CN101903381A - 对淀粉样蛋白具有亲和性的新化合物 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种用作以淀粉样蛋白为靶向的图像诊断探针的化合物，和用于检测沉积在生物组织上的淀粉样蛋白的包含该化合物的试剂。本发明提供如下式(1)所示的化合物以及包含该化合物的试剂：其中R1选自以下的基团：卤素取代基，具有1-4个碳原子的烷基取代基，烷基链具有1-4个碳原子的烷氧基取代基和羟基，R2选自以下的基团：氰基取代基，具有1-4个碳原子的烷基取代基和卤素取代基，R3选自以下的基团：羟基，卤素取代基和下式表示的取代基：(其中R4是氢，卤素取代基或羟基，且m是1-4的整数)，条件是，R1、R2、R3和R4中的至少一个表示放射性卤素。

Description

对淀粉样蛋白具有亲和性的新化合物
技术领域
本发明涉及用于诊断脑变性疾病的化合物。更具体地，本发明涉及在阿尔茨海默病和其他与淀粉样蛋白蓄积有关的疾病的诊断中用于在病灶部位检测淀粉样蛋白的化合物。
背景技术
由被称作淀粉样蛋白的纤维状蛋白质在体内各种器官或组织中沉积而引发的疾病统称作淀粉样变性病。淀粉样变性病的共同特征是，富含β-折叠结构的被称作淀粉样蛋白的纤维状蛋白质在各种器官中***性地或在位点局部性地沉积，以至于在器官或组织中触发了功能异常。
阿尔茨海默病(以下称作AD)是一种典型的淀粉样变性病，已知它是一种引发痴呆的疾病。随着淀粉样蛋白在脑内的渐进性沉积，该疾病是致命性的，因此，据称它是一种与其他淀粉样变性病相比更受社会关注的疾病。近年来，随着社会的老龄化，发达国家的AD患者数量迅速增加，从而引发社会问题。
从病理组织学的观点来看，AD的特征在于在脑内的三种病理检查发现，即老年斑的出现，神经元纤维缠结的形成和广泛的神经元丢失。老年斑具有主要由淀粉样蛋白组成的结构，据称其出现在AD发病的最初阶段，因此，在临床症状发生前约10年或更久时间在脑内就会出现这种病理学现象。
诊断AD，包括在图像诊断例如CT和MRI的组合帮助下，进行各种认知功能的各种评价(例如，Hasegawa scale，ADAS-JCog和MMSE)。但是，基于这些认知功能的评价的方法在发病早期阶段中诊断灵敏度较低，此外，存在诊断结果容易受到个体的先天认知功能影响的问题。目前，当AD患者仍然在世时，实际上不可能进行AD的确诊，因为确诊需要对病变部位的活组织检查(非专利文献1)。
同时，有报告称，构成老年斑的淀粉样蛋白是淀粉状β蛋白(以下称作Aβ)的凝集物。同时，很多报告指出，Aβ凝集物形成了导致神经细胞毒性的β-折叠结构。基于这些发现，提出了所谓“淀粉样蛋白联锁反应假说”，它提出Aβ的脑内沉积引发了下游现象，即，神经元纤维缠结的形成和神经元丢失(非专利文献2)。
基于这些事实，近来试图用与淀粉样蛋白具有高度亲和性的化合物作为标记物进行AD的体内检测。
用于脑内淀粉样蛋白的图像诊断的很多这样的探针是疏水性的低分子量化合物，其与淀粉样蛋白具有高度的亲和性，且脑转移性很高，用各种放射性核素例如11C、18F和123I标记。例如，有报告指出，11C或放射性卤素标记的化合物包括各种硫磺素衍生物例如6-碘-2-[4′-(N，N-二甲氨基)苯基]苯并噻唑(以下称作TZDM)和6-羟基-2-[4′-(N-甲基氨基)苯基]苯并噻唑(以下称作6-OH-BTA-1)(专利文献1，非专利文献3)；均二苯乙烯化合物例如(E)-4-甲基氨基-4′-羟基均二苯乙烯(以下称作SB-13)和(E)-4-二甲氨基-4′-碘代均二苯乙烯(以下称作m-I-SB)(专利文献2，非专利文献4，非专利文献5)；苯并噁唑衍生物例如6-碘-2-[4′-(N，N-二甲氨基)苯基]苯并噁唑(以下称作IBOX)和6-[2-(氟)乙氧基]-2-[2-(2-二甲氨基噻唑-5-基)乙烯基]苯并噁唑(非专利文献6，非专利文献7)，DDNP衍生物例如2-(1-{6-[(2-氟乙基)(甲基)氨基]-2-萘基}亚乙基)丙二腈(以下称作FDDNP)(专利文献4，非专利文献8)；和咪唑并吡啶衍生物例如6-碘-2-[4′-(N，N-二甲氨基)苯基]咪唑并[1，2-a]吡啶(以下称作IMPY)(专利文献3，非专利文献9)。此外，对用于图像诊断的某些探针，已经进行了人体图像研究，并且报道了与正常人相比，在AD患者的脑内有显著的蓄积(非专利文献10，非专利文献11，非专利文献12，非专利文献13)。
国际公开WO2007/002540小册子披露了一系列的化合物，它们具有与淀粉样蛋白有亲和性的基团，该基团与放射性核素标记的位点通过乙二醇或聚乙二醇连接(专利文献5)。
国际公开WO2007/063946小册子披露了一系列的化合物，它们与五元芳香杂环相连以防止它们在脑内代谢(专利文献6)。
[专利文献1]JP-T-2004-506723
[专利文献2]JP-T-2005-504055
[专利文献3]JP-T-2005-512945
[专利文献4]JP-T-2002-523383
[专利文献5]国际公开WO2007/002540小册子
[专利文献6]国际公开WO2007/063946小册子
[非专利文献1]J.A.Hardy & G.A.Higgins，“Alzheimer′sDisease：The Amyloid Cascade Hypothesis.”，Science，1992，256，p.184-185
[非专利文献2]G.McKhann等人，“Clinical diagnosis ofAlzheimer′s disease：Report of the NINCDS-ADRDA Work Group underthe auspices of Department of Health and Human Services TaskForce on Alzheimer′s Disease.”，Neurology，1984，34，p.939-944
[非专利文献3]Z.-P.Zhuang等人，“RadioiodinatedStyrylbenzenes and Thioflavins as Probes for AmyloidAggregates.”，J.Med.Chem.，2001，44，p.1905-1914
[非专利文献4]Masahiro Ono等人，“11C-labeled stilbenederivatives as Aβ-aggregate-specific PET imaging agents forAlzheimer′s disease.”，Nuclear Medicine and Biology，2003，30，p.565-571
[非专利文献5]H.F.Kung等人，“Novel Stilbenes as Probesfor amyloid plaques.”，J.American Chemical Society，2001，123，p.12740-12741
[非专利文献6]Zhi-Ping Zhuang等人，“IBOX(2-(4′-dimethylaminophenyl)-6-iodobensoxazole)：a ligand for imaging amyloidplaques in the brain.”，Nuclear Medicine and Biology，2001，28，p.887-894
[非专利文献7]Furumoto Y等人，“[11C]BF-227：A New 11C-Labeled2-Ethenylbenzoxazole Derivative for Amyloid-β PlaquesImaging.”，European Journal of Nuclear Medicine and MolecularImaging，2005，32，Sup.1，P759
[非专利文献8]Eric D.Agdeppa等人，“2-Dialkylamino-6-Acylmalononitrile Substituted Naphthalenes(DDNP Analogs)：NovelDiagnostic and Therapeutic Tools in Alzheimer′s Disease.”，Molecular Imaging and Biology，2003，5，p.404-417
[非专利文献9]Zhi-Ping Zhuang等人，“Structure-ActivityRelationship of Imidazo[1，2-a]Pyridines as Ligands forDetecting β-Amyloid Plaques in the Brain.”，J.Med.Chem，2003，46，p.237-243
[非专利文献10]W.E.Klunk等人，“Imaging brain amyloidin Alzheimer′s disease with Pittsburgh Compound-B.”，Ann.Neurol.，2004，55，p.306-319
[非专利文献11]Nicolaas P.L.G.Verhoeff等人，“In-VivoImaging of Alzheimer Disease β-Amyloid With[11C]SB-13PET.”，American Journal of Geriatric Psychiatry，2004，12，p.584-595
[非专利文献12]Hiroyuki Arai等人，“[11C]-BF-227 AND PETto Visualize  Amyloid in Alzheimer′s  Disease Patients”，Alzheimer′s & Dementia：The Journal of the Alzheimer′sAssociation，2006，2，Sup.1，S312
[非专利文献13]Christopher M.Clark等人，“Imaging Amyloidwith I123 IMPY SPECT”，Alzheimer′s & Dementia：The Journal ofthe Alzheimer′s Association，2006，2，Sup.1，S342
发明内容
发明要解决的课题
如上所述，公开了各种化合物可以作为以淀粉样蛋白为对象的图像诊断的探针，并研究了其临床用途。
使用正常小鼠进行的实验表明，用[125I]标记的TZDM、IBOX和m-I-SB都会在施用2分钟后转移到脑内。但是，这些化合物从正常组织中的清除是不充分的，并且会随着施用后时间的推移而在脑内逐渐蓄积(JP-T-2005-512945：Zhi-Ping Zhuang等人，Nuclear Medicineand Biology，2001，28，P.887-894；H.F.Kung等人，J.Am.Chem.Soc.，2001，123，p.12740-12741)。当从正常组织中的清除不充分时，就出现了一个问题：在淀粉样蛋白蓄积位点不能获得足够的对比度。用[11C]标记的SB-13在使用大鼠进行的实验中显示了其具有从正常组织中的清除性能，但清除速度还谈不上足够快(Masahiro Ono等人，NuclearMedicine and Biology，2003，30，p.565-571)。
同时，据披露，如使用[125I]标记的化合物进行的实验结果所示，具有咪唑并吡啶骨架的化合物例如IMPY具有在施用后转移到脑内并在淀粉样蛋白上蓄积的性质，其也具有与上述化合物不同的从正常组织中迅速清除的优良性质。但是，IMPY是一种在回复突变试验中呈阳性的化合物。为了将这种化合物用作图像诊断的探针，必须充分考虑剂量和给药方式(国际公开WO03/106439小册子)。
据报道，FDDNP在回复突变试验中也是呈阳性的。(国际公开WO03/106439小册子)。
本发明正是鉴于下述情况而完成的，其中已经公开了作为靶向淀粉样蛋白的图像诊断探针的各化合物，但是还没有化合物被证实具有临床可容许的性质。本发明的目的在于提供一种有效作为靶向淀粉样蛋白的图像诊断探针的化合物和包含该化合物的用于检测沉积在生物组织上的淀粉样蛋白的试剂。
解决课题的方法
作为深入研究的结果，本发明人发现，通过一系列具有咪唑并吡啶-苯基骨架且该骨架的3-位碳原子上连接有除了氢原子以外的取代基的化合物，可以提供有效用作靶向淀粉样蛋白的图像诊断探针的化合物，由此完成了本发明。
根据本发明的一个方面，提供如下式(1)表示的化合物及其盐：
以及包含式(1)所示化合物或其盐的用于检测沉积在生物组织上的淀粉样蛋白的试剂。这里，生物组织可以是已知在淀粉样变性病中淀粉样蛋白沉淀于其中的各种组织。这些生物组织的典型例子包括脑、心、肺、胰腺、骨和关节，在最典型的生物组织中，可举出脑。在脑的情况下，典型的淀粉样变性病包括阿尔茨海默病和Lewy体痴呆。
在式(1)中，R1选自以下的基团：卤素取代基，具有1-4个碳原子的烷基取代基，烷基链具有1-4个碳原子的烷氧基取代基和羟基，且R2选自以下的基团：氰基取代基，具有1-4个碳原子的烷基取代基和卤素取代基。
R3选自以下的基团：羟基，卤素取代基和下式(2)表示的取代基：
Figure BPA00001160825700062
同时，在式(2)中，R4为氢，卤素取代基或羟基，且m是1-4的整数。
另外，由于本发明的化合物用作图像诊断探针，所以R1、R2、R3和R4中的至少一个需要是放射性卤素。作为放射性卤素，可以使用通常用于SPECT和PET的核素。更具体地，可以使用选自18F，76Br，123I，124I，125I和131I的放射性卤素，更优选使用18F或123I。
因此，根据优选实施方案，本发明的化合物选自2-(4′-氟苯基)-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶，2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶，2-(4′-羟基苯基)-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶，3-氰基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘咪唑并[1，2-a]吡啶，2-[4′-(2″-[18F]氟乙氧基)苯基]-3-碘代-6-甲氧基咪唑并[1，2-a]吡啶，2-[4′-(2″-[18F]氟乙氧基)苯基]-6-甲氧基-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶和2-(4′-[18F]氟苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶，本发明的检测试剂包含这些化合物或其盐。
根据本发明的另一个方面，提供了由下式(3)：
Figure BPA00001160825700071
下式(5)：
Figure BPA00001160825700072
下式(6)：
或下式(7)：
Figure BPA00001160825700081
中的任一个表示的化合物或其盐。
在上述各式中，R5选自以下的基团：卤素取代基，具有1-4个碳原子的烷基取代基，烷基链具有1-4个碳原子的烷氧基取代基和羟基，R6选自以下的基团：氰基取代基，具有1-4个碳原子的烷基取代基和卤素取代基，且R7选自以下的基团：羟基，卤素取代基和下式(4)表示的取代基：
Figure BPA00001160825700082
其中R8为氢，卤素取代基或羟基，且n是1-4的整数。
R9选自以下的基团：非放射性卤素取代基，硝基，烷基链具有1-4个碳原子的三烷基甲锡烷基取代基或三苯基甲锡烷基，R10选自以下的基团：非放射性卤素取代基，硝基，烷基链具有1-4个碳原子的三烷基甲锡烷基取代基或三苯基甲锡烷基，R11选自以下的基团：非放射性卤素取代基，硝基取代基，烷基链具有1-4个碳原子的三烷基甲锡烷基取代基和三苯基甲锡烷基取代基，且R12选自以下的基团：非放射性卤素取代基，甲磺酰氧基取代基，三氟甲磺酰氧基取代基和芳香族磺酰氧基取代基。
发明效果
本发明提供了一种对淀粉样蛋白具有亲和性并且具有优异的使生物体中的淀粉样蛋白显像的能力的新化合物，以及用于检测沉积在生物组织上的淀粉样蛋白的试剂。
附图说明
图1是2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶(非放射性碘化形式)的合成路线。
图2是6-三丁基甲锡烷基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶的合成路线。
图3是2-(4′-氟苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶(非放射性碘化形式)的合成路线。
图4是6-三丁基甲锡烷基-2-(4′-氟苯基)-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶的合成路线。
图5是2-(4′-羟基苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶(非放射性碘化形式)的合成路线。
图6是6-三丁基甲锡烷基-2-(4′-羟基苯基)-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶的合成路线。
图7是3-氰基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-碘咪唑并[1，2-a]吡啶(非放射性碘化形式)的合成路线。
图8是6-三丁基甲锡烷基-3-氰基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-咪唑并[1，2-a]吡啶的合成路线。
图9是2-[4′-(2″-氟乙氧基)苯基]-3-碘代-6-甲氧基咪唑并[1，2-a]吡啶(非放射性碘化形式)的合成路线。
图10(a)是注射2-(4′-氟苯基)-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶后的脑切片的放射自显影图，图10(b)是硫磺素T染色的样品的荧光显微镜图像(注射淀粉样蛋白混悬液的位点的放大图)。
图11(a)是注射2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶后的脑切片的放射自显影图，图11(b)是硫磺素T染色的样品的荧光显微镜图像(注射淀粉样蛋白混悬液的位点的放大图)。
图12(a)是注射2-(4′-羟基苯基)-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶后的脑切片的放射自显影图，图12(b)是硫磺素T染色的样品的荧光显微镜图像(注射淀粉样蛋白混悬液的位点的放大图)。图13(a)是注射3-氰基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘咪唑并[1，2-a]吡啶后的脑切片的放射自显影图，图13(b)是硫磺素T染色的样品的荧光显微镜图像(注射淀粉样蛋白混悬液的位点的放大图)。
具体实施方式
(放射性卤素标记化合物的前体化合物的合成)
以下，以6-三丁基甲锡烷基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶的合成为例，描述本发明化合物的合成方法。
为了合成6-三丁基甲锡烷基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶，首先使4′-羟基苯丙酮与溴化铜反应，以制备2-溴-4′-羟基苯丙酮(图1，步骤1)。该反应可以根据常规方法进行，例如在文献King，L.Carroll & Ostrum，G.Kenneth，Journal ofOrganic Chemistry，1964，29(12)，p.3459-3461中描述的方法。
然后，使如上制备的2-溴-4′-羟基苯丙酮与2-氨基-5-碘吡啶反应，以制备2-(4′-羟基苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶(图1，步骤2)。该步骤可以根据例如以下方法进行。
首先，将2-溴-4′-羟基苯丙酮和2-氨基-5-碘吡啶溶解于惰性溶剂诸如乙腈中，并允许彼此在回流温度反应2-6小时，得到2-(4′-羟基苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶的氢溴酸盐，为白色沉淀物。在该情况中使用的溶剂可以是乙腈或通常用于类似反应的其它溶剂，例如甲醇和丙酮。反应温度可以是允许回流的温度，例如在溶剂是乙腈时为110℃。使用的溶剂的量可以是足以实现反应的量，然而，予以说明，如果溶剂太多，则难以获得反应产物的沉淀物。例如，当使用相当于10mmol量的2-溴-4′-羟基苯丙酮进行反应时，所使用的溶剂的量可以是约40-80mL。
然后，可以将反应液过滤，以回收沉淀物。将该白色沉淀物混悬在甲醇/水(1∶1)的混合液中。然后，向其中加入相对于混悬的沉淀物为较大过量的碳酸氢钠饱和水溶液，以释放作为沉淀物的2-(4′-羟基苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶。将新生成的沉淀物过滤，以回收作为本步骤的目标化合物的2-(4′-羟基苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶，(图1，步骤2)。对于甲醇/水的混合液的量没有具体限制，只要它足以实现反应即可。然而，予以说明，如果混合液的量太大，则会妨碍产物的析出。例如，当使用相当于10mmol量的2-溴-4′-羟基苯丙酮时，甲醇/水的混合液可以以约40-100mL的量使用。对于碳酸氢钠的量没有具体限制，只要其相对于作为反应底物的上述沉淀物为较大过量即可。例如，当反应在上述条件下进行时，加入到反应液中的碳酸氢钠饱和水溶液的量可以为约50mL。
在此，使2-溴乙醇和叔丁基二苯基氯硅烷(TBDPSC1)彼此反应，以制备1-溴-2-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)乙烷(图1，步骤3)。在该情况中，反应可以根据常规方法进行，例如在文献(Organic Syntheses，Coll.Vol.10，p.170(2004)；Vol.79，p.59(2002))中描述的方法。
然后，将上述制备的2-(4′-羟基苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶充分干燥，溶解于N，N-二甲基甲酰胺，用其中加入碳酸钾和1-溴-2-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)乙烷。在将该混合物在大约90℃搅拌约2小时后，加入饱和氯化钠水溶液，随后用乙酸乙酯萃取，浓缩乙酸乙酯层，进行色谱纯化，得到2-[4′-(2″-叔丁基二苯基甲硅烷氧基乙氧基)苯基]-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶(图1，步骤4)。碳酸钾的量可以是可中和反应过程中由1-溴-2-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)乙烷生成的氢溴酸的量，并典型地是另一种原料1-溴-2-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)乙烷的约2～3倍的摩尔比。另外，1-溴-2-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)乙烷可以以相对于反应底物过量的量使用，并典型地为反应底物2-(4′-羟基苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶的约1.5倍的摩尔比。
然后，使用氟化四丁铵将得到的2-[4′-(2″-叔丁基二苯基甲硅烷氧基乙氧基)苯基]-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶的叔丁基二苯基甲硅烷基脱保护，得到2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶(图1，步骤5)。在该情况中，反应可以根据常规方法进行，例如在文献(Organic Syntheses，Coll.Vol.9，p.417(1998)；Vol.74，p.248(1997))中描述的方法。
将得到的2-[4′-(2″-羟基乙氧基)]苯基]-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶溶解于二噁烷，用溶液加入三乙胺，随后加入双(三丁基锡)和催化剂量的四(三苯膦)钯。将该反应液在大约90℃加热以进行反应约24小时。然后将溶剂蒸馏掉，并进行色谱纯化，得到目标化合物6-三丁基甲锡烷基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶(图2，步骤1)。在该情况中使用的双(三丁基锡)的量可以是满足其相对于反应底物过量这一条件的量，具体地，其相对于反应底物2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶为约1.5倍的摩尔比。
当得到的化合物的咪唑并吡啶环的6位上的取代基是三丁基甲锡烷基取代基以外的三烷基甲锡烷基取代基时，可以使用适合目的的各种双(三烷基锡)来代替图2的步骤1中的双(三丁基锡)。例如，当合成6位上的取代基是三甲基甲锡烷基取代基的化合物时，可以在图2的步骤1中使用双(三甲基锡)进行与上述类似的反应。
可以使用吡啶环上的碘的结合位置各不相同的各种化合物来代替图1的步骤2中使用的2-氨基-5-碘吡啶，得到咪唑并吡啶环上的官能团的结合位置是6位碳以外的碳原子的化合物。例如，当官能团的结合位置是咪唑并吡啶环的8位碳时，可以使用2-氨基-3-碘吡啶来代替图1的步骤2中的2-氨基-5-碘吡啶。
(放射性卤素标记化合物的合成方法)
下面以放射性碘标记的化合物的合成为例，描述根据本发明另一个方面的放射性卤素标记的化合物的制备方法。
可以如下合成放射性碘标记的化合物：将按照上述操作制备的标记前体化合物溶解于惰性有机溶剂中，向其中加入通过已知方法得到的[123I]碘化钠溶液等，用其中加入酸和氧化剂进行反应。作为溶解标记前体化合物的惰性有机溶剂，可以使用与标记前体、[123I]碘化钠等之间没有反应性的各种溶剂，优选可以使用甲醇。
作为酸，可以使用各种酸，优选盐酸。
对于氧化剂没有特别的限制，只要它可以使反应液中的碘氧化即可，优选过氧化氢或过乙酸。氧化剂的添加量可以是足以氧化反应液中的碘的量。
可以通过用符合目的的放射性卤素来标记符合合成目的的标记前体，来合成用碘以外的放射性卤素标记的化合物。例如，为了合成2-(4′-[18F]氟苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶，可以使标记前体2-(4′-硝基苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶与[18F]氟离子在相转移催化剂和碳酸钾的存在下反应。
(本发明诊断剂的制备方法和使用方法)
本发明的诊断剂，可以与其它一般公知的放射性诊断剂同样地，制备成将本发明的放射性卤素标记的化合物混合入根据希望任选调整至适当pH的水或生理盐水或林格液等而成的溶液。此时，应将本发明化合物的浓度调整至不超过确保本发明化合物的稳定性的浓度。本发明化合物的剂量没有特别限定，只要它足以获得所给予的药剂的分布图像即可。例如，在碘-123(123I)标记的化合物和氟-18(18F)标记的化合物的场合，可以以静脉或局部给予约50～600MBq/60kg成人体重。所给予药剂的分布可以通过公知的方法显像。例如，可以通过SPECT装置将碘-123(123I)标记的化合物显像，另外可以通过PET装置将氟-18(18F)标记的化合物显像。
下面，通过实施例、比较例和参考例更详细地描述本发明。但是，这些例子并不限制本发明的范围。同时，在下列实施例中，实验中所用各化合物的名称如表1中所定义。
表1
  化合物名称   通用名
  化合物1   2-(4′-氟苯基)-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶
化合物2   2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶
  化合物3   2-(4′-羟基苯基)-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶
化合物4   3-氰基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘咪唑并[1，2-a]吡啶
化合物5   2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶(非放射性碘标记的形式)
实施例1：2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-碘代-3-甲基咪唑并 [1，2-a]吡啶(非放射性碘化形式)的合成
向6.26g(相当于27.9mmol)的溴化铜加入40mL乙酸乙酯以得到混悬液，向其中加入2.00g(相当于13.3mmol)的4′-羟基苯丙酮。然后，将得到的混合物加热回流。在2小时后，将反应混合物冷却到室温并过滤。将得到的滤液减压浓缩。得到的粗产物通过快速硅胶柱色谱法纯化(洗脱溶剂：己烷/乙酸乙酯＝3/1)，得到3.49g(相当于15.2mmol)的2-溴-4′-羟基苯丙酮(图1，步骤1)。
将734mg(相当于3.20mmol)的2-溴-4′-羟基苯丙酮和705mg(相当于3.20mmol)的2-氨基-5-碘吡啶溶解于15mL的乙腈中。得到的溶液在油浴中在110℃加热回流4小时。在反应完成后，将反应液冷却到室温，并过滤和回收沉淀物。沉淀物用乙腈洗涤并减压干燥。将得到的粗结晶混悬在3.0mL水和1.0mL甲醇的混合液中。然后，向其中加入约10mL的饱和碳酸氢钠溶液，并使用超声洗涤机将混合物声处理5分钟。从得到的混合物过滤和回收沉淀物，用水充分洗涤，并减压干燥，得到226mg(相当于0.645mmol)的2-(4′-羟基苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶(图1，步骤2)。
另外，将2.50g(相当于20.0mmol)的2-溴乙醇和2.72g(相当于40.0mmol)的咪唑溶解于10mL的N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，并冷却到0℃。然后，向其中加入5.50g(相当于20.0mmol)的叔丁基二苯基氯硅烷(TBDPSC1)。在将反应混合物室温搅拌18小时后，加入饱和氯化钠水溶液，用乙酸乙酯萃取3次。合并的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，并减压浓缩。将得到的粗产物通过硅胶柱色谱法纯化(洗脱溶剂：己烷/乙酸乙酯＝10/1)，得到7.04g(相当于19.4mmol)的1-溴-2-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)乙烷(图1，步骤3)。
将220mg(相当于0.628mmol)的2-(4′-羟基苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶溶解于3.0mL的N，N-二甲基甲酰胺中，用其中加入260mg(相当于1.88mmol)的碳酸钾。然后，向其中加入251mg(相当于0.691mmol)的1-溴-2-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)乙烷。在将反应混合物在90℃搅拌2小时后，加入饱和氯化铵水溶液，用乙酸乙酯萃取3次。合并的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，并减压浓缩。得到的粗产物通过硅胶柱色谱法纯化(洗脱溶剂：己烷/乙酸乙酯＝3/1)，得到344mg(相当于0.544mmol)的2-[4′-(2″-叔丁基二苯基甲硅烷氧基乙氧基)苯基]-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶(图1，步骤4)。
将344mg(相当于0.544mmol)的2-[4′-(2″-叔丁基二苯基甲硅烷氧基乙氧基)苯基]-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶溶解于1.0mL的四氢呋喃，用其中加入0.65mL的含1.0mol/L四丁基氟化铵的四氢呋喃溶液。在将反应混合物室温搅拌30分钟后，加入氯化铵水溶液，随后加入5.0mL水和2.0mL乙腈。然后将沉淀物过滤。将过滤的沉淀物依次用水和乙腈洗涤，得到166mg(相当于0.421mmol)的2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶(图1，步骤5)。
得到的2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶的NMR测定结果(内标物：四甲基硅烷)如下所示。
使用的NMR装置：JNM-ECP-500(由日本电子株式会社(JEOL)制)
1H-NMR(溶剂：二甲亚砜-d6；共振频率：500MHz)：δ8.59(s，1H)，7.01(d，J＝7.3Hz，2H)，7.38(s，2H)，7.03(d，J＝7.3Hz，2H)，4.87(t，J＝5.5Hz，1H)，4.02(t，J＝5.0Hz，2H)，3.73(dt，J＝5.5，5.0Hz，2H)，2.60(s，2H)。
13C-NMR(溶剂：二甲亚砜-d6，共振频率：125MHz)：δ158.9，142.7，142.1，131.8，129.8，129.6，127.6，118.4，116.6，115.3，76.3，70.3，60.4，10.2。
实施例2：6-三丁基甲锡烷基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-3- 甲基咪唑并[1，2-a]吡啶的合成
将实施例1中得到的50.0mg(相当于0.127mmol)的2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶溶解于3.0mL的二噁烷，用其中加入0.50mL的三乙胺。然后，向其中加入0.10mL(相当于0.19mmol)的双(三丁基锡)和9.7mg(催化剂量)的四(三苯膦)钯。在将反应混合物在90℃搅拌18小时后，将溶剂减压蒸馏掉。残余物通过快速硅胶柱色谱法纯化(洗脱溶剂：己烷/乙酸乙酯＝2/1)，得到52.9mg(相当于0.0949mmol)的6-三丁基甲锡烷基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶(图2，步骤1)。
得到的6-三丁基甲锡烷基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶的NMR测定结果(内标物：四甲基硅烷)如下所示。
使用的NMR装置：JNM-ECP-500(由日本电子株式会社(JEOL)制)
1H-NMR(溶剂：氯仿-d1；共振频率：500MHz)：δ7.76-7.65(m，3H)，7.61(d，J＝8.7Hz，1H)，7.18(d，J＝8.7Hz，1H)，7.00(d，J＝10.2Hz，2H)，4.10(t，J＝4.6Hz，2H)，3.98(t，J＝4.6Hz，2H)，2.63(s，3H)，1.64-1.51(m，6H)，1.40-1.32(m，6H)，1.20-1.10(m，6H)，0.91(t，J＝7.4Hz，9H)。
实施例3：2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-[ 123 I]碘-3-甲基咪唑 并[1，2-a]吡啶的合成
向60μL的6-三丁基甲锡烷基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶在甲醇/二甲亚砜(混合比：9/1)混合液中的溶液(浓度：1mg/mL)中，加入30μL的1mol/L盐酸、15μL的1mmol/L碘化钠、18μL的303MBq的[123I]碘化钠和15μL的10％(W/V)过氧化氢。在将混合液在50℃静置10分钟后，使其在下述条件下进行HPLC，得到2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶的级分。
HPLC条件：
柱：Phenomenex Luna C18(商品名；由Phenomenex公司制备；规格：4.6×150mm)
流动相：含0.1％三氟乙酸的水/含0.1％三氟乙酸的乙腈＝20/80→0/100(17分钟)
流速：1.0mL/min。
检测器：紫外可见吸光光度计(检测波长：282nm)和放射性活度计数器(Raytest公司制；STEFFI型)
向所述级分加入10ml水。使得到的溶液通过反相柱(商品名：Sep-Pak(注册商标)Light C8 Cartridges，由Waters制备；填充剂的填充量：145mg)，使所述柱吸附和收集2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶。将柱用1mL水漂洗，然后使1mL***通过柱，以洗脱2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶。在合成结束时，得到的化合物的放射性活度的量是184.5MBq。另外，在下述条件下进行TLC分析，结果，所得化合物的放射化学纯度是99％。
TLC分析条件：
TLC板：硅胶60F254(商品名；由默克公司制)
流动相：氯仿/甲醇/三乙胺＝100/1/2
检测器：Rita Star(商品名；由Raytest公司制)
实施例4：2-(4′-氟苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶(非 放射性碘化形式)的合成
向1.50g(相当于6.44mmol)的溴化铜加入20mL乙酸乙酯，得到混悬液，向其中加入426mg(相当于2.80mmol)的4′-氟苯丙酮。然后，将混合物加热回流。在2小时后，将反应液冷却到室温并过滤。然后将得到的滤液减压浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯，并将得到的粗产物通过快速硅胶柱色谱法纯化(洗脱溶剂：己烷/乙酸乙酯＝10/1)，得到650mg(相当于2.80mmol)的2-溴-4′-氟苯丙酮(图3，步骤1)。
将650mg(相当于2.80mmol)的2-溴-4′-氟苯丙酮和616mg(相当于2.80mmol)的2-氨基-5-碘吡啶溶解于15mL乙腈。将得到的溶液在油浴中在110℃加热回流2小时。在反应完成后，将反应液冷却到室温，并将沉淀物过滤。然后，将沉淀物用乙腈洗涤并减压干燥。将得到的粗晶体混悬在1.0mL水和1.0mL甲醇的混合液中。然后向其中加入约1.0mL的饱和碳酸氢钠溶液，并使用超声洗涤机将混合物声处理10分钟。从得到的混合物过滤和回收沉淀物，用水充分洗涤，并减压干燥，得到42.8mg(相当于0.122mmol)的2-(4′-氟苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶(图3，步骤2)。
得到的2-(4′-氟苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶的NMR测定结果(内标物：四甲基硅烷)如下所示。
使用的NMR装置：JNM-ECP-500(由日本电子株式会社(JEOL)制)
1H-NMR(溶剂：氯仿-d1；共振频率：500MHz)：δ8.17(s，1H)，7.76-7.74(m，2H)，7.46(d，J＝9.2Hz，1H)，7.37(d，J＝9.2Hz，1H)，7.19-7.15(m，2H)，2.62(s，3H)。
实施例5：6-三丁基甲锡烷基-2-(4′-氟苯基)-3-甲基咪唑并 [1，2-a]吡啶的合成
将22.5mg(相当于63.9μmol)实施例4中得到的2-(4′-氟苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶溶解于2.0mL二噁烷中，向其中加入1.0mL三乙胺。然后向其中加入0.048mL(相当于96μmol)的双(三丁基锡)和0.6mg(催化剂量)的四(三苯膦)钯。在将反应混合物在90℃搅拌22小时后，将溶剂减压蒸馏掉。残余物通过快速硅胶柱色谱法纯化(洗脱溶剂：己烷/乙酸乙酯＝5/1)，得到31.9mg(相当于61.9μmol)的6-三丁基甲锡烷基-2-(4′-氟苯基)-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶(图4，步骤1)。
得到的6-三丁基甲锡烷基-2-(4′-氟苯基)-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶的NMR测定结果(内标物：四甲基硅烷)如下所示。
使用的NMR装置：JNM-ECP-500(由日本电子株式会社(JEOL)制)
1H-NMR(溶剂：氯仿-d1；共振频率：500MHz)：δ7.78(m，3H)，7.63(d，J＝8.8Hz，1H)，7.19-7.14(m，3H)，2.63(s，3H)，1.69-1.49(m，6H)，1.40-1.34(m，6H)，1.20-1.07(m，6H)，0.94-0.90(m，9H)。
13C-NMR(溶剂：氯仿-d1，共振频率：125MHz)：δ144.3，140.7，130.9，130.6，130.1，130.0，127.3，121.9，116.8，115.5，114.7，29.0，27.3，16.4，13.7，9.9。
实施例6：2-(4′-氟苯基)-6-[ 123 I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶 的合成
向60μL的6-三丁基甲锡烷基-2-(4′-氟苯基)-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶在甲醇/二甲亚砜(混合比例：9/1)混合液中的溶液(浓度：1mg/mL)中，加入70μL的2mol/L盐酸、15μL的1mmol/L碘化钠、100μL的348MBq的[123I]碘化钠和15μL的10％(W/V)过氧化氢。在将混合液在50℃静置10分钟后，使其在下述条件下进行HPLC，得到2-(4′-氟苯基)-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶的级分。
HPLC条件：
柱：Phenomenex Luna C18(商品名；由Phenomenex公司制备；规格：4.6×150mm)
流动相：含0.1％三氟乙酸的水/含0.1％三氟乙酸的乙腈＝20/80→0/100(17分钟)
流速：1.0mL/min。
检测器：紫外可见吸光光度计(检测波长：282nm)和放射性活度计数器(由Raytest公司制备；STEFFI型)
向所述级分加入10mL水。使得到的溶液通过反相柱(商品名：Sep-Pak(注册商标)Light C8 Cartridges，由Waters制备；填充剂的填充量：145mg)，使所述柱吸附和收集2-(4′-氟苯基)-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶。将柱用1mL水漂洗，然后使1mL的***通过柱以洗脱2-(4′-氟苯基)-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶。在合成结束时，得到的化合物的放射性活度的量是114.2MBq。另外，在下述条件下进行TLC分析，结果，所得化合物的放射化学纯度是99％。
TLC分析条件：
TLC板：硅胶60F254(商品名；由默克公司制)
流动相：氯仿/甲醇/三乙胺＝100/1/2
检测器：Rita Star(商品名；由Raytest公司制)
实施例7：2-(4′-羟基苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶 (非放射性碘化形式)的合成
向6.26g(相当于27.9mmol)的溴化铜加入40mL乙酸乙酯，得到混悬液，向其中加入2.00g(相当于13.3mmol)的4′-羟基苯丙酮。然后将混合物加热回流。在2小时后，将反应液冷却到室温并过滤。然后，将得到的滤液减压浓缩。得到的粗产物通过快速硅胶柱色谱法纯化(洗脱溶剂：己烷/乙酸乙酯＝3/1)，得到3.49g(相当于15.2mmol)的2-溴-4′-羟基苯丙酮(图5，步骤1)。
将734mg(相当于3.20mmol)的2-溴-4′-羟基苯丙酮和705mg(相当于3.20mmol)的2-氨基-5-碘吡啶溶解于15mL乙腈中。将得到的溶液在油浴中在110℃加热回流4小时。在反应完成后，将反应液冷却到室温，并将沉淀物过滤。然后，将沉淀物用乙腈洗涤并减压干燥。将得到的粗结晶混悬在3.0mL水和1.0mL甲醇的混合液中。然后，向其中加入大约10mL的饱和碳酸氢钠溶液，并使用超声洗涤机将混合物声处理5分钟。从得到的混合物过滤和回收沉淀物，用水充分洗涤，并减压干燥，得到226mg(相当于0.645mmol)的2-(4′-羟基苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶(图5，步骤2)。
得到的2-(4′-羟基苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶的NMR测定结果(内标物：四甲基硅烷)如下所示。
使用的NMR装置：JNM-ECP-500(由日本电子株式会社(JEOL)制)
1H-NMR(溶剂：二甲亚砜-d6；共振频率：500MHz)：δ9.77(s，1H)，8.79(s，1H)，7.66-7.64(m，1H)，7.60-7.58(m，2H)，7.51-7.49(m，1H)，6.92-6.90(m，2H)，2.61(s，3H)。
实施例8：6-三丁基甲锡烷基-2-(4′-羟基苯基)-3-甲基咪唑并 [1，2-a]吡啶的合成
将100mg(相当于0.286mmol)实施例7中得到的2-(4′-羟基苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶溶解于4.0mL二噁烷中，用其中加入2.0mL三乙胺。然后，向其中加入0.22mL(相当于0.43mmol)的双(三丁基锡)和19.8mg(催化剂量)的四(三苯膦)钯。在将反应混合物在90℃搅拌78小时后，将溶剂减压蒸馏掉。残余物通过快速硅胶柱色谱法纯化(洗脱溶剂：己烷/乙酸乙酯＝1/1)，得到55.0mg(相当于0.107mmol)的6-三丁基甲锡烷基-2-(4′-羟基苯基)-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶(图6，步骤1)。
得到的6-三丁基甲锡烷基-2-(4′-羟基苯基)-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶的NMR测定结果(内标物：四甲基硅烷)如下所示。
使用的NMR装置：JNM-ECP-500(由日本电子株式会社(JEOL)制)
1H-NMR(溶剂：氯仿-d1；共振频率：500MHz)：δ7.72(s，1H)，7.63(d，J＝8.7Hz，1H)，7.52(d，J＝8.7Hz，2H)，7.17(d，J＝8.7Hz，1H)，6.85(d，J＝8.7Hz，2H)，2.60(s，3H)，1.65-1.48(m，6H)，1.39-1.32(m，6H)，1.19-1.06(m，6H)，0.90(t，J＝7.3Hz，9H)。
实施例9：2-(4′-羟基苯基)-6-[ 123 I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡 啶的合成
向60μL的6-三丁基甲锡烷基-2-(4′-羟基苯基)-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶在甲醇/二甲亚砜(混合比：9/1)的混合液中的溶液(浓度：1mg/mL)中，加入30μL的1mol/L盐酸、15μL的1mmol/L碘化钠、18μL的303MBq的[123I]碘化钠和15μL的10％(W/V)过氧化氢。在将混合液在50℃静置10分钟后，使其在下述条件下进行HPLC，得到2-(4′-羟基苯基)-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶的级分。
HPLC条件：
柱：Phenomenex Luna C18(商品名；由Phenomenex公司制备；规格：4.6×150mm)
流动相：含0.1％三氟乙酸的水/含0.1％三氟乙酸的乙腈＝20/80→0/100(17分钟)
流速：1.0mL/min。
检测器：紫外可见吸光光度计(检测波长：282nm)和放射性活度计数器(由Raytest公司制备；STEFFI型)
向所述级分加入10mL水。使得到的溶液通过反相柱(商品名：Sep-Pak(注册商标)Light C8 Cartridges，由Waters制备；填充剂的填充量：145mg)，使所述柱吸附和收集2-(4′-羟基苯基)-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶。将该柱用1mL水漂洗，然后使1mL的***通过柱，以洗脱2-(4′-羟基苯基)-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶。在合成结束时，得到的化合物的放射性活度的量是95.7MBq。另外，在下述条件下进行TLC分析，结果，所得化合物的放射化学纯度是99％。
TLC分析条件：
TLC板：硅胶60F254(商品名；由默克公司制)
流动相：氯仿/甲醇/三乙胺＝100/1/2
检测器：Rita Star(商品名；由Raytest公司制)
实施例10：3-氰基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-碘咪唑并 [1，2-a]吡啶(非放射性碘化形式)的合成
将300mg(相当于2.20mmol)的4′-羟基苯乙酮溶解于10.0mL的二甲基甲酰胺中，向其中加入365mg(相当于2.64mmol)的碳酸钾。然后，向其中加入800mg(相当于2.20mmol)实施例1的步骤3中合成的1-溴-2-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)乙烷。在将反应混合物在90℃搅拌2小时后，加入饱和氯化铵水溶液，并用乙酸乙酯萃取3次。合并的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，并减压浓缩。使得到的粗产物通过硅胶柱色谱法纯化(洗脱溶剂：己烷/乙酸乙酯＝10/1)，得到499mg(相当于1.19mmol)的4′-(2″-叔丁基二苯基甲硅烷氧基乙氧基)苯乙酮(图7，步骤1)。
向585mg(相当于2.62mmol)的溴化铜加入10mL的乙酸乙酯，得到混悬液，向其中加入499mg(相当于1.19mmol)的4′-(2″-叔丁基二苯基甲硅烷氧基乙氧基)苯乙酮。然后将得到的混合物加热回流。在2小时后，将反应混合物冷却到室温并过滤。将得到的滤液减压浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯并通过加入活性碳进行脱色操作。然后，将得到的溶液过滤并浓缩。得到的粗产物通过快速硅胶柱色谱法纯化(洗脱溶剂：己烷/乙酸乙酯＝10/1)，得到398mg(相当于0.800mmol)的2-溴-4′-(2″-叔丁基二苯基甲硅烷氧基乙氧基)苯乙酮(图7，步骤2)。
将398mg(相当于0.800mmol)的2-溴-4′-(2″-叔丁基二苯基甲硅烷氧基乙氧基)苯乙酮和194mg(相当于0.880mmol)的2-氨基-5-碘吡啶溶解于5.0mL的乙腈。将得到的溶液在油浴中在110℃加热回流4小时。在反应完成后，将反应液冷却到室温，并过滤和回收沉淀物。沉淀物用乙腈洗涤并减压干燥，得到271mg(相当于0.386mmol)的2-[4′-(2″-叔丁基二苯基甲硅烷氧基乙氧基)苯基]-6-碘咪唑并[1，2-a]吡啶-氢溴酸盐(图7，步骤3)。
将180mg(相当于0.257mmol)的2-[4′-(2″-叔丁基二苯基甲硅烷氧基乙氧基)苯基]-6-碘咪唑并[1，2-a]吡啶-氢溴酸盐溶解于3.0mL的乙腈中，用其中加入36μL(相当于0.257mmol)的三乙胺。然后，将反应混合物冷却到0℃，并缓慢滴加48μL(相当于0.514mmol)的氯磺酰基异氰酸酯。在将反应混合物室温搅拌3天后，加入饱和碳酸氢钠水溶液，用二氯甲烷萃取3次。合并的二氯甲烷层用无水硫酸钠干燥，并减压浓缩。得到的粗产物通过硅胶柱色谱法纯化(洗脱溶剂：己烷/乙酸乙酯＝5/1)，得到143mg(相当于0.222mmol)的2-[4′-(2″-叔丁基二苯基甲硅烷氧基乙氧基)苯基]-3-氰基-6-碘咪唑并[1，2-a]吡啶(图7，步骤4)。
将143mg(相当于0.222mmol)的2-[4′-(2″-叔丁基二苯基甲硅烷氧基乙氧基)苯基]-3-氰基-6-碘咪唑并[1，2-a]吡啶溶解于1.0mL的四氢呋喃，用其中加入0.23mL的1.0mol/L四丁基氟化铵的四氢呋喃溶液。在将反应混合物室温搅拌30分钟后，加入氯化铵水溶液，随后加入5.0mL水和1.0mL乙腈，以过滤析出的沉淀。将过滤的沉淀物依次用水和乙腈洗涤，得到84.0mg(相当于0.207mmol)的3-氰基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-碘咪唑并[1，2-a]吡啶(图7，步骤5)。
得到的3-氰基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-碘咪唑并[1，2-a]吡啶的NMR测定结果(内标物：四甲基硅烷)如下所示。
使用的NMR装置：JNM-ECP-500(由日本电子株式会社(JEOL)制)
1H-NMR(溶剂：二甲基甲酰胺-d6；共振频率：500MHz)：δ8.60(s，1H)，8.10(d，J＝8.7Hz，2H)，7.59(d，J＝9.1Hz，1H)，7.51(d，J＝9.1Hz，1H)，7.11(d，J＝8.7Hz，2H)，4.95(t，J＝5.5Hz，1H)，4.13(t，J＝4.6Hz，2H)，3.85(t，J＝4.6Hz，2H)。
实施例11：6-三丁基甲锡烷基-3-氰基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基) 苯基]咪唑并[1，2-a]吡啶的合成
将50mg(相当于0.123mmol)上述实施例10中得到的3-氰基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-碘咪唑并[1，2-a]吡啶溶解于2.0mL的二噁烷，用其中加入1.0mL的三乙胺。然后向其中加入0.10mL(相当于0.19mmol)的双(三丁基锡)和8.5mg(催化剂量)的四(三苯膦)钯。在将反应混合物在90℃搅拌20小时后，将溶剂减压蒸馏掉。残余物通过快速硅胶柱色谱法纯化(洗脱溶剂：己烷/乙酸乙酯＝1/2)，得到43.2mg(相当于0.0760mmol)的6-三丁基甲锡烷基-3-氰基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]咪唑并[1，2-a]吡啶(图8，步骤1)。
得到的6-三丁基甲锡烷基-3-氰基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]咪唑并[1，2-a]吡啶的NMR测定结果(内标物：四甲基硅烷)如下所示。
使用的NMR装置：JNM-ECP-500(由日本电子株式会社(JEOL)制)
1H-NMR(溶剂：氯仿-d1；共振频率：500MHz)：δ8.08(d，J＝8.7Hz，2H)，8.00(s，1H)，7.59(d，J＝8.7Hz，1H)，7.24(d，J＝8.7Hz，1H)，7.03(d，J＝8.7Hz，2H)，4.15(d，J＝4.6Hz，2H)，4.00(t，J＝4.6Hz，2H)，1.63-1.50(m，6H)，1.41-1.33(m，6H)，1.22-1.12(m，6H)，0.92(t，J＝7.4Hz，9H)。
实施例12：3-氰基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-[ 123 I]碘咪唑 并[1，2-a]吡啶的合成
向70μL的6-三丁基甲锡烷基-3-氰基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]咪唑并[1，2-a]吡啶在甲醇/二甲亚砜(9/1)混合液中的溶液(浓度：1mg/mL)中，加入70μL的1mol/L盐酸、20μL的1mmol/L碘化钠、100μL的634MBq的[123I]碘化钠和20μL的10％(W/V)过氧化氢。在将混合液在50℃静置10分钟后，使其在下述条件下进行HPLC，得到3-氰基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘咪唑并[1，2-a]吡啶的级分。
HPLC条件：
柱：Phenomenex Luna C18(商品名；由Phenomenex公司制备；规格：4.6×150mm)
流动相：含0.1％三氟乙酸的水/含0.1％三氟乙酸的乙腈＝20/80→0/100(17分钟)
流速：1.0mL/min。
检测器：紫外可见吸光光度计(检测波长：282nm)和放射性活度计数器(由Raytest公司制备；STEFFI型)
向所述级分加入10mL水。使得到的溶液通过反相柱(商品名：Sep-Pak(注册商标)Light C8 Cartridges，由Waters制备；填充剂的填充量：145mg)，使所述柱吸附和收集3-氰基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘咪唑并[1，2-a]吡啶。将柱用1mL水漂洗，然后使1mL的***通过柱以洗脱3-氰基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘咪唑并[1，2-a]吡啶。在合成结束时，得到的化合物的放射性活度的量是499MBq。另外，在下述条件下进行TLC分析，结果，所得化合物的放射化学纯度是94％。
TLC分析条件：
TLC板：硅胶60F254(商品名；由默克公司制)
流动相：氯仿/甲醇/三乙胺＝100/1/2
检测器：Rita Star(商品名；由Raytest公司制)
实施例13：2-[4′-(2″-氟乙氧基)苯基]-3-碘代-6-甲氧基咪唑并 [1，2-a]吡啶(非放射性碘化形式)的合成
将100.0g(相当于0.575mol)的2-溴-3-羟基吡啶溶解于310mL的二甲亚砜中，用其中加入575mL(相当于0.575mol)的1mol/L甲醇钠-甲醇溶液。然后，将反应液加热到90℃以蒸馏掉甲醇。在将反应液冷却到10℃或更低后，加入93.9g(相当于0.662mol)的碘甲烷，然后室温搅拌20.5小时。在反应完成后，将反应液倾倒在冰水中并用氯仿萃取2次。合并的氯仿层用1mol/L氢氧化钠溶液洗涤，用饱和氯化钠溶液洗涤2次，用无水硫酸钠干燥。在将溶剂减压蒸馏掉后，得到65.4g(相当于0.348mol)的2-溴-3-甲氧基吡啶(图9，步骤1)。
将262mL的浓硫酸冷却到-2℃，并小心地向其中加入262mL的90％硝酸。随后，小心地向其中加入65.3g(相当于0.347mmol)的2-溴-3-甲氧基吡啶。在将反应混合物在冰浴中搅拌10分钟后，将混合物在室温搅拌30分钟，然后加热到55℃并进一步搅拌1.5小时。在将反应液冷却后，将反应液逐渐地倾倒在碎冰中，以生成沉淀物。将沉淀物过滤并用水洗涤，然后在减压下用五氧化二磷干燥，得到55.7g(相当于0.239mmol)的2-溴-3-甲氧基-6-硝基吡啶(图9，步骤2)。
将55.6g(相当于0.239mol)的2-溴-3-甲氧基-6-硝基吡啶溶解于1700mL的乙醇，并在氩气流下向其中加入37.3g(50％湿度)的10％钯-碳。然后向混合物滴加283mL的一水合肼。在将反应混合物加热回流70分钟后，将反应液冷却到室温。然后将钯-碳过滤掉，残余物用乙醇洗涤，并将洗液与滤液合并。将合并的溶液减压浓缩。然后，向浓缩物加入1300mL水和130mL浓氨水，并将得到的混合物用氯仿萃取8次。合并的氯仿层用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将得到的粗产物减压蒸馏，得到26.2g(相当于0.211mol)的2-氨基-5-甲氧基吡啶(图9，步骤3)。
向4.69g(相当于21.0mmol)的溴化铜加入30mL的乙酸乙酯，得到混悬液，向其中加入1.36g(相当于10.0mmol)4′-羟基苯乙酮在30mL乙酸乙酯中的溶液，并将得到的混合物加热回流。在1.5小时后，将反应混合物冷却到室温并过滤。将得到的滤液减压浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯并通过加入活性碳进行脱色操作。然后，将得到的溶液过滤并浓缩。得到的粗产物通过快速硅胶柱色谱法纯化(洗脱溶剂：氯仿/甲醇＝20/1)，得到2.15g(相当于10.0mmol)的2-溴-4′-羟基苯乙酮(图9，步骤4)。
将645mg(相当于3.00mmol)的2-溴-4′-羟基苯乙酮和372mg(相当于3.00mmol)的2-氨基-5-甲氧基吡啶溶解于20mL的乙腈。将得到的溶液在油浴中在90℃加热回流2小时。在反应完成后，将反应液冷却到室温，并过滤和回收沉淀物。将沉淀物用乙腈洗涤并减压干燥，得到粗结晶。将得到的粗结晶混悬在4.0mL水和4.0mL甲醇的混合液中。然后向其中加入大约2.0mL的饱和碳酸氢钠溶液，并使用超声洗涤机将混合物声处理5分钟。从得到的混合物过滤和回收沉淀物，用水充分洗涤，并减压干燥，得到512mg(相当于2.17mmol)的2-(4′-羟基苯基)-6-甲氧基咪唑并[1，2-a]吡啶(图9，步骤5)。
将充分干燥而除去水分的246mg(相当于1.02mmol)的2-(4′-羟基苯基)-6-甲氧基咪唑并[1，2-a]吡啶溶解于9.0mL的N，N-二甲基甲酰胺，用其中加入353mg(相当于3.06mmol)的碳酸钾。为混合物补充279mg(相当于1.53mmol)的2-氟-1-对甲苯磺酰氧基乙烷，然后将溶液在90℃搅拌2小时。在反应完成后，向其中加入饱和氯化铵水溶液，用乙酸乙酯萃取3次。合并的乙酸乙酯层用水和饱和氯化钠溶液洗涤，用无水硫酸钠干燥，并减压浓缩。得到的粗产物通过硅胶柱色谱法纯化(洗脱溶剂：乙酸乙酯)，得到247mg(相当于0.863mmol)的2-[4′-(2″-氟乙氧基)苯基]-6-甲氧基咪唑并[1，2-a]吡啶(图9，步骤6)。
将247mg(相当于0.863mmol)的2-[4′-(2″-氟乙氧基)苯基]-6-甲氧基咪唑并[1，2-a]吡啶溶解于8.0mL的乙腈，用其中加入233mg(相当于1.04mmol)的N-碘琥珀酰亚胺。将反应混合物在0℃搅拌20分钟，然后向其中加入饱和碳酸氢钠水溶液和饱和硫代硫酸钠水溶液，用乙酸乙酯萃取3次。合并的乙酸乙酯层用水和饱和氯化钠溶液洗涤，用无水硫酸钠干燥，并减压浓缩。得到的粗产物通过硅胶柱色谱法纯化(洗脱溶剂：己烷/乙酸乙酯＝1/2)，得到352mg(相当于0.854mmol)的2-[4′-(2″-氟乙氧基)苯基]-3-碘代-6-甲氧基咪唑并[1，2-a]吡啶(图9，步骤7)。
得到的2-[4′-(2″-氟乙氧基)苯基]-3-碘代-6-甲氧基咪唑并[1，2-a]吡啶的NMR测定结果(内标物：四甲基硅烷)如下所示。
使用的NMR装置：JNM-ECP-500(由日本电子株式会社(JEOL)制)
1H-NMR(溶剂：氯仿-d1；共振频率：500MHz)：δ7.99(d，J＝8.7Hz，2H)，7.74(s，1H)，7.51(d，J＝9.6Hz，1H)，7.06-7.02(m，3H)，4.79(dt，2JHF＝48.0Hz，J＝4.6Hz，2H)，4.29(dt，3JHF＝27.5Hz，J＝4.6Hz，2H)，3.91(s，3H)。
实施例14：2-[4′-(2″-氟乙氧基)苯基]-3-[ 123 I]碘-6-甲氧基咪唑 并[1，2-a]吡啶的合成
向60μL的2-[4′-(2″-氟乙氧基)苯基]-6-甲氧基咪唑并[1，2-a]吡啶在甲醇/二甲亚砜(混合比为9/1)混合液中的溶液(浓度：1mg/mL)中，加入70μL的2mol/L盐酸、15μL的1mmol/L碘化钠、100μL的243MBq的[123I]碘化钠和15μL的10％(W/V)过氧化氢。在将混合液在50℃静置10分钟后，使溶液在下述条件下进行HPLC，得到2-[4′-(2″-氟乙氧基)苯基]-3-[123I]碘-6-甲氧基咪唑并[1，2-a]吡啶的级分。
HPLC条件：
柱：Phenomenex Luna C18(商品名；由Phenomenex公司制备；规格：4.6×150mm)
流动相：含0.1％三氟乙酸的水/含0.1％三氟乙酸的乙腈＝20/80→0/100(17分钟)
流速：1.0mL/min。
检测器：紫外可见吸光光度计(检测波长：282nm)和放射性活度计数器(由Raytest公司制备；STEFFI型)
向所述级分加入10mL水。使得到的溶液通过反相柱(商品名：Sep-Pak(注册商标)Light C8 Cartridges，由Waters制备；填充剂的填充量：145mg)，使所述柱吸附和收集2-[4′-(2″-氟乙氧基)苯基]-3-[123I]碘-6-甲氧基咪唑并[1，2-a]吡啶。将柱用1mL水漂洗，然后使1mL的***通过柱，以洗脱2-[4′-(2″-氟乙氧基)苯基]-3-[123I]碘-6-甲氧基咪唑并[1，2-a]吡啶。在合成结束时，得到的化合物的放射性活度的量是96.9MBq。另外，在下述条件下进行TLC分析，结果，所得化合物的放射化学纯度是89.6％。
TLC分析条件：
TLC板：硅胶60F254(商品名；由默克公司制)
流动相：氯仿/甲醇/三乙胺＝100/1/2
检测器：Rita Star(商品名；由Raytest公司制)
参考例1：[ 123 I]-IMPY的合成
根据以下步骤合成[123I]-IMPY，用于在比较例中通过测定logP辛醇进行评价。
根据在文献(Zhi-Ping Zhuang等人，J.Med.Chem，2003，46，p.237-243)中描述的方法合成6-三丁基甲锡烷基-2-[4′-(N，N-二甲氨基)苯基]咪唑并[1，2-a]吡啶，将其溶解于甲醇(浓度：1mg/mL)。向53μL所得溶液中加入75μL的1mol/L盐酸、60-70μL的224-253MBq的[123I]碘化钠、10μL的1mmol/L碘化钠溶液和15μL的10％(W/V)过氧化氢。在将混合液在50℃静置10分钟后，使溶液在与实施例3相同的条件下进行HPLC，得到[123I]-IMPY的级分。
向所述级分加入10mL水。将得到的溶液通过反相柱(商品名：Sep-Pak(注册商标)Light C8 Cartridges，由Waters制备；填充剂的填充量：145mg)，使所述柱吸附和收集[123]-IMPY。将柱用1mL水漂洗，然后让1mL***通过柱，以洗脱[123I]-IMPY。在合成结束时，得到的化合物的放射性活度的量是41-57MBq。另外，在与实施例3相同的条件下进行TLC分析，结果，所得化合物的放射化学纯度是93％。
实施例15-18、比较例1：基于辛醇萃取法的分配系数的测定
测定了基于辛醇萃取法的分配系数(以下称作logP辛醇)，通常已知其是化合物通过血脑屏障(以下称作BBB)的渗透性的指示。
方法
将化合物1、化合物2、化合物3和化合物4各自的***溶液以及[123I]-IMPY的***溶液分别用包含10mg/mL抗坏血酸的生理盐水稀释，并调节到27-30MBq/mL的放射性浓度。分别向2mL辛醇中加入10μL的各溶液，并加入2mL的10mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.4)，随后搅拌30秒。在将各混合物用低速离心机(型号：CTD4，日立工业株式会社制)离心(2000rpm×60min)后，对辛醇层和水层各自取样1mL，并使用Autowell Gamma***(型号：ARC-301B，由Aloka制)进行放射性活度计数的测定。使用所测得的放射性活度计数，根据以下公式(1)计算logP辛醇。
Figure BPA00001160825700311
结果
结果示出在表2中。如该表所示，所有的化合物的logP辛醇值都显示在1～3之间。众所周知，能够渗透BBB的化合物的logP辛醇值都显示在1～3之间(Douglas D.Dischino等人，J.Nucl.Med.，(1983)，24，p.1030-1038)。上述结果表明，本实验的各化合物都具有与IMPY同等的BBB渗透能力。
表2：本发明化合物的logP辛醇值
  实验  化合物   logP辛醇值
  比较例1  [123I]-IMPY   1.9
  实施例15  化合物1   2.3
  实施例16  化合物2   2.2
  实施例17  化合物3   2.5
  实施例18  化合物4   3.0
实施例19-22、比较例2：脑内转移性和清除性的测定
使用化合物1，化合物2，化合物3和化合物4，测定在雄性Wistar大鼠(7周龄)的脑中放射性蓄积的经时变化。
方法
制备在包含10mg/mL抗坏血酸的生理盐水中的化合物1(放射性浓度为27MBq/mL)，在包含10mg/mL抗坏血酸的生理盐水中的化合物2(放射性浓度为27MBq/mL)，在包含10mg/mL抗坏血酸的生理盐水中的化合物3(放射性浓度为28MBq/mL)，和在包含10mg/mL抗坏血酸的生理盐水中的化合物4(放射性浓度为30MBq/mL)，得到样品溶液。在硫喷妥钠麻醉下将各样品溶液注射到雄性Wistar大鼠(7周龄)的尾静脉中(剂量：0.05mL，剂量给药的放射性活度：相当于1.4-1.5MBq)。在注射后的2、5、30和60分钟，通过从腹部大动脉放血将这些大鼠处死，取出脑，测定脑质量，然后用单通道分析仪(检测器型号：SP-20，应用光研工业株式会社制)测定放射性活度(在本实施例中，以下称作A)。另外，根据与上述相同的方法测定身体其余部分的放射性活度水平(在本实施例中，以下称作B)。使用这些测定结果，根据下式(2)计算在各解剖时间点的每单位脑重量的放射性蓄积量(％ID/g)(实施例19-22)。
另外，制备在包含10mg/mL抗坏血酸的生理盐水中的[123I]-IMPY(放射性浓度为16MBq/mL)，进行与上述相同的操作，并计算各解剖时间点的每单位脑重量的放射性蓄积量(％ID/g)(比较例1)。
同时，对于所有的实施例和比较例2，在各时间点使用三只动物。
Figure BPA00001160825700321
结果
结果示出在表3中。如表3所示，本发明的各化合物都在注射后的2分钟时间点表现出与[123I]-IMPY同等的显著的放射性蓄积，然后显示了在60分钟内快速清除的趋势。这些结果提示，化合物1、2、3和4具有与[123I]-IMPY同样优异的脑中转移性，并且可从脑中快速清除。
表3：本发明化合物在静脉注射后的脑中放射性蓄积(大鼠)
Figure BPA00001160825700322
实施例23-26：脑内淀粉样蛋白的显像确认
进行以下实验以考查本发明化合物是否能够使脑内淀粉样蛋白显像。
方法
(1)将Aβ1-42(由Wako制)溶解于磷酸盐缓冲液(pH 7.4)，在37℃振荡72小时，得到1mg/mL的凝集Aβ混悬液(在本实施例中，以下称为淀粉样蛋白混悬液)。
(2)在硫喷妥钠麻醉下，将2.5μL(相当于25μg)的淀粉样蛋白混悬液注射到雄性Wistar大鼠(7周龄)一侧的杏仁核中。作为对照，将2.5μL的磷酸盐缓冲生理盐水(pH 7.4)注射到大鼠另一侧的杏仁核中。在注射淀粉样蛋白混悬液和磷酸盐缓冲生理盐水(pH 7.4)1天后，对大鼠进行研究。
(3)分别制备在包含10mg/mL抗坏血酸的生理盐水中的化合物1(放射性浓度为27MBq/mL，实施例23)，在包含10mg/mL抗坏血酸的生理盐水中的化合物2(放射性浓度为27MBq/mL，实施例24)，在包含10mg/mL抗坏血酸的生理盐水中的化合物3(放射性浓度为28MBq/mL，实施例25)和在包含10mg/mL抗坏血酸的生理盐水中的化合物4(放射性浓度为30MBq/mL，实施例26)，得到样品溶液。在硫喷妥钠的麻醉下通过尾静脉将各样品溶液注射到大鼠体内(剂量：0.5mL，剂量给药的放射性活度：相当于14-15MBq)。
(4)在注射后60分钟，将脑取出，用切片机(型号：CM3050S，由LEICA制)制成10μm厚的脑切片。将该脑切片在成像板上曝光20小时，然后使用生物-图像分析仪(型号：BAS-2500；富士胶片公司制)进行图像分析。
(5)在使用生物-图像分析仪进行图像分析后，用硫磺素T进行病理学染色，使用荧光显微镜(尼康公司制；型号：TE2000-U型；激发波长：400-440nm；检测波长：470nm)进行显像。由此证实淀粉样蛋白沉积在该切片上(图10b，图11b，图12b和图13b)。
结果
图10-13示出了脑内注射淀粉样蛋白的大鼠的脑切片的放射自显影图和硫磺素T染色得到的图像。如图中所示，在注射淀粉样蛋白混悬液的那一侧的杏仁核中观察到显著的放射性蓄积。从放射性蓄积位点的硫磺素T染色的结果，证实了在该位点存在有淀粉样蛋白。另一方面，在注射生理盐水的那一侧杏仁核中没有观察到与其它位点相比显著的放射性蓄积。
这些结果提示，各化合物都具有在脑内淀粉样蛋白上蓄积的性质和使脑内淀粉样蛋白显像的能力。
实施例27：回复突变试验
为了考查化合物5的基因诱变性，使用鼠伤寒沙门氏菌TA98和TA100进行回复突变试验(以下称作Ames试验)。
在有和没有添加S9mix的情况下进行试验。使用二甲亚砜(以下称作DMSO)作为阴性对照。在没有添加S9mix的情况下的阳性对照是2-(2-呋喃基)-3-(5-硝基-2-呋喃基)丙烯酰胺(以下称作AF-2)，在添加S9mix的情况下的阳性对照是2-氨基蒽(以下称作2-AA)。
作为要被添加到试验板上的样品溶液，制备了化合物5以最大浓度溶解于DMSO中的溶液(化合物浓度：50mg/mL)和将最大浓度溶液用DMSO稀释而得到的每个浓度的要被添加到试验板的样品溶液。作为用于制备阳性对照样品的样品溶液，在使用TA98作为试验菌株而没有添加S9mix的情况中，制备AF-2的DMSO溶液(化合物浓度：1μg/mL)；在使用TA100作为试验菌株而没有添加S9mix的情况中，制备AF-2的DMSO溶液(化合物浓度：0.1μg/mL)；在使用TA98作为试验菌株并添加S9mix的情况中，制备2-AA的DMSO溶液(化合物浓度：5μg/mL)；在使用TA100作为试验菌株并添加S9mix的情况中，制备2-AA的DMSO溶液(化合物浓度：10μg/mL)。各样品的添加量为0.1mL/板，作为阴性对照，仅添加0.1mL/板的DMSO。
结果示出在表4中。不管是否添加了S9mix和待检样品的添加量是多少，在用化合物2处理的组中的回复突变菌落数低于用阴性对照物处理的组的2倍。另一方面，用阳性对照物处理的组表现出回复突变菌落数的明显增加。从上述结果判断，化合物5在Ames试验中呈阴性，没有基因诱变性。
表4：Ames试验的结果
Figure BPA00001160825700351
产业实用性
本发明的化合物和检测试剂可以在诊断剂领域中应用。

Claims (10)

1.由下式(1)表示的化合物或其盐：
Figure FPA00001160825600011
其中R1选自以下的基团：卤素取代基，具有1-4个碳原子的烷基取代基，烷基链具有1-4个碳原子的烷氧基取代基和羟基，
R2选自以下的基团：氰基取代基，具有1-4个碳原子的烷基取代基和卤素取代基，且
R3选自以下的基团：羟基，卤素取代基和由下式(2)表示的取代基：
Figure FPA00001160825600012
其中R4是氢，卤素取代基或羟基，且m是1-4的整数，
条件是，R1、R2、R3和R4中的至少一个表示放射性卤素。
2.权利要求1的化合物或其盐，其中R1、R2、R3和R4中的至少一个表示选自18F，76Br，123I，124I，125I或131I的放射性卤素。
3.权利要求2的化合物或其盐，选自
2-(4′-氟苯基)-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶，
2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶，
2-(4′-羟基苯基)-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶，
3-氰基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘咪唑并[1，2-a]吡啶，
2-[4′-(2″-[18F]氟乙氧基)苯基]-3-碘代-6-甲氧基咪唑并[1，2-a]吡啶，
2-[4′-(2″-[18F]氟乙氧基)苯基]-6-甲氧基-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶，和
2-(4′-[18F]氟苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶。
4.由下式(3)表示的化合物或其盐：
Figure FPA00001160825600021
其中R9选自以下的基团：非放射性卤素取代基，硝基，烷基链具有1-4个碳原子的三烷基甲锡烷基取代基或三苯基甲锡烷基，
R6选自以下的基团：氰基取代基，具有1-4个碳原子的烷基取代基和卤素取代基，且
R7选自以下的基团：羟基，卤素取代基和由下式(4)表示的取代基：
其中R8为氢，卤素取代基或羟基，且n是1-4的整数。
5.由下式(5)表示的化合物或其盐：
Figure FPA00001160825600023
其中R5选自以下的基团：卤素取代基，具有1-4个碳原子的烷基取代基，烷基链具有1-4个碳原子的烷氧基取代基和羟基，
R10选自以下的基团：非放射性卤素取代基，硝基，烷基链具有1-4个碳原子的三烷基甲锡烷基取代基或三苯基甲锡烷基，且
R7选自以下的基团：羟基，卤素取代基和由下式(4)表示的取代基：
Figure FPA00001160825600031
其中R8为氢，卤素取代基或羟基，且n是1-4的整数。
6.由下式(6)表示的化合物或其盐：
Figure FPA00001160825600032
其中R5选自以下的基团：卤素取代基，具有1-4个碳原子的烷基取代基，烷基链具有1-4个碳原子的烷氧基取代基和羟基，
R6选自以下的基团：氰基取代基，具有1-4个碳原子的烷基取代基和卤素取代基，且
R11选自以下的基团：非放射性卤素取代基，硝基取代基，烷基链具有1-4个碳原子的三烷基甲锡烷基取代基和三苯基甲锡烷基。
7.由下式(7)表示的化合物或其盐：
Figure FPA00001160825600033
其中R5选自以下的基团：卤素取代基，具有1-4个碳原子的烷基取代基，烷基链具有1-4个碳原子的烷氧基取代基和羟基，
R6选自以下的基团：氰基取代基，具有1-4个碳原子的烷基取代基和卤素取代基，且
R12选自以下的基团：非放射性卤素取代基，甲磺酰氧基取代基，三氟甲磺酰氧基取代基和芳香族磺酰氧基取代基。
8.用于检测沉积在生物组织上的淀粉状蛋白的试剂，包含由下式(1)表示的化合物或其盐：
Figure FPA00001160825600041
其中R1选自以下的基团：卤素取代基，具有1-4个碳原子的烷基取代基，烷基链具有1-4个碳原子的烷氧基取代基和羟基，
R2选自以下的基团：氰基取代基，具有1-4个碳原子的烷基取代基和卤素取代基，且
R3选自以下的基团：羟基，卤素取代基和由下式(2)表示的取代基：
Figure FPA00001160825600042
其中R4为氢，卤素取代基或羟基，且m是1-4的整数，
条件是，R1、R2、R3和R4中的至少一个表示放射性卤素。
9.权利要求8的用于检测沉积在生物组织上的淀粉状蛋白的试剂，其中R1、R2、R3和R4中的至少一个表示选自18F，76Br，123I，124I，125I或131I的放射性卤素。
10.用于检测沉积在生物组织上的淀粉状蛋白的试剂，包含选自下列的化合物：
2-(4′-氟苯基)-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶，
2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶，
2-(4′-羟基苯基)-6-[123I]碘-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶，
3-氰基-2-[4′-(2″-羟基乙氧基)苯基]-6-[123I]碘咪唑并[1，2-a]吡啶，
2-[4′-(2″-[18F]氟乙氧基)苯基]-3-碘代-6-甲氧基咪唑并[1，2-a]吡啶，
2-[4′-(2″-[18F]氟乙氧基)苯基]-6-甲氧基-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶，和
2-(4′-[18F]氟苯基)-6-碘代-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶。
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Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW200803903A (en) * 2006-04-28 2008-01-16 Nihon Mediphysics Co Ltd Novel compound having affinity to amyloid
ATE535527T1 (de) * 2006-05-19 2011-12-15 Nihon Mediphysics Co Ltd Verbindung mit affinität zu amyloid
EP2042501B1 (en) * 2006-06-21 2017-04-12 Nihon Medi-Physics Co., Ltd. Compound having affinity for amyloid
WO2008056481A1 (fr) * 2006-11-09 2008-05-15 Nihon Medi-Physics Co., Ltd. Agent d'imagerie de diagnostic radioactif
CN101535309A (zh) * 2006-11-17 2009-09-16 日本医事物理股份有限公司 对淀粉状蛋白具有亲和性的新化合物
NZ577511A (en) * 2006-11-30 2012-04-27 Nihon Mediphysics Co Ltd 2-Phenyl-imidazo[1,2-a]pyridine derivatives substituted with a radioactive halogen substituent
TWI406674B (zh) 2007-02-13 2013-09-01 Nihon Mediphysics Co Ltd Method for manufacturing diagnostic radiographic diagnostic agents
CN101903383A (zh) * 2007-10-26 2010-12-01 日本医事物理股份有限公司 对淀粉样蛋白具有亲和性的新化合物
AU2008319985A1 (en) * 2007-10-30 2009-05-07 Nihon Medi-Physics Co., Ltd. Use of novel compound having affinity for amyloid, and process for production of the same
EP2216052A4 (en) * 2007-10-30 2012-11-21 Nihon Mediphysics Co Ltd USE OF A NEW COMPOUND WITH AFFINITY FOR AMYLOID AND METHOD FOR THE PRODUCTION THEREOF
TWI528977B (zh) 2011-05-20 2016-04-11 Nihon Mediphysics Co Ltd New amyloid affinity products
EP2725027B1 (en) 2011-06-24 2017-03-01 Nihon Medi-Physics Co., Ltd. Novel compound with amyloid affinity

Family Cites Families (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1473819A (en) * 1976-01-28 1977-05-18 Gallardo Antonio Sa Derivatives of imidazo 1,2-a pyridine
FR2492382A1 (fr) * 1980-10-22 1982-04-23 Synthelabo Derives d'imidazo (1,2-a) pyridine, leur preparation et leur application en therapeutique
US4727145A (en) * 1986-09-22 1988-02-23 Ortho Pharmaceutical Corporation 2- Or 3- aryl substituted imidazo [1,2-a]pyridines
US4871745A (en) * 1986-09-22 1989-10-03 Ortho Pharmaceutical Corporation 2- or 3-aryl substituted imidazo(1,2-A)pyridines and their use as antisecretory agents
US4791117A (en) * 1986-09-22 1988-12-13 Ortho Pharmaceutical Corporation 2- or 3-aryl substituted imidazo[1,2-a]pyridines and their use as calcium channel blockers
US4833149A (en) * 1986-09-22 1989-05-23 Ortho Pharmaceutical Corporation 2- or 3-aryl substituted imidazo[1,2-a]pyridines
US4880615A (en) * 1988-11-25 1989-11-14 Merck & Co., Inc. Stabilized radiopharmaceutical compositions
ES2079994B1 (es) * 1992-10-07 1996-08-01 Cusi Lab Formulacion farmaceutica a base de polimixina-trimetoprim y un agente antiinflamatorio para su utilizacion topica oftalmica y otica.
DE4327027A1 (de) * 1993-02-15 1994-08-18 Bayer Ag Imidazoazine
BR9611047A (pt) * 1995-10-17 2000-03-08 Searle & Co Processo de deteção de ciclo oxigenase-2
US6812327B1 (en) * 1996-10-25 2004-11-02 Human Genome Sciences, Inc. Neutrokine-alpha polypeptides
HUP9603001A3 (en) * 1996-10-30 1999-07-28 Richter Gedeon Vegyeszet Heterocycle compounds comprising nitrogen, process for producing them and pharmaceutical compositions containing the same
US5985892A (en) * 1998-04-02 1999-11-16 Merck & Co., Ltd. Antagonists of gonadotropin releasing hormone
CA2340394A1 (en) 1998-08-20 2000-03-02 Jorge R. Barrio Methods for labeling .beta.-amyloid plaques and neurofibrillary tangles
WO2000053185A1 (en) * 1999-03-10 2000-09-14 Merck & Co., Inc. 6-azaindole compounds as antagonists of gonadotropin releasing hormone
WO2001074813A2 (en) * 2000-03-31 2001-10-11 Ortho Mcneil Pharmaceutical, Inc. METHOD FOR USING 2- OR 3-ARYL SUBSTITUTED IMIDAZO[1,2-a] PYRIDINES AS H3 ANTAGONISTS
US20010051632A1 (en) * 2000-03-31 2001-12-13 Wenying Chai Phenyl-substituted indolizines and tetrahydroindolizines
WO2001074815A2 (en) * 2000-03-31 2001-10-11 Ortho Mcneil Pharmaceutical, Inc. Phenyl-substituted imidazopyridines
WO2001089517A2 (en) * 2000-05-19 2001-11-29 Thomas Jefferson University Inhibition of cell proliferation and matrix synthesis by antioxidants and nad(p)h oxidase inhibitors
US6514969B2 (en) * 2000-08-16 2003-02-04 Boehringer Ingelheim Pharma Kg β-amyloid inhibitors, processes for preparing them, and their use in pharmaceutical compositions
RU2324686C2 (ru) * 2000-08-24 2008-05-20 Юнивесити Оф Питсбэг ПРОИЗВОДНЫЕ ТИОФЛАВИНА, СВЯЗЫВАЮЩИЕ АМИЛОИД, СПОСОБ ОБНАРУЖЕНИЯ in vivo ОТЛОЖЕНИЙ АМИЛОИДА И СПОСОБ РАСПОЗНАВАНИЯ БОЛЕЗНИ АЛЬЦГЕЙМЕРА
SE0100568D0 (sv) * 2001-02-20 2001-02-20 Astrazeneca Ab Compounds
SE0100567D0 (sv) * 2001-02-20 2001-02-20 Astrazeneca Ab Compounds
IL157359A0 (en) * 2001-02-26 2004-02-19 Bristol Myers Squibb Pharma Co A radiopharmaceutical composition containing an ascorbic acid analog
US6596731B2 (en) * 2001-03-27 2003-07-22 Hoffmann-La Roche Inc. Substituted imidazo[1,2-A] pyridine derivatives
JP4317955B2 (ja) * 2001-04-23 2009-08-19 ザ・トラスティーズ・オブ・ザ・ユニバーシティ・オブ・ペンシルバニア アミロイド斑凝集阻害剤および診断用造影剤
US7186714B2 (en) * 2001-06-21 2007-03-06 Smithkline Beecham Corporation Imidazo[1,2-α]pyridine derivatives for the prophylaxis and treatment of herpes viral infections
JP4436928B2 (ja) 2001-08-27 2010-03-24 ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア スチルベン誘導体、およびアミロイド斑の結合および画像化のためのその使用
WO2003039467A2 (en) * 2001-11-02 2003-05-15 Diagenics International Corporation Monoclonal antibodies specific for beta-amyloid.
GB0205281D0 (en) * 2002-03-06 2002-04-17 Novartis Ag Organic compounds
EP1356827A1 (en) * 2002-04-24 2003-10-29 Mallinckrodt Inc. Method for obtaining a 2-18F-fluor-2-deoxy-D-glucose (18F-FDG)-solution
AU2003242233A1 (en) 2002-06-12 2003-12-31 Bf Research Institute, Inc. Probe compound for image diagnosis of disease with amyloid accumulation, compound for staining age spots/diffuse age spots, and remedy for disease with amyloid accumulation
JPWO2004035522A1 (ja) * 2002-08-30 2006-02-16 株式会社 ビーエフ研究所 プリオン蛋白蓄積性疾患の診断プローブおよび治療薬ならびにプリオン蛋白の染色剤
GB0229695D0 (en) * 2002-12-20 2003-01-29 Amersham Plc Solid-phase preparation of 18F-labelled amino acids
EP1699799B1 (en) * 2003-12-31 2007-05-16 Schering-Plough Ltd. Control of parasites in animals by the use of imidazo [1,2-b]pyridazine derivatives
CA2617319A1 (en) 2005-06-24 2007-01-04 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Radiolabeled-pegylation of ligands for use as imaging agents
WO2007033080A2 (en) * 2005-09-12 2007-03-22 Emory University Alzheimer's disease imaging agents
WO2007063946A1 (ja) 2005-11-30 2007-06-07 Fujifilm Ri Pharma Co., Ltd. アミロイドの凝集及び／又は沈着に起因する疾患の診断薬及び治療薬
TW200803903A (en) * 2006-04-28 2008-01-16 Nihon Mediphysics Co Ltd Novel compound having affinity to amyloid
ATE535527T1 (de) * 2006-05-19 2011-12-15 Nihon Mediphysics Co Ltd Verbindung mit affinität zu amyloid
EP2042501B1 (en) * 2006-06-21 2017-04-12 Nihon Medi-Physics Co., Ltd. Compound having affinity for amyloid
NZ577511A (en) * 2006-11-30 2012-04-27 Nihon Mediphysics Co Ltd 2-Phenyl-imidazo[1,2-a]pyridine derivatives substituted with a radioactive halogen substituent
CN101903383A (zh) * 2007-10-26 2010-12-01 日本医事物理股份有限公司 对淀粉样蛋白具有亲和性的新化合物
CN101909659A (zh) * 2007-10-30 2010-12-08 日本医事物理股份有限公司 对淀粉样蛋白具有亲和性的新化合物的应用及制备方法
AU2008319985A1 (en) * 2007-10-30 2009-05-07 Nihon Medi-Physics Co., Ltd. Use of novel compound having affinity for amyloid, and process for production of the same
CA2724842A1 (en) * 2008-05-19 2009-11-26 Sunovion Pharmaceuticals Inc. Imidazo[1,2-a]pyridine compounds

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