CN103784623A

CN103784623A - 一种具有降血糖药用植物提取物的制备方法及其在制药和保健食品中的应用

Info

Publication number: CN103784623A
Application number: CN201210429257.XA
Authority: CN
Inventors: 郭鹏; 许旭东; 张小坡; 吴崇明
Original assignee: Institute of Medicinal Plant Development of CAMS and PUMC
Current assignee: Institute of Medicinal Plant Development of CAMS and PUMC
Priority date: 2012-11-01
Filing date: 2012-11-01
Publication date: 2014-05-14

Abstract

本发明涉及一种药用植物提取物的制备方法及其在制药和保健品中的应用，本发明以岭南药用植物野菠萝(露兜簕的果实)为原料，经提取分离制备而得。制备方法是野菠萝经水或/和醇进行提取，提取液浓缩干燥后，即得本发明中的提取物。提取物溶解于水中经脱脂后利用有机溶剂萃取得到萃取部位或通过大孔吸附树脂，使用水、甲醇、乙醇、丙酮或60-90％乙醇或丙酮水溶液洗脱；收集萃取液或提取液或洗脱液，减压回收，浓缩成浸膏、干燥，即得本发明中的药用植物提取物的有效部位。所述中药提取物通过多种药效学实验证明具有降血糖作用，可用于制备降血糖的药物或保健品，用于治疗糖尿病及其相关并发症等疾病。

Description

一种具有降血糖药用植物提取物的制备方法及其在制药和保健食品中的应用

技术领域

本发明涉及制药和保健食品领域，具体是一种降糖的药用植物-野菠萝降糖提取物及其活性部位的制备方法和在制药及保健品开发中应用。

背景技术

随着社会的进步和生活方式的改变，糖尿病等代谢性疾病的发病率逐年升高。据统计数据显示，2010年全球糖尿病患者总数为2.85亿，占世界成年人口的6.4％，每年有超过380万人死于糖尿病相关的疾病。在我国，糖尿病的发病率大约为9.7％，远高于世界平均水平，2011年，我国糖尿病患者总数已接近1亿，另有大约5000万人处于糖尿病的边缘。面对如此严峻的糖尿病发病趋势，寻找可治疗糖尿病的新型药物已成为摆在全世界药物研究人员面前的最紧急的问题。

由于糖尿病是一种病因非常复杂的***性疾病，涉及到糖代谢、脂代谢、免疫响应等多个生理***的改变，因此成分和治疗靶点比较单一的西药虽然能够在很大程度上改善糖尿病的症状，但却无法实现根治，导致糖尿病患者必须终生依赖这些药物控制血糖。这不仅给糖尿病患者带来长期的经济负担，而且患者还要忍受长期服药所引起的不良药物反应的痛苦。与西药相比，中药由于其成分较为复杂，加之中医学家对药物仔细配伍，从而有可能对糖尿病患者的多个***进行全面的调理，从更广泛的角度对糖尿病进行治疗。这不仅有助于糖尿病病症的全身性改善，更为彻底根治糖尿病带来了一线希望。

目前市售的降糖复方制剂或中成药有，消渴丸、玉泉丸、渴乐宁胶囊、金芪降糖片、仙灵骨葆等。有关降血糖中药和民族药的研究与开发也一直方兴未艾，如丹参、地黄、知母、枸杞子、人参、黄芪等的降血糖作用研究。在这些研究过程中发现的皂苷类、黄酮类、多糖类等成分具有显著降血糖活性，同时对这些有效成分的降血糖机制也进行了大量的研究，包括促进胰岛素分泌、增加胰岛素敏感性、抑制淀粉等多糖的吸收和分解等，这些无疑都为以后降血糖药用植物或民族药的研发奠定了科学基础。

野菠萝为露兜科(Pandanaceae)露兜树属(Pandanus)植物露兜簕(Pandanus tectorius Soland)的果实。野菠萝，生长于热带或亚热带地区，在我国分布在广东、广西、云南、海南、台湾等地，资源十分丰富，见《广东省中药材标准》、《海南省中药材标准》、《南宁市药物志》。野菠萝其形态奇特，坚硬而含木质，文献记载其可补脾胃、固元气、解酒毒，主治肝热虚火、肝硬化腹水等。

本发明的有益效果和意义在于：本发明中的提取物和活性部位是从露兜树属岭南药用植物露兜簕(Landaus tectorius Soland.)的果实提取、纯化而得，该植物资源十分丰富。我们的研究其具有显著降血糖作用，可用作制备降血糖的有效药物或保健品，同时对于进一步综合利用药材，带动岭南药材经济的发展具有很重要的现实意义。

发明内容

本发明提供了一直用药用植物提取物制备方法，及其在降糖药物和作为保健品中的应用。

本发明的药用植物或保健品提取物的制备方法包括以下步骤：

(1)、提取：

取野菠萝，净选、掰碎，加入到10～20倍的水或/和醇中浸泡过夜、煎煮、过滤；过滤后的药渣再加水或/和醇提取1-3次，过滤、合并滤液，然后将滤液减压浓缩，加热至60℃，热测相对密度为1.10-1.30的浓缩液，将浓缩液冷至室温。

(2)、纯化：

将浓缩后的药液，按生药重量：水体积比为0.5-3∶1的比例加入中性水，加热至30-50℃，搅拌使溶解，静置2-24小时，过滤得滤液；

将所得滤液经有机溶剂脱脂处理后，用有机溶剂萃取或提取，所得萃取液或提取液经浓缩，干燥，即得有效部位，或将所得到的提取液上大孔吸附树脂吸附，先用3～5个柱床体积的水洗去杂质，然后用洗脱溶剂进行洗脱，直至薄层色谱检识无明显斑点为止；收集洗脱液，干燥，即得有效部位；

所述用于脱脂的有机溶剂为石油醚、苯、氯仿、乙酸乙酯、环己烷、正己烷。

所用萃取或提取用溶剂为丙酮、乙醇、甲醇、正丁醇、丙醇、异丙醇、乙酸乙酯、水、乙醇-水溶液、甲醇-水溶液。

所述洗脱溶剂为水、甲醇、乙醇、丙酮、或50-95v％的乙醇或丙酮的水溶液。

所采用的大孔树脂包括D系列、HPD系列、HP系列、XAD系列和AB-8大孔吸附树脂。

本发明药用植物提取物和有效部位的制备方法包括，将本发明所述的药用植物提取物或有效部位与可药用载体混合。

本发明所述的药用植物提取物可以被制成各种剂型，例如散剂、片剂、丸剂、分散剂、胶囊剂、软胶囊、滴丸、颗粒剂、泡腾片、袋茶、口服液、保健饮料等。

根据本发明所公开的技术内容，本领域技术人员将很清楚本发明的其他实施方案，下述实施方案仅作示例。在不违反本发明主旨及范围的情况下，可对本发明进行各种改变和改进。这些改变和改进均应在本发明的保护范围之内。

附图说明

图1野菠萝果实水提液对自发型糖尿病小鼠胰岛素耐量试验(ITT)的影响。雄性db/db自发型糖尿病小鼠随机分成高血糖模型组、二甲双胍阳性对照组和野菠萝水提取物(YBL)3个剂量组(剂量分别为50、100和200mg/kg)、100mg/kg二甲双胍组，每组12只动物，均喂食高脂饲料，同时灌胃给予相应药物，高血糖模型组灌胃等体积自来水。给药3周后，各组小鼠禁食不禁水4h，腹腔注射0.8U/kg胰岛素，并于注射胰岛素后0、30、60、90和120min，用血糖仪测量尾静脉血糖值。

图2野菠萝果实水提液对自发型糖尿病小鼠口服葡萄糖耐量试验(OGTT)的影响。动物分组和处理同图1。给药4周后，各组小鼠禁食不禁水6h，灌胃4g/kg葡萄糖，并于给葡萄糖后0、30、60、90和120min，用血糖仪测量尾静脉血糖值。

图3野菠萝果实水提液对自发型糖尿病小鼠空腹血糖和血清胰岛素水平的影响。动物分组和处理同图1和图2。给药5周后，各组小鼠禁食不禁水12h，腹腔注射戊巴比妥钠麻醉后，摘眼球取血，离分取血清，用试剂盒按紫外分光光度法测定血清葡萄糖水平，并用胰岛素放射免疫测定试剂盒测量血清胰岛素水平。与模型组比较，**p＜0.01；***p＜0.001

具体实施方式

下面结合实施案例对本发明做进一步的详细描述。

实施例1本发明中的药用植物提取物及其有效部位制备例(一)

取新鲜成熟的野菠萝，置于容器中，加入10-20倍水，浸泡2h后，煎煮3次，每次2h，过滤，浓缩至干得药用植物提取物。药用植物提取物经水溶解后，经D-101大孔吸附树脂分离，以不同浓度的乙醇-水溶液进行洗脱至无色，洗脱液经减压浓缩制得水洗脱物、70％乙醇洗脱物，浓缩，喷雾干燥后即得本发明中的有效部位。

实施例2本发明中的药用植物提取物及其有效部位制备例(二)

取新鲜成熟后阴干后的野菠萝，置于容器中，加入10-20倍乙醇或乙醇-水(7∶3)，浸泡2h后，回流提取3次，每次2h，过滤，浓缩至干得药用植物提取物。药用植物提取物经水溶解后，经有机溶剂氯仿或乙酸乙酯脱脂后，用正丁醇反复萃取至无色，萃取液经减压浓缩后，喷雾干燥后即得本发明中的有效部位。

实施例3本发明药用植物提取物对自发型糖尿病小鼠胰岛素耐量的影响

3.1.试验材料：野菠萝水提取物，二甲双胍，高脂饲料，罗氏全自动血糖仪

3.2.试验动物：db/db自发型糖尿病小鼠(30～40g)

3.3.试验方法：取30～40g雄性db/db自发型糖尿病小鼠60只，随机分成高血糖模型组、二甲双胍阳性对照组和野菠萝水提取物3个剂量组(剂量分别为50mg/kg，100mg/kg，200mg/kg)、100mg/kg二甲双胍组共5组(12只组)，均喂食高脂饲料，同时灌胃给予相应药物，高血糖模型组灌胃等体积自来水。给药3周后，各组小鼠禁食不禁水4h，腹腔注射0.8U/kg胰岛素，并于注射胰岛素后0、30、60、90和120min，用血糖仪测量尾静脉血糖值。

3.4.实验结果：

用野菠萝果实水提取物处理db/db自发型糖尿病小鼠模型3周后，进行胰岛素耐量试验(ITT)，以二甲双胍为阳性对照药。结果发现灌胃野菠萝果实水提物可以显著提高db/db自发型糖尿病小鼠的胰岛素敏感性，在100mg/kg的剂量下，效果已经较为显著(p＜0.05)。

实施例4本发明药用植物提取物对自发型糖尿病小鼠葡萄糖耐量的影响

4.1.试验材料：野菠萝水提取物，二甲双胍，高脂饲料，罗氏全自动血糖仪

4.2.试验动物：db/db自发型糖尿病小鼠(30～40g)

4.3.试验方法：动物分组和处理同实施例3。给药4周后，各组小鼠禁食不禁水6h，灌胃4g/kg葡萄糖，并于给葡萄糖后0、30、60、90和120min，用血糖仪测量尾静脉血糖值。

4.4.实验结果：

用野菠萝果实水提取物处理db/db自发型糖尿病小鼠模型4周后，进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)，以二甲双胍为阳性对照药。结果发现灌胃野菠萝果实水提物可以显著提高db/db自发型糖尿病小鼠的胰岛素敏感性，在200mg/kg的剂量下，效果较为显著(p＜0.05)。

实施例5本发明药用植物提取物对自发型糖尿病小鼠空腹血糖和血清胰岛素的影响

5.1.试验材料：野菠萝水提取物，二甲双胍，高脂饲料，葡萄糖测定试剂盒，¹²⁵I胰岛素放射免疫测定试剂盒

5.2.试验动物：db/db自发型糖尿病小鼠(30～40g)

5.3.试验方法：动物分组和处理同实施例3和实施例4。给药5周后，各组小鼠禁食不禁水12h，腹腔注射戊巴比妥钠麻醉后，摘眼球取血，3000r/min离心10min，取血清，用试剂盒按紫外分光光度法测定血清葡萄糖水平，并用胰岛素放射免疫测定试剂盒测量血清胰岛素水平。

5.4.实验结果：

用野菠萝果实水提取物处理db/db自发型糖尿病小鼠模型5周后，测量空腹血糖和血清胰岛素水平，以二甲双胍为阳性对照药。结果发现灌胃野菠萝果实水提物可以显著降低db/db自发型糖尿病小鼠的空腹血糖水平(图3A)，在50mg/kg的剂量下，效果已经较为显著(p＜0.05)。同时，野菠萝水提物处理可以显著降低db/db自发型糖尿病小鼠的血清胰岛素水平，改善其高胰岛素血症症状(图3B)，在50mg/kg的剂量下，效果已经较为显著(p＜0.01)。

实施例6本发明中的药用植物提取物或有效部位散剂制备例

将实施例所制得的药用植物提取物或有效部位和有效部位研成细粉、过筛，取已过筛的该药用植物提取物细粉1份，加入淀粉3.5份、乳糖6.5份按等量递加混合法混合均匀，按容量法分剂量制得散剂。

实施例7本发明药用植物提取物或有效部位硬胶囊剂的制备例

将实施例1或2所制得的药用植物提取物或有效部位粉碎，过60-100目筛，取已过筛的该药用植物提取物细粉1份，加入干淀粉1.1份作为填充剂，加入1-3％滑石粉作助流剂，混匀后用空心胶囊充填制得硬胶囊剂。

实施例8本发明中的药用植物提取物或有效部位片剂的制备例

将实施例1或2所制得的药用植物提取物或有效部位粉碎过60-100目筛，取已过筛的该药用植物提取物细粉1份，加入羟丙基纤维素1.1份做崩解剂，加入药用糊精0.4份作粘合剂，加入适量50-95％的乙醇做润滑剂，湿法制粒、干燥、整粒后加入1-3％的润滑剂混合均匀，压制成片剂。

实施例9本发明中的药用植物提取物或有效部位分散片的制备例

将实施例1或2所制得的药用植物提取物或有效部位1份和载体材料4份共同溶于50-95％的乙醇中，用喷雾干燥法干燥后，过筛，加入2.0份的微晶纤维素做崩解剂，加入适量微粉硅胶做助流剂，混合均匀后将粉末直接压制成片剂，即得分散片。

实施例10本发明中的药用植物提取物或有效部位保健饮料的制备例

将实施例1或2所制得的药用植物提取物或有效部位一份和无糖甜味剂0.001份共同溶解于食用级水中，加入调味剂制备成各种口味的饮料，灌装后即得保健饮料。

Claims

1.一种降血糖的药用植物提取物及其有效部位，其特征是：以露兜簕果实为原材料经提取，浓缩而得，有效部位是药用植物提取物经有机溶剂萃取或提取或大孔吸附树脂纯化而得。

2.根据权利要求1中所述的药用植物提取物及其有效部位的制备方法，其特征在于该方法含有如下a、b、c三个步骤：

a：取野菠萝，加10～30倍量水或/和醇煎煮或回流提取2～4次，每次1～3个小时，合并提取液，滤过，减压浓缩该滤液浓缩干燥后，即得本发明中的药用植物提取物；

b：有效部位提取工艺(一)：取a提取物，溶于水中，得到一定浓度的水溶液，加入已填装好的大孔吸附树脂柱中，待该步骤结束后，用蒸馏水冲洗树脂柱，至洗脱液无色；然后向树脂柱中加入洗脱剂，收集洗脱液，浓缩并干燥，最终得该本发明中的有效部位。

c：有效部位提取工艺(二)：取a中的浓缩液，加入有机溶剂(见7)进行脱脂处理后，加入有机溶剂(见8)进行萃取或提取，萃取液或提取液浓缩干燥后，得到本发明中的有效部位。

3.根据权利要求2a中所述的制备方法，其特征在于：所用提取溶剂为水或/和醇。

4.根据权利要求2b中所述制备方法，其特征在于：所用洗脱剂乙醇含量为水、甲醇、乙醇、丙酮、或50-95v％的乙醇或丙酮的水溶液。

5.根据权利要求2c中所述的萃取或提取方法，其特征在于：萃取或提取有机溶剂为丙酮、乙醇、甲醇、正丁醇、丙醇、异丙醇、乙酸乙酯、水、乙醇-水溶液、甲醇-水、丙酮-水溶液。

6.根据权利要求1所述的药用植物提取物及其有效部位，其特征是：该药用植物提取物及其有效部位具有降低空腹和餐后血糖作用。

7.权利要求1所述的一种药用植物提取物及其有效部位在制备降血糖药物中的应用。

8.权利要求1所述的一种药用植物提取物及其有效部位在制备降血糖保健品中的应用。

9.根据权利要求8所述的降血糖药物，其特征在于：包括散剂、片剂、丸剂、分散剂、胶囊剂、软胶囊、滴丸、颗粒剂、泡腾片、袋茶、口服液、保健饮料等等。

10.根据权利要求9中所述降血糖保健品，其特征在于：包括饮料、胶囊剂、泡腾片、袋茶、口服液、颗粒剂等。