CN102333771B

CN102333771B - 作为crth2受体拮抗剂的吲哚衍生物

Info

Publication number: CN102333771B
Application number: CN201080010563.9A
Authority: CN
Inventors: C.伯泰勒特; M.博伊; J.科卢奇; K.维尔纳夫; J.梅瑟
Original assignee: Merck Canada Inc; Schering Corp
Current assignee: Merck Canada Inc; Merck Sharp and Dohme LLC
Priority date: 2009-02-24
Filing date: 2010-02-19
Publication date: 2014-03-19
Anticipated expiration: 2030-02-19
Also published as: EP2492267B1; CL2011002056A1; MY152062A; KR20110107395A; SI2401269T1; KR20130028156A; PE20120056A1; AR075597A1; BRPI1008906A2; AU2010218209A1; JP4989786B1; EP2492267A1; WO2010099039A1; HRP20140384T1; TWI454474B; TW201035096A; US9023864B2; IL214342A0; EA201171081A1; TN2011000382A1

Abstract

式（I）的化合物是PGD2受体CRTH2的拮抗剂，因此可用于治疗和/或预防CRTH2介导的疾病如哮喘。

Description

作为CRTH2受体拮抗剂的吲哚衍生物

背景技术

***素D₂ (PGD₂)是花生四烯酸的环加氧酶代谢物。其响应于免疫学攻击而从肥大细胞和TH2细胞中释放，并且在不同生理事件例如睡眠和***反应中起着作用。

PGD₂的受体包括“DP”受体、在TH2细胞(“CRTH2”)上表达的趋化物受体同源分子和“FP”受体。这些受体是被PGD₂活化的G-蛋白偶联受体。CRTH2受体及其在包括T辅助细胞、嗜碱性细胞和嗜酸性细胞的不同细胞上的表达在下列文献中有描述：Abe等人, Gene 227:71-77, 1999, Nagata等人, FEBS Letters 459:195-199, 1999以及Nagata等人, The Journal of Immunology 162:1278-1286, 1999（描述了CRTH2受体）。Hirai等人, J. Exp, Med. 193:255-261, 2001指出CRTH2是PGD₂的受体。

WO2007019675公开了下式的CRTH2拮抗剂：

。

发明内容

本发明提供了属于CRTH2受体拮抗剂的新型化合物。本发明的化合物可用于治疗各种***素介导的疾病和病症；相应地，本发明提供了使用本文所述的新型化合物治疗***素介导的疾病的方法以及含有它们的药物组合物。

附图说明

图1描述了实施例8A的化合物的晶型B的X射线粉末衍射图。

图2描述了实施例8A的化合物的晶型C的X射线粉末衍射图。

图3描述了实施例8A的化合物的晶型B的差示扫描量热法(DSC)曲线。

图4描述了实施例8A的化合物的晶型C的差示扫描量热法(DSC)曲线。

具体实施方式

本发明涉及式I的化合物

及其药用盐，其中：

表示

或

Y₁ 选自任选被取代的芳基和-C(R₂)(R₃)(R₄)；

Y₂选自H和-C_1-6烷基；

Z选自H和-C_1-6烷基；

R_1a和R_1b 独立地选自H、卤素、-OC_1-6烷基、-O-卤代C_1-6烷基、-C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、任选被取代的芳基和-(C_1-3亚烷基)-任选取代的芳基；

R₂选自H，任选被卤素、-OH或-NHSO₂CH₃取代的-C_1-6烷基，-OH，-OC_1-6烷基，-S(O)_nC_1-6烷基，-CN，任选被取代的芳基，任选被取代的-O-芳基和任选被取代的杂芳基，其中n是0、1或2；

R₃选自H、-C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基，任选被取代的芳基和任选被取代的杂芳基；以及

R₄选自H、-C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、任选被取代的芳基和任选被取代的杂芳基；或

R₃、R₄和它们所连接的碳原子一起形成-C_3-6环烷基、芴基或具有选自-N(R^a)-、-O-和-S-中的环杂原子的-C_3-6杂环基；或者

R₃、R₄一起表示C_1-6烷叉基(alkylidene)；

R^a是H、C_1-6烷基或-C(O)C_1-6烷基；以及

芳基和杂芳基的任选取代基是独立地选自卤素、-C_1-3烷氧基、-C_1-3卤代烷基、羟基-C_1-3烷基、-S(O)_n-C_1-3烷基、氨基和单-和二-(C_1-3烷基)氨基中的1-4个基团。

式I的一个子集是其中R_1b、Y₂和Z各自是H的化合物。

式I的一个子集是式Ia的化合物及其药用盐：

。

式I的另一个子集是式Ib的化合物及其药用盐：

。

式I的另一个子集是式Ic的化合物及其药用盐：

。

式I、Ia、Ib和Ic内的一个组是其中R_1a是H或卤素的化合物。在一个实施方案中，R_1a是H。在另一个实施方案中，R_1a是F。

式I、Ia、Ib和Ic内的另一个组是其中Y₁是任选被取代的芳基的化合物。在一个实施方案中，Y₁是任选被1-3个独立地选自下列之中的基团取代的苯基：卤素、-C_1-3烷氧基、-C_1-3卤代烷基、羟基-C_1-3烷基、-S(O)_n-C_1-3烷基、氨基、以及单-和二-(C_1-3烷基)氨基。

式I、Ia、Ib和Ic内的另一个组是其中Y₁是-C(R₃)(R₄)-任选取代的苯基或-CH₂O-任选取代的苯基的化合物。在一个实施方案中，R₃和R₄各自是H。在第二个实施方式中，R₃和R₄的一个是OH，且另一个是H、C_1-3烷基或任选被取代的苯基。在第三个实施方案中，R₃、R₄和它们所连接的碳原子一起形成-C_3-6环烷基。在第四个实施方案中，R₃和R₄的一个是H，且另一个是C_1-3烷基或任选被取代的苯基。在第五个实施方案中，R₃和R₄一起表示-C_1-3烷叉基。在该组中，苯基的任选取代基是1-3个独立地选自下列之中的基团：卤素、-C_1-3烷氧基、-C_1-3卤代烷基、羟基-C_1-3烷基、-S(O)_n-C_1-3烷基、氨基、以及单-和二-(C_1-3烷基)氨基；更尤其，该任选的取代基是1或2个卤素原子。

式Ia和Ib内的另一组是其中R_1a是H或F，且Y₁选自任选被取代的苯基、-(R₃)(R₄)-任选取代的苯基和-CH₂O-任选取代的苯基。属于该组内的是式Ib的化合物，其中Y₁是-(R₃)(R₄)-任选取代的苯基，且(i) R₃和R₄的一个是H或OH，且另一个是H、-C_1-3烷基或任选被取代的苯基；或(ii) R₃、R₄和它们所连接的碳原子一起形成-C_3-6环烷基；或(iii) R₃和R₄一起形成-C_1-3烷叉基。

属于式Ib内的另一组是其中R_1a是H或F且Y₁是任选被1或2个独立地选自卤素、-C_1-3烷氧基、-C_1-3卤代烷基、羟基-C_1-3烷基、-S(O)_n-C_1-3烷基、氨基、以及单-和二-(C_1-3烷基)氨基中的基团取代的-CH₂-苯基；更尤其，该任选的取代基是1或2个卤素原子。

本发明的代表性化合物（包括它们的药用盐）是：

[7-(4-苄基-[1,2,3]***-1-基)-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基]-乙酸；

{7-[4-(4-甲氧基-苯基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸；

[7-(5-苄基-[1,2,3]***-1-基)-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基]-乙酸；

(7-{5-[(2,6-二氯苯氧基)甲基]-1H-1,2,3-***-1-基}-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸；

(7-{5-[1-(4-氟-苯基)-1-羟基-乙基]-[1,2,3]***-1-基}-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)-乙酸；

{7-[5-(1-苯基-环戊基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸；

[7-(5-苄基-[1,2,3]***-1-基)-4-氟-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基]-乙酸；

{4-氟-7-[5-(4-氟苄基)-1H-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸；

{(7R)-4-氟-7-[5-(4-氟苄基)-1H-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]-吲哚-10-基}-乙酸；

[3-(5-苄基-[1,2,3]***-1-基)-1,2,3,4-四氢-咔唑-9-基]-乙酸；

{7-[4-(4-氟-苯基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸；

{7-[4-(4-甲烷磺酰基氨基-丁基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸；

{7-[4-(1-羟基-2-甲基-丙基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸；

{7-[4-(1-羟基-2-苯基-乙基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸；

[7-(4-苯氧基甲基-[1,2,3]***-1-基)-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基]-乙酸；

{7-[4-(4-甲磺酰基-苯基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸；

(7-{4-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-苯基]-[1,2,3]***-1-基}-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)-乙酸；

{7-[4-(4-三氟甲基-苯基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸；

[7-(4-萘-1-基-[1,2,3]***-1-基)-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-a]吲哚-10-基]-乙酸；

{7-[4-(4-二甲基氨基-苯基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸；

{7-[5-(4-氟-苯基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸；

[7-(5-苯氧基甲基-[1,2,3]***-1-基)-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基]-乙酸；

(7-{5-[(4-溴苯基)-羟基-甲基]-[1,2,3]***-1-基}-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)-乙酸；

4-[3-(10-羧甲基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-7-基)-3H-[1,2,3]***-4-基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯；

[7-(5-环己基-[1,2,3]***-1-基)-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基]-乙酸；

{7-[5-(9-羟基-9H-芴-9-基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸；

(7-{5-[1-(4-氟苯基)-乙烯基]-[1,2,3]***-1-基}-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)-乙酸；

(7-{(R)-5-[双-(4-氟苯基)-羟基-甲基]-[1,2,3]***-1-基}-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)-乙酸；

{(R)-7-[5-(4-氟苄基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸；

{(R)-7-[5-(1-苯基乙基)-[1,2,3]***-l-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸；

((R)-7-{5-[双-(4-氟苯基)-甲基]-[1,2,3]***-1-基}-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)-乙酸；

((R)-7-{5-[1-(4-氟苯基)-1-羟乙基]-[1,2,3]***-1-基}-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)-乙酸；

{4-氟-7-[5-(1-苯基-乙基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸；

{7-[5-(3,4-二氟苄基)-1H-1,2,3-***-1-基]-4-氟-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}乙酸；

{7-[5-(4-氯苄基)-1H-1,2,3-***-1-基]-4-氟-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}乙酸；和

{7-[5-(2,2,2-三氟-1-羟基-1-苯基乙基)-1H-1,2,3-***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}乙酸。

本发明还包括含有式I化合物的药物组合物，以及使用式I的化合物治疗或预防***素介导的疾病的方法。

除非另有说明，本发明使用下列定义来叙述。

术语“卤素”或“卤代”包括F、CI、Br和I。

术语“烷基”是指具有指定碳原子数目的线性或支链烷基链。烷基的非限制性例子包括甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，仲丁基、叔丁基，戊基，己基等。

“卤代烷基”是指如上所述的烷基，其中一个或多个氢原子被卤素原子置换，且至多全部氢原子被卤素基团完全取代。C_1-6卤代烷基例如包括-CF₃、-CF₂CF₃、CHFCH₃等。

“烷氧基”表示具有指定碳原子数的线性或支链烷基链的烷氧基。C_1-6烷氧基例如包括甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基等。

“芳基”是指包括1-3个苯环的6-14员碳环芳族环体系。如果存在两个或多个芳族环，那么所述环稠合在一起，使得相邻的环共有一个共同键。实例包括苯基和萘基。“任选被取代的芳基”是指未被取代的或如规定的那样被取代的芳基。

在本文使用的术语“杂芳基”(Het)表示含有1个环或2个稠环、1-4个选自O、S和N中的杂原子的5-10员芳族环体系。Het包括，但不限于，呋喃基，咪唑基，异

唑基，异噻唑基，二唑基，

唑基，吡唑基，吡啶基，吡咯基，四唑基，噻唑基，噻二唑基，噻吩基，三嗪基，***基，7H-吡咯-2,5-二酮基，2-吡喃酮，4-吡喃酮，吡咯并吡啶，呋喃并吡啶和噻吩并吡啶。“任选被取代的杂芳基”是指未被取代或如规定的那样被取代的杂芳基。

“治疗有效量”是指将引起研究人员、兽医、医生或其他临床医师所寻求的组织、***、动物或人体的生物学或医学反应的药物或药剂的量。

术语“治疗”包括缓解、改善、减轻或以其他方式减少与疾病或病症有关的体征和症状。

如药物组合物中的术语“组合物”意图包括含有一种或多种活性成分以及构成载体的一种或多种惰性成分（药用赋型剂），以及直接或间接由任何两种或多种成分的组合、络合或聚集，或由一种或多种成分的离解，或由一种或多种成分的其他类型的反应或相互作用获得的任何产物。因此，本发明的药物组合物包括通过将式I的化合物和药用赋型剂混合而制备的任何组合物。

术语“任选被取代的”是指“未被取代的或取代的”，因此，本文所述的通用结构式包括含有规定的任选取代基的化合物以及不含任选的取代基的化合物。

各变量每当其在通用结构式定义内出现时被独立地定义。例如，当具有多于一个的取代基用于芳基/杂芳基时，各取代基在各种情况下被独立地选择，且各取代基可以彼此相同或不同。

旋光异构体 - 非对映异构体 - 几何异构体 - 互变异构体

式I的化合物含有一个或多个不对称中心，且因此能够作为外消旋物和外消旋混合物、单一对映异构体、非对映体混合物和单个非对映异构体存在。本发明意图包含所有此类式I的化合物的异构体形式，作为单一物质或它们的混合物。

本文所述的一些化合物含有烯属双键，除非另有规定，意图包括E和Z几何异构体。

本文所述的一些化合物可以存在不同的氢连接点，称为互变异构体。这种实例可以是酮及其烯醇式，称为酮-烯醇互变异构体。单个互变异构体及其混合物包括在式I的化合物内。

式I的化合物例如可以通过从适合的溶剂例如甲醇或乙酸乙酯或它们的混合物中分级结晶而分离为对映异构体的非对映异构体对。这样获得的一对对映异构体可通过传统方法，例如通过利用旋光活性酸作为拆解试剂而分离为单个立体异构体。

或者，通式I的化合物的任何对映异构体可以通过使用旋光纯的起始原料、中间体或已知构型的试剂的立体有择合成来获得。

盐

术语“药用盐”是指由包括无机碱和有机碱的药用无毒碱制备的盐。由无机碱衍生的盐包括铝，铵，钙，铜，铁，亚铁，锂，镁，锰，亚锰，钾，钠，锌等的盐。特别优选的是铵盐，钙盐，镁盐，钾盐和钠盐。由药用有机无毒碱衍生的盐包括伯胺、仲胺和叔胺，包括天然存在的取代胺类的取代胺类，环胺和碱离子交换树脂的盐，例如精氨酸，甜菜碱，咖啡因，胆碱，N,N'-二苄基亚乙基二胺，二乙胺，2-二乙氨基乙醇，2-二甲氨基乙醇，乙醇胺，乙二胺，N-乙基-吗啉，N-乙基哌啶，葡萄糖胺，葡糖胺，组氨酸，海巴明胺，异丙胺，赖氨酸，甲基葡糖胺，吗啉，哌嗪，哌啶，多胺树脂，普鲁卡因，嘌呤，可可碱，三乙胺，三甲胺，三丙胺，三羟甲基氨基甲烷等的盐。

当本发明的化合物为碱性时，盐可以由包括无机酸和有机酸的药用无毒的酸制备。这种酸包括乙酸，苯磺酸，苯甲酸，樟脑磺酸，柠檬酸，乙磺酸，富马酸，葡糖酸，谷氨酸，氢溴酸，盐酸，羟基乙磺酸，乳酸，马来酸，苹果酸，扁桃酸，甲磺酸，粘酸，硝酸，双羟萘酸，泛酸，磷酸，琥珀酸，硫酸，酒石酸，对甲苯磺酸等。特别优选的是柠檬酸、氢溴酸、盐酸、马来酸、磷酸、硫酸和酒石酸。

很清楚，除非另作说明，所提到的式I、Ia、Ib、Ic和Id的化合物、其子集、其实施方案以及具体的化合物意图还包括药用盐。

此外，本发明的化合物的一些晶型可以作为多形晶存在，照此，所有形式意图被包括在本发明中。另外，本发明的一些化合物可以用水(水合物)或普通的有机溶剂形成溶剂化物。此类溶剂化物被包括在本发明范围内。

标记化合物

在通式I的化合物中，原子可显示它们的天然同位素丰度，或者一个或多个原子可以在具有相同原子序数的特定同位素中人工富集，但原子量或质量数不同于在自然中发现的占优势的原子量或质量数。本发明意图包括通式I的化合物的所有适合的同位素变型。例如，氢（H）的不同同位素形式包括氕(¹H)和氘(²H)。氕是自然界中存在的占优势的氢同位素。氘的富集可以获得某些治疗优点，例如增加体内半衰期或减少剂量需求，或者可以提供用作表征生物样品的标准的化合物。通式I内的同位素富集的化合物可以不用过度实验而通过本领域技术人员公知的传统方法或者通过使用合适的同位素富集的试剂和/或中间体的类似于本文的反应路线和实施例中描述的方法来制备。

应用

式I的化合物与***素受体相互作用的能力使得它们可用于预防或逆转由***素在哺乳动物，尤其人体患者中引起的不希望有的症状。这种***素作用的模拟或拮抗作用表明，这些化合物及其药物组合物可用于治疗、预防或改善哺乳动物，尤其人体中的下述疾病：呼吸性疾病，***反应疾病，疼痛，炎症性疾病，粘液分泌病症，骨病症，睡眠障碍，生育力病症，血液凝固病症，视觉障碍以及免疫疾病和自身免疫病。另外，这种化合物可以抑制细胞的赘生转化和转移性肿瘤生长，由此可被用于癌症的治疗。式I的化合物还可用于治疗和/或预防***素介导的增殖病症例如可在糖尿病性视网膜病和肿瘤血管生成中发生的增殖病症。式I的化合物还可通过拮抗收缩性***素类或模拟松驰性***素类而抑制***素类诱导的平滑肌收缩，由此可用于治疗痛经、早产和嗜酸性粒细胞相关的病症。更尤其，式I的化合物是***素D2受体CRTH2的拮抗剂。

因此，本发明的另一个方面提供了治疗或预防***素介导的疾病的方法，该方法包括将式I的化合物以有效治疗或预防所述***素介导的疾病的量给药于需要这种治疗的哺乳动物患者。所述***素介导的疾病包括，但不限于，过敏性鼻炎，鼻塞，鼻漏，常年性鼻炎，鼻炎，包括变应性哮喘在内的哮喘，慢性阻塞性肺病和其它形式的肺炎症；睡眠障碍和睡眠-觉醒周期障碍；与痛经和早产有关的***素类诱导的平滑肌收缩；嗜酸性粒细胞相关病症；血栓形成；青光眼和视觉障碍；闭塞性血管病；充血性心力衰竭；需要抗凝血治疗的疾病或病症例如创伤后治疗或手术后治疗；炎症；坏疽；肢端动脉痉挛症；包括细胞保护在内的粘液分泌病症；疼痛和偏头痛；需要控制骨形成和再吸收的疾病例如骨质疏松症；休克；包括发烧的热控制；以及需要免疫调节的免疫疾病或病症。更具体而言，所要治疗的疾病是由***素D2介导的疾病，例如鼻塞、肺充血以及包括变应性哮喘在内的哮喘。

本发明的一个实施方案是治疗或预防***素介导的疾病的方法，包括将式I的化合物以有效治疗或预防***素介导的疾病的量给药于需要这种治疗的哺乳动物患者，其中该***素介导的疾病是鼻塞、包括***反应性鼻炎和常年性鼻炎在内的鼻炎以及包括变应性哮喘在内的哮喘。

本发明的另一个实施方案是治疗或预防***素D2介导的疾病的方法，包括将式I的化合物以有效治疗或预防***素D2介导的疾病的量给药于需要这种治疗的哺乳动物患者，其中所述***素D2介导的疾病是鼻塞或哮喘。

本发明的另一个实施方案是治疗需要这种治疗的患者的鼻塞的方法，该方法包括将治疗有效量的式I化合物给药于所述患者。

本发明的又一个实施方案是治疗需要这种治疗的患者的包括变应性哮喘在内的哮喘的方法，该方法包括将治疗有效量的式I化合物给药于所述患者。

剂量范围

该式I的化合物的预防或治疗剂量的大小当然随所要治疗的疾病的性质和严重度以及特定的式I化合物及其给药途径而改变。其也根据包括年龄、体重、一般健康、性别、饮食、给药时间、***速率、药物组合和个体患者的反应在内的各种因素而改变。通常，日剂量为约0.001 mg到约100 mg/kg体重的哺乳动物，优选为0.01 mg到约10 mg/kg。另一方面，在某些情况下可能需要使用在这些界限之外的剂量。

可与载体材料组合而产生单个剂型的活性成分的量将根据所要治疗的主体以及特定的给药方式而改变。例如，用于人的口服给药的制剂可以含有与适当量的载体材料复合的0.05mg到5g的活性剂，该适当量可以为总组合物的约5到约99.95%。剂量单位形式一般含有约0.1 mg到约0.4 g的活性成分，典型地为0.5 mg，1 mg，2 mg，5 mg，10 mg，25 mg，50 mg，100 mg，200 mg，或400 mg。

药物组合物

本发明的另一个方面提供了包括式I的化合物与药用载体的药物组合物。为了治疗任何***素类介导的疾病，式I的化合物可以按照含有普通无毒药用载体、助剂和媒介物的剂量单位制剂通过口服、吸入喷雾、局部、胃肠外或直肠给药。在本文使用的术语胃肠外包括皮下注射、静脉内、肌内、胸骨内注射或输液技术。除治疗温血动物如小鼠、大鼠、马、牛、羊、狗、猫等以外，本发明的化合物可有效治疗人。

含有活性成分的药物组合物可以为适合于口服使用的形式，例如作为片剂，锭剂，糖锭，水性悬浮液或油性悬浮液，可分散性粉剂或颗粒，乳液，硬胶囊或软胶囊，或糖浆剂或酏剂。用于口服用途的组合物可以根据本领域已知用于制造药物组合物的任何方法来制备，且此类组合物可以含有一种或多种选自甜味剂、增香剂、着色剂和防腐剂中的试剂，以便提供药学上精致而美味的制剂。片剂含有活性成分与适合于制造片剂的无毒的药用赋型剂的混合物。这些赋型剂例如可以是惰性稀释剂，例如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；制粒和崩解剂，例如玉米淀粉或海藻酸；粘结剂，例如淀粉、明胶或***树胶，以及润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。这些片剂可以是未涂布的，或者它们可以通过已知技术来涂布，以延迟在胃肠道中的崩解和吸收，从而在更长的期间内提供持续作用。例如，可以使用延时材料例如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。它们还可以通过在美国专利4,256,108；4,166,452；和4,265,874中所述的技术来涂布，以形成用于控释的渗透治疗片剂。

用于口服用途的制剂还可以作为硬明胶胶囊提供，其中活性成分与惰性固体稀释剂例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土混合，或者作为软明胶胶囊提供，其中该活性成分与水混溶性溶剂如丙二醇、PEG和乙醇或油介质如花生油、液体石蜡或橄榄油混合。

水性悬浮液含有活性材料与适合于制造水性悬浮液的赋型剂的混合物。此类赋型剂是悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠，甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素，海藻酸钠，聚乙烯吡咯烷酮，黄芪胶和***树胶；分散或润湿剂可以是自然存在的磷脂，例如卵磷脂，或者氧化烯与脂肪酸的缩合产物，例如聚氧化乙烯硬脂酸酯，或者环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物，例如十七亚乙基氧基鲸蜡醇，或环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇衍生的偏酯的缩合产物例如聚氧化乙烯山梨糖醇一油酸酯，或环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇酸酐衍生的偏酯的缩合产物，例如聚氧乙烯去水山梨糖醇单油酸酯。该水悬浮液还可以含有一种或多种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯，一种或多种着色剂，一种或多种增香剂以及一种或多种甜味剂，例如蔗糖、糖精或阿斯巴特。

油性悬浮液可通过将活性成分悬浮在植物油例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油或矿物油例如液体石蜡中来配制。该油性悬浮液还可含有增稠剂例如蜂蜡、硬石蜡或十六烷醇。可以添加甜味剂如上述那些以及增香剂，以提供美味的口服制剂。这些组合物可以通过添加抗氧化剂如抗坏血酸来保存。

适合于通过添加水来制备水性悬浮液的可分散性粉剂和颗粒提供活性成分与分散剂或润湿剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂的混合物。适合的分散剂或润湿剂和悬浮剂可列举出上述那些。还可以存在其他赋型剂例如甜味剂、增香剂和着色剂。

本发明的药物组合物还可以为水包油型乳液的形式。该油相可以是植物油，例如橄榄油或花生油，或矿物油，例如液体石蜡或它们的混合物。适合的乳化剂可以是自然存在的磷脂，例如黄豆，卵磷脂以及由脂肪酸和己糖醇酸酐衍生的酯类或偏酯类，例如去水山梨糖醇单油酸酯，以及所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧化乙烯去水山梨糖醇单油酸酯。该乳液还可以含有甜味剂和增香剂。

糖浆剂和酏剂可以用甜味剂，例如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖配制。这种制剂还可以含有缓和剂、防腐剂、增香剂和着色剂。该药物组合物可以为无菌的可注射的水性或油性悬浮液形式。该悬浮液可以按照已知技术使用上述适合的分散剂或润湿剂和悬浮剂配制。无菌的可注射制剂还可以是在无毒的胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌的可注射的溶液或悬浮液，例如在1,3-丁二醇中的溶液。属于可以使用的可接受的载体和溶剂的是水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。还可以使用助溶剂例如乙醇、丙二醇或聚乙二醇。另外，无菌的固定油类通常被用作溶剂或悬浮介质。为此，可以使用任何温和的固定油，包括合成甘油一酯或甘油二酯在内。另外，脂肪酸如油酸可用于注射剂的制备。

用于吸入给药的剂型可以便利地作为气溶胶或干燥粉末配制。对于适合于和/或适宜于吸入给药的组合物，优选的是，活性物质为粒度减小形式，更优选为粒度减小形式通过或可通过微粉化来获得。优选的粒度减小（例如微粉化）化合物或盐或溶剂化物的优选粒度通过约0.5-约10微米的D50值来定义(例如使用激光器衍射测定)。

在一个实施方案中，该药物制剂适合于与加压定量吸入器一起使用，其在每一次起动时释放定量的药物。pMDIs的制剂可以为在卤代烃推进剂中的溶液或悬浮液的形式。在pMDIs中使用的推进剂的类型转变为氢氟烷烃类（HFAs），也称为氢氟碳（HFCs），因为氯氟烃类（还称为Freons或CFCs）的使用正在逐步停止。尤其，1,1,1,2-四氟乙烷(HFA 134a)和1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷(HFA 227)在几种目前市售的药物吸入产品中使用。该组合物可以包括用于吸入使用的其他的药用赋型剂，例如乙醇，油酸，聚乙烯吡咯烷酮等。

加压MDIs典型地具有双组件。首先，具有其中药物颗粒在压力下以悬浮液或溶液形式储存的筒组件。第二，具有用于保持和操纵筒的贮器组件。典型地，筒将含有多剂量的该制剂，但也有可能具有单一剂量的筒。筒组件典型地包括阀门出口，由该阀门出口可以排出筒的内容物。通过对筒组件施加力，推动它进入贮器组件，从而打开阀门出口，并使药物颗粒通过贮器组件从阀门出口输送，从贮器出口排出，从而从pMDI分配气溶胶药物。从筒中释放时，药物颗粒被“雾化”，形成气溶胶。意图使患者用他或她的吸入配合雾化药物的排出，使得药物颗粒在患者的吸气流中夹带，并输送到肺中。典型地，pMDIs使用推进剂来对筒的内容物加压，并推进药物颗粒从贮器组件的出口出来。在pMDIs中，制剂以液体或悬浮液形式提供，并与推进剂一起存留在容器的内部。该推进剂可以采取各种形式。例如，该推进剂可以包括压缩气体或液化气。

在另一个实施方案中，药物制剂适合于用干燥粉末吸入器使用。适合于在DPIs中使用的吸入组合物典型地包括活性成分的颗粒和药用载体的颗粒。活性材料的粒度可以是约0.1 μm到约10 μm；然而，为了有效输送到远端的肺，至少95%的活性剂颗粒为5 μm或更小。每一种活性剂能够以0.01-99%的浓度存在。然而，典型地，每一种活性剂以约0.05-50%的浓度存在，更典型地以组合物总重量的约0.2-20%的量存在。

如上所述，除该活性成分之外，该可吸入的粉末优选地包括药用载体，其可以由可为吸入所接受的任何药学惰性材料或材料的组合组成。有利地，载体颗粒由一种或多种结晶糖组成；该载体颗粒可由一种或多种糖醇或多元醇组成。优选地，该载体颗粒是右旋糖或乳糖的颗粒，尤其乳糖的颗粒。在利用普通干燥粉末吸入器如Handihaler、Rotohaler、Diskhaler、Twisthaler和Turbohaler的本发明的实施方案中，载体颗粒的粒度可以为约10微米到约1000微米。在这些实施方案的一些中，载体颗粒的粒度可以为约20微米到约120微米。在某些其它实施方案中，至少90wt%的载体颗粒的粒度小于1000微米，优选为60微米到1000微米。这些载体颗粒的较大粒度获得了良好的流动和夹带特性。在存在的情况下，以粉末的总重量为基准计，载体颗粒的量一般为至多95%，例如至多90%，有利地至多80%，且优选至多50wt%。如果存在的话，以粉末的总重量为基准计，任何细的赋型剂材料的量可以为至多50wt%，有利地至多30wt%，尤其至多20wt%。该粉末可以任选含有性能改性剂例如L-亮氨酸或其他氨基酸，和/或硬脂酸的金属盐例如硬脂酸镁或硬脂酸钙。

式I的化合物还能以用于药物直肠给药的栓剂的形式给药。这些组合物可通过将药物与在环境温度下为固体但在直肠温度下为液体的适合的无刺激性的赋型剂混合来制备，因此将在直肠中熔化而释放出该药物。这种材料是可可脂和聚乙二醇。

对于局部使用，使用含有式I的化合物的霜剂，软膏，凝胶剂，溶液或悬浮液等。(对于本申请来说，局部施用应该包括漱口剂和含漱剂。) 局部用制剂一般可以包括药物载体、助溶剂、乳化剂、渗透增强剂、防腐剂体系和润肤剂。

与其它药物的组合

为了治疗和预防***素介导的疾病，式I的化合物可以与其它治疗剂共同给药。因此，在另一个方面，本发明提供了包括治疗有效量的式I的化合物和一种或多种其它治疗剂的用于治疗***素媒介导的疾病的药物组合物。用于与式I的化合物组合治疗的适合的治疗剂包括：(1) DP受体拮抗剂例如S-5751； (2) 皮质甾类例如曲安奈德，布地缩松，倍氯米松，莫米松糠酸酯，丙酸氟替卡松和环索奈德； (3) β-激动剂例如沙美特罗，福莫特罗，特布他林，二羟苯基异丙氨基乙醇，舒喘宁等； (4) 白三烯调节剂，包括白三烯受体拮抗剂例如孟鲁司特，扎鲁司特，普仑司特，或者脂氧合酶抑制剂包括 5-脂氧合酶抑制剂和FLAP(5-脂氧合酶活化蛋白质)抑制剂例如齐留通； (5) 抗组胺剂例如溴苯那敏，扑尔敏，右氯苯那敏，吡咯烷甲苯基丙烯吡啶，氯马斯汀，可他敏，双苯拉林，苄吡二胺，羟嗪，甲吡咯烷基甲吩噻嗪，异丙嗪，异丁嗪，阿扎他定，二苯环庚啶，安塔唑啉，苯吡胺，吡拉明，阿司咪唑，特非那丁，氯雷它定，西替利嗪，非索非那定，脱乙酰氯雷它定等； (6) 解充血药，包括新福林，苯丙醇胺，伪麻黄碱，氧甲唑啉，肾上腺素，萘唑啉，丁下唑啉，六氢脱氧麻黄碱，或左脱氧麻黄碱； (7) 止咳药，包括可待因，氢可酮，咳美芬，维静宁，或右美沙芬； (8) 其他***素配体，包括***素F激动剂，例如拉坦前列素；迷索前列醇，恩前列素，利奥前列素，奥诺前列素或罗沙前列醇； (9) 利尿剂； (10) 非甾族抗炎剂(NSAIDs)例如丙酸衍生物(阿明洛芬，苯恶洛芬，布氯酸，卡洛芬，联苯丁酮酸，非诺洛芬，氟洛芬，氟比洛芬，布洛芬，吲哚洛芬，酮洛芬，咪洛芬，萘普生，奥沙普秦，吡洛芬，普拉洛芬，舒洛芬，噻洛芬酸和硫恶洛芬)，乙酸衍生物(吲哚美辛，阿西美辛，阿氯芬酸，环氯茚酸，双氯芬酸，芬氯酸，氯苯噻唑乙酸，芬替酸，呋罗芬酸，异丁苯乙酸，伊索克酸，oxpinac，舒林酸，硫平酸，四苯酰吡咯乙酸，齐多美辛和佐美酸)，灭酸衍生物(氟灭酸，甲氯灭酸，扑湿痛，尼氟酸和托灭酸)，联苯甲酸衍生物 (二氟尼柳和氟苯沙酸)，昔康类(伊索昔康，吡罗昔康，舒多昔康和替诺昔康)，水杨酸盐(乙酰水杨酸，水杨酸偶氮磺胺吡啶)和吡唑啉酮类(炎爽痛，bezpiperylon，非泼拉酮，莫非保松，羟保泰松，苯基保泰松)；(11) 环加氧酶-2 (COX-2)抑制剂例如塞来昔布和罗非考昔； (12) 磷酸二酯酶IV型抑制剂(PDE-IV)例如Ariflo，罗氟司特； (13) 趋化因子受体拮抗剂，尤其CCR-1，CCR-2和CCR-3；(14) 胆固醇降低剂例如HMG-CoA还原酶抑制剂(洛弗斯特丁，辛伐他汀和普伐他汀，氟伐他汀，阿托伐他汀和其它他汀类药物），多价螯合剂(消胆胺和降胆宁)，烟酸，非诺贝酸衍生物(二甲苯氧庚酸，氯贝丁酯，非诺贝特和苯扎贝特)，和普罗布可；(15) 抗糖尿病药如胰岛素，磺脲类，双胍(二甲双胍)，α-葡糖苷酶抑制剂(阿卡波糖)和格列酮类(曲格列酮，吡格列酮，恩格列酮，罗格列酮等等)； (16) 干扰素β制剂(干扰素β-1 a，干扰素β-1b)； (17) 抗胆碱能药剂例如毒蕈碱拮抗剂(溴化异丙托品，噻托溴铵，曲司氯铵，阿地溴铵和胃长宁，包括R,R-胃长宁)，以及选择性的毒蕈碱M3拮抗剂； (18) 甾体类，例如倍氯米松，甲基强的松龙，培他米松，强的松，***和氢化可的松； (19) 通常用于治疗偏头痛的曲坦类药物例如舒马曲坦（sumitriptan）和利扎曲坦； (20) 用于骨质疏松症的阿仑膦酸钠和其它治疗剂； (21) 其它化合物例如5-氨基水杨酸及其前药，抗代谢物例如硫唑嘌呤和6-巯基嘌呤，细胞毒癌症化疗剂，缓激肽(BK2)拮抗剂比如FK-3657，TP受体拮抗剂例如塞曲司特，神经激肽拮抗剂(NK1/NK2)，VLA-4拮抗剂，例如在US 5,510,332，WO97/03094，WO97/02289，WO96/40781，WO96/22966，WO96/20216，WO96/01644，WO96/06108，WO95/15973和WO96/31206中所述的那些。另外，本发明包括治疗***素D₂介导的疾病的方法，该方法包括：将无毒的治疗有效量的式I的化合物给药于需要这种治疗的患者，任选与诸如以上所列举的成分的一种或多种共同给药。

合成方法

式I的化合物可以根据在以下反应路线中给出的合成路线以及通过按照本文描述的方法来制备。所使用的缩写包括： Ac=乙酰基; Bu=丁基; COD=1,5-环辛二烯; Cp*=五甲基环戊二烯基; CPME=环丙基甲基醚; DCM=二氯甲烷; DIPEA=二异丙基乙胺; DMF=二甲基甲酰胺; EA/EtOAc=乙酸乙酯; Et=乙基; Hex=己烷; HMDS=六甲基二硅氮烷; IPA=异丙醇; IPAc=醋酸异丙酯; iPr=异丙基; Me=甲基; Ms=甲磺酰基(mesyl); MTBE=甲基叔丁基醚; Pr=丙基; RT=室温; t-bu=叔丁基; TEA=三乙胺; THF=四氢呋喃; TMS=三甲基甲硅烷基; p-TSA=对甲苯磺酸。

如反应路线1所述，取代的叠氮化物VIII可以在七个连续的步骤中制备。由 4-氧代庚二酸酯 I和取代的肼II在回流甲苯中的缩合获得乙酯中间体III。在丙醇中用甲磺酸处理III时，能够获得相应的吲哚类IV。将碘化三甲基锍的阴离子区域选择性加成到吲哚的2位上的酯上则提供了叶立德V。V在催化量的氯(1,5-环辛二烯)铱(I)二聚物的存在下的环化获得所需的羟吲哚VI。该酮结构部分至叠氮化物VIII的转化可以经由标准三步骤规程来进行，包括用硼氢化钠还原，用甲烷磺酰氯甲磺酰化和用叠氮化钠置换。

反应路线1：叠氮化物的合成

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非商业性的炔烃可以通过使用乙基溴化镁和溴化铜的三甲基甲硅烷基乙炔与相应的苄基卤IX的反应来制备 (反应路线2, Gazz, Chim. Ital. 1990, 120, 783)。X中的TMS基团的除去可以通过使用在DMF中含水KF来完成，从而获得所需取代的炔烃XI。

反应路线2 炔烃的合成

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***例如 XIII和XV可以使用Click化学来制备。在碘化亚铜的存在下的叠氮化物VIII和炔烃XI的环加成作用(3+2)专门地获得了1,4-***XII (Angew. Chem. Int. Ed. 2002, 41, 2596)。1,5-***例如XIV可以使用钌配合物来制备 (J. Am. Chem. Soc. 2005, 127, 15998)。XII或XIV在碱水溶液中的水解获得了最终产物XIII或XV。

反应路线3：1,4-***(部分A)和1,5-***(部分B)的合成

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酮XVI 以前在J. Med. Chem. 2005, 48, 897中有报告。该酮结构部分至叠氮化物XVIII的转化可以经由标准三步骤规程来进行，包括用硼氢化钠还原，用甲烷磺酰氯甲磺酰化和用叠氮化钠置换。叠氮化物XVIII可以使用铜或钌来与炔烃XI偶联，从而获得***XIX。标准水解提供了所需的酸XX。

反应路线4

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获得非商业性的炔烃的替代路线包括使用Sonogashira条件来提供TMS-炔烃，该TMS-炔烃能够通过使用催化量的用乙酸缓冲的氟化四甲基铵四水合物而去保护，获得乙炔XXII。内炔烃可以通过末端炔烃XXIII用甲基碘的烷基化来制备，从而提供炔烃XXIV (反应路线5, Knobloch, K.; Keller, M.; Eberbach, W. Eur. J. Org. Chem. 2001, 3313-23332)。偕二甲基α取代的炔烃可以通过用氢化钠将酯XXV去质子化，随后用甲基碘烷基化来制备。酯XXVI的还原，随后在Swern条件下的氧化，获得了醛XXVII。用Bestmann反应剂处理，提供了所需的偕二甲基取代的炔烃XXVIII。

反应路线5

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吲哚XXXI 可以经由酮缩醇(XXIX)和亚胺(XXX)形成来制备，随后是Heck环化和叶立德形成。铟催化的环化提供酮XXXII。酮至手性醇XXXIII的转化可以经由酶还原来完成，从而安装所需的立构中心。

反应路线6

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酮VI用碘代甲烷的烷基化提供取代的酮XXXIV。酮结构部分XXXIV至***XXXVII的转化按照类似于如反应路线1和反应路线3所示的非甲基化酮的规程来进行。

反应路线7

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二取代的炔烃还可以使用钌催化剂来与叠氮化物VIII偶联，从而提供1,4,5-***的区域异构混合物。在异构体分离和相应的酯类水解之后，获得了羧酸类XXXVIII和XXXIX。

反应路线8

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式I的化合物可以根据在本文的反应路线和实施例中所述的工序使用合适的材料来制备，并且进一步通过以下具体实施例来举例说明。然而，所举例的化合物不被认为以任何方式限制本发明的范围。实施例进一步说明了制备本发明的化合物的细节。本领域技术人员能够容易地理解，保护基、试剂以及以下制备工序的条件和方法的已知变化能够用于制备这些化合物。还应理解的是，当化学试剂市场上不能买到时，这种化学试剂能够容易地由本领域技术人员通过按照或采用文献中所述的已知方法来制备。所有温度是摄氏温度，除非另作说明。质谱(MS)通过电喷射离子质谱法(ESMS)或通过大气压化学电离质谱法（APCI）来测定。

实施例1

[7-(4-苄基-[1,2,3]***-1-基)-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基]-乙酸

步骤 1 ： [7-(4- 苄基 -1H-1,2,3- *** -1- 基 -6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 ] 乙酸丙基酯

在室温下向(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙酯(1eq) (WO07019675 A1中所述的合成)和丙-2-炔-1-基苯(2eq)在四氢呋喃(THF) (0.1 M)中的搅拌溶液中添加二异丙基乙胺(DIPEA) (5eq)和CuI(5eq)。反应混合物搅拌过夜，然后用NH₄Cl饱和液猝灭，用乙酸乙酯（EA）萃取，用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥，再蒸发。通过combi-flash EA/Hex 0-100% 提纯，获得所需的化合物，其直接用于下一步。

步骤 2 ：

在室温下向[7-(4-苄基-1H-1,2,3-***-1-基)-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基]乙酸丙酯(1eq)在THF / MeOH (2:1，0.1M)中的搅拌溶液中添加氢氧化钾(10eq)的2M溶液。反应混合物在室温下搅拌2小时，然后通过添加 HCl 10%猝灭，直到酸性pH为止，再用二氯甲烷(DCM)稀释。通过相分离器过滤，随后蒸发，获得作为白色固体的所需产物。

实施例2

{7-[4-(4-甲氧基-苯基)-[1,2,2]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸

使用实施例1所述的类拟工序由(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙酯和1-乙炔基-4-甲氧基苯制备标题化合物。

实施例3

[7-(5-苄基-[1,2,3]***-1-基)-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基]-乙酸

步骤 1 ： [7-(5- 苄基 -1H-1,2,3- *** -1- 基 -6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 ] 乙酸丙基酯

在室温下向(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-β]吲哚-10-基)乙酸丙酯 (WO07019675 A1中所述的合成)和丙-2-炔-1-基苯(1.5eq)在苯(0.3M)中的搅拌溶液中添加氯 (1,5-环辛二烯)-(五甲基环戊二烯基)钌(II) (0.1eq)。反应混合物用氮气吹洗，然后加热至80℃过夜，冷却至室温，用硅胶过滤，用EtOAc洗涤，并浓缩。该残留物通过硅胶柱色谱法提纯，用 EtOAc /己烷(0-50%)洗脱，得到所需外消旋酯类，其通过使用10×250mm Chiralpak AD柱的SFC在150BAR和254nm下拆分，用40%MeOH在5mL/min的流速下洗脱（保留时间=7.5分钟和9.8分钟）。

步骤 2 ：

所得手性酯类(1eq) (保留时间= 7.5 min和9.8min)在室温下使用在THF / MeOH (2：1，0.1M)中的2M氢氧化钾溶液(10eq)分开水解。反应混合物在室温下搅拌2小时，然后通过添加 HCl 10%猝灭，直到酸性pH为止，再用DCM稀释。通过相分离器过滤，随后蒸发，分别地获得实施例3.1和3.2。实施例的3.1的¹H NMR数据:

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实施例4

(7-{5-[(2,6-二氯苯氧基)甲基]-1H-1,2,3-***-1-基}-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸

使用实施例3所述的类拟工序由(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙基酯和2,6-二氯苯基丙-2-炔-1-基醚制备标题化合物。

实施例5

(7-{5-[1-(4-氟-苯基)-1-羟基-乙基]-[1,2,3]***-1-基}-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)-乙酸

使用实施例3所述的类拟工序由(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙基酯和2-(4-氟苯基)丁-3-炔-2-醇制备标题化合物。所得非对映异构体的分离在酯阶段通过快速色谱法使用10-70% EA/Hex的梯度来进行，获得两种对映异构体混合物。更快洗脱的对映异构体混合物通过手性HPLC使用50×400mm Chiralcel OD柱拆分，用8% iPrOH、8% EtOH、83.75%己烷和0.25% Et₃N在60mL/min和254nm下洗脱。所得酯类(保留时间= 18.4和22.1分钟)分开地在THF/MeOH (2:1，0.1M)中在室温下使用1M氢氧化钠溶液(10eq)水解。反应混合物在室温下搅拌2小时，然后通过添加 HCl 10%猝灭，直到酸性pH为止，再用DCM稀释。通过相分离器过滤，随后蒸发，分别地获得所需实施例5.1和5.2。较慢洗脱的对映异构体混合物通过手性HPLC使用50×400mm Chiralcel OD柱拆分，用30% iPrOH、70%己烷在60mL/min和254nm下洗脱。所得酯类(保留时间= 18.3和34min)以与以上所述类似的方式水解，从而分别获得实施例5.3和5.4。实施例5.1的¹H NMR数据：

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实施例6

{7-[5-(1-苯基-环戊基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸

使用实施例3中所述的类似工序，由(1-乙炔基环戊基)苯和对映异构体纯的(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙酯制备标题化合物，该乙酸丙酯通过在4.6×250mm ChiralCel OD柱上进行拆分，用15% MeOH、15% iPrOH、69.75%己烷和0.25% Et₃N在1mL/min和254nm的条件下洗脱来制备。保留时间=10.3分钟和11.5分钟。实施例6.1和6.2由该手性叠氮化物制备，保留时间分别为10.3分钟和11.5分钟。实施例6.1的¹HNMR数据:

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实施例7

[7-(5-苄基-[1,2,3]***-1-基)-4-氟-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基]-乙酸

步骤 1 ： 3-[1-(2- 氟苯基 )-6- 氧代 -1,4,5,6- 四氢哒嗪 -3- 基 ] 丙酸乙酯

在装有迪安-斯达克分水器的烧瓶内，将2-氟肼盐酸盐(1eq)和4-氧代庚二酸二乙基酯 (1eq)在甲苯(1M)中合并。将该悬浮液在回流下老化24小时。将反应混合物冷却到室温，并在真空下浓缩。该粗产物在硅胶柱上提纯，用EtOAc/己烷(10-50%) 洗脱，从而获得橙棕色油状的所需材料，其在下一步中直接使用。

步骤 2 ： 3-[7- 氟 -3-(2- 氧代 -2- 丙氧基乙基 )-1H- 吲哚 -2- 基 ] 丙酸丙酯

将甲磺酸(1.2eq)加入到3-[1-(2-氟苯基)-6-氧代-1,4,5,6-四氢哒嗪-3-基]丙酸乙酯(1eq)在正丙醇(1M)中的搅拌溶液中。将该混合物在80℃下加热48小时。将混合物冷却至室温，用氢氧化钠的水溶液(1.2eq)中和，再用甲基叔丁基醚(MTBE)萃取。将有机层用硫酸钠干燥，再浓缩。残留物通过短硅胶柱提纯，用EtOAc/己烷(0-60%，30分钟)洗脱，得到棕色油状的所需物质。

步骤 3 ： (2-{4-[ 二甲基 ( 氧化 )-1- 硫酮 ]-3- 氧代丁基 }-7- 氟 -1- 基 - 吲哚 -3- 基 ) 乙酸丙酯

将三甲基碘化亚砜(2eq)部分地溶于THF (9M)中，并添加叔丁醇钾在THF (2.4eq)中的溶液。将该混合物加热至67℃，保持2小时，然后冷却至0℃。经15分钟向该冷却溶液中添加3-[7-氟-3-(2-氧代-2-丙氧基乙基)-1H-吲哚-2-基]丙酸丙酯(1eq)在THF (5M)中的溶液。将该混合物加热到室温，并搅拌24小时。将该反应混合物倒入水和EtOAc的混合物中，并将各层分割。水层用EtOAc反萃取。合并的有机层用NaHCO₃的饱和水溶液和盐水连续洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，浓缩，获得橙棕色固体状所需物质，其在下一步中直接使用。

步骤 4 ： (4- 氟 -7- 氧代 -6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 ) 乙酸丙酯

使用套管，经15分钟将(2-{4-[二甲基(氧化)-1-硫酮]-3-氧代丁基}-7-氟-1H-吲哚-3-基)乙酸丙酯(1eq)在二甲基甲酰胺(DMF)中的脱气溶液 (0.2M)添加到预热(105℃)的氯(1,5-环辛二烯)铱(I)二聚物(0.02eq)在甲苯中的脱气溶液(0.01M)中。将该混合物在105℃下老化45分钟，冷却至室温，倒入盐水中，并用Et₂O稀释。将各层分离，有机层用盐水再次洗涤。将有机层干燥(Na₂SO₄)，过滤，再在减压下浓缩。残留物通过硅胶柱色谱法提纯，用EtOAc/己烷(0-30%，30分钟)洗脱，得到黄色油状的所需物质。

步骤 5 ： {4- 氟 -7-[( 甲基磺酰基 ) 氧基 ]-6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 } 乙酸丙酯

在0℃下向(4-氟-7-氧代-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸酯(1eq)和MeOH (3eq)在THF中的搅拌溶液(0.07M)中添加NaBH₄ (1eq)。将反应混合物在0℃下搅拌60分钟。添加氯化铵饱和溶液和EtOAc，并分割各层。将有机层用盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤，再浓缩，获得作为固体的所需醇，其在下一步中直接使用。在0℃下，向粗乙醇(1eq)在CH₂Cl₂ 中的搅拌溶液(0.33M)中添加甲烷磺酰氯(1.05eq)和随后添加三乙胺(1.1eq)。将该反应混合物在0℃下搅拌30分钟，然后在室温下搅拌过夜。反应通过添加饱和NH₄Cl的溶液来猝灭，用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤，干燥，再蒸发。残留物通过硅胶柱色谱法提纯，用EtOAc/己烷(0-100%)洗脱，得到浅黄色油状的所需物质。

步骤 6 ： (7- 叠氮基 -4- 氟 -6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 ) 乙酸丙酯

在0℃下，向{4-氟-7-[(甲基磺酰基)氧基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}乙酸丙酯(1eq)在DMF 中的搅拌溶液(0.15M)中添加叠氮化钠(1.2eq)。将反应混合物在60℃下搅拌6小时。反应通过添加水和NH₄Cl来猝灭，用EtOAc萃取，用水、盐水洗涤，干燥，再蒸发。残留物通过硅胶柱色谱法提纯，用EtOAc/己烷(0-50%)洗脱，得到黄色油状的所需物质。

步骤 7 ： [7-(5- 苄基 -1H-1,2,3- *** -1- 基 )-4- 氟 -6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 ] 乙酸丙酯

在室温下向(7-叠氮基-4-氟-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙酯和丙-2-炔-1-基苯(1.5eq)在苯中的搅拌溶液(0.3M)中添加氯 (1,5-环辛二烯)-(五甲基环戊二烯基)钌(II) (0.1eq)。反应混合物用氮气吹洗，然后在80℃下老化过夜，冷却至室温，用硅胶过滤，用EtOAc洗涤，再浓缩。残留物通过硅胶柱色谱法提纯，用EtOAc/己烷(0-50%)洗脱，得到棕色油状的所需物质。该外消旋混合物通过使用50×400mm Chiralpak AD柱的HPLC在50 ml/min和254nm下来拆分，用15%MeOH、15%EtOH、69.75%己烷和0.25% Et₃N洗脱，获得所需手性酯，保留时间分别为9.6分钟和11.6分钟。

步骤 8 ：

步骤7的两种手性酯类分开地如下皂化。在室温下向[7-(5-苄基-1H-1,2,3-***-1-基)-4-氟-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基]乙酸丙酯(1eq)在THF:MeOH中的搅拌溶液(2:1 0.3M)中添加1M氢氧化钠溶液(12eq)。将该反应混合物在室温下搅拌2小时，通过添加 10%HCl 猝灭，直到酸性pH为止，再用EtOAc稀释。将各层分离，水相用EtOAc反萃取。将合并的有机级分干燥(MgSO4)，过滤，在减压下蒸发，在用醚/己烷共蒸发之后，得到作为白色固体的所需手性酸7.1和7.2。

实施例8

{4-氟-7-[5-(4-氟-苄基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸

使用实施例3中所述的类似工序，由(7-叠氮基-4-氟-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙酯(实施例7，步骤6)和按照下列工序(Gazz. CMm. Ital. 1990, 120, 783)获得的1-氟-4-丙-2-炔-1-基苯制备标题化合物。在室温下向乙炔基三甲基硅烷 (1eq)在THF (0.6M)中的混合物中添加溴化乙基镁(1eq)。将该混合物在室温下搅拌30 min，然后添加溴化铜(I) (0.1eq)。在搅拌30分钟之后，添加4-氟苄基溴(1eq)在THF中的1M溶液，并将该混合物加热至回流过夜。反应混合物通过添加到饱和NH₄Cl的***液中来猝灭，搅拌30分钟，然后用Et₂O萃取，用盐水洗涤，干燥，再蒸发。通过使用梯度0-100% EA/Hex的Combi-flash提纯，获得所需的TMS炔烃。将TMS炔烃直接与氟化钾(1.2eq)在DMF (0.2M，含有 1%水)中混合。将该混合物在室温下搅拌过夜，然后通过添加3N HCl猝灭，搅拌1小时，然后用戊烷萃取，用饱和NaHCO₃、盐水洗涤，干燥，再蒸发。粗炔烃化合物直接用于实施例3中所述的click化学方法。所得外消旋酯通过使用4.6×250mm Chiralpak AS柱的HPLC拆分，用60%EtOH、39.75%己烷和0.25% Et₃N在0.8ml/min和254nm下洗脱。将所得手性酯类(停留时间= 10.3分钟和13.3分钟)水解，分别获得实施例8.1和8.2。实施例8.1的¹H NMR:

。

实施例8A

{(7R)-4-氟-7-[5-(4-氟苄基)-1H-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]-吲哚-10-基}-乙酸

步骤 1 ： 4,4- 二乙氧基庚二酸二乙酯（“酮缩醇”）

向EtOH (27.8 L)、原甲酸三乙酯(9.26 L，55.6 mol)和4-氧代庚二酸二乙基酯(5.93 L，27.8 mol)中添加对甲苯磺酸一水合物(0.053 kg，0.278 mol)，并在搅拌下将反应混合物加热至77.0℃，搅拌20小时。中断加热，并通过在真空下蒸馏除去乙醇，用该批料在63℃下开始。将剩余的橙色的酮缩醇溶液溶于甲苯(32 L)中，再在搅拌下转移到装有2% NaHCO₃ (24 L)的100-L萃取器中。

将各层分离，甲苯层用水(19.2 L)洗涤，然后经由在管线中的滤器转移到附着于加热外罩的50-L圆底烧瓶中。在真空下除去甲苯，包括附加冲洗(5 L)，用于共沸除去水。该酮缩醇作为黄色油被分离。

步骤 2 ： 4-[(2- 溴 -6- 氟苯基 ) 亚胺基 ] 庚二酸二乙酯 ( “亚胺” )

在氮气下，向步骤1的酮缩醇 (8.46 kg，24.31 mol)中添加2-溴-6-氟苯胺(2.509 L，22.10 mol)和乙酸(0.253 L，4.42 mol)。将该混合物加热至145℃，再通过蒸馏除去乙醇。该产物用于下一反应。

步骤 3 ： 3-[3-(2- 乙氧基 -2- 氧代乙基 )-7- 氟 -1H- 吲哚 -2- 基 ] 丙酸乙酯 ( “吲哚二酯类” )

将环丙基甲基醚(CPME，27 L) 脱气20分钟，然后添加三(二苄叉基丙酮)二钯(0) (0.504 kg，0.551 mol)和四氟硼酸三叔丁基鏻(0.639 kg，2.203 mol)，随后添加CPME (3.2 L)。将该混合物脱气，再添加N-甲基二环己基胺 (2.336 L，11.01 mol)，并连续脱气100分钟。

用主动的脱气，将步骤2的亚胺 (8.86 kg，22.03 mol)溶于CPME(28 L)中。添加N-甲基二环己基胺 (7.01 L，33.0 mol)，并将该混合物脱气75分钟。

用连续的氮气流，通过真空将该亚胺溶液转移到催化剂溶液中，且整个反应容器严格地脱气20分钟。在脱气之后，将CPME (2.2L)漂洗液在真空下转移到反应容器中。将该反应混合物再次脱气35分钟，并在约108℃下加热18小时。将该批料进行洗涤2×2N HCl (18 L)，1× 5% NaHCO₃ (18 L)，1× H₂O (12 L)。

将合并的CPME层经由2个在管线中的滤器(1个常规，1个碳)过滤，通过真空蒸馏脱除CPME至低容量，产生暗黄色溶液。添加甲苯(12 L)，在真空下脱除，从而有助于冲洗掉附加的CPME。添加庚烷(18 L)，并将该不均匀混合物搅拌，用晶体吲哚二酯类接种，使之继续冷却，但没有实现结晶。

添加甲苯(500 mL)和THF (5 L)，以完全溶解该批料；将该反应溶液在干冰/丙酮浴中冷却。在-6.8℃下，该批料变得稍微浑浊，添加少量种子，该批料变成晶体。经30分钟继续冷却至-10℃。在该温度下，添加庚烷(30 L)，维持温度在<-6℃。将该批料冷却到-17到-15℃，并老化1.5小时。将该批料在约-17℃下搅拌另外2小时，然后通过泵抽在-19到-18℃下冷过滤。使用冷庚烷洗涤(12 L)用来漂洗该容器，并洗涤发粘的黄橙色晶体。将该批料在氮气和真空下干燥，该吲哚二酯类作为发粘的黄色固体分离。

步骤 4 ： (2-{4-[ 二甲基 ( 氧化 )-1- 硫酮 ]-3- 氧代丁基 }-7- 氟 -1H- 吲哚 -3- 基 ) 乙酸乙酯 ( “叶立德” )

在N₂下在室温下向叔丁醇钾在THF (27 L)中的1M溶液中分批添加Me₃SOI (5.81 kg)。将所得悬浮液加热至66℃，保持2小时。在将反应混合物冷却至30℃之后，经10分钟添加步骤3 的吲哚二酯类(5.35 kg)在THF (5 L)中的溶液。含有附加THF (2.5 L)的漂洗液也被转移到反应容器中。将反应混合物加热至60℃，保持2.5小时。

在将反应混合物冷却至20℃之后，添加水(40 L)和EtOAc (20 L)。将该混合物在20℃下搅拌30分钟。分离各层，并将附加水(15L)加入到水层中，以溶解观测到的沉淀。水层用EtOAc (20 L和10 L)反萃取两次。合并的有机层用饱和NaHCO₃(30 L)洗涤，然后用2 wt%NaCl水溶液 (20 L)洗涤。该有机相用两个在管线中的滤器(1个常规，1个碳)过滤。将该滤液在减压下浓缩，用EtOAc (40 L)冲洗至大约12 L的目标体积。经30分钟添加庚烷(24 L)。观察到了黄色沉淀。添加附加的EtOAc (500 mL)，以获得3:1的庚烷/EtOAc的体积比。将所得悬浮液在室温下老化一夜，然后过滤。滤饼用25%EtOAc/庚烷(32 L)洗涤，然后在室温下在真空和氮气下干燥，从而提供作为黄色固体的叶立德。

步骤 5 ： [4- 氟 -7- 氧代 -6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 ] 乙酸乙酯 ( “酮” )

将[Ir(COD)Cl]₂(46.9 g)加入到用N₂喷射过夜的甲苯(53 L)中。在用N₂喷射另外50分钟之后，将该溶液加热至100℃。

将步骤4的叶立德 (1.74 kg)在DMF (7 L) (KF= 1500ppm)中的溶液用N₂喷射1小时，然后经1.5小时在100℃下转移到以上[Ir(COD)Cl]₂溶液中。将具有脱气DMF (1L)的漂洗液转移到反应容器中。在添加完之后，将反应混合物在100℃下保持另外30分钟。

在冷却到室温之后，将反应混合物用水(2×18 L)洗涤，并且该有机相通过2个在管线中的滤器(1个常规，1个碳)过滤。添加硅胶(3.5 kg，230-400目，等级60)，并将该混合物在室温下搅拌一夜。在过滤之后，该硅胶滤饼用甲苯(3×17 L)洗涤。制备两批的该材料，再合并。合并的溶液经由两个在管线中的滤器(1个常规，1个碳)过滤，在减压下浓缩，用IPA(2×15 L)冲洗至大约7 L的目标体积。接近浓缩结束时，产物开始作为红色油出油，之后作为桃红色固体结晶。

经1小时添加水(15 L)，并将所得悬浮液老化2小时，过滤，滤饼用1:2 IPA/水(15 L)洗涤，然后在室温下在真空和氮气下干燥，获得桃红色酮。

步骤 6 ： [(7S)-4- 氟 -7- 羟基 -6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 ] 乙酸乙基酯 ( “醇” )

在室温下将K₂HPO₄ (0.604 kg，3.47 mol)溶于水(33 L)，形成0.1M磷酸盐缓冲液。使用5N HCl (260 mL)将pH调节到7.0。通过N₂鼓泡将缓冲液脱气过夜。在室温下，将NADP (0.0422 kg, 0.055 mol)和CDX KRED P3H2 (Codex KRED Panel 酮还原酶 P3H2, 购自Codexis, Inc., Redwood City, CA, USA; 0.1925 kg, 5.23 mol) 溶于pH 7.0缓冲液中。

通过N₂鼓泡将异丙醇(14.5 L)脱气一夜。将步骤5 获得的酮(1.61 kg，5.23 mol)加入到IPA中，并在40-43℃下溶解。将温溶液加入到酶溶液中，加热至33-35℃并老化过夜。在搅拌20小时以后，添加IPAc(31.1 L))，并且将混合物搅拌15分钟。在 2小时后，除去底部水层，合并的有机和乳化分层（rag layers)通过solka floc床在2层棉布上过滤，用附加的IPAc（11L）洗涤。将各相分离，IPAc层用1%盐水(16 L)和水(16 L)洗涤。IPAc溶液经由两个在管线中的滤器(1个常规，1个碳)过滤，用附加的IPAc(2 ×16 L)冲洗至11.5 L (10 L IPAc，1.5L醇）的目标体积。

替代性还原：

将甲酸钠(5.97eq)和磷酸氢二钾(1.3eq)溶于水(.077M)。使用6N HCl将pH调节到pH 7.0。添加β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(0.02eq)，并在室温下溶解。然后，添加来源于红平红球菌（Rhodococcus Erythropolis）的醇脱氢酶 (50 wt%)和甲酸酯脱氢酶(10%)，使用搅拌在室温下溶解。温度设置在35℃，检查pH(7.0)。将(4-氟-7-氧代-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸乙酯酯溶于DMF (.69M)。将该储备溶液的一半加入到该反应器中。每小时添加另外三个部分的储备溶液，总计3小时，最后添加DMF漂洗液。pH是7.4，使用6N HCl将pH调节到7.1。

在21小时反应时间时，pH是7.8。添加6N HCl以调节pH至7.3。将反应冷却至室温。添加Solka floc，并混合~3小时，之后通过solka floc床过滤。撇开水层，滤饼用2L MTBE洗涤三次。让该滤液在分液漏斗中沉降，然后截取水相，与含水滤液合并。有机层用盐水洗涤。合并的水层用MTBE萃取，让各相沉降过夜。该用过的水相和分层被丢弃。有机相用盐水洗涤。将合并的有机层浓缩，且获得所需吲哚产物。

步骤 7 ： [(7S)-4- 氟 -7- 甲烷磺酰基氧基 -6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 ] 乙酸乙基酯 ( “甲磺酸酯” )

将步骤6的醇 (1.53 kg，5.25 mol)在IPAc(9.95 L)中的溶液冷却至-20℃。按一份添加Et₃N (1.5 L，10.76 mol)，并使内部温度平衡至-10℃。经90分钟的时间将MsCl(0.551 L，7.07 mol)缓慢添加到反应混合物中；将内部温度保持在低于10℃。在搅拌另外5分钟之后，添加附加的MsCl(41 mL)，将反应混合物搅拌15分钟，冷却至-2℃，并经20分钟缓慢添加1N HCl (7.75 L)的溶液。在搅拌10分钟后，分离各层。有机层用5% NaHCO₃ (7.75 L)洗涤，然后用0.5%盐水(3L)洗涤。

IPAc溶液经由两个在管线中的滤器（1个常规，1个碳）过滤，将该溶液浓缩，与IPAc (4×4L）一起共沸干燥。通过在室温下缓慢添加庚烷（17L）将所形成的iPAc溶液（约3L）结晶。让晶体老化45分钟，然后过滤。该容器和晶体用总共的9:1庚烷:IPAc(15 L)洗涤。将晶体在真空和氮气下干燥过夜。该甲磺酸酯作为浅黄色结晶固体分离。

步骤 8 ： [(7R)-4- 氟 -7- 叠氮基 -6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 ] 乙酸乙基酯 ( 叠氮化物 )

在恒定的N₂流下，将步骤7的甲磺酸酯 (1.67 kg，4.32 mol)、DMF (8.35 L)、NaN₃ (0.457 kg，7.03 mol)和Et₃N(65 mL，0.466 mol)的反应混合物维持在66-70℃之间。在18小时之后，将混合物冷却至室温，在强烈搅拌下缓慢添加H₂O (8.45 L)。将反应混合物过滤；该晶体用1 :1 DMF:H₂O (16 L)、3:7 DMF:H₂O (8.5 L)和水(14 L)洗涤。将暗褐色固体在真空和氮气下干燥。

通过在N₂下将棕色叠氮化物晶体(1.374 kg)溶解在IPAc(8.25 L)中来进行重结晶。添加Darco-KB (302 g, 22 wt%)，并将该多相混合物搅拌1.5小时。将所得悬浮液通过Solka-Floc过滤，滤饼用IPAC（3×4L）洗涤，获得叠氮化物在IPAC中的红色溶液。将IPAc溶液经由在管线中的滤器过滤、浓缩，再将溶剂切换为庚烷。在庚烷的添加过程中，发生了叠氮化物的结晶，添加庚烷，直到获得94:6庚烷: IPAc(~10倍体积的溶剂）的浓度为止。将反应容器冷却至-20℃，使之老化1小时。通过泵抽将晶体冷过滤，用冷(-20℃) 2:98 IPAc:庚烷(8.5 L)洗涤，随后用100%庚烷(8 L)洗涤。该叠氮化物作为浅棕色晶体分离。

步骤 9 ： [3-(4- 氟苯基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ] ( 三甲基 ) 硅烷 ( “ TMS 炔烃” )

将N-甲基二环己基胺 (2.95 kg，15.08 mol)加入到甲醇(10.50 L)，四氟硼酸三叔丁基鏻(46 g，0.159 mol)和乙酸钯(II)(18 g，0.080 mol)的混合物中，并将反应混合物脱气45分钟。添加4-氟苄基溴(0.980 L，7.94 mol)和三甲基甲硅烷基乙炔 (1.225 L，8.73 mol)，并将该批料加热至50℃，保持90分钟，然后冷却。

在30℃下，添加庚烷(6 L，4倍体积)。在19.3℃下，经22分钟将1N HCl (6 L，4倍体积)缓慢添加到反应混合物中，用冰-水浴冷却；使温度增加到最高25.8℃。然后经由在管线中的滤器通过真空将双相混合物输送到50L带夹套的圆柱形容器中。还转移附加庚烷(1.5 L，1倍体积和0.5 L，1/3倍体积)漂洗液。将该混合物搅拌，并使各层分离。有机层用水(6L，4倍体积)洗涤。该暗橙色庚烷层经由在管线中的滤器过滤，且通过真空蒸馏除去庚烷。将该批料缓慢加热，直到发生蒸馏。蒸馏在112-118℃下发生，表示表面压力为~ 10托 (参考: Gazz. Chim. Ital. 1990, 120, 783: 在10托114℃)。

步骤 10 ： 1- 氟 -4-( 丙 -2- 炔 -1- 基 ) 苯 ( “炔烃” )

将步骤9的TMS-炔烃(1.48 kg，5.95 mol)在DMF (1.5 L)中的溶液冷却至 6.6℃，并在其中添加乙酸(0.069 L，1.205 mol)和附加DMF (DMF总体积 = 2.96 L)。随后经15分钟的时间分三批引入Me₄NF·4H₂O (0.250 kg，1.523 mol)。在引入最后一批之后观测放热，其中在5分钟的期间内温度上升至23.1℃，之后经另外15-20分钟冷却至5℃。

将反应混合物再冷却至0℃，添加甲苯(3L)，随后缓慢添加1N HCl (7.5 L，5倍体积)。将反应混合物搅拌，经30分钟升温至17℃。将水相除去，橙色有机相用1%NaHCO₃(7.5 L)和水(3 L)洗涤。添加Na₂SO₄(300g)，并将该悬浮液搅拌1小时。在1小时之后，使固体沉降，并通过在管线中的滤器将悬浮液过滤。炔烃作为在甲苯中的浅黄色溶液储存。

步骤 11 ： {(7R)-4- 氟 -7-[5-(4- 氟苄基 )-1H-[1,2,3] *** -1- 基 ]-6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2-a] 吲哚 -10- 基 }- 乙酸乙基酯 ( “***酯” )

将步骤8的叠氮化物 (1.125 kg，3.56 mol)溶于甲苯(0.984 L)中，使用电热板以补偿吸热溶解。

将18.7 wt%步骤10的炔烃在甲苯中的溶液(2.81 kg，3.91 mol)和Cp*Ru(COD)Cl (0.0236 kg，0.062 mol)脱气30分钟，并将反应混合物加热至70℃。将叠氮化物的暗红色甲苯溶液经50分钟加入到反应混合物中。在添加之后，将温度维持在70℃下达10分钟，然后经15分钟升高到90℃。在90℃下2小时后，将内部温度升温到96℃，并且反应完成需要附加7.5小时。

添加Darco KB-G (400 g，25 wt%)，并将该悬浮液搅拌90分钟。将该混合物用Solka floc过滤，用甲苯(5×4 L)洗涤。合并的滤液经由两个在管线中的滤器(1个常规和1个碳)过滤，再浓缩。

步骤 12 ： {(7R)-4- 氟 -7-[5-(4- 氟苄基 )-1H-[1,2,3] *** -1- 基 ]-6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 }- 乙酸

在氮气下将EtOH (2.90 L)加入到作为在甲苯(4.35 L)中的22wt%溶液获得的步骤11的***酯(1.45 kg，3.22 mol)中，将该混合物脱气过夜。

经10分钟添加氢氧化钠(0.773 L，3.86 mol)，并将反应混合物加热至50℃保持2小时。将反应混合物冷却至33℃，再添加1:1 EtOH:H₂O (2.9 L)。当温度是25℃时，该双相的混合物经由在管线中的滤器过滤，并将各层搅拌，然后分离。该水层通过真空经由2个在管线中的滤器(1个常规，1个碳)转移到清洁容器中。添加Ecosorb C-908 (544 g)，并将该混合物搅拌75分钟。将该悬浮液通过Solka floc过滤，用1:1 EtOH:H₂O (1× 3.25 L)和1:2 EtOH:H₂O (1×3.25 L)洗涤。

合并的滤液(16.4 kg)经由1.0μm在管线中的滤器过滤。混合物用THF (2.5 L)稀释，经由在管线中的滤器添加，并在氮气下搅拌。添加盐酸(0.308 L，3.70 mol)。然后将该批料过滤，滤饼用5:4:2 H₂O:EtOH:THF (1 x 6 L，1 x 5L)、2:1:1 H₂O:EtOH:THF (1 x 4 L)和水(1 x 5L)洗涤。将该固体在氮气和真空下干燥，产物作为灰白色的结晶固体分离。

在氮气下向由前一步骤获得的产物(1.198 kg，2.84 mol)中添加水(3.0 L，167 mol)、EtOH (1.593 L)和THF (2.001 L)，随后添加氢氧化钠(0.596 L，2.98 mol)。添加Darco G-60 (300g)，并将混合物搅拌80分钟。将该混合物用Solka floc过滤，用5:3:2 H₂O:THF:EtOH(2×2.5L)洗涤。溶液经由1.0μm在管线中的滤器过滤，并添加盐酸(0.248 L，2.98 mol)。发生结晶，获得了极稠的白色悬浮液；添加另外5:3:2 水:THF:EtOH(4.8 L)。将该批料过滤，用过滤的5:3:2水:THF:EtOH洗涤。该产物作为含有主要B型与一些C型的白色结晶固体分离。

在氮气下经由1.0μM在管线中的滤器向以上结晶固体(1.095 kg，2.59 mol)中添加THF (4.38 L)和水(4.38 L)。将该悬浮液有力地搅拌14小时。在搅拌一夜后，浆料的物理性能似乎由不沉降的乳状浓稠悬浮液改变为很好地沉降的具有黄色上清液和结晶固体的浆料。将该浆料过滤，该固体用3:1 H₂O:THF (4 L，2 L)洗涤，在氮气和真空下干燥。在干燥>2天之后，分离标题产物C型。

图1和图2中分别地示出了X射线粉末衍射(XRPD)图形B型和C型。使用从3-40度2θ的连续扫描，用具有PW3040/60操作台的Philips Pananalytical X'Pert Pro X射线粉末衍射仪产生XRPD图案。使用铜K-Alpha 1 (Kαl)和K-Alpha 2 (Kα2) 辐射作为源。用样品在室温和大气开放下进行实验。XRPD图案中的2θ值和相应d间距在下表中包括。

B型和C型的差示扫描量热法(DSC)曲线分别在图3和4中示出。它们是用TA Instruments DSC Q 2000差示扫描量热计以10℃/分钟的加热速率在氮气氛中在密闭铝锅内从25℃加热到265℃而获得的。B型的DSC曲线显示了起始温度256℃和峰值温度258℃的吸热。该热函变化是108.9 J/g。该吸热是被认为是由于伴随的熔化和分解。C型的DSC曲线显示出两种吸热。第一吸热显示了190℃的起始温度和198℃的峰值温度，相关的热函变化为22.4 J/g。这吸热被认为是由于C型至B型的固体-固体转换。这之后是具有257℃的起始温度和260℃的峰值温度的第二吸热，相关的热函变化为104.3 J/g。该吸热归于伴随的熔化和分解。

实施例9

[3-(5-苄基-[1,2,3]***-1-基)-1,2,3,4-四氢-咔唑-9-基]-乙酸

使用实施例7的步骤5到8所述的工序由(3-叠氮基-1,2,3,4-四氢-9H-咔唑-9-基)乙酸乙酯(J Med. Chem.，2005，48，897)和丙-2-炔-1-基苯制备标题化合物。所获得的外消旋酸通过使用4.6×250mm Chiralcel OD柱的HPLC来拆分，用40%MeOH、30%iPrOH、29.75%己烷和0.25% Et₃N在1 mL/min和254nm (停留时间= 8.9和18.3min)下洗脱，分别获得实施例9.1和9.2。实施例9.1的 ¹H NMR :

。

实施例10

{7-[4-(4-氟-苯基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-]吲哚-10-基}-乙酸

使用实施例1中所述的工序由(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙酯和1-乙炔基-4-氟代苯制备标题化合物。MS (+ESI) m/z: 391.1。

实施例11

{7-[4-(4-甲烷磺酰基氨基-丁基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸

使用实施例1中所述的工序由(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙酯和N-己-5-炔-1-基甲烷磺酰胺制备标题化合物。MS (+-ESI) m/z: 446.2。

实施例12

{7-[4-(1-羟基-2-甲基-丙基)-[1,2,3]***-1-基]–6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸

使用实施例1中所述的工序由(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙酯和4-甲基戊-1-炔-3-醇制备标题化合物。MS (+ESI) m/z: 369.2。

实施例13

{7-[4-(1-羟基-1-苯基-乙基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸

使用实施例1中所述的工序由(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙酯和2-苯基丁-3-炔-2-醇制备标题化合物。MS (+ESI) m/z: 417.1。

实施例14

[7-(4-苯氧基甲基-[1,2,3]***-1-基)-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基]-乙酸

使用实施例1中所述的工序由(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙酯和苯基丙-2-炔-1-基醚制备标题化合物。MS (+ESI) m/z: 403.2。

实施例15

{7-[4-(4-甲磺酰基-苯基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸

使用实施例1中所述的工序由(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙酯和1-乙炔基-4-(甲基磺酰基)苯制备标题化合物。MS (+ESI) m/z: 451.1。

实施例16

(7-{4-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-苯基]-[1,2,3]***-1-基}-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)-乙酸

使用实施例1所述的工序由(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙基酯和2-(4-乙炔基苯基)丙-2-醇制备标题化合物。MS (+ESI) m/z: 431.2。

实施例17

{7-[4-(4-三氟甲基-苯基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}乙酸

使用实施例1所述的工序由(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙基酯和1-乙炔基-4-(三氟甲基)苯制备标题化合物。MS (+ESI) m/z: 441.1。

实施例18

[7-(4-萘-1-基-[1,2,3]***-1-基)-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基]-乙酸

使用实施例1所述的工序由(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙基酯和1-乙炔基萘制备标题化合物。MS (+ESI) m/z: 423.2。

实施例19

{7-[4-(4-二甲基氨基-苯基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸

使用实施例1所述的工序由(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙基酯和4-乙炔基-N,N-二甲苯胺制备标题化合物。MS (+ESI) m/z: 416.2。

实施例20

{7-[5-(4-氟-苯基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸

使用实施例3所述的工序由(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙基酯和1-乙炔基-4-氟代苯制备标题化合物。MS (+ESI) m/z: 391.1。

实施例21

[7-(5-苯氧基甲基-[1,2,3]***-1-基)-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基]-乙酸

使用实施例3所述的工序由(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙基酯和(丙-2-炔-1-基氧基)苯制备标题化合物。MS (+ESI) m/z: 403.1。

实施例22

(7-{5-[(4-溴-苯基)-羟基-甲基]-[1,2,3]***-1-基}-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)-乙酸

使用实施例3所述的工序由(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙基酯和1-(4-溴苯基)丙-2-炔-1-醇制备标题化合物。MS (+ESI) m/z: 483.0。

实施例23

4-[3-(10-羧甲基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-7-基)-3H-[1,2,3]***-4-基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯

使用实施例3所述的工序由(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙基酯和4-乙炔基哌啶-1-羧酸叔丁酯制备标题化合物。MS (+ESI) m/z: 480.2。

实施例24

[7-(5-环己基-[1,2,3]***-1-基)-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基]-乙酸

使用实施例3所述的工序由(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙基酯和乙炔基环己烷制备标题化合物。MS (+ESI) m/z: 379.2。

实施例25

{7-[5-(9-羟基-9H-芴-9-基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸

使用实施例3所述的工序由(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙基酯和9-乙炔基-9H-芴-9-醇制备标题化合物。MS (+ESI) m/z: 477.1。

实施例26

(7-{5-[1-(4-氟-苯基)-乙烯基]-[1,2,3]***-1-基}-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)-乙酸

通过将(7-{5-[1-(4-氟-苯基)-1-羟基-乙基]-[1,2,3]***-1-基}-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)-乙酸(实施例5)在二烷：2M HCl的1:1混合物中的溶液回流24小时来制备标题化合物。将反应混合物冷却至室温，然后用EA萃取，用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥，再蒸发。通过Combi-flash EA/Hex 50-100%提纯来获得所需化合物。MS (+ESI) m/z: 417.1。

实施例27

(7-{(R)-5-[双-(4-氟-苯基)-羟基-甲基]-[1,2,3]***-1-基}-6,7,8,9-四氢-吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)-乙酸

由实施例6中所述的对映异构纯(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙基酯和1,1-双(4-氟苯基)丙-2-炔-1-醇制备标题化合物。由实施例6的保留时间分别为10.3分钟和11.5分钟的手性叠氮化物制备实施例27.1和27.2。MS (+ESI) m/z: 515.2。

实施例28

{(R)-7-[5-(4-氟-苄基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸

使用实施例6的对映异构纯(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙基酯以及实施例8中所述的由4-氟苄基氯和乙炔基三甲基硅烷制备的1-氟-4-丙-2-炔-1-基苯来制备标题化合物。由实施例6的保留时间分别为10.3分钟和11.5分钟的手性叠氮化物制备实施例28.1和28.2。MS (+ESI) m/z: 405.1。

实施例29

{(R)-7-[5-(1-苯基-乙基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸

使用实施例8中所述的工序，由对映异构纯(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙酯以及由(1-溴乙基)苯和乙炔基三甲基硅烷制备的(1-甲基丙-2-炔-1-基)苯来制备标题化合物。由实施例6的保留时间10.3分钟的手性叠氮化物衍生的所得非对映异构体酯类通过使用梯度10-70% EA/Hex的快速色谱法来分离，从而在标准水解之后获得实施例29.1和29.2。由实施例6的保留时间11.5分钟的手性叠氮化物衍生的所得非对映异构体酯类通过使用梯度10-70% EA/Hex的快速色谱法来分离，从而在标准水解之后获得实施例29.3和29.4。MS (+ESI) m/z: 405.1。

实施例30

((R)-7-{5-[双-(4-氟-苯基)-甲基]-[1,2,3]***-1-基}-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)-乙酸

使用实施例8所述的工序由对映异构纯(7-叠氮基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙基酯和1,1'-丙-1-炔-3,3-二基双(4-氟代苯)制备标题化合物。MS (+ESI) m/z: 499.2。

实施例31

((R)-7-{5-[1-(4-氟苯基)-1-羟乙基]-[1,2,3]***-1-基}-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)-乙酸

使用实施例8所述的工序由(7-叠氮基-4-氟-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙基酯和2-(4-氟苯基)丁-3-炔-2-醇制备标题化合物。所得非对映异构体的分离在酯阶段通过快速色谱法使用10-100% EA/Hex的梯度来进行，获得2种酯类。更快洗脱的对映异构体混合物通过手性HPLC使用4.6×250mm Chiralcel OD柱拆分，用20% iPrOH、20% EtOH、59.75%己烷和0.25% Et₃N在1mL/min和254nm下洗脱。保留时间= 6.9和8.4分钟。该2种所得酯类分开水解，从而分别获得实施例31.1和31.2。更减慢洗脱的对映异构体混合物通过手性HPLC使用4.6×250mm Chiralcel OD柱拆分，用20% iPrOH、20% EtOH、60%己烷在1mL/min和254nm下洗脱。保留时间= 8.7和11.6分钟。该2种所得酯类分开水解，从而分别获得实施例31.3和31.4。MS (+ESI) m/z: 453.1。

实施例32

{4-氟-7-[5-(1-苯基-乙基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸

使用实施例8中所述的工序，由(7-叠氮基-4-氟-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙酯以及由(1-溴乙基)苯和乙炔基三甲基硅烷制备的(1-甲基丙-2-炔-1-基)苯来制备标题化合物。所得非对映异构体酯类通过快速色谱法使用10-70% EA/Hex的梯度来进行分离，获得2种对映异构体混合物。极性较小的对映异构体混合物通过使用4.6×250mm Chiralpak AD柱的手性HPLC拆分，用20% iPrOH、20% EtOH、59.75%己烷和0.25% Et₃N在1mL/min和254nm下洗脱。所得手性酯类(保留时间= 7.8和11.9分钟)分开水解，从而分别获得实施例32.1和32.2。极性较高的对映异构体混合物通过使用4.6×250mm Chiralcel OD柱的手性HPLC拆分，用20% MeOH、20% EtOH、60%己烷在1mL/min和254nm下洗脱。所得手性酯类(保留时间＝9.6和10.5分钟)分开水解，从而分别获得实施例32.3和32.4。MS (+ESI) m/z: 419.2。

以下化合物使用实施例8所述的类似的工序制备。

实施例36

(4-氟-7-[5-(4-氟苄基)-4-甲基-1H-1,2,3-***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}乙酸

步骤 1 ： 1-( 丁 -2- 炔 -1- 基 )-4- 氟代苯

1-氟-4-(丙-2-炔-1-基)苯在THF中的溶液 (0.3M)在0℃下用正丁基锂在己烷(1.2当量)中的2.5M溶液处理，搅拌10分钟，随后添加MeI(1.4当量)。移走冷却浴，并将反应混合物搅拌30分钟。用饱和NH₄C1猝灭，用醚稀释，用水洗，干燥(Na₂SO₄)，再浓缩，提供该所需甲基取代的炔烃中间体1-(丁-2-炔-1-基)-4-氟代苯： 1H NMR (600 MHz, CDCl₃) δ 7.24-7.28 (m, 2 H), 6.96-6.98 (m, 2 H), 3.49 (s, 2H), 1.83 (s, 3 H)。

步骤 2 ： {4- 氟 -7-[5-(4- 氟苄基 )-4- 甲基 -1H-1,2,3- *** -1- 基 ]-6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 } 乙酸乙基酯和 {4- 氟 -7-[4-(4- 氟苄基 )-5- 甲基 -1H-1,2,3- *** -1- 基 ]-6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 } 乙酸乙基酯

外消旋(7-叠氮基-4-氟-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸乙基酯和1-(丁-2-炔-1-基)-4-氟代苯(5当量)在苯(0.3M)中的溶液用ClCp*(COD)Ru(II) (0.25当量)处理。将该混合物加热至80℃，搅拌一夜，浓缩成油。SiO₂色谱法 (0-50% EtOAc/DCM)获得了作为有利于4-甲基-1,2,3-***取代的区域异构体的不可分离的4:1混合物的中间体***基酯。首先，使用手性反相色谱法分离两种区域异构体。主要的区域异构体然后进一步使用手性超临界流体柱色谱法(Chiral Technology AS-H 2.1×25 cm柱，30% IPA/CO2)提纯，从而提供两种手性酯类。MS (EI) C26H27F2N4O2 [M+1]+计算值 465.2, 实测值465.1。

步骤 3 ： {4- 氟 -7-[5-(4- 氟苄基 )-4- 甲基 -1H-1,2,3- *** -1- 基 }-6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 } 乙酸

手性拆分的{4-氟-7-[5-(4-氟苄基)-4-甲基-1H-1,2,3-***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}乙酸乙酯的每一种通过溶解在1:1:1 THF/MeOH/水(0.06 M)中而水解为最终的酸产物，用LiOH(3.6当量)处理，并搅拌一夜。反应混合物用EtOAc稀释，用2N HCl、水萃取，干燥(Na₂SO₄)，再浓缩，提供{4-氟-7-[5-(4-氟苄基)-4-甲基-2H-1,2,3-***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}乙酸实施例36.1和36.2： MS (EI) C₂₄H₂₃F₂N₄O₂ [M+1]+ 计算值437.2, 实测值437.1。

实施例37

{4-氟-7-[4-(4-氟苄基)-5-甲基-1H-1,2,3-***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}乙酸

该外消旋{4-氟-7-[4-(4-氟苄基)-5-甲基-1H-1,2,3-***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}乙酸乙基酯(如实施例36中所述)通过溶于1:1:1 THF/MeOH/水(0.06 M)中而水解为最终的酸产物，用LiOH(3.6当量)处理，并搅拌一夜。反应混合物然后用EtOAc稀释，用2N HCl、水萃取，干燥(Na₂SO₄)，再浓缩，提供标题化合物： MS (EI) C24H23F2N4O2 [M+1]+计算值437.2, 实测值437.1。

实施例38

{4-氟-7-[5-(4-氟苄基)-1H-1,2,3-***-1-基]-6-甲基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}乙酸

步骤 1 ： (4- 氟 -6- 甲基 -7- 氧代 -6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 ) 乙酸丙基酯

将(4-氟-7-氧代-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙基酯在THF (0.17M)中的溶液在-78℃下用NaHMDS在THF (1.2当量)中的1.0M溶液处理。在搅拌10分钟后，添加MeI(2.0当量)。移走冷却浴，将该混合物搅拌1小时，浓缩至干燥，残留物通过SiO₂色谱法(0-100% EtOAc/己烷)提纯。

步骤 2 ： (4- 氟 -7- 羟基 -6- 甲基 -6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 ) 乙酸丙基酯

步骤1获得的中间体甲基酮在THF中的溶液 (0.25M)用NaBH₄(2.0当量)处理，并搅拌1小时，用DCM稀释，用水萃取，干燥(Na₂SO₄)，再浓缩，获得中间体醇。MS (EI) C18H23FNO3 [M+l]+ 计算值320.2, 实测值 320.1。

步骤 3 ： {4- 氟 -6- 甲基 -7-[( 甲基磺酰基 ) 氧基 ]-6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2-a] 吲哚 -10- 基 } 乙酸丙基酯

将步骤2获得的中间体醇 (80 mg，0.25 mmol)在2 mL的DCM中的溶液 (1M)在0℃用许尼希碱(2当量)和MsCl(1.5当量)处理。在搅拌30分钟之后，混合物用DCM稀释，用1M柠檬酸、水萃取，干燥(Na₂SO₄)，再浓缩。

步骤 4 ： (7- 叠氮基 -4- 氟 -6- 甲基 -6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 ) 乙酸丙基酯

将{4-氟-6-甲基-7-[(甲基磺酰基)氧基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}乙酸丙基酯溶于DMF(1M)中，用NaN₃(2.0当量)处理，加热至80℃，并搅拌一夜。反应混合物用EtOAc稀释，用饱和NH₄Cl、水萃取，干燥(Na₂SO₄)，再浓缩。SiO₂色谱法 (0-100% EtOAc/己烷)获得了(7-叠氮基-4-氟-6-甲基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙酯：

步骤 5 ： {4- 氟 -7-[5-(4- 氟苄基 )-1H-1,2,3- *** -1- 基 ]-6- 甲基 -6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 } 乙酸丙酯

外消旋(7-叠氮基-4-氟-6-甲基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸丙基酯和1-氟-4-(丙-2-炔-1-基)苯(5当量)在苯(0.1M)中的溶液用ClCp*(COD)Ru (II) (0.4当量)处理。将该混合物加热至80℃，搅拌一夜，浓缩成油。SiO₂色谱法 (0-50% EtOAc/DCM)获得中间体***基酯。该对映异构体通过使用SFC (Chiral Technology AS-H 2.1×25 cm柱，30% IPA/CO₂)的手性超临界流体色谱法来拆分： MS (EI) C27H29F2N4O2 [M+1]+的计算值 479.2，实测值479.1。

步骤 6 ： (4- 氟 -7-[5-(4- 氟苄基 )-1H-1,2,3- *** -1- 基 ]-6- 甲基 -6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 } 乙酸

该两种拆分的手性乙酯通过溶于1:1:1 THF/MeOH/水(0.01 M)，用LiOH (10当量)处理并搅拌1小时而各自水解为相应酸产物。混合物用EtOAc稀释，用2N HCl、水萃取，干燥(Na₂SO₄₎，再浓缩，提供作为实施例38.1和38.2的{4-氟-7-[5-(4-氟苄基)-1H-1,2,3-***-1-基]-6-甲基-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}乙酸： MS(EI) C24H23F2N4O2 [M+1]+ 计算值437.2, 实测值437.1。

实施例39

(4-氟-7-{5-[1-(4-氟苯基)-1-甲基乙基]-1H-1,2,3-***-1-基}-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)乙酸

。

步骤 1 ： 2-(4- 氟苯基 )-2- 甲基丙酸甲酯

将(4-氟苯基)乙酸甲酯在THF (1.8M)中的溶液在0℃下用矿物油中的60%NaH(1.1当量）处理，搅拌20分钟，然后用MeI（1.3当量）处理。在搅拌5小时后，反应混合物中添加另外60%NaH(1.1当量)和MeI(1.3当量)。然后将反应搅拌一夜，用DCM稀释，用水萃取，干燥(Na₂SO₄)，再浓缩。

步骤 2 ： 2-(4- 氟苯基 )-2- 甲基丙 -1- 醇

步骤1获得的酯通过溶于THF (0.15 M)中并用LiBH₄(5当量)处理和搅拌15小时来还原。反应混合物用水猝灭，用DCM萃取，将有机层干燥(Na₂SO₄)，再浓缩，从而提供油状2-(4-氟苯基)-2-甲基丙-1-醇： 1H NMR (600 MHz_, CDCl₃) δ 7.31-7.34 (m, 2 H), 6.99-7.02 (m, 2 H), 3.58 (d_, J = 5.8 Hz_, 2 H), 1.30 (s, 6 H)。

步骤 3 ： 2-(4- 氟苯基 )-2- 甲基丙醛

DMSO(1.7当量)在DCM (0.5 M)中的溶液在-78℃下用草酰氯在DCM (1.4当量)中的2M溶液处理。将反应搅拌5分钟，并且将2-(4-氟苯基)-2-甲基丙-1-醇(1当量)在DCM (3M)中的溶液加到反应混合物中。在搅拌10分钟之后，添加NEt₃ (2.4当量)，将反应混合物加热至0℃，搅拌1小时，除去冷却浴，并搅拌另外1小时。该混合物用DCM稀释，用漂白剂/水、1M柠檬酸、水萃取，干燥(Na₂SO₄₎，浓缩。

步骤 4 ： 1- 氟 -4-(2- 甲基丁 -3- 炔 -2- 基 ) 苯

接着，(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(1.4当量)在MeOH中的溶液 (0.6 M)在0℃下用K2CO3(2.4当量)和2-(4-氟苯基)-2-甲基丙醛(1.0当量)处理。将反应混合物搅拌1小时，用EtOAc稀释，用水洗，干燥(Na₂SO₄)，再浓缩，获得1-氟-4-(2-甲基丁-3-炔-2-基)苯：

。

步骤 5 ： (4- 氟 -7-{5-[2-(4- 氟苯基 ) 丙 -2- 基 )-1H-1,2,3- *** -1- 基 }-6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 ) 乙酸乙基酯

外消旋(7-叠氮基-4-氟-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-a]-吲哚-10-基)乙酸乙基酯和1-氟-4-(2-甲基丁-3-炔-2-基)苯(3当量)在苯中的溶液(0.2M)用ClCp*(COD)Ru(II)(0.2当量)处理。将该混合物加热至80℃，搅拌一夜，浓缩成油。SiO₂色谱法 (0-50% EtOAc/DCM)获得来中间体***基酯。MS (EI) C27H29F2N4O2 [M+1]+ 计算值479.2, 实测值479.2。

步骤 6 ： (4- 氟 -7-{5-[1-(4- 氟苯基 )-1- 甲基乙基 ]-1H-1,2,3- *** -1- 基 }-6,7,8,9- 四氢吡啶并 [1,2- α ] 吲哚 -10- 基 ) 乙酸

该乙酯通过溶于1:1:1 THF/MeOH/水(0.07 M)，用LiOH (4当量)处理并搅拌过夜而各自水解为外消旋酸产物。混合物用EtOAc稀释，用2N HCl、水萃取，干燥(Na₂SO₄)，再浓缩。该残留物通过手性超临界流体色谱法 (Chiral Technology AS-H 2.1×25 cm柱，0.25% TFA/40% IPA/CO₂)来拆分，从而提供标题化合物： MS (EI) C25H25F2N4O2 [M+1]+ 计算值451.2, 实测值451.1。

以下化合物使用实施例8所述的类似的工序制备。

生物学试验

放射性配体结合试验。放射性配体结合试验在室温下在含有10mM MnCl₂和0.7 nM [³H]PGD₂ (NEN, 171 Ci mmol^-1)的10 mM HEPES/KOH pH 7.4, 1mM EDTA中进行，最终容积0.2 ml。竞争性配体在保持恒定于最终孵育体积的1% (v/v)的二甲亚砜(Me₂SO)中稀释。反应通过添加由HEK-hCRTH2细胞系制备的8-20 μg的膜蛋白来引发。总结合和非特异性结合分别在有和无10 μM PGD₂存在的情况下测定。在这些条件下，放射性配体与受体的特异性结合（总结合减去非特异性结合）在50分钟内达到平衡，并稳定多达180分钟。反应通常在室温下进行60分钟，并使用Tomtec MachIII半自动化采集装置（用于HEK-hCRTH2）通过用预润湿的Unifilters GF/C (Packard)快速过滤来终止。过滤器然后用4ml相同缓冲液洗涤，与过滤器结合的残留放射性配体在25 μl Ultima Gold F™ (Unifilter) (Packard)中平衡之后通过液体闪烁计数来测定。本发明的代表性化合物的Ki（按nM计）值如下所示：≤5: 实施例3.1, 5.1, 6.1, 7.1, 8.1/8A, 9.1, 26, 27.1, 28.1, 29.1, 30, 31.1, 31.3, 32.1, 32.4, 33.1，34.1, 36.1, 38.1, 39, 40, 41; >5且≤10: 实施例4, 5.3, 29.2; >10且≤50: 实施例1, 10, 14, 21, 22, 25, 31.4, 32.3, 35, 36.2, 37; >50且≤100: 实施例2, 5.4, 6.2, 27.2, 28.2; >100: 实施例3.2, 5.2, 7.2, 8.2, 9.2, 11, 12, 13, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 23, 24, 31.2, 32.2, 33.2, 34.2, 38.2。

i[cAMP] 测量。HEK-hCRTH2细胞生长至80-90% 融合率。在试验当天，细胞用PBS洗涤，在细胞解离缓冲液中孵育2分钟，通过在室温下在300g下离心5分钟来收获，再按照1.25×10⁶(1.25e10⁶)个细胞/ml悬浮于含有20 mM HEPES pH 7.4和0.75 mM IBMX (HBSS/HEPES/IBMX)的汉克平衡盐溶液中。该试验在每孔含有12 500个细胞和75 nl的各种浓度的试验化合物的具有0.01 ml HBSS/HEPES/IBMX的384孔板格式中进行。在37℃下用试验化合物将细胞预孵育10分钟之后，分别以10μM和150 nM的最终浓度添加在HBSS 20 mM Hepes中的0.005 ml Forskolin /DK-PGD₂稀释物，以引发反应。在37℃孵育10分钟之后，使用cAMP XS+ HitHunter化学荧光试验定量cAMP含量。(GE Healthcare 90-0075)。%抑制率使用Forskolin和EC85 DK-PGD2对照来计算。

人全血嗜酸性粒细胞形变试验。在含有EDTA的真空采血管中采集血液。将拮抗剂加入到血液中，并在室温下培养10分钟。然后在流水浴中在37℃下用4分钟将DK-PGD₂(13,14-二氢-15-酮***素D₂)加入到血液中。然后，在用75% (v/v) PBS中制备的冷0.25% (v/v)多聚甲醛的存在下将血细胞在冰上固定1分钟。175μL的固定血液转移到870μL的冷155mM NH₄Cl裂解液中，并在4℃下孵育至少40分钟。然后将该溶液在430g下离心5分钟，丢弃上清液。离心的细胞用FACs Calibur流式细胞仪(Becton Dickinson)分析。通过基于其高自身荧光从中性粒细胞分离嗜酸性粒细胞，并测定具有增加FSC-H值的总嗜酸性粒细胞的百分率，用FlowJo软件分析流式细胞计量术原始数据。分别在10 μM DK-PGD₂和PBS的存在下测定最大（100%）形变和最小（0%）形变。用每一试验制作DK-PGD₂的剂量响应曲线以测定各供血者的EC₅₀。在30nM DK-PGD₂的存在下在10剂量滴定曲线中检验化合物以测定拮抗剂IC₅₀。

一些本发明的化合物相比于DP受体对CRTH2受体具有选择性。关于DP以及其他***素类受体的试验在WO2003/06220中描述。

Claims

1.式I的化合物

Figure 2010800105639100001DEST_PATH_IMAGE001

及其药用盐，其中：

Figure 2010800105639100001DEST_PATH_IMAGE002

表示

Figure 2010800105639100001DEST_PATH_IMAGE003

或

Figure 2010800105639100001DEST_PATH_IMAGE004

Y₁ 选自任选被取代的芳基和-C(R₂)(R₃)(R₄)；

Y₂选自H和-C_1-6烷基；

Z选自H和-C_1-6烷基；

R₂选自H，任选被卤素、-OH或-NHSO₂CH₃取代的-C_1-6烷基，-OH，-OC_1-6烷基，-S(O)_nC_1-6烷基，-CN，任选被取代的芳基，任选被取代的-O-芳基，其中n是0、1或2；

R₃选自H、-C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基，任选被取代的芳基；以及

R₄选自H、-C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基、任选被取代的芳基；或

R₃、R₄和它们所连接的碳原子一起形成-C_3-6环烷基、芴基或具有选自-N(R^a)-的环杂原子的-C_3-6杂环基；或者

R₃、R₄一起表示C_1-6烷叉基；

R^a是H、C_1-6烷基或-C(O)C_1-6烷基；

所述芳基为苯基或萘基；以及

芳基的任选取代基是独立地选自卤素、-C_1-3烷氧基、-C_1-3卤代烷基、羟基-C_1-3烷基、-S(O)_n-C_1-3烷基、氨基和单-和二-(C_1-3烷基)氨基中的1-4个基团。

2.根据权利要求1所述的化合物，其中R_1b、Y₂和Z各自是H。

3.具有式Ia的权利要求1的化合物及其药用盐：

Figure 2010800105639100001DEST_PATH_IMAGE005

其中Y₁和R_1a如权利要求1所定义。

4.具有式Ib的权利要求1的化合物及其药用盐：

其中Y₁和R_1a如权利要求1所定义。

5.根据权利要求3所述的化合物，其中Y₁是-C(R₃)(R₄)-任选取代的苯基或-CH₂O-任选取代的苯基，且(i) R₃和R₄的一个是H，且另一个是H、-C_1-3烷基或任选被取代的苯基；或(ii) R₃、R₄和它们所连接的碳原子一起形成-C_3-6环烷基；或(iii) R₃和R₄一起形成-C_1-3烷叉基。

6.根据权利要求5所述的化合物，其中Y₁是任选被1或2个卤素原子取代的-C(R₃)(R₄)-苯基。

7.根据权利要求6所述的化合物，其中R₃和R₄的一个是H，且另一个是H、-C_1-3烷基或任选被1或2个卤素原子取代的苯基。

8.根据权利要求6所述的化合物，其中R₃、R₄和它们所连接的碳原子一起形成-C_3-6环烷基。

9.根据权利要求6所述的化合物，其中R₃和R₄一起表示-C_1-3烷叉基。

10.选自下列的化合物：

[3-(5-苄基-[1,2,3]***-1-基)-1,2,3,4-四氢-咔唑-9-基]-乙酸；

{7-[5-(2,2,2-三氟-1-羟基-1-苯基乙基)-1H-1,2,3-***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}乙酸；

及其药用盐。

11.选自下列的化合物：

(7-{5-[1-(4-氟苯基)-1-羟基-乙基]-[1,2,3]***-1-基}-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)-乙酸；

((R)-7-{5-[1-(4-氟苯基)-1-羟乙基]-[1,2,3]***-1-基}-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)-乙酸；和

{4-氟-7-[5-(1-苯基乙基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸；

及其药用盐。

12. 权利要求11的化合物或其药用盐，其中该化合物是[7-(5-苄基-[1,2,3]***-1-基)-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基]-乙酸。

13. 权利要求11的化合物或其药用盐，其中该化合物是{4-氟-7-[5-(4-氟苄基)-1H-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸。

14. 权利要求11的化合物或其药用盐，其中该化合物是{(7R)-4-氟-7-[5-(4-氟苄基)-1H-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]-吲哚-10-基}-乙酸。

15.权利要求11的化合物或其药用盐，其中该化合物是{(R)-7-[5-(4-氟苄基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸。

16. 权利要求11的化合物或其药用盐，其中该化合物是((R)-7-{5-[1-(4-氟苯基)-1-羟乙基]-[1,2,3]***-1-基}-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基)-乙酸。

17.权利要求11的化合物或其药用盐，其中该化合物是{4-氟-7-[5-(4-苯基乙基)-[1,2,3]***-1-基]-6,7,8,9-四氢吡啶并[1,2-α]吲哚-10-基}-乙酸。

18.一种药物组合物，其包括治疗有效量的权利要求1所述的化合物和药用载体。

19.根据权利要求18所述的药物组合物，其进一步包括第二活性成分。

20.根据权利要求19所述的药物组合物，其中所述第二成分是白三烯调节剂。

21.根据权利要求19所述的药物组合物，其中所述第二成分是选自孟鲁司特、普仑司特和扎鲁司特及各自的药用盐中的白三烯受体拮抗剂。

22.根据权利要求21所述的药物组合物，其中所述白三烯受体拮抗剂是孟鲁司特或其药用盐。

23.权利要求1-17任一项的化合物在制备用于治疗或预防CRTH2介导的疾病的药物中的用途。

24.权利要求1-17任一项的化合物或其药用盐在制备用于治疗或预防哮喘的药物中的用途。

25.权利要求24的用途，其中该哮喘是变应性哮喘。

26.权利要求1-17任一项的化合物或其药用盐与孟鲁司特组合在制备用于治疗或预防***素介导的药物中的用途。