CN102440964A

CN102440964A - 戈舍瑞林缓释微球制剂及其制备方法

Info

Publication number: CN102440964A
Application number: CN2011104275993A
Authority: CN
Inventors: 支钦; 姚志勇; 李新宇
Original assignee: SHENZHEN CITY JIANYUAN PHARMACEUTICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: SHENZHEN CITY JIANYUAN PHARMACEUTICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date: 2011-12-16
Filing date: 2011-12-16
Publication date: 2012-05-09

Abstract

本发明公开了一种戈舍瑞林缓释微球制剂及其制备方法。该缓释微球包括以微球重量计，0.5％-30％(w/w)的戈舍瑞林或其盐，占微球重量70％-99.5％的分子量为5，000-300，000道尔顿的可生物降解且具生物相容性的高分子材料，以及占微球重量0％-10％的药学上可接受的其他辅料。本发明的缓释微球平均粒径为5-40μm，包封率大于80％。该缓释微球缓释期长达数天或数月，明显减少用药次数，提高了戈舍瑞林的生物利用度，降低了药物的毒副作用，有利于临床治疗。

Description

戈舍瑞林缓释微球制剂及其制备方法

技术领域：

本发明涉及缓释微球制剂技术领域，尤其涉及一种含戈舍瑞林或其盐的缓释制剂及制备方法。

背景技术：

戈舍瑞林是一种合成的LHRH的类似物，能促进性腺激素的释放，作用较人体分泌的LHRH强50～100倍，LH-RH类似物通过竞争结合垂体LH-RH的大部分受体，反馈性抑制LH和FSH的分泌，从而抑制卵巢***的生成，达到药物性卵巢切除的治疗作用。

目前市场上可见的戈舍瑞林剂型是植入剂，系英国阿斯利康制药有限公司研制产品，是一种可在体内逐渐进行生物降解的多聚缓释植入剂，商品名为“诺雷德”。1987年在法国获准上市，1989年12月29日获FDA批准上市。可用激素治疗的***癌及绝经前及围绝经期的乳腺癌，也可用于子宫内膜异位症的治疗，如缓解疼痛并减少子宫内膜损伤。

戈舍瑞林用于治疗***癌及绝经前及围绝经期的乳腺癌，子宫内膜异位症的原理是药物去势。由于性激素释放激素的产生受到下丘脑脉冲式释放的LHRH的调控，LHRH类似物与垂体LHRH受体结合，导致受体下调，从而抑制黄体素，将***降至绝经期水平。这种药物去势在乳腺癌治疗领域从一出现就引起了关注，其完全可以避免手术、放疗带来的治疗方式本身所有的缺点，而且在一定的程度上其卵巢的功能抑制作用是可逆的。

通过抑制垂体释放作用于***细胞的***而抑制睾酮产生，使血中睾酮浓度降到去势水平。这种药物去势是***癌的一个主要治疗方法，因有良好的耐受性而取代已在临床应用50多年的双侧睾丸切除术和口服***治疗。

根据2005年中国抗肿瘤药物市场分析报告，目前我国医院临床用的戈舍瑞林均是由阿斯利康制药有限公司提供的缓释植入剂，规格：3.6mg/支，涉及三个美国专利4100247、4267628、5366734前两个已经过期，最后一个专利到2011年过期。其专利内容是将戈舍瑞林载入到由一定比例组成的高分子材料PLGA组成的载体中，压缩成厚度为0.038cm一定形状的植入剂，供腹部皮下植入注射。但是截至目前没有见到该公司申请的戈舍瑞林微球注射植入剂的专利报道。并且目前没有该药在中国专利局的申请记录。

WO2006123361是一篇有关戈舍瑞林缓释微球研制专利，其主要内容是将戈舍瑞林载入单一的PLA或者PLGA生物可降解高分子中，用特定的方法制备成微球制剂。

本研究的出发点是从不涉及有关专利内容条件下，将戈舍瑞林用特定的复合高分子材料吸附或包裹成微球。

发明内容：

在我国整个抗肿瘤药物市场中戈舍瑞林的市场份额已上升到激素类用药的前列，在***癌的应用有较快的扩张，治疗***癌已经列入国家医保乙类，但目前没有国产产品问世。因此本发明针对现有现状，提供一种以戈舍瑞林为活性成分的注射用的缓释微球制剂。该制剂能选择性地提高肿瘤局部的药物浓度，减少注射次数和药物耐受性，提高病人的适应性，方便临床使用和患者接受。

缓释微球制剂与普通制剂相比，给药频率显著减少，患者的接受程度大大提高。另外，它还消除了普通注射剂多次给药产生的体内药物浓度峰谷现象，可获得平稳长时间的有效浓度，降低了毒副作用，并且总给药剂量减少。

本发明制备了一种含LHRH类似物醋酸戈舍瑞林药物的注射用的缓释微球制剂，其特征在于所述制剂中的戈舍瑞林缓释微球含有占微球重量0.5％-30％(w/w)的戈舍瑞林或其盐，占微球重量70％-99.5％的分子量为5,000-300,000道尔顿的可生物降解且具生物相容性的高分子材料，以及占微球重量0％-10％的药学上可接受的其他辅料。所述缓释微球粒径为1-100μm，平均540μm。

所述的盐为戈舍瑞林的盐酸盐、硫酸盐、醋酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、构橼酸盐、磷酸盐或其混合物。其中，醋酸戈舍瑞林分子量为1329.47，分子式为[C59H84N18O14·(C2H4O2)XX＝1-2.4]，化学结构式缩写为D-Ser(Bul)6-Azg-ly10-GnRH。

所述可生物降解且具生物相容性的高分子材料，可选自聚丙交酯(PLA)、聚乙交酯(PGA)、聚丙交酯-乙交酯(PLGA)、聚氰基丙烯酸烷酯、聚己内酯(PCL)、聚羟丁酸(PHB)、聚羟戊酸(PVA)、聚癸酸(PDA)、聚酸酐、聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯、聚乳酸-聚乙二醇、聚羟乙酸-聚乙二醇其中的一种或其混合物，优选PLA和PLGA混合物。所述的丙交酯和乙交酯分子量范围均在5,000-30,000道尔顿，比例范围是40∶60-75∶25，PLA和PLGA比例是60∶40。

所述的药学上可接受的其他辅料包括明胶、甘油、乳化稳定剂及赋形剂，所述乳化稳定剂选自聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚甲基丙烯酸钠、聚丙烯酸钠、羧甲基纤维素钠等。乳化稳定剂优选聚乙烯醇，其用量范围为0.1％-10％。

赋形剂选自山梨醇、甘露醇、乳糖、蔗糖、甘氨酸中的一种或其混合物，优选甘露醇，其用量范围为0.1％-5％。

另外，本发明还提供了制备含LHRH类似物戈舍瑞林药物的缓释微球制剂的制备方法，其工艺如下：

第一步，首先将戈舍瑞林或其盐溶于水，得内水相；令将PLA和PLGA溶于有机溶剂中，得油相；将油相和内水相置于搅拌器内，高速乳匀，形成W/O乳液；然后将W/O乳液加入到聚乙烯醇水溶液中，高速乳匀，形成W/O/W复乳；

第二步，将W/O/W复乳移入聚乙烯醇水溶液中，低速搅拌，离心，收集所得微球，用蒸馏水洗涤多次后，再离心收集，冷冻干燥，即得戈舍瑞林或其盐缓释微球。

附图说明：

图1、图2、图3分别为各个实施例制备的醋酸戈舍瑞林缓释微球制剂体外释放度-释放时间曲线图。

具体实施方式：

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。

实施例1

称取15mg醋酸戈舍瑞林溶于蒸馏水中，得内水相；称取200mgPLA和800mgPLGA(聚合比例＝1∶1)溶于二氯甲烷中，得油相。配制浓度为5％的PVA溶液50ml和浓度为0.5％的PVA溶液500ml。先将醋酸戈舍瑞林溶液移入溶有PLA和PLGA的二氯甲烷溶液中，室温下置于乳化分散机上高速(30000rpm)乳匀30秒，然后将所得的W/O型乳剂转移至20ml浓度为5％的PVA溶液中，置于乳化分散机上以5000rpm的转速，乳匀1分钟，得W/O/W型复乳，移入500ml0.5％的PVA溶液中，置于机械搅拌器上，以500rpm的转速低速搅拌2小时，离心，收集所得微球，用蒸馏水多次洗涤，然后再离心收集，冷冻干燥，分装成实际载药量在3.6mg剂量的醋酸戈舍瑞林缓释微球制剂，粒径平均5-40μm。

精密称取实施例1制备的载药醋酸戈舍瑞林缓释微球5mg溶于1mL二氯甲烷，分次加入3mL和2mL重蒸馏水提取药物，涡旋萃取1min，15000rpm离心3min，吸取合并上清液，移取上清液0.5mL以重蒸馏水定容至10mL，进样20μl，HPLC测定含量，绘制标准曲线，根据标准曲线计算得实施例1制备的载药醋酸戈舍瑞林缓释微球中药物含量，据此计算收率和包封率载药量分别是72.3％和68.9％。

对实施例1制备的醋酸戈舍瑞林缓释微球制剂进行体外释药考察，方法如下：

精密称取若干份实施例1制备的醋酸戈舍瑞林缓释微球，每份5mg，置于35个10mL的西林瓶中，每份加入含有0.1M的Na₂HPO₄和0.1M的NaH₂PO₄的pH7.4的磷酸缓冲溶液，置于37℃恒温水浴中，分别在第0、4、8、12、16、20、24、28、32天取出，离心，重新分散在二氯甲烷醋酸缓冲液(1∶1v/v)，色谱柱为C18 50×2mm，流动相为1∶1的含有0.1％三氟醋酸和含有1％三氟醋酸的50％乙腈混合溶液，流速1.0ml/min，在240nm处检测，测定微球内残余药量，按照外标法计算累计释放度，实施例1制备的醋酸戈舍瑞林缓释微球制剂的体外释药测定结果如表1所示：

表1实施例1制备的醋酸戈舍瑞林缓释微球制剂的体外释药实验结果

以释药时间为横坐标，累计释放度为纵坐标，绘制实施例1制备的醋酸戈舍瑞林缓释微球制剂体外释药曲线，结果见说明书附图1。

实施例2

称取15mg醋酸戈舍瑞林溶于蒸馏水中，得内水相；称取1000mgPLGA(聚合比例＝1∶1)溶于二氯甲烷中，得油相。配制浓度为5％的PVA溶液50ml和浓度为0.5％的PVA溶液500ml。先将醋酸戈舍瑞林溶液移入溶有PLGA的二氯甲烷溶液中，室温下置于乳化分散机上高速(30000rpm)乳匀30秒，然后将所得的W/O型乳剂转移至20ml浓度为5％的PVA溶液中，置于乳化分散机上以5000rpm的转速，乳匀1分钟，得W/O/W型复乳，移入500ml0.5％的PVA溶液中，置于机械搅拌器上，以500rpm的转速低速搅拌2小时，离心，收集所得微球，用蒸馏水多次洗涤，然后再离心收集，冷冻干燥，分装成实际载药量在3.6mg剂量的醋酸戈舍瑞林缓释微球制剂，粒径平均5-40μm。

精密称取实施例2制备的载药醋酸戈舍瑞林缓释微球5mg溶于1mL二氯甲烷，分次加入3mL和2mL重蒸馏水提取药物，涡旋萃取1min，15000rpm离心3min，吸取合并上清液，移取上清液0.5mL以重蒸馏水定容至10mL，进样20μl，HPLC测定含量，绘制标准曲线，根据标准曲线计算得实施例1制备的载药醋酸戈舍瑞林缓释微球中药物含量，据此计算收率和包封率载药量分别是58.4％和53.6％。

对实施例2制备的醋酸戈舍瑞林缓释微球制剂进行体外释药考察，方法如下：

精密称取若干份实施例2制备的醋酸戈舍瑞林缓释微球，每份5mg，置于35个10mL的西林瓶中，每份加入含有0.1M的Na₂HPO₄和0.1M的NaH₂PO₄的pH7.4的磷酸缓冲溶液，置于37℃恒温水浴中，分别在第0、4、8、12、16、20、24、28、32天取出，离心，重新分散在二氯甲烷醋酸缓冲液(1∶1v/v)，色谱柱为C18 50×2mm，流动相为1∶1的含有0.1％三氟醋酸和含有1％三氟醋酸的50％乙腈混合溶液，流速1.0ml/min，在240nm处检测，测定微球内残余药量，按照外标法计算累计释放度，实施例2制备的醋酸戈舍瑞林缓释微球制剂的体外释药测定结果如表2所示：

表2实施例2制备的醋酸戈舍瑞林缓释微球制剂的体外释药实验结果

以释药时间为横坐标，累计释放度为纵坐标，绘制实施例2制备的醋酸戈舍瑞林缓释微球制剂体外释药曲线，结果见说明书附图2。

实施例3

称取25mg醋酸戈舍瑞林溶于蒸馏水中，得内水相；称取500mgPLA和1500mgPLGA(聚合比例＝3∶2)溶于二氯甲烷中，得油相。配制浓度为5％的PVA溶液100ml和浓度为0.5％的PVA溶液1000ml。先将醋酸戈舍瑞林溶液移入溶有PLA和PLGA的二氯甲烷溶液中，室温下置于乳化分散机上高速(30000rpm)乳匀30秒，然后将所得的W/O型乳剂转移至20ml浓度为5％的PVA溶液中，置于乳化分散机上以5000rpm的转速，乳匀1分钟，得W/O/W型复乳，移入500ml0.5％的PVA溶液中，置于机械搅拌器上，以500rpm的转速低速搅拌2小时，离心，收集所得微球，用蒸馏水多次洗涤，然后再离心收集，冷冻干燥，分装成实际载药量在3.6mg剂量的醋酸戈舍瑞林缓释微球制剂，粒径平均5-40μm。

精密称取实施例3制备的载药醋酸戈舍瑞林缓释微球5mg溶于1mL二氯甲烷，分次加入3mL和2mL重蒸馏水提取药物，涡旋萃取1min，15000rpm离心3min，吸取合并上清液，移取上清液0.5mL以重蒸馏水定容至10mL，进样20μl，HPLC测定含量，绘制标准曲线，根据标准曲线计算得实施例3制备的载药醋酸戈舍瑞林缓释微球中药物含量，据此计算收率和包封率载药量分别是63.2％和64.7％。

对实施例3制备的醋酸戈舍瑞林缓释微球制剂进行体外释药考察，方法如下：

精密称取若干份实施例3制备的醋酸戈舍瑞林缓释微球，每份5mg，置于35个10mL的西林瓶中，每份加入含有0.1M的Na₂HPO₄和0.1M的NaH₂PO₄的pH7.4的磷酸缓冲溶液，置于37℃恒温水浴中，分别在第0、4、8、12、16、20、24、28、32天取出，离心，重新分散在二氯甲烷醋酸缓冲液(1∶1v/v)，色谱柱为C18 50×2mm，流动相为1∶1的含有0.1％三氟醋酸和含有1％三氟醋酸的50％乙腈混合溶液，流速1.0ml/min，在240nm处检测，测定微球内残余药量，按照外标法计算累计释放度，实施例3制备的醋酸戈舍瑞林缓释微球制剂的体外释药测定结果如表3所示：

表3实施例3制备的醋酸戈舍瑞林缓释微球制剂的体外释药实验结果

以释药时间为横坐标，累计释放度为纵坐标，绘制实施例3制备的醋酸戈舍瑞林缓释微球制剂体外释药曲线，结果见说明书附图3。

Claims

1.一种戈舍瑞林缓释微球制剂，其特征是：所述制剂中的戈舍瑞林缓释微球含有占微球重量0.5％-30％(w/w)的戈舍瑞林或其盐，占微球重量70％-99.5％的分子量为5,000-300,000道尔顿的可生物降解且具生物相容性的高分子材料，以及占微球重量0％-10％的药学上可接受的其他辅料。所述缓释微球粒径为1-100μm，平均5-40μm。

2.根据权利要求1所述的戈舍瑞林缓释微球制剂，其特征是：所述的盐为戈舍瑞林的盐酸盐、硫酸盐、醋酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、构橼酸盐、磷酸盐或其混合物。

3.根据权利要求1所述的戈舍瑞林缓释微球制剂，其特征是：所述可生物降解且具生物相容性的高分子材料，可选自聚丙交酯(PLA)、聚乙交酯(PGA)、聚丙交酯-乙交酯(PLGA)、聚氰基丙烯酸烷酯、聚己内酯(PCL)、聚羟丁酸(PHB)、聚羟戊酸(PVA)、聚癸酸(PDA)、聚酸酐、聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯、聚乳酸-聚乙二醇、聚羟乙酸-聚乙二醇其中的一种或其混合物，优选PLA和PLGA混合物。

4.根据权利要求3所述的戈舍瑞林缓释微球制剂，其特征是：所述的丙交酯和乙交酯分子量范围均在5,000-30,000道尔顿，聚丙交酯中丙交酯和乙交酯的比例范围是40∶60-75∶25，PLA和PLGA比例范围是0∶10-10∶10。

5.根据权利要求1所述的戈舍瑞林缓释微球制剂，其特征是：所述的药学上可接受的其他辅料包括明胶、甘油、乳化稳定剂及赋形剂，所述乳化稳定剂选自聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚甲基丙烯酸钠、聚丙烯酸钠、羧甲基纤维素钠等。

6.根据权利要求6所述的戈舍瑞林缓释微球制剂，其特征是：乳化稳定剂优选聚乙烯醇，其用量范围为0.1％-10％。

7.根据权利要求6所述的戈舍瑞林缓释微球制剂，其特征是：赋形剂选自山梨醇、甘露醇、乳糖、蔗糖、甘氨酸中的一种或其混合物。

8.根据权利要求6所述的戈舍瑞林缓释微球制剂，其特征是：赋形剂优选甘露醇，其用量范围为0.1％-5％。

9.根据权利要求1所述的戈舍瑞林缓释微球制剂的制备方法，其特征在于采用复乳-液中干燥法，分两步制备微球，其特征是：

10.根据权利要求11所述的戈舍瑞林或其盐缓释微球制备方法，其特征是：所述的有机溶剂包括二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、***、丙酮、二氧六环或四氢呋喃等，优选二氯甲烷。