TWI270544B - Derivatives of tryptamine and analogous compounds, and pharmaceutical formulations containing them - Google Patents

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1270544 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（） 發明領域： 本發明是關於色胺衍生物及其類似物之新化合物，以 及包含色胺衍生物及其類似物的藥學配方，與應用此種新 化合物於製造可治療數種疾病之藥物的方法。 發明背景： #黑激素為脊椎動物的松果腺所分泌之主要荷爾 冡。至今所研究過的動物中，包括人類，松果腺所製造之 极黑激素I於夜間會有明顯增加；但於有光照之情況下， 所製造之褪黑激素量則會明顯被抑制。褪黑激素是用於調 節與生理及與光週期有關之過程。動物與人類對褪黑激素 訊號 < 反應可能與褪黑激素受體有關。褪黑激素作用於中 樞神經系統之上，經由位與腦中之受體對神經機制產生影 響。此外，許多研究指出，經由周圍褪黑激素受體，褪黑 激素的存在對周圍器官會產生直接影響。褪黑激素受體存 在於心臟、肺臟、***' 生殖腺、白血球、視網膜、腦 垂體、甲狀腺、腎臟、腸子與血管等處。觀察注入大鼠體 内之放射性褪黑激素的滯留模式，證明褪黑激素會聚集於 腦、腦垂體、肺臟、心臟、生殖腺與副性器官中 (Withyach疆narnkul et al·，Life Sci 12:1757 65, η%)。 褪黑激素的合成與分泌存在有會隨著季節與年齡變化 之晝夜節律，例如***與衰老均會影響褪黑激素之分 泌。有力證據顯示褪黑激素對於調節許多種與神經與内分 泌有關之功能，尤其是對於存有書浚銘法二、^ >々 』旦仗即律和近似年節律的 第2頁 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公^·-------_____ 卜---U---^^^裝--------訂-------- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 127〇544 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（） 功能，十分重要。 褪黑激素已被認為與許多人體疾病有關，其中有些被認 為與生物壽命學上的異常有關聯。故褪黑激素已被用來 讓因光週期位向改變而導致之晝夜節奏改變再同調。該種 晝夜節奏改變產生的可能原因有：因為快速通過不同時區 所導致的睡眠/清醒不規律（生理時差），患延緩睡眠相位 症候群（D S P S )之病人，輪班工作所導致之晝夜節律改 變，或盲人等原因，均可以褪黑激素或其類似物進行治療 (見Short etal·擁有之美國專利4,6〇〇,723號與4,666,086 號與Lewy et al.擁有之美國專利5,242,941號）。 但是褪黑激素對於正常受試者亦有鎮靜/安眠的效果 (例如 Waldhauser et al·， Psychopharmacology， 100:222-226, 1 990;Vollrath et al., Bioscience 29:327-329, 1981:Dollins et al·，Proc Natl .Acad· Sci，99:1 824-1 828, 1994, D’Orlando et al擁有之美國專利540385 !號）。目 前已辨認出三種褪黑色素受體亞型mt-1、MT-2、

Mellc(Barrett et al·，Biol. Signals Recept·, 1999，8: 6-14)。MT-2主要存在中樞神經系統，而mt-i主要存在於 中樞神經系統與周圍器官，例如腎臟與泌尿生殖道中 (Dubocovich et al.? IUPHAR media, London, UK, 197-93, 1 9 9 8)。目削對褪黑激素受體亞型的了解尚不足以用來評 估褪黑激素所造成的各種影響，所以仍需要發現更多褪黑 激素受體亞型以增進此方面之了解。 褪黑激素在許多齧齒類動物實驗中，已被證明具有抗 第3頁 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公f ) -----ί---U---裝--------訂-------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 1270544 B7_ 五、發明說明（） 焦慮(Golus and King, Pharmacol. Biochem. Behav·， 41:405-408， 1992， Naranj o-Rodriguez et al·， Soc.

Neurosci· Abst· 18:1167，1992; Golombek et al·，Eur. J. Pharmacol， 237:231-236， 1993)與防止疼痛的能力 (Brallowsky， Electroencephalo. Clin. Neurophysiol. 41:314-319，1 9 7 6; Farielloet al., Neurology 27:567-570, 1 977， Rudeen et al·， Epilepsia 2 1:149-1 54， 1 980; Suggen，J. Pharmacol Exp. Ther. 227:587-591，1 9 8 3;

Golombek et al·，Eur. J. Pharmacol 21 0:253-258，1992)。 褪黑激素對叢發性頭痛與偏頭痛具有療效 (Claustrat et al·，headache，29:241-4，1 989)。褪黑激素也 可能與其他有關精神病學的情況有關，特别是沮喪，除 此之外，亦可能與狂躁與精神***症有關（見Dobocovich “Antidepressant Agents”，美國專利 5,093,352 號；Miles and Philbrick， Biol. Psychiatry 23:405-425, 1 998: Sandyk and Kay，Schizophr Bull. 1 6:653-662，1990) ° 在 某些例子中，精神失常可能有潛藏於其下，與生物壽命 學有關之病因（例如冬季憂鬱），該種症狀即非常適合以 褪黑激素進行治療。 褪黑激素和人體體溫之晝夜節律與近似年節律之調 節有關，故以外源性褪黑激素爲處方可降低體心溫度 (Strassman et al.? J. Appl. Physiol, 7 1:2 1 78-2 1 82, 1 99 1; Cagnacci et al·， J Clin. Endocrinol. Merab. 75:447·452，1992)。褪黑激素亦具有止痛的效果（Sugden， 第4頁 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) · 1 I ϋ I ϋ n ®J n ϋ I ϋ ϋ ϋ n I · 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1270544 A7 五、 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 發明說明（ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) J. Pharmacol. Exp. Ther. 227:587-591, 1 983)。因此，類 似褪黑激素之化合物可能可以作爲不含類固醇之抗炎症 藥物、退熱劑，例如阿斯匹靈（乙醯水楊酸）、退熱淨（對 乙酸胺基紛}、衣布洛芬（ibuprofen)的替代藥品。 眾所皆知，體内褪黑激素濃度會隨著年齡增加而減少 (Sack et al.? J. Pineal Res. 4:379-3 88, 1 986; Waldhauser et al.，J. Clin. Endocrinol. Metab·，66:648-652, 1 988;

Van Coavorden et al.，Am. J. Physiol· 260:E65 1 -661, 1 9 9 1) ’並因而導致一些不適症狀，神經退行性疾病通常 即與老化有關，例如阿茲海默症與帕金森症，而該類症 狀可利用能刺激褪黑激素分泌之化合物予以治療 (Maurizi, Med. Hypotheses 3 1:233-242, 1 990; Sandyk

Int. J. Neurosci. 50:37-53, 1 990; Skene et al.? Brain Rev. 528:170-174， 1990) 〇 已有前例顯示褪黑激素對老年睡眠失調具有療效 (Garfinkel et al.? Lancet, 346:541 -543，1 995，Zisapel 擁 有之美國專利5 4 9 8 4 2 3號）。不管是經由以靜脈注射、 鼻腔内施用或口服等方式之處方施用於人體，褪黑激素 均具有催贼的效果{劑量0.3-240毫克}。除了催眠效果， 外源性褪黑激素可經由能使生物時鐘位相重置的功用來 影響睡眠。以褪黑激素爲處方可使睡眠延緩睡眠相位患 者之睡眠如移’亦能使百人受驗者睡眠能與晝夜循環同 調化。褪黑激素對不眠症患者，當施用劑量為 0.3-5 (mg/os)以下，且受試對象主要為年長患者、有服用 第5頁 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公f ) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1270544 A7 — B7 五、發明說明（） 氨醯心安（A t e η ο 1 〇 1)之患者與慢性心臟病患者，並且大部 分均有低或不規則的褪黑激素節律之情況下，已被證明 具有療效。在一些此類研究中，所使用之藥學配方為能 整夜釋出褪黑激素之藥學配方，以避免荷爾蒙快速肅清 現象及模擬褪黑激素之内源分布（Nutrition， 1 998, 14:1-2; The Aging Male，1998,1:1-8)。對患有睡眠失調 與已經產生痴呆現象21天之病人投以3毫克褪黑激素， 結果顯著增力π其睡眠品質，並減少其睡眠時的偶發性清 醒，同時晚間（日落後）的焦慮行為亦同時顯著減少。（Bi〇1 Signals Recept. 1 999,8(1 -2): 126-3 1) 近來研究發現，褪黑激素可能不僅可增進睡眠品 質，亦可以產生長期的治療下如HBA1C數值減低所代表 的意義，改善糖尿病患者的整體狀況。 每日經由飲水對中年（10個月大）到老年（22個月大）之 之雄性Sprague-Dawley大鼠，投以劑量為4 /z g/ml之褪 黑激素，可使與年齡有關的後腹膜脂肪及副睪脂肪與體 重之比例恢復較高水準，並使血漿中胰島素與痩體素 (leptin)恢復至年輕時期水準（四個月大）（Rasinusseil et al.，Endocrinology，1 999，140(2): 1009-12)° 即使骨質疏鬆症也可能與能刺激褪黑激素分泌之基 構組成有關（Sandyk et al·，Int· J· Neurosci· 62:2 1 5-225, 19 92)。事實上，褪黑激素已被建議為可供抗老化、抗壓 力之何爾象（Armstrong and Redman，Med· Hypotheses 34:300-309， 1991; Reiter, Bioassays, 14:169-175, 第6頁 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -----：---^---裝--------訂-------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1270544 A7 B7 五、發明說明（） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1 992)。原因可能為褪黑激素可以清除體内自由基 (Pooggeler et al·，J. Pineal Res. 14:151-168，1993)或是 此與免疫系統產生交互作用的結果（Maestroni and Conti， J. Neuroimmun. 28:1 67- 1 76 1 990; Fraschini et al.? Acta. Oncol. 29:775-776 1990, Guerrero and Reiter, Endocr. Res. 1 8:9 1 - 1 1 3,1 992)。褪黑激素可能可以預防缺血性中 風（Cho et al·，Brain Research 755: 335-33 8，1997)，降低 阿钱海默症造成的細胞夕匕亡（Pappola et al.，J Neurosci 1 7:1 683-90，1 997)與降低年輕幼兒因體内内源性褪黑激 素濃度過低而受 SID S侵襲的風險。（以色列專利 1 1 586 1/2號與Laudon等人擁有之美國專利5,5〇〇,225 號）。 與上述有關的發現是褪黑激素有抑制多種癌症腫瘤 的效果，目前研究最多的是與***受器有關之乳癌 (Blasak and Hill, J. Neural. Transm. Suppl. 21:433-449, 1 986; Gonzalez et al·, Melanoma. Res. 1:237-243, 1991; Lissoni et al.， Eur. J. Cancer 29A: 1 86-1 89, 1993;Shellard et al. Br. J. Cancer 60:288-290, 1 989;

Philo and Berkowitz，J. Urol. 1 39:1099-1 102，1 988;見 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

Clemens等人擁有之美國專利5,196,435號與Fraschini 等人擁有之美國專利5，2 7 2，1 4 1號）。褪黑激素也可能對 非癌細胞有抗增殖的作用，且可能可以用來治療良性腫 瘤與增殖性疾病，例如B P Η ·(美國專利5,7 5 0，5 5 7號 與Zisapel擁有的歐洲專利Ε Ρ 0565296Β )與牛皮癬。 第7頁 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）

1270544 五、發明說明（） 針對褪黑激素的研究主要著重於生殖方面，尤其是具 季節性繁殖行為的物種（例如倉鼠、綿羊等），褪望激 素主宰該類物種的春情期、生殖力、冬眠與皮毛之顏色。 這些與褪黑激素有關的效應對動物飼養業具相當意義。 褪黑激素應用於影響人體中生殖内分泌的情形包括：供 作避孕劑與助孕劑、早熟的不正常***治療、月經前 症候群、泌乳素過高症治療（Pevre et al，J Clin Endocrinol. Metab. 4 7:1 3 83- 1 386, 1 978; Furry et al.? Am. J. Psychiatry 144:762-766, 1 987; Waldhauser et al.? Clin. Endocrinol. Metab. 73:793-796, 1 991; Bispink et al.5 Pineal Res. 8:97-1 06, 1 990; Cagnacci et al.? J. Clin. Endocrinol. Metab. 73:210-220, 1991; Voordouw et al., J. Clin. Endocrinol. Metab. 74:1 07- 1 08，1 992;見 Cohen 等人擁有之美國專利 4,855,305號與 4,945，103號與 Fraschini等人擁有之美國專利5,272，141號）。褪黑激 素化合物在其他内分泌症狀上可能也有應用的空間，尤 其是牽涉到生長荷爾蒙的情況（Cramer et al.，

Arzeneim-For sch, 2 6 :1 07 6 -1 07 8 ? 1 9 76 ; Wright et al.5 Clin

Endocrinol. 24:375-382, 1 986; paccotti et al·，

Chronobiologica 1 5:279-288, 1 988; Valcavi et al·，Clin Endocrinol. 39:139-199，1993)。褪黑激素可用於減輕前 列腺肥大之症狀（見前述Zi sap el之美國與歐洲專利），對 去除睪丸的年輕大鼠施以口服褪黑激素處方可使*** 腹葉與貯精嚢生長不再受雄性荷爾蒙影響。近來我們已 第8頁 本紙張尺度適用中國_票準(CNS)A4規格（210 X 297公釐） -----·— ：— --------訂-------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1270544 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（） 證明對褪黑激素有高親和力的褪黑激素受體存在於人類 之良性***上皮細胞，且可能會對細胞生長與生存能 力有影響（Endocrinology，137:1412-17,1996 )。 除了松果腺之外，眼睛也會合成褪黑激素。近來褪 黑激素被認爲與眼内壓力調節有關，並可能可應用於治 療青光眼（Samples et al.，Curr，Eye，Res. 7:649-653, 1 988; Rhode et al·，Ophthalmic. Res· 25:10-15，1 993)。 腎臟也有褪黑激素受體分佈，並且褪黑激素會影響 垂體後葉荷爾蒙分泌與尿液***（Song et al.，FASEB J 1 1:93-1 00， 1 997，Yasin et al.? Brain Res. Bull 39:1 -5,1 997 ) 〇 因爲褪黑激素在治療用途上有相當大的發展空間， 因此辨認能與刺激褪黑激素分泌之系統產生交互作用並 發展爲醫藥用途之新化合物，一直受到相當的_目。這 些新發現的化合物可能可使褪黑激素之作用持續較長的 時間、產生選擇性局邵化效果與較佳的效率。 與褪黑激素有關，但在藥理與藥物動力特性方面與 褪黑激素有異之新化合物，均可能在發展新藥物方面有 重要影響，例如美國專利5,4〇3,851號揭露了使用取代 色胺、苯基燒基胺與相關化合物治療許多藥皋卜 卞丄的適應 症狀’包括睡眠失調、内分泌症狀、免疫***矣；〜 ' R綱等。 PCT 專利申請案WO 87/00432中所描述供、、A A 、 八/σ聲或預 防牛皮癖之組合物，即包含褪黑激素或其相關化 J儿合物。 歐洲專利申請0330625A2號揭露製造褪黑激素邀 -、其類 似物供多種治療用途，包括褪黑激素盥曇& ®虱胸苷 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ▼ · I I I I--I ----— II--· 第9頁

1270544 五 _ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 發明說明（） (azidothymidine，AZT)之組合處方以用於治療愛滋 病。基於蓁環及叫丨哚環之生物立體阻障特性所發展出之 褪黑激素類似物已揭露於J· Med. Chem. 1 992. 35: 1484-1485; Depreux等人擁有之歐洲專利662471 A2 950712 號；Ladlow 等人擁有之 W0 9529173 A1 951102; Horn等人擁有之美國專利5,151，446號；與 Adrieux等人擁有之美國專利5，194,614號；與Lesieur 等人擁有之美國專利5,276,051號。 特定腦區域分泌之多巴胺會因爲褪黑激素而抑制 的現象已在對羊、倉鼠（Malpaux et al· Reprod Nutr Dev 1999;39(3):355-66)、大鼠（Zisapel et al., Brain Res 1982;246(l):161-3;Brain Res 1982;246(1):161-3)的囊 胚實驗中得到證實。此外褪黑激素可以減低紋狀體神經 原 之興奮 性（Escames et al. Neuroreport 1996;7(2):597-600)與增進大鼠紋狀體之D2多巴胺受體 的親和性（Hamdi Life Sci 1 998;63:2 1 1 5-20)。因此褪黑 激素可以治療因多巴胺增加或對多巴胺過度敏感所造 成之症狀，例如遲發性運動困難或古柯鹼成癮。褪黑激 素對抗劑也有醫療上的潛力。與紋狀體有關，刺激多巴 胺分泌的活動若因褪黑激素存在而降低時，會導致帕金 森病人病情惡化與靜坐不能之副作用，該現象已得到帕 金森症之動物模式結果的支持（Willis and Armstrong Brain Res Brain Res Rev 1998;27(3):177-242)，故褪黑 激素對抗藥除可避免内源性褪黑激素對帕金森症所造 成的不良影響；此外，褪黑激素對抗藥亦可避免因為夜 間因内源性褪黑激素增加而導致輪班工人之疲勞與嗜 第10頁 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -----j— ^裝--------訂-------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1270544 A7

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 睡；對於盲人無法與環境晝夜循璜 俯农冋步之問題及因在白 天分泌褪黑激素或因為時差導致> 、 令致又延遲睡眠症候群病 人亦具有療效。 褪黑激素之促效劑與對抗劑對 J 了多種疾病與症狀均具 有治療用途之潛力。故本發明英舌 A 者重於對比褪黑激素更具 選擇性療效化合物之需求。 化合物N-(2,4 -二硝基笨其1 h 々 尽暴）-5 -甲氣基色胺（“ML-23，，） 與N-(2,4-二硝基苯基）-2-碘甲烷氧基色胺均對褪黑 激素有對抗作用（Zisapel et al i 989擁有之美國專利 4,880,826 號，Laudon et al，】End〇cHn〇i 1 98 8;1 1 6:43-53, Oaknin-Bendahan et al., Neuroreport 1 995 27;6:785-8? Nordic et al Proc Soc Exp Biol Med 1 989; 191:321-5，Zisapel et al.，Eur J Pharmacol 1987:136，259-6 0)，就本發明人目前所知，目前尚無人 對N-(2,4-二硝基苯基）-5 -甲氧基色胺與其醚類或硫醚類 之類似物可能可與可刺激褪黑激素分泌之系統產生交互 作用之潛在利用價值進行研討。 前文所引用的專利内容，專利申請案與文獻在本文 件中均被視爲本文之參考文獻。 發明目的及概述： 本發明之一目的係提供具如下分子式⑴之化合物及 該鹼性化合物與酸反應產生之鹽類， 第11頁 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ------厂卜·1·裝--------訂-------卜 Γ4先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1270544 A7

Ri、R2、R3均分別選自氫、函素、烷基（Ci 4)、垸氧 基（Cu)、NR，R”、N(R，）C(:〇)RG、硝基、芳香基、芳香基 -烷基（Cw)、芳香基-烷氧基（Cl_4)中·· R0為烷基（Ci4)或芳 香基，且每一 R’與R”係分別為氫或烷基（Cl 4)，或 R — R =C1CH2CH2或NR’R”構成一含有3-8個成員的飽和 雜環；m = 0-4 ; t = 0-3 ; X 為 NH、N-烷基（Cm)、氧或硫； 但前提是當（尺1)„1為5 -甲氧基、r2為氫或蛾且t = 〇時，X 不為NH。 上述定義中，芳香族指的是有或無取代基之芳香環的單 價殘餘物，以苯環較佳，但也可能是諸如蓁基之其他的 單價芳香環羧酸殘基，或其他諸如如呋喃、嘍吩、也咯 環、说啶、苯并蒎、苯并塞吩之單價雜環芳香環殘基。 當芳香基有取代基時，取代基可能為一個或一個以上的 氫氧基、燒氧基（Cn)、鹵素、氰基、硝基、歎酸、酯或 醯胺、磺酸、楓、亞楓或諸如氯化甲基、二氯甲基或三 氟化碳之鹵化燒基（Cn)、氨基、單烷基（Ci 4)胺基、二烷 基（Ci_4)胺基或燒基（Ci_4)。 另一方面，本發明提出一種藥學配方，其至少包含一 第12頁 本紙張尺度適用中關家標準（CNS)A4規格（210 X 297公f---— --- ------.---^---裝--------訂-------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1270544 A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印制衣 五、發明說明（ 種製藥上可接受的蘇#罢、— 妥又的稀釋硬、防腐劑、溶劑、乳化劑、 劑、與/或載體、且嘮鏟A 佐 且4柒學配方組成中至少有一組合 含上述本發明定羞~ ^ 義 < 化合物與其之藥學上可接受 類。 风 在另一方面，本發明提出利用由上述本發明定 化口物與其《藥學上可接受的鹽類所組成的藥學配方 應用於製造能與可刺激褪黑激素分泌之系統產生交互作 用之藥物，例如—種用於繁殖動物用途的藥物，或用於 預防或治療***症狀、陽萎、心血管失調、中樞神細 系統與精神失調，或因内分泌造成之慢性生物性失調= 腫瘤症狀、免疫系統、與老化有關之症狀、眼部疾病、 叢發性頭痛與偏頭痛之藥物。 另一方面，本發明也提供一種治療哺乳類動物（包括 人類與非人類之哺乳類動物）之醫學狀況的方法， 、 略被治 療之哺乳類動物在以可和刺激褪黑激素分泌之系統產生 交互作用的藥物治療後，其症狀可獲得緩解；該方法包 含以一有效量之至少一種由申請專利範圍第1項所定義 之化合物所組成族群之成員及其之製藥上可接受的_讀 來治療該醫學症狀。 璧Ljl詳細說明： 在不失去對本發明中的化合物之一般性定羞π 我下’目前 具有上述分子式及下列副官能基之較佳化合物為： 當m = 〇、t=l時，位於未稠合苯環三號位蒈4 ^ I < R3 為 第13頁 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ——.—^--------^--------I ^Mw. (請先閱讀背面之>i意事項再填寫本頁> 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1270544 Α7 Β7 五、發明說明（） N(R，）C(:〇)RG，X是NH、NH-烷基（Ci-4)或氧之化合物； 當m=l、t=l時，蚓哚環五號位置之Ri為甲基或甲氧 基，位於未稠合苯環三號位置之b為N(R’）C(:〇)rg，x 則代表NH、NH-烷基（Cb4)或氧之化合物； 當m = 0、t=l時，位於未稠合苯環二號位置之R3為 NH2，X則是NH、NH-烷基（C卜4)或氧之化合物； 當m= 1、t= 1時’ p5| p朵壤五號位置之R1為甲基或甲氧 基，位於未稠合苯環三號位置之R3為NH2，X則是nh、 NH-垸基（C1 _4)或氧之化合物； 當m = 0或1、t=l時，且當m=l，位於哨嗓環五號位 置之I為甲基之化合物。 本發明之藥學配方至少具有以下一種特徵： (i) 本配方可以應用於經由口服、直腸吸收、靜 脈注射、經兩頰吸收、經肺内吸收、穿透皮 膚等方式使用之處方； (ii) 本配方形式為單位劑量形式，每單位劑量均 至少包含一有效劑量之上述藥學處方中之至 少一種組合物，劑量在0.0025-1000亳克之 間； (iii) 本配方為控制釋放配方，其中該至少一種組 合物係以一預定之速率被釋出。 在本發明之藥學配方中，該製藥上可接受的稀釋液、 防腐劑、溶劑、乳化劑、佐劑、與/或載體均為傳統上用 於製藥或獸醫用途配方之化學物質。本發明之藥學配方 第Η頁 -----*---!---裝--------訂-------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

1270544 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 五、發明說明（） 可被改良作為人體或/與動物之處方。 本藥學配方可以製成藥片、賫^ 或懸浮液以供口服處方使用。至於 //合液、糖水 骆太蘊爯阶、w 、 直腸吸收之處方則可 將本樂學配万利用安瓶、或配合 ^ 或油性基礎劑製成懸 汙液、洛硬或乳劑之形式。當在特 0令,丨禮*十丨 耳施例中需要加入懸 >于％丨j、穩疋劑、與/或分散劑時需考庹 基礎劑中之溶解性或其他性質。配方:4作用化合物在 加其他物f，例如在生理考# i ^能會需要額外添 劑。 " < < 防腐劑與抗氧化 本藥學配方也可製為以傳統检 他甘油脂為基礎之栓劑。本配方可以製如可可奶油或其 物，以使作用成分能於預先設定之#為長效劑形式之藥 本發明之化合物亦可藉由經由二間中緩慢釋出。 透皮膚等輸送方式開立處方。 麵肺内吸收、穿 以下収進一步詳述與解釋之症狀 可經由以本發明中之化合物作為 為目前考量可能 些症狀包括良性腫瘤與***贅生物、^療之症狀’這 包括高血壓、預防血液凝固、血检 彡、心血管失調 經系統與精神失調，例如睡眠失調、的中風；中榧神 焦慮、精神疾病、神經變性病、神确或其他痙攣、 阿兹海默症、帕金森症與杭丁 ^ <订性疾病，例如 disease)，發燒、痛覺缺失；盥几 民症（Huntinton’s 例如時差、週期規律睡眠障礙、-有關之失調’ 輪班引發之問題及與季節有關之、遲睡眠症候群、 疋失。周例如冬季抑鬱；内 第15頁 本紙張尺度賴巾關家標準（CNS)A4規格（2i〇7^f 公釐） * *---裝--------訂--------r >^9. (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) !27〇544 A7

五、發明說明（） 分泌適應症、例如避孕與***、早熟的不正常***、 月經如症候群、高泌乳激素血症與缺乏生長激素；腫瘤 病包括癌症與其他增生性疾病；免疫系統疾病例如愛滋 病、衰老、眼部疾病、叢發性頭痛、偏頭痛、遲發性運 動困難、糖尿病 DIABETES stabilization、weight gain disorder(脂痩素、肥胖）、與幫助動物繁殖例如 調節春情期、生殖力、皮毛之顏色。 本發明化合物，特別是那些具抗氧化及掃除自由基 能力之分子式（I)之化合物，故本發明亦包括可供局部使 用之保護皮膚成分與化妝品成分，例如（僅以會 [施例說明 藥膏、乳膏、軟膏與乳液，其係至少包含一本發明化合 物，及至少一稀釋液、載體與佐劑。 本發明將以下列實施例加以說明。 實施例1 N-(2,4-二硝基苯基）色胺（ML-25) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) | ^1 .1 ϋ ·ϋ ϋ ϋ ϋ 一OJa ϋ_1 ϋ IV ϋ βϋ ϋ I · 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

一毫莫耳色胺溶於1 00亳升的水中並以 莫耳之 破酸氫鈉（NaHC〇3)將酸鹼度調至8.3，取溶於2〇〇毫升 第16頁 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1270544 A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（） 乙醇濃度為1 · 5 %之2，4 -二硝基氟化苯加入並將混合物於 室溫攪拌兩小時。所要之產物會沉澱，將其取出清洗並 烘乾，該產物產率為90%，利用薄層層析法（沖提劑為四 氯化碳，矽膠片）可以看到一個黃色小點（Rf=〇 84)且能在 相同條件下與起始物分離得相當完全。 實施例2 N-(2,4-二硝基苯基）·5-甲基色胺（ML-28)

B7 •ΝΑ te #； 一愛莫耳5 -甲基色胺溶於100毫升的水中並以2.5 莫耳之碳酸氫鈉（NaHC03)將酸鹼度調至8.3，取溶於200 晕升乙醇濃度為1.5%之2,4-二硝基氟化苯加入並將混合 物於室溫攪拌兩小時。所要之產物會沉澱，將其取出清 洗並洪乾’該產物產率為85%，利用薄層層析法（沖提劑 為四氯化碳’矽膠片）可以看到一個黃色小點（Rf=〇 8)且 此在相同條件下與起始物分離得相當完全。 —.—.—裝--------訂--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 第17頁

1270544 A7 B7 五、發明說明（） 實施例3 2,4-二硝基苯基-5-色胺基乙醯苯胺 （ML-2 6)

一毫莫耳色胺溶於1〇〇毫升的水中並以2.5莫耳之 碳酸氫鈉（NaHC03)將酸鹼度調至8.3，取溶於200毫升 乙醇濃度為 1.5 %之 2，4-二硝基-5-氟化乙醯苯胺加入並 將混合物於室溫攪拌兩小時。所要之產物會沉澱，將其 取出清洗並烘乾，該產物產率為80%利用薄層層析法（沖 提劑為四氯化碳，矽膠片）可以看到一個黃色小點 (Rf=0.76)且能在相同條件下與起始物分離得相當完全。 實施例4 2,4-二硝基苯基-5-(5’-甲基色胺基）氨基乙醯苯胺 (ML-29) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

第18頁 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1270544 A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（ 一毫莫耳5-甲基色胺溶於1〇〇亳升的水中並以2 $ 莫耳之碳酸氫鈉（NaHCOO將酸鹼度調至8.3，取溶於2〇〇 毫升乙醇濃度為丨乃％之2,4-二硝基-5-氟化乙酿苯胺加 入並將混合物於室溫攪拌兩小時。所要之產物會沉殿， 將其取出清洗並烘乾，該產物產率為9 5 °/〇，利用薄展舞 析法（沖提劑為四氯化碳，矽膠片）可以看到一個黃色小 點（Rf=0.7)且能在相同條件下與起始物分離得相合+入。 實施例5 2,4-二硝基-5-(5甲氧基色胺基）氨基乙醯苯胺（Με_3〇)

加入並將混合物於室溫攪摔兩小時。所要之產物會沉 澱，將其取出清洗並烘乾，該產物產率為8 5 %，利用薄 層層析法（沖提劑為四氯化碳，矽膠片）可以看到一個黃 色小點（Rf=0.57)且能在相同條件下與起始物分離得相當 第19頁 *—'—裝--------訂--------1^9. (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1270544

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（ 完全。 實施例6 N""(2,4_一硝基_5_胺基苯基）色胺（ML-27)

笔莫耳色胺溶於100毫升的水中並以2.5莫耳之 碳酸氮納（NaHC〇3)將酸鹼度調至8.3，取溶於2〇〇亳升 乙醇/辰度為1.5%之2,4_二硝基_5_氟化苯胺加入並將混 口物於Α μ揽摔兩小時。所要之產物會沉澱，將其取出 清洗並烘乾’該產物產率為90%，利用薄層層析法（沖提 戶iJ為四氯化奴’矽膠片）可以看到一個黃色小點（Rf=〇 57) 且能在相同條件下與起始物分離得相當完全。 第20頁 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） -----·—-—裝--------訂--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1270544

五、發明說明（） 實施例7 N-(2,4-二硝基氨基苯基）_5、甲基色胺（ml-31)

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一毫莫耳5 -甲基色胺溶於1〇〇毫升的水中並以2.5 莫耳之碳酸氫鈉（NaHC〇3)將酸鹼度調至8 3,取溶於2〇〇 毫升乙醇濃度為1.5%之2,4-二硝基-5-氟化苯胺加入並 將混合物於室溫攪拌兩小時。所要之產物會沉澱，將其 取出清诜並烘乾，該產物產率為9〇%，利用薄層層析法 (沖提劑為四氯化碳，矽膠片）可以看到一個黃色小點 (Rf=〇·59)且能在相同條件下與起始物分離得相當完全: 實施例8 N-(2,4-二硝基-5-氨基苯基）-5，_甲葡 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ♦裝 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 T虱基色胺（ml-32)

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五、發明說明（ -完莫耳5-甲氧基色胺溶於1〇〇毫升的水中並以 2.5莫耳之錢U (NaH⑺㈣❹度調至8 3，取 則毫升乙醇濃度為i .5%之2,4_二硝基_5_氟化苯胺：入 並將混合物於室溫攪拌兩小時。所要之產物會沉 其取出清洗並洪乾’該產物產率為㈣，利用薄 法（沖提劑為四氯化碳，矽膠片）可以看到一個 (Rf=〇·57)，且能在相同條件下與起始物分離得彳目t完全點 實施例9 〇-2,4-二硝基苯基_5，_甲氧基色氨醇（ml_32) 酬 將溶於二氯曱烷（DCM)之2,4-二硝基-5-氟化苯（2〇5 耄克，4.0耄莫耳）溶液逐滴加入溶於三毫升之$ 甲氧基胰化蛋白醇（700毫克，3·7亳莫耳）中，加入完畢 後於氬氣中進行震盪。緩慢加入三乙基胺（41〇亳克，* 當莫耳）後將該混合物震盡整夜直到溶劑揮發完畢。利用 薄層層析法（溶劑為四氯化碳，矽膠片）可以看到一個黃 色小點（Rf=0.8)，且能在相同條件下與起始物分離得相= 第22頁 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ------^---*---裝--------訂---------^9 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁} 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1270544

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（） 完全。粗產物溶於四氯化碳（200毫升）中並以〇·1Ν鹽酸 (2X2 00毫升）、1Ν氫氧化納（2X200亳升）、水（2〇〇毫升） 沖洗。有機層以硫酸鎂去水並以真空濃縮法濃縮。以四 氯化碳為沖提劑，利用在矽膠上的快閃色層層析（flash chromatography)可得純的5_甲氧基胰化蛋白醇基_2，肛二 確基苯基醚亮黃色粉末（89〇毫克，2·5亳莫耳，產率 67%) 〇 本發明化合物之生物測就 實驗一 表~L·，本I日月中_Ml化合也對於海馬迴體細胞株（HT22) 土 -因谷氨酸所謗發之氧化I性所造成之 根據文獻（Nuydens e t al， 1999 L of NeUr〇SCienCe;92， 153_9)中之方法，利用勞光探針 5,5’，6,6’-四氯-1，1，，3,3，-四乙基苯并咪坐羧花青碘（；^_1) 評估粒線體膜電位之改變，小鼠海馬迴細胞胞株2) 被保存於添加10%胎牛血清之改良的Dulbecc〇，s最小需 求培養基中（DMEM)，並藉由胰蛋白臃化反應將培養之細 胞自已長滿細胞之培養盤中取下、再培育繁衍。細胞（96 孔盤中的每一孔中含有3000個細胞）以内含5 mM谷氨 酸之DMEM培養，同時並以濃度為"^乂的ML化合物 處理24小時。之後於37t下，藉由將培養基換為内含 葡萄糖（lg/L)與JC-1(10//M)之磷酸緩衝溶液（pBs)，處 理10分鐘後，清洗一次，而使細胞内載入螢光標織物 第23頁 本紙張尺度適用中國國家標準（CNSM4規格（210 X 297公爱"7 *—'—裝--------訂-------1 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1270544 A7 B7 五、發明說明（ JC-1。完成後將96孔盤置於培養盤判讀器並將吸收光波 長/發射光波長分別設定為 480/530nm與 530/590nm。 530/590nm: 48〇/530nm這兩個波長所得之榮光比值可以 作為粒線體膜電位變化之指標。該比值變小表示粒線體 膜電位呈現去極化現象，該現象可能是因缺氧或病理上 的原因導致細胞凋零死亡。表一結果證明螢光強度比值 因添加谷氣酸而降低，表示海馬迴細胞中的粒線體膜電 位文到損害’褪黑激素、ML-23與四種本發明化合物 (ML-25、ML-26、ML-27、ML-30)明顯可保護粒線體對 抗因谷氨酸引起的損害，所以加入上述物質後之榮光強 度比值較未加入上述物質、或僅加入谷氨酸之對照組為 高。這些化合物中’其中ML-23、MU25、ML_26不會 降低控制細胞之膜電位，但ML_27、ML-3〇則會。表一 中之其他化合物ML-29、ML-32、。， ML-31會降低控制細 胞之膜電位且無法對抗谷氨酸引起的 、的知害，ML-28則會 升高控制細胞之膜電位但卻也無法料 W无對柷谷氨酸引起的損 害。 該實驗指出本發明中之化合物血 口奶興璲黑激素相似，均 可直接抑制粒線體膜電位。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1270544 A7 B7 五、發明說明（） 表1 控制環境 +谷氨酸5mM JC-1比例 JC-1比例 JC-1比例 A B A/B(%) 控制組 2.46 控制組 2.09 85 褪黑激素 2.48 褪黑激素 2.44 98 ML-23 2.19 ML-23 1.97 90 ML-25 2.21 ML-25 2.01 91 ML-26 2.16 ML-26 2.1 1 98 ML-27 1.80 ML-27 1.83 102 ML-28 2.77 ML-28 2.28 82 ML-29 2.28 ML-29 1.79 78 ML-30 1.83 ML-30 2.13 1 16 ML-3 1 1.93 ML-3 1 1.57 81 ML-32 2.15 ML-32 1.76 82 實驗2 接合（binding)於倉鼠腦膜之125I-褪黑激素 取兩個倉鼠的腦，置於冰冷的三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩衝溶液（500 mmol/L三羥甲基氨基甲烷、5mmol/L 二氯化鈣、pH = 7.4)中，加量為 10 vol/每克組織，然後 以鐵氟龍-玻璃組織均質機加以均質化。均質液以 10,000g離心10分鐘，上澄液再以100,000g離心兩小時 以得到神經突觸小球（P2)粗產物。取P2(20 # 1)懸浮液， 第25頁 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -----#---"---Μ,--------^--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1270544

五、發明說明（ Λ L褪黑激素（250 ρΜ)混合，於^ 认 人 ％ 37 C下培養60分鐘， 在含有或不含有InM-100// Μ之測a， fc 、 <哪4物質（ML化合物與 提黑激素）之三羥甲基氨基甲烷 _ 避馱緩衝溶液中，接合 反應藉由加入冰冷之三羥甲基廣 見基甲烷緩衝液予以終 止。接著腦膜可藉由以GF/C破璃纖&、、+ m、> #、％ 纖維濾材進行真空過 滤而加h以收集，並以3x4毫升之冰冷緩衝液清洗。含有 矣口 褪黑激素之濾材中可藉由7計數器測定其放射 性。表2證明了 ML化合物會與！2小褪黑激素競爭小鼠 腦膜上之特定接和位置。ML_29、ML 3〇、ml_3i(i〇 6m) θ抑制 ^褪黑激素之特定接和現象。ML-27、ML-28、 ML-23減低^^―褪黑激素之特定接和現象至較低程度 d3%)，褪黑激素^^⑷亦會減低⑴^褪黑激素之特定 接和現象至相似程度（20%)。 雖本文件特别以數個具體化實施例敘述本發明，對 於習知技藝人士來説，具體化實例之修飾與變化是明颟 可達成的。因此本發明並不限制於本文件中之具體眘、> 例中’而是需藉由專利申請範圍之精神與範圍對本發曰月 之概念加以了解。 (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) ^--------訂-------- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 第26頁 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1270544 A7 B7 五、發明說明（） 表 2 競爭物 0 10'6M 接合百 ιο_7μ 接合百 濃度 分比 分比 褪黑激 424 335 79 377 89 素 ML-23 463 403 87 435 94 ML-25 429 390 91 396 92 M1-26 417 411 99 435 104 ML-27 486 426 87 448 92 ML-28 418 365 87 381 91 ML-29 447 358 80 404 90 ML-30 509 409 80 488 96 ML-3 1 464 334 72 438 94 ML-32 45 2 419 93 408 90 -----'---,---'·裝--------訂------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 第27頁 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）

Claims (1)

1270544 &8遵（印办0號靜谋今年月修正 C8 一 D8 六、申請專利範圍 1 . 種式（I)化合物 本””

Ν〇2 CP 與該化合物與酸所形成之加成鹽類，其中： 每個Rl及R3均分別選自氫、鹵素、Ci_4燒基、Ci_4烧 氧基、NH2 及 NHC(:0)RG ·· R。為 Ci-4 烷基；m = 0-4 ; t = 0-3 ; X為NH或氧；但前提是當（RQm為5-甲氧基、 R2為氫且t = 0時，X不為NH，以及當R2是Η和m = t = 0時，X不是NH。 2. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中 m = 0， t=l，位於未稠合苯環三號位置之R3為NHC(:0)RG。 3. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中 m= 1， t= 1，位於吲哚環五號位置之Ri為甲基或甲氧基，且 位於未稠合苯環三號位置之R3為NHC(:0)RG。 4. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中 m = 0， t=l，位於未稠合苯環三號位置之R3為nh2。 5. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中 1， 第28頁 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------------------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1270544 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 t= 1，位於吲哚環五號位置之Ri為甲基或甲氧基，位 於未稠合苯環三號位置之R3為NH2。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 6. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中1，t = 0 時，位於吲哚環五號位置之Ri為甲基。 7. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中之化合物 係選自下列化合物組成之族群中： N-(2,4-二硝基苯基）色胺； N-(2,4-二硝基苯基）-5-甲基色胺； N-(2,4-二硝基苯基）-5-氯色胺； 2，4-二硝基-5-色胺基胺基乙醯苯胺； 2.4- 二硝基- 5-(5甲基色胺基）氨基乙醯苯胺； 2.4- 二硝基-5-(5’ -曱氧基色胺基）氨基乙醯苯 胺； N-(2,4-二硝基-5-胺基苯基）色胺； N-(2,4-二硝基-5-氨基苯基）-5’-甲基色胺； N-(2,4-二硝基-5-氨基苯基）-5’ -甲氧基色胺；及 0-2,4-二硝基苯基- 5’-曱氧基色氨醇。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 8. 一種用於預防及治療會和能刺激褪黑激素分泌之系 統產生交互作用之疾病或症狀的藥學組合物，其至 少包含一種藥學上可接受的稀釋液、防腐劑、溶劑、 乳化劑、佐劑、與/或載體，及至少一種選自由申請 第29頁 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 經濟部智慧財產局員工消費合作社印制农 1270544 as C8 D8 六、申請專利範圍 專利範圍第1項所定義之式（I)化合物及其藥學上可 接受之鹽類所組成之物質族群中的化合物，其中每 個Ri和R3分別選自氫、鹵素、Cb4烷基、Ci_4烷 氧基、NH2及NHC(:0)RG ; R2是氫；RG是Cm烷基； m是0-4;t是0-3;且X是NH或0;前提是當（RQm 是5-甲氧基，R2是氫且t = 0時，X不是NH。 9. 如申請專利範圍第8項所述之藥學組合物，其係具有 至少一種下述特徵： (i) 其適合以口服、直腸吸收、靜脈注射、經兩頰 吸收、經肺内吸收、穿透皮膚等方式施用； (ii) 其為單位劑量形式，每單位劑量均至少包含一有 效量之至少一種化合物，且該化合物含量介於 0.0025-1 000毫克之間； (iii) 其為一種控制釋放配方，其中該至少一種化合物 係以一預設之速率被釋出。 1 0. —種可供局部使用之皮膚保護組合物，其包含至少 一種選自申請專利範圍第1項所定義具有抗氧化及 掃除自由基能力的式（1)化合物，及至少一種稀釋 液、載體與佐劑。 11. 一種可供局部使用之化妝用組合物，其包含至少一 種選自申請專利範圍第1項所定義具有抗氧化及掃 第30貫 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐〉 ------------讓------ --訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1270544 韶 C8 D8 六、申請專利範圍 除自由基能力的式（1)化合物’及至少一種稀釋液、 載體與佐劑。 *!* 3 第 --------------------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）