WO2019112269A1 - Lrrk2 억제제로서의 피롤로(피라졸로)피리미딘 유도체 - Google Patents

Lrrk2 억제제로서의 피롤로(피라졸로)피리미딘 유도체 Download PDF

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WO2019112269A1
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pyrimidin
amine
pyrrolo
pyrazol
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김중호
최장식
이재상
박송은
김화실
정동식
고종성
김세원
이재규
송호준
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주식회사 오스코텍
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia

Definitions

  • the present invention relates to pyrrolo (pyrazolo) pyrimidine derivatives having an effect as an inhibitor of LRRK2 (Leucine-rich repeat kinase 2) and pharmaceutical compositions for preventing or treating degenerative brain diseases comprising the same.
  • LRRK2 Leucine-rich repeat kinase 2
  • LRRK2 Leucine-rich repeat kinase 2
  • GTPase GTPase
  • serine-threonine kinase activity in one protein.
  • LRRK2 is reported to be highly expressed in dopaminergic neurons in the cerebral cortex, black body, striatum, hippocampus, cerebellum, etc., which are associated with the pathogenesis of Parkinson's disease.
  • specific expression of LRRK2 was observed in abnormal protein aggregates called Lewy bodies, which are observed as specific diseases in dopaminergic neurons in patients with Parkinson's disease.
  • LRRK2 gain-of-function'mutant of LRRK2 is closely related to the onset of late-onset autosomal dominant Parkinson's disease, and LRRK2 Increased activity is known to affect onset and progression of Parkinson's disease.
  • LRRK2 when normal LRRK2 is overexpressed in neurons, apoptosis is induced.
  • This LRRK2-induced cell physiological change pattern is very similar to the neuronal cell death in Parkinson's disease patients .
  • the activation of LRRK2 has a high clinical relevance to the onset and progression of Parkinson's disease, and it is possible to control both the neuronal apoptosis and neuronal inflammatory response, which are the most important pathological changes of Parkinson's disease, through the regulation of LRRK2 activity It is expected.
  • the present inventors have made efforts to develop a compound which exhibits selective and excellent activity in LRRK2.
  • a novel pyrrolo (pyrazolo) pyrimidine derivative was synthesized and showed that the derivative exhibits excellent LRRK2 activity inhibitory effect. Completed.
  • an object of the present invention is to provide a novel compound having an excellent LRRK2 activity inhibitory effect.
  • An aspect of the present invention provides a compound selected from the group consisting of a compound represented by the following formula (1), and a pharmaceutically acceptable salt, hydrate, solvate, prodrug, and isomer thereof:
  • X is CH or N
  • R 1 is hydrogen, halogen, or C 1-4 alkyl or C 1-4 alkoxy unsubstituted or substituted with one or more halogens;
  • R 2 is C 1-6 alkyl, C 1-3 alkoxy C 1-6 alkyl, C 3-6 cycloalkyl C 1-6 alkyl, C 1-6 alkoxy, C 3-6 cycloalkyl, 4-7 membered Heterocycloalkyl, or C 6-10 aryl optionally substituted with one or more halogens;
  • heterocycloalkyl of 4 to 7 circle C 1-4 alkyl, optionally substituted with one or more halogen C 1-4 alkylcarbonyl, C 3-6 cycloalkyl-carbonyl, C 1-4 alkyl substituted with Unsubstituted 4 to 7 membered heterocycloalkylcarbonyl, C 1-4 alkylsulfonyl, C 3-6 cycloalkylsulfonyl, or oxetanyl,
  • heterocycloalkyl comprises at least one atom selected from N, O and S,
  • R 3 is hydrogen, halogen, or C 1-4 alkyl
  • R 4 is C 1-6 alkyl or C 3-6 cycloalkyl optionally substituted with one or more halogens;
  • R < 5 > is halogen, or C1-4 alkyl optionally substituted with one or more halogens.
  • Another aspect of the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating a degenerative brain disease comprising the compound as an active ingredient.
  • the pyrrolo (pyrazolo) pyrimidine derivative according to the present invention has an excellent selective inhibitory effect on LRRK2 and is useful as a preventive and therapeutic agent for degenerative brain diseases including Parkinson's disease.
  • halogen examples include fluorine, chlorine, bromine and iodine.
  • X is CH or N
  • R 1 is hydrogen, halogen, or C 1-4 alkyl or C 1-4 alkoxy unsubstituted or substituted with one or more halogens;
  • R 2 is C 1-6 alkyl, C 1-3 alkoxy C 1-6 alkyl, C 3-6 cycloalkyl C 1-6 alkyl, C 1-6 alkoxy, C 3-6 cycloalkyl, 4-7 membered Heterocycloalkyl, or C 6-10 aryl optionally substituted with one or more halogens;
  • heterocycloalkyl of 4 to 7 circle C 1-4 alkyl, optionally substituted with one or more halogen C 1-4 alkylcarbonyl, C 3-6 cycloalkyl-carbonyl, C 1-4 alkyl substituted with Unsubstituted 4 to 7 membered heterocycloalkylcarbonyl, C 1-4 alkylsulfonyl, C 3-6 cycloalkylsulfonyl, or oxetanyl,
  • heterocycloalkyl comprises at least one atom selected from N, O and S,
  • R 3 is hydrogen, halogen, or C 1-4 alkyl
  • R 4 is C 1-6 alkyl or C 3-6 cycloalkyl optionally substituted with one or more halogens;
  • R < 5 > is halogen, or C1-4 alkyl optionally substituted with one or more halogens.
  • R 1 is hydrogen, halogen, trifluoroC 1-4 alkyl, C 1-4 alkyl, or C 1-4 alkoxy.
  • R 4 is trifluoroC 1-4 alkyl, C 1-4 alkyl, or C 3-6 cycloalkyl.
  • R 5 is halogen, trifluoroC 1-4 alkyl, or C 1-4 alkyl.
  • R 2 is C 1-4 alkyl, C 1-3 alkoxyC 1-4 alkyl, C 3-6 cycloalkylC 1-4 alkyl, C 1-4 alkoxy, C 3-6 cyclo Alkyl, 4- to 7-membered heterocycloalkyl, or C 6-10 aryl substituted with F or Cl, said 4- to 7-membered heterocycloalkyl being optionally substituted with C 1-4 alkyl, trifluoroC 1-4 alkylcarbonyl carbonyl, C 1-4 alkylcarbonyl, C 3-6 cycloalkyl-carbonyl, C 1-4 heterocycloalkyl carbonyl of the substituted or unsubstituted 4 to 7 membered alkyl carbonyl, C 1-4 alkylsulfonyl, C 3-6 cycloalkylsulfonyl, or oxetanyl, wherein said heterocycloalkyl comprises one or more atoms selected from N and &lt
  • R < 2 &gt may be selected from the following substituents:
  • the compound represented by Formula 1 may be selected from the group consisting of the following compounds.
  • the inhibitory rate (IC 50 ) of LRRK2 according to the substituent of the compound represented by Formula 1 is as shown in Table 1 below (++++: more than 0 and less than 10 nM, +++: more than 10 nM 100 nM or less, ++: 100 nM or more and 1,000 nM or less, +: 1,000 nM or more and 10,000 nM or less).
  • the pharmaceutically acceptable salt of the compound represented by Formula 1 may be an alkali metal salt, an alkaline earth metal salt, an ammonium salt, an amine salt, an acid addition salt, a hydrate salt, .
  • inorganic acid salts such as hydrochloride, hydrobromide, hydroiodide, sulfate, phosphate and nitrate
  • salts of organic acids such as formic acid, tartaric acid, tartaric acid, citric acid, tartaric acid, citric acid, tartaric acid, citric acid, tartaric acid, citric acid, Organic acid salts such as acid salts, gluconic acid salts and fatty acid salts.
  • the pharmaceutically acceptable salt is selected from the group consisting of hydrochloride, hydrobromide, hydroiodide, sulfate, nitrate, methanesulfonate, ethanesulfonate, benzenesulfonate and toluenesulfonate Or more.
  • the hydrate and solvate of the compound represented by Formula 1 can be prepared by a method well known in the art. Specifically, it is preferably non-toxic and water-soluble, and may be a hydrate and a solvate in which 1 to 5 molecules of water and an alcohol-based solvent (particularly, ethanol, etc.) are combined.
  • the prodrug of the compound represented by Formula 1 may be prepared by a method well known in the art, which is a chemical derivative that can be converted into the compound represented by Formula 1 in vivo upon administration .
  • the isomer of the compound represented by Formula 1 is not only an optical isomer (for example, enantiomers, diastereomers and mixtures thereof), but also conformation isomers and positional isomers (position isomers).
  • R 1 to R 5 are as defined in Formula 1 above.
  • the organic solvent may be at least one selected from the group consisting of acetone, 1,4-dioxane, methyl ethyl ketone, N, N-dimethylformamide, N-methylpyrrolidone and ethyl acetate, no.
  • step (1) for example, the compound of formula (2) may be reacted with NCS (N-chlorosuccinimide) in a N, N-dimethylformamide solvent at room temperature for 1 to 2 hours.
  • NCS N-chlorosuccinimide
  • step (2) for example, the compound of formula (4) may be reacted with potassium hydroxide and the compound of formula (5) in a N, N-dimethylformamide solvent at room temperature for 2 hours.
  • the compound of formula (2) is reacted with iodine and potassium hydroxide in a N, N-dimethylformamide solvent at 0 ° C to room temperature, followed by addition of iodomethane , Methylfluorosulfonyldifluoroacetate (MFSDA) at 100 to 130 ° C for 4 hours to prepare 2-chloro-7-methyl-5- (trifluoromethyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine It is possible.
  • MFSDA Methylfluorosulfonyldifluoroacetate
  • step (3) for example, the compound of formula (6) and the compound of formula (7) are dissolved in an ethanol solvent, hydrochloric acid is added thereto, and the compound is reacted at 80 ° C for 12 hours.
  • R 1 to R 5 are as defined in Formula 1 above.
  • the organic solvent may be at least one selected from the group consisting of acetone, dichloromethane, 1,4-dioxane, methyl ethyl ketone, N, N-dimethylformamide, N-methylpyrrolidone and ethyl acetate. But is not limited thereto.
  • step (A) for example, the compound of formula (8) can be prepared by reacting the compound of formula (8) with N 2 H 4 and acetonitrile (ACN) at room temperature for 1 to 2 hours.
  • ACN acetonitrile
  • the compound of formula (10) may be prepared by reacting the compound of formula (9) with 10% KOH at 90 to 110 ° C for 2 to 3 hours.
  • step (C) for example, the compound of formula (10) can be prepared by reacting the compound of formula (10) with phosphoryl chloride (POCl 3 ) at 90-110 ° C.
  • phosphoryl chloride (POCl 3 ) at 90-110 ° C.
  • step (D) for example, the compound of formula (11) may be reacted with the compound of formula (5) in a solvent of N, N-dimethylformamide at 0 ° C to room temperature for 2 hours.
  • step (E) for example, the compound of formula (12) can be reacted with mCPBA (m-chloroperoxybenzoic acid) in dichloromethane or N, N-dimethylformamide for 4 hours at room temperature .
  • mCPBA m-chloroperoxybenzoic acid
  • step (F) for example, the compound of formula (13) may be reacted with p-toluenesulfonic acid and the compound of formula (7) in a N-methylpyrrolidone solvent at 100 to 120 ° C for 6 hours to prepare the compound of formula have.
  • the compounds represented by Formula 1 exhibit high LRRK2 inhibitory activity and excellent selectivity for inhibitory activity. Accordingly, the compound represented by Formula 1 and its pharmaceutically acceptable salts, hydrates, solvates, prodrugs and isomers are useful as a preventive or therapeutic agent for degenerative brain diseases requiring inhibition of LRRK2 activity.
  • One embodiment provides a pharmaceutical composition for preventing or treating degenerative brain diseases, comprising the compound as an active ingredient.
  • the degenerative brain disease may be Parkinson's disease.
  • the pharmaceutical composition exhibits selective LRRK2 (Leucine Rich Repeat Kinase2) inhibitory activity.
  • the pharmaceutical composition may comprise one or more pharmaceutically acceptable excipients.
  • Lubricants such as, for example, magnesium stearate, sodium lauryl sulfate and talc; Excipients such as lactose, sodium citrate, calcium carbonate and dicalcium phosphate; Disintegrants such as starch, alginic acid and certain complex silicates; And various carriers may be used for the preparation of tablets.
  • the kind of the carrier may vary depending on the solubility of the active substance, the chemical property, and the administration mode.
  • the pharmaceutical composition may be prepared according to a conventional method using one or more pharmaceutically acceptable additives.
  • additives may include, among others, diluents, sterile aqueous media and various non-toxic organic solvents, which may additionally contain sweetening, flavoring, coloring or stabilizing agents, if desired.
  • the pharmaceutical composition may be formulated into various dosage forms such as tablets, pills, granules, capsules, powders, aqueous solutions or suspensions, injectable solutions, elixirs or syrups according to conventional formulation methods in the pharmaceutical field.
  • lactose and high molecular weight polyethylene glycols are advantageous to use.
  • they may contain emulsifying agents or agents that facilitate suspension, and diluents such as sucrose, ethanol, polyethylene glycol, propylene glycol, glycerol or chloroform, or mixtures thereof may be used.
  • the pharmaceutical composition may be administered parenterally or orally, if necessary, and may be administered at a dose of 0.5 mg / kg body weight to 5 mg / kg body weight, preferably 1 mg / kg body weight per day for parenteral administration To 4 mg / kg body weight; In the case of oral administration, one or more doses may be administered in an amount of 5 mg / kg body weight to 50 mg / kg body weight, preferably 10 mg / kg body weight to 40 mg / kg body weight.
  • the dosage for a patient may vary depending on the weight, age, sex, health condition, diet, administration time, administration method, excretion rate, severity of disease, etc. of each patient.
  • a method of treating a degenerative brain disease comprising administering the compound to a patient.
  • 2,5-dichloro-7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidine (3.31 g, 17.60 mmol) was added to the N, N-dimethylformamide solvent (33 ml) and cooled to 0 ⁇ ⁇ .
  • NaH (1.15 g, 26.40 mmol) was slowly added thereto, and the mixture was stirred at 0 ° C for 30 minutes.
  • Iodoethane (1.69 ml, 21.12 mmol) was slowly added dropwise and then the temperature was raised to room temperature and stirred for 2 hours. Water (80 ml) was added to precipitate a solid. After filtration under reduced pressure, 3.15 g (yield: 82%) of the title compound was obtained.
  • Step 1 Synthesis of ethyl 4-hydrazinyl-2- (methylthio) pyrimidine-5-carboxylate
  • Acetyl nitrate (Acetyl nitrate) was prepared by slowly adding HNO 3 (18 ml) to acetic anhydride (42 ml) at 0 ° C. 1H-pyrazole (10 g) was added to another flask and acetic acid (28 ml) was added. The acetyl nitrate was slowly added to the pyrazole compound at 0 ° C, stirred for 1 hour, and then water was added to precipitate a solid. Filtration under reduced pressure with water gave 16.0 g (yield: 97%) of the desired compound.
  • Step 2 Synthesis of tetrahydro-2H-pyran-4-ylmethanesulfonate
  • Step 3 Synthesis of 4-nitro-1- (tetrahydro-2H-pyran-4-yl) -3- (trifluoromethyl) -1H-pyrazole
  • Step 1 Synthesis of 1-isopropyl-4-nitro-3- (trifluoromethyl) -1H-pyrazole
  • Step 1 Synthesis of 4-nitro-1- (oxetan-3-yl) -1H-pyrazole
  • tert-Butyl-4-hydroxypiperidine-l-carboxylate (20.0 g, 99.42 mmol) was dissolved in DCM (200 ml). Methanesulfonyl chloride (10 mL, 1.3 eq.) was added thereto, followed by stirring. Triethylamine (41.6 mL, 3.0 eq.) was added and stirred for 1 hour. After the reaction was completed, the mixture was extracted three times with brine and DCM, dried over MgSO 4 and concentrated under reduced pressure to obtain 27.7 g (yield: 99%) of an ivory solid compound.
  • Step 1 Synthesis of tert-butyl-3-hydroxyazetidine-1-carboxylate
  • Azetidin-3-ol hydrochloride (3.0 g, 27.38 mmol) was dissolved in H 2 O (6 ml).
  • K 2 CO 3 (3.78 g, 1.0 eq.) was dissolved in H 2 O (6 mL) and added.
  • Di-tert-butyl dicarbonate (5.98 g, 1.0 eq.) was dissolved in THF (27 mL), and the mixture was stirred for 4 hours. After the reaction was completed, ethyl acetate was added thereto, and the mixture was extracted three times, dried and concentrated to obtain 4.7 g (yield: 99%) of yellow target compound.
  • tert-Butyl-3-hydroxyazetidine-1-carboxylate (4.7 g, 27.13 mmol) was dissolved in DCM (50 ml). Methanesulfonyl chloride (2.7 ml, 1.3 eq.) was added and stirred. Triethylamine (11.3 mL, 3.0 eq.) was added and stirred for 1 hour. After the reaction was completed, the reaction mixture was extracted three times with brine and DCM, dried over MgSO 4 and concentrated to obtain 6.8 g (yield: 99%) of the desired compound as a brown solid.
  • Step 1 Synthesis of tert-butyl-4- (4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) piperidine-
  • Step 2 Synthesis of tert-butyl-4- (5-chloro-4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) piperidine-
  • Step 1 Synthesis of l- (4- (5-chloro-4-nitro-lH-pyrazol-l-yl) piperidin-
  • Step 1 Synthesis of tert-butyl-4- (4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) piperidine-
  • Step 1 Synthesis of 4- (4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) -1- (oxetan-3- yl) piperidine
  • Step 2 Synthesis of 4- (5-chloro-4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) -1- (oxetan-
  • Step 1 Synthesis of tert-butyl-3- (4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) azetidine-
  • Step 1 Synthesis of 4-nitro-1- (1- (oxetan-3-yl) azetidin-3-yl) -1H-pyrazole
  • Step 1 Synthesis of 4-nitro-1- (tetrahydro-2H-pyran-4-yl) -1H-pyrazole
  • Step 1 Synthesis of 1- (4-fluorophenyl) -4-nitro-1H-pyrazole
  • Step 1 Synthesis of cyclopropyl (4- (4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) piperidin-
  • step 2 of Preparation 34 cyclopropyl (4- (4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) piperidine was used instead of 4-nitro-3- (trifluoromethyl) -1-yl) methanone (0.28 g, 1.07 mmol) was used in place of 4-chloro-2-fluoroaniline to yield the desired compound (0.10 g, Yield: 34%).
  • Preparation 50 Preparation of Intermediate 50 (l- (4- (4-Amino-3-chloro-lH-pyrazol- l-yl) piperidin- l-yl) -2,2,2-trifluoroethane On) >
  • Step 1 Synthesis of 1- (1- (methylsulfonyl) azetidin-3-yl) -4-nitro-1H-pyrazole
  • step 2 of Preparation 34 21- (1- (methylsulfonyl) azetidin-3-yl) -4-nitro-thiazole was used instead of 4-nitro- 240 mg (yield: 47%) of the desired compound was obtained by the same procedure as in the step 2 of Preparation Example 34, except that 1H-pyrazole (500 mg, 2.03 mmol) was used.
  • Step 1 Synthesis of tert-butyl-4- (4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) azepane-
  • Step 1 Synthesis of tert-butyl 4- (3-chloro-5-methyl-4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) piperidine-
  • Step 3 Synthesis of (4- (3-chloro-5-methyl-4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) piperidin-l-yl) (cyclopropyl) methanone
  • Step 1 Synthesis of tert-butyl 4- (3,5-dimethyl-4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) piperidine-
  • Step 3 of Production Example 25 The procedure of Step 3 of Production Example 25 was repeated to give 0.39 g of the target compound (yield: 99%).
  • Step 3 Synthesis of 4- (3,5-dimethyl-4-nitro-1H-pyrazol-1-yl) -1- (methylsulfonyl) piperidine
  • the compound was dissolved in 100 mM DMSO at 10 mM and then a solution of LRRK2 activity measurement (50 mM HEPES (4- (2-hydroxyethyl) -1-piperazineethanesulfonic acid) pH 7.5, 10 mM MgCl 2 , 1 mM EGTA (1 ⁇ M to 10 ⁇ M) was serially diluted with 1 ⁇ M -bis (o-aminophenoxy) ethane-N, N, N ', N'-tetraacetic acid, 2 mM DTT (Dithiothreitol) and 0.01% Tween- .
  • LRRK2 activity measurement 50 mM HEPES (4- (2-hydroxyethyl) -1-piperazineethanesulfonic acid) pH 7.5, 10 mM MgCl 2 , 1 mM EGTA (1 ⁇ M to 10 ⁇ M
  • the compound of the present invention has an inhibitory effect on LRRK2 activity at nM level and has LRRK2 activity inhibitory properties superior to that of LRRK2-IN-1, which was conventionally used.
  • LRRK2-IN-1 LRRK2-IN-1
  • six tyrosine kinase panel tests were performed on the compounds 25, 28, 30, 31, 32, 33, 35, 42, 43, 46, 47, 51, 52, 55, 57, 58 and 59 As a result, all of them showed high LRRK2 inhibitory activity, confirming excellent selectivity of LRRK2 inhibitory activity.

Abstract

본 발명은 LRRK2 억제제로서의 효능을 갖는 피롤로(피라졸로)피리미딘 유도체, 이의 제조 방법 및 이를 포함하는 퇴행성 뇌질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.

Description

LRRK2 억제제로서의 피롤로(피라졸로)피리미딘 유도체
본 발명은 LRRK2(Leucine-rich repeat kinase 2) 억제제로서의 효능을 갖는 피롤로(피라졸로)피리미딘 유도체 및 이를 포함하는 퇴행성 뇌질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
LRRK2(Leucine-rich repeat kinase 2)는 류신-풍부 반복 키나제 집단(leucin-rich repeat kinase family)에 속하는 단백질로서, 종간 유사성이 높은 2,527개의 아미노산 배열로 구성된다. LRRK2는 특징적으로 하나의 단백질 안에 GTP 가수분해효소(GTPase)와 세린-트레오닌 키나제(Serine-threonine kinase) 활성을 모두 갖는다.
LRRK2는 파킨슨병의 병인과 관련된 뇌의 대뇌피질, 흑질, 선조체, 해마, 소뇌 등에 존재하는 도파민신경세포에서 높게 발현되는 것으로 보고된다. 환자대상 사후시험(postmortem study)에서는 파킨슨병 환자의 도파민신경세포내 특이적 질환으로 관찰되는 루이소체(Lewy bodies)라는 비정상적인 단백질 응집체에서 LRRK2의 특이적 발현증가가 관찰된 바 있다.
또한, LRRK2의 활성이 증가된 돌연변이(gain-of-functions’mutant)가 후발성 상염색체우성형 파킨슨병(late-onset autosomal dominant Parkinson’s disease)의 발병과 상호 밀접한 관련성을 갖는 것이 확인되어, LRRK2의 활성증가가 파킨슨병의 발병 및 진행에 영향을 주는 것으로 알려져 있다.
특히, 정상적인 LRRK2가 신경세포 내에서 과발현되면 이로 인해 세포사멸(apoptosis)이 유도되는데, 이러한 LRRK2 유래 세포생리학적 변화양상은 파킨슨병 환자에서 나타나는 신경세포사멸과정 상에서의 세포변화와 매우 유사한 것으로 확인된다. LRRK2의 활성변화는 파킨슨병의 발병 및 진행과 높은 임상관련성을 갖고 있으며, LRRK2의 활성 조절을 통해 파킨슨병의 가장 핵심적인 병리학적 변화인 신경세포사멸과 신경세포염증반응을 모두 제어할 수 있을 것으로 기대되고 있다.
한편, 현재 처방되고 있는 파킨슨병 치료제는 처방 환자군의 40%가 운동기복(motor fluctuation)을 경험한 것으로 확인되고 있다. 또한, 처방 후 일정기간(발병기준 4 내지 6년)이 경과된 시점에서는, 처방약에 대한 내성으로 인해 운동기복을 경험하는 환자율이 매년 10%씩 증가되고 있다.
따라서, 부작용이 최소화되면서도 경구투여가 가능한 저분자 합성 신약에 대한 개발이 요구되고 있다.
이에 본 발명자들은 LRRK2에 선택적이면서 우수한 활성을 나타내는 화합물을 개발하기 위해 노력한 결과, 신규 피롤로(피라졸로)피리미딘 유도체를 합성하였으며, 상기 유도체가 우수한 LRRK2 활성 억제 효과를 나타냄을 밝힘으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 LRRK2 활성 억제 효과가 우수한 신규 화합물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 유효성분으로서 상기 화합물을 포함하는, 퇴행성 뇌질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 일 측면은, 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 및 이의 약학적으로 허용되는 염, 수화물, 용매화물, 전구약물 및 이성질체로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물을 제공한다:
[화학식 1]
Figure PCTKR2018015184-appb-I000001
상기 식에서,
X는 CH 또는 N이고;
R1은 수소, 할로겐, 또는 하나 이상의 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않은 C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시이며;
R2는 C1-6 알킬, C1-3 알콕시 C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-6 시클로알킬, 4 내지 7원의 헤테로시클로알킬, 또는 하나 이상의 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않은 C6-10 아릴이고;
상기 4 내지 7원의 헤테로시클로알킬은 C1-4 알킬, 하나 이상의 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않은 C1-4 알킬카보닐, C3-6 시클로알킬카보닐, C1-4 알킬로 치환되거나 치환되지 않은 4 내지 7원의 헤테로시클로알킬카보닐, C1-4 알킬설포닐, C3-6 시클로알킬설포닐, 또는 옥세타닐로 치환될 수 있고,
이때, 상기 헤테로시클로알킬은 N, O 및 S 중에서 선택된 하나 이상의 원자를 포함하며,
R3은 수소, 할로겐, 또는 C1-4 알킬이며;
R4는 하나 이상의 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않은 C1-6 알킬 또는 C3-6 시클로알킬이고;
R5는 할로겐, 또는 하나 이상의 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않은 C1-4 알킬이다.
본 발명의 다른 측면은, 상기 화합물을 유효성분으로 포함하는, 퇴행성 뇌질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 피롤로(피라졸로)피리미딘 유도체는 LRRK2에 대한 선택적 억제효과가 우수하며, 파킨슨 병을 비롯한 퇴행성 뇌질환의 예방 및 치료제로서 유용하다.
이하, 구현예를 통해 발명을 상세하게 설명한다. 구현예는 이하에서 개시된 내용에 한정되는 것이 아니라 발명의 요지가 변경되지 않는 한, 다양한 형태로 변형될 수 있다.
본 명세서에 있어서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함" 한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한, 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
본 명세서에 있어서, 할로겐의 예로는 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 들 수 있다.
일 구현예는 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 및 이의 약학적으로 허용되는 염, 수화물, 용매화물, 전구약물 및 이성질체로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물을 제공한다:
[화학식 1]
Figure PCTKR2018015184-appb-I000002
상기 식에서,
X는 CH 또는 N이고;
R1은 수소, 할로겐, 또는 하나 이상의 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않은 C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시이며;
R2는 C1-6 알킬, C1-3 알콕시 C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-6 시클로알킬, 4 내지 7원의 헤테로시클로알킬, 또는 하나 이상의 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않은 C6-10 아릴이고;
상기 4 내지 7원의 헤테로시클로알킬은 C1-4 알킬, 하나 이상의 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않은 C1-4 알킬카보닐, C3-6 시클로알킬카보닐, C1-4 알킬로 치환되거나 치환되지 않은 4 내지 7원의 헤테로시클로알킬카보닐, C1-4 알킬설포닐, C3-6 시클로알킬설포닐, 또는 옥세타닐로 치환될 수 있고,
이때, 상기 헤테로시클로알킬은 N, O 및 S 중에서 선택된 하나 이상의 원자를 포함하며,
R3은 수소, 할로겐, 또는 C1-4 알킬이며;
R4는 하나 이상의 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않은 C1-6 알킬 또는 C3-6 시클로알킬이고;
R5는 할로겐, 또는 하나 이상의 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않은 C1-4 알킬이다.
일 구현예에 따르면, 상기 R1은 수소, 할로겐, 트리플루오로 C1-4 알킬, C1-4 알킬, 또는 C1-4 알콕시이다.
일 구현예에 따르면, 상기 R4는 트리플루오로 C1-4 알킬, C1-4 알킬, 또는 C3-6 시클로알킬이다.
일 구현예에 따르면, 상기 R5는 할로겐, 트리플루오로 C1-4 알킬, 또는 C1-4 알킬이다.
일 구현예에 따르면, 상기 R2는 C1-4 알킬, C1-3 알콕시 C1-4 알킬, C3-6 시클로알킬 C1-4 알킬, C1-4 알콕시, C3-6 시클로알킬, 4 내지 7원의 헤테로시클로알킬, 또는 F 또는 Cl로 치환된 C6-10 아릴이고, 상기 4 내지 7원의 헤테로시클로알킬은 C1-4 알킬, 트리플루오로 C1-4 알킬카보닐, C1-4 알킬카보닐, C3-6 시클로알킬카보닐, C1-4 알킬로 치환되거나 치환되지 않은 4 내지 7원의 헤테로시클로알킬카보닐, C1-4 알킬설포닐, C3-6 시클로알킬설포닐, 또는 옥세타닐로 치환될 수 있고, 이때, 상기 헤테로시클로알킬은 N 및 O 중에서 선택된 하나 이상의 원자를 포함한다.
일 구현예에 따르면, 상기 R2는 하기 치환기들 중에서 선택될 수 있다:
Figure PCTKR2018015184-appb-I000003
상기 치환기에 있어서,
Figure PCTKR2018015184-appb-I000004
,
Figure PCTKR2018015184-appb-I000005
, 및
Figure PCTKR2018015184-appb-I000006
는 연결되는 부위를 의미한다.
일 구현예에 따르면, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화합물들로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
1) N-(5-클로로-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-7-메틸-5-(트리플루오로메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(N-(5-chloro-1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)-7-methyl-5-(trifluoromethyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
2) 5-클로로로-N-(1-이소프로필-3-메톡시-1H-피라졸-4-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(1-isopropyl-3-methoxy-1H-pyrazol-4-yl)-7-methyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
3) 5-클로로-N-(3-클로로-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(3-chloro-1-isopropyl-1H-pyrazol-4-yl)-7-methyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
4) 5-클로로-7-메틸-N-(1-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-7-methyl-N-(1-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-3-(trifluoromethyl)-1H-pyrazol-4-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
5) 5-클로로-N-(5-클로로-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(5-chloro-1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)-7-methyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
6) 5-클로로-N-(5-클로로-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(5-chloro-1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
7) 5-클로로-N-(3-클로로-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-7-이소프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(3-chloro-1-isopropyl-1H-pyrazol-4-yl)-7-isopropyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
8) 5-클로로-N-(3-클로로-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(3-chloro-1-isopropyl-1H-pyrazol-4-yl)-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
9) 5-클로로-N-(1-이소프로필-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(1-isopropyl-3-(trifluoromethyl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-methyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
10) 5-클로로-N-(1-(2-메톡시에틸)-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(1-(2-methoxyethyl)-3-(trifluoromethyl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-methyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
11) N-(1-부틸-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-일)-5-클로로-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(N-(1-butyl-3-(trifluoromethyl)-1H-pyrazol-4-yl)-5-chloro-7-methyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
12) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(2-메톡시에틸)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(3-chloro-1-(2-methoxyethyl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
13) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(시클로프로필메틸)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(3-chloro-1-(cyclopropylmethyl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
14) 5-클로로-N-(3-클로로-1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(3-chloro-1-cyclopropyl-1H-pyrazol-4-yl)-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
15) 5-클로로-N-(3-클로로-1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(3-chloro-1-cyclopropyl-1H-pyrazol-4-yl)-7-cyclopropyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
16) 5-클로로-N-(5-클로로-1-(옥세탄-3-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(5-chloro-1-(oxetan-3-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
17) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(1-메틸피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(3-chloro-1-(1-methylpiperidin-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
18) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(3-chloro-1-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
19) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(2,6-di메틸테트라하이드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(3-chloro-1-(2,6-dimethyltetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
20) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(1-에틸피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(3-chloro-1-(1-ethylpiperidin-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
21) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(4-플루오로페닐)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(3-chloro-1-(4-fluorophenyl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
22) 5-클로로-N-(5-클로로-1-(4-클로로페닐)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(5-chloro-1-(4-chlorophenyl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
23) 1-(4-(5-클로로-4-(5-클로로-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)에탄온(1-(4-(5-chloro-4-(5-chloro-7-methyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino)-1H-pyrazol-1-yl)piperidin-1-yl)ethanone),
24) (4-(3-클로로-4-(5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(시클로프로필)메탄온((4-(3-chloro-4-(5-chloro-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino)-1H-pyrazol-1-yl)piperidin-1-yl)(cyclopropyl)methanone),
25) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(3-chloro-1-(1-(methylsulfonyl)piperidin-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
26) 1-(4-(3-클로로-4-(5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)-2-메틸프로판-1-온(1-(4-(3-chloro-4-(5-chloro-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino)-1H-pyrazol-1-yl)piperidin-1-yl)-2-methylpropan-1-one),
27) 5-클로로-N-(5-클로로-1-(1-(옥세탄-3-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(5-chloro-1-(1-(oxetan-3-yl)piperidin-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-methyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
28) 5-클로로-N-(5-클로로-1-(1-(옥세탄-3-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(5-chloro-1-(1-(oxetan-3-yl)piperidin-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
29) 5-클로로-N-(5-클로로-1-(1-(옥세탄-3-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(5-chloro-1-(1-(oxetan-3-yl)piperidin-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-cyclopropyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
30) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(3-chloro-1-(1-(methylsulfonyl)piperidin-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-cyclopropyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
31) (4-(3-클로로-4-(5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(모르폴리노)메탄온((4-(3-chloro-4-(5-chloro-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino)-1H-pyrazol-1-yl)piperidin-1-yl)(morpholino)methanone),
32) (4-(3-클로로-4-(5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(4-메틸피페라진-1-일)메탄온((4-(3-chloro-4-(5-chloro-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino)-1H-pyrazol-1-yl)piperidin-1-yl)(4-methylpiperazin-1-yl)methanone),
33) 1-(4-(3-클로로-4-(5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)-2,2-디메틸프로판-1-온(1-(4-(3-chloro-4-(5-chloro-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino)-1H-pyrazol-1-yl)piperidin-1-yl)-2,2-dimethylpropan-1-one),
34) 5-클로로-N-(3,5-디메틸-1-(1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(3,5-dimethyl-1-(1-(methylsulfonyl)piperidin-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
35) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(시클로프로필술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(3-chloro-1-(1-(cyclopropylsulfonyl)piperidin-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
36) (R)-5-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민((R)-5-chloro-N-(3-chloro-1-(1-(methylsulfonyl)pyrrolidin-3-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
37) (S)-5-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민((S)-5-chloro-N-(3-chloro-1-(1-(methylsulfonyl)pyrrolidin-3-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
38) (R)-(3-(3-클로로-4-(5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-일)(시클로펜틸)메탄온((R)-(3-(3-chloro-4-(5-chloro-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino)-1H-pyrazol-1-yl)pyrrolidin-1-yl)(cyclopentyl)methanone),
39) (S)-(3-(3-클로로-4-(5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-일)(시클로펜틸)메탄온((S)-(3-(3-chloro-4-(5-chloro-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino)-1H-pyrazol-1-yl)pyrrolidin-1-yl)(cyclopentyl)methanone),
40) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)azetidin-3-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(3-chloro-1-(1-(methylsulfonyl)azetidin-3-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
41) (3-(3-클로로-4-(5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-1-일)(시클로프로필)메탄온((3-(3-chloro-4-(5-chloro-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino)-1H-pyrazol-1-yl)azetidin-1-yl)(cyclopropyl)methanone),
42) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)아제판-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(5-chloro-N-(3-chloro-1-(1-(methylsulfonyl)azepan-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine),
43) (4-(3-클로로-4-(5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-1H-피라졸-1-일)아제판-1-일)(시클로프로필)메탄온((4-(3-chloro-4-(5-chloro-7-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino)-1H-pyrazol-1-yl)azepan-1-yl)(cyclopropyl)methanone),
44) 3-클로로-N-(3-클로로-1-(4-플루오로페닐)-1H-피라졸-4-일)-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(3-chloro-N-(3-chloro-1-(4-fluorophenyl)-1H-pyrazol-4-yl)-1-ethyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-amine),
45) 3-클로로-N-(5-클로로-1-(1-(옥세탄-3-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(3-chloro-N-(5-chloro-1-(1-(oxetan-3-yl)piperidin-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-1-ethyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-amine),
46) 3-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-1-시클로프로필-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(3-chloro-N-(3-chloro-1-(1-(methylsulfonyl)piperidin-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-1-cyclopropyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-amine),
47) 3-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(시클로프로필술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(3-chloro-N-(3-chloro-1-(1-(cyclopropylsulfonyl)piperidin-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-1-ethyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-amine),
48) 1-(4-(3-클로로-4-(3-클로로-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)-2,2,2-트리플루오로에탄온(1-(4-(3-chloro-4-(3-chloro-1-ethyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-ylamino)-1H-pyrazol-1-yl)piperidin-1-yl)-2,2,2-trifluoroethanone),
49) 3-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-1-(2,2,2-트리플루오로에틸)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(3-chloro-N-(3-chloro-1-(1-(methylsulfonyl)piperidin-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-1-(2,2,2-trifluoroethyl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-amine),
50) 3-클로로-N-(5-클로로-1-(1-(옥세탄-3-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-1-(2,2,2-트리플루오로에틸)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(3-chloro-N-(5-chloro-1-(1-(oxetan-3-yl)piperidin-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-1-(2,2,2-trifluoroethyl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-amine),
51) 3-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)아제판-4-일)-1H-피라졸-4-일)-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(3-chloro-N-(3-chloro-1-(1-(methylsulfonyl)azepan-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-1-ethyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-amine),
52) (4-(3-클로로-4-(3-클로로-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-1H-피라졸-1-일)아제판-1-일)(시클로프로필)메탄온((4-(3-chloro-4-(3-chloro-1-ethyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-ylamino)-1H-pyrazol-1-yl)azepan-1-yl)(cyclopropyl)methanone),
53) 1-(4-(3-클로로-4-(3-클로로-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)-2,2-디메틸프로판-1-온(1-(4-(3-chloro-4-(3-chloro-1-ethyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-ylamino)-1H-pyrazol-1-yl)piperidin-1-yl)-2,2-dimethylpropan-1-one),
54) (4-(3-클로로-4-(3-클로로-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(모르폴리노)메탄온((4-(3-chloro-4-(3-chloro-1-ethyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-ylamino)-1H-pyrazol-1-yl)piperidin-1-yl)(morpholino)methanone),
55) 3-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(3-chloro-N-(3-chloro-1-(1-(methylsulfonyl)piperidin-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-1-ethyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-amine),
56) (4-(3-클로로-4-(3-클로로-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-5-메틸-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(시클로프로필)메탄온((4-(3-chloro-4-(3-chloro-1-ethyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-ylamino)-5-methyl-1H-pyrazol-1-yl)piperidin-1-yl)(cyclopropyl)methanone),
57) (4-(3-클로로-4-(3-클로로-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(시클로프로필)메탄온((4-(3-chloro-4-(3-chloro-1-ethyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-ylamino)-1H-pyrazol-1-yl)piperidin-1-yl)(cyclopropyl)methanone),
58) 1-(4-(3-클로로-4-(3-클로로-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)에탄온(1-(4-(3-chloro-4-(3-chloro-1-ethyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-ylamino)-1H-pyrazol-1-yl)piperidin-1-yl)ethanone),
59) 3-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(3-chloro-N-(3-chloro-1-(1-(ethylsulfonyl)piperidin-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-1-ethyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-amine),
60) (3-(3-클로로-4-(3-클로로-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-1-일)(시클로프로필)메탄온((3-(3-chloro-4-(3-chloro-1-ethyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-ylamino)-1H-pyrazol-1-yl)azetidin-1-yl)(cyclopropyl)methanone),
61) 3-클로로-N-(5-클로로-1-(1-(옥세탄-3-일)아제티딘-3-일)-1H-피라졸-4-일)-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(3-chloro-N-(5-chloro-1-(1-(oxetan-3-yl)azetidin-3-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-1-ethyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-amine),
62) 3-클로로-N-(5-클로로-1-(1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(3-chloro-N-(5-chloro-1-(1-(methylsulfonyl)piperidin-4-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-1-ethyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-amine).
일 구현예에 따르면, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 치환기에 따른 LRRK2 억제율(IC50)은 하기 표 1에 기재된 바와 같다(++++: 0 초과 10 nM 이하, +++: 10 nM 초과 100 nM 이하, ++: 100 nM 초과 1,000 nM 이하, +: 1,000 nM 초과 10,000 nM 이하).
Figure PCTKR2018015184-appb-T000001
Figure PCTKR2018015184-appb-I000007
Figure PCTKR2018015184-appb-I000008
Figure PCTKR2018015184-appb-I000009
Figure PCTKR2018015184-appb-I000010
Figure PCTKR2018015184-appb-I000011
Figure PCTKR2018015184-appb-I000012
일 구현예에 따르면, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 약학적으로 허용되는 염은 알칼리 금속염, 알칼리 토금속염, 암모늄염, 아민염, 산 부가염, 수화물 염 등을 들 수 있으며, 비독성 및 수용성일 수 있다. 예를 들어, 염산염, 브롬화수소산염, 요오드화수소산염, 황산염, 인산염, 질산염과 같은 무기산염; 및 초산염, 개미산염, 유산염, 주석산염, 탄닌산염, 숙신산염, 말린산염, 푸마르산염, 안식향산염, 구연산염, 메탄술폰산염, 에탄술폰산염, 벤젠술폰산염, 톨루엔술폰산염, 이세티온산염, 글루쿠론산염, 글루콘산염, 지방산염과 같은 유기산염 등이 있다.
일 구현예에 따르면, 상기 약학적으로 허용되는 염은 염산염, 브롬화수소산염, 요오드화수소산염, 황산염, 질산염, 메탄술폰산염, 에탄술폰산염, 벤젠술폰산염, 및 톨루엔술폰산염으로 이루어진 군으로부터 1종 이상 선택될 수 있다.
일 구현예에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 수화물 및 용매화물은 당 분야에 잘 알려진 방법으로 제조될 수 있다. 구체적으로, 비독성 및 수용성인 것이 바람직하고, 각각 물 및 알코올계 용매(특히, 에탄올 등)의 분자가 1 내지 5개 결합된 수화물 및 용매화물일 수 있다.
일 구현예에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 전구약물은 투여 시에 생체 내에서 상기 화학식 1로 표시되는 화합물로 전환될 수 있는 화학적 유도체로서, 당 분야에 잘 알려진 방법에 따라 제조될 수 있다.
일 구현예에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 이성질체는 광학 이성질체(예를 들어, 거울상 이성질체(enantiomers), 부분 입체 이성질체(diastereomers) 및 그의 혼합물)뿐만 아니라, 형태 이성질체(conformation isomers) 및 위치 이성질체(position isomers)를 포함한다.
일 구현예에 따른 화학식 1a(X가 CH인 경우)의 화합물은 하기 반응식 1과 같은 제조 방법으로 제조할 수 있다.
[반응식 1]
Figure PCTKR2018015184-appb-I000013
상기 반응식 1에 있어서, R1 내지 R5는 상기 화학식 1에서 정의한 바와 같다.
구체적으로, (1) 화학식 2의 화합물을 유기 용매 중에서 화학식 3의 화합물과 반응시켜 화학식 4의 화합물을 제조하는 단계; (2) 상기 화학식 4의 화합물을 유기 용매 중에서 화학식 5의 화합물과 반응시켜 화학식 6의 화합물을 제조하는 단계; 및 (3) 상기 화학식 6의 화합물을 유기 용매 중에서 화학식 7의 화합물과 반응시켜 화학식 1a의 화합물을 제조하는 단계;를 포함하는 방법에 의해 화학식 1a의 화합물을 제조할 수 있다.
상기 유기 용매는 아세톤, 1,4-디옥산, 메틸에틸케톤, N,N-디메틸포름아미드, N-메틸피롤리돈 및 에틸 아세테이트로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 단계 (1)에서, 예컨대, 화학식 2의 화합물을 N,N-디메틸포름아미드 용매 중에서 NCS(N-chlorosuccinimide)와 상온에서 1 내지 2시간 동안 반응시켜 화학식 4의 화합물을 제조할 수 있다.
상기 단계 (2)에서, 예컨대, 화학식 4의 화합물을 N,N-디메틸포름아미드 용매 중에서 수산화칼륨 및 화학식 5의 화합물과 상온에서 2시간 동안 반응시켜 화학식 6의 화합물을 제조할 수 있다.
다르게는, 상기 단계 (1) 및 (2)와 달리, 화학식 2의 화합물을 N,N-디메틸포름아미드 용매 중에서 요오드 및 수산화칼륨과 0℃ 내지 실온에서 반응시킨 후, 아이오도메탄을 첨가한 다음, MFSDA(methyl fluorosulfonyldifluoroacetate)와 100 내지 130℃에서 4시간 동안 반응시켜 2-클로로-7-메틸-5-(트리플루오로메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘을 제조할 수도 있다.
상기 단계 (3)에서, 예컨대, 화학식 6의 화합물과 화학식 7의 화합물을 에탄올 용매에 용해시킨 후 여기에 염산을 가하고 80℃에서 12시간 동안 반응시켜 화학식 1a의 화합물을 제조할 수 있다.
다르게는, 1,4-디옥산과 같은 유기 용매 중에서, 팔라듐(II) 아세테이트(0.1 내지 0.5 당량), 잔트포스(Xantphos)(0.5 내지 1.0 당량), 탄산칼륨(2 내지 3 당량), 화합물 6 및 7을 80 내지 110℃에서 10 내지 12시간 동안 반응시켜 화학식 1a의 화합물을 제조할 수도 있다.
일 구현예에 따른 화학식 1b(X가 N인 경우)의 화합물은 하기 반응식 2와 같은 제조 방법으로 제조할 수 있다.
[반응식 2]
Figure PCTKR2018015184-appb-I000014
상기 반응식 2에 있어서, R1 내지 R5는 상기 화학식 1에서 정의한 바와 같다.
구체적으로, (A) 화학식 8의 화합물을 N2H4 및 아세토니트릴(ACN, acetonitrile)과 반응시켜 화학식 9의 화합물을 제조하는 단계; (B) 상기 화학식 9의 화합물을 KOH와 반응시켜 화학식 10의 화합물을 제조하는 단계; (C) 상기 화학식 10의 화합물을 염화포스포릴(POCl3)과 반응시켜 화학식 11의 화합물을 제조하는 단계; (D) 상기 화학식 11의 화합물을 유기 용매 중에서 화학식 5의 화합물과 반응시켜 화학식 12의 화합물을 제조하는 단계; (E) 상기 화학식 12의 화합물을 유기 용매 중에서 mCPBA(m-chloroperoxybenzoic acid)와 반응시켜 화학식 13의 화합물을 제조하는 단계; 및 (F) 상기 화학식 13의 화합물을 유기 용매 중에서 p-톨루엔술폰산 및 화학식 7의 화합물과 반응시켜 화학식 1b의 화합물을 제조하는 단계;를 포함하는 방법에 의해 화학식 1b의 화합물을 제조할 수 있다.
상기 유기 용매는 아세톤, 디클로로메탄, 1,4-디옥산, 메틸에틸케톤, N,N-디메틸포름아미드, N-메틸피롤리돈 및 에틸 아세테이트로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 단계 (A)에서, 예컨대, 화학식 8의 화합물을 N2H4 및 아세토니트릴(ACN, acetonitrile)과 상온에서 1 내지 2시간 동안 반응시켜 화학식 9의 화합물을 제조할 수 있다.
상기 단계 (B)에서, 예컨대, 화학식 9의 화합물을 10% KOH와 90 내지 110℃에서 2 내지 3시간 동안 반응시켜 화학식 10의 화합물을 제조할 수 있다.
상기 단계 (C)에서, 예컨대, 화학식 10의 화합물을 염화포스포릴(POCl3)과 90 내지 110℃에서 반응시켜 화학식 11의 화합물을 제조할 수 있다.
상기 단계(D)에서, 예컨대, 화학식 11의 화합물을 N,N-디메틸포름아미드 용매 중에서 화학식 5의 화합물과 0℃ 내지 상온에서 2시간 동안 반응시켜 화학식 12의 화합물을 제조할 수 있다.
상기 단계(E)에서, 예컨대, 화학식 12의 화합물을 디클로로메탄 또는 N,N-디메틸포름아미드 용매 중에서 mCPBA(m-chloroperoxybenzoic acid)과 상온에서 4 시간 동안 반응시켜 화학식 13의 화합물을 제조할 수 있다.
상기 단계 (F)에서, 예컨대, 화학식 13의 화합물을 N-메틸피롤리돈 용매 중에서 p-톨루엔술폰산 및 화학식 7의 화합물과 100 내지 120℃에서 6시간 동안 반응시켜 화학식 1b의 화합물을 제조할 수 있다.
상기 화학식 10 및 11의 화합물의 합성에 관해서는 문헌에 보고된 바를 참조하였다(문헌[Hauser, Martin. et al., J. Org, Chem. 1960, 25, 1570-1573]; [J. Org. Chem. 1961, 26, 451-455]; 및 [Liu, Jing. et al., ACS Comb. Sci. 2011, 13, 414-420]).
일 구현예에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물, 및 이의 약학적으로 허용되는 염, 수화물, 용매화물, 전구약물 및 이성질체는 높은 LRRK2 억제 활성을 나타낼 뿐만 아니라, 억제 활성의 선택성이 우수하다. 따라서, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 및 이의 약학적으로 허용되는 염, 수화물, 용매화물, 전구약물 및 이성질체는 LRRK2 활성의 억제가 요구되는 퇴행성 뇌질환의 예방 또는 치료제로서 유용하다.
일 구현예는 상기 화합물을 유효성분으로 포함하는, 퇴행성 뇌질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
일 구현예에 따르면, 상기 퇴행성 뇌질환은 파킨슨병일 수 있다.
일 구현예에 따르면, 상기 약학적 조성물은 선택적 LRRK2(Leucine Rich Repeat Kinase2) 억제 활성을 나타낸다.
일 구현예에 따르면, 상기 약학적 조성물은 하나 이상의 약학적으로 허용되는 첨가제를 포함할 수 있다. 예를 들어, 마그네슘 스테아레이트, 나트륨 라우릴 설페이트 및 탈크와 같은 윤활제; 락토즈, 나트륨 시트레이트, 칼슘 카보네이트 및 디칼슘 포스페이트와 같은 부형제; 전분, 알긴산 및 특정의 복합 실리케이트와 같은 붕해제; 및 각종 담체가 정제의 제조를 위해서 사용될 수 있다. 또한, 담체의 종류는 활성 물질의 용해도, 화학적 특성 및 투여 방식 등에 따라 달라질 수 있다.
상기 약학적 조성물은 하나 이상의 약학적으로 허용되는 첨가제를 사용하여 통상적인 방법에 따라서 제조될 수 있다. 상기 첨가제에는 특히, 희석제, 멸균 수성 매질 및 다양한 무독성 유기 용매가 포함될 수 있는데, 필요에 따라, 감미제, 방향제, 착색제 또는 안정화제 등을 추가로 포함할 수 있다.
상기 약학적 조성물은 약학 분야의 통상적인 제제화 방법에 따라 정제, 환제, 과립제, 캅셀제, 산제, 수성 용액제 또는 현탁액제, 주사용 용액제, 엘릭서 또는 시럽제 등의 다양한 투여 형태로 제제화될 수 있다.
캅셀제를 제조하기 위해서는, 락토즈 및 고분자량 폴리에틸렌 글리콜을 사용하는 것이 유리하다. 수성 현탁액제가 사용되는 경우에, 이들은 유화제 또는 현탁을 용이하게 하는 제제를 함유할 수 있고, 슈크로즈, 에탄올, 폴리에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 글리세롤 또는 클로로포름과 같은 희석제 또는 이들의 혼합물이 사용될 수도 있다.
이와 같이, 상기 약학적 조성물은 필요에 따라 비경구 투여 또는 경구 투여할 수 있으며, 하루를 기준으로 비경구 투여의 경우 0.5 mg/kg체중 내지 5 mg/kg체중, 바람직하게는 1 mg/kg체중 내지 4 mg/kg체중의 양으로; 경구 투여의 경우 5 mg/kg체중 내지 50 mg/kg체중, 바람직하게는 10 mg/kg체중 내지 40 mg/kg체중의 양으로 한번 이상 나누어 투여할 수 있다. 환자에 대한 투여 용량은 각 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율, 질환의 중증도 등에 따라 변화될 수 있다.
일 구현예에 따르면, 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 의약(medicament)의 제조를 위한 상기 화합물의 용도가 제공된다.
일 구현예에 따르면, 상기 화합물을 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 퇴행성 뇌질환의 치료 방법이 제공된다.
이하, 다음의 실시예를 들어 본 발명을 보다 구체적으로 설명하고자 한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명의 구체적인 실시 양태를 특정하여 설명하고자 하는 것일 뿐이며, 본 발명의 권리 범위를 이들에 기재된 내용으로 한정하거나 제한하여 해석하고자 의도하는 것은 아니다.
<제조예 1: 중간체 1(2,5-디클로로-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000015
N,N-디메틸포름아미드 용매(20 ml)에 2,5-디클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘(2.16 g, 11.48 mmol)을 넣어주고 0℃로 냉각시켰다. NaH(0.68 g, 17.23 mmol)을 천천히 넣어주고 0℃에서 30분간 교반시켰다. 아이오도메탄(1.59 ml, 17.23 mmol)을 천천히 적가한 후 실온으로 온도를 올려 2시간 동안 교반했다. 물(50 ml)을 넣어주어 고체를 석출했다. 물로 감압여과한 후 n-헵탄으로 씻어주어 베이지색 고체의 목적화합물 2.20 g (수율: 94%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 201.9, 204.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.95 (s, 1H), 7.88(s, 1H), 3.77 (s, 3H).
<제조예 2: 중간체 2(2,5-디클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000016
N,N-디메틸포름아미드 용매(33 ml)에 2,5-디클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘(3.31 g, 17.60 mmol)을 넣어주고 0℃로 냉각시켰다. NaH(1.15 g, 26.40 mmol)을 천천히 넣어주고 0℃에서 30분간 교반했다. 아이오도에탄(1.69 ml, 21.12 mmol)을 천천히 적가한 후 실온으로 온도를 올려 2시간 동안 교반했다. 물(80 ml)을 넣어주어 고체를 석출했다. 물로 감압여과한 후 목적화합물 3.15 g (수율: 82%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 216.0, 217.8 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.92 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 4.21 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.38 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
<제조예 3: 중간체 3(2,5-디클로로-7-(2,2,2-트리플루오로에틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000017
N,N-디메틸포름아미드 용매(50 ml)에 2,5-디클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘(900 mg, 4.79 mmol), 세슘카보네이트(Cs2CO3, 1.9 g, 5.7 mmol) 및 1,1,1-트리플루오로-2-아이오도에탄(9.58 mmol, 0.94 ml)을 넣어주고 100℃에서 12시간 동안 교반했다. 물과 디클로로메탄(DCM)으로 추출하여 감압한 후, 컬럼크로마토그래피하여(EA:Hep=1:1) 목적화합물 1.0 g (수율: 77%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 269.8 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.89(s, 1H), 7.279(s, 1H), 4.84(q, J = 8.4 Hz, 2H).
<제조예 4: 중간체 4(2,5-디클로로-7-이소프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000018
N,N-디메틸포름아미드 용매(10 ml)에 2,5-디클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘(1.0 g, 5.31 mmol)을 넣어주고 0℃로 냉각시켰다. NaH(0.32 g, 7.97 mmol)을 천천히 넣어주고 0℃에서 30분간 교반했다. 2-아이오도프로판(0.79 ml, 7.97 mmol)을 천천히 적가한 후 실온으로 온도를 올려 2시간 동안 교반한 후, 실온으로 물 (30 ml)을 넣어주어 고체를 석출했다. 물로 감압여과한 후, 목적화합물 1.05 g (수율: 85%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 230.0, 232.0 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.85 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 5.09 (p, J = 6.9 Hz, 1H), 1.57 (s, 3H), 1.55 (s, 3H).
<제조예 5: 중간체 5(2,5-디클로로-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000019
N,N-디메틸포름아미드 용매(10 ml)에 2,5-디클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘(0.2 g, 1.06 mmol)을 넣어주고 0℃로 냉각시켰다. NaH (69.6 mg, 1.59 mmol)을 천천히 넣어주고 0℃에서 30분간 교반했다. 시클로프로판카보닐 염화물(cyclopropanecarbonyl chloride, 0.11 ml, 1.27 mmol)을 천천히 적가한 후, 실온으로 온도를 올려 2시간 동안 교반한 후, 실온에서 물(30 ml)을 넣어주어 고체를 석출했다. 물로 감압여과한 후, 목적화합물 0.23 g (수율: 87%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 255.9, 258.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.90 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 3.85-3.79 (m, 1H), 1.43-1.40 (m, 2H), 1.33-1.30 (m, 2H).
<제조예 6: 중간체 6(2-클로로-7-메틸-5-(트리플루오로메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000020
단계 1: 2-클로로-5-아이오도-7H-피롤[2,3-d]피리미딘의 합성
N,N-디메틸포름아미드 용매(10 ml)에 2-클로로-7H-피롤[2,3-d]피리미딘(1 g, 6.51 mmol)을 용해시킨 후, 0℃로 냉각시켰다. 포타슘 하이드록사이드(1.37 g, 24.41 mmol)와 아이오딘(3.3 g, 13.02 mmol)을 넣어주고 서서히 실온으로 승온시켰다. 2시간 동안 교반한 후, 물(80 ml)을 넣어 반응을 종결시킨 후, 고체를 석출했다. 물로 감압여과 시킨 후, 에틸아세테이트(EtOAc)로 씻어주어 노란색 고체의 목적화합물 1.68 g (수율: 89%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 279.8, 281.8 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.37 (s, 1H), 7.64 (s, 1H).
단계 2: 2-클로로-5-아이오도-7-메틸-7H-피롤[2,3-d]피리미딘의 합성
2-클로로-5-아이오도-7H-피롤[2,3-d]피리미딘(1 g, 3.57 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드 용매(5 ml)에 용해시킨 후, 0℃로 냉각시켰다. NaH(0.21 g, 5.36 mmol)를 천천히 넣고 0℃에서 30분 동안 교반했다. 아이오도메탄(0.49 ml, 5.36 mmol)을 천천히 적가한 후 실온으로 온도를 올려 2시간 동안 교반했다. 물(10 ml)을 넣어 고체를 석출했다. 물로 감압여과한 후, n-헵탄으로 씻어주어 베이지색 고체의 목적화합물 0.60 g (수율: 57%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 236.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.60 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 3.88 (s, 3H).
단계 3: 중간체 6의 합성
2-클로로-5-아이오도-7-메틸-7H-피롤[2,3-d]피리미딘(0.5 g, 1.70 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드 용매(10 ml)에 용해시켰다. 메틸 2,2-다이플루오로-2-(플루오로설포닐)아세테이트(0.53 ml, 4.25 mmol)와 Cu(I)I (0.32 g, 1.70 mmol)을 넣고, 130℃에서 2시간 동안 교반했다. 실온으로 온도를 낮춘 후, 에틸아세테이트(50 ml)를 넣고, 물(30 ml)을 넣어 반응을 종결시켰다. 셀라이트로 여과한 후, 에틸아세테이트와 물로 추출하고 브라인(brine)으로 씻어줬다. 유기층을 MgSO4로 건조시킨 후, 감압여과하여 농축시켰다. 컬럼크로마토그래피하여 목적화합물 0.12 g (수율: 31%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 235.9, 238.0 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.96 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 3.90 (s, 3H).
<제조예 7: 중간체 7(3-클로로-1-메틸-6-(메틸티오)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000021
단계 1: 에틸 4-하이드라지닐-2-(메틸티오)피리미딘-5-카복실레이트의 합성
에틸 4-클로로-2-(메틸티오)피리미딘-5-카복실레이트(1.3 g, 5.58 mmol)에 에탄올(5.5 ml)을 넣고 0℃로 냉각시켰다. 에탄올(5.5 ml)에 묽힌 메틸 하이드라진(0.58 ml, 11.17 mmol)을 천천히 넣어주고, 2시간동안 실온에서 교반했다. 물(30 ml)을 넣어 반응을 종결시키고, 흰색 고체를 석출했다. 감압여과하여 목적화합물 0.86 g (수율: 64%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 243.3 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.33 (s, 1H), 4.33 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.17 (s, 2H), 3.40 (s, 3H), 2.53 (s, 3H), 1.37 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
단계 2: 6-(메틸티오)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3(2H)-온의 합성
에틸 4-하이드라지닐-2-(메틸티오)피리미딘-5-카복실레이트(0.86 g, 3.54 mmol)을 10% KOH(9.0 ml)에 넣고 100℃에서 15분 동안 환류시켰다. 실온으로 온도를 낮춘 뒤, 25% 아세트산 수용액(8 ml)을 넣어 중화시켜 노란색 고체를 석출했다. 물로 감압여과하여 목적화합물 0.58 g (수율: 84%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 197.0 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.59 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 3.72 (s, 3H), 2.56 (s, 3H).
단계 3: 중간체 7의 합성
6-(메틸티오)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3(2H)-온(0.58 g, 2.95 mmol)을 감압플라스크에 넣고, POCl3(2.34 ml, 25.12 mmol)을 넣고 140℃에서 5시간 동안 교반했다. 실온으로 온도를 낮춘 뒤, 0℃에서 암모늄 하이드록사이드(20 ml)을 천천히 넣어 중화시켜 베이지색 고체를 석출했다. 물로 감압여과하고, 에탄올:물=1:1 용액으로 씻어주어 목적화합물 0.50 g (수율: 79%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 214.9, 216.9 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.87 (s, 1H), 4.02 (s, 2H), 2.66 (s, 3H).
<제조예 8: 중간체 8(3-클로로-1-에틸-6-(메틸티오)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000022
3-클로로-6-(메틸티오)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘(12.7 g, 63.29 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드 용매(63 ml)에 용해시킨 후, 0℃로 냉각시켰다. NaH(3.31 g, 75.95 mmol)을 천천히 넣고, 0℃에서 30분 동안 교반했다. 아이오도에탄(6.10 ml, 75.95 mmol)을 천천히 넣고, 실온으로 온도를 올려준 후, 2시간 동안 교반했다. 반응을 종결시킨 후, 물(100 ml)을 넣어 갈색 고체를 석출했다. 이를 여과하고 감압건조하여 목적화합물 12.26 g (수율: 84%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 228.70 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.86 (s, 1H), 4.44 (q, J = 7.2Hz, 2H), 2.65 (s, 3H), 1.53 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
<제조예 9: 중간체 9(3-클로로-6-(메틸티오)-1-(2,2,2-트리플루오로에틸)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000023
3-클로로-6-(메틸티오)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘(70 mg, 0.49 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드 용매(63 ml)에 용해시켰다. 세슘 카보네이트(243 mg, 0.74 mmol)와 2,2,2-트리플루오로에틸 메탄설포네이트(70.0 ml, 0.59 mmol)를 넣고, 80℃에서 5시간 동안 교반했다. 실온으로 온도를 낮추고, 물과 에틸아세테이트로 추출했다. 유기층을 MgSO4로 건조시킨 후, 감압여과하여 농축시켰다. 컬럼크로마토그래피하여 목적화합물 48.3 mg (수율: 48%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 282.8, 285.0 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, Acetone-d6) δ 9.09 (s, 1H), 5.27 (q, J = 8.7 Hz, 2H), 2.66 (s, 3H).
<제조예 10: 중간체 10(3-클로로-1-시클로프로필-6-(메틸티오)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000024
3-클로로-6-(메틸티오)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘(0.2 g, 0.99 mmol), 싸이클로보론산(0.17 g, 1.99 mmol), 2,2'-바이피리딘(0.15 g, 0.99 mmol) 및 Na2CO3(0.21 g, 1.99 mmol)을 감압플라스크에 넣었다. 디클로로에탄(10 ml)을 넣고 10분간 질소(N2) 버블링했다. Cu(OAc)2 (0.18 g, 0.99 mmol)을 넣고 1분간 N2 버블링한 후, 60℃에서 18시간 동안 교반했다. 실온으로 온도를 낮추고, 에틸아세테이트로 여과한 후 농축시켰다. 에틸아세테이트와 1N 염산수용액으로 추출하고 MgSO4로 건조시킨 후, 감압여과하여 농축시켰다. 컬럼크로마토그래피하여 목적화합물 0.16 g (수율: 67%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 241.1, 243.2 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.84 (s, 1H), 3.82-3.75 (m, 1H), 2.67 (s, 3H), 1.36-1.33 (m, 2H), 1.18-1.14 (m, 2H).
<제조예 11: 중간체 11(1-이소프로필-3-메톡시-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000025
단계 1: 1-니트로-1H-피라졸의 합성
0℃에서 아세트산 무수물(Acetic anhydride, 42 ml)에 HNO3(1 8ml)을 천천히 넣어 아세틸 니트레이트(Acetyl nitrate)를 제조했다. 1H-피라졸(10 g)을 다른 플라스크에 넣고 아세트산(28 ml)을 넣었다. 상기 아세틸 니트레이트를 0℃에서 피라졸 화합물에 천천히 넣고, 1시간동안 교반한 후 물을 넣어 고체를 석출했다. 물로 감압여과하여 목적화합물 16.0 g (수율: 97%)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.79 (t, J = 3.3 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 0.6 Hz, 1H).
단계 2: 3-니트로-1H-피라졸의 합성
1-니트로-1H-피라졸(10 g)을 벤조니트릴(benzonitrile, 70 ml)에 용해시킨 후, 180℃에서 4시간 동안 환류했다. 실온으로 온도를 낮추어 고체를 석출했다. 헵탄(Heptane, 250 ml)을 넣고 10분간 교반한 후, 감압여과하여 목적화합물 8.9 g (수율: 89%)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 12.80 (br s, 1H), 7.87 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.04 (t, J = 1.2 Hz, 1H).
단계 3: 3,4-디니트로-1H-피라졸의 합성
3-니트로-1H-피라졸(2.5 g, 22.11 mmol)을 H2SO4 (7.6 ml, 143.71 mmol)에 용해시킨 후, 0℃로 온도를 낮췄다. 발연 질산(Fuming HNO3, 1.03 ml, 24.32 mmol)을 천천히 넣어준 후, 80℃에서 4시간 동안 교반했다. 0℃로 온도를 낮추고 NaHCO3로 중화시켰다. 에틸아세테이트로 추출하고 MgSO4로 건조한 후 감압여과하여 농축시켰다. 컬럼크로마토그래피하여 목적화합물 0.80 g (수율: 22%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 159.1 [M+H]+; 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.12 (s, 1H).
단계 4: 1-이소프로필-3,4-디니트로-1H-피라졸의 합성
3,4-디니트로-1H-피라졸(0.8 g, 5.06 mmol)을 디메틸포름아마이드(DMF, 10 ml)에 용해시킨 후, 0℃로 온도를 낮췄다. NaH(0.30 g, 7.59 mmol)을 천천히 넣어주고 30분 동안 교반했다. 2-아이오도프로판(0.75 ml, 7.59 mmol)을 넣어준(dropwise) 후, 실온에서 1시간 동안 교반했다. 물을 넣어 반응을 종결시키고 에틸아세테이트로 추출했다. MgSO4로 건조한 후 감압 여과하여 농축시켰다. 컬럼크로마토그래피하여 목적화합물 0.31 g (수율: 30%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 201.0 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.19 (s, 1H), 4.58 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 1.64 (s, 3H), 1.61 (s, 3H).
단계 5: 1-이소프로필-3-메톡시-4-니트로-1H-피라졸의 합성
1-이소프로필-3,4-디니트로-1H-피라졸(0.31 g, 1.54 mmol)을 MeOH에 용해시킨 후, NaOMe(0.78 g, 3.09 mmol)을 넣었다. 6시간 동안 환류한 뒤, 실온으로 온도를 낮춘 후, 에틸아세테이트와 물로 추출했다. MgSO4로 건조한 후 감압 여과하여 농축시켰다. 컬럼크로마토그래피하여 목적화합물 0.26 g (수율: 92%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 186.0 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.03 (s, 1H), 4.32 (p, J = 6.6 Hz, 1H), 4.06 (s, 3H), 1.53 (s, 3H), 1.51 (s, 3H).
단계 6: 중간체 11의 합성
1-이소프로필-3-메톡시-4-니트로-1H-피라졸(0.26 g, 1.40 mmol)을 MeOH에 용해시킨 후, Pd/C 10 wt%(37.75 mg, 0.03 mmol)을 천천히 넣었다. H2 조건 하에서 14시간 동안 교반했다. 셀라이트(Cellite)로 여과한 후 농축하고 컬럼크로마토그래피하여 목적화합물 0.16 g (수율: 75%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 201.0 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.95 (s, 1H), 4.20 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 1.41 (s, 3H), 1.39 (s, 3H).
<제조예 12: 중간체 12(4-니트로-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000026
3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸(2 g, 14.69 mmol), H2SO4(9.36 g, 95.53 mmol)을 넣고 ice-bath에서 교반했다. HNO3(1.01 g, 16.16 mmol)을 넣은 후 80℃에서 4시간 동안 교반했다. 반응이 종결된 후, ice를 넣고 교반했다. 생성된 고체 화합물을 1차 여과하고 여액을 다시 에틸아세테이트로 추출한 후 MgSO4로 건조하고 감압 하여 흰색 고체 화합물 2.60 g (수율: 97%)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.46 (s, 1H).
<제조예 13: 중간체 13(1-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000027
단계 1: 테트라하이드로-2H-피란-4-올의 합성
디하이드로-2H-피란-4(3H)-온(1 g, 9.98 mmol), 테트라하이드로퓨란(THF, 10 mL)을 넣고 ice-bath에서 10 min 동안 교반했다. LiAlH4(2M in THF, 10 mL)를 넣어준(dropping) 후 3시간 동안 교반했다. 반응을 종결시킨 후, 2N NaOH에 침지했다. NH4Cl을 넣고 교반한 후, 여과했다. 용액을 감압 증발 시키고, 이소프로필에테르(Isoprpylether, IPE)를 넣고 교반한 후, 여과했다. 여액을 다시 감압하여 목적화합물 0.18 g (수율: 18%)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 3.54-3.47 (m, 4H), 1.25-1.20 (m, 5H).
단계 2: 테트라하이드로-2H-피란-4-일 메탄술포네이트의 합성
테트라하이드로-2H-피란-4-올(0.18 g, 1.82 mmol), DCM(15 mL)를 넣고 ice-bath에서 10분 동안 교반한 후, 메탄술포닐클로라이드(methanesulfonyl chloride, 0.31 g, 2.73 mmol) 및 트리에틸아민(TEA, 0.27 g, 2.73 mmol)을 넣고 7시간 동안 교반했다. 반응을 종결시킨 후, 추출하고 MgSO4로 건조하고 감압하여 목적화합물 0.20 g (수율: 62%)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.97-4.88 (m, 1H), 4.00-3.93 (m, 2H), 3.61-3.53 (m, 2H), 3.06 (s, 3H), 2.11-2.03 (m, 2H), 1.96-1.84 (m, 2H).
단계 3: 4-니트로-1-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸의 합성
4-니트로-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸(0.1 g, 0.55 mmol, 중간체 12), DMF(13 mL) 및 Cs2CO3(0.27 g, 0.82 mmol)을 넣고 30분 동안 교반한 후, 테트라하이드로-2H-피란-4-일 메탄술포네이트(0.13 g, 0.82 mmol)을 넣고 2시간 동안 환류했다. 반응을 종결시킨 후, 용액을 감압 증발시키고, 에틸아세테이트로 추출했다. MgSO4로 건조한 후, 용액을 감압 증발시킨 다음, 컬럼크로마토그래피하여 (MC:MeOH=10:1) 목적화합물 0.045 g (수율: 31%)을 얻었다.
단계 4: 중간체 13의 합성
4-니트로-1-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸(0.045 g, 0.17 mmol) 및 THF:MeOH (7 mL, 10:1 v/v)을 넣고 ice-bath에서 10분 동안 교반한 후, Ni(OAc)2·4H2O (0.0042 g, 0.016 mmol) 및 NaBH4 (0.025 g, 0.67 mmol)을 넣고 30분 동안 교반했다. 반응을 종결시킨 후, 여과하고 용액을 감압 증발시켰다. 컬럼크로마토그래피하여(MC:MeOH=10:1) 목적화합물 0.039 g (수율: 98%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 236.0 [M+H]+
<제조예 14: 중간체 14(1-이소프로필-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000028
단계 1: 1-이소프로필-4-니트로-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸의 합성
4-니트로-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸(0.10 g, 0.58 mmol, 중간체 12) 및 DMF(15 mL)를 넣고 ice-bath에서 10분 동안 교반한 후, NaH(0.038 g, 0.87 mmol)을 넣고 30분 동안 교반했다. 2-아이오도프로판(0.13 g, 0.76 mmol)을 넣고 3시간 동안 환류했다. 반응을 종결시킨 후, 용액을 감압 증발 시키고, 에틸아세테이트로 추출했다. MgSO4로 건조한 후 용액을 감압시키고 컬럼크로마토그래피하여(Hep:EA=1:1) 목적화합물 0.09 g (수율: 69%)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.28 (s, 1H), 4.64-4.55 (m, 1H), 1.59 (s, 6H).
단계 2: 중간제 14의 합성
상기 제조예 13의 단계 3 및 4에서, 테트라하이드로-2H-피란-4-일 메탄술포네이트 대신에 1-이소프로필-4-니트로-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸을 사용한 것을 제외하고, 동일하게 실험하여 목적화합물 0.09 g (수율: 69%)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.06 (s, 1H), 4.49-4.38 (m, 1H), 3.19 (bs, 2H), 1.49 (s, 3H), 1.47 (s, 3H).
<제조예 15: 중간체 15(1-(2-메톡시에틸)-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000029
상기 제조예 14에서, 2-아이오도프로판 대신에 1-브로모-2-메톡시에탄을 사용한 것을 제외하고, 제조예 14와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.14 g (수율: 72%)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.14 (s, 1H), 4.22-4.19 (t, 2H, J=10.2Hz), 3.73-3.71 (t, 2H, J=10.2Hz), 3.36 (s, 3H), 3.19 (bs, 2H).
<제조예 16: 중간체 16(1-부틸-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000030
상기 제조예 14에서, 2-아이오도프로판 대신에 1-브로모부탄을 사용한 것을 제외하고, 제조예 14와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.17 g (수율: 93%)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.01 (s, 1H), 4.06-4.01 (t, 2H, J=14.7Hz), 3.19 (s, 2H), 1.87-1.77 (m, 2H), 1.40-1.28 (m, 2H), 0.97-0.93 (t, 3H, J=14.7Hz).
<제조예 17: 중간체 17(5-클로로-1-메틸-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000031
단계 1: 1-메틸-4-니트로-1H-피라졸의 합성
4-니트로피라졸(1.0 g, 8.84 mmol)을 DMF(10 ml)에 용해시킨 후, K2CO3(3.6 g, 26.5 mmol)을 넣고 30분 동안 교반한 다음, MeI(1.65 ml, 13.26 mmol)를 넣었다. 하룻밤이 지난(Overnight) 후, K2CO3로 여과한 후, 용매를 농축하였다. 디클로로메탄(DCM) 및 물을 사용하여 추출하고, MgSO4로 건조한 후, 농축하여 목적화합물 0.82 g (수율: 73%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 128.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.84 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 3.91 (s, 3H).
단계 2: 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸의 합성
1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(1.0 g, 7.86 mmol)에 THF(20 ml)를 넣었다. 온도를 -78℃로 낮춘 후, 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드(LiHMDS, 1M in THF, 15.6 ml)를 넣었다(dropping). 30분 동안 교반한 후, 헥사클로로에탄(2.79 g, 11.8 mmol)을 넣었다. 실온에서 1시간 동안 교반한 후, NaCl(10 ml)를 넣어서 반응을 종결시킨 다음, 에틸아세테이트로 추출한 후, MgSO4로 건조 및 농축하여 목적 화합물 1.1 g (수율: 87%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 162.2 [M+H]+; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.14 (s, 3H), 3.91 (s, 3H).
단계 3: 중간체 17의 합성
5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(1.1 g, 6.83 mmol)에 THF (50 ml), MeOH (50 ml)를 넣어준 후, Ni(OAc)2.4H2O (169 mg, 0.68 mmol)을 첨가했다. Ice bath를 사용하여 온도를 0 내지 4℃로 낮춘 후에 NaBH4 (590 mg, 13.6 mmol)을 두번으로 나누어서 넣었다. 30분 동안 교반하고 TLC를 확인한 후, aq. NH4Cl를 첨가하여 반응을 종결시킨 다음 에틸아세테이트를 사용하여 추출했다. MgSO4로 건조한 후, 디옥산에 4M HCl를 용해시킨 용액(3.4 ml, 13.6 mmol)을 넣었다. 30분 동안 교반한 후 농축시킨 다음, 아세톤을 넣고 재결정하여 목적화합물 160 mg (수율: 18%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 132.0, 134.2 [M+H]+; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.48 (brs, 2H), 7.68 (s, 1H), 3.81 (s, 3H).
<제조예 18: 중간체 18(5-클로로-1-(옥세탄-3-일)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000032
단계 1: 4-니트로-1-(옥세탄-3-일)-1H-피라졸의 합성
4-니트로-1H-피라졸(0.66g, 5.88 mmol) 및 옥세탄-3-일 메탄술포네이트(0.94 g, 6.17 mmol)을 DMF에 용해시킨 후, Cs2CO3(3.80 g, 11.67 mmol)을 넣고 90℃에서 18시간 동안 교반했다. 실온으로 온도를 낮춘 후, 물로 반응을 종결시켰다. 아세테이트로 추출한 후, MgSO4로 건조했다. 감압여과한 후 농축하고 컬럼크로마토그래피하여 목적화합물 0.83 g (수율: 84%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 170.0 [M+H]+
단계 2: 5-클로로-4-니트로-1-(옥세탄-3-일)-1H-피라졸의 합성
4-니트로-1-(옥세탄-3-일)-1H-피라졸(0.83 g, 4.90 mmol)에 THF(10 ml)를 넣었다. 온도를 -78℃로 낮춘 후에, LiHMDS(1M in THF, 9.81ml)을 넣었다(Dropping). 30분 동안 교반한 후, THF(5 ml)에 용해시킨 헥사클로로메탄(1.39 g, 5.88 mmol)을 넣었다. 78℃에서 1시간 동안 교반한 후, aq. NaCl (10 ml)를 넣어서 반응을 종결시킨 다음, 에틸아세테이트로 추출했다. MgSO4로 건조 및 농축한 후, 컬럼크로마토그래피하여 목적 화합물 0.42g(수율: 43%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 204.1 [M+H]+
단계 3: 중간체 18의 합성
5-클로로-4-니트로-1-(옥세탄-3-일)-1H-피라졸(0.42 g, 2.06 mmol)에 EtOH(20 ml)과 물(2 ml)을 넣었다. Fe(0.34 g, 6.18 mmol)과 NH4Cl(0.33 g, 6.18 mmol)을 넣고, 90℃에서 3시간 동안 환류했다. 실온으로 온도를 낮춘 후, 여과한 다음 감압농축시켰다. 에틸아세테이트를 넣고, 3분 동안 초음파처리(sonication)한 후 녹지 않는 물질을 여과한 후 농축하여 목적화합물 0.34 g (수율: 95%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 173.9, 176.1 [M+H]+
<제조예 19: 중간체 19(5-클로로-1-(4-클로로페닐)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000033
단계 1: 1-(4-클로로페닐)-4-니트로-1H-피라졸의 합성
4-니트로-1H-피라졸(1 g, 8.84 mmol), 4-클로로벤젠보론산(2.76 g, 17.68 mmol) 및 Cu(OAc)2(2.40 g, 13.26 mmol)을 DCM(40 ml)에 넣었다. 피리딘(2.85 ml, 35.37 mmol)을 넣은 후, 20시간 동안 실온에서 교반했다. 반응을 종결되면 여과한 후, DCM 및 물로 추출했다. 유기층을 MgSO4로 건조한 후, 여과했다. 감압농축한 후, 컬럼크로마토그래피하여 목적화합물 0.88 g (수율: 44%)을 얻었다.
단계 2: 5-클로로-1-(4-클로로페닐)-4-니트로-1H-피라졸의 합성
1-(4-클로로페닐)-4-니트로-1H-피라졸(0.64 g, 2.86 mmol)에 THF(6 ml)를 넣었다. 온도를 -78℃로 낮춘 후에 LiHMDS(1M in THF, 5.7 ml)을 넣었다(dropping). 30분 동안 교반한 후, THF(3 ml)에 용해시킨 헥사클로로에탄(0.81 g, 3.43 mmol)을 넣었다. 78℃에서 1시간 동안 교반한 후, aq. NaCl(10 ml)를 넣어서 반응을 종결시켰다. 에틸아세테이트로 추출한 후, MgSO4로 건조 및 농축시켰다. 컬럼크로마토그래피하여 목적 화합물 0.20 g (수율: 27%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 258.2, 260.0 [M+H]+
단계 3: 중간체 19의 합성
5-클로로-1-(4-클로로페닐)-4-니트로-1H-피라졸(0.20 g, 0.77 mmol)에 EtOH (15 ml) 및 물(1.5 ml)을 넣었다. Fe(0.12 g, 2.32 mmol)과 NH4Cl(0.12 g, 2.32 mmol)을 넣고 90℃에서 3시간 동안 환류했다. 실온으로 온도를 낮춘 후, 여과한 다음, 감압농축시켰다. 에틸아세테이트를 넣고, 3분 동안 초음파처리(sonication)한 후 녹지 않는 물질을 여과한 후, 농축하여 목적화합물 0.17 g (수율: 99%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 228.0, 230.1 [M+H]+
<제조예 20: 중간체 20(tert-부틸 4-(메틸술포닐옥시)피페리딘-1-카복실레이트)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000034
tert-부틸-4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트(20.0 g, 99.42 mmol)를 DCM (200 ml)에 용해시켰다. 메탄술포닐 클로라이드(methanesulfonyl chloride, 10 mL, 1.3 eq.)를 넣어준 후, 교반했다. 트리에틸아민(41.6 mL, 3.0 eq.)을 넣고 1시간 동안 교반했다. 반응이 종결되면, 브라인(brine)과 DCM으로 세 번 추출하고 MgSO4로 건조한 후, 감압농축하여 아이보리색의 고체 화합물 27.7 g (수율: 99%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 280.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.95-4.54 (m, 1H), 3.74-3.70 (m, 2H), 3.35-3.28 (m, 2H), 3.05 (s, 3H), 1.96-1.84 (m, 4H), 1.48 (s, 9H).
<제조예 21: 중간체 21(tert-부틸 3-(메틸술포닐옥시)아제티딘-1-카복실레이트)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000035
단계 1: tert-부틸-3-하이드록시아제티딘-1-카복실레이트의 합성
아제티딘-3-올 하이드로클로라이드(3.0 g, 27.38 mmol)을 H2O (6 ml)에 용해시켰다. K2CO3(3.78 g, 1.0 eq.)을 H2O(6 mL)에 녹인 후, 첨가했다. 여기에 디-tert-부틸 디카보네이트(5.98 g, 1.0 eq.)를 THF(27 mL)에 용해시켜 적가한 후, 4시간 동안 교반했다. 반응이 종결되면 에틸아세테이트를 첨가하여 세 번 추출하고 건조한 후, 농축하여 노란색의 목적화합물 4.7 g (수율: 99%)를 얻었다.
MS (ESI) m/z 174.2 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.59-4.56 (m, 1H), 4.54-4.11 (m, 2H), 3.82-3.77 (m, 2H), 3.16 (s, 1H), 1.43 (s, 9H).
단계 2: 중간체 21의 합성
tert-부틸-3-하이드록시아제티딘-1-카복실레이트(4.7 g, 27.13 mmol)를 DCM(50 ml)에 용해시켰다. 메탄술포닐 클로라이드(2.7 ml, 1.3 eq.)를 넣고 교반했다. 트리에틸아민(11.3 mL, 3.0 eq.)를 넣고 1시간 동안 교반했다. 반응이 종결된 후, 브라인(brine)과 DCM으로 세 번 추출하고 MgSO4로 건조한 후, 농축하여 갈색의 목적화합물 6.8 g (수율: 99%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 252.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.24-5.17 (m, 1H), 4.31-4.25 (m, 2H), 4.13-4.08 (m, 2H), 3.07 (s, 3H), 1.45 (s, 9H).
<제조예 22: 중간체 22(tert-부틸 4-(메틸술포닐옥시)아제판-1-카복실레이트)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000036
상기 제조예 20에서, tert-부틸-4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트 대신에 tert-부틸-4-하이드록시아제판-1-카복실레이트(2.0 g, 9.29 mmol)를 사용한 것을 제외하고, 제조예 20과 동일하게 실험하여 목적화합물 2.7 g (수율: 99%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 294.0 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.91 (s, 1H), 3.45-3.38 (m, 1H), 3.02 (s, 3H), 2.08-2.04 (m, 5H), 1.73-1.64 (m, 1H), 1.47 (s, 9H).
<제조예 23: 중간체 23((R)-tert-부틸 3-(메틸술포닐옥시)피롤리딘-1-카복실레이트)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000037
상기 제조예 20에서, tert-부틸-4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트 대신에 (R)-tert-부틸-3-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트(10.0 g, 53.41 mmol)를 사용한 것을 제외하고, 제조예 20과 동일하게 실험하여 목적화합물 14.4 g (수율: 99%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 266.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.28-5.26 (m, 1H), 3.68-3.50 (m, 4H), 3.05 (s, 3H), 2.27-2.16 (m, 2H), 1.47 (s, 9H).
<제조예 24: 중간체 24((S)-tert-부틸 3-(메틸술포닐옥시)피롤리딘-1-카복실레이트)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000038
상기 제조예 20에서, tert-부틸-4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트 대신에 (S)-tert-부틸-3-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트(10.0 g, 53.41 mmol)를 사용한 것을 제외하고, 제조예 20과 동일하게 실험하여 목적화합물 14.0 g (수율: 98.8%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 266.1 [M+H]+
<제조예 25: 중간체 25(4-(5-클로로-4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘 하이드로클로라이드)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000039
단계 1: tert-부틸-4-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카복실레이트의 합성
4-니트로-1H-피라졸(4.71 g, 41.66 mmol)을 DMF(42 ml)에 용해시켰다. NaH(2.7 g, 1.5 eq.)을 넣어준 후, 0℃에서 30분 동안 교반했다. tert-부틸-4-(메틸술포닐옥시)피페리딘-1-카복실레이트(12.8 g, 1.1 eq. 중간체 20)을 넣고, 150℃로 승온한 후, 12시간 동안 교반했다. 반응이 종결되면 H2O와 DCM으로 세 번 추출한 후, MgSO4로 건조 및 농축했다. 컬럼크로마토그래피하여(MeOH:MC=1:40) 노란색 목적화합물 10.2 g (수율: 83%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 297.2 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.17 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 4.34-4.26 (m, 3H), 2.20-2.16 (m, 3H), 1.98-1.89 (m, 2H), 1.49 (s, 9H).
단계 2: tert-부틸-4-(5-클로로-4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카복실레이트의 합성
tert-부틸-4-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)페피리딘-1-카복실레이트(800 mg, 2.70 mmol)을 THF (9.0 ml)에 용해시켰다. -78℃로 온도를 낮춘 후, LiHMDS (1.0M in THF, 5.4 mL, 2.0 eq.)을 넣고, 30분 동안 교반했다. Cl3CCCl3(765 mg, 1.2 eq.)을 THF (8.0 mL)에 용해시켜 첨가한 후, 1시간 동안 교반했다. 물을 첨가하여 반응을 종결 시켰다. 에틸아세테이트를 첨가하여 세 번 추출하고 MgSO4로 건조한 후, 농축하여 갈색 목적화합물 500 mg (수율: 56%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 331.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.19 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 4.54-4046 (m, 1H), 4.32 (d, J = 12.3 Hz, 2H), 2.91 (t, J = 12.6 Hz, 2H), 2.20-2.07 (m, 2H), 1.94 (d, J = 12.3 Hz, 2H), 1.49 (s, 9H).
단계 3: 중간체 25의 합성
tert-부틸-4-(5-클로로-4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카복실레이트(500 mg, 1.51 mmol)을 DCM(5 ml)에 넣었다. HCl(4M in dioxane, 1.13 ml, 3.0 eq.)를 넣어준 후, 12시간 동안 교반했다. 반응이 종결되면 여과하여 흰색 목적화합물 120 mg (수율: 34%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 230.7 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.19 (s, 1H), 4.49-4.41 (m, 1H), 3.29 (d, J = 12.9 Hz, 2H), 2.79 (t, J = 10.8 Hz, 2H), 2.17-2.03 (m, 2H), 1.94 (d, J = 11.7 Hz, 2H).
<제조예 26: 중간체 26(1-(4-(4-아미노-5-클로로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)에탄온)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000040
단계 1: 1-(4-(5-클로로-4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)에탄온의 합성
4-(5-클로로-4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘 하이드로클로라이드(120 mg, 0.52 mmol, 중간체 25)을 THF (1.0 ml)에 넣었다. K2CO3(108 mg, 1.5 eq.)를 넣고 아세틸클로라이드(0.04 mL, 1.1 eq.)를 적가한 후, 12시간 동안 교반했다. 반응이 종결되면 물과 DCM으로 추출한 후, 농축하여 흰색 목적화합물 110 mg (수율: 78%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 273.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.19 (s, 1H), 4.82-4.78 (m, 1H), 4.63-4.53 (m, 1H), 4.07-4.01 (m, 1H), 3.44-3.27 (m, 2H), 2.83-2.75 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 2.06 (s, 3H).
단계 2: 중간체 26의 합성
1-(4-(5-클로로-4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)에탄온(110 mg, 0.403 mmol)을 EtOH (5 ml) 및 물 (0.5 mL)에 용해시켰다. 여기에 NH4Cl (64 mg, 3.0 eq.)과 Fe (67 mg, 3.0 eq.)을 첨가하고 90℃에서 12시간 동안 교반했다. 반응이 종결되면 Fe를 제거하고 농축했다. 물과 에틸아세테이트로 추출하고 건조시킨 후, 농축하여 붉은색 목적화합물 90 mg (수율: 92%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 243.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz. CDCl3) δ 7.23 (s, 1H), 4.75-4.70 (m, 1H), 4.37-4.32 (m, 1H), 4.00-3.95 (m, 1H), 3.43-2.73 (m, 4H), 2.13 (s, 3H), 2.05-1.98 (m, 2H).
<제조예 27: 중간체 27(5-클로로-1-(1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000041
상기 제조예 26에서, 아세틸클로라이드 대신에 메탄술포닐 클로라이드를 사용한 것을 제외하고, 제조예 26과 동일하게 실험하여 목적화합물 0.23 g (수율: 73%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 278.7, 280.4 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.21 (s, 1H) 4.13-4.05 (m, 1H), 3.90 (s, 2H), 3.65-3.59 (m,2H), 2.92 (s, 3H), 2.90-2.83 (m, 2H), 2.02-1.88 (m, 2H), 1.88-1.82 (m, 2H).
<제조예 28: 중간체 28(4-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘 하이드로클로라이드)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000042
단계 1: tert-부틸-4-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카복실레이트의 합성
4-니트로-1H-피라졸(4.71 g, 41.66 mmol)을 DMF (42 ml) 용해시켰다. NaH(2.7 g, 1.5 eq.)을 넣고, 0℃에서 30분 동안 교반했다. tert-부틸-4-(메틸술포닐옥시)피페리딘-1-카복실레이트(12.8 g, 1.1 eq. 중간체 20)를 넣고, 150℃로 승온한 후, 12시간 동안 교반했다. 반응이 종결되면 H2O과 DCM으로 세 번 추출했다. MgSO4로 건조 및 농축한 후, 컬럼크로마토그래피하여(MeOH:MC=1:40) 노란색 목적화합물 10.2 g (수율: 83%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 297.2 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.17 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 4.34-4.26 (m, 3H), 2.20-2.16 (m, 3H), 1.98-1.89 (m, 2H), 1.49 (s, 9H).
단계 2: 중간체 28의 합성
tert-부틸-4-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카복실레이트(10.2 g, 34.42 mmol)을 DCM(68 ml)에 넣었다. HCl(4M in dioxane, 25.8 ml, 3.0 eq.)을 넣고, 12시간 동안 교반했다. 반응이 종결되면 여과하여 흰색 목적화합물 6.0 g (수율: 75%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 197.2 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz. MeOD) : δ 8.67 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 4.70-4.61 (m, 1H), 3.58 (d, J = 13.2 Hz, 2H), 3.27-3.18 (m, 2H), 2.41-2.32 (m, 4H).
<제조예 29: 중간체 29(5-클로로-1-(1-(옥세탄-3-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000043
단계 1: 4-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)-1-(옥세탄-3-일)피페리딘의 합성
4-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘 하이드로클로라이드 (0.40 g, 1.74 mmol, 중간체 28), 디클로로에탄(DCE, 15 mL), 디이소프로필에틸아민(DIPEA, 0.44 g, 3.48 mmol) 및 옥세탄-3-온(0.31 g, 4.35 mmol)을 넣은 후 15분 동안 교반했다. NaBH(OAc)3 (1.10 g, 5.22 mmol) 및 AcOH (0.12 g, 2.08 mmol)을 넣고 2시간 동안 교반했다. 반응이 종결된 후, NaHCO3에 침지한 다음, DCM으로 추출하였다. 건조시킨 후 용액을 감압증발시켜 목적화합물 0.42 g (수율: 96%) 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.19 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 4.72-4.62 (m, 4H), 4.19-4.17 (d, 1H, J=4.5Hz), 3.60-3.52 (m, 1H), 2.92-2.90 (d, 2H, J=5.4Hz), 2.231 (s, 2H), 2.11-2.05 (m, 4H).
단계 2: 4-(5-클로로-4-니트로-1H-피라졸-1-일)-1-(옥세탄-3-일)피페리딘의 합성
4-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)-1-(옥세탄-3-일)피페리딘(0.32 g, 1.26 mmol)을 THF(15 mL)에 넣은 후, -78℃에서 교반했다. LiHMDS (1M in THF, 2.53mL, 2.53 mmol)을 넣고 30분 동안 교반했다. 헥사클로로에탄(0.36 g, 1.52 mmol)을 THF(3 mL)에 용해시켜 넣어준(dropping) 후, 30분 동안 교반했다. 반응이 종결된 후, NH4Cl에 침지한 다음, 에틸아세테이트로 추출했다. MgSO4로 건조한 후, 감압하여 목적화합물 0.26 g (수율: 72%) 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.20 (s, 1H), 4.72-4.62 (m, 4H), 4.42-4.31 (m, 1H), 3.61-3.52 (m, 1H), 2.95-2.91 (m, 2H), 2.38-2.25 (m, 2H), 2.09-1.96 (m, 4H).
단계 3: 중간체 29의 합성
상기 제조예 26의 단계 2에서, 1-(4-(5-클로로-4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)에탄온 대신에 4-(5-클로로-4-니트로-1H-피라졸-1-일)-1-(옥세탄-3-일)피페리딘을 사용한 것을 제외하고, 제조예 26의 단계 2와 동일하게 실험하여 목적화합물 1.0 g (수율: 86%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 257.3, 259.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.24 (s, 1H), 4.70-4.62 (m, 4H), 4.19-4.09 (m, 1H), 3.59-3.51 (m, 1H), 2.90 (s, 4H), 2.28-2.16 (m, 2H), 2.05-1.92 (m, 4H).
<제조예 30: 중간체 30(1-(아제티딘-3-일)-4-니트로-1H-피라졸 하이드로클로라이드)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000044
단계 1: tert-부틸-3-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)아제티딘-1-카복실레이트의 합성
4-니트로-1H-피라졸(2.9 g, 25.77 mmol)을 DMF (30 ml)에 용해시켰다. Cs2CO3(17.6 g, 2.0 eq.) 및 tert-부틸-3-(메틸술포닐옥시)아제티딘-1-카복실레이트(6.8 g, 1.05 eq., 중간체 21)을 넣고 90℃에서 12시간 동안 교반했다. 물을 첨가하여 반응을 종결시킨 후, 에틸아세테이트로 세 번 추출한 후 MgSO4로 건조 및 농축했다. 컬럼크로마토그래피하여(MeOH:MC=1:40) 노란색 목적화합물 6.45 g (수율: 93%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z : 268.9 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.30 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 5.09-5.03 (m, 1H), 4.44-4.29 (m, 4H), 1.46 (s, 9H).
단계 2: 중간체 30의 합성
tert-부틸-3-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)아제티딘-1-카복실레이트(6.45 g, 24.05 mmol)을 DCM(50 ml)에 넣었다. HCl(4M in dioxane, 20 mL, 3.0 eq.)를 넣고, 12시간 동안 교반했다. 반응이 종결된 후, 여과하여 흰색 목적화합물 4.5 g (수율: 91%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 429.9 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, MeOD) δ 8.68 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 5.54-5.50 (m, 1H), 4.62-4.55 (m, 4H).
<제조예 31: 중간체 31(5-클로로-1-(1-(옥세탄-3-일)아제티딘-3-일)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000045
단계 1: 4-니트로-1-(1-(옥세탄-3-일)아제티딘-3-일)-1H-피라졸의 합성
1-(아제티딘-3-일)-4-니트로-1H-피라졸 하이드로클로라이드(1.0 g, 4.89 mmol, 중간체 30)을 DCE(20 ml)에 넣었다. DIPEA(1.7 mL, 2.0 eq.) 및 옥세탄-3-온(881 mg, 2.5 eq.)을 넣은 후, 상온에서 15분 동안 교반했다. NaBH(OAc)3(3.1 g, 3.0 eq.) 및 AcOH(0.336 mL, 1.2 eq.)를 넣은 후, 실온에서 1.5시간 동안 교반했다. 반응이 종결된 후, NaHCO3와 DCM으로 추출 및 농축한 후, 컬럼크로마토그래피하여(MeOH:MC=1:40) 노란색 목적화합물 540 mg (수율: 49%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 225.2 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.36 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 5.02-4.98 (m, 1H), 4.78-4.57 (m, 4H), 3.93-3.68 (m, 5H).
단계 2: 5-클로로-4-니트로-1-(1-(옥세탄-3-일)아제티딘-3-일)-1H-피라졸의 합성
상기 제조예 29의 단계 2에서, 4-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)-1-(옥세탄-3-일)피페리딘 대신에 4-니트로-1-(1-(옥세탄-3-일)아제티딘-3-일)-1H-피라졸을 사용한 것을 제외하고, 제조예 29의 단계2와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.43 g (수율: 69%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 259.2 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.25 (s, 1H), 5.28-5.19 (m, 1H), 4.79-4.74 (m, 2H), 4.64-4.60 (m, 2H), 3.79-3.76 (m, 5H).
단계 3: 중간체 31의 합성
상기 제조예 26의 단계 2에서, 1-(4-(5-클로로-4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)에탄온 대신에 5-클로로-4-니트로-1-(1-(옥세탄-3-일)아제티딘-3-일)-1H-피라졸을 사용한 것을 제외하고, 제조예 26의 단계2와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.1 g (수율: 26%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 229.2 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.30 (s, 1H), 5.08-5.03 (m, 1H), 4.77-4.73 (m, 2H), 4.64-4.60 (m, 2H), 3.96-3.69 (m, 5H).
<제조예 32: 중간체 32(3,5-디메틸-4-니트로-1H-피라졸)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000046
상기 제조예 12에서, 3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸 대신에 3,5-디메틸-1H-피라졸을 사용한 것을 제외하고, 제조예 12와 동일하게 실험하여 목적화합물 7.0 g (수율: 96%)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 11.01 (bs, 1H), 2.62 (s, 6H).
<제조예 33: 중간체 33(3-클로로-5-메틸-4-니트로-1H-피라졸)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000047
단계 1: 5-메틸-1H-피라졸-3(2H)-온의 합성
에틸-3-옥소부타노에이트(28.59g, 219.73 mmol)를 EtOH(50 mL)에 넣고, ice-bath에서 10분 동안 교반했다. 하이드라진 하이드레이트(hydrazine hydrate, 10 g, 199.76 mmol)를 넣고, 밤새도록(overnight) 환류시켰다. 반응이 종결된 후, 감압증발시켰다. 에틸아세테이트를 넣고 교반한 후, 여과하여 흰색 목적화합물 14.68 g (수율: 75%)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 5.21 (s, 1H), 2.08 (s, 3H)
단계 2: 3-클로로-5-메틸-1H-피라졸의 합성
고압 반응기에 5-메틸-1H-피라졸-3(2H)-온(14 g, 101.93 mmol) 및 POCl3(42.20 g, 275.22 mmol)을 넣고, 160℃에서 밤새도록(overnight) 환류시켰다. 반응이 종결되면 증발시킨 후, NaHCO3 및 5N-NaOH으로 중화시켰다. DCM으로 추출하고 MgSO4로 건조한 후, 감압증발시켰다. 컬럼크로마토그래피하여(Hep:EA=2:1) 목적화합물 2.90 g (수율: 17%) 얻었다.
MS (ESI) m/z 117.0 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 11.58 (bs, 1H), 6.01 (s, 1H), 2.37 (s, 3H).
단계 3: 중간체 33의 합성
상기 제조예 12에서, 3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸 대신에 3-클로로-5-메틸-1H-피라졸을 사용한 것을 제외하고, 제조예 12와 동일하게 실험하여 목적화합물 3.68 g (수율: 91%)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 2.72 (s, 3H).
<제조예 34: 중간체 34(3-클로로-1-이소프로필-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000048
단계 1: 1-이소프로필-4-니트로-1H-피라졸의 합성
4-니트로-1H-피라졸(0.30 g, 2.65 mmol) 및 DMF(30 mL)를 넣고 ice-bath에서 10분 동안 교반했다. NaH(0.17 g, 3.97 mmol)을 넣고 30분 동안 교반한 후, 2-아이오도프로판(0.58 g, 3.44 mmol)을 넣고 3시간 동안 환류시켰다. 반응이 종결되면, 감압증발시킨 후, 에틸아세테이트로 추출했다. MgSO4로 건조한 후, 감압증발시켰다. 컬럼크로마토그래피하여(Hep:EA=1:1) 액상 목적화합물 0.26 g (수율: 65%)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.17 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 4.58-4.49 (m, 1H), 1.56 (s, 6H).
단계 2: 중간체 34의 합성
4-니트로-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸(0.26 g, 1.72 mmol), EtOH(20 mL) 및 HCl(1.43 mL, 17.20 mmol)을 넣고, N2 하에서 교반했다. Pd/Al(0.026 g)을 넣고 트리에틸실란(1.20 g, 10.35 mmol)을 넣어준(dropping) 후, 밤새도록(overnight) 반응시켰다. 반응이 종결된 후, celite-545로 여과했다. 에틸아세테이트로 추출한 후 감압 증발시켜 목적화합물 0.17 g (수율: 50%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 160.2 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.59 (s, 1H), 4.67-4.58 (m, 1H), 1.38 (s, 3H), 1.36 (s, 3H).
<제조예 35: 중간체 35(3-클로로-1-(시클로프로필메틸)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000049
상기 제조예 34에서, 2-아이오도프로판 대신에 (브로모메틸)시클로프로판을 사용한 것을 제외하고, 제조예 34와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.66 g (수율: 88%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 171.9, 174 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.78 (s, 1H), 3.99 (s, 2H), 1.27-1.23 (m, 1H), 0.62-0.60 (m, 2H), 0.41 (s, 2H).
<제조예 36: 중간체 36(3-클로로-1-시클로프로필-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000050
단계 1: 1-시클로프로필-4-니트로-1H-피라졸의 합성
4-니트로-1H-피라졸(0.5 g, 4.42 mmol), 시클로프로필보론산(0.75 g, 8.84 mmol), 2,2'-비피리딘(0.69 g, 4.42 mmol) 및 Na2CO3(0.93 g, 8.84 mmol)을 감압플라스크에 넣었다. 디클로로에탄(22 ml)을 넣고, 10분 동안 N2 버블링(bubbling)했다. Cu(OAc)2(0.80 g, 4.42 mmol)을 넣고 1분 동안 N2 버블린한 후, 70℃에서 18시간 동안 교반했다. 실온으로 온도를 낮춘 후, 에틸아세테이트로 여과한 후, 농축시켰다. 에틸아세테이트와 1N 염산수용액으로 추출하고 MgSO4로 건조한 후, 감압여과하고 농축하여 목적화합물 0.67 g (수율: 45%)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.20 (s, 1H), 3.69 (p, J = 1.8 Hz, 1H), 1.27-1.16 (m, 4H).
단계 2: 중간체 36의 합성
상기 제조예 34의 단계 2에서, 4-니트로-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸 대신에 1-시클로프로필-4-니트로-1H-피라졸(0.3 g, 1.95 mmol)을 사용한 것을 제외하고, 제조예 34의 단계 2와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.14 g (수율: 47%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 158.0, 160.2 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.16 (s, 1H), 4.37 (p, J = 3.9 Hz, 1H), 2.89 (s, 2H), 1.18-1.14 (m, 2H), 1.07-1.04 (m, 2H).
<제조예 37: 중간체 37(3-클로로-1-(1-메틸피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000051
단계 1: 1-메틸-4-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘의 합성
4-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘 하이드로클로라이드(0.4 g, 1.71 mmol)을 DMF(5 ml)에 녹인 후, 0℃로 온도를 낮췄다. NaH(0.30 g, 6.87 mmol)을 천천히 가해주고, 30분 동안 교반했다. 아이오도메탄(0.16 ml, 2.57 mmol)을 넣어준(dropwise) 후, 실온에서 1시간 동안 교반했다. 물을 넣어 반응을 종결시키고 에틸아세테이트로 추출했다. MgSO4로 건조한 후, 감압 여과한 다음 농축시켰다. 컬럼크로마토그래피하여 목적화합물 0.16 g (수율: 45%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 211.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, Acetone-d6) δ 8.64 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 4.26 (p J = 7.2 Hz, 1H), 2.95-2.91 (m, 2H), 2.25 (s, 3H), 2.12-2.05 (m, 6H).
단계 2: 중간체 37의 합성
상기 제조예 34의 단계 2에서, 4-니트로-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸 대신에 1-메틸-4-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘(0.16 g, 0.76 mmol)을 사용한 것을 제외하고, 제조예 34의 단계 2와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.18 g (수율: 95%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 215.0, 217.0 [M+H]+
<제조예 38: 중간체 38(3-클로로-1-(1-에틸피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000052
상기 제조예 37에서, 아이오도메탄 대신에 아이오도에탄을 사용한 것을 제외하고, 제조예 37과 동일하게 실험하여 목적화합물 0.05 g (수율: 21%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 229.1 [M+H]+
<제조예 39: 중간체 39(3-클로로-1-(테테르하이드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000053
단계 1: 4-니트로-1-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸의 합성
4-니트로-1H-피라졸(0.08 g, 0.76 mmol), DMF(10 mL) 및 Cs2CO3(0.37 g, 1.14 mmol)을 넣고 30분 동안 교반했다. 테트라하이드로-2H-피란-4-일 메탄술포네이트(0.20 g, 1.314 mmol)를 넣고 2시간 동안 환류시켰다. 반응이 종결되면, 감압증발시킨 후, 에틸아세테이트로 추출했다. MgSO4로 건조한 후, 감압증발시켰다. 컬럼크로마토그래피하여(MC:MeOH=10:1) 목적화합물 0.085 g (수율: 57%) 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.19 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 4.44-4.34 (m, 1H), 4.18-4.13 (m, 2H), 3.61-3.52 (m, 2H), 2.20-2.01 (m, 4H).
단계 2: 중간체 39의 합성
상기 제조예 34의 단계 2에서, 4-니트로-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸 대신에 4-니트로-1-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸을 사용한 것을 제외하고, 제조예 34의 단계 2와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.04 g (수율: 99%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 202.0 [M+H]+
<제조예 40: 중간체 40(3-클로로-1-(2,6-디메틸테트라하이드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000054
상기 제조예 39에서, 테트라하이드로-2H-피란-4-일 메탄술포네이트 대신에 2,6-디메틸테트라하이드로-2H-피란-4-일 메탄술포네이트를 사용한 것을 제외하고, 제조예 39과 동일하게 실험하여 목적화합물 0.09 g (수율: 71%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 230.1 [M+H]+
<제조예 41: 중간체 41(3-클로로-1-(4-플루오로페닐)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000055
단계 1: 1-(4-플루오로페닐)-4-니트로-1H-피라졸의 합성
4-니트로-1H-피라졸(1 g, 8.84 mmol), 4-플루오로페닐 보론산(2.47 g, 17.68 mmol) 및 Cu(OAc)2(2.41g, 13.27mmol)을 DCM(40 ml)에 넣었다. 피리딘(2.85 ml, 35.37 mmol)을 넣은 후, 20시간 동안 실온에서 교반했다. 반응이 종결되면, 여과한 후, DCM과 물로 추출했다. 유기층을 MgSO4로 건조하고, 여과한 후 감압농축했다. 컬럼크로마토그래피하여 목적화합물 0.82 g (수율: 45%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 208.0 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.62 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.01-7.98 (m, 2H), 7.45-7.41 (m, 2H).
단계 2: 중간체 41의 합성
상기 제조예 34의 단계 2에서, 4-니트로-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸 대신에 1-(4-플루오로페닐)-4-니트로-1H-피라졸(0.82 g, 3.95 mmol)을 사용한 것을 제외하고, 제조예 34의 단계 2와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.23 g (수율: 27%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 212.2, 214.1 [M+H]+
<제조예 42: 중간체 42((4-(4-아미노-3-클로로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(시클로프로필)메탄온)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000056
단계 1: 시클로프로필(4-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)메탄온의 합성
4-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘 하이드로클로라이드(0.25 g, 1.07 mmol, 중간체 28)를 DCM에 용해시켰다. 트리에틸아민(0.37 ml, 2.68 mmol)을 넣고, 온도를 0℃로 낮췄다. 시클로프로판 카보닐 클로라이드(0.11 ml, 1.28 mmol)를 천천히 적가한 후, 실온에서 2시간 동안 교반했다. 물을 넣어 반응을 종결시킨 후, 에티아세테이트로 추출했다. 유기층을 MgSO4로 건조한 후, 감압여과하여 농축했다. 컬럼크로마토그래피하여 목적화합물 0.28 g (수율: 99%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 265.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, Acetone-d6) δ 8.69 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 4.65 (m, 3H), 3.37 (s, 1H), 2.78-2.75 (m, 2H), 2.27-2.25 (m, 2H), 2.02-1.97 (m, 2H), 0.84-0.82 (m, 2H), 0.81-0.78 (m, 2H).
단계 2: 중간체 42의 합성
상기 제조예 34의 단계 2에서, 4-니트로-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸 대신에 시클로프로필(4-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)메탄온(0.28 g, 1.07 mmol)을 사용한 것을 제외하고, 제조예 34의 단계 2와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.10 g (수율: 34%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 269.1, 271.0 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, Acetone-d6) δ 7.14 (s, 1H), 4.58-4.42 (m, 3H), 3.63 (s, 2H), 3.37 (m, 1H), 2.02-1.97 (m, 6H), 0.83-0.82 (m, 2H), 0.75-0.70 (m, 2H).
<제조예 43: 중간체 43(1-(4-(4-아미노-3-클로로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)-2-메틸프로판-1-온)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000057
상기 제조예 42에서, 시클로프로판 카보닐 클로라이드 대신에 이소부틸릴 클로라이드를 사용한 것을 제외하고, 제조예 42와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.35 g (수율: 100%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 271.1, 273.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.24 (s, 1H), 4.79-4.76 (d, 1H, J=11.4Hz), 4.41-4.31 (m, 1H), 4.13-4.09 (d, 1H, J=12.6Hz), 3.25-3.17 (t, 1H, J=24.6Hz), 2.97-2.70 (m, 5H), 2.19-1.99 (m, 4H). 1.17-1.15 (d, 7H, J=6Hz).
<제조예 44: 중간체 44(1-(4-(4-아미노-3-클로로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)-2,2-디메틸프로판-1-온)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000058
상기 제조예 42에서, 시클로프로판 카보닐 클로라이드 대신에 피발로일 클로라이드(pivaloyl chloride)를 사용한 것을 제외하고, 제조예 42와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.15 g (수율: 22%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 285.1, 287.0 [M+H]+
<제조예 45: 중간체 45((4-(4-아미노-3-클로로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(모르폴리노)메탄온)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000059
상기 제조예 42에서, 시클로프로판 카보닐 클로라이드 대신에 4-모르폴린카보닐 클로라이드를 사용한 것을 제외하고, 제조예 42와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.12 g (수율: 48%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 314.1, 316.0 [M+H]+
<제조예 46: 중간체 46((4-(4-아미노-3-클로로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(4-메틸피페라진-1-일)메탄온)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000060
상기 제조예 42에서, 시클로프로판 카보닐 클로라이드 대신에 4-메틸-1-피페라진카보닐 클로라이드 하이드로클로라이드를 사용한 것을 제외하고, 제조예 42와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.35 g (수율: 95%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 327.1, 329.0 [M+H]+
<제조예 47: 중간체 47(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000061
상기 제조예 42에서, 시클로프로판 카보닐 클로라이드 대신에 메탄술포닐 클로라이드를 사용한 것을 제외하고, 제조예 42와 동일하게 실험하여 목적화합물 5.4 g (수율: 53%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 278.9 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.24 (s, 1H), 4.31-4.24 (m, 1H), 3.95-3.89 (m, 2H), 3.02-2.92 (m, 2H), 2.86 (s, 3H), 2.31-2.18 (m, 2H), 2.08-2.02 (m, 2H).
<제조예 48: 중간체 48(3-클로로-1-(1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000062
상기 제조예 42에서, 시클로프로판 카보닐 클로라이드 대신에 에탄술포닐 클로라이드를 사용한 것을 제외하고, 제조예 42와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.58 g (수율: 46%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 293.2, 295.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.11 (s, 1H), 4.29 (p, J = 6.9 Hz, 1H), 4.00 (s, 2H), 3.72-3.66 (m, 2H), 3.08 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.94-1.86 (m, 4H), 1.22 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
<제조예 49: 중간체 49(3-클로로-1-(1-(시클로프로필술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000063
상기 제조예 42에서, 시클로프로판 카보닐 클로라이드 대신에 시클로프로필 술포닐 클로라이드를 사용한 것을 제외하고, 제조예 42와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.56 g (수율: 46%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 305.1, 307.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.24 (s, 1H), 4.33-4.23 (m, 1H), 3.98-3.94 (m, 2H), 3.11-3.06 (m, 2H), 2.92 (s, 2H), 2.35-2.18 (m, 3H), 2.09-1.98 (m, 2H), 1.24-1.18 (m, 2H), 1.06-0.98 (m, 2H).
<제조예 50: 중간체 50(1-(4-(4-아미노-3-클로로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)-2,2,2-트리플루오로에탄온)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000064
단계 1: 2,2,2-트리플루오로-1-(4-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)에탄온의 합성
4-(5-클로로-4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘 하이드로클로라이드(500 mg, 2.15 mmol)를 DCM(5 ml)에 넣었다. TEA (0.66 mL, 2.2 eq.) 및 2,2,2-트리플루오로아세트산 무수물(2,2,2-trifluoroacetic anhydride, 0.45 ml, 1.5 eq.)을 넣고 상온에서 12시간 동안 교반했다. 반응이 종결되면, 물과 DCM으로 추출한 후 농축하여 흰색 목적화합물 680 mg (수율: 98%)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz. CDCl3) δ 8.21 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 4.70-4.64 (m, 1H), 4.52-4.43 (m, 1H), 4.21-4.17 (m, 1H), 3.42-3.32 (m, 1H), 3.11-3.03 (m, 1H), 2.34-2.30 (m, 2H), 2.16-2.07 (m, 2H).
단계 2: 중간체 50의 합성
상기 제조예 34의 단계 2에서, 4-니트로-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸 대신에 2,2,2-트리프루오로-1-(4-(4-ㅣ트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)에탄온(680 mg, 2.33 mmol)을 사용한 것을 제외하고, 제조예 34의 단계 2와 동일하게 실험하여 목적화합물 200 mg (수율: 29%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z : 297.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz. CDCl3) δ 7.24 (s, 1H), 4.61-4.57 (m, 1H), 4.48-4.40 (m, 1H), 4.19-4.15 (m, 1H), 3.40-3.30 (m, 1H), 3.13-3.04 (m, 1H), 2.93 (s, 2H), 2.22-2.06 (m, 4H).
<제조예 51: 중간체 51(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)아제티딘-3-일)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000065
단계 1: 1-(1-(메틸술포닐)아제티딘-3-일)-4-니트로-1H-피라졸의 합성
1-(아제티딘-3-일)-4-니트로-1H-피라졸 하이드로클로라이드(500 mg, 2.44 mmol, 중간체 30)를 DCM(12 ml)에 넣었다. TEA(1.4 mL, 3.0 eq.) 및 메탄술포닐 클로라이드(0.266 mL, 1.2 eq.)를 적가한 후, 실온에서 1시간 동안 교반했다. 반응이 종결되면 물과 DCM으로 추출한 후, 농축하여 노란색 목적화합물 500 mg (수율: 83%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 247.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.31 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 5.16-5.12 (m, 1H), 4.48-4.41 (m, 4H), 3.03 (s, 3H).
단계 2: 중간체 51의 합성
상기 제조예 34의 단계 2에서, 4-니트로-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸 대신에 21-(1-(메틸술포닐)아제티딘-3-일)-4-니트로-1H-피라졸(500 mg, 2.03 mmol)을 사용한 것을 제외하고, 제조예 34의 단계 2와 동일하게 실험하여 목적화합물 240 mg (수율: 47%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 250.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.33 (s, 1H), 5.16-5.11 (m, 1H), 4.46-4.30 (m, 4H), 3.02 (s, 3H).
<제조예 52: 중간체 52((3-(4-아미노-3-클로로-1H-피라졸-1-일)아제티딘-1-일)(시클로프로필)메탄온)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000066
상기 제조예 51에서, 메탄술포닐 클로라이드 대신에 시클로프로판카보닐 클로라이드를 사용한 것을 제외하고, 제조예 51과 동일하게 실험하여 목적화합물 0.21 g (수율: 41%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z : 241.2 [M+H]+; 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.31 (s, 1H), 4.78-4.66 (m, 4H), 3.21-3.06 (m, 1H), 1.00-0.76 (m, 4H).
<제조예 53: 중간체 53(4-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)아제판 하이드로클로라이드)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000067
단계 1: tert-부틸-4-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)아제판-1-카복실레이트의 합성
4-니트로-1H-피라졸(0.946 g, 8.37 mmol)을 DMF(9 ml)에 용해시켰다. NaH(0.548 g, 1.5 eq.)을 넣고, 0℃에서 30분 동안 교반했다. tert-부틸-4-(메틸술포닐옥시)아제판-1-카복실레이트(2.7 g, 1.1 eq.)를 넣고, 150℃로 승온하여 12시간 동안 교반했다. 반응이 종결되면 H2O와 DCM으로 세 번 추출했다. MgSO4로 건조 및 농축시킨 후, 컬럼크로마토그래피하여(MeOH:MC=1:40) 노란색 목적화합물 2.2 g (수율: 85%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 311.3 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.15 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 4.33-4.26 (m, 1H), 3.78-3.33 (m, 4H), 2.29-1.72 (m, 6H), 1.49 (s, 9H).
단계 2: 중간체 53의 합성
tert-부틸-4-(4-니트로-1H-피라졸-1-일)아제판-1-카복실레이트(2.2 g, 7.09 mmol)를 DCM(14 ml)에 넣었다. HCl(4M in dioxane, 5.32 ml, 3.0 eq.)를 넣고, 12시간 동안 교반했다. 반응이 종결되면 여과하여 흰색 목적화합물 1.4 g (수율: 80%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 211.2 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, MeOD) δ 11.05 (s, 1H), 10.56 (s, 1H), 7.13-7.08 (m, 1H), 5.77-5.71 (m, 5H), 4.88-4.35 (m, 6H).
<제조예 54: 중간체 54((R)-4-니트로-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸 하이드로클로라이드)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000068
상기 제조예 53에서, tert-부틸-4-(메틸술포닐옥시)아제판-1-카복실레이트 대신에 (R)-tert-부틸-3-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트를 사용한 것을 제외하고, 제조예 53과 동일하게 실험하여 목적화합물 3.5 g (수율: 90%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 183.3 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, MeOD) δ 8.73 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 5.39-5.32 (m, 1H), 3.80-3.53 (m, 4H), 2.69-2.47 (m, 2H).
<제조예 55: 중간체 55((S)-4-니트로-1-(피롤리딘-3-일)-1H-피라졸 하이드로클로라이드)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000069
상기 제조예 53에서, tert-부틸-4-(메틸술포닐옥시)아제판-1-카복실레이트 대신에 (S)-tert-부틸-3-하이드록시피롤리딘-1-카복실레이트를 사용한 것을 제외하고, 제조예 53과 동일하게 실험하여 목적화합물 3.0 g (수율: 77.4%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 183.3 [M+H]+
<제조예 56: 중간체 56(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)아제판-4-일)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000070
상기 제조예 53에서, 4-니트로-1H-피라졸 및 tert-부틸-4-(메틸술포닐옥시)아제판-1-카복실레이트 대신에 3-클로로-4-니트로-1H-피라졸 및 tert-부틸-4-(메틸술포닐)아제판-1-카복실레이트를 사용한 것을 제외하고, 제조예 53과 동일하게 실험하여 목적화합물 0.05 g (수율: 11%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 292.9 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.28 (s, 1H), 4.48-4.44 (m, 1H), 3.70-3.50 (m, 3H), 3.26-3.18 (m, 1H), 2.86 (s, 3H), 3.31-1.99 (m, 6H).
<제조예 57: 중간체 57((4-(4-아미노-3-클로로-1H-피라졸-1-일)아제판-1-일)(시클로프로필)메탄온)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000071
상기 제조예 53에서, 4-니트로-1H-피라졸 및 tert-부틸-4-(메틸술포닐옥시)아제판-1-카복실레이트 대신에 3-클로로-4-니트로-1H-피라졸 및 tert-부틸-4-(시클로프로판카보닐)아제판-1-카복실레이트를 사용한 것을 제외하고, 제조예 53과 동일하게 실험하여 목적화합물 0.22 g (수율: 53%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 282.9 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.21 (s, 1H), 4.38-4.26 (m, 1H), 3.92-3.56 (m, 4H), 2.92 (s, 2H), 2.20-1.70 (m, 7H), 1.08-0.76 (m, 4H).
<제조예 58: 중간체 58((R)-3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000072
상기 제조예 39에서, 테트라하이드로-2H-피란-4-일 메탄술포네이트 대신에 (R)-1-(메틸술포닐)피롤리딘-3-일-메탄술포네이트를 사용한 것을 제외하고, 제조예 39와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.22 g (수율: 36%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 264.9 [M+H]+; 1H NMR (300 MHz, MeOD) δ 7.25 (s, 1H), 5.11-5.07 (m, 1H), 4.82-3.50 (m, 4H), 2.90 (s, 3H), 2.45-2.35 (m, 2H).
<제조예 59: 중간체 59((S)-3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000073
상기 제조예 39에서, 테트라하이드로-2H-피란-4-일 메탄술포네이트 대신에 (S)-1-(메틸술포닐)피롤리딘-3-일-메탄술포네이트를 사용한 것을 제외하고, 제조예 39와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.2 g (수율: 32.8%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 264.9 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.25 (s, 1H), 5.11 - 5.07 (m, 1H), 3.81 - 3.52 (m, 4H), 2.90(s, 3H), 2.39 - 2.36 (m, 2H).
<제조예 60: 중간체 60((R)-(3-(4-아미노-3-클로로-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-일)(시클로펜틸)메탄온)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000074
상기 제조예 39에서, 테트라하이드로-2H-피란-4-일 메탄술포네이트 대신에 (R)-1-(시클로펜탄카보닐)피롤리딘-3-일-메탄술포네이트를 사용한 것을 제외하고, 제조예 39와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.28 g (수율: 46%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 283.0 [M+H]+
<제조예 61: 중간체 61((S)-(3-(4-아미노-3-클로로-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-일)(시클로펜틸)메탄온)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000075
상기 제조예 39에서, 테트라하이드로-2H-피란-4-일 메탄술포네이트 대신에 (S)-1-(시클로펜탄카보닐)피롤리딘-3-일-메탄술포네이트를 사용한 것을 제외하고, 제조예 39와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.27 g (수율: 44.2%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 283.0 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.23 (s, 1H), 5.14 - 5.09 (m, 1H), 3.85 - 3.53 (m, 4H), 3.02 - 2.92 (m, 1H), 2.90(s, 3H), 2.45 - 2.31 (m, 2H), 1.92 - 1.61 (m, 8H).
<제조예 62: 중간체 62((4-(4-아미노-3-클로로-5-메틸-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(시클로프로필)메탄온)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000076
단계 1: tert-부틸 4-(3-클로로-5-메틸-4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카복실레이트의 합성
3-클로로-5-메틸-4-니트로-1H-피라졸(1.84 g, 11.44 mmol, 중간체 33)을 DMF(15 mL)에 용해시킨 후, ice-bath에서 10분 동안 교반했다. NaH(0.99 g, 22.89 mmol)을 첨가하고 30분 동안 교반했다. tert-부틸-4-(메틸술포닐옥시)피페리딘-1-카복실레이트(4.79 g, 17.16 mmol)를 넣고, 상온에서 12시간 교반했다. 반응이 종결된 후, 용액을 감압증발시키고 에틸아세테이트로 추출했다. MgSO4로 건조한 후 감압증발시켰다. 여액을 이소프로필에테르로 재결정하여 목적화합물 1.2 g (수율: 30%)을 얻었다.
단계 2: 4-(3-클로로-5-메틸-4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘의 합성
tert-부틸 4-(3-클로로-5-메틸-4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카복실레이트(0.90 g, 2.61 mmol)를 DCM(Dichloromethane, 30 mL)에 넣고 TFA(Trifluoroacetic acid, 2.97 g, 26.10 mmol)를 첨가한 후, 환류조건에서 12시간 교반했다. 반응이 종결되면, 용액을 감압증발시켰다. 잔류물에 이소프로필에테르를 넣고, 교반시켜 목적화합물 0.92 g (수율: 98%)을 얻었다.
단계 3: (4-(3-클로로-5-메틸-4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(시클로프로필)메탄온의 합성
4-(3-클로로-5-메틸-4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘 (0.50 g, 1.39 mmol)을 DCM(30 mL)에 넣고, TEA(0.42 g, 4.18 mmol) 및 시클로프로판카보닐 클로라이드(0.21 g, 2.09 mmol)을 첨가한 후, 상온에서 1시간 동안 교반했다. 반응이 종결된 후, 물을 가하여 추출하고 MgSO4로 건조시켰다. 용액을 감압증발시킨 후 컬럼크로마토그래피하여(DCM:MeOH=10:1) 목적화합물 0.2 g (수율: 46%)을 얻었다.
단계 4: 중간체 62의 합성
(4-(3-클로로-5-메틸-4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(시클로프로필)메탄온(0.2 g, 0.63 mmol)을 에탄올 및 물(20 mL, 3:1 v/v)에 넣고, NH4Cl(0.034 g, 0.63 mmol)과 Fe (0.35 g, 6.39 mol)을 가한 후, 70℃에서 1시간 동안 교반했다. 반응이 종결되면, 여과한 후 용액을 감압증발 시켰다. 여액을 에틸아세테이트로 다시 추출한 다음 MgSO4로 건조한 후, 용액을 감압증발시켜 액상의 목적화합물 0.14 g (수율: 90%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 283.1, 285.0 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.73-4.60 (m, 1H, 4.48-4.41 (m, 1H), 4.17-4.08 (m, 1H), 3.24 (s, 1H), 2.68 (s, 2H), 2.23 (s, 3H), 1.93-1.84 (m, 2H), 1.81-1.73 (m, 1H), 1.00 (s, 2H), 0.80-0.76 (m, 2H).
<제조예 63: 중간체 63(3,5-디메틸-1-(1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000077
단계 1: tert-부틸 4-(3,5-디메틸-4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카복실레이트의 합성
3,5-디메틸-4-니트로-1H-피라졸 (0.46 g, 3.25 mmol, 중간체 32)을 DMF(4 mL)에 용해시켰다. tert-부틸 4-(메틸술포닐옥시)피페리딘-1-카복실레이트(1 g, 3.57 mmol) 및 Cs2CO3(2.12 g, 6.52 mmol)을 첨가하고, 80℃에서 15시간 동안 교반했다. 반응이 종결되면, 에틸아세테이트로 추출하고 MgSO4로 건조시켰다. 용액을 감압증발시킨 후 잔류물에 에틸아세테이드/헵탄(1:3)을 가하여 목적화합물 0.48 g (수율: 46%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 325.2 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.38-4.25 (m, 2H), 4.22-4.11 (m, 1H), 2.93-2.83 (m, 2H), 2.67 (s, 3H), 2.52 (s, 3H), 2.24-2.12 (m, 2H), 1.86-1.81 (m, 2H), 1.49 (s, 9H).
단계 2: 4-(3,5-디메틸-4-니트로-1H-피라졸-1-일)피페리딘 염산의 합성
상기 제조예 25의 단계 3 반응과 동일하게 실험하여 목적화합물 0.39 g (수율: 99%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 225.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.83 (br s, 2H), 4.68-4.59 (m, 1H), 3.44-3.37 (m, 2H), 3.10-3.00 (m, 2H), 2.62 (s, 3H), 2.41 (s, 3H), 2.27-2.12 (m, 2H), 2.02-1.98 (m, 2H).
단계 3: 4-(3,5-디메틸-4-니트로-1H-피라졸-1-일)-1-(메틸술포닐)피페리딘의 합성
상기 제조예 42의 단계 1에서, 시클로프로판 카보닐 클로라이드 대신에 메탄술포닐 클로라이드를 사용한 것을 제외하고 동일하게 실험하여 목적화합물 0.39 g (수율: 97%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 302.35 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.21-4.14 (m, 1H), 4.01-3.96 (m, 2H), 3.00-2.91 (m, 2H), 2.88 (s, 3H), 2.66 (s, 3H), 2.51 (s, 3H), 2.39-2.30 (m, 4H), 2.02-1.97 (m, 2H).
단계 4: 중간체 63의 합성
상기 제조예 17의 단계 3에서, 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸 대신에 4-(3,5-디메틸-4-니트로-1H-피라졸-1-일)-1-(메틸술포닐)피페리딘을 사용한 것을 제외하고, 동일하게 실험하여 목적화합물 0.21 g (수율: 67%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 273.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.05-3.89 (m, 3H), 2.96-2.91 (m, 2H), 2.86 (s, 3H), 2.30-2.24 (m, 2H), 2.17 (s, 6H), 1.99-1.94 (m, 2H).
<제조예 64: 중간체 64(3-클로로-1-(2-메톡시에틸)-1H-피라졸-4-아민)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000078
상기 제조예 34에서, 2-아이오도프로판 대신에 2-브로모메틸 메틸 에테르를 사용한 것을 제외하고, 제조예 34와 동일하게 실험하여 목적화합물 0.46 g (수율: 59%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 176.2, 178.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.25 (s, 1H), 4.23 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 3.74 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 3.35 (s, 3H), 2.85 (s, 2H).
<제조예 65: 중간체 65(1-(4-(4-아미노-3-클로로-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)에탄온)의 합성>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000079
상기 제조예 37에서, 아이오도메탄 대신에 아세틸 클로라이드를 사용한 것을 제외하고, 제조예 37과 동일하게 실험하여 목적화합물 0.22 g (수율: 29%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 243.2, 245.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.24 (s, 1H), 4.77-4.74 (m, 1H), 4.39-4.30 (m, 1H), 4.01-3.97 (m, 1H), 3.28-3.19 (m, 1H), 2.92 (br s, 2H), 2.81-2.72 (m, 1H), 2.14 (s, 3H), 2.02-1.95 (m, 4H).
<실시예 1: 화합물 1의 제조>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000080
중간체 6(2-클로로-7-메틸-5-(트리플루오로메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘, 45 mg, 0.29 mmol)과 중간체 17(5-클로로-1-메틸-1H-피라졸-4-아민 하이드로클로라이드, 68.7 mg, 0.29 mmol)를 EtOH(1 ml)에 용해시킨 후, conc.HCl 한 방울을 넣었다. 3시간 동안 환류시키고 실온으로 온도를 낮추어 고체를 석출시켰다. 에테르로 여과하여 목적화합물 7.9 mg (수율: 18%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 331.0, 332.9 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.98 (br s, 1H), 8.71 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.68 (s, 3H).
<실시예 2: 화합물 2의 제조>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000081
방법 1:
중간체 1(2,5-디클로로-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘, 65 mg, 0.32 mmol) 과 중간체 11(1-이소프로필-3-메톡시-1H-피라졸-4-아민, 50 mg, 0.32 mmol)을 n-BuOH(1 ml)에 넣었다. 트리플루오로아세트산(TFA, 24.6 ul, 0.32 mmol)을 넣고, 120℃에서 20시간 동안 환류시켰다. 실온으로 온도를 낮추고, NaHCO3로 중화시킨 뒤 DCM으로 추출했다. MgSO4로 건조한 후, 감압 여과하여 농축했다. 컬럼크로마토그래피하여 목적화합물 46.1 mg (수율: 44%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 321.0, 323.1 [M+H]+;
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.60 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 4.33 (p, J = 6.6 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.71 (s, 3H), 1.51 (s, 3H), 1.48 (s, 3H).
방법 2:
Pd(OAc)2(11.11 mg, 0.049 mmol)와 잔트포스(Xantphose, 34.3 mg, 0.059 mmol)을 디옥산(dioxane, 2 ml)에 용해시킨 후, 30분 동안 실온에서 교반했다. 중간체 11(1-이소프로필-3-메톡시-1H-피라졸-4-아민, 76.8 mg, 0.49 mmol)을 넣고, 미리 100℃로 가열시킨 oil bath에서 5분간 교반한 후, 실온으로 온도를 낮췄다. 중간체 1(2,5-디클로로-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘, 100 mg, 0.49 mmol)과 Cs2CO3 (0.45 g, 1.38 mmol)을 넣고, 100℃에서 5시간 동안 교반한 후 실온으로 온도를 낮췄다. H2O을 넣어 반응을 종결하고, 여과한 다음, DCM과 H2O로 추출했다. MgSO4로 건조시킨 후, 여과하여 감압농축했다. 컬럼크로마토그래피하여 목적화합물 12.7 mg (수율: 8%)을 얻었다.
<실시예 3 내지 43: 화합물 3 내지 43의 제조>
각각의 중간체의 종류를 하기 표 2에 기재된 바와 같이 변화시킨 것을 제외하고는, 상기 실시예 1 및 2와 유사한 절차와 방법으로 화합물 3 내지 43을 제조하였으며, 각 화합물의 물리화학적 특성은 하기 표 3에 나타내었다.
Figure PCTKR2018015184-appb-T000002
Figure PCTKR2018015184-appb-I000082
Figure PCTKR2018015184-appb-T000003
Figure PCTKR2018015184-appb-I000083
Figure PCTKR2018015184-appb-I000084
Figure PCTKR2018015184-appb-I000085
Figure PCTKR2018015184-appb-I000086
Figure PCTKR2018015184-appb-I000087
Figure PCTKR2018015184-appb-I000088
Figure PCTKR2018015184-appb-I000089
Figure PCTKR2018015184-appb-I000090
Figure PCTKR2018015184-appb-I000091
Figure PCTKR2018015184-appb-I000092
<실시예 44: 화합물 44의 제조>
Figure PCTKR2018015184-appb-I000093
방법 1:
중간체 8(3-클로로-1-에틸-6-(메틸티오)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘, 82.4 mg, 0.34 mmol)을 DMF(1 ml)에 용해시켰다. mCPBA (156.5 mg, 0.90 mmol)을 넣고, 실온에서 1시간 동안 교반했다. 중간체 29(3-클로로-1-(4-플루오로페닐)-1H-피라졸-4-아민, 76.2 mg, 0.34 mmol)을 넣고, 120℃에서 16시간 동안 교반한 후, 실온으로 온도를 낮췄다. 반응이 종결된 후, Sat. NaHCO3와 에틸아세테이트로 추출하고, MgSO4로 건조한 후, 여과하여 감압농축했다. MC:MeOH=40:1로 컬럼크로마토그래피하여 목적화합물 21 mg (수율: 13%)을 얻었다.
MS (ESI) m/z 392.0, 394.0 [M+H]+
방법 2:
중간체 8(3-클로로-1-에틸-6-(메틸술포닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘, 100 mg, 0.38 mmol), 중간체 29(3-클로로-1-(4-플루오로페닐)-1H-피라졸-4-아민, 104.5 mg, 0.49 mmol) 및 p-톨루엔술폰산(PTSA, 72.2 mg, 0.38 mmol)를 감압플라스크에 넣었다. NMP(1 ml)을 넣고, 110℃에서 16시간 동안 교반했다. 실온으로 온도를 낮춘 후, sat. NaHCO3로 중화시켜 갈색고체를 석출했다. 여과하여 얻어진 고체를 에틸아세테이트로 컬럼크로마토그래피하여 목적화합물 76.7mg (수율: 51%)을 얻었다.
<실시예 45 내지 62: 화합물 45 내지 62의 제조>
각각의 중간체의 종류를 하기 표 4에 기재된 바와 같이 변화시킨 것을 제외하고는, 상기 실시예 44와 유사한 절차와 방법으로 화합물 45 내지 62을 제조하였으며, 각 화합물의 물리화학적 특성은 하기 표 5에 나타내었다.
Figure PCTKR2018015184-appb-T000004
Figure PCTKR2018015184-appb-T000005
Figure PCTKR2018015184-appb-I000094
Figure PCTKR2018015184-appb-I000095
Figure PCTKR2018015184-appb-I000096
Figure PCTKR2018015184-appb-I000097
<평가예: LRRK2 억제효과>
화합물 1 내지 62에 대한 시험관내(in vitro) LRRK2(Leucine Rich Repeat Kinase 2)의 억제효과를 측정하였다. 결과분석에 있어서는 시험관내 활성의 정량적 비교가 가능하도록 IC50 값을 산출하였다.
시험방법
화합물을 100% DMSO에 10 mM로 용해시킨 후, LRRK2 활성측정용액(50 mM HEPES(4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid) pH 7.5, 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA(1,2-bis(o-aminophenoxy)ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid), 2 mM DTT(Dithiothreitol) 및 0.01% Tween-20(Aldrich사))으로 1 μM에서 10 μM까지 계열희석하였다. 계열희석된 화합물 6 ㎕가 포함된 흑색 U-바닥 96-웰 마이크로타이터 플레이트에 정제된 LRRK2 (CARNA BIOSCIENCES)를 첨가한 후, 상온에서 30분 동안 인큐베이션시켰다. 키나제 반응을 위해 ATP와 기질용액 특이적 유라이트표지-폴리 펩타이드(UlightTM-poly TK, PerkinElimer)를 첨가하였다. 반응은 실온에서 1시간 동안 수행하였고, EDTA를 포함하는 랜스(LANCE, 상표명) 검출용액으로 검침하였다. 유로피움-표지 항체(LRRK2 특이적 PT66)를 포함하는 랜스 검출 용액을 첨가한 후, 상온에서 50분 동안 인큐베이션하여 키나제 실험을 종결하였다. 인산화 기질은 665 nm 방출 측정으로 검출하였다. IC50 값은 키나제 억제제가 없는 경우를 기준으로 프리즘 프로그램(PrismTM software)을 이용한 비선형 회귀분석으로 계산하였고, 그 결과를 하기 표 6에 나타내었다.
비교예로서, LRRK2 활성 억제효과를 갖는 것으로 알려진 화합물 LRR2-IN-1을 사용하였다.
화합물 번호 IC50 (nM) 화합물 번호 IC50 (nM)
LRRK2-IN-1 8.20 43 5.83
25 6.67 46 7.91
28 6.50 47 6.48
30 2.02 51 4.75
31 4.66 52 5.60
32 2.50 55 4.49
33 6.07 57 7.22
35 6.66 58 5.92
42 5.11 59 3.94
상기 표 6에서 보는 바와 같이, 본 발명의 화합물은 LRRK2 활성에 대한 억제효과가 nM 수준으로서, 종래에 사용되던 LRRK2-IN-1보다 우수한 LRRK2 활성 억제 특성을 가짐을 알 수 있다. 구체적으로, 상기 화합물 25, 28, 30, 31, 32, 33, 35, 42, 43, 46, 47, 51, 52, 55, 57, 58 및 59에 대해서는 6종의 티로신 키나제 판넬 시험이 수행되었으며, 그 결과 이들 모두 높은 LRRK2 억제 활성을 나타내어, LRRK2 억제활성의 선택성이 우수함을 확인했다.

Claims (13)

  1. 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 및 이의 약학적으로 허용되는 염, 수화물, 용매화물, 전구약물 및 이성질체로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물:
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2018015184-appb-I000098
    상기 식에서,
    X는 CH 또는 N이고;
    R1은 수소, 할로겐, 또는 하나 이상의 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않은 C1-4 알킬 또는 C1-4 알콕시이며;
    R2는 C1-6 알킬, C1-3 알콕시 C1-6 알킬, C3-6 시클로알킬 C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C3-6 시클로알킬, 4 내지 7원의 헤테로시클로알킬, 또는 하나 이상의 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않은 C6-10 아릴이고;
    상기 4 내지 7원의 헤테로시클로알킬은 C1-4 알킬, 하나 이상의 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않은 C1-4 알킬카보닐, C3-6 시클로알킬카보닐, C1-4 알킬로 치환되거나 치환되지 않은 4 내지 7원의 헤테로시클로알킬카보닐, C1-4 알킬설포닐, C3-6 시클로알킬설포닐, 또는 옥세타닐로 치환될 수 있고,
    이때, 상기 헤테로시클로알킬은 N, O 및 S 중에서 선택된 하나 이상의 원자를 포함하며,
    R3은 수소, 할로겐, 또는 C1-4 알킬이며;
    R4는 하나 이상의 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않은 C1-6 알킬 또는 C3-6 시클로알킬;
    R5는 할로겐, 또는 하나 이상의 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않은 C1-4 알킬이다.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 R1은 수소, 할로겐, 트리플루오로 C1-4 알킬, C1-4 알킬, 또는 C1-4 알콕시인, 화합물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 R4는 트리플루오로 C1-4 알킬, C1-4 알킬, 또는 C3-6 시클로알킬인, 화합물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 R5는 할로겐, 트리플루오로 C1-4 알킬, 또는 C1-4 알킬인, 화합물.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 R2는 C1-4 알킬, C1-3 알콕시 C1-4 알킬, C3-6 시클로알킬 C1-4 알킬, C1-4 알콕시, C3-6 시클로알킬, 4 내지 7원의 헤테로시클로알킬, 또는 F 또는 Cl로 치환된 C6-10 아릴이고;
    상기 4 내지 7원의 헤테로시클로알킬은 C1-4 알킬, 트리플루오로 C1-4 알킬카보닐, C1-4 알킬카보닐, C3-6 시클로알킬카보닐, C1-4 알킬로 치환되거나 치환되지 않은 4 내지 7원의 헤테로시클로알킬카보닐, C1-4 알킬설포닐, C3-6 시클로알킬설포닐, 또는 옥세타닐로 치환될 수 있고,
    이때, 상기 헤테로시클로알킬은 N 및 O 중에서 선택된 하나 이상의 원자를 포함하는, 화합물.
  6. 제5항에 있어서,
    상기 R2는 하기 치환기들 중에서 선택되는, 화합물:
    Figure PCTKR2018015184-appb-I000099
    상기 치환기에 있어서,
    Figure PCTKR2018015184-appb-I000100
    ,
    Figure PCTKR2018015184-appb-I000101
    , 및
    Figure PCTKR2018015184-appb-I000102
    는 연결되는 부위를 의미한다.
  7. 제1항에 있어서,
    상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화합물들로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물:
    1) N-(5-클로로-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-7-메틸-5-(트리플루오로메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    2) 5-클로로로-N-(1-이소프로필-3-메톡시-1H-피라졸-4-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    3) 5-클로로-N-(3-클로로-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    4) 5-클로로-7-메틸-N-(1-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    5) 5-클로로-N-(5-클로로-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    6) 5-클로로-N-(5-클로로-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    7) 5-클로로-N-(3-클로로-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-7-이소프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    8) 5-클로로-N-(3-클로로-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    9) 5-클로로-N-(1-이소프로필-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    10) 5-클로로-N-(1-(2-메톡시에틸)-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    11) N-(1-부틸-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-4-일)-5-클로로-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    12) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(2-메톡시에틸)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    13) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(시클로프로필메틸)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    14) 5-클로로-N-(3-클로로-1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    15) 5-클로로-N-(3-클로로-1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    16) 5-클로로-N-(5-클로로-1-(옥세탄-3-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    17) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(1-메틸피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    18) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    19) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(2,6-di메틸테트라하이드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    20) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(1-에틸피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    21) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(4-플루오로페닐)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    22) 5-클로로-N-(5-클로로-1-(4-클로로페닐)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    23) 1-(4-(5-클로로-4-(5-클로로-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)에탄온,
    24) (4-(3-클로로-4-(5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(시클로프로필)메탄온,
    25) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    26) 1-(4-(3-클로로-4-(5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)-2-메틸프로판-1-온,
    27) 5-클로로-N-(5-클로로-1-(1-(옥세탄-3-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    28) 5-클로로-N-(5-클로로-1-(1-(옥세탄-3-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    29) 5-클로로-N-(5-클로로-1-(1-(옥세탄-3-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    30) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-시클로프로필-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    31) (4-(3-클로로-4-(5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(모르폴리노)메탄온,
    32) (4-(3-클로로-4-(5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(4-메틸피페라진-1-일)메탄온,
    33) 1-(4-(3-클로로-4-(5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)-2,2-디메틸프로판-1-온,
    34) 5-클로로-N-(3,5-디메틸-1-(1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    35) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(시클로프로필술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    36) (R)-5-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    37) (S)-5-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)피롤리딘-3-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    38) (R)-(3-(3-클로로-4-(5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-일)(시클로펜틸)메탄온,
    39) (S)-(3-(3-클로로-4-(5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피롤리딘-1-일)(시클로펜틸)메탄온,
    40) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)azetidin-3-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    41) (3-(3-클로로-4-(5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-1-일)(시클로프로필)메탄온,
    42) 5-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)아제판-4-일)-1H-피라졸-4-일)-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민,
    43) (4-(3-클로로-4-(5-클로로-7-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-1H-피라졸-1-일)아제판-1-일)(시클로프로필)메탄온,
    44) 3-클로로-N-(3-클로로-1-(4-플루오로페닐)-1H-피라졸-4-일)-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민,
    45) 3-클로로-N-(5-클로로-1-(1-(옥세탄-3-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민,
    46) 3-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-1-시클로프로필-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민,
    47) 3-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(시클로프로필술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민,
    48) 1-(4-(3-클로로-4-(3-클로로-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)-2,2,2-트리플루오로에탄온,
    49) 3-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-1-(2,2,2-트리플루오로에틸)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민,
    50) 3-클로로-N-(5-클로로-1-(1-(옥세탄-3-일)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-1-(2,2,2-트리플루오로에틸)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민,
    51) 3-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)아제판-4-일)-1H-피라졸-4-일)-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민,
    52) (4-(3-클로로-4-(3-클로로-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-1H-피라졸-1-일)아제판-1-일)(시클로프로필)메탄온,
    53) 1-(4-(3-클로로-4-(3-클로로-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)-2,2-디메틸프로판-1-온,
    54) (4-(3-클로로-4-(3-클로로-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(모르폴리노)메탄온,
    55) 3-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민,
    56) (4-(3-클로로-4-(3-클로로-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-5-메틸-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(시클로프로필)메탄온,
    57) (4-(3-클로로-4-(3-클로로-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)(시클로프로필)메탄온,
    58) 1-(4-(3-클로로-4-(3-클로로-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-일)에탄온,
    59) 3-클로로-N-(3-클로로-1-(1-(에틸술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민,
    60) (3-(3-클로로-4-(3-클로로-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-1-일)(시클로프로필)메탄온,
    61) 3-클로로-N-(5-클로로-1-(1-(옥세탄-3-일)아제티딘-3-일)-1H-피라졸-4-일)-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민,
    62) 3-클로로-N-(5-클로로-1-(1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)-1-에틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민.
  8. 제1항에 있어서,
    상기 약학적으로 허용되는 염은 염산염, 브롬화수소산염, 요오드화수소산염, 황산염, 질산염, 메탄술폰산염, 에탄술폰산염, 벤젠술폰산염, 및 톨루엔술폰산염으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항의 화합물을 유효성분으로 포함하는, 퇴행성 뇌질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  10. 제9항에 있어서,
    상기 퇴행성 뇌질환이 파킨슨병인, 약학적 조성물.
  11. 제9항에 있어서,
    상기 약학적 조성물이 선택적 LRRK2(Leucine Rich Repeat Kinase 2) 억제 활성을 나타내는, 약학적 조성물.
  12. 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 의약(medicament)의 제조를 위한 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항의 화합물의 용도.
  13. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항의 화합물을 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 퇴행성 뇌질환의 치료 방법.
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