CN101472927B

CN101472927B - 制备[(1R),2S]-2-氨基丙酸2-[4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基氧基]-1-甲基乙酯的方法

Info

Publication number: CN101472927B
Application number: CN2007800232897A
Authority: CN
Inventors: 杰勒德·A·克里斯皮诺; 莫拉德·哈梅蒂; 托马斯·L·莱波特; 约翰·E·桑顿; 贾安·A·佩斯蒂; 徐忠民; 保罗·C·洛本; 戴维·K·莱希; 贾尔·马斯莱希迪诺格卢; 赖佳仁; 洛丽·A·斯潘格勒; 罗伯特·P·迪斯科迪亚
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2006-04-21
Filing date: 2007-04-19
Publication date: 2012-07-04
Anticipated expiration: 2027-04-19
Also published as: HRP20130099T1; IL194715A; AU2007240453A1; ES2399379T3; CN101472927A; MX2008013232A; AR060622A1; JP5203353B2; US20070249610A1; JP2009534413A; KR20090008246A; EA019693B1; CL2010000554A1; US7671199B2; CA2650059A1; DK2010538T3; TW200808799A; BRPI0710691A2; NO20084326L; PT2010538E

Abstract

本发明关于一种制备下式(I)化合物即[(1R)，2S]-2-氨基丙酸2-[4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基氧基]-1-甲基乙酯的经改良的方法。已显示化合物(I)适用于治疗某些类型的癌症。

Description

制备[(1R),2S]-2-氨基丙酸2-[4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基氧基]-1-甲基乙酯的方法

技术领域

本发明通常关于一种制备[(1R)，2S]-2-氨基丙酸2-[4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基氧基]-1-甲基乙酯即目前在临床试验中用于治疗癌症的为VEGFR及FGFR酪氨酸激酶的新颖抑制剂的经改良的方法。

背景技术

本申请揭示一种制备式I的[(1R)，2S]-2-氨基丙酸2-[4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基氧基]-1-甲基乙酯的经改良的方法，在式I中Me为甲基

化合物I、包含化合物I的组合物及使用化合物I的方法揭示于转让给本受让人且在此将其完整引入作为参考的美国专利第6,869,952B2号中。

为前药的化合物I适于抑制诸如VEGFR-2及FGFR-1的生长因子受体的酪氨酸激酶活性且适用于治疗癌症。化合物I亦适用于治疗除癌症外与经由生长因子及抗血管生成受体(诸如VEGFR-2)起作用的信号转导途径相关的疾病。

发明内容

本发明的一个方面提供制备化合物I即[(1R)，2S]-2-氨基丙酸2-[4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基氧基]-1-甲基乙酯即目前在临床试验中用于治疗癌症的为VEGFR-2的新颖抑制剂的经改良的方法

本发明的第二个方面提供经由连续氧化及淬灭来制备下式化合物C的方法

化合物C

该连续方法包括在反应器中比分批方法更好的热转移及使用明显较少的物质以防止潜在危险的热失控(thermal runaway)。

本发明的第三个方面提供制备及纯化为化合物I的关键前体的化合物H的经改良的方法。

本发明的最后方面提供治疗增生性疾病的方法，其包含向需要其的哺乳动物物种投予治疗有效剂量的化合物I，其中化合物I利用本发明的新颖方法步骤制备。

本发明的方法具有优于化合物I的先前合成法的若干重要优势。详言之，由于一些反应物的高危险性，因此所开发的连续方法为所存在的大规模制备化合物I的中间体的方法中最安全的方法。另外，该方法始终以高品质提供用作医药API的化合物I。

附图说明

通过参考以下附图来说明本发明。

图1显示了步骤2的氧化反应和一般设置。

具体实施方式

本发明提供制备化合物I的经改良方法

其包含以下步骤

a)使下式的化合物A

化合物A

与诸如氯化甲基镁的甲基化剂于适当溶剂中反应，得到下式的化合物B

化合物B

b)使用连续氧化及淬灭反应以自化合物B制备下式的化合物C

化合物C

且随后保护以将化合物C转化成下式的化合物D

化合物D

c)将化合物D氯化，得到下式的化合物E

化合物E

d)使化合物E与下式的化合物F偶联

化合物F

，得到下式的化合物G

化合物G

e)随后，使化合物G脱保护且与(R)-(+)-氧化丙烯于适当溶剂中反应，且任选重结晶以改良品质，得到下式的化合物H

化合物H

使化合物H与Cbz-L-丙氨酸及偶联剂反应，得到下式的化合物J

化合物J

使化合物J脱保护且结晶，得到为N-1形式的结晶化合物I。化合物I的N-1形式在2006年9月27日申请的USSN 11/527,864中描述且要求保护，在此将其主题引入作为参考。

用途及效用

化合物I适用于抑制诸如VEGF的蛋白激酶。更具体地，化合物I抑制与诸如癌症的血管生成及/或血管渗透性增加相关的VEGF及FGF的效应。本发明亦关于包含化合物I及医药学上可接受的载剂或稀释剂的医药组合物；及此医药组合物在治疗哺乳动物的过度增生性病症中的用途。详言之，该医药组合物可用于抑制与VEGF及FGF相关的那些原发性及复发性实体肿瘤，尤其对于其生长及扩散而言显著依赖于VEGF的那些肿瘤的生长，所述肿瘤包括例如膀胱癌、肝癌、鳞状细胞癌、头癌、结肠直肠癌、食道癌、妇科癌症(诸如卵巢癌)、胰腺癌、乳癌、***癌、肺癌、***癌、皮肤癌、脑癌、泌尿生殖道癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、淋巴***癌(诸如甲状腺癌)、胃癌、喉癌及肺癌。在另一实施例中，化合物I亦可适用于治疗非癌性病症，诸如糖尿病、糖尿病视网膜病、银屑病、类风湿性关节炎、肥胖、卡波氏肉瘤(Kaposi’s sarcoma)、血管瘤、急性肾病及慢性肾病、动脉粥样硬化、动脉再狭窄、自体免疫疾病、急性炎症及伴有视网膜血管增殖的眼部疾病、糖尿病视网膜病、早产儿视网膜病及黄斑变性。化合物I具有抗VEGF受体酪氨酸激酶的良好活性，同时具有一些抗其它酪氨酸激酶的活性。

化合物I亦可抑制其它包括FGFR、HER1及HER2的受体酪氨酸激酶且因此适用于治疗诸如银屑病及癌症的增生性病症。已展示HER1受体激酶在包括非小细胞肺癌、结肠直肠癌及乳癌的许多实体肿瘤中表达且活化。同样，已展示HER2受体激酶在乳癌、卵巢癌、肺癌及胃癌中过量表达。下调HER2受体的丰度或抑制HER1受体的信号转导的单克隆抗体在临床前及临床研究中展示抗肿瘤功效。因此，预期HER1及/或HER2激酶的抑制剂将在治疗依赖于上述两种受体之一的信号转导的肿瘤方面具有功效。化合物I抑制HER1的能力进一步使其用作抗血管生成剂。

本文先前所定义的抗增生性、抗血管生成及/或血管渗透性降低治疗可作为单一疗法应用或可除化合物I外包括一种或多种其它物质及/或治疗。此结合治疗可借助同时、先后或独立投予各个治疗组份来达成。化合物I亦可适用于与已知的抗癌剂及细胞毒剂及包括辐射的治疗组合。若调配成固定剂量，则这些组合产品使用在以下所述的剂量范围内的化合物I及在其认可的剂量范围内的另一医药活性剂。当组合配方不合适时，化合物I可与已知的抗癌剂或细胞毒剂及包括辐射的治疗先后使用。

在医学肿瘤学领域中，使用不同治疗形式的组合来治疗患有癌症的每一患者为常规惯例。在医学肿瘤学中，除本文先前所定义的抗增生性、抗血管生成及/或血管渗透性降低治疗外，此结合治疗的其它组分可为：手术、放射疗法或化学疗法。此化学疗法可包括三种主要类别的治疗剂：

(i)通过与上文所定义不同的机制起作用的抗血管生成剂(例如利诺胺(linomide)、整联蛋白avβ3功能的抑制剂、血管生长抑素及雷佐生(razoxane))；

(ii)细胞生长抑制剂，诸如抗***(例如他莫昔芬(tamoxifen)、托瑞米芬(toremifene)、雷诺昔酚(raloxifene)、曲洛昔芬(droloxifene)及艾多昔芬(iodoxifene))、孕激素(例如乙酸甲地孕酮(megestrol acetate))、芳香酶抑制剂(例如阿那曲唑(anastrozole)、来曲唑(letrozole)、硼唑(borazole)及依西美坦(exemestane))、抗激素、抗孕激素、抗雄激素(例如氟他胺(flutamide)、尼鲁米特(nilutamide)、比卡鲁胺(bicalutamide)及乙酸环丙孕酮(cyproteroneacetate))、LHRH激动剂及拮抗剂(例如乙酸戈舍瑞林(gosereline acetate)及亮丙瑞林(leuprolide))、睾酮5α-二氢还原酶的抑制剂(例如非那雄胺(finasteride))、法尼基转移酶抑制剂、抗侵入剂(例如金属蛋白酶抑制剂如马立马司他(marimastat)及尿激酶血浆素原活化剂受体功能的抑制剂)及生长因子功能的抑制剂(这些生长因子包括例如EGF、FGF、血小板衍生生长因子及肝细胞生长因子)(诸如生长因子抗体、生长因子受体抗体诸如

(贝伐单抗(bevacizumab))及(西妥昔单抗(cetuximab))、酪氨酸激酶抑制剂及丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂)；及

(iii)用于医学肿瘤学的抗增生性/抗肿瘤药物及其组合，诸如抗代谢物(例如抗叶酸类，如甲胺喋呤(methotrexate)，氟嘧啶类，如5-氟尿嘧啶，嘌呤及腺苷类似物，阿糖胞苷)；***抗肿瘤抗生素(例如蒽环霉素，如阿霉素(doxorubicin)、柔红霉素(daunomycin)、表柔比星(epirubicin)、去甲氧基柔红霉素(idarubicin)、丝裂霉素C(mitomycin-C)、放线菌素D(dactinomycin)及光辉霉素(mithramycin))；铂衍生物(例如顺铂(cisplatin)及卡铂(carboplatin))；烷化剂(例如氮芥(nitrogen mustard)、美法仑(melphalan)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、白消安(busulphan)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、异环磷酰胺(ifosfamide)、亚硝基脲(nitrosourea)、塞替派(thiotepa)；抗有丝***剂(例如长春花生物碱，如长春新碱，及紫杉烷taxoid)，如

(紫杉醇(paclitaxel))、

(多西紫杉醇(docetaxel))及新颖微管剂，诸如埃坡霉素(epothilone)类似物、discodermolide类似物及艾榴素(eleutherobin)类似物)；拓扑异构酶抑制剂(例如表鬼臼毒素(epipodophyllotoxin)，如依托泊苷(etoposide)、替尼泊苷(teniposide)、安吖啶(amsacrine)及拓扑替康(topotecan))；细胞周期抑制剂(例如flavopyridol)；生物应答调节剂及蛋白酶体抑制剂，诸如

(硼替佐米(bortezomib))。

如上所述，化合物I由于其抗血管生成及/或血管渗透性降低效应而令人关注。此化合物预期适用于宽范围的疾病病况，其包括癌症、糖尿病、银屑病、类风湿性关节炎、卡波氏肉瘤、血管瘤、肥胖、急性肾病及慢性肾病、动脉粥样硬化、动脉再狭窄、自体免疫疾病、急性炎症及与视网膜血管增生相关的眼部疾病，诸如糖尿病视网膜病。

更具体地，化合物I适用于治疗多种癌症，其包括(但不限于)以下癌症：

癌瘤，其包括膀胱癌瘤、***癌瘤、结肠癌瘤、肾癌瘤、肝癌瘤、肺癌瘤(包括小细胞肺癌)、食管癌瘤、胆囊癌瘤、卵巢癌瘤、胰腺癌瘤、胃癌瘤、子***瘤、甲状腺癌瘤、***癌瘤及皮肤癌瘤(包括鳞状细胞癌)；

淋巴系的造血肿瘤，其包括白血病、急性淋巴细胞白血病、急性淋巴母细胞白血病、B细胞淋巴瘤、T细胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤(Hodgkinslymphoma)、非霍奇金淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤及伯克特氏淋巴瘤(Burkett’slymphoma)；

骨髓系的造血肿瘤，其包括急性及慢性骨髓白血病、骨髓发育不良症候群及前髓细胞白血病；

间充质细胞起源的肿瘤，其包括纤维肉瘤及横纹肌肉瘤；

中枢及外周神经***的肿瘤，其包括星形细胞瘤、神经母细胞瘤、神经胶质瘤及神经鞘瘤；及

其它肿瘤，其包括黑素瘤、***瘤、畸胎癌、骨肉瘤、着色性干皮病、角化棘皮瘤、甲状腺卵泡癌及卡波氏肉瘤。

化合物I尤其适用于治疗具有高酪氨酸激酶活性发生率的肿瘤，诸如结肠、肺、肝细胞及胰腺的肿瘤。通过投予包含化合物I的组合物(或组合)，得以降低哺乳动物宿主肿瘤的发展。

化合物I亦可适用于治疗除癌症外的可能与经由生长因子受体(诸如VEGFR-2及FGFR-1)起作用的信号转导途径相关的疾病。

化合物I可以用医药媒剂或稀释剂调配用于经口、静脉内或皮下投药。可使用适于所要投药模式的固体或液体媒剂、稀释剂及/或添加剂以典型的方式来调配医药组合物。化合物I可按片剂形式(包括包衣片剂)、胶囊、颗粒、散剂及其类似物经口投予。亦可使用适于此投药模式的载剂以悬浮液形式来投予化合物I。

化合物I的有效量可由本领域技术人员确定且包括用于哺乳动物的以单一剂量或以2至4个分份剂量给予的约0.05至约300毫克/公斤/天优选小于约200毫克/公斤/天的例示性剂量。详言之，优选600-800毫克/天的剂量。应理解，用于任何特定受试者的特定剂量水平及给药频率可变化且将取决于多种因素：N-1形式的化合物I的生物利用度，化合物I的代谢稳定性及作用时间，受试者的物种、年龄、体重、一般健康状况、性别及膳食，投药模式及时间，***率，药物组合及特定病状的严重性。治疗的优选受试者包括动物，最优选为哺乳动物物种，诸如人及家畜，诸如犬、猫、马等。

本发明的方法揭示于以下反应流程中：

通常，化合物A可通过用甲基化剂(诸如格氏试剂(Grignard reagent)即氯化甲基镁)于适当溶剂中处理来转化成化合物B。适当溶剂包括醚溶剂，诸如THF(四氢呋喃)、甲基-THF、MTBE(甲基叔丁基醚)或***。THF为用于反应的优选溶剂。化合物A揭示于美国专利第6,982,265号中且化合物B揭示于2005年6月24日申请的USSN 11/165,875中。

化合物C以连续氧化自化合物B制备，这是本发明的关键步骤之一。化合物B至化合物C的氧化反应可以分批方法或连续方法进行。反应混合物具有热失控的可能性，且连续方法使在任何给定时间下处于风险中的物质的量最小化，以使***冲击最小化，且提供更有效的热转移，以使失控可能性最小化。通常，可使用连续流动搅拌槽反应器或塞式流动反应器来进行连续反应。考虑到反应的性质，为获得具有相同品质的产物，在连续流动搅拌槽反应器中进行反应将需要比塞式流动反应器高的过氧化氢浓度。塞式流动反应器亦具有比连续流动搅拌槽反应器大得多的热转移。因此，由于安全性及产物品质的原因，塞式流动反应器及连续方法为进行化合物B至化合物C的氧化的优选模式。

在此步骤中，将化合物B(于THF及水中)的溶液与过氧化氢混合且冷却。将酸添加至反应混合物中且使反应流进入称为低温度反应阶段的阶段。其通常在约0℃(-5℃至5℃)的温度发生。接着，使反应混合物流入保持在约10℃至约18℃的温度的高温度反应阶段。此阶段的优选温度为约14℃。调整3种输入流的相对流动速率以控制反应化学计量及产物品质。控制连续方法的流动速率及温度范围，使得在连续反应器中的总滞留时间为12-18分钟。最后，使所要化合物流入淬灭槽中，其中可在用于下一步骤前，将所要化合物以多种方式处理。优选地，将过量过氧化氢用还原剂淬灭且调整pH值。可将连续输出流送往单一淬灭槽，历时4-30小时的时期。

该方法的关键在于不分离在2005年6月24日申请的USSN 11/165,875中揭示的化合物C。经淬灭的流使用新戊酰氯及胺碱来保护，以形成亦在2005年6月24日申请的USSN 11/165,875中揭示的化合物D。

在该方法的下一步骤中，利用磷酰氯将化合物D氯化，得到化合物E。化合物E亦在2005年6月24日申请的USSN 11/165,875中揭示。

在由化合物E及F制备化合物G中，通常将化合物F通过与诸如DABCO的碱混合而活化，随后与化合物E组合以形成化合物G。化合物F的制备在美国专利第6,933,386号中揭示且要求保护。化合物G可任选通过自丙酮/水中重结晶而纯化。

化合物H可自化合物G经由中间体K(使用多种试剂来实现化合物G的脱保护)来制备。这些试剂包括NaOMe(甲醇钠)、KOMe(甲醇钾)、KOEt(乙醇钾)、KOiPr(异丙醇钾)、NaOEt(乙醇钠)及NaOiPr(异丙醇钠)。NaOMe为优选试剂。可使用诸如甲醇、乙醇、异丙醇、DMF(二甲基甲酰胺)及THF的其它溶剂来替代乙腈。另外，能够实现化合物K与氧化丙烯的偶联反应的其它溶剂组合包括丙酮及水或甲醇及水，尽管该两种溶剂组合均不提供在上述流程中展示的乙腈/水组合的高产率及纯度。

任选地，化合物H可自丙酮/水或乙腈/水中重结晶，得到高品质化合物H。优选丙酮/水。

在最后步骤中，由化合物H制备化合物I包括使用偶联剂使化合物H与CBz-L-丙氨酸(苄氧羰基-L-丙氨酸)之间形成酯，得到化合物J。化合物J通常不分离。此反应通常在0℃至室温，在添加有DMF的THF或乙酸乙酯中进行。优选的偶联剂为EDAC-HCl(N-(3-二甲氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐)。在此步骤的第二阶段中，化合物J经由氢化来脱保护且结晶，得到化合物I。

通常，化合物I可通过以下方法来结晶：用庚烷处理且用乙酸乙酯/庚烷及THF/庚烷洗涤。

与优选反应条件及上述替代试剂一起成功使用的其它溶剂包括乙酸烷基酯，诸如EtOAc(乙酸乙酯)、nBuOAc(乙酸叔丁酯)及iPrOAc(乙酸异丙酯)；醚，诸如THF及2-甲基THF；卤化溶剂，诸如二氯甲烷；及极性质子性溶剂，诸如DMF及NMP(N-甲基吡咯烷酮)。这些溶剂亦适用作共溶剂。

用于结晶的其它适当溶剂包括多种诸如nBuOAc、iBuOAc(乙酸异丁酯)、iPrOAc的乙酸烷基酯及诸如THF的醚。已证明为抗溶剂的溶剂有正庚烷、庚烷、甲苯、MTBE。诸如二氯甲烷、环己烷、丙酮、异丙醇、NMP、DMF、DMA(二甲基乙酰胺)的其它溶剂可能用于化合物I的结晶。结晶条件亦可根据温度、浓度、接种策略、加热/冷却情况及搅拌速率而变化。

实施例

现将通过为本发明优选实施方案的以下工作实施例进一步描述本发明。除非另有指示，否则所有温度为摄氏度(℃)。这些实施例为说明性而非限制性，且应理解可存在属于所附权利要求书所定义的本发明的精神及范畴内的其它实施方案。

实施例1

化合物A至化合物B的转化

将化合物A(22.0kg，99.5摩尔)及无水四氢呋喃(257.3kg)的混合物用氮气净化且冷却至7℃。在6℃-12℃，经25min，添加氯化甲基镁于四氢呋喃(3M，169.4kg，503.1摩尔)中的溶液，继而添加四氢呋喃(2kg)以洗涤管线。将溶液温热至28℃/10min且在约30℃再保持2h。在0-4℃，经3小时20分钟，将反应混合物转移至氯化铵(75.9kg)于水(303kg)中的溶液中。将反应容器用另一份22kg四氢呋喃冲洗且将乙酸乙酯(237.7kg)添加至混合物中。使各相静置1.5h且回收750L上层有机相。将有机相用氯化钠(24kg)于水(83.6kg)中的溶液洗涤且经由硅藻土垫(11kg)过滤，得到750L滤液。将滤液在真空中蒸馏至160L。装填乙酸乙酯且重复蒸馏使其缩减体积至160L。用49.6kg乙酸乙酯重复此循环。将混合物用60.7kg庚烷稀释且重复蒸馏。将结晶物质在31℃保持1h且经4h冷却至2℃。将晶体通过过滤收集且用乙酸乙酯(22kg)及庚烷(11.8kg)的溶液洗涤。滤饼脱液后，将其在35℃在真空下干燥3天，得到19.6kg 92重量％的化合物B(87.5％产率)。

实施例2

实施例2A：(以可变pH值进行反向淬灭)

制备三种进料溶液，且用于经由连续氧化方法将化合物B转化成化合物C的反应。首先制备化合物B(120g)加四氢呋喃(1452.15g)及水(245.66g)的混合物。此溶液称为起始原料溶液(SMS)。反应所需要的其它两种进料溶液为市售70％(含水)甲烷磺酸(MSA)及市售50％(含水)过氧化氢。SMS流以31.9克/小时的流动速率泵入***。首先将SMS经由热交换器预冷却至0℃且随后与以6.1克/小时的流动速率泵入***的过氧化氢溶液混合。在在线混合器(微型反应器或静态混合器)中进行混合。随后，将所得混合物经由热交换器冷却至0℃，且在夹套微型反应器或静态混合器中与预冷却(0℃)的甲烷磺酸溶液在线混合。甲烷磺酸溶液的流动速率为17.5g/h。在此方法中，混合次序是重要的。每一进料溶液的相对流动速率亦影响反应时间及产物品质。为确保控制反应温度以减轻失控反应的任何风险，尽管仍容许在合理时间框架内使反应完全，但反应流流经两个温度区。第一温度区具有-5℃至5℃的范围。在此低温区中的滞留时间为大约两分钟(包括在线混合器)。第二温度区具有十至十二分钟的滞留时间及大约10℃-18℃的温度。

连续方法排出的反应流为酸性且含有过量过氧化氢。将连续反应的输出物送至淬灭槽。在此操作中，淬灭槽初始装有216.4克亚硫酸氢钠(NaHSO₃)、517.06克水及296.34克28％氢氧化铵(NH₄OH)水溶液。将淬灭槽溶液保持在5℃-18℃。淬灭溶液的初始pH值为10.7。使连续反应及淬灭进行二十四小时。在进行二十三小时时，淬灭槽中的pH值为约6.23且随后通过添加12.62克28％氢氧化铵调整至7.3。在进行结束时，通过添加4.19克氢氧化铵将pH值调整至7.1。将淬灭槽中的有机相及水相分离且回收624.06克有机溶液。将水相用208克THF洗涤。合并的有机相的量为859.21克且该方法的产率经估算为86％。

实施例2B：(通过pH值控制来进行反向淬灭)

反应条件与以上相同，但规模较大，且淬灭程序不同。三种进料溶液具有相同组成。对于起始原料溶液进料速率为52.1g/min、对于过氧化氢水溶液为9.91g/min且对于甲烷磺酸水溶液为27.9g/min。使用市售50重量％的过氧化氢水溶液。将甲烷磺酸制备成9.18kg水及22.776kg 99％甲烷磺酸的混合物。用42.35kg四氢呋喃(THF)、7.00kg水及3.495kg化合物B的混合物制备SMS。

在此实施例中，使用另一种淬灭程序。淬灭槽初始装有15.580kg亚硫酸氢钠、41.155kg水及22.302kg的28％氢氧化铵。溶液的初始pH值为7.6。连续方法进行16小时。在整个进行过程中，按需要通过添加28％氢氧化铵，连续调整淬灭槽的pH值，使其在6.3至8.5的范围内。在进行期间，淬灭槽温度在5℃至18℃的范围内。

进行完成后，将水相及有机相分离且将水相(129.8kg)用四氢呋喃(18.6kg)洗涤。萃取且分离各相后，将水相排出废弃且将贫有机相(24.1kg)与富有机相(39.7kg)合并。化合物C的估算产率为82％。

实施例3

由在THF水溶液中的化合物C合成化合物D

将化合物C的THF水溶液(4005kg溶液，通过HPLC检定化合物C为132.9kg)经由10微米聚丙烯织物过滤，移除任何残余固体。将体积经由真空蒸馏缩减60％至7-8w/w％化合物C(通过HPLC分析)。pH值测试指示溶液在7.0-7.5的所要范围内。通过KF滴定水含量，发现溶液在20-25w/w％的所要水范围内。将溶液冷却至5℃，随后经30分钟，添加三乙胺(242.9kg)。经30分钟，添加三甲基乙酰氯(新戊酰氯)(169.1kg)，导致轻度放热。30分钟后，通过HPLC分析确定反应完成。

将二相混合物温热至20℃，无搅拌下保持2小时，随后将余下的含水下层分离且弃去。经由真空蒸馏(40℃)将上层浓缩，在此期间产物结晶。随后，将浆液用水(1323kg)稀释，冷却至＜10℃，保持两小时，过滤且用水(600L)洗涤三次。将白色结晶粉末在75℃在真空中干燥18小时。根据对化合物C输入溶液进行的检定，产量为173.8kg化合物D(85.1％)。通过HPLC分析，纯度为98.2w/w％。

实施例4

实施例4A：自化合物D及化合物F制备化合物G

将于无水乙腈(287kg，0.02％水)中的化合物D(119.8kg，纯度为98.2重量％，472摩尔)置放于氮气气氛下，且添加磷酰氯(148kg，966摩尔)。经15分钟，添加二异丙基乙胺(62.2kg，481摩尔)且经45min，将混合物加热至回流。将化合物D转化成化合物E的反应完成后，在12℃-21℃，经1h，将一半反应物质转移至12.4重量％磷酸氢二钾水溶液(1950kg)及乙酸异丙酯(501kg)的淬灭溶液中。在第二容器中，将另一半类似地淬灭。将经淬灭的溶液搅拌1h，允许静置1-2.5h且分离。将有机相合并。将合并的溶液用15重量％磷酸氢二钾水溶液(537kg)洗涤15min，接着静置80min，随后分离，得到8.3的最终pH值。

在另一容器中，将化合物F(87.4kg，纯度为98.7重量％，522摩尔)溶解于乙腈(150kg)中且经过1微米过滤器，保留颗粒。使用额外乙腈(30kg)来洗涤剩余量。将1，4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷(59.4kg，530摩尔)加入溶液中，接着加入更多乙腈(50kg)。经35min，将化合物E的溶液经由过滤器添加至此混合物中。将残余量用更多乙腈(71kg)转移。将混合物搅拌65min且在200mBarr(毫巴)下，通过蒸馏浓缩至960L，此时通过添加乙腈，使体积维持于约1000L。在总共83/4h后，当乙酸异丙酯含量通过GC测量为1.1体积％时，停止溶剂交换。将混合物冷却至40℃且经1h添加5℃的水(1200L)。将混合物搅拌2h且通过在过滤器干燥器中过滤而收集。将容器内含物用水(200L)洗涤、使滤饼脱液且用水(3×450L)洗涤。干燥损失(LOD)值为＜25％时，将滤饼在75℃(夹套)加以干燥伴以偶尔搅拌。将滤饼干燥直至LOD达到0.3％，得到180.2kg奶白色固体(98.8重量％，95.2％产率)。

化合物G自丙酮水溶液中重结晶(任选)

在55℃-60℃，将化合物G(254kg溶剂-湿化合物，LOD＝19.7％)于丙酮(1500kg)中的混合物搅拌1h，形成澄清溶液。将溶液冷却至40℃-45℃且经45min，通过10μm过滤器而澄清。将反应器用更多丙酮(176kg)冲洗且将合并的溶液通过真空蒸馏645kg丙酮而浓缩。将溶液冷却至20℃且经36min添加水(840kg)。将所得浆液冷却至0℃-5℃且保持2h。经80min，通过过滤收集固体且用水(390kg)洗涤。得到284kg湿晶体，将其在75℃在真空下干燥，得到199.4kg(98％回收率；纯度为99.91LC面积％；LOD＜0.05％；0.07％水)。

可替换的制备

实施例4B：通过连二亚硫酸钠处理自化合物D及化合物F制备化合物G

将于无水乙腈(36mL，＜100ppm水)中的化合物D(10.00g，纯度为99.3重量％，39.8毫摩尔)置放于氮气气氛下且一次性添加磷酰氯(12.3g，99重量％，79.4毫摩尔)。经4min添加二异丙基乙胺(5.1g，＞99重量％，39.5毫摩尔)且经30min将混合物加热至回流。回流10小时且冷却9小时后，在5℃，将化合物E的溶液转移至12重量％磷酸氢二钾水溶液(349g)及乙酸异丙酯(76mL)的淬灭溶液中。将经淬灭的混合物搅拌10min，允许静置15min且分离。将有机相用15重量％磷酸氢二钾水溶液(49g)洗涤1min，接着静置15min，随后分离各相(最终pH＝9)。

在另一容器中，经30分钟将化合物F(7.27g，纯度为99重量％，43.6毫摩尔)溶解于乙腈(24mL)中且经过Whatman#4纸过滤器。使用额外乙腈(4mL)冲洗该纸。将1，4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷(4.89g，98重量％，42.7毫摩尔)加入溶液中。25min后，经5min，将化合物E的溶液经由Whatman#4纸过滤器添加至此浆液中。将残余量用更多乙腈(3mL)转移。将混合物搅拌18h且在200mBarr下，通过蒸馏浓缩使其缩减体积至100mL，此时通过添加乙腈而维持体积。3.5h后，当已收集总共365mL馏出物时，停止溶剂交换。此时，将体积降至约80mL。将混合物冷却至40℃且加入10mL四氢呋喃，接着加入足够乙腈，恢复100mL的浆液体积。向此混合物中加入1.60mL新鲜制备的连二亚硫酸钠于水中的溶液(100毫克/2.00毫升水)。经10min，使得混合物回流。回流30min后，再加入1.60mL新鲜制备的连二亚硫酸钠溶液。再15min后，将水(1.00mL)加入且再保持回流5min，溶解额外固体。经100min，使溶液冷却至30℃。经105min，添加水(100mL)且将浆液搅拌2.5天。通过于Buchner过滤器中于Whatman#4纸上过滤来收集晶体且将其用水(4×38mL)洗涤。在1mmHg真空下，将滤饼干燥2h，得到15.39g呈固体状的化合物G(纯度为99.93LC面积％，产率为98％)。此物质含有20-100ppm化合物D及5-20ppm化合物E。任选地，将此物质自丙酮水溶液中重结晶。在45℃-55℃，化合物G(15.00g)于丙酮(90mL)中的混合物经由Whatman#4纸而澄清且再用5mL丙酮洗涤。在氮气下，通过加热至回流重新溶解沉淀的固体。将溶液冷却且接种直至晶核开始生长。使晶体生长同时经17h缓慢冷却，其后经105min加入水(62mL)。3h后，于Whatman#4纸上收集固体，用水(40mL)洗涤且在氮气下，于过滤器上干燥，移除大部分溶剂。在1mmHg真空下，将晶体进一步干燥24h，得到14.24g晶体(97％回收率；纯度为99.94LC面积％)。此纯化的化合物G含有5-20ppm化合物D及＜5ppm的化合物E。

实施例5

自化合物G及氧化丙烯制备化合物H

使化合物G脱保护而得到化合物K

将夹套4000L反应容器配备机械搅拌器、回流冷凝器及温度热电偶。将乙腈(188.9kg)加入经氮气吹扫的反应器中，接着依次加入化合物G(170.8kg，430.8mol)及乙腈(103kg)。在氮气吹扫下，将反应混合物冷却至10℃。将甲醇钠于甲醇(91.5kg，430.8mmol)中的25重量％溶液缓慢添加至反应混合物中，接着添加乙腈冲洗液(28kg)，同时保持内部温度于23℃。将反应混合物在氮气下搅拌1小时，此时反应等分试样的HPLC分析指示化合物G完全耗尽。

对化合物K进行烷基化来得到化合物H

将水加入化合物K的溶液中，接着加入(R)-(+)氧化丙烯(128.7kg，2218.4摩尔)及乙腈冲洗液(22kg)。将反应容器通风口关闭后，将所得混合物在20℃-30℃保持17小时，得到浆液。此时反应等分试样的HPLC分析指示向化合物H的转化＞98％。

在30psi氮气压力下，将浆液混合物于过滤器-干燥器中经由20μm过滤器织物过滤。将产物滤饼用20％丙酮水溶液洗涤，且完全脱液后导致25％-35％的典型LOD。

将预混合的丙酮/水溶液(729公斤丙酮/92.4公斤水)加入过滤器-干燥器中，得到浆液。将浆液加热至50℃-58℃且在此温度搅拌20min-90min，得到溶液，将该溶液转移至夹套4000L反应容器中。将过滤器-干燥器用预混合的丙酮/水溶液(182公斤丙酮/23.1公斤水)冲洗且将冲洗溶液与溶解溶液合并。将合并的溶液加热至50℃-58℃。经50min添加水(1039.6kg)，同时保持内部温度介于50℃-56℃之间。经2小时，将所得浆液冷却至18℃-20℃且陈化6-20小时。通过于过滤器-干燥器中过滤，将固体分离。将湿滤饼用预混合的丙酮/水溶液(1366kg水及266kg丙酮)洗涤且在50℃-60℃在真空下干燥，得到120kg(75％)化合物H。

实施例6

实施例6A：自化合物H制备化合物I

化合物H至化合物J的转化

将1000加仑衬有玻璃的反应器用氮气钝化三次，然后加入557.1kgTHF，接着加入73.7kg DMF。将77.4kg化合物H、60.2kg EDAC-HCl及0.760kg 4-二甲氨基吡啶加入其中。将反应混合物冷却至-1.7℃至2.7℃。在达到设定温度后，将60.8kg CBz-L-丙氨酸加入，接着加入65.0kg THF冲洗液。将反应混合物陈化3小时，此时采集样品且HPLC分析指示未检测到任何化合物H。20分钟后，通过加入878.7kg于18重量％盐水溶液中的0.5M磷酸，接着加入39.4kg水冲洗液将反应淬灭。使混合物温热至室温且随后搅拌30分钟。停止搅拌且经30分钟，使两相分离。将余下的下层水相转移，废弃。将有机相用880.3kg于18重量％盐水溶液中的5重量％K₂CO₃洗涤。将混合物搅拌30分钟，停止搅拌且经30分钟，使两相分离。将余下的下层水相转移，废弃。将有机相用506.4kg于18重量％盐水溶液中的5重量％K₂CO₃再次洗涤。将混合物再次搅拌30分钟，随后停止搅拌且经30分钟，使两相分离。将余下的下层水相转移，废弃。将富含物质的有机流保持过夜。次日，将富含物质的有机流自540L的初始体积浓缩至295L的最终体积(夹套温度＜80℃，200毫巴)。将乙酸乙酯自另一反应器转移直至将体积调整至约475L。将溶剂经由蒸馏转变成乙酸乙酯。使于乙酸乙酯中的化合物J的流经由10微米精良过滤器过滤且装入筒中(drumm)，得到425.1kg于乙酸乙酯流中的26.6重量％化合物J。向反应器加入50.3kg乙酸乙酯冲洗液，随后使冲洗液经过精良过滤器且单独装入筒中。其相当于114.28kg化合物J(92.7％的步骤产率)。

脱保护得到化合物I

将于EtOAc(乙酸乙酯)中的溶液形式的化合物J(总共467kg流体，含有120kg化合物J)添加至250加仑标称尺寸的不锈钢反应器中。将衬里用25kgEtOAc冲洗，随后将5％Pd/C(24kg，50重量％水)及碳酸钾(20kg)添加至反应器中。通过加入约80kg EtOAc，将浓度调整至5L/kg化合物J。将反应器用氮气净化三次达30psig(磅/平方英寸)的压力且用氢气净化两次达20psig的压力。将批料温度设定为25℃。在20psig的氢气气氛下，将反应混合物搅拌7小时。采集反应混合物的样品；HPLC分析指示99.45％的转化率。将容器减压且用氮气净化。在整个反应中，化合物J及I及CO₂副产物通过在线FTIR监测且在氮气净化期间监测CO₂，确保在反应溶液中无任何CO₂剩余。将反应混合物经由5微米袋式过滤器，接着经由3微米Sparkler过滤器及随后经由0.5微米Cuno过滤器过滤。将余下固体用180kg新鲜EtOAc洗涤。将合并的有机流通过HPLC检定，指示过程中的产量为80.98kg(基于化合物H输入量，产率为88％)。

化合物I的结晶及分离

实施例A.自EtOAc/庚烷中结晶：

将于EtOAc中的溶液形式的化合物I(713.4kg，11.6重量％)加入配备有机械搅拌器、回流冷凝器及热电偶的夹套2000L反应器中。在夹套温度设定于约50℃的情况下，将溶液在减压(约200毫巴)下蒸馏至大约20重量％的浓度。在达到近似浓度后，将新鲜EtOAc自4000L反应器加入来将蒸馏转变成恒定体积蒸馏。将约400kg EtOAc用于恒定体积蒸馏，得到18.9重量％化合物I的最终溶液浓度。蒸馏期间，将批料温度保持于30℃-40℃之间。

完成蒸馏后，释放真空且将溶液温热至约45℃-50℃且获得澄清溶液。经20-30分钟，将275.0kg庚烷添加至溶液中，同时仍将批料温度保持在40℃-50℃。用0.3kg晶种处理反应混合物且将混合物陈化10分钟，得到可搅拌浆液。经20-30分钟再添加275.0kg庚烷。经2小时，将所得浆液冷却至20℃且再陈化一小时。使浆液经受湿法研磨约30分钟，得到粒度小于120μm的物质。固体通过以500-700rpm离心来分离。将所得湿滤饼依次用约300kg EtOAc/庚烷(1∶4v/v)及约300kg庚烷洗涤，且在锥形干燥器中在50℃在真空下干燥，得到69.9kg化合物I(约84.1％产率)。

实施例B.化合物I自BuOAc(乙酸丁酯)/庚烷中结晶

将在配备有机械搅拌器、回流冷凝器及热电偶的夹套2000L反应器中的于BuOAc中的溶液形式的化合物I(约150kg，约18重量％)加热至约60℃，且获得澄清溶液。经25分钟，将40.9kg庚烷加入2000L反应器中，得到为过饱和溶液的溶液。在庚烷加入期间，将批料温度保持接近60℃且将分散于0.7kg正庚烷中的50g晶种经由接种机(seeder)加入反应器中，引发结晶。首批庚烷加入后，经30分钟，将批料冷却至50℃-55℃且在相同温度保持1/2小时。在冷却及陈化期间，浆液形成。陈化后，经2小时，将另外98.0kg正庚烷加入反应器中。随后经2小时，将批料冷却至15℃-20℃且随后在15-20℃保持1小时。用装配于2000L反应器再循环回路中的定位于底部阀门与隔膜泵之间的湿法研磨机，使所得浆液经受湿法研磨。将浆液研磨大约4.5小时直至物质的粒度处于规格内。

经由具有约0.6m²有效过滤面积的过滤器干燥器对浆液进行过滤。随后，将分离的湿滤饼用约34.3kg BuOAc/正庚烷(1/4)混合物及58.9kg正庚烷洗涤。在20℃，将湿滤饼在原位干燥10小时(真空)，接着在50℃真空干燥2小时。自过滤器干燥器中取出19.3kg无水化合物I，总产率为69.3％(自化合物H)。

实施例6B：(可替换的方法)

化合物H至化合物J的转化

将2000加仑衬有玻璃的反应器用氮气钝化三次，且加入1056.7kg THF，接着加入140.9kg DMF。将147.9kg化合物H加入此混合物中。加入115.9kgEDAC-HCl及1.46kg 4-二甲氨基吡啶且将反应混合物冷却。在达到低于5℃的所要温度后，加入116.8kg CBz-L-丙氨酸，接着加入作为冲洗液的132.6kgTHF。将反应混合物陈化3.5小时，此时取样。HPLC分析指示存在少于0.10％的化合物H。再一小时后，通过加入1253.8kg于15重量％盐水溶液中的0.5M磷酸将反应淬灭，接着加入44.4kg水冲洗液。伴以中度搅拌，使混合物温热至室温且随后再陈化30分钟。停止搅拌且经30分钟，使两相分离。将余下的下层水相转移，废弃。随后，将有机相用1684.9kg于15重量％盐水溶液中的4重量％K₂CO₃洗涤。将混合物搅拌30分钟，停止搅拌且经60分钟，使两相分离。将余下的下层水相转移，废弃。将有机相用1825.7kg的15重量％盐水溶液洗涤。将混合物再次搅拌30分钟，随后停止搅拌且经120分钟，使两相分离。将余下的下层水相转移，废弃。在大气压力下，将富含物质的有机流自897L的初始体积浓缩至526L的最终体积。随后使用自另一容器转移的902kg THF，达到恒定体积蒸馏至0.5重量％的Karl-Fischer(KF)终点。将于THF中的化合物J的流经由过滤器过滤且装入筒中，得到1018.5kg于THF流中的化合物J。将反应器用98.5kg THF冲洗；使冲洗液经过过滤器且单独装入筒中。由HPLC确定富含物质的有机流的量化产率。

脱保护得到化合物I

将于THF中的溶液形式的化合物J(总共472kg流体，含有112kg)添加至250加仑标称尺寸的不锈钢反应器中，随后接着添加5％Pd/C(11.5kg，50重量％水)至反应器中。通过再加入58kg THF，将浓度调整至5L/kg化合物J。在最小搅拌下，将反应器用氮气净化三次达30psig的压力，接着用氢气净化顶空三次，在10psig与20psig之间循环。将批料温度设定为25℃。在以20psig通过表面下添加而补给的氢气气氛下，将反应混合物搅拌85分钟。初始压力设定点为25psig，解决气体的迅速消耗。采集反应混合物样品；HPLC分析指示99.9％的转化率。将容器减压且用氮气净化。在整个反应中，通过在线FTIR监测化合物J及I及CO₂副产物且在氮气净化期间监测CO₂，确保在反应溶液中无任何CO₂剩余。将反应混合物经由1微米袋式过滤器，接着经由两个串联0.5微米聚丙烯过滤器过滤。由HPLC检定合并的有机流(598.6kg，15.0重量％)，指示过程中的量化产率(基于化合物H输入量)。

化合物I的结晶及分离

自EtOAc/庚烷中结晶：

将于THF中的溶液形式的化合物I加入配备有机械搅拌器、回流冷凝器及热电偶的夹套4000L反应器中，得到1233.9kg(包括冲洗液)13.9重量％的溶液。在夹套温度设定于约80℃的情况下，将溶液在减压(约200毫巴)下蒸馏至大约560L的最小体积。随后进行恒定体积蒸馏及与EtOAc的溶剂交换，其具有以下终点：在EtOAc中，4.2体积％残余的THF及21重量％的化合物I浓度。蒸馏期间，将批料温度保持于20℃-40℃之间。

完成蒸馏后，将真空释放且将溶液温热至约50℃-55℃。经40分钟，将459kg庚烷添加至溶液中，同时仍将批料温度保持在50℃-55℃。将所得澄清溶液用0.6kg悬浮于30.2kg庚烷中的化合物I的晶种处理，得到可搅拌浆液，其陈化10min。经40分钟再添加459kg庚烷。经2小时，将所得浆液冷却至20℃且陈化过夜。使浆液经受湿法研磨约60分钟，得到其中90％粒子小于54μm的浆液。

通过离心及锥形干燥器或通过过滤器干燥器，将固体分离成两份负载料(load)。将第一负载料依次用158kg 4∶1庚烷/EtOAc及143.4kg庚烷洗涤，随后转移至锥形干燥器中。将第二负载料依次用149kg 4∶1庚烷/EtOAc及143.1kg庚烷洗涤，随后转移至同一干燥器中。将所得湿滤饼在50℃，在真空下，于锥形干燥器中干燥，得到130.1kg化合物I(75％产率)。12.9kg(8％)损失于母液中且预期大约额外17kg(10％)尾料(heel)留在干燥器中。

Claims

1.一种连续反应方法，其用于自下式化合物B

化合物B

制备下式化合物C

化合物C

所述方法包含在连续反应器中氧化化合物B，其中当化合物B的溶液及过氧化氢及酸连续流经该反应器时，化合物B的溶液及过氧化氢及酸发生接触，同时经冷却。

2.权利要求1的方法，其中使未经分离的化合物C经新戊酰氯及碱保护，产生化合物D，

化合物D。

3.权利要求1的方法，其中该连续反应方法包括经由受严格控制的低温区及高温区进行反应，避免热失控。

4.权利要求3的方法，其中在该低温区中的反应物的温度保持在0℃-5℃的范围内。

5.权利要求3的方法，其中在该高温区中的反应物的温度保持在12℃-18℃的范围内。

6.权利要求1的方法，其中反应流用还原剂淬灭，以及调整pH值。

7.权利要求6的方法，其中所使用的还原剂为亚硫酸氢钠。

8.权利要求1的方法，其中所使用的酸为甲烷磺酸。

9.权利要求6的方法，其中使用氨来连续调整淬灭pH值，使其在6.3与8.5之间。