TW201942116A - 作為抗癌劑之四氫喹唑啉衍生物 - Google Patents
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Abstract
本發明關於下述通式之化合物：
該等化合物之製備方法，含有該等化合物之組成物，及該等化合物之用途。
該等化合物之製備方法，含有該等化合物之組成物，及該等化合物之用途。
Description
本發明關於用作為KRAS蛋白質抑制劑之新穎的四氫喹唑啉衍生物。本發明亦關於使用此等化合物治療哺乳動物，尤其為人類的異常細胞生長之方法及作為抗癌劑之醫藥組成物。
Kirsten大鼠肉瘤致癌基因同源物(KRAS)為小型GTP酶，其整合來自細胞外部的信號至細胞內的增生及生存信號。這係通過生長因子介導之鳥嘌呤交換因子(GEF)激活而發生，其移除Ras之GDP且容許GTP進入，GTP係以高濃度存在於細胞質中。在GTP核苷酸結合後，兩個無序的開關區域(開關I和開關II)係與核苷酸之γ磷酸鹽交互作用，容許Ras經由Ras結合結構域(RBD)與效應子酵素交互作用，其開始改變基因表現之傳訊級聯。GTP酶活化蛋白(GAP)之結合加速GTP內在轉化成GDP，且使蛋白質處於非活性狀態，因此終止信號(Rajalingam, K., R. Schreck, U. R. Rapp and S. Albert (2007). "Ras oncogenes and their downstream targets." Biochim Biophys Acta 1773(8): 1177-1195)。
Ras在多達20%之人類腫瘤中於密碼子12、13和61位置上突變，其適合於助長蛋白質之GTP結合形式。該等腫瘤包括結腸、胰臟和肺腫瘤，後者在高達25至30%之所有腫瘤中顯示KRAS突變，以40%之該等藏匿G12C突變之腫瘤被認為是由香煙煙霧中的致癌物助長。具有G12C突變之KRAS激活Mapk路徑且助長非小細胞肺癌(NSCLC)生長及生存。(Prior, I. A., P. D. Lewis and C. Mattos (2012). "A comprehensive survey of Ras mutations in cancer." Cancer Res 72(10): 2457-2467)。
因為在人類腫瘤中發現KRAS突變且抑制由該等蛋白質傳訊造成癌表型之抑制，所以學術團體和工業界一直強烈希望找到Ras抑制劑(Feramisco, J. R., R. Clark, G. Wong, N. Arnheim, R. Milley and F. McCormick (1985). "Transient reversion of ras oncogene-induced cell transformation by antibodies specific for amino acid 12 of ras protein." Nature 314(6012): 639-642.)及(McCormick, F. (2015). "KRAS as a Therapeutic Target." Clin Cancer Res 21(8): 1797-1801)。單獨及與Mapk路徑的其他抑制劑組合之KRAS效應子BRaf的特異性抑制劑在黑色素瘤中顯示出顯著的反應，其中此BRaf時常經由突變激活(Flaherty, K. T., I. Puzanov, K. B. Kim, A. Ribas, G. A. McArthur, J. A. Sosman, P. J. O'Dwyer, R. J. Lee, J. F. Grippo, K. Nolop and P. B. Chapman (2010). "Inhibition of mutated, activated BRAF in metastatic melanoma." N Engl J Med 363(9): 809-819)。相反地，一般的Mapk抑制劑在具有突變的KRAS之癌中未顯示出顯著的反應，可能是因為缺乏遍及正常組織之適當的治療指數或由其他的Ras路徑之補償性傳訊。(Turk Turke, A. B., Y. Song, C. Costa, R. Cook, C. L. Arteaga, J. M. Asara and J. A. Engelman (2012). "MEK inhibition leads to PI3K/AKT activation by relieving a negative feedback on ERBB receptors." Cancer Res 72(13)：3228-3237.e, Song等人，2012)及(Janne, P. A., M. M. van den Heuvel, F. Barlesi, M. Cobo, J. Mazieres, L. Crino, S. Orlov, F. Blackhall, J. Wolf, P. Garrido, A. Poltoratskiy, G. Mariani, D. Ghiorghiu, E. Kilgour, P. Smith, A. Kohlmann, D. J. Carlile, D. Lawrence, K. Bowen and J. Vansteenkiste (2017). "Selumetinib Plus Docetaxel Compared With Docetaxel Alone and Progression-Free Survival in Patients With KRAS-Mutant Advanced Non-Small Cell Lung Cancer: The SELECT-1 Randomized Clinical Trial." Jama 317(18): 1844-1853)。
選擇性結合突變的KRAS之化合物是非常理想的，因為彼等能免除對正常組織的衝擊，且充分抑制腫瘤內引發抗腫瘤活性的Ras傳訊。最近，KRAS G12C已顯示出既以生化方式且又於癌細胞中保留循環，創造破壞激活的機會(Hunter, J. C., A. Manandhar, M. A. Carrasco, D. Gurbani, S. Gondi and K. D. Westover (2015). "Biochemical and Structural Analysis of Common Cancer-Associated KRAS Mutations." Mol Cancer Res 13(9): 1325-1335)。描述利用在G12C中用於結合之半胱胺酸取代及防止GDP與GTP交換之化合物(Ostrem, J. M., U. Peters, M. L. Sos, J. A. Wells and K. M. Shokat (2013). "K-Ras(G12C) inhibitors allosterically control GTP affinity and effector interactions." Nature 503(7477)：548-551)。這使得利用鎖定KRAS於非活性狀態之G12C結合化合物為有吸引力的癌治療機會。
Ras在多達20%之人類腫瘤中於密碼子12、13和61位置上突變，其適合於助長蛋白質之GTP結合形式。該等腫瘤包括結腸、胰臟和肺腫瘤，後者在高達25至30%之所有腫瘤中顯示KRAS突變，以40%之該等藏匿G12C突變之腫瘤被認為是由香煙煙霧中的致癌物助長。具有G12C突變之KRAS激活Mapk路徑且助長非小細胞肺癌(NSCLC)生長及生存。(Prior, I. A., P. D. Lewis and C. Mattos (2012). "A comprehensive survey of Ras mutations in cancer." Cancer Res 72(10): 2457-2467)。
因為在人類腫瘤中發現KRAS突變且抑制由該等蛋白質傳訊造成癌表型之抑制，所以學術團體和工業界一直強烈希望找到Ras抑制劑(Feramisco, J. R., R. Clark, G. Wong, N. Arnheim, R. Milley and F. McCormick (1985). "Transient reversion of ras oncogene-induced cell transformation by antibodies specific for amino acid 12 of ras protein." Nature 314(6012): 639-642.)及(McCormick, F. (2015). "KRAS as a Therapeutic Target." Clin Cancer Res 21(8): 1797-1801)。單獨及與Mapk路徑的其他抑制劑組合之KRAS效應子BRaf的特異性抑制劑在黑色素瘤中顯示出顯著的反應，其中此BRaf時常經由突變激活(Flaherty, K. T., I. Puzanov, K. B. Kim, A. Ribas, G. A. McArthur, J. A. Sosman, P. J. O'Dwyer, R. J. Lee, J. F. Grippo, K. Nolop and P. B. Chapman (2010). "Inhibition of mutated, activated BRAF in metastatic melanoma." N Engl J Med 363(9): 809-819)。相反地，一般的Mapk抑制劑在具有突變的KRAS之癌中未顯示出顯著的反應，可能是因為缺乏遍及正常組織之適當的治療指數或由其他的Ras路徑之補償性傳訊。(Turk Turke, A. B., Y. Song, C. Costa, R. Cook, C. L. Arteaga, J. M. Asara and J. A. Engelman (2012). "MEK inhibition leads to PI3K/AKT activation by relieving a negative feedback on ERBB receptors." Cancer Res 72(13)：3228-3237.e, Song等人，2012)及(Janne, P. A., M. M. van den Heuvel, F. Barlesi, M. Cobo, J. Mazieres, L. Crino, S. Orlov, F. Blackhall, J. Wolf, P. Garrido, A. Poltoratskiy, G. Mariani, D. Ghiorghiu, E. Kilgour, P. Smith, A. Kohlmann, D. J. Carlile, D. Lawrence, K. Bowen and J. Vansteenkiste (2017). "Selumetinib Plus Docetaxel Compared With Docetaxel Alone and Progression-Free Survival in Patients With KRAS-Mutant Advanced Non-Small Cell Lung Cancer: The SELECT-1 Randomized Clinical Trial." Jama 317(18): 1844-1853)。
選擇性結合突變的KRAS之化合物是非常理想的，因為彼等能免除對正常組織的衝擊，且充分抑制腫瘤內引發抗腫瘤活性的Ras傳訊。最近，KRAS G12C已顯示出既以生化方式且又於癌細胞中保留循環，創造破壞激活的機會(Hunter, J. C., A. Manandhar, M. A. Carrasco, D. Gurbani, S. Gondi and K. D. Westover (2015). "Biochemical and Structural Analysis of Common Cancer-Associated KRAS Mutations." Mol Cancer Res 13(9): 1325-1335)。描述利用在G12C中用於結合之半胱胺酸取代及防止GDP與GTP交換之化合物(Ostrem, J. M., U. Peters, M. L. Sos, J. A. Wells and K. M. Shokat (2013). "K-Ras(G12C) inhibitors allosterically control GTP affinity and effector interactions." Nature 503(7477)：548-551)。這使得利用鎖定KRAS於非活性狀態之G12C結合化合物為有吸引力的癌治療機會。
鑒於KRAS在調節各種生物過程中的角色，使KRAS為以小分子抑制劑調節之有吸引力的靶標。迄今為止，幾乎沒有開發出有效的KRAS抑製劑，若有任何KRAS抑制劑已進入臨床，但是很少是有效的。
下文所述之本發明化合物的每一實施態樣可與本文所述之本發明化合物的任何其他實施態樣組合，該任何其他實施態樣不與其組合之實施態樣前後矛盾。此外，下文描述本發明之每一實施態樣係設想本發明化合物的醫藥上可接受之鹽在其範圍內。因此，詞組「或其醫藥上可接受之鹽」隱含在本文所述之所有化合物的描述中。
本發明包括其中提供式(I)化合物的實施態樣：
或其醫藥上可接受之鹽；其中：
J為具有3至12個環原子的雜環，其中J隨意地經1、2、3、4、5或6個R2 取代；
K為C6 -C12 芳基，或K為具有5至12個環原子的雜芳基，其中K隨意地經1、2、3、4、5、6或7個R3 取代；
W係選自由下列者所組成之群組：
其中W隨意地經1、2或3個R5 取代；
各R1 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷基-羥基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 烷基-C1 -C6 烷氧基、羥基、C2 -C6 烯基、C2 -C6 炔基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基、氰基和-N(R6 )2 ，或兩個R1 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基；
各R2 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、羥基、C1 -C6 烷基-羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基、氰基、C1 -C6 烷基-氰基和側氧基，或兩個R2 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基；
各R3 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 烷基-羥基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基、N(R6 )2 、側氧基和氰基，或兩個R3 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基；
R4 為-X-Y-Z，其中：
X不存在或選自由下列者所組成之群組：氧、硫和
-NR6 -，
Y不存在或為C1 -C6 伸烷基，及
Z係選自H、-N(R6 )2 、-C(O)-N(R6 )2 、-OR6 、具有3至12個環原子的雜環、具有5至12個環原子的雜芳基和C3 -C6 環烷基，
其中R4 隨意地經一或多個R7 取代；
各R5 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素和-N(R6 )2 ；
各R6 係獨立地選自由下列者所組成之群組：氫、羥基、C1 -C6 烷氧基和C1 -C6 烷基，或兩個R6 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基；
各R7 獨立為R7’ 或C1 -C6 烷基-R7’ ，其中各R7’ 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素、-N(R6 )2 、具有3至12個環原子的雜環和側氧基；且
m為0、1、2、3、4、5、6或7。
本發明包括更多其中提供式(I)化合物的實施態樣：
或其醫藥上可接受之鹽；其中：
J係選自由下列者所組成之群組：
其中W*表示與W的連接點，且其中J隨意地經1、2、3、4、5或6個R2 取代；
K係選自由下列者所組成之群組：
K係選自由下列者所組成之群組：
其中K隨意地經1、2、3、4、5、6或7個R3 取代；
W係選自由下列者所組成之群組：
其中W隨意地經1、2或3個R5 取代；
各R1 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷基-羥基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 烷基-C1 -C6 烷氧基、羥基、C2 -C6 烯基、C2 -C6 炔基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基、氰基和-N(R6 )2 ，或兩個R1 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基；
各R2 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、羥基、C1 -C6 烷基-羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基、氰基、C1 -C6 烷基-氰基和側氧基，或兩個R2 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基；
各R3 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 烷基-羥基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基、N(R6 )2 、側氧基和氰基，或兩個R3 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基；
R4 為-X-Y-Z，其中：
X不存在或選自由下列者所組成之群組：氧、硫和
-NR6 -，
Y不存在或為C1 -C6 伸烷基，及
Z係選自H、-N(R6 )2 、-C(O)-N(R6 )2 、-OR6 、具有3至12個環原子的雜環、具有5至12個環原子的雜芳基和C3 -C6 環烷基，
其中R4 隨意地經一或多個R7 取代；
各R5 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素和-N(R6 )2 ；
各R6 係獨立地選自由下列者所組成之群組：氫、羥基、C1 -C6 烷氧基和C1 -C6 烷基，或兩個R6 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基；
各R7 獨立為R7’ 或C1 -C6 烷基-R7’ ，其中各R7’ 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素、-N(R6 )2 、具有3至12個環原子的雜環和側氧基；且
m為0、1、2、3、4、5、6或7。
本發明包括又更多其中提供式(I)化合物的實施態樣：
或其醫藥上可接受之鹽；其中：
J係選自由下列者所組成之群組：
其中W*表示與W的連接點，且其中J隨意地經R2 取代；
K係選自由下列者所組成之群組：
K係選自由下列者所組成之群組：
其中K隨意地經1或2個R3 取代；
W係選自由下列者所組成之群組：
其中W隨意地經1、2或3個R5 取代；
R1 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基和C1 -C6 烷基-C1 -C6 烷氧基；
R2 為C1 -C6 烷基；
各R3 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、羥基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基和C1 -C6 烷基-羥基；
R4 為-X-Y-Z，其中：
X不存在或為氧，
Y不存在或為C1 -C6 伸烷基，及
Z係選自H、-N(R6 )2 、-OR6 和具有3至12個環原子的雜環，
其中R4 隨意地經一或多個R7 取代；
各R5 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素和-N(R6 )2 ；
各R6 係獨立地選自由下列者所組成之群組：氫和C1 -C6 烷基；
各R7 獨立為R7’ 或C1 -C6 烷基-R7’ ，其中各R7’ 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基和-N(R6 )2 ；
m為0或1。
亦包括其中K係選自由下列者所組成之群組的本發明之實施態樣：
包括那些其中K係選自由下列者所組成之群組的實施態樣：
。
亦包括其中K係選自由下列者所組成之群組的本發明之實施態樣：
。
亦包括其中W為下列者的本發明之實施態樣：
。
亦包括其中J為下列者的本發明之實施態樣：
，
包括其中J係選自由下列者所組成之群組的實施態樣：
另外，本發明包括其中R4 係選自由下列者所組成之群組的實施態樣：
而且，本發明之實施態樣包括選自由下列者所組成之群組的化合物：
或其醫藥上可接受之鹽。
本發明之實施態樣優先選擇地包括選自由下列者所組成之群組的化合物：
或其醫藥上可接受之鹽。
本發明之額外的實施態樣包括醫藥組成物，其包含治療有效量的本文所述之化合物或其醫藥上可接受之鹽及醫藥上可接受之賦形劑。
本發明之額外的實施態樣亦包括用於抑制細胞的KRAS活性之方法，其係藉由令希望其中的KRAS活性抑制之細胞與治療有效量的本文所述之化合物或其醫藥上可接受之鹽，或含有該化合物或其醫藥上可接受之鹽的醫藥組成物接觸。
本發明之額外的實施態樣亦包括用於治療癌之方法，其包含對患有癌症之患者投予治療有效量的單獨或與一或多種醫藥上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑組合的如本文所述之化合物或其醫藥上可接受之鹽。
實施態樣進一步包括其中所投予之化合物或其醫藥上可接受之鹽的治療有效量為每天介於約0.01至300毫克/公斤；或每天介於約0.1至100毫克/公斤的此等方法。
本發明之額外的實施態樣亦包括用於治療哺乳動物的異常細胞生長之方法，其包含對哺乳動物投予治療有效量的如本文所述之化合物或其醫藥上可接受之鹽。在特定的此等實施態樣中，異常細胞生長為癌，且在特定的那些實施態樣中，癌為肺癌、骨癌、胰臟癌、皮膚癌、頭或頸癌、皮膚或眼內黑色素瘤、子宮癌、卵巢癌、直腸癌、肛區癌、胃癌、結腸癌、乳癌、子宮癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、***癌、外陰癌、霍奇金氏病(Hodgkin's Disease)、食道癌、小腸癌、內分泌系統癌、甲狀腺癌、副甲狀腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、***癌、慢性或急性白血病、淋巴細胞淋巴瘤、膀胱癌、腎或輸尿管癌、腎細胞癌、腎盂癌、中樞神經系統(CNS)腫瘤、原發性CNS淋巴瘤、脊髓軸腫瘤、腦幹膠質瘤或垂體腺瘤。此等癌可為KRAS相關癌。特別關注諸如肺癌、結腸癌、胰臟癌和卵巢癌之癌。
在另外的實施態樣中，其提供以本文所述之化合物治療癌之方法，其中癌為肺癌、結腸癌、胰臟癌和卵巢癌。
在另外的實施態樣中，其提供以本文所述之化合物治療癌之方法，其中癌為肺癌。
在另外的實施態樣中，其提供以本文所述之化合物治療癌之方法，其中癌為胰臟癌。
本發明之實施態樣亦包括本文所述之化合物於製備藥劑之用途，或其醫藥上可接受之鹽於製備藥劑之用途，該藥劑係用於治療哺乳動物的異常細胞生長。在特定的此等實施態樣中，異常細胞生長為癌，且在特定的那些實施態樣中，癌為肺癌，骨癌、胰臟癌、皮膚癌、頭或頸癌、皮膚或眼內黑色素瘤、子宮癌、卵巢癌、直腸癌、肛區癌、胃癌、結腸癌、乳癌、子宮癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、***癌、外陰癌、霍奇金氏病、食道癌、小腸癌、內分泌系統癌、甲狀腺癌、副甲狀腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、***癌、慢性或急性白血病、淋巴細胞淋巴瘤、膀胱癌、腎或輸尿管癌、腎細胞癌、腎盂癌、中樞神經系統(CNS)腫瘤、原發性CNS淋巴瘤、脊髓軸腫瘤、腦幹膠質瘤或垂體腺瘤。此等癌可為KRAS相關癌。
亦與癌治療有關的本發明之實施態樣包括用於治療有其需要之患者的癌之方法，其包含：(a)測定與KRAS突變相關聯的癌；及(b)對患者投予治療有效量的如本文所述之化合物或醫藥上可接受之鹽或其醫藥組成物。在一些實施態樣中，KRAS突變為或併入G12C突變。在一些實施態樣中，KRAS突變為或併入在密碼子12、13及/或61上的Ras突變。
定義
除非另有其他陳述，否則在本說明書及申請專利範圍中所使用之下列術語具有下文討論之含義。在此章節中所定義之變數(諸如R、X、n及類似者)僅於此章節之範圍內參考，且不意指具有與可於此定義章節之範圍外使用相同的含義。再者，本文所定義之許多基團可隨意地經取代。在典型的取代基之此定義章節中的列表為例示且不意欲限制在本說明書及申請專利範圍內於別處所定義之取代基。
「烯基」係指由至少兩個碳原子及至少一個碳-碳雙鍵所組成之如本文所定義之烷基。代表性實例包括但不限於乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基或3-丁烯基及類似者。「伸烯基」係指二價形式的烯基。
「烷氧基」係指-O-烷基，其中烷基較佳為C1 -C8 、C1 -C7 、C1 -C6 、C1 -C5 、C1 -C4 、C1 -C3 、C1 -C2 或C1 烷基。
「烷基」係指飽和脂族烴基，其包括1至20個碳原子(「(C1 -C20 )烷基」)，較佳為1至12個碳原子(「(C1 -C12 )烷基」)，較佳為1至8個碳原子(「(C1 -C8 )烷基」)或1至6個碳原子(「(C1 -C6 )烷基」)或1至4個碳原子(「(C1 -C4 )烷基」)的直鏈及支鏈基團。烷基的實例包括甲基、乙基、丙基、2-丙基、正丁基、異丁基、三級丁基、戊基、新戊基及類似者。烷基可經取代或未經取代。典型的取代基包括環烷基、芳基、雜芳基、雜脂環基、羥基、烷氧基、芳氧基、巰基、烷硫基、芳硫基、氰基、鹵素、羰基、硫羰基、O-胺甲醯基、N-胺甲醯基、O-硫代胺甲醯基、N-硫代胺甲醯基、C-醯胺基、N-醯胺基、C-羧基、O-羧基、硝基、矽基、胺基和-NRx Ry ，其中Rx 和Ry 為例如氫、烷基、環烷基、芳基、羰基、乙醯基、磺醯基、三氟甲烷磺醯基和組合之5或6員雜脂環狀環。「鹵烷基」(例如(C1 -C6 )鹵烷基)係指具有1至6個碳及一或多個鹵素取代基之烷基，例如-CF3 和-CHF2 。「伸烷基」係指二價形式的烷基。
「炔基」係指由至少兩個碳原子及至少一個碳-碳參鍵所組成之如本文所定義之烷基。代表性實例包括但不限於乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基或3-丁炔基及類似者。「伸炔基」係指二價形式的炔基。
「胺基」係指-NRx Ry 基團，其中Rx 和Ry 皆為氫。
「(C6 -C12 )芳基」係指具有完全共軛π電子系統之6至12個碳原子的全碳單環或稠環多環基團。同樣地，「(C5 -C12 )芳基」係指具有完全共軛π電子系統之5至12個碳原子的全碳單環或稠環多環基團。芳基的非限制性實例為苯基、萘基和蒽基。芳基可經取代或未經取代。典型的取代基包括鹵基、三鹵甲基、烷基、羥基、烷氧基、芳氧基、巰基、烷硫基、芳硫基、氰基、硝基、羰基、硫羰基、C-羧基、O-羧基、O-胺甲醯基、N-胺甲醯基、O-硫代胺甲醯基、N-硫代胺甲醯基、C-醯胺基、N-醯胺基、亞磺醯基、磺醯基、胺基和-NRx Ry ，Rx 和Ry 係如上文所定義。
「(C6 -C12 )芳基」亦包括如上文所述之芳基環及環系統，其另外包括與其稠合之碳環或雜環，例如：
。
「氰基」係指-C≡N基團。氰基可表示為CN。
「(C3 -C10 )環烷基」係指3至10員全碳單環、3至10員全碳雙環、全碳5員/6員或6員/6員稠雙環、稠多環基團(「稠」環系統意指系統中的各環與系統中的各其他環彼此共享相鄰的碳原子配對)，其中環中之一或多者可含有一或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛π電子系統、及橋連全碳環系統。環烷基的非限制性實例為環丙烷、環丁烷、環戊烷、環戊烯、環己烷、環己二烯、金剛烷、環庚烷、環庚三烯及類似者。環烷基可經取代或未經取代。典型的取代基包括烷基、芳基、雜芳基、雜脂環基、羥基、烷氧基、芳氧基、巰基、烷硫基、芳硫基、氰基、鹵基、羰基、硫羰基、C-羧基、O-羧基、O-胺甲醯基、N-胺甲醯基、C-醯胺基、N-醯胺基、硝基、胺基和-NRx Ry ，Rx 和Ry 係如上文所定義。
「G12C」係指其中野生型KRAS中於位置12上的胺基酸自甘胺酸突變成半胱胺酸殘基之突變。
「鹵素」或前綴詞「鹵基」係指氟、氯、溴和碘。鹵素較佳地係指氟或氯。
「雜烷基」係指1至20個碳原子，較佳為1至12個碳原子，更佳為1至8個碳原子，或1至6個碳原子，或1至4個碳原子的直鏈或支鏈烷基，其中該等碳原子中之一、二或三個經選自NRx 、N、O和S(O)n (其中n為0、1或2)之雜原子置換。在超過一個雜原子中的雜原子通常彼此不相鄰。例示性雜烷基包括烷基醚、二級或三級烷基胺、醯胺、烷基硫化物及類似者。基團可為端基或橋連基。如本文所使用，當在橋連基團的上下文中使用正鏈時，則述及之正鏈係指連結橋連基團的兩個末端位置之原子的直鏈。如同「烷基」一樣，在「雜烷基」上典型的取代基包括環烷基、芳基、雜芳基、雜脂環基、羥基、烷氧基、芳氧基、巰基、烷硫基、芳硫基、氰基、鹵素、羰基、硫羰基、O-胺甲醯基、N-胺甲醯基、O-硫代胺甲醯基、N-硫代胺甲醯基、C-醯胺基、N-醯胺基、C-羧基、O-羧基、硝基、矽基、胺基和-NRx Ry ，其中Rx 和Ry 為例如氫、烷基、環烷基、芳基、羰基、乙醯基、磺醯基、三氟甲烷磺醯基和組合之5或6員雜脂環狀環。「雜烯基」係指具有一或多個碳-碳雙鍵之雜烷基。「伸雜烷基」係指二價形式的雜烷基。「伸雜烯基」係指二價形式的雜烯基。
「雜芳基」係指含有一、二、三或四個選自NRx 、N、O和S(O)n (其中n為0、1或2)之環雜原子及另外具有完全共軛π電子系統之5至12個環原子的單環或稠環基團。較佳的雜芳基包括依照上文定義之(C2 -C7 )雜芳基。未經取代之雜芳基的非限制性實例為吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、㗁唑、噻唑、吡唑、吡啶、嘧啶、喹啉、異喹啉、嘌呤、四唑、三和咔唑。雜芳基可經取代或未經取代。典型的取代基包括烷基、環烷基、鹵基、三鹵甲基、羥基、烷氧基、芳氧基、巰基、烷硫基、芳硫基、氰基、硝基、羰基、硫羰基、磺醯胺基、C-羧基、O-羧基、亞磺醯基、磺醯基、O-胺甲醯基、N-胺甲醯基、O-硫代胺甲醯基、N-硫代胺甲醯基、C-醯胺基、N-醯胺基、胺基和-NRx Ry ，Rx 和Ry 係如上文所定義。醫藥上可接受之雜芳基為足夠穩定以附著至本發明化合物、調配成醫藥組成物且於隨後投予有其需要的患者之基團。典型的單環雜芳基的實例包括但不限於：
適合的稠環雜芳基的實例包括但不限於：
「雜環基」係指含有一、二、三或四個選自N、O和S(O)n (其中n為0、1或2)之環雜原子及1至9個碳原子之具有3至12個環原子的單環、螺環或稠環系統。環亦可具有一或多個雙鍵。然而，環不具有完全共軛π電子系統。較佳的雜環包括依照上文定義之(C2 -C6 )雜環。
適合的飽和雜環基團的實例包括但不限於：
適合的部分不飽和雜環基團的實例包括但不限於：
適合的稠雜環基團的實例包括但不限於：
。
適合的半飽和稠雜環基團的實例包括但不限於：
適合的螺環雜環基團的實例包括但不限於：
。
雜環基隨意地經一或兩個獨立地選自下列的取代基取代：鹵基、低碳烷基、經羧基取代之低碳烷基、酯羥基、單或二烷基胺基或側氧基。而且，雜環可含有橋連，包括在雜環上不相鄰的碳之間的橋連，該橋含有1至2個碳及0至1個選自NRx 、O和S(O)n (其中n為0、1或2)之雜原子。
「羥基(hydroxy)」或「羥基(hydroxyl)」係指-OH基團。
「試管內」係指在人工環境中執行之程序，諸如而不限於試管內或培養基內。
「活體內」係指在活的有機體內執行之程序，諸如而不限於小鼠、大鼠或兔子。
「隨意的」或「隨意地」意指隨後說明的事件或狀況可能發生但可不必發生，且該說明包括其中事件或狀況發生的情況及其中事件或狀況未發生的情況。例如，「隨意地經烷基取代之雜環基」意指烷基可能存在但可不必存在，且該說明包括其中雜環基經烷基取代的情況及其中雜環基未經烷基取代的情況。
「有機體」係指由至少一個細胞所組成之任何活的實體。活有機體可如例如單一真核細胞一樣簡單或如哺乳動物(包括人類)一樣複雜。
「醫藥上可接受之賦形劑」係指添加至醫藥組成物中以進一步使化合物容易投予的惰性物質。賦形劑的非限制性實例包括碳酸鈣、磷酸鈣、各種糖及澱粉型式、纖維素衍生物、明膠、植物油和聚乙二醇。
如本文所使用之術語「醫藥上可接受之鹽」係指那些保留母體化合物之生物有效性及性質的鹽。此等鹽包括：(i)酸加成鹽，其可藉令母體化合物之游離鹼與下列酸反應而獲得：無機酸，諸如鹽酸、氫溴酸、硝酸、磷酸、硫酸和過氯酸及類似者，或有機酸，諸如乙酸、草酸、(D)或(L)蘋果酸、順丁烯二酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸、酒石酸、檸檬酸、琥珀酸或丙二酸及類似者；或(ii)當存在於母體化合物中的酸性質子經金屬離子(例如鹼金屬離子、鹼土金屬離子或鋁離子)置換或與有機鹼(諸如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、胺基丁三醇、N-甲基還原葡糖胺及類似者)配位時所形成之鹽。
「醫藥組成物」係指本文所述之化合物或其生理上/醫藥上可接受之鹽、溶劑合物、水合物或前藥中之一或多者與其他的化學組分(諸如生理上/醫藥上可接受之載劑及賦形劑)之混合物。醫藥組成物的目的係使化合物容易投予有機體。
如本文所使用之「生理上/醫藥上可接受之載劑」係指不對有機體造成顯著的刺激且不消除所投予之化合物的生物活性及性質之載劑或稀釋劑。
「治療有效量」係指所投予之化合物使欲治療之疾患的症狀中之一或多者緩解至某種程度的量。關於癌的治療，治療有效量係指具有下列效應中之至少一者的量：縮減腫瘤大小、抑制(亦即減緩至某種程度，較佳地停止)腫瘤轉移、抑制(亦即減緩至某種程度，較佳地停止)腫瘤生長至某種程度及緩解一或多種與癌相關聯的一或多種症狀至某種程度(或者較佳地消除)。
「治療(Treat)」、「治療(treating)」及「治療
(treatment)」係指減輕或消除經甲基轉移酶介導之細胞疾患及/或其伴隨的症狀之方法。特別關於癌，該等術語純粹地意指增加罹患癌之個體的預期壽命或減少疾病的症狀中之一或多者。
詳細說明
用於合成本發明化合物之通用流程可見於本文之實施例段落中。
除非另有其他指示，否則本文所有述及之本發明化合物包括述及之其鹽、溶劑合物、水合物及複合物，以及其鹽之溶劑合物、水合物及複合物，包括其多晶形物、立體異構物及經同位素標記之型式。
醫藥上可接受之鹽包括酸加成鹽及鹼鹽(包括二鹽)。適合的酸加成鹽係自形成無毒性鹽之酸形成。實例包括乙酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、硼酸鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、乙二磺酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡萄糖酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、六氟磷酸鹽、海苯酸鹽(hibenzate)、鹽酸鹽/氯化物、氫溴酸鹽/溴化物、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙磺酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、萘甲酸鹽、2-萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、乳清酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽(pamoate)、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、蔗糖酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽和三氟乙酸鹽。
適合的鹼鹽係自形成無毒性鹽之鹼形成。實例包括鋁、精胺酸、苄星(benzathine)、鈣、膽鹼、二乙胺、二乙醇胺、甘胺酸、離胺酸、鎂、甲葡胺(meglumine)、乙醇胺(olamine)、鉀、鈉、胺基丁三醇和鋅鹽。關於適合的鹽之評論，參見“Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use” by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002)，將其揭示內容藉引用全文而併入本文。
本發明化合物的醫藥上可接受之鹽可藉由令化合物溶液在適當的情況下與所欲酸或鹼混合在一起而輕易地製得。鹽可自溶液沈澱且以過濾收集或可藉由蒸發溶劑而回收。在鹽中的離子化程度可自完全離子化至幾乎未離子化不等。
本發明化合物可以非溶劑化及溶劑化形式二者存在。術語「溶劑合物」在本文用於描述包含本發明化合物及一或多種醫藥上可接受之溶劑分子(例如乙醇)的分子複合物。當溶劑為水時，則使用術語「水合物」。依照本發明的醫藥上可接受之溶劑合物包括其中結晶溶劑可經同位素取代(例如D2 O、d6 -丙酮、d6 -DMSO)之水合物及溶劑合物。
複合物亦包括在本發明之範圍內，諸如晶籠化合物、藥物-主體包合複合物，其中藥物及主體係以化學計量或非學計量之量存在，與前述溶劑合物相反。亦包括含有二或更多種可以化學計量或非化學計量之量存在的有機及/或無機組分之藥物的複合物。可將所得複合物離子化、部分離子化或非離子化。關於此等複合物之評論，參見J Pharm Sci, 64 (8), 1269-1288 by Haleblian (August 1975)，將其揭示內容藉引用全文而併入本文。
本發明化合物之多晶形物、前藥及異構物(包括光學、幾何和互變異構物)亦在本發明之範圍內。
本發明化合物之衍生物本身可具有少許或不具有藥理學活性，但當投予患者時可轉化成本發明化合物，例如藉由水解性裂解。此等衍生物被稱為「前藥」。關於使用前藥的進一步資訊可見於‘Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14, ACS Symposium Series (T Higuchi and W Stella)及‘Bioreversible Carriers in Drug Design’, Pergamon Press, 1987 (E B Roche編輯，美國醫藥學會)，將彼等揭示內容藉引用彼等全文而併入本文。
依照本發明之前藥可例如藉由令存在於本發明化合物中之適當的官能基以那些熟習此項技術領域者已知為「前部分」的特定部分置換而產生，如例如在H Bundgaard之"Design of Prodrugs" (Elsevier，1985)中所述，將其揭示內容藉引用全文而併入本文。
依照本發明之前藥的一些實例包括：(i)在化合物含有羧酸官能基-(COOH)、其酯的情況下，例如令氫以(C1 -C8 )烷基置換；(ii)在化合物含有醇官能基(-OH)、其醚的情況下，例如令氫以(C1 -C6 )烷醯氧基甲基置換；及(iii)在化合物含有一級或二級胺基官能基(-NH2 或-NHR，其中R≠H)、其醯胺的情況下，例如令一或二個氫以(C1 -C10 )烷醯基置換。依照前述實例及其他前藥類型的實例之置換基團的更多實例可見於前述參考資料中。
最後，特定的本發明化合物本身可充當為其他的本發明化合物之前藥。
含有一或多個不對稱碳原子的本發明化合物可以二或更多種立體異構物存在。在根據本發明之化合物具有至少一個手性中心的情況下，彼等可因此以鏡像異構物存在。在化合物具有二或更多個手性中心的情況下，彼等可另外以非鏡像異構物存在。同樣地，在本發明化合物含有環丙基或其中有手性存在的其他環狀基團、及烯基或伸烯基的情況下，幾何順/反(或Z/E)異構物是可能的。在化合物含有例如酮基或肟基或芳族部分的情況下，可出現互變異構物的異構現象(「互變異構現象」)。單一化合物可展現一種類型以上的異構現象。
本發明化合物(包括展現一種類型以上的異構現象之化合物)的所有立體異構物、幾何異構物和互變異構物形式及一或多種彼等之混合物包括在本發明之範圍內。亦包括其中相對離子為光學活性之酸加成鹽或鹼鹽(例如D-乳酸鹽或L-離胺酸)，或消旋物(例如DL-酒石酸鹽或DL-精胺酸)。
順/反異構物可藉由那些熟習此項技術領域者熟知的慣用技術分離，例如層析術及分段結晶法。
用於製備/分離個別鏡像異構物的慣用技術包括自適合的光學純前驅物之手性合成或使用例如手性高壓液相層析術(HPLC)或超臨界流體層析術(SFC)解析消旋物(或鹽或衍生物之消旋物)。
另一選擇地，消旋物(或消旋物前驅物)可與適合的光學活性化合物反應，例如與醇反應，或在其中化合物含有酸性或鹼性部分的例子中，與酸或鹼(諸如酒石酸或1-苯基乙胺)反應。所得非鏡像異構物混合物可藉由層析術及/或分段結晶法分離，及非鏡像異構物中之一或多者係藉由熟習此項技術領域者熟知的方式法轉化成相應的純鏡像異構物。
立體異構物晶團可藉由那些熟習此項技術領域者已知的慣用技術分離；參見例如E L Eliel (Wiley，New York，1994)之“Stereochemistry of Organic Compounds”，將其揭示內容藉引用全文而併入本文。
本發明亦包括經同位素標記之本發明化合物，其中一或多個原子經具有相同的原子數但原子質量或質量數不同於自然界經常發現的原子質量或質量數之原子置換。適合於包括在本發明化合物中之同位素的實例包括下列者的同位素：氫，諸如2 H和3 H，碳，諸如11 C、13 C和14 C，氯，諸如36 Cl，氟，諸如18 F，碘，諸如123 I和125 I，氮，諸如13 N和15 N，氧，諸如15 O、17 O和18 O，磷，諸如32 P，及硫，諸如35 S。特定的經同位素標記之本發明化合物(例如那些併入放射活性同位素者)可用於藥物及/或受質組織分布研究。放射活性同位素氚(3 H)及碳-14(14 C)係鑒於彼等容易併入及現成的檢測方式而特別有用於此目的。以較重的同位素(諸如氘，2 H)取代可起因於更大的代謝穩定性(例如增加的活體內半生期)或降低的劑量需求而供給特定的治療優勢，且因此在一些狀況下可能較佳。以正子發射同位素(諸如11 C、18 F、15 O和13 N)取代可用於正子放射斷層攝影(PET)研究以檢查受質受體佔有率。
經同位素標記之本發明化合物通常可藉由那些熟習此項技術領域者已知的慣用技術或藉由類似於那些本文所述之方法使用適當的經同位素標記之試劑代替另外使用的未標記之試劑而製得。
依照本發明之醫藥上可接受之溶劑合物包括那些其中結晶溶劑可經同位素取代者，例如D2 O、d6 -丙酮、d6 -DMSO。
意欲於醫藥應用的本發明化合物可以晶形或非晶形產物或彼之混合物投予。彼等可藉由諸如沈澱、結晶、冷凍乾燥、噴霧乾燥或蒸發乾燥之方法而以例如實心塞、粉末或薄膜獲得。可出於此目的而使用微波或射頻乾燥。
化合物可單獨或與本發明之一或多種其他化合物組合投予。彼等通常係以與一或多種醫藥上可接受之賦形劑締合之調配物投予。本文所用之術語「賦形劑」描述除了本發明化合物以外的任何成分。賦形劑的選擇在很大程度上取決於諸如特定的投予模式、賦形劑對溶解度和穩定性的效應及劑型的本性等因素而定。
適合於遞送本發明化合物之醫藥組成物及彼等之製備方法為那些熟習此項技術領域者輕易地明白。此等組成物及彼等之製備方法可見於例如第19版‘Remington’s Pharmaceutical Sciences’(Mack Publishing Company, 1995)，將其揭示內容藉引用全文而併入本文。
經口投予：本發明化合物可經口投予。經口投予可包含吞嚥，使得化合物進入胃腸道，或可使用頰內或舌下投予，藉此使化合物自口部直接進入血流中。
適合於經口投予之調配物包括固體調配物(諸如錠劑)、膠囊(含有微粒、液體或粉末)、菱形錠(包括經液體填充者)、咀嚼錠、多-和奈米-微粒、凝膠、固溶體、脂質體、薄膜(包括黏膜黏著劑)、卵狀小體、噴霧及液體調配物。
液體調配物包括懸浮液、溶液、糖漿和酏劑。此等調配物可用於作為軟或硬膠囊中的填料且通常包括載劑，例如水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甲基纖維素或適合的油，及一或多種乳化劑及/或懸浮劑。液體調配物亦可藉由重組例如來自小藥囊中的固體而製得。
本發明化合物亦可用於快速溶解、快速崩解劑型中，諸如那些於Liang and Chen (2001)之Expert Opinion in Therapeutic Patents, 11 (6), 981-986中所述者，將其揭示內容藉引用全文而併入本文。
關於錠劑劑型，藥物可取決於劑量而構成劑型的1重量%至80重量%，更典型為劑型的5重量%至60重量%。除了藥物之外，錠劑通常含有崩解劑。崩解劑的實例包括澱粉乙醇酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈣、交聯羧甲基纖維素鈉(croscarmellose sodium)、交聯聚維酮(crospovidone)、聚乙烯吡咯啶酮、甲基纖維素、微晶纖維素、經低碳烷基取代之羥丙基纖維素、澱粉、預糊化澱粉和海藻酸鈉。崩解劑通常構成劑型的1重量%至25重量%，較佳為5重量%至20重量%。
結合劑通常用以賦予錠劑調配物之內聚特性。適合的結合劑包括微晶纖維素、明膠、糖、聚乙二醇、天然和合成膠、聚乙烯吡咯啶酮、預糊化澱粉、羥丙基纖維素及羥丙基甲基纖維素。錠劑亦可含有稀釋劑，諸如乳糖(單一水合物、經噴霧乾燥之單一水合物、無水物及類似者)、甘露醇、木糖醇、右旋糖、蔗糖、山梨醇、微晶纖維素、澱粉和磷酸氫鈣二水合物。
錠劑亦可隨意地包括表面活化劑(諸如月桂基硫酸鈉和聚山梨醇酯80)及助流劑(諸如二氧化矽和滑石)。當存在時，表面活性劑的量通常為錠劑的0.2重量%至5重量%，及助流劑的量通常為錠劑的0.2重量%至1重量%。
錠劑通常亦含有潤滑劑，諸如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅、硬脂基富馬酸鈉和硬脂酸鎂與月桂基硫酸鈉之混合物。潤滑劑通常係以劑型的0.25重量%至10重量%的量存在，較佳為0.5重量%至3重量%。
其他慣用的成分包括抗氧化劑、著色劑、調味劑、保存劑及遮味劑。
例示性錠劑含有至多約80重量%之藥物、約10重量%至約90重量%之結合劑、約0重量%至約85重量%之稀釋劑、約2重量%至約10重量%之崩解劑及約0.25重量%至約10重量%之潤滑劑。
錠劑摻合物可直接或以滾筒壓縮以形成錠劑。錠劑摻合物或摻合物的一部分可另一選擇地在製錠前經濕式-、乾式-或熔融-造粒、熔融凍凝或擠壓。最後的調配物可包括一或多層且可經包膜或未經包膜；或膠囊化。
錠劑調配物詳細地討論於H. Lieberman and L. Lachman於“Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol. 1”，Marcel Dekker, N.Y., N.Y., 1980 (ISBN 0-8247-6918-X)中，將其揭示內容藉引用全文而併入本文。
用於經口投予之固體調配物可能調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾釋放型調配物包括延遲、持續、脈衝、控制、靶向及程控化釋放。
適合的修飾釋放型調配物描述於美國專利第6,106,864號中。其他適合的釋放技術之詳情(諸如高能量分散液、及滲透和包膜粒子)可見於Verma等人之Pharmaceutical Technology On-line, 25(2), 1-14(2001)。利用咀嚼膠達成控制釋放描述於WO 00/35298中。將該等參考資料的揭示內容藉引用彼之全文而併入本文。
非經腸投予
本發明化合物亦可直接投予血流中、肌肉中或內部器官中。適合於非經腸投予的方式包括靜脈內、動脈內、腹膜內、椎管內、腦室內、尿道內、胸骨內、顱內、肌肉內和皮下。適合於非經腸投予之器材包括針(包括微型針)注射器、無針注射器和輸注技術。
非經腸調配物通常為水性溶液，其可含有賦形劑，諸如鹽、醣和緩衝劑(較佳為3至9之pH)，但在一些應用而言，彼等可能更適合調配成無菌非水性溶液或與適合的媒劑(諸如無菌的無熱源水)結合使用的乾燥形式。
在無菌條件下藉由例如冷凍乾燥製備非經腸調配物可使用那些熟習此項技術領域者熟知的標準醫藥技術輕易地完成。
在製備非經腸溶液所使用之本發明化合物的溶解度可藉使用適當的調配技術而增加，諸如併入溶解度增強劑。用於非經腸投予之調配物可能調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾釋放型調配物包括延遲、持續、脈衝、控制、靶向及程控化釋放。因此，本發明化合物可能調配成以植入式儲積物投予之固體、半固體或觸變性液體，以提供修飾釋放之活性化合物。此等調配物的實例包括塗藥支架和PGLA微球體。
局部投予
本發明化合物亦可能經局部投予皮膚或黏膜，亦即經皮膚或透皮投予。出於此目的之典型的調配物包括凝膠、水凝膠、洗劑、溶液、乳膏、軟膏、撒布劑、敷料、發泡體、薄膜、皮膚貼片、粉片、植入物、藥棉、纖維、繃帶和微乳液。亦可能使用脂質體。典型的載劑包括酒精、水、礦油、液態礦脂、白凡士林、甘油、聚乙二醇和丙二醇。可併入穿滲透增強劑；參見例如Finnin and Morgan 之J Pharm Sci, 88 (10), 955-958 (1999年10月)。其他的局部投予方式包括以電穿孔法、電離子透入法、超聲波透入法、超聲波導入法和微型針或無針注射(例如Powderject™、Bioject™等)遞送。將該等參考資料的揭示內容藉引用彼之全文而併入本文。
用於局部投予之調配物可能調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾釋放型調配物包括延遲、持續、脈衝、控制、靶向及程控化釋放。
吸入/鼻內投予
本發明化合物亦可經鼻內或吸入投予，通常呈來自乾粉吸入器的乾粉形式(單獨、成為混合物，例如與乳糖的乾摻合物，或成為混合型組分粒子，例如與磷脂(諸如磷脂醯膽鹼)混合)，或呈來自使用或未使用適合的推噴劑(諸如1,1,1,2-四氟乙烷或1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷)之加壓容器、泵、噴霧器、霧化器(較佳為使用電流體動力學產生細霧的霧化器)或氣霧器的煙霧噴霧形式。用於鼻內的粉末可包含生物黏著劑，例如聚葡萄胺糖或環糊精。
加壓容器、泵、噴霧器、霧化器或氣霧器含有本發明化合物之溶液或懸浮液，其包含例如乙醇、水性乙醇或適合於分散、溶解或延長釋放活性物的替代劑、作為溶劑之推進劑及隨意的界面活性劑，諸如山梨醇酐三油酸酯、油酸或寡乳酸。
在以乾燥粉末或懸浮液調配物使用前，先將藥產物微粉化成適合於吸入遞送之大小(通常為小於5微米)。這可藉由形成奈米粒子之任何適當的粉碎方法(諸如螺旋噴射研磨、流化床噴射研磨、超臨界流體處理)、高壓均質化或噴霧乾燥而達成。
在吸入器或吹藥器中使用的膠囊(例如自明膠或HPMC製成)、泡殼及藥筒可能經調配以含有本發明化合物、適合的粉末基底(諸如乳糖或澱粉)與性能修飾劑(諸如l-白胺酸、甘露醇或硬脂酸鎂)之粉末混合物。乳糖可為無水物或呈單一水合物形式，以後者較佳。其他適合的賦形劑包括右旋糖、葡萄糖、麥芽糖、山梨醇、木糖醇、果糖、蔗糖和繭糖。
適合於使用電流體力學以產生細霧之霧化器中的溶液調配物可以每一引動含有1微克至20毫克本發明化合物且引動體積可自1微升至100微升不等。典型的調配物包括本發明化合物、丙二醇、無菌水、乙醇和氯化鈉。可用於代替丙二醇的可替代溶劑包括甘油和聚乙二醇。
適合的調味劑(諸如薄荷醇和左旋薄荷醇)或甜味劑(諸如糖精或糖精鈉)可添加至意欲吸入/鼻內投予的那些本發明之調配物中。
用於吸入/鼻內投予之調配物可使用例如聚(DL-乳酸-共-乙醇酸)(PGLA)調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾釋放調配物包括延遲、持續、脈衝、控制、靶向及程控化釋放。
在乾粉吸入器及煙霧劑的例子中，劑量單位係藉助於遞送經計量之量的閥測定。通常安排依照本發明的單位以投予含有所欲量之本發明化合物的經計量之劑量或「噴氣(puff)」。每日總劑量可能以單一劑量或更常以分次劑量供全天投予。
直腸/***內投予
本發明化合物可經直腸或***投予，例如呈栓劑、子宮托或灌腸劑形式。可可脂為傳統的栓劑基底，但可在適當時使用各種替代物。用於直腸/***投予之調配物可能調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾型調配物包括延遲、持續、脈衝、控制、靶向及程控化釋放。
眼部投予
本發明化合物亦可能直接投予眼或耳，通常呈經pH調整之等張性無菌食鹽水中的微粉化懸浮液或溶液的滴劑形式。適合於眼及耳投予之其他調配物包括軟膏、生物可降解性(例如可吸收性凝膠海綿、膠原)和生物不可降解性(例如聚矽氧)植入物、粉片、鏡片及微粒狀或多孔狀系統，諸如類脂囊泡(niosome)或脂質體。可令聚合物(諸如經交聯之聚丙烯酸、聚乙烯醇、玻尿酸、纖維素聚合物(例如羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素或甲基纖維素)或雜多糖聚合物(例如結蘭膠(gelan gum)))與保存劑(諸如氯化烷基二甲基苯甲銨(benzalkonium chloride))合併在一起。此等調配物亦可以電離子透入法遞送。
用於眼/耳投予之調配物可能調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾型調配物包括延遲、持續、脈衝、控制、靶向或程控化釋放。
其他技術
本發明化合物可能與可溶性大分子實體(諸如環糊精和其適合的衍生物)或含聚乙二醇之聚合物組合，以改進彼等的溶解度、溶解速率、遮味、生物利用率及/或穩定性供前述投予模式中任一者使用。
藥物-環糊精複合物例如經發現通常可用於大多數的劑型及投予途徑。可使用包合及非包合複合物二者。作為與藥物直接複合之替代物的環糊精亦可用於作為輔助添加劑，亦即作為載劑、稀釋劑或增溶劑。出於該等目的而最常使用α-、β-和γ-環糊精，其實例可見於PCT發表案號WO 91/11172、WO 94/02518和WO 98/55148中，將彼等揭示內容藉引用彼等全文而併入本文。
劑量
所投予之活性化合物的量係取決於欲治療之個體、疾患或症狀的嚴重性、投予速率、化合物的配置及處方醫師的判斷而定。然而，呈單一或分次劑量的有效劑量通常在每天每公斤體重約0.001至約100毫克之範圍內，較佳為約0.01至約35毫克/公斤/天。對70公斤人類而言，這可總計約0.07至約7000毫克/天，較佳為約0.7毫克至約2500毫克/天。在一些事例中，低於前述範圍下限的劑量值可能更適當，而在其他的例子中可能仍使用不引起任何有害副作用的更大劑量，且此等更大劑量通常分成一些較小的劑量供全天投予。
套組配件
鑒於可能希望投予活性化合物之組合，例如出於治療特定疾病或症狀的目的，在本發明之範圍內可令二或更多種醫藥組成物(其中至少一者含有依照本發明之化合物)合宜地組合成適合於共同投予組成物之套組形式。因此，本發明之套組包括二或更多種個別的醫藥組成物(其中至少一者含有本發明化合物)及個別容納該等組成物之器材，諸如容器、分次瓶或分次箔包。此種套組的實例為用於包裝錠劑、膠囊及類似者之常見的泡殼包裝。
本發明之套組特別適合投予不同的劑型(例如經口和非經腸)、在不同的劑量間隔投予個別的組成物或相互滴定個別的組成物。為了協助遵守醫囑，套組通常包括投予指示且可具備有記憶輔助工具。
在本文可使用下列的縮寫：Ac(乙醯基)；AcCl(乙醯氯)；AcOH或HOAc(乙酸)；Ac2 O(乙酸酐)；aq.(水性)；Boc或boc(三級丁氧基羰基)；BOP(六氟磷酸(苯并***-1-氧基)參(二甲基胺基)鏻)；B2 pin2 (雙(頻哪醇)二硼)；ca.(約或大約)；CDCl3 (氘化氯仿)；CH2 Cl2 及/或DCM(二氯甲烷)；DABCO(1,4-二氮雜雙環[2,2,2]辛烷)；DAST(二乙基胺基三氟化硫)；DBU(1,8-二氮雜雙環[5,4,0]十一-7-烯)；DCE(二氯乙烷)；DEA(二乙胺)；DIBAL或DIBAL-H(二異丁基氫化鋁)；DIC(二異丙基碳化二醯亞胺)；DIPEA或亨尼格氏(Hunig’s)鹼(N,N-二異丙基乙胺)；DHP(二氫吡喃)；DMA(二甲基乙醯胺)；DMF(二甲基甲醯胺)；DME(乙二醇)；DMP(戴斯-馬丁高碘酸鹽(Dess-Martin Periodinane))；DMAP(4-二甲基胺基吡啶)；DMSO(二甲亞碸)；DMSO-d6 (氘化二甲亞碸)；EDC或EDCI(1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)-碳化二醯亞胺)；Et(乙基)；Et3 N或TEA(三乙胺)；EtOH(乙醇)；EtOAc(乙酸乙酯)；Et2 O(二***)；g或gm(克(gram)或克(grams))；HATU(2-(7-氮雜-1H-苯并***-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽)；HBTU(鄰-(苯并***-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽)；HFIP(1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇)；HMPT(參(二甲基胺基)膦)；HPLC(高性能液相層析術)；HOBT(1-羥基苯并***)；h或hr(視情況為小時(hour)或小時(hours))；iBu(異丁基)；IPA(異丙醇)；iPr(異丙基)；iPrOAc(乙酸異丙酯)；KHMDS(雙(三甲基矽基)胺化鉀)；KOAc(乙酸鉀)；LCMS(液相層析術-質譜術)；LDA(二異丙基胺化鋰)；LiHMDS(雙(三甲基矽基)胺化鋰)；mCPBA(偏-氯過氧苯甲酸)；Me(甲基)；MeOH(甲醇)；MeOD(氘化甲醇)；MeCN(乙睛)；m或min(視情況為分鐘(minute)或分鐘(minutes))；mg(毫克(milligram)或毫克(milligrams))；Ms(甲基磺醯基)；MsCl(甲烷磺醯氯)；N(正)；NBS(N-溴琥珀醯亞胺)；NCS(N-氯琥珀醯亞胺)；NFSI(N-氟二苯磺醯亞胺)；NMR(核磁共振)；nBu(正丁基)；nBuLi(正丁基鋰)；nPr(正丙基)；Pd/C(鈀/碳)；Pd2 (dba)3 (參(二亞苯甲基丙酮)二鈀(0))；Pd(dppf)Cl2 ([1,1′-雙(二苯膦基)二茂鐵]二氯鈀(II))；Pd[P(o-tol)3 ]2 (雙[參(2-甲基苯基)膦]鈀)；Ph(苯基)；PTSA或pTSA(對-甲苯磺酸)；PPTS：(吡啶對-甲苯磺酸鹽)；Rt(滯留時間)；rt(室溫)；RuCl(對-異丙基甲苯)[(R,R)-Ts-DPEN]([N-[(1R,2R)-2-(胺基-κN)-1,2-二苯基乙基]-4-甲基苯磺醯胺基-κN]氯[(1,2,3,4,5,6-η)-1-甲基-4-(1-甲基乙基)苯]-釕)；s或sec(視情況為秒(second)或秒(seconds))；Selectfluor(N-氯甲基-N′-氟三伸乙基二銨雙(四氟硼酸鹽))；SEM(2-三甲基矽基乙氧基甲氧基)；SFC(超臨界流體層析術)；Si-Thiol(二氧化矽1-丙硫醇)；SK-CCO2-A(氯化2-(二甲基胺基甲基)二茂鐵-1-基-鈀(II)二降莰基膦)；T3P(丙基膦酸酐)；TBAF(四丁基氟化銨)；TBDMSCl(三級丁基二甲基矽基氯)；TBME或MTBE(三級丁基甲醚)；t-BuOH(2-甲基-2-丙醇、三級丁醇(tert -butanol)或三級丁醇(tert -butyl alcohol))；tBu-Xphos(2-二-三級丁膦基-2’,4’,6’-三異丙基聯苯)；TDA-1(Tris[2-(2-甲氧基乙氧基)乙基]胺或參(3,6-二氧雜庚基)胺)；TEA、NEt3 或Et3 N(三乙胺)；TFA(三氟乙酸)；THF(四氫呋喃)；THP(四氫吡喃)；TLC(薄層層析術)；TMS(三甲基矽基)；TMSCl(三甲基矽基氯)；TMSCF3 (三甲基(三氟甲基)矽烷)；Tos或tosyl(4-甲苯磺醯基)；TOSMIC(對-甲苯磺醯基甲基異氰化物)；UV(紫外線)。
下文所述之本發明化合物的每一實施態樣可與本文所述之本發明化合物的任何其他實施態樣組合，該任何其他實施態樣不與其組合之實施態樣前後矛盾。此外，下文描述本發明之每一實施態樣係設想本發明化合物的醫藥上可接受之鹽在其範圍內。因此，詞組「或其醫藥上可接受之鹽」隱含在本文所述之所有化合物的描述中。
本發明包括其中提供式(I)化合物的實施態樣：
或其醫藥上可接受之鹽；其中：
J為具有3至12個環原子的雜環，其中J隨意地經1、2、3、4、5或6個R2 取代；
K為C6 -C12 芳基，或K為具有5至12個環原子的雜芳基，其中K隨意地經1、2、3、4、5、6或7個R3 取代；
W係選自由下列者所組成之群組：
其中W隨意地經1、2或3個R5 取代；
各R1 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷基-羥基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 烷基-C1 -C6 烷氧基、羥基、C2 -C6 烯基、C2 -C6 炔基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基、氰基和-N(R6 )2 ，或兩個R1 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基；
各R2 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、羥基、C1 -C6 烷基-羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基、氰基、C1 -C6 烷基-氰基和側氧基，或兩個R2 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基；
各R3 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 烷基-羥基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基、N(R6 )2 、側氧基和氰基，或兩個R3 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基；
R4 為-X-Y-Z，其中：
X不存在或選自由下列者所組成之群組：氧、硫和
-NR6 -，
Y不存在或為C1 -C6 伸烷基，及
Z係選自H、-N(R6 )2 、-C(O)-N(R6 )2 、-OR6 、具有3至12個環原子的雜環、具有5至12個環原子的雜芳基和C3 -C6 環烷基，
其中R4 隨意地經一或多個R7 取代；
各R5 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素和-N(R6 )2 ；
各R6 係獨立地選自由下列者所組成之群組：氫、羥基、C1 -C6 烷氧基和C1 -C6 烷基，或兩個R6 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基；
各R7 獨立為R7’ 或C1 -C6 烷基-R7’ ，其中各R7’ 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素、-N(R6 )2 、具有3至12個環原子的雜環和側氧基；且
m為0、1、2、3、4、5、6或7。
本發明包括更多其中提供式(I)化合物的實施態樣：
或其醫藥上可接受之鹽；其中：
J係選自由下列者所組成之群組：
其中W*表示與W的連接點，且其中J隨意地經1、2、3、4、5或6個R2 取代；
K係選自由下列者所組成之群組：
K係選自由下列者所組成之群組：
其中K隨意地經1、2、3、4、5、6或7個R3 取代；
W係選自由下列者所組成之群組：
其中W隨意地經1、2或3個R5 取代；
各R1 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷基-羥基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 烷基-C1 -C6 烷氧基、羥基、C2 -C6 烯基、C2 -C6 炔基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基、氰基和-N(R6 )2 ，或兩個R1 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基；
各R2 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、羥基、C1 -C6 烷基-羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基、氰基、C1 -C6 烷基-氰基和側氧基，或兩個R2 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基；
各R3 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 烷基-羥基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基、N(R6 )2 、側氧基和氰基，或兩個R3 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基；
R4 為-X-Y-Z，其中：
X不存在或選自由下列者所組成之群組：氧、硫和
-NR6 -，
Y不存在或為C1 -C6 伸烷基，及
Z係選自H、-N(R6 )2 、-C(O)-N(R6 )2 、-OR6 、具有3至12個環原子的雜環、具有5至12個環原子的雜芳基和C3 -C6 環烷基，
其中R4 隨意地經一或多個R7 取代；
各R5 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素和-N(R6 )2 ；
各R6 係獨立地選自由下列者所組成之群組：氫、羥基、C1 -C6 烷氧基和C1 -C6 烷基，或兩個R6 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基；
各R7 獨立為R7’ 或C1 -C6 烷基-R7’ ，其中各R7’ 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素、-N(R6 )2 、具有3至12個環原子的雜環和側氧基；且
m為0、1、2、3、4、5、6或7。
本發明包括又更多其中提供式(I)化合物的實施態樣：
或其醫藥上可接受之鹽；其中：
J係選自由下列者所組成之群組：
其中W*表示與W的連接點，且其中J隨意地經R2 取代；
K係選自由下列者所組成之群組：
K係選自由下列者所組成之群組：
其中K隨意地經1或2個R3 取代；
W係選自由下列者所組成之群組：
其中W隨意地經1、2或3個R5 取代；
R1 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基和C1 -C6 烷基-C1 -C6 烷氧基；
R2 為C1 -C6 烷基；
各R3 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、羥基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基和C1 -C6 烷基-羥基；
R4 為-X-Y-Z，其中：
X不存在或為氧，
Y不存在或為C1 -C6 伸烷基，及
Z係選自H、-N(R6 )2 、-OR6 和具有3至12個環原子的雜環，
其中R4 隨意地經一或多個R7 取代；
各R5 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素和-N(R6 )2 ；
各R6 係獨立地選自由下列者所組成之群組：氫和C1 -C6 烷基；
各R7 獨立為R7’ 或C1 -C6 烷基-R7’ ，其中各R7’ 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基和-N(R6 )2 ；
m為0或1。
亦包括其中K係選自由下列者所組成之群組的本發明之實施態樣：
包括那些其中K係選自由下列者所組成之群組的實施態樣：
。
亦包括其中K係選自由下列者所組成之群組的本發明之實施態樣：
。
亦包括其中W為下列者的本發明之實施態樣：
。
亦包括其中J為下列者的本發明之實施態樣：
，
包括其中J係選自由下列者所組成之群組的實施態樣：
另外，本發明包括其中R4 係選自由下列者所組成之群組的實施態樣：
而且，本發明之實施態樣包括選自由下列者所組成之群組的化合物：
或其醫藥上可接受之鹽。
本發明之實施態樣優先選擇地包括選自由下列者所組成之群組的化合物：
或其醫藥上可接受之鹽。
本發明之額外的實施態樣包括醫藥組成物，其包含治療有效量的本文所述之化合物或其醫藥上可接受之鹽及醫藥上可接受之賦形劑。
本發明之額外的實施態樣亦包括用於抑制細胞的KRAS活性之方法，其係藉由令希望其中的KRAS活性抑制之細胞與治療有效量的本文所述之化合物或其醫藥上可接受之鹽，或含有該化合物或其醫藥上可接受之鹽的醫藥組成物接觸。
本發明之額外的實施態樣亦包括用於治療癌之方法，其包含對患有癌症之患者投予治療有效量的單獨或與一或多種醫藥上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑組合的如本文所述之化合物或其醫藥上可接受之鹽。
實施態樣進一步包括其中所投予之化合物或其醫藥上可接受之鹽的治療有效量為每天介於約0.01至300毫克/公斤；或每天介於約0.1至100毫克/公斤的此等方法。
本發明之額外的實施態樣亦包括用於治療哺乳動物的異常細胞生長之方法，其包含對哺乳動物投予治療有效量的如本文所述之化合物或其醫藥上可接受之鹽。在特定的此等實施態樣中，異常細胞生長為癌，且在特定的那些實施態樣中，癌為肺癌、骨癌、胰臟癌、皮膚癌、頭或頸癌、皮膚或眼內黑色素瘤、子宮癌、卵巢癌、直腸癌、肛區癌、胃癌、結腸癌、乳癌、子宮癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、***癌、外陰癌、霍奇金氏病(Hodgkin's Disease)、食道癌、小腸癌、內分泌系統癌、甲狀腺癌、副甲狀腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、***癌、慢性或急性白血病、淋巴細胞淋巴瘤、膀胱癌、腎或輸尿管癌、腎細胞癌、腎盂癌、中樞神經系統(CNS)腫瘤、原發性CNS淋巴瘤、脊髓軸腫瘤、腦幹膠質瘤或垂體腺瘤。此等癌可為KRAS相關癌。特別關注諸如肺癌、結腸癌、胰臟癌和卵巢癌之癌。
在另外的實施態樣中，其提供以本文所述之化合物治療癌之方法，其中癌為肺癌、結腸癌、胰臟癌和卵巢癌。
在另外的實施態樣中，其提供以本文所述之化合物治療癌之方法，其中癌為肺癌。
在另外的實施態樣中，其提供以本文所述之化合物治療癌之方法，其中癌為胰臟癌。
本發明之實施態樣亦包括本文所述之化合物於製備藥劑之用途，或其醫藥上可接受之鹽於製備藥劑之用途，該藥劑係用於治療哺乳動物的異常細胞生長。在特定的此等實施態樣中，異常細胞生長為癌，且在特定的那些實施態樣中，癌為肺癌，骨癌、胰臟癌、皮膚癌、頭或頸癌、皮膚或眼內黑色素瘤、子宮癌、卵巢癌、直腸癌、肛區癌、胃癌、結腸癌、乳癌、子宮癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、***癌、外陰癌、霍奇金氏病、食道癌、小腸癌、內分泌系統癌、甲狀腺癌、副甲狀腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、***癌、慢性或急性白血病、淋巴細胞淋巴瘤、膀胱癌、腎或輸尿管癌、腎細胞癌、腎盂癌、中樞神經系統(CNS)腫瘤、原發性CNS淋巴瘤、脊髓軸腫瘤、腦幹膠質瘤或垂體腺瘤。此等癌可為KRAS相關癌。
亦與癌治療有關的本發明之實施態樣包括用於治療有其需要之患者的癌之方法，其包含：(a)測定與KRAS突變相關聯的癌；及(b)對患者投予治療有效量的如本文所述之化合物或醫藥上可接受之鹽或其醫藥組成物。在一些實施態樣中，KRAS突變為或併入G12C突變。在一些實施態樣中，KRAS突變為或併入在密碼子12、13及/或61上的Ras突變。
定義
除非另有其他陳述，否則在本說明書及申請專利範圍中所使用之下列術語具有下文討論之含義。在此章節中所定義之變數(諸如R、X、n及類似者)僅於此章節之範圍內參考，且不意指具有與可於此定義章節之範圍外使用相同的含義。再者，本文所定義之許多基團可隨意地經取代。在典型的取代基之此定義章節中的列表為例示且不意欲限制在本說明書及申請專利範圍內於別處所定義之取代基。
「烯基」係指由至少兩個碳原子及至少一個碳-碳雙鍵所組成之如本文所定義之烷基。代表性實例包括但不限於乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基或3-丁烯基及類似者。「伸烯基」係指二價形式的烯基。
「烷氧基」係指-O-烷基，其中烷基較佳為C1 -C8 、C1 -C7 、C1 -C6 、C1 -C5 、C1 -C4 、C1 -C3 、C1 -C2 或C1 烷基。
「烷基」係指飽和脂族烴基，其包括1至20個碳原子(「(C1 -C20 )烷基」)，較佳為1至12個碳原子(「(C1 -C12 )烷基」)，較佳為1至8個碳原子(「(C1 -C8 )烷基」)或1至6個碳原子(「(C1 -C6 )烷基」)或1至4個碳原子(「(C1 -C4 )烷基」)的直鏈及支鏈基團。烷基的實例包括甲基、乙基、丙基、2-丙基、正丁基、異丁基、三級丁基、戊基、新戊基及類似者。烷基可經取代或未經取代。典型的取代基包括環烷基、芳基、雜芳基、雜脂環基、羥基、烷氧基、芳氧基、巰基、烷硫基、芳硫基、氰基、鹵素、羰基、硫羰基、O-胺甲醯基、N-胺甲醯基、O-硫代胺甲醯基、N-硫代胺甲醯基、C-醯胺基、N-醯胺基、C-羧基、O-羧基、硝基、矽基、胺基和-NRx Ry ，其中Rx 和Ry 為例如氫、烷基、環烷基、芳基、羰基、乙醯基、磺醯基、三氟甲烷磺醯基和組合之5或6員雜脂環狀環。「鹵烷基」(例如(C1 -C6 )鹵烷基)係指具有1至6個碳及一或多個鹵素取代基之烷基，例如-CF3 和-CHF2 。「伸烷基」係指二價形式的烷基。
「炔基」係指由至少兩個碳原子及至少一個碳-碳參鍵所組成之如本文所定義之烷基。代表性實例包括但不限於乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基或3-丁炔基及類似者。「伸炔基」係指二價形式的炔基。
「胺基」係指-NRx Ry 基團，其中Rx 和Ry 皆為氫。
「(C6 -C12 )芳基」係指具有完全共軛π電子系統之6至12個碳原子的全碳單環或稠環多環基團。同樣地，「(C5 -C12 )芳基」係指具有完全共軛π電子系統之5至12個碳原子的全碳單環或稠環多環基團。芳基的非限制性實例為苯基、萘基和蒽基。芳基可經取代或未經取代。典型的取代基包括鹵基、三鹵甲基、烷基、羥基、烷氧基、芳氧基、巰基、烷硫基、芳硫基、氰基、硝基、羰基、硫羰基、C-羧基、O-羧基、O-胺甲醯基、N-胺甲醯基、O-硫代胺甲醯基、N-硫代胺甲醯基、C-醯胺基、N-醯胺基、亞磺醯基、磺醯基、胺基和-NRx Ry ，Rx 和Ry 係如上文所定義。
「(C6 -C12 )芳基」亦包括如上文所述之芳基環及環系統，其另外包括與其稠合之碳環或雜環，例如：
。
「氰基」係指-C≡N基團。氰基可表示為CN。
「(C3 -C10 )環烷基」係指3至10員全碳單環、3至10員全碳雙環、全碳5員/6員或6員/6員稠雙環、稠多環基團(「稠」環系統意指系統中的各環與系統中的各其他環彼此共享相鄰的碳原子配對)，其中環中之一或多者可含有一或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛π電子系統、及橋連全碳環系統。環烷基的非限制性實例為環丙烷、環丁烷、環戊烷、環戊烯、環己烷、環己二烯、金剛烷、環庚烷、環庚三烯及類似者。環烷基可經取代或未經取代。典型的取代基包括烷基、芳基、雜芳基、雜脂環基、羥基、烷氧基、芳氧基、巰基、烷硫基、芳硫基、氰基、鹵基、羰基、硫羰基、C-羧基、O-羧基、O-胺甲醯基、N-胺甲醯基、C-醯胺基、N-醯胺基、硝基、胺基和-NRx Ry ，Rx 和Ry 係如上文所定義。
「G12C」係指其中野生型KRAS中於位置12上的胺基酸自甘胺酸突變成半胱胺酸殘基之突變。
「鹵素」或前綴詞「鹵基」係指氟、氯、溴和碘。鹵素較佳地係指氟或氯。
「雜烷基」係指1至20個碳原子，較佳為1至12個碳原子，更佳為1至8個碳原子，或1至6個碳原子，或1至4個碳原子的直鏈或支鏈烷基，其中該等碳原子中之一、二或三個經選自NRx 、N、O和S(O)n (其中n為0、1或2)之雜原子置換。在超過一個雜原子中的雜原子通常彼此不相鄰。例示性雜烷基包括烷基醚、二級或三級烷基胺、醯胺、烷基硫化物及類似者。基團可為端基或橋連基。如本文所使用，當在橋連基團的上下文中使用正鏈時，則述及之正鏈係指連結橋連基團的兩個末端位置之原子的直鏈。如同「烷基」一樣，在「雜烷基」上典型的取代基包括環烷基、芳基、雜芳基、雜脂環基、羥基、烷氧基、芳氧基、巰基、烷硫基、芳硫基、氰基、鹵素、羰基、硫羰基、O-胺甲醯基、N-胺甲醯基、O-硫代胺甲醯基、N-硫代胺甲醯基、C-醯胺基、N-醯胺基、C-羧基、O-羧基、硝基、矽基、胺基和-NRx Ry ，其中Rx 和Ry 為例如氫、烷基、環烷基、芳基、羰基、乙醯基、磺醯基、三氟甲烷磺醯基和組合之5或6員雜脂環狀環。「雜烯基」係指具有一或多個碳-碳雙鍵之雜烷基。「伸雜烷基」係指二價形式的雜烷基。「伸雜烯基」係指二價形式的雜烯基。
「雜芳基」係指含有一、二、三或四個選自NRx 、N、O和S(O)n (其中n為0、1或2)之環雜原子及另外具有完全共軛π電子系統之5至12個環原子的單環或稠環基團。較佳的雜芳基包括依照上文定義之(C2 -C7 )雜芳基。未經取代之雜芳基的非限制性實例為吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、㗁唑、噻唑、吡唑、吡啶、嘧啶、喹啉、異喹啉、嘌呤、四唑、三和咔唑。雜芳基可經取代或未經取代。典型的取代基包括烷基、環烷基、鹵基、三鹵甲基、羥基、烷氧基、芳氧基、巰基、烷硫基、芳硫基、氰基、硝基、羰基、硫羰基、磺醯胺基、C-羧基、O-羧基、亞磺醯基、磺醯基、O-胺甲醯基、N-胺甲醯基、O-硫代胺甲醯基、N-硫代胺甲醯基、C-醯胺基、N-醯胺基、胺基和-NRx Ry ，Rx 和Ry 係如上文所定義。醫藥上可接受之雜芳基為足夠穩定以附著至本發明化合物、調配成醫藥組成物且於隨後投予有其需要的患者之基團。典型的單環雜芳基的實例包括但不限於：
適合的稠環雜芳基的實例包括但不限於：
「雜環基」係指含有一、二、三或四個選自N、O和S(O)n (其中n為0、1或2)之環雜原子及1至9個碳原子之具有3至12個環原子的單環、螺環或稠環系統。環亦可具有一或多個雙鍵。然而，環不具有完全共軛π電子系統。較佳的雜環包括依照上文定義之(C2 -C6 )雜環。
適合的飽和雜環基團的實例包括但不限於：
適合的部分不飽和雜環基團的實例包括但不限於：
適合的稠雜環基團的實例包括但不限於：
。
適合的半飽和稠雜環基團的實例包括但不限於：
適合的螺環雜環基團的實例包括但不限於：
。
雜環基隨意地經一或兩個獨立地選自下列的取代基取代：鹵基、低碳烷基、經羧基取代之低碳烷基、酯羥基、單或二烷基胺基或側氧基。而且，雜環可含有橋連，包括在雜環上不相鄰的碳之間的橋連，該橋含有1至2個碳及0至1個選自NRx 、O和S(O)n (其中n為0、1或2)之雜原子。
「羥基(hydroxy)」或「羥基(hydroxyl)」係指-OH基團。
「試管內」係指在人工環境中執行之程序，諸如而不限於試管內或培養基內。
「活體內」係指在活的有機體內執行之程序，諸如而不限於小鼠、大鼠或兔子。
「隨意的」或「隨意地」意指隨後說明的事件或狀況可能發生但可不必發生，且該說明包括其中事件或狀況發生的情況及其中事件或狀況未發生的情況。例如，「隨意地經烷基取代之雜環基」意指烷基可能存在但可不必存在，且該說明包括其中雜環基經烷基取代的情況及其中雜環基未經烷基取代的情況。
「有機體」係指由至少一個細胞所組成之任何活的實體。活有機體可如例如單一真核細胞一樣簡單或如哺乳動物(包括人類)一樣複雜。
「醫藥上可接受之賦形劑」係指添加至醫藥組成物中以進一步使化合物容易投予的惰性物質。賦形劑的非限制性實例包括碳酸鈣、磷酸鈣、各種糖及澱粉型式、纖維素衍生物、明膠、植物油和聚乙二醇。
如本文所使用之術語「醫藥上可接受之鹽」係指那些保留母體化合物之生物有效性及性質的鹽。此等鹽包括：(i)酸加成鹽，其可藉令母體化合物之游離鹼與下列酸反應而獲得：無機酸，諸如鹽酸、氫溴酸、硝酸、磷酸、硫酸和過氯酸及類似者，或有機酸，諸如乙酸、草酸、(D)或(L)蘋果酸、順丁烯二酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸、酒石酸、檸檬酸、琥珀酸或丙二酸及類似者；或(ii)當存在於母體化合物中的酸性質子經金屬離子(例如鹼金屬離子、鹼土金屬離子或鋁離子)置換或與有機鹼(諸如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、胺基丁三醇、N-甲基還原葡糖胺及類似者)配位時所形成之鹽。
「醫藥組成物」係指本文所述之化合物或其生理上/醫藥上可接受之鹽、溶劑合物、水合物或前藥中之一或多者與其他的化學組分(諸如生理上/醫藥上可接受之載劑及賦形劑)之混合物。醫藥組成物的目的係使化合物容易投予有機體。
如本文所使用之「生理上/醫藥上可接受之載劑」係指不對有機體造成顯著的刺激且不消除所投予之化合物的生物活性及性質之載劑或稀釋劑。
「治療有效量」係指所投予之化合物使欲治療之疾患的症狀中之一或多者緩解至某種程度的量。關於癌的治療，治療有效量係指具有下列效應中之至少一者的量：縮減腫瘤大小、抑制(亦即減緩至某種程度，較佳地停止)腫瘤轉移、抑制(亦即減緩至某種程度，較佳地停止)腫瘤生長至某種程度及緩解一或多種與癌相關聯的一或多種症狀至某種程度(或者較佳地消除)。
「治療(Treat)」、「治療(treating)」及「治療
(treatment)」係指減輕或消除經甲基轉移酶介導之細胞疾患及/或其伴隨的症狀之方法。特別關於癌，該等術語純粹地意指增加罹患癌之個體的預期壽命或減少疾病的症狀中之一或多者。
詳細說明
用於合成本發明化合物之通用流程可見於本文之實施例段落中。
除非另有其他指示，否則本文所有述及之本發明化合物包括述及之其鹽、溶劑合物、水合物及複合物，以及其鹽之溶劑合物、水合物及複合物，包括其多晶形物、立體異構物及經同位素標記之型式。
醫藥上可接受之鹽包括酸加成鹽及鹼鹽(包括二鹽)。適合的酸加成鹽係自形成無毒性鹽之酸形成。實例包括乙酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、硼酸鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、乙二磺酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡萄糖酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、六氟磷酸鹽、海苯酸鹽(hibenzate)、鹽酸鹽/氯化物、氫溴酸鹽/溴化物、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙磺酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、萘甲酸鹽、2-萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、乳清酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽(pamoate)、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、蔗糖酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽和三氟乙酸鹽。
適合的鹼鹽係自形成無毒性鹽之鹼形成。實例包括鋁、精胺酸、苄星(benzathine)、鈣、膽鹼、二乙胺、二乙醇胺、甘胺酸、離胺酸、鎂、甲葡胺(meglumine)、乙醇胺(olamine)、鉀、鈉、胺基丁三醇和鋅鹽。關於適合的鹽之評論，參見“Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use” by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002)，將其揭示內容藉引用全文而併入本文。
本發明化合物的醫藥上可接受之鹽可藉由令化合物溶液在適當的情況下與所欲酸或鹼混合在一起而輕易地製得。鹽可自溶液沈澱且以過濾收集或可藉由蒸發溶劑而回收。在鹽中的離子化程度可自完全離子化至幾乎未離子化不等。
本發明化合物可以非溶劑化及溶劑化形式二者存在。術語「溶劑合物」在本文用於描述包含本發明化合物及一或多種醫藥上可接受之溶劑分子(例如乙醇)的分子複合物。當溶劑為水時，則使用術語「水合物」。依照本發明的醫藥上可接受之溶劑合物包括其中結晶溶劑可經同位素取代(例如D2 O、d6 -丙酮、d6 -DMSO)之水合物及溶劑合物。
複合物亦包括在本發明之範圍內，諸如晶籠化合物、藥物-主體包合複合物，其中藥物及主體係以化學計量或非學計量之量存在，與前述溶劑合物相反。亦包括含有二或更多種可以化學計量或非化學計量之量存在的有機及/或無機組分之藥物的複合物。可將所得複合物離子化、部分離子化或非離子化。關於此等複合物之評論，參見J Pharm Sci, 64 (8), 1269-1288 by Haleblian (August 1975)，將其揭示內容藉引用全文而併入本文。
本發明化合物之多晶形物、前藥及異構物(包括光學、幾何和互變異構物)亦在本發明之範圍內。
本發明化合物之衍生物本身可具有少許或不具有藥理學活性，但當投予患者時可轉化成本發明化合物，例如藉由水解性裂解。此等衍生物被稱為「前藥」。關於使用前藥的進一步資訊可見於‘Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14, ACS Symposium Series (T Higuchi and W Stella)及‘Bioreversible Carriers in Drug Design’, Pergamon Press, 1987 (E B Roche編輯，美國醫藥學會)，將彼等揭示內容藉引用彼等全文而併入本文。
依照本發明之前藥可例如藉由令存在於本發明化合物中之適當的官能基以那些熟習此項技術領域者已知為「前部分」的特定部分置換而產生，如例如在H Bundgaard之"Design of Prodrugs" (Elsevier，1985)中所述，將其揭示內容藉引用全文而併入本文。
依照本發明之前藥的一些實例包括：(i)在化合物含有羧酸官能基-(COOH)、其酯的情況下，例如令氫以(C1 -C8 )烷基置換；(ii)在化合物含有醇官能基(-OH)、其醚的情況下，例如令氫以(C1 -C6 )烷醯氧基甲基置換；及(iii)在化合物含有一級或二級胺基官能基(-NH2 或-NHR，其中R≠H)、其醯胺的情況下，例如令一或二個氫以(C1 -C10 )烷醯基置換。依照前述實例及其他前藥類型的實例之置換基團的更多實例可見於前述參考資料中。
最後，特定的本發明化合物本身可充當為其他的本發明化合物之前藥。
含有一或多個不對稱碳原子的本發明化合物可以二或更多種立體異構物存在。在根據本發明之化合物具有至少一個手性中心的情況下，彼等可因此以鏡像異構物存在。在化合物具有二或更多個手性中心的情況下，彼等可另外以非鏡像異構物存在。同樣地，在本發明化合物含有環丙基或其中有手性存在的其他環狀基團、及烯基或伸烯基的情況下，幾何順/反(或Z/E)異構物是可能的。在化合物含有例如酮基或肟基或芳族部分的情況下，可出現互變異構物的異構現象(「互變異構現象」)。單一化合物可展現一種類型以上的異構現象。
本發明化合物(包括展現一種類型以上的異構現象之化合物)的所有立體異構物、幾何異構物和互變異構物形式及一或多種彼等之混合物包括在本發明之範圍內。亦包括其中相對離子為光學活性之酸加成鹽或鹼鹽(例如D-乳酸鹽或L-離胺酸)，或消旋物(例如DL-酒石酸鹽或DL-精胺酸)。
順/反異構物可藉由那些熟習此項技術領域者熟知的慣用技術分離，例如層析術及分段結晶法。
用於製備/分離個別鏡像異構物的慣用技術包括自適合的光學純前驅物之手性合成或使用例如手性高壓液相層析術(HPLC)或超臨界流體層析術(SFC)解析消旋物(或鹽或衍生物之消旋物)。
另一選擇地，消旋物(或消旋物前驅物)可與適合的光學活性化合物反應，例如與醇反應，或在其中化合物含有酸性或鹼性部分的例子中，與酸或鹼(諸如酒石酸或1-苯基乙胺)反應。所得非鏡像異構物混合物可藉由層析術及/或分段結晶法分離，及非鏡像異構物中之一或多者係藉由熟習此項技術領域者熟知的方式法轉化成相應的純鏡像異構物。
立體異構物晶團可藉由那些熟習此項技術領域者已知的慣用技術分離；參見例如E L Eliel (Wiley，New York，1994)之“Stereochemistry of Organic Compounds”，將其揭示內容藉引用全文而併入本文。
本發明亦包括經同位素標記之本發明化合物，其中一或多個原子經具有相同的原子數但原子質量或質量數不同於自然界經常發現的原子質量或質量數之原子置換。適合於包括在本發明化合物中之同位素的實例包括下列者的同位素：氫，諸如2 H和3 H，碳，諸如11 C、13 C和14 C，氯，諸如36 Cl，氟，諸如18 F，碘，諸如123 I和125 I，氮，諸如13 N和15 N，氧，諸如15 O、17 O和18 O，磷，諸如32 P，及硫，諸如35 S。特定的經同位素標記之本發明化合物(例如那些併入放射活性同位素者)可用於藥物及/或受質組織分布研究。放射活性同位素氚(3 H)及碳-14(14 C)係鑒於彼等容易併入及現成的檢測方式而特別有用於此目的。以較重的同位素(諸如氘，2 H)取代可起因於更大的代謝穩定性(例如增加的活體內半生期)或降低的劑量需求而供給特定的治療優勢，且因此在一些狀況下可能較佳。以正子發射同位素(諸如11 C、18 F、15 O和13 N)取代可用於正子放射斷層攝影(PET)研究以檢查受質受體佔有率。
經同位素標記之本發明化合物通常可藉由那些熟習此項技術領域者已知的慣用技術或藉由類似於那些本文所述之方法使用適當的經同位素標記之試劑代替另外使用的未標記之試劑而製得。
依照本發明之醫藥上可接受之溶劑合物包括那些其中結晶溶劑可經同位素取代者，例如D2 O、d6 -丙酮、d6 -DMSO。
意欲於醫藥應用的本發明化合物可以晶形或非晶形產物或彼之混合物投予。彼等可藉由諸如沈澱、結晶、冷凍乾燥、噴霧乾燥或蒸發乾燥之方法而以例如實心塞、粉末或薄膜獲得。可出於此目的而使用微波或射頻乾燥。
化合物可單獨或與本發明之一或多種其他化合物組合投予。彼等通常係以與一或多種醫藥上可接受之賦形劑締合之調配物投予。本文所用之術語「賦形劑」描述除了本發明化合物以外的任何成分。賦形劑的選擇在很大程度上取決於諸如特定的投予模式、賦形劑對溶解度和穩定性的效應及劑型的本性等因素而定。
適合於遞送本發明化合物之醫藥組成物及彼等之製備方法為那些熟習此項技術領域者輕易地明白。此等組成物及彼等之製備方法可見於例如第19版‘Remington’s Pharmaceutical Sciences’(Mack Publishing Company, 1995)，將其揭示內容藉引用全文而併入本文。
經口投予：本發明化合物可經口投予。經口投予可包含吞嚥，使得化合物進入胃腸道，或可使用頰內或舌下投予，藉此使化合物自口部直接進入血流中。
適合於經口投予之調配物包括固體調配物(諸如錠劑)、膠囊(含有微粒、液體或粉末)、菱形錠(包括經液體填充者)、咀嚼錠、多-和奈米-微粒、凝膠、固溶體、脂質體、薄膜(包括黏膜黏著劑)、卵狀小體、噴霧及液體調配物。
液體調配物包括懸浮液、溶液、糖漿和酏劑。此等調配物可用於作為軟或硬膠囊中的填料且通常包括載劑，例如水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甲基纖維素或適合的油，及一或多種乳化劑及/或懸浮劑。液體調配物亦可藉由重組例如來自小藥囊中的固體而製得。
本發明化合物亦可用於快速溶解、快速崩解劑型中，諸如那些於Liang and Chen (2001)之Expert Opinion in Therapeutic Patents, 11 (6), 981-986中所述者，將其揭示內容藉引用全文而併入本文。
關於錠劑劑型，藥物可取決於劑量而構成劑型的1重量%至80重量%，更典型為劑型的5重量%至60重量%。除了藥物之外，錠劑通常含有崩解劑。崩解劑的實例包括澱粉乙醇酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈣、交聯羧甲基纖維素鈉(croscarmellose sodium)、交聯聚維酮(crospovidone)、聚乙烯吡咯啶酮、甲基纖維素、微晶纖維素、經低碳烷基取代之羥丙基纖維素、澱粉、預糊化澱粉和海藻酸鈉。崩解劑通常構成劑型的1重量%至25重量%，較佳為5重量%至20重量%。
結合劑通常用以賦予錠劑調配物之內聚特性。適合的結合劑包括微晶纖維素、明膠、糖、聚乙二醇、天然和合成膠、聚乙烯吡咯啶酮、預糊化澱粉、羥丙基纖維素及羥丙基甲基纖維素。錠劑亦可含有稀釋劑，諸如乳糖(單一水合物、經噴霧乾燥之單一水合物、無水物及類似者)、甘露醇、木糖醇、右旋糖、蔗糖、山梨醇、微晶纖維素、澱粉和磷酸氫鈣二水合物。
錠劑亦可隨意地包括表面活化劑(諸如月桂基硫酸鈉和聚山梨醇酯80)及助流劑(諸如二氧化矽和滑石)。當存在時，表面活性劑的量通常為錠劑的0.2重量%至5重量%，及助流劑的量通常為錠劑的0.2重量%至1重量%。
錠劑通常亦含有潤滑劑，諸如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅、硬脂基富馬酸鈉和硬脂酸鎂與月桂基硫酸鈉之混合物。潤滑劑通常係以劑型的0.25重量%至10重量%的量存在，較佳為0.5重量%至3重量%。
其他慣用的成分包括抗氧化劑、著色劑、調味劑、保存劑及遮味劑。
例示性錠劑含有至多約80重量%之藥物、約10重量%至約90重量%之結合劑、約0重量%至約85重量%之稀釋劑、約2重量%至約10重量%之崩解劑及約0.25重量%至約10重量%之潤滑劑。
錠劑摻合物可直接或以滾筒壓縮以形成錠劑。錠劑摻合物或摻合物的一部分可另一選擇地在製錠前經濕式-、乾式-或熔融-造粒、熔融凍凝或擠壓。最後的調配物可包括一或多層且可經包膜或未經包膜；或膠囊化。
錠劑調配物詳細地討論於H. Lieberman and L. Lachman於“Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol. 1”，Marcel Dekker, N.Y., N.Y., 1980 (ISBN 0-8247-6918-X)中，將其揭示內容藉引用全文而併入本文。
用於經口投予之固體調配物可能調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾釋放型調配物包括延遲、持續、脈衝、控制、靶向及程控化釋放。
適合的修飾釋放型調配物描述於美國專利第6,106,864號中。其他適合的釋放技術之詳情(諸如高能量分散液、及滲透和包膜粒子)可見於Verma等人之Pharmaceutical Technology On-line, 25(2), 1-14(2001)。利用咀嚼膠達成控制釋放描述於WO 00/35298中。將該等參考資料的揭示內容藉引用彼之全文而併入本文。
非經腸投予
本發明化合物亦可直接投予血流中、肌肉中或內部器官中。適合於非經腸投予的方式包括靜脈內、動脈內、腹膜內、椎管內、腦室內、尿道內、胸骨內、顱內、肌肉內和皮下。適合於非經腸投予之器材包括針(包括微型針)注射器、無針注射器和輸注技術。
非經腸調配物通常為水性溶液，其可含有賦形劑，諸如鹽、醣和緩衝劑(較佳為3至9之pH)，但在一些應用而言，彼等可能更適合調配成無菌非水性溶液或與適合的媒劑(諸如無菌的無熱源水)結合使用的乾燥形式。
在無菌條件下藉由例如冷凍乾燥製備非經腸調配物可使用那些熟習此項技術領域者熟知的標準醫藥技術輕易地完成。
在製備非經腸溶液所使用之本發明化合物的溶解度可藉使用適當的調配技術而增加，諸如併入溶解度增強劑。用於非經腸投予之調配物可能調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾釋放型調配物包括延遲、持續、脈衝、控制、靶向及程控化釋放。因此，本發明化合物可能調配成以植入式儲積物投予之固體、半固體或觸變性液體，以提供修飾釋放之活性化合物。此等調配物的實例包括塗藥支架和PGLA微球體。
局部投予
本發明化合物亦可能經局部投予皮膚或黏膜，亦即經皮膚或透皮投予。出於此目的之典型的調配物包括凝膠、水凝膠、洗劑、溶液、乳膏、軟膏、撒布劑、敷料、發泡體、薄膜、皮膚貼片、粉片、植入物、藥棉、纖維、繃帶和微乳液。亦可能使用脂質體。典型的載劑包括酒精、水、礦油、液態礦脂、白凡士林、甘油、聚乙二醇和丙二醇。可併入穿滲透增強劑；參見例如Finnin and Morgan 之J Pharm Sci, 88 (10), 955-958 (1999年10月)。其他的局部投予方式包括以電穿孔法、電離子透入法、超聲波透入法、超聲波導入法和微型針或無針注射(例如Powderject™、Bioject™等)遞送。將該等參考資料的揭示內容藉引用彼之全文而併入本文。
用於局部投予之調配物可能調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾釋放型調配物包括延遲、持續、脈衝、控制、靶向及程控化釋放。
吸入/鼻內投予
本發明化合物亦可經鼻內或吸入投予，通常呈來自乾粉吸入器的乾粉形式(單獨、成為混合物，例如與乳糖的乾摻合物，或成為混合型組分粒子，例如與磷脂(諸如磷脂醯膽鹼)混合)，或呈來自使用或未使用適合的推噴劑(諸如1,1,1,2-四氟乙烷或1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷)之加壓容器、泵、噴霧器、霧化器(較佳為使用電流體動力學產生細霧的霧化器)或氣霧器的煙霧噴霧形式。用於鼻內的粉末可包含生物黏著劑，例如聚葡萄胺糖或環糊精。
加壓容器、泵、噴霧器、霧化器或氣霧器含有本發明化合物之溶液或懸浮液，其包含例如乙醇、水性乙醇或適合於分散、溶解或延長釋放活性物的替代劑、作為溶劑之推進劑及隨意的界面活性劑，諸如山梨醇酐三油酸酯、油酸或寡乳酸。
在以乾燥粉末或懸浮液調配物使用前，先將藥產物微粉化成適合於吸入遞送之大小(通常為小於5微米)。這可藉由形成奈米粒子之任何適當的粉碎方法(諸如螺旋噴射研磨、流化床噴射研磨、超臨界流體處理)、高壓均質化或噴霧乾燥而達成。
在吸入器或吹藥器中使用的膠囊(例如自明膠或HPMC製成)、泡殼及藥筒可能經調配以含有本發明化合物、適合的粉末基底(諸如乳糖或澱粉)與性能修飾劑(諸如l-白胺酸、甘露醇或硬脂酸鎂)之粉末混合物。乳糖可為無水物或呈單一水合物形式，以後者較佳。其他適合的賦形劑包括右旋糖、葡萄糖、麥芽糖、山梨醇、木糖醇、果糖、蔗糖和繭糖。
適合於使用電流體力學以產生細霧之霧化器中的溶液調配物可以每一引動含有1微克至20毫克本發明化合物且引動體積可自1微升至100微升不等。典型的調配物包括本發明化合物、丙二醇、無菌水、乙醇和氯化鈉。可用於代替丙二醇的可替代溶劑包括甘油和聚乙二醇。
適合的調味劑(諸如薄荷醇和左旋薄荷醇)或甜味劑(諸如糖精或糖精鈉)可添加至意欲吸入/鼻內投予的那些本發明之調配物中。
用於吸入/鼻內投予之調配物可使用例如聚(DL-乳酸-共-乙醇酸)(PGLA)調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾釋放調配物包括延遲、持續、脈衝、控制、靶向及程控化釋放。
在乾粉吸入器及煙霧劑的例子中，劑量單位係藉助於遞送經計量之量的閥測定。通常安排依照本發明的單位以投予含有所欲量之本發明化合物的經計量之劑量或「噴氣(puff)」。每日總劑量可能以單一劑量或更常以分次劑量供全天投予。
直腸/***內投予
本發明化合物可經直腸或***投予，例如呈栓劑、子宮托或灌腸劑形式。可可脂為傳統的栓劑基底，但可在適當時使用各種替代物。用於直腸/***投予之調配物可能調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾型調配物包括延遲、持續、脈衝、控制、靶向及程控化釋放。
眼部投予
本發明化合物亦可能直接投予眼或耳，通常呈經pH調整之等張性無菌食鹽水中的微粉化懸浮液或溶液的滴劑形式。適合於眼及耳投予之其他調配物包括軟膏、生物可降解性(例如可吸收性凝膠海綿、膠原)和生物不可降解性(例如聚矽氧)植入物、粉片、鏡片及微粒狀或多孔狀系統，諸如類脂囊泡(niosome)或脂質體。可令聚合物(諸如經交聯之聚丙烯酸、聚乙烯醇、玻尿酸、纖維素聚合物(例如羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素或甲基纖維素)或雜多糖聚合物(例如結蘭膠(gelan gum)))與保存劑(諸如氯化烷基二甲基苯甲銨(benzalkonium chloride))合併在一起。此等調配物亦可以電離子透入法遞送。
用於眼/耳投予之調配物可能調配成立即釋放及/或修飾釋放。修飾型調配物包括延遲、持續、脈衝、控制、靶向或程控化釋放。
其他技術
本發明化合物可能與可溶性大分子實體(諸如環糊精和其適合的衍生物)或含聚乙二醇之聚合物組合，以改進彼等的溶解度、溶解速率、遮味、生物利用率及/或穩定性供前述投予模式中任一者使用。
藥物-環糊精複合物例如經發現通常可用於大多數的劑型及投予途徑。可使用包合及非包合複合物二者。作為與藥物直接複合之替代物的環糊精亦可用於作為輔助添加劑，亦即作為載劑、稀釋劑或增溶劑。出於該等目的而最常使用α-、β-和γ-環糊精，其實例可見於PCT發表案號WO 91/11172、WO 94/02518和WO 98/55148中，將彼等揭示內容藉引用彼等全文而併入本文。
劑量
所投予之活性化合物的量係取決於欲治療之個體、疾患或症狀的嚴重性、投予速率、化合物的配置及處方醫師的判斷而定。然而，呈單一或分次劑量的有效劑量通常在每天每公斤體重約0.001至約100毫克之範圍內，較佳為約0.01至約35毫克/公斤/天。對70公斤人類而言，這可總計約0.07至約7000毫克/天，較佳為約0.7毫克至約2500毫克/天。在一些事例中，低於前述範圍下限的劑量值可能更適當，而在其他的例子中可能仍使用不引起任何有害副作用的更大劑量，且此等更大劑量通常分成一些較小的劑量供全天投予。
套組配件
鑒於可能希望投予活性化合物之組合，例如出於治療特定疾病或症狀的目的，在本發明之範圍內可令二或更多種醫藥組成物(其中至少一者含有依照本發明之化合物)合宜地組合成適合於共同投予組成物之套組形式。因此，本發明之套組包括二或更多種個別的醫藥組成物(其中至少一者含有本發明化合物)及個別容納該等組成物之器材，諸如容器、分次瓶或分次箔包。此種套組的實例為用於包裝錠劑、膠囊及類似者之常見的泡殼包裝。
本發明之套組特別適合投予不同的劑型(例如經口和非經腸)、在不同的劑量間隔投予個別的組成物或相互滴定個別的組成物。為了協助遵守醫囑，套組通常包括投予指示且可具備有記憶輔助工具。
在本文可使用下列的縮寫：Ac(乙醯基)；AcCl(乙醯氯)；AcOH或HOAc(乙酸)；Ac2 O(乙酸酐)；aq.(水性)；Boc或boc(三級丁氧基羰基)；BOP(六氟磷酸(苯并***-1-氧基)參(二甲基胺基)鏻)；B2 pin2 (雙(頻哪醇)二硼)；ca.(約或大約)；CDCl3 (氘化氯仿)；CH2 Cl2 及/或DCM(二氯甲烷)；DABCO(1,4-二氮雜雙環[2,2,2]辛烷)；DAST(二乙基胺基三氟化硫)；DBU(1,8-二氮雜雙環[5,4,0]十一-7-烯)；DCE(二氯乙烷)；DEA(二乙胺)；DIBAL或DIBAL-H(二異丁基氫化鋁)；DIC(二異丙基碳化二醯亞胺)；DIPEA或亨尼格氏(Hunig’s)鹼(N,N-二異丙基乙胺)；DHP(二氫吡喃)；DMA(二甲基乙醯胺)；DMF(二甲基甲醯胺)；DME(乙二醇)；DMP(戴斯-馬丁高碘酸鹽(Dess-Martin Periodinane))；DMAP(4-二甲基胺基吡啶)；DMSO(二甲亞碸)；DMSO-d6 (氘化二甲亞碸)；EDC或EDCI(1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)-碳化二醯亞胺)；Et(乙基)；Et3 N或TEA(三乙胺)；EtOH(乙醇)；EtOAc(乙酸乙酯)；Et2 O(二***)；g或gm(克(gram)或克(grams))；HATU(2-(7-氮雜-1H-苯并***-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽)；HBTU(鄰-(苯并***-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽)；HFIP(1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇)；HMPT(參(二甲基胺基)膦)；HPLC(高性能液相層析術)；HOBT(1-羥基苯并***)；h或hr(視情況為小時(hour)或小時(hours))；iBu(異丁基)；IPA(異丙醇)；iPr(異丙基)；iPrOAc(乙酸異丙酯)；KHMDS(雙(三甲基矽基)胺化鉀)；KOAc(乙酸鉀)；LCMS(液相層析術-質譜術)；LDA(二異丙基胺化鋰)；LiHMDS(雙(三甲基矽基)胺化鋰)；mCPBA(偏-氯過氧苯甲酸)；Me(甲基)；MeOH(甲醇)；MeOD(氘化甲醇)；MeCN(乙睛)；m或min(視情況為分鐘(minute)或分鐘(minutes))；mg(毫克(milligram)或毫克(milligrams))；Ms(甲基磺醯基)；MsCl(甲烷磺醯氯)；N(正)；NBS(N-溴琥珀醯亞胺)；NCS(N-氯琥珀醯亞胺)；NFSI(N-氟二苯磺醯亞胺)；NMR(核磁共振)；nBu(正丁基)；nBuLi(正丁基鋰)；nPr(正丙基)；Pd/C(鈀/碳)；Pd2 (dba)3 (參(二亞苯甲基丙酮)二鈀(0))；Pd(dppf)Cl2 ([1,1′-雙(二苯膦基)二茂鐵]二氯鈀(II))；Pd[P(o-tol)3 ]2 (雙[參(2-甲基苯基)膦]鈀)；Ph(苯基)；PTSA或pTSA(對-甲苯磺酸)；PPTS：(吡啶對-甲苯磺酸鹽)；Rt(滯留時間)；rt(室溫)；RuCl(對-異丙基甲苯)[(R,R)-Ts-DPEN]([N-[(1R,2R)-2-(胺基-κN)-1,2-二苯基乙基]-4-甲基苯磺醯胺基-κN]氯[(1,2,3,4,5,6-η)-1-甲基-4-(1-甲基乙基)苯]-釕)；s或sec(視情況為秒(second)或秒(seconds))；Selectfluor(N-氯甲基-N′-氟三伸乙基二銨雙(四氟硼酸鹽))；SEM(2-三甲基矽基乙氧基甲氧基)；SFC(超臨界流體層析術)；Si-Thiol(二氧化矽1-丙硫醇)；SK-CCO2-A(氯化2-(二甲基胺基甲基)二茂鐵-1-基-鈀(II)二降莰基膦)；T3P(丙基膦酸酐)；TBAF(四丁基氟化銨)；TBDMSCl(三級丁基二甲基矽基氯)；TBME或MTBE(三級丁基甲醚)；t-BuOH(2-甲基-2-丙醇、三級丁醇(tert -butanol)或三級丁醇(tert -butyl alcohol))；tBu-Xphos(2-二-三級丁膦基-2’,4’,6’-三異丙基聯苯)；TDA-1(Tris[2-(2-甲氧基乙氧基)乙基]胺或參(3,6-二氧雜庚基)胺)；TEA、NEt3 或Et3 N(三乙胺)；TFA(三氟乙酸)；THF(四氫呋喃)；THP(四氫吡喃)；TLC(薄層層析術)；TMS(三甲基矽基)；TMSCl(三甲基矽基氯)；TMSCF3 (三甲基(三氟甲基)矽烷)；Tos或tosyl(4-甲苯磺醯基)；TOSMIC(對-甲苯磺醯基甲基異氰化物)；UV(紫外線)。
實施例
本文所有的反應及本文所使用之新穎起始材料的製備皆為慣用的，且適合於彼等性能及製備的試劑和反應條件以及適合於分離所欲產物的程序為那些熟習此項技術領域者以參考文獻先例及其實施例和製備法而熟知。
所述的一些步驟可能需要保護不想要反應的潛在反應性官能基，且於後續裂解該保護基。在此例子中，可能使用任何可相容的保護基。特別地可使用保護及去保護方法，諸如那些以T.W. Greene (Protective Groups in Organic Synthesis, A. Wiley-Interscience Publication, 1981)或P. J. Kocienski (Protecting groups , Georg Thieme Verlag, 1994)所述者。
通用的合成流程
如流程I中所例示，化合物(諸如I)可經購買或合成取得(J. Org. Chem. 2012, 77, 9422-9425)且可為非手性、消旋性或鏡像純化合物。化合物(諸如I)可與經適當地取代之硼酸或BPin酯(II)以適當的鹼(諸如LiOMe之K3 PO4 、KOSiMe3 )在添加或未添加H2 O的溶劑中(諸如1,4-二㗁烷)進行銠催化之共軛加成反應以得到化合物(諸如III)。化合物(諸如III)可以適當的鹼及羰基化試劑在適當的溶劑中(諸如在THF中的NaH及碳酸二乙酯、在THF中的LDA及氰基甲酸甲酯或在甲苯中的LHDMS及氰基甲酸甲酯)羰基化以提供化合物(諸如IV)。化合物(諸如IV)可以烷氧化物鹼與甲脒縮合以提供化合物(諸如V)，通常在醇系溶劑中。化合物(諸如V)可與親核胺種類偶合以提供化合物(諸如VI)。此偶合通常係在使用BOP試劑及DBU的一個步驟中或在藉由以POCl3 處理V，繼而添加親核胺種類的兩個步驟中進行。化合物(諸如VI)可藉由以酸處理而去保護，通常以TFA於DCM中或以HCl於MeOH中處理以提供化合物(諸如VII)。化合物(諸如VII)可醯化以提供化合物(諸如VIII)，通常藉由以丙烯醯氯於DCM中及以TEA作為鹼處理、以EtOAc/H2 O及以NaHCO3 作為鹼處理或以HFIP及以NaHCO3 作為鹼處理。在一些例子中，種類R可含有保護基，其可以合成順序中的額外步驟移除。R、R’、A及B係如本文下述之實施態樣、流程、實施例及申請專利範圍中所定義。每一步驟的化合物可以標準的技術純化，諸如管柱層析術、結晶及反相HPLC或SFC。若必要時，VIII之鏡像異構物的分離可在此項技術中已知的標準方法下進行，諸如手性SFC或HPLC，以供給單一鏡像異構物。
如流程II中所例示，令化合物(諸如IV)(根據流程I所製備)與N,N-二烷基胍縮合以提供化合物(諸如IX)。該等反應通常係在醇系溶劑中以適當的烷氧化物鹼進行。化合物(諸如IX)可與親核胺種類偶合以提供化合物(諸如X)。此偶合通常係在使用BOP試劑及DBU的一個步驟中或在藉由以POCl3 處理IX，繼而添加親核胺種類的兩個步驟中進行。化合物(諸如X)可在酸性條件下去保護，通常以TFA於DCM中或以HCl於MeOH中以提供化合物(諸如XI)。化合物(諸如XI)可醯化以提供化合物(諸如XII)，通常藉由以丙烯醯氯於DCM中及以TEA作為鹼處理、以EtOAc/H2 O及以NaHCO3 作為鹼處理或以HFIP及以NaHCO3 作為鹼處理。R、R’、R’’、R’’’、A及B係如本文下述之實施態樣、流程、實施例及申請專利範圍中所定義。每一步驟的化合物可以標準的技術純化，諸如管柱層析術、結晶及反相HPLC或SFC。若必要時，XII之鏡像異構物的分離可在此項技術中已知的標準方法下進行，諸如手性SFC或HPLC，以供給單一鏡像異構物。
如流程III中所例示，令化合物(諸如IV)與尿素縮合以提供化合物(諸如XIII)。令化合物(諸如XIII)氯化，通常以POCl3 以提供化合物(諸如XIV)，接著與親核胺種類在鹼性條件下偶合以提供化合物(諸如XV)。通常在溫和的催化酸存在下以DHP保護化合物(諸如XV)以提供化合物(諸如XVI)。令化合物(諸如XVI)與醇在鹼性條件下偶合以提供化合物(諸如XVII)。令化合物(諸如XVII)在酸性條件下去保護，通常以TFA於DCM中或以HCl於MeOH中以提供化合物(諸如XVIII)。化合物(諸如XVIII)可醯化以提供化合物(諸如XIX)，通常藉由以丙烯醯氯於DCM中及以TEA作為鹼處理、以EtOAc/H2 O及以NaHCO3 處理或以HFIP及以NaHCO3 作為鹼處理。R、R’、R’’’’係如本文下述之實施態樣、流程、實施例及申請專利範圍中所定義。每一步驟的化合物可以標準的技術純化，諸如管柱層析術、結晶及反相HPLC或SFC。若必要時，XIX之鏡像異構物的分離可在此項技術中已知的標準方法下進行，諸如手性SFC或HPLC，以供給單一鏡像異構物。
如流程IV中所例示，化合物(諸如XX)接受酵素性氧化反應以提供化合物(諸如XXI)。
如流程V中所例示，令化合物(諸如XXII)與適當的芳基硼酸或芳基BPin酯在標準的Pd催化之鈴木(Suzuki)偶合條件下偶合以提供化合物(諸如XXIII)。令化合物(諸如XXIII)氫化，通常在H2 的存在下於極性溶劑中(諸如MeOH)使用催化性Pd/C或Pt/C以提供化合物(諸如XXIV)。令化合物(諸如XXIV)在酸性條件下去保護，通常以TFA於DCM中或以HCl於MeOH中以提供化合物(諸如XXV)。化合物(諸如XXV)可醯化以提供化合物(諸如XXVI)，通常藉由以丙烯醯氯於DCM中及以TEA作為鹼處理、以EtOAc/H2 O及以NaHCO3 作為鹼處理或以HFIP及以NaHCO3 作為鹼處理。Z係如本文下述之實施態樣、流程、實施例及申請專利範圍中所定義，且可能含有保護基，其可於合成順序中的後續步驟移除。每一步驟的化合物可以標準的技術純化，諸如管柱層析術、結晶及反相HPLC或SFC。若必要時，XXVI之鏡像異構物的分離可在此項技術中已知的標準方法下進行，諸如手性SFC或HPLC，以供給單一鏡像異構物。
如流程VII中所例示，化合物(諸如XXVII)接受酵素性氧化反應以提供化合物(諸如XXVIII)。
合成中間物之製備
[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]硼酸(Int-1)之製備，如流程1中所示。
步驟1：4-溴-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(1b)之合成
此反應係以兩個並行的批組進行。令PPTS(11.9克，47.4毫莫耳，0.1當量)在28℃下添加至DCM(1公升)中的4-溴-5-甲基-1H-吲唑(100克，474毫莫耳，1.0當量)之攪拌溶液中。接著添加一份DHP(119.6克，1.4莫耳，3.0當量)。令混合物在30℃下攪拌18小時。TLC分析(20%之EtOAc/石油醚)顯示起始材料已完全消耗。令兩個批組合併在一起進行整理。令反應以H2 O(1.5公升)淬滅且令層分離。令水層以DCM(1公升)萃取。令合併的有機物以H2 O(1公升)及食鹽水(1公升)清洗，經Na2 SO4 乾燥且濃縮至乾燥。令殘餘物以石油醚(300毫升)濕磨，以提供成為灰白色固體的4-溴-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(1b)(223克，80%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.00 (s, 1H), 7.68 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.84 (dd, J = 9.6, 2.5 Hz, 1H), 3.87 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.73 (ddd, J = 11.5, 7.7, 6.0 Hz, 1H), 2.45 (s, 3H), 2.43-2.31 (m, 1H), 2.09-1.90 (m, 2H), 1.83-1.66 (m, 1H), 1.57 (dt, J = 9.3, 3.9 Hz, 2H)。LCMS (ESI) m/z 295, 297 (M+H)。
步驟2：[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]硼酸(Int-1)之合成
反應係以兩個並行的批組進行。令THF(2.0公升)中的4-溴-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(210.0克，711.44毫莫耳，1.0當量)及B(O-iPr)3 (267.61克，1.42莫耳，2.0當量)之攪拌溶液冷卻至-70℃。接著令n-BuLi(526.5毫升，1.32莫耳，1.85當量)經3小時期間逐滴添加至上述溶液中，維持反應溫度介於-70℃與-65℃之間。在加完後，令反應混合物在-70℃下攪拌1小時。TLC分析(20%之EtOAc/石油醚)顯示起始材料已消耗。令混合物以飽和水性NH4 Cl溶液(2.0公升)淬滅且以MTBE(2.0公升)稀釋。令層分離且令水層以MTBE(1.0公升)萃取。令合併的有機物以食鹽水(1.5公升)清洗，經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且在25℃下濃縮。令殘餘物溶解在MTBE(300毫升)中。令石油醚(1.2公升)在20℃(室溫)下逐滴添加至溶液中。在石油醚添加期間沉澱出白色固體。令所得懸浮液過濾且令濾餅以石油醚(800毫升)清洗。令濾餅在真空下乾燥以提供成為白色固體的[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]硼酸(Int-1)(280.0克，76%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.29 (s, 2H), 7.89 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.77 (dd, J = 9.7, 2.6 Hz, 1H), 3.91-3.83 (m, 1H), 3.72 (ddd, J = 11.5, 7.8, 6.2 Hz, 1H), 2.45 (s, 3H), 2.39 (ddd, J = 16.2, 8.4, 3.8 Hz, 1H), 2.10-1.97 (m, 1H), 1.91 (dq, J = 13.0, 3.4 Hz, 1H), 1.80-1.67 (m, 1H), 1.57 (dq, J = 9.0, 4.6 Hz, 2H)。LCMS (ESI) m/z 261 (M+H)。
5-氯-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-醇(Int-2)之製備，如流程2中所示。
步驟1：4-溴-5-氯-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(2b)之合成
令DHP(518毫克，6.16毫莫耳，1.5當量)及PPTS(103毫克，0.410毫莫耳，0.1當量)添加至THF(50毫升)中的4-溴-5-氯-1H-吲唑(2a)(950毫克，4.10毫莫耳，1.0當量)之溶液中。令混合物在50℃下攪拌20小時。添加另一批組的DHP(173毫克，2.05毫莫耳，0.5當量)且令所得混合物在50℃下攪拌16小時。LCMS分析表明起始材料已消耗，以提供成為兩種區域異構物的混合物之產物。在減壓下移除溶劑。令粗製產物以快速層析術純化(SiO2 ，20克，10%之EtOAc/石油醚)，以提供成為白色固體的4-溴-5-氯-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(2b)(850毫克，66%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.11 (s, 1H), 7.84 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.93-5.88 (m, 1H), 3.87 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 3.77-3.72 (m, 1H), 2.37-2.32 (m, 1H), 2.01 (t, J = 14.0 Hz, 2H), 1.73 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 1.58 (t, J = 6.4 Hz, 2H)。LCMS (ESI) m/z 315, 317 (M + H)。
步驟2：[5-氯-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]硼酸(Int-2)之合成
令n-BuLi(2.4M於己烷中，4.5毫升，10.8毫莫耳，1.5當量)在-70℃下添加至THF(20毫升)中的4-溴-5-氯-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(2b)(2.27克，7.193毫莫耳1.0當量)之混合物中。令混合物在此溫度下攪拌20分鐘。在-70℃下添加硼酸三甲酯(2.24克，22毫莫耳，3.0當量)。令混合物在此溫度下攪拌20分鐘。LCMS分析顯示形成所欲化合物。令反應以飽和水性NH4 Cl淬滅且接著以EtOAc(2×30毫升)萃取。令合併的有機物以食鹽水清洗，經無水Na2 SO4 乾燥，濃縮且以快速層析術純化(SiO2 ，0→50%之EtOAc/PE)，以提供成為白色固體的[5-氯-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]硼酸(Int-2)(1.42克，70%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.59 (s, 2H), 7.94 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 8.9, 0.9 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.84 (dd, J = 9.6, 2.6 Hz, 1H), 3.94-3.82 (m, 1H), 3.73 (ddd, J = 11.5, 7.9, 5.8 Hz, 1H), 2.45-2.28 (m, 1H), 2.08-1.97 (m, 1H), 1.94 (dq, J = 13.1, 3.6 Hz, 1H), 1.82-1.65 (m, 1H), 1.58 (tt, J = 8.6, 3.7 Hz, 2H)。LCMS (ESI) m/z 281 (M + H)。
5-氯-6-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-1H-吲唑(Int-3)之製備，如流程3中所示。
步驟1：1-溴-2-氯-5-氟-3-甲基苯(3b)之合成
令2-溴-4-氟-6-甲基苯胺(3a)(5克，24.5毫莫耳，1.0當量)添加至濃縮HCl(30毫升)及H2 O(30毫升)之溶液中且令所得混合物在60至70℃下攪拌1小時。令混合物冷卻至0至5℃，添加在H2 O(10毫升)中的NaNO2 (2.03克，29.4毫莫耳，1.2當量)之溶液且令反應攪拌15分鐘。令混合物添加至濃縮HCl(50毫升)中的CuCl(3.64克，36.8毫莫耳，1.5當量)之溶液中且在70至80℃下攪拌30分鐘。令粗製反應混合物冷卻至室溫且以DCM(3×100毫升)萃取。令合併的有機物經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮以提供成為棕色油的1-溴-2-氯-5-氟-3-甲基苯(3b)(4.5克，80%之產率)，其無需接受進一步的純化。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.23 (dd, J = 7.8, 2.9 Hz, 1H), 6.97 - 6.91 (m, 1H), 2.43 (s, 3H)。
步驟2：2-溴-3-氯-6-氟-4-甲基苯甲醛(3c)之合成
令LDA(2.0M於THF中，35毫升，1.2當量)在-78℃下添加至THF(100毫升)中的1-溴-2-氯-5-氟-3-甲基苯(3b)(13克，58毫莫耳，1.0當量)之溶液中。令混合物攪拌40分鐘且接著添加DMF(6.5毫升)。令反應在-78℃下攪拌1小時。令反應混合物倒入H2 O(50毫升)中且以EtOAc(3×40毫升)萃取。令合併的有機物經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮至乾燥。令粗製殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，0→15%之EtOAc/PE)，以提供成為淺黃色固體的2-溴-3-氯-6-氟-4-甲基苯甲醛(3c)(8.34克，57%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 10.29 (s, 1H), 7.09 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 2.51 (s, 3H)。
步驟3：5-溴-4-甲氧基-1H-吲唑(3d)之合成
令NH2 NH2 (516毫克，10.3毫莫耳，12當量)添加至DMSO(5毫升)中的2-溴-3-氯-6-氟-4-甲基苯甲醛(3c)(220毫克，0.875毫莫耳，1.0當量)之混合物中。令混合物在130℃下攪拌3小時。令反應混合物倒入H2 O(35毫升)中且以DCM(3×30毫升)萃取。令合併的有機物經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮至乾燥。令粗製殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，0→20%之EtOAc/PE)，以提供成為白色粉末的4-溴-5-氯-6-甲基-1H-吲唑(3d)(108毫克，50%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.02 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 2.56 (d, J = 0.6 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 245, 247 (M + H)。
步驟4：4-溴-5-氯-6-甲基-1H-吲唑(3e)之合成
4-溴-5-氯-6-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(3e)(2.4克，59%之產率)係根據用於製備4-溴-5-甲基-1-(四氫2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(1b)之程序製備，除了反應在THF中於50℃下進行以外。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.94 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 5.66 (dd, J = 9.0, 2.6 Hz, 1H), 3.99 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 3.80-3.64 (m, 1H), 2.56 (s, 3H), 2.54-2.46 (m, 1H), 2.15 (dd, J = 8.1, 4.4 Hz, 1H), 2.11-2.03 (m, 1H), 1.79-1.64 (m, 3H)。LCMS (ESI) m/z 329, 331 (M + H)。
步驟5：5-氯-6-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-1H-吲唑(Int-3)之合成
令1,4-二㗁烷(25毫升)中的4-溴-5-氯-6-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(3e)(3克，9.1毫莫耳，1.0當量)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-雙(1,3,2-二氧硼雜環戊烷)(4.62克，18.2毫莫耳，2.0當量)、KOAc(2.68克，27.3毫莫耳，3.0當量)與Pd(dppf)Cl2 (0.666克，0.910毫莫耳，0.1當量)之混合物在80℃下攪拌16小時。LCMS分析顯示起始材料已完全消耗。令反應冷卻至25℃且濃縮至乾燥。令殘餘物以H2 O(30毫升)稀釋且以EtOAc(3×30毫升)萃取。令合併的有機物以食鹽水(50毫升)清洗，經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮至乾燥。令粗製殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，0→20%之EtOAc/PE)，以提供成為淺黃色膠的5-氯-6-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-1H-吲唑(Int-3)(2.2克，得到63.7%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.06 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 6.08-5.29 (m, 1H), 3.92-3.82 (m, 1H), 3.80-3.66 (m, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.43-2.33(m, 1H), 2.08-2.00 (m, 1H), 1.97-1.88 (m, 1H), 1.80-1.67 (m, 1H), 1.63-1.53 (s, 2H), 1.38 (s, 12H)；LCMS (ESI) m/z 377 (M + H)。
根據流程4製備4-(7-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)-5,6-二氫喹唑啉-4-基)哌-1-羧酸三級丁酯(Int-4)。
步驟1：4-乙氧基-2-側氧基環己-3-烯-1-羧酸乙酯(4b)之合成
令LHMDS(1.0M於THF中，713毫升，713毫莫耳，2.0當量)在-78℃下快速地逐滴添加至THF(600毫升)中的3-乙氧基環己-2-烯-1-酮(4a)(50克，356.7毫莫耳，1.0當量)及碳酸二乙酯(84.3克，713毫莫耳，2.0當量)之溶液中。令混合物溫熱至20℃且攪拌16小時。添加額外的LHMDS(250毫升，250毫莫耳，1.0M)且令混合物在20℃下攪拌4小時。令混合物倒入1N HCl(1公升)中且攪拌1小時。令混合物以EtOAc(3×500毫升)萃取。令合併的有機物以食鹽水(400毫升)清洗且經無水Na2 SO4 乾燥。在過濾及濃縮後，令殘餘物以石油醚/EtOAc(10/1)清洗，以提供成為黃色固體的4-乙氧基-2-側氧基環己-3-烯-1-羧酸乙酯(4b)(57克，75%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 )δ 5.38 (s, 1H), 4.21 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.91 (qd, J = 7.1, 2.2 Hz, 2H), 3.31 (dd, J = 8.9, 5.0 Hz, 1H), 2.56 (dt, J = 17.0, 5.4 Hz, 1H), 2.51-2.25 (m, 2H), 2.25-2.06 (m, 1H), 1.36 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.28 (t, J = 7.1 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 213 (M + H)。
步驟2：7-側氧基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-羧酸酯(4c)之合成
令70%之水性乙酸(1.5公升)中的4-乙氧基-2-側氧基環己-3-烯-1-羧酸乙酯(4b)(220克，1.03莫耳，1.0當量)之溶液在60℃下攪拌16小時。令混合物濃縮至乾燥。令所得殘餘物自苯(3x)共沸蒸餾而乾燥以提供粗製二酮。令乙二醇(70克，1.13毫莫耳，1.1當量)及對-甲苯磺酸單水合物(19.57克，1.03毫莫耳，1.0當量)添加至苯(800毫升)中的二酮之溶液中。令燒瓶以迪安-斯塔克分水器(Dean-Stark trap)封蓋且令混合物加熱至回流2小時。在冷卻至室溫後，令溶液以飽和水性NaHCO3 製成鹼性。令產物以EtOAc(3×2公升)萃取。令合併的有機物以食鹽水清洗，經Na2 SO4 乾燥且蒸發至乾燥。令粗製殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，2%之EtOAc/己烷)，以提供成為黃色油的7-側氧基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-羧酸乙酯(4c)(48克，21%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 4.19 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.97-3.82 (m, 5H), 2.49-2.42 (m, 2H), 2.27 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 1.69 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 1.23 (t, J = 7.1 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 229 (M + H)。
步驟3：5',8'-二氫-3'H-螺[1,3-二氧雜環戊烷-2,7'-喹唑啉]-4'(6'H)-酮(4d)之合成
令MeOH(500毫升)中的7-側氧基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-羧酸乙酯(4c)(48克，210.5毫莫耳，1.0當量)、甲脒乙酸鹽(43.78克，421毫莫耳，2.0當量)與NaOMe(22.7克，421毫莫耳，2.0當量)之混合物回流4小時。令反應混合物濃縮至乾燥且令殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，DCM/MeOH=20/1)，以給出成為黃色固體的5',8'-二氫-3'H-螺[1,3-二氧雜環戊烷-2,7'-喹唑啉]-4'(6'H)-酮(4d)(29克，66%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.99 (s, 1H), 4.01-3.89 (m, 4H), 2.70 (s, 2H), 2.47 (dd, J = 13.8, 7.3 Hz, 2H), 1.78 (t, J = 6.6 Hz, 2H)。LCMS (ESI) m/z 209 (M + H)。
步驟4：4-(5',8'-二氫-6'H-螺[1,3-二氧雜環戊烷-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌-1-羧酸三級丁酯(4e)之合成
令DBU(63.56克，418.2毫莫耳，3.0當量)添加至DMF(300毫升)中的5',8'-二氫-3'H-螺[1,3-二氧雜環戊烷-2,7'-喹唑啉]-4'(6'H)-酮(4d)(29克，139.4毫莫耳，1.0當量)、哌-1-羧酸三級丁酯(38.9克，209.1毫莫耳，1.5當量)與BOP試劑(123.2克，278.8毫莫耳，2.0當量)之混合物中，且令混合物在20℃下攪拌16小時。添加EtOAc(500毫升)且令混合物以H2 O(3×300毫升)清洗。令有機相經無水Na2 SO4 乾燥。在過濾及濃縮後，令殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，石油醚/EtOAc=2/3)，以提供成為黃色油的4-(5',8'-二氫-6'H-螺[1,3-二氧雜環戊烷-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌-1-羧酸三級丁酯(4e)(25克，47.5%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.48 (s, 1H), 3.97 (td, J = 6.4, 1.9 Hz, 4H), 3.46-3.42 (m, 4H), 3.32-3.27 (m, 4H), 2.92-2.89 (m, 2H), 2.68 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 1.81 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 1.42 (s, 9H)。LCMS (ESI) m/z 377 (M + H)。
步驟5：4-(哌-1-基)-5,6-二氫喹唑啉-7-醇(4f)之合成
令HCl(4.0N於1,4-二㗁烷中，60毫升，240毫莫耳，3.6當量)添加至THF(300毫升)中的4-(5',8'-二氫-6'H-螺[1,3-二氧雜環戊烷-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌-1-羧酸三級丁酯(4e)(25克，66.31毫莫耳，1.0當量)之溶液中，且令混合物在50℃下攪拌16小時。LCMS分析顯示起始材料已消耗。令混合物濃縮至乾燥以提供4-(哌-1-基)-5,6-二氫喹唑啉-7-醇(4f)，其無需接受進一步的純化。LCMS(ESI)m/z233(M+H)。
步驟6：4-(7-側氧基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基)哌-1-羧酸三級丁酯(4g)之合成
令THF(300毫升)、H2 O(60毫升)及EtOAc(100毫升)中的粗製4-(哌-1-基)-5,6-二氫喹唑啉-7-醇鹽酸鹽(4f)之溶液調整至pH=7，且添加(Boc)2 O(15.18克，69.62毫莫耳，1.05當量)。接著添加K2 CO3 (9.15克，66.31毫莫耳)且令混合物在20℃下攪拌30分鐘。令混合物以EtOAc(2×400毫升)萃取。令合併的有機物以食鹽水(400毫升)清洗且經無水Na2 SO4 乾燥。在過濾及濃縮後，令殘餘物以EtOAc/石油醚(1/40)濕磨，以提供成為黃色固體的4-(7-側氧基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基)哌-1-羧酸三級丁酯(4g)(16克，73%之產率，兩個步驟)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.62 (s, 1H), 3.68 (s, 2H), 3.57 (dd, J = 6.2, 3.9 Hz, 4H), 3.44-3.32 (m, 4H), 2.92 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.65-2.52 (m, 2H), 1.49 (s, 9H)。LCMS (ESI) m/z 333 (M + H)。
步驟7：4-(7-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)-5,6-二氫喹唑啉-4-基)哌-1-羧酸三級丁酯(Int-4)之合成
令4-(7-側氧基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基)哌-1-羧酸三級丁酯(4g)(1.0克，3.008毫莫耳，1.0當量)及THF(10毫升)添加至配備有磁攪拌棒的50毫升燒瓶中。令混合物冷卻至-78℃。添加LHMDS(1.0M於THF中，3.01毫升，3.01毫莫耳，1.0當量)。在10分鐘後，添加PhNTf2 (1.02克，2.86毫莫耳，0.95當量)。令混合物在-78℃下攪拌2小時且接著溫熱至室溫隔夜。LCMS分析表明形成所欲產物且起始材料已完全消耗。令混合物以1M水性NaHCO3 (10毫升)淬滅且以EtOAc(3×30毫升)萃取。令合併的有機物以水及食鹽水清洗且接著經無水MgSO4 乾燥。令混合物過濾且濃縮至乾燥以提供殘餘物，令其以快速層析術純化(SiO2 ，0→60%之EtOAc/庚烷)，以提供成為淺黃色固體的4-(7-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)-5,6-二氫喹唑啉-4-基)哌-1-羧酸三級丁酯(Int-4)(1.4克，100%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.66 - 8.59 (m, 1H), 6.62 - 6.42 (m, 1H), 3.62 - 3.49 (m, 4H), 3.38 - 3.22 (m, 4H), 3.00 - 2.87 (m, 2H), 2.78 - 2.65 (m, 2H), 1.49 (s, 9H)。LCMS (ESI) m/z 465 (M + H)。
根據流程5製備6-氯-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-1H-吲唑(Int-5)
步驟1：4-氯-2-氟-5-甲基苯胺(5b)之合成
令12M HCl(10.1毫升，121毫莫耳)添加至EtOH/H2 O(200毫升，1:1)中的1-氯-5-氟-2-甲基-4-硝苯(5a)(23.0克，121毫莫耳)之溶液中。令混合物加熱至80℃且經30分鐘期間緩慢地添加Fe(23.7克，425毫莫耳)。令混合物在相同的溫度下攪拌1小時。LCMS分析表明起始材料已消耗且形成所欲產物。令混合物冷卻至25℃，以乙酸乙酯(300毫升)稀釋且以飽和水性NaHCO3 鹼化至pH=8~9。令層過濾分離且令水層以乙酸乙酯(2×300毫升)萃取。令合併的有機物以食鹽水清洗，經Na2 SO4 乾燥，過濾且在減壓下濃縮，以提供成為黃色固體的4-氯-2-氟-5-甲基苯胺(5b)(18.0克，93%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.08 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 5.20 (s, 2H), 2.15 (s, 3H)。LCMS (ESI) m/z 160, 162 (M + H)。
步驟2：2-溴-4-氯-6-氟-3-甲基苯胺(5c)之合成
令NBS(20.9克，117毫莫耳)在0℃下緩慢地添加至DMF(150毫升)中的4-氯-2-氟-5-甲基苯胺(5b)(18.7克，117毫莫耳)之溶液中。接著令混合物溫熱至最高25℃且攪拌1小時。LCMS分析表明起始材料已消耗且形成所欲產物。令混合物以飽和水性NaHCO3 淬滅且以乙酸乙酯(2×200毫升)萃取。令合併的有機層以水及食鹽水清洗，經Na2 SO4 乾燥，過濾且在減壓下濃縮。令殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，120克，石油醚/乙酸乙酯=98:2)，以提供成為黃色固體的2-溴-4-氯-6-氟-3-甲基苯胺(5c)(22.1克，79%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.30 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 5.45 (s, 2H), 2.36 (d, J = 1.0 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 238, 240 (M + H)。
步驟3：3-溴-1-氯-5-氟-4-碘-2-甲基苯(5d)之合成
令2-溴-4-氯-6-氟-3-甲基苯胺(5c)(22.1克，93毫莫耳)添加至H2 O(250毫升)中的濃縮H2 SO4 (62毫升)之溶液中。令混合物在25℃下攪拌10分鐘且冷卻至5℃。逐滴添加在H2 O(20毫升)中的NaNO2 (7.1克，102毫莫耳)。令所得混合物在5℃下攪拌20分鐘且添加至H2 O(50毫升)中的KI(62克，370毫莫耳)之溶液中，令其在5℃下攪拌20分鐘且接著溫熱至25℃經18小時。TLC分析(石油醚)表明起始材料已消耗。令混合物以水(150毫升)淬滅且以乙酸乙酯(2×500毫升)萃取。令合併的有機層以飽和水性Na2 SO3 及食鹽水清洗，經Na2 SO4 乾燥，過濾且在減壓下濃縮。令殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，120克，石油醚)，以提供成為淺黃色固體的3-溴-1-氯-5-氟-4-碘-2-甲基苯(5d)(18克，56%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.60 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 2.56 (d, J = 1.1 Hz, 3H)。
步驟4：2-溴-4-氯-6-氟-3-甲基苯甲醛(5e)之合成
令n-BuLi(2.5M於己烷中，20毫升，50毫莫耳)在-100℃下逐滴添加至THF(100毫升)中的3-溴-1-氯-5-氟-4-碘-2-甲基苯(5d)(17.5克，50.1毫莫耳)之溶液中。令混合物在相同的溫度下攪拌30分鐘。添加無水DMF(4.0克，55毫莫耳)且令混合物在-100℃下攪拌20分鐘。TLC(石油醚)表明幾乎所有的起始材料已消耗且形成所欲產物。令粗製反應混合物以1N HCl淬滅。令水添加至混合物中且令水層以乙酸乙酯(2×150毫升)萃取。令合併的有機層以H2 O清洗，經Na2 SO4 乾燥，過濾且在減壓下濃縮。令粗製產物以快速層析術純化(SiO2 ，120克，石油醚/乙酸乙酯=97:3)，以提供成為黃色固體的2-溴-4-氯-6-氟-3-甲基苯甲醛(5e)(8.6克，68%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.18 (s, 1H), 7.75 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 2.52 - 2.50 (m, 3H)。LCMS (ESI) m/z 251, 253 (M + H)。
步驟5：4-溴-6-氯-5-甲基-1H-吲唑(5f)之合成
4-溴-6-氯-5-甲基-1H-吲唑(5f)(6.7克，80%之產率)係根據用於製備5-溴-4-甲氧基-1H-吲唑(3d)之程序製備，除了反應係在90℃下進行21小時以外。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.43 (s, 1H), 8.00 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 2.53 (s, 3H)。LCMS (ESI) m/z 245, 247 (M + H)。
步驟6：4-溴-6-氯-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(5g)之合成
4-溴-6-氯-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(5g)(5.7克，73%之產率)係根據用於製備4-溴-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(1b)之程序製備，除了反應係在THF中於80℃下進行以外。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.05 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 5.88 (dd, J = 9.6, 2.4 Hz, 1H), 3.86 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 3.80 - 3.73 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.38 - 2.31 (m, 1H), 2.05 - 1.94 (m, 2H), 1.71 (dd, J = 9.1, 3.3 Hz, 1H), 1.57 (dt, J = 9.1, 4.6 Hz, 2H)。LCMS (ESI) m/z 329, 331 (M + H)。
步驟7：6-氯-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-1H-吲唑(Int-5)之合成
令1,4-二㗁烷(100毫升)中的4-溴-6-氯-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(7克，20毫莫耳)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-雙(1,3,2-二氧硼雜環戊烷)(5.93克，23.4毫莫耳)、KOAc(6.25克，63.7毫莫耳)與Pd(dppf)Cl2 (0.777克，1.06毫莫耳)之混合物在N2 下加熱至85℃經16小時。LCMS分析顯示大部分的起始材料已消耗。令混合物冷卻至25℃且過濾。令過濾物濃縮。令殘餘物以H2 O(80毫升)稀釋且以EtOAc(3×50毫升)萃取。令合併的有機物以食鹽水(50毫升)清洗，經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮。令粗製材料以快速層析術純化(SiO2 ，0至10%之EtOAc/石油醚)，以供給成為白色固體的6-氯-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-1H-吲唑(Int-5)(7.4克，90%之產率，65%之純度)，其受到6-氯-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑污染。1 H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.19 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 9.6, 2.5 Hz, 1H), 3.90-3.82 (m, 1H), 3.80-3.68 (m, 1H), 2.59 (s, 3H), 2.44-2.26 (m, 1H), 2.10-1.98 (m, 1H), 1.97-1.86 (m, 1H), 1.79-1.66 (m, 1H), 1.64-1.50 (m, 2H), 1.38 (s, 12H)。LCMS (ESI) m/z 377, 379 (M + H)。
實施例之製備：
實施例A1(流程A)：1-{4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮
實施例A2(流程A)：1-{4-[(7R)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮
實施例A3(流程A)：1-{4-[(7S)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮
步驟1：3-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]環己酮(A-1)之合成
令[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]硼酸(Int-1)(650毫克，2.5毫莫耳，1.0當量)、[RhCl(COD)]2
(61.6毫克，0.125毫莫耳，0.05當量)及NaHCO3 (620毫克，5.0毫莫耳，2.0當量)添加至配備有磁攪拌棒的25毫升燒瓶中。令燒瓶以氮氣沖洗且接著添加水(12.5毫升)及環己烯酮(721毫克，7.5毫莫耳，3.0當量)。令混合物在80℃下攪拌隔夜。LCMS分析表明硼酸已消耗。令反應冷卻至室溫。令混合物倒入分液漏斗中且以EtOAc(2×25毫升)萃取。令合併的有機物經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。以快速層析術純化(Biotage，25克SiO2 , 25%之EtOAc/庚烷)提供成為透明油的3-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]環己酮(A-1)(1:1之非鏡像異構物混合物，680毫克，87%之產率)，其在靜置時固化成灰白色固體。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.18 (s, 1H), 7.39 (dd, J = 8.5, 3.2 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.71 (dt, J = 9.5, 2.5 Hz, 1H), 4.05 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 3.84-3.69 (m, 1H), 3.54 (tt, J = 13.1, 3.9 Hz, 1H), 3.01 (t, J = 13.9 Hz, 1H), 2.68-2.48 (m, 4H), 2.43 (s, 3H), 2.41-2.35 (m, 1H), 2.34-2.22 (m, 1H), 2.19 (s, 1H), 2.12-1.92 (m, 2H), 1.94-1.75 (m, 3H), 1.69 (d, J = 3.1 Hz, 1H)。LCMS (ESI) m/z 313 (M + H)。
步驟2：3-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]環己酮(A-2)之合成
令3-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]環己酮(A-1)(677毫克，2.2毫莫耳，1.0當量)、碳酸二乙酯(3毫升)及THF(6毫升)添加至配備有磁攪拌棒的50毫升燒瓶中。添加一份氰化鈉(60%之分散液於礦油中，217毫克，5.4毫莫耳，2.5當量)。燒瓶配備有回流冷凝器且接著令混合物加熱至70℃。在1小時後，以LCMS檢查反應，其表明起始材料已消耗且形成為非鏡像異構物之複合混合物的產物。令反應倒入分液漏斗中，以EtOAc稀釋且以飽和水性NH4 Cl清洗。令水層以EtOAc萃取。令合併的有機物以食鹽水清洗，經無水MgSO4 乾燥，過濾且濃縮。令粗製殘餘物以快速層析術純化(Biotage，25克SiO2 ，10→25%之EtOAc/庚烷)，以提供成為黃色油的3-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]環己酮(A-2)(680毫克，82%之產率)，其無需接受進一步的純化。LCMS(ESI)m/z 385(M+H)。
步驟3：7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(A-3)之合成
令4-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-側氧基環己烷羧酸乙酯(A-2)(384毫克，1.0毫莫耳，1.0當量)及甲脒乙酸鹽(521毫克，5.0毫莫耳，5.0當量)添加至配備有磁攪拌棒的2打蘭(dram)小瓶中。添加甲醇鈉(0.5M於MeOH中，20毫升，10.0毫莫耳，10當量)且令混合物加熱至回流隔夜。令反應冷卻至室溫且濃縮至乾燥。令殘餘物溶解在EtOAc中且以飽和水性NH4 Cl清洗。令水層以EtOAc萃取。令合併的有機物經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。令殘餘物以快速層析術純化(Biotage，10克SiO2 ，100%之EtOAc→15%之EtOH/EtOAc)，以提供成為白色固體的7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(A-3)(1:1之非鏡像異構物混合物，364毫克，48%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.06 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.39 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.70 (dd, J = 9.4, 2.7 Hz, 1H), 4.04 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.74 (td, J = 11.1, 2.8 Hz, 1H), 3.52 (tdd, J = 12.4, 5.2, 2.9 Hz, 1H), 3.24 (dd, J = 17.3, 11.7 Hz, 1H), 2.98 (dd, J = 17.3, 5.0 Hz, 1H), 2.88 (dd, J = 18.4, 4.6 Hz, 1H), 2.67-2.52 (m, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.39-2.23 (m, 1H), 2.20-2.02 (m, 3H), 1.81-1.61 (m, 3H)。LCMS (ESI) m/z 365 (M + H)。
步驟4：4-{7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(A-4)之合成
令7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(A-3)(364毫克，1.0毫莫耳，1.0當量)、DMF(2.5毫升)、DBU(304毫克，2.0毫莫耳，2.0當量)、BOP試劑(464毫克，1.05毫莫耳，1.05當量)及哌-1-羧酸三級丁酯(233毫克，1.25毫莫耳，1.25當量)添加至配備有磁攪拌棒的10毫升燒瓶中。令混合物加熱至65℃隔夜。LCMS分析表明轉化成為1:1之非鏡像異構物混合物的所欲產物。令反應冷卻至室溫且添加水。形成白色固體，以過濾收集。令濾餅以水清洗且在真空下乾燥。令所得固體溶解在EtOAc(30毫升)中且以0.1N HCl(2×20毫升)及食鹽水清洗。令有機溶液經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。以快速層析術純化(Biotage，25克SiO2 ，60→100%之EtOAc/庚烷)提供成為灰白色固體的4-{7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(1:1之非鏡像異構物混合物，327毫克，61%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.55 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.32 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.62 (ddd, J = 9.5, 4.2, 2.8 Hz, 1H), 4.00-3.88 (m, 1H), 3.73-3.62 (m, 1H), 3.56 (t, J = 3.5 Hz, 3H), 3.43 (d, J = 9.9 Hz, 4H), 3.30-3.16 (m, 3H), 3.08 (dd, J = 18.8, 6.3 Hz, 1H), 2.81-2.61 (m, 3H), 2.56-2.43 (m, 1H), 2.40 (s, 3H), 2.24-1.99 (m, 4H), 1.75-1.63 (m, 2H), 1.42 (s, 9H)。LCMS (ESI) m/z 533 (M + H)。
步驟5：7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(A-5)之合成
令4-{7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(A-4)(325毫克，0.61毫莫耳，1.0當量)、MeOH(6.1毫升)及HCl(4.0N於1,4-二㗁烷中，3.1毫升，12.2毫莫耳，20當量)添加至配備有磁攪拌棒的25毫升燒瓶中。令反應攪拌隔夜。LCMS分析表明形成完全去保護之產物。令反應濃縮至乾燥以提供成為棕色油的7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(A-5)(214毫克，100%之產率)，其無需進步純化而前進至下一步驟。LCMS(ESI)m/z349(M+H)。
步驟6：1-{4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例A1)之合成
令7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(A-5)(34.8毫克，0.1毫莫耳，1.0當量)、DCM(4毫升)、TEA(101毫克，1.0毫莫耳，10當量)及丙烯醯氯(13.6毫克，0.15毫莫耳，1.5當量)添加至配備有磁攪拌棒的25毫升燒瓶中。在2小時後，以LCMS檢查反應，其顯示轉化成所欲產物。令反應濃縮至乾燥且以快速層析術純化(Biotage，10克SiO2 ，20%之EtOH/EtOAc)，以提供成為白色固體的1-{4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(14.7毫克，37%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.58 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.29 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.53 (dd, J = 16.7, 10.6 Hz, 1H), 6.27 (dd, J = 16.8, 1.7 Hz, 1H), 5.74 (dd, J = 10.6, 1.7 Hz, 1H), 4.11-3.63 (m, 9H), 3.25-3.15 (m, 2H), 3.01-2.83 (m, 1H), 2.84-2.70 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.32-2.06 (m, 2H)。LCMS (ESI) m/z 403 (M + H)。
步驟7：1-{4-[(7R)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例A2)及1-{4-[(7S)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例A3)之合成
令7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(214毫克，0.614毫莫耳，0.614當量)、DCM(10毫升)、TEA(621毫克，6.14毫莫耳，10當量)及丙烯醯氯(83.3毫克，0.92毫莫耳，1.5當量)添加至配備有磁攪拌棒的25毫升燒瓶中。在1小時後，令反應濃縮至乾燥。令殘餘物在Chrialpak AD-3管柱上(4.6毫米×100毫米，3微米粒徑)以手性SFC純化，令管柱以40%之IPA溶析，在25℃及120巴下固定於CO2 中。以4.0毫升/分鐘之流速給出Rt( 峰 1) =1.62分鐘及Rt( 峰 2) =1.62分鐘。1-{4-[(7R)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例A2)(峰1)：36毫克，＞99% ee，15%之產率。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 12.94 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.30 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.85 (dd, J = 16.7, 10.4 Hz, 1H), 6.15 (dd, J = 16.7, 2.4 Hz, 1H), 5.72 (dd, J = 10.4, 2.4 Hz, 1H), 3.85-3.70 (m, 2H), 3.69-3.57 (m, 3H), 3.55-3.48 (m, 2H), 3.30-3.23 (m, 2H), 3.20-3.07 (m, 1H), 3.05-2.88 (m, 2H), 2.70 (d, J = 16.7 Hz, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.36-2.20 (m, 1H), 2.00 (d, J = 12.4 Hz, 1H)； [α]d 22 = -44.0° (C=0.1, CHCl3 )；LCMS (ESI) m/z 403 (M + H)。1-{4-[(7S)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例A3)(峰2)：34.3毫克，~98% ee，14%之產率。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 12.94 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.30 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.85 (dd, J = 16.7, 10.5 Hz, 1H), 6.15 (dd, J = 16.7, 2.4 Hz, 1H), 5.72 (dd, J = 10.5, 2.4 Hz, 1H), 3.86-3.69 (m, 2H), 3.70-3.57 (m, 3H), 3.57-3.44 (m, 2H), 3.30-3.22 (m, 2H), 3.15 (dd, J = 18.3, 11.5 Hz, 1H), 3.04-2.87 (m, 2H), 2.70 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.35-2.19 (m, 1H), 2.00 (d, J = 12.3 Hz, 1H)； [α]d 22 = +53.3(C=0.2, CHCl3 )；LCMS (ESI) m/z 403 (M + H)。
在表A中的實施例係使用類似於流程A的化學法及用於製備1-{4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例A1)及[(6R,7R)-rel-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-6-基]甲醇(A-7)之程序製備。下列的實施例係以非關鍵性改變或取代用於製備實施例A1之例示性程序而達成，其能由熟習此項技術領域者實現。
在下列製備中詳述之中間物A-6係根據方法A供給實施例A7。然而，此實施例係由於需要去保護步驟而落在前述實施例的合成範圍之外，且為了完整性起見，在下文包括此化學法。供給最終實施例的後續化學法類似於方法A實施例，以熟習此項技術領域者可理解的最少添加或改變。
[(6R,7R)-rel-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-6-基]甲醇(A-7)之合成
令4-{(6R,7R)-rel-6-[(苯甲氧基)甲基]-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(A-6)(340毫克，0.52毫莫耳，1.0當量)、MeOH(5.2毫升)及HCl(4.0 N於1,4-二㗁烷中，0.26毫升，1.0毫莫耳，2.0當量)添加至10毫升不銹鋼反應容器中。添加Pd/C(10%裝載量，70毫克)且令容器以H2 加壓至8巴及加熱至50℃隔夜。LCMS分析顯示完全的去苯甲基化連同THP及Boc基團的部分去保護。令粗製反應物通過薄矽藻土墊過濾。令混合物在旋轉蒸發器上濃縮且接著溶解在MeOH(6毫升)中。添加額外的HCl(4.0 N於1,4-二㗁烷中，1.3毫升，5.2毫莫耳，10當量)以誘導完全去保護。令混合物攪拌隔夜。令混合物濃縮至乾燥以提供成為灰白色固體的[(6R,7R)-rel-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-6-基]甲醇(A-7)(195毫克，99%之產率)，其無需接受進一步的純化。LCMS(ESI)m/z 379(M+H)。
實施例B1(流程B)：1-{6-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]-2,6-二氮雜螺[3.3]庚-2-基}丙-2-烯-1-酮係以文庫格式製備
步驟1：4-氯-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(B-1)之合成
令7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(A-4)(300毫克，0.825毫莫耳，1.0當量)、POCl3 (5毫升)及甲苯(5毫升)添加至40毫升小瓶中。添加DIPEA(320毫克，2.475毫莫耳，3.0當量)。令小瓶封蓋且在110℃下振盪16小時。在減壓下移除溶劑以提供4-氯-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(B-1)，其無需純化而直接用於下一步驟中。
步驟2：6-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]-2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸三級丁酯(B-2)之合成
令2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸三級丁酯溶液(90微莫耳，1.2當量)添加至8毫升小瓶中。令TEA(225微莫耳，3.0當量)添加至小瓶中，繼而添加在NMP(0.9毫升)中的4-氯-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(B-1)(75微莫耳，1.0當量)之溶液。令小瓶封蓋且在130℃下振盪16小時。LCMS分析顯示完全反應。在真空中移除溶劑且令所得殘餘物以製備性TLC純化，以提供6-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]-2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸三級丁酯(B-2)。
步驟3：4-(2,6-二氮雜螺[3.3]庚-2-基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(B-3)之合成
令6-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]-2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸三級丁酯(B-2)及HCl(4.0M於MeOH中，750微升)添加至8毫升小瓶中。令小瓶封蓋且在30℃下振盪2小時。LCMS分析顯示完全反應。在真空下移除溶劑以提供4-(2,6-二氮雜螺[3.3]庚-2-基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(B-3)，其無需接受進一步的純化。
步驟4：1-{6-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]-2,6-二氮雜螺[3.3]庚-2-基}丙-2-烯-1-酮(實施例B1)之合成
令飽和水性NaHCO3 (500微升)、THF(500微升)及丙烯醯氯溶液(0.15M於THF中，500微升，75微莫耳，1.0當量)添加至含有4-(2,6-二氮雜螺[3.3]庚-2-基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(B-3)之小瓶中。令小瓶封蓋且在30℃下振盪2小時。LCMS分析顯示轉化成產物。令混合物以EtOAc(3×1.5毫升)萃取。令合併的有機物經無水MgSO4 乾燥，過濾且濃縮。令殘餘物以製備性HPLC純化(Agela Durashell C18，150×25毫米，5微米，乙睛及水(0.22%之甲酸)的0至35%梯度，30毫升/分鐘)，以提供1-{6-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]-2,6-二氮雜螺[3.3]庚-2-基}丙-2-烯-1-酮(實施例B1)。LCMS(ESI)m/z 414(M+H)。
在表B中的實施例係使用類似於流程B的化學法及用於製備1-{6-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]-2,6-二氮雜螺[3.3]庚-2-基}丙-2-烯-1-酮(實施例B1)之程序的文庫格式製得。下列的實施例係以非關鍵性改變或取代用於製備實施例B1之例示性程序而達成，其能由熟習此項技術領域者實現。
實施例C1(流程C)：4-{2-氯-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯
步驟1：4-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-側氧基環己烷羧酸乙酯(C-1)之合成
令尿素(3.59克，59.8毫莫耳，2.0當量)及NaOMe(3.23克，59.8毫莫耳，2.0當量)添加至MeOH(400毫升)中的4-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-側氧基環己烷羧酸乙酯(A-2)(11.5克，29.9毫莫耳，1.0當量)之溶液中。令反應在80℃下攪拌16小時。LCMS分析顯示形成所欲產物。令混合物濃縮至乾燥且令粗製殘餘物以管柱層析術純化(SiO2 ，10%之MeOH/DCM)，以提供4-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-側氧基環己烷羧酸乙酯(C-1)(2.3克，20%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.95 (s, 1H), 10.69 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.49 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.79 (dd, J = 9.8, 2.5 Hz, 1H), 3.87 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 3.79-3.65 (m, 1H), 3.45-3.36 (m, 1H), 2.94-2.77 (m, 1H), 2.57-2.47 (m, 1H), 2.46-2.34 (m, 5H), 2.31-2.15 (m, 2H), 2.09-1.97 (m, 1H), 1.93 (dd, J = 13.3, 3.2 Hz, 1H), 1.84 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 1.79-1.65 (m, 1H), 1.62-1.50 (m, 2H)。LCMS (ESI) m/z 381 (M + H)。
步驟2：2,4-二氯-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(C-2)之合成
令POCl3 (30毫升)中的4-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-側氧基環己烷羧酸乙酯(C-1)(2.3克，6.0毫莫耳)之溶液在105℃下攪拌2小時。LCMS分析顯示起始材料已完全消耗。令混合物濃縮至乾燥。令殘餘物以DCM(30毫升)稀釋且添加TEA以調整pH至8。令溶劑蒸發。令粗製殘餘物以管柱層析術純化(SiO2 ，33%之EtOAc/PE)，以提供2,4-二氯-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(C-2)(1克，50%之產率)。LCMS(ESI)m/z333(M+H)。
步驟3：4-[2-氯-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-羧酸三級丁酯(C-3)之合成
令哌-1-羧酸三級丁酯(671毫克，3.6毫莫耳，1.2當量)及DIPEA(776毫克，6毫莫耳，2.0當量)添加至DMF(30毫升)中的2,4-二氯-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(C-2)(1克，3毫莫耳，1.0當量)之溶液中。令反應在80℃下攪拌2小時。LCMS分析顯示轉化成所欲產物。令反應混合物冷卻至室溫且倒入分液漏斗中。添加水(50毫升)且令混合物以EtOAc(2×30毫升)萃取。令合併的有機物以食鹽水清洗，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮至乾燥。令粗製物以管柱層析術純化(SiO2 ，25%之EtOAc/PE)，以提供4-[2-氯-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-羧酸三級丁酯C-3)(1克，70%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.04 (s, 1H), 7.32 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 3.72-3.43 (m, 8H), 3.44-3.35 (m, 2H), 3.30 (dd, J = 19.2, 11.5 Hz, 1H), 3.14 (dd, J = 19.1, 6.4 Hz, 1H), 2.79-2.66 (m, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.32-2.02 (m, 2H), 1.49 (s, 9H)。LCMS (ESI) m/z 483 (M + H)。
步驟4：4-{2-氯-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(C-4)之合成
令3,4-二氫-2H-吡喃(272毫克，3.23毫莫耳，3.0當量)及吡啶4-甲苯磺酸鹽(27.1毫克，0.108毫莫耳，0.1當量)添加至0℃下在DCM(400毫升)中的4-[2-氯-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-羧酸三級丁酯(C-3)(520毫克，1.08毫莫耳，1.0當量)之溶液中。令反應溫熱至20℃且攪拌18小時。LCMS分析顯示轉化成所欲產物。令混合物濃縮至乾燥且令粗製殘餘物以管柱層析術純化(SiO2 ，50%之EtOAc/PE)，以提供4-{2-氯-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(C-4)(500毫克，82%之產率)。LCMS(ESI)m/z 567(M+H)。
步驟5：4-{2-(2-甲氧基乙氧基)-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(C-5)之合成
令2-甲氧基乙-1-醇(107毫克，1.41毫莫耳，4.0當量)及NaH(60%之分散液於礦油中，70.5毫克，1.76毫莫耳，5.0當量)添加至1,4-二㗁烷(20毫升)中的4-{2-氯-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(C-4)(200毫克，0.353毫莫耳，1.0當量)之溶液中。令反應在90℃下攪拌16小時。LCMS分析顯示轉化成所欲產物。令反應以添加水(10毫升)淬滅。令混合物倒入分液漏斗中且以EtOAc(2×20毫升)萃取。令合併的有機物以食鹽水清洗，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮至乾燥。令粗製殘餘物以管柱層析術純化(SiO2 ，50%之EtOAc/PE)，以提供4-{2-(2-甲氧基乙氧基)-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(C-5)(200毫克，94%之產率)。LCMS(ESI)m/z 607(M+H)。
步驟6：2-(2-甲氧基乙氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(C-6)之合成
令DCM中的25%之TFA(20毫升)中的4-{2-(2-甲氧基乙氧基)-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(C-5)(200毫克，0.33毫莫耳，1.0當量)之溶液在20℃下攪拌2小時。LCMS分析顯示轉化成所欲產物。令反應混合物濃縮至乾燥以提供2-(2-甲氧基乙氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(C-6)(120毫克，86%之產率)，其以未進一步純化取得。LCMS(ESI)m/z 423(M+H)。
步驟7：1-{4-[2-(2-甲氧基乙氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例C1)
令飽和NaHCO3 溶液(10毫升)添加至EtOAc(10毫升)中的2-(2-甲氧基乙氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(C-6)(120毫克，0.284毫莫耳，1.0當量)之溶液中。添加在EtOAc中的丙烯醯氯(31毫克，0.341毫莫耳，1.2當量)之溶液且令反應在20℃下攪拌20分鐘。LCMS分析顯示轉化成所欲產物。令反應混合物倒入分液漏斗中且以EtOAc(2×20毫升)萃取。令合併的有機物以食鹽水清洗，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮至乾燥。令粗製殘餘物以製備性HPLC純化(Gemini 5u C18，150×21.2毫米，40至50%之乙睛，20毫升/分鐘)，以提供1-{4-[2-(2-甲氧基乙氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例C1)(25.7毫克，19%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.14-7.94 (m, 1H), 7.30 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.60 (dd, J = 16.7, 10.6 Hz, 1H), 6.35 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 5.76 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.46 (s, 2H), 4.07-3.88 (m, 1H), 3.78 (d, J = 32.0 Hz, 4H), 3.63 (s, 4H), 3.52-3.08 (m, 7H), 2.75 (s, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.21 (d, J = 32.3 Hz, 2H)。LCMS (ESI) m/z 477 (M + H)。
在表C中的實施例係使用類似於流程C的化學法及用於製備1-{4-[2-(2-甲氧基乙氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例C1)之程序製備。下列的實施例係以非關鍵性改變或取代用於製備實施例C1之例示性程序而達成，其能由熟習此項技術領域者實現。
實施例D1(流程D)：1-(4-{(6R,7R)-7-[5-(羥基甲基)-1H-吲唑-4-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮
令25毫升無菌Iowa培養基(右旋糖(20克))、Nutrisoy粉(5克)、NaCl(5克)、酵母萃取物(5克)、K2 HPO4 (5克)、P2000防沫劑(1毫升)、去離子水(1000毫升)添加至兩個250毫升無菌Nalgene燒瓶(隔板式、通風)的各者中。令pH以1N HCl調整至7.0且令溶液經高壓蒸氣滅菌(121℃，25分鐘/公升)。令解凍之植物儲存液中的壯觀鏈黴菌(Streptomyces spectabilis)ATCC 27465溶液(0.25毫升)添加至各燒瓶中。令燒瓶封蓋且在30℃下於2"動程旋轉振盪器(Innova 4900，210rpm)上培育兩天。令DMSO(1毫升)中的1-{4-[(6R,7R)-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例A6)(5毫克，12微莫耳)之溶液添加至各燒瓶中。令燒瓶封蓋且如上述方式培育。在5天後，令分別培養的兩個燒瓶合併且倒入分液漏斗中。令溶液以EtOAc(2×50毫升)萃取且令合併的有機物通過無水MgSO4 墊過濾。令濾餅以EtOAc(20毫升)清洗且令合併的有機物濃縮至乾燥。令粗製材料在Princeton甲烷磺醯胺管柱上(10毫米×250毫米，5微米粒徑)以製備性SFC純化，令管柱以60%之MeOH溶析，在25℃及100巴下固定於CO2 中，具有10毫升/分鐘之流速，以提供1-(4-{(6R,7R)-7-[5-(羥基甲基)-1H-吲唑-4-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例D1)(11微克，0.2%之產率)。LCMS(ESI)m/z 433(M+H)。
實施例E1(流程E)：1-{4-[(6R,7R)-7-(7-羥基-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮
1-{4-[(6R,7R)-7-(7-羥基-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例E1)(26微克，0.5%之產率)係根據用於實施例D1之通用程序製得，除了使用壯觀鏈黴菌ATCC 13273作為細胞系以外。LCMS(ESI)m/z 433(M+H)。
實施例F1(流程F)：1-{4-[(6R,7R)-rel-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮
實施例F2(流程F)：1-{4-[(6S,7S)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮
實施例F3(流程F)：1-{4-[(6R,7R)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮
步驟1：(3R,4R)-rel-4-甲基-3-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]環己酮(F-1)之合成
(3R,4R)-rel-4-甲基-3-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]環己酮(F-1)(118克，90%之產率，＞20:1dr)係根據用於合成3-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]環己酮(A-1)之程序製備，除了使用KOSiMe3 作為鹼於1,4-二㗁烷/H2 O(20:1)之溶劑混合物中以外，以提供成為黃色膠的所欲產物。LCMS(ESI)m/z 327(M+H)。
步驟2：(4R,5R)-rel-5-甲基-4-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-側氧基環己烷羧酸乙酯(F-2)及(2S,3R)-rel-3-甲基-2-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-6-側氧基環己烷羧酸乙酯(F-3)之合成
(4R,5R)-rel-5-甲基-4-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-側氧基環己烷羧酸乙酯(F-3)與(2S,3R)-rel-3-甲基-2-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-6-側氧基環己烷羧酸乙酯(F-2)(86.8克，44.02%之產率)的~1:1之混合物係根據用於合成3-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]環己酮(A-2)之通用程序製得，以提供成為灰白色固體的產物。LCMS(ESI)m/z 399(M+H)。
步驟3：(6R,7R)-rel-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(F-4)之合成
令NaOEt溶液[藉由添加Na金屬(204毫克，8.88毫莫耳)至乙醇(5毫升)中而製得]添加至無水EtOH(5毫升)中的(4R,5R)-rel-5-甲基-4-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-側氧基環己烷羧酸乙酯(F-3)與(2S,3R)-rel-3-甲基-2-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-6-側氧基環己烷羧酸乙酯(F-2)(885毫克，1.11毫莫耳，1.0當量)的~1:1之混合物及3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-甲脒鹽酸鹽(411毫克，2.89毫莫耳，2.6當量)(WO15089327)之攪拌溶液中。令所得混合物在25℃下攪拌4小時。LCMS顯示僅消耗(4R,5R)-rel-5-甲基-4-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-側氧基環己烷羧酸乙酯。令混合物過濾且令濾餅以EtOH(2×3毫升)清洗。令合併的過濾物濃縮。令粗製殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，0→10%之MeOH/DCM)，以提供成為膠狀白色固體的(6R,7R)-rel-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(F-4)(300毫克，57%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.05 (s, 1H), 7.34 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.81-5.57 (m, 1H), 4.18 (t, J = 8.1 Hz, 2H), 4.04 (t, J = 12.6 Hz, 3H), 3.75 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 3.33 (s, 1H), 3.21 (s, 1H), 3.16-3.03 (m, 1H), 2.87 (dd, J = 17.3, 4.6 Hz, 1H), 2.70 (dd, J = 18.1, 4.4 Hz, 1H), 2.56 (s, 1H), 2.42 (s, 4H), 2.28 (s, 6H), 2.09 (dd, J = 28.1, 10.2 Hz, 3H), 1.81-1.60 (m, 3H), 0.74 (s, 3H)。LCMS (ESI) m/z 477 (M + H)。
步驟4：4-{(6R,7R)-rel-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(F-5)之合成
令(6R,7R)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(F-4)(1克，2.1毫莫耳，1.0當量)、哌-1-羧酸三級丁酯(1.95克，10.5毫莫耳，5.0當量)及BOP試劑(1.4克，3.15毫莫耳，1.5當量)添加至配備有磁攪拌棒的250毫升燒瓶中。添加MeCN(21毫升)及DBU(639毫克，4.2毫莫耳，2.0當量)且令混合物加熱至60℃。在48小時後，以LCMS檢查反應，其顯示轉化成所欲產物。令反應混合物冷卻至室溫且倒入分液漏斗中。令混合物分溶在TBME(50毫升)與水(20毫升)之間。令有機層以水(20毫升)及食鹽水(20毫升)清洗，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。令粗製殘餘物以快速層析術純化(Biotage，25克SiO2 ，40→60%之EtOAc/庚烷+2%之NEt3 )，以提供成為灰白色固體的4-{(6R,7R)-rel-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(F-5)(1.33克，99%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.98 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 7.34 (dd, J = 15.0, 8.6 Hz, 1H), 7.23-7.15 (m, 1H), 5.68 (ddd, J = 12.6, 9.7, 2.6 Hz, 1H), 4.16-3.86 (m, 5H), 3.75 (dd, J = 10.8, 8.1 Hz, 1H), 3.62 (t, J = 8.5 Hz, 2H), 3.46 (d, J = 11.2 Hz, 3H), 3.34-3.03 (m, 6H), 2.70 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 2.64-2.50 (m, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.32 (q, J = 11.9, 11.0 Hz, 2H), 2.21 (s, 6H), 2.15 (s, 1H), 2.06 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 1.80-1.72 (m, 3H), 1.49 (s, 9H), 0.76 (d, J = 5.6 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 645 (M + H)。
步驟5：N,N-二甲基-1-[(6R,7R)-rel-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基]吖丁啶-3-胺(F-6)之合成
令TFA(2毫升)添加至DCM(8毫升)中的4-{(6R,7R)-rel-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(F-5)(125毫克，0.194毫莫耳，1.0當量)之攪拌溶液中。令所得溶液在25℃下攪拌72小時。LCMS分析顯示轉化成產物。在減壓下移除溶劑以提供成為棕色油的N,N-二甲基-1-[(6R,7R)-rel-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基]吖丁啶-3-胺(F-6)(89毫克，100%之產率)，其無需接受進一步的純化。LCMS(ESI)m/z 461(M+H)。
步驟6：1-{4-[(6R,7R)-rel-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例F1)之合成
令EtOAc(5毫升)中的丙烯醯氯(17.5毫克，0.193毫莫耳，1.0當量)之溶液在0至5℃下逐滴添加至EtOAc(50毫升)及飽和NaHCO3 (50毫升)中的N,N-二甲基-1-[(6R,7R)-rel-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基]吖丁啶-3-胺(F-6)(89毫克，0.19毫莫耳，1.0當量)之攪拌混合物中。令所得混合物在相同的溫度下攪拌20分鐘。LCMS分析顯示起始材料已消耗。令有機層分離。令水層以EtOAc(2×30毫升)萃取。令合併的有機物經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮。令粗製材料以快速層析術純化(SiO2 ，0→5%之MeOH/DCM)，以提供成為白色固體的1-{4-[(6R,7R)-rel-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例F1)(26毫克，27%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 12.94 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.28 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.84 (dd, J = 16.7, 10.5 Hz, 1H), 6.14 (dd, J = 16.7, 2.4 Hz, 1H), 5.71 (dd, J = 10.4, 2.4 Hz, 1H), 3.95 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 3.85-3.75 (m, 1H), 3.76-3.67 (m, 3H), 3.64-3.57 (m, 2H), 3.49-3.40 (m, 2H), 3.29-3.15 (m, 3H), 3.12-2.94 (m, 2H), 2.81 (dd, J = 18.3, 6.2 Hz, 1H), 2.69-2.61 (m, 1H), 2.60-2.51 (m, 1H), 2.45-2.34 (m, 4H), 2.09 (s, 6H), 0.68 (d, J = 6.1 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 515 (M + H)。
步驟7：1-{4-[(6S,7S)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例F2)及1-{4-[(6R,7R)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例F3)之合成
令1-{4-[(6R,7R)-rel-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(218毫克)在Chrialpak AD-3管柱上(4.6毫米×100毫米，3微米粒徑)以手性SFC純化，令管柱以30%之IPA+10mM NH3 溶析，在25℃及120巴下固定於CO2 中。以4.0毫升/分鐘之流速給出Rt( 峰 1) =2.53分鐘及Rt( 峰 2) =4.58分鐘。1-{4-[(6R,7R)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例F2)(峰1)：29.8毫克，＞99% ee，14%之產率。1 H NMR (600 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.03 (s, 1H), 7.28 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.83 (ddd, J = 14.9, 10.0, 4.1 Hz, 1H), 6.14 (dd, J = 16.6, 2.3 Hz, 1H), 5.71 (dt, J = 10.7, 1.8 Hz, 1H), 3.94 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.78 (s, 1H), 3.73-3.68 (m, 3H), 3.60 (s, 2H), 3.41-3.34 (m, 3H), 3.27-3.14 (m, 1H), 3.08-2.96 (m, 2H), 2.81 (dd, J = 18.5, 6.6 Hz, 1H), 2.67-2.61 (m, 2H), 2.49-2.34 (m, 5H), 2.07 (s, 6H), 0.68 (s, 3H)； [α]d 22 = -27.3° (C=0.1, MeOH)；LCMS (ESI) m/z 515 (M + H)。1-{4-[(6S,7S)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例F3)(峰2)：32.7毫克，~99% ee，15%之產率。1 H NMR (600 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.04 (s, 1H), 7.28 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.94-6.72 (m, 1H), 6.25-5.97 (m, 1H), 5.71 (dt, J = 10.5, 1.9 Hz, 1H), 3.94 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.79 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 3.74-3.67 (m, 3H), 3.61 (s, 2H), 3.41-3.34 (m, 3H), 3.31-3.13 (m, 1H), 3.08-2.97 (m, 2H), 2.81 (dd, J = 18.5, 5.8 Hz, 1H), 2.63 (d, J = 15.4 Hz, 2H), 2.49-2.34 (m, 5H), 2.07 (s, 6H), 0.68 (d, J = 6.3 Hz, 3H)； [α]d 22 = 51.2 (C=0.1, MeOH)；LCMS (ESI) m/z 515 (M + H)。
實施例F14(流程F’)：1-(4-{(6R,7R)-7-(6-氯-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮
步驟1：(3R,4R)-3-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-4-甲基環己烷-1-酮(F-7)之合成
令6-氯-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-1H-吲唑(9.4毫克，25毫莫耳)、LiOMe(1.1克，30.0毫莫耳)及[RhCl(COD)]2 (247毫克，0.50毫莫耳)添加至配備有磁攪拌棒的經烘箱乾燥之燒瓶中。令燒瓶以N2 徹底沖洗。添加脫氣之1,4-二㗁烷(以N2 吹洗1小時)及(4R)-4-甲基環己-2-烯-1-酮(3.58克，32.5毫莫耳)。令反應加熱至40℃且在此溫度下攪拌48小時。LCMS分析顯示起始材料已消耗，形成所欲產物塊。令反應轉移至分液漏斗中且分溶在EtOAc與飽和水性NH4 Cl之間。令有機層以食鹽水清洗，經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。令殘餘物以快速層析術純化(Biotage，50克SiO2 ，15至25%之EtOAc/庚烷)，以提供成為白色濃厚泡沫的(3R,4R)-3-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基(oxan-2-yl))-1H-吲唑-4-基]-4-甲基環己烷-1-酮(F-7)(6.15克，68%之產率)，其在靜置時固化。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.25-8.09 (m, 1H), 7.59 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 5.64 (td, J = 9.7, 2.7 Hz, 1H), 4.13-3.93 (m, 1H), 3.86-3.68 (m, 1H), 3.30 (ddd, J = 14.3, 11.0, 4.3 Hz, 1H), 3.10-2.83 (m, 1H), 2.69-2.37 (m, 8H), 2.31-2.03 (m, 3H), 1.90-1.56 (m, 4H), 0.73 (dd, J = 6.5, 3.6 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 361 (M + H)。
步驟2：(4R,5R)-4-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸甲酯(F-9)及(5R,6R)-6-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸甲酯(F-8)之合成
令甲苯(39.6毫升，c=0.14M)、LHMDS(1.0M於PhMe中，11.1毫升，11.1毫莫耳)及TEA(6.73克，9.27毫升，66.5毫莫耳)添加至配備有磁攪拌棒的經烘箱乾燥之小燒瓶。令混合物冷卻至-78℃。逐滴添加在甲苯(10毫升)中的(3R,4R)-3-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-4-甲基環己烷-1-酮(F-7)(2.0克，5.54毫莫耳)之溶液且令混合物在-78℃下攪拌。產生鮮黃色反應溶液。逐滴添加在甲苯(10毫升)中的氰基甲酸甲酯(566毫克，0.54毫升，6.65毫莫耳)之溶液。令混合物攪拌5分鐘。LCMS分析顯示起始材料已消耗，形成所欲產物塊。令反應以添加飽和水性NH4 Cl淬滅且令混合物轉移至分液漏斗中。令反應分溶在EtOAc與水之間。令有機層以食鹽水清洗，經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮至白色泡沫(2.3克)。1 H NMR分析顯示粗製材料為具有成為主要區域異構物之(4R,5R)-4-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸甲酯(F-9)與成為次要區域異構物之(5R,6R)-6-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸甲酯(F-8)的非鏡像異構物之複合混合物。LCMS(ESI)m/z 419(M+H)。
步驟3：(6R,7R)-7-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(F-10)之合成
令含有(4R,5R)-4-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸甲酯(F-9)(2.3克，5.5毫莫耳)、3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-甲脒雙-鹽酸鹽(WO15089327)(1.2克，5.5毫莫耳)的粗製混合物在氮氣下添加至配備有磁攪拌棒的燒瓶中。添加NaOMe溶液(1M於MeOH中，16.6毫升，16.6毫莫耳)且令混合物在周圍溫度下攪拌2小時。LCMS分析表明選擇性及完全消耗F-9，形成所欲產物塊。令反應以飽和水性NaHCO3 淬滅且以DCM(3x)萃取。令合併的有機萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮至黃色固體。令粗製殘餘物以快速層析術純化(Isco，40克SiO2 ，0至15%之MeOH/DCM+2%之TEA)，以提供成為灰白色固體的(6R,7R)-7-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(F-10)(1.4克，49%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.24 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 5.94-5.74 (m, 1H), 3.98 (td, J = 8.0, 7.3, 1.9 Hz, 2H), 3.91-3.82 (m, 1H), 3.75 (td, J = 11.1, 9.0, 6.2 Hz, 3H), 3.40-3.19 (m, 2H), 3.15-3.03 (m, 1H), 2.94 (td, J= 14.6, 11.6, 6.8 Hz, 1H), 2.70 (dt, J= 17.5, 4.3 Hz, 1H), 2.56-2.47 (m, 1H，在DMSO下), 2.47-2.29 (m, 4H), 2.06 (s, 9H), 1.80-1.65 (m, 1H), 1.57 (dq, J = 10.4, 6.2, 4.8 Hz, 2H), 0.63 (dd, J =9.0, 6.4 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 511 (M + H)。
步驟4：4-{(6R,7R)-7-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(F-11)之合成
令(6R,7R)-7-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(F-10)(1.4克，2.6毫莫耳)及哌-1-羧酸三級丁酯(3.5克，18.6毫莫耳)添加至配備有磁攪拌棒的圓底燒瓶中。令燒瓶以氮氣吹洗且添加MeCN(6.63毫升，c=0.4M)、DBU(0.8毫升，5.3毫莫耳)及BOP試劑(1.8克，4.0毫莫耳)。令反應加熱至50℃且在此溫度下攪拌24小時。LCMS分析顯示起始材料已消耗，形成所欲產物塊。令反應冷卻至室溫且接著倒入水中。令混合物攪拌1小時且接著以MTBE(2x)萃取。令合併的有機層以水清洗，經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮以提供黃色殘餘物。令材料以快速層析術純化(Isco，SiO2 ，10至15%之MeOH/DCM+2%之TEA)，以提供成為灰白色固體的4-{(6R,7R)-7-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(F-11)(1.8克，82%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.19 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 5.84 (dd, J = 9.4, 2.4 Hz, 1H), 3.93 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 3.85 (s, 1H), 3.76 (q, J = 7.1, 6.0 Hz, 1H), 3.70 (dd, J = 8.5, 5.7 Hz, 2H), 3.52 (d, J = 9.5 Hz, 2H), 3.39 (dd, J = 18.6, 10.3 Hz, 5H), 3.22-3.10 (m, 2H), 3.03 (q, J = 6.2 Hz, 1H), 2.99-2.91 (m, 1H), 2.86 (td, J = 11.2, 5.8 Hz, 1H), 2.69-2.54 (m, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.39 (dd, J= 22.2, 11.5 Hz, 2H), 2.07 (s, 8H), 1.82-1.63 (m, 1H), 1.57 (s, 2H), 1.42 (s, 9H), 0.67 (dd, J= 8.7, 6.0 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 679 (M + H)。
步驟5：1-[(6R,7R)-7-(6-氯-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-甲基-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基]-N,N-二甲基吖丁啶-3-胺(F-12)之合成
令4-{(6R,7R)-7-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(F-11)(1.1克，1.5毫莫耳)裝入配備有磁攪拌棒的小瓶中。添加DCM(5.1毫升，c=0.3M)及TFA(7.4克，5.0毫升，66毫莫耳)。令混合物攪拌3小時，其顯示起始材料已消耗，形成所欲產物塊。令反應混合物小心地倒入水性飽和NaHCO3 中(放出氣體)且以DCM(4x)萃取。令合併的有機萃取物經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮以提供1-[(6R,7R)-7-(6-氯-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-甲基-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基]-N,N-二甲基吖丁啶-3-胺(F-12)(786毫克，100%之產率)，其無需接受進一步的純化。LCMS(ESI)m/z 495(M+H)。
步驟6：1-(4-{(6R,7R)-7-(6-氯-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F14)
令1-[(6R,7R)-7-(6-氯-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-甲基-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基]-N,N-二甲基吖丁啶-3-胺(F-12)(1.1克，2.2毫莫耳)及HFIP(11毫升，c=0.2M)裝入配備有磁攪拌棒的小瓶中。攪拌混合物，直到固體溶解為止。添加NaHCO3 (1.1克，13.2毫莫耳)及丙烯醯氯(234毫克，0.21毫升，2.6毫莫耳)。在5分鐘後，LCMS分析顯示形成所欲產物塊，具有~20%之剩餘起始材料。添加額外的丙烯醯氯(0.035毫升，0.43毫莫耳)。在5分鐘後，令反應以MTBE稀釋，轉移至分液漏斗中且以H2 O清洗。令水層以MTBE萃取。令合併的有機物經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮以提供黃色殘餘物。令粗製產物溶解在DMSO中且以Phenomenex Luna Omega Polar C18管柱(250×50毫米，5微米粒徑)之製備性HPLC純化，令管柱以5至30%之MeCN/H2 O(+0.1%之AcOH)溶析，具有85毫升/分鐘之流速，以提供成為灰白色固體的1-(4-{(6R,7R)-7-(6-氯-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F14)(588毫克，47%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.06 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.84 (dd, J= 16.7, 10.5 Hz, 1H), 6.14 (dd, J= 16.7, 2.4 Hz, 1H), 5.71 (dd, J= 10.4, 2.4 Hz, 1H), 3.94 (dd, J= 8.7, 7.0 Hz, 2H), 3.86-3.67 (m, 4H), 3.61 (s, 2H), 3.50-3.37 (m, 3H), 3.24 (d, J= 26.7 Hz, 2H), 3.08-2.94 (m, 2H), 2.84 (dd, J= 18.3, 6.3 Hz, 1H), 2.63 (dd, J= 15.0, 3.5 Hz, 1H), 2.47 (s, 5H), 2.08 (s, 6H), 0.68 (d, J= 6.0 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 549 (M + H)。
實施例F5(流程F’’)：1-(4-{(6R,7R)-rel-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮
實施例F10(流程F’’)：1-(4-{(6R,7R)-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮
實施例F11(流程F’’)：1-(4-{(6S,7S)-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮
步驟1：(3R,4R)-rel-3-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-4-甲基環己烷-1-酮(F-13)之合成
令[Rh(COD)Cl]2 (160毫克，0.321毫莫耳)在惰性氛圍下添加至1,4-二㗁烷(40毫升)與H2 O(9毫升)之混合物中的(5-氯-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)硼酸(Int-2)(1.8克，6.43毫莫耳)、4-甲基環己-2-烯-1-酮(1.06克，9.63毫莫耳)及K3 PO4 (4.09克，19.3毫莫耳)之攪拌溶液中。令所得混合物在40℃及N2 下攪拌16小時。LCMS分析顯示起始材料已消耗，形成所欲產物塊。令反應以添加食鹽水(50毫升)淬滅且令混合物以EtOAc(3×50毫升)萃取。令合併的有機物以食鹽水(50毫升)清洗，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。以快速層析術純化(SiO2 ，0至30%之EtOAc/石油醚)提供成為白色固體的(3R,4R)-rel-3-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-4-甲基環己烷-1-酮(F-13)(955毫克，43%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.66 (s, 1H), 7.66 (dd, J = 9.0, 2.4 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.94-5.77 (m, 1H), 3.87 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 3.75 (dq, J = 11.5, 6.3, 5.4 Hz, 1H), 3.50 (ddd, J = 13.6, 11.2, 4.2 Hz, 1H), 3.11 (td, J = 13.9, 6.8 Hz, 1H), 2.92 (td, J = 14.1, 6.1 Hz, 1H), 2.72-2.54 (m, 1H), 2.46-1.91 (m, 6H), 1.75 (dd, J = 12.5, 8.0 Hz, 1H), 1.64-1.44 (m, 3H), 0.64 (dd, J = 8.7, 6.4 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 347 (M+H)。
步驟2：(5R,6S)-rel-6-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸甲酯(F-14)及(4R,5R)-4-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸甲酯(F-15)之合成
令LDA(2M於THF中，2.74毫升，5.48毫莫耳)在-78℃下逐滴添加至THF(30毫升)中的(3R,4R)-rel-3-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-4-甲基環己烷-1-酮(F-13)(950毫克，2.74毫莫耳)之溶液中。令混合物在-78℃下攪拌30分鐘。接著添加氰基甲酸乙酯(407毫克，4.11毫莫耳)且令混合物在-78℃下攪拌2小時。LCMS顯示沒有起始材料。令混合物以飽和水性NH4 Cl淬滅且以EtOAc(3×40毫升)萃取。令合併的有機物經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。令殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，石油醚/EA=3/2)，以提供成為黃色油的非鏡像異構物之複合混合物：(5R,6S)-rel-6-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸甲酯(F-14)及(4R,5R)-4-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸甲酯(F-15)(1.0克，87%之產率，~1:1之混合物)。LCMS(ESI)m/z 419(M+H)。
步驟3：(6R,7R)-rel-7-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮之合成
令NaOMe(258毫克，4.77毫莫耳)添加至EtOH(20毫升)中的(5R,6S)-rel-6-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸乙酯(F-14)及(4R,5R)-4-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸乙酯(F-15)(1.0克，2.4毫莫耳)與3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-甲脒(679毫克，4.77毫莫耳)之混合物中，且令混合物在回流下攪拌16小時。LCMS分析顯示完全及選擇性消耗F-15，形成所欲產物塊。令混合物濃縮至乾燥且以快速層析術純化(SiO2 ，DCM/MeOH=1:1)，以提供成為黃色固體的(6R,7R)-rel-7-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(F-16)(400毫克，34%之產率)。LCMS(ESI)m/z 497(M+H)。
步驟4：4-{(6R,7R)-rel-7-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(F-17)之合成
令DBU(245毫克，1.61毫莫耳)添加至MeCN(10毫升)中的(6R,7R)-rel-7-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(F-16)(400毫克，0.805毫莫耳)、哌-1-羧酸三級丁酯(300毫克，1.61毫莫耳)與BOP試劑(711毫克，1.61毫莫耳)之混合物中，且令混合物在20℃下攪拌16小時。LCMS分析顯示形成HOBt加成物。令混合物濃縮且令殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，DCM/MeOH=7/3)，以給出1-{(6R,7R)-4-[(1H-苯并***-1-基)氧基]-7-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-yl}-N,N-二甲基吖丁啶-3-胺(400毫克，82%之產率)。令DBU(198毫克，1.3毫莫耳)添加至DMF(10毫升)中的此中間物(400毫克，0.651毫莫耳)及哌-1-羧酸三級丁酯(243毫克，1.3毫莫耳)中，且令混合物在90℃下攪拌16小時。LCMS分析顯示起始材料已消耗，形成所欲產物。令混合物濃縮且令殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，DCM/MeOH=20/1)，以提供成為棕色油的4-{(6R,7R)-rel-7-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(F-17)(300毫克，69%之產率)。LCMS(ESI)m/z 665(M+H)。
步驟5：1-[(6R,7R)-rel-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-6-甲基-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基]-N,N-二甲基吖丁啶-3-胺(F-18)之合成
令HCl(4M於1,4-二㗁烷中，3毫升)添加至DCM(5毫升)中的4-{(6R,7R)-rel-7-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(F-17)(300毫克，0.451毫莫耳)之溶液中。令混合物在20℃下攪拌2小時。LCMS分析顯示起始材料已消耗，形成所欲產物塊。令混合物過濾且濃縮以提供成為棕色固體的1-[(6R,7R)-rel-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-6-甲基-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基]-N,N-二甲基吖丁啶-3-胺(F-18)(233毫克，100%之產率)，其無需接受進一步的純化。LCMS(ESI)m/z 481(M+H)。
步驟6：1-(4-{(6R,7R)-rel-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F5)之合成
令丙烯醯氯(45毫克，0.495毫莫耳)添加至EtOAc(40毫升)及飽和水性NaHCO3 (40毫升)中的1-[(6R,7R)-rel-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-6-甲基-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基]-N,N-二甲基吖丁啶-3-胺(F-18)(233毫克，0.45毫莫耳)之溶液中。令混合物在周圍溫度下攪拌30分鐘。令混合物以EA(3×40毫升)萃取。令合併的有機萃取物以食鹽水(20毫升)清洗，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。令殘餘物以Gemini-18管柱(100×21.2毫米，5微米粒徑)的製備性HPLC純化，令管柱以45至55%之MeCN/H2 O(+0.05%之NH3 )溶析，以提供成為白色固體的1-(4-{(6R,7R)-rel-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F5)(28毫克，12%之產率)。1 H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.13 (s, 1H), 7.45-7.39 (m, 2H), 6.81 (dd, J = 16.8, 10.6 Hz, 1H), 6.26 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 5.81-5.75 (m, 1H), 4.12-4.09 (m, 2H), 3.91-3.78 (m, 4H), 3.71-3.60 (m, 4H), 3.42-3.33 (m, 2H), 3.25-3.05 (m, 3H), 3.00-2.94 (m, 1H), 2.76 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 2.54-2.40 (m, 2H), 2.21 (s, 6H), 0.82 (d, J = 5.7 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 535, (M+H)。
步驟7：1-(4-{(6R,7R)-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F10)及1-(4-{(6S,7S)-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F11)之合成
令1-(4-{(6R,7R)-rel-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(18.2毫克)(實施例F5)以Phenomenex Lux Amylose-1管柱(100×4.6毫米管柱，3微米)之製備性SFC純化，令管柱在CO2 (+10mM NH3 )中以5至60%之IPA溶析。以4毫升/分鐘之流速給出Rt( 峰 1) =2.84分鐘及Rt( 峰 2) =3.36分鐘。1-(4-{(6R,7R)-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F10)(峰1)：6.02毫克，＞99% ee，33%之產率。1 H NMR (600 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.35 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.50 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.88 (dd, J = 16.7, 10.5 Hz, 1H), 6.19 (dd, J = 16.7, 2.4 Hz, 1H), 5.76 (dd, J = 10.4, 2.4 Hz, 1H), 3.99 (ddd, J = 9.8, 7.1, 3.2 Hz, 2H), 3.87-3.58 (m, 8H), 3.52-3.47 (m, 2H), 3.31-3.23 (m, 2H), 3.15-3.02 (m, 2H), 2.85 (dd, J = 18.3, 6.2 Hz, 1H), 2.70 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.50 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 2.12 (s, 6H), 0.76 (d, J = 5.4 Hz, 3H)；[α]d 22 = -45.5° (c = 0.1，MeOH)；LCMS (ESI) m/z 535 (M+H)。1-(4-{(6S,7S)-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F11)(峰2)：6.38毫克，＞99% ee，35%之產率。1 H NMR (600 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.35 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.41 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.89 (dd, J = 16.7, 10.4 Hz, 1H), 6.19 (dd, J = 16.7, 2.4 Hz, 1H), 5.76 (dd, J = 10.5, 2.3 Hz, 1H), 4.08-3.92 (m, 2H), 3.88-3.59 (m, 8H), 3.51-3.46 (m, 2H), 3.32-3.21 (m, 2H), 3.15-3.04 (m, 2H), 2.85 (dd, J = 18.3, 6.1 Hz, 1H), 2.70 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.50 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 2.12 (s, 6H), 0.76 (d, J = 5.4 Hz, 3H)；[α]d 22 = +78.9° (c = 0.1，MeOH)；LCMS (ESI) m/z 535 (M+H)。
在表F中的實施例係使用類似於流程F、流程F’和流程F’’的化學法及用於製備1-{4-[(6R,7R)-rel-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例F1)、1-{4-[(6S,7S)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例F2)、1-{4-[(6R,7R)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例F3)、1-(4-{(6R,7R)-7-(6-氯-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F14)、1-(4-{(6R,7R)-rel-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F5)、1-(4-{(6R,7R)-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F10)、1-(4-{(6S,7S)-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F11)之程序製備。下列的實施例係以非關鍵性改變或取代用於製備實施例F1之例示性程序而達成，其能由熟習此項技術領域者實現。
實施例G1(流程G)：1-(4-(7-(5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基)哌-1-基)丙-2-烯-1-酮
步驟1：4-(7-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基)-5,6-二氫喹唑啉-4-基)哌-1-羧酸三級丁酯(G-1)之合成
令4-(7-{[(三氟甲基)磺醯基]氧基}-5,6-二氫喹唑啉-4-基)哌-1-羧酸三級丁酯(Int-4)(186毫克，0.4毫莫耳)添加至配備有磁攪拌棒的25毫升燒瓶中。令材料溶解在THF/H2 O(9:1，5毫升)中。添加[1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]硼酸(151毫克，0.48毫莫耳，1.2當量)及PdCl2 (dppf)(29.3毫克，0.04毫莫耳，0.1當量)。令燒瓶抽空且以氮氣(3x)回填，且接著添加三乙胺(0.56毫升，4.0毫莫耳，10當量)。令混合物加熱至60℃經2小時。LCMS分析表明形成所欲產物且起始材料已完全消耗。令混合物以EtOAc稀釋，以食鹽水清洗且經無水MgSO4 乾燥。令混合物濃縮至乾燥且令殘餘物以ISCO純化(0-50%之丙酮/庚烷)，以提供成為灰白色/淺黃色固體的4-(7-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基)-5,6-二氫喹唑啉-4-基)哌-1-羧酸三級丁酯(G-1)(200.0毫克，85%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ = 8.67 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.70 (s, 2H), 6.67 - 6.59 (m, 1H), 5.81 - 5.71 (m, 1H), 4.04 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 3.84 - 3.72 (m, 1H), 3.59 (br s, 4H), 3.37 (br s, 4H), 3.00 - 2.85 (m, 2H), 2.70 (br s, 2H), 2.61 - 2.47 (m, 1H), 2.17 (s, 1H), 1.88 - 1.62 (m, 4H), 1.50 (s, 9H)。LCMS (ESI) m/z 585.7 (M + H)。
步驟2：4-(哌-1-基)-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉(G-2)之合成
令4-(7-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基)-5,6-二氫喹唑啉-4-基)哌-1-羧酸三級丁酯(G-1)(30毫克，0.051毫莫耳，1.0當量)、MeOH(5毫升)及Pt/C(5%之裝載量，70毫克)裝入配備有磁攪拌棒的50毫升試管中。令混合物以H2 (100psi)加壓且接著加熱至60℃經3天。LCMS分析表明形成所欲產物且起始材料幾乎完全消耗。令混合物通過矽藻土墊過濾。令過濾物濃縮且令粗製物以快速層析術純化(SiO2 ，0至70%之丙酮/庚烷)，以提供成為黃色固體的4-(哌-1-基)-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉(G-2)(17.0毫克，56%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.63 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.73 - 7.65 (m, 1H), 7.62 - 7.51 (m, 1H), 5.83 - 5.66 (m, 1H), 4.10 - 3.97 (m, 1H), 3.90 - 3.73 (m, 2H), 3.71 - 3.60 (m, 2H), 3.51 (d, J = 9.8 Hz, 4H), 3.43 - 3.18 (m, 4H), 2.80 (br. s., 1H), 2.64 - 2.47 (m, 1H), 2.17 (m, 4H), 1.87 - 1.63 (m, 4H), 1.50 (s, 9H)。LCMS (ESI) m/z 587.6 (M + H)。
步驟3：4-(哌-1-基)-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉(G-3)之合成
令4-{7-[1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(G-2)(6毫克，0.01毫莫耳，1.0當量)、DCM(0.4毫升)及TFA(0.2毫升)添加至配備有磁攪拌棒的8毫升小瓶中。令反應攪拌15分鐘。LCMS分析表明形成完全去保護之產物。令反應濃縮至乾燥以提供成為棕色殘餘物的4-(哌-1-基)-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉(G-3)(6毫克，100%之產率)，其無需進步純化而前進至下一步驟。LCMS(ESI)m/z 403.3(M+H)。
步驟4：1-(4-{7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例G1)之合成
令4-(哌-1-基)-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉(G-3)溶解在THF(1毫升)中且冷卻至0℃。令混合物以丙烯醯氯(0.945毫克，0.01毫莫耳，0.85微升，1.0當量)及三乙胺(7.13微升，0.05毫莫耳，10.0當量)處理。令混合物在0℃下攪拌15分鐘。LCMS分析表明形成所欲產物且起始材料已完全消耗。在減壓下移除溶劑且令殘餘物以HPLC純化，以提供成為灰白色固體的1-(4-{7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例G1)(3.0毫克，40%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.61 (s, 1H), 8.16 - 8.10 (m, 1H), 7.65 - 7.57 (m, 1H), 7.52 - 7.41 (m, 1H), 6.62 - 6.50 (m, 1H), 6.34 - 6.22 (m, 1H), 5.82 - 5.66 (m, 1H), 4.14 - 3.59 (m, 8H), 3.53 - 3.39 (m, 2H), 3.12 - 2.60 (m, 3H), 2.36 - 2.08 (m, 2H)。LCMS (ESI) m/z 457.5 (M + H)。
在下列製備中詳述之中間物G-4係根據方法G供給實施例G2和G3。然而，此實施例係由於需要去保護步驟而落在前述實施例的合成範圍之外，且為了完整性起見，在下文包括此化學法。供給最終實施例的後續化學法類似於方法G實施例，以熟習此項技術領域者可理解的最少添加或改變。
步驟5：1-{4-[(7R)-7-(3-羥基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例G2)及1-{4-[(7S)-7-(3-羥基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例G3)之合成
令DCM(10毫升)中的1-{4-[7-(3-甲氧基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(G-4)(166毫克，0.387毫莫耳)之溶液在氮氣下以冰浴冷卻至0℃。令混合物以三溴化硼溶液(1.0M，1.94毫升，1.94毫莫耳，5.0當量)逐滴處理以提供粉紅色懸浮液，令其緩慢地溫熱至室溫且再攪拌4小時。令懸浮液以冰浴冷卻且小心地以飽和水性NaHCO3 (10毫升)淬滅。令層分離且令水層以DCM:MeOH(95:5，4x)萃取。令合併的有機物經無水硫酸鈉乾燥且濃縮。令粗製材料在Chiralpak AD-3管柱上(4.6×100毫米)以製備性SFC純化，令管柱在120巴之CO2 中以40%之IPA溶析。以4毫升/分鐘之流速給出Rt( 峰 1) =2.83分鐘及Rt( 峰 2) =3.49分鐘。1-{4-[(7R)-7-(3-羥基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(峰1)(實施例G2)：23毫克，＞99% ee，32%之產率。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) = 9.66 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.08 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.40 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.35 - 7.27 (m,1H), 7.05 - 6.97 (m, 2H), 6.84 (dd, J = 10.4, 16.6 Hz, 1H), 6.15 (dd, J = 2.3, 16.8 Hz, 1H), 5.77 - 5.65 (m, 1H), 3.92 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 3.84 - 3.58 (m, 4H), 3.50 (td, J = 3.5, 13.0 Hz, 2H), 3.29 - 3.25 (m, 2H), 3.17 (dd, J = 5.0, 18.1 Hz, 1H), 3.01 (t, J = 11.4 Hz, 1H), 2.85 (dd, J = 11.0, 18.2 Hz, 1H), 2.64 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 2.15 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 1.87 (dd, J = 3.3, 11.5 Hz, 1H)。[α]d 22 = 27.7° (C=0.1, MeOH)；LCMS (ESI) m/z 415 (M + H)。1-{4-[(7S)-7-(3-羥基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(峰2)(實施例G3)：27毫克，~99% ee，37%之產率。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 9.66 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.08 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.40 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.35 - 7.27 (m,1H), 7.07 - 6.97 (m, 2H), 6.84 (dd, J = 10.5, 16.6 Hz, 1H), 6.15 (dd, J = 2.3, 16.8 Hz, 1H), 5.79 - 5.64 (m, 1H), 3.92 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 3.83 - 3.58 (m, 4H), 3.55 - 3.44 (m, 2H), 3.29 - 3.25 (m, 2H), 3.17 (dd, J = 4.8, 18.3 Hz, 1H), 3.00 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 2.85 (dd, J = 11.1, 18.2 Hz, 1H), 2.71 - 2.59 (m, 1H), 2.15 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 1.87 (dd, J = 3.8, 12.0 Hz, 1H)。[α]d 22 = -24.8° (C=0.1, MeOH)；LCMS (ESI) m/z 415 (M + H)。
實施例H1(流程H)：1-(4-{(6R,7R)-7-(6-氯-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-甲基-2-[3-(甲基胺基)吖丁啶-1-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例H1)之合成
令去離子H2 O(27.04毫升)裝入500毫升Erlenmeyer燒瓶中且以pH7.5之1.0M磷酸鉀緩衝溶液(4.0毫升)、0.165M MgCl溶液(0.8毫升，132微莫耳)及在MeCN/H2 O(1:1)中的1-(4-{(6R,7R)-7-(6-氯-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F14)之0.005M溶液(0.16毫升，0.8微莫耳)處理。令混合物以經***(dexamethasone)誘導之雄性大鼠肝微粒體(新鮮製備，2毫克/毫升)處理，繼而添加新鮮製備的NADPH之0.013M水性溶液(4.0毫升，52微莫耳)。令未封蓋之Erlenmeyer燒瓶在37℃下使用具有1”動程的Thermo Scientific Precision振盪器振盪1小時。令反應混合物分成相等的部分(各20毫升)且倒入兩個50毫升Falcon錐形離心管中。令溶液以添加至各Falcon試管中的MeCN(20毫升)淬滅。令Falcon試管使用Cetrifuge CT422儀器在3000rpm下渦旋且離心5分鐘。令上清液傾析且以相等的部分(各20毫升)轉移至兩個50毫升Falcon錐形離心管中，且使用EZ-2 Plus Genevac蒸發溶劑(1小時HPLC設定，34℃/238毫巴至41℃/7毫巴)。令剩餘水性溶液合併(~20毫升)至50毫升Falcon錐形離心管中且以MeCN (0.5毫升)及純甲酸(0.5毫升)處理，且裝入去離子H2 O至50毫升最終體積。令溶液分成相等的部分(各25毫升)，倒入兩個高速離心管中且使用Beckman Coulter Allegra 64R(26200速度，24℃)儀器以40,000G離心30分鐘。令上清液傾析至50毫升錐形玻璃管中且令澄清溶液使用JASCO PU-1580 HPLC泵以0.8毫升/分鐘之流速經~60分鐘吸收在C18 HPLC管柱上(Zorbax Polaris，C18-A，250×4.6毫米，5微米粒徑)。令HPLC管柱轉移至與由四元泵(quaternary pump)、自動取樣器及光二極體陣列UV/vis檢測器所組成之Waters Acquity UHPLC儀器連線的Thermo LTQ Velos質譜儀。應用梯度(MeCN/H2 O+0.1%之甲酸)分離關注產物。在通過PDA檢測器後，溶析液以~15:1之比分開，較大部分進入流份檢測器(Collect PAL，Leap Technologies)及較小部分進入質譜儀(每20秒收集流份)。令含有關注峰之流份以使用與Thermo Accelar UHPLC及具有CTC Analytics Leap自動注射器(Thermo-Fisher)之二極體陣列UV/vis檢測器連線的Thermo Orbitrap Elite高解析離子阱質譜儀的UHPLC-UV-HRMS分析。令樣品注射(2微升)至C18 UHPLC管柱上(Phenomenex Kinetex，C18，50×2.1毫米，1.7微米粒徑)及應用0.4毫升/分鐘流速的MeCN/H2 O+0.1%之甲酸梯度，維持在45℃。在UHPLC-UV-HRMS分析後，匯集流份且使用EZ-2 Plus Genevac移除溶劑(3小時HPLC設定，34℃/238毫巴至41℃/7毫巴)，以供給1-(4-{(6R,7R)-7-(6-氯-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-甲基-2-[3-(甲基胺基)吖丁啶-1-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例G1)(32微克，60毫微莫耳，7.5%之產率)。令乾燥之樣品以NMR光譜術分析且藉由使用具有Topspin V3.2之ERETIC2功能以相對於DMSO-d6 中的5.0mM苯甲酸標準溶液之1 H NMR光譜的外部校準進行量化。1 H NMR (600 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.12 (br. s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 6.85 (dd, J = 16.7, 10.4 Hz, 1H), 6.15 (dd, J = 16.7, 2.3, 1H), 5.72 (dd, J = 10.4, 2.3 Hz, 1H), 4.03 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 3.87 - 3.77 (m, 1H), 3.77 - 3.67 (m, 1H), 3.65 - 3.56 (m, 4H), 3.50 - 3.40 (m, 4H), 3.24 - 3.15 (m, 2H), 3.04 - 2.96 (m, 1H), 2.89 - 2.81 (m, 1H), 2.64 - 2.61 (m, 1H), 2.49 - 2.47 (m, 4H), 2.43 - 2.39 (m, 1H), 2.22 (s, 3H), 0.68 (d, J = 6.3 Hz, 3H)。HRMS (ESI-TOF)以C28 H36 ClN8 O之[M+H]: m/z計算值=535.2701，實測值535.2700(0.2ppm)
生物實施例及生物檢定方法
質譜術反應性檢定法(MSRA)
本發明呈示之化合物係使用MSRA共價結合kRas G12C以檢測例示性化合物與kRas G12C之共價加成物。
令裝載GDP之kRas(1-169)G12C、C51S、C80L、C118S在蛋白質檢定緩衝液25mM Hepes pH7.5、200mM NaCl、5%之甘油中稀釋至5µM濃度且令20微升蛋白質轉移至96槽孔盤中。產生初始化合物儲備液，其濃度比彼等所欲檢定濃度高100倍。參見K-Ras(G12C)inhibitors allosterically control GTP affinity and effector interactions； Ostrem JM, Peters U, Sos ML, Wells JA, Shokat KM； Nature. 2013, Nov 28； 503(7477):548-51。
令溶解在DMSO中的例示性化合物以100倍稀釋至96槽孔盤中含有20微升5µM kRas蛋白質之溶液中以引發反應。使用Mosquito(TPP Lab tech)液體處置機器人添加化合物至蛋白質溶液中。化合物之典型的最終濃度為10µM。令盤在RT下放置在振盪器上1分鐘，密封且在室溫下培育特定的時期。令5微升反應混合物添加至10微升0.2%之甲酸終止溶液中且徹底混合。典型的結束點為30、120、600和1440分鐘。
使用Waters Acquity H-class UPLC系統/Xevo G2-XS TOF質譜儀收集數據。令蛋白質以彼等液相注射在Bruker Microtrap蛋白質管柱TR1/15109/03上。使用下列的緩衝液設定LC梯度：緩衝液A：0.2%之甲酸H20；B：0.2%之甲酸ACN。蛋白質係使用下列的LC梯度自管柱溶析：0至0.4分鐘，10%之B至30%之B；0.4分鐘至2.4分鐘至90%之B，2.5分鐘，10%之B，3分鐘，10%之B。在數據採集後，立即使用MaxEnt軟體進行初始數據分析。
使用標準的自動處理功能，在數據採集後立即使用MexEnt軟體定義未經修飾及經修飾之kRas蛋白質百分比。最高峰被定義為100%，而較小峰被定義為以自動處理功能定義之指配數字。令相應於經例示性化合物修飾及未經修飾之KRas(裝載GDP之kRas)(1-169)G12C、C51S、C80L、C118S的修飾百分比輸出至Xcel數據分析軟體。
在規定之例示性化合物濃度下的經修飾之蛋白質的百分比係使用下式計算：%修飾=經修飾之峰的數目/經修飾+未經修飾之數目總和。經定義為百分比修飾(PM)之所得值及增加的PM反映特定的化合物在指定的化合物濃度下於給出之時間點比其他的化合物更好。
MiaPaCa2細胞活性檢定法
本發明呈示之化合物在治療人類癌細胞系時導致結合GDP之Ras的聚積。
在細胞環境中結合GDP之KRAS G12C的聚積係基於KRAS G12C在處於其活性-GTP結合狀態時僅結合至其下游激酶Raf-1(MAP激酶激酶激酶)之原理測量。在此狀態下，結合至Raf-1激酶之結構域的Ras被稱為Ras結合結構域(RBD)。
令MiaPaCa2細胞在以10%之胎牛血清及1%之青黴素/鏈黴素補充之DMEM培養基(Gibco 11995)中生長。令細胞以40,000個細胞/槽孔之密度接種在96槽孔組織培養盤中且容許附著16至24小時。試驗化合物係於DMSO中製備成10mM儲備液且使用3倍稀釋方案於100%之DMSO中連續稀釋。在完全生長培養基中製得中間物5X濃縮盤且以25微升/槽孔添加至100微升細胞中而成為0.1%之DMSO的最終濃度。以一式兩份測試每一濃度的例示性化合物。陰性對照槽孔為具有10μM之對照抑制劑的細胞及陽性對照槽孔為沒有藥物，僅DMSO的細胞。令盤在37℃，5%之CO2 下培育6小時。在處理後，令細胞以冰冷的PBS及100微升/槽孔之冰冷的1X檢定/溶解液清洗3次。添加具有蛋白酶抑制劑之緩衝液(25 mM HEPES，pH 7.5、150 mM NaCl、1%之NP-40、10mM MgCl2、1mM EDTA、2%之甘油)。在溶解後，令樣品冷凍在-80℃下。
令Raf-1 RBD(LJIC-1988A1)在PBS中稀釋至100毫微克/槽孔且令5微升/槽孔點塗在MSD高結合SECTOR盤(L15XB)上。令盤在室溫下於迴轉式振盪器上培育1小時。令盤以PBS/0.05%之Tween-20清洗且添加50微升/槽孔的解凍之溶解樣品，繼而添加50微升在PBS/0.05%之Tween-20中的1%之MSD阻斷劑A(R93BA)。令盤在迴轉式振盪器上培育1小時且以PBS/0.05%之Tween-20清洗。添加在1%之MSD阻斷劑A溶液中以1:3000稀釋之25微升/槽孔之Anti-pan-Ras抗體(Cell Biolabs 244003)，令盤在迴轉式振盪器上培育1小時且以PBS/0.05%之Tween-20清洗。令SULFO-TAG山羊抗小鼠二次抗體(MSD R32AC)在MSD阻斷劑A溶液中以1:500稀釋且以25微升/槽孔添加。令盤在迴轉式振盪器上培育1小時且以PBS/0.05%之Tween-20清洗。添加在H2 O中以1:3稀釋之150微升/槽孔之讀取緩衝液T(MSD R92TC)且令盤在Meso Scale Discovery Sector Imager S600上讀取。
令KRAS信號標準化至最大抑制及DMSO對照值，且使用劑量反應曲線的4參數擬合產生IC50值。降低的IC50反映例示性化合物在治療癌細胞系的特定時間點導致結合GDP之KRAS G12C的聚積水平比另一例示性化合物高。
H358細胞活性檢定法
本發明呈示之化合物在治療人類癌細胞系時導致結合GDP之Ras的聚積。
在細胞環境中結合GDP之KRAS G12C的聚積係基於KRAS G12C在處於其活性-GTP結合狀態時僅結合至其下游激酶Raf-1(MAP激酶激酶激酶)之原理測量。在此狀態下，結合至Raf-1激酶之結構域的Ras被稱為Ras結合結構域(RBD)。
令H358細胞在以10%之胎牛血清及1%之青黴素/鏈黴素補充之RPMI1640培養基(Gibco 11875)中生長。令細胞以40,000個細胞/槽孔之密度接種在96槽孔組織培養盤中且容許附著16至24小時。試驗化合物係於DMSO中製備成10mM儲備液且使用3倍稀釋方案於100%之DMSO中連續稀釋。在完全生長培養基中製得中間物5X濃縮盤且以25微升/槽孔添加至100微升細胞中而成為0.1%之DMSO的最終濃度。以一式兩份測試每一濃度的例示性化合物。陰性對照槽孔為以10μM之對照抑制劑的細胞及陽性對照槽孔為沒有藥物，僅DMSO的細胞。令盤在37℃，5%之CO2 下培育6小時。在處理後，令細胞以冰冷的PBS及100微升/槽孔之冰冷的1X檢定/溶解液清洗3次。添加具有蛋白酶抑制劑之緩衝液(25 mM HEPES，pH 7.5、150 mM NaCl、1%之NP-40、10 mM MgCl2、1 mM EDTA、2%之甘油)。在溶解後，令樣品冷凍在-80℃下。
令Raf-1 RBD(LJIC-1988A1)在PBS中稀釋至100毫微克/槽孔且令5微升/槽孔點塗在MSD高結合SECTOR盤(L15XB)上。令盤在室溫下於迴轉式振盪器上培育1小時。令盤以PBS/0.05%之Tween-20清洗且添加50微升/槽孔的解凍之溶解樣品，繼而添加50微升在PBS/0.05%之Tween-20中的1%之MSD阻斷劑A(R93BA)。令盤在迴轉式振盪器上培育1小時且以PBS/0.05%之Tween-20清洗。添加在1%之MSD阻斷劑A溶液中以1:3000稀釋之25微升/槽孔之Anti-pan-Ras抗體(Cell Biolabs 244003)，令盤在迴轉式振盪器上培育1小時且以PBS/0.05%之Tween-20清洗。令SULFO-TAG山羊抗小鼠二次抗體(MSD R32AC)在MSD阻斷劑A溶液中以1:500稀釋且以25微升/槽孔添加。令盤在迴轉式振盪器上培育1小時且以PBS/0.05%之Tween-20清洗。添加在H2 O中以1:3稀釋之150微升/槽孔之讀取緩衝液T(MSD R92TC)且令盤在Meso Scale Discovery Sector Imager S600上讀取。
令KRAS信號標準化至最大抑制及DMSO對照值，且使用劑量反應曲線的4參數擬合產生IC50值。降低的IC50反映例示性化合物在治療癌細胞系的特定時間點導致結合GDP之KRAS G12C的聚積水平比另一例示性化合物高。
本文所有的反應及本文所使用之新穎起始材料的製備皆為慣用的，且適合於彼等性能及製備的試劑和反應條件以及適合於分離所欲產物的程序為那些熟習此項技術領域者以參考文獻先例及其實施例和製備法而熟知。
所述的一些步驟可能需要保護不想要反應的潛在反應性官能基，且於後續裂解該保護基。在此例子中，可能使用任何可相容的保護基。特別地可使用保護及去保護方法，諸如那些以T.W. Greene (Protective Groups in Organic Synthesis, A. Wiley-Interscience Publication, 1981)或P. J. Kocienski (Protecting groups , Georg Thieme Verlag, 1994)所述者。
通用的合成流程
如流程I中所例示，化合物(諸如I)可經購買或合成取得(J. Org. Chem. 2012, 77, 9422-9425)且可為非手性、消旋性或鏡像純化合物。化合物(諸如I)可與經適當地取代之硼酸或BPin酯(II)以適當的鹼(諸如LiOMe之K3 PO4 、KOSiMe3 )在添加或未添加H2 O的溶劑中(諸如1,4-二㗁烷)進行銠催化之共軛加成反應以得到化合物(諸如III)。化合物(諸如III)可以適當的鹼及羰基化試劑在適當的溶劑中(諸如在THF中的NaH及碳酸二乙酯、在THF中的LDA及氰基甲酸甲酯或在甲苯中的LHDMS及氰基甲酸甲酯)羰基化以提供化合物(諸如IV)。化合物(諸如IV)可以烷氧化物鹼與甲脒縮合以提供化合物(諸如V)，通常在醇系溶劑中。化合物(諸如V)可與親核胺種類偶合以提供化合物(諸如VI)。此偶合通常係在使用BOP試劑及DBU的一個步驟中或在藉由以POCl3 處理V，繼而添加親核胺種類的兩個步驟中進行。化合物(諸如VI)可藉由以酸處理而去保護，通常以TFA於DCM中或以HCl於MeOH中處理以提供化合物(諸如VII)。化合物(諸如VII)可醯化以提供化合物(諸如VIII)，通常藉由以丙烯醯氯於DCM中及以TEA作為鹼處理、以EtOAc/H2 O及以NaHCO3 作為鹼處理或以HFIP及以NaHCO3 作為鹼處理。在一些例子中，種類R可含有保護基，其可以合成順序中的額外步驟移除。R、R’、A及B係如本文下述之實施態樣、流程、實施例及申請專利範圍中所定義。每一步驟的化合物可以標準的技術純化，諸如管柱層析術、結晶及反相HPLC或SFC。若必要時，VIII之鏡像異構物的分離可在此項技術中已知的標準方法下進行，諸如手性SFC或HPLC，以供給單一鏡像異構物。
如流程II中所例示，令化合物(諸如IV)(根據流程I所製備)與N,N-二烷基胍縮合以提供化合物(諸如IX)。該等反應通常係在醇系溶劑中以適當的烷氧化物鹼進行。化合物(諸如IX)可與親核胺種類偶合以提供化合物(諸如X)。此偶合通常係在使用BOP試劑及DBU的一個步驟中或在藉由以POCl3 處理IX，繼而添加親核胺種類的兩個步驟中進行。化合物(諸如X)可在酸性條件下去保護，通常以TFA於DCM中或以HCl於MeOH中以提供化合物(諸如XI)。化合物(諸如XI)可醯化以提供化合物(諸如XII)，通常藉由以丙烯醯氯於DCM中及以TEA作為鹼處理、以EtOAc/H2 O及以NaHCO3 作為鹼處理或以HFIP及以NaHCO3 作為鹼處理。R、R’、R’’、R’’’、A及B係如本文下述之實施態樣、流程、實施例及申請專利範圍中所定義。每一步驟的化合物可以標準的技術純化，諸如管柱層析術、結晶及反相HPLC或SFC。若必要時，XII之鏡像異構物的分離可在此項技術中已知的標準方法下進行，諸如手性SFC或HPLC，以供給單一鏡像異構物。
如流程III中所例示，令化合物(諸如IV)與尿素縮合以提供化合物(諸如XIII)。令化合物(諸如XIII)氯化，通常以POCl3 以提供化合物(諸如XIV)，接著與親核胺種類在鹼性條件下偶合以提供化合物(諸如XV)。通常在溫和的催化酸存在下以DHP保護化合物(諸如XV)以提供化合物(諸如XVI)。令化合物(諸如XVI)與醇在鹼性條件下偶合以提供化合物(諸如XVII)。令化合物(諸如XVII)在酸性條件下去保護，通常以TFA於DCM中或以HCl於MeOH中以提供化合物(諸如XVIII)。化合物(諸如XVIII)可醯化以提供化合物(諸如XIX)，通常藉由以丙烯醯氯於DCM中及以TEA作為鹼處理、以EtOAc/H2 O及以NaHCO3 處理或以HFIP及以NaHCO3 作為鹼處理。R、R’、R’’’’係如本文下述之實施態樣、流程、實施例及申請專利範圍中所定義。每一步驟的化合物可以標準的技術純化，諸如管柱層析術、結晶及反相HPLC或SFC。若必要時，XIX之鏡像異構物的分離可在此項技術中已知的標準方法下進行，諸如手性SFC或HPLC，以供給單一鏡像異構物。
如流程IV中所例示，化合物(諸如XX)接受酵素性氧化反應以提供化合物(諸如XXI)。
如流程V中所例示，令化合物(諸如XXII)與適當的芳基硼酸或芳基BPin酯在標準的Pd催化之鈴木(Suzuki)偶合條件下偶合以提供化合物(諸如XXIII)。令化合物(諸如XXIII)氫化，通常在H2 的存在下於極性溶劑中(諸如MeOH)使用催化性Pd/C或Pt/C以提供化合物(諸如XXIV)。令化合物(諸如XXIV)在酸性條件下去保護，通常以TFA於DCM中或以HCl於MeOH中以提供化合物(諸如XXV)。化合物(諸如XXV)可醯化以提供化合物(諸如XXVI)，通常藉由以丙烯醯氯於DCM中及以TEA作為鹼處理、以EtOAc/H2 O及以NaHCO3 作為鹼處理或以HFIP及以NaHCO3 作為鹼處理。Z係如本文下述之實施態樣、流程、實施例及申請專利範圍中所定義，且可能含有保護基，其可於合成順序中的後續步驟移除。每一步驟的化合物可以標準的技術純化，諸如管柱層析術、結晶及反相HPLC或SFC。若必要時，XXVI之鏡像異構物的分離可在此項技術中已知的標準方法下進行，諸如手性SFC或HPLC，以供給單一鏡像異構物。
如流程VII中所例示，化合物(諸如XXVII)接受酵素性氧化反應以提供化合物(諸如XXVIII)。
合成中間物之製備
[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]硼酸(Int-1)之製備，如流程1中所示。
步驟1：4-溴-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(1b)之合成
此反應係以兩個並行的批組進行。令PPTS(11.9克，47.4毫莫耳，0.1當量)在28℃下添加至DCM(1公升)中的4-溴-5-甲基-1H-吲唑(100克，474毫莫耳，1.0當量)之攪拌溶液中。接著添加一份DHP(119.6克，1.4莫耳，3.0當量)。令混合物在30℃下攪拌18小時。TLC分析(20%之EtOAc/石油醚)顯示起始材料已完全消耗。令兩個批組合併在一起進行整理。令反應以H2 O(1.5公升)淬滅且令層分離。令水層以DCM(1公升)萃取。令合併的有機物以H2 O(1公升)及食鹽水(1公升)清洗，經Na2 SO4 乾燥且濃縮至乾燥。令殘餘物以石油醚(300毫升)濕磨，以提供成為灰白色固體的4-溴-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(1b)(223克，80%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.00 (s, 1H), 7.68 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.84 (dd, J = 9.6, 2.5 Hz, 1H), 3.87 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.73 (ddd, J = 11.5, 7.7, 6.0 Hz, 1H), 2.45 (s, 3H), 2.43-2.31 (m, 1H), 2.09-1.90 (m, 2H), 1.83-1.66 (m, 1H), 1.57 (dt, J = 9.3, 3.9 Hz, 2H)。LCMS (ESI) m/z 295, 297 (M+H)。
步驟2：[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]硼酸(Int-1)之合成
反應係以兩個並行的批組進行。令THF(2.0公升)中的4-溴-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(210.0克，711.44毫莫耳，1.0當量)及B(O-iPr)3 (267.61克，1.42莫耳，2.0當量)之攪拌溶液冷卻至-70℃。接著令n-BuLi(526.5毫升，1.32莫耳，1.85當量)經3小時期間逐滴添加至上述溶液中，維持反應溫度介於-70℃與-65℃之間。在加完後，令反應混合物在-70℃下攪拌1小時。TLC分析(20%之EtOAc/石油醚)顯示起始材料已消耗。令混合物以飽和水性NH4 Cl溶液(2.0公升)淬滅且以MTBE(2.0公升)稀釋。令層分離且令水層以MTBE(1.0公升)萃取。令合併的有機物以食鹽水(1.5公升)清洗，經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且在25℃下濃縮。令殘餘物溶解在MTBE(300毫升)中。令石油醚(1.2公升)在20℃(室溫)下逐滴添加至溶液中。在石油醚添加期間沉澱出白色固體。令所得懸浮液過濾且令濾餅以石油醚(800毫升)清洗。令濾餅在真空下乾燥以提供成為白色固體的[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]硼酸(Int-1)(280.0克，76%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.29 (s, 2H), 7.89 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.77 (dd, J = 9.7, 2.6 Hz, 1H), 3.91-3.83 (m, 1H), 3.72 (ddd, J = 11.5, 7.8, 6.2 Hz, 1H), 2.45 (s, 3H), 2.39 (ddd, J = 16.2, 8.4, 3.8 Hz, 1H), 2.10-1.97 (m, 1H), 1.91 (dq, J = 13.0, 3.4 Hz, 1H), 1.80-1.67 (m, 1H), 1.57 (dq, J = 9.0, 4.6 Hz, 2H)。LCMS (ESI) m/z 261 (M+H)。
5-氯-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-醇(Int-2)之製備，如流程2中所示。
步驟1：4-溴-5-氯-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(2b)之合成
令DHP(518毫克，6.16毫莫耳，1.5當量)及PPTS(103毫克，0.410毫莫耳，0.1當量)添加至THF(50毫升)中的4-溴-5-氯-1H-吲唑(2a)(950毫克，4.10毫莫耳，1.0當量)之溶液中。令混合物在50℃下攪拌20小時。添加另一批組的DHP(173毫克，2.05毫莫耳，0.5當量)且令所得混合物在50℃下攪拌16小時。LCMS分析表明起始材料已消耗，以提供成為兩種區域異構物的混合物之產物。在減壓下移除溶劑。令粗製產物以快速層析術純化(SiO2 ，20克，10%之EtOAc/石油醚)，以提供成為白色固體的4-溴-5-氯-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(2b)(850毫克，66%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.11 (s, 1H), 7.84 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.93-5.88 (m, 1H), 3.87 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 3.77-3.72 (m, 1H), 2.37-2.32 (m, 1H), 2.01 (t, J = 14.0 Hz, 2H), 1.73 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 1.58 (t, J = 6.4 Hz, 2H)。LCMS (ESI) m/z 315, 317 (M + H)。
步驟2：[5-氯-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]硼酸(Int-2)之合成
令n-BuLi(2.4M於己烷中，4.5毫升，10.8毫莫耳，1.5當量)在-70℃下添加至THF(20毫升)中的4-溴-5-氯-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(2b)(2.27克，7.193毫莫耳1.0當量)之混合物中。令混合物在此溫度下攪拌20分鐘。在-70℃下添加硼酸三甲酯(2.24克，22毫莫耳，3.0當量)。令混合物在此溫度下攪拌20分鐘。LCMS分析顯示形成所欲化合物。令反應以飽和水性NH4 Cl淬滅且接著以EtOAc(2×30毫升)萃取。令合併的有機物以食鹽水清洗，經無水Na2 SO4 乾燥，濃縮且以快速層析術純化(SiO2 ，0→50%之EtOAc/PE)，以提供成為白色固體的[5-氯-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]硼酸(Int-2)(1.42克，70%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.59 (s, 2H), 7.94 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 8.9, 0.9 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.84 (dd, J = 9.6, 2.6 Hz, 1H), 3.94-3.82 (m, 1H), 3.73 (ddd, J = 11.5, 7.9, 5.8 Hz, 1H), 2.45-2.28 (m, 1H), 2.08-1.97 (m, 1H), 1.94 (dq, J = 13.1, 3.6 Hz, 1H), 1.82-1.65 (m, 1H), 1.58 (tt, J = 8.6, 3.7 Hz, 2H)。LCMS (ESI) m/z 281 (M + H)。
5-氯-6-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-1H-吲唑(Int-3)之製備，如流程3中所示。
步驟1：1-溴-2-氯-5-氟-3-甲基苯(3b)之合成
令2-溴-4-氟-6-甲基苯胺(3a)(5克，24.5毫莫耳，1.0當量)添加至濃縮HCl(30毫升)及H2 O(30毫升)之溶液中且令所得混合物在60至70℃下攪拌1小時。令混合物冷卻至0至5℃，添加在H2 O(10毫升)中的NaNO2 (2.03克，29.4毫莫耳，1.2當量)之溶液且令反應攪拌15分鐘。令混合物添加至濃縮HCl(50毫升)中的CuCl(3.64克，36.8毫莫耳，1.5當量)之溶液中且在70至80℃下攪拌30分鐘。令粗製反應混合物冷卻至室溫且以DCM(3×100毫升)萃取。令合併的有機物經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮以提供成為棕色油的1-溴-2-氯-5-氟-3-甲基苯(3b)(4.5克，80%之產率)，其無需接受進一步的純化。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.23 (dd, J = 7.8, 2.9 Hz, 1H), 6.97 - 6.91 (m, 1H), 2.43 (s, 3H)。
步驟2：2-溴-3-氯-6-氟-4-甲基苯甲醛(3c)之合成
令LDA(2.0M於THF中，35毫升，1.2當量)在-78℃下添加至THF(100毫升)中的1-溴-2-氯-5-氟-3-甲基苯(3b)(13克，58毫莫耳，1.0當量)之溶液中。令混合物攪拌40分鐘且接著添加DMF(6.5毫升)。令反應在-78℃下攪拌1小時。令反應混合物倒入H2 O(50毫升)中且以EtOAc(3×40毫升)萃取。令合併的有機物經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮至乾燥。令粗製殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，0→15%之EtOAc/PE)，以提供成為淺黃色固體的2-溴-3-氯-6-氟-4-甲基苯甲醛(3c)(8.34克，57%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 10.29 (s, 1H), 7.09 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 2.51 (s, 3H)。
步驟3：5-溴-4-甲氧基-1H-吲唑(3d)之合成
令NH2 NH2 (516毫克，10.3毫莫耳，12當量)添加至DMSO(5毫升)中的2-溴-3-氯-6-氟-4-甲基苯甲醛(3c)(220毫克，0.875毫莫耳，1.0當量)之混合物中。令混合物在130℃下攪拌3小時。令反應混合物倒入H2 O(35毫升)中且以DCM(3×30毫升)萃取。令合併的有機物經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮至乾燥。令粗製殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，0→20%之EtOAc/PE)，以提供成為白色粉末的4-溴-5-氯-6-甲基-1H-吲唑(3d)(108毫克，50%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.02 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 2.56 (d, J = 0.6 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 245, 247 (M + H)。
步驟4：4-溴-5-氯-6-甲基-1H-吲唑(3e)之合成
4-溴-5-氯-6-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(3e)(2.4克，59%之產率)係根據用於製備4-溴-5-甲基-1-(四氫2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(1b)之程序製備，除了反應在THF中於50℃下進行以外。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.94 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 5.66 (dd, J = 9.0, 2.6 Hz, 1H), 3.99 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 3.80-3.64 (m, 1H), 2.56 (s, 3H), 2.54-2.46 (m, 1H), 2.15 (dd, J = 8.1, 4.4 Hz, 1H), 2.11-2.03 (m, 1H), 1.79-1.64 (m, 3H)。LCMS (ESI) m/z 329, 331 (M + H)。
步驟5：5-氯-6-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-1H-吲唑(Int-3)之合成
令1,4-二㗁烷(25毫升)中的4-溴-5-氯-6-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(3e)(3克，9.1毫莫耳，1.0當量)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-雙(1,3,2-二氧硼雜環戊烷)(4.62克，18.2毫莫耳，2.0當量)、KOAc(2.68克，27.3毫莫耳，3.0當量)與Pd(dppf)Cl2 (0.666克，0.910毫莫耳，0.1當量)之混合物在80℃下攪拌16小時。LCMS分析顯示起始材料已完全消耗。令反應冷卻至25℃且濃縮至乾燥。令殘餘物以H2 O(30毫升)稀釋且以EtOAc(3×30毫升)萃取。令合併的有機物以食鹽水(50毫升)清洗，經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮至乾燥。令粗製殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，0→20%之EtOAc/PE)，以提供成為淺黃色膠的5-氯-6-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-1H-吲唑(Int-3)(2.2克，得到63.7%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.06 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 6.08-5.29 (m, 1H), 3.92-3.82 (m, 1H), 3.80-3.66 (m, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.43-2.33(m, 1H), 2.08-2.00 (m, 1H), 1.97-1.88 (m, 1H), 1.80-1.67 (m, 1H), 1.63-1.53 (s, 2H), 1.38 (s, 12H)；LCMS (ESI) m/z 377 (M + H)。
根據流程4製備4-(7-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)-5,6-二氫喹唑啉-4-基)哌-1-羧酸三級丁酯(Int-4)。
步驟1：4-乙氧基-2-側氧基環己-3-烯-1-羧酸乙酯(4b)之合成
令LHMDS(1.0M於THF中，713毫升，713毫莫耳，2.0當量)在-78℃下快速地逐滴添加至THF(600毫升)中的3-乙氧基環己-2-烯-1-酮(4a)(50克，356.7毫莫耳，1.0當量)及碳酸二乙酯(84.3克，713毫莫耳，2.0當量)之溶液中。令混合物溫熱至20℃且攪拌16小時。添加額外的LHMDS(250毫升，250毫莫耳，1.0M)且令混合物在20℃下攪拌4小時。令混合物倒入1N HCl(1公升)中且攪拌1小時。令混合物以EtOAc(3×500毫升)萃取。令合併的有機物以食鹽水(400毫升)清洗且經無水Na2 SO4 乾燥。在過濾及濃縮後，令殘餘物以石油醚/EtOAc(10/1)清洗，以提供成為黃色固體的4-乙氧基-2-側氧基環己-3-烯-1-羧酸乙酯(4b)(57克，75%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 )δ 5.38 (s, 1H), 4.21 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.91 (qd, J = 7.1, 2.2 Hz, 2H), 3.31 (dd, J = 8.9, 5.0 Hz, 1H), 2.56 (dt, J = 17.0, 5.4 Hz, 1H), 2.51-2.25 (m, 2H), 2.25-2.06 (m, 1H), 1.36 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.28 (t, J = 7.1 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 213 (M + H)。
步驟2：7-側氧基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-羧酸酯(4c)之合成
令70%之水性乙酸(1.5公升)中的4-乙氧基-2-側氧基環己-3-烯-1-羧酸乙酯(4b)(220克，1.03莫耳，1.0當量)之溶液在60℃下攪拌16小時。令混合物濃縮至乾燥。令所得殘餘物自苯(3x)共沸蒸餾而乾燥以提供粗製二酮。令乙二醇(70克，1.13毫莫耳，1.1當量)及對-甲苯磺酸單水合物(19.57克，1.03毫莫耳，1.0當量)添加至苯(800毫升)中的二酮之溶液中。令燒瓶以迪安-斯塔克分水器(Dean-Stark trap)封蓋且令混合物加熱至回流2小時。在冷卻至室溫後，令溶液以飽和水性NaHCO3 製成鹼性。令產物以EtOAc(3×2公升)萃取。令合併的有機物以食鹽水清洗，經Na2 SO4 乾燥且蒸發至乾燥。令粗製殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，2%之EtOAc/己烷)，以提供成為黃色油的7-側氧基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-羧酸乙酯(4c)(48克，21%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 4.19 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.97-3.82 (m, 5H), 2.49-2.42 (m, 2H), 2.27 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 1.69 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 1.23 (t, J = 7.1 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 229 (M + H)。
步驟3：5',8'-二氫-3'H-螺[1,3-二氧雜環戊烷-2,7'-喹唑啉]-4'(6'H)-酮(4d)之合成
令MeOH(500毫升)中的7-側氧基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-羧酸乙酯(4c)(48克，210.5毫莫耳，1.0當量)、甲脒乙酸鹽(43.78克，421毫莫耳，2.0當量)與NaOMe(22.7克，421毫莫耳，2.0當量)之混合物回流4小時。令反應混合物濃縮至乾燥且令殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，DCM/MeOH=20/1)，以給出成為黃色固體的5',8'-二氫-3'H-螺[1,3-二氧雜環戊烷-2,7'-喹唑啉]-4'(6'H)-酮(4d)(29克，66%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.99 (s, 1H), 4.01-3.89 (m, 4H), 2.70 (s, 2H), 2.47 (dd, J = 13.8, 7.3 Hz, 2H), 1.78 (t, J = 6.6 Hz, 2H)。LCMS (ESI) m/z 209 (M + H)。
步驟4：4-(5',8'-二氫-6'H-螺[1,3-二氧雜環戊烷-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌-1-羧酸三級丁酯(4e)之合成
令DBU(63.56克，418.2毫莫耳，3.0當量)添加至DMF(300毫升)中的5',8'-二氫-3'H-螺[1,3-二氧雜環戊烷-2,7'-喹唑啉]-4'(6'H)-酮(4d)(29克，139.4毫莫耳，1.0當量)、哌-1-羧酸三級丁酯(38.9克，209.1毫莫耳，1.5當量)與BOP試劑(123.2克，278.8毫莫耳，2.0當量)之混合物中，且令混合物在20℃下攪拌16小時。添加EtOAc(500毫升)且令混合物以H2 O(3×300毫升)清洗。令有機相經無水Na2 SO4 乾燥。在過濾及濃縮後，令殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，石油醚/EtOAc=2/3)，以提供成為黃色油的4-(5',8'-二氫-6'H-螺[1,3-二氧雜環戊烷-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌-1-羧酸三級丁酯(4e)(25克，47.5%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.48 (s, 1H), 3.97 (td, J = 6.4, 1.9 Hz, 4H), 3.46-3.42 (m, 4H), 3.32-3.27 (m, 4H), 2.92-2.89 (m, 2H), 2.68 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 1.81 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 1.42 (s, 9H)。LCMS (ESI) m/z 377 (M + H)。
步驟5：4-(哌-1-基)-5,6-二氫喹唑啉-7-醇(4f)之合成
令HCl(4.0N於1,4-二㗁烷中，60毫升，240毫莫耳，3.6當量)添加至THF(300毫升)中的4-(5',8'-二氫-6'H-螺[1,3-二氧雜環戊烷-2,7'-喹唑啉]-4'-基)哌-1-羧酸三級丁酯(4e)(25克，66.31毫莫耳，1.0當量)之溶液中，且令混合物在50℃下攪拌16小時。LCMS分析顯示起始材料已消耗。令混合物濃縮至乾燥以提供4-(哌-1-基)-5,6-二氫喹唑啉-7-醇(4f)，其無需接受進一步的純化。LCMS(ESI)m/z233(M+H)。
步驟6：4-(7-側氧基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基)哌-1-羧酸三級丁酯(4g)之合成
令THF(300毫升)、H2 O(60毫升)及EtOAc(100毫升)中的粗製4-(哌-1-基)-5,6-二氫喹唑啉-7-醇鹽酸鹽(4f)之溶液調整至pH=7，且添加(Boc)2 O(15.18克，69.62毫莫耳，1.05當量)。接著添加K2 CO3 (9.15克，66.31毫莫耳)且令混合物在20℃下攪拌30分鐘。令混合物以EtOAc(2×400毫升)萃取。令合併的有機物以食鹽水(400毫升)清洗且經無水Na2 SO4 乾燥。在過濾及濃縮後，令殘餘物以EtOAc/石油醚(1/40)濕磨，以提供成為黃色固體的4-(7-側氧基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基)哌-1-羧酸三級丁酯(4g)(16克，73%之產率，兩個步驟)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.62 (s, 1H), 3.68 (s, 2H), 3.57 (dd, J = 6.2, 3.9 Hz, 4H), 3.44-3.32 (m, 4H), 2.92 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.65-2.52 (m, 2H), 1.49 (s, 9H)。LCMS (ESI) m/z 333 (M + H)。
步驟7：4-(7-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)-5,6-二氫喹唑啉-4-基)哌-1-羧酸三級丁酯(Int-4)之合成
令4-(7-側氧基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基)哌-1-羧酸三級丁酯(4g)(1.0克，3.008毫莫耳，1.0當量)及THF(10毫升)添加至配備有磁攪拌棒的50毫升燒瓶中。令混合物冷卻至-78℃。添加LHMDS(1.0M於THF中，3.01毫升，3.01毫莫耳，1.0當量)。在10分鐘後，添加PhNTf2 (1.02克，2.86毫莫耳，0.95當量)。令混合物在-78℃下攪拌2小時且接著溫熱至室溫隔夜。LCMS分析表明形成所欲產物且起始材料已完全消耗。令混合物以1M水性NaHCO3 (10毫升)淬滅且以EtOAc(3×30毫升)萃取。令合併的有機物以水及食鹽水清洗且接著經無水MgSO4 乾燥。令混合物過濾且濃縮至乾燥以提供殘餘物，令其以快速層析術純化(SiO2 ，0→60%之EtOAc/庚烷)，以提供成為淺黃色固體的4-(7-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)-5,6-二氫喹唑啉-4-基)哌-1-羧酸三級丁酯(Int-4)(1.4克，100%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.66 - 8.59 (m, 1H), 6.62 - 6.42 (m, 1H), 3.62 - 3.49 (m, 4H), 3.38 - 3.22 (m, 4H), 3.00 - 2.87 (m, 2H), 2.78 - 2.65 (m, 2H), 1.49 (s, 9H)。LCMS (ESI) m/z 465 (M + H)。
根據流程5製備6-氯-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-1H-吲唑(Int-5)
步驟1：4-氯-2-氟-5-甲基苯胺(5b)之合成
令12M HCl(10.1毫升，121毫莫耳)添加至EtOH/H2 O(200毫升，1:1)中的1-氯-5-氟-2-甲基-4-硝苯(5a)(23.0克，121毫莫耳)之溶液中。令混合物加熱至80℃且經30分鐘期間緩慢地添加Fe(23.7克，425毫莫耳)。令混合物在相同的溫度下攪拌1小時。LCMS分析表明起始材料已消耗且形成所欲產物。令混合物冷卻至25℃，以乙酸乙酯(300毫升)稀釋且以飽和水性NaHCO3 鹼化至pH=8~9。令層過濾分離且令水層以乙酸乙酯(2×300毫升)萃取。令合併的有機物以食鹽水清洗，經Na2 SO4 乾燥，過濾且在減壓下濃縮，以提供成為黃色固體的4-氯-2-氟-5-甲基苯胺(5b)(18.0克，93%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.08 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 5.20 (s, 2H), 2.15 (s, 3H)。LCMS (ESI) m/z 160, 162 (M + H)。
步驟2：2-溴-4-氯-6-氟-3-甲基苯胺(5c)之合成
令NBS(20.9克，117毫莫耳)在0℃下緩慢地添加至DMF(150毫升)中的4-氯-2-氟-5-甲基苯胺(5b)(18.7克，117毫莫耳)之溶液中。接著令混合物溫熱至最高25℃且攪拌1小時。LCMS分析表明起始材料已消耗且形成所欲產物。令混合物以飽和水性NaHCO3 淬滅且以乙酸乙酯(2×200毫升)萃取。令合併的有機層以水及食鹽水清洗，經Na2 SO4 乾燥，過濾且在減壓下濃縮。令殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，120克，石油醚/乙酸乙酯=98:2)，以提供成為黃色固體的2-溴-4-氯-6-氟-3-甲基苯胺(5c)(22.1克，79%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.30 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 5.45 (s, 2H), 2.36 (d, J = 1.0 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 238, 240 (M + H)。
步驟3：3-溴-1-氯-5-氟-4-碘-2-甲基苯(5d)之合成
令2-溴-4-氯-6-氟-3-甲基苯胺(5c)(22.1克，93毫莫耳)添加至H2 O(250毫升)中的濃縮H2 SO4 (62毫升)之溶液中。令混合物在25℃下攪拌10分鐘且冷卻至5℃。逐滴添加在H2 O(20毫升)中的NaNO2 (7.1克，102毫莫耳)。令所得混合物在5℃下攪拌20分鐘且添加至H2 O(50毫升)中的KI(62克，370毫莫耳)之溶液中，令其在5℃下攪拌20分鐘且接著溫熱至25℃經18小時。TLC分析(石油醚)表明起始材料已消耗。令混合物以水(150毫升)淬滅且以乙酸乙酯(2×500毫升)萃取。令合併的有機層以飽和水性Na2 SO3 及食鹽水清洗，經Na2 SO4 乾燥，過濾且在減壓下濃縮。令殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，120克，石油醚)，以提供成為淺黃色固體的3-溴-1-氯-5-氟-4-碘-2-甲基苯(5d)(18克，56%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 7.60 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 2.56 (d, J = 1.1 Hz, 3H)。
步驟4：2-溴-4-氯-6-氟-3-甲基苯甲醛(5e)之合成
令n-BuLi(2.5M於己烷中，20毫升，50毫莫耳)在-100℃下逐滴添加至THF(100毫升)中的3-溴-1-氯-5-氟-4-碘-2-甲基苯(5d)(17.5克，50.1毫莫耳)之溶液中。令混合物在相同的溫度下攪拌30分鐘。添加無水DMF(4.0克，55毫莫耳)且令混合物在-100℃下攪拌20分鐘。TLC(石油醚)表明幾乎所有的起始材料已消耗且形成所欲產物。令粗製反應混合物以1N HCl淬滅。令水添加至混合物中且令水層以乙酸乙酯(2×150毫升)萃取。令合併的有機層以H2 O清洗，經Na2 SO4 乾燥，過濾且在減壓下濃縮。令粗製產物以快速層析術純化(SiO2 ，120克，石油醚/乙酸乙酯=97:3)，以提供成為黃色固體的2-溴-4-氯-6-氟-3-甲基苯甲醛(5e)(8.6克，68%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.18 (s, 1H), 7.75 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 2.52 - 2.50 (m, 3H)。LCMS (ESI) m/z 251, 253 (M + H)。
步驟5：4-溴-6-氯-5-甲基-1H-吲唑(5f)之合成
4-溴-6-氯-5-甲基-1H-吲唑(5f)(6.7克，80%之產率)係根據用於製備5-溴-4-甲氧基-1H-吲唑(3d)之程序製備，除了反應係在90℃下進行21小時以外。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.43 (s, 1H), 8.00 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 2.53 (s, 3H)。LCMS (ESI) m/z 245, 247 (M + H)。
步驟6：4-溴-6-氯-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(5g)之合成
4-溴-6-氯-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(5g)(5.7克，73%之產率)係根據用於製備4-溴-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(1b)之程序製備，除了反應係在THF中於80℃下進行以外。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.05 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 5.88 (dd, J = 9.6, 2.4 Hz, 1H), 3.86 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 3.80 - 3.73 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.38 - 2.31 (m, 1H), 2.05 - 1.94 (m, 2H), 1.71 (dd, J = 9.1, 3.3 Hz, 1H), 1.57 (dt, J = 9.1, 4.6 Hz, 2H)。LCMS (ESI) m/z 329, 331 (M + H)。
步驟7：6-氯-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-1H-吲唑(Int-5)之合成
令1,4-二㗁烷(100毫升)中的4-溴-6-氯-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(7克，20毫莫耳)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-雙(1,3,2-二氧硼雜環戊烷)(5.93克，23.4毫莫耳)、KOAc(6.25克，63.7毫莫耳)與Pd(dppf)Cl2 (0.777克，1.06毫莫耳)之混合物在N2 下加熱至85℃經16小時。LCMS分析顯示大部分的起始材料已消耗。令混合物冷卻至25℃且過濾。令過濾物濃縮。令殘餘物以H2 O(80毫升)稀釋且以EtOAc(3×50毫升)萃取。令合併的有機物以食鹽水(50毫升)清洗，經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮。令粗製材料以快速層析術純化(SiO2 ，0至10%之EtOAc/石油醚)，以供給成為白色固體的6-氯-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-1H-吲唑(Int-5)(7.4克，90%之產率，65%之純度)，其受到6-氯-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑污染。1 H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.19 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 5.85 (dd, J = 9.6, 2.5 Hz, 1H), 3.90-3.82 (m, 1H), 3.80-3.68 (m, 1H), 2.59 (s, 3H), 2.44-2.26 (m, 1H), 2.10-1.98 (m, 1H), 1.97-1.86 (m, 1H), 1.79-1.66 (m, 1H), 1.64-1.50 (m, 2H), 1.38 (s, 12H)。LCMS (ESI) m/z 377, 379 (M + H)。
實施例之製備：
實施例A1(流程A)：1-{4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮
實施例A2(流程A)：1-{4-[(7R)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮
實施例A3(流程A)：1-{4-[(7S)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮
步驟1：3-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]環己酮(A-1)之合成
令[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]硼酸(Int-1)(650毫克，2.5毫莫耳，1.0當量)、[RhCl(COD)]2
(61.6毫克，0.125毫莫耳，0.05當量)及NaHCO3 (620毫克，5.0毫莫耳，2.0當量)添加至配備有磁攪拌棒的25毫升燒瓶中。令燒瓶以氮氣沖洗且接著添加水(12.5毫升)及環己烯酮(721毫克，7.5毫莫耳，3.0當量)。令混合物在80℃下攪拌隔夜。LCMS分析表明硼酸已消耗。令反應冷卻至室溫。令混合物倒入分液漏斗中且以EtOAc(2×25毫升)萃取。令合併的有機物經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。以快速層析術純化(Biotage，25克SiO2 , 25%之EtOAc/庚烷)提供成為透明油的3-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]環己酮(A-1)(1:1之非鏡像異構物混合物，680毫克，87%之產率)，其在靜置時固化成灰白色固體。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.18 (s, 1H), 7.39 (dd, J = 8.5, 3.2 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.71 (dt, J = 9.5, 2.5 Hz, 1H), 4.05 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 3.84-3.69 (m, 1H), 3.54 (tt, J = 13.1, 3.9 Hz, 1H), 3.01 (t, J = 13.9 Hz, 1H), 2.68-2.48 (m, 4H), 2.43 (s, 3H), 2.41-2.35 (m, 1H), 2.34-2.22 (m, 1H), 2.19 (s, 1H), 2.12-1.92 (m, 2H), 1.94-1.75 (m, 3H), 1.69 (d, J = 3.1 Hz, 1H)。LCMS (ESI) m/z 313 (M + H)。
步驟2：3-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]環己酮(A-2)之合成
令3-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]環己酮(A-1)(677毫克，2.2毫莫耳，1.0當量)、碳酸二乙酯(3毫升)及THF(6毫升)添加至配備有磁攪拌棒的50毫升燒瓶中。添加一份氰化鈉(60%之分散液於礦油中，217毫克，5.4毫莫耳，2.5當量)。燒瓶配備有回流冷凝器且接著令混合物加熱至70℃。在1小時後，以LCMS檢查反應，其表明起始材料已消耗且形成為非鏡像異構物之複合混合物的產物。令反應倒入分液漏斗中，以EtOAc稀釋且以飽和水性NH4 Cl清洗。令水層以EtOAc萃取。令合併的有機物以食鹽水清洗，經無水MgSO4 乾燥，過濾且濃縮。令粗製殘餘物以快速層析術純化(Biotage，25克SiO2 ，10→25%之EtOAc/庚烷)，以提供成為黃色油的3-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]環己酮(A-2)(680毫克，82%之產率)，其無需接受進一步的純化。LCMS(ESI)m/z 385(M+H)。
步驟3：7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(A-3)之合成
令4-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-側氧基環己烷羧酸乙酯(A-2)(384毫克，1.0毫莫耳，1.0當量)及甲脒乙酸鹽(521毫克，5.0毫莫耳，5.0當量)添加至配備有磁攪拌棒的2打蘭(dram)小瓶中。添加甲醇鈉(0.5M於MeOH中，20毫升，10.0毫莫耳，10當量)且令混合物加熱至回流隔夜。令反應冷卻至室溫且濃縮至乾燥。令殘餘物溶解在EtOAc中且以飽和水性NH4 Cl清洗。令水層以EtOAc萃取。令合併的有機物經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。令殘餘物以快速層析術純化(Biotage，10克SiO2 ，100%之EtOAc→15%之EtOH/EtOAc)，以提供成為白色固體的7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(A-3)(1:1之非鏡像異構物混合物，364毫克，48%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.06 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.39 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.70 (dd, J = 9.4, 2.7 Hz, 1H), 4.04 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.74 (td, J = 11.1, 2.8 Hz, 1H), 3.52 (tdd, J = 12.4, 5.2, 2.9 Hz, 1H), 3.24 (dd, J = 17.3, 11.7 Hz, 1H), 2.98 (dd, J = 17.3, 5.0 Hz, 1H), 2.88 (dd, J = 18.4, 4.6 Hz, 1H), 2.67-2.52 (m, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.39-2.23 (m, 1H), 2.20-2.02 (m, 3H), 1.81-1.61 (m, 3H)。LCMS (ESI) m/z 365 (M + H)。
步驟4：4-{7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(A-4)之合成
令7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(A-3)(364毫克，1.0毫莫耳，1.0當量)、DMF(2.5毫升)、DBU(304毫克，2.0毫莫耳，2.0當量)、BOP試劑(464毫克，1.05毫莫耳，1.05當量)及哌-1-羧酸三級丁酯(233毫克，1.25毫莫耳，1.25當量)添加至配備有磁攪拌棒的10毫升燒瓶中。令混合物加熱至65℃隔夜。LCMS分析表明轉化成為1:1之非鏡像異構物混合物的所欲產物。令反應冷卻至室溫且添加水。形成白色固體，以過濾收集。令濾餅以水清洗且在真空下乾燥。令所得固體溶解在EtOAc(30毫升)中且以0.1N HCl(2×20毫升)及食鹽水清洗。令有機溶液經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。以快速層析術純化(Biotage，25克SiO2 ，60→100%之EtOAc/庚烷)提供成為灰白色固體的4-{7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(1:1之非鏡像異構物混合物，327毫克，61%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.55 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.32 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.62 (ddd, J = 9.5, 4.2, 2.8 Hz, 1H), 4.00-3.88 (m, 1H), 3.73-3.62 (m, 1H), 3.56 (t, J = 3.5 Hz, 3H), 3.43 (d, J = 9.9 Hz, 4H), 3.30-3.16 (m, 3H), 3.08 (dd, J = 18.8, 6.3 Hz, 1H), 2.81-2.61 (m, 3H), 2.56-2.43 (m, 1H), 2.40 (s, 3H), 2.24-1.99 (m, 4H), 1.75-1.63 (m, 2H), 1.42 (s, 9H)。LCMS (ESI) m/z 533 (M + H)。
步驟5：7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(A-5)之合成
令4-{7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(A-4)(325毫克，0.61毫莫耳，1.0當量)、MeOH(6.1毫升)及HCl(4.0N於1,4-二㗁烷中，3.1毫升，12.2毫莫耳，20當量)添加至配備有磁攪拌棒的25毫升燒瓶中。令反應攪拌隔夜。LCMS分析表明形成完全去保護之產物。令反應濃縮至乾燥以提供成為棕色油的7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(A-5)(214毫克，100%之產率)，其無需進步純化而前進至下一步驟。LCMS(ESI)m/z349(M+H)。
步驟6：1-{4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例A1)之合成
令7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(A-5)(34.8毫克，0.1毫莫耳，1.0當量)、DCM(4毫升)、TEA(101毫克，1.0毫莫耳，10當量)及丙烯醯氯(13.6毫克，0.15毫莫耳，1.5當量)添加至配備有磁攪拌棒的25毫升燒瓶中。在2小時後，以LCMS檢查反應，其顯示轉化成所欲產物。令反應濃縮至乾燥且以快速層析術純化(Biotage，10克SiO2 ，20%之EtOH/EtOAc)，以提供成為白色固體的1-{4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(14.7毫克，37%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.58 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.29 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.53 (dd, J = 16.7, 10.6 Hz, 1H), 6.27 (dd, J = 16.8, 1.7 Hz, 1H), 5.74 (dd, J = 10.6, 1.7 Hz, 1H), 4.11-3.63 (m, 9H), 3.25-3.15 (m, 2H), 3.01-2.83 (m, 1H), 2.84-2.70 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.32-2.06 (m, 2H)。LCMS (ESI) m/z 403 (M + H)。
步驟7：1-{4-[(7R)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例A2)及1-{4-[(7S)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例A3)之合成
令7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(214毫克，0.614毫莫耳，0.614當量)、DCM(10毫升)、TEA(621毫克，6.14毫莫耳，10當量)及丙烯醯氯(83.3毫克，0.92毫莫耳，1.5當量)添加至配備有磁攪拌棒的25毫升燒瓶中。在1小時後，令反應濃縮至乾燥。令殘餘物在Chrialpak AD-3管柱上(4.6毫米×100毫米，3微米粒徑)以手性SFC純化，令管柱以40%之IPA溶析，在25℃及120巴下固定於CO2 中。以4.0毫升/分鐘之流速給出Rt( 峰 1) =1.62分鐘及Rt( 峰 2) =1.62分鐘。1-{4-[(7R)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例A2)(峰1)：36毫克，＞99% ee，15%之產率。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 12.94 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.30 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.85 (dd, J = 16.7, 10.4 Hz, 1H), 6.15 (dd, J = 16.7, 2.4 Hz, 1H), 5.72 (dd, J = 10.4, 2.4 Hz, 1H), 3.85-3.70 (m, 2H), 3.69-3.57 (m, 3H), 3.55-3.48 (m, 2H), 3.30-3.23 (m, 2H), 3.20-3.07 (m, 1H), 3.05-2.88 (m, 2H), 2.70 (d, J = 16.7 Hz, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.36-2.20 (m, 1H), 2.00 (d, J = 12.4 Hz, 1H)； [α]d 22 = -44.0° (C=0.1, CHCl3 )；LCMS (ESI) m/z 403 (M + H)。1-{4-[(7S)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例A3)(峰2)：34.3毫克，~98% ee，14%之產率。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 12.94 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.30 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.85 (dd, J = 16.7, 10.5 Hz, 1H), 6.15 (dd, J = 16.7, 2.4 Hz, 1H), 5.72 (dd, J = 10.5, 2.4 Hz, 1H), 3.86-3.69 (m, 2H), 3.70-3.57 (m, 3H), 3.57-3.44 (m, 2H), 3.30-3.22 (m, 2H), 3.15 (dd, J = 18.3, 11.5 Hz, 1H), 3.04-2.87 (m, 2H), 2.70 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.35-2.19 (m, 1H), 2.00 (d, J = 12.3 Hz, 1H)； [α]d 22 = +53.3(C=0.2, CHCl3 )；LCMS (ESI) m/z 403 (M + H)。
在表A中的實施例係使用類似於流程A的化學法及用於製備1-{4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例A1)及[(6R,7R)-rel-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-6-基]甲醇(A-7)之程序製備。下列的實施例係以非關鍵性改變或取代用於製備實施例A1之例示性程序而達成，其能由熟習此項技術領域者實現。
在下列製備中詳述之中間物A-6係根據方法A供給實施例A7。然而，此實施例係由於需要去保護步驟而落在前述實施例的合成範圍之外，且為了完整性起見，在下文包括此化學法。供給最終實施例的後續化學法類似於方法A實施例，以熟習此項技術領域者可理解的最少添加或改變。
[(6R,7R)-rel-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-6-基]甲醇(A-7)之合成
令4-{(6R,7R)-rel-6-[(苯甲氧基)甲基]-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(A-6)(340毫克，0.52毫莫耳，1.0當量)、MeOH(5.2毫升)及HCl(4.0 N於1,4-二㗁烷中，0.26毫升，1.0毫莫耳，2.0當量)添加至10毫升不銹鋼反應容器中。添加Pd/C(10%裝載量，70毫克)且令容器以H2 加壓至8巴及加熱至50℃隔夜。LCMS分析顯示完全的去苯甲基化連同THP及Boc基團的部分去保護。令粗製反應物通過薄矽藻土墊過濾。令混合物在旋轉蒸發器上濃縮且接著溶解在MeOH(6毫升)中。添加額外的HCl(4.0 N於1,4-二㗁烷中，1.3毫升，5.2毫莫耳，10當量)以誘導完全去保護。令混合物攪拌隔夜。令混合物濃縮至乾燥以提供成為灰白色固體的[(6R,7R)-rel-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-6-基]甲醇(A-7)(195毫克，99%之產率)，其無需接受進一步的純化。LCMS(ESI)m/z 379(M+H)。
實施例B1(流程B)：1-{6-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]-2,6-二氮雜螺[3.3]庚-2-基}丙-2-烯-1-酮係以文庫格式製備
步驟1：4-氯-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(B-1)之合成
令7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(A-4)(300毫克，0.825毫莫耳，1.0當量)、POCl3 (5毫升)及甲苯(5毫升)添加至40毫升小瓶中。添加DIPEA(320毫克，2.475毫莫耳，3.0當量)。令小瓶封蓋且在110℃下振盪16小時。在減壓下移除溶劑以提供4-氯-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(B-1)，其無需純化而直接用於下一步驟中。
步驟2：6-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]-2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸三級丁酯(B-2)之合成
令2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸三級丁酯溶液(90微莫耳，1.2當量)添加至8毫升小瓶中。令TEA(225微莫耳，3.0當量)添加至小瓶中，繼而添加在NMP(0.9毫升)中的4-氯-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(B-1)(75微莫耳，1.0當量)之溶液。令小瓶封蓋且在130℃下振盪16小時。LCMS分析顯示完全反應。在真空中移除溶劑且令所得殘餘物以製備性TLC純化，以提供6-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]-2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸三級丁酯(B-2)。
步驟3：4-(2,6-二氮雜螺[3.3]庚-2-基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(B-3)之合成
令6-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]-2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷-2-羧酸三級丁酯(B-2)及HCl(4.0M於MeOH中，750微升)添加至8毫升小瓶中。令小瓶封蓋且在30℃下振盪2小時。LCMS分析顯示完全反應。在真空下移除溶劑以提供4-(2,6-二氮雜螺[3.3]庚-2-基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(B-3)，其無需接受進一步的純化。
步驟4：1-{6-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]-2,6-二氮雜螺[3.3]庚-2-基}丙-2-烯-1-酮(實施例B1)之合成
令飽和水性NaHCO3 (500微升)、THF(500微升)及丙烯醯氯溶液(0.15M於THF中，500微升，75微莫耳，1.0當量)添加至含有4-(2,6-二氮雜螺[3.3]庚-2-基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(B-3)之小瓶中。令小瓶封蓋且在30℃下振盪2小時。LCMS分析顯示轉化成產物。令混合物以EtOAc(3×1.5毫升)萃取。令合併的有機物經無水MgSO4 乾燥，過濾且濃縮。令殘餘物以製備性HPLC純化(Agela Durashell C18，150×25毫米，5微米，乙睛及水(0.22%之甲酸)的0至35%梯度，30毫升/分鐘)，以提供1-{6-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]-2,6-二氮雜螺[3.3]庚-2-基}丙-2-烯-1-酮(實施例B1)。LCMS(ESI)m/z 414(M+H)。
在表B中的實施例係使用類似於流程B的化學法及用於製備1-{6-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]-2,6-二氮雜螺[3.3]庚-2-基}丙-2-烯-1-酮(實施例B1)之程序的文庫格式製得。下列的實施例係以非關鍵性改變或取代用於製備實施例B1之例示性程序而達成，其能由熟習此項技術領域者實現。
實施例C1(流程C)：4-{2-氯-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯
步驟1：4-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-側氧基環己烷羧酸乙酯(C-1)之合成
令尿素(3.59克，59.8毫莫耳，2.0當量)及NaOMe(3.23克，59.8毫莫耳，2.0當量)添加至MeOH(400毫升)中的4-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-側氧基環己烷羧酸乙酯(A-2)(11.5克，29.9毫莫耳，1.0當量)之溶液中。令反應在80℃下攪拌16小時。LCMS分析顯示形成所欲產物。令混合物濃縮至乾燥且令粗製殘餘物以管柱層析術純化(SiO2 ，10%之MeOH/DCM)，以提供4-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-側氧基環己烷羧酸乙酯(C-1)(2.3克，20%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 10.95 (s, 1H), 10.69 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.49 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.79 (dd, J = 9.8, 2.5 Hz, 1H), 3.87 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 3.79-3.65 (m, 1H), 3.45-3.36 (m, 1H), 2.94-2.77 (m, 1H), 2.57-2.47 (m, 1H), 2.46-2.34 (m, 5H), 2.31-2.15 (m, 2H), 2.09-1.97 (m, 1H), 1.93 (dd, J = 13.3, 3.2 Hz, 1H), 1.84 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 1.79-1.65 (m, 1H), 1.62-1.50 (m, 2H)。LCMS (ESI) m/z 381 (M + H)。
步驟2：2,4-二氯-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(C-2)之合成
令POCl3 (30毫升)中的4-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-側氧基環己烷羧酸乙酯(C-1)(2.3克，6.0毫莫耳)之溶液在105℃下攪拌2小時。LCMS分析顯示起始材料已完全消耗。令混合物濃縮至乾燥。令殘餘物以DCM(30毫升)稀釋且添加TEA以調整pH至8。令溶劑蒸發。令粗製殘餘物以管柱層析術純化(SiO2 ，33%之EtOAc/PE)，以提供2,4-二氯-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(C-2)(1克，50%之產率)。LCMS(ESI)m/z333(M+H)。
步驟3：4-[2-氯-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-羧酸三級丁酯(C-3)之合成
令哌-1-羧酸三級丁酯(671毫克，3.6毫莫耳，1.2當量)及DIPEA(776毫克，6毫莫耳，2.0當量)添加至DMF(30毫升)中的2,4-二氯-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(C-2)(1克，3毫莫耳，1.0當量)之溶液中。令反應在80℃下攪拌2小時。LCMS分析顯示轉化成所欲產物。令反應混合物冷卻至室溫且倒入分液漏斗中。添加水(50毫升)且令混合物以EtOAc(2×30毫升)萃取。令合併的有機物以食鹽水清洗，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮至乾燥。令粗製物以管柱層析術純化(SiO2 ，25%之EtOAc/PE)，以提供4-[2-氯-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-羧酸三級丁酯C-3)(1克，70%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.04 (s, 1H), 7.32 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 3.72-3.43 (m, 8H), 3.44-3.35 (m, 2H), 3.30 (dd, J = 19.2, 11.5 Hz, 1H), 3.14 (dd, J = 19.1, 6.4 Hz, 1H), 2.79-2.66 (m, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.32-2.02 (m, 2H), 1.49 (s, 9H)。LCMS (ESI) m/z 483 (M + H)。
步驟4：4-{2-氯-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(C-4)之合成
令3,4-二氫-2H-吡喃(272毫克，3.23毫莫耳，3.0當量)及吡啶4-甲苯磺酸鹽(27.1毫克，0.108毫莫耳，0.1當量)添加至0℃下在DCM(400毫升)中的4-[2-氯-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-羧酸三級丁酯(C-3)(520毫克，1.08毫莫耳，1.0當量)之溶液中。令反應溫熱至20℃且攪拌18小時。LCMS分析顯示轉化成所欲產物。令混合物濃縮至乾燥且令粗製殘餘物以管柱層析術純化(SiO2 ，50%之EtOAc/PE)，以提供4-{2-氯-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(C-4)(500毫克，82%之產率)。LCMS(ESI)m/z 567(M+H)。
步驟5：4-{2-(2-甲氧基乙氧基)-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(C-5)之合成
令2-甲氧基乙-1-醇(107毫克，1.41毫莫耳，4.0當量)及NaH(60%之分散液於礦油中，70.5毫克，1.76毫莫耳，5.0當量)添加至1,4-二㗁烷(20毫升)中的4-{2-氯-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(C-4)(200毫克，0.353毫莫耳，1.0當量)之溶液中。令反應在90℃下攪拌16小時。LCMS分析顯示轉化成所欲產物。令反應以添加水(10毫升)淬滅。令混合物倒入分液漏斗中且以EtOAc(2×20毫升)萃取。令合併的有機物以食鹽水清洗，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮至乾燥。令粗製殘餘物以管柱層析術純化(SiO2 ，50%之EtOAc/PE)，以提供4-{2-(2-甲氧基乙氧基)-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(C-5)(200毫克，94%之產率)。LCMS(ESI)m/z 607(M+H)。
步驟6：2-(2-甲氧基乙氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(C-6)之合成
令DCM中的25%之TFA(20毫升)中的4-{2-(2-甲氧基乙氧基)-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(C-5)(200毫克，0.33毫莫耳，1.0當量)之溶液在20℃下攪拌2小時。LCMS分析顯示轉化成所欲產物。令反應混合物濃縮至乾燥以提供2-(2-甲氧基乙氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(C-6)(120毫克，86%之產率)，其以未進一步純化取得。LCMS(ESI)m/z 423(M+H)。
步驟7：1-{4-[2-(2-甲氧基乙氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例C1)
令飽和NaHCO3 溶液(10毫升)添加至EtOAc(10毫升)中的2-(2-甲氧基乙氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉(C-6)(120毫克，0.284毫莫耳，1.0當量)之溶液中。添加在EtOAc中的丙烯醯氯(31毫克，0.341毫莫耳，1.2當量)之溶液且令反應在20℃下攪拌20分鐘。LCMS分析顯示轉化成所欲產物。令反應混合物倒入分液漏斗中且以EtOAc(2×20毫升)萃取。令合併的有機物以食鹽水清洗，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮至乾燥。令粗製殘餘物以製備性HPLC純化(Gemini 5u C18，150×21.2毫米，40至50%之乙睛，20毫升/分鐘)，以提供1-{4-[2-(2-甲氧基乙氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例C1)(25.7毫克，19%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.14-7.94 (m, 1H), 7.30 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.60 (dd, J = 16.7, 10.6 Hz, 1H), 6.35 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 5.76 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.46 (s, 2H), 4.07-3.88 (m, 1H), 3.78 (d, J = 32.0 Hz, 4H), 3.63 (s, 4H), 3.52-3.08 (m, 7H), 2.75 (s, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.21 (d, J = 32.3 Hz, 2H)。LCMS (ESI) m/z 477 (M + H)。
在表C中的實施例係使用類似於流程C的化學法及用於製備1-{4-[2-(2-甲氧基乙氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例C1)之程序製備。下列的實施例係以非關鍵性改變或取代用於製備實施例C1之例示性程序而達成，其能由熟習此項技術領域者實現。
實施例D1(流程D)：1-(4-{(6R,7R)-7-[5-(羥基甲基)-1H-吲唑-4-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮
令25毫升無菌Iowa培養基(右旋糖(20克))、Nutrisoy粉(5克)、NaCl(5克)、酵母萃取物(5克)、K2 HPO4 (5克)、P2000防沫劑(1毫升)、去離子水(1000毫升)添加至兩個250毫升無菌Nalgene燒瓶(隔板式、通風)的各者中。令pH以1N HCl調整至7.0且令溶液經高壓蒸氣滅菌(121℃，25分鐘/公升)。令解凍之植物儲存液中的壯觀鏈黴菌(Streptomyces spectabilis)ATCC 27465溶液(0.25毫升)添加至各燒瓶中。令燒瓶封蓋且在30℃下於2"動程旋轉振盪器(Innova 4900，210rpm)上培育兩天。令DMSO(1毫升)中的1-{4-[(6R,7R)-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例A6)(5毫克，12微莫耳)之溶液添加至各燒瓶中。令燒瓶封蓋且如上述方式培育。在5天後，令分別培養的兩個燒瓶合併且倒入分液漏斗中。令溶液以EtOAc(2×50毫升)萃取且令合併的有機物通過無水MgSO4 墊過濾。令濾餅以EtOAc(20毫升)清洗且令合併的有機物濃縮至乾燥。令粗製材料在Princeton甲烷磺醯胺管柱上(10毫米×250毫米，5微米粒徑)以製備性SFC純化，令管柱以60%之MeOH溶析，在25℃及100巴下固定於CO2 中，具有10毫升/分鐘之流速，以提供1-(4-{(6R,7R)-7-[5-(羥基甲基)-1H-吲唑-4-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例D1)(11微克，0.2%之產率)。LCMS(ESI)m/z 433(M+H)。
實施例E1(流程E)：1-{4-[(6R,7R)-7-(7-羥基-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮
1-{4-[(6R,7R)-7-(7-羥基-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例E1)(26微克，0.5%之產率)係根據用於實施例D1之通用程序製得，除了使用壯觀鏈黴菌ATCC 13273作為細胞系以外。LCMS(ESI)m/z 433(M+H)。
實施例F1(流程F)：1-{4-[(6R,7R)-rel-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮
實施例F2(流程F)：1-{4-[(6S,7S)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮
實施例F3(流程F)：1-{4-[(6R,7R)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮
步驟1：(3R,4R)-rel-4-甲基-3-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]環己酮(F-1)之合成
(3R,4R)-rel-4-甲基-3-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]環己酮(F-1)(118克，90%之產率，＞20:1dr)係根據用於合成3-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]環己酮(A-1)之程序製備，除了使用KOSiMe3 作為鹼於1,4-二㗁烷/H2 O(20:1)之溶劑混合物中以外，以提供成為黃色膠的所欲產物。LCMS(ESI)m/z 327(M+H)。
步驟2：(4R,5R)-rel-5-甲基-4-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-側氧基環己烷羧酸乙酯(F-2)及(2S,3R)-rel-3-甲基-2-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-6-側氧基環己烷羧酸乙酯(F-3)之合成
(4R,5R)-rel-5-甲基-4-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-側氧基環己烷羧酸乙酯(F-3)與(2S,3R)-rel-3-甲基-2-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-6-側氧基環己烷羧酸乙酯(F-2)(86.8克，44.02%之產率)的~1:1之混合物係根據用於合成3-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]環己酮(A-2)之通用程序製得，以提供成為灰白色固體的產物。LCMS(ESI)m/z 399(M+H)。
步驟3：(6R,7R)-rel-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(F-4)之合成
令NaOEt溶液[藉由添加Na金屬(204毫克，8.88毫莫耳)至乙醇(5毫升)中而製得]添加至無水EtOH(5毫升)中的(4R,5R)-rel-5-甲基-4-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-側氧基環己烷羧酸乙酯(F-3)與(2S,3R)-rel-3-甲基-2-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-6-側氧基環己烷羧酸乙酯(F-2)(885毫克，1.11毫莫耳，1.0當量)的~1:1之混合物及3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-甲脒鹽酸鹽(411毫克，2.89毫莫耳，2.6當量)(WO15089327)之攪拌溶液中。令所得混合物在25℃下攪拌4小時。LCMS顯示僅消耗(4R,5R)-rel-5-甲基-4-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-側氧基環己烷羧酸乙酯。令混合物過濾且令濾餅以EtOH(2×3毫升)清洗。令合併的過濾物濃縮。令粗製殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，0→10%之MeOH/DCM)，以提供成為膠狀白色固體的(6R,7R)-rel-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(F-4)(300毫克，57%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.05 (s, 1H), 7.34 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.81-5.57 (m, 1H), 4.18 (t, J = 8.1 Hz, 2H), 4.04 (t, J = 12.6 Hz, 3H), 3.75 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 3.33 (s, 1H), 3.21 (s, 1H), 3.16-3.03 (m, 1H), 2.87 (dd, J = 17.3, 4.6 Hz, 1H), 2.70 (dd, J = 18.1, 4.4 Hz, 1H), 2.56 (s, 1H), 2.42 (s, 4H), 2.28 (s, 6H), 2.09 (dd, J = 28.1, 10.2 Hz, 3H), 1.81-1.60 (m, 3H), 0.74 (s, 3H)。LCMS (ESI) m/z 477 (M + H)。
步驟4：4-{(6R,7R)-rel-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(F-5)之合成
令(6R,7R)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(F-4)(1克，2.1毫莫耳，1.0當量)、哌-1-羧酸三級丁酯(1.95克，10.5毫莫耳，5.0當量)及BOP試劑(1.4克，3.15毫莫耳，1.5當量)添加至配備有磁攪拌棒的250毫升燒瓶中。添加MeCN(21毫升)及DBU(639毫克，4.2毫莫耳，2.0當量)且令混合物加熱至60℃。在48小時後，以LCMS檢查反應，其顯示轉化成所欲產物。令反應混合物冷卻至室溫且倒入分液漏斗中。令混合物分溶在TBME(50毫升)與水(20毫升)之間。令有機層以水(20毫升)及食鹽水(20毫升)清洗，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。令粗製殘餘物以快速層析術純化(Biotage，25克SiO2 ，40→60%之EtOAc/庚烷+2%之NEt3 )，以提供成為灰白色固體的4-{(6R,7R)-rel-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(F-5)(1.33克，99%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 7.98 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 7.34 (dd, J = 15.0, 8.6 Hz, 1H), 7.23-7.15 (m, 1H), 5.68 (ddd, J = 12.6, 9.7, 2.6 Hz, 1H), 4.16-3.86 (m, 5H), 3.75 (dd, J = 10.8, 8.1 Hz, 1H), 3.62 (t, J = 8.5 Hz, 2H), 3.46 (d, J = 11.2 Hz, 3H), 3.34-3.03 (m, 6H), 2.70 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 2.64-2.50 (m, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.32 (q, J = 11.9, 11.0 Hz, 2H), 2.21 (s, 6H), 2.15 (s, 1H), 2.06 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 1.80-1.72 (m, 3H), 1.49 (s, 9H), 0.76 (d, J = 5.6 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 645 (M + H)。
步驟5：N,N-二甲基-1-[(6R,7R)-rel-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基]吖丁啶-3-胺(F-6)之合成
令TFA(2毫升)添加至DCM(8毫升)中的4-{(6R,7R)-rel-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-[5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(F-5)(125毫克，0.194毫莫耳，1.0當量)之攪拌溶液中。令所得溶液在25℃下攪拌72小時。LCMS分析顯示轉化成產物。在減壓下移除溶劑以提供成為棕色油的N,N-二甲基-1-[(6R,7R)-rel-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基]吖丁啶-3-胺(F-6)(89毫克，100%之產率)，其無需接受進一步的純化。LCMS(ESI)m/z 461(M+H)。
步驟6：1-{4-[(6R,7R)-rel-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例F1)之合成
令EtOAc(5毫升)中的丙烯醯氯(17.5毫克，0.193毫莫耳，1.0當量)之溶液在0至5℃下逐滴添加至EtOAc(50毫升)及飽和NaHCO3 (50毫升)中的N,N-二甲基-1-[(6R,7R)-rel-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基]吖丁啶-3-胺(F-6)(89毫克，0.19毫莫耳，1.0當量)之攪拌混合物中。令所得混合物在相同的溫度下攪拌20分鐘。LCMS分析顯示起始材料已消耗。令有機層分離。令水層以EtOAc(2×30毫升)萃取。令合併的有機物經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮。令粗製材料以快速層析術純化(SiO2 ，0→5%之MeOH/DCM)，以提供成為白色固體的1-{4-[(6R,7R)-rel-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例F1)(26毫克，27%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 12.94 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.28 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.84 (dd, J = 16.7, 10.5 Hz, 1H), 6.14 (dd, J = 16.7, 2.4 Hz, 1H), 5.71 (dd, J = 10.4, 2.4 Hz, 1H), 3.95 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 3.85-3.75 (m, 1H), 3.76-3.67 (m, 3H), 3.64-3.57 (m, 2H), 3.49-3.40 (m, 2H), 3.29-3.15 (m, 3H), 3.12-2.94 (m, 2H), 2.81 (dd, J = 18.3, 6.2 Hz, 1H), 2.69-2.61 (m, 1H), 2.60-2.51 (m, 1H), 2.45-2.34 (m, 4H), 2.09 (s, 6H), 0.68 (d, J = 6.1 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 515 (M + H)。
步驟7：1-{4-[(6S,7S)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例F2)及1-{4-[(6R,7R)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例F3)之合成
令1-{4-[(6R,7R)-rel-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(218毫克)在Chrialpak AD-3管柱上(4.6毫米×100毫米，3微米粒徑)以手性SFC純化，令管柱以30%之IPA+10mM NH3 溶析，在25℃及120巴下固定於CO2 中。以4.0毫升/分鐘之流速給出Rt( 峰 1) =2.53分鐘及Rt( 峰 2) =4.58分鐘。1-{4-[(6R,7R)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例F2)(峰1)：29.8毫克，＞99% ee，14%之產率。1 H NMR (600 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.03 (s, 1H), 7.28 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.83 (ddd, J = 14.9, 10.0, 4.1 Hz, 1H), 6.14 (dd, J = 16.6, 2.3 Hz, 1H), 5.71 (dt, J = 10.7, 1.8 Hz, 1H), 3.94 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.78 (s, 1H), 3.73-3.68 (m, 3H), 3.60 (s, 2H), 3.41-3.34 (m, 3H), 3.27-3.14 (m, 1H), 3.08-2.96 (m, 2H), 2.81 (dd, J = 18.5, 6.6 Hz, 1H), 2.67-2.61 (m, 2H), 2.49-2.34 (m, 5H), 2.07 (s, 6H), 0.68 (s, 3H)； [α]d 22 = -27.3° (C=0.1, MeOH)；LCMS (ESI) m/z 515 (M + H)。1-{4-[(6S,7S)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例F3)(峰2)：32.7毫克，~99% ee，15%之產率。1 H NMR (600 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.04 (s, 1H), 7.28 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.94-6.72 (m, 1H), 6.25-5.97 (m, 1H), 5.71 (dt, J = 10.5, 1.9 Hz, 1H), 3.94 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.79 (d, J = 17.9 Hz, 1H), 3.74-3.67 (m, 3H), 3.61 (s, 2H), 3.41-3.34 (m, 3H), 3.31-3.13 (m, 1H), 3.08-2.97 (m, 2H), 2.81 (dd, J = 18.5, 5.8 Hz, 1H), 2.63 (d, J = 15.4 Hz, 2H), 2.49-2.34 (m, 5H), 2.07 (s, 6H), 0.68 (d, J = 6.3 Hz, 3H)； [α]d 22 = 51.2 (C=0.1, MeOH)；LCMS (ESI) m/z 515 (M + H)。
實施例F14(流程F’)：1-(4-{(6R,7R)-7-(6-氯-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮
步驟1：(3R,4R)-3-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-4-甲基環己烷-1-酮(F-7)之合成
令6-氯-5-甲基-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-1H-吲唑(9.4毫克，25毫莫耳)、LiOMe(1.1克，30.0毫莫耳)及[RhCl(COD)]2 (247毫克，0.50毫莫耳)添加至配備有磁攪拌棒的經烘箱乾燥之燒瓶中。令燒瓶以N2 徹底沖洗。添加脫氣之1,4-二㗁烷(以N2 吹洗1小時)及(4R)-4-甲基環己-2-烯-1-酮(3.58克，32.5毫莫耳)。令反應加熱至40℃且在此溫度下攪拌48小時。LCMS分析顯示起始材料已消耗，形成所欲產物塊。令反應轉移至分液漏斗中且分溶在EtOAc與飽和水性NH4 Cl之間。令有機層以食鹽水清洗，經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。令殘餘物以快速層析術純化(Biotage，50克SiO2 ，15至25%之EtOAc/庚烷)，以提供成為白色濃厚泡沫的(3R,4R)-3-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基(oxan-2-yl))-1H-吲唑-4-基]-4-甲基環己烷-1-酮(F-7)(6.15克，68%之產率)，其在靜置時固化。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.25-8.09 (m, 1H), 7.59 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 5.64 (td, J = 9.7, 2.7 Hz, 1H), 4.13-3.93 (m, 1H), 3.86-3.68 (m, 1H), 3.30 (ddd, J = 14.3, 11.0, 4.3 Hz, 1H), 3.10-2.83 (m, 1H), 2.69-2.37 (m, 8H), 2.31-2.03 (m, 3H), 1.90-1.56 (m, 4H), 0.73 (dd, J = 6.5, 3.6 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 361 (M + H)。
步驟2：(4R,5R)-4-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸甲酯(F-9)及(5R,6R)-6-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸甲酯(F-8)之合成
令甲苯(39.6毫升，c=0.14M)、LHMDS(1.0M於PhMe中，11.1毫升，11.1毫莫耳)及TEA(6.73克，9.27毫升，66.5毫莫耳)添加至配備有磁攪拌棒的經烘箱乾燥之小燒瓶。令混合物冷卻至-78℃。逐滴添加在甲苯(10毫升)中的(3R,4R)-3-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-4-甲基環己烷-1-酮(F-7)(2.0克，5.54毫莫耳)之溶液且令混合物在-78℃下攪拌。產生鮮黃色反應溶液。逐滴添加在甲苯(10毫升)中的氰基甲酸甲酯(566毫克，0.54毫升，6.65毫莫耳)之溶液。令混合物攪拌5分鐘。LCMS分析顯示起始材料已消耗，形成所欲產物塊。令反應以添加飽和水性NH4 Cl淬滅且令混合物轉移至分液漏斗中。令反應分溶在EtOAc與水之間。令有機層以食鹽水清洗，經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮至白色泡沫(2.3克)。1 H NMR分析顯示粗製材料為具有成為主要區域異構物之(4R,5R)-4-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸甲酯(F-9)與成為次要區域異構物之(5R,6R)-6-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸甲酯(F-8)的非鏡像異構物之複合混合物。LCMS(ESI)m/z 419(M+H)。
步驟3：(6R,7R)-7-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(F-10)之合成
令含有(4R,5R)-4-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸甲酯(F-9)(2.3克，5.5毫莫耳)、3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-甲脒雙-鹽酸鹽(WO15089327)(1.2克，5.5毫莫耳)的粗製混合物在氮氣下添加至配備有磁攪拌棒的燒瓶中。添加NaOMe溶液(1M於MeOH中，16.6毫升，16.6毫莫耳)且令混合物在周圍溫度下攪拌2小時。LCMS分析表明選擇性及完全消耗F-9，形成所欲產物塊。令反應以飽和水性NaHCO3 淬滅且以DCM(3x)萃取。令合併的有機萃取物經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮至黃色固體。令粗製殘餘物以快速層析術純化(Isco，40克SiO2 ，0至15%之MeOH/DCM+2%之TEA)，以提供成為灰白色固體的(6R,7R)-7-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(F-10)(1.4克，49%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 11.24 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 5.94-5.74 (m, 1H), 3.98 (td, J = 8.0, 7.3, 1.9 Hz, 2H), 3.91-3.82 (m, 1H), 3.75 (td, J = 11.1, 9.0, 6.2 Hz, 3H), 3.40-3.19 (m, 2H), 3.15-3.03 (m, 1H), 2.94 (td, J= 14.6, 11.6, 6.8 Hz, 1H), 2.70 (dt, J= 17.5, 4.3 Hz, 1H), 2.56-2.47 (m, 1H，在DMSO下), 2.47-2.29 (m, 4H), 2.06 (s, 9H), 1.80-1.65 (m, 1H), 1.57 (dq, J = 10.4, 6.2, 4.8 Hz, 2H), 0.63 (dd, J =9.0, 6.4 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 511 (M + H)。
步驟4：4-{(6R,7R)-7-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(F-11)之合成
令(6R,7R)-7-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(F-10)(1.4克，2.6毫莫耳)及哌-1-羧酸三級丁酯(3.5克，18.6毫莫耳)添加至配備有磁攪拌棒的圓底燒瓶中。令燒瓶以氮氣吹洗且添加MeCN(6.63毫升，c=0.4M)、DBU(0.8毫升，5.3毫莫耳)及BOP試劑(1.8克，4.0毫莫耳)。令反應加熱至50℃且在此溫度下攪拌24小時。LCMS分析顯示起始材料已消耗，形成所欲產物塊。令反應冷卻至室溫且接著倒入水中。令混合物攪拌1小時且接著以MTBE(2x)萃取。令合併的有機層以水清洗，經無水Na2 SO4 乾燥且濃縮以提供黃色殘餘物。令材料以快速層析術純化(Isco，SiO2 ，10至15%之MeOH/DCM+2%之TEA)，以提供成為灰白色固體的4-{(6R,7R)-7-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(F-11)(1.8克，82%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.19 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 5.84 (dd, J = 9.4, 2.4 Hz, 1H), 3.93 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 3.85 (s, 1H), 3.76 (q, J = 7.1, 6.0 Hz, 1H), 3.70 (dd, J = 8.5, 5.7 Hz, 2H), 3.52 (d, J = 9.5 Hz, 2H), 3.39 (dd, J = 18.6, 10.3 Hz, 5H), 3.22-3.10 (m, 2H), 3.03 (q, J = 6.2 Hz, 1H), 2.99-2.91 (m, 1H), 2.86 (td, J = 11.2, 5.8 Hz, 1H), 2.69-2.54 (m, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.39 (dd, J= 22.2, 11.5 Hz, 2H), 2.07 (s, 8H), 1.82-1.63 (m, 1H), 1.57 (s, 2H), 1.42 (s, 9H), 0.67 (dd, J= 8.7, 6.0 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 679 (M + H)。
步驟5：1-[(6R,7R)-7-(6-氯-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-甲基-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基]-N,N-二甲基吖丁啶-3-胺(F-12)之合成
令4-{(6R,7R)-7-[6-氯-5-甲基-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(F-11)(1.1克，1.5毫莫耳)裝入配備有磁攪拌棒的小瓶中。添加DCM(5.1毫升，c=0.3M)及TFA(7.4克，5.0毫升，66毫莫耳)。令混合物攪拌3小時，其顯示起始材料已消耗，形成所欲產物塊。令反應混合物小心地倒入水性飽和NaHCO3 中(放出氣體)且以DCM(4x)萃取。令合併的有機萃取物經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮以提供1-[(6R,7R)-7-(6-氯-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-甲基-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基]-N,N-二甲基吖丁啶-3-胺(F-12)(786毫克，100%之產率)，其無需接受進一步的純化。LCMS(ESI)m/z 495(M+H)。
步驟6：1-(4-{(6R,7R)-7-(6-氯-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F14)
令1-[(6R,7R)-7-(6-氯-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-甲基-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基]-N,N-二甲基吖丁啶-3-胺(F-12)(1.1克，2.2毫莫耳)及HFIP(11毫升，c=0.2M)裝入配備有磁攪拌棒的小瓶中。攪拌混合物，直到固體溶解為止。添加NaHCO3 (1.1克，13.2毫莫耳)及丙烯醯氯(234毫克，0.21毫升，2.6毫莫耳)。在5分鐘後，LCMS分析顯示形成所欲產物塊，具有~20%之剩餘起始材料。添加額外的丙烯醯氯(0.035毫升，0.43毫莫耳)。在5分鐘後，令反應以MTBE稀釋，轉移至分液漏斗中且以H2 O清洗。令水層以MTBE萃取。令合併的有機物經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮以提供黃色殘餘物。令粗製產物溶解在DMSO中且以Phenomenex Luna Omega Polar C18管柱(250×50毫米，5微米粒徑)之製備性HPLC純化，令管柱以5至30%之MeCN/H2 O(+0.1%之AcOH)溶析，具有85毫升/分鐘之流速，以提供成為灰白色固體的1-(4-{(6R,7R)-7-(6-氯-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F14)(588毫克，47%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.06 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.84 (dd, J= 16.7, 10.5 Hz, 1H), 6.14 (dd, J= 16.7, 2.4 Hz, 1H), 5.71 (dd, J= 10.4, 2.4 Hz, 1H), 3.94 (dd, J= 8.7, 7.0 Hz, 2H), 3.86-3.67 (m, 4H), 3.61 (s, 2H), 3.50-3.37 (m, 3H), 3.24 (d, J= 26.7 Hz, 2H), 3.08-2.94 (m, 2H), 2.84 (dd, J= 18.3, 6.3 Hz, 1H), 2.63 (dd, J= 15.0, 3.5 Hz, 1H), 2.47 (s, 5H), 2.08 (s, 6H), 0.68 (d, J= 6.0 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 549 (M + H)。
實施例F5(流程F’’)：1-(4-{(6R,7R)-rel-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮
實施例F10(流程F’’)：1-(4-{(6R,7R)-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮
實施例F11(流程F’’)：1-(4-{(6S,7S)-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮
步驟1：(3R,4R)-rel-3-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-4-甲基環己烷-1-酮(F-13)之合成
令[Rh(COD)Cl]2 (160毫克，0.321毫莫耳)在惰性氛圍下添加至1,4-二㗁烷(40毫升)與H2 O(9毫升)之混合物中的(5-氯-1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)硼酸(Int-2)(1.8克，6.43毫莫耳)、4-甲基環己-2-烯-1-酮(1.06克，9.63毫莫耳)及K3 PO4 (4.09克，19.3毫莫耳)之攪拌溶液中。令所得混合物在40℃及N2 下攪拌16小時。LCMS分析顯示起始材料已消耗，形成所欲產物塊。令反應以添加食鹽水(50毫升)淬滅且令混合物以EtOAc(3×50毫升)萃取。令合併的有機物以食鹽水(50毫升)清洗，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。以快速層析術純化(SiO2 ，0至30%之EtOAc/石油醚)提供成為白色固體的(3R,4R)-rel-3-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-4-甲基環己烷-1-酮(F-13)(955毫克，43%之產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 8.66 (s, 1H), 7.66 (dd, J = 9.0, 2.4 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.94-5.77 (m, 1H), 3.87 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 3.75 (dq, J = 11.5, 6.3, 5.4 Hz, 1H), 3.50 (ddd, J = 13.6, 11.2, 4.2 Hz, 1H), 3.11 (td, J = 13.9, 6.8 Hz, 1H), 2.92 (td, J = 14.1, 6.1 Hz, 1H), 2.72-2.54 (m, 1H), 2.46-1.91 (m, 6H), 1.75 (dd, J = 12.5, 8.0 Hz, 1H), 1.64-1.44 (m, 3H), 0.64 (dd, J = 8.7, 6.4 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 347 (M+H)。
步驟2：(5R,6S)-rel-6-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸甲酯(F-14)及(4R,5R)-4-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸甲酯(F-15)之合成
令LDA(2M於THF中，2.74毫升，5.48毫莫耳)在-78℃下逐滴添加至THF(30毫升)中的(3R,4R)-rel-3-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-4-甲基環己烷-1-酮(F-13)(950毫克，2.74毫莫耳)之溶液中。令混合物在-78℃下攪拌30分鐘。接著添加氰基甲酸乙酯(407毫克，4.11毫莫耳)且令混合物在-78℃下攪拌2小時。LCMS顯示沒有起始材料。令混合物以飽和水性NH4 Cl淬滅且以EtOAc(3×40毫升)萃取。令合併的有機物經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。令殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，石油醚/EA=3/2)，以提供成為黃色油的非鏡像異構物之複合混合物：(5R,6S)-rel-6-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸甲酯(F-14)及(4R,5R)-4-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸甲酯(F-15)(1.0克，87%之產率，~1:1之混合物)。LCMS(ESI)m/z 419(M+H)。
步驟3：(6R,7R)-rel-7-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮之合成
令NaOMe(258毫克，4.77毫莫耳)添加至EtOH(20毫升)中的(5R,6S)-rel-6-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸乙酯(F-14)及(4R,5R)-4-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-羥基-5-甲基環己-1-烯-1-羧酸乙酯(F-15)(1.0克，2.4毫莫耳)與3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-甲脒(679毫克，4.77毫莫耳)之混合物中，且令混合物在回流下攪拌16小時。LCMS分析顯示完全及選擇性消耗F-15，形成所欲產物塊。令混合物濃縮至乾燥且以快速層析術純化(SiO2 ，DCM/MeOH=1:1)，以提供成為黃色固體的(6R,7R)-rel-7-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(F-16)(400毫克，34%之產率)。LCMS(ESI)m/z 497(M+H)。
步驟4：4-{(6R,7R)-rel-7-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(F-17)之合成
令DBU(245毫克，1.61毫莫耳)添加至MeCN(10毫升)中的(6R,7R)-rel-7-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4(3H)-酮(F-16)(400毫克，0.805毫莫耳)、哌-1-羧酸三級丁酯(300毫克，1.61毫莫耳)與BOP試劑(711毫克，1.61毫莫耳)之混合物中，且令混合物在20℃下攪拌16小時。LCMS分析顯示形成HOBt加成物。令混合物濃縮且令殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，DCM/MeOH=7/3)，以給出1-{(6R,7R)-4-[(1H-苯并***-1-基)氧基]-7-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-yl}-N,N-二甲基吖丁啶-3-胺(400毫克，82%之產率)。令DBU(198毫克，1.3毫莫耳)添加至DMF(10毫升)中的此中間物(400毫克，0.651毫莫耳)及哌-1-羧酸三級丁酯(243毫克，1.3毫莫耳)中，且令混合物在90℃下攪拌16小時。LCMS分析顯示起始材料已消耗，形成所欲產物。令混合物濃縮且令殘餘物以快速層析術純化(SiO2 ，DCM/MeOH=20/1)，以提供成為棕色油的4-{(6R,7R)-rel-7-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(F-17)(300毫克，69%之產率)。LCMS(ESI)m/z 665(M+H)。
步驟5：1-[(6R,7R)-rel-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-6-甲基-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基]-N,N-二甲基吖丁啶-3-胺(F-18)之合成
令HCl(4M於1,4-二㗁烷中，3毫升)添加至DCM(5毫升)中的4-{(6R,7R)-rel-7-[5-氯-1-(氧雜環己烷-2-基)-1H-吲唑-4-基]-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(F-17)(300毫克，0.451毫莫耳)之溶液中。令混合物在20℃下攪拌2小時。LCMS分析顯示起始材料已消耗，形成所欲產物塊。令混合物過濾且濃縮以提供成為棕色固體的1-[(6R,7R)-rel-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-6-甲基-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基]-N,N-二甲基吖丁啶-3-胺(F-18)(233毫克，100%之產率)，其無需接受進一步的純化。LCMS(ESI)m/z 481(M+H)。
步驟6：1-(4-{(6R,7R)-rel-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F5)之合成
令丙烯醯氯(45毫克，0.495毫莫耳)添加至EtOAc(40毫升)及飽和水性NaHCO3 (40毫升)中的1-[(6R,7R)-rel-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-6-甲基-4-(哌-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-2-基]-N,N-二甲基吖丁啶-3-胺(F-18)(233毫克，0.45毫莫耳)之溶液中。令混合物在周圍溫度下攪拌30分鐘。令混合物以EA(3×40毫升)萃取。令合併的有機萃取物以食鹽水(20毫升)清洗，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。令殘餘物以Gemini-18管柱(100×21.2毫米，5微米粒徑)的製備性HPLC純化，令管柱以45至55%之MeCN/H2 O(+0.05%之NH3 )溶析，以提供成為白色固體的1-(4-{(6R,7R)-rel-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F5)(28毫克，12%之產率)。1 H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.13 (s, 1H), 7.45-7.39 (m, 2H), 6.81 (dd, J = 16.8, 10.6 Hz, 1H), 6.26 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 5.81-5.75 (m, 1H), 4.12-4.09 (m, 2H), 3.91-3.78 (m, 4H), 3.71-3.60 (m, 4H), 3.42-3.33 (m, 2H), 3.25-3.05 (m, 3H), 3.00-2.94 (m, 1H), 2.76 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 2.54-2.40 (m, 2H), 2.21 (s, 6H), 0.82 (d, J = 5.7 Hz, 3H)。LCMS (ESI) m/z 535, (M+H)。
步驟7：1-(4-{(6R,7R)-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F10)及1-(4-{(6S,7S)-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F11)之合成
令1-(4-{(6R,7R)-rel-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(18.2毫克)(實施例F5)以Phenomenex Lux Amylose-1管柱(100×4.6毫米管柱，3微米)之製備性SFC純化，令管柱在CO2 (+10mM NH3 )中以5至60%之IPA溶析。以4毫升/分鐘之流速給出Rt( 峰 1) =2.84分鐘及Rt( 峰 2) =3.36分鐘。1-(4-{(6R,7R)-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F10)(峰1)：6.02毫克，＞99% ee，33%之產率。1 H NMR (600 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.35 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.50 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.88 (dd, J = 16.7, 10.5 Hz, 1H), 6.19 (dd, J = 16.7, 2.4 Hz, 1H), 5.76 (dd, J = 10.4, 2.4 Hz, 1H), 3.99 (ddd, J = 9.8, 7.1, 3.2 Hz, 2H), 3.87-3.58 (m, 8H), 3.52-3.47 (m, 2H), 3.31-3.23 (m, 2H), 3.15-3.02 (m, 2H), 2.85 (dd, J = 18.3, 6.2 Hz, 1H), 2.70 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.50 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 2.12 (s, 6H), 0.76 (d, J = 5.4 Hz, 3H)；[α]d 22 = -45.5° (c = 0.1，MeOH)；LCMS (ESI) m/z 535 (M+H)。1-(4-{(6S,7S)-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F11)(峰2)：6.38毫克，＞99% ee，35%之產率。1 H NMR (600 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.35 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.41 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.89 (dd, J = 16.7, 10.4 Hz, 1H), 6.19 (dd, J = 16.7, 2.4 Hz, 1H), 5.76 (dd, J = 10.5, 2.3 Hz, 1H), 4.08-3.92 (m, 2H), 3.88-3.59 (m, 8H), 3.51-3.46 (m, 2H), 3.32-3.21 (m, 2H), 3.15-3.04 (m, 2H), 2.85 (dd, J = 18.3, 6.1 Hz, 1H), 2.70 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.50 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 2.12 (s, 6H), 0.76 (d, J = 5.4 Hz, 3H)；[α]d 22 = +78.9° (c = 0.1，MeOH)；LCMS (ESI) m/z 535 (M+H)。
在表F中的實施例係使用類似於流程F、流程F’和流程F’’的化學法及用於製備1-{4-[(6R,7R)-rel-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例F1)、1-{4-[(6S,7S)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例F2)、1-{4-[(6R,7R)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例F3)、1-(4-{(6R,7R)-7-(6-氯-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F14)、1-(4-{(6R,7R)-rel-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F5)、1-(4-{(6R,7R)-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F10)、1-(4-{(6S,7S)-7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F11)之程序製備。下列的實施例係以非關鍵性改變或取代用於製備實施例F1之例示性程序而達成，其能由熟習此項技術領域者實現。
實施例G1(流程G)：1-(4-(7-(5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基)哌-1-基)丙-2-烯-1-酮
步驟1：4-(7-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基)-5,6-二氫喹唑啉-4-基)哌-1-羧酸三級丁酯(G-1)之合成
令4-(7-{[(三氟甲基)磺醯基]氧基}-5,6-二氫喹唑啉-4-基)哌-1-羧酸三級丁酯(Int-4)(186毫克，0.4毫莫耳)添加至配備有磁攪拌棒的25毫升燒瓶中。令材料溶解在THF/H2 O(9:1，5毫升)中。添加[1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]硼酸(151毫克，0.48毫莫耳，1.2當量)及PdCl2 (dppf)(29.3毫克，0.04毫莫耳，0.1當量)。令燒瓶抽空且以氮氣(3x)回填，且接著添加三乙胺(0.56毫升，4.0毫莫耳，10當量)。令混合物加熱至60℃經2小時。LCMS分析表明形成所欲產物且起始材料已完全消耗。令混合物以EtOAc稀釋，以食鹽水清洗且經無水MgSO4 乾燥。令混合物濃縮至乾燥且令殘餘物以ISCO純化(0-50%之丙酮/庚烷)，以提供成為灰白色/淺黃色固體的4-(7-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基)-5,6-二氫喹唑啉-4-基)哌-1-羧酸三級丁酯(G-1)(200.0毫克，85%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ = 8.67 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.70 (s, 2H), 6.67 - 6.59 (m, 1H), 5.81 - 5.71 (m, 1H), 4.04 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 3.84 - 3.72 (m, 1H), 3.59 (br s, 4H), 3.37 (br s, 4H), 3.00 - 2.85 (m, 2H), 2.70 (br s, 2H), 2.61 - 2.47 (m, 1H), 2.17 (s, 1H), 1.88 - 1.62 (m, 4H), 1.50 (s, 9H)。LCMS (ESI) m/z 585.7 (M + H)。
步驟2：4-(哌-1-基)-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉(G-2)之合成
令4-(7-(1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基)-5,6-二氫喹唑啉-4-基)哌-1-羧酸三級丁酯(G-1)(30毫克，0.051毫莫耳，1.0當量)、MeOH(5毫升)及Pt/C(5%之裝載量，70毫克)裝入配備有磁攪拌棒的50毫升試管中。令混合物以H2 (100psi)加壓且接著加熱至60℃經3天。LCMS分析表明形成所欲產物且起始材料幾乎完全消耗。令混合物通過矽藻土墊過濾。令過濾物濃縮且令粗製物以快速層析術純化(SiO2 ，0至70%之丙酮/庚烷)，以提供成為黃色固體的4-(哌-1-基)-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉(G-2)(17.0毫克，56%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.63 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.73 - 7.65 (m, 1H), 7.62 - 7.51 (m, 1H), 5.83 - 5.66 (m, 1H), 4.10 - 3.97 (m, 1H), 3.90 - 3.73 (m, 2H), 3.71 - 3.60 (m, 2H), 3.51 (d, J = 9.8 Hz, 4H), 3.43 - 3.18 (m, 4H), 2.80 (br. s., 1H), 2.64 - 2.47 (m, 1H), 2.17 (m, 4H), 1.87 - 1.63 (m, 4H), 1.50 (s, 9H)。LCMS (ESI) m/z 587.6 (M + H)。
步驟3：4-(哌-1-基)-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉(G-3)之合成
令4-{7-[1-(四氫-2H-吡喃-2-基)-5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-羧酸三級丁酯(G-2)(6毫克，0.01毫莫耳，1.0當量)、DCM(0.4毫升)及TFA(0.2毫升)添加至配備有磁攪拌棒的8毫升小瓶中。令反應攪拌15分鐘。LCMS分析表明形成完全去保護之產物。令反應濃縮至乾燥以提供成為棕色殘餘物的4-(哌-1-基)-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉(G-3)(6毫克，100%之產率)，其無需進步純化而前進至下一步驟。LCMS(ESI)m/z 403.3(M+H)。
步驟4：1-(4-{7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例G1)之合成
令4-(哌-1-基)-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉(G-3)溶解在THF(1毫升)中且冷卻至0℃。令混合物以丙烯醯氯(0.945毫克，0.01毫莫耳，0.85微升，1.0當量)及三乙胺(7.13微升，0.05毫莫耳，10.0當量)處理。令混合物在0℃下攪拌15分鐘。LCMS分析表明形成所欲產物且起始材料已完全消耗。在減壓下移除溶劑且令殘餘物以HPLC純化，以提供成為灰白色固體的1-(4-{7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例G1)(3.0毫克，40%之產率)。1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 8.61 (s, 1H), 8.16 - 8.10 (m, 1H), 7.65 - 7.57 (m, 1H), 7.52 - 7.41 (m, 1H), 6.62 - 6.50 (m, 1H), 6.34 - 6.22 (m, 1H), 5.82 - 5.66 (m, 1H), 4.14 - 3.59 (m, 8H), 3.53 - 3.39 (m, 2H), 3.12 - 2.60 (m, 3H), 2.36 - 2.08 (m, 2H)。LCMS (ESI) m/z 457.5 (M + H)。
在下列製備中詳述之中間物G-4係根據方法G供給實施例G2和G3。然而，此實施例係由於需要去保護步驟而落在前述實施例的合成範圍之外，且為了完整性起見，在下文包括此化學法。供給最終實施例的後續化學法類似於方法G實施例，以熟習此項技術領域者可理解的最少添加或改變。
步驟5：1-{4-[(7R)-7-(3-羥基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例G2)及1-{4-[(7S)-7-(3-羥基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(實施例G3)之合成
令DCM(10毫升)中的1-{4-[7-(3-甲氧基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(G-4)(166毫克，0.387毫莫耳)之溶液在氮氣下以冰浴冷卻至0℃。令混合物以三溴化硼溶液(1.0M，1.94毫升，1.94毫莫耳，5.0當量)逐滴處理以提供粉紅色懸浮液，令其緩慢地溫熱至室溫且再攪拌4小時。令懸浮液以冰浴冷卻且小心地以飽和水性NaHCO3 (10毫升)淬滅。令層分離且令水層以DCM:MeOH(95:5，4x)萃取。令合併的有機物經無水硫酸鈉乾燥且濃縮。令粗製材料在Chiralpak AD-3管柱上(4.6×100毫米)以製備性SFC純化，令管柱在120巴之CO2 中以40%之IPA溶析。以4毫升/分鐘之流速給出Rt( 峰 1) =2.83分鐘及Rt( 峰 2) =3.49分鐘。1-{4-[(7R)-7-(3-羥基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(峰1)(實施例G2)：23毫克，＞99% ee，32%之產率。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) = 9.66 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.08 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.40 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.35 - 7.27 (m,1H), 7.05 - 6.97 (m, 2H), 6.84 (dd, J = 10.4, 16.6 Hz, 1H), 6.15 (dd, J = 2.3, 16.8 Hz, 1H), 5.77 - 5.65 (m, 1H), 3.92 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 3.84 - 3.58 (m, 4H), 3.50 (td, J = 3.5, 13.0 Hz, 2H), 3.29 - 3.25 (m, 2H), 3.17 (dd, J = 5.0, 18.1 Hz, 1H), 3.01 (t, J = 11.4 Hz, 1H), 2.85 (dd, J = 11.0, 18.2 Hz, 1H), 2.64 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 2.15 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 1.87 (dd, J = 3.3, 11.5 Hz, 1H)。[α]d 22 = 27.7° (C=0.1, MeOH)；LCMS (ESI) m/z 415 (M + H)。1-{4-[(7S)-7-(3-羥基萘-1-基)-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基]哌-1-基}丙-2-烯-1-酮(峰2)(實施例G3)：27毫克，~99% ee，37%之產率。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ 9.66 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.08 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.40 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.35 - 7.27 (m,1H), 7.07 - 6.97 (m, 2H), 6.84 (dd, J = 10.5, 16.6 Hz, 1H), 6.15 (dd, J = 2.3, 16.8 Hz, 1H), 5.79 - 5.64 (m, 1H), 3.92 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 3.83 - 3.58 (m, 4H), 3.55 - 3.44 (m, 2H), 3.29 - 3.25 (m, 2H), 3.17 (dd, J = 4.8, 18.3 Hz, 1H), 3.00 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 2.85 (dd, J = 11.1, 18.2 Hz, 1H), 2.71 - 2.59 (m, 1H), 2.15 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 1.87 (dd, J = 3.8, 12.0 Hz, 1H)。[α]d 22 = -24.8° (C=0.1, MeOH)；LCMS (ESI) m/z 415 (M + H)。
實施例H1(流程H)：1-(4-{(6R,7R)-7-(6-氯-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-甲基-2-[3-(甲基胺基)吖丁啶-1-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例H1)之合成
令去離子H2 O(27.04毫升)裝入500毫升Erlenmeyer燒瓶中且以pH7.5之1.0M磷酸鉀緩衝溶液(4.0毫升)、0.165M MgCl溶液(0.8毫升，132微莫耳)及在MeCN/H2 O(1:1)中的1-(4-{(6R,7R)-7-(6-氯-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(二甲基胺基)吖丁啶-1-基]-6-甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例F14)之0.005M溶液(0.16毫升，0.8微莫耳)處理。令混合物以經***(dexamethasone)誘導之雄性大鼠肝微粒體(新鮮製備，2毫克/毫升)處理，繼而添加新鮮製備的NADPH之0.013M水性溶液(4.0毫升，52微莫耳)。令未封蓋之Erlenmeyer燒瓶在37℃下使用具有1”動程的Thermo Scientific Precision振盪器振盪1小時。令反應混合物分成相等的部分(各20毫升)且倒入兩個50毫升Falcon錐形離心管中。令溶液以添加至各Falcon試管中的MeCN(20毫升)淬滅。令Falcon試管使用Cetrifuge CT422儀器在3000rpm下渦旋且離心5分鐘。令上清液傾析且以相等的部分(各20毫升)轉移至兩個50毫升Falcon錐形離心管中，且使用EZ-2 Plus Genevac蒸發溶劑(1小時HPLC設定，34℃/238毫巴至41℃/7毫巴)。令剩餘水性溶液合併(~20毫升)至50毫升Falcon錐形離心管中且以MeCN (0.5毫升)及純甲酸(0.5毫升)處理，且裝入去離子H2 O至50毫升最終體積。令溶液分成相等的部分(各25毫升)，倒入兩個高速離心管中且使用Beckman Coulter Allegra 64R(26200速度，24℃)儀器以40,000G離心30分鐘。令上清液傾析至50毫升錐形玻璃管中且令澄清溶液使用JASCO PU-1580 HPLC泵以0.8毫升/分鐘之流速經~60分鐘吸收在C18 HPLC管柱上(Zorbax Polaris，C18-A，250×4.6毫米，5微米粒徑)。令HPLC管柱轉移至與由四元泵(quaternary pump)、自動取樣器及光二極體陣列UV/vis檢測器所組成之Waters Acquity UHPLC儀器連線的Thermo LTQ Velos質譜儀。應用梯度(MeCN/H2 O+0.1%之甲酸)分離關注產物。在通過PDA檢測器後，溶析液以~15:1之比分開，較大部分進入流份檢測器(Collect PAL，Leap Technologies)及較小部分進入質譜儀(每20秒收集流份)。令含有關注峰之流份以使用與Thermo Accelar UHPLC及具有CTC Analytics Leap自動注射器(Thermo-Fisher)之二極體陣列UV/vis檢測器連線的Thermo Orbitrap Elite高解析離子阱質譜儀的UHPLC-UV-HRMS分析。令樣品注射(2微升)至C18 UHPLC管柱上(Phenomenex Kinetex，C18，50×2.1毫米，1.7微米粒徑)及應用0.4毫升/分鐘流速的MeCN/H2 O+0.1%之甲酸梯度，維持在45℃。在UHPLC-UV-HRMS分析後，匯集流份且使用EZ-2 Plus Genevac移除溶劑(3小時HPLC設定，34℃/238毫巴至41℃/7毫巴)，以供給1-(4-{(6R,7R)-7-(6-氯-5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6-甲基-2-[3-(甲基胺基)吖丁啶-1-基]-5,6,7,8-四氫喹唑啉-4-基}哌-1-基)丙-2-烯-1-酮(實施例G1)(32微克，60毫微莫耳，7.5%之產率)。令乾燥之樣品以NMR光譜術分析且藉由使用具有Topspin V3.2之ERETIC2功能以相對於DMSO-d6 中的5.0mM苯甲酸標準溶液之1 H NMR光譜的外部校準進行量化。1 H NMR (600 MHz, DMSO-d6 ) δ 13.12 (br. s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 6.85 (dd, J = 16.7, 10.4 Hz, 1H), 6.15 (dd, J = 16.7, 2.3, 1H), 5.72 (dd, J = 10.4, 2.3 Hz, 1H), 4.03 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 3.87 - 3.77 (m, 1H), 3.77 - 3.67 (m, 1H), 3.65 - 3.56 (m, 4H), 3.50 - 3.40 (m, 4H), 3.24 - 3.15 (m, 2H), 3.04 - 2.96 (m, 1H), 2.89 - 2.81 (m, 1H), 2.64 - 2.61 (m, 1H), 2.49 - 2.47 (m, 4H), 2.43 - 2.39 (m, 1H), 2.22 (s, 3H), 0.68 (d, J = 6.3 Hz, 3H)。HRMS (ESI-TOF)以C28 H36 ClN8 O之[M+H]: m/z計算值=535.2701，實測值535.2700(0.2ppm)
生物實施例及生物檢定方法
質譜術反應性檢定法(MSRA)
本發明呈示之化合物係使用MSRA共價結合kRas G12C以檢測例示性化合物與kRas G12C之共價加成物。
令裝載GDP之kRas(1-169)G12C、C51S、C80L、C118S在蛋白質檢定緩衝液25mM Hepes pH7.5、200mM NaCl、5%之甘油中稀釋至5µM濃度且令20微升蛋白質轉移至96槽孔盤中。產生初始化合物儲備液，其濃度比彼等所欲檢定濃度高100倍。參見K-Ras(G12C)inhibitors allosterically control GTP affinity and effector interactions； Ostrem JM, Peters U, Sos ML, Wells JA, Shokat KM； Nature. 2013, Nov 28； 503(7477):548-51。
令溶解在DMSO中的例示性化合物以100倍稀釋至96槽孔盤中含有20微升5µM kRas蛋白質之溶液中以引發反應。使用Mosquito(TPP Lab tech)液體處置機器人添加化合物至蛋白質溶液中。化合物之典型的最終濃度為10µM。令盤在RT下放置在振盪器上1分鐘，密封且在室溫下培育特定的時期。令5微升反應混合物添加至10微升0.2%之甲酸終止溶液中且徹底混合。典型的結束點為30、120、600和1440分鐘。
使用Waters Acquity H-class UPLC系統/Xevo G2-XS TOF質譜儀收集數據。令蛋白質以彼等液相注射在Bruker Microtrap蛋白質管柱TR1/15109/03上。使用下列的緩衝液設定LC梯度：緩衝液A：0.2%之甲酸H20；B：0.2%之甲酸ACN。蛋白質係使用下列的LC梯度自管柱溶析：0至0.4分鐘，10%之B至30%之B；0.4分鐘至2.4分鐘至90%之B，2.5分鐘，10%之B，3分鐘，10%之B。在數據採集後，立即使用MaxEnt軟體進行初始數據分析。
使用標準的自動處理功能，在數據採集後立即使用MexEnt軟體定義未經修飾及經修飾之kRas蛋白質百分比。最高峰被定義為100%，而較小峰被定義為以自動處理功能定義之指配數字。令相應於經例示性化合物修飾及未經修飾之KRas(裝載GDP之kRas)(1-169)G12C、C51S、C80L、C118S的修飾百分比輸出至Xcel數據分析軟體。
在規定之例示性化合物濃度下的經修飾之蛋白質的百分比係使用下式計算：%修飾=經修飾之峰的數目/經修飾+未經修飾之數目總和。經定義為百分比修飾(PM)之所得值及增加的PM反映特定的化合物在指定的化合物濃度下於給出之時間點比其他的化合物更好。
MiaPaCa2細胞活性檢定法
本發明呈示之化合物在治療人類癌細胞系時導致結合GDP之Ras的聚積。
在細胞環境中結合GDP之KRAS G12C的聚積係基於KRAS G12C在處於其活性-GTP結合狀態時僅結合至其下游激酶Raf-1(MAP激酶激酶激酶)之原理測量。在此狀態下，結合至Raf-1激酶之結構域的Ras被稱為Ras結合結構域(RBD)。
令MiaPaCa2細胞在以10%之胎牛血清及1%之青黴素/鏈黴素補充之DMEM培養基(Gibco 11995)中生長。令細胞以40,000個細胞/槽孔之密度接種在96槽孔組織培養盤中且容許附著16至24小時。試驗化合物係於DMSO中製備成10mM儲備液且使用3倍稀釋方案於100%之DMSO中連續稀釋。在完全生長培養基中製得中間物5X濃縮盤且以25微升/槽孔添加至100微升細胞中而成為0.1%之DMSO的最終濃度。以一式兩份測試每一濃度的例示性化合物。陰性對照槽孔為具有10μM之對照抑制劑的細胞及陽性對照槽孔為沒有藥物，僅DMSO的細胞。令盤在37℃，5%之CO2 下培育6小時。在處理後，令細胞以冰冷的PBS及100微升/槽孔之冰冷的1X檢定/溶解液清洗3次。添加具有蛋白酶抑制劑之緩衝液(25 mM HEPES，pH 7.5、150 mM NaCl、1%之NP-40、10mM MgCl2、1mM EDTA、2%之甘油)。在溶解後，令樣品冷凍在-80℃下。
令Raf-1 RBD(LJIC-1988A1)在PBS中稀釋至100毫微克/槽孔且令5微升/槽孔點塗在MSD高結合SECTOR盤(L15XB)上。令盤在室溫下於迴轉式振盪器上培育1小時。令盤以PBS/0.05%之Tween-20清洗且添加50微升/槽孔的解凍之溶解樣品，繼而添加50微升在PBS/0.05%之Tween-20中的1%之MSD阻斷劑A(R93BA)。令盤在迴轉式振盪器上培育1小時且以PBS/0.05%之Tween-20清洗。添加在1%之MSD阻斷劑A溶液中以1:3000稀釋之25微升/槽孔之Anti-pan-Ras抗體(Cell Biolabs 244003)，令盤在迴轉式振盪器上培育1小時且以PBS/0.05%之Tween-20清洗。令SULFO-TAG山羊抗小鼠二次抗體(MSD R32AC)在MSD阻斷劑A溶液中以1:500稀釋且以25微升/槽孔添加。令盤在迴轉式振盪器上培育1小時且以PBS/0.05%之Tween-20清洗。添加在H2 O中以1:3稀釋之150微升/槽孔之讀取緩衝液T(MSD R92TC)且令盤在Meso Scale Discovery Sector Imager S600上讀取。
令KRAS信號標準化至最大抑制及DMSO對照值，且使用劑量反應曲線的4參數擬合產生IC50值。降低的IC50反映例示性化合物在治療癌細胞系的特定時間點導致結合GDP之KRAS G12C的聚積水平比另一例示性化合物高。
H358細胞活性檢定法
本發明呈示之化合物在治療人類癌細胞系時導致結合GDP之Ras的聚積。
在細胞環境中結合GDP之KRAS G12C的聚積係基於KRAS G12C在處於其活性-GTP結合狀態時僅結合至其下游激酶Raf-1(MAP激酶激酶激酶)之原理測量。在此狀態下，結合至Raf-1激酶之結構域的Ras被稱為Ras結合結構域(RBD)。
令H358細胞在以10%之胎牛血清及1%之青黴素/鏈黴素補充之RPMI1640培養基(Gibco 11875)中生長。令細胞以40,000個細胞/槽孔之密度接種在96槽孔組織培養盤中且容許附著16至24小時。試驗化合物係於DMSO中製備成10mM儲備液且使用3倍稀釋方案於100%之DMSO中連續稀釋。在完全生長培養基中製得中間物5X濃縮盤且以25微升/槽孔添加至100微升細胞中而成為0.1%之DMSO的最終濃度。以一式兩份測試每一濃度的例示性化合物。陰性對照槽孔為以10μM之對照抑制劑的細胞及陽性對照槽孔為沒有藥物，僅DMSO的細胞。令盤在37℃，5%之CO2 下培育6小時。在處理後，令細胞以冰冷的PBS及100微升/槽孔之冰冷的1X檢定/溶解液清洗3次。添加具有蛋白酶抑制劑之緩衝液(25 mM HEPES，pH 7.5、150 mM NaCl、1%之NP-40、10 mM MgCl2、1 mM EDTA、2%之甘油)。在溶解後，令樣品冷凍在-80℃下。
令Raf-1 RBD(LJIC-1988A1)在PBS中稀釋至100毫微克/槽孔且令5微升/槽孔點塗在MSD高結合SECTOR盤(L15XB)上。令盤在室溫下於迴轉式振盪器上培育1小時。令盤以PBS/0.05%之Tween-20清洗且添加50微升/槽孔的解凍之溶解樣品，繼而添加50微升在PBS/0.05%之Tween-20中的1%之MSD阻斷劑A(R93BA)。令盤在迴轉式振盪器上培育1小時且以PBS/0.05%之Tween-20清洗。添加在1%之MSD阻斷劑A溶液中以1:3000稀釋之25微升/槽孔之Anti-pan-Ras抗體(Cell Biolabs 244003)，令盤在迴轉式振盪器上培育1小時且以PBS/0.05%之Tween-20清洗。令SULFO-TAG山羊抗小鼠二次抗體(MSD R32AC)在MSD阻斷劑A溶液中以1:500稀釋且以25微升/槽孔添加。令盤在迴轉式振盪器上培育1小時且以PBS/0.05%之Tween-20清洗。添加在H2 O中以1:3稀釋之150微升/槽孔之讀取緩衝液T(MSD R92TC)且令盤在Meso Scale Discovery Sector Imager S600上讀取。
令KRAS信號標準化至最大抑制及DMSO對照值，且使用劑量反應曲線的4參數擬合產生IC50值。降低的IC50反映例示性化合物在治療癌細胞系的特定時間點導致結合GDP之KRAS G12C的聚積水平比另一例示性化合物高。
Claims (23)
- 一種式(I)化合物： 或其醫藥上可接受之鹽；其中： J為具有3至12個環原子的雜環，其中J隨意地經1、2、3、4、5或6個R2 取代； K為C6 -C12 芳基，或K為具有5至12個環原子的雜芳基，其中K隨意地經1、2、3、4、5、6或7個R3 取代； W係選自由下列者所組成之群組： 其中W隨意地經1、2或3個R5 取代； 各R1 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷基-羥基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 烷基-C1 -C6 烷氧基、羥基、C2 -C6 烯基、C2 -C6 炔基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基、氰基和-N(R6 )2 ，或兩個R1 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基； 各R2 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、羥基、C1 -C6 烷基-羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基、氰基、C1 -C6 烷基-氰基和側氧基，或兩個R2 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基； 各R3 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 烷基-羥基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基、N(R6 )2 、側氧基和氰基，或兩個R3 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基； R4 為-X-Y-Z，其中： X不存在或選自由下列者所組成之群組：氧、硫和 -NR6 -， Y不存在或為C1 -C6 伸烷基，及 Z係選自H、-N(R6 )2 、-C(O)-N(R6 )2 、-OR6 、具有3至12個環原子的雜環、具有5至12個環原子的雜芳基和C3 -C6 環烷基， 其中R4 隨意地經一或多個R7 取代； 各R5 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素和-N(R6 )2 ； 各R6 係獨立地選自由下列者所組成之群組：氫、羥基、C1 -C6 烷氧基和C1 -C6 烷基，或兩個R6 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基； 各R7 獨立為R7’ 或C1 -C6 烷基-R7’ ，其中各R7’ 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素、-N(R6 )2 、具有3至12個環原子的雜環和側氧基；且 m為0、1、2、3、4、5、6或7。
- 一種式(I)化合物： 或其醫藥上可接受之鹽；其中： J係選自由下列者所組成之群組： 其中W*表示與W的連接點，且其中J隨意地經1、2、3、4、5或6個R2 取代； K係選自由下列者所組成之群組： K係選自由下列者所組成之群組： 其中K隨意地經1、2、3、4、5、6或7個R3 取代； W係選自由下列者所組成之群組： 其中W隨意地經1、2或3個R5 取代； 各R1 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、C1 -C6 烷基-羥基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 烷基-C1 -C6 烷氧基、羥基、C2 -C6 烯基、C2 -C6 炔基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基、氰基和-N(R6 )2 ，或兩個R1 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基； 各R2 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、羥基、C1 -C6 烷基-羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基、氰基、C1 -C6 烷基-氰基和側氧基，或兩個R2 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基； 各R3 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、C3 -C6 環烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、C1 -C6 烷基-羥基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基、N(R6 )2 、側氧基和氰基，或兩個R3 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基； R4 為-X-Y-Z，其中： X不存在或選自由下列者所組成之群組：氧、硫和 -NR6 -、 Y不存在或為C1 -C6 伸烷基，且 Z係選自H、-N(R6 )2 、-C(O)-N(R6 )2 、-OR6 、具有3至12個環原子的雜環、具有5至12個環原子的雜芳基和C3 -C6 環烷基， 其中R4 隨意地經一或多個R7 取代； 各R5 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素和-N(R6 )2 ； 各R6 係獨立地選自由下列者所組成之群組：氫、羥基、C1 -C6 烷氧基和C1 -C6 烷基，或兩個R6 隨意地接合以形成具有3至12個環原子的雜環或C3 -C6 環烷基； 各R7 獨立為R7’ 或C1 -C6 烷基-R7’ ，其中各R7’ 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素、-N(R6 )2 、具有3至12個環原子的雜環和側氧基；且 m為0、1、2、3、4、5、6或7。
- 一種式(I)化合物： 或其醫藥上可接受之鹽；其中： J係選自由下列者所組成之群組： 其中W*表示與W的連接點，且其中J隨意地經R2 取代； K係選自由下列者所組成之群組： K係選自由下列者所組成之群組： 其中K隨意地經1或2個R3 取代； W係選自由下列者所組成之群組： 其中W隨意地經1、2或3個R5 取代； R1 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基和C1 -C6 烷基-C1 -C6 烷氧基； R2 為C1 -C6 烷基； 各R3 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、羥基、鹵素、C1 -C6 鹵烷基和C1 -C6 烷基-羥基； R4 為-X-Y-Z，其中： X不存在或為氧， Y不存在或為C1 -C6 伸烷基，且 Z係選自H、-N(R6 )2 、-OR6 和具有3至12個環原子的雜環， 其中R4 隨意地經一或多個R7 取代； 各R5 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基、羥基、C1 -C6 烷氧基、鹵素和-N(R6 )2 ； 各R6 係獨立地選自由下列者所組成之群組：氫和C1 -C6 烷基； 各R7 獨立為R7’ 或C1 -C6 烷基-R7’ ，其中各R7’ 係獨立地選自由下列者所組成之群組：C1 -C6 烷基和-N(R6 )2 ； m為0或1。
- 根據申請專利範圍第2項之化合物或鹽，其中K係選自由下列者所組成之群組：。
- 根據申請專利範圍第2項之化合物或鹽，其中K係選自由下列者所組成之群組：。
- 根據申請專利範圍第2項之化合物或鹽，其中K為：。
- 根據申請專利範圍第1至6項中任一項之化合物或鹽，其中W為：。
- 根據申請專利範圍第1、2、4、5和6項中任一項之化合物或鹽，其中J為隨意地經取代之。
- 根據申請專利範圍第1、2、4、5和6項中任一項之化合物或鹽，其中J係選自由下列者所組成之群組：。
- 根據申請專利範圍第1至6項中任一項之化合物或鹽，其中R4 係選自由下列者所組成之群組：
- 一種選自由下列者所組成之群組的化合物： 或其醫藥上可接受之鹽。
- 一種選自由下列者所組成之群組的化合物： 或其醫藥上可接受之鹽。
- 根據申請專利範圍第1至6、11和12項中任一項之化合物或鹽，其中一或多個氫原子係經氘原子置換。
- 一種醫藥組成物，其包含治療有效量的根據申請專利範圍第1至13項中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽及醫藥上可接受之賦形劑。
- 一種根據申請專利範圍第1至13項中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽於製備藥劑之用途，該藥劑係用於抑制細胞的KRAS活性。
- 一種根據申請專利範圍第1至13項中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽於製備藥劑之用途，該藥劑係用於治療哺乳動物的異常細胞生長。
- 根據申請專利範圍第16項之用途，其中該異常細胞生長為癌。
- 根據申請專利範圍第17項之用途，其中該癌為肺癌、骨癌、胰臟癌、皮膚癌、頭或頸癌、皮膚或眼內黑色素瘤、子宮癌、卵巢癌、直腸癌、肛區癌、胃癌、結腸癌、乳癌、子宮癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、***癌、外陰癌、霍奇金氏病(Hodgkin's Disease)、食道癌、小腸癌、內分泌系統癌、甲狀腺癌、副甲狀腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、***癌、慢性或急性白血病、淋巴細胞淋巴瘤、膀胱癌、腎或輸尿管癌、腎細胞癌、腎盂癌、中樞神經系統(CNS)腫瘤、原發性CNS淋巴瘤、脊髓軸腫瘤、腦幹膠質瘤或垂體腺瘤。
- 根據申請專利範圍第17項之用途，其中該癌為肺癌、結腸癌、胰臟癌或卵巢癌。
- 根據申請專利範圍第17項之用途，其中該癌為肺癌。
- 根據申請專利範圍第17項之用途，其中該癌為胰臟癌。
- 根據申請專利範圍第17項之用途，其中該癌係與KRAS突變相關聯。
- 根據申請專利範圍第17項之用途，其中該癌係與KRAS突變相關聯，該突變為G12C突變。
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