CN101214278A - 提取五味子总木脂素的新原料及制备工艺和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明属于医药技术领域,公开了五味子总木脂素提取物的新原料及其制备工艺。该工艺以中药五味子果梗(果柄)和五味子叶为原料,粉碎后采用溶剂提取法、树脂吸附法、正相柱层析法、反相柱层析法等工艺中的一种或者多种工艺,制备成总木脂素含量为30-95%的提取物。该制备方法工艺简单,含量稳定,重现性好。此提取物能替代五味子果实总木脂素提取物入药或入健康食品,充分利用五味子资源,缓解五味子果实供不应求的状况。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域,涉及五味子总木脂素提取物的新原料及其制备工艺。根据该制备工艺所得的提取物,其木脂素类化合物的总含量在30-95%。用于预防和治疗肝炎。
背景技术
五味子的脂溶性活性成分主要为木脂素。其药理作用涉及消化***、心血管***、中枢神经***、生殖***以及抗氧化、抗衰老等各个方面(中药材2005年2月第28卷第2期)。
五味子叶及五味子果梗(果柄)是木兰科五味子属植物北五味子Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.、华中五味子Schisandrasphenanthera Rehd.et Wils.及五味子属其他植物的干燥叶及果梗(果柄)。
国外学者应用高效液相色谱仪对五味子叶的CO2超临界提取物进行分析,发现其含有和五味子果实相同的木脂素,如五味子醇甲、醇乙、甲素、乙素、丙素和gomisin N等(Journal of Chromatography B,770(2002)283289)。五味子果梗(果柄)中含有与五味子果实相同的木脂素,如五味子醇甲、酯甲、甲素、乙素等(延边大学医学学报2005年3月第28卷第1期)。
目前,五味子市场需求量很大,远远满足不了国内外市场的要求,出现了对野生资源灭绝性的割蔓采收和破坏,有的地区普遍出现掠青现象,使五味子资源受到不同程度的破坏,导致可利用的五味子的资源减少,质量下降,价格不断攀升。五味子果实成熟时果实与果梗(果柄)一起从五味子藤上采摘下来,而果梗(果柄)作为杂质被剔除,而五味子叶资源更是十分丰富,如果能将五味子叶及果梗(果柄)作为五味子木脂素来源的补充,将能够充分利用资源,变废为宝。
发明内容
本发明的目的是针对上述五味子药材紧缺的情况提供五味子总木脂素的两种新来源,两种五味子果梗(果柄)及叶总木脂素提取物的制备工艺,以及依据该工艺制备而得的提取物及其相关剂型。作为五味子资源的补充,替代五味子果实总木脂素提取物入药或健康食品。
本发明是通过如下技术方案完成的:
(1)将五味子叶、果梗(果柄)干燥,粉碎,水煮;将水提取后残渣干燥,用50~95%的甲醇、乙醇、异丙醇或正丁醇的一种加热回流提取,提取液减压浓缩为密度0.80-1.20的浓缩液;采用大孔吸附树脂柱富集,用水,40%~75%乙醇,95%乙醇洗脱,收集95%乙醇洗脱液,浓缩后得到的提取物,其总木脂素重量含量为30%-95%。
(2)将五味子叶、果梗(果柄)干燥,粉碎,水煮;将水提取后残渣干燥,用70~95%的甲醇、乙醇、异丙醇或正丁醇的一种加热回流提取,提取液减压浓缩至干,有机溶剂室温或加热回流提取,提取物采用色谱柱洗脱,洗脱后得到的提取物,其总木脂素重量含量为30%-95%。
依据以上工艺制备而得的总木脂素提取物含有化合物:五味子醇甲、醇乙、甲素、乙素、丙素和gomisin G、gomisinL1、gomisinM1、gomisinN等。此提取物可以和药学上可以接受的载体混合,制成各种临床可用的剂型。
本发明的有益效果
本发明针对替代五味子果实总木脂素提取物入药或入健康食品,充分利用五味子资源,缓解五味子果实供不应求的状况。
具体实施方式
下面的实施例可进一步说明本发明,但不以任何方式限制本发明。
实施例1:
北五味子叶2Kg,粉碎,加水回流提取两次,每次保持微沸状态1.5小时,过滤,弃去合并的滤液。残渣晾干后,加入14L80%乙醇,加热回流提取3次,每次2小时,过滤,合并滤液并减压浓缩,得密度为0.93的浓缩液610g。用大孔吸附树脂柱富集,分别用水,60%乙醇,90%乙醇梯度洗脱,收集90%乙醇洗脱液,减压回收乙醇,再次用大孔吸附树脂柱富集,分别用水,75%乙醇,90%乙醇洗脱,收集90%乙醇洗脱液,减压回收乙醇得到15g提取物。总木脂素含量60%。
实施例2:
北五味子叶2Kg,粉碎,加水回流提取两次,每次保持微沸状态1.5小时,过滤,弃去合并的滤液。残渣晾干后,加入14L80%乙醇,加热回流提取3次,每次2小时,过滤,合并滤液并减压回收乙醇得到干浸膏130g。用石油醚回流提取3次,合并提取液,减压浓缩至小体积10ml,通过硅胶柱层析富集,用石油醚∶乙酸乙酯(20∶1)洗脱后,再用石油醚∶乙酸乙酯(2∶1)洗脱,收集石油醚∶乙酸乙酯(2∶1)洗脱液,减压浓缩得到10g提取物。总木脂素含量65%。
实施例3:
北五味子果梗(果柄)2Kg,粉碎,加水回流提取两次,每次保持微沸状态1.5小时,过滤,弃去合并的滤液。残渣晾干后,加入12L90%乙醇,加热回流提取3次,每次2小时,过滤,合并滤液并减压浓缩,得密度为0.91的浓缩液650g。用大孔吸附树脂柱富集,分别用水,70%乙醇,90%乙醇梯度洗脱,收集90%乙醇洗脱液,减压回收乙醇得到20g提取物。总木脂素含量63%。
实施例4:
北五味子果梗(果柄)2Kg,粉碎,加水回流提取两次,每次保持微沸状态1.5小时,过滤,弃去合并的滤液。残渣晾干后,加入12L90%乙醇,加热回流提取3次,每次2小时,过滤,合并滤液并减压回收乙醇得到干浸膏150g。用石油醚回流提取3次,合并提取液,减压浓缩至小体积10ml,通过硅胶柱层析富集,用石油醚∶乙酸乙酯(20∶1)洗脱后,再用石油醚∶乙酸乙酯(2∶1)洗脱,收集石油醚∶乙酸乙酯(2∶1)洗脱液,减压浓缩得到15g提取物。总木脂素含量70%。
实施例5:
北五味子果梗(果柄)2Kg,粉碎,加水回流提取两次,每次保持微沸状态1.5小时,过滤,弃去合并的滤液。残渣晾干后,加入12L90%乙醇,加热回流提取3次,每次2小时,过滤,合并滤液并减压回收乙醇得到干浸膏150g。用石油醚回流提取3次,合并提取液,减压浓缩至小体积10ml,硅胶柱层析,用石油醚∶乙酸乙酯(100∶1~1∶100)梯度洗脱后,合并相同组分洗脱物,再经ODS柱、高效液相(HPLC)、重结晶等方法纯化,得到了五味子醇甲、醇乙、甲素、乙素、丙素、gomisin G、gomisinL1、gomisinM1、gomisinN等25个化合物。并运用核磁共振(NMR)、质谱(MS)、红外(IR)等光谱手段确定了它们的结构。
实施例6:
将实施例1、2所得到的五味子叶总木脂素提取物经薄层色谱、高效液相(HPLC)与实施例5中所得到的化合物进行比较,显示其含有五味子醇甲、醇乙、甲素、乙素、丙素、gomisinL1、gomisinM1、gomisinN等14种木脂素。
实施例7:
北五味子果梗(果柄)2Kg,粉碎,加水回流提取两次,每次保持微沸状态1.5小时,过滤,弃去合并的滤液。残渣晾干后,加入12L90%乙醇,加热回流提取3次,每次2小时,过滤,合并滤液并减压浓缩,得密度为0.91的浓缩液650g。用大孔吸附树脂柱富集,分别用水,70%乙醇,90%乙醇梯度洗脱,收集90%乙醇洗脱液,减压回收乙醇得到20g提取物。总木脂素含量63%。加入4g淀粉,混匀,80%乙醇制粒,干燥,加入硬脂酸镁0.3g,混匀,装入1号胶囊,即得本发明制得的硬胶囊剂70粒。每粒含内容物0.3g。
实施例8:五味子总木脂素提取物对四氯化碳肝损伤小鼠的治疗作用
取小鼠50只,随机分成5组,分别为正常对照组、四氯化碳(CCl4)模型组、五味子果实总木脂素提取物组、实施例1提取物组和实施例3提取物组。
其中五味子果实总木脂素提取物的制备方法如下:北五味子果实粉碎,加水回流提取两次,每次保持微沸状态1.5小时,过滤,弃去合并的滤液。残渣晾干后,加入90%乙醇,加热回流提取3次,每次2小时,过滤,合并滤液并减压浓缩,浓缩液用大孔吸附树脂柱富集,分别用水,40%乙醇,90%乙醇梯度洗脱,收集90%乙醇洗脱液,减压回收乙醇,减压回收乙醇得到总木脂素含量70%的提取物。
动物实验方法如下:除正常对照组外,每组第一天腹腔注射0.1%CCl4石蜡油溶液(10ml/kg),同时连续灌胃给药7天,末次给药后16小时眼眶取血,测血清谷丙转氨酶(SGPT)。
实验结果见下表:
组别(n=10) | 剂量(mg/kg) | SGPT含量(U/ml) |
正常对照组 | 168.1±27.34 | |
CCl4模型组 | 443.2±47.61 | |
五味子果实总木脂素提取物组 | 200 | 271.3±35.53 |
实施例1提取物组 | 200 | 281.4±34.79 |
实施例3提取物组 | 200 | 287.7±36.88 |
结论:CCl4组小鼠SGPT显著高于正常对照组(P<0.01);与CCl4组相比,五味子果实总木脂素提取物组、实施例1提取物组、实施例3提取物组SGPT均显著降低(P<0.01);五味子果实总木脂素提取物组、实施例1提取物组、实施例3提取物组之间差异均无显著性意义(P>0.05)。说明五味子果梗(果柄)及叶总木脂素提取物与五味子果实总木脂素提取物对四氯化碳肝损伤小鼠的治疗作用相当,均对四氯化碳肝损伤小鼠导致的SGPT升高有显著的抑制作用。
Claims (10)
1.提取五味子总木脂素的新原料,其特征在于:将中药五味子果梗和五味子叶经工艺处理得到的提取物,其总木脂素重量含量为30-95%,能替代五味子果实总木脂素提取物入药或入健康食品。
2.根据权利要求1所述的五味子总木脂素的新原料,其特征在于:五味子叶和五味子果梗其植物来源为下列植物中的一种或两种:木兰科植物五味子Schisandra chinensis Bill.及华中五味子Schisandrasphenanthera Rehd.et Wils.及其他五味子属的植物。
3.根据权利要求1或2所述的提取五味子总木脂素的新原料,其特征在于:所述的木脂素为下列化合物中的一种或多种,1:五味子醇甲;2:五味子醇乙;3:五味子甲素;4:五味子乙素;5:五味子丙素;6:伪γ-五味子素;7:新五味子素;8:异五味子素;9:五味子酚;10:五味子酚乙;11:五味子酚酯;12:五味子酯A;13:五味子酯B;14:五味子酯C;15:五味子酯D;16:五味子酯E;17:红花五味子酯;18:戈米辛D;19:戈米辛E;20:戈米辛F;21:戈米辛G;22:戈米辛H;23:戈米辛K1;24:戈米辛K2;25:戈米辛K3;26:戈米辛L1;27:戈米辛L2;28:戈米辛M1;29:戈米辛M2;30:戈米辛N;31:戈米辛0;32:戈米辛R;33:当归酰戈米辛H;34:当归酰戈米辛0;35:当归酰戈米辛P;36:当归酰戈米辛Q;37:顺芷酰戈米辛H;38:顺芷酰戈米辛P;39:苯甲酰戈米辛H。
4.一种如权利要求1所述的五味子总木脂素提取物的制备工艺,其特征在于:(1)将五味子叶、果梗干燥,粉碎,水煮;将水提取后残渣干燥,用50~95%的甲醇、乙醇、异丙醇或正丁醇的一种加热回流提取,提取液减压浓缩为密度0.80-1.20的浓缩液或浓缩液经有机溶剂萃取后得到的浸膏,采用大孔吸附树脂柱富集,用水,40%~75%乙醇,95%乙醇洗脱,收集95%乙醇洗脱液,浓缩后得到的提取物,其总木脂素重量含量为30%-95%;
(2)将五味子叶、果梗(果柄)干燥,粉碎,水煮;将水提取后残渣干燥,用70~95%的甲醇、乙醇、异丙醇或正丁醇的一种加热回流提取,提取液减压浓缩至干,有机溶剂室温或加热回流提取,提取物采用色谱柱洗脱,洗脱后得到的提取物,其总木脂素重量含量为30%-95%。
5.根据权利要求4所述的五味子总木脂素提取物的制备工艺,其特征在于:有机溶剂为极性小于正丁醇的醚、醇、酯、酮;溶剂洗脱方式包括单一或混合溶剂的正相、反相或梯度洗脱。
6.据权利要求4所述的五味子总木脂素提物的制备工艺,其特征在于:所述的吸附树脂为苯乙烯类、苯丙酸类、丙稀酰胺类或氧化氮类大孔树脂中的一种或几种。
7.根据权利要求4所述的五味子总木脂素提取物的制备工艺,其特征在于:色谱柱填料为硅胶、氧化铝、聚酰胺、吸附树脂、葡萄糖凝胶、ODS、硅藻土中的一种或多种。
8.根据权利要求1所述的提取五味子总木脂素的新原料,其特征在于:由该原料得到的提取物可以与药学上可接受的赋形剂或载体混合制成临床上可接受的药物和食品剂型
9.根据权利要求8所述的提取五味子总木脂素的新原料,其特征在于:所述的剂型为片剂、胶囊、散剂、酊剂、口服液、滴丸及注射剂或饮料、面包、饼干、糖果、酒、茶及化妆品等。
10.提取五味子总木脂素的新原料的用途,其特征在于:由该原料得到的提取物用于制备预防或治疗肝炎产品中应用。
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