CH655936A5

CH655936A5 - Derives du 3-amino pregn-5-ene, leurs sels, leur preparation, medicaments et compositions les renfermant.

Info

Publication number: CH655936A5
Application number: CH6242/82A
Authority: CH
Inventors: Vesperto Torelli; Josette Benzoni; Roger Deraedt
Original assignee: Roussel Uclaf
Priority date: 1981-10-27
Filing date: 1982-10-26
Publication date: 1986-05-30
Also published as: ES8405035A1; ES516825A0; IE54278B1; HU186983B; GB2110212B; JPH0411559B2; JPS5883700A; DK473182A; CA1193247A; DE3239823A1; DE3239823C2; IT8249354A0; PT75756A; FR2515188B1; ES8401497A1; AT387023B; DK160561C; SE8204918D0; BE894805A; FR2515188A1

Description

' L'invention a pour objet de nouveaux dérivés du 3-amino prégn-5-ène, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule générale I:

CH,

(I)

V

dans laquelle R2 a la signification indiquée ci-dessus, et Hai représente un atome de chlore, de brome ou d'iode, et, si désiré, on salifie le composé obtenu.

13. Procédé de préparation des dérivés du 3-amino prégn-5-ène selon la revendication 1, dans lesquels Ri représente un radical hydroxyalcoyle renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, R2 représente un radical dérivé d'un acide a-aminé ou d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides a-aminés, et X et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, caractérisé en ce que l'on prépare, par le procédé selon la revendication 11, un composé de formule (I) dans laquelle a la signification indiquée ci-dessus et R2 représente un atome d'hydrogène, on fait réagir ce composé avec un a-amino acide ou un peptide comprenant 2 ou 3 atomes acides aminés dont la fonction amine est monosubstituée ou disubstituée par un radical alcoyle renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou protégée par un groupement facilement clivable, puis traite, le cas échéant, de façon à éliminer le groupement protecteur et, si désiré, on salifie le composé obtenu.

14. Médicaments, caractérisés en ce qu'ils sont constitués par les dérivés du 3-amino prégn-5-ène selon la revendication 1 ainsi que par leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables.

15. Médicaments selon la revendication 14, caractérisés en ce qu'ils sont constitués par les dérivés du 3-amino prégn-5-ène selon la revendication 2 ainsi que par leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables.

16. Médicaments selon la revendication 14, caractérisés en ce qu'ils sont constitués par les dérivés du 3-amino prégn-5-ène selon la revendication 3, 4 ou 5 ainsi que par leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables.

17. Médicaments selon la revendication 14, caractérisés en ce qu'ils sont constitués par la 3a-méthylamino prégn-5-én-20-one ainsi que par ses sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables.

18. Compositions pharmaceutiques, caractérisées en ce qu'elles renferment, à titre de principe actif, l'un au moins des composés selon l'une des revendications 1 à 6.

. 3 T"3

dans laquelle X représente un groupement C ou CH.

/ \> / ÖH

15 les traits ondulés signifient que le radical correspondant se trouve dans l'une ou l'autre des configurations a ou ß, R, représente un atome d'hydrogène ou un radical hydroxyalcoyle renfermant de 2 à 5 atomes de carbone.

R2 représente un atome d'hydrogène, un radical hydroxyalcoyle 20 renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, acyle aliphatique renfermant de 3 à 8 atomes de carbone ou alcoxycarbonyle renfermant de 2 à 8 atomes de carbone ou un radical dérivé d'un acide a-aminé ou d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides aminés dont l'amine est soit libre, soit mono- ou disubstituée par un radical alcoyle renfermant 25 de 1 à 5 atomes de carbone, étant entendu que, d'une part, Rj et R2 ne représentent pas en même temps un atome d'hydrogène et que, d'autre part, si le groupement amino est en position 3ß,

i) lorsque X représente un groupement: CH,

! J /\ '

R! et R2 ne peuvent pas représenter en même temps un radical hy-droxyéthyle,

ii) lorsque X représente un groupement: CH_

k3 ,

/ OH

si Rj représente un atome d'hydrogène, R2 ne représente pas un radical éthoxycarbonyle,

40 ainsi qu'à la formule générale I ci-dessus, dans laquelle X représente un groupement:

-C

\

La présente invention concerne de nouveaux dérivés de 3-amino prégn-5-ène, ainsi que leurs sels, le procédé de préparation, ainsi que les médicaments et les compositions les renfermant.

45 Rj représente un atome d'hydrogène, R2 représente un radical méthyle et le groupement amino est en position 3a.

Dans la formule générale I et dans ce qui suit, le terme radical alcoyle renfermant de 1 à 5 atomes de carbone désigne, par exemple, un radical méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle ou so pentyle, le terme radical hydroxyalcoyle renfermant de 2 à 5 atomes de carbone désigne, par exemple, un radical hydroxyéthyle ou hy-droxypropyle; le terme radical acyle renfermant de 3 à 8 atomes de carbone désigne, par exemple, un radical propionyle, n-butyryle ou isobutyryle, le terme radical alcoxycarbonyle renfermant de 2 à 55 8 atomes de carbone désigne, par exemple, un radical méthoxy, éthoxy ou propoxycarbonyle; le reste dérivé d'un acide a-aminé peut être choisi par exemple dans le groupe constitué par Ala, Val, Leu, Ile, Asp, Asn, Glu, Gin, Ser, Thr, Cys, Met, Lys, Arg, Phe, Tyr, Trp, His, Pro, Nva, Nie, Hyp, Orn, ces acides aminés étant sous la so forme D ou L, ainsi que par Sar et Gly; lorsque R2 représente un radical dérivé d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides a-aminés, ceux-ci sont choisis dans le groupe constitué par les acides a-aminés ci-dessus.

Lorsque les acides a-aminés ou les peptides sont N-mono- ou di-65 alcoylés, c'est de préférence par des radicaux méthyle, éthyle ou propyle.

On admettra par convention que les symboles des acides a-aminés représentent ces acides sous leur configuration D ou L (par

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exemple, le terme Ala signifie Alanine sous forme D ou sous forme L).

La nomenclature utilisée dans la présente demande est la nomenclature IUPAC, dont les règles sont publiées notamment dans «BiocheM. J.» (1972), 126, 773-780.

Les sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques peuvent être, par exemple, les sels formés avec les acides chlorhydri-que, bromhydrique, nitrique, sulfurique, phosphorique, acétique, formique, propionique, benzoïque, maléique, fumarique succinique, tartrique, citrique, oxalique, glyoxylique, aspartique, alcane sulfoni-ques tels que les acides méthane ou éthane sulfoniques, arylsulfoni-ques, tels que les acides benzène ou paratoluène sulfoniques et aryl-carboxyliques.

Parmi les produits, objet de l'invention, on peut citer notamment les dérivés répondant à la formule I ci-dessus, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques caractérisés en ce que, dans ladite formule I, le groupement amino est en position 3a, R, représente un atome d'hydrogène et R2 représente un radical dérivé d'un acide a-aminé ou d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides aminés.

Parmi ceux-ci, on peut citer plus particulièrement les dérivés, caractérisés en ce que, dans ladite formule I, X représente un groupement:

CH,

CK,

CH

I

OU

carbone ou encore libre et, lorsqu'elle est libre, est protégée par un groupement facilement clivable notamment par hydrolyse acide ou par hydrogénolyse, puis traite de façon à éliminer le groupement protecteur pour obtenir un produit de formule I dans laquelle R] re-5 présente un atome d'hydrogène, R2 représente un radical dérivé d'un acide a-aminé ou d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides a-aminés, et X et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, que l'on isole et salifie, si désiré,

— soit dans le cas où X représente un groupement: — C —CH3 io 1

O

et où le groupement amino est en position 3a, avec un halogénure de méthyle, pour obtenir un produit de formule I, dans laquelle X représente un groupement: — C—CH3.

15 O

Rj représente un atome d'hydrogène, R2 représente un radical méthyle et le groupement amino est en position 3a,

— soit avec un halogénure d'hydroxyalcoyle renfermant de 2 à 5 atomes de carbone et dont l'halogène est un atome de chlore, de

20 brome ou d'iode, pour obtenir un produit de formule I dans laquelle l'amine en 3 est mono- ou disubstituée par un radical hydroxyalcoyle renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, et X et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, produit de formule I que, ou bien l'on isole et salifie, si désiré, ou bien, dans le cas où R2 représente un 25 atome d'hydrogène, l'on fait réagir ledit produit de formule I avec un halogénure de formule IV :

OH

Hal-R',

(III)

dans laquelle Hai représente un atome de chlore, de brome ou d'iode, et R'2 représente un radical acyle aliphatique renfermant de 3 à 8 atomes de carbone ou alcoxycarbonyle renfermant de 2 à 8 atomes de carbone, pour obtenir un produit de formule I dans laquelle R] représente un atome d'hydrogène, R, représente un radical R'2 tel que défini ci-dessus, X et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, produit de formule I que l'on isole et salifie, si désiré,

— soit avec un acide ou un anhydride d'acide de formule III':

A-O-R"

(III')

dans laquelle A représente un atome d'hydrogène ou un radical R"2 et R"2 représente un radical acyle aliphatique renfermant de 3 à 8 atomes de carbone, pour obtenir un produit de formule I dans laquelle R[ représente un atome d'hydrogène, R2 représente R"2 tel que défini ci-dessus, et X et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, produit de formule I que l'on isole et salifie, si désiré,

— soit avec un a-amino acide ou un peptide comprenant 2 ou 3 acides aminés dont la fonction amine est monosubstituée ou disubstituée par un radical alcoyle renfermant de 1 à 5 atomes de

Hal-R"

(IV)

dont l'hydroxyde est en position 20a et tout particulièrement la 3a-méthylamino prégn-5-ène-20-one et les autres dérivés préparés dans les exemples.

L'invention a également pour objet un procédé de préparation des dérivés, tels que définis par la formule I ci-dessus, ainsi que de leurs sels, caractérisé en ce que l'on fait réagir une amine de formule II:

.X

(II)

dans laquelle le trait ondulé et X ont la signification déjà indiquée, — soit avec un halogénure de formule III:

30 dans laquelle R'"2 représente un radical hydroxyalcoyle renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, acyle aliphatique renfermant de 3 à 8 atomes de carbone ou alcoxycarbonyle renfermant de 2 à 8 atomes de carbone et Hai a la signification déjà indiquée, pour obtenir un produit de formule I dans laquelle Rj représente un radical hy-35 droxyalcoyle renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, R2 représente un radical R'"2 tel que défini ci-dessus, et X et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, que l'on isole et salifie, si désiré, ou bien encore dans le cas où R2 représente un atome d'hydrogène, l'on fait réagir ledit produit de formule I avec un a-amino acide ou un 40 peptide comprenant 2 ou 3 acides aminés dont la fonction amine est monosubstituée ou disubstituée par un radical alcoyle renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou protégée par un groupement facilement clivable notamment par hydrolyse acide ou par hydrogénolyse, puis traite, le cas échéant, de façon à éliminer le groupement protecteur, 45 pour obtenir un produit de formule I dans laquelle Rj représente un radical hydroxyalcoyle renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, R, représente un radical dérivé d'un acide a-aminé ou d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides a-aminés, et X et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, que l'on isole et salifie, si désiré.

5° Dans des conditions préférées de mise en œuvre de l'invention, le procédé de préparation ci-dessus décrit est exécuté comme suit:

a) La réaction de l'amine de formule II avec l'halogénure de formule III est effectuée en présence d'un agent fixateur d'acides, en particulier un hydroxyde, un carbonate, un bicarbonate ou un

55 acétate alcalin (par exemple de sodium ou de potassium), un carbonate alcalino-terreux (par exemple de calcium), une amine tertiaire (par exemple une trialcoylamine ou la pyridine) ou un alcoolate alcalin (par exemple l'éthylate de sodium). La réaction peut s'effectuer, par exemple, dans des solvants ou milieux de suspension inertes 60 tels que le dioxanne, le diméthylformamide, le benzène, le toluène ou un hydrocarbure halogéné, tel que le chlorure de méthylène.

b) La réaction de l'amine de formule II avec un acide de formule III' est effectuée avec un agent d'activation tel qu'un carbodi-imide. D'autres techniques sont utilisables, telles que celles décrites,

65 par exemple, dans «The Peptides», vol. 1, Academic press, 1979.

c) La réaction de l'amine de formule II ou du produit de formule I, dans laquelle R, représente un atome d'hydrogène et Rj représente un radical hydroxyalcoyle, avec l'acide a-aminé ou le peptide

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dont la fonction aminée est monosubstituée, disubstituée ou protégée par un groupement protecteur facilement clivable, a lieu en présence d'un agent de condensation. L'agent de condensation a, dans ce cas, pour but d'activer la fonction acide de l'amino-acide.

Comme agent de condensation, on peut utiliser un carbodiimide de formule:

A1-N = C=N-B1

dans laquelle Aj et Bj représentent un radical alcoyle renfermant de 1 à 8 atomes de carbone éventuellement porteur d'un radical dial-coylamino, ou représentent un radical cycloalcoyle.

On peut citer, par exemple, le dicyclohexylcarbodiimide ou le 1-éthyl 3-(3-diméthylaminopropyl)carbodiimide, de préférence ce dernier.

On peut utiliser également un halogénure de 2-chloro N-méthyl-pyridinium tel que l'iodure.

On peut aussi utiliser un chloroformiate d'alcoyle comme, par exemple, le chloroformiate de méthyle, d'éthyle ou d'isobutyle; on peut aussi utiliser un pyrophosphite d'alcoyle, comme par exemple le pyrophosphite d'éthyle.

Comme groupement protecteur facilement clivable, on peut utiliser, selon le cas, de préférence le groupement benzyloxycarbonyle (Z) ou le groupement terbutyloxycarbonyle (BOC).

Pour éliminer le groupement protecteur facilement clivable ci-dessus, on utilise de préférence comme agent de clivage un acide tel que l'acide chlorhydrique; on opère par exemple à l'aide d'une solution alcoolique d'acide chlorhydrique ou à l'aide d'acide chlorhydrique anhydre par barbotage dans le nitrométhane. On peut aussi utiliser des acides tels que l'acide paratoluène sulfonique, l'acide formi-que ou l'acide trifluoroacétique. On peut utiliser également l'hydrogène en présence de palladium, pour le groupement protecteur Z par exemple.

d) La réaction de l'amine de formule II avec l'halogénure de méthyle ou d'hydroxyalcoyle se fait en présence des mêmes agents fixateurs d'acides et solvants que dans le cas de la réaction avec l'halogénure de formule III.

La fonction hydroxy de l'hydroxyalcoyle est avantageusement bloquée par un groupement protecteur facilement clivable notamment par hydrolyse acide.

e) La réaction du produit de formule I dans laquelle R2 représente un atome d'hydrogène, Rt représente un radical hydroxyalcoyle renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, et X et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, avec l'halogénure de formule IV est effectuée selon la nature de R'"2, dans les conditions précédemment décrites pour la réaction de l'amine de formule II avec l'halogénure de formule III.

Pour la préparation des produits de formule I N-méthylés, il peut être intéressant d'opérer de façon particulière: on peut préparer un carbamate de l'amine du produit de formule II, par exemple par action d'un haloformiate d'alcoyle tel que d'éthyle, puis réduire le carbamate, par exemple à l'aide d'hydrure d'aluminium-lithium.

Dans le cas où X représente un radical O

lors de la réduction, il faut protéger la cétone en 20, par exemple par action d'éthylène glycol, puis, après la réduction, hydrolyser le cétal, par exemple à l'aide d'un acide minéral tel que l'acide chlorhydrique.

Les dérivés de formule I, à l'exception de ceux pour lesquels R2 représente un radical acyle ou alcoxycarbonyle, présentent un caractère basique. On peut avantageusement préparer les sels d'addition des dérivés de formule I en faisant réagir, en proportions sensiblement stœchiométriques, un acide minéral ou organique avec ledit dérivé de formule I. Les sels peuvent être préparés sans isoler les bases correspondantes.

Les dérivés, objet de la présente invention, possèdent de très intéressantes propriétés pharmacologiques; ils sont doués notamment de remarquables propriétés immunothérapeutiques. Ils sont en particulier capables de stimuler les réactions immunitaires.

Ces propriétés sont illustrées plus loin dans la partie expérimentale.

5 Ces propriétés justifient l'utilisation des dérivés du 3-amino prégn-5-ène, ainsi que de leurs sels pharmaceutiquement acceptables, à titre de médicaments.

La présente demande a ainsi également pour objet l'application, à titre de médicaments, des dérivés du 3-amino prégn-5-ène, tels que io définis par la formule I, ainsi que de leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables.

Parmi les médicaments, objet de l'invention, on retient, de préférence, les médicaments caractérisés en ce qu'ils sont constitués par les nouveaux dérivés du 3-amino prégn-5-ène répondant à la formu-is le I, dans laquelle le groupement amino est en position 3a, Rx représente un atome d'hydrogène et R2 représente un radical dérivé d'un acide a-aminé ou d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides aminés, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables.

20 Parmi ceux-ci, on retient notamment ceux répondant à la formule I, dans laquelle X représente un groupement ch3 ch3

A " Ah dont l'hydroxyle est en position 20a, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables.

Parmi ces derniers, on retient tout particulièrement les dérivés 30 dont les noms suivent:

— le 2-amino N-(20-oxo prégn-5-én-3a-yl)acétamide,

— le (2S) 2-amino N-(20-oxo prégn-5-én-3a-yl)propionamide,

— la 3a-méthylamino prégn-5-én-20-one,

ainsi que leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement 35 acceptables.

Les médicaments selon l'invention trouvent leur emploi, par exemple, dans le traitement des immunodéficiences, et notamment des maladies auto-immunes résultant d'une déficience en certains lymphocytes, qu'il s'agisse de maladies du tissu conjonctif non spéci-40 fiques d'un organe comme par exemple l'arthrite rhumatoïde, le lupus érythémateux systémique ou qu'il s'agisse de maladies spécifiques d'un organe comme la thyroïdite, le pemphigus ou l'anémie hé-molytique.

Les produits de l'invention peuvent être ainsi utilisés comme trai-45 tement adjuvant de l'antibiothérapie et de la chimiothérapie anticancéreuse.

La dose usuelle, variable selon le dérivé utilisé, le sujet traité et l'affection en cause, peut être, par exemple, de 10 mg à 1 g/d, par voie orale chez l'homme du dérivé de l'exemple 4 comme adjuvant 50 d'antibiothérapie.

L'invention a enfin pour objet les compositions pharmaceutiques qui renferment au moins un dérivé précité ou l'un de ses sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables, à titre de principe actif.

55 A titre de médicaments, les dérivés répondant à la formule I et leurs sels d'addition avec les acides pharmaceutiquement acceptables peuvent être incorporés dans des compositions pharmaceutiques destinées à la voie digestive ou parentérale.

Ces compositions pharmaceutiques peuvent être, par exemple, 60 solides ou liquides et se présenter sous les formes pharmaceutiques couramment utilisées en médecine humaine, comme par exemple les comprimés, simples ou dragéifiés, les gélules, les granulés, les suppositoires, les préparations injectables; elles sont préparées selon les méthodes usuelles. Le ou les principes actifs peuvent y être incorpo-65 rés à des excipients habituellement employés dans ces compositions pharmaceutiques, tels que le talc, la gomme arabique, le lactose, l'amidon, le stéarate de magnésium, le beurre de cacao, les véhicules aqueux ou non, les corps gras d'origine animale ou végétale, les

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dérivés paraffiniques, les glycols, les divers agents mouillants, dispersants ou émulsifiants, les conservateurs.

Les produits de départ de formule II dans laquelle X représente un groupement CH, peuvent être préparés comme suit.

I

On réduit un produit de formule V :

CH.

h2N

dans laquelle le trait ondulé a la signification déjà indiquée, par exemple à l'aide d'un métal alcalin, tel que le sodium, dans un solvant tel qu'un alcool aliphatique inférieur comme l'êthanol, pour obtenir un produit de formule II :

f3

'OH

dans laquelle les traits ondulés ont la signification déjà indiquée,

sous la forme d'un mélange d'isomères 20(a) et 20(ß), que l'on sépare, par exemple par préparation du dérivé trifluoroacétylé de l'amine et de l'alcool, Chromatographie, puis hydrolyse des groupements trifluoroacétyls des isomères séparés.

Un exemple d'une telle préparation figure ci-après dans la partie expérimentale.

Les acides aminés ou peptides, dont la fonction amine est mono-ou disubstituée, peuvent être préparés, lorsqu'ils ne sont pas connus, par les procédés classiques d'alcoylation des aminés.

Les exemples suivants illustrent l'invention, sans toutefois la limiter.

Exemple 1:

Chlorhydrate de 3a-méthylamino prêgn 5-èn-20-one Stade A: (20-oxoprégn-5-én-3a-yl)carbamate d'éthyle

On dissout 6 g de 3a-amino prégn-5-ène-20-one (holamine) dans 100 cm3 de chlorure de méthylène, ajoute entre +5 et + 10° C 22 cm3 de soude aqueuse N, puis en 10 min, 2 cm3 de chloroformiate d'éthyle et agite pendant 1 h.

On acidifie par 15 cm3 d'une solution aqueuse d'acide chlorhydrique 2N, décante, lave la phase organique à l'eau, sèche et amène à sec. On reprend le résidu obtenu par 70 cm3 d'éther éthylique, porte au reflux, essore, lave à l'éther, sèche et obtient 6,25 g du produit attendu. F=202° C.

Stade B: (20,20-êthylène-dioxv prégn-5-én-3a-yl) carbamate d'éthyle

On chauffe vers 50° C sous atmosphère inerte, 10,9 g de produit tel qu'obtenu au stade précédent avec 54,5 cm3 d'éthylène glycol et 22 cm3 d'orthoformiate d'éthyle. On ajoute 220 mg d'acide parato-luène sulfonique monohydraté et agite pendant 3 h environ. On refroidit à 20° C, ajoute 4,2 cm3 de triéthylamine, verse sous agitation sur 550 cm3 d'eau, essore, lave à l'eau, sèche à 60° C et obtient 12 g du produit attendu. F^200 C.

Stade C: 3a-mêthyl amino prégn-5-én-20-one(N-mêthyl holamine) et son chlorhydrate

On met en suspension sous atmosphère inerte 1,145 g d'hydrure d'aluminium et de lithium dans 110 cm3 de tétrahydrofuranne et introduit au reflux, en 30 min, 6,51 g du produit obtenu au stade précédent en solution dans 65 cm3 de tétrahydrofuranne. Après 1 h 5 min de reflux, on ramène à 15-20 C, ajoute avec précaution 15 cm3 d'eau, puis 15 cm3 d'acide chlorhydrique concentré et agite pendant 1 h 45 min. On alcalinise par 25 cm3 de lessive de potasse et 5 cm3 d'ammoniaque concentrée, agite pendant 10 min, ajoute 100 cm3 de solution de sel de Seignette, décante, extrait à l'acétate d'éthyle, lave à l'eau saturée au chlorure de sodium, sèche, amène à sec sous pression réduite, recristallise dans l'acétate d'éthyle et obtient 4,07 g du produit attendu. F ^ 139 C.

Formation du chlorhydrate:

On dissout 1,5 g de base dans 30 cm3 d'acétate d'éthyle à 25-30 C, ajoute un excès d'acide chlorhydrique dissous dans l'acétate d'éthyle, glace, essore, lave à l'acétate d'éthyle, sèche à 40: C sous pression réduite, recristallise dans l'êthanol et obtient 1,31 g de produit attendu. F ~270" C.

Analyse pour C22H3eNOCl = 365,99% :

Calculé: C 72,20 H 9,91 N 3,83 Cl 9,69%

Trouvé: C 72,4 H 10,1 N 3,8 Cl 9,7 %

Exemple 2:

Fumarate de 2-amino N-mêthyl N-f 20-oxo prégn-5-én-3a-yljacé-tamide

Stade A : 2-[/ (phénylméthoxy J carbonyljamino]N-j (20-oxo Jprégn-5-én-3a-ylfN-mêthyl acètamide

On dissout sous atmosphère inerte 4,43 g de la base de l'exemple 1 dans 130 cm3 de chloroforme et 27 cm3 de triéthylamine,

ajoute 5,6 g de N-(benzyloxycarbonyl)glycine (Z glycine) puis en 20 min, sous agitation, 3,89 g d'iodure de 2-chloro N-méthyl pyridi-nium. 1 h après on rajoute 800 mg du sel de pyridinium ci-dessus, agite pendant 20 min, ajoute encore 400 mg de sel de pyridinium, agite encore pendant 20 min, lave avec une solution aqueuse d'acide chlorhydrique N, puis de soude N, avec de l'eau, sèche, amène à sec, purifie par Chromatographie sur silice (éluant: chlorure de méthylène- acétate d'éthyle 9/1 ), recristallise dans l'acétate d'éthyle pour obtenir 5,8 g de produit attendu. F = 130°C, puis 150°C.

Stade B: 2-amino N-mêthyl N-(20-oxo prêgn 5-ên-3a-yl) acètamide et sonfumarate

On dissout sous atmosphère inerte 6,2 g du produit obtenu au stade A, dans 60 cm3 de tétrahydrofuranne, ajoute 1,2 g de charbon palladiê à 5% et fait barboter de l'hydrogène. Après 2 h, on filtre, lave le catalyseur avec du chlorure de méthylène, amène à sec et obtient 4,55 g du produit attendu sous forme de résine.

Formation du fumar ate:

On dissout à chaud 1,9 g de la base ci-dessus dans 4 cm3 d'étha-nol à 95°, ajoute une solution chaude de 560 mg d'acide fumarique dans 6 cm3 d'éthanol à 95:, amorce la cristallisation, glace pendant 1 h, essore, lave à l'êthanol glacé, sèche à 60° C sous vide, et obtient 2,02 g du produit attendu sous forme d'hémi-hydrate. F=: 160° C.

Analyse pour C24H38N202, C4H404, '/2H20 = 511,63%:

Calculé: C 65,73 H 8,67 N 5,47%

Trouvé: C 65,6 H 8,5 N 5,4 %

Exemple 3:

(2S) 2-amino N-( 20-oxo prêgn-5-ên-3a-yl)propionamide et son chlorhydrate

Stade A: 2-/( 1,1-dimêthylêthoxyjcarbonyljamino N-(20-oxoprêgn-5-ên-3a-vl) propionamide

On dissout sous atmosphère inerte 3,15 g d'holamine et 2,08 g de tert-butyloxy carbonyl L-alanine (BOC L-alanine) dans 75 cm3 de chloroforme et 15 cm3 de pyridine, ajoute 2,1 g de chlorhydrate de

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

7

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l-éthyl-3-(3-diméthylaminopropyl)carbodiimide et agite pendant 1 h 15 min. On lave avec une solution aqueuse d'acide chlorhydrique 2N, avec une solution aqueuse de bicarbonate de sodium, sèche, distille à sec sous pression réduite, purifie par Chromatographie sur silice (éluant: benzène - méthyl éthyl cétone 1/1) et obtient 4,5 g du produit attendu sous forme d'huile.

Stade B: chlorhydrate de (2S) 2-amino N-(20-oxo prégn-5-én-3-yljpropionamide

On agite pendant 2 h 30 min sous atmosphère inerte 4,5 g du produit obtenu au stade A, en solution dans 30 cm3 d'une solution 2N d'acide chlorhydrique sec dans le méthanol. On distille à sec sous pression réduite à 30° C, cristallise dans 30 cm3 d'acétate d'éthyle, essore, dissout dans 15 cm3 de méthanol au reflux, filtre, ajoute 50 cm3 d'acétate d'éthyle, concentre à mi-volume, essore, sèche à 40e C sous pression réduite et obtient 2,5 g du produit attendu. F=260°C.

Analyse pour C24H3!)C1N202=423,03% :

Calculé: C 68,14 H 9,29 N 6,62 Cl 8,38%

Trouvé: C 68,4 H 9,3 N 6,5 Cl 8,5 %

Exemple 4:

Chlorhydrate de 2-amino N-(20-oxo prégn-5-én-3a-yl) acètamide

En opérant selon un procédé analogue à celui décrit ci-dessus pour l'exemple 2, en faisant réagir la Z-glycine ou N-(benzyloxycar-bonyl)glycine avec l'holamine, on a préparé le produit attendu. F=295°C après cristallisation dans l'acétate d'éthyle.

Analyse pour C23H36N202, HCl=409,019% :

Calculé: C 67,54 H 9,12 Cl 8,67 N 6,85% Trouvé: C 67,8 H 9,1 Cl 8,5 N 6,7 %

Exemple 5:

Fumarate de (2S) 2-amino N-(20-oxo prégn-5-én-3a-yl)lH-indo-le-3-propanamide

En opérant selon un procédé analogue à celui décrit ci-dessus pour l'exemple 3, en faisant réagir le BOC L-tryptophane avec l'holamine, on a préparé le produit attendu. F = 180° C après cristallisation dans le méthanol.

Analyse pour C32H43N302, HOOC-CH = CH-COOH, CH3OH = 617,76%:

Calculé: C 68,39 H 7,91 N 6,47%

Trouvé: C68,l H 8,0 N 6,5 %

Exemple 6:

Chlorhydrate de 2-amino N-/(20S) 20-hydroxy prégn-5-én-3a-yljacétamide

En opérant selon un procédé identique à celui décrit ci-dessus pour la préparation de l'exemple 2, en faisant réagir la Z-glycine avec le (20S) 3a-amino prégn-5-én-20-ol, on a préparé le produit attendu. F=264°C (avec décomposition) après cristallisation dans l'acétate d'éthyle.

Analyse pour C23H38N202 HC1=447,495%:

Calculé: C 67,20 H 9,56 Cl 8,63 N 6,82%

Trouvé: C 67,3 H 9,6 Cl 8,7 N 6,8 %

Le (20S) 3a-amino prégn-5-én-20-ol de départ peut être préparé comme suit:

Stade 1: 3a-amino prêgn-5-én-20-ol

On porte au reflux 100 cm3 de propanol, ajoute en 20 min et simultanément 5 g de sodium par petites portions et une solution de 5

d'holamine dans 5 cm3 de propanol et maintient le reflux. Après 1 h 25 min, on laisse revenir à température ambiante, glace, acidifie à l'acide acétique jusqu'à pH = 6, revient à pH = 8 à l'aide de carbonate de potassium, dilue avec 500 cm3 d'eau, évapore en partie, 5 reprend par 300 cm3 d'eau, laisse cristalliser pendant 24 h au réfrigérateur, filtre, rince les cristaux à l'eau, les dissout dans 10 cm3 de chlorure de méthylène, ajoute 50 cm3 d'acétate d'éthyle et 30 cm3 d'éther isopropylique, évapore le chlorure de méthylène, laisse cristalliser 16 h au réfrigérateur et obtient 3 g du produit attendu, io F=160 C.

Stade 2: trifluoroacétate de (20S)/3a-(trifluoroacétylamino)-prêgn-5-én-20-yle

On dissout 5,5 g de produit tel qu'obtenu ci-dessus dans 55 cm3 is de chlorure de méthylène, ajoute 5,5 cm3 de pyridine, amène à 0°C, ajoute 5,5 cm3 d'anhydride trifluoroacétique en 5 min, agite à température ambiante pendant 15 min, amène à sec, reprend au cyclo-hexane, filtre, concentre à sec, Chromatographie le résidu sur silice (éluant: cyclohexane - acétate d'éthyle 9/1) et obtient trois fractions, 20 la première correspondant à l'isomère (20R), la seconde (3,56 g) à un mélange (20R-20S), la troisième (1,5 g) à l'isomère (20S) recherché. F=140C.

Stade 3: (20S) 3a-amino prëgn-5-én-20-ol

25 On refroidit au bain de glace une suspension de 2,4 g de produit tel qu'obtenu ci-dessus dans 24 cm3 de méthanol, ajoute 12 cm3 de solution aqueuse de soude 2N, agite pendant 2 h 30 min à température ambiante, dilue à l'eau, extrait au chlorure de méthylène, lave la phase organique à l'eau saturée de chlorure de sodium, sèche, 30 évapore et obtient 1,42 g de la base attendue. F = 190°C.

Exemple 7:

On a préparé des comprimés répondant à la formule:

— chlorhydrate de 2-amino N-(20-oxo prégn-

35 5-én-3a-yl) acètamide 20 mg

— excipient q.s. pour un comprimé terminé à 100 mg (détail de l'excipient: lactose, amidon, talc, stéarate Mg)

Etude pharmacologique 40 1. Adjuvant du choc anaphylactique Principe:

L'administration à des animaux d'un produit capable de stimuler l'activité des systèmes immunitaires se traduit par une augmentation 45 du choc en réponse à l'administration d'un antigène auquel l'animal était sensibilisé.

Des souris mâles pesant 30 à 35 g sont sensibilisées par voie in-traplantaire avec l'albumine sérique de bœuf. 8 d plus tard, elles reçoivent cet antigène par voie intraveineuse. Dans des conditions de so sensibilisation minimum, les animaux témoins ne font pas de choc mortel lors de cette dernière administration.

Le produit à tester est injecté par voie intraplantaire mélangé avec l'antigène: si ce produit est adjuvant, il va augmenter la sensibilisation et il en résultera un choc mortel lors d'une administration 55 par voie intraveineuse.

On retient comme dose active la dose qui provoque une mortalité égale ou supérieure à 50% des animaux.

Produit de l'exemple

Dose par animal en mg

4 6

1 4

2. Test des rosettes aux globules rouges de mouton 6s Principe:

L'administration à des animaux d'un produit capable de stimuler l'activité des systèmes immunitaires se traduit par une augmentation de leur capacité de réaction à l'injection d'un produit immunogène.

655 936

8

Des rats mâles âgés de 3 mois sont sensibilisés par voie intrapêri-tonéale avec des érythrocytes de mouton (jour 0). 7 d plus tard (jour 7), leur rate est prélevée et les splénocytes sont mis en contact avec des érythrocytes de mouton; on compte ensuite le pourcentage de leucocytes autour desquels les érythrocytes ont formé des rosettes.

Résultats:

3. Etude de la toxicité aiguë

On a évalué les doses non létales (DL0) de différents composés testés après administration par voie orale chez la souris.

On appelle DL0 la dose maximale ne provoquant aucune mortalité en 8 d.

Les résultats obtenus sont les suivants:

Le produit à étudier est administré per os quotidiennement du jour —1 au jour 1.

On considère comme dose immunostimulante la dose de produit qui multiplie environ par 2 le pourcentage de rosettes observé chez ? les animaux témoins.

Produit de l'exemple

DL0 en mg/kg

3

>400

4

600

6

>400

Produit de l'exemple

Dose par animal en mg/kg per os

3

4

2 5

R

Claims

655 936

(1)

Nï

1. Dérivés du 3-amino prêgn-5-ène, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule générale (I):
2. Dérivés du 3-amino prégn-5-ène selon la revendication 1, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule générale (I) ci-dessus, mais à l'exception des composés pour lesquels X représente un groupement —COCH3, Rj représente un atome d'hydrogène, R2 représente un radical méthyle et le groupement amino est en position 3a.

"2 f3 <rH3

dans laquelle X représente un groupement c ou CH
3

655 936

3. Dérivés du 3-amino prégn-5-ène selon la revendication 1, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisés en ce que le groupement amino est en position 3a, R! représente un atome d'hydrogène et R2 représente un radical dérivé d'un acide a-aminé ou d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides aminés.

/ 3

V

R! représente un atome d'hydrogène, R2 représente un radical méthyle et le groupement amino est en position 3a.
4. Dérivés du 3-amino prégn-5-ène selon la revendication 3, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisés en ce que X représente un groupement CH_

CH, I '

I 3 CH

/ V

Hal-R,

(III)

A

iH dont l'hydroxyle est en position 20a.

dans laquelle R2 a la signification indiquée ci-dessus et Hai représente un atome de chlore, de brome ou d'iode, et, si désiré, on salifie so le composé obtenu.
5. Le 2-amino N-(20-oxo prégn-5-én-3a-yl)acétamide, le (2S) 2-amino N-(20-oxo prégn-5-én-3a-yl)propionamide, ainsi que leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques à titre de composés selon la revendication 3.

s
6. La 3a-méthylamino prégn-5-én-20-one, ainsi que ses sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques à titre de composés selon la revendication 1.
7. Procédé de préparation des dérivés du 3-amino prégn-5-ène selon la revendication 1, dans lesquels Ri représente un atome d'hy-io drogène, R2 représente un radical acyle aliphatique renfermant de 3 à 8 atomes de carbone ou alcoxycarbonyle renfermant de 2 à 8 atomes de carbone, et X et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, ainsi que de leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisé en ce que l'on fait réagir une amine de 15 formule:

(II)

dans laquelle le trait ondulé et X ont la signification déjà indiquée, avec un halogénure de formule:

CH

/\ / % 7

/ 0 / OH

les traits ondulés signifient que le radical correspondant se trouve dans l'une ou l'autre des configurations a ou ß, Rj représente un atome d'hydrogène ou un radical hydroxyalcoyle renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, R2 représente un atome d'hydrogène, un radical hydroxyalcoyle renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, acyle aliphatique renfermant de 3 à 8 atomes de carbone ou alcoxycarbo-nyle renfermant de 2 à 8 atomes de carbone, ou un radical dérivé d'un acide a-aminé ou d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides aminés dont l'amine est soit libre, soit mono- ou disubstituée par un radical alcoyle renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, étant entendu que d'une part, R] et R2 ne représentent pas en même temps un atome d'hydrogène, et que d'autre part, si le groupement amino est en position 3ß,

i) lorsque X représente un groupement CH^

C

/\

R! et R2 ne peuvent pas représenter en même temps un radical hy-droxyéthyle,

ii) lorsque X représente un groupement CH^

CH / ^OH

si R! représente un atome d'hydrogène, R2 ne représente pas un radical éthoxycarbonyle,

ainsi qu'à la formule générale (I) ci-dessus, dans laquelle X représente un groupement
8. Procédé de préparation des dérivés du 3-amino prégn-5-ène selon la revendication 1, dans lesquels R, représente un atome d'hydrogène, R2 représente un radical acyle aliphatique renfermant de 3 à 8 atomes de carbone, et X et le trait ondulé ont la signification

35 déjà indiquée, ainsi que de leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisé en ce que l'on fait réagir une amine de formule (II) ci-dessus, dans laquelle le trait ondulé et X ont la signification déjà indiquée, avec un acide ou un anhydride d'acide de formule:

40

A-0-R2 (III')

dans laquelle A représente un atome d'hydrogène ou un radical R2, R2 ayant la signification indiquée ci-dessus, et, si désiré, on salifie le 45 composé obtenu.
9. Procédé de préparation des dérivés du 3-amino prégn-5-ène selon la revendication 1, dans lesquels R, représente un atome d'hydrogène, R2 représente un radical dérivé d'un acide a-aminé ou d'un peptide comprenant 2 ou 3 acides a-aminés, et X et le trait ondulé

50 ont la signification déjà indiquée, ainsi que de leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, caractérisé en ce que l'on fait réagir une amine de formule (II) ci-dessus, dans laquelle le trait ondulé et X ont la signification déjà indiquée, avec un a-amino acide ou un peptide comprenant 2 ou 3 acides aminés dont la fonction 55 amine est monosubstituée ou disubstituée par un radical alcoyle renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou encore libre, et lorsqu'elle est libre, est protégée par un groupement facilement clivable, puis traite de façon à éliminer le groupement protecteur et, si désiré, on salifie le composé obtenu.

60
10. Procédé de préparation des dérivés du 3-amino prégn-5-ène selon la revendication 1, dans lesquels X représente un groupement — CO—CH3, R, représente un atome d'hydrogène, R2 représente un radical méthyle et le groupement amino est en position 3a, ainsi que de leurs sels d'addition avec les acides minéraux ou organiques, 65 caractérisé en ce que l'on fait réagir une amine de formule (II) ci-dessus, dans laquelle le trait ondulé et X ont la signification déjà indiquée, avec un halogénure de méthyle et, si désiré, on salifie le composé obtenu.

9

REVENDICATIONS
11. Procédé de préparation des dérivés du 3-amino prégn-5-ène selon la revendication 1, dans lesquels le groupe amino en position 3 est mono- ou disubstitué par un radical hydroxyalcoyle renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, et X et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, caractérisé en ce que l'on fait réagir une amine de formule (II) ci-dessus, dans laquelle le trait ondulé et X ont la signification déjà indiquée, avec un halogénure d'hydroxyalcoyle renfermant de 2 à 5 atomes de carbone et dont l'halogène est un atome de chlore, de brome ou d'iode et, si désiré, on salifie le composé obtenu.
12. Procédé de préparation des dérivés du 3-amino prégn-5-ène selon la revendication 1, dans lesquels Rj représente un radical hydroxyalcoyle renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, R2 représente un radical hydroxyalcoyle renfermant de 2 à 5 atomes de carbone ou un radical acyle aliphatique renfermant de 3 à 8 atomes de carbone ou un radical alcoxycarbonyle renfermant de 2 à 8 atomes de carbone, et X et le trait ondulé ont la signification déjà indiquée, caractérisé en ce que l'on prépare, par le procédé selon la revendication 11, un composé de formule (I) dans laquelle Ri a la signification indiquée ci-dessus et R2 représente un atome d'hydrogène, on fait réagir ce composé avec un halogénure de formule:

Hai —R,

(IV)