SI20026A - Heptapeptidni analogi - antagonisti oksitocina - Google Patents
Heptapeptidni analogi - antagonisti oksitocina Download PDFInfo
- Publication number
- SI20026A SI20026A SI9720076A SI9720076A SI20026A SI 20026 A SI20026 A SI 20026A SI 9720076 A SI9720076 A SI 9720076A SI 9720076 A SI9720076 A SI 9720076A SI 20026 A SI20026 A SI 20026A
- Authority
- SI
- Slovenia
- Prior art keywords
- abu
- asn
- ile
- mpa
- residue
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/16—Oxytocins; Vasopressins; Related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/04—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for inducing labour or abortion; Uterotonics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/06—Antiabortive agents; Labour repressants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/10—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for impotence
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/14—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for lactation disorders, e.g. galactorrhoea
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/18—Feminine contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/10—Drugs for disorders of the endocrine system of the posterior pituitary hormones, e.g. oxytocin, ADH
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/02—Linear peptides containing at least one abnormal peptide link
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Gynecology & Obstetrics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Pregnancy & Childbirth (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Heptapeptidni analogi ali njihove farmacevtsko sprejemljive soli, ki obstajajo iz heksapeptidnega dela S in C-terminalnega beta-aminoalkoholnega ostanka Z, vezanega na del S z amidno vezjo, pri čemer beta-aminoalkohol Z je -NR-CH(Q)-CH2OH, Q je (CH2)n-NH-A, n je 1-6 in A je H ali -C(=NH)NH2 ter R je CH3 ali C2H5, in je del S, kjer je X D-aromatska-a-aminokislina ter je Y alifatska a-aminokislina, in imajo oksitocin-antagonistično učinkovitost. Opisan je tudi postopek za njihovo sintezo, farmacevtski sestavki, ki vsebujejo te analoge, sinteza takih sestavkov ter metoda za kontrolo kontrakcij uterusa.ŕ
Description
Heptapeptidni analogi - antagonisti oksitocina
Področje izuma
Predmetni izum se nanaša na nove heptapeptidne analoge (to je heptapeptide, v katerih je N-terminalni ostanek deaminiran in C-terminus reduciran v alkohol), ki kažejo oksitocinantagonistično učinkovitost, ter so med drugim koristni za zmanjšanje ali blokiranje kontrakcije mišic uterusa, ki je v zvezi s prezgodnjimi porodnimi popadki in menstruacijskimi bolečinami. Izum se nanaša tudi na farmacevtske sestavke, ki vsebujejo te peptidne analoge, in na njihovo uporabo.
Ozadje izuma
Oksitocin je peptidni hormon. Stimulira kontrakcijo mišic uterusa. Zato menijo, da je povezan z etiologijo prezgodnjih porodnih popadkov in menstruacijske bolečine. Nadalje menijo, da bi oksitocin antagonisti mogli biti koristni pri kontroli teh stanj. Znani so peptidi, ki so oksitocin-antagonisti z zadostno jakostjo in selektivnostjo za terapevtske namene. Pogosto so namenjeni za dajanje v vodni raztopini. Proizvodnja takih doz tovrstnih antagonistov, ki so pripravljeni za uporabo, terja stabilnost raztopin v daljših obdobjih, kar pa ni vedno res. Za take primere je potrebno pripraviti zdravilo neposredno pred uporabo, npr. iz liofiliziranega peptida ali njegove farmacevtsko sprejemljive soli. Tovrstno rokovanje je neprikladno in pogojuje tveganje kontaminacije.
Nameni izuma
Namen predmetnega izuma je, da nudi nove oksitocin-antagoniste, ki so heptapeptidni analogi z izboljšano stabilnostjo v vodnih medijih, pri čemer ohranijo zadostno jakost in selektivnost za terapevtsko učinkovitost.
Nadaljnji namen izuma je, da nudi farmacevtske sestavke, ki vsebujejo navedene nove heptapeptidne analoge, ki so oksitocin-antagonisti z izboljšano stabilnostjo in zato daljšim skladiščnim časom.
Nadaljnji namen izuma je, da nudi metodo za zdravljenje zdravstvenega stanja, ki je v zvezi s prekomerno ali neprimerno kontrakcijo uterusa, pri čemer je ta metoda dajanje farmacevtskega sestavka, ki vsebuje navedeni heptapeptidni analog.
Povzetek izuma
Predmetni izum obsega razred spojin, ki so heptapeptidni analogi, farmacevtske sestavke, ki vsebujejo take analoge, in metodo za uporabo teh sestavkov, katera je zdravljenje kontrakcij uterusa, zlasti v zvezi s prezgodnjimi porodnimi popadki in menstruacijsko bolečino.
Heptapeptidni analogi po predmetnem izumu imajo N-terminalni heksapeptidni del S ter C-terminalni β-aminoalkohol Z, ki ga v nadaljevanju smatramo kot formalni ekvivalent sedme aminokisline heptapeptida. Del S ima strukturo:
Mpa-X-Ile-Y-Asn-Abu- S v kateri imajo Mpa, Ile, Asn in Abu naslednje pomene:
Mpa ostanek 3-merkaptopropionske kisline (sicer imenovan dezaminocistein) lle ostanek izolevcina
Asn ostanek asparagina
Abu ostanek α-amino maslene kisline;
in kjer je X aromatska D-a-amino kislina ter je Y alifatska α-amino kislina.
Aminoalkohol Z ima strukturo:
Q
I
-n-ch-ch2-oh z
I
R v kateri
R je metil ali etil in
Q je -(CH2)n-NH-A, kjer je n število 1-6 in A stoji za H ali -C(=NH)NH2.
Spojine po predmetnem izumu lahko tvorijo kislinske adicijske soli in v kolikor so te soli farmacevtsko sprejemljive, so vključene v obseg predmetnega izuma.
Spojine lahko vdelamo bodisi v trdne ali tekoče formulacije. Primeri za take formulacije vključujejo tablete, kapsule, raztopine in suspenzije. Druge komponente takih formulacij lahko vključujejo na primer razredčila, dispergatorje, konzervanse, pufrska sredstva, arome ter sredstva za regulacijo osmotskega tlaka. Trdne formulacije so posebno prikladne za oralno dajanje, medtem ko so raztopine najbolj koristne za injiciranje (i.v., i.m. ali 5. c.) ali za intranazalno dajanje. Posebna zasluga spojin po predmetnem izumu je v tem, da so njihove raztopine stabilnejše pri dolgotrajnem skladiščenju od tistih, narejenih iz že znanih spojin s primerljivo močjo.
Formulirani farmacevtik je koristen za kontrolo kontrakcij uterusa. Dve indikaciji, pri katerih bo verjetno potrebna taka kontrola, sta predčasni porodni popadki in menstruacijska bolečina. Kadar jih uporabimo pri kontroli predčasnih porodnih popadkov, lahko uporabimo farmacevtike kot akutna tokolitična sredstva po pričetku porodnih popadkov in kot vzdrževalno terapijo za preprečitev ponovnega pojava takih epizod.
Podroben opis izuma
V skladu s predmetnim izumom opisujemo heptapeptidne analoge, ki kažejo terapevtsko koristno oksitocin-antagonistično aktivnost ter imajo izboljšano stabilnost v vodnih medijih.
Heptapeptidni analogi po predmetnem izumu so značilni po strukturi, ki obsega S del N-terminalnega heksapeptidnega analoga ter Z del C-terminalnega β-aminoalkohola. Struktura β-aminoalkohola Z je :
-nr-ch-ch2oh (Z) v kateri Q stoji za -(CH2)n-NH-A, n je 1-6 in A je H ali -C(=NH)NH2, in kjer R stoji za CH3 ali C2H5; in del S je:
Mpa-X-Ile-Y-Asn-Abu- (S) kjer imajo Mpa, Ile, Asn in Abu naslednje pomene:
Mpa ostanek 3-merkaptopropionske kisline (sicer imenovan dezaminocistein)
Mpa
Ile ostanek izolevcina
Asn
Abu ostanek asparagina ostanek α-aminomaslene kisline;
in kjer je D-aromatska α-aminokislina; in je alifatska a-aminokislina.
X
Z aromatsko α-aminokislino mislimo α-aminokislino, v kateri stranska veriga vključuje aromatski obročni sistem. Tak sistem je lahko karbocikličen ali heterocikličen, monocikličen ali kondenziran. Primeri za aromatske α-aminokisline vključujejo (niso pa omejene na) fenilalanin, tirozin, (<?-etil)tirozin, triptofan, P-(2-naftil)alanin in fenilglicin. Upoštevati je treba, da je ostanek X v spojinah predmetnega izuma v nenaravni Dkonfiguraciji.
Z alifatsko α-aminokislino mislimo α-aminokislino, kjer ima stranska veriga samo atome ogljika in vodika. Take stranske verige bodo vključevale alkilne in cikloalkilne skupine. Lahko so nenasičene, vendar pa naj ne vključujejo aromatskih ostankov. Vključene so stranske verige z 1 do 12 atomi ogljika, čeprav je prednostno območje s 3 do 7 atomi ogljika. Primeri za alifatske α-aminokisline vključujejo (vendar niso omejene na) alanin, valin, levcin, cikloheksilglicin in adamantil alanin.
Ostanek Y ima naravno L-konfiguracijo.
V strukturi dela S heksapeptidnega analoga ima črta, ki združuje ostanka Mpa in Abu, svoj običajni pomen. To pomeni, da gre za kovalentno vez, ki veže konca stranskih verig obeh ostankov. V tem primeru je atom žvepla v Mpa ostanku vezan s kovalentno vezjo na γ- (ali 4-) atom ogljika v ostanku Abu.
Del Z aminoalkohola vključuje stereogen center in tako lahko obstaja v dveh epimemih oblikah, to je R in S, kar ustreza D in L izomeroma sorodnih aminokislin. Heptapeptidni analogi vsakega izmed teh izomerov so vključeni v obseg izuma, prav tako tudi zmesi epimerov. Prednostno je aminoalkoholni del prisoten kot en sam epimer in ima prednostno S konfiguracijo.
V kontekstu predmetnega izuma smatramo Mpa ostanek in aminoalkohol Z kot formalna ekvivalenta α-aminokislin ter ustrezno poimenujemo spojine predmetnega izuma kot heptapeptidni analogi.
Pri prednostni izvedbi predmetnega izuma je X bodisi D-triptofanski ostanek ali β-(2naftil)-D-alaninski ostanek.
Pri nadaljnji prednostni izvedbi izuma je Y ostanek valina, levcina, izolevcina, aloizolevcina, cikloheksilalanina in (p,p-dietil)alanina.
Pri nadaljnji prednostni izvedbi izuma je n v območju 2-4.
Pri bolj prednostni izvedbi izuma je X bodisi D-triptofanski ostanek ali P-(2-naftil)-Dalaninski ostanek in Y je ostanek valina, levcina, izolevcina, aloizolevcina, cikloheksilalanina in (p,P-dietil)alanina.
Posebno prednostna izvedba izuma je peptidni analog, izbran izmed:
Mjo a - D- T rp-11 e - a 1 o 11 e-Asn-Abu-N-CH- CH2OH
CH3 ch2ch2ch2nh2
Mya-D-Trp-Ile-al.oIle-Asn-Abu-N-CH-CH2OH
CH3 ch2ch2ch2ch2nh2
Mjoa-D-Trp-Ile-al oIle-Asn-Abu-N-CH- CH2OH ch3 ch2ch2nh2
Mpa-D-Trp-Ile-aloIle-Asn-Abu-N-CH-CH2OH 1--1 I I ch3 ch2ch2ch2nh-c=nh
Ί nh2
Mpa-D-Trp-Ile-Ala(3, 3- dietil ) -Asn-Abu-N——CH-CH2OH 1-·-1 I ' I ch3 ch2ch2ch2nh2
M^a-D-Nal-Ile~alolle -Asn-Abu-N-CH-CH2OH ch3 ch2ch2ch2nh2
Mpa-D-Na 1 -11 e-Ala (3, 3- dietil .) -Asn-Abu-N-CH-CH2OH 1-1 I I ch3 ch2ch2ch2nh2
Mpa-D-Trp-Ile-Ile-Asn-Abu-N-CH-CH2OH
I___I
CH3 ch2ch2ch2nh2
Mpa-D-Trp-Ile-Leu-Asn-Abu-N-CH-CH2OH
I-1 | |
CHi CHaCHjC^NHz
Mpa-D-Trp-Ile-Val-Asn-Abu-N——CH-CH2OH 1--J I I ch3 ch2ch2ch2nh2
Mpa-D-Trp-Ile-Cha-Asn-Abu-N-CH-CH2OH 1-' I I
CH3 CH2CH2CH2NH2 kjer smo uporabili še
D-Trp
Alolle
Ala(3,3-dietil)
D-Nal
Leu
Val
Cha naslednje okrajšave: ostanek D-triptofana ostanek aloizolevcina ostanek (p,p-dietil)alanina ostanek p-(2-naftil)-D-alanina ostanek levcina ostanek valina ostanek β-cikloheksilalanina.
Najbolj prednostna izvedba izuma je peptidni analog:
-CH-CH2OH
CH2CH2CH2NH2.
Spojine predmetnega izuma vsebujejo bazičen položaj oz. mesto (aminsko ali gvanidinsko) in tako lahko tvorijo soli s kislinami, pri čemer te soli ohranijo farmakološke lastnosti prostih baz. Zato so take soli vključene v obseg predmetnega izuma. Primeri za take soli vključujejo, vendar niso omejeni na hidroklorid, hidrobromid, sulfat, acetat, citrat, benzoat, trifluoroacetat in metansulfanat.
V predmetnem izumu so opisani in vključeni tudi farmacevtski sestavki, ki obsegajo farmakološko učinkovito množino najmanj enega izmed zgoraj opisanih heptapeptidnih analogov, ki so antagonisti oksitocina. Sestavek lahko vključuje tudi farmacevtsko sprejemljive dodatke, kot so konzervansi, razredčila, dispergima sredstva, sredstva za pospešitev absorpcije v mukozi (sluznici) (primeri za le-te so opisani v Merkus, F. W. H. M. et al., J. Controlled Release 24, 201-208, 1993, in ki vključujejo površinsko aktivna sredstva, žolčne kisline, fuzidate, fosfolipide in ciklodekstrine), pufrska sredstva in arome. Tovrstne sestavke lahko formuliramo kot trdne snovi (npr. kot tablete, kapsule ali praške), ali kot tekočine (npr. kot raztopine ali suspenzije), ki naj vključujejo kreme in mazila, namenjene za oralno ali parenteralno dajanje. Primerni načini doziranja so lahko oralno (vključno sublingualno in bukalno), intranazalno, pulmonamo, transdermalno, rektalno, vaginalno, subkutano, intramuskulamo in intravenozno.
Prednosten sestavek po predmetnem izumu je sterilna vodna raztopina heptapeptidnega analoga kot je opisano, zlasti pa izotonična solna raztopina, primerna za intranazalno dajanje ali intravenozno injiciranje. Raztopina lahko vsebuje puffsko sredstvo za vzdrževanje pH raztopine v območju 3.0-7.0, prednostno v območju 3.5-5.5. Pufer je npr. fosfatno/citratni pufer.
Nadaljnji prednostni sestavek po predmetnem izumu je tableta za oralno dajanje. Posebno prednostna je tableta, ki je preslojena s snovjo, katera je pretežno netopna pri nizkem pH, ki je prisoten v želodcu, pač pa se raztaplja v bolj nevtralnem pH tankega črevesa, da sprošča peptidni analog za absorpcijo. Primeri za take prevleke so opisani v PCT/SE94/00244 in v PCT/SE95/00249, ki jih vključujemo kot referenco v predmetni opis.
Predmetni izum nadalje prikazuje metodo za zmanjšanje ali ustavitev nezaželenih kontrakcij mišic uterusa. Ta metoda je dajanje pacientu učinkovite množine enega izmed heptapeptidnih analogov po predmetnem izumu, ki je oksitocin-antagonist, prednostno formuliranega kot zgoraj opisani sestavek. Iz opisa predmetnega izuma bo razvidno, da izum opisuje tudi uporabo spojin in formulacij po predmetnem izumu.
Posebno prednostna izvedba izuma je postopek za ustavitev kontrakcij uterusa pri prezgodnjih porodnih popadkih. Po začetni intervenciji, ki bo terjala eno- do tri-dnevno obdobje, lahko nadaljujemo z zdravljenjem, da preprečimo ponoven pojav porodnih popadkov, dokler se lečečemu zdravniku to ne zdi primemo. Torej obstajata dva vidika izvedbe in sicer akutna tokolitična uporaba in vzdrževalna terapevtska uporaba.
Nadaljnja prednostna izvedba izuma je postopek za zmanjšanje bolečih kontrakcij uterusa povezanih z menstruacijo.
Množina heptapeptidnega analoga, ki tvori terapevtsko učinkovito dozo, bo odvisna od številnih faktorjev. Način dajanja bo pomemben pri presoji. Intravenozna injekcija bo verjetno naj učinkovitejši način dajanja, medtem ko bo intranazalno dajanje po pričakovanju verjetno učinkovitejše od oralnega doziranja. Torej bo za eno samo intravenozno dozo potrebno manj spojine, kot za eno samo intranazalno dozo, več spojine pa bo potrebno za eno samo oralno dozo. Lečeči zdravnik bo moral upoštevati tudi faktoije, kot so, starost, teža in zdravstveno stanje pacienta. Kontrola oz. ublažitev menstruacijske bolečine bo veijetno terjala manj spojine od prezgodnjih porodnih popadkov.
Množina spojine, ki tvori eno samo učinkovito dozo za intravenozno zdravljenje povprečne ženske pri prezgodnjih porodnih popadkih, je od okoli 0.1 mg do okoli 500 mg, prednostno od okoli 1 mg do okoli 200 mg, v obdobju 24 ur.
Heptapeptidni analogi po predmetnem izumu selektivno inhibirajo kontrakcije mišic uterusa, pri tem pa nimajo nezaželenih lastnosti oksitocin-agonistov. Imajo tudi malo ali sploh nič antidiuretičnih, hipotenzivnih ali hipertenzivnih učinkov, ki bi bili lahko stranski učinki analogov oksitocina in sorodnega hormona vazopresina. Po jakosti so primerljivi s tistimi spojinami, znanimi v stroki, katerim so strukturno najbolj podobne. Od teh spojin, ki so prikazane v W095/02609, se razlikujejo po naravi C-terminalnega ostanka. Znane spojine imajo karboksamidno funkcijo (-CONH2), medtem ko imajo spojine po predmetnem izumu primarni alkohol (-ΟΗ2ΟΗ). Spojine po predmetnem izumu prekašajo tiste iz W095/02609 z ozirom na njihovo stabilnost, zlasti v vodnih medijih. To je jasna prednost, kadar je treba spojino formulirati kot vodno raztopino, ki bo imela posledično daljšo skladiščno dobo in manj stroge zahteve glede hlajenja, poleg tega pa bo imela prednost pri postopkih proizvodnje in formuliranja, ki vključujeta časovna obdobja, v katerih je spojina v raztopini, celo takrat, kadar je končni sestavek trdna snov.
Čeprav smo zgoraj poudarili, da so spojine po predmetnem izumu posebno koristne pri kontroli kontrakcij mišic uterusa, pa bodo strokovnjaki zlahka upoštevali, da so možne za antagoniste oksitocina tudi druge terapevtske uporabe. Tako npr. je nadaljnja tarčna uporaba oksitocinskega delovanja mlečna žleza, ki pospešuje izločanje mleka. Spojine po predmetnem izumu bi se dale zato uporabiti za kontrolo neustrezne laktacije. Nadalje bi bile lahko koristne pri kontroli nekaterih tumorjev, zlasti tumorjev na dojki in sekundarnih metastaz, ki izvirajo iz primarnega tumorja na dojki. Nadaljnja tarčna terapija bi bila lahko tudi hiperplazija prostate. Predpostavljali so že tudi, da je oksitocin udeležen pri razvoju luteusa in pri olajšanju post-koitalnega transporta sperme. Iz tega se da sklepati, da bi bile spojine po predmetnem izumu lahko koristne kot kontracepcijska sredstva ali kot sredstva za regulacijo plodnosti. Nadaljnja periferna tarča oksitocina je imunski sistem. Antagonisti oksitocina so zato potencialno koristni kot imunomodulacijska in anti-inflamatoma sredstva.
Oksitocin je prisoten tudi v možganih, kjer naj bi po dosedanjih predlogih sodeloval pri etiologiji tako različnih stanj, kot je psihogena erektilna disfunkcija, shizofrenija in z alkoholom izzvane nevropsihološke hibe. Pri nekaterih vrstah se je tudi pokazalo, da učinkuje na kompleksno socialno obnašanje. Zato bi se dalo spojine po predmetnem izumu uporabiti npr. kot antipsihotiČna sredstva ali sredstva za izboljšanje kognitivnosti. Uporaba spojin po izumu v katerikoli izmed teh terapevtskih situacij naj bo vsebovana v okviru predmetnega opisa.
V nadaljevanju bomo opisali izum na splošno in s specifičnimi Primeri. Razumeti pa je treba, da predloženi opis ni namenjen za omejevanje obsega izuma in da v njegov obseg vključuje tudi take variacije, ki so v stroki znane in ki bi jih strokovnjak smatral za ekvivalentne.
Splošne metode sinteze
Kemične pretvorbe, ki so potrebne za izvedbo sinteze spojin po predmetnem izumu, so v stroki dobro znane. Tehnike peptidne kemije, tako v raztopini kot tudi na trdnih nosilcih, so posebno relevantne. Metode v fazi topil so opisane v naslednjih referencah:
Law, H.B. in Du Vigneaud, V., J. Am. Chem. Soc. 82,4579 - 4581, 1960;
ZhuZe, A. L. et al., Coli. Czech. Chem. Comm. 29,2648-2662,1964; in
Larsson, L.-E. et al., J. Med. Chem. 21, 352-356,1978.
Metode s trdno fazo so obravnavane v:
Merrifield, R. B.., J. Am. Chem. Soc. 85,2149,1963;
Merrifield, R. B., Biochemistry 3,1385, 1964; in
Konig, W. in Geiger, R. Chem. Ber. 103, 788, 1970.
Pot, ki so jo uporabili izumitelji, je v obrisih obravnavana spodaj in nato podrobno prikazana s Primeri. Strokovnjaku s področja peptidne kemije bo očitno, da je možno spreminjati zaporedje izvajanja nekaterih izmed pretvorb. Ni namen izumiteljev, da bi bile take očitne variacije izključene iz obsega izuma.
Najpogosteje bo izhodni material zaščitena N-alkilamino kislina s splošno formulo 1
P2 p’-N
-ch-co2h v kateri sta R in n izbrana izmed zgoraj nakazanih možnosti. P1 je zaščitna skupina za dušik. Eden izmed najugodnejših izborov za P1 je 9-fluorenilmetil-oksikarbonil (Fmoc).
Ce naj bo A v tarčni spojini H, tedaj je bodisi P skupina, ki ščiti dušik in se razlikuje od P (npr. benziloksikarbonil) ter P stoji za H ali za enak pomen kot P , ali pa sta P in P skupaj dvovalentni zaščitni skupini za dušik (npr. ftaloil).
3
Kadar naj A pomeni -C(=NH)NH2 je P bodisi H ali zaščitna skupina kot zgoraj ter P stoji za -C(=NP4)NH2, kjer je P4 zaščitna skupina ter je prednostno isto kot P2. Strokovnjaku iz prakse bo očitno, da ti zaščiteni gvanidini lahko obstajajo kot tavtomeri in položajni izomeri. Čeprav je bil -(CH2)n-N(P2)P3 definiran kot 2A, lahko smatramo B C D izomere 2 , 2 in 2 kot ekvivalente tej strukturi za namene predmetnega opisa.
N-P N-H N-P ρ II p I h ||
- (CH;)„-N-C-NHj - (CH2)„-N-C-NH-P - (CH2) „-N-C-NH-P ,B
NH-P
I
- (CH2) n-N=C-NH-P
Kadar zaščitene N-alkilamino kisline s splošno formulo 1 niso komercialno dostopne, se jih da pripraviti po metodah opisanih v literaturi, ali po metodah, ki so jim analogne.
Če predpostavimo, da naj uporabimo metode v trdni fazi, je aminokislina 1 vezana na primemo smolo, da daje spojino 3 kot prvi intermediat
P2
I , ch2 „-n-p3 , I
P^-N-CH-COi-Res 3
I
R kjer Res predstavlja polimerno smolo.
P1 cepimo in pripajamo FmocAbu(SCH2CH2CO2t-Bu)OH, da dobimo spojino 4.
P2
I , t-BuOzC (CH2) 2-S- (CH2) 2 (CH2) n-N-P3
Fmoc-NH-CH-CO-N-CH-C02-Res 4
I
R
Peptid razširimo s sekvenčnim pripajanjem s FmocAsn, FmocY, Fmoclle in nato BocX. Kadar X stoji za D-Trp, je prikladno, da zaščitimo indolni dušik kot njegov formilni derivat. Uporaba Boc-zaščite za to aminokislino dopušča istočasno cepitev t-butil estra in N-terminaine zaščitne skupine. Pri tej stopnji je prisoten intermediat 5.
P2 t-BuO2C (CH2) 2-S- (CH2) 2 (CH2)n-N-P3
Boc-X-Ile-Y-Asn-NH-CH-C0-N-CH-CO2-Res 5
R
Peptid cepimo od smole z uporabo primernih standardnih pogojev in nato zaestrimo, npr. z obdelavo z benzilbromidom, da dobimo benzil ester 6.
P2 t-BuO2C (CH2) 2-S- (CH2) 2 (CH2) n-N-P3
I I 6
Boc-X-1 le-Y-Asn-NH-CH-C0-N-CH-CO2-CH2Ph
R (Le-tega lahko pišemo kot
P2
I 3 (CH2) n-N-P3 i-:-1 I
Mpa-Ot-Bu Boc-X-Ile-Y-Asn-Abu-N-CH-CO2-CH2Ph 6}
I
R
Boc skupino in t-butil ester cepimo s kislinsko obdelavo ter nastale aminske in kislinske skupine kondenziramo, da tvorimo makrocikel. Benzil ester nato reduciramo, da dobimo primarni alkohol tarčne spojine, npr. z reakcijo z natrijevim borohidridom v vodnem izopropanolu. Prikladno lahko dosežemo med to pretvorbo tudi odstranitev preostalih zaščitnih skupin. Če pa se to ne zgodi, je potrebna končna stopnja odstranitve zaščitne skupine. Produkt izoliramo in očistimo z uporabo standardnih tehnik.
Naslednje specifične Primere pripravimo po teh splošnih navodilih. So predstavniki spojin predmetnega izuma. Uporabljamo naslednje okrajšave:
TBTU 2-( 1 -H-benzotriazol-1 -il)-1,1,3,3-tetrametil-uronij ev tetrafluoroborat
Boc /erc-butiloksikarbonil
Fmoc 9-fluorenilmetiloksikarbonil
TFA trifluorocetna kislina
DMF dimetilformamid
DBU 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en
Bn
Om
Pht benzil omitin ftaloil.
Zaščitene aminokisline smo dobili kot sledi:
FmocAbu(SCH2CH2CO2t-Bu) pripravljen po Prochazka, E. et al., Coli. Czech. Chem. Comm. 57, 1335, 1992;
FmocNaMeOm(Pht) pripravljen analogno načinu, uporabljenem za lizinski derivat v Freidinger, R. M. et al., J. Org. Chem. 48, 77, 1983;
Fmoc-alolle pripravljen po Ten Kortenaar, P. B. W. et al., Int. J. Peptide Protein Res. 27, 398,1986;
FmocAla(3,3-dietil) pripravljen po Eisler, K. et al., Coli. Czech. Chem. Comm. 31,
4563,1966;
Boc-D-Trp(CHO); Boc-D-Nal; FmocAsn; Fmoclle; FmocVal; FmocLeu;
FmocCha vsi iz Bachem (CH in USA).
Primer 1
Mpa-D-Trp-Ile- alolle —Asn-Abu-N
CH-CHaOH
CH3 CH2CH2CH2NH2 la: Boc-D-Trp (CHO) -Ile- alolle -Asn-Abu-N°MeOrn (Pht) OBn
I
SCH2CH2CO2t-Bu
Peptid la smo sintetizirali z uporabo metodologije v trdni fazi na o-klorotritilni smoli in s
Fmoc strategijo.
Prva aminokislina, FmocNaMeOm(Pht)OH, je bila vezana na smolo. Cepitev Fmoc skupine smo dosegli z 2% DBU v DMF. Druge ostanke smo sekvenčno pripajali in zaključili z Boc-D-Trp(CHO)OH. Na smolo vezani peptid smo obdelali z zmesjo ocetne kisline/trifluoroetanola/diklorometana(l :2:7), nato smo zmes filtrirali, filtrat uparili in liofilizirali. Nastalo peptidno kislino smo zaestrili z reakcijo z benzilbromidom (2 ekvivalenta) ter diizopropiletilaminom (2.5 ekvivalentov) v DMF v teku 27 ur. Topilo smo uparili in ostanek liofilizirali iz ocetne kisline.
Ib: Mpa-D-Trp (CHO)-Ile- alolle -Asn-Abu-N“MeOrn (Pht) OBn 1_I
N-terminalno Boc skupino in t-butil ester spojine la smo cepili z obdelavo s 95 % TFA/
2.5 % anizoIa/2.5 % vode v teku 1.5 ur pri sobni temperaturi. TFA smo uparili in produkt oborili z dodatkom dietiletra. Peptid smo ciklizirali z obdelavo s TBTU (1 ekvivalent) in N-metilmorfolinom (17 ekvivalentov) v DMF pri sobni temperaturi. Topilo smo uparili in peptid Ib očistili z reverzno-fazno kromatografijo.
Ic: Mpa-D-Trp-Ile- alolle -Asn-Abu-N-CH-CHjOH p—r-1 i i
CH, CH2CHzCH2NH2
Očiščeni benzil ester Ib smo obdelali z NaBH4 (7 ekvivalentov) v raztopini v zmesi izopropanol/voda (6:1) pri sobni temperaturi v teku 22 ur v atmosferi inertnega plina. Dodali smo ocetno kislino (18 ekvivalentov) ter zmes segrevali 6 ur pri 80 °C. Topilo smo uparili in produkt peptid Ic (= »peptid I«) smo očistili z reverzno-fazno tekočinsko kromatografijo: stacionarna faza; Kromasil® 13 pm ali 5 pm, lOOm ’10, Cis ali Cs (EKA Nobel, Švedska) : mobilna faza; acetonitril/0.1 % TFA v vodi. Dobitek 14 mg. Masna spektrometrija (elektrospray ionizacija, analiza z ionsko pastjo (»ion trap«), pozitivni modul) je pokazala molekulsko maso v skladu s predlagano strukturo (ugotovljeno m/z =
830.5 [MH+j; izračunano za [^oH^NgOsS+H+j m/z = 830.5 ).
Ob uporabi enake metode kot pri Primeru I in z zamenjavo primernih zaščitenih aminokislin za Boc-D-Trp(CHO)OH in Fmoc-alolleOH, smo pripravili peptide, naštete v
Tabeli 1.
Tabela 1. Podatki za masno spektroskopijo
Mpa-X-Ile-Y-Asn-Abu-N-CH-CH2OH 1-1 I I
CHj CH2CH2CH2NH2
Primeri II - VII
Peptid | X | Y | Masni spekter | |
Izrač. MIT | Ugotovljeno | |||
II | D-Trp | Leu | 830.5 | 830.4 |
III | D-Trp | Val | 816.4 | 816.4 |
IV | D-Trp | Cha | 870.5 | 870.5 |
v | D-Trp | lle | 830.5 | 830.5 |
VI | D-Nal | alolle | 841.5 | 841.5 |
VII | D-Trp | Ala (3,3.dietil) 844.5 | 844.5 |
Pripravili smo številne referenčne peptid amide po metodah, prikazanih v W095/02609, da smo primerjali lastnosti predmetnega izuma s tistimi, ki so znane v stroki. Ti referenčni peptidi so zbrani v Tabeli 2.
Tabela 2. Referenčni peptidi
Mpa-X-I1e-Y-Asn-Abu-N— L___1 1 | -CH-CONH2 1 ch2ch2ch2nh2 Y | |
Peptid | 1 CHj X | |
r-IX | D-Trp | alolle |
r-X | D-Trp | Val |
r-XI | D-Nal | alolle |
Primer VIII
Ob uporabi metode iz primera I, le z zamenjavo -etil-omitina za hT-metilamino kislino, smo pripravili naslednji peptid (VHI) (ugotovljeno m/z = 855.1 [MH+] ; Izračunano za [C^H^NgOsS+Hf] m/x = 855.5 ).
Mpa-D-Nal-Ile-alolle —Asn-Abu-N - CH-CH20H 1-1 I I ch3-ch2 ch2ch2ch2nh2 peptid VIII
Primer IX
Biološko ovrednotenje spojin
Spojine po predmetnem izumu lahko preizkusimo v številnih in vitro ter in vivo bioloških sistemih. Te testne sisteme smo izbrali kolikor mogoče relevantne za ciljnega humanega pacienta.
i) Poskus vezave oksitocin receptorja
Rekombinantne humane oksitocin receptorje smo izrazili bodisi v CHO ali HEK293 celicah ob uporabi standardnih tehnik molekularne biologije. Pripravili smo membransko frakcijo in inkubirali v prisotnosti [ I]-oksitocina in s spremenljivimi koncentracijami heptapeptidnega analoga. Membrane smo nato izolirali s filtracijo in prešteli glede radioaktivnosti, da smo ugotovili oksitocinsko vezavo. Za analog smo določili inhibicijsko konstanto Ki.
Dobljene rezultate smo predstavili v Tabeli 3.
Tabela 3. Preizkus oksitocin receptorja; inhibicijske konstante Ki
Peptid | Ki (nM); srednji+SEM |
I | 0.25+0.16 |
II | 3.2+0.75 |
III | 0.80+0.30 |
IV | 7.1+1.85 |
V | 1.4+0.15 |
VI | 0.1±0.0 |
VII | 2.4+0.85 |
ii) Antagonistični učinek in vitro na modelu humanega uterusa
Tkivo mišic uterusa žensk v pozni nosečnosti s carskim rezom smo narezali na pramene, ki smo jih namestili v kopel za tkivo, polnjeno s Krebs-Ringeijevim pufrom in oksigenirali s karbogenskim plinom (95 % O2 + 5 % CO2). Spremembe napetosti izometrične mišice, ugotovljene s pretvornikom napetosti, smo zapisali na Grassovem poligrafu.
Zapisali smo krivuljo koncentracija - učinek za oksitocin. Učinek, izmeijen v tem primeru, ustreza neto vrednosti integrirane kontrakcijske krivulje med 10-minutnim obdobjem, ki sledi dajanju agonista (t.j. oksitocina). Izbrali smo koncentracijo oksitocina, ki daje najmanj polovico maksimalnega odziva. To koncentracijo agonista smo dajali v tkivo v prisotnosti različnih koncentracij antagonista heptapeptidnega analoga, ter zapisali odziv. Koncentracija antagonista, ki je bila potrebna za zmanjšanje odziva na 50 % njegove kontrolne vrednosti, je bila gotovljena z analizo regresije in tukaj podana kot IC50 vrednost. [IC50 vrednost = koncentracija antagonista, potrebna za zmanjšanje učinka dane doze agonista za 50 %]. Rezultati so podani v Tabeli 4.
Tabela 4. Inhibicija učinka agonista (model uterusa).
Peptid | IC50, model humanega uterusa (nM) |
I | 5±1 |
r-VIII | 18+3 |
iii) in vivo model na podgani
Podgane Sprague Dawley (približno 250 g) v naravnem estrusu smo anestetizirali z Inactinom (0.5mg/100 g telesne teže, i.p.). Aktivnost miometrija smo izmerili s pomočjo katetra, fiksiranega v votlini uterusa ter napolnili z modificirano Lockesovo raztopino. Kateter smo povezali s Statham P23d pretvornikom moči ter izmerili kontrakcije na Grassovem poligrafu (model 7D).
-4 -3
Zapisali smo krivuljo doza - odziv za oksitocin (2 x 10 - 5 x 10 pmol/kg). V tem primeru je bil odziv kvantificiran z integracijo krivulje med 15 minutami, ki slede injekciji agonista. Izbrali smo dozo oksitocina, ki je dala učinek, ki ustreza intralumenamemu kontrakcijskemu tlaku 1332 - 3996 Pa (10 - 30 mm Hg), ter v okviru linearnega odseka krivulje. To dozo oksitocina smo dajali živali skupaj z najmanj dvema različnima dozama antagonista in zapisali učunek. Dozo antagonista, ki zmanjša učinek agonista na 50 % njegove kontrolne vrednosti, smo določili z interpolacijo in je tukaj navedena kot ID50 vrednost. [ ID50 vrednost = doza antagonista, potrebnega za zmanjšanje učinka dane doze agonista za 50%]. Rezultati so podani v Tabeli 5.
Trajanje učinka antagonistov smo tudi določili na tem modelu. Izbrali smo dozo oksitocina (2 χ 10'4 - 5 x ΙΟ’3 pmol/kg), ki daje učinek ustrezen polovici maksimalnega učinka (ta doza je ED50). Ugotovljeni učinek je bil enak, kot pri zgoraj definirani določitvi ID50). -4 -3
Izbrali smo dozo antagonista (8x10 -4x10 pmol/kg), tako, da smo dobili vsaj 50 % inhibicije odziva na agonist. Na pričetku poizkusa smo skupaj dajali posamične doze agonista in antagonista. V 20-minutnih intervalih zatem smo dajali doze samega agonista in izmerili odziv. Čas, ki je potreben za inhibicijo učinka agonista, da se zmanjša na 25 % svoje izhodne vrednosti, smo določili z interpolacijo in ga tukaj navedli kot t75 vrednost. [t75 vrednost = časovno obdobje, ki je potrebno za zmanjšanje učinkovitosti posamične doze za 75 % ]. Rezultati so predstavljeni v Tabeli 5.
Tabela 5. Inhibicija učinka agonista (in vivo model na podgani)
Peptid ID50, Model na podgani (nmol/kg) t75, Model na podgani (min)
I 2.9+0.3 169+2 r-IX 2.9+0.3 180+9
Iz rezultatov, predstavljenih v Tabelah 3 - 5, je razvidno, da so spojine po predmetnem izumu vsaj tako dobre kot doslej znane spojine na modelu podgane, tako glede jakosti in trajanja učinka, in prekašajo doslej znane spojine pri bolj relevantnem humanem modelu.
Primer X
Farmacevtske formulacije
Raztopina v izotonični zapufrani slanici za i.v. injiciranje.
Pripravili smo naslednje raztopine:
Raztopina A (0.02 M citronska kislina)
Monohidrat citronske kisline 0.42 g
Destilirana voda do 100 ml
Raztopina B (0.04 M dinatrijev hidrogen fosfat) Na2HPO4.2H2O 0.712 g
Destilirana voda do 100 ml
K 27 ml raztopine A dodamo 23 ml raztopine B, 0.81 g NaCI ter 0.322 g peptid I acetata. Nato nastavimo pH na 4.5 z raztopino A ter dodamo destilirano vodo, da dobimo celotni volumen 100 ml. Končno filtriramo zmes skozi Sterivex-GV 0.22 pm. To da izotonično raztopino, ki vsebuje 0.3 mg/ml peptida I (izračunano kot prosto bazo) primemo za intravenozno injekcijo.
Tablete za oralno dajanje
Kombinirali smo naslednje komponente:
Peptid 1 acetata 108 mg
Manitola 7.7 g
Laktoze 6.0 g
Mikrokristalne celuloze 6.0 g
Premrežene karboksimetil celuloze 200 mg
Smukca 800 mg
Magnezijevega stearata 200 mg
Polivinilpirolidona/etanola za vezavo
Homogeno zmes smo oblikovali v tablete z uporabo standardnih metod. Zmes je zadoščala za pripravo 100 tablet, ki so vsebovale vsaka 1 mg peptida I (računano kot prosto bazo).
Enterična tableta za oralno dajanje zgoraj navedenih tablet smo z zračnim razprševanjem prevlekli s 100 mg celuloznega acetat ftalata (4 mg na tableto).
Za izum je bil tudi koristen sestavek, opisan v WO 95/25534, v katerem je učinkovina (npr. desmopresin) lahko nadomeščena s spojinami po predmetnem izumu. Prilagoditev sestavka, da prenese višje množine učinkovin, ki so potrebne za vdelavo v tableto, je za strokovnjaka zelo enostavna.
Primer XI
Ovrednotenje stabilnosti
Pripravili smo raztopine analogov heptapeptida predmetnega izuma s sestavki, ki so predstavniki vodnih formulacij. Raztopine smo skladiščili več tednov pri 50 °C ter periodično jemali alikvotne deleže za HPLC analizo. Vzporedno smo proučevali referenčne peptide. Razgradnjo smo ugotavljali kot izgubo peptida ( v % mase na teden), neodvisno od narave produktov razgradnje. Rezultati so prikazani v Tabeli 6.
Tabela 6. Test stabilnosti
Peptid Sestava testne raztopine Razgradnja pri 50 °C (mas. %/ teden)
I | Izotonični citratno/fosfatni pufer, pH 4.5 | 0.4 |
r-IX | kot zgoraj | 2.9 |
III | kot zgoraj | 0.7 |
r-X | kot zgoraj | 4.3 |
VI | kot zgoraj | 1.2 |
r-XI | kot zgoraj | 4.0 |
Rezultati, predstavljeni zgoraj, jasno označujejo, da so spojine po predmetnem izumu stabilnejše v raztopini od predhodno opisanih spojin. V praksi pomeni ta povečana stabilnost, da bodo imele vodne formulacije daljšo skladiščno dobo in da bodo manj zahtevne glede skladiščenja v hladilnikih. Poleg posledičnih finančnih prihrankov bodo koristi tako glede prikladnosti kot tudi varnosti, saj bo zmanjšana potreba po pripravi posameznih doz tik pred aplikacijo. Koristi pa bodo tudi pri proizvodnem procesu, saj bodo spojine odpornejše na razgradnjo med in po čiščenju.
Claims (22)
- PATENTNI ZAHTEVKI1. Heptapeptidni analog ali njegova farmacevtsko sprejemljiva sol, ki ima oksitocin antagonistično učinkovitost ter obstaja iz heksapeptidnega dela S in C-terminalnega βaminoalkoholnega ostanka Z, vezanega na del S z amidno vezjo, pri čemer je βaminoalkohol Z:-NR-CH-CH2OH (25)IQ v kateri Q stoji za -(CH2)n-NH-A, nje 1-6 in A je H ali -C(=NH)NH2, in kjer R stoji za CH3 ali C2Hs; in del S je:Mp a-X-Ile-Y-Asn-Abu-1 (S) kjer imajo Mpa, Ile, Asn in Abu naslednje pomene: Mpa ostanek 3-merkaptopropionske kislineIle ostanek izolevcinaAsn ostanek asparaginaAbu ostanek α-aminomaslene kisline;in kjerX je D-aromatska α-aminokislina; inY je alifatska a-aminokislina.
- 2. Heptapeptidni analog po zahtevku 1, značilen po tem, daje X amino acilni ostanek Dtriptofana ali P-(2-naftil)-D-alanina.
- 3. Heptapeptidni analog po zahtevku 2, značilen po tem, da je Y amino acilni ostanek levcina, valina, izolevcina, aloizolevcina, β,β-dietilalanina, cikloheksilalanina ali cikloheksilglicina.
- 4. Heptapeptidni analog po zahtevku 1, značilen po tem, da je Y amino acilni ostanek levcina, valina, izolevcina, aloizolevcina, β,β-dietilalanina, cikloheksilalanina ali cikloheksilglicina.
- 5. Heptapeptidni analog po zahtevku 4, značilen po tem, daje n enak 2, 3 ali 4.
- 6. Heptapeptidni analog po zahtevku 1, značilen po tem, daje n enak 2, 3 ali 4.
- 7. Heptapeptidni analog po zahtevku 6, značilen po tem, daje X amino acilni ostanek Dtriptofana ali β-(2-ηΒ&Π)-Ο-Βΐ3ηίη3.
- 8. Heptapeptidni analog po zahtevku 1, značilen po tem, daje X amino acilni ostanek Dtriptofana ali p-(2-naftil)-D-alanina, Y je amino acilni ostanek levcina, valina, izolevcina, aloizolevcina, β,β-dietilalanina, cikloheksilalanina ali cikloheksilglicina, in n stoji za 2, 3 ali 4.
- 9. Heptapeptidni analog po zahtevku 8, značilen po tem, daje izbran izmed: M^a-D-Trp-Ile-aloIle-Asn-Abu-N-CH-CH2OHCH3 ch2ch2ch2nh2Mpa-D-Trp-Ile-aloIle-Asn-Abu-N-CH-CH2OHCHj CH2CH2CH2CH2NH2Mpa-D-Trp-He-al-oHe-Asn-Abu-N-CH-CH2OHCHj CH2CH2NH2M{j)a-D-Trp-Ile- alolle -Asn-Abu-N——CH-CH2OHCH3 ch2ch2ch2nh-c=nh nh2Mpa-D-Trp-Ile-Ala (3, 3-dietil ) -Asn-Abu-N—-CH-CH2OH ΐ--1 , | ch3 ch2ch2ch2nh2Mpa-D-Nal-Ile- alolle -Asn-Abu-N-CH-CH2OH J I I ch3 ch2ch2ch2nh2Mpa-D-Nal-Ile-Ala(3, 3- dietil ) -Asn-Abu-N-CH-CH2OHCH3 ch2ch2ch2nh2M^a-D-Trp-Ile-Ile-Asn-Abu-N-CH-CH2OH ch3 ch2ch2ch2nh2Mpa-D-Trp-Ile-Leu-Asn-Abu-N-CH-CH2OH1-1 I I ch3 ch2ch2ch2nh2M^a-D-Trp-Ile-Val-Asn-Abu-N-CH-CH2OHI I ch3 ch2ch2ch2nh2Mpa-D-Trp-Ile-Cha-Asn-Abu-N-CH-CH2OH 1-1 I I ch3 ch2ch2ch2nh2.
- 10. Heptapeptidni analog po zahtevku 1, značilen po tem, da ima strukturo:Mpa-D-Trp-Ile- alolle -Asn-Abu-N-CH-CH2OH ΐ-_-1 | |CH, CHjCHiCH2NH2ZJ
- 11. Heptapeptidni analog po zahtevku 1, značilen po tem, da ima strukturo:Mjoa-D-Trp-Ile-L alolle -Asn-Abu-N —CH-CH2OHCH3 CH2CH2CH2CH2NH2
- 12. Heptapeptidni analog po zahtevku 1, značilen po tem, da ima strukturo:Mpa-D-Trp-Ile- alolle -Asn-Abu-N-CH-CH2OHCH3 ch2ch2ch2nh-c=nh I nh2
- 13. Heptapeptidni analog po zahtevku 1, značilen po tem, da ima strukturo:Mpa-D-Nal-Ile-Ala (3, 3- dietil ) -Asn-Abu-N-CH-CH2OH 1-' I I ch3 ch2ch2ch2nh2
- 14. Heptapeptidni analog po zahtevku 1, značilen po tem, da ima strukturo:Mpa-D-Nal-Ile- alolle -Asn-Abu-N-CH-CH2OH ch3 ch2ch2ch2nh2
- 15. Farmacevtski sestavek, značilen po tem, da obsega farmakološko učinkovito množino heptapeptidnega analoga po zahtevku 1, in farmacevtsko sprejemljiv nosilec.
- 16. Sestavek po zahtevku 15, značilen po tem, daje vodna raztopina za nazalno, subkutano ali intravenozno dajanje.
- 17. Sestavek po zahtevku 15, značilen po tem, da nosilec vključuje pufrsko sredstvo.
- 18. Sestavek po zahtevku 15, značilen po tem, da je v obliki tablete, kapsule, granul in podobnega, za oralno dajanje.1% Postopek za pripravo heptapeptidnega analoga ali njegove farmacevtsko sprejemljive soli, ki imajo oksitocin-antagonistično učinkovitost in obstajajo iz heksapeptidnega dela S in C-terminalnega β-aminoalkoholnega ostanka Z, vezanega na del S z amidno vezjo, pri čemer je β-aminoalkohol Z:-NR-CH-CH2OHIQ (Z) v kateri Q stoji za -(CH2)n-NH-A, nje 1-6 in A je H ali -C(=NH)NH2, in.kjer R stoji za CH3 ali C2H3; in del S je:Mpa-X-Ile-Y-Asn-Abu- (S)I_I kjer imajo Mpa, Ile, Asn in Abu naslednje pomene: Mpa ostanek 3-merkaptopropionske kisline lle ostanek izolevcinaAsn ostanek asparaginaAbu ostanek α-aminomaslene kisline;in kjerX je D-aromatska α-aminokislina; inY je alifatska a-aminokislina.z redukcijo ustrezne spojine, v kateri Z stoji za Y:-NlU-CH-CO-OBn (Y) v kateri M stoji za (CH2)n-N(Pht) ali -(CH2)n-N(P)-C(=NP)NP2, v kateri je ena ali dve izmed skupin P zaščitna skupina za dušik, ostale pa so vodik, nje 1-6, R1 pa stoji za CH3 ali C2H5, z uporabo borohidridne soli ali substituiranega borohidrida ali borana.
- 20. Postopek po zahtevku 49. značilen po tem, daje borohidrid NaBH4.24· Postopek za pripravo farmacevtskega sestavka, značilen po tem, daje dobljeni sestavek namenjen za oskrbo oz. zdravljenje predčasnih porodnih popadkov in menstruacijske bolečine, neoplazij in hiperplazij, shizofrenije, vedenjskih motenj, erektilne disfunkcije, vnetja in neustrezne laktacije, ali kot sredstvo za izboljšanje kognitivnosti, za modulacijo imunosti ali za regulacijo fertilnosti, pri čemer postopek obsega združitev heptapeptidnega analoga ali njegove farmacevtsko sprejemljive soli, ki imajo oksitocin-antagonistično aktivnost ter obstajajo iz heksapeptidnega dela S in C-terminalnega β-aminoalkoholnega ostanka Z, vezanega na del S z amidno vezjo, pri čemer je β-aminoalkohol Z:-NR-CH-CHjOH (Z)IQ v kateri Q stoji za -(CH2)n-NH-A, nje 1-6 in A je H ali -C(=NH)NH2, in kjer R stoji za CH3 ali C2Hs; in del S je:Mpa-X-Ile-Y-Asn-Abu- (S) i - _I kjer imajo Mpa, Ile, Asn in Abu naslednje pomene:Mpa ostanek 3-merkaptopropionske kislineIle ostanek izolevcinaAsn ostanek asparaginaAbu ostanek α-aminomaslene kisline;in kjerX je D-aromatska α-aminokislina; inY je alifatska a-aminokislina s farmacevtsko sprejemljivim nosilcem.
- 22. -Postopek po zahtevku 21, značilen po tem, da je sestavek homogena zmes heptapeptidnega analoga ali njegove soli ter nosilca.
- 23. Postopek po zahtevku 22, značilen po tem, da obsega preslojenje navedene zmesi z enterično prevleko, zlasti tako enterično prevleko, ki ni zlahka topna pri pH 5.0 ali manj.
- 24. Postopek po zahtevku 22 ali 23, značilen po tem, da obsega tabletiranje ali granuliranje zmesi in/ali polnitev v kapsulo.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SE9604341A SE9604341D0 (sv) | 1996-11-26 | 1996-11-26 | Hepta-peptide oxytocin analogue |
PCT/SE1997/001968 WO1998023636A1 (en) | 1996-11-26 | 1997-11-21 | Heptapeptide oxytocin analogues |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SI20026A true SI20026A (sl) | 2000-02-29 |
SI20026B SI20026B (sl) | 2000-06-30 |
Family
ID=20404757
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SI9720076A SI20026B (sl) | 1996-11-26 | 1997-11-21 | Heptapeptidni analogi - antagonisti oksitocina |
Country Status (35)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US6143722A (sl) |
EP (1) | EP0938496B1 (sl) |
JP (1) | JP3405460B2 (sl) |
KR (1) | KR100463132B1 (sl) |
CN (1) | CN1129606C (sl) |
AR (1) | AR008531A1 (sl) |
AT (1) | ATE242264T1 (sl) |
AU (1) | AU713424B2 (sl) |
BR (1) | BR9713366B1 (sl) |
CA (1) | CA2272990C (sl) |
CZ (1) | CZ299532B6 (sl) |
DE (1) | DE69722651T2 (sl) |
DK (1) | DK0938496T3 (sl) |
EE (1) | EE03832B1 (sl) |
ES (1) | ES2203823T3 (sl) |
HK (1) | HK1022481A1 (sl) |
HR (1) | HRP970630B1 (sl) |
HU (1) | HU228568B1 (sl) |
IL (1) | IL129519A (sl) |
LT (1) | LT4650B (sl) |
LV (1) | LV12350B (sl) |
MY (1) | MY125555A (sl) |
NO (1) | NO321380B1 (sl) |
NZ (1) | NZ336445A (sl) |
PL (1) | PL189292B1 (sl) |
PT (1) | PT938496E (sl) |
RO (1) | RO120772B1 (sl) |
RU (1) | RU2180668C2 (sl) |
SE (1) | SE9604341D0 (sl) |
SI (1) | SI20026B (sl) |
SK (1) | SK283800B6 (sl) |
TR (1) | TR199901028T2 (sl) |
UA (1) | UA54459C2 (sl) |
WO (1) | WO1998023636A1 (sl) |
ZA (1) | ZA9710518B (sl) |
Families Citing this family (33)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2181297C2 (ru) | 2000-06-20 | 2002-04-20 | Эпштейн Олег Ильич | Способ лечения патологического синдрома и лекарственное средство |
US6476072B1 (en) * | 2000-11-21 | 2002-11-05 | Arthur Vanmoor | Method of treating menstrual pain by enhancing the effectiveness of the human immune system |
DE60309847T2 (de) * | 2002-02-27 | 2007-10-18 | Ferring B.V. | Zwischenprodukte und verfahren zur herstellung von heptapeptid-oxytocinanaloga |
EP1504268A2 (en) * | 2002-05-02 | 2005-02-09 | Bayer HealthCare AG | Diagnostics and therapeutics for diseases associated with oxytocin receptor (oxtr) |
GB0210397D0 (en) | 2002-05-07 | 2002-06-12 | Ferring Bv | Pharmaceutical formulations |
UA76639C2 (uk) * | 2002-08-02 | 2006-08-15 | Олєг Ільіч Епштєйн | Гомеопатичний лікарський засіб та спосіб лікування еректильних дисфункцій |
EP1530967B1 (en) * | 2003-11-13 | 2006-05-03 | Ferring B.V. | Blister pack and solid dosage form comprising desmopressin |
EP1555029A1 (en) | 2004-01-19 | 2005-07-20 | Ferring B.V. | Use of substances having oxytocin antagonistic properties for the preparation of a medicament for treating hypertension |
US20060171909A1 (en) * | 2005-02-03 | 2006-08-03 | The Procter & Gamble Company | Cosmetic compositions comprising colorants with low free dye |
SE528446C2 (sv) * | 2006-03-02 | 2006-11-14 | Ferring Int Ct Sa | Farmaceutisk sammansättning innefattande desmopressin, kiseldioxid och stärkelse |
KR101522747B1 (ko) | 2007-08-06 | 2015-05-26 | 알레간 인코포레이티드 | 데스모프레신 약물 전달을 위한 방법 및 장치 |
NZ587817A (en) * | 2008-03-31 | 2012-05-25 | Ferring Bv | Oxytocin analogues |
LT2712622T (lt) | 2008-05-21 | 2016-09-26 | Ferring B.V. | Burnoje disperguojamas desmopresinas, skirtas nikturijos netrikdomo miego pirminio periodo pailginimui |
US11963995B2 (en) | 2008-05-21 | 2024-04-23 | Ferring B.V. | Methods comprising desmopressin |
US20100286045A1 (en) | 2008-05-21 | 2010-11-11 | Bjarke Mirner Klein | Methods comprising desmopressin |
TWI463990B (zh) * | 2009-09-21 | 2014-12-11 | Ferring Bv | 催產素受體促進劑 |
AU2011278038B2 (en) | 2010-07-15 | 2017-02-02 | Oleg Iliich Epshtein | A method of increasing the effect of an activated-potentiated form of an antibody |
JO3400B1 (ar) * | 2010-09-30 | 2019-10-20 | Ferring Bv | مركب صيدلاني من كاربيتوسين |
ES2742299T3 (es) | 2011-03-09 | 2020-02-13 | Jitsubo Co Ltd | Nuevos péptidos entrecruzados que contienen una estructura entrecruzada no peptídica, método para sintetizar péptidos entrecruzados y nuevo compuesto orgánico utilizado en el método |
CN102875650B (zh) * | 2012-09-26 | 2014-06-11 | 深圳翰宇药业股份有限公司 | 巴卢西班的制备方法 |
US9365615B2 (en) | 2013-09-09 | 2016-06-14 | Jitsubo Co., Ltd. | Cross-linked peptides containing non-peptide cross-linked structure, method for synthesizing cross-linked peptides, and novel organic compound used in method |
EP3037101B1 (en) | 2014-12-22 | 2019-03-06 | Ferring B.V. | Oxytocin receptor antagonist therapy in the luteal phase for implantation and pregnancy in women undergoing assisted reproductive technologies |
US9750785B2 (en) | 2015-01-30 | 2017-09-05 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US9744209B2 (en) | 2015-01-30 | 2017-08-29 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US9687526B2 (en) | 2015-01-30 | 2017-06-27 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US9937223B2 (en) | 2015-01-30 | 2018-04-10 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US9744239B2 (en) | 2015-01-30 | 2017-08-29 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US9925233B2 (en) | 2015-01-30 | 2018-03-27 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
EP3359557A1 (en) | 2015-10-06 | 2018-08-15 | Ferring B.V. | New methods for making barusiban and its intermediates |
RS63286B1 (sr) | 2016-01-04 | 2022-06-30 | ObsEva SA | Istovremeno davanje alfa-amino estra hidroksipropiltiazolidin karboksamidnog derivata i tokolitičkog agensa |
MX2019000498A (es) | 2016-07-21 | 2019-09-16 | ObsEva SA | Regímenes de dosis de antagonista de oxitocina para promover la implantación embrionaria y prevenir abortos espontaneos. |
WO2021043726A1 (en) | 2019-09-03 | 2021-03-11 | ObsEva S.A. | Oxytocin antagonist dosing regimens for promoting embryo implantation and preventing miscarriage |
EP4103750A1 (en) | 2020-02-10 | 2022-12-21 | ObsEva S.A. | Biomarkers for oxytocin receptor antagonist therapy |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2036973A1 (en) * | 1990-02-27 | 1991-08-28 | Mark G. Bock | Cyclic hexapeptide oxytocin antagonists |
SE9002384D0 (sv) * | 1990-07-09 | 1990-07-09 | Ferring Ab | Derivat av baklobshormoner |
SE501678C2 (sv) * | 1993-07-13 | 1995-04-10 | Ferring Bv | Peptid med oxytocinantagonistaktivitet samt farmaceutisk komposition innehållande nämnda peptid |
SE523819C2 (sv) | 1994-01-27 | 2004-05-18 | Per-Ingvar Nilsson | Accelerationsmunstycke samt metod för dess användning |
SE9400918L (sv) | 1994-03-18 | 1995-09-19 | Anne Fjellstad Paulsen | Stabiliserad komposition för oral administrering av peptider |
SE9500249L (sv) | 1995-01-25 | 1996-03-25 | Valeo Engine Cooling Ab | Värmeväxlartank med ändstycken, förfarande för framställning av en sådan tank, samt värmeväxlare försedd med en sådan |
-
1996
- 1996-11-26 SE SE9604341A patent/SE9604341D0/xx unknown
-
1997
- 1997-11-21 NZ NZ336445A patent/NZ336445A/en not_active IP Right Cessation
- 1997-11-21 HR HR970630A patent/HRP970630B1/xx not_active IP Right Cessation
- 1997-11-21 TR TR1999/01028T patent/TR199901028T2/xx unknown
- 1997-11-21 SI SI9720076A patent/SI20026B/sl unknown
- 1997-11-21 DE DE69722651T patent/DE69722651T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1997-11-21 JP JP52460298A patent/JP3405460B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1997-11-21 CN CN97180014A patent/CN1129606C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1997-11-21 AT AT97946210T patent/ATE242264T1/de active
- 1997-11-21 SK SK704-99A patent/SK283800B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1997-11-21 PL PL97333876A patent/PL189292B1/pl unknown
- 1997-11-21 ES ES97946210T patent/ES2203823T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1997-11-21 IL IL12951997A patent/IL129519A/en not_active IP Right Cessation
- 1997-11-21 AU AU51429/98A patent/AU713424B2/en not_active Expired
- 1997-11-21 HU HU0000577A patent/HU228568B1/hu unknown
- 1997-11-21 PT PT97946210T patent/PT938496E/pt unknown
- 1997-11-21 RO RO99-00593A patent/RO120772B1/ro unknown
- 1997-11-21 EE EEP199900210A patent/EE03832B1/xx unknown
- 1997-11-21 BR BRPI9713366-3A patent/BR9713366B1/pt not_active IP Right Cessation
- 1997-11-21 EP EP97946210A patent/EP0938496B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-11-21 KR KR10-1999-7004449A patent/KR100463132B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1997-11-21 CA CA002272990A patent/CA2272990C/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-11-21 RU RU99113364/04A patent/RU2180668C2/ru active
- 1997-11-21 UA UA99042410A patent/UA54459C2/uk unknown
- 1997-11-21 ZA ZA9710518A patent/ZA9710518B/xx unknown
- 1997-11-21 WO PCT/SE1997/001968 patent/WO1998023636A1/en active IP Right Grant
- 1997-11-21 US US09/308,912 patent/US6143722A/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-11-21 CZ CZ0183299A patent/CZ299532B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1997-11-21 DK DK97946210T patent/DK0938496T3/da active
- 1997-11-25 MY MYPI97005691A patent/MY125555A/en unknown
- 1997-11-26 AR ARP970105543A patent/AR008531A1/es active IP Right Grant
-
1999
- 1999-04-30 LV LVP-99-77A patent/LV12350B/en unknown
- 1999-05-11 LT LT99-052A patent/LT4650B/lt not_active IP Right Cessation
- 1999-05-26 NO NO19992532A patent/NO321380B1/no not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-03-07 HK HK00101422A patent/HK1022481A1/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU713424B2 (en) | Heptapeptide oxytocin analogues | |
FI92326C (fi) | LHRH:n nonapeptidi- ja dekapeptidianalogeja, jotka ovat käyttökelpoisia LHRH:n antagonisteina | |
RU2199549C2 (ru) | Антагонисты gnrh, модифицированные в положениях 5 и 6 | |
JP4191259B2 (ja) | GnRH拮抗物質 | |
HU213098B (en) | Process for producing decapeptides antagonistic to hormone for releazing lutheinizing-hormone and pharmaceutical compositions containing them as active components | |
KR0123009B1 (ko) | 쥐이엔알에이취(GnRH) 유사체 | |
US4604378A (en) | Basic V1 -vasopressin antagonists | |
US5620959A (en) | Bombesin antagonists | |
US5698522A (en) | 6-position modified decapeptide LHRH antagonists | |
EP0683792A1 (en) | Lhrh antagonists having modified aminoacyl residues at postions 5 and 6 | |
WO1992002545A1 (en) | Bombesin antagonists | |
US4684621A (en) | Methods of producing vasodilation or antioxytocic activity | |
AU8225191A (en) | Derivatives of pituitary posterior lobe hormones | |
TW386086B (en) | Heptapeptide oxytocin analogues | |
US4658015A (en) | Polypeptide intermediates | |
JPS63303999A (ja) | バソプレシン拮抗剤 | |
CZ993A3 (en) | derivatives of neurohypophysis lobe hormones |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
IF | Valid on the event date |