CN101011481B - 白花蛇舌草提取物及其药物制剂、制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

白花蛇舌草提取物及其药物制剂、制备方法和应用，该提取物中E-6-O-P-香豆酰鸡屎藤苷甲酯的含量为7％～40％。本发明还涉及白花蛇舌草提取物的制备方法和用于治疗胆囊炎的良好地应用效果。本发明的提取物其有效成分的含量确定，对于治疗和预防胆囊炎有很好地药效作用，更有利于药物的制备和临床的应用。由本发明的制备方法所得提取物其有效成分的质量稳定，可以很好地保留其原料中的有效成分，去掉杂质，且制备方法简单易于操作。

Description

白花蛇舌草提取物及其药物制剂、制备方法和应用

技术领域

本发明涉及中药白花蛇舌草提取物及其制备的药物制剂，还涉及白花蛇舌草提取物的制备方法和用于治疗胆囊炎。

背景技术

白花蛇舌草为茜草科植物白花蛇舌草的全草，多生于潮湿的田边、沟边、路旁及草地，全国大部分地区均有分布。白花蛇舌草含三十一烷、豆甾醇、谷甾醇、熊果酸、齐墩果酸、乌索酸、对香豆酸、β-谷甾酸、β-谷甾醇-D-葡萄糖甙等。白花蛇舌草性寒、味甘苦，归心、肺、肝、大肠经，具有清热解毒、收敛利湿、消痈散结的功效。白花蛇舌草：1、用于肠痈、肺痈、疮疖肿痛、毒蛇咬伤。肠痈、肺痈，轻证单用有效。疮疖肿痛，单用或与蒲公英、紫花地丁用同。蛇伤(如青竹蛇咬伤)，可用本品酒煎服，亦可外敷。2、用于各种肿瘤，尤多用于消化道及淋巴肿瘤。单用或与山豆根、半枝莲、黄药子等治肿瘤药配伍。3、用于湿热水肿、热淋、黄疸。可与其它清热利湿、退黄药同用。此外，现代又用于支气管炎、***等。

白花蛇舌草药理作用为：1、能显著增强机体的免疫能力，如刺激网状内皮细胞增生，使吞噬活跃，促进抗体形成，并使***、脾、肝等组织中嗜银物质呈致密化改变。2、有抗肿瘤作用，如对急性淋巴细胞型、粒细胞型、单核细胞型以及慢性粒细胞型的肿瘤细胞有抑制作用；对吉田肉瘤和艾氏腹水癌有抑制作用。3、体外抗菌作用不显著，高浓度煎剂对绿脓杆菌、伤寒杆菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌、痢疾杆菌、流感杆菌、肺炎球菌、溶血性链球菌、奈氏球菌有抑制作用。此外，又能增强肾上腺皮质功能，并有镇痛、镇静、催眠作用。

目前，白花蛇舌草多作为复方制剂中的一种，和其它药配伍使用，还没有研究白花蛇舌草提取物单独作为药物的报道，更没有用于治疗胆囊炎的应用情况的报道。而现在治疗胆囊炎的药物，主要以消炎利胆片这种复方中药为主，其药效相对较慢，且利胆的作用不明显。

发明内容

本发明的目的之一旨在提供一种药物制剂以白花蛇舌草提取物为活性成分，具有良好地清热解毒、利湿消肿、活血止痛之功效。

本发明的目的之二旨在提供含量指示成分明确白花蛇舌草提取物。

本发明的目的之三旨在提供白花蛇舌草提取物在治疗胆囊炎上的应用。

本发明的目的之四旨在提供一种白花蛇舌草提取物的制备方法。

本发明的目的是通过下述方式实现的：

白花蛇舌草提取物其中E-6-O-P-香豆酰鸡屎藤苷甲酯(E-6-O-p-coumaroyl scandosidemethyl ester，以下简称CSME)的含量为7％～40％。

白花蛇舌草提取物其中总香豆酸衍生物含量为30％～85％，较优的含量，总香豆酸衍生物含量50-85％。

一种药物制剂，含有活性成分白花蛇舌草提取物，并加入相应剂型药物辅料制成。

用本发明上述的药物制剂或白花蛇舌草提取物作为制备治疗或预防胆囊炎的药物或保健品。

本发明的提取物其有效成分的含量确定，对于治疗和预防胆囊炎有很好地药效作用，更有利于药物的制备和临床的应用。

本发明的白花蛇舌草提取物的制备方法为：

(6)取白花蛇舌草用含水有机溶剂提取，得提取液；

(7)提取液浓缩，得浓缩液；

(8)将所得浓缩液加入壳聚糖溶液沉降，滤过，得滤液；

(9)滤液经上聚酰胺柱，水洗弃去，碱水或含水乙醇洗脱，得洗脱液；

(10)洗脱液浓缩、干燥得提取物。

上述提取物，不加或加入其可接受的药物辅料制成相应药物制剂。

本发明中使用含水有机溶剂包括：10％-90％的乙醇溶液或含水丙酮。

本发明的碱水最优选氨水浓度由0.1％-1％均可。

由本发明的制备方法所得提取物其有效成分的质量稳定，可以很好地保留其原料中的有效成分，去掉杂质，制备方法简单易于操作。

本发明提供的白花蛇舌草提取物经过加工制备的适合服用的任何单位剂量形式的药物制剂。剂型包括片剂、分散片、泡腾片、冻干粉针、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、丹剂、混悬剂、粉剂，需要时可以制成缓释制剂、肠溶制剂。在制备成药物制剂时可加入药物可接受的载体，所述药物可接受的载体选自：抗氧剂、鳌合剂、表面活性剂、填充剂、崩解剂、润湿剂、分散剂、润滑剂、溶剂缓释材料、肠溶材料、PH调节剂、矫味剂、色素等，常用的载体如：乳糖、葡萄糖、纤维素及纤维素衍生物、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、糊精、淀粉、β-环糊精、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、羧甲基淀粉钠等。

本发明的药物制剂需根据病人的病情，确定用法和用量，可2-3次/日服用，日服用量为200-800mg提取物，优选600mg。

本发明的提取物，由于其成分含量确定，其药效则可发挥地更好，可以很好地用于制备治疗或预防胆囊炎的药物。为了更好地理解本发明的应用实质，以下就本发明提取物的药效学情况予以说明。

1、实验材料

1.1、药物及试剂

本发明的白花蛇舌草提取物胶囊，100mg/粒；消炎利胆片，批号：B6A004，广州白云山和记黄埔中药有限公司；阿司匹林片，批号031101，山东省德州制药厂；角叉菜胶，批号：110H3367，Sigma公司生产；细菌内毒素，9000Eu/amp，批号：981，中国生物制品研究所生产；伊文思兰，批号：820805，Koch-light进口分装，由上海化学试剂采购供应站经销。

1.2、动物及仪器：

清洁级昆明种小鼠、SD大鼠、豚鼠、日本大耳白家兔，均由湖南农业大学动物科技学院实验动物养殖场提供；实验动物生产许可证：SCXK(湘)2003-0003号；湖南省药品检验所动物房，实验动物使用许可证：SYXK(湘)2003-0006号。F-800全血细胞分析仪，日本东亚生产；ACTONALYSER自动生化分析仪，意大利；血液血粘仪，北京中勤世帝科学仪器有限公司；LEICAQ5501W医学图像分析仪，德国。

2、实验方法和结果

2.1药物配制方法和实验动物分组

实验动物一般分为六组：第一组为正常对照组，给等体积蒸馏水；第二组为模型对照组，给等体积蒸馏水；第三组为阳性药物组；第四、五、六组分别为白花蛇舌草提取物胶囊高、中、低剂量组，用白花蛇舌草提取物胶囊提取物加蒸馏水分别配成1.44g/100ml、0.72g/100ml、0.36g/100ml的浓度供小鼠用；分别配成1.26g/100ml、0.63g/100ml、0.32g/100ml的浓度供大鼠用；分别配成2.6g/100ml、1.3g/100ml、0.65g/100ml的浓度供家兔用；分别配成16.6g/100ml、8.3g/100ml、4.2g/100ml的浓度供豚鼠用；(按体表面积计，分别相当于人用等效剂量的4倍、2倍和1倍)；阳性药物用二个，一个为消炎利胆片，用蒸馏水分别配成3.44g/100ml、0.54g/100ml、0.26g/100ml、0.30g/100ml的浓度供豚鼠、家兔、大鼠和小鼠用(按体表面积计，相当于人用等效剂量的2倍)；一个为阿司匹林片，用蒸馏水分别配成2.24g/100ml、1.24g/100ml的浓度供家兔和小鼠用(按体表面积计，相当于人用等效剂量的2倍)；所有动物均灌胃给药，小鼠给药体积为25ml/kg体重，大鼠20ml/kg体重，家兔为5ml/kg体重。除另有规定外，一般每天给药一次，连续灌胃8天，实验室温度控制在18～28℃。

2.2白花蛇舌草提取物胶囊的抗炎作用^[2]

2.2.1对巴豆油致小白鼠耳廓肿胀的影响

清洁级昆明种小鼠50只，雄性，体重18～22g，随机分为五组(n＝10)，阳性药用消炎利胆片，按2.1方法给药，每天一次，共8天，在给药第8天，末次给药40min后，于小鼠右耳涂2％巴豆油(含2％巴豆油、20％无水乙醇、5％蒸馏水和73％***)0.1ml/只致肿，左耳不涂为正常耳。4h后脱颈椎处死小鼠，用直径为8mm打孔器冲下左耳和右耳同一部位的圆片，于电子分析天平上称重，以耳廓肿胀度值(小鼠右耳重量与小鼠左耳重量之差)比较药物的抗炎作用。结果见表1。

表1白花蛇舌草提取物胶囊对巴豆油致小鼠耳廓肿胀的影响(X±SD，n＝10)

与模型对照组比较^*P＞0.05  ^**P＜0.05  ^***P＜0.01

结果表明，白花蛇舌草提取物胶囊高、中、低三个剂量组和阳性药物组能显著降低巴豆油所致小鼠耳廓肿胀率，其肿胀率明显低于模型对照组。

2.2.2对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响

清洁级昆明种小鼠50只，雌雄各半，体重18～22g，随机分为五组(n＝10)，阳性药用消炎利胆片，按2.1方法给药，每天一次，共8天，在给药第8天，末次给药40min后，各鼠均静脉注射1％伊文思蓝(0.1ml/g)，随即腹腔注射0.6％醋酸(0.2ml/只)，20min后，脱颈椎处死，用5ml生理盐水冲洗腹腔，用注射器吸取洗涤液(3～4ml左右)并移至试管中。将洗涤液进行1000rpm离心5min，取上清液在590nm处测定吸光度(A)。结果见表2。

表2白花蛇舌草提取物胶囊对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响(X±SD，n＝10)

与模型对照组比较^*P＞0.05  ^**P＜0.05  ^***P＜0.01

结果表明，白花蛇舌草提取物胶囊高、中两个剂量组和阳性药物组能明显抑制醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性的增加，但低剂量组作用不明显。

2.2.3对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀的影响

清洁级SD大鼠50只，雄性，体重160～180g，随机分为五组(n＝10)，阳性药用消炎利胆片，按2.1方法给药，每天一次，共8天，在给药第8天，末次给药1.0h后，于大鼠右后足跖皮下注入1％角叉菜胶0.1ml/只，致炎后的1.0h、2.0h、3.0h、4.0h、5.0h、6.0h分别测定大鼠足跖周长，计算肿胀度值(致炎后足跖周长与致炎前足跖周长之差)。结果见表3。

表3白花蛇舌草提取物胶囊对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀的影响(X±SD，n＝10)

续表3：

与模型对照组比较^*P＞0.05  ^**P＜0.05  ^***P＜0.01

结果表明，白花蛇舌草提取物胶囊高、中、低三个剂量组和阳性药物组能明显抑制角叉菜胶引起的大鼠足跖肿胀，其肿胀率明显低于模型对照组。

2.2.4对胆囊炎豚鼠胆囊病理变化的影响^[3]

取豚鼠48只，350～450g，雌雄各半，随机分为六组(n＝8)，阳性药用消炎利胆片。除正常对照组外，其余五组均给予盐酸林可霉素60mg/kg/d，皮下注射，连续注射4天，停2天，再注射3天。于实验第4天开始按2.1方法给药，每天一次，共8天。于第12天，末次给药60min后，处死豚鼠，迅速剖开胸腔取胆囊，***固定，送病理。呈胆囊炎样病理改变：凡发生黏膜水肿、渗血、固有膜腺体向下浸润、炎细胞浸润、息肉形成或炎症的动物为阳性。结果见表4。图片附后。

表4白花蛇舌草提取物胶囊对胆囊炎豚鼠胆囊病理变化的影响(Pearson卡方(x²)，n＝10)

与空白对照组比较^P＞0.05  ^^P＜0.05  ^^^P＜0.01

与模型对照组比较^*P＞0.05  ^**P＜0.05  ^***P＜0.01

结果表明，模型对照组豚鼠胆囊呈胆囊炎样病理改变：黏膜水肿、渗血、固有膜腺体向下浸润、炎细胞浸润。白花蛇舌草提取物胶囊高、中、低三个剂量组和阳性药物组无水肿、无或少量渗血、无或少量炎细胞浸润，都具有较好的抗炎作用。

2.3白花蛇舌草提取物胶囊的解热作用

取日本大耳白家兔数只，雌雄各半，体重2.0～2.5kg，按中国药典二部附录预测家兔体温，选择符合要求的家兔70只供试验。均分成7组，每组10只，于实验当日先测正常体温两次，然后按2.1法的剂量灌胃给药(5ml/kg)，给药后30分钟，按家兔体重自耳静脉注射细菌内毒素35Eu/Kg，开始每半小时测家兔肛温一次，共测4次，2小时后，每小时测家兔肛温一次，测8个小时。记录家兔体温和计算升温值，结果见表5。

表5白花蛇舌草提取物胶囊对细菌内毒素引起的家兔体温升高的影响(X±SD，n＝10)

续表5：

与空白对照组比较^P＞0.05  ^^P＜0.05  ^^^P＜0.01

与模型对照组比较^*P＞0.05  ^**P＜0.05  ^***P＜0.01

结果表明，白花蛇舌草提取物胶囊高、中、低三个剂量组和阿司匹林组能明显抑制细菌内毒素引起的家兔体温的升高，但消炎利胆片组作用不明显。

2.4白花蛇舌草提取物胶囊的镇痛作用

2.4.1对醋酸致痛小鼠扭体次数的影响

清洁级昆明种小鼠60只，雌雄各半，体重18～22g，随机分为六组(n＝10)，阳性药用阿司匹林片，按2.1方法给药，每天一次，共8天，在给药第8天，除正常对照组外，末次给药60min后，腹腔注射0.7％冰醋酸(0.15ml/10g)，观察每只小鼠15min内因疼痛引起的扭体次数。结果见表6。

表6白花蛇舌草提取物胶囊对醋酸致痛小白鼠扭体次数的影响(X±SD，n＝10)

与模型对照组比较^*P＞0.05  ^**P＜0.05  ^***P＜0.01

结果表明，白花蛇舌草提取物胶囊高、中两个剂量组和阳性药物组能明显抑制醋酸致痛小鼠扭体次数的增加，低剂量组仅抑制醋酸致痛小鼠扭体次数增加的趋势，而消炎利胆片组作用不明显。

2.4.2对热刺激小鼠疼痛反应的影响

筛选合格小鼠：热板温度恒定在(55±0.5)℃10min后，取体重18～22g雌性清洁级昆明种小鼠数只。凡舔后足时间小于5s或大于30s或跳跃者弃之不用。选合格小鼠60只，随机分为六组(n＝10)，测其正常痛阈值，作为该鼠给药前痛阈值。阳性药用阿司匹林片，按2.1方法给药，给药后30、60、90min分别测小鼠痛阈值。结果见表7。

表7白花蛇舌草提取物胶囊对热刺激小鼠疼痛反应的影响(X±SD，n＝10)

与模型对照组比较^*P＞0.05  ^**P＜0.05  ^***P＜0.01

结果表明，白花蛇舌草提取物胶囊高、中两个剂量组和阳性药物组能明显提高热刺激小鼠的痛阈值，低剂量组仅显示提高热刺激小鼠痛阈值的趋势，而消炎利胆片组作用不明显。

2.5白花蛇舌草提取物胶囊的利胆作用

2.5.1对家兔胆汁流量的影响

取日本大耳白家兔40只，雌雄各半，体重2.0～2.5kg，随机分成五组(n＝8)，然后按2.1法的剂量灌胃给药(5ml/kg)，每天一次，共8天，在给药第7天后，禁食12h，自由饮水，第8天给药后，用3％戊巴比妥钠溶液(1ml/kg/只)进行耳缘静脉注射麻醉，麻醉后背位固定于手术台上，开腹，将胆总管剪一小口，***内径为1.2mm塑料管，结扎固定以便胆汁引出体外，分别收集给药后1h、2h、3h、4h各时间的胆汁流量。结果见表8。

表8白花蛇舌草提取物胶囊对家兔胆汁流量的影响(X±SD，n＝8)(单位：ml)

与模型对照组比较^*P＞0.05  ^**P＜0.05  ^***P＜0.01

与消炎利胆片组比较^P＞0.05  ^^P＜0.05  ^^^P＜0.01

结果表明，白花蛇舌草提取物胶囊高、中、低三个剂量组和消炎利胆片组均有明显利胆作用，且高剂量组给药后1小时和2小时的利胆作用明显强于消炎利胆片组的利胆作用。

2.5.2对正常小鼠小肠推进运动的影响^[4]

取昆明种小鼠50只，体重18～20g，雌雄兼用。均分成5组。剂量、分组均按试验2.1的方法。一次性灌胃给药60分钟后，灌胃同体积的10％墨汁。每次容量均为25ml/Kg。15分钟后处死动物。取胃幽门至回盲部的肠管，平放于玻璃板上，量取长度作为“小肠总长度”，从幽门至墨汁前沿的距离作为“墨汁在肠内推进距离”，计算墨汁推进百分率。结果见表9。

表9白花蛇舌草提取物胶囊对正常小鼠小肠推进运动的影响(X±SD，n＝8)

与模型对照组比较^*P＞0.05  ^**P＜0.05  ^***P＜0.01

结果表明，白花蛇舌草提取物胶囊中、低两个剂量组和消炎利胆片组能明显减慢小肠推进墨汁的速率，但高剂量组仅显示减慢小鼠小肠推进的趋势。

2.6白花蛇舌草提取物胶囊对胆囊粪便感染豚鼠的治疗作用^[5]

2.6.1胆囊感染模型复制

体重300～320g豚鼠48只，雌雄各半，随机分为6组，术前禁食12h，其间分别给药1次。模型组给予生理盐水。术前将20％的豚鼠新鲜粪便混悬液过滤备用。手术暴露豚鼠胆囊，由胆囊底部抽取胆汁，注入粪便悬液0.1ml/只，结扎针眼，缝合。术后给药1次，以后每天给药1次，共7天。

2.6.2对胆囊感染豚鼠白细胞计数的影响

术后12h，豚鼠眼球眶后静脉丛采血，白细胞记数。结果见表10。

表10白花蛇舌草提取物胶囊对胆囊感染豚鼠白细胞计数的影响(X±SD，n＝8)

与空白对照组比较^P＞0.05  ^^P＜0.05  ^^^P＜0.01

与模型对照组比较^*P＞0.05  ^**P＜0.05  ^***P＜0.01

结果表明，白花蛇舌草提取物胶囊高、中、低三个剂量组和消炎利胆片组均能明显对抗胆囊感染初期豚鼠白细胞数下降，有利于机体对抗病原微生物的感染。

2.6.3对胆囊感染豚鼠胆汁中细菌数的影响

术后第4日，处死动物，抽取胆汁，将胆汁分别依次稀释为10^-3、10^-4、10^-5、10^-6，各稀释液分别取0.1ml滴在营养琼脂平板上，每个稀释度作2个平板，孵育24h，对生长菌落在30～300个的平板进行需氧菌计数。结果见表11。

表11白花蛇舌草提取物胶囊对胆囊感染豚鼠胆汁需氧菌(CFU)的影响(X±SD，n＝8)

与模型对照组比较^*P＞0.05  ^**P＜0.05  ^***P＜0.01

结果表明，白花蛇舌草提取物胶囊高、中、低三个剂量组和消炎利胆片组均能明显抑制胆汁中需氧菌的作用。

3、小结

白花蛇舌草提取物胶囊的药效学试验结果表明：白花蛇舌草提取物胶囊具有明显的抗炎作用。高、中、低三个剂量组对巴豆油所致小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用，对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀也有显著的抑制作用；白花蛇舌草提取物胶囊高、中两个剂量组对醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增高有明显的抑制作用，并能明显改善胆囊炎豚鼠胆囊的病理变化。白花蛇舌草提取物胶囊具有明显的镇痛作用。高、中两个剂量组能显著降低醋酸致痛小鼠扭体的次数，提高小鼠对热板法的痛阈值。白花蛇舌草提取物胶囊具有明显的利胆作用，三个剂量组均能显著增加家兔胆汁流量。白花蛇舌草提取物胶囊具有明显的解热作用，三个剂量组对细菌内毒素引起的家兔体温升高均有明显的解热作用。白花蛇舌草提取物胶囊中、低二个剂量组能明显减慢小肠蠕动。白花蛇舌草提取物胶囊高、中、低三个剂量组均能明显抑制胆汁中需氧菌的作用，并能明显对抗胆囊感染初期豚鼠白细胞数下降，有利于机体对抗病原微生物的感染。

具体实施方式

以下实施例旨在说明本发明而不是对本发明的进一步限定。

实施例1

取白花蛇舌草药材10kg，切成2-3cm小段，分别用11、8倍量60％的乙醇回流提取两次，每次1小时，醇提液合并，滤过，减压回收乙醇并浓缩至约30L(60℃、-0.07～-0.09MPa)，搅拌加入15％(v/v)的10g.L^-1的壳聚糖溶液(1％的醋酸配制)，静置12小时，滤过，上清液减压浓缩至约10L，上样至已处理好的10L聚酰胺柱(30-60目)，流速约1柱体积/小时，水洗20L，弃去，30L70％乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩(60℃、-0.07～-0.09MPa)至稠膏，真空干燥(60℃，-0.09MPa)，得提取物干膏。将提取物粉碎成细粉，加入100g淀粉、10g羧甲基淀粉钠，混匀，75％乙醇制软材，24目筛制粒，60℃烘干，整粒，填充，制成1000粒胶囊。

白花蛇舌草提取物中含量控制指标性成分含量测定。

(1)CSME含量测定

指标性成分：(E)-6-O-P-香豆酰鸡屎藤苷甲酯(E-6-O-p-coumaroyl scandoside methylester，以下简称CSME)(自制，纯度99.4％)。

色谱条件与***适用性

Agilent 1100型高效液相色谱仪：低压四元泵，自动进样器，柱温箱，DAD检测器，ChemStation色谱工作站。

色谱柱：Kromasil ODS-1色谱柱(4.6×250mm，5μm)

流动相：乙腈：0.1％冰醋酸梯度洗脱乙腈％ 0min 20％ 20min 30％30min 60％

柱温：30℃。

检测波长：310nm；

流速：1.0mL/min

对照品溶液的制备：取CSME对照品约10mg，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇适量，超声使溶解，放至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

供试品溶液的制备：取本品约40mg，精密称定，置25ml量瓶中，加甲醇适量，超声使溶解，放至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本实施例样品提取物的CSME含量应为18％。

(2)总香豆酸衍生物含量测定

对照品溶液的制备取CSME对照品约10mg，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇适量，超声使溶解，放至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为储备液。精密量取储备液5.0ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

供试品溶液的制备取本品约20mg，精密称定，置25ml量瓶中，加适量甲醇超声使溶解，放至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀。精密吸取1.0ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。

测定法照分光光度法(中国药典2005年版一部附录V A)，在(310±1)nm波长处测定吸光度，计算，即得。

本实施例样品提取物按干燥品计算，总香豆酸衍生物含量以CSME计，为65％。

实施例2

取白花蛇舌草药材10kg，粉碎，分别用10倍量40％的乙醇回流提取两次，每次1小时，醇提液合并，滤过，减压回收乙醇并浓缩至约30L(60℃、-0.07～-0.09MPa)，搅拌加入15％(v/v)的10g.L^-1的壳聚糖溶液(1％的醋酸配制)，静置12小时，滤过，上清液减压浓缩至约10L，上样至已处理好的10L聚酰胺柱(30-60目)，流速约1柱体积/小时，水洗20L，弃去，30L0.4％氨水洗脱，洗脱液减压浓缩(60℃、-0.07～-0.09MPa)至稠膏，喷雾干燥，得提取物。在提取物细粉中加入100g微晶纤维素、10g羧甲基淀粉钠，混匀，75％乙醇制软材，24目筛制粒，60℃烘干，整粒，加入2g硬脂酸镁，压片，制成1000片。

按实施例1的测试方法测试，本品CSME含量应为15％。本品按干燥品计算，总香豆酸衍生物含量以CSME计，为60％。

实施例3

取白花蛇舌草药材10kg，粉碎，分别用10倍量水饱和丙酮回流提取两次，每次2小时，醇提液合并，滤过，回收丙酮，加水调整体积至约30L(60℃、-0.07～-0.09MPa)，搅拌加入15％(v/v)的10g.L^-1的壳聚糖溶液(1％的醋酸配制)，静置12小时，滤过，上清液减压浓缩至约10L，上样至已处理好的10L聚酰胺柱(30-60目)，流速约1柱体积/小时，水洗20L，弃去，30L0.4％氨水洗脱，洗脱液减压浓缩(60℃、-0.07～-0.09MPa)至稠膏，喷雾干燥，得提取物。在提取物细粉中加入100g淀粉、10g羧甲基淀粉钠，混匀，75％乙醇制软材，24目筛制粒，60℃烘干，整粒，压片，制成1000片。

按实施例1的测试方法测试，本品CSME含量应为30％。本品按干燥品计算，总香豆酸衍生物含量以CSME计，为80％。

Claims (6)

1.白花蛇舌草提取物，其特征在于：其中E-6-O-P-香豆酰鸡屎藤苷甲酯的含量为7％～40％；总香豆酸衍生物的含量为30％～85％；由下述方法制备而成，

(1)取白花蛇舌草用含水有机溶剂提取，得提取液；

(2)提取液经浓缩，得浓缩液；

(3)将所得浓缩液加入壳聚糖溶液沉降，滤过，得滤液；

(4)滤液经上聚酰胺柱，水洗弃去，碱水洗脱，得洗脱液；

(5)洗脱液浓缩、干燥得提取物。

2.根据权利要求1所述的白花蛇舌草提取物，其特征在于：其中总香豆酸衍生物的含量为50％～85％。

3.用权利要求1或2所述的白花蛇舌草提取物作为制备治疗或预防胆囊炎的药物或保健品。

4.制备权利要求1或2所述的白花蛇舌草提取物的方法为：其特征在于：

(1)取白花蛇舌草用含水有机溶剂提取，得提取液；

(2)提取液经浓缩，得浓缩液；

(3)将所得浓缩液加入壳聚糖溶液沉降，滤过，得滤液；

(4)滤液经上聚酰胺柱，水洗弃去，碱水洗脱，得洗脱液；

(5)洗脱液浓缩、干燥得提取物。

5.根据权利要求4所述的白花蛇舌草提取物的制备方法，其特征在于：所述的含水有机溶剂包括10％-90％的乙醇溶液或含水丙酮。

6.由权利要求1所述的白花蛇舌草提取物制备的药物制剂，其特征在于：将所述的提取物，加入其可接受的药物辅料制成相应药物制剂。