WO2021228223A1 - 氘代akt激酶抑制剂 - Google Patents

氘代akt激酶抑制剂 Download PDF

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WO2021228223A1
WO2021228223A1 PCT/CN2021/093813 CN2021093813W WO2021228223A1 WO 2021228223 A1 WO2021228223 A1 WO 2021228223A1 CN 2021093813 W CN2021093813 W CN 2021093813W WO 2021228223 A1 WO2021228223 A1 WO 2021228223A1
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WO
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compound
formula
methyl
protecting group
prepare
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PCT/CN2021/093813
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Inventor
马昌友
田禾
赵建良
余方丹
吴杏森
陈东晖
吴舰
徐丹
朱春霞
田舟山
Original Assignee
南京正大天晴制药有限公司
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Definitions

  • the invention belongs to the field of medicinal chemistry, and specifically relates to a deuterated AKT kinase inhibitor, a preparation method thereof, and medical use.
  • the PI3K/AKT/mTOR pathway composed of phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) and its downstream protein AKT (also known as protein kinase B, PKB) and mammalian target of rapamycin (mTOR) is very important in the cell
  • PI3K phosphatidylinositol 3-kinase
  • AKT protein kinase B
  • mTOR mammalian target of rapamycin
  • the signal transduction pathway plays an extremely important biological function in the process of cell growth, survival, proliferation, apoptosis, angiogenesis, and autophagy. Abnormal activation of this pathway can cause a series of diseases, including cancer, neuropathy, autoimmune diseases and blood lymphatic system diseases.
  • AKT a type of serine/threonine kinase, affects cell survival, growth, metabolism, proliferation, migration and differentiation through numerous downstream effectors.
  • Over 50% of human tumors have over-activated AKT, especially prostate cancer, pancreatic cancer, bladder cancer, ovarian cancer, and breast cancer. Overactivation of AKT can lead to tumorigenesis, metastasis and drug resistance.
  • AKT has three subtypes: AKT1, AKT2 and AKT3.
  • each subtype is composed of an amino-terminal PH domain (Pleckstrin homology domain), a kinase domain that binds ATP in the middle, and a carboxy-terminal regulatory domain.
  • PH domain Pleckstrin homology domain
  • kinase domain that binds ATP in the middle
  • carboxy-terminal regulatory domain about 80% of the amino acid sequences of the three subtypes are homologous, with large changes only in the junction region of the PH domain and the kinase domain.
  • the targeted drugs for the PI3K/AKT/mTOR signal pathway are mainly PI3K inhibitors and mTOR inhibitors, and AKT is at the core of the signal transduction pathway. Inhibition of AKT activity can not only avoid the serious side effects caused by inhibiting upstream PI3K, but also avoid the negative feedback mechanism caused by inhibiting downstream mTOR from affecting the efficacy of the drug. Therefore, looking for effective and selective AKT inhibitors is an important direction of current tumor-targeted drug research and development.
  • CN101631778A discloses a class of cyclopenta[D]pyrimidine derivatives
  • CN101578273A discloses a class of hydroxylated and methoxylated cyclopenta[D]pyrimidine derivatives
  • CN101511842A discloses a class of dihydrofuran and pyrimidine derivatives
  • CN101970415A discloses a class 5H- cyclopenta [d] pyrimidine derivatives, these compounds have IC 50 of less than 10 ⁇ M in AKT1 inhibition.
  • the present invention provides a compound represented by formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof,
  • R 1 is selected from H, OH, halogen, CN, NH 2 , NO 2 or C1-C6 alkyl optionally substituted by halogen or OH;
  • R 2 and R 3 are each independently selected from H, C 1 -C 6 alkyl, C 3 -C 6 cycloalkyl, (C 3 -C 6 cycloalkyl) -(CH 2 )-, (C 3- C 6 cycloalkyl)-(CH 2 CH 2 )-, benzyl, phenethyl, pyrrolidinyl, tetrahydrofuranyl or tetrahydropyranyl, wherein the C 1 -C 6 alkyl group, C 3 -C 6 cycloalkyl, (C 3 -C 6 cycloalkyl)-(CH 2 )- or (C 3 -C 6 cycloalkyl)-(CH 2 CH 2 )-optionally by halogen, OH, CN, NH 2 or C 1 -C 3 alkoxy substituted, the benzyl or phenethyl group is optionally substituted by halogen, OH, CN, NO 2 ,
  • R 1 , R 2 and the atoms connected to them together form a 4-7 membered nitrogen-containing heterocyclic ring;
  • n are each independently selected from 0, 1, 2 or 3;
  • R 6 , R 7 , R 8 , and R 9 are each independently selected from H, CN, C 1 -C 6 alkyl or C 1 -C 6 alkoxy, wherein the C 1 -C 6 alkyl or C The 1- C 6 alkoxy is optionally substituted by halogen, OH, CN or C 1 -C 3 alkoxy;
  • R 10 is selected from H or C 1 -C 6 alkyl, wherein the C 1 -C 6 alkyl is optionally substituted by halogen, OH, CN or C 1 -C 3 alkoxy;
  • L is an optionally substituted 5-12 membered saturated heterocyclic ring containing 1-2 nitrogen atoms
  • G is a 6-10 membered aryl group or a 5-10 membered heteroaryl group optionally substituted by 1-5 R 11;
  • the compound described in the present disclosure has one or more C-H bonds substituted by C-D bonds.
  • At least one or more C-H bonds on L are substituted by C-D bonds in the compound.
  • the compound has one, two, three, four, five, six, seven or eight C-H bonds substituted by C-D bonds on L.
  • R 1 is selected from H, OH, or C 1 -C 6 alkyl optionally substituted with halogen or OH; in some typical embodiments, R 1 is selected from H, OH, Me, CF 3 or CH 2 OH; in some more typical embodiments, R 1 is selected from H or OH; in some most typical embodiments, R 1 is selected from H.
  • R 2 and R 3 are each independently selected from H, C1-C6 alkyl, C 3 -C 6 cycloalkyl, (C 3 -C 6 cycloalkyl)-(CH 2 )-, (C 3 -C 6 cycloalkyl)-(CH 2 CH 2 )-, benzyl, phenethyl, pyrrolidinyl or tetrahydropyranyl, wherein the C 1 -C 6 alkyl group, C 3- C 6 cycloalkyl, (C 3 -C 6 cycloalkyl)-(CH 2 )- or (C 3 -C 6 cycloalkyl)-(CH 2 CH 2 )-optionally by F, Cl , Br, I, OH, CN, NH 2 or C1-C3 alkoxy substituted, the benzyl or phenethyl group is optionally substituted by F, Cl, Br, I, OH, OMe, CF 3
  • R 2 and R 3 are each independently selected from H, methyl, ethyl, isopropyl, isobutyl, tert-butyl, 3-pentyl, CH 2 OH, CH 2 CH 2 OH , CH 2 CH 2 OMe, CF 3 , CH 2 CF 3 , CH 2 CHF 2 , CH 2 CH 2 F, cyclopropyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cyclopropyl-(CH 2 )-, cyclopentyl -(CH 2 )-, cyclohexyl-(CH 2 )-, cyclopropyl-(CH 2 CH 2 )-, cyclopentyl-(CH 2 CH 2 )-, benzyl, 4-fluorobenzyl , 4-chlorobenzyl, 4-fluorophenethyl, 4-chlorophenethyl or tetrahydropyran-4-yl.
  • R 2 and R 3 are each independently selected from H, methyl, ethyl, isopropyl, cyclopropyl, cyclohexyl, cyclopropyl-(CH 2 )-, cyclohexyl- (CH 2 )- or tetrahydropyran-4-yl.
  • R 2 and R 3 are each independently selected from H, isopropyl, or cyclopropyl.
  • R 2 is H.
  • R 3 is isopropyl or cyclopropyl.
  • R 2 is H and R 3 is isopropyl or cyclopropyl
  • R 1 , R 2 and the atoms to which they are attached together form::
  • R 3 is defined as above.
  • R 1 , R 2 and the atoms to which they are attached together form:
  • R 3 is defined as above.
  • n is 0, 1, or 2; in some typical embodiments, m is 0 or 1; in some more typical embodiments, m is 1.
  • n is 0, 1, or 2; in some typical embodiments, n is 0 or 1; in some more typical embodiments, n is 0.
  • R 4 and R 5 are both hydrogen.
  • for And R 4 and R 5 together form O.
  • for And R 4 and R 5 together form O.
  • for And R 4 and R 5 together form O.
  • for And R 4 and R 5 together form O.
  • for And R 4 and R 5 are both H.
  • for And R 4 and R 5 together form O.
  • R 6 , R 7 , R 8 , and R 9 are each independently selected from H, CN, C1-C6 alkyl or C1-C6 alkoxy, wherein the C1-C6 alkyl or C1 -C6 alkoxy is optionally substituted by F, Cl, Br, I, OH, CN or OMe.
  • R 6 , R 7 , R 8 , and R 9 are each independently selected from H, CN, C1-C6 alkyl or C1-C6 alkoxy, wherein the C1-C6 alkyl or C1 -C6 alkoxy is optionally substituted by F, CN or OH.
  • R 6 , R 7 , R 8 , R 9 are each independently selected from H, CN, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, CF 3 , CH 2 CF 3 , CH 2 CHF 2.
  • R 6 is H, CN, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, CF 3 , CH 2 CF 3 , CH 2 CHF 2 , CH 2 CH 2 F, CH 2 CN, CH 2 CH 2 CN, CH 2 OH, CH 2 CH 2 OH, OMe, OEt, OCH 2 CH 2 CH 3 or isopropoxy; in some typical embodiments, R 6 is H, CN, methyl, ethyl Group, isopropyl, CF 3 , CH 2 CH 2 OH, OMe or OEt; in some more typical embodiments, R 6 is H, CN, methyl, CF 3 or OMe; in some more typical implementations In the scheme, R 6 is CN, methyl, CF 3 or OMe; in some more typical embodiments, R 6 is H, CN or methyl; in some more typical embodiments, R 6 is H , CF 3 or methyl; in some more typical embodiments, R 6 is methyl, CF 3
  • R 7 is H.
  • R 8 is H, CN, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, CF 3 , CH 2 CF 3 , CH 2 CHF 2 , CH 2 CH 2 F, CH 2 CN, CH 2 CH 2 CN, CH 2 OH, CH 2 CH 2 OH, OMe, OEt, OCH 2 CH 2 CH 3 or isopropoxy; in some typical embodiments, R 8 is H, CN, methyl, ethyl Group, isopropyl, CF 3 , CH 2 CH 2 OH, OMe, or OEt; in some more typical embodiments, R 8 is H, CN, or methyl; in some more typical embodiments, R 8 Is H or CN; in some more typical embodiments, R 8 is H or methyl; in some more typical embodiments, R 8 is H.
  • R 9 is H.
  • R 10 is selected from H or C1-C6 alkyl, wherein the C1-C6 alkyl is optionally substituted by halogen, OH or CN; in some embodiments, R 10 is H, methyl Group, ethyl, propyl, isopropyl, CF 3 , CH 2 CF 3 , CH 2 CHF 2 , CH 2 CH 2 F, CH 2 CN, CH 2 CH 2 CN, CH 2 OH or CH 2 CH 2 OH ; In some typical embodiments, R 10 is methyl, ethyl, isopropyl, CH 2 CF 3 , CH 2 CHF 2 , CH 2 CN, or CH 2 CH 2 OH; in some more typical embodiments Among them, R 10 is methyl, ethyl, CH 2 CN, or CH 2 CH 2 OH; in some more typical embodiments, R 10 is methyl.
  • L is the following group optionally substituted with one or more R 12 , and one or more CH bonds on L are substituted with CD bonds.
  • one, two, three, four, five, six, seven, or eight C-H bonds on the L are replaced by C-D bonds:
  • the single wave line is the position where L is connected to the carbonyl group, and the double wave line is the position where L is connected to the pyrimidine;
  • R 12 is selected from halogen, OH, CN, vinyl, C1-C6 alkyl or C1-C6 alkoxy, wherein said C1-C6 alkyl or C1-C6 alkoxy is optionally substituted by halogen or OH ;
  • h is selected from 0, 1, 2, 3 or 4;
  • j is selected from 0, 1, 2 or 3;
  • k is selected from 1, 2, 3 or 4;
  • q, s, v, and t are each independently selected from 0, 1, or 2, and q, s, v, and t are not 0 at the same time;
  • p is selected from 0, 1, 2 or 3;
  • e is selected from 0, 1 or 2;
  • u is selected from 1, 2 or 3;
  • W and Z are each independently selected from N or C, and at least one of W and Z is N.
  • R 12 is selected from F, Cl, Br, I, OH, CN, vinyl, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, CF 3 , CH 2 CF 3 , CH 2 CHF 2 , CH 2 CH 2 F, OMe, OEt, CH 2 OH, CH 2 CH 2 OH, OCH 2 OH or OCH 2 CH 2 OH; in some typical embodiments, R 12 is selected from methyl, ethyl, iso Propyl, CF 3 , CH 2 CF 3 , OMe, OEt, CH 2 OH or OCH 2 OH; in some more typical embodiments, R 12 is selected from methyl, ethyl or CF 3 ; in some more In a typical embodiment, R 12 is selected from methyl.
  • h is 0, 1, 2, or 3 and j is 0, 1, or 2; in some typical embodiments, h is 0, 1, or 2 and j is 0 or 1; in some more typical In some embodiments, h is 0 or 1 and j is 0; in some more typical embodiments, h is 1 and j is 0.
  • k is 1, 2 or 3; in some typical embodiments, k is 1 or 3; in some more typical embodiments, k is 1.
  • q, s, v, and t are each independently 0 or 1, and q, s, v, and t are not 0 at the same time; in some typical embodiments, q, s, v, and t are all Is 1; in some more typical embodiments, q and s are both 0, and v and t are both 1. In some more typical embodiments, q and s are both 1, and v and t are both 0 ; In some more typical embodiments, s and v are both 0, and q and t are both 1.
  • p is 0, 1, or 2; in some typical embodiments, p is 0 or 2; in some more typical embodiments, p is 2.
  • e is 0 or 1, and u is 1 or 2; in some typical embodiments, e is 0 or 1, and u is 1; in some more typical embodiments, e is 0, and u is 1.
  • W is C and Z is N; in some typical embodiments, W is N and Z is C; in some more typical embodiments, both W and Z are N.
  • L is the following group optionally substituted by one or more R 12 , and one or more CH bonds on L are substituted by CD bonds, preferably, there are One, two, three, four, five, six, seven or eight CH keys are replaced by CD keys:
  • R 12 is the same as above.
  • L is the following group optionally substituted by one or more R 12 , and one or more CH bonds on L are substituted by CD bonds, preferably, there are One, two, three, four, five, six, seven or eight CH keys are replaced by CD keys:
  • R 12 is the same as above.
  • L is selected from the following groups, and one or more CH bonds on L are substituted by CD bonds.
  • one or more CH bonds on L are substituted by CD bonds.
  • there are one, two, three, or four on L Five, six, seven or eight CH keys are replaced by CD keys:
  • L is selected from the following groups, and one or more CH bonds on L are substituted by CD bonds.
  • one or more CH bonds on L are substituted by CD bonds.
  • there are one, two, three, or four on L Five, six, seven or eight CH keys are replaced by CD keys:
  • L is selected from the following groups, and one or more CH bonds on L are substituted by CD bonds.
  • one or more CH bonds on L are substituted by CD bonds.
  • there are one, two, three, or four on L Five, six, seven or eight CH keys are replaced by CD keys:
  • L is And one or more CH bonds on L are replaced by CD bonds, preferably, one, two, three, four, five, six, seven or eight CH bonds on L are replaced by CD bonds replace;
  • L is And one or more CH bonds on L are replaced by CD bonds, preferably, one, two, three, four, five, six, seven or eight CH bonds on L are replaced by CD bonds replace.
  • L is selected from
  • L is:
  • G is phenyl optionally substituted with 1-5 R 11 or thienyl or pyridyl optionally substituted with 1 or more R 11.
  • R 11 is independently selected from F, Cl, Br, I, OH, CN, NH 2 , NO 2 , benzyloxy, methyl, ethyl, isopropyl, CH 2 CF 3 , CF 3 , SMe, OMe, OCF 3 , OEt or isopropoxy; in some typical embodiments, R 11 is independently selected from F, Cl, Br, CN, benzyloxy, methyl, ethyl, isopropoxy group, CF 3, OMe, SMe, or OCF 3; in some of the more typical embodiments, R 11 is independently selected from F, Cl or CF 3; in some of the more typical embodiments, R 11 is Cl.
  • G is phenyl, 2-chlorophenyl, 3-chlorophenyl, 4-chlorophenyl, 4-fluorophenyl, 4-bromophenyl, 4-methylphenyl, 4- Ethylphenyl, 4-isopropylphenyl, 4-trifluoromethylphenyl, 4-cyanophenyl, 4-methoxyphenyl, 4-methylthiophenyl, 4-trifluoromethyl Oxyphenyl, 4-chloro-3-fluorophenyl, 3,4-difluorophenyl, 2,4-dichlorophenyl or 4-benzyloxyphenyl; in some typical embodiments, G Is 4-chlorophenyl, 4-chloro-3-fluorophenyl, 4-trifluoromethylphenyl or 3,4-difluorophenyl; in some more typical embodiments, G is 4-chloro Phenyl.
  • G is thienyl or pyridyl optionally substituted with one or more halogens; in some more typical embodiments, G is optionally substituted with one or more F, Cl, Br, or I Thiophene or pyridyl; in some more typical embodiments, G is:
  • the present invention provides a compound represented by formula II or a pharmaceutically acceptable salt thereof,
  • R 1 , R 2 , R 4 , R 5 , G, L, m and The definition of is the same as that of the compound of formula I, wherein the compound has one or more CH bonds replaced by CD bonds.
  • at least one or more CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • one, two, three, four, five, six, seven or eight CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • the present invention provides a compound represented by formula III or a pharmaceutically acceptable salt thereof,
  • R 2 , R 4 , R 5 , G, L and The definition of is the same as that of the compound of formula I, wherein the compound has one or more CH bonds replaced by CD bonds.
  • at least one or more CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • one, two, three, four, five, six, seven or eight CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • the present invention provides a compound represented by formula IV or a pharmaceutically acceptable salt thereof,
  • R 2 , G, L and The definition of is the same as that of the compound of formula I, wherein the compound has one or more CH bonds replaced by CD bonds.
  • at least one or more CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • one, two, three, four, five, six, seven or eight CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • the present invention provides a compound represented by formula V or a pharmaceutically acceptable salt thereof,
  • R 2 , R 6 , R 8 , G and L have the same definitions as the compound of formula I, wherein the compound has one or more CH bonds substituted by CD bonds.
  • the compound has one or more CH bonds substituted by CD bonds.
  • at least one or more CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • one, two, three, four, five, six, seven or eight CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • the present invention provides a compound represented by formula VI or a pharmaceutically acceptable salt thereof,
  • R 2 , R 6 , R 8 , R 11 and L have the same definitions as the compound of formula I, and d is selected from 0, 1, 2, 3, 4 or 5, wherein the compound has one or more CH bonds
  • the CD key replaces.
  • at least one or more CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • one, two, three, four, five, six, seven or eight CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • d is selected from 0, 1, 2 or 5; in some typical embodiments, d is selected from 0, 1 or 2; in some more typical embodiments, d is selected from 1 or 2. ; In some more typical embodiments, d is 1.
  • the present invention provides a compound represented by formula VII or a pharmaceutically acceptable salt thereof,
  • R 2 , R 6 , R 8 , R 11 and L are defined as the compound of formula I, and d is defined as the compound of formula VI, wherein the compound has one or more CH bonds substituted by CD bonds.
  • at least one or more CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • one, two, three, four, five, six, seven or eight CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • the present invention provides a compound represented by formula VIII or a pharmaceutically acceptable salt thereof,
  • R 2 , R 8 , R 10 , G, and L have the same definition as the compound of formula I, wherein the compound has one or more CH bonds substituted by CD bonds.
  • the compound has one or more CH bonds substituted by CD bonds.
  • at least one or more CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • one, two, three, four, five, six, seven or eight CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • the present invention provides a compound represented by formula IX or a pharmaceutically acceptable salt thereof,
  • R 2 , R 8 , R 10 , R 11 and L are defined as the compound of formula I, and d is defined as the compound of formula VI, wherein the compound has one or more CH bonds substituted by CD bonds.
  • at least one or more CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • one, two, three, four, five, six, seven or eight CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • the compound of the present invention also includes a compound represented by formula X or a pharmaceutically acceptable salt thereof,
  • R 1 , R 2 , R 3 , G, L, m, n and The definition of is the same as that of the compound of formula I, wherein the compound has one or more CH bonds replaced by CD bonds.
  • at least one or more CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • one, two, three, four, five, six, seven or eight CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • the present invention also provides a compound represented by formula XI or a pharmaceutically acceptable salt thereof,
  • R 2 , R 6 , G and L have the same definitions as the compound of formula I, wherein the compound has one or more CH bonds substituted by CD bonds.
  • the compound has one or more CH bonds substituted by CD bonds.
  • at least one or more CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • one, two, three, four, five, six, seven or eight CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • the present invention also provides a compound represented by formula XII or a pharmaceutically acceptable salt thereof,
  • R 2 , R 6 , R 11 and L are defined as the compound of formula I, and d is defined as the compound of formula VI, wherein the compound has one or more CH bonds substituted by CD bonds.
  • at least one or more CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • one, two, three, four, five, six, seven or eight CH bonds on L are substituted by CD bonds in the compound.
  • the present invention provides the following compounds or pharmaceutically acceptable salts thereof:
  • one or more C-H bonds on the ring corresponding to L in the above compound structure are substituted by C-D bonds.
  • one, two, three, four, five, six, seven or eight C-H bonds are substituted by C-D bonds on the ring corresponding to L in the above compound structure.
  • the present invention provides the following compounds:
  • one or more C-H bonds are substituted by C-D bonds on the ring corresponding to L in the above compound structure.
  • one, two, three, four, five, six, seven or eight C-H bonds are substituted by C-D bonds on the ring corresponding to L in the above compound structure.
  • the present invention provides the following compounds or pharmaceutically acceptable salts thereof:
  • the present invention provides the following compounds:
  • the present invention provides a compound represented by formula XIII-XVIII or a pharmaceutically acceptable salt thereof:
  • the present invention also provides a pharmaceutical composition, which comprises a therapeutically effective amount of a compound of formula I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI or XII or a pharmaceutical composition thereof Acceptable salt.
  • the present invention also provides a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of a compound of formula I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI or XII or A pharmaceutically acceptable salt, and one or more pharmaceutically acceptable carriers.
  • the pharmaceutical composition of the present invention can be administered by any suitable route or method, for example, oral or parenteral (for example, intravenous) administration.
  • the therapeutically effective amount of the compound of formula I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI or XII is from about 0.001 mg to 20 mg/Kg body weight/day, preferably from 0.01 mg to 10 mg/Kg Weight/day.
  • the pharmaceutical composition of the present invention is usually provided in the form of tablets, capsules or solutions.
  • the tablet may contain the compound of the present invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof and a pharmaceutically acceptable carrier.
  • the carrier includes, but is not limited to, diluents, disintegrants, binders, lubricants, colorants or preservatives.
  • Capsules include hard capsules and soft capsules.
  • the pharmaceutical composition of the present invention can be administered by intravenous injection, intramuscular injection or subcutaneous injection. It is usually provided as a sterile aqueous solution or suspension or lyophilized powder, and adjusted to suitable pH and isotonicity.
  • the present invention also provides compounds of formula I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI or XII for the prevention and/or treatment of AKT protein kinase-mediated diseases. Or use in medicine for disease states.
  • the present invention also provides a method for preventing and/or treating a disease or disease state mediated by AKT protein kinase, which comprises administering the formula I, II, III, IV, V of the present invention to an individual in need , VI, VII, VIII, IX, X, XI or XII compound or the pharmaceutical composition of the present invention.
  • the present invention also provides the formula I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X of the present invention for preventing and/or treating diseases or disease states mediated by AKT protein kinase. , XI or XII compound or the pharmaceutical composition of the present invention.
  • diseases or disease states mediated by the AKT protein kinase include, but are not limited to, breast cancer, prostate cancer, or ovarian cancer.
  • the compound of the present invention has an inhibitory effect on AKT1, AKT2, and AKT3, especially has a significant inhibitory effect on AKT3, has a significant proliferation inhibitory effect on cancer cells, has good pharmacokinetic absorption, and has a significantly better oral absorption effect.
  • the present invention provides a method for preparing the compound of formula V, including but not limited to the following synthetic schemes:
  • R 2 , R 6 , R 8 , G, h, j are as defined above, P 1 is H or an amine protecting group, and P 2 is an amine protecting group;
  • the compound of formula 1-1 prepares the compound of formula 1-2 in the presence of a base (such as sodium methoxide) and a solvent (such as methanol).
  • a base such as sodium methoxide
  • a solvent such as methanol
  • the compound of formula 1-3 is prepared in the presence of, and the compound of formula 1-4 is prepared in the presence of a base (such as diisopropylethylamine) and a solvent (such as acetonitrile), and the compound of formula 1-4 is further produced into formula 1- 5
  • Compounds, compounds of formula 1-5 are reacted with compounds of formula 1-6 to prepare compounds of formula 1-7, compounds of formula 1-7 are removed from protecting groups to prepare compounds of formula 1-8, compounds of formula 1-8 are reacted with compounds of formula 1-9
  • synthesis scheme 1 further includes removing the amine protecting group.
  • R 2 , R 6 , R 8 , G, q, v, s, t, p are as defined above, P 1 is H or an amine protecting group, and P 2 is an amine protecting group;
  • the compound of formula 1-5 is prepared according to the synthesis scheme 1, the compound of formula 1-5 is reacted with the compound of formula 2-6 to prepare the compound of formula 2-7, and the protective group of the compound of formula 2-7 is removed to prepare the compound of formula 2-8, formula 2-8 The compound is reacted with the compound of formula 1-9 to prepare the compound of formula 2-10.
  • synthesis scheme 2 further includes removing the amine protecting group.
  • R 2 , R 6 , R 8 , G, h, j, and k are as defined above, P 1 is H or an amine protecting group, and P 2 is an amine protecting group;
  • the compound of formula 1-5 is prepared according to the synthesis scheme 1, the compound of formula 1-5 is reacted with the compound of formula 3-6 to prepare the compound of formula 3-7, and the protective group of the compound of formula 3-7 is removed to prepare the compound of formula 3-8, formula 3-8 The compound is reacted with the compound of formula 1-9 to prepare the compound of formula 3-10.
  • synthesis scheme 3 further includes removing the amine protecting group.
  • R 2 , R 6 , R 8 , e, and u are as described above, P 1 is H or an amine protecting group, and P 2 is an amine protecting group;
  • the compound of formula 1-5 is prepared in synthetic scheme 1.
  • the compound of formula 1-5 is reacted with the compound of formula 4-6 to prepare the compound of formula 4-7, the protective group of the compound of formula 4-7 is removed to prepare the compound of formula 4-8, the compound of formula 4-8
  • the compound of formula 4-10 is prepared by reacting with the compound of formula 1-9.
  • synthesis scheme 4 further includes removing the amine protecting group.
  • the present invention provides a method for preparing a compound of formula VIII, including but not limited to the following schemes:
  • R 2 , R 10 , R 8 , G, h, j are as defined above, P 1 is H or an amine protecting group, and P 2 is an amine protecting group;
  • R 2 , R 10 , R 8 , G, q, s, v, t, p are as defined above, P 1 is H or an amine protecting group, and P 2 is an amine protecting group;
  • the compound of formula 5-5 is prepared according to the synthesis scheme 5.
  • the compound of formula 5-5 is reacted with the compound of formula 2-6 to prepare the compound of formula 6-7, and the protective group of the compound of formula 6-7 is removed to prepare the compound of formula 6-8, formula 6-8
  • the compound is reacted with the compound of formula 1-9 to prepare the compound of formula 6-10; when P 1 is an amine protecting group, synthesis scheme 6 further includes a step of removing the protecting group.
  • R 2 , R 10 , R 8 , G, h, j, and k are as defined above, P 1 is H or an amine protecting group, and P 2 is an amine protecting group;
  • the compound of formula 5-5 is prepared according to the synthesis scheme 5.
  • the compound of formula 5-5 is reacted with the compound of formula 3-6 to prepare the compound of formula 7-7, and the protective group of the compound of formula 7-7 is removed to prepare the compound of formula 7-8, formula 7-8
  • the compound is reacted with the compound of formula 1-9 to prepare the compound of formula 7-10; when P 1 is an amine protecting group, synthesis scheme 7 further includes a step of removing the protecting group.
  • R 2 , R 10 , R 8 , G, e, u are as defined above, P 1 is H or an amine protecting group, and P 2 is an amine protecting group;
  • the compound of formula 5-5 is prepared according to the synthesis scheme 5.
  • the compound of formula 5-5 is reacted with the compound of formula 4-6 to prepare the compound of formula 8-7, and the protective group of the compound of formula 8-7 is removed to prepare the compound of formula 8-8.
  • the compound is reacted with the compound of formula 1-9 to prepare the compound of formula 8-10; when P 1 is an amine protecting group, synthesis scheme 8 further includes a step of removing the protecting group.
  • R 2 , R 6 , h, j, and G are as defined above, P 1 is H or an amine protecting group, and P 2 is an amine protecting group.
  • the compound formula 9-2 is prepared from the compound formula 9-1, the formula 9-2 is reacted with the compound formula 1-6 to prepare the compound formula 9-3, the formula 9-3 is reduced to produce the compound formula 9-4, and the formula 9-4 is produced
  • Compound formula 9-5 is prepared by ring reaction, and the protective group of formula 9-5 is removed to generate compound formula 9-6 or its salt, which is further reacted with compound formula 1-9 to prepare compound formula 9-7; when P 1 is an amine group
  • Synthetic Scheme 9 further includes the step of removing the protecting groups.
  • X is halogen
  • R 2 , R 6 , h, j, and G are as defined in claim 1, 3, 6 or 8
  • P 1 is H or an amine protecting group
  • P 2 is an amine protecting group.
  • Compound formula 9-2 is prepared from compound formula 9-1, compound formula 13-1 is prepared by reduction reaction of formula 9-2, compound formula 13-2 is prepared by cyclization reaction of formula 13-1, formula 13-2 and compound formula 1 -6 coupling reaction to prepare compound formula 9-5, formula 9-5 removes the protective group to produce compound formula 9-6 or its salt, and then further reacts with compound formula 1-9 to prepare compound formula 9-7; when P When 1 is an amine protecting group, synthetic scheme 9 further includes the step of removing the protecting group; optionally, compound formula 13-2 is prepared by chiral resolution to obtain stereoisomers, and the stereoisomers participate in subsequent reactions to prepare them. Optically pure compounds of formula 9-7.
  • R 2 , R 6 , q, v, s, t, p, G are as defined above, P 1 is H or an amine protecting group, and P 2 is an amine protecting group.
  • the compound formula 9-2 is prepared from the compound formula 9-1, the formula 9-2 is reacted with the compound formula 2-6 to prepare the compound formula 10-3, the formula 10-3 is reduced to produce the compound formula 10-4, and the formula 10-4 is produced
  • Compound formula 10-5 is prepared by ring reaction, and the protective group of formula 10-5 is removed to generate compound formula 10-6 or its salt, which is further reacted with compound formula 1-9 to prepare compound formula 10-7; when P 1 is an amine group
  • synthesis scheme 10 further includes the step of removing the protecting groups.
  • R 2 , R 6 , h, k, j, and G are as defined above, P 1 is H or an amine protecting group, and P 2 is an amine protecting group.
  • the compound formula 9-2 is prepared from the compound formula 9-1, the formula 9-2 is reacted with the compound formula 11-1 to prepare the compound formula 11-2, the formula 11-2 is reduced to produce the compound formula 11-3, and the formula 11-3 is produced
  • Compound formula 11-4 is prepared by ring reaction, and the protective group of formula 11-4 is removed to generate compound formula 11-5 or its salt, and then further reacted with compound formula 1-9 to prepare compound formula 11-6; when P 1 is an amine group
  • Synthesis Scheme 11 further includes the step of removing the protecting groups.
  • R 2 , R 6 , R 8 , h, k, j, and G are as defined above, P 1 is H or an amine protecting group, and P 2 is an amine protecting group.
  • Compound formula 12-1 is prepared by reacting compound formula 1-5 with compound 11-1, formula 12-1 is deprotected to prepare compound formula 12-2, and formula 12-2 is reacted with compound formula 1-9 to prepare compound formula 12- 3;
  • P 1 is an amine protecting group
  • Synthetic Scheme 12 further includes a step of removing the protecting group.
  • the compound and/or intermediate prepared by the above preparation method includes one or more C-H bonds substituted by C-D bonds.
  • Figure 1 is a schematic diagram of a single molecule of Example 15 Isomer 2;
  • Example 15 is a schematic diagram of the asymmetric structural unit of Example 15 Isomer 2 single crystal
  • Figure 3 is a schematic diagram of a single molecule of Example 34 Isomer 1;
  • Example 34 is a schematic diagram of the asymmetric structural unit of Example 34 Isomer 1 single crystal
  • Figure 5 is a schematic diagram of a single molecule of isomer 3 of Example 34;
  • Example 34 is a schematic diagram of asymmetric structural units of Example 34 Isomer 3 single crystal.
  • the "compound” in the present invention includes all stereoisomers and tautomers.
  • the compounds of the invention may be asymmetric, for example, have one or more stereoisomers. Unless otherwise specified, all stereoisomers include, for example, enantiomers and diastereomers.
  • the compound containing asymmetric carbon atoms of the present invention can be isolated in an optically pure form or a racemic form. The optically active pure form can be resolved from the racemic mixture or synthesized by using chiral raw materials or chiral reagents. The racemates, diastereomers, and enantiomers are all included in the scope of the present invention.
  • the compounds of the present invention also include tautomeric forms.
  • the tautomeric form is derived from the exchange of a single bond with an adjacent double bond accompanied by the migration of a proton.
  • deuterium denotes a single deuterium atom. It should be understood that the compounds disclosed in the present invention may be isotopically labeled. Substitution with isotopes such as deuterium may provide certain therapeutic advantages resulting from higher metabolic stability, such as increasing in vivo half-life or reducing dosage requirements, and therefore may be preferred in some cases. In addition, the deuterated compounds of the present disclosure have the same or even better Akt enzyme inhibitory activity. In the structure of the compound of the present disclosure, the hydrogen atom may be explicitly disclosed or understood as being present in the compound.
  • the hydrogen atom can be any isotope of hydrogen, including but not limited to: 1 H (protium) and 2 H (deuterium).
  • the deuterium substitution can be partial or complete, and partial deuterium substitution means that at least one hydrogen is replaced by at least one deuterium.
  • C1-C6 means that the group can have 1 carbon atom, 2 carbon atoms, 3 carbon atoms, 4 carbon atoms, 5 carbon atoms, or 6 carbon atoms;
  • C3-C6 is It means that the group can have 3 carbon atoms, 4 carbon atoms, 5 carbon atoms, or 6 carbon atoms.
  • substituted means that any one or more hydrogen atoms on a specific atom or group is replaced by a substituent, as long as the valence of the specific atom or group is normal and the substituted compound is stable.
  • type and number of substituents can be arbitrary on the basis that they can be chemically realized.
  • any variable such as R
  • its definition in each case is independent.
  • the group can optionally be substituted with up to 5 Rs, and R has independent options in each case.
  • combinations of substituents and/or variants thereof are only permitted if such combinations result in stable compounds.
  • alkyl refers to a saturated aliphatic hydrocarbon group, including straight or branched chain saturated hydrocarbon groups having the indicated number of carbon atoms.
  • C1-C6 alkyl includes C1 alkyl, C2 alkyl, C3 alkyl, C4 alkyl, C5 alkyl, C6 alkyl, examples include, but are not limited to, methyl, ethyl, n-propyl , Isopropyl, n-butyl, isobutyl, tert-butyl, n-pentyl, 2-pentyl, 3-pentyl, n-hexyl, 2-hexyl, 3-hexyl, etc. It can be divalent, such as methylene, ethylene.
  • alkoxy refers to a group having an alkyl-O- structure, and the alkyl group includes a linear or branched saturated monovalent hydrocarbon group.
  • C1-C3 alkoxy includes methoxy, ethoxy, n-propoxy, and isopropoxy.
  • C1-C4 alkanoyl includes C1 alkanoyl, C2 alkanoyl, C3 alkanoyl, and C4 alkanoyl.
  • Suitable alkanoyl groups include formyl, acetyl, n-propionyl, isopropionyl, n-butyryl, Isobutyryl, tert-butyryl.
  • deuterium substitution and “deuterium substitution” refer to the substitution of one or more CH bonds in a compound or group by CD bonds.
  • the deuterium substitution can be mono-, di-, multi- or full-substitution, such as the term "C1-C3 "Alkyl is deuterium substituted" means that one or more of the CH bonds in the C1-C3 alkyl are replaced by CD bonds, examples include, but are not limited to, CDH 2 , CD 2 H, CD 3 , CH 2 CDH 2 , CH 2 CD 2 H, CH 2 CD 3 , CDHCH 3 , CD 2 CH 3 , CD 2 CD 3 and so on.
  • the "deuteration” method adopts conventional methods in the art. For example, commercial deuterated intermediates can be used, for example, commercial deuterated intermediates can be used. Or introduce deuterium into the compound according to the method disclosed in the prior art.
  • halo refers to substitution by one or more halogen atoms, and examples of halogen atoms include fluorine atoms, chlorine atoms, bromine atoms, and iodine atoms.
  • halogenated C1-C3 alkoxy refers to C1-C3 alkoxy substituted by one or more halogen atoms, examples include, but are not limited to, OCF 3 , OCHF 2 , OCH 2 F, OCH 2 CF 3 , OCH 2 CHF 2 or OCF 2 CF 3 .
  • halogenated C1-C3 alkyl refers to C1-C3 alkyl substituted by one or more halogen atoms, examples include, but are not limited to, CF 3 , CHF 2 , CH 2 F, CH 2 CF 3 , CH 2 CHF 2 or CF 2 CF 3 .
  • cycloalkyl refers to a monocyclic saturated hydrocarbon system without heteroatoms or double bonds.
  • C3-C6 cycloalkyl include, but are not limited to, cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, and cyclohexyl.
  • aryl refers to an all-carbon monocyclic or fused polycyclic aromatic ring group with a conjugated ⁇ -electron system, which is obtained by removing one hydrogen atom from a single carbon atom of the parent aromatic ring system.
  • the aryl group may have 6-20 carbon atoms, 6-14 carbon atoms, or 6-10 carbon atoms.
  • heteroaryl refers to a monovalent aryl group containing at least one 5-, 6-, and 7-membered ring independently selected from nitrogen, oxygen, and sulfur heteroatoms, and includes a fused ring system of 5-10 atoms ( At least one of them is aromatic).
  • heteroaryl groups include, but are not limited to, pyridyl, thienyl, imidazolyl, pyrimidinyl, pyridyl, furyl, pyrazinyl, thiazolyl, quinolinyl, isoquinolinyl, indolyl, benzene Bisimidazolyl, imidazopyridyl, benzofuranyl, pyridazinyl, isoindolyl.
  • element refers to the number of skeletal atoms that make up the ring.
  • “5-10 membered” means that the number of backbone atoms constituting the ring is 5, 6, 7, 8, 9, or 10. Therefore, for example, pyridine, piperidine, piperazine, and benzene are six-membered rings, while thiophene and pyrrole are five-membered rings.
  • heterocyclic ring refers to a 5-12 membered saturated non-aromatic system having ring carbon atoms and 1 to 2 ring heteroatoms, where the heteroatoms are independently selected from nitrogen, sulfur, or oxygen atoms. In heterocyclic groups containing one or more nitrogen atoms, the point of attachment may be a carbon or nitrogen atom, as long as the valence allows.
  • the heterocyclic ring may be a monocyclic or polycyclic ring system, such as a bicyclic ring, in which two or more rings exist in the form of a fused ring, a bridged ring or a spiro ring, and at least one ring contains one or more heteroatoms.
  • the substituent R 12 may be bonded to any atom on the ring as long as the valence allows. Combinations of substituents and/or variants thereof are only permitted if such combinations result in stable compounds. Those skilled in the art can understand that for any group containing one or more R 12 substituents, any substitution or substitution pattern that is impossible to exist in space and/or cannot be synthesized will not be introduced.
  • amino protecting group refers to a protecting group suitable for preventing side reactions at the nitrogen position of an amino group.
  • amino protecting groups include, but are not limited to: Boc, DMB, benzyloxycarbonyl, 9-fluorenylmethyloxycarbonyl, benzyl, formyl, or acetyl.
  • pharmaceutically acceptable salt refers to a salt that retains the biological efficacy of the free acid and base of a specific compound without biological adverse effects.
  • acid including organic acid and inorganic acid
  • base addition salt including organic base and inorganic base
  • the pharmaceutically acceptable salt of the present invention can be synthesized from the parent compound containing acid or base by conventional chemical methods.
  • such salts are prepared by reacting these compounds in free acid or base form with a stoichiometric amount of appropriate base or acid in water or an organic solvent or a mixture of both.
  • an effective amount or “therapeutically effective amount” refers to a sufficient amount of a drug or medicament that is non-toxic but can achieve the desired effect.
  • pharmaceutically acceptable carrier refers to those carriers that have no obvious stimulating effect on the body and do not impair the biological activity and performance of the active compound. Including, but not limited to, any diluents, disintegrants, adhesives, glidants, and wetting agents approved by the State Food and Drug Administration that can be used for humans or animals.
  • PE Petroleum ether
  • HATU (2-(7-Azobenzotriazole)-N,N,N',N'-tetramethylurea hexafluorophosphate)
  • reaction conditions such as reactants, solvents, bases, amounts of compounds used, reaction temperature, reaction time, etc. are not limited to the following examples.
  • the compound of the present invention can also be conveniently prepared by combining various synthetic methods described in this specification or known in the art, and such a combination can be easily performed by a person skilled in the art.
  • Reaction conditions a) ethyl crotonate, sodium methoxide methanol solution (30% wt), methanol; b) formamidine acetate, sodium methoxide methanol solution (30% wt); c) phosphorus oxychloride, diisopropyl ethyl Amine, acetonitrile; d) ammonia (25-28% wt); e) tert-butyl piperazine-1-carboxylate; f) trifluoroacetic acid, dichloromethane; g) (S)-2-(4- Chlorophenyl)-3-(isopropylamino)propionic acid, 2-(7-benzotriazole oxide)-N,N,N',N'-tetramethylurea hexafluorophosphate, diiso Propyl ethylamine, dichloromethane.
  • Example 1 4-(4-((S)-2-(4-chlorophenyl)-3-(isopropylamino)propionyl)piperazin-1-yl)-5-methyl-5, 8-Dihydropyridine[2,3-d]pyrimidin-7(6H)-one
  • sodium methoxide methanol solution (30%wt) (8.16g) was added to methanol (400mL) at 20°C, then the temperature was raised to 70°C, and dimethyl malonate (24.64g) and crotonic acid The ethyl ester (21.08g) was mixed uniformly, added dropwise to the above-mentioned sodium methoxide methanol solution, and reacted at 70°C for 3 hours.
  • reaction solution was cooled to 0°C, poured into 200 mL ice water, adjusted to pH 7-8 with saturated sodium bicarbonate solution, extracted with ethyl acetate (50 mL ⁇ 3), combined the organic phases, and evaporated under reduced pressure
  • Reaction conditions a) methyl acrylate, sodium methoxide methanol solution (30% wt), methanol; b) formamidine acetate, sodium methoxide, methanol; c) phosphorus oxychloride, diisopropylethylamine, acetonitrile; d) Ammonia (25-28%wt); e) tert-butylpiperazine-1-carboxylate; f) trifluoroacetic acid, dichloromethane; g) (S)-2-(4-chlorophenyl)-3 -(Isopropylamino)propionic acid, 2-(7-benzotriazole oxide)-N,N,N',N'-tetramethylurea hexafluorophosphate, diisopropylethylamine, two Methyl chloride.
  • Reaction conditions a) ethyl crotonate, sodium methoxide methanol solution (30% wt), methanol; b) disodium hydrogen phosphate, deionized water, hydrochloric acid, lipolytic enzyme (Candida rugosa), sodium hydroxide ; C) Formamidine acetate, sodium methoxide, methanol; d) Phosphorus oxychloride, diisopropylethylamine, acetonitrile; e) Ammonia (25-28% wt).
  • reaction solution was cooled to 10°C, adjusted to pH 3-4 with 3M hydrochloric acid, 500mL ethyl acetate was added, filtered with suction, the filter cake was washed with ethyl acetate (600mL), separated, and saturated sodium bicarbonate aqueous solution (100mL ) Washing, liquid separation, and concentration of the organic phase to obtain 26.89 g of pale yellow liquid.
  • reaction solution was cooled to 0°C, 100 mL ethyl acetate was added, the pH was adjusted to 7-8 with saturated sodium bicarbonate solution, extracted with ethyl acetate (50 mL ⁇ 3), and the organic phase was evaporated under reduced pressure to obtain 13.89g of yellow solid was used directly in the next step.
  • Reaction conditions a) 2,5-diazabicyclo[2.2.1]heptane-2-carboxylic acid tert-butyl ester, 4-dimethylaminopyridine, N-methylpyrrolidone; b) hydrogen chloride/1,4- Dioxane (4.0M), dioxane; c) (S)-2-(4-chlorophenyl)-3-(isopropylamino)propionic acid, 2-(7-benzotrioxide) Nitrozole)-N,N,N',N'-tetramethylurea hexafluorophosphate, diisopropylethylamine, N,N-dimethylformamide.
  • Example 6 Prepared as described in Example 6, using hexahydropyrrolo[3,4-c]pyrrole-2(1H)-carboxylic acid tert-butyl ester instead of 2,5-diazabicyclo[2.2.1]heptane-2 -Tert-butyl carboxylate.
  • the final product is prepared and resolved to obtain cis-isomer and trans-isomer.
  • the product with a retention time of 8-10 min is collected as the cis isomer, and the product with a retention time of 11-13 min is collected as the trans isomer.
  • Cis isomer LC-MS (ESI) m/z: 497. (M+H).
  • Reaction conditions a) 2,5-diazabicyclo[4.1.0]heptane-2-carboxylic acid tert-butyl ester, N-methylpyrrolidone, 4-dimethylaminopyridine; b) hydrogen chloride/1,4- Dioxane (4.0M), dichloromethane; c) (S)-3-((tert-butoxycarbonyl)(isopropyl)amino)-2-(4-chlorophenyl)-propionic acid, 2 -(7-benzotriazole oxide)-N,N,N',N'-tetramethylurea hexafluorophosphate, 4-dimethylaminopyridine, N,N-dimethylformamide; d) Trifluoroacetic acid, dichloromethane.
  • Example 15 (R)-4-((1S,6R)-5-((S)-2-(4-chlorophenyl)-3-(isopropylamino)propionyl)-2,5- Diazabicyclo[4.1.0]heptan-2-yl)-5-methyl-5,8-dihydropyridine[2,3-d]pyrimidine-7(6H)-one or (R)-4 -((1R,6S)-5-((S)-2-(4-chlorophenyl)-3-(isopropylamino)propionyl)-2,5-diazabicyclo[4.1.0] Heptan-2-yl)-5-methyl-5,8-dihydropyridine[2,3-d]pyrimidin-7(6H)-one
  • High-performance liquid preparation conditions Column: Aglient 5 ⁇ m prep-C18 50 ⁇ 21.2mm, mobile phase A: water (containing 0.1% ammonia); mobile phase B: methanol. Gradient: time 0-10min, phase B 60-70% (volume ratio).
  • Reaction conditions a) 4,4,4-trifluorobut-2-enoic acid methyl ester, sodium methoxide methanol solution (30% wt); b) formamidine acetate, sodium methoxide methanol solution (30% wt); c) Phosphorus oxychloride, diisopropylethylamine, acetonitrile; d) ammonia (25-28% wt); e) tert-butylpiperazine-1-carboxylate; f) trifluoroacetic acid, dichloromethane; g )(S)-2-(4-chlorophenyl)-3-(isopropylamino)propionic acid, 2-(7-benzotriazole oxide)-N,N,N',N'-tetra Methylurea hexafluorophosphate, diisopropylethylamine, dichloromethane.
  • Example 16 4-(4-((S)-2-(4-chlorophenyl)-3-(isopropylamino)propionyl)piperazin-1-yl)-5-(trifluoromethyl )-5,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-7(6H)-one
  • Isomer separation Use supercritical fluid chromatography to perform chiral resolution of the above title compound to obtain isomer 1 and isomer 2.
  • Reaction conditions a) tert-butyl piperazine-1-carboxylate, N-methylpyrrolidone, 4-dimethylaminopyridine; b) dichloromethane, hydrogen chloride/1,4-dioxane solution (4.0M ); c) Diisopropylethylamine, N,N-dimethylformamide, 2-(7-benzotriazole oxide)-N,N,N',N'-tetramethylurea hexafluoro Phosphate, 1-(tert-butoxycarbonyl)-4-(4-chlorophenyl)piperidine-4-carboxylic acid; d) dichloromethane, hydrogen chloride/1,4-dioxane solution (4.0M ).
  • reaction solution was poured into ethyl acetate (20mL) and washed with water (5mL*3).
  • the organic phase was evaporated under reduced pressure to obtain a crude product.
  • Reaction conditions a) methyl methacrylate, sodium methoxide, methanol; b) formamidine acetate, sodium methoxide, methanol; c) phosphorus oxychloride, diisopropylethylamine, acetonitrile; d) ammonia (25-28 %Wt); e) tert-butylpiperazine-1-carboxylate, N,N-dimethylpyridine-4-amine, N-methylpyrrolidone; f) hydrogen chloride/1,4-dioxane solution (4.0M); g) (S)-3-((tert-butoxycarbonyl)(isopropyl)amino)-2-(4-chlorophenyl)propionic acid, diisopropylethylamine, 2-( 7-oxybenzotriazole)-N,N,N',N'-tetramethylurea hexafluorophosphate, N,N-dimethyl
  • Example 19 4-(4-((S)-2-(4-chlorophenyl)-3-(isopropylamino)propyl)piperazin-1-yl)-6-methyl-5,8 -Dihydropyridine[2,3-d]pyrimidine-7(6H)-one hydrochloride
  • 6-Methyl-4-(piperazin-1-yl)-5,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidine-7(6H)-one (0.1g) is dissolved at 20°C Add (S)-3-((tert-butoxycarbonyl)(isopropyl)amino)-2-(4-chlorophenyl)propionic acid (0.17g) to the N,N-dimethylformamide (10mL) ), diisopropylethylamine (0.16 g). The reaction mixture was stirred for 2 min.
  • Reaction conditions a) ethyl bromoacetate, sodium hydride, tetrabutylammonium iodide, tetrahydrofuran; b) 2,4 dimethoxybenzylamine, triethylamine, isopropanol; c) methyl iodide, sodium hydride , N, N dimethylformamide; d) trifluoroacetic acid; e) tert-butyl piperazine-1-carboxylate, 4-dimethylaminopyridine, N-methylpyrrolidone; f) hydrogen chloride/1,4 -Dioxane solution (4.0M); g)(S)-3-((tert-butoxycarbonyl)(isopropyl)amino)-2-(4-chlorophenyl)propionic acid, diisopropyl Ethylamine, 2-(7-benzotriazole oxide)-N,N,N',N'-t
  • Example 22 4-((S)-4-((S)-2-(4-chlorophenyl)-3-(isopropylamino)propionyl)-3-methylpiperazin-1-yl )-5-methyl-5,8-dihydropteridine-7(6H)-one
  • Reagents a) ammonia (25%-28%wt), tetrahydrofuran; b) acetonitrile, tert-butylpiperazine-1-carboxylate, N,N-diisopropylethylamine; c) sodium borohydride, Methanol, saturated aqueous ammonium chloride solution; d) trichloromethyl carbonate, N,N-diisopropylethylamine, tetrahydrofuran; e) dichloromethane, hydrogen chloride/1,4-dioxane solution (4.0M ); f) (S)-3-((tert-butoxycarbonyl)(isopropyl)amino)-2-(4-chlorophenyl)propionic acid, N,N-diisopropylethylamine, N ,N-dimethylformamide, 2-(7-azobenzotriazole)-N,N,N',N'-
  • Reaction conditions a) dimethyl tert-butyl (2-iodoethoxy) silane, sodium hydride, N,N-dimethylformamide; b) 3,8-diazabicyclo[3.2.1]octane Tert-butyl alkane-8-carboxylate, 4-dimethylaminopyridine, N-methylpyrrolidone; c) hydrogen chloride in dioxane solution; d) (S)-3-((tert-butoxycarbonyl)(isopropyl )Amino)-2-(4-chlorophenyl)propionic acid, diisopropylethylamine, 2-(7-benzotriazole oxide)-N,N,N',N'-tetramethylurea Hexafluorophosphate, N,N dimethylformamide; e) Trifluoroacetic acid, dichloromethane.
  • the organic phase was washed with saturated sodium chloride solution (100 mL*3), dried with anhydrous sodium sulfate, and spin-dried.
  • the reaction solution was poured into water (100 mL), and ethyl acetate (100 mL) was added for extraction.
  • the organic phase was washed with saturated sodium chloride solution (100 mL*3), dried with anhydrous sodium sulfate, and spin-dried.
  • Trifluoroacetic acid (3 mL) was added to the product of step d) (40 mg) at 20°C. The reaction mixture was stirred at 60°C for 3 hours. The reaction solution was spin-dried, NaHCO 3 was added and stirred for 20 min, and a nearly white solid (10 mg) was obtained by filtration. LCMS (ESI) m/z: 528 (M+H).
  • the compound 34-3 was resolved by SFC chiral column to obtain the desired target products compound 34-4a and compound 34-4b.
  • step e The product (3.2 g) of step e) was dissolved in HCl/i-PrOH (10 mL), and stirred at room temperature for 2 h. After the reaction was completed, it was concentrated to obtain a crude product, which was used directly in the next step without purification.
  • step g) The product of step g) (7.2g) was dissolved in MeOH (25mL), then HCl/dioxane (70mL) was added, the reaction solution was stirred at room temperature for 2h, and then the reaction solution was concentrated to obtain a red oily crude product, which was then dissolved in MeOH ( 20 mL) and dissociated with Na 2 CO 3 and concentrated to obtain 6 g of crude product.
  • the compound 34-8a was resolved by SFC chiral column to prepare isomer 1 and isomer 4.
  • the oxalate single crystal of isomer 3 was prepared according to the method described in the preparation of single crystal of isomer 1 above.
  • Reaction conditions a) (2,4-dimethoxyphenyl) methylamine, triethylamine, tetrahydrofuran; b) 4,6-dichloropyrimidin-5-amine, triethylamine, isopropanol; c) Methyl iodide, sodium hydride, N,N-dimethylformamide; d) tert-butylpiperazine-1-carboxylate, 4-dimethylaminopyridine, N-methylpyrrolidone; e) dioxane hydrogen chloride Solution; f) (S)-3-((tert-butoxycarbonyl)(isopropyl)amino)-2-(4-chlorophenyl)propionic acid, diisopropylethylamine, 2-(7-oxidation Benzotriazole)-N,N,N',N'-tetramethylurea hexafluorophosphate, N,N dimethylformamide
  • Reaction conditions a) 2,4-dimethoxybenzylamine, N,N-diisopropylethylamine, acetonitrile; b) tetrahydrofuran, potassium carbonate, methyl 2-chloro-2-oxoacetate; c) N,N-diisopropylethylamine, ethanol; d) 3,8-diazabicyclo[3.2.1]octane-8-tert-butyl carboxylate, N,N-diisopropylethylamine, Acetonitrile; e) N,N-dimethylformamide, potassium carbonate, methyl iodide; f) trifluoroacetic acid; g) (S)-3-((tert-butoxycarbonyl)(isopropyl)amino)- 2-(4-chlorophenyl)propionic acid, N,N-diisopropylethylamine, N,N-dimethyl
  • the crude product was dissolved in ethyl acetate (30 mL), adjusted to pH 3-4 with dilute hydrochloric acid, washed with water to pH 5-6, and concentrated to obtain the crude product.
  • reaction solution was poured into 30mL saturated ammonium chloride solution, separated, washed with 120mL saturated brine, the organic phase was dried and concentrated A crude product was obtained.
  • reaction solution was poured into 50 mL of water, extracted with ethyl acetate (20 mL*2), and washed with saturated brine (10 mL*3), the organic phase was dried and concentrated to obtain a crude product.
  • Reaction conditions a) tert-butylamine, N,N-dimethylformamide; b) 2-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl) Ethyl cyclopropane formate, palladium acetate, tricyclohexylphosphine, potassium carbonate, toluene, water; c) sulfuric acid, dichloromethane; d) triethylamine, ethanol; e) 3,8-diazabicyclo[3.2.
  • the organic phase was washed with saturated sodium chloride solution (100 mL*3), dried with anhydrous sodium sulfate, and spin-dried.
  • isomer 2 was prepared from isomer 2a.
  • Reaction conditions a) tert-butyl piperazine-1-carboxylate-2,2,3,3,5,5,6,6-d 8 ,4-dimethylaminopyridine, N-methylpyrrolidone; b) Hydrogen chloride/dioxane solution (4.0M), dioxane; c) (S)-3-((tert-butoxycarbonyl)(isopropyl)amino)-2-(4-chlorophenyl)propane Acid, 2-(7-benzotriazole oxide)-N,N,N',N'-tetramethylurea hexafluorophosphate, 4-dimethylaminopyridine, N,N-dimethylformamide D) Hydrogen chloride/dioxane solution (4.0M), dioxane.
  • reaction solution was poured into 30mL of water, extracted with ethyl acetate (20mL*2), washed with 15mL of saturated brine, and the organic phase was dried and concentrated to obtain a crude product.
  • Reaction conditions a) tert-butyl piperazine-1-carboxylate-2,2,3,3,5,5,6,6-d 8 , N,N-diisopropylethylamine, acetonitrile; b) Hydrogen chloride/dioxane solution (4.0M), dichloromethane; c) (S)-3-((tert-butoxycarbonyl)(isopropyl)amino)-2-(4-chlorophenyl)propionic acid , 2-(7-benzotriazole oxide)-N,N,N',N'-tetramethylurea hexafluorophosphate, N,N-diisopropylethylamine, N,N-dimethyl Carboxamide; d) Hydrogen chloride/dioxane solution (4.0M), dichloromethane.
  • the main reagents included in the HTRF kinEASE TK kit (article number #62TKOPEC, Cisbio)
  • AKT1 (article number #01-101, Carna)
  • AKT2 (article number #01-102, Carna)
  • AKT3 (article number #PV3185, Invitrogen)
  • Table 1 The components and concentration table of the kinase reaction system
  • 1mL Kinase AKT1, 2, 3 1x Kinase Reaction Buffer contains 200 ⁇ L 5x Kinase Reaction Buffer, 5 ⁇ L 1M MgCl 2 , 1 ⁇ L 1M DTT, 794 ⁇ L ultrapure water.
  • the concentration used in enzyme screening is shown in Table 1.
  • the compound stock solution (10 mM DMSO solution) was diluted to 100 ⁇ M compound solution with DMSO, and then diluted to 2.5 ⁇ M compound working solution (containing 2.5% DMSO) with 1-fold kinase reaction buffer.
  • Use 1x kinase reaction buffer to prepare 2.5% DMSO solution then use 2.5% DMSO solution to dilute 2.5 ⁇ M compound working solution, 4-fold dilution ratio 7 times, a total of 8 concentrations (2500nM, 625nM, 156nM, 39nM, 9.8 nM, 2.4nM, 0.6nM, 0.15nM) compound working solution.
  • 4 ⁇ L of the diluted compound working solution was added to all reaction wells, and 4 ⁇ L of the previously prepared 2.5% DMSO/kinase buffer solution was added to the control wells.
  • Inhibition rate (ER positive control- ER sample ) / (ER positive control- ER negative control ) * 100%
  • ATP1 is diluted from 10mM to 130 ⁇ M (5 ⁇ ), the final concentration is 26 ⁇ M;
  • ATP2 is diluted from 10mM to 200 ⁇ M (5 ⁇ ), the final concentration is 40 ⁇ M;
  • ATP3 is diluted from 10mM to 165 ⁇ M (5 ⁇ ) ), the final concentration is 33 ⁇ M;
  • STK-Biotin-labeled substrate 3 STK Substrate 3-biotin is diluted from 50 ⁇ M to 5 ⁇ M (5 ⁇ ), and the final concentration is 1 ⁇ M; each ATP is mixed with the same volume of the substrate, using BioTek Add 4 ⁇ L of automatic dispenser to each well;
  • the compound was formulated into a 10 mg/mL stock solution with DMSO.
  • mice mouse, strain ICR, source: Weitong Lihua Laboratory Animal Technology Co., Ltd., age: 6-10 weeks, male.
  • the experimental animals are kept in the animal room of Suzhou Shengsu New Pharmaceutical Development Co., Ltd.
  • the animal room is well ventilated and equipped with air-conditioning.
  • the temperature is kept at 20-25°C and the humidity is kept at 40%-70%.
  • Bright and dark lighting for 12 hours each, the experimental animals eat and drink freely.
  • mice with good physical signs can be selected for this experiment.
  • Each mouse is marked with a tail number.
  • the animal experiment protocol is shown in Table 4.
  • mice On the day before the experiment, the mice were fasted overnight and were allowed to drink freely. They were fed 4 hours after the administration.
  • mice in groups A to E were intragastrically administered 10 mg ⁇ kg -1 of the administration solution of Example 10, Example 21, GDC-0068, Example 15 Isomer 2, Example 34 Isomer 4, respectively.
  • mice in groups A to E were intragastrically administered 10 mg ⁇ kg -1 of the administration solution of Example 10, Example 21, GDC-0068, Example 15 Isomer 2, Example 34 Isomer 4, respectively.
  • about 100 ⁇ L of blood was collected from the orbit of the mouse at each time point and placed in an EDTA-K 2 anticoagulant tube. Centrifuge the whole blood sample at 5,500 rpm for 10 min, and store the separated plasma in a refrigerator at -40 to -20°C for biological sample analysis.
  • An LC-MS/MS analytical method for determining the concentration of compounds in mouse plasma was established and used to determine the concentration of compounds in the biological samples obtained in this experiment.
  • the non-compartmental model in Pharsight Phoenix 7.0 was used to calculate the pharmacokinetic parameters.

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Abstract

本公开涉及氘代AKT激酶抑制剂，具体地，涉及式I所示的化合物，或其药学上可接受的盐。本发明还提供了其制备方法，以及用于预防和/或治疗AKT蛋白激酶介导的疾病的用途。

Description

氘代AKT激酶抑制剂
本申请要求于2020年05月15日向中华人民共和国知识产权局提交的申请号为2020104153124的中国发明专利申请的优先权。在此通过引用方式将其全部内容以其整体并入本文。
技术领域
本发明属于药物化学领域，具体涉及氘代AKT激酶抑制剂、其制备方法以及医药用途。
背景技术
磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)及其下游蛋白AKT(又称蛋白激酶B，PKB)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)组成的PI3K/AKT/mTOR通路作为细胞内非常重要的信号转导途径，在细胞的生长、存活、增殖、凋亡、血管生成、自吞噬等过程中发挥着极其重要的生物学功能。该通路的异常激活会引起一系列的疾病，包括癌症、神经病变、自身免疫性疾病和血液淋巴***疾病。
AKT，是一类丝氨酸/苏氨酸激酶，通过下游众多效应器影响细胞存活、生长、代谢、增殖、迁移和分化。超过50％的人类肿瘤存在AKT过度活化的现象，尤以***癌、胰腺癌、膀胱癌、卵巢癌、乳腺癌为主。AKT过活化可导致肿瘤发生、转移以及耐药性产生。
AKT具有三种亚型：AKT1、AKT2和AKT3。作为典型的蛋白激酶，每种亚型均由氨基末端的PH结构域(Pleckstrin homology domain)、中部结合ATP的激酶结构域以及羧基末端的调节结构域组成。3种亚型约80％的氨基酸序列同源，仅在PH结构域和激酶结构域连接区变化较大。
目前，针对PI3K/AKT/mTOR信号通路的靶向药物主要是PI3K抑制剂和mTOR抑制剂，而AKT处于该信号转导通路的核心部位。抑制AKT活性既可避免抑制上游PI3K造成的严重副作用，也可避免抑制下游mTOR引起的负反馈机制影响药效。因此，寻找有效和选择性的AKT抑制剂是当前肿瘤靶向药物研发的重要方向。CN101631778A公开了一类环戊二烯并[D]嘧啶衍生物，CN101578273A公开了一类羟基化和甲氧基化的环戊二烯并[D]嘧啶衍生物，CN101511842A公开了一类二氢呋喃并嘧啶衍生物，CN101970415A公开了一类5H-环戊二烯并[d]嘧啶衍生物，这些化合物具有小于10μM的抑制AKT1的IC 50。
发明内容
一方面，本发明提供了式I所示的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure PCTCN2021093813-appb-000001
其中：
R 1选自H、OH、卤素、CN、NH 2、NO 2或任选地被卤素或OH取代的C1-C6烷基；
R 2、R 3各自独立地选自H、C 1-C 6烷基、C 3-C 6环烷基、(C 3-C 6环烷基)-(CH 2)-、(C 3-C 6环烷基)-(CH 2CH 2)-、苯甲基、苯乙基、吡咯烷基、四氢呋喃基或四氢吡喃基，其中所述的C 1-C 6烷基、C 3-C 6环烷基、(C 3-C 6环烷基)-(CH 2)-或(C 3-C 6环烷基)-(CH 2CH 2)-任选地被卤素、OH、CN、NH 2或C 1-C 3烷氧基取代，所述的苯甲基或苯乙基任选地被卤素、OH、CN、NO 2、NH 2、C 1-C 3烷氧基、卤代C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3烷基或卤代C 1-C 3烷基取代，所述的吡咯烷基、四氢呋喃基或四氢吡喃基任选地被卤素、OH、C 1-C 3烷基、环丙基甲基或C 1-C 4烷酰基取代；
或R 1、R 2和与它们相连的原子一起形成4-7元含氮杂环；
m、n各自独立地选自0、1、2或3；
R 4、R 5均为氢或R 4、R 5一起形成＝O；
Figure PCTCN2021093813-appb-000002
选自：
Figure PCTCN2021093813-appb-000003
R 6、R 7、R 8、R 9各自独立地选自H、CN、C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基，其中所述的C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基任选地被卤素、OH、CN或C 1-C 3烷氧基取代；
R 10选自H或C 1-C 6烷基，其中所述的C 1-C 6烷基任选地被卤素、OH、CN或C 1-C 3烷氧基取代；
L为任选被取代的包含1-2个氮原子的5-12元饱和杂环；
G是任选被1-5个R 11取代的6-10元芳基或5-10元杂芳基；
R 11独立地选自卤素、OH、CN、NH 2、NO 2、苄氧基、-NH(C 1-C 6烷基)、-N(C 1-C 6烷基) 2、-C(＝O)NH 2、-C(＝O)NH(C 1-C 6烷基)、-C(＝O)N(C 1-C 6烷基) 2、-SO 2(C 1-C 6烷基)、C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基，其中所述的C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基任选地被卤素取代；
条件是：当R 1、R 2和与它们相连的原子一起形成4-7元含氮杂环时，R 1、R 2均不为H；
并且，其中，本公开所述化合物有一个或多个C-H键被C-D键取代。
在一些典型的实施方案中，所述化合物中至少在L上有一个或多个C-H键被C-D键取代。
在一些典型的实施方案中，所述化合物中在L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代。
在一些实施方案中，R 1选自H、OH或任选地被卤素或OH取代的C 1-C 6烷基；在一些典型的实施方案中，R 1选自H、OH、Me、CF 3或CH 2OH；在一些更典型的实施方案中，R 1选自H或OH；在一些最典型的实施方案中，R 1选自H。
在一些实施方案中，R 2和R 3各自独立地选自H、C1-C6烷基、C 3-C 6环烷基、(C 3-C 6环烷基)-(CH 2)-、(C 3-C 6环烷基)-(CH 2CH 2)-、苯甲基、苯乙基、吡咯烷基或四氢吡喃基，其中所述的C 1-C 6烷基、C 3-C 6环烷基、(C 3-C 6环烷基)-(CH 2)-或(C 3-C 6环烷基)-(CH 2CH 2)-任选地被F、Cl、Br、I、OH、CN、NH 2或C1-C3烷氧基取代，所述的苯甲基或苯乙基任选地被F、Cl、Br、I、OH、OMe、CF 3或Me取代，所述的吡咯烷基或四氢吡喃基任选地被F、Cl、Br、I、OH、C1-C3烷基、环丙基甲基或C1-C4烷酰基取代。
在一些实施方案中，R 2和R 3各自独立地选自H、甲基、乙基、异丙基、异丁基、叔丁基、3-戊基、CH 2OH、CH 2CH 2OH、CH 2CH 2OMe、CF 3、CH 2CF 3、CH 2CHF 2、CH 2CH 2F、环丙基、环戊基、环己基、环丙基-(CH 2)-、环戊基-(CH 2)-、环己基-(CH 2)-、环丙基-(CH 2CH 2)-、环戊基-(CH 2CH 2)-、苯甲基、4-氟苯甲基、4-氯苯甲基、4-氟苯乙基、4-氯苯乙基或四氢吡喃-4-基。
在一些典型的实施方案中，R 2和R 3各自独立地选自H、甲基、乙基、异丙基、环丙基、环己基、环丙基-(CH 2)-、环己基-(CH 2)-或四氢吡喃-4-基。
在一些更为典型的实施方案中，R 2和R 3各自独立地选自H、异丙基或环丙基。
在一些实施方案中，R 2为H。
在一些实施方案中，R 3为异丙基或环丙基。
在一些实施方案中，R 2为H且R 3为异丙基或环丙基
在一些实施方案中，R 1、R 2和与它们相连的原子一起形成：：
Figure PCTCN2021093813-appb-000004
其中，R 3的定义如上文。
在一些典型的实施方案中，R 1、R 2和与它们相连的原子一起形成：
Figure PCTCN2021093813-appb-000005
其中，R 3的定义如上文。
在一些实施方案中，m为0、1或2；在一些典型的实施方案中，m为0或1；在一些更典型的实施方案中，m为1。
在一些实施方案中，n为0、1或2；在一些典型的实施方案中，n为0或1；在一些更典型的实施方案中，n为0。
在一些实施方案中，R 4、R 5均为氢。
在一些实施方案中，R 4、R 5一起形成＝O。
在一些实施方案中，
Figure PCTCN2021093813-appb-000006
选自：
Figure PCTCN2021093813-appb-000007
在一些实施方案中，
Figure PCTCN2021093813-appb-000008
选自：
Figure PCTCN2021093813-appb-000009
在一些实施方案中，
Figure PCTCN2021093813-appb-000010
选自：
Figure PCTCN2021093813-appb-000011
在一些实施方案中，
Figure PCTCN2021093813-appb-000012
为
Figure PCTCN2021093813-appb-000013
且R 4和R 5一起形成＝O。
在一些实施方案中，
Figure PCTCN2021093813-appb-000014
为
Figure PCTCN2021093813-appb-000015
且R 4和R 5一起形成＝O。
在一些实施方案中，
Figure PCTCN2021093813-appb-000016
为
Figure PCTCN2021093813-appb-000017
且R 4和R 5一起形成＝O。
在一些实施方案中，
Figure PCTCN2021093813-appb-000018
为
Figure PCTCN2021093813-appb-000019
且R 4和R 5一起形成＝O。
在一些实施方案中，
Figure PCTCN2021093813-appb-000020
为
Figure PCTCN2021093813-appb-000021
且R 4和R 5均为H。
在一些实施方案中，
Figure PCTCN2021093813-appb-000022
为
Figure PCTCN2021093813-appb-000023
且R 4和R 5一起形成＝O。
在一些实施方案中，R 6、R 7、R 8、R 9各自独立地选自H、CN、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基，其中所述的C1-C6烷基或C1-C6烷氧基任选地被F、Cl、Br、I、OH、CN或OMe取代。
在一些实施方案中，R 6、R 7、R 8、R 9各自独立地选自H、CN、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基，其中所述的C1-C6烷基或C1-C6烷氧基任选地被F、CN或OH取代。
在一些实施方案中，R 6、R 7、R 8、R 9各自独立地选自H、CN、甲基、乙基、丙基、异丙基、CF 3、CH 2CF 3、CH 2CHF 2、CH 2CH 2F、CH 2CN、CH 2CH 2CN、CH 2OH、CH 2CH 2OH、OMe、OEt、OCH 2CH 2CH 3或异丙氧基。
在一些实施方案中，R 6为H、CN、甲基、乙基、丙基、异丙基、CF 3、CH 2CF 3、CH 2CHF 2、CH 2CH 2F、CH 2CN、CH 2CH 2CN、CH 2OH、CH 2CH 2OH、OMe、OEt、OCH 2CH 2CH 3或异丙氧基；在一些典型的实施方案中，R 6为H、CN、甲基、乙基、异丙基、CF 3、CH 2CH 2OH、OMe或OEt；在一些更典型的实施方案中，R 6为H、CN、甲基、CF 3或OMe；在一些更为典型的实施方案中，R 6为CN、甲基、CF 3或OMe；在一些更为典型的实施方案中，R 6为H、CN或甲基；在一些更为典型的实施方案中，R 6为H、CF 3或甲基；在一些更为典型的实施方案中，R 6为甲基或CF 3。
在一些实施方案中，R 7为H。
在一些实施方案中，R 8为H、CN、甲基、乙基、丙基、异丙基、CF 3、CH 2CF 3、CH 2CHF 2、CH 2CH 2F、CH 2CN、CH 2CH 2CN、CH 2OH、CH 2CH 2OH、OMe、OEt、OCH 2CH 2CH 3或异丙氧基；在一些典型的实施方案中，R 8为H、CN、甲基、乙基、异丙基、CF 3、CH 2CH 2OH、OMe或OEt；在一些更为典型的实施方案中，R 8为H、CN或甲基；在一些更典型的实施方案中，R 8为H或CN；在一些更典型的实施方案中，R 8为H或甲基；在一些更为典型的实施方案中，R 8为H。
在一些实施方案中，R 9为H。
在一些实施方案中，R 10选自H或C1-C6烷基，其中所述的C1-C6烷基任选地被卤素、OH或CN取代；在一些实施方案中，R 10为H、甲基、乙基、丙基、异丙基、CF 3、CH 2CF 3、CH 2CHF 2、CH 2CH 2F、CH 2CN、CH 2CH 2CN、CH 2OH或CH 2CH 2OH；在一些典型的实施方案中，R 10为甲基、乙基、异丙基、CH 2CF 3、CH 2CHF 2、CH 2CN或CH 2CH 2OH；在一些更为典型的实施方案中，R 10为甲基、乙基、CH 2CN、或CH 2CH 2OH；在一些更为典型的实施方案中，R 10为甲基。
在一些实施方案中，L是任选被一个或多个R 12取代的下列基团，且L上有一个或多个C-H键被C-D键取代。
在一些典型的实施方案中，所述L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代：
Figure PCTCN2021093813-appb-000024
其中：
单波线是L连接至羰基的位置，且双波线是L连接至嘧啶的位置；
R 12选自卤素、OH、CN、乙烯基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基，其中所述的C1-C6烷基或C1-C6烷氧基任选地被卤素或OH取代；
h选自0、1、2、3或4；
j选自0、1、2或3；
k选自1、2、3或4；
q、s、v、t各自独立地选自0、1或2，且q、s、v、t不同时为0；
p选自0、1、2或3；
e选自0、1或2；
u选自1、2或3；
W、Z各自独立地选自N或C，且W、Z至少一个为N。
在一些实施方案中，R 12选自F、Cl、Br、I、OH、CN、乙烯基、甲基、乙基、丙基、异丙基、CF 3、CH 2CF 3、CH 2CHF 2、CH 2CH 2F、OMe、OEt、CH 2OH、CH 2CH 2OH、OCH 2OH或OCH 2CH 2OH；在一些典型的实施方案中，R 12选自甲基、乙基、异丙基、CF 3、CH 2CF 3、OMe、OEt、CH 2OH或OCH 2OH；在一些更为典型的实施方案中，R 12选自甲基、乙基或CF 3；在一些更为典型的实施方案中，R 12选自甲基。
在一些实施方案中，h为0、1、2或3且j为0、1或2；在一些典型的实施方案中，h为0、1或2且j为0或1；在一些更典型的实施方案中，h为0或1且j为0；在一些更典型的实施方案中，h为1且j为0。
在一些实施方案中，k为1、2或3；在一些典型的实施方案中，k为1或3；在一些更为典型的实施方案中，k为1。
在一些实施方案中，q、s、v、t各自独立地为0或1，且q、s、v、t不同时为0；在一些典型的实施方案中，q、s、v、t均为1；在一些更典型的实施方案中，q、s均为0，且v、t均为1；在一些更典型的实施方案中，q、s均为1，且v、t均为0；在一些更典型的实施方案中，s、v均为0，且q、t均为1。
在一些实施方案中，p为0、1或2；在一些典型的实施方案中，p为0或2；在一些更为典型的实施方案中，p为2。
在一些实施方案中，e为0或1，且u为1或2；在一些典型的实施方案中，e为0或1，且u为1；在一些更为典型的实施方案中，e为0，且u为1。
在一些实施方案中，W为C，且Z为N；在一些典型的实施方案中，W为N，且Z为C；在一些更典型的实施方案中，W、Z均为N。
在一些更为典型的实施方案中，L是任选被一个或多个R 12取代的下列基团，且L上有一个或多个C-H键被C-D键取代，优选地，所述L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代：
Figure PCTCN2021093813-appb-000025
Figure PCTCN2021093813-appb-000026
其中，R 12的定义同上文。
在一些更为典型的实施方案中，L是任选被一个或多个R 12取代的下列基团，且L上有一个或多个C-H键被C-D键取代，优选地，所述L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代：
Figure PCTCN2021093813-appb-000027
其中，R 12的定义同上文。
在一些更为典型的实施方案中，L选自下列基团，且L上有一个或多个C-H键被C-D键取代，优选地，所述L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代：
Figure PCTCN2021093813-appb-000028
在一些更为典型的实施方案中，L选自下列基团，且L上有一个或多个C-H键被C-D键取代，优选地，所述L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代：
Figure PCTCN2021093813-appb-000029
在一些更为典型的实施方案中，L选自下列基团，且L上有一个或多个C-H键被C-D键取代，优选地，所述L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代：
Figure PCTCN2021093813-appb-000030
在一些更为典型的实施方案中，L为
Figure PCTCN2021093813-appb-000031
且L上有一个或多个C-H键被C-D键取代，优选地，所述L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代；
在一些最为典型的实施方案中，L为
Figure PCTCN2021093813-appb-000032
且L上有一个或多个C-H键被C-D键取代，优选地，所 述L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代。
在一些实施方案中，L选自
Figure PCTCN2021093813-appb-000033
在一些更为典型的实施方案中，L为：
Figure PCTCN2021093813-appb-000034
在一些实施方案中，G是任选被1-5个R 11取代的苯基或任选被1个或多个R 11取代的噻吩基或吡啶基。
在一些实施方案中，R 11独立地选自F、Cl、Br、I、OH、CN、NH 2、NO 2、苄氧基、甲基、乙基、异丙基、CH 2CF 3、CF 3、SMe、OMe、OCF 3、OEt或异丙氧基；在一些典型的实施方案中，R 11独立地选自F、Cl、Br、CN、苄氧基、甲基、乙基、异丙基、CF 3、OMe、SMe或OCF 3；在一些更为典型的实施方案中，R 11独立地选自F、Cl或CF 3；在一些更为典型的实施方案中，R 11为Cl。
在一些实施方案中，G是苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、4-氟苯基、4-溴苯基、4-甲基苯基、4-乙基苯基、4-异丙基苯基、4-三氟甲基苯基、4-氰基苯基、4-甲氧基苯基、4-甲硫基苯基、4-三氟甲氧基苯基、4-氯-3-氟苯基、3,4-二氟苯基、2,4-二氯苯基或4-苄氧基苯基；在一些典型的实施方案中，G是4-氯苯基、4-氯-3-氟苯基、4-三氟甲基苯基或3,4-二氟苯基；在一些更为典型的实施方案中，G是4-氯苯基。
在一些实施方案中，G是任选被一个或多个卤素取代的噻吩基或吡啶基；在一些更典型的实施方案中，G是任选被一个或多个F、Cl、Br或I取代的噻吩或吡啶基；在一些更典型的实施方案中，G是：
Figure PCTCN2021093813-appb-000035
另一方面，本发明提供了式II所示的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure PCTCN2021093813-appb-000036
其中，R 1、R 2、R 4、R 5、G、L、m和
Figure PCTCN2021093813-appb-000037
的定义同式I化合物，其中，所述化合物有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中至少在L上有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中在L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代。
另一方面，本发明提供了式III所示的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure PCTCN2021093813-appb-000038
其中，R 2、R 4、R 5、G、L和
Figure PCTCN2021093813-appb-000039
的定义同式I化合物，其中，所述化合物有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中至少在L上有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中在L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代。
另一方面，本发明提供了式IV所示的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure PCTCN2021093813-appb-000040
其中，R 2、G、L和
Figure PCTCN2021093813-appb-000041
的定义同式I化合物，其中，所述化合物有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中至少在L上有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中在L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代。
另一方面，本发明提供了式V所示的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure PCTCN2021093813-appb-000042
其中，R 2、R 6、R 8、G和L的定义同式I化合物，其中，所述化合物有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中至少在L上有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中在L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代。
另一方面，本发明提供了式VI所示的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure PCTCN2021093813-appb-000043
其中，R 2、R 6、R 8、R 11和L的定义同式I化合物，d选自0、1、2、3、4或5，其中，所述化合物有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中至少在L上有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中在L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代。
在一些实施方案中，d选自0、1、2或5；在一些典型的实施方案中，d选自0、1或2；在一些更为典型的实施方案中，d选自1或2；在一些更为典型的实施方案中，d为1。
另一方面，本发明提供了式VII所示的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure PCTCN2021093813-appb-000044
其中，R 2、R 6、R 8、R 11和L的定义同式I化合物，d的定义同式VI化合物，其中，所述化合物有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中至少在L上有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中在L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代。
另一方面，本发明提供了式VIII所示的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure PCTCN2021093813-appb-000045
其中，R 2、R 8、R 10、G、L的定义同式I化合物，其中，所述化合物有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中至少在L上有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中在L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代。
另一方面，本发明提供了式IX所示的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure PCTCN2021093813-appb-000046
其中，R 2、R 8、R 10、R 11和L的定义同式I化合物，d的定义同式VI化合物，其中，所述化合物有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中至少在L上有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中在L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代。
另一方面，本发明的化合物还包括式X所示的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure PCTCN2021093813-appb-000047
其中，R 1、R 2、R 3、G、L、m、n和
Figure PCTCN2021093813-appb-000048
的定义同式I化合物，其中，所述化合物有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中至少在L上有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中在L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代。
另一方面，本发明还提供了式XI所示的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure PCTCN2021093813-appb-000049
其中，R 2、R 6、G和L的定义同式I化合物，其中，所述化合物有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中至少在L上有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中在L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代。
另一方面，本发明还提供了式XII所示的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure PCTCN2021093813-appb-000050
其中，R 2、R 6、R 11和L的定义同式I化合物，d的定义同式VI化合物，其中，所述化合物有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中至少在L上有一个或多个C-H键被C-D键取代。在一些典型的实施方案中，所述化合物中在L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代。
另一方面，本发明提供下列所示的化合物或其药学上可接受的盐：
Figure PCTCN2021093813-appb-000051
Figure PCTCN2021093813-appb-000052
Figure PCTCN2021093813-appb-000053
顺-(5R)-4-(5-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)-5-甲基-5,8-二氢 吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮，或
反-(5R)-4-(5-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮，其中，上述化合物中一个或多个C-H键被C-D键取代。
在一些典型的实施方案中，上述化合物结构中与L相应的环上有一个或多个C-H键被C-D键取代。
在一些典型的实施方案中，上述化合物结构中与L相应的环上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代。
另一方面，本发明提供了下列所示的化合物：
Figure PCTCN2021093813-appb-000054
其中，上述化合物中一个或多个C-H键被C-D键取代。
在一个典型的实施方案中，上述化合物结构中与L相应的环上有一个或多个C-H键被C-D键取代。
在一些典型的实施方案中，上述化合物结构中与L相应的环上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代。
另一方面，本发明提供了下列化合物或其药学上可接受的盐：
Figure PCTCN2021093813-appb-000055
另一方面，本发明提供了下列化合物：
Figure PCTCN2021093813-appb-000056
另一方面，本发明提供了式XIII-XVIII所示化合物或其药学上可接受的盐：
Figure PCTCN2021093813-appb-000057
另一方面，本发明还提供了一种药物组合物，其包含治疗有效量的式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI或XII化合物或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，本发明还提供了一种药物组合物，其包含治疗有效量的式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI或XII化合物或其药学上可接受的盐，以及一种或多种药学上可接受的载体。
本发明所述的药物组合物可以通过任何适用的途径或方法给药，例如通过口服或肠胃外(例如，静脉内)给药。式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI或XII化合物的治疗有效量为从约0.001mg到20mg/Kg体重/天，优选从0.01mg到10mg/Kg体重/天。
对于口服途径给药，本发明的药物组合物通常以片剂、胶囊剂或溶液的形式提供。片剂可以包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。所述载体包括但不限于稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、着色剂或防腐剂。胶囊剂包括硬胶囊剂和软胶囊剂。
对于胃肠道外途径给药，本发明的药物组合物可以通过静脉内注射、肌内注射或皮下注射给药。其通常以无菌水溶液或混悬液或冻干粉末提供，并调节合适的pH和等渗性。
另一方面，本发明还提供了式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI或XII化合物在制备用于预防和/或治疗AKT蛋白激酶介导的疾病或疾病状态的药物中的用途。
另一方面，本发明还提供了用于预防和/或治疗AKT蛋白激酶介导的疾病或疾病状态的方法，其包括向有需要的个体给予本发明的式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI或XII化合物或本发明的药物组合物。
另一方面，本发明还提供了用于预防和/或治疗AKT蛋白激酶介导的疾病或疾病状态的本发明的式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X、XI或XII化合物或本发明的药物组合物。
所述AKT蛋白激酶介导的疾病或疾病状态的实例包括但不限于乳腺癌、***癌或卵巢癌。
本发明化合物对AKT1、AKT2、AKT3具有抑制作用，尤其对于AKT3具有明显的抑制作用，对癌细胞有明显的增殖抑制作用，且药代吸收良好，具有明显较优的口服吸收效果。
另一方面，本发明提供一种制备式V化合物的方法，包括但不限于以下合成方案：
合成方案1：
Figure PCTCN2021093813-appb-000058
其中，R 2、R 6、R 8、G、h、j的定义如前所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基；
式1-1化合物在碱(例如甲醇钠)和溶剂(例如甲醇)的存在下制备式1-2化合物，式1-2化合物与乙酸甲脒在碱(例如甲醇钠)和溶剂(例如甲醇)的存在下制备式1-3化合物，式1-3在碱(例如二异丙基乙胺)和溶剂(例如乙腈)存在下制备式1-4化合物，式1-4化合物进一步生成式1-5化合物，式1-5化合物与式1-6化合物反应制备式1-7化合物，式1-7化合物脱除保护基制备式1-8化合物，式1-8化合物与式1-9化合物反应制备式1-10化合物，当P 1为胺基保护基时，合成方案1进一步包括将胺基保护基脱除。
合成方案2：
Figure PCTCN2021093813-appb-000059
其中，R 2、R 6、R 8、G、q、v、s、t、p的定义如前所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基；
式1-5化合物按照合成方案1制备，式1-5化合物与式2-6化合物反应制备式2-7化合物，式2-7化合物脱除保护基制备式2-8化合物，式2-8化合物与式1-9化合物反应制备式2-10化合物，当P 1为胺基保护基时，合成方案2进一步包括将胺基保护基脱除。
合成方案3：
Figure PCTCN2021093813-appb-000060
其中，R 2、R 6、R 8、G、h、j、k的定义如前所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基；
式1-5化合物按照合成方案1制备，式1-5化合物与式3-6化合物反应制备式3-7化合物，式3-7化合物脱除保护基制备式3-8化合物，式3-8化合物与式1-9化合物反应制备式3-10化合物，当P 1为胺基保护基时，合成方案3进一步包括将胺基保护基脱除。
合成方案4：
Figure PCTCN2021093813-appb-000061
其中，R 2、R 6、R 8、e、u的定义如前所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基；
式1-5化合物合成方案1制备，式1-5化合物与式4-6化合物反应制备式4-7化合物，式4-7化合物脱除保护基制备式4-8化合物，式4-8化合物与式1-9化合物反应制备式4-10化合物，当P 1为胺基保护基时，合成方案4进一步包括将胺基保护基脱除。
另一方面，本发明提供一种制备式VIII化合物的方法，包括但不限于以下方案：
合成方案5：
Figure PCTCN2021093813-appb-000062
其中，R 2、R 10、R 8、G、h、j的定义如前所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基；
式5-1化合物在碱(例如氢化钠)和溶剂(例如四氢呋喃)存在下制备式5-2化合物，式5-2化合物与NH 2P 2在碱(例如三乙胺)和溶剂(例如异丙醇)存在下制备式5-3化合物，式5-3化合物在碱(例如氢化钠)和溶剂(例如DMF)存在下制备式5-4化合物，式5-4化合物脱除保护基制备式5-5化合物，式5-5化合物与式1-6化合物反应制备式5-7化合物，式5-7化合物脱除保护基制备式5-8化合物，式5-8化合物与式1-9化合物反应制备式5-10化合物；当P 1为胺基保护基时，合成方案5进一步包括脱除保护基步骤。
合成方案6：
Figure PCTCN2021093813-appb-000063
其中，R 2、R 10、R 8、G、q、s、v、t、p的定义如前所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基；
式5-5化合物按照合成方案5制备，式5-5化合物与式2-6化合物反应制备式6-7化合物，式6-7化合物脱除保护基制备式6-8化合物，式6-8化合物与式1-9化合物反应制备式6-10化合物；当P 1为胺基保护基时，合成方案6进一步包括脱除保护基步骤。
合成方案7：
Figure PCTCN2021093813-appb-000064
其中，R 2、R 10、R 8、G、h、j、k的定义如前所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基；
式5-5化合物按照合成方案5制备，式5-5化合物与式3-6化合物反应制备式7-7化合物，式7-7化合物脱除保护基制备式7-8化合物，式7-8化合物与式1-9化合物反应制备式7-10化合物；当P 1为胺基保护基时，合成方案7进一步包括脱除保护基步骤。
合成方案8：
Figure PCTCN2021093813-appb-000065
其中，R 2、R 10、R 8、G、e、u的定义如前所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基；
式5-5化合物按照合成方案5制备，式5-5化合物与式4-6化合物反应制备式8-7化合物，式8-7化合物脱除保护基制备式8-8化合物，式8-8化合物与式1-9化合物反应制备式8-10化合物；当P 1为胺基保护基时，合成方案8进一步包括脱除保护基步骤。
合成方案9：
Figure PCTCN2021093813-appb-000066
其中X为卤素，R 2、R 6、h、j、G的定义如前所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基。
由化合物式9-1制备化合物式9-2，式9-2与化合物式1-6反应制备化合物式9-3，式9-3被还原生成化合物式9-4，式9-4发生成环反应制备化合物式9-5，式9-5脱去保护基生成化合物式9-6或其盐，再进一步与化合物式1-9反应制备得到化合物式9-7；当P 1为胺基保护基时，合成方案9进一步包括脱除保护基步骤。
合成方案9a：
Figure PCTCN2021093813-appb-000067
其中，X为卤素，R 2、R 6、h、j、G的定义如权利要求1、3、6或8所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基。
由化合物式9-1制备化合物式9-2，式9-2经还原反应制备化合物式13-1，式13-1发生环合反应制备化合物式13-2，式13-2与化合物式1-6发生偶连反应制备化合物式9-5，式9-5脱去保护基生成化合物式9-6或其盐，再进一步与化合物式1-9反应制备得到化合物式9-7；当P 1为胺基保护基时，合成方案9进一步包括脱除保护基步骤；任选地，化合物式13-2通过手性拆分制备得到立体异构体，立体异构体参与后续反应从而制备得到光学纯的化合物式9-7。
合成方案10：
Figure PCTCN2021093813-appb-000068
其中X为卤素，R 2、R 6、q、v、s、t、p、G的定义如前所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基。
由化合物式9-1制备化合物式9-2，式9-2与化合物式2-6反应制备化合物式10-3，式10-3被还原生成化合物式10-4，式10-4发生成环反应制备化合物式10-5，式10-5脱去保护基生成化合物式10-6或其盐，再进一步与化合物式1-9反应制备得到化合物式10-7；当P 1为胺基保护基时，合成方案10进一步包括脱 除保护基步骤。
合成方案11：
Figure PCTCN2021093813-appb-000069
其中X为卤素，R 2、R 6、h、k、j、G的定义如前所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基。
由化合物式9-1制备化合物式9-2，式9-2与化合物式11-1反应制备化合物式11-2，式11-2被还原生成化合物式11-3，式11-3发生成环反应制备化合物式11-4，式11-4脱去保护基生成化合物式11-5或其盐，再进一步与化合物式1-9反应制备得到化合物式11-6；当P 1为胺基保护基时，合成方案11进一步包括脱除保护基步骤。
合成方案12：
Figure PCTCN2021093813-appb-000070
其中，R 2、R 6、R 8、h、k、j、G的定义如前所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基。
由化合物式1-5与化合物11-1反应制备化合物式12-1，式12-1脱去保护基制备化合物式12-2，式12-2与化合物式1-9反应制备化合物式12-3；当P 1为胺基保护基时，合成方案12进一步包括脱除保护基步骤。
本领域技术人员可以理解，当L为R 12取代时，本发明的化合物可以参照上述合成方案制备。
在一个典型的实施方案中，上述制备方法所制备的化合物和/或所用中间体包括一个或多个C-H键被C-D键取代。
附图说明
图1为实施例15异构体2的单分子示意图；
图2为实施例15异构体2单晶的不对称结构单元示意图；
图3为实施例34异构体1的单分子示意图；
图4为实施例34异构体1单晶的不对称结构单元示意图；
图5为实施例34异构体3的单分子示意图；
图6为实施例34异构体3单晶的不对称结构单元示意图。
具体实施方式
I.相关定义
除非有特定说明，下列用在说明书和权利要求书中的术语具有下述含义：
本发明所述的“化合物”包括所有的立体异构体和互变异构体。
本发明化合物可以是不对称的，例如，具有一个或多个立体异构体。除非另有说明，所有立体异构体都包括，如对映异构体和非对映异构体。本发明的含有不对称碳原子的化合物可以以光学活性纯的形式或外消旋形式被分离出来。光学活性纯的形式可以从外消旋混合物拆分，或通过使用手性原料或手性试剂合成。外消旋体、非对映异构体、对映异构体都包括在本发明的范围之内。
本发明化合物还包括互变异构体形式。互变异构体形式来源于一个单键与相邻的双键交换并一起伴随一个质子的迁移。
术语“氘”、“D”或“ 2H”表示单个氘原子。应当理解，本发明所公开的化合物可为同位素标记的。使用诸如氘的同位素取代可提供由更高代谢稳定性产生的某些治疗优点，例如，如增加体内半衰期或减少剂量需求，因此在一些情况下可能是优选的。除此之外，本公开的氘代化合物具有同样甚至更优秀的Akt酶抑制活性。本公开的化合物结构中，氢原子可被明确地公开或者被理解为存在于化合物中。在氢原子可存在的化合物的任何位置，氢原子可以是氢的任何同位素，包括但不限于： 1H(氕)和 2H(氘)。其中氘取代可以是部分或完全的，部分氘取代是指至少一个氢被至少一个氘取代。
术语“任选”或“任选地”是指随后描述的事件或情况可能发生或可能不发生，该描述包括发生所述事件或情况和不发生所述事件或情况。
本公开中的数字范围，是指给定范围中的各个整数。例如，“C1-C6”是指该基团可具有1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子、4个碳原子、5个碳原子或6个碳原子；“C3-C6”是指该基团可具有3个碳原子、4个碳原子、5个碳原子或6个碳原子。
术语“被取代的”是指特定原子或基团上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，只要特定原子或基团的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。当取代基为酮基(即＝O)时，意味着两个氢原子被取代。除非另有规定，取代基的种类和数目在化学上可以实现的基础上可以是任意的。
当任何变量(例如R)在化合物的组成或结构中出现一次以上时，其在每一种情况下的定义都是独立的。因此，例如，如果一个基团被1-5个R所取代，则所述基团可以任选地至多被5个R所取代，并且每种情况下的R都有独立的选项。此外，取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。
术语“烷基”指饱和的脂族烃基团，包括直链的或支链的饱和烃基，所述烃基具有所示出的碳原子数。如术语“C1-C6烷基”包括C1烷基、C2烷基、C3烷基、C4烷基、C5烷基、C6烷基，实例包括，但不限于，甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、2-戊基、3-戊基、正己基、2-己基、3-己基等。其可以是二价的，例如亚甲基、亚乙基。
术语“烷氧基”指具有烷基-O-结构的基团，烷基为包括直链的或支链的饱和一价烃基。如“C1-C3烷氧基”包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基。
术语“烷酰基”指具有RC(＝O)-结构的基团，R为H或饱和的脂族烃基团，包括直链或支链的饱和一价烃基。如“C1-C4烷酰基”包括C1烷酰基、C2烷酰基、C3烷酰基、C4烷酰基，合适的烷酰基基团包括甲酰基、乙酰基、正丙酰基、异丙酰基、正丁酰基、异丁酰基、叔丁酰基。
术语“氘取代”、“氘代”指化合物或基团中的一个或多个C-H键被C-D键取代，氘取代可以是一取代、二取代、多取代或全取代，如术语“C1-C3烷基是氘取代的”指C1-C3烷基中的一个或多个C-H键被C-D键取代，实例包括但不限于，CDH 2、CD 2H、CD 3、CH 2CDH 2、CH 2CD 2H、CH 2CD 3、CDHCH 3、CD 2CH 3、CD 2CD 3等。所述“氘代”方法采用本领域的常规方法，例如，可使用商品化氘代中间体，例如使用商品
Figure PCTCN2021093813-appb-000071
或按照现有技术中公开的方法在化合物中引入氘。
术语“卤代”指被一个或多个卤素原子取代，卤素原子的实例包括氟原子、氯原子、溴原子、碘原子。如术语“卤代C1-C3烷氧基”指被一个或多个卤素原子取代的C1-C3烷氧基，实例包括，但不限于，OCF 3、OCHF 2、OCH 2F、OCH 2CF 3、OCH 2CHF 2或OCF 2CF 3。如术语“卤代C1-C3烷基”指被一个或多个卤素原子取代的C1-C3烷基，实例包括，但不限于，CF 3、CHF 2、CH 2F、CH 2CF 3、CH 2CHF 2或CF 2CF 3。
术语“环烷基”指单环饱和烃体系，无杂原子，无双键。术语“C3-C6环烷基”的实例包括，但不限于，环丙基、环丁基、环戊基、环己基。
术语“芳基”是指具有共轭的π电子体系的全碳单环或稠合多环的芳香环基团，其通过从母体芳香环体系的单一碳原子上除去一个氢原子而得到。例如，芳基可以具有6-20个碳原子、6-14个碳原子或6-10个碳原子。包括包含与饱和、部分不饱和的环，或芳香碳环稠合的芳环的双环基团。实例包括，但不限于，苯基、萘基、蒽基、茚、茚满、1,2-二氢萘、1,2,3,4-四氢萘。
术语“杂芳基”指包含至少一个独立地选自氮、氧和硫杂原子的5-、6-、7-元环的一价芳基，并且包括5-10个原子的稠环体系(其中至少一个是芳香性的)。杂芳基的实例包括，但不限于，吡啶基、噻吩基、咪唑基、嘧啶基、吡啶基、呋喃基、吡嗪基、噻唑基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、咪唑并吡啶基、苯并呋喃基、哒嗪基、异吲哚基。
术语“元”是指组成环的骨架原子的数目。例如，“5-10元”是指组成环的骨架原子的数目为5个、6个、7个、8个、9个或10个。因此，举例而言，吡啶、哌啶、哌嗪和苯为六元环，而噻吩、吡咯为五元环。
术语“杂环”是指具有环碳原子和1至2个环杂原子的5-12元饱和非芳香体系，其中杂原子独立地选自氮、硫或氧原子。在含有一或多个氮原子的杂环基团中，连接点可为碳或氮原子，只要原子价容许。杂环可为单环或多环体系，例如二环，其中两个或两个以上的环以并环、桥环或螺环形式存在，其中至少一个环含有一个或多个杂原子。
取代基R 12可以与环上的任意原子相键合，只要原子价容许。取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。本领域技术人员可以理解，对于包含一个或多个R 12取代基的任何基团，不会引入任何在空间上不可能存在和/或不能合成的取代或取代模式。
单波线
Figure PCTCN2021093813-appb-000072
与双波线
Figure PCTCN2021093813-appb-000073
均是指化学键连接处，两者具有相同的化学意义，如无特殊说明，
Figure PCTCN2021093813-appb-000074
与
Figure PCTCN2021093813-appb-000075
的区别仅在于区分连接的位置或顺序。
术语“胺基保护基”是指适合用于阻止胺基氮位上副反应的保护基团。胺基保护基的实例包括但不限于：Boc、DMB、苄氧羰基、9-芴甲氧羰基、苄基、甲酰基或乙酰基。
术语“药学上可接受的盐”是指保留了特定化合物的游离酸和碱的生物学效力而没有生物学不良作用的盐。例如酸(包括有机酸和无机酸)加成盐或碱加成盐(包括有机碱和无机碱)。
本发明的药学上可接受的盐可由含有酸根或碱基的母体化合物通过常规化学方法合成。一般情况下，这样的盐的制备方法是：在水或有机溶剂或两者的混合物中，经由游离酸或碱形式的这些化合物与化学计量的适当的碱或酸反应来制备。
术语“有效量”或“治疗有效量”是指无毒的但能达到预期效果的药物或药剂的足够用量。
术语“药学上可接受的载体”是指对机体无明显刺激作用，而且不会损害该活性化合物的生物活性及性能的那些载体。包括但不限于国家食品药品监督管理局许可的可用于人或动物的任何稀释剂、崩解剂、粘合剂、助流剂、润湿剂。
权利要求书和说明书中所使用的简称其含义如下：
M：mol/L
mM：mmol/L
nM：nmol/L
Boc：叔丁氧羰基
DMB：2,4-二甲氧基苄基
NMP：N-甲基吡咯烷酮
DMAP：对二甲氨基吡啶
DMF：N,N-二甲基甲酰胺
DEA：二乙胺
PE：石油醚
EA：乙酸乙酯
HATU：(2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯)
RT：保留时间
SFC：超临界流体色谱
H：小时
min:分
TK：酪氨酸激酶
SEB：荧光信号增强剂
HTRF：均相时间分辨荧光
DTT：二硫苏糖醇
NR：未计算
制备方法：
下面更具体地描述本发明的化合物的制备方法，但这些具体的制备方法不对本发明的范围构成任何限制。此外，反应条件如反应物、溶剂、碱、所用化合物的量、反应温度、反应时间等不限于下面的实例。
本发明的化合物还可以任选地将在本说明书中描述的或本领域已知的各种合成方法组合起来而方便制得，这样的组合可由本领域的技术人员容易地进行。
流程A:
Figure PCTCN2021093813-appb-000076
反应条件：a)巴豆酸乙酯，甲醇钠甲醇溶液(30％wt)，甲醇；b)乙酸甲脒，甲醇钠甲醇溶液(30％wt)；c)三氯氧磷，二异丙基乙胺，乙腈；d)氨水(25-28％wt)；e)叔丁基哌嗪-1-羧酸酯；f)三氟乙酸，二氯甲烷；g)(S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酸，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，二异丙基乙胺，二氯甲烷。
实施例1：4-(4-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
Figure PCTCN2021093813-appb-000077
a)2-甲基丙烷-1,1,3-三羧酸三甲酯
在氮气保护下，20℃时将甲醇钠甲醇溶液(30％wt)(8.16g)加入到甲醇中(400mL)，随后升温至70℃，将丙二酸二甲酯(24.64g)和巴豆酸乙酯(21.08g)混合均匀，滴加到上述甲醇钠甲醇溶液中，70℃反应3小时。反应完全后，减压蒸去溶剂，加入乙酸乙酯(100mL)并用4M盐酸调节pH＝7，然后加入100mL水，分液，浓缩有机相，得到黄色液体45.48g，，无须纯化直接用于下一步。 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)0.93(d，J＝6.8Hz，3H)，2.26(q，J＝12.0Hz，2H)，2.52-2.58(m，1H)，3.56(d，J＝6.8Hz，1H)，3.59(s，3H)，3.65(s，3H)，3.67(s，3H)。
b)3-(4,6-二羟基嘧啶-5-基)丁酸甲酯
氮气保护下，20℃时将甲醇钠甲醇溶液(30％wt)(97.55g)加入到甲醇中(400mL)，随后冷却至-15℃，加入乙酸甲脒(22.98g)，反应30min，随后滴加2-甲基丙烷-1,1,3-三羧酸三甲酯(45.72g)，缓慢升温至20℃，继续反应12小时。反应完全后，将反应液冷却至0℃，加入4M的盐酸调节pH＝2，减压蒸去溶剂，之后于0℃下加入100mL水，有固体析出，抽滤收集固体，滤饼经水洗涤(50mL)后，真空干燥，得到黄色固体29.60g，无须纯化直接用于下一步。 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)11.62(s，2H)，7.86(s，1H)，3.53(s，3H)，3.34-3.42(m，1H)，2.58-2.70(m，2H)，1.11(d，J＝6.8Hz，3H)。
c)3-(4,6-二氯嘧啶-5-基)丁酸甲酯
在氮气保护下，22℃时将3-(4,6-二羟基嘧啶-5-基)丁酸甲酯(9.1g)分散在乙腈中(100mL)，先后滴加三氯氧磷(16.03g)及二异丙基乙胺(7.79g)，体系放热明显，固体逐渐溶清，随后升温至60℃，反应18小时。反应完全后，将反应液冷却至0℃，倾入200mL冰水中，用饱和碳酸氢钠溶液调节pH至7-8,用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相，减压蒸去溶剂，硅胶柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝4:1，体积比)分离，得到棕色液体8.36g。
d)4-氯-5-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
于20℃时将3-(4,6-二氯嘧啶-5-基)丁酸甲酯(4.12g)和氨水(25-28％wt，25mL)加入到100mL高压釜中，升温至60℃，反应18小时。反应完全后，将反应液冷却至0℃，抽滤，滤饼用(石油醚：乙酸乙酯＝10:1，体积比)30mL打浆，得到淡黄色固体1.51g 1H NMR(300MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)1.09-1.12(d，J＝7.2Hz，3H)，2.36-2.49(m，1H)，2.92-3.00(m，1H)，3.27-3.36(m，1H)，8.54(s，1H)。
e)4-(5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气保护下，于22℃时将4-氯-5-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮(0.42g)和叔丁基哌嗪-1-羧酸酯(10.76g)直接加热至140℃搅拌6小时。反应完全后，将反应液冷却至0℃，倒入30mL冰水中，用加入4M的盐酸调节pH＝7,二氯甲烷(20mL×2)萃取，减压蒸去溶剂，硅胶柱层析(二氯甲烷：甲醇＝30:1，体积比)分离，得到淡黄色固体0.67g，。LC-MS(ESI)m/z:348，(M+H). 1H NMR(300MHz，CDCl 3)δ(ppm)8.47(s，1H)，8.42(s，1H)，3.24-3.61(m，9H)，2.56-2.83(m，2H)，1.48(s，9H)，1.23-1.26(d，J＝6.9Hz，3H)。
f)5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
于25℃时将4-(5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.67g)溶解于二氯甲烷(10mL)，加入三氟乙酸(1.31g)反应16小时。反应完全后，减压蒸去溶剂，冷却至0℃，用20％氢氧化钠溶液调节pH＝12,二氯甲烷(20mL×6)萃取，合并有机相，减压蒸去溶剂，硅胶柱层析(二氯甲烷：甲醇＝20:1，体积比)分离，得到黄色固体0.39g直接用于下一步。
g)4-(4-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
在氮气保护下，于20℃时将5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮(0.10g)和(S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酸(0.107g)溶解于二氯甲烷(5mL)，然后分别加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(0.184g)和二异丙基乙胺(0.078g)，25℃反应16小时。反应完全后，向反应液加入10mL水，分液，有机相用饱和食盐水(2mL)洗涤，减压蒸去溶剂柱层析(二 氯甲烷：甲醇＝25:1，体积比)分离，得到白色固体0.12g。LC-MS(ESI)m/z:471(M+H). 1H NMR(300MHz，CDCl 3)δ(ppm)1.06-1.28(m，6H)，1.30-1.38(m，3H)，2.57(d，J＝15.0Hz，1H)，2.70-2.78(m，4H)，2.80-3.25(m，2H)，3.28-3.69(m，7H)，3.86-4.09(m，2H)，7.22-7.36(m，4H)，8.38(s，1H)，8.61(s，1H)。
实施例2：(S)-4-(4-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮及(R)-4-(4-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
Figure PCTCN2021093813-appb-000078
在氮气保护下，20℃时将5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮(0.49g)和(S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酸(0.53g)溶解于N，N-二甲基甲酰胺(20mL)，随后分别加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(1.50g)和二异丙基乙胺(0.51g)，25℃反应4小时。反应完全后，向反应液加入100mL水，分液，有机相用饱和食盐水(40mL)洗涤，减压蒸去溶剂，硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝25:1，体积比)分离，得到白色固体0.59g。经手性拆分，得到(S)构型产物0.21g(de％＝100％)和(R)构型产物0.19g(de％＝99％)。
拆分仪器：waters SFC200；色谱柱：Daicel Chiralcel OD，250×30mm I.D.，5μm；流动相A：CO 2，流动相B：异丙醇(含0.1％NH 3·H 2O)，A:B＝70:30(体积比)。
(S)构型产物：LC-MS(ESI)m/z:471(M+H). 1H NMR(300MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)0.93-0.96(m，6H)，1.30(d，J＝3.0Hz，3H)，2.23-2.36(m，1H)，2.61-2.84(m，4H)，3.12-3.31(m，5H)，3.35-3.49(m，2H)，3.65-3.78(m，3H)，4.21-4.29(m，1H)，7.33(d，J＝6.6Hz，2H)，7.40(d，J＝6.6Hz，2H)，8.38(s，1H)，10.66(s，1H)；
(R)构型产物：LC-MS(ESI)m/z:471(M+1). 1H NMR(300MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)0.95-1.03(m，9H)，2.26-2.30(m，1H)，2.66-2.79(m，1H)，2.82-2.96(m，3H)，3.11-3.20(m，4H)，3.34-3.47(m，3H)，3.62-3.69(m，3H)，4.18-4.22(m，1H)，7.34(d，J＝6.6Hz，2H)，7.42(d，J＝6.6Hz，2H)，8.28(s，1H)，10.62(s，1H)。
流程B：
Figure PCTCN2021093813-appb-000079
反应条件：a)丙烯酸甲酯，甲醇钠甲醇溶液(30％wt)，甲醇；b)乙酸甲脒，甲醇钠，甲醇；c)三氯氧磷，二异丙基乙胺，乙腈；d)氨水(25-28％wt)；e)叔丁基哌嗪-1-羧酸酯；f)三氟乙酸，二氯甲烷；g)(S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酸，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，二异丙基乙胺，二氯甲烷。
实施例3：(S)-4-(4-(2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)-5,8-二氢吡啶并[2,3-d] 嘧啶-7(6H)-酮
Figure PCTCN2021093813-appb-000080
如实施例1描述的方法制备：采用丙烯酸甲酯替换巴豆酸乙酯。LC-MS(ESI)m/z:457(M+H). 1H NMR(300MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)0.92-0.96(m，6H)，2.42-2.49(m，2H)，2.62-2.78(m，5H)，3.08-3.29(m，4H)，3.38-3.43(m，2H)，3.57-3.65(m，3H)，4.21-4.29(m，1H)7.31-7.34(m，2H)，7.38-7.40(m，2H)，8.27(s,1H)，10.53(s,1H)。
实施例4：4-((R)-4-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)-2-甲基哌嗪-1-基)-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
Figure PCTCN2021093813-appb-000081
如实施例3描述的方法制备：采用(R)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯替换叔丁基哌嗪-1-羧酸酯。LC-MS(ESI)m/z:471(M+H). 1H NMR(300MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)0.75-0.95(m，9H)，2.40-2.49(m，3H)，2.51-2.61(m，4H)，2.85-3.36(m，5H)，3.62-3.76(m，1H)，3.91-3.96(m，1H)，4.14-4.19(m，2H)7.29-7.42(m，4H)，8.26(d,J＝7.2Hz,1H)，10.54(s，1H)。
实施例5：4-((S)-4-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)-2-甲基哌嗪-1-基)-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
Figure PCTCN2021093813-appb-000082
如实施例3描述的方法制备：采用(S)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯替换叔丁基哌嗪-1-羧酸酯。LC-MS(ESI)m/z:471(M+H) 1H NMR(300MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)1.10-1.33(m，9H)，2.42-2.49(m，2H)，2.67-2.76((m，4H)，2.84-3.05(m，4H)，3.51-3.58(m，3H)，3.91-4.19(m，2H)，4.28-4.54(m，1H)7.32-7.45(m，4H)，8.27(s，1H)，10.53(s，1H)。
流程C：
Figure PCTCN2021093813-appb-000083
反应条件：a)巴豆酸乙酯，甲醇钠甲醇溶液(30％wt)，甲醇；b)磷酸氢二钠，去离子水，盐酸，脂肪水解酶(皱褶假丝酵母菌)，氢氧化钠；c)乙酸甲脒，甲醇钠，甲醇；d)三氯氧磷，二异丙基乙胺，乙腈；e)氨水(25-28％wt)。
中间体(R)-4-氯-5-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
Figure PCTCN2021093813-appb-000084
a)2-甲基丙烷-1,1,3-三羧酸三甲酯
氮气保护下，于20℃将甲醇钠甲醇溶液(30％wt，50.32g)加入到甲醇中(900mL)，然后升温至70℃，将丙二酸二甲酯(461.12g)和巴豆酸乙酯(349.46g)混合均匀，滴加到上述甲醇钠甲醇溶液中，70℃反应3小时。反应完全后，减压蒸去溶剂，加入乙酸乙酯(1L)，用4M盐酸调节pH至7-8，随后加入500mL水，分液，减压蒸去有机相，得到黄色液体777.68g。 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)3.67(s，3H)，3.65(s，3H)，3.59(s，3H)，3.56(d，J＝6.8Hz，1H)，2.45-2.58(m，2H)，2.23-2.29(m，1H)，0.93(d，J＝6.8Hz，3H)。
b)(R)-2-甲基丙烷-1,1,3-三羧酸三甲酯
25℃时，将磷酸氢二钠(4.5g)溶解在1.5L去离子水中，用2N盐酸调节pH＝7.05，加入2-甲基丙烷-1,1,3-三羧酸三甲酯(150.46g)和脂肪水解酶(皱褶假丝酵母菌，40g分6天加入)，用2N的氢氧化钠溶液调节pH至7.0-7.6之间，35℃反应6天，手性检测ee％>98％,手性检测条件(Chiralpak IC，4.6×250mm,5μm，正己烷：乙醇＝9:1，体积比)。将反应液冷却至10℃，用3M的盐酸调节pH至3-4，加入500mL乙酸乙酯，抽滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤(600mL)，分液，加入饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)洗涤，分液，浓缩有机相，得到淡黄色液体26.89g。 1H NMR(400MHz，CDCl 3)δ(ppm)3.74(s，6H)，3.68(s，3H)，3.46(d，J＝7.2Hz，1H)，2.71-2.79(m，1H)，2.54(dd，J＝15.6、4.8Hz，1H)，2.32(dd，J＝16.0、8.4Hz，1H)，1.06(d，J＝6.8Hz，3H)。
c)(R)-3-(4,6-二羟基嘧啶-5-基)丁酸甲酯
在氮气保护下，于20℃将乙酸甲脒(11.33g)溶解在甲醇中(200mL)，冷却至0℃，滴加甲醇钠甲醇溶液(30％，55.62g)，0℃反应60min，滴加(R)-2-甲基丙烷-1,1,3-三羧酸三甲酯(24.07g)的甲醇(60mL)溶液，自然升温至20℃，反应10小时。反应完全后，将反应液冷却至0℃，加入3N的盐酸调节pH至5-6,减压蒸去溶剂，随后冷却至0℃，加入3N的盐酸调节pH＝3，有固体析出，抽滤收集固体，滤饼用冰水洗涤(100mL)，真空干燥滤饼，得到白色固体18.79g，直接用于下一步。
d)(R)-3-(4,6-二氯嘧啶-5-基)丁酸甲酯
在氮气保护下，22℃时将(R)-3-(4,6-二羟基嘧啶-5-基)丁酸甲酯(14.63g)分散在乙腈中(70mL)，先后滴加三氯氧磷(26.42g)及二异丙基乙胺(12.51g)，体系放热明显，随后升温至60℃，固体逐渐溶清，继续反应18小时。反应完全后，将反应液冷却至0℃，加入100mL乙酸乙酯，用饱和碳酸氢钠溶液调节pH至7-8,以乙酸乙酯(50mL×3)萃取，减压蒸去有机相，得到黄色固体13.89g，直接用于下一步。
e)(R)-4-氯-5-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
20℃时将(R)-3-(4,6-二氯嘧啶-5-基)丁酸甲酯(13.89g)和氨水(25-28％wt，70mL)加入到100mL高压釜中，升温至50℃，反应18小时。反应完全后，将反应液冷却至0℃，抽滤，滤饼用(石油醚：乙酸乙酯＝10:1，体积比)30mL打浆，得到淡黄色固体7.32g。LC-MS(ESI)m/z:198(M+H). 1H NMR(300MHz，CDCl 3)δ(ppm)1.30(d，J＝7.2Hz，3H)，2.65-2.69(m，1H)，2.86-2.92(m，1H)，3.47-3.54(m，1H)，8.64(s，1H)，10.10(s，1H)。
流程D：
Figure PCTCN2021093813-appb-000085
反应条件：a)2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁酯，4-二甲氨基吡啶，N-甲基吡咯烷酮；b)氯化氢 /1,4-二氧六环(4.0M)，二氧六环；c)(S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酸，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，二异丙基乙胺，N，N-二甲基甲酰胺。
实施例6：(5R)-4-(5-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
Figure PCTCN2021093813-appb-000086
a)4-(5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在氮气保护下，22℃时将(R)-4-氯-5-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮(0.30g)、2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁酯(1.21g)和4-二甲氨基吡啶(0.58g)溶于N-甲基吡咯烷酮中，加热至140℃，反应6小时。反应完全后，将反应液冷却至0℃，倒入30mL冰水中，加入4M盐酸调节pH至4-5,以乙酸乙酯(20mL×2)萃取，饱和食盐水洗涤有机相(10mL×3)，减压蒸去有机相，硅胶柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝1:1，体积比)，得到淡黄色固体0.33g。LC-MS(ESI)m/z:360(M+H)。
b)(5R)-4-(2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
25℃时将4-(5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.28g)溶解于二氧六环(3mL)，加入氯化氢/1,4-二氧六环(4.0M)1.91g反应16小时。反应完全后，将反应液浓缩去溶剂，冷却至0℃，加入20％氢氧化钠溶液调节pH＝12，以二氯甲烷(20mL×8)萃取，减压蒸去有机相，得到棕色固体0.15g，直接用于下一步。
c)(5R)-4-(5-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
在氮气保护下，20℃时将4-(5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.15g)和(S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酸(0.157g)溶于N，N-二甲基甲酰胺(5mL)中，分别加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(0.26g)和二异丙基乙胺(0.29g)，25℃反应16小时。反应完全后，向反应液加入10mL水，分液，有机相用饱和食盐水(2mL)洗涤，减压蒸去有机相，硅胶柱层析(二氯甲烷：甲醇＝20:1，体积比)，得到小麦色固体0.037g。LC-MS(ESI)m/z:483(M+H). 1H NMR(300MHz，DMSO d 6)δ(ppm)0.68-1.24(m，10H)，1.75-2.38(m，3H)，2.54-2.61(m，4H)，3.08-3.28(m，2H)，3.59-3.61(m，2H)，3.87-4.16(m，2H)，4.72-4.97(m，2H)7.31-7.38(m，4H)，8.10(d，J＝23.1Hz，1H)，10.36(d，J＝11.4Hz，1H)。
实施例7：(R)-4-((R)-4-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)-2-甲基哌嗪-1-基)-5-甲基-5,8--二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
Figure PCTCN2021093813-appb-000087
如实施例6描述的方法制备，采用(R)-4-Boc-2-甲基哌嗪替换2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁酯。LC-MS(ESI)m/z:485(M+H). 1H NMR(300MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)0.94-1.04(m，12H)，2.24-2.29(m，1H)，2.67-2.93(m，5H)，3.06-3.19(m，5H)，3.57-3.62(m，3H)，4.21-4.24(m，1H)，7.32-7.44(m，4H)，8.26(s,1H)，10.61(s,1H)。
实施例8：(R)-4-((R)-4-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)-3-甲基哌嗪-1-基)-5- 甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
Figure PCTCN2021093813-appb-000088
如实施例6描述的方法制备，采用(R)-1-N-Boc-2-甲基哌嗪替换2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁酯。
LC-MS(ESI)m/z:485(M+H). 1H NMR(300MHz，CDCl 3)δ(ppm)8.37(d，J＝12.0Hz，1H)，8.28(s，1H)，7.36(d，J＝6.0Hz，2H)，7.26(d，J＝6.0Hz，2H)，4.59-4.95(m，1H)，4.08-4.31(m，2H)，3.15-3.82(m，6H)，2.72-3.09(m，4H)，2.52-2.58(m，1H)，2.32-2.39(m，1H)，1.10-1.38(m，12H)。
实施例9：(R)-4-((S)-4-((R)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙氨基)丙酰基)-3-甲基哌嗪-1-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
Figure PCTCN2021093813-appb-000089
如实施例6描述的方法制备，采用(S)-1-N-Boc-2-甲基哌嗪替换2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁酯。LC-MS(ESI)m/z:485(M+H). 1H NMR(400MHz，CDCl 3)δ(ppm)8.35(d，J＝16.0Hz，1H)，7.41–7.28(m，3H)，7.26–7.21(m，1H)，4.89(d，J＝6.8Hz，1H)，4.76–4.49(m，1H)，3.75–3.65(m，1H)，3.64–3.54(m，1H)，3.51–3.49(m，1H)，3.44–3.34(m，1H)，3.34–3.17(m，3H)，3.17–3.09(m，1H)，3.06–2.96(m，1H)，2.89–2.49(m，3H)，1.44–1.29(m，7H)，1.25–1.06(m，5H)。
实施例10：(R)-4-(8-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙氨基)丙酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
Figure PCTCN2021093813-appb-000090
如实施例6描述的方法制备，采用3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯替换2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁酯。LC-MS(ESI)m/z:497(M+H). 1H NMR(400MHz，CDCl 3)δ(ppm)8.35(d，J＝16.0Hz，1H)，7.41–7.28(m，3H)，7.26–7.21(m，1H)，4.83(s，1H)，4.51–4.30(m，2H)，4.25–4.22(m，1H)，4.10–4.03(m，1H)，3.92–3.84(m，1H)，3.73-3.62(m，1H)，3.50–3.26(m，3H)，3.24–3.21(m，1H)，3.20–2.85(m，2H)，2.75-2.62(m，1H)，2.49–2.41(m，1H)，2.20–1.90(m，1H)，1.88–1.60(m，3H)，1.44–1.29(m，6H)，1.25–1.06(m，3H)。
实施例11：(R)-4-(3-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
Figure PCTCN2021093813-appb-000091
如实施例6描述的方法制备，采用3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯替换2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁酯。LC-MS(ESI)m/z:497(M+H). 1H NMR(400MHz，CDCl 3)δ(ppm)8.66(s，1H)，8.28(d，J＝5.2Hz，1H)，7.15-7.38(m，4H)，4.31-4.56(m，3H)，3.93(s，1H)，3.49-3.66(m，2H)，3.15-3.31(m，2H)，2.70-3.01(m，4H)，2.26-2.50(m，1H)，1.74-2.03(m，3H)，1.57-1.67(m，1H)，1.43-1.50(m，1H)，1.03-1.26(m，9H)。
实施例12：(R)-4-(4-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛烷-7-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
Figure PCTCN2021093813-appb-000092
如实施例6描述的方法制备，采用4,7-二氮杂螺[2.5]辛烷-4-甲酸叔丁酯替换2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁酯。LC-MS(ESI)m/z＝497(M+H). 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ10.58(s，1H)，8.22(s,1H)，7.33-7.38(m，4H)，4.37(s,1H)，3.40-4.15(m，4H)，2.97-3.09(m，3H)，2.57-2.90(m，4H)，2.24-2.32(m，1H)，0.44–1.13(m，13H)。
实施例13：(5R)-4-(5-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
Figure PCTCN2021093813-appb-000093
如实施例6描述的方法制备，采用六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯替换2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁酯。制备得终产品后经拆分得到顺式异构体和反式异构体。手性拆分条件：拆分仪器：waters SFC200；色谱柱：Daicel Chiralcel AD，250×30mm I.D.，5μm；流动相A：CO 2，流动相B：乙醇(含0.1％氨水)，A:B＝65:35(体积比)。收集保留时间8-10min的产物，为顺式异构体，收集保留时间11-13min的产物，为反式异构体。
顺式异构体：LC-MS(ESI)m/z:497.(M+H). 1H NMR(300MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)10.31(d，J＝6.9Hz，1H)，8.08(d，J＝13.5Hz，1H)，7.28-7.38(m，4H)，3.76-3.93(m，3H)，3.56-3.72(m，2H)，3.45-3.52(m，2H)，3.38-3.40(m，2H)，3.13-3.24(m，2H)，3.03-3.07(m，1H)，2.84-2.90(m，2H)，2.57-2.78(m，3H)，2.17-2.26(m，1H)，1.04(d，J＝5.1Hz，2H)，0.87-0.93(m，7H)。
反式异构体：LC-MS(ESI)m/z:497.(M+H). 1H NMR(300MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)10.31(d， J＝7.8Hz，1H)，8.08(d，J＝13.2Hz，1H)，7.28-7.40(m，4H)，3.82-3.94(m，2H)，3.68-3.79(m，1H)，3.47-3.63(m，2H)，3.07-3.22(m，3H)，2.62-3.02(m，5H)，2.18-2.27(m，1H)，1.20-1.29(m，3H)，1.05(d，J＝5.4Hz，1H)，0.90-0.96(m，6H)，0.81-0.86(m，3H)。
实施例14：(R)-4-(6-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)-2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
Figure PCTCN2021093813-appb-000094
如实施例6描述的方法制备，采用2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯替换2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁酯。LC-MS(ESI)m/z:483(M+H). 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)10.38(s，1H)，8.09(s，1H)，7.36-7.38(m，2H)，7.30-7.32(m，2H)，4.48(d，J＝9.6Hz，1H)，4.35(s，2H)，4.26(s，2H)，3.98-4.08(m，3H)，3.63-3.67(m，1H)，3.00-3.10(m，2H)，2.61-2.73(m，4H)，2.23(d，J＝16.0Hz，1H)，1.02(d，J＝7.2Hz，3H)，0.91-0.93(m，6H)。
流程E：
Figure PCTCN2021093813-appb-000095
反应条件：a)2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-羧酸叔丁酯，N-甲基吡咯烷酮，4-二甲氨基吡啶；b)氯化氢/1,4-二氧六环(4.0M)，二氯甲烷；c)(S)-3-((叔丁氧羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)-丙酸，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，4-二甲氨基吡啶，N,N-二甲基甲酰胺；d)三氟乙酸，二氯甲烷。
实施例15：(R)-4-((1S，6R)-5-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)-2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮或(R)-4-((1R，6S)-5-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)-2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
Figure PCTCN2021093813-appb-000096
a)5-((R)-5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-羧酸叔丁酯
氮气保护下，于22℃将(R)-4-氯-5-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮(0.21g)，2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-羧酸叔丁酯(0.31g)和4-二甲氨基吡啶(0.39g)溶解在N-甲基吡咯烷酮(5mL)，然后加热至140℃，反应3小时。反应完全后，将反应液冷却至20℃，倒入20mL冰水中，乙酸乙酯(20mL×2)萃取，饱和食盐水洗涤(10mL×3)，减压蒸除溶剂，硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝3:1～1:1)分离，得 到淡黄色液体0.28g。LC-MS(ESI)m/z:360(M+H)。
b)(5R)-4-(2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮盐酸盐
20℃将5-((R)-5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-羧酸叔丁酯(0.28g)溶解于二氯甲烷(5mL)，加入氯化氢/1,4-二氧六环(4.0mL)反应1小时。反应完全后，反应液减压蒸除溶剂，得到黄色固体0.23g，直接用于下一步。
c)(2S)-2-(4-氯苯基)-3-(5-((R)-5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-基)-3-氧代丙基)(异丙基)氨基甲酸叔丁酯
在氮气保护下，于20℃将(5R)-4-(2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮盐酸盐(0.20g)和(S)-3-((叔丁氧羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)-丙酸(0.22g)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(0.59g)和4-二甲氨基吡啶(0.48g)，25℃反应4小时。反应完全后，向反应液中加入20ml水，以乙酸乙酯(10mL×3)萃取，有机相用饱和食盐水洗涤(10mL×2)，减压蒸除有机相，柱层析(二氯甲烷：甲醇＝50:1)分离，得到黄色固体0.18g。LC-MS(ESI)m/z:583(M+H)。
d)(R)-4-((1S，6R)-5-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)-2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮或(R)-4-((1R，6S)-5-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)-2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
20℃将(2S)-2-(4-氯苯基)-3-(5-((R)-5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-基)-3-氧代丙基)(异丙基)氨基甲酸叔丁酯(0.18g)溶解于二氯甲烷(2mL)，加入三氟乙酸(0.86mL)，反应3小时。反应完全后，向反应液中加入二氯甲烷(10mL)，于0℃滴加2M的氢氧化钠溶液，调节pH＝12，分液，饱和食盐水洗涤(5mL)有机相，无水硫酸钠干燥，减压蒸除有机相，得到黄色固体0.10g。经高效制备液相拆分，得到异构体1(3mg)，异构体2(12mg)。
高效制备液相条件：色谱柱：Aglient 5μm prep-C18 50×21.2mm，流动相A：水(含0.1％氨水)；流动相B：甲醇。梯度：时间0-10min，B相60-70％(体积比)。
异构体1：RT 1＝5.3min，LC-MS(ESI)m/z:483(M+H)。
异构体2：RT 2＝5.9min；LC-MS(ESI)m/z:483(M+H)； 1H NMR(400MHz，CDCl 3)δ(ppm)8.27(d，J＝7.6Hz，1H)，7.92(s，1H)，7.27-7.30(m，4H)，4.23-4.29(m，1H)，3.90-3.95(m，1H)，3.81-3.85(m，1H)，3.69-3.72(m，1H)，3.44-3.59(m，1H)，3.20-3.38(m，3H)，3.01-3.05(m，1H)，2.70-2.85(m，3H)，2.47-2.57(m，1H)，2.21-2.25(m，1H)，1.25-1.28(m，3H)，1.03-1.11(m，6H)，0.82-0.90(m，2H)。
单晶衍射测定构型：
单晶制备：将30.0mg异构体2化合物、2.0mL异丙醇加入5mL螺口玻璃瓶中，搅拌5min，固体溶清。称取3.9mg二水合草酸加入上述玻璃瓶中，玻璃瓶中逐渐有白色固体析出，室温搅拌3h，玻璃瓶中析出大量白色固体。向玻璃瓶中加入1.0mL甲醇，白色固体逐渐消失，溶液变澄清，继续搅拌1h。溶液经0.22μm微孔滤膜滤至3mL螺口玻璃瓶中，玻璃瓶口用保鲜膜覆盖。用针头在瓶口处扎8个小孔，室温放置7天，制得异构体2化合物的草酸盐单晶。
单晶衍射实验：
单晶X射线衍射仪：BRUKER D8 VENTURE PHOTON II
波长：Ga Kα
Figure PCTCN2021093813-appb-000097
测试温度：190K
用于结构解析的计算机程序：SHELXL-2018
单晶数据：分子式：C 55H 72Cl 2N 12O 9；分子量：1116.14；晶系：六方晶系；空间群：P 61；晶胞参数：
Figure PCTCN2021093813-appb-000098
α＝90°，β＝90°，γ＝120°；单位晶胞体积：
Figure PCTCN2021093813-appb-000099
Figure PCTCN2021093813-appb-000100
单位晶胞中包含的分子式个数：Z＝12；计算密度：D calc＝0.838g/cm 3；R(F o)：0.0730；R W(F o 2)：0.2069；拟合优度(S)：1.034；Flack参数：0.066(9)。
结构描述：单晶X射线衍射及结构解析表明，所制得的单晶为异构体2的草酸盐异丙醇合物。晶体的不对称结构单元中包含四个异构体2分子、两个草酸分子及两个异丙醇分子，其中异构体2和草酸形成草酸盐。化合物异构体2的单分子示意图如图1所示，草酸盐单晶的不对称结构单元如图2所示。结构式表示如下：
Figure PCTCN2021093813-appb-000101
流程F：
Figure PCTCN2021093813-appb-000102
反应条件：a)4,4,4-三氟丁-2-烯酸甲酯，甲醇钠甲醇溶液(30％wt)；b)乙酸甲脒，甲醇钠甲醇溶液(30％wt)；c)三氯氧磷，二异丙基乙胺，乙腈；d)氨水(25-28％wt)；e)叔丁基哌嗪-1-羧酸酯；f)三氟乙酸，二氯甲烷；g)(S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酸，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，二异丙基乙胺，二氯甲烷。
实施例16：4-(4-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)-5-(三氟甲基)-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
Figure PCTCN2021093813-appb-000103
按照流程F，如实施例1描述的方法制备。LC-MS(ESI)m/z:525(M+H).
异构体分离：采用超临界流体色谱法对上述标题化合物进行手性拆分得到异构体1和异构体2。拆分仪器及条件：waters SFC200；色谱柱：Daicel Chiralcel AS,250×30mm I.D.,5μm；流动相：A为CO 2，B为乙醇(0.1％NH 3H 2O)；A:B＝85:15(体积比)；流速60mL/min，柱温38℃。
异构体1：
Figure PCTCN2021093813-appb-000104
LCMS(ESI)m/z:525(M+H). 1HNMR(400MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)：0.91-0.95，(m,6H),2.59-2.78(m,4H)，3.07-3.12(m,1H),3.20-3.31(m，4H),3.37-3.50(m，3H)，3.69-3.75(m，2H),4.08-4.19(m，2H),7.35(dd，J＝25.2、8.0Hz,4H),8.36(s,1H)，10.90(s，1H)。
异构体2：
Figure PCTCN2021093813-appb-000105
LCMS(ESI)m/z:525(M+H). 1HNMR(300MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)0.93-1.06(m，6H)，2.58-2.72(m，4H)，3.06-3.31(m，4H)，3.45-3.68(m，6H)，4.11-4.20(m，2H)7.31-7.43(m，4H)，8.34(d，J＝6.0Hz，1H)，10.92(s,1H)。
流程G：
Figure PCTCN2021093813-appb-000106
反应条件：a)4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯，二氧六环，碳酸铯，水，四(三苯基膦)钯；b)甲醇,甲酸，钯碳(5％)，氢气；c)二氯甲烷，氯化氢/1,4-二氧六环溶液(4.0M)；d)(S)-3-((叔丁氧基羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸，N，N-二甲基甲酰胺，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，二异丙基乙胺；e)二氯甲烷，氯化氢/1,4-二氧六环溶液(4.0M)。
实施例17：
Figure PCTCN2021093813-appb-000107
a)(R)-4-(5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H))-甲酸叔丁酯
在氮气保护下，22℃时将(R)-4-氯-5-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮(0.60g)和4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(1.03g)溶解在二氧六环(20mL)中，加入碳酸铯和水(5mL)最后加入四(三苯基膦)钯(0.35g)，100℃反应7小时。反应完全后，将反应液冷却至20℃，倾入10mL冰水中，以乙酸乙酯(20mL)萃取，减压蒸去有机相，硅胶柱层析(石油 醚：乙酸乙酯＝4:1，体积比)分离，得到淡黄色固体0.81g。MS(ESI)m/z:345(M+H)。
b)(R)-4-(5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
20℃时，将(R)-4-(5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H))-甲酸叔丁酯(0.75g)溶于甲醇(50mL)中，加入甲酸(0.11g)和钯碳(5％)0.30g，氮气置换3次，充入氢气，60℃反应16小时。反应完全后，冷却至10℃，抽滤钯碳，滤液减压蒸去溶剂，得到无色油状物0.66g,MS(ESI)m/z:347(M+H)。
c)(R)-5-甲基-4-(哌啶-4-基)-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
25℃时将(R)-4-(5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.63g)溶解于二氯甲烷(10mL)，加入氯化氢/1,4-二氧六环溶液(4.0M)(10mL)反应2小时。反应完全后，浓缩去溶剂，冷却至0℃，加入20％氢氧化钠溶液调节pH＝12,乙酸乙酯(10mL×3)萃取，饱和食盐水(15mL)洗涤，减压蒸去有机相，得到黄色固体0.346g，直接用于下一步。
d)(S)-2-(4-氯苯基)-3-(4-((R)-5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-1-基)-3-氧代丙基)(异丙基)氨基甲酸叔丁酯
在氮气保护下，20℃时将(R)-5-甲基-4-(哌啶-4-基)-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮(0.302g)和(S)-3-((叔丁氧基羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.308g)溶于N，N-二甲基甲酰胺(5mL)，随后加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(0.86g)和二异丙基乙胺(0.76g)，20℃反应3小时。反应完全后，向反应液加入30mL水，以乙酸乙酯(50mL)萃取，分液，有机相用饱和食盐水(10mL×2)洗涤，减压蒸去有机相，硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝25:1，体积比)分离，得到白色固体0.339g，直接用于下一步。
e)(R)-4-(1-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)哌啶-4-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
25℃将(S)-2-(4-氯苯基)-3-(4-((R)-5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-1-基)-3-氧代丙基)(异丙基)氨基甲酸叔丁酯(0.320g)溶解于二氯甲烷(3mL)中，加入氯化氢/1,4-二氧六环溶液(4.0M)(2.9mL)反应2小时。反应完全后，将反应液减压蒸去溶剂，然后冷却至0℃，加入20％氢氧化钠溶液调节pH＝12,乙酸乙酯(10mL×3)萃取，饱和食盐水(15mL)洗涤，减压蒸去有机相，得到白色固体0.176g。
LC-MS(ESI)m/z:470(M+H). 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)0.83-0.97(m，6H)，1.03-1.10(m，3H)，1.24-1.43(m，2H)，1.57-1.95(m，2H)，2.29-2.35(m，1H)，2.51-2.87(m，5H)，3.01-3.19(m，3H)，3.35-3.41(m，1H)，4.02-4.21(m，2H)，4.51-4.62(m，1H)7.32-7.43(m，4H)，8.50-8.61(m,1H)，10.85(s，1H)。
流程H：
Figure PCTCN2021093813-appb-000108
反应条件：a)叔丁基哌嗪-1-羧酸酯，N-甲基吡咯烷酮，4-二甲氨基吡啶；b)二氯甲烷，氯化氢/1,4-二氧六环溶液(4.0M)；c)二异丙基乙胺，N,N-二甲基甲酰胺，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯,1-(叔丁氧基羰基)-4-(4-氯苯基)哌啶-4-羧酸；d)二氯甲烷，氯化氢/1,4-二氧六环溶液(4.0M)。
实施例18：(R)-4-(4-(4-(4-氯苯基)哌啶-4-羰基)哌嗪-1-基)-5-甲基-5,6-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲酸盐
Figure PCTCN2021093813-appb-000109
a)(R)-4-(5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
20℃时将(R)-4-氯-5-甲基-5,6-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(400mg)、叔丁基哌嗪-1-羧酸酯(1.8g)和4-二甲氨基吡啶(494mg)溶于N-甲基吡咯烷酮(10mL),反应液用氮气置换三次,并在氮气保护下升温至150℃，反应4小时。反应完全后，将反应液倒入20mL乙酸乙酯中，用水洗涤(2mL*2),再以0.5M稀盐酸洗涤pH至5-6。分液，有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品。粗品通过快速过柱仪柱分离纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝2:1，体积比)得到白色固体0.6g。LC-MS(ESI)m/z:348(M+H)。
b)(R)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5,6-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮
18℃时将(R)-4-(5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)叔丁基哌嗪-1-羧酸酯(0.6g)溶于二氯甲烷(2mL),并滴入氯化氢/1,4-二氧六环溶液(4.0M，5mL)，于18℃反应2小时。反应完全后，将反应液减压蒸去溶剂得到油状目标产物，产物用二氯甲烷溶解，并加入氢氧化钠固体，搅拌至油状物溶解，过滤除去固体，剩余物浓缩得到白色固体(0.3g)，直接用于下一步。
c)(R)-4-(4-氯苯基)-4-(4-(5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基))哌嗪-1-羰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
18℃时将(R)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5,6-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(150mg)，(1-(叔丁氧基羰基)-4-(4-氯苯基)哌啶-4-羧酸(247mg)，二异丙基乙胺(235mg)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(346mL)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(3mL)，于18℃反应12小时。反应完全后，将反应液倒入乙酸乙酯中(20mL)并用水(5mL*3)洗涤，减压蒸去有机相得到粗品。粗品通过硅胶柱分离(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1:2，体积比)纯化后得到无色油状目标产物280mg，直接用于下一步。
d)(R)-4-(4-(4-(4-氯苯基)哌啶-4-羰基)哌嗪-1-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮甲酸盐
15℃将(R)-4-(4-氯苯基)-4-(4-(5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基))哌嗪-1-羰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(280mg)溶于二氯甲烷(5mL)然后滴入氯化氢/1,4-二氧六环溶液(4.0M，5mL)，于15℃反应1.5小时。反应完全后，将反应液浓缩得到白色粗品。粗品通过高效液相制备分离得到60mg目标产物。制备条件：色谱柱：Kromasil 10μm C18 50×250mm，流动相A：水(含0.1％甲酸)，流动相B：甲醇。梯度：时间0-10min，B相20％；10-30min，B相20-50％；30-40min，B相50％(体积比)，RT＝31.4min。LC-MS(ESI)m/z＝469[M+H]. 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)10.62(s，1H)，8.41(s，1H)，8.26(s，1H)，7.48(d，J＝8.3Hz，2H)，7.29(d，J＝8.3Hz，2H)，2.74-3.74(m，12H)，2.49-2.50(m，2H)，2.22-2.26(m，3H)，1.96-2.00(m，2H)，0.97-0.99(m，3H)。
流程I：
Figure PCTCN2021093813-appb-000110
反应条件：a)甲基丙烯酸甲酯，甲醇钠，甲醇；b)乙酸甲脒，甲醇钠，甲醇；c)三氯氧磷，二异丙基乙胺，乙腈；d)氨水(25-28％wt)；e)叔丁基哌嗪-1-羧酸酯,N,N-二甲基吡啶-4-胺,N-甲基吡咯烷酮；f)氯化氢/1,4-二氧六环溶液(4.0M)；g)(S)-3-((叔丁氧羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸，二异丙基乙胺，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，N,N-二甲基甲酰胺；h)氯化氢/1,4-二氧六环溶液(4.0M)。
实施例19：4-(4-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙氨基)丙基)哌嗪-1-基)-6-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮盐酸盐
Figure PCTCN2021093813-appb-000111
a)1,1,3-三羧酸三甲基丁烷
在氮气保护下，20℃时将甲醇钠(2.45g)分散在甲醇中(50mL)，加入丙二酸二甲酯(5g)和甲基丙烯酸甲酯(3.75g)，升温至60℃，反应16小时。反应完全后，将反应液减压蒸去溶剂，得到黄色液体5g，直接用于下一步。
b)3-(4,6-二羟基嘧啶-5-基)-2-甲基丙酸甲酯
在氮气保护下，20℃时将甲醇钠(11.67g)溶解在甲醇中(30mL)，冷却至0℃搅拌下加入乙酸甲脒(2.44g)，反应30min，然后滴加1,1,3-三羧酸三甲基丁烷(5g)，于20℃反应16小时。反应完全后，向反应液中加入盐酸异丙醇(4.0M)调节pH＝5,减压蒸去溶剂，冷却至0℃，析出固体，抽滤，滤饼用水洗涤(50mL)，烘干滤饼，得到淡黄色固体3.7g，直接用于下一步。
c)3-(4,6-二氯嘧啶-5-基)-2-甲基丙酸甲酯
在氮气保护下，22℃将3-(4,6-二羟基嘧啶-5-基)-2-甲基丙酸甲酯(3g)分散在乙腈中(60mL)，先后滴加三氯氧磷(2.91mL)和二异丙基乙胺(1.18mL)，体系放热明显，固体逐渐溶清，随即升温至90℃，反应16小时。反应完全后，将反应液倾入水(100mL)中，再加入乙酸乙酯(100mL)萃取。有机相加入饱和氯化钠溶液(100mL*3)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干。产品经硅胶层析柱纯化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1，体积比)得到白色固体1.50g，直接用于下一步。
d)4-氯-6-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
20℃时将3-(4,6-二氯嘧啶-5-基)-2-甲基丙酸甲酯(1.5g)加入氨水(3mL)中，20℃反应16小时。反应完全后，将反应液倾入水(100mL)中，再加入乙酸乙酯(100mL)萃取。有机相加入饱和氯化钠溶液(100mL*3)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干。产品经硅胶层析柱纯化(石油醚:乙酸乙酯＝4:1，体积比)得到白色固体0.30g。LC-MS(ESI)m/z:199(M+H).
e)4-(6-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
20℃下向溶有4-氯-6-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮(0.1g)的N-甲基吡咯烷酮溶液(3mL)中加入叔丁基哌嗪-1-羧酸酯(0.28g)和N,N-二甲基吡啶-4-胺(0.31g)，将反应混合物在150℃下搅拌3小时。反应完全后，将反应液倾入水(100mL)中，再加入乙酸乙酯(100mL)萃取。有机相加入饱和氯化钠溶液(100mL*3)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸去溶剂。产品经层析硅胶板纯化(石油醚:乙酸乙酯＝1:1，体积比)得到白色固体0.31g。LC-MS(ESI)m/z:348.2(M+H).
f)6-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
20℃下向4-(6-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.1g)中加入氯化氢/1,4-二氧六环溶液(4.0M 10mL)，将反应混合物在20℃下搅拌3小时。反应完全后，减压蒸去溶剂得到近白色固体(0.1g)。LC-MS(ESI)m/z:248.2(M+H).
g)(2S)-2-(4-氯苯基)-3-(4-(6-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧丙基(异丙基)氨基甲酸叔丁酯
在20℃下向溶有6-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮(0.1g)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中加入(S)-3-((叔丁氧羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.17g)，二异丙基乙胺(0.16 g)。将反应混合物搅拌2min。再20℃加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(0.23g)将反应混合物在20℃下搅拌1小时。反应完全后，将反应液倾入水(100mL)中，再加入乙酸乙酯(100mL)萃取。有机相加入饱和氯化钠溶液(100mL*3)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸去溶剂。产品经层析硅胶板纯化(石油醚:乙酸乙酯＝1:2，体积比)得到白色固体0.08g，直接用于下一步。
h)4-(4-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙氨基)丙酰基)-哌嗪-1-基)-6-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮盐酸盐
20℃下向(2R)-2-(4-氯苯基)-3-(4-(6-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧丙基(异丙基)氨基甲酸叔丁酯(0.2g)中加入氯化氢/1,4-二氧六环溶液(4.0M，3mL)。将反应混合物在20℃下搅拌3小时。反应完全后，反应液减压蒸去溶剂经制备分离得到近白色固体0.06g。LC-MS(ESI)m/z:471(M+H). 1H NMR(400MHz，MeOD)δ8.42(d，J＝4.5Hz，1H)，7.54–7.33(m，4H)，4.64–4.52(m，1H)，3.96–3.81(m，2H)，3.79–3.73(m，2H)，3.70–3.66(m，2H)，3.63–3.56(m，1H)，3.51–3.40(m，2H)，3.24–3.16(m，1H)，3.09–2.94(m，1H)，2.84(s，1H)，2.79–2.66(m，2H)，1.44–1.35(m，6H)，1.33–1.25(m，3H)。
异构体分离：
采用超临界流体色谱法对上述标题化合物进行手性拆分。拆分仪器及条件：Waters SFC200；色谱柱：Daicel Chiralcel AS,250×30mm I.D.,5μm；流动相：A为CO 2，B为甲醇(0.1％NH 3H 2O)，A:B＝90:10(体积比)；流速60mL/min，柱温38℃。
异构体1：
Figure PCTCN2021093813-appb-000112
LCMS(ESI)m/z:471(M+H). 1H NMR(400MHz，CDCl 3)δ8.36(s，1H)，7.86(s，1H)，7.32-7.37(m，2H)，7.21-7.27(m，2H)，4.18(s，1H)，3.89-4.00(m，1H)，3.65-3.74(m，1H)，3.53-3.64(m，2H)，3.44-3.52(m，1H)，3.35-3.42(m，2H)，3.27-3.34(m，2H)，2.87-2.94(m，1H)，2.74-2.82(m，2H)，2.57-2.64(m，1H)，2.47-2.54(m，1H)，1.32(d，J＝6.6Hz，3H)，1.07-1.19(m，6H)。
异构体2：
Figure PCTCN2021093813-appb-000113
LCMS(ESI)m/z:471(M+H). 1H NMR(400MHz，CDCl 3)δ8.37(s，1H)，7.33-7.38(m，2H)，7.21-7.27(m，2H)，4.09(s，1H)，3.83-3.91(m，1H)，3.62-3.72(m，1H)，3.47(s，3H)，3.26-3.34(m，2H)，3.12-3.21(m，1H)，2.69-2.98(m，5H)，2.50-2.66(m，2H)，1.32(d，J＝6.7Hz，3H)，1.11(dd，J＝14.8，6.2Hz，6H)。
流程J：
Figure PCTCN2021093813-appb-000114
反应条件：a)溴乙酸乙酯，氢化钠，四丁基碘化铵，四氢呋喃；b)2,4二甲氧基苯甲胺，三乙胺，异丙醇；c)碘甲烷，氢化钠，N,N二甲基甲酰胺；d)三氟乙酸；e)叔丁基哌嗪-1-羧酸酯，4-二甲氨基吡啶，N-甲基吡咯烷酮；f)氯化氢/1,4-二氧六环溶液(4.0M)；g)(S)-3-((叔丁氧羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸，二异丙基乙胺，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，N,N二甲基甲酰胺；h)氯化氢/1,4-二氧六环溶液(4.0M)。
实施例20：(S)-4-(4-(2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)-5-甲基-5,8-二氢蝶啶-7(6H)-酮盐酸盐
Figure PCTCN2021093813-appb-000115
a)2-((4,6-二氯嘧啶-5-基)氨基)乙酸乙酯
0℃下向溶有4，6-二氯-5-氨基嘧啶(10.0g)的四氢呋喃溶液(100mL)中加入氢化钠(2.93g)。将反应混合物搅拌2min。自然升温至20℃后加入溴乙酸乙酯(12.22g)，再加入四丁基碘化铵(27.03g)。将反应混合物在20℃下搅拌16小时。反应完全后，将反应液倾入水(100mL)中，搅拌30min，再加入乙酸乙酯(100mL)萃取。有机相以饱和氯化钠溶液(100mL*3)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸去溶剂。产品经硅胶层析柱纯化(石油醚:乙酸乙酯＝20:1，体积比)得到无色油状物6.5g，直接用于下一步。
b)4-氯-8-(2,4-二甲氧基苄基)-5,8-二氢蝶啶-7(6H)-酮
20℃下向溶有2-((4,6-二氯嘧啶-5-基)氨基)乙酸乙酯(5g)的异丙醇溶液(150mL)中加入2,4-二甲氧基苯甲胺(3.67g)，然后加入三乙胺(4.45g)。将反应混合物在80℃下搅拌18小时。反应完全后，反应液过滤，滤饼用乙醇洗涤后减压干燥得到近白色固体5.0g，直接用于下一步。
c)4-氯-8-(2,4-二甲氧基苄基)-5-甲基-5,8-二氢蝶啶-7(6H)-酮
0℃下向溶有4-氯-8-(2,4-二甲氧基苄基)-5,6-二氢蝶啶-7(8H)-酮(3.3g)的N,N-二甲基甲酰胺溶液(30mL)中加入碘甲烷(1.68g)，将反应混合物搅拌20min。保持0℃并加入氢化钠(0.47g)。将反应混合物继续在0℃下搅拌3小时。反应完全后，将反应液倾入水(100mL)中，再加入乙酸乙酯(100mL)萃取。有机相加入饱和氯化钠溶液(100mL*3)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸去溶剂。产品经硅胶层析柱纯化(石油醚:乙酸乙酯＝5:1，体积比)得到产品白色固体1.5g，直接用于下一步。
d)4-氯-5-甲基-5,8-二氢蝶啶-7(6H)-酮
在20℃下向4-氯-8-(2,4-二甲氧基苄基)-5-甲基-5,6-二氢蝶啶-7(8H)-酮(5g)中加入三氟乙酸(20mL)。将反应混合物在60℃下搅拌16小时。反应完全后，减压蒸去溶剂得到近紫色固体(1.0g)。LC-MS(ESI)m/z:199.1(M+H). 1H NMR(300MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)11.60(s，1H)，8.35(s，1H)，3.77(s,2H)，2.85(s，3H)。
e)4-(5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢蝶啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
20℃下向溶有4-氯-5-甲基-5,8-二氢蝶啶-7(6H)-酮(0.3g)的N-甲基吡咯烷酮溶液(5mL)中加入叔丁基哌嗪-1-羧酸酯(0.85g)，4-二甲氨基吡啶(0.93g)。将反应混合物在150℃下搅拌3小时。反应完全后，将反应液倾入水(100mL)中，再加入乙酸乙酯(100mL)萃取。有机相加入饱和氯化钠溶液(100mL*3) 洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸去溶剂。产品经层析硅胶板纯化(石油醚:乙酸乙酯＝1:1，体系比)得到白色固体0.27g，直接用于下一步。
f)5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5,8-二氢蝶啶-7(6H)-酮
在20℃下向4-(5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢蝶啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.1g)中加入氯化氢/1,4-二氧六环溶液(4.0M，3mL)，将反应混合物在20℃下搅拌3小时。反应完全后，减压蒸去溶剂得到近白色固体(0.1g)。
g)(S)-(2-(4-氯苯基)-3-(4-(5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢蝶啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧丙基(异丙基)氨基甲酸叔丁酯
20℃下向溶有5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5,6-二氢蝶啶-7(8H)-酮(0.1g)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中加入(S)-3-((叔丁氧羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.17g)，二异丙基乙胺(0.16g)，将反应混合物搅拌2min，再于20℃加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(0.23g)，随后将反应混合物在20℃下搅拌1小时。反应完全后，将反应液倾入水(100mL)中，再加入乙酸乙酯(100mL)萃取。有机相加入饱和氯化钠溶液(100mL*3)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸去溶剂。产品经层析硅胶板纯化(石油醚:乙酸乙酯＝1:1.5，体积比)得到产品白色固体0.08g。LC-MS(ESI)m/z:572(M+H)。
h)(S)-4-(4-(2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)-5-甲基-5,8-二氢蝶啶-7(6H)-酮盐酸盐
20℃下向(S)-(2-(4-氯苯基)-3-(4-(5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢蝶啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基(异丙基)氨基甲酸叔丁酯(0.08g)中加入氯化氢/1,4-二氧六环溶液(4.0M，3mL)，将反应混合物在20℃下搅拌3小时。反应完全后，反应液减压蒸去溶剂经制备分离得到近白色固体0.02g。LC-MS(ESI)m/z:472(M+H). 1H NMR(300MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)10.94(s，1H)，8.12(s，1H)，7.46-7.51(m，2H)，7.37-7.43(m，2H)，4.68-4.74(m，1H)，3.81-3.91(m，2H)，3.64-3.74(m，2H)，3.59-3.63(m，2H)，3.52-3.59(m，4H)，3.25-3.34(m，2H)，2.95-3.03(m，1H)，2.48(s，3H)，1.20-1.28(m，6H)。
实施例21：4-(8-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)-5-甲基-5,8-二氢蝶啶-7(6H)-酮甲酸盐
Figure PCTCN2021093813-appb-000116
如实施例20描述的方法制备，采用3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯替换叔丁基哌嗪-1-羧酸酯，目标产物高效制备液相条件：色谱柱：Aglient 5μm prep-C18 50×21.2mm，流动相A：水(含0.1％甲酸)；流动相B：乙腈。梯度：时间0-10min，B相5-75％(体积比)，RT＝3.4min。LC-MS(ESI)m/z:498(M+H). 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)10.89(s，1H)，8.27(s，1H)，8.10(d，J＝25.6Hz，1H)，7.31–7.48(m，4H)，4.48–4.68(m，3H)，4.09–4.30(m，2H)，3.50–3.60(m，3H)，3.11–3.24(m，2H)，2.62–2.84(m，3H)，2.37–2.47(m，3H)，1.49–1.88(m，4H)，0.89–1.02(m，6H)。
实施例22：4-((S)-4-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)-3-甲基哌嗪-1-基)-5-甲基-5,8-二氢蝶啶-7(6H)-酮
Figure PCTCN2021093813-appb-000117
如实施例20描述的方法制备，采用(S)-1-N-Boc-2-甲基哌嗪替换叔丁基哌嗪-1-羧酸酯，最终产物在0℃下加入10％氢氧化钠溶液调节pH＝9，二氯甲烷(10mL×3)萃取，饱和食盐水(15mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸去有机相得白色固体70mg。LC-MS(ESI)m/z:486(M+H). 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)10.88(s，1H)，8.09(d，J＝5.6Hz，1H)，7.35-7.42(m，3H)，7.27(d，J＝8.4Hz，1H)，4.55-4.74(m，3H)，4.44-4.53(m，1H)，4.31-4.39(m，1H)，4.16-4.26(m，1H)，4.00-4.10(m，1H)，3.87-3.96(m，1H)，3.04-3.16(m，2H)，2.87-2.96(m，1H)，2.77-2.85(m，1H)，2.56-2.63(m，2H)，2.42-2.47(m，3H)，1.18-1.29(m，3H)，0.90-0.96(m，6H)。
流程K:
Figure PCTCN2021093813-appb-000118
反应试剂：a)氨水(25％-28％wt)，四氢呋喃；b)乙腈，叔丁基哌嗪-1-羧酸酯，N,N-二异丙基乙胺；c)硼氢化钠，甲醇，饱和氯化铵水溶液；d)碳酸三氯甲基酯,N,N-二异丙基乙胺,四氢呋喃；e)二氯甲烷，氯化氢/1,4-二氧六环溶液(4.0M)；f)(S)-3-((叔丁氧基羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸，N,N-二异丙基乙胺，N,N-二甲基甲酰胺，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯；g)二氯甲烷，氯化氢/1,4-二氧六环溶液(4.0M)。
实施例23：5-(4-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)-4-甲基-1,4-二氢-2H-嘧啶并[4,5-d][1,3]恶嗪-2-酮甲酸盐
Figure PCTCN2021093813-appb-000119
a)1-(4-氨基-6-氯嘧啶-5-基)乙酮
20℃时将1-(4,6-二氯嘧啶-5-基)乙酮(2.5g)，溶于四氢呋喃(15mL)然后加入氨水(9g),反应液在20℃搅拌5小时，然后浓缩并加少量水稀释，抽滤得到白色固体，真空干燥后得到白色固体2g，直接用于下一步。
b)4-(5-乙酰基-6-氨基嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
20℃时将(1-(4-氨基-6-氯嘧啶-5-基)乙酮(2g)，N,N-二异丙基乙胺(3g)溶于乙腈(20mL),然后加入1-(4-氨基-6-氯嘧啶-5-基)乙酮，反应液在40℃搅拌5小时。反应完全后，减压蒸去溶剂得到粗产品，粗产品通过硅胶层析柱分离纯化(乙酸乙酯：石油醚＝1:1，体积比)得到淡黄色固体3.2g，直接用于下一步。
c)4-(6-氨基-5-(1-羟乙基)嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
20℃时将4-(5-乙酰基-6-氨基嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.5g)溶于甲醇(15mL)并冷却至-10℃，再分批加入硼氢化钠(1g)，完毕后反应液缓慢升温至20℃继续搅拌3小时。反应完全后，将反应液用饱和氯化铵水溶液淬灭。然后将反应液浓缩并用乙酸乙酯(20m L*2)打浆。母液浓缩得到油状粗产品。粗产品通过硅胶层析柱分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝1:30，体积比)得到白色油状产物400mg。LC-MS(ESI):m/z＝324[M+H]。
d)4-(4-甲基-2-氧代-1,4-二氢-2H-嘧啶并[4,5-d][1,3]恶嗪-5-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
20℃时将4-(6-氨基-5-(1-羟乙基)嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(300mg)N,N-二异丙基乙胺(282mg)溶于四氢呋喃(3mL)，然后降温至-5℃并缓慢加入碳酸三氯甲基酯，并在-5℃搅拌0.5小时。随后缓慢升温至18℃搅拌1.5小时。反应完全后，用碳酸氢钠水溶液淬灭反应，并用乙酸乙酯(10mL*3)萃取，合并有机相并以无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到油状粗品。粗产品通过硅胶层析柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯＝1:1，体积比)得到白色固体108mg)。LC-MS(ESI)m/z＝350[M+H]。
e)4-甲基-5-(哌嗪-1-基)-1,4-二氢-2H-嘧啶并[4,5-d][1,3]恶嗪-2-酮盐酸盐
20℃时将4-(4-甲基-2-氧代-2,4-二氢-1H-嘧啶并[4,5-d][1,3]恶嗪-5-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(100mg)溶于二氯甲烷(3mL)并搅拌状态下加入氯化氢/1,4-二氧六环溶液(4.0M，3mL)，反应液在20℃搅拌1小时，有白色固体析出。将反应液减压蒸去溶剂得到白色固体目标产物80mg，直接用于下一步。
f)(2S)-2-(4-氯苯基)-3-(4-(4-甲基-2-氧代-1,4-二氢-2H-嘧啶并[4,5-d][1,3]恶嗪-5-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基)(异丙基)氨基甲酸叔丁酯
20℃时将4-甲基-5-(哌嗪-1-基)-1H-嘧啶并[4,5-d][1,3]恶嗪-2(4H)-酮(80mg),(S)-3-((叔丁氧基羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(100mg)，N,N-二异丙基乙胺(113mg)和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(167mg)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(2.5mL),反应液在20℃搅拌12小时。反应完全后，将反应液倒入乙酸乙酯(20mL)中,并用水洗涤两次，氯化钠水溶液洗涤一次，有机相浓缩得到粗产品。粗产品通过硅胶层析柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯＝1:1，体积比)得到白色固体130mg。LC-MS(ESI)m/z＝573[M+H]。
g)5-(4-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)-4-甲基-1,4-二氢-2H-嘧啶并[4,5-d][1,3]恶嗪-2-酮甲酸盐
20℃时将(2S)-2-(4-氯苯基)-3-(4-(4-甲基-2-氧代-2,4-二氢-1H-嘧啶并[4,5-d][1,3]叔丁基]恶嗪-5-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基)(异丙基)氨基甲酸叔丁酯(130mg)溶于二氯甲烷(2mL)并搅拌状态下加入氯化氢/1,4-二氧六环溶液(4.0M，2mL)，反应液在20℃搅拌2小时。反应完全后，将反应液冷却至0℃，加入10％氢氧化钠溶液调节pH＝9，二氯甲烷(10mL×3)萃取，饱和食盐水(15mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸去有机相，残留物通过高效制备液相分离纯化得到白色固体32mg。制备条件：色谱柱：Aglient 5μm prep-C18 50×21.2mm，流动相A：水(含0.1％甲酸)；流动相B：乙腈，梯度：时间0-10min，B相5-45％(体积比)，RT＝3.7min。LC-MS(ESI):m/z＝473[M+H]。 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)8.22-8.31(m，2H)，7.37-7.45(m,2H)，7.28-7.36(m，2H)，5.68-5.81(m,1H)，4.18-4.28(m，1H)，3.41-3.78(m，8H)，3.03-3.26(m，3H)，2.89-3.01(m，1H)，2.74–2.83(m，1H).2.64–2.72(m，1H).1.33–2.49(m，3H).0.89–1.04(m，6H)。
异构体分离：
采用超临界流体色谱法对上述标题化合物进行手性拆分。拆分仪器及条件：waters SFC200；色谱柱：Daicel Chiralcel AD,250×30mm I.D.,5μm；流动相：A为CO 2，B为甲醇(0.1％NH 3H 2O)，A:B＝65:35(体积比)；流速60mL/min，柱温38℃。
异构体1：
Figure PCTCN2021093813-appb-000120
LCMS(ESI):m/z＝473(M+H). 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ8.28(s，1H)，7.47–7.23(m，4H)，5.76(d，J＝6.3Hz，1H)，4.15(s，1H)，3.75–3.44(m，6H)，3.28-3.20(m，2H)，3.15–3.04(m，2H)，2.74–2.58(m，2H)，1.41(d，J＝6.2Hz，3H)，0.93(t，J＝6.9Hz，6H)。
异构体2：
Figure PCTCN2021093813-appb-000121
LCMS(ESI):M/Z＝473(M+H). 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ10.85(s，1H)，8.29(s，1H)，7.43(dd，J＝42.1，8.2Hz，4H)，5.75(q，J＝6.2Hz，1H)，4.76–4.54(m，1H)，3.79–3.39(m，8H)，3.32–3.20(m，2H)，3.10–2.85(m，2H)，1.43(d，J＝6.4Hz，3H)，1.25(t，J＝5.6Hz，6H)。
实施例24：
Figure PCTCN2021093813-appb-000122
按照流程F描述的方法，采用3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯替换叔丁基哌嗪-1-羧酸酯。终产物经超临界流体色谱法分离得到异构体1和异构体2。拆分仪器及条件：waters SFC200；色谱柱：Daicel Chiralcel OD,250×30mm I.D.,5μm；流动相：A为CO 2，B为乙醇(0.1％NH 3H 2O)，A:B＝70:30(体积比)；流速60mL/min，柱温38℃。
异构体1：LCMS(ESI)m/z:551(M+H). 1HNMR(300MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)：1.28-1.11(m，6H)，2.10–1.47(m，6H)，3.18-2.75(m，7H)，4.28-3.65(m，5H)，4.85-4.83(m，1H)，7.41–7.25(m，4H),8.42-8.33(m，1H)。
异构体2：LCMS(ESI)m/z:551(M+H). 1HNMR(300MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)：2.28-1.20(m，13H)，3.43-2.89(m，6H)，4.37-3.71(m，5H)，4.86-4.81(m,1H)，7.39–7.27(m，4H)，8.36(s，1H)。
实施例25：
Figure PCTCN2021093813-appb-000123
按照流程F描述的方法，采用3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯替换叔丁基哌嗪-1-羧酸酯。终产物经超临界流体色谱法分离得到异构体1和异构体2。拆分仪器及条件：waters SFC200；色谱柱：Daicel Chiralcel OZ,250×30mm I.D.,5μm；流动相：A为CO 2，B为乙醇(0.1％NH 3H 2O)，A:B＝60:40(体积比)；流速60mL/min，柱温38℃。
异构体1：
LCMS(ESI)m/z:551(M+H). 1HNMR(400MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)：0.98-0.92(m,6H)，1.96-1.57(m，3H)，2.87-2.59(m，5H)，3.29-3.12(m，2H)，3.63-3.42(m，2H)，3.99(s，1H)，4.67-4.24(m，5H)，7.46-7.27(m，4H)，8.30(d,J＝3.6Hz，1H)，10.84(s，1H)。
异构体2：
LCMS(ESI)m/z:551(M+H). 1HNMR(400MHz，DMSO-d 6)δ(ppm):0.98-0.89(m,6H)，2.03-1.54(m，4H)，2.76-2.57(m,4H)，3.27-2.95(m，4H)，3.70-3.67(m，1H)，3.99-3.95(m，1H)，4.67-4.20(m，4H)，7.45-7.27(m，4H)，8.28(s，1H)，10.83(s，1H)。
实施例26：
Figure PCTCN2021093813-appb-000124
按照流程J描述的方法，采用3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯替换叔丁基哌嗪-1-羧酸酯。LCMS(ESI):m/z＝498(M+H). 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ10.86(s，1H)，8.06-8.15(m，1H)，7.23-7.47(m，4H)，4.85-5.09(m，2H)，4.11–4.31(m，2H)，3.92–4.04(m，1H)，3.54–3.62(m，2H)，3.05–3.17(m，1H)，2.84–2.95(m，1H)，2.72–2.82(m，1H)，2.55–2.63(m，1H)，2.41(s，3H)，1.91(s，1H)，1.61-1.77(m，1H)，1.40-1.55(m，1H)，1.22–1.33(m，1H)，0.84-1.01(m，6H)，0.40–0.53(m，1H)。
实施例27：
Figure PCTCN2021093813-appb-000125
按照流程J描述的方法，采用2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-羧酸叔丁酯替换叔丁基哌嗪-1-羧酸酯。终产物采用超临界流体色谱法分离得到异构体1和异构体2。拆分仪器及条件：Waters SFC200；色谱柱：Daicel Chiralcel OZ,250×30mm I.D.,5μm；流动相：A为CO 2，B为乙醇(0.1％NH 3H 2O)，A:B＝60:40(体积比)；流速60mL/min，柱温38℃。
超高效合相色谱条件:色谱柱：Daicel Chiralcel AD,2.1×150mm I.D.,3μm，流动相A：CO 2，流动相B：乙醇(0.1％DEA)，梯度：时间0-8min，B相5-40％(体积比)；流速：1mL/min；柱温40℃。异构体1：RT＝4.0min；异构体2：RT＝4.8min。
异构体1：LCMS(ESI):m/z＝484(M+H). 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ10.97(s，1H)，8.17–8.25(m，1H)，7.38-7.52(m，4H)，4.44–4.51(m，1H)，4.20-4.38(m，1H)，3.65–3.78(m 1H)，3.50–3.63(m，4H)，3.13-3.33(m，3H)，2.69–2.86(m，2H)，2.49–2.58(m，3H)，1.44-1.51(m，1H)，0.93–1.06(m，7H)，0.51(d，J＝5.6Hz，1H)。
异构体2：LCMS(ESI):m/z＝484(M+H). 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ10.89(s，1H)，7.99–8.19(m，1H)，7.16-7.47(m，4H)，4.07-4.36(m，2H)，3.56-3.69(m，2H)，3.39-3.54(m，3H)，3.03-3.25(m，3H)，2.71–2.79(m，1H)，2.57–2.69(m，2H)，2.27-2.32(m，3H)，1.23–1.35(m，1H)，0.80–1.02(m，6H)，0.66(q，J＝4.9Hz，1H)。
实施例28：
Figure PCTCN2021093813-appb-000126
按照流程J描述的方法，采用碘乙烷替换碘甲烷，采用3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯替换叔丁基哌嗪-1-羧酸酯。LCMS(ESI):m/z＝512(M+H). 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ10.88(s，1H)，8.15(d，J＝26.0Hz，1H)，7.54–7.39(m，4H)，4.71–4.52(m，4H)，4.26-4.19(m，1H)，4.15-4.06(m，1H)，3.75–3.57(m，2H)，3.29–3.11(m，2H)，3.01-2.93(m，1H)，2.85-2.78(m，1H)，2.72-2.64(m，4H)，2.09-1.98(m，1H)，1.96-1.86(m，1H)，1.88–1.59(m，3H)，1.04–0.87(m，7H)。
实施例29：
Figure PCTCN2021093813-appb-000127
按照流程J描述的方法，采用溴乙腈替换碘甲烷。
LCMS(ESI):m/z：523(M+H). 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ11.02(s，1H)，8.16(d，J＝22.9Hz，1H)，7.38(dd，J＝11.8、2.4Hz，4H)，4.61–4.44(m，2H)，4.34–4.08(m，3H)，4.05–3.94(m，2H)，3.85–3.80(m，2H)，3.23–3.01(m，2H)，2.77–2.66(m，2H)，1.90–1.53(m，4H)，0.94(t，J＝5.6Hz，6H)。
实施例30：
Figure PCTCN2021093813-appb-000128
按照流程J描述的方法，采用1-氟-2-碘乙烷替换碘甲烷。
LCMS(ESI)m/z:530(M+H) 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ8.28(d，J＝5.3Hz，1H)，8.05-8.15(m，1H)，7.33-7.49(m，4H)，4.22-4.70(m，8H)，3.48-3.74(m，1H)，3.21-3.43(m，2H)，2.88-3.16(m，3H)，2.74-2.86(m，1H)，1.44-2.02(m，4H)，0.97-1.11(m，6H)。
流程J-1:
Figure PCTCN2021093813-appb-000129
反应条件：a)二甲基叔丁基(2-碘乙氧基)硅烷，氢化钠，N,N-二甲基甲酰胺；b)3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯，4-二甲氨基吡啶，N-甲基吡咯烷酮；c)氯化氢二氧六环溶液；d)(S)-3-((叔丁氧羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸，二异丙基乙胺，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，N,N二甲基甲酰胺；e)三氟乙酸，二氯甲烷。
实施例31：
Figure PCTCN2021093813-appb-000130
a)5-(2-((叔丁基二甲基硅基)氧乙基)-4-氯-8-(2,4-二甲氧基苄基)-5,8-二氢蝶啶-7(6H)-酮
在0℃下向溶有4-氯-8-(2,4-二甲氧基苄基)-5,8-二氢蝶啶-7(6H)-酮(2.2g)的N,N二甲基甲酰胺溶液(30mL)中加入氢化钠(0.53g)。将反应混合物搅拌20分钟。在0℃加入二甲基叔丁基(2-碘乙氧基)硅烷(2.82g)。将反应混合物在0℃下搅拌3小时。将反应液倾入水(100mL)中，再加入乙酸乙酯(100mL)萃取。有机相加入饱和氯化钠溶液(100mL*3)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干。产品经层析硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)得到产品白色固体0.8g。
b)5-(2-((叔丁基二甲基硅基)氧乙基)-4-(8-叔丁基氧基羰基-3,8-二氮杂双环[3,2,1]辛烷-3-基)-8-(2,4-二甲氧基苄基)-5,8-二氢蝶啶-7(6H)-酮
在20℃下向溶有步骤a)产物(0.2g)的N-甲基吡咯烷酮溶液(5mL)中加入3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(0.85g)，4-二甲氨基吡啶(0.17g)。将反应混合物在150℃下搅拌3小时。将反应液倾入水(100mL)中，再加入乙酸乙酯(100mL)萃取。有机相加入饱和氯化钠溶液(100mL*3)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干。产品经层析硅胶板纯化(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)得到产品白色固体0.08g。
c)4-(3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)-8-(2,4-二甲氧基苄基)-5-(2-羟乙基)-5,8-二氢蝶啶-7(6H)-酮
在20℃下向步骤b)产物(0.08g)中加入氯化氢二氧六环溶液(3mL)。将反应混合物在20℃下搅拌3小时。反应液旋干得到近白色固体(0.06g)。
d)叔丁基((S)-2-(4-氯苯基)-3-3-(8-(2,4-二甲氧基苄基)-5-(2-羟乙基)-7-氧代-5,6,7,8-四氢蝶啶-4-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-氨基甲酸基)-3-氧代丙基(异丙基)酯
在20℃下向溶有步骤c)产物(0.06g)的N,N二甲基甲酰胺(10mL)中加入(S)-3-((叔丁氧羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.04g)，二异丙基乙胺(0.03g)。将反应混合物搅拌2分钟。再20℃加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(0.04g)将反应混合物在20℃下搅拌1小时。将反应液倾入水(100mL)中，再加入乙酸乙酯(100mL)萃取。有机相加入饱和氯化钠溶液(100mL*3)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干。产品经层析硅胶板纯化(石油醚:乙酸乙酯＝1:2)得到产品白色固体0.04g。
e)4-8-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙氨基)丙酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)-5-(2-羟乙基)-5,6-二氢蝶啶-7(8H)-酮
在20℃下向步骤d)产物(40mg)中加入三氟乙酸(3mL)。将反应混合物在60℃下搅拌3小时。反应液旋干,加入NaHCO 3搅拌20min，过滤得到近白色固体(10mg)。LCMS(ESI)m/z:528(M+H). 1H NMR:(400MHz,DMSO-d 6)δ10.78(d，J＝19.6Hz，1H)，8.07(d，J＝29.4Hz，1H)，7.30–7.51(m，4H)，4.61–4.70(m，1H)，4.384–4.54(m，1H)，4.26–4.36(m，1H)，4.04–4.25(m，1H)，3.49–3.78(m，6H)，2.97–3.23(m，4H)，2.82–2.91(m，1H)，2.63–2.80(m，1H)，1.62–2.02(m，4H)，1.27–1.17(m，8H)。
实施例32：
Figure PCTCN2021093813-appb-000131
按照流程K描述的方法，采用3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯替换叔丁基哌嗪-1-羧酸酯。终产物采用超临界流体色谱法进行分离得到异构体1和异构体2。拆分仪器和条件：waters SFC200；色谱柱：Daicel Chiralcel OZ,250×30mm I.D.,5μm；流动相：A为CO 2，B为异丙醇(0.1％NH 3H 2O)；A:B＝60:40(体积比)；流速60mL/min，柱温38℃。
超高效合相色谱条件:色谱柱：Daicel Chiralcel AD,2.1×150mm I.D.,3μm；流动相A：CO 2，流动相B：异丙醇(0.1％DEA)，梯度：时间0-8min，B相5-40％(体积比)；流速：1mL/min；柱温40℃。异构体1：RT＝4.3min；异构体2：RT＝4.5min。
异构体1：
LCMS(ESI)m/z:499(M+H). 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ8.23(d，J＝11.7Hz，1H)，7.50–7.21(m，4H)，5.79-5.59(m，1H)，4.64-4.47(m，2H)，4.08–3.94(m，2H)，3.70–3.40(m，2H)，3.31-3.20(m，2H)，3.16–3.06(m，1H)，2.82(d，J＝9.2Hz，0.5H)，2.75–2.62(m，2H)，2.17(d，J＝8.7Hz，0.5H)1.96–1.49(m，4H)，1.46–1.28(m，3H)，0.98-0.87(m，6H)。
异构体2：
LCMS(ESI)m/z:499(M+H). 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ8.24(d，J＝16.4Hz，1H)，7.53–7.21(m，4H)，5.81–5.65(m，1H)，4.73–4.60(m，2H)，4.46(d，J＝4.9Hz，0.5H)，4.19(d，J＝5.1Hz，0.5H)，4.03(d，J＝9.3Hz，0.5H)，3.76(d，J＝9.3Hz，0.5H)，3.70-3.49(m，3H)，3.21–3.16(m，1H)，3.06-2.92(m,2H)，2.11–1.86(m，1.5H)，1.84–1.52(m，4H)，1.48-1.33(m，3.5H)，1.30–1.22(m，6H)。
实施例33：
Figure PCTCN2021093813-appb-000132
按照流程K描述的方法，采用3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯替换叔丁基哌嗪-1-羧酸酯。终产物采用超临界流体色谱法分离得到异构体1和异构体2。拆分仪器和条件：Waters SFC200；色谱柱：Daicel Chiralcel OZ,250×30mm I.D.,5μm；流动相：A为CO 2，B为乙醇(0.1％NH3H2O)；A:B＝60:40(体积比)；流速60mL/min，柱温38℃。
超高效合相色谱条件:色谱柱：Daicel Chiralcel AD,2.1×150mm I.D.,3μm，流动相A：CO 2，流动相B：乙醇(0.1％DEA)，梯度：时间0-8min，B相5-40％(体积比)，流速：1mL/min；柱温40℃。异构体1： RT＝4.6min；异构体2：RT＝5.0min。
异构体1：
LCMS(ESI)m/z:499(M+H). 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ10.87(s，1H)，8.23(d，J＝11.7Hz，1H)，7.50–7.21(m，4H)，5.80–5.76(m，1H)，4.68–4.64(m，1H)，4.44–4.39(m，1H)，4.33–4.14(m，2H)，4.07–3.88(m，2H)，3.66–3.62(m，1H)，3.16–2.88(m，2H)，2.79–2.55(m，4H)，2.01–1.77(m，1H)，1.72–1.49(m，2H)，1.48–1.36(m，2H)，1.31–1.18(m，1H)，1.04–0.85(m，4H)，0.54–0.44(m，1H)。
异构体2：
LCMS(ESI)m/z:499(M+H). 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ10.69(s，1H)，8.24(d，J＝3.8Hz，1H)，7.53–7.21(m，4H)，5.80–5.76(m，1H)，4.64–4.48(m，1H)，4.43–4.42(m，1H)，4.27–4.18(m，1H)，4.02–3.92(m，1H)，3.68–3.60(m，1H)，3.21–3.02(m，1H)，2.95–2.64(m,4H)，2.02–1.70(m，2H)，1.60–1.22(m，5H)，1.04–0.83(m，6H)，0.43–0.40(m，1H)。
实施例34：
Figure PCTCN2021093813-appb-000133
a)1-(4-氨基-6-氯嘧啶-5-基)乙酮(化合物34-1)
20℃下将1-(4,6-二氯嘧啶-5-基)乙酮(2.5g)溶于四氢呋喃(15mL)，然后加入氨水(9g)，反应液在20℃搅拌5小时，然后浓缩并加少量水稀释，抽滤得到白色固体，真空干燥后得到白色固体2g，直接用于下一步。
b)1-(4-氨基-6-氯嘧啶-5-基)乙烷-1-醇(化合物34-2)
20℃时将1-(4-氨基-6-氯嘧啶-5-基)乙酮(1.5g)溶于甲醇(15mL)并冷却至-10℃，再分批加入硼氢化钠(1g)，完毕后反应液缓慢升温至20℃继续搅拌3小时。反应完全后，将反应液用饱和氯化铵水溶液淬灭。然后将反应液浓缩并用乙酸乙酯(20mL*2)打浆。母液浓缩得到油状粗产品。粗品经层析柱分离得到白色油状产物400mg。LC-MS(ESI)m/z:174(M+H)。
c)5-氯-4-甲基-1,4-二氢-2H-嘧啶[4,5-d][1,3]恶嗪-2-酮(化合物34-3)
20℃时将1-(4-氨基-6-氯嘧啶-5-基)乙烷-1-醇(300mg)、N,N-二异丙基乙胺(282mg)溶于四氢呋喃(3mL)，然后降温至-5℃并缓慢加入二(三氯甲基)碳酸酯(300mg)，并在-5℃搅拌0.5小时。随后缓慢升温至18℃搅拌1.5小时。反应完全后，用碳酸氢钠水溶液淬灭反应，并用乙酸乙酯(10mL*3)萃取，合并有机相并以无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到油状粗品。粗品经柱层析柱分离纯化得到白色固体108mg。LC/MS(ESI)m/z:200(M+H)。
d)(S)-5-氯-4-甲基-1,4-二氢-2H-嘧啶[4,5-d][1,3]恶嗪-2-酮(化合物34-4a)及(R)-5-氯-4-甲基-1,4- 二氢-2H-嘧啶[4,5-d][1,3]恶嗪-2-酮(化合物34-4b)
将化合物34-3通过SFC手性柱拆分得到所需目标产物化合物34-4a和化合物34-4b。
SFC手性拆分条件如下：仪器:waters SFC200；分离柱:Daicel Chiralcel AD,250×50mm I.D.,10μm；流动相:A：CO 2，B：甲醇(0.1％NH 3H 2O)，A：B＝65：35(体积比)；流速:150mL/min；压力:100bar；柱温:38℃；检测波长:220nm；循环时间:14min；样品预处理:10g溶于300ml MeOH；进样量:16ml。
后处理:将样品40℃浓缩后冻干分别得到标题化合物34-4a和化合物34-4b。
路线一：异构体1和异构体4的制备
e)5-((S)4-甲基-2-氧代-1,4-二氢-2H-嘧啶基[4,5-d][1,3]恶嗪-5-基)-2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-羧酸叔丁酯(化合物34-5a)
将化合物34-4a(2g)、2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-羧酸叔丁酯(3.58g)溶于无水MeCN(20mL)，并加入DIEA(3.89g),反应液用氮气吹扫后，封管95℃搅拌6小时，反应完毕后，浓缩得到目标产物粗品。粗品再溶于DCM,水洗后浓缩得到粗品，通过柱层析分离纯化(EA:PE＝1:1)得到淡棕色固体3.2g。
f)(4S)-5-(2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-基)-4-甲基-1,4-二氢-2H-嘧啶并[4,5-d][1,3]恶嗪-2-酮盐酸盐(化合物34-6a)
将步骤e)产物(3.2g)溶于HCl/i-PrOH(10mL)，并室温搅拌2h，反应完毕后，浓缩得到粗品，无需纯化直接用于下一步。
g)化合物34-7a
将步骤f)产物(3.3g)、(S)-3-((叔丁氧羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(4.9g)、HATU(6.32g)、DIPEA(4.3g)溶于无水DMF(50mL)，反应液在室温搅拌12小时，反应完毕后，将反应液倒入100mL乙酸乙酯中，并用水(20mL*3)和饱和食盐水10mL洗涤，有机相干燥，浓缩得到粗品。粗品通过柱层析分离纯化(PE:EA＝1:1)得到褐色固体7.2g。MS(ESI)m/z:585(M+H)。
h)化合物34-8a
将步骤g)产物(7.2g)溶于MeOH(25mL),然后加入HCl/二氧六环(70mL)，反应液在室温搅拌2h,然后将反应液浓缩得到红色油状粗品，再溶于MeOH(20mL)并用Na 2CO 3游离后浓缩得到粗品6g。
i)异构体1和异构体4
将化合物34-8a通过SFC手性柱拆分制备得到异构体1和异构体4。
SFC拆分条件：仪器:waters SFC200；分离柱:Daicel Chiralcel AD,250×50mm I.D.,10μm；流动相:A：CO 2，B：MeOH(0.1％NH 3H 2O)，A：B＝75：25；流速:70mL/min；压力：100bar；柱温：38℃；检测波长：254nm；循环时间：5min；样品预处理：10g溶于200ml MeOH；进样量：16ml。
后处理:样品40℃浓缩后冻干分别得到标题化合物异构体1和异构体4。
路线二：异构体2和异构体3的制备
以化合物34-4b为原料，按照路线一描述的方法，分别制备得到异构体2和异构体3。
异构体1：LCMS m/z:485(M+H). 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ10.70(s，1H)，8.23(s，1H)，7.46(d，J＝8.5Hz，2H)，7.39(d，J＝8.6Hz，2H)，6.13(q，J＝6.6Hz，1H)，4.51(s，1H)，4.42-4.30(m，1H)，3.53-3.45(m，1H)，3.28–3.06(m，5H)，3.01–2.59(m，3H)，1.52–1.34(m，4H)，1.08-0.97(m，6H)，0.93-0.84(m，1H)。
异构体4：LCMS m/z:485(M+H). 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ10.73(s，1H)，8.23(s，1H)，7.41–7.32(m，4H)，6.14(q，J＝8.0Hz，1H)，4.40–4.36(m，1H)，4.19–4.11(m，1H)，3.62–3.51(m，2H)，3.49–3.35(m，1H)，3.24–3.05(m，4H)，2.73–2.63(m，2H)，1.45(d，J＝8.0Hz，1H)，1.33(d，J＝8.0Hz，2H)，1.12(q，J＝4.0Hz，1H)，0.95–0.88(m，6H)，0.26(q，J＝4.0Hz，1H)。
异构体2：LCMS m/z:485(M+H). 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ10.86(s，1H)，8.27(s，1H)，7.54–7.27(m，4H)，6.32–6.18(m，1H)，4.69–4.52(m，1H)，4.27–3.97(m，2H)，3.66–3.43(m，2H)，3.29–2.92(m，6H)，2.61-2.55(m，1H)，1.63–1.58(m，1H)，1.53–1.28(m，3H)，1.28–1.12(m，6H)。
异构体3：LCMS m/z:485(M+H). 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ10.71(s，1H)，8.18(s，1H)，7.46–7.39(m，1H)，7.36–7.28(m，3H)，6.00(q，J＝6.4Hz，1H)，4.53(s，1H)，4.46–4.33(m，1H)，3.56–3.44(m，2H)，3.26–3.09(m，5H)，3.00–2.71(m，2H)，1.43-1.38(m，3H)，1.10–0.93(m，7H)，-0.07–-0.11(m，1H)。
单晶衍射测定构型：
(1)异构体1构型测定
单晶制备：称取化合物异构体1(50.0mg)、异丙醇3.0ml加入5ml螺口玻璃瓶中，搅拌5min固体溶清。称取二水合草酸13.0mg加入上述玻璃瓶中，玻璃瓶中逐渐有白色固体析出，室温搅拌3h，玻璃瓶中析出大量白色固体。向玻璃瓶中加入1.5ml甲醇，0.2ml纯化水后白色固体逐渐消失，溶液变澄清，继续搅拌1h。溶液经0.22μm微孔滤膜滤至20ml螺口玻璃瓶中，玻璃瓶口用保鲜膜覆盖。用针头在瓶口处扎8个小孔，室温放置10天，制得异构体1化合物的草酸盐单晶。
单晶衍射实验：
单晶X射线衍射仪：BRUKER KAPPA APEX-II CCD
波长：Cu Kα
Figure PCTCN2021093813-appb-000134
测试温度：296K
用于结构解析的计算机程序：SHELXL-2018
单晶数据：分子式：C 50H 60Cl 2N 12O 10；分子量：1060.00；晶系：正交晶系；空间群：C 2 2 2；晶胞参数：
Figure PCTCN2021093813-appb-000135
α＝90°，β＝90°，γ＝90°；单位晶胞体积：
Figure PCTCN2021093813-appb-000136
Figure PCTCN2021093813-appb-000137
单位晶胞中包含的分子式个数：Z＝8；计算密度：D calc＝1.064g/cm 3；R(F o)：0.0612；R W(F o 2)：0.1856；拟合优度(S)：1.023；Flack参数：0.040(11)。
结构描述：单晶X射线衍射及结构解析表明，所制得的单晶为异构体1的草酸盐。晶体的不对称结构单元中包含两分子异构体及一分子草酸。化合物异构体1的单分子示意图如图3所示，草酸盐单晶如图4所示。结构式表示如下：
Figure PCTCN2021093813-appb-000138
(2)异构体3构型测定
单晶制备：按照上述异构体1单晶制备描述的方法制备异构体3的草酸盐单晶。
单晶衍射实验：
单晶X射线衍射仪：BRUKER D8 VENTURE PHOTON II
波长：Ga Kα
Figure PCTCN2021093813-appb-000139
测试温度：173K
用于结构解析的计算机程序：SHELXL-2018
单晶数据：分子式：C 52H 64Cl 2N 12O 15；分子量：1168.05；晶系：单斜晶系；空间群：P 2 1/c；晶胞参数：
Figure PCTCN2021093813-appb-000140
α＝90°，β＝98.259(3)°，γ＝90°；单位晶胞体积：
Figure PCTCN2021093813-appb-000141
单位晶胞中包含的分子式个数：Z＝4；计算密度：D calc＝1.257g/cm 3；R(F o)：0.0634；R W(F o 2)：0.2016；拟合优度(S)：1.053。
结构描述：单晶X射线衍射及结构解析表明，所制得的单晶为异构体3的草酸盐水合物。晶体的不对称结构单元中包含两分子异构体3、两分子草酸以及一分子水，其中异构体3和草酸形成草酸盐。化合物异构体3的单分子示意图如图5所示，草酸盐单晶的不对称结构单元如图6所示。结构式表示如下：
Figure PCTCN2021093813-appb-000142
流程L：
Figure PCTCN2021093813-appb-000143
反应条件：a)(2,4-二甲氧基苯基)甲胺，三乙胺，四氢呋喃；b)4,6-二氯嘧啶-5-胺，三乙胺，异丙醇；c)碘甲烷，氢化钠，N,N-二甲基甲酰胺；d)叔丁基哌嗪-1-羧酸酯，4-二甲氨基吡啶，N-甲基吡咯烷酮；e)氯化氢二氧六环溶液；f)(S)-3-((叔丁氧羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸，二异丙基乙胺，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐，N,N二甲基甲酰胺；g)三氟乙酸。
实施例35：
Figure PCTCN2021093813-appb-000144
a)2-(2,4-二甲氧基苄基)氨基乙酸乙酯
在0℃下向溶有溴乙酸乙酯(1.0g)的THF溶液(10mL)中加入三乙胺(0.6g)和(2,4-二甲氧基苯基)甲胺(1.0g)。将反应混合物在室温下搅拌3小时。将反应液倾入水(100mL)中，再加入乙酸乙酯(100mL)萃取。有机相加入饱和氯化钠溶液(100mL*3)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干。产品经层析硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)得到产品白色固体1.3g。
b)4-氯-8-(2,4-二甲氧基苄基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮
在0℃下向溶有2-(2,4-二甲氧基苄基)氨基乙酸乙酯(1.3g)的异丙醇(10mL)中加入三乙胺(1.56g)和4,6-二氯嘧啶-5-胺(0.84g)。将反应混合物在90℃下搅拌3小时。反应液过滤，得到产品白色固体0.7g。
c)4-氯-8-(2,4-二甲氧基苄基)-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮
在0℃下向溶有4-氯-8-(2,4-二甲氧基苄基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮(0.5g)的N,N二甲基甲酰胺溶液(5mL)中加入氢化钠(76.7mg)。将反应混合物搅拌20分钟。在0℃加入碘甲烷(255mg)。将反应混合物在0℃下搅拌3小时。将反应液倾入水(100mL)中，再加入乙酸乙酯(100mL)萃取。有机相加入饱和氯化钠溶液(100mL*3)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干。产品经层析硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)得到产品白色固体0.5g。
d)4-(8-(2,4-二甲氧基苄基)-5-甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢蝶啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯
在20℃下向溶有4-氯-8-(2,4-二甲氧基苄基)-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮(0.5g)的N-甲基吡咯烷酮溶液(10mL)中加入叔丁基哌嗪-1-羧酸盐(0.53g)，4-二甲氨基吡啶(0.52g)。将反应混合物在150℃下搅拌3小时。将反应液倾入水(100mL)中，再加入乙酸乙酯(100mL)萃取。有机相加入饱和氯 化钠溶液(100mL*3)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干。产品经层析硅胶板纯化(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)得到产品白色固体0.5g。
e)8-(2,4-二甲氧基苄基)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮
在20℃下向4-(8-(2,4-二甲氧基苄基)-5-甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢蝶啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯(0.1g)中加入盐酸、二氧六环溶液(5mL)。将反应混合物在20℃下搅拌3小时。反应液旋干得到近白色固体(0.1g)。
f)(s)-叔丁基(2-(4-氯苯基)-3-(4-(8-(2,4-二甲氧基苄基)-5-甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢蝶啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基)(异丙基)氨基甲酸酯
在20℃下向溶有8-(2,4-二甲氧基苄基)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基)-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮(0.1g)的N,N二甲基甲酰胺(10mL)中加入(S)-3-((叔丁氧羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.12g)，二异丙基乙胺(0.10g)。将反应混合物搅拌2分钟。再20℃加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(0.12g)将反应混合物在20℃下搅拌1小时。将反应液倾入水(100mL)中，再加入乙酸乙酯(100mL)萃取。有机相加入饱和氯化钠溶液(100mL*3)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干。产品经层析硅胶板纯化(石油醚:乙酸乙酯＝1:2)得到产品白色固体0.1g。
g)(S)-4-(4-(2-(4-氯苯基)-3-(异丙氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)-5-甲基-7,8-二氢蝶啶-6(5H)-酮
在20℃下向(S)-叔丁基(2-(4-氯苯基)-3-(4-(8-(2,4-二甲氧基苄基)-5-甲基-6-氧代-5,6,7,8-四氢蝶啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基)(异丙基)氨基甲酸酯(100mg)中加入三氟乙酸(5mL)。将反应混合物在60℃下搅拌3小时。反应液旋干,得到近白色固体(20mg)。LCMS(ESI)m/z:472(M+H) 1H NMR(400MHz，CDCl 3)δ7.89(s，1H)，7.22–7.29(m，2H)，7.10–7.18(m，2H)，4.08–4.17(m，1H)，3.86(s，2H)，3.32–3.45(m，2H)，3.15-3.30(m，3H)，3.08(s，3H)，2.82–2.93(m，2H)，2.51–2.78(m，4H)，1.21–1.31(m，2H)，1.03–1.12(m，6H)。
流程M：
Figure PCTCN2021093813-appb-000145
反应条件：a)2,4-二甲氧基苄胺,N,N-二异丙基乙胺，乙腈；b)四氢呋喃，碳酸钾，2-氯-2-氧代乙酸甲酯；c)N,N-二异丙基乙胺，乙醇；d)3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯,N,N-二异丙基乙胺,乙腈；e)N,N-二甲基甲酰胺，碳酸钾，碘甲烷；f)三氟乙酸；g)(S)-3-((叔丁氧基羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸，N,N-二异丙基乙胺，N,N-二甲基甲酰胺，HATU；h)二氯甲烷，氯化氢/异丙醇溶液。
实施例36：
Figure PCTCN2021093813-appb-000146
a)6-氯-N-(2,4-二甲氧基苄基)嘧啶-4,5-二胺
将4,6-二氯嘧啶-5-胺(2g),N,N-二异丙基乙胺(4.7g)和2,4-二甲氧基苄胺(2.45g)溶于乙腈(20mL),反应液在90℃搅拌5小时，然后浓缩得到粗品，然后溶于二氯甲烷并加少量水洗涤，有机相旋蒸干燥后得 到粗品，粗品通过柱层析分离(PE:EA＝1:1)纯化，浓缩得到淡黄色固体目标产物(3.5g)。
b)2-((4-氯-6-(((2,4-二甲氧基苄基)氨基)嘧啶-5-基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯
将6-氯-N-(2,4-二甲氧基苄基)嘧啶-4,5-二胺(1.5g)，碳酸钾(1.1g)和2-氯-2-氧代乙酸甲酯(623mg)溶于无水乙醇(20mL),反应液在20℃搅拌3小时。将反应液倒入30mL乙酸乙酯并用水(10mL*2)洗涤，有机相浓缩至恒重得到粗产品，粗产品通过(PE:EA＝3:1)打浆纯化得到白色固体产物(1.6g)。
c)4-氯-8-(2,4-二甲氧基苄基)-5,8-二氢蝶啶-6,7-二酮
将2-((4-氯-6-(((2,4-二甲氧基苄基)氨基)嘧啶-5-基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯(1g)溶于无水乙醇(10mL)并加入N,N-二异丙基乙胺(1.02g，反应液在氮气保护下90℃-110℃搅拌拌2小时。然后将液反应液浓缩得到粗品，再溶于二氯甲烷，并用稀盐酸调至弱酸性，用水洗去盐。有机相浓缩得到粗产品，粗产品通过(PE:EA＝3:1)打浆纯化得到白色油状产物(800mg)。 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ12.15(s，1H)，8.47(s，1H)，6.88(d，J＝8.4Hz，1H)，6.59(d，J＝2.3Hz，1H)，6.32(dd，J＝8.4，2.3Hz，1H)，5.21(s，2H)，3.84(s，3H)，3.72(s，3H)。
d)叔丁基-3-(8-(2,4-二甲氧基苄基)-6,7-二氧代-5,6,7,8-四氢蝶啶-4-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸酯
将4-氯-8-(2,4-二甲氧基苄基)-5,8-二氢蝶啶-6,7-二酮(250mg)，(1R，5S)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(456mg)和N,N-二异丙基乙胺(278mg)溶于无水乙腈(5mL)，反应液在氮气保护下，封管90℃搅拌,3小时。然后将浓缩得到油状粗品。粗产品再溶于乙酸乙酯(30mL)，并用稀盐酸调至pH 3-4，并用水洗涤至pH 5-6，再浓缩得到粗品。粗品通过柱层析分离纯化(PE:EA＝1:1)得到白色固体200mg,m/z＝525(M+H)。
e)(叔丁基-3-(8-(2,4-二甲氧基苄基)-5-甲基-6,7-二氧代-5,6,7,8-四氢碟啶-4-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸酯
将叔丁基-3-(8-(2,4-二甲氧基苄基)-6,7-二氧代-5,6,7,8-四氢蝶啶-4-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸盐(180mg),碘甲烷(146mg)，碳酸钾(142mg)溶于无水DMF(3mL)，反应液在20℃搅拌1h,然后将反应液倒入30mL EA并用水(10mL*2)和饱和食盐水(10mL)洗涤，有机相浓缩得到粗品。粗品通过柱层析分离纯化(PE:EA＝3:1)得到淡黄色固体180mg。
f)4-((1R，5S)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-5-甲基-5,8-二氢蝶啶-6,7-二酮
将叔丁基-3-(8-(2,4-二甲氧基苄基)-5-甲基-6,7-二氧代-5,6,7,8-四氢吡啶-4-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸盐(120mg),溶于无水DCM(1mL)，并滴入TFA(2mL)反应液在室温搅拌3小时，反应液呈红色将反应液直接浓缩得到粗产品，并用碳酸氢钠溶液调至pH 8-9,再浓缩，并用THF溶解，过滤除盐，剩余物通过柱层析分离(DCM:MeOH＝10:1)，得到油状产物60mg。
g)叔丁基((s)-2-(4-氯苯基)-3-3-(5-甲基-6,7-二氧-5,6,7,8-四氢蝶啶-4-基)-3,8-二氮杂二环[3.2.1]八烷基-8-基)-3-氧代丙基氨基甲酸酯(异丙基)
将化合物4-(3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-5-甲基-5,8-二氢蝶啶-6,7-二酮(60mg),(S)-3-((叔丁氧基羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(90mg)，(2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(130mg),N,N-二异丙基乙胺(102mg)溶于无水DMF(2mL)，反应液在室温搅拌3小时，然后将反应液倒入20mL乙酸乙酯中，并用水(50mL*2)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品。粗品通过硅胶柱层析分离纯化(DCM；MeOH＝10:1)得到油状产物120mg。
h)4-(8-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙氨基)丙酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-5-甲基-5,8-二氢蝶啶-6,7-二酮
将叔丁基((s)-2-(4-氯苯基)-3-3-(5-甲基-6,7-二氧-5,6,7,8-四氢蝶啶-4-基)-3,8-二氮杂二环[3.2.1]八烷基-8-基)-3-氧代丙基氨基甲酸酯(异丙基)溶于DCM(2mL)并滴入HCl/i-PrOH(2mL),反应液在室温搅拌3h,然后将反应液浓缩得到粗品，粗品通过制备分离冻干得到白色固体14mg.m/z:499(M+H). 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.32(d，J＝25.7Hz，1H)，7.68–7.32(m，4H)，5.14(m，1H)，4.71–4.28(m，3H)，4.12–3.92(m，3H)，3.80–3.40(m，3H)，3.23-3.15(m，2H)，2.24-2.16(m，1H)，1.92-1.82(m，2H)，1.80-1.70(m，1H)，1.48–1.16(m，8H)。
实施例37
流程N:
Figure PCTCN2021093813-appb-000147
反应条件：a)三乙胺，二碳酸二叔丁酯，二氯甲烷；b)双(三甲基硅基)氨基钠(2.0mol/L四氢呋喃溶液)，溴甲基甲基醚，2-甲基四氢呋喃；c)(R)-4-苄基恶唑烷-2-酮，二异丙基乙胺，三甲基乙酰氯，甲苯；d)四氯化钛(1mol/L甲苯溶液)，二异丙基乙胺，二氯甲烷；e)过氧化氢溶液(30％)，一水合氢氧化锂，四氢呋喃，水；f)2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-羧酸叔丁酯，4-二甲氨基吡啶，N-甲基吡咯烷酮；g)氯化氢二氧六环(4.0M)；h)2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，二异丙基乙胺，N,N–二甲基甲酰胺；i)氯化氢二氧六环(4.0M)。
a)环丙基氨基甲酸叔丁酯
在氮气保护下，20℃将环丙胺(9.3g)和三乙胺(19.7g)溶于二氯甲烷(100mL)，0℃滴加二碳酸二叔丁酯(35.48g)，20℃反应16h，反应结束，脱溶，得到无色液体24.3g。 1H NMR(400MHz，CDCl 3)δ(ppm)0.47-0.50(m，2H)，0.66-0.72(m，2H)，1.44(s，9H)，2.53(m，1H),4.79(s，1H)。
b)环丙基(甲氧基甲基)氨基甲酸叔丁酯
在氮气保护下，将环丙基氨基甲酸叔丁酯(24.3g)，溶于2-甲基四氢呋喃(100mL)，0℃滴入双(三甲基硅基)氨基钠(120mL)，反应液在0℃搅拌1小时，0℃滴入溴甲基甲基醚(35.7g)，反应液在0℃搅拌6小时，将反应液倒入50g冰水中，分液，乙酸乙酯萃取(100mL*2)，将反应液直接浓缩得到产品为无色液体29.1g，直接用于下一步，无须纯化。
c)(R)-4-苄基-3-(2-(4-(氯苯基)乙酰基)恶唑烷-2-酮
在氮气保护下，将2-(4-氯苯基)乙酸(50g)，(R)-4-苄基恶唑烷-2-酮(45.5g)和二异丙基乙胺(127.3g)溶于甲苯(600mL)，15℃，滴加三甲基乙酰氯(38.4g)反应液回流搅拌16小时，然后将反应液倒入200mL水中，分液，并用饱和食盐水120mL洗涤，有机相干燥，浓缩得到粗品。粗品通过柱层析分离纯化(PE:EA＝5:1)得到白色固体32g。 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)2.88-3.02(m，2H)，4.12-4.37(m，4H)，4.64-4.70(m,1H)，7.13-7.16(m，2H)，7.23-7.32(m,5H)，7.39-7.42(m，2H)。
d)((S)-3-((R)-4-苄基-2-氧杂恶唑烷-3-基)-2-(4-氯苯基)-3-氧丙基)(环丙基)氨基甲酸叔丁酯
在氮气保护下，将(R)-4-苄基-3-(2-(4-(氯苯基)乙酰基)恶唑烷-2-酮(3.48g)溶于二氯甲烷(60mL)，0℃滴入四氯化钛甲苯溶液(13mL)，反应液在0℃搅拌2h，滴加DIPEA(1.49g)反应液在0℃搅拌1.5h，滴加环丙基(甲氧基甲基)氨基甲酸叔丁酯(2.77g)反应液在0℃搅拌6h，反应结束。然后将反应液倒入30mL饱和氯化铵溶液中，分液，并用饱和食盐水120mL洗涤，有机相干燥，浓缩得到粗品。粗品通过硅胶柱层析分离纯化(PE:EA＝10:1)得到无色油状物2.50g。
e)(S)-3-((叔丁氧羰基)(环丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸
将一水合氢氧化锂(0.63g)溶于水(18mL)加入四氢呋喃(20mL)0℃滴入双氧水(1.6mL)，在0℃加入((S)-3-((R)-4-苄基-2-氧杂恶唑烷-3-基)-2-(4-氯苯基)-3-氧丙基)(环丙基)氨基甲酸叔丁酯(2.50g)，反应液在0℃搅拌3h，向反应液中加入亚硫酸钠饱和溶液(15mL)，反应1.5h，用硫酸氢钾饱和溶液调节pH＝3～4，乙酸乙酯萃取(30mL*2)分液，有机相干燥，浓缩得到粗品。粗品通过柱层析分离纯化(PE:EA＝1:1)得到无色固体1.26g。 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ(ppm):0.45-0.48(m， 2H)，0.60-0.64(m,2H)，1.30(s，9H)，2.19(s，1H),3.61(d，J＝7.6Hz，1H)，3.95(t，J＝8.0Hz，1H)，7.37(dd，J＝26.8、8.8Hz，4H)，12.7(s，1H)。
f)5-((R)-5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-羧酸酯
在氮气保护下，将(R)-4-氯-5-甲基-5,8-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮(300mg)，2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-羧酸叔丁酯(455mg)，4-二甲氨基吡啶(600mg)溶于N-甲基吡咯烷酮(5mL)，120℃搅拌12h，然后将反应液倒入50mL水中，乙酸乙酯萃取(20mL*2)，并用饱和食盐水15mL洗涤，有机相干燥，脱溶得到粗品。粗品通过硅胶柱层析分离纯化(PE:EA＝1:1～1:2)得到黄色固体400mg。
g)(5R)-4-(2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚-2-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
将5-((R)-5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-羧酸酯(400mg)，溶于二氧六环(5mL)，并滴入氯化氢二氧六环溶液(5mL)，在25℃搅拌2小时，反应结束，将反应液直接浓缩得到粗品黄色固体，直接用于下一步。
h)叔丁基((S)-2-(4-氯苯基)-3-((1R，6S)-5-((R)-5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚-2-基)-3-氧丙基)(环丙基)氨基甲酸酯
在氮气保护下，将(5R)-4-(2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚-2-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮(270mg),化合物5(389mg)，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(474mg)和二异丙基乙胺(671mg)溶于N,N–二甲基甲酰胺(10mL)，反应液在25℃搅拌3小时，反应结束。然后将反应液倒入50mL水中，乙酸乙酯萃取(20mL*2)，并用饱和食盐水(10mL*3)洗涤，有机相干燥，浓缩得到粗品。粗品通过柱层析分离纯化(PE:EA＝1:2)得到黄色固体320mg。
i)(R)-4-((1R，6S)-5-((S)-2-(4-氯苯基)-3(环丙基氨基)丙酰基)-2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚-2-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮及(R)-4-((1S，6R)-5-((S)-2-(4-氯苯基)-3(环丙基氨基)丙酰基)-2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚-2-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮
将叔丁基((S)-2-(4-氯苯基)-3-((1R，6S)-5-((R)-5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶基[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚-2-基)-3-氧丙基)(环丙基)氨基甲酸酯(320mg)溶于二氧六环(2.5mL)并滴入氯化氢二氧六环(2.7mL)，反应液在25℃搅拌14h，反应结束，然后将反应液浓缩得到粗品，用碳酸钾饱和溶液调节pH＝13～14，DCM萃取(10mL*2)，水洗(10mL)，脱溶，产品通过超临界流体色谱法拆分得到异构体1(61.2mg)和异构体2(31.2mg)。
拆分仪器及条件：waters SFC200；色谱柱：Daicel Chiralcel AS,250×30mm I.D.,5μm；流动相：A为CO 2，B为异丙醇(0.1％NH 3H 2O)，A:B＝70:30(体积比)；流速60mL/min，柱温38℃。
超高效合相色谱条件:色谱柱：Daicel Chiralcel AD,2.1×150mm I.D.,3μm，流动相A：CO 2；流动相B：异丙醇(0.1％DEA)，梯度：时间0-8min，B相5-40％(体积比)；流速：1mL/min；柱温：40℃。异构体1：RT＝3.7min；异构体2：RT＝4.6min。
异构体1:LCMS(ESI)m/z:481(M+H). 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ(ppm):0.03-0.12(m，2H)，0.25-0.30(m,2H)，0.66-0.70(m，1H)，0.96-1.05(m，3H),1.35-1.40(m，1H)，1.93-2.11(m，2H)，2.29-2.35(m，1H)，2.67-2.77(m，2H)，2.80-2.86(m，1H)，3.03-3.25(m,4H)，3.39-3.48(m，1H)，3.69-3.79(m,1H)，4.24-4.34(m，2H)，7.34-7.41(m，4H)，8.17(s，1H)，10.52(s，1H)。
异构体2:LCMS(ESI)m/z:481(M+H). 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm):0.14-0.21(m，2H)，0.30-0.37(m，2H)，0.93-1.07(m，4H)，2.03-2.34(m，3H)，2.66-2.86(m，2H)，3.10-3.25(m，4H),3.36-3.94(m，4H)，4.07-4.15(m,1H)，4.41-4.45(m，1H)，7.32-7.42(m，4H)，8.19(s，1H)，10.48(s，1H)。
实施例38:
Figure PCTCN2021093813-appb-000148
按照流程N描述的方法，采用3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯替换2,5-二氮杂双环[4.1.0]庚烷-2-羧酸叔丁酯制备得到目标化合物。LCMS(ESI)m/z:495(M+H). 1HNMR(400MHz，DMSO-d 6)δ(ppm)：0.11-0.22(m，2H)，0.29-0.37(m,2H)，1.01(dd,J＝30.8、6.8Hz，3H)，1.52-1.69(m,1H),1.72-1.93(m，3H)，2.04-2.14(m，1H)，2.25(d，J＝16Hz，1H)，2.32(d，J＝13.2Hz，1H)，2.66-2.83(m，3H)，3.11-3.26(m，3H)，3.52(d，J＝16Hz，1H)，3.75-3.83(m，1H)，4.09-4.15(m,1H)，4.45-4.63(m，2H)，7.33-7.41(m，4H),8.14(d，J＝32Hz,1H)，10.57(d，J＝9.6Hz，1H)。
实施例39:
流程P：
Figure PCTCN2021093813-appb-000149
反应条件：a)叔丁胺，N,N-二甲基甲酰胺；b)2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)环丙烷甲酸乙酯，醋酸钯，三环己基膦，碳酸钾，甲苯，水；c)硫酸，二氯甲烷；d)三乙胺，乙醇；e)3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯，N,N-二异丙基乙胺，N,N-二甲基甲酰胺；f)氯化氢二氧六环溶液；g)(S)-3-((叔丁氧羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸，二异丙基乙胺，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐，N,N-二甲基甲酰胺；h)SFC；i)氯化氢二氧六环溶液。
a)N-(叔丁基)-6-氯-5-碘嘧啶-4-胺
将4,6-二氯-5-碘嘧啶(4.00g)在N,N-二甲基甲酰胺(60ml)中搅拌混合，在氮气保护下，室温加入叔丁胺(5.32g)。混合物在室温下搅拌过夜。随后将混合物倒入水中(300mL)，用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并有机相，以无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，得到浅黄色固体(4.1g)。
b)2-(4-(叔丁基)-6-氯嘧啶-5-基)环丙基甲酸乙酯
将N-叔丁基-6-氯-5-碘嘧啶-4-胺(4.10g)和2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼-2-基)环丙烷-1-羧酸酯(6.32g)溶于甲苯(64.00mL)和水(16.00mL)中，分别加入三环己基膦(1.475g)和醋酸钯(1.475g)，碳酸钾(0.59g)在氮气保护下，90℃下搅拌过夜。随后将混合物冷却到室温，用水(100mL)稀释，并加入乙酸乙酯(2×100mL)萃取。合并有机相，以无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，产品经层析硅胶板纯化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)得到暗黄色固体2.50g。
c)2-(4-氨基-6-氯嘧啶-5-基)环丙基甲酸乙酯
在二氯甲烷(40.00mL)中加入2-(4-(叔丁基)-6-氯嘧啶-5-基)环丙基甲酸乙酯(2.50g)。在0-5℃氮气保护下，滴入硫酸(4.94g)。反应液在室温下搅拌1小时，随后冷却到0℃，用饱和碳酸氢钠溶液将混合物中和至pH＝8。以二氯甲烷(2×50ml)萃取。合并有机相，以无水硫酸镁干燥。过滤，滤液减压浓缩，得到 黄色液体2.4g。
d)1-氯-7,7a-二氢-5H-环丙烷[4,5]吡啶[2,3-d]嘧啶-6(6aH)-酮
在室温氮气保护下，将2-(4-氨基-6-氯嘧啶-5-基)环丙基甲酸乙酯(2.40g)，三乙胺(6.03g)加入200.00mL乙醇溶液中。反应混合物在80℃下搅拌过夜。随后把混合物冷却到室温。，真空浓缩。产品经层析硅胶板纯化(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)得到产品淡黄色固体1.05g。
e)叔丁基3-(6-氧代-6,6a，7,7a-四氢-5H-环丙烷吡啶[4,5]嘧啶-1-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸酯
在20℃下向溶有1-氯-7,7a-二氢-5H-环丙烷[4,5]吡啶[2,3-d]嘧啶-6(6aH)-酮(0.20g)的N,N二甲基甲酰胺(5mL)中加入3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(0.43g)，N,N-二异丙基乙胺(0.39g)。将反应混合物在110℃下搅拌24小时。随后将反应液倾入水(100mL)中，再加入乙酸乙酯(100mL)萃取。有机相加入饱和氯化钠溶液(100mL*3)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干。产品经层析硅胶板纯化(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)得到产品白色固体0.30g。
f)1-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛坦-3-基)-7,7-二氢-5H-环丙烷[4,5]吡啶[2,3-d]嘧啶-6(6aH)-酮
在20℃下向叔丁基3-(6-氧代-6,6a，7,7a-四氢-5H-环丙烷吡啶[4,5]嘧啶-1-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸酯(0.15g)中加入4M氯化氢二氧六环溶液(2mL)。将反应混合物在20℃下搅拌3小时。反应液旋干得到近白色固体(0.12g)。
g)叔丁基((2R)-2-(4-氯苯基)-3-氧代-3-3-(6-氧代-6,6-a，7,7a-四氢-5H-环丙基-4,5]吡啶多[2,3-d]嘧啶-1-基)-3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛坦-8-基)丙基氨基甲酸酯(异丙基)酯
在20℃下向溶有1-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛坦-3-基)-7,7-二氢-5H-环丙烷[4,5]吡啶[2,3-d]嘧啶-6(6aH)-酮(0.12g)的N,N二甲基甲酰胺(5mL)中加入(S)-3-((叔丁氧羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(0.18g)，二异丙基乙胺(0.17g)。将反应混合物搅拌2分钟。再20℃加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(0.20g)将反应混合物在20℃下搅拌1小时。将反应液倾入水(100mL)中，再加入乙酸乙酯(100mL)萃取。有机相加入饱和氯化钠溶液(100mL*3)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干。产品经层析硅胶板纯化(石油醚:乙酸乙酯＝1:1.5)得到产品白色固体0.20g。
h)手性拆分
拆分仪器及条件：waters SFC200；色谱柱：Daicel Chiralcel AS,250×50mm I.D.,10μm；流动相：A为CO 2，B为甲醇(0.1％NH 3H 2O)；A:B＝60:40(体积比)；流速60mL/min，柱温38℃。
i)异构体1和异构体2的制备
在20℃下向异构体1a(20mg)中加入4M氯化氢二氧六环溶液(1mL)。将反应混合物在20℃下搅拌3小时。反应液旋干经制备分离得到近白色固体(10mg)。
同样的方法以异构体2a为原料制备异构体2。
异构体1：LCMS(ESI)m/z:495(M+H) 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ8.69–8.59(m，1H)，7.34-7.52(m，4H)，5.39-5.53(m，1H)，4.69-4.81(m，3H)，4.52-4.67(m，1H)，4.09-4.38(m，2H)，3.75-3.81(m，1H)，3.64-3.73(m，2H)，3.45-3.53(m，2H)，3.26-3.36(m，1H)，2.95-3.06(m，1H)，1.96-2.07(m，1H)，1.50-1.66(m，2H)，1.21-1.30(m，8H)，1.01-1.11(m，1H)，0.83-0.90(m，1H).
异构体2：LCMS(ESI)m/z:495(M+H) 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ10.43(d，J＝15.9Hz，1H)，8.20(d，J＝26.6Hz，1H)，7.37-7.51(m，4H)，4.64-4.74(m，1H)，4.46-4.61(m，2H)，4.19-4.23(m，2H)，4.09-4.14(m，2H)，3.67-3.73(m，2H)，3.56-3.62(m，2H)，2.97-3.13(m，2H)，2.17-2.28(m，1H)，1.96-2.10(m，2H)，1.75-1.84(m，1H)，1.62-1.68(m，1H)，1.20-1.30(m，6H)，0.67-0.77(m，1H).
实施例40
Figure PCTCN2021093813-appb-000150
按照实施例39流程P描述的方法，采用叔丁基哌嗪-1-羧酸酯替换3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯制备，经超临界流体色谱法分离，再分别脱Boc保护基得到异构体1和异构体2。拆分仪器及条件：waters SFC200；色谱柱：Daicel Chiralcel AS,250×50mm I.D.,10μm；流动相：A为CO 2，B为异丙醇(0.1％NH 3H 2O)；A:B＝60:40(体积比)；流速60mL/min，柱温38℃。
异构体1：
LCMS(ESI)m/z:469(M+H) 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ10.49(s，1H)，8.24(s，1H)，7.34-7.52(m，4H)，4.66-4.74(m，1H)，3.77-3.85(m，1H)，3.60-3.73(m，4H)，3.49-3.51(m，1H)，3.43-3.48(m，2H)，3.24-3.35(m，2H)，2.95-3.04(m，1H)，2.80-2.92(m，1H)，2.62-2.73(m，1H)，2.21-2.29(m，1H)，2.01-2.11(m，1H)，1.66-1.76(m，1H)，1.21-1.27(m，6H)，0.72(q，J＝4.9Hz，1H).
异构体2：
LCMS(ESI)m/z:469(M+H) 1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ10.48(s，1H)，8.22(s，1H)，7.33-7.57(m，4H)，4.59-4.68(m，1H)，3.64-3.72(m，4H)，3.45-3.53(m，3H)，3.27-3.36(m，2H)，3.16-3.24(m，1H)，3.04-3.12(m，1H)，2.93-3.03(m，1H)，2.17-2.28(m，1H)，1.99-2.09(m，1H)，1.67-1.76(m，1H)，1.19-1.31(m，6H)，0.72(q，J＝4.4Hz，1H).
流程Q
Figure PCTCN2021093813-appb-000151
反应条件：a)哌嗪-1-羧酸叔丁酯-2,2,3,3,5,5,6,6-d 8，4-二甲氨基吡啶，N-甲基吡咯烷酮；b)氯化氢/二氧六环溶液(4.0M)，二氧六环；c)(S)-3-((叔丁氧羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，4-二甲氨基吡啶，N,N–二甲基甲酰胺；d)氯化氢/二氧六环溶液(4.0M)，二氧六环。
实施例41:
Figure PCTCN2021093813-appb-000152
a)(R)4-(5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基-2,2,3,3,5,5,6,6-d 8)-1-甲酸叔丁基酯
在氮气保护下，将(R)-4-氯-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮(200mg，参照流程C方法制备)，哌嗪-1-羧酸叔丁酯-2,2,3,3,5,5,6,6-d 8(244mg)和4-二甲氨基吡啶(377mg)溶于N-甲基吡咯烷酮(4mL)，120℃搅拌4小时，反应结束，然后将反应液倒入30mL水中，乙酸乙酯萃取(20mL*2)，并用饱和食盐水15mL洗涤，有机相干燥，浓缩得到粗品。粗品通过柱层析分离纯化(PE:EA＝1:1～1:2)得到类白色固体252mg。
b)(R)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基-2,2,3,3,5,5,6,6-d 8)-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮盐酸盐
将(R)4-(5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基-2,2,3,3,5,5,6,6-d 8)-1-甲酸叔丁基酯(420mg)溶于无水二氧六环(5mL)，并滴入氯化氢/二氧六环溶液(5.5mL)，反应液在室温搅拌16小时，将反应液直接浓缩得到粗产品280mg，无须纯化，直接用于下一步。LC-MS(ESI)m/z:256(M+H)。
c)叔丁基((S)-2-(4-氯苯基)-3-(4-((R)-5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基-2,2,3,3,5,5,6,6-d 8)-3-氧代丙基)(异丙基)氨基甲酸酯
将化合物(R)-5-甲基-4-(哌嗪-1-基-2,2,3,3,5,5,6,6-d 8)-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮盐酸盐(170mg),(S)-3-((叔丁氧羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(249mg)，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(507mg)和4-二甲氨基吡啶(407mg)溶于无水N,N–二甲基甲 酰胺(5mL)，反应液在25℃搅拌3小时，然后将反应液倒入30mL水中，乙酸乙酯萃取(20mL*2)，并用饱和食盐水15mL洗涤，有机相干燥，浓缩得到粗品。粗品通过柱层析分离纯化(PE:EA＝2:1～1:2)，得到白色固体246mg。
d)(R)-4-(4-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)哌嗪-1-基-2,2，3,3，5,5,6,6-d 8)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶7(6H)-酮甲酸盐
将叔丁基((S)-2-(4-氯苯基)-3-(4-((R)-5-甲基-7-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基-2,2,3,3,5,5,6,6-d 8)-3-氧代丙基)(异丙基)氨基甲酸酯(246mg)溶于二氧六环(2mL)，并滴入氯化氢/二氧六环溶液(2mL)，反应液在25℃搅拌3h，将反应液脱溶，加入碳酸钾饱和溶液，调节pH＝13～14，EA萃取(10mL*2)干燥，浓缩得到粗品，粗品通制备色谱得到目标产物34mg。制备条件：色谱柱：Kromasil 10μm C18 30×150mm，流动相A：水(含0.1％甲酸)，流动相B：乙腈。梯度：时间0-10min，B相20-40％；10-12min，B相40-95％；12-14min，B相20％(体积比)，RT＝6.21min。LC-MS(ESI)m/z:479(M+H). 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm):10.61(s,1H),8.26(s,1H),7.32-7.43(m,4H),4.20(s,1H),3.14-3.19(m,2H),2.68-2.82(m,3H),2.25-2.29(m,1H),0.95-1.01(m,9H).
流程R
Figure PCTCN2021093813-appb-000153
反应条件：a)哌嗪-1-羧酸叔丁酯-2,2,3,3,5,5,6,6-d 8，N,N–二异丙基乙胺，乙腈；b)氯化氢/二氧六环溶液(4.0M)，二氯甲烷；c)(S)-3-((叔丁氧羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，N,N–二异丙基乙胺，N,N–二甲基甲酰胺；d)氯化氢/二氧六环溶液(4.0M)，二氯甲烷。
实施例42:
Figure PCTCN2021093813-appb-000154
a)(S)-4-(4-甲基-2-氧代-1,4-二氢-2H-嘧啶[4,5-d][1,3]恶嗪-5-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯-2,2,3,3,5,5,6,6-d8
将(S)-5-氯-4-甲基-1,4-二氢-2H-嘧啶基[4,5-d][1,3]恶嗪-2-酮(160mg，按照实施例34的方法制备)、哌嗪-1-羧酸叔丁酯-2,2,3,3,5,5,6,6-d8(234mg)溶于无水乙腈(5mL)，并加入N,N–二异丙基乙胺(310mg)，反应液用氮气吹扫后，封管95℃搅拌6小时，反应完毕后，浓缩得到目标产物粗品。粗品通过柱层析分离纯化(EA:PE＝1:1)得到无色油状目标产物250mg。
b)(S)-4-甲基-5-(哌嗪-1-基-2,2,3,3,5,5,6,6-d8)-1,4-二氢-2H-嘧啶[4,5-d][1,3]恶嗪-2-酮盐酸盐
将(S)-4-(4-甲基-2-氧代-1,4-二氢-2H-嘧啶[4,5-d][1,3]恶嗪-5-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯-2,2,3,3,5,5,6,6-d8(250mg)溶于二氯甲烷(2mL)滴入氯化氢/二氧六环溶液(5mL)，反应液浑浊，滴加甲醇使澄清，再室温搅拌3小时，反应完毕后，浓缩得到粗品，白色固体200mg，无需纯化直接用于下一步。
c)(S)-5-(4-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙氨基)丙酰基)哌嗪-1-基-2,2,3,3,5,5,6,6-d8)-4-甲基-1,4-二氢-2H-嘧啶[4,5-d][1,3]恶嗪-2-酮
将(S)-4-甲基-5-(哌嗪-1-基-2,2,3,3,5,5,6,6-d8)-1,4-二氢-2H-嘧啶[4,5-d][1,3]恶嗪-2-酮盐酸盐(200mg)，(S)-3-((叔丁氧羰基)(异丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸(280mg)，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(388mg)，N,N–二异丙基乙胺(352mg)溶于无水N,N–二甲基甲酰胺(5mL)，反应液在室温搅拌12小时，反应完毕后，将反应液倒入40mL乙酸乙酯中，并用水(10mL*3)和饱和食盐水10mL洗涤，有机相干燥，浓缩得到粗品。粗品通过柱层析分离纯化(PE:EA＝1:1)得到油状产物目标320mg。LC-MS(ESI)m/z:581(M+H)。
d)(S)-5-(4-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙氨基)丙酰基)哌嗪-1-基-2,2,3,3,5,5,6,6-d8)-4-甲基-1,4-二氢-2H-嘧啶[4,5-d][1,3]恶嗪-2-酮甲酸盐
将(S)-5-(4-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙氨基)丙酰基)哌嗪-1-基-2,2,3,3,5,5,6,6-d8)-4-甲基-1,4-二氢-2H-嘧啶[4,5-d][1,3]恶嗪-2-酮(320mg)溶于二氯甲烷(2mL)，然后加入氯化氢/二氧六环溶液(5mL)，反应液在室温搅拌3小时，然后将反应液浓缩得到红色油状粗品，再溶于二氯甲烷(20mL)并用碳酸钾游离后浓缩得到的粗品，粗产品通过制备分离并冻干得到目标产物230mg。制备条件：色谱柱：Kromasil 10μm C18 30×150mm，流动相A：水(含0.1％甲酸)，流动相B：乙腈。梯度：时间0-10min，B相15-35％；10-12min，B相35-95％；12-14min，B相15％(体积比)，RT＝7.75min。LC-MS(ESI)m/z:481(M+H)。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.31-8.19(m,1H),7.45(d,J＝8.5Hz,2H),7.30(d,J＝8.5Hz,2H),5.75(q,J＝6.4Hz,1H),4.33(dd,J＝8.4,4.9Hz,1H),3.29-3.23(m,1H),3.03-2.95(m,1H),2.85-2.76(m,1H),1.38(d,J＝6.5Hz,3H),1.07(dd,J＝6.2,2.3Hz,6H)。
实验例1：实施例1-40化合物体外酶活性测试
1.材料和试剂
Envision型号读板仪(Molecular Devices)
白色384孔板(货号#264706,Thermo)
HTRF kinEASE TK试剂盒包含的主要试剂(货号#62TKOPEC,Cisbio)
TK-生物素底物
链霉亲和素-XL665
铕标记的酪氨酸激酶底物抗体
5x酶反应缓冲液
SEB
HTRF检测缓冲液
AKT1(货号#01-101,Carna)
AKT2(货号#01-102,Carna)
AKT3(货号#PV3185,Invitrogen)
ATP 10mM(货号#PV3227,Invitrogen)
DTT 1M(货号#D5545,Sigma)
MgCl 2 1M(货号#M8266,Sigma)
本发明化合物
阳性对照物：GDC-0068
2.实验步骤
2.1试剂配制
表1激酶的反应体系各组分及浓度表
Figure PCTCN2021093813-appb-000155
1x激酶反应缓冲液
1mL激酶AKT1，2，3的1x激酶反应缓冲液中含有200μL 5x激酶反应缓冲液、5μL 1M MgCl 2、1μL 1M DTT、794μL超纯水。
5x TK-生物素底物和ATP工作液
TK-生物素底物和ATP的具体浓度见表1。
用1x激酶反应缓冲液稀释底物和ATP至反应浓度的5倍。
5x激酶工作液
酶筛选时所用的浓度见表1。用1x激酶反应缓冲液配制5x酶工作液。
4x链霉亲和素-XL665工作液
链霉亲和素-XL665在反应中的浓度参见表1。用检测缓冲液配制4x链霉亲和素-XL665工作液。
4x铕标记的酪氨酸激酶底物抗体工作液
用检测反应缓冲液将铕标记的酪氨酸激酶底物抗体稀释100倍作为工作液。
2.2实验流程
所有试剂按照上述方法配好后，除酶外，平衡到室温以后，开始进行加样。
a)首先用DMSO将化合物储液(10mM的DMSO溶液)稀释至100μM化合物溶液，然后用1倍激酶反应缓冲液稀释至2.5μM化合物工作液(含2.5％的DMSO)。使用1x激酶反应缓冲液配制2.5％的DMSO溶液，然后用2.5％的DMSO溶液稀释2.5μM化合物工作液，4倍倍比梯度稀释7次，共8个浓度(2500nM,625nM,156nM,39nM,9.8nM,2.4nM,0.6nM，0.15nM)的化合物工作液。除对照孔外，向所有反应孔中加入4μL的稀释好的化合物工作液，向对照孔中加入4μL先前配制的2.5％DMSO/激酶缓冲溶液。
b)向所有反应孔中加入2μL先前配制好的TK-生物素底物溶液(酶筛选时底物的用量见表1)。
c)向除阴性孔外的所有反应孔中加入2μL先前配制好的酶溶液(酶的用量见表1)，阴性孔用2μL酶对应1x激酶反应缓冲液补足体积。用封板膜封板，混匀后室温孵育10分钟，让化合物和酶充分作用结合。
d)向所有反应孔中加入2μL的ATP溶液来启动激酶反应(酶筛选时的ATP浓度和反应时间见表1)。
e)在激酶反应结束前5分钟开始配制检测液。使用试剂盒中的检测缓冲液配制链霉亲和素-XL665和铕标记的酪氨酸激酶底物抗体(1:100)检测液(酶筛选时检测试剂浓度见表1)。
f)待激酶反应结束后，向所有反应孔中加入5μL稀释好的链霉亲和素-XL665，混匀后立即加入稀释好的铕标记的酪氨酸激酶底物抗体检测液。
g)封板混匀，室温反应1h后，用ENVISION(Perkinelmer)仪器检测荧光信号(320nm刺激,665nm，615nm发射)。通过全活性孔和背景信号孔计算出每个孔的抑制率，复孔取平均值，同时用专业的画图分析软件PRISM 6.0对每个待测化合物进行半数抑制活性(IC50)的拟合。
表2：实验加样流程表
Figure PCTCN2021093813-appb-000156
2.3数据分析
ER＝665nm荧光值/615nm荧光值
抑制率＝(ER 阳性对照-ER 样品)/(ER 阳性对照-ER 阴性对照)*100％
3.实验结果
实验结果如表3所示：
表3：AKT抑制活性
Figure PCTCN2021093813-appb-000157
Figure PCTCN2021093813-appb-000158
Figure PCTCN2021093813-appb-000159
Figure PCTCN2021093813-appb-000160
Figure PCTCN2021093813-appb-000161
Figure PCTCN2021093813-appb-000162
Figure PCTCN2021093813-appb-000163
Figure PCTCN2021093813-appb-000164
Figure PCTCN2021093813-appb-000165
Figure PCTCN2021093813-appb-000166
Figure PCTCN2021093813-appb-000167
Figure PCTCN2021093813-appb-000168
实验例2实施例41-42化合物体外酶活性测试
1.试剂与材料
表4、试剂与材料来源
Figure PCTCN2021093813-appb-000169
2.仪器设备
表5、设备来源及其型号
名称 生产厂家 型号
多功能酶标仪 PerkinElmer Envision 2105
单道可调移液器：1000,200,10,2.5μL Eppendorf Research plus
-80℃冰箱 Thermo Forma 905-ULTS
-20℃冰箱 海尔 DW-25L262
涡旋振荡器 Wiggens Vortex3000
超纯水仪 Merck Millipore IQ7000
板式离心机 杭州奥盛 Mini-p25
微型离心机 上海泰坦 Timi-4k
生化培养箱 Thermo IGS-60
3.试剂配制
3.1 1×反应buffer配制(1ml为例)
表6、激酶缓冲液配制各组分及浓度
Figure PCTCN2021093813-appb-000170
3.2 AKT1/2/3酶、底物及ATP配制
表7、激酶反应体系组分及浓度
Figure PCTCN2021093813-appb-000171
3.3化合物浓度设置(起始1μM，1/2log梯度稀释，共8个梯度)
表8、药物浓度设置
化合物/nM 1000 316.46 100.14 31.69 10.03 3.17 1.00 0.32
3.4 XL665配制
表9、链霉素-XL665配制
Figure PCTCN2021093813-appb-000172
4.实验步骤
(1)激酶AKt1/2/3配制：Akt1/3从33.33ng/μL到0.013ng/μL(1.67×,final conc.＝0.008ng/uL)，Akt2从33.33ng/μL到0.084ng/μL(1.67×,final conc.＝0.05ng/μL)，使用BioTek自动分液仪每孔加入6μL；
(2)化合物配制：使用DMSO将化合物及阳性药从10mM稀释到稀释至100μM，用于化合物滴定仪，第1个浓度为1μM，1/2log梯度稀释，共8个浓度，滴定仪自动喷入每孔所需浓度，第9个孔为0即阴性对照，第10个孔为不加酶的空白对照；
(3)2500rpm离心30s，室温预孵育15min；
(4)ATP及底物配制：ATP1从10mM稀释到130μM(5×)，终浓度为26μM；ATP2从10mM稀释到200μM(5×)，终浓度为40μM；ATP3从10mM稀释到165μM(5×)，终浓度为33μM；STK-生物素标记底物3(STK Substrate 3-biotin)从50μM稀释到5μM(5×)，终浓度为1μM,；各ATP分别同底物等体积混合，使用BioTek自动分液仪4μL加入每孔；
(5)2500rpm离心30s，25℃反应30min；
(6)终止液配制：链霉素-XL665(Streptavidin-XL665)从16.67μM稀释到250nM(4×)，终浓度为62.5nM；链霉素-XL665同铕标记的STK-抗体等体积混合，使用BioTek自动分液仪10μL加入每孔；
(7)2500rpm离心30s，25℃终止反应1小时；
(8)多功能读板仪HTRF模块检测。
表10、实验步骤流程表
Figure PCTCN2021093813-appb-000173
Figure PCTCN2021093813-appb-000174
5.检测结果
表11、AKT抑制活性
Figure PCTCN2021093813-appb-000175
实验例3药代动力学评价
实施例10、实施例21、GDC-0068、实施例15异构体2、实施例34异构体4化合物的处方配制：
混合溶媒：Tween 80：PEG400：水＝1:9:90(v/v/v)
将化合物用DMSO配制成10mg/mL的储备液。
分别准确吸取浓度为10mg/mL的储备液400μl至玻璃瓶，加入3.6mL混合溶媒，最终制剂中溶媒的比例为DMSO:混合溶媒(v/v)＝10:90，涡旋(或超声)，分散均匀，得每个化合物浓度为1mg·mL -1的4mL给药溶液。
实施例15异构体2化合物的处方配制：
溶媒：DMSO:PEG400:超纯水＝5:20:75(v/v/v)
称取供试品实施例15异构体2化合物5.37mg至玻璃瓶中；加入0.269mL的DMSO，涡旋振荡，使固体物质完全溶解；加入1.074mL的PEG400，涡旋振荡，混匀；加入4.028mL的超纯水，涡旋振荡，混匀，得浓度为1mg·mL -1无色溶液。
实验动物：小鼠，品系ICR，来源：维通利华实验动物技术有限公司，周龄：6～10周，雄性。
实验方案：
表4：动物实验方案表
Figure PCTCN2021093813-appb-000176
实验动物饲养在苏州圣苏新药开发有限公司动物房内。动物房通风良好，装备空调，温度保持在20～25℃，湿度保持在40％～70％。明暗照明各12小时，实验动物自由进食和饮水。正常喂养至少5天后，经兽医检验，体征状况良好小鼠可入选本实验。每只小鼠使用尾部编号标记。动物实验方案详见表4。
称量体重后按以下公式计算每只小鼠的理论给药体积。
Figure PCTCN2021093813-appb-000177
实验前一天，小鼠禁食过夜，可自由饮水，给药后4小时喂食。
实验当天，A～E组小鼠分别灌胃给予10mg·kg -1实施例10、实施例21、GDC-0068、实施例15异构体2、实施例34异构体4的给药溶液。给药后小鼠在各时间点，由眼眶采血约100μL，置于EDTA-K 2抗凝管中。将全血样品于5,500rpm离心10min，将分离得到的血浆保存于-40～-20℃冰箱中，用于生物样品分析。建立测定小鼠血浆中化合物浓度的LC-MS/MS分析方法，并用于测定本实验获得的生物样品中化合物的浓度。采用Pharsight Phoenix 7.0中的非房室模型计算药代动力学参数。
实验结果：实验结果如表5所示：
表5：本发明化合物的药代动力学参数
Figure PCTCN2021093813-appb-000178
NR：未计算

Claims (21)

  1. 式I所示的化合物或其药学上可接受的盐，
    Figure PCTCN2021093813-appb-100001
    其中：
    R 1选自H、OH、卤素、CN、NH 2、NO 2或任选地被卤素或OH取代的C1-C6烷基；
    R 2、R 3各自独立地选自H、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、(C3-C6环烷基)-(CH 2)-、(C3-C6环烷基)-(CH 2CH 2)-、苯甲基、苯乙基、吡咯烷基、四氢呋喃基或四氢吡喃基，其中所述的C1-C6烷基、C3-C6环烷基、(C3-C6环烷基)-(CH 2)-或(C3-C6环烷基)-(CH 2CH 2)-任选地被卤素、OH、CN、NH 2或C1-C3烷氧基取代，所述的苯甲基或苯乙基任选地被卤素、OH、CN、NO 2、NH 2、C1-C3烷氧基、卤代C1-C3烷氧基、C1-C3烷基或卤代C1-C3烷基取代，所述的吡咯烷基、四氢呋喃基或四氢吡喃基任选地被卤素、OH、C1-C3烷基、环丙基甲基或C1-C4烷酰基取代；
    或R 1、R 2和与它们相连的原子一起形成4-7元含氮杂环；
    m、n各自独立地选自0、1、2或3；优选地，m为0、1或2；更优选地，m为0或1；更优选地，m为1；优选地，n为0、1或2；更优选地，n为0或1；更优选地，n为0；
    R 4、R 5均为氢或R 4、R 5一起形成＝O；优选地，R 4、R 5一起形成＝O；
    Figure PCTCN2021093813-appb-100002
    选自：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100003
    R 6、R 7、R 8、R 9各自独立地选自H、CN、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基，其中所述的C1-C6烷基或C1-C6烷氧基任选地被卤素、OH、CN或C1-C3烷氧基取代；
    R 10选自H或C1-C6烷基，其中所述的C1-C6烷基任选地被卤素、OH、CN或C1-C3烷氧基取代；
    L为任选被取代的包含1-2个氮原子的5-12元饱和杂环；
    G是任选被1-5个R 11取代的6-10元芳基或5-10元杂芳基；
    R 11独立地选自卤素、OH、CN、NH 2、NO 2、苄氧基、-NH(C1-C6烷基)、-N(C1-C6烷基) 2、-C(＝O)NH 2、-C(＝O)NH(C1-C6烷基)、-C(＝O)N(C1-C6烷基) 2、-SO 2(C1-C6烷基)、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基，其中所述的C1-C6烷基或C1-C6烷氧基任选地被卤素取代；
    条件是：当R 1、R 2和与它们相连的原子一起形成4-7元含氮杂环时，R 1、R 2均不为H；
    优选地，所述的化合物具有式II所示结构：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100004
    优选地，所述的化合物具有式III所示结构：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100005
    更优选地，所述的化合物具有式IV所示结构：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100006
    更优选地，所述的化合物具有式V所示结构：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100007
    更优选地，所述的化合物具有式VI所示结构：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100008
    其中，d选自0、1、2或5；优选地，d选自0、1或2；更优选地，d选自1或2；更优选地，d为1；
    更优选地，所述的化合物具有式VII所示结构：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100009
    其中，d选自0、1、2或5；优选地，d选自0、1或2；更优选地，d选自1或2；更优选地，d为1；
    优选地，所述化合物具有式VIII所示结构：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100010
    更优选地，所述的化合物具有式IX所示结构：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100011
    其中，d选自0、1、2或5；优选地，d选自0、1或2；更优选地，d选自1或2；更优选地，d为1；
    优选地，所述化合物具有式XI所示结构：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100012
    更优选地，所述的化合物具有式XII所示结构：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100013
    其中，d选自0、1、2或5；优选地，d选自0、1或2；更优选地，d选自1或2；更优选地，d为1；
    并且，其中，所述化合物有一个或多个C-H键被C-D键取代，优选地，所述化合物中至少在L上有一个或多个C-H键被C-D键取代；更优选地，所述化合物中L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代。
  2. 根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，R 1选自H、OH或任选地被卤素或OH取代的C1-C6烷基；优选地，R 1选自H、OH、Me、CF 3或CH 2OH；更优选地，R 1选自H或OH；最优选地，R 1选自H。
  3. 根据权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，R 2和R 3各自独立地选自H、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、(C3-C6环烷基)-(CH 2)-、(C3-C6环烷基)-(CH 2CH 2)-、苯甲基、苯乙基、吡咯烷基或四氢吡喃基，其中所述的C1-C6烷基、C3-C6环烷基、(C3-C6环烷基)-(CH 2)-或(C3-C6环烷基)-(CH 2CH 2)-任选地被F、Cl、Br、I、OH、CN、NH 2或C1-C3烷氧基取代，所述的苯甲基或苯乙基任选地被F、Cl、Br、I、OH、OMe、CF 3或Me取代，所述的吡咯烷基或四氢吡喃基任选地被F、Cl、Br、I、OH、C1-C3烷基、环丙基甲基或C1-C4烷酰基取代；
    优选地，R 2和R 3各自独立地选自H、甲基、乙基、异丙基、异丁基、叔丁基、3-戊基、CH 2OH、CH 2CH 2OH、CH 2CH 2OMe、CF 3、CH 2CF 3、CH 2CHF 2、CH 2CH 2F、环丙基、环戊基、环己基、环丙基-(CH 2)-、环戊基-(CH 2)-、环己基-(CH 2)-、环丙基-(CH 2CH 2)-、环戊基-(CH 2CH 2)-、苯甲基、4-氟苯甲基、4-氯苯甲基、4-氟苯乙基、4-氯苯乙基或四氢吡喃-4-基；
    更优选地，R 2和R 3各自独立地选自H、甲基、乙基、异丙基、环丙基、环己基、环丙基-(CH 2)-、环己基-(CH 2)-或四氢吡喃-4-基；
    更优选地，R 2和R 3各自独立地选自H、异丙基或环丙基；
    更优选地，R 2为H；
    更优选地，R 3为异丙基或环丙基；
    最优选地，R 2为H且R 3为异丙基或环丙基。
  4. 根据权利要求1-3任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，R 1、R 2和与它们相连的原子一起形成：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100014
    优选地，R 1、R 2和与它们相连的原子一起形成：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100015
  5. 根据权利要求1-4任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中
    Figure PCTCN2021093813-appb-100016
    选自：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100017
    优选
    Figure PCTCN2021093813-appb-100018
    更优选
    Figure PCTCN2021093813-appb-100019
    优选地，
    Figure PCTCN2021093813-appb-100020
    为
    Figure PCTCN2021093813-appb-100021
    且R 4和R 5一起形成＝O；
    优选地，
    Figure PCTCN2021093813-appb-100022
    为
    Figure PCTCN2021093813-appb-100023
    且R 4和R 5一起形成＝O；
    优选地，
    Figure PCTCN2021093813-appb-100024
    为
    Figure PCTCN2021093813-appb-100025
    且R 4和R 5一起形成＝O；
    优选地，
    Figure PCTCN2021093813-appb-100026
    为
    Figure PCTCN2021093813-appb-100027
    且R 4和R 5一起形成＝O；
    优选地，
    Figure PCTCN2021093813-appb-100028
    为
    Figure PCTCN2021093813-appb-100029
    且R 4和R 5均为H；
    优选地，
    Figure PCTCN2021093813-appb-100030
    为
    Figure PCTCN2021093813-appb-100031
    且R 4和R 5一起形成＝O。
  6. 根据权利要求1-5任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，R 6、R 7、R 8、R 9各自独立地选自H、CN、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基，其中所述的C1-C6烷基或C1-C6烷氧基任选地被F、Cl、Br、I、OH、CN或OMe取代；
    优选地，R 6、R 7、R 8、R 9各自独立地选自H、CN、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基，其中所述的C1-C6烷基或C1-C6烷氧基任选地被F、CN或OH取代；
    更优选地，R 6、R 7、R 8、R 9各自独立地选自H、CN、甲基、乙基、丙基、异丙基、CF 3、CH 2CF 3、CH 2CHF 2、CH 2CH 2F、CH 2CN、CH 2CH 2CN、CH 2OH、CH 2CH 2OH、OMe、OEt、OCH 2CH 2CH 3或异丙氧基；
    更优选地，R 6为H、CN、甲基、乙基、丙基、异丙基、CF 3、CH 2CF 3、CH 2CHF 2、CH 2CH 2F、CH 2CN、CH 2CH 2CN、CH 2OH、CH 2CH 2OH、OMe、OEt、OCH 2CH 2CH 3或异丙氧基；更优选地，R 6为H、CN、甲基、乙基、异丙基、CF 3、CH 2CH 2OH、OMe或OEt；更优选地，R 6为H、CN、甲基、CF 3或OMe；更优选地，R 6为CN、甲基、CF 3或OMe；更优选地，R 6为H、CN或甲基；更优选地，R 6为H、CF 3或甲基；最优选地，R 6为甲基或CF 3；
    更优选地，R 7为H；
    更优选地，R 8为H、CN、甲基、乙基、丙基、异丙基、CF 3、CH 2CF 3、CH 2CHF 2、CH 2CH 2F、CH 2CN、CH 2CH 2CN、CH 2OH、CH 2CH 2OH、OMe、OEt、OCH 2CH 2CH 3或异丙氧基；优选地，R 8为H、CN、甲基、乙基、异丙基、CF 3、CH 2CH 2OH、OMe或OEt；更优选地，R 8为H、CN或甲基；更优选地，R 8为H或CN；更优选地，R 8为H或甲基；最优选地，R 8为H；
    更优选地，R 9为H。
  7. 根据权利要求1-6任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，R 10选自H或C1-C6烷基，其中所述的C1-C6烷基任选地被卤素、OH或CN取代；优选地，R 10为H、甲基、乙基、丙基、异丙基、CF 3、CH 2CF 3、CH 2CHF 2、CH 2CH 2F、CH 2CN、CH 2CH 2CN、CH 2OH或CH 2CH 2OH；更优选地，R 10为甲基、乙基、异丙基、CH 2CF 3、CH 2CHF 2、CH 2CN或CH 2CH 2OH；更优选地，R 10为甲基、乙基、CH 2CN或CH 2CH 2OH；更优选地，R 10为甲基。
  8. 根据权利要求1-7任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，L是任选被一个或多个R 12取代的下列基团：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100032
    其中：
    单波线是L连接至羰基的位置，且双波线是L连接至嘧啶的位置，且L上有一个或多个C-H键被C-D键取代，优选地，所述L上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代；
    R 12选自卤素、OH、CN、乙烯基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基，其中所述的C1-C6烷基或C1-C6烷氧基任选地被卤素或OH取代；
    h选自0、1、2、3或4；
    j选自0、1、2或3；
    k选自1、2、3或4；
    q、s、v、t各自独立地选自0、1或2，且q、s、v、t不同时为0；
    p选自0、1、2或3；
    e选自0、1或2；
    u选自1、2或3；
    W、Z各自独立地选自N或C，且W、Z至少一个为N；
    优选地，R 12选自F、Cl、Br、I、OH、CN、乙烯基、甲基、乙基、丙基、异丙基、CF 3、CH 2CF 3、CH 2CHF 2、CH 2CH 2F、OMe、OEt、CH 2OH、CH 2CH 2OH、OCH 2OH或OCH 2CH 2OH；更优选地，R 12选自甲基、乙基、异丙基、CF 3、CH 2CF 3、OMe、OEt、CH 2OH或OCH 2OH；更优选地，R 12选自甲基、乙基或CF 3；最优选地，R 12选自甲基；
    优选地，h为0、1、2或3且j为0、1或2；优选地，h为0、1或2且j为0或1；更优选地，h为0或1且j为0；最优选地，h为1且j为0；
    优选地，k为1、2或3；优选地，k为1或3；更优选地，k为1；
    优选地，q、s、v、t各自独立地为0或1，且q、s、v、t不同时为0；优选地，q、s、v、t均为1；更优选地，q、s均为0，且v、t均为1；更优选地，q、s均为1，且v、t均为0；最优选地，s、v均为0，且q、t均为1；
    优选地，p为0、1或2；优选地，p为0或2；更优选地，p为2；
    优选地，e为0或1，且u为1或2；优选地，e为0或1，且u为1；更优选地，e为0，且u为1；
    优选地，W为C，且Z为N；优选地，W为N，且Z为C；更优选地，W、Z均为N。
  9. 根据权利要求8所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，L是任选被一个或多个R 12取代的下列基团：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100033
    优选地，L是任选被一个或多个R 12取代的下列基团：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100034
    更优选地，L选自下列基团：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100035
    Figure PCTCN2021093813-appb-100036
    更优选地，L选自下列基团：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100037
    更优选地，L选自下列基团：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100038
    更优选地，L为
    Figure PCTCN2021093813-appb-100039
    更优选地，L为
    Figure PCTCN2021093813-appb-100040
  10. 根据权利要求9所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，L选自
    Figure PCTCN2021093813-appb-100041
    Figure PCTCN2021093813-appb-100042
    更优选地，L为：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100043
  11. 根据权利要求1-10任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，G是任选被1-5个R 11取代的苯基或任选被1个或多个R 11取代的噻吩基或吡啶基；
    优选地，R 11独立地选自F、Cl、Br、I、OH、CN、NH 2、NO 2、苄氧基、甲基、乙基、异丙基、CH 2CF 3、CF 3、SMe、OMe、OCF 3、OEt或异丙氧基；优选地，R 11独立地选自F、Cl、Br、CN、苄氧基、甲基、乙基、异丙基、CF 3、OMe、SMe或OCF 3；更优选地，R 11独立地选自F、Cl或CF 3； 最优选地，R 11为Cl；
    优选地，G是苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、4-氟苯基、4-溴苯基、4-甲基苯基、4-乙基苯基、4-异丙基苯基、4-三氟甲基苯基、4-氰基苯基、4-甲氧基苯基、4-甲硫基苯基、4-三氟甲氧基苯基、4-氯-3-氟苯基、3,4-二氟苯基、2,4-二氯苯基或4-苄氧基苯基；优选地，G是4-氯苯基、4-氯-3-氟苯基、4-三氟甲基苯基或3,4-二氟苯基；更优选地，G是4-氯苯基；
    优选地，G是任选被一个或多个卤素取代的噻吩基或吡啶基；优选地，G是任选被一个或多个F、Cl、Br或I取代的噻吩或吡啶基；更优选地，G是：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100044
  12. 根据权利要求1任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，具体为下列化合物，
    Figure PCTCN2021093813-appb-100045
    Figure PCTCN2021093813-appb-100046
    Figure PCTCN2021093813-appb-100047
    顺-(5R)-4-(5-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮，或
    反-(5R)-4-(5-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮；
    其中，上述化合物中一个或多个C-H键被C-D键取代；
    优选地，上述化合物结构中与L相应的环上有一个或多个C-H键被C-D键取代；
    更优选地，上述化合物结构中与L相应的环上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代。
  13. 根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，具体为下列化合物：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100048
    其中，上述化合物中一个或多个C-H键被C-D键取代；
    优选地，上述化合物结构中与L相应的环上有一个或多个C-H键被C-D键取代；
    更优选地，上述化合物结构中与L相应的环上有一个、二个、三个、四个、五个、六个、七个或八个C-H键被C-D键取代。
  14. 下列化合物或其药学上可接受的盐：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100049
  15. 下列化合物：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100050
  16. 式XIII-XVIII所示化合物或其药学上可接受的盐：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100051
    其中
    Figure PCTCN2021093813-appb-100052
    R 4、R 5、R 6、R 8、R 10如权利要求1、6或7所定义。
  17. 药物组合物，其包含权利要求1-12任一项所述化合物或其药学上可接受的盐；优选地，所述组合物包含权利要求1-12任一项所述化合物或其药学上可接受的盐以及一种或多种药学上可接受的载体。
  18. 式V、VIII、XI化合物的制备方法，包括以下合成方案所示步骤：
    合成方案1：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100053
    其中，R 2、R 6、R 8、G、h、j的定义如权利要求1、3、6或8所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基；
    式1-1化合物在碱例如甲醇钠，和溶剂例如甲醇的存在下制备式1-2化合物，式1-2化合物与乙酸甲脒在碱例如甲醇钠，和溶剂例如甲醇的存在下制备式1-3化合物，式1-3在碱例如二异丙基乙胺，和溶剂例如乙腈存在下制备式1-4化合物，式1-4化合物进一步生成式1-5化合物，式1-5化合物与式1-6化合物反应制备式1-7化合物，式1-7化合物脱除保护基制备式1-8化合物，式1-8化合物与式1-9化合物反应制备式1-10化合物，当P 1为胺基保护基时，合成方案1进一步包括将胺基保护基脱除；
    合成方案2：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100054
    其中，R 2、R 6、R 8、G、q、v、s、t、p的定义如权利要求1、3、6或8所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基；
    式1-5化合物按照合成方案1制备，式1-5化合物与式2-6化合物反应制备式2-7化合物，式2-7化合物脱除保护基制备式2-8化合物，式2-8化合物与式1-9化合物反应制备式2-10化合物，当P 1为胺基保护基时，合成方案2进一步包括将胺基保护基脱除；
    合成方案3：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100055
    其中，R 2、R 6、R 8、G、h、j、k的定义如权利要求1、3、6或8所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基；
    式1-5化合物按照合成方案1制备，式1-5化合物与式3-6化合物反应制备式3-7化合物，式3-7化合物脱除保护基制备式3-8化合物，式3-8化合物与式1-9化合物反应制备式3-10化合物，当P 1为胺基保护基时，合成方案3进一步包括将胺基保护基脱除；
    合成方案4：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100056
    其中，R 2、R 6、R 8、e、u的定义如权利要求1、3、6或8所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺 基保护基；
    式1-5化合物合成方案1制备，式1-5化合物与式4-6化合物反应制备式4-7化合物，式4-7化合物脱除保护基制备式4-8化合物，式4-8化合物与式1-9化合物反应制备式4-10化合物，当P 1为胺基保护基时，合成方案4进一步包括将胺基保护基脱除；
    合成方案5：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100057
    其中，R 2、R 10、R 8、G、h、j的定义如权利要求1、3、6、7或8所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基；
    式5-1化合物在碱例如氢化钠，和溶剂例如四氢呋喃存在下制备式5-2化合物，式5-2化合物与NH 2P 2在碱例如三乙胺，和溶剂例如异丙醇存在下制备式5-3化合物，式5-3化合物在碱例如氢化钠，和溶剂例如DMF存在下制备式5-4化合物，式5-4化合物脱除保护基制备式5-5化合物，式5-5化合物与式1-6化合物反应制备式5-7化合物，式5-7化合物脱除保护基制备式5-8化合物，式5-8化合物与式1-9化合物反应制备式5-10化合物；当P 1为胺基保护基时，合成方案5进一步包括脱除保护基步骤；
    合成方案6：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100058
    其中，R 2、R 10、R 8、G、q、s、v、t、p的定义如权利要求1、3、6、7或8所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基；
    式5-5化合物按照合成方案5制备，式5-5化合物与式2-6化合物反应制备式6-7化合物，式6-7化合物脱除保护基制备式6-8化合物，式6-8化合物与式1-9化合物反应制备式6-10化合物；当P 1为胺基保护基时，合成方案6进一步包括脱除保护基步骤；
    合成方案7：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100059
    其中，R 2、R 10、R 8、G、h、j、k的定义如前所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基；
    式5-5化合物按照合成方案5制备，式5-5化合物与式3-6化合物反应制备式7-7化合物，式7-7化合物脱除保护基制备式7-8化合物，式7-8化合物与式1-9化合物反应制备式7-10化合物；当P 1 为胺基保护基时，合成方案7进一步包括脱除保护基步骤；
    合成方案8：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100060
    其中，R 2、R 10、R 8、G、e、u的定义如权利要求1、3、6、7或8所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基；
    式5-5化合物按照合成方案5制备，式5-5化合物与式4-6化合物反应制备式8-7化合物，式8-7化合物脱除保护基制备式8-8化合物，式8-8化合物与式1-9化合物反应制备式8-10化合物；当P 1为胺基保护基时，合成方案8进一步包括脱除保护基步骤；
    合成方案9：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100061
    其中X为卤素，R 2、R 6、h、j、G的定义如权利要求1、3、6或8所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基。
    由化合物式9-1制备化合物式9-2，式9-2与化合物式1-6反应制备化合物式9-3，式9-3被还原生 成化合物式9-4，式9-4发生成环反应制备化合物式9-5，式9-5脱去保护基生成化合物式9-6或其盐，再进一步与化合物式1-9反应制备得到化合物式9-7；当P 1为胺基保护基时，合成方案9进一步包括脱除保护基步骤；
    合成方案9a：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100062
    其中，X为卤素，R 2、R 6、h、j、G的定义如权利要求1、3、6或8所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基；
    由化合物式9-1制备化合物式9-2，式9-2经还原反应制备化合物式13-1，式13-1发生环合反应制备化合物式13-2，式13-2与化合物式1-6发生偶连反应制备化合物式9-5，式9-5脱去保护基生成化合物式9-6或其盐，再进一步与化合物式1-9反应制备得到化合物式9-7；当P 1为胺基保护基时，合成方案9进一步包括脱除保护基步骤；任选地，化合物式13-2通过手性拆分制备得到立体异构体，立体异构体参与后续反应从而制备得到光学纯的化合物式9-7。
    合成方案10：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100063
    其中X为卤素，R 2、R 6、q、v、s、t、p、G的定义如权利要求1、3、6或8所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基；
    由化合物式9-1制备化合物式9-2，式9-2与化合物式2-6反应制备化合物式10-3，式10-3被还原生成化合物式10-4，式10-4发生成环反应制备化合物式10-5，式10-5脱去保护基生成化合物式10-6或其盐，再进一步与化合物式1-9反应制备得到化合物式10-7；当P 1为胺基保护基时，合成方案10进一步包括脱除保护基步骤；
    合成方案11：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100064
    其中X为卤素，R 2、R 6、h、k、j、G的定义如权利要求1、3、6或8所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基；
    由化合物式9-1制备化合物式9-2，式9-2与化合物式11-1反应制备化合物式11-2，式11-2被还原生成化合物式11-3，式11-3发生成环反应制备化合物式11-4，式11-4脱去保护基生成化合物式11-5或其盐，再进一步与化合物式1-9反应制备得到化合物式11-6；当P 1为胺基保护基时，合成方案11进一步包括脱除保护基步骤；
    合成方案12：
    Figure PCTCN2021093813-appb-100065
    其中，R 2、R 6、R 8、h、k、j、G的定义如权利要求1、3、6或8所述，P 1为H或胺基保护基，P 2为胺基保护基；
    由化合物式1-5与化合物11-1反应制备化合物式12-1，式12-1脱去保护基制备化合物式12-2，式12-2与化合物式1-9反应制备化合物式12-3；当P 1为胺基保护基时，合成方案12进一步包括脱除保护基步骤；
    任选地，所述制备方法所制备的化合物和/或所用中间体包括一个或多个C-H键被C-D键取代。
  19. 权利要求1-16任一项所述化合物或其药学上可接受的盐或权利要求17所述药物组合物或权利要求18的制备方法在制备用于预防和/或治疗AKT蛋白激酶介导的疾病或疾病状态的药物中的用途；优选地，所述疾病或疾病状态为癌症；更优选地，所述疾病或疾病状态为乳腺癌、***癌或卵巢癌。
  20. 用于预防和/或治疗AKT蛋白激酶介导的疾病或疾病状态的方法，其包括向有需要的个体给予权利要求1-16任一项所述化合物或其药学上可接受的盐或权利要求17所述药物组合物；优选地，所述疾病或疾病状态为癌症；更优选地，所述疾病或疾病状态为乳腺癌、***癌或卵巢癌。
  21. 用于预防和/或治疗AKT蛋白激酶介导的疾病或疾病状态的权利要求1-16任一项所述化合物或其药学上可接受的盐或权利要求17所述药物组合物或权利要求18的制备方法；优选地，所述疾病或疾病状态为癌症；更优选地，所述疾病或疾病状态为乳腺癌、***癌或卵巢癌。
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