WO2022111624A1 - 一种苯并咪唑类衍生物及其制备方法和医药用途 - Google Patents

一种苯并咪唑类衍生物及其制备方法和医药用途 Download PDF

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WO2022111624A1
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methyl
alkyl
mmol
oxy
pyridin
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PCT/CN2021/133447
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吴俊军
陆银锁
吴建立
肖瑛
邢伟
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深圳信立泰药业股份有限公司
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems

Definitions

  • the invention belongs to the technical field of chemical medicine, and provides a series of agonists of glucagon-like peptide-1 receptor (GLP-1R).
  • GLP-1R glucagon-like peptide-1 receptor
  • the present invention also relates to pharmaceutical compositions containing these compounds and the use of the compounds in medicines for treating diseases such as diabetes.
  • Diabetes affects millions of people worldwide and is considered one of the major threats to human mortality in the 21st century. Over time, uncontrolled diabetes can damage body systems, including the heart, blood vessels, eyes, kidneys and nerves. Worldwide, the socioeconomic burden of diabetes is high.
  • Type I diabetes is characterized by insulin deficiency, mainly caused by autoimmune-mediated destruction of islet beta cells
  • type II diabetes is characterized by abnormal insulin secretion and consequent insulin resistance.
  • To prevent ketoacidosis patients with type 1 diabetes must take exogenous insulin to survive.
  • type II diabetics are not as dependent on exogenous insulin as type I diabetics, they may require exogenous insulin to control blood sugar levels.
  • GLP-1 Glucagon-like peptide-1
  • GLP-1R GLP-1 receptor
  • GLP-1R GLP-1 receptor
  • GLP-1 receptor agonist is a new type of hypoglycemic drug, which can not only effectively control blood sugar level without causing hypoglycemia, but also increase satiety, delay gastric emptying, suppress appetite and reduce fat. Accumulation, etc., effectively reduce body weight and achieve the purpose of weight loss.
  • GLP-1 receptor agonist-based polypeptide drugs liraglutide, exenatide, semaglutide, etc. have been applied to obese type II diabetic patients and simple obesity or overweight patients, all showing Significantly reduce body weight, but often accompanied by nausea, vomiting and other gastrointestinal adverse reactions.
  • Oral non-polypeptide drugs have always been tried by research institutions for the treatment of type II diabetes and weight loss.
  • glucagon-like peptide-1 receptor small molecule drugs are limited. 's discovery.
  • the present invention aims to discover new non-polypeptide GLP-1 receptor agonists, especially new compounds with good biological properties that can be safely applied to the human body, and the present invention also provides for prevention and/or The tools needed to treat GLP-1 related diseases, especially diabetes related diseases.
  • the invention provides a series of benzimidazole derivatives, their preparation method and their application in medicine.
  • the present invention provides compounds of formula (I), or stereoisomers, tautomers, pharmaceutically acceptable salts thereof, wherein all variables are as defined herein.
  • GLP-1R glucagon-like peptide 1 receptor
  • the present invention realizes through the following technical solutions:
  • A is selected from benzene ring, heteroaromatic ring, 8-10-membered fused aromatic ring;
  • R 1 is selected from hydrogen, halogen, cyano, alkyl, alkoxy, haloalkyl, haloalkoxy, alkoxyalkyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, alkyl substituted with 1 or more R 7 , aryl and heteroaryl substituted with one or more R 8 ;
  • n 0, 1, 2 or 3;
  • W is O or NH
  • R 2 is selected from hydrogen, halogen, cyano, alkyl, haloalkyl, alkoxy, alkoxyalkyl;
  • q 0, 1, 2;
  • X is CH or N
  • Y is CH or N
  • R 5 is selected from halogen, hydroxy, alkyl, haloalkyl, alkoxy, haloalkoxy, alkoxyalkyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, alkylcycloalkyl, alkylheterocycloalkyl;
  • R 4 is -C 1-3 alkyl, -C 0-3 alkylene-C 3-6 cycloalkyl, -C 0-3 alkylene-R 9 or -C 1-3 alkylene-R 6 , wherein the alkyl group can be independently selected from 0 to 3 substituents of 0 to 3 F atoms through 0 to 3 substituents or through 0 to 1 selected from -C 0-1 alkylene-CN, Substituents of -C 0-1 alkylene-OR O and -N(R N ) 2 , wherein the alkylene and cycloalkyl groups can be independently selected from 0 to 2 when the valence allows Substituent from 0 to 2 F atoms or substituted with 0 to 1 selected from -C 0-1 alkylene-CN, -C 0-1 alkylene-OR O and -N(R N ) 2 base substitution;
  • R 9 is a 4- to 6-membered heterocycloalkyl, wherein the heterocycloalkyl may be substituted, as valency permits, with 0 to 2 substituents independently selected from the following:
  • R 6 is a 5- to 6-membered heteroaryl group, wherein the heteroaryl group may be substituted with ⁇ 0 to 2 substituents independently selected from the following when the valence permits:
  • alkyl group may be substituted, as valency allows, with 0 to 3 substituents independently selected from the following:
  • Each R O is independently H or -C 1-3 alkyl, wherein C 1-3 alkyl may be substituted with 0 to 3 F atoms;
  • each R N is independently H or -C 1-3 alkyl
  • Z 1 , Z 2 and Z 3 are each independently -CR Z or N, and each R Z is independently H, F, Cl or -CH 3 ;
  • R 7 is selected from halogen, cyano, hydroxyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, sulfone;
  • R 8 is selected from halogen, cyano, alkyl, haloalkyl, alkoxy, haloalkoxy, alkoxyalkyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, sulfone.
  • A is selected from benzene ring, heteroaromatic ring, 8-10-membered fused aromatic ring;
  • R 1 is selected from hydrogen, halogen, cyano, alkyl, alkoxy, haloalkyl, haloalkoxy, alkoxyalkyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, alkyl substituted with 1 or more R 7 , aryl and heteroaryl substituted with one or more R 8 ;
  • n 0, 1, 2 or 3;
  • W is O or NH
  • q 0, 1, 2;
  • X is CH or N
  • Y is CH or N
  • R 5 is selected from halogen, hydroxy, alkyl, haloalkyl, alkoxy, haloalkoxy, alkoxyalkyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, alkylcycloalkyl, alkylheterocycloalkyl;
  • R 4 is -C 1-3 alkyl, -C 0-3 alkylene-C 3-6 cycloalkyl, -C 0-3 alkylene-R 9 or -C 1-3 alkylene-R 6 , wherein the alkyl group can be independently selected from 0 to 3 substituents of 0 to 3 F atoms through 0 to 3 substituents or through 0 to 1 selected from -C 0-1 alkylene-CN, Substituent substitution of -C 0-1 alkylene-OR O or -N(R N ) 2 , and the alkylene and cycloalkyl groups described therein may be independently replaced by 0 to 2 when the valence allows Substituents selected from 0 to 2 F atoms or through 0 to 1 selected from -C 0-1 alkylene-CN, -C 0-1 alkylene-OR O or -N(R N ) 2 Substituent substitution;
  • R 9 is a 4- to 6-membered heterocycloalkyl, wherein the heterocycloalkyl may be substituted, as valency permits, with 0 to 2 substituents independently selected from the following:
  • R 6 is a 5- to 6-membered heteroaryl group, wherein the heteroaryl group may be substituted, as valence permits, with 0 to 2 substituents independently selected from the following:
  • alkyl group may be substituted, as valency allows, with 0 to 3 substituents independently selected from the following:
  • Each R O is independently H or -C 1-3 alkyl, wherein C 1-3 alkyl may be substituted with 0 to 3 F atoms;
  • each R N is independently H or -C 1-3 alkyl
  • Z 1 , Z 2 and Z 3 are each independently -CR Z or N, and each R Z is independently H, F, Cl or -CH 3 ;
  • R 7 is selected from halogen, cyano, hydroxyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, sulfone;
  • R 8 is selected from halogen, cyano, alkyl, haloalkyl, alkoxy, haloalkoxy, alkoxyalkyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, sulfone.
  • A is selected from benzene ring, heteroaromatic ring, 8-10-membered fused aromatic ring;
  • R 1 is selected from hydrogen, halogen, cyano, alkyl, alkoxy, haloalkyl, haloalkoxy, alkoxyalkyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, alkyl substituted with 1 or more R 7 , aryl and heteroaryl substituted with one or more R 8 ;
  • n 0, 1, 2 or 3;
  • R 3 is selected from fluorine, hydroxyl, cyano, C 1-3 alkyl, OC 1-3 alkyl, C 3-4 cycloalkyl, or 2 R 3 are cyclized together to form C 3-4 spirocycloalkyl, Wherein C 1-3 alkyl and OC 1-3 alkyl, cycloalkyl or spirocycloalkyl can be substituted by 0 to 3 fluorine atoms or 0 to 1 hydroxyl group when the valence allows;
  • q 0, 1, 2;
  • X is CH or N
  • Y is CH or N
  • R 5 is selected from halogen, hydroxy, alkyl, haloalkyl, alkoxy, haloalkoxy, alkoxyalkyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, alkylcycloalkyl, alkylheterocycloalkyl;
  • R 4 is -C 1-3 alkyl, -C 0-3 alkylene-C 3-6 cycloalkyl, -C 0-3 alkylene-R 9 or -C 1-3 alkylene-R 6 , wherein the alkyl group can be independently selected from 0 to 3 substituents of 0 to 3 F atoms through 0 to 3 substituents or through 0 to 1 selected from -C 0-1 alkylene-CN, Substituent substitution of -C 0-1 alkylene-OR O or -N(R N ) 2 , and the alkylene and cycloalkyl groups described therein may be independently replaced by 0 to 2 when the valence allows Substituents selected from 0 to 2 F atoms or through 0 to 1 selected from -C 0-1 alkylene-CN, -C 0-1 alkylene-OR O or -N(R N ) 2 Substituent substitution;
  • R 9 is a 4- to 6-membered heterocycloalkyl, wherein the heterocycloalkyl may be substituted, as valency permits, with 0 to 2 substituents independently selected from the following:
  • R 6 is a 5- to 6-membered heteroaryl group, wherein the heteroaryl group may be substituted, as valence permits, with 0 to 2 substituents independently selected from the following:
  • alkyl group may be substituted, as valency allows, with 0 to 3 substituents independently selected from the following:
  • Each R O is independently H or -C 1-3 alkyl, wherein C 1-3 alkyl may be substituted with 0 to 3 F atoms;
  • each R N is independently H or -C 1-3 alkyl
  • Z 1 , Z 2 and Z 3 are each independently -CR Z or N, and each R Z is independently H, F, Cl or -CH 3 ;
  • R 7 is selected from halogen, cyano, hydroxyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, sulfone;
  • R 8 is selected from halogen, cyano, alkyl, haloalkyl, alkoxy, haloalkoxy, alkoxyalkyl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, sulfone.
  • the alkyl group refers to a branched, unbranched and cyclic saturated hydrocarbon chain containing a specified number of carbon atoms, preferably an alkyl group selected from C 1-6 , the C 1 -6
  • the alkyl group is selected from methyl, ethyl, propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, sec-butyl, tert-butyl, n-pentyl, sec-pentyl, 1-ethylpropyl , 2-methylbutyl, tert-amyl, 1,2-dimethylpropyl, isopentyl, neopentyl, n-hexyl, isohexyl, sec-hexyl, tert-hexyl, neohexyl, 2-methylpentyl base, 1,2-dimethylbutyl, 1-ethylbutyl.
  • the alkoxy group refers to an alkyl ether radical, preferably from a C 1-6 alkoxy group, and the C 1-6 alkoxy group is selected from methoxy, ethyl Oxy, propoxy, isopropoxy, n-butoxy, isobutoxy, sec-butoxy, tert-butoxy, n-pentoxy, sec-pentoxy, 1-ethylpropoxy, 2-methylbutoxy, tert-amyloxy, 1,2-dimethylpropoxy, isopentyloxy, neopentyloxy, n-hexyloxy, isohexyloxy, sec-hexyloxy, tert-hexyloxy group, neohexyloxy, 2-methylpentyloxy, 1,2-dimethylbutoxy, 1-ethylbutoxy.
  • the alkoxyalkyl group means that one or more hydrogen atoms of the alkyl group are substituted by an alkoxy group, preferably an alkyl group selected from C 1-4 alkoxy C 1-4 , and further selected from Methoxymethyl, Methoxyethyl, Methoxypropyl, Methoxybutyl, Ethoxymethyl, Ethoxyethyl, Ethoxypropyl, Ethoxybutyl, Propoxymethyl, Propoxyethyl, Propoxypropyl, propoxybutyl, butoxymethyl, butoxyethyl, butoxypropyl, butoxybutyl, etc.
  • the halogen is selected from fluorine, chlorine, bromine and iodine
  • haloalkyl means that one or more hydrogen atoms of an alkyl group are replaced by halogen
  • haloalkoxy means that one or more hydrogen atoms of an alkoxy group are replaced by halogen
  • hydroxyalkyl means that more than one hydrogen atom of an alkyl group is replaced by a hydroxyl group
  • heterocycloalkyl means that more than one hydrogen atom of an alkyl group is replaced by a heterocyclic ring
  • cycloalkanemethylene means that one or more hydrogen atoms of an alkyl group are replaced by a heterocyclic ring.
  • the fused aromatic ring is selected from naphthalene or a fused aromatic heterocyclic ring
  • the fused aromatic heterocyclic ring refers to an aromatic ring or a heteroaromatic ring and a heteroaromatic ring fused
  • the heteroaromatic ring The heteroatom on is selected from nitrogen, oxygen, and sulfur, and the heteroatom is one or more.
  • the fused aromatic heterocycle is selected from indazole, quinoline, isoquinoline, quinoxaline, indole, isoindole, cinnoline, quinazoline, phthalazine, purine, Naphthyridine, pteridine, benzofuran, benzothiophene, benzoxazole, benzothiazole, benzisoxazole, benzisothiazole, benzoxadiazole, benzothiadiazole, benzotriazole , benzotriazine, benzimidazole, pyrazinopyrazole, pyrazinopyrimidine, pyrazinopyridazine, pyrazinotriazine, pyrimidopyrazole, pyrimidazole, pyrimidotriazole, pyrimidotriazine azine, pyrimidopyridazine, pyridazine, pyrida
  • the naphthyridine is selected from The pyridoimidazole is selected from The pyrazinimidazole is selected from The pyrazinotriazole is selected from The pyrimidopyrazole is selected from The pyrimimidazole is selected from The pyrimidotriazole is selected from The pyridazinimidazole is selected from The pyridazinotriazole is selected from The triazineimidazole is selected from The pyridopyridazine is selected from The pyridopyrazole is selected from The pyridopyrimidine is selected from The pyridotriazine is selected from The pyrimidotriazine is selected from
  • the heterocycle of the heterocycloalkyl is selected from 4- to 10-membered heterocycles, and the 4- to 10-membered heterocycles are selected from
  • the aryl group is selected from phenyl; the heteroaryl group is selected from the 5- to 12-membered heteroaryl group, and the 5- to 12-membered heteroaryl group is selected from
  • the "alkylene group” refers to that the alkyl group can be independently substituted by 0 to 2 substituents when the valence allows, and the cyano group refers to the group - CN, the hydroxyl group refers to the group -OH, and the sulfone group refers to the group -SO2 .
  • the "heterocycle” refers to a saturated or unsaturated heterocycle containing one or more heteroatoms (nitrogen, oxygen, sulfur);
  • the "aromatic ring” is a Refers to a benzene ring;
  • the "heteroaromatic ring” refers to a heterocyclic ring with a closed conjugated system of 4n+2 ⁇ electrons, such as furan, thiophene, tetrahydropyrrole, dihydropyrazole, imidazole, thiazole, isotope Thiazole, thiadiazole, oxazole, oxadiazole, isoxazole, piperidine, piperazine, pyridazine, pyrazine, triazine, pyrimidine, morpholine or pyridine, etc.; the multiple refers to two, three one, or four.
  • the cycloalkane is selected from C 3-6 cycloalkane, and the C 3-6 cycloalkane is selected from cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, and cyclohexyl.
  • the A is selected from benzene ring.
  • the compound or its stereoisomer, tautomer, and pharmaceutically acceptable salt are shown in formula (I), wherein:
  • Described A is selected from benzene ring,
  • R 1 is selected from hydrogen, fluorine, chlorine, bromine, cyano, difluoroethyl, trifluoroethyl;
  • n 0, 1, 2;
  • W is O or NH
  • R 2 is selected from chlorine, cyano, trifluoromethyl, methoxy, methoxymethyl;
  • R 4 is oxetan-2-ylmethyl
  • X is CH or N
  • Y is CH or N
  • R 5 is selected from methyl, ethyl, cyclopropylmethyl, fluoroethyl, methoxyethyl;
  • Z 1 is CH
  • Z 2 is CH or CF
  • Z 3 is CH or N or CF.
  • Described A is selected from benzene ring,
  • R 1 is selected from hydrogen, fluorine, chlorine, bromine, cyano, difluoroethyl, trifluoroethyl;
  • n 0, 1, 2;
  • W is O or NH
  • R 4 is oxetan-2-ylmethyl
  • X is CH or N
  • Y is CH or N
  • R 5 is methyl, ethyl, cyclopropylmethyl, fluoroethyl, methoxyethyl;
  • Z 1 is CH
  • Z 2 is CH or CF
  • Z 3 is CH or N or CF.
  • Described A is selected from benzene ring,
  • R 1 is selected from hydrogen, fluorine, chlorine, bromine, cyano, difluoroethyl, trifluoroethyl;
  • n 0, 1, 2;
  • R 4 is oxetan-2-ylmethyl
  • X is CH or N
  • Y is CH or N
  • R 5 is selected from methyl, ethyl, cyclopropylmethyl, fluoroethyl, methoxyethyl;
  • Z 1 is CH
  • Z 2 is CH or CF
  • Z 3 is CH or N or CF.
  • the carbon atom connected to R 5 is a chiral carbon atom
  • the hand The preferred carbon atom is in S configuration and/or R configuration, preferably S configuration.
  • the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof is selected from the following compounds:
  • the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof is selected from the following compounds:
  • the pharmaceutically acceptable salt refers to the preparation of a compound with a pharmaceutically acceptable acid or base.
  • more than one hydrogen atom of the compound is substituted with the isotope deuterium.
  • Another object of the present invention provides a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising the aforementioned compound of formula (I), or a stereoisomer, tautomer, pharmaceutically acceptable salt and more than one pharmaceutically acceptable compound thereof Carrier.
  • Another object of the present invention is to provide the compound of formula (I), or its stereoisomers, tautomers, pharmaceutically acceptable salts, in the preparation of pharmaceutical use for the preparation of treatment of GLP-1 related diseases , in particular, relates to the pharmaceutical use of diabetes-related diseases.
  • pharmaceutically acceptable salt refers to a salt of a compound of the present invention, prepared from a compound of the present invention having a specified substituent and a pharmaceutically acceptable acid or base.
  • the compounds provided herein also exist in prodrug forms.
  • Prodrugs of the compounds described herein are readily chemically altered under physiological conditions to convert to the compounds of the present invention.
  • prodrugs can be converted to the compounds of the present invention by chemical or biochemical methods in an in vivo environment.
  • the compounds of the present invention may exist in specific geometric or stereoisomeric forms.
  • the present invention contemplates all such compounds, including cis and trans isomers, (-)- and (+)-enantiomers, (R)- and (S)-enantiomers, diastereomers isomers, (D)-isomers, (L)-isomers, and racemic and other mixtures thereof, such as enantiomerically or diastereomerically enriched mixtures, all of which belong to within the scope of the present invention.
  • Additional asymmetric carbon atoms may be present in substituents such as alkyl. All such isomers, as well as mixtures thereof, are included within the scope of the present invention.
  • Optically active (R)- and (S)-isomers can be prepared by chiral synthesis or chiral reagents or other conventional techniques. If one enantiomer of a compound of the present invention is desired, it can be prepared by asymmetric synthesis or derivatization with a chiral auxiliary, wherein the resulting mixture of diastereomers is separated and the auxiliary group is cleaved to provide pure desired enantiomer.
  • a diastereomeric salt is formed with an appropriate optically active acid or base, followed by conventional methods known in the art
  • the diastereoisomers were resolved and the pure enantiomers recovered.
  • separation of enantiomers and diastereomers is usually accomplished by the use of chromatography employing a chiral stationary phase, optionally in combination with chemical derivatization (eg, from amines to amino groups) formate).
  • the atoms of the molecules of the compounds of the present invention are isotopes, and the isotope derivatization can usually prolong the half-life, reduce the clearance rate, stabilize the metabolism and improve the activity in vivo. Also, an embodiment is included wherein at least one atom is replaced by an atom having the same atomic number (number of protons) and a different mass number (sum of protons and neutrons).
  • isotopes included in the compounds of the present invention include hydrogen atom, carbon atom, nitrogen atom, oxygen atom, phosphorus atom, sulfur atom, fluorine atom, chlorine atom, which respectively include 2 H, 3 H, 13 C, 14 C, 15 N, 17 O, 18 O, 31 P, 32 P, 35 S, 18 F, 36 Cl.
  • radioisotopes that emit radiation as they decay such as 3 H or 14 C, are useful in the topological examination of pharmaceutical formulations or compounds in vivo. Stable isotopes neither decay or change with their amount, nor are they radioactive, so they are safe to use.
  • the isotopes can be converted according to general methods by substituting the reagents used in the synthesis with reagents containing the corresponding isotopes.
  • the compounds of the present invention may contain unnatural proportions of atomic isotopes at one or more of the atoms that constitute the compound.
  • compounds can be labeled with radioisotopes, such as deuterium ( 2 H), iodine-125 ( 125 I) or C-14 ( 14 C). All transformations of the isotopic composition of the compounds of the present invention, whether radioactive or not, are included within the scope of the present invention.
  • one or more hydrogen atoms of the compounds of the present invention are substituted by the isotope deuterium ( 2 H).
  • the compounds of the present invention After deuteration, the compounds of the present invention have the effects of prolonging half-life, reducing clearance rate, stabilizing metabolism and improving in vivo activity.
  • the preparation methods of the isotopic derivatives generally include: a phase transfer catalysis method.
  • a preferred deuteration method employs a phase transfer catalyst (eg, tetraalkylammonium salts, NBu4HSO4 ) .
  • the methylene protons of diphenylmethane compounds are exchanged using a phase transfer catalyst, resulting in higher ratios than with deuterated silanes (eg, triethyldeuterated silane) or with Lewis acids such as trichloro in the presence of an acid (eg, methanesulfonic acid) Aluminium is reduced with sodium deuteroborate to introduce higher deuterium.
  • pharmaceutically acceptable carrier refers to any formulation carrier or medium capable of delivering an effective amount of the active substance of the present invention, without interfering with the biological activity of the active substance, and without toxic side effects to the host or patient
  • representative carriers include water, oil , vegetables and minerals, cream base, lotion base, ointment base, etc. These bases include suspending agents, tackifiers, penetration enhancers, and the like.
  • Their formulations are well known to those skilled in the cosmetic or topical pharmaceutical field. For additional information on carriers, reference can be made to Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed., Lippincott, Williams & Wilkins (2005), the contents of which are incorporated herein by reference.
  • excipient generally refers to the carrier, diluent and/or medium required to formulate an effective pharmaceutical composition.
  • an "effective amount” or “therapeutically effective amount” with respect to a drug or pharmacologically active agent refers to a non-toxic but sufficient amount of the drug or agent to achieve the desired effect.
  • an "effective amount” of one active substance in a composition refers to the amount required to achieve the desired effect when used in combination with another active substance in the composition. The determination of the effective amount varies from person to person, depends on the age and general condition of the recipient, and also depends on the specific active substance, and the appropriate effective amount in individual cases can be determined by those skilled in the art based on routine experiments.
  • active ingredient refers to a chemical entity that is effective in treating a target disorder, disease, or condition.
  • the compounds of the present invention can be prepared by a variety of synthetic methods well known to those skilled in the art, including the specific embodiments enumerated below, embodiments formed in combination with other chemical synthesis methods, and those well known to those skilled in the art Equivalent to alternatives, preferred embodiments include, but are not limited to, the embodiments of the present invention.
  • FIG. 1 is a schematic diagram of the single crystal structure of 39A in Example 39.
  • FIG. 1 is a schematic diagram of the single crystal structure of 39A in Example 39.
  • NMR nuclear magnetic resonance
  • MS mass spectrometry
  • the MS was measured using an ISQ EC mass spectrometer (manufacturer: Thermo, model: ISQ EC).
  • HPLC High performance liquid chromatography
  • CombiFlash rapid preparation instrument uses CombiFlash Rf+LUMEN (TELEDYNE ISCO).
  • the thin layer chromatography silica gel plate uses Yantai Yinlong HSGF 254 or GF 254 silica gel plate, the size of the silica gel plate used for thin layer chromatography (TLC) is 0.17mm ⁇ 0.23mm, and the size of the TLC separation and purification products is 0.4mm ⁇ 0.5mm.
  • Silica gel column chromatography generally uses Rushan Shangbang silica gel 100-200 mesh silica gel as the carrier.
  • Reagents LDA-lithium diisopropylamide, THF-tetrahydrofuran, TEA-triethylamine, Dioxane-1,4-dioxane, BH3-borane, EDCl-1-ethyl-( 3 -dimethylamine) aminopropyl)carbodiimide hydrochloride, HOBT-1-hydroxybenzotriazole, DIPEA-N,N-diisopropylethylamine, DMF-N,N-dimethylformamide, K 2CO3 - potassium carbonate, DMSO-dimethylsulfoxide, EtOH -ethanol, NaH-sodium hydride, toluene-toluene, rt-room temperature, PdCl2 (dppf)-[1,1'-bis(diphenylphosphine) base)ferrocene]palladium dichloride, Pd(OAc)2-palladium acetate,
  • Step B Synthesis of 6-((4-Chloro-2-fluorobenzyl)oxy)-3',6'-dihydro-[2,4'-bipyridine]-1'(2'H)-carboxy tert-butyl acid
  • Step C Synthesis of tert-butyl 4-(6-((4-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidine-1-carboxylate
  • Step D Synthesis of 2-((4-Chloro-2-fluorobenzyl)oxy)-6-(piperidin-4-yl)pyridine
  • Step E Synthesis of Ethyl 2-(4-(6-((4-Chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)propanoate
  • Step F Synthesis of 2-(4-(6-((4-Chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)propanoic acid
  • Step G Synthesis of Methyl 4-(2-(4-(6-((4-Chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)propionamido)- 3-((((S)-oxetan-2-yl)methyl)amino)benzoate
  • Step H Synthesis of 2-(1-(4-(6-((4-Chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl)-1-( ((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylate methyl ester
  • reaction solution was poured into 50.0 ml of saturated aqueous sodium bicarbonate solution, extracted with ethyl acetate (30 ml ⁇ 3 times), the organic phases were combined, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated.
  • Step I Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((4-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl) -1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid (1A) and 2-((R)-1-( 4-(6-((4-Chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl)-1-(((S)-oxetane -2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid (1B)
  • reaction Phase high performance liquid phase preparation (eluent concentration, lyophilization), preparation conditions are as follows: chromatographic column: Agilent 5 Prep-C18 100mm ⁇ 30mm 5 ⁇ M; mobile phase: water (containing 0.1% ammonia water) and acetonitrile elution; flow rate: 20 ml/min; Gradient: 1A and 1B eluted from 27% acetonitrile at 9.07 min and 12.00 min, respectively, detection wavelength: 254 nm.
  • Step A Synthesis of tert-butyl 4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-ylpiperidine-1-carboxylate
  • Step B Synthesis of 3-fluoro-4-(((6-(piperidin-4-yl)pyridinyl-2-yl)oxy)methyl)benzonitrile
  • Step C Synthesis of ethyl 2-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)propanoate
  • Step D Synthesis of 2-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)propionic acid
  • Step E Synthesis of Methyl 4-(2-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)propionamido) -3-((((S)-oxetan-2-yl)methyl)amino)benzoate
  • Step F Synthesis of 2-(1-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl)-1- (((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylate methyl ester
  • Step G Synthesis of Compound 2-((S)-1-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl yl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid (2A) and 2-((R)-1 -(4-(6-((4-Cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl)-1-(((S)-oxa Cyclobutan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid (2B)
  • Step B Synthesis of tert-butyl 4-(6-((5-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidine-1-carboxylate
  • Step C Synthesis of 2-((5-Chloro-2-fluorobenzyl)oxy)-6-(piperidin-4-yl)pyridine
  • Step C Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((5-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl) -1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylate methyl ester
  • Step D Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((5-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl) -1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • Step A Synthesis of tert-butyl 4-(6-((3-fluoropyridin-4-yl)methoxy)pyridin-2-yl)piperidine-1-carboxylate
  • Step B Synthesis of 4-(6-((3-fluoropyridin-4-yl)methoxy)pyridin-2-yl)piperidine
  • Step C Synthesis of methyl 4-(((S)-2-chloropropionamido)-3-(((((S)-oxetan-2-yl)methyl)amino)benzoate
  • Step D Synthesis of 2-((S)-1-Chloroethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1Hbenzo[d]imidazole-6- Methyl Carboxylate
  • Step E Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((3-fluoropyridin-4-yl)methoxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl) -3-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-3H-imidazo[4,5-b]pyridine-5-carboxylate methyl ester
  • Step F Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((3-fluoropyridin-4-yl)methoxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl) -3-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-3H-imidazo[4,5-b]pyridine-5-carboxylic acid
  • Step B Synthesis of methyl 4-(((R)-2-chloropropionamido)-3-((((S)-oxetan-2-yl)methyl)amino)benzoate
  • Step C Synthesis of 2-((R)-1-chloroethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H benzo[d]imidazole-6- Methyl Carboxylate
  • Step D Synthesis of tert-butyl 4-(6-((2,5-difluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidine-1-carboxylate
  • tert-butyl 4-(6-((2,5-difluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidine-1-carboxylate 88.0 mg, 0.22 mmol was added to dioxane
  • the ring was reacted in a hydrochloric acid solution (1.00 mmol/mL, 3 mL) under N2 protection for 1 h at room temperature.
  • Step F Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((2,5-difluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl)- 1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylate methyl ester
  • Step G Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((2,5-difluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl)- 1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • the reaction was completed, quenched by adding water, adjusted to pH 6 with an aqueous ammonium chloride solution (0.5 mol/L), extracted with dichloromethane (30 mL ⁇ 3 times), combined with the organic phases, and an aqueous ammonium chloride solution (30 mL ⁇ 2 times) After washing, drying over anhydrous sodium sulfate, the obtained crude product was purified by preparative high performance liquid chromatography.
  • Step A Synthesis of tert-butyl 4-(6-((2,4-difluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidine-1-carboxylate
  • Step B Synthesis of 2-((2,4-difluorobenzyl)oxy)-6-(piperidin-4-yl)pyridine
  • tert-butyl 4-(6-((2,4-difluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidine-1-carboxylate 76.0 mg, 0.19 mmol was added to dioxane
  • the ring was reacted in a hydrochloric acid solution (1.00 mmol/mL, 3 mL) under N2 protection for 1 h at room temperature.
  • Step C Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((2,4-difluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl)- 1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylate methyl ester
  • Step D Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((2,4-difluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl)- 1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • Step A Synthesis of methyl 5-((S)-2-chloropropionamido)-6-(((((S)-oxetan-2-yl)methyl)amino)picolinate
  • Step B Synthesis of 2-((S)-1-chloroethyl)-3-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-3H-imidazo[4,5-b ]pyridine-5-carboxylate methyl ester
  • Step C Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((5-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl) -3-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-3H-imidazo[4,5-b]pyridine-5-carboxylate methyl ester
  • Step D Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((5-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl) -3-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-3H-imidazo[4,5-b]pyridine-5-carboxylic acid
  • Step A Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2-difluoroethyl)-1H-indazol-6-yl)methoxy)pyridine-2 -yl)piperidin-1-yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid methyl ester
  • Step B Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2-difluoroethyl)-1H-indazol-6-yl)methoxy)pyridine-2 -yl)piperidin-1-yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • Example 9 1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2,2 -Trifluoroethyl)-1H-indazol-6-yl)methoxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • Step A Synthesis of 1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2, 2-Trifluoroethyl)-1H-indazol-6-yl)methoxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxy methyl ester
  • Step B Synthesis of 1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2, 2-Trifluoroethyl)-1H-indazol-6-yl)methoxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxy acid
  • reaction solution was neutralized by adding 20 mL of saturated ammonium chloride, extracted with ethyl acetate (30 mL ⁇ 2 times), the organic phases were combined, washed with saturated brine (20 mL ⁇ 2 times), dried over anhydrous sodium sulfate, and finally The crude product obtained by concentration under reduced pressure was separated by column chromatography to prepare 42 mg of pale yellow solid 1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-2-((S)-1-(4 -(6-((1-(2,2,2-Trifluoroethyl)-1H-indazol-6-yl)methoxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl) -1H-Benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid.
  • Step A Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-(isoquinolin-6-ylmethoxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl)-1- (((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylate methyl ester
  • Step B Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-(isoquinolin-6-ylmethoxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl)-1- (((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • Step A Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2-difluoroethyl)-1H-indazol-6-yl)methoxy)pyridine-2 -yl)piperidin-1-yl)ethyl)-3-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-3H-imidazo[4,5-b]pyridine-5 -Methyl carboxylate
  • Step B Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2-difluoroethyl)-1H-indazol-6-yl)methoxy)pyridine-2 -yl)piperidin-1-yl)ethyl)-3-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-3H-imidazo[4,5-b]pyridine-5 -carboxylic acid
  • Step A Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((4-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl) -3-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-3H-imidazo[4,5-b]pyridine-5-carboxylate methyl ester
  • Step B Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((4-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl) -3-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-3H-imidazo[4,5-b]pyridine-5-carboxylic acid
  • Step B Synthesis of tert-butyl 4-(6-((4-bromo-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidine-1-carboxylate
  • tert-butyl 4-(6-((4-bromo-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidine-1-carboxylate 82.0 mg, 0.18 mmol was added to two oxane in hydrochloric acid solution (1.00 mmol/mL, 3 mL), under N 2 protection, and react at room temperature for 1 hour.
  • Step D Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((4-bromo-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl) -1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylate methyl ester
  • Step E Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((4-bromo-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl) -1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • the reaction was completed, quenched by adding water, adjusted to pH 6 with an aqueous ammonium chloride solution (0.5 mol/L), extracted with dichloromethane (30 mL ⁇ 3 times), combined with the organic phases, and an aqueous ammonium chloride solution (30 mL ⁇ 2 times) After washing, drying over anhydrous sodium sulfate, the obtained crude product was purified by preparative high performance liquid chromatography.
  • Separation conditions are as follows, column: Agilent 5 Prep-C18 100mm ⁇ 30mm 5 ⁇ M; mobile phase: water (containing 0.05% aqueous ammonia) and acetonitrile; flow rate: 20 ml/min; gradient: eluted from 25% acetonitrile at 7.50 minutes ; Detection wavelength: 254nm.
  • 2,5-Difluorobenzaldehyde 300 mg, 2.11 mmol was dissolved in methanol (15 mL) at room temperature, sodium borohydride (156 mg, 4.23 mmol) was added at zero degrees Celsius, and the mixture was stirred at room temperature reaction.
  • Step B Synthesis of tert-butyl 4-(6-((2,5-difluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidine-1-carboxylate
  • Step C Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((2,5-difluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl)- Isopropyl 1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylate
  • Step D Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((2,5-difluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl)- 1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • Step A Synthesis of tert-butyl 4-(6-(((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-ylpiperidine-1-carboxylate
  • Step B Synthesis of 3-fluoro-4-(((6-(piperidin-4-yl)pyridinyl-2-yl)oxy)methyl)benzonitrile
  • Step C Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl )-3-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-3H-imidazo[4,5-b]pyridine-5-carboxylate isopropyl ester
  • Step D Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl )-3-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-3H-imidazo[4,5-b]pyridine-5-carboxylic acid
  • Step A Synthesis of 1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-2-((S)-1-(4-(6-(quinolin-8-ylmethoxy) yl)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid methyl ester
  • Step B Synthesis of 1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-2-((S)-1-(4-(6-(quinolin-8-ylmethoxy) yl)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • Step A Synthesis of 3-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2, 2-Trifluoroethyl)-1H-indazol-6-yl)methoxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl)-3H-imidazo[4,5-b]pyridine -5-Carboxylic acid isopropyl ester
  • Step B Synthesis of 3-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2, 2-Trifluoroethyl)-1H-indazol-6-yl)methoxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl)-3H-imidazo[4,5-b]pyridine -5-Carboxylic acid
  • Methyl (7-fluoroquinolin-4-yl)acetate (400.0 mg, 1.82 mmol) was dissolved in methanol (3.0 mL), aqueous sodium hydroxide solution (1.8 mL, 3.64 mmol) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour . It was concentrated under reduced pressure to remove methanol, diluted with ethyl acetate (50 mL), extracted, washed with saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, concentrated under reduced pressure to remove the organic solvent, and the resultant concentrated was separated by column chromatography (ethyl acetate).
  • Step E Synthesis of tert-butyl 4-(6-((7-fluoroquinolin-4-yl)methoxy)pyridin-2-yl)piperidine-1-carboxylate
  • Step F Synthesis of 7-fluoro-4-((6-(piperidin-4-yl)pyridin-2-yl)oxy)methyl)quinoline
  • Step G Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((7-fluoroquinolin-4-yl)methoxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl )-3-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-3H-imidazo[4,5-b]pyridine-5-carboxylate isopropyl ester
  • Step H Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((7-fluoroquinolin-4-yl)methoxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl )-3-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-3H-imidazo[4,5-b]pyridine-5-carboxylic acid
  • Step D Synthesis of tert-butyl 4-(6-((3-fluoroquinolin-8-yl)methoxy)pyridin-2-yl)piperidine-1-carboxylate
  • Step E Synthesis of 3-fluoro-8-(((6-(piperidin-4-yl)pyridinyl-2-yl)oxy)methyl)quinoline
  • Step F Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((3-fluoroquinolin-8-yl)methoxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl )-3-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-3H-imidazo[4,5-b]pyridine-5-carboxylate isopropyl ester
  • Step G Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((3-fluoroquinolin-8-yl)methoxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)ethyl )-3-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-3H-imidazo[4,5-b]pyridine-5-carboxylic acid
  • Step A Synthesis of tert-butyl 4-(6-chloropyridin-2-yl)piperazine-1-carboxylate
  • Piperazine-1-carboxylate tert-butyl ester (300.0 mg, 1.61 mmol) was dissolved in 1,4-dioxane (12.0 mL) and 2,6-dichloropyridine (262.0 mg, 1.77 mmol) was added ), methanesulfonic acid (2-dicyclohexylphosphino-2',4',6'-triisopropyl-1,1'-biphenyl)(2'-amino-1,1'-biphenyl) -2-yl)palladium(II) (135.4 mg, 0.16 mmol) and cesium carbonate (788.5 mg, 2.42 mmol).
  • Step B Synthesis of tert-butyl 4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperazine-1-carboxylate
  • Step D Synthesis of 2-(1-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperazin-1-yl)ethyl)-1- (((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylate methyl ester
  • Step E Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperazin-1-yl)ethyl )-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid (20A) and 2-((R)-1- (4-(6-((4-Cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperazin-1-yl)ethyl)-1-(((S)-oxoheterocycle Butan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid (20B)
  • the crude product was purified by preparative high performance liquid chromatography. Separation conditions are as follows: Column: Agilent 5 Prep-C18 100mm ⁇ 30mm 5 ⁇ M; Mobile phase: water (containing 0.1% ammonia water) and acetonitrile elution; flow rate: 20 mL/min; 20A and 20B were eluted in 8.54 minutes, respectively, and the detection wavelength was 254 nm.
  • Step B Synthesis of (S)-tert-butyl 4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-2-methylpiperazine-1-carboxylate
  • Step C Synthesis of (S)-3-fluoro-4-((6-(3-methylpiperazin-1-yl)pyridin-2-yl)oxy)methyl)benzonitrile
  • Step D Synthesis of 2-((S)-1-((S)-4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-2-methyl Piperazin-1-yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylate methyl ester
  • Step E Synthesis of 2-((S)-1-((S)-4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-2-methyl Piperazin-1-yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • Step A Synthesis of 2-((S)-1-(4-(tert-butoxycarbonyl)-2-oxopiperazin-1-yl)ethyl)-1-((((S)
  • Step B Synthesis of 1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-2-((S)-1-(2-oxopiperazin-1-yl)ethyl) -1H-Benzo[d]imidazole-6-carboxylate methyl ester
  • Step C Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-2-oxopiperazine-1 -yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylate methyl ester
  • Step D Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-2-oxopiperazine-1 -yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • Step A Synthesis of tert-butyl 4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-3-oxopiperazine-1-carboxylate
  • Step B Synthesis of 3-fluoro-4-((((6-(2-oxopiperazin-1-yl)pyridin-2-yl)oxy)methyl)benzonitrile
  • Step C Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-3-oxopiperazine-1 -yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylate methyl ester
  • reaction was completed, diluted with water, extracted with ethyl acetate (30 ml ⁇ 2 times), combined with the organic phases, washed with saturated brine (20 ml ⁇ 2 times), dried over anhydrous sodium sulfate, and finally concentrated under reduced pressure.
  • Step D Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-3-oxopiperazine-1 -yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • Example 24 2-((S)-1-(4-(6-((4-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)propyl)- 1-(((S)-Oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid (24A) and 2-((R)-1-(4- (6-((4-Chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)propyl)-1-(((S)-cyclooxetane-2 -yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid (24B)
  • Step A Synthesis of Methyl 4-(((R)-2-Bromobutanamido)-3-((((S)-oxetan-2-yl)methyl)amino)benzoate
  • Step B Synthesis of 2-((R)-1-bromopropyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6 - Methyl formate
  • Step C Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((4-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)propyl) -1-(((S)-Oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid methyl ester
  • Step D Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((4-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)propyl) -1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • Step A Synthesis of methyl 4-(((S)-2-bromobutanamido)-3-(((((S)-oxetan-2-yl)methyl)amino)benzoate
  • Step B Synthesis of 2-((S)-1-bromopropyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6 - Methyl formate
  • Step C Synthesis of 2-((R)-1-(4-(6-((4-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)propyl) -1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid methyl ester
  • Step D Synthesis of 2-((R)-1-(4-(6-((4-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)propyl) -1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • Step A Synthesis of ethyl 2-(4-(6-((4-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)-2-cyclopropylacetate
  • Step B Synthesis of 2-(4-(6-((4-Chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)-2-cyclopropylacetic acid
  • Step C Synthesis of 4-(2-(4-(6-((4-Chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl-2-cyclopropylacetamide yl)-3-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)benzoate
  • Step D Synthesis of 2-((4-(6-((4-Chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)(cyclopropyl)methyl)- 1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylate methyl ester
  • reaction solution was cooled to room temperature, diluted with water (30 mL), extracted with ethyl acetate (15 mL ⁇ 3 times), and the organic phases were combined and successively used Saturated aqueous sodium carbonate solution (15 mL ⁇ 3 times), washed with saturated brine (15 mL ⁇ 3 times), dried over anhydrous sodium sulfate, and finally concentrated under reduced pressure.
  • Step E Synthesis of 2-((4-(6-((4-Chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)(cyclopropyl)methyl)- 1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • Step A Synthesis of methyl 2-(4-(6-((4-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)-3-methoxypropanoate
  • Step B Synthesis of 2-(4-(6-((4-Chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)-3-methoxypropionic acid
  • Step C Synthesis of 4-(2-(4-(6-((4-Chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl-3-methoxypropionamide yl)-3-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)benzoate
  • Step D Synthesis of 2-(1-(4-(6-((4-Chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)-2-methoxyethyl yl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid methyl ester
  • reaction solution was cooled to room temperature, diluted with water (30 mL), extracted with ethyl acetate (15 mL ⁇ 3 times), and the organic phases were combined, sequentially washed with saturated aqueous sodium carbonate solution (15 mL ⁇ 3 times), saturated Washed with brine (15 mL ⁇ 3 times), dried over anhydrous sodium sulfate, and finally concentrated under reduced pressure.
  • Step E Synthesis of 2-(1-(4-(6-((4-Chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)-2-methoxyethyl yl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • Step A Synthesis of tert-butyl 4-(6-bromopyridin-2-yl)-4-hydroxypiperidine-1-carboxylate
  • Step B Synthesis of tert-butyl 4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-4-hydroxypiperidine-1-carboxylate
  • Step C Synthesis of 3-fluoro-4-((((6-(4-hydroxypiperidin-4-yl)pyridin-2-yl)oxy)methyl)benzonitrile
  • Step D Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-4-hydroxypiperidine-1- yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylate methyl ester
  • Step E Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-4-hydroxypiperidine-1- yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • Step B Synthesis of methyl 2-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy))pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)-3-hydroxypropanoate
  • Step C Synthesis of methyl 2-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)-3-fluoropropanoate
  • Step D Synthesis of 4-(2-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)-3-fluoropropionamide yl)-3-((((S)-oxetan-2-yl)methyl)amino)benzoic acid methyl ester
  • Step E Synthesis of 2-(1-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)-2-fluoroethyl )-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylate methyl ester
  • Step F Synthesis of 2-(1-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-1-yl)-2-fluoroethyl )-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • Step B Synthesis of (R)-tert-4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-2-(hydroxymethyl)piperazine-1-carboxylic acid Butyl ester
  • Step C Synthesis of (R)-4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-2-(methoxymethyl)piperazine-1- tert-butyl formate
  • Step D Synthesis of (R)-3-fluoro-4-(((6-(3-(methoxymethyl)piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)oxy)methyl)benzonitrile
  • Step E Synthesis of 2-((S)-1-((R)-4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-2-(methyl) Oxymethyl)piperazin-1-yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylate methyl ester
  • Step F Synthesis of 2-((S)-1-((R)-4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-2-(methyl) Oxymethyl)piperazin-1-yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylate acid
  • Step A Synthesis of tert-butyl 4-(6-bromo-3-fluoropyridin-2-yl)piperazine-1-carboxylate
  • Step B Synthesis of tert-butyl 4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)-3-fluoropyridin-2-yl)piperazine-1-carboxylate
  • Step C Synthesis of 3-fluoro-4-(((5-fluoro-6-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)oxy)methyl)benzonitrile
  • Step D Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)-3-fluoropyridin-2-yl)piperazine-1- yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylate methyl ester
  • Step E Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)-3-fluoropyridin-2-yl)piperazine-1- yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • Step A Synthesis of (3,4-trans)-4-(6-((4-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)piperidin-3-ol
  • Step B Synthesis of 2-((1S)-1-((3,4-trans)-4-(6-((4-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-3 -Hydroxypiperidin-1-yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid methyl ester
  • Step C Synthesis of 2-((1S)-1-((3,4-trans)-4-(6-((4-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-3 -Hydroxypiperidin-1-yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • Step B Synthesis of tert-butyl 4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)-3,5-difluoropyridin-2-yl)piperazine-1-carboxylate
  • Step C Synthesis of 4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)-3,5-difluoropyridin-2-yl)piperazine
  • tert-butyl 4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)-3,5-difluoropyridin-2-yl)piperazine-1-carboxylate (198 mg, 0.44 mg mol) was dissolved in 3 ml of methanol, 4M hydrochloric acid 1,4-dioxane solution (3 ml) was added at zero degrees Celsius, and the reaction was raised to room temperature for 40 minutes.
  • Step D Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)-3,5-difluoropyridin-2-yl)piperazine -1-yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylate methyl ester
  • the reaction was completed, quenched by adding water, and extracted with ethyl acetate (50 mL ⁇ 3 times). The organic phases were combined, washed with saturated brine (30 mL ⁇ 3 times), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and the organic phases were concentrated under reduced pressure.
  • Step E Synthesis of 2-((S)-1-(4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)-3,5-difluoropyridin-2-yl)piperazine -1-yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • reaction was completed, quenched by adding water, adjusted to pH 6 with an aqueous ammonium chloride solution (0.5 mol/L), extracted with dichloromethane (30 mL ⁇ 3 times), combined with the organic phases, and an aqueous ammonium chloride solution (30 mL ⁇ 3 times) Washed, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure.
  • aqueous ammonium chloride solution 0.5 mol/L
  • dichloromethane (30 mL ⁇ 3 times
  • an aqueous ammonium chloride solution (30 mL ⁇ 3 times) Washed, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure.
  • Step A Synthesis of (3,4-cis)-4-(6-((4-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-3-fluoropiperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester
  • Step B Synthesis of 2-((4-Chloro-2-fluorobenzyl)oxy)-6-((3,4-cis)-3-fluoropiperidin-4-yl)pyridine
  • Step C Synthesis of 2-((1S)-1-((3,4-cis)-4-(6-((4-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-3 -Fluoropiperidin-1-yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylate methyl ester
  • the reaction was completed, diluted with water, extracted with ethyl acetate (40 ml ⁇ 2 times), and the organic phases were combined.
  • the organic phase was first washed with saturated brine (30 ml ⁇ 2 times), then dried with anhydrous sodium sulfate, and finally reduced in pressure.
  • Step D Synthesis of 2-((1S)-1-((3,4-cis)-4-(6-((4-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-3 -Fluoropiperidin-1-yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • Step A Synthesis of 2-((S)-1-((R)-4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-2-(hydroxyl Methyl)piperazin-1-yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid methyl ester
  • Step B Synthesis of 2-((S)-1-((R)-4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-2-(fluoro Methyl)piperazin-1-yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid methyl ester
  • Step C Synthesis of 2-((S)-1-((R)-4-(6-((4-cyano-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-2-(fluoro Methyl)piperazin-1-yl)ethyl)-1-(((S)-oxetan-2-yl)methyl)-1H-benzo[d]imidazole-6-carboxylic acid
  • Step A Synthesis of 6-((4-Chloro-2-fluorobenzyl)oxy)-3',6'-dihydro-[2,4'-dipyridine]-1'(2'H)-carboxy tert-butyl acid
  • Step B Synthesis of (3,4-trans)-4-(6-((4-chloro-2-fluorobenzyl)oxy)pyridin-2-yl)-3-hydroxypiperidine-1-carboxylic acid tert-butyl ester

Abstract

公开了式(I)的化合物、其制备方法及其在医药上的应用。具体提供式(I)的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐。这些化合物是胰高血糖样肽-1受体(GLP-1R)的激动剂。还涉及包含这些化合物的药物组合物以及使用该化合物治疗糖尿病等疾病的药物中的用途。

Description

一种苯并咪唑类衍生物及其制备方法和医药用途 技术领域
本发明属于化学药物技术领域，提供了一系列的胰高血糖样肽-1受体(GLP-1R)的激动剂。本发明还涉及包含这些化合物的药物组合物以及使用该化合物治疗糖尿病等疾病的药物中的用途。
背景技术
糖尿病影响全世界数百万人，被认为是21世纪人类死亡的主要威胁之一。随着时间推移，不被控制的糖尿病能损坏身体***，包括心脏、血管、眼、肾和神经。在全世界范围，糖尿病的社会经济负担很沉重。
有两种主要类型的糖尿病，命名为I型和II型，其中II型糖尿病(T2DM)占全世界所有糖尿病的超过90％。I型糖尿病特征为胰岛素缺乏，主要由自身免疫介导的胰岛β细胞破坏引起，II型糖尿病特征为胰岛素分泌异常和随之而来的胰岛素耐受。为预防引起酮酸中毒，患有I型糖尿病的患者必须摄取外源胰岛素以存活。尽管II型糖尿病患者不像I型糖尿病患者那样依赖于外源胰岛素，他们可能需要外源胰岛素以控制血糖水平。
胰高血糖素样肽-1(GLP-1)是肠促胰素的一种，由肠道上皮L细胞分泌，通过与其受体结合发挥生理效应。GLP-1受体(GLP-1R)属于G蛋白耦联受体亚家族，当GLP-1与GLP-1受体相结合后，引发一系列的生物学效应。有研究表明，GLP-1是以葡萄糖依赖的方式促进胰岛素分泌，即当人体内血糖浓度升高时，GLP-1刺激胰岛细胞，增加胰岛素分泌，降低血糖。GLP-1受体激动剂是一种新型的降糖药物，既可在不引起低血糖的情况下，有效控制血糖水平；又可通过增加饱腹感、延缓胃排空、抑制食欲及减少脂肪堆积等，有效减轻体质量，达到减肥的目的。
目前，以GLP-1受体激动剂为基础的多肽类药物利拉鲁肽、艾塞那肽、索马鲁肽等已经应用于肥胖的II型糖尿病患者以及单纯肥胖或超重患者，均显示出明显地减轻体质量作用，但常伴有恶心、呕吐等胃肠道不良反应。口服非多肽类药物一直是研究机构尝试用于治疗II型糖尿病及减肥的药物，但由于小分子难以模拟受体与多肽的相互作用，限制了胰高血糖素样肽-1受体小分子药物的发现。
目前公开非多肽类GLP-1受体激动剂的专利申请有WO2009/111700、WO2010/114824、WO2011/114271、WO2013/090454、WO2018/056453、WO2018/109607、WO2019239319、WO2019239371、WO2020103815等。其中，目前仅有vTv公司的TTP-273和辉瑞公司的PF-06882961进入了临床二期研究。
因此，本发明意在发现新的非多肽类GLP-1受体激动剂、特别是具有良好的生物性能、能够被安全地应用到人体中的新化合物，本发明也提供用于预防和/或治疗涉及GLP-1相关疾病、特别是糖尿病相关疾病的所需工具。
发明内容
本发明提供了一系列的苯并咪唑类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用。
具体而言，本发明提供式(I)的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其中所有变量如本文所定义。
Figure PCTCN2021133447-appb-000001
这些化合物是胰高血糖素样肽1受体(GLP-1R)的激动剂。本发明还涉及包含这些化合物的药物组合物以及使用该化合物治疗糖尿病等疾病的药物中的用途。
具体的，本发明通过以下技术方案来实现：
式(I)的化合物：
Figure PCTCN2021133447-appb-000002
或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其中：
A选自苯环、杂芳环、8～10元稠芳环；
R 1选自氢、卤素、氰基、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、烷氧烷基、环烷基、杂环烷基、1个或多个R 7取代的烷基、1个或多个R 8取代的芳基和杂芳基；
m为0、1、2或3；
W为O或NH；
R 2选自氢、卤素、氰基、烷基、卤代烷基、烷氧基、烷氧烷基；
R 3选自氟、羟基、氰基、氧代(＝O)、C 1-3烷基、OC 1-3烷基、C 3-4环烷基、或2个R 3一起环化成C 3-4螺环烷基，其中C 1-3烷基、OC 1-3烷基、C 3-4环烷基或C 3-4螺环烷基在化合价容许时可经0～3个氟原子或经0～1个羟基取代；
q为0、1、2；
X为CH或N；
Y为CH或N；
R 5选自卤素、羟基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷氧烷基、环烷基、杂环烷基、烷基环烷基、烷基杂环烷基；
R 4为-C 1-3烷基、-C 0-3亚烷基-C 3-6环烷基、-C 0-3亚烷基-R 9或-C 1-3亚烷基-R 6，其中所述的烷基在化合价容许时可经0至3个独立地选自0至3个F原子的取代基或经0至1个选自-C 0-1亚烷基-CN、-C 0-1亚烷基-OR O和-N(R N) 2的取代基取代，其中所述的亚烷基和环烷基在化合价容许时可独立地经0至2个独立地选自0至2个F原子的取代基或经0至1个选自-C 0-1亚烷基-CN、-C 0-1亚烷基-OR O和-N(R N) 2的取代基取代；
R 9为4至6元杂环烷基，其中该杂环烷基在化合价容许时可经0至2个独立地选自下列的取代基取代：
0至1个氧代(＝O)，
0至1个-CN，
0至2个F原子，或
0至2个独立地选自-C 1-3烷基和-OC 1-3烷基的取代基，其中C 1-3烷基和OC 1-3烷基的烷基在化合价容许时可经0至3个独立地选自下列的取代基取代：
0至3个F原子，
0至1个-CN，或
0至1个-OR O；
R 6为5至6元杂芳基，其中该杂芳基在化合价容许时可经▼0至2个独立地选自下列的取代基取代：
0至2个卤素，
0至1个选自-OR O和-N(R N) 2的取代基，或
0至2个-C 1-3烷基，其中该烷基在化合价容许时可经0至3个独立地选自下列的取代基取代：
0至3个F原子，或
0至1个-OR O；
各R O独立地为H或-C 1-3烷基，其中C 1-3烷基可经0至3个F原子取代；
各R N独立地为H或-C 1-3烷基；
Z 1、Z 2和Z 3各自独立地为-CR Z或N，各R Z独立地为H、F、Cl或-CH 3；
R 7选自卤素、氰基、羟基、环烷基、杂环烷基、砜基；
R 8选自卤素、氰基、烷基、卤代烷基，烷氧基、卤代烷氧基、烷氧烷基、环烷基、杂环烷基、砜基。
作为本发明的一种优选方案，所述化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐如式(III)所示：
Figure PCTCN2021133447-appb-000003
其中：
A选自苯环、杂芳环、8～10元稠芳环；
R 1选自氢、卤素、氰基、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、烷氧烷基、环烷基、杂环烷基、1个或多个R 7取代的烷基、1个或多个R 8取代的芳基和杂芳基；
m为0、1、2或3；
W为O或NH；
R 3选自氟、羟基、氰基、氧代(＝O)、C 1-3烷基、OC 1-3烷基、C 3-4环烷基、或2个R 3一起环化成C 3-4螺环烷基，其中C 1-3烷基、OC 1-3烷基、C 3-4环烷基或C 3-4螺环烷基在化合价容许时可经0～3个氟原子或经0～1个羟基取代；
q为0、1、2；
X为CH或N；
Y为CH或N；
R 5选自卤素、羟基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷氧烷基、环烷基、杂环烷基、烷基环烷基、烷基杂环烷基；
R 4为-C 1-3烷基、-C 0-3亚烷基-C 3-6环烷基、-C 0-3亚烷基-R 9或-C 1-3亚烷基-R 6，其中所述的烷基在化合价容许时可经0至3个独立地选自0至3个F原子的取代基或经0至1个选自-C 0-1亚烷基-CN、-C 0-1亚烷基-OR O或-N(R N) 2的取代基取代，及其中所述的亚烷基和环烷基在化合价容许时可独立地经0至2个独立地选自0至2个F原子的取代基或经0至1个选自-C 0-1亚烷基-CN、-C 0-1亚烷基-OR O或-N(R N) 2的取代基取代；
R 9为4至6元杂环烷基，其中该杂环烷基在化合价容许时可经0至2个独立地选自下列的取代基取代：
0至1个氧代(＝O)，
0至1个-CN，
0至2个F原子，或
0至2个独立地选自-C 1-3烷基或-OC 1-3烷基的取代基，其中C 1-3烷基和OC 1-3烷基的烷基在化合价容许时可经0至3个独立地选自下列的取代基取代：
0至3个F原子，
0至1个-CN，或
0至1个-OR O；
R 6为5至6元杂芳基，其中该杂芳基在化合价容许时可经0至2个独立地选自下列的取代基取代：
0至2个卤素，
0至1个选自-OR O和-N(R N) 2的取代基，或
0至2个-C 1-3烷基，其中该烷基在化合价容许时可经0至3个独立地选自下列的取代基取代：
0至3个F原子，或
0至1个-OR O；
各R O独立地为H或-C 1-3烷基，其中C 1-3烷基可经0至3个F原子取代；
各R N独立地为H或-C 1-3烷基；
Z 1、Z 2和Z 3各自独立地为-CR Z或N，各R Z独立地为H、F、Cl或-CH 3；
R 7选自卤素、氰基、羟基、环烷基、杂环烷基、砜基；
R 8选自卤素、氰基、烷基、卤代烷基，烷氧基、卤代烷氧基、烷氧烷基、环烷基、杂环烷基、砜基。
作为本发明的一种优选方案，所述化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐如式(III)所示：
Figure PCTCN2021133447-appb-000004
其中：
A选自苯环、杂芳环、8～10元稠芳环；
R 1选自氢、卤素、氰基、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、烷氧烷基、环烷基、杂环烷基、1个或多个R 7取代的烷基、1个或多个R 8取代的芳基和杂芳基；
m为0、1、2或3；
R 3选自氟、羟基、氰基、C 1-3烷基、OC 1-3烷基、C 3-4环烷基、或2个R 3一起环化成C 3-4螺环烷基，其中C 1-3烷基和OC 1-3烷基、环烷基或螺环烷基在化合价容许时可经0～3个氟原子或经0～1个羟基取代；
q为0、1、2；
X为CH或N；
Y为CH或N；
R 5选自卤素、羟基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷氧烷基、环烷基、杂环烷基、烷基环烷基、烷基杂环烷基；
R 4为-C 1-3烷基、-C 0-3亚烷基-C 3-6环烷基、-C 0-3亚烷基-R 9或-C 1-3亚烷基-R 6，其中所述的烷基在化合价容许时可经0至3个独立地选自0至3个F原子的取代基或经0至1个选自-C 0-1亚烷基-CN、-C 0-1亚烷基-OR O或-N(R N) 2的取代基取代，及其中所述的亚烷基和环烷基在化合价容许时可独立地经0至2个独立地选自0至2个F原子的取代基或经0至1个选自-C 0-1亚烷基-CN、-C 0-1亚烷基-OR O或-N(R N) 2的取代基取代；
R 9为4至6元杂环烷基，其中该杂环烷基在化合价容许时可经0至2个独立地选自下列的取代基取代：
0至1个氧代(＝O)，
0至1个-CN，
0至2个F原子，或
0至2个独立地选自-C 1-3烷基或-OC 1-3烷基的取代基，其中C 1-3烷基和OC 1-3烷基的烷基在化合价容许时可经0至3个独立地选自下列的取代基取代：
0至3个F原子，
0至1个-CN，或
0至1个-OR O；
R 6为5至6元杂芳基，其中该杂芳基在化合价容许时可经0至2个独立地选自下列的取代基取代：
0至2个卤素，
0至1个选自-OR O和-N(R N) 2的取代基，或
0至2个-C 1-3烷基，其中该烷基在化合价容许时可经0至3个独立地选自下列的取代基取代：
0至3个F原子，或
0至1个-OR O；
各R O独立地为H或-C 1-3烷基，其中C 1-3烷基可经0至3个F原子取代；
各R N独立地为H或-C 1-3烷基；
Z 1、Z 2和Z 3各自独立地为-CR Z或N，各R Z独立地为H、F、Cl或-CH 3；
R 7选自卤素、氰基、羟基、环烷基、杂环烷基、砜基；
R 8选自卤素、氰基、烷基、卤代烷基，烷氧基、卤代烷氧基、烷氧烷基、环烷基、杂环烷基、砜基。
作为本发明的一种优选方案，所述烷基是指包含指定数量的碳原子的分支的、不分支的和环状的饱和烃链，优选自C 1-6的烷基，所述C 1-6的烷基选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、仲戊基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、叔戊基、1,2-二甲基丙基、异戊基、新戊基、正己基，异己基，仲己基，叔己基，新己基，2-甲基戊基，1，2-二甲基丁基，1-乙基丁基。
作为本发明的一种优选方案，所述烷氧基是指烷基醚自由基，优选自C 1-6的烷氧基，所述C 1-6的烷氧基选自甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、仲戊氧基、1-乙基丙氧基、2-甲基丁氧基、叔戊氧基、1,2-二甲基丙氧基、异戊氧基、新戊氧基、正己氧基，异己氧基，仲己氧基，叔己氧基，新己氧基，2-甲基戊氧基，1，2-二甲基丁氧基，1-乙基丁氧基。
作为本发明的一种优选方案，所述烷氧烷基是指烷基一个以上的氢原子被烷氧基取代，优选自C 1-4的烷氧C 1-4的烷基，进一步选自甲氧甲基、甲氧乙基、甲氧丙基、甲氧丁基、乙氧甲基、乙氧乙基、乙氧丙基、乙氧丁基、丙氧甲基、丙氧乙基、丙氧丙基、丙氧丁基、丁氧甲基、丁氧乙基、丁氧丙基、丁氧丁基等。
作为本发明的一种优选方案，所述卤素选自氟、氯、溴、碘，卤代烷基指烷基一个以上的氢原子被卤素取代，卤代烷氧基指烷氧基一个以上的氢原子被卤素取代，羟烷基指烷基一个以上的氢原子被羟基取代，杂环烷基是指烷基一个以上的氢原子被杂环取代，环烷亚甲基是指烷基一个以上的氢原子被环烷取代。作为本发明的一种优选方案，所述稠芳环选自萘或者稠芳杂环，所述稠芳杂环指芳环或杂芳环与杂芳环稠合而成，所述杂芳环上的杂原子选自氮、氧、硫，所述杂原子为一个或者多个。
作为本发明的一种优选方案，所述稠芳杂环选自吲唑、喹啉、异喹啉、喹喔啉、吲哚、异吲哚、噌啉、喹唑啉、酞嗪、嘌呤、萘啶、蝶啶、苯并呋喃、苯并噻吩、苯并噁唑、苯并噻唑、苯并异噁唑、苯并异噻唑、苯并噁二唑、苯并噻二唑、苯并***、苯并三嗪、苯并咪唑、吡嗪并吡唑、吡嗪并嘧啶、吡嗪并哒嗪、吡嗪并三嗪、嘧啶并吡唑、嘧啶并咪唑、嘧啶并***、嘧啶并三嗪、嘧啶并哒嗪、哒嗪并咪唑、哒嗪并吡唑、哒嗪并***、哒嗪并三嗪、三嗪并咪唑、三嗪并吡唑、三嗪并***、吡啶并咪唑、吡啶并哒嗪、吡啶并吡唑、吡啶并嘧啶、吡啶并三嗪、吡啶并噁唑、吡啶并噻唑、吡啶并异噁唑、吡啶并异噻唑、吡啶并噁二唑、吡啶并噻二唑、吡啶并呋喃、吡啶并吡咯、吡嗪并咪唑、吡嗪并***、吡嗪并噁唑、吡嗪并噻唑、吡嗪并异噁唑、吡嗪并异噻唑、吡嗪并噁二唑、吡嗪并噻二唑、吡嗪并呋喃、吡嗪并吡咯、嘧啶并噁唑、嘧啶并噻唑、嘧啶并异噁唑、嘧啶并异噻唑、嘧啶并噁二唑、嘧啶并噻二唑、嘧啶并呋喃、嘧啶并吡咯、哒嗪并噁唑、哒嗪并噻唑、哒嗪并异噁唑、哒嗪并异噻唑、哒嗪并噁二唑、哒嗪并噻二唑、哒嗪并呋喃、哒嗪并吡咯、三嗪并噁唑、三嗪并噻唑、三嗪并异噁唑、三嗪并异噻唑、三嗪并噁二唑、三嗪并噻二唑、三嗪并呋喃、三嗪并吡咯。其中所述萘啶选自
Figure PCTCN2021133447-appb-000005
Figure PCTCN2021133447-appb-000006
所述吡啶并咪唑选自
Figure PCTCN2021133447-appb-000007
Figure PCTCN2021133447-appb-000008
所述吡嗪并咪唑选自
Figure PCTCN2021133447-appb-000009
所述吡嗪并***选自
Figure PCTCN2021133447-appb-000010
Figure PCTCN2021133447-appb-000011
所述嘧啶并吡唑选自
Figure PCTCN2021133447-appb-000012
所述嘧啶并咪唑选自
Figure PCTCN2021133447-appb-000013
所述嘧啶并***选自
Figure PCTCN2021133447-appb-000014
所述哒嗪并咪唑选自
Figure PCTCN2021133447-appb-000015
Figure PCTCN2021133447-appb-000016
所述哒嗪并***选自
Figure PCTCN2021133447-appb-000017
所述三嗪并咪唑选自
Figure PCTCN2021133447-appb-000018
Figure PCTCN2021133447-appb-000019
所述吡啶并哒嗪选自
Figure PCTCN2021133447-appb-000020
所述吡啶并吡唑选自
Figure PCTCN2021133447-appb-000021
所述吡啶并嘧啶选自
Figure PCTCN2021133447-appb-000022
Figure PCTCN2021133447-appb-000023
所述吡啶并三嗪选自
Figure PCTCN2021133447-appb-000024
所述嘧啶并三嗪选自
Figure PCTCN2021133447-appb-000025
作为本发明的一种优选方案，所述杂环烷基的杂环选自4至10元杂环，所述4至10元杂环选自
Figure PCTCN2021133447-appb-000026
Figure PCTCN2021133447-appb-000027
所述芳基选自苯基；所述杂芳基选自5至12元杂芳基，所述5至12元杂芳基选自
Figure PCTCN2021133447-appb-000028
Figure PCTCN2021133447-appb-000029
作为本发明的一种优选方案，所述的“亚烷基”，是指烷基在化合价容许时可独立地经0至2个独立地被取代基取代，所述氰基是指基团-CN，所述羟基是指基团-OH，所述砜基是指基团-SO 2。
作为本发明的一种优选方案，所述的“杂环”，是指含一个或多个杂原子(氮、氧、硫)的饱和或不饱和杂环；所述的“芳环”，是指苯环；所述的“杂芳环”，是指具有4n+2个π电子的闭合共轭体系的杂环，如呋喃、噻吩、四氢吡咯、二氢吡唑、咪唑、噻唑、异噻唑、噻二唑、噁唑、噁二唑、异噁唑、哌啶、哌嗪、哒嗪、吡嗪、三嗪、嘧啶、吗啉或吡啶等；所述多个是指两个、三个、或四个。
作为本发明的一种优选方案，所述环烷选自C 3-6的环烷，C 3-6的环烷选自环丙基、环丁基、环戊基、环己基。
作为本发明的一种优选方案，所述A选自苯环、
Figure PCTCN2021133447-appb-000030
作为本发明的一种优选方案，所述化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐如式(I)所示，其中：
所述A选自苯环、
Figure PCTCN2021133447-appb-000031
R 1选自氢、氟、氯、溴、氰基、二氟乙基、三氟乙基；
m为0、1、2；
W为O或NH；
R 2选自氯、氰基、三氟甲基、甲氧基、甲氧甲基；
q为0、1；
R 3为氟、甲基、氧代(＝O)、羟基、氟代甲基、甲氧基乙基；
R 4为氧杂环丁-2-基甲基；
X为CH或N；
Y为CH或N；
R 5选自甲基、乙基、环丙甲基、氟代乙基、甲氧基乙基；
Z 1为CH；
Z 2为CH或CF；
Z 3为CH或N或CF。
作为本发明的一种优选方案，所述化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐如式(III)所示，其中：
所述A选自苯环、
Figure PCTCN2021133447-appb-000032
R 1选自氢、氟、氯、溴、氰基、二氟乙基、三氟乙基；
m为0、1、2；
W为O或NH；
q为0、1；
R 3为氟、甲基、氧代(＝O)、羟基、氟代甲基、甲氧基乙基；
R 4为氧杂环丁-2-基甲基；
X为CH或N；
Y为CH或N；
R 5为甲基、乙基、环丙甲基、氟代乙基、甲氧基乙基；
Z 1为CH；
Z 2为CH或CF；
Z 3为CH或N或CF。
作为本发明的一种优选方案，所述化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐如式(II)所示，其中：
所述A选自苯环、
Figure PCTCN2021133447-appb-000033
R 1选自氢、氟、氯、溴、氰基、二氟乙基、三氟乙基；
m为0、1、2；
q为0；
R 4为氧杂环丁-2-基甲基；
X为CH或N；
Y为CH或N；
R 5选自甲基、乙基、环丙甲基、氟代乙基、甲氧基乙基；
Z 1为CH；
Z 2为CH或CF；
Z 3为CH或N或CF。
作为本发明的一种优选方案，所述化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，当与R 5相连的碳原子为手性碳原子时，所述手性碳原子为S构型和/或R构型，优选S构型。
作为本发明的一种优选方案，所述化合物或其药学上可接受的盐，选自以下化合物：
Figure PCTCN2021133447-appb-000034
Figure PCTCN2021133447-appb-000035
Figure PCTCN2021133447-appb-000036
Figure PCTCN2021133447-appb-000037
作为本发明的一种优选方案，所述化合物或其药学上可接受的盐，选自以下化合物：
Figure PCTCN2021133447-appb-000038
Figure PCTCN2021133447-appb-000039
Figure PCTCN2021133447-appb-000040
Figure PCTCN2021133447-appb-000041
Figure PCTCN2021133447-appb-000042
作为本发明的一种优选方案，所述药学上可接受的盐是指化合物与药学上可接受的酸或碱制备。
作为本发明的一种优选方案，所述化合物的一个以上的氢原子上被同位素氘取代。
本发明另一目的提供了一种药物组合物，包括前述的式(I)的化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐和一种以上药学上可接受的载体。
本发明另一目的在于提供所述的式(I)的化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐在制备用于制备治疗GLP-1相关疾病的药物用途，具体地，涉及糖尿病相关疾病的药物用途。
除非另有说明，本文所用的下列术语和短语旨在具有下列含义。一个特定的术语或短语在没有特别定义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的，而应该按照普通的含义去理解。当本文中出现商品名时，意在指代其对应的商品或其活性成分。这里所采用的术语“药学上可接受的”，是针对那些化合 物、材料、组合物和/或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。
术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐，由本发明发现的具有特定取代基的化合物与药学上可接受的酸或碱制备。
除了盐的形式，本发明所提供的化合物还存在前药形式。本文所描述的化合物的前药容易地在生理条件下发生化学变化从而转化成本发明的化合物。此外，前体药物可以在体内环境中通过化学或生化方法被转换到本发明的化合物。
本发明的某些化合物可以以非溶剂化形式或者溶剂化形式存在，包括水合物形式。一般而言，溶剂化形式与非溶剂化的形式相当，都包含在本发明的范围之内。
本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本发明设想所有的这类化合物，包括顺式和反式异构体、(-)-和(+)-对对映体、(R)-和(S)-对映体、非对映异构体、(D)-异构体、(L)-异构体，及其外消旋混合物和其他混合物，例如对映异构体或非对映体富集的混合物，所有这些混合物都属于本发明的范围之内。烷基等取代基中可存在另外的不对称碳原子。所有这些异构体以及它们的混合物，均包括在本发明的范围之内。
可以通过的手性合成或手性试剂或者其他常规技术制备光学活性的(R)-和(S)-异构体，以及D和L异构体。如果想得到本发明某化合物的一种对映体，可以通过不对称合成或者具有手性助剂的衍生作用来制备，其中将所得非对映体混合物分离，并且辅助基团裂开以提供纯的所需对映异构体。或者，当分子中含有碱性官能团(如氨基)或酸性官能团(如羧基)时，与适当的光学活性的酸或碱形成非对映异构体的盐，然后通过本领域所公知的常规方法进行非对映异构体拆分，然后回收得到纯的对映体。此外，对映异构体和非对映异构体的分离通常是通过使用色谱法完成的，所述色谱法采用手性固定相，并任选地与化学衍生法相结合(例如由胺生成氨基甲酸盐)。
本发明化合物分子的原子是同位素，通过同位素衍生化通常可以延长半衰期、降低清除率、代谢稳定和提高体内活性等效果。并且，包括一个实施方案，其中至少一个原子被具有相同原子数(质子数)和不同质量数(质子和中子和)的原子取代。本发明化合物中包括的同位素的实例包括氢原子、碳原子、氮原子、氧原子、磷原子、硫原子、氟原子、氯原子，其分别包括 2H、 3H、 13C、 14C、 15N、 17O、 18O、 31P、 32P、 35S、 18F、 36Cl。特别的是，随其衰退而发射辐射的放射性同位素例如 3H或 14C可用于药物制剂或者体内化合物的局部解剖学检验。稳定的同位素既不随其量衰减或变化，也不具有放射性，因此其可以安全使用。当构成本发明化合物分子的原子是同位素时，通过用包含相应同位素的试剂替代合成中所用的试剂，可以根据通用方法转化同位素。
本发明的化合物可以在一个或多个构成该化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，可用放射性同位素标记化合物，比如氘( 2H)，碘-125( 125I)或C-14( 14C)。本发明的化合物的所有同位素组成的变换，无论放射性与否，都包括在本发明的范围之内。
进一步地，本发明的化合物一个或多个氢原子上被同位素氘( 2H)取代，本发明化合物氘代后，具有延长半衰期、降低清除率、代谢稳定和提高体内活性等效果。
所述同位素衍生物的制备方法通常包括：相转移催化方法。例如，优选的氘化方法采用相转移催化剂(例如，四烷基铵盐，NBu 4HSO 4)。使用相转移催化剂交换二苯基甲烷化合物的亚甲基质子，导致比在酸(例如，甲磺酸)存在下用氘化硅烷(例如三乙基氘化甲硅烷)或用路易斯酸如三氯化铝采用氘化硼酸钠还原而引入较高的氘。
术语“药学上可接受的载体”是指能够递送本发明有效量活性物质、不干扰活性物质的生物活性并且对宿主或者患者无毒副作用的任何制剂载体或介质，代表性的载体包括水、油、蔬菜和矿物质、膏基、洗剂基质、软膏基质等。这些基质包括悬浮剂、增粘剂、透皮促进剂等。它们的制剂为化妆品领域或局部药物领域的技术人员所周知。关于载体的其他信息，可以参考Remington:The Science and Practice of Pharmacy,21st Ed.,Lippincott,Williams&Wilkins(2005)，该文献的内容通过引用的方式并入本文。
术语“赋形剂”通常是指配制有效的药物组合物所需要载体、稀释剂和/或介质。
针对药物或药理学活性剂而言，术语“有效量”或“治疗有效量”是指无毒的但能达到预期效果的 药物或药剂的足够用量。对于本发明中的口服剂型，组合物中一种活性物质的“有效量”是指与该组合物中另一种活性物质联用时为了达到预期效果所需要的用量。有效量的确定因人而异，取决于受体的年龄和一般情况，也取决于具体的活性物质，个案中合适的有效量可以由本领域技术人员根据常规试验确定。
术语“活性成分”、“治疗剂”、“活性物质”或“活性剂”是指一种化学实体，它可以有效地治疗目标紊乱、疾病或病症。
“任选”或“任选地”指的是随后描述的事件或状况可能但不是必需出现的，并且该描述包括其中所述事件或状况发生的情况以及所述事件或状况不发生的情况。
Figure PCTCN2021133447-appb-000043
表示连接键。
本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备，包括下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式，优选的实施方式包括但不限于本发明的实施例。
附图说明
图1，为实施例39中39A的单晶结构示意图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但发明的实施方式不限于此。
化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或质谱(MS)来确定的。NMR位移(δ)以10 -6(ppm)的单位给出。NMR的测定是用Bruker AVANCE-III核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d 6)，氘代氯仿(CDCl 3)，内标为四甲基硅烷(TMS)。
MS的测定用ISQ EC质谱仪(生产商：Thermo,型号：ISQ EC)。
高效液相色谱法(HPLC)分析使用Thermo U3000 HPLC DAD高效液相色谱仪和Agilent 1260高效液相色谱仪。
CombiFlash快速制备仪使用CombiFlash Rf+LUMEN(TELEDYNE ISCO)。
薄层层析硅胶板使用烟台银龙HSGF 254或GF 254硅胶板，薄层色谱法(TLC)使用的硅胶板采用的规格是0.17mm～0.23mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。
硅胶柱色谱法一般使用乳山上邦硅胶100～200目硅胶为载体。
试剂：LDA-二异丙基氨基锂，THF-四氢呋喃，TEA-三乙胺，Dioxane-1，4-二氧六环，BH 3-硼烷，EDCl-1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐，HOBT-1-羟基苯并***，DIPEA-N,N-二异丙基乙胺，DMF-N,N-二甲基甲酰胺，K 2CO 3-碳酸钾，DMSO-二甲基亚砜，EtOH-乙醇，NaH-氢化钠，toluene-甲苯，r.t.-室温，PdCl 2(dppf)-[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯，Pd(OAc)2-乙酸钯，PhMe-甲苯，HCl/dioxane-盐酸的二氧六环，NaCO 3-碳酸钠，MeOH-甲醇，DCE-二氯乙烷，NCS-N-氯代丁二酰亚胺，TfOH-三氟甲磺酸，TFA-三氟乙酸，AcOH-乙酸，(CH 2O)n多聚甲醛，CDI-N,N'-羰基二咪唑，LAH-氢化铝锂，PPA-多聚磷酸，TsOH-对甲苯磺酸，NBS-N-溴代丁二酰亚胺，BPO-过氧苯甲酰，HATU-2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N,N,-四甲基脲六氟磷酸酯,KOH.H 2O-一水合氢氧化钾，NaOH-氢氧化钠，CS 2CO 3-碳酸铯，AIBN-偶氮二异丁腈，MeCN-乙腈，DEAD-偶氮二甲酸二乙酯，DAST-二乙氨基三氟化硫，PPH 3-三苯基膦，DCM-二氯甲烷，DMAP-4-二甲氨基吡啶，TBD-1,5,7-三叠氮双环(4,4,0)癸-5-烯，DIEA-N,N-二异丙基乙胺，BINAP-2,2'-双(二苯基膦)-1,1'-联萘，NMP-N-甲基吡咯烷酮。
实施例1 2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(1A)和2-((R)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(1B)
Figure PCTCN2021133447-appb-000044
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-氯-6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶
Figure PCTCN2021133447-appb-000045
将(4-氯-2-氟苯基)甲醇(1.6克，10.0毫摩尔)，2,6-二氯吡啶(1.627克，11.0毫摩尔)，氢氧化钠(1.2克，30.0毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(30.0毫升)中，120摄氏度搅拌12小时。
反应结束后，将反应液倒入100毫升冰水中，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并并干燥有机相，浓缩所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)得到1.2克白色固体2-氯-6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶(收率：44.2％)。LC-MS:RT＝2.29min,[M+H] +＝272.04。
步骤B：合成6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)-3',6'-二氢-[2,4'-联吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000046
将2-氯-6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶(1.2克，4.4毫摩尔)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(1.3克，4.4毫摩尔)，[1,1-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(323.0毫克)，磷酸钾(1.8克，8.8毫摩尔)溶于水(4毫升)，二氧六环(20毫升)中，温度升高到75摄氏度搅拌8小时。
反应结束后，将反应液倒入20毫升水中，乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取，合并并干燥有机相，浓缩所得粗品用柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)得到1.2克淡黄色固体6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)-3',6'-二氢-[2,4'-联吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯(收率：65.2％)。LC-MS:RT＝2.43min,[M+H] +＝419.24。
步骤C：合成4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000047
将6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)-3',6'-二氢-[2,4'-联吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯(1.1克，2.6毫摩尔)溶于乙酸乙酯(55.0毫升)中，加入钯/碳((275.0毫克)，于氢气(一个大气压)下室温反应6小时。
反应结束后，过滤，旋干，得到1.2克无色油状物4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(收率：80.0％)。LC-MS:RT＝2.43min,[M+H-56] +＝365.20。
步骤D：合成2-((4-氯-2-氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶
Figure PCTCN2021133447-appb-000048
将4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.1克，4.5毫摩尔)溶于二氧六环(5.0毫升)中，冰浴条件下加入盐酸的二氧六环溶液(35.0毫升)中，室温反应2小时。
反应完全后，有固体析出，过滤，旋干，得到500.0毫克淡黄色固体2-((4-氯-2-氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶。
步骤E：合成2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶基-2-基)哌啶-1-基)丙酸乙酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000049
室温下，将2-((4-氯-2-氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶(500.0豪克，1.6毫摩尔)，2-溴丙酸乙酯(309.3豪克，1.7毫摩尔)，碳酸钾(441.0毫克，3.2毫摩尔)溶于乙腈(8.0毫升)中，在室温下搅拌过夜。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并并干燥有机相，浓缩所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/3)得到353.0毫克白色固体2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶基-2-基)哌啶-1-基)丙酸乙酯(收率：52.5％)。LC-MS:RT＝1.82min,[M+H] +＝421.25。
步骤F：合成2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶基-2-基)哌啶-1-基)丙酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000050
室温下，将2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶基-2-基)哌啶-1-基)丙酸乙酯(323豪克0.7毫摩尔)溶于混合溶剂(3.6毫升，乙醇/水＝5/1)中，加入氢氧化钠(121.6毫克，3.0毫摩尔)，室温下搅拌12小时。
反应结束后，往反应液中加入0.5N的稀盐酸，调pH＝2，有白色固体析出，过滤，旋干固体得到302.0毫克白色固体2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶基-2-基)哌啶-1-基)丙酸。LC-MS:RT＝1.84min,[M+H] +＝393.21。
步骤G：合成甲基4-(2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000051
室温下，将2-(4-(6-((4-氯基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙酸(262.0毫克0.7毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2.5毫升)中，加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N,N,-四甲基脲六氟磷酸酯(380.0毫克，1.0毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(0.5毫升)，搅拌0.5小时后加入(S)-4-氨基-3-(((氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(158.0毫克，0.6毫摩尔)，室温下搅拌过夜。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯萃取(30毫升×3次)，合并有机相，无水硫酸钠干燥， 过滤后浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)得到395.0毫克淡黄色固体甲基4-(2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸酯(收率：92.5％)。LC-MS:RT＝1.82min,[M+H] +＝611.31。
步骤H：合成2-(1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000052
将甲基4-(2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸酯(355.0毫克，0.6毫摩尔)溶于乙酸(4.0毫升)中，加热至60摄氏度反应5小时。
反应结束后，将反应液倒入50.0毫升饱和碳酸氢钠水溶液中，乙酸乙酯萃取(30毫升×3次)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩，所得粗品用Prep-TLC分离(展开剂：二氯甲烷/甲醇/＝13/1)得到118.0毫克淡黄色固体2-(1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：33.0％)。LC-MS:RT＝1.84min,[M+H] +＝593.31。
步骤I：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(1A)和2-((R)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(1B)
Figure PCTCN2021133447-appb-000053
室温下，将2-(1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(70.0毫克0.2毫摩尔)溶于混合溶剂(2.5毫升，四氢呋喃/甲醇/水＝1/3/1)中，加入氢氧化锂(48.0毫克，1.1毫摩尔)，室温反应24小时。
反应结束后，加饱和氯化铵淬灭，混合溶剂萃取(15毫升×3次，二氯甲烷/甲醇＝15/1)合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩，所得粗品用反相高效液相制备(洗脱液浓缩、冻干)，制备条件如下：色谱柱：Agilent 5 Prep-C18 100mm×30mm 5μM；流动相：水(含有0.1％的氨水)和乙腈洗脱；流速：20毫升/分钟；梯度：由27％乙腈在9.07分钟及12.00分钟分别洗脱出来1A和1B，检测波长：254nm。
先后得到8.0毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(1A)(收率：7.0％)和4.0毫克2-((R)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲 基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(1B)(收率：3.5％)。
化合物1A：HPLC:RT＝9.07min。LC-MS:RT＝1.82min,[M+H] +＝579.29。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.20(brs,1H),7.80(dd,J＝8.4,1.3Hz,1H),7.63–7.53(m,3H),7.45(dd,J＝10.0,1.9Hz,1H),7.28(dd,J＝8.2,2.0Hz,1H),6.84(d,J＝7.3Hz,1H),6.66(d,J＝8.2Hz,1H),5.36(s,2H),5.22–5.16(m,1H),4.87–4.78(m,1H),4.62(dd,J＝15.2,5.2Hz,1H),4.49–4.41(m,2H),4.18(dt,J＝9.4,5.9Hz,1H),2.98–2.96(m,1H),2.65–2.60(m,2H),2.59–2.49(m,2H),2.38–2.21(m,2H),1.86–1.68(m,3H),1.58–1.48(m,1H),1.47(d,J＝6.7Hz,3H)。
化合物1B：HPLC:RT＝12.00min。LC-MS:RT＝1.84min,[M+H] +＝579.31。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.38(s,1H),7.90(d,J＝7.8Hz,1H),7.79(d,J＝8.1Hz,1H),7.70–7.57(m,2H),7.47(d,J＝9.8Hz,1H),7.36–7.26(m,1H),6.91–6.89(m,1H),6.74–6.72(m,1H),5.38(s,2H),5.14–4.91(m,2H),4.71–4.46(m,2H),3.60–3.15(m,3H),2.90–2.75(m,1H),2.50–2.39(m,1H),2.14–1.92(m,4H),1.79–1.62(m,3H),1.28–1.22(m,4H)。
实施例2 2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(2A)和2-((R)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(2B)
Figure PCTCN2021133447-appb-000054
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000055
将3-氟-4-(羟甲基)苄腈(3.45克，22.88毫摩尔)，4-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.50克，15.25毫摩尔)，钯催化剂(644毫克)，碳酸铯(10克，30.50毫摩尔)溶于二氧六环(80毫升)中，温度升高到100摄氏度搅拌8个小时。
反应结束后，用硅藻土抽滤，用二氯甲烷淋洗，浓缩滤液，所得粗品用柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝10/1)得到5克淡黄色油状液体4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基哌啶-1-羧酸叔丁酯(收率：80％)。LC-MS:RT＝2.27min,[M-55] +＝356.21。
步骤B：合成3-氟-4-(((6-(哌啶-4-基)吡啶基-2-基)氧基)甲基)苄腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000056
将4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(5.00克)溶于盐酸的二氧六环溶液(40毫升)中，室温搅拌。
反应完全后，减压旋干得到4.5克淡黄色固体3-氟-4-(((6-(哌啶-4-基)吡啶基-2-基)氧基)甲基)苄腈。LC-MS:RT＝1.65min,[M+H] +＝312.21。
步骤C：合成2-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙酸乙酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000057
室温下，将3-氟-4-(((6-(哌啶-4-基)吡啶基-2-基)氧基)甲基)苄腈(4.50克，14.46毫摩尔)和碳酸钾(4.00克，28.92毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(50毫升)中，再加入2-溴丙酸乙酯(3.16毫克,17.35毫摩尔)，在室温下搅拌。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭反，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并并干燥有机相，浓缩所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/3)得到3.7克白色固体2-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙酸乙酯(收率：62％)。LC-MS:RT＝1.70min,[M+H] +＝412.25。
步骤D：合成2-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000058
室温下，将2-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙酸乙酯(1.00克2.43毫摩尔)溶于混合溶剂(22毫升，乙醇/水＝5/1)中，加入氢氧化锂(185毫克，4.87毫摩尔)，室温下搅拌48小时。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯萃取(20毫升×3次)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)得到200毫克白色固体2-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙酸(收率：21％)。LC-MS:RT＝1.73min,[M+H] +＝384.27。
步骤E：合成甲基4-(2-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000059
室温下，将2-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙酸(200毫克0.51毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)中，加入HATU(388毫克，1.02毫摩尔)和DIEA(2毫升)，搅拌0.5小时后加入(S)-4-氨基-3-((氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(144毫克，0.61毫摩尔)室温下搅拌。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯萃取(20毫升×3次)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)得到183毫克淡黄色固体甲基4-(2-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸酯(收率：60％)。LC-MS:RT＝1.77min,[M+H] +＝602.32。
步骤F：合成2-(1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000060
将甲基4-(2-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁-2-基)甲基)氨基)苯甲酸酯(183毫克，0.30毫摩尔)溶于乙酸(2毫升)中，加热至60摄氏度反应。
反应结束后，直接浓缩所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝7/1)得到150毫克棕黄色固体2-(1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：86％)。LC-MS:RT＝1.79min,[M+H] +＝584.32。
步骤G：合成化合物2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(2A)和2-((R)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(2B)
Figure PCTCN2021133447-appb-000061
室温下，将2-(1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(150毫克0.26毫摩尔)溶于混合溶剂(5毫升，四氢呋喃/甲醇/水＝2.5/2.5/1)中，加入氢氧化锂(40毫克，1.05毫摩尔)，升温至40摄氏度反应。
反应结束后，加饱和氯化铵淬灭，依次用乙酸乙酯(10毫升×2次)，混合溶剂萃取(10毫升×2次，二氯甲烷/甲醇＝30/1),合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩，所得粗品用反相高效液相制备(洗脱液浓缩、冻干)，制备条件如下：色谱柱：Agilent 5 Prep-C18 100mm×30mm 5μM；流动相：水(含有0.1％的氨水)和乙腈洗脱；流速：20毫升/分钟；梯度：由23％乙腈在13.77分钟及15.74分钟分别洗脱出来2A和2B，检测波长：254nm。先后得到18.93毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(2A)(收率：13％)和31.15毫克白色固体2-((R)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(2B)(收率：21％)。
化合物2A：HPLC:RT＝13.77min。LC-MS:RT＝1.77min,[M+H] +＝570.31。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.77(brs,1H),8.29–8.28(m,1H),7.87(d,J＝10.4Hz,1H),7.80(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.70–7.66(m,3H),7.62(dd,J＝8.2,7.4Hz,1H),6.84(d,J＝7.1Hz,1H),6.70(d,J＝7.7Hz,1H),5.44(brs,2H),5.19–5.14(m,1H),4.83(dd,J＝15.5,3.1Hz,1H),4.68(dd,J＝15.4,5.6Hz,1H),4.50–4.39(m,2H),4.18(dt,J＝9.1,5.7Hz,1H),2.98–2.94(m,1H),2.67–2.45(m,4H),2.37–2.19(m,2H),1.84–1.61(m,3H),1.46(d,J＝6.8Hz,3H),1.54–1.43(m,1H)。
化合物2B：HPLC:RT＝15.74min。LC-MS:RT＝1.77min,[M+H] +＝570.35。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.24(s,1H),7.87(d,J＝10.1Hz,1H),7.78(dd,J＝8.4,1.4Hz,1H),7.72-7.67(m,2H),7.63(dd,J＝8.0,6.2Hz,2H),6.86(d,J＝7.3Hz,1H),6.70(d,J＝8.1Hz,1H),5.46(s,2H),5.12-5.00(m,1H),4.89(dd,J＝15.1,8.6Hz,1H),4.63-4.40(m,4H),3.04(d,J＝10.8Hz,1H),2.78-2.69(m,1H),2.61(t,J＝10.4Hz,1H),2.55(s,2H),2.26(t,J＝10.7Hz,1H),1.96-1.59(m,4H),1.55-1.39(m,4H)。
实施例3 2-((S)-1-(4-(6-((5-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环 丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000062
具体合成路线如下：
步骤A：合成5-氯-2-氟苄醇
Figure PCTCN2021133447-appb-000063
室温下，将5-氯-2-氟苯甲醛(500毫克，3.16毫摩尔)溶于甲醇(15毫升)中，在冰浴中冷却至零摄氏度，加入硼氢化钠(234毫克，6.33毫摩尔)，在室温下搅拌。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，二氯甲烷(30毫升)萃取，水洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/3)得到410毫克无色油状液体5-氯-2-氟苄醇(收率：81％)。LC-MS:RT＝1.78min。
步骤B：合成4-(6-((5-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000064
将5-氯-2-氟苄醇(410毫克，2.56毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)中，在冰浴中冷却至零摄氏度，加入钠氢(270毫克，5.12毫摩尔)，在室温下搅拌0.5小时，再加入4-(6-氟吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(718毫克，2.56毫摩尔)，室温反应。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯(30毫升)萃取，用水洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)得到550毫克无色油状液体4-(6-((5-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(收率：51％)。LC-MS:RT＝2.41min,[M-55] +＝365.17。
步骤C：合成2-((5-氯-2-氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶
Figure PCTCN2021133447-appb-000065
将4-(6-((5-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(550毫克，1.31毫摩尔)溶于盐酸的二氧六环溶液(10毫升)中，室温搅拌。反应完全后，减压浓缩得到520克白色固体2-((5-氯-2-氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶。LC-MS:RT＝1.72min,[M+H] +＝321.18。
步骤C：合成2-((S)-1-(4-(6-((5-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000066
室温下，将2-((5-氯-2-氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶(150毫克，0.47毫摩尔)，DIEA(1毫升)，碘化钾(156毫克，0.94毫摩尔)和碳酸钾(130克，0.94毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)中，再加入2-((R)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(144毫克,0.47毫摩尔)，升温至50摄氏度反应。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯(20毫升×2次)萃取，合并并干燥有机相，浓缩所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/8)得到90毫克白色固体化合物2-((S)-1-(4-(6-((5-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：32％)。LC-MS:RT＝1.86min,[M+H] +＝593.31。
步骤D：合成2-((S)-1-(4-(6-((5-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000067
室温下，将化合物2-((S)-1-(4-(6-((5-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(90毫克0.15毫摩尔)溶于混合溶剂(5毫升，四氢呋喃/甲醇/水＝2.5/2.5/1)中，加入氢氧化锂(23毫克，0.61毫摩尔)，升温至40摄氏度反应。
反应结束后，加饱和氯化铵淬灭，依次用乙酸乙(10毫升×2次)，混合溶剂萃取(10毫升×2次，二氯甲烷/甲醇＝30/1)，合并有机相并，用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩，浓缩所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝20/1)得到31.88毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((5-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：21％)。LC-MS:RT＝1.81min,[M+H] +＝579.30。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ12.72(s,1H),8.28(s,1H),7.79(s,1H),7.64(dd,J＝30.9,7.9Hz,3H),7.41(d,J＝3.6Hz,1H),7.26(t,J＝9.2Hz,1H),6.83(d,J＝7.4Hz,1H),6.67(d,J＝8.0Hz,1H),5.36(d,J＝9.1Hz,2H),5.16(s,1H),4.84(d,J＝13.6Hz,1H),4.69(s,1H),4.54-4.31(m,2H),4.17(dt,J＝11.4,5.7Hz,1H),2.97(s,1H),2.62(d,J＝6.0Hz,2H),2.24(d,J＝54.1Hz,3H),1.73(dd,J＝28.8,21.5Hz,4H),1.59-1.35(m,4H)。
实施例4 2-((S)-1-(4-(6-((3-氟吡啶-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000068
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(6-((3-氟吡啶-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000069
将(3-氟吡啶-4-基)甲醇(86毫克，0.68毫摩尔)和4-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(201毫克，0.68毫摩尔)溶解于4毫升无水二氧六环中，加入碳酸铯(443毫克，1.36毫摩尔)和甲烷磺酸(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(58毫克，0.068毫摩尔)，氮气置换3次，于100摄氏度下反应7小时。
反应结束，加水稀释，乙酸乙酯(50毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得粗品经过柱(正己烷/乙酸乙酯＝4/1)分离得101毫克淡黄色固体4-(6-((3-氟吡啶-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(收率：38.3％)。
步骤B：合成4-(6-((3-氟吡啶-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶
Figure PCTCN2021133447-appb-000070
将4-(6-((3-氟吡啶-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(101毫克，0.26毫摩尔)溶解于3毫升甲醇中，零摄氏度下加入4M盐酸二氧六环溶液(3毫升)，升至室温下反应40分钟。
反应结束，反应液直接旋干得98毫克白色固体4-(6-((3-氟吡啶-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶，直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝1.56min,[M+H] +＝288.22。
步骤C：合成4-((S)-2-氯丙酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000071
室温下，将(S)-4-氨基-3-(((氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(500.0毫克，2.25毫摩尔)、(S)-2-氯丙酸(243.0毫克，2.25毫摩尔)溶于二氯甲烷(10.0毫升)中，依次加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(1.28克，3.38毫摩尔)、N,N-二异丙基乙胺(3毫升)，N 2保护下，50摄氏度反应2.0小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取。合并有机相，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝2/1)得到580.0毫克淡黄色固体4-((S)-2-氯丙酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(收率：79.1％)。LC-MS:RT＝1.82min,[M+H] +＝327.18。
步骤D：合成2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000072
室温下，将4-((S)-2-氯丙酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(580.0毫克，1.78毫摩尔)溶于乙酸(10.0毫升)中，N 2保护下，60摄氏度反应12.0小时。
反应结束，加水淬灭，用碳酸氢钠溶液(0.5摩尔/升)调pH至6，二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷：乙酸乙酯＝4：1)得到520.0毫克淡红色油2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：94.8％)。LC-MS:RT＝1.86min,[M+H] +＝309.23。
步骤E：合成2-((S)-1-(4-(6-((3-氟吡啶-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000073
室温下，将4-(6-((3-氟吡啶-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶(55.0毫克，0.19毫摩尔)、2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(58.5毫克，0.19毫摩尔)、碘化钾(31.5毫克，0.19毫摩尔)和碳酸铯(123.1毫克，0.38毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中，最后加入N,N-二异丙基乙胺(1.0毫升)，N 2保护下，45摄氏度反应3.0小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取。合并有机相，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝20/1)得到65.0毫克淡黄色固体2-((S)-1-(4-(6-((3-氟吡啶-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯(收率：58.6％)。LC-MS:RT＝1.73min,[M+H] +＝560.34。
步骤F：合成2-((S)-1-(4-(6-((3-氟吡啶-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000074
室温下，向含有2-((S)-1-(4-(6-((3-氟吡啶-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯(65.0毫克，0.11毫摩尔)的四氢呋喃(3.0毫升)中滴加氢氧化锂(20.0毫克，0.48毫摩尔)水溶液(1.0毫升)，最后加入(1.0毫升)的甲醇，45摄氏度下反应3.0小时。
反应结束，加水淬灭，用氯化铵水溶液(0.5摩尔/升)调pH至6，二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，合并有机相，氯化铵水溶液(30毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，得到的粗产品经过柱分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝15/1),得32毫克淡黄色固体2-((S)-1-(4-(6-((3-氟吡啶-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸(收率：51.1％)。LC-MS:RT＝1.68min,[M+H] +＝546.31。
实施例5 2-((S)-1-(4-(6-((2,5-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000075
具体合成路线如下：
步骤A：合成(2,5-二氟苯基)甲醇
Figure PCTCN2021133447-appb-000076
冰浴下，将2,5-二氟苯甲醛(500.0毫克，3.52毫摩尔)加入(30.0毫升)甲醇中，再分批次加入硼氢化钠(200.6毫克，5.28毫摩尔)。N 2保护下，室温搅拌1.0小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩得到402.0毫克无色油状物(2,5-二氟苯基)甲醇(收率：80.4％)。
步骤B：合成4-((R)-2-氯丙酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000077
室温下，将(S)-4-氨基-3-(((氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(500.0毫克，2.25毫摩尔)、(R)-2-氯丙酸(243.0毫克，2.25毫摩尔)溶于二氯甲烷(10.0毫升)中，依次加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(1.28克，3.38毫摩尔)、N,N-二异丙基乙胺(3毫升)，N 2保护下，50摄氏度反应2.0小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取。合并有机相，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷：乙酸乙酯＝2：1)得到586.0毫克淡黄色固体4-((R)-2-氯丙酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(收率：79.8％)。LC-MS:RT＝1.82min,[M+H] +＝327.17。
步骤C：合成2-((R)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000078
室温下，将4-((R)-2-氯丙酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(586.0毫克，1.80毫摩尔)溶于乙酸(10.0毫升)中，N 2保护下，60摄氏度反应12.0小时。
反应结束，加水淬灭，用碳酸氢钠溶液(0.5摩尔/升)调pH至6，二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷： 乙酸乙酯＝4：1)得到408.0毫克淡红色油2-((R)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：73.5％)。LC-MS:RT＝1.84min,[M+H] +＝309.23。
步骤D：合成4-(6-((2,5-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000079
冰浴下，将(2,5-二氟苯基)甲醇(50.0毫克，0.35毫摩尔)加入(4.0毫升)N,N-二甲基甲酰胺中，再分批次加入质量分数为60％的钠氢(28.0毫克，0.70毫摩尔)。N 2保护下，室温搅拌0.5小时后加入4-(6-氟吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(98.0毫克，0.35毫摩尔)，室温反应1.0小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝50/1)，得到88.0毫克白色固体4-(6-((2,5-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(收率：62.2％)。LC-MS:RT＝2.33min,[M+H-56] +＝349.33。
步骤E：合成2-((2,5-二氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶
Figure PCTCN2021133447-appb-000080
室温下，将4-(6-((2,5-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(88.0毫克，0.22毫摩尔)加入二氧六环的盐酸溶液(1.00毫摩尔/毫升，3毫升)中，N 2保护下，室温反应1小时。
反应结束，减压浓缩。得到58.0毫克乳白色固体2-((2,5-二氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶(收率：87.4％)直接用于下步反应。LC-MS:RT＝1.68min,[M+H] +＝305.22。
步骤F：合成2-((S)-1-(4-(6-((2,5-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000081
室温下，将2-((2,5-二氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶(58.0毫克，0.19毫摩尔)、2-((R)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(58.5毫克，0.19毫摩尔)、碘化钾(31.5毫克，0.19毫摩尔)和碳酸铯(123.1毫克，0.38毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中，最后加入N,N-二异丙基乙胺(1.0毫升)，N 2保护下，45摄氏度反应3.0小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取。合并有机相，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷：甲醇＝20：1)得到68.0毫克淡黄色固体化合物2-((S)-1-(4-(6-((2,5-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：62.1％)。LC-MS:RT＝1.85min,[M+H] +＝577.39。
步骤G：合成2-((S)-1-(4-(6-((2,5-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000082
室温下，向含有化合物2-((S)-1-(4-(6-((2,5-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(68.0毫克，0.12毫摩尔)的四氢呋喃(3.0毫升)中滴加氢氧化锂(20.0毫克，0.48毫摩尔)水溶液(1.0毫升)，最后加入(1.0毫升)的甲醇，45摄氏度下反应3.0小时。
反应结束，加水淬灭，用氯化铵水溶液(0.5摩尔/升)调pH至6，二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，合并有机相，氯化铵水溶液(30毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，得到的粗产品用制备型高效液相色谱纯化。分离条件如下，色谱柱：Agilent 5 Prep-C18 100mm×30mm 5μM；流动相：水(含有0.05％的氨水)和乙腈；流速：20毫升/分钟；梯度：由28％乙腈在8.00分钟洗脱出来；检测波长：254nm。纯化后，低温冻干得到24.0毫克白色固体化合物2-((S)-1-(4-(6-((2,5-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：35.8％)。LC-MS:RT＝1.79min,[M+H]+＝563.32。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.70(brs,1H),8.30–8.29(m,1H),7.83–7.79(m,1H),7.69(d,J＝8.5Hz,1H),7.65–7.60(m,1H),7.38–7.34(m,1H),7.31–7.19(m,2H),6.85(d,J＝7.2Hz,1H),6.69(d,J＝8.2Hz,1H),5.36(brs,2H),5.20–5.15(m,1H),4.89–4.82(m,1H),4.68(dd,J＝15.1,5.2Hz,1H),4.50–4.42(m,2H),4.19(dt,J＝9.0,5.7Hz,1H),2.99–2.96(m,1H),2.70–2.49(m,4H),2.38–2.21(m,2H),1.86–1.68(m,3H),1.58–1.45(m,1H),1.48(d,J＝6.6Hz,3H)。
实施例6 2-((S)-1-(4-(6-((2,4-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000083
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(6-((2,4-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000084
冰浴下，将(2,4-二氟苯基)甲醇(50.0毫克，0.35毫摩尔)加入(4.0毫升)N,N-二甲基甲酰胺中，再分批次加入质量分数为60％的钠氢(28.0毫克，0.70毫摩尔)。N 2保护下，室温搅拌0.5小时后加入4-(6-氟吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(98.0毫克，0.35毫摩尔)，室温反应1.0小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝50/1)，得到76.0毫克白色固体4-(6-((2,4-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(收率：54.2％)。LC-MS:RT＝2.33min,[M+H-56] +＝349.33。
步骤B：合成2-((2,4-二氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶
Figure PCTCN2021133447-appb-000085
室温下，将4-(6-((2,4-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(76.0毫克，0.19毫摩尔)加入二氧六环的盐酸溶液(1.00毫摩尔/毫升，3毫升)中，N 2保护下，室温反应1小时。
反应结束，减压浓缩。得到43.0毫克乳白色固体2-((2,4-二氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶(收率：74.4％)直接用于下步反应。LC-MS:RT＝1.68min,[M+H] +＝305.22。
步骤C：合成2-((S)-1-(4-(6-((2,4-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000086
室温下，将2-((2,4-二氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶(43.0毫克，0.14毫摩尔)、2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(43.5毫克，0.14毫摩尔)、碘化钾(23.2毫克，0.14毫摩尔)和碳酸铯(91.3毫克，0.28毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中，最后加入N,N-二异丙基乙胺(1.0毫升)，N 2保护下，45摄氏度反应3.0小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取。合并有机相，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷：甲醇＝20：1)得到59.0毫克淡黄色固体2-((S)-1-(4-(6-((2,4-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：73.2％)。LC-MS:RT＝1.85min,[M+H] +＝577.39。
步骤D：合成2-((S)-1-(4-(6-((2,4-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000087
室温下，向含有2-((S)-1-(4-(6-((2,4-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(59.0毫克，0.10毫摩尔)的四氢呋喃(3.0毫升)中滴加氢氧化锂(16.8毫克，0.40毫摩尔)水溶液(1.0毫升)，最后加入(1.0毫升)的甲醇，45摄氏度下反应3.0小时。
反应结束，加水淬灭，用氯化铵水溶液(0.5摩尔/升)调pH至6，二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，合并有机相，氯化铵水溶液(30毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷：甲醇＝10：1)得到17.3毫克淡黄色固体2-((S)-1-(4-(6-((2,4-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：32.0％)。LC-MS:RT＝1.79min,[M+H] +＝563.32。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.29(s,1H),8.04(s,1H),7.81(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.69(d,J＝8.5Hz,1H),7.30–7.23(m,1H),7.11–7.04(m,1H),6.84(d,J＝7.2Hz,1H),6.65(d,J＝7.7Hz,1H),6.15(t,J＝6.7Hz,1H),5.35(s,2H),5.27(d,J＝4.2Hz,1H),5.04(t,J＝5.2Hz,1H),4.85(dd,J＝15.5,3.1Hz,1H),4.69(dd,J＝15.8,5.8Hz,1H),4.49–4.42(m,3H),4.07(d,J＝2.1Hz,3H),3.80–3.77(m,1H), 2.11(dd,J＝8.4,6.8Hz,3H),1.72(dd,J＝16.0,7.2Hz,3H),1.48(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例7 2-((S)-1-(4-(6-((5-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000088
具体合成路线如下：
步骤A：合成5-((S)-2-氯丙酰胺基)-6-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)吡啶甲酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000089
将(S)-5-氨基-6-(((氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)吡啶甲酸甲酯(0.8克,2.3毫摩尔)溶于四氢呋喃(30.0毫升)中,加三乙胺(1.0毫升,8.0毫摩尔),零摄氏度下搅拌15分钟后,将(S)-2-氯丙酰氯(350.0毫克,2.76毫摩尔)的四氢呋喃溶液(10.0毫升)缓慢滴加到该混合液中,室温搅拌1小时,LC-MS监测至反应完全。
向反应液加水(20.0毫升),乙酸乙酯(40.0毫升×3次)萃取,合并有机相,饱和食盐水(25.0毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩,所得残余物经硅胶柱层析纯化得到600毫克黄色固体5-((S)-2-氯丙酰胺基)-6-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)吡啶甲酸甲酯(收率：62.2％)。LC-MS：RT＝1.73min,[M+H] +＝328.21。
步骤B：合成2-((S)-1-氯乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000090
将5-((S)-2-氯丙酰胺基)-6-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)吡啶甲酸甲酯(0.4克,1.23毫摩尔)溶于四氢呋喃(10.0毫升)中,加醋酸(1.0毫升),60摄氏度下搅拌2小时，LC-MS监测至反应完全。
向反应液加水(20.0毫升),乙酸乙酯(40.0毫升×3次)萃取,合并有机相,饱和食盐水(25.0毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩,所得残余物经硅胶柱层析纯化得到300毫克黄色固体2-((S)-1-氯乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯(收率：78.3％)。LC-MS：RT＝1.79min,[M+H] +＝310.11。
步骤C：合成2-((S)-1-(4-(6-((5-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000091
将2-((5-氯-2-氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶(100.0毫克,0.28毫摩尔)溶于乙腈(10.0毫升)和三乙胺(2.0毫升)中,加碳酸钾(77.0毫克,0.56毫摩尔)和碘化钾(93.0毫克,0.56毫摩尔),2-((S)-1-氯乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯(82.0毫克,0.28毫摩尔)加入反应液中,50摄氏度下搅拌2小时后,TLC监测至反应完全。
向反应液加水(30.0毫升),乙酸乙酯(40.0毫升×3次)萃取,合并有机相,饱和食盐水(25.0毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩,得到120毫克黄色固体2-((S)-1-(4-(6-((5-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯(收率：72.3％)。LC-MS：RT＝1.81min,[M+H] +＝594.21。
步骤D：合成2-((S)-1-(4-(6-((5-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000092
将化合物2-((S)-1-(4-(6-((5-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯(120.0毫克,0.73毫摩尔)溶于四氢呋喃(30.0毫升)和甲醇(10.0毫升)中,然后将氢氧化锂(84.0毫克,2.0毫摩尔)的水溶液(10.0毫升)加入反应液中,室温搅拌2小时后。
LC-MS监测至反应完全，二氯甲烷/甲醇(9/1,20.0毫升×3次)萃取,合并有机相,饱和食盐水(15.0毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物经硅胶柱层析纯化得到46毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((5-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸(收率：63.8％)。LC-MS：RT＝1.77min,[M+H] +＝580.31。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.17(d,J＝8.2Hz,1H),7.99(d,J＝8.2Hz,1H),7.61(dd,J＝10.8,4.9Hz,2H),7.45–7.38(m,1H),7.27(t,J＝9.3Hz,1H),6.84(d,J＝7.3Hz,1H),6.67(d,J＝8.2Hz,1H),5.36(s,2H),5.31(s,1H),4.85(dd,J＝15.0,4.3Hz,1H),4.79–4.68(m,1H),4.61(d,J＝6.6Hz,1H),4.41(dd,J＝13.7,7.7Hz,1H),4.13–4.02(m,1H),3.00(d,J＝11.4Hz,1H),2.60(dd,J＝22.6,10.7Hz,4H),2.36(s,1H),2.30–2.21(m,1H),1.80(d,J＝23.1Hz,2H),1.73–1.63(m,1H),1.56(d,J＝8.6Hz,1H),1.48(d,J＝6.6Hz,3H)。
实施例8 2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000093
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000094
室温下，将1-(2,2-二氟乙基)-6-(((6-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)-1H-吲唑(150毫克，0.40毫摩尔)，DIEA(1毫升)，碘化钾(133毫克，0.80毫摩尔)和碳酸钾(110克，0.80毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)中，再加入2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(124毫克,0.40毫摩尔)，升温至50摄氏度反应。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯(20毫升×2次)萃取，合并并干燥有机相，浓缩所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/8)得到69毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：27％)。LC-MS:RT＝1.79min,[M+H] +＝645.42。
步骤B：合成2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000095
室温下，将2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(69毫克0.11毫摩尔)溶于混合溶剂(5毫升，四氢呋喃/甲醇/水＝2.5/2.5/1)中，加入氢氧化锂(16毫克，0.44毫摩尔)，升温至40摄氏度反应。
反应结束后，加饱和氯化铵淬灭，依次用乙酸乙酯(10毫升×2次)，混合溶剂(10毫升×2次，二氯甲烷/甲醇＝30/1)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩，浓缩所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝20/1)得到19.73毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：29％)。LC-MS:RT＝1.75min,[M+H] +＝631.40。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ12.73(s,1H),8.27(s,1H),8.12(s,1H),7.77(dd,J＝18.7,7.8Hz,3H),7.70-7.56(m,2H),7.26(d,J＝8.3Hz,1H),6.82(d,J＝7.4Hz,1H),6.67(d,J＝8.1Hz,1H),6.52(s,0.31H),6.39(t,J＝3.4Hz,0.47H),6.25(s,0.29H),5.45(s,2H),5.16(s,1H),4.90(d,J＝12.1Hz,1H),4.66(d,J＝10.9Hz,1H),4.52-4.37(m,2H),4.22-4.11(m,1H),2.96(s,1H),2.62(s,2H),2.39-2.11(m,3H),1.77(dd,J＝33.1,20.9Hz,4H),1.51(dd,J＝35.0,7.7Hz,4H)。
实施例9 1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000096
具体合成路线如下：
步骤A：合成1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000097
将6-(((6-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吲唑(75毫克,0.176毫摩尔)，碳酸钾(48.6毫克,0.352毫摩尔)和碘化钾(58毫克,0.352毫摩尔)溶于5毫升无水乙腈中，加入甲基2-(S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(54毫克,0.176毫摩尔)于60摄氏度下反应2小时。
反应结束，加水稀释，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩所得96毫克淡黄色固体1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯。LC-MS:RT＝1.86min,[M+H] +＝663.38。
步骤B：合成1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000098
将1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(96毫克,0.145毫摩尔)溶解于4毫升四氢呋喃中，加入一水合氢氧化锂(31毫克,0.723毫摩尔)，1毫升水和1毫升乙醇于室温下反应50分钟。
反应结束，反应液加入20毫升饱和氯化铵中和，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩所得粗品经柱层析分离制备得42毫克淡黄色固体1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸。 1H NMR(500MHz,DMSO)δ12.65(s,1H),8.29(s,1H),8.19(d,J＝0.9Hz,1H),7.88(s,1H),7.77–7.83(m,2H),7.69(d,J＝8.4Hz,1H),7.59–7.65(m,1H),7.31(dd,J＝8.3,1.2Hz,1H),6.84(d,J＝7.3Hz,1H),6.69(d,J＝8.2Hz,1H),5.48(s,2H),5.42(q,J＝9.2Hz,2H),5.12–5.18(m,1H),4.80–4.84(m,1H),4.66–4.70(m,1H),4.40–4.49(m,2H),4.16–4.20(m,1H),2.95–3.02(m,1H),2.54–2.69(m,4H),2.22–2.35(m,2H),1.85–1.90(m,1H),1.72–1.78(m,2H),1.53–1.60(m,1H),1.48(d,J＝6.5Hz,3H).LC-MS:RT＝1.77min,[M+H] +＝649.37。
实施例10 2-((S)-1-(4-(6-(异喹啉-6-基甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000099
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-((S)-1-(4-(6-(异喹啉-6-基甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000100
将6-(((6-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)异喹啉(100毫克,0.281毫摩尔)，碳酸钾(73.1毫克,0.563毫摩尔)和碘化钾(92毫克,0.563毫摩尔)溶于5毫升无水乙腈中，加入甲基2-(S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(86毫克,0.281毫摩尔)于60摄氏度下反应2小时。反应结束，加水稀释，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩所得粗品经柱层析分离得78毫克淡黄色固体2-((S)-1-(4-(6-(异喹啉-6-基甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯。LC-MS:RT＝1.71min,[M+H] +＝592.28。
步骤B：合成2-((S)-1-(4-(6-(异喹啉-6-基甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000101
将2-((S)-1-(4-(6-(异喹啉-6-基甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(78毫克,0.131毫摩尔)溶解于4毫升四氢呋喃中，加入一水合氢氧化锂(28毫克,0.655毫摩尔)，1毫升水和1毫升乙醇于室温下反应50分钟。
反应结束，加20毫升饱和氯化铵中和，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩所得粗品经柱层析分离制备得38毫克淡黄色固体2-((S)-1-(4-(6-(异喹啉-6-基甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.20(s,1H),9.27(s,1H),8.40(d,J＝5.5Hz,1H),8.28–8.33(m,1H),8.10(d,J＝8.5Hz,1H),7.89–8.04(m,1H),7.80–7.85(m,1H),7.68–7.78(m,3H),7.60–7.67(m,1H),6.84(d,J＝7.1Hz,1H),6.73(d,J＝8.0Hz,1H),5.56(s,2H),5.15–5.20(m,1H),4.81–4.86(m,1H),4.64–4.74(m,1H),4.38–4.51(m,2H),4.15–4.20(m,1H),2.94–3.00(m,1H),2.57–2.66(m,2H),2.14–2.35(m,4H),1.77–1.85(m,2H),1.66–1.75(m,2H),1.45–1.52(m,3H).LC-MS:RT＝1.60min,[M-H] -＝578.39。
实施例11 2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000102
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000103
将1-(2,2-二氟乙基)-6-(((6-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)-1H-吲唑(150.0毫克,0.37毫摩尔)溶于乙腈(10.0毫升)和三乙胺(2.0毫升)中,加碳酸钾(102.0毫克,0.74毫摩尔)和碘化钾(123.0毫克,0.74毫摩尔),2-((S)-1-氯乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯(114.0毫克,0.37毫摩尔)加入反应液中,50摄氏度下搅拌2小时后。
TLC监测至反应完全，加水(30.0毫升)稀释,乙酸乙酯(40.0毫升×3次)萃取,合并有机相,饱和食盐水(25.0毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩,得到180毫克黄色固体2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯。LC-MS：RT＝1.78min,[M+H] +＝646.34。
步骤B：合成2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000104
将2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯(180.0毫克,0.28毫摩尔)溶于四氢呋喃(6.0毫升)和甲醇(2.0毫升)中,然后将氢氧化锂(21.0毫克,0.5毫摩尔)的水溶液(2.0毫升)加入反应液中,室温搅拌1小时后。
LC-MS监测至反应完全，二氯甲烷/甲醇(9/1,20.0毫升×3次)萃取,合并有机相,饱和食盐水(15.0毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物经硅胶柱层析纯化得到64毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸(收率：36.2％)。LC-MS：RT＝1.73min,[M+H] +＝632.35。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.14(s,1H),8.06(d,J＝8.1Hz,1H),7.95(d,J＝8.1Hz,1H),7.81(s,1H),7.75(d,J＝8.3Hz,1H),7.61(t,J＝7.8Hz,1H),7.26(d,J＝8.2Hz,1H),6.82(d,J＝7.3Hz,1H),6.67(d,J＝8.2Hz,1H),6.54(t,J＝3.8Hz,0.27H),6.40(m,0.49H),6.27(m,0.28H),5.45(d,J＝3.3Hz,2H),5.20(s,1H),4.89(td,J＝15.4,3.5Hz,2H),4.76(s,2H),4.65–4.57(m,1H),4.34(dd,J＝13.5,7.8Hz,1H),4.06–4.01(m,1H),4.00–3.93(m,1H),2.98(d,J＝10.5Hz,1H),2.61(d,J＝11.0Hz,2H),2.23(t,J＝10.8Hz,1H),2.10(d,J＝8.7Hz,1H),1.99(s,1H),1.92–1.67(m,3H),1.62–1.50(m,1H),1.47(d,J＝6.7Hz,3H),1.17(t,J＝7.1Hz,1H),1.17(t,J＝7.1Hz,1H).
实施例12 2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000105
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000106
将2-((4-氯-2-氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶(100毫克,0.28毫摩尔)溶于乙腈(10.0毫升)和三乙胺(2.0毫升)中,加碳酸钾(77.0毫克,0.56毫摩尔)和碘化钾(93.0毫克,0.56毫摩尔),2-((S)-1-氯乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯(82.0毫克,0.28毫摩尔)加入反应液中,50摄氏度下搅拌2小时后。
TLC监测至反应完全，加水(30.0毫升)稀释,乙酸乙酯(40.0毫升×3次)萃取,合并有机相,饱和食盐水(25.0毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩,得到120毫克黄色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯(收率：72.3％)。LC-MS：RT＝1.83min,[M+H] +＝594.21。
步骤B：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000107
将2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯(120毫克,0.73毫摩尔)溶于四氢呋喃(30.0毫升)和甲醇(10.0毫升)中,然后将氢氧化锂(84毫克,2.0毫摩尔)的水溶液(10.0毫升)加入反应液中,室温搅拌5小时后。
LC-MS监测至反应完全，二氯甲烷/甲醇(9/1,20.0毫升×3次)萃取,合并有机相,饱和食盐水(15.0毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物经硅胶柱层析纯化得到16毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸(收率：23.8％)。LC-MS：RT＝1.81min,[M+H] +＝580.31。
实施例13 2-((S)-1-(4-(6-((4-溴-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000108
具体合成路线如下：
步骤A：合成(2,5-二氟苯基)甲醇
Figure PCTCN2021133447-appb-000109
冰浴下，将2,5-二氟苯甲醛(500.0毫克，2.47毫摩尔)加入(25.0毫升)甲醇中，再分批次加入硼氢化钠(140.6毫克，3.70毫摩尔)。N 2保护下，室温搅拌1.0小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩得到380.3毫克黄色油状物(2,5-二氟苯基)甲醇(收率：76.0％)。
步骤B：合成4-(6-((4-溴-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000110
冰浴下，将(4-溴-2-氟苯基)甲醇(60.0毫克，0.29毫摩尔)加入(3.0毫升)N,N-二甲基甲酰胺中，再分批次加入质量分数为60％的钠氢(23.2毫克，0.58毫摩尔)。N 2保护下，室温搅拌0.5小时后加入4-(6-氟吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(81.2毫克，0.29毫摩尔)，室温反应1.0小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝50/1)，得到82.0毫克白色固体4-(6-((4-溴-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(收率：61.0％)。LC-MS:RT＝2.45min,[M+H-56] +＝409.17。
步骤C：合成2-((4-溴-2-氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶
Figure PCTCN2021133447-appb-000111
室温下，将4-(6-((4-溴-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(82.0毫克，0.18毫摩尔)加入二氧六环的盐酸溶液(1.00毫摩尔/毫升，3毫升)中，N 2保护下，室温反应1小时。
反应结束，减压浓缩。得到50.2毫克乳白色固体2-((4-溴-2-氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶(收率：76.4％)直接用于下步反应。LC-MS:RT＝1.77min,[M+H] +＝365.16。
步骤D：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-溴-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000112
室温下，将2-((4-溴-2-氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶(50.2毫克，0.14毫摩尔)、2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(43.5毫克，0.14毫摩尔)、碘化钾(23.2毫克，0.14毫摩尔)和碳酸铯(91.3毫克，0.28毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中，最后加入N,N-二异丙基乙胺(1.0毫升)，N 2保护下，45摄氏度反应3.0小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取。合并有机相，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷：甲醇＝20：1)得到66.3毫克淡黄色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-溴-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：74.4％)。LC-MS:RT＝1.88min,[M+H] +＝637.26。
步骤E：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-溴-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000113
室温下，向含有2-((S)-1-(4-(6-((4-溴-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(66.3毫克，0.10毫摩尔)的四氢呋喃(3.0毫升)中滴加氢氧化锂(16.8毫克，0.40毫摩尔)水溶液(1.0毫升)，最后加入(1.0毫升)的甲醇，45摄氏度下反应3.0小时。
反应结束，加水淬灭，用氯化铵水溶液(0.5摩尔/升)调pH至6，二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，合并有机相，氯化铵水溶液(30毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，得到的粗产品用制备型高效液相色谱纯化。分离条件如下，色谱柱：Agilent 5 Prep-C18 100mm×30mm 5μM；流动相：水(含有0.05％的氨水)和乙腈；流速：20毫升/分钟；梯度：由25％乙腈在7.50分钟洗脱出来；检测波长：254nm。纯化后，低温冻干得到19.3毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-溴-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：30.0％)。LC-MS:RT＝1.84min,[M+H] +＝623.28。
实施例14 2-((S)-1-(4-(6-((2,5-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000114
具体合成路线如下：
步骤A：合成(2,5-二氟苯基)甲醇
Figure PCTCN2021133447-appb-000115
室温下，将2,5-二氟苯甲醛(300毫克，2.11毫摩尔)溶于甲醇(15毫升)中，零摄氏度下，加入硼氢化钠(156毫克，4.23毫摩尔)，在室温下搅拌反应。反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，二氯甲烷(30毫升)萃取，水洗两次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩有机相，所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/3)得到240毫克无色油状液体(2,5-二氟苯基)甲醇(收率：80％)。LC-MS:RT＝1.78min。
步骤B：合成4-(6-((2,5-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000116
将(2,5-二氟苯基)甲醇(240毫克，1.67毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)中，降至零摄氏度下，加入钠氢(80毫克，3.34毫摩尔)，在室温下搅拌0.5小时，加入4-(6-氟吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(476毫克，1.67毫摩尔)，室温下反应。反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯(30毫升)萃取，水洗两次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩有机相，所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)得到280毫克无色油状液体4-(6-((2,5-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(收率：48％)。LC-MS:RT＝2.32min,[M-55] +＝349.25。
步骤C：合成2-((2,5-二氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶
Figure PCTCN2021133447-appb-000117
将4-(6-((2,5-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(280毫克，0.69毫摩尔)溶于含盐酸的1,4-二氧六环溶液(5毫升)中，室温搅拌。反应完全后，减压浓缩得到粗品300毫克白色固体2-((2,5-二氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶。LC-MS:RT＝1.68min,[M+H] +＝305.25。
步骤C：合成2-((S)-1-(4-(6-((2,5-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸异丙酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000118
室温下，将2-((2,5-二氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶(60毫克，0.20毫摩尔)，DIEA(0.5毫升)，碘化钾(65毫克，0.9毫摩尔)和碳酸钾(54克，0.39毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)中，加入2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸异丙酯(67毫克，0.20毫摩尔)， 升至50摄氏度反应。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯(20毫升×2次)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/8)，得到65毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((2,5-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸异丙酯(收率：32％)。LC-MS:RT＝1.93min,[M+H] +＝606.38。
步骤D：合成2-((S)-1-(4-(6-((2,5-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000119
室温下，将2-((S)-1-(4-(6-((2,5-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸异丙酯(65毫克，0.11毫摩尔)溶于混合溶剂(6毫升，四氢呋喃/甲醇/水＝2.5/2.5/1)中，加入氢氧化锂(16毫克，0.44毫摩尔)，室温反应。
反应结束后，加饱和氯化铵淬灭，依次用乙酸乙酯(10毫升×2次)，混合溶剂(10毫升×1次，二氯甲烷/甲醇＝30/1)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩有机相，所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1)，得到30.75毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((2,5-二氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：21％)。LC-MS:RT＝1.77min,[M+H] +＝564.31。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.15(d,J＝8.2Hz,1H),7.98(d,J＝8.2Hz,1H),7.64–7.58(m,1H),7.39-7.14(m,4H),6.83(d,J＝7.3Hz,1H),6.67(dd,J＝8.1,4.4Hz,1H),5.32(dd,J＝19.5,6.1Hz,3H),4.84(dd,J＝15.0,4.2Hz,1H),4.72(dd,J＝15.1,3.6Hz,1H),4.60(d,J＝6.8Hz,1H),4.39(dd,J＝13.6,7.7Hz,1H),4.07(dd,J＝15.0,6.0Hz,1H),2.98(d,J＝11.0Hz,1H),2.57(dd,J＝11.7,8.4Hz,3H),2.26(dd,J＝22.2,11.6Hz,2H),1.84–1.63(m,4H),1.54(dd,J＝12.0,3.7Hz,1H),1.46(t,J＝6.5Hz,3H)。
实施例15 2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000120
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(6-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000121
零摄氏度下，向含3-氟-4-(羟甲基)苄腈(648毫克，4.29毫摩尔)的四氢呋喃(5.0毫升)中，加入氢化钠(357毫克，60％分散于矿物油,8.94毫摩尔)，搅拌20分钟后，加入4-(6-氟吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.0克，3.57毫摩尔)，室温反应4小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，饱和食盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，滤液减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/10)。得到850毫克白色固体4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(收率：57.9％)。LC-MS:RT＝2.28min,[M-H] -＝410.32。
步骤B：合成3-氟-4-(((6-(哌啶-4-基)吡啶基-2-基)氧基)甲基)苄腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000122
零摄氏度下，向含4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(850毫克，2.07毫摩尔)的甲醇(4毫升)中，加入含盐酸的1,4-二氧六环溶液(2毫升，4摩尔每升)，室温下反应40分钟。
反应结束，反应液直接浓缩得720毫克白色固体3-氟-4-(((6-(哌啶-4-基)吡啶基-2-基)氧基)甲基)苄腈，直接用于下一步。LC-MS:RT＝1.65min,[M+H] +＝312.26。
步骤C：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸异丙酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000123
室温下，向含3-氟-4-(((6-(哌啶-4-基)吡啶基-2-基)氧基)甲基)苄腈(120毫克，0.35毫摩尔)的N,N-二甲基甲酰胺(4.0毫升)中，加入2-((S)-1-氯乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸异丙酯(98毫克，0.29毫摩尔)、碘化钾(96毫克，0.58毫摩尔)和碳酸钾(80毫克，0.58毫摩尔)，60摄氏度反应4小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，饱和食盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/5)。得到60毫克黄色固体化合物2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸异丙酯(收率：33.7％)。LC-MS:RT＝1.84min,[M+H] +＝613.38。
步骤D：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000124
零摄氏度下，向含2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸异丙酯(60毫克，0.10毫摩尔)的四氢呋喃(3毫升)和甲醇(1毫升)中，滴加氢氧化锂(17毫克，0.40毫摩尔)水溶液(1毫升)，室温反应30分钟。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，饱和食盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到43毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸(收率：75.3％)。LCMS:RT＝1.75min,[M+H] +＝571.36。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.22–8.08(m,1H),7.99(dd,J＝8.2,5.2Hz,1H),7.86(d,J＝10.3Hz,1H),7.68(d,J＝3.9Hz,2H),7.66–7.60(m,1H),6.85(t,J＝7.5Hz,1H),6.70(dt,J＝13.3,6.6Hz,1H),5.45(s,2H),5.36–5.02(m,3H),4.86–4.46(m,4H),4.48–4.36(m,1H),4.16–4.08(m,1H),4.07–3.98(m,1H),3.13–2.91(m,2H),2.67–2.54(m,2H),2.31–2.14(m,2H),2.02–1.90(m,1H),1.23(d,J＝3.7Hz,3H)。
实施例16 1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-(喹啉-8-基甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000125
具体合成路线如下：
步骤A：合成1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-(喹啉-8-基甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000126
将8-(((6-(哌啶-4-基)吡啶基-2-基)氧基)甲基)喹啉(60毫克，0.169毫摩尔)，碳酸钾(47.0毫克，0.338毫摩尔)和碘化钾(40.5毫克，0.253毫摩尔)溶于5毫升无水乙腈中，加入2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(52.1毫克，0.169毫摩尔)，于60摄氏度下反应2小时。反应结束，加水稀释，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩所得粗品经柱层析分离得76毫克淡黄色固体1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-(喹啉-8-基甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯。LC-MS:RT＝1.82min,[M+H] +＝592.30。
步骤B：合成1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-(喹啉-8-基甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000127
将1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-(喹啉-8-基甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(76毫克，0.128毫摩尔)溶解于4毫升四氢呋喃中，加入一水合氢氧 化锂(27毫克，0.643毫摩尔)，1毫升水和1毫升乙醇，于室温下反应50分钟。反应结束，加20毫升饱和氯化铵中和，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩所得粗品经柱层析分离制备得24毫克淡黄色固体1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-(喹啉-8-基甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸。LC-MS:RT＝1.75min,[M-H] -＝578.37。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.71(s,1H),8.96(dd,J＝4.2,1.8Hz,1H),8.41(dd,J＝8.3,1.7Hz,1H),8.28(s,1H),7.93–7.96(m,1H),7.79–7.86(m,2H),7.56–7.71(m,4H),6.84(d,J＝7.2Hz,1H),6.73(d,J＝8.3Hz,1H),6.00(s,2H),5.11–5.16(m,1H),4.75–4.81(m,1H),4.56–4.64(m,1H),4.36–4.46(m,2H),4.▼10–4.17(m,1H),2.90–2.98(m,1H),2.54–2.65(m,4H),2.18–2.33(m,2H),1.67–1.87(m,4H),1.43–1.48(m,3H)。
实施例17 3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000128
具体合成路线如下：
步骤A：合成3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸异丙酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000129
将6-(((6-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吲唑(78毫克，0.183毫摩尔)，碳酸钾(50.5毫克，0.366毫摩尔)和碘化钾(43.8毫克，0.274毫摩尔)溶于5毫升无水乙腈中，加入2-((S)-1-氯乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸异丙酯(61.6毫克,0.183毫摩尔)，于60摄氏度下反应2小时。反应结束，加水稀释，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩所得粗品经柱层析分离得92毫克淡黄色固体3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸异丙酯。LC-MS:RT＝1.81min,[M+H] +＝692.27。
步骤B：合成3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000130
将3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基) 哌啶-1-基)乙基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸异丙酯(92毫克，0.133毫摩尔)溶解于4毫升四氢呋喃中，加入一水合氢氧化锂(28毫克，0.664毫摩尔)，1毫升水和1毫升乙醇于室温下反应50分钟。反应结束，加20毫升饱和氯化铵中和，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩所得粗品经柱层析分离制备得22毫克淡黄色固体3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吲唑-6-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸。LC-MS：RT＝1.75min,[M+H] +＝650.39。 1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.19(s,1H),8.15(d,J＝8.2Hz,1H),7.99(d,J＝8.3Hz,1H),7.88(s,1H),7.78(d,J＝8.2Hz,1H),7.62(t,J＝7.8Hz,1H),7.31(d,J＝8.2Hz,1H),6.84(▼d,J＝7.4Hz,1H),6.69(d,J＝8.1Hz,1H),5.48(d,J＝1.7Hz,2H),5.42(dd,J＝18.6,9.4Hz,2H),5.30–5.26(m,1H),4.84–4.71(m,2H),4.41–4.37(m,1H),4.08–4.03(m,2H),3.03–2.99(m,1H),2.68–2.52(m,4H),2.22–2.30(m,2H),1.70–1.90(m,4H),1.49(d,J＝6.7Hz,3H)。
实施例18 2-((S)-1-(4-(6-((7-氟喹啉-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-((((S-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000131
具体合成路线如下：
步骤A：合成7-氟-4-甲基喹啉
Figure PCTCN2021133447-appb-000132
将4-溴-7-氟喹啉(1.00克，4.42毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(15.0毫升)中，加入三甲基环三硼氧烷(1.3毫升，4.42毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(323.4毫克，0.44毫摩尔)，碳酸钾水溶液(3.3毫升，6.63毫摩尔)。氮气保护下，100摄氏度搅拌反应4小时。过滤除去固体，旋干滤液，柱层析纯化(乙酸乙酯/正己烷＝1/5)，得530.0毫克无色液体7-氟-4-甲基喹啉(收率：74.3％)。LC-MS：RT＝0.84min,[M+H] +＝162.14。
步骤B：合成4-(溴甲基)-7-氟喹啉
Figure PCTCN2021133447-appb-000133
将7-氟-4-甲基喹啉(530.0毫克，3.29毫摩尔)溶于四氯化碳(10.0毫升)中，加入N-溴代琥珀酰亚胺(703.0毫克，3.95毫摩尔)和偶氮二异丁腈(54.2毫克，0.33毫摩尔)。升温至77摄氏度，搅拌反应2小时。过滤除去固体，旋干滤液，得780.0毫克米黄色固体4-(溴甲基)-7-氟喹啉(收率：98.8％)。LC-MS：RT＝1.88min,[M+H] +＝240.08。
步骤C：合成(7-氟喹啉-4-基)乙酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000134
将4-(溴甲基)-7-氟喹啉(775.0毫克，3.23毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(6.0毫升)中，加入乙酸钾(634.0毫克，6.46毫摩尔)。升温至50摄氏度，搅拌1小时。加入乙酸乙酯稀释(50毫升)，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干溶剂，柱层析分离(乙酸乙酯：正己烷＝1：2)，得400.0毫克米黄色固体(7-氟喹啉-4-基)乙酸甲酯(收率：56.5％)。LC-MS：RT＝1.73min,[M+H] +＝220.15。
步骤D：合成(7-氟喹啉-4-基)甲醇
Figure PCTCN2021133447-appb-000135
将(7-氟喹啉-4-基)乙酸甲酯(400.0毫克，1.82毫摩尔)溶于甲醇(3.0毫升)中，加入氢氧化钠水溶液(1.8毫升，3.64毫摩尔)，室温搅拌1小时。减压浓缩去除甲醇，加入乙酸乙酯稀释(50毫升)，萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩去除有机溶剂，浓缩所得物经柱层析分离(乙酸乙酯：正己烷＝2：1)，得120.0毫克白色固体(7-氟喹啉-4-基)甲醇(收率：37.1％)。LC-MS：RT＝0.60min,[M+H] +＝178.13。
步骤E：合成4-(6-((7-氟喹啉-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000136
将(7-氟喹啉-4-基)甲醇(90.0毫克，0.51毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(5毫升)中,加入4-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(151.4毫克，0.51毫摩尔)，甲烷磺酸(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(42.3毫克，0.05毫摩尔)和碳酸铯(249.3毫克，0.77毫摩尔)。氮气保护下，升温至100摄氏度，搅拌反应过夜。过滤除去固体，滤液浓缩至干，所得物经柱层析分离(乙酸乙酯：正己烷＝1：2)，得190.0毫克米黄色固体4-(6-((7-氟喹啉-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(收率：85.5％)。LC-MS：RT＝2.25min,[M+H] +＝438.32。
步骤F：合成7-氟-4-((6-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)喹啉
Figure PCTCN2021133447-appb-000137
将4-(6-((7-氟喹啉-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(190.0毫克，0.43毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(1.0毫升)中，加入含盐酸的1,4-二氧六环溶液(1.0毫升，4.0毫升)，室温搅拌1小时。浓缩去除溶剂，得149.0毫克白色固体7-氟-4-((6-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)喹啉(收率：91.8％)。LC-MS：RT＝1.63min,[M+H] +＝338.28。
步骤G：合成2-((S)-1-(4-(6-((7-氟喹啉-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸异丙酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000138
将7-氟-4-((6-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)喹啉(70.0毫克，0.19毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3.0毫升)中，加入N,N-二异丙基乙胺(132微升，0.80毫摩尔)，搅拌溶解。然后依次加入2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸丙酯(64毫克，0.19毫摩尔)，碳酸钾(39毫克，0.28毫摩尔)，碘化钾(46毫克，0.28毫摩尔)。升温至50摄氏度，搅拌反应2小时。加乙酸乙酯稀释(50毫升)，萃取，依次用水，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩去除溶剂，所得物经柱层析分离(乙酸乙酯：正己烷＝5：1)，得80.0毫克米黄色固体2-((S)-1-(4-(6-((7-氟喹啉-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸异丙酯(收率：66.9％)。LC-MS：RT＝1.81min,[M+H] +＝639.43。
步骤H：合成2-((S)-1-(4-(6-((7-氟喹啉-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000139
将2-((S)-1-(4-(6-((7-氟喹啉-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸异丙酯(80.0毫克，0.13毫摩尔)溶于四氢呋喃(0.3毫升)，甲醇(0.1毫升)和水(0.1毫升)的混合溶剂中，加入一水合氢氧化锂(26.3毫克，0.63毫摩尔)。室温下搅拌4小时。浓缩去除溶剂，所得物经柱层析分离(甲醇：二氯甲烷＝7:93)，得51.3毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((7-氟喹啉-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸(收率：68.8％)。LC-MS：RT＝1.70min,[M+H] +＝597.34。 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.86(d,J＝4.3Hz,1H),8.25(dd,J＝9.1,6.2Hz,1H),8.13(d,J＝8.2Hz,1H),7.97(d,J＝8.2Hz,1H),7.78(dd,J＝10.3,2.4Hz,1H),7.68–7.56(m,2H),7.53(d,J＝4.3Hz,1H),6.84(d,J＝7.4Hz,1H),6.74(d,J＝8.2Hz,1H),5.87(s,2H),5.31–5.18(m,1H),4.83–4.73(m,1H),4.71–4.63(m,1H),4.61–4.52(m,1H),4.41–4.32(m,1H),4.09–4.00(m,1H),2.98–2.89(m,1H),2.63–2.51(m,3H),2.38–2.10(m,3H),1.84–1.57(m,4H),1.44(d,J＝6.6Hz,3H)。
实施例19 2-((S)-1-(4-(6-((3-氟喹啉-8-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000140
步骤A：合成3-氟-8-甲基喹啉
Figure PCTCN2021133447-appb-000141
室温下，向含有8-溴-3-氟喹啉(200毫克，0.89毫摩尔)的1,4-二氧六环/水溶液(3.4/1.0毫升)中，依次加入三甲基环三硼氧烷(0.25毫升，0.89毫摩尔)、1,1'-双二苯基膦二茂铁二氯化钯(32毫克，0.044毫摩尔)和碳酸钾(244毫克，1.77毫摩尔)，置换氮气，100摄氏度反应3小时。反应结束，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/10)。得到128毫克白色固体3-氟-8-甲基喹啉(收率：89.8％)。LC-MS:RT＝2.01min,[M+H] +＝162.14。
步骤B：合成8-(溴甲基)-3-氟喹啉
Figure PCTCN2021133447-appb-000142
室温下，向含有3-氟-8-甲基喹啉(128毫克，0.80毫摩尔)的四氯化碳(4.0毫升)中依次加入N-溴代丁二酰亚胺(156毫克，0.88毫摩尔)和偶氮二异丁腈(5毫克，0.032毫摩尔)，加热至80摄氏度反应1小时。反应结束，加二氯甲烷(100毫升)稀释，萃取，依次用饱和碳酸氢钠(50毫升)和食盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/15)。得到90毫克白色固体8-(溴甲基)-3-氟喹啉(收率：46.9％)。LC-MS:RT＝2.05min,[M+H] +＝242.05。
步骤C：合成(3-氟喹啉-8-基)甲醇
Figure PCTCN2021133447-appb-000143
室温下，向含有8-(溴甲基)-3-氟喹啉(90毫克，0.38毫摩尔)的1,4-二氧六环/水(1.5毫升/1.5毫升)溶液中加入碳酸钠(119毫克，1.13毫摩尔)，加热至100摄氏度反应3小时。
反应结束，冷却至室温，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，饱和食盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/8)。得到40毫克白色固体(3-氟喹啉-8-基)甲醇(收率：59.5％)。LC-MS:RT＝1.72min,[M+H] +＝178.15。
步骤D：合成4-(6-((3-氟喹啉-8-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000144
冰水浴，氮气保护下，向含有(3-氟喹啉-8-基)甲醇(266毫克，1.50毫摩尔)的四氢呋喃溶液(5.0毫升)中加入氢化钠(180毫克，60％分散于矿物油，4.5毫摩尔)。加毕，撤去冰水浴，室温搅拌30分钟。加入4-(6-氟吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的四氢呋喃(2.0毫升)溶液，加热至50摄氏度反应3小时。
反应结束，加饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/8)。得到450毫克淡黄色油状物4-(6-((3-氟喹啉-8-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(收率：68.5％)。LC-MS:RT＝2.37min,[M+H] +＝438.24。
步骤E：合成3-氟-8-(((6-(哌啶-4-基)吡啶基-2-基)氧基)甲基)喹啉
Figure PCTCN2021133447-appb-000145
室温下，向含有4-(6-((3-氟喹啉-8-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(450毫克，1.03毫摩尔)的甲醇溶液(4.0毫升)中加入盐酸/1,4二氧六环溶液(1.3毫升，4.0摩尔/升，5.14毫摩尔)。加毕，室温搅拌2小时。反应结束，减压蒸干溶剂，得到420毫克白色固体3-氟-8-(((6-(哌啶-4-基)吡啶基-2-基)氧基)甲基)喹啉。LC-MS:RT＝1.73min,[M+H] +＝338.27。
步骤F：合成2-((S)-1-(4-(6-((3-氟喹啉-8-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸异丙酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000146
室温下，向含有3-氟-8-(((6-(哌啶-4-基)吡啶基-2-基)氧基)甲基)喹啉(153毫克，0.342毫摩尔)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(2.0毫升)中加入N,N-二异丙基乙基胺(132微升，0.80毫摩尔)，搅拌溶解。依次加入2-((S)-1-氯乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸异丙酯(90毫克，0.27毫摩尔)，碳酸钾(74毫克，0.53毫摩尔)，碘化钾(89毫克，0.53毫摩尔)。加毕，加热至60摄氏度搅拌1小时。
反应结束，加饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝8/92)。得到90毫克无色油状物2-((S)-1-(4-(6-((3-氟喹啉-8-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸异丙酯(收率：52.8％)。
LCMS:RT＝1.89min,[M+H] +＝639.37。
步骤G：合成2-((S)-1-(4-(6-((3-氟喹啉-8-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000147
室温下，向含有2-((S)-1-(4-(6-((3-氟喹啉-8-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸异丙酯(90毫克，0.14毫摩尔)的四氢呋喃/甲醇/ 水溶液(2.5/2.5/1.0毫升)中，加入一水合氢氧化锂(45毫克，1.07毫摩尔)，加热至35摄氏度反应1小时，反应完毕，加入乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝8/92)。得到34毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((3-氟喹啉-8-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸(收率：40.4％)。LC-MS:RT＝1.80min,[M+H] +＝597.40。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.04–8.96(m,1H),8.32(dd,J＝9.6,2.9Hz,1H),8.09(d,J＝8.2Hz,1H),7.96(d,J＝8.2Hz,2H),7.82(d,J＝6.7Hz,1H),7.63(dd,J＝15.5,7.6Hz,2H),6.83(d,J＝7.2Hz,1H),6.71(d,J＝8.1Hz,1H),5.97(s,2H),5.29–5.19(m,1H),4.72(ddd,J＝38.7,14.9,4.0Hz,2H),4.55(q,J＝6.6Hz,1H),4.41–4.32(m,1H),4.05(dt,J＝9.2,5.9Hz,1H),2.95(d,J＝10.9Hz,1H),2.63–2.52(m,4H),2.35–2.17(m,2H),1.88–1.62(m,3H),1.57–1.48(m,1H),1.46(d,J＝6.7Hz,3H)。
实施例20 2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(20A)和2-((R)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(20B)
Figure PCTCN2021133447-appb-000148
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(6-氯吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000149
将哌嗪-1-羧酸叔丁酯(300.0毫克,1.61毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(12.0毫升)中，加入2,6-二氯吡啶(262.0毫克,1.77毫摩尔)，甲烷磺酸(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(135.4毫克,0.16毫摩尔)和碳酸铯(788.5毫克,2.42毫摩尔)。氮气保护下，升温至100摄氏度，搅拌反应5小时。旋干溶剂，柱层析分离(乙酸乙酯：正己烷＝1：10)，得150.0毫克米黄色固4-(6-氯吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(收率：31.3％)。LC-MS：RT＝1.82min,[M- tBu+H] +＝242.36。
步骤B：合成4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000150
将4-(6-氯吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(150.0毫克，0.51毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(5.0毫升)中，加入3-氟-4-(羟甲基)苯甲腈(76.3毫克，0.51毫摩尔)，甲烷磺酸(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(43.2毫克，0.05毫摩尔)和碳酸铯(246.8毫克，0.76毫摩尔)。氮气保护下，升温至100摄氏度，搅拌反应15小时。旋干溶剂，柱层析分离(乙酸乙酯：正己烷＝1：10)，得102.0毫克米黄色固体4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(收率： 49.1％)。LC-MS：RT＝2.23min,[M- tBu+H] +＝357.23。
步骤C：合成3-氟-4-(((6-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苯甲腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000151
将4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(102.0毫克，0.25毫摩尔)溶于甲醇(2.0毫升)中，加入盐酸/1,4-二氧六环溶液(0.5毫升，2.0毫摩尔)。室温条件下，搅拌反应3小时。旋干溶剂，得73.7毫克白色固体3-氟-4-(((6-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈(收率：73.5％)。
LC-MS：RT＝1.68min,[M+H] +＝313.25。
步骤D：合成2-(1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000152
将3-氟-4-(((6-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈(73.7毫克，0.21毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3.0毫升)中，加入N,N-二异丙基乙胺(54.7毫克，0.42毫摩尔)，碳酸钾(58.5毫克，0.42毫摩尔)，碘化钾(52.8毫克，0.32毫摩尔)和2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(71.7毫克，0.23毫摩尔)。升温至60摄氏度，搅拌反应4小时。反应结束，加乙酸乙酯(50毫升)稀释，萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干溶剂，柱层析分离(乙酸乙酯：正己烷＝4：1)，得102.0毫克米黄色固体2-(1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：82.6％,dr＝80％)。LC-MS：RT＝1.86min,[M+H] +＝585.42。
步骤E：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(20A)和2-((R)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(20B)
Figure PCTCN2021133447-appb-000153
将2-(1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(102.0毫克，0.17毫摩尔)溶于四氢呋喃(3.0毫升)，甲醇(3.0毫升)，水(1.0毫升)的混合溶剂中，加入一水合氢氧化锂(36.6毫克，0.87毫摩尔)。室温条件下，搅拌反应4小时。旋干溶剂，经制备液相分离，得21.0毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(20A)(收率：20.6％)和2.2毫克白色固体 2-((R)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(20B)(收率2.3％)。粗产品用制备型高效液相色谱纯化。分离条件如下：色谱柱：Agilent 5 Prep-C18 100mm×30mm 5μM；流动相：水(含有0.1％的氨水)和乙腈洗脱；流速：20毫升/分钟；梯度：由23％乙腈在7.67分钟及8.54分钟分别洗脱出来20A和20B，检测波长：254nm。
化合物20A:HPLC:RT＝7.67min。LC-MS：RT＝1.79min,[M+H] +＝571.39。 1H NMR(500MHz,DMSO-d 6)δ(ppm):8.06(s,1H),7.87(dd,J＝9.9,1.2Hz,1H),7.78(d,J＝8.3Hz,1H),7.69(dd,J＝7.9,1.4Hz,1H),7.64(d,J＝7.4Hz,1H),7.46(s,1H),7.44(s,1H),6.29(d,J＝8.2Hz,1H),6.09(d,J＝7.8Hz,1H),5.37(s,2H),5.20–5.13(m,1H),4.75(dd,J＝15.5,3.6Hz,1H),4.55–4.53(m,1H),4.48–4.42(m,2H),4.18–4.12(m,1H),3.40–3.30(m,4H),2.65–2.63(m,1H),2.58–2.50(m,4),2.35–2.29(m,1H),1.42(d,J＝6.7Hz,3H)。
化合物20B：HPLC:RT＝8.54min。LC-MS：RT＝1.78min,[M+H] +＝571.33。 1H NMR(500MHz,DMSO-d 6)δ(ppm):12.74(s,1H),8.27(d,J＝1.2Hz,1H),7.87(dd,J＝9.9,1.4Hz,1H),7.79(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),7.69(dd,J＝7.9,1.5Hz,1H),7.68–7.61(m,2H),7.46(t,J＝8.0Hz,1H),6.31(d,J＝8.2Hz,1H),6.11(d,J＝7.8Hz,1H),5.39(s,2H),5.08–5.03(m,1H),4.93–4.87(m,1H),4.59–4.56(m,1H),4.51–4.47(m,3H),3.42–3.39(m,4H),2.78–2.73(m,1H),2.70–2.58(m,2H),2.54–2.45(m,3H),1.41(d,J＝6.7Hz,3H)。
实施例21 2-((S)-1-((S)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000154
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-((6-氯吡啶-2-基)氧基)甲基)-3-氟苯甲腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000155
将3-氟-4-(羟甲基)苯甲腈(1.00克，6.62毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(25.0毫升)中，加入2,6-二氯吡啶(1.18克，7.94毫摩尔)，甲烷磺酸(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(558.7毫克，0.66毫摩尔)和碳酸铯(3.24克，9.93毫摩尔)。氮气保护下，升温至100摄氏度，搅拌反应过夜。过滤除去固体，旋干滤液，柱层析分离(乙酸乙酯：正己烷＝1：10)纯化得330.0毫克白色固体4-((6-氯吡啶-2-基)氧基)甲基)-3-氟苯甲腈(收率：19.0％)。LC-MS：RT＝2.13min,[M+H] +＝263.09。
步骤B：合成(S)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000156
将4-((6-氯吡啶-2-基)氧基)甲基)-3-氟苯甲腈(330.0毫克，1.26毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(15.0 毫升)中，加入(S)-2-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(302.4毫克，1.51毫摩尔)，甲烷磺酸(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(110.0毫克，0.13毫摩尔)和碳酸铯(615.8毫克，1.89毫摩尔)。氮气保护下，升温至100摄氏度，搅拌反应14小时。过滤除去固体，旋干滤液，柱层析分离(乙酸乙酯：正己烷＝1：5)，得260.3毫克白色固体(S)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(收率：48.6％)。LC-MS：RT＝2.27min,[M- tBu+H] +＝371.21。
步骤C：合成(S)-3-氟-4-((6-(3-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苯甲腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000157
将(S)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(260.3毫克，0.61毫摩尔)溶于甲醇(3.0毫升)中，加入盐酸/1,4-二氧六环溶液(1毫升，4.0毫摩尔)。室温条件下，搅拌反应2小时。旋干溶剂，得73.7毫克白色固体(S)-3-氟-4-((6-(3-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苯甲腈220.1毫克(收率：99.4％)。LC-MS：RT＝1.68min,[M+H] +＝327.25。
步骤D：合成2-((S)-1-((S)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000158
将(S)-3-氟-4-((6-(3-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苯甲腈(110.5毫克，0.30毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中，加入N,N-二异丙基乙胺(78.4毫克，0.61毫摩尔)，碳酸钾(83.9毫克，0.61毫摩尔)，碘化钾(75.7毫克，0.46毫摩尔)和2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(102.9毫克，0.33毫摩尔)。升温至60摄氏度，搅拌反应过夜。加乙酸乙酯(50毫升)稀释，萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干溶剂，柱层析分离(乙酸乙酯：正己烷＝4：1)纯化，得140.0毫克米黄色固体2-((S)-1-((S)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：76.8％)。LC-MS：RT＝1.93min,[M+H] +＝599.35。
步骤E：合成2-((S)-1-((S)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000159
将2-((S)-1-((S)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(140.0毫克，0.23毫摩尔)溶于乙腈(5.0毫升)和水(1.0毫升)的混合溶剂中，加入1,5,7-三氮杂二环[4.4.0]癸-5-烯(65.1毫克，0.47毫摩尔)。室温条件下，搅拌反应过夜。加柠檬酸水溶液(2摩尔/升)调体系的pH至6，二氯甲烷萃取(30毫升×3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，旋干溶剂，柱层析分离(甲醇：二氯甲烷＝8:92)，得45.0毫克白色固体2-((S)-1-((S)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：32.1％)。LC-MS：RT＝1.84min,[M+H] +＝585.39。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm):8.26(d,J＝1.0Hz,1H),7.87(dd,J＝10.0,1.4Hz,1H),7.81(dd,J＝ 8.4,1.6Hz,1H),7.71–7.66(m,2H),7.61(t,J＝7.6Hz,1H),7.44(t,J＝8.0Hz,1H),6.28(d,J＝8.2Hz,1H),6.10(d,J＝7.8Hz,1H),5.37(s,2H),5.25–5.17(m,1H),5.03(dd,J＝15.6,3.0Hz,1H),4.95(q,J＝6.6Hz,1H),4.62(dd,J＝15.4,5.0Hz,1H),4.49–4.39(m,1H),4.19–4.11(m,1H),4.07–4.00(m,1H),3.88(d,J＝12.6Hz,1H),2.67–2.54(m,2H),2.40–2.28(m,2H),2.27–2.18(m,1H),1.66–1.56(m,2H),1.36(d,J＝6.6Hz,3H),1.17(d,J＝6.2Hz,3H)。
实施例22 2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-氧代哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000160
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-((S)-1-(4-(叔丁氧羰基)-2-氧代哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S
)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000161
将3-氧代哌嗪-1-羧酸叔丁酯(380毫克，1.90毫摩尔)，氢化钠(380毫克，9.5毫摩尔)和碘化钾(473毫克，2.85毫摩尔)溶于15毫升无水四氢呋喃中，加入2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(600毫克，1.94毫摩尔)，于60摄氏度下反应20分钟。反应结束，反应液倒入200毫升氯化铵溶液中，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(60毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩所得粗品经柱层析分离得110毫克淡黄色固体2-((S)-1-(4-(叔丁氧羰基)-2-氧代哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯。LC-MS:RT＝2.12min,[M+H] +＝473.27。
步骤B：合成1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(2-氧代哌嗪-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000162
将2-((S)-1-(4-(叔丁氧羰基)-2-氧代哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(110毫克，0.233毫摩尔)溶于4毫升无水二氯甲烷中，加入2毫升三氟乙酸，于室温下反应40分钟。反应结束，反应液倒入100毫升碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得粗品90毫克1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(2-氧代哌嗪-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯。LC-MS:RT＝1.96min,[M+H] +＝373.27。
步骤C：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-氧代哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000163
将1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(2-氧代哌嗪-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(90毫克，0.241毫摩尔)，4-(((6-氯吡啶-2-基)氧基)甲基)-3-氟苄腈(63.2毫克，0.241毫摩尔)，碳酸铯(157毫克，0.482毫摩尔)和1,1'-联萘-2,2'-双二苯膦(15.2毫克，0.0241毫摩尔)溶于5毫升无水1,4-二氧六环中，加入三(二亚苄基丙酮)二钯(22.1毫克，0.0241毫摩尔)，氮气置换3次，于120摄氏度下微波反应2小时。反应结束，加水稀释，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩所得粗品经柱层析分离得72毫克淡黄色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-氧代哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯。LC-MS:RT＝2.08min,[M+H] +＝599.27。
步骤D：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-氧代哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000164
将2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-氧代哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(72毫克，0.121毫摩尔)溶解于4毫升四氢呋喃中，加入一水合氢氧化锂(26毫克，0.602毫摩尔)，1毫升水和1毫升乙醇，于室温下反应50分钟。反应结束，加入20毫升饱和氯化铵中和，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩所得粗品经柱层析分离得37毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-氧代哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸。LC-MS:RT＝1.95min,[M+H] +＝585.38。 1H NMR(500MHz,DMSO)δ12.67(s,1H),8.30(d,J＝1.0Hz,1H),7.89(dd,J＝9.7,0.9Hz,1H),7.82(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.75(t,J＝8.0Hz,1H),7.72–7.70(m,3H),7.54–7.51(m,1H),6.73–(m,1H),5.43(s,2H),5.15–5.09(m,1H),4.75–4.70(m,2H),4.59–4.55(m,1H),4.45–4.41(m,1H),4.18–4.14(m,1H),3.80–3.72(m,2H),3.43(d,J＝11.6Hz,2H),2.94–2.88(m,2H),2.65–2.57(m,1H),2.34–2.24(m,1H),1.55(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例23 2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氧代哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000165
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000166
将4-(((6-氯吡啶-2-基)氧基)甲基)-3-氟苄腈(130毫克，0.496毫摩尔)，3-氧代哌嗪-1-羧酸叔丁酯(99.2毫克，0.496毫摩尔)，碳酸铯(323毫克，0.992毫摩尔)和2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(22.5毫克，0.0496毫摩尔)溶于5毫升无水1,4-二氧六环中，加入三(二亚苄基丙酮)二钯(45.3毫克，0.0496毫摩尔)，氮气置换3次，于90摄氏度下微波反应2小时。反应结束，加水稀释，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，所得粗品经柱层析分离得151毫克淡黄色固体4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯。LC-MS:RT＝2.08min,[M+H] +＝427.21。
步骤B：合成3-氟-4-(((6-(2-氧代哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000167
将4-(6-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(151毫克，0.354毫摩尔)溶于4毫升无水二氯甲烷中，加入2毫升三氟乙酸，于室温下反应40分钟。反应结束，反应液倒入60毫升碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩得粗品120毫克3-氟-4-(((6-(2-氧代哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈。LC-MS:RT＝1.89min,[M+H] +＝327.27。
步骤C：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氧代哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000168
将3-氟-4-(((6-(2-氧代哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈(120毫克，0.367毫摩尔)，碳酸钾(101毫克，0.733毫摩尔)和碘化钾(91.4毫克，0.551毫摩尔)溶于5毫升无水乙腈中，加入2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(113毫克，0.367毫摩尔)，于60摄氏度下反应2小时。反应结束，加水稀释，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩所得粗品经柱层析分离得146毫克淡黄色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氧代哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯。LC-MS:RT＝1.93min,[M+H] +＝599.27。
步骤D：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氧代哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000169
将2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氧代哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(146毫克，0.243毫摩尔)溶解于4毫升乙腈中，加入1,5,7-三氮杂二环[4.4.0]癸-5-烯(71毫克，0.510毫摩尔)和1毫升水，于室温下反应7小时。反应结束，加入20毫升饱和氯化铵中和，二氯甲烷(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩所得粗品经柱层析分离制备得38毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氧代哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸。GC-MS：RT＝1.87min,[M+H] +＝585.33。 1H NMR(500MHz,DMSO)δ12.69(s,1H),8.30(d,J＝1.0Hz,1H),7.89(dd,J＝9.7,0.9Hz,1H),7.82(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.75(t,J＝8.0Hz,1H),7.72–7.70(m,3H),7.54–7.51(m,1H),6.73–6.70(m,1H),5.43(s,2H),5.15–5.09(m,1H),4.75–4.70(m,2H),4.59–4.55(m,1H),4.45–4.41(m,1H),4.17(dt,J＝9.0,5.8Hz,1H),3.78–3.72(m,2H),3.43(d,J＝11.6Hz,2H),2.94–2.88(m,2H),2.65–2.57(m,1H),2.34–2.24(m,1H),1.51(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例24 2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙基)-1-(((S)-环杂氧丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲酸(24A)和2-((R)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙基)-1-(((S)-环杂氧丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲酸(24B)
Figure PCTCN2021133447-appb-000170
化合物24A具体合成路线如下：
步骤A：合成4-((R)-2-溴丁酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000171
室温下，将4-氨基-3-((((S)氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(190.2毫克，0.8毫摩尔)、(R)-2-溴丁酸(200.0毫克，1.2毫摩尔)溶解在干燥的二氯甲烷溶液(5毫升)中。依次加入4-二甲氨基吡啶(9.7毫克，80.0微摩尔)和二环己基碳二亚胺(494.4毫克，2.4毫摩尔)。在室温下搅拌反应过夜，待反应完全后，利用硅藻土减压过滤，并减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1)，得到300.3毫克淡黄色油状物4-((R)-2-溴丁酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(收率：97.1％)。LC-MS:RT＝2.45min,[M+H] +＝384.76,387.02。
步骤B：合成2-((R)-1-溴丙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000172
室温下，将4-((R)-2-溴丁酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(300.3毫克，0.8毫摩尔)溶解在甲苯(3毫升)溶液中，加入醋酸(200微升)。在110摄氏度下回流反应3小时，待反应完全后，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝3/1)得到195.2毫克黄色油状物2-((R)-1-溴丙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲酸甲酯(收率：68.3％)。LC-MS:RT＝2.34min,[M+H] +＝366.93,369.12。
步骤C：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙基)-1-(((S)-环杂氧丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000173
室温下，将2-((R)-1-溴丙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲酸甲酯(195.2毫克，0.5毫摩尔)和2-((4-氯-2-氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶(210.3毫克，0.6毫摩尔)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(3毫升)中。加入无水碳酸钾(208.5毫克，1.5毫摩尔)，在室温下搅拌反应过夜。待反应完全后，加水(20毫升)稀释，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(50毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1～15/1)，得到230.2毫克白色固体化合物2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲酸甲酯(收率：71.4％)。
LC-MS:RT＝3.43min,[M+H] +＝607.07。
步骤D：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000174
在室温下，将2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲酸甲酯(230.2毫克，0.4毫摩尔)溶解在四氢呋喃(6毫升)，水(2毫升)和乙醇(2毫升)的溶液中，加入氢氧化钠(48.0毫克，1.2毫摩尔)，在室温下搅拌反应过夜。
反应完全后，滴加1摩尔每升的柠檬酸水溶液，直到溶液的pH到5为止。加入水(20毫升)稀释，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(25毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用半制备HPLC纯化(流动相：含0.1％氨水的水/乙腈＝90/10～40/60)得到68.8毫克2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲酸(收率：30.7％)。LC-MS:RT＝2.68min,[M+H] +＝593.21。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.40(s,1H),8.09(dd,J＝8.6,1.5Hz,1H),7.86(d,J＝8.5Hz,1H),7.67(t,J＝7.8Hz,1H),7.51(t,J＝8.0Hz,1H),7.25(ddd,J＝10.7,9.0,2.0Hz,2H),6.91(d,J＝7.2Hz,1H),6.75(d,J＝8.3Hz,1H),5.43(s,2H),5.22(q,J＝7.9Hz,1H),5.09(dd,J＝11.0,3.9Hz,1H),4.92(s,1H),4.80(d,J＝15.3Hz,3H), 4.04(s,1H),3.64(s,2H),3.03(s,1H),2.93(p,J＝7.4Hz,1H),2.70(p,J＝8.3Hz,1H),2.47(d,J＝36.2Hz,2H),2.20(t,J＝12.0Hz,3H),2.15–1.96(m,2H),0.98(t,J＝7.3Hz,3H)。
化合物24B具体合成路线如下：
步骤A：合成4-((S)-2-溴丁酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000175
室温下，将4-氨基-3-((((S)氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(190.2毫克，0.8毫摩尔)、(S)-2-溴丁酸(200.0毫克，1.2毫摩尔)溶解在干燥的二氯甲烷溶液(5毫升)中。依次加入4-二甲氨基吡啶(9.7毫克，80.0微摩尔)和二环己基碳二亚胺(494.4毫克，2.4毫摩尔)。在室温下搅拌反应过夜，待反应完全后，利用硅藻土减压过滤，并减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1)，得到300.3毫克淡黄色油状物4-((S)-2-溴丁酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(收率：97.1％)。LC-MS:RT＝2.45min,[M+H] +＝384.76,387.02。
步骤B：合成2-((S)-1-溴丙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000176
室温下，将4-((S)-2-溴丁酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(300.3毫克，0.8毫摩尔)溶解在甲苯(3毫升)溶液中，加入醋酸(200微升)。在110摄氏度下回流反应3小时，待反应完全后，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝3/1)得到195.2毫克黄色油状物2-((S)-1-溴丙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲酸甲酯(收率：68.3％)。LC-MS:RT＝2.34min,[M+H] +＝366.93,369.12。
步骤C：合成2-((R)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000177
室温下，将2-((S)-1-溴丙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲酸甲酯(195.2毫克，0.5毫摩尔)和2-((4-氯-2-氟苄基)氧基)-6-(哌啶-4-基)吡啶(210.3毫克，0.6毫摩尔)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(3毫升)中。加入无水碳酸钾(208.5毫克，1.5毫摩尔)，在室温下搅拌反应过夜。待反应完全后，加水(20毫升)稀释，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(50毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1～15/1)，得到230.2毫克白色固体化合物2-((R)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲酸甲酯(收率：71.4％)。
LC-MS:RT＝3.43min,[M+H] +＝607.07。
步骤D：合成2-((R)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙基)-1-(((S)-氧杂环 丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000178
在室温下，将2-((R)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲酸甲酯(230.2毫克，0.4毫摩尔)溶解在四氢呋喃(6毫升)和水(2毫升)和乙醇(2毫升)的溶液中，加入氢氧化钠(48.0毫克，1.2毫摩尔)，在室温下搅拌反应过夜。
反应完全后，滴加1摩尔每升的柠檬酸水溶液，直到溶液的pH到5为止。加水(20毫升)稀释，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(25毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用半制备HPLC纯化(流动相：含0.1％氨水的水/乙腈＝90/10～40/60)得到68.8毫克2-((R)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)丙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲酸(收率：30.7％)。LC-MS:RT＝2.68min,[M+H] +＝593.21。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.34(d,J＝1.5Hz,1H),8.03(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),7.77(d,J＝8.5Hz,1H),7.60(dd,J＝8.2,7.3Hz,1H),7.50(t,J＝8.3Hz,1H),7.25–7.14(m,2H),6.83(d,J＝7.3Hz,1H),6.66(d,J＝8.1Hz,1H),5.41(s,2H),5.32(qd,J＝7.2,2.5Hz,1H),4.85(dd,J＝15.8,2.7Hz,1H),4.75(dd,J＝15.8,5.9Hz,1H),4.66(td,J＝8.0,5.9Hz,1H),4.51(dd,J＝10.6,4.1Hz,1H),4.40(dt,J＝9.3,5.8Hz,1H),3.22(t,J＝10.9Hz,2H),2.92(td,J＝10.8,4.8Hz,1H),2.80(ddt,J＝13.8,8.1,4.0Hz,1H),2.68(dq,J＝10.9,5.5,4.8Hz,1H),2.60(td,J＝12.1,3.4Hz,1H),2.56–2.46(m,1H),2.35(ddd,J＝13.1,10.6,7.1Hz,1H),2.19(ddt,J＝11.6,7.3,4.3Hz,1H),1.96(td,J＝10.5,9.5,3.4Hz,2H),1.91–1.72(m,2H),0.99(t,J＝7.3Hz,3H)。
实施例25 2-((4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)(环丙基)甲基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000179
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-2-环丙基乙酸乙酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000180
在室温下，将化合物4-(6-((4-氯基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶(155.0毫克，483.2微摩尔)，2-溴-2-环丙基乙酸乙酯(200.0毫克，966.4微摩尔)和碳酸钾(267.3毫克，1.9毫摩尔)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)中，在室温反应16小时。待反应完全后，加水(80毫升)稀释，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(50毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1)，得到177.2毫克淡黄色油状物2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-2-环丙基乙酸乙酯(S、R构型混合物)(收率：82.5％)。LC-MS:RT＝3.00min,[M+H] +＝446.97。
步骤B：合成2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-2-环丙基乙酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000181
在室温下，将化合物2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-2-环丙基乙酸乙酯(177.0毫克，396.7微摩尔)，溶解在四氢呋喃(10毫升)、乙醇(3毫升)和水(3毫升)溶液中，加入氢氧化钠(160.0毫克，4.0毫摩尔)，在室温下反应48小时。反应完全后，滴加1摩尔每升的柠檬酸水溶液，直到溶液的pH到5为止。加水(50毫升)稀释，乙酸乙酯(25毫升×3次)萃取，饱和食盐水(25毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1～10/1)，得到132.0毫克黄色油状物2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-2-环丙基乙酸(S、R构型混合物)(收率：76.9％)。LC-MS:RT＝2.45min,[M+H] +＝419.05。
步骤C：合成4-(2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基-2-环丙基乙酰胺基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)苯甲酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000182
室温下，将2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-2-环丙基乙酸(132.0毫克，315.1微摩尔)、2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(120.0毫克，315.1毫摩尔)、N,N-二异丙基乙胺(122.5毫克，945.2微摩尔)溶解于N,N-二甲基甲酰胺溶液(5毫升)中，室温反应半小时后，加入(S)-4-氨基-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(74.3毫克，315.1毫摩尔)，继续反应24小时。
待反应完全后，加乙酸乙酯(50毫升)稀释，萃取，依次用水(30毫升×3次)，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1～1/1)得到85.0毫克黄色油状物4-(2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基-2-环丙基乙酰胺基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)苯甲酸甲酯(S、R构型混合物)(收率：42.2％)。LC-MS:RT＝3.38min,[M+H] +＝637.14。
步骤D：合成2-((4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)(环丙基)甲基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000183
室温下，将4-(2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基-2-环丙基乙酰胺基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)苯甲酸甲酯(85.0毫克，137.2微摩尔)加入到甲苯(5毫升)中，加入醋酸(200微升)。将温度升到110摄氏度反应4小时。待反应完全后，将反应液冷却至室温，加水(30毫升)稀释，乙酸乙酯(15毫升×3次)萃取，合并有机相，依次用饱和碳酸钠水溶液(15毫升×3次)， 饱和食盐水(15毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1～10/1)得到51.0毫克黄色油状物2-((4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)(环丙基)甲基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(S、R构型混合物)(收率：60.1％)。LC-MS:RT＝3.48min,[M+H] +＝619.29。
步骤E：合成2-((4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)(环丙基)甲基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000184
在室温下，将化合物2-((4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)(环丙基)甲基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并咪唑-6-羧酸甲酯(51.0毫克，82.4微摩尔)溶解在四氢呋喃(6毫升)、甲醇(2毫升)和水(2毫升)溶液中，加入氢氧化钠(32.9毫克，823.7微摩尔)，在室温下反应24小时。反应完全后，滴加1摩尔每升的柠檬酸水溶液，直到溶液的pH到5为止。加水(50毫升)稀释，乙酸乙酯(25毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(25毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用反相HPLC(流动相：含0.1％氨水的水/乙腈＝90/10～40/60)进行纯化，冻干得到9.2毫克白色固体2-((4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)(环丙基)甲基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(S、R构型混合物)(收率：18.4％)。LC-MS:RT＝2.84min,[M+H] +＝605.22。
实施例26 2-(1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-2-甲氧基乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000185
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-3-甲氧基丙酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000186
在室温下，将化合物4-(6-((4-氯基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶(155.0毫克，483.2微摩尔)，2-溴-3-甲氧基丙酸甲酯(200.0毫克，966.4微摩尔)和碳酸钾(267.3毫克，1.9毫摩尔)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)中，在室温反应16小时。
待反应完全后，加水(80毫升)稀释，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，饱和食盐水(50毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1)，得到177.2毫克淡黄色油状物2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-3-甲氧基丙酸甲酯(S、R构型混合物)(收率：82.5％)。LC-MS:RT＝2.63min,[M+H] +＝436.96。
步骤B：合成2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-3-甲氧基丙酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000187
在室温下，将化合物2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-3-甲氧基丙酸甲酯(177.0毫克，396.7微摩尔)，溶解在四氢呋喃(10毫升)、乙醇(3毫升)和水(3毫升)溶液中并加入氢氧化锂(96.0毫克，4.0毫摩尔)，在室温下反应6小时。反应完全后，滴加1摩尔每升的柠檬酸水溶液，直到溶液的pH到5为止。加水(50毫升)稀释，乙酸乙酯(25毫升×3次)萃取，饱和食盐水(25毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1～10/1)，得到139.0毫克黄色油状物2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-3-甲氧基丙酸(S、R构型混合物)(收率：69.2％)。LC-MS:RT＝2.37min,[M+H] +＝423.03。
步骤C：合成4-(2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基-3-甲氧基丙酰胺基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)苯甲酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000188
室温下，将2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-3-甲氧基乙酸(195.0毫克，460.1微摩尔)、2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(174.8毫克，460.1微摩尔)、N,N-二异丙基乙胺(178.3毫克，1.4毫摩尔)溶解于N,N-二甲基甲酰胺溶液(5毫升)中，室温反应0.5小时，加入4-氨基-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(109.0毫克，460.1微摩尔)，继续反应24小时。
待反应完全后，加乙酸乙酯(50毫升)稀释，萃取，依次用水(30毫升×3次)，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝2/1～1/1)得到145.0毫克黄色油状物4-(2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基-3-甲氧基丙酰胺基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)苯甲酸甲酯(S、R构型混合物)(收率：49.0％)。LC-MS:RT＝3.12min,[M+H] +＝641.05。
步骤D：合成2-(1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-2-甲氧基乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000189
室温下，将4-(2-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基-3-甲氧基丙酰胺基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)苯甲酸甲酯(145.0毫克，227.8微摩尔)加入到甲苯(5毫升)中，加入醋酸(100微升)。将温度升到110氏度反应4小时。
待反应完全后，将反应液冷却至室温，加水(30毫升)稀释，乙酸乙酯(15毫升×3次)萃取，合并有 机相，依次用饱和碳酸钠水溶液(15毫升×3次)，饱和食盐水(15毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1～10/1)得到98.5毫克黄色油状物2-(1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-2-甲氧基乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(S、R构型混合物)(收率：68.0％)。LC-MS:RT＝3.48min,[M+H] +＝623.48。
步骤E：合成2-(1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-2-甲氧基乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000190
在室温下，将化合物2-(1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-2-甲氧基乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(98.5毫克，158.1微摩尔)溶解在四氢呋喃(6毫升)、甲醇(2毫升)和水(2毫升)溶液中，加入氢氧化钠(101.8毫克，2.5毫摩尔)，在室温下反应24小时。反应完全后，滴加1摩尔每升的柠檬酸水溶液，直到溶液的pH到5为止。加水(50毫升)稀释，乙酸乙酯(25毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(25毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用反相HPLC(流动相：含0.1％氨水的水/乙腈＝90/10～40/60)进行进一步的纯化，冻干得到18.7毫克白色固体2-(1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-2-甲氧基乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(S、R构型混合物)(收率：20.5％)。LC-MS:RT＝2.82min,[M+H] +＝609.27。
实施例27 2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-4-羟基哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000191
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(6-溴吡啶-2-基)-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000192
室温下，将2,6-二溴吡啶(5克，21.18毫摩尔)溶于四氢呋喃(30毫升)中，在氮气保护下加入异丙基氯化镁-氯化锂(16.3毫升)，室温搅拌2小时，加入4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.23克，21.18毫摩尔)，室温反应过夜。
反应结束后，加饱和氯化铵淬灭，乙酸乙酯萃取(30毫升×3次)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩有机相，所得粗品用用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝5/1)得到2克淡黄色油状液体4-(6-溴吡啶-2-基)-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(收率：27％)。LC-MS:RT＝2.04min,[M-55] +＝301.11。
步骤B：合成4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000193
将3-氟-4-(羟甲基)苄腈(425毫克，2.81毫摩尔)，4-(6-溴吡啶-2-基)-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1克，2.81毫摩尔)，钯催化剂(128毫克)，BINAP(175毫克，0.28毫摩尔)和碳酸铯(1.83克，5.62毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(50毫升)中，温度升高到110摄氏度搅拌8小时。
反应结束后，用硅藻土抽滤，二氯甲烷淋洗，浓缩滤液，所得粗品用柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝10/1)得到820毫克淡黄色油状液体4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(收率：68％)。LC-MS:RT＝2.12min,[M-55] +＝372.33。
步骤C：合成3-氟-4-(((6-(4-羟基哌啶-4-基)吡啶基-2-基)氧基)甲基)苄腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000194
将4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(820毫克,1.92毫摩尔)溶于盐酸的1,4-二氧六环溶液(15毫升)中，室温搅拌。
反应完全后，减压旋干得到410毫克淡黄色固体3-氟-4-(((6-(4-羟基哌啶-4-基)吡啶基-2-基)氧基)甲基)苄腈(收率：69％)。LC-MS:RT＝1.63min,[M+H] +＝328.22。
步骤D：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-4-羟基哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000195
室温下，将3-氟-4-(((6-(4-羟基哌啶-4-基)吡啶基-2-基)氧基)甲基)苄腈(150毫克，0.46毫摩尔)，碘化钾(153毫克，0.92毫摩尔)和碳酸钾(127毫克，0.92毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)中，加入2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(141毫克，0.46毫摩尔)，升温至50摄氏度反应。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝10/1)得到100毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-4-羟基哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：36％)。LC-MS:RT＝1.73min,[M+H] +＝600.34。
步骤E：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-4-羟基哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000196
室温下，将2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-4-羟基哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁 烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯1(100毫克，0.17毫摩尔)溶于混合溶剂(6毫升，乙腈/水＝5/1)中，加入1,5,7-三叠氮双环(4,4,0)癸-5-烯(47毫克，0.34毫摩尔)，室温反应。
反应结束后，加柠檬酸淬灭，乙酸乙酯萃取(10毫升×3次)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩有机相，浓缩所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1)得到58.26毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-4-羟基哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：58％)。LC-MS:RT＝1.72min,[M+H] +＝585.36。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ12.86(s,1H),10.63(s,1H),8.38(s,1H),7.94–7.67(m,6H),7.24(d,J＝7.4Hz,1H),6.78(d,J＝8.0Hz,1H),5.70–5.40(m,3H),5.28–5.06(m,2H),4.90–4.72(m,2H),4.46(d,J＝6.2Hz,1H),4.18(dt,J＝9.2,5.9Hz,1H),3.86–3.70(m,1H),3.60–3.40(m,2H),3.24–3.10(m,2H),2.69–2.54(m,2H),2.30–2.22(m,1H),1.82–1.64(m,4H)。
实施例28合成2-(1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-2-氟乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000197
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-溴-3-羟基丙酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000198
冰盐浴下，向含有DL-丝氨酸(1.2克，11.4毫摩尔)的水溶液(9.3毫升)中，依次加入氢溴酸(2.8毫升，48％水溶液)、溴化钾(4.6克，38.8毫摩尔)，和碳酸钾(244毫克，1.77毫摩尔)，在该温度搅拌10分钟，室温反应3小时。反应结束，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。
所得残余物溶于甲醇(8.8毫升)，加入乙酰氯(924微升，13.0毫摩尔)，加热至回流，反应3小时。反应结束，减压蒸除溶剂，所得残余物用乙酸乙酯(100毫升)稀释，依次用饱和碳酸氢钠(50毫升)、饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。所得1.5克粗产物直接用于下一步反应。
步骤B：合成2-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基))吡啶-2-基)哌啶-1-基)-3-羟基丙酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000199
室温下，向含有2-溴-3-羟基丙酸甲酯(1.5克，8.2毫摩尔)的乙腈(4.0毫升)中依次加入3-氟-4-((((6-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈(950毫克，2.73毫摩尔)、N,N-二异丙基乙胺(1.0毫升，6.06毫摩尔)和碳酸钾(1.0克，7.25毫摩尔)，加热至80摄氏度反应2小时。反应结束，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝5/95)，得到800毫克黄色油状物2-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-3-羟基丙酸甲酯(S、R构型混合物)(收率：71.3％)。LC-MS:RT＝1.70min,[M+H] +＝414.26。
步骤C：合成2-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-3-氟丙酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000200
冰水浴下，向含有2-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-3-羟基丙酸甲酯(200毫克，0.484毫摩尔)的二氯甲烷(5.0毫升)溶液中，加入双(2-甲氧基乙基)氨基三氟化硫(179微升，0.969毫摩尔)，自然升至室温反应2小时。
反应结束，冰水浴冷却，加水淬灭，二氯甲烷(80毫升)萃取，有机相依次用饱和碳酸氢钠(50毫升)、饱和食盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝3/97)。得到160毫克淡黄色油状物2-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-3-氟丙酸甲酯(S、R构型混合物)(收率：79.7％)。LC-MS:RT＝1.73min,[M+H] +＝416.26。
步骤D：合成4-(2-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-3-氟丙酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000201
室温下，向含有2-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-3-氟丙酸甲酯(160毫克，0.386毫摩尔)的四氢呋喃/甲醇/水溶液(3.0/0.5/0.5毫升)中，加入一水合氢氧化锂(71毫克，1.54毫摩尔)，室温反应0.5小时。反应结束，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。所得粗产物直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝1.72min,[M+H] +＝402.26。
上述粗产物溶于二氯甲烷(4.0毫升)，依次加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(293毫克，0.77毫摩尔)、N,N-二异丙基乙胺(127微升，0.77毫摩尔)和(S)-4-氨基-3-(((氧杂环丁-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(90毫克，0.386毫摩尔)，室温反应40分钟。反应结束，用二氯甲烷(100毫升)稀释，有机相依次用水(50毫升)和饱和食盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝5/95)。得到200毫克淡黄色油状物4-(2-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-3-氟丙酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(S、R构型混合物)(收率：83.6％)。LC-MS:RT＝1.79min,[M+H] +＝620.36。
步骤E：合成2-(1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-2-氟乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000202
将4-(2-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-3-氟丙酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(200毫克，0.323毫摩尔)溶于乙酸(2.0毫升)中，于60摄氏度反应2小时。反应完毕，加入乙酸乙酯(100毫升)，搅拌下加入饱和碳酸氢钠溶液直至无气泡产生，分层，有机相依次用水(50毫升)和饱和食盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝5/95)。得到130毫克淡黄色油状物2-(1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-2-氟乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(S、R构型混合物)(收率：67.0％)。LC-MS:RT＝1.81min,[M+H] +＝602.30。
步骤F：合成2-(1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-2-氟乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000203
室温下，向含有2-(1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-2-氟乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(130毫克，0.216毫摩尔)的四氢呋喃/甲醇/水溶液(2.5/2.5/1.0毫升)中，加入一水合氢氧化锂(36毫克，0.86毫摩尔)，加热至35摄氏度反应1小时。反应完毕，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝6/94)。得到19毫克白色固体2-(1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-2-氟乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(S、R构型混合物)(收率：15.0％)。LC-MS:RT＝1.77min,[M+H] +＝588.23。
实施例29 2-((S)-1-((R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000204
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(((6-溴吡啶-2-基)氧基)甲基)-3-氟苄腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000205
将3-氟-4-(羟甲基)苄腈(5.00克，28.41毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(30毫升)中，加入碳酸钾(7.84克，56.82毫摩尔)和2-溴-6-氟吡啶(4.30毫克，28.41毫摩尔)，升温至110摄氏度反应。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯萃取(30毫升×3次)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩有机相，所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/10)得到4.50克白色固体4-(((6-溴吡啶-2-基)氧基)甲基)-3-氟苄腈(收率：52％)。LC-MS:RT＝2.14min,[M+H] +＝307.03。
步骤B：合成(R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-(羟甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000206
将4-(((6-溴吡啶-2-基)氧基)甲基)-3-氟苄腈(1.00克，3.26毫摩尔)，(R)-2-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.70克，3.26毫摩尔)，钯催化剂(302毫克)，BINAP(411毫克，0.66毫摩尔)，碳酸铯(2克，6.52毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(20毫升)中，升温至100摄氏度搅拌8小时。
反应结束后，用硅藻土抽滤，二氯甲烷淋洗，浓缩滤液，所得粗品用柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)得到1.00克淡黄色油状液体(R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基氧基)吡啶-2-基)-2-(羟甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(收率：69％)。LC-MS:RT＝2.09min,[M-55] +＝443.22。
步骤C：合成(R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000207
将(R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-(羟甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(100毫克，0.23毫摩尔)溶于四氢呋喃(5毫升)中，降至零摄氏度，加入钠氢(11毫克，0.46毫摩尔)，在室温下搅拌0.5小时，加入碘甲烷(65毫克，0.46毫摩尔)，室温反应过夜。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯(30毫升)萃取，水洗两次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩有机相，所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)得到280毫克淡黄色固体(R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(收率：48％)。LC-MS:RT＝2.25min,[M-55] +＝457.27。
步骤D：合成(R)-3-氟-4-(((6-(3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000208
将(R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(50毫克，0.11毫摩尔)溶于盐酸/1,4-二氧六环溶液(5毫升)中，室温搅拌。
反应完全后，减压旋干得到粗品61毫克(R)-3-氟-4-(((6-(3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈。LC-MS:RT＝1.70min,[M+H] +＝357.18。
步骤E：合成2-((S)-1-((R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000209
室温下，将(R)-3-氟-4-(((6-(3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈(60毫克，0.17毫摩尔)，DIEA(1毫升)，碘化钾(56毫克，0.34毫摩尔)和碳酸钾(47克，0.34毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)中，加入2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(52毫克，0.17毫摩尔)，升温至60摄氏度反应。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯(20毫升×2次)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝10/1)得到20毫克淡黄色固体2-((S)-1-((R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基]吡啶-2-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：19％)。LC-MS:RT＝1.97min,[M+H] +＝629.33。
步骤F：合成2-((S)-1-((R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000210
室温下，将2-((S)-1-((R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(20毫克，0.03毫摩尔)溶于混合溶剂(3.5毫升，乙腈/水＝3/0.5)中，加入1,5,7-三叠氮双环(4,4,0)癸-5-烯(9毫克，0.06毫摩尔)，室温反应。
反应结束后，加柠檬酸淬灭，乙酸乙酯萃取(10毫升×2次)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩有机相，浓缩所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1)得到12毫克白色固体2-((S)-1-((R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基]吡啶-2-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：61％)。LC-MS:RT＝1.86min,[M+H] +＝615.31。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ12.71(s,1H),8.27(s,1H),7.86(dd,J＝10.0,1.3Hz,1H),7.79(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),7.69–7.64(m,2H),7.61(t,J＝7.6Hz,1H),7.44(t,J＝8.0Hz,1H),6.26(d,J＝8.2Hz,1H),6.10(d,J＝7.8Hz,1H),5.37(s,2H),5.13(d,J＝13.0Hz,2H),4.87(d,J＝6.6Hz,1H),4.61(dd,J＝15.8,6.5Hz,1H),4.44(dd,J＝13.4,8.0Hz,1H),4.20(dt,J＝9.0,5.9Hz,1H),4.08–3.96(m,1H),3.82(d,J＝11.8Hz,1H),3.65(dd,J＝10.5,3.4Hz,1H),3.53–3.41(m,1H),3.33(s,3H),2.81(t,J＝11.3Hz,1H),2.71–2.60(m,2H),2.35(d,J＝9.1Hz,2H),2.27–2.13(m,2H),1.39(d,J＝6.6Hz,3H)。
实施例30 2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3-氟吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000211
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000212
将2,6-二溴-3-氟吡啶(1.0克，3.93毫摩尔)，碳酸钾(1.08克，7.86毫摩尔)和哌嗪-1-羧酸叔丁酯(731毫克，3.93毫摩尔)溶于10毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，于120摄氏度下反应2小时。反应结束，加水稀释，乙酸乙酯(50毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩所得粗品经柱层析分离得1.18克白色固体4-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯。LC-MS:RT＝1.98min,[M+H] +＝360.10。
步骤B：合成4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3-氟吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000213
将4-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(400毫克，1.11毫摩尔)和3-氟-4-(羟甲基)苄腈(168毫克，1.11毫摩尔)溶解于5毫升无水1,4-二氧六环中，加入碳酸铯(723毫克，2.22毫摩尔)和(2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯([2-(2′-氨基-1,1′-联苯)]甲磺酸钯(94毫克，0.111毫摩尔)，氮气置换3次。于120摄氏度下反应5小时。反应结束，加水稀释，乙酸乙酯(50毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩所得粗品经过柱分离得367毫克淡黄色固体4-(6-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3-)氟吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯。LC-MS:RT＝1.95min,[M-H] -＝431.22。
步骤C：合成3-氟-4-(((5-氟-6-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000214
将4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3-氟吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(367毫克，0.85毫摩尔)溶于4毫升无水二氯甲烷中，加入2毫升三氟乙酸，于室温下反应40分钟。反应结束，反应液倒入60毫升碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得260毫克3-氟-4-(((5-氟-6-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈。LC-MS:RT＝1.81min,[M+H] +＝331.27。
步骤D：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3-氟吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000215
将3-氟-4-(((5-氟-6-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈(260毫克，0.785毫摩尔)，碳酸钾(216毫克，1.57毫摩尔)和碘化钾(195毫克，1.17毫摩尔)溶于5毫升无水乙腈中，加入2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(241毫克，0.785毫摩尔)，于60摄氏度下反应2小时。反应结束，加水稀释，乙酸乙酯(40毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩所得粗品经柱层析分离得310毫克淡黄色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3-氟吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯。LC-MS:RT＝1.91min,[M+H] +＝603.27。
步骤E：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3-氟吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000216
将2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3-氟吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(100毫克，0.166毫摩尔)溶解于4毫升乙腈中，加入1,5,7-三氮杂二环[4.4.0]癸-5-烯(48.4毫克，0.348毫摩尔)和1毫升水，于室温下反应7小时。反应结束，加20毫升饱和氯化铵中和，二氯甲烷(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩所得粗品经柱层析分离制备得38毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3-氟吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸。LC-MS:RT＝1.79min,[M+H] +＝589.27。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.78(s,1H),8.29(d,J＝1.0Hz,1H),7.88(dd,J＝10.0,1.2Hz,1H),7.81(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),7.72–7.64(m,3H),7.49–7.44(m,1H),6.26(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),5.37(s,2H),5.19–5.11(m,1H),4.83–4.78(m,1H),4.69(dd,J＝15.6,5.6Hz,1H),4.49–4.43(m,2H),4.21–4.16(m,1H),2.66–2.62(m,2H),2.60–2.55(m,6H),2.37–2.30(m,2H),1.44(d,J＝6.7Hz,3H)。
实施例31 2-((1S)-1-((3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000217
具体合成路线如下：
步骤A：合成(3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-3-醇
Figure PCTCN2021133447-appb-000218
将(3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(350毫克，0.802毫摩尔)溶于5毫升无水二氯甲烷中，加入2毫升三氟乙酸，于室温下反应40分钟。反应结束，反应液倒入60毫升碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯(50毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得270毫克(3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-3-醇。LC-MS:RT＝1.81min,[M+H] +＝337.17。
步骤B：合成2-((1S)-1-((3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000219
将(3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-3-醇(270毫克，0.801毫摩尔)，碳酸钾(222毫克，1.61毫摩尔)和碘化钾(199毫克，1.21毫摩尔)溶于5毫升无水乙腈中，加入2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(246毫克，0.801毫摩尔)，60摄氏度下反应2小时。反应结束，加水稀释，乙酸乙酯(40毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩所得粗品经柱层析分离得320毫克淡黄色固体2-((1S)-1-((3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯。LC-MS:RT＝1.86min,[M+H] +＝609.27。
步骤C：合成2-((1S)-1-((3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000220
将2-((1S)-1-((3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(150毫克，0.246毫摩尔)溶解于4毫升乙腈中，加入1,5,7-三氮杂二环[4.4.0]癸-5-烯(71.8毫克，0.517毫摩尔)和1毫升水，于室温下反应7小时。反应结束，加20毫升饱和氯化铵中和，二氯甲烷(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩所得粗品经柱层析分离制备得41毫克白色固体2-((1S)-1-((3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：三步8.6％)。LC-MS:RT＝1.78min,[M+H] +＝595.25。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.78(s,1H),8.30(dd,J＝5.1,1.0Hz,1H),7.83–7.80(m,1H),7.74–7.71(m,1H),7.70–7.68(m,1H),7.61–7.54(m,2H),7.48–7.42(m,1H),7.28–7.24(m,1H),6.84–6.81(m,1H),6.65(d,J＝8.2Hz,1H),5.42–5.32(m,2H),5.24–5.14(m,1H),4.85–4.80(m,1H),4.72–4.66(m,1H),4.55–4.41(m,3H),4.22–4.16(m,1H),3.20–3.17(m,2H),2.70–2.60(m,2H),2.40–2.32(m,3H),1.88(t,J＝5.9Hz,2H),1.48(dd,J＝6.7,2.7Hz,3H)。
实施例32 2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000221
具体合成路线如下：
步骤A：合成3-氟-4-(((3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000222
将3-氟-4-(羟甲基)苄腈(151毫克，1毫摩尔)和2,3,5,6-四氟吡啶(151毫克，1毫摩尔)溶解于2毫升N-甲基吡咯烷酮中，加入碳酸钾(414毫克，3毫摩尔)，氮气置换3次，于100摄氏度下反应8小时。
反应结束，加水稀释，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩所得粗品经过柱(正己烷/乙酸乙酯＝8/1)分离得212毫克淡黄色固体合成3-氟-4-(((3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈(收率：76.3％)。LC-MS:RT＝2.09min,[M-H] +＝279.13。
步骤B：合成4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000223
将3-氟-4-(((3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈(212毫克，0.76毫摩尔)和哌嗪-1-羧酸叔丁酯(157毫克，0.84毫摩尔)溶解于2毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入碳酸钾(210毫克，1.52毫摩尔)，氮气置换3次，于110摄氏度下反应8小时。
反应结束，加水稀释，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩所得粗品经过柱(正己烷/乙酸乙酯＝8/1)分离得198毫克淡黄色固体合成4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(收率：58.0％)。
步骤C：合成4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)哌嗪
Figure PCTCN2021133447-appb-000224
将4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(198毫克，0.44毫摩尔)溶解于3毫升甲醇中，零摄氏度下，加入4M盐酸1,4-二氧六环溶液(3毫升)，升至室温反应40分钟。
反应结束，反应液直接旋干得215毫克白色固体4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)哌嗪，直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝1.68min,[M+H] +＝349.16。
步骤D：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000225
室温下，将4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)哌嗪(215毫克，0.44毫摩尔)、2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(135毫克，0.44毫摩尔)、碘化钾(73毫克，0.44毫摩尔)和碳酸铯(287毫克，0.88毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中，加入N,N-二异丙基乙胺(1.0毫升)，氮气保护下，60摄氏度反应3.0小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取。合并有机相，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩有机相，所得物硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝20/1)得到205毫克淡黄色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：75.1％)。LC-MS:RT＝1.89min,[M+H] +＝621.34。
步骤E：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000226
室温下，向含有2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(205毫克，0.33毫摩尔)的四氢呋喃(3.0毫升)中，滴加氢氧化锂(16毫克，0.66毫摩尔)水溶液(1.0毫升)，加入(1.0毫升)的甲醇，25摄氏度下反应3.0小时。
反应结束，加水淬灭，用氯化铵水溶液(0.5摩尔/升)调pH至6，二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，合并有机相，氯化铵水溶液(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到的粗产品经过柱分离纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝15/1),得132毫克淡黄色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：51.1％)。LC-MS:RT＝1.79min,[M+H] +＝607.29。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ12.74(s,1H),8.27(s,1H),7.92–7.86(m,1H),7.83–75(m,2H),7.72–7.62(m,3H),5.45(d,J＝13.7Hz,2H),5.13(d,J＝2.9Hz,1H),4.83–4.74(m,1H),4.67(dd,J＝15.4,5.5Hz,1H),4.49–4.40(m,2H),4.17(dt,J＝9.1,5.8Hz,1H),3.29–3.18(m,3H),2.67–2.52(m,5H),2.29(dd,J＝18.2,7.3Hz,1H),1.42(t,J＝8.0Hz,3H)。
实施例33 2-((1S)-1-((3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氟哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000227
具体合成路线如下：
步骤A：合成(3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氟哌啶-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000228
将(3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(500毫克，1.14毫摩尔)溶于5毫升无水二氯甲烷中，零摄氏度下，加入二乙胺基三氟化硫(220毫克,1.37毫摩尔)，于该温度下反应30分钟。反应结束，反应液倒入60毫升冰水中，乙酸乙酯(40毫升×2次)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(30毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得485毫克(3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氟哌啶-1-甲酸叔丁酯。LC-MS:RT＝1.97min,[M+H] +＝439.22。
步骤B：合成2-((4-氯-2-氟苄基)氧基)-6-((3,4-cis)-3-氟哌啶-4-基)吡啶
Figure PCTCN2021133447-appb-000229
将(3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氟哌啶-1-甲酸叔丁酯(485毫克，1.10毫摩尔)溶于5毫升无水二氯甲烷中，加入2毫升三氟乙酸，于室温下反应40分钟。反应结束，反应液倒入60毫升碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯(50毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩得330毫克2-((4-氯-2-氟苄基)氧基)-6-((3,4-cis)-3-氟哌啶-4-基)吡啶。LC-MS:RT＝1.92min,[M+H] +＝339.17。
步骤C：合成2-((1S)-1-((3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氟哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000230
将2-((4-氯-2-氟苄基)氧基)-6-((3,4-cis)-3-氟哌啶-4-基)吡啶(330毫克，0.973毫摩尔)，碳酸钾(268毫克，1.94毫摩尔)和碘化钾(242毫克，1.46毫摩尔)溶于5毫升无水乙腈中，加入2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(299毫克，0.973毫摩尔)，于60摄氏度下反应2小时。反应结束，加水稀释，用乙酸乙酯(40毫升×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(30毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩所得粗品经柱层析分离得510毫克淡黄色固体2-((1S)-1-((3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氟哌啶-1-基)乙基)-1-甲基((S)-氧杂环丁烷-2-基甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯。LC-MS:RT＝2.08min,[M+H] +＝611.23。
步骤D：合成2-((1S)-1-((3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氟哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000231
将2-((1S)-1-((3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氟哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(200毫克，0.327毫摩尔)溶解于4毫升乙腈中，加入1,5,7-三氮杂二环[4.4.0]癸-5-烯(95.5毫克，0.687毫摩尔)和1毫升水，于室温下反应7小时。反应结束，加20毫升饱和氯化铵中和，二氯甲烷(40毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩所得粗品经柱层析分离制备得47毫克白色固体2-((1S)-1-((3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氟哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：四步6.9％)。LC-MS:RT＝1.96min,[M+H] +＝597.23。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.77(s,1H),8.31(s,1H),7.84–7.80(m,1H),7.73–7.69(m,1H),7.66–7.60(m,1H),7.57–7.53(m,1H),7.42(ddd,J＝10.0,4.8,2.0Hz,1H),7.28–7.23(m,1H),6.90(d,J＝7.4Hz,1H),6.72(d,J＝8.2Hz,1H),5.43–5.34(m,2H),5.20–5.14(m,1H),5.02–4.82(m,1H),4.78–4.68(m,2H),4.62–4.53(m,2H),4.43(dd,J＝13.5,7.8Hz,1H),4.21–4.16(m,1H),3.03–2.91(m,1H),2.77–2.57(m,3H),2.34–2.18(m,2H),1.85–1.61(m,2H),1.50(dd,J＝6.7,2.8Hz,3H)。
实施例34 2-((S)-1-((R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-(氟甲基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000232
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-((S)-1-((R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-(羟甲基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000233
室温下，将(R)-3-氟-4-(((6-(3-(羟甲基)哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈(160毫克，0.47毫摩尔)，DIEA(1毫升)，碘化钾(155毫克，0.93毫摩尔)和碳酸钾(129克，0.93毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)中，加入2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(144毫克，0.47毫摩尔)，升温至50摄氏度反应。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯(20毫升×2次)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝10/1)得到94毫克淡黄色固体2-((S)-1-((R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-(羟甲基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：33％)。LC-MS:RT＝1.81min,[M+H] +＝615.30。
步骤B：合成2-((S)-1-((R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-(氟甲基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000234
将2-((S)-1-((R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-(羟甲基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(90毫克，0.15毫摩尔)溶于二氯甲烷(2毫升)中，冷却至零下78摄氏度，加入DAST(63毫克，0.29毫摩尔)，低温下搅拌。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯(10毫升×2次)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝10/1)得到80毫克淡黄色固体2-((S)-1-((R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-(氟甲基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：33％)。LC-MS:RT＝2.09min,[M+H] +＝617.27。
步骤C：合成2-((S)-1-((R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-(氟甲基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000235
室温下，将2-((S)-1-((R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-(氟甲基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(80毫克，0.13毫摩尔)溶于混合溶剂(6毫升，乙腈/水＝5/1)中，加入1,5,7-三叠氮双环(4,4,0)癸-5-烯(36毫克，0.26毫摩尔)，室温反应。
反应结束后，加柠檬酸淬灭，乙酸乙酯萃取(10毫升×2次)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩有机相，浓缩所得粗品高效液相制备得到9毫克白色固体2-((S)-1-((R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-2-(氟甲基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：12％)。LC-MS:RT＝1.97min,[M+H] +＝603.31。
实施例35 2-((1S)-1-((3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000236
具体合成路线如下：
步骤A：合成6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)-3',6'-二氢-[2,4'-二吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000237
将(4-氯-2-氟苯基)甲醇(17克，106.5毫摩尔)溶于四氢呋喃(300毫升)中，降至零摄氏度，加入氢化钠(5.6克，142毫摩尔)，在室温下搅拌0.5小时，加入6-氟-3',6'-二氢-[2,4'-二吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯(20克，71毫摩尔)，室温下搅拌过夜。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯(30毫升)萃取，水洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/10)得到10克白色固体6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)-3',6'-二氢-[2,4'-二吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯(收率：34％)。LC-MS:RT＝2.15min,[M+H] +＝419.23。
步骤B：合成(3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000238
将6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)-3',6'-二氢-[2,4'-二吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯(10克，24毫摩尔)溶于四氢呋喃(150毫升)中，降至零摄氏度，缓慢滴加硼烷的四氢呋喃溶液(1M，26毫升，26毫摩尔)，在室温下搅拌0.5小时，加入氢氧化钠(1M，2.4克)和过氧化氢(30％，10毫升)，室温下搅拌过夜。
反应结束后，加饱和亚硫酸氢钠溶液和饱和的碳酸氢钠溶液淬灭，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/5)得到9克白色固体(3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(收率：90％)。LC-MS:RT＝1.90min,[M+H] +＝437.37
步骤C：合成(3,4-cis)-4-(6-(((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-((4-硝基苯甲酰基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000239
将三苯基膦溶于四氢呋喃中，冰浴下加入偶氮二甲酸二乙酯(800毫克，4.6毫摩尔)，搅拌0.5小时，加入(3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1克，2.3毫摩尔)，搅拌15分钟，加入对硝基苯甲酸(768毫克，4.6毫摩尔)，室温下搅拌16小时。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯(100毫升×3次)萃取，合并有机相，水洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/10)得到800毫克白色固体黄色固体(3,4-cis)-4-(6-(((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-((4-硝基苯甲酰基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(收率：45％)。LC-MS:RT＝2.13min,[M+H] +＝586.19。
步骤D：合成(3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000240
将(3,4-cis)-4-(6-(((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-((4-硝基苯甲酰基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(500毫克，0.85毫摩尔)溶于甲醇(10毫升)和水(2毫升)中，加入一水合氢氧化锂(107毫克，2.55毫摩尔)，室温下反应1小时。
反应结束后，加水淬灭稀释，乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和碳酸氢钠洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩所得400毫克黄色固体(3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(收率：98％)。LC-MS:RT＝1.90min,[M+H] +＝437.25。
步骤E：合成(3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-3-醇
Figure PCTCN2021133447-appb-000241
室温下，将(3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(150毫克，0.34毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(2毫升)中，冰水浴下加入盐酸/1,4-二氧六环溶液(2毫升)，室温下搅拌0.5个小时。
反应结束后，浓缩得到120毫克白色固体(3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-3-醇。LC-MS:RT＝1.65min,[M+H] +＝337.25。
步骤F：合成2-((1S)-1-((3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000242
室温下，将(3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-3-醇(120毫克，0.34毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2毫升)中，加入2-((S)-(1-氯甲基)-1-(((S)氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(157毫克，0.51毫摩尔)，碘化钾(113毫克，0.68毫摩尔)和碳酸钾(88毫克，0.68毫摩尔)，60摄氏度下搅拌12小时。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯萃取(10毫升×2次)，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩有机相，所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)得到60毫克无色油状液体2-((1S)-1-((3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：42％)。LC-MS:RT＝1.97min,[M+H] +＝609.35。
步骤G：合成2-((1S)-1-((3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000243
将2-((1S)-1-((3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(60毫克，0.1毫摩尔)溶于四氢呋喃(3毫升)，甲醇(1毫升)和水(1毫升)中，室温下加入一水合氢氧化锂(12毫克，0.3毫摩尔)，反应4小时。
反应结束后，浓缩，所得粗品高效液相纯化得到18.22毫克白色固体2-((1S)-1-((3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：30％)。LC-MS:RT＝1.81min,[M+H] +＝595.27。
实施例36 2-((1S)-1-((3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氟哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000244
具体合成路线如下：
步骤A：合成(3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氟哌啶-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000245
将(3,4-cis)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(200毫克，0.45毫摩尔)溶于四氢呋喃中，冰水浴下加入二乙胺基三氟化硫(147毫克，0.9毫摩尔)，冰水浴下搅拌0.5小时。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，水洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/10)得到150毫克黄色固体黄色固体(3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氟哌啶-1-甲酸叔丁酯(收率：76％)。LC-MS:RT＝2.03min,[M+H] +＝439.19
步骤B：合成2-((4-氯-2-氟苄基)氧基)-6-((3,4-trans)-3-氟哌啶-4-基)吡啶
Figure PCTCN2021133447-appb-000246
室温下，将(3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)苯基)-3-氟哌啶-1-甲酸叔丁酯(150毫克，0.34毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(2毫升)中，冰水浴下，加入盐酸/1,4-二氧六环溶液(2毫升)，室温下搅拌0.5小时。
反应结束后，浓缩得到120毫克白色固体2-((4-氯-2-氟苄基)氧基)-6-((3,4-trans)-3-氟哌啶-4-基)吡啶。LC-MS:RT＝1.68min,[M+H] +＝339.29。
步骤C：合成2-((1S)-1-((3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氟哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000247
室温下，将2-((4-氯-2-氟苄基)氧基)-6-((3,4-trans)-3-氟哌啶-4-基)吡啶(120毫克，0.34毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2毫升)中，加入2-((S)-1-氯甲基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(157毫克，0.51毫摩尔)，碘化钾(113毫克，0.68毫摩尔)和碳酸钾(88毫克，0.68毫摩尔)，60摄氏度下搅 拌12个小时。
反应结束后，加饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯萃取(10毫升×2次)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩有机相，所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)得到60毫克无色油状液体2-((1S)-1-((3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氟哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：42％)。LC-MS:RT＝1.99min,[M+H] +＝611.38。
步骤D：合成2-((1S)-1-((3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氟哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000248
将2-((1S)-1-((3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氟哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(60毫克，0.1毫摩尔)溶于四氢呋喃(3毫升)，甲醇(1毫升)和水(1毫升)中，室温下，加入一水合氢氧化锂(12毫克，0.3毫摩尔)，反应4小时。
反应结束后，浓缩，所得粗品经高效液相纯化得到18.22毫克白色固体2-((1S)-1-((3,4-trans)-4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-氟哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：30％)。LC-MS:RT＝1.88min,[M+H] +＝597.23。
实施例37 2-((S)-1-(4-(6-((3-氟喹啉-8-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000249
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-((S)-1-(4-(6-((3-氟喹啉-8-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000250
室温下，向含有3-氟-8-(((6-(哌啶-4-基)吡啶基-2-基)氧基)甲基)喹啉(132毫克，0.325毫摩尔)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(2.0毫升)中，加入N,N-二异丙基乙基胺(161微升，0.975毫摩尔)，搅拌溶解。依次加 入2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(100毫克，0.325毫摩尔)，碳酸钾(90毫克，0.65毫摩尔)，碘化钾(108毫克，0.65毫摩尔)。加毕，加热至60摄氏度搅拌1小时。
反应结束，加饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝6/94)。得到111毫克无色油状物2-((S)-1-(4-(6-((3-氟喹啉-8-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：56.0％)。LC-MS:RT＝1.87min,[M+H] +＝610.33。
步骤B：合成2-((S)-1-(4-(6-((3-氟喹啉-8-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000251
室温下，向含有2-((S)-1-(4-(6-((3-氟喹啉-8-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(111毫克，0.18毫摩尔)的四氢呋喃/甲醇/水溶液(2.5/2.5/1.0毫升)中，加入一水合氢氧化锂(31毫克，0.73毫摩尔)，加热至35摄氏度反应1小时，反应完毕，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝8/92)。得到27毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((3-氟喹啉-8-基)甲氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：24.9％)。LC-MS:RT＝1.82min,[M+H] +＝596.32。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.75(s,1H),9.00(d,J＝2.9Hz,1H),8.30(dd,J＝9.6,2.9Hz,1H),8.27(d,J＝0.8Hz,1H),7.95(d,J＝8.1Hz,1H),7.85–7.77(m,2H),7.70–7.58(m,3H),6.83(d,J＝7.3Hz,1H),6.71(d,J＝8.1Hz,1H),5.97(s,2H),5.18–5.10(m,1H),4.77(dd,J＝15.5,2.7Hz,1H),4.62(dd,J＝15.5,5.4Hz,1H),4.46–4.35(m,2H),4.14(dt,J＝9.1,5.8Hz,1H),2.94(d,J＝10.6Hz,1H),2.66–2.51(m,4H),2.34–2.17(m,2H),1.85–1.62(m,3H),1.55–1.47(m,1H),1.45(d,J＝6.7Hz,3H)。
实施例38 2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-环氧丁烷-2-基)甲基)-1-H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000252
具体合成路线如下：
步骤A：合成6-氨基-3’6’-二氢-[2,4’-联吡啶]-1’(2’H)-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000253
室温下，将4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(500.4毫克， 1.6毫摩尔)、2-氨基-6-氯吡啶(420.3毫克，3.2毫摩尔)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(146.3毫克，0.2毫摩尔)和碳酸铯(1.2克，3.5毫摩尔)加入到1,4-二噁烷(30毫升)及水(6毫升)中。氮气置换保护，升温至90摄氏度回流反应24小时。
待反应完全后，反应液用硅藻土过滤，减压浓缩滤液。加水(100毫升)稀释，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，饱和食盐水(50毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝6/1)得到310.7毫克黄色油状物6-氨基-3’6’-二氢-[2,4’-联吡啶]-1’(2’H)-羧酸叔丁酯。(收率：69.6％)
步骤B：合成4-(6-氨基吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000254
室温下，将6-氨基-3’6’-二氢-[2,4’-联吡啶]-1’(2’H)-羧酸叔丁酯(310.2毫克，1.1毫摩尔)溶解在甲醇(10毫升)中，加入二氧化铂(12.5毫克，55.0微摩尔)。氢气置换3次，在氢气保护下反应24小时。待反应完全后，反应液用硅藻土过滤，减压浓缩滤液。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1)，得到103.5毫克白色油状物4-(6-氨基吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(收率：33.0％)。LC-MS:RT＝3.25min,[M+H] +＝278.21。
步骤C：合成4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000255
室温下，将4-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(103.2毫克，371.4微摩尔)、4-(溴甲基)-3-氟苯氰(159.02毫克，742.8微摩尔)、碳酸钾(151.8毫克，1.1毫摩尔)溶解加入到N,N-二甲基甲酰胺(3毫升)中。升至60摄氏度反应6小时。
待反应完全后，加水(20毫升)稀释，乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取，饱和食盐水(15毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1)得到101.2毫克黄色油状物4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(收率：66.4％)。
LC-MS:RT＝4.07min,[M+Na] +＝433.25
步骤D：合成3-氟-4-(((6-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲氰
Figure PCTCN2021133447-appb-000256
室温下，将4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(101.3毫克，246.0微摩尔)溶解于4摩尔每升的盐酸乙酸乙酯溶液(5毫升)中，搅拌1小时，逐渐有白色固体析出。待反应完全后，将反应液减压浓缩，加水(20毫升)稀释，滴入饱和碳酸钠水溶液将混合液调至碱性，将水层以乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取，饱和食盐水(15毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。得到76.4毫克白色粉末3-氟-4-(((6-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲氰，无需纯化，直接用于下步反应。LC-MS:RT＝2.69min,[M+H] +＝311.04
步骤E：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1-H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000257
在室温下，将化合物3-氟-4-(((6-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)甲基)苯甲氰(76.1毫克，244.7微摩尔)，2-((S)-1-氯丙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲酸甲酯(83.2毫克，269.2微摩尔)和碳酸钾(170.3毫克，1.2毫摩尔)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)中，在50摄氏度反应16小时。
待反应完全后，加水(20毫升)稀释，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，饱和食盐水(20毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1～0/1)，得到102.9毫克2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1-H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：72.1％)。LC-MS:RT＝1.97min,[M+H] +＝583.73。
步骤F：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1-H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000258
在室温下，将2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1-H-苯并咪唑-6-羧酸甲酯(102.9毫克，171.8微摩尔)，溶解在四氢呋喃(10毫升)、乙醇(3毫升)和水(3毫升)溶液中，加入氢氧化钠(76.0毫克，1.9毫摩尔)，在室温下反应16小时。
反应完全后，滴加1摩尔每升的柠檬酸水溶液，直到溶液的pH到5为止。加水(20毫升)稀释，乙酸乙酯(25毫升×3次)萃取，饱和食盐水(25毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。所得残余物经半制备HPLC纯化(流动相：含0.1％氨水的水/乙腈＝90/10～40/60)进行进一步的纯化，得到20.5毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1-H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：20.4％)。LC-MS:RT＝1.08min,[M+H] +＝569.60。
实施例39 2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(39A)和2-((R)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(39B)
Figure PCTCN2021133447-appb-000259
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-氯-6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶
Figure PCTCN2021133447-appb-000260
零摄氏度下，向含(4-氯-2-氟苯基)甲醇(5.0克，31.14毫摩尔)的四氢呋喃(50.0毫升)中，加入叔丁醇钾(4.88克，43.60毫摩尔)，搅拌30分钟后，加入2,6-二氯吡啶(4.2克，28.38毫摩尔)，于25摄氏度下反应过夜。
反应结束，加水(50毫升)淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(50毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)。得到7.53克黄色油状物2-氯-6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶(收率：88.9％)。LC-MS:RT＝2.27min,[M+H] +＝272.05。
步骤B：合成4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000261
25摄氏度下，向含有2-氯-6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶(7.53克，27.68毫摩尔)的1,4-二氧六环中，加入哌嗪-1-羧酸叔丁酯(5.15克，27.68毫摩尔)、碳酸铯(18.05克，55.36毫摩尔)和甲烷磺酸(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(702.5毫克，0.83毫摩尔)，于100摄氏度下反应3小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(50毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)。得到4.7克白色固体4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(收率：40.2％)。LC-MS:RT＝2.39min,[M+H] +＝422.22。
步骤C：合成4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪
Figure PCTCN2021133447-appb-000262
向含有4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.34克,10.28毫摩尔)的甲醇(30毫升)中，加入含盐酸的1,4-二氧六环溶液(20.0毫升，4摩尔/升)，于室温下反应3小时。
反应结束，反应液直接旋干得3.68克白色固体4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪，直接用于下一步。LC-MS:RT＝1.65min,[M+H] +＝312.26。
步骤D：合成2-(1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000263
向含有4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪(750毫克,2.09毫摩尔)的乙腈(8.0毫升)中，加入N,N-二异丙基乙胺(1.0毫升)、碘化钾(420毫克，3.13毫摩尔)、碳酸钾(577毫克，4.18毫摩尔)、N,N- 二甲基甲酰胺(10.0毫升)，最后加入2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(650毫克,2.09毫摩尔)，N 2保护下，于60摄氏度反应3小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝2/1。得到770毫克黄色固体2-(1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：62.1％，dr＝60％)。LC-MS:RT＝1.92min,[M+H] +＝594.26。
步骤E：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(39A)和2-((R)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(39B)
Figure PCTCN2021133447-appb-000264
零摄氏度下，向含有2-(1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(770毫克,1.30毫摩尔)的四氢呋喃(3毫升)和甲醇(1毫升)混合溶液中，滴加氢氧化锂(307毫克,7.30毫摩尔)的水溶液(1毫升)，于25摄氏度下反应30分钟。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相用，饱和食盐水(20毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10。得到313毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(39A)(收率：41.6％)和78毫克白色固体2-((R)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(39B)(收率10.4％)。粗产品用制备型高效液相色谱纯化。分离条件如下：色谱柱：Agilent 5 Prep-C18 100mm×30mm 5μM；流动相：水(含有0.1％的氨水)和乙腈洗脱；流速：20毫升/分钟；梯度：由25％乙腈在15.23分钟及17.06分钟分别洗脱出来39A和39B，检测波长：254nm。
化合物39A：HPLC:RT＝15.23min。LC-MS:RT＝1.88min,[M+H] +＝580.26。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.26(s,1H),7.80(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),7.66(d,J＝8.4Hz,1H),7.49(t,J＝8.2Hz,1H),7.44(dt,J＝16.0,4.9Hz,2H),7.28(dd,J＝8.2,1.8Hz,1H),6.28(d,J＝8.1Hz,1H),6.06(d,J＝7.8Hz,1H),5.29(d,J＝8.8Hz,2H),5.14(d,J＝3.0Hz,1H),4.80(dd,J＝15.5,2.9Hz,1H),4.68(dd,J＝15.5,5.5Hz,1H),4.52–4.40(m,2H),4.18(dt,J＝9.1,5.7Hz,1H),3.40(d,J＝5.3Hz,4H),2.68–2.59(m,1H),2.54(d,J＝16.1Hz,4H),2.38–2.26(m,1H),1.45(d,J＝6.7Hz,3H)。
其中化合物39A的单晶结构示意图如图1所示，具体晶体参数如下：
Figure PCTCN2021133447-appb-000265
Figure PCTCN2021133447-appb-000266
化合物39B：HPLC:RT＝17.06min。LC-MS:RT＝1.88min,[M+H] +＝580.26。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ12.74(s,1H),8.27–8.26(m,1H),7.79(dd,J＝9.9,1.4Hz,1H),7.66(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),7.50(t,J＝8.0Hz,1H),7.46–7.42(m,2H),7.29–7.27(m,1H),6.30(d,J＝8.2Hz,1H),6.07(d,J＝7.8Hz,1H),5.29(s,2H),4.93–4.87(m,1H),4.60–4.55(m,1H),4.52–4.47(m,3H),3.47–3.38(m,5H),2.79–2.72(m,1H),2.64–2.61(m,2H),2.56–2.47(m,2H),1.42(d,J＝6.7Hz,3H)。
实施例40 2-(1-(1-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000267
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-(哌啶-4-基)丙酸乙酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000268
将4-(1-乙氧基-1-氧代丙烷-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(520毫克,1.82毫摩尔)溶于4毫升无水二氯甲烷中，加入2毫升三氟乙酸，于室温下反应40分钟。反应结束，反应液倒入50毫升碳酸氢钠溶液中， 乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得310毫克2-(哌啶-4-基)丙酸乙酯(收率：92.1％)。
步骤B：合成2-(1-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-4-基)丙酸乙酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000269
向含有2-(哌啶-4-基)丙酸乙酯(310毫克，1.67毫摩尔)的N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中，加入N,N-二异丙基乙胺(432毫克，3.35毫摩尔)，搅拌2分钟后，加入2,6-二氯吡啶(245毫克，1.67毫摩尔)，于120摄氏度下反应3小时。
反应结束，加水(50毫升)淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相用，饱和食盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)。得到422克淡黄色固体2-(1-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-4-基)丙酸乙酯(收率：85.1％)。LC-MS:RT＝2.21min,[M+H] +＝297.23。
步骤C：合成2-(1-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-4-基)丙酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000270
将2-(1-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-4-基)丙酸乙酯(422毫克,1.42毫摩尔)溶于10毫升甲醇和水的混合液中，加入氢氧化钠固体(142毫克,3.55毫摩尔)，于40摄氏度下反应3小时。
反应结束，反应液用稀盐酸中和至pH＝6左右，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得264毫克2-(1-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-4-基)丙酸(收率：69.1％)。LC-MS:RT＝1.94min,[M+H] +＝269.11。
步骤D：合成4-(2-(1-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-4-基)丙酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000271
向含有2-(1-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-4-基)丙酸(240毫克，0.892毫摩尔)，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(255毫克，1.34毫摩尔)的二氯甲烷(10.0毫升)中，加入吡啶(141毫克，1.78毫摩尔)，搅拌10分钟后，加入(S)-4-氨基-3-(((氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(211毫克，0.892毫摩尔)，于室温下反应3小时。
反应结束，加水(50毫升)淬灭，二氯甲烷(50毫升×3次)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)。得到166克淡黄色固体4-(2-(1-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-4-基)丙酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(收率：38.2％)。LC-MS:RT＝1.98min,[M+H] +＝487.23。
步骤E：合成2-(1-(1-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-4-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000272
将4-(2-(1-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-4-基)丙酰胺基)-3-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)氨基)苯甲酸甲酯(166毫克,0.341毫摩尔)溶于5毫升醋酸中，于85摄氏度下反应12小时。
反应结束，反应液用饱和碳酸氢钠中和至pH＝7左右，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得86毫克2-(1-(1-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-4-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：53.7％)。LC-MS:RT＝2.24min,[M+H] +＝469.23。
步骤F：合成2-(1-(1-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000273
室温下，向含有2-(1-(1-(6-氯吡啶-2-基)哌啶-4-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(86.0毫克，0.183毫摩尔)，3-氟-4-(羟甲基)苄腈(33.2毫克，0.221毫摩尔)的1,4-二氧六环(5毫升)中，加入碳酸铯(119毫克，0.366毫摩尔)和甲烷磺酸(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(15.5毫克，0.0183毫摩尔)，100摄氏度反应3小时。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝5/1)。得到52毫克淡黄色固体2-(1-(1-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：48.6％)。LC-MS:RT＝2.12min,[M+H] +＝584.27。
步骤G：合成2-(1-(1-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000274
将2-(1-(1-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2- 基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(52.0毫克,0.089毫摩尔)溶解于4毫升乙腈中，加入1,5,7-三氮杂二环[4.4.0]癸-5-烯(25.9毫克,0.187毫摩尔)和1毫升水，于室温下反应7小时。
反应结束，加20毫升饱和氯化铵中和，二氯甲烷(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得粗品经prep-HPLC(氨水)分离制备得22毫克白色固体2-((S)-1-(4-(4-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：43.4％)。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.71(s,1H),8.20(dd,J＝6.1,1.3Hz,1H),7.87–7.90(m,1H),7.79(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.68–7.71(m,1H),7.59–7.66(m,2H),7.41–7.45(m,1H),6.30(dd,J＝8.2,4.8Hz,1H),6.05–6.08 4(m,1H),5.38(s,2H),4.95–5.05(m,1H),4.44–4.55(m,2H),4.25–4.28(m,1H),4.06–4.13(m,1H),3.06–3.15(m,2H),2.58–2.77(m,5H),2.32–2.38(m,1H),1.96–2.10(m,2H),1.80–1.95(m,2H),1.28(t,J＝6.7Hz,3H).LC-MS:RT＝1.97min,[M+H] +＝570.29。
实施例41 2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000275
具体合成路线如下：
步骤A：合成2,6-二氯-4-(甲氧基甲基)吡啶
Figure PCTCN2021133447-appb-000276
零摄氏度下，向含有(2,6-二氯吡啶-4-基)甲醇(1.00克，5.68毫摩尔)的四氢呋喃(10.0毫升)中，加入60％氢化钠(272毫克，6.81毫摩尔)，搅拌5分钟后，加入碘甲烷(873毫克，6.24毫摩尔)，于零到室温下反应2小时。
反应结束，加水(50毫升)淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/5)。得到670毫克白色固体2,6-二氯-4-(甲氧基甲基)吡啶(收率：61.4％)。LC-MS:RT＝2.24min,[M+H] +＝192.23。
步骤B：合成4-(6-氯-4-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000277
向含有2,6-二氯-4-(甲氧基甲基)吡啶(670毫克，3.48毫摩尔)，哌嗪-1-羧酸叔丁酯(647毫克，3.48毫摩尔)的乙腈(10.0毫升)中，加入碳酸钾(960毫克，6.96毫摩尔)，于95摄氏度下反应3小时。
反应结束，加水(50毫升)淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/3)。得到746毫克淡黄色固体4-(6-氯-4-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(收率：62.6％)。LC-MS:RT＝2.18min,[M+H] +＝342.17。
步骤C：合成4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000278
室温下，向含有4-(6-氯-4-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(250毫克，0.733毫摩尔)，3-氟-4-(羟甲基)苄腈(122毫克，0.806毫摩尔)的1,4-二氧六环(5毫升)中，加入碳酸铯(477毫克，1.46毫摩尔)和甲烷磺酸(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(62.1毫克，0.0733毫摩尔)，于100摄氏度反应3小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(50毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)。得到320毫克淡黄色固体4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(收率：69.5％)。LC-MS:RT＝1.98min,[M+H] +＝456.27。
步骤D：合成3-氟-4-(((4-(甲氧基甲基)-6-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000279
将4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(320毫克,0.701毫摩尔)溶于4毫升无水二氯甲烷中，加入2毫升三氟乙酸，于室温下反应40分钟。
反应结束，反应液倒入50毫升碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得236毫克3-氟-4-(((4-(甲氧基甲基)-6-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈(收率：94.4％)。LC-MS:RT＝1.83min,[M+H] +＝356.27。
步骤E：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000280
室温下，向含有3-氟-4-(((4-(甲氧基甲基)-6-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈(236毫克,0.662毫摩尔)的乙腈(8.0毫升)中，加入2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(204毫克,0.662毫摩尔)、碘化钾(165毫克,0.993毫摩尔)和碳酸钾(183毫克,1.32毫摩尔)，60摄氏度下反应5小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝5/1。得到296毫克淡黄色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：71.1％)。LC-MS:RT＝1.89min,[M+H] +＝629.27。
步骤F：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000281
将2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(120毫克,0.191毫摩尔)溶解于4毫升乙腈中，加入1,5,7-三氮杂二环[4.4.0]癸-5-烯(55.7毫克,0.401毫摩尔)和1毫升水，于室温下反应7小时。
反应结束，加入20毫升饱和氯化铵中和，二氯甲烷(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得粗品经柱层析分离制备得36毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：30.7％)。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.77(s,1H),8.28(d,J＝0.9Hz,1H),7.85–7.91(m,1H),7.81(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),7.67–7.72(m,2H),7.60–7.66(m,1H),6.23(s,1H),6.05(s,1H),5.39(s,2H),5.12–5.19(m,1H),4.80(dd,J＝16.2,3.7Hz,1H),4.65–4.73(m,1H),4.42–4.52(m,2H),4.29(s,2H),4.14–4.23(m,1H),3.27(s,3H),3.14–3.23(m,2H),2.60–2.68(m,2H),2.52–2.56(m,3H),2.30–2.36(m,1H),1.81–1.96(m,2H),1.44(d,J＝6.7Hz,3H).LC-MS:RT＝1.79min,[M+H] +＝615.38。
实施例42 2-((S)-1-(4-(4-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-5-氟嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000282
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(((2-氯-5-氟嘧啶-4-基)氧基)甲基)-3-氟苄腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000283
将(4-氰基-2-氟苯基)甲醇(2克，13.2毫摩尔)溶于四氢呋喃(100毫升)中，降温至零摄氏度，加入氢化钠(0.8克，19.5毫摩尔)，在室温下搅拌0.5小时,加入2,4-二氯-5-氟嘧啶(3.3克，71毫摩尔)，室温下搅拌过夜。
反应结束后，加入饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯(30毫升)萃取，水洗两次，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/10)得到2克白色固体4-(((2-氯-5-氟嘧啶-4-基)氧基)甲基)-3-氟苄腈(收率：53％)。LC-MS:RT＝2.12min,[M+H] +＝282.23
步骤B：合成4-(4-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-5-氟嘧啶-2-基)哌嗪)-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000284
将4-(((2-氰基-5-氟嘧啶-4-基)氧基)甲基)-3-氟苄腈(1克，3.5毫摩尔)溶于四氢呋喃(50毫升)中，加入哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1克,5.3毫摩尔)，于90摄氏度下搅拌过夜。
反应结束后，加入饱和氯化钠淬灭，用乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并并干燥有机相，减压浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/5)得到1克白色固体4-(4-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-5-氟嘧啶-2-基)哌嗪)-1-甲酸叔丁酯(收率：44％)。LC-MS:RT＝1.89min,[M+H] +＝432.37。
步骤C：合成3-氟-4-(((5-氟-2-(哌嗪-1-基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)苄腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000285
室温下，将4-(4-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-5-氟嘧啶-2-基)哌嗪)-1-甲酸叔丁酯(1克，2.3毫摩尔)溶于二氧六环(10毫升)中，冰水浴下加入氯化氢二氧六环溶液(10毫升)，室温下搅拌0.5小时。
反应结束后，浓缩得到120毫克白色固体3-氟-4-(((5-氟-2-(哌嗪-1-基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)苄腈。LC-MS:RT＝1.62min,[M+H] +＝332.25。
步骤D：合成2-((S)-1-(4-(4-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-5-氟嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000286
室温下，将3-氟-4-(((5-氟-2-(哌嗪-1-基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)苄腈(200毫克0.6毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)中，加入(S)-2-(氯乙基)-1-(((S)氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯 (186毫克，0.6毫摩尔),碘化钾(200毫克，1.2毫摩尔)和碳酸钾(166毫克，1.2毫摩尔)，于60摄氏度下搅拌12小时。
反应结束后，加入饱和氯化钠淬灭，乙酸乙酯萃取(10毫升×2次)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩有机相，所得粗品用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)得到150毫克无色油状液体2-((S)-1-(4-(4-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-5-氟嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：41％)。LC-MS:RT＝1.95min,[M+H] +＝603.35。
步骤E：合成2-((S)-1-(4-(4-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-5-氟嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000287
将2-((S)-1-(4-(4-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-5-氟嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(150毫克，0.25毫摩尔)溶于乙腈(10毫升)和水(2毫升)中，加入1,3,4,6,7,8-六氢-2H-嘧啶[1,2-a]嘧啶(139毫克，1.0毫摩尔)，于室温下反应4小时。
反应结束后，浓缩，所得粗品高效液相纯化得到55.11毫克白色固体2-((S)-1-(4-(4-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-5-氟嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：37％)。LC-MS:RT＝1.80min,[M+H] +＝590.27。
实施例43 2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000288
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-氯-6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-甲氧基吡啶
Figure PCTCN2021133447-appb-000289
零摄氏度下，向含有(4-氰基-2-氟苯基)甲醇(1.0克，6.23毫摩尔)的四氢呋喃(10.0毫升)中，加入叔丁醇钾(0.98克，8.72毫摩尔)，搅拌30分钟后，加入2,6-二氯-4-甲氧基吡啶(1.1克，6.23毫摩尔)，于25摄氏度下反应过夜。
反应结束，加水(50毫升)淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(50毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)。得到0.98克黄色油状物2-氯-6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-甲氧基吡啶(收率：53.9％)。LC-MS:RT＝2.15min,[M+H]+＝293.05。
步骤B：合成4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000290
25摄氏度下，向含有2-氯-6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-甲氧基吡啶(0.98克，3.36毫摩尔)的1,4-二氧六环中，加入哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.62克，3.36毫摩尔)、碳酸铯(2.2克，6.72毫摩尔)和甲烷磺酸(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(288毫克，0.34毫摩尔)，于100摄氏度下反应3小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(50毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)。得到1.2克白色固体4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(收率：80.8％)。LC-MS:RT＝2.23min,[M+H] +＝443.29。
步骤C：合成4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪
Figure PCTCN2021133447-appb-000291
25摄氏度下，向含有4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.2克,2.71毫摩尔)的甲醇(20毫升)中，加入盐酸的1,4-二氧六环溶液(10.0毫升，4摩尔/升)，于25摄氏度下反应3小时。
反应结束，反应液直接旋干得1.33克白色固体4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪，直接用于下一步。LC-MS:RT＝1.72min,[M+H] +＝343.18。
步骤D：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000292
25摄氏度下，向含有4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪盐酸盐(1.33克,2.71毫摩尔)的乙腈(8.0毫升)中，加入N,N-二异丙基乙胺(1.0毫升)、碘化钾(676毫克，4.07毫摩尔)、碳酸钾(748毫克，5.42毫摩尔)、N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)，最后加入2-((S)-1-氯乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(837毫克,2.71毫摩尔)，N 2保护下，于60摄氏度反应3小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝2/1。得到900毫克黄色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：54.0％)。LC-MS:RT＝1.92min,[M+H]+＝615.31。
步骤E：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000293
零摄氏度下，向含有2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(9000毫克,1.46毫摩尔)的四氢呋喃(3毫升)和甲醇(1毫升)混合溶液中，滴加氢氧化锂(307毫克,7.30毫摩尔)的水溶液(1毫升)，于25摄氏度下反应30分钟。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并机相，饱和食盐水(20毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10。得到430毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：49.0％)。LC-MS:RT＝1.79min,[M+H]+＝601.39。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ12.75(s,1H),8.27(t,J＝2.4Hz,1H),7.86(dd,J＝10.0,1.3Hz,1H),7.79(ddd,J＝5.6,4.1,1.5Hz,1H),7.71–7.65(m,2H),7.62(t,J＝7.6Hz,1H),5.83(t,J＝4.1Hz,1H),5.76–5.71(m,1H),5.35(s,2H),5.12(d,J＝3.0Hz,1H),4.78(dd,J＝15.5,2.9Hz,1H),4.67(dd,J＝15.5,5.5Hz,1H),4.52–4.41(m,2H),4.20–4.11(m,1H),3.71(d,J＝3.0Hz,3H),3.33(s,4H),2.67–2.59(m,1H),2.50(d,J＝1.2Hz,4H),2.31(dt,J＝18.4,7.4Hz,1H),1.48–1.39(m,3H)。
实施例44 2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000294
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(6-氯-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000295
室温下，将2,6-二氯-4-(三氟甲基)吡啶(500.0毫克，2.32毫摩尔)、哌嗪-1-羧酸叔丁酯(431.5毫克，2.32毫摩尔)和碳酸钾(641.3毫克，4.64毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(20.0毫升)中，N 2保护下，于100摄氏度反应6小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝5/1)，得到677.0毫克淡黄色固体4-(6-氯-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(收率：79.6％)。LC-MS:RT＝1.93min,[M+H] +-56＝310.11。
步骤B：合成4-(6-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪)-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000296
室温下，将4-(6-氯-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300.0毫克，0.82毫摩尔),3-氟-4-(羟甲基)苄腈(148.6毫克，0.98毫摩尔)和碳酸铯(534.6毫克，1.64毫摩尔)加入二氧六环(15.0毫升)中，再加入甲烷磺酸(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(35.0毫克，0.04毫摩尔)，N 2保护下，于100摄氏度反应5.0小时。
反应结束，加水淬灭，二氯甲烷(50毫升×3次)萃取。合并有机相，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷：乙酸乙酯＝10：1)得到240.0毫克淡黄色油状固体4-(6-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪)-1-甲酸叔丁酯(收率：60.1％)。LC-MS:RT＝1.95min,[M-56+H] +＝425.26。
步骤C：合成3-氟-4-((((6-(哌嗪-1-基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000297
室温下，将4-(6-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪)-1-甲酸叔丁酯(240.0毫克，0.50毫摩尔)加入二氧六环的盐酸溶液(1.00毫摩尔/毫升，5毫升)中，N 2保护下，于室温反应1小时。
反应结束，减压浓缩。得到195.0毫克淡黄色固体3-氟-4-((((6-(哌嗪-1-基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈(收率：100.0％)直接用于下步反应。LC-MS:RT＝1.72min,[M+H] +＝381.17。
步骤D：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000298
室温下，将3-氟-4-((((6-(哌嗪-1-基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈(50.0毫克，0.13毫摩尔)，2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(40.0毫克，0.13毫摩尔)和碳酸铯(40.4毫克，0.13毫摩尔)、碘化钾(22.0毫克，0.13毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中，最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.50毫升)，N 2保护下，于50摄氏度反应4.0小时。
反应结束，加水淬灭，用乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取。合并有机相，饱和食盐水(30毫升×3次) 洗涤，无水硫酸钠干燥，最后硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷：甲醇＝20：1)得到50.2毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：59.1％)。LC-MS:RT＝1.83min,[M+H] +＝653.27。
步骤E：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000299
室温下，向含有2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(50.2毫克，0.08毫摩尔)的乙腈(12.0毫升)中滴加1,5,7-三氮杂二环[4.4.0]癸-5-烯(33.4毫克，0.24毫摩尔)水溶液(3.0毫升)，室温下反应3小时。
反应结束，加水淬灭，用柠檬酸水溶液(0.5摩尔/升)调pH至6，混合液用二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，合并有机相，柠檬酸水溶液(30毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，粗产品用制备型高效液相色谱纯化。分离条件如下，色谱柱：Agilent 5 Prep-C18 100mm×30mm 5μM；流动相：水(含有0.1％的氨水)和乙腈；流速：20毫升/分钟；梯度：由32.3％乙腈在8.12分钟洗脱出来；检测波长：254nm。纯化后，低温冻干得到22.0毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：44.1％)。LC-MS:RT＝1.75min,[M+H] +＝639.33。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.26(d,J＝0.9Hz,1H),7.88(dd,J＝10.0,1.2Hz,1H),7.79(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),7.68(qd,J＝7.8,3.6Hz,3H),6.55(s,1H),6.33(s,1H),5.43(s,2H),5.13(dd,J＝13.9,8.9Hz,1H),4.70(ddd,J＝25.6,10.8,4.3Hz,2H),4.46(dd,J＝17.0,4.8Hz,2H),4.20–4.12(m,1H),3.48(d,J＝5.4Hz,4H),2.67–2.51(m,5H),2.38–2.24(m,1H),1.43(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例45 2-((S)-1-(4-(4-氰基-6-((4-氰基-2-氟苄基)氧代)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000300
具体合成路线如下：
步骤A:合成4-(6-氯-4-氰基吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000301
室温下，将2,6二氯-4-氰基吡啶(1.0克，5.78毫摩尔)，N-Boc-哌嗪(1.29克，6.94毫摩尔)和碳酸钾(1.6克，11.56毫摩尔)加入到10毫升干燥的乙腈中，升温至85摄氏度下反应4小时。
反应结束后，将反应液冷却至室温，倒入40毫升的冰水溶液中，搅拌30分钟，抽滤，水洗滤饼。滤饼干燥后得1.7克白色固体4-(6-氯-4-氰基吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(收率：91.4％)。LC-MS：RT＝2.18min，[M+H] +＝223.10。
步骤B:合成4-(4-氰基-6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000302
室温下，将中间体4-(6-氯-4-氰基吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500毫克，1.55毫摩尔)以及3-氟-4-羟甲基苯甲腈(258毫克，1.70毫摩尔)，甲烷磺酸(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(65.7毫克，0.08毫摩尔)和碳酸铯(1012毫克，3.1毫摩尔)加入到10毫升干燥的二氧六环溶液中，N 2保护下，110摄氏度反应2小时。
反应结束后，蒸干反应液，乙酸乙酯萃取(20毫升)，无水硫酸钠干燥，蒸干得淡黄色固体。柱层析纯化(正己烷/乙酸乙酯＝5/2)，得380毫克淡黄色固体4-(4-氰基-6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(收率：56.1％)。LC-MS：RT＝2.21min，[M-56] +＝379.25。
步骤C:合成2-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-6-(哌嗪-1-基)异烟腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000303
室温下，将4-(4-氰基-6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(380毫克，0.87毫摩尔)溶于10毫升甲醇溶剂中，冰浴下加入10毫升4M/L的盐酸二氧六环溶液，室温反应2小时。
反应结束后，蒸干反应液得340毫克白色固体2-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-6-(哌嗪-1-基)异烟腈(收率：116.0％)。LC-MS：RT＝1.70min，[M+H] +＝338.18。
步骤D：合成2-((S)-1-(4-(4-氰基-6-((4-氰基-2-氟苄基)氧代)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000304
室温下，将中间体2-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-6-(哌嗪-1-基)异烟腈(380毫克，0.87毫摩尔)以及2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(267毫克，0.87毫摩尔)、碳酸钾(240毫克，1.74毫摩尔)和碘化钾(217毫克，1.3毫摩尔)加入至10毫升DMF溶液中，升温至60摄氏度反应10小时。
反应结束后，将反应液倒入冰水，析出固体，抽滤，水洗滤饼得300毫克白色产品2-((S)-1-(4-(4-氰基-6-((4-氰基-2-氟苄基)氧代)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：56.6％)。LC-MS：RT＝1.93min，[M+H] +＝610.34。
步骤E：合成2-((S)-1-(4-(4-氰基-6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000305
室温下，将中间体2-((S)-1-(4-(4-氰基-6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(100毫克，0.16毫摩尔)溶于5毫升乙腈/水(4:1)的混合溶液中，室温下加入1,5,7-三氮杂双环[4.4.0]-5-癸烯(48毫克，0.34毫摩尔)，室温反应4小时。
反应结束后，将反应液倒入15％的柠檬酸水溶液中，调节Ph至3-4。二氯甲烷萃取(20毫升)，水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，蒸干得淡黄色固体。柱层析纯化(二氯甲烷/甲醇＝10/1)，得60毫克白色固体2-((S)-1-(4-(4-氰基-6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：61.4％)。LC-MS：RT＝1.82min，[M+H] +＝596.29。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.25(s,1H),7.88(dd,J＝10.0,1.3Hz,1H),7.79(dd,J＝8.4,1.4Hz,1H),7.71–7.60(m,3H),6.76(s,1H),6.46(s,1H),5.42(d,J＝13.5Hz,2H),5.18–5.06(m,1H),4.81–4.72(m,1H),4.66(dd,J＝15.4,5.4Hz,1H),4.52–4.36(m,2H),4.16(dt,J＝9.1,5.8Hz,1H),3.50–3.42(m,4H),2.67–2.56(m,1H),2.56–2.50(m,4H),2.37–2.21(m,1H),1.42(d,J＝6.7Hz,3H)。
实施例46 2-((S)-1-(4-(4-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)嘧啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000306
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-((((2-氯嘧啶-4-基)氧基)甲基)-3-氟苄腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000307
向含有(4-氰基-2-氟苯基)甲醇(2.0克，1.32毫摩尔)的N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中，加入碳酸铯(860毫克，2.64毫摩尔)，搅拌2分钟后，加入2,4-二氯嘧啶(1.97克，1.32毫摩尔)，于90摄氏度下反应3小时。
反应结束，加水(50毫升)淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)。得到2.3克黄色油状物4-((((2-氯嘧啶-4-基)氧基)甲基)-3-氟苄腈(收率：67.6％)。LC-MS:RT＝2.36min,[M+H] +＝264.17。
步骤B：合成4-(4-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)嘧啶-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000308
室温下，向含有4-(((2-氯嘧啶-4-基)氧基)甲基)-3-氟苄腈(700毫克，2.65毫摩尔)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(820毫克，2.65毫摩尔)的1,4-二氧六环水混合液中，加入碳酸钾(731毫克，5.30毫摩尔)和1,1'-二(二苯膦基)二茂铁二氯化钯(II)(193毫克，0.265毫摩尔)，氮气置换3次，于100摄氏度反应3小时。
反应结束，加水，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，，饱和食盐水(50毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)。得到570毫克淡黄色固体4-(4-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)嘧啶-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(收率：52.3％)。LC-MS:RT＝2.22min,[M+H] +＝411.22。
步骤C：合成4-(4-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)嘧啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000309
将4-(4-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)嘧啶-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(300毫克,0.729毫摩尔)溶于10毫升甲醇中，加入30毫克湿钯碳(10％)，于氢气氛围下室温反应3小时。
反应结束，过滤，滤液无水硫酸钠干燥，减压浓缩得186毫克4-(4-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)嘧啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(收率：61.8％)。LC-MS:RT＝2.03min,[M+H] +＝413.23。
步骤D：合成3-氟-4-((((2-(吡啶-4-基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)苄腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000310
将4-(4-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)嘧啶-2-基)吡啶-1-甲酸叔丁酯(186毫克,0.451毫摩尔)溶于4毫升无水二氯甲烷中，加入2毫升三氟乙酸，于室温下反应40分钟。
反应结束，反应液倒入50毫升碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得110毫克3-氟-4-((((2-(吡啶-4-基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)苄腈(收率：78.1％)。LC-MS:RT＝1.86min,[M+H] +＝313.27。
步骤E：合成2-((S)-1-(4-(4-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)嘧啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000311
室温下，向含有3-氟-4-(((2-(吡啶-4-基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)苄腈(110毫克,0.352毫摩尔)的乙腈(8.0毫升)中，加入2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6- 羧酸甲酯(109毫克,0.352毫摩尔)、碘化钾(234毫克,1.41毫摩尔)和碳酸钾(242毫克,1.76毫摩尔)，于60摄氏度下反应5小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升)洗涤，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝5/1。得到84毫克黄色固体2-((S)-1-(4-(4-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)嘧啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-((((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：70.4％)。LC-MS:RT＝1.97min,[M+H] +＝585.31。
步骤F：合成2-((S)-1-(4-(4-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)嘧啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000312
将2-((S)-1-(4-(4-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)嘧啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(82.0毫克,0.140毫摩尔)溶解于4毫升乙腈中，加入1,5,7-三氮杂二环[4.4.0]癸-5-烯(41.1毫克,0.294毫摩尔)和1毫升水，于室温下反应7小时。
反应结束，加20毫升饱和氯化铵中和，二氯甲烷(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得粗品经柱层析分离制备得26毫克白色固体2-((S)-1-(4-(4-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)嘧啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：32.5％)。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.75(s,1H),8.49(d,J＝5.1Hz,1H),8.27(d,J＝1.1Hz,1H),7.91(dd,J＝10.2,1.1Hz,1H),7.80(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),7.74–7.76(m,1H),7.71–7.73(m,1H),7.67(d,J＝8.7Hz,1H),7.07(d,J＝5.1Hz,1H),5.48(s,2H),5.13–5.19(m,1H),4.83(dd,J＝16.2,3.7Hz,1H),4.68(dd,J＝15.5,5.7Hz,1H),4.41–4.50(m,2H),4.16–4.21(m,1H),2.96–2.98(m,1H),2.54–2.67(m,4H),2.21–2.35(m,2H),1.83–1.86(m,2H),1.67–1.76(m,2H),1.47(d,J＝6.8Hz,3H).LC-MS:RT＝1.70min,[M+H] +＝571.31。
实施例47 1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-(吡唑[1,5-a]吡啶-2-基甲氧)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000313
具体合成路线如下：
步骤A:合成2-(((6-氯吡啶-2-基)氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]吡啶
Figure PCTCN2021133447-appb-000314
室温下，将2,6二氯吡啶(375毫克，2.55毫摩尔)，吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基甲醇(453毫克，3.06毫摩尔)和氢氧化钠(510毫克，12.75毫摩尔)加入到10毫升干燥的DMF中，升温至130摄氏度反应2小时。
反应结束后，将反应液冷却至室温，倒入20毫升的冰水溶液中，搅拌30分钟后抽滤，水洗滤饼。滤饼干燥后得480毫克白色固体2-(((6-氯吡啶-2-基)氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]吡啶(收率：72.7％)。LC-MS：RT＝2.04min，[M+H] +＝260.10。
步骤B:合成6-(吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基甲氧)-3',6'-二氢-[2,4'-二吡啶]1'(2'H)-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000315
室温下，将中间体2-(((6-氯吡啶-2-基)氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]吡啶(300毫克，1.16毫摩尔)以及N-叔丁氧羰基-1,2,5,6-四氢吡啶-4-硼酸频哪醇酯(430毫克，1.39毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(127.3毫克，0.17毫摩尔)，碳酸钾(320毫克，2.32毫摩尔)加入至10毫升二氧六环/水(4/1)的混合溶液中，N 2保护下升温至100摄氏度反应2小时。
反应结束后，蒸干反应液，乙酸乙酯萃取，萃取，无水硫酸钠干燥，蒸干得淡黄色固体。柱层析纯化(正己烷/乙酸乙酯＝5/1)，得266毫克6-(吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基甲氧)-3',6'-二氢-[2,4'-二吡啶]1'(2'H)-羧酸叔丁酯(收率：56.5％)。LC-MS：RT＝2.21min，[M+H] +＝407.21。
步骤C:合成4-(6-(吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基甲氧)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000316
冰浴下，将6-(吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基甲氧)-3',6'-二氢-[2,4'-二吡啶]1'(2'H)-羧酸叔丁酯(240毫克，0.59毫摩尔)溶于5毫升甲醇溶剂中，冰浴下加入10％的钯碳(24毫克，0.0059毫摩尔)，H 2保护下，零摄氏度反应12小时。
反应结束后，抽滤，蒸干滤液得200毫克白色油状物4-(6-(吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基甲氧)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(收率：83.0％)。LC-MS：RT＝2.21min，[M+H] +＝409.29。
步骤D:合成2-(((6-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]吡啶
Figure PCTCN2021133447-appb-000317
室温下，将4-(6-(吡唑并[1,5-a]吡啶-2-基甲氧)吡啶-2-基)吡啶-1-羧酸叔丁酯(200毫克，0.49毫摩尔)溶于10毫升甲醇溶剂中，冰浴下加入5毫升4M的盐酸二氧六环溶液，室温反应2小时。
反应结束后，蒸干反应液得200毫克白色固体2-(((6-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]吡啶(收率：132.5％)。LC-MS：RT＝1.65min，[M+H] +＝309.22。
步骤E：合成1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-(吡唑[1,5-a]吡啶-2-基甲氧)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000318
室温下，将中间体2-(((6-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]吡啶(200毫克，0.49毫摩尔)以及2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(150毫克，0.49毫摩尔)、碳酸钾(136.2毫克，0.98毫摩尔)和碘化钾(122毫克，0.74毫摩尔)加入至10毫升DMF溶液中，升温至60摄氏度反应10小时。
反应结束后，将反应液倒入冰水，析出固体，抽滤，水洗滤饼得200毫克白色产品1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-(吡唑[1,5-a]吡啶-2-基甲氧)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：70.4％)。LC-MS：RT＝1.79min，[M+H] +＝581.38。
步骤F：合成1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-(吡唑[1,5-a]吡啶-2-基甲氧)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000319
室温下，将中间体1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-(吡唑[1,5-a]吡啶-2-基甲氧)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(200毫克，0.34毫摩尔)溶于5毫升乙腈/水(4:1)的混合溶液中，室温下加入1,5,7-三氮杂双环[4.4.0]-5-癸烯(101毫克，0.71毫摩尔)，于室温反应7小时。
反应结束后，将反应液倒入15％的柠檬酸水溶液中，调节Ph至3-4。二氯甲烷萃取(20毫升)，水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，蒸干得淡黄色固体。柱层析纯化(二氯甲烷/甲醇＝10/1)，得130毫克白色固体1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-2-((S)-1-(4-(6-(吡唑[1,5-a]吡啶-2-基甲氧)吡啶-2-基)哌啶-1-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：67.7％)。LC-MS：RT＝1.73min，[M+H] +＝567.35。
实施例48 2-((S)-1-((R)-4-(6-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(48A)和2-((S)-1-((S)-4-(6-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(48B)
Figure PCTCN2021133447-appb-000320
化合物48A具体合成路线如下：
步骤A:合成(R)-4-(6-氯吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000321
室温下，将2,6-二氯吡啶(1.5克，10毫摩尔)，(R)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.64克，13毫摩尔)和碳酸钾(2.76克，20毫摩尔)加入到20毫升干燥的乙腈中，升温至85摄氏度反应15小时。
反应结束后，将反应液冷却至室温，倒入40毫升的冰水溶液中，搅拌30分钟后抽滤，水洗滤饼。滤饼干燥柱层析纯化(正己烷/乙酸乙酯＝5/1)后得350毫克白色固体(R)-4-(6-氯吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(收率：11％)。LC-MS：RT＝2.20min，[M-56] +＝256.16。
步骤B:合成(R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000322
室温下，将中间体(R)-4-(6-氯吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(150毫克，0.48毫摩尔)以及3-氟-4羟甲基苯甲腈(80毫克，0.53毫摩尔)，甲烷磺酸(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(20.4毫克，0.024毫摩尔)和碳酸铯(314毫克，0.96毫摩尔)加入到10毫升干燥的二氧六环溶液中，N 2保护下，于110摄氏度反应2小时。
反应结束后，蒸干反应液，乙酸乙酯萃取(20毫升)，无水硫酸钠干燥，蒸干得淡黄色固体。柱层析纯化(正己烷/乙酸乙酯＝5/2)，得150毫克淡黄色固体(R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(收率：73.5％)。LC-MS：RT＝2.27min，[M-56] +＝371.19。
步骤C:合成(R)-3-氟-4-(((6-(2-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苯甲腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000323
室温下，将(R)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(150毫克，0.35毫摩尔)溶于10毫升甲醇溶剂中，冰浴下加入5毫升4M/L的盐酸二氧六环溶液，室温反应2小时。
反应结束后，蒸干反应液得118毫克白色固体(R)-3-氟-4-(((6-(2-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苯甲腈(收率：103.5％)。LC-MS：RT＝1.70min，[M+H] +＝327.21。
步骤D：合成2-((S)-1-((R)-4-(6-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000324
室温下，将中间体(R)-3-氟-4-(((6-(2-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苯甲腈(150毫克，0.35毫摩尔)以及2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯 (108毫克，0.35毫摩尔)、碳酸钾(97.2毫克，0.70毫摩尔)和碘化钾(87.7毫克，0.53毫摩尔)加入至10毫升DMF溶液中，升温至60摄氏度反应10小时。
反应结束后，将反应液倒入冰水，析出固体，抽滤，水洗滤饼得140毫克白色产品2-((S)-1-((R)-4-(6-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：67.0％)。LC-MS：RT＝1.97min，[M+H] +＝599.34。
步骤E：合成2-((S)-1-((R)-4-(6-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(48A)
Figure PCTCN2021133447-appb-000325
室温下，将中间体2-((S)-1-((R)-4-(6-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(100毫克，0.17毫摩尔)溶于5毫升乙腈/水(4:1)的混合溶液中，室温下加入1,5,7-三氮杂双环[4.4.0]-5-癸烯(58毫克，0.42毫摩尔)。室温反应4小时。
反应结束后，将反应液倒入15％的柠檬酸水溶液中，调节pH至3-4。二氯甲烷萃取(20毫升)，水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，蒸干得淡黄色固体。柱层析纯化(二氯甲烷/甲醇＝10/1)，得38毫克白色固体2-((S)-1-((R)-4-(6-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(48A)(收率：38.2％)。LC-MS：RT＝1.86min，[M+H] +＝585.31。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.26(s,1H),7.87(dd,J＝10.0,1.3Hz,1H),7.80(dd,J＝8.4,1.4Hz,1H),7.67(td,J＝5.8,3.0Hz,2H),7.60(t,J＝7.6Hz,1H),7.42(t,J＝8.0Hz,1H),6.20(d,J＝8.2Hz,1H),6.07(d,J＝7.8Hz,1H),5.41(d,J＝13.7Hz,1H),5.32(d,J＝13.7Hz,1H),5.20–5.07(m,1H),4.86–4.76(m,1H),4.71(dd,J＝15.5,5.6Hz,1H),4.45(dt,J＝13.4,7.3Hz,3H),4.17(dt,J＝9.1,5.8Hz,1H),3.73(d,J＝11.7Hz,1H),2.82–2.56(m,4H),2.52(d,J＝9.6Hz,1H),2.32–2.22(m,1H),2.17(dd,J＝11.5,8.3Hz,1H),1.43(d,J＝6.7Hz,3H),1.01(d,J＝6.5Hz,3H)。
化合物48B具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(6-氯吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000326
室温下，将2,6-二氯吡啶(1.5克，10.00毫摩尔)、(S)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.4克，12.00毫摩尔)和碳酸钾(2.7克，20.00毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(50.0毫升)中，N 2保护下，100摄氏度反应16.0小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(50毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝5/1)，得到108.0毫克淡黄色固体(S)-4-(6-氯吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(收率：3.5％)。LC-MS:RT＝2.21min,[M-56+H] +＝256.11。
步骤B：合成(S)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000327
室温下，将(S)-4-(6-氯吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(108.0毫克，0.35毫摩尔)、3-氟-4-(羟甲基)苄腈(63.4毫克，0.42毫摩尔)和碳酸铯(228.2毫克，0.70毫摩尔)加入二氧六环(10.0毫升)中，再加入甲烷磺酸(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(12.0毫克，0.01毫摩尔)，N 2保护下，100摄氏度反应5.0小时。
反应结束，加水淬灭，二氯甲烷(30毫升×3次)萃取。合并有机相，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷：乙酸乙酯＝10：1)得到76.5毫克棕色油状固体(S)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(收率：51.3％)。LC-MS:RT＝2.28min,[M+H-56] +＝371.26。
步骤C：合成(S)-3-氟-4-(((6-(2-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000328
室温下，将(S)-4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(76.5毫克，0.18毫摩尔)加入二氧六环的盐酸溶液(1.00毫摩尔/毫升，5毫升)中，N 2保护下，室温反应1小时。
反应结束，减压浓缩。得到60.0毫克淡黄色固体(S)-3-氟-4-(((6-(2-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈(收率：100.0％)直接用于下步反应。LC-MS:RT＝1.74min,[M+H] +＝327.14。
步骤D：合成2-((S)-1-((S)-4-(6-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000329
室温下，将(S)-3-氟-4-(((6-(2-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈(60.0毫克，0.18毫摩尔)、2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(55.4毫克，0.18毫摩尔)和碳酸铯(117.4毫克，0.36毫摩尔)、碘化钾(30.0毫克，0.18毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中，最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.50毫升)，N 2保护下，50摄氏度反应4.0小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取。合并有机相，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷：甲醇＝20：1)得到43.0毫克白色固体2-((S)-1-((S)-4-(6-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：40.1％)。LC-MS:RT＝2.00min,[M+H] +＝599.37。
步骤E：合成2-((S)-1-((S)-4-(6-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(48B)
Figure PCTCN2021133447-appb-000330
室温下，向含有2-((S)-1-((S)-4-(6-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(43.0毫克，0.07毫摩尔)的乙腈(12.0毫升)中滴加1,5,7-三氮杂二环[4.4.0]癸-5-烯(77.8毫克，0.56毫摩尔)水溶液(3.0毫升)，室温下反应2.0小时。
反应结束，加水淬灭，用柠檬酸水溶液(0.5摩尔/升)调pH至6，二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，合并有机相，柠檬酸水溶液(30毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，粗产品用制备型高效液相色谱纯化。分离条件如下，色谱柱：Agilent 5 Prep-C18 100mm×30mm 5μM；流动相：水(含有0.1％的氨水)和乙腈；流速：20毫升/分钟；梯度：由36.3％乙腈在8.23分钟洗脱出来；检测波长：254nm。纯化后，低温冻干得到9.0毫克白色固体2-((S)-1-((S)-4-(6-(((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)-3-甲基哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(48B)(收率：22.1％)。LC-MS:RT＝1.89min,[M+H] +＝585.37。 1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.23(s,1H),7.85(dd,J＝10.0,1.3Hz,1H),7.79(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),7.69–7.63(m,2H),7.60(t,J＝7.6Hz,1H),7.43(t,J＝8.0Hz,1H),6.21(d,J＝8.2Hz,1H),6.07(d,J＝7.8Hz,1H),5.41(d,J＝13.7Hz,1H),5.32(d,J＝13.7Hz,1H),5.17–5.09(m,1H),4.89(dd,J＝15.5,2.6Hz,1H),4.71(dd,J＝15.5,5.7Hz,1H),4.55–4.39(m,2H),4.27(s,1H),4.19(d,J＝9.1Hz,1H),3.88(d,J＝12.1Hz,1H),3.20(s,1H),3.01–2.84(m,2H),2.66–2.57(m,1H),2.32(dd,J＝31.7,17.9Hz,3H),1.43(d,J＝6.7Hz,3H),0.77(d,J＝6.5Hz,3H)。
实施例49 2-((S)-1-(4-(4-氯-6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000331
步骤A:合成4-(6-溴-4-氯吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000332
室温下，将2,6二氯-4-溴吡啶(200毫克，1.1毫摩尔)，N-Boc-哌嗪(214克，1.15毫摩尔)和碳酸钾(302克，2.2毫摩尔)加入到10毫升干燥的NMP中，升温至150摄氏度反应1小时。
反应结束后，将反应液冷却至室温，倒入20毫升的冰水溶液中，搅拌30分钟后抽滤，水洗滤饼。滤饼干燥后得208毫克白色固体4-(6-溴-4-氯吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(收率：50.5％)。LC-MS：RT＝2.30min，[M-55] +＝320.10。
步骤B:合成4-(4-氯-6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000333
室温下，将中间体4-(6-溴-4-氯吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(168毫克，0.45毫摩尔)以及3-氟-4羟甲基苯甲腈(74.4毫克，0.49毫摩尔)，甲烷磺酸(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(19毫克，0.02毫摩尔)和碳酸铯(293.4毫克，0.90毫摩尔)加入到10毫升干燥的二氧六环溶液中，N 2保护下110摄氏度反应2小时。
反应结束后，蒸干反应液，20毫升乙酸乙酯萃取，分出乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥，蒸干得淡黄色固体。柱层析纯化(正己烷/乙酸乙酯＝5/2)，得82毫克淡黄色固体4-(4-氯-6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(收率：40.8％)。LC-MS：RT＝2.29min，[M-56+H] +＝391.18。
步骤C:合成4-(((4-氯-6-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)-3-氟苯腈
Figure PCTCN2021133447-appb-000334
室温下，将4-(4-氯-6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)哌啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(82毫克，0.18毫摩尔)溶于10毫升甲醇溶剂中，冰浴下加入10毫升4M/L的盐酸二氧六环溶液，室温反应2小时。
反应结束后，蒸干反应液得85毫克白色固体4-(((4-氯-6-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)-3-氟苯腈(收率：140.5％)。LC-MS：RT＝1.77min，[M+H] +＝347.19。
步骤D：合成2-((S)-1-(4-(4-氯-6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000335
室温下，将中间体4-(((4-氯-6-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氧基)甲基)-3-氟苯腈(85毫克，0.19毫摩尔)以及2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(59毫克，0.19毫摩尔)、碳酸钾(52.4毫克，0.38毫摩尔)和碘化钾(63.0毫克，0.38毫摩尔)加入至10毫升DMF溶液中，升温至60摄氏度反应10小时。
反应结束后，将反应液倒入冰水，析出固体，抽滤，水洗滤饼得63毫克白色产品2-((S)-1-(4-(4-氯-6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(收率：53.8％)。LC-MS：RT＝1.98min，[M+H] +＝619.30。
步骤E：合成2-((S)-1-(4-(4-氯-6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000336
室温下，将中间体2-((S)-1-(4-(4-氯-6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(63毫克，0.10毫摩尔)溶于5毫升乙腈/水(4:1)的混合溶液中，室温下加入1,5,7-三氮杂双环[4.4.0]-5-癸烯(34.8毫克，0.25毫摩尔)。室温反应4小时。
反应结束后，将反应液倒入15％的柠檬酸水溶液中，调节pH至3-4。二氯甲烷萃取(20毫升)，水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，蒸干得淡黄色固体。柱层析纯化(二氯甲烷/甲醇＝10/1)，得30毫克白色固体2-((S)-1-(4-(4-氯-6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸(收率：49.8％)。LC-MS：RT＝1.88min，[M+H] +＝605.37。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.24(s,1H),7.87(d,J＝10.1Hz,1H),7.79(dd,J＝8.4,1.3Hz,1H),7.66(ddd,J＝15.1,9.5,7.9Hz,3H),6.39(s,1H),6.18(d,J＝0.9Hz,1H),5.38(s,2H),5.13(s,1H),4.77(d,J＝12.8Hz,1H),4.65(dd,J＝15.5,5.5Hz,1H),4.45(td,J＝13.4,7.3Hz,2H),4.16(dt,J＝9.0,5.7Hz,1H),3.41(m,4H),2.61(dd,J＝16.7,8.7Hz,1H),2.50(m,4H),2.29(dd,J＝18.0,7.8Hz,1H),1.42(d,J＝6.7Hz,3H)。
实施例50 2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000337
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000338
室温下，将3-氟-4-((((6-(哌嗪-1-基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)甲基)苄腈(50.0毫克，0.13毫摩尔)、2-((S)-1-氯乙基)-1-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(40.0毫克，0.13毫摩尔)和碳酸铯(40.4毫克，0.13毫摩尔)、碘化钾(22.0毫克，0.13毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中，最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.50毫升)，N 2保护下，50摄氏度反应4.0小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取。合并有机相，饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，无水硫酸钠干燥，最后硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷：甲醇＝20：1)得到37.2毫克黄色固体 2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯(收率：43.7％)。LC-MS:RT＝1.81min,[M+H] +＝654.33。
步骤B：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸
Figure PCTCN2021133447-appb-000339
室温下，向含有2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯(37.2毫克，0.06毫摩尔)的乙腈(12.0毫升)中滴加1,5,7-三氮杂二环[4.4.0]癸-5-烯(66.7毫克，0.48毫摩尔)水溶液(3.0毫升)，室温下反应3.0小时。
反应结束，加水淬灭，用柠檬酸水溶液(0.5摩尔/升)调pH至6，二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，合并有机相，柠檬酸水溶液(30毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，粗产品用制备型高效液相色谱纯化。分离条件如下，色谱柱：Agilent 5 Prep-C18 100mm×30mm 5μM；流动相：水(含有0.1％的氨水)和乙腈；流速：20毫升/分钟；梯度：由33.7％乙腈在7.52分钟洗脱出来；检测波长：254nm。纯化后，低温冻干得到10.0毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸(收率：26.1％)。LC-MS:RT＝1.69min,[M+H] +＝640.33。
实施例51 2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸(51A)和2-((R)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸(51B)
Figure PCTCN2021133447-appb-000340
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-(1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000341
25摄氏度下，向含有4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪盐酸盐(652毫克,2.09毫摩尔)的乙腈(8.0毫升)中，加入N,N-二异丙基乙胺(1.0毫升)、碘化钾(420毫克，3.13毫摩尔)和碳酸钾(577 毫克，4.18毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中，最后加入2-((S)-1-氯乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯(650毫克,2.09毫摩尔)，N 2保护下，60摄氏度反应3.0小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝2/1。得到690毫克黄色固体2-(1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯(收率：56.4％，dr＝66％)。LC-MS:RT＝1.93min,[M+H] +＝586.26。
步骤B：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸(51A)和2-((R)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸(51B)
Figure PCTCN2021133447-appb-000342
零摄氏度下，向含有2-(1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯(690毫克,1.18毫摩尔)的四氢呋喃(3毫升)和甲醇(1毫升)混合溶液中，滴加氢氧化锂(198毫克,4.72毫摩尔)的水溶液(1毫升)，于25摄氏度下反应30分钟。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10。得到290毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸(51A)(收率：43.0％)和59毫克白色固体2-((R)-1-(4-(6-((4-氰基-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸(51B)(收率8.7％)。粗产品用制备型高效液相色谱纯化。分离条件如下：色谱柱：Agilent 5 Prep-C18 100mm×30mm 5μM；流动相：水(含有0.1％的氨水)和乙腈洗脱；流速：20毫升/分钟；梯度：由21％乙腈在10.12分钟及12.17分钟分别洗脱出来51A和51B，检测波长：254nm。
化合物51A:HPLC:RT＝10.12min。LC-MS:RT＝1.79min,[M+H] +＝572.30。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.14(d,J＝8.2Hz,1H),7.97(d,J＝8.2Hz,1H),7.87(dd,J＝10.0,1.5Hz,1H),7.69(dd,J＝7.9,1.4Hz,1H),7.64(t,J＝7.6Hz,1H),7.45(t,J＝8.0Hz,1H),6.30(d,J＝8.1Hz,1H),6.10(d,J＝7.8Hz,1H),5.38(s,2H),5.30–5.24(m,1H),4.82–4.70(m,2H),4.63–4.58(m,1H),4.44–4.39(m,1H),4.11–4.06(m,1H),3.43–3.33(m,4H),2.64–2.58(m,1H),2.56–2.52(m,4H),2.39–2.30(m,1H),1.45(d,J＝6.7Hz,3H)。
化合物51B:HPLC:RT＝12.17min。LC-MS:RT＝1.79min,[M+H] +＝572.30。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.09(d,J＝8.2Hz,1H),7.95(d,J＝8.2Hz,1H),7.87(dd,J＝10.0,1.4Hz,1H),7.69(dd,J＝7.9,1.5Hz,1H),7.67–7.61(m,1H),7.46(t,J＝8.0Hz,1H),6.31(d,J＝8.1Hz,1H),6.11(d,J＝7.8Hz,1H),5.39(s,2H),5.07–5.00(m,2H),4.69–4.49(m,4H),3.47–3.37(m,4H),2.79–2.70(m,1H),2.66–2.52(m,5H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例52 2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸(52A)和2-((R)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸(52B)
Figure PCTCN2021133447-appb-000343
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-氯-6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶
Figure PCTCN2021133447-appb-000344
零摄氏度下，向含有(4-氯-2-氟苯基)甲醇(5.0克，31.14毫摩尔)的四氢呋喃(50.0毫升)中，加入叔丁醇钾(4.88克，43.60毫摩尔)，搅拌30分钟后，加入2,6-二氯吡啶(4.2克，28.38毫摩尔)，室温反应过夜。
反应结束，加水(50毫升)淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)。得到7.53克黄色油状物2-氯-6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶(收率：88.9％)。LC-MS:RT＝2.27min,[M+H] +＝272.05。
步骤B：合成4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000345
室温下，向含有2-氯-6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶(7.53克，27.68毫摩尔)的1,4-二氧六环中，加入哌嗪-1-羧酸叔丁酯(5.15克，27.68毫摩尔)、碳酸铯(18.05克，55.36毫摩尔)和甲烷磺酸(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(702.5毫克，0.83毫摩尔)，100摄氏度反应3小时。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(50毫升×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)。得到4.7克白色固体4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(收率：40.2％)。LC-MS:RT＝2.39min,[M+H] +＝422.22。
步骤C：合成4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪
Figure PCTCN2021133447-appb-000346
室温下，向含有4-(6-(((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.34克,10.28毫摩尔)的甲醇(30毫升)中，加入盐酸的二氧六环溶液(20.0毫升，4摩尔/升)，室温下反应3小时。
反应结束，反应液直接旋干得3.68克白色固体4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪盐酸盐，直接用于下一步。LC-MS:RT＝1.73min,[M+H] +＝322.15。
步骤D：合成2-(1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021133447-appb-000347
室温下，向含有4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪盐酸盐(750毫克,2.09毫摩尔)的乙腈(8.0毫升)中，加入2-(1-氯乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯(650毫克,2.09毫摩尔)、碘化钾(521毫克,3.14毫摩尔)和碳酸钾(577毫克,4.18毫摩尔)，60摄氏度反应过夜。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(30毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝2/1。得到870毫克黄色固体2-(1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯(收率：70.0％)。LC-MS:RT＝1.93min,[M+H] +＝595.25。
步骤E：合成2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸(52A)和2-((R)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸(52B)
Figure PCTCN2021133447-appb-000348
零摄氏度下，向含有2-(1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸甲酯(870毫克,1.46毫摩尔)的四氢呋喃(3毫升)和甲醇(1毫升)混合溶液中，滴加氢氧化锂(307毫克,7.30毫摩尔)水溶液(1毫升)，室温反应30分钟。
反应结束，加水淬灭，乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，饱和食盐水(20毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10。得到300毫克白色固体2-((S)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸(52A)(收率：35.4％)和53毫克白色固体2-((R)-1-(4-(6-((4-氯-2-氟苄基)氧基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)-3-(((S)-氧杂环丁烷-2-基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-羧酸(52B)(收率：6.2％)。粗产品用制备型高效液相色谱纯化。分离条件如下：色谱柱：Agilent 5 Prep-C18 100mm×30mm 5μM；流动相：水(含有0.1％的氨水)和乙腈洗脱；流速：20毫升/分钟；梯度：由25％乙腈在14.09分钟及15.49分钟分别洗脱出来52A和52B，检测波长：254nm。
化合物52A：HPLC:RT＝14.09min。LC-MS:RT＝1.91min,[M+H] +＝581.25。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.14(d,J＝8.2Hz,1H),7.97(d,J＝8.2Hz,1H),7.49(t,J＝8.2Hz,1H),7.46–7.41(m,2H),7.28(dd,J＝8.2,2.0Hz,1H),6.29(d,J＝8.1Hz,1H),6.07(d,J＝7.8Hz,1H),5.28(s,2H),4.83–4.70(m,2H),4.62(q,J＝6.5Hz,1H),4.44–4.39(m,1H),4.11–4.06(m,1H),3.42–3.19(m,5H),2.64–2.55(m,5H),2.39–2.32(m,1H),1.47(d,J＝6.8Hz,3H)。
化合物52B：HPLC:RT＝15.49min。LC-MS:RT＝1.91min,[M+H] +＝581.25。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.03(d,J＝8.1Hz,1H),7.92(d,J＝8.2Hz,1H),7.51(d,J＝8.0Hz,1H),7.49–7.41(m,2H),7.28(dd,J＝8.2,2.1Hz,1H),6.31(d,J＝8.1Hz,1H),6.07(d,J＝7.8Hz,1H),5.29(s,2H),5.04–5.00(m,2H),4.69–4.50(m,3H),3.49–3.42(m,3H),3.29–3.19(m,2H),2.79–2.71(m,1H),2.67–2.55(m,4H),1.92–1.86(m,1H),1.42(d,J＝6.6Hz,3H)。
实施例53：人源GLP1R细胞中化合物体外cAMP信号活化的测量
1、细胞培养
将稳定表达人GLP1 R的细胞系(hGLP1R-U2OS)用于该试验中。细胞采用生长培养基(完全培养基，DMEM+10％FBS+500μg/ml G418(Promega))，于37℃、5％CO 2饱和湿度的培养箱中培养。
2、cAMP测定
以1.0×10 4个细胞/孔(5μl)(细胞工作液为：DMEM+0.1％BSA+1mM IBMX(毕得医药))，将hGLP1R-U2OS接种于384孔板中，置于37℃的培养箱中静置30min，备用。将试剂盒中Stimulation Buffer 1(1X)逐级稀释待测化合物，将稀释好的待测化合物加入培养板中，5μl/孔，置于37℃的培养箱中孵育30min，然后，依次加入5μl/孔Lysis&Detection缓冲液配置的cAMP-d2和5μl/孔的Anti cAMP-Cryptate工作液，于室温孵育60min，最后进行检测。
3、数据处理
计算每个孔供体与受体发射信号的比率：HTRF率＝665nm信号/620nm信号*104，然后将HTRF率转化为反应率(％)，通过Y＝Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^((LogIC50-X)*HillSlope))的四参数方程创建各实施例化合物的浓度-响应曲线，并且计算半数最大(50％)有效浓度(EC 50)，结果见表一。
表一：本发明化合物对人GLP-1 R的EC 50
实施例化合物 EC 50(nM)
1A 1.71
2A 3.18
5 1.04
8 10.3
9 3.48
11 3.45
12 3.89
13 18.72
14 16.85
15 2.57
17 2.92
18 2.66
19 3.94
20A 4.66
31 14.4
39A 15.5
42 11.97
45 24.55
51A 2.28
52A 2.00
结论：本发明化合物对人GLP-1 R具有明显的激动活性。
实施例54：本发明化合物大鼠药代动力学研究
1、实验材料
SD大鼠：雄性，180-250g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司。
试剂：DMSO(二甲亚砜)，PEG-400(聚乙二醇400)，生理盐水，肝素，乙腈，甲酸，***(内标)均为市售可得。
仪器：赛默飞LC-MS(U300 UPLC，TSQ QUANTUMN ULTRA三重四级杆质谱)。
2、实验方法
称取化合物溶于DMSO-PEG-400-生理盐水(5：60：35，v/v/v)体系中，大鼠静脉或灌胃给药后，于15min、30min、1h、2h、5h、7h、24h(iv组加采5min)采集静脉血200μL于肝素化EP管中，12000rpm离心2min，取血浆-80℃冻存待测。精密称取一定量供试品用DMSO溶解至2mg/mL，作为储备液。准确吸取适量的化合物储备液，加入乙腈稀释制成标准系列溶液。准确吸取上述标准系列溶液各20μL，加入空白血浆180μL，涡旋混匀，配制成相当于血浆浓度为0.3、1、3、10、30、100、300、1000、3000ng/mL的血浆样品，每一浓度进行双样本分析，建立标准曲线。取30μL血浆(静脉给药5min、15min、30min、1h血浆稀释10倍)，加入内标***(50ng/mL)的乙腈溶液200μL，涡旋混匀后，加入100μL纯化水，再次涡旋混匀，4000rpm离心5min，取上清LC-MS分析。LC-MS检测条件如下：
色谱柱：赛默飞HYPERSIL GOLD C-18 UPLC柱，100*2.1mm，1.7μm。
流动相：水(0.1％甲酸)-乙腈按下表进行梯度洗脱
时间(min) 水(含0.1％甲酸) 乙腈
0 90％ 10％
0.6 90％ 10％
1 10％ 90％
2.6 10％ 90％
2.61 90％ 10％
4 90％ 10％
3、数据处理
LC-MS检测血药浓度后，采用WinNonlin 6.1软件，非房室模型法计算药动学参数，结果见表二。
表二：本发明化合物对大鼠药代动力学结果
Figure PCTCN2021133447-appb-000349
Figure PCTCN2021133447-appb-000350
结论：从表二中可以看出本发明化合物在大鼠口服吸收较好，具有较高的暴露量和生物利用度。
实施例55：本发明化合物对hERG钾离子通道作用的研究
1、细胞培养
将稳定表达hERG钾离子通道的中国仓鼠卵巢细胞系CHO-hERG用于该实验中。细胞采用F12完全培养基，10％胎牛血清，1％抗生素(G418)，89μg/mL潮霉素。恢复培养基为F12培养基，10％胎牛血清，于37℃。5％CO 2条件培养。
2、hERG测定
采用手动膜片钳***，测定本发明化合物系列梯度浓度对CHO-hERG中钾离子通道的抑制活性。
3、数据处理
hERG电流值导入到EXCEL中用于数据分析，测得的IC 50值见表三。
表三：本发明化合物对hERG钾离子通道的抑制作用结果
Figure PCTCN2021133447-appb-000351
结论：从表三中可以看出本发明化合物对hERG的抑制作用较弱。同时，按上述实验方法测试部分化合物的IC 50甚至大于100μM，可显著降低由hERG引起的心血管相关副作用。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (22)

  1. 式(I)的化合物：
    Figure PCTCN2021133447-appb-100001
    或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其中：
    A选自苯环、杂芳环、8～10元稠芳环；
    R 1选自氢、卤素、氰基、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、烷氧烷基、环烷基、杂环烷基、1个或多个R 7取代的烷基、1个或多个R 8取代的芳基和杂芳基；
    m为0、1、2或3；
    W为O或NH；
    R 2选自氢、卤素、氰基、烷基、卤代烷基、烷氧基、烷氧烷基；
    R 3选自氟、羟基、氰基、氧代(＝O)、C 1-3烷基、OC 1-3烷基、C 3-4环烷基、或2个R 3一起环化成C 3-4螺环烷基，其中C 1-3烷基、OC 1-3烷基、C 3-4环烷基或C 3-4螺环烷基在化合价容许时可经0～3个氟原子或经0～1个羟基取代；
    q为0、1、2；
    X为CH或N；
    Y为CH或N；
    R 5选自卤素、羟基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷氧烷基、环烷基、杂环烷基、烷基环烷基、烷基杂环烷基；
    R 4为-C 1-3烷基、-C 0-3亚烷基-C 3-6环烷基、-C 0-3亚烷基-R 9或-C 1-3亚烷基-R 6，其中所述的烷基在化合价容许时可经0至3个独立地选自0至3个F原子的取代基或经0至1个选自-C 0-1亚烷基-CN、-C 0-1亚烷基-OR O或-N(R N) 2的取代基取代，及其中所述的亚烷基和环烷基在化合价容许时可独立地经0至2个独立地选自0至2个F原子的取代基或经0至1个选自-C 0-1亚烷基-CN、-C 0-1亚烷基-OR O或-N(R N) 2的取代基取代；
    R 9为4至6元杂环烷基，其中该杂环烷基在化合价容许时可经0至2个独立地选自下列的取代基取代：
    0至1个氧代(＝O)，
    0至1个-CN，
    0至2个F原子，或
    0至2个独立地选自-C 1-3烷基或-OC 1-3烷基的取代基，其中C 1-3烷基和OC 1-3烷基的烷基在化合价容许时可经0至3个独立地选自下列的取代基取代：
    0至3个F原子，
    0至1个-CN，或
    0至1个-OR O；
    R 6为5至6元杂芳基，其中该杂芳基在化合价容许时可经0至2个独立地选自下列的取代基取代：
    0至2个卤素，
    0至1个选自-OR O和-N(R N) 2的取代基，或
    0至2个-C 1-3烷基，其中该烷基在化合价容许时可经0至3个独立地选自下列的取代基取代：
    0至3个F原子，或
    0至1个-OR O；
    各R O独立地为H或-C 1-3烷基，其中C 1-3烷基可经0至3个F原子取代；
    各R N独立地为H或-C 1-3烷基；
    Z 1、Z 2和Z 3各自独立地为-CR Z或N，各R Z独立地为H、F、Cl或-CH 3；
    R 7选自卤素、氰基、羟基、环烷基、杂环烷基、砜基；
    R 8选自卤素、氰基、烷基、卤代烷基，烷氧基、卤代烷氧基、烷氧烷基、环烷基、杂环烷基、砜基。
  2. 根据权利要求1所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述化合物如式(III)所示：
    Figure PCTCN2021133447-appb-100002
    其中：
    A选自苯环、杂芳环、8～10元稠芳环；
    R 1选自氢、卤素、氰基、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、烷氧烷基、环烷基、杂环烷基、1个或多个R 7取代的烷基、1个或多个R 8取代的芳基和杂芳基；
    m为0、1、2或3；
    W为O或NH；
    R 3选自氟、羟基、氰基、氧代(＝O)、C 1-3烷基、OC 1-3烷基、C 3-4环烷基、或2个R 3一起环化成C 3-4螺环烷基，其中C 1-3烷基、OC 1-3烷基、C 3-4环烷基或C 3-4螺环烷基在化合价容许时可经0～3个氟原子或经0～1个羟基取代；
    q为0、1、2；
    X为CH或N；
    Y为CH或N；
    R 5选自卤素、羟基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷氧烷基、环烷基、杂环烷基、烷基环烷基、烷基杂环烷基；
    R 4为-C 1-3烷基、-C 0-3亚烷基-C 3-6环烷基、-C 0-3亚烷基-R 9或-C 1-3亚烷基-R 6，其中所述的烷基在化合价容许时可经0至3个独立地选自0至3个F原子的取代基或经0至1个选自-C 0-1亚烷基-CN、-C 0-1亚烷基-OR O或-N(R N) 2的取代基取代，及其中所述的亚烷基和环烷基在化合价容许时可独立地经0至2个独立地选自0至2个F原子的取代基或经0至1个选自-C 0-1亚烷基-CN、-C 0-1亚烷基-OR O或-N(R N) 2的取代基取代；
    R 9为4至6元杂环烷基，其中该杂环烷基在化合价容许时可经0至2个独立地选自下列的取代基取代：
    0至1个氧代(＝O)，
    0至1个-CN，
    0至2个F原子，或
    0至2个独立地选自-C 1-3烷基或-OC 1-3烷基的取代基，其中C 1-3烷基和OC 1-3烷基的烷基在化合价容许时可经0至3个独立地选自下列的取代基取代：
    0至3个F原子，
    0至1个-CN，或
    0至1个-OR O；
    R 6为5至6元杂芳基，其中该杂芳基在化合价容许时可经0至2个独立地选自下列的取代基取代：
    0至2个卤素，
    0至1个选自-OR O和-N(R N) 2的取代基，或
    0至2个-C 1-3烷基，其中该烷基在化合价容许时可经0至3个独立地选自下列的取代基取代：
    0至3个F原子，或
    0至1个-OR O；
    各R O独立地为H或-C 1-3烷基，其中C 1-3烷基可经0至3个F原子取代；
    各R N独立地为H或-C 1-3烷基；
    Z 1、Z 2和Z 3各自独立地为-CR Z或N，各R Z独立地为H、F、Cl或-CH 3；
    R 7选自卤素、氰基、羟基、环烷基、杂环烷基、砜基；
    R 8选自卤素、氰基、烷基、卤代烷基，烷氧基、卤代烷氧基、烷氧烷基、环烷基、杂环烷基、砜基。
  3. 根据权利要求1所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述化合物如式(II)所示：
    Figure PCTCN2021133447-appb-100003
    其中：
    A选自苯环、杂芳环、8～10元稠芳环；
    R 1选自氢、卤素、氰基、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、烷氧烷基、环烷基、杂环烷基、1个或多个R 7取代的烷基、1个或多个R 8取代的芳基和杂芳基；
    m为0、1、2或3；
    R 3选自氟、羟基、氰基、C 1-3烷基、OC 1-3烷基、C 3-4环烷基、或2个R 3一起环化成C 3-4螺环烷基，其中C 1-3烷基和OC 1-3烷基、环烷基或螺环烷基在化合价容许时可经0～3个氟原子或经0～1个羟基取代；
    q为0、1、2；
    X为CH或N；
    Y为CH或N；
    R 5选自卤素、羟基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷氧烷基、环烷基、杂环烷基、烷基环烷基、烷基杂环烷基；
    R 4为-C 1-3烷基、-C 0-3亚烷基-C 3-6环烷基、-C 0-3亚烷基-R 9或-C 1-3亚烷基-R 6，其中所述的烷基在化合价容许时可经0至3个独立地选自0至3个F原子的取代基或经0至1个选自-C 0-1亚烷基-CN、-C 0-1亚烷基-OR O或-N(R N) 2的取代基取代，及其中所述的亚烷基和环烷基在化合价容许时可独立地经0至2个独立地选自0至2个F原子的取代基或经0至1个选自-C 0-1亚烷基-CN、-C 0-1亚烷基-OR O或-N(R N) 2的取代基取代；
    R 9为4至6元杂环烷基，其中该杂环烷基在化合价容许时可经0至2个独立地选自下列的取代基取代：
    0至1个氧代(＝O)，
    0至1个-CN，
    0至2个F原子，或
    0至2个独立地选自-C 1-3烷基或-OC 1-3烷基的取代基，其中C 1-3烷基和OC 1-3烷基的烷基在化合价容许时可经0至3个独立地选自下列的取代基取代：
    0至3个F原子，
    0至1个-CN，或
    0至1个-OR O；
    R 6为5至6元杂芳基，其中该杂芳基在化合价容许时可经0至2个独立地选自下列的取代基取代：
    0至2个卤素，
    0至1个选自-OR O和-N(R N) 2的取代基，或
    0至2个-C 1-3烷基，其中该烷基在化合价容许时可经0至3个独立地选自下列的取代基取代：
    0至3个F原子，或
    0至1个-OR O；
    各R O独立地为H或-C 1-3烷基，其中C 1-3烷基可经0至3个F原子取代；
    各R N独立地为H或-C 1-3烷基；
    Z 1、Z 2和Z 3各自独立地为-CR Z或N，各R Z独立地为H、F、Cl或-CH 3；
    R 7选自卤素、氰基、羟基、环烷基、杂环烷基、砜基；
    R 8选自卤素、氰基、烷基、卤代烷基，烷氧基、卤代烷氧基、烷氧烷基、环烷基、杂环烷基、砜基。
  4. 根据权利要求1或2或3任一权利要求所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述烷基选自C 1-6的烷基，所述C 1-6的烷基选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、仲戊基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、叔戊基、1,2-二甲基丙基、异戊基、新戊基、正己基、异己基、仲己基、叔己基、新己基、2-甲基戊基、1，2-二甲基丁基、1-乙基丁基。
  5. 根据权利要求1或2或3任一权利要求所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述烷氧基选自C 1-6的烷氧基，所述C 1-6的烷氧基选自甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、仲戊氧基、1-乙基丙氧基、2-甲基丁氧基、叔戊氧基、1,2-二甲基丙氧基、异戊氧基、新戊氧基、正己氧基、异己氧基、仲己氧基、叔己氧基、新己氧基、2-甲▼基戊氧基、1，2-二甲基丁氧基、1-乙基丁氧基；所述烷氧烷基选自C 1-4的烷氧C 1-4的烷基，进一步选自甲氧甲基、甲氧乙基、甲氧丙基、甲氧丁基、乙氧甲基、乙氧乙基、乙氧丙基、乙氧丁基、丙氧甲基、丙氧乙基、丙氧丙基、丙氧丁基、丁氧甲基、丁氧乙基、丁氧丙基、丁氧丁基等。
  6. 根据权利要求1或2或3任一权利要求所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述卤素选自氟、氯、溴、碘，卤代烷基指烷基一个以上的氢原子被卤素取代，卤代烷氧基指烷氧基一个以上的氢原子被卤素取代，杂环烷基是指烷基一个以上的氢原子被杂环取代。
  7. 根据权利要求1或2或3任一权利要求所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述稠芳环选自萘或者稠芳杂环，所述稠芳杂环指芳环或杂芳环与杂芳环稠合而成，所述杂芳环上的杂原子选自氮、氧、硫，所述杂原子为一个或者多个。
  8. 根据权利要求7所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述稠芳杂环选自吲唑、喹啉、异喹啉、喹喔啉、吲哚、异吲哚、噌啉、喹唑啉、酞嗪、嘌呤、萘啶、蝶啶、苯并呋喃、苯并噻吩、苯并噁唑、苯并噻唑、苯并异噁唑、苯并异噻唑、苯并噁二唑、苯并噻二唑、苯并***、苯并三嗪、苯并咪唑、吡嗪并吡唑、吡嗪并嘧啶、吡嗪并哒嗪、吡嗪并三嗪、嘧啶并吡唑、嘧啶并咪唑、嘧啶并***、嘧啶并三嗪、嘧啶并哒嗪、哒嗪并咪唑、哒嗪并吡唑、哒嗪并***、哒嗪并三嗪、三嗪并咪唑、三嗪并吡唑、三嗪并***、吡啶并咪唑、吡啶并哒嗪、吡啶并吡唑、吡啶并嘧啶、吡啶并三嗪、吡啶并噁唑、吡啶并噻唑、吡啶并异噁唑、吡啶并异噻唑、吡啶并噁二唑、吡啶并噻二唑、吡啶并呋喃、吡啶并吡咯、吡嗪并咪唑、吡嗪并***、吡嗪并噁唑、吡嗪并噻唑、吡嗪并异噁唑、吡嗪并异噻唑、吡嗪并噁二唑、吡嗪并噻二唑、吡嗪并呋喃、吡嗪并吡咯、嘧啶并噁唑、嘧啶并噻唑、嘧啶并异噁唑、嘧啶并异噻唑、嘧啶并噁二唑、嘧啶并噻二唑、嘧啶并呋喃、嘧啶并吡咯、哒嗪并噁唑、哒嗪并噻唑、哒嗪并异噁唑、哒嗪并异噻唑、哒嗪并噁二唑、哒嗪并噻二唑、哒嗪并呋喃、哒嗪并吡咯、三嗪并噁唑、三嗪并噻唑、三嗪并异噁唑、三嗪并异噻唑、三嗪并噁二唑、三嗪并噻二唑、三嗪并呋喃、三嗪并吡咯。
  9. 根据权利要求8所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述萘啶选自
    Figure PCTCN2021133447-appb-100004
    所述吡啶并咪唑选自
    Figure PCTCN2021133447-appb-100005
    Figure PCTCN2021133447-appb-100006
    所述吡嗪并咪唑选自
    Figure PCTCN2021133447-appb-100007
    所述吡嗪并***选自
    Figure PCTCN2021133447-appb-100008
    所述嘧啶并吡唑选自
    Figure PCTCN2021133447-appb-100009
    所述嘧啶并咪唑选自
    Figure PCTCN2021133447-appb-100010
    所述嘧啶并***选自
    Figure PCTCN2021133447-appb-100011
    所述哒嗪并咪唑选自
    Figure PCTCN2021133447-appb-100012
    所述哒嗪并***选自
    Figure PCTCN2021133447-appb-100013
    所述三嗪并咪唑选自
    Figure PCTCN2021133447-appb-100014
    所述吡啶并哒嗪选自
    Figure PCTCN2021133447-appb-100015
    Figure PCTCN2021133447-appb-100016
    所述吡啶并吡唑选自
    Figure PCTCN2021133447-appb-100017
    所述吡啶并嘧啶选自
    Figure PCTCN2021133447-appb-100018
    所述吡啶并三嗪选自
    Figure PCTCN2021133447-appb-100019
    Figure PCTCN2021133447-appb-100020
    所述嘧啶并三嗪选自
    Figure PCTCN2021133447-appb-100021
  10. 根据权利要求1或2或3任一权利要求所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述杂环烷基的杂环选自4至10元杂环，所述4至10元杂环选自
    Figure PCTCN2021133447-appb-100022
    Figure PCTCN2021133447-appb-100023
    所述芳基选自苯基；所述杂芳基选自5至12元杂芳基，所述5至12元杂芳基选自
    Figure PCTCN2021133447-appb-100024
    Figure PCTCN2021133447-appb-100025
  11. 根据权利要求1或2或3任一权利要求所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述环烷基选自C 3-6的环烷，C 3-6的环烷选自环丙基、环丁基、环戊基、环己基。
  12. 根据权利要求1或2或3任一权利要求所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述A选自苯环、
    Figure PCTCN2021133447-appb-100026
  13. 根据权利要求1所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述A选自苯环、
    Figure PCTCN2021133447-appb-100027
    R 1选自氢、氟、氯、溴、氰基、二氟乙基、三氟乙基；
    m为0、1、2；
    W为O或NH；
    R 2选自氯、氰基、三氟甲基、甲氧基、甲氧甲基；
    q为0、1；
    R 3为氟、甲基、氧代(＝O)、羟基、氟代甲基、甲氧基乙基；
    R 4为氧杂环丁-2-基甲基；
    X为CH或N；
    Y为CH或N；
    R 5选自甲基、乙基、环丙甲基、氟代乙基、甲氧基乙基；
    Z 1为CH；
    Z 2为CH或CF；
    Z 3为CH或N或CF。
  14. 根据权利要求2所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述A选自苯环、
    Figure PCTCN2021133447-appb-100028
    R 1选自氢、氟、氯、溴、氰基、二氟乙基、三氟乙基；
    m为0、1、2；
    W为O或NH；
    q为0、1；
    R 3为氟、甲基、氧代(＝O)、羟基、氟代甲基、甲氧基乙基；
    R 4为氧杂环丁-2-基甲基；
    X为CH或N；
    Y为CH或N；
    R 5选自甲基、乙基、环丙甲基、氟代乙基、甲氧基乙基；
    Z 1为CH；
    Z 2为CH或CF；
    Z 3为CH或N或CF。
  15. 根据权利要求3所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述A选自苯环、
    Figure PCTCN2021133447-appb-100029
    R 1选自氢、氟、氯、溴、氰基、二氟乙基、三氟乙基；
    m为0、1、2；
    q为0；
    R 4为氧杂环丁-2-基甲基；
    X为CH或N；
    Y为CH或N；
    R 5选自甲基、乙基、环丙甲基、氟代乙基、甲氧基乙基；
    Z 1为CH；
    Z 2为CH或CF；
    Z 3为CH或N或CF。
  16. 根据权利要求1-15任一权利要求所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，当与R 5相连的碳原子为手性碳原子时，所述手性碳原子为S构型和/或R构型，优选S构型。
  17. 根据权利要求1或2或3任一权利要求所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，选自以下化合物：
    Figure PCTCN2021133447-appb-100030
    Figure PCTCN2021133447-appb-100031
    Figure PCTCN2021133447-appb-100032
    Figure PCTCN2021133447-appb-100033
  18. 根据权利要求1或2或3任一权利要求所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，选自以下化合物：
    Figure PCTCN2021133447-appb-100034
    Figure PCTCN2021133447-appb-100035
    Figure PCTCN2021133447-appb-100036
    Figure PCTCN2021133447-appb-100037
    Figure PCTCN2021133447-appb-100038
  19. 根据权利要求1或2或3任一权利要求所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述药学上可接受的盐是指化合物与药学上可接受的酸或碱制备。
  20. 根据权利要求1-18任一项所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于：所述化合物的一个以上的氢原子上被同位素氘取代。
  21. 一种药物组合物，其特征在于，包括前述权利要求1-20任一项所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐和一种以上药学上可接受的载体。
  22. 根据权利要求1-20任一项所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐在制备用于制备治疗GLP-1相关疾病的药物用途，优选糖尿病相关疾病的药物用途。
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