KR20070067702A - 유방암을 치료하기 위한 ｃｔｌａ-4 항체와 아로마타제억제제 병용 요법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 유방암을 치료하기 위해, 항-CTLA4 항체, 특히 인간 CTLA4에 대한 인간 항체, 예를 들어 항체 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1, 및 10D1 (MDX-010)의 아미노산 서열을 갖는 항체를, 아로마타제 억제제와 병용해서 투여하는 것에 관한 것이다. 보다 특히, 본 발명은 유방암을 치료하기 위해 항-CTLA4 항체와 엑세메스탄 (exemestane)을 투여하는 것에 관한 것이다.

Description

유방암을 치료하기 위한 ＣＴＬＡ-4 항체와 아로마타제 억제제 병용 요법 {CTLA-4 Antibody and aromatase inhibitor or combination treatment for breast cancer}

미국에서는 매년 180,000명 이상의 여성들이 유방암에 걸린 것으로 진단되고 있다. 이러한 유방암 진단과 관련한 현 추세가 지속된다면, 새로 태어나는 여아가 평균 약 60세 내지 65세에 유방암에 걸릴 확률은 1/10 정도가 된다.

폐경 후 유방암 환자의 대략 2/3 정도에게는 에스트로겐-의존성 질병이 있기 때문에, 이들 환자에게 항에스트로겐 요법을 받게할 수 있다. 에스트로겐은 특이적 표적 세포, 예를 들어 유방 상피 및 에스트로겐-의존성 유방 암종 세포의 성장과 증식을 증진시킨다 [참고: Brueggemeier Amer J Therapeutics 8:333-344 (2001)]. 따라서, 국소성 유방암에 대한 일차 치료 (예를 들어, 유방 보존 수술 및 방사선 또는 유방절제술) 이외에 투여되는 전신성 보조 치료 요법은 종양 세포 상의 에스트로겐 수용체를 차단시키는 작용제에 촛점을 맞추어 왔다 이러한 항호르몬제에는 에스트로겐과 에스트로겐 수용체와의 결합을 억제시키는 타목시펜 (tamoxifen) (NOVALDEX D, SOLTAMOX, TAMOFEN); 상기 수용체를 분해시키는 풀베스트란트 (fulvestrant) (FASLODEX) 뿐만 아니라 아로마타제 효소가 촉매하여 안드로겐을 에스트로겐으로 만드는 것을 억제함으로써 상기 수용체와 결합하기 위해 이용 가능한 호르몬 리간드의 양을 감소시키는 아로마타제 억제제 [예: 아나스트로졸 (anastrozole) (ARIMIDEX), 레트로졸 (letrozole) (FEMARA), 및 엑세메스탄 (exemestane) (AROMASIN)]이 포함된다.

호르몬 또는 기타 유방암 요법에 있어서의 진척에도 불구하고, 2004년도에는 40,921명의 여성이 재발성 또는 진행성 유방암으로 인해 사망할 것으로 추정된다 [참고: American Cancer Society, Cancer Statistics (2004)]. 현재에는, 광범위한 질환에 걸린 환자에게 이용 가능한 치유법이 없으며, 치료법은 대부분이 고통완화적이다. 따라서, 신규한 요법, 예를 들어 항호르몬제와 면역요법을 병용하는 것이 유방암 치료에 있어 중요하다. 보다 구체적으로 언급하면, 한 가지 암 면역요법 접근법은 활성화 T 세포 상에 발현된 세포 표면 수용체인 세포독성 T 림프구-관련 항원 4 (CTLA4; CD152)를 표적으로 한다. CTLA4가 그의 천연 리간드인 B7.1 (CD80) 및 B7.2 (CD86)와 결합하면, 음성 조절성 신호가 T 세포에 전달되고, 이러한 음성 신호를 차단시키면, 동물 모델에게서 T 세포 면역 기능과 항종양 활성이 증강된다 [참고: Thompson and Allison Immunity 7:445-450 (1997); McCoy and LeGros lmmunol. & Cell Biol. 77:1-10 (1999)]. 몇 가지 연구 결과, 항체를 이용한 CTLA4 차단이 T 세포 매개된 종양 사멸을 현저하게 증강시키고 항종양 면역을 유도시킬 수 있는 것으로 입증되었다 [참고: Leach et al., Science 271:1734-1736 (1996); Kwon et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94:8099-8103 (1997); Kwon et al., Natl. Acad. Sci. USA 96:15074-15079 (1999)].

항종양 반응을 유도하기 위해 항-CTLA4 항체를 사용하는 것이 암을 치료하는데 있어 큰 기대를 갖게 하긴 하지만, 그리고 유방암을 치료하는데 있어서 항호르몬 요법이 유망함에도 불구하고, 유방암을 치료하기 위한 신규한 요법을 개발할 필요가 있다. 본 발명은 이러한 필요성을 충족시켜 준다.

발명의 요약

본 발명에는 치료가 필요한 환자에게서 유방암을 치료하는 방법이 포함된다. 이러한 방법은 치료상 유효량의 항-CTLA4 항체, 또는 그의 항원-결합성 부분을, 치료상 유효량의 아로마타제 억제제와 병용해서 환자에게 투여하는 것을 포함한다.

한 국면에서는, 아로마타제 억제제가 아나스트로졸, 레트로졸 및 엑세메스탄으로 이루어진 군 중에서 선택된 하나 이상의 억제제이다. 또 다른 국면에서는, 아로마타제 억제제가 엑세메스탄이다.

한 국면에서는, 인간 항-CTLA4 항체의 치료상 유효량 범위가 약 1 mg/kg 내지 40 mg/kg이다.

추가의 국면에서는, 인간 항-CTLA4 항체의 치료상 유효량 범위가 약 3 mg/kg 내지 15 mg/kg이다.

또 다른 국면에서는, 엑세메스탄의 치료상 유효량 범위가 1일 약 25 mg 내지 1일 200 mg이다.

추가의 국면에서는, 엑세메스탄의 치료상 유효량이 1일 약 25 mg이다.

한 국면에서는, 치료가 신생보조 요법, 보조 요법, 1차 치료, 2차 치료 및 3차 치료로 이루어진 군 중에서 선택된다.

또 다른 국면에서는, 항체가 비-인간 포유류 항체, 키메라 항체, 및 인간 항체로 이루어진 군 중에서 선택된다.

한 국면에서는 항체가 인간 항-CTLA4 항체이다.

또 다른 국면에서는, 항-CTLA4 항체, 또는 그의 항원-결합성 부분이 다음으로 이루어진 군 중에서 선택된 하나 이상의 항체이다:

(a) CTLA4에 대한 결합 친화도가 약 10^-8 이상이고, CTLA4와 B7-1과의 결합을 억제하며 CTLA4와 B7-2와의 결합을 억제하는 인간 항체;

(b) 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1., 12.3.1.1, 12.9.1.1, 및 10D1로 이루어진 군 중에서 선택된 항체로부터의 CDR 서열에 상응하는 하나 이상의 인간 CDR 서열을 포함하는 아미노산 서열을 갖는 인간 항체;

(c) 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1., 12.3.1.1, 및 12.9.1.1로 이루어진 군 중에서 선택된 항체의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 갖는 인간 항체;

(d) 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1., 12.3.1.1, 12.9.1.1, 및 10D1로 이루어진 군 중에서 선택된 항체의 중쇄 가변 영역과 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열을 갖는 인간 항체;

(e) CTLA4와의 결합을 놓고 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1., 12.3.1.1, 12.9.1.1, 및 10D1로 이루어진 군 중에서 선택된 항체의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 항체와 경쟁하는 항체, 또는 그의 항원-결합성 부분; 및

(f) CTLA4와의 결합을 놓고 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1., 12.3.1.1, 12.9.1.1, 및 10D1로 이루어진 군 중에서 선택된 항체의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 항체와 교차-경쟁하는 항체, 또는 그의 항원-결합성 부분.

또 다른 국면에서는, 항체가 항체 11.2.1의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 갖는 인간 항체이다.

또 다른 국면에서는, 항체가 중쇄의 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열과, 경쇄의 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이 다음으로 이루어진 군 중에서 선택되는 중쇄와 경쇄를 포함한다:

(a) 서열 3의 아미노산 서열과 서열 9의 아미노산 서열;

(b) 서열 15의 아미노산 서열과 서열 21의 아미노산 서열;

(c) 서열 27의 아미노산 서열과 서열 33의 아미노산 서열;

(d) 서열 1의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열과, 서열 7의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열;

(e) 서열 13의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열과, 서열 19의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열;

(f) 서열 25의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열과, 서열 31의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열;

(g) 항체 10D1의 중쇄 가변 영역과 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열.

한 국면에서는, 항체, 또는 그의 항원-결합성 부분이 다음으로 이루어진 군 중에서 선택된 항체이다:

(a) 서열 4, 서열 5 및 서열 6에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역을 갖고, 서열 10, 서열 11 및 서열 12에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 추가로 갖는 항체;

(b) 서열 16, 서열 17 및 서열 18에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역을 갖고, 서열 22, 서열 23 및 서열 24에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 추가로 갖는 항체;

(c) 서열 28, 서열 29 및 서열 30에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역을 갖고, 서열 34, 서열 35 및 서열 36에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 추가로 갖는 항체;

(d) 항체 10D1의 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역을 갖고, 항체 10D1의 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 추가로 갖는 항체.

또 다른 국면에서, 본 발명의 방법은 환자에게 알킬화제, 엽산염 길항제, 피리미딘 길항제, 안트라사이클린 항생제, 백금 화합물, 탁산, 빈카 알카로이드, 캄프토테신 유사체, 톨 (toll)-유사 수용체 자극제, 열 쇽 단백질에 의거한 종양 백신, 항원 제시 세포에 의거한 요법, 포유류 표적의 라파마이신 억제제, erbB2 억제제, EGFR 억제제, VEGF 억제제, VEGFR 억제제, 혈관형성 억제제, 항체, 면역조정제, 선택적 에스트로겐 수용체 조정제, 사이토킨, 종양 백신, 항증식제, 면역 공-자극성 분자, 및 사이토킨으로 이루어진 군 중에서 선택된 한 가지 이상의 작용제를 투여하는 것을 추가로 포함한다.

본 발명에는 치료상 유효량의 항-CTLA4 항체; 치료상 유효량의 아로마타제 억제제; 및 제약상 허용 가능한 담체를 포함하는, 유방암을 치료하기 위한 제약 조성물이 포함된다.

한 국면에서는, 아로마타제 억제제가 아나스트로졸, 레트로졸 및 엑세메스탄으로 이루어진 군 중에서 선택된 하나 이상의 아로마타제 억제제이다.

추가의 국면에서는, 아로마타제 억제제가 엑세메스탄이다.

본 발명에는 특정 환자에게서 유방암을 치료하기 위한 (이러한 치료는 환자에게 특정 양의 아로마타제 억제제를 투여하는 것을 추가로 포함한다) 조성물을 제조하는데 있어서의, 특정 양의 항-CTLA4 항체의 용도가 포함된다.

한 국면에서는, 아로마타제 억제제가 엑세메스탄이고, 추가로 상기 항체가 항체 11.2.1의 중쇄 및 경쇄 가변 영역 아미노산 서열을 갖는 인간 항체이다.

전술된 발명의 요약 뿐만 아니라 다음에 기재되는 발명의 상세한 설명은 첨부된 도면과 연계할 경우에 보다 잘 이해될 것이다. 본 발명을 예시할 목적으로, 바람직하게 제시되는 다음 도면 양태들이 도시되어 있다. 그러나, 본 발명이 도시된 바와 같은 배열과 수단에 제한되지 않는다는 것을 인지해야 한다.

도 1A 내지 1D를 포함하는 도 1은 항-CTLA4 항체 4.1.1에 대한 뉴클레오티드 및 아미노산 서열을 도시한 것이다. 도 1A는 4.1.1 중쇄에 대한 완전한 길이의 뉴클레오티드 서열 (서열 1)을 도시한 것이다. 도 1B는 4.1.1 중쇄에 대한 완전한 길이의 아미노산 서열 (서열 2), 및 사각 괄호 "［］" 사이에 지정된 4.1.1 중쇄 가변 영역에 대한 아미노산 서열 (서열 3)을 도시한 것이다. 각 4.1.1 중쇄 CDR의 아미노산 서열이 밑줄처져 있다. CDR 서열은 다음과 같다: CDR1: GFTFSSHGMH (서열 4); CDR2: VIWYDGRNKYYADSV (서열 5); 및 CDR3: GGHFGPFDY (서열 6). 도 1C는 4.1.1 경쇄에 대한 뉴클레오티드 서열 (서열 7)을 도시한 것이다. 도 1D는 완전한 길이의 4.1.1 경쇄에 대한 아미노산 서열 (서열 8), 및 사각 괄호 "［］" 사이에 표시된 바와 같은 가변 영역의 아미노산 서열 (서열 9)을 도시한 것이다. 각 CDR의 아미노산 서열은 다음과 같이 나타낸다: CDR1: RASQSISSSFLA (서열 10); CDR2: GASSRAT (서열 11); 및 CDR3: CQQYGTSPWT (서열 12).

도 2A 내지 2D를 포함하는 도 2는 항-CTLA4 항체 4.13.1에 대한 뉴클레오티드 및 아미노산 서열을 도시한 것이다. 도 2A는 4.13.1 중쇄에 대한 완전한 길이의 뉴클레오티드 서열 (서열 13)을 도시한 것이다. 도 2B는 4.13.1 중쇄에 대한 완전한 길이의 아미노산 서열 (서열 14), 및 사각 괄호 "［］" 사이에 지정된 4.13.1 중쇄 가변 영역에 대한 아미노산 서열 (서열 15)을 도시한 것이다. 각 4.13.1 중쇄 CDR의 아미노산 서열이 밑줄처져 있다. CDR 서열은 다음과 같다: CDR1: GFTFSSHGIH (서열 16); CDR2: VIWYDGRNKDYADSV (서열 12); 및 CDR3: VAPLGPLDY (서열 18). 도 2C는 4.13.1 경쇄에 대한 뉴클레오티드 서열 (서열 19)을 도시한 것이다. 도 2D는 완전한 길이의 4.13.1 경쇄에 대한 아미노산 서열 (서열 20), 및 사각 괄호 "［］" 사이에 표시된 바와 같은 가변 영역의 아미노산 서열 (서열 21)을 도시한 것이다. 각 CDR의 아미노산 서열은 다음과 같이 나타낸다: CDR1: RASQSVSSYLA (서열 22); CDR2: GASSRAT (서열 23); 및 CDR3: CQQYGRSPFT (서열 24).

도 3A 내지 3D를 포함하는 도 3은 항-CTLA4 항체 11.2.1에 대한 뉴클레오티드 및 아미노산 서열을 도시한 것이다. 도 3A는 11.2.1 중쇄에 대한 완전한 길이의 뉴클레오티드 서열 (서열 25)을 도시한 것이다. 도 3B는 11.2.1 중쇄에 대한 완전한 길이의 아미노산 서열 (서열 26), 및 사각 괄호 "［］" 사이에 지정된 11.2.1 중쇄 가변 영역에 대한 아미노산 서열 (서열 27)을 도시한 것이다. 각 11.2.1 중쇄 CDR의 아미노산 서열이 밑줄처져 있다. CDR 서열은 다음과 같다: CDR1: GFTFSSYGMH (서열 28); CDR2: VIWYDGSNKYYADSV (서열 29); 및 CDR3: DPRGATLYYYYYGMDV (서열 30). 도 3C는 11.2.1 경쇄에 대한 뉴클레오티드 서열 (서열 31)을 도시한 것이다. 도 3D는 완전한 길이의 11.2.1 경쇄에 대한 아미노산 서열 (서열 32), 및 사각 괄호 "［］" 사이에 표시된 바와 같은 가변 영역의 아미노산 서열 (서열 33)을 도시한 것이다. 각 CDR의 아미노산 서열은 다음과 같이 나타낸다: CDR1: RASQSINSYLD (서열 34); CDR2: AASSLQS (서열 35); 및 CDR3: QQYYSTPFT (서열 36).

본 발명은 치료가 필요한 환자에게서 유방암을 치료하기 위해 하나 이상의 아로마타제 억제제, 예를 들어 아나스트로졸, 레트로졸 및 엑세메스탄과 병용해서 사용되는 항-CTLA4 항체에 관한 것이다. 본 발명은 추가로, 상기 항체-아로마타제 억제제 조합물을 또 다른 작용제(들)와 병용함으로써 유방암을 치료하는 것에 관한 것이다.

본원에서 달리 규정되지 않는 한, 본 발명과 연계해서 사용된 과학 및 기술 용어들은 당업자가 통상적으로 인식하고 있는 의미를 지닐 것이다. 추가로, 문맥상 달리 요구되지 않는 한, 단수 용어는 복수를 포함하고, 복수 용어는 단수를 포함할 것이다. 일반적으로, 본원에 기재된 세포 및 조직 배양, 분자 생물학, 면역학, 미생물학, 유전학, 및 단백질 및 핵산 화학 및 혼성화 기술 분야에 이들과 관련해서 사용된 명칭은 당해 분야에 널리 공지되어 있고 흔히 사용되고 있는 것이다.

본 발명의 방법과 기술은 일반적으로, 당해 분야에 널리 공지되어 있고 달리 언급되지 않는 한 본 명세서 전반에 걸쳐 인용되고 논의된 각종의 일반적이고도 보다 구체적인 참고 문헌에 기재된 바와 같은 방법에 따라서 수행한다. 이러한 참고 문헌에는, 예를 들어 다음이 포함된다 [참고: Sambrook and Russell, Molecular Cloning, A Laboratory Approach, Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, NY (2001), Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, NY (2002), and Harlow and Lane Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY (1990) (이들은 본원에 참고로 도입된다)]. 효소적 반응 및 정제 기술은 당해 분야에서 통상적으로 수행되는 바와 같거나 또는 본원에 기재된 바와 같이, 제조업자의 명세 내용에 따라서 수행한다. 본원에 기재된 분석 화학, 합성 유기 화학, 및 의학적 및 제약 화학 기술 분야의 실험 과정 및 기술에서 이들과 관련해서 사용된 명칭은 당해 분야에 널리 공지되어 있고 흔히 사용되고 있는 것이다. 화학적 합성, 화학적 분석, 제약 제제, 제형화 및 전달, 및 환자 치료에 대한 표준 기술을 사용한다.

본원에 사용된 바와 같은 다음 용어들 각각은 이러한 선택 내에서 그와 연관된 의미를 갖는다.

단수의 "특정 (또는 1개)"이란 표현은 문법상 대상체 하나 이상 (즉, 적어도 하나)를 지칭하기 위해 본원에 사용된다. 예시하자면, 단수의 "특정 요소"는 하나 이상의 요소를 의미한다.

본원에 사용된 바와 같은, 20개의 통상적인 아미노산 및 그들의 약어는 통상적인 활용에 따른다 [참고: Immunology--A Synthesis (2nd Edition, E. S. Golub and D. R. Gren, Eds., Sinauer Associates, Sunderland, Mass. (1991)); 본원에 참고로 도입된다].

"보존적 아미노산 치환"은 특정의 아미노산 잔기가 유사한 화학적 특성 (예: 전화 또는 소수성)을 지닌 측쇄 R 기를 갖는 또 다른 아미노산 잔기에 의해 치환되는 것이다. 일반적으로, 보존적 아미노산 치환은 특정 단백질의 기능적 특성을 실질적으로 변화시키지 않을 것이다. 2개 이상의 아미노산 서열이 보존적 치환에 의해 서로 상이한 경우에는, 보존적 치환 특성을 교정하기 위해 서열 동일률 또는 유사율을 상향 조정할 수 있다. 이와 같이 조정하는 방법은 당업자에게 널리 공지되어 있다 [참고: 예를 들어, Pearson, Methods Mol. Biol. 243:307-31 (1994)].

유사한 화학적 특성을 지닌 측쇄를 갖는 아미노산 군의 예에는 다음이 포함된다: 1) 지방족 측쇄: 글리신, 알라닌, 발린, 루이신 및 이소루이신; 2) 지방족-히드록실 측쇄: 세린 및 트레오닌; 3) 아미드-함유 측쇄: 아스파라긴 및 글루타민; 4) 방향족 측쇄: 페닐알라닌, 티로신 및 트립토판; 5) 염기성 측쇄: 리신, 아르기닌 및 히스티딘; 6) 산성 측쇄: 아스파르트산 및 글루탐산; 및 7) 황-함유 측쇄: 시스테인 및 메티오닌. 바람직한 보존적 아미노산 치환 군은 발린-루이신-이소루이신, 페닐알라닌-티로신, 리신-아르기닌, 알라닌-발린, 글루타메이트-아스파르테이트, 및 아스파라긴-글루타민이다.

또 다른 한편, 보존적 대체는 본원에 참고로 도입된 문헌 [참고: Gonnet et al., Science 256:1443-45 (1992)]에 기재된 PAM250 log-가능도 매트릭스에서 양성 값을 갖는 모든 변화이다. "적당한 수준으로 보존적인" 대체는 PAM250 log-가능도 매트릭스에서 비-음성 값을 갖는 모든 변화이다.

바람직한 아미노산 치환은 (1) 단백질 분해에 대한 감수성을 저하시키고; (2) 산화에 대한 감수성을 저하시키며; (3) 단백질 복합체를 형성하는 것에 대한 결합 친화도를 변경시키며; (4) 해당 유사체의 기타 물리화학적 또는 기능적 특성을 부여하거나 변형시키는 것이다. 치환, 결실 및/또는 삽입을 포함하는 유사체에는 지정된 펩티드 서열 이외의 서열의 각종 돌연변이 단백질이 포함될 수 있다. 예를 들어, 단일 또는 다중 아미노산 치환 (바람직하게는, 보존적 아미노산 치환)은 지정된 서열 [바람직하게는, 분자간 접촉물을 형성하는 도메인(들) 외부, 예를 들어 CDRs 외부의 폴리펩티드 부분 내의 서열]에서 이루어질 수 있다. 보존적 아미노산 치환은 모 서열의 구조적 특징을 실질적으로 변화시키지 않아야 한다 (예를 들어, 대체 아미노산이 모 서열 내에 존재하는 나선을 파괴시키지 않아야 하거나, 또는 모 서열의 특징이 되는 기타 유형의 이차 구조를 붕괴시키지 않아야 한다). 당해 분야에 인식되고 있는 폴리펩티드 이차 및 삼차 구조의 예가 본원에 참고로 도입된 다음 문헌에 기재되어 있다 [참고: Proteins, Structures and Molecular Principles (Creighton, Ed., W. H. Freeman and Company, New York (1984)); Introduction to Protein Structure (C. Branden and J. Tooze, eds., Garland Publishing, New York, N.Y. (1991)); and Thornton et al., Nature 354:105 (1991)].

폴리펩티드에 대한 서열 유사율은 전형적으로, 서열 분석용 소프트웨어를 사용하여 측정한다. 단백질 분석용 소트프웨어는 각종 치환, 결실 및 기타 변형 (보존적 아미노산 치환 포함)에 할당된 유사성 수단을 이용하여 유사한 서열을 매치시킨다. 예를 들어, 위스콘신 패키지 (Wisconsin Package)로서 지칭되기도 하는 제네틱스 컴퓨터 그룹 (GCG; 공급처: Genetics Computer Group, Inc.)은 뉴클레오티드와 단백질 서열에 접근하고, 이를 분석하며 조작하기 위해 130개 이상의 프로그램을 통합한 소프트웨어 패키지이다. GCG는 밀접하게 관계된 폴리펩티드, 예를 들어 상이한 유기체 종으로부터의 상동성 폴리펩티드 간의 서열 유사성, 상동성 및/또는 서열 동일성을 결정하거나, 또는 야생형 단백질과 그의 돌연변이 단백질 간의 서열 유사성, 상동성 및/또는 서열 동일성을 결정하기 위해 디폴트 (default) 파라미터와 함께 사용할 수 있는 "갭 (Gap)" 및 "최량 적합 (Bestfit)" 등의 프로그램을 함유하고 있다 [참고: 예를 들어, GCG 버젼 6.1, 버젼 9.1, 및 버젼 10.0].

폴리펩티드 서열들은 또한, 디폴트 또는 권장 파라미터를 이용하는 FASTA, GCG 버젼 6.1의 프로그램을 사용하여 비교할 수 있다. FASTA (예: FASTA2 및 FASTA3)은 조회 서열과 조사 서열 간에 가장 잘 중복된 영역의 서열 동일률과 정렬을 제공해준다 [참고: Pearson, Methods Enzymol. 183:63-98 (1990); Pearson, Methods Mol. Biol. 132:185-219 (2000)]. 본 발명의 서열을 상이한 유기체로부터의 다수의 서열을 함유하는 데이터베이스와 비교하는 경우에 바람직한 또 다른 알고리즘은 디폴트 파라미터를 이용하는 컴퓨터 프로그램 BLAST, 특히 blastp 또는 tblastn이다 [참고: 예를 들어, 본원에 참고로 도입된 Altschul et al., J. Mol. Biol. 215:403-410 (1990); Altschul et al., Nucleic Acids Res. 25:3389-402 (1997)].

본원에 사용된 바와 같은 용어 "아로마타제"는 안드로겐 기질 (주로 안드로스텐디온)의 A 환을 에스트론으로 방향족화하는 것을 촉매하는 효소 (예: 450_arom)를 지칭한다.

"아로마타제 억제제"는 아로마타제와 접촉하는 경우에, 해당 화합물 또는 물질의 부재 하에서의 방향족화 수준과 비교해서 안드로겐 기질의 A 환의 형성을 탐지 가능한 수준으로 억제시키는 화합물 또는 물질을 의미한다. 아로마타제에 의한 효소적 활성 수준을 평가하기 위한 모든 검정을 이용하여, 억제가 존재하는지를 평가하고/하거나 그의 수준을 평가할 수 있다. 아로마타제 억제제에는 스테로이드계 및 비-스테로이드계 억제제, 예를 들어 엑세메스탄, 아나스트로졸, 레트로졸, 파드로졸, 보로졸, 및 포르메스탄이 포함되지만, 이에 제한되지 않고, 상기 용어는 현재 공지되어 있거나 앞으로 확인 (동정)될 모든 아로마타제 억제제를 포괄한다.

본래의 "항체"는 디설파이드 결합에 의해 상호-연결된 적어도 2개의 중쇄 (H)와 2개의 경쇄 (L)를 포함한다 [참고: 일반적으로, Fundamental Immunology, Ch. 7 (Paul, W., ed., 2nd ed. Raven Press, N.Y. (1989)) (본원에 참고로 도입된다)]. 각 중쇄는 중쇄 가변 영역 (HCVR 또는 V_H)과 중쇄 불변 영역 (C_H)으로 구성된다. 중쇄 불변 영역은 3개의 도메인, 즉 CH1, CH2 및 CH3으로 구성된다. 각 경쇄는 경쇄 가변 영역 (LCVR 또는 V_L)과 경쇄 불변 영역으로 구성된다. 경쇄 불변 영역은 1개의 도메인, 즉 C_L로 구성된다. V_H 및 V_L 영역은 추가로, 골격 영역 (FR)으로 지칭되는 보다 보존된 영역이 산재된, 상보성 결정 영역 (CDR)으로 지칭되는 초가변성 영역으로 세분될 수 있다. 각 V_H 및 V_L은 3개의 CDRs과 4개의 FRs로 구성되는데, 이들은 아미노-말단에서부터 카복실-말단까지 다음 순서로 배열된다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. 아미노산을 각 도메인에 할당하는 것은 다음 문헌의 정의에 따른다 [참고: Kabat, Sequences of Proteins of Immunological Interest (National Institutes of Health, Bethesda, MD (1987 and 1991)), or Chothia & Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987); Chothia et al., Nature 342:878-883 (1989)].

본원에 사용된 바와 같은, 항체의 "항원-결합성 부분" (또는 간단히 "항체 부분")은 항원 (예: CTLA4)과 특이적으로 결합할 수 있는 능력을 보유하고 있는 항체의 하나 이상의 단편을 지칭한다. 항체의 항원-결합성 기능은 완전한 길이 항체의 단편에 의해 수행할 수 있는 것으로 밝혀졌다. 용어 항체의 "항원-결합성 부분" 내에 포괄되는 결합성 단편의 예에는 (i) V_L, V_H, C_L 및 C_H1 도메인으로 이루어진 1가 단편인 Fab 단편; (ii) 힌지 영역에서 디설파이드 브릿지에 의해 연결된 2개의 Fab 단편을 포함하는 2가 단편인 F(ab')₂ 단편; (iii) V_H 및 C_H1 도메인으로 이루어진 Fd 단편; (iv) 항체의 단일 암 (arm)의 V_L 및 V_H 도메인으로 이루어진 Fv 단편; (v) V_H 도메인으로 이루어진 dAb 단편 [참고: Ward et al., (1989) Nature 341:544-546]; 및 (vi) 분리된 상보성 결정 영역 (CDR)이 포함된다. 더우기, Fv 단편의 두 도메인 V_L과 V_H가 별개의 유전자에 의해 암호화되긴 하지만, 재조합 방법을 사용하여, 이들이 단일 단백질 쇄로서 만들어질 수 있도록 해주는 합성 링커에 의해 함께 연결될 수 있는데, 여기서는 V_L 영역과 V_H 영역이 쌍을 형성하여 1가 분자 [단일 쇄 Fv (scFv)로서 공지됨]를 형성한다 [참고: 예를 들어, Bird et al. Science 242:423-426 (1988) and Huston et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883 (1988)]. 이러한 단일 쇄 항체 또한, 용어 항체의 "항원-결합성 부위" 내에 포괄된다. 기타 형태의 단일 쇄 항체, 예를 들어 디아보디 (diabody) 또한 포괄된다. 디아보디는 V_H 및 V_L 도메인이 단일 폴리펩티드 쇄 상에 발현되지만, 동일한 쇄 상에서 두 도메인 간에 쌍을 형성시키기에는 너무 짧은 링커를 사용함으로써, 이들 도메인이 또 다른 쇄의 상보성 도메인과 쌍을 형성하도록 하고 2개의 항원 결합 부위를 창출시키는 2가의 이중-특이적 항체이다 [참고: 예를 들어, Holliger et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448 (1993); Poljak et al. Structure 2:1121-1123 (1994)].

또한 추가로, 항체 또는 그의 항원-결합성 부분은 이러한 항체 또는 항체 부분과 하나 이상의 기타 단백질 또는 펩티드와의 공유적 또는 비공유적 연합에 의해 형성된 보다 큰 면역부착인자 분자의 일부일 수 있다. 이러한 면역부착인자 분자의 예에는 사량체성 scFv 분자를 만들기 위해 스트렙타비딘 코어 영역을 사용하는 것 [참고: Kipriyanov et al. Human Antibodies and Hybridomas 6:93-101 (1995)]과, 2가 및 바이오티닐화 scFv 분자를 만들기 위해 시스테인 잔기, 마커 펩티드 및 C-말단 폴리히스티딘을 사용하는 것이 포함된다 [참고: Kipriyanov et al. Mol. Immunol. 31:1047-1058 (1994)]. 기타 예에는 항체로부터의 하나 이상의 CDRs를, 관심있는 항원 (예: CTLA4)과 특이적으로 결합하는 면역부착인자가 되도록 공유적 또는 비공유적으로 특정 분자 내로 도입시키는 것이 포함된다. 이러한 양태에서는, CDR(s)이 보다 큰 폴리펩티드 쇄의 일부로서 혼입될 수 있거나, 또 다른 폴리펩티드 쇄에 공유적으로 연결될 수 있거나, 또는 비공유적으로 혼입될 수 있다. 항체 부분, 예를 들어 Fab 및 F(ab')₂ 단편은 통상적인 기술, 예를 들어 완전한 항체를 각각 파파인 또는 펩신 분해시킴으로써 완전한 항체로부터 제조할 수 있다. 더우기, 본원에 기재된 바와 같은 표준 재조합 DNA 기술을 사용하여 항체, 항체 부분 및 면역부착인자 분자를 수득할 수 있다.

"항체"가 본 발명과 관련하여 본원에 지칭되는 경우에는, 그의 항원-결합성 부분을 사용할 수도 있다는 것을 인지해야 한다. 항원 결합성 부분은 특이적 결합을 놓고 본래의 항체와 경쟁한다 [참고: Fundamental Immunology, Ch. 7 (Paul, W., ed., 2nd ed. Raven Press, N.Y. (1989) (모든 목적을 위해 그의 전문이 본원에 참고로 도입된다)]. 항원 결합성 부분은 재조합 DNA 기술에 의해 생성시킬 수 있거나, 또는 본래의 항체를 효소적 또는 화학적으로 절단함으로써 생성시킬 수 있다. 몇몇 양태에서, 항원 결합성 부분에는 Fab, Fab', F(ab')₂, Fd, Fv, dAb, 및 폴리펩티드에 대한 특이적 항원 결합성을 부여하기에 충분한 적어도 항체 부분을 함유하는 상보성 결정 영역 (CDR) 단편, 단일 쇄 항체 (scFv), 키메라 항체, 디아보디 및 폴리펩티드가 포함된다. 하나 이상의 결합 부위를 갖는 양태에서는, 이러한 결합 부위가 서로 동일하거나 상이할 수 있다.

본원에서 상호 교환적으로 사용된 바와 같은 용어 "인간 항체" 또는 "인간 서열 항체"에는 인간 생식세포계 면역글로불린 서열로부터 유래된 가변 영역과 불변 영역 (존재하는 경우)을 갖는 항체가 포함된다. 본 발명의 인간 서열 항체에는 인간 생식세포계 면역글로불린 서열에 의해 암호화되지 않은 아미노산 잔기 (예를 들어, 시험관 내에서의 무작위 또는 부위-특이적 돌연변이 유발에 의해, 또는 생체 내에서의 체세포 돌연변이에 의해 도입된 돌연변이물)가 포함될 수 있다. 그러나, 본원에 사용된 바와 같은 용어 "인간 항체"에는 또 다른 포유류 종 (예: 마우스)의 생식세포계로부터 유래된 CDR 서열을 인간 골격 서열 상으로 이식시킨 "키메라" 항체 (즉, "인간화" 또는 PRIMATIZED™ 항체)가 포함되지 않는다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "키메라 항체"는 2가지 이상의 상이한 항체로부터의 영역을 포함하는 항체를 의미한다. 한 양태에서는, CDRs 중의 하나 이상이 인간 항-CTLA4 항체로부터 유래된다. 또 다른 양태에서는, 모든 CDRs이 인간 항-CTLA4 항체로부터 유래된다. 또 다른 양태에서는, 하나 이상의 인간 항-CTLA4 항체로부터의 CDRs을 키메라 인간 항체에서 합한다. 예를 들어, 키메라 항체는 제1 인간 항-CTLA4 항체의 경쇄로부터의 CDR1, 제2 인간 항-CTLA4 항체의 경쇄로부터의 CDR2, 및 제3 인간 항-CTLA4 항체의 경쇄로부터의 CDR3을 포함할 수 있고, 중쇄로부터의 CDRs는 하나 이상의 기타 항-CD40 항체로부터 유래될 수 있다. 추가로, 골격 영역은 동일한 항-CTLA4 항체 중의 하나로부터 유래될 수 있거나, 또는 하나 이상의 상이한 인간(들)로부터 유래될 수 있다.

더우기, 본원에서 앞서 논의된 바와 같이, 키메라 항체에는 한 가지 이상 종의 생식세포계 서열로부터 유래된 부분을 포함하는 항체가 포함된다.

"글리코형 (당형)"은 각종 탄수화물 단위 연쇄를 포함하는 복합 올리고당류 구조를 지칭한다. 이러한 구조는 표준 당생물학 (glycobiology) 명칭에 관한 고찰을 제공해주는 문헌 [참고: 예를 들어, Essentials of Glycobiology Varki et al., eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY (1999)]에 기재되어 있다. 이러한 글리코형에는 G2, G1, GO, G-1, 및 G-2가 포함된다 [참고: 예를 들어, 국제공개공보 WO 99/22764].

"당화 패턴"은 특정 단백질에 공유적으로 부착되는 탄수화물 단위 패턴 (예: 글리코형) 뿐만 아니라 이러한 글리코형이 특정 단백질, 보다 구체적으로는 면역글로불린 단백질의 펩티드 주쇄에 공유적으로 부착되는 부위(들)와 공유적으로 부착되는 탄수화물 단위 패턴으로서 규정된다.

상이한 세포주에 의해 발현되거나 또는 트랜스제닉 (transgenic) 동물에서 발현된 항체는 서로 비교해서 상이한 글리코형 및/또는 당화 패턴을 지닐 것으로 추정된다. 그러나, 본원에 제공된 핵산 분자에 의해 암호화되거나, 또는 본원에 제공된 아미노산 서열을 포함하는 모든 항체는 이러한 항체의 당화에 상관없이 본 발명의 일부이다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "유효량" 또는 "치료상 유효량"은 포유류, 바람직하게는 인간에게 투여된 경우에, 해당 화합물의 부재 하에서 탐지된 반응과 비교해서 탐지 가능한 수준의 치료적 반응을 매개하는 양을 의미한다. 치료적 반응, 예를 들어 종양 성장, 종양 크기, 전이 등의 억제 및/또는 저하는 당해 분야에 인식되고 있는 다수의 방법, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 방법에 의해 용이하게 평가할 수 있다.

당업자는 본원에서 투여된 화합물 또는 조성물의 유효량이 다양하고, 이는 치료하고자 하는 질병 또는 질환, 질병 상태 (병기), 치료받고 있는 포유류의 연령 및 건강 상태 및 신체적 조건, 질병의 중증도, 투여되는 특별한 화합물 등의 수 많은 요인들에 기초하여 용이하게 결정할 수 있다는 것을 이해할 것이다.

항체와 관련하여 본원에 사용된 바와 같은 용어 "경쟁하다"란 제1 항체 또는 그의 항원 결합성 부분이 결합을 놓고 제2 항체 또는 그의 항원 결합성 부분과 경쟁하는데, 여기서는 제1 항체와 그의 동족 에피토프와의 결합성이, 제2 항체의 부재 하에서의 제1 항체의 결합성과 비교해서 제2 항체의 존재 하에서는 탐지 가능한 수준으로 저하된다. 제2 항체와 그의 에피토프와의 결합성이 또한, 제1 항체의 존재 하에서 탐지 가능한 수준으로 저하되는 또 다른 방식 (대안)이 있을 수 있지만, 반드시 그렇치는 않다. 즉, 제1 항체는 제2 항체와 그의 에피토프와의 결합을 억제할 수 있는데, 이에 수반하여 제2 항체가 제1 항체와 그의 각각의 에피토프와의 결합을 억제하지는 않는다. 그러나, 각 항체가 다른 항체와 그의 동족 에피토프 또는 리간드와의 결합을 탐지 가능한 수준으로 억제하는 경우에는 (동일한 수준으로 억제하든지, 보다 큰 수준으로 억제하든지 아니면 보다 낮은 수준으로 억제하든지 간에), 이러한 항체는 그들 각각의 에피토프(들)와의 결합을 놓고 서로 "교차-경쟁"하는 것으로 여겨진다. 예를 들어, 교차-경쟁성 항체는 본 발명에 사용된 항체가 결합하는 에피토프, 또는 에피토프의 일부와 결합할 수 있다. 경쟁성 항체와 교차-경쟁성 항체 둘 다가 본 발명에 포괄된다. 이러한 경쟁 또는 교차-경쟁이 일어나는 기전 (예를 들어, 입체 장애, 입체 형태적 변화, 또는 통상적인 에피토프 또는 그의 일부와의 결합 등)에 상관없이, 당업자는 본원에 제공된 교시에 근거하여, 상기 경쟁성 및/또는 교차-경쟁성 항체가 포괄되고 본원에 기재된 방법에 유용할 수 있다는 것을 인지할 것이다.

용어 "에피토프"에는 면역글로불린 또는 T-세포 수용체와 특이적으로 결합할 수 있는 모든 단백질 결정기가 포함된다. 에피토프성 결정기는 통상적으로, 아미노산 또는 당 측쇄와 같은 분자의 화학적 활성 표면 집단으로 이루어지고, 통상적으로 특이적 전하 특징 뿐만 아니라 특이적 3차원적 구조적 특징을 지니고 있다. 입체 형태적 에피토프와 비-입체 형태적 에피토프는 전자와의 결합이 변성 용매의 존재 하에 상실되는 반면, 후자와의 결합은 그렇치 않다는 점에서 구별된다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "교재 (Instructional material)"에는 본원에 언급된 각종 질병 또는 장애에 영향을 미치거나, 이를 완화시키거나 또는 치료하기 위한 키트 내에 본 발명의 화합물, 조합물 및/또는 조성물의 유용성을 전달하기 위해 사용될 수 있는 공보, 기록물, 다이아그램, 또는 기타 모든 표현 매체가 포함된다. 임의로, 또는 또 다른 한편으론, 교재에는 본원에서 그 밖에 언급된 바와 같은, 특정 세포, 조직 또는 포유류에서 상기 질병 또는 장애를 완화시키기 위한 한 가지 이상의 방법이 기재될 수 있다.

키트의 교재는, 예를 들어 본 발명의 화합물 및/또는 조성물을 함유하는 용기에 고착될 수 있거나, 또는 본 발명의 화합물 및/또는 조성물을 함유하는 용기와 함께 선적될 수 있다. 또 다른 한편, 교재는 수용자가 교재와 본 발명의 화합물을 협력하여 사용할 의도로 용기와는 별도로 선적할 수도 있다.

달리 언급된 경우를 제외하고는, 용어 "환자" 또는 "대상체"는 상호 교환적으로 사용되고, 이는 수의 대상체, 예를 들어 토끼, 랫트 및 마우스, 및 기타 동물 뿐만 아니라 포유류, 예를 들어 인간 환자 및 비-인간 영장류를 지칭한다. 바람직하게, 환자는 사람을 지칭한다.

폴리펩티드 서열을 묘사하기 위한 통상적인 표기가 본원에 사용된다: 폴리펩티드 서열의 좌측 끝이 아미노-말단이고; 폴리펩티드 서열의 우측 끝이 카복실-말단이다.

본원에 사용된 바와 같은 "특이적으로 결합하는"이란, 샘플 중의 특이적 분자를 인식하고 이와 결합하지만, 샘플 중의 기타 분자는 실질적으로 인식 또는 결합하지 않는 화합물, 예를 들어 단백질, 핵산, 항체 등을 의미한다. 예를 들어, 특정 샘플 중의 동족 리간드를 인식하고 이와 결합하지만, 샘플 중의 기타 분자는 실질적으로 인식 또는 결합하지 않는 항체 또는 펩티드 억제제 (예를 들어, 그의 동족 항원 CTLA4와 결합하는 항-CTLA4 항체)가 있다. 따라서, 지정된 검정 조건 하에, 명시된 결합성 부분 (예를 들어, 항체 또는 그의 항원-결합성 부분)은 시험 샘플 중에 존재하는 특별한 표적 서열과는 우선적으로 결합하지만, 이러한 샘플 중에 존재하는 상당 량의 기타 성분들과는 결합하지 않는다. 각종 검정 포맷을 사용하여 관심있는 분자와 특이적으로 결합하는 항체를 선별할 수 있다. 예를 들어, 고체 상 ELISA 면역검정, 면역침전, BIA코어 및 웨스턴 블롯 분석을 사용하여, CTLA4와 특이적으로 반응하는 항체를 확인 (동정)한다. 전형적으로, 특이적 또는 선택적 반응은 2배 이상의 배경 신호 또는 소음, 보다 전형적으로는 10배 이상의 배경 신호 또는 소음일 것이며, 보다 더 구체적으로는 평형 해리 상수 (K_D)가 ≤ 1 μM, 바람직하게 ≤ 100 nM, 가장 바람직하게 ≤ 10 nM인 경우에는 항체가 항원과 "특이적으로 결합하는" 것으로 간주된다.

용어 "K_D"는 특별한 항체-항원 상호 작용의 평형 해리 상수를 지칭한다.

본원에 사용된 바와 같은 "실질적으로 순수한"이란 객체 종이 존재하는 우성 종 (즉, 몰 기준으로 하여, 조성물 중의 기타 어떠한 개개 종 보다 더 풍부하다)이고, 바람직하게 실질적으로 정제된 분획은 객체 종 (예: 항-CTLA4 항체)이 존재하는 모든 거대분자상 종의 약 50% 이상 (몰 기준으로 함)을 차지하는 조성물이다. 일반적으로, 실질적으로 순수한 조성물은 이러한 조성물에 존재하는 모든 거대분자상 종을 약 80% 초과, 보다 바람직하게는 약 85%, 90%, 95%, 및 99% 초과 포함할 것이다. 가장 바람직하게는, 객체 종을 본질적으로 균질하도록 정제하는데 (통상적인 탐지 방법에 의해서는 오염 종이 조성물에서 탐지될 수 없다), 이러한 조성물은 본질적으로 단일 거대분자상 종으로 이루어진다.

본원에 사용된 바와 같은 "치료하는"이란, 환자가 경험하는 질병 증상 (즉, 종양 성장 및/또는 전이, 또는 면역 세포의 수 및/또는 활성 등에 의해 매개된 기타 효과)의 빈도 (횟수)를 저하시키는 것을 의미한다. 이 용어에는 특정 질병의 증상, 합병증 또는 생화학적 지표 (예: PSA 수준 상승)의 발생을 예방하거나 지연시키기 위해 본 발명의 화합물 또는 작용제를 투여하여, 이러한 증상을 완화시키거나 질병, 질환 또는 장애의 추가 발생을 정지 또는 억제시키는 것이 포함된다. 치료는 예방적일 수 있거나 (질병 발생을 예방 또는 지연시키기 위해, 또는 그의 임상적 또는 무증상성 증상의 발현을 예방하기 위함) 또는 질병 발현 후 증상의 치료적 저해 또는 완화일 수 있다.

I. 항체-아로마타제 억제제 병용 요법

본 발명은 인간 CTLA4와 결합하는 항체, 또는 이러한 항체의 항원-결합성 부분을, 유방암을 치료하기 위해 호르몬 요법 (예: 아로마타제 억제제)과 병용해서 투여하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법에 따라서 환자에게 CTLA4 차단을 에스트로겐 수준 저하와 병용하면, 다음에 보다 상세히 논의되는 바와 같은 상승적인 치료 이점이 제공될 수 있다.

본 발명이 수 많은 병용 요법 (여기서는, 항체를 하나 이상의 아로마타제 억제제와 병용해서 환자에게 투여한다)을 포괄하긴 하지만, 본 발명은 단지 예시 목적으로 본원에 제시되는 예시된 작용제로 제한되지 않아야 한다.

한 양태에서는, CTLA4 항체, 또는 그의 항원-결합성 부분과 아로마타제 억제제 ("AI")의 조합물을 유방암 환자에게 투여한다. 한 국면에서는, 아로마타제 억제제가 아나스트로졸, 레트로졸 및 엑세메스탄 (이들은 각각 ARIMIDEX, FEMARA 및 AROMASIN로서 시판되고 있다)로 이루어진 군 중에서 선택된다. 보다 바람직하게는, 아로마타제 억제제가 엑세메스탄이다. 이는 상승적 또는 부가의 효과가 항-CTLA4 항체와 AI를 포함하는 조합물의 투여에 의해 매개되기 때문이다. 본 발명의 특별한 이론에 얽매이는 것은 아니지만, AI 요법은 아마도 세포소멸성 또는 기타 구조적 변화에 의해, 면역계에 대한 유방암 종양 특이적 항원(들)의 노출을 증가시켜 종양 세포에 대한 면역 반응이 증가되도록 할 수 있다. 즉, 호르몬 요법은 종양 세포 사멸에 의해 매개된 종양 특이적 항원의 공급원을 창출시키거나 증가시켜, 결국에는 종양 항원을 숙주 항원 제시 경로 내로 공급할 수 있다. 항-CTLA4 항체는 항원 제시 경로에서 종양 특이적 항원의 수준 증가에 대한 면역 반응 증가를 매개함으로써, 아로마타제 억제제 요법과 병용되는 경우에 잠재적이고도 상승적인 치료 효과를 제공해준다. 종양 특이적 항원의 세포 사멸 방출을 통하여 면역 반응의 항-CTLA4 증강과 상승 작용을 일으킬 수 있는 기타 병용 요법은 특히, 방사선, 수술, 및 화학요법이다.

본 발명의 어떠한 이론에도 얽매이는 것은 아니지만, CTLA4 차단과 아로마타제 억제를 병용하면, 유방암에 대해 예상한 것 보다 더 강건한 면역학적 반응이 유도될 수 있다. 따라서, 특히 엑세메스탄을 이용한 아로마타제 차단을 항-CLTA4 항체와 병용하는 것이 잠재적인 상승적 효과를 제공함으로써, 유방암에 대한 중요한 신규 치료적 처치를 제공해줄 수 있다.

본 발명의 방법은 종양 세포를 감작시키기 위해 또는 환자에게 치료적 이점을 부여하기 위해, 수술, 방사선 요법, 또는 기타 모든 국소성 요법 이전의 신생보조 요법으로서 수행할 수 있다. 그러나, 본 발명은 이러한 신생보조 세팅으로 제한되지 않는다. 오히려, 본 발명의 방법은 질병 전기간과 지속적인 치료 내내 사용할 수 있는데, 예를 들면 유방암에 대한 보조 요법, 1차 요법, 2차 요법, 3차 요법 등으로서 사용할 수 있다.

한 양태에서는, 유방암이 에스트로겐 수용체 양성 (ER+)이기 때문에, 아로마타제 억제는 에스트로겐 수준을 저하시켜 종양에 영향을 미친다. 한 국면에서는, ER+ 종양이 폐경 후 여성 환자에게 존재하기 때문에, 에스트로겐 수준을 저하시키는 것이 이러한 환자에게서 치료적 항-종양 효과를 매개한다. 그러나, AI 요법을 폐경 후 ER+ 환자에게 투여하는 것이 바람직할 수도 있지만, 본 발명은 이러한 환자로만 제한되지 않고, 오히려 당업자가 본원에 제공된 교시로 보강하여 결정한 바와 같이, CTLA4 차단을 통한 면역 증강을 에스트로겐 수준 저하와 조합함으로써 치료적 이점이 유도될 수 있는 모든 환자에게 항-CTLA4 항체-아로마타제 억제제 요법을 투여하는 것을 포함한다.

II. 투여량 섭생

투여량 섭생은 목적하는 최적의 반응을 제공하도록 조정할 수 있다. 예를 들어, 단일 거환을 투여할 수 있거나, 수 회분으로 나누어 일정 시간에 걸쳐 투여할 수 있거나, 또는 치료적 상황의 위급성에 따라 결정되는 바와 같이 용량을 일정 비율로 감소 또는 증가시킬 수 있다. 투여의 용이성과 투여량의 균일성을 위해 비경구 조성물을 투여 단위 형태로 제형화하는 것이 특히 유리하다. 본원에 기재된 바와 같은 투여 단위 형태는 치료받고자 하는 포유류 대상체에 대한 단일 투여량으로서 적합한 물리적으로 별개의 단위를 지칭하는데, 이들 단위 각각은 요구되는 제약 담체와 연합하여 목적하는 치료 효과를 가져다 주는 것으로 계산된 예정 량의 활성 화합물을 함유하고 있다. 본 발명의 투여 단위 형태에 관한 명세서는 (a) 항체의 독특한 특징과, 달성하고자 하는 특별한 치료적 또는 예방적 효과, 및 (b) 개개인에게서 민감증을 치료하기 위해 상기 활성 화합물을 화합하는 분야에 내재된 제한 사항에 직접적으로 좌우되고 이에 영향을 받는다.

본 발명에 따라서 투여된 항체의 치료상 유효량에 대한 비-제한적 예시 범위는 약 1 mg/kg 이상, 약 5 mg/kg 이상, 약 10 mg/kg 이상, 약 10 mg/kg 초과, 또는 약 15 mg/kg 이상, 또는 예를 들어 약 1 내지 30 mg/kg, 또는 예를 들어 약 1 내지 25 mg/kg, 또는 예를 들어 약 1 내지 20 mg/kg, 또는 예를 들어 약 5 내지 20 mg/kg, 또는 예를 들어 약 10 내지 20 mg/kg, 또는 예를 들어 약 15 내지 20 mg/kg, 또는 예를 들어 약 15 mg/kg이다. 투여량 값은 완화시키고자 하는 질환의 유형과 중증도에 따라서 다양할 수 있고, 이에는 단일 용량 또는 수 회분 (다중) 용량이 포함될 수 있다는 것을 인지해야 한다. 특별한 어떠한 대상체에 대해서도, 구체적인 투여량 섭생은 개개인의 필요와, 해당 조성물을 투여하거나 이러한 투여를 관리하는 사람의 전문적인 판단에 따라서 시간이 경과함에 따라 조정해야 하고, 본원에 제시된 투여량 범위는 단지 예시적이며 청구된 조성물의 범위나 실시를 제한하지 않는다는 것을 추가로 인지해야 한다. 항체를 투여하는데 적당한 투여량 및 섭생을 결정하는 것은 관련 분야에 널리 공지되어 있고, 이는 본원에 기재된 교시가 제공된다면 당업자는 잘 이해할 것이다.

한 양태에서는, 항체를 적당한 완충제 시스템 중에서, 약 5 내지 20 mg/ml의 항체를 함유하는 멸균성 수성 용제로서 정맥내 제형으로 투여한다.

한 양태에서는, 저 용량을 투여하기 위해 용량 일부를 정맥내 거환으로써 투여한 다음, 나머지 항체 제형은 주입한다. 예를 들어, 항체 0.01 mg/kg 정맥내 주사제를 거환으로서 제공할 수 있고, 예정된 항체 용량의 나머지는 정맥내 주사함으로써 투여할 수 있다. 또 다른 양태에서는, 저 용량 전체를 단일 거환 주사제로서 투여한다. 보다 고 용량의 경우에는, 항체 3 mg/kg을 거환으로서 투여하지 않지만, 전체 양을 주입 투여한다. 예정된 용량의 항체를, 예를 들어 약 1시간 반 내지 약 5시간에 걸쳐 투여할 수도 있다.

본 발명은 항-CTLA4 항체와 아로마타제 억제제의 조합물을 투여하는 것에 관한 것이다. 당업자는 이러한 조합물을 동시에 투여할 수 있거나, 또는 2가지 작용제를 상이한 시점에 투여할 수 있다는 것을 인지할 것이다. 예를 들어 한 양태에서는, 항체를 단일 주사제 및/또는 주입제로서 투여하고 아로마타제 억제제 (예: 엑세메스탄)를 상기 항체의 투여 전, 투여 동안 또는 투여 후에 시작하여 1일 1회 투여한다. 전형적으로는, 엑세메스탄을 통상적으로 매일 같은 시간에 식사와 함께, 1일 1회 투여한다. 그러나, 본 발명은 아로마타제 억제제에 대한 어떠한 특별한 투여량이나 투여 섭생으로 제한되지 않는다. 오히려, 상기 항체와 아로마타제 억제제를 투여하기 위한 최적의 용량, 경로 및 섭생은 널리 공지된 방법을 사용하여 관련 분야에 통상적인 지식을 가진 업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.

예를 들어, 항체의 단일 용량 또는 수 회분 용량을 투여할 수 있다. 또 다른 한편으론, 1회분 이상, 또는 3회분, 6회분 또는 12회분 이상의 용량을 투여할 수도 있다. 이러한 용량은, 예를 들어 2주 마다, 매월, 20일 마다, 25일 마다, 28일 마다, 30일 마다, 40일 마다, 6주 마다. 50일 마다, 2개월 마다, 70일 마다, 80일 마다, 3개월 마다, 6개월 마다 또는 매년 투여할 수 있다. 또한, 아로마타제 억제제는 매일, 1일 수회 또는 1회, 매주, 격주, 3주 마다, 4주 마다, 매월, 3개월 마다, 6개월 마다, 1년에 1회, 또는 전문의에 의해 결정된 바와 같이 환자에게 치료적 이점을 제공해주는 기타 모든 기간에 걸쳐 투여할 수 있다.

어느 것이 더 짧은 기간이든지 간에 질병이 진행될 때까지, 또는 참을 수 없는 독성이 나타날 때까지, 또는 12 연속 주기까지 항체를 투여할 수 있다. 항체는 또한, 부하 용량을 투여한 다음, 보다 저 용량을 투여하는 것을 포함하는 섭생을 이용하여 투여할 수 있다. 기존에 항-CTLA4 항체와 아로마타제 억제제를 병용해서 투여한 것으로부터 이득을 얻은 바 있지만, 종양이 재발한 환자에게, 상기 항체와 아로마타제 억제제를 1주기 이상, 보다 바람직하게는 수 회 주기로 반복해서 투여할 수 있다.

한 양태에서는, 항-CTLA4 항체를 포함하는 단일 주사제를 28일 마다 약 3 mg/kg의 용량으로 환자에게 정맥내 투여한다. 이러한 항체를 투여하기 전, 투여하는 동안 및/또는 투여 후에 1일 엑세메스탄 대략 25 mg의 용량을 환자에게 투여하기도 한다. 본 발명의 특정 양태에서는, 항-CTLA4 항체를 포함하는 단일 용량을 3개월 마다 약 3 mg/kg의 용량, 바람직하게는 약 6 mg/kg의 용량, 보다 바람직하게는 약 10 mg/kg의 용량, 바람직하게는 약 15 mg/kg의 용량으로 환자에게 정맥내 투여한다. 이러한 항체를 투여하기 전, 투여하는 동안 및/또는 투여 후에 1일 엑세메스탄 대략 25 mg의 용량을 환자에게 투여하기도 한다. 또 다른 양태에서는, 항-CTLA4 항체를 포함하는 거환 주사제를 28일 마다 3 mg/kg 초과 용량 (예를 들어, 6, 10, 15, 20, 25, 30, 35 또는 40 mg/kg)으로 환자에게 정맥내 투여한다. 이 용량은 특히 기타 요인, 독성 (존재하는 경우), 및 치료적 효능에 근거하여 당해 분야에 공지된 바와 같이 조정할 수 있다. 항체를 투여하기 전, 투여하는 동안 및/또는 투여 후에 1일 엑세메스탄 대략 25 mg의 용량을 환자에게 투여하기도 한다.

항체-아로마타제 억제제 조합물은 1차 전신 보조 요법으로서 투여할 수 있거나, 또는 종양 세포를 감작시키기 위해 또는 환자에게 치료적 이점을 부여하기 위해 수술, 방사선 요법, 또는 기타 모든 요법 이전의 신생보조 요법으로서 환자에게 투여할 수 있다.

추가로, 상기 조합물은 타목시펜 1차 요법이 실패한 경우에는 2차 요법으로서 투여할 수도 있다. 또 다른 한편으론, 상기 조합물은 타목시펜 요법과 동시에 투여할 수 있고/있거나 타목시펜 요법 동안의 어느 시점에서도 투여할 수 있는데, 이는 전형적으로 초기 치료 후 대략 5년 동안 투여한다. 또 다른 양태에서는, 항-CTLA4 항체와 엑세메스탄의 조합물을, 타목시펜 또는 기타 보조 요법을 약 2년 또는 3년 수행한 후에 환자에게 투여할 수 있다. 이는 타목시펜 요법을 약 2년 내지 3년 수행한 후에 엑세메스탄 요법을 시작하는 것이 타목시펜 요법의 부작용을 감소시키면서 치료적 이점을 제공하는 것으로 입증되었기 때문이다.

따라서, 항-CTLA4 항체와 아로마타제 억제제 (바람직하게는, 엑세메스탄)의 조합물은 타목시펜 요법이 실패하였고/하였거나, 또 다른 아로마타제 억제제 (예: 아나스트로졸, 레트로졸 등)를 이용한 전신 보조 요법이 실패하였고/하였거나 타목시펜을 약 2년 내지 3년 동안 투여한 후에 치료적 이득을 제공해줄 수 있다. 따라서, 본 발명은 본원에 제공된 기재 내용에 근거하여 당업자에 의해 잘 인지되는 바와 같이 항-CTLA4 항체와 아로마타제 억제제를, 타목시펜, 아나스트로졸, 레트로졸 및 풀베스트란트 등의 부가의 항호르몬 요법과 병용해서 또는 이러한 항호르몬 요법 후에 투여하는 것을 포괄한다.

III. 항-CTLA4 항체

한 양태에서, 본 발명에 사용된 CTLA4 항체는 V_H의 아미노산 서열이 서열 3, 15 및 27에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함한다. 또 다른 양태에서는, CTLA4 항체의 V_L이 서열 9, 21 및 33에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 보다 바람직하게, 상기 항체의 V_H 및 V_L 영역은 서열 3 (V_H 4.1.1)과 서열 9 (V_L 4.1.1) 각각에 제시된 아미노산 서열; 서열 15 (V_H 4.13.1)와 서열 21 (V_L 4.13.1) 각각에 제시된 아미노산 서열; 및 서열 27 (V_H 11.2.1)과 서열 33 (V_L 11.2.1) 각각에 제시된 아미노산 서열을 포함한다. 가장 바람직하게, 항체는 항체 11.2.1의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 갖는 티실리무마브 (ticilimumab) (CP-675,206으로서 공지되기도 함)이다.

또 다른 양태에서는, 중쇄의 아미노산 서열이 서열 1, 13 및 15에 제시된 핵산 서열을 포함하는 핵산에 의해 암호화된 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 양태에서는, 경쇄가 서열 7, 19 및 31에 제시된 핵산 서열을 포함하는 핵산에 의해 암호화된 아미노산 서열을 포함한다. 보다 바람직하게, 중쇄 및 경쇄는 서열 1 (중쇄 4.1.1)과 서열 7 (경쇄 4.1.1) 각각에 제시된 핵산 서열; 서열 13 (중쇄 4.13.1)과 서열 19 (경쇄 4.13.1) 각각에 제시된 핵산 서열; 및 서열 25 (중쇄 11.2.1)와 서열 31 (경쇄 11.2.1) 각각에 제시된 핵산 서열을 포함하는 핵산에 의해 암호화된 아미노산 서열을 포함한다.

더우기, 항체는 V_H 3-30 또는 3-33 유전자로부터 유래된 인간 CDR 아미노산 서열, 또는 이 내부의 보존적 치환물 또는 체세포 돌연변이물을 포함하는 중쇄 아미노산 서열을 포함할 수 있다. V_H 3-30 또는 V_H 3-33 유전자는 항체 분자의 중쇄 가변 영역의 FR1 내지 FR3을 암호화된다는 것을 인지해야 한다. 따라서, 본 발명은 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1, 10D1, 및 DP-50으로 이루어진 군 중에서 선택된 항체의 FR1 내지 FR3 서열과의 동일률이 85% 이상, 보다 바람직하게는 90% 이상, 보다 바람직하게는 91% 이상, 보다 더 바람직하게는 94% 이상, 보다 바람직하게는 95% 이상, 보다 바람직하게는 97% 이상, 보다 더 바람직하게는 98% 이상, 보다 바람직하게는 99% 이상, 가장 바람직하게는 100%인 항체를 포괄한다.

항체는 A27 또는 O12 유전자로부터 유래된 그의 경쇄 내에 CDR 영역을 추가로 포함할 수 있거나, 또는 이는 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1, 10D1로 이루어진 군 중에서 선택된 항체의 CDR 영역을 포함할 수 있다.

본 발명의 기타 양태에서는, 항체가 CTLA4와 B7-1 또는 B7-2의 결합을 억제하거나, 또는 CTLA4와 B7-1 및 B7-2 둘 다의 결합을 억제한다. 바람직하게, 항체는 B7-1과의 결합을 IC₅₀ 약 100 nM 이하, 보다 바람직하게는 약 10 nM 이하, 예를 들어 약 5 nM 이하, 보다 바람직하게는 약 2 nM 이하, 또는 보다 더 바람직하게는 예를 들어 약 1 nM 이하로 억제할 수 있다. 마찬가지로, 항체는 B7-2와의 결합을 IC₅₀ 약 100 nM 이하, 보다 바람직하게는 약 10 nM 이하, 예를 들어 보다 더 바람직하게는 약 5 nM 이하, 보다 바람직하게는 약 2 nM 이하, 또는 보다 더 바람직하게는 약 1 nM 이하로 억제할 수 있다.

추가로 또 다른 양태에서, 항-CTLA4 항체는 CTLA4에 대한 결합 친화도가 약 10^-8 이상, 보다 바람직하게는 약 10^-9 이상, 보다 바람직하게는 약 10^-10 이상, 보다 더 바람직하게는 약 10^-11 이상이다.

항-CTLA4 항체에는 결합을 놓고 4.1.1, 6.1.1, 11.2.1, 4.13.1 및 4.14.3으로 이루어진 군 중에서 선택된 항체의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 갖는 항체와 경쟁하는 항체가 포함된다. 추가로, 항-CTLA4 항체는 결합을 놓고 항체 10D1과 경쟁할 수 있다.

또 다른 양태에서, 상기 항체는 바람직하게, 항체 4.1.1, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1 또는 11.2.1의 중쇄 및 경쇄 서열, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및/또는 중쇄 및 경쇄 CDR 서열을 갖는 항체와 교차-경쟁한다. 예를 들어 상기 항체는, 4.1.1, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1 또는 11.2.1로 이루어진 군 중에서 선택된 항체의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열, 가변 서열 및/또는 CDR 서열을 갖는 항체가 결합하는 에피토프와 결합할 수 있다. 추가의 양태에서는, 항체가 10D1 (MDX-D010)의 중쇄 및 경쇄 서열, 또는 항원-결합성 서열을 갖는 항체와 교차-경쟁한다.

또 다른 양태에서, 본 발명은 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 및 12.9.1.1로 이루어진 군 중에서 선택된 항체의 CDR-1, CDR-2, 및 CDR-3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄와, 상기 항체의 CDR-1, CDR-2, 및 CDR-3의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하거나, 또는 보전적 변화 및 비-보존적 치환들로 이루어진 군 중에서 선택된 CDR 서열로부터의 변화를 지닌 서열을 포함하는 항-CTLA4 항체를 사용하여 실시하는데, 상기 보존적 변화는 비극성 잔기를 기타 비극성 잔기로 대체시키고, 전하를 띤 극성 잔기를 전하를 띠지 않은 기타 극성 잔기로 대체시키며, 전하를 띤 극성 잔기를 전하를 띤 기타 극성 잔기로 대체시키고, 구조적으로 유사한 잔기들을 치환시키는 것으로 이루어진 군 중에서 선택되고; 상기 비-보존적 치환은 전하를 띠지 않은 극성 잔기를 전하를 띤 극성 잔기로 치환시키고, 극성 잔기를 비극성 잔기로 치환시키고, 부가시키며 결실시키는 것으로 이루어진 군 중에서 선택된다.

본 발명의 추가의 양태에서는, 항체가 골격 또는 CDR 영역 내의 생식세포계 서열로부터의 10, 7, 5, 또는 3개 미만 아미노산 변화를 함유하고 있다. 또 다른 양태에서는, 항체가 골격 영역 내에 5개 미만 아미노산 변화를 함유하고 CDR 영역 내에 10개 미만 아미노산 변화를 함유하고 있다. 한 가지 바람직한 양태에서는, 항체가 골격 영역 내에 3개 미만 아미노산 변화를 함유하고 CDR 영역 내에 7개 미만 아미노산 변화를 함유하고 있다. 바람직한 양태에서는, 골격 영역 내의 변화가 보존적이고, CDR 영역 내의 변화는 체세포 돌연변이이다.

또 다른 양태에서는, 상기 항체가 중쇄 및 경쇄 완전한 길이 서열 전반에 걸쳐, 또는 개별적으로 중쇄 또는 경쇄 전반에 걸쳐, 항체 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1, 10D1의 서열과의 서열 (예: 아미노산, 핵산, 또는 둘 다) 동일률 또는 서열 유사율이 80% 이상, 보다 바람직하게는 85% 이상, 보다 더 바람직하게는 90% 이상, 보다 바람직하게는 94% 이상, 바람직하게는 95% 이상, 보다 바람직하게는 99% 이상이다. 보다 더 바람직하게는 상기 항체가 중쇄와 경쇄 전반에 걸쳐, 또는 개별적으로 중쇄 또는 경쇄 서열 전반에 걸쳐, 항체 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1, 10D1 중에서 선택된 항체의 서열과의 서열 동일률 또는 서열 유사율이 100%이다.

또 다른 양태에서는, 상기 항체가 중쇄 및 경쇄 완전한 길이 서열 전반에 걸쳐, 또는 개별적으로 중쇄 또는 경쇄 전반에 걸쳐, 생식세포계 V_κ A27, 생식세포계 V_κ 012, 및 생식세포계 DP50 (이는 VH 3-33 유전자 자리의 대립유전자이다)의 서열과의 서열 동일률 또는 서열 유사율이 80% 이상, 보다 바람직하게는 85% 이상, 보다 더 바람직하게는 90% 이상, 보다 바람직하게는 94% 이상, 보다 바람직하게는 95% 이상, 보다 더 바람직하게는 99% 이상이다. 보다 더 바람직하게는, 상기 항체가 생식세포계 DP50의 중쇄 서열 전반에 걸쳐 및/또는 생식세포계 A27, 또는 생식세포계 O12의 경쇄 서열과의 서열 동일률 또는 서열 유사율이 100%이다.

한 양태에서는, 상기 항체가 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열 전반에 걸쳐, 또는 개별적으로 중쇄 또는 경쇄 가변 영역 서열 전반에 걸쳐, 항체 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1, 10D1의 서열과의 서열 (예: 아미노산, 핵산, 또는 둘 다) 동일률 또는 서열 유사율이 80% 이상, 보다 바람직하게는 85% 이상, 보다 더 바람직하게는 90% 이상, 보다 바람직하게는 94% 이상, 바람직하게는 95% 이상, 보다 바람직하게는 99% 이상이다. 보다 더 바람직하게는 상기 항체가 중쇄와 경쇄 가변 영역 서열 전반에 걸쳐, 또는 개별적으로 중쇄 또는 경쇄 서열 전반에 걸쳐, 항체 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1, 10D1 중에서 선택된 항체의 서열과의 서열 동일률 또는 서열 유사율이 100%이다.

또 다른 양태에서는, 상기 항체가 중쇄 가변 영역 서열 전반에 걸쳐, 생식세포계 DP50 (이는 V_H 3-33 유전자 자리의 대립유전자이다)의 중쇄 가변 서열, 또는 생식세포계 V_κ A27 또는 생식세포계 V_κ O12의 경쇄 가변 서열과의 서열 동일률 또는 서열 유사율이 80% 이상, 보다 바람직하게는 85% 이상, 보다 더 바람직하게는 90% 이상, 보다 바람직하게는 94% 이상, 보다 바람직하게는 95% 이상, 보다 더 바람직하게는 99% 이상이다. 보다 더 바람직하게는, 상기 항체 중쇄 영역 서열이, 생식세포계 DP50의 서열 및/또는 생식세포계 A27, 또는 생식세포계 O12의 경쇄 서열과의 서열 동일률 또는 서열 유사율이 100%이다.

본 발명의 한 양태에서는, 상기 항체가 FR1 내지 FR4로부터의 경쇄 서열 또는 중쇄 서열, 또는 둘 다 전반에 걸쳐, 항체 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1, 10D1의 FR1 내지 FR4 영역 서열과의 서열 동일률 또는 서열 유사율이 80% 이상, 보다 바람직하게는 85% 이상, 보다 더 바람직하게는 90% 이상, 보다 바람직하게는 95% 이상, 보다 바람직하게는 99% 이상이다. 보다 더 바람직하게는, 상기 항체가 FR1 내지 FR4로부터의 경쇄 서열 또는 중쇄 서열, 또는 둘 다 전반에 걸쳐, 항체 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1, 및 10D1과의 서열 동일률 또는 서열 유사율이 100%이다.

본 발명의 또 다른 양태에서는, 상기 항체가 FR1 내지 FR3으로부터의 중쇄 서열 전반에 걸쳐, 생식세포계 DP50의 FR1 내지 FR3 영역 서열과의 서열 동일률 또는 서열 유사율이 80% 이상, 보다 바람직하게는 85% 이상, 보다 더 바람직하게는 90% 이상, 보다 바람직하게는 95% 이상, 보다 바람직하게는 99% 이상, 가장 바람직하게는 약 100%이다.

본 발명의 또 다른 양태에서는, 상기 항체가 FR1 내지 FR4로부터의 경쇄 서열 전반에 걸쳐, 생식세포계 V_κ A27 또는 생식세포계 V_κ 012의 FR1 내지 FR4 영역 서열과의 서열 동일률 또는 서열 유사율이 80% 이상, 보다 바람직하게는 85% 이상, 보다 더 바람직하게는 90% 이상, 보다 바람직하게는 95% 이상, 보다 바람직하게는 99% 이상, 가장 바람직하게는 약 100%이다.

본 발명의 한 양태에서는, 상기 항체가 항체 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1, 10D1의 중쇄 또는 경쇄, 또는 둘 다의 CDR-1, CDR-2 및 CDR-3 서열과의 서열 동일률 또는 서열 유사율이 80% 이상, 보다 바람직하게는 85% 이상, 보다 더 바람직하게는 90% 이상, 보다 바람직하게는 95% 이상, 보다 바람직하게는 99% 이상이다. 보다 더 바람직하게는, 상기 항체가 중쇄 또는 경쇄, 또는 둘 다의 CDR-1, CDR-2 및 CDR-3 서열 전반에 걸쳐, 항체 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1, 및 10D1과의 서열 동일률 또는 서열 유사율이 100%이다.

본 발명의 또 다른 양태에서는, 상기 항체가 중쇄 CDR-1 및 CDR-2 서열 전반에 걸쳐, 생식세포계 DP50의 CDR-1 및 CDR-2 서열과의 서열 동일률 또는 서열 유사율이 80% 이상, 보다 바람직하게는 85% 이상, 보다 더 바람직하게는 90% 이상, 보다 바람직하게는 95% 이상, 보다 바람직하게는 99% 이상, 가장 바람직하게는 약 100%이다.

본 발명의 또 다른 양태에서는, 상기 항체가 경쇄 CDR-1, CDR-2 및 CDR-3 서열 전반에 걸쳐, 생식세포계 V_κ A27 또는 생식세포계 V_κ 012의 CDR-1, CDR-2 및 CDR-3 서열과의 서열 동일률 또는 서열 유사율이 80% 이상, 보다 바람직하게는 85% 이상, 보다 더 바람직하게는 90% 이상, 보다 바람직하게는 95% 이상, 보다 바람직하게는 99% 이상, 가장 바람직하게는 약 100%이다.

본 발명에 이용 가능한 항체, 및 이들의 생성 방법의 예가 특히 미국 특허원 제09/472,087호 (현재 미국 특허 제6,682,736호로 허여됨); 국제특허출원 PCT/USOO/23356 (2001년 3월 1일자로 WO 01/14424로서 공개됨) [예를 들어, MDX-010 (Medarex, Princeton, NJ)로서 공지되기도 한 항체 10D1]; 국제특허출원 PCT/US99/28739 (2000년 6월 8일자로 WO 00/32231로서 공개됨); 미국 특허 제5,811,097호, 제5,855,887호, 제6,051,227호 및 제6,207,156호 (이들 각각이 본원에 참고로 도입된다)에 기재되어 있다. 이들 항체와 관련된 아미노산 및 핵산 서열에 관한 정보가 본원에 제공되긴 하지만, 추가의 정보가 미국 특허 제6,682,736호 뿐만 아니라 WO 00/37504에 언급될 수 있고; 이들 특허에 제시된 서열이 본원에 참고로 도입된다.

각종 암을 치료하기 위한 이들 항체에 대한 특정 용도가 미국 특허원 제10/153,382호 (현재 미국 특허공개공보 제2003/0086930호로 공개됨) (이는 그의 전문이 본원에 참고로 도입된다)에 논의되었다.

본 발명의 방법에 유용한 인간 항-CTLA4 항체의 특징들이, 예를 들어 미국 특허 제6,682,736호에 광범위하게 논의되어 있고, 이에는 항체 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1, 및 10D1 등의 항체의 아미노산 서열을 갖는 항체가 포함된다. 본 발명은 또한, 상기 인용된 특허원 및 특허에 기재된 바와 같은, CDR 영역 상의 변화를 포함하는 항체 뿐만 아니라 상기 항체의 중쇄 및 경쇄의 CDRs의 아미노산 서열을 포함하는 항체를 이용하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 또한, 이들 항체의 중쇄 및 경쇄의 가변 영역을 포함하는 항체에 관한 것이다. 또 다른 양태에서는, 상기 항체가 항체 3.1.1, 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1, 12.3.1.1, 12.9.1.1, 및 10D1의 중쇄 및 경쇄의 완전한 길이, 가변 영역, 또는 CDR 아미노산 서열을 포함하는 항체 중에서 선택된다.

본원에서 앞서 논의된 항-CTLA4 항체가 바람직할 수 있긴 하지만, 당업자는 본원에 제공된 기재 내용을 근거로 하여 본 발명이 광범위한 항-CTLA4 항체를 포괄하고, 이들 특별한 항체들로만 제한되지 않는다는 것을 인지할 것이다. 보다 특히, 인간 항체가 바람직하긴 하지만, 본 발명은 어떠한 방식으로든 인간 항체로만 제한되지 않고; 오히려, 본 발명은 종 기원에 상관없이 유용한 항체를 포괄하는데, 이에는 특히 키메라, 인간화 및/또는 영장류화 항체가 포함된다. 또한, 본원에 예시된 항체를 트랜스제닉 포유류, 예를 들어 인간 면역 레퍼토리를 포함하는 마우스를 사용하여 수득하였지만, 당업자는 본원에 제공된 기재 내용을 근거로 하여 본 발명이 이러한 방법이나 기타 특별한 어떠한 방법에 의해 생성된 항체로 제한되지 않는 다는 것을 이해할 것이다. 대신, 본 발명에는 본 발명의 항-CTLA4 항체를 생성시키는 것으로 당해 분야에 공지된 방법 [예를 들어, 파아지 디스플레이 (phage display) 라이브러리를 스크리닝하는 방법 등], 또는 본 발명의 항-CTLA4 항체를 생성시키기 위해 앞으로 개발되는 방법을 포함하지만, 이에 제한되지 않는 모든 방법에 의해 생성된 항-CTLA4 항체가 포함된다. 본원에 제공되고, 예를 들어 미국 특허 제6,682,736호 (Hanson et al.), 및 미국 특허공개공보 제2002/0088014호에 제공된 광범위한 기재 내용을 근거로 하여, 당업자는 본원에 기재된 신규한 방법을 사용하여 호르몬 치료제와 병용해서 유방암을 치료하는데 유용한 항체를 용이하게 생성 및 확인 (동정)할 수 있다.

본 발명은 미국 특허 제6,682,736호 (Hanson et al.)에 기재된 바와 같은, 트랜스제닉 비-인간 포유류, 즉 제노마우스 (XenoMouse™) (공급처: Abgenix, Inc., Fremont, CA)를 사용하여 생성된 인간 항체를 포괄한다.

"인간" 항체를 생성시키기 위한 또 다른 트랜스제닉 마우스 시스템은 내인성 뮤 (mu) 및 카파 쇄 유전자자리를 불활성화시키는 표적화 돌연변이와 함께, 재배열되지 않은 인간 중쇄 (뮤 및 감마) 및 카파 경쇄 면역글로불린 서열을 암호화하는 인간 면역글로불린 유전자 소형 유전자자리를 함유하는 "HuMAb-마우스™" (공급처: Medarex, Princeton, NJ)로서 지칭된다 [참고: Lonberg et al. Nature 368:856-859 (1994), 및 미국 특허 제5,770,429호].

그러나, 본 발명은 모든 트랜스제닉 포유류, 예를 들어 문헌 [참고: Tomizuka et al., Proc Natl Acad Sci USA 97:722 (2000); Kuroiwa et al., Nature Biotechnol 18:1086 (2000); 미국 특허공개공보 제2004/0120948호 (Mikayama et al.)]에 기재된 바와 같은 키린 (Kirin) TC 마우스™ (공급처: Kirin Beer Kabushiki Kaisha, Tokyo, Japan); 및 HuMAb-마우스™ (공급처: Medarex, Princeton, NJ) 및 제노마우스™ (공급처: Abgenix, Inc., Fremont, CA) [상기 참고]를 사용하여 생성된 인간 항-CTLA4 항체를 이용한다. 따라서, 본 발명은 모든 트랜스제닉 또는 기타 비-인간 동물을 사용하여 생성된 항-CTLA4 항체를 사용하는 것을 포괄한다.

또 다른 양태에서는, 본 발명의 방법에 이용된 항체가 완전한 인간 항체가 아니라, "인간화" 항체이다. 특히, 뮤린 항체 또는 기타 종으로부터의 항체는 당해 분야에 널리 공지된 기술을 사용하여 "인간화" 또는 "영장류화"할 수 있다 [참고: 예를 들어, Winter and Harris Immunol. Today 14:43-46 (1993), Wright et al. Crit. Reviews in Immunol. 12:125-168 (1992), 및 미국 특허 제4,816,567호 (Cabilly et al.), and Mage and Lamoyi in Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications pp. 79-97, Marcel Dekker, Inc., New York, NY (1987)]. 따라서, 어떠한 인간 항체 뿐만 아니라 모든 종으로부터 유래된 인간화, 키메라 항체, 항-CTLA4 항체 [예를 들어, 미국 특허 제5,759,808호 및 제6,765,087호 (Casterman and Hamers)에 기재된 바와 같은 카멜리드 (camelid)로부터 수득한 단일 쇄 항체 포함]를, 본원에 기재된 신규 방법을 실시하기 위해 특정 치료제와 병용할 수 있다.

본원에 제공된 기재 내용을 근거로 하여 인지되는 바와 같이, 본 발명에 사용하기 위한 항체는 트랜스제닉 비-인간 포유류, 및 이들로부터 유래된 하이브리도마로부터 수득할 수 있지만, 하이브리도마 이외의 세포주에서도 발현될 수 있다.

발현을 위한 숙주로서 이용 가능한 포유류 세포주는 당해 분야에 널리 공지되어 있고, 이에는 많은 불멸화 세포주 [공급처: American Type Culture Collection (ATCC)]가 포함되는데, 이에는 중국산 햄스터 난소 (CHO) 세포, NSO, Sp2, HEK, HeLa 세포, 유아 햄스터 신장 (BHK) 세포, 원숭이 신장 세포 (COS), 및 인간 간세포 암종 세포 (예: Hep G2)가 포함되지만, 이에 제한되지 않는다. 세균, 효모, 곤충 및 식물 세포를 포함한 비-포유류 원핵 및 진핵 세포를 이용할 수도 있다.

당해 분야에 널리 공지된 바와 같은 각종 발현 시스템, 예를 들어 다음 문헌에 기재된 발현 시스템을 사용할 수 있다 [참고: Sambrook and Russell, Molecular Cloning, A Laboratory Approach, Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, NY (2001), and Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, NY (2002)]. 이들 발현 시스템에는 특히, 디히드로폴레이트 환원효소 (DHFR)에 의거한 시스템이 포함된다. 글루타민 신세타제 발현 시스템이 유럽 특허 제0216846B1호, 제0256055B1호, 및 제0323997B1호, 및 유럽 특허원 제EP89303964와 연계해서 전부 또는 부분적으로 논의되어 있다. 한 양태에서는, 사용된 항체를, 글루타민 신세타제 시스템 (GS-NS0)을 이용하여 NS0 세포에서 만든다. 또 다른 양태에서는, DHFR 시스템을 사용하여 항체를 CHO 세포에서 만든다. 양 시스템은 당해 분야에 널리 공지되어 있고, 특히 문헌 [참고: Barnes et al. Biotech & Bioengineering 73:261-270 (2001), 및 이에 인용된 참고 문헌]에 기재되어 있다.

비-인간 당화로부터 비롯되는 면역원성, 약동학 및/또는 효과기 기능 상의 변화를 방지하기 위해서는, 당화를 제거하도록 하는 항체 CH2 도메인의 부위 지시된 돌연변이 유발이 바람직할 수 있다. 추가로, 항체를 효소적 방법 [참고: 예를 들어, Thotakura et al. Meth. Enzymol. 138:350 (1987)] 및/또는 화학적 방법 [참고: 예를 들어, Hakimuddin et al., Arch. Biochem. Biophys. 259:52 (1987)]에 의해 탈당화시킬 수 있다.

추가로, 본 발명은 변경된 당화 패턴을 포함하는 항-CTLA4 항체를 사용하는 것을 포괄한다. 당업자는 본원에 제공된 기재 내용을 근거로 하여, 항-CTLA4 항체가 천연 발생적 항체와 비교해서 부가의, 몇 개 적은, 또는 상이한 당화 부위를 포함하도록 변형시킬 수 있다는 것을 인지할 것이다. 이러한 변형이, 예를 들어 미국 특허공개공보 제2003/0207336호 및 제2003/0157108호, 및 국제공개공보 WO 01/81405 및 00/24893에 기재되어 있다.

부가적으로, 본 발명은 존재하는 경우에는 항체 상에 존재하는 글리코형에 상관없이 항-CTLA4 항체를 사용하는 것을 포함한다. 더우기, 당단백질 상에 존재하는 글리코형을 광범위하게 재형성 (리모델링)시키는 방법은 당해 분야에 널리 공지되어 있고, 이에는, 예를 들어 국제공개공보 WO 03/031464, WO 98/58964, 및 WO 99/22764, 미국 특허공개공보 제2004/0063911호, 제2004/0132640호, 제2004/0142856호, 제2004/0072290호, 및 미국 특허 제6,602,684호 (Umana et al.)에 기재된 방법들이 포함된다.

추가로, 본 발명은 예를 들어 미국 특허공개공보 제2003/0207346호 및 제2004/0132640호, 및 미국 특허 제4,640,835호; 제4,496,689호; 제4,301,144호; 제4,670,417호; 제4,791,192호; 제4,179,337호에 제시된 방식으로, 당해 분야에 공지된 공유적 및 비공유적 변형, 예를 들어 폴리펩티드를 각종 비단백질성 중합체들 (예: 폴리에틸렌 글리콜, 폴리프로필렌 글리콜, 또는 폴리옥시알킬렌) 중의 하나에 연결시키는 것을 수반하여 항-CTLA4 항체를 사용하는 것을 포괄한다.

부가적으로, 본 발명은 항-CTLA4 항체, 또는 그의 항원-결합성 부분, 인간 혈청 알부민 폴리펩티드 등을 포함하는 키메라 단백질, 또는 그의 단편을 사용하는 것을 포괄한다. 키메라 단백질을, 예를 들어 이러한 키메라 단백질을 암호화하는 키메라 핵산을 클로닝함으로써 재조합 방법을 사용하여 생성시키든지 아니면 2개의 펩티드 부분을 화학적으로 연결시킴으로써 생성시키든지 간에, 당업자는 본원에 제공된 교시로 일단 보강하게 되면, 이러한 키메라 단백질이 당해 분야에 널리 공지되어 있고 목적하는 생물학적 특성, 예를 들어 본 발명의 항체에 대한 안정성과 혈청 반감기 증가를 부여할 수 있다는 것을 이해할 것이므로, 이들 분자가 본원에 포함된다.

본 발명에 사용하기 위해 생성시킨 항체가 초기에 특별히 목적하는 이소형을 반드시 보유할 필요는 없다. 오히려, 생성된 바와 같은 항체는 어떠한 이소형도 보유할 수 있고, 통상적인 기술을 사용한 후에 전환되는 이소형일 수 있다. 이에는 직접 재조합 기술 [참고: 예를 들어, 미국 특허 제4,816,397호], 및 세포-세포 융합 기술 [참고: 예를 들어, 미국 특허 제5,916,771호]이 포함된다.

본 발명에 사용된 항체의 효과기 기능은 각종 치료적 용도를 위해 IgGI, lgG2, lgG3, lgG4, IgD, IgA, IgE, 또는 IgM로의 이소형 전환에 의해 변할 수도 있다. 더우기, 세포 사멸을 위한 보체에 대한 의존성은, 예를 들어 이중-특이체, 면역독소 또는 방사성표지를 사용함으로써 피할 수 있다.

항체 4.1.1, 4.13.1 및 11.2.1이 lgG2 항체이고, 이러한 항체의 가변 영역 서열이 본원 (도 1 내지 3) 및 본원에 참고로 도입된 특허원 및 특허에 제공되긴 하지만, 완전한 길이의 이들 항체가 본원에 포괄될 뿐만 아니라 서열 1 내지 36에 제시된 서열을 포함하고, 본원에 보다 상세히 논의된 바와 같은 이소형에 상관없이 모든 불변 영역을 추가로 포함하는 어떠한 항체의 사용도 본원에 포괄된다는 것을 인지해야 한다. 마찬가지로, 완전한 길이의 10D1, 또는 그의 일부 (10D1의 항원 결합성 부분을 암호화하는 서열 포함)을 포함하는 항체를 본 발명의 방법에 따라서 사용할 수 있다.

따라서, 당업자는 본원에 제공된 교시가 일단 제공되면, 본 발명의 항-CTLA4 항체-치료제 조합물이 다수의 항-CTLA4 항체를 포함할 수 있다는 것을 용이하게 인지할 것이다.

추가로, 당업자는 본원에 제공된 기재 내용을 기초로 하여, 본 발명이 단지 단일 항체의 투여로만 제한되지 않는다는 것을 이해할 것이며; 오히려, 본 발명은 하나 이상의 항-CTLA4 항체, 예를 들어 4.1.1, 4.13.1, 또는 11.2.1 중의 하나를 치료제와 병용해서 투여하는 것을 포괄한다. 추가로, 항-CTLA4 항체의 모든 조합물을 한 가지 이상의 치료제와 병용할 수 있고, 본 발명은 이러한 모든 병용 조합과 그의 순열을 포괄한다.

IV. 아로마타제 억제제

본 발명은 항-CTLA4 항체와 아로마타제 억제제의 조합물을, 유방암을 치료하기 위해 환자에게 투여하는 것에 관한 것이다.

에스트로겐 수용체 발현성 유방암 종양을 치료하기 위한 호르몬 요법제는 당해 분야에 널리 공지되어 있다. 이들 호르몬 요법제에는 수용체 자체에 영향을 미치는 화합물, 예를 들어 수용체와 결합함으로써 수용체:리간드 상호 작용을 억제시키는 타목시펜; 및 수용체를 분해시켜 수용체:리간드 상호 작용을 통한 신호 전달을 매개하는데 덜 이용 가능하도록 하는 풀베스트란트가 포함되지만, 이에 제한되지 않는다.

부가적으로, 호르몬 요법제는 아로마타제 효소 억제제, 예를 들어 아나스트로졸, 레트로졸 및 엑세메스탄을 포함한다. 이들 항호르몬제는 타목시펜 및 풀베스트란트 (상기 참고)와는 달리, 수용체와 결합하는데 이용 가능한 리간드 수준을 저하시킴으로써 수용체:리간드 상호 작용을 억제시킨다. 보다 구체적으로 언급하면, 아로마타제 억제제는 안드로겐 기질의 A 환을 방향족화하여 에스트로겐을 형성시키는 단계 (이는 수용체 리간드, 즉 에스트로겐의 생합성에 있어 필수 단계이다)를 억제시킨다. 따라서, 아로마타제 억제제는 에스트로겐의 혈청 수준 감소를 매개함으로써, 성장을 위해서는 호르몬을 필요로 하는 종양 세포의 성장을 억제시킨다.

비-스테로이드계 아로마타제 억제제 ("Al"), 예를 들어 아나스트로졸 및 레트로졸은 아로마타제 분자의 헴 (heme) 부분과 가역적으로 결합하고 아로마타제 활성 증가와 연관이 있다. 이는 특히 억제제를 장기간 사용하는 경우에는, 종양 내성 발생과 연관이 있을 수 있다. 추가로, 이들 억제제의 존재 하에서 에스트로겐을 생합성하는 것은 새로운 아로마타제의 합성을 필요로 하지 않으면서도 일어날 수 있는데, 이는 상기 억제제가 효소와 가역적으로 결합함으로써 [참고: Miller Clin Breast Cancer 1:S9-S14 (2000)], 종양 세포가 이러한 억제를 피할 수 있는 또 다른 기회를 제공하기 때문이다.

스테로이드계 아로마타제 억제제, 예를 들어 엑세메스탄은 비-스테로이드계 억제제 (예: 아나스트로졸 및 레트로졸)과 상이한데, 스테로이드계 작용제는 효소의 기질 결합 부위와 비가역적으로 결합하고 아로마타제 활성 저하와 연관이 있다는 점에서 비-스테로이드계 억제제와 다르다. 예를 들어, 엑세메스탄은 천연 기질 안드로스텐디온과 구조적으로 관계가 있고, 효소에 의해 가성 (false) 기질로서 인식되기 때문에, 이는 활성 부위에서 천연 기질과 경쟁한다. 이어서, 엑세메스탄은 그를 불활성화시키는 (즉, "자살 억제시키는") 효소와 비가역적으로 결합하는 중간체로 형질전환된다 [참고: 미국 특허원 제10/611,653호 (미국 특허공개공보 제2004/0082557호로서 공개됨), 미국 특허원 제10/363,935호 (미국 특허공개공보 제2004/0024044호로서 공개됨), 및 미국 특허원 제10/343,595호 (미국 특허공개공보 제2003/0158168호로서 공개됨)].

따라서, 가역적 비스테로이드계 억제제와는 달리, 엑세메스탄은 아로마타제와 비가역적으로 결합하여 종양에서 뿐만 아니라 말초 조직에서 아로마타제 활성을 거의 완벽하게 억제시키고, 외인성 내분비적 효과없이 혈청 에스트로겐 수준을 상당히 저하시키는 것을 매개하는 스테로이드계 아로마타제 불활성화제이다 [참고: Kaufmann et al. J Clin Oncol 18:1399-1411 (2000)]. 엑세메스탄은 현재, 전이성 유방암에 걸린 폐경 후 여성의 2차 요법 (예를 들어, 타목시펜 1차 요법 후 질병이 진행된 경우)에 사용하도록 미국, 캐나다 및 유럽에서 승인되었다. 엑세메스탄은 평균 생존 기간이 123.4주인 대략 15%의 반응율을 가져다 주고, 비스테로이드계 작용제와의 교차-내성이 결여된 것으로 입증되었기 때문에, 아나스트로졸 및 레트로졸 치료 후에 유효한 것으로 밝혀졌다 [참고: Geisler et al. Clin Cancer Res 4:2089-2093 (1998); Lonning J Clin Oncol 18:2234-2244 (2000)]. 보다 최근에는, 엑세메스탄이 폐경 후 여성에게서 초기 보조 타목시펜 요법을 2 내지 3년간 수행한 후 에스트로겐 수용체 양성 침습성 조기 유방암의 보조 치료에 사용하도록 유럽에서 승인되었다.

엑세메스탄은 그의 중간체가 비가역적으로 결합되기 때문에, 비스테로이드계 아로마타제 억제제와는 달리, 엑세메스탄은 아로마타제 효소의 드 노보 (de novo) 합성을 요구하는 에스트로겐 생합성을 추가로 방지시켜 준다. 더우기, 비스테로이드계 아로마타제 억제제와 스테로이드계 아로마타제 억제제의 상이한 작용 기전은 하나의 아로마타제 억제제가 또 다른 아로마타제 억제제의 실패 후에 유효할 수 있는 현상을 설명해줄 수 있다. 보다 특히, 타목시펜과 비스테로이드계 아로마타제 억제제 둘 다 실패 후에 엑세메스탄으로 치료받은 폐경 후 유방암 환자의 치료법은 임상적 이득을 제공하였다 [참고: Lonning et al. J Clin Oncol 18:2234-2244 (2000)].

따라서, 항-CTLA4 항체를 특정한 아로마타제 억제제, 또는 여러 개의 억제제와 병용해서 사용하여, 종양이 에스트로겐 수용체를 발현하는 (ER+) 유방암 환자를 치료할 수 있다. 추가로, 본 발명이 엑세메스탄을 포함하는 조합물로써 예시되긴 하였지만, 본 발명은 이러한 억제제 또는 그의 억제 기전으로 제한되지 않는다. 실제로, 아로마타제 억제제가 효소를 억제시키는 기전이 반드시 공지될 필요는 없다. 따라서, 이러한 활성을 평가하는 것으로 공지된 모든 검정을 이용하여 에스트로겐 생합성에서 특정 기질의 A 환을 방향족화하는 것을 탐지 가능한 수준으로 억제시키는 모든 억제제가 본 발명의 조합물에 사용될 수 있다.

V. 부가의 작용제

본 발명은 환자를 치료하기 위해 부가의 작용제 및 요법, 예를 들어 화학요법, 수술, 방사선 요법, 이식술 등과 추가로 병용할 수 있다. 즉, 환자에게 널리 공지된 작용제, 예를 들어 성장 인자 억제제, 생체 반응 조정제, 알킬화제, 삽입성 항생제, 빈카 알카로이드, 면역조정제, 탁산, 선택적 에스트로겐 수용체 조정제 (SERMs), 예를 들면 라소폭시펜 (lasofoxifene), 및 혈관형성 억제제를 이용한 부가의 화학요법을 적용할 수 있다.

수 많은 치료제가 있고, 이들은, 예를 들어 미국 특허공개공보 제2004/0005318호, 제2003/0086930호, 제2002/0086014호, 및 국제공개공보 WO 03/086459 (이들 모두가 본원에 참고로 도입된다)에 기재되었다. 이러한 치료제에는 토포이소머라제 I 억제제; 기타 항체 [리툭시마브 (rituximab), 베바시주마브 (bevacizumab), 트라스투주마브 (trastuzumab), 항-IGF 1R 항체 (예: CP-751,871), 항-CD40 항체 (예: CP-870,893) 등]; 화학요법제, 예를 들어 이마티니브 (imatinib) (GLEEVEC), SU11248 [SUTENT; 수니티니브 (sunitinib)], SU12662, SU14813; BAY 43-9006, AG-O13736 [악시티니브 (axitinib)], 톨-유사 수용체 자극제 [예: TLR-9 작동제, 예를 들어 CPG-7909 (PF03512676 또는 PROMUNE로서 지칭되기도 함)], 인돌아민-2,3-디옥시게나제 (IDO) 억제제; 선택적 에스트로겐 수용체 조정제 (SERMs; 예: 라소폭시펜); 탁산; 빈카 알카로이드; 테모졸로미드; 혈관형성 억제제; EGFR 억제제; VEGF 억제제; erbB2 수용체 억제제; 항증식제 (예: 파르네실 단백질 트랜스퍼라제 억제제, 및 αvβ3 억제제, αvβ5 억제제, p53 억제제 등); 면역조정제; 생체 반응 조정제; 사이토킨; 종양 백신; 종양-특이적 항원; 열 쇽 단백질에 의거한 종양 백신; 수지상 및 줄기 세포 요법; 알킬화제; 엽산염 길항제; 피리미딘 길항제; 안트라사이클린 항생제; 백금 화합물; 면역 공자극 분자 (예: CD4, CD25, PD-1, B7-H3, 4-1BB, OX40, ICOS, CD30, HLA-DR, MHCII, 및 LFA), 및 이에 대한 작동제 항체가 포함되지만, 이에 제한되지 않는다.

한 양태에서, 본 발명의 방법은 유방암을 앓고 있는 환자에게 치료적 이득을 제공하기 위해 이식술, 예를 들어 줄기 세포 이식술과 추가로 병용할 수 있다. 줄기 세포 이식술은 당해 분야에 공지된 방법에 따라서 수행할 수 있고, 동종 (allogeneic) 또는 자기 유래의 줄기 세포 이식술일 수 있다. 부가적으로, 당업자는 본원에 제공된 기재 내용을 근거로 하여, 이식술이 자기 유래이거나 HLA-일치된 공여자로부터 수득한 림프구의 양자 면역전달을 포괄한다는 것을 인지할 것이다. 본 발명의 방법이 줄기 세포 이식을 포함하는 경우, 항체-AI 요법제 조합물의 제1 용량은 해당 포유류의 면역계가 이식술로부터 회복된 후, 예를 들어 이식술을 수행한지 1 내지 12개월 후에 투여할 수 있다. 특정 양태에서는, 상기 제1 용량을 이식술을 수행한지 1 내지 3개월 후, 또는 1 내지 4개월 후에 투여한다. 이식술 방법은 수 많은 논문에 기재되었다 [참고: Appelbaum in Harrison's Principles of Internal Medicine, Chapter 14, Braunwald et al., Eds., 15^th ed., McGraw-Hill Professional (2001)] (이는 본원에 참고로 도입된다).

본원에서 앞서 지적된 바와 같이, 본 발명의 병용 요법에 사용하기 적합한, 현재 종양을 치료하는데 이용 가능한 수 많은 화학요법제가 있다. 예를 들어, 알킬화제는 DNA를 알킬화하여 가닥의 풀림과 복제를 제한하는 약물 부류이다. 본 발명의 방법에 사용하기 바람직한 알킬화제는 시클로포스파미드 (CYTOXAN)이다.

엽산염 길항제는 디히드로폴레이트 환원효소 (DHFR)와 결합하고 피리미딘 (티미딘) 합성을 방해한다. 메토트렉세이트 및 페메트렉세드 (ALIMTA)가 본 발명의 방법에 사용하기 적합한 엽산염 길항제이다. DHFR 이외에도, 페메트렉세드는 티미딜레이트 신타제와 글리신아미드 리보뉴클레오티드 포르밀 트랜스퍼라제를 억제하기도 하는데, 이들 두 효소는 티미딘 합성에 관여하는 기타 엽산염-의존성 효소이다.

피리미딘 길항제는 피리미딘 합성에 관여하는 효소를 억제한다. 이들은 피리미딘 유사체로서, DNA 분자 내로의 혼입을 놓고 정상 뉴클레오티드와 경쟁함으로써 DNA 생성을 방해하기도 한다. 본 발명의 방법에 사용하기 적합한 피리미딘 길항제에는 5-플루오로우라실 (5-FU); 생체 내에서 5-FU로 효소적으로 전환되는 5'-데옥시-5-플루오로우리딘 (5'-FDUR)의 프로드럭인 카페시타빈 (XELODA); 및 젬시타빈 (GEMZAR)이 포함된다.

안트라사이클린 항생제는 DNA 가닥 사이에 삽입함으로써 DNA의 풀림을 억제한다. 안트라사이클린 항생제에는 독소루비신 히드로클로라이드 (ADRIAMYCIN), 에피루비신 히드로클로라이드 (ELLENCE, PHARMORUBICIN), 다우노루비신 (CERUBIDINE, DAUNOXOME), 및 이다루비신 히드로클로라이드 (IDAMYCIN PFS, ZAVEDOS)가 포함된다. 본 발명에 사용하기 바람직한 안트라사이클린에는 독소루비신 및 에피루비신이 포함된다.

백금 화합물은 DNA 가닥 사이에 삽입하고 가닥 내에 삽입하여 DNA의 풀림을 억제시킴으로써 그들의 항종양 효과를 발휘한다. 본 발명의 방법에 유용한 백금 화합물에는 시스플라틴 (PLATINOL), 옥살리플라틴 (ELOXATIN), 및 카르보플라틴 (PARAPLATIN)이 포함된다.

탁산은 미소관이 투불린으로 분해되는 것을 억제함으로써 유사분열 동안 방추체 (mitotic spindle)를 분쇄시킬 수 있는 세포의 능력을 차단시키면서 미소관의 어셈블리를 증진시킨다. 이는 단일 작용제 요법으로서 및 기타 화학요법제와 병용해서 수 많은 고형 종양에 대항하여 상당한 활성을 지니는 것으로 입증되었다. 본 발명의 병용 요법의 한 가지 양태에는 하나 이상의 탁산을 IGF-1R 항체와 병용해서 사용하는 것이 포함된다. IGF-1R 항체와 병용해서 사용하기에 적합한 탁산에는 도세탁셀 (TAXOTERE) 및 파클리탁셀 (TAXOL)이 포함된다.

독소루비신, 빈블라스틴, 파클리탁셀, 도세탁셀 등에 대해 내성이 있는 세포에서 활성일 수 있는 탁산-유도체에는 XRP-9981 (Sanofi Aventis)이 포함되고, 이는 본 발명에 포괄된다.

빈카 알카로이드는 탁산과 같이, 방추체를 형성하는 미소관 상에서 작용하는 "방추체 독 (poison)"이다. 이는 미소관 어셈블리를 방해하여 방추체가 형성되게 함으로써 유사분열을 억제한다. 빈카 알카로이드에는 빈데신 (ELDISINE), 빈블라스틴 설페이트 (VELBAN), 빈크리스틴 설페이트 (ONCOVIN) 및 비노렐빈 타르트레이트 (NAVELBINE)가 포함된다. 본 발명의 방법에 사용하기 바람직한 빈카 알카로이드는 비노렐빈이다.

BMS-247550 (익사베필론: ixabepilone)은 투불린 중합과 미소관 안정화를 증진시킴으로써, G2-M 상의 세포를 정지시키고 종양 세포 세포사멸을 유도시킨다. 이러한 작용제는 탁산-내성 세포에 대항하여 활성을 나타낸다.

포유류 표적의 라파마이신 (mTOR)과 결합하여 이를 억제하는 라파마이신 유사체가 또한 유용하고, 이에는 특히 CCI-779 [템시롤리무스 (temsirolimus); 공급처: Wyeth] 및 RAD-001 [에베롤리무스 (everolimus), CERTICAN; 공급처: Novartis]이 포함된다.

캄프토테신 유사체는 DNA 복제와 패키징에 있어 중요한 효소인 토포이소머라제 I의 억제를 통하여 작용한다. 토포이소머라제 I의 수준은 정상 조직에서 보다 종양 세포에서 더 높다. 본 발명의 방법에 유용한 캄프토테신 유사체는 이리노테칸 (irinotecan) (CAMPTOSAR)이다.

본 발명의 특정 양태에서는, 상기 언급된 방법을 암 백신과 병용한다 [참고: 예를 들어, Oh et al., Cancer Res. 64:2610-2618 (2004) (TARP 에피토프 및 유방암); Kontani et al., Int J Molec Med 12:493-502 (2003) (MUC1 뮤신을 표적으로 하는 수지상 세포 백신); Holmberg & Sandmaier Expert Rev Vaccines 3:269-277 (2004) (유방암 또는 난소암에 대한 백신접종)]. 즉, 유용한 백신은 유방암 관련 항원 (예: HER-2/neu, 맘마글로빈 (mammaglobin), 전립선 및 유방 종양 관련 단백질 [TARP], MUC1, CEA, 시알릴-Tn 및 기타 탄수화물 항원), 기타 종양 암 관련 항원 (예: p53, 텔로머라제), 항-개체특이형 항체, 예를 들어 11D10으로 구성된 백신 뿐만 아니라 GM-CSF를 포함하는 백신, DNA 및 세포에 의거한 백신, 수지상 세포 백신, 재조합 바이러스성 (예: 백시니아 바이러스) 백신, 및 열 쇽 단백질 (HSP) 백신 (예: HSPPC-96; 공급처: Antigenics Inc.)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 유용한 백신에는 또한, 종양 백신, 예를 들어 유방 종양 세포로 형성된 종양 백신이 포함되고; 이는 자기 유래이거나 동종일 수 있으며; 이러한 백신은 펩티드, DNA 또는 세포계일 수 있다.

백신은 항체-아로마타제 억제제 조합물을 투여하기에 앞서, 또는 투여 후에 투여할 수 있고, 화학요법이 해당 섭생의 일부인 경우에는, 화학요법에 앞서 백신을 투여할 수 있다. 특정 양태에서는, 본 발명의 항체-아로마타제 억제제 조합물을 화학요법에 앞서 투여할 수도 있다. 기타 양태에서는, 이러한 치료를 줄기 세포 이식과 병용할 수 있다. 즉, 항체-아로마타제 억제제 조합물은 줄기 세포 이식 전 또는 후에 투여할 수 있다. 백신은 줄기 세포 이식술 전 또는 후에 투여할 수 있고, 특정 양태에서는 항체와 동시에 투여한다.

상기 언급된 요법들은 신호 변환 억제제, 예를 들어 EGFR (표피 성장 인자 수용체) 반응을 억제시킬 수 있는 작용제, 예를 들어 EGFR 항체, EGF 항체, 및 EGFR 억제제인 분자; VEGF (혈관 내피 성장 인자) 억제제, 예를 들어 VEGF를 억제할 수 있는 VEGF 수용체 및 분자; 및 erbB2 수용체 (HER2) 억제제, 예를 들어 erbB2 수용체와 결합하는 유기 분자 또는 항체, 예를 들어 트라스투주마브 (trastuzumab) (HERCEPTIN, 공급처: Genentech, Inc., San Francisco, CA), 및 페르투주마브 (pertuzumab) (2C4, OMNITARG; 공급처: Genentech) [이는 HER 이량체화 억제제 (HDI)이다]와 함께 사용할 수도 있다.

EGFR 억제제는, 예를 들어 국제공개공보 WO 95/19970, WO 98/14451, WO 98/02434, 및 미국 특허 제5,747,498호에 기재되어 있고, 이러한 물질은 본원에 기재된 바와 같이 본 발명에 사용할 수 있다. EGFR-억제성 작용제에는 모노클로날 항체 C225, 항-EGFR 22Mab (공급처: ImClone Systems Inc., New York, NY) 및 ABX-EGF (공급처: Abgenix Inc., remont, CA), 화합물 ZD-1839 (공급처: AstraZeneca), BIBX-1382 (공급처: Boehringer Ingelheim), MDX-447 (공급처: Medarex, lnc., Annandale, NJ), 및 OLX-103 (공급처: Merck & Co., Whitehouse Station, NJ), VRCTC-310 (공급처: Ventech Research) 및 EGF 융합 독소 (공급처: Seragen Inc., Hopkinton, MA)가 포함되지만, 이에 제한되지 않는다. 이들 및 기타 EGFR-억제성 작용제를 본 발명에 사용할 수 있다.

표피 성장 인자 수용체 (EGFR) 티로신 키나제 (TK)의 억제를 지시한 화합물은 본 발명의 방법에 유용한 비교적 신규한 부류의 항종양성 약물을 나타낸다. 많은 인간 암은 세포 표면 상에 EGFR 계열의 구성원들을 발현한다. 리간드가 EGFR과 결합하는 경우, 이는 세포성 반응의 케스케이드를 유발시켜 세포 분열을 증가시키고 암 발생과 진행의 기타 국면들 (이에는 혈관형성, 전이 확산, 및 세포소멸의 억제)에 영향을 미친다. EGFR-TK 억제제는 EGFR 계열 구성원들 [EGFR (HER1 또는 ErbB-1로서 공지되기도 함), HER2/neu (ErbB-2로서 공지되기도 함), HER3 (ErbB-3으로서 공지되기도 함), 또는 HER4 (ErbB-4로서 공지되기도 함)] 중의 하나를 선택적으로 표적으로 할 수 있거나, 또는 이들 중의 둘 이상을 표적으로 할 수 있다. 본 발명에 사용하기 적합한 EGFR-TK 억제제에는 제피티니브 (gefitinib) (IRESSA), 에를로티니브 (erlotinib) (TARCEVA), CI-1033 (공급처: Pfizer), GW2016 (공급처: GlaxoSmithKline), EKB-569 (공급처: Wyeth), PKI-166 (공급처: Novartis), CP-724,714 (공급처: Pfizer), 및 BIBX-1382 (공급처: Boeringer-Ingelheim)이 포함된다. 부가의 EGFR-TK 억제제가 미국 특허 제6,890,924호에 기재되어 있다.

VEGF 억제제, 예를 들어 SU-5416, SU-6668, SU-11248, SU-12662, SU-14813 (공급처: Sugen Inc., San Francisco, CA) 뿐만 아니라 AG-013736 (공급처: Pfizer)을 또한, 항체와 병용해서 이용할 수 있다. VEGF 억제제는, 예를 들어 국제출원번호 PCT/IB99/00797 (1999년 5월 3일자로 출원됨), 국제공개공보 WO 99/24440; WO 95/21613; WO 99/61422; WO 98/50356; WO 99/10349; WO 97/32856; WO 97/22596; WO 98/54093; WO 98/02438; WO 99/16755; WO 98/02437; 미국 특허 제5,834,504호; 제5,883,113호; 제5,886,020호; 및 제5,792,783호에 기재되어 있다. 본 발명에 유용한 몇몇 특이적 VEGF 억제제의 기타 예는 IM862 (공급처: Cytran Inc., Kirkland, WA); IMC-1C11 임클론 (Imclone) 항체, 항-VEGF 모노클로날 항체 (공급처: Genentech, Inc., San Francisco, CA); 및 리보자임 (Ribozyme) (Boulder, CO) 및 키론 (Chiron) (Emeryville, CA)으로부터의 합성 리보자임인 안지오자임 (angiozyme)이다.

ErbB2 수용체 억제제, 예를 들어 GW-282974, GW-572016 (라파티니브: lapatinib) (공급처: Glaxo Wellcome plc), 및 모노클로날 항체 AR-209 (공급처: Aronex Pharmaceuticals Inc., Woodlands, TX), 트라스투주마브 (HERCEPTIN; 공급처: Genentech, Inc., San Francisco, CA), 페르투주마브 (OMNITARG; 2C4; 공급처: Genentech; HER2 이량체화 억제제 (HDI)), 및 2B-1 (공급처: Chiron)을, 항체-아로마타제 억제제 병용 요법과 병용할 수 있다. 기타 erbB2 수용체 억제제가, 예를 들어 국제공개공보 WO 98/02434; WO 99/35146; WO 99/35132; WO 98/02437; WO 97/13760; WO 95/19970; 미국 특허 제5,587,458호 및 제5,877,305호에 기재되어 있다. 본 발명에 유용한 ErbB2 수용체 억제제는 또한, EP1029853 (2000년 8월 23일자로 공개됨) 및 국제공개공보 WO 00/44728 (2000년 8월 3일자로 공개됨)에 기재되어 있다. 전술된 PCT 출원, 미국 특허 및 미국 가특허원에 기재된 erbB2 수용체 억제제 화합물 및 물질 뿐만 아니라 erbB2 수용체를 억제하는 기타 화합물 및 물질을, 본 발명에 따라서 항체와 아로마타제 억제제 조합물과 함께 사용할 수 있다.

본 발명의 치료법을 또한, 비정상적인 세포 성장 또는 암을 치료하는데 유용한 기타 작용제, 예를 들어 항종양 면역 반응을 증강시킬 수 있는 기타 작용제, 예를 들면 부가의 상이한 CTLA4 항체, 및 CTLA4를 차단시킬 수도 있는 기타 작용제; 및 항증식제, 예를 들어 파르네실 단백질 트랜스퍼라제 억제제, 및 αvβ3 억제제, 예를 들어, αvβ3 항체, VITAXIN, αvβ5 억제제, p53 억제제 등과 함께 사용할 수 있다.

본 발명의 항체를 또 다른 면역조정제와 병용해서 투여하는 경우, 이러한 면역조정제는, 예를 들어 수지상 세포 활성화제, 예를 들면 CD40 리간드 및 항-CD40 작동제 항체 뿐만 아니라 항원 제시 증강인자, T-세포 지향성 증강인자, 종양 관련 면역억제성 인자의 억제제, 예를 들어 TGF-β (전환 성장 인자 베타), 및 IL-10으로 이루어진 군 중에서 선택될 수 있다. 바람직한 항-CD40 작동제 항체는 국제특허출원 PCT/US02/36107 (2002년 11월 8일자로 출원되고; 현재 국제공개공보 WO 03/040170으로 공개됨), 및 미국 특허원 제10/292,088호 (2002년 11월 8일자로 출원되고, 현재 미국 특허공개공보 US2003/0211100로서 공개됨)에 기재된 항체를 포괄하고, 이에는 항체 3.1.1, 3.1.1.H-A78T, 3.1.1H-A78T-V88A-V97A, 3.1.1L-L4M-L83V, 3.1.1H-A78T-V88A-V97A/3.1.1L-L4M-L83V, 7.1.2, 10.8.3, 15.1.1, 21.2.1, 21.4.1, 22.1.1, 22.1.1H-C109A, 23.5.1, 23.25.1, 23.28.1, 23.28.1H-D16E, 23.29.1, 및 24.2.1의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 갖는 항체가 포함되지만, 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 치료 섭생을, IGF-1R (인슐린-유사 성장 인자 1 수용체)와 결합함으로써 종양 성장을 억제시키는 항체 또는 기타 리간드와 병용할 수도 있다. 본 발명에 사용할 수 있는 구체적인 항-IGF-1R 항체에는 국제특허출원 PCT/US01/51113 (2001년 12월 20일자로 출원되고, 국제공개공보 WO 02/053596로서 공개됨), 국제특허출원 PCT/IB2004/002555 (2004년 8월 3일자로 출원되고, 국제공개공보 WO 2005/016967로서 공개됨)에 기재된 것들이 포함된다. 바람직한 항-IGFR-1R 항체는, 예를 들어 항체 2.12.1, 2.13.2, 2.14.3, 3.1.1, 4.9.2 및 4.17.3의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 갖는 항체를 포괄한다.

본 발명의 항체는 또한, 사이토킨, 예를 들어 IL-2, 인터페론 (예: IFN-γ, IFN-α 등), GM-CSF, IL-12, IL-18, 및 FLT-3L과 함께 투여할 수도 있다.

본원에 기재된 치료 섭생을 항혈관형성제, 예를 들어 MMP-2 (매트릭스-메탈로프로테이나제 2) 억제제, MMP-9 (매트릭스-메탈로프로테이나제 9) 억제제, 및 COX-II (시클로옥시게나제 II) 억제제와 병용할 수 있고, 이를 본 발명의 방법에서 항체와 연계해서 사용할 수 있다. 유용한 COX-II 억제제의 예에는 CELEBREX (셀레콕시브: celecoxib), 발데콕시브 (valdecoxib), 및 로페콕시브 (rofecoxib)가 포함된다. 유용한 매트릭스-메탈로프로테이나제 억제제의 예가 국제공개공보 WO 96/33172; WO 96/27583; WO 98/07697, WO 98/03516, WO 98/34918, WO 98/34915, WO 98/33768, WO 98/30566, WO 90/05719, WO 99/52910, WO 99/52889, WO 99/29667, 유럽 특허원 제780386호 (1997년 6월 25일자로 공개됨), 제97304971호 (1997년 7월 8일자로 출원됨), 제99308617호 (1999년 10월 29일자로 출원됨), 제606046호 (1994년 7월 13일자로 공개됨), 제931788호 (1999년 7월 28일자로 공개됨), 제99302232호 (1999년 3월 25일자로 출원됨), 국제특허출원 PCT/IB98/01113 (1998년 7월 21일자로 출원됨), 영국 특허원 제9912961호 (1999년 6월 3일자로 출원됨), 미국 가특허원 제60/148,464호 (1999년 8월 12일자로 출원됨), 및 미국 특허 제5,863,949호 및 제5,861,510호에 기재되어 있다.

바람직한 MMP-2 및 MMP-9 억제제는 MMP-1을 억제시키는 활성이 거의 또는 전혀 없는 것이다. 보다 바람직한 것은 기타 매트릭스-메탈로프로테이나제 (즉, MMP-1, MMP-3, MMP-4, MMP-5, MMP-6, MMP-7, MMP-8, MMP-10, MMP-11, MMP-12, 및 MMP-13)와 비교해서 MMP-2 및/또는 MMP-9를 선택적으로 억제시키는 것이다.

본 발명에 유용한 MMP 억제제의 몇 가지 구체적인 예는 AG-3340, RO 32-3555, RS 13-0830, 및 다음 목록에 인용된 화합물이다:

3-[[4-(4-플루오로-페녹시)-벤젠설포닐]-(1-히드록시카바모일-시클로펜틸)-아미노]-프로피온산;

3-엑소-3-[4-(4-플루오로-페녹시)-벤젠설포닐아미노]-8-옥사-바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-카복실산 히드록시아미드;

(2R,3R) 1-[4-(2-클로로-4-플루오로-벤질옥시)-벤젠설포닐]-3-히드록시-3-메틸-피페리딘-2-카복실산 히드록시아미드;

4-[4-(4-플루오로-페녹시)-벤젠설포닐아미노]-테트라히드로-피란-4-카복실산 히드록시아미드;

3-[[4-(4-플루오로-페녹시)-벤젠설포닐]-(1-히드록시카바모일-시클로부틸)-아미노]-프로피온산;

4-[4-(4-클로로-페녹시)-벤젠설포닐아미노]-테트라히드로-피란-4-카복실산 히드록시아미드;

(R) 3-[4-(4-클로로-페녹시)-벤젠설포닐아미노]-테트라히드로-피란-3-카복실산 히드록시아미드;

(2R,3R) 1-[4-(4-플루오로-2-메틸-벤질옥시)-벤젠설포닐]-3-히드록시-3-메틸-피페리딘-2-카복실산 히드록시아미드;

3-[[4-(4-플루오로-페녹시)-벤젠설포닐]-(1-히드록시카바모일-1-메틸-에틸)-아미노]-프로피온산;

3-[[4-(4-플루오로-페녹시)-벤젠설포닐]-(4-히드록시카바모일-테트라히드로-피란-4-일)-아미노]-프로피온산;

3-엑소-3-[4-(4-클로로-페녹시)-벤젠설포닐아미노]-8-옥사-바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-카복실산 히드록시아미드;

3-엔도-3-[4-(4-플루오로-페녹시)-벤젠설포닐아미노]-8-옥사-바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-카복실산 히드록시아미드; 및

(R) 3-[4-(4-플루오로-페녹시)-벤젠설포닐아미노]-테트라히드로-푸란-3-카복실산 히드록시아미드; 및

상기 화합물의 제약상 허용 가능한 염 및 용매화물.

방사선 요법은 유방암을 치료하는 것으로 널리 공지된 방사선 요법에 따라서 투여할 수 있다. 방사선 요법에 대한 용량 및 섭생은 당업자에 의해 용이하게 결정할 수 있고, 이는 질병의 병기, 및 당해 분야에 널리 공지된 기타 요인들에 기초한다.

항체를 아로마타제 억제제와 공동-투여하는 (병용 요법) 것은 항-CTLA4 항체와 하나 이상의 아로마타제 억제제(들) 둘 다를 포함하는 제약 조성물을 투여하는 것과, 2개 이상의 별개의 제약 조성물 (하나의 제약 조성물은 항-CTLA4 항체를 포함하고, 기타 제약 조성물은 아로마타제 억제제를 포함한다)을 투여하는 것을 포괄한다. 추가로, 공동-투여 또는 병용 요법이 일반적으로, 항체와 부가의 치료제를 서로 동시에 투여하는 것을 의미하긴 하지만, 이는 개개의 치료 성분들을 동시에, 순차적으로 또는 별개로 투여하는 것을 포괄한다. 부가적으로, 항체를 정맥내 투여하고 아로마타제 억제제 (예: 엑세메스탄)를 경구 투여하는 경우에는, 이들을 2개의 별개의 제약 조성물로서 투여하는 것이 바람직하다.

본 발명은 또한, 제1 및 제2 성분들 이외에 기타 치료제를 투여하는 것을 포괄하는데, 이들 성분 중의 하나 이상을 동시에 투여하거나, 또는 전 및/또는 후에 순차적으로 투여한다. 이러한 치료제에는 암 백신, 항혈관제, 항증식제, 및 지지 요법 (supportive care)을 제공하기 위한 고통완화제, 예를 들어 진통제, 항구토제, 항설사제, 및 스테로이드가 포함된다. 바람직한 항구토제에는 온단세트론 히드로클로라이드, 그라니세트론 히드로클로라이드 및 메토클로프라미드가 포함된다. 바람직한 항설사제에는 디페녹실레이트 및 아트로핀 (LOMOTIL), 로페라미드 (IMMODIUM), 옥트레오티드 (SANDOSTATIN), 올살라진 (DIPENTUM), 및 메살라민 (ASACOL)이 포함된다. 바람직한 스테로이드에는 비-흡수성 스테로이드 부데소니드 (ENTOCORT), 및 전신 투여용 스테로이드 덱사메타손 (DECADRAN) 및 프레드니손 (METICORTEN)이 포함된다.

각 투여는 그의 기간이 신속한 투여에서부터 지속적인 관류까지 다양할 수 있다. 그 결과 본 발명의 목적상, 상기 조합물은 구성분들을 물리적으로 연합시킴으로써 수득되는 것으로 제한되지 않을 뿐만 아니라 동시에 투여되거나 일정 간격을 두고 투여될 수 있는 별개의 투여를 허용하는 것으로만 제한되지 않는다. 본 발명에 따르는 조성물은 바람직하게, 비경구적으로 투여될 수 있는 조성물이다. 그러나, 이들 조성물은 국한성 국소 요법의 경우에는 복강내 또는 경구 투여할 수 있다.

당업자가 잘 인지하고 있는 바와 같이, 항-CTLA4 항체와 아로마타제 억제제 병용 요법과 병용해서 사용될 치료제의 선택과 이들의 사용 시기는 부분적으로는, 치료받고 있는 암의 유형과 병기에 의해 결정될 것이다. 예를 들어, 초기 유방암의 경우 (암이 유방을 벗어나서 확산되지 않은 경우)에는, 수술과 방사선 치료에 이어 일반적으로 보조 화학요법 또는 보조 호르몬 요법을 수행하는데, 이들 요법은 본 발명의 방법에서 항-CTLA4 항체-아로마타제 억제제 조합물과 병용할 수 있다. 초기 유방암에 대한 전형적인 보조 화학요법에는 시클로포스파미드, 메토트렉세이트 및 5-FU ("CMF"); 5-FU, 독소루비신 및 시클로포스파미드 ("FAC"); 도세탁셀, 독소루비신 및 시클로포스파미드 ("TAC"); 독소루비신 및 시클로포스파미드 ("AC"); 독소루비신 및 시클로포스파미드에 이어 파클리탁셀 ("AC 및 T"); 및 5-FU, 에피루비신 및 시클로포스파미드 ("FEC")가 포함된다. 본원에서 앞서 논의된 바와 같이, 타목시펜은 이러한 병기에 투여되는 항호르몬 요법이다. 따라서, 항체-아로마타제 억제제 조합물을, 부가의 호르몬 요법 (예를 들어, 또 다른 아로마타제 억제제, 타목시펜, 풀베스트란트, 또는 그의 모든 조합물)과 병용해서 투여할 수 있고, 이러한 조합물을 보조 화학요법과 병용해서 투여할 수 있다 (예를 들어, CMF, FAC, TAC, AC, AC 및 T, 및/또는 FEC, 또는 화학요법제를 항체-아로마타제 억제제 조합물과 병용해서 개별적으로 투여할 수 있다).

암이 근처 조직이나 림프절로만 확산된, 국소적으로 진행된 유방암에서는 수술 및 방사선 치료에 앞서 환자에게 종종 화학요법을 제공한 다음, 보조 호르몬 요법을 수행한다. 또 다른 한편으론, 수술/방사선 치료에 이어 보조 화학요법을 수행한 다음, 보조 호르몬 요법을 적용한다. 항-CTLA4 항체-아로마타제 억제제 조합물을 화학요법제 또는 부가의 호르몬 요법제 (예를 들어, 또 다른 아로마타제 억제제, 타목시펜, 풀베스트란트, 또는 그의 모든 조합물)와 연계해서 투여할 수 있는데, 이들은 수술/방사선 치료 전 또는 후에 사용한다. 국소적으로 진행된 유방암에 대한 전형적인 화학요법 섭생에는 FAC, AC, FEC, 및 독소루비신 + 도세탁셀 ("AT")이 포함된다.

전이성 유방암은 이러한 암이 시작한 유방으로부터 신체의 다른 부위로 확산되었다. 화학요법은 임의로, 호르몬 요법 보다 앞설 수 있다. 현재 사용되고 있는 1차 호르몬 요법에는 타목시펜 및 아나스트로졸이 포함된다. 현재 사용되고 있는 1차 화학요법 섭생에는 FAC, TAC, 도세탁셀 + 에피루비신, 도세탁셀, 파클리탁셀, 카페시타빈, 비노렐빈, 및 트라스투주마브 (HERCEPTIN)가 포함된다. 2차 요법에는 도세탁셀 단독, 또는 카페시타빈과 병용되는 도세탁셀이 포함된다. 본 발명의 방법은 1차 요법 및 2차 요법 둘 다로서 사용하기에 적합하다. 추가로, 본 발명의 방법은 방사선 요법 및 줄기 세포 이식와 병용할 수 있고, 본원에 기재되거나, 당해 분야에 공지되어 있거나 또는 앞으로 개발된 모든 요법들의 조합과 병용할 수 있다.

한 양태에서는, 항체-아로마타제 억제제 요법과 함께 투여되는 부가의 치료제가 알킬화제이다. 한 국면에서는, 알킬화제가 시클로포스파미드이다.

또 다른 양태에서는, 부가의 작용제가 엽산염 길항제이다. 한 국면에서는, 이러한 엽산염 길항제가 메토트렉세이트 및 페메트렉세드로 이루어진 군 중에서 선택된다.

본 발명의 한 양태에서는, 부가의 작용제가 피리미딘 길항제이다. 피리미딘 유사체는 5-FU, 카페시타빈, 및 젬시타빈으로 이루어진 군 중에서 선택될 수 있다.

본 발명의 또 다른 양태에서는, 부가의 작용제가 안트라사이클린 항생제이다. 한 국면에서는, 안트라사이클린 항생제가 에피루비신 및 독소루비신으로 이루어진 군 중에서 선택된다. 추가의 국면에서는, 안트라사이클린 항생제가 독소루비신이다.

본 발명의 또 다른 양태에서는, 부가의 작용제가 백금 화합물이다. 백금 화합물은 시스플라틴 및 카르보플라틴으로 이루어진 군 중에서 선택될 수 있다.

본 발명의 또 다른 양태에서는, 부가의 작용제가 탁산이다. 한 국면에서는, 탁산이 도세탁셀이다. 또 다른 국면에서는, 탁산이 파클리탁셀이다.

본 발명의 특정 양태에서는, 항-CTLA4 항체와 아로마타제 억제제 조합물을, 카페시타빈, 시스플라틴, 젬시타빈 및 에피루비신 중의 하나 이상과 추가로 병용해서, 도세탁셀과 함께 투여한다.

본 발명의 특정 양태에서는, 항-CTLA4 항체와 아로마타제 억제제 조합물을, 카르보플라틴, 시스플라틴 및 젬시타빈으로 이루어진 군 중에서 선택된 부가의 작용제, 및 파클리탁셀과 추가로 병용해서 투여한다. 한 국면에서는, 부가의 작용제가 카르보플라틴이다.

또 다른 양태에서는, 항-CTLA4 항체와 아로마타제 억제제 조합물을 부가의 작용제 (여기서, 부가의 작용제는 빈카 알카로이드이다)와 함께 투여한다. 한 국면에서는, 빈카 알카로이드가 비노렐빈이다.

본 발명의 특정 양태에서는, 항체-아로마타제 억제제 조합물과 함께 투여되는 부가의 작용제가 캄프토테신 유사체이다. 한 국면에서는, 캄프토테신 유사체가 이리노테칸이다.

또 다른 양태에서는, 부가의 작용제가 EGFR 억제제이다.

본 발명의 특정 양태에서는, 부가의 작용제가 erbB2 억제제이다. 한 국면에서는, erbB2 억제제가 트라스투주마브 및 페르투주마브 중에서 선택된다. 또 다른 국면에서는, erbB2 억제제가 트라스투주마브 (HERCEPTIN)이다.

본 발명의 특정 양태에서는, 항-CTLA4 항체와 아로마타제 억제제 조합물을, 5-FU, 독소루비신 및 시클로포스파미드를 포함하는 조합물과 추가로 병용해서 투여한다.

본 발명의 또 다른 양태에서는, 항-CTLA4 항체와 아로마타제 억제제 조합물을, 도세탁셀, 독소루비신 및 시클로포스파미드를 포함하는 조합물과 추가로 병용해서 투여한다.

본 발명의 방법은 또한, 줄기 세포 이식술을 진행한 적이 있는 포유류에게, 줄기 세포 이식술과 추가로 병용해서 아로마타제 억제제와 병용하여 암을 치료하는데 유효한 양의 인간 항-CTLA4 항체를 투여하는 것을 포함하여, 이러한 포유류, 바람직하게는 인간에게서 암을 치료하는 방법에 관한 것이다. 줄기 세포 이식술은 동종 또는 자기 유래의 줄기 세포 이식술일 수 있고, 보다 바람직하게는 아로마타제 억제제가 엑세메스탄이다. 본 발명의 방법이 줄기 세포 이식을 포함하는 경우, 항체-아로마타제 억제제 조합물의 제1 용량은 해당 포유류의 면역계가 이식술로부터 회복된 후, 예를 들어 이식술을 수행한지 1 내지 12개월 후에 투여할 수 있다. 특정 양태에서는, 상기 제1 용량을 이식술을 수행한지 1 내지 3개월 후, 또는 1 내지 4개월 후에 투여한다. 환자에게 줄기 세포 이식술 예비 처치(들)를 진행할 수 있다.

VI. 제약 조성물

본 발명은 활성 성분으로서 본 발명의 인간 항-CTLA4 항체를, 아로마타제 억제제, 바람직하게는 스테로이드계 아로마타제 억제제, 보다 더 바람직하게는 엑세메스탄과 병용해서 포함하는 제약 조성물의 제조 및 용도를 포괄한다. 이러한 제약 조성물은 대상체에게 투여하기 적합한 형태로, 각 활성 성분 단독으로 이루어지거나, 한 가지 이상 활성 성분의 조합물 (예를 들어, 유효 용량의 항-CTLA4, 유효 용량의 아로마타제 억제제)로서 이루어질 수 있거나, 또는 상기 제약 조성물은 활성 성분과, 하나 이상의 제약상 허용 가능한 담체, 하나 이상의 부가의 (활성 및/또는 불활성) 성분, 또는 이들의 몇몇 조합물을 포함할 수 있다.

한 양태에서는, 항체를 수성 용제 형태로 비경구 (예: 정맥내) 투여하는 반면, 아로마타제 억제제 (예: 엑세메스탄)은 환제/캅셀제 형태로 경구 투여한다. 그러나, 당업자는 본원에 제공된 기재 내용을 근거로 하여, 본 발명이 이들 제형, 또는 기타 어떠한 제형, 용량, 투여 경로 등으로 제한되지 않는다는 것을 이해할 것이다. 오히려, 본 발명은 항체를 아로마타제 억제제와 병용해서 투여하는 어떠한 투여 방법이나 제형을 포괄하는데, 이에는 각 작용제를 상이한 투여 경로를 통하여 상이한 제형으로 별개로 투여하는 것과, 항체와 아로마타제 억제제를 단일 조성물 (예를 들어, 특히 정맥내 투여되는 수성 조성물)로 투여하는 것이 포함되지만, 이에 제한되지 않는다. 따라서, 다음에는 항-CTLA4 항체를 아로마타제 억제제와 병용해서 투여하는 것을 포함하는 본 발명의 방법을 실시하기 위한 각종 제형이 기재되지만, 본 발명은 이들 제형으로 제한되지 않고, 본 발명의 방법에 사용하기 위해 본원에 제공된 교시로 보강된다면 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있는 바와 같은 모든 제형을 포함한다.

본 발명에 이용된 항체는 대상체에게 투여하기 적합한 제약 조성물 내로 혼입될 수 있다. 전형적으로, 본 발명의 제약 조성물은 이러한 항체와 제약상 허용 가능한 담체를 포함한다. 본원에 사용된 바와 같은 "제약상 허용 가능한 담체"에는 생리학적으로 화합성인 모든 용매, 분산 매질, 피복재, 항균 및 항진균제, 등장성 및 흡수 지연제 등이 포함된다. 제약상 허용 가능한 담체의 예에는 물, 식염수, 인산염 완충 식염수, 덱스트로스, 글리세롤, 에탄올 등 중의 하나 이상 뿐만 아니라 이들의 조합물이 포함된다. 많은 경우에 있어, 등장제, 예를 들어 당, 다가 알코올, 예를 들면 만니톨, 솔비톨, 또는 염화나트륨이 조성물에 포함되는 것이 바람직할 것이다. 항체 또는 항체 부분의 저장 수명 또는 유효성을 증강시키는 제약상 허용 가능한 물질에는, 예를 들어 습윤제 또는 미량의 보조 물질, 예를 들면 습윤제 또는 유화제, 방부제 또는 완충제가 포함된다.

항체는 각종 형태로 존재할 수 있다. 이에는 예를 들어, 액상, 반고형 및 고형 투여 형태, 예를 들어 액상 용제 (예: 주사용 및 주입성 용제), 분산제 또는 현탁제, 정제, 환제, 산제, 리포솜 및 좌제가 포함된다. 바람직한 형태는 의도한 투여 방식과 치료적 적용에 좌우된다. 전형적인 바람직한 조성물은 주사용 또는 주입성 용제 형태, 예를 들어 인간을 기타 항체로 수동 면역시키는데 이용된 것과 유사한 조성물이다. 바람직한 투여 방식은 비경구 (예: 정맥내, 피하, 복강내, 근육내)이다. 바람직한 양태에서는, 항체를 정맥내 주입 또는 주사함으로써 투여한다. 또 다른 바람직한 양태에서는, 항체를 근육내 또는 피하 주사함으로써 투여한다.

치료적 조성물은 전형적으로, 제조 및 저장 조건 하에서 멸균성이면서도 안정적이어야만 한다. 이 조성물은 용제, 마이크로에멀션, 분산제, 리포솜, 또는 높은 약물 농도에 적한한 기타 차수의 구조물로서 제형화할 수 있다. 멸균성 주사용 용제는 요구되는 양의 항체를 필요에 따라 상기 열거된 성분들 중의 하나 또는 조합물과 함께 적당한 용매에 혼입한 다음, 여과 멸균시킴으로써 제조할 수 있다. 일반적으로, 분산제는 기본 분산 매질과 상기 열거된 것으로부터 요구되는 기타 성분을 함유하는 멸균성 비히클 내로 활성 화합물을 혼입함으로써 제조한다. 멸균성 주사용 용제를 제조하기 위한 멸균성 산제의 경우에 바람직한 제조 방법은, 활성 성분 + 앞서 멸균성 여과시킨 용액으로부터의 부가의 목적 성분의 분말을 산출시키는 진공 건조 및 동결 건조법이다. 적당한 용액 유동성은, 예를 들어 레시틴과 같은 피복제를 사용하고, 분산제의 경우에는 요구되는 입자 크기를 유지하며, 계면활성제를 사용함으로써 유지할 수 있다. 주사용 조성물의 흡수 연장은 이러한 조성물 내에 흡수를 지연시키는 작용제, 예를 들어 모노스테아레이트 염 및 젤라틴을 포함시킴으로써 이루어질 수 있다.

항체는 당해 분야에 공지된 각종 방법, 예를 들어 경구, 비경구, 점막, 흡입, 국소, 볼내, 비내 및 직장 투여할 수 있다. 많은 치료적 적용 분야에 바람직한 투여 경로/방식은 피하, 근육내, 정맥내 또는 주입이다. 경우에 따라, 비-침상 주사를 이용할 수도 있다. 당업자가 인지하는 바와 같이, 투여 경로 및/또는 방식은 목적하는 결과에 따라서 다양할 것이다.

특정 양태에서는, 항체를, 화합물이 신속하게 방출되지 못하게 하는 담체, 예를 들어 서방출 제형 (이에는 이식체, 경피용 패치 및 미소피막화된 전달 시스템이 포함된다)과 함께 준비할 수 있다. 생분해성, 생체적합성 중합체, 예를 들어 에틸렌 비닐 아세테이트, 폴리무수물, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르토에스테르 및 폴리락트산을 사용할 수 있다. 이러한 제형을 제조하기 위한 많은 방법이 특허되었거나 당업자에게 일반적으로 공지되어 있다 [참고: 예를 들어, Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J. R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York (1978)].

투여량 섭생은 목적하는 최적의 반응을 제공하도록 조정할 수 있다. 예를 들어, 단일 거환을 투여할 수 있거나, 수 회분으로 나누어 일정 시간에 걸쳐 투여할 수 있거나, 또는 치료적 상황의 위급성에 따라 결정되는 바와 같이 용량을 일정 비율로 감소 또는 증가시킬 수 있다. 투여의 용이성과 투여량의 균일성을 위해 비경구 조성물을 투여 단위 형태로 제형화하는 것이 특히 유리하다. 본원에 사용된 바와 같은 투여 단위 형태는 치료받고자 하는 포유류 대상체에 대한 단일 투여량으로서 적합한 물리적으로 별개의 단위를 지칭하는데, 이들 단위 각각은 요구되는 제약 담체와 연합하여 목적하는 치료 효과를 가져다 주는 것으로 계산된 예정 량의 활성 화합물을 함유하고 있다. 본 발명의 투여 단위 형태에 관한 명세서는 (a) 항체의 독특한 특징과, 달성하고자 하는 특별한 치료적 또는 예방적 효과, 및 (b) 개개인에게서 민감증을 치료하기 위해 상기 활성 화합물을 화합하는 분야에 내재된 제한 사항에 직접적으로 좌우되고 이에 영향을 받는다.

투여량 값은 완화시키고자 하는 질환의 유형과 중증도에 따라서 다양할 수 있고, 이에는 단일 용량 또는 수 회분 용량이 포함될 수 있다는 것을 인지해야 한다. 특별한 어떠한 대상체에 대해서도, 구체적인 투여량 섭생은 개개인의 필요와, 해당 조성물을 투여하거나 이러한 투여를 관리하는 사람의 전문적인 판단에 따라서 시간이 경과함에 따라 조정해야 하고, 본원에 제시된 투여량 범위는 단지 예시적이며 청구된 조성물의 범위나 실시를 제한하지 않는다는 것을 추가로 인지해야 한다.

한 양태에서는, 항체를 pH 약 5 내지 6 하에 나트륨 아세테이트, 폴리솔베이트 80 및 염화나트륨과 함께, 5 mg/ml, 또는 보다 바람직하게 약 10 mg/ml, 또는 보다 바람직하게 약 15 mg/ml, 또는 보다 더 바람직하게 약 20 mg/ml의 항체를 함유하는 멸균성 수성 용제로서 정맥내 제형으로 투여한다. 바람직하게는, 정맥내 제형이 5 또는 10 mg/ml의 항체를, 20 mM 나트륨 아세테이트, 0.2 mg/ml 폴리솔베이트 80, 및 140 mM 염화나트륨 (pH 5.5)과 함께 함유하는 멸균성 수성 용제이다. 추가로, 항-CTLA4 항체를 포함하는 용제는 기타 많은 화합물들 중에서, 히스티딘, 만니톨, 슈크로스, 트레할로스, 글리신, 폴리(에틸렌) 글리콜, EDTA, 메티오닌 및 그의 모든 조합물, 및 관련 분야에 공지된 기타 많은 화합물을 포함할 수 있다.

한 양태에서는, 용량 일부를 정맥내 거환으로 투여하고, 나머지 항체 제형을 주입 투여한다. 예를 들어, 0.01 mg/kg의 정맥내 주사용 항체가 거환으로서 제공될 수 있고, 예정된 항체 용량의 나머지가 비경구 주사로써 투여될 수 있다. 예정 용량의 항체를, 예를 들어 1시간 반 내지 2시간 내지 5시간에 걸쳐 투여할 수 있다.

아로마타제 억제제와 관련해서는, 이러한 억제제가 제약 조성물 내에 생리상 허용 가능한 에스테르 또는 염 형태, 예를 들어 당해 분야에 널리 공지된 바와 같이 생리상 허용 가능한 양이온 또는 음이온과 병용해서 존재할 수 있다.

본원에 기재된 제약 조성물의 제형은 약리학 분야에 공지되어 있거나 그 후에 개발되는 모든 방법에 의해 제조할 수 있다. 일반적으로, 이러한 제조 방법은 활성 성분을 담체 또는 한 가지 이상의 기타 보조 성분들과 연합시키는 단계; 및 필요한 경우, 생성물을 목적하는 단일 또는 다중 용량 단위로 성형 또는 패키징하는 단계를 포함한다.

본 발명의 방법에 유용한 제약 조성물은 경구, 직장, 질내, 비경구, 국소, 폐, 비내, 볼내, 눈, 또는 또 다른 투여 경로에 적합한 제형으로 제조, 패키징 또는 판매할 수 있다. 고려되는 기타 제형에는 사출 나노입자, 리포솜성 제제, 활성 성분을 함유하는 재봉합 적혈구, 및 면역학에 의거한 제형이 포함된다.

본 발명의 제약 조성물은 벌크로, 단일 단위 용량으로서, 또는 복수 개의 단일 단위 용량으로서 제조, 패키징 또는 판매할 수 있다. 본원에 사용된 바와 같은 "단위 용량"은 예정 량의 활성 성분을 포함하는 별개 양의 제약 조성물이다. 활성 성분의 양은 일반적으로, 대상체에게 투여되는 활성 성분의 투여량과 동등하거나, 또는 이러한 투여량의 편리한 분획, 예를 들어 상기 투여량의 절반이나 1/3이다.

본 발명의 제약 조성물 중의 활성 성분, 제약상 허용 가능한 담체, 및 모든 부가의 성분들의 상대적 양은 치료받는 대상체의 실체, 크기 및 상태에 따라서, 추가로 이러한 조성물이 투여되는 경로에 따라서 다양할 것이다. 예를 들자면, 조성물은 활성 성분을 0.1% 내지 100% (w/w) 포함할 수 있다.

활성 성분 이외에도, 본 발명의 제약 조성물은 한 가지 이상의 부가의 제약상 활성제를 추가로 포함할 수 있다. 특히 고려되는 부가의 작용제에는 항구토제, 항설사제, 화학요법제, 사이토킨 등이 포함된다.

통상적인 기술을 이용하여, 본 발명의 제약 조성물의 제어 방출 또는 지속 방출 제형을 만들 수 있다.

경구 투여용으로 적합한 본 발명의 제약 조성물의 제형은, 각각 예정 량의 활성 성분을 함유하는 정제, 경질 또는 연질 캅셀제, 교갑 (cachet), 트로키제 또는 로젠지를 포함하지만, 이에 제한되지 않는 별개의 고형 용량 단위 형태로 제조, 패키징 또는 판매할 수 있다. 경구 투여용으로 적합한 기타 제형에는 분말형 또는 과립상 제형, 수성 또는 오일상 현탁제, 수성 또는 오일상 용제, 또는 에멀션이 포함되지만, 이에 제한되지 않는다.

본원에 사용된 바와 같은 "오일상" 액상물은 탄소 함유 액상 분자를 포함하고 물 보다는 덜 극성인 특징을 나타내는 것이다.

활성 성분을 포함하는 정제는, 예를 들어 활성 성분을 임의로 한 가지 이상의 부가 성분과 함께 압축 또는 성형시킴으로써 만들 수 있다. 압축 정제는 활성 성분을 적합한 용기 내에서, 임의로 결합제, 윤활제, 부형제, 표면 활성제, 및 분산제 중의 하나 이상과 혼합된 자유-유동 형태, 예를 들어 분말형 또는 과립상 제제로 압축시킴으로써 제조할 수 있다. 성형 정제는 적합한 용기 내에서, 활성 성분, 제약상 허용 가능한 담체, 및 적어도 해당 혼합물을 습윤시키기에 충분한 액상물의 혼합물을 성형시킴으로써 만들 수 있다.

정제를 제조하는데 사용되는 제약상 허용 가능한 부형제에는 불활성 희석제, 과립화제 및 붕해제, 결합제, 및 윤활제가 포함되지만, 이에 제한되지 않는다. 공지된 분산제에는 감자 전분 및 나트륨 전분 글리콜레이트가 포함되지만, 이에 제한되지 않는다. 공지된 표면 활성제에는 나트륨 라우릴 설페이트가 포함되지만, 이에 제한되지 않는다. 공지된 희석제에는 탄산칼슘, 탄산나트륨, 락토스, 미세결정성 셀룰로스, 인산칼슘, 인산수소칼슘 및 인산나트륨이 포함되지만, 이에 제한되지 않는다. 공지된 과립화제 및 붕해제에는 옥수수 전분 및 알진산이 포함되지만, 이에 제한되지 않는다. 공지된 결합제에는 젤라틴, 아카시아, 예비-젤라틴화 옥수수 전분, 폴리비닐피롤리돈 및 히드록시프로필 메틸셀룰로스가 포함되지만, 이에 제한되지 않는다. 공지된 윤활제에는 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산, 실리카 및 탈크가 포함되지만, 이에 제한되지 않는다.

정제는 피복시키지 않을 수 있거나, 또는 대상체의 위장관 내에서의 붕해를 지연시키는 것으로 공지된 방법을 사용하여 피복시킴으로써, 활성 성분의 지속 방출과 흡수를 제공할 수 있다. 예를 들자면, 글리세릴 모노스테아레이트 또는 글리세릴 디스테아레이트 등의 물질을 사용하여 정제를 피복할 수 있다. 추가로 예를 들자면, 정제는 삼투압적으로 제어 방출되는 정제를 형성하기 위해 미국 특허 제4,256,108호; 제4,160,452호; 및 제4,265,874호에 기재된 방법을 사용하여 피복할 수 있다. 정제는 제약상 우아하고 맛 좋은 제제를 제공하기 위해 감미제, 향미제, 착색제, 방부제, 또는 이들의 몇몇 조합물을 추가로 포함할 수 있다.

활성 성분을 포함하는 경질 캅셀제는 생리상 분해 가능한 조성물, 예를 들어 젤라틴을 사용하여 만들 수 있다. 이러한 경질 캅셀제는 활성 성분을 포함하고, 부가의 성분, 예를 들어 불활성 고형 희석제, 예를 들면 탄산칼슘, 인산칼슘 또는 카올린을 추가로 포함할 수 있다.

활성 성분을 포함하는 연질 젤라틴 캅셀제는 생리상 분해 가능한 조성물, 예를 들어 젤라틴을 사용하여 만들 수 있다. 이러한 연질 캅셀제는 활성 성분을 포함하는데, 이는 물 또는 오일 매질, 예를 들어 땅콩유, 액상 파라핀 또는 올리브유와 혼합할 수 있다.

경구 투여용으로 적합한 본 발명의 제약 조성물의 액상 제형은 액상 형태로, 또는 사용 전에 물이나 또 다른 적합한 비히클로 재구성하기 위한 무수 생성물 형태로 제조, 패키징 및 판매할 수 있다.

액상 현탁제는 수성 또는 오일상 비히클 중에서의 활성 성분의 현탁을 달성하는데 통상적인 방법을 사용하여 제조할 수 있다. 수성 비히클에는, 예를 들어 물 및 등장성 식염수가 포함된다. 오일상 비히클에는, 예를 들어 아몬드 오일, 오일상 에스테르, 에틸 알코올, 식물성 오일, 예를 들면 아라키스 (arachis) 오일, 올리브유, 참깨유 또는 코코넛 오일, 분할된 식물성 오일, 및 광유, 예를 들면 액상 파라핀이 포함된다. 액상 현탁제는 한 가지 이상의 부가 성분, 예를 들어 현탁제, 분산제 또는 습윤제, 유화제, 점활제, 방부제, 완충제, 염, 향미제, 착색제, 및 감미제를 추가로 포함할 수 있다. 오일상 현탁제는 증점제를 추가로 포함할 수 있다. 공지된 현탁제에는 솔비톨 시럽, 수소화 식용 지방, 나트륨 알지네이트, 폴리비닐피롤리돈, 트라가칸드 검, 아카시아 검, 및 셀룰로스 유도체, 예를 들어 나트륨 카복시메틸셀룰로스, 메틸셀룰로스, 히드록시프로필 메틸셀룰로스가 포함되지만, 이에 제한되지 않는다. 공지된 분산제 또는 습윤제에는 천연 발생적 포스파티드, 예를 들어 레시틴, 알킬렌 옥사이드와 지방산과의 축합 생성물, 알킬렌 옥사이드와 장쇄 지방족 알코올과의 축합 생성물, 알킬렌 옥사이드와 지방산 및 헥시톨로부터 유래된 부분 에스테르와의 축합 생성물, 또는 알킬렌 옥사이드와 지방산 및 헥시톨 무수물로부터 유래된 부분 에스테르와의 축합 생성물 (예: 각각 폴리옥시에틸렌 스테아레이트, 헵타데카에틸렌옥시세타놀, 폴리옥시에틸렌 솔비톨 모노올레에이트, 및 폴리옥시에틸렌 솔비탄 모노올레에이트)이 포함되지만, 이에 제한되지 않는다. 공지된 유화제에는 레시틴 및 아카시아가 포함되지만, 이에 제한되지 않는다. 공지된 방부제에는 메틸, 에틸 또는 n-프로필-파라-히드록시벤조에이트, 아스코르브산, 및 소르브산이 포함되지만, 이에 제한되지 않는다. 공지된 감미제에는, 예를 들어 글리세롤 프로필렌 글리콜, 솔비톨, 슈크로스 및 삭카린이 포함된다. 오일상 현탁제에 대한 공지된 증점제에는, 예를 들어 밀랍, 경질 파라핀, 및 세틸 알코올이 포함된다.

수성 또는 오일상 용매 중의 활성 성분의 액상 용제는 액상 현탁제와 실질적으로 동일한 방식으로 제조할 수 있는데, 주요 차이점은 활성 성분을 용매에 현탁시키는 것이 아니라 용해시킨다는 것이다. 본 발명의 제약 조성물의 액상 용제는 액상 현탁제와 관련하여 기재된 각각의 성분의 포함할 수 있는데, 현탁제는 활성 성분이 용매에서 용해되는 것을 반드시 보조할 필요는 없다고 이해해야 한다. 수용 용매에는, 예를 들어 물 및 등장성 식염수가 포함된다. 오일상 용매에는, 예를 들어 아몬드 오일, 오일상 에스테르, 에틸 알코올, 식물성 오일, 예를 들면 아라키스 오일, 올리브유, 참깨유 또는 코코넛 오일, 분할된 식물성 오일, 및 광유, 예를 들면 액상 파라핀이 포함된다.

본 발명의 제약 조성물의 분말형 및 과립상 제형은 공지된 방법을 사용하여 제조할 수 있다. 이러한 제형은 대상체에게 직접 투여할 수 있고, 예를 들어 정제를 형성시키거나, 캅셀제를 충전시키거나, 또는 수성 또는 오일상 비히클을 부가함으로써 수성 또는 오일상 현탁제 또는 용제를 제조하기 위해 사용할 수 있다. 이들 제형 각각은 분산제 또는 습윤제, 현탁제, 및 방부제 중의 한 가지 이상을 추가로 포함할 수 있다. 부가의 부형제, 예를 들어 충전제 및 감미제, 향미제 또는 착색제가 이들 제형에 포함될 수도 있다.

본 발명의 제약 조성물은 수중유 에멀션 또는 유중수 에멀션 형태로 제조, 패키징 또는 판매할 수도 있다. 오일상 상은 식물성 오일, 예를 들어 올리브유 또는 아라키스 오일, 광유, 예를 들어 액상 파라핀, 또는 이들의 조합물일 수 있다. 이러한 조성물은 한 가지 이상의 유화제, 예를 들어 천연 발생적 검, 예를 들면 아카시아 검 또는 트라가칸드 검, 천연 발생적 포스파미드, 예를 들면 대두 또는 레시틴 포스파미드, 지방산과 헥시톨 무수물의 조합물로부터 유래된 에스테르 또는 부분 에스테르, 예를 들어 솔비탄 모노올레에이트, 및 이러한 부분 에스테르와 에틸렌 옥사이드와의 축합 생성물, 예를 들어 폴리옥시에틸렌 솔비탄 모노올레에이트를 추가로 포함할 수 있다. 이들 에멀션은 또한, 부가의 성분, 예를 들어 감미제 또는 향미제를 함유할 수 있다.

본 발명의 제약 조성물은 직장 투여용으로 적합한 제형으로 제조, 패키징 또는 판매할 수 있다. 이러한 조성물은, 예를 들어 좌제, 정체 관장제, 및 직장 또는 결장 세척용 용제의 형태일 수 있다.

좌제 제형은 활성 성분을, 통상적인 실온 (즉, 약 20℃) 하에서는 고체이고 대상체의 직장 온도 (즉, 건강한 사람인 경우에는 약 37℃)에서는 액체인 비-자극성의 제약상 허용 가능한 부형제와 합함으로써 만들 수 있다. 적합한 제약상 허용 가능한 부형제에는 코코아 버터, 폴리에틸렌 글리콜, 및 각종 글리세라이드가 포함되지만, 이에 제한되지 않는다. 좌제 제형은 각종 부가 성분, 예를 들어 항산화제 및 방부제를 추가로 포함할 수 있다.

정체 관장제, 또는 직장 또는 결장 세척용 용제는 활성 성분을 제약상 허용 가능한 액상 담체와 합함으로써 만들 수 있다. 당해 분야에 널리 공지된 바와 같이, 관장제는 대상체의 직장 해부학에 맞도록 적응시킨 전달 장치를 사용하여 투여할 수 있고, 이러한 전달 장치 내에서 패키징할 수 있다. 관장제는 각종 부가 성분, 예를 들어 항산화제 및 방부제를 추가로 포함할 수 있다.

본 발명의 제약 조성물은 질내 투여용으로 적합한 제형으로 제조, 패키징 또는 판매할 수 있다. 이러한 조성물은, 예를 들어 좌제, 함침되거나 피복된 질-삽입성 물질, 예를 들어 탐폰, 질 세척기 제제, 또는 질 세척용 젤, 크림 또는 용제의 형태일 수 있다.

특정 물질을 화학적 조성물로 함침 또는 피복시키는 방법은 당해 분야에 공지되어 있고, 이에는 화학적 조성물을 특정 표면 상으로 침착 또는 결합시키는 방법, 화학적 조성물을 특정 물질의 합성 동안 이러한 물질의 구조 내로 혼입시키는 방법 (즉, 생리상 분해 가능한 물질의 경우), 및 수성 또는 오일상 용제 또는 현탁제를 흡수재 내로 흡수시키는 방법 (후속 건조 단계를 수반하거나 수반하지 않음)이 포함되지만, 이에 제한되지 않는다.

질 세척용 용제 또는 질 세척기 제제는 활성 성분을 제약상 허용 가능한 액상 담체와 합함으로써 만들 수 있다. 당해 분야에 널리 공지된 바와 같이, 질 세척기 제제는 대상체의 질 해부학에 맞도록 적응시킨 전달 장치를 사용하여 투여할 수 있고, 이러한 전달 장치 내에서 패키징할 수 있다. 질 세척기 제제는 각종 부가 성분, 예를 들어 항산화제, 항생제, 항진균제 및 방부제를 추가로 포함할 수 있다.

본원에 사용된 바와 같은, 제약 조성물의 "비경구 투여"에는 특정 대상체의 조직을 물리적으로 침해하고, 이러한 조직 내에서의 침해를 통하여 제약 조성물을 투여하는 것을 특징으로 하는 모든 투여 경로가 포함된다. 따라서, 비경구 투여에는 제약 조성물을 주사하고, 외과적 절개를 통하여 이 조성물을 적용하며, 조직-침투성 비-외과적 외상을 통하여 조성물을 적용함으로써 제약 조성물을 투여하는 것이 포함되지만, 이에 제한되지 않는다. 특히 비경구 투여에는 피하, 복강내, 근육내, 흉골내 주사, 및 신장 투석 주입 기술이 포함되지만, 이에 제한되지 않는 것으로 고려된다.

비경구 투여용으로 적합한 제약 조성물의 제형은 활성 성분을 제약상 허용 가능한 담체, 예를 들어 멸균수 또는 멸균성 등장 식염수와 합하여 포함한다. 이러한 제형은 거환 투여용으로 적합하거나 지속적인 투여용으로 적합한 형태로 제조, 패키징 또는 판매할 수 있다. 주사용 제형은 단위 투여 형태, 예를 들어 방부제를 함유하는 다중-용량 용기 또는 앰풀 형태로 제조, 패키징 또는 판매할 수 있다. 비경구 투여용 제형에는 다음에 논의되는 바와 같은, 오일상 또는 수성 비히클 중의 현탁제, 용제, 에멀션; 페이스트, 및 이식 가능한 지속 방출 또는 생분해성 제형이 포함되지만, 이에 제한되지 않는다. 이러한 제형은 한 가지 이상의 부가 성분, 예를 들어 현탁제, 안정화제 또는 분산제를 추가로 포함할 수 있다. 비경구 투여용 제형의 한 양태에서는, 재구성된 조성물을 비경구 투여하기에 앞서 적합한 비히클 (예: 멸균성 발열원-무함유 수)로 재구성하기 위해, 활성 성분을 건조 (즉, 분말 또는 과립상) 형태로 제공한다.

본 발명의 조성물은 당해 분야에 공지된 각종 방법에 의해 투여할 수 있다. 투여 경로 및/또는 방식은 목적하는 결과에 따라서 다양하다. 활성 화합물은 이러한 화합물이 신속하게 방출되지 못하게 하는 담체, 예를 들어 제어 방출 제형 (이에는 이식체, 경피용 패치 및 미소피막화된 전달 시스템이 포함된다)과 함께 준비할 수 있다. 생분해성, 생체적합성 중합체, 예를 들어 에틸렌 비닐 아세테이트, 폴리무수물, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르토에스테르 및 폴리락트산을 사용할 수 있다. 이러한 제형을 제조하기 위한 많은 방법이, 예를 들어 다음 문헌에 기재되어 있다 [참고: Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J. R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York (1978)]. 제약 조성물은 GMP 조건 하에 제조하는 것이 바람직하다.

본 발명의 제약 조성물은 멸균성 주사용 수성 또는 오일상 현탁제 또는 용제의 형태로 제조, 패키징 또는 판매할 수 있다. 이러한 현탁제 또는 용제는 공지된 기술에 따라서 제형화할 수 있고, 활성 성분 이외에도 부가의 성분, 예를 들어 본원에 기재된 분산제, 습윤제 또는 현탁제를 포함할 수 있다. 이러한 멸균성 주사용 제형은 비경구적으로 허용 가능한 비-독성 희석제 또는 용매, 예를 들어 물 또는 1,3-부탄 디올을 이용하여 제조할 수 있다. 기타 허용 가능한 희석제 및 용매에는 링거 용액, 등장성 염화나트륨 용액, 및 고정유, 예를 들어 합성 모노- 또는 디-글리세라이드가 포함되지만, 이에 제한되지 않는다. 유용한 기타 비경구적으로 투여 가능한 제형에는 활성 성분을 미세결정성 형태로 포함하거나, 리포솜 제제 내에 포함하거나, 또는 생분해성 중합체 시스템의 구성분으로서 포함하는 것들이 포함된다. 지속 방출 또는 이식용 조성물은 제약상 허용 가능한 중합체성 또는 소수성 물질, 예를 들어 에멀션, 이온 교환 수지, 거의 불용성인 중합체, 또는 거의 불용성인 염을 포함할 수 있다.

국소 투여용으로 적합한 제형에는 액상 또는 반-액상 제제, 예를 들어 연고, 로션, 수중유 또는 유중수 에멀션, 예를 들면 크림, 연고 또는 페이스트, 및 용제 또는 현탁제가 포함되지만, 이에 제한되지 않는다. 국소적으로 투여 가능한 제형은, 예를 들어 활성 성분을 약 1% 내지 약 10% (w/w) 포함할 수 있지만, 활성 성분의 농도는 용매 중에서의 활성 성분의 용해도 한계치 정도로 높을 수 있다. 국소 투여용 제형은 본원에 기재된 한 가지 이상의 부가 성분을 추가로 포함할 수 있다.

본 발명의 제약 조성물은 구강을 통하여 폐 투여하는데 적합한 제형으로 제조, 패키징 또는 판매할 수 있다. 이러한 제형은 활성 성분을 포함하고 직경 범위가 약 0.5 내지 약 7 나노미터, 바람직하게는 약 1 내지 약 6 나노미터인 건조 입자를 포함할 수 있다. 이러한 조성물은 편리하게는, 추진체 스트림이 분말을 분산시키도록 지시할 수 있는 건조 분말 저장고를 포함하는 장치를 사용하거나, 또는 자가-추진성 용매/분말-분산성 용기, 예를 들어 밀폐된 용기 내에 저-비점 추진체에 용해되거나 현탁된 활성 성분을 포함하는 장치를 사용하여 투여하기 위한 건조 분말 형태이다. 바람직하게는, 상기 분말이 입자의 98 중량% 이상이 0.5 나노미터 초과 직경을 갖고, 입자의 95 수% 이상이 7 나노미터 미만 직경을 갖는 입자를 포함한다. 보다 바람직하게는 입자의 95 중량% 이상이 1 나노미터 초과 직경을 갖고, 입자의 90 수% 이상이 6 나노미터 미만 직경을 갖는다. 건조 분말 조성물에는 바람직하게, 고형 미세 분말 희석제, 예를 들어 당이 포함되고, 이는 단위 투여 형태로 제공되는 것이 편리하다.

저-비점 추진체에는 일반적으로, 대기압 하에서의 비점이 65℉ 아래인 액상 추진체가 포함된다. 일반적으로, 이러한 추진체는 조성물의 50 내지 99.9% (w/w)를 차지할 수 있고, 활성 성분은 조성물의 0.1 내지 20% (w/w)를 차지할 수 있다. 추진체는 부가의 성분, 예를 들어 액상 비이온성 또는 고형 음이온성 계면활성제 또는 고형 희석제 (바람직하게는, 활성 성분을 포함하는 입자와 동일한 차수의 입자 크기를 갖는다)를 추가로 포함할 수 있다.

폐 전달용으로 제형화된 본 발명의 제약 조성물은 또한, 활성 성분을 용제 또는 현탁제의 비말 형태로 제공할 수 있다. 이러한 제형은 활성 성분을 포함하는, 임의로 멸균성인 수성 또는 묽은 알코올성 용제 또는 현탁제로서 제조, 패키징 또는 판매할 수 있다. 이러한 제형은 한 가지 이상의 부가 성분, 예를 들어 향미제, 예를 들면 삭카린 나트륨, 휘발성 오일, 완충제, 표면 활성제, 또는 방부제 (예: 메틸히드록시벤조에이트)를 추가로 포함할 수 있다. 이러한 투여 경로에 의해 제공된 비말은 바람직하게, 평균 직경 범위가 약 0.1 내지 약 200 나노미터이다.

폐 전달에 유용한 것으로 본원에 기재된 제형은 또한, 본 발명의 제약 조성물을 비내 전달하는 데에도 유용하다.

비내 투여용으로 적합한 또 다른 제형은 활성 성분을 포함하고 평균 입자 크기가 약 0.2 내지 500 마이크로미터인 조악한 분말이다. 이러한 제형은 코담배를 맡는 방식으로, 즉 콧구멍에 가까이 댄 분말 용기로부터 콧구멍을 통하여 신속하게 흡입함으로써 투여한다.

비내 투여용으로 적합한 제형은, 예를 들어 활성 성분을 대략 0.1 % (w/w) 정도로 거의 포함하지 않거나 100% (w/w) 정도로 많이 포함할 수 있고, 본원에 기재된 부가의 성분들 중의 한 가지 이상을 추가로 포함할 수 있다.

본 발명의 제약 조성물은 볼 투여용으로 적합한 제형으로 제조, 패키징 또는 판매할 수 있다. 이러한 제형은, 예를 들어 통상적인 방법을 사용하여 만든 정제 또는 로젠지의 형태일 수 있고, 예를 들어 활성 성분을 0.1 내지 20% (w/w) 포함할 수 있으며, 나머지 성분들은 경구 용해 가능하거나 분해 가능한 조성물, 및 임의로 본원에 기재된 부가의 성분들 중의 한 가지 이상을 포함할 수 있다. 또 다른 한편, 볼 투여용으로 적합한 제형은 활성 성분을 포함하는 분말 또는 에어로솔화 또는 분무형 용액 또는 현탁액을 포함할 수 있다. 이러한 분말형, 에어로솔화 또는 분무형 제형이 분산될 경우, 이는 바람직하게 평균 입자 또는 비말 크기가 약 0.1 내지 약 200 나노미터일 수 있고, 본원에 기재된 부가의 성분들 중의 한 가지 이상을 추가로 포함할 수 있다.

본 발명의 제약 조성물은 눈 투여용으로 적합한 제형으로 제조, 패키징 또는 판매할 수 있다. 이러한 제형은, 예를 들어 수성 또는 오일상 액상 담체 중에 활성 성분의 0.1 내지 1.0% (w/w) 용액 또는 현탁액을 포함하는 점안약 형태일 수 있다. 이러한 점안약은 완충제, 염, 또는 본원에 기재된 부가의 성분들 중의 한 가지 이상을 추가로 포함할 수 있다. 유용한 기타 안과적으로 투여 가능한 제형에는 활성 성분을 미세결정성 형태로 포함하거나 리포솜성 제제 내에 포함하는 제형이 포함된다.

본원에 사용된 바와 같은 "부가의 성분"에는 다음 성분들 중의 한 가지 이상이 포함되지만, 이에 제한되지 않는다: 부형제; 표면 활성제; 분산제; 불활성 희석제; 과립화제 및 붕해제; 결합제; 윤활제; 감미제; 향미제; 착색제; 방부제; 생리상 분해 가능한 조성물, 예를 들어 젤라틴; 수성 비히클 및 용매; 오일상 비히클 및 용매; 현탁제; 분산제 또는 습윤제; 유화제; 점활제; 완충제; 염; 증점제; 충전제; 유화제; 항산화제; 항생제; 항진균제; 안정화제; 및 제약상 허용 가능한 중합체성 또는 소수성 물질. 본 발명의 제약 조성물에 포함될 수 있는 기타 "부가의 성분"은 당해 분야에 공지되어 있고, 예를 들어 본원에 참고로 도입된 다음 문헌에 기재되어 있다 [참고: Remington's Pharmaceutical Sciences, Genaro, ed., Mack Publishing Co., Easton, PA (1985)].

본 발명의 항-CTLA4/아로마타제 억제제 활성 성분 조합물은 동물, 바람직하게는 인간에게 투여할 수 있다. 각 활성 성분의 정확한 투여량은 수 많은 요인들, 예를 들어 치료받고 있는 동물의 유형 및 치료하고자 하는 질병 상태의 유형, 동물의 연령 및 투여 경로에 따라서 다양할 것이다.

항-CTLA4 항체는 동물에게 1일 수회 정도로 자주 투여할 수 있거나, 또는 이 보다 덜 자주 투여할 수 있는데, 예를 들어 1일 1회, 1주 1회, 2주 마다 1회, 1개월 마다 1회 투여하거나, 심지어 이 보다 덜 자주 투여할 수 있는네, 예를 들어 수 개월 마다 1회, 또는 1년 내에 1회 투여할 수 있다. 투여 횟수는 당업자에게 용이하게 명백할 것이며, 이는 수 많은 요인들, 예를 들어 치료받고자 하는 질환의 유형 및 중증도, 동물의 유형 및 연령 등에 좌우될 것이다.

아로마타제 억제제, 바람직하게 엑세메스탄은 동물에게 1일 수회 정도로 자주 투여할 수 있거나, 또는 이 보다 덜 자주 투여할 수 있는데, 예를 들어 1일 1회, 1주 1회, 2주 마다 1회, 1개월 마다 1회 투여하거나, 심지어 이 보다 덜 자주 투여할 수 있는네, 예를 들어 수 개월 마다 1회, 또는 1년 내에 1회 투여할 수 있다. 투여 횟수는 당업자에게 용이하게 명백할 것이며, 이는 수 많은 요인들, 예를 들어 치료받고자 하는 질환의 유형 및 중증도, 동물의 유형 및 연령 등에 좌우될 것이다.

상기 항체와 아로마타제 억제제는 이들을 상이한 날짜에 또는 하루 중의 상이한 시간에 별개로 투여할 수 있을 뿐만 아니라 동시에 또는 동일한 날짜에 투여할 수 있다는 점에서 공동-투여할 수 있다. 따라서 공동-투여에는 항체와 아로마타제 억제제의 투여로 인해 환자에게 치료적 이득 (이는 어느 한 가지 작용제를 다른 작용제의 부재 하에서 투여한 경우 보다 탐지 가능한 정도로 훨씬 더 크다)이 매개되도록 이들 두 작용제의 모든 시간적 투여 조합이 포괄된다.

본 발명의 항체-아로마타제 억제제 조합물은 수 많은 기타 화합물 (특히, 기타 항호르몬 요법제, 사이토킨, 화학요법제 및/또는 항바이러스제)과 공동-투여할 수 있다. 또 다른 한편, 이러한 화합물(들)은 본 발명의 항체-아로마타제 억제제 병용 요법에 앞서, 또는 그의 어떠한 순열로든, 시간당, 일별, 주별, 개월별, 또는 그 이상으로 투여할 수 있다. 추가로 상기 화합물(들)은 방사선, 줄기 세포 이식, 또는 치료제 (예: 사이토킨, 화학요법 화합물 등)의 투여 후에, 또는 그의 어떠한 순열로든, 시간당, 일별, 주별, 또는 그 이상으로 투여할 수 있다. 빈도와 투여 섭생은 당업자에게 용이하게 명백할 것이고, 이는 수 많은 요인들, 예를 들어 치료하고자 하는 질환의 유형 및 중증도, 동물의 연령 및 건강 상태, 투여되는 화합물(들)의 실체, 각종 화합물들의 투여 경로 등에 좌우될 것이다.

VII. 키트

본 발명에는 치료상 유효량의 본 발명의 인간 항-CTLA4 항체 및 치료상 유효량의 아로마타제 억제제를, 본 발명의 방법을 수행하기 위해 상기 조합물을 사용하는 것에 관해 기재한 교재 및 국소기구와 함께 포함하는 각종 키트가 포함된다. 이의 예시 키트가 다음에 기재되긴 하지만, 기타 유용한 키트의 내용물도 본 명세서 관점에서 당업자에게 명백할 것이다. 이들 키트 각각이 본 발명 내에 포함된다.

본 발명에는 치료가 필요한 환자에게 유방암을 치료하기 위한 키트가 포함된다. 이러한 키트에는 본 발명의 인간 항-CTLA4 항체와 하나 이상의 아로마타제 억제제가 포함된다. 이 억제제에는 풀베스트란트, 아나스트로졸, 레트로졸 및 엑세메스탄이 포괄되지만, 이에 제한되지 않는다. 본 발명의 키트는 환자에게 키트 구성분들을 투여하기 위한 국소기구, 예를 들어 주사기를 추가로 포함한다. 추가로, 키트는 이러한 키트를 환자에게서 유방암을 치료하기 위해 사용한다는 것과 관련된 정보가 제시된 교재를 포함한다.

보다 바람직하게는, 키트가 항체 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1., 12.3.1.1, 12.9.1.1, 및 10D1 (MDX-010)의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 갖는 항체 중에서 선택된 하나 이상의 항-CTLA4 항체를 포함하고; 보다 더 바람직하게는, 상기 항체가 항체 4.13.1, 11.2.1, 및 10D1 (MDX-010)의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 갖는 항체이다.

한 양태에서는, 아로마타제 억제제가 아나스트로졸, 레트로졸 및 엑세메스탄 중에서 선택된 하나 이상의 억제제이다. 보다 바람직하게는, 아로마타제 억제제가 엑세메스탄이다.

키트는 유방암을 치료하기 위한 수 많은 부가의 작용제를 포함할 수 있다. 이러한 작용제가 앞서 제시되었고, 이에는 화학요법 화합물, 암 백신, 신호 변환 억제제, 비정상적인 세포 성장 또는 암을 치료하는데 유용한 작용제, IGF-1R과 결합함으로써 종양 성장을 억제하는 항체 또는 기타 리간드, 및 사이토킨 등이 포함된다.

본 발명은 또한, 암을 치료하는데 유효한 양 (예를 들어, 10 mg/kg 초과, 15 mg/kg 이상, 또는 15 mg/kg)의 인간 항-CTLA4 항체와, 치료상 유효량의 아로마타제 억제제를 포함하는 제조품 (예를 들어, 정맥내 투여용으로 적응시킨 투여 형태)에 관한 것이다. 특정 양태에서는, 이러한 제조품이 인간 항-CTLA4 항체, 아로마타제 억제제, 및 암을 치료하기 위해 사용하는 것에 관한 지시 사항 및/또는 라벨을 포함하는 용기(들)를 포함한다.

본 발명은 다음 실험 실시예를 참고로 하여 상세히 추가 기재된다. 이들 실시예는 단지 예시 목적으로 제공된 것이며, 달리 명시되지 않는 한은 이로써 제한되지 않는다. 따라서, 본 발명은 다음 실시예로써 제한되는 것이 아니라, 오히려 본원에 제공된 교시 결과로서 명백해진 모든 변동을 포괄하는 것으로 간주되어야 한다.

폐경 후 환자의 전이성 또는 국소적으로 진행된 유방암을 치료하는데 있어서 항-CTLA4 항체를 엑세메스탄과 병용함

정확하게 2차원적으로 측정할 수 있고 크기가 통상적인 CT 스캔에 의해서는 ≥ 2 cm x 1 cm이거나 나선 CT 스캔에 의해서는 ≥ 1 cm x 1 cm인 하나 이상의 병변을 지닌 전이성 또는 국소적으로 진행된 유방암 환자에게, 본원에 기재된 바와 같은 항-CTLA4 항체를 정맥내 주입 투여하였다 (100 mL/hr). 예방적 항구토제와 항설사제를 적당한 바 대로 제공하였다.

28일 후에 치료를 반복하였다. 성공적인 코호트 (cohort)에게는 항-CTLA4 항체를 3 mg/kg 용량부터 시작하여 그 후 28일 마다 용량을 6 mg/kg, 10 mg/kg 및 15 mg/kg으로 단계적으로 상승시켜 최대 12주기 동안 투여하였는데, 참을 수 없는 독성이나 질병 진행이 없었다.

바람직하게는, 환자에게 항-CTLA4 항체를 주입하기 적어도 30분 전에 항히스타민제 (H1)를 미리 투약하였다. 미리 투약하는 것이 권장되긴 하지만, 반드시 요구되지는 않는다.

모든 환자에게 엑세메스탄을 28일 주기로 1일 25 mg 경구 용량으로 연속적으로 투여하였다. 바람직하게는, 엑세메스탄을 해당 날짜에 같은 시간에 취하였다.

코호트당 3 내지 6명의 대상체를 이용하는 용량-배가 도식을 활용하여 가속 적정 계획 하에 용량을 단계적으로 상승시켰다. 각각의 새로운 코호트 내에서는 대상체들 간에 기다리는 시간이 필요 없다. 현 용량 수준 하에서 제1 대상체를 21일 동안 관찰하였고 후속 대상체를 14일 동안 관찰할 때까지 후속 코호트를 개방하지 않을 수 있다.

상기 항체를 고무 마개와 알루미늄 실 (seal)이 장착된 10 ml용의 청정한 유리 바이알에 제공하였다. 각 바이알은 20 mM 나트륨 아세테이트, 0.2 mg/ml 폴리솔베이트 80, 및 140 mM 염화나트륨 (pH 5.5)을 포함하는 멸균성 수성 용액 중에, 5 mg/ml (바이알당 공칭 충전 용량 50 mg)의 항-CTLA4 항체를 함유하였다.

모든 환자를 대상으로 하여, 투여 전에 ECOG 성능 상태, 극히 중요한 징후, 및 체중을 평가하였고, 극히 중요한 징후는 투여 후에 임상적으로 나타낸 바와 같이, 반복해서 평가할 수 있다. 1일 째에 신체 검사 (안과적 평가 및 자가면역 징후 포함)를 수행하였다. 혈액학 패널 (적혈구 용적율, RBC 계수치, WBC 계수치, 시차), 화학 (알칼리성 포스파타제, 칼슘, 클로라이드, GGT, LDH, 마그네슘, 인, 랜덤 글루코스, 나트륨, 뇨, 뇨산), 뇨검사 (혈액, 단백질), 기타 (활성화 부분 트롬보플라스틴 시간 [APTT], 프로트롬빈 시간 (PT), 자가항체 패널, C 반응성 단백질, TSH, T3, T4, 아밀라제, 리파제, 혈청 C3, C4, 혈청 Ig 수준)를 알아보기 위한 샘플을 수득하였다.

기준선 인간 항-인간 항체 (HAHA) 역가를 결정하였고, 약동학적 (PK) 표본을 투여 전에 수득하였다.

다음 종말점을 측정하였다: PK 파라미터, HAHA, 반응율 및 진행되기 까지의 시간. 진행되기 까지의 시간과 전반적인 생존률은 카플란-마이어 (Kaplan-Meier) 생성물 제한 방법을 사용하여 계산하였다.

바람직하게는, 항-CTLA4 항체가 4.1.1, 4.13.1, 11.2.1, 및 10D1 중에서 선택된 하나 이상의 항체의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 갖는다. 보다 바람직하게는, 항체가 11.2.1의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 갖는다.

3명의 환자에게 항-CTLA4 항체 (티실리무마브)를 3 mg/kg 용량으로 투여하였다. 3명 환자 모두에게 엑세메스탄 25 mg을 매일 투여하였다. 1명의 환자에게는 56일 동안, 28일 마다 항-CTLA4를 투여하였고 (2회 용량), 엑세메스탄은 매일 투여하였다. 주기 2 병기 CT 결과, 폐 병변이 기준선에 존재하지 않은 것으로 나타났다. 또한, 이 환자에게, 병인이 밝혀지지 않아 감염이나 염증인 것으로 예상되는 말단 회장, 원위 하향성 결장 및 S자 결장을 포함하여, 약한 수준으로 벽이 원주형으로 두꺼워지는 새로운 현상이 나타났다. 이 환자에게는 이들 변화를 설명할 수 있는 임상 병력이 없었고 환자는 몸 상태가 좋다고 느꼈으며, 임상적으로 무증상이었다. 감염은 전혀 탐지되지 않았다. 이 환자를 대상으로 하여 질병 진행 (PD)을 알아보기 위한 연구를 개시하였다.

두 번째 환자에게는 항-CTLA4 항체를 2 주기로 투여하였고, 엑세메스탄 요법은 대략 14일 동안 수행하였다 (매일 25 mg). 초기 티실리무마브 용량 투여 후에, 상기 환자에게서 우측 팔의 몇몇 기준선 림프부종이 보고되었고, 이는 다소 악화되었다가 진정되었다. 또한, 이 환자에게서는 일시적인 가벼운 비-소양성 발진이 관찰되었다.

세 번째 환자에게는 티실리무마브를 1 주기로 투여하였고, 엑세메스탄을 매일 25 mg씩 대략 28일 동안 투여하였다. 28일 째에, 통상적인 실험실 연구 결과 등급 1 상승된 ALP 및 AST 뿐만 아니라 등급 2 상승된 ALT가 탐지되었다. 이 환자는 무증상이었다. 이들 실험치를 개선시키기 위해 현재 진행중인 요법에 희망을 걸고 있다.

이들 데이터는 티실리무마브와 엑세메스탄을 병용해서 치료받은 환자들이 생물학적 활성을 나타내었다는 것을 제시하고 있다.

본원에 인용된 각각의 모든 특허, 특허원 및 공개문헌의 기재 내용은 그의 전문이 본원에 참고로 도입된다.

본 발명이 구체적 양태들을 참고로 하여 기재되긴 하였지만, 본 발명의 기타 양태와 변동들이 본 발명의 요지와 범위를 벗어나지 않고서도 당업자에에 의해 추론될 수 있다는 것이 명백하다. 첨부된 청구의 범위는 이러한 모든 양태와 등가의 변동을 포함하는 것으로 간주되어야 한다.

SEQUENCE LISTING <110> PFIZER PRODUCTS INC. Gomez-Navarro, Jesus <120> CTLA4 Antibody and Aromatase Inhibitor Combination Treatment For Breast Cancer <130> PC32619A <140> app no. to be assigned <141> 2005-10-07 <150> US 60/624,856 <151> 2004-11-04 <160> 36 <170> PatentIn version 3.3 <210> 1 <211> 1392 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 1 atggagtttg ggctgagctg ggttttcctc gttgctcttt taagaggtgt ccagtgtcag 60 gtgcagctgg tggagtctgg gggaggcgtg gtccagcctg ggaggtccct gagactctcc 120 tgtgtagcgt ctggattcac cttcagtagc catggcatgc actgggtccg ccaggctcca 180 ggcaaggggc tggagtgggt ggcagttata tggtatgatg gaagaaataa atactatgca 240 gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtttctg 300 caaatgaaca gcctgagagc cgaggacacg gctgtgtatt actgtgcgag aggaggtcac 360 ttcggtcctt ttgactactg gggccaggga accctggtca ccgtctcctc agcctccacc 420 aagggcccat cggtcttccc cctggcgccc tgctccagga gcacctccga gagcacagcg 480 gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 540 ggcgctctga ccagcggcgt gcacaccttc ccagctgtcc tacagtcctc aggactctac 600 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<211> 10 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 16 Gly Phe Thr Phe Ser Ser His Gly Ile His 1 5 10 <210> 17 <211> 15 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 17 Val Ile Trp Tyr Asp Gly Arg Asn Lys Asp Tyr Ala Asp Ser Val 1 5 10 15 <210> 18 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 18 Val Ala Pro Leu Gly Pro Leu Asp Tyr 1 5 <210> 19 <211> 645 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 19 gaaattgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcctgca gggccagtca gagtgtcagc agctacttag cctggtacca gcagaaacct 120 ggccaggctc ccaggctcct catctatggt gcatccagca gggccactgg catcccagac 180 aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag actggagcct 240 gaggattttg cagtgtatta ctgtcaacag tatggtaggt caccattcac tttcggccct 300 gggaccaaag tagatatcaa gcgaactgtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360 tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420 cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540 ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600 ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 645 <210> 20 <211> 214 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 20 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Arg Ser Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 21 <211> 146 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 21 Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu 1 5 10 15 Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln 20 25 30 Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser 35 40 45 Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 50 55 60 Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val 65 70 75 80 Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Arg Ser Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly 85 90 95 Thr Lys Val Asp Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile 100 105 110 Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val 115 120 125 Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys 130 135 140 Val Asp 145 <210> 22 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 22 Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr Leu Ala 1 5 10 <210> 23 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 23 Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr 1 5 <210> 24 <211> 10 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 24 Cys Gln Gln Tyr Gly Arg Ser Pro Phe Thr 1 5 10 <210> 25 <211> 1413 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 25 atggagtttg ggctgagctg ggttttcctc gttgctcttt taagaggtgt ccagtgtcag 60 gtgcagctgg tggagtctgg gggaggcgtg gtccagcctg ggaggtccct gagactctcc 120 tgtgcagcgt ctggattcac cttcagtagc tatggcatgc actgggtccg ccaggctcca 180 ggcaaggggc tggagtgggt ggcagttata tggtatgatg gaagtaataa atactatgca 240 gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtatctg 300 caaatgaaca gcctgagagc cgaggacacg gctgtgtatt actgtgcgag agatccgagg 360 ggagctaccc tttactacta ctactacggt atggacgtct ggggccaagg gaccacggtc 420 accgtctcct cagcctccac caagggccca tcggtcttcc ccctggcgcc ctgctccagg 480 agcacctccg agagcacagc ggccctgggc tgcctggtca aggactactt ccccgaaccg 540 gtgacggtgt cgtggaactc aggcgctctg accagcggcg tgcacacctt cccagctgtc 600 ctacagtcct caggactcta ctccctcagc agcgtggtga ccgtgccctc cagcaacttc 660 ggcacccaga cctacacctg caacgtagat cacaagccca gcaacaccaa ggtggacaag 720 acagttgagc gcaaatgttg tgtcgagtgc ccaccgtgcc cagcaccacc tgtggcagga 780 ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 840 gaggtcacgt gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ccgaggtcca gttcaactgg 900 tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cacgggagga gcagttcaac 960 agcacgttcc gtgtggtcag cgtcctcacc gttgtgcacc aggactggct gaacggcaag 1020 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaaggc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 1080 aaaaccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggaggag 1140 atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctaccc cagcgacatc 1200 gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac acctcccatg 1260 ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 1320 cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 1380 cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa tga 1413 <210> 26 <211> 451 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 26 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Pro Arg Gly Ala Thr Leu Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met 100 105 110 Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr 115 120 125 Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser 130 135 140 Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu 145 150 155 160 Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His 165 170 175 Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser 180 185 190 Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys 195 200 205 Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu 210 215 220 Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala 225 230 235 240 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 245 250 255 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 260 265 270 Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 275 280 285 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe 290 295 300 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 305 310 315 320 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile 325 330 335 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 340 345 350 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser 355 360 365 Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 370 375 380 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 385 390 395 400 Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 405 410 415 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 420 425 430 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 435 440 445 Pro Gly Lys 450 <210> 27 <211> 167 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 27 Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser 1 5 10 15 Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro 20 25 30 Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn 35 40 45 Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp 50 55 60 Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu 65 70 75 80 Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Pro Arg Gly Ala Thr Leu 85 90 95 Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 115 120 125 Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 130 135 140 Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 145 150 155 160 Ala Leu Thr Ser Gly Val His 165 <210> 28 <211> 10 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 28 Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His 1 5 10 <210> 29 <211> 15 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 29 Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 1 5 10 15 <210> 30 <211> 16 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 30 Asp Pro Arg Gly Ala Thr Leu Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val 1 5 10 15 <210> 31 <211> 714 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 31 atggacatga gggtccccgc tcagctcctg gggctcctgc tactctggct ccgaggtgcc 60 agatgtgaca tccagatgac ccagtctcca tcctccctgt ctgcatctgt aggagacaga 120 gtcaccatca cttgccgggc aagtcagagc attaacagct atttagattg gtatcagcag 180 aaaccaggga aagcccctaa actcctgatc tatgctgcat ccagtttgca aagtggggtc 240 ccatcaaggt tcagtggcag tggatctggg acagatttca ctctcaccat cagcagtctg 300 caacctgaag attttgcaac ttactactgt caacagtatt acagtactcc attcactttc 360 ggccctggga ccaaagtgga aatcaaacga actgtggctg caccatctgt cttcatcttc 420 ccgccatctg atgagcagtt gaaatctgga actgcctctg ttgtgtgcct gctgaataac 480 ttctatccca gagaggccaa agtacagtgg aaggtggata acgccctcca atcgggtaac 540 tcccaggaga gtgtcacaga gcaggacagc aaggacagca cctacagcct cagcagcacc 600 ctgacgctga gcaaagcaga ctacgagaaa cacaaagtct acgcctgcga agtcacccat 660 cagggcctga gctcgcccgt cacaaagagc ttcaacaggg gagagtgtta gtga 714 <210> 32 <211> 214 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 32 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Tyr 20 25 30 Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Thr Pro Phe 85 90 95 Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 33 <211> 139 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 33 Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys 1 5 10 15 Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Tyr Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys 20 25 30 Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln 35 40 45 Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe 50 55 60 Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr 65 70 75 80 Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Thr Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys 85 90 95 Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro 100 105 110 Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu 115 120 125 Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val 130 135 <210> 34 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 34 Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Tyr Leu Asp 1 5 10 <210> 35 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 35 Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser 1 5 <210> 36 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 36 Gln Gln Tyr Tyr Ser Thr Pro Phe Thr 1 5

Claims (20)

1. 치료가 필요한 환자에게, 치료상 유효량의 항-CTLA4 항체, 또는 그의 항원-결합성 부분을, 치료상 유효량의 아로마타제 억제제와 병용해서 투여하는 것을 포함하여, 이러한 환자에게서 유방암을 치료하는 방법.
2. 제1항에 있어서, 아로마타제 억제제가 아나스트로졸 (anastrozole), 레트로졸 (letrozole) 및 엑세메스탄 (exemestane)으로 이루어진 군 중에서 선택된 하나 이상의 억제제인 방법.
3. 제2항에 있어서, 아로마타제 억제제가 엑세메스탄인 방법.
4. 제3항에 있어서, 인간 항-CTLA4 항체의 치료상 유효량 범위가 약 1 mg/kg 내지 40 mg/kg인 방법.
5. 제4항에 있어서, 인간 항-CTLA4 항체의 치료상 유효량 범위가 약 3 mg/kg 내지 15 mg/kg인 방법.
6. 제3항에 있어서, 엑세메스탄의 치료상 유효량 범위가 1일 약 25 mg 내지 1일 200 mg인 방법.
7. 제6항에 있어서, 엑세메스탄의 치료상 유효량이 1일 약 25 mg인 방법.
8. 제1항에 있어서, 치료가 신생보조 요법, 보조 요법, 1차 치료, 2차 치료 및 3차 치료로 이루어진 군 중에서 선택되는 방법.
9. 제1항에 있어서, 항체가 비-인간 포유류 항체, 키메라 항체, 및 인간 항체로 이루어진 군 중에서 선택되는 방법.
10. 제9항에 있어서, 항체가 인간 항체인 방법.
11. 제1항에 있어서, 항-CTLA4 항체, 또는 그의 항원-결합성 부분이 다음으로 이루어진 군 중에서 선택된 하나 이상의 항체인 방법:

    (a) CTLA4에 대한 결합 친화도가 약 10^-8 이상이고, CTLA4와 B7-1과의 결합을 억제하며 CTLA4와 B7-2와의 결합을 억제하는 인간 항체;

    (b) 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1., 12.3.1.1, 12.9.1.1, 및 10D1로 이루어진 군 중에서 선택된 항체로부터의 CDR 서열에 상응하는 하나 이상의 인간 CDR 서열을 포함하는 아미노산 서열을 갖는 인간 항체;

    (c) 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1., 12.3.1.1, 및 12.9.1.1로 이루어진 군 중에서 선택된 항체의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 갖는 인간 항체;

    (d) 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1., 12.3.1.1, 12.9.1.1, 및 10D1로 이루어진 군 중에서 선택된 항체의 중쇄 가변 영역과 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열을 갖는 인간 항체;

    (e) CTLA4와의 결합을 놓고 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1., 12.3.1.1, 12.9.1.1, 및 10D1로 이루어진 군 중에서 선택된 항체의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 항체와 경쟁하는 항체, 또는 그의 항원-결합성 부분; 및

    (f) CTLA4와의 결합을 놓고 4.1.1, 4.8.1, 4.10.2, 4.13.1, 4.14.3, 6.1.1, 11.2.1, 11.6.1, 11.7.1., 12.3.1.1, 12.9.1.1, 및 10D1로 이루어진 군 중에서 선택된 항체의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 갖는 하나 이상의 항체와 교차-경쟁하는 항체, 또는 그의 항원-결합성 부분.
12. 제1항에 있어서, 항체가 항체 11.2.1의 중쇄 및 경쇄 아미노산 서열을 갖는 인간 항체인 방법.
13. 제1항에 있어서, 항체가 중쇄의 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열과, 경쇄의 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열이 다음으로 이루어진 군 중에서 선택되는 중쇄와 경쇄를 포함하는 방법:

    (a) 서열 3의 아미노산 서열과 서열 9의 아미노산 서열;

    (b) 서열 15의 아미노산 서열과 서열 21의 아미노산 서열;

    (c) 서열 27의 아미노산 서열과 서열 33의 아미노산 서열;

    (d) 서열 1의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열과, 서열 7의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열;

    (e) 서열 13의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열과, 서열 19의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열;

    (f) 서열 25의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열과, 서열 31의 핵산 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열;

    (g) 항체 10D1의 중쇄 가변 영역과 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열.
14. 제1항에 있어서, 항체, 또는 그의 항원-결합성 부분이 다음으로 이루어진 군 중에서 선택된 항체인 방법:

    (a) 서열 4, 서열 5 및 서열 6에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역을 갖고, 서열 10, 서열 11 및 서열 12에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 추가로 갖는 항체;

    (b) 서열 16, 서열 17 및 서열 18에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역을 갖고, 서열 22, 서열 23 및 서열 24에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 추가로 갖는 항체;

    (c) 서열 28, 서열 29 및 서열 30에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역을 갖고, 서열 34, 서열 35 및 서열 36에 제시된 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 추가로 갖는 항체;

    (d) 항체 10D1의 중쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역을 갖고, 항체 10D1의 경쇄 CDR1, CDR2 및 CDR3의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 추가로 갖는 항체.
15. 제1항에 있어서, 환자에게 알킬화제, 엽산염 길항제, 피리미딘 길항제, 안트라사이클린 항생제, 백금 화합물, 탁산, 빈카 알카로이드, 캄프토테신 유사체, 톨 (toll)-유사 수용체 자극제, 열 쇽 단백질에 의거한 종양 백신, 항원 제시 세포에 의거한 요법, 포유류 표적의 라파마이신 억제제, erbB2 억제제, EGFR 억제제, VEGF 억제제, VEGFR 억제제, 혈관형성 억제제, 항체, 면역조정제, 선택적 에스트로겐 수용체 조정제, 사이토킨, 종양 백신, 항증식제, 면역 공-자극성 분자, 및 사이토킨으로 이루어진 군 중에서 선택된 한 가지 이상의 작용제를 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.
16. 치료상 유효량의 항-CTLA4 항체;

    치료상 유효량의 아로마타제 억제제; 및

    제약상 허용 가능한 담체

    를 포함하는, 유방암을 치료하기 위한 제약 조성물.
17. 제16항에 있어서, 아로마타제 억제제가 아나스트로졸, 레트로졸 및 엑세메스탄으로 이루어진 군 중에서 선택된 하나 이상의 아로마타제 억제제인 제약 조성물.
18. 제17항에 있어서, 아로마타제 억제제가 엑세메스탄인 제약 조성물.
19. 특정 환자에게서 유방암을 치료하기 위한 (이러한 치료는 환자에게 특정 양의 아로마타제 억제제를 투여하는 것을 추가로 포함한다) 조성물을 제조하는데 있어서의, 특정 양의 항-CTLA4 항체의 용도.
20. 제19항에 있어서, 아로마타제 억제제가 엑세메스탄이고, 추가로 상기 항체가 항체 11.2.1의 중쇄 및 경쇄 가변 영역 아미노산 서열을 갖는 인간 항체인 용도.