WO2014111037A1 - 五元并六元杂环化合物、其制备方法、药物组合物和应用 - Google Patents

五元并六元杂环化合物、其制备方法、药物组合物和应用 Download PDF

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mmol
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fluorenyl
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许祖盛
张农
孙庆瑞
汪廷汉
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上海昀怡健康管理咨询有限公司
凯惠科技发展(上海)有限公司
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    • C07D491/048—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring the oxygen-containing ring being five-membered

Definitions

  • the present invention relates to a five-membered six-membered heterocyclic compound, a process for its preparation, a pharmaceutical composition and use. Background technique
  • JAK-STAT (Janus kinase - signal transducer and activator of transcription) is a signal transduction pathway stimulated by cytokines in recent years. It is involved in many important biology such as cell proliferation, differentiation, apoptosis and immune regulation. Process (Aaronson, DS et al. Science 2002, 296, 1653-1655; O'Shea, JJ et al. Nat. Rev. Drug Discovery 2004, 3, 555-564). Compared to other signaling pathways, this signaling pathway is relatively simple. It consists of three components, the tyrosine kinase-related receptor, the tyrosine kinase JAK, and the transcription factor STAT.
  • Cytokines such as interferon IFN and interleukin IL
  • growth factors such as epidermal growth factor EGF, platelet-derived factor PDGF, etc.
  • EGF epidermal growth factor
  • PDGF platelet-derived factor
  • a common feature of these receptors is that the receptor itself does not have kinase activity, but the intracellular domain has a binding site for the tyrosine kinase JAK. After the receptor binds to the ligand, the tyrosine residue of each target protein is acidified by the activation of JAK in combination with it to achieve signal translocation from extracellular to intracellular.
  • JAK family is a non-receptor tyrosine protein kinase (PTK), and four JAK family kinases have been identified to date, including JAKl, JAK2. JAK3 and TYK2. They are structurally composed of seven JAK homology domains (JH), wherein the JH1 domain is the kinase domain, the JH2 domain is the "false” kinase domain, and JH6 and JH7 are receptor binding regions.
  • JH JAK homology domains
  • STAT plays a key role in signal transduction and transcriptional activation.
  • STAT is a DNA-binding protein and an important JAK substrate with seven members, STAT1, STAT2, STAT3, STAT4, STAT5a, STAT5b, and STAT6.
  • the STAT protein can be structurally divided into the following functional segments: N-terminal domain, helical domain, DNA binding domain, junction region, SH3 domain, SH2 domain, and C-terminal transcriptional activation region. Among them, the most conservative and functionally most important segment in the sequence is SH2.
  • the domain which has the identical core sequence "GTFLLRFSS," as the SH2 domain of the tyrosine kinase Src.
  • the transfer process of the JAK-STAT signaling pathway is relatively simple.
  • the signal transduction process is as follows: Binding of the cytokine to the corresponding receptor causes dimerization of the receptor molecule, which allows the JAK kinases coupled to the receptor to be close to each other and activated by interactive tyrosine acidification. After JAK activation, the tyrosine residue on the catalytic receptor is modified by pity acidification, and then these acidified tyrosine sites form a "docking site" with the surrounding amino acid sequence, and contain the SH2 domain. STAT protein was recruited to this "parking site”.
  • the kinase JAK catalyzes the chelation of the STAT protein on the receptor, and the activated STAT protein enters the nucleus as a dimer to bind to the target gene and regulate gene transcription (Ihie, JJ Nature 1995, 377, 591 -594).
  • a JAK kinase can be involved in the signal transduction of many cytokines.
  • a cytokine signaling pathway can also activate multiple JAK kinases, but cytokines have certain choices for activated STAT molecules. Sex. For example, IL-4 activates STAT6, while IL-12 specifically activates STAT4.
  • the JAK-STAT pathway is widely present in various tissues and cells in the body, especially for the differentiation, proliferation and anti-infection of lymphocyte lines, and is involved in the interaction and signal transduction of various inflammatory factors (Kiesseleva T. et al /. Ge «e, 2002, 285, 1-24).
  • the abnormal activation of this pathway is closely related to many diseases. Finding and screening JAK inhibitors can help to further study the regulation mechanism of JAK-STAT, and provide new drugs and means for prevention and treatment of related diseases.
  • interleukin IL-6, IL-15, interferon (IFN) and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) are significantly increased in the development of the disease.
  • the process plays an important role, and all of the above cytokines act through the JAK-STAT signal transduction pathway. Therefore, targeted blocking of the JAK-STAT pathway can achieve the goal of improving the pathophysiological process of rheumatoid arthritis (Joel M.K. et al. Arthritis Rheum. 2009, 60, 1859-1905).
  • STAT3 is the focus of convergence of multiple oncogenic tyrosine kinase signaling pathways such as EGFR, IL-6/JAK, and Src.
  • the JAK-STAT pathway inhibitor belongs to the PTK inhibitor, which is a member of the oncogene protein and proto-oncoprotein family and plays an important role in normal and abnormal proliferation of cells. The occurrence and growth of tumors are inseparable
  • JAK-STAT pathway inhibitors inhibit tumor growth by antagonizing PTK and have significant anti-tumor effects (Mora L.B. et al. /. Cancer Res. 2002, 62(22), 6659-6666).
  • Inflammatory bowel disease is closely related to autoimmunity. JAK-STAT pathway is involved in the signal transduction and regulation of a variety of important proinflammatory-anti-inflammatory cytokines, especially IFN-Y, IL-1, IL-6, IL. -10, IL-4 is closely related. Inflammatory mediators and cytokines can also activate multiple signaling pathways, which directly or indirectly mediate the expression of inflammatory mediators, leading to damage to the intestinal mucosa, but many of the complex signaling mechanisms remain to be elucidated.
  • blocking the over-activated JAK-STAT signaling pathway can inhibit the expression of numerous inflammatory cytokines from the upstream, thereby achieving the goal of preventing and treating inflammatory bowel disease (Riley, JK et al. /. Biol. Chem. 1999, 274, 16513-16521).
  • the technical problem to be solved by the present invention is to provide a five-membered and six-membered heterocyclic compound of the formula I, which is completely different from the prior art, a pharmaceutically acceptable salt, a metabolite thereof, a metabolic precursor or Its prodrug, the five-membered and six-membered heterocyclic compound as shown in Formula I, is a very effective Janus Kinase (JAK) inhibitor that can be used to treat or prevent cancer, infection, inflammation and itself.
  • JK Janus Kinase
  • the present invention provides a five-membered and six-membered heterocyclic compound as shown in Formula I, which is pharmaceutically acceptable Salt, metabolites, before metabolism,
  • V is N or C
  • W is N or CR 3 ;
  • X is 0, S, N or CR 4 ;
  • Y is S or CR 5 ;
  • Ring A is an aromatic ring (preferably C W . of : ring, further preferably a benzene ring ( )) or a heteroaromatic ring (preferably a hetero atom is a nitrogen atom, a heteroatom number of 1-3, C 2 _ 5 ;
  • Step preference to pyrazole (eg Partially linked, the b' end is linked to the L 1 moiety of formula I) imidazole, pyrrole, pyridine, pyrimidine, triazole, pyrazine, tetrazole, anthracene
  • L 1 is a chemical bond, a mercapto group (preferably a mercapto group of CM), a fluorenylene group, a cyclodecyl group (preferably a C 3 -6 cyclodecyl group, further preferably a cyclopropyl group) or a heterocyclic fluorenyl group (preferably a hetero atom is a nitrogen atom) Atom, the number of heteroatoms is 1-3, the heterocyclic fluorenyl or hetero atom of C 3 -6 is an oxygen atom, the number of hetero atoms is 1-3, and the heterocyclic fluorenyl group of C 3 -6 ; Wherein the above fluorenyl, fluorenylene, cyclodecyl or heterocyclic fluorenyl group may each independently be further substituted by one or more substituents selected from the group consisting of halogen (which may be ?, Cl, Br, or I, preferably).
  • halogen which may be ?, Cl
  • a cyano group preferably a sulfonyl group or a cyclic alkyl with alkyl with C 3 _ 6 sulfonyl group, said d_ 6
  • the preferred sulfonyl embankment embankment sulfonyl group more preferably 3 or ⁇ ⁇ ), an acyl group (preferably formyl or ( ⁇ _ 4 alkyl with the acyl group, the acyl group is preferably alkyl with the CM 2 alkyl with an acyl group), a cycloalkyl group (preferably a C 3 -6 cyclodecyl group, further preferably a cyclopentyl group) and a heterocyclic fluorenyl group;
  • L 2 is alkyl with (preferably C M of the embankment group, more preferably methyl), acyl (formyl or carbonyl group), cyclic alkyl with (preferably C cyclic alkyl with 3 _ 6, more preferably cyclopropyl or cyclohexyl) , embankment heterocyclic group (preferably the heteroatom is oxygen and / or nitrogen atom, 1-4 hetero atoms, the heterocyclic alkyl with C 3 _ 6; and further preferably an oxygen atom as hetero atom, the number of hetero atoms is 1 3, C 3 -6 heterocyclic fluorenyl groups, still more preferably four
  • heteroaryl group preferably, the hetero atom is a nitrogen atom, and the number of hetero atoms is 1-4; further preferably, the hetero atom is a nitrogen atom, and the number of hetero atoms is 1-4, C 4 -8 Heteroaryl;
  • imidazolyl pyridyl (such as or ' ⁇ , ), benzimidazolyl (such as), ⁇
  • M is a halogen (preferably fluorine), a mercapto group (preferably a fluorenyl group of d- 6 , more preferably a methyl group, an ethyl group, a propyl group or an isopropyl group), an anthranylene group or a cyclodecyl group (preferably a ring of C 3 -6 ) Base, further preferably cyclopropyl), a decyloxy group [preferably a methoxy group of C M substituted by a heterocyclic fluorenyl group, more preferably a decyloxy group of C 2 substituted with a heterocyclic fluorenyl group; wherein the "d_ 4 substituted by a heterocyclic fluorenyl group”
  • the heterocyclic fluorenyl group described in the "oxyl group” preferably has a hetero atom which is an oxygen and/or a nitrogen atom and has a number of heteroatoms of from 1 to 4.
  • morpholinyl such as Or tetrahydropyrrolyl
  • heterocycloalkyl preferably a hetero atom is an oxygen and/or nitrogen atom, a heteroatom number of 1-4, C 3 -8 ; further preferably the hetero atom is oxygen and / or nitrogen atom, 1-4 hetero atoms, the heterocyclic alkyl with C 4 _ 6; and further preferably morpholinyl (e.g.
  • acyl or acyl group may be each independently optionally further selected from one or more selected from halogen
  • halogen-substituted d- 6 fluorenyl group is preferably a trifluoromethyl group or
  • cyano substituted d- 6 thiol is preferably acylamino, nitro, carboxy, sulfonyl, methylsulfonyl (methanesulfonyl substituted d- 6 )
  • embankment group (preferably 6 _ embankment group, more preferably 3 d_ embankment group, said group having 3 embankment d_ may be methoxy, ethoxy, propoxy An oxy group or an isopropoxy group;
  • the fluorenyl group of the decyloxy group-substituted d- 6 is preferably a sulfonyl group (preferably a C 3 -6 cyclodecyl group, further preferably a cyclopropyl group), a heterocyclic ring.
  • Mercapto group (preferably the hetero atom is an oxygen and/or nitrogen atom, and the number of hetero atoms is 1-4) Water, C 3-8 heterocyclic fluorenyl; further preferably the hetero atom is an oxygen and/or nitrogen atom, and the number of hetero atoms is 1-4
  • Piperazinyl, tetrahydropyrrolyl or tetrazolyl (eg Substituted by a substituent of an aryl group and a heteroaryl group;
  • R 1 is a hydrogen atom, a halogen atom, a halogen (may be ?, Cl, Br or I, preferably F), a cyano group, a fluorenyl group (preferably a fluorenyl group of d 4 ), a cyclodecyl group, a sulfonyl group, a fluorenyl group _ NH ⁇ _NH 2 ; wherein the thiol group described in the above R 1 may be optionally further substituted by one or more substituents selected from the group consisting of halogen, hydroxy, cyano, amino, nitro, carboxy a sulfonyl group, an acyl group, a decyloxy group, a cyclodecyl group, an alkenyl group and an alkynyl group;
  • R 2 , R 3 , R 4 and R 5 are each independently hydrogen, deuterium, halogen or fluorenyl (preferably C M fluorenyl); m is 0, 1, 2 or 3; n is 1, 2, 3 or 4;
  • p 0, 1, 2, 3, 4 or 5.
  • V is N or C
  • W is N or CH
  • X is 0, S, N or CH;
  • Y is S or CH
  • R 2 is hydrogen, deuterium, halogen (which may be ?, Cl, Br or I) or a mercapto group;
  • n is 1 or 2 ;
  • p 0 or 1.
  • the five-membered six-membered heterocyclic compound I described in the present invention is more preferably a combination shown below. Matter II,
  • the five-membered and six-membered heterocyclic compound I described in the present invention is further preferably a compound 111-1, oxime-2 or 111-3 shown below.
  • the compound ⁇ -1 described in the present invention is preferably a compound IV-1-1 or IV-1-2 as shown below.
  • IV-1-1 IV- 1-2 where X is S or 0, and the rest of the letters and groups are as defined above.
  • the compound ⁇ -2 described in the present invention is preferably a compound IV-2 shown below,
  • the compound ⁇ -3 described in the present invention is preferably the compound IV-3 shown below,
  • the compound IV-1-1 described in the present invention is preferably a compound V-1-1 shown below.
  • the present invention also provides a method for preparing the five-membered and six-membered heterocyclic compound as shown in Formula I, which is any of the following methods:
  • Method 1 Under the alkaline condition, the compound I-A and the compound I-B are subjected to a nucleophilic substitution reaction;
  • the definitions of the groups and letters are the same as described above unless otherwise specified.
  • the method and conditions of the nucleophilic substitution reaction may be conventional methods and conditions for such reactions in the art, and the present invention particularly preferably has the following methods and conditions: in the solvent, the compound IA and the compound IB are The nucleophilic substitution reaction can be carried out under alkaline conditions.
  • the solvent is preferably one or more of dimethyl sulfoxide, 1,4-dioxane and hydrazine, hydrazine-dimethylformamide, and further preferably dimethyl sulfoxide.
  • the base in the alkaline condition is particularly preferably an inorganic base, and the inorganic base is preferably one or more of potassium fluoride, sodium fluoride, cesium carbonate and potassium carbonate, and more preferably potassium fluoride.
  • the volume-mass ratio of the solvent to the compound ⁇ - ⁇ is preferably from 10 mL/g to 100 mL/g.
  • the molar ratio of the compound ⁇ - ⁇ to the compound I-B is preferably 0.1 : 1 to 1 : 1, more preferably 0.3 : 1 to 0.9 : 1.
  • the molar ratio of the base to the compound I-B is preferably 1:1 to 10:1, more preferably 1 :1 to 2:1.
  • the reaction temperature is preferably 50 ° C to 150 ° C, more preferably 70 ° C to 110 ° C.
  • the reaction time is preferably such that the reaction is detected to be complete, and is particularly preferred in the present invention 51! ⁇ 24h.
  • the method and conditions of the nucleophilic substitution reaction may be conventional methods and conditions for such reactions in the art, and the present invention particularly preferably has the following methods and conditions: in the solvent, the compound IA
  • the compound IB can be subjected to a nucleophilic substitution reaction under acidic conditions.
  • the solvent described therein is preferably an organic solvent, and the organic solvent is preferably one or more of isobutanol, n-butanol, dimethyl sulfoxide and hydrazine, hydrazine-dimethylformamide, and further preferably isobutanol. .
  • the acid in the acidic condition is preferably an organic acid and an inorganic acid, further preferably an organic acid, and the organic acid is preferably p-toluenesulfonic acid, and the inorganic acid is preferably hydrochloric acid and/or sulfuric acid.
  • the volume-to-mass ratio of the solvent to the compound ⁇ - ⁇ is preferably from 10 mL/g to 100 mL/g.
  • the molar ratio of the compound IA to the compound IB is preferably 0.1:1 to 1:1, more preferably 0.3:1 to 0.9:1.
  • the molar ratio of the acid to the compound IB is preferably 0.1:1 to 3:1, further preferably 0.6:1 to 1.2:1.
  • the reaction temperature is preferably 50 ° C to 150 ° C, and more preferably 80 ° C to 120 ° C.
  • the reaction time is preferably such that the reaction is detected to be complete, and 51 is particularly preferred in the present invention! ⁇ 24h.
  • the method and conditions of the coupling reaction may be conventional methods and conditions for such a reaction in the art, and the present invention particularly preferably has the following methods and conditions: in a solvent, under the protection of an inert gas, in a base and The IA and IB are subjected to a coupling reaction by a palladium catalyst, wherein the inert gas is preferably argon and/or nitrogen; the solvent is preferably an organic solvent and/or water, and the organic The solvent is preferably one or more of 1,4-dioxane, toluene and ethylene glycol dimethyl ether, and further preferably 1,4-dioxane.
  • the volume-to-mass ratio of the solvent to the compound IA is preferably 20 mL/g to 100 mL/g.
  • the base is preferably an inorganic base, and the inorganic base is preferably one or more of potassium carbonate, cesium carbonate, sodium carbonate and potassium ketchate.
  • the molar ratio of the base to the compound IA is preferably 1:1 to 10:1, more preferably 3:1 to 5:1.
  • the palladium catalyst is a conventional catalyst in the art for such a coupling reaction, and particularly preferred in the present invention is tris(dibenzylidenefluorene:) palladium, palladium acetate, tetrakis(triphenylphosphine)palladium and [ One or more of ruthenium, osmium-bis(diphenylphosphino)ferrocene]palladium dichloride, and more preferably tris(dibenzylidenefluorenone:)dipalladium.
  • the molar ratio of the palladium catalyst to the compound ruthenium-iridium is preferably 0.005: 1-0.5:1, more preferably 0.01:1 to 0.10:1.
  • the molar ratio of the compound ⁇ - ⁇ to the compound ⁇ - ⁇ is preferably 0.5:1 to 2:1, more preferably 0.9:1 to 1.5:1; and the reaction temperature is preferably 50 ° C to 150 ° C. Further, it is preferably 90 ° C to 130 ° C; the reaction time is preferably such that the reaction is detected to be complete, and particularly preferably 0.51 in the present invention! ⁇ 3h.
  • the compounds of the present invention can be obtained by a variety of methods well known in the art, using known starting materials, such as chemical synthesis or methods of extraction from plants. These methods are all included in the present invention.
  • the starting materials used to prepare the compounds of the present invention or intermediates thereof are known in the art or are commercially available unless otherwise stated or provided.
  • each of the preferred conditions in the preparation method can be arbitrarily combined, that is, the preferred examples of the present invention are obtained.
  • the invention also provides five yuan-A,
  • V is N or C
  • W is N or CR 3 ;
  • X, Y are each independently 0, S, N or CR 4 ;
  • Ring A is an aromatic ring or a heteroaryl ring
  • L 1 is a chemical bond, a mercapto group (preferably a mercapto group of C M ), a fluorenylene group, a cyclodecyl group (preferably a C 3 -6 cyclodecyl group, further preferably a cyclopropyl group) or a heterocyclic fluorenyl group (preferably a hetero atom is a nitrogen atom having a hetero atom number of 1-3, a C 3 -6 heterocyclic fluorenyl group or a hetero atom is an oxygen atom, a hetero atom number of 1-3, and a C 3 -6 heterocyclic fluorenyl group;
  • the fluorenyl, fluorenylene, cyclodecyl or heterocyclic fluorenyl group may each be further independently substituted with one or more substituents selected from the group consisting of: halogen (which may be ?, Cl, Br, or
  • R 1 is a hydrogen atom, a halogen atom, a halogen (may be ?, Cl, Br or I, preferably F), a cyano group, a fluorenyl group (preferably a fluorenyl group of c M ), a cyclodecyl group, a sulfonyl group, a fluorenyl group _ NH ⁇ _NH 2 ; wherein the above fluorenyl group may be optionally further substituted by one or more substituents selected from the group consisting of halogen, hydroxy, cyano, amino, nitro, carboxy, sulfonyl, acyl , anthracenyloxy, cyclodecyl, alkenyl and alkynyl;
  • R 2 , R 3 and R 4 are each independently hydrogen, deuterium, halogen or fluorenyl
  • the five-membered six-membered heterocyclic compound represented by the formula I-A described in the present invention is preferably: wherein, when V is N, X is N, and W and Y are CH;
  • V is C; W is N; X, Y are each independently 0, S or CH;
  • R 2 is a hydrogen atom, a halogen (which may be ?, Cl, Br or I) or a fluorenyl group; m is 0, 1 or 2; n is 1 or 2.
  • the five-membered six-membered heterocyclic compound represented by the formula IA described in the present invention is further preferably a compound represented by the formula: ⁇ - ⁇ :
  • the compound represented by the formula ⁇ - ⁇ described in the present invention further preferably a compound of the formula IV-A;
  • the five-membered six-membered heterocyclic compound represented by the formula I-A described in the present invention is further preferably any of the following compounds:
  • the method and conditions of the coupling reaction may be conventional methods and conditions for such a reaction in the art, and the following methods and conditions are particularly preferred in the present invention: in a solvent, under the protection of an inert gas
  • the compound IC and the ID are subjected to a coupling reaction under the action of a base and a palladium catalyst.
  • the inert gas is argon and/or nitrogen
  • the solvent is preferably an organic solvent and/or water, and the organic solvent is preferably 1,4-dioxane, toluene, ethylene glycol dimethyl ether. One or more of them is further preferably 1,4-dioxane.
  • the volume-to-mass ratio of the solvent to the compound IC is preferably 20 mL/g to 100 mL/g.
  • the base is preferably an inorganic base, and the inorganic base is preferably one or more of potassium carbonate, cesium carbonate, sodium carbonate and potassium klysate; the molar ratio of the base to the compound IC is preferably 1: 1 to 10: 1, further preferably 3: 1 to 5: 1.
  • the palladium catalyst is a conventional catalyst in the art for such a coupling reaction, and particularly preferred in the invention are tris(dibenzylidenefluoreneacetone)dipalladium, palladium acetate, tetrakis(triphenylphosphine)palladium and [ruthenium].
  • One or more of ruthenium-bis(diphenylphosphino)ferrocene]palladium dichloride further preferably [ ⁇ , ⁇ -double (two ⁇ Iron] palladium dichloride.
  • the molar ratio of the palladium catalyst to the compound IC is preferably 0.005:1 to 0.5:1, more preferably 0.01:1 to 0.10:1; and the molar ratio of the compound IC to the compound ID is preferably 0.5. 1 to 2: 1, further preferably 0.9: 1 to 1.5: 1;
  • the reaction temperature is preferably 20 ° C to 120 ° C, and more preferably 70 ° C to 110 ° C.
  • the reaction time is preferably such that the reaction is detected to be complete, and 41 is particularly preferred in the present invention! ⁇ 18h.
  • the present invention also provides a five-membered and six-membered heterocyclic compound represented by the above formula I, a pharmaceutically acceptable salt, a metabolite thereof, a metabolic precursor or a prodrug thereof, for preparing a Janus kinase (JAK) inhibitor Use of the drug.
  • the present invention also provides a five-membered and six-membered heterocyclic compound represented by the above formula I, a pharmaceutically acceptable salt, a metabolite thereof, a metabolic precursor or a prodrug thereof, for the preparation of a therapeutic and/or prophylactic cell proliferation Use in drugs for diseases.
  • the cell proliferative diseases described therein are diseases caused by proliferation of cells conventionally used in the art, and cancer, infection, inflammation and autoimmune diseases are particularly preferable in the present invention.
  • the present invention also provides a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of a five-membered and six-membered heterocyclic compound as shown in Formula I as described above, a pharmaceutically acceptable salt thereof, a metabolite, and a pre-metabolism Or a prodrug thereof, and one or more pharmaceutically acceptable carriers and/or diluents thereof.
  • the present invention provides the use of the pharmaceutical composition for the preparation of a medicament for a Janus kinase (JAK) inhibitor.
  • JK Janus kinase
  • the present invention provides the use of the pharmaceutical composition for the preparation of a medicament for the treatment and/or prevention of a cell proliferative disorder.
  • the cell proliferative diseases described therein are diseases caused by cell proliferation conventional in the art, and cancer, infection, inflammation and autoimmune diseases are particularly preferable in the present invention.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may be in a form suitable for oral administration or in the form of a sterile injectable aqueous solution, and the oral or injectable composition may be prepared according to any method known in the art for preparing a pharmaceutical composition.
  • mercapto means a branched and straight chain saturated aliphatic hydrocarbon comprising from 1 to 20 carbon atoms. a group, preferably 1 to 10 carbon atoms, more preferably 1 to 8 carbon atoms, such as methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, t-butyl, isobutyl, pentyl, hexyl , heptyl, octyl, decyl, decyl, 4,4-dimethylpentyl, 2,2,4-trimethylpentyl, undecyl, decyl, and various Isomers and the like; and the above fluorenyl group containing any one of the following 1-4 substituents: hydrazine, halogen (preferably ?, Br, C1 or 1), fluorenyl, decyloxy, aryl, aryloxy, aryl Substituted
  • indenylene (including when used alone or in another group) is meant to include a branched and straight chain subsaturated aliphatic hydrocarbon group of 1 to 20 carbon atoms, preferably 1 to 10 carbons. Atom, more preferably 1 to 8 carbon atoms, such as methylene, ethylene, propylene, isopropylidene, n-butylene, tert-butyl, isobutylene, pentylene, hexylene , heptylene, octylene, fluorenylene, fluorenylene, arylene (4,4-dimethylpentyl), sub (2,2,4-trimethylpentyl), arylene , a decylene group, and various isomers thereof and the like; and the above-described fluorenylene group containing any one of the following 1-4 substituents: hydrazine, halogen (preferably F, Br, CI or 1), hydrazine Al
  • alicyclic or "cycloalkyl” refers to an all-carbon monocyclic or polycyclic group wherein each ring may contain one or more double bonds, but none of the rings have a fully conjugated pi-electron system.
  • 3 to 20 carbons are formed by 1 to 3 ring cyclodecyl groups, more preferably 3 to 10 carbons, for example: cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl, cyclooctyl , ring and ring, fluorenyl, cyclohexenyl;
  • the group may be substituted by any of the following 1 to 4 substituents: anthracene, halogen, fluorenyl, decyloxy, hydroxy, aryl, aryloxy, aryl fluorenyl, cyclodecyl, decylamino, acylamino, oxy, Acyl
  • decyloxy denotes a cyclic or acyclic fluorenyl group having the number of carbon atoms attached through an oxygen bridge.
  • nonyloxy includes the definitions of the above fluorenyl and cycloalkyl.
  • alkenyl refers to a straight, branched or cyclic non-aromatic hydrocarbon radical containing the specified number of carbon atoms and at least one carbon to carbon double bond. Preferably there is one carbon-carbon double bond and up to four non-aromatic carbon-carbon double bonds may be present.
  • C 2 -12 alkenyl means an alkenyl group having 2 to 12 carbon atoms.
  • C 2 -6 alkenyl means an alkenyl group having 2 to 6 carbon atoms, and includes a vinyl group, a propenyl group, a butenyl group, a 2-methylbutenyl group, and a cyclohexenyl group.
  • the linear, branched or cyclic moiety of the alkenyl group may contain a double bond, and if a substituted alkenyl group is indicated, the substituent may be independently selected from one or more of the following groups: fluorenyl, halogen, decyloxy, hydroxy, Aryl, aryloxy, aryl fluorenyl, cyclodecyl, decylamino, acylamino, acyl, arylcarbonylamino, amino, nitro, nitrile, fluorenyl and/or decylthio and/or any of the present invention
  • the base of the definition The base of the definition.
  • alkynyl refers to a straight, branched or cyclic hydrocarbon radical containing the specified number of carbon atoms and at least one carbon to carbon triple bond. There may be up to three carbon-carbon triple bonds.
  • C 2 -12 alkynyl means an alkynyl group having 2 to 12 carbon atoms.
  • the "C 2 -6 alkynyl group” means an alkynyl group having 2 to 6 carbon atoms, and includes an ethynyl group, a propynyl group, a butynyl group, a 3-methylbutynyl group and the like.
  • aryl refers to any stable monocyclic or bicyclic carbon ring which may be up to 7 atoms in each ring, at least one of which is an aromatic ring.
  • aryl unit examples include a phenyl group, a naphthyl group, a tetrahydronaphthyl group, a 2,3-indanyl group, a biphenyl group, a phenanthryl group, a fluorenyl group or an acenaphthyl group. It will be understood that in the case where the aryl substituent is a bicyclic substituent and one of the rings is a non-aromatic ring, the linkage is carried out through an aromatic ring.
  • aryl group containing any one of the following 1-4 substituents hydrazine, halogen (F, Br, CI or 1), fluorenyl, decyloxy, aryl, aryloxy, aryl substituted aryl or Diaryl, arylsulfonyl, aryloxy, alkenyl, alkynyl, cyclodecyl, cycloalkenyl, cyclodecylmercapto, cyclodecyloxy, optionally substituted amino, hydroxy, hydroxy Sulfhydryl, acyl, aldehyde, heteroaryl, heteroaryloxy, heterocycloalkyl, heterocyclomethoxy, arylheteroaryl, aryloxycarbonyl, heteroaryl , heteroaryl methoxy, aryloxy aryl, aryloxyaryl, decylamino, fluorenylamino, arylcarbonylamino, nitro,
  • aromatic ring means any stable monocyclic or bicyclic carbon ring which may be up to 7 atoms in each ring, at least one of which is an aromatic ring.
  • aromatic ring unit examples include phenyl, naphthyl, tetrahydronaphthyl, indanyl, biphenyl, phenanthryl, anthryl or acenaphthyl. It is understood that in the case where the aryl substituent is a bicyclic substituent and one of the rings is a non-aromatic ring, the linkage is carried out through an "aromatic ring".
  • aromatic ring containing any one of the following 1-4 substituents: hydrazine, halogen (F, Br, CI or 1), fluorenyl, decyloxy, aryl, aryloxy, aryl substituted aryl or Diaryl, arylsulfonyl, aryloxy, alkenyl, alkynyl, cyclodecyl, cycloalkenyl, cyclodecylmercapto, cyclodecyloxy, amino, hydroxy, hydroxy decyl, acyl, Aldehyde, heteroaryl, heteroaryloxy, heterocycloalkyl, heterocyclomethoxy, arylheteroaryl, aryloxycarbonyl, heteroarylalkyl, heteroaryloxy, aryloxy Anthracenyl, aryloxyaryl, decylamino, fluorenylamino, arylcarbonylamino, schyl, n
  • heterocyclic ring or “aromatic heterocyclic ring” refers to a stable monocyclic or bicyclic ring which may represent up to 7 atoms in each ring, wherein at least one ring is an aromatic ring and contains 1 to 4 selected from 0, N, And the hetero atom of S.
  • Heteroaromatic rings within the scope of this definition include, but are not limited to, acridine, carbazole, porphyrin, porphyrin, quinoxaline, imidazole, pyrazole, pyrrole, indole, indoline, benzotriazole, Benzimidazole, furan, thiophene, isothiazole, benzothiophene, dihydrobenzothiophene, benzofuran, isobenzofuran, benzoxazole, benzofurazan, benzopyrazole, quinoline, isonitrogen Heteroquinone, isoquinoline, oxazole, oxadiazole, isoxazole, hydrazine, pyrazine, pyridopyridine, tetrazolopyridine, pyridazine, pyridine, naphthyl pyrimidine, pyrimidine, pyrrole, tetrazole,
  • heterocyclic ring is also understood to include any N-oxide derivative containing a nitrogen-containing heteroaryl ring.
  • heteroaryl substituent is a bicyclic substituent and one ring is a non-aromatic ring or does not contain a hetero atom, it is understood that the linkage is carried out by an aromatic ring or by a hetero atom comprising a ring, respectively.
  • the heteroaryl ring may be substituted by any of the following 1 to 4 substituents: anthracene, halogen, fluorenyl, decyloxy, hydroxy, aryl, aryloxy, aryl fluorenyl, cyclodecyl, decylamino, acylamino, Acyl, arylcarbonylamino, amino, Nitro, nitrile, fluorenyl and/or sulfonylthio and/or any fluorenyl group as defined in the invention.
  • halogen means fluoro, chloro, bromo, iodo or quinone.
  • hydroxy means ⁇ QH.
  • amino means - ⁇ NH2 .
  • cyano is used.
  • sulfonyl means.
  • acyl means a carbonyl group or a formyl group which is a carbonyl group when a substituent is bonded to both sides, and a formyl group when only one terminal is attached to a substituent.
  • amido means a carbonyl amide group or a formylamino group which is a carbonyl amide group when both have a substituent attached thereto, and a formylamino group when only one terminal is attached with a substituent.
  • haloindenyl denotes a fluorenyl group substituted at any position of the halogen.
  • halogenated fluorenyl includes the definitions of the above halogens and fluorenyl groups.
  • halomethoxy refers to a decyloxy group substituted at any position of the halogen.
  • haloanthracene includes the definitions of the above halo and halooxy.
  • aryloxy denotes an aryl group having the number of carbon atoms attached through an oxygen bridge. Thus, “aryloxy” embraces the definition of the above aryl.
  • arylhetero or “heteroaryl” as used herein, denotes a stable monocyclic or bicyclic ring of up to 7 atoms in each ring, wherein at least one ring is an aromatic ring and contains from 1 to 4 selected from 0, Hetero, and S heteroatoms.
  • Heteroaryl groups within the scope of this definition include, but are not limited to: acridinyl, oxazolyl, porphyrinyl, porphyrinyl, quinoxalinyl, imidazolyl, pyrazolyl, pyrrolyl, fluorenyl, di Hydroquinone, benzotriazolyl, benzimidazolyl, furyl, thienyl, isothiazolyl, benzothienyl, dihydrobenzothiophenyl, benzofuranyl, isobenzofuranyl, benzene And oxazolyl, benzofurazinyl, benzopyrazolyl, quinolyl, isoazepine, isoquinolyl, oxazolyl, oxadiazolyl, isoxazolyl, Mercapto, pyrazinyl, pyridopyridyl, tetrazolopyridyl, pyrida
  • Heteroaryl is also understood to include any nitrogen-containing heteroaryl N-oxide derivative.
  • the heteroaryl substituent is a bicyclic substituent and one ring is a non-aromatic ring or does not contain a hetero atom, it is understood that the linkage is through an aromatic ring.
  • the heteroaryl group may be substituted by any of the following 1 to 4 substituents: oxime, halogen, fluorenyl, decyloxy, hydroxy, aryl, aryloxy, aryl fluorenyl, cyclodecyl, decylamino, acylamino, Acyl, arylcarbonylamino, amino, nitro, nitrile, fluorenyl and/or sulfonylthio and/or any fluorenyl group as defined in the invention.
  • heteroalicyclic or “heterocyclic fluorenyl” as used herein alone or as part of another group, is meant to include from 1 to 4 heteroatoms (eg one or more of nitrogen, oxygen and sulfur) A 4 to 12 membered monocyclic or polycyclic group wherein each ring may contain one or more double bonds, but none of the rings have a fully conjugated pi-electron system.
  • the heterocyclic fluorenyl group may contain 1 to 4 substituents such as an anthracenyl group, a halogen, an oxo group and/or any fluorenyl substituent as defined in the present invention.
  • any heterocyclic indenyl ring may be fused to a cycloalkyl, aryl, heteroaryl or heterocyclic indenyl ring.
  • Heterocyclic fluorenyl groups within the scope of this definition include, but are not limited to, oxazoline, oxocyclobutyl, pyranyl, tetrahydropyranyl, azetidinyl, 1,4-dioxenyl, hexahydro Azastrolin, piperazinyl, piperidinyl, pyrrolidinyl, morpholinyl, thiomorpholinyl, dihydrofuranyl, dihydroimidazolyl, indanyl, dihydroisoxazolyl, Dihydroisothiazolyl, dihydrooxadiazolyl, dihydrooxazolyl, dihydropyrazinyl, dihydropyrazolyl, dihydropyridyl, dihydropyr
  • the reagents and starting materials used in the present invention are commercially available.
  • the positive progress of the present invention is:
  • the present invention provides a compound of the formula I, and a pharmaceutically acceptable salt thereof, and a metabolite and a metabolic precursor or a prodrug thereof:
  • the compounds shown are a very effective class of Janus Kinase (JAK) inhibitors that can be used to treat or prevent cell proliferative diseases such as cancer, infection, inflammation and autoimmune diseases.
  • JK Janus Kinase
  • the structure of the compound is determined by nuclear magnetic resonance (NMR) or mass spectrometry (MS).
  • NMR nuclear magnetic resonance
  • MS mass spectrometry
  • the nuclear magnetic resonance spectrum is obtained by a Bruker Avance-500 instrument, deuterated dimethyl sulfoxide, deuterated chloroform and deuterated methanol, etc., tetramethylsilane. ⁇ (TMS) is an internal standard.
  • Mass spectra were obtained by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) coupled to Agilent Technologies 6110 using an ESI ion source.
  • the microwave reaction was carried out in an Explorer fully automatic microwave synthesizer manufactured by CEM Corporation of the United States.
  • the magnetron frequency was 2450 MHz and the continuous microwave output power was 300 W.
  • the instrument used for high performance liquid phase preparation was Gilson 281, and the preparation columns used were Shimadazu Shim-Pack, PRC-ODS, 20 x 250 mm, 15 ⁇ .
  • the synthetic route is as follows:
  • the synthetic route is as follows:
  • the synthetic route is as follows:
  • the synthetic route is as follows:
  • the synthetic route is as follows:
  • Tris(dibenzylidenepyridinium)dipalladium (47 mg, 0.05 mmol) and 2,2'-bis(diphenylphosphine naphthalene (34 mg, 0.05 mmol) were added to the compound 5 (130 mg, 0.31) under a nitrogen atmosphere.
  • Ment a suspension of 5-aminopyrimidine (89 mg, 0.94 mmol) and cesium carbonate (102 mg, 0.32 mmol) in dioxane (4 mL), microwaved at 120 ° C for 60 min.
  • Dichloromethane (20 mL) was diluted, filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was diluted with methanol (5mL), and solids were precipitated.
  • Tris(dibenzylidenefluoreneacetone)dipalladium (55 mg, 0.06 mmol) and 2,2'-bis(diphenylphosphine binaphthyl (40 mg, 0.06 mmol) were added to the compound 5 (200 mg, 0.47) under a nitrogen atmosphere.
  • Methyl a suspension of compound 15-a (138 mg, 1.42 mmol) and cesium carbonate (309 mg, 0.95 mmol) in dioxane (4 mL), microwaved at 120 ° C for 60 min.
  • Methyl hydrazine (20 mL) was diluted, filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was purified by HPLC (mobile phase: acetonitrile, water (0.05% trifluoroacetic acid); gradient: 60%-90%-10%) Yellow solid T-15 (23 mg, yield: 14%). mp.
  • the synthetic route is as follows:
  • 2,4-Dichlorothieno[3,2-d]pyrimidine 1.0 g, 4.9 mmol
  • 4-carboxybenzeneboronic acid 542 mg, 3.3 mmol
  • sodium carbonate 2.1 g, 19.6 mmol
  • Oxalyl chloride (4 mL) and dimethylformamide (0.1 mL) were added to a suspension of the compound 16-b in dichloromethane and stirred at room temperature for 3 hours.
  • the reaction mixture was concentrated under reduced vacuolululululululululululululululululululululululululululu
  • the reaction solution was slowly warmed to room temperature, and the reaction was continued for 2 hours, then dichloromethane (50 mL) and water (20 mL).
  • the organic phase was washed with hydrochloric acid (1N, 10 mL) and water (20 mL), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and evaporated.
  • the synthetic route is as follows:
  • the compound 18-a (360 mg, 0.84 mmol) was dissolved in dichloromethane (2 mL), and 4N hydrochloric acid-dichlorocyclohexane (4 mL) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 16 hours, and the reaction mixture was concentrated under reduced pressure. The residue was added to dichloromethane (10 mL) and triethylamine (2 mL). The mixture was cooled to 0 ° C, and ethyl sulfonyl chloride (141 mg, 1.26 mmol) was slowly added dropwise, and stirring was continued at 0 ° C for 30 minutes.
  • the synthetic route is as follows:
  • the synthetic route is as follows:
  • Tris(dibenzylidenepyridinium)dipalladium (22 mg, 0.03 mmol) and 2,2'-bis(diphenylphosphine naphthalene (20 mg, 0.03 mmol) were added to the compound 5 (100 mg, 0.24) under a nitrogen atmosphere.
  • Methyl a suspension of compound 21-a (45 mg, 0.48 mmol) and cesium carbonate (155 mg, 0.48 mmol) in dioxane (2 mL), microwaved at 120 ° C for 60 min.
  • Methyl hydrazine (20 mL) was diluted, filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure.
  • the synthetic route is as follows:
  • Tris(dibenzylidenepyridinium)dipalladium (22 mg, 0.03 mmol) and 2,2'-bis(diphenylphosphine naphthalene (20 mg, 0.03 mmol) were added to the compound 5 (100 mg, 0.24) under a nitrogen atmosphere.
  • dichloromethane (20 mL) was added to dilute, filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure.
  • the residue was purified by HPLC (mobile phase: acetonitrile, water (0.05% trifluoroacetic acid); gradient: 50%-80%- ⁇ RTIgt; ⁇ /RTI> ⁇ RTIgt; ⁇ /RTI> ⁇ RTIgt; ⁇ /RTI> ⁇ RTIgt;
  • the synthetic route is as follows:
  • the compound 23-a (165 mg, 0.37 mmol) was dissolved in dioxane (4 mL), 4N hydrochloric acid dioxane (0.93 mL) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 16 hr. The residue was added to dichloromethane (10 mL) and triethylamine (0.16 mL, 1.12 mmol). The mixture was cooled to 0 ° C, and ethyl sulfonyl chloride (62 mg, 0.56 mmol) was slowly added dropwise, and stirring was continued at 0 ° C for 30 minutes.
  • T-24 Compound 5 (208 mg, 0.49 mmol) and p-fluoroaniline (164 mg, 1.48 mmol) were dissolved in isobutanol (12 mL), and p-toluenesulfonic acid monohydrate (188 mg, 0.98 mmol) was added. The mixture was reacted at 110 ° C for 16 hours, and the reaction mixture was concentrated under reduced pressure.
  • the synthetic route is as follows:
  • Tris(dibenzylidenepyridinium)dipalladium (32 mg, 0.035 mmol) and 2,2'-bis(diphenylphosphine binaphthyl (22 mg, 0.035 mmol) were added to compound 5 (150 mg, 0.35) under a nitrogen atmosphere.
  • Methyl a suspension of 1-methyl-3-aminopyrazole (104 mg, 1.48 mmol) and cesium carbonate (228 mg, OJ mmol) in dioxane (4 mL), microwaved at 120 ° C for 60 min.
  • the synthetic route is as follows:
  • Tris(dibenzylidenepyridinium)dipalladium (22 mg, 0.023 mmol) and 2,2'-bis(diphenylphosphinylnaphthalene (15 mg, 0.023 mmol) were added to compound 5 (100 mg, 0.23) under a nitrogen atmosphere.
  • Methyl a solution of 3-aminopyridine (22 mg, 0.23 mmol) and cesium carbonate (154 mg, 0.47 mmol) in dioxane (4 mL), microwaved at 125 ° C for 30 min.
  • the synthetic route is as follows:
  • the synthetic route is as follows:
  • Tris(dibenzylidenefluoreneacetone)dipalladium (18 mg, 0.02 mmol) and 2,2'-bis(diphenylphosphine naphthalene (12 mg, 0.02 mmol) were added to compound 5 (85 mg, 0.20) under a nitrogen atmosphere.
  • Methyl a suspension of cyclopropylamine (33 mg, 0.6 mmol) and cesium carbonate (196 mg, 0.6 mmol) in dioxane (4 mL), microwaved at 125 ° C for 40 min. The mixture was diluted with water (20 mL ⁇ 3) and brine (20 mL), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and evaporated.
  • Tris(dibenzylidenefluoreneacetone)dipalladium (1 lmg, 0.012 mmol) and 4,5-bisdiphenylphosphino-9,9-dimethyloxaxime (7 mg, 0.012 mmol) under nitrogen atmosphere Add to a suspension of compound 5 (50 mg, 0.12 mmol), cyclopropylformamide (30 mg, 0.36 mmol) and cesium carbonate (55 mg, 0.16 mmol) in dioxane (4 mL). minute.
  • the synthetic route is as follows:
  • Trifluoroacetic acid (2.5 mL) was added to a solution of compound 30- g (0.56 g, 2.3 mmol) in methylene chloride (4 mL). The reaction mixture was concentrated under reduced pressure. EtOAcjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjj
  • chlorosulfonyl isocyanate (0.49 g, 3.5 mmoL) was slowly added dropwise to a solution of compound 30-f (0.35 g, 2.5 mmoL) in dichloromethane (5 mL). Stir for 40 minutes at room temperature. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure.
  • Tris(dibenzylidenepyridinium)dipalladium (15 mg, 0.017 mmol) and 2-dicyclohexyl peg-2',6'-diisopropoxybiphenyl (10 mg, 0.07 mmol) were added to the nitrogen atmosphere.
  • Compound 30 70 mg, 0.17 mmol
  • aniline 25 mg, 0.26 mmol
  • potassium carbonate 138 mg, 1.0 mmol
  • the synthetic route is as follows:
  • O-benzotriazole-oxime, oxime, ⁇ ', ⁇ '-tetramethylurea tetrafluoroboric acid 200 mg, 0.62 mmol
  • diisopropylethylamine 65 mg, 0.5 mmol
  • T- 35 70 mg, 0.13 mmol
  • dimethylamine hydrochloride 12 mg, 0.26 mmol
  • the synthetic route is as follows:
  • the synthetic route is as follows:
  • Phase preparation Phase water (0.04% trifluoroacetic acid), acetonitrile; gradient: 30% to 60%) Compound T-38 (38 mg, yield: 13.6%).
  • LC-MS (ESI): m/z 554 [M+H]+.
  • Tris(dibenzylidenepyridinium)dipalladium (15 mg, 0.017 mmol) and 2-dicyclohexyl pita-2',6'-diisopropoxybiphenyl (10 mg, 0.07 mmol) were added under a nitrogen atmosphere.
  • Compound 39-a 24 mg, 0.17 mmol
  • Compound 5 71 mg, 0.17 mmol
  • m.p. After cooling to room temperature, it was diluted with ethyl acetate (10 mL), filtered, and the filtrate was concentrated.
  • the synthetic route is as follows:
  • the synthetic route is as follows:
  • the synthetic route is as follows:
  • the synthetic route is as follows:
  • the synthetic route is as follows:
  • the synthetic route is as follows:
  • the compound 5-a (70 mg, 0.16 mmol) was dissolved in dichloromethane (1 mL), EtOAc (EtOAc, EtOAc. The residue was added to dichloromethane (5 mL) and triethylamine (0.1 mL). After stirring for 15 minutes, glycolic acid (16 mg, 0.21 mmol), 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride (40 mg, 0.21 mmol) and 1-hydroxybenzophenone were added in that order.
  • Triazole (3 mg, 0.02 mmol), the mixture was stirred at room temperature for 16 hrs, water (15 mL) was added, and the mixture was extracted with dichloromethane (10 mL ⁇ 3), and the organic phases were combined with aqueous hydrochloric acid (IN, 50 mL) and saturated The aqueous sodium hydrogencarbonate solution (50 mL) was washed with anhydrous sodium sulfate and filtered, and the filtrate was evaporated.
  • the synthetic route is as follows:
  • the synthetic route is as follows:
  • the synthetic route is as follows:
  • Example 53 2-[l-(Ethylsulfonyl)-3- ⁇ 4-[2-( ⁇ l-[2-(morpholin-4-yl)ethyl]-1H-pyrazol-4-yl)
  • the synthesis route of "amino" thieno[3,2-d]pyrimidin-4-yl]-1 ⁇ -pyrazol-1-yl ⁇ azetidin-3-yl]acetonitrile T-53 is as follows:
  • the synthetic route is as follows:
  • the synthetic route is as follows:
  • the synthetic route is as follows:
  • Tris(dibenzylidenepyridinium)dipalladium (28 mg, 0.03 mmol) and 2,2'-bis(diphenylphosphine naphthalene (20 mg, 0.03 mmol) were added to the compound 5 (100 mg, 0.24) under a nitrogen atmosphere.
  • Methyl a suspension of compound 62-a (85 mg, 0.47 mmol) and cesium carbonate (155 mg, 0.48 mmol) in dioxane (2 mL), microwaved at 110 ° C for 30 min.
  • the formazan (15 mL) was diluted, washed with water (10 mL ⁇ 3) and brine (10 mL), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and evaporated.
  • Compound T-62 (10 mg, yield: 8 %). mp. + .
  • the synthetic route is as follows:
  • Tris(dibenzylidenepyridinium)dipalladium (15 mg, 0.017 mmol) and 2-dicyclohexyl peg-2',6'-diisopropoxybiphenyl (10 mg, 0.07 mmol) were added to the nitrogen atmosphere.
  • Compound 5 (422 mg, 1.0 mmol), compound 65-b (357 mg, 1.5 mmol), and EtOAc (EtOAc, EtOAc (EtOAc) After cooling to room temperature, it was diluted with EtOAc (EtOAc) (EtOAc)EtOAc. (374 mg, yield: 60%).
  • LC-MS (ESI): m / z 625 [M + H] +.
  • the synthetic route is as follows:
  • Methyl p-toluenesulfonate (190 mg, 1.0 mmol) was slowly added dropwise to a mixture of compound 67-c (239 mg, 1.0 mmol) and potassium carbonate (1.38 g, 10.0 mmol) in tetrahydrofuran. After stirring for 2 hours, a saturated aqueous solution of sodium hydrogencarbonate (10 mL), EtOAc (EtOAc) (EtOAc) Rate: 100%), the product does not need to be purified, directly into the next reaction.
  • LC-MS (ESI): m/z 254 [M+H] + o
  • the synthetic route is as follows:
  • the synthetic route is as follows:
  • Trifluoroacetic acid (3 mL) was added to a solution of Compound 5-a (250 mg, 0.58 mmol) in dichloromethane (3 mL), and the mixture was reacted for 3 hr.
  • Dichloromethane (10 mL) and triethylamine (2 mL) were added to the residue, the mixture was cooled to 0 ° C, and methanesulfonyl chloride (100 mg, 0.87 mmol) was slowly added dropwise and stirring was continued for 30 minutes.
  • LC-MS (ESI): m/z 409 [M+H] + .
  • Benzoic acid (1.59 g, 1.3 mmol) was added to 1-ethoxy-1-trimethylsiloxycyclopropene ( 17.4 g, 100 mmol) and ethyl (triphenylphosphine) acetate (45 g, 130 mmol) In a solution of toluene (250 mL). The mixture was reacted at 90 ° C for 18 hours, cooled to room temperature, and the reaction mixture was filtered over silica gel (300 g), washed with petroleum ether (100 mL), and the filtrate was concentrated under reduced pressure to 100 mL.
  • the 75-e solution (100 mL) obtained in the previous step was added to the sodium pyridazole borate (1.9 g, 10 mmol) and 1,8-diazabicyclo[5,4,0] ⁇ -carbon-7. a solution of ene (lg, 6.6 mmol) in dry acetonitrile (200 mL). This mixture was stirred at 80 ° C for 3 hours.
  • the synthetic route is as follows:
  • the synthetic route is as follows:
  • Tetrakisylphenyl palladium (0.56 g, 0.5 mmol) was added to 1-THP-4-pyrazoleboronic acid pinacol ester (2.8 g, 10 mmol), 2,4-dichlorothiophene [3] under nitrogen atmosphere. , a suspension of 2-d]pyrimidine (2.05 g, 10 mmol) and potassium carbonate (2.76 g, 20 mmol) in dioxane (30 mL). The mixture was stirred at 80 ° C for 4 hours, cooled to rt.
  • EtOAc was evaporated.jjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjjj
  • the synthetic route is as follows:
  • the synthetic route is as follows:
  • JAK1 buffer 25 mM HEPES, pH 7.5, 0.01% Brij-35, 0.01 M Triton.
  • JAK 2, 3 buffer 50 mM HEPES, pH 7.5, 0.0015% Brij-35.
  • JAK2,3 enzyme was diluted to the optimal concentration with the following buffer: 50 mM HEPES, pH 7.5, 0.0015% Brij-35, 2 mM DTT.
  • the JAK1 enzyme was diluted to the optimal concentration with the following buffer: 25 mM HEPES, pH 7.5, 0.01% Brij-35, 2 mM DTT, 0.01 M Triton. Transfer to a 384-well plate and incubate with the compound for a certain period of time.
  • JAK2,3 substrate was diluted to the optimal concentration with the following buffer: 50 mM HEPES, pH 7.5, 0.0015% Brij-35, 10 mM MgC12, three adipic acid adenosine at Km.
  • the JAK1 substrate was diluted to the optimal concentration with the following buffer: 25 mM HEPES, pH 7.5, 0.01% Brij-35, 10 mM MgC12, 0.01 M Triton.
  • the triuretic adenosine at Km was added to a 384-well plate to initiate the reaction, and reacted at 28 ° C for 1 hour.

Abstract

一种如通式I所示的五元并六元杂环化合物，其药学上可接受的盐、代谢产物、代谢前体或其药物前体，及其制备方法、药物组合物和应用。所述的五元并六元杂环化合物具有作为Janus激酶（JAK）抑制剂的活性，并可用于制备治疗因这些激酶的异常活性引起的疾病的药物，例如癌症等细胞增殖类疾病。

Description

五元并六元杂环化合物、 其制备方法、 药物组合物和应用 技术领域
本发明涉及五元并六元杂环化合物、 其制备方法、 药物组合物和应用。 背景技术
JAK-STAT (Janus kinase - signal transducer and activator of transcription) 信号通路是近年来发现的一条由细胞因子刺激的信号转导通路， 参与细胞的 增殖、分化、凋亡以及免疫调节等许多重要的生物学过程 （Aaronson, D.S. et al. Science 2002 , 296, 1653-1655; O'Shea, J.J. et al. Nat. Rev. Drug Discovery 2004， 3, 555-564)。 与其它信号通路相比， 这条信号通路的传递过程相对简 单， 它主要由三个成分组成， 即酪氨酸激酶相关受体、 酪氨酸激酶 JAK和 转录因子 STAT。
细胞因子 （如干扰素 IFN和白介素 IL等） 和生长因子 （如表皮生长因 子 EGF , 血小板衍生因子 PDGF等）在细胞膜上有相应的受体。这些受体的 共同特点是受体本身不具有激酶活性， 但胞内段具有酪氨酸激酶 JAK 的结 合位点。 受体与配体结合后， 通过与之相结合的 JAK 的活化， 来憐酸化各 种靶蛋白的酪氨酸残基以实现信号从胞外到胞内的转递。 JAK家族是一种非 受体型酪氨酸蛋白激酶 (PTK), 迄今为止已鉴定出四种 JAK家族的激酶， 包 括 JAKl、 JAK2. JAK3和 TYK2。它们在结构上有 7个 JAK同源结构域（JAK homology domain, JH)， 其中 JHl结构域为激酶区、 JH2结构域是"假"激酶 区、 JH6和 JH7是受体结合区域。
STAT在信号转导和转录激活上发挥了关键性的作用， STAT是一种 DNA 结合蛋白，是重要的 JAK底物，共有七个成员 STAT1、 STAT2、 STAT3、 STAT4、 STAT5a、 STAT5b和 STAT6。 STAT蛋白在结构上可分为以下几个功能区段： N-端结构域、 螺旋结构域、 DNA结合域、 连接区、 SH3结构域、 SH2结构 域及 C-端的转录激活区。其中，序列上最保守和功能上最重要的区段是 SH2 结构域， 它具有与酪氨酸激酶 Src 的 SH2 结构域完全相同的核心序列 "GTFLLRFSS，，。
JAK-STAT信号通路的传递过程相对简单。信号传递过程如下：细胞因 子与相应的受体结合后引起受体分子的二聚化， 这使得与受体偶联的 JAK 激酶相互接近并通过交互的酪氨酸憐酸化作用而活化。 JAK激活后催化受体 上的酪氨酸残基发生憐酸化修饰， 继而这些憐酸化的酪氨酸位点与周围的氨 基酸序列形成 "停泊位点" （docking site ) , 同时含有 SH2结构域的 STAT蛋 白被招募到这个"停泊位点"。最后， 激酶 JAK催化结合在受体上的 STAT蛋 白发生憐酸化修饰， 活化的 STAT蛋白以二聚体的形式进入细胞核内与靶基 因结合， 调控基因的转录 (Ihie, J.J. Nature 1995 , 377, 591-594)。 值得一提 的是， 一种 JAK激酶可以参与多种细胞因子的信号转导过程， 一种细胞因 子的信号通路也可以激活多个 JAK激酶，但细胞因子对激活的 STAT分子却 具有一定的选择性。 例如 IL-4激活 STAT6, 而 IL- 12却特异性激活 STAT4。
JAK-STAT通路广泛存在于机体内各种组织细胞内，尤其对淋巴细胞系 的分化、 增殖、 抗感染具有重要作用， 并参与多种炎症因子的相互作用和信 号转导 (Kiesseleva T. et al. /. Ge«e， 2002， 285， 1-24)。 该通路的异常活化与 多种疾病密切相关， 寻找与筛选 JAK抑制剂能有助于深入研宄 JAK-STAT 的调控机制， 进而为防治相关疾病提供新的药物及手段。
类风湿性关节炎滑膜组织中白介素 IL-6、 IL-15、 干扰素 （IFN)、 粒细 胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF )等表达水平显著升高， 在病症的发生 发展过程中发挥重要作用， 且上述细胞因子均通过 JAK-STAT信号转导通路 发挥作用。 因此， 针对性阻断 JAK-STAT通路可以达到改善类风湿性关节炎 病理生理过程的目的 (Joel M.K. et al. Arthritis Rheum. 2009， 60, 1859-1905)。
肿瘤的发生、生长、侵袭和转移与 JAK-STAT信号转导通路有关。正常 信号转导中 STATs的激活快速而短暂， STATs持续性激活与细胞的恶性转化 进程密切相关 (Buettner R. et al. Clin. Cancer Res. 2002， 8(4) , 945-954)。 STAT3 是 EGFR、 IL-6/JAK、 Src等多个致癌性酪氨酸激酶信号通道的汇聚的焦点， 在多种肿瘤细胞和组织中都有激活，如乳腺癌、卵巢癌、头颈部鳞状细胞癌、 ***癌、 恶性黑色素瘤、 多发性骨髓瘤、 淋巴瘤、 脑瘤、 非小细胞性肺癌 和各种白血病等 (Niu G. et al. Oncogene 2002 , 21(13) , 2000-2008)。 JAK-STAT 通路抑制剂属于 PTK抑制剂， 而该酶是癌基因蛋白和原癌蛋白家族成员， 在细胞的正常以及非正常增生中起着重要作用。肿瘤的发生和生长都离不开
PTK, 因此， JAK-STAT通路抑制剂通过拮抗 PTK而抑制肿瘤的生长， 具有 明显的抗肿瘤效应 (Mora L.B. et al. /. Cancer Res. 2002 , 62(22) , 6659-6666)。
炎症性肠病与自身免疫密切相关， JAK-STAT通路参与了多种重要致炎- 抗炎细胞因子的信号转导及调控过程， 其中尤与 IFN-Y、 IL-1、 IL-6、 IL-10、 IL-4关系密切。 且炎症介质及细胞因子也可导致机体多条信号通路活化， 从 而通过它们直接或间接地介导炎症介质的表达， 导致肠粘膜受损， 但其中许 多错综复杂的信号机制仍有待阐明。 在理论上， 阻断过度激活的 JAK-STAT 信号转导通路可从上游抑制众多炎性细胞因子的表达， 从而达到防治炎症性 肠病的目的 (Riley, J.K. et al. /. Biol. Chem. 1999 , 274, 16513- 16521)。
另外， 最新的研宄表明： 器官移植排斥、 银屑病、 组织和器官纤维化、 支气管哮喘、 缺血性心肌病、 心力衰竭、 心肌梗死、 血液***疾病以及免疫 ***疾病都与 JAK-STAT信号转导通路密切相关， 这条信号通路不但对维持 细胞的正常生理功能具有重要意义， 而且对疾病的发生和发展也有重要的调 控作用。 发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供了一种与现有技术完全不同的如通 式 I所示的五元并六元杂环化合物， 其药学上可接受的盐、 代谢产物、 代谢 前体或其药物前体， 所述的如通式 I所示的五元并六元杂环化合物是一类非 常有效的 Janus Kinase ( JAK) 抑制剂， 可以用于治疗或预防癌症， 感染， 炎症及自身免疫性病变等细胞增殖类疾病。
本发明提供了如通式 I所示的五元并六元杂环化合物， 其药学上可接受 的盐、 代谢产物、 代谢前 ，
Figure imgf000006_0001
其中， V为 N或 C;
W为 N或 CR3;
X为 0， S， N或 CR4;
Y为 S或 CR5;
环 A为芳环（优选 CW。的 ^ ：环， 进一步优选苯环（
Figure imgf000006_0002
)) 或杂芳环 （优选杂原子为氮原子， 杂原子数为 1-3个， C2_5的杂芳环； 进-
步优选吡唑 （如
Figure imgf000006_0003
部分相连接， b'端与通 式 I中的 L1部分相连接） 咪唑、 吡咯、 吡啶、 嘧啶、 ***、 吡嗪、 四唑、 哒
嗪或三嗪； 再进一步优选吡唑 （如
Figure imgf000006_0004
a'端与通式 I中 部分 相连接， b'端与通式 I中的 L1部分相连接： )；
L1为化学键、 垸基 （优选 CM的垸基）、 亚垸基、 环垸基 （优选 C3_6的 环垸基， 进一步优选环丙基）或杂环垸基（优选杂原子为氮原子， 杂原子数 为 1-3个， C3_6的杂环垸基或杂原子为氧原子， 杂原子数为 1-3个， C3_6的杂 环垸基）； 其中上述的垸基、 亚垸基、 环垸基或杂环垸基可以各自独立进一步被一 个或多个选自下列的取代基所取代： 卤素（可以为？、 Cl、 Br、或 I，优选 F)、 氰基、 磺酰基 （优选 的垸基磺酰基或 C3_6的环垸基磺酰基， 所述的 d_6
〇2 02
的垸基磺酰基优选 的垸基磺酰基，进一步优选 或 ^3^ )、酰基（优 选甲酰基或(^_4的垸基酰基， 所述的 CM的垸基酰基优选 2垸基酰基）、 环 垸基 （优选 C3_6的环垸基， 进一步优选环戊基） 和杂环垸基；
L2为垸基（优选 CM的垸基，进一步优选甲基）、酰基（甲酰基或羰基）、 环垸基 （优选 C3_6的环垸基， 进一步优选环丙基或环己基）、 杂环垸基 （优 选杂原子为氧和 /或氮原子， 杂原子数为 1-4个， C3_6的杂环垸基； 进一步优 选杂原子为氧原子， 杂原子数为 1-3个， C3_6的杂环垸基， 再进一步优选四
Figure imgf000007_0001
)) 或杂芳基 （优选杂原子为氮原子， 杂原子数为 1-4个， 。的杂 基； 进一步优选杂原子为氮原子， 杂原子数为 1-4个， C4_8的杂芳基； 再
或 )、咪唑基、吡啶基（如 或
Figure imgf000007_0002
'Ν^、 )、 苯并咪唑基 （如 )、 哒
嗪基 （
Figure imgf000007_0003
) 或嘧啶基
M为卤素 （优选氟）、 垸基（优选 d_6的垸基， 进一步优选甲基、 乙基、 丙基或异丙基）、亚垸基、环垸基（优选 C3_6的环垸基， 进一步优选环丙基）、 垸氧基 [优选被杂环垸基取代的 CM的垸氧基，进一步优选被杂环垸基取代的 C2的垸氧基； 其中， 所述的 "被杂环垸基取代的 d_4的垸氧基"中所述的杂 环垸基优选杂原子是氧和 /或氮原子， 杂原子数为 1-4个， 。的杂环垸基；
进一步优选吗啉基（如
Figure imgf000008_0001
)或四氢吡咯基]、 杂环垸基 [优选杂原子为氧和 / 或氮原子， 杂原子数为 1-4个， C3_8的杂环垸基； 进一步优选杂原子为氧和 / 或氮原子， 杂原子数为 1-4个， C4_6的杂环垸基； 再进一步优选吗啉基 （如
Figure imgf000008_0002
)、吖丁啶基（如 )、哌啶基 氧杂环丁垸基 （如 L0 )、 四唑基 （如 或:^ N' ) 哌嗪基或四氢吡 咯基]、 芳基（优选 。的芳基， 进一步优选苯基）、 杂芳基、 氰基、 磺酰基 或酰基； 其中上述 M 中所述的垸基， 亚垸基， 垸氧基， 杂环垸基， 芳基， 杂芳基， 磺酰基或酰基可以各自独立的任选进一步被一个或多个选自卤素
(F、 Cl、 Br或 I， 优选 F; 所述的卤素取代的 d_6的垸基优选三氟甲基或
)、 羟基 （羟基取代的 d_6的垸基优选
Figure imgf000008_0003
Figure imgf000008_0004
或 )、 氰基 （氰基取代的 d_6的垸基优选 酰氨基、 硝基、 羧基、 磺酰基、 甲磺酰基 （甲磺酰基基取代的 d_6的垸基优
02
选、 ^ ^^S^ 酰基、 垸氧基 （优选 _6的垸氧基， 进一步优选 d_3的垸氧 基， 所述的 d_3的垸氧基可以为甲氧基、 乙氧基、 丙氧基或异丙氧基； 所述 的垸氧基取代的 d_6的垸基优选 ^ο^ )、 环垸基（优选 C3_6的环垸基， 进 一步优选环丙基）、杂环垸基（优选杂原子为氧和 /或氮原子， 杂原子数为 1-4 水， C3-8的杂环垸基； 进一步优选杂原子为氧和 /或氮原子， 杂原子数为 1-4
水 ， C4_6的杂环垸基；再进一步优选吗啉基（如
Figure imgf000009_0001
)、四氢吡喃基（如 )、 吖丁啶基 （如 QjH )、 哌啶基 （ 氧杂环丁垸基 （如 Ώ) )、
Ν-Ν、
. 1
哌嗪基、 四氢吡咯基或四唑基（如
Figure imgf000009_0002
N' ))芳基和杂芳基的取代 基所取代；
R1为氢原子、 氘原子、 卤素 （可以为？、 Cl、 Br或 I， 优选 F)、 氰基、 垸基 （优选 d_4的垸基）、 环垸基、 磺酰基、 垸基 _NH ^^或垸基 _NH 2 ; 其中上述 R1中所述的垸基可以任选进一步被一个或多个选自下列的取代基 所取代： 卤素、 羟基、 氰基、 氨基、 硝基、 羧基、 磺酰基、 酰基、 垸氧基、 环垸基、 烯基和炔基；
R2、 R3、 R4和 R5各自独立的为氢、氘、 卤素或垸基（优选 CM的垸基）； m是 0， 1， 2或 3 ; n是 1， 2 , 3或 4;
p是 0， 1， 2， 3， 4或 5。
化合物 I中的各取代基优选如下取代基：
其中， V为 N或 C;
W为 N或 CH;
X为 0， S， N或 CH;
Y为 S或 CH;
R2为氢、 氘、 卤素 （可以为？、 Cl、 Br或 I ) 或垸基；
m是 0或 1 ; n是 1或 2 ;
p是 0或 1。
本发明中所述的五元并六元杂环化合物 I， 进一步优选如下所示的化合 物 II，
Figure imgf000010_0001
II 其中， 各字母和基团的定义均同前所述。
本发明中所述的五元并六元杂环化合物 I， 再进一步优选如下所示的化 合物 111-1， ΠΙ-2或 111-3。
Figure imgf000010_0002
III- 1 III- 2
Figure imgf000010_0003
in-: 其中， 各字母和基团的定义均同前所述。
本发明中所述的化合物 ΠΙ-1 较佳的为， 如下所示的化合物 IV-1-1 或 IV- 1-2，
Figure imgf000011_0001
IV-1-1 IV- 1-2 其中， X为 S或 0， 其余各字母和基团的定义均同前所述。
本发明中所述的化合物 ΠΙ-2较佳的为， 如下所示的化合物 IV-2，
Figure imgf000011_0002
IV-2
其中， 各字母和基团的定义均同前所述。
本发明中所述的化合物 ΠΙ-3较佳的为， 如下所示的化合物 IV-3,
Figure imgf000011_0003
IV-3
其中， 各字母和基团的定义均同前所述。
本发明中所述的化合物 IV-1-1较佳的为， 如下所示的化合物 V-1-1
Figure imgf000012_0001
V-l-1
其中， 各字母和基团的定义均同前所述。
本发明中所述的如通式 I所示的五元并六元杂环化合物， 进 任一
Figure imgf000012_0002
/:/:/ O 8/-/-iHi>l£ ζ-εοϊπΗοίAV
Figure imgf000013_0001
Figure imgf000014_0001
■εθΐΐΐ/ ΟΖ OAV
Figure imgf000015_0001
Figure imgf000016_0001
本发明还提供了所述的如通式 I所示的五元并六元杂环化合物的制备方 法， 其为如下任一方法：
方法 1：在碱性条件下，将化合物 I-A和化合物 I-B,进行亲核取代反应， 即可；
Figure imgf000016_0002
I-A 方法 2: 将化合物 I-A和化合物 I-B在酸性条件下进行亲核取代反应，
Figure imgf000017_0001
I-A -A和化合物 I-B进行
Figure imgf000017_0002
I-A 方法 1、 2和 3中， 除特殊说明外， 各基团和字母的定义均同前所述。 方法 1中，所述的亲核取代反应的方法和条件均可为本领域中此类反应 的常规方法和条件，本发明特别优选下述方法和条件：溶剂中，将化合物 I-A 和化合物 I-B在碱性条件下进行亲核取代反应， 即可。 所述溶剂较佳的为二 甲亚砜， 1,4-二氧六环和 Ν,Ν-二甲基甲酰胺中的一种或多种， 进一步优选二 甲亚砜。所述的碱性条件中的碱特别优选无机碱，所述的无机碱优选氟化钾、 氟化钠、 碳酸铯和碳酸钾中的一种或多种， 进一步优选氟化钾。 所述的溶剂 与所述的化合物 Ι-Α的体积质量比优选 10mL/g〜100mL/g。所述的化合物 Ι-Α 与所述的化合物 I-B的摩尔比优选 0.1 : 1〜1： 1， 进一步优选 0.3 : 1〜0.9： 1。 所述碱与所述的化合物 I-B的摩尔比优选 1 : 1〜10： 1， 进一步优选 1 : 1〜2： 1。 所述的反应温度优选 50°C〜150°C， 进一步优选 70°C〜110°C。 所 述的反应时间较佳的以检测反应完全为止， 本发明中特别优选 51！〜 24h。
方法 2中，所述的亲核取代反应的方法和条件均可为本领域中此类反应 的常规方法和条件，本发明特别优选下述方法和条件：溶剂中，将化合物 I-A 和化合物 I-B在酸性条件下进行亲核取代反应， 即可。 其中所述的溶剂优选 有机溶剂， 所述的有机溶剂优选异丁醇、正丁醇、二甲亚砜和 Ν,Ν-二甲基甲 酰胺中的一种或多种， 进一步优选异丁醇。 所述的酸性条件中的酸优选有机 酸和无机酸， 进一步优选有机酸， 所述的有机酸优选对甲苯磺酸， 所述的无 机酸优选盐酸和 /或硫酸。所述的溶剂与所述的化合物 Ι-Α的体积质量比优选 10mL/g〜100mL/g。所述的化合物 I-A与所述的化合物 I-B的摩尔比优选 0.1： 1〜1： 1， 进一步优选 0.3 : 1〜0.9： 1。 所述的酸与所述的化合物 I-B的摩尔 比优选 0.1 : 1〜3： 1，进一步优选 0.6: 1〜1.2： 1。所述的反应温度优选 50°C〜 150°C，进一步优选 80°C〜120°C。所述的反应时间较佳的以检测反应完全为 止， 本发明中特别优选 51！〜 24h。
方法 3中，所述的偶联反应的方法和条件均可为本领域中此类反应的常 规方法和条件，本发明特别优选下述方法和条件：溶剂中，惰性气体保护下， 在碱和钯催化剂的作用下， 将化合物 I-A和 I-B进行偶联反应， 即可； 其中， 所述的惰性气体优选氩气和 /或氮气； 所述的溶剂优选有机溶剂和 /或水， 所 述的有机溶剂优选 1,4-二氧六环、 甲苯和乙二醇二甲醚中的一种或多种， 进 一步优选 1,4-二氧六环。 所述的溶剂与所述的化合物 I-A的体积质量比优选 20mL/g~100mL/g。 所述的碱优选无机碱， 所述的无机碱优选碳酸钾、 碳酸 铯、 碳酸钠和憐酸钾中的一种或多种。 所述的碱的与所述的化合物 I-A的摩 尔比优选 1 : 1〜10： 1， 进一步优选 3 : 1〜5： 1。 所述的钯催化剂为本领域 中发生此类偶联反应的常规催化剂， 本发明中特别优选三 (二亚苄基茚丙酮:) 二钯、 醋酸钯、 四 （三苯基膦） 钯和 [Ι,Γ-双 （二苯基膦基） 二茂铁]二氯化 钯中的一种或多种， 进一步优选三 (二亚苄基茚丙酮:)二钯。 所述的钯催化剂 与所述的化合物 Ι-Α的摩尔比优选 0.005: 1-0.5： 1， 进一步优选 0.01 : 1〜 0.10： 1。所述的化合物 Ι-Α与所述的化合物 Ι-Β的摩尔比优选 0.5 : 1〜2： 1， 进一步优选 0.9: 1〜1.5： 1； 所述的反应温度优选 50°C〜150°C， 进一步优 选 90°C〜130°C ; 所述的反应时间较佳的以检测反应完全为止， 本发明中特 别优选 0.51！〜 3h。 本发
Figure imgf000019_0001
本领域人员应理解， 在得知了本发明化合物的结构以后， 可通过多种本 领域熟知的方法、 利用公知的原料， 来获得本发明的化合物， 比如化学合成 或从植物中提取的方法， 这些方法均包含在本发明中。 除非另外说明或提供 制备方法， 制备本发明的化合物或其中间体所用的原料均是本领域已知或可 通过商购获得的。
本发明中， 所述的制备方法中的各优选条件可任意组合， 即得本发明的 各较佳实例。
本发明还提供了五元 -A,
Figure imgf000019_0002
I-A
其中， V为 N或 C;
W为 N或 CR3;
X， Y各自独立地为 0， S， N或 CR4;
环 A为芳环或杂芳环； L1为化学键、 垸基 （优选 CM的垸基）、 亚垸基、 环垸基 （优选 C3_6的 环垸基， 进一步优选环丙基）或杂环垸基（优选杂原子是氮原子， 杂原子数 为 1-3个， C3_6的杂环垸基或杂原子是氧原子， 杂原子数为 1-3个， C3_6的杂 环垸基）； 其中上述的垸基、 亚垸基、 环垸基或杂环垸基可以各自独立进一 步被一个或多个选自下列的取代基所取代： 卤素 （可以为？、 Cl、 Br, 或 I， 优选 F)、 氰基、 磺酰基 (优选 d_6的垸基磺酰基或 C3_6的环 磺酰 2所 述的 d_6的垸基磺酰基优选 d_3的垸基磺酰基， 进一步优选 或 ^S )、 酰基 (优选甲酰基或 CM的垸基酰基， 所述的 CM的垸基酰基优选 C2垸基酰 基：)、 环垸基 （优选 C3_6的环垸基， 进一步优选环戊基） 和杂环垸基；
R1为氢原子、 氘原子、 卤素 （可以为？、 Cl、 Br或 I， 优选 F)、 氰基、 垸基 （优选 cM的垸基）、 环垸基、 磺酰基、 垸基 _NH ^^或垸基 _NH 2 ; 其中上述的垸基可以任选进一步被一个或多个选自下列的取代基所取代： 卤 素、 羟基、 氰基、 氨基、 硝基、 羧基、 磺酰基、 酰基、 垸氧基、 环垸基、 烯 基和炔基；
R2、 R3和 R4各自独立地为氢、 氘、 卤素或垸基；
m是 0， 1， 2或 3 ; n是 1， 2, 3或 4。
本发明中所述的如通式 I-A所示的五元并六元杂环化合物， 较佳的为： 其中， V为 N时， X为 N， W和 Y为 CH;
或 V为 C; W为 N; X， Y各自独立地为 0， S或 CH;
R2为氢原子、 卤素 （可以为？、 Cl、 Br或 I) 或垸基； m是 0， 1或 2; n是 1或 2。
本发明中所述的如通式 I-A所示的五元并六元杂环化合物， 进一步优选 如式 ΠΙ-Α所示的化合物：
Figure imgf000021_0001
III-A 其中， 各字母和基团的定义均同前所述。
本发明中所述的如通式 ΠΙ-Α所示的化合物 :进一步优选如式 IV-A所; 的化合物：
Figure imgf000021_0002
其中， 各字母和基团的定义均同前所述。
本发明中所述的如通式 I-A所示的五元并六元杂环化合物， 进一步优选 如下任一化合物：
Figure imgf000021_0003
Figure imgf000022_0001
Figure imgf000023_0001
77 81
和化合物 I-D进行偶联反应， 即可;
Figure imgf000023_0002
化合物 I-A的制备方法中， 所述的偶联反应的方法和条件均可为本领域 中此类反应的常规方法和条件，本发明中特别优选下述方法和条件：溶剂中， 惰性气体保护下， 在碱和钯催化剂的作用下， 将化合物 I-C和 I-D进行偶联 反应， 即可。其中， 所述的惰性气体为氩气和 /或氮气； 所述的溶剂优选有机 溶剂和 /或水， 所述的有机溶剂优选 1,4-二氧六环、 甲苯、 乙二醇二甲醚中的 一种或多种， 进一步优选 1,4-二氧六环。 所述的溶剂与所述的化合物 I-C的 体积质量比优选 20mL/g~100mL/g。 所述的碱优选无机碱， 所述的无机碱优 选碳酸钾、 碳酸铯、 碳酸钠和憐酸钾中的一种或多种； 所述的碱与所述的化 合物 I-C的摩尔比优选 1 : 1〜10： 1， 进一步优选 3 : 1〜5： 1。 所述的钯催 化剂为本领域中发生该类偶联反应的常规催化剂， 本发明中特别优选三 (二 亚苄基茚丙酮)二钯、 醋酸钯、 四 （三苯基膦） 钯和 [Ι,Γ-双 （二苯基膦基） 二茂铁]二氯化钯中的一种或多种， 进一步优选 [Ι,Γ-双 （二 ^ 铁]二氯化钯。所述的钯催化剂与所述的化合物 I-C的摩尔比优选 0.005: 1〜 0.5： 1， 进一步优选 0.01 : 1〜0.10： 1； 所述的化合物物 I-C与所述的化合 物 I-D的摩尔比优选 0.5 : 1〜2： 1， 进一步优选 0.9: 1〜1.5： 1； 所述的反 应温度优选 20°C〜120°C， 进一步优选 70°C〜110°C。 所述的反应时间较佳 的以检测反应完全为止， 本发明中特别优选 41！〜 18h。
本发明还提供了上述通式 I所示的五元并六元杂环化合物， 其药学上可 接受的盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 在制备 Janus激酶 （JAK) 抑制剂的药物中的用途。
本发明还提供了上述通式 I所示的五元并六元杂环化合物， 其药学上可 接受的盐、代谢产物、代谢前体或其药物前体， 在制备治疗和 /或预防细胞增 殖类疾病的药物中的用途。其中所述的细胞增殖类疾病为本领域中常规的细 胞增殖所导致的疾病， 本发明中特别优选癌症、 感染、 炎症和自身免疫性疾 病。
本发明还提供了一种药物组合物， 其含有治疗有效剂量的如上所述的如 通式 I所示的五元并六元杂环化合物， 其药学上可接受的盐、 代谢产物、 代 谢前体或其药物前体， 及其药学上可接受的一种或多种载体和 /或稀释剂。
本发明提供了所述的药物组合物在制备 Janus激酶 （JAK) 抑制剂的 药物中的应用。
本发明提供了所述的药物组合物在制备治疗和 /或预防细胞增殖类疾病 的药物中的应用。其中所述的细胞增殖类疾病为本领域中常规的细胞增殖所 导致的疾病， 本发明中特别优选癌症、 感染、 炎症和自身免疫性疾病。
本发明中所述药物组合物可以是适用于口服的形式， 也可以是无菌注射 水溶液形式， 可按照本领域任何已知制备药用组合物的方法制备口服或注射 组合物。
除非另有说明，在本发明说明书和权利要求书中出现的以下术语具有下 述含义：
在此使用的"垸基"意指包括 1〜20个碳原子的支链和直链的饱和脂族烃 基， 优选 1〜10个碳原子， 更优选 1〜8个碳原子， 比如甲基、 乙基、 正丙 基、 异丙基、 正丁基、 叔丁基、 异丁基、 戊基、 己基、 庚基、 辛基、 壬基、 癸基、 4,4-二甲基戊基、 2,2,4-三甲基戊基、 十一垸基、 十二垸基， 及它们的 各种异构体等； 以及包含下述任意 1〜4种取代基的上述垸基： 氘、 卤素（优 选？、 Br, C1或 1)、 垸基、 垸氧基、 芳基、 芳氧基、 芳基取代的芳基或二芳 基、 芳垸基、 芳垸氧基、 烯基、 炔基、 环垸基、 环烯基、 环垸基垸基、 环垸 基垸氧基、 氨基、 羟基、 羟基垸基、 酰基、 醛基、 杂芳基、 杂芳氧基、 杂环 垸基、 杂环垸氧基、 芳基杂芳基、 芳基垸氧羰基、 杂芳基垸基、 杂芳基垸氧 基、 芳氧垸基、 芳氧芳基、 垸氨基、 酰氨基、 芳基羰基氨基、 硝基、 腈基、 巯基、 卤代垸基、 三卤垸基和 /或垸硫基。
在此使用的"亚垸基"（包括单独使用及包含在其它基团中时） 意指包括 1〜20个碳原子的支链和直链的亚饱和脂族烃基， 优选 1〜10个碳原子， 更 优选 1〜8个碳原子， 比如亚甲基、 亚乙基、 亚丙基、 亚异丙基、 亚正丁基、 亚叔丁基、 亚异丁基、 亚戊基、 亚己基、 亚庚基、 亚辛基、 亚壬基、 亚癸基、 亚 （4,4-二甲基戊基）、 亚 （2,2,4-三甲基戊基）、 亚 ^一垸基、 亚十二垸基， 及它们的各种异构体等等； 以及包含下述任意 1〜4种取代基的上述亚垸基: 氘、 卤素 （优选 F、 Br, CI或 1)、 垸基、 垸氧基、 芳基、 芳氧基、 芳基取代 的芳基或二芳基、 芳垸基、 芳垸氧基、 烯基、 炔基、 环垸基、 环烯基、 环垸 基垸基、 环垸基垸氧基、 氨基、 羟基、 羟基垸基、 酰基、 醛基、 杂芳基、 杂 芳氧基、杂环垸基、杂环垸氧基、 芳基杂芳基、 芳基垸氧羰基、杂芳基垸基、 杂芳基垸氧基、 芳氧垸基、 芳氧芳基、 垸氨基、 酰氨基、 芳基羰基氨基、 硝 基、 腈基、 巯基、 卤代垸基、 三卤垸基和 /或垸硫基； 上述取代基中的一种或 多种也可与亚垸基连接成环， 从而形成并环或螺环。
术语"脂环"或"环垸基 "指全碳单环或多环基团， 其中每个环可以含有一 个或多个双键， 但没有一个环具有完全共轭的 π电子体系。优选 3〜20个碳 所形成的 1〜3个环的环垸基， 更优选 3〜10个碳， 例如： 环丙基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 环庚基、 环辛基、 环癸垸和环十二垸基、 环己烯基； 环垸 基可被下述任意 1〜4种取代基取代： 氘、 卤素、 垸基、 垸氧基、 羟基、 芳 基、 芳氧基、 芳垸基、 环垸基、 垸氨基、 酰氨基、 氧、 酰基、 芳基羰基氨基、 氨基、 硝基、 腈基、 巯基和 /或垸硫基和 /或任意本发明中定义的垸基。
术语"垸氧基 "表示通过氧桥连接的具有所述碳原子数目的环状或者非 环状垸基。 由此， "垸氧基"包含上述垸基和环垸基的定义。
术语"烯基"是指含有指定数目碳原子和至少一个碳碳双键的直链、 支链 或者环状非芳香烃基。 优选存在一个碳碳双键， 并且可以存在高达四个非芳 香碳碳双键。 由此， "C2_12烯基"是指具有 2〜12个碳原子的烯基。 " C2_6烯基" 是指具有 2〜6个碳原子的烯基， 包括乙烯基、 丙烯基、 丁烯基、 2-甲基丁 烯基和环己烯基。 烯基的直链、 支链或者环部分可以含有双键， 并且如果表 明为取代烯基， 取代基可独立地选自一个或多个以下基团： 垸基、 卤素、 垸 氧基、 羟基、 芳基、 芳氧基、 芳垸基、 环垸基、 垸氨基、 酰氨基、 酰基、 芳 基羰基氨基、 氨基、 硝基、 腈基、 巯基和 /或垸硫基和 /或任意本发明中定义 的垸基。
术语"炔基"是指含有指定数目碳原子和至少一个碳碳三键的直链、 支链 或者环状烃基。 其中可以存在高达三个碳碳三键。 由此， "C2_12炔基"是指具 有 2〜12个碳原子的炔基。 "C2_6炔基"是指具有 2〜6个碳原子的炔基， 包括 乙炔基、 丙炔基、 丁炔基和 3-甲基丁炔基等。
在此使用的"芳基"是指任何稳定的在各环中可高达 7个原子的单环或者 双环碳环，其中至少一个环是芳香环。上述芳基单元的实例包括苯基、萘基、 四氢萘基、 2,3-二氢化茚基、 联苯基、 菲基、 蒽基或者苊基 （acenaphthyl)。 可以理解，在芳基取代基是二环取代基，且其中一个环是非芳香环的情况中， 连接是通过芳环进行的。 以及包含下述任意 1〜4种取代基的上述芳基： 氘、 卤素 （F、 Br, CI或 1)、 垸基、 垸氧基、 芳基、 芳氧基、 芳基取代的芳基或 二芳基、 芳垸基、 芳垸氧基、 烯基、 炔基、 环垸基、 环烯基、 环垸基垸基、 环垸基垸氧基、任选被取代的氨基、 羟基、 羟基垸基、 酰基、 醛基、 杂芳基、 杂芳氧基、 杂环垸基、 杂环垸氧基、 芳基杂芳基、 芳基垸氧羰基、 杂芳基垸 基、 杂芳基焼氧基、 芳氧焼基、 芳氧芳基、焼氨基、 酉先氨基、 芳基羰基氨基、 硝基、 腈基、 巯基、 卤代垸基、 三卤垸基和 /或垸硫基。
术语 "芳环"是指任何稳定的在各环中可高达 7个原子的单环或者双环 碳环， 其中至少一个环是芳香环。 上述芳环单元的实例包括苯基、 萘基、 四 氢萘基、 2,3-二氢化茚基、 联苯基、 菲基、 蒽基或者苊基 （acenaphthyl)。 可 以理解， 在芳基取代基是二环取代基， 且其中一个环是非芳香环的情况中， 连接是通过 "芳环"进行的。 以及包含下述任意 1〜4种取代基的上述芳环： 氘、 卤素 （F、 Br, CI或 1)、 垸基、 垸氧基、 芳基、 芳氧基、 芳基取代的芳 基或二芳基、 芳垸基、 芳垸氧基、 烯基、 炔基、 环垸基、 环烯基、 环垸基垸 基、 环垸基垸氧基、 氨基、 羟基、 羟基垸基、 酰基、 醛基、 杂芳基、 杂芳氧 基、 杂环垸基、 杂环垸氧基、 芳基杂芳基、 芳基垸氧羰基、 杂芳基垸基、 杂 芳基焼氧基、 芳氧焼基、 芳氧芳基、 焼氨基、 酉先氨基、 芳基羰基氨基、 石肖基、 腈基、 巯基、 卤代垸基、 三卤垸基和 /或垸硫基。
术语 "杂芳环"或 "芳杂环"是指表示各环中可高达 7个原子的稳定单 环或者二环， 其中至少一个环是芳香环并且含有 1〜4个选自 0、 N、 和 S 的杂原子。 在此定义范围内的杂芳环包括但不限于： 吖啶、 咔唑、 噌啉、 咔 啉、 喹喔啉、 咪唑、 吡唑、 吡咯、 吲哚、 二氢吲哚、 苯并***、 苯并咪唑、 呋喃、 噻吩、 异噻唑、 苯并噻吩、 二氢苯并噻吩、 苯并呋喃、 异苯并呋喃、 苯并噁唑、 苯并呋咱、 苯并吡唑、 喹啉、 异氮杂茚、 异喹啉、 噁唑、 噁二唑、 异噁唑、 吲哚、 吡嗪、 吡啶并吡啶、 四唑并吡啶、 哒嗪、 吡啶、 萘嘧啶、 嘧 啶、 吡咯、 四唑、 噻二唑、 噻唑、 噻吩、 ***、 喹唑啉、 四氢喹啉、 二氢苯 并咪唑、 二氢苯并呋喃、 二氢苯并噁唑、 二氢喹啉。 正如以下杂环的定义一 样， "杂芳环"还应当理解为包括任何含氮杂芳环的 N-氧化物衍生物。在其中 杂芳基取代基是二环取代基并且一个环是非芳香环或者不包含杂原子的情 况下， 可以理解， 连接分别通过芳环或者通过包含环的杂原子进行。 杂芳环 可被下述任意 1〜4种取代基取代： 氘、 卤素、 垸基、 垸氧基、 羟基、 芳基、 芳氧基、 芳垸基、 环垸基、 垸氨基、 酰氨基、 酰基、 芳基羰基氨基、 氨基、 硝基、 腈基、 巯基和 /或垸硫基和 /或任意本发明中定义的垸基。
术语"卤素"表示氟、 氯、 溴、 碘或砹。 术语"羟基"表示 ^QH。 术语"氨基"表示— ^NH2。 术语"氰基"表示 。
Figure imgf000028_0001
术语"磺酰基 "表示 。
术语"酰基"表示羰基或甲酰基， 当两边都连有取代基时为羰基， 当只有 一端连有取代基时为甲酰基。
术语"酰氨基 "表示羰基酰胺基或甲酰氨基， 当两边都连有取代基时为羰 基酰胺基， 当只有一端连有取代基时为甲酰氨基。
术语"卤代垸基"表示卤素任意位置取代的垸基。 由此， "卤代垸基"包含 以上卤素和垸基的定义。
术语"卤代垸氧基"表示卤素任意位置取代的垸氧基。 由此， "卤代垸氧 基"包含以上卤素和垸氧基的定义。
术语"芳氧基 "表示通过氧桥连接的具有所述碳原子数目的芳基。 由此， "芳氧基"包含以上芳基的定义。
在此使用的术语"芳杂基 "或"杂芳基 "表示各环中可高达 7个原子的稳定 单环或者二环， 其中至少一个环是芳香环并且含有 1〜4个选自 0、 Ν、 和 S 的杂原子。 在此定义范围内的杂芳基包括但不限于： 吖啶基、 咔唑基、 噌啉 基、 咔啉基、 喹喔啉基、 咪唑基、 吡唑基、 吡咯基、 吲哚基、 二氢吲哚基、 苯并***基、 苯并咪唑基、 呋喃基、 噻吩基、 异噻唑基、 苯并噻吩基、 二氢 苯并噻吩基、 苯并呋喃基、 异苯并呋喃基、 苯并噁唑基、 苯并呋咱基、 苯并 吡唑基、 喹啉基、 异氮杂茚基、 异喹啉基、 噁唑基、 噁二唑基、 异噁唑基、 吲哚基、 吡嗪基、 吡啶并吡啶基、 四唑并吡啶基、 哒嗪基、 吡啶基、 萘嘧啶 基、 嘧啶基、 吡咯基、 四唑基、 噻二唑基、 噻唑基、 噻吩基、 ***基、 喹唑 啉基、 喹喔啉基、 四氢喹啉、 二氢苯并咪唑基、 二氢苯并呋喃基、 二氢苯并 噁唑基、 二氢喹啉基、 亚甲基二氧基苯甲酰基。 正如以下杂环的定义一样，
"杂芳基"还应当理解为包括任何含氮杂芳基的 N-氧化物衍生物。在其中杂芳 基取代基是二环取代基并且一个环是非芳香环或者不包含杂原子的情况下， 可以理解， 连接通过芳环。 杂芳基可被下述任意 1〜4种取代基取代： 氘、 卤素、 垸基、 垸氧基、 羟基、 芳基、 芳氧基、 芳垸基、 环垸基、 垸氨基、 酰 氨基、 酰基、 芳基羰基氨基、 氨基、 硝基、 腈基、 巯基和 /或垸硫基和 /或任 意本发明中定义的垸基。
术语"杂脂环 "或"杂环垸基"在此单独或作为另一个基团的一部分使用 时， 指包含 1〜4个杂原子 （如氮、 氧和硫中的一种或多种） 的 4〜12元单 环或多环基团， 其中每个环可以含有一个或多个双键， 但没有一个环具有完 全共轭的 π电子体系。 所述杂环垸基可包含 1〜4个取代基， 如垸基、 卤素、 氧代基和 /或任何本发明中定义的垸基取代基。此外，任何杂环垸基环可以稠 合于环垸基、 芳基、 杂芳基或杂环垸基环上。 在此定义范围内的杂环垸基包 括但不限于： 噁唑啉、 氧环丁基、 吡喃基、 四氢吡喃基、氮杂环丁垸基、 1,4- 二噁垸基、 六氢氮杂草基、 哌嗪基、 哌啶基、 吡咯垸基、 吗啉基、 硫代吗啉 基、 二氢呋喃基、 二氢咪唑基、 二氢吲哚基、 二氢异噁唑基、 二氢异噻唑基、 二氢噁二唑基、 二氢噁唑基、 二氢吡嗪基、 二氢吡唑基、 二氢吡啶基、 二氢 嘧啶基、 二氢吡咯基、 二氢四唑基、 二氢噻二唑基、 二氢噻唑基、 二氢噻吩 基、 二氢***基、 二氢氮杂环丁垸基、 四氢呋喃基和四氢噻吩基及其 Ν-氧 化物。 杂环垸基可以经其中的碳原子或者杂原子与其他基团进行连接。
本发明中所述的确定了碳数范围的 "Cxl_yl " 的垸基 （xl和 yl为整数）、 环垸基、 杂环垸基、 芳基和杂芳基， 如 " _12垸基"， 均表示未包含取代基 的 Ci_12垸基。
在不违背本领域常识的基础上， 上述各优选条件， 可任意组合， 即得本 发明各较佳实例。
本发明所用试剂和原料均市售可得。
本发明的积极进步效果在于： 本发明提供了如通式 I所示的化合物， 以 及其药学上可接受的盐， 以及代谢产物和代谢前体或其药物前体： 所述的如 通式 I所示的化合物是一类非常有效的 Janus Kinase (JAK)抑制剂， 可以用 于治疗或预防癌症， 感染， 炎症及自身免疫性病变等细胞增殖类疾病。 具体实施方式
下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在 所述的实施例范围之中。 下列实施例中未注明具体条件的实验方法， 按照常 规方法和条件， 或按照商品说明书选择。
化合物的结构由核磁共振 （NMR) 或质谱 (MS)来确定， 核磁共振谱是 通过 BrukerAvance-500仪器获得，氘代二甲亚砜，氘代氯仿和氘代甲醇等为 溶剂， 四甲基硅垸（TMS)为内标。 质谱是由液相色谱 -质谱 (LC-MS)联用仪 Agilent Technologies 6110 获得， 采用 ESI离子源。
微波反应是在美国 CEM公司生产的 Explorer全自动微波合成仪中进行， 磁控管频率为 2450MHz, 连续微波输出功率为 300W。
高效液相制备所用的仪器是 Gilson 281， 所用的制备柱是 Shimadazu Shim-Pack, PRC-ODS, 20x250 mm, 15 μηι。
实施例 1 3-{4-[2- (苄氨基)噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1Η-吡唑 -1-基}丁腈
T-01
合成路线如下：
Figure imgf000031_0001
化合物 1-a的合成
将碳酸铯 （13.3g， 41.2mmol) 加入到 3-溴丁氰 （2.0g， 10.3mmol) 和 4-吡唑硼酸频钠醇酯 (2.3g， 15.5mmol)的乙腈（lOOmL)溶液中， 混合物加热 至 90°C， 搅拌 3小时。 在冷却至室温后， 加水 (lOOmL)淬灭反应。 用乙酸乙 酯 （100mLx3) 萃取， 有机相合并， 依次用水 (60mLx3)和饱和食盐水 (60mL) 洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 得到无色液体 1-a (2.3g)， 粗产 品直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 262 [M+H]+。
化合物 1的合成
氮气氛下， 将碳酸钠 （318mg， 3.0mmol) 加入到 2,4-二氯噻吩并 [3,2-d] 嘧啶 (265mg， 1.29mmol)， 化合物 1-a (261mg， l.Ommol) 和 [Ι,Γ-双 (二苯基 憐)二茂铁]二氯化钯 (80mg， O. lmmol)的 1,4-二氧六环 （10mL) 溶液中， 混 合物于 65°C下搅拌反应 18小时。减压浓縮反应液， 残余物经硅胶柱层析纯 化（石油醚 /乙酸乙酯 =2: 1 )得化合物 l (250mg，产率： 82 % )。LC-MS (ESI): m/z = 304 [M+H]+ o
化合物 T-01的合成
化合物 l(30mg， O. lmmol), 苄胺 （32mg， 0.3mmol)， 氟化钾 （17mg， 0.3mmol)， 1,4-二氧六环 (5mL)和 二甲亚砜 (lmL)的混合物于 110°C 下反应 20小时。 减压浓縮反应液， 残余物加水 （50mL) 稀释， 用乙酸乙酯 (50mL) 萃取。 有机相依次用水 （20mLx2 )， 饱和食盐水 （20mL) 洗， 无水硫酸钠 干燥，过滤，减压浓縮滤液，残余物经硅胶柱层析纯化（二氯甲烧 /甲醇 =100: 1 ) 得化合物 T-01 (20mg， 产率： 53 % )。 LC-MS (ESI): m/z = 375 [M+H]+。
1HNMR (400MHz, CDC13) δ: 8.29 (s， 1H)， 8.24 (s， 1H)， 7.80 (d, J=5.6Hz, 1H)， 7.41-7.42 (m, 2H)， 7.31-7.35 (m, 2H)， 7.24-7.28 (m, 2H)， 5.63 (br, 1H)， 4.75 (d, J=6.0Hz， 2H)， 4.73 (m, 1H)， 2.93-3.06 (m, 2H)， 1.76 (d, J=6.8Hz， 3H) ppm
实施例 2 3-{4-[2- (苯氨基)噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}丁腈
T-02
合成路线
Figure imgf000032_0001
1 T-02
将化合物 1 (30mg， O.lmmol), 苯胺 （55mg， 0.6mmol) 和对甲苯磺酸 单水合物 (76mg， 0.4mmol)溶于异丁醇 （8mL) 中， 混合物在 110°C下搅拌 反应 16小时。 减压浓縮反应液， 残余物用乙醇 （30mL) 稀释后， 依次用 饱和碳酸氢钠水溶液 （30mL)， 水 （30mL) 以及饱和食盐水 （30mL) 洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =1: 1 )得化合物 T-02 (20mg，产率： 55 %)。 LC-MS (ESI): m/z = 361 [M+H]+ o
ifiNMR (400MHz, CDC13) δ: 8.35 (s， 1H)， 8.32 (s， 1H)， 7.88 (d, J=5.6Hz, 1H)， 7.75 (d， J=8.0Hz， 1H)， 7.33-7.39 (m， 4H)， 7.03-7.06 (m, 1H)， 4.75-4.80 (m， 1H)， 2.96-3.09 (m, 2H)， 1.76 (d, J=6.8Hz, 3H) ppm
实施例 3 3-环戊基 -3-{4-[2- (苯氨基)噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1- 基}丙腈 T-03 合成路线如下：
Figure imgf000033_0001
化合物 3-b的合成
氮气氛下， 将氰甲基三苯基溴化膦（12g， 31.49mmol) 的无水四氢呋喃 ( lOOmL)悬浮液冷却到 0°C， 慢慢滴加 2.5M正丁基锂正己垸溶液（13mL， 34.64mmol)。在 0°C继续搅拌 30分钟后，加入环戊基甲醛（3.1g， 31.49mmol) 并升至室温搅拌 1 小时。 加饱和氯化铵溶液 （50mL) 淬灭反应， 用乙酸乙 酯 （100mLx3) 萃取， 有机相合并， 依次用水 (60mLx3)和饱和食盐水 (60mL) 洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石 油醚 /乙酸乙酯 =10: 1 )得无色的油状化合物 3-b (l.Og,产率： 26.2%)。 LC-MS (ESI): m/z = 122 [M+H]+。
化合物 3-a的合成
将化合物 3-b ( lg， 8.26mmol)和 4-吡唑硼酸频钠醇酯（2.4g， 12.39mmol) 溶于乙腈 ( lOmL ) 中， 加入 1,8-二氮杂双环 [5,4,0] ^—碳 -7-烯 ( 2.5g , 16.52mmol) 。 此混合物于 60°C下搅拌反应 18小时。 减压浓縮反应液， 残 余物加入水 （50mL) ， 用乙酸乙酯 （100mLx3) 萃取， 有机相合并， 依次用 水 (60mLx3:>和饱和食盐水 (60mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =3: 1 ) 得浅黄色油状化合物 3-a (715mg, 产率： 27·5 %)。 LC-MS (ESI): m/z = 316 [M+H]+。
化合物 3的合成 氮气氛下， 将化合物 3-a (715mg, 2.27mmol) ， 2,4-二氯噻吩并 [3,2-d] 嘧啶 （465mg， 2.27mmol) 和碳酸钠 （72 mg， 6.80mmol) 悬浮于二氧六环 (4mL) 和水 （4mL) 的混合溶剂中， 加入 [Ι,Γ-双 (二苯基憐)二茂铁]二氯 化钯 （233mg， 0.28mmol) 。 混合物在 80°C下搅拌反应 16小时。 减压浓縮 反应液， 残余物加水（20mL) ， 用二氯甲垸（20mLx3 )萃取， 有机相合并， 依次用水 (60mLx3:>和饱和食盐水 (^OmL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓 縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =2:1 ) 得浅黄色固体 3 (330mg， 产率： 40.7%)。 LC-MS (ESI): m/z = 358 [M+H]+。
化合物 T-03的合成
将化合物 3 (50mg， 0.14mmol) 和苯胺 （39mg， 0.42mmol) 溶于异丁 醇 （0.5mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （54mg， 0.28mmol) 。 此混合物 在 110°C搅拌反应 16小时， 冷却到室温后， 继续搅拌 2小时， 过滤， 固体经 高效液相制备（流动相:乙腈，水（0.05 %三氟乙酸）；梯度： 40%-70%-10% ) 得到黄色固体 T-03 (23mg，产率： 39.7% )。 LC-MS (ESI): m/z = 415 [M+H]+。
^-NMR (400MHz, CDC13) δ: 8.37 (d, J=6Hz， 2H)， 7.90 (d, J=6Hz， 1H)， 7.76 (d, J=8Hz， 2H)， 7.37 (m, 3H)， 7.05 (t, J=7Hz， 1H)， 4.28 (m, 1H)， 3.17 (m, 1H)， 2.97 (m, 1H)， 2.61 (m, 1H)， 1.99 (m, 1H)， 1.71 (m, 7H) ppm
实施例 4 3-环戊基 -3-(4-{2- [(嘧啶 -5-基)氨基]噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4- 基 }-1Η-吡唑 -1-基） 丙腈 T-04合成路线如下：
Figure imgf000034_0001
T-04 将化合物 3 (50mg， 0.14mmol) 和 5-氨基嘧啶 （40mg， 0.42mmol) 溶 于异丁醇 （0.5mL) ， 加入对甲苯磺酸单水合物 （53mg， 0.28mmol) 。 此混 合物在 110°C搅拌反应 16小时。减压浓縮反应液，残余物经高效液相制备（流 动相： 乙腈， 水 （0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 60%-90%-10% ) 得到黄色固 体 T-04 (7mg， 产率： 12% ) 。 LC-MS (ESI): m/z = 417 [M+H]+。
^-NMR (400MHz, CD3OD) 5: 9.37 (s, 2H)， 8.76 (s, 1H)， 8.65 (s, 1H)， 8.41 (s， 1H)， 8.21 (d， J=6Hz， 1H)， 7.43 (d， J=6Hz， 1H)， 4.53 (m， 1H)， 3.12-3.28 (m, 2H)， 2.56 (m, 1H)， 1.97 (m, 1H)， 1.41-1.72 (m, 7H) ppm 实施例 5 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-{4-[2- (苯氨基）噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4- 基] -1Η-吡 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-05 合成路线如下：
Figure imgf000035_0001
化合物 5-c的合成
氮气氛下， 将氰甲基三苯基溴化膦 （13.4g， 35.09mmol) 的无水四氢呋 喃（ lOOmL)悬浮液冷却到 0°C，慢慢滴加 2.5M正丁基锂正己垸溶液（ 15.5mL， 38.59mmol)。 在 0°C继续搅拌 30分钟后， 加入 l-Boc-3-氮杂环丁酮 （6.0g， 35.09mmol)并升至室温搅拌 1小时。加饱和氯化铵溶液（50mL)淬灭反应， 用乙酸乙酯 （150mLx3) 萃取，有机相合并，依次用水 (100mLx3)和饱和食盐 水 (100mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层 析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =5: 1 )得白色固体 5-c (2.5g， 产率： 37%)。 LC-MS (ESI): m/z = 217 [M+Na]+。
化合物 5-b的合成
将化合物 5-c ( 6.0g， 30.93mmol ) 和 4-吡唑硼酸频那醇酯 （9.2g， 47.42mmol) 溶于乙腈 ( 60 mL) 中， 加入 1,8-二氮杂双环 [5,4,0]4 ^一碳 -7-烯 ( 10.0g， 65.79mmol) 。 此混合物于 60 °C下搅拌反应 18小时。 减压浓縮反 应液， 残余物加入 1 N盐酸水溶液 （lOOmL) ， 用乙酸乙酯 （100mLx3) 萃 取， 有机相合并， 依次用水 (60mLx3)和饱和食盐水 (60mL)洗， 无水硫酸钠干 燥，过滤，减压浓縮滤液，残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =3: 1 ) 得白色固体 5-b (7.1g， 产率： 59·2 %)。 LC-MS (ESI): m/z=389 [M+H]+。
化合物 5-a的合成
氮气氛下， 将化合物 5-b (4.0g， 10.3mmol) ， 2,4-二氯噻吩并 [3,2-d]嘧 啶（2.52g， 12.4mmol)和碳酸钠（3.3g， 31.2mmol)悬浮于二氧六环（25mL) 和水（25mL)的混合溶剂中，加入 [Ι,Γ-双 (二苯基憐)二茂铁]二氯化钯（l. lg, 1.5mmol) 。 混合物在 80°C下搅拌反应 16小时。 减压浓縮反应液， 残余物 加水（200mL)，用二氯甲垸（200mLx3 )萃取，有机相合并，依次用水 (100mLx3) 和饱和食盐水 (lOOmL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物 经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =2: 1 ) 得浅黄色固体 5-a(3.2g， 产率： 63 %)。 LC-MS (ESI): m/z = 431 [M+H]+。
化合物 5的合成
将化合物 5-a ( 310mg， 0.72mmol) 溶于二氯甲垸 （2mL) 中， 加入盐 酸二氧六环溶液 （4N， lmL) ， 混合物在室温下搅拌反应 16小时， 减压浓 縮反应液， 残余物加入二氯甲垸（10mL)和三乙胺（2mL) 。 混合物冷却到 0°C， 慢慢滴加乙基磺酰氯 （154mg， 1.37mmol) ， 滴加完毕继续在 0°C搅拌 30分钟。 加入水 （5mL) ， 用二氯甲垸 （10mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 依 次用水 (10mLx3)和饱和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮 滤液，残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =2:1 )得化合物 5 (108mg, 产率： 34%)。 LC-MS (ESI): m/z = 423 [M+H]+。
化合物 T-05的合成
将化合物 5 (50mg， 0.12mmol) 和苯胺 （33mg， 0.36mmol) 溶于异丁 醇 （ImL) ， 加入对甲苯磺酸单水合物 （45mg， 0.24mmol) 。 此混合物在 110°C搅拌反应 16小时。减压浓縮反应液，残余物经高效液相制备（流动相： 乙腈， 水 （0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 60%-90%-10% ) 得到黄色固体 T-05 (21mg, 产率： 37% ) 。 LC-MS (ESI): m/z = 480 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CDC13) δ: 8.47 (s， 1H)， 8.39 (s， 1H)， 7.92 (d, J=5Hz， 1H)， 7.75 (d, J=8Hz， 2H)， 7.38 (m, 3H)， 7.06 (t, J=7Hz， 1H)， 4.64 (d, J=9Hz， 2H)， 4.26 (d, J= 9Hz， 2H)， 3.39 (s, 2H)， 3.10 (q, J= 7Hz, 2H)， 1.43 (t， J= 7Hz， 3H) ppm
实施例 6 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-(4-{2- [(四氢吡喃 -4-基)氨基]噻吩并
[3,2-d]嘧啶 -4-基}-111-吡唑 -1-基)氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-06
合成
Figure imgf000037_0001
T-06 将化合物 5 ( 150mg， 0.36mmol)， 4-氨基四氢吡喃（90mg， 0.89mmol) 和无水氟化钾 （31mg， 0.54mmol) 悬浮于二甲亚砜 （2mL) 中， 混合物于 80°C反应 16 小时。冷却到室温后，加入二氯甲垸（50mL)稀释，水（20mLx2) 洗， 有机相用无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经硅胶制备板层析 纯化 (石油醚 /乙酸乙酯 =2:1 )得化合物 T-06 ( 18mg， 产率： 11 % )。 LC-MS (ESI): m/z = 488 [M+H]+。
^-NMR (400MHz, CDC13) 5: 8.41 (s, 1H)， 8.34 (s, 1H)， 7.83 (d, J=5Hz， 1H)， 7.25 (d, J=5Hz， 1H)， 5.10 (br, 1H)， 4.63 (d, J= 9Hz， 2H)， 4.24 (d, J= 9Hz， 2H)， 4.19 (m, 1H)， 4.05 (m, 2H)， 3.55 (m, 2H)， 3.41 (s, 2H)， 3.11 (q， J= 7Hz， 2H)， 2.10 (m, 2H)， 1.61 (m， 2H)， 1.42 (t, J= 7Hz， 3H) ppm 实施例 7 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-[4-(2-{[4- (吗啉 -4-基)苯基]氨基 }噻吩并
[3,2-d]嘧啶 -4-基) -1H-吡唑 -1-基]氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-07
合
Figure imgf000038_0001
T-07
化合物 7-b的合成
将 1-氟 -4-硝基苯 （2.9g， 20.56mmol) 和吗啉 （3.6g， 41.13mmol) 溶于 二甲亚砜（15mL)中， 加入碳酸钾（4.26g， 30.84mmol)， 此混合物于 80°C 反应 18 小时。 冷却到室温后， 慢慢倒入到水 （lOOmL) 中， 有黄色固体析 出， 过滤， 水洗， 真空干燥 24小时后得化合物 7-b (3.5g， 产率： 82% ) 。 产品无需纯化， 直接投入下一步反应。 化合物 7-a的合成
将化合物 7-b ( 1.5g, 7.21mmol)和氯化铵 ( l.Og, 18.03mmol)溶于 50% 乙醇-水 （20mL) 中， 加入锌粉 （1.2g， 18.03mmol) 。 混合物加热回流 30 分钟后， 冷却到室温， 过滤， 固体用乙醇 （10mL) 洗涤， 合并的滤液减压 浓縮， 残留物加水 （50mL) 并用乙酸乙酯 （50mLx3 ) 萃取， 有机相用无水 硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮得到浅棕色固体 7-a ( l.lg, 产率： 86% ) 。 产品无需纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 179 [M+H]+。
化合物 T-07的合成
将化合物 5 ( 150mg， 0.36mmol)和化合物 7-a ( 190mg， 1.07mmol) 溶 于异丁醇 （2mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （135mg， 0.71mmol) 。 此 混合物于 110°C反应 16小时， 然后冷却到室温继续搅拌 30分钟， 有固体析 出， 过滤， 固体经高效液相制备 （流动相： 乙腈， 水 （0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 50%-80%-10% )得到黄色固体 T-07 (21mg, 产率： 26% ) 。 LC-MS (ESI): m/z =565 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CDC13) δ: 8.44 (s， 1H)， 8.35 (s， 1H)， 7.89 (d, J=5Hz， 1H)， 7.61 (d， J=9Hz， 2H)， 7.32 (d， J=5Hz, 1H)， 6.96 (d， J=9Hz， 2H)， 4.64 (d, J=9Hz， 2H)， 4.24 (d, J= 9Hz， 2H)， 3.89 (m， 4H)， 3.41 (s, 2H)， 3.08-3.16 (m, 6H)， 1.43 (t, J= 7Hz, 3H) ppm
实施例 8 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-{4-[2-({4-[2- (吗啉 -4-基)乙氧基]苯基 }氨 基)噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-08
合成路线如下：
Figure imgf000040_0001
化合物 8-C的合成
将对硝基苯酚 （6.0g， 43.16mmol)和 1,2-二溴乙垸 （16.0g， 86.02mmol) 溶于丙酮 （60mL) 中， 加入碳酸钾 （9.0g， 65.22mmol) 。 此混合物加热回 流 3小时后， 冷却到室温， 过滤， 滤饼用丙酮 （30mL) 洗。 滤液减压浓縮， 残余物加入水 （50mL) ， 用乙酸乙酯 （50mLx3) 萃取， 有机相合并， 依次 用水 (50mLx3:)和饱和食盐水 OmL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤 液，残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =5: 1 )得浅黄色固体 8-c(2.1g， 产率： 19 % ) 。
化合物 8-b的合成
将化合物 8-c ( l.Og, 4.08mmol) 和吗啉 （702mg， 8.16mmol) 溶于乙腈 ( 5mL) 中， 加入碳酸钾 （1.2g， 8.16mmol) 。 此混合物加热回流 3小时后， 冷却到室温， 过滤， 固体用乙酸乙酯 （30mL) 洗涤。 滤液减压浓縮， 残余 物加入水 （50mL) ， 用乙酸乙酯 （50mLx3) 萃取， 有机相合并， 依次用水 (50mLx3)和饱和食盐水 (50mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液得 浅黄色固体 8-b (900mg) ， 产品无需纯化， 直接投入下一步反应。
化合物 8-a的合成 氢气氛 ( latm) 下， 10% 的钯-碳 (0.5g) 加入到化合物 8-b (900mg， 3.57mmol) 的乙醇 （50mL) 溶液中。 混合物于 25°C反应 18小时后， 过滤， 滤液减压浓縮得到浅黄色油状物 8-a (760mg， 产率： 96% ) ， 产品无需纯 化， 直接投入下一步反应。
化合物 T-08的合成
将化合物 8-a ( 105mg， 0.47mmol) 和化合物 5 ( lOOmg, 0.24mmol) 溶 于正丁醇 （2mL) ， 加入对甲苯磺酸单水合物（68mg， 0.36mmol) 。 此混合 物于 110°C反应 16小时后， 冷却到室温并继续搅拌 30分钟， 过滤， 固体经 高效液相制备（流动相：乙腈，水（0.05 %三氟乙酸）；梯度： 40%-70%-10% ) 得到黄色固体 T-08 (51mg， 产率： 35 % )。 LC-MS (ESI): m/z =609 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CDC13) δ: 8.43 (s， 1H)， 8.35 (s， 1H)， 7.86 (d, J=5Hz， 1H)， 7.61 (d, J=9Hz， 2H)， 7.31 (d, J=5Hz， 1H)， 7.19 (s, 1H)， 6.93 (d, J=9Hz， 2H)， 4.63 (d, J=9Hz， 2H)， 4.16 (t， J=5Hz， 2H)， 3.78 (t, J=4Hz， 4H)， 3.39 (s， 2H)， 3.09 (q， J=6Hz， 2H)， 2.89 (t， J=4Hz， 2H)， 2.69 (s， 4H)， 1.43 (t， J= 6Hz， 3H) ppm
实施例 9 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-{4-[2-({4-[2- (四氢吡咯 -1-基)乙氧基]苯基 } 氨基） 噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-09
Figure imgf000041_0001
化合物 9-b的合成
将化合物 8-c ( l.Og, 4.08mmol)和吡咯垸（580mg， 8.16mmol)溶于乙 腈（50mL) 中， 加入碳酸钾 （1.2g， 8.16mmol) 。 此混合物加热回流 3小时 后， 冷却到室温， 过滤， 固体用乙酸乙酯 （30mL) 洗涤。 滤液减压浓縮， 残余物加入水 （50mL) ， 用乙酸乙酯 （50mLx3) 萃取， 有机相合并， 依次 用水 (50mLx3:)和饱和食盐水 OmL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤 液得黄色油状物 9-b ( l.Og) ， 产品无需纯化， 直接投入下一步反应。
化合物 9-a的合成
氢气氛（latm)下， 10 %的钯-碳（0.5g)加入到化合物 9-b ( 1.0g，4.24mmol) 的乙醇 （50mL) 溶液中。 混合物于 25°C反应 18小时后， 过滤， 滤液减压 浓縮得到浅黄色油状物 9-a ( 780mg， 产率： 90 % ) ， 产品无需纯化， 直接 投入下一步反应。
化合物 T-09的合成
将化合物 9-a (73mg， 0.35mmol)和化合物 5 ( 50mg， 0.12mmol)溶于 正丁醇 （2mL) ， 加入对甲苯磺酸单水合物 （45mg， 0.24mmol) 。 此混合物 于 110°C反应 16小时后， 冷却到室温并继续搅拌 30分钟， 过滤， 固体经高 效液相制备（流动相： 乙腈， 水（0.05 %三氟乙酸）； 梯度： 50%-80%-10 % ) 得到黄色固体 T-09 ( 51mg， 产率： 36 % )。 LC-MS (ESI): m/z =593 [M+H]+。
^-NMR (400MHz, MeOD) δ: 8.60 (m, 1H)， 8.20 (m, 2H)， 7.55 (m, 1H)， 7.22 (m， 1H)， 7.02 (m， 2H)， 4.61 (d， J=9Hz， 2H)， 4.34 (m， 2H)， 4.26 (d, J=9Hz， 2H)， 3.77 (m, 2H)， 3.68 (m， 2H)， 3.60 (s, 2H)， 3.17-3.24 (m， 4H)， 2.04-2.20 (m, 4H)， 1.38 (t, J= 6Hz， 3H) ppm
实施例 10 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-[4-(2-{[4-(1Η-1,2,4-*** -1-基)苯基]氨基 } 噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-10
合成路线如下：
Figure imgf000043_0001
T-10
化合物 10-b的合成
0°C时，氢化钠（1.6g， 39.01mmol)加入到 1,2,4-三氮唑（2.7g， 39.01mmol) 的二甲基甲酰胺（50mL)溶液中， 搅拌 30分钟后加入 1-氟 -4-硝基苯（5.0g， 35.46mmol) ， 并继续反应 2小时。 缓慢加入水 （150mL) 后有固体析出， 过滤， 固体用水 （50mLx3) 洗涤， 于真空中干燥 8小时得到黄色固体 10-b (6.2g，产率： 91%)，产品无需纯化，直接投入下一步反应。 LC-MS(ESI): m/z=191 [M+H]+。
化合物 10-a的合成
将化合物 10-b (3.0g， 15.78mmol) 和氯化铵 （2.1g， 39.62mmol) 溶于 50%乙醇-水 （60mL) 中， 加入锌粉 （2.6g， 40mmol) 。 混合物加热回流 30 分钟， 冷却到室温， 过滤， 固体用乙醇 （10mL) 洗涤， 合并的滤液减压浓 縮， 残留物加水 （lOOmL) 并用乙酸乙酯 （100mLx3) 萃取， 有机相用无水 硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮得到黄色固体 10-a (l.lg, 产率： 81%) 。 产 品无需纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS(ESI): m/z= 161 [M+H]+。
化合物 T-10的合成
将化合物 10-a (114mg， 0.71mmol) 和化合物 5 (lOOmg, 0.24mmol) 溶于正丁醇 （2mL) ， 加入对甲苯磺酸单水合物 （180mg， 0.95mmol) 。 此 混合物于 110°C反应 16小时，冷却到室温后继续搅拌 30分钟，有固体析出， 过滤， 固体经高效液相制备（流动相： 乙腈， 水（0.05 %三氟乙酸） ； 梯度: 60%-90%-10% )得到黄色固体 T-10 (25mg, 产率： 19% ) 。 LC-MS (ESI): m/z =547 [M+H]+ o
-NMR (400MHz， CDC13) 5: 8.58 (d, J=4Hz， 2H)， 8.41 (s, 1H)， 8.13 (s， 1H)， 8.09 (d， J=6Hz， 1H)， 7.92 (d， J=9Hz， 2H)， 7.71 (d， J=9Hz， 2H)， 7.49 (d, J=6Hz， 1H)， 4.66 (d, J=9Hz， 2H)， 4.25 (d, J=9Hz， 2H)， 3.45 (s, 2H)， 3.10 (q, J=6Hz， 2H)， 1.43 (t， J= 6Hz， 3H) ppm
实施例 11 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-[4-(2-{[4-(1Η-吡唑 -1-基)苯基]氨基 }噻吩 并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-11
合成
Figure imgf000044_0001
化合物 11-b的合成
0°C时， 氢化钠 （1.6g， 39.01mmol) 加入到吡唑 （2.7g， 39.01mmol) 的 二甲基甲酰胺 （50mL) 溶液中， 搅拌 30分钟后加入 1-氟 -4-硝基苯 （5.0g， 35.46mmol) ， 并继续反应 2小时。 缓慢加入水 （250mL) 后有固体析出， 过滤， 固体用水 （50mLx3 ) 洗涤， 于真空中干燥 8小时得到黄色固体 11-b (6g， 产率： 90% ) ， 产品无需纯化， 直接投入下一步反应。
化合物 11-a的合成 将化合物 11-b ( l.Og, 5.29mmol) 和氯化铵 （0.7g， 13.23mmol) 溶于 50%乙醇-水 （20mL) 中， 加入锌粉 （0.9g， 13.23mmol) 。 混合物加热回流
30分钟， 冷却到室温， 过滤， 固体用乙醇 ( lOmL) 洗涤， 合并的滤液减压 浓縮， 残留物加水 （50mL) 并用乙酸乙酯 （50mLx3 ) 萃取， 有机相用无水 硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮得到黄色固体 11-a (670mg， 产率： 80% ) 。 产品无需纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 160 [M+H]+。
化合物 T-ll的合成
将化合物 11-a (79mg， 0.50mmol)和化合物 5 (70mg， 0.17mmol)溶于 正丁醇 （2mL) ， 加入对甲苯磺酸单水合物 （95mg， 0.50mmol) 。 此混合物 于 110°C反应 16小时， 冷却到室温后继续搅拌 30分钟， 有固体析出， 过滤， 固体经高效液相制备 （流动相： 乙腈， 水 （0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 60% -90%-10% )得到黄色固体 T-ll (31mg， 产率： 34% ) 。 LC-MS (ESI): m/z =546 [M+H]+。
^-NMR (400MHz, CDC13) δ: 8.49 (s， 1H)， 8.40 (s， 1H)， 7.94 (d, J=6Hz， 1H)， 7.91 (d, J=2Hz， 1H)， 7.84 (d, J=9Hz， 2H)， 7.68-7.73 (m, 3H)， 7.40 (d， J=6Hz， 2H)， 6.47 (t, J=2Hz， 1H)， 4.65 (d, J=9Hz， 2H)， 4.26 (d, J=9Hz， 2H)， 3.43 (s, 2H)， 3.10 (q, J=6Hz， 2H)， 1.43 (t, J= 6Hz， 3H) ppm
实施例 12 2-[l-(乙基磺酰基 )-3-(4-{2-[(4-甲基磺酰基苯基)氨基]噻吩并
[3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-12
合成路线如下：
Figure imgf000046_0001
5 T-12 将 4-甲基磺酰苯胺（98mg， 0.57mmol)和化合物 5 ( 80mg， 0.19mmol) 溶于正丁醇（2mL) ， 加入对甲苯磺酸单水合物 （72mg， 0.38mmol) 。 此混 合物于 110°C反应 16小时， 冷却到室温后继续搅拌 30分钟， 有固体析出， 过滤， 固体经高效液相制备（流动相： 乙腈， 水（0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 65 %-95 %-10% )得到白色固体 T-12 (30mg， 产率： 28 % ) 。 LC-MS (ESI): m/z =558 [M+H]+ o
-NMR (400MHz， CDC13) 5: 8.51 (s, 1H)， 8.40 (s， 1H)， 7.92-8.00 (m, 6H)， 7.44 (d， J=6Hz， 1H)， 4.66 (d， J=9Hz, 2H)， 4.26 (d， J=9Hz, 2H)， 3.44 (s， 2H)， 3.13 (q， J=6Hz， 2H)， 3.07 (m, 3H)， 1.44 (t， J= 6Hz， 3H) ppm 实施例 13 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-[4-(2-{[3- (吗啉 -4-基)苯基]氨基 }噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-13
合成路线如下：
Figure imgf000046_0002
将 3-(4-吗啉基)苯胺（102mg， 0.57mmol)和化合物 5 ( 80mg， 0.19mmol) 溶于正丁醇 （2mL) ， 加入对甲苯磺酸单水合物 （180mg， 0.95mmol) 。 此 混合物于 110°C反应 16小时，冷却到室温后继续搅拌 30分钟，有固体析出， 过滤， 固体经高效液相制备（流动相： 乙腈， 水（0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 60%-90 %-10 % )得到白色固体 T-13 ( 15mg， 产率： 14 % ) 。 LC-MS (ESI): m/z =565 [M+H]+ o
^-NMR (400MHz, CDC13) 5: 10.2 (br, 1H)， 8.56 (s, 1H)， 8.36 (s， 1H)， 8.04 (d, J=6Hz， 1H)， 7.61 (d, J=6Hz， 2H)， 7.28-7.36 (m, 3H)， 6.75 (m, 1H)， 4.63 (d, J=9Hz, 2H)， 4.25 (d, J= 9Hz， 2H)， 3.90 (m, 4H)， 3.41 (s, 2H)， 3.24 (m, 2H)， 3.08 (q, J=6Hz， 2H)， 1.43 (t， J= 7Hz， 3H) ppm
实施例 14 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-(4-{2- [(嘧啶 -5-基)氨基]噻吩并 [3,2-d]嘧 啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-14
合成路线
Figure imgf000047_0001
T-14
氮气氛下， 将三 (二亚苄基茚丙酮)二钯（47mg， 0.05mmol)和 2,2'-双 (二 苯基膦 联萘（34mg， 0.05mmol)加入到化合物 5 ( 130mg， 0.31mmol)， 5-氨基嘧啶 （89mg， 0.94mmol)和碳酸铯 （102mg， 0.32mmol) 的二氧六环 (4mL) 的悬浮液中， 于 120°C微波反应 60分钟。 冷却到室温， 加入二氯甲 垸（20mL)稀释， 过滤， 滤液减压浓縮， 残留物用甲醇 （5mL)稀释， 有固 体析出，过滤后固体经高效液相制备（流动相： 乙腈，水（0.05 %三氟乙酸）； 梯度： 40%-70%-10% )得到浅黄色固体 T-14 ( 16mg， 产率： 10% )。 LC-MS (ESI): m/z = 482 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CDC13) 5: 9.29 (s, 2H)， 8.94 (s， 1H)， 8.55 (s, 1H)， 8.40 (br， 1H)， 8.39 (s， 1H)， 8.02 (d, J=6Hz， 1H)， 7.42 (d, J=6Hz， 1H)， 4.67 (d, J=9Hz， 2H)， 4.27 (d, J= 9Hz， 2H)， 3.44 (s, 2H)， 3.11 (q, J= 7Hz， 2H)， 1.43 (t， J= 7Hz， 3H) ppm
实施例 15 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-(4-{2-[(l-甲基 -1H-吡唑 -4-基)氨基]噻吩 并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-15
合成
Figure imgf000048_0001
T-15
化合物 15-b的合成
0°C下，将氢化钠（1.3g， 32.1mmol)加入到 4-硝基吡唑（3.3g， 29.2mmol) 的无水四氢呋喃（30mL)溶液中， 搅拌 1小时后， 慢慢加入碘甲垸（2mL)， 并在室温下继续搅拌 2小时。 此混合物倒入冰水 （lOOmL) 中， 用乙酸乙酯 ( 50mLx3 ) 萃取， 有机相用无水硫酸钠干燥， 过滤， 滤液减压浓縮， 残余 物加入石油醚和乙酸乙酯 (20:1)的混合溶剂（20mL)， 搅拌， 有固体析出， 过 滤， 固体在真空中干燥 8小时得白色固体 15-b (2.6g， 产率： 70% ) 。 产品 无需纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z =128 [M+H]+。
化合物 15-a的合成 氢气氛 ( latm) 下， 10 % 的钯-碳 ( 0.2g) 加入到化合物 15-b ( l.Og, 7.87mmol) 的乙醇 （15mL) 溶液中。 混合物于 25°C反应 18小时后， 过滤， 滤液减压浓縮， 残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =1 :1 )得到红色 油状物 15-a (700mg， 产率： 92 % ) 。
化合物 T-15的合成
氮气氛下， 将三 (二亚苄基茚丙酮)二钯 （55mg， 0.06mmol) 和 2,2'-双 (二 苯基膦 联萘（40mg， 0.06mmol)加入到化合物 5 (200mg， 0.47mmol)， 化合物 15-a ( 138mg， 1.42mmol) 和碳酸铯 （309mg， 0.95mmol) 的二氧六 环（4mL)悬浮液中， 于 120°C微波反应 60分钟。 冷却到室温， 加入二氯甲 垸 （20mL) 稀释， 过滤， 滤液减压浓縮， 残留物经高效液相制备 （流动相： 乙腈， 水（0.05 %三氟乙酸）； 梯度： 60%-90%-10% )得到浅黄色固体 T-15 (23mg， 产率： 14% ) 。 LC-MS (ESI): m/z = 484 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CDC13) 5: 8.44 (s， 1H)， 8.34 (s， 1H)， 8.55 (s, 1H)， 7.97 (s, 1H)， 7.86 (d, J=6Hz， 1H)， 7.53 (s, 1H)， 7.31 (d, J=6Hz， 1H)， 7.19 (s, 1H)， 4.63 (d, J=9Hz， 2H)， 4.24 (d, J= 9Hz， 2H)， 3.93 (s, 3H)， 3.39 (s， 2H)， 3.09 (q， J= 7Hz， 2H)， 1.41 (t, J= 7Hz， 3H) ppm
实施例 16 N- (氰甲基: )-4-[2- (苯胺基)噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基]苯甲酰胺 T-16
合成路线如下：
Figure imgf000050_0001
T-16
化合物 16-b的合成
氮气氛下， 将 2,4-二氯噻吩并 [3,2-d]嘧啶（1.0g， 4.9mmol)， 4-羧基苯硼 酸（542mg， 3.3mmol)和碳酸钠（2.1g， 19.6mmol)悬浮于二氧六环（10mL) 和水 （10mL ) 的混合溶剂中， 加入 [Ι,Γ-双 (二苯基憐)二茂铁]二氯化钯 (400mg， 0.5mmol) 。 混合物在 80°C下搅拌反应 16小时,冷却至室温， 缓 慢滴加盐酸 （1.0N) 至 pH=3， 乙酸乙酯 （20mLx3 ) 萃取， 有机相用饱和碳 酸氢钠溶液 (50mL)和饱和食盐水 (50mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓 縮滤液得黄色固体 16-b (160mg， 产率： 20%)。 产品无需纯化， 直接投入下 一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 291 [M+H]+。
化合物 16-a的合成
分别将草酰氯 （4mL) 和二甲基甲酰胺 （O. lmL) 加入到化合物 16-b 的 二氯甲垸悬浮液中并在室温下搅拌 3小时。 减压浓縮反应液， 残余物加入到 二氯甲垸 （50mL) 中并冷却至 0°C， 依次缓慢加入氨基乙腈盐酸盐 （75mg， 0.81mmol) 和三乙胺 （0.6mL) 。 反应液慢慢升至室温， 继续反应 2小时后 加入二氯甲垸（50mL)和水（20mL)。有机相用盐酸（ 1N， lOmL)和水 (20mL) 洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经高效液相制备 （流动 相： 乙腈，水 (0.05 %三氟乙酸)；梯度： 40%-70%-10% )得到 16-a ( 125mg, 产率： 68% ) 。 LC-MS (ESI): m/z = 329 [M+H]+。
化合物 T-16的合成
将苯胺 （108mg， 1.16mmol) 和化合物 16-a ( 125mg， 0.38mmol) 溶于 正丁醇 （0.5mL) ， 加入对甲苯磺酸单水合物 （133mg， OJmmol) 。 此混合 物于 110°C反应 16小时，减压浓縮反应液，残余物经高效液相制备（流动相: 乙腈， 水 （0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 60%-90%-10% ) 得到黄色固体 T-16 (33mg， 产率： 23 % ) 。 LC-MS (ESI): m/z =386 [M+H]+。
^-NMR (400MHz, MeOD) 5: 8.31-8.34 (m, 2H)， 8.19 (d, J=5Hz， 1H)， 8.08 (dd, J=2Hz J=6Hz， 2H)， 7.82 (dd, J=2Hz J=8Hz， 3H)， 7.40 (d, J=6Hz， 1H)， 7.33 (t, J=8Hz， 2H)， 7.01 (t, J=8Hz， 1H)， 4.39 (s， 2H) ppm
实施例 17 1-N-叔丁基 -4-(2-{[4- (吗啉 -4-基)苯基]氨基 }噻吩并 [3,2-d]嘧 啶 -4-基)苯磺酰胺 T-17
合成路线如下：
Figure imgf000051_0001
化合物 17- c的合成
0°C时将 4-溴苯磺酰氯（3.0g， 11.8mml)加入到叔丁胺（2.0g， 29.6mmol) 的二氯甲垸 （30mL) 溶液中并继续搅拌 30分钟。 反应液依次用盐酸 （I N, 20mL) 和水 （30mLx3) 洗， 有机相用无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤 液得白色固体 17-c (3.6g， 产率： 100%) 。 产品无需纯化， 直接投入下一步 反应。
化合物 17-b的合成
氮气氛下， 将化合物 17-c (500mg， 1.72mmol) ， 双联频那醇硼酸酯 (524mg, 2.06mmol)和醋酸钾（505mg， 5.15mmol)悬浮于二氧六环（5mL) 中并加入 [Ι,Γ-双 (二苯基憐)二茂铁]二氯化钯 （130mg， 0.17mmol) 。 混合 物在 80°C下搅拌反应 16小时。 减压浓縮反应液， 残余物加水（50mL) ， 用 乙酸乙酯 （50mLx3) 萃取， 有机相合并， 依次用水 (50mLx3)和饱和食盐水 (50mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯 化（石油醚 /乙酸乙酯 =5:1)得白色固体 17-b (350mg， 产率： 60%)。 LC-MS (ESI): m/z = 340 [M+H]+。
化合物 17-a的合成
氮气氛下， 将化合物 17-b (300mg， 0.89mmol) ， 化合物 5 (181mg， 0.89mmol)和碳酸钠（281mg， 2.67mmol)悬浮于乙醇 （2mL)和水 （2mL) 的混合溶剂中并加入 [Ι,Γ-双 (二苯基憐)二茂铁]二氯化钯（74mg， 0.1mmol)。 混合物在 80°C下搅拌反应 16小时。减压浓縮反应液，残余物加水（50mL)， 用乙酸乙酯 （50mLx3) 萃取， 有机相合并， 依次用水 (50mLx3)和饱和食盐 水 (50mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析 纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 = 5:1) 得浅黄色固体 17-a (105mg， 产率： 32%)。 LC-MS (ESI): m/z = 382 [M+H]+。
化合物 T- 17的合成
将化合物 17-a (lOOmg, 0.26mmol) 和 4-(4-吗啉基）苯胺 （140mg， 0.79mmol) 溶于正丁醇 （2mL) ， 加入对甲苯磺酸单水合物 （180mg， 0.95mmol) 。 此混合物于 110°C反应 16小时， 冷却到室温后继续搅拌 30分 钟， 有固体析出， 过滤， 固体经高效液相制备 （流动相： 乙腈， 水 （0.05% 三氟乙酸）；梯度： 60 %-90%-10% )得到黄色固体 T-17 ( 15mg，产率： 25 % ) 0 LC-MS (ESI): m/z =524 [M+H]+。
^-NMR (400MHz, CDC13) δ: 8.26 (d, J=9Hz， 2H)， 8.08 (d, J=9Hz， 1H)， 7.89 (d, J=5Hz， 1H)， 7.94 (d, J=5Hz， 1H)， 7.70 (br, 2H)， 7.3,8 (d, J=5Hz， 1H)， 7.04 (br, 2H)， 4.82 (s， 1H)， 3.90 (m， 4H)， 3.20 (br, 4H)， 1.27 (s, 9H) ppm
实施例 18 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-(4-{2-[(4-甲基磺酰基苯基)氨基]噻吩并 [2,3-d]嘧啶 -4-基}-111-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-18
合成路 ：
Figure imgf000053_0001
化合物 18-a的合成
氮气氛下， 将 2,4-二氯噻吩并 [2,3-d]嘧啶 （500mg， 2.45mmol) ， 化合 物 5-a ( 633 mg， 1.63mmol) 和碳酸钠 （779mg， 7.35mmol) 悬浮于二氧六 环（5mL)中并加入 [Ι,Γ-双 (二苯基憐)二茂铁]二氯化钯（250mg， 0.3mmol)。 混合物在 80°C下搅拌反应 4小时， 冷却至室温后加二氯甲垸 （50mL) ， 过 滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =1 : 1 到二 氯甲垸 /甲醇 =10:1 ) 得灰色固体 18-a (360mg， 产率： 52%)。 LC-MS (ESI): m/z = 431 [M+H]+。
化合物 18的合成
将化合物 18-a (360mg， 0.84mmol)溶于二氯甲垸 (2mL) 中， 加入 4N 盐酸二氧六环溶液 （4mL) ， 混合物在室温下搅拌反应 16小时， 减压浓縮 反应液，残余物加入二氯甲垸（10mL)和三乙胺（2mL)。混合物冷却到 0°C， 慢慢滴加乙基磺酰氯（141mg， 1.26mmol) ， 滴加完毕继续在 0°C搅拌 30分 钟。 加入水 （5mL) ， 用二氯甲垸 （10mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 依次用 水 (10mLx3)和饱和食盐水 (10mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =2:1 )得化合物 18 (90mg，产率： 26%)。 LC-MS (ESI): m/z = 423 [M+H]+。
化合物 T-18的合成
将化合物 18 ( 80mg， 0.19mmol)和 4-甲基磺酰苯胺（98mg， 0.57mmol) 溶于正丁醇（2mL) ， 加入对甲苯磺酸单水合物 （72mg， 0.38mmol) 。 此混 合物于 110°C反应 16小时， 减压浓縮反应液， 残余物经高效液相制备（流动 相： 乙腈， 水 （0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 50%-80%-10% ) 得到浅黄色固 体 T-18 ( 13mg， 产率： 13 % ) 。 LC-MS (ESI): m/z =558 [M+H]+。
^-NMR (400MHz, CDC13) 5: 9.70 (br, 1H)， 8.75 (s, 1H)， 8.29 (s, 1H)， 8.99 (d, J=9Hz， 2H)， 7.93 (d, J=9Hz， 2H)， 7.51 (d, J=6Hz， 1H)， 7.43 (d, J=6Hz， 1H)， 4.66 (d, J=9Hz， 2H)， 4.28 (d, J= 9Hz， 2H)， 3.44 (s， 2H)， 3.10 (q, J= 7Hz， 2H)， 3.06 (s， 3H)， 1.43 (t, J= 7Hz， 3H) ppm
实施例 19 4-[(4-{l-[3- (氰甲基) -1- (乙基磺酰基)氮杂环丁 -3-基] -1H-吡 唑 -4-基}噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -2-基)氨基]苯甲腈 T-19
合成路线如下：
Figure imgf000055_0001
T-19
将化合物 5 (50mg， 0.12mmol) 和 4-胺基苯甲腈 （42mg， 0.36mmol) 溶于正丁醇（2mL) ， 加入对甲苯磺酸单水合物 （45mg， 0.24mmol) 。 此混 合物于 110°C反应 16小时， 减压浓縮反应液， 残余物经高效液相制备（流动 相： 乙腈， 水 （0.05%三氟乙酸） ； 梯度： 65%-95%-10%) 得到浅黄色固 体 T-19 (13mg， 产率： 13%) 。 LC-MS (ESI): m/z =505 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CDC13) δ: 8.49 (s， 1H)， 8.39 (s， 1H)， 7.98 (d, J=6Rz, 1H)， 7.90 (d， J=9Rz, 2H)， 7.65 (d， J=9Rz, 2H)， 7.43 (d， J=6Rz, 1H)， 4.66 (d, J=9Rz, 2H)， 4.26 (d, J=9Rz, 2H)， 3.44 (s， 2H)， 3.11 (q, J=7Hz， 2H)， 1.43 (t， J=7Hz， 3H) ppm
实施例 20 2-(3-{4-[2- (苯胺基)噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基} 氧杂环丁 -3-基)已腈 T-20
合成路线如下：
Figure imgf000056_0001
20 T-20 化合物 20-b的合成
室温下，将氰亚甲基三苯基膦（10.0g， 33.2mmol)和 3-氧杂环丁酮（ 1.2g， 16.7mmol) 溶于二氯甲垸 （lOOmL) 中， 搅拌反应 16小时。 减压浓縮反应 液， 残余物加入到石油醚和乙酸乙酯 （10: 1 ) 的混合溶剂（50mL) 中， 有白 色固体生成， 过滤， 滤液减压浓縮， 残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸 乙酯 = 5: 1 ) 得化合物 20-b (1.0g， 产率： 63 %)。
^-NMR (400MHz, CDC13) 5: 5.39 (m, 2H)， 5.30 (m, 2H)， 5.25 (m,lH) ppm
化合物 20-a的合成
将化合物 20-b ( 500mg， 5.26mmol) 和 4-吡唑硼酸频那醇酯 （1.3g， 6.7mmol)溶于乙腈（10mL)中，加入 1,8-二氮杂双环 [5,4,0：^ ^—碳 -7-烯（1.6g， 10.53mmol) 。 此混合物于 60°C下搅拌反应 18小时。 减压浓縮反应液， 残 余物加入 1 N盐酸水溶液调 pH值至 3-4， 乙酸乙酯 （20mLx3) 萃取， 有机 相合并，依次用水 (20mLx3)和饱和食盐水 (20mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤， 减压浓縮滤液得黄色油状物 20-a (900mg， 产率： 59 %), 产品无需纯化， 直 接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 290 [M+H]+。
化合物 20的合成 氮气氛下， 将化合物 20-a (300mg， 1.04mmol)， 2,4-二氯噻吩并 [3,2-d] 嘧啶 （317mg， 1.56mmol) 和碳酸钠 （331mg， 3.12mmol) 悬浮于二氧六环 ( 0.5mL) 和水 （0.5mL) 的混合溶剂中， 加入 [Ι,Γ-双 (二苯基憐)二茂铁] 二氯化钯 （82mg， O.lmmol) 。 混合物在 80°C下搅拌反应 4小时。 减压浓縮 反应液， 残余物加水（20mL) ， 用二氯甲垸（20mLx3 )萃取， 有机相合并， 依次用水 (10mLx3:>和饱和食盐水 (lOmL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓 縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =2:1 ) 得浅黄色固体 20 (102mg, 产率： 30%)。 LC-MS (ESI): m/z = 332 [M+H]+。
化合物 T-20的合成
将化合物 20 ( 50mg， 0.15mmol) 和苯胺 （42mg， 0.45mmol) 溶于正丁 醇（2mL)，加入对甲苯磺酸单水合物（58mg， 0.3mmol)。此混合物于 110°C 反应 16小时， 减压浓縮反应液， 残余物经高效液相制备 （流动相： 乙腈， 水（0.05 %三氟乙酸）；梯度： 60%-90%-10% )得到浅黄色固体 T-20 (23mg， 产率： 40% ) 。 LC-MS (ESI): m/z =389 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CDC13) δ: 8.45 (s， 1H)， 8.40 (s， 1H)， 7.89 (d, J=5Hz， 1H)， 7.75 (d, J=8Hz， 2H)， 7.37 (m, 3H)， 7.20 (s, 1H)， 7.05 (t, J=7Hz， 1H)， 5.20 (d, J=8Hz， 2H)， 4.89 (d, J= 8Hz， 2H)， 3.46 (s, 2H) ppm
实施例 21 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-(4-{2- [(吡啶 -4-基)氨基]噻吩并 [3,2-d]嘧 啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-21
合成
Figure imgf000057_0001
T-21 化合物 21-a的合成
向 4-硝基氮氧化吡啶（600mg， 6.46mmol)和甲酸铵（622mg， 10.92mmol) 的乙醇 （10mL) 溶液中慢慢加入 10%的 Pd-C (0.6g) 。 此混合物在室温下 搅拌 16小时后， 过滤， 滤液减压浓縮， 残余物加水 （20mL) ， 用乙酸乙酯 (20mLx3 )萃取， 有机相合并， 依次用水 (10mLx3)和饱和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液得浅黄色固体 21-a (380mg, 产率： 94%)。 产品无需纯化， 直接投入下一步反应。
化合物 T-21的合成
氮气氛下， 将三 (二亚苄基茚丙酮)二钯（22mg， 0.03mmol)和 2,2'-双 (二 苯基膦 联萘（20mg， 0.03mmol)加入到化合物 5 ( lOOmg, 0.24mmol)， 化合物 21-a (45mg， 0.48mmol) 和碳酸铯 （155mg， 0.48mmol) 的二氧六 环（2mL)悬浮液中， 于 120°C微波反应 60分钟。 冷却到室温， 加入二氯甲 垸 （20mL) 稀释， 过滤， 滤液减压浓縮， 残余物经高效液相制备 （流动相： 乙腈， 水 （0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 40%-70%-10% ) 得到黄色固体 T-21 ( 8mg， 产率： 7% ) 。 LC-MS (ESI): m/z = 481 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CDC13) δ: 8.72 (s, 1H)， 8.37 (m, 4H)， 8.30 (br, 1H)， 8.23 (d， J=6Hz， 1H)， 7.42 (d， J=6Hz， 1H)， 4.57 (d， J=9Hz， 2H)， 4.22 (d, J= 9Hz， 2H)， 3.55 (s, 2H)， 3.10 (q， J= 7Hz， 2H)， 1.31 (t， J= 7Hz， 3H) ppm
实施例 22 5-[(4-{l-[3- (氰甲基) -1- (乙基磺酰基)氮杂环丁 -3-基] -1H-吡 唑 -4-基}噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -2-基)氨基] -2-吡啶甲腈 T-22
合成路线如下：
Figure imgf000059_0001
T-22
氮气氛下， 将三 (二亚苄基茚丙酮)二钯（22mg， 0.03mmol)和 2,2'-双 (二 苯基膦 联萘（20mg， 0.03mmol)加入到化合物 5 ( lOOmg, 0.24mmol)， 2-氰基 -5-氨基吡啶 （56mg， 0.48mmol)和碳酸铯（155mg， 0.48mmol) 的二 氧六环（2mL)悬浮液中， 于 120 °C微波反应 60分钟。 冷却到室温， 加入二 氯甲垸 （20mL) 稀释， 过滤， 滤液减压浓縮， 残余物经高效液相制备 （流 动相： 乙腈， 水 （0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 50%-80%-10% ) 得到黄色固 体 T-22 (33mg， 产率： 28% ) 。 LC-MS (ESI): m/z = 506 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CDC13) 5: 10.49 (s， 1H)， 9.10 (d, J=2Hz， 1H)， 8.89 (s， 1H)， 8.66 (dd, J=9Hz J=2Hz, 1H)， 7.97 (s, 1H)， 8.49 (d, J=6Hz， 1H)， 8.45 (s， 1H)， 7.96 (d, J=9Hz， 1H)， 7.54 (d, J=5Hz， 1H)， 4.58 (d, J=9Hz， 2H)， 4.29 (d, J= 9Hz， 2H)， 3.73 (s, 2H)， 3.25 (q, J= 7Hz， 2H)， 1.26 (t, J= 7Hz， 3H) ppm
实施例 23 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-{4-[6-甲基 -2- (苯胺基)噻吩并 [3,2-d]嘧 啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-23
合成路线如下：
Figure imgf000060_0001
化合物 23-a的合成
氮气氛下， 将化合物 5-a ( 194mg， 0.5mmol) ， 2,4-二氯 -6-甲基噻吩并 [3,2-d]嘧啶 （149mg， 0.5mmol)和碳酸钠水溶液（2.0N， 0.75mL)悬浮于二 氧六环 （7.5mL ) 中， 加入 [Ι,Γ-双 (二苯基憐)二茂铁]二氯化钯 （18mg， 0.025mmol) 。 混合物在 80°C下搅拌反应 4小时。 减压浓縮反应液， 残余物 加乙酸乙酯 （50mL) ， 经硅藻土过滤后， 有机相依次用水 (10mLx3)和饱和 食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶制 备板层析纯化 （二氯甲垸 /甲醇 =30: 1 ) 得化合物 23-a (165mg， 产率： 74%)。 LC-MS (ESI): m/z = 445 [M+H]+。
化合物 23的合成
将化合物 23-a ( 165mg， 0.37mmol)溶于二氧六环（4mL) 中， 加入 4N 盐酸二氧六环溶液 （0.93mL) ， 混合物在室温下搅拌反应 16小时， 减压浓 縮反应液， 残余物加入二氯甲垸（10mL)和三乙胺 （0.16mL， 1.12mmol) 。 混合物冷却到 0°C， 慢慢滴加乙基磺酰氯（62mg， 0.56mmol) ， 滴加完毕继 续在 0°C搅拌 30分钟。 加入水 （5mL) ， 用二氯甲垸 （10mLx3 ) 萃取， 有 机相合并， 依次用水 (10mLx3)和饱和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过 滤，减压浓縮滤液， 残余物经硅胶制备板层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 = 1:1 ) 得化合物 23 (60mg， 产率： 37%)。 LC-MS (ESI): m/z = 437 [M+H]+。
化合物 T-23的合成
将化合物 23 (60mg， 0.14mmol) 和苯胺 （39mg， 0.42mmol) 溶于异丁 醇 （10mL) ， 加入对甲苯磺酸单水合物 （53mg， 0.28mmol) 。 此混合物于 110°C反应 16小时， 减压浓縮反应液， 残余物经硅胶制备板层析纯化 （石油 醚 /乙酸乙酯 =1: 1 ) 得化合物 T-23 (20mg， 产率： 29 % ) 。 LC-MS (ESI): m/z =494 [M+H]+ o
-NMR (400MHz， DMS0) 5: 9.56(s, 1H)， 8.78 (s, 1H)， 8.35 (s, 1H)， 7.88 (d， J=8.4Hz， 2H)， 7.31 (t， J=7.8Hz, 2H)， 7.18 (s， 1H)， 6.94 (t， J=7.4Hz, 1H)， 4.57 (d, J=9.2Hz, 2H)， 4.27 (d, J= 9.2Hz, 2H)， 3.72 (s, 2H)， 3.22-3.28 (m， 2H)， 2.67 (s, 3H)， 1.25 (t, J= 7.4Hz, 3H) ppm
实施例 24 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-(4-{2-[(4-氟苯基)氨基]噻吩并 [3,2-d]嘧 啶—4-基}-111-吡唑 -1-基)氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-24
合成路 ：
Figure imgf000061_0001
T-24 将化合物 5 (208mg， 0.49mmol) 和对氟苯胺 （164mg， 1.48mmol) 溶 于异丁醇 （12mL) ， 加入对甲苯磺酸单水合物 （188mg， 0.98mmol) 。 此混 合物于 110°C反应 16小时，减压浓縮反应液，残余物溶解在二氯甲垸（lOOmL) 中， 依次用水 (20mLx3:>和饱和食盐水 pOmL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减 压浓縮滤液有固体生成， 此固体经二氯甲垸（5mL)和乙酸乙酯（25mL)洗 涤后得化合物 T-24 (30mg， 产率： 12 % )。 LC-MS (ESI): m/z =498 [M+H]+。
-NMR (400MHz， DMSO) 5: 9.66 (s, 1H)， 8.83 (s, 1H)， 8.39-8.40 (m, 2H)， 7.89-7.92 (m, 2H)， 7.42 (d， J=5.5Hz, 1H)， 7.16 (t， J=9.0Hz, 2H)， 4.58 (d， J=9.0Hz, 2H)， 4.28 (d， J=9.5Hz, 2H)， 3.73 (s， 2H)， 3.23-3.27 (m， 2H)， 1.26 (t, J= 7.5Hz, 3H) ppm
实施例 25 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-(4-{2-[(l-甲基 -1H-吡唑 -3-基)氨基]噻吩 并 [3,2-d]嘧啶 -4-基}-111-吡唑 -1-基)氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-25
合成路线如下：
Figure imgf000062_0001
氮气氛下，将三 (二亚苄基茚丙酮)二钯（32mg， 0.035mmol)和 2,2'-双 (二 苯基膦 联萘（22mg， 0.035mmol)加入到化合物 5 ( 150mg， 0.35mmol)， 1-甲基 -3-氨基吡唑（104mg， 1.48mmol)和碳酸铯（228mg， OJmmol) 的二 氧六环（4mL)悬浮液中， 于 120 °C微波反应 60分钟。 冷却到室温， 加入二 氯甲垸（lOOmL)稀释， 依次用水 (20mLx3)和饱和食盐水 (20mL)洗， 无水硫 酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液有固体生成， 此固体经四氢呋喃 （20mL) 和甲醇（10mL)洗涤后得化合物 T-25 ( 80mg， 产率： 46% )。 LC-MS (ESI): m/z =484 [M+H]+ o
-NMR (400MHz， DMSO) 5: 9.58(s, 1H)， 8.80 (s， 1H)， 8.36-8.37 (m, 2H)， 7.57(d, J=1.5Hz, 1H)， 7.38 (d, J=5.0Hz, 1H)， 6.77 (d, J=2.0Hz, 1H)， 4.57 (d, J=9.0Hz， 2H)， 4.27 (d, J=9.5Hz, 2H)， 3.76 (s, 3H)， 3.72 (s, 2H)， 3.23-3.27 (m,2H), 1.25 (t, J= 7.5Hz, 3H) ppm
实施例 26 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-(4-{2- [(吡啶 -3-基)氨基]噻吩并 [3,2-d]嘧 啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-26
合成路线如下：
Figure imgf000063_0001
5 T-26
氮气氛下，将三 (二亚苄基茚丙酮)二钯（22mg， 0.023mmol)和 2,2'-双 (二 苯基膦 联萘（15mg， 0.023mmol)加入到化合物 5 ( lOOmg, 0.23mmol)， 3-氨基吡啶 （22mg， 0.23mmol)和碳酸铯 （154mg， 0.47mmol) 的二氧六环 (4mL)悬浮液中， 于 125°C微波反应 30分钟。 冷却到室温， 加入二氯甲垸 ( lOOmL)稀释， 依次用水 (20mLx3)和饱和食盐水 (20mL)洗， 无水硫酸钠干 燥，过滤，减压浓縮滤液，残余物经高效液相制备（流动相： 乙腈，水（0.05 % 三氟乙酸） ； 梯度： 40%-70%-10% )得化合物 T-26 ( 18mg， 产率： 16% ) 。 LC-MS (ESI): m/z =481 [M+H]+。 Ή-NMR (400MHz， CDC13) 5: 8.91 (d, J=2.4Hz, 1H)， 8.45(s, 1H)， 8.33 (s， 1H)， 8.27-8.31 (m, 2H)， 7.90 (d, J=7.0Hz, 1H)， 7.51 (s, 1H)， 7.29-7.34 (m， 2H)， 4.66 (d， J=9.2Hz, 2H)， 4.25 (d， J=9.6Hz， 2H)， 3.42 (s， 2H)， 3.08-3.14 (m, 2H)， 1.42 (t, J= 7.2Hz, 3H) ppm
实施例 27 2-(3-{4-[2- (环己基氨基)噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1- 基}-1- (乙基磺酰基)氮杂环丁 -3-基)乙腈 T-27
合成路线如下：
Figure imgf000064_0001
T-27 氮气氛下，将三 (二亚苄基茚丙酮)二钯（43mg， 0.047mmol)和 2,2'-双 (二 苯基膦 )—1,1 '―联萘（30mg， 0.047mmol)加入到化合物 5 (200mg， 0.47mmol)， 环己胺（141mg， 1.42mmol)和碳酸铯（463mg， 1.42mmol)的二氧六环（4mL) 悬浮液中， 于 125 °C微波反应 60分钟。冷却到室温，加入乙酸乙酯（lOOmL) 稀释， 依次用水 (20mLx3)和饱和食盐水 (20mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经高效液相制备 （流动相： 乙腈， 水 （0.05 %三氟乙 酸）； 梯度： 40%-70%-10% )得化合物 T-27 (25mg, 产率： 11 % )。 LC-MS (ESI): m/z =486 [M+H]+。
-NMR (500MHz, CDC13) δ: 8.38 (s， 1H)， 8.34 (s， 1H)， 7.79 (d, J=5.5Hz, 1H)， 7.24 (d, J=5.0Hz, 1H)， 5.05 (d, J=8.5Hz, 1H)， 4.62 (d, J=9.5Hz,2H), 4.25 (d, J=9.5Hz, 2H)， 3.95-3.97 (m, 1H)， 3.40 (s, 2H)， 3.06-3.11 (m, 2H)， 2.09-2.12 (m， 2H)， 1.76-1.80 (m， 3H)， 1.65-1.67 (m， 1H)， 1.45-1.48 (m， 1H)， 1.42 (t, J=7.0Hz, 3H)， 1.25-1.31 (m,3H) ppm
实施例 28 2-(3-{4-[2- (环丙氨基)噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1- 基}-1- (乙基磺酰基)氮杂环丁 -3-基)乙腈 T-28
合成路线如下：
Figure imgf000065_0001
氮气氛下， 将三 (二亚苄基茚丙酮)二钯（18mg， 0.02mmol)和 2,2'-双 (二 苯基膦 联萘（12mg， 0.02mmol)加入到化合物 5 ( 85mg， 0.20mmol)， 环丙胺（33mg， 0.6mmol)和碳酸铯（196mg， 0.6mmol) 的二氧六环（4mL) 悬浮液中， 于 125°C微波反应 40分钟。冷却到室温，加入乙酸乙酯（lOOmL) 稀释， 依次用水 (20mLx3)和饱和食盐水 (20mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶制备板层析纯化（二氯甲烧 /乙酸乙酯 =1 :1 )得 化合物 T-28 ( 8mg， 产率： 9 % ) 。 LC-MS (ESI): m/z =444 [M+H]+。
-NMR (500MHz, CDC13) δ: 8.33 (s， 1H)， 8.28 (s， 1H)， 7.76 (d, J=5.5Hz, 1H)， 7.26 (d, J=5.5Hz, 1H)， 5.33 (s, 1H)， 4.55 (d, J=9.0Hz， 2H)， 4.18 (d, J=9.5Hz,2H), 3.33 (s, 2H)， 3.00-3.04 (m, 2H)， 2.80-2.84 (m, 1H)， 1.34 (t， J=7.5Hz, 3H)， 0.78-0.82 (m, 2H)， 0.52-0.55 (m, 2H) ppm
实施例 29 Ν-(4-{1-[3- (氰甲基) -1- (乙基磺酰基)氮杂环丁 -3-基] -1H-吡唑 -4-基}噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -2-基)环丙甲酰胺 T-29 合成路线如下:
Figure imgf000066_0001
氮气氛下， 将三 (二亚苄基茚丙酮)二钯 （l lmg, 0.012mmol) 和 4,5-双 二苯基膦 -9,9-二甲基氧杂蒽 （7mg， 0.012mmol) 加入到化合物 5 ( 50mg， 0.12mmol)，环丙基甲酰胺（30mg， 0.36mmol)和碳酸铯（55mg， 0.16mmol) 的二氧六环（4mL)悬浮液中， 于 125°C微波反应 30分钟。 冷却到室温， 加 入二氯甲垸（lOOmL)稀释， 依次用水 (20mLx3)和饱和食盐水 (20mL)洗， 无 水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经高效液相制备 （流动相： 乙 腈， 水（0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 50%-80%-10% )得化合物 T-29 (22mg, 产率： 39% ) 。 LC-MS (ESI): m/z =472 [M+H]+。
-NMR (400MHz, CDC13) 5： 10.88 (s， 1H)， 8.87 (s， 1H)， 8.53 (d, J=5.2Hz, 1H)， 8.41 (s， 1H)， 7.54 (d， J=5.2Hz, 1H)， 4.57 (d， J=8.8Hz， 2H)， 4.27 (d， J=9.2Hz, 2H)， 3.72 (s, 2H)， 3.22-3.28 (m, 2H)， 2.17-2.23 (m, 1H)， 1.24 (t, J=7.2Hz, 3H)， 0.81-0.85 (m, 4H) ppm
实施例 30 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-{4-[2- (苯氨基）呋喃并 [3,2-d]嘧啶 -4- 基] -1Η-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-30
合成路线如下：
Figure imgf000067_0001
Figure imgf000067_0002
Figure imgf000067_0003
Figure imgf000067_0004
30 Τ-30
化合物 30-h的合成
将 3-呋喃甲酸 （2.8g， 25mmoL) ， 叠氮憐酸二苯酯 (6ml， 27.5mmoL) 和 三乙胺（5mL， 35mmoL)加入到叔丁醇（50mL)中。混合物加热至 90°C， 并继续搅拌 12小时。 冷却至室温后， 加入碳酸氢钠水溶液 (2N,100mL)。 过 滤， 固体溶于乙酸乙酯 （lOOmL) ， 依次用水 (50mLx3:)和饱和食盐水 (50mL) 洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石 油醚 /乙酸乙酯 =10:1 ) 得白色固体 30-h (3.2g， 产率： 70%)。 LC-MS (ESI): m/z = 184 [M+H
化合物 30-g的合成
-40°C时， 将 Ν,Ν-四甲基乙二胺 (1.8mL， 12.1mmoL)加入到化合物 30-h ( 1.7g， 9.3mmoL) 的无水四氢呋喃 （50mL) 溶液中， 搅拌 20分钟后缓慢 滴加正丁基锂的正己垸溶液（2.5N， 8.4mL， 21mmoL)使温度控制在 -40°C， 滴加完毕后搅拌 30分钟。缓慢升温至 0°C后， 搅拌 1小时。混合物重新冷却 至 -40°C， 搅拌 10分钟， 碳酸二甲酯（2.4mL， 28mmoL)快速加入反应液中。 反应液缓慢升至室温， 搅拌 1小时。 加入盐酸 （2N,l lmL) 和水 （lOOmL) 淬灭反应， 乙酸乙酯 （100mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过 滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =100: 1 )得 白色固体 30-g (0.56g， 产率： 25 %)。 LC-MS (ESI): m/z = 142 [M+H]+。
化合物 30-f的合成
将三氟乙酸 (2.5mL) 加入到化合物 30-g (0.56g， 2.3mmoL) 的二氯甲 垸 （4mL) 溶液中， 室温搅拌 2小时。 减压浓縮反应液， 加入碳酸氢钠水溶 液 (2N， 6mL), 乙酸乙酯 (5mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用水 (10mLx3)和饱 和食盐水 (20mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液得黄色液体 30-f (0.35g, 产率： 100%)。 产品无需纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 142 [M+H
化合物 30-e的合成
-78°C时， 将氯磺酰异氰酸酯（0.49g， 3.5mmoL)缓慢滴加到化合物 30-f (0.35g， 2.5mmoL)的二氯甲垸（5mL)溶液中， 滴加完毕后缓慢升至室温， 搅拌 40 分钟。 减压浓縮反应液， 残余物加入盐酸 （6N， 3mL， 18mmoL) ， 加热至 100°C， 搅拌 30分钟。冷却至室温， 减压浓縮反应液， 残余物加入碳 酸氢钠水溶液 (2N， 6mL), 乙酸乙酯 (5mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用水 (10mLx3)和饱和食盐水 (20mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液得 黄色固体 30-e (176mg， 产率： 38%)。 产品无需纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 185 [M+H]+。
化合物 30-d的合成
将氢氧化钠水溶液 (2N， 2mmoL)加入到化合物 30-e (0.176g， 0.96mmoL) 的甲醇 （4mL) 溶液中， 混合物加热回流 2小时。 冷却至室温后， 加入盐酸 水溶液（6N， 0.5mL)调节 pH = 3。混合物减压浓縮， 残余物加入甲醇 (5mL) 后有灰色固体析出， 过滤， 真空干燥 16小时， 得到灰色固体 30-d (110mg， 产率： 75 %) 。产品无需纯化，直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 153 [M+H
化合物 30-c的合成
-40°C时， 将二异丙基乙胺 （2mL ) 缓慢滴加到化合物 30-d ( 0.86g， 5.6mmoL) 的三氯氧憐 (8mL)溶液中， 搅拌 10分钟后加热回流 24小时。 反 应液冷却至室温， 倒入冰中淬灭反应， 乙酸乙酯 （50mLx3 ) 萃取， 有机相 合并， 依次用水 (20mLx3)和饱和食盐水 (20mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =100:1 )得白色 固体 30-c (430mg， 产率： 41 %)。 LC-MS (ESI): m/z = 189 [M+H]+。
化合物 30-b的合成
氮气氛下， 将化合物 5-a (640mg， 1.65mmol) ， 化合物 30-c (280mg， 1.49mmol)和碳酸钾（720mg， 5.2mmol)悬浮于二氧六环（2mL)和水（6mL) 的混合溶剂中。 将四三苯基憐钯 （57mg， 0.05mmol) 加入混合物中， 并在 80°C下搅拌反应 16小时。 减压浓縮反应液， 残余物加水 （20mL) ， 用二氯 甲垸（20mLx3 )萃取，有机相合并，依次用水 (10mLx3)和饱和食盐水 (10mL) 洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石 油醚 /乙酸乙酯 =3:1 )得浅黄色固体 30-b (620mg，产率： 70%)。 LC-MS (ESI): m/z = 415 [M+H
化合物 30-a的合成 将三氟乙酸 （lmL) 加入到化合物 30-b ( 500mg， 1.2mmoL) 的二氯甲 垸 （4mL) 溶液中， 室温搅拌 2小时。 减压浓縮反应液， 残余物加入碳酸氢 钠水溶液 (2N，6mL)，乙酸乙酯 (5mLx3) 萃取,有机相合并，依次用水 (20mLx3) 和饱和食盐水 (20mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液得浅黄色液 体 30-a (370mg， 产率： 97%)。产品无需纯化，直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 315 [M+H]+。
化合物 30的合成
0°C时，将乙磺酰氯（154mg， 1.2mmoL)缓慢滴加到化合物 30-a (314mg， l.OmmoL)和三乙胺（lmL) 的二氯甲垸（4mL)溶液中。 搅拌 30分钟后减 压浓縮反应液，残余物加入碳酸氢钠水溶液 (2N， 6mL),乙酸乙酯 (5mLx3) 萃 取,有机相合并， 依次用水 (10mLx3)和饱和食盐水 (20mL)洗， 无水硫酸钠干 燥， 过滤， 减压浓縮滤液得黄色固体 30 (280mg， 产率： 70%)。 产品无需纯 化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 407 [M+H]+。
化合物 T-30的合成
氮气氛下， 将三 (二亚苄基茚丙酮)二钯 （15mg， 0.017mmol) 和 2-双环 己基憐 -2',6'-二异丙氧基联苯 （10mg， 0.07mmol) 加入到化合物 30 (70mg， 0.17mmol) ， 苯胺 （25mg， 0.26mmol) 和碳酸钾 （138mg， l.Ommol) 的二 氧六环 （4mL) 悬浮液中， 于 130°C微波反应 3小时。 冷却到室温， 加入乙 酸乙酯 （10mL) 稀释， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经高效液相制备 （流 动相： 乙腈， 水（0.05 %三氟乙酸）； 梯度： 50%-80%-10% )得化合物 T-30 ( 16mg， 产率： 20% ) 。 LC-MS (ESI): m/z =464 [M+H]+。
-NMR (400MHz, CDC13) δ: 9.48 (s， 1H)， 8.86 (s， 1H)， 8.42 (d, J=1.6Hz, 1H)， 8.40 (s， 1H)， 7.88 (d, J=6.4Hz， 2H)， 7.30 (t, J=6.4Hz， 1H)， 7.04 (d, J=1.6Hz, 1H)， 6.93 (t， J=6.4Hz, 1H)， 4.56 (d, J=7.2Hz, 2H)， 4.27 (d, J= 7.2Hz, 2H)， 3.72 (s, 2H)， 3.25 (q, J= 6Hz， 2H)， 1.25 (t, J= 6Hz， 3H) ppm 实施例 31 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-(4-{2-[(1Η-吡唑 -4-基）氨基]噻吩并 「3,2-dl嘧啶 -4-基}-1 吡唑 -1-基)氮杂环丁 -3-基 1乙腈 T-31 合
Figure imgf000071_0001
T-31
化合物 31-a的合成
氢气氛（latm)下， 10% 的钯-碳（O.lg)加入到化合物 4-硝基吡唑（1.13g， lOmmol) 的甲醇 （10mL) 溶液中。 混合物于 25°C反应 12小时后， 过滤， 滤液减压浓縮得化合物 31-a ( 860mg， 产率： 100% ) ， 产品无需纯化， 直 接投入下一步反应。
化合物 T-31的合成
将化合物 31-a ( 130mg， 1.5mmol) 和化合物 5 (222mg， 0.5mmol) 溶 于正丁醇 （10mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （344mg， 2.0mmol) 。 此 混合物于 120°C反应 3 小时后， 冷却到室温。 加入饱和碳酸氢钠水溶液 ( lOmL) ， 二氯甲垸 (10mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用水 (10mLx3)和饱 和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 残余物经高效液相制备（流动 相：水 (0.04%三氟乙酸)， 乙腈；梯度： 32 %-62% )得化合物 T-31 ( 143mg， 产率： 61 % ) 。 LC-MS (ESI): m/z =470 [M+H]+。
-NMR (400MHz， DMSO-d6) 5: 9.43 (s, 1H)， 8.81 (s, 1H)， 8.37 (s, 1H)， 8.34 (d, J=4.0Hz， 1H)， 7.87 (s, 2H)， 7.39 (d, J=4.0Hz， 1H)， 4.57 (d, J=8Hz， 2H)， 4.27 (d, J = 8Hz， 2H)， 3.91 (s, 4H)， 3.24 (q， J= 6Hz， 2H)， 1.25 (t, J= 6Hz， 3H) ppm
实施例 32 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-[4-(2-{[l-(2-甲氧基乙酰基) -1H-吡唑 -4- 基]氨基 }噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基) -1Η-吡唑 -1-基]氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-32 合
Figure imgf000072_0001
T-31 Τ-32
0°C时，将甲氧基乙酰氯（l lmg, 0.2mmol)缓慢加到化合物 T-31 (47mg， O.lmmoL) 和三乙胺 (lOOmg, l.OmoL)的二氯甲垸 （10mL) 溶液中， 并继续 搅拌 1小时。 减压浓縮反应液， 残余物加入饱和碳酸氢钠水溶液 （5mL) ， 二氯甲垸 （5mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮 滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =3:1 ) 得化合物 T-32 (32mg， 产率： 59%)。 LC-MS (ESI): m/z = 542 [M+H]+。
-NMR (400MHz， DMSO-d6) 5: 9.94 (s, 1H)， 8.85 (s, 1H)， 8.66 (s, 1H)， 8.43 (d, J=5.2Hz, 1H)， 8.39 (s, 1H)， 8.06 (s， 1H)， 7.51 (d, J=5.2Hz, 1H)， 4.87 (s, 2H)， 4.57 (d, J=9.2Hz, 2H)， 4.28 (d, J=9.2Hz, 2H)， 3.73 (s, 2H)， 3.43 (s, 3H)， 3.25 (q, J= 7.2Hz, 2H)， 1.25 (t, J= 7.2Hz, 3H) ppm 实施例 33 2-{4-[(4-{l-[3- (氰甲基) -1- (乙基磺酰基)氮杂环丁 -3-基] -1H- 吡唑—4-基}噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -2-基)氨基] -1H-吡唑 -1-基}乙酸 T-33
：
Figure imgf000072_0002
33- b 33-;
Figure imgf000073_0001
33 T-33
化合物 33-b的合成
分别将溴乙酸乙酯 （1.67g， lOmmol)和碳酸钾 （2.76g， 20mmol)加入 到 4-硝基吡唑 （1.13g， lOmmol) 的 Ν,Ν-二甲基甲酰胺 （15mL) 的溶液中， 混合物加热至 90°C并反应 12小时。 冷却到室温， 加水 （60mL) ， 用乙酸乙 酯 （20mLx3 )萃取， 有机相合并， 依次用水 (10mL)和饱和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =5: 1 )得化合物 33-b (1.68g,产率： 84%)。 LC-MS (ESI): m/z = 200 [M+H]+ o
化合物 33-a的合成
氢气氛（latm)下， 10 % 的钯-碳（O. lg)加入到化合物化合物 33-b ( 1.0g， 5mmol) 的甲醇（10mL)溶液中。 混合物于 25°C反应 12小时后， 过滤， 滤 液减压浓縮得化合物 33-a (760mg， 产率： 90% ) ， 产品无需纯化， 直接投 入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 170 [M+H]+。
化合物 33的合成
将化合物 33-a ( 170mg， LOmmol) 和化合物 5 (211mg, 0.5mmol) 溶 于正丁醇 （10mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （344mg， 2.0mmol) 。 此 混合物于 120 °C反应 3 小时后， 冷却到室温。 加入饱和碳酸氢钠水溶液 ( lOmL) ， 二氯甲垸 (10mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用水 (10mLx3)和饱 和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石 油醚 /乙酸乙酯 =3:1 ) 得化合物 33 (116mg， 产率： 21 %)。 LC-MS (ESI): m/z = 584 [M+H]+。
化合物 T-33的合成
将氢氧化锂水溶液 （2N， 0.5mL) 加入到化合物 33 ( 83mg， 0.15mmol) 的甲醇 （2mL)和四氢呋喃 （6mL) 的溶液中， 于 25°C反应 1小时。 将盐酸 水溶液 （2N， 0.5mL) 加入到反应液中， 混合物减压浓縮除去有机溶剂， 残 余物加入水 （2mL) ， 乙酸乙酯 （2mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠 干燥，过滤，减压浓縮滤液得化合物 T-33 (36mg,产率： 47%)。 LC-MS (ESI): m/z = 528 [M+H]+ o
-NMR (400MHz， DMSO-d6) 5: 8.65 (s, 1H)， 8.31 (s, 1H)， 8.09 (s, 1H)， 8.07 (d, J=4.4Hz， 1H)， 7.56 (s, 1H)， 7.23 (d, J=4.4Hz， 1H)， 4.90 (s, 2H)， 4.56 (d, J=7.2Hz, 2H)， 4.22 (d, J=7.2Hz, 2H)， 3.51 (s, 2H)， 3.07 (q, J= 5.6Hz, 2H)， 1.27 (t, J= 5.6Hz, 3H) ppm
实施例 34 3-{4-[(4-{l-[3- (氰甲基) -1- (乙基磺酰基)氮杂环丁 -3-基] -1H- 吡唑—4-基}噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -2-基)氨基] -1H-吡唑 -1-基}丙酸正丁酯 T-34 合成路线如下：
Figure imgf000074_0001
T-34 化合物 34-b的合成
将化合物 4-硝基吡唑（1.13g， lOmmol)和丙烯酸乙酯（1.72g， 20mmol) 溶于乙腈 (30mL) 中， 加入 1,8-二氮杂双环 [5,4,0] ^—碳 -7-烯 (2mL) 。 此 混合物于 90°C下搅拌反应 12小时。减压浓縮反应液，残余物加入水（50mL)， 用乙酸乙酯 （50mLx3) 萃取，有机相合并，依次用水 (50mLx3)和饱和食盐水 (50mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯 化（石油醚 /乙酸乙酯 = 3:1 )得化合物 34-b (1.37g，产率：69%)。LC-MS (ESI): m/z = 214 [M+H
化合物 34-a的合成
氢气氛（latm)下， 10% 的钯-碳（O.lg)加入到化合物化合物 34-b ( 1.0g， 5mmol) 的甲醇（10mL)溶液中。 混合物于 25°C反应 12小时后， 过滤， 滤 液减压浓縮得化合物 34-a (780mg， 产率： 92% ) ， 产品无需纯化， 直接投 入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 184 [M+H]+
化合物 T-34的合成
将化合物 34-a ( 184mg， l.Ommol) 和化合物 5 (211mg, 0.5mmol) 溶 于正丁醇 （10mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （258mg， 1.5mmol) 。 此 混合物于 120°C反应 3 小时后， 冷却到室温。 加入饱和碳酸氢钠水溶液 ( lOmL) ， 二氯甲垸 (10mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用水 (10mLx3)和饱 和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石 油醚 /乙酸乙酯 =3:1 ) 得化合物 T-34 (138mg， 产率： 24.8 %)。 LC-MS (ESI): m/z = 598 [M+H
-NMR (400MHz， CDC13) 5: 8.45 (s, 1H)， 8.23 (s, 1H)， 8.01 (s, 1H)， 7.80 (d, J=5.6Hz, 1H)， 7.46 (s, 1H)， 7.23 (d, J=5.6Hz, 1H)， 7.05(s,lH), 4.62 (d, J=9.6Hz， 2H)， 4.38 (t， J=6.4Hz, 2H)， 4.19 (d, J=9.6Hz, 2H)， 4.00 (t， J=6.4Hz， 2H)， 3.35 (s, 2H)， 3.02 (q, J= 7.2Hz, 2H)， 2.85 (t, J=6.4Hz， 2H)， 1.49 (q, J=7.2Hz, 2H)， 1.34 (t, J=7.2Hz, 3H)， 1.24 (m, 4H)， 0.79 (t, J= 7.2Hz, 3H) ppm 实施例 35 3-{4-[(4-{l-[3- (氰甲基) -1- (乙基磺酰基)氮杂环丁 -3-基] -1Η- 吡唑—4-基}噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -2-基)氨基] -1H-吡唑 -1-基}丙酸 T-35
合
Figure imgf000076_0001
将氢氧化锂水溶液（2N， 0.5mL)加入到化合物 T-34 ( 138mg， 0.25mmol) 的甲醇 （2mL)和四氢呋喃 （6mL) 的溶液中， 于 25°C反应 1小时。 将盐酸 水溶液 （2N， 0.5mL) 加入到反应液中， 混合物减压浓縮除去有机溶剂， 残 余物加入水 （2mL) ， 乙酸乙酯 （2mLx3 ) 萃取， 有机相 无水硫酸钠 干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经高效液相制备 （流动相： 水 （0.04% 三氟乙酸） ， 乙腈； 梯度： 32%-62% )得化合物 T-35 (98mg， 产率： 71 %)。 LC-MS (ESI): m/z = 542 [M+H]+。
-NMR (400MHz， DMSO-d6) 5: 9.44(s， 1H)， 8.81 (s, 1H)， 8.41 (s, 1H)， 8.34 (d, J=5.2Hz, 1H)， 8.09 (s， 1H)， 7.57 (s,lH), 7.37 (d, J=5.2Hz, 1H)， 4.59 (d, J=8.8Hz， 2H)， 4.32 (t， J=6.4Hz， 2H)， 4.27 (d, J=8.8Hz， 2H)， 3.73 (s, 2H)， 3.25 (q, J=7.6Hz, 2H)， 2.79 (t, J=6.4Hz,2H), 1.25 (t, J=7.6Hz, 3H) ppm
实施例 36 3-{4-[(4-{l-[3- (氰甲基) -1- (乙基磺酰基)氮杂环丁 -3-基] -1H- 吡唑—4-基}噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -2-基)氨基] -1H-吡唑 -1-基}^^-二甲基丙酰胺 T-36
合成路线如下：
Figure imgf000077_0001
将 O-苯并三氮唑 -Ν,Ν,Ν',Ν'-四甲基脲四氟硼酸 （200mg， 0.62mmol) 和 二异丙基乙胺 （65mg， 0.5mmol) 加入到化合物 T-35 (70mg， 0.13mmol) 和二甲胺盐酸盐（12mg， 0.26mmol) 的二氯甲垸（5mL)溶液中。 混合物在 25°C反应 1小时后加入盐酸水溶液（IN, 4mL)， 二氯甲垸（3mLx3 )萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经高效液相制 备 （流动相： 水 （0.04%三氟乙酸） ， 乙腈； 梯度： 30 %-60 % ) 得化合物 T-36 (31mg, 产率： 42%)。 LC-MS (ESI): m/z = 569 [M+H]+。
^-NMR (400MHz, CD3OD) δ: 8.86 (s， 1H)， 8.47 (s， 1H)， 8.26 (d, J=5.2Hz, 1H)， 8.18 (s, 1H)， 7.65 (s, 1H)， 7.37 (d, J=5.2Hz, 1H)， 4.71 (d, J=8.8Hz, 2H)， 4.49 (t， J=6.0Hz， 2H)， 4.32 (d, J=8.8Hz， 2H)， 3.65 (s, 2H)， 3.32 (q, J= 7.2Hz, 2H)， 2.97 (m, 8H)， 1.38 (t, J=7.2Hz, 3H) ppm
实施例 37 3-{4-[(4-{l-[3- (氰甲基) -1- (乙基磺酰基)氮杂环丁 -3-基] -1H- 吡唑—4-基}噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -2-基)氨基] -1H-吡唑 -1-基}^^-二甲基丁酰胺 T-37
合成路线如下:
Figure imgf000077_0002
Figure imgf000078_0001
Figure imgf000078_0002
T-37
化合物 37-f的合成
将化合物 4-硝基吡唑（1.13g， lOmmol)和溴丁酸甲酯（1.81g， lOmmol) 溶于二甲基甲酰胺 （15mL) 中， 加入碳酸钾 （2.76g， 2mmol) 。 此混合物 于 90°C下搅拌反应 12小时，加入水（60mL)，用乙酸乙酯 （20mLx3) 萃取， 有机相合并， 依次用水 (20mLx3)和饱和食盐水 (20mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =5:1 )得 化合物 37-f (1.42g， 产率： 67%)。 LC-MS (ESI): m/z = 214 [M+H]+。
化合物 37-e的合成
将氢氧化锂水溶液（2N， l.OmL)加入到化合物 37-f (426mg， 2.0mmol) 的甲醇 （2mL)和四氢呋喃 （6mL) 的溶液中， 于 25°C反应 1小时。 将盐酸 水溶液 （2N， l.OmL) 加入到反应液中， 混合物减压浓縮除去有机溶剂， 残 余物加入水 （2mL) ， 乙酸乙酯 （2mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠 干燥， 过滤， 减压浓縮滤液得化合物 37-e (368mg， 产率： 92 %)。 产品无需 纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 200 [M+H]+。
化合物 37-d的合成
将 0-苯并三氮唑 -Ν,Ν,Ν',Ν'-四甲基脲四氟硼酸 （800mg， 2.4mmol) 和 二异丙基乙胺 （650mg， 5mmol) 加入到化合物 37-e (368mg， 1.85mmol) 和二甲胺盐酸盐 （110mg， 2.4mmol) 的二氯甲垸 （20mL) 溶液中。 混合物 在 25°C反应 1小时后加入盐酸水溶液 （1N， 4mL) ， 二氯甲垸 （20mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液得化合物 37-d (320mg， 产率： 76%)。产品无需纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 227 [M+H
化合物 37-c的合成
氢气氛 （latm) 下， 10 % 的钯-碳 （O.lg) 加入到化合物化合物 34-b (320mg， 1.4mmol) 的甲醇 （10mL) 溶液中。 混合物于 25°C反应 12小时 后， 过滤， 滤液减压浓縮得化合物 37-c (280mg， 产率： 74 % ) ， 产品无需 纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 197 [M+H]+。
化合物 37-b的合成
将化合物 37-c (200mg， l .Ommol) 和化合物 5 (221mg, 0.5mmol) 溶 于正丁醇 （10mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （258mg， 1.5mmol) 。 此 混合物于 120 °C反应 3 小时后， 冷却到室温。 加入饱和碳酸氢钠水溶液 ( lOmL) ， 二氯甲垸 (10mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用水 (10mLx3)和饱 和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石 油醚 /乙酸乙酯 =3: 1 ) 得化合物 37-b (118mg， 产率： 41 %)。 LC-MS (ESI): m/z = 612 [M+H
化合物 37-a的合成
将氢氧化锂水溶液（2N， 0.5mL)加入到化合物 37-b ( 114mg， 0.2mmol) 的甲醇 （2mL)和四氢呋喃 （6mL) 的溶液中， 于 25 °C反应 1小时。 将盐酸 水溶液 （2N， 0.5mL) 加入到反应液中， 混合物减压浓縮除去有机溶剂， 残 余物加入水 （2mL) ， 乙酸乙酯 （2mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠 干燥， 过滤， 减压浓縮滤液得化合物 37-a (68 mg， 产率： 61 %)。 产品无需 纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 556 [M+H]+。
化合物 T-37的合成
将 Ο-苯并三氮唑 -Ν,Ν,Ν',Ν'-四甲基脲四氟硼酸 （200mg， 0.62mmol) 和 二异丙基乙胺 （65mg， 0.5mmol) 加入到化合物 37-a ( 68mg， 0.12mmol) 和二甲胺盐酸盐（l lmg, 0.24mmol) 的二氯甲垸（5mL)溶液中。 混合物在 25°C反应 1小时后加入盐酸水溶液（IN, 4mL)， 二氯甲垸（3mLx3 )萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经高效液相制 备 （流动相： 水 （0.04%三氟乙酸） ， 乙腈； 梯度： 30 %-60 % ) 得化合物 T-37 (21mg, 产率： 30%)。 LC-MS (ESI): m/z = 583 [M+H]+。
-NMR (400MHz, CD3OD) δ: 8.79 (s， 1H)， 8.44 (s， 1H)， 8.23 (d, J=5.2Hz, 1H)， 8.12 (s, 1H)， 7.66 (s,lH), 7.36 (d, J=5.2Hz, 1H)， 4.67 (d, J=8.8Hz， 2H)， 4.32 (d, J=8.8Hz, 2H)， 4.25 (t, J=6.8Hz, 2H)， 3.64(s, 2H)， 3.20 (q, J= 7.2Hz, 2H)， 2.97 (d, J= 35.6Hz, 6H)， 2.42 (t, J= 6.4Hz, 2H)， 2.19 (m, 2H)， 1.38 (t， J=7.2Hz, 3H) ppm
实施例 38 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-[4-(2-{[l-(4-四氢吡喃基) -1H-吡唑 -4-基] 氨基 }噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基) -1Η-吡唑 -1-基]氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-38
合成路线如下：
Figure imgf000081_0001
T-38 化合物 38-b的合成
25 °C时， 将偶氮二甲酸二异丙酯 （3.06g， 15mmol) 缓慢加入到化合物 4-硝基吡唑 （1.13g， lOmmol) ， 4-羟基吡喃 （1.12g， l lmmol) 和三苯基膦 (3.93g， 15mmol) 的无水四氢呋喃 （50mL) 溶液中。 搅拌 3小时后， 反应 液减压浓縮， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =3: 1 ) 得化合物 38-b (990mg, 产率： 49%)。 LC-MS (ESI): m/z = 198 [M+H]+。
化合物 38-a的合成
氢气氛 （latm) 下， 10 % 的钯-碳 （O.lg) 加入到化合物化合物 38-b (990mg， 49mmol) 的甲醇 （10mL) 溶液中。 混合物于 25°C反应 12小时 后， 过滤， 滤液减压浓縮得化合物 38-a ( 620mg， 产率： 75 % ) ， 产品无需 纯化， 直接投入下一步反应。
化合物 T-38的合成
将化合物 38-a ( 170mg， l.Ommol) 和化合物 5 (221mg, 0.5mmol) 溶 于正丁醇 （10mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （258mg， 1.5mmol) 。 此 混合物于 120 °C反应 3 小时后， 冷却到室温。 加入饱和碳酸氢钠水溶液 ( lOmL) ， 二氯甲垸 (10mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用水 (10mLx3)和饱 和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 残余物经高效液相制备（流动 相： 水（0.04%三氟乙酸）， 乙腈； 梯度： 30%-60% )得化合物 T-38 (38mg， 产率： 13.6%)。 LC-MS (ESI): m/z = 554 [M+H]+。
^-NMR (400MHz, CD3OD) δ: 8.76 (s， 1H)， 8.44 (s， 1H)， 8.22 (d, J=5.2Hz, 1H)， 8.14 (s， 1H)， 7.69 (s, 1H)， 7.35 (d, J=5.2Hz, 1H)， 4.66 (d, J=9.6Hz， 2H)， 4.51 (m, 1H)， 4.31 (d, J=9.6Hz, 2H)， 4.10 (d, J=3.6Hz, 2H)， 3.64 (s, 2H)， 3.62 (d, J=3.6Hz， 2H)， 3.20 (q, J= 7.6Hz, 2H)， 2.11 (m, 3H)， 1.38 (t, J=7.6Hz, 3H) ppm
实施例 39 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-[4-(2-{[l-(3-氧杂环丁基) -1H-吡唑 -4-基] 氨基 }噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基) -1Η-吡唑 -1-基]氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-39
合成路
Figure imgf000082_0001
化合物 39-c的合成
0°C时， 将氢氧化钠水溶液（2N， 15mL)缓慢滴加到 3-羟基氧杂环丁垸 ( 1.48g， 20mmol) 和对甲苯磺酰氯 （4.18g， 22mmol) 的水 ( 50mL) 溶液 中。 搅拌 3小时后加入水 （lOOmL) ， 用二氯甲垸 （100mLx3 ) 萃取， 有机 相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化 (石油醚 /乙酸乙酯 =10:1 )得化合物得化合物 39-c (3.9g，产率： 85 %)。LC-MS (ESI): m/z = 229 [M+H]+。
化合物 39-b的合成 将化合物 39-c (3.9g， 17mmol) 加入到 4-硝基吡唑 （1.13g， lOmmol) 和碳酸铯 （6.5g， 20mmol) 的 Ν,Ν-二甲基甲酰胺 （15mL) 混合液中， 加热 至 120°C搅拌 12小时。冷却至室温后加入水（60mL)，用乙酸乙酯（20mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶 柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =5:1 )得化合物 39-b (1.3g，产率：77%)。LC-MS (ESI): m/z = 170 [M+H]+。
化合物 39-a的合成
氢气氛（latm)下， 10% 的钯-碳（O.lg)加入到化合物化合物 39-b ( 1.3g， 7.7mmol) 的甲醇 （10mL) 溶液中。 混合物于 25°C反应 12小时后， 过滤， 滤液减压浓縮得化合物 39-a ( 820mg， 产率： 76% ) ， 产品无需纯化， 直接 投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 140 [M+H]+。
化合物 T-39的合成
氮气氛下， 将三 (二亚苄基茚丙酮)二钯 （15mg， 0.017mmol) 和 2-双环 己基憐 -2',6'-二异丙氧基联苯（10mg， 0.07mmol)加入到化合物 39-a (24mg， 0.17mmol) ， 化合物 5 (71mg， 0.17mmol) 和碳酸钾 （138mg， l.Ommol) 的二氧六环 （4mL) 悬浮液中， 于 130°C微波反应 3小时。 冷却到室温， 加 入乙酸乙酯 （10mL) 稀释， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经高效液相制备 (流动相： 乙腈， 水 （0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 50%-80%-10% ) 得化合 物 T-39 ( 13mg， 产率： 14.5 % ) 。 LC-MS (ESI): m/z =526 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CDC13) 5: 8.74 (s, 1H)， 8.43 (s, 1H)， 8.31 (s, 1H)， 8.13 (d, J=4.4Hz, 1H)， 7.77 (s, 1H)， 7.34 (d, J=4.4Hz, 2H)， 5.60 (m, 1H)， 5.10 (m, 4H)， 4.77 (d, J=7.2Hz, 2H)， 4.33(d, J=7.2Hz, 2H)， 3.64 (s， 2H)， 3.21 (q, J=6.0Hz, 2H)， 2.51 (s, 3H)， 1.40 (t, J=6.0Hz, 3H) ppm
实施例 40 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-(4-{2-[(l-乙基 -1H-吡唑 -4-基)氨基]噻吩 并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-40
合成路线如下：
Figure imgf000084_0001
Figure imgf000084_0002
T-40
化合物 40-b的合成
将溴乙垸 （l.lg, lOmmol) 和碳酸钾 （2.76g， 20mmol) 分别加入到 4- 硝基吡唑 （1.13g， lOmmol) 的 Ν,Ν-二甲基甲酰胺（15mL)溶液中， 加热至 90°C搅拌 12小时。 冷却至室温后加入水 （60mL) ， 用乙酸乙酯 （20mLx3) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶 柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =5:1)得化合物 40-b (1.2g，产率：85%)。LC-MS (ESI): m/z = 142 [M+H]+。
化合物 40-a的合成
氢气氛（latm)下， 10% 的钯-碳（O.lg)加入到化合物化合物 40-b(1.0g， 7.1mmol) 的甲醇 （10mL) 溶液中。 混合物于 25°C反应 12小时后， 过滤， 滤液减压浓縮得化合物 40-a (760mg， 产率： 96%) ， 产品无需纯化， 直接 投入下一步反应。 LC-MS(ESI): m/z= 112 [M+H]+。
化合物 T-40的合成
将化合物 40-a (lllmg, LOmmol) 和化合物 5 (221mg, 0.5mmol) 溶 于正丁醇 （10mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （258mg， 1.5mmol) 。 此 混合物于 120°C反应 3 小时后， 冷却到室温。 加入饱和碳酸氢钠水溶液 (lOmL) ， 二氯甲垸 (10mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用水 (10mLx3)和饱 和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 残余物经高效液相制备（流动 相： 水（0.04%三氟乙酸）， 乙腈； 梯度： 40%-70% )得化合物 T-40 (23mg， 产率： 9·2 %)。 LC-MS (ESI): m/z = 498 [M+H]+。
-NMR (400MHz， DMSO-d6) 5: 9.44 (s， 1H)， 8.82 (s, 1H)， 8.39 (s, 1H)， 8.34 (d, J=5.2, 1H)， 8.06 (s， 1H)， 7.58 (s, 1H)， 7.38 (d, J=5.2Hz, 1H)， 4.58 (d, J=9.2Hz, 2H)， 4.27 (d, J=9.2Hz, 2H)， 4.14 (q, J= 7.2Hz, 2H)， 3.24 (q, J=7.2Hz, 2H)， 1.39 (t， J= 7.2Hz, 3H)， 1.25 (t, J=7.2Hz, 3H) ppm
实施例 41 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-(4-{2-[(l-异丙基 -1H-吡唑 -4-基)氨基]噻 吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-41
化合物 T-41的合成
Figure imgf000085_0001
T-41
化合物 41-b的合成
将 2-碘丙垸（2.3g， 13.27mmol)和碳酸钾 （1.81g， 13.27mmol)依次加 入到 4-硝基吡唑 （1.0g， 8.85mmol) 的 Ν,Ν-二甲基甲酰胺 （10mL)溶液中， 加热至 60°C搅拌 3小时。混合物倒入冰水（ lOOmL)中，用乙酸乙酯（ 100mLx3 ) 萃取，有机相合并，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓縮滤液得黄色油状物 41-b (l.lg, 产率： 81 %)。 产品无需纯化， 直接投入下一步反应。 化合物 41-a的合成
氢气氛 （latm) 下， 10% 的钯-碳 （0.2g) 加入到化合物 41-b ( l.lg, 8.8mmol) 的乙醇 （20mL) 溶液中。 混合物于 25°C反应 12小时后， 过滤， 滤液减压浓縮得化合物 41-a ( 830mg， 产率： 94% ) ， 产品无需纯化， 直接 投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 126 [M+H]+。
化合物 T-41的合成
将化合物 41-a (71mg, 0.57mmol) 和化合物 5 ( 80mg， 0.19mmol) 溶 于正丁醇 （2mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （71mg， 0.38mmol) 。 此混 合物于 115°C反应 18小时后，冷却到室温。加入饱和碳酸氢钠水溶液（10mL)， 二氯甲垸 (10mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用水（10mLx3)和饱和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 残余物经高效液相制备（流动相： 乙腈 /甲醇 （1: 1 ) ， 水 （0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 75 %-95 %-10 % ) 得化合物 T-41 (48 mg, 产率： 49%)。 LC-MS (ESI): m/z = 512 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CDC13) 5: 8.65 (s, 1H)， 8.30 (d, J=3Hz， 1H)， 8.15 (d， J=5Hz， 1H)， 8.00 (d, J=3Hz， 1H)， 7.67 (d, J=3Hz， 1H)， 7.36 (d, J=6Hz， 1H)， 4.63 (t， J=6Hz, 2H)， 4.53(m， 1H)， 4.28 (d， J=9Hz， 1H)， 3.60 (s， 3H)， 3.18 (q, J= 7Hz, 2H)， 1.39 (t, J= 7Hz, 3H) ppm
实施例 42 2-[3-(4-{2-[(l-甲基 -1H-吡唑 -4-基)氨基]噻吩并 [2,3-d]嘧啶 -4- 基 }-1Η-吡唑 -1-基)氧杂环丁 -3-基]乙腈 T-42
合成路线如下：
Figure imgf000086_0001
化合物 42的合成 氮气氛下， 将 2,4-二氯噻吩并 [2,3-d]嘧啶 （317mg， 1.56mmol) ， 化合 物 20-a (300mg， 1.04mmol) 和碳酸钠 （331mg， 3.12mmol) 悬浮于二氧六 环（5mL)中并加入 [Ι,Γ-双 (二苯基憐)二茂铁]二氯化钯（82mg， O.lmmol)。 混合物在 80°C下搅拌反应 18小时， 冷却至室温后加二氯甲垸（50mL) ， 过 滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =1 :1 到二 氯甲垸 /甲醇 = 10:1 ) 得灰色固体 42 (120mg， 产率： 35 %)。 LC-MS (ESI): m/z = 332 [M+H]+ o
化合物 T-42的合成
将化合物 42 (50mg， 0.15mmol)和 1-甲基 -4-氨基吡唑（44mg， 0.45mmol) 溶于正丁醇（2mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （58mg， 0.31mmol) 。 此 混合物于 110°C反应 16 小时后， 冷却到室温。 加入饱和碳酸氢钠水溶液 ( lOmL) ， 二氯甲垸 (10mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用水 (10mLx3)和饱 和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 残余物经高效液相制备（流动 相： 乙腈，水（0.05 %三氟乙酸）；梯度： 50%-80%-10% )得化合物 T-42 (14 mg， 产率： 24%)。 LC-MS (ESI): m/z = 393 [M+H]+。
^-NMR (400MHz, CDC13) 5: 8.59 (br, 1H)， 8.25 (s, 1H)， 7.92 (s, 1H)， 7.66 (s， 1H)， 7.42 (d， J=6Hz， 1H)， 7.24 (d， J=6Hz， 1H)， 5.21 (d， J=9Hz， 2H)， 4.87 (d, J= 9Hz， 2H)， 3.93 (s, 3H)， 3.45 (s, 2H) ppm
实施例 43 2-[3-(4-{2-[(l-甲基 -1H-吡唑 -4-基)氨基]噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4- 基 }-1Η-吡唑 -1-基)氧杂环丁 -3-基]乙腈 T-43
合成路线如下：
Figure imgf000088_0001
将化合物 20( 108mg，0.33mmol)和 1-甲基 -4-氨基吡唑（95mg， 0.98mmol) 溶于正丁醇 （3mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （124mg， 0.66mmol) 。 此混合物于 110°C反应 16小时后， 冷却到室温。 加入饱和碳酸氢钠水溶液 ( lOmL) ， 二氯甲垸 (10mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用水 (10mLx3)和饱 和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 残余物经硅胶制备板层析纯化
(流动相: 乙酸乙酯） 得化合物 T-43 (75mg， 产率： 59%)。 LC-MS (ESI): m/z = 393 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CDC13) 5: 8.42 (s, 1H)， 8.36 (s， 1H)， 7.96 (s, 1H)， 7.87 (d， J=6Hz， 1H)， 7.54 (s， 1H)， 7.33 (d， J=6Hz， 1H)， 7.14 (s， 1H)， 5.18 (d, J=9Hz， 2H)， 4.87 (d, J= 9Hz， 2H)， 3.92 (s, 3H)， 3.43 (s, 2H) ppm 实施例 44 2-[4-(4-{2-[(l-甲基 -1H-吡唑 -4-基)氨基]噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4- 基 }—m—吡唑 -1-基)四氢吡喃 -4-基]乙腈 T-44
合成 下：
Figure imgf000088_0002
Figure imgf000089_0001
化合物 44-b的合成
室温下， 将氰亚甲基三苯基膦 （8.0g， 20mmol) 和四氢吡喃酮 （2.0g， 20mmol) 溶于二氯甲垸 （20mL) 中， 搅拌反应 16小时。 减压浓縮反应液， 残余物加入到石油醚和乙酸乙酯 （10: 1 ) 的混合溶剂（50mL) 中， 有白色固 体生成， 过滤， 滤液减压浓縮， 残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =5: 1 ) 得化合物 44-b (2.0g， 产率： 81 %)。 产品无需纯化， 直接投入下一步 反应。
化合物 44-a的合成
将化合物 44-b ( 500mg， 4.06mmol) 和 4-吡唑硼酸频那醇酯 （1.2g， 6.09mmol) 溶于乙腈 （10mL) 中， 加入 1,8-二氮杂双环 [5,4,0：^ ^—碳 -7-烯 ( 1.23g， 8.12mmol) 。 此混合物于 60 °C下搅拌反应 18小时。 减压浓縮反应 液， 残余物加入 1N盐酸水溶液调 pH值至 3-4， 乙酸乙酯 （20mLx3) 萃取， 有机相合并， 依次用水 (20mLx3)和饱和食盐水 (20mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液得黄色油状物 44-a (700mg， 产率： 54%), 产品无需纯 化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 318 [M+H]+。
化合物 44的合成
氮气氛下， 将化合物 44-a ( 500mg， 3.65mmol)， 2,4-二氯噻吩并 [3,2-d] 嘧啶 （745mg， 3.65mmol) 和碳酸钠 （1.2g， 10.95mmol) 悬浮于二氧六环 ( 0.5mL) 和水 （0.5mL) 的混合溶剂中， 加入 [Ι,Γ-双 (二苯基憐)二茂铁] 二氯化钯 （330mg， 0.4mmol) 。 混合物在 80°C下搅拌反应 4小时。 减压浓 縮反应液， 残余物加水 （20mL) ， 用二氯甲垸 （20mLx3 ) 萃取， 有机相合 并， 依次用水 (10mLx3)和饱和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减 压浓縮滤液得浅黄色固体 44 (210 g， 产率： 38 %)。 LC-MS (ESI): m/z = 360 [M+H]+ o
化合物 T-44的合成
将化合物 44 ( 120mg , 0.34mmol ) 和 1-甲基 -4-氨基吡唑 （97mg， 10.03mmol ) 溶于正丁醇 （5mL ) ， 加入对甲苯磺酸单水合物 （127mg， 0.67mmol) 。 此混合物于 110°C反应 16小时， 减压浓縮反应液， 残余物经 硅胶制备板层析纯化 （流动相： 乙酸乙酯） 得到浅黄色固体 T-44 ( 121mg， 产率： 86% ) 。 LC-MS (ESI): m/z =421 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CDC13) 5: 8.43 (s, 1H)， 8.38 (s， 1H)， 7.98 (s, 1H)， 7.87 (d， J=6Hz， 1H)， 7.54 (s， 1H)， 7.33 (d， J=6Hz， 1H)， 7.03 (s， 1H)， 3.93 (s， 3H)， 3.89 (m， 2H)， 3.61 (m， 2H)， 2.95 (s， 2H)， 2.67 (m， 2H)， 2.24 (m， 2H) ppm
实施例 45 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-[4-(2-{[4-(2H-l,2,3,4-四唑 -5-基)苯基]氨 基}噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基) -1H-吡唑 -1-基]氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-45
合成路线如下：
Figure imgf000090_0001
T-45 将化合物 5(422mg， l.Ommol)和 4-(2H-四唑 -5-基)苯胺（242mg， 1.5mmol) 溶于正丁醇（5mL) ， 加入对甲苯磺酸单水合物 （285mg， 1.5mmol) 。 此混 合物于 110°C反应 16小时， 减压浓縮反应液， 残余物经高效液相制备（流动 相： 乙腈， 水 （0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 60%-90%-10% ) 得到浅黄色固 体 T-45 ( 52mg, 产率： 10% ) 。 LC-MS (ESI): m/z =548 [M+H]+。
-NMR (400MHz， DMSO-d6) 5: 10.08 (s, 1H)， 8.88 (s, 1H)， 8.45 (m, 2H)， 8.13 (d， J=9Hz， 1H)， 7.99 (d， J=9Hz， 1H)， 7.50 (d， J=9Hz， 1H)， 4.59 (d, J=9Hz， 2H)， 4.29 (d, J= 9Hz， 2H)， 3.74 (s, 2H)， 3.24 (q, J= 7Hz， 2H)， 1.25 (t, J= 7Hz， 3H) ppm
实施例 46 2-[3-(4-{2-[(l-甲基 -1H-吡唑 -4-基)氨基]噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4- 基 }-1Η-吡唑 -1-基) -1-丙酰基氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-46
合成 ：
Figure imgf000091_0001
5 46 T-46 化合物 46的合成
将化合物 5-a (250mg， 0.58mmol) 溶于二氯甲垸 （2mL) 中， 加入盐 酸二氧六环溶液 （4N， 4mL) ， 混合物在室温下搅拌反应 16小时， 减压浓 縮反应液， 残余物加入二氯甲垸 （5mL) 和三乙胺 （0.4mL) 。 混合物冷却 到 0°C， 慢慢滴加丙酰氯 （lOOmg, 1.09mmol) ， 滴加完毕继续在 0°C搅拌 30分钟。 加入水 （15mL) ， 用二氯甲垸 （10mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 依 次用水 (10mLx3)和饱和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮 滤液，残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =2: 1 )得化合物 46 (140mg, 产率： 63 %)。 LC-MS (ESI): m/z = 387 [M+H]+。 化合物 T-46的合成
将化合物 46 ( 140mg， 0.36mmol ) 和 1-甲基 -4-氨基吡唑 （105mg， 1.09mmol ) 溶于正丁醇 （3mL ) ， 加入对甲苯磺酸单水合物 （137mg， 0.73mmol) 。 此混合物于 110°C反应 16小时， 减压浓縮反应液， 残余物经 硅胶制备板层析纯化（二氯甲烧 /甲醇 =10:1 )得到黄色固体 T-46 (65mg， 产 率： 40% ) 。 LC-MS (ESI): m/z =448 [M+H]+。
-NMR (400MHz， DMSO-d6) 5: 9.46 (s， 1H)， 8.79 (s, 1H)， 8.37 (s, 1H)， 8.34 (d， J=5Hz， 1H)， 8.05 (s， 1H)， 7.56 (s， 1H)， 7.37 (d， J=5Hz， 1H)， 4.78 (d, J=9Hz， 1H)， 4.78 (m, 2H)， 4.24 (d, J=9Hz， 1H)， 3.84 (s, 3H)， 3.72 (s, 2H)， 2.15 (q, J= 7Hz， 2H)， 0.99 (t, J= 7Hz， 3H) ppm
实施例 47 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-(4-{2- [(哒嗪 -4-基)氨基]噻吩并 [3,2-d]嘧 啶—4-基}-111-吡唑 -1-基)氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-47
合成路线如下：
Figure imgf000092_0001
T-47
将化合物 5 ( 50mg， 0.12mmol) 和 4-氨基哒嗪 （34mg， 0.36mmol) 溶 于正丁醇 （3mL) ， 加入对甲苯磺酸单水合物（45mg， 0.24mmol) 。 此混合 物于 110°C反应 16小时，减压浓縮反应液，残余物经高效液相制备（流动相： 乙腈， 水 （0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 60%-90%-10% ) 得到黄色固体 T-47 (6mg， 产率： 11 % ) 。 LC-MS (ESI): m/z =482 [M+H]+。 Ή-NMR (400MHz， CDC13) 5: 8.79 (d, J=9Hz， 1H)， 8.54 (s, 1H)， 8.45 (s， 1H)， 8.08 (d, J=6Hz， 1H)， 7.92 (d, J=3Hz， 1H)， 7.66 (d, J=6Hz， 1H)， 6.32 (m, 1H)， 4.66 (d, J=9Hz， 2H)， 4.26 (d, J= 9Hz， 2H)， 3.44 (s， 2H)， 3.12 (q, J= 7Hz, 2H)， 1.43 (t, J= 7Hz, 3H) ppm
实施例 48 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-(4-{2-[(l-甲基 -1H-咪唑 -4-基)氨基]噻吩 并 [3,2-d]嘧啶 -4-基}-111-吡唑 -1-基)氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-48
合成路
Figure imgf000093_0001
化合物 48-a的合成
氢气氛 （latm) 下， 10 % 的钯-碳 （O.lg) 加入到 1-甲基 -4-硝基咪唑 (500mg， 3.94mmol) 的乙醇 (20mL)溶液中。 混合物于 25°C反应 12小时 后， 过滤， 滤液减压浓縮得化合物 48-a (310mg， 产率： 82 % ) ， 产品无需 纯化， 直接投入下一步反应。
化合物 T-48的合成
将化合物 5 (70mg， 0.17mmol)和化合物 48-a (48mg， 0.5mmol) 溶于 正丁醇 （3mL) ， 加入对甲苯磺酸单水合物 （60mg， 0.33mmol) 。 此混合物 于 110°C反应 16小时， 减压浓縮反应液， 残余物经高效液相制备 （流动相： 乙腈， 水 （0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 60%-90%-10% ) 得到黄色固体 T-48 (5mg， 产率： 6% ) 。 LC-MS (ESI): m/z =484 [M+H]+。
-NMR (500MHz， CD3OD) 5: 8.80 (s, 1H)， 8.64 (s， 1H)， 8.47 (s, 1H)， 8.28 (d, J=5Hz， 1H)， 7.49 (d, J=5Hz， 1H)， 7.45 (s, 1H)， 4.67 (d, J=9Hz， 2H)， 4.32 (d, J= 9Hz， 2H)， 3.99 (s, 2H)， 3.65 (s, 2H)， 3.20 (q, J
2H)， 1.39 (t， J= 7Hz， 3H) ppm
实施例 49 2-[l-(2-羟基乙酰基) -3-(4-{2-[(l-甲基 -1H-吡唑 -4-基) 吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基}-111-吡唑 -1-基)氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-49
合成路线如下：
Figure imgf000094_0001
5- a 49 T-49 化合物 49的合成
将化合物 5-a ( 70mg， 0.16mmol) 溶于二氯甲垸 （lmL) 中， 加入盐酸 二氧六环溶液 （4N， lmL) ， 混合物在室温下搅拌反应 16小时， 减压浓縮 反应液， 残余物加入二氯甲垸 （5mL)和三乙胺 （O. lmL) 。 搅拌 15分钟后 依次加入乙醇酸 （16mg， 0.21mmol) ， 1-乙基 -3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺盐 酸盐 （40mg， 0.21mmol) 和 1-羟基苯并*** （3mg， 0.02mmol) ， 混合物 在室温下继续搅拌 16 小时， 加入水 （15mL) ， 用二氯甲垸 （10mLx3 ) 萃 取，有机相合并，依次用盐酸水溶液 (IN, 50mL)和饱和碳酸氢钠水溶液 (50mL) 洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶制备板层析纯化
(二氯甲烧 /甲醇 =10: 1 ) 得化合物 49 (20mg， 产率： 44%)。 LC-MS (ESI): m/z = 389 [M+H]+ o
化合物 T-49的合成
将化合物 49 (20mg， 0.05mmol)和 1-甲基 -4-氨基吡唑（ 15mg， 0.16mmol) 溶于正丁醇 （2mL) ， 加入对甲苯磺酸单水合物 （20mg， O. lmmol) 。 此混 合物于 120°C反应 3小时， 减压浓縮反应液， 残余物经硅胶制备板层析纯化 (二氯甲烧 /甲醇 =10: 1 )得到黄色固体 T-49(5mg，产率：22% )。LC-MS (ESI): m/z =450 [M+H]+ o
-NMR (400MHz, CD3OD) δ: 8.77 (s， 1H)， 8.43 (s， 1H)， 8.25 (d, J=5Hz， 1H)， 8.02 (s, 1H)， 7.65 (s, 1H)， 7.35 (d, J=5Hz， 1H)， 4.99 (d, J=10Hz， 1H)， 4.76 (d, J=10Hz， 1H)， 4.69 (d, J=l lHz， 1H)， 4.46 (d, J=l lHz， 1H)， 4.21 (s, 2H)， 3.93 (s， 3H)， 3.62 (s, 2H) ppm
实施例 50 2-(4-{4-[2-({l-[2- (吗啉 -4-基)乙基] -1H-吡唑 -4-基}氨基)噻吩 并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}四氢吡喃 -4-基)乙腈 T-50
合成路线如下：
Figure imgf000095_0001
T-50
化合物 50-b的合成
将 N-(2-氯乙基)吗啉盐酸盐 （2.1g， 11.06mmol) 和氢氧化钾 ( 1.24g, 22.12mmol) 依次加入到 4-硝基吡唑 （1.0g， 8.85mmol) 的乙醇 (20mL) 溶 液中， 加热至 80°C搅拌 3小时。 减压浓縮反应液， 残余物加水 （50mL) ， 用乙酸乙酯 （50mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压 浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =1:1 )得化合物 50-b (600mg， 产率： 30%)。 LC-MS (ESI): m/z =227 [M+H]+。 化合物 50-a的合成
氢气氛 ( latm) 下， 10% 的钯-碳 (O.lg) 加入到化合物 50-b (600mg， 2.66mmol) 的乙醇 （20mL) 溶液中。 混合物于 25°C反应 12小时后， 过滤， 滤液减压浓縮得化合物 50-a (450mg， 产率： 87% ) ， 产品无需纯化， 直接 投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z =197 [M+H]+。
化合物 T-50的合成
将化合物 50-a ( 80mg， 0.41mmol)和化合物 44 (60mg， 0.17mmol) 溶 于正丁醇 （6mL) ， 加入对甲苯磺酸单水合物 （210mg， l.l lmmol) 。 此混 合物于 130°C反应 3小时， 减压浓縮反应液， 残余物经高效液相制备 （流动 相： 乙腈， 水 （0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 60%-90%-10% ) 得到黄色固体 T-50 ( 10mg， 产率： 12% ) 。 LC-MS (ESI): m/z =520 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CD3OD) 5: 8.71 (s, 1H)， 8.44 (s， 1H)， 8.25 (s, 1H)， 8.21 (d, J=6Hz， 1H)， 7.75 (s, 1H)， 7.36 (d, J=6Hz， 1H)， 4.65 (t, J=6Hz， 2H)， 3.91 (m， 6H)， 3.57 (m, 2H)， 3.32 (br, 4H)， 3.18 (s， 2H)， 2.70 (m, 2H)， 2.25 (m, 2H) ppm
实施例 51 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-[4-(2-{[l-(2-羟乙基) -1H-吡唑 -4-基]氨 基}噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基) -1H-吡唑 -1-基]氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-51
合成路线如下：
BrCH2CH2OH Pd-C, H2
ΌΗ
02N" K2C〇3 02Ν' H2N' ' N、 -OH
51- a
Figure imgf000096_0001
T-51 化合物 51-b的合成
将 2-溴乙醇 （1.9g， 15.57mmol) 和碳酸钾 （2.9g， 21.12mmol) 依次加 入到 4-硝基吡唑 （1.6g， 14.16mmol) 的乙腈 （20mL) 溶液中， 加热至 60°C 搅拌 16小时。冷却至室温后过滤，减压浓縮滤液得化合物 51-b (l.lg,产率： 49.5 %)。 产品无需纯化， 直接投入下一步反应。
化合物 51-a的合成
氢气氛 （latm) 下， 10% 的钯-碳 （0.2g) 加入到化合物 51-b ( l.lg, 7mmol) 的乙醇（20mL)溶液中。 混合物于 25°C反应 12小时后， 过滤， 滤 液减压浓縮得化合物 51-a (740mg， 产率： 83 % ) ， 产品无需纯化， 直接投 入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z =128 [M+H]+。
化合物 T-51的合成
将化合物 51-a (72mg, 0.57mmol) 和化合物 5 ( 80mg， 0.19mmol) 溶 于正丁醇 （2mL) ， 加入对甲苯磺酸单水合物（72mg， 0.38mmol) 。 此混合 物于 115°C反应 18小时，减压浓縮反应液，残余物经高效液相制备（流动相： 乙腈， 水 （0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 40%-70%-10% ) 得到黄色固体 T-51 (45mg， 产率： 46% ) 。 LC-MS (ESI): m/z =514 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CDC13) 5: 11.80 (s, 1H)， 8.52 (s, 1H)， 8.15 (s, 1H)， 8.01 (d, J=6Hz， 1H)， 7.77 (s, 1H)， 7.68 (s, 1H)， 7.28 (s, 1H)， 7.18 (d, J=6Hz,lH)， 4.69 (d, J=9Hz， 2H)， 4.24 (d, J=9Hz， 4H)， 4.03 (s， 2H)， 3.49 (s， 2H)， 3.12 (q, J=7Hz， 2H)， 1.43 (t， J=7Hz， 3H) ppm
实施例 52 2-[3-(4-{2-[(l-乙酰基 -1H-吡唑 -4-基)氨基]噻吩并 [3,2-d]嘧啶 —4-基}-111-吡唑 -1-基) -1- (乙基磺酰基)氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-52
合成路线如下：
Figure imgf000098_0001
Τ-31 T-52
0°C时， 将乙酰氯 （7mg， 0.089mmol) 缓慢加到化合物 T-31 (35mg， 0.075mmoL) 和三乙胺 (O.lmL)的二氯甲垸 （5mL) 溶液中， 并继续搅拌 30 分钟。 减压浓縮反应液， 残余物加入饱和碳酸氢钠水溶液 （5mL) ， 二氯甲 垸 （5mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经高效液相制备（流动相： 乙腈， 水（0.05 %三氟乙酸）； 梯度： 70% -95 %-10% ) 得化合物 T-52 (25mg， 产率： 66%)。 LC-MS (ESI): m/z = 512 [M+H]+ o
-NMR (400MHz， CDC13) 5: 8.78 (s, 1H)， 8.56 (s, 1H)， 8.41 (s, 1H)， 8.01 (d， J=5Hz， 1H)， 7.92 (s， 1H)， 7.46 (d， J=5Hz， 1H)， 4.65 (d， J=9Hz， 2H)， 4.28 (d, J=9Hz, 4H)， 3.42 (s, 2H)， 3.11 (q, J= 7Hz, 2H)， 2.72 (s, 3H)， 1.43 (t， J= 7Hz， 3H) ppm
实施例 53 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-{4-[2-({l-[2- (吗啉 -4-基)乙基] -1H-吡唑 -4-基}氨基)噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1Η-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-53 合成路线如下：
Figure imgf000099_0001
5 T-53
将化合物 50-a (97mg， 0.5mmol)和化合物 5 (70mg， 0.17mmol)溶于 正丁醇 （2mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （126mg， 0.67mmol) 。 此混 合物于 115°C反应 18小时， 减压浓縮反应液， 残余物经高效液相制备（流动 相： 乙腈， 水 （0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 40%-70%-10% ) 得到黄色固体 T-53 (41mg， 产率： 43 % ) 。 LC-MS (ESI): m/z =583 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CDC13) 5: 12.09 (s, 1H)， 8.94 (s， 1H)， 8.39 (s, 1H)， 8.21 (s, 1H)， 8.14 (d, J=5Hz， 1H)， 7.72 (s, 1H)， 7.47 (d, J=5Hz， 1H)， 4.74 (m， 4H)， 4.26 (d, J=9Hz， 4H)， 3.93 (m, 4H)， 3.71 (t, J=5Hz， 2H)， 3.51 (s, 2H)， 3.11 (m， 4H)， 3.09 (q， J= 7Hz， 2H)， 1.43 (t， J= 7Hz， 3H) ppm 实施例 54 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-[4-(2-{[l-(l-甲基氮杂环丁 -3-基) -1H-吡 唑 -4-基]氨基 }噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基) -1Η-吡唑 -1-基]氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-54
Figure imgf000099_0002
Figure imgf000100_0001
Τ-54
化合物 54-d的合成
将硼氢化钠（l.Olg, 26.7mmol)缓慢加入到 1-BOC-3-氮杂环丁酮（2.28g， 13.3mmol) 的乙醇 （30mL) 的溶液中， 搅拌反应 2小时后减压浓縮， 残余 物加水 （50mL) ， 用乙酸乙酯 （50mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠 干燥， 过滤， 减压浓縮滤液得化合物 54-d (2.28g, 产率： 99 %)。 产品无需 纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z =175 [M+H]+。
化合物 54-c的合成
0°C时，将对甲苯磺酰氯（2.12g， l l.lmmol)缓慢加到化合物 54-d ( 1.28g， 7.4mmoL ) 和 1,4-二氮杂二环 [2.2.2]辛垸（1.66g， 14.8mmoL)的二氯甲垸 (30mL)溶液中， 升至室温后继续搅拌 40分钟。 二氯甲垸（30mL)稀释反 应液， 依次用盐酸水溶液 （1N， 50mL) ， 饱和碳酸氢钠水溶液 （50mL) 以 及水 （50mL) 洗， 有机相用无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液得化合 物 54-c (1.96g， 产率： 81 %)。 产品无需纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 350 [M+Na]+。
化合物 54-b的合成
将化合物 54-c (4.9g， 15mmol) 和碳酸铯 （6.5g， 2mmol) 依次加入到 4-硝基吡唑 （1.13g， lOmmol) 的 Ν,Ν-二甲基甲酰胺 （15mL)溶液中， 加热 至 120°C搅拌 16小时。冷却至室温后加水（60mL)， 用乙酸乙酯（30mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶 柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =5:1 )得化合物 54-b (l.lg，产率：41 %)。LC-MS (ESI): m/z = 291 [M+Na]+。 化合物 54-a的合成
将化合物 54-b ( l.lg, 4.1mmol) 的无水四氢呋喃 （10mL) 溶液慢慢滴 加到四氢锂铝 （360mg， lOmmol) 的无水四氢呋喃 （10mL) 混合液中， 加 热回流 3小时后冷却至室温， 缓慢滴加乙酸乙酯 （2mL) ， 混合物过滤， 减 压浓縮滤液得化合物 54-a (430mg， 产率： 69%)。 产品无需纯化， 直接投入 下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 153 [M+H]+。
化合物 T-54的合成
将化合物 54-a ( 152mg， lmmol) 和化合物 5 (221mg， 0.5mmol) 溶于 正丁醇 （10mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （258mg， 1.5mmol) 。 此混 合物于 120°C反应 3小时后，冷却到室温。加入饱和碳酸氢钠水溶液（10mL)， 二氯甲垸 (10mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用水（10mLx3)和饱和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 残余物经高效液相制备（流动相： 乙腈， 水 (0.05 %三氟乙酸) ； 梯度： 40%-70%-10% )得到黄色固体 T-54 (28mg， 产率： 10.4% ) 。 LC-MS (ESI): m/z =554 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CD3OD) 5: 8.74 (s, 1H)， 8.43 (s, 1H)， 8.25 (s, 1H)， 8.13 (d, J=4.0Hz， 1H)， 7.74 (s,lH), 7.35 (d, J=4.0Hz， 1H)， 5.05 (m, 1H)， 4.67 (d, J=7.2Hz, 2H)， 4.33 (d, J=7.2Hz, 2H)， 3.90 (t, J=5.6Hz, 2H)， 3.66 (t， J=5.6Hz, 2H)， 3.64 (s， 2H)， 3.21 (q, J=6.0Hz， 2H)， 2.51 (s, 3H)， 1.38 (t， J=6.0Hz， 3H) ppm
实施例 55 2-( 1 -乙基磺酰基 -3-[4-(5-苯胺基-吡唑并 [ 1 ,5-a]嘧啶 -7- 基) -1H-吡唑 -1-基]氮杂环丁 -3-基)乙腈 T-55
合成路线如下：
Figure imgf000102_0001
55-a
Figure imgf000102_0002
T-55
化合物 55-a的合成
氮气氛下， 将化合物 5-a (400mg， 1.04mmol) ， 5,7-二氯吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 （200mg， 1.04mmol) 和碳酸钠 （331mg， 3.12mmol) 悬浮于二氧六环 (2mL) 和水 （2mL) 的混合溶剂中， 加入 [Ι,Γ-双 (二苯基憐)二茂铁]二氯 化钯（lOOmg, O.lmmol) 。 混合物在 80°C下搅拌反应 16小时。 减压浓縮反 应液，残余物加二氯甲垸（20mL)，并依次用水 (10mLx3)和饱和食盐水 (10mL) 洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶制备板层析纯化 (二氯甲烧 /乙酸乙酯 =30: 1 ) 得化合物 55-a (230mg， 产率： 54%)。 LC-MS (ESI): m/z = 414 [M+H]+。
化合物 55的合成 将化合物 55-a (230mg， 0.56mmol)溶于四氢呋喃（2mL) 中， 加入 4N 盐酸二氧六环溶液（1.5mL) ， 混合物在室温下搅拌反应 16小时， 减压浓縮 反应液， 残余物加入二氯甲垸 （5mL)和三乙胺 （0.3mL， 2.2mmol) 。 混合 物冷却到 0°C， 慢慢滴加乙基磺酰氯 （0.15mL， 0.84mmol) ， 滴加完毕继续 在 0°C搅拌 30分钟。 加入水 （5mL) ， 用二氯甲垸 （10mL><3) 萃取， 有机 相合并，依次用水 (10mLx3)和饱和食盐水 (10mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶制备板层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =1:1)得化 合物 55 (102mg， 产率： 45%)。 LC-MS (ESI): m/z = 406 [M+H]+。
化合物 T-55的合成
氮气氛下， 将醋酸钯（15mg， 0.07mmol)和 2,2'-双 (二苯基膦) -Ι,Γ-联萘 (40mg， 0.07mmol) 加入到化合物 55 (70mg， 0.17mmol) ， 苯胺 （25mg， 0.26mmol) 和碳酸铯 （102mg， 0.32mmol) 的二氧六环 （4mL) 悬浮液中， 于 125°C微波反应 40分钟。 冷却到室温， 加入乙酸乙酯 （10mL) 稀释， 依 次用水 (5mLx3)和饱和食盐水 (5mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤 液， 残余物经高效液相制备（流动相： 乙腈， 水（0.05%三氟乙酸） ； 梯度： 40%-70%-10%)得化合物 T-55 (10mg， 产率： 13%) 。 LC-MS (ESI): m/z
Figure imgf000103_0001
^-NMR (400MHz, CDC13) δ: 9.12 (s， 1H)， 8.15 (s， 1H)， 8.01 (d, J=2Rz, 1H)， 7.46 (m， 4H)， 7.26 (m， 1H)， 6.61 (s， 1H)， 6.39 (d， J=2Rz, 1H)， 4.63 (d， J=9Rz, 2H)， 4.24 (d， J= 9Hz， 2H)， 3.42 (s， 2H)， 3.09 (q， J= 7Hz， 2H)， 1.42 (t, J=7Hz， 3H) ppm
实施例 56 2-氟 -4-[2- (苯胺基)噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基]苯乙腈 T-56 合成路线如下：
Figure imgf000104_0001
56-a
Figure imgf000104_0002
56 Τ-56
化合物 56-a的合成
氮气氛下，将对溴邻氟苯乙腈（4.0g， 20mmol)，双联频那醇硼酸酯（3.8g， 30mmol)和醋酸钾（6.1g， 60mmol)悬浮于二甲亚砜（50mL)中并加入 [Ι,Γ- 双 (二苯基憐)二茂铁]二氯化钯 （1.5g， 0.2mmol) 。 混合物在 80°C下搅拌反 应 4小时。 加水 （lOOmL) ， 乙酸乙酯 （100mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 依 次用水 (50mLx3)和饱和食盐水 (50mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮 滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =50: 1到 10: 1 ) 得白色固 体 56-a (3.6g， 产率： 73 %)。
^-NMR (400MHz, CD3OD) 5: 7.62 (m, 3H)， 1.35 (s, 12H) ppm 化合物 56的合成
氮气氛下， 将化合物 56-a ( l .Og, 4mmol) ， 2,4-二氯噻吩并 [3,2-d]嘧啶 ( l.Og, 4.9mmol) 和碳酸钾 （1.38g， lOmmol) 悬浮于二氧六环 ( 20mL ) 和水（4mL) 的混合溶剂中， 加入四三苯基膦钯 （490mg， 0.6mmol) 。 混合 物在 100°C下搅拌反应 2小时。 减压浓縮反应液， 残余物加水（20mL) ， 用 二氯甲垸 （20mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 依次用水 (10mLx3)和饱和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯 化 （石油醚 /乙酸乙酯 =3: 1 ) 得浅黄色固体 56 (1.0g， 产率： 87.5 %)。 LC-MS (ESI): m/z = 290 [M+H]+。
化合物 T-56的合成
将化合物 56 (290mg， l.Ommol) 和苯胺 （140mg， 1.5mmol) 溶于正丁 醇 （10mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （260mg， 1.5mmol) 。 此混合物 于 120°C反应 6小时后， 冷却到室温。 加入饱和碳酸氢钠水溶液 （10mL) ， 二氯甲垸 (10mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用水（10mLx3)和饱和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙 酸乙酯 =3:1到 1 :1 )得到化合物 T-56 ( 120mg, 产率： 35 % )。 LC-MS (ESI): m/z =347 [M+H]+ o
-NMR (400MHz， DMSO-d6) δ: 9.89 (s, 1H)， 8.48 (d, J=5.2, 1H)， 8.29 (m, 3H)， 7.87 (d, J=7.6, 1H)， 7.51 (d, J=5.2Hz, 1H)， 7.33 (t, J=7.2Hz, 2H)， 6.98 (t， J=7.2Hz, 1H) ppm
实施例 57 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-(4-{2-[(1Η-吲唑 -5-基
[3,2-d]嘧啶 -4-基}-111-吡唑 -1-基)氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-57
合
Figure imgf000105_0001
将 5-氨基吲唑 （47mg， 0.36mmol) 和化合物 5 (50mg， 0.12mmol) 溶 于正丁醇 （0.5mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （43mg， 0.24mmol) 。 此 混合物于 110°C反应 18 小时后， 冷却到室温。 加入饱和碳酸氢钠水溶液 (lOmL) ， 二氯甲垸 (5mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用水 (5mLx3)和饱和 食盐水 (5mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 残余物经高效液相制备（流动相： 甲醇， 水 （0.05%三氟乙酸） ； 梯度： 70%-95%-10%) 得到黄色固体 T-57 (20mg， 产率： 33%) 。 LC-MS (ESI): m/z =520 [M+H]+。
^-NMR (400MHz, CDC13)5: 11.1 (br, 1H)， 8.53 (s, 1H)， 8.36 (s， 1H)， 8.15 (d, J=1.2Hz, 1H)， 8.09 (d, J=9Hz， 2H)， 7.52 (d, J=1.2Hz, 1H)， 7.48 (d， J=9Rz, 1H)， 4.62 (d， J=9Hz， 2H)， 4.23 (d， J=9Hz, 2H)， 3.41 (s， 2H)， 3.09 (q， J= 7Hz, 2H)， 1.42 (t, J= 7Hz, 3H) ppm
实施例 58 2-[3-(4-{2-[(1Η-1,3-苯并咪唑 -5-基)氨基]噻吩并 [3,2-d]嘧啶 —4-基}-111-吡唑 -1-基) -1- (乙基磺酰基)氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-58
合
Figure imgf000106_0001
T-58
将 5-氨基苯并咪唑（47mg， 0.36mmol)和化合物 5 (50mg， 0.12mmol) 溶于正丁醇 （0.5mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （43mg， 0.24mmol) 。 此混合物于 110°C反应 18小时后， 冷却到室温。 加入饱和碳酸氢钠水溶液
(lOmL) ， 二氯甲垸 (5mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用水 (5mLx3)和饱和 食盐水 (5mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 残余物经高效液相制备（流动相： 甲醇， 水 （0.05%三氟乙酸） ； 梯度： 50%-80%-10%) 得到黄色固体 T-57
(20mg， 产率： 33%) 。 LC-MS (ESI): m/z =520 [M+H]+。 Ή-NMR (500MHz， DMSO-d6) 5: 10.11 (s, 1H)， 9.45 (s, 1H)， 8.88 (s, 1H)， 8.76 (d, J=1.5Hz, 1H)， 8.52 (s, 2H)， 8.47 (d, J=1.5Hz, 1H)， 7.85 (dd, J=10Hz， J=1.5Hz, 1H)， 7.44 (d, J=5.5Hz, 1H)， 4.59 (d, J=9Hz， 2H)， 4.29 (d， J=9Hz， 2H)， 3.75 (s， 2H)， 3.25 (q, J= 7Hz, 2H)， 1.26 (t, J= 7Hz, 3H) ppm
实施例 59 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-[4-(2-{[4-(1Η-1,2,3,4-四唑 -1-基)苯基]氨 基}噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基) -1H-吡唑 -1-基)氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-59
Figure imgf000107_0001
将 5-(4-氨苯基) -1H-四唑 （77mg， 0.47mmol ) 和化合物 5 ( lOOmg, 0.26mmol ) 溶于正丁醇 （2mL ) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （68mg， 0.36mmol) 。 此混合物于 110°C反应 18小时后， 冷却到室温。 加入饱和碳 酸氢钠水溶液 （10mL) ， 二氯甲垸 (10mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用水 (10mLx3:)和饱和食盐水 (lOmL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 残余物经高效液 相制备 （流动相： 乙腈， 水 （0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 50%-80%-10% ) 得到黄色固体 T-59 (44mg， 产率： 34% )。 LC-MS (ESI): m/z =548 [M+H]+。
-NMR (400MHz， DMSO-d6) δ: 10.07 (s, 1H)， 10.00 (s, 1H)， 8.88 (s, 1H)， 8.45 (d, J=9Hz， 1H)， 8.16 (d, J=9Hz， 2H)， 7.84 (d, J=1.2Hz, 1H)， 7.49 (d， J=10Hz， J=1.6Hz, 1H)， 4.58 (d， J=9Hz， 2H)， 4.28 (d， J=9Hz， 2H)， 3.74 (s, 2H)， 3.25 (q, J= 7Hz, 2H)， 1.26 (t, J= 7Hz， 实施例 60 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-{4-[2-({l-[3- (吗啉 -4-基)丙基] -1Η-吡唑 -4-基}氨基)噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-60 合成路线如下：
Figure imgf000108_0001
T-60
化合物 60-b的合成
0°C时， 将含量为 60%的矿物油保护的氢化钠（530mg， 13.27mmol)加 入到 4-硝基吡唑 （1.0g， 8.85mmol) 的四氢呋喃 （10mL) 溶液中， 混合物 搅拌 30分钟后加入 N-(3-氯丙基)吗啉（1.73g， 10.62mmol) ， 升至室温后继 续反应 16 小时。 加入水 （25mL) ， 乙酸乙酯 （50mLx3 ) 萃取， 有机相合 并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石 油醚 /乙酸乙酯 =1:1 )得黄色油状物 60-b (1.2g，产率： 56.6%)。 LC-MS (ESI): m/z =241 [M+H]+ o
化合物 60-a的合成
氢气氛 ( latm) 下， 10% 的钯-碳 (O.lg) 加入到化合物 60-b (300mg， 1.25mmol) 的乙醇 （5mL) 溶液中。 混合物于 25°C反应 16小时后， 过滤， 滤液减压浓縮得红棕色油状物 60-a ( 180mg， 产率： 69% ) ， 产品无需纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z =211 [M+H]+。 化合物 T-60的合成
将化合物 60-a ( lOOmg, 0.48mmol) 和化合物 5 ( lOOmg, 0.24mmol) 溶于正丁醇（2mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （68mg， 0.36mmol) 。 此 混合物于 110°C反应 18 小时后， 冷却到室温。 加入饱和碳酸氢钠水溶液 ( lOmL) ， 二氯甲垸 (10mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用水 (10mLx3)和饱 和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 残余物经高效液相制备（流动 相： 乙腈， 水 （0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 25 %-55 %-10% ) 得到黄色固体 T-60 ( 60mg， 产率： 43 % ) 。 LC-MS (ESI): m/z =597 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CD3OD) 5: 8.78 (s, 1H)， 8.44 (s， 1H)， 8.25 (s, 1H)， 8.21 (d, J=5.2Hz, 1H)， 8.18 (s, 1H)， 7.72 (s, 1H)， 7.35 (d, J=5.6Hz, 1H)， 4.66 (d, J=9Hz， 2H)， 4.33 (m， 4H)， 4.06 (m， 2H)， 3.77 (m, 2H)， 3.65 (s, 2H)， 3.50 (m, 2H)， 3.20 (m, 6H)， 2.36 (m, 2H)， 1.38 (d, J=7Hz, 2H) ppm 实施例 61 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-{4-[2-({l-[3-(2H-l,2,3,4-四唑 -5-基)丙 基] -1Η-吡唑 -4-基}氨基)噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1Η-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3- 基]乙腈 T-61
合成路线如下：
Figure imgf000109_0001
化合物 61-c的合成 将 4-溴丁腈（4.27g， 26.55mmol)加入到 4-硝基吡唑（2.0g， 17.69mmol) 和碳酸钾（5.0g， 35.39mmol)的乙腈 (20mL)混合液中， 加热回流 16小时。 冷却至室温后加入水（60mL) ， 用乙酸乙酯（50mLx3 )萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =5: 1 ) 得化合物 61-c (2.5g， 产率： 79%)。
化合物 61-b的合成
将 1.0M 四丁基氟化铵的四氢呋喃溶液 （12mL， 12mmol) 加入到化合 物 61-c(2.0g， l l. lmmol)和三甲基叠氮化硅（2.0g， 17.39mmol)的甲苯（20mL) 溶液中， 混合物加热回流 16小时。补加三甲基叠氮化硅（2.0g， 17.39mmol) 后， 继续加热回流 16小时。减压浓縮反应液， 残余物经硅胶柱层析纯化（二 氯甲垸 /甲醇 =10: 1 )得化合物 61-b (2.1g,产率： 85 %)。LC-MS (ESI): m/z =224
Figure imgf000110_0001
化合物 61-a的合成
氢气氛 （latm) 下， 10 % 的钯-碳 （O.lg) 加入到化合物 61-b ( l.Og, 4.48mmol) 的乙醇 （20mL) 溶液中。 混合物于 25°C反应 16小时后， 过滤， 滤液减压浓縮得红棕色油状物 61-a (750mg， 产率： 86% ) ， 产品无需纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z =194 [M+H]+。
化合物 T-61的合成
将化合物 61-a ( 137mg， 0.71mmol) 和化合物 5 ( lOOmg, 0.24mmol) 溶于正丁醇（2mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （91mg， 0.47mmol) 。 此 混合物于 110°C反应 18 小时后， 冷却到室温。 加入饱和碳酸氢钠水溶液 ( lOmL) ， 二氯甲垸 (10mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用水 (10mLx3)和饱 和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 残余物经高效液相制备（流动 相： 乙腈， 水 （0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 25 %-55 %-10 % ) 得到黄色固体 T-61 ( 19mg， 产率： 13.6% ) 。 LC-MS (ESI): m/z =580 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CDC13) 5: 8.49 (s, 1H)， 8.37 (s, 1H)， 8.03 (s, 1H)， 7.91 (d， J=5.6Hz, 1H)， 7.69 (s， 1H)， 7.35 (d， J=5.6Hz, 1H)， 6.97 (s， 1H)， 4.66 (d, J=9Hz， 2H)， 4.25 (d, J=9Hz， 4H)， 4.17 (t, J=6Hz， 4H)， 3.44 (s, 2H)， 3.11 (q， J=7Hz， 2H)， 2.91 (m, 2H)， 2.28 (m, 2H)， 1.42 (t, J=7Hz， 3H) ppm
实施例 62 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-[4-(2-{[6- (吗啉 -4-基)吡啶 -3-基]氨基 }噻 吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-62
合成路线如下：
Figure imgf000111_0001
T-62
化合物 62-b的合成
将吗啉 （2.0g， 31.7mmol) 加入到 2-氯 -5-硝基吡啶 （2.0g， 12.7mmol) 的乙腈（20mL)溶液中， 反应液在室温下搅拌 16小时。 加入水（50mL)后 有固体析出，过滤， 固体真空干燥 6小时得化合物 62-b (2g，产率： 75.6% )。 产品无需纯化， 直接投入下一步反应。
化合物 62-a的合成
氢气氛 （latm) 下， 10% 的钯-碳 （0.2g) 加入到化合物 62-b (2.0g， 9.62mmol) 的乙醇 （20mL) 溶液中。 混合物于 25°C反应 16小时后， 过滤， 滤液减压浓縮得棕色固体 62-a ( 1.5g， 产率： 87% ) ， 产品无需纯化， 直接 投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z =180 [M+H]+。
化合物 T-62的合成
氮气氛下， 将三 (二亚苄基茚丙酮)二钯（28mg， 0.03mmol)和 2,2'-双 (二 苯基膦 联萘（20mg， 0.03mmol)加入到化合物 5 ( lOOmg, 0.24mmol)， 化合物 62-a ( 85mg， 0.47mmol) 和碳酸铯 （155mg， 0.48mmol) 的二氧六 环（2mL)悬浮液中， 于 110°C微波反应 30分钟。 冷却到室温， 加入二氯甲 垸 （15mL) 稀释， 依次用水 (10mLx3)和饱和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠 干燥，过滤，减压浓縮滤液，残余物经高效液相制备（流动相：乙腈，水（0.05 % 三氟乙酸） ； 梯度： 35 %-65 %-10% ) 得化合物 T-62 ( 10mg， 产率： 8 % ) 。 LC-MS (ESI): m/z =566 [M+H]+。
^-NMR (500MHz, CDC13) δ: 12.45 (br, 1H)， 9.22 (br, 2H)， 8.43 (s, 1H)， 8.23 (d, J=5.2Hz, 1H)， 8.04 (dd, J=9.6Hz， J=2.8Hz, 1H)， 7.55 (d, J=9.6Hz， 1H)， 7.03 (d, J=9.6Hz， 1H)， 4.77 (d, J=9Hz， 2H)， 4.30 (d, J= 9Hz， 2H)， 3.93 (m， 4H)， 3.73 (m, 4H)， 3.59 (s, 2H)， 3.15 (q, J= 7Hz， 2H)， 1.42 (t, J= 7Hz, 3H) ppm
实施例 63 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-[4-(2-{[2- (吗啉 -4-基)嘧啶 -5-基]氨基 }噻 吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-63
合成路线如下：
Figure imgf000112_0001
Figure imgf000113_0001
T-63
化合物 63-b的合成
将吗啉（492mg， 6.07mmol)加入到 2-氯 -5-硝基嘧啶（440mg， 2.76mmol) 的乙腈 （5mL) 溶液中， 反应液在室温下搅拌 3小时， 减压浓縮反应液， 残 余物加乙酸乙酯（50mL)和 1N盐酸水溶液 (20mL)，有机相依次用水 (10mLx3) 和饱和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液得化合物 63-b ( 350 mg， 产率： 61 % )。产品无需纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z =211 [M+H]+。
化合物 63-a的合成
氢气氛 ( latm) 下， 10% 的钯-碳 (O. lg) 加入到化合物 63-b (350mg， 1.67mmol) 的乙醇 （10mL) 溶液中。 混合物于 25°C反应 16小时后， 过滤， 滤液减压浓縮得棕色固体 63-a (230mg， 产率： 77% ) ， 产品无需纯化， 直 接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z =181 [M+H]+。
化合物 T-63的合成
将化合物 63-a ( 52mg, 0.28mmol) 和化合物 5 ( 80mg， 0.19mmol) 溶 于正丁醇 （2mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （44mg， 0.23mmol) 。 此混 合物于 110°C反应 18小时后， 冷却到室温。减压浓縮反应液， 残余物加入饱 和碳酸氢钠水溶液 （5mL) ， 二氯甲垸 (10mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用 水 (10mLx3:)和饱和食盐水 (lOmL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 残余物经高效 液相制备 （流动相： 乙腈， 水 （0.05 %三氟乙酸） ； 梯度： 40%-70%-10% ) 得到棕色固体 T-63 ( 12mg, 产率： 12 % )。 LC-MS (ESI): m/z =567 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CDC13) δ: 8.70 (d, J=2.4Hz, 1H)， 8.48 (s, 1H)， 8.37 (s， 1H)， 7.97 (d, J=5.6Hz, 1H)， 7.36 (d, J=5.2Hz, 1H)， 4.63 (d, J=9.2Hz, 2H)， 4.25 (d, /= 9.2Hz, 2H)， 3.81 (s, 8H)， 3.43 (s, 2H)， 3.15 (q, /= 7Hz， 2H)， 1.42 (t, /= 7Hz, 3H) ppm
实施例 64 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-[4-(2-{[l-(l-甲基哌啶 -4-基) -1H-吡唑 -4- 基]氨基 }噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1Η-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-64
Figure imgf000114_0001
T-64
化合物 64-b的合成
0°C时， 将偶氮二甲酸二异丙酯 （5.4g， 26.54mmol) 慢慢滴加到 4-硝基 吡唑 （2.0g， 17.69mmol) ， 三苯基憐 （6.95g， 26.54mmol) 和 N-甲基 -4-羟 基哌啶 （2.4 ， 21.23mmol) 的无水四氢呋喃 （50mL) 溶液中， 反应液升至 室温后继续搅拌 16小时。减压浓縮反应液，残余物依次加入乙酸乙酯（50mL) 和 3N盐酸水溶液 （50mL) ， 水相用饱和碳酸钾溶液调节 pH至 9， 乙酸乙 酯 (50mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用水 (50mLx3)和饱和食盐水 (50mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 残余物减压浓縮得黄色油状物 64-b (2.1g， 产率： 57% ) ， 产品无需纯化， 直接投入下一步反应。
化合物 64-a的合成
氢气氛 ( latm) 下， 10% 的钯-碳 (O.lg) 加入到化合物 64-b (500mg， 2.38mmol) 的乙醇 （10mL) 溶液中。 混合物于 25°C反应 16小时后， 过滤， 滤液减压浓縮得红棕色油状物 64-a (420mg， 产率： 98% ) ， 产品无需纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z =181 [M+H]+。
化合物 T-64的合成
将化合物 64-a ( 128mg， 0.71mmol) 和化合物 5 ( lOOmg, 0.24mmol) 溶于正丁醇 （2mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （135mg， 0.71mmol) 。 此混合物于 110°C反应 18小时后， 冷却到室温。减压浓縮反应液， 残余物加 入饱和碳酸氢钠水溶液 （5mL) ， 二氯甲垸 (10mLx3) 萃取,有机相合并， 依 次用水 (10mLx3:>和饱和食盐水 (lOmL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 残余物经 高效液相制备（流动相:乙腈，水（0.05 %三氟乙酸）；梯度： 25 %-55 %-10% ) 得到棕色固体 T-64 ( 62 mg, 产率： 47% )。 LC-MS (ESI): m/z =567 [M+H]+。
-NMR (400MHz， CDC13) 5: 8.43 (s, 1H)， 8.35 (s, 1H)， 8.03 (s, 1H)， 7.87 (d, J=5.6Hz, 1H)， 7.58 (s, 1H)， 7.31 (d, J=5.2Hz, 1H)， 7.18 (s, 1H)， 4.63 (d, J=9.2Hz, 2H)， 4.25 (d, J= 9.2Hz, 2H)， 4.18 (m， 1H)， 3.40 (s, 2H)， 3.09 (q， J= 7Hz， 2H)， 3.01 (m, 2H)， 2.35 (s, 3H)， 2.15 (m, 6H)， 1.41 (t, J= 7Hz， 3H) ppm
实施例 65 2-{3-[4-(2-{[l- (氮杂环丁 -3-基) -1H-吡唑 -4-基]氨基 }噻吩并
[3,2-d]嘧啶 -4-基) -1H-吡唑 -1-基] -1- (乙基磺酰基)氮杂环丁 -3-基}乙腈 T-65 合成路线如下：
Figure imgf000115_0001
54-b 65-b
Figure imgf000116_0001
65- a T-65 化合物 65-b的合成
氢气氛 (latm) 下， 10% 的钯-碳 (O.lg) 加入到化合物 54-b (1.33g， 5mmol) 的甲醇（lOmL)溶液中。 混合物于 25°C反应 12小时后， 过滤， 滤 液减压浓縮得化合物 65-b (940mg， 产率： 79%) ， 产品无需纯化， 直接投 入下一步反应。 LC-MS(ESI): m/z=261 [M+Na]+。
化合物 65-a的合成
氮气氛下， 将三 (二亚苄基茚丙酮)二钯 （15mg， 0.017mmol) 和 2-双环 己基憐 -2',6'-二异丙氧基联苯 （10mg， 0.07mmol) 加入到化合物 5 (422mg， l.Ommol) ， 化合物 65-b (357mg, 1.5mmol) 和碳酸钾 （276mg， 2.0mmol) 的二氧六环 （10mL) 悬浮液中， 于 120 °C微波反应 40分钟。 冷却到室温， 加入乙酸乙酯 （10mL) 稀释， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析 纯化 (石油醚 /乙酸乙酯 =2:1到 1:1)得化合物 65-a (374mg， 产率： 60%) 。 LC-MS (ESI): m/z =625 [M+H]+。
化合物 T-65的合成
将三氟乙酸 （2mL) 加入到化合物 65-a (370mg， 0.6mmol) 的二氯甲 垸 （6mL) 溶液中并搅拌 3小时。 减压浓縮反应液， 残余物加入饱和碳酸氢 钠水溶液（10mL)，二氯甲垸 (10mLx3) 萃取,有机相合并，无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =1:1 到 1:3)得化合物 T-65 (160mg，产率： 50%)。 LC-MS (ESI): m/z =525 [M+H]+。 Ή-NMR (400MHz， DMSO-d6) δ: 9.56 (s, 1H) ， 8.84 (s， 1H) ， 8.41 (s, 1H)， 8.37 (d， J=5.6， 1H)， 8.22 (s， 1H)， 7.74 (s， 1H)， 7.81 (d， J=5.6Hz, 1H)， 5.35 (m, 1H)， 4.59 (d, J=9.6Hz, 2H)， 4.27 (d, J=9.6Hz, 2H)， 4.18 (m， 4H)， 3.73 (s， 2H)， 3.27 (q, J= 7.2Hz, 2H)， 1.25 (t, J= 7.2Hz, 3H) ppm 实施例 66 2-(3-{4-[2-({l-[l- (环丙基甲基)氮杂环丁 -3-基] -1H-吡唑 -4-基} 氨基)噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基 }-1- (乙基磺酰基)氮杂环丁 -3-基） 乙腈 T-66
合成路线如下：
Figure imgf000117_0001
0°C时， 将三乙酰氧基硼氢化钠（212mg， l.Ommol)加入到化合物 T-65 ( 120mg, 0.23mmol) ， 环丙基甲醛 （70mg， l.Ommol) 的甲醇 （6mL) 和 二氯甲垸 （6mL) 混合溶液中， 搅拌 2小时后升至室温， 继续搅拌 16小时。 减压浓縮反应液， 残余物加入饱和碳酸氢钠水溶液 （10mL ) ， 二氯甲垸 (10mLx3) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残 余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =1 : 1到 1 :3 )得化合物11-66 ( 6011¾， 产率： 43 % ) 。 LC-MS (ESI): m/z =579 [M+H]+。
-NMR (400MHz， DMSO-d6) 5: 9.49 (s, 1H)， 8.83 (s, 1H)， 8.40 (s, 1H)， 8.36 (d, J=5.2Hz, 1H)， 8.20 (s, 1H)， 7.65 (s, 1H)， 7.38 (d, J=5.2Hz,lH), 4.98 (m， 1H)， 4.59 (d， J=9.2Hz, 2H)， 4.27 (d， J=9.2Hz, 2H)， 3.72 (m， 4H)， 3.37 (t， J= 7.2Hz, 2H)， 3.25 (q， J= 7.2Hz, 2H)， 2.36 (d， J=7.2Hz, 2H)， 1.25 (t, J= 7.2Hz, 3H)， 0.79 (m, 1H)， 0.41 (m, 2H)， 0.11 (m, 2H) ppm 实施例 67 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-{4-[2-({l-[3-(4-甲基哌嗪 -1-基)丙基] -1Η- 吡唑—4-基}氨基)噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-67
Figure imgf000118_0001
T-67 化合物 67-e的合成
将 1,3-二溴丙垸 （4.0g， 20mmol) 缓慢加入 1-叔丁氧羰基哌嗪 （1.86g， lOmmol) 和三乙胺 （4.0g， 40mmol) 的二氯甲垸 （200mL) 溶液中。 搅拌 16小时后， 减压浓縮反应液， 残余物加入饱和碳酸氢钠水溶液 （lOOmL) ， 二氯甲垸 (100mLx3) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮 滤液，残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =1 : 1到 1 :3 )得化合物 67-e ( 1.25g, 产率： 41 % ) 。 Ή-NMR (400MHz， CDC13) 5: 3.60 (t， J=6.6Hz， 2H)， 3.43(t， J=5.0Hz, 4H)， 2.49(t, J=7.0Hz, 2H)， 2.38 (t, J=5.0Hz, 4H)， 1.94 (m, 2H)， 1.46 (s, 9H) ppm
化合物 67-d的合成
将化合物 67-e ( 1.23g， 4.1mmol)加入到 4-硝基吡唑（650mg， 5.0mmol) 和碳酸铯 （3.25g， lO.Ommol) 的 Ν,Ν-二甲基甲酰胺 （15mL) 混合液中， 加 热至 90°C反应 6小时。冷却至室温后加入水（60mL)，用乙酸乙酯（20mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶 柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =1:1 ) 得化合物 67-d (910mg， 产率： 66%)。
LC-MS (ESI): m/z =340 [M+H]+。
化合物 67-c的合成
将三氟乙酸 （2mL) 加入到化合物 67-d (560mg， 1.66mmol) 的二氯甲 垸 （6mL) 溶液中并搅拌 3小时。 减压浓縮反应液， 残余物加入饱和碳酸氢 钠水溶液（10mL)，二氯甲垸 (10mLx3) 萃取,有机相合并，无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液得化合物 67-c (360mg， 产率： 90% ) ，产品无需纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z =240 [M+H]+。
化合物 67-b的合成
将对甲苯磺酸甲酯（190mg， l.Ommol)缓慢滴加到化合物 67-c (239mg， l.Ommol) 和碳酸钾 （1.38g， lO.Ommol) 的四氢呋喃混合液中。 搅拌 2小时 后， 加入饱和碳酸氢钠水溶液（10mL) ， 二氯甲垸 (15mLx3) 萃取,有机相合 并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液得化合物 67-b (255mg， 产率： 100 % ) ，产品无需纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI) : m/z =254 [M+H]+ o
化合物 67-a的合成
氢气氛 ( latm) 下， 10% 的钯-碳 (O.lg) 加入到化合物 67-b (255mg， l.Ommol) 的甲醇 （10mL) 溶液中。 混合物于 25°C反应 12小时后， 过滤， 滤液减压浓縮得化合物 67-a ( 180mg， 产率： 80% ) ， 产品无需纯化， 直接 投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z =224 [M+Na]+。
化合物 T-67的合成
将化合物 67-a ( 180mg， 0.8mmol) 和化合物 5 (221mg, 0.5mmol) 溶 于正丁醇 （10mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （258mg， 1.5mmol) 。 此 混合物于 120°C反应 3 小时后， 冷却到室温。 加入饱和碳酸氢钠水溶液 ( lOmL) ， 二氯甲垸 (10mLx3) 萃取,有机相合并， 依次用水 (10mLx3)和饱 和食盐水 (10mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 残余物经高效液相制备（流动 相： 乙腈， 水（0.05 %三氟乙酸）； 梯度： 20%-50%-10% )得到化合物 T-67 ( 15mg, 产率： 4.9% ) 。 LC-MS (ESI): m/z =610 [M+H]+。
-NMR (400MHz， DMS0-^) 5: 8.75 (s, 1H)， 8.38 (s, 1H)， 8.25 (d, J=5.2Hz, 1H) ， 8.09 (s， 1H)， 7.89 (s,lH), 7.32 (d, J=5.2Hz, 1H)， 4.67 (d, J=9.2Hz, 2H)， 4.33 (s,2H), 4.30 (d, J=9.2Hz, 2H)， 3.65 (s, 2H)， 3.53 (s, 4H)， 3.37 (s, 2H)， 3.20 (q, J= 7.6Hz, 2H)， 3.06 (m， 2H)， 2.95 (s, 3H)， 2.29 (m, 2H)， 1.39 (t, J=7.6Hz, 3H) ppm
实施例 68 2-[3-(4-{6-氯 -2-[(l-甲基 -1H-吡唑 -4-基)氨基]噻吩并 [3,2-d]嘧 啶—4-基}-111-吡唑 -1-基) -1- (乙基磺酰基)氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-68
Figure imgf000121_0001
68 T-68
化合物 68-d的合成
0°C时， 将化合物 1,3-二氢噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -2,4-二酮（1.68g， lOmmol) 缓慢加入到浓硝酸 （15mL) 和浓硫酸 （15mL) 的混合溶液中， 搅拌 1小时 后加入冰水（30mL)，并继续搅拌 3小时。混合物过滤，滤饼用冰水（5mLx3 ) 洗涤， 经真空干燥 8小时后得黄色固体 68-d ( 1.36g， 产率： 63.8%), 产品 无需进一步纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS(ESI): m/z = 214 [M+H]+. 化合物 68-c的合成
将化合物 68-d ( 1.36g， 6.4mmol) 和苯基二氯氧憐 （15mL) 的混合物 加热至 180°C， 反应 4小时后冷却至 90°C， 缓慢加入水 （200mL)。 混合物 慢慢冷却至 25°C， 并继续搅拌 16小时。 过滤， 滤饼用水 （15mLx3 ) 洗涤， 经真空干燥 8小时后得白色固体 68-c ( l.lg, 产率： 72%), 产品无需进一步 纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS(ESI): m/z = 239 [M+H]+.
化合物 68-b的合成
氮气氛下， 将化合物 5-b (390mg， l.Ommol), 化合物 68-c (240mg， l.Ommol)和碳酸钾（280mg， 2.0mmol)悬浮于二氧六环（8mL)和水（2mL) 的混合溶剂中， 将四三苯基憐钯 （48mg， 0.04mmol) 加入混合物中， 并在 80°C下搅拌反应 4小时。 减压浓縮反应液， 残余物加水 （10mL)， 用乙酸乙 酯 （10mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 依次用水 (10mLx3)和饱和食盐水 (10mL) 洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石 油醚 /乙酸乙酯 =3:1 ) 得化合物 68-b (230mg， 产率： 49.6%)。 LC-MS (ESI): m/z = 465 [M+H]+. 化合物 68-a的合成
将三氟乙酸 （3mL) 加入到化合物 68-b (230mg， 0.5mmoL) 的二氯甲 垸（6mL)溶液中，室温搅拌 3小时。减压浓縮反应液得化合物 68-a (160mg, 产率： 88 %)。产品无需纯化，直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 365 [M+H]+.
化合物 68的合成
室温下，将乙磺酰氯（65mg， 0.5mmoL)缓慢滴加到化合物 68-a ( 160mg， 0.44mmoL) 和三乙胺 （90mg， 0.88mmol) 的二氯甲垸 （6mL) 溶液中。 搅 拌 3小时后减压浓縮反应液， 残余物加入饱和碳酸氢钠水溶液 (10mL)， 二氯 甲垸 (10mLx3) 萃取， 有机相合并， 依次用水 (10mLx3)和饱和食盐水 (20mL) 洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓縮滤液得化合物 68 (150mg，产率：74.5 %)。 产品无需纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 459 [M+H] +.
化合物 T-68的合成
将化合物 68 ( 150mg， 0.33mmol) 和 1-甲基 -1H-吡唑 -4-胺 （97mg， l.Ommol) 溶于正丁醇 （10mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （190mg， l.OmmoDo此混合物于 108°C反应 3小时，冷却至室温，减压蒸馏除去溶剂， 残余物加入饱和碳酸氢钠水溶液 （10mL)， 用二氯甲垸 （10mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经硅胶柱层析纯化 (石油醚 /乙酸乙酯 =3:1-1:1 )得化合物 T-68(36mg，产率：21%)。LC-MS(ESI): m/z = 518 [M+H] +.
-NMR (400MHz, CD3OD) δ: 8.57 (s， 1H)， 8.22 (s， 1H)， 7.95 (s， 1H)， 7.49 (s, 1H)， 7.19 (s, 1H)， 4.50 (d, J=9.2Hz, 2H)， 4.20 (d, J=9.2Hz, 2H)， 3.80 (s， 3H)， 3.51 (s, 2H)， 3.08 (q, J= 7.6Hz, 2H)， 1.27 (t, J= 7.6Hz, 3H) ppm
实施例 69 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-[4-(2-{[l-(2,2,2-三氟乙基) -1H-吡唑 -4- 基]氨基 }噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基) -1Η-吡唑 -1-基]氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-69 合成路线如下：
Figure imgf000123_0001
Figure imgf000123_0002
化合物 69-b的合成 将 4-硝基吡唑 （1.13g， lOmmol) 加入到 2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯 (3.48g， 15mmol) 和无水碳酸钾 （2.76g， 20mmol) 的 Ν,Ν-二甲基甲酰胺 ( 10mL)的混合液中，加热至 40°C反应 6小时。冷却至室温后加水（ lOOmL), 用乙酸乙酯 （50mLx2 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压 浓縮， 残余物用石油醚 （20mL)洗涤得白色固体 69-c ( 1.6g， 产率： 82%), 产品无需进一步纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS(ESI) : m/z = 196 [M+H]+.
化合物 69-a的合成
氢气氛 （latm) 下， 将 10%的钯-碳 （0.15g)加入到化合物 69-b ( 1.5g， 7.69mmol) 的乙醇 （5mL) 溶液中。 混合物在 25°C反应 16小时后， 过滤， 滤液减压浓縮得红棕色油状物 69-a ( 1.2g， 产率： 95%), 产品无需进一步纯 化， 直接投入下一步反应。 LC-MS(ESI): m/z = 166 [M+H]+.
化合物 T-69的合成
将化合物 69-a ( 176mg， 1.07mmol) 和化合物 5 ( 150mg， 0.36 mmol) 溶于正丁醇 （0.5mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （170mg， 0.89mmol)。 此混合物于 110°C反应 18小时， 冷却至室温， 减压蒸馏除去溶剂， 残余物 加入饱和碳酸氢钠水溶液 （50mL)， 用二氯甲垸 （50mLx2 ) 萃取， 有机相 合并，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓縮，残余物经硅胶制备板层析纯化（乙 酸乙酯为展开剂） 得黄色固体物 T-69 (73mg， 产率： 38%)。 LC-MS(ESI): m/z = 552 [M+H]+.
^-NMR (400MHz, CDC13) 5： 8.47 (s, 1H)， 8.35 (s, 1H)， 8.18 (s, 1H)， 7.91 (d, J = 5.2Hz, 1H)， 7.63 (s, 1H)， 7.34 (d, J = 5.2Hz, 1H)， 7.22 (s， 1H)， 4.74 (dd, J = 16.8Hz, J = 8.4Hz, 2H)， 4.64 (d, J=9Hz， 2H)， 4.24 (d， J=9Hz， 2H)， 3.41 (s, 2H)， 3.10 (q， J= 7Hz， 2H)， 1.42 (t, J= 7Hz， 3H) ppm 实施例 70 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-[4-(2-{[l-(2-甲氧基乙基) -1H-吡唑 -4-基] 氨基 }噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基) -1Η-吡唑 -1-基]氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-70
合
Figure imgf000124_0001
化合物 70-b的合成
0°C时， 将偶氮二甲酸二乙酯 （4.1g， 19.91mmol) 缓慢加入到化合物 4- 硝基吡唑 （1.5g， 13.27mmol)， 2-甲氧基乙醇 （1.5g， 19.91mmol) 和三苯基 膦 （5.2g， 19.91mmol) 的无水四氢呋喃 （25mL) 溶液中。 升至室温， 搅拌 3小时后，反应液减压浓縮，残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =5: 1 ) 得白色固体 70-b ( 1.72g, 产率： 76.1% ) o LC-MS (ESI): m/z = 198 [M+H]+. 化合物 70-a的合成
氢气氛 ( latm) 下， 将 10%的钯-碳 (0.2g) 加入到化合物 70-b ( 1.7g， lOmmol) 的乙醇 （20mL) 溶液中。 混合物在 25°C反应 16小时后， 过滤， 滤液减压浓縮得红棕色油状物 70-a ( 1.3g， 产率： 93%), 产品无需进一步纯 化， 直接投入下一步反应。 LC-MS(ESI): m/z = 142 [M+H]+.
化合物 T-70的合成
将化合物 70-a ( 151mg， 1.07mmol) 和化合物 5 ( 150mg， 0.36 mmol) 溶于正丁醇（3mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物（170mg， 0.89mmol)。 此 混合物于 110°C反应 18小时， 冷却至室温， 减压蒸馏除去溶剂， 残余物加 入饱和碳酸氢钠水溶液 （50mL)， 用二氯甲垸 （50mLx2) 萃取， 有机相合 并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经硅胶制备板层析纯化 （乙 酸乙酯为展开剂） 得黄色固体物 T-70 (55mg， 产率： 30%)。 LC-MS(ESI): m/z = 528 [M+H]+.
-NMR (400MHz, CDC13) 5: 8.41 (s, 1H)， 8.32 (s, 1H)， 8.03 (s, 1H)， 7.84 (d, J=5.2Hz, 1H)， 7.58 (s, 1H)， 7.45 (s, 1H)， 7.27 (d, J=5.2Hz, 1H)， 4.62 (d, J=9Hz， 2H)， 4.30 (t， J=5.2Hz, 2H)， 4.24 (d, J=9Hz， 2H)， 3.79 (t, J=5.2Hz, 2H)， 3.39 (s, 2H), 3.37 (s, 3H)， 3.09 (q， J=7Hz， 2H)， 1.41 (t, J=7Hz， 3H)ppm
实施例 71 3-{4-[(4-{l-[3-氰甲基 -1- (乙基磺酰基)氮杂环丁 -3-基] -1H-吡 唑 -4-基}噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -2-基)氨基] -1H-吡唑 -1-基}丙腈 T-71
合成路线
Figure imgf000125_0001
T-31 T-71 化合物 T-71的合成
室温下， 将 1,8-二氮杂双环 [5,4,0] ^—碳 -7-烯 （O.lmL) 加入到化合物 T-31 (235mg， 0.5mmol)和丙烯腈（50mg， lmmol) 的乙腈（8mL)溶液中。 反应 3小时后， 混合物减压浓縮， 残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙 酯 =5:1 )得浅黄色固体 T-71 (38mg， 产率： 14.6%) o LC-MS (ESI): m/z = 523 [M+H]+.
¾-NMR (400MHz, DMSO-^) δ: 9.54 (s, 1H)， 8.83 (s, 1H)， 8.38 (s,lH), 8.36 (s, 1H)， 8.20 (s,lH)， 7.65 (s,lH)， 4.58 (d， J=9.2Hz, 2H)， 4.40 (t， J=6.0Hz， 2H)， 4.27 (d, J=9.2Hz, 2H)， 3.73 (s, 2H)， 3.25 (q, J=7.6Hz, 2H)， 3.07 (t, J=6.4Hz， 2H)， 1.25 (t, J=7.6Hz, 3H) ppm
实施例 72 2-[l- (乙基磺酰基 )-3-(4-{2-[(5-甲基 -1H-吡唑 -3-基)氨基] 噻 吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基}-111-吡唑 -1-基）氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-72
合成路线如下：
Figure imgf000126_0001
T-72 化合物 T-72的合成
将 5-甲基 -3-氨基吡唑（69mg， 0.72mmol)和化合物 5 ( 100mg， 0.24 mmol) 溶于正丁醇 （2mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （91mg， 0.48mmol)。 此 混合物于 110°C反应 48小时， 冷却至室温， 减压浓縮除去溶剂， 残余物加 入饱和碳酸氢钠水溶液 （50mL)， 用二氯甲垸 （50mLx2) 萃取， 有机相合 并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经高效液相制备 （流动相： 水 ( lOmmol/mL碳酸氢铵），乙腈；梯度： 22 %-55 % )得黄色固体 T-72 ( 10mg， 产率： 9% )。 LC-MS (ESI): m/z = 484 [M+H]+. Ή-NMR (400MHz, CDC13) 5： 8.71-8.45 (2xs, 1H)， 8.37-8.33 (2xs, 1H)， 8.04-7.90 (2xd, J=5.6Hz, 1H)， 7.90-7.57(2xd, J=5.6Hz, 1H)， 7.34 (d, J=5.6Hz, 1H)， 6.21-5.93 (2xbr, 1H)， 5.44 (s, 1H)， 4.64 (dd, J=3.6H, J=9.2Hz, 2H), 4.26 (dd, J=9Hz， J=3.6Hz, 2H), 3.41 (s, 2H), 3.10 (m, 2H)， 2.31 (s, 3H)， 1.42 (m, 3H) ppm
实施例 73 2-{1-[4-(2-{[1-(3-甲磺酰基丙基) -1H-吡唑 -4-基]氨基 }噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基) -1H-吡唑 -1-基]环丁基 }乙腈 T-73
合成路线如下：
Figure imgf000127_0001
HO NsO NsO
MeOH
O
73- 73- e
02N一 02N- 二 N
Figure imgf000127_0002
73-d 73-,
Figure imgf000127_0003
73- a
Figure imgf000127_0004
73 T-73 化合物 73-f的合成 加到 3-甲巯基丙醇 （1.06g， lOmmol)和 4-二甲氨基吡啶 （1.46g， 12 mmol) 的甲苯（20mL)溶液中。混合物升温至 25°C，反应 16小时。加入水（ lOOmL), 用乙酸乙酯 （100mLx2) 萃取， 有机相合并， 用饱和食盐水 （lOOmL) 洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸 乙酯 =3: 1 )得白色固体 73-f (2g，产率： 69%)。LC-MS (ESI): m/z = 292 [Μ+Η]+· 化合物 73-e的合成
0°C 时， 将过硫酸氢钾复合盐 （9.3g， 15.12mmol) 的水 （50mL) 溶液 滴加到化合物 73-f (2g， 6.87mmol) 的甲醇 （50mL) 溶液中， 混合物升至 室温， 并继续反应 2小时。 减压浓縮除去溶剂， 残余物加入水 （50mL)， 用 乙酸乙酯 （100mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 用饱和食盐水 （lOOmL) 洗， 无 水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮得化合物 73-e ( 1.7g， 产率： 77%), 产品 无需进一步纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 346 [M+Na]+. 化合物 73-d的合成
将 4-硝基吡唑（250mg，2.21mmol)加入到化合物 73-e( 790mg， 2.45mmol) 和无水碳酸钾 （765mg， 5.54mmol) 的乙腈 （10mL) 混合液中， 加热回流 18小时。冷却至室温后减压浓縮，残余物加水（20mL)，用乙酸乙酯（50mLx2 ) 萃取，有机相合并，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓縮得黄色固体 73-d(485mg， 产率： 94%),产品无需进一步纯化，直接投入下一步反应。 LC-MS(ESI): m/z = 234 [M+H]+.
化合物 73-c的合成
氢气氛 ( latm)下， 将 10%的钯-碳 ( 0.2g)加入到化合物 73-d (210mg， 0.91mmol) 的乙醇 （5mL) 溶液中。 混合物在 25°C反应 16小时后， 过滤， 滤液减压浓縮得红棕色油状物 73-c ( 171mg， 产率： 93%), 产品无需进一步 纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS(ESI): m/z = 204 [M+H]+.
化合物 73-b的合成
室温下， 将环丁酮 （2.5g， 35.7mmol) 加入到氰甲基三苯基膦 （16.2g， 53.57mmol) 的二氯甲垸 （30mL) 溶液中， 反应 3小时后， 减压浓縮除去溶 剂， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =10: 1 ) 得黄色油状物 73-d (3g， 产率： 90.3
化合物 73-a的合成
将化合物 73-b ( 1.5g， 15.79mmol ) 和 4-吡唑硼酸频钠醇酯 （4.6g， 23.68mmol) 溶于无水乙腈 （50mL) 中， 加入 1,8-二氮杂双环 [5,4,0：^ ^—碳 -7-烯 （6.1g， 40mmol)。 此混合物于 80°C下搅拌反应 18小时。 减压浓縮反 应液， 残余物加入水 （50mL)， 用乙酸乙酯 （50mLx2) 萃取。 水相用盐酸 水溶液 （3N) 调节到 pH=3， 然后用乙酸乙酯 （50mLx2) 萃取， 有机相合 并， 依次用水 （60mLx3 ) 和饱和食盐水 （60mL) 洗， 无水硫酸钠干燥， 过 滤， 减压浓縮滤液得无色油状化合物 73-a (2.6g， 产率： 58 % ), 产品无需 进一步纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 288 [M+H]+.
化合物 73的合成
氮气氛下， 将化合物 73-a (2.6g， 9.06mmol)， 2,4-二氯噻吩并 [3,2-d]嘧 啶（1.85g， 9.06mmol)和碳酸钠（2.9g， 27.18mmol)悬浮于二氧六环（ 15mL) 和水 （15mL ) 的混合溶剂中， 加入 [Ι,Γ-双 (二苯基憐)二茂铁]二氯化钯 (733mg， 0.9mmol)。 混合物在 80°C下搅拌反应 16小时， 冷却至室温， 减 压浓縮反应液， 残余物加水 （20mL)， 用二氯甲垸 （20mLx3 ) 萃取， 有机 相合并， 依次用水（60mLx3 )和饱和食盐水（60mL)洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化（二氯甲烧 /甲醇 =100: 1 )得 浅黄色固体 73 ( 1.6g, 产率： 53.6 LC-MS (ESI): m/z = 330 [M+H]+. 化合物 T-73的合成
将化合物 73-c (46mg， 0.227mmol) 和化合物 73 ( 50mg， 0.152 mmol) 溶于正丁醇（5mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物（43mg， 0.227mmol)。 此 混合物于 110°C反应 48小时， 冷却至室温， 减压浓縮除去溶剂， 残余物加 入饱和碳酸氢钠水溶液 （50mL)， 用二氯甲垸 （50mLx3 ) 萃取， 有机相合 并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经硅胶制备板层析纯化 （乙 酸乙酯为展开剂） 得黄色固体物 T-73 (27mg， 产率： 36%)。 LC-MS(ESI): m/z = 497 [M+H]十.
¾-NMR (400MHz, CDC13) δ: 8.39 (s， 1H)， 8.34 (s， 1H)， 8.09 (s,lH), 7.88 (d, J=5.2Hz, 1H)， 7.56 (s, 1H)， 7.32 (d, J=5.2Hz, 1H)， 7.14 (s, 1H)， 4.32 (t, J=6.4Hz， 2H)， 3.16 (s, 2H)， 3.05 (t, J=6.4Hz， 2H)， 2.91 (s, 3H)， 2.86 (m, 2H)， 2.58 (m, 2H)， 2.47 (m, 2H)， 2.12 (m, 2H) ppm
实施例 74 2-[l-甲基磺酰基 -3-(4-{2-[(l-甲基 -1H-吡唑 -4-基)氨基] 噻吩 并 [3,2-d]嘧啶 -4-基}-111-吡唑 -1-基）氮杂环丁 -3-基]乙腈 T-74
Figure imgf000130_0001
74 T-74 化合物 74的合成
室温下， 将三氟乙酸 （3mL) 加入到化合物 5-a (250mg， 0.58mmol) 的二氯甲垸 （3mL) 的溶液中， 反应 3小时后减压浓縮反应液。 往残余物中 加入二氯甲垸 （10mL) 和三乙胺 （2mL)， 混合物冷却到 0°C， 慢慢滴加甲 基磺酰氯（lOOmg, 0.87mmol)并继续搅拌 30分钟。混合液中加入水（5mL)， 用二氯甲垸 （5mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓 縮，残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =3:1 )得化合物 74 ( 135mg， 产率： 57% )。 LC-MS (ESI): m/z = 409 [M+H]+.
化合物 T-74的合成
将化合物 74( lOOmg, 0.25mmol)和 1-甲基 -4-氨基吡唑（71mg， 0.74 mmol) 溶于正丁醇（2mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物（117mg， 0.62mmol)。 此 混合物于 110°C反应 18小时， 冷却至室温， 减压浓縮除去溶剂， 残余物加 入饱和碳酸氢钠水溶液 （50mL)， 用二氯甲垸 （50mLx3 ) 萃取， 有机相合 并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经硅胶制备板层析纯化 （乙 酸乙酯为展开剂） 得黄色固体物 T-74 (25mg， 产率： 22%)。 LC-MS(ESI): m/z = 470 [M+H]+.
^-NMR (400MHz, CDC13) 5： 8.45 (s, 1H)， 8.36 (s, 1H)， 7.96 (s, 1H)， 7.88 (d, J=5.2Hz, 1H), 7.55 (s, 1H)， 7.32 (d, J=5.2Hz, 1H)， 7.12 (s, 1H)， 4.60 (d, J=9.2Hz, 2H)， 4.26 (d, J=9.6Hz， 2H)， 3.93 (s, 3H), 3.42 (s, 2H)， 3.01 (s, 3H) ppm
实施例 75 2-[1-(4-{2-[(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基)氨基]噻吩并 [3,2-d]嘧啶 —4-基}-111-吡唑 -1-基)环丙基]乙腈 T-75
合
Figure imgf000131_0001
化合物 75-e的合成
将苯甲酸（1.59g，1.3mmol)加入到 1-乙氧基 -1-三甲硅氧基环丙垸（ 17.4g， lOOmmol)和乙基（三苯基膦）乙酸酯（45g， 130mmol)的甲苯溶液（250mL) 中。 此混合物于 90°C反应 18小时， 冷却至室温， 反应液经硅胶 （300g) 过 滤， 用石油醚 （lOOOmL) 洗涤， 滤液减压浓縮至 lOOmL, 此溶液将直接投 入到下一步反应。
化合物 75-d的合成
将上一步所得 75-e的溶液（ lOOmL)加入到 4-吡唑硼酸频钠醇酯（ 1.9g， lOmmol) 和 1,8-二氮杂双环 [5,4,0] ^—碳 -7-烯 （lg， 6.6mmol) 的无水乙腈 (200mL)溶液中。 此混合物于 80°C下搅拌反应 3小时。 冷却至室温后， 减 压浓縮反应液， 残余物加入水 （50mL)， 用乙酸乙酯 （50mLx3 ) 萃取， 有 机相合并， 依次用水 （60mLx3 ) 和饱和食盐水 （60mL) 洗， 无水硫酸钠干 燥，过滤，减压浓縮滤液，残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =1 : 1 ) 得化合物 75-d ( 1.6g, 产率： 50%)。 LC-MS (ESI): m/z = 321 [Μ+Η]+·
化合物 75-c的合成
氮气氛下， 将化合物 75-d ( 1.6g， 5mmol)加入到 2,4-二氯噻吩并 [3,2-d] 嘧啶 （1.02g， 5mmol)， 碳酸钾 （1.38g， lOmmol) 和四三苯基憐钯 （0.56g， 0.5mmol)的二氧六环（15mL)悬浮液中。混合物在 80°C下搅拌反应 4小时。 减压浓縮反应液， 残余物加水 （20mL)， 用二氯甲垸 （20mLx3 ) 萃取， 有 机相合并， 依次用水 （60mLx3 ) 和饱和食盐水 （60mL) 洗， 无水硫酸钠干 燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =2: 1-1 : 1 )得浅黄色固体 75-c (0.91g,产率： 50% ) o LC-MS (ESI): m/z = 363 [M+H]+.
化合物 75-b的合成
将氢氧化锂（90mg， 3.75mmol)加入到化合物 75-c (910mg， 2.5mmol) 的甲醇（lmL)， 四氢呋喃（4mL)和水（lmL)的混合溶液中， 反应 1小时。 混合物中加入水（20mL)以及盐酸水溶液（2N，2mL)，用乙酸乙酯 （10mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液得化合物 75-b
(0.79g，产率： 94.6% ),产品无需进一步纯化，直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 335 [M+H]+.
化合物 75-a的合成
将氯化亚砜（2mL)加入到化合物 75-b ( 800mg， 2.3mmol)的甲苯（5mL) 溶液中， 混合物加热至 100°C并继续反应 3小时， 冷却至室温后， 减压浓縮 反应液。 将氨水 （3mL) 加入到残余物中， 反应 1小时后， 加入饱和碳酸氢 钠水溶液 （10mL)， 用二氯甲垸 （20mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸 钠干燥， 过滤， 减压浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =3:1 ) 得灰色化合物 75-a (0.68g, 产率： 88.8 % )。 LC-MS (ESI): m/z = 334 [M+H]+.
化合物 75的合成
0°C下，将三氟乙酸酐（430mg，2.1mmol)缓慢加入到化合物 75-a( 680mg， 2.1mmol) 和吡啶 （320mg， 4.2mmol) 的二氯甲垸 （10mL) 溶液中。 混合 物升至室温， 继续反应 1小时后， 加入饱和碳酸氢钠水溶液 （10mL)， 用二 氯甲垸 （20mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮 滤液，残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =3: 1 )得化合物 75(510mg， 产率： 77% )。 LC-MS (ESI): m/z = 316 [M+H]+.
化合物 T-75的合成
将 1-甲基 -4-氨基吡唑（37mg，0.38mmol)和化合物 75( lOOmg, 0.32mmol) 溶于正丁醇（10mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物（72mg， 0.38mmol)。 此 混合物于 108°C反应 3小时， 冷却至室温， 减压浓縮除去溶剂， 残余物加入 饱和碳酸氢钠水溶液 （10mL)， 用二氯甲垸 （10mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经高效液相制备 （流动相： 水 ( 10mmol/mL碳酸氢铵）， 乙腈； 梯度： 26%-78 % ) 得化合物 T-75 (32mg， 产率： 26.6%)。 LC-MS (ESI): m/z = 377 [M+H]+. Ή-NMR (400MHz, CD3OD) 5： 8.60 (s， 1H)， 8.35 (s， 1H)， 8.11 (d, J=5.6Hz, 1H)， 8.07 (s, 1H)， 7.63 (s, 1H)， 7.33 (d, J=5.6Hz, 1H)， 3.92 (s, 3H)， 3.18 (s， 2H)， 1.55 (t, J=5.6Hz, 2H)， 1.36 (t, J=5.6Hz, 2H) ppm
实施例 76 2-[1-(4-{2-[(1-环丙基 -1H-吡唑 -4-基)氨基]噻吩并 [3,2-d]嘧啶 —4-基}-111-吡唑 -1-基)环丙基]乙腈 T-76
Figure imgf000134_0001
T-76 化合物 76-b的合成
氮气氛下， 将 4-硝基吡唑（1.0g， 8.45mmol)加入到环丙基硼酸（1.45g， 16.9mmol)， 无水硫酸铜 （1.55g， 8.45mmol)， 4,4'-二叔丁基联吡啶 （2.26g， 8.45mmol) 和碳酸钠 （1.87g， 16.9mmol) 的 1,2-二氯乙垸 (30mL) 的混合 液中。 此混合物于 70°C反应 16小时， 冷却至室温， 减压浓縮除去溶剂， 残 余物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =8:1 )得化合物 76-b (740mg， 产 率： 55 % )。 LC-MS (ESI): m/z = 154 [M+H]+.
化合物 76-a的合成
氢气氛（latm)下，将 10%的钯-碳 (30mg)加入到化合物 76-b ( lOOmg, 0.65mmol) 的甲醇 （10mL) 溶液中。 混合物在 25°C反应 1小时后， 过滤， 滤液中加入对甲苯磺酸单水合物 （124mg， 0.65mmol)， 混合物减压浓縮得 化合物 76-a的对甲苯磺酸盐， 产品无需进一步纯化， 直接投入下一步反应。
LC-MS(ESI)： m/z = 124 [M+H]+.
化合物 T-76的合成
将上一步得到的化合物 76-a对甲苯磺酸盐（94mg， 0.3mmol)加入到化 合物 75 ( lOOmg, 0.32mmol) 的正丁醇 （3mL) 溶液中， 此混合物于 108°C 反应 3小时， 冷却至室温， 减压浓縮除去溶剂， 残余物加入饱和碳酸氢钠水 溶液 （10mL)， 用二氯甲垸 （10mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干 燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =1:1 )得 化合物 T-76 (23mg， 产率： 19% )。 LC-MS (ESI): m/z = 403 [M+H]+.
^-NMR (400MHz, CD3OD) δ: 8.68 (s， 1H)， 8.41 (s, 1H)， 8.28 (d, J=5.6Hz, 1H)， 8.10 (s， 1H)， 7.68 (s， 1H)， 7.38 (d， J=5.6Hz, 1H)， 3.72 (m, 3H)， 3.20 (s, 2H)， 1.56 (t, J=5.6Hz, 2H)， 1.37 (t, J=5.6Hz, 2H)， 1.19 (m, 2H)， 1.11 (m， 2H) ppm
实施例 77 2-[3-氟 -1-(4-{2-[(1-甲基 -1H-吡唑 -4-基)氨基]噻吩并 [3,2-d]嘧 啶—4-基}-111-吡唑 -1-基)环丁基]乙腈 T-77
合成路线如下：
Figure imgf000135_0001
化合物 77-d的合成
将 3- (苄氧基)环丁酮（1.0g， 5.68mmol)加入到 (三苯基膦)乙腈（2.6g， 8.52mmol) 的甲苯溶液中， 混合物加热回流 16小时。 冷却至室温， 减压浓 縮， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =10:1 ) 得无色油状物 77-d ( l.lg, 产率： 97% )。 LC-MS (ESI): m/z = 200 fM+Hf. Ή-NMR (400MHz, CDC13) δ: 7.25-7.38 (m, 5H)， 5.22 (m, 1H)， 4.47 (s, 2H)， 4.17 (m, 1H)， 3.05 (m, 1H)， 2.96 (m, 1H)， 2.91 (m, 2H) ppm
化合物 77-c的合成
将化合物 77-d ( l.Og, 5mmol)和 4-吡唑硼酸频钠醇酯（1.16g， 6mmol) 溶于无水乙腈 ( lOmL) 中， 加入 1,8-二氮杂双环 [5,4,0] ^—碳 -7-烯 （5g， 33mmol)。 此混合物于 55°C下搅拌反应 18小时。 减压浓縮反应液， 残余物 加入水 （50mL)， 用乙酸乙酯 （50mLx2) 萃取。 水相用盐酸水溶液 （1N) 调节到 pH=5， 然后用乙酸乙酯 （50mLx2) 萃取， 有机相合并， 依次用水 ( 50mLx3 ) 和饱和食盐水 （50mL) 洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮 滤液得浅黄色油状化合物 77-c ( 1.15g， 产率： 58 % ), 产品无需进一步纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS (ESI): m/z = 394 [M+H]+.
化合物 77的合成
氮气氛下， 将化合物 77-c ( l.lg, 2.8mmol)， 2,4-二氯噻吩并 [3,2-d]嘧啶 (0.571g, 8.51mmol)和碳酸钠（0.902g， 8.51mmol)悬浮于二氧六环（ 10mL) 和水 （10mL ) 的混合溶剂中， 加入 [Ι,Γ-双 (二苯基憐)二茂铁]二氯化钯 (228mg, 0.28mmol) o混合物在 80°C下搅拌反应 16小时。减压浓縮反应液， 残余物加水 （20mL)， 用二氯甲垸 （20mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 依次用 水 （20mLx3 ) 和饱和食盐水 （20mL) 洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓 縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化 （二氯甲垸 /甲醇 =100: 1 ) 得浅黄色固体 77 ( 1.05g, 产率： 94% )。 LC-MS (ESI): m/z = 436 [M+H]+.
化合物 77-b的合成
将化合物 1-甲基 -4-氨基吡唑 （0.667g， 6.87mmol) 和化合物 77 ( l.Og, 2.29mmol ) 溶于正丁醇 （20mL ) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （1.31g， 6.87mmol)。 此混合物于 100°C反应 18小时， 冷却至室温， 减压浓縮除去溶 剂， 残余物加入饱和碳酸氢钠水溶液 （lOOmL) , 用二氯甲垸 （100mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经硅胶制备 板层析纯化（展开剂： 二氯甲烧 /甲醇 =100: 1 )得浅黄色固体物 77-b ( 0.515g， 产率： 45%)。 LC-MS(ESI): m/z = 497 [M+H]+.
化合物 77-a的合成
-78°C下， 将三溴化硼的二氯甲垸溶液 （4N， 2mL) 缓慢滴加到化合物 77-b (510mg， 1.03mmol) 的二氯甲垸 （20mL)溶液中， 升至室温后继续反 应 30分钟。 将混合物慢慢加到饱和碳酸氢钠水溶液 （50mL) 中， 用二氯甲 垸 （50mLx2) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残 余物经硅胶柱层析纯化（二氯甲烧 /甲醇 =100:1 )得浅黄色固体物 77-a (98mg， 产率： 24%)。 LC-MS(ESI): m/z = 407 [M+H]+.
化合物 T-77的合成
0°C 下， 将双 （2-二甲氧乙基） 氨基三氟化硫 （360mg， 1.62mmol) 慢 慢滴加到化合物 77-a (98mg， 0.24mmol) 的二氯甲垸 （10mL) 溶液中， 混 合物升至室温后继续反应 30分钟。 加水 （10mL)， 饱和碳酸钠水溶液调至 pH=10， 二氯甲垸 （50mLx2) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经高效液相制备 （流动相： 水 （0.05%三氟乙酸）， 乙腈； 梯度： 15 %-50% ) 得化合物 T-77 (7mg， 产率： 12%)。 LC-MS (ESI): m/z = 409 [M+H]+.
^-NMR (400MHz, CD3OD) 5: 8.74 (d, J=0.4Hz， 1H)， 8.44 (d, J=6.0Hz， 1H)， 8.31 (d, J=5.6Hz, 1H)， 8.04 (s, 1H), 7.68 (s, 1H)， 7.38 (d, J=5.2Hz, 1H)， 5.13-5.34 (m, 1H)， 3.91 (s, 3H)， 3.44 (s， 2H)， 3.37 (m, 2H)， 2.88 (m, 2H) ppm
实施例 78 2-{3-[4-(2-{[l-(2-羟基 -2-甲基丙基) -1H-吡唑 -4-基]氨基 }噻吩 并 [3,2-d]嘧啶 -4-基) -1H-吡唑 -1-基] -1-甲基磺酰基氮杂环丁 -3-基}乙腈 T-78 合成路线如下：
Figure imgf000138_0001
化合物 78-b的合成
将 4-硝基吡唑 （1.13g， lOmmol) 加入到化合物 2,2-二甲基环氧乙垸 (20mL) 和碳酸铯 （2g， 6mmol) 的乙腈 （65mL) 混合液中， 升温至 80°C 反应 12小时。 冷却至室温后加水（lOOmL), 用乙酸乙酯（100mLx3 )萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经硅胶柱层析纯化 (石油醚 /乙酸乙酯 =1 :1 )得化合物 78-b (0.99g， 产率： 54%)。 LC-MS(ESI): m/z = 186 [M+H]+.
化合物 78-a的合成
氢气氛 ( latm)下， 将 10%的钯-碳 (0.30g)加入到化合物 78-b (99mg， 5.4mmol) 的甲醇 （10mL) 溶液中。 混合物在 25°C反应 12小时后， 过滤， 滤液浓縮得化合物 78-a (0.8g， 产率： 95%), 产品无需进一步纯化， 直接投 入下一步反应。 LC-MS(ESI): m/z = 156 [M+H]+.
化合物 T-78的合成
将化合物 78-a ( 116mg， 0.75mmol) 和化合物 74 (210mg， 0.5mmol) 溶于正丁醇（5mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物（140mg， 0.75mmol)。 此 混合物于 110°C反应 6小时， 冷却至室温， 减压浓縮除去溶剂， 残余物加入 饱和碳酸氢钠水溶液 （10mL)， 用二氯甲垸 （10mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸 乙酯 =1: 1 ) 得化合物 T-78 ( 61mg， 产率： 23%)。 LC-MS(ESI): m/z = 528 [M+H]+. Ή-NMR (400MHz， CD3OD) 5: 8.73 (s, 1H)， 8.43 (s, 1H)， 8.20 (s, 1H)， 8.11 (d， J=5.6Hz, 2H)， 7.64 (s， 1H)， 7.30 (d， J=5.6Hz, 1H)， 4.67 (d， J=9.6Hz， 2H)， 4.34 (d, J=9.6Hz， 2H)， 4.12 (s, 2H)， 3.65 (s, 2H)， 3.09 (s， 3H)， 1.23 (s， 6H) ppm
实施例 79 2-{3-[4-(2-{[l-(l-羟基 -2-甲基丙 -2-基) -1H-吡唑 -4-基]氨基 } 噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基) -1H-吡唑 -1-基] -1-甲基磺酰基氮杂环丁 -3-基}乙腈 T-79
Figure imgf000139_0001
T-79 化合物 79-b的合成
将 4-硝基吡唑（1.13g， lOmmol)加入到化合物 2-溴异丁酸乙酯（3.88g， 20mmol)和碳酸铯 （6.5g， 20mmol) 的 Ν,Ν-二甲基甲酰胺 （50mL) 混合液 中， 升温至 80°C 反应 4 小时。 冷却至室温后加水 （lOOmL), 用乙酸乙酯 ( 100mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余 物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =3: 1 ) 得化合物 79-b ( 1.7g， 产率： 75%)。 LC-MS(ESI): m/z = 228 [M+H]+.
化合物 79-a的合成
室温下， 将化合物 79-b ( 1.15g， 5mmol) 的无水四氢呋喃 （30mL) 溶 液缓慢滴加到四氢锂铝的四氢呋喃溶液 （1N， 15 mL， 15mmol) 中。 反应 2 小时后， 分批加入十水硫酸钠 （3g)， 混合物过滤， 滤液减压浓縮得化合物 79-a ( 0.6g， 产率： 77% ) , 产品无需进一步纯化， 直接投入下一步反应。
LC-MS(ESI): m/z = 156 [M+H]+. 化合物 T-79的合成
将化合物 79-a ( 116mg， 0.75mmol) 和化合物 74 (210mg, 0.5mmol) 溶于正丁醇（5mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物（140mg， 0.75mmol)。 此 混合物于 110°C反应 6小时， 冷却至室温， 减压浓縮除去溶剂， 残余物加入 饱和碳酸氢钠水溶液 （10mL)， 用二氯甲垸 （10mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸 乙酯 =1: 1 ) 得化合物 T-79 (76mg， 产率： 28%)。 LC-MS(ESI): m/z = 528 [M+H]+.
-NMR (400MHz， CD3OD) 5: 8.75 (s, 1H)， 8.45 (s, 1H)， 8.21 (s, 1H)， 8.13 (d， J=5.6Hz, 2H)， 7.71 (s， 1H)， 7.32 (d， J=5.6Hz, 1H)， 4.67 (d， J=9.6Hz， 2H)， 4.31 (d, J=9.6Hz， 2H)， 3.79 (s, 2H)， 3.65 (s, 2H)， 3.09 (s， 3H)， 1.62 (s， 6H) ppm
实施例 80 2-(3-{4-[2-({l-[(2R)-2-羟基丙基] -1H-吡唑 -4-基}氨基)噻吩并
[3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氧杂环丁 -3-基)乙腈 T-80
Figure imgf000140_0001
T-80 化合物 80-b的合成
将 4-硝基吡唑（2.5g， 22.12mmol)加入到化合物 （R)-环氧丙垸垸（30mL) 和碳酸铯 （2g， 6mmol) 的混合物中， 室温下反应 18小时。 加水 （50mL)， 用乙酸乙酯 （50mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压 浓縮得浅黄色油状物 80-b (2.5g， 产率： 66%), 产品无需进一步纯化， 直接 投入下一步反应。 LC-MS(ESI): m/z = 172 [M+H]+.
化合物 80-a的合成 氢气氛 ( latm) 下， 将 10%的钯-碳 (0.2g) 加入到化合物 80-b ( 1.0g， 5.85mmol) 的乙醇 （25mL) 溶液中。 混合物在 25°C反应 18小时后， 过滤， 滤液浓縮得红棕色油状物物 80-a (0.78g， 产率： 95%), 产品无需进一步纯 化， 直接投入下一步反应。
化合物 T-80的合成
将化合物 80-a ( 179mg， 1.27mmol) 和化合物 20 ( 140mg， 0.43mmol) 溶于正丁醇（5mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物（242mg， 1.27mmol)。 此 混合物于 110°C反应 16小时， 冷却至室温， 减压浓縮除去溶剂， 残余物加 入饱和碳酸氢钠水溶液 （lOOmL), 用二氯甲垸 （100mLx3 ) 萃取， 有机相 合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经高效液相制备（流动相： 水（0.05%三氟乙酸）， 乙腈； 梯度： 20%-55 % )得浅黄色固体 T-80 (25mg， 产率： 14%)。 LC-MS(ESI): m/z = 437 [M+H]+.
¾-NMR (400MHz, CDC13) δ: 8.46 (s， 1H)， 8.36 (s， 1H)， 8.06 (s, 1H)， 7.88 (d, J=5.6Hz, 1H)， 7.56 (s, 1H)， 7.32 (d, J=5.6Hz, 1H)， 7.04 (s, 1H)， 5.19 (d, J=7.6Hz, 2H), 4.87 (d, J=7.6Hz, 2H)， 4.24 (br, 1H)， 4.17-4.21 (m, 1H)， 3.97-4.03 (m, 1H)， 3.56 (s, 1H)， 3.45 (s, 2H)， 1.25 (d, J=6.4Hz， 3H) ppm
实施例 81 2-(3-{4-[2-({l-[(2S)-2-羟基丙基] -1H-吡唑 -4-基}氨基)噻吩并
[3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氧杂环丁 -3-基)乙腈 T-81
合成路线如下：
Figure imgf000141_0001
Figure imgf000142_0001
Figure imgf000142_0002
Τ-81 化合物 81的合成
氮气氛下， 将四三苯基憐钯 （0.56g， 0.5mmol)加入到 1-THP-4-吡唑硼 酸频那醇酯 （2.8g， lOmmol), 2,4-二氯噻吩并 [3,2-d]嘧啶 （2.05g， lOmmol) 和碳酸钾 （2.76g， 20mmol) 的二氧六环（30mL)悬浮液中。 混合物在 80 °C 下搅拌反应 4小时， 冷却至室温， 减压浓縮反应液， 残余物加水 （lOOmL), 用乙酸乙酯 （100mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压 浓縮滤液， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =3:1-2:1 ) 得浅黄色 固体 81 (2.8g, 产率： 87.5 % )。 LC-MS (ESI): m/z = 321 [M+H]+.
化合物 81-c的合成
将 4-硝基吡唑（l.Og, 8.85mmol)加入到化合物 （S)-环氧丙垸垸（3mL) 和碳酸铯（1.73g， 5.31mmol)的混合物中，室温下反应 18小时。加水（50mL)， 用乙酸乙酯 （50mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压 浓縮得浅黄色油状物 80-b ( lg， 产率： 66%), 产品无需进一步纯化， 直接 投入下一步反应。 LC-MS(ESI): m/z = 172 [M+H]+.
化合物 81-b的合成
氢气氛 （latm) 下， 将 10%的钯-碳 （0.2g) 加入到化合物 81-c ( l.Og, 5.85mmol) 的乙醇 （25mL) 溶液中。 混合物在 25°C反应 18小时后， 过滤， 滤液浓縮得红棕色油状物物 81-b (0.7g，产率： 85%),产品无需进一步纯化， 直接投入下一步反应。
化合物 81-a的合成
将化合物 81-b (397mg， 2.82mmol) 和化合物 81 (300mg， 0.94mmol) 溶于正丁醇（5mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物（555mg， 2.82mmol)。 此 混合物于 110°C反应 16小时， 冷却至室温， 减压浓縮除去溶剂， 残余物加 入饱和碳酸氢钠水溶液 （50mL)， 用二氯甲垸 （50mLx3 ) 萃取， 有机相合 并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经硅胶柱层析纯化 （二氯甲 烧 /甲醇 =100: 1 ) 得黄色固体 81-a (67mg， 产率： 21%)。 LC-MS(ESI): m/z = 341 [M+H]+.
化合物 T-81的合成
将化合物 81-a (67mg， 0.29mmol) 和化合物 20-b (31mg， 0.32mmol) 溶于无水乙腈 ( lmL) 中， 加入 1,8-二氮杂双环 [5,4,0] ^—碳 -7-烯 （0.1g， 0.6mmol)。 室温下反应 1小时。 减压浓縮反应液， 残余物加入水 （50mL)， 用二氯甲垸 （50mLx2) 萃取。 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压 浓縮滤液， 残余物经硅胶制备板层析纯化 （展开剂： 乙酸乙酯）得浅黄色固 体 T-81 (21mg, 产率： 26% )。 LC-MS (ESI): m/z = 437 [M+H]+.
-NMR (400MHz， CDC13) 5: 8.44 (s, 1H)， 8.36 (s， 1H)， 8.06 (s， 1H)， 7.87 (d, J=5.6Hz, 1H)， 7.54 (d, J=0.4Hz， 1H)， 7.31 (d, J=5.6Hz, 1H)， 7.15 (s, 1H)， 5.19 (d, J=7.6Hz, 2H)， 4.87 (d, J=7.6Hz, 2H)， 4.16-4.21 (m, 2H)， 3.97-4.02 (m, 2H)， 3.55 (br, 1H)， 3.45 (s, 3H)， 1.26 (d, J=6.4Hz， 3H) ppm 实施例 82 2-(3-{4-[2-({l-[(2R)-l-羟基丙 -2-基] -1H-吡唑 -4-基}氨基)噻 吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氧杂环丁 -3-基)乙腈 T-82
Figure imgf000143_0001
82-a
Figure imgf000144_0001
化合物 82-c的合成
25°C时， 将偶氮二甲酸二异丙酯 （10.8g， 53.1mmol) 缓慢加入到化合 物 4-硝基吡唑 （5g， 44.2mmol)， L-乳酸甲酯 （5.1g， 48.6mmol) 和三苯基 膦 （13.9g， 53.1mmol) 的无水四氢呋喃 （lOOmL) 溶液中。 搅拌 3小时后， 反应液减压浓縮， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =10:1) 得化 合物 82-c (6.6g, 产率： 74%)。 LC-MS (ESI): m/z = 200 [M+H]+.
化合物 82-b的合成
室温下， 将化合物 82-c (2.0g， lOmmol)缓慢加入到四氢锂铝的四氢呋 喃溶液 （1N， 26.3mL， 26.3mmol) 中。 反应 2小时后， 分批加入十水硫酸 钠 （3g)， 混合物过滤， 滤液减压浓縮得化合物 82-b (l.lg, 产率： 78%), 产品无需进一步纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS(ESI): m/z = 142 [M+H]+.
化合物 82-a的合成
将化合物 82-b (140mg， lmmol) 和化合物 81 (320mg， lmmol) 溶于 正丁醇 （5mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （190mg， lmmol)。 此混合物 于 110°C反应 6小时， 冷却至室温， 减压浓縮除去溶剂， 残余物加入饱和碳 酸氢钠水溶液 （10mL)， 用二氯甲垸 （10mLx3) 萃取， 有机相合并， 无水 硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =1:1)得黄色固体 82-a(38mg，产率： 10.6%)。LC-MS(ESI): m/z = 342 [Μ+Η]+· 化合物 Τ-82的合成
将化合物 82-a (38mg， 0.106mmol)和化合物 20-b (llmg, 0.106mmol) 溶于无水乙腈 （3mL) 中， 加入 1,8-二氮杂双环 [5,4,0;H ^—碳 -7-烯 （lOOmg, 0.6mmol)。 室温下反应 1小时。 减压浓縮反应液， 残余物加入水 （50mL)， 用二氯甲垸 （50mLx2) 萃取。 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压 浓縮滤液， 残余物经高效液相制备（流动相： 水（10mmol/L碳酸氢铵）， 乙 腈；梯度： 15 %-45 % )得浅黄色固体 T-82 ( 13mg，产率： 28%)。 LC-MS(ESI): m/z = 437 [M+H]+.
-NMR (400MHz， CD3OD) 5: 8.72 (s, 1H)， 8.43 (s, 1H)， 8.16 (s, 1H)， 8.13 (d， J=5.6Hz, 1H)， 7.69 (s， 1H)， 7.32 (d， J=5.6Hz, 1H)， 5.24 (d， J=8.4Hz， 2H)， 4.95 (d， J=8.4Hz， 2H)， 4.43 (m， 1H)， 3.86 (m， 2H)， 3.64 (s， 2H)， 1.53 (d, J=6.8Hz, 3H) ppm
实施例 83 2-(3-{4-[2-({l-[(2S)-l-羟基丙 -2-基] -1H-吡唑 -4-基}氨基)噻 吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}氧杂环丁 -3-基)乙腈 T-83
Figure imgf000145_0001
化合物 83-c的合成
25°C时， 将偶氮二甲酸二异丙酯 （10.8g， 53.1mmol) 缓慢加入到化合 物 4-硝基吡唑 （5g， 44.2mmol)， D-乳酸甲酯 （5.1g， 48.6mmol) 和三苯基 膦 （13.9g， 53.1mmol) 的无水四氢呋喃 （lOOmL) 溶液中。 搅拌 3小时后， 反应液减压浓縮， 残余物经硅胶柱层析纯化 （石油醚 /乙酸乙酯 =10:1 ) 得化 合物 83-c (6.2g, 产率： 70% )。 LC-MS (ESI): m/z = 200 [M+H]+. 化合物 83-b的合成
室温下， 将化合物 83-c (2.0g， lOmmol)缓慢加入到四氢锂铝的四氢呋 喃溶液 （1N， 26.3mL， 26.3mmol) 中。 反应 2小时后， 分批加入十水硫酸 钠 （3g)， 混合物过滤， 滤液减压浓縮得化合物 83-b ( l.Og, 产率： 71 % ), 产品无需进一步纯化， 直接投入下一步反应。 LC-MS(ESI) : m/z = 142 [M+H]+.
化合物 83-a的合成
将化合物 83-b ( 140mg， lmmol) 和化合物 81 (320mg， lmmol) 溶于 正丁醇 （5mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （190mg， lmmol)。 此混合物 于 110°C反应 6小时， 冷却至室温， 减压浓縮除去溶剂， 残余物加入饱和碳 酸氢钠水溶液 （10mL)， 用二氯甲垸 （10mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水 硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸乙酯 =1:1 )得黄色固体 83-a(76mg，产率：22.3%)。LC-MS(ESI): m/z = 342 [Μ+Η]+· 化合物 Τ-83的合成
将化合物 83-a (76mg， 0.223mmol)和化合物 20-b (21mg, 0.223mmol) 溶于无水乙腈 (5mL) 中， 加入 1,8-二氮杂双环 [5,4,0]4 ^一碳 -7-烯 ( lOOmg, 0.6mmol)。 室温下反应 1小时。 减压浓縮反应液， 残余物加入水 （50mL)， 用二氯甲垸 （50mLx2) 萃取。 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压 浓縮滤液， 残余物经硅胶制备板层析纯化 （展开剂： 乙酸乙酯）得黄色固体 T-83 (56mg， 产率： 57.6%)。 LC-MS(ESI): m/z = 437 [M+H]+.
-NMR (400MHz， CD3OD) 5: 8.72 (s, 1H)， 8.43 (s, 1H)， 8.16 (s, 1H)， 8.13 (d， J=5.6Hz, 1H)， 7.69 (s， 1H)， 7.33 (d， J=5.6Hz, 1H)， 5.24 (d， J=7.2Hz, 2H)， 4.95 (d, J=7.2Hz, 2H)， 4.44 (m， 1H)， 3.33 (m， 2H)， 1.55 (d, J=6.8Hz, 3H) ppm
实施例 84 2-(3-{4-[2-({l-[(2R)-l-羟基丙 -2-基] -1H-吡唑 -4-基}氨基)噻 吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基 }-1-甲基磺酰基氮杂环丁 -3-基）乙腈 T-84 合成路线如下:
Figure imgf000147_0001
化合物 T-84的合成
将化合物 74 (210mg， 0.5mmol) 和化合物 82-b (70mg， 0.5 mmol) 溶 于正丁醇 （5mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （lOOmg, 0.5mmol)。 此混 合物于 110°C反应 6小时， 冷却至室温， 减压浓縮除去溶剂， 残余物加入饱 和碳酸氢钠水溶液 （10mL)， 用二氯甲垸 （10mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经硅胶柱层析纯化（石油醚 /乙酸 乙酯 =1: 1 ) 得化合物 T-84 ( lOOmg, 产率： 38%)。 LC-MS(ESI): m/z = 514 [M+H]+.
-NMR (400MHz, CD3OD) δ: 8.83 (s， 1H)， 8.50 (s， 1H)， 8.27 (d, J=5.6Hz, 2H)， 8.15 (s, 1H)， 7.72 (s, 1H)， 7.37 (d, J=5.6Hz, 2H)， 4.68 (d, J=9.6Hz， 2H)， 4.46 (m， 1H)， 4.37 (d, J=9.6Hz， 2H)， 3.87 (m, 1H)， 3.66 (s， 2H)， 3.09 (s， 3H)， 1.54 (d, J=6.8Hz, 3H) ppm
实施例 85 2-(3-{4-[2-({l-[(2S)-l-羟基丙 -2-基] -1H-吡唑 -4-基}氨基)噻 吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基 }-1-甲基磺酰基氮杂环丁 -3-基）乙腈 T-85
合成路线如下：
Figure imgf000147_0002
T-85 化合物 T-85的合成
将化合物 74 (210mg， 0.5mmol) 和化合物 83-b (70mg， 0.5 mmol) 溶 于正丁醇 （5mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （lOOmg, 0.5mmol)。 此混 合物于 110°C反应 6小时， 冷却至室温， 减压浓縮除去溶剂， 残余物加入饱 和碳酸氢钠水溶液 （10mL)， 用二氯甲垸 （10mLx3 ) 萃取， 有机相合并， 无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓縮，残余物经高效液相制备（流动相：水（0.05% 三氟乙酸）， 乙腈； 梯度： 15 %-65 % ) 得化合物 T-85 ( 80mg， 产率： 32%)。
LC-MS(ESI)： m/z = 514 [M+H]+.
^-NMR (400MHz, CD3OD) δ: 8.82 (s， 1H)， 8.49 (s， 1H)， 8.26 (d, J=5.6Hz, 2H)， 8.15 (s, 1H)， 7.71 (s, 1H)， 7.37 (d, J=5.6Hz, 2H)， 4.68 (d, J=9.6Hz， 2H)， 4.47 (m, 1H)， 4.36 (d, J=9.6Hz， 2H)， 3.88 (m， 1H)， 3.66 (s， 2H)， 3.09 (s， 3H)， 1.54 (d, J=6.8Hz, 3H) ppm
实施例 86 2-(3-{4-[2-({l-[(2R)-2-羟基丙基] -1H-吡唑 -4-基}氨基)噻吩并
[3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}-1-甲基磺酰基氮杂环丁 -3-基)乙腈 T-86
合成路线如下：
Figure imgf000148_0001
化合物 T-86的合成
将化合物 80-a (311mg， 2.21mmol) 和化合物 74 (300mg， 0.74mmol) 溶于正丁醇 （10mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （349mg， 1.84mmol)。 此混合物于 110°C反应 16小时， 冷却至室温， 减压浓縮除去溶剂， 残余物 加入饱和碳酸氢钠水溶液 （50mL)， 用二氯甲垸 （50mLx3 ) 萃取， 有机相 合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经硅胶柱层析纯化 （乙酸 乙酯）得黄色固体 T-80( 115mg，产率：31%)。LC-MS(ESI): m/z = 514 [Μ+Η]+· Ή-NMR (400MHz, CDC13) δ: 8.47 (d, J=0.4Hz, 1H)， 8.36 (s, 1H)， 8.04 (s， 1H)， 7.88 (d, J=5.6Hz, 1H)， 7.57 (d, J=0.4Hz， 1H)， 7.31 (d, J=5.6Hz, 1H)， 6.96 (s， 1H)， 4.61 (d, J=7.6Hz, 2H), 4.26 (d, J=7.6Hz, 2H)， 4.03-4.18 (m， 3H)， 3.43 (s， 2H)， 3.02 (s, 3H)， 1.26 (d, J=6.4Hz， 3H) ppm
实施例 87 2-(3-{4-[2-({l-[(2S)-2-羟基丙基] -1H-吡唑 -4-基}氨基)噻吩并 [3,2-d]嘧啶 -4-基] -1H-吡唑 -1-基}-1-甲基磺酰基氮杂环丁 -3-基)乙腈 T-87 合成路线如下：
Figure imgf000149_0001
化合物 T-87的合成
将化合物 80-a (311mg， 2.21mmol) 和化合物 74 (300mg， 0.74mmol) 溶于正丁醇 （10mL) 中， 加入对甲苯磺酸单水合物 （349mg， 1.84mmol)。 此混合物于 110°C反应 16小时， 冷却至室温， 减压浓縮除去溶剂， 残余物 加入饱和碳酸氢钠水溶液 （50mL)， 用二氯甲垸 （50mLx3 ) 萃取， 有机相 合并， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 减压浓縮， 残余物经硅胶柱层析纯化 （乙酸 乙酯） 得黄色油状物 T-80 (65mg， 产率： 17%)。 LC-MS(ESI): m/z = 514 [M+H]+.
^-NMR (400MHz, CDC13) δ: 8.47 (d, J=0.4Hz, 1H)， 8.36 (s, 1H)， 8.04 (s， 1H)， 7.88 (d, J=5.6Hz, 1H)， 7.57 (d, J=0.4Hz， 1H)， 7.31 (d, J=5.6Hz, 1H)， 6.96 (s， 1H)， 4.61 (d, J=7.6Hz, 2H), 4.26 (d, J=7.6Hz, 2H)， 4.03-4.18 (m， 3H)， 3.43 (s， 2H)， 3.02 (s, 3H)， 1.26 (d, J=6.4Hz， 3H) ppm
效果实施例
胞质内酪氨酸激酶 JAK1,2,3酶活抑制 IC5。评价实验 实验步骤
1. 缓冲液配置
JAK1缓冲液： 25 mM HEPES, pH 7.5, 0.01% Brij-35, 0.01M Triton。 JAK2,3缓冲液： 50 mM HEPES, pH 7.5, 0.0015% Brij-35。
2. 化合物在 100%DMSO中配置成浓度梯度，加入 384孔板，最终 DMSO 浓度为 2%。
3. JAK2,3酶用以下缓冲液稀释成最佳浓度： 50 mM HEPES, pH 7.5, 0.0015% Brij-35, 2 mM DTT。 JAKl酶用以下缓冲液稀释成最佳浓度： 25 mM HEPES, pH 7.5, 0.01% Brij-35, 2 mM DTT, 0.01M Triton。 转移到 384孔 板中， 与化合物孵育一定时间。
4. JAK2,3底物用以下缓冲液稀释成最佳浓度： 50 mM HEPES, pH 7.5, 0.0015% Brij-35, 10mM MgC12， Km下的三憐酸腺苷。 JAKl底物用以下缓 冲液稀释成最佳浓度： 25 mM HEPES, pH 7.5, 0.01% Brij-35, 10mM MgC12, 0.01M Triton 。 Km下的三憐酸腺苷加入 384孔板起始反应， 并于 28°C反应 1小时。
5. 用 Caliper Reader读取转化率， 计算抑制率为两次测试平均值。
实验结果
本发明化合物的生物学活性通过以上的试验进行测定，测得的结果如下 (表 1 ) ：
表 1 : 本发明化合物对 JAK1,2,3酶的活性抑制结果
Figure imgf000150_0001
Figure imgf000151_0001
V V V 18-丄
e V V £8-丄
e V e 乙 8一丄
e V e 18-丄
e V e 08-丄
V V V 6L-1
V V V 丄
e V e LL-L
e V e 9 -丄
e V e -丄
V V V 丄
e V e -丄
V V V
V V V -丄
V V V O -丄
e V V 69 -丄
a e a 89 -丄
V V e -丄
V V V 99 -丄
e V V 9 -丄
V V V 19 -丄
3 V 3 £9 -丄
e V e 乙 9一丄
V V V 19 -丄
V V V 09 -丄
e V V 6 -丄
e V V 8 -丄
e V e -丄
a a a 9 -丄
a a a -丄
e V e 丄
V V e -丄
e V V 一丄
V V V IS-丄
3 V 3 OS-丄
3 V 3 61 -丄
a e a 81 -丄
a 3 3 -丄
■εθΐΐΐ/ ΟΖ OAV T-85 A A A
T-86 A A A
Τ-87 A A A
表 1中， "n.d."表示没有测试， "A"表示 IC5。值小于等于 50 nM， "B"表 示 IC5。值大于 50 nM但小于等于 500 nM, "C"表示 IC5。值大于 500 nM但小 于等于 1000 nM, "D"表示 IC5。值大于 1000 nM。

Claims

权利要求
1、 一种如通式 I所示的五元并六元杂环化合物， 其药学上可接受的盐、 代谢产物、 代谢前体或其 物前体，
Figure imgf000154_0001
其中， V为 N或 C;
W为 N或 CR3;
X为 0， S， N或 CR4;
Y为 S或 CR5;
环 A为芳环或杂芳环；
L1为化学键、 垸基、 亚垸基、 环垸基或杂环垸基； 其中所述的垸基、 亚 垸基、环垸基或杂环垸基可以各自独立进一步被一个或多个选自下列的取代 基所取代： 卤素、 氰基、 磺酰基、 酰基、 环垸基和杂环垸基；
L2为垸基、 酰基、 环垸基、 杂环垸基、 芳基或杂芳基；
M为卤素、垸基、 亚垸基、 环垸基、 垸氧基、 杂环垸基、 芳基、 杂芳基、 氰基、 磺酰基或酰基； 其中上述 M 中所述的垸基、 亚垸基、 垸氧基、 杂环 垸基、 芳基、 杂芳基、 磺酰基或酰基可以各自独立的进一步被一个或多个选 自下列的取代基所取代： 素、 羟基、 氰基、 氨基、 酰氨基、 硝基、 羧基、 磺酰基、 酰基、 垸氧基、 环垸基、 杂环垸基、 芳基和杂芳基；
o
R1为氢原子、氘原子、卤素、氰基、垸基、环垸基、磺酰基、垸基 _NH_ 或垸基 _ΝΗέθ2 ; 其中上述 Rl中所述的垸基可以进一步被一个或多个选自下 列的取代基所取代： 卤素、 羟基、 氰基、 氨基、 硝基、 羧基、 磺酰基、 酰基、 垸氧基、 环垸基、 烯基和炔基；
R2、 R3、 R4和 R5各自独立的为氢、 氘、 卤素或垸基；
m是 0， 1， 2或 3 ; n是 1， 2 , 3或 4;
p是 0， 1， 2， 3， 4或 5。
2、 如权利要求 1所述的五元并六元杂环化合物， 其药学上可接受的盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于： 所述的化合物 I中的各取 代基如下：
其中， V为 N或 C;
W为 N或 CH;
X为 0， S， N或 CH;
Y为 S或 CH;
R1为氢原子、 垸基或卤素； 其中 R1中所述的垸基任选进一步被一个或 多个选自下列的取代基所取代： 卤素、 羟基、 氰基、 氨基、 硝基、 羧基、 磺 酰基和酰基；
R2为氢、 氘、 卤素或垸基；
m是 0或 1 ; n是 1或 2 ;
p是 0或 1。
3、如权利要求 1所述的五元并六元杂环化合物， 其药学上可接受的盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于：
当所述的环 A为芳环时， 所述的芳环为 C6_1Q的芳环；
和 /或， 当所述的环 A为杂芳环时， 所述的杂芳环为杂原子为氮原子， 杂原子数为 1-3个， C2_5的杂芳环；
和 /或， 当所述的 R1为卤素时， 所述的卤素为 F、 Cl、 Br或 I;
和 /或， 当所述的 R2、 R3、 R4和 R5各自独立的为卤素时， 所述的卤素为 F、 Cl、 Br或 I; 和 /或， 当所述的 L1为垸基时， 所述的垸基为 d_4的垸基； 和 /或， 当所述的 L1为环垸基时， 所述的环垸基为 C3_6的环垸基； 和 /或，当所述的 L1为杂环垸基时，所述的杂环垸基为杂原子是氮原子， 杂原子数为 1-3个， C3_6的杂环垸基或杂原子为氧原子， 杂原子数为 1-3个，
C3_6的杂环垸基；
和 /或， 当所述的 L1中所述的垸基、 亚垸基、 环垸基或杂环垸基被一个 或多个环垸基所取代时，所述的 "被一个或多个环垸基所取代" 中所述的环 垸基为 C3_6的环垸基；
和 /或， 当所述的 L1中所述的垸基、 亚垸基、 环垸基或杂环垸基被一个 或多个磺酰基所取代时，所述的 "被一个或多个磺酰基所取代" 中所述的磺 酰基为 的垸基磺酰基或 C3_6的环垸基磺酰基；
和 /或， 当所述的 L1中所述的垸基、 亚垸基、 环垸基或杂环垸基被一个 或多个酰基所取代时， 所述的 "被一个或多个酰基所取代" 中所述的酰基为 甲酰基或 CM的垸基酰基；
和 /或， 当所述的 L1中所述的垸基、 亚垸基、 环垸基或杂环垸基被一个 或多个卤素所取代时， 所述的 "被一个或多个卤素所取代" 中所述的卤素为 F、 Cl、 Br、 或 I;
和 /或， 所述的 R1中所述的垸基为 d_4的垸基；
和 /或， 当所述的 R2、 R3、 R4和 R5各自独立的为垸基时， 所述的垸基为 CM的垸基。
4、如权利要求 1所述的五元并六元杂环化合物， 其药学上可接受的盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于：
当所述的 L2为垸基时， 所述的垸基为 _4的垸基；
和 /或， 当所述的 L2为环垸基时， 所述的环垸基为 C3_6的环垸基； 和 /或， 当所述的 L2为杂环垸基时， 所述的杂环垸基是杂原子为氧和 / 或氮原子， 杂原子数为 1-4个， C3_6的杂环垸基； 和 /或， 当所述的 L2为杂芳基时， 所述的杂芳基是杂原子为氮原子， 杂 原子数为 1-4个， 。的杂芳基。
5、如权利要求 1所述的五元并六元杂环化合物， 其药学上可接受的盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于：
当所述的 M为卤素时， 所述卤素为氟；
和 /或， 当所述的 M为垸基时， 所述的垸基为 d_6的垸基；
和 /或， 当所述的 M为环垸基时， 所述的环垸基为 C3_6的环垸基； 和 /或，当所述的 M为垸氧基时，所述的垸氧基为被杂环垸基取代的 d_4 的垸氧基； 所述的杂环垸基未被取代基所取代； 或所述的杂环垸基是杂原子 为氧和 /或氮原子， 杂原子数为 1-4个， C2_i。的杂环垸基；
和 /或， 当所述的 M为杂环垸基时， 所述的杂环垸基是杂原子为氧和 / 或氮原子， 杂原子数为 1-4个， C3_8的杂环垸基。
6、 如权利要求 1所述的五元并六元杂环化合物， 其药学上可接受的盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于：
当所述的 M为芳基时， 所述的芳基为 C6_1Q的芳基；
和 /或， 当所述的 M为被卤素所取代的垸基， 亚垸基， 环垸基， 垸氧基， 杂环垸基， 杂芳基， 磺酰基或酰基时， 所述的卤素为 F、 Cl、 Br或 I;
和 /或， 当所述的 M为被垸氧基所取代的垸基， 亚垸基， 环垸基， 垸氧 基， 杂环垸基， 杂芳基， 磺酰基或酰基时， 所述的垸氧基为 d_6的垸氧基； 和 /或， 当所述的 M为被环垸基所取代的垸基， 亚垸基， 环垸基， 垸氧 基， 杂环垸基， 杂芳基， 磺酰基或酰基时， 所述的环垸基为 C3_6的环垸基； 和 /或， 当所述的 M为被杂环垸基取代的垸基， 亚垸基， 环垸基， 垸氧 基， 杂环垸基， 杂芳基， 磺酰基或酰基时， 所述的 "M为被杂环垸基取代" 中所述的杂环垸基是杂原子为氧和 /或氮原子， 杂原子数为 1-4个， C3_8的杂 环垸基。
7、如权利要求 3所述的五元并六元杂环化合物， 其药学上可接受的盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于： 当所述的环 A为 C6_1Q的芳环时， 所述的 C6_1Q的芳环为苯环；
和 /或， 当所述的环 A为 C2_5的杂芳环时， 所述的 C2_5的杂芳环为吡唑、 咪唑、 吡咯、 吡啶、 嘧啶、 ***、 吡嗪、 四唑、 哒嗪或三嗪；
所述的 "被一个或多个环垸基所取代"中， 所述的 C3_6的环垸基为环戊 基；
和 /或， 当所述的 L1中所述的垸基、 亚垸基、 环垸基或杂环垸基被一个 或多个 的垸基磺酰基所取代时， 所述的 d_6的垸基磺酰基为 d_3的垸基 磺酰基；
和 /或， 当所述的 L1中所述的垸基、 亚垸基、 环垸基或杂环垸基被一个 或多个 CM的垸基酰基所取代时， 所述的 CM的垸基酰基为 C2垸基酰基； 和 /或， 当所述的 L1为 C3_6的环垸基时，所述的 C3_6的环垸基为环丙基。
8、如权利要求 4所述的五元并六元杂环化合物， 其药学上可接受的盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于：
当所述的 L2为 d_4的垸基时， 所述的 CM的垸基为甲基；
和 /或， 当所述的 L2为 C3_6的环垸基时， 所述的 C3_6的环垸基为环丙基 或环己基；
和 /或， 当所述的 L2为杂环垸基时， 所述的杂环垸基为杂原子为氧， 杂 原子数为 1-3个， C3_6的杂环垸基；
和 /或， 当所述的 L2为 C6_1Q的芳基时， 所述的 C6_1Q的芳基为苯基； 和 /或， 当所述的 L2为 C3_1Q的杂芳基时， 所述的 C3_1Q的杂芳基为杂原 子为氮， 杂原子数为 1-4个的 C4_8的杂芳基。
9、如权利要求 5所述的五元并六元杂环化合物， 其药学上可接受的盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于：
当所述的 M为 d_6的垸基时， 所述的 d_6的垸基为甲基、 乙基、丙基或 异丙基；
和 /或，当所述的 M为卤素取代的 d_6的垸基时，所述的卤素取代的 d_6 的垸基为三氟甲基或 ^eF3 ; 和 /或，当所述的 M为羟基取代的 d_6的垸基时，所述的羟基取代的 d_6 的垸基为 Λ 、 、 、 或 ； 和 /或，当所述的 Μ为氰基取代的 d_6的垸基时，所述的氰基取代的 d_6 的垸基为
Figure imgf000159_0001
;
和 /或， 当所述的 M为甲磺酰基取代的 d_6的垸基时， 所述的甲磺酰基
〇2
基取代的 的垸基为、
和 /或， 当所述的 M为被 d_6的垸氧基所取代的垸基， 亚垸基， 环垸基， 垸氧基， 杂环垸基， 杂芳基， 磺酰基或酰基时， 所述的 d_6的垸氧基为 d_3 的垸氧基；
和 /或， 当所述的 M为被 。的杂环垸基取代的 d_4的垸氧基时， 所述 的 d_4的垸氧基为 C2垸氧基；
和 /或， 当所述的 M为被 C2_i。的杂环垸基取代的 CM的垸氧基时， 所述 的 。的杂环垸基为杂原子为氧和 /或氮原子， 杂原子数为 1-3个， C3_8的杂 环垸基；
和 /或， 当所述的 M为 C3_8的杂环垸基时， 所述的 C3_8的杂环垸基是杂 原子为氧和 /或氮原子， 杂原子数为 1-4个， C4_6的杂环垸基。
10、如权利要求 6所述的五元并六元杂环化合物，其药学上可接受的盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于：
当所述的 M为 C6_1()的芳基时， 所述的 C6_1()的芳基为苯基；
和 /或， 当所述的 M为被 C3_6的环垸基所取代的垸基， 亚垸基， 垸氧基， 杂环垸基， 杂芳基， 磺酰基或酰基时， 所述的 C3_6的环垸基为环丙基；
和 /或， 当所述的 M为被 。的杂环垸基取代的 d_4的垸氧基时， 所述 的 。的杂环垸基是杂原子为氧和 /或氮原子， 杂原子数为 1-3个， C4_6的杂 环垸基。
11、如权利要求 8所述的五元并六元杂环化合物，其药学上可接受的盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于：
当所述的 L2为 C3_6的杂环垸基时， 所述的 C3_6的杂环垸基为四氢吡喃 基；
和 /或， 当所述的 L2为 C4_8的杂芳基时，所述的 C4_8的杂芳基为吡唑基、 咪唑基、 吡啶基、 苯并咪唑基、 苯并吡唑基、 哒嗪基或嘧啶基。
12、如权利要求 9所述的五元并六元杂环化合物，其药学上可接受的盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于：
当所述的 M为被 。的杂环垸基取代的 C2的垸氧基时， 所述的 C2_1() 的杂环垸基为杂原子为氧和 /或氮原子，杂原子数为 1-3个， C3_8的杂环垸基; 当所述的 M为 C4_6的杂环垸基时，所述的 C4_6的杂环垸基为吗啉基、四 氢吡喃基、 吖丁啶基、 哌啶基、 氧杂环丁垸基、 四唑基、 哌嗪基或四氢吡咯 基；
当 M为 d_3的垸氧基取代的 d_6的垸基时，所述的 d_3的垸氧基取代的 6的垸基为 ^0,。
13、 如权利要求 12所述的五元并六元杂环化合物， 其药学上可接受的 盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于：
当所述的 Μ为被 。的杂环垸基取代的 C2的垸氧基时， 所述的 C2_1() 的杂环垸基是杂原子为氧和 /或氮原子，杂原子数为 1-3个， C3_8的杂环垸基。
14、 如权利要求 13所述的五元并六元杂环化合物， 其药学上可接受的 盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于：
所述的 M中所述的 2垸氧基被 C4_6的杂环垸基所取代时， 所述的 C4_6 的杂环垸基为吗啉基或四氢吡咯基。
15、 如权利要求 13所述的五元并六元杂环化合物， 其药学上可接受的 盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于：
当 M为被 C4_6的杂环垸基取代的 C2的垸氧基时， 所述的 C4_6的杂环垸 基为吗啉基、 四氢吡喃基、 吖丁啶基、 哌啶基、 氧杂环丁垸基、 哌嗪基或四 氢吡咯基。 16、 如权利要求 1〜15任一项所述的五元并六元杂环化合物， 其药学上 可接受的盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于： 所述的化合 物 I为如下所示的化合物 II
Figure imgf000161_0001
II
其中， 各字母和基团的定义均如权利要求 1〜15任一项所述。
17、 如权利要求 1〜15任一项所述的五元并六元杂环化合物， 其药学上 可接受的盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于： 所述的化合 物 I为如下所示的化合物 111-1， III-2或 111-3，
Figure imgf000161_0002
III- 1 III- 2
Figure imgf000161_0003
III- 3 其中， 各字母和基团的定义均如权利要求 1〜15任一项所述。
18、 如权利要求 17所述的五元并六元杂环化合物， 其药学上可接受的 盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于： 所述的化合物 ΠΙ-1 为 IV-1-1或 IV-1-2,
Figure imgf000162_0001
IV-1-1 IV-1-2 其中， X为 S或 0， 其余各字母和基团的定义均如权利要求 1〜15任一 项所述。
19、如权利要求 17所述的五元并六元杂环化合物，其药学上可接受的盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于： 所述的化合物 ΠΙ-2 为如 下所示的化合物 IV-2,
Figure imgf000162_0002
IV-2
其中， 各字母和基团的定义均如权利要求 1〜15任一项所述。
20、如权利要求 17所述的五元并六元杂环化合物，其药学上可接受的盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于： 所述的化合物 ΠΙ-3 为如 下所示的化合物 IV-3 ,
Figure imgf000163_0001
IV-3
其中， 各字母和基团的定义均如权利要求 1〜15任一项所述。
21、如权利要求 18所述的五元并六元杂环化合物，其药学上可接受的盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于： 所述的化合物 IV-1-1为如 下所示的化合物 V-1-1 ,
Figure imgf000163_0002
V-1-1
其中， 各字母和基团的定义均如权利要求 1〜15任一项所述。
22、 如权利要求 1〜15任一项所述的五元并六元杂环化合物， 其药学上 可接受的盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 其特征在于： 所述的化合 物 I 一化合物：
Figure imgf000163_0003
Figure imgf000164_0001
/:/:/ O 8/-/-iHi>l£ ζ-εοϊπΗοίAV
Figure imgf000165_0001
Figure imgf000166_0001
■εθΐΐΐ/ ΟΖ OAV
Figure imgf000167_0001
Figure imgf000168_0001
23、 如权利要求 1〜21任一项所述的如通式 I所示的五元并六元杂环化 合物的制备方法， 其特征在于所述的制备方法为如下任一方法：
方法 1：在碱性条件下，将化合物 I-A和化合物 I-B,进行亲核取代反应， 即可；
Figure imgf000168_0002
I-A 方法 2: 将化合物 I-A和化合物 I-B在酸性条件下进行亲核取代反应,
Figure imgf000168_0003
Ι-Α 方法 3 : 将化合物 Ι-Α和化合物 Ι-Β进行偶联反应， 即可;
Figure imgf000169_0001
I-A
方法 1、 2和 3中， 各基团和字母的定义均如权利要求 1〜15任一项所
24、 一种如式 I-A所
Figure imgf000169_0002
I-A
其中， 各取代基均如权利要求 1〜15任一项所述。
25、 如权利要求 24所述的五元并六元杂环化合物， 其特征在于： 所述 的五元并六元杂环化合物 I-A为如式 ΠΙ-Α所示的化合物：
Figure imgf000169_0003
III-A 其中， 各字母和基团的定义均如权利要求 1〜15任一项所述。
26、 如权利要求 25所述的五元并六元杂环化合物， 其特征在于： 所述 的五元并六元杂环化合物 ΠΙ-Α为如式 IV-A所示的化合物：
Figure imgf000170_0001
其中， 各字母和基团的定义均如权利要求 1〜15任一项所述。
27、 如权利要求 24所述的化合物 I-A, 其特征在于： 其为如下所示的任 -
Figure imgf000170_0002
Figure imgf000171_0001
Figure imgf000171_0002
Figure imgf000171_0003
77 81 。
、 如权利要求 24所述的五元并六元杂环化合物 I-A的制备方法， 其
Figure imgf000172_0001
I-C I-D
I-A
其中， 各字母和基团的定义均如权利要求 1〜15任一项所述。
29、 如权利要求 1〜22任一项所述的如通式 I所示的五元并六元杂环化 合物， 其药学上可接受的盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 在制备治 疗和 /或预防细胞增殖类疾病的药物中的用途。
30、一种药物组合物，其特征在于：含有治疗有效剂量的如权利要求 1〜 22任一项所述的如通式 I所示的五元并六元杂环化合物，其药学上可接受的 盐、 代谢产物、 代谢前体或其药物前体， 及其药学上可接受的一种或多种载 体和 /或稀释剂。
31、如权利要求 30所述的药物组合物在制备 Janus激酶抑制剂的药物中 的应用。
32、 如权利要求 30所述的药物组合物在制备治疗和 /或预防细胞增殖 疾病的药物中的应用。
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