BR112018008880B1

BR112018008880B1 - 7-(tiazol-5-il) pirrolopirimidina, seu uso, e composição farmacêutica

Info

Publication number: BR112018008880B1
Application number: BR112018008880-3A
Authority: BR
Inventors: Zhaozhong DING; Fei Sun; Lifang Wu; Hao Wu; Shuhui Chen; Ling Yang
Original assignee: Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co., Ltd.
Priority date: 2015-11-05
Filing date: 2016-11-04
Publication date: 2023-01-17
Also published as: US20180370976A1; MX2018005708A; DK3381918T3; US10676478B2; KR20180073676A; JP6524355B2; SG11201803699YA; NZ742453A; EA035116B1; IL259115A; HUE052770T2; AU2016349080B2; CL2018001207A1; EP3381918A1; CN108349982B; CA3004173A1; IL259115B; JP2018536702A; WO2017076346A1; BR112018008880A8

Abstract

COMPOSTO 7-(TIAZOL-5-IL) PIRROLOPIRIMIDINA COMO AGONISTA DE TLR7. A presente invenção refere-se a um composto 7-(tiazol-5- il)pirrolopirimidina como um agonista de TLR7, e refere-se particularmente a um composto mostrado na fórmula (I), um seu sal farmaceuticamente aceitável e modo de preparação, uma composição farmacêutica contendo tal composto, e seu uso na preparação de um fármaco antiviral.

Description

Campo Técnico

[0001] A invenção se refere a um composto cíclico de 7-(tiazol-5- il)pirrolopirimidina ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo como agonista de TLR7, que é útil para tratar ou prevenir a infecção viral, particularmente a infecção viral de hepatite B ou de hepatite C.

Antecedentes

[0002] O receptor do tipo Toll é expresso por várias células imunes e reconhece motivos estruturais reservados: Padrão Molecular Associado a Patógenos (PAMP) expresso por micro-organismos patogênicos ou Padrões Moleculares Associados a Danos (DAMP) liberados por células mortas. O PAMP ou o DAMP estimula o receptor do tipo Toll para disparar a cascata de sinal que induz as ativações de fatores de transcrição como AP-1, NF-KB e reguladores de interferon (função de resposta de pulso). Resulta em várias respostas celulares, incluindo produções de interferons, citocinas pró-inflamatórias e citocinas efetoras, através das quais a resposta imune é produzida.

[0003] De longe, 13 tipos de receptores do tipo Toll foram constatados em mamíferos. Os receptores do tipo Toll 1, 2, 4, 5 e 6 são principalmente expressos na superfície celular enquanto os receptores tipo Toll 3, 7, 8 e 9 são expressos no endossoma. Diferentes receptores do tipo Toll reconhecem ligandos derivados de diferentes patógenos. O receptor do tipo Toll 7 (TLR7) é expresso e o ligando reconhecido pelas células dendríticas do tipo plasmoide (pDC) para induzir a secreção de interferon α (IFN-α). O receptor do tipo Toll 7 (TLR7) e o receptor do tipo Toll 8 (TLR8) são altamente homólogos e, portanto, o ligando de TLR7 em muitos casos é também o de TLR8. A estimulação de TLR8 induz principalmente a produção de citocinas como fator de necrose tumoral α (TNF-α) e quimioatrativo. O interferon α é um dos principais medicamentos para o tratamento de hepatite B crônica ou hepatite C, enquanto o TNF-α é uma citocina pró-inflamatória, cuja supersecreção resultará em efeitos colaterais graves.

[0004] Foram relatados vários agonistas de TLR7, como Imiquimod (British Journal of Dermatology 2003; 149 (Suppl. 66): 5-8), Resiquimod (Antiviral Research 64 (2004) 79-83), GS-9620 (Gastroenterology (2013), 144 (7), 1508-1517). No entanto, é desejável ter novos agonistas de TLR7 com melhor seletividade, atividade e segurança.

Sumário

[0005] Em um aspecto, é fornecido um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,

[0006] onde

[0007] R1 e R2 são, cada um, independentemente selecionados a partir do grupo que consiste de H e C1-4 alquila, ou

[0008] R1 e R2 em conjunto com o átomo de N ao qual estão ligados formam uma heterocicloalquila de 4-8 membros, a heterocicloalquila de 4-8 membros é opcionalmente substituída por um ou mais R3, R3 é cada um independentemente selecionado a partir do grupo que consiste de hidroxila, halogênio, ciano, C1-4 alquila e C1-4 alcóxi.

[0009] Em uma modalidade, a heterocicloalquila de 4-8 membros pode conter 0, 1, 2 ou 3 heteroátomos adicionais selecionados a partir do grupo que consiste de N, O e S.

[0010] Em outra modalidade, a heterocicloalquilo de 4-8 membros pode ser heterocicloalquila de 4 membros, 5 membros, 6 membros, 7 membros ou 8 membros.

[0011] Em outra modalidade, R3 é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste de hidroxila, F, Cl, Br, CN, metila, etila, propila, metoxila, etoxila e propóxi.

[0012] Em uma modalidade específica, o grupo formado por R1, R2 em conjunto com o átomo de N ao qual estão ligados é selecionado a partir do grupo que consiste de:

[0013] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula (I) é o seguinte composto:

[0014] Em outro aspecto, é fornecida uma composição farmacêutica, compreendendo um composto de Fórmula (I) e/ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um ou mais veículos e/ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis. A composição farmacêutica pode ainda opcionalmente compreender um ou mais agentes terapêuticos adicionais.

[0015] Em outro aspecto, é fornecido um método para tratar ou prevenir a infecção viral, compreendendo administrar a um indivíduo em necessidade de tratamento um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou a composição farmacêutica de acordo com a invenção em quantidade terapêutica ou profilaticamente eficaz.

[0016] Em um aspecto adicional, é fornecido o uso de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou a composição farmacêutica de acordo com a invenção para a fabricação de um medicamento para tratar ou prevenir a infecção viral.

[0017] Ainda em um aspecto, é fornecido um composto de Fórmula (1) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou a composição farmacêutica de acordo com a invenção para uso no tratamento ou prevenção de infecção viral.

[0018] Em algumas modalidades de acordo com a invenção, a infecção viral é infecção viral de vírus da dengue, vírus da febre- amarela, vírus do Nilo Ocidental, vírus da encefalite japonesa, vírus da encefalite transmitida pelo carrapato, vírus Kunjin, vírus da encefalite de Murray Valley, vírus da encefalite de St Louis, vírus da Febre Hemorrágica de Omsk, Vírus da Diarreia Viral, Vírus da Zika ou Vírus da Hepatite. Em uma modalidade preferencial, a infecção viral é infecção viral por hepatite. Em outra modalidade preferencial, a infecção viral é a infecção viral de hepatite B ou de hepatite C.

Breve Descrição dos Desenhos

[0019] A Figura 1 representa os resultados in vivo do teste de farmacodinâmica no modelo de camundongo infectado com o vírus da hepatite B portador de AAV (nível de cópia de HBsAg plasmático).

[0020] A Figura 2 representa os resultados in vivo do teste de farmacodinâmica no modelo de camundongo infectado com o vírus da hepatite B portador de AAV (nível de cópia de HBV DNA plasmático).

[0021] A Figura 3 representa os resultados in vivo do teste de farmacodinâmica no modelo de camundongo infectado com o vírus da hepatite B portador de AAV (nível de produção anti-HBsAb plasmático).

Descrição Detalhada Definição geral e termos

[0022] A menos que determinado de outra forma, os termos e frases usados aqui têm o significado a seguir. Um termo ou frase específica não deve ser considerado obscuro ou indefinido quando não está especificamente definido. Dever-se-ia entender de acordo com o significado geral. O nome comercial utilizado neste documento se refere ao produto correspondente ou ao ingrediente ativo.

[0023] Quando usado com uma variável numérica, o termo "aproximado" ou "aproximadamente" geralmente se refere ao valor da variável e todos os valores da variável dentro do erro experimental (por exemplo, dentro de um intervalo de confiança médio de 95%) ou dentro de ± 10% do valor especificado, ou um intervalo mais amplo.

[0024] A expressão "compreendem" ou seus sinônimos "contêm", "incluem", "têm" ou similares está em aberto, o que não exclui outros elementos, etapas ou ingredientes não listados. A expressão "consistem de" exclui quaisquer elementos, etapas ou ingredientes não listados. A expressão "substancialmente consistem de" se refere a elementos, etapas ou ingredientes especificados dentro de uma dada faixa, juntamente com elementos, etapas ou componentes opcionais que não afetam substancialmente a característica básica e nova do assunto reivindicado. Dever-se-ia entender que a expressão "compreendem" engloba as expressões "substancialmente consistem de" e "consistem de".

[0025] O termo "opcional" ou "opcionalmente" significa que o evento descrito a seguir pode ou não acontecer. Este termo abrange os casos em que o evento pode ou não acontecer. Por exemplo, a expressão em que etila é "opcionalmente" substituída por halogênio significa que a etila não é substituída (CH2CH3), monossubstituída (por exemplo, CH2CH2F), multissubstituída (por exemplo, CHFCH2F, CH2CHF2, etc.), ou é completamente substituída (CF2CF3). Um versado na técnica deveria notar que, para qualquer grupo contendo um ou mais substituintes, uma substituição ou modo de substituição que não existe possivelmente no espaço e/ou não pode ser sintetizado não será introduzido.

[0026] O termo Cm-n aqui utilizado significa que a porção tem m-n átomos de carbono. Por exemplo, "C1-4alquila" significa que a dita alquila tem 1-4 átomos de carbono.

[0027] A faixa numérica se refere a cada um dos números inteiros e subfaixas constituídas pelos números inteiros. Por exemplo, "C1-4" significa que o dito grupo pode ter 1 átomo de carbono, 2 átomos de carbono, 3 átomos de carbono ou 4 átomos de carbono. Assim, "C1- 4alquila" engloba "C2-3alquila", "C1-3alquila", "C2-4alquila" bem como C1-alquila, C2-alquila, C3-alquila, C4-alquila ou similares.

[0028] O termo "substituído" significa que qualquer um ou mais átomos de hidrogénio em um dado átomo são substituídos por substituinte(s), uma vez que a valência do dado átomo é normal e o composto após substituição é estável.

[0029] Quando qualquer variável (por exemplo, R) ocorre na composição ou estrutura do composto ao longo de um tempo, é definida independentemente em cada caso. Portanto, por exemplo, se um grupo é substituído por 0-2 R, o grupo pode ser opcionalmente substituído por no máximo dois R e R tem opção independente em cada caso. Adicionalmente, uma combinação de substituintes e/ou as suas variantes são permitidas apenas se tal combinação resultar em um composto estável.

[0030] A menos que determinado de outro modo, o termo "hetero" significa heteroátomo ou radical heteroátomo (isto é, um radical contendo heteroátomo), isto é, os átomos além dos átomos de carbono e hidrogênio ou o radical contendo tais átomos. De um modo preferencial, o heteroátomo é selecionado independentemente a partir do grupo que consiste de O, N, S e similares. Em uma modalidade em que dois ou mais heteroátomos estão envolvidos, os dois ou mais heteroátomos podem ser os mesmos, ou parte ou todos os dois ou mais heteroátomos podem ser diferentes.

[0031] O termo "halo" ou "halogênio" se refere a F, Cl, Br ou I.

[0032] O termo "hidroxila" se refere ao grupo -OH.

[0033] O termo "ciano" se refere ao grupo -CN.

[0034] O termo "alquila" se refere a um grupo hidrocarbila alifática saturada, linear ou ramificada, composto por átomos de carbono e hidrogênio, que está ligado ao resto da molécula através de uma ligação simples. Exemplos não limitantes de C1-4alquila compreendem, mas não estão limitados a metila, etila, propila, isopropila, n-butila, isobutila, sec-butila e ter-butila.

[0035] O termo "C1-4alcóxi" se refere a "C1-4alquila", que está conectado ao resto da molécula através de "-O-", onde "C1-4alquila" é definida como acima.

[0036] O termo "heterocicloalquila" se refere a um grupo do sistema monocíclico ou policíclico saturado, onde parte dos átomos de anel são heteroátomos selecionados a partir do grupo que consiste de N, O, S e os resto dos átomos do anel são C. Consequentemente, o termo "heterocicloalquila de 4-8 membros" se refere à heterocicloalquila contendo 4 a 8 átomos de anel no sistema, onde um ou mais átomos do anel são heteroátomos selecionados a partir do grupo que consiste de N, O, S. Os exemplos de heterociclo-hidrocarbila de 4 membros compreendem mas não estão limitados a azetidinila. Os exemplos da heterocicloalquila de 5 membros compreendem mas não estão limitados a pirrolidinila, isoxazolidinila, oxazolidinila, isotiazolidinilo, tiazolidinila, imidazolidinila. Os exemplos de heterociclo-hidrocarbila de 6 membros compreendem, mas não estão limitados a piperidinila, morfolinila, piperazinila. Os exemplos de heterociclo-hidrocarbila de 7 membros compreendem, mas não estão limitados a, azaciclo-heptanila, oxa- azabiciclo[2.2.1]heptila ou similares.

[0037] O termo "farmaceuticamente aceitável" se refere ao composto, material, composição e/ou forma de dosagem, que estão dentro do escopo do julgamento médico confiável, adequado para contato com tecidos humanos e animais, sem excesso de toxicidade, irritação, reação alérgica ou outros problemas ou complicações e tem relação risco/benefício aceitável.

[0038] O termo "composição farmacêutica" se refere a um composto ativo (por exemplo, um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), que é opcionalmente combinado com um ou mais componentes químicos farmaceuticamente aceitáveis (por exemplo, mas não limitados a veículo e/ou excipiente).

[0039] O termo "veículo farmaceuticamente aceitável" se refere aos veículos que não têm irritação significativa e não prejudicam a bioatividade e propriedade do composto ativo. O "veículo farmaceuticamente aceitável" se refere a uma substância inerte que é administrada juntamente com o ingrediente ativo e é benéfica para a sua administração, e compreende, mas não está limitado a qualquer uma das seguintes substâncias aprovadas por Food and Drug Administration para uso em humanos ou animais (por exemplo, gado): glidante, agente adoçante, diluente, conservante, corante, agente flavorizante, tensoativo, agente umectante, dispersante, desintegrante, agente de suspensão, agente estabilizante, agente isotônico, solvente ou agente emulsificante. Exemplos não limitantes dos veículos compreendem carbonato de cálcio, fosfato de cálcio, vários açúcares e amidos, derivado de celulose, gelatina, óleo vegetal e polietileno glicol ou similares. Outras informações relativas aos veículos podem ser encontradas em Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21a Ed., Lippincott, Williams & Wilkins (2005), cujos conteúdos são aqui incorporados por referência. O termo "excipiente" se refere geralmente ao veículo, diluente e/ou meio utilizado para formular uma composição farmacêutica eficaz.

[0040] O termo "administração" ou "administrar" ou similar se refere a um método que permite que um composto ou composição seja entregue a um sítio desejado de ação biológica. Tais métodos compreendem, mas não estão limitados à administração oral, parentérica (incluindo injeção intravenosa, subcutânea, intraperitoneal, intramuscular, intravascular ou infusão), administração local, retal ou similares.

[0041] Quanto ao agente ativo farmacêutico ou farmacológico, o termo "quantidade eficaz", "quantidade terapeuticamente eficaz" ou "quantidade profilaticamente eficaz" se refere à quantidade do medicamento ou agente que não é tóxico, mas suficiente para alcançar o efeito desejado. No que diz respeito à formulação oral aqui, a "quantidade eficaz" para uma substância ativa na composição se refere à quantidade necessária para alcançar o efeito desejado em combinação com outra substância ativa na composição. A quantidade eficaz pode ser determinada individualmente e depende da idade e da condição geral do receptor, bem como da substância ativa específica. A quantidade eficaz no caso específico pode ser determinada por um versado na técnica através de teste convencional.

[0042] O termo "ingrediente ativo", "agente terapêutico", "substância ativa" ou "agente ativo" se refere a uma entidade química útil para o tratamento ou prevenção de distúrbio, doença ou condição alvo de forma eficaz.

[0043] "Grupo protetor" se refere a um tipo de substituinte que é utilizado para bloquear ou proteger uma certa funcionalidade enquanto reage com outros grupos funcionais no composto. Por exemplo, um "grupo amino-protetor" é um substituinte ligado a um grupo amino que bloqueia ou protege a funcionalidade amino no composto. Os grupos amino-protetores adequados incluem, mas não estão limitados a acetila, grupo trifluoro, t-butoxicarbonila (BOC), benziloxicarbonila (CBZ), de 9- fluorenilmetil cloroformato (Fmoc), 2-(trimetilsilil) etoxil metila (SEM) e similares. A descrição geral de grupos protetores e seu uso pode ser encontrada em Greene e Wuts, Protective Groups In Organic Synthesis, Wiley and Sons, 1991.

Composto de acordo com a invenção

[0044] É fornecido um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,

[0045] onde cada um dos grupos é definido como acima.

[0046] A expressão "o grupo formado por R1, R2 junto com o átomo de N ao qual eles estão ligados" se refere ao grupo formado pela porção

no composto de Fórmula (I). Os exemplos incluem, mas não estão limitados a

[0047] O(s) heteroátomo(s) adicional(ais) na expressão "a heterocicloalquila de 4-8 membros pode conter 0, 1, 2 ou 3 heteroátomos adicionais selecionados a partir do grupo que consiste de N, O e S" se refere a heteroátomo(s) que não o átomo de N na porção

. De um modo preferencial, o heteroátomo adicional pode ser selecionado a partir do grupo que consiste de N, O e S, e o número pode ser 0, 1, 2 ou 3.

[0048] Em uma modalidade preferencial, é fornecido o composto da seguinte Fórmula:

[0049] Dever-se-ia entender que o composto de acordo com a invenção pode estar presente na forma de sal farmaceuticamente aceitável. Como sal farmaceuticamente aceitável, por exemplo, os seguintes exemplos podem ser mencionados: sais metálicos, sais de amônio, sais formados com bases orgânicas, ácidos inorgânicos, idos orgânicos, aminoácidos ácidos ou básicos ou similares. Exemplos não limitantes de sais metálicos compreendem, mas não estão limitados a, sais de metais alcalinos, por exemplo, sal de sódio, sal de potássio ou similares; sais de metais alcalinoterrosos, por exemplo, sal de cálcio, sal de magnésio, sal de bário ou similares; sal de alumínio ou similares. Exemplos não limitantes dos sais formados com bases orgânicas compreendem, mas não estão limitados àqueles formados com trimetilamina, trietilamina, piridina, metilpiridina, 2,6-dimetilpiridina, etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, ciclo-hexilamina, diciclo- hexilamina ou similares. Exemplos não limitantes dos sais formados com ácidos inorgânicos compreendem, mas não estão limitados àqueles formados com ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido nítrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico ou similares. Exemplos não limitantes dos sais formados com ácidos orgânicos compreendem, mas não estão limitados àqueles formados com ácido fórmico, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido fumárico, ácido oxálico, ácido málico, ácido maleico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido sucínico, ácido metanossulfônico, ácido benzenossulfônico, ácido p-toluenossulfônico ou similares. Exemplos não limitantes dos sais formados com aminoácidos básicos compreendem, mas não estão limitados àqueles formados com arginina, lisina, ornitina ou similares. Exemplos não limitantes dos sais formados com aminoácidos ácidos compreendem, mas não estão limitados àqueles formados com ácido aspártico, ácido glutâmico ou similares.

[0050] Os sais farmaceuticamente aceitáveis de acordo com a invenção podem ser preparados a partir do composto de origem contendo grupo ácido ou básico através de procedimentos químicos convencionais. Geralmente, esses sais podem ser preparados através da reação dos compostos na forma de ácido ou base livre com base ou ácido estequiométrica apropriada em água, solvente orgânico ou mistura destes. Tipicamente, meios não aquosos como éter, etil acetato, etanol, isopropanol ou acetonitrilo, etc. são preferenciais.

[0051] O composto de acordo com a invenção pode ter um ou mais centros estereoisoméricos e cada um dos centros pode existir na configuração R ou configuração S ou combinação dos mesmos. Portanto, os compostos de acordo com a invenção compreendem todas as formas estereoisoméricas configuracionais individuais, formas isoméricas de posição, formas diastereoméricas, formas enantioméricas e formas epiméricas, bem como as suas misturas correspondentes. A tecnologia para reverter um centro estereoisomérico particular ou mantê-lo inalterado, bem como a tecnologia de resolução de misturas de estereoisômeros é bem conhecida na técnica e um versado na técnica pode selecionar um procedimento particular de acordo com exigências particulares.

[0052] Os compostos de acordo com a invenção podem existir em formas não solvatadas ou solvatadas, incluindo a forma de hidrato. Em geral, as formas solvatadas são equivalentes às formas não solvatadas e ambas estão abrangidas no escopo da invenção. Os compostos de acordo com a invenção podem existir em formas polimórficas ou amorfas e tais formas estão abrangidas dentro do escopo da invenção.

[0053] O composto de acordo com a invenção pode conter um isótopo atômico em uma relação não natural em um ou mais átomos que constituem o dito composto. Por exemplo, o composto pode ser marcado com radioisótopo, tal como Trítio (3H), Iodo-125 (125I) ou C14 (14C). A alternação de todos os radioisótopos do composto, radioativos ou não, está abrangida dentro do escopo da invenção.

[0054] A presente invenção também abrange qualquer derivado farmaceuticamente aceitável dos compostos de acordo com a Fórmula (I), por exemplo, éster, sal do éster. Um derivado particularmente preferencial é o pró-fármaco. Mediante administração a um indivíduo, tal derivado pode fornecer, direta ou indiretamente, o composto de acordo com a invenção ou o seu metabólito ou resíduo com atividade farmacêutica. Um derivado particularmente preferencial (por exemplo, pró-fármaco) é o composto que, mediante administração a um indivíduo, aumenta a biodisponibilidade do composto de acordo com a invenção ou melhora a administração do composto de origem aos tecidos ou órgãos de um corpo vivo.

Administração, Composição Farmacêutica e Kit

[0055] É fornecido um método para tratar ou prevenir a infecção viral, compreendendo administrar a um indivíduo em necessidade de tratamento um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou a composição farmacêutica de acordo com a invenção em uma quantidade terapêutica ou profilaticamente eficaz. O método pode opcionalmente compreender administrar um ou mais agentes ativos adicionais para tratar ou prevenir a infecção viral.

[0056] Alternativamente, é fornecido o uso de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou a composição farmacêutica de acordo com a invenção para a fabricação de um medicamento para tratar ou prevenir a infecção viral. Em uma modalidade particular, o composto de Fórmula (I) ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo pode ser usado em combinação com um ou mais agentes ativos adicionais para tratar ou prevenir a infecção viral.

[0057] Alternativamente, é fornecido um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou a composição farmacêutica de acordo com a invenção para uso no tratamento ou prevenção de infecção viral. Em uma modalidade particular, o composto de Fórmula (I) ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo pode ser utilizado em combinação com um ou mais agentes ativos adicionais para tratar ou prevenir a infecção viral.

[0058] Em algumas modalidades de acordo com a invenção, a infecção viral é infecção viral de vírus da dengue, vírus da febre- amarela, vírus do Nilo Ocidental, vírus da encefalite japonesa, vírus da encefalite transmitida pelo carrapato, vírus Kunjin, vírus da encefalite de Murray Valley, vírus da encefalite de St Louis, vírus da Febre Hemorrágica de Omsk, Vírus da Diarreia Viral, Vírus da Zika ou Vírus da Hepatite. Em uma modalidade preferencial, a infecção viral é infecção viral por hepatite. Em outra modalidade preferencial, a infecção viral é a infecção viral de hepatite B ou de hepatite C.

[0059] É fornecida também uma composição farmacêutica, compreendendo um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um ou mais veículos e/ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis. A composição farmacêutica pode ainda opcionalmente compreender um ou mais agentes ativos adicionais.

[0060] A composição farmacêutica de acordo com a invenção pode ser preparada combinando o composto de acordo com a invenção ou o sal do mesmo com um veículo farmaceuticamente aceitável. Por exemplo, ela pode ser formulada em formulação sólida, semissólida, líquida ou gasosa, tal como comprimido, pílula, cápsula, pó, grânulo, pomada, emulsão, suspensão, solução, supositório, injeção, inalante, gel, microesfera, aerossol ou similar.

[0061] A composição farmacêutica de acordo com a invenção pode ser preparada pelos processos bem conhecidos na técnica, tais como misturação convencional, dissolução, granulação, revestimento de drágeas, levigação, emulsão, liofilização ou similares.

[0062] As vias típicas para administrar o composto de acordo com a invenção ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou o seu estereoisômero ou composição farmacêutica compreendem, mas não estão limitadas à administração oral, retal, transmucosa, entica ou local, transcutânea, inalada, parentérica, sublingual, intravaginal, intranasal, intraocular, intraperitoneal, intramuscular, subcutânea, intravenosa.

[0063] Quanto à administração oral, os compostos ativos podem ser misturados com os veículos farmaceuticamente aceitáveis bem conhecidos na técnica para preparar a composição farmacêutica. Os veículos podem ser utilizados para preparar os compostos de acordo com a invenção em comprimido, pílula, trocisco, drágea, cápsula, líquido, gel, pasta, suspensão ou similares, úteis para administração oral ao paciente.

[0064] A composição oral sólida pode ser preparada por processos convencionais de misturação, enchimento ou compressão, por exemplo, pelos seguintes processos: misturar os compostos ativos com excipientes sólidos, opcionalmente moer a mistura resultante, adicionar outros adjuvantes apropriados se necessário e, em seguida, processar a mistura em grânulos de modo a obter o núcleo do comprimido ou drágea. Os adjuvantes apropriados compreendem, mas não estão limitados a ligante, diluente, desintegrante, lubrificante, glidante, adoçante, ou similares. Exemplos adicionais compreendem celulose microcristalina, solução de glicose, gel de acácia, solução de gelatina, sacarose e pasta de amido; talco, amido, estearato de magnésio, estearato de cálcio ou ácido esteárico; lactose, sacarose, amido, manitol, sorbitol ou fosfato dicálcio; dióxido de silício; croscarmelose de sódio, amido pré-gelatinizado, amido glicolato de sódio, ácido algínico, amido de milho, amido de batata, metil celulose, ágar, carboximetil celulose, polivinil pirrolidona reticulada ou similares. O núcleo da drágea pode ser opcionalmente revestido através de processos bem conhecidos na prática farmacêutica convencional, especialmente por um revestimento entérico.

[0065] A composição farmacêutica de acordo com a invenção pode ser útil para administração parentérica, por exemplo, como forma de dosagem unitária apropriada como solução estéril, suspensão ou produto liofilizado. Podem ser utilizados excipientes apropriados, tais como enchimento, tampão ou tensoativo.

[0066] O composto de Fórmula (I) ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção pode ser administrado por qualquer via e processo adequados, por exemplo, por administração oral ou parentérica (por exemplo, administração intravenosa). A quantidade terapeuticamente ou profilaticamente eficaz do composto de Fórmula (I) pode variar de aproximadamente 0,0001 a 20 mg/kg de peso corporal/dia, por exemplo, 0,001 a 10 mg/kg de peso corporal/dia.

[0067] A frequência de dosagem do composto de Fórmula (I) depende das exigências do paciente individual, por exemplo, uma ou duas ou mais vezes por dia. A administração pode ser intermitente, por exemplo, durante o período de vários dias, o paciente recebe a dosagem diária do composto de Fórmula (I), e então durante o período de vários dias ou um tempo maior, o paciente não recebe a dosagem diária do composto de Fórmula (I).

[0068] É fornecida também uma combinação farmacêutica, por exemplo, um kit, que compreende a) um primeiro agente ativo que é um composto como aqui descrito; b) um ou mais agentes ativos adicionais. A combinação farmacêutica pode compreender instruções para a sua administração, se necessário. Se necessário, os itens a) e b) acima podem ser fornecidos no mesmo recipiente ou em recipientes diferentes. A combinação farmacêutica pode ainda compreender os agentes para auxiliar a administração no mesmo recipiente ou em recipientes diferentes, por exemplo, os veículos e/ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis como mencionado acima. Opcionalmente, o kit pode compreender uma unidade para diagnóstico de infecção viral (por exemplo, as infecções virais mencionadas acima). Síntese e Preparação

[0069] O composto de acordo com a invenção pode ser preparado através de vários processos de síntese bem conhecidos por um versado na técnica, incluindo as modalidades específicas ilustradas abaixo, as modalidades através da combinação dessas modalidades específicas com outros processos de síntese química bem como equivalentes conhecidos por um versado na técnica. As modalidades preferenciais compreendem, mas não estão limitadas aos Exemplos de trabalho aqui apresentados. A reação química da modalidade específica de acordo com a invenção pode ser realizada em um solvente apropriado que deveria ser adequado para a alteração química e reagente e material exigidos de acordo com a invenção. Para obter o composto de acordo com a invenção, um versado na técnica precisa executar modificação ou seleção para a etapa de síntese ou procedimento de reação com base nas modalidades conhecidas.

[0070] Um fator importante na concepção de qualquer esquema de síntese na técnica reside na seleção de um grupo protetor apropriado para o grupo reativo (por exemplo, amino na invenção). Um versado na técnica pode referir-se a Protective Groups In Organic Synthesis, Wiley and Sons, 1991 por Greene e Wuts. As referências citadas acima são aqui incorporadas por referência na totalidade.

[0071] Por exemplo, o composto de Fórmula geral (I) de acordo com a invenção pode ser preparado por um versado na técnica de síntese química com procedimentos padrão de acordo com o seguinte esquema:

[0072] Preparação do composto de Fórmula 4: O composto de Fórmula 1, como material de partida, é feito reagir com o composto de Fórmula 2 via reação de condensação para fornecer o composto de Fórmula 3, que é usado para fornecer o composto de Fórmula 4 sob a ação de n-butil-lítio e DMF.

[0073] Preparação do composto de Fórmula (I): O composto de Fórmula 5, com a proteção de SEM, é utilizado para fornecer o composto de Fórmula 6, que é submetido à amino-substituição para fornecer o composto de Fórmula 7; o composto de Fórmula 7 é feito reagir com n-butanol sob a ação de Na para fornecer o composto de Fórmula 8, que é submetido à desproteção do grupo protetor SEM sob a ação de TFA para fornecer o composto de Fórmula 9; o composto de Fórmula 9 reage com o composto de Fórmula 4 para fornecer o composto de Fórmula 10, que é submetido à remoção de hidroxila para fornecer o composto de Fórmula (I).

[0074] Os solventes aqui utilizados estão comercialmente disponíveis e podem ser utilizados sem purificação adicional. As reações são geralmente realizadas sob nitrogênio inerte em solvente anidro. Os dados de ressonância magnética de prótons são registrados no espectrômetro Bruker Avance III 400 (400 MHz), com o deslocamento químico mostrado como (ppm) em baixo campo de tetrametilsilano. A espectrometria de massas é determinada em Agilent 1200 plus 6110 (& 1956A). LC/MS ou Shimadzu MS inclui um DAD: SPD-M20A (LC) e detector Shimadzu Micromass 2020. O espectrômetro de massas é equipado com uma ionização por eletroaspersão (ESI) operada no modo positivo ou negativo.

[0075] Os compostos são nomeados manualmente ou pelo software ChemDraw®. Os nomes dos compostos comercialmente disponíveis fornecidos no catálogo do fornecedor são utilizados.

[0076] A análise por cromatografia líquida de alto desempenho é realizada com o sistema Shimadzu LC20AB equipado com autoamostrador Shimadzu SIL-20A e detector Shimadzu DAD: SPD- M20A japonês em coluna cromatográfica Xtimate C18 (3m enchimento, 2,1x300 mm). Método 0-60AB_6 min: gradiente linear é aplicado, onde a eluição é iniciada com 100% A (A é 0,0675% solução aquosa de TFA) e terminada com 60% B (B é 0,0625% TFA em solução de MeCN) (todo o processo é de 4,2 min), e depois 60% B é usado para a eluição durante 1 min. A coluna cromatográfica é ainda equilibrada durante 0,8 min para atingir 100:0 e o tempo operacional total é de 6 min. Método de 10- 80AB_6 min: gradiente linear é aplicado, onde a eluição é iniciada com 90% A (A é 0,0675% de solução aquosa de TFA) e terminada com 80% B (B é 0,0625% TFA em solução de acetonitrilo) (todo o processo é de 4,2 min), e depois 80% B é usado para eluição por 1 min. A coluna cromatográfica é ainda equilibrada durante 0,8 min até atingir 90:10 e o tempo operacional total é de 6 min. A temperatura da coluna é de 50° C e a velocidade é de 0,8 mL/min. A onda de varredura do detector de arranjo de diodos é de 200 a 400 nm.

[0077] A análise por cromatografia em camada delgada (TLC) é realizada em sílica gel GF254 do grupo Sanpont. Speckles são detectados com luz UV em geral e, em alguns casos, outros processos também podem ser usados. Nestes casos, a placa de camada delgada é espalhada com iodo (aproximadamente 1 g de iodo é adicionado a 10 g de sílica gel com mistura completa), aldeído de vanilina (aproximadamente 1 g de aldeído de vanilina é dissolvido em 100 mL de H2SO4 a 10%), ninidrina (disponível a partir de Aldrich) ou revelador particular ((NH4)6Mo7O24 • 4H2O, 5 g de (NH4)2Ce(IV)(NO3)6, 450 mL de H2O e 50 mL de H2SO4 concentrado são completamente misturados) e o composto é detectado. Com um processo similar ao descrito em Still, W. C.; Kahn, M; e Mitra, M. Journal of Organic Chemistry, 1978, 43, 2923 a 2925, a cromatografia em coluna flash é realizada em 40-63 μm (230-400 mesh) de sílica gel da Silicycle. Os solventes comuns em cromatografia em coluna flash ou cromatografia em camada delgada compreendem mistura de diclorometano/metanol, etil acetato/metanol e hexano/etil acetato.

[0078] A análise cromatográfica preparativa é executada no sistema Gilson-281 Prep LC 322 com detector Gilson UV/VIS-156, e a coluna cromatográfica é Agella Venusil ASB Prep C18, 5m, 150 x 21,2 mm; Phenomenex Gemini C18, 5 m, 150 x 30 mm; Boston Symmetrix C18, 5 m, 150 x 30 mm; ou Phenomenex Synergi C18, 4 m, 150 x 30 mm. Acetonitrilo/água de baixo gradiente é usado para eluir o composto quando a velocidade é aproximadamente 25 mL/min, onde a água contém HCl a 0,05%, HCOOH a 0,25% ou NH3 • H2O a 0,5%, e o tempo de operação total é de 8 a 15 min.

[0079] As seguintes abreviaturas são usadas aqui: n-BuLi: n-butil- lítio; THF: tetraidrofurano; SEM: 2-(trimetilsilil)etoxil metila; DIPEA: diisopropil etil amina; IPA: isopropanol; TFA: ácido trifluoroacético; DMF: N,N-dimetilformamida; n-BuOH: n-butanol; Et3SiH: trietilsilano.

Efeito vantajoso

[0080] Os compostos de acordo com a invenção têm alta atividade de ligação ao receptor do tipo Toll 7 e baixa atividade de ligação ao receptor do tipo Toll 8, apresentando melhor seletividade, atividade e segurança, bem como menor efeito colateral, e podem ser utilizados para tratar e prevenir eficazmente a infecção viral, particularmente infecção viral por hepatite B ou hepatite C.

Exemplos

[0081] Os seguintes Exemplos são fornecidos para um versado na técnica para ilustrar e praticar claramente a invenção. Eles são apenas ilustrativos e exemplificativos e não devem ser entendidos como uma limitação ao escopo. A menos que determinado de outro modo, as relações (incluindo percentagens) ou partes são baseadas em peso.

[0082] Exemplo 1:

[0083] 2-butoxi-7-((2-(pirrolidin-1-ilmetil)tiazol-5-il)metil)-5Hpirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina (I)

[0084] Etapa 1: 2-(pirrolidin-1-ilmetil)tiazol

[0085] A um frasco de reação de 500 mL foram adicionados tiazol 2-formaldeído (25,00 g, 220,90 mmol) e tetraidrofurano (300,0 mL), que foram agitados durante 5 min e, em seguida, ácido acético glacial (39,80 g, 662,90 mmol) foi adicionado. O sistema foi resfriado para 0-10º C com agitação e pirrolidina (13,80 g, 194,40 mmol) foi adicionada por gotejamento. A temperatura foi mantida abaixo de 10º C durante a adição. Após a adição, triacetoxiboridreto de sódio (56,20 g, 265,10 mmol) foi adicionado em porções. A reação foi realizada a 10-20° C durante 12 horas e foi monitorada com TLC até os materiais de partida desaparecerem totalmente. Depois de completada a reação, ao líquido reacional foi adicionado bicarbonato de sódio aquoso saturado lentamente até pH de 9-10 e o líquido reacional foi extraído com 150 mL de etil acetato três vezes. As fases orgânicas foram combinadas, secas sobre sulfato de sódio anidro e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (gradiente de fase móvel: etil acetato/éter de petróleo: 3/1/-1/1) para fornecer 15,00 g do composto título como um óleo amarelo, rendimento: 40,3%.

[0086] 1H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,71 (d, J = 3,26 Hz, 1H), 7,26 - 7,32 (m, 1H), 4,02 (s, 2H), 2,60 - 2,75 (m, 4H), 1,84 (td, J = 3,20, 6,65 Hz, 4H).

[0087] Etapa 2: 2-(pirrolidin-1-ilmetil)tiazol-5-formaldeído

[0088] A um frasco de três gargalos de 500 mL foram adicionados 2- (pirrolidin-1-ilmetil) tiazol (15,00 g, 89,10 mmol) e tetraidrofurano (250,00 mL), que foi arrefecido até -78° C com acetona e gelo seco. A - 78° C, n-butil-lítio (2,5 M, 71,3 mL) foi adicionado lentamente por gotejamento. Após a adição, a mistura reacional foi agitada durante 30 min a -78° C. A -78 ° C, ao líquido reacional foi adicionado DMF (13,00 g, 178,30 mmol) por gotejamento. Após a adição, a mistura reacional foi ainda agitada a -78° C durante 30 min. A conclusão da reação foi detectada com TLC. O líquido reacional foi resfriado com 50 mL de cloreto de amônio aquoso saturado e extraído com 150 mL de etil acetato. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio saturado, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 15,00 g do composto título como um óleo amarelo e o produto cru foi utilizado para a etapa seguinte diretamente.

[0089] 1H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) δ 10,03 (s, 1H), 8,32 (s, 1H), 4,03 (s, 2H), 2,73 (t, J = 6,02 Hz, 4H), 1,86 (td, J = 3,20, 6,65 Hz, 4H).

[0090] Etapa 3: 2,4-dicloro-5-((2-(trimetilsilil)etoxil)metil)-5H- pirrolo[3,2-d]pirimidina

[0091] 2,4-dicloro-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidina (4,00 kg, 21,28 mol) foi dissolvida em DMF (20,00 L); em temperatura ambiente (25° C), DIPEA (2,58 kg, 20,00 mol) foi adicionado em porções e a mistura reacional foi agitada durante 30 min subsequentemente. O líquido reacional foi resfriado a 0° C com um banho de gelo e depois SEM-Cl (4,00 kg, 24,00 mol) foi adicionado lentamente por gotejamento a uma taxa de 1-2 gotas/segundo durante 5 horas. Após a adição, o líquido reacional foi agitado durante 4 horas a 0° C. A conclusão da reação foi monitorada com HPLC. O líquido reacional foi resfriado com 70 L de água e extraído com etil acetato (15 L x 3) após a diluição. As fases orgânicas combinadas foram lavadas com ácido clorídrico aquoso a 1M (5 L x 2) e solução salina saturada (7L x 2) sucessivamente, e o solvente foi removido por destilação sob pressão reduzida para fornecer o composto título (6,40 kg, 20,11 mol, rendimento de 94,50 %).

[0092] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,24-8,35 (m, 1H), 6,70 - 6,85 (m, 1H), 5,77 (s, 2H), 3,45 - 3,57 (m, 2H), 0,74 - 0,86 (m, 2H), 0,00 (s, 9H).

[0093] Etapa 4: 2-cloro-5-((2-(trimetilsilil)etoxil)metil)-5H-pirrolo [3,2-d]pirimidin-4-amina

[0094] Em um autoclave de 10 L, 2,4-dicloro-5-((2- (trimetilsilil)etoxil)metil)-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidina (1,60 kg, 5,03 mol) foi dissolvido em isopropanol (1,60 L) e amônia aquosa (4 L) foi adicionada em uma porção em temperatura ambiente (25° C). A mistura reacional foi agitada a 95° C durante 7 horas e a conclusão da reação foi monitorada com HPLC. O líquido reacional foi resfriado até a temperatura ambiente espontaneamente e filtrado com funil de Buchner para fornecer um sólido preto acastanhado. O sólido foi suspenso com etil acetato/n-heptano (1/1, 5 L x 2), suspenso com etil acetato (4 L), sucessivamente, para fornecer o composto título como um sólido castanho (1,25 kg, 4,18mol, rendimento 83,1%).

[0095] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,61 - 7,77 (m, 1H), 6,97 - 7,19 (m, 2H), 6,28 - 6,38 (m, 1H), 5,54 - 5,67 (m, 2H). 3,43 - 3,53 (m, 2H), 0,76 - 0,91 (m, 2H), 0,07 (s, 9H).

[0096] Etapa 5: 2-butoxi-5-((2-(trimetilsilil)etoxil)metil)-5H- pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina

[0097] Sob a proteção de nitrogênio, a n-BuOH (17,0 L) foi lentamente adicionado sódio metálico (525,05 g, 22,84 mol) em porções. Após a adição, o sistema foi aquecido a 60° C e continuou a ser agitado a essa temperatura até a completa dissolução do sódio metálico. Em seguida, o sistema foi resfriado para 25° C e 2-cloro-5 - ((2- (trimetilsilil) etoxil) metil) -5H- pirrolo [3,2-d] pirimidin-4-amina (1,95 kg, 6,53 mol) foi adicionado em porções. Após a misturação uniforme com agitação, os reagentes foram agitados durante 8 horas a 90° C e a reação foi monitorada com HPLC. A mistura reacional foi resfriada para 25° C espontaneamente e depois vertida lentamente em 30 L de cloreto de amônio aquoso e extraída com etil acetato (15 L x 3). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com solução salina saturada (20 L x 2), secas sobre Na2SO4 anidro e filtradas. Após a destilação do solvente sob pressão reduzida, o resíduo foi suspenso em n-heptano (4L). A filtração foi realizada para fornecer o sólido, que foi suspenso em etil acetato (5 L) para fornecer o composto título como um sido branco amarelado (1,53 kg, 4,55 mol, 69,7%).

[0098] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,49 - 7,54 (m, 1H), 6,54 - 6,62 (m, 2H), 6,15 - 6,20 (m, 1H), 5,54 (s, 2H), 4,10 - 4,22 (m, 2H), 3,42 - 3,55 (m, 2H), 1,58 - 1,73 (m, 2H), 1,35 - 1,47 (m, 2H), 0,90 - 0,96 (m, 3H), 0,83 - 0,89 (m, 2H), 0,05 (s, 9H).

[0099] Etapa 6: 2-butoxi-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidina-4-amina

[0100] 2-butoxi-5-((2-(trimetilsilil)etoxil)metil)-5H-pirrolo[3,2- d]pirimidin-4-amina (1,10 kg, 3,27 mol) foi dissolvido em TFA (5,50 L) e o líquido reacional foi agitado durante 16 horas a 25° C. A conclusão da reação foi monitorada com HPLC e o TFA foi removido por destilação sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (1,2 L) e água gelada (1,2 L) e o pH do sistema foi ajustado para 12 com amônia aquosa concentrada com agitação uniforme e depois foi agitado durante 2 horas. O precipitado continuou a aparecer na solução. Após filtração, o bolo de filtração como sólido branco foi misturado com amônia aquosa a 15% (1,2 L x 3) e etil acetato (4 L) para fornecer o composto título como um sólido branco (550,00 g, 2,67 mol, 81,7%).

[0101] 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,37 (d, J = 2,89 Hz, 1H), 6,29 (d, J = 3,01 Hz, 1H), 4,27 (t, J = 6,53 Hz, 2H), 1,75 (d, J = 7,91 Hz, 2H), 1,44 - 1,61 (m, 2H), 1,00 (t, J = 7,40 Hz, 3H).

[0102] Etapa 7:

[0103] (4-amino-2-butoxi-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-7-il-[2- (pirrolidin-1-ilmetil)tiazol-5-il]metanol

[0104] A um frasco com três gargalos de 500 mL foram adicionados 2-butoxi-5H-pirrolo [3,2-d] pirimidina-4-amina (10,00 g, 48,49 mmol), carbonato de potássio (7,37 g, 53,34 mmol), água (100 mL) e isopropanol (100 mL), ao qual foi adicionado 2- (pirrolidin-1-ilmetil) tiazol-5-formaldeído (14,27 g, 72,74 mmol) com agitação. A reação foi realizada a 25° C durante 16 h e o 2-(pirrolidin-1-ilmetil)tiazol-5- formaldeído foi monitorado com LCMS para conclusão da reação. O líquido reacional foi adicionado com 100 mL de água para diluição e extraído com 100 mL de diclorometano três vezes. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio anidro, os sólido removidos por filtração e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o resíduo, que foi purificado com cromatografia em coluna (gradiente de fase móvel: diclorometano/metanol/amônia aquosa: 30/1/0,1 a 10/1/0,1) para fornecer o composto título como um sólido castanho (5,20 g, 12,92 mmol, rendimento: 26,6%). MS (ESI) m/z: 403,3 [M + H+].

[0105] Etapa 8:

[0106] 2-butoxi-7-((2-(pirrolidin-1-ilmetil)tiazol-5-il)metil)-5H- pirrolo[3,2-d]pirimidin-4-amina

[0107] A um frasco em forma de beringela de 100 mL foram carregados (4-amino-2-butoxi-5H-pirrolo[3,2-d]pirimidin-7-il)-[2- (pirrolidin-1-ilmetil)tiazol- 5-il] metanol (5,10 g, 12,60 mmol), trietilsilano (10,00 mL) e ácido trifluoroacético (40,00 mL) e a mistura reacional foi agitada a 20° C durante 12 horas. As matérias-primas foram monitoradas com LCMS para conclusão da reação. O solvente foi removido por concentração sob pressão reduzida. Ao sistema foram adicionados 100 mL de etil acetato e depois solução saturada de carbonato de sódio foi adicionada para ajustar a solução para pH = 910. A extração foi realizada com 50 mL de etil acetato três vezes. As fases orgânicas foram combinadas, secas sobre sulfato de sódio anidro, os sólidos removidos por filtração e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o resíduo, que foi separado com cromatografia líquida de alto desempenho preparativa para fornecer 4,2 g de 2-butoxi-7-((2- (pirrolidin-1- ilmetil)tiazol-5-il)metil)-5H-pirrolo [3,2-d] pirimidin-4-amina como um óleo amarelo claro (diformato do composto título).

[0108] 1H RMN (400 MHz, metanol-d4): δ 8,30 (s, 2H), 7,61 (s, 1H), 7,41 (s, 1H), 4,51 (s, 2H), 4,44 (q, J = 6,6 Hz, 2H), 4,24 (s, 2H), 3,33 - 3,28 (m, 4H), 2,02 (s, 4H), 1,83 - 1,73 (m, 2H), 1,56 - 1,46 (m, 2H), 0,99 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

Exemplo Experimental 1: Receptor do tipo Toll 7 e Receptor do tipo Toll 8, atividade de ligação ao receptor in vitro

[0109] Reagentes:

[0110] Célula HEK-blue hTLR7 e célula HEK-blue hTLR8 (disponível a partir de InvivoGen)

[0111] Meio DMEM

[0112] Soro bovino fetal inativado por calor

[0113] Reagente Anti Micoplasma NormocinTM

[0114] Bleomicina

[0115] Blasticidina

[0116] O GS-9620 e o R848 usados têm as seguintes estruturas. GS-9620 pode ser preparado de acordo com o processo descrito em US20100143301; R848 é adquirido a partir de ABGENT (Catálogo: IMG- 2208, 0,5 mg). GS9620 R848/Resiquimod

[0117] Esquema:

[0118] 1. Preparação da placa de composto de 96 poços:

[0119] Os compostos foram diluídos por gradiente com DMSO em 3 vezes utilizando a estação de trabalho líquida POD começando em uma concentração de 10 mmol/L e 10 pontos foram diluídos (2a coluna à 11a coluna, e cada ponto foi duplicado). Na 12a coluna, i μL de 5 mg/mL de composto positivo R848 foi adicionado como controle positivo; e na 1a coluna, 1 μL de DMSO foi adicionado como controle negativo. Cada poço continha 1 μL de DMSO.

[0120] 2. As células no frasco de cultura celular foram coletadas e a densidade celular foi diluída para 250.000 células/mL.

[0121] 3. 200 μL (50.000 células/poço) de suspensão celular foram adicionados à placa de composto preparada e a concentração final de DMSO em cada poço foi de 0,5%.

[0122] 4. As placas de cultura contendo as células e os compostos foram incubadas em incubadora de CO2 durante 24 h a 37° C, 5% de CO2.

[0123] 5. Após 24 h de incubação, 20 μL de sobrenadante foram removidos de cada poço das placas de cultura celular para uma placa de ensaio transparente de 96 poços. A cada poço da placa de ensaio foram adicionados 180 μL de reagente Quanti-Blue e a placa foi incubada em uma incubadora a 37° C, 5% CO2 por 1 h.

[0124] 6. Após 1 h, o teor de fosfatase alcalina em 20 μL de sobrenadante foi determinado usando Microplate Reader em OD650.

[0125] 7. O EC50 de cada composto foi obtido com o software Prism.

[0126] Os resultados foram mostrados na Tabela 1: Tabela 1

Amostra de Teste TLR7 EC50 (nM) TLR8 EC50 (nM) GS-9620 517 7867 Exemplo 1 454,1 29332

[0127] De acordo com a tabela acima, o composto de acordo com a invenção apresentou maior atividade de ligação ao receptor in vitro ao receptor do tipo Toll 7 do que o controle GS-9620 do agonista do receptor do tipo Toll 7 e menor atividade de ligação ao receptor in vitro ao receptor do tipo Toll 8 do que o controle do agonista de receptor do tipo Toll 7 GS-9620. O composto de acordo com a invenção tem uma diferença significativa na seletividade para vários receptores, mostrando um efeito melhor do que o estado da técnica anterior.

Exemplo Experimental 2: Ensaio Farmacocinético em ratos

[0128] 12 ratos SD machos foram divididos em 4 grupos com 3 ratos SD em cada grupo. 2 grupos de animais foram administrados por injeção intravenosa (IV) 1 mg/kg do composto de controle do agonista do receptor do tipo 7 Toll GS-9620 e composto do Exemplo 1 como solução aquosa de hidroxipropil-p-ciclodextrina a 10% (a concentração é de 0,5 mg/mL), respectivamente. Os outros 2 grupos foram administrados oralmente (PO) 5 mg/kg de GS-9620 e 3 mg/kg de composto do Exemplo 1 como metilcelulose a 0,5%/suspensão em água pura de Tween 80 a 0,2% (a concentração é de 1 mg/mL). Cada rato com injeção intravenosa foi coletado para amostras de sangue integral que foram preparadas em plasma 2, 15, 30 min e 1, 2, 4, 8, 24 h continuamente após a administração. Cada rato com administração oral foi coletado para amostras de sangue integral que foram preparadas em plasma 15, 30 min e 1, 2, 4, 8, 24 h continuamente após a administração. As concentrações em plasma de GS-9620 e do composto do Exemplo 1 foram determinadas com LC-MS/MS.

[0129] Os resultados foram mostrados na Tabela 2. Tabela 2

[0130] Sob as condições equivalentes, tanto para a injeção intravenosa quanto para a administração oral (quantidade de administração convertida), comparativamente com o controle do agonista GS-9620 do receptor do tipo Toll 7, o composto de acordo com a invenção mostrou maior exposição em ratos.

Exemplo Experimental 3: Ensaio de farmacodinâmica in vivo em modelo de camundongo infectado com vírus da hepatite B (VHB) portador de AAV (Vírus Adeno Associado)

[0131] Concepção e procedimentos experimentais:

[0132] Via de administração: Administração intragástrica

[0133] Tempo de administração: Desde o dia 26 após a injeção do vírus, uma administração a cada três dias, 6 semanas no total

[0134] Grupos de administração: Grupo 1: veículo, 10% de HP-β- CD; grupo 2: GS-9620, 20 mg/kg; grupos 3: composto do Exemplo 1, 20 mg/kg

[0135] Coleta de sangue: Desde o 3° dia após a 1a administração, duas vezes por semana, 8 semanas no total;

[0136] Coleta de fígado: A amostra de fígado foi coletada no dia 64 após a primeira administração.

[0137] Os detalhes foram mostrados na Tabela 3 e na Tabela 4. Tabela 3

* HBsAg: antígeno de superfície da hepatite B; HBeAg: antígeno E da hepatite B Tabela 4

[0138] Os resultados detalhados do ensaio de farmacodinâmica in vivo em modelo de camundongo infectado com o vírus da hepatite B portador de AAV foram apresentados nas Figuras 1-3. Os dados do número de cópias do HBV-DNA em plasma, o número de cópias do HBsAg em plasma e o nível de produção do anti-HBsAb (anticorpo antígeno de superfície da hepatite B) mostraram que o composto do Exemplo 1 tem melhor eficácia do que o controle GS-9620 do agonista do receptor do tipo Toll 7 sob condições equivalentes, mostrando efeito mais vantajoso.

[0139] A menos que indicado de outro modo, todos os números que expressam quantidades de ingredientes, cultura de células, condições de tratamento, etc., utilizados na especificação, incluindo reivindicações, devem ser entendidos como sendo modificados em todos os casos pelo termo "aproximadamente". Consequentemente, a menos que indicado de outro modo, os parâmetros numéricos são aproximações e podem variar dependendo das propriedades desejadas que se pretende obter com a presente invenção. A menos que indicado de outro modo, o termo "ao menos" precedendo uma série de elementos deve ser entendido como referindo-se a cada elemento da série. Um versado na técnica reconhecerá, ou será capaz de determinar utilizando não mais do que experimentação de rotina, muitos equivalentes às modalidades específicas da invenção aqui descrita. Tais equivalentes destinam-se a ser englobados pelas reivindicações em anexo.

[0140] Muitas modificações e variações da invenção podem ser feitas sem abandonar o seu espírito e escopo, como será evidente para um versado na técnica. As modalidades específicas aqui descritas são oferecidas apenas a título de exemplo e não se destinam a ser limitantes de qualquer forma. Pretende-se que a especificação e os exemplos sejam considerados apenas como exemplificativos, com um verdadeiro escopo e espírito da invenção sendo indicado pelas reivindicações em anexo.

Claims

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a Fórmula (I)

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na qual R1 e R2 são, cada um, independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em H e C1-4 alquila, ou R1 e R2 em conjunto com o átomo de N ao qual estão ligados formam uma heterocicloalquila de 4-8 membros, a heterocicloalquila de 4-8 membros é opcionalmente substituída por um ou mais R3, R3 é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em hidroxila, halogênio, ciano, C1-4 alquila e C1-4 alcóxi.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que a heterocicloalquila de 4-8 membros contém 0, 1, 2 ou 3 heteroátomos adicionais selecionados a partir do grupo que consiste em N, O e S.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 2, ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que a heterocicloalquila de 4-8 membros é heterocicloalquila de 4 membros, 5 membros, 6 membros, 7 membros ou 8 membros.

4. Composto, de acordo com a reivindicação 1, ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R3 é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em hidroxila, F, Cl, Br, CN, metila, etila, propila, metoxila, etoxila e propóxi.

5. Composto, de acordo com a reivindicação 1, ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que o grupo formado por R1, R2 em conjunto com o átomo de N ao qual estão ligados é selecionado a partir do grupo que consiste em:

6. Composto, de acordo com a reivindicação 5, ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que o grupo formado por R1, R2 em conjunto com o átomo de N ao qual estão ligados é

.

7. Composto, caracterizado pelo fato de que é apresenta a seguinte Fórmula:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

8. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende o composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 7, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em uma quantidade terapêutica ou profilaticamente eficaz, e um ou mais veículos e/ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

9. Uso do composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 7, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou de uma composição farmacêutica, como definida na reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que é para fabricação de um medicamento para tratar ou prevenir infecção viral.

10. Uso, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que a infecção viral é a infecção viral do vírus da dengue, vírus da febre-amarela, vírus do Nilo Ocidental, vírus da encefalite japonesa, vírus da encefalite transmitida pelo carrapato, vírus Kunjin, vírus da encefalite de Murray Valley, vírus da encefalite de St Louis, vírus da Febre Hemorrágica de Omsk, Vírus da Diarreia Viral, Vírus da Zika ou Vírus da Hepatite.

11. Uso, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que a infecção viral é a infecção viral por hepatite.

12. Uso, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que a infecção viral é infecção viral por hepatite B ou hepatite C.