BR112017015123B1 - Derivados de indol como inibidores da replicação viral do dengue - Google Patents
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Abstract
A presente invenção se relaciona com compostos de indol mono- ou dissubstituídos, métodos para prevenir ou tratar infecções virais do dengue por uso dos referidos compostos e se relaciona também com os referidos compostos para uso como um medicamento, mais preferencialmente para uso como um medicamento para tratar ou prevenir infecções virais do dengue. A presente invenção se relaciona além do mais com composições farmacêuticas ou preparações de combinação dos compostos, com as composições ou preparações para uso como um medicamento, mais preferencialmente para a prevenção ou tratamento de infecções virais do dengue. A invenção se relaciona também com processos para preparação dos compostos.
Description
[001] A presente invenção se relaciona com compostos de indol mono- ou dissubstituídos, métodos para prevenir ou tratar infecções virais do dengue por uso dos referidos compostos e se relaciona também com os referidos compostos para uso como um medicamento, mais preferencialmente para uso como um medicamento para tratar ou prevenir infecções virais do dengue. A presente invenção se relaciona além do mais com composições farmacêuticas ou preparações de combinação dos compostos, com as composições ou preparações para uso como um medicamento, mais preferencialmente para a prevenção ou tratamento de infecções virais do dengue. A invenção se relaciona também com processos para preparação dos compostos.
[002] Os flavivírus, que são transmitidos por mosquitos ou carrapatos, causam infecções com risco de vida no homem, tais como en- cefalite e febre hemorrágica. São conhecidos quatro serotipos distintos, mas intimamente relacionados, do flavivírus dengue, assim chamados DENV-1, -2, -3, e -4. O dengue é endêmico na maioria das regiões tropicais e subtropicais em todo o mundo, predominantemente em áreas urbanas e semiurbanas. De acordo com a Organização Mundial de Saúde (OMS), 2,5 bilhões de pessoas dos quais 1 bilhão de crianças estão em risco de infecção do DENV (OMS, 2002). 50 a 100 milhões de casos estimados de febre do dengue [DF], meio milhão de casos de doença do dengue grave (i.e., febre hemorrágica do dengue [DHF] e síndrome do choque do dengue [DSS]), e mais do que 20.000 mortes ocorrem globalmente a cada ano. A DHF se tem tornado uma causa principal de hospitalização e morte entre crianças em regiões endêmicas. Ao todo, o dengue representa a causa mais comum de doença arboviral. Devido a grandes surtos recentes em países situados na América Latina, Sudeste Asiático e no Pacífico Ocidental (incluindo Brasil, Porto Rico, Venezuela, Camboja, Indonésia, Vietnã, Tailândia), os números de casos de dengue têm aumentado dramaticamente ao longo dos últimos anos. Não só está o número de casos de dengue a aumentar à medida que a doença está se disseminando para novas áreas, mas também os surtos tendem a ser mais graves.
[003] Para prevenir e/ou controlar a doença associada à infecção viral do dengue, os únicos métodos disponíveis no presente são estratégias de erradicação dos mosquitos para controlar o vetor. Embora esteja a ser feito progresso no desenvolvimento de vacinas contra o dengue, muitas dificuldades são encontradas. Estas incluem a existência de um fenômeno referido como intensificação dependente de anticorpos (ADE). A recuperação a partir de uma infecção por um se- rotipo proporciona imunidade ao longo da vida contra esse serotipo mas confere somente proteção parcial e transiente contra uma infecção subsequente por um dos outros três serotipos. Após infecção com outro serotipo, os anticorpos heterólogos pré-existentes formam complexos com o serotipo do vírus do dengue recém-infectado mas não neutralizam o patógeno. Ao invés se acredita que a entrada o vírus nas células é facilitada, resultando em replicação não controlada do vírus e títulos virais no pico mais elevados. Em infecções tanto primárias como secundárias, títulos virais mais elevados estão associados a doença do dengue mais grave. Uma vez que anticorpos maternos podem passar facilmente para crianças por amamentação, isto poderá ser uma das razões pelas quais as crianças são mais afetadas por doença do dengue grave do que os adultos.
[004] Em localizações com dois ou mais serotipos circulando si-multaneamente, também referidas como regiões hiperendêmicas, o risco de doença do dengue grave é significativamente mais elevado devido a um risco aumentado de se experienciar uma infecção secundária, mais grave. Além do mais, em uma situação de hiperendemici- dade, a probabilidade da emergência de estirpes mais virulentas é aumentada, o que por seu turno aumenta a probabilidade de febre hemorrágica do dengue (DHF) ou síndrome do choque do dengue.
[005] Os mosquitos que transportam o dengue, incluindo Aedes aegypti e Aedes albopictus (mosquito-tigre), estão se movendo para norte no globo. De acordo com os Centers for Disease Control and Prevention (CDC) dos Estados Unidos (EUA), ambos os mosquitos são correntemente omnipresentes no sul do Texas. A disseminação para norte de mosquitos transportando o dengue não está confinada aos EUA, mas foi também observada na Europa.
[006] Apesar de grandes esforços ao longo das últimas 3 décadas, não existe correntemente vacina disponível para proteger os humanos contra a doença do vírus do dengue. O principal problema é desenvolver uma vacina que ofereça proteção contra todos os quatro serotipos (uma vacina tetravalente) na mesma medida. Além do mais, hoje, fármacos antivirais específicos para o tratamento ou prevenção da infecção pelo vírus da febre do dengue não estão disponíveis. Claramente existe ainda uma grande necessidade médica não atendida de terapêuticos para a prevenção ou tratamento de infecções virais em animais, mais em particular em humanos e especialmente para infecções virais causadas por Flavivírus, mais em particular vírus do Dengue. Compostos com boa potência antiviral, nenhuns ou baixos níveis de efeitos secundários, uma atividade de amplo espectro contra múltiplos serotipos do vírus do Dengue, uma baixa toxicidade e/ou boas propriedades farmacocinéticas ou -dinâmicas são altamente necessá-rios.
[007] A presente invenção proporciona agora compostos, derivados de indol mono- ou dissubstituídos, que mostram elevada atividade potente contra todos os quatro (4) serotipos do vírus do Dengue. Igualmente, os compostos de acordo com a invenção possuem um bom perfil farmacocinético e surpreendentemente estes compostos específicos mostram uma estabilidade quiral melhorada.
[008] A presente invenção é baseada na descoberta inesperada de que pelo menos um dos problemas acima mencionados pode ser resolvido pelos correntes compostos da invenção.
[009] A presente invenção proporciona compostos que se mostrou possuírem atividade antiviral potente contra todos os quatro (4) serotipos correntemente conhecidos. A presente invenção demonstra além do mais que estes compostos inibem eficientemente a proliferação do vírus do Dengue (DENV). Portanto, estes compostos constituem uma classe útil de compostos potentes que podem ser usados no tratamento e/ou prevenção de infecções virais em animais, mamíferos e humanos, mais especificamente para o tratamento e/ou prevenção de infecções com vírus do Dengue.
[0010] A presente invenção se relaciona além do mais com o uso de tais compostos como medicamentos e com seu uso para a fabricação de medicamentos para tratamento e/ou prevenção de infecções virais, em particular com vírus pertencendo à família dos vírus do Dengue em animais ou mamíferos, mais em particular em humanos. A invenção se relaciona também com métodos para a preparação de todos tais compostos e com composições farmacêuticas compreendendo os mesmos em uma quantidade eficaz.
[0011] A presente invenção se relaciona também com um método de tratamento ou prevenção de infecções virais do dengue em humanos pela administração de uma quantidade eficaz de um ou mais tais compostos, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, opcionalmente em combinação com um ou mais outros medicamentos, como outro agente antiviral ou vacina contra o dengue ou ambos, a um paciente com sua necessidade.
[0012] Um aspecto da invenção é o fornecimento de compostos da fórmula (I)
uma sua forma esteroisomérica, um sal, solvato ou polimorfo farma- ceuticamente aceitável compreendendo um grupo indol mono- ou dis- substituído; o referido composto é selecionado do grupo em que: R1 é F, R2 é F, CH3 ou OCH3 e R3 é H, R1 é H, R2 é Cl ou F e R3 é CH3, R1 é CH3, R2 é OCH3, F ou H e R3 =H, R1 é H, R2 é Cl ou F e R3 é H, R1 é CH3, R2 é H e R3 é F, R1 é F, R2 é H e R3 é CH3, R1 é H, R2 é OCH3 e R3 é H ou Cl, R1 é H, R2 é F e R3 é F, R1 é CF3 ou OCF3, R2 é H e R3 é H, R1 é Cl, R2 é OCH3 e R3é H.
[0013] Em particular, os compostos da invenção ou sua forma es- teroisomérica, um sal, solvato ou polimorfo farmaceuticamente aceitável são selecionados do grupo:
[0014] Outro aspecto da invenção é o uso de um composto repre- sentado pela seguinte fórmula estrutural
(I) uma sua forma esteroisomérica, um sal, solvato ou polimorfo farma- ceuticamente aceitável compreendendo um grupo indol mono- ou dis- substituído; o referido composto é selecionado do grupo em que: R1 é F, R2 é F, CH3 ou OCH3 e R3 é H, R1 é H, R2 é Cl ou F e R3 é CH3, R1 é CH3, R2 é OCH3, F ou H e R3 =H, R1 é H, R2 é Cl ou F e R3 é H, R1 é CH3, R2 é H e R3 é F, R1 é F, R2 é H e R3 é CH3, R1 é H, R2 é OCH3 e R3 é H ou Cl, R1 é H, R2 é F e R3 é F, R1 é CF3 ou OCF3, R2 é H e R3 é H, R1 é Cl, R2 é OCH3 e R3é H para inibição da replicação de vírus do dengue em uma amostra bioló-gica ou paciente.
[0015] Parte da corrente invenção é também uma composição farmacêutica compreendendo um composto da fórmula (I) ou uma sua forma estereoisomérica, um sal, solvato ou polimorfo farmaceutica- mente aceitável em conjunto com um ou mais excipientes, diluentes ou transportadores farmaceuticamente aceitáveis.
[0016] Os sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da fórmula (I) incluem os seus sais de adição ácida e básica. Sais de adição ácida adequados são formados a partir de ácidos que formam sais não tóxicos. Sais básicos adequados são formados a partir de bases que formam sais não tóxicos.
[0017] Os compostos da invenção podem também existir em formas não solvatadas e solvatadas. O termo "solvato" é usado aqui para descrever um complexo molecular compreendendo o composto da in-venção e uma ou mais moléculas de solvente farmaceuticamente acei-táveis, por exemplo, etanol.
[0018] O termo "polimorfo" se refere à capacidade do composto da invenção de existir em mais do que uma forma ou estrutura de cristal.
[0019] Os compostos da presente invenção podem ser administrados como produtos cristalinos ou amorfos. Podem ser obtidos por exemplo como tampões sólidos, pós, ou filmes por métodos tais como precipitação, cristalização, liofilização, secagem por pulverização, ou secagem por evaporação. Podem ser administrados sozinhos ou em combinação com um ou mais outros compostos da invenção ou em combinação com um ou mais outros fármacos. Geralmente serão ad-ministrados como uma formulação em associação com um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis. O termo "excipiente" é usado aqui para descrever qualquer ingrediente sem ser o(s) composto(s) da invenção. A escolha do excipiente depende largamente de fatores tais como o modo de administração particular, o efeito do excipiente na solubilidade e estabilidade, e a natureza da forma de dosagem.
[0020] Os compostos da presente invenção ou qualquer seu subgrupo podem ser formulados em várias formas farmacêuticas para propósitos de administração. Como composições apropriadas podem ser citadas todas as composições usualmente empregues para administração sistêmica de fármacos. Para preparar as composições farmacêuticas desta invenção, uma quantidade eficaz do composto particular, opcionalmente em forma de sal de adição, como o ingrediente ativo é combinada em mistura íntima com um transportador farmaceu- ticamente aceitável, cujo transportador pode tomar uma ampla varie-dade de formas dependendo da forma de preparação desejada para administração. Estas composições farmacêuticas estão desejavelmente em forma de dosagem unitária adequada, por exemplo, para admi-nistração oral ou retal. Por exemplo, na preparação das composições na forma de dosagem oral, pode ser empregue qualquer um dos meios farmacêuticos usuais tais como, por exemplo, água, glicóis, óleos, ál- coois e similares no caso de preparações líquidas orais tais como sus-pensões, xaropes, elixires, emulsões, e soluções; ou transportadores sólidos tais como amidos, açúcares, caulim, diluentes, lubrificantes, ligantes, agentes de desintegração e similares no caso de pós, pílulas, cápsulas, e comprimidos. Devido à sua facilidade na administração, os comprimidos e as cápsulas representam as formas unitárias de dosa-gem oral mais vantajosas, em cujo caso são obviamente empregues transportadores farmacêuticos sólidos. São também incluídas prepara-ções em forma sólida que podem ser convertidas, pouco tempo antes do uso, em formas líquidas.
[0021] É especialmente vantajoso formular as composições farma-cêuticas acima mencionadas em forma de dosagem unitária para faci-lidade de administração e uniformidade de dosagem. Forma de dosa-gem unitária como usada aqui se refere a unidades fisicamente discre-tas adequadas como dosagens unitárias, contendo cada unidade uma quantidade predeterminada de ingrediente ativo calculada para produzir o efeito terapêutico desejado em associação com o transportador farmacêutico requerido. Exemplos de tais formas de dosagem unitária são comprimidos (incluindo comprimidos sulcados ou revestidos), cáp-sulas, pílulas, pacotes de pó, hóstias, supositórios, soluções ou sus-pensões injetáveis e similares, e seus múltiplos segregados.
[0022] Os peritos no tratamento de doenças infecciosas serão capazes de determinar a quantidade eficaz a partir dos resultados de teste apresentados doravante. Em geral é contemplado que uma quantidade diária eficaz será de 0,01 mg/kg a 50 mg/kg de peso corporal, mais preferencialmente de 0,1 mg/kg a 10 mg/kg de peso corporal. Pode ser apropriado administrar a dose requerida como duas, três, quatro ou mais subdoses em intervalos apropriados ao longo do dia. As referidas subdoses podem ser formuladas como formas de dosagem unitária, por exemplo, contendo 1 a 1000 mg, e em particular 5 a 200 mg de ingrediente ativo por forma de dosagem unitária.
[0023] A dosagem e frequência de administração exatas dependem do composto particular da fórmula (I) usado, da condição patológica particular sendo tratada, da gravidade da condição patológica sendo tratada, da idade, peso e condição física geral do paciente particular bem como outra medicação que o indivíduo possa estar tomando, como é bem conhecido dos peritos na técnica. Além do mais é evidente que a quantidade eficaz pode ser diminuída ou aumentada dependendo da resposta do sujeito tratado e/ou dependendo da avaliação do médico prescrevendo os compostos da presente invenção. As gamas de quantidades eficazes mencionadas acima são portanto apenas orientações e não se destinam a limitar o escopo ou uso da invenção em qualquer medida.
[0024] A presente divulgação se destina também a incluir quaisquer isótopos de átomos presentes nos compostos da invenção. Por exemplo, isótopos de hidrogênio incluem trítio e deutério e isótopos de carbono incluem C-13 e C-14.
[0025] Os presentes compostos usados na corrente invenção podem também existir na sua forma estereoquimicamente isomérica, definindo todos os compostos possíveis constituídos pelos mesmos átomos ligados pela mesma sequência de ligações mas tendo estruturas tridimensionais diferentes, que não são interpermutáveis. A não ser que de outro modo mencionado ou indicado, a designação química de compostos engloba a mistura de todas as possíveis formas estereo- quimicamente isoméricas, que os referidos compostos possam possuir.
[0026] A referida mistura pode conter todos os diastereômeros e/ou enantiômeros da estrutura molecular básica do referido composto. Todas as formas estereoquimicamente isoméricas dos compostos usados na presente invenção tanto na forma pura como em mistura uns com os outros se destinam a estar abrangidas dentro do escopo da presente invenção incluindo quaisquer misturas racêmicas ou ra-cematos.
[0027] As formas estereoisoméricas puras dos compostos e inter-mediários como mencionadas aqui são definidas como isômeros subs-tancialmente isentos de outras formas enantioméricas ou diastereomé- ricas da mesma estrutura molecular básica dos referidos compostos ou intermediários. Em particular, o termo "estereoisomericamente puro" diz respeito a compostos ou intermediários que têm um excesso estereoisomérico de pelo menos 80% (isto é, mínimo de 90% de um isômero e máximo de 10% dos outros isômeros possíveis) até um ex-cesso estereoisomérico de 100% (isto é, 100% de um isômero e ne-nhum dos outros), mais particularmente, os compostos ou intermediá-rios que têm um excesso estereoisomérico de 90% até 100%, ainda mais particularmente tendo um excesso estereoisomérico de 94% até 100% e muito particularmente tendo um excesso estereoisomérico de 97% até 100%. Os termos "enantiomericamente puro" e "diastereome- ricamente puro" devem ser entendidos de um modo similar, mas tendo em conta então o excesso enantiomérico, respectivamente o excesso diastereomérico, da mistura em questão.
[0028] As formas estereoisoméricas puras dos compostos e inter-mediários usados em esta invenção podem ser obtidas pela aplicação de procedimentos conhecidos na técnica. Por exemplo, os enantiôme- ros podem ser separados uns dos outros por cristalização seletiva dos seus sais diastereoméricos com ácidos ou bases opticamente ativos. Seus exemplos são ácido tartárico, ácido dibenzoiltartárico, ácido dito- luoiltartárico e ácido canforsulfônico. Alternativamente, os enantiôme- ros podem ser separados por técnicas cromatográficas usando fases estacionárias quirais. As referidas formas estereoquimicamente isomé- ricas puras podem ser também derivadas das correspondentes formas estereoquimicamente isoméricas puras dos materiais de início apropri- ados, contanto que a reação ocorra estereoespecificamente. Preferen-cialmente, se for desejado um estereoisômero específico, esse com-posto será sintetizado por métodos de preparação estereoespecíficos. Estes métodos empregarão vantajosamente materiais de partida enan- tiomericamente puros.
[0029] A síntese de compostos da fórmula geral I pode ser realizada como delineado no Esquema 1. O ácido 2-(4-fluoro-2- metoxifenil)acético (II) pode ser convertido no correspondente cloreto de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)acetila (III) com um reagente de cloração como por exemplo cloreto de tionila. A reação de Friedel-Crafts do cloreto de ácido III com um indol substituído da fórmula geral IV pode ser realizada usando um reagente de ácido de Lewis como por exemplo Et2AlCl ou TiCl4 em um solvente adequado como por exemplo CH2Cl2 ou 1,2-dicloroetano, e sob condições de reação adequadas que envolvem tipicamente (mas não exclusivamente) resfriamento, para proporcionar o indol 3-acilado da fórmula geral V. A introdução de uma fração de anilina na posição alfa relativamente à fração de carbonila dos compostos da fórmula geral V pode ser alcançada por uma sequência de reações que envolve por exemplo bromação de V com um reagente como por exemplo tribrometo de feniltrimetilamônio em um solvente adequado como por exemplo THF, para proporcionar os compostos da fórmula geral VI, e reação subsequente dos compostos da fórmula geral VI 3-metoxi-5-(metilsulfonil)anilina (VII) em um solvente adequado como por exemplo CH3CN, e usando tipicamente uma base como por exemplo TEA ou DIPEA, para proporcionar os compostos da fórmula geral I como misturas racêmicas. A separação quiral dos compostos da fórmula geral I pode ser realizada, por exemplo, por cromatografia quiral para proporcionar os Enantiômeros A e B da fórmula geral I.
Esquema 1
[0030] Em alguns casos, a síntese do intermediário da fórmula geral V via a abordagem de síntese de Friedel-Crafts, beneficia da presença de um grupo protetor (PG) no N do indol durante a etapa reaci- onal de Friedel-Crafts, como delineado no Esquema 2. Para este propósito, o indol substituído da fórmula geral IV pode ser primeiramente convertido em um intermediário protegido em N da fórmula geral VIII, tal como por exemplo um intermediário N-Tosilado da fórmula geral VIII (PG = Ts), usando um reagente tal como por exemplo cloreto de tosila, na presença de uma base tal como por exemplo hidreto de sódio. A reação de Friedel-Crafts do indol substituído da fórmula geral IV com cloreto de ácido III pode ser realizada usando um reagente de ácido de Lewis tal como por exemplo Et2AlCl ou TiCl4 em um solvente adequado tal como por exemplo CH2Cl2 ou 1,2-dicloroetano, e sob condições reacionais adequadas que tipicamente (mas não exclusivamente) envolvem resfriamento, para proporcionar o indol N-protegido 3-acilado da fórmula geral IX. A remoção do grupo protetor PG de N do indol do intermediário da fórmula geral IX pode ser alcançada com um reagente tal como por exemplo LiOH (para PG = Ts) em uma mis-tura de solventes tal como por exemplo THF/água a uma temperatura reacional adequada, para proporcionar o indol 3-acilado da fórmula geral V.
[0031] A medição por Cromatografia Líquida de Elevado Desempenho (HPLC) foi realizada usando uma bomba de LC, um detector de arranjo de díodos (DAD) ou de UV e uma coluna como especificada nos respectivos métodos. Se necessário foram incluídos detectores adicionais (ver tabela de métodos em baixo).
[0032] O fluxo a partir da coluna foi conduzido para o Espectrôme- tro de Massa (MS) que estava configurado com uma fonte de íons à pressão atmosférica. Está dentro do conhecimento do perito definir os parâmetros de ajuste (p.ex., gama de varredura, tempo de permanência...) de modo a se obterem íons que permitam a identificação do peso molecular (PM) monoisotópico nominal do composto. A aquisição de dados foi realizada com software apropriado.
[0033] Os compostos são descritos pelos seus tempos de retenção (Rt) experimentais e íons. Se não especificado diferentemente na tabela de dados, o íon molecular relatado corresponde ao [M+H]+ (molécula protonada) e/ou [M-H]- (molécula desprotonada). No caso de o composto não ter sido diretamente ionizável, é especificado o tipo de aduto (i.e., [M+NH4]+, [M+HCOO]-, etc...). Para moléculas com múlti- plos padrões isotópicos (Br, Cl), o valor relatado é o obtido para a massa isotópica mais baixa. Todos os resultados foram obtidos com incertezas experimentais que estão comummente associadas ao método usado.
[0034] Doravante, "SQD" significa Detector de Quadripolo Único, "MSD" Detector Seletivo de Massa, "TA" temperatura ambiente, "BEH" híbrido em ponte de etilsiloxano/sílica, "DAD" Detector de Arranjo de Díodos, "HSS" sílica de Elevada Resistência.
[0035] Códigos dos Métodos de LCMS (Fluxo expresso em mL/min; temperatura da coluna (T) em °C; Tempo de o peração em mi- nutos).
[0036] A medição por SFC foi realizada usando um sistema de cromatografia Analítica com fluido Supercrítico (SFC) composto por uma bomba binária para administração de dióxido de carbono (CO2) e modificador, um autoamostrador, um forno de coluna, um detector de arranjo de díodos equipado com uma célula de fluxo a elevada pressão resistindo até 400 bars. Se configurado com um Espectrômetro de Massa (MS), o fluxo a partir da coluna foi levado para o (MS). Está dentro do conhecimento do perito definir os parâmetros de ajuste (p.ex., gama de varredura, tempo de permanência...) de modo a se obterem íons que permitam a identificação do peso molecular (PM) monoisotópico nominal do composto. A aquisição de dados foi realizada com software apropriado.
[0037] Métodos Analíticos de SFC-MS (Fluxo expresso em mL/min; temperatura da coluna (T) em °C; Tempo de operação em minutos, Contrapressão (BPR) em bars).
Pontos de Fusão
[0038] Os valores são valores de pico ou intervalos de fusão, e são obtidos com incertezas experimentais que estão habitualmente associadas a este método analítico.
[0039] Para alguns compostos, os pontos de fusão foram determinados com um DSC823e (Mettler-Toledo). Os pontos de fusão foram medidos com um gradiente de temperatura de 10 °C/mi nuto. A temperatura máxima foi 300 °C.
[0040] As rotações ópticas foram medidas em um polarímetro 341 da PerkinElmer com uma lâmpada de sódio e relatadas como se segue: [a]° (À, c g/100 mL, solvente, T °C).
[0041] [a]xT = (100a) / (l x c): onde l é o comprimento do percurso em dm e c é a concentração em g/100 mL para uma amostra a uma temperatura T (°C) e um comprimento de onda À (em nm). Se o comprimento de onda da luz usado for 589 nm (linha D do sódio), então o símbolo D poderá ser usado ao invés. O sinal da rotação (+ ou -) deve ser sempre dado. Quando se usa esta equação, a concentração e o solvente são sempre proporcionados entre parênteses após a rotação. A rotação é reportada usando graus e não são dadas quaisquer unidades de concentração (é presumida como sendo g/100 mL). Exemplo 1: síntese de 1-(6-fluoro-1 H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2- metoxifenil)-2-((3-metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 1) e separação quiral nos Enantiômeros 1A e 1B.
[0042] Ácido 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)acético [CAS 886498-61-9] (28,9 g, 157 mmol) foi adicionado em pequenas porções a cloreto de tionila (150 mL) e a solução resultante foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. O solvente foi concentrado sob pressão reduzida e coevaporado com tolueno para dar cloreto de 2-(4-fluoro-2- metoxifenil)acetila 1a (31,8 g) como um resíduo oleoso que foi usado sem purificação adicional no passo seguinte.
[0043] Uma solução de 6-fluoro-1H-indol [CAS 399-51-9] (14,2 g, 105 mmol) em CH2Cl2 (400 mL) foi resfriada até 0 °C sob atmosfera de N2. Uma solução de cloreto de dietilalumínio a 1 M em hexano (160 mL, 160 mmol) foi adicionada ao longo de um período de 10 min à solução agitada e a mistura resultante foi mantida a 0 °C d urante 40 min. Depois, uma solução de cloreto de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)acetila 1a (31,8 g, 157 mmol) em CH2Cl2 (300 mL) foi adicionada gota a gota ao longo de um período de 2,5 h enquanto se mantinha a temperatura interna da mistura reacional abaixo de 5 °C. A temp eratura da mistura reacional agitada foi mantida a 0 °C durante 3,5 h. O banho de gelo foi removido e após agitação à temperatura ambiente durante 2,5 h, a mistura reacional foi resfriada novamente até 0 °C e a reação foi extinta pela adição lenta de uma solução de tartarato de potássio e sódio tetraidratado [CAS 6100-16-9] (59,6 g, 210 mmol) em água (70 mL) enquanto se mantinha a temperatura interna da mistura abaixo de 10 °C. Após agitação durante 30 min adicionais a 0 °C, o banho de gelo foi removido e a mistura resultante foi diluída com THF (1 L). Na2SO4 (150 g) foi adicionado e, após agitação durante a noite, a mistura foi filtrada sobre Dicalite®. O bolo de filtração foi lavado duas vezes com THF (2 x 1 L). Os filtrados combinados foram evaporados sob pressão reduzida até um volume residual de aproximadamente 50 mL. Um precipitado branco foi separado por filtração e seco sob vácuo a 50 °C para proporcionar 1-(6-fluoro-1 H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2- metoxifenil)etanona 1b (22,3 g) como um pó branco.
[0044] Uma solução agitada de 1-(6-fluoro-1H-indol-3-il)-2-(4- fluoro-2-metoxifenil)etanona 1b (11,0 g, 36,3 mmol) em THF (300 mL) foi resfriada até 0 °C sob atmosfera de N 2. Uma solução de tribrometo de feniltrimetilamônio [CAS 4207-56-1] (14,3 g, 38,2 mmol) em THF (100 mL) foi adicionada gota a gota ao longo de um período de 45 min. A suspensão resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 4 h e evaporada sob pressão reduzida até um resíduo branco. Este resíduo, contendo a 2-bromo-1-(6-fluoro-1H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2- metoxifenil)etanona 1c bruta, foi dissolvido em acetonitrila (300 mL). Após adição de 3-metoxi-5-(metilsulfonil)anilina [CAS 62606-02-4] (14,8 g, 73 mmol) e di-isopropiletilamina (13 mL, 75 mmol), a mistura foi agitada a 50 °C durante dois dias - até à conve rsão completa no Composto 1. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida, o resíduo foi misturado com água (500 mL) e o produto foi extraído com 2-metil-THF (2x 500 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com HCl 0,5 N (800 mL), uma solução aquosa saturada de NaHCO3 (200 mL) e salmoura (200 mL), secas em MgSO4, filtradas e evaporadas sob pressão reduzida. O resíduo foi cristalizado a partir de EtOAc (50 mL). Os sólidos foram removidos por filtração e secos sob vácuo a 50 °C, dando origem a 1-(6-fluoro-1 H-indol-3-il)-2-(4- fluoro-2-metoxifenil)-2-((3-metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 1, 9,9 g) na forma de uma mistura racêmica.
[0045] Foi realizada separação quiral dos enantiômeros do Composto 1 (9,67 g) através de Cromatografia Quiral de Fase Normal (Fase estacionária: AS 20 μm (1 kg), Fase móvel: MeOH a 100%). As frações de produto contendo o enantiômero que eluiu em primeiro lugar foram combinadas e evaporadas sob pressão reduzida (banho de água a 38 °C) para um volume residual de 30 mL. A s uspensão resultante foi filtrada e os sólidos foram lavados com pequenas frações de MeOH e secos sob vácuo a 40 °C, dando origem ao Ena ntiômero 1A (2,9 g) na forma de um sólido branco. As frações de produto combinadas do produto que eluiu em segundo lugar foram evaporadas sob pressão reduzida (banho de água a 37 °C) para um vo lume residual de 90 mL. Os sólidos foram removidos por filtração, lavados com pequenas frações de MeOH e secos sob vácuo a 40 °C, dand o origem ao Enantiômero 1B (3,15 g). Composto 1: 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,09 (s, 3 H) 3,73 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,23 (d, J=7,75 Hz, 1 H) 6,56 - 6,62 (m, 2 H) 6,74 (td, J=8,48, 2,48 Hz, 1 H) 6,91 (t, J=1,46 Hz, 1 H) 6,96 (dd, J=11,35, 2,50 Hz, 1 H) 7,02 - 7,11 (m, 2 H) 7,28 (dd, J=9,62, 2,38 Hz, 1 H) 7,37 (dd, J=8,61, 6,83 Hz, 1 H) 8,15 (dd, J=8,76, 5,59 Hz, 1 H) 8,44 (s, 1 H) 12,09 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-A): Tr 1,08 min, MH+ 501 Enantiômero 1A: 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,23 (d, J=7,78 Hz, 1 H) 6,58 - 6,59 (m, 1 H) 6,59 - 6,60 (m, 1 H) 6,73 (td, J=8,44, 2,49 Hz, 1 H) 6,92 (t, J=1,61 Hz, 1 H) 6,96 (dd, J=11,30, 2,49 Hz, 1 H) 7,04 (d, J=7,80 Hz, 1 H) 7,06 (ddd, J=9,68, 8,80, 2,35 Hz, 1 H) 7,27 (dd, J=9,61, 2,27 Hz, 1 H) 7,37 (dd, J=8,66, 6,90 Hz, 1 H) 8,15 (dd, J=8,80, 5,58 Hz, 1 H) 8,43 (s, 1 H) 12,09 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-A): Tr 1,08 min, MH+ 501 [α]D20: +131,7° (c 0,48, DMF) SFC quiral (método SFC-K): Rt 2,22 min, MH+ 501, pureza quiral 100%. Ponto de fusão: 241°C Enantiômero 1B: 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,23 (d, J=7,77 Hz, 1 H) 6,56 - 6,61 (m, 2 H) 6,73 (td, J=8,48, 2,46 Hz, 1 H) 6,91 (t, J=1,83 Hz, 1 H) 6,96 (dd, J=11,36, 2,49 Hz, 1 H) 7,01 - 7,12 (m, 2 H) 7,27 (dd, J=9,62, 2,38 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J=8,62, 6,85 Hz, 1 H) 8,15 (dd, J=8,77, 5,59 Hz, 1 H) 8,44 (s, 1 H) 12,07 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-A): Tr 1,07 min, MH+ 501 [α]D20: -127,7° (c 0,535, DMF) SFC quiral (método SFC-K): Rt 3,68 min, MH+ 501, pureza quiral 100%. Ponto de fusão: 249°C Exemplo 2: síntese de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(6-fluoro-7-metil-1 H- indol-3-il)-2-((3-metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 2) e separação quiral nos Enantiômeros 2A e 2B.
[0046] Uma solução agitada de 6-fluoro-7-metil-1H-indol [CAS 57817-10-4] (5,41 g, 36,2 mmol) em CH2Cl2 (100 mL) foi resfriada em gelo sob atmosfera de N2. Uma solução de cloreto de dietilalumínio a 1 M em hexano (54,4 mL, 54,4 mmol) foi adicionada gota a gota. Após 15 min a 0 °C, uma solução de cloreto de 2-(4-fluoro-2- metoxifenil)acetila 1a (11,0 g, 54,4 mmol, quanto à síntese: ver Exemplo 1) em CH2Cl2 (30 mL) foi adicionada gota a gota enquanto se mantinha a temperatura interna abaixo de 5 °C. O banho de gelo foi removido e a suspensão resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 4 h. A mistura reacional foi vertida lentamente em uma solução aquosa saturada resfriada (0 °C) de NaHCO 3. A mistura foi filtrada em Dicalite® e o bolo de filtração foi lavado com THF. Os filtrados combi-nados foram extraídos com EtOAc, secos sobre MgSO4 e evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi triturado com CH2Cl2 e os sólidos foram separados por filtração para dar 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(6- fluoro-7-metil-1H-indol-3-il)etanona 2a (7,47 g) como um pó branco.
[0047] Uma solução agitada de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(6- fluoro-7-metil-1H-indol-3-il)etanona 2a (7,43 g, 23,56 mmol) em THF (100 mL) foi resfriada a 0 °C sob atmosfera de N 2. Uma solução de tribrometo de feniltrimetilamônio [CAS 4207-56-1] (8,96 g, 23,8 mmol) em THF (100 mL) foi adicionada gota a gota. Após a adição, a mistura reacional foi agitada durante 2 h à temperatura ambiente. A suspensão foi filtrada para se removerem os sólidos e o filtrado foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi triturado com CH2Cl2, os sólidos foram separados por filtração e secos sob vácuo para proporcionar 2-bromo- 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(6-fluoro-7-metil-1H-indol-3-il)etanona 2b (8,95 g).
[0048] 2-Bromo-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(6-fluoro-7-metil-1H- indol-3-il)etanona 2b (3,07 g, 7,8 mmol), 3-metoxi-5- (metilsulfonil)anilina [CAS 62606-02-4] (1,63 g, 8,11 mmol), e di- isopropiletilamina (1,35 mL, 7,83 mmol) foram misturados em CH3CN (100 mL) e a mistura foi aquecida sob refluxo durante 3 h. Após resfriamento para a temperatura ambiente, o solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em sílica (Fase estacionária: HP-Spher 25 μM (340 g), Fase móvel: gradiente de heptano/EtOAc 100/0 até 0/100). As frações de produto foram evaporadas sob pressão reduzida. Uma pequena alíquota do resíduo oleoso foi solidificada por trituração com CH2Cl2. Os sólidos foram isolados por filtração, lavados com CH2Cl2 e secos sob vácuo, dando origem a 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(6-fluoro-7-metil-1H-indol- 3-il)-2-((3-metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 2, 250 mg) na forma de uma mistura racêmica.
[0049] Foi realizada separação quiral dos enantiômeros do Composto 2 (787 mg) através de SFC Preparativa (Fase estacionária: Chi- ralpak® Diacel OJ 30 x 250 mm, Fase móvel: CO2, MeOH com iPrNH2 0,2%) e as frações de produto foram combinadas e evaporadas sob pressão reduzida. O enantiômero que eluiu em primeiro lugar foi adicionalmente purificado por cromatografia em coluna (Fase estacionária: HP-Spher 25 μM (10 g), Fase móvel: gradiente de heptano/EtOAc 100/0 até 0/100). Evaporação das frações de produto e liofilização do resíduo oleoso a partir de uma mistura de CH3CN e água proporcionaram o Enantiômero 2A (91 mg) na forma de um pó amorfo. O enantiô- mero que eluiu em segundo lugar foi adicionalmente purificado por cromatografia em coluna (Fase estacionária: HP-Spher 25 μM (10 g), Fase móvel: gradiente de heptano/EtOAc 100/0 até 0/100). Evaporação das frações de produto e liofilização do resíduo oleoso a partir de uma mistura de CH3CN e água proporcionaram o enantiômero 2B (141 mg) na forma de um pó amorfo. Composto 2: 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 2,38 (s, 3 H) 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 4,00 (s, 3 H) 6,25 (d, J=7,69 Hz, 1 H) 6,59 (d, J=10,28 Hz, 2 H) 6,73 (t, J=8,32 Hz, 1 H) 6,88 - 7,10 (m, 4 H) 7,36 (t, J=7,68 Hz, 1 H) 7,97 (dd, J=8,00, 6,07 Hz, 1 H) 8,45 (s, 1 H) 12,23 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-A): Tr 1,11 min, MH+ 515 Enantiômero 2A: 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 2,38 (d, J=1,57 Hz, 3 H) 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 4,00 (s, 3 H) 6,25 (d, J=7,74 Hz, 1 H) 6,56 - 6,62 (m, 2 H) 6,73 (td, J=8,49, 2,49 Hz, 1 H) 6,90 - 7,07 (m, 4 H) 7,36 (dd, J=8,62, 6,83 Hz, 1 H) 7,97 (dd, J=8,71, 5,21 Hz, 1 H) 8,45 (s, 1 H) 12,22 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-B): Tr 2,06 min, MH+ 515 [α]D20: +110,6° (c 0,5, DMF) SFC quiral (método SFC-L): Rt 2,86 min, MH+ 515, pureza quiral 100%. Enantiômero 2B: 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 2,38 (d, J=1,59 Hz, 3 H) 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 4,00 (s, 3 H) 6,25 (d, J=7,73 Hz, 1 H) 6,56 - 6,59 (m, 1 H) 6,59 - 6,62 (m, 1 H) 6,73 (td, J=8,47, 2,46 Hz, 1 H) 6,87 - 7,10 (m, 4 H) 7,36 (dd, J=8,60, 6,83 Hz, 1 H) 7,97 (dd, J=8,68, 5,23 Hz, 1 H) 8,45 (s, 1 H) 12,22 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-B): Tr 2,07 min, MH+ 515 [α]D20: -104,1° (c 0,538, DMF) SFC quiral (método SFC-L): Rt 3,38 min, MH+ 515, pureza quiral 100%. Exemplo 3: Síntese de 1-(6-cloro-7-metil-1 H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2- metoxifenil)-2-((3-metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 3) e separação quiral nos Enantiômeros 3A e 3B.
[0050] Uma solução agitada de 6-cloro-7-metil-1H-indol [CAS 57817-09-1] (3,2 g, 19,3 mmol) em CH2Cl2 (150 mL), sob fluxo de N2, foi resfriada em um banho de resfriamento de NaCl gelado. Cloreto de dietilalumínio a 1 M em hexano (29 mL, 29 mmol) foi adicionado ao longo de um período de 2 min e a solução resfriada foi agitada a - 10 °C durante 30 min. Uma solução de cloreto de 2-(4-fluoro-2- metoxifenil)acetila 1a (5,48 g, 27,1 mmol, síntese: ver Exemplo 1) em CH2Cl2 (30 mL) foi adicionada gota a gota ao longo de 30 min enquanto se mantinha a temperatura interna abaixo de -10 °C e a mistura resultante foi agitada durante 2 h adicionais a -10 °C. A reação foi extinta pela adição lenta de uma solução de tartarato de potássio e sódio te- traidratado [CAS 6100-16-9] (10,9 g, 38,6 mmol) em água (10 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 15 min. Um precipitado branco estava presente na mistura reacional. O precipitado foi isolado por filtração, lavado com água e seco sob vácuo para proporcionar 1-(6-cloro-7-metil-1H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)etanona 3a (4200 mg) como um sólido esbranquiçado.
[0051] Uma solução de 1-(6-cloro-7-metil-1H-indol-3-il)-2-(4-fluoro- 2-metoxifenil)etanona 3a (2000 mg, 6,03 mmol) em THF (120 mL) foi agitada à temperatura ambiente sob atmosfera de N2. Uma solução de tribrometo de feniltrimetilamônio [CAS 4207-56-1] (2,38 g, 6,33 mmol) em THF (35 mL) foi adicionada gota a gota e a mistura foi agitada durante 90 min adicionais à temperatura ambiente. O precipitado foi separado por filtração e o filtrado foi concentrado sob vácuo para proporcionar 2-bromo-1-(6-cloro-7-metil-1H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2- metoxifenil)etanona 3b (2200 mg) como um pó esbranquiçado.
[0052] 2-Bromo-1-(6-cloro-7-metil-1H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2- metoxifenil)etanona 3b (1,29 g, 3,15 mmol) foi suspensa em CH3CN (60 mL). Adicionaram-se 3-metoxi-5-(metilsulfonil)anilina [CAS 6260602-4] (0,7 g, 3,46 mmol), e di-isopropiletilamina (1,2 mL, 6,9 mmol) e a mistura agitada foi aquecida a 65 °C durante 4 h. A mistura foi concen-trada sob vácuo e o resíduo foi submetido a partição entre EtOAc e água. A camada orgânica foi separada, seca com Na2SO4, filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por croma- tografia em coluna (Fase estacionária: sílica Grace Reveleris® (330 g), Fase móvel: gradiente de EtOAc/heptano 50/50 até 100/0) e subsequentemente por HPLC Preparativa (Fase estacionária: Uptisphere C18 ODB - 10 μm, 200 g, 5 cm, Fase móvel: solução de NH4HCO3 0,25% em água, CH3CN), dando origem a 1-(6-cloro-7-metil-1H-indol- 3-il)-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-2-((3-metoxi-5- (metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 3, 725 mg) na forma de uma mistura racêmica.
[0053] Foi realizada separação quiral dos enantiômeros do Composto 3 (635 mg) usando separação Quiral de Fase Normal (Fase estacionária: AS 5 μm, Fase móvel: MeOH a 100%, eluição isocrática. Comprimento de onda de detecção 308 nm, fluxo 1 mL/min). As frações de produto foram combinadas e evaporadas, dando origem ao Enantiômero 3A (223 mg) como primeiro produto a eluir e Enantiômero 3B (247 mg) como segundo produto a eluir. Ambos os enantiômeros 3A e 3B ocorreram como pós amorfos. Composto 3: 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) Δ ppm 2,49 (s, 3 H) 2,94 (s, 3 H) 3,77 (s, 3 H) 4,12 (s, 3 H) 6,03 (d, J=6,31 Hz, 1 H) 6,18 (d, J=6,27 Hz, 1 H) 6,42 (t, J=2,20 Hz, 1 H) 6,57 (td, J=8,36, 2,42 Hz, 1 H) 6,64 (dd, J=10,56, 2,42 Hz, 1 H) 6,70 (dd, J=2,21, 1,51 Hz, 1 H) 6,84 (t, J=1,76 Hz, 1 H) 7,24 - 7,30 (m, 1 H) 7,28 (d, J=8,58 Hz, 1 H) 8,15 (d, J=8,61 Hz, 1 H) 8,17 (d, J=3,07 Hz, 1 H) 8,70 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-B): Tr 2,16 min, MH+ 531 Enantiômero 3A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 2,50 (s, 3 H) 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 4,00 (s, 3 H) 6,26 (d, J=7,68 Hz, 1 H) 6,57 - 6,59 (m, 1 H) 6,60 - 6,63 (m, 1 H) 6,73 (td, J=8,48, 2,50 Hz, 1 H) 6,90 - 6,93 (m, 1 H) 6,96 (dd, J=11,37, 2,55 Hz, 1 H) 7,02 (d, J=7,71 Hz, 1 H) 7,22 (d, J=8,53 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J=8,62, 6,82 Hz, 1 H) 7,99 (d, J=8,50 Hz, 1 H) 8,45 (s, 1 H) 12,25 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-A): Tr 1,18 min, MH+ 531 [α]D20: +111,1° (c 0,515, DMF) SFC quiral (método SFC-M): Rt 2,07 min, MH+ 531, pureza quiral 100%. Enantiômero 3B: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 2,50 (s, 3 H) 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 4,00 (s, 3 H) 6,26 (d, J=7,70 Hz, 1 H) 6,56 - 6,59 (m, 1 H) 6,60 - 6,62 (m, 1 H) 6,73 (td, J=8,48, 2,51 Hz, 1 H) 6,91 - 6,93 (m, 1 H) 6,96 (dd, J=11,33, 2,53 Hz, 1 H) 7,02 (d, J=7,72 Hz, 1 H) 7,22 (d, J=8,54 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J=8,62, 6,82 Hz, 1 H) 7,99 (d, J=8,50 Hz, 1 H) 8,45 (s, 1 H) 12,25 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-A): Tr 1,18 min, MH+ 531 [α]D20: -100,7° (c 0,55, DMF) SFC quiral (método SFC-M): Rt 2,45 min, MH+ 531, pureza quiral 100%. Exemplo 4: síntese de 1-(6-cloro-1 H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2- metoxifenil)-2-((3-metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 4) e separação quiral nos Enantiômeros 4A e 4B.
[0054] Uma solução agitada de 6-cloro-1H-indol [CAS 17422-33-2] (2,23 g, 14,7 mmol) em CH2Cl2 (125 mL), sob fluxo de N2, foi resfriada até 0 °C usando um banho de gelo. Uma solução de cl oreto de dietila- lumínio a 1 M em hexano (22,1 mL, 22,1 mmol) foi adicionada gota a gota e a mistura foi agitada durante 10 min a 0 °C. Depois, uma solução de cloreto de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)acetila 1a (4,47 g, 22,1 mmol, síntese: ver Exemplo 1) em CH2Cl2 (30 mL) foi adicionada gota a gota ao longo de um período de 50 min e a mistura resultante foi mantida a 0 °C durante 1 h e foi subsequentemente a gitada a 10 °C durante 1 h. Após resfriamento até 0 °C novamente, a reação foi extinta pela adição lenta de uma solução de tartarato de potássio e sódio tetraidratado [CAS 6100-16-9] (8,31 g, 29,4 mmol) em água (9 mL) e se permitiu que a mistura aquecesse até à temperatura ambiente ao longo de 1 h. A mistura reacional foi diluída pela adição de 2-metil-THF (150 mL) e agitada durante 30 min à temperatura ambiente. Na2SO4 (30 g) foi adicionado e, após agitação durante 30 min, a mistura foi filtrada sobre Dicalite®. O bolo de filtração foi lavado várias vezes com 2-metil-THF e os filtrados combinados foram concentrados sob vácuo até um volume residual de 25 mL. Após repouso durante 2 h, formouse um precipitado e o precipitado foi separado por filtração e seco sob vácuo para proporcionar 1-(6-cloro-1H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2- metoxifenil)etanona 4a (2,85 g).
[0055] Uma solução de 1-(6-cloro-1H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2- metoxifenil)etanona 4a (0,8 g, 2,52 mmol) em THF (40 mL) foi agitada sob fluxo de N2 e resfriada em um banho de gelo. Adicionou-se em porções tribrometo de feniltrimetilamônio [CAS 4207-56-1] (0,99 g, 2,64 mmol) e a mistura foi agitada a 0 °C durante 1 h e subsequente- mente à temperatura ambiente durante 1 h. Os sólidos foram removidos da mistura reacional por filtração. O filtrado, contendo 2-bromo-1- (6-cloro-1H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)etanona 4b bruta, foi misturado com 3-metoxi-5-(metilsulfonil)anilina [CAS 62606-02-4] (0,56 g, 2,77 mmol) e di-isopropiletilamina (1,3 mL, 7,55 mmol) e os solventes foram evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi recolhido com CH3CN (50 mL) e aquecido sob refluxo durante 18 h. Após resfriamento para a temperatura ambiente, a mistura reacional foi vertida em água (250 mL). Os produtos foram extraídos com 2-metil-THF (2x) e as camadas orgânicas combinadas foram secas em MgSO4, filtradas e evaporadas sob pressão reduzida. O resíduo foi agitado em EtOAc (7,5 mL) e os sólidos foram removidos por filtração. O filtrado foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatogra- fia Flash em sílica (Fase estacionária: sílica Grace Reveleris® 40 g, Fase móvel: gradiente de heptano/EtOAc 100/0 até 0/100). As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas, e o resíduo foi adicionalmente purificado via HPLC Preparativa (Fase estacionária: Uptisphere C18 ODB - 10 μm, 200 g, 5 cm, Fase móvel: solução de NH4HCO3 a 0,25% em água, CH3CN). As frações de produto foram combinadas e evaporadas sob pressão reduzida, e o resíduo foi coe- vaporado com MeOH. O resíduo sólido foi agitado em Et2O (7,5 mL), removido por filtração e seco sob vácuo a 50 °C, da ndo origem a 1-(6- cloro-1H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-2-((3-metoxi-5- (metilsulfonil)fenil)amino)etanona racêmica (Composto 4, 352 mg).
[0056] Foi realizada separação quiral dos enantiômeros do Composto 4 (352 mg) via separação Quiral de Fase Normal (Fase estacionária: AS 500 g 20 μm, Fase móvel: MeOH a 100%). As frações do produto foram combinadas e evaporadas sob pressão reduzida. O primeiro produto a eluir foi agitado em CH2Cl2 (5 mL), removido por filtração e seco sob vácuo a 40 °C, dando origem ao Enantiômero 4A (56 mg). O segundo produto a eluir foi agitado em CH2Cl2 (3,5 mL), removido por filtração e seco sob vácuo a 40 °C, da ndo origem ao Enantiômero 4B (68 mg). Composto 4: 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,09 (s, 3 H) 3,73 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,24 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 6,59 (s, 2 H) 6,74 (td, J=8,4, 2,2 Hz, 1 H) 6,92 (s, 1 H) 6,97 (dd, J=11,2, 2,4 Hz, 1 H) 7,06 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 7,23 (dd, J=8,5, 1,6 Hz, 1 H) 7,37 (dd, J=8,4, 7,1 Hz, 1 H) 7,54 (d, J=1,6 Hz, 1 H) 8,15 (d, J=8,5 Hz, 1 H) 8,47 (s, 1 H) 11,82 - 12,42 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-A): Tr 1,12 min, MH+ 517 Enantiômero 4A: 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,22 (d, J=7,75 Hz, 1 H) 6,56 - 6,60 (m, 2 H) 6,73 (td, J=8,45, 2,51 Hz, 1 H) 6,91 (t, J=1,83 Hz, 1 H) 6,96 (dd, J=11,38, 2,51 Hz, 1 H) 7,06 (d, J=7,73 Hz, 1 H) 7,20 (dd, J=8,49, 1,96 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J=8,66, 6,83 Hz, 1 H) 7,52 (d, J=1,94 Hz, 1 H) 8,13 (d, J=8,49 Hz, 1 H) 8,45 (s, 1 H) 12,24 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-A): Tr 1,15 min, MH+ 517 [α]D20: +129,9° (c 0,525, DMF) SFC quiral (método SFC-N): Rt 2,77 min, MH+ 517, pureza quiral 100%. Ponto de fusão: 245°C Enantiômero 4B: 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,08 (s, 3 H) 3,71 (s, 3 H) 3,98 (s, 3 H) 6,22 (d, J=7,75 Hz, 1 H) 6,56 - 6,60 (m, 2 H) 6,73 (td, J=8,49, 2,47 Hz, 1 H) 6,91 (t, J=1,65 Hz, 1 H) 6,96 (dd, J=11,35, 2,48 Hz, 1 H) 7,06 (d, J=7,79 Hz, 1 H) 7,20 (dd, J=8,51, 1,93 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J=8,63, 6,84 Hz, 1 H) 7,52 (d, J=1,92 Hz, 1 H) 8,13 (d, J=8,51 Hz, 1 H) 8,45 (s, 1 H) 12,10 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-A): Tr 1,15 min, MH+ 517 [α]D20: -123,3° (c 0,544, DMF) SFC quiral (método SFC-N): Rt 3,52 min, MH+ 517, pureza quiral 100%. Ponto de fusão: 247°C Exemplo 5: síntese de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(6-metoxi-1 H-indol- 3-il)-2-((3-metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 5) e separação quiral nos Enantiômeros 5A e 5B.
[0057] Uma solução agitada de 6-metoxi-1H-indol [CAS 3189-13-7] (2,54 g, 17,3 mmol) em CH2Cl2 (100 mL) sob fluxo de N2, foi resfriada para -22 °C usando um banho de resfriamento de acetona controlado por criostato. Uma solução de cloreto de dietilalumínio 1 M em hexano (25,9 mL, 25,9 mmol) foi adicionada gota a gota e a mistura foi agitada a -22 °C durante 20 min. Então, uma solução de cloreto de 2-(4-fluoro- 2-metoxifenil)acetila 1a (5,24 g, 25,9 mmol, síntese: ver Exemplo 1) em CH2Cl2 (60 mL) foi adicionada gota a gota ao longo de um período de 90 min mantendo a temperatura interna inferior a -20 °C e a mistura resultante foi mantida a -20 °C durante 2,5 h. A re ação foi extinta pela adição lenta de uma solução de tartarato de sódio e potássio tetraidra- tado [CAS 6100-16-9] (9,74 g, 34,5 mmol) em água (10 mL) e a mistura foi agitada a -20 °C durante 30 min e subsequentemente à temperatura ambiente durante 1 h. A mistura reacional foi diluída pela adição de THF (300 mL) e agitada durante 1 h à temperatura ambiente. Na2SO4 (32 g) foi adicionado e, após agitação durante 18 h, a mistura foi filtrada sobre Dicalite®. O bolo de filtração foi lavado várias vezes com THF e os filtrados combinados foram concentrados sob vácuo até um volume residual de 7,5 mL. Após repouso durante 4 h, formou-se um precipitado e o precipitado foi removido por filtração e seco sob vácuo a 50 °C, dando origem a 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(6-metoxi- 1H-indol-3-il)etanona 5a (2,21 g).
[0058] Uma solução de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(6-metoxi-1H- indol-3-il)etanona 5a (2,2 g, 7,02 mmol) em THF (150 mL) foi agitada sob fluxo de N2 e resfriada em um banho de gelo. Adicionou-se em porções tribrometo de feniltrimetilamônio [CAS 4207-56-1] (2,77 g, 7,37 mmol) e a mistura foi agitada a 0 °C durante 1 h e subsequentemente à temperatura ambiente durante 2 h. 3-Metoxi-5- (metilsulfonil)anilina [CAS 62606-02-4] (4,24 g, 21,1 mmol) foi adicionado e aproximadamente 125 mL de solvente foram evaporados sob pressão reduzida. CH3CN (50 mL) foi adicionado e a mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente durante 5 dias e subsequentemente a 50 °C durante 2 dias. Após resfriamento para a temperatura ambiente, a mistura reacional foi vertida em água (200 mL). Os produtos foram extraídos com 2-metil-THF (2x) e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em MgSO4, filtradas e evaporadas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromato- grafia Flash em sílica (Fase estacionária: sílica Grace Reveleris® 120 g, Fase móvel: gradiente de heptano/EtOAc 100/0 até 0/100). As frações contendo produto foram combinadas e lavadas com HCl 1 N (100 mL), uma solução aquosa saturada de NaHCO3, secas com MgSO4, filtradas e evaporadas sob pressão reduzida. O resíduo foi cristalizado a partir de uma mistura de CH2Cl2 (10 mL) e éter de di-isopropila (15 mL), removido por filtração e seco sob vácuo a 50 °C, dando origem a 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(6-metoxi-1H-indol-3-il)-2-((3-metoxi-5- (metilsulfonil)fenil)amino)etanona racêmica (Composto 5, 2,25 g). Uma pequena alíquota do Composto 5 (150 mg) foi adicionalmente purificada por formação de pasta em MeOH (4 mL) durante 2 h. Os sólidos foram removidos por filtração e secos sob vácuo a 50 °C, dando origem a 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(6-metoxi-1H-indol-3-il)-2-((3-metoxi- 5-(metilsulfonil)fenil)amino)etanona racêmica (Composto 5, 112 mg).
[0059] Foi realizada separação quiral dos enantiômeros do Composto 5 (2,1 g) via separação Quiral de Fase Normal (Fase estacionária: (S,S)-Whelk-O 1, Fase móvel: EtOH 100%). As frações do produto foram combinadas e evaporadas. O primeiro produto a eluir foi agitado em MeOH (6 mL), removido por filtração e seco sob vácuo a 40 °C, dando origem ao Enantiômero 5A (825 mg). O segundo produto a eluir foi agitado em MeOH (5 mL), removido por filtração e seco sob vácuo a 40 °C, dando origem ao Enantiômero 5B (784 mg). Composto 5: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,08 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,76 (s, 3 H) 4,00 (s, 3 H) 6,19 (d, J=7,66 Hz, 1 H) 6,55 - 6,61 (m, 2 H) 6,72 (td, J=8,47, 2,49 Hz, 1 H) 6,83 (dd, J=8,71, 2,30 Hz, 1 H) 6,90 (t, J=1,65 Hz, 1 H) 6,92 - 6,98 (m, 2 H) 7,00 (d, J=7,69 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J=8,60, 6,85 Hz, 1 H) 8,02 (d, J=8,71 Hz, 1 H) 8,29 (s, 1 H) 11,85 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-A): Tr 1,01 min, MH+ 513 Enantiômero 5A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,08 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,77 (s, 3 H) 4,00 (s, 3 H) 6,20 (d, J=7,68 Hz, 1 H) 6,56 - 6,61 (m, 2 H) 6,72 (td, J=8,48, 2,48 Hz, 1 H) 6,83 (dd, J=8,72, 2,30 Hz, 1 H) 6,91 (t, J=1,65 Hz, 1 H) 6,92 - 6,98 (m, 2 H) 7,01 (d, J=7,70 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J=8,61, 6,85 Hz, 1 H) 8,02 (d, J=8,71 Hz, 1 H) 8,30 (s, 1 H) 11,76 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-A): Tr 1,04 min, MH+ 513 [α]D20: -127,5° (c 0,6, DMF) SFC quiral (método SFC-I): Rt 3,01 min, MH+ 513, pureza quiral 100%. Ponto de fusão: 190°C Enantiômero 5B: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,08 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,77 (s, 3 H) 4,00 (s, 3 H) 6,20 (d, J=7,67 Hz, 1 H) 6,55 - 6,62 (m, 2 H) 6,73 (td, J=8,48, 2,49 Hz, 1 H) 6,83 (dd, J=8,72, 2,30 Hz, 1 H) 6,91 (t, J=1,65 Hz, 1 H) 6,93 - 6,98 (m, 2 H) 7,01 (d, J=7,68 Hz, 1 H) 7,37 (dd, J=8,61, 6,84 Hz, 1 H) 8,03 (d, J=8,71 Hz, 1 H) 8,30 (s, 1 H) 11,82 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-A): Tr 1,04 min, MH+ 513 [α]D20: +125,3° (c 0,455, DMF) SFC quiral (método SFC-I): Rt 2,51 min, MH+ 513, pureza quiral 100%. Ponto de fusão: 204°C Exemplo 6: 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(7-fluoro-5-metil-1 H-indol-3-il)- 2-((3-metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 6) e separação quiral nos Enantiômeros 6A e 6B.
[0060] Uma solução agitada de 7-fluoro-5-metil-1H-indol [CAS 442910-91-0] (2,54 g, 17,0 mmol) em CH2Cl2 (150 mL) sob fluxo de N2, foi resfriada para 0 °C usando um banho de gelo. Um a solução de clo- reto de dietilalumínio 1 M em hexano (25,6 mL, 25,6 mmol) foi adicionada gota a gota e a mistura foi agitada a 0 °C durante 30 min. Então, uma solução de cloreto de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)acetila 1a (5,18 g, 25,6 mmol, síntese: ver Exemplo 1) em CH2Cl2 (150 mL) foi adicionada gota a gota e a mistura resultante foi agitada a 0 °C durante 1 h e sub-sequentemente à temperatura ambiente durante 3 h. A reação foi vertida em água gelada contendo excesso de tartarato de sódio e potássio tetraidratado [CAS 6100-16-9]. A mistura foi filtrada em Dicalite® e o bolo de filtração foi lavado várias vezes com THF. A camada orgânica foi separada, lavada com água, seca em MgSO4, filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi suspenso em CH2Cl2 (20 mL). Os sólidos foram removidos por filtração, lavados com uma pequena quantidade de uma mistura de CH2Cl2 / heptano (1/1) e secos sob vácuo a 50 °C, dando origem a 2-(4-fluoro-2-metoxifen il)-1-(7-fluoro-5- metil-1H-indol-3-il)etanona 6a (4,13 g).
[0061] Uma solução de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(7-fluoro-5- metil-1H-indol-3-il)etanona 6a (4,11 g, 13,0 mmol) em THF (100 mL) foi agitada sob fluxo de N2 e resfriada em um banho de gelo. Uma solução de tribrometo de feniltrimetilamônio [CAS 4207-56-1] (5,39 g, 14,3 mmol) em THF (150 mL) foi adicionada gota a gota e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. Os sólidos foram removidos por filtração, lavados com THF e os filtrados combinados foram evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi triturado com uma pequena quantidade de CH2Cl2, os sólidos foram isolados por filtração e secos sob vácuo, dando origem a 2-bromo-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(7- fluoro-5-metil-1H-indol-3-il)etanona 6b (4,81 g) na forma de um pó branco. Síntese do Composto 6 e separação quiral dos Enantiômeros 6A e 6B:
[0062] Uma solução de 2-bromo-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(7- fluoro-5-metil-1H-indol-3-il)etanona 6b (1,02 g, 2,59 mmol), 3-metoxi-5- (metilsulfonil)anilina [CAS 62606-02-4] (782 mg, 3,89 mmol) e di- isopropiletilamina (670 μL, 3,89 mmol) em CH3CN (25 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 4 dias e a mistura foi subsequentemente aquecida a 70 °C durante 10 h. Após resfriamento para a temperatura ambiente, os solventes foram evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi recolhido com CH2Cl2, lavado com HCl 0,5 N e água, seco em MgSO4, filtrado e evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em sílica (Fase estacionária: Biotage® SNAP Ultra 100 g, Fase móvel: gradiente de EtOAc:EtOH (3:1)/heptano 0/100 até 50/50). As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas sob pressão reduzida, dando origem a 2-(4- fluoro-2-metoxifenil)-1-(7-fluoro-5-metil-1H-indol-3-il)-2-((3-metoxi-5- (metilsulfonil)fenil)amino)etanona racêmica (Composto 6, 747 mg) na forma de um sólido branco.
[0063] Foi realizada separação quiral dos enantiômeros do Composto 6 (747 mg) através de SFC Preparativa (Fase estacionária: Chi- ralpak® Diacel AD 20 x 250 mm, Fase móvel: CO2, EtOH com iPrNH2 0,2%). As frações de produto foram combinadas, evaporadas sob pressão reduzida e secas sob vácuo a 50 °C. O prime iro produto a elu- ir proporcionou o Enantiômero 6A (275 mg) na forma de um sólido amorfo branco. O segundo produto a eluir proporcionou o Enantiômero 6B (259 mg) na forma de um pó amorfo branco. Composto 6: LC/MS (método LC-A): Tr 1,13 min, MH+ 515 Enantiômero 6A: 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 2,39 (s, 3 H) 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,98 (s, 3 H) 6,24 (d, J=7,78 Hz, 1 H) 6,55 - 6,62 (m, 2 H) 6,73 (td, J=8,48, 2,49 Hz, 1 H) 6,88 - 6,99 (m, 3 H) 7,01 (d, J=7,80 Hz, 1 H) 7,35 (dd, J=8,61, 6,83 Hz, 1 H) 7,79 (s, 1 H) 8,40 (s, 1 H) 12,49 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-B): Tr 2,04 min, MH+ 515 [α]D20: +134,0° (c 0,332, DMF) SFC quiral (método SFC-O): Rt 2,24 min, MH+ 515, pureza quiral 100%. Enantiômero 6B: 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 2,39 (s, 3 H) 3,10 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,98 (s, 3 H) 6,25 (d, J=7,79 Hz, 1 H) 6,57 - 6,61 (m, 2 H) 6,74 (td, J=8,48, 2,48 Hz, 1 H) 6,89 - 6,99 (m, 3 H) 7,02 (d, J=7,80 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J=8,62, 6,83 Hz, 1 H) 7,79 (s, 1 H) 8,41 (s, 1 H) 12,47 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-B): Tr 2,04 min, MH+ 515 [α]D20: -129,2° (c 0,288, DMF) SFC quiral (método SFC-O): Rt 3,40 min, MH+ 515, pureza quiral 100%. Exemplo 7: síntese de 1-(5,6-difluoro-1 H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2- metoxifenil)-2-((3-metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 7) e separação quiral nos Enantiômeros 7A e 7B.
[0064] Uma solução de cloreto de dietilalumínio 1 M em hexano (19,9 mL, 19,9 mmol) foi adicionada gota a gota a 0 °C a uma solução de 5,6-difluoro-1H-indol [CAS 169674-01-5] (2,0 g, 13,1 mmol) em CH2Cl2 (24 mL). Após 30 min a 0 °C, uma solução de cloreto de 2-(4- fluoro-2-metoxifenil)acetila 1a (4,0 g, 19,6 mmol, síntese: ver Exemplo 1) em CH2Cl2 (24 mL) foi lentamente adicionada. A reação foi agitada a 0 °C durante 3 h. Adicionou-se solução de sal de Rochelle 1 N (50 mL) e a mistura reacional foi vigorosamente agitada à temperatura ambiente durante 1 h. O precipitado foi removido por filtração e submetido a partição entre em EtOAc e HCl 1 N. A fase aquosa foi extraída com EtOAc. As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura, secas em MgSO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida, dando origem a 1-(5,6-difluoro-1H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2- metoxifenil)etanona 7a (4,0 g).
[0065] Uma solução de tribrometo de feniltrimetilamônio [CAS 4207-56-1] (1,9 g, 2,37 mmol) em THF (30 mL) foi adicionada gota a gota a 0 °C a uma solução de 1-(5,6-difluoro-1 H-indol-3-il)-2-(4-fluoro- 2-metoxifenil)etanona 7a (1,5 g, 4,70 mmol) em THF (50 mL). A mistura foi agitada a 0 °C durante 15 min e à temperatura ambiente durante a noite. O precipitado foi separado por filtração e lavado com EtOAc. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi absorvido com um mínimo de acetonitrila. O precipitado foi removido por filtração, dando origem a 2-bromo-1-(5,6-difluoro-1H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2- metoxifenil)etanona 7b (1,9 g).
[0066] Uma mistura de 2-bromo-1-(5,6-difluoro-1H-indol-3-il)-2-(4- fluoro-2-metoxifenil)etanona 7b (0,800 g, 2,01 mmol) e 3-metoxi-5- (metilsulfonil)anilina [CAS 62606-02-4] (1,2 g, 6,03 mmol) em acetoni- trila (8 mL) foi irradiada em um forno de micro-ondas a 100 °C durante 10 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e lavada com HCl 1 N. A fase orgânica foi lavada com uma solução aquosa saturada de NaHCO3 e salmoura, seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi cristalizado a partir de acetonitrila, dando origem a 1-(5,6-difluoro-1H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)- 2-((3-metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 7, 640 mg) na forma de uma mistura racêmica.
[0067] Foi realizada separação quiral dos enantiômeros do Composto 7 (596 mg) via SFC Quiral Preparativa (Fase estacionária: Chi- ralpak® IA 5 μm 250 x 20 mm, Fase móvel: CO2 a 70%, MeOH a 30%) originando 250 mg do primeiro enantiômero eluído e 250 mg do segundo enantiômero eluído. O enantiômero que eluiu em primeiro lugar foi solidificado por trituração com Et2O, dando origem ao Enantiômero 7A (194 mg) na forma de um pó amorfo. O enantiômero que eluiu em segundo lugar foi solidificado por trituração com Et2O, dando origem ao Enantiômero 7B (212 mg) na forma de um pó amorfo. Composto 7: 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,98 (s, 3 H) 6,23 (d, J=7,8 Hz, 1 H) 6,57 - 6,61 (m, 2 H) 6,74 (td, J=8,5, 2,5 Hz, 1 H) 6,91 (s, 1 H) 6,96 (dd, J=11,4, 2,5 Hz, 1 H) 7,06 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J=8,6, 6,9 Hz, 1 H) 7,54 (dd, J=10,8, 7,0 Hz, 1 H) 8,01 (dd, J=11,2, 8,1 Hz, 1 H) 8,48 (s, 1 H) 12,19 (s l, 1 H) LC-MS (método LC-D) Tr 3,3 min, MH+ 519 Enantiômero 7A: 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,08 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,98 (s, 3 H) 6,22 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 6,55 - 6,60 (m, 2 H) 6,74 (td, J=8,4, 2,4 Hz, 1 H) 6,88 - 6,92 (m, 1 H) 6,95 (dd, J=11,2, 2,4 Hz, 1 H) 7,04 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J=8,4, 6,9 Hz, 1 H) 7,53 (dd, J=10,7, 6,9 Hz, 1 H) 8,00 (dd, J=11,2, 8,0 Hz, 1 H) 8,47 (s, 1 H) 12,18 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-C): Tr 3,00 min, MH+ 519 [α]D20: +103,9° (c 0,282, DMF) SFC quiral (método SFC-G): Rt 3,16 min, MH+ 519, pureza quiral 100%. Enantiômero 7B: 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,08 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,98 (s, 3 H) 6,22 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 6,55 - 6,61 (m, 2 H) 6,74 (td, J=8,4, 2,4 Hz, 1 H) 6,91 (s, 1 H) 6,96 (dd, J=11,3, 2,4 Hz, 1 H) 7,04 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J=8,5, 6,9 Hz, 1 H) 7,53 (dd, J=10,7, 6,9 Hz, 1 H) 8,00 (dd, J=11,0, 8,2 Hz, 1 H) 8,47 (s, 1 H) 12,18 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-C): Tr 3,00 min, MH+ 519 [α]D20: -109,2° (c 0,285, DMF) SFC quiral (método SFC-G): Rt 3,92 min, MH+ 519, pureza quiral 99,17%. Exemplo 8: síntese de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5-fluoro-7-metil-1 H- indol-3-il)-2-((3-metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 8) e separação quiral nos Enantiômeros 8A e 8B.
[0068] Cloreto de dietilalumínio a 1 M em hexano (22 mL, 22 mmol) foi adicionado gota a gota a 0 °C a uma solução de 5-fluoro-7-metil- 1H-indol [CAS 1082041-52-8] (1,62 g, 10,9 mmol) em CH2Cl2 (45 mL). Após 30 min a 0 °C, uma solução de cloreto de 2-(4-fluoro-2- metoxifenil)acetila 1a (3,3 g, 16,3 mmol, síntese: ver Exemplo 1) em CH2Cl2 (30 mL) foi adicionada lentamente a 0 °C. A reação foi agitada a 0 °C durante 3 h. Solução de sal de Rochelle (1 N , 75 mL) foi adicionada e a mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. O precipitado foi separado por filtração e particionado entre EtOAc e HCl a 1 N. A fase orgânica foi lavada com HCl a 1 N e salmoura, seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi absorvido com uma quantidade mínima de EtOAc. O precipitado foi removido por filtração, dando origem a 2-(4-fluoro-2- metoxifenil)-1-(5-fluoro-7-metil-1H-indol-3-il)etanona 8a (2,4 g).
[0069] Uma solução de tribrometo de feniltrimetilamônio [CAS 4207-56-1] (2,2 g, 5,85 mmol) em THF (60 mL) foi adicionada gota a gota a 0 °C a uma solução de 2-(4-fluoro-2-metoxife nil)-1-(5-fluoro-7- metil-1H-indol-3-il)etanona 8a (1,66 g, 5,26 mmol) em THF (45 mL). A mistura foi agitada a 0 °C durante 1 h e à temperat ura ambiente durante a noite. O precipitado foi separado por filtração e lavado com EtOAc. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, dando origem a 2- bromo-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5-fluoro-7-metil-1H-indol-3- il)etanona 8b (1,9 g).
[0070] Uma mistura de 2-bromo-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5- fluoro-7-metil-1H-indol-3-il)etanona 8b (0,100 g, 0,254 mmol) e 3- metoxi-5-(metilsulfonil)anilina [CAS 62606-02-4] (0,155 g, 0,770 mmol) em acetonitrila (1 mL) foi irradiada em um forno de micro-ondas a 100 °C durante 10 min. A mistura reacional foi dilu ída com EtOAc e lavada com HCl 1 N. A fase orgânica foi lavada com uma solução aquosa saturada de NaHCO3 e salmoura, seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi cristalizado a partir de EtOAc e heptano, dando origem a 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5- fluoro-7-metil-1H-indol-3-il)-2-((3-metoxi-5- (metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 8, 95 mg) na forma de uma mistura racêmica.
[0071] Foi realizada separação quiral dos enantiômeros do Composto 8 (491 mg) via SFC Quiral Preparativa (Fase estacionária: Chi- ralpak IC 5 μm 250 x 30 mm, Fase móvel: CO2 60%, i PrOH 40%) originando 224 mg do enantiômero que eluiu em primeiro lugar e 212 mg do enantiômero que eluiu em segundo lugar. O enantiômero que eluiu em primeiro lugar foi cristalizado a partir de Et2O e algumas gotas de CH3CN, dando origem ao Enantiômero 8A (174 mg) na forma de um pó branco. O enantiômero que eluiu em segundo lugar foi cristalizado a partir de Et2O e algumas gotas de CH3CN, dando origem ao Enanti- ômero 8B (164 mg) na forma de um pó branco. Composto 8: 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,47 (s, 3 H) 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 4,00 (s, 3 H) 6,24 (d, J=7,7 Hz, 1 H) 6,55 - 6,64 (m, 2 H) 6,73 (td, J=8,4, 2,4 Hz, 1 H) 6,87 - 6,98 (m, 3 H) 7,04 (d, J=7,7 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J=8,6, 6,8 Hz, 1 H) 7,66 (dd, J=9,7, 2,5 Hz, 1 H) 8,46 (s, 1 H) 12,23 (s l, 1 H) LC-MS (método LC-E): Tr 8,5 min, MH+ 515 Enantiômero 8A: 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 2,47 (s, 3 H) 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 4,00 (s, 3 H) 6,24 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 6,53 - 6,65 (m, 2 H) 6,73 (td, J=8,8, 2,4 Hz, 1 H) 6,88 - 6,99 (m, 3 H) 7,05 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J=8,8, 6,9 Hz, 1 H) 7,66 (dd, J=9,6, 2,4 Hz, 1 H) 8,46 (s, 1 H) 12,24 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-C): Tr 3,07 min, MH+ 515 [α]D20: +101,1° (c 0,282, DMF) SFC quiral (método SFC-B): Rt 3,31 min, MH+ 515, pureza quiral 100%. Ponto de fusão: 208°C Enantiômero 8B: 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 2,47 (s, 3 H) 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 4,00 (s, 3 H) 6,24 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 6,54 - 6,63 (m, 2 H) 6,73 (td, J=8,5, 2,4 Hz, 1 H) 6,87 - 6,98 (m, 3 H) 7,04 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 7,35 (dd, J=8,5, 6,9 Hz, 1 H) 7,66 (dd, J=9,6, 2,4 Hz, 1 H) 8,46 (s, 1 H) 12,24 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-C): Tr 3,07 min, MH+ 515 [α]D20: -105,3° (c 0,264, DMF) SFC quiral (método SFC-B): Rt 4,39 min, MH+ 515, pureza quiral 99,67%. Ponto de fusão: 208°C Exemplo 9: síntese de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5-fluoro-6-metil-1 H- indol-3-il)-2-((3-metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 9) e separação quiral nos Enantiômeros 9A e 9B.
[0072] Uma solução de cloreto de dietilalumínio 1 M em hexano (13,5 mL, 13,5 mmol) foi adicionada gota a gota a -15 °C a uma solução de 5-fluoro-6-metil-1H-indol [CAS 1000343-16-7] (1,0 g, 6,97 mmol) em CH2Cl2 (30 mL). Após 30 min a -15 °C, uma solução de cloreto de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)acetila (2,0 g, 10,0 mmol, síntese: ver exemplo 1) em CH2Cl2 (20 mL) foi lentamente adicionada. A reação foi agitada a -15 °C durante 3 h. Adicionou-se solução de sal de Rochelle 1 N (50 mL) e a mistura reacional foi vigorosamente agitada à temperatura ambiente durante 1,5 h. O precipitado foi removido por filtração e submetido a partição entre em EtOAc e HCl 1 N. A fase orgânica foi lavada com HCl 1 N e salmoura, seca em MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida, dando origem a 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1- (5-fluoro-6-metil-1H-indol-3-il)etanona 9a (1,2 g).
[0073] Uma solução de tribrometo de feniltrimetilamônio [CAS 4207-56-1] (1,8 g, 4,81 mmol) em THF (50 mL) foi adicionada gota a gota a 0 °C a uma solução de 2-(4-fluoro-2-metoxife nil)-1-(5-fluoro-6- metil-1H-indol-3-il)etanona 9a (1,2 g, 3,78 mmol) em THF (40 mL). A mistura foi agitada a 0 °C durante 15 min e à tempe ratura ambiente durante a noite. O precipitado foi separado por filtração e lavado com EtOAc. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi recolhido com um mínimo de EtOAc. O precipitado foi removido por filtração, dando origem a 2-bromo-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5-fluoro- 6-metil-1H-indol-3-il)etanona 9b (1,2 g).
[0074] Uma mistura de 2-bromo-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5- fluoro-6-metil-1H-indol-3-il)etanona 9b (0,204 g, 0,517 mmol) e 3- metoxi-5-(metilsulfonil)anilina [CAS 62606-02-4] (0,309 g, 1,54 mmol) em acetonitrila (1 mL) e THF (1 mL) foi irradiada em um forno de micro-ondas a 100 °C durante 10 min. A mistura reacio nal foi diluída com EtOAc e lavada com HCl 1 N. A fase orgânica foi lavada com uma solução aquosa saturada de NaHCO3 e salmoura, seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi cristalizado a partir de EtOAc, dando origem a 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5- fluoro-6-metil-1H-indol-3-il)-2-((3-metoxi-5- (metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 9, 162 mg) na forma de uma mistura racêmica.
[0075] Foi realizada separação quiral dos enantiômeros do Com- posto 9 (462 mg) via SFC Quiral Preparativa (Fase estacionária: Chi- ralpak AD-H 5 μm 250 x 30 mm, Fase móvel: CO2 a 60%, MeOH a 40%) originando 160 mg do primeiro enantiômero eluído e 170 mg do segundo enantiômero eluído. O enantiômero que eluiu em primeiro lugar foi purificado de novo por cromatografia Flash em sílica gel (1540 μm, 4 g, CH2Cl2/MeOH 99/1). As frações puras foram coletadas e evaporadas até à secura. O resíduo (120 mg) foi solidificado a partir de Et2O e algumas gotas de CH3CN, dando origem ao Enantiômero 9A (83 mg) na forma de um pó branco. O enantiômero que eluiu em segundo lugar foi purificado de novo por cromatografia Flash em sílica gel (15-40 μm, 4 g, CH2Cl2/EtOAc 98/2). As frações puras foram coletadas e evaporadas até à secura. O resíduo (110 mg) foi solidificado a partir de Et2O e algumas gotas de CH3CN, dando origem ao Enantiô- mero 9B (68 mg) na forma de um pó branco. Composto 9: 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,31 (d, J=1,4 Hz, 3 H) 3,08 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,20 (d, J=7,7 Hz, 1 H) 6,56 - 6,61 (m, 2 H) 6,73 (td, J=8,5, 2,4 Hz, 1 H) 6,90 (m, 1 H) 6,95 (dd, J=11,6, 2,4 Hz, 1 H) 7,03 (d, J=7,7 Hz, 1 H) 7,28 - 7,42 (m, 2 H) 7,77 (d, J=10,6 Hz, 1 H) 8,39 (s, 1 H) 12,02 (s, 1 H) LC-MS (método LC-E): Tr 8,6 min, MH+ 515 Enantiômero 9A: 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 2,29 - 2,32 (m, 3 H) 3,08 (s, 3 H) 3,71 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,20 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 6,53 - 6,61 (m, 2 H) 6,73 (td, J=8,4, 2,5 Hz, 1 H) 6,90 (s, 1 H) 6,95 (dd, J=11,4, 2,5 Hz, 1 H) 7,04 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 7,28 - 7,42 (m, 2 H) 7,77 (d, J=10,4 Hz, 1 H) 8,40 (s, 1 H) 12,05 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-C): Tr 3,05 min, MH+ 515 [α]D20: +125,5° (c 0,3945, DMF) SFC quiral (método SFC-D): Rt 2,54 min, MH+ 515, pureza quiral 99,05%. Ponto de fusão: 206°C Enantiômero 9B: 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 2,26 - 2,33 (m, 3 H) 3,08 (s, 3 H) 3,71 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,20 (d, J=7,6 Hz, 1 H) 6,53 - 6,60 (m, 2 H) 6,73 (td, J=8,5, 2,5 Hz, 1 H) 6,90 (s, 1 H) 6,95 (dd, J=11,4, 2,5 Hz, 1 H) 7,04 (d, J=7,6 Hz, 1 H) 7,27 - 7,41 (m, 2 H) 7,77 (d, J=10,7 Hz, 1 H) 8,40 (s, 1 H) 12,05 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-C): Tr 3,05 min, MH+ 515 [α]D20: -129,5° (c 0,3955, DMF) SFC quiral (método SFC-D): Rt 2,98 min, MH+ 515, pureza quiral 99,18%. Ponto de fusão: 206°C Exemplo 10: 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-2-((3-metoxi-5- (metilsulfonil)fenil)amino)-1-(6-metoxi-5-metil-1H-indol-3-il)etanona (Composto 10) e separação quiral nos Enantiômeros 10A e 10B.
[0076] Cloreto de dietilalumínio a 1 M em hexano (18,6 mL, 18,6 mmol) foi adicionado gota a gota a 0 °C a uma solução de 6-metoxi-5- metil-1H-indol [CAS 1071973-95-9] (2 g, 12,4 mmol) em CH2Cl2 (60 mL). Após 30 min a 0 °C, cloreto de 2-(4-fluoro-2-m etoxifenil)acetila 1a (3,3 g, 16,3 mmol, síntese: ver Exemplo 1) em CH2Cl2 (60 mL) foi adi-cionado lentamente a 0 °C. A reação foi agitada a 0 °C durante 3 h. Adicionou-se água gelada e o precipitado foi removido por filtração, lavado com água, e seco sob vácuo, dando origem a 2-(4-fluoro-2- metoxifenil)-1-(6-metoxi-5-metil-1H-indol-3-il)etanona 10a (3,15 g).
[0077] A 0 °C, uma solução de tribrometo de feniltrimetilamônio [CAS 4207-56-1] (3,8 g, 10,1 mmol) em THF (90 mL) foi adicionada gota a gota a uma mistura de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(6-metoxi-5- metil-1H-indol-3-il)etanona 10a (3,15 g, 9,6 mmol) em THF (90 mL). A mistura foi agitada a 0 °C durante 1 h e à temperat ura ambiente durante 2,5 h. O precipitado foi separado por filtração e lavado com EtOAc. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi absorvido com uma quantidade mínima de CH3CN e éter de di- isopropila. O precipitado foi removido por filtração e seco sob vácuo, dando origem a 2-bromo-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(6-metoxi-5-metil- 1H-indol-3-il)etanona 10b (2,8 g).
[0078] Uma mistura de 2-bromo-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(6- metoxi-5-metil-1H-indol-3-il)etanona 10b (1,0 g, 2,46 mmol), 3-metoxi- 5-(metilsulfonil)anilina [CAS 62606-02-4] (743 mg, 3,69 mmol) e di- isopropiletilamina (0,64 mL, 3,69 mmol) em CH3CN (15 mL) e THF (15 mL) foi aquecida a 70 °C durante 12 h. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em EtOAc. A camada orgânica foi lavada duas vezes com HCl a 1 N, lavada com água, seca sobre MgSO4, filtrada e o solvente foi concentrado sob pressão reduzida. A purificação foi realizada por cromatografia Flash em sílica gel (15-40 μm, 40 g, CH2CI2/CH3OH 99,8/0,2). As frações puras foram recolhidas e evaporadas até à secura, dando origem a 2-(4-fluoro-2- metoxifenil)-2-((3-metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)-1-(6-metoxi-5- metil-1H-indol-3-il)etanona (Composto 10, 638 mg) na forma de uma mistura racêmica.
[0079] Foi realizada separação quiral dos enantiômeros do Composto 10 via SFC Quiral Preparativa (Fase estacionária: Chiralpak® AD-H 5 μm 250 x 30 mm, Fase móvel: CO2 70%, i PrOH 30%) originando 244 mg do enantiômero que eluiu em primeiro lugar e 163 mg do enantiômero que eluiu em segundo lugar. O enantiômero que eluiu em primeiro lugar foi purificado de novo por cromatografia Flash em sílica gel (15-40 μm, 40 g, CH2Cl2/EtOAc 98/2). As frações puras foram coletadas e evaporadas até à secura. O resíduo (161 mg) foi solidificado a partir de Et2O e algumas gotas de CH3CN, dando origem ao Enantiômero 10A (136 mg). O enantiômero que eluiu em segundo lugar foi purificado de novo por cromatografia Flash em sílica gel (15-40 μm, 40 g, CH2Cl2/EtOAc 98/2). As frações puras foram coletadas e evaporadas até à secura. O resíduo (158 mg) foi solidificado a partir de Et2O e algumas gotas de CH3CN, dando origem ao Enantiômero 10B (135 mg). Composto 10: 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 2,21 (s, 3 H) 3,08 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,79 (s, 3 H) 4,00 (s, 3 H) 6,18 (d, J=7,6 Hz, 1 H) 6,55 - 6,60 (m, 2 H) 6,72 (td, J=8,5, 2,5 Hz, 1 H) 6,89 - 7,00 (m, 4 H) 7,35 (dd, J=8,5, 7,1 Hz, 1 H) 7,90 (s, 1 H) 8,23 (s, 1 H) 11,75 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-C): Tr 3,04 min, MH+ 527 Ponto de fusão: 224°C Enantiômero 10A: 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 2,21 (s, 3 H) 3,08 (s, 3 H) 3,71 (s, 3 H) 3,79 (s, 3 H) 4,00 (s, 3 H) 6,18 (d, J=7,6 Hz, 1 H) 6,53 - 6,60 (m, 2 H) 6,72 (td, J=8,5, 2,5 Hz, 1 H) 6,87 - 7,02 (m, 4 H) 7,35 (dd, J=8,5, 7,1 Hz, 1 H) 7,90 (s, 1 H) 8,24 (d, J=2,8 Hz, 1 H) 11,76 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-C): Tr 3,03 min, MH+ 527 [α]D20: -121,5° (c 0,284, DMF) SFC quiral (método SFC-F): Rt 2,35 min, MH+ 527, pureza quiral 100% Ponto de fusão: 242°C Enantiômero 10B: 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 2,21 (s, 3 H) 3,08 (s, 3 H) 3,71 (s, 3 H) 3,79 (s, 3 H) 4,00 (s, 3 H) 6,18 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 6,54 - 6,60 (m, 2 H) 6,72 (td, J=8,5, 2,2 Hz, 1 H) 6,87 - 7,02 (m, 4 H) 7,35 (dd, J=8,5, 6,9 Hz, 1 H) 7,90 (s, 1 H) 8,24 (s, 1 H) 11,76 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-C): Tr 3,03 min, MH+ 527 [α]D20: +122,9° (c 0,284, DMF) SFC quiral (método SFC-F): Rt 3,33 min, MH+ 527, pureza quiral 99,1%. Ponto de fusão: 242°C Exemplo 10.1: Estabilidade quiral do Enantiômero 10B a pH 7,4
[0080] A estabilidade quiral do Enantiômero 10B (R = OMe) foi avaliada por determinação do excesso enantiomérico (% de ee) após incubação durante 24 h e 48 h em uma solução tamponada a pH 7,4 a 40 °C e 60 °C. Para avaliar a influência do substit uinte de metóxi do Enantiômero 10B (R = OMe) na estabilidade contra a racemização, a estabilidade quiral do Enantiômero 10'B (R = H) foi testada sob as mesmas condições.
[0081] Para esta finalidade, soluções tamponadas a 5 μM (pH = 7,4) de 10B e 10'B foram preparadas por mistura de 25 μL de uma solução a 100 μM de 10B ou 10'B em DMSO com 475 μL de tampão aquoso pH 7,4. Foram retiradas amostras às 24 h e 48 h após a incubação a 40 °C e 60 °C. As amostras analíticas foram analisadas por SFC Quiral (detecção por MS) e a pureza quiral foi expressa como o excesso enantiomérico (% de ee = % de enantiômero B - % de enanti- ômero A). Ambos os Enantiômeros 10B e 10'B tinham uma pureza quiral de 100% antes da sua incubação.
Exemplo 11: 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5-fluoro-6-metoxi-1 H-indol-3- il)-2-((3-metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 11) e separação quiral nos Enantiômeros 11A e 11B. 
[0082] Cloreto de dietilalumínio a 1 M em hexano (20 mL, 20 mmol) foi adicionado gota a gota a 0 °C a uma solução de 5-fluoro-6-metoxi- 1H-indol [CAS 1211595-72-0] (2,2 g, 13,3 mmol) em CH2Cl2 (60 mL). Após 30 min a 0 °C, cloreto de 2-(4-fluoro-2-metoxi fenil)acetila 1a (3,85 g, 19 mmol, síntese: ver Exemplo 1) em CH2Cl2 (60 mL) foi adicionado lentamente a 0 °C. A reação foi agitada a 0 ° C durante 3 h. Adi-cionaram-se água gelada e uma solução aquosa de NaHCO3. A mistura reacional foi extraída com CH2Cl2/MeOH. A camada orgânica foi lavada com água, seca sobre MgSO4, filtrada, e o solvente foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi absorvido com um mínimo de CH2Cl2. O precipitado foi removido por filtração e seco, dando origem a 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5-fluoro-6-metoxi-1H-indol-3- il)etanona 11a (3,2 g).
[0083] A 0 °C, uma solução de tribrometo de feniltrimetilamônio [CAS 4207-56-1] (3,22 g, 8,56 mmol) em THF (80 mL) foi adicionada gota a gota a uma mistura de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5-fluoro-6- metoxi-1H-indol-3-il)etanona 11a (2,7 g, 8,15 mmol) em THF (80 mL). A mistura foi agitada a 0 °C durante 1 h e à temperatura ambiente durante 2,5 h. O precipitado foi removido por filtração, lavado com EtOAc e água e seco, dando origem a um primeiro lote de 2-bromo-2-(4- fluoro-2-metoxifenil)-1-(5-fluoro-6-metoxi-1H-indol-3-il)etanona 11b (1,5 g). A camada orgânica do filtrado foi separada, seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi absorvido com uma quantidade mínima de CH3CN e éter de di- isopropila. O precipitado foi removido por filtração e seco sob vácuo, dando origem a um segundo lote de 11b (1,7 g).
[0084] Uma mistura de 2-bromo-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5- fluoro-6-metoxi-1H-indol-3-il)etanona 11b (0,8 g, 1,95 mmol), 3-metoxi- 5-(metilsulfonil)anilina [CAS 62606-02-4] (589 mg, 2,93 mmol) e di- isopropiletilamina (0,51 mL, 2,93 mmol) em CH3CN (15 mL) e THF (15 mL) foi aquecida a 70 °C durante 72 h. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em EtOAc. A camada orgânica foi lavada duas vezes com HCl a 1 N, lavada com água, seca sobre MgSO4, filtrada e o solvente foi concentrado sob pressão reduzi-da. A purificação foi realizada por cromatografia Flash em sílica gel (15-40 μm, 40 g, CH2CI2/CH3OH 99,5/0,5). As frações puras foram re-colhidas e evaporadas até à secura, dando origem a 2-(4-fluoro-2- metoxifenil)-1-(5-fluoro-6-metoxi-1H-indol-3-il)-2-((3-metoxi-5- (metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 11, 450 mg) na forma de uma mistura racêmica.
[0085] Foi realizada separação quiral dos enantiômeros do Composto 11 (380 mg) via SFC Quiral Preparativa (Fase estacionária: Chi- ralpak® IC 5 μm 250 x 20 mm, Fase móvel: CO2 70%, MeOH 30%) originando, após cristalização a partir de CH3CN/éter de di-isopropila, 174 mg do enantiômero que eluiu em primeiro lugar (Enantiômero 11A) e 165 mg do enantiômero que eluiu em segundo lugar (Enantiômero 11B). Composto 11: 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,08 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,85 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,20 (d, J=7,6 Hz, 1 H) 6,58 (s, 2 H) 6,73 (td, J=8,4, 2,5 Hz, 1 H) 6,87 - 6,92 (m, 1 H) 6,96 (dd, J=11,3, 2,5 Hz, 1 H) 7,03 (d, J=7,6 Hz, 1 H) 7,15 (d, J=7,3 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J=8,4, 6,9 Hz, 1 H) 7,83 (d, J=12,0 Hz, 1 H) 8,34 (s, 1 H) 11,95 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-C): Tr 2,89 min, MH+ 531 Ponto de fusão: 172°C Enantiômero 11A: 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,08 (s, 3 H) 3,71 (s, 3 H) 3,85 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,19 (d, J=7,6 Hz, 1 H) 6,53 - 6,61 (m, 2 H) 6,73 (td, J=8,4, 2,5 Hz, 1 H) 6,90 (s, 1 H) 6,96 (dd, J=11,3, 2,5 Hz, 1 H) 7,04 (d, J=7,6 Hz, 1 H) 7,15 (d, J=7,3 Hz, 1 H) 7,35 (dd, J=8,4, 6,8 Hz, 1 H) 7,82 (d, J=12,0 Hz, 1 H) 8,34 (s, 1 H) 11,96 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-C): Tr 2,89 min, MH+ 531 [α]D20: +104,9° (c 0,264, DMF) SFC quiral (método SFC-E): Rt 2,92 min, MH+ 531, pureza quiral 100%. Ponto de fusão: 247°C Enantiômero 11B: 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,08 (s, 3 H) 3,71 (s, 3 H) 3,85 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,20 (d, J=7,6 Hz, 1 H) 6,53 - 6,61 (m, 2 H) 6,73 (td, J=8,4, 2,5 Hz, 1 H) 6,90 (s, 1 H) 6,96 (dd, J=11,3, 2,5 Hz, 1 H) 7,04 (d, J=7,6 Hz, 1 H) 7,15 (d, J=7,3 Hz, 1 H) 7,35 (dd, J=8,4, 6,9 Hz, 1 H) 7,82 (d, J=11,7 Hz, 1 H) 8,34 (s, 1 H) 11,95 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-C): Tr 2,89 min, MH+ 531 [α]D20: -105,7° (c 0,279, DMF) SFC quiral (método SFC-E): Rt 3,92 min, MH+ 531, pureza quiral 99,37%. Ponto de fusão: 245°C Exemplo 12: 1-(7-cloro-6-metoxi-1 H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2- metoxifenil)-2-((3-metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 12) e separação quiral nos Enantiômeros 12A e 12B.
[0086] Cloreto de dietilalumínio a 1 M em hexano (16,5 mL, 16,5 mmol) foi adicionado gota a gota a 0 °C a uma solução de 7-cloro-6- metoxi-1H-indol [CAS 1227604-21-8] (2 g, 11 mmol) em CH2Cl2 (60 mL). Após 30 min a 0 °C, cloreto de 2-(4-fluoro-2-m etoxifenil)acetila 1a (3,3 g, 16,3 mmol, síntese: ver Exemplo 1) em CH2Cl2 (60 mL) foi adicionado lentamente a 0 °C. A reação foi agitada a 0 °C durante 3 h. Adicionou-se água gelada e o precipitado foi removido por filtração, lavado com água, e seco sob vácuo, dando origem a 1-(7-cloro-6- metoxi-1H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)etanona 12a (2,7 g).
[0087] A 0 °C, uma solução de tribrometo de feniltrimetilamônio [CAS 4207-56-1] (3,06 g, 8,15 mmol) em THF (80 mL) foi adicionada gota a gota a uma mistura de 1-(7-cloro-6-metoxi-1H-indol-3-il)-2-(4- fluoro-2-metoxifenil)etanona 12a (2,7 g, 7,76 mmol) em THF (80 mL). A mistura foi agitada a 0 °C durante 1 h e à temperatura ambiente durante 2,5 h. O precipitado foi separado por filtração e lavado com EtO- Ac. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, solubilizado em EtOAc e lavado com água. A camada orgânica foi separada, seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi absorvido com uma quantidade mínima de CH3CN e éter de di-isopropila. O precipitado foi removido por filtração e seco sob vácuo, dando origem a 2-bromo-1-(7-cloro-6-metoxi-1H-indol-3-il)-2-(4- fluoro-2-metoxifenil)etanona 12b (3,2 g).
[0088] Uma mistura de 2-bromo-1-(7-cloro-6-metoxi-1H-indol-3-il)- 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)etanona 12b (0,9 g, 2,11 mmol), 3-metoxi-5- (metilsulfonil)anilina [CAS 62606-02-4] (637 mg, 3,16 mmol) e di- isopropiletilamina (0,55 mL, 3,16 mmol) em CH3CN (20 mL) e THF (20 mL) foi aquecida a 45 °C durante 72 h. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em EtOAc. A camada orgânica foi lavada duas vezes com HCl a 1 N, lavada com água, seca sobre MgSO4, filtrada e o solvente foi concentrado sob pressão reduzida. A purificação foi realizada por cromatografia Flash em sílica gel (15-40 μm, 80 g, CH2CI2/CH3OH 99,5/0,5). As frações puras foram recolhidas e evaporadas até à secura, dando origem a 1-(7-cloro-6- metoxi-1H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-2-((3-metoxi-5- (metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 12, 820 mg) na forma de uma mistura racêmica.
[0089] Foi realizada separação quiral dos enantiômeros do Composto 12 (750 mg) via SFC Quiral Preparativa (Fase estacionária: Chi- ralcel® OD-H 5 μm 250 x 30 mm, Fase móvel: CO2 60%, MeOH 40%) originando, após solidificação em éter de di-isopropila, 285 mg do enantiômero que eluiu em primeiro lugar (Enantiômero 12A) e 260 mg do enantiômero que eluiu em segundo lugar (Enantiômero 12B) na forma de pós amorfos. Composto 12: 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,87 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,24 (d, J=7,6 Hz, 1 H) 6,51 - 6,64 (m, 2 H) 6,73 (td, J=8,4, 2,2 Hz, 1 H) 6,92 (s, 1 H) 6,96 (dd, J=11,4, 2,2 Hz, 1 H) 7,03 (d, J=7,6 Hz, 1 H) 7,11 (d, J=8,8 Hz, 1 H) 7,32 - 7,41 (m, 1 H) 8,05 (d, J=8,8 Hz, 1 H) 8,36 (s, 1 H) 12,20 (s, 1 H) LC/MS (método LC-C): Tr 3,02 min, MH+ 547 Enantiômero 12A: 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,87 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,24 (d, J=7,6 Hz, 1 H) 6,53 - 6,64 (m, 2 H) 6,73 (td, J=8,4, 2,2 Hz, 1 H) 6,92 (s, 1 H) 6,96 (dd, J=11,4, 2,2 Hz, 1 H) 7,03 (d, J=7,6 Hz, 1 H) 7,11 (d, J=8,8 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J=8,4, 7,6 Hz, 1 H) 8,05 (d, J=8,8 Hz, 1 H) 8,36 (s, 1 H) 12,20 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-C): Tr 3,01 min, MH+ 547 [α]D20: +89,7° (c 0,262, DMF) SFC quiral (método SFC-C): Rt 2,79 min, MH+ 547, pureza quiral 98,98%. Enantiômero 12B: 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,87 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,24 (d, J=7,6 Hz, 1 H) 6,54 - 6,62 (m, 2 H) 6,73 (td, J=8,5, 2,2 Hz, 1 H) 6,92 (s, 1 H) 6,96 (dd, J=11,2, 2,2 Hz, 1 H) 7,03 (d, J=7,6 Hz, 1 H) 7,11 (d, J=8,8 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J=8,5, 7,6 Hz, 1 H) 8,05 (d, J=8,8 Hz, 1 H) 8,36 (s, 1 H) 12,20 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-C): Tr 3,01 min, MH+ 547 [α]D20: -93,2° (c 0,236, DMF) SFC quiral (método SFC-C): Rt 3,76 min, MH+ 547, pureza quiral 99,66%. Exemplo 13: síntese de 1-(6,7-difluoro-1 H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2- metoxifenil)-2-((3-metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 13) e separação quiral nos Enantiômeros 13A e 13B.
[0090] Uma solução de cloreto de dietilalumínio 1 M em hexano (20 mL, 20 mmol) foi adicionada gota a gota a 0 °C a uma solução de 6,7-difluoro-1H-indol [CAS 271780-84-8] (1,5 g, 10,1 mmol) em CH2Cl2 (45 mL). Após 30 min a 0 °C, uma solução de cloreto de 2-(4-fluoro-2- metoxifenil)acetila 1a (3,1 g, 15,04 mmol, síntese: ver Exemplo 1) em CH2Cl2 (30 mL) foi lentamente adicionada. A reação foi agitada a 0 °C durante 3 h. Adicionou-se solução de sal de Rochelle 1 N (50 mL) e a mistura reacional foi vigorosamente agitada à temperatura ambiente durante 1 h. O precipitado foi removido por filtração e submetido a par-tição entre em EtOAc e HCl 1 N. A fase aquosa foi extraída com EtO- Ac. As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura, secas em MgSO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida, dando origem a 1-(6,7-difluoro-1H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)etanona 13a (1,6 g).
[0091] Uma solução de tribrometo de feniltrimetilamônio [CAS 4207-56-1] (2,3 g, 6,06 mmol) em THF (45 mL) foi adicionada gota a gota a 0 °C a uma solução de 1-(6,7-difluoro-1 H-indol-3-il)-2-(4-fluoro- 2-metoxifenil)etanona 13a (1,8 g, 5,57 mmol) em THF (55 mL). A mistura foi agitada a 0 °C durante 15 min e à temperat ura ambiente durante a noite. O precipitado foi separado por filtração e lavado com EtOAc. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi absorvido com um mínimo de acetonitrila. O precipitado foi removido por filtração, dando origem a 2-bromo-1-(6,7-difluoro-1H-indol-3-il)-2-(4- fluoro-2-metoxifenil)etanona 13b (2,0 g).
[0092] Uma mistura de 2-bromo-1-(6,7-difluoro-1H-indol-3-il)-2-(4- fluoro-2-metoxifenil)etanona 13b (1,3 g, 3,29 mmol) e 3-metoxi-5- (metilsulfonil)anilina [CAS 62606-02-4] (2,0 g, 9,91 mmol) em acetoni- trila (13 mL) foi irradiada em um forno de micro-ondas a 100 °C durante 10 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc, lavada com HCl 1 N e salmoura, seca em MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi triturado com acetonitrila, acetato de etila e éter de dietila, dando origem a 1-(6,7-difluoro-1H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2- metoxifenil)-2-((3-metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 13, 750 mg) na forma de uma mistura racêmica.
[0093] Foi realizada separação quiral dos enantiômeros do Composto 13 (1,27 g) via SFC Quiral Preparativa (Fase estacionária: Chi- ralpak® IC 5 μm 250 x 30 mm, Fase móvel: CO2 70%, MeOH 30%) originando, após cristalização a partir de CH2Cl2/éter de di-isopropila, 409 mg do enantiômero que eluiu em primeiro lugar (Enantiômero 13A) e 385 mg do enantiômero que eluiu em segundo lugar (Enantiômero 13B). Composto 13: 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,98 (s, 3 H) 6,27 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 6,56 - 6,63 (m, 2 H) 6,74 (td, J=8,4, 2,4 Hz, 1 H) 6,92 (s, 1 H) 6,96 (dd, J=11,3, 2,4 Hz, 1 H) 7,06 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 7,25 (m, 1 H) 7,36 (dd, J=8,6, 6,9 Hz, 1 H) 7,93 (dd, J=8,8, 4,4 Hz, 1 H) 8,51 (d, J= 2,8 Hz, 1 H) 12,8 (s l, 1 H) LC-MS (método LC-F) Tr 1,41 min, MH+ 519 Enantiômero 13A: 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 12,80 (s l, 1 H) 8,50 (s., 1 H) 7,93 (m, 1 H) 7,37 (t, J=7,3 Hz, 1 H) 7,16 - 7,29 (m, 1 H) 7,06 (d, J=7,3 Hz, 1 H) 6,86 - 6,99 (m, 2 H) 6,74 (t, J=7,3 Hz, 1 H) 6,60 (m, 2 H) 6,26 (d, J=7,3 Hz, 1 H) 3,98 (s., 3 H) 3,73 (s., 3 H) 3,10 (s., 3 H) LC/MS (método LC-C): Tr 3,05 min, MH+ 519 [α]D20: -47,8° (c 0,2827, DMF) SFC quiral (método SFC-A): Rt 2,52 min, MH+ 519, pureza quiral 100%. Ponto de fusão: 226°C Enantiômero 13B: 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 12,78 (s l, 1 H) 8,49 (s, 1 H) 7,92 (dd, J=8,7, 4,3 Hz, 1 H) 7,36 (t, J=7,7 Hz, 1 H) 7,16 - 7,28 (m, 1 H) 7,04 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 6,86 - 6,99 (m, 2 H) 6,74 (td, J=8,5, 1,9 Hz, 1 H) 6,54 - 6,65 (m, 2 H) 6,26 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 3,98 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,09 (s, 3 H) LC/MS (método LC-C): Tr 3,05 min, MH+ 519 [α]D20: +48,2° (c 0,3009, DMF) SFC quiral (método SFC-A): Rt 3,04 min, MH+ 519, pureza quiral 99,57%. Ponto de fusão: 222°C Exemplo 14: síntese de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(6-fluoro-5-metil- 1H-indol-3-il)-2-((3-metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Com- posto 14) e separação quiral nos Enantiômeros 14A e 14B.
[0094] Uma solução de 6-fluoro-5-metil-1H-indol [CAS 162100-950] (880 mg, 5,9 mmol) em CH2Cl2 (50 mL) foi resfriada para 0 °C sob atmosfera de N2. Uma solução de cloreto de dietilalumínio 1 M em hexano (8,85 mL, 8,85 mmol) foi adicionada gota a gota e a mistura resultante foi mantida a 0 °C durante 15 min. Uma sol ução de cloreto de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)acetila 1a (1,67 g, 8,26 mmol) em CH2Cl2 (25 mL) foi adicionada gota a gota. Continuou-se a agitação a 0 °C durante 1 h e a mistura reacional foi subsequentemente agitada à temperatura ambiente durante 2 h. A mistura reacional foi vertida em uma solução com agitação de gelo/sal de Rochelle. A mistura foi filtrada em Dicali- te® e o bolo de filtração foi lavado várias vezes com THF. Os filtrados foram combinados. As camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada com salmoura e água, seca em MgSO4, filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O resíduo sólido foi suspenso em CH2Cl2 (30 mL). O precipitado foi removido por filtração, lavado com uma pequena quantidade de CH2Cl2 e seco sob vácuo a 50 °C, dando origem a 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(6-fluoro-5-metil-1H-indol-3-il)etanona 14a (1,22 g).
[0095] solução agitada de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(6-fluoro-5- metil-1H-indol-3-il)etanona 14a (1,22 g, 3,87 mmol) em THF (125 mL) foi resfriada para 0 °C. Uma solução de tribrometo de feniltrimetilamô- nio [CAS 4207-56-1] (1,6 g, 4,26 mmol) em THF (25 mL) foi adicionada gota a gota. A mistura reacional foi agitada a 0 °C durante 2 h e à temperatura ambiente durante 2 h. Os sólidos foram removidos por filtração e lavados com THF. Os filtrados combinados foram evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi misturado com EtOAc (50 mL). Os sólidos foram isolados por filtração, lavados com uma pequena quantidade de EtOAc e secos sob vácuo a 50 °C, dando orig em a 2-bromo- 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(6-fluoro-5-metil-1H-indol-3-il)etanona 14b (1,48 g), que foi usado sem purificação adicional na etapa seguinte.
[0096] Uma mistura de 2-bromo-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(6- fluoro-5-metil-1H-indol-3-il)etanona 14b (1,5 g, 3,65 mmol), 3-metoxi-5- (metilsulfonil)anilina [CAS 62606-02-4] (1,10 g, 5,48 mmol) e di- isopropiletilamina (629 μL, 3,65 mmol) em CH3CN (100 mL) foi agitada a 85 °C durante a noite. A mistura reacional foi co ncentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em CH2Cl2 (100 mL), lavado com HCl 1 N (100 mL) e água (100 mL), seco em MgSO4, filtrado e evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por croma- tografia Flash em sílica (Fase estacionária: sílica Grace Reveleris® 120 g, Fase móvel: gradiente de EtOAc:EtOH (3:1)/heptano 0/100 a 50/50). As frações desejadas foram combinadas e evaporadas sob pressão reduzida. O sólido residual foi agitado em CH2Cl2 (20 mL). O precipitado foi removido por filtração e lavado com CH2Cl2. O sólido foi agitado em MeOH (20 mL). O precipitado foi removido por filtração e lavado com MeOH. O sólido (630 mg) foi adicionalmente purificado via HPLC preparativa (Fase estacionária: Uptisphere® C18 ODB - 10 μm, 200 g, 5 cm, Fase móvel: solução de NH4HCO3 a 0,25% em água, CH3CN). As frações desejadas foram combinadas, evaporadas sob pressão reduzida, e coevaporadas com EtOAc (20 mL), dando origem a 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(6-fluoro-5-metil-1H-indol-3-il)-2-((3- metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 14, 426 mg) na forma de uma mistura racêmica.
[0097] Foi realizada separação quiral dos enantiômeros do Composto 14 (426 mg) via SFC preparativa (Fase estacionária: Chiralpak® Diacel AD 20 x 250 mm, Fase móvel: CO2, EtOH + iPrNH2 0,4%). As frações de produto foram combinadas e evaporadas, dando origem ao Enantiômero 14A como primeiro produto a eluir e Enantiômero 14B como segundo produto a eluir. Ambos os enantiômeros 14A e 14B foram solidificados do modo seguinte: os resíduos da evaporação foram agitados em H2O/MeOH 1/1 (5 mL) durante 1 h, O precipitado foi isolado por filtração, lavado com H2O/MeOH 1/1 e seco sob vácuo a 50 °C, dando origem ao Enantiômero 14A (113 mg) e Enantiômero 14B (97 mg) na forma de pós brancos. Composto 14: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 2,30 (d, J=1,3 Hz, 3 H) 3,08 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,21 (d, J=7,7 Hz, 1 H) 6,58 (d, J=1,8 Hz, 2 H) 6,73 (td, J=8,5, 2,5 Hz, 1 H) 6,91 (t, J=1,8 Hz, 1 H) 6,95 (dd, J=11,4, 2,4 Hz, 1 H) 6,99 (d, J=7,7 Hz, 1 H) 7,22 (d, J=10,3 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J=8,6, 6,8 Hz, 1 H) 8,03 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 8,37 (s, 1 H) 11,95 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-B): Tr 2,07 min, MH+ 515 Enantiômero 14A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 2,30 (d, J=1,5 Hz, 3 H) 3,08 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,21 (d, J=7,7 Hz, 1 H) 6,58 (d, J=1,5 Hz, 2 H) 6,73 (td, J=8,5, 2,6 Hz, 1 H) 6,91 (t, J=1,7 Hz, 1 H) 6,95 (dd, J=11,3, 2,5 Hz, 1 H) 6,98 (d, J=7,7 Hz, 1 H) 7,22 (d, J=10,3 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J=8,6, 6,8 Hz, 1 H) 8,03 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 8,37 (s, 1 H) 11,95 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-B): Tr 2,06 min, MH+ 515 [α]D20: +150,0° (c 0,51, DMF) SFC quiral (método SFC-J): Rt 3,49 min, MH+ 515, pureza quiral 100%. Enantiômero 14B: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 2,31 (d, J=1,3 Hz, 3 H) 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,21 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 6,59 (d, J=1,8 Hz, 2 H) 6,73 (td, J=8,5, 2,4 Hz, 1 H) 6,92 (t, J=1,8 Hz, 1 H) 6,95 (dd, J=11,4, 2,4 Hz, 1 H) 6,99 (d, J=7,7 Hz, 1 H) 7,22 (d, J=10,3 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J=8,6, 7,0 Hz, 1 H) 8,03 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 8,37 (s, 1 H) 11,95 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-B): Tr 2,06 min, MH+ 515 [α]D20: -137,3° (c 0,52, DMF) SFC quiral (método SFC-J): Rt 3,85 min, MH+ 515, pureza quiral 100%. Exemplo 15: síntese de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-2-((3-metoxi-5- (metilsulfonil)fenil)amino)-1-(5-metil-1H-indol-3-il)etanona (Composto 15) e separação quiral nos Enantiômeros 15A e 15B.
[0098] Uma solução 5-metil-1H-indol [CAS 614-96-0] (5 g, 38,1 mmol) em CH2Cl2 (100 mL) foi resfriada para -10 °C sob atmosfera d e N2. Uma solução de cloreto de dietilalumínio 1 M em hexano (57,2 mL, 57,2 mmol) foi adicionada gota a gota e a mistura resultante foi mantida a -10°C durante 10 min. Uma solução de cloreto d e 2-(4-fluoro-2- metoxifenil)acetila 1a (11,6 g, 57,2 mmol) em CH2Cl2 (100 mL) foi adi-cionada gota a gota. A mistura reacional foi agitada à temperatura am-biente durante 3,5 h. A mistura reacional foi vertida em uma solução com agitação de gelo/sal de Rochelle. A mistura foi filtrada em Dicalite® e o bolo de filtração foi lavado várias vezes com THF. Os filtrados foram combinados. As camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada com água, seca em MgSO4, filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O resíduo sólido foi suspenso em CH2Cl2 (30 mL). O precipitado foi removido por filtração, lavado (2x) com uma pequena quantidade de CH2Cl2 e seco sob vácuo a 50 °C, dando origem a 2-(4- fluoro-2-metoxifenil)-1-(5-metil-1H-indol-3-il)etanona 15a (7,19 g).
[0099] Uma solução agitada de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5- metil-1H-indol-3-il)etanona 15a (7,19 g, 24,2 mmol) em THF (500 mL) foi resfriada para 0 °C. Uma solução de tribrometo de feniltrimetilamô- nio [CAS 4207-56-1] (10 g, 26,6 mmol) em THF (150 mL) foi adicionada gota a gota. A mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente durante 4 h. Os sólidos foram removidos por filtração e lavados com THF. Os filtrados combinados foram evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi misturado com EtOAc (50 mL). Os sólidos foram isolados por filtração, lavados com uma pequena quantidade de EtOAc e secos sob vácuo a 50 °C, dando origem a 2-bromo-2-(4-fluo ro-2-metoxifenil)- 1-(5-metil-1H-indol-3-il)etanona 15b (8,02 g).
[00100] Uma mistura de 2-bromo-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5- metil-1H-indol-3-il)etanona 15b (3,5 g, 9,3 mmol), 3-metoxi-5- (metilsulfonil)anilina [CAS 62606-02-4] (2,81 g, 14 mmol) e di- isopropiletilamina (1,60 mL, 9,3 mmol) em CH3CN foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A temperatura reacional foi aumentada para 80 °C durante 1 h e a mistura foi subsequentem ente agitada de novo à temperatura ambiente durante 2 dias. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em CH2Cl2 (100 mL), lavado com HCl 1 N (100 mL) e salmoura (100 mL), seco em MgSO4, filtrado e evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (Fase estacionária: sílica Grace Reveleris® 120 g, Fase móvel: gradiente de EtOAc/heptano 35/65 até 45/55). As frações desejadas foram combinadas e evaporadas sob pressão reduzida. O resíduo (3,96 g) foi adicionalmente purificado via HPLC preparativa (Fase estacionária: Uptisphere® C18 ODB - 10 μm, 200 g, 5 cm, Fase móvel: solução de NH4HCO3 a 0,25% em água, CH3CN). As frações desejadas foram combinadas, evaporadas sob pressão reduzida, e coevaporadas com EtOAc (20 mL). O sólido residual foi agitado em uma mistura de MeOH (5 mL) e água (5 mL) durante 1 h. O precipitado foi removido por filtração e seco sob vácuo, dando origem a 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-2-((3-metoxi-5- (metilsulfonil)fenil)amino)-1-(5-metil-1H-indol-3-il)etanona (Composto 15, 1,92 g) na forma de uma mistura racêmica.
[00101] Foi realizada separação quiral dos enantiômeros do Composto 15 (1,50 g) via separação Quiral de Fase Normal (Fase estacionária: AS 20 μm, Fase móvel: metanol 100%). As frações de produto foram combinadas e evaporadas, dando origem ao Enantiômero 15A (742 mg) como primeiro produto a eluir e Enantiômero 15B (745 mg) como segundo produto a eluir. O Enantiômero 15A foi adicionalmente purificado por cromatografia em coluna em sílica (fase estacionária: sílica Grace Reveleris® 40 g, Fase móvel: gradiente de CH2Cl2/MeOH 100/0 a 90/10). As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas. O resíduo sólido foi agitado em MeOH/água (1/1) (14 mL) durante 2 h. O precipitado foi removido por filtração e seco sob vácuo a 50 °C, dando origem ao Enantiômero 15A (361 mg) na forma de um pó branco. O Enantiômero 15B foi agitado em MeOH/água (1/1) (14 mL) durante 5 h. O precipitado foi removido por filtração e seco sob vácuo a 50 °C, dando origem ao Enantiômero 15B (445 mg) na forma de um pó branco. Composto 15: 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 2,39 (s, 3 H) 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 4,00 (s, 3 H) 6,22 (d, J=7,7 Hz, 1 H) 6,55 - 6,62 (m, 2 H) 6,73 (td, J=8,5, 2,4 Hz, 1 H) 6,92 (s l, 1 H) 6,96 (dd, J=11,3, 2,6 Hz, 1 H) 6,99 - 7,06 (m, 2 H) 7,31 - 7,39 (m, 2 H) 7,98 (s, 1 H) 8,37 (s, 1 H) 11,94 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-A): Tr 1,09 min, MH+ 497 Enantiômero 15A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 2,39 (s, 3 H) 3,08 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 4,00 (s, 3 H) 6,21 (d, J=7,7 Hz, 1 H) 6,56 - 6,61 (m, 2 H) 6,72 (td, J=8,5, 2,4 Hz, 1 H) 6,92 (t, J=1,7 Hz, 1 H) 6,95 (dd, J=11,2, 2,4 Hz, 1 H) 6,99 (d, J=7,7 Hz, 1 H) 7,04 (dd, J=8,4, 1,3 Hz, 1 H) 7,32 - 7,39 (m, 2 H) 7,98 (s, 1 H) 8,36 (s, 1 H) 11,92 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-B): Tr 2,03 min, MH+ 497 [α]D20: +149,8° (c 0,49, DMF) SFC quiral (método SFC-J): Rt 3,67 min, MH+ 497, pureza quiral 100%. Enantiômero 15B: 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 2,39 (s, 3 H) 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 4,00 (s, 3 H) 6,21 (d, J=7,7 Hz, 1 H) 6,55 - 6,61 (m, 2 H) 6,73 (td, J=8,5, 2,4 Hz, 1 H) 6,92 (t, J=1,6 Hz, 1 H) 6,96 (dd, J=11,3, 2,2 Hz, 1 H) 7,00 - 7,06 (m, 2 H) 7,31 - 7,39 (m, 2 H) 7,98 (s, 1 H) 8,37 (s, 1 H) 11,95 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-B): Tr 2,03 min, MH+ 497 [α]D20: -149,3° (c 0,515, DMF) SFC quiral (método SFC-J): Rt 4,06 min, MH+ 497, pureza quiral 99,6%. Exemplo 16: síntese de 1-(5-cloro-6-metoxi-1 H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2- metoxifenil)-2-((3-metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 16) e separação quiral nos Enantiômeros 16A e 16B.
[00102] Uma solução 5-cloro-6-metoxi-1H-indol [CAS 90721-60-1] (4 g, 22 mmol) em CH2Cl2 (150 mL) foi resfriada para 0 °C sob atmosfera de N2. Uma solução de cloreto de dietilalumínio 1 M em hexano (33 mL, 33 mmol) foi adicionada gota a gota e a mistura resultante foi mantida a 0 °C durante 15 min. Uma solução de cloreto de 2-(4-fluoro- 2-metoxifenil)acetila 1a (6,25 g, 30,8 mmol) em CH2Cl2 (50 mL) foi adi-cionada gota a gota. A mistura reacional foi agitada a 0 °C durante 1 h e subsequentemente à temperatura ambiente durante 1 h. A mistura reacional foi vertida em uma solução com agitação de gelo/sal de Ro-chelle. A mistura foi filtrada em Dicalite® e o bolo de filtração foi lavado várias vezes com THF. Os filtrados foram combinados. As camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada com salmoura, seca em MgSO4, filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi misturado com CH2Cl2 (50 mL). Os sólidos foram removidos por filtração e secos sob vácuo a 50 °C, dando origem a 1-(5- cloro-6-metoxi- 1H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)etanona 16a (4,01 g) na forma de um pó. O filtrado foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi recolhido com CH2Cl2 (10 mL). Os sólidos foram removidos por filtração e secos sob vácuo a 50 °C, dando origem a uma s egunda colheita de 16a (369 mg).
[00103] Uma solução agitada de 1-(5-cloro-6-metoxi-1H-indol-3-il)- 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)etanona 16a (3,5 g, 8,96 mmol) em THF (500 mL) foi resfriada para 0 °C. Uma solução de tribrom eto de feniltrimeti- lamônio [CAS 4207-56-1] (3,7 g, 9,85 mmol) em THF (100 mL) foi adicionada gota a gota. A mistura reacional foi agitada sob resfriamento (0 °C) durante 5 h e subsequentemente à temperatura ambiente durante 2 h. Os sólidos foram removidos por filtração e lavados com THF. Os filtrados combinados foram evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi misturado com EtOAc (50 mL). Os sólidos foram isolados por filtração, lavados com uma pequena quantidade de EtOAc e secos sob vácuo a 50 °C, dando origem a 2-bromo-1-(5-cloro-6-metoxi-1H- indol-3-il)-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)etanona 16b (3,02 g).
[00104] Uma mistura 2-bromo-1-(5-cloro-6-metoxi-1H-indol-3-il)-2- (4-fluoro-2-metoxifenil)etanona 16b (3,02 g, 6,58 mmol), 3-metoxi-5- (metilsulfonil)anilina [CAS 62606-02-4] (1,81 g, 8,99 mmol) e di- isopropiletilamina (1,13 mL, 6,58 mmol) em CH3CN (120 mL) foi agitada durante a noite a 60 °C. A temperatura reacional foi aumentada para 80 °C durante 8 h e finalmente para 90 °C com ag itação durante a noite. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em CH2Cl2 (100 mL), lavado com HCl 1 N (100 mL) e água (100 mL), seco em MgSO4, filtrado e evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de HPLC Preparativa (Fase estacionária: RP XBridge® Prep C18 OBD - 10 μm, 50 x 150 mm, Fase móvel: solução de NH4HCO3 a 0,25% em água, CH3CN). As frações desejadas foram combinadas e evaporadas sob pressão reduzida. O resíduo foi agitado em EtOAc (20 mL). Os sólidos foram isolados por filtração, dando origem a uma primeira colheita de 1-(5-cloro-6-metoxi- 1H-indol-3-il)-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-2-((3-metoxi-5- (metilsulfonil)fenil)amino)etanona (Composto 16, 309 mg) na forma de uma mistura racêmica. O filtrado foi evaporado sob pressão reduzida. MeOH foi adicionado e a suspensão resultante foi agitada durante 30 min. Os sólidos foram removidos por filtração, dando origem a uma segunda colheita de Composto 16 racêmico (423 mg).
[00105] Foi realizada separação quiral dos enantiômeros do Composto 16 (493 mg) via separação Quiral de Fase Normal (Fase estacionária: AS 20 μm, Fase móvel: metanol 100%). As frações de produto foram combinadas e evaporadas, dando origem ao Enantiômero 16A como primeiro produto a eluir e Enantiômero 16B como segundo produto a eluir. O Enantiômero 16A foi agitado em MeOH (5 mL) durante 30 min. O precipitado foi removido por filtração, lavado com MeOH (2x 2 mL) e seco sob vácuo a 50 °C, dando origem ao Ena ntiômero 16A (156 mg) na forma de um pó branco. O Enantiômero 16B foi agitado em MeOH (5 mL) durante 30 min. O precipitado foi removido por filtração, lavado com MeOH (2x 2 mL) e seco sob vácuo a 50 °C, dando origem ao Enantiômero 16B (146 mg) na forma de um pó branco. Composto 16: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,08 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,87 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,20 (d, J=7,7 Hz, 1 H) 6,59 (d, J=1,3 Hz, 2 H) 6,73 (td, J=8,5, 2,4 Hz, 1 H) 6,91 (t, J=1,8 Hz, 1 H) 6,96 (dd, J=11,4, 2,4 Hz, 1 H) 7,01 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 7,14 (s, 1 H) 7,36 (dd, J=8,6, 6,8 Hz, 1 H) 8,12 (s, 1 H) 8,35 (s, 1 H) 11,98 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-B): Tr 2,02 min, MH+ 547 Enantiômero 16A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,08 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,86 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,20 (d, J=7,7 Hz, 1 H) 6,55 - 6,62 (m, 2 H) 6,73 (td, J=8,5, 2,4 Hz, 1 H) 6,90 (t, J=1,2 Hz, 1 H) 6,95 (dd, J=11,3, 2,5 Hz, 1 H) 7,00 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 7,14 (s, 1 H) 7,36 (dd, J=8,6, 6,8 Hz, 1 H) 8,11 (s, 1 H) 8,34 (s, 1 H) 11,97 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-A): Tr 1,10 min, MH+ 547 [α]D20: +138,1° (c 0,565, DMF) SFC quiral (método SFC-J): Rt 4,17 min, MH+ 547, pureza quiral 100%. Ponto de fusão: 252°C Enantiômero 16B: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,08 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,86 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,20 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 6,58 (d, J=1,3 Hz, 2 H) 6,73 (td, J=8,5, 2,4 Hz, 1 H) 6,91 (t, J=1,5 Hz, 1 H) 6,95 (dd, J=11,4, 2,4 Hz, 1 H) 7,00 (d, J=7,7 Hz, 1 H) 7,14 (s, 1 H) 7,36 (dd, J=8,6, 7,0 Hz, 1 H) 8,11 (s, 1 H) 8,34 (s, 1 H) 11,98 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-A): Tr 1,11 min, MH+ 547 [α]D20: -121,7° (c 0,545, DMF) SFC quiral (método SFC-J): Rt 4,57 min, MH+ 547, pureza quiral 100%. Ponto de fusão: 253°C Exemplo 17: síntese de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-2-((3-metoxi-5- (metilsulfonil)fenil)amino)-1-(5-(trifluorometil)-1H-indol-3-il)etanona (Composto 17) e separação quiral nos Enantiômeros 17A e 17B.
[00106] A 0 °C, sob um fluxo de N 2, adicionou-se em porções hidre- to de sódio (2,48 g, 64,81 mmol) a uma mistura de 5-(trifluorometil)- 1H-indol [CAS 100846-24-0] (10 g, 54,01 mmol) em DMF (150 mL) e a mistura foi agitada a 0 °C durante 30 min. Uma solu ção de cloreto de tosila (11,3 g, 59,4 mmol) em DMF (50 mL) foi adicionada gota a gota e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h. Após resfriamento para 0 °C, a reação foi extinta p ela adição de água. O precipitado resultante foi removido por filtração e seco sob vácuo a 70 °C durante a noite, dando origem a 1-tosil-5-(trifluorometil)-1H-indol 17a (18,4 g).
[00107] Cloreto de titânio(IV) (2,32 mL, 21,2 mmol) foi adicionado gota a gota à temperatura ambiente a uma solução agitada de 1-tosil- 5-(trifluorometil)-1H-indol 17a (3,6 g, 10,6 mmol) e cloreto de 2-(4- fluoro-2-metoxifenil)acetila 1a (3,85 g, 19 mmol, síntese: ver Exemplo 1) em 1,2-dicloroetano (70 mL). A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. Adicionou-se água gelada. A mistura reacional foi extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca em MgSO4, filtrada, e o solvente foi concentrado sob pressão reduzida. O composto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em sílica gel (15-40 μm, 80 g, CH2Cl2/MeOH 99,5/0,5). As frações contendo o Composto 17b foram combinadas e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O composto foi agitado em CH3CN/éter de di-isopropila. O precipitado foi removido por filtração e seco, dando origem a 2-(4-fluoro-2- metoxifenil)-1-(1-tosil-5-(trifluorometil)-1H-indol-3-il)etanona 17b (3 g).
[00108] Hidróxido de lítio (0,66 g, 15,8 mmol) foi adicionado a uma solução de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(1-tosil-5-(trifluorometil)-1H- indol-3-il)etanona 17b (3,2 g, 6,33 mmol) em THF (18 mL) e água (6 mL). A mistura foi agitada a 30 °C durante 1 h. Adi cionaram-se água e EtOAc. A camada orgânica foi separada, seca sobre MgSO4, filtrada, e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo sólido foi agitado em éter de di-isopropila. O precipitado foi removido por filtração e seco, dando origem a 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5- (trifluorometil)-1H-indol-3-il)etanona 17c (2,1 g).
[00109] A 0 °C, uma solução de tribrometo de fenilt rimetilamônio [CAS 4207-56-1] (1,6 g, 4,27 mmol) em THF (50 mL) foi adicionada gota a gota a uma mistura de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5- (trifluorometil)-1H-indol-3-il)etanona 17c (1,5 g, 4,27 mmol) em THF (50 mL). A mistura foi agitada a 0 °C durante 1 h e à temperatura ambiente durante 4 h. O precipitado foi separado por filtração e lavado com EtOAc. Os filtrados combinados foram concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em EtOAc. A camada orgânica foi lavada com água, seca em MgSO4, filtrada, e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi agitado em éter de di-isopropila. O precipitado foi removido por filtração e seco, dando origem a 2-bromo- 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5-(trifluorometil)-1H-indol-3-il)etanona 17d (1,8 g).
[00110] Uma mistura de 2-bromo-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5- (trifluorometil)-1H-indol-3-il)etanona 17d (1,2 g, 2,79 mmol), 3-metoxi- 5-(metilsulfonil)anilina [CAS 62606-02-4] (617 mg, 3,07 mmol) e di- isopropiletilamina (0,48 mL, 2,79 mmol) em CH3CN (60 mL) e THF (30 mL) foi agitada a 70 °C durante 24 h. A solução foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em EtOAc e a solução foi lavada com HCl 1 N. A camada orgânica foi separada, seca em MgSO4, filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em sílica gel (15-40 μm, 80 g, CH2Cl2/MeOH 99,5/0,5). As frações contendo o Composto 17 foram combinadas e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O composto foi cristalizado a partir de éter de di-isopropila/CH3CN, dando origem a 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-2-((3-metoxi-5- (metilsulfonil)fenil)amino)-1-(5-(trifluorometil)-1H-indol-3-il)etanona (Composto 17, 410 mg) na forma de uma mistura racêmica.
[00111] Os Enantiômeros do Composto 17 foram separados via SFC preparativa Quiral (Fase estacionária: Chiralpak® AD-H 5 μm 250 x 20 mm, Fase móvel: CO2 75%, iPrOH 25%) dando origem, após cristalização a partir de éter de petróleo/éter de di-isopropila, a 147 mg do enantiômero que eluiu em primeiro lugar 17A e 150 mg do enantiôme- ro que eluiu em segundo lugar 17B. Composto 17: 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,98 (s, 3 H) 6,27 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 6,59 (d, J=1,3 Hz, 2 H) 6,74 (td, J=8,4, 2,4 Hz, 1 H) 6,92 (s, 1 H) 6,97 (dd, J=11,3, 2,5 Hz, 1 H) 7,06 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 7,37 (dd, J=8,5, 6,9 Hz, 1 H) 7,54 (dd, J=8,5, 1,6 Hz, 1 H) 7,69 (d, J=8,5 Hz, 1 H) 8,49 (s, 1 H) 8,60 (s, 1 H) 12,43 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-C): Tr 3,09 min, MH+ 551 Ponto de fusão: 160°C Enantiômero 17A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,98 (s, 3 H) 6,27 (d, J=7,6 Hz, 1 H) 6,59 (d, J=1,5 Hz, 2 H) 6,74 (td, J=8,5, 2,3 Hz, 1 H) 6,92 (s, 1 H) 6,96 (dd, J=11,4, 2,3 Hz, 1 H) 7,04 (d, J=7,6 Hz, 1 H) 7,37 (dd, J=8,6, 7,1 Hz, 1 H) 7,53 (dd, J=8,6, 1,5 Hz, 1 H) 7,69 (d, J=8,6 Hz, 1 H) 8,49 (s, 1 H) 8,59 (s, 1 H) 12,39 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-C): Tr 3,13 min, MH+ 551 [α]D20: -119,3° (c 0,2364, DMF) SFC quiral (método SFC-H): Rt 3,40 min, MH+ 551, pureza quiral 100%. Ponto de fusão: 231°C Enantiômero 17B: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,09 (s, 3 H) 3,73 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,27 (d l, J=8,1 Hz, 1 H) 6,59 (s, 2 H) 6,74 (td, J=8,2, 2,3 Hz, 1 H) 6,92 (s, 1 H) 6,96 (d l, J=11,6 Hz, 1 H) 7,05 (d l, J=8,1 Hz, 1 H) 7,33 - 7,41 (m, 1 H) 7,54 (d l, J=8,6 Hz, 1 H) 7,69 (d l, J=8,6 Hz, 1 H) 8,49 (s, 1 H) 8,60 (s, 1 H) 12,37 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-C): Tr 3,13 min, MH+ 551 [α]D20: +112,8° (c 0,2545, DMF) SFC quiral (método SFC-H): Rt 4,45 min, MH+ 551, pureza quiral 100%. Ponto de fusão: 230°C Exemplo 18: síntese de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-2-((3-metoxi-5- (metilsulfonil)fenil)amino)-1-(5-(trifluorometoxi)-1H-indol-3-il)etanona (Composto 18) e separação quiral nos Enantiômeros 18A e 18B.
[00112] Uma solução de 5-(trifluorometoxi)-1H-indol [CAS 26259363-5] (5 g, 24,9 mmol) em CH2Cl2 (150 mL) foi resfriada para 0 °C sob atmosfera de N2. Uma solução de cloreto de dietilalumínio 1 M em hexano (37,3 mL, 37,3 mmol) foi adicionada gota a gota e a mistura resultante foi mantida a 0 °C durante 15 min. Uma sol ução de cloreto de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)acetila 1a (7,05 g, 34,8 mmol) em CH2Cl2 (50 mL) foi adicionada gota a gota. Continuou-se a agitação a 0 °C durante 1 h e à temperatura ambiente durante 1,5 h. A mistura reacional foi vertida em uma solução com agitação de gelo/sal de Rochelle. Depois de o gelo ter fundido, a mistura foi filtrada em Dicalite® e o bolo de filtração foi lavado várias vezes com THF. Os filtrados foram combinados. As camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada com salmoura, seca em MgSO4, filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi triturado com CH2Cl2 (50 mL) e o precipitado foi removido por filtração, dando origem a 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5- (trifluorometoxi)-1H-indol-3-il)etanona 18a (7,36 g). O filtrado foi concentrado sob vácuo e o resíduo sólido foi agitado em CH2Cl2 (10 mL). A filtração dos sólidos proporcionou uma segunda colheita de 18a (431 mg).
[00113] Uma solução agitada de 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5- (trifluorometoxi)-1H-indol-3-il)etanona 18a (7,35 g, 20,0 mmol) em THF (200 mL) foi resfriada para 0 °C. Uma solução de tr ibrometo de fenil- trimetilamônio [CAS 4207-56-1] (8,28 g, 22,0 mmol) em THF (100 mL) foi adicionada gota a gota. A suspensão resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. Os sólidos foram removidos por filtração e lavados com THF. Os filtrados combinados foram evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi misturado com EtOAc (30 mL). Os sólidos foram isolados por filtração, lavados com uma pequena quantidade de EtOAc e secos sob vácuo a 50 °C, dando origem a 2-bromo-2- (4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5-(trifluorometoxi)-1H-indol-3-il)etanona 18b (7,8 g).
[00114] Uma mistura de 2-bromo-2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-1-(5- (trifluorometoxi)-1H-indol-3-il)etanona 18b (3 g, 6,72 mmol), 3-metoxi- 5-(metilsulfonil)anilina [CAS 62606-02-4] (1,85 g, 9,18 mmol) e di- isopropiletilamina (1,16 mL, 6,72 mmol) em CH3CN (120 mL) foi agitada a 90 °C durante 24 h. A mistura reacional foi co ncentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em CH2Cl2 (100 mL), lavado com HCl 1 N (100 mL) e água (100 mL), seco em MgSO4, filtrado e evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por croma- tografia em coluna em sílica (Fase estacionária: sílica Grace Revele- ris® 120 g, Fase móvel: gradiente de EtOAc:EtOH (3:1)/heptano 0/100 até 50/50). As frações desejadas foram combinadas e evaporadas sob pressão reduzida. O resíduo foi agitado em EtOAc (20 mL). Os sólidos foram isolados por filtração e secos sob vácuo a 50 °C, dando origem a 2-(4-fluoro-2-metoxifenil)-2-((3-metoxi-5-(metilsulfonil)fenil)amino)-1- (5-(trifluorometoxi)-1H-indol-3-il)etanona (Composto 18, 608 mg) na forma de uma mistura racêmica.
[00115] Foi realizada separação quiral dos enantiômeros do Composto 18 (578 mg) via separação Quiral de Fase Normal (Fase estacionária: AS 20 μm, Fase móvel: metanol 100%). As frações de produto foram combinadas e evaporadas, dando origem ao Enantiômero 18A como primeiro produto a eluir e Enantiômero 18B como segundo produto a eluir. O Enantiômero 18A foi precipitado por agitação durante a noite a partir de MeOH/água. O precipitado foi removido por filtração e seco sob vácuo a 50 °C, dando origem ao Enantiômero 18A (123 mg) na forma de um pó branco. O Enantiômero 18B foi precipitado por agitação durante a noite a partir de MeOH/água. O precipitado foi removido por filtração e seco sob vácuo a 50 °C, dando origem ao Enantiô- mero 18B (91 mg) na forma de um pó branco. Composto 18: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,09 (s, 3 H) 3,73 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,25 (d, J=7,7 Hz, 1 H) 6,59 (d, J=1,3 Hz, 2 H) 6,74 (td, J=8,5, 2,5 Hz, 1 H) 6,92 (t, J=1,3 Hz, 1 H) 6,96 (dd, J=11,2, 2,4 Hz, 1 H) 7,05 (d, J=7,7 Hz, 1 H) 7,21 (dd, J=8,7, 1,9 Hz, 1 H) 7,38 (dd, J=8,6, 6,8 Hz, 1 H) 7,59 (d, J=8,8 Hz, 1 H) 8,07 (s l, 1 H) 8,54 (s, 1 H) 12,28 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-B): Tr 2,13 min, MH+ 567 Enantiômero 18A: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,25 (d, J=7,7 Hz, 1 H) 6,59 (d, J=1,5 Hz, 2 H) 6,74 (td, J=8,5, 2,5 Hz, 1 H) 6,91 (t, J=1,7 Hz, 1 H) 6,96 (dd, J=11,2, 2,4 Hz, 1 H) 7,04 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 7,21 (dd, J=8,8, 2,0 Hz, 1 H) 7,37 (dd, J=8,7, 6,9 Hz, 1 H) 7,59 (d, J=8,8 Hz, 1 H) 8,07 (d, J=1,1 Hz, 1 H) 8,54 (s, 1 H) 12,29 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-B): Tr 2,12 min, MH+ 567 [α]D20: +112,0° (c 0,465, DMF) SFC quiral (método SFC-J): Rt 2,85 min, MH+ 547, pureza quiral 100%. Ponto de fusão: 215°C Enantiômero 18B: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Δ ppm 3,09 (s, 3 H) 3,72 (s, 3 H) 3,99 (s, 3 H) 6,25 (d, J=7,7 Hz, 1 H) 6,59 (d, J=1,3 Hz, 2 H) 6,74 (td, J=8,5, 2,5 Hz, 1 H) 6,91 (t, J=1,7 Hz, 1 H) 6,96 (dd, J=11,2, 2,4 Hz, 1 H) 7,04 (d, J=7,9 Hz, 1 H) 7,21 (dd, J=8,7, 1,9 Hz, 1 H) 7,37 (dd, J=8,6, 6,8 Hz, 1 H) 7,59 (d, J=8,8 Hz, 1 H) 8,07 (d, J=0,9 Hz, 1 H) 8,54 (s, 1 H) 12,28 (s l, 1 H) LC/MS (método LC-B): Tr 2,12 min, MH+ 567 [α]D20: -116,7° (c 0,425, DMF) SFC quiral (método SFC-J): Rt 3,17 min, MH+ 547, pureza quiral 100%. Ponto de fusão: 214°C
[00116] A atividade antiviral de todos os compostos da invenção foi testada contra a estirpe de DENV-2 16681 que foi marcada com proteína fluorescente verde intensificada (eGFP; Tabela 1). O meio de cultura consiste em meio essencial mínimo suplementado com 2% de soro fetal de bezerro inativado pelo calor, gentamicina a 0,04% (50 mg/mL) e 2 mM de L-glutamina. Células Vero, obtidas da ECACC, foram suspensas em meio de cultura e 25 μL foram adicionados a placas de 384 poços (2500 células/poço), que já contêm os compostos antivirais. Tipicamente, estas placas contêm uma diluição em série de 4 vezes de 9 passos de diluição do composto de teste a 200 vezes a concentração final em DMSO a 100% (200 nL). Adicionalmente, a concentração de cada composto é testada em quadruplicado (gama de concentrações finais: 25 μM - 0,00038 μM). Finalmente, cada placa contém poços que são atribuídos como controles de vírus (contendo células e vírus na ausência de composto), controles de células (contendo células na ausência de vírus e composto) e controles de meio (contendo meio na ausência de células, vírus e compostos). Aos poços atribuídos como controle de meio, 25 μL de meio de cultura foram adi-cionados em vez de células Vero. Assim que as células foram adicio-nadas às placas, as placas foram incubadas durante 30 minutos à temperatura ambiente para permitir que as células se distribuíssem uniformemente dentro dos poços. De seguida, as placas foram incubadas em um incubador totalmente umidificado (37 °C , CO2 a 5%) até ao dia seguinte. Depois, a estirpe de DENV-2 16681, marcada com eGFP, foi adicionada a uma multiplicidade de infecção (MOI) de 0,5. Portanto, 15 μL de suspensão de vírus foram adicionados a todos os poços contendo composto de teste e aos poços atribuídos como controle de vírus. Em paralelo, 15 μL de meio de cultura foram adicionados aos controles de meio e células. De seguida, as placas foram incubadas durante 3 dias em um incubador totalmente umidificado (37 °C, CO 2 a 5%). No dia da leitura, a fluorescência de eGFP foi medida usando um microscópio de fluorescência automatizado a 488 nm (laser azul). Usando um sistema LIMS interno, curvas de resposta à dose de inibição para cada composto foram calculadas e a concentração eficaz semimáxima (EC50) foi determinada. Portanto, a percentagem de inibição (I) para cada concentração de teste é calculada usando a seguinte fórmula: I = 100*(ST-SCC)/(SVC-SCC); ST, SCC e SVC são a quantidade de sinal de eGFP nos poços com compostos de teste, controle de células e controle de vírus, respectivamente. A EC50 representa a concentração de um composto à qual a replicação do vírus é inibida em 50%, como medida por uma redução de 50% da intensidade fluorescente de eGFP em comparação com o controle de vírus. A EC50 é calculada usando interpolação linear.
[00117] Em paralelo, a toxicidade dos compostos foi avaliada nas mesmas placas. Logo que a leitura do sinal de eGFP foi feita, 10 μL de resazurina, uma coloração da viabilidade das células, foram adiciona- dos a todos os poços das placas de 384 poços. O ensaio de resazuri- na é baseado na redução da resazurina azul por NADH, produzido pelas células, no produto altamente fluorescente, resorufina. A formação de resorufina fluorescente rosa está diretamente relacionada com o número de células viáveis no poço. As placas foram incubadas durante 5 dias adicionais em um incubador totalmente umidificado (37 °C, CO 2 a 5%). De seguida, as placas foram medidas em um leitor Infinite (Te- can) usando um comprimento de onda de excitação de 530 nm. A concentração citotóxica semimáxima (CC50) foi também determinada, definida como a concentração requerida para reduzir a conversão de resazurina em 50% em comparação com os poços com controle de células. Finalmente, o índice de seletividade (SI) foi determinado para os compostos, que foi calculado como se segue: SI = CC50/EC50. Tabela 1: EC50, CC50, e SI para os compostos da invenção no ensaio antiviral de DENV-2
N = o número de experiências independentes nas quais os compostos foram testados. Ensaio de PCR quantitativa com transcriptase reversa (RT-qPCR) te-travalente: Protocolo A.
[00118] A atividade antiviral dos compostos da invenção foi testada contra a estirpe de DENV-1 TC974#666 (NCPV; Tabela 6), estirpe de DENV-2 16681 (Tabela 7), estirpe de DENV-3 H87 (NCPV; Tabela 8) e estirpes de DENV-4 H241 (NCPV; Tabela 9) em um ensaio de RT- qPCR. Portanto, células Vero foram infectadas com DENV-1, ou -2, ou -3, ou -4 na presença ou ausência de compostos de teste. Ao dia 3 pós-infecção, as células foram lisadas e os lisatos de células foram usados para preparar cDNA tanto de um alvo viral (a 3'UTR de DENV; tabela 2) como de um gene de referência celular (Β-actina, tabela 2). Subsequentemente, uma PCR em tempo real em dúplex foi realizada em um instrumento Lightcycler480. O valor de Cp gerado é inversamente proporcional à quantidade de expressão de RNA destes alvos. A inibição da replicação de DENV por um composto de teste resulta em um desvio de Cps para o gene de 3'UTR. Por outro lado, se um composto de teste for tóxico para as células, será observado um efeito similar na expressão de β-actina. O método comparativo de ΔΔCp é usado para calcular a EC50, que é baseada na expressão genética relativa do gene alvo (3'UTR) normalizada com o gene de manutenção celular (Β-actina). Tabela 2: Iniciadores e sondas usados para a RT-PCR quantitativa, em tempo real
a Os corantes repórter (FAM , HEX) e elementos extintores (BHQ1) es- tão indicados a negrito e itálico. b A sequência de nucleotídeos dos iniciadores e sondas foi selecionada da região conservada na região 3'UTR do genoma do vírus do dengue, com base no alinhamento de 300 sequências de nucleotídeos dos quatro serotipos do dengue depositados no Genbank (Gong et al., 2013, Methods Mol Biol, Capítulo 16).
[00119] O meio de cultura consistiu em meio essencial mínimo su-plementado com 2% de soro fetal de bezerro inativado pelo calor, gen- tamicina a 0,04% (50 mg/mL) e 2 mM de L-glutamina. Células Vero, obtidas da ECACC, foram suspensas em meio de cultura e 75 μL/poço foram adicionados a placas de 96 poços (10000 células/poço), que já contêm os compostos antivirais. Tipicamente, estas placas contêm uma diluição em série de 4 vezes de 9 passos de diluição do composto de teste a 200 vezes a concentração final em DMSO a 100% (500 nL; gama de concentrações finais: 25 μM - 0,00038 μM). Adicionalmente, cada placa contém poços que são atribuídos como controles de vírus (contendo células e vírus na ausência de composto) e controles de cé-lulas (contendo células na ausência de vírus e composto). Assim que as células foram adicionadas às placas, as placas foram incubadas em um incubador totalmente umidificado (37 °C, CO 2 a 5%) até ao dia seguinte. Então, adicionaram-se a estirpe de DENV-1 TC974#666 a uma MOI de 0,6, estirpe de DENV-2 16681 a uma MOI de 0,01, estirpe de DENV-3 H87 a uma MOI de 1,0 e estirpes de DENV-4 H241 a uma MOI de 0,2 e SG/06K2270DK1/2005 a uma MOI de 0,16. Portanto, 25 μL de suspensão de vírus foram adicionados a todos os poços contendo composto de teste e aos poços atribuídos como controle de vírus. Em paralelo, 25 μL de meio de cultura foram adicionados aos controles de células. De seguida, as placas foram incubadas durante 3 dias em um incubador totalmente umidificado (37 °C, CO 2 a 5%). Após 3 dias, o sobrenadante foi removido dos poços e as células foram lavadas duas vezes com PBS gelado (~100 μL). Os péletes de células dentro das placas de 96 poços foram armazenados a -80 °C durante pelo menos 1 dia. De seguida, o RNA foi extraído usando o estojo de lise Cells-to- CTTM, de acordo com a orientação do fabricante (Applied Biosystems). Os lisatos de células podem ser armazenados a -80 °C ou imediatamente usados no passo de transcrição reversa.
[00120] Na preparação do passo de transcrição reversa, a mistura A (tabela 3A) foi preparada e 7,57 μL/poço foram distribuídos em uma placa de 96 poços. Após adição de 5 μL dos lisatos de células foi realizado um passo de desnaturação de cinco minutos a 75 °C (tabela 3B). De seguida, 7,43 μL de mistura B foram adicionados (tabela 3C) e o passo de transcrição reversa foi iniciado (tabela 3D) para gerar cDNA.
[00121] Finalmente, uma mistura de RT-qPCR foi preparada, mistu- ra C (tabela 4A), distribuída em placas de qPCR LightCycler de 96 poços às quais 3 μL de cDNA foram adicionados e a qPCR foi realizada de acordo com as condições na tabela 4B em um LightCycler 480.
[00122] Usando o software LightCycler e sistema LIMS interno, curvas de resposta à dose para cada composto foram calculadas e a concentração eficaz semimáxima (EC50) e a concentração citotóxica se- mimáxima (CC50) foram determinadas. Tabela 3: Síntese de cDNA usando Mistura A, desnaturação, Mistura B e transcrição reversa.
N = o número de experiências independentes nas quais os compostos foram testados. NA: não aprovado. ND: não determinado. Tabela 7: EC50, CC50, e SI para os compostos contra o serotipo 2 nos ensaios de RT-qPCR 
N = o número de experiências independentes nas quais os compostos foram testados. NA: não aprovado. ND: não determinado. Tabela 8: EC50, CC50, e SI para os compostos contra o serotipo 3 nos ensaios de RT-qPCR 
N = o número de experiências independentes nas quais os compostos foram testados. NA: não aprovado; ND: não determinado. Tabela 9: EC50, CC50, e SI para os compostos contra o serotipo 4 nos ensaios de RT-qPCR 
N = o número de experiências ind ependentes nas quais os compostos foram testados. NA: não aprovado.
Claims (6)
1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula (I)
uma sua forma esteroisomérica, ou um sal farmaceuticamente aceitável; o referido composto é selecionado do grupo em que: R1 é F, R2 é F, CH3 ou OCH3 e R3 é H, R1 é H, R2 é Cl ou F e R3 é CH3, R1 é CH3, R2 é OCH3, F ou H e R3 =H, R1 é H, R2 é Cl ou F e R3 é H, R1 é CH3, R2 é H e R3 é F, R1 é F, R2 é H e R3 é CH3, R1 é H, R2 é OCH3 e R3 é H ou Cl, R1 é H, R2 é F e R3 é F, R1 é CF3 ou OCF3, R2 é H e R3 é H, R1 é Cl, R2 é OCH3 e R3é H.
2. Composto ou uma sua forma esteroisomérica, ou um sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o referido composto é selecionado do grupo:
3. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto da fórmula (I) ou uma sua forma estereoisomérica, ou um sal farmaceuticamente aceitável, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, em conjunto com um ou mais excipientes, diluentes ou transportadores farmaceuticamente aceitáveis.
4. Uso de um composto da fórmula (I) ou uma sua forma estereoisomérica, ou um sal farmaceuticamente aceitável, como definido na reivindicação 1 ou 2, ou uma composição farmacêutica, como definida na reivindicação 3, caracterizado pelo fato de ser para preparação de uma composição ou medicamento.
5. Uso de um composto da fórmula (I) ou uma sua forma estereoisomérica, ou um sal farmaceuticamente aceitável, como definida na reivindicação 1, ou uma composição farmacêutica, como definida na reivindicação 3, caracterizado pelo fato de ser para preparação de uma composição ou medicamento no tratamento do dengue.
6. Uso de um composto representado pela seguinte fórmula estrutural (I)
uma forma esteroisomérica, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; o referido composto é selecionado do grupo em que: R1 é F, R2 é F, CH3 ou OCH3 e R3 é H, R1 é H, R2 é Cl ou F e R3 é CH3, R1 é CH3, R2 é OCH3, F ou H e R3 =H, R1 é H, R2 é Cl ou F e R3 é H, R1 é CH3, R2 é H e R3 é F, R1 é F, R2 é H e R3 é CH3, R1 é H, R2 é OCH3 e R3 é H ou Cl, R1 é H, R2 é F e R3 é F, R1 é CF3 ou OCF3, R2 é H e R3 é H, R1 é Cl, R2 é OCH3 e R3é H caracterizado pelo fato de ser para preparação de uma composição ou medicamento para inibição da replicação de vírus do dengue em uma amostra biológica ou paciente.
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