CN101052655A - 用于治疗乳腺癌的ctla4抗体和芳香酶抑制剂组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及抗－CTLA4抗体给药，特别是抗人类CTLA4的人类抗体，例如具有抗体3.1.1、4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、12.9.1.1和10DI(MDX－010)的氨基酸序列的抗体，联合芳香酶抑制剂，用于乳腺癌的治疗。更具体地，本发明涉及给予抗－CTLA4抗体和依西美坦治疗乳腺癌。

Description

用于治疗乳腺癌的CTLA4抗体和芳香酶抑制剂组合物

背景技术

每年，在美国超过180,000的女性诊断为乳腺癌。如果目前的乳腺癌的发生率保持不变，那么现在出生的每位女性在约60到65岁的平均乳腺癌发病年龄时，将有十分之一的机率会发生乳腺癌。

大约三分之二的绝经后的乳腺癌患者患有***依赖型疾病，从而使她们可受抗***治疗影响。***促进特定靶细胞(例如乳腺上皮细胞和***依赖性乳腺癌细胞(Brueggemeier Amer JTherapeutics 8：333-344(2001)))的生长和增殖。因此，除了局部化的乳腺初步治疗(例如保留乳腺的手术和放疗或者乳腺切除术)之外施用的***化辅助疗法，集中于阻碍肿瘤细胞上的***受体的药物。此类抗激素药物包括它莫昔芬(tamoxifen)(NOVALDEX D，SOLTAMOX，TAMOFEN)，其抑制***与***受体的结合；氟维司群(fulvestrant)(FASLODEX)，其使受体退化；以及芳香酶抑制剂(例如阿那曲唑(anastrozole)(ARIMIDEX)、来曲唑(letrozole)(FEMARA)和依西美坦(exemestane)(AROMASIN))，其阻滞雄激素对***的芳香酶酶催化作用，从而减少可以用来与受体结合的激素配体量。

尽管激素或其它乳腺癌治疗有所进展，但是据估计在2004年将有40,921位女性死于复发性或者进行性乳腺癌(American Cancer Society，Cancer Statics(2004))。目前，对于患有多发性疾病的患者仍然没有根治疗法，并且治疗基本上是姑息性的。因此，新的治疗方法，例如联合抗激素药物和免疫治疗，在乳腺癌的治疗有重要作用。更具体地，一种癌免疫治疗方法以细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA4；CD152)作为目标，这种抗原是在激活的T细胞上表达的细胞表面受体。CTLA4结合到其自然配体B7.1(CD80)和B7.2(CD86)，向T细胞传递负的调节信号，并阻滞这个负的信号从而在动物模型中导致T细胞免疫功能和抗肿瘤活性增强(Thompson和Allison Immunity 7：445-450(1997)；McCoy和LeGros Immunol.& Cell Biol.77：1-10(1999))。多个研究已经证实，利用抗体进行CTLA4阻滞可以显著增强T细胞介导的肿瘤杀伤并诱导抗肿瘤免疫(Leach等人，Science 271：1734-1736(1996)；Kwon等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 94：8099-8103(1997)；Kwon等人，Natl.Acad.Sci.USA 96：15074-15079(1999))。

尽管使用抗-CTLA4抗体来诱导抗肿瘤反应在***方面具有很大的前景，以及抗激素治疗在治疗乳腺癌方面的前景，仍然需要开发新的治疗方法来治疗乳腺癌。本发明正是为了满足这样的需求。

发明内容

本发明包括一种对需要乳腺癌治疗的患者进行乳腺癌治疗的方法。该方法包括对患者施用治疗有效量的抗-CTLA4抗体、或其抗原结合部分，并结合治疗有效量的芳香酶抑制剂。

在一个方面，芳香酶抑制剂是至少一种选自阿那曲唑、来曲唑和依西美坦的抑制剂。在另一个方面，芳香酶抑制剂是依西美坦。

在一个方面，治疗有效量的人抗-CTLA4抗体的用量范围在约1mg/kg到40mg/kg。

在又一方面，治疗有效量的人抗-CTLA4抗体的用量范围在约3mg/kg到15mg/kg。

在另一方面，治疗有效量的依西美坦的用量范围在约25mg/日到200mg/日。

在进一方面，治疗有效量的依西美坦为约25mg/日。

在一个方面，治疗选自新辅助疗法、辅助疗法、一线治疗、二线治疗和三线治疗。

在另一个方面，抗体选自非人哺乳动物抗体、嵌合抗体和人抗体。

在一个方面，抗体是人抗-CTLA4抗体。

在另一个方面，抗-CTLA4抗体或其抗原结合部分是至少一种选自下列物质的抗体：

(a)具有对CTLA4约为10^-8或者更大结合亲合力的人抗体，其抑制CTLA4与B7-1之间的结合，并抑制CTLA4与B7-2之间的结合；

(b)具有包括至少一种人CDR序列的氨基酸序列的人抗体，所述人CDR序列相应于源自选自以下的抗体的CDR序列：4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、12.9.1.1和10D1；

(c)具有选自4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1和12.9.1.1的抗体的重链和轻链氨基酸序列的人抗体；

(d)具有选自4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、12.9.1.1和10D1的抗体的重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列的人抗体；

(e)抗体或其抗原结合部分，其与至少一种具有选自4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、12.9.1.1和10D1的抗体的重链和轻链氨基酸序列的抗体竞争结合CTLA4；以及

(f)抗体或其抗原结合部分，其与至少一种具有选自4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、12.9.1.1和10D1的抗体的重链和轻链氨基酸序列的抗体交叉竞争结合CTLA4。

在另一个方面，抗体是具有抗体11.2.1的重链和轻链氨基酸序列的人抗体。

在又一个方面，抗体包括重链和轻链，其中重链的重链可变区和轻链的轻链可变区的氨基酸序列选自：

(a)SEQ ID NO：3的氨基酸序列和SEQ ID NO：9的氨基酸序列；

(b)SEQ ID NO：15的氨基酸序列和SEQ ID NO：21的氨基酸序列；

(c)SEQ ID NO：27的氨基酸序列和SEQ ID NO：33的氨基酸序列；

(d)由SEQ ID NO：1的核酸序列编码的氨基酸序列和由SEQ IDNO：7的核酸序列编码的氨基酸序列；

(e)由SEQ ID NO：13的核酸序列编码的氨基酸序列和由SEQ IDNO：19的核酸序列编码的氨基酸序列；

(f)由SEQ ID NO：25的核酸序列编码的氨基酸序列和由SEQ IDNO：31的核酸序列编码的氨基酸序列；

(g)抗体10D1的重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列。

在一个方面，抗体或其抗原结合部分是选自如下的抗体：

(a)具有包括SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6中所列的氨基酸序列的重链可变区，并进一步具有包括SEQ ID NO：10、SEQID NO：11和SEQ ID NO：12中所列的氨基酸序列的轻链可变区的抗体；

(b)具有包括SEQ ID NO：16、SEQ ID NO：17和SEQ ID NO：18中所列的氨基酸序列的重链可变区，并进一步具有包括SEQ ID NO：22、SEQ ID NO：23和SEQ ID NO：24中所列的氨基酸序列的轻链可变区的抗体；

(c)具有包括SEQ ID NO：28、SEQ ID NO：29和SEQ ID NO：30中所列的氨基酸序列的重链可变区，并进一步具有包括SEQ ID NO：34、SEQ ID NO：35和SEQ ID NO：36中所列的氨基酸序列的轻链可变区的抗体；以及

(d)具有包括抗体10D1的重链CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列的重链可变区，并进一步具有包括抗体10D1的轻链CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列的轻链可变区的抗体。

在另一个方面，该方法进一步包括给予患者至少一种选自如下的药物：烷基化剂、叶酸拮抗剂、嘧啶拈抗剂、蒽环类抗生素、铂化合物、紫杉烷(taxane)、长春花属生物碱、喜树碱类似物、toll样受体激动剂、热休克蛋白类肿瘤疫苗、抗原递呈细胞类治疗剂、雷帕霉素抑制剂的哺乳动物靶、erbB2抑制剂、EGFR抑制剂、VEGF抑制剂、VEGFR抑制剂、血管生产抑制剂、抗体、免疫调节剂、选择性***受体调节剂、细胞因子、肿瘤疫苗、抗增殖剂、免疫共刺激分子和细胞因子。

本发明包括一种用于治疗乳腺癌的药物组合物，其包括：治疗有效量的抗-CTLA4抗体；治疗有效量的芳香酶抑制剂；和药物上可接受的载体。

在一个方面，芳香酶抑制剂是选自阿那曲唑、来曲唑和依西美坦的至少一种芳香酶抑制剂。

在又一方面，芳香酶抑制剂是依西美坦。

本发明包括一定量的抗-CTLA4抗体在制备用于治疗患者乳腺癌的组合物中的用途，其中所述治疗进一步包括给予患者一定量的芳香酶抑制剂。

在一个方面，芳香酶抑制剂是依西美坦，而且其中抗体是具有抗体11.2.1的重链和轻链可变区的氨基酸序列的人抗体。

附图说明

结合附图可以更好地理解本发明的前述简要说明、以及下面的详细说明。为了说明本发明，在附图中显示了优选的实施方式。但是应当理解，本发明不限于所示的精确方案和手段。

在附图中：

图1，包括图1A-1D，显示了抗-CTLA4抗体4.1.1的核苷酸和氨基酸序列。图1A显示了4.1.1重链的全长核苷酸序列(SEQ ID NO：1)。图1B显示了4.1.1重链的全长氨基酸序列(SEQ ID NO：2)，以及在括号“[]”之间指明的4.1.1重链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：3)。每个4.1.1重链CDR的氨基酸序列加下划线。CDR序列如下：CDR1：GFTFSSHGMH(SEQ ID NO：4)；CDR2：VIWYDGRNKYYADSV(SEQID NO：5)；和CDR3：GGHFGPFDY(SEQ ID NO：6)。图1C显示了4.1.1轻链的核苷酸序列(SEQ ID NO：7)。图1D显示了全长4.1.1轻链的氨基酸序列(SEQ ID NO：8)，以及在括号“[]”之间指明的可变区(SEQID NO：9)。每个CDR的氨基酸序列指明如下：CDR1：RASQSISSSFLA(SEQ ID NO：10)；CDR2：GASSRAT(SEQ ID NO：11)；和CDR3：CQQYGTSPWT(SEQ ID NO：12)。

图2，包括图2A-2D，显示了抗-CTLA4抗体4.13.1的核苷酸和氨基酸序列。图2A显示了4.13.1重链的全长核苷酸序列(SEQ IDNO：13)。图2B显示了4.13.1重链的全长氨基酸序列(SEQ ID NO：14)，以及在括号“[]”之间指明的4.13.1重链可变区的氨基酸序列(SEQ IDNO：15)。每个4.13.1重链CDR的氨基酸序列加下划线。CDR序列如下：CDR1：GFTFSSHGIH(SEQ ID NO：16)；CDR2：VIWYDGRNKDYADSV(SEQ ID NO：12)；和CDR3：VAPLGPLDY(SEQ ID NO：18)。图2C显示了4.13.1轻链的核苷酸序列(SEQ ID NO：19)。图2D显示了全长4.13.1轻链的氨基酸序列(SEQ ID NO：20)，以及在括号“[]”之间指定的可变区(SEQ ID NO：21)。每个CDR的氨基酸序列指明如下：CDR1：RASQSVSSYLA(SEQ ID NO：22)；CDR2：GASSRAT(SEQ IDNO：23)；和CDR3：CQQYGRSPFT(SEQ ID NO：24)。

图3，包括图3A-3D，显示了抗-CTLA4抗体11.2.1的核苷酸和氨基酸序列。图3A显示了11.2.1重链的全长核苷酸序列(SEQ ID NO：25)。图3B显示了11.2.1重链的全长氨基酸序列(SEQ ID NO：26)，以及在括号“[]”之间指明的11.2.1重链可变区的氨基酸序列(SEQ ID NO：27)。每个11.2.1重链CDR的氨基酸序列加下划线。CDR序列如下：CDR1：GFTFSSYGMH(SEQ ID NO：28)；CDR2：VIWYDGSNKYYADSV(SEQID NO：29)；和CDR3：DPRGATLYYYYYGMDV(SEQ ID NO：30)。图3C显示了11.2.1轻链的核苷酸序列(SEQ ID NO：31)。图3D显示了全长11.2.1轻链的氨基酸序列(SEQ ID NO：32)，以及在括号“[]”之间指明的可变区(SEQ ID NO：33)。每个CDR的氨基酸序列指明如下：CDR1：RASQSINSYLD(SEQ ID NO：34)；CDR2：AASSLQS(SEQ IDNO：35)；和CDR3：QQYYSTPFT(SEQ ID NO：36)。

具体实施方式

本发明涉及将抗-CTLA4抗体与至少一种芳香酶抑制剂，例如阿那曲唑、来曲唑和依西美坦，联合用于治疗需要乳腺癌治疗的患者的乳腺癌。本发明进一步涉及通过将抗体-芳香酶抑制剂与其它一种或多种药物组合来治疗乳腺癌。

除非在本文中另外限定，本发明所使用的科学和技术术语应具有本领域普通技术人员所通常理解的意义。而且，除非上下文另外需要，单数形式术语应包括复数形式，复数形式术语应包括单数形式。通常，此处所述与细胞和组织培养、分子生物学、免疫学、微生物学、遗传学和蛋白核酸化学和杂交相关的术语、以及这些技术，是本领域所熟知和通常使用的。

除非另外说明，本发明的方法和技术通常根据本领域所公知的方法进行，并且在本说明书通篇引用和讨论的各种通用和更专业的参考文献中有所描述。这样的参考文献包括，例如，Sambrook和Russell，Molecular Cloning，A Laboratory Approach，Cold Spring Harbor Press，Cold Spring Harbor，NY(2001)，Ausubel等人，Current Protocols inMolecular Biology，John Wiley & Sons，NY(2002)，以及Harlow和Lane，Antibodies：A Laboratory Manual，Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，NY(1990)，在此引入作为参考。如现有技术的通常的做法或如本文所述，酶促反应和纯化技术根据厂商的说明进行。此处描述的与分析化学、合成有机化学以及药物和药剂化学相关的术语及其实验室程序和技术，是本领域所公知的并在本领域中通常使用。标准技术用于化学合成、化学分析、药剂制备、配方、运送以及患者的治疗。

如此处所用的，下列每个术语具有与其在该节中相关的含义。

此处所使用的冠词“一个(种)(a和an)”指一个(种)或多个(种)(即，至少一个(种))该冠词的语法对象。例如，“一种成分”指一种成分或一种以上成分。

如此处所使用的，20个传统的氨基酸和它们的缩写遵从传统的用法。参见Immunology--A Synthesis(2^nd Edition，E.S.Golub和D.R.Gren，Eds.，Sinauer Associates，Sunderland，Mass.(1991))，在此引入作为参考。

“保守的氨基酸置换”是指其中氨基酸残基被具有相似化学特性(例如电荷性或者疏水性)的侧链R基的其它氨基酸残基所置换。通常，保守的氨基酸置换将基本上不改变蛋白质的功能特性。在通过保守置换使两个或者多个氨基酸序列彼此不同的情况下，序列一致性的百分比或者相似度可被上调以校正该置换的保守特性。进行这种调整的方法对于本领域的技术人员是已知的。参见，例如Pearson，MethodsMol.Biol.243：307-31(1994)。

具有相似化学特性的侧链的氨基酸基团的例子包括，1)脂肪族侧链：甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸；2)脂肪族-羟基侧链：丝氨酸和苏氨酸；3)含有酰胺的侧链：天冬酰胺和谷氨酰胺；4)芳香族侧链：苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸；5)碱性侧链：赖氨酸、精氨酸和组氨酸；6)酸性侧链：天冬氨酸和谷氨酸；以及7)含硫侧链：半胱氨酸和蛋氨酸。优选的保守的氨基酸置换基团是：缬氨酸-亮氨酸-异亮氨酸、苯丙氨酸-酪氨酸、赖氨酸-精氨酸、丙氨酸-缬氨酸、谷氨酸-天冬氨酸、以及天冬酰胺-谷氨酰胺。

或者，保守替换是在Gonnet等人，Science 256：1443-45(1992)中公开、在此作为参考引入的PAM250对数似然矩阵(log-likehoodmatrix)中具有正值的任意改变。“适度保守的”替换是在PAM250对数似然矩阵中具有非负值的任意改变。

优选的氨基酸置换是如下这些：(1)减少对蛋白水解的敏感性，(2)减少对氧化作用的敏感性，(3)改变形成蛋白复合体的亲和性，以及(4)赋予或者修饰该类似物的其它物理化学或功能特性。包括置换、缺失和/或***的类似物除了特定的肽序列外，可以包括序列的各种突变型蛋白。例如，单个或者多个氨基酸置换(优选保守的氨基酸置换)可以在特定的序列中(优选在形成分子间接触的区域之外的多肽部分中，例如，在CDRs之外)进行。保守的氨基酸置换应基本上不改变母序列的结构特性(例如，取代的氨基酸应没有打破母序列中出现的螺旋的趋势，或者没有破坏表征母序列的其它类型二级结构的趋势)。现有技术已知的多肽的二级或者三级结构的例子描述于Proteins，Structures and Molecular Principles(Creighton，Ed.，W.H.Freeman andCompany，New York(1984))；Introduction to Protein Structure(C.Branden和J.Tooze，eds.，Garland Publishing，New York，N.Y.(1991))；和Thornton等人，Nature 354：105(1991)，均在此引入作为参考。

多肽的序列相似性通常使用序列分析软件测定。蛋白分析软件利用对各种置换、缺失和其他修饰(包括保守的氨基酸置换)的相似性进行测定来比较(match)类似序列。例如，Genetics Computer Group(来自Genetics Computer Group，Inc.de GCG)，也称作WisconsinPackage，是用于评估、分析和操作核苷酸和蛋白质序列的超过130个程序的整合软件包。GCG含有例如“Gap”和“Bestfit”的程序，所述程序可以使用默认参数来测定紧密相关的多肽(例如来自不同种有机体的同源性多肽)之间的、或野生型蛋白质及其突变型蛋白质之间的序列相似性、同源性和/或序列一致性。参见例如GCG 6.1版本、9.1版本和10.1版本。

多肽序列也可以通过使用GCG 6.1版本中的FASTA程序，使用默认参数或推荐参数进行比较。FASTA(例如FASTA2和FASTA3)提供了查询和研究的序列之间的最佳重叠区域的比对和序列一致性的百分比(Pearson，Methods Enzymol.183：63-98(1990)；Pearson，Methods Mol.Biol.132：185-219(2000))。当将本发明的序列与含有来自不同有机体的大量序列的数据库进行比较时，另外一种优选的算法是使用默认参数的计算机程序BLAST，尤其是blastp或tblastn。参见例如Altschul等人，J.Mol.Biol.215：403-410(1990)；Altschul等人，Nucleic Acids Res.25：3389-402(1997)，在此引入作为参考。

此处所使用的术语“芳香酶”指催化雄激素底物(主要为雄烯二酮)的A环芳构化为雌酮的酶(例如45_arom)。

“芳香酶抑制剂”指如下化合物或者物质，当它们与芳香酶接触时，与没有这种化合物或者物质时的芳构化水平相比，能够可检测的抑制雄激素底物的A环的形成。任何通过芳香酶来评估酶活性水平的检测方法，都可以用于检测是否有抑制和/或其抑制水平。芳香酶抑制剂包括但不限于，甾族的和非甾族的抑制剂，例如，尤其是依西美坦、阿那曲唑、来曲唑、法倔唑(fadrozole)、伏氯唑(vorozole)和福美斯坦(formestane)，并且该术语还包括目前已知或者将来确定的任何芳香酶抑制剂。

完整的“抗体”包括通过二硫键相互连接的至少两种重链(H)和两种轻链(L)。通常参见Fundamental Immunology，Ch.7(Paul，W.，ed.，2^nded.Raven Press，N.Y.(1989))(为所有目的，在此全部引入作为参考)。每一重链由重链可变区(HCVR或V_H)和重链恒定区(C_H)组成。重链恒定区由CH1、CH2和CH3三个区域构成。每一轻链由轻链可变区(LCVR或V_L)和轻链恒定区组成。轻链恒定区由C_L一个区域构成。V_H和V_L区域可进一步划分为超变(hypervariability)区——称作互补决定区(CDR)，以及散布于其中的更为保守的区域——称为构架区(FR)。每一个V_H和V_L由三个CDR和四个FR组成，按照下列顺序从氨基末端到羧基末端排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。氨基酸到各个区的分配根据下列定义：Kabat，Sequences ofProteins of Immunological Interest(National Institutes of Health，Bethesda，MD(1987 and 1991))，或Chothia & Lesk，J.Mol.Biol.196：901-917(1987)；Chothia等人，Nature 342：878-883(1989)。

此处所使用的术语抗体的“抗原结合部分”(或简言之“抗体部分”)指保留有特异性地结合某种抗原(例如CTLA4)的能力的一个或者多个抗体片段。已经表明抗体的抗原结合功能可以通过全长抗体的片段来实现。包括在该术语抗体的“抗原结合部分”之内的结合片段的例子包括：(i)Fab片段，由V_L、V_H、C_L和C_H1区域组成的单价片段；(ii)F(ab′)₂片段，在铰链区包括由二硫键连接的两个Fab片段的二价片段；(iii)由V_H和C_H1区域组成的Fd片段；(iv)由抗体的单臂的V_L和V_H区域组成的Fv片段；(v)由V_H区域组成的dAb片段(Ward等人，(1989)Nature 341：544-546)；(vi)分离的互补决定区域(CDR)。此外，尽管Fv片段的两个区域(V_L和V_H)是由独立的基因编码的，但是它们可以通过合成的连接键使用重组技术结合在一起，所述合成的连接键能使它们成为单一蛋白链，其中V_L和V_H区域配对以形成单价分子(称为单链Fv(scFv))；参见例如Bird等人，Science 242：423-426(1988)和Huston等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85：5879-5883(1988))。这种单链抗体也要包括在术语抗体的“抗原结合部分”之内。其它类型的单链抗体，例如双功能抗体(diabody)也被包括在内。双功能抗体是二价的、双重特异性抗体，其中V_H和V_L区域在单个多肽链上表达，但使用过短的连接键而不能在同一链上的两个区域之间配对，从而迫使该区域与另一条链的互补区域配对，并形成两个抗原结合位点(参见例如Holliger等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90：6444-6448(1993)；Poljak等人，Sturcture 2：1121-1123(1994))。

更进一步，抗体或者其抗原结合部分可以是大的免疫粘附分子的一部分，其通过抗体或抗体部分与一个或者多个其它蛋白质或多肽的共价结合或非共价结合而形成。此类免疫粘附分子的例子包括用抗生物素蛋白链菌素的核心区制成四聚体的scFv分子(Kipriyanov等人，Human Antibodies and Hybridomas 6：93-101(1995))、以及用半胱氨酸残基、标记肽和C末端的多聚组氨酸标记制成二价的和生物素化的scFv分子(Kipriyanov等人，Mol.Immunol.31：1047-1058(1994))。其它例子包括，其中一种或者多种来自抗体的CDR以共价或非共价引入分子中，使其成为特异地结合到目标抗原(例如CTLA4)上的免疫粘合素。在这样的实施方式中，CDR可以引入作为较大的多肽链的一部分，可以共价连接到另一条多肽链上，或者可以非共价地引入。抗体部分，例如Fab和F(ab′)₂片段，可以通过使用传统的技术从完整的抗体制备，例如分别用木瓜蛋白酶或者胃蛋白酶消化完整的抗体。而且，抗体、抗体部分和免疫粘附分子能够使用此处所描述的标准重组DNA技术获得。

根据本发明本文使用“抗体”，应该理解也可以使用其抗原结合部分。抗原结合部分与完整的抗体竞争进行特异性结合。通常参见，Fundamental Immunology，Ch.7(Paul，W.，ed.，2^nd ed.Raven Press，N.Y.(1989))(在此全部引入作为参考)。抗原结合部分可以通过重组DNA技术或者通过完整抗体的酶或者化学裂解而制成。在某些实施方式中，抗原结合部分包括Fab、Fab’、F(ab’)₂、Fd、Fv、dAb和互补决定区域(CDR)片段、单链抗体(scFv)、嵌合抗体、双功能抗体以及多肽，其含有足够赋予与多肽的特异性抗原结合的至少一部分抗体。在具有一个或者多个结合位点的实施方式中，结合位点可以彼此相同或不同。

此处所交替使用的术语“人抗体”或者“人序列抗体”，包括来源于人系(germline)免疫球蛋白序列的具有可变区和恒定区(如果存在)的抗体。本发明的人序列抗体可包括未被人系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如通过体外的随机或定点诱变或者体内的体细胞突变所产生的突变)。但是，此处所使用的术语“人抗体”不是要包括“嵌合”抗体，所述“嵌合”抗体中的CDR序列来源于其它哺乳类种系，例如小鼠，被嫁接到人框架序列上(即“人化的”或者PRIMATIZED^TM抗体)。

此处所使用的术语“嵌合抗体”指含有来自两个或者多个不同的抗体的区域的抗体。在一个实施方式中，一个或者多个CDR来源于人抗-CTLA4抗体。在另一个实施方式中，所有的CDR来源于人抗-CTLA4抗体。在另一个实施方式中，来源于一个以上的人抗-CTLA4抗体CDR结合在嵌合人抗体内。例如，嵌合抗体可以包括来源于第一人抗-CD40抗体的轻链的CDR1、来源于第二人抗-CTLA4抗体的轻链的CDR2和来源于第三人抗-CTLA4抗体的轻链的CDR3，并且来源于重链的CDR可以来源于一个或者多个其它抗-CD40抗体。此外，框架区可以来源于同样的抗-CTLA4抗体中的一个或者来源于一个或者多个不同的人。

而且，正如前述所讨论的，嵌合抗体包括含有来源于一个以上物种的种系序列的部分的抗体。

“糖形(glycoform)”指包括各种糖单元键的复合寡糖结构。这样的结构在例如Essentials of Glycobiology Varki et al.，eds.，Cold SpringHarbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，NY(1999)中描述，其还提供了标准的糖生物学术语汇编。这样的糖形包括但不限于，G2、G1、G0、G-1和G-2(参见例如国际专利申请第WO 99/22764号)。

“糖基化方式(glycosylation pattern)”定义为糖单元共价地附着于蛋白质(例如，糖形)的方式，以及附着于该糖形共价附着于蛋白质(更具体地，免疫球蛋白)的多肽骨架的位点的方式。

通过彼此比较，可能被不同细胞系或在转基因动物中表达的抗体会有不同的糖形和/或糖基化方式。但是，所有本文提供的核酸分子所编码的抗体或者含有本文所提供的氨基酸序列的抗体是本发明的一部分，而不论该抗体的糖基化作用。

此处所使用的术语“有效量”或者“治疗有效量”指如下的量：与没有该化合物所测到的反应相比，当将该量给予哺乳动物(优选人)时，其调节可测量到的治疗反应。治疗反应，例如但不限于，抑制和/或减少肿瘤生长、肿瘤大小、转移等，可以通过大量现有技术已知的方法(包括例如此处所公开的方法)进行评估。

本领域的技术人员明白此处所施用的化合物或者复合物的有效量可以有所改变，并可以根据例如待治疗的疾病或者状况、疾病的分期、待治疗的哺乳动物的年龄和健康以及身体状况、疾病的严重程度、所给予的特定化合物等许多因素来轻易地确定。

此处所使用的关于抗体的术语“竞争”，指第一抗体或其抗原结合部分，竞争结合第二抗体或其抗原结合部分，此时与没有第二抗体时的第一抗体的结合相比，在有第二抗体时第一抗体与其同源的抗原决定簇的结合可测量地减少。或者，在存在第一抗体时，第二抗体与其抗原决定簇的结合也有可能有可测量地减少，但并非一定如此。也就是说，第一抗体能够抑制第二抗体与其抗原决定簇的结合而第二抗体不抑制第一抗体与其各自的抗原决定簇结合。但是，每个抗体可测量地抑制其它抗体与其同源的抗原决定簇或配基的结合，无论是相同、更大、或者更小的程度，抗体被称为是彼此“交叉竞争”来结合其各自的抗原决定簇。例如，交叉竞争的抗体能够结合到本发明所使用的抗体所结合的抗原决定簇或者抗原决定簇的一部分上。竞争或者交叉竞争抗体的应用都包括在本发明之内。不管这样的竞争或者交叉竞争的发生机理(例如空间位阻、构象变化、或者结合到普通的抗原决定簇或其部分等)，本领域的技术人员基于此处所提供的教导，将能够理解这样的竞争和/或交叉竞争抗体包含在此处公开的方法中，并且可用于该方法。

术语“抗原决定簇”包括任何能够特异性结合到免疫球蛋白或者T细胞受体的蛋白质决定簇。抗原决定簇通常由分子的化学活性表面基团所组成，例如氨基酸或者糖基侧链，并通常具有特定的三维结构特征以及特定的电荷特性。构象和非构象的抗原决定簇的区别在于，在变性溶剂存在条件下，对前者的结合丧失，而对后者的结合不会如此。

此处所使用的术语“指导材料”包括出版物、录制品、图表或者任何其它表达的媒介，其能够用来传递关于药盒中的本发明的化合物、组合和/或组合物用来影响、减轻或者治疗此处所述的各种疾病或者紊乱的信息。任选地，或者另选地，指导材料能够描述一种或者多种减轻在细胞、组织或者哺乳动物(包括本文别处所描述的)内的疾病或者紊乱的方法。

例如，药盒的指导材料可以附着在含有本发明的化合物和/或组合物的容器上，或者与含有该化合物和/或组合物的容器一起装运。或者，指导材料可以与容器分开单独装运，目的是令接受者协调地使用指导材料和化合物。

除了特殊说明，术语“患者”或者“受治疗者”可以互换使用，指哺乳动物例如人类患者和非人类灵长类动物，以及兽医的治疗对象例如兔子、大鼠、小鼠和其它动物。优选地，患者指人。

此处使用传统的符号来描绘多肽序列：多肽序列的左手末端是氨基末端；多肽序列的右手末端是羧基末端。

此处所使用的短语“特异性结合”指例如蛋白质、核酸、抗体等的化合物，其识别和结合样本中的特定分子，但基本上不识别或结合其它分子。例如，识别和结合样本中的同源配基的抗体或者肽抑制剂(例如结合其同源的抗原CTLA4的抗-CTLA4抗体)，但基本上不识别和结合样本中的其它分子。因此，在指定的检测条件下，特异性结合部分(例如，抗体或其抗原结合部分)优选与特定目标分子结合而不与测试样本中存在的其它成分有明显量的结合。许多检测形式可用于选择能与目标分子特异性结合的抗体。例如，使用固相ELISA免疫检测、免疫沉淀反应、BIAcore以及Westen印渍分析来识别能与CTLA4特异性反应的抗体。典型的特异性或者选择性的反应至少是两倍背景信号或噪声，更典型的是超过10倍背景，更为特别地，当平衡离解常数(K_D)≤1μm，优选≤100nM并最优选≤10nM时，抗体才称做“特异性结合”抗原。

术语“K_D”指特定抗体-抗原反应的平衡离解常数。

此处所使用的“基本上纯的”指目标物种是存在的占统治地位的物种(即，基于摩尔，它比组合物中的任何其它单独的物种更丰富)，优选的基本上纯的部分是组合物中的目标物种(例如抗-CTLA4抗体)占存在的所有大分子物种的至少约50％(基于摩尔)。通常，基本上纯的组合物含有超过约80％的组合物中存在的所有大分子物种，更优选超过约85％、90％、95％和99％。最优选地，目标物种纯化到基本上同质(组合物中的污染物物种不能用传统的检测方法检测到)，其中组合物基本上由单一大分子物种组成。

此处所使用的“治疗”指减少患者所经受的疾病(即肿瘤生长和/或转移，或者由免疫细胞的数量和/或活性所介导的其它效果等)症状的发生率。该术语包括给予本发明的化合物或者药物来预防或者延迟疾病的症状、并发症或者生物化学征象(例如PSA水平的升高)的发生，减轻症状或者阻止或抑制疾病、状况或者紊乱的进一步发展。治疗可以是预防性的(预防或者延迟疾病的症状，或者防止其临床或亚临床症状的表现)或者是治疗性的抑制或者是疾病出现后的缓解症状。

I.抗体-芳香酶抑制剂联合治疗

本发明涉及施用与人CTLA4结合的抗体或者该抗体的抗原结合部分，联合激素(例如芳香酶抑制剂)治疗来治疗乳腺癌的方法。根据本发明的方法，对***水平下降的患者联合使用CTLA4阻滞剂，可以提供协同治疗作用，详述如下。

尽管本发明包括多种联合疗法，其中抗体联合至少一种芳香酶抑制剂进行给药，但本发明不限于例示的药物，它们仅在此用于举例说明的目的。

在一个实施方式中，联合给予乳腺癌患者CTLA4抗体或其抗原结合部分与芳香酶抑制剂(“AI”)。在一个方面，芳香酶抑制剂选自阿那曲唑、来曲唑和依西美坦，它们分别来自市售的ARIMIDEX、FEMARA和AROMASIN。更优选地，芳香酶抑制剂是依西美坦。这是因为协同效应或累加效应通过给予含有抗-CTLA4抗体和AI的组合物来调节。不希望被本发明的任何特殊理论所约束，AI治疗可能是通过细胞凋亡或者其它结构上的改变，来增加乳腺癌肿瘤特异性抗原对免疫***的暴露，从而增加了对肿瘤细胞的免疫反应。即，激素治疗可以创造或增加通过肿瘤细胞死亡来介导的肿瘤特异抗原的来源，其反过来又可将肿瘤抗原加入宿主抗原呈递通路中。抗-CTLA4抗体在抗原呈递通路中调节对增加的肿瘤特异性抗原水平的增加的免疫反应，从而在与芳香酶抑制剂联合治疗时提供潜在的协同治疗效应。其它联合治疗包括放疗、手术和化疗，该联合治疗可通过细胞死亡释放肿瘤特异性抗原，导致与抗-CTLA4一起协同增强免疫反应。

不希望被本发明的任何理论所约束，CTLA4阻滞剂和芳香酶抑制剂的组合物可以诱发比预期更为强大的对于乳腺癌的免疫学反应。所以，使用芳香酶阻滞剂(尤其是依西美坦)联合抗-CTLA4抗体的组合物能够提供潜在的协同效应，从而为乳腺癌提供重要的新型的治疗手段。

本发明的方法可以作为新辅助疗法在手术、放疗或者其它局限治疗之前施行，目的是使肿瘤细胞变得敏感或者另外赋予患者治疗价值。但是，本发明不限于这种新辅助疗法。更确切地说，本发明的方法可用于整个疾病和治疗连续性，例如但不限于，乳腺癌的辅助治疗、一线治疗、二线治疗、三线治疗等。

在一个实施方式中，乳腺癌是***受体阳性的(ER+)，所以芳香酶抑制剂可以减少***的水平从而影响肿瘤。在一个方面，ER+肿瘤发生在经绝后(post-men)女性患者中，因而***水平下降可调节患者体内的治疗性抗肿瘤效应。但是，尽管优选对绝经后ER+患者给予AI治疗，但是本发明不限于此类患者，而是包括对任意患者的抗-CTLA4抗体-芳香酶抑制剂的给药治疗，所述患者如本领域的技术人员根据此处所提供的指导所确定，可以从***水平的减少联合通过CTLA4阻滞剂的免疫增强的结合来获得治疗价值。

II.给药方案

给药方案可以调整来提供最理想的反应。例如，根据治疗情况的紧急程度的指示，可以给予单一丸剂，可以给予随时间分成数个的剂量或者可以按比例减少或增加的剂量。为了易于给药和剂量一致性，以剂量单位的形式配制成胃肠外组合物具有特别的优势。此处所使用的剂量单位形式指适合作为单位剂量用于待治疗的哺乳动物受体的物理离散单元；每个单位含有经过计算的预定量的活性化合物，以与所需的药物载体联合产生预期的治疗效应。本发明的剂量单位形式的规格通过以下条件来规定或者直接取决于以下条件：(a)抗体的唯一特性和所要达到的特殊的治疗或者预防效应，以及(b)在现有技术中配制该活性化合物来治疗个体敏感性的固有限制。

根据本发明施用的抗体的示例性而非限制性的治疗有效量至少为约1mg/kg，至少约5mg/kg，至少约10mg/kg，大于约10mg/kg，或者至少约15mg/kg，例如约1-30mg/kg，或者例如约1-25mg/kg，或者例如约1-20mg/kg，或者例如约5-20mg/kg，或者例如约10-20mg/kg，或者例如约15-20mg/kg，或者例如约15mg/kg。需要注意的是，剂量值可以随着所要缓解的疾病的类型和严重程度而改变，且可以包括单剂量或者多剂量。应该进一步理解，对于任何特定的治疗对象，特定的给药方案应该根据个体需要和给药或者监测组合物给药的人的专业判断，随着时间进行调整，此处所提出的剂量范围仅用于示例而不是用于限制要求保护的组合物的范围或实践。确定用于抗体给药的适当剂量和方案在相关领域是众所周知的，并且应该理解一旦本领域技术人员具有此处所提供的指导，其要包括在本发明的范围内。

在一个实施方式中，抗体作为在适当的缓冲体系内含有约5到20mg/ml抗体的无菌水溶液，以静脉制剂的方式给药。

在一个实施方式中，对于低剂量给药，抗体制剂的部分剂量通过静脉丸剂给药，剩余部分通过灌注给药。例如，抗体的0.01mg/kg静脉注射可以作为丸剂给予，剩余的预定抗体剂量可以通过静脉注射给药。在另一个实施方式中，全部低剂量作为单一团注给药。对于高剂量，例如3mg/kg，抗体不作为丸剂给药，但全部剂量通过灌注给药。预定剂量的抗体可以通过例如约1小时和约4个半小时给药。

本发明涉及给予抗-CTAL4抗体和芳香酶抑制剂的组合物。本领域的技术人员可以理解该组合物可以同时给药或者两种药物在不同时间给药。例如，在一个实施方式中，抗体以单独注射和/或灌注给药，而芳香酶抑制剂(例如依西美坦)在抗体给药之前、之中和之后开始每天给药一次。通常，依西美坦每天给药，每天一次，通常在每天的同一时间餐时服用。但是，本发明对于芳香酶抑制剂不限定任何特定的剂量或者给药方案。更确切地说，抗体和芳香酶抑制剂的最佳剂量、给药途径和给药方案，可以由任何一个相关领域的普通技术人员使用所公知的方法轻易地确定。

例如，可以给予单剂量或者多剂量的抗体。或者，可以给予至少一个剂量，或者至少三个、六个或者12个剂量。可以例如每两个星期、每月、每12天、每25天、每28天、每30天、每40天、每6周、每50天、每2月、每70天、每80天、每3月、每6月或者每年给予该剂量。另外，芳香酶抑制剂可以每天、每天几次或一次、每周、每隔一周、每三周、每四周、每月、每3月、每6月、每年一次、或专业人员决定的能够为患者提供治疗作用的任意其它间期给药。

抗体能够一直给药直到疾病有所进展、或者产生无法忍受的毒性、或者达到12个连续的周期，而不论时间是否较短。抗体还可以使用如下方案给药，在给予负荷剂量之后给予较低剂量。可以对先前从抗-CTLA4抗体和芳香酶抑制剂的组合物给药中受益的肿瘤复发患者，至少重复一次抗体和芳香酶抑制剂的疗程，且更优选重复数次该疗程。

在一个实施方式中，包括抗-CTLA4抗体的单一注射剂以大约3mg/kg的剂量、每28天静脉给予患者。在给予抗体之前、之中和/或之后，也给予患者每天约25mg剂量的依西美坦。在本发明的一个实施方式中，包括抗-CTLA4抗体的单一剂量以约3mg/kg、优选约6mg/kg、更优选约10mg/kg，优选约15mg/kg的剂量，每3个月静脉给予患者。在给予抗体之前、之中和/或之后，也给予患者每天约25mg剂量的依西美坦。在另一个实施方式中，包括抗-CTLA4抗体的团注剂以高于3mg/kg(例如6、10、15、20、25、30、35或者40mg/kg)的剂量每28天静脉给予患者。剂量可以根据本领域已知的因素来调节，尤其是毒性(如果有的话)和治疗效果。在给予抗体之前、之中和/或之后，也给予患者每天约25mg剂量的依西美坦。

抗体-芳香酶抑制剂组合物可以作为一线***辅助治疗给药，或者其可以作为新辅助疗法在手术、放疗或者任何其它治疗之前给予患者，目的是使肿瘤细胞变得敏感或者另外赋予患者治疗价值。

此外，该组合物可以作为二线治疗给药，例如但不限于，当它莫西芬一线治疗失败后。或者，该组合物可以与它莫西芬治疗同时给药，以及或者在它莫西芬治疗的任何时间点，通常在初始治疗后给药约5年。在另一个实施方式中，抗-CTLA4抗体和依西美坦的组合物可以在它莫西芬或者其它辅助治疗大约2或3年后给药。这是因为已经证实它莫西芬治疗2至3年后的依西美坦治疗，提供了治疗价值同时减少了它莫西芬治疗的副作用。

因此，抗-CTLA4和芳香酶抑制剂(优选依西美坦)的组合物，能够在一旦它莫西芬治疗失败时、一旦使用其它芳香酶抑制剂(例如阿那曲唑、来曲唑等)的***辅助治疗失败时、和/或在它莫西芬给药约2到3年后，提供治疗价值。所以，本领域技术人员基于此处所公开的内容可以理解：本发明包括联合以下附加抗激素治疗或者在附加抗激素治疗后，给予抗-CTLA4抗体和芳香酶抑制剂，所述附加抗激素治疗包括但不限于它莫西芬、阿那曲唑、来曲唑以及氟维司群。

III.抗-CTLA4抗体

在一个实施方式中，本发明所使用的CTLA4抗体包括重链，其中V_H的氨基酸序列包括在SEQ ID Nos：3、15和27中所列的氨基酸序列。在另一个实施方式中，CTLA4抗体的V_L包括在SEQ ID Nos：9、21和33中所列的氨基酸序列。更优选地，抗体的V_H和V_L区域包括分别在SEQ ID No：3(V_H 4.1.1)和SEQ ID No：9(V_L 4.1.1)中所列的氨基酸序列；分别在SEQ ID No：15(V_H 4.13.1)和SEQ ID No：21(V_L 4.13.1)中所列的氨基酸序列；以及分别在SEQ ID No：27(V_H 11.2.1)和SEQ IDNo：33(V_L 11.2.1)中所列的氨基酸序列。最优选地，抗体是ticilimumab(也称为CP-675,206)，其具有抗体11.2.1的重链和轻链氨基酸序列。

在又一个实施方式中，重链的氨基酸序列包括由包括SEQ IDNos：1、13和25中所列的核酸序列的核酸所编码的氨基酸序列。在又一个实施方式中，轻链包括由包括SEQ ID Nos：7、19和31中所列的核酸序列的核酸所编码的氨基酸序列。更优选地，重链和轻链包括由包括以下核酸序列的核酸所编码的氨基酸序列：分别在SEQ ID No：1(重链4.1.1)和SEQ ID No：7(轻链4.1.1)中所列的核酸序列；分别在SEQID No：13(重链4.13.1)和SEQ ID No：19(轻链4.13.1)中所列的核酸序列；以及分别在SEQ ID No：25(重链11.2.1)和SEQ ID No：31(轻链11.2.1)中所列的核酸序列。

此外，抗体可以包括含有来源于V_H 3-30或者3-33基因的人CDR氨基酸序列的重链氨基酸序列，或者其保守置换或体细胞突变。可以理解V_H 3-30或者V_H 3-33基因编码抗体分子的重链可变区的FR1至FR3。因此，本发明所包括的抗体与选自3.1.1、4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、2.9.1.1、10D1和DP-50的抗体的FR1至FR3的序列具有至少85％的一致性，更优选至少90％，也更优选至少91％，再更优选至少94％，也更优选至少95％，更优选至少97％，再更优选至少98％，也更优选至少99％，且最优选100％。

抗体在其来源于A27或者O12基因的轻链中可进一步包括CDR区域，或者它可包括选自3.1.1、4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、2.9.1.1、10D1的抗体的CDR区域。

在本发明的其它实施方式中，抗体抑制CTLA4与B7-1、B7-2之间的结合、或者两个都抑制。优选地，抗体能抑制与B7-1结合，其IC₅₀约为100nM或者更低，更优选约10nM或者更低，例如约5nM或者更低，也更优选约2nM或者更低，或者再更优选，例如约1nM或者更低。同样，抗体能抑制与B7-2结合，其IC₅₀约为100nM或者更低，更优选约10nM或者更低，例如又更优选约5nM或者更低，也更优选约2nM或者更低，或者再更优选，例如约1nM或者更低。

此外，在另一个实施方式中，抗-CTLA4抗体对于CTLA4的结合亲合力为约10^-8，或者更大的亲合力，更优选约10^-9或者更大的亲合力，更优选约10^-10或者更大的亲合力，再更优选约10^-11或者更大的亲合力。

抗-CTLA4抗体包括与具有选自4.1.1、6.1.1、11.2.1、4.13.1和4.14.3的抗体的重链和轻链氨基酸序列的抗体竞争结合。进一步地，抗-CTLA4抗体能与抗体10D1竞争结合。

在另一个实施方式中，优选抗体与具有抗体4.1.1、4.13.1、4.14.3、6.1.1或者11.2.1的重链和轻链序列、可变重链和可变轻链序列、和/或重和轻CDR序列的抗体交叉竞争。例如，抗体能结合到如下抗原决定簇，所述抗原决定簇与具有选自4.1.1、4.13.1、4.14.3、6.1.1或者11.2.1的抗体的重链和轻链氨基酸序列、可变序列和/或CDR序列相结合。在另一个实施方式中，所述抗体与具有10D1(MDX-D010)的重链和轻链序列或抗原结合序列的抗体交叉竞争。

在另一个实施方式中，使用抗-CTLA4抗体来实施本发明，所述抗体含有包括如下抗体的CDR-1、CDR-2和CDR-3的氨基酸序列的重链、和包括该抗体的CDR-1、CDR-2和CDR-3的氨基酸序列的轻链，所述抗体选自3.1.1、4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1和12.9.1.1，或者使用具有来自CDR序列的改变的序列来实施本发明，所述改变选自保守改变，其中所述保守改变选自非极性残基被其它非极性残基所替换、极性带电荷的残基被其它极性未带电荷的残基所替换、极性带电荷的残基被其它极性带电荷的残基所替换、以及结构相似的残基的置换；非保守置换，其中所述非保守置换选自极性带电荷的残基取代极性未带电荷的残基、以及非极性残基取代极性残基、附加和缺失。

在本发明的进一步的实施方式中，抗体含有来自在框架或者CDR区域中的种系序列的少于10、7、5或者3个的氨基酸改变。在另一个实施方式中，抗体在框架区域中含有少于5个氨基酸改变并在CDR区域中少于10个改变。在一个优选的实施方式中，抗体在框架区域中含有少于3个氨基酸改变并在CDR区域中少于7个改变。在优选的实施方式中，在框架区域的改变是保守的而在CDR区域中的改变是体细胞突变。

在另一个实施方式中，该抗体与抗体3.1.1、4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、12.9.1.1、10D1的序列，在重链和轻链的全长序列上、或者分别在重链或轻链上，具有至少80％的序列(例如氨基酸、核酸、或者两者)一致性或者序列相似性、更优选至少85％、再更优选至少90％、也更优选至少94％、优选至少95％、更优选至少99％。甚至更优选地，抗体与选自抗体3.1.1、4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、12.9.1.1、10D1的抗体，在重链和轻链上、或者分别在重链或轻链上，具有100％的序列一致性或者序列相似性。

在另一个实施方式中，抗体与种系V_kA27、种系V_kO12和种系DP50(它是V_H 3-33基因座位的等位基因)的序列，在重链和轻链的全长序列上、或者分别在重链或轻链上，具有至少80％的序列一致性或者序列相似性、更优选至少85％、再更优选至少90％、也更优选至少94％、更优选至少95％，仍更优选至少99％。甚至更优选地，抗体在种系DP50的重链序列上和/或种系A27或种系O12的轻链上，具有100％的序列一致性或者序列相似性。

在另一个实施方式中，抗体与抗体3.1.1、4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、12.9.1.1、10D1的序列，在重链和轻链可变区序列上、或分别在重链或轻链可变区序列上，具有至少80％的序列(例如氨基酸、核酸、或者两者)一致性或序列相似性、更优选至少85％、再更优选至少90％、也更优选至少94％、优选至少95％、更优选至少99％。甚至更优选地，抗体与选自抗体3.1.1、4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、12.9.1.1、10D1的抗体，在重链和轻链可变区序列上、或分别在重链或轻链序列上，具有100％的序列一致性或序列相似性。

在另一个实施方式中，抗体与重种系DP50(它是位于V_H 3-33基因座位的等位基因)的重链可变区序列、或者与种系V_xA27或种系V_kO12的轻链可变区序列，在重链可变区序列上，具有至少80％的序列一致性或序列相似性、更优选至少85％、再更优选至少90％、也更优选至少94％、更优选至少95％，仍更优选至少99％。甚至更优选地，抗体重链可变区序列与种系DP50的序列、或者与种系A27或种系O12的轻链序列具有100％的序列一致性或序列相似性。

在本发明的一个实施方式中，抗体与抗体3.1.1、4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、12.9.1.1、10D1的从FR1到FR4区域序列，在从FR1到FR4的重链序列、轻链序列或者两者上，具有至少80％的序列一致性或序列相似性、更优选至少85％、再更优选至少90％、也更优选至少95％、更优选至少99％。甚至更优选地，抗体与抗体3.1.1、4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、12.9.1.1和10D1，在从FR1到FR4的重链序列、轻链序列或者两者上，具有100％的序列一致性或序列相似性。

在本发明的另一个实施方式中，抗体与种系DP50的FR1到FR3区域序，在经过从FR1到FR3的重链序列上，具有至少80％的序列一致性或序列相似性、更优选至少85％、再更优选至少90％、也更优选至少95％、更优选至少99％，最优选大约100％。

在本发明的又一个实施方式中，抗体与种系V_kA27或种系V_kO12的FR1到FR4区域序列，在从FR1到FR4的轻链序列上，具有至少80％的序列一致性或序列相似性、更优选至少85％、再更优选至少90％、也更优选至少95％、更优选至少99％，最优选大约100％。

在本发明的一个实施方式中，抗体与抗体3.1.1、4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、12.9.1.1、10D1的CDR-1、CDR-2和CDR-3序列，在重链、轻链、或者两者上，具有至少80％的序列一致性或者序列相似性、更优选至少85％、再更优选至少90％、也更优选至少95％、更优选至少99％。甚至更优选地，抗体与抗体3.1.1、4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、12.9.1.1和10D1的CDR-1、CDR-2和CDR-3序列，在重链、轻链、或者两者上，具有100％的序列一致性或者序列相似性。

在本发明的另一个实施方式中，抗体与种系DP50的CDR-1和CDR-2序列，在重链CDR-1和CDR-2序列上，具有至少80％的序列一致性或者序列相似性、更优选至少85％、再更优选至少90％、也更优选至少95％、更优选至少99％、最优选约100％。

在本发明的又一个实施方式中，抗体与种系V_kA27或者种系V_kO12的CDR-1、CDR-2和CDR-3序列，在轻链CDR-1、CDR-2和CDR-3序列上，具有至少80％的序列一致性或者序列相似性、更优选至少85％、再更优选至少90％、也更优选至少95％、更优选至少99％、最优选约100％。

本发明所使用的抗体的具体例子以其制作方法在以下文献中描述，其中美国专利申请第09/472,087号、现已授权为美国专利第6,682,736号；国际申请第PCT/US00/23356号(作为WO 01/14424于2001年3月1日公开)(例如抗体10D1，也称为MDX-101，Medarex，Princeton，NJ)；国际申请第PCT/US99/28739号(作为WO 00/32231于2000年6月8日公开)；美国专利第5,811,097、5,855,887、6,051,227和6,207,156号；在此全部引入作为参考。尽管这里提供了涉及到这些抗体的氨基酸和核酸序列的信息，进一步的信息可以在美国专利第6,682,736号和WO 00/37504中找到；在那些申请中所列的序列在此引入作为参考。

这些抗体用于治疗各种癌症的某些用途在美国专利申请第10/153,382号中有所讨论，其现在作为美国专利申请公开第2003/0086930号公开，在此全部引入作为参考。

本发明的方法中有用的人抗-CTLA4抗体的特性，在例如美国专利第6,682,736号中详细地讨论，并包括具有如下抗体的氨基酸序列的抗体，例如但不限于，抗体3.1.1、4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、12.9.1.1和10D1。如上述引用的申请和专利，本发明也涉及使用包括这些抗体的重链和轻链的CDR的氨基酸序列的抗体的方法，以及使用在CDR区域内包括改变的抗体的方法。本发明也涉及含有那些抗体的重链和轻链的可变区的抗体。在另一个实施方式中，抗体选自含有抗体3.1.1、4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、12.9.1.1和10D1的重链和轻链的全长的可变区、或者CDR、氨基酸序列的抗体。

尽管可能优选本文前面讨论的抗-CTLA4抗体，本领域的技术人员基于此处所提供的公开内容，将会理解本发明包括多种抗-CTLA4抗体，且不限于这些特定的抗体。更特别地，尽管优选人抗体，但是本发明不是要限于人抗体；相反，本发明包括各种有用的抗体而不管物种起源，并且尤其包括嵌合抗体、人化抗体和/或灵长化抗体。而且，尽管此处示例的抗体通过使用转基因哺乳动物(例如，含有人免疫所有组成部分的小鼠)获得，本领域的技术人员基于此处所提供的公开内容，可以理解本发明不限于通过这种方法或者通过其它任何特定方法制成的抗体。反而，本发明包括通过任何方法制成的抗-CTLA4抗体，包括但不限于本领域已知的方法(例如筛选噬菌体展示文库(phagedisplay library)等)或者在将来开发的用于制作本发明的抗-CTLA4抗体的方法。基于本文所提供的、以及在例如Hanson等人的美国专利第6,682,736号、和美国专利申请公开第2002/0088014号中广泛公开的内容，本领域的技术人员能够使用此处公开的新方法，轻易地制出和鉴定对于与激素治疗药物联合治疗乳腺癌有用的抗体。

本发明包括用转基因非人哺乳动物制作的人抗体，即，公开于Hanson等人的U.S.6,682,736中的XenoMouse^TM(Abgenix，Inc.，Fremont，CA)。

另一个制作“人”抗体的转基因鼠***称为“HuMAb-Mouse^TM”(Medarex，Princeton，NJ)，它含有编码未重排的人重链(μ和γ)和κ轻链免疫球蛋白序列的人免疫球蛋白基因小基因座(minilocus)，连同使内源性的μ和κ链基因座失活的目标突变物(Lonberg等人，Nature368：856-859(1994)以及美国专利第5,770,429号)。

但是本发明使用通过用任意转基因哺乳动物制成的人抗-CTLA4抗体，所述转基因哺乳动物例如但不限于Kirin TC Mouse^TM(Kirin BeerKabushiki Kaisha，Tokyo，Japan)，例如Tomizuka等人，Proc Natl AcadSci USA 97：722(2000)；Kuroiwa等人，Nature Biotechnol 18：1086(2000)；Mikayama等人的美国专利申请公开第2004/0120948号所述；以及HuMAb-Mouse^TM(Medarex，Princeton NJ)和XenoMouse^TM(Abgenix，Inc.，Fremon，CA)，见前所述。因此，本发明包括使用通过用转基因或者其它非人类动物制成的抗-CTLA4抗体。

在另一个实施方式中，本发明的方法所使用的抗体不是完全的人抗体，而是“人化”的抗体。特别地，鼠科动物抗体或者源自其它物种的抗体能通过用本领域公知的技术而被“人化”或者“灵长化”。参见例如Winter和Harris，Immunol.Today 14：43-46(1993)、Wright等人Crit.Reviews in Immunol.12：125-168(1992)、和Cabilly等人的美国专利第4,816,567号、以及Mage和Lamoyi in Monoclonal Antibody ProductionTechniques and Applications pp.79-97，Marcel Dekker.Inc.，New York，NY(1987)。因此，来自任何物种的人化的、嵌合抗体、抗-CTLA4抗体(包括从例如Casterman和Hamers的美国专利第5,759,808和6,765,087号中描述的camelids获得的单链抗体)、以及任何人抗体，能与治疗药物联合来实施此处公开的新方法。

可以理解，基于此处所提供的公开内容，用于本发明的抗体能从转基因非人类哺乳动物以及源自它们的杂交瘤细胞获得，但也能在除了杂交瘤细胞之外的细胞系中表达。

可得到的作为表达宿主的哺乳动物细胞系为本领域所公知，包括许多来自American Type Culture Collection(ATCC)的永生细胞系，包括但不限于中国仓鼠卵巢(CHO)细胞、NS0、Sp2、HEK、Hela细胞、幼仓鼠肾(BHK)系、猴肾细胞(COS)和人肝细胞癌细胞(例如HepG2)。也可使用非哺乳动物原核和真核细胞，包括细菌、酵母、昆虫和植物细胞。

可以使用本领域所公知的各种表达***，例如但不限于，在例如Sambrook和Russell，Molecular Cloning，A Laboratory Approach，ColdSpring Harbor Press，Cold Spring Harbor，NY(2001)以及Ausubel等人，Current Protocols in Molecular Biology，John Wiley & Sons，NY(2002)中所描述的那些。这些表达***尤其包括二氢叶酸还原酶(DHFR)-类***。表达的谷氨酰胺合成酶***在欧洲专利第0216846B1、0256055B1和0323997B1号以及欧洲专利申请第EP89303964号中有全部或部分讨论。在一个实施方式中，所使用的抗体在NS0细胞中用谷氨酰胺合成酶***(GS-NS0)制成。在另一个实施方式中，抗体在CHO细胞中用DHFR***制成。这两种***都为本领域所公知的，尤其在Barnes等人的Biotech & Bioengineering 73：261-270(2001)中有所描述，在此引入作为参考。

抗体CH2域的位点定向诱变来消除糖基化作用可能是优选的，目的是防止在免疫原性、药代动力学和/或效应子(effector)功能的改变而导致非人类的糖基化作用。此外，抗体能通过酶促(见例如Thotakura等人Meth.Enzymol.138：350(1987))和/或化学方法(见例如Hakimuddin等人，Arch.Biochem.Biophys.259：52(1987))而去糖基化作用。

此外，本发明包括使用含有改变的糖基化方式的抗-CTLA4抗体。基于此处所提供的公开内容，本领域的技术人员能够理解，与天然产生的抗体相比，抗-CTLA4抗体能被修饰成包括额外的、少量的或者不同的糖基化作用位点。这种修饰在例如美国专利申请公开第2003/0207336和2003/0157108号、以及国际专利申请第WO 01/81405和00/24893号中有所描述。

此外，本发明包括使用抗-CTLA4抗体，而不论抗体上是否存在糖形。而且，用于广泛地重新塑造存在于糖蛋白上的糖形的方法，在现有技术中已知，包括，例如在国际专利公开第WO 03/031464、WO98/58964和WO99/22764号，以及美国专利申请公开第2004/0063911、2004/0132640、2004/0142856、2004/0072290号，以及Umana等人的美国专利第6,602,684号中描述的那些。

而且，本发明包括与任何现有技术中已知的共价和非共价修饰一起使用抗-CTLA4抗体，所述修饰包括但不限于，将多肽与各种非蛋白质聚合物(例如聚乙二醇、聚丙二醇、或聚氧化烯)之一按照例如美国专利中请公开第2003/0207346和2004/0132640号、以及美国专利第4,640,835、4,496,689、4,301,144、4,670,417、4,791,192、4,179,337号中描述的方式结合。

此外，本发明包括使用抗-CTLA4抗体、或其抗原结合部分、嵌合蛋白质(包括，例如人血清白蛋白多肽)、或其片断。不论嵌合蛋白质是否使用重组方法来生产，例如通过编码嵌合蛋白质的嵌合核酸的克隆、或通过两个肽部分的化学键连，本领域的技术人员一旦具有本发明提供的指导便可以理解，该嵌合蛋白质在现有技术是已知的，并且该嵌合蛋白质能够给予希望的生物特性，例如但不限于，增加本发明的抗体的稳定性和血清半衰期，因此该分子也包括在本文中。

用于本发明而生产的抗体不需要一开始便具有特别需要的同种型。而且，所产生的抗体可以具有任何同种型，并且可以为使用常规技术之后转化成同种型。这些包括直接的重组技术(参见，例如美国专利4,816,397)、和细胞-细胞融合技术(参见例如美国专利第5,916,771号)。

本发明使用的抗体的效应子功能可以通过同种型切换至IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgD、IgA、IgE或IgM来改变，而用于多种治疗用途。而且，通过使用例如双特异(bispecifics)、免疫毒素、或放射性同位素示踪(radiolabels)来避免对于细胞杀灭的补体(complement)的依赖性。

尽管抗体4.1.1、4.13.1和11.2.1为IgG2抗体，且此处提供了该抗体的各种区域的序列(图1-3)，在此处参考和引入的申请和专利中，可以理解，此处包括这些抗体的全长序列，以及包括SEQ ID Nos：1-36中所列的序列并进一步包括任何恒定区的任意抗体的用途，而不论在本文别处所充分讨论的同种型。同样，包括10D1的全长序列或其任意部分(包括编码10D1的抗原结合部分的序列)的任意抗体，可以根据本发明的方法而使用。

因此，本领域的技术人员一旦具有此处所提供的指导，便能够轻易地理解本发明的抗-CTLA4抗体-治疗剂组合物可以包括多种抗-CTLA4抗体。

而且，本领域的技术人员基于此处提供的内容，可以理解本发明不限于仅仅单一抗体的给药；相反，本发明包括联合治疗剂来给予至少一种抗-CTLA4抗体，例如4.1.1、4.13.1或11.2.1之一。而且，抗-CTLA4抗体的任意组合可以与至少一种治疗剂联合，本发明包括任意这种组合及具改变。

IV.芳香酶抑制剂

本发明涉及给予患者抗-CTLA4抗体和芳香酶抑制剂的组合物来治疗乳腺癌。

用于治疗表达乳腺癌肿瘤的***受体的激素治疗剂，在现有技术是已知的。该激素治疗剂包括影响受体自身的化合物，例如但不限于它莫昔芬，其结合受体从而抑制受体：配体相互作用；以及氟维司群，其使受体退化使其不大能够调节经由受体：配体相互作用的信号。

此外，激素治疗剂包括芳香酶抑制剂的抑制剂，例如但不限于阿那曲唑、来曲唑和依西美坦。该抗激素剂不像上述它莫昔芬和氟维司群，而是通过降低能够结合受体的配体的水平来抑制受体：配体相互作用。更具体地说，芳香酶抑制剂抑制了雄激素底物的A环的芳香化作用以形成***，这在受体配体(即***)的生物合成过程中是必要步骤。因此，芳香酶抑制剂调节降低的***的血清水平，从而抑制需要激素用于生长的肿瘤细胞的生长。

非甾体芳香酶抑制剂(“AI”)，例如但不限于阿那曲唑和来曲唑，可逆地结合至芳香酶分子的血红素部分，并且与芳香酶活性的增加有关。这可能与肿瘤抵抗力的发展有关，特别是与长期使用抑制剂有关。而且，由于该抑制剂可逆地与酶结合，在这些抑制剂的存在条件下，***的生物合成能够不需要合成新的芳香酶而发生(参见Miller ClinBreast Cancer 1：S9-S14(2000))，从而也为肿瘤细胞提供另外的机会来避免抑制。

甾体芳香酶抑制剂，例如依西美坦，与非甾体抑制剂(例如阿那曲唑和来曲唑)不同，因为甾体剂不可逆地与酶的底物结合位点相结合，并且与芳香酶活性的降低有关。例如，依西美坦结构上涉及天然的底物雄烯二酮，并被认为是作为假底物的酶从而与天然底物在活性位点上竞争。随后，依西美坦转变为不可逆地与酶结合的中间体，导致其失活(即，“***式抑制”)。参见美国专利申请第10/611,653号，公开号为2004/0082557，美国专利申请第10/363,935号，公开号为2004/024044，以及美国专利申请第10/343,595号，公开号为2003/0158168。

因此，不像可逆的非甾体抑制剂，依西美坦是甾体芳香酶灭活剂，其不可逆地与芳香酶结合，几乎导致芳香酶活性在周缘组织以及肿瘤中的完全抑制，并调节血清***水平的充分降低，而没有外部的内分泌影响(Kaufmann等人，J Clin Oncol 18：1399-1411(2000))。如今美国、加拿大和欧洲批准将依西美坦用于二线治疗(例如，在它莫昔芬一线治疗后疾病发展的情况下)具有转移性乳腺癌的经绝后妇女。依西美坦产生了大约15％的反应率和123.4周的生存中值，并证明缺乏与非甾体剂的交叉抗性，使得其显示在阿那曲唑和来曲唑治疗后有效(Geisler等人，Clin Cancer Res 4：2089-2093(1998)；Lonning J ClinOncol 18：2234-2244(2000))。最近，依西美坦在欧洲已经被批准在绝经后妇女的早期辅助它莫昔芬治疗后的2至3年后，用于***受体阳性侵入性早期乳腺癌的辅助疗法。

由于其中间体不可逆地结合依西美坦，而不像非甾体芳香酶抑制剂，进一步防止***的生物合成，因此需要芳香酶的重新合成。而且，非甾体和甾体芳香酶抑制剂的不同作用机制可以解释如下现象，一种芳香酶抑制剂能够在另一种失败后依然有效。更具体地说，在它莫昔芬和非甾体芳香酶抑制剂失败后，用依西美坦来治疗的绝经后的乳腺癌患者的治疗提供了临床优势(Lonning等人，J Clin Oncol 18：2234-2244(2000))。

因此，抗-CTLA4抗体结合任何芳香酶抑制剂或多重抑制剂，能够用于***表达***受体(ER+)的乳腺癌患者。而且，尽管本发明通过包括依西美坦的组合物来举例说明，本发明不是要限于该抑制剂或其抑制机制。实际上，通过芳香酶抑制剂来抑制酶的机制不需要知道。因此，在本发明的组合物中可以使用任何如下抑制剂，该抑制通过使用任何已知的评价该活性的测定法，能够可检测到地抑制在***生物合成中的底物的A环的芳香化作用。

V.添加剂

本发明可进一步联合添加剂和疗法，例如化学疗法、手术、放射疗法、移植等，来治疗患者。即，患者可以用已知的药物来进行附加化学疗法，例如但不限于，生长因子抑制剂、生物反应修饰因子、烷基化剂、***性抗生素、长春花属生物碱、免疫调节剂、紫杉烷、选择性***受体调节剂(SERM)(例如，但不限于拉索昔芬(lasofoxifene))、以及血管生成抑制剂。

治疗剂很多，其中，在例如美国专利申请公开第2004/0005318、2003/0086930、2002/0086014号、以及国际申请第WO 03/086459号中有所描述，所有这些在本文中引入作为参考。该治疗剂包括但不限于：拓扑异构酶I抑制剂；其它抗体(利妥昔单抗(rituximab)、贝伐单抗(bevacizumab)、曲妥珠单抗(trastuzumab)、抗-IGF 1R抗体[例如CP-751,871]、抗-CD40抗体[例如，CP-870,893]等)；化学治疗剂，例如但不限于伊马替尼(imatinib)(GLEEVEC)、SU11248(SUTENT；sunitinib)、SU12662、SU14813；BAY43-9006、AG-O13736(axitinib)、toll样受体刺激剂(例如，TLR-9激动剂；例如但不限于CPG-7909，也称作PF03512676或PROMUNE)、吲哚胺-2，3-双加氧酶(IDO)抑制剂；选择性***受体调节剂(SERM；例如拉索昔芬)；紫杉烷；长春花属生物碱；替莫唑胺(temozolomide)；血管生成抑制剂；EGFR抑制剂；VEGF抑制剂；erbB2受体抑制剂；抗增殖剂(例如法呢基蛋白质转移酶抑制剂、以及αvβ3抑制剂、αvβ5抑制剂、p53抑制剂等)；免疫调节剂；生物反应修饰剂；细胞因子；肿瘤疫苗；肿瘤特异性抗原；热激蛋白质类肿瘤疫苗；树突细胞和干细胞治疗剂；烷基化剂、叶酸拮抗剂；嘧啶拮抗剂；蒽环类抗生素、铂化合物、免疫共刺激分子(例如，CD4、CD25、PD-1、B7-H3、4-1BB、OX40、ICOS、CD30、HLA-DR、MHCII、以及LFA)、以及激动剂抗体等。

在一个实施方式中，本发明的方法可以进一步联合移植，例如干细胞移植，以对受乳腺癌折磨的患者提供治疗益处。干细胞移植可以根据现有技术已知的方法来进行，并且可以为同种异体或自体干细胞移植。此外，基于本文所公开的内容，本领域的技术人员将理解，移植包括自体或从HLA配对的供体获得的淋巴细胞的继承性转移。在该方法包括干细胞移植的情况下，抗体-AI治疗剂组合物的第一剂可以在哺乳动物的免疫***从移植恢复之后给药，例如，在移植后的1至12个月期间内给药。在某个实施方式中，第一剂在移植后的1至3月、或1至4月期间内给药。移植方法在许多论文中有所描述，包括Appelbaum in Harrison’s Principles of Internal Medicine，第14章，Braunwald等人编辑，第15版，McGraw-Hill Professional(2001)，其在本文中作为参考引入。

如前文所指出的那样，目前有许多化学治疗剂用于治疗适合使用本发明的联合疗法的肿瘤。例如，烷基化剂是一类使DNA烷基化、限制链解螺旋和复制的药物。用于本发明的方法的优选烷基化剂是环磷酰胺(CYTOXAN)。

叶酸拈抗剂结合二氢叶酸还原酶(DHFR)，并干扰嘧啶(胸腺嘧啶)合成。甲氨蝶呤和培美曲塞(pemetrexed)(ALIMTA)是适合用于本发明的方法的叶酸拮抗剂。除了DHFR，培美曲塞还抑制胸苷酸合成酶和甘氨酰胺核糖核甘酸甲酰转移酶、胸腺嘧啶合成中涉及的两种其它的叶酸依赖性酶。

嘧啶拮抗剂抑制嘧啶合成中涉及的酶。作为嘧啶同类物，它们还通过与普通的核苷酸竞争对DNA分子并入来干扰DNA生产。适合用于本发明的方法的嘧啶拮抗剂包括5-氟尿嘧啶(5-FU)；卡培他滨(capecitabine)(XELODA)，其是在体内酶促作用下转化成5-FU的5’-脱氧-5-氟尿苷(5’-FDUR)的前药；以及吉西他滨(gemcitabine)(GEMZAR)。

蒽环类抗生素通过***DNA链之间而抑制DNA解螺旋。蒽环类抗生素包括盐酸阿霉素(ADRIAMYCIN)、盐酸表柔比星(epirubicin)(ELLENCE，PHARMORUBICIN)、柔红霉素(daunorubicin)(CERUBIDINE，DAUNOXOME)、以及盐酸伊达比星(idarubicin)(IDAMYCIN PFS，ZAVEDOS)。优选用于本发明的蒽环包括阿霉素和表柔比星。

铂化合物通过***(intercalation和intracalation)DNA链之间而抑制DNA的解螺旋，来发挥其抗肿瘤作用。在本发明的方法中有效的铂化合物包括顺铂(PLATINOL)、奥沙利铂(oxaliplatin)(ELOXATIN)和卡铂(PARAPLATIN)。

紫杉烷促进微管的组合，同时抑制其分解成为微管蛋白，从而阻碍细胞能力以破坏在有丝***过程中的有丝***纺锤体。作为单一制剂治疗和联合其它化学治疗剂，其证明了对抗许多固体肿瘤的显著活性。本发明的组合治疗的一个实施方式包括联合IGF-1R抗体使用一种或多种紫杉烷。用于联合IGF-1R抗体的合适的紫杉烷包括多西他赛(docetaxel)(TAXOTERE)和紫杉醇(paclitaxel)(TAXOL)。

在细胞中有活性以抵抗阿霉素、长春碱、紫杉醇、多西他赛等的的紫杉烷衍生物包括XRP-9981(Sanofi Aventis)，并包括在本发明中。

长春花属生物碱，类似于紫杉烷，是“纺锤体毒物”，作用于形成有丝***纺锤体的微管。其通过干扰微管组合、防止纺锤体形成来抑制有丝***。长春花属生物碱包括长春地辛(vindesine)(ELDISINE)、硫酸长春碱(VELBAN)、硫酸长春新碱(ONCOVIN)和酒石酸长春瑞滨(vinorelbine)(NAVELBINE)。用于本发明的方法的优选长春花属生物碱是长春瑞滨。

BMS-247550(ixabepilone)促进微管蛋白聚合和微管稳定化，从而阻滞G2-M相中的细胞并诱导肿瘤细胞凋亡。该药物证明了对耐紫杉烷细胞的活性。

结合并抑制雷帕霉素的哺乳动物靶点的雷帕霉素类似物也有效，其中包括CCI-779(temsirolimus；Wyeth)和RAD-001(everolimus，CERTICAN；Novartis)。

喜树碱类似物通过抑制拓扑异构酶I(对于DNA的复制和组装关键的酶)来发挥作用。拓扑异构酶I的水平在肿瘤细胞中比在正常组织中高。可用于本发明的方法的喜树碱类似物是伊立替康(irinotecan)(CAMPTOSAR)。

在本发明的某个实施方式中，上述方法与癌疫苗相联合。参见，例如Oh等人，Cancer Res.64：2610-2618(2004)(TARP表位和乳腺癌)；Kontani等人，Int J Molec Med 12：493-502(2003)(靶向MUC1粘蛋白的树突细胞疫苗)；Holmberg & Sandmaier Expert Rev Vaccines 3：269-277(2004)(用于乳腺癌或卵巢癌的接种)。换言之，有效的疫苗可以是，不受限制的，由以下物质构成的那些疫苗：与乳腺癌相关的抗原(例如，HER-2/neu、乳腺球蛋白(mammaglobin)、与***和乳腺肿瘤相关的蛋白质[TARP]、MUC1、CEA、sialyl-Tn和其它碳水化合物抗原)、其它与肿瘤癌相关的抗原(例如，p53、端粒酶)、例如11D10的抗个体基因型抗体、以及疫苗，所述疫苗包括GM-CSF、DNA和细胞类疫苗、树突细胞疫苗、重组病毒(例如牛痘病毒)疫苗、以及热激蛋白质(HSP)疫苗(例如HSPPC-96；Antigenics Inc.)。有效的疫苗还包括肿瘤疫苗，例如由乳腺肿瘤细胞形成的疫苗；并且该疫苗可为自体或同种异体，并且该疫苗可为肽、DNA或细胞类。

疫苗可以在抗体-芳香酶抑制剂组合物给药之前或之后给药，并且当化疗是方案一部分时，疫苗可以在化疗之前给药。在某些实施方式中，本发明的抗体-芳香酶抑制剂组合物还可以在化疗之前给药。在又一个实施方式中，该治疗可以联合干细胞移植。换言之，抗体-芳香酶抑制剂组合物可以在干细胞移植之前或之后给药。并且在某些实施方式中，疫苗还可以伴随抗体在干细胞移植之前或之后给予。

上述治疗还可以与信号转导抑制剂一起使用，例如能够抑制EGFR(表皮生长因子受体)反应的药物，例如EGFR抗体、EGF抗体、以及作为EGFR抑制剂的分子；VEGF(血管内皮生长因子)抑制剂，例如VEGF受体和能够抑制VEGF的分子；以及erbB2受体(HER2)抑制剂，例如与erbB2受体结合的有机分子或抗体，例如曲妥珠单抗(HERCEPTIN，Genentech，Inc.，San Francisco，CA)和帕妥珠单抗(pertuzumab)(2C4，OMNITARG，Genentech)，其为HER二聚作用抑制剂(HDI)。

EGFR抑制剂在例如国际专利申请公开第WO 95/19970、WO98/14451、WO 98/02434号和美国专利第5,747,498号中有所描述，并且该底物可以在此处所述的本发明中使用。抑制EGFR的药物包括但不限于，单克隆抗体C225、抗-EGFR 22Mab(ImClone Sysems Inc.，New York，NY)、和ABX-EGF(Abgenix Inc.，remont，CA)、化合物ZD-1839(AstraZeneca)、BIBX-1382(Boehringer Ingelheim)、MDX-447(Medarex，Inc.，Annandale，NJ)、和OLX-103(Merck & Co.，Whitehouse Station，NJ)、VRCTC-310(Ventech Research)和EGF融合毒素(Seragen Inc，Hopkinton，MA)。这些以及其它抑制EGFR的药物可以用于本发明。

用于抑制表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶(TK)的化合物，代表了在本发明的方法中有效的相对新型的抗肿瘤药。许多人癌在细胞表面上表达EGFR家族的成员。当配体与EGFR联合时，其抵消了一串细胞反应，所述反应导致细胞***增加并影响癌生长和进展的其它方面，包括血管生成、转移扩散、合抑制凋亡。EGFR-TK抑制剂可以选择性地靶向EGFR家族(EGFR(也称为HER1或ErbB-1)、HER2/neu(也称为ErbB-2)、HER3(也称为ErbB-3)或HER4(也称为ErbB-4))中的一员，或者可以靶向其中的两个或多个。适用于本发明的EGFR-TK抑制剂包括吉非替尼(gefitinib)(IRESSA)、埃罗替尼(erlotinib)(TARCEVA)、CI-1033(Pfizer)、GW2016(GlaxoSmithKline)、EKB-569(Wyeth)、PKI-166(Novartis)、CP-724,714(Pfizer)、和BIBX-1382(Boeringer-Ingelheim)。添加的EGFR-TK抑制剂在美国专利第6,890,924号中有所描述。

VEGF抑制剂，例如SU-5416、SU-6668、SU-11248、SU-12662、SU-14813(Sugen Inc.，San Francisco，CA)、以及AG-013736(Pfizer)也可以联合抗体使用。VEGF抑制剂在例如国际专利申请第PCT/IB99/00797号(1999年5月3日申请)、国际专利公开第WO99/24440、WO 95/21613、WO 99/61422、WO 98/50356、WO 99/10349、WO 97/32856、WO 97/22596、WO 98/54093、WO 98/02438、WO99/16755、WO 98/02437号、美国专利第5,834,504、5,883,113、5,886,020和5,792,783号中有所描述。在本发明中有效的一些特殊的VEGF抑制剂的其它例子是IM862(Cytran Inc.，Kirkland，WA)；IMC-1C11 Imclone抗体，Genentech，Inc.，San Francisco，CA的抗-VEGF单克隆抗体；以及angiozyme，来自Ribozyme(B oulder，CO)和Chiron(Emeryville，CA)的合成核糖酶。

ErbB2受体抑制剂，例如GW-282974、GW-572016(拉帕替尼(lapatinib))(Glaxo Wellcome plc)、和单克隆抗体AR-209(AronexPharmaceuticals Inc.，Woodlands，TX)、曲妥珠单抗(HERCEPTIN；Genentech，Inc.，San Francisco，CA)、帕妥珠单抗(OMNITARG；2C4；Genentech，HER2二聚合抑制剂HDI)、和2B-1(Chiron)，能够联合抗体-芳香酶抑制剂组合疗法。其它erbB2受体抑制剂在例如国际专利公开第WO 98/02434、WO 99/35146、WO 99/35132、WO 98/02437、WO 97/13760、WO 95/19970号、美国专利第5,587,458和5,877,305号中有所描述。在本发明中有效的ErbB2受体抑制剂还在EP1029853(在2000年8月23日公开)和国际专利公开第WO 00/44728号(2000年8月3日公开)中有所描述。在前述PCT申请、美国专利、和美国临时申请中所述的erbB2受体抑制剂化合物和物质、以及其它抑制erbB2受体的化合物和物质，根据本发明可以与抗体和芳香酶抑制剂组合物一起使用。

本发明的治疗还可以与其它在治疗异常细胞生长或癌症中有效的药物一起使用，包括但不限于，能够增强抗肿瘤免疫反应的其它药物，例如其它的不同的CTLA4抗体、以及其它也能够阻断CTLA4的药物；以及抗增殖剂，例如法呢基蛋白质转移酶抑制剂和αvβ3抑制剂，例如αvβ3抗体VITAXIN、αvβ5抑制剂、p53抑制剂等。

在将本发明的抗体与其它免疫调节剂联合给药时，免疫调节剂能够选自，例如树突细胞激活剂，例如CD40配体和抗-CD40激动剂抗体、以及抗原呈递的增强子、T-细胞向性的增强子、肿瘤相关的免疫抑制因子的抑制剂，例如TGF-β(转化生长因子β)、以及IL-10。优选的抗-CD40激动剂抗体包括在2002年11月8日申请的国际专利申请第PCT/US02/36107号，现在公开为国际专利公开第WO 03/040170号，以及在2002年11月8日申请的美国专利申请第10/292,088号，现在公开为美国专利公开第US2003/0211100号中公开的抗体，包括但不限于具有以下抗体的重链和轻链氨基酸序列的抗体：3.1.1、3.1.1.H-A78T、3.1.1H-A78T-V97A、3.1.1L-L4M-L83V、3.1.1H-A78T-V88A-V97A/3.1.1L-L4M-L83V、7.1.2、10.8.3、15.1.1、21.2.1、21.4.1、22.1.1、22.1.1H-C109A、23.5.1、23.25.1、23.28.1、23.28.1H-D16E、23.29.1和24.2.1。

本发明的治疗方案还可联合抗体或其它通过与IGF-1R(***1受体)结合而抑制肿瘤生长的配体。在本发明中可以使用的特殊的抗-IGF-1R抗体包括以下文献中描述的哪些：2001年12月20日申请的国际专利申请第PCT/US01/51113号，并作为国际专利公开第WO 02/053593号公开；在2004年8月3日申请的国际专利申请第PCT/IB2004/002555号，并作为国际专利公开第WO 2005/016967号公开。优选的抗-IGFR-1R抗体包括具有以下抗体的重链和轻链氨基酸序列的抗体：2.12.1、2.13.2、2.14.3、3.1.1、4.9.2和4.17.3。

本发明的抗体还可以与细胞因子，例如IL-2、干扰素(例如，IFN-γ、IFN-α等)、GM-CSF、IL-12、IL-18和FLT-3L一起给药。

本文所述的治疗方案可以与血管生成抑制剂(例如，MMP-2(基质金属蛋白酶2)抑制剂、MMP-9(基质金属蛋白酶9)抑制剂、以及COX-II(环加氧酶II)抑制剂)联合，能够联合抗体用于本发明的方法中。有效的COX-II抑制剂的例子包括CELEBREX(塞来考昔(celecoxib))、伐地考昔(valdecoxib)、和罗非考昔(rofecoxib)。有效的基质金属蛋白酶抑制剂的例子描述于国际专利公开第WO96/33172、WO 96/27583、WO 98/07697、WO 98/03516、WO 98/34918、WO 98/34915、WO 98/33768、WO 98/30566、WO 90/05719、WO99/52910、WO 99/52889、WO 99/29667号，欧洲专利申请第780386(1997年6月25日公开)、97304971(1997年7月8日申请)、99308617(1999年10月29日申请)、606046(1994年7月13日公开)、931788(1999年7月28日公开)、99302232号(1999年3月25日申请)，国际申请第PCT/IB98/01113号(1998年7月21日申请)，英国专利申请第9912961号(1999年6月3日申请)，美国临时专利申请第60/148,464号(1999年8月12日申请)，以及美国专利第5,863,949和5,861,510号。

优选的MMP-2和MMP-9抑制剂是那些抑制MMP-1的活性很小或没有活性的物质。更优选的是那些相对于其它基质金属蛋白酶(即，MMP-1、MMP-3、MMP-4、MMP-5、MMP-6、MMP-7、MMP-8、MMP-10、MMP-11、MMP-12和MMP-13)，选择性地抑制MMP-2和/或MMP-9的物质。

在本发明中有效的MMP抑制剂的一些具体例子是AG-3340、RO32-3555、RS 13-0830，以及下列化合物：

3-[[4-(4-氟-苯氧基)-苯磺酰基]-(1-羟基氨基甲酰基-环戊基)-氨基]-丙酸；

3-外-3-[4-(4-氟-苯氧基)-苯磺酰氨基]-8-氧杂-二环[3.2.1]辛烷-3-羧酸羟基酰胺；

(2R，3R)1-[4-(2-氯-4-氟-苄氧基)-苯磺酰基]-3-羟基-3-甲基-哌啶-2-羧酸羟基酰胺；

4-[4-(4-氟-苯氧基)-苯磺酰氨基]-四氢-吡喃-4-羧酸羟基酰胺；

3-[[4-(4-氟-苯氧基)-苯磺酰基]-(1-羟基氨基甲酰基-环丁基)-氨基]-丙酸；

4-[4-(4-氯-苯氧基)-苯磺酰氨基]-四氢-吡喃-4-羧酸羟基酰胺；

(R)3-[4-(4-氯-苯氧基)-苯磺酰氨基]-四氢-吡喃-3-羧酸羟基酰胺；

(2R，3R)1-[4-(4-氟-2-甲基-苄氧基)-苯磺酰基]-3-羟基-3-甲基-哌啶-2-羧酸羟基酰胺；

3-[[4-(4-氟-苯氧基)-苯磺酰基]-(1-羟基氨基甲酰基-1-甲基-乙基)-氨基]-丙酸；

3-[[4-(4-氟-苯氧基)-苯磺酰基]-(4-羟基氨基甲酰基-四氢-吡喃-4-基)-氨基]-丙酸；

3-外-3-[4-(4-氯-苯氧基)-苯磺酰氨基]-8-氧杂-二环[3.2.1]辛烷-3-羧酸羟基酰胺；

3-内-3-[4-(4-氟-苯氧基)-苯磺酰氨基]-8-氧杂-二环[3.2.1]辛烷-3-羧酸羟基酰胺；以及

(R)3-[4-(4-氟-苯氧基)-苯磺酰氨基]-四氢-呋喃-3-羧酸羟基酰胺；

以及所述化合物的药物上可接受的盐和溶剂化物。

放射疗法可以根据已知的用于治疗乳腺癌的放射疗法来进行。用于放射疗法的剂量和方案可以由本领域的技术人员轻易地确定，并且是基于疾病的阶段、以及其它本领域已知的因素。

抗体与芳香酶抑制剂的同时给药(组合治疗)包括将含有抗-CTLA4抗体和一种或多种芳香酶抑制剂的药物组合物进行给药，以及将两种或多种单独的药物组合物进行给药，其中一种含有抗-CTLA4抗体而另一种(或几种)含有芳香酶抑制剂。而且，尽管同时给药或组合(联合)治疗通常指将抗体和其它治疗剂彼此同时地给药，还包括将治疗的各个成分同时、相继或分别给药。此外，在抗体静脉给药而芳香酶抑制剂(例如依西美坦)口腔给药时，可以理解其组合优选作为两种单独的药物组合物进行给药。

本发明除了第一和第二成分外，在给予一种或多种这些成分的同时、或之前和/或之后，还包括给予其它治疗剂。该治疗剂包括癌症疫苗、抗血管剂、抗增殖剂和姑息剂以提供支持性护理，例如但不限于，镇痛药、止吐剂、止泻剂和类固醇。优选的止吐剂包括盐酸昂丹司琼(ondansetron)、盐酸格拉司琼(granisetron)、和甲氧普胺(metoclopramide)。优选的止泻剂包括地芬诺酯(diphenoxylate)和阿托品(atropine)(LOMOTIL)、洛哌丁胺(loperamide)(IMMODIUM)、奥曲肽(octreotide)(SADNOSTATIN)、奥沙拉秦(olsalazine)(DIPENTUM)、和美沙拉秦(mesalamine)(ASACOL)。优选的类固醇包括非吸收性的类固醇布***(budesonide)(ENTOCORT)，以及用于***性给药的类固醇***(dexametasone)(DECADRAN)和***(prednisone)(METICORTEN)。

每一种给药方式的持续时间有所变化，从快速给药至连续灌注不一。结果，为了本发明的目的，该组合不排他性地限制于通过将成分物理的联合在一起而获得的那些，还包括允许隔离给药的那些，这种给药可以同时或相隔一段时间进行。根据本发明的组合物优选能够以胃肠道给药的组合物。但是，这些组合物在局部区域治疗的情况下，可经口腔或向腹膜内给药。

如本领域的技术人员所知的那样，选择与抗-CTLA4抗体和芳香酶抑制剂组合物治疗联合使用的治疗剂、以其使用的时间，部分地由待治疗的癌症的类型和阶段来确定。例如，在早期乳腺癌(其中癌还没有扩散至乳腺之外)中，手术和放射之后通常为辅助化疗或辅助激素治疗，其均可与按照本发明的方法的抗-CTLA4抗体-芳香酶抑制剂组合物联合。一般早期乳腺癌的辅助化疗包括环磷酰胺、甲氨喋呤和5-FU(“CMF”)；5-FU、阿霉素、和环磷酰胺(“FAC”)；多西他赛、阿霉素、和环磷酰胺(“TAC”)；阿霉素和环磷酰胺(“AC”)；阿霉素和环磷酰胺，随后是紫杉醇(“AC”和“T”)；以及5-FU、表柔比星、和环磷酰胺(“FEC”)。如本文别处所讨论的那样，它莫昔芬是在该阶段给药的抗激素治疗剂。因此，抗体-芳香酶抑制剂组合物能够联合其它激素疗法(例如，另一种芳香酶抑制剂、它莫昔芬、氟维司群、或其组合)来进行给药，并且该组合物可以联合辅助化学治疗(例如，CMF、FAC、TAC、AC、AC和T、和/或FEC，或者化疗剂可以联合抗体-芳香酶抑制剂组合物单独给药)共同给药。

在其中癌症仅仅向附近组织或***扩散的局部晚期乳腺癌中，患者通常在手术和放射之前给与化疗，其后进行辅助激素治疗。或者，手术/放射之后是辅助化疗，随后是辅助激素治疗。抗-CTLA4抗体-芳香酶抑制剂组合物可以连同化疗或其它激素治疗剂(例如，另外的芳香酶抑制剂、它莫昔芬、氟维司群、或其任意组合)给药，而不论其是用于手术/放射之前还是之后。用于局部晚期乳腺癌的典型化疗条件包括FAC、AC、FEC、和阿霉素加多西他赛(“AT”)。

转移性乳腺癌从其产生的乳腺扩散至身体的其它部分。激素疗法可以任选地优先于化疗。现有的一线激素疗法包括它莫昔芬和阿那曲唑。现有的一线化疗方案包括FAC、TAC、多西他赛加表柔比星、多西他赛、紫杉醇、卡培他滨、长春瑞滨、和曲妥珠单抗(HERCEPTIN)。二线治疗包括单独的多西他赛，或者与卡培他滨联合。本发明的方法适合用于一线疗法和二线疗法。而且，本发明的方法可以联合本领域已知的、或将来要开发的放射疗法和干细胞移植、以及本文所述的任意治疗的任意组合。

在一个实施方式中，与抗体-芳香酶抑制剂治疗剂一起给药的其它治疗剂是烷基化剂。在一个方面，烷基化剂是环磷酰胺。

在另一个实施方式中，其它药剂是叶酸拮抗剂。在一个方面，叶酸拮抗剂选自甲氨蝶呤和培美曲塞。

在本发明的一个实施方式中，其它药剂是嘧啶拮抗物。该嘧啶类似物可选自5-FU、卡培他滨、和吉西他滨。

在本发明的另一个实施方式中，其它药剂是蒽环类抗生素。在一个方面，蒽环类抗生素选自表柔比星和阿霉素。在另一个方面，该蒽环类抗生素是阿霉素。

在本发明的另一个实施方式中，其它药剂是铂化合物。该铂化合物可选自顺铂和卡铂。

在本发明的又一个实施方式中，其它药剂是紫杉烷。在一个方面，紫杉烷是多西他赛。在另一个方面，紫杉烷是紫杉醇。

在本发明的一个实施方式中，抗-CTLA4抗体和芳香酶抑制剂组合物与多西他赛一起给药，进一步联合卡培他滨、顺铂、吉西他滨和表柔比星中的至少一种。

在本发明的一个实施方式中，抗-CTLA4抗体和芳香酶抑制剂组合物进一步与紫杉醇和选自卡铂、顺铂和吉西他滨的其它药剂联合给药。在一个方面，其它药剂是卡铂。

在另一个实施方式中，抗-CTLA4抗体和芳香酶抑制剂组合物联合其它药剂给药，其中所述其它药剂为长春花属生物碱。在一个方面，长春花属生物碱是长春瑞滨。

在本发明的一个实施方式中，联合抗体-芳香酶抑制剂组合物给药的其它药剂是喜树碱类似物。在一个方面，喜树碱类似物是伊立替康。

在另一个实施方式中，其它药剂是EGFR抑制剂。

在本发明的一个实施方式中，其它药剂是erbB2抑制剂。在一个方面，erbB2抑制剂选自曲妥珠单抗和帕妥珠单抗。在又一个方面，erbB2抑制剂是曲妥珠单抗(HERCEPTIN)。

在本发明的一个实施方式中，抗-CTLA4抗体和芳香酶抑制剂组合物进一步联合含有5-FU、阿霉素和环磷酰胺的组合物来给药。

在本发明的一个实施方式中，抗-CTLA4抗体和芳香酶抑制剂组合物进一步联合含有多西他赛、阿霉素和环磷酰胺的组合物来给药。

本发明的方法还涉及经历干细胞移植的哺乳动物(优选人)的癌症的治疗，该方法包括联合芳香酶抑制剂给予哺乳动物一定量的有效治疗癌症的人抗-CTLA4抗体，并进一步联合干细胞移植。干细胞移植可以是同种异体或自体干细胞移植，更优选地，芳香酶抑制剂是依西美坦。在该方法包括干细胞移植的情况下，第一剂量的抗体-芳香酶抑制剂组合物可以在哺乳动物的免疫***从移植康复后，例如在移植后1至12个月的期间内给药。在某些实施方式中，第一剂量在移植后1至3个月、或1至4个月后给药。患者可经历干细胞移植预备治疗。

VI.药物组合物

本发明包括制备和使用如下药物组合物，其包括本发明的人抗-CTLA4抗体作为活性成份，并联合芳香酶抑制剂，优选甾体芳香酶抑制剂，更优选该芳香酶抑制剂是依西美坦。该药物组合物可以由单独的每种活性成分组成，以适合患者给药的形式作为至少一种活性成分(例如，有效剂量的抗-CTLA4、有效剂量的芳香酶抑制剂)的组合，或者该药物组合物含有活性成分和一种或多种药物上可接受的载体、一种或多种附加(活性和/或非活性)成分、或其某些组合。

在一个实施方式中，抗体以水溶液形式经胃肠外(例如，静脉内)给药，而芳香酶抑制剂(例如，依西美坦)以丸剂/胶囊形式口服给药。但是，基于本文公开的内容，技术人员可以理解本发明不限于这些、或任何其它剂型、剂量、给药途径等。相反，本发明包括施用与芳香酶抑制剂结合的抗体的任何剂型或方法，包括但不限于，经过不同的给药途径分别以不同剂型施用每种药物、以及以单一组合物施用抗体和芳香酶抑制剂(例如，以水性组合物给药，尤其是静脉注射)、等等。因此，接下来的讨论描述了不同的剂型，用于实施本发明的方法，包括联合任意芳香酶抑制剂的任意抗-CTLA4抗体的给药，但是本发明不限于这些剂型，而是包括可以被本领域技术人员，一旦具有本文所提供的使用本发明的方法的教导，所轻易确定的任何剂型。

在本发明中采用的抗体可以加入适合给予患者的药物组合物中。典型地，药物组合物包括抗体和药物上可接受的载体。如本文所使用的，“药物上可接受的载体”包括生理上相容的任何和所有溶剂、分散介质、涂层、抗菌剂和抗真菌剂、等渗和吸收延迟剂等。药物上可接受的载体的例子包括一种或多种水、盐水、磷酸盐缓冲盐水、葡萄糖、丙三醇、乙醇等、及其组合。在许多情况下，优选在组合物中包括等渗剂，例如糖、例如甘露醇、山梨醇的多元醇、或氯化钠。药物上可接受的物质例如润湿量或微量的辅助物质，例如润湿剂或乳化剂、防腐剂或缓冲剂，增强抗体或抗体部分的保存期或效力。

抗体可以为多种形式。其包括，例如，液体、半固体和固体剂型，例如液体溶液(例如，注射和滴注溶液)、分散体或悬液、片剂、丸剂、粉末、脂质体和栓剂。优选的形式取决于预期的给药模式和治疗用途。一般优选的组合物是以可注射或滴注溶液的形式，例如类似于那些与其它抗体一起用于人的被动免疫的组合物。优选的给药模式是胃肠外(例如，静脉、皮下、腹膜内、肌内)给药。在优选的实施方式中，抗体通过静脉滴注或注射给药。在另一个优选的实施方式中，抗体通过肌内或皮下注射给药。

治疗组合物一般必须在生产和储存条件下为无菌和稳定的。该组合物可以配制成溶液、微乳、分散体、脂质体、或其它适合高药物浓度的有序结构。无菌注射溶液可通过如下方式制备：根据需要，将需要量的抗体与上述列举的一种成分或成分组合一起加入合适的溶剂中，其后进行过滤灭菌。通常分散体制备如下：将活性化合物加入含有基础分散介质和来自上述列举的所需的其它成分的无菌媒介中。在用于制备无菌注射溶液的无菌粉末的情况下，优选的制备方法是真空干燥和冷冻干燥，产生来自其之前的无菌滤液的活性成分加上任何附加的所需成分的粉末。溶液的合适流动性可通过如下方式来保持：例如，通过使用例如卵磷脂的涂层、通过在分散体的情况下保持所需的颗粒粒径、以及通过使用表面活性剂。注射组合物的长效吸收能够通过在组合物中包括延缓吸收的药物，例如单硬脂酸盐和明胶来实现。

抗体可以通过现有技术公知的各种方法给药，包括但不限于，口服、胃肠外、粘膜、吸入、局部、口颊(buccal)、鼻腔和直肠。在许多治疗用途中，优选的给药路径/模式是皮下、肌内、静脉或滴注。如果需要，可以采用无针注射。如本领域技术人员所理解的那样，给药的路径和/或模式将根据预期的结果而变化。

在某些实施方式中，抗体可以与防止化合物快速释放的载体一起制备，例如控释制剂，包括植入剂、透皮帖剂、和微囊给药***。也可以使用生物可降解的、生物相容的聚合物，例如乙烯醋酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、骨胶原、聚原酸酯和聚乳酸。许多关于该剂型的制备方法具有专利或为本领域的技术人员所公知。参见，例如Sustainedand Controlled Release Drug Delivery Systems，J.R.Robinson，ed.，MarcelDekker，Inc.，New York(1978)。

可以调节剂量方案以提供最佳的预期反应。例如，根据治疗情形的紧急程度的指示，可以给予单一丸剂，可以随时间给予数个分剂量，或者可以按比例减少或增加剂量。为了给药方便和剂量均一性，特别有利的是以剂量单位的形式配制成胃肠外组合物。这里使用的剂量单位形式指适合作为单位剂量用于待治疗的哺乳动物受体的物理离散单元；每个单位含有经过计算的预定量的活性化合物，以与所需的药物载体联合产生预期的治疗效应。本发明的剂量单位形式的规格通过以下条件来规定或者直接取决于以下条件：(a)抗体的唯一特性和所要达到的特殊的治疗或者预防效应，以及(b)在现有技术中配制该活性化合物来治疗个体敏感性的固有限制。

要注意的是，剂量值可根据待缓和的病症的类型和严重性来变化，并且可包括单一或多种剂量。可以进一步理解，对于任何特别的受治疗者，应该根据个体所需和给药或监督该组合物给药的人的专业判断来随着时间调节具体的剂量方案，这里所列的剂量范围只是用于示例，而并非要限制要求保护的组合物的范围或实施。

在一个实施方式中，抗体作为含有5mg/ml、或更优选大约10mg/ml、或进一步优选大约15mg/ml、或甚至更优选大约20mg/ml抗体、以及硬脂酸钠、聚山梨酯80和氯化钠的无菌水溶液(pH范围在大约5至6)，以静脉制剂的方式给药。优选地，静脉制剂是含有5或10mg/ml的抗体、以及20mM硬脂酸钠、0.2mg/ml聚山梨酯80和140mM氯化钠的无菌水溶液(pH为5.5)。而且，含有抗-CTLA4抗体的溶液可以包括许多化合物，尤其是组氨酸、甘露醇、蔗糖、海藻糖、甘氨酸、聚乙二醇、EDTA、蛋氨酸、及其任何组合，以及许多相关领域公知的其它化合物。

在一个实施方式中，部分剂量通过静脉团注给药，剩余的通过抗体制剂的滴注给药。例如，0.01mg/kg抗体静脉注射可以以团注实现，剩余的预定抗体剂量可以通过静脉注射给药。预定剂量的抗体可以在例如，一个半小时至两小时至5小时的期间内给药。

关于芳香酶抑制剂，该抑制剂可以如本领域所公知的那样，以生理上可接受的酯或盐的形式，例如联合生理上可接受的阳离子或阴离子的形式，存在于药物组合物中。

本文所描述的药物组合物的制剂可以通过药学领域内已知或以后将开发的方法来制备。通常，该制备方法包括如下步骤：将活性成分加入载体或一种或多种其它附加成分，随后，如果必须或希望，将产品定型或包装成为希望的单一或多剂量单位。

可以将在本发明的方法中有用的药物组合物以适合口服、直肠、***、肠胃外、局部、肺、鼻内、口颊、眼、或其它给药途径的剂型的形式来制备、包装或销售。其它预料的制剂包括预期的纳米粒、脂质体制剂、含有活性成分的重新密封的红血球、以及免疫类制剂。

本发明的药物组合物可以作为单一单位剂量、或作为多个单一单位剂量制备、包装或销售。如此处所使用的，“单位剂量”是含有预定量的活性成分的药物组合物的离散量。活性成分的量通常相当于要给予受治疗者的活性成分的剂量或该剂量的适宜的部分，例如，该剂量的一半或三分之一。

本发明的药物组合物中的活性成分、药物上可接受的载体和任何附加成分的相对量，根据要治疗的受治疗者的身份、体型和情况而变化，并进一步根据要给药的组合物的途径而变化。作为例子，该组合物可含有介于0.1％和100％(w/w)的活性成分。

除了活性成分之外，本发明的药物组合物可以进一步含有一种或多种其它的药物活性剂。特别预期的添加剂包括止吐剂、止泻剂、化疗剂、细胞因子等。

本发明的药物组合物的控释或缓释制剂可以使用传统技术来制备。

适合口服给药的本发明的药物组合物的制剂可以以离散的固体剂量单位的形式来制备、包装或销售，包括但不限于，片剂、硬或软胶囊、扁囊剂、锭剂或糖锭，每种含有预定量的活性成分。其它适合口服给药的制剂包括但不限于，粉末或颗粒制剂、水或油悬液、水或油溶液、或乳液。

如本文所使用的，“油”液体是包括含碳液体分子，并且显示的极性比水小的物质。

含有活性成分的片剂可以，例如，通过将活性成分以及任选的一种或多种附加成分一起压制或模制而成。压制的片剂可以通过如下方式制备：在适合的设备中，将自由流动形式的活性成分，例如粉末或颗粒制剂，任选地与一种或多种粘合剂、润滑剂、赋形剂、表面活性剂和分散剂混合，进行压制。模制的片剂可以如下制备：在合适的设备中，将活性成分、药物上可接受的载体的混合物，和至少足以润湿混合物的液体，进行模制。

用于制造片剂的药物上可接受的赋形剂包括但不限于，惰性稀释剂、成粒和崩解剂、粘合剂、以及润滑剂。已知的分散剂包括但不限于，马铃薯淀粉和羧甲淀粉钠。已知的表面活性剂包括但不限于月桂基硫酸钠。已知的稀释剂包括但不限于，碳酸钙、碳酸钠、乳糖、微晶纤维素、磷酸钙、磷酸氢钙和磷酸钠。已知的成粒和崩解剂包括但不限于，玉米淀粉和藻酸。已知的粘合剂包括但不限于，明胶、***胶、预胶化玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和羟丙基甲基纤维素。已知的润滑剂包括但不限于，硬脂酸镁、硬脂酸、硅石和滑石。

片剂可以不包衣，或者它们可以使用已知方法包衣，以实现在受治疗者的胃肠道内的延迟崩解，从而提供活性成分的缓释和吸收。作为例子，可以使用例如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯的材料来包覆片剂。作为进一步的例子，可以使用美国专利第4,256,108；4,160,452和4,265,874号所述的方法来包覆片剂，以形成渗透地控制释放的片剂。片剂可进一步含有甜味剂、香味剂、着色剂、防腐剂、或其某些组合，从而提供药物的优质和口感好的制剂。

含有活性成分的硬胶囊可使用生理上可降解的组合物，例如明胶来制成。该硬胶囊含有活性成分，并可进一步含有附加成分，包括例如，惰性固体稀释剂，例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土。

含有活性成分的软明胶胶囊可使用生理上可降解的组合物，例如明胶来制成。该软胶囊含有活性成分，该成分可与水或油介质(例如花生油、液体石蜡或橄榄油)混合。

适合口服给药的本发明的药物组合物的液体制剂，可以以液体形式或在使用之前用水或另外合适的媒介来重组的干品形式来制备、包装和销售。

液体悬液可以使用常规方法来制备，以实现活性成分在水或油媒介中的悬液。水媒介包括，例如，水和等渗盐水。油媒介包括，例如，杏仁油、油酯、乙醇、植物油(例如落花生、橄榄、芝麻或椰子油)、分馏植物油、和矿物油(例如液体石蜡)。液体悬液可进一步包括一种或多种附加成分，包括但不限于，悬浮剂、分散或润湿剂、乳化剂、缓和剂、防腐剂、缓冲剂、盐、香料、着色剂和甜味剂。油悬液可进一步包含增稠剂。已知的悬浮剂包括但不限于，山梨醇糖浆、氢化食用脂肪、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶、***树胶和纤维素衍生物，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素。已知的分散或润湿剂包括但不限于，天然产生的磷脂(例如卵磷脂)，环氧烷与脂肪酸、与长链脂肪醇、与来自脂肪酸和己糖醇的偏酯、或与来自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯(例如分别为硬脂酸聚氧乙烯酯、十七乙烯氧基鲸蜡醇的缩合物(heptadecaethyleneoxycetanol)、聚氧乙烯山梨醇单油酸酯、以及聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯)。已知的乳化剂包括但不限于，卵磷脂和***胶。已知的防腐剂包括但不限于，甲基、乙基、或正丙基对羟基苯甲酸酯、抗坏血酸和山梨酸。已知的甜味剂包括，例如甘油、丙二醇、山梨醇、蔗糖和糖精。已知的用于油悬液的增稠剂包括，例如蜂蜡、固体石蜡和鲸蜡醇。

活性成分在水或油溶剂中的液体溶液，可以按照与液体悬液基本相同的方式制备，主要区别在于活性成分溶解，而非悬浮在溶剂中。本发明的药物组合物的液体溶液含有根据液体悬液所述的每种组分，可以理解，将不需要悬浮剂来辅助活性成分溶解在溶剂中。水溶剂包括，例如，水和等渗盐水。油溶剂包括，例如，杏仁油、油酯、乙醇、植物油(例如落花生、橄榄、芝麻或椰子油)、分馏植物油、以及矿物油(例如液体石蜡)。

本发明的药物制剂的粉末和颗粒剂型，可以使用已知方法制备。该剂型可以直接给药于受治疗者，用于例如形成片剂、填装胶囊、或通过向其中添加水或油媒介来制备水或油悬液或溶液。每一种该制剂可以进一步含有一种或多种分散或润湿剂、悬浮剂和防腐剂。附加的赋形剂，例如填料和甜味剂、香料或着色剂，也可以包括在该制剂中。

本发明的药物组合物还可以以水包油乳液或油包水乳液的形式制备、包装或销售。油相可以是植物油(例如橄榄或落花生油)、矿物油(例如液体石蜡)、或其组合。该组合物可以进一步包括一种或多种乳化剂，例如天然产生的胶(例如***树胶或黄蓍胶)、天然产生的磷脂(例如大豆或卵磷脂)、来自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯(例如失水山梨醇单油酸酯)、以及该偏酯与环氧乙烷的缩合物(例如聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯)。该乳液还可以含有附加成分，包括，例如甜味剂或香料。

本发明的药物组合物可以以适合直肠给药的剂型来制备、包装或销售。该组合物可以为，例如栓剂、保留灌肠制剂、和用于直肠或结肠冲洗的溶液的形式。

栓剂剂型可以通过将活性成分与在普通室温(即大约20℃)为固体而在受治疗者的直肠温度(即，健康人为大约37℃)为液体的无刺激的药物上可接受的赋形剂结合而制备。合适的药物上可接受的赋形剂包括但不限于，可可脂、聚乙二醇和各种甘油酯。栓剂剂型可以进一步包含各种附加的成分，包括但不限于抗氧剂和防腐剂。

保留灌肠制剂或用于直肠或结肠冲洗的溶液，可以通过将活性成分与药物上可接受的液体载体结合而制备。如本领域所公知，灌肠制剂可以使用适合于受治疗者的直肠解剖的传送设备来给药，并且包装在该传送设备中。灌肠制剂可以进一步包括各种附加成分，包括但不限于抗氧剂和防腐剂。

本发明的药物组合物可以以适合***给药的剂型来制备、包装或销售。该组合物可以为例如，栓剂、浸渍有或包覆有***嵌入性材料(例如棉塞)、灌注制剂、或用于***冲洗的凝胶或油膏或溶液的形式。

用化学组合物来进行浸渍或包覆材料的方法在现有技术中已知，包括但不限于，将化学组合物沉积或粘合在表面上的方法、在合成材料(即，例如生理可降解材料)的过程中将化学组合物加入该材料结构中的方法、以及将水或油溶液或悬液吸附至吸收性材料上，随后进行干燥或不进行干燥的方法。

灌注制剂或用于***冲洗的溶液，可以通过将活性成分与药物上可接受的液体载体结合而制备。如本领域所公知的那样，灌注制剂可以使用适合于受治疗者的***解剖的传送设备来给药，或包装在该传送设备中。灌注制剂可以进一步包含各种附加成分，包括但不限于抗氧剂、抗菌剂、抗真菌剂和防腐剂。

如本文所使用的，药物组合物的“胃肠外给药”包括以下任何给药途径，其特征在于：物理地突破受治疗者的组织，并将药物组合物经过组织中的破口给药。因此胃肠外给药包括但不限于，药物组合物通过注射组合物的给药、通过手术切口应用组合物、通过组织穿透的非手术伤口使用组合物等。特别地，预计胃肠外给药包括但不限于，皮下、腹膜内、肌内、膜内注射、以及肾透析灌注技术。

适合胃肠外给药的药物组合物的剂型，包括活性成分与药物上可接受的载体结合，例如无菌水或无菌等渗盐水。该剂型可以以适合团注给药或连续给药的形式来制备、包装或销售。注射剂型以单位剂量形式制备、包装或销售，例如在安瓿中或在含有防腐剂的多剂量容器中。用于胃肠外给药的剂型包括但不限于，悬液、溶液、在油或水媒介中的乳液、糊剂、以及下述可植入的缓释或生物可降解的剂型。该剂型进一步含有一种或多种附加成分，包括但不限于悬浮剂、稳定剂或分散剂。在胃肠外给药的剂型的一个实施方式中，在重组组合物的胃肠外给药之前，活性成分以干躁(即，粉末或颗粒)形式与合适的媒介(例如，无菌无热原水)进行重组。

本发明的组合物可以通过现有技术已知的各种方法进行给药。给药的途径和/或模式取决于预期的结果。活性化合物可以与保护化合物防止快速释放的载体一起制备，例如控释制剂，包括植入剂、透皮帖剂、和微囊给药***。也可以使用生物可降解的、生物相容的聚合物，例如乙烯醋酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、骨胶原、聚原酸酯和聚乳酸。许多关于该剂型的制备方法在，例如Sustained and Controlled ReleaseDrug Delivery Systems，J.R.Robinson，ed.，Marcel Dekker，Inc.，New York(1978)中有所描述。药物组合物优选在GMP条件下生产。

药物组合物可以以无菌注射水或油悬液或溶液的形式制备、包装或销售。该悬液或溶液可以根据已知技术来配制，并且可含有除了活性成分之外的添加成分，例如本文所述的分散剂、润湿剂或悬浮剂。该无菌注射制剂可以使用无毒的胃肠外可接受的稀释剂或溶剂，例如水或1，3-丁二醇来制备。其它可接受的稀释剂和溶剂包括但不限于，林格氏溶液、等渗氯化钠溶液、和例如合成的单-或二-甘油酯的不挥发性油。其它有用的胃肠外给药的剂型包括如下剂型：含有活性成分的微晶形式、脂质体制剂、或作为生物可降解聚合物***的成分。用于缓释或植入的组合物可以含有药物上可接受的聚合性或疏水性物质，例如乳液、离子交换树脂、微溶聚合物、或微溶盐。

适合局部给药的剂型包括但不限于，液体或半液体制剂，例如搽剂、洗剂、水包油或油包水乳液，例如乳膏、软膏或贴剂、以及溶液或悬液。局部给药的剂型可以，例如含有大约1％至大约10％(w/w)的活性成分，尽管活性成分的浓度可以与活性成分在溶剂中的溶解度极限一样高。局部给药的剂型可以进一步含有一种或多种本文所述的附加成分。

本发明的药物组合物可以以适合经由口颊腔的肺部给药的剂型制备、包装或销售。该剂型可以含有干躁颗粒，该颗粒包括活性成分并且直径在大约0.5至大约7纳米、优选大约1至大约6纳米的范围内。该组合物以干粉形式，使用如下装置来方便地给药：包括干粉容器的装置，可将喷射剂流导于所述干粉容器以分散粉末；自喷射溶剂/粉末分散容器，例如包括活性成分的装置，所述活性成分在密封容器中溶解或悬浮于低沸点喷射剂中。优选地，该粉末含有颗粒，其中至少98重量％的颗粒的直径大于0.5纳米，至少95数量％的颗粒的直径小于7纳米。更优选地，至少95重量％的颗粒的直径大于1纳米，至少90数量％的颗粒的直径小于6纳米。干躁粉末组合物优选包括固体细粉末稀释剂(例如糖)，并且便于配置成单位剂量形式。

低沸点喷射剂通常包括在大气压下沸点低于65的液体喷射剂。通常该喷射剂可构成50-99.9％(w/w)的组合物，而活性成分可构成0.1-20％(w/w)的组合物。喷射剂可进一步含有附加成分，例如液体非离子或固体阴离子表面活性剂或固体稀释剂(优选其粒度与含有活性成分的颗粒的粒度具有相同的级数)。

配制成肺部给药的本发明的药物组合物还可以以溶液或悬液的液滴的形式提供活性成分。该剂型可以作为水或稀释醇溶液或悬液的形式制备、包装或销售，任选为无菌的，且含有活性成分，并且可以使用任何喷雾或雾化装置来方便地给药。该剂型可以进一步含有一种或多种附加成分，包括但不限于，例如糖精钠的香味剂、挥发油、缓冲剂、表面活性剂、或例如羟基苯甲酸甲酯(methylhydroxybenzoate)的防腐剂。通过该给药途径提供的液滴优选平均直径在大约0.1至大约200纳米的范围内。

本文所述用于肺部给药的剂型还用于本发明的药物组合物的鼻内给药。

适合鼻内给药的另一种剂型是含有活性成分并且平均粒径为大约0.2至500微米的粗粉。该剂型通过吸的方式给药，即，从在鼻孔附近的粉末容器中经过鼻腔快速吸入。

适合鼻腔给药的剂型可以，例如含有大约最少为0.1％(w/w)且最大为100％(w/w)的活性成分，并且可进一步含于一种或多种本文所述的附加成分。

本发明的药物组合物可以以适合口颊给药的剂型制备、包装或销售。该剂型可以，例如，为片剂或锭剂的形式，使用常规方法制成，并且可以含有例如0.1至20％(w/w)的活性成分，余量包括口服可溶解或可降解的组合物、以及任选的本文所述的一种或多种附加成分。或者，适合口颊给药的剂型可以包括含有活性成分的粉末或喷雾或雾化溶液或悬液。该粉末、喷雾或雾化剂型，在分散后，优选平均粒径或液滴大小在大约0.1至大约200纳米的范围内，并且可进一步包括一种或多种本文所述的附加成分。

本发明的药物组合物可以以适合眼内给药的剂型制备、包装或销售。该剂型可以为，例如，滴眼剂的形式，其包括，例如0.1-1.0％(w/w)的活性成分在水或油液体载体中的溶液或悬液。该滴剂可以进一步含有缓冲剂、盐、或一种或多种本文所述的附加成分。其它有用的眼内给药的剂型包括含有微晶形式或脂质体制剂形式的活性成分的剂型。

如本文所使用的，“附加成分”包括但不限于一种或多种以下物质：赋形剂；表面活性剂；分散剂；惰性稀释剂；粒化剂和崩解剂；粘合剂；润滑剂；甜味剂；香味剂；着色剂；防腐剂；生理可降解组合物，例如明胶；水媒介和溶剂；油媒介和溶剂；悬浮剂；分散或润湿剂；乳化剂；缓和剂；缓冲剂；盐；增稠剂；填料；乳化剂；抗氧剂；抗菌剂；抗真菌剂；稳定剂；以及药物上可接受的聚合或疏水物质。其它可包括在本发明的药物组合物中的“附加成分”在现有技术中为已知的并且有所描述，例如Remington’s Pharmaceutical Sciences，Genaro，ed.，Mack Publishing Co.，Easton，PA(1985)，其在此引入作为参考。

本发明的抗-CTLA4/芳香酶抑制剂活性成分组合物，可以给予动物，优选为人。而给药的每种活性成分的准确剂量根据许多因素而变化，其包括但不限于，动物的类型和要治疗的疾病状态的类型、动物的年龄和给药途径。

抗-CTLA4抗体可以每日频繁地给予动物数次，或者可以不太频繁地给药，例如一天一次、一周一次、每两周一次、一月一次、或更不频繁地，例如每数月一次或甚至一年一次或更少。给药的频率对于本领域技术人员而言很容易确定，并且取决于许多因素，例如但不限于，要治疗的疾病的类型和严重程度、动物的类型和年龄等。

芳香酶抑制剂，优选依西美坦，可以每日频繁地给予动物数次，或者可以不太频繁地给药，例如一天一次、一周一次、每两周一次、一月一次、甚至更不频繁地，例如每数月一次或甚至一年一次或更少。给药的频率对于本领域技术人员而言很容易确定，并且取决于许多因素，例如但不限于，要治疗的疾病的类型和严重程度、动物的类型和年龄等。

抗体和芳香酶可以共同给药，即它们可以在不同日期或同一天的不同时间内分别给药，以及同时或在同一日期给药。因此共同给药包括抗体和芳香酶抑制剂的任意的临时组合给药，使得这两种药物的给药调解对于患者的治疗益处，该益处明显比给予任意一种药物而不给予另一种药物更好。

本发明的抗体-芳香酶抑制剂组合可以与多种其它化合物(尤其是其它抗激素治疗剂、细胞因子、化疗和/或抗病毒药物)共同给药。或者，化合物可以在给与抗体-芳香酶抑制剂组合物之前一小时、一天、一周、一月或甚至更长时间给药，或其任意排列。而且，化合物可以在给予辐射、干细胞移植、或给予任何治疗剂(例如细胞因子、化疗化合物等)之后一小时、一天、一周、一月或甚至更长时间给药，或其任意排列。频率和给药方案对于本领域技术人员而言显而易见，并且取决于许多因素，例如但是不限于，要治疗的疾病的类型和严重程度、动物的年龄和健康状况、要给予的化合物的特性、不同化合物的给药途径等。

VII.药盒

本发明包括各种药盒，其包括治疗有效量的本发明的人抗-CTLA4抗体和治疗有效量的芳香酶抑制剂，连同涂药器和指导性材料，其描述了该组合物用于本发明方法的应用。尽管在下文描述了示例性的药盒，根据本发明公开的内容，其它有用的药盒的内容物对于本领域技术人员是显而易见的。这些药盒中的每一种均包括在本发明内。

本发明包括用于治疗需要乳腺癌治疗的患者乳腺癌的药盒。该药盒包括本发明的人抗-CTLA4抗体和至少一种芳香酶抑制剂。该抑制剂包括但不限于，氟维司群、阿那曲唑、来曲唑和依西美坦。该药盒进一步包括涂药器，包括但不限于注射器，用于将药盒的成分给予患者。而且，该药盒含有指导性材料，其列出有关信息，提供用于治疗患者乳腺癌的药盒的用法。

更优选地，该药盒包括至少一种抗-CTLA4抗体，选自具有抗体4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、12.9.1.1和10D1(MDX-010)的重链和轻链氨基酸序列的抗体，进一步优选该抗体是具有抗体4.13.1、11.2.1和10D1(MDX-010)的重链和轻链氨基酸序列的抗体。

在一个实施方式中，芳香酶抑制剂是至少一种选自阿那曲唑、来曲唑和依西美坦的抑制剂。更优选地，该芳香酶抑制剂是依西美坦。

该药盒可以包括任意数量的附加药物用于治疗乳腺癌。该药物在前文已经列出，并且包括化疗化合物、癌症疫苗、信号传导抑制剂、在治疗异常细胞生长或癌症有用的药物、通过结合IGF-1R来抑制肿瘤生长的抗体或其它配体、以及细胞因子，等等。

本发明还涉及包括治疗癌症有效量(例如，超过10mg/kg，至少15mg/kg，或15mg/kg)的人抗-CTLA4抗体和治疗有效量的芳香酶抑制剂的制品(例如，适合静脉给药的剂型)。在某些实施方式中，制品包括容器或含有人抗-CTLA4抗体、芳香酶抑制剂、以及标签和/或用于治疗癌症的说明的容器。

通过参考以下实验实施例来进一步描述本发明。这些实施例仅仅用于举例说明的目的，不是要用于限制，除非另有说明。因此，本发明决不能被解释为限制于以下实施例，而应被解释为包括从本文所提供的教导而显而易见的任何和所有变化。

                         实施例

抗-CTLA4抗体联合依西美坦治疗绝经后患者的转移性或局部晚期乳腺癌

如此处所述，对患有转移性或局部晚期乳腺癌的患者施用抗-CTLA4抗体的静脉灌注液(100ml/hr)，所述患者至少一个病灶能够在二维上精确测量，且常规CT扫描其尺寸≥2cm×1cm，或者螺旋CT扫描其尺寸≥1cm×1cm。适当地给予预防性的止吐药和止泻药。

28天后重复该治疗。连续的群组接受剂量逐步增加的抗-CTLA4抗体，以3mg/kg开始，分别在每28天之后增加到6mg/kg、10mg/kg和15mg/kg，在没有无法忍受的毒性或者疾病进展的情况下最多连续12个周期。

优选地，患者至少在抗-CTLA4灌注一个半小时前给予抗组胺药(H1)的术前用药。推荐进行术前用药但不是必须的。

所有患者均接受依西美坦，连续的口服25mg/天，每28天一个周期。优选地，每天在同一时间给予依西美坦。

利用剂量加倍方案，每组3-6个患者，用加速滴定设计逐步增加剂量。在每个新的组内，在受治疗者之间无需等待间期。随后的组不用开始，直到以现有剂量水平的第一受治疗者被观察21天，随后的受治疗者被观察14天。

抗体存放在带有橡胶塞子和铝封的10ml的干净的玻璃小瓶内。每个小瓶含有5mg/ml(标准装量为50mg/小瓶)抗-CTLA4抗体的无菌水溶液，所述水溶液含有20mM乙酸钠、0.2mg/ml聚山梨醇酯80、和140mM氯化钠，pH 5.5。

如临床上要求的那样，对于所有患者，在初始剂量前评估ECOG性能状态、生命体征以及体重，用药后可以重复评估生命体征。在第一天进行物理检查(包括眼科评估和自身免疫症状)。获得样本的血液学板(hematology panel)(血细胞比容、RBC计数、WBC计数、分化(differential))、化学性质(碱性磷酸酶、钙、氯、GGT、LDH、镁、磷、无规葡萄糖、钠、尿素、尿酸)、尿分析(血、蛋白)、其它(活化的部分凝血活酶时间[APTT]、凝血酶原时间(PT)、自体抗体板、C反应蛋白、TSH、T3、T4、淀粉酶、脂肪酶、血清C3、C4、血清Ig水平)。

测定人抗-人抗体(HAHA)滴度基线，并在用药前获得药代动力学(PK)样本。

测量接下来的终点：PK参数、HAHA、反应速率和进展时间。进展时间和总的生存率用Kaplan-Meier乘积极限(product limit)法计算。

优选地，抗-CTLA4抗体具有至少一个选自4.1.1、4.13.1、11.2.1和10D1的抗体的重链和轻链氨基酸序列。更优选地，抗体具有11.2.1的重链和轻链氨基酸序列。

给予三位患者3mg/kg的抗-CTLA4抗体(ticilimumab)。所有的三位患者也给予每天25mg的依西美坦。一个患者每28天接受两个剂量的抗-CTLA4，且56天每天接受依西美坦。周期2阶段(Cycle 2staging)CT显示在基线处不存在肺病变。同时，证实患者形成了新的、轻微的周围壁增厚(circumferential wall thickening)，其涉及末端回肠、远段降结肠和乙状结肠的不确定病因，可能是感染或者炎症。患者没有临床病史来解释这些改变，且患者感觉良好并且没有临床症状。没有检测到感染。该患者进行用于病情进展(PD)的折衷研究(off-study)。

第二个患者给予两个周期的抗-CTLA4抗体，以及约14天的的依西美坦治疗剂(每天25mg)。初始的ticilimumab给药之后，报告显示患者右臂某种基线的淋巴水肿有些恶化随后减退。同时，报告显示患者短暂的、轻微的不痒的皮疹。

第三个患者迄今接受了一个周期的ticilimumab和约28天每天25mg的依西美坦。在第28天，常规的实验室研究测得1级(Grade 1)升高的ALP和AST以及2级升高的ALT。患者没有症状。治疗中断，直到这些试验值有所进展。

这些数据表明用ticilimumab和依西美坦的组合物进行治疗的患者显示出生物学活性。

此处所引用的每个专利、专利申请和出版物的内容在此全部引入作为参考。

本发明通过参考具体实施方式而公开，显然本领域的其它技术人员在不脱离本发明的真实意图和范围的条件下，可以设计本发明的其它实施方式和变化。所附的权利要求要被理解为包括所有这些实施方式和等效的变化。

                           序列表

<110>辉瑞产品有限公司

     J.戈麦斯-纳瓦罗

<120>用于治疗乳腺癌的CTLA4抗体和芳香酶抑制剂组合物

<130>PC32619A

<140>PCT/IB2005/003307

<141>2005-10-07

<150>US 60/624,856

<151>2004-11-04

<160>36

<170>PatentIn version 3.3

<210>1

<211>1392

<212>DNA

<213>智人

<400>1

atggagtttg ggctgagctg ggttttcctc gttgctcttt taagaggtgt ccagtgtcag    60

gtgcagctgg tggagtctgg gggaggcgtg gtccagcctg ggaggtccct gagactctcc   120

tgtgtagcgt ctggattcac cttcagtagc catggcatgc actgggtccg ccaggctcca   180

ggcaaggggc tggagtgggt ggcagttata tggtatgatg gaagaaataa atactatgca   240

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caaatgaaca gcctgagagc cgaggacacg gctgtgtatt actgtgcgag aggaggtcac   360

ttcggtcctt ttgactactg gggccaggga accctggtca ccgtctcctc agcctccacc   420

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gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca   540

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gacgtgagcc acgaagaccc cgaggtccag ttcaactggt acgtggacgg cgtggaggtg   900

cataatgcca agacaaagcc acgggaggag cagttcaaca gcacgttccg tgtggtcagc   960

gtcctcaccg ttgtgcacca ggactggctg aacggcaagg agtacaagtg caaggtctcc  1020

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gaaccacagg tgtacaccct gcccccatcc cgggaggaga tgaccaagaa ccaggtcagc  1140

ctgacctgcc tggtcaaagg cttctacccc agcgacatcg ccgtggagtg ggagagcaat  1200

gggcagccgg agaacaacta caagaccaca cctcccatgc tggactccga cggctccttc  1260

ttcctctaca gcaagctcac cgtggacaag agcaggtggc agcaggggaa cgtcttctca  1320

tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac cactacacgc agaagagcct ctccctgtct  1380

ccgggtaaat ga                                                      1392

<210>2

<211>463

<212>PRT

<213>智人

<400>2

Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Leu Leu Arg Gly

1               5                   10                  15

Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln

            20                  25                  30

Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe

        35                  40                  45

Ser Ser His Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu

    50                  55                  60

Glu Trp Val Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Arg Asn Lys Tyr Tyr Ala

65                  70                  75                  80

Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn

                85                  90                  95

Thr Leu Phe Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val

            100                 105                 110

Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Gly His Phe Gly Pro Phe Asp Tyr Trp Gly

        115                 120                 125

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser

    130                 135                 140

Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala

145                 150                 155                 160

Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val

                165                 170                 175

Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala

            180                 185                 190

Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val

        195                 200                 205

Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His

    210                 215                 220

Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys

225                 230                 235                 240

Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val

                245                 250                 255

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

            260                 265                 270

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu

        275                 280                 285

Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

    290                 295                 300

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser

305                 310                 315                 320

Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys

                325                 330                 335

Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile

            340                 345                 350

Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

        355                 360                 365

Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

    370                 375                 380

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn

385                 390                 395                 400

Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser

                405                 410                 415

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

            420                 425                 430

Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

        435                 440                 445

His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

    450                 455                 460

<210>3

<211>167

<212>PRT

<213>智人

<400>3

Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser

1               5                   10                  15

Gly Phe Thr Phe Ser Ser His Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro

            20                  25                  30

Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Arg Asn

        35                  40                  45

Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp

    50                  55                  60

Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu

65                  70                  75                  80

Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Gly His Phe Gly Pro Phe

                85                  90                  95

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr

            100                 105                 110

Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser

        115                 120                 125

Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu

    130                 135                 140

Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His

145                 150                 155                 160

Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

                165

<210>4

<211>10

<212>PRT

<213>智人

<400>4

Gly Phe Thr Phe Ser Ser His Gly Met His

1               5                   10

<210>5

<211>15

<212>PRT

<213>智人

<400>5

Val Ile Trp Tyr Asp Gly Arg Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

1               5                   10                  15

<210>6

<211>9

<212>PRT

<213>智人

<400>6

Gly Gly His Phe Gly Pro Phe Asp Tyr

1               5

<210>7

<211>708

<212>DNA

<213>智人

<400>7

atggaaaccc cagcgcagct tctcttcctc ctgctactct ggctcccaga taccaccgga    60

gaaattgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc   120

ctctcctgca gggccagtca gagtattagc agcagcttct tagcctggta ccagcagaga   180

cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggtgcatcca gcagggccac tggcatccca   240

gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag   300

cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagtatggta cctcaccctg gacgttcggc   360

caagggacca aggtggaaat caaacgaact gtggctgcac catctgtctt catcttcccg   420

ccatctgatg agcagttgaa atctggaact gcctctgttg tgtgcctgct gaataacttc  480

tatcccagag aggccaaagt acagtggaag gtggataacg ccctccaatc gggtaactcc  540

caggagagtg tcacagagca ggacagcaag gacagcacct acagcctcag cagcaccctg  600

acgctgagca aagcagacta cgagaaacac aaagtctacg cctgcgaagt cacccatcag  660

ggcctgagct cgcccgtcac aaagagcttc aacaggggag agtgttag               708

<210>8

<211>235

<212>PRT

<213>智人

<400>8

Met Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Phc Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro

1               5                   10                  15

Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser

            20                  25                  30

Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser

        35                  40                  45

Ile Ser Ser Ser Phe Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ala

    50                  55                  60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro

65                  70                  75                  80

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile

                85                  90                  95

Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr

            100                 105                 110

Gly Thr Ser Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

        115                 120                 125

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

    130                 135                 140

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

145                 150                 155                 160

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

                165                 170                 175

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

            180                 185                 190

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

        195                 200                 205

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

    210                 215                 220

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

225                 230                 235

<210>9

<211>141

<212>PRT

<213>智人

<400>9

Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu

1               5                   10                  15

Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Ser Phe Leu Ala Trp Tyr

            20                  25                  30

Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser

        35                  40                  45

Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly

    50                  55                  60

Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala

65                  70                  75                  80

Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Thr Ser Pro Trp Thr Phe Gly Gln

                85                  90                  95

Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe

            100                 105                 110

Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val

        115                 120                 125

Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

    130                 135                 140

<210>10

<211>12

<212>PRT

<213>智人

<400>10

Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Ser Phe Leu Ala

1               5                   10

<210>11

<211>7

<212>PRT

<213>智人

<400>11

Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr

1               5

<210>12

<211>10

<212>PRT

<213>智人

<400>12

Cys Gln Gln Tyr Gly Thr Ser Pro Trp Thr

1               5                   10

<210>13

<211>1335

<212>DNA

<213>智人

<400>13

caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc     60

tcctgtgcag cgtctggatt caccttcagt agtcatggca tccactgggt ccgccaggct    120

ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatggtatg atggaagaaa taaagactat    180

gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat    240

ttgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggctgtgt attactgtgc gagagtggcc    300

ccactggggc cacttgacta ctggggccag ggaaccctgg tcaccgtctc ctcagcctcc    360

accaagggcc catcggtctt ccccctggcg ccctgctcca ggagcacctc cgagagcaca    420

gcggccctgg gctgcctggt caaggactac ttccccgaac cggtgacggt gtcgtggaac    480

tcaggcgctc tgaccagcgg cgtgcacacc ttcccagctg tcctacagtc ctcaggactc    540

tactccctca gcagcgtggt gaccgtgccc tccagcaact tcggcaccca gacctacacc    600

tgcaacgtag atcacaagcc cagcaacacc aaggtggaca agacagttga gcgcaaatgt    660

tgtgtcgagt gcccaccgtg cccagcacca cctgtggcag gaccgtcagt cttcctcttc    720

cccccaaaac ccaaggacac cctcatgatc tcccggaccc ctgaggtcac gtgcgtggtg    780

gtggacgtga gccacgaaga ccccgaggtc cagttcaact ggtacgtgga cggcgtggag    840

gtgcataatg ccaagacaaa gccacgggag gagcagttca acagcacgtt ccgtgtggtc    900

agcgtcctca ccgttgtgca ccaggactgg ctgaacggca aggagtacaa gtgcaaggtc    960

tccaacaaag gcctcccagc ccccatcgag aaaaccatct ccaaaaccaa agggcagccc   1020

cgagaaccac aggtgtacac cctgccccca tcccgggagg agatgaccaa gaaccaggtc   1080

agcctgacct gcctggtcaa aggcttctac cccagcgaca tcgccgtgga gtgggagagc   1140

aatgggcagc cggagaacaa ctacaagacc acacctccca tgctggactc cgacggctcc   1200

ttcttcctct acagcaagct caccgtggac aagagcaggt ggcagcaggg gaacgtcttc   1260

tcatgctccg tgatgcatga ggctctgcac aaccactaca cgcagaagag cctctccctg   1320

tctccgggta aatga                                                    1335

<210>14

<211>444

<212>PRT

<213>智人

<400>14

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1               5                   10                  15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser His

            20                  25                  30

Gly Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

        35                  40                  45

Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Arg Asn Lys Asp Tyr Ala Asp Ser Val

    50                  55                  60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65                  70                  75                  80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

                85                  90                  95

Ala Arg Val Ala Pro Leu Gly Pro Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

            100                 105                 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

        115                 120                 125

Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly

    130                 135                 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145                 150                 155                 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

                165                 170                 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

            180                 185                 190

Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser

        195                 200                 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys

    210                 215                 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe

225                 230                 235                 240

Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val

                245                 250                 255

Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe

            260                 265                 270

Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro

        275                 280                 285

Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr

    290                 295                 300

Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val

305                 310                 315                 320

Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr

                325                 330                 335

Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg

            340                 345                 350

Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

        355                 360                 365

Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro

    370                 375                 380

Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser

385                 390                 395                 400

Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln

                405                 410                 415

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His

            420                 425                 430

Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

        435                 440

<210>15

<211>153

<212>PRT

<213>智人

<400>15

Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe

1               5                   10                  15

Ser Ser His Gly Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu

            20                  25                  30

Glu Trp Val Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Arg Asn Lys Asp Tyr Ala

        35                  40                  45

Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn

    50                  55                  60

Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val

65                  70                  75                  80

Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Ala Pro Leu Gly Pro Leu Asp Tyr Trp Gly

                85                  90                  95

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser

            100                 105                 110

Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala

        115                 120                 125

Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val

    130                 135                 140

Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

145                 150

<210>16

<211>10

<212>PRT

<213>智人

<400>16

Gly Phe Thr Phe Ser Ser His Gly Ile His

1               5                   10

<210>17

<211>15

<212>PRT

<213>智人

<400>17

Val Ile Trp Tyr Asp Gly Arg Asn Lys Asp Tyr Ala Asp Ser Val

1               5                   10                  15

<210>18

<211>9

<212>PRT

<213>智人

<400>18

Val Ala Pro Leu Gly Pro Leu Asp Tyr

1               5

<210>19

<211>645

<212>DNA

<213>智人

<400>19

gaaattgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc   60

ctctcctgca gggccagtca gagtgtcagc agctacttag cctggtacca gcagaaacct  120

ggccaggctc ccaggctcct catctatggt gcatccagca gggccactgg catcccagac  180

aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag actggagcct  240

gaggattttg cagtgtatta ctgtcaacag tatggtaggt caccattcac tttcggccct  300

gggaccaaag tagatatcaa gcgaactgtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca  360

tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat  420

cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag  480

gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg  540

ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc  600

ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag                  645

<210>20

<211>214

<212>PRT

<213>智人

<400>20

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1               5                   10                  15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr

            20                  25                  30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

        35                  40                  45

Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly

    50                  55                  60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro

65                  70                  75                  80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Arg Ser Pro Phe

                85                  90                  95

Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

            100                 105                 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

        115                 120                 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

    130                 135                 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145                 150                 155                 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

                165                 170                 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

            180                 185                 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

        195                 200                 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

    210

<210>21

<211>146

<212>PRT

<213>智人

<400>21

Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu

1               5                   10                  15

Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln

            20                  25                  30

Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser

        35                  40                  45

Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr

    50                  55                  60

Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val

65                  70                  75                  80

Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Arg Ser Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly

                85                  90                  95

Thr Lys Val Asp Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile

            100                 105                 110

Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val

        115                 120                 125

Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys

    130                 135                 140

Val Asp

145

<210>22

<211>11

<212>PRT

<213>智人

<400>22

Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr Leu Ala

1               5                   10

<210>23

<211>7

<212>PRT

<213>智人

<400>23

Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr

1               5

<210>24

<211>10

<212>PRT

<213>智人

<400>24

Cys Gln Gln Tyr Gly Arg Ser Pro Phe Thr

1               5                   10

<210>25

<211>1413

<212>DNA

<213>智人

<400>25

atggagtttg ggctgagctg ggttttcctc gttgctcttt taagaggtgt ccagtgtcag    60

gtgcagctgg tggagtctgg gggaggcgtg gtccagcctg ggaggtccct gagactctcc   120

tgtgcagcgt ctggattcac cttcagtagc tatggcatgc actgggtccg ccaggctcca   180

ggcaaggggc tggagtgggt ggcagttata tggtatgatg gaagtaataa atactatgca   240

gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtatctg   300

caaatgaaca gcctgagagc cgaggacacg gctgtgtatt actgtgcgag agatccgagg   360

ggagctaccc tttactacta ctactacggt atggacgtct ggggccaagg gaccacggtc   420

accgtctcct cagcctccac caagggccca tcggtcttcc ccctggcgcc ctgctccagg   480

agcacctccg agagcacagc ggccctgggc tgcctggtca aggactactt ccccgaaccg   540

gtgacggtgt cgtggaactc aggcgctctg accagcggcg tgcacacctt cccagctgtc   600

ctacagtcct caggactcta ctccctcagc agcgtggtga ccgtgccctc cagcaacttc   660

ggcacccaga cctacacctg caacgtagat cacaagccca gcaacaccaa ggtggacaag   720

acagttgagc gcaaatgttg tgtcgagtgc ccaccgtgcc cagcaccacc tgtggcagga   780

ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct   840

gaggtcacgt gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ccgaggtcca gttcaactgg   900

tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cacgggagga gcagttcaac   960

agcacgttcc gtgtggtcag cgtcctcacc gttgtgcacc aggactggct gaacggcaag  1020

gagtacaagt gcaaggtctc caacaaaggc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc  1080

aaaaccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggaggag  1140

atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctaccc cagcgacatc  1200

gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac acctcccatg  1260

ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg  1320

cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg  1380

cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa tga                               1413

<210>26

<211>451

<212>PRT

<213>智人

<400>26

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1               5                   10                  15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

            20                  25                  30

Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

        35                  40                  45

Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

    50                  55                  60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65                  70                  75                  80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

                85                  90                  95

Ala Arg Asp Pro Arg Gly Ala Thr Leu Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met

            100                 105                 110

Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr

        115                 120                 125

Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser

    130                 135                 140

Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu

145                 150                 155                 160

Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His

                165                 170                 175

Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser

            180                 185                 190

Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys

        195                 200                 205

Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu

    210                 215                 220

Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala

225                 230                 235                 240

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

                245                 250                 255

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His

            260                 265                 270

Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

        275                 280                 285

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe

    290                 295                 300

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

305                 310                 315                 320

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile

                325                 330                 335

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

            340                 345                 350

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser

        355                 360                 365

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

    370                 375                 380

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

385                 390                 395                 400

Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

                405                 410                 415

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

            420                 425                 430

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

        435                 440                 445

Pro Gly Lys

    450

<210>27

<211>167

<212>PRT

<213>智人

<400>27

Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser

1               5                   10                  15

Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro

            20                  25                  30

Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn

        35                  40                  45

Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp

    50                  55                  60

Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu

65                  70                  75                  80

Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Pro Arg Gly Ala Thr Leu

                85                  90                  95

Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val

            100                 105                 110

Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala

        115                 120                 125

Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu

    130                 135                 140

Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly

145                 150                 155                 160

Ala Leu Thr Ser Gly Val His

                165

<210>28

<211>10

<212>PRT

<213>智人

<400>28

Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His

1               5                   10

<210>29

<211>15

<212>PRT

<213>智人

<400>29

Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

1               5                   10                  15

<210>30

<211>16

<212>PRT

<213>智人

<400>30

Asp Pro Arg Gly Ala Thr Leu Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val

1               5                   10                  15

<210>31

<211>714

<212>DNA

<213>智人

<400>31

atggacatga gggtccccgc tcagctcctg gggctcctgc tactctggct ccgaggtgcc    60

agatgtgaca tccagatgac ccagtctcca tcctccctgt ctgcatctgt aggagacaga   120

gtcaccatca cttgccgggc aagtcagagc attaacagct atttagattg gtatcagcag   180

aaaccaggga aagcccctaa actcctgatc tatgctgcat ccagtttgca aagtggggtc   240

ccatcaaggt tcagtggcag tggatctggg acagatttca ctctcaccat cagcagtctg   300

caacctgaag attttgcaac ttactactgt caacagtatt acagtactcc attcactttc   360

ggccctggga ccaaagtgga aatcaaacga actgtggctg caccatctgt cttcatcttc   420

ccgccatctg atgagcagtt gaaatctgga actgcctctg ttgtgtgcct gctgaataac   480

ttctatccca gagaggccaa agtacagtgg aaggtggata acgccctcca atcgggtaac   540

tcccaggaga gtgtcacaga gcaggacagc aaggacagca cctacagcct cagcagcacc   600

ctgacgctga gcaaagcaga ctacgagaaa cacaaagtct acgcctgcga agtcacccat   660

cagggcctga gctcgcccgt cacaaagagc ttcaacaggg gagagtgtta gtga         714

<210>32

<211>214

<212>PRT

<213>智人

<400>32

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Sar Val Gly

1               5                   10                  15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Tyr

            20                  25                  30

Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

        35                  40                  45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

    50                  55                  60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65                  70                  75                  80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Thr Pro Phe

                85                  90                  95

Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

            100                 105                 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

        115                 120                 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

    130                 135                 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145                 150                 155                 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

                165                 170                 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

            180                 185                 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

        195                 200                 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

    210

<210>33

<211>139

<212>PRT

<213>智人

<400>33

Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys

1               5                   10                  15

Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Tyr Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys

            20                  25                  30

Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln

        35                  40                  45

Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe

    50                  55                  60

Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr

65                  70                  75                  80

Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Thr Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys

                85                  90                  95

Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro

            100                 105                 110

Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu

        115                 120                 125

Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val

    130                 135

<210>34

<211>11

<212>PRT

<213>智人

<400>34

Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Tyr Leu Asp

1               5                   10

<210>35

<211>7

<212>PRT

<213>智人

<400>35

Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser

1               5

<210>36

<211>9

<212>PRT

<213>智人

<400>36

Gln Gln Tyr Tyr Ser Thr Pro Phe Thr

1               5

Claims (20)

1.一种对需要乳腺癌治疗的患者进行乳腺癌治疗的方法，所述方法包括对所述患者施用治疗有效量的抗-CTLA4抗体、或其抗原结合部分，与治疗有效量的芳香酶抑制剂的组合。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述芳香酶抑制剂是至少一种选自阿那曲唑、来曲唑和依西美坦的抑制剂。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述芳香酶抑制剂是依西美坦。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述治疗有效量的人抗-CTLA4抗体的用量范围为约1mg/kg到40mg/kg。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述治疗有效量的人抗-CTLA4抗体的用量范围为约3mg/kg到15mg/kg。

6.根据权利要求3所述的方法，其中所述治疗有效量的依西美坦的用量范围为约25mg/日到200mg/日。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述治疗有效量的依西美坦为约25mg/日。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述治疗选自新辅助疗法、辅助疗法、一线治疗、二线治疗和三线治疗。

9.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗体选自非人哺乳动物抗体、嵌合抗体和人抗体。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述抗体是人抗体。

11.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗-CTLA4抗体或其抗原结合部分是至少一种选自下列物质的抗体：

(a)具有对CTLA4约为10^-8或者更大结合亲合力的人抗体，其抑制CTLA4与B7-1之间的结合，并抑制CTLA4与B7-2之间的结合；

(b)具有包括至少一种人CDR序列的氨基酸序列的人抗体，所述人CDR序列相应于源自选自下列抗体的CDR序列：4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、12.9.1.1和10D1；

(c)具有选自4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1和12.9.1.1的抗体的重链和轻链氨基酸序列的人抗体；

(d)具有选自4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、12.9.1.1和10D1的抗体的重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列的人抗体；

(e)抗体或其抗原结合部分，其与至少一种具有选自4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、12.9.1.1和10D1的抗体的重链和轻链氨基酸序列的抗体竞争结合CTLA4；以及

(f)抗体或其抗原结合部分，其与至少一种具有选自4.1.1、4.8.1、4.10.2、4.13.1、4.14.3、6.1.1、11.2.1、11.6.1、11.7.1、12.3.1.1、12.9.1.1和10D1的抗体的重链和轻链氨基酸序列的抗体交叉竞争结合CTLA4。

12.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗体是具有抗体11.2.1的重链和轻链氨基酸序列的人抗体。

13.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗体包括重链和轻链，其中所述重链的重链可变区和所述轻链的轻链可变区的氨基酸序列选自：

(a)SEQ ID NO：3的氨基酸序列和SEQ ID NO：9的氨基酸序列；

(b)SEQ ID NO：15的氨基酸序列和SEQ ID NO：21的氨基酸序列；

(c)SEQ ID NO：27的氨基酸序列和SEQ ID NO：33的氨基酸序列；

(d)由SEQ ID NO：1的核酸序列编码的氨基酸序列和由SEQ IDNO：7的核酸序列编码的氨基酸序列；

(e)由SEQ ID NO：13的核酸序列编码的氨基酸序列和由SEQ IDNO：19的核酸序列编码的氨基酸序列；

(f)由SEQ ID NO：25的核酸序列编码的氨基酸序列和由SEQ IDNO：31的核酸序列编码的氨基酸序列；

(g)抗体10D1的重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列。

14.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗体或其抗原结合部分是选自如下的抗体：

(a)具有包括SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6中所列的氨基酸序列的重链可变区，并进一步具有包括SEQ ID NO：10、SEQID NO：11和SEQ ID NO：12中所列的氨基酸序列的轻链可变区的抗体；

(b)具有包括SEQ ID NO：16、SEQ ID NO：17和SEQ ID NO：18中所列的氨基酸序列的重链可变区，并进一步具有包括SEQ ID NO：22、SEQ ID NO：23和SEQ ID NO：24中所列的氨基酸序列的轻链可变区的抗体；

(c)具有包括SEQ ID NO：28、SEQ ID NO：29和SEQ ID NO：30中所列的氨基酸序列的重链可变区，并进一步具有包括SEQ ID NO：34、SEQ ID NO：35和SEQ ID NO：36中所列的氨基酸序列的轻链可变区的抗体；以及

(d)具有包括抗体10D1的重链CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列的重链可变区，并进一步具有包括抗体10D1的轻链CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列的轻链可变区的抗体。

15.根据权利要求1所述的方法，所述方法进一步包括给予所述患者至少一种选自如下的药物：烷基化剂、叶酸拮抗剂、嘧啶拮抗剂、蒽环类抗生素、铂化合物、紫杉烷、长春花属生物碱、喜树碱类似物、toll样受体激动剂、热休克蛋白类肿瘤疫苗、抗原递呈细胞类治疗剂、雷帕霉素抑制剂的哺乳动物靶、erbB2抑制剂、EGFR抑制剂、VEGF抑制剂、VEGFR抑制剂、血管生产抑制剂、抗体、免疫调节剂、选择性***受体调节剂、细胞因子、肿瘤疫苗、抗增殖剂、免疫共刺激分子和细胞因子。

16.一种用于治疗乳腺癌的药物组合物，包括：

治疗有效量的抗-CTLA4抗体；

治疗有效量的芳香酶抑制剂；和

药物上可接受的载体。

17.根据权利要求16所述的药物组合物，其中所述芳香酶抑制剂是至少一种选自阿那曲唑、来曲唑和依西美坦的芳香酶抑制剂。

18.根据权利要求17所述的药物组合物，其中所述芳香酶抑制剂是依西美坦。

19.一定量的抗-CTLA4抗体在制备用于治疗患者乳腺癌的组合物中的应用，其中所述治疗进一步包括给予所述患者一定量的芳香酶抑制剂。

20.根据权利要求19所述的应用，其中所述芳香酶抑制剂是依西美坦，并且进一步地，其中所述抗体是具有抗体11.2.1的重链和轻链可变区的氨基酸序列的人抗体。

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