SK6712000A3 - Adenosine derivatives, method for their preparation, pharmaceutical composition containing the same and their use - Google Patents

Description

Oblasť techniky

Predkladaný vynález sa týka nových derivátov adenozínu, spôsobu ich prípravy, farmaceutických prostriedkov s ich obsahom a ich použitia v lekárstve. Deriváty adenozínu a ich analógy s agonistickým účinkom voči adenozínu použiteľné ako antihypertenzné, kardioprotektívne, antiischemické a antilipolytické prostriedky boli opísané vo zverejnenej medzinárodnej patentovej prihláške WO 95/28160.

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu sú deriváty adenozínu všeobecného vzorca I, ktoré majú agonistické účinky na adenozínový receptor A1

R¹

NH kde

HÓ ÓH (l)

R² znamená Ci_3alkyl, halogén alebo atóm vodíka;

R³ znamená fluorovanú alkylovú skupinu s priamym alebo rozvetveným reťazcom s až 6 atómami uhlíka;

R¹ znamená skupinu zvolenú zo skupiny:

1) -(alk)_n-(C3-7)cykloalkyl vrátane premosteného cykloalkylu, pričom cykloalkylová skupina môže byť prípadne substituovaná jedným alebo viacerými substituentami

-2zo skupiny OH, halogén, -(C₁.₃)alkoxy, kde (alk) znamená C^alkylén a n znamená 0 alebo 1,

2) alifatická heterocyklická skupina so 4 až 6 atómami v kruhu obsahujúca aspoň jeden heteroatóm zvolený z O, N a S, prípadne substituovaný jedným alebo viacerými substituentami zvolenými zo skupiny -(Ci-3)alkyl, -CO₂-(Ci-4)alkyl, -CO-(Ci.₃alkyl), -S(=O)_n-(Ci-3alkyl), -CONR^aR^b, kde skupiny R^a a R^b nezávisle znamenajú atóm vodíka alebo skupinu Ci_3alkyl, alebo =0, kde pokiaľ je v heterocyklíčkom kruhu prítomný atóm síry, je tento atóm síry prípadne substituovaný skupinou (=0)_n, kde n je 1 alebo 2,

3) priamy alebo rozvetvený Ci.^alkyl, ktorý prípadne obsahuje jeden alebo viacej atómov kyslíka, skupín S(=0)_n, kde n je O, 1 alebo 2, alebo atómov dusíka substituovaných alkylovým reťazcom, kde uvedený alkyl je prípadne substituovaný jednou alebo viacerými z nasledujúcich skupín: fenyl, halogén, hydroxy alebo NR^aR^b, kde R^a a R^b znamenajú obe C-i_3alkyl alebo atóm vodíka,

4) fúzovaný bicyklický aromatický kruh kde B znamená 5- alebo 6-člennú heterocyklickú aromatickú skupinu obsahujúcu jeden alebo viacej atómov O, N alebo S, kde bicyklický kruh je naviazaný na atóm dusíka všeobecného vzorca I cez atóm kruhu A a kruh B je prípadne substituovaný skupinou -CO2-(Ci-3alkyl),

5) fenylová skupina prípadne substituovaná jedným alebo viacerými substituentami zvolenými zo skupiny: halogén, -SO₃H, -(alk)_nOH, -(alk)_nkyano, -(0)_n-(Ci-6)alkyl, prípadne substituovaný jedným alebo viacerými atómami halogénu, -(alk)_nnitro, -(O)_rn-(alk)n-CO₂R^c, -(alk)n-CONR^cR^d, -(alk)n-COR^c, -(alk)n-SOR^e, -(alk)n-SO2NR^cR^d, -(alk)nOR^c, -(alk)n-(CO)m-NHSO₂R^e, -(alk)n-NHCOR^c, -(alk)nNR^cR^d, kde m a n znamenajú O alebo 1 a alk znamená Ci_₆alkylénovú skupinu alebo C₂-6alkenylovú skupinu,

6) fenylová skupina substituovaná 5- alebo 6-člennou heterocyklickou aromatickou skupinou, kde heterocyklická aromatická skupina je prípadne substituovaná skupinou Ci-3alkyl alebo NR^cR^d, pričom skupiny R^c a R^d môžu každá nezávisle znamenať atóm vodíka alebo skupinu Ci_3alkyl, alebo ak môže časť skupiny NR^cR^d, R^c a R^d spolu s atómom dusíka tvoriť 5- alebo 6-členný heterocyklický kruh prípadne obsahujúci iné heteroatómy, tento heterocyklický kruh môže byť prípadne substituovaný jednou alebo viacerými Ci.3alkylovými skupinami,

R^e znamená Ci^alkyl, a ich soli a solváty, najmä ich fyziologicky prijateľné solváty a soli.

Látky s agonistickým účinkom na receptor adenozínu A1 všeobecného vzorca I majú vyššiu aktivitu voči adenozínovému receptoru A1 než voči iným subtypom adenozínového receptora, najmä A3.

Zlúčeniny podľa vynálezu majú malú alebo žiadnu aktivitu voči receptoru A3.

Bude zrejmé, že ak skupiny R¹ a/alebo R² v zlúčeninách všeobecného vzorca I obsahujú jeden alebo viac asymetrických atómov uhlíka, vynález zahrnuje všetky diastereoizoméry zlúčenín všeobecného vzorca I a ich zmesi. Inak je stereochemická konfigurácia zlúčenín podľa vynálezu taká ako je znázornené vo všeobecnom vzorci I.

Ako sa tu používa, termín „alkyl znamená alkylovú skupinu s priamym alebo rozvetveným reťazcom. Príklady vhodných alkylových skupín vo význame R¹ a R² zahrnujú skupiny metyl, etyl, n-propyl, /-propyl, n-butyl, s-butyl, ŕenc-butyl a 2,2dimetylpropyl.

Ako sa tu používa, termín „alkylén“ znamená alkylénovú skupinu obsahujúcu 1 až 6 atómov uhlíka, napríklad metylénovú skupinu.

Ako sa tu používa, termín „C2-6alkenyľ znamená alkenylovú skupinu s priamym alebo rozvetveným reťazcom obsahujúcim 2 až 6 atómov uhlíka. Skupina alyl je jeden z príkladov vhodnej C₂^alkenylovej skupiny.

Termín „halogén“ znamená fluór, chlór, bróm alebo jód.

Termín alifatická heterocyklická skupina znamená cyklickú skupinu obsahujúcu 4 až 6 atómov uhlíka, kde jeden alebo viac atómov uhlíka je

-4nahradených heteroatómami nezávisle zvolenými zo skupiny dusík, kyslík alebo síra. Táto skupina môže byť prípadne substituovaná ako je definované vyššie.

Termín heterocyklická aromatická skupina označuje aromatický mono- alebo bicyklický kruhový systém obsahujúci od 5 do 10 atómov uhlíka, kde jeden alebo viac atómov uhlíka je nahradených heteroatómami nezávisle zvolenými zo skupiny dusík, kyslík a síra, pričom tento kruhový systém môže byť prípadne substituovaný ako je definované vyššie.

Farmaceutický prijateľné soli zlúčenín všeobecného vzorca I zahrnujú soli odvodené od farmaceutický prijateľných anorganických a organických kyselín. Medzi príklady vhodných kyselín patrí kyselina chlorovodíková, bromovodíková, sírová, dusičná, chlorečná, fumarová, maleínová, fosforečná, glykolová, mliečna, salicylová, jantárová, toluén-p-sulfónová, vinná, octová, citrónová, metánsulfónová, mravčia, benzoová, malónová, naftalén-2-sulfónová a benzénsulfónová. Vhodnou farmaceutický prijateľnou soľou zlúčenín všeobecného vzorca I je hydrochloridová soľ. Ďalšie kyseliny ako je kyselina šťavelová, ktoré samé osebe nie sú farmaceutický prijateľné, môžu byť použité ako medziprodukty na získanie zlúčenín podľa vynálezu a ich farmaceutický prijateľných adičných solí s kyselinami. Solváty môžu byť napríklad hydráty.

Skupina R³ výhodne znamená Ci.3fluóralkylovú skupinu, najmä skupinu fluórmetyl. Skupina R³ znamená výhodnejšie trifluórmetylovú skupinu.

Skupina R² znamená výhodne atóm vodíka, metyl alebo halogén, výhodnejšie atóm vodíka alebo atóm chlóru.

Skupina R¹ môže výhodne znamenať skupinu (alk)_n-C₃-6cykloalkyl, kde n je 0 alebo 1 a uvedený cykloalkyl je buď substituovaný aspoň jedným substituentom zvoleným z atómu halogénu, najmä fluóru, skupiny OH alebo je nesubstituovaný. n je výhodne 0. Výhodnejšie je cykloalkylová skupina monosubstituovaná buď skupinou OH alebo atómom fluóru a výhodnejšie má cykloalkylový kruh päť atómov uhlíka.

Skupina R¹ môže alternatívne znamenať substituovanú alebo nesubstituovanú alifatickú heterocyklickú skupinu, pričom substituent je zvolený zo skupiny -CO2(Ci_4)-alkyl, -CO-(Ci-3)alkyl, -S(=O)_n-(Cv3)alkyl, CONR^aR^b (kde R^a a R^b sú určené vyššie), a ak je v kruhu prítomný heteroatóm S, tento heteroatóm môže byť

-5prípadne substituovaný skupinou (=O)_n, kde n je 1 alebo 2. Výhodnejšie je heterocyklický kruh nesubstituovaný alebo sú substituenty -CO2-(Ci^)alkyl, alebo ak je heteroatóm S, substituent (=O)_n je naviazaný na heterocyklický atóm síry, ešte výhodnejšie platí, že ak je v kruhu prítomný heteroatóm síry, tento atóm S je nesubstituovaný.

Alifatická heterocyklická skupina je výhodne nesubstituovaná alebo ak je substituent -C02(CM)alkyl, heteroatóm je N a substituent je priamo naviazaný na uvedený atóm dusíka v kruhu.

Heterocyklický kruh je výhodne päť alebo šesťčlenný a výhodne obsahuje len heteroatóm O, N alebo S.

Alternatívne môže skupina R¹ znamenať priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s 1 až 5 atómami uhlíka, prípadne s aspoň jednou skupinou S(=O)_n, kde n je výhodne 0, 1 alebo 2, a/alebo atómom N substituovaným v reťazci. Alkylová skupina môže byť výhodne nesubstituovaná alebo substituovaná aspoň jednou skupinou OH.

Skupina R¹ môže alternatívne znamenať fenylovú skupinu, ktorá je substituovaná jedným alebo viacerými substituentami zvolenými zo skupiny OH a halogén. Výhodne je skupina fenyl disubstituovaná v polohách 2, 4. Oba substituenty sú výhodne atómy halogénu, najmä atómy fluóru a chlóru. Zvlášť výhodná kombinácia je napríklad 2-fluór a 4-chlór.

Rozumie sa, že predkladaný vynález zahrnuje všetky kombinácie zvláštnych a výhodných skupín uvedených vyššie.

Medzi konkrétne zlúčeniny podľa vynálezu patria nasledujúce látky: A/-(tetrahydropyrán-4-yl)-5'-O-trifluórmetyladenozín, /\/-(2-pyridín-4-yl-etyl)-5^,-O-trifluórmetyladenozín, /V-(2S-fluórcyklopent-(S)-yl)-5^,-O-trifluórmetyladenozín, A/-(tetrahydrotiopyrán-4-yl)-5'-O-trifluórmetyladenozín,

A/-(3,4-difluórfenyl)-5'-O-trifluórmetyladenozín, A/-(3-fluórfenyl)-5'-O-trifluórmetyladenozín,

A/-(exo-bicyklo[2.2.1 ]hept-2-yl)-5'-O-trifluórmetyladenozín,

N-(1,1 -dioxohexahydro-1 .delta. 6-tiopyrán-4-yl)-5'-O-trifluórmetyladenozin, /V-ŕerc-butyl-S'-O-trifluórmetyladenozín,

-6etylester kyseliny 4-[9-(3/?,4S-dihydroxy-5R-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-2Ryl)-9/-/-purín-6-ylamino]-piperidín-1-karboxylovej, A/-(2S-hydroxycyklopent-(S)-yl)-5^,-O-trifluórmetyladenozín, /V-(rel-2,3-dihydroxypropyl)-5'-O-trifluórmetyladenozín, /V-(tetrahydrofurán-3/?-yl)-5'-O-trifluórmetyladenozín, A/-(tetrahydrofurán-3S-yl)-5'-O-trifluórmetyladenozín, /V-{2-[9-(3/?,4S-dihydroxy-5/?-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-2/?-yl)-9H-purín-6ylaminojetyljacetamid, 5'-O-trifluórmetyladenozín, metylamid kyseliny 2-[9-(3/?,4S-dihydroxy-5R-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán2/?-yl)-9H-purín-6-ylamino]etánsulfónovej, etylester kyseliny 4-[9-(3R,4S-dihydroxy-5/?-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-2f?yl)-2-metyl-9/7-purín-6-ylamino]piperidín-1-karboxylovej, 2-metyl-/V-(tetrahydropyrán-4-yl)-5^,-O-trifluórmetyladenozín, 5'-O-(3-fluórpropyl)-/\/-(tetrahydropyrán-4-yl)adenozín, 2-chlór-5'-O-(3-fluórpropyl)-A/-(tetrahydropyrán-4-yl)adenozín, A/-cyklopentyl-5'-O-(2,2,2-trifluóretyl)adenozín, /V-(tetrahydropyrán-4-yl)-5'-O-(2,2,2-trifluóretyl)adenozín, /V-(2/?-hydroxycyklopent-(R)-yl)-5^,-O-(2,2,2-trifluóretyl)adenozín, /V-(4-fluórfenyl)-5^,-O-(2,2,2-trifluóretyl)adenozín.

Zlúčeniny podľa vynálezu sú použiteľné ako inhibítory lipolýzy, t.j. znižujú koncentrácie voľných mastných kyselín v plazme. Tieto zlúčeniny môžu byť teda použité pri liečení hyperlipidémií. Naviac majú tieto zlúčeniny ako dôsledok svojej antilipolytickej aktivity schopnosť znižovať zvýšenú hladinu krvnej glukózy, inzulínu a ketónov v tele a preto môžu byť vhodné na liečenie cukrovky. Pretože antilipolytické prostriedky majú hypolipidemické a hypofibrinogenemické účinky, zlúčeniny môžu mať aj antisklerotické účinky. Antilipolytická aktivita zlúčenín podľa predkladaného vynálezu bola ukázaná ich schopnosťou znižovať koncentráciu neesterifikovaných mastných kyselín (NEFA) u hladujúcich potkanov pri orálnom dávkovaní podľa spôsobu opísaného v P. Strong a ďalší, Clinical Science (1993), 84, 663 - 669.

-7 Naviac k ich antilipolytickým účinkom môžu zlúčeniny podľa vynálezu nezávisle ovplyvňovať srdcovú funkciu znižovaním tepovej frekvencie a vodivosti. Zlúčeniny môžu byť teda použité pri liečení celého radu kardiovaskulárnych porúch, napríklad srdcových arytmií, najmä po infarkte myokardu a angíny.

Naviac sú zlúčeniny podľa vynálezu použiteľné ako kardioprotektívne látky použiteľné pri liečbe ischemickej srdcovej choroby. Termín „ischemická srdcová choroba“, ako sa tu používa, zahrnuje poškodenie spojené tak s ischémiou myokardu ako aj s reperfúziou, napríklad spojenou so zavedením štepu pri koronárnom arteriálnom bypase (CABG), perkutánnou transluminálnou koronárnou angioplastikou (PTCA), kardioplégiou, akútnym infarktom myokardu, trombolýzou, stabilnou a nestabilnou angínou a chirurgickými zákrokmi na srdci vrátane čiastočnej transplantácie srdca. Zlúčeniny podľa vynálezu sú naviac použiteľné na liečenie ischemického poškodenia ďalších orgánov. Zlúčeniny podľa vynálezu môžu byť tiež cenné pri liečení iných porúch vznikajúcich ako dôsledok rozšírenej aterosklerózy, napríklad ochorenia periférnych ciev (PVD) a mŕtvice.

Zlúčeniny môžu tiež inhibovať uvoľňovanie renínu a môžu byť tak použiteľné pri liečení hypertenzie a zlyhania srdca. Zlúčeniny môžu byť tiež použiteľné ako látky ovplyvňujúce centrálnu nervovú sústavu (napríklad ako hypnotiká, sedatíva, analgetiká a/alebo antikonvulzívne látky, ktoré sa používajú najmä pri liečení epilepsie).

Naviac sa môžu zlúčeniny podľa vynálezu používať pri liečení apnoickej pauzy v spánku.

Zlúčenina všeobecného vzorca I a jej farmaceutický prijateľné adičné soli s kyselinami sú použiteľné ako analgetická, preto sú použiteľné pri liečení alebo prevencii bolesti. Môžu byť použité na zlepšenie stavu hostiteľa, typicky človeka trpiaceho bolesťou. Môžu byť tiež použité na zmiernenie bolesti u pacienta. Zlúčenina všeobecného vzorca I a jej farmaceutický prijateľné adičné soli s kyselinami môžu byť použité ako preventívne analgetická na liečenie akútnej bolesti ako je bolesť kostrového svalstva, pooperačná bolesť a bolesť pri chirurgickom zákroku, chronická bolesť ako je chronická zápalová bolesť (napríklad pri reumatickej artritíde a osteroartritíde), neuropatická bolesť (napríklad posterpetická neuralgia, neuralgia trigemínu, neuropatie spojené s diabetom a

-8bolesti udržované sympatikom) a bolesť spojená s rakovinou a fibromyalgiou. Zlúčenina všeobecného vzorca I môže byť tiež použitá pri liečení alebo prevencii bolesti spojenej so stavom ako je migréna, tenzná bolesť hlavy a bolesť spojená s funkčnými ochorením čriev (napríklad IBS), bolesť na hrudi iného než srdcového pôvodu a bolesť žalúdka nevredového pôvodu.

Vynález teda poskytuje zlúčeninu všeobecného vzorca I alebo jej fyziologicky prijateľnú soľ alebo solvát na použitie v lekárstve a najmä pri liečení človeka alebo zvieraťa trpiaceho stavom, pri ktorom je výhodné zníženie koncentrácie voľných mastných kyselín v plazme alebo zníženie tepovej frekvencie a vodivosti alebo ak terapia zahrnuje liečenie ischemického ochorenia srdca, ochorenie periférnych ciev alebo mŕtvicu, alebo ak pacient trpí poruchami CNS, apnoickými poruchami v spánku alebo bolesťou.

V ďalšom uskutočnení poskytuje vynález použitie zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľnej soli alebo solvátu na výrobu farmaceutického prostriedku na liečenie človeka alebo zvieraťa trpiacich stavom, pri ktorom je výhodné zníženie koncentrácie voľných mastných kyselín v plazme alebo zníženie tepovej frekvencie a vodivosti, alebo ak pacient trpí ischemickým ochorením srdca alebo je citlivý na toto ochorenie, alebo ak pacient trpí ochorením CNS alebo apnoickou poruchou v spánku alebo bolesťou.

Vzhľadom k vyššie uvedenému liečeniu ischemickej choroby bolo zistené, že podľa zvlášť neočakávaného hľadiska predkladaného vynálezu podávanie zlúčeniny všeobecného vzorca I pred ischémiou nielen poskytuje ochranu proti infarktu myokardu, ale ochrana je poskytovaná aj v prípade, ak je zlúčenina všeobecného vzorca I podaná po ischemickej príhode a pred reperfúziou. To znamená, že spôsoby podľa predkladaného vynálezu sú použiteľné nielen pri plánovanej alebo očakávanej ischémii, napríklad pri chirurgickom zákroku na srdci, ale aj v prípadoch náhlej a neočakávanej ischémie, napríklad pri srdcovej príhode a nestabilnej angíne.

Bude zrejmé, že odkazy na liečenie zahrnujú akútne liečenie a prevenciu rovnako ako zmiernenie už vytvorených príznakov.

V ďalšom uskutočnení poskytuje vynález farmaceutický prostriedok obsahujúci aspoň jednu zlúčeninu všeobecného vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ alebo solvát v spojení s farmaceutický prijateľným nosičom a/alebo pomocnou látkou na použitie v lekárstve a najmä pri liečení človeka alebo zvieraťa trpiacich stavom, pri ktorom je výhodné zníženie koncentrácie voľných mastných kyselín v plazme alebo zníženie tepovej frekvencie a vodivosti, alebo ak pacient trpí ischemickým ochorením srdca alebo je citlivý na toto ochorenie, alebo ak pacient trpí ochorením CNS alebo apnoickou poruchou v spánku alebo bolesťou.

Predkladaný vynález ďalej poskytuje spôsob výroby farmaceutického prostriedku, ktorý zahrnuje miešanie aspoň jednej zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľnej soli alebo solvátu s farmaceutický prijateľným nosičom a/alebo pomocnou látkou.

Prostriedky podľa vynálezu môžu byť formulované na topické, orálne, bukálne, parenterálne alebo rektálne podávanie alebo vo forme vhodnej na podávanie inhaláciou alebo insufláciou. Výhodné je orálne podávanie. Farmaceutické prostriedky môžu byť upravené na oneskorené uvoľňovanie.

Na miestne podávanie môže byť farmaceutický prostriedok vhodne vo forme transdermálnej náplasti.

Tablety a kapsuly na orálne podávanie môžu obsahovať bežné pomocné látky ako sú spojivá, napríklad sliz škrobu alebo polyvinylpyrolidónu, plnivá, napríklad laktóza, mikrokryštalická celulóza alebo kukuričný škrob, klzné látky, napríklad stearan horečnatý alebo kyselina stearová, rozvoľňovadlá, napríklad zemiakový škrob, sodná soľ kroskarmalózy alebo sodná soľ glykolátu škroby, alebo zmáčadlá ako je laurylsulfát sodný. Tablety môžu byť poťahované v danej oblasti techniky známym spôsobom. Orálne kvapalné preparáty môžu byť vo forme napríklad vodných alebo olejových suspenzií, roztokov, emulzií, sirupov alebo elixírov alebo môžu byť vo forme suchého produktu na rekonštitúciu s vodou alebo iným vhodným vehikulom pred použitím. Tieto kvapalné prostriedky môžu obsahovať bežné aditíva ako sú suspendujúce látky, napríklad sorbitolový sirup, metylcelulóza alebo karboxymetylcelulóza, emulgátory, napríklad sorbitanmonooleát, nevodné vehikulá (ktoré môžu zahrnovať jedlé oleje), napríklad propylénglykol alebo etylalkohol, a ochranné látky, napríklad metyl- alebo propyl-p-hydroxybenzoáty alebo kyselinu sorbovú. Farmaceutické prostriedky môžu tiež obsahovať,

-10pokiaľ je to vhodné, pufračné soli, aromatické látky, farbivá a sladidlá (napríklad manitol).

Na bukálne podávanie môžu byť farmaceutické prostriedky vo forme tabliet alebo pastiliek formulovaných bežným spôsobom. Zlúčeniny všeobecného vzorca I môžu byť formulované na parenterálne podávanie jednorázovou injekciou alebo kontinuálnou infúziou a môžu byť obsiahnuté v jednotkovej dávke v ampulách alebo v zásobníkoch obsahujúcich viac dávok s pridanou ochrannou látkou, prostriedky môžu byť vo forme suspenzii, roztokov alebo emulzií v olejových alebo vodných vehikulách a môžu obsahovať formulačné činidlá ako suspendujúce, stabilizačné a/alebo dispergačné činidlá. Alternatívne môže byť účinná zložka vo forme prášku na rekonštitúciu s vhodným vehikulom, napríklad sterilnou apyrogennou vodou, pred použitím.

Zlúčeniny všeobecného vzorca I môžu byť tiež formulované ako čapíky, t.j. môžu obsahovať bežné čapíkové základy, ako je kakaové maslo a ďalšie glyceridy.

Navrhovaná dávka zlúčenín podľa vynálezu na podávanie človekovi (telesnej hmotnosti približne 70 kg) je 1 mg až 2 g, výhodne 1 mg až 100 mg účinnej zložky na jednotkovú dávku, ktorá môže byť podávaná napríklad raz až štyrikrát za deň. Bude zrejmé, že môžu by uskutočňované rutinné variácie dávkovania v závislosti na veku a stave pacienta. Dávkovanie bude tiež závisieť na spôsobe podávania.

V ešte inom uskutočnení vynález poskytuje použitie zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľnej soli alebo solvátu na výrobu farmaceutického prostriedku na liečenie človeka alebo zvieraťa trpiacich stavom, pri ktorom je výhodné zníženie koncentrácie voľných mastných kyselín v plazme alebo zníženie tepovej frekvencie a vodivosti, alebo ak pacient trpí ischemickým ochorením srdca alebo je citlivý na toto ochorenie, ochorením periférnych ciev (PVD) alebo mŕtvicou, alebo ak pacient trpí ochorením CNS alebo apnoickou poruchou v spánku alebo bolesťou.

Zlúčeniny všeobecného vzorca I a ich fyziologicky prijateľné soli alebo solváty môžu byť pripravené ďalej opísanými spôsobmi, pričom tieto spôsoby tvoria ďalšie uskutočnenie vynálezu. V nasledujúcom opise majú skupiny R¹, R² a R³ význam určený pre vzorec I, pokiaľ nie je uvedené inak.

-11 Podľa prvého všeobecného spôsobu A môže byť zlúčenina všeobecného vzorca I pripravená reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca II

kde L znamená odštiepiteľnú skupinu ako je atóm halogénu (napríklad atóm chlóru) a skupiny P¹ a P² znamenajú atóm vodíka alebo vhodnú ochrannú skupinu (napríklad acetyl) so zlúčeninou všeobecného vzorca R¹NH2 alebo jej soľou za bázických podmienok.

Zlúčeniny všeobecného vzorca II môžu byť použité na výrobu zlúčenín všeobecného vzorca I priamo reakciou so skupinou R¹NH2 buď v neprítomnosti alebo prítomnosti rozpúšťadla ako je alkohol (napríklad nižší alkohol ako je izopropanol, terc-butanol alebo 3-pentanol), éter (napríklad tetrahydrofurán alebo dioxán) substituovaný amid (napríklad dimetylformamid), halogenovaný uhľovodík (napríklad chloroform) alebo acetonitril, výhodne pri zvýšenej teplote (napríklad až do teploty varu rozpúšťadla pod spätným chladičom) v prítomnosti vhodnej látky odstraňujúcej kyselinu, napríklad anorganických báz ako je uhličitan sodný alebo draselný alebo organických báz ako je trietylamín, diizopropyletylamín alebo pyridin.

Pred touto reakciou môže predchádzať alebo po nej nasledovať v prípade potreby odstránenie ochranných skupín P¹ a P² in situ. Napríklad ak skupiny P¹ a P² znamenajú acetyl, môže sa odstránenie uskutočniť amínom ako je amoniak alebo ŕerc-butylamín v rozpúšťadle ako je metanol pri vhodnej teplote.

Zlúčeniny všeobecného vzorca II môžu byť vyrobené reakciou zlúčeniny vzorca III

(III)

-12kde P³ znamená vhodnú ochrannú skupinu, napríklad Ci.₃alkyl alebo acetyl a skupiny P¹, P² a R³ sú určené vyššie, so zlúčeninou všeobecného vzorca IV

(IV) kde L a R² sú určené vyššie.

Reakcia sa pohodlne uskutočňuje vo vhodnom rozpúšťadle, ako je acetonitril v prítomnosti silylačného činidla ako je trimetylsilyltrifluórmetánsulfonát a bázy ako je diazabicyklo[5.4.0]undek-7-én (DBU). Alternatívne je možné zlúčeninu všeobecného vzorca IV najskôr silylovať vhodným silylačným činidlom ako je hexametyldisilazan s následnou reakciou silylovaného medziproduktu so zlúčeninou všeobecného vzorca III a vhodnou Lewisovou kyselinou, napríklad trimetylsilyltrifluórmetánsulfonátom vo vhodnom rozpúšťadle ako je acetonitril. Zlúčeniny všeobecného vzorca IV sú buď v danej oblasti techniky známe alebo môžu byť pripravené zo známych zlúčenín použitím analogických metód ako sú metódy používané na výrobu známych zlúčenín vzorca IV.

Zlúčeniny všeobecného vzorca III môžu byť vyrobené z alternatívnych chránených zlúčenín náhradou alternatívnych ochranných skupín skupinami P¹ a P², napríklad ak P¹ a P² znamenajú acetyl, zlúčeniny všeobecného vzorca III môžu byť vyrobené zo zlúčenín vzorca V, kde P⁴ a P⁵ znamenajú C^alkyl a P³ je určené vyššie odstránením alkylidénovej ochrannej skupiny katalyzovaním kyselinou ako je napríklad chlorovodík v metanole a následnou acyláciou in situ napríklad acetanhydridom v prítomnosti bázy ako je pyridín v rozpúšťadle ako je dichlórmetán.

(V)

-13Zlúčeniny všeobecného vzorca V sú známe zlúčeniny alebo môžu byť pripravené spôsobmi analogickými so spôsobmi používanými v danej oblasti techniky na výrobu známych zlúčenín všeobecného vzorca V. Napríklad zlúčeniny všeobecného vzorca V, kde P³, P⁴ a P⁵ znamenajú metyl a R³ znamená skupinu CF₃ môžu byť pripravené zo známej zlúčeniny všeobecného vzorca VI

VI) reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca VI s vhodnou bázou, napríklad hydridom sodným, a následnou reakciou so sírouhlíkom spolu s alkylačným činidlom R⁴L, kde L je odštiepiteľná skupina ako je halogén (napríklad atóm brómu alebo jódu) a R⁴ je alkylová skupina ako bola definovaná vyššie, napríklad metyljodidom za získania zlúčeniny všeobecného vzorca Vil

(VII)

Zlúčenina všeobecného vzorca Vil môže reagovať s vhodným bromačným činidlom, napríklad dibrómmetylhydantoínom a komplexom pyridín/fluorovodík vo vhodnom rozpúšťadle ako je dichlórmetán spôsobom podľa Hiyoma T. a ďalší, Tetrahedron Letters 1992, 4173 až 4176, za vytvorenia zlúčeniny všeobecného vzorca V.

Alternatívne môže známa zlúčenina všeobecného vzorca Vili uvedeného nižšie reagovať s trifluórmetoxidom tris(dimetylamino)sírovým vo vhodnom rozpúšťadle ako je dichlórmetán

-14(VIII)

za získania zlúčeniny všeobecného vzorca V.

Odborníkom v danej oblasti techniky bude zrejmé, že acetylová skupina v akejkoľvek z vyššie uvedených zlúčenín by mohla byť nahradená akoukoľvek vhodnou ochrannou skupinou, napríklad inými estermi.

Analogickými spôsobmi je tiež možné pripraviť zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo II zo zlúčenín, v ktorých alkylidénové skupiny definované symbolmi P⁴ a P⁵ nahradia skupinu P¹ a P². Táto reakcia znamená zámenu jednej ochrannej skupiny za inú a uvedené reakcie budú v odborníkom v danej oblasti techniky zrejmé.

Ďalší spôsob B zahrnuje premenu zlúčeniny všeobecného vzorca I na inú zlúčeninu všeobecného vzorca I modifikáciou skupiny R¹, R² alebo R³ tejto zlúčeniny.

Zlúčeniny všeobecného vzorca II môžu byť pohodlne pripravené odstránením alkylidénovej ochrannej skupiny zo zlúčeniny všeobecného vzorca IX

kde P⁴, P⁵, R³, R² a L sú určené vyššie použitím podmienok opísaných vyššie.

-15Zlúčeniny všeobecného vzorca IX sa môžu vyrobiť reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca X

(X)

kde P⁴ a P⁵ sú určené vyššie s halogenačným činidlom (napríklad chroračným) činidlom za bežných podmienok. Chlorácia sa môže napríklad vhodne uskutočniť pôsobením oxychloridu fosforečného na látku všeobecného vzorca X v prítomnosti organickej bázy ako je 4-dimetylaminopyridín a vo vhodnom rozpúšťadle ako je acetonitril pri zvýšenej teplote (napríklad až do teploty varu rozpúšťadla pod spätným chladičom).

Zlúčeniny všeobecného vzorca X môžu byť vyrobené zo zlúčenín všeobecného vzorca XI

(XI)

reakciou s atómom vodíka alebo so zdrojom vodíka ako je mravčan amónny v prítomnosti vhodného katalyzátora ako je paládium alebo uhlie vo vhodnom rozpúšťadle ako je etanol.

-16Zlúčeniny všeobecného vzorca XI môžu byť vyrobené zo zlúčenín všeobecného vzorca XII

(XII)

reakciou s alkoholom R³OH v prítomnosti silnej bázy ako je hydrid sodný vo vhodnom inertnom rozpúšťadle ako je dimetylformamid.

Zlúčeniny všeobecného vzorca XII sa môžu vyrobiť zo zlúčenín všeobecného vzorca XIII

(XIII)

reakciou s benzylalkoholom v prítomnosti vhodnej silnej bázy ako je hydrid sodný v inertnom rozpúšťadle ako je tetrahydrofurán.

Zlúčeniny všeobecného vzorca XIII sa môžu vyrobiť zo zlúčenín všeobecného vzorca XIV reakciou s metánsulfonylchloridom v prítomnosti vhodnej bázy ako je trietylamín, diizopropylamín alebo pyridín vo vhodnom rozpúšťadle ako je dichlórmetán.

-17(XIV)

Cl

Je zrejmé, že skupina R¹ alebo R² alebo R³ sa môže premeniť na inú skupinu R¹ alebo R² alebo R³ v jednom čiastkovom kroku v rámci celkovej syntézy zlúčenín podľa vynálezu, zatiaľ čo spôsob B uvedený vyššie len opisuje zámenu ako konečný krok spôsobu.

Zlúčeniny všeobecného vzorca XIV sú buď v danej oblasti techniky známe alebo sa môžu vyrobiť zo známych zlúčenín spôsobmi analogickými so spôsobmi používanými v oblasti na výrobu zlúčenín všeobecného vzorca XIV. Niektoré zlúčeniny všeobecných vzorcov II, III a V sú nové medziprodukty a predstavujú ďalšie uskutočnenie vynálezu. Zlúčeniny všeobecného vzorca R¹NH2 sú buď známe látky alebo sa môžu vyrobiť zo známych zlúčenín použitím bežných spôsobov s určitými výnimkami uvedenými v experimentálnej časti nižšie.

Pri alternatívnom spôsobe C sa môžu zlúčeniny všeobecného vzorca I vyrobiť zo zlúčenín všeobecného vzorca XV

(XV)

kde P¹ a P² sú vhodné ochranné skupiny určené vyššie a P⁶ znamená tiež vhodnú ochrannú skupinu. Napríklad ak skupina R² znamená Cl, skupiny P¹, P² a P⁶ výhodne všetky znamenajú skupinu benzoyl (teda známu zlúčeninu).

-18Zlúčeniny všeobecného vzorca XI sa môžu použiť na výrobu zlúčenín všeobecného vzorca I reakciou so skupinou R¹NH₂ buď v neprítomnoti alebo v prítomnosti rozpúšťadla ako je alkohol (napríklad alkanol ako je izopropanol, tercbutanol alebo 3-pentanol), éter (napríklad tetrahydrofurán alebo dioxán), substituovaný amid (napríklad dimetylformamid), halogenovaný uhľovodík (napríklad chloroform), alebo acetonitril, výhodne pri zvýšenej teplote (napríklad do teploty varu rozpúšťadla pod spätným chladičom) v prítomnosti vhodnej látky viažucej kyselinu, napríklad anorganických báz ako je uhličitan sodný alebo draselný alebo organických báz ako je trietylamín, diizopropyletylamín alebo pyridín.

Tejto reakcii môže predchádzať alebo po tejto reakcii môže nasledovať v prípade potreby odstránenie ochranných skupín P¹, P² a P⁶ in situ. Napríklad ak skupiny P¹, P² a P⁶ znamenajú benzoyl, môže sa toto odstránenie uskutočniť uhličitanom ako je uhličitan draselný v rozpúšťadle ako je metanol za vytvorenia zlúčeniny všeobecného vzorca XVI

NHR¹

(XVI)

Reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca XVI s ochrannými skupinami P⁴ a P⁵ ako je určené vyššie sa môže vyrobiť zlúčenina všeobecného vzorca XVII

NHR¹

(XVII)

O O

-19Skupina R³ môže byť potom zavedená do zlúčeniny spôsobmi známymi odborníkom v danej oblasti techniky s následným odstránením ochranných skupín zo zlúčeniny ako bolo opísané v spôsobe A vyššie.

Určité optické izoméry zlúčeniny všeobecného vzorca I môžu byť získané bežnými spôsobmi, napríklad syntézou z vhodného asymetrického východiskového materiálu použitím akéhokoľvek z opísaných spôsobov, alebo pokiaľ je to vhodné delením zmesi izomérov zlúčeniny všeobecného vzorca I bežnými spôsobmi, napríklad trakčnou kryštalizáciou alebo chromatograficky.

Pri vyššie opísaných všeobecných spôsoboch môže byť získaná zlúčenina všeobecného vzorca I vo forme soli, výhodne vo forme farmaceutický prijateľnej soli. Ak je potrebné, tieto soli môžu byť premenené na zodpovedajúce voľné bázy bežnými spôsobmi.

Farmaceutický prijateľné adičné soli s kyselinami zlúčenín všeobecného vzorca I môžu byť pripravené reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca I s vhodnou kyselinou v prítomnosti vhodného rozpúšťadla ako je acetonitril, acetón, chloroform, etylacetát alebo alkohol (napríklad metanol, etanol alebo izopropanol). Farmaceutický prijateľné adičné soli s bázami môžu byť získané analogickým spôsobom pôsobením vhodnej bázy na roztok zlúčeniny všeobecného vzorca I. Farmaceutický prijateľné soli môžu byť tiež pripravené z iných solí vrátane iných farmaceutický prijateľných solí zlúčenín všeobecného vzorca I použitím bežných spôsobov.

Vynález je ďalej ilustrovaný nasledujúcimi neobmedzujúcimi príkladmi a medziproduktami.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Štandardné podmienky HPLC sú nasledujúce:

Kolóna, podmienky a eluent pre štandardnú automatizovanú preparatívnu HPLC

Automatizovaná preparatívna kvapalinová chromatografia s vysokou účinnosťou (autoprep. HPLC) sa uskutočnila na kolóne Supelco^R ABZ+5 pm 100 mm x 22 mm s elúciou zmesou rozpúšťadiel zloženou z nasledujúcich látok: i) 0,1% kyselina mravčia vo vode a ii) 0,05% kyselina mravčia v acetonitrile, kde eluent je

-20vyjadrený ako percento ii) v zmesi rozpúšťadiel pri prietoku 4 ml za minútu. Pokiaľ nie je uvedené inak, eluent sa použil ako gradient 0 až 95 % zložky ii) v priebehu 20 minút.

Systém LC/MS

Tento systém používal kolónu ABZ+PLUS, 3,3 cm x 4,6 mm a elúciu rozpúšťadlami: A = 0,1% kyselina mravčia (objemové %) + 0,077% octan amónny vo vode (hmotn./obj.); a B = 95:5 acetonitrikvoda + 0,05% kyselina mravčia (objemové %) s prietokom 1 ml za minútu. Použil sa nasledujúci protokol: 100 % A 0,7 minút; A + B zmes, profil gradientu 0 až 100 % B v priebehu 3,5 minúty; zdržanie na 100 % B 3,5 minúty; návrat na 100 % A v priebehu 0,3 minút.

Obidva systémy používali prístroje typu micromass platform spectrometer v móde elektrorozprašovacej ionizácie, prepínanie kladných a záporných iónov, rozmedzie hmotnosti 80 až 1000 jednotiek atómovej hmotnosti.

Systém HPLC

Analytický systém HPLC používal kolónu lnertsil^R ODS2 150 mm x 4,6 mm s elúciou rozpúšťadlami: A = 0,1% kyselina fosforečná (objemové %) a B = 95:5 acetonitrikvoda + 0,1% kyselina fosforečná (objemové %). Bol použitý nasledujúci protokol pre gradient pri prietoku 1,0 ml/minútu: 100 % A 2 minúty; zmesi A+B, profil gradientu 0 až 100 % B v priebehu 40 minút; zdržanie pri 100 % B 10 minút.

Blesková chromatografia sa uskutočnila buď na silikagéli Merck (Merck 9385) alebo na oxide hlinitom Merck aluminaR (Merck 1077).

Medziprodukt 1 O-(6R-Metoxy-2,2-dimetyltetrahydro-(3aR,6aR)-furo[3,4-d][1,3]dioxol-4R-ylmetyl)ester-S-metylester kyseliny ditiouhličitej [6/?-Metoxy,2,2-dimetyltetrahydro-(3a/?,6a/?)-furo[3,4-d][1,3]dioxol-4/?-yl]metanol (5,20 g) sa rozpustil v suchom THF (70 ml) a zmiešal sa po častiach v priebehu 10 minút so 60% hydridom sodným v oleji (1,20 g) v atmosfére dusíka pri 22 °C. Po 20 minútach sa pridal sírouhlík (5 ml, 6,33 g) a zmes sa miešala ďalších

-21 20 minút pri 22 °C. Pridal sa jódmetán (2 ml) a po ďalšej 0,5 hodine pri 22 °C sa rozpúšťadlo odstránilo vo vákuu a zvyšok sa zmiešal s vodou (80 ml) a extrahoval etylacetátom. Spojené etylacetátové extrakty sa sušili (Na2SO₄) a odparili vo vákuu za poskytnutia produktu ako svetložltého oleja (8,60 g).

TLC SiO₂ (cyklohexán:éter 1:1) R_f = 0,62.

Medziprodukt 2 (3a/?,4R,6R,6a/?)-4-Metoxy-2,2-dimetyl-6-trifluórmetoxymetyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol

1,3-Dibróm-5,5-dimetylhydantoín (4,29 g) sa suspendoval v dichlórmetáne (20 ml) a pridal sa komplex fluorovodík-pyridín (10 ml, približne 80 ekvivalentov). Zmes sa ochladila na -70 °C v atmosfére dusíka a pridal sa roztok O-(6/?-metoxy2,2-dimetyltetrahydro-(3af?,6aR)-furo[3,4-d][1,3]dioxol-4R-ylmetyl)ester-S-metylester kyseliny ditiouhličitej (1,472 g) v dichlórmetáne (10 ml). Zmes sa potom miešala pri 0 až 5 °C 1 hodinu pred tým, ako sa reakcia ukončila pomalým pridávaním zmesi 2M uhličitanu sodného (250 ml) obsahujúcej disiričitan sodný (10 g). Potom sa pridal dichlôrmetán (60 ml) a vodná vrstva sa ďalej extrahovala dichlórmetánom (100 ml). Spojené dichlórmetánové extrakty sa premyli 5% roztokom disiričitanu sodného, 2M roztokom uhličitanu sodného, sušili sa Na₂SO4 a odparili sa vo vákuu. Zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli (150 g) selúciou zmesou cyklohexán:éter (4:1 až 2:1) za poskytnutia v nadpise uvedenej zlúčeniny ako číreho oleja (650 mg).

TLC SiO₂ (cyklohexán:éter 1:1) Rf = 0,5.

Medziprodukt 2 (alternatívny spôsob)

6R-Metoxy-2,2-dimetyltetrahydro-(3aF?,6aF?)-furo[3,4-d][1,3]dioxol-4/?-ylmetyl-ester kyseliny trifluórmetánsulfónovej (1 g) sa rozpustil v dichlórmetáne (20 ml) a zmiešal sa s tris(dimetylamino)sulfóniumtrifluórmetoxidom (1,12 g) a miešal sa pri 22 °C 16 hodín v atmosfére dusíka. Roztok sa odparil vo vákuu a zvyšok sa

-22čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli (25 g) s elúciou zmesou cyklohexán:éter (4:1) za získania uvedenej zlúčeniny ako číreho oleja (237 mg).

Medziprodukt 3 2R,4f?-Diacetoxy-5R-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-3ŕ?-yl-ester kyseliny octovej (α-anomér) a 2S,4/?-Diacetoxy-5/?-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-3R-yl-ester kyseliny octovej (β-anomér) (3aR,4R,6R,6aR)-4-Metoxy-2,2-dimetyl-6-trifluórmetoxymetyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol (0,61 g) sa rozpustil v zmesi 9:1 kyselina trifluóroctová-voda (10 ml) a nechal sa stáť 1 hodinu pri 22 °C. Rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu a zvyšok sa znova odparil s toluénom. Zvyšok sa rozpustil v dichlórmetáne (15 ml), pyridíne (5 ml) a pridal sa 4-dimetylaminopyridín (5 mg) a acetanhydrid (3 ml) a roztok sa nechal stáť pri 22 °C 17 hodín. Zmes sa koncentrovala vo vákuu a zvyšok sa rozpustil vetylacetáte (150 ml), premyl sa 2M kyselinou chlorovodíkovou a 8% hydrogenuhličitanom sodným, sušil sa Na₂SO₄ a odparil sa vo vákuu. Blesková chromatografia na silikagéli (30 g) s elúciou zmesou cyklohexán:éter (3:1 až 1:1) poskytla najskôr 2S,4R-diacetoxy-5R-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-3/?-yl-ester kyseliny octovej (β-anomér) (237 mg) a potom 2R,4R-diacetoxy-5/?-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-3/?-yl-ester kyseliny octovej (a-anomér) (202 mg).

(β-anomér) hmotnostné spektrum m/z 362 (MNH₄ ⁺) (α-anomér) hmotnostné spektrum m/z 362 (MNH₄ ⁺).

Medziprodukt 4 4/?-Acetoxy-5R-metoxy-2R-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-3R-yl-ester kyseliny octovej (3aŕ?,4/?,6ŕ?,6aF?)-4-Metoxy-2,2-dimetyl-6-trifluórmetoxymetyltetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol (6,67 g) sa rozpustil vmetanole (100 ml) a zmiešal sa s koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou (3,0 ml) a zahrieval sa pod spätným

-23chladičom 65 hodín. Po 24 hodinách a 48 hodinách sa oddestilovalo 20 ml metanolu a k reakčnej zmesi sa pridal čerstvý metanol (20 ml). Roztok sa odparil vo vákuu a zvyšok sa znova odparil s pyridínom (10 ml), potom sa zvyšok rozpustil v dichlórmetáne (150 ml), pyridíne (15 ml). Pridal sa 4-dimetylaminopyridín (približne 20 mg) a acetanhydrid (9 ml) a roztok sa ponechal stáť 24 hodín pri 22 °C. Rozpúšťadlá sa odstránili vo vákuu a zvyšok sa zmiešal s 8% hydrogenuhličitanom sodným (150 ml) a extrahoval sa etylacetátom (2 x 150 ml). Organické extrakty sa sušili Na2SO₄ a odparili sa vo vákuu a zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli (300 g) selúciou zmesou cyklohexán:éter (2:1 až 1:1) za poskytnutia v nadpise uvedenej zlúčeniny (2,45 g) ako bezfarebného oleja.

TLC SiO₂ (éter) R_f = 0,72.

Medziprodukt 5 4/?-Acetoxy-2/?-(6-chlórpurín-9-yl)-5/?-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-3R-ylester kyseliny octovej

6-Chlórpurín (0,770 g), 1,1,1,3,3,3-hexametyldisilazán (4 ml, 18,96 mmol) a toluén (10 ml) sa zahrievali pod spätným chladičom v atmosfére dusíka 3 hodiny. Rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu a zvyšok sa spoločne odparil s toluénom (10 ml). Zvyšok sa premiestnil do suchého acetonitrilu (12 ml) a zmiešal sa 2S,4Rdiacetoxy-5/?-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-3ŕ?-ylesterom kyseliny octovej (425 mg), 1,8-diazabicykloundek-7-énom (0,28 ml) a trimetylsilyltrifluórmetánsulfonátom (0,41 ml) a miešal sa pri 22 °C 20 hodín v atmosfére dusíka, potom sa zahrieval pod spätným chladičom 2 hodiny. Získaný oranžový roztok sa ochladil na 20 °C, vlial sa do 8% roztoku hydrogenuhličitanu sodného (100 ml) a extrahoval sa etylacetátom. Organické extrakty sa sušili (Na₂SO₄) a odparili vo vákuu a zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli (60 g) selúciou zmesou cyklohexán:éter (gradient 1:1 až 1:4) za poskytnutia v nadpise uvedenej zlúčeniny (345 mg).

TLC SiO₂ (Et₂O) R_f = 0,6.

-24Medziprodukt 5 (alternatívny spôsob)

6-Chlórpurín (0,31 g) 1,1,1,3,3,3-hexametyldisilazán (2 ml) a toluén (6 ml) sa zahrievali pod spätným chladičom v atmosfére dusíka 2 hodiny. Rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu a zvyšok sa spoločne odparil s toluénom. Tuhý zvyšok sa rozpustil v suchom acetonitrile (12 ml) a pridal sa 4R-acetoxy-5R-metoxy-2Rtrifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-3R-ylester kyseliny octovej (0,29 g), 1,8-diazabicyklo-undek-7-én (0,24 ml) a trimetylsilyltrifluórmetánsulfonát (0,35 ml) a roztok sa zahrieval pod spätným chladičom v atmosfére dusíka 2 hodiny. Potom sa ochladil a ponechal sa stáť 17 hodín pri 22 °C. Pridal sa ďalší trimetylsilyltrifluórsulfonát (0,35 ml) a roztok sa zahrieval pod spätným chladičom v atmosfére dusíka ďalších 5 hodín. Roztok sa pridal k 8% hydrogenuhličitanu sodnému (30 ml) a extrahoval sa dichlórmetánom. Organické extrakty sa sušili (Na₂SO₄) a odparili vo vákuu na tmavý olej, ktorý sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli (25 g) s elúciou zmesou cyklohexán:éter (gradient 1:1 až 1:4) za získania v nadpise uvedenej zlúčeniny (304 mg).

Hmotnostné spektrum m/z = 439/441 (MH⁺).

Medziprodukt 6 (2R,3R,4S,5R)-2-(6-Chlórpurín-9-yl)-5R-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-3,4-diol

4R-Acetoxy-2R-(6-chlórpurín-9-yl)-5R-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-3Rylester kyseliny octovej (345 mg) sa rozpustil v metanole (6 ml), ochladil sa na 0 až 5 °C a pridal sa ŕerc-butylamín (0,25 ml). Roztok sa ponechal stáť pri 0 až 5 °C 1 hodinu, potom sa odparil do sucha vo vákuu za získania v nadpise uvedenej zlúčeniny ako bezfarebnej peny (265 mg).

TLC SiO₂ (CH₂CI₂-MeOH 9:1) R_f = 0,31.

Medziprodukt 7 4R-Acetoxy-2R-(6-chlór-2-metylpurín-9-yl)-5R-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán3R-yl-ester kyseliny octovej

-25Hydrochlorid 6-chlór-2-metylpurínu (0,734 g), 1,1,1,3,3,3-hexametyldisilazid (7 ml) a suchý toluén (20 ml) sa zahrievali pod spätným chladičom v atmosfére dusíka 1,5 hodiny. Zmes sa odparila vo vákuu a zvyšok sa spoločne odparil s toluénom, potom sa rozpustil v suchom acetonitrile (15 ml). Pridal sa 4R-acetoxy5ŕ?-metox-2/?-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-3ŕ?-yl-ester kyseliny octovej (0,566 g), 1,8-diazabicyklo-undek-7-én (0,48 ml) a trimetylsilyltrifluórmetánsulfonát (1,03 ml) a zmes sa miešala pri 22 °C 10 minút, potom sa zahrievala pod spätným chladičom v atmosfére dusíka 2 hodiny. Pridal sa ďalší trimetylsilyltrifluórmetánsulfonát (0,7 ml) a roztok sa zahrieval pod spätným chladičom v atmosfére dusíka ďalšiu 12,5 hodinu. Tmavá zmes sa pridala k 8% roztoku hydrogénuhličitanu sodného (100 ml) a extrahovala sa etylacetátom. Organické extrakty sa sušili (Na₂SO₄) a odparili vo vákuu a zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli (60 g) s elúciou éterom na získanie produktu (290 mg).

TLC SiO₂ (Et₂O) Rf = 0,17.

Medziprodukt 8

2-(2S-Hydroxy-(S)-cyklopentyl)izoindol-1,3-dión

Hydrochlorid (1S,2S)-2-aminocyklopentanolu (1,20 g) sa rozpustil v roztoku metoxidu sodného (497 mg) v metanole (10 ml), prefiltroval sa a odparil vo vákuu. Zvyšok sa rozpustil v toluéne (30 ml) a pridal sa ftalanhydrid (1,55 g) a zmes sa zahrievala pod spätným chladičom 24 hodín. Po ochladení sa pridal etylacetát a zmes sa prefiltrovala. Filtrát sa odparil vo vákuu a zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli (40 g) s elúciou zmesou cyklohexán:etylacetát (2:1) za získania v nadpise uvedenej zlúčeniny ako bezfarebnej tuhej látky (1,08 g). Hmotnostné spektrum m/z 232 (MH⁺).

Medziprodukt 9

2-(2S-Fluór-(S)-cyklopentyl)izoindol-1,3-dión

2-(2S-Hydroxy-(S)-cyklopentyl)izoindol-1,3-dión (3,42 g) sa rozpustil v suchom dichlórmetáne (55 ml) a pridal sa trifluorid dietylaminosírový (3,43 ml) a

-26roztok sa miešal pod spätným chladičom v atmosfére dusíka 72 hodín. Roztok sa opatrne vlial do 8% roztoku hydrogenuhličitanu sodného (100 ml) a organická fáza sa oddelila. Vodná fáza sa ďalej extrahovala dichlórmetánom a spojené organické vrstvy sa sušili MgSO₄ a odparili vo vákuu. Zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli (100 g) s elúciou zmesou cyklohexánretylacetát (1:1) za poskytnutia v nadpise uvedenej zlúčeniny ako krémového prášku (1,25 g). Hmotnostné spektrum m/z 234 (MH⁺), 251 (MNH₄ ⁺).

Medziprodukt 10

Hydrochlorid (1 S,2S)-2-fluórcyklopentylamínu

2-(2S-Fluór-(S)-cyklopentyl)izoindol-1,3-dión (6,75 g), hydrát hydrazínu (1,55 ml) a etanol (200 ml) sa zmiešali s vodou (1,55 ml) a zahrievali sa pod spätným chladičom 4 hodiny. Zmes sa ochladila na 20 °C, prefiltrovala sa a filtrát sa zmiešal s koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou na pH 1. Roztok sa odparil vo vákuu a preniesol sa do vody, prefiltroval sa a filtrát sa odparil vo vákuu. Zvyšok sa rekryštalizoval (filtráciou za horúca) zo zmesi etylacetát-metanol (3:1) za získania v nadpise uvedenej zlúčeniny ako belavej tuhej látky (2,59 g).

NMR δ (DMSO) 8,3 (3H, brs, -NH₃ ⁺), 5,04 (1H, dm, CHF, J F-C-H, 52 Hz), 3,49 (1H, brdm, CH, J F-C-C-H, 20 Hz) a 2,2 -1,4 (6Hm, 3 x CH₂).

Medziprodukt 11 [6R-6-(Cyklopentylaminopurín-9-yl)-2,2-dimetylatetrahydro-(3aR,6aR)-furo[3,4-d]- [1.3] dioxol-4R-yl]metanol

Roztok {2,2-dimetyl-6R-[6-chlórpurín-9-yl]-tetrahydro-(3aR₁6aR)-furo[3,4-d]- [1.3] dioxol-4R-yl}metanolu (3 g) v cyklopentylamíne (50 ml) sa zahrieval pod spätným chladičom 8 hodín. Roztok sa ochladil na teplotu miestnosti, koncentroval sa vo vákuu a zvyšok sa naniesol na kolónu silikagélu (250 g) a eluoval sa zmesou etylacetát:metanol (20:1) za získania v nadpise uvedenej zlúčeniny ako žltej peny (3,87 g).

NMR δ (DMSO) 8,4 (1 H, s, -CH), 8,26 (1H, brs, CH), 7,85 (1H, brs, NH), 6,19 (1 Hd, CH), 5,4 (1 Hdd, CH), 5,37 (1H brs, OH), 5,03 (1 Hdd, CH), 4,57 (1H brs, CH), 4,28 (1Hm, CH), 3,60 (2Hm, CH₂), 1,99 (2Hm, CH₂), 1,8 - 1,55 (9H, 3 x CH₂ + CH₃) a 1,38, CH₃).

Medziprodukt 12 Cyklopentyl-{9-[2,2-dimetyl-6R-(2,2,2-trifluóretoxymetyl)tetrahydro-(3aR,6aR)-furo[3,4-d]-[1,3]dioxol-4R-yl]-9H-purín-6-yl}amín

Roztok [6/?-6-(Cyklopentylaminopurín-9-yl)-2,2-dimetylatetrahydro-(3a/?,6aR)furo[3,4-d][1,3]dioxol-4ŕ?-yl]metanolu (230 mg) v tetrahydrofuráne (5 ml) v atmosfére dusíka pri 0 °C sa zmiešal s tri-n-butylfosfínom (0,23 ml, 186 mg) a

2,2,2-trifluóretanolom (0,07 ml, 92 mg), potom s 1,ľ-azadikarbonyldipipendínom (232 mg). Zmes sa miešala pri teplote 0 °C 10 minút, potom sa ponechala stáť pri 22 °C 18 hodín. Zmes sa potom zahrievala na 50 °C 24 hodín, ochladila sa na 22 °C a rozpúšťadlo sa odparilo vo vákuu. Zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli (20 g). Elúcia etylacetátom poskytla v nadpise uvedenú zlúčeninu ako slamovožltú penu (110 mg).

TLC silica (etylacetát) Rf = 0,45.

Medziprodukt 13 {2,2-dimetyl-6/?-[6-(tetrahydropyrán-4-ylamino)purín-9-yl]tetrahydro-(3aR,6af?)-furo[3,4-d][1,3]dioxol-4R-yl} metanol

Roztok {2,2-dimetyl-6R-[6-chlórpurín-9-yl]-tetrahydro-(3aR,6a/?)-furo[3,4-d]- [1,3]dioxol-4R-yl}metanolu (2,00 g), hydrochloridu tetrahydropyrán-4-ylamínu (2,67 ml) v propán-2-ole (15 ml) sa zahrieval pod spätným chladičom v atmosfére dusíka 24 hodín a ponechal sa ochladiť na teplotu miestnosti. Tento jantárovo sfarbený roztok sa koncentroval vo vákuu za získania hnedého oleja, ktorý sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli (115 g) s elúciou zmesou etylacetát:metanol (195:5), Získala sa v nadpise uvedená zlúčenina ako biela pena (2,2 g).

TLC S1O2 (metanoľetylacetát 5:195), Rf = 0,30.

Medziprodukt 14 {9-[2,2-Dimetyl-6/?-(2,2,2-trifluóretoxymetyl)tetrahydro-(3a/?,6a/^:?)-furo[3,4-d][1,3]dioxol-4/?-yl]-9/-/-purín-6-yl}-(tetrahydropyrán-4-yl)amín

Roztok {2,2-dimetyl-6/?-[6-(tetrahydropyrán-4-ylamino)purin-9-yl]tetrahydro(3a/?,6a/?)-furo-[3,4-d][1,3]dioxol-4/?-yl}metanolu (400 mg) v tetrahydrofuráne (10 ml) v atmosfére dusíka pri 0 °C sa zmiešal s tri-n-butylfosfínom (0,38 ml, 310 mg) a

2,2,2-trifluóretanolom (0,11 ml, 153 mg), potom s 1,ľ-azadikarbonyldipiperidínom (387 mg) a zmes sa miešala pri 0 °C 10 minút. Potom sa zmes miešala pri 22 °C 1 hodinu, potom pri 50 °C 18 hodín. Zmes sa potom ochladila na 22 °C a rozpúšťadlo sa ochladilo vo vákuu. Zvyšok sa čistil chromatografiou na kolóne silikagélu (30 g). Elúcia zmesou metanol:dichlórmetán 0,35:10 poskytla slamovožltý olej. Olej sa ďalej čistil chromatografiou na oxide hlinitom (20 g). Elúcia zmesou etylacetát:cyklohexán (7:3) poskytla v nadpise uvedenú zlúčeninu ako bielu penu (113 mg).

TLC SiO₂ (CH₂CI₂-MeOH 200:7) R_f = 0,31.

Medziprodukt 15 6/?-(6-Chlórpurín-9-yl)-2,2-dimetyltetrahydro-(3a/?,6a/?)-furo[3,4-d][1,3]dioxol-4/?-ylmetylester kyseliny metánsulfónovej

Roztok {2,2-dimetyl-6/?-[6-chlórpurín-9-yl]-tetrahydro-(3a/?,6a/?)-furo[3,4-d]- [1,3]dioxol-4/?-yl}metanolu (500 mg) v dichlórmetáne (20 ml) v atmosfére dusíka pri 0 °C sa zmiešal s trietylamínom (0,32 ml, 232 mg) a metánsulfonylchloridom (0,15 ml) a zmes sa miešala pri 0 °C 0,5 hodiny. Zmes sa vliala do 8% roztoku hydrogenuhličitanu sodného (20 ml), organická fáza sa oddelila, sušila sa Na2SO4 a odparila vo vákuu za poskytnutia v nadpise uvedenej zlúčeniny ako bielej peny (577 mg).

TLC oxid kremičitý, etylacetát Rf = 0,43.

-29Medziprodukt 16 6ŕ?-(6-Benzyloxypurín-9-yl)-2,2-dimetyltetrahydro-(3a/?,6aR)-furo[3,4-d][1,3]dioxol4/?-ylmetylester kyseliny metánsulfónovej

Roztok benzylalkoholu (1,60 ml, 1,765 g) v ettrahydrofuráne (100 ml) v atmosfére dusíka pri 0 °C sa po častiach zmiešal s hydridom sodným (626 mg, 60% v oleji) a miešal sa pri 0 °C 0,5 hodiny. Pridal sa roztok 6R-(6-chlórpurín-9-yl)-

2,2-dimetyltetrahydro-(3aR,6a/?)-furo[3,4-d][1,3]dioxol-4/?-ylmetylester kyseliny metánsulfónovej (5,70 g) v tetrahydrofuráne (100 ml) a zmes sa miešala pri 0 °C 2 hodiny a potom pri 22 °C 3 dni. Pridal sa fosfátový pufor (pH 6,5, 100 ml) a voda (100 ml) a zmes sa extrahovala etylacetátom. Spojené extrakty sa sušili Na₂SO₄ a rozpúšťadlo sa odparilo vo vákuu za poskytnutia v nadpise uvedenej zlúčeniny ako slamovožltej viskóznej gumy (6,67 g).

TLC SiO₂ (etylacetátcyklhexán 7:3) Rf = 0,35.

Medziprodukt 17 6-Benzyloxy-9-[2,2-dimetyl-6f?-(2,2,2-trifluóretoxymetyl)-tetrahydro-(3a/?,6aR)-furo[3,4-d][1,3]dioxol-4R-yl]-9H-purín

2,2,2-Trifluóretanol (1,13 ml, 1,549 g) v DMF (dimetylformamid) (50 ml) sa v atmosfére dusíka zmiešal s hydridom sodným (563 mg, 60% v oleji) a miešal sa 0,5 hodiny pri 22 °C. Pridal sa roztok 6R-(6-benzyloxypurín-9-yl)-2,2-dimetyltetrahydro-(3aR,6aR)-furo[3,4-d][1,3]dioxol-4R-ylmetylester kyseliny metánsulfónovej (6,67 g) v DMF (50 ml) a zmes sa miešala pri 22 °C 18 hodín. Pridal sa fosfátový pufor (pH 6,5, 100 ml)a voda (300 ml), zmes sa extrahovala etylacetátom. Spojené extrakty sa premyli vodou, roztokom soli a sušili sa Na₂SO₄. Odparenie vo vákuu poskytlo zvyšok, ktorý sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli (100 g). Elúcia zmesou etylacetátcyklohexán (1:3, potom 1:2) poskytla v nadpise uvedenú zlúčeninu ako bezfarebný olej (1,30 g).

TLC oxid kremičitý (etylacetátcyklohexán 2:3) R_f = 0,27.

-30Medziprodukt 18 9-[2,2-Dimetyl-6/?-(2,2,2-trifluóretoxymetyl)tetrahydro-(3a/?,6a/?)-furo[3,4-d][1,3]d i oxo I-4 /?-y I ]-1,9-dihyd ropurí η-6-όη

Roztok 6-benzyloxy-9-[2,2-dimetyl-6R-(2,2,2-trifluóretoxymetyl)-tetrahydro(3a/?,6aF?)-furo[3,4-d][1,3]dioxol-4R-yl]-9/7-purínu (1,50 g) v etanole (30 ml) sa hydrogenoval 10% paládiom na uhlí (50% obsah vody) (350 mg). Po 35 minútach sa zmes prefiltrovala cez materiál hyflo a opatrne sa premyla metanolom. Filtrát a premývacie roztoky sa spojili a odparili vo vákuu za poskytnutia v nadpise uvedenej zlúčeniny ako bielej tuhej látky (633 mg). Hmotnostné spektrum m/z 391 (MH⁺).

Medziprodukt 19 6-Chlór-9-[2,2-dimetyl-6/?-(2,2,2-trifluóretoxymetyl)tetrahydro-(3a/?,6a/?)-furo[3,4-d]- [1,3]dioxol-4/?-yl]-9H-purín

Oxychlorid fosforečný (0,44 ml, 726 mg) sa pridal k miešanému roztoku 9-[2,2-dimetyl-6/?-(2,2,2-trifluóretoxymetyl)tetrahydro-(3a/?,6aR)-furo[3,4-d][1,3]-dioxol-4/?-yl]-1,9-dihydropurín-6-ónu (616 mg) a 4-dimetylaminopyridínu (193 mg) v acetonitrile (10 ml) pod dusíkom. Zmes sa zahrievala pod spätným chladičom 0,5 hodiny. Pridal sa ďalší oxychlorid fosforečný (približne 0,2 ml) a zmes sa zahrievala pod spätným chladičom ďalšiu 0,5 hodinu. Zmes sa ochladila na 22 °C a ponechala sa stáť 18 hodín, vliala sa na trietylamín (6 ml)/ľad (6 ml) za chladenia. Vodná fáza sa okyslila na pH 1 koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou, potom sa extrahovala etylacetátom. Spojené organické extrakty sa premyli roztokom soli, sušili sa nad Na₂SO₄ a odparili vo vákuu za poskytnutia hnedého oleja (1,3 g), ktorý sa čistil chromatografiou na silikagéli (Merck 9385, 30 g). Elúcia zmesou metanohdichlórmetán (2:98) poskytla v nadpise uvedenú zlúčeninu ako béžovú penu (783 mg).

TLC oxid kremičitý (metanokdichlórmetán 2:98), R_f = 0,37.

-31 Medziprodukt 20 (2/?,3R,4S,5R)-2-(6-Chlórpurín-9-yl)-5-(2,2,2-trifluóretoxymetyl)tetrahydrofurán-3,4diol

Roztok 6-chlór-9-[2,2-dimetyl-6R-(2,2,2-trifluóretoxymetyl)tetrahydro-(3a/?,6a/?)furo[3,4-d]-[1,3]dioxol-4R-yl]-9H-purínu (754 mg) v kyseline trifluóroctovej (10 ml) v atmosfére dusíka pri -10 °C sa zmiešal s vodou (1,0 ml) a zmes sa miešala pri -10 °C až 0 °C 1,5 hodiny. Rozpúšťadlo sa odparilo vo vákuu pri 20 °C a zvyšok sa zmiešal so zmesou dichlórmetán:etanol:amoniak 10:8:1 (30 ml) a rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu za získania oleja. Ten sa chromatografoval na silikagéli (30 g). Elúcia zmesou metanoLdichlórmetán (5:95) poskytla v nadpise uvedenú zlúčeninu ako bezfarebnú penu (483 mg, 71 %).

TLC oxid kremičitý (metanoLdichlórmetán, 5:95) Rf = 0,26.

Medziprodukt 21 {2,2-Dimetyl-6R-[6-(tetrahydropyrán-4-ylamino)purín-9-yl]tetrahydro-(3aR,6a/?)furo[3,4-d]-[1,3]dioxol-4ŕ?-yl}-metanol

Zmes 3/?,4R-bis-benzoyloxy-5/?-(2,6-dichlórpurín-9-yl)tetrahydrofurán-2R-ylesteru kyseliny benzoovej (8,25 g), hydrochloridu tetrahydropyrán-4-yl-amínu (1,92 g) a diizopropyletylaminu (5,5 ml) v izopropanolu (100 ml) sa zmiešala pod spätným chladičom v atmosfére dusíka 1,5 hodiny. Roztok sa koncentroval vo vákuu a zvyšok sa zmiešal s uhličitanom draselným (4,5 g) v metanole (150 ml). Po 24 hodinách pri 21 °C sa pridal ďalší uhličitan draselný (4,5 g) a miešanie pokračovalo pri 21 °C 64 hodín. Rozpúšťadlo sa odparili vo vákuu a zvyšok sa absorboval na oxid kremičitý pred čistením bleskovou chromatografiou (250 g), so zmesou dichlórmetán:metanol:amoniak (90:10:1 ako eluentom za získania belavej peny (3,7 g). Tento materiál sa rozpustil v acetóne (60 ml) a zmiešal sa s monohydrátom kyseliny para-toluénsulfónovej (2,0 g) a 2,2-dimetoxypropánom (6 ml) a získaná zmes sa miešala pri 22 °C cez noc. Biela suspenzia sa koncentrovala vo vákuu a zvyšok sa rozdelil medzi 8% vodný hydrogenuhličitan sodný a etylacetát. Vodná

-32vrstva sa ďalej extrahovala etylacetátom a spojené organické extrakty sa premyli vodou, roztokom soli, sušili sa (Na₂SO₄) a koncentrovali vo vákuu na penu, ktorá sa čistila bleskovou chromatografiou na silikagéli (100 g) s etylacetátom ako eluentom za získania v nadpise uvedenej zlúčeniny ako bezfarebnej peny (3,49 g).

TLC oxid kremičitý (etylacetát) Rf= 0,23.

Medziprodukt 22 {9-{6R-[3-(terc-Butyldimetylsilanyloxy)propoxymetyl]-2,2-dimetyltetrahydro(3aR,6a/?)-furo[3,4-d][1,3]dioxol-4R-yl}-2-chlór-9H-purín-6-yl}-(tetrahydropyrán-4yl)amín

Hydrid sodný (60% disperzia v oleji, 150 mg) sa pridal k roztoku ŕerc-butyl-(3jódpropoxy)dimetylsilánu (720 mg) v suchom dimetylformamide (5 ml) v atmosfére dusíka a ochladil sa v ľadovom kúpeli. Po 1 hodine sa žltá zmes zmiešala s {2,2dimetyl-6R-[6-(tetrahydropyrán-4-ylamino)purín-9-yl]tetrahydro-(3a/?,6aR)-furo[3,4d]-[1,3]dioxol-4/?-yl}-metanolom (540 mg) a miešala sa pri teplote miestnosti 17 hodín. Pridala sa kyselina octová (0,5 ml) a zmes sa miešala 1 hodinu a potom sa vliala do roztoku soli (15 ml). Vodná zmes sa extrahovala etylacetátom a spojené organické extrakty sa premyli vodou, roztokom soli, sušili sa (Na₂SO₄) a koncentrovali sa vo vákuu na žltý olej. Ten sa čistil bleskovou chromatografiou na kolóne silikagélu (priemer 5 cm, eluent toluén:etanol:trietylamín, 95:5:1), chromatografia sa opakovala na 3cm kolóne za získania svetložltého oleja (269 mg).

TLC oxid kremičitý (toluén:etanol:trietylamín 90:10:1) Rf = 0,39.

Medziprodukt 23 3-{6/?-[2-Chlór-6-(tetrahydropyrán-4-ylamino)purín-9-yl]-[2,2-dimetyl-tetrahydro(3a/?,6aR)-furo[3,4-d]-[1,3]dioxol-4R-yl]metoxy}propán-1-ol

Roztok {9-{6R-[3-(terc-butyldimetylsilanyloxy)propoxymetyl]-2,2-dimetyltetrahydro-(3a/?,6aR)-furo[3,4-d][1,3]dioxol-4/?-yl}-2-chlór-9/-/-purín-6-yl}-(tetrahydro

-33pyrán-4-yl)amínu (420 mg) v suchom tetrahydrofuráne (4 ml) sa zmiešal s tetra-nbutylamóniumfluoridom (1M v tetrahydrofuráne, 12 ml) a žltý roztok sa miešal pri teplote miestnosti 3 hodiny. Rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu a zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou na kolóne silikagélu (20 g, eluent toluén:etanol:trietylamín 90:10:1) za poskytnutia v nadpise uvedenej zlúčeniny ako bezfarebnej gumy (299 mg).

TLC oxid kremičitý (toluén:etanol:trietylamín 90:10:1) Rf= 0,28.

Medziprodukt 24 {2-Chlór-9-[6R-(3-fluórpropoxymetyl)-2,2-dimetyltetrahydro-(3aR,6aR)-furo[3,4-d]- [1,3]dioxol-4R-yl]-9H-purín-6-yl}-(tetrahydropyrán-4-yl)amín

Roztok 3-{6R-[2-chlór-6-(tetrahydropyrán-4-ylamino)purín-9-yl]-[2,2-dimetyltetrahydro-(3aft,6a/?)-furo[3,4-d]-[1,3]dioxol-4R-yl]metoxy}propán-1-olu (280 mg) v dichlórmetáne (3 ml) sa zmiešal s trifluoridom dietylaminosírovým (0,13 ml) a svetložltý roztok sa miešal pri 22 °C 17 hodín. Reakčná zmes sa rozdelila medzi etylacetát (10 ml) a 2N uhličitan sodný (10 ml), vrstvy sa oddelili a vodná vrstva sa reextrahovala etylacetátom (10 ml). Spojené organické extrakty sa premyli roztokom soli, sušili sa (Na2SO₄) a koncentrovali za poskytnutia svetložltého oleja, ktorý sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli (30 g) s elúciou zmesou toluén:etanol:trietylamín 95:5:1) za poskytnutia v nadpise uvedenej zlúčeniny ako belavej peny (173 mg).

TLC oxid kremičitý (toluén:etanol:trietylamín 90:10:1) Rf= 0,41.

Medziprodukt 25 {9-[6R-(3-Fluórpropoxymetyl)-2,2-dimetyltetrahydro-(3a/?,6aR)-furo[3,4-d][1,3]dioxol-4R-yl]-9H-purín-6-yl}-(tetrahydropyrán-4-yl)amín

Suspenzia {2-chlór-9-[6R-(3-fluórpropoxymetyl)-2,2-dimetyltetrahydro(3aR,6a/?)-furo[3,4-d]-[1,3]dioxol-4R-yl]-9H-purín-6-yl}-(tetrahydropyrán-4-yl)amínu (120 mg), 5% paládia na uhlí (50% vodná pasta, 180 mg) a mravčanu amónneho

-34(120 mg) v metanole (25 ml) sa miešala pod spätným chladičom v atmosfére dusíka 18 hodín. Suspenzia sa prefiltrovala cez materiál hyflo, odparila vo vákuu a zvyšok sa rozdelil medzi etylacetát (5 ml) a spojené organické extrakty sa premyli roztokom soli, sušili sa (Na₂SO4) a koncentrovali vo vákuu na polotuhú látku. Zvyšok sa zmiešal s chloroformom (približne 5 ml) a kalná suspenzia sa prefiltrovala cez zátku z bavlny a filtrát sa koncentroval vo vákuu za poskytnutia v nadpise uvedenej zlúčeniny ako bielej peny (81 mg).

TLC oxid kremičitý (toluén:etanol:trietylamín 90:10:1) Rf= 0,33.

Príklad 1

A/-(Tetrahydropyrán-4-yl)-5‘-O-trifluórmetyladenozín

4f?-Acetoxy-2R-(6-chlórpurín-9-yl)-5R-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-3Ryl-ester kyseliny octovej (170 mg) sa zahrieval pod spätným chladičom s hydrochloridom tetrahydropyrán-4-ylamínu (235 mg) a diizopropyletylamínom (0,35 ml) v izopropanole (8 ml) 20 hodín. Po ochladení sa rozpúšťadlo odstránilo vo vákuu, pridaLsa nasýtený metanolický amoniak (15 ml) a roztok sa ponechal stáť pri 22 °C 3 hodiny. Rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu a surový produkt sa zmiešal s éterom (6 ml) za poskytnutia v nadpise uvedenej zlúčeniny ako bezfarebného prášku (96 mg).

Hmotnostné spektrum m/z 420 (MH⁺) Mikroanalýza: nájdené: C 45,7, H 4,9, N 16,3, Ci₆H₂oF₃N₅05 vypočítané: C 45,8, H 4,8, N 16,7 %.

Príklad 2

A/-(2-Pyridín-4-yl-etyl)-5^,-O-trifluórmetyladenozín (2/?,3/?₁4S,5/?)-2-(6-Chlórpurín-9-yl)-5-trifluóretoxymetyltetrahydrofurán-3,4diol (42 mg), 2-pyridín-4-yletylamín (58 mg) a diizopropyletylamín (0,124 ml) za zahrievali pri 80 °C v izopropanole (5 ml) v reakčnej nádobke reactivial 17 hodín. Roztok sa odparil v prúde dusíka a čistil sa automatickou preparativnou HPLC za poskytnutia v nadpise uvedenej zlúčeniny ako bezfarebnej tuhej látky (16 mg).

-35Hmotnostné spektrum m/z 441 (MH⁺), HPLC R_t = 10,39 minút.

Príklad 3 /\/-(exo-Bicyklo[2.2.1 ]hept-2-yl)-5'-O-trifluórmetyladenozín

4R-Acetoxy-2R-(6-chlórpurín-9-yl)-5R-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-3Ryl-ester kyseliny octovej (54 mg), (±)-exo-norbornylamín (55 mg) a diizopropyletylamín (0,128 ml) sa zahrievali pri 80 °C v izopropanole (7 ml) v reakčnej nádobe reactivial 65 hodín. Roztoky sa odparili na malý objem prúdom dusíka, pridal sa nasýtený metanolický amoniak a roztok sa ponechal stáť 3 hodiny. Roztok sa odparil vo vákuu a zvyšok sa čistil chromatografiou s použitím patróny SPE s chloroformom, potom zmesou etylacetát:metanol (10:1) ako eluenta, za poskytnutia v nadpise uvedenej zlúčeniny ako bezfarebnej peny (51 mg). Hmotnostné spektrum m/z 430 (MH⁺),

LCMS R_t = 4,16 minút.

Príklad 4

5'-O-trifluórmetyladenozín

4R-Acetoxy-2R-(6-chlórpurín-9-yl)-5R-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-3Ryl-ester kyseliny octovej (53 mg) sa rozpustil v nasýtenom metanolickom amoniaku (5 ml) a ponechal sa stáť pri 22 °C 3 dni. Vzorka sa odparila v prúde dusíka a čistila sa bleskovou chromatografiou na silikagéli (10 g) so zmesou dichlórmetán:metanol (9:1) ako eluentom, za získania v nadpise uvedenej zlúčeniny ako priehľadnej gumy (8,3 mg).

Hmotnostné spektrum m/z 336 (MH⁺),

LCMS R_t = 3,44 minút.

Príklad 5

Metylamid kyseliny 2-[9-(3R,4S-dihydroxy-5R-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán2R-yl)-9H-purín-6-ylamino]etánsulfónovej

-364R-Acetoxy-2R-(6-chlórpurín-9-yl)-5/?-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-3Ryl-ester kyseliny octovej (53 mg) v izopropanole (5 ml) sa zmiešal s metylamidom kyseliny 2-aminoetánsulfónovej (85 mg) a diizopropyletylamínom (0,211 ml) a zahrieval sa v reakčnej nádobe reactivial pri 80 °C 65 hodín. Po ochladení sa rozpúšťadlo odstránilo v prúde dusíka a pridal sa nasýtený metanolický amoniak. Roztok sa ponechal stáť pri 22 °C 3 hodiny, potom sa zmiešal s 8% roztokom hydrogenuhličitanu sodného (5 ml) a oxidu kremičitého (5 g) a získaná zmes sa odparila vo vákuu do sucha. Získaná tuhá zmes sa naniesla na kolónu silikagélu (20 g) s elúciou zmesou dichlórmetán:metanol (20:1 až 5:1) za poskytnutia bezfarebnej tuhej látky, ktorá sa rekryštalizovala z metanolu (2 ml) za poskytnutia v nadpise uvedenej zlúčeniny ako bezfarebných kryštálov (20 mg).

Hmotnostné spektrum m/z 457 (MH⁺),

LCMS R_t = 3,62 minút.

Príklad 6

N-Cyklopenty l-5'-O-(2,2,2-trifluóretyl)adenozi n

Roztok cyklopentyl-{9-[2,2-dimetyl-6/?-(2,2,2-trifluóretoxymetyl)-tetrahydro(3aR,6aR-furo[3,4-d][1,3]dioxol-4R-yl]-9H-purín-6-yl}amínu (100 mg) v kyseline trifluóroctovej (2 ml) pri -10 °C v atmosfére dusíka sa zmiešal s vodou (0,2 ml) a zmes sa miešala pri -10 °C až 0 °C 4 hodiny. Rozpúšťadlo sa odparilo vo vákuu pri 20 °C, zvyšok sa zmiešal so zmesou dichlórmetán:etanol:amoniak (10:8:1) a rozpúšťadlo sa odparilo vo vákuu. Zvyšok sa čistil bleskovou chroamtografiou na silikagéli (15 g). Elúcia zmesou dichlórmetán:etanol:amoniak (100:8:1) poskytla v nadpise uvedenú zlúčeninu ako bezfarebnú tuhú látku (60 mg). Teplota topenia 74 až 76 °C.

TLC oxid kremičitý (dichlórmetán:etanol:amoniak 100:8:1) Rf = 0,29. Hmotnostné spektrum m/z 418 (MH⁺).

Príklad 7 /V-(Tetrahydropyrán-4-yl)-5'-O-(2,2,2-trifluóretyl)adenozín

-37Roztok {9-[2_I2-dimetyl-6/?-(2,2₁2-trifluóretoxymetyl)-tetrahydro-(3aR,6a/?furo[3,4-d][1,3]dioxol-4/?-yl]-9H-purín-6-yl}-(tetrahydropyrán-4-yl)amínu (90 mg) v kyseline trifluóroctovej (2 ml) pri -10 °C v atmosfére dusíka sa zmiešal s vodou (0,2 ml) a zmes sa miešala pri -10 °C až 0 °C 4 hodiny. Rozpúšťadlo sa odparilo vo vákuu. Zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli pri 20 °C a zvyšok sa zmiešal so zmesou dichlórmetán:etanol:amoniak (10:8:1) (15 ml) a rozpúšťadlo sa odparilo vo vákuu (15 g). Elúcia zmesou dichlórmetán:etanol:amoniak (75:8:1) poskytla v nadpise uvedenú zlúčeninu ako bielu tuhú látku (69 mg). Teplota topenia 80 až 82 °C.

TLC oxid kremičitý (dichlórmetán:etanol:amoniak 75:8:1) Rf = 0,2.

Príklad 8 /V-(2R-Hydroxycyklopent-(R)-yl)-5^,-O-(2,2,2-trifluóretyl)adenozín (2/?,3/?,4S,5/?)-2-(6-Chlórpurín-9-yl)-5-(2_I2,2-trifluóretoxymetyl)-tetrahydrofurán-3,4-diol (150 mg) v izopropanole (5 ml) pod dusíkom sa zmiešal s (1R,2R)-2aminocyklopentanolom (82 mg), a diizopropyletylamínom (0,28 ml, 210 mg) a zahrieval pod spätným chladičom 18 hodín. Rozpúšťadlo sa odparilo vo vákuu za získania zvyšku, ktorý sa čistil chromatografiou na silikagéli (30 g). Elúcia zmesou dichlórmetán:etanol:amoniak (100:10:1) poskytla v nadpise uvedenú zlúčeninu ako béžovú tuhú látku (116 mg) s teplotou topenia 164 až 166 °C.

TLC oxid kremičitý (dichlórmetán:etanol:amoniak 100:10:1) R_f = 0,32.

Príklad 9 /V-(4-Fluórfenyl)-5^,-O-(2,2,2-trifluóretyl)adenozín (2/?,3/?,4S,5/?)-2-(6-Chlórpurín-9-yl)-5-(2,2,2-trifluóretoxymetyl)-tetrahydrofurán-3,4-diol (125 mg) v izopropanole (5 ml) pod dusíkom sa zmiešal so 4-fluóranilínom (0,08 ml, 90 mg) a diizopropyletylamínom (0,28 ml, 210 mg) a zahrieval pod spätným chladičom 24 hodín. Po ochladení na 22 °C sa zmes prefiltrovala, filtračný koláč sa premyl izopropanolom (2 ml) a éterom (15 ml) a tuhá látka sa

-38sušila vo vákuu za získania v nadpise uvedenej zlúčeniny ako bielej tuhej látky (70 mg) s teplotou topenia 214 až 215 °C.

TLC oxid kremičitý (dichlórmetán:etanol:amoniak 100:10:1) Rf = 0,36.

Príklad 10 5'-O-(3-Fluórpropyl)-A/-(tetrahydropyrán-4-yl)adenozín {9-[6R-(3-fluórpropoxymetyl)-2_I2-dimetyltetrahydro-(3aR,6a/?-furo[3,4-d][1,3]dioxol-4R-yl]-9H-purín-6-yl}-(tetrahydropyrán-4-yl)amín (79 mg) sa rozpustil v ľadovej kyseline trifluóroctovej (0,8 ml), zmiešal s vodou (0,08 ml), potom sa zmiešal pri 0 až 5 °C 1 hodinu. Prebytok kyseliny trifluóroctovej sa odstránil vo vákuu pri 30 °C a zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou na kolóne silikagélu (10 g) s elúciou zmesou dichlórmetán:etanol:amoniak (94:6:1) za poskytnutia v nadpise uvedenej zlúčeniny ako bezfarebnej peny (52 mg). Hmotnostné spektrum m/z 412 (MH⁺).

TLC oxid kremičitý (dichlórmetán:etanol:amoniak 94:6:1) Rf = 0,14.

Príklad 11

2-Chlór-5'-O-(3-fluórpropyl)-/\/-(tetrahydropyrán-4-yl)adenozín

Roztok {2-chlór-9-[6/?-(3-fluórpropoxymetyl)-2,2-dimetyltetrahydro-(3a/?,6a/?furo[3,4-d][1,3]-dioxol-4/?-yl]-9H-purín-6-yl}-(tetrahydropyrán-4-yl)amínu (50 mg) v kyseline trifluóroctovej (0,5 ml) sa pri 0 °C zmiešal s vodou (0,05 ml) a reakčná zmes sa miešala pri 0 °C 30 minút. Prebytok kyseliny trifluóroctovej sa odstránil vo vákuu pri 30 °C a zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou na kolóne silikagélu (10 g) s elúciou zmesou dichlórmetán:etanol:amoniak (94:6:1) za poskytnutia v nadpise uvedenej zlúčeniny ako bezfarebnej peny (22 mg). Hmotnostné spektrum m/z = 446 (MH⁺).

TLC oxid kremičitý (dichlórmetán:etanol:amoniak 94:6:1) Rf = 0,18.

Analogickými spôsobmi sa pripravili nasledujúce príklady.

-39Príklad 12

A/-(2S-Fluórcyklopent-(S)-yl)-5^,-O-trifluórmetyladenozín

Vyrobený z medziproduktu 6.

Hmotnostné spektrum m/z = 442 (MH⁺).

HPLC R_t = 19,24 min.

Príklad 13 /V-(Tetrahydrotiopyrán-4-yl)-5'-O-trifluórmetyladenozín

Vyrobený z medziproduktu 6.

Hmotnostné spektrum m/z = 436 (MH⁺).

HPLC R_t= 17,61 min.

Príklad 14

A/-(3,4-Difluórfenyl)-5'-O-trifluórmetyladenozín

Vyrobený z medziproduktu 6.

Hmotnostné spektrum m/z = 448 (MH⁺).

HPLC R_t = 25,44 min.

Príklad 15 /\/-(3-Fluórfčenyl)-5'-O-trifluórmetyladenozín

Vyrobený z medziproduktu 6.

Hmotnostné spektrum m/z = 430 (MH⁺).

HPLC R_t = 24,65 min.

Príklad 16

N-( 1,1 -Dioxohexahydro-1 .delta.6-tiopyrán-4-yl)-5'-O-trifluórmetyladenozín

Vyrobený z medziproduktu 5.

-40LC/MS R_t = 3,62 min.

Hmotnostné spektrum m/z = 468 (MH⁺).

Príklad 17

A/-ŕerc-Butyl-5'-O-trifluórmetyladenozín

Vyrobený z medziproduktu 5.

LC/MS R_t = 4,12 min.

Hmotnostné spektrum m/z = 392 (MH⁺).

Príklad 18

Etylester kyseliny 4-[9-(3/?,4S-dihydroxy-5R-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-2/?yl)-9H-pu rí n-6-ylamino]-piperid í n-1 -karboxylovej

Vyrobený z medziproduktu 5.

Hmotnostné spektrum m/z = 491 (MH⁺).

NMR δ (CDCI₃) 8,25 (1Hs, CH[heterocyklický]), 8,15 (1Hs, CH[heterocyklický]), 6,05 (1 Hd, CH), 4,7 (1Hm, CH), 4,0 - 4,5 (9Hm, 5 x CH + 2 x CH₂), 3,1 (2H brt, CH₂), 2,08 (2H bŕd, 2 x CH), 1,55 (2H brq, 2 x CH) a 1,28 (3Ht, CH₃).

Príklad 19

A/-(2S-Hydroxycyklopent)-(S)-yl)-5^,-0-trifluórmetyladenozín

Vyrobený z medziproduktu 5.

LC/MS R_t = 3,71 min.

Hmotnostné spektrum m/z = 420 (MH⁺).

Príklad 20

A/-(rel-2,3-Dihydroxypropyl)-5'-O-trifluórmetyladenozín

Vyrobený z medziproduktu 5.

LC/MS R_t = 3,43 min.

-41 Hmotnostné spektrum m/z = 410 (MH⁺).

Príklad 21 /V-(Tetrahydrofurán-3R-yl)-5'-O-trifluórmetyladenozín

Vyrobený z medziproduktu 5.

LC/MS R_t = 3,62 min.

Hmotnostné spektrum m/z = 406 (MH⁺).

Príklad 22 /V-(Tetrahydrofurán-3S-yl)-5'-O-trifluórmetyladenozín

Vyrobený z medziproduktu 5.

LC/MS R_t = 3,62 min.

Hmotnostné spektrum m/z = 406 (MH⁺).

Príklad 23

A/-{2-[9-(3R,4S-Dihydroxy-5R-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-2R-yl)-9H-purín-6ylamino]-etyl}acetamid

Vyrobený z medziproduktu 5.

LC/MS R_t = 3,53 min.

Hmotnostné spektrum m/z = 421 (MH⁺).

Príklad 24

Etylester kyseliny 4-[9-(3R,4S-dihydroxy-5R-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-2Ryl)-2-metyl-9H-purín-6-ylamino]-piperidín-1-karboxylovej

Vyrobený z medziproduktu 5.

LC/MS R_t = 3,97 min.

Hmotnostné spektrum m/z = 505 (MH⁺).

-42Príklad 25

2-Metyl-/V-(Tetrahydropyrán-4-yl)-5^,-O-trifluórmetyladenozín

LC/MS R_t = 3,72 min.

Hmotnostné spektrum m/z = 434 (MH⁺).

Príklad 26

A/-(2-Chlór-4-fluórfenyl)-5'-O-trifluórmetyladenozín

4/?-Acetoxy-2/?-(6-chlórpurín-9-yl)-5/?-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-3/?ylester kyseliny octovej (0,16 g), 2-chlór-4-fluóranilín (0,26 ml), octan paladnantý (8 mg), R-BINAP (/3-(+)-2,2'-bis(difenylfosfín)-1,1 ’-binaftyl) (33 mg) a uhličitan cézny (0,16 g) v 1,2 ml toluénu sa zahrievali v nádobke reactivial pri 85 až 91 °C 16 hodín. Reakčná zmes sa ochladila na teplotu miestnosti a reakcia sa ukončila vodou (20 ml) a zmes sa extrahovala dichlórmetánom (3 x 50 ml). Organické extrakty sa sušili (MgSO₄) a odparili vo vákuu. Získaný zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli (8 g kolóna Biotage) s elúciou zmesou cyklohexán:etylacetát 9:1 až 6:4) za poskytnutia číreho oleja, ktorý sa rozpustil v 1 ml metanolu, ochladil sa na 0 až 5 °C a zmiešal sa ŕerc-butylamínom (0,05 ml). Zmes sa udržiavala na tejto teplote 1 hodinu a odparila sa do sucha vo vákuu za poskytnutia v nadpise uvedenej zlúčeniny (67 mg) ako bielej tuhej látky.

LC/MS R_t = 3,04 min.

Hmotnostné spektrum m/z = 464 (MH⁺), 466 (MH⁺ + 2).

Príklad 27 /V-(4-Chlór-2-fluórfenyl)-5'-O-trifluórmetyladenozín

Vyrobený z medziproduktu 5 analogicky s príkladom 26. LC/MS R_t = 3,16 min.

Hmotnostné spektrum m/z = 464 (MH⁺), 466 (MH⁺ + 2).

-43Experimenty s reportérovým génom

Agonistická aktivita sa merala na bunkách vaječníkov čínskych škrečkov (CHO) obsahujúcich prvky reportérového génu CRE/SPAP/HYG (CRE = prvok odpovede na cyklický AMP; HYG = rezistencia na hygromycín; SPAP = sekrenovaná placentárna alkalická fosfatáza), ktoré po stimulácii cAMP produkovali SPAP. Použila sa bunková línia, ktorá bola naviac k vyššie uvedeným prvkom stabilne transfekovaná buď ľudským receptorom A1 pre adenozín alebo ľudským receptorom A3 pre adenozín. Bunky sa vysiali do 96-jamkových doštičiek v kultivačnom médiu a kultivovali sa pri 37 °C 1 hodinu. Na meranie účinnosti boli do príslušných jamiek pridávané látky s agonistickým účinkom v rozmedzí koncentrácií približne 10’¹° až 10“⁵ M. Po 15 minútach sa maximálne hladiny cAMP stimulovali prídavkom maximálnej koncentrácie forskolinu. Všetky bunky sa potom inkubovali ďalších 5 hodín pri 37 °C a ochladili sa na teplotu miestnosti a potom sa pridal substrát pre fosfatázu (paranitrofenolfosfát, (pNPP), ktorý sa premení prostredníctvom SPAP na sfarbenú látku) a 96 jamkové doštičky sa odčítali na čítacom zariadení. Z týchto výsledkov sa môže vypočítať závislosť inhibície agonistu produkcie SPAP stimulovanej forskolínom na koncentrácii. Jedným z agonistov testovaných na každej 96-jamkovej doštičke bol štandardný neselektívny agonista, N-etylkarboxamido-adenozín (NECA), pričom účinnosť všetkých testovaných zlúčenín s agonistickým účinkom sa vyjadruje vzhľadom na účinnosť štandardu NECA.

(ECR = pomer koncentrácie s rovnakou účinnosťou vzhľadom na NECA = 1) Výsledky

Claims (29)

PATENTOVÉ NÁROKY

1) -(alk)_n-(C₃-7)cykloalkyl vrátane premosteného cykloalkylu, pričom čykloalkylová skupina môže byť prípadne substituovaná jedným alebo viacerými substituentami zo skupiny OH, halogén, -(Ci.₃)alkoxy, kde (alk) znamená Ci_₃alkylén a n znamená 0 alebo 1,

1. Deriváty adenozínu všeobecného vzorca I

R¹

R² znamená Ci.₃alkyl, halogén alebo atóm vodíka;

R³ znamená fluorovanú alkylovú skupinu s priamym alebo rozvetveným reťazcom s 1 až 6 atómami uhlíka;

R¹ znamená skupinu zvolenú zo skupiny

2-metyl-A/-(tetrahydropyrán-4-yl)-5'-O-trifluórmetyladenozín,

2. Deriváty adenozínu podľa nároku 1, kde skupina R³ znamená Ci_₃fluóralkylovú skupinu.

2) alifatická heterocyklická skupina so 4 až 6 atómami v kruhu obsahujúca aspoň jeden heteroatóm zvolený z O, N a S, prípadne substituovaný jedným alebo viacerými substituentami zvolenými zo skupiny -(C-i_₃)alkyl, -CO₂-(Ci^)alkyl, -CO(Ci.₃alkyl), -S(=O)_n-(Ci_3alkyl), -CONR^aR^b, kde skupiny R^a a R^b nezávisle znamenajú atóm vodíka alebo skupinu Ci.₃alkyl, alebo =0, kde pokiaľ je v heterocyklickom kruhu prítomný atóm síry, je tento atóm síry prípadne substituovaný skupinou (=0)_n, kde n je 1 alebo 2,

3. Deriváty adenozínu podľa nároku 2, kde skupina R³ znamená fluórmetylovú skupinu.

3) priamy alebo rozvetvený Ci.i₂alkyl, ktorý prípadne obsahuje jeden alebo viacej atómov kyslíka, skupín S(=0)_n, kde n je O, 1 alebo 2, alebo atómov dusíka substituovaných alkylovým reťazcom, kde uvedený alkyl je prípadne substituovaný jednou alebo viacerými z nasledujúcich skupín: fenyl, halogén, hydroxy alebo NR^aR^b, kde R^a a R^b znamenajú obe Ci.₃alkyl alebo atóm vodíka,

4. Deriváty adenozínu podľa nároku 1, kde skupina R³ znamená trifluórmetylovú skupinu.

4) fúzovaný bicyklický aromatický kruh kde B znamená 5- alebo 6-člennú heterocyklickú aromatickú skupinu obsahujúcu jeden alebo viacej atómov O, N alebo S, kde bicyklický kruh je naviazaný na atóm dusíka vzorca I cez atóm kruhu A a kruh B je pripadne substituovaný skupinou -CO2-(Ci.₃alkyl),

5'-O-(3-fluórpropyl)-/V-(tetrahydropyrán-4-yl)adenozín, 2-chlór-5'-O-(3-fluórpropyl)-/\/-(tetrahydropyrán-4-yl)adenozín₁ A/-cyklopentyl-5^,-O-(2,2,2-trifluóretyl)adenozín,

-50A/-(tetrahydropyrán-4-yl)-5^,-O-(2,2,2-trifluóretyl)adenozín, A/-(2R-hydroxycyklopent-(R)-yl)-5^,-O-(2,2,2-trifluóretyl)adenozín, A/-(4-fluórfenyl)-5^,-O-(2,2,2-trifluóretyl)adenozín.

5'-O-trifluórmetyladenozín, metylamid kyseliny 2-[9-(3R,4S-dihydroxy-5/?-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán2R-yl)-9/-/-purín-6-ylamino]etánsulfónovej, etylester kyseliny 4-[9-(3/?,4S-dihydroxy-5/?-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-2/?yl)-2-metyl-9H-purín-6-ylamino]piperidín-1-karboxylovej,

5. Deriváty adenozínu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4, kde skupina R² znamená atóm vodíka, metyl alebo atóm halogénu.

5) fenylová skupina prípadne substituovaná jedným alebo viacerými substituentami zvolenými zo skupiny: halogén, -SO₃H, -(alk)_nOH, -(alk)_nkyano, -(O)_n-(Ci_6)alkyl, prípadne substituovaný jedným alebo viacerými atómami halogénu, -(alk)_nnitro, -(O)_m-(alk)_n-CO₂R^c, -(alk)n-CONR^cR^d, -(alk)n-COR^c, -(alk)n-SOR^e, -(alk)n-SO₂NR^cR^d, -(alk)nOR^c, -(alk)n-(CO)_m-NHSO₂R^e, -(alk)n-NHCOR^c, -(alk)nNR^cR^d, kde m a n znamenajú 0 alebo 1 a alk znamená Cvealkylénovú skupinu alebo C₂.6alkenylovú skupinu,

6. Deriváty adenozínu podľa nároku 5, kde skupina R² znamená atóm vodíka metylovú skupinu alebo atóm chlóru.

6) fenylová skupina substituovaná 5- alebo 6-člennou heterocyklickou aromatickou skupinou, kde heterocyklické aromatická skupina je pripadne substituovaná skupinou C^alkyl alebo NR^cR^d pričom skupiny R^c a R^d môžu každá nezávisle znamenať atóm vodíka alebo skupinu Ci.3alkyl, alebo ak môže časť skupiny NR^cR^d, R^c a R^d spolu s atómom dusíka tvoriť 5- alebo 6-členný heterocyklický kruh prípadne obsahujúci iné heteroatómy, tento heterocyklický kruh môže byť prípadne substituovaný jednou alebo viacerými Ci-3alkylovými skupinami,

R^e znamená Ci.₃alkyl, a ich soli a solváty, najmä ich fyziologicky prijateľné solváty a soli.

7. Deriváty adenozínu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 6, kde skupina R¹ znamená skupinu (alk)_n-C₃^cykloalkyl, kde n je 0 alebo 1 a uvedený cykloalkyl je substituovaný aspoň jedným substituentom zvoleným z atómu halogénu, skupiny OH alebo je nesubstituovaný.

8. Deriváty adenozínu podľa nároku 7, kde n je 0.

9. Deriváty adenozínu podľa nároku 8, kde cykloalkylová skupina je monosubstituovaná skupinou OH alebo atómom fluóru.

10. Deriváty adenozínu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 7 až 9, kde cykloalkylový kruh obsahuje 5 atómov uhlíka.

11. Deriváty adenozínu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 6, kde skupina R¹ znamená substituovanú alebo nesubstituovanú alifatickú heterocyklickú skupinu, pričom substituent je zvolený zo skupiny -CO2-(Ci^)-alkyl, -CO-(Ci.3)alkyl, -S(=O)n(Ci.3)alkyl, CONR^aR^b, kde R^a a R^b sú určené v nároku 1, a ak je v kruhu prítomný heteroatóm S, tento heteroatóm môže byť prípadne substituovaný skupinou (=O)n, kde n je 0,1 alebo 2.

12. Deriváty adenozínu podľa nároku 11, kde heterocyklický kruh nesubstituovaný alebo je substituovaný skupinou -CO₂-(C₁^)alkyl, alebo ak je heteroatóm S, substituent (=O)_n je naviazaný na heterocyklický atóm síry.

13. Deriváty adenozínu podľa nároku 12, kde heteroatóm síry je nesubstituovaný.

14. Deriváty adenozínu podľa nároku 11, kde alifatická heterocyklická skupina je nesubstituované alebo ak je substituent skupina -CO₂(Ci^)alkyl je • heteroatóm N a substituent je naviazaný priamo na atóme dusíka kruhu.

15. Deriváty adenozínu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 11 až 14, kde heterocyklický kruh je päť alebo šesťčlenný a výhodne obsahuje heteroatóm zo skupiny O, N alebo S.

16. Deriváty adenozínu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 6, kde skupina R¹ znamená priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s 1 až 5 atómami uhlíka, prípadne s aspoň jednou skupinou S(=O)_n, kde n je 0, 1 alebo 2 a/alebo atómom dusíka substituovaným v reťazci.

17. Deriváty adenozínu podľa nároku 16, kde ak je v reťazci skupina S(=O)_n, n je 1 alebo 2.

18. Deriváty adenozínu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 15 až 17, kde alkylová skupina môže byť nesubstituované alebo substituovaná aspoň jednou skupinou OH.

19. Deriváty adenozínu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 6, kde skupina *

R¹ znamená fenylovú skupinu, ktorá je substituovaná jedným alebo viacerými » substituentami zvolenými zo skupiny OH a halogénu.

20. Deriváty adenozínu podľa nároku 19, kde fenylová skupina je disubstituovaná v polohách 2,4.

21. Deriváty adenozínu podľa nároku 20, kde obidva substituenty sú atómy halogénu.

22. Deriváty adenozínu podľa nárokov 21, kde substituent v polohe 2 je atóm fluóru a substituent v polohe 4 je atóm chlóru.

23. Deriváty adenozínu podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, ktorými sú:

/V-(tetrahydropyrán-4-yl)-5'-O-trifluórmetyladenozin, /V-(2-pyridín-4-yl-etyl)-5^,-O-trifluórmetyladenozín, /\Z-(2S-fluórcyklopent-(S)-yl)-5'-O-trifluórmetyladenozín, /V-(tetrahydrotiopyrán-4-yl)-5'-O-trifluórmetyladenozín, A/-(3,4-difluórfenyl)-5'-O-trifluórmetyladenozín, /V-(3-fluórfenyl)-5'-O-trifluórmetyladenozín, /\/-(exo-bicyklo[2.2.1 ]hept-2-yl)-5'-O-trifluórmetyladenozín,

Λ/-(1,1 -dioxohexahydro-1 .delta.6-tiopyrán-4-yl)-5'-O-trifluórmetyladenozín,

A/-ŕerc-butyl-5'-O-trifluórmetyladenozín, etylester kyseliny 4-[9-(3ŕ?,4S-dihydroxy-5ŕ?-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-2Ryl)-9/-/-purín-6-ylamino]-piperidín-1-karboxylovej,

A/-(2S-hydroxycyklopent-(S)-yl)-5'-O-trifluórmetyladenozín, /\Z-(rel-2,3-dihydroxypropyl)-5'-O-trifluórmetyladenozín, /V-ítetrahydrofurán-SR-yO-S'-O-trifluórmetyladenozín, /V-(tetrahydrofurán-3S-yl)-5'-O-trifluórmetyladenozín, A/-{2-[9-(3/?,4S-dihydroxy-5F?-trifluórmetoxymetyltetrahydrofurán-2f?-yl)-9/-/-purín-6ylaminojetyljacetamid,

24. Deriváty adenozínu podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, ktoré majú malú alebo nemajú žiadnu aktivitu na adenozínový receptor A3.

25. Spôsob prípravy derivátu adenozínu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 24, v y z n a č u j ú c i sa t ý m, že sa uskutoční reakcia zlúčeniny všeobecného vzorca II

L p¹ O* OP² kde L znamená odštiepiteľnú skupinu, R¹, R² a R³ sú určené v nároku 1 a P¹ a P² znamenajú atóm vodíka alebo vhodnú ochrannú skupinu a R¹, R² a R³ sú určené v nároku 1, so zlúčeninou všeobecného vzorca R¹NH₂ alebo je soľou za bázických podmienok.

26. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje derivát adenozínu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 24 spolu s farmaceutický prijateľným nosičom a/alebo pomocnou látkou.

27. Deriváty adenozínu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 24 na použitie v lekárstve.

28. Deriváty adenozínu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 24 na použitie na liečenie pacienta trpiaceho stavom, pri ktorom je výhodné zníženie koncentrácie voľných mastných kyselín v plazme alebo zníženie tepovej frekvencie alebo ak pacient trpí alebo je náchylný na ischemické ochorenie srdca, ochorenie periférnych ciev alebo mŕtvicu, alebo ak pacient trpí bolesťou, poruchami CNS alebo apnoickými poruchami v spánku.

29. Použitie derivátu adenozínu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 24 na výrobu liečiva na liečenie pacienta trpiaceho stavom, pri ktorom je výhodné zníženie koncentrácie voľných mastných kyselín v plazme alebo zníženie tepovej frekvencie alebo ak pacient trpí alebo je náchylný na ischemické ochorenie srdca, ochorenie periférnych ciev alebo mŕtvicu, alebo ak pacient trpí bolesťou, poruchami CNS alebo apnoickými poruchami v spánku.