RO120772B1 - Analogi de heptapeptidă, compoziţie farmaceutică care îi conţine şi procedeu de preparare a acestora - Google Patents
Analogi de heptapeptidă, compoziţie farmaceutică care îi conţine şi procedeu de preparare a acestora Download PDFInfo
- Publication number
- RO120772B1 RO120772B1 RO99-00593A RO9900593A RO120772B1 RO 120772 B1 RO120772 B1 RO 120772B1 RO 9900593 A RO9900593 A RO 9900593A RO 120772 B1 RO120772 B1 RO 120772B1
- Authority
- RO
- Romania
- Prior art keywords
- abu
- asn
- residue
- heptapeptide
- ile
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/16—Oxytocins; Vasopressins; Related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/04—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for inducing labour or abortion; Uterotonics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/06—Antiabortive agents; Labour repressants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/10—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for impotence
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/14—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for lactation disorders, e.g. galactorrhoea
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/18—Feminine contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/10—Drugs for disorders of the endocrine system of the posterior pituitary hormones, e.g. oxytocin, ADH
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/02—Linear peptides containing at least one abnormal peptide link
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Gynecology & Obstetrics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Pregnancy & Childbirth (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Invenţia se referă la analogi heptapeptidici, care constau dintr-un radical S de hexapeptidă şi un reziduu de beta-aminoalcool C-terminal legat la partea S printr-o legătură amidică, analogi de peptidă cu activitate de antagonist de oxitocină, la compoziţii farmaceutice cu aceşti analogi, la un procedeu pentru prepararea acestor analogi, precum şi la utilizarea analogilor de heptapeptidă, pentru reducerea sau blocarea contracţiei muşchiului uterin.
Description
Invenția se referă la analogi heptapetidici prezentând activitate de antagonist de oxitocină utilizat, printre altele, pentru descreșterea și blocarea contracției mușchiului uterului, asociată cu travaliul înainte de termen și cu durerile menstruale. Invenția se referă, de asemenea, la un procedeu pentru producerea acestora, la compozițiile farmaceutice care conțin acești analogi de peptide și la utilizarea lor.
Este cunoscut faptul că oxitocina este un hormon peptidic, care stimulează contracția mușchiului uterin și, din acest motiv, se crede că este implicată în etiologia travaliului înainte de termen și a durerilor menstruale. Se crede, de asemenea, că antagoniștii de oxitocină sunt utili în controlul acestor afecțiuni. Sunt cunoscute peptidele antagonist de oxitocină care au o potență și o selectivitate adecvată pentru utilizare terapeutică. Adesea, sunt destinate pentru administrarea în soluție apoasă. Fabricarea dozelor bune de administrat din astfel de antagoniști necesită ca soluțiile să fie stabile pe perioade lungi de timp, fapt care nu este întotdeauna valabil. în asemenea cazuri, medicamentul trebuie preparat imediat înaintea administrării, de exemplu, din peptidă uscată prin congelare sau sarea sa acceptabilă din punct de vedere farmaceutic. Acest gen de manipulare nu este convenabil și atrage după sine riscul contaminării.
Problema pe care o rezolvă invenția este de a prezenta un nou analog heptapeptic de oxitocină, un procedeu pentru prepararea acestor analogi, o compoziție farmaceutică cu acești analogi și utilizarea acestor analogi în fabricarea unui medicament pentru reducerea sau blocarea contracției mușchiului uterin.
Analogul heptapeptidic, conform invenției, înlătură dezavantajele de mai sus prin aceea că are activitate de antagonist de oxitocină și care constă dintr-un radical S de hexapeptidă și un reziduu de β-aminoalcool Z la capătul C-terminal legat la partea S printr-o legătură amidică, unde β-aminoalcoolul Z este:
-nr-ch-ch2oh
I <z>
Q unde Q este (CH2)-NH-A, n este 1 ...6, și A este H sau -C(=NH)NH2, și unde R este CH3 sau C2H5;
și radicalul S este
Mpa-X-Ile-Y-Asn-Abu- (s) unde Mpa, lle, Asn și Abu au următoarele înțelesuri
Mpa reziduu de acid 3-mercaptopropionic (denumit desaminocisteină) lle reziduu de izoleucină
Asn reziduu de asparagină
Abu reziduu de acid a-aminobutiric;
și unde
X este un α-aminoacid D-aromatic; și
Y este un α-aminoacid alifatic.
Procedeul pentru prepararea unui analog de heptapeptidă, înlătură dezavantajele de mai sus prin aceea că el cuprinde etapa de reducere a unui compus corespunzător în care Z este:
RO 120772 Β1
NR'-CH-CO-OBn | (V)
Η unde M este (CH2)n-N(Pht) sau -(CH2)n-N(P)-C(=NP)NP2 în care una sau două dintre grupările P sunt grupări de protejare a azotului și restul sunt hidrogen, n este 1 ...6 și R1 este CH3 sau C2H5, folosind o sare borhidrură sau o borhidrură substituită sau boran
Compoziția farmaceutică conform invenției cuprinde o cantitate eficientă din punct de vedere farmacologic dintr-un analog de heptapeptidă definit în revendicarea 1 și un purtător acceptabil farmaceutic.
Utilizarea unui analog de haptapeptidă definit în revendicarea 1, pentru fabricarea unui medicament pentru reducerea sau blocarea contracției mușchiului uterin asociată cu travaliul dinainte de termen.
Un obiect al acestei invenții este realizarea de noi antogoniști de oxitocină care sunt analogi heptapeptidici (adică heptapepdide în care restul N-terminal este deaminat și restul C-terminal este redus la un alcool), care au o stabilitate îmbunătățită în mediu apos și prezintă o potență și o selectivitate adecvată pentru a fi eficiente terapeutic.
Un al doilea obiect al acestei invenții este realizarea unor compoziții farmaceutice care conțin noii analogi heptapeptidici antagoniști de oxitocină și care au o stabilitate îmbunătățită și, deci, durata de valabilitate mărită.
Un alt obiect al prezentei invenții este utilizarea analogilor heptapeptidici pentru fabricarea unui medicament pentru tratamentul unei afecțiuni medicale asociate cu contracțiile uterine în exces sau necorespunzătoare.
Invenția cuprinde o clasă de compuși care sunt analogi heptapeptidici, compoziții farmaceutice care conțin astfel de analogi, și o utilizare a acestor compoziții pentru tratarea contracțiilor uterine, mai ales în contextul travaliului înainte de termen și a durerii menstruale.
Analogii heptapeptidici din această invenție au un porțiune S la capătul N-terminal al heptapeptidei și un β-aminoalcool Z la capătul C-terminal, care este considerat în cele ce urmează echivalentul formal al celui de-al șaptelea aminoacid al heptapeptidei. Radicalul S are structura:
Mpa-X-Ile-Y-Asn-Abu- (S) unde Mpa, lle, Asn și Abu au următoarele înțelesuri:
Mpa reziduu de acid 3-mercaptopropionic (denumit dezaminocisteină) lle reziduu de izoleucină
Asn reziduu de asparagină
Abu reziduu de acid a-aminobutiric;
și unde X este un D-a-aminoacid aromatic și Y este un α-aminoacid alifatic. Aminoalcoolul Z are structura:
(Z)
RO 120772 Β1 unde R este metil sau etil și
Q este-(CH2)n-NH-A, unde n este 1-6 și A este H sau -C(=NH)NH2.
Compușii din invenție pot forma săruri de adiție de acid, și aceste săruri sunt acceptabile din punct de vedere farmaceutic și sunt incluse în scopul acestei invenții.
Compușii pot fi sub formă de formulări solide sau lichide. Exemple, de asemenea, formulări includ tablete, capsule, soluții și suspensii. Alte componente ale acestor formulări pot include, de exemplu, diluanți, dispersanți, conservanți, agenți de tamponare, agenți de aromatizare și agenți de reglare a presiunii osmotice. Formulările solide suntfoarte potrivite pentru administrarea orală, în timp ce soluțiile sunt folosite pentru administrare prin injectare (i.v., i.m. sau s.c.) sau pentru administrare intranazală. Un merit particular al compușilor din invenție este că soluțiile lor sunt mai stabile la depozitare prelungită față de compușii cunoscuți în stadiul tehnicii, cu o potență comparabilă.
Produsul farmaceutic formulat este utilizat în controlul contracțiilor uterine. Două afecțiuni în care acest control este posibil sunt travaliul înainte de termen și durerile menstruale. Atunci când sunt folosite în conducerea travaliului înainte de termen, produsele pot fi utilizate ca agenți tocolitici acuți, după începerea travaliului, și ca terapie de menținere pentru prevenirea revenirii episoadelor de acest fel.
Conform prezentei invenții sunt descriși analogi heptapeptidici care prezintă activitate de antagonist de oxitocină utile din punct de vedere terapeutic și care au stabilitate îmbunătățită în mediu apos.
Analogii heptapeptidici din invenție sunt caracterizați printr-o structură care cuprinde un radical S de heptapeptidăla capătul N-terminal și un radical Z de β-aminoalcool șa capătul C-terminal. Structura β-aminoalcoolului Z este:
-NR-CH-CH2OH
I <Z)
Q unde Q este -(CH2)n-NH-A, n este 1-6 și A este H sau -C(=NH)NH2, și unde R este CH3 sau C2H5;
și radicalul S este:
Mpa - X - Ile - Y - Asn - Abu - /o\ unde Mpa, Ile, Asn și Abu au următoarele înțelesuri:
Mpa reziduu de acid 3-mercaptopropionic (denumit dezaminocisteină)
Ile reziduu de izoleucină
Asn reziduu de asparagină
Abu reziduu de acid a-aminobutiric;
și unde
X este un α-aminoacid D-aromatic; și
Y este un α-aminoacid alifatic.
Printr-un α-aminoacid aromatic se înțelege un α-aminoacid în care catena laterală include un sistem de ciclu aromatic. Un astfel de sistem poate fi carbociclic sau heterociclic, monociclic sau fuzionat. Exemple de α-aminoacizi includ (dar nu se limitează) la fenilalanină, tirosină, (O-etil)tirosină, triptofan, (P-(2-naftil)alanină și fenilglicină. Se observă faptul că reziduul X are configurația nenaturală D în compușii din invenție.
RO 120772 Β1
Printr-un α-aminoacid alifatic se înțelege un α-aminoacid în care catena laterală are 1 numai atomi de carbon și hidrogen. Astfel de catene laterale includ grupări de alchil și cicloalchil. Ele pot fi nesaturate, dar nu pot include reziduuri aromatice. Sunt incluse și catene 3 laterale cu 1 până la 12 atomi de carbon, deși numărul preferat este de 3 până la 7 atomi de carbon. Exemple de α-aminoacizi alifatici includ (dar nu se limitează la) alanină, valină, leu- 5 cină, ciclohexilglicină și adamantilalanină. Reziduul Y are configurația naturală L.
în structura radicalului S de analog hexapeptidic, linia care unește reziduurile Mpa 7 și Abu are înțelesul său convențional și înseamnă că există o legătură covalentă care unește capetele catenelor laterale ale acestor două reziduuri. în acest caz, atomul de sulf al rezi- 9 duului Mpa este unit printr-o legătură covalentă la atomul de carbon y-(sau 4 -) al reziduului Abu. 11
Radicalul Z de aminoalcool include un centru stereogenic și astfel poate exista în două forme epimerice, R și S, corespunzând izomerilor D și L ai aminoacizilor înrudiți. Ana- 13 logii heptapeptidici ai oricărui dintre acești izomeri sunt incluși în scopul acestei invenții, precum și amestecurile de epimeri. De preferință, radicalul de aminoalcool este prezent sub 15 forma unui singur epimer, și, de preferință, are configurația S. în contextul prezentei invenții, reziduul Mpa și aminoalcoolul Z sunt considerați a fi echivalenți formali ai a-aminoacizilor, 17 și compușii din invenție sunt în consecință analogi heptapeptidici.
într-o variantă preferată a prezentei invenții, X este fie un reziduu de D-triptofan, fie 19 un reziduu de p-(2-naftil)-D-alanină.
într-o altă variantă preferată a invenției, Y este un reziduu de aminoacid ales dintre 21 valină, leucină, izoleucină, aloizoleucină, ciclohexilalanină și (P-(P-dietil)alanină.
într-o altă variantă preferată a invenției, n este din domeniul 2-4. 23 într-o altă variantă și mai preferată a invenției, X este fie un reziduu de D-triptofan sau un reziduu de p-(2-naftil)-D-alanină și Y este un reziduu al uneia dintre valină, leucină, izoleu- 25 cină, aloizoleucină, ciclohexilalanină și (β, β-dietilalanină).
O variantă deosebit de preferată a invenției este un analog de peptidă ales dintre: 27 [pa - D - Trp - Ile - alolle
CH3 CH2CH2CH2NH2
Mpa - D - Trp - Ile - alolle - Asn - Abu - N — CH - CH2OH
RO 120772 Β1
CH-CH2OH ch2ch2nh2
Mpa - D - Tip - Ile - alolle - Asn - Abu - N -- CH - CH2OH
I____________________________________________________________________________________________I I I
GH3 ch2ch2ch2nh-c=nh
I nh2
Njfpa - D - Tip - Πβ - Ala(3,3 - dietil) ~ Asn - Ajbu - N — CH - CH2OH ch3 ch2ch2ch2nh2
Mpa - D - Nai — Ile - alolle - Asn - Abu - y — (jH - CH2OH CH3 Cî
CH3 CH2CH2CH2NH2
N|pa - D - Trp - Ile - Ala(3t3 - dietil) - Asn - A^bu - N — CH - CH2OH ch3 ch2ch2ch2nh2
KJpa - D - Trp - Ile - Ile - Asn - Abju - y — (jH - CH2OH ch3 b :h3 Ch2ch2ch2nh2
Mpa-D - Trp - Ile - Leu-Asn-Abu-N — CH-CH2OH
I__________________________________________________________________________________I I I ch3 ch2ch2ch2nh2
N|pa-D -Trp-Ile-Val-Asn-Abiji-bJ — Cp-CH2OH
CH3 ch2ch2ch2nh2 &|pa - D - Trp - Ile - Cha - Asn - Abp - y — CjH - CH2OH
CH3 ch2ch2ch2nh2 unde au fost folosite următoarele abrevieri:
D-Trp Alo Ile Ala(3,3-dietil) D-Nal Leu Val Cha | reziduu de D-triptofan reziduu de aloizoleucină reziduu de ((3, p-dietil)alanină reziduu de (3-(2-naftil)-D-alanină reziduu de leucină reziduu de valină reziduu de β-ciclohexilalanină. |
RO 120772 Β1
O variantă deosebit de preferată a invenției este analogul de peptidă:
N^pa - D - Nai - Uc - alolle - Asn - ήδϋ - y — (jH - CH2OH CHj CH2CH2CH2NH2
Compușii din invenție conțin o zonă bazică (amină sau guanidină) și astfel pot forma săruri cu acizi, săruri care rețin proprietățile farmacologice ale bazelor libere. în consecință, astfel de săruri sunt incluse în domeniul invenției. Exemple de astfel de săruri includ (dar nu se limitează la) clorhidrat, bromhidrat sulfat, acetat, citrat, benzoat, trifluoacetat și metansulfonat.
De asemenea, în această invenție sunt descrise compozițiile farmaceutice care includ o cantitate eficientă din punct de vedere farmacologic din cel puțin unul dintre analogii heptapeptidici de antagoniști de oxitocină descriși mai sus. Compoziția poate include, de asemenea, aditivi acceptabili din punct de vedere farmaceutic cum ar fi conservanți, diluanți, agenți de dispersie, agenți care ajută absorbția în mucoasă (exemplele sunt descrise de Merkus, F.W.H.M. și colab., J. Controlled Release 24, 201-208,1993 și care includ agenți activi de suprafață, acizi biliari, fusidați, fosfolipide și ciclodextrine), agenți detamponare și de aromatizare. Astfel de compoziții pot fi formulate în formă solidă (de exemplu, tablete, capsule sau pulberi) sau lichidă (de exemplu, sub formă de soluții sau suspensii), care aici includ și creme și unguente, pentru administare orală sau parenterală. Sunt adecvate formele de dozare pentru administrare orală (inclusiv sublinguală și bucală), intranazală, pulmonară, transdermală, rectală, vaginală, subcutanată, intramusculară și intravenoasă.
O compoziție preferată, conform invenției, este o soluție apoasă sterilă a unui analog heptapeptidic, așa cum este descris, și mai ales o soluție salină izotonică potrivită pentru administrarea intranazală sau pentru injectarea intravenoasă. Soluția poate conține un agent de tamponare pentru a menține pH-ul soluției între 3,0-7,0 și, de preferință, între 3,5-5,5. Tamponul este, de exemplu, un tampon fosfat/citrat.
O altă compoziție preferată, conform invenției, este o tabletă pentru administrarea orală. O altă formă preferată, în mod deosebit, este o tabletă care este acoperită cu o substanță care este în mare insolubilă la un pH mic cum ar fi cel din stomac, dar care se dizolvă la un pH-ul mai neutru din intestinul subțire pentru a elibera analogul de peptidă pentru absorbție.
Exemple de astfel de materiale pentru acoperirea tabletei sunt descrise în PCT/SE94/00244 și în PCT/SE95/00249, la care se face referire în această descriere.
Un alt obiect al invenției este o metodă pentru reducerea sau oprirea contracțiilor nedorite ale mușchilor uterini. Această metodă constă în administrarea la un subiect a unei cantități eficiente din unul dintre analogii heptapeptidici de antagonist de oxitocină, de preferință formulat sub forma unei compoziții așa cum este descris mai sus. Este evident faptul că descrierea invenției include, de asemenea, descrierea folosirii unuia dintre compuși și a formulărilor din invenție.
O variantă deosebit de preferată a invenției este o metodă pentru oprirea contracțiilor uterului în travaliul înainte de termen. După intervenția inițială, care implică o perioadă de 1 -3 zile, tratamentul poate fi continuat pentru a preveni o revenire a travaliului până când medicul constată că a venit momentul. Astfel, există două aspecte ale acestei variante, o utilizare acută tocolitică și o utilizare terapeutică de menținere.
O altă variantă preferată a invenției este o metodă pentru reducerea contracțiilor dureroase ale uterului asociate cu menstruația.
RO 120772 Β1
Cantitatea de analog heptapeptidic care constituie o doză eficientă din punct de vedere terapeutic depinde de un număr de factori. Calea de administrare este importantă. Cea mai eficientă cale de administrare este injectarea intravenoasă, în timp ce administrarea intranazală se așteptă să fie eficientă mai decât dozarea orală. în consecință, este nevoie de o cantitate mai mică de compus pentru o singură doză intravenoasă decât pentru o singură doză intranazală și este nevoie de mai mult compus pentru o singură doză orală. Este, de asemenea, necesar ca medicul curant să ia în considerare o serie de factori cum ar fi vârsta, greutatea și starea sănătății pacientului. De asemenea, este probabil ca în cazul durerii menstruale să fie necesar mai puțin compus decât în cazul travaliul înainte de termen. Cantitatea de compus care constituie o singură doză eficientă pentru tratamentul intravenos pentru o femeie medie care se află în travaliu înainte de termen este de la aproximativ 0,1 mg până la aproximativ 500 mg, și de preferință de la aproximativ 1 mg până la aproximativ 200 mg, pe o perioadă de 24 h.
Analogii heptapeptidici din prezenta invenție inhibă selectiv contracțiile mușchiului uterin fiind lipsit de reacții nedorite ale agonistului de oxitocină. De asemenea, aceștia au foarte puține sau nu au deloc efecte antidiuretice, hipotensive sau hipertensive, care pot fi potențiale efecte secundare ale analogilor de oxitocină și a hormonului înrudit de vasopresină. Ca putere, ei pot fi comparați cu compuși cunoscuți în domeniu, cu care seamănă în mare parte din punct de vedere structural. Diferă de compușii descriși în W095/02609, prin natura reziduului structural de la capătul C-terminal. Compușii cunoscuți au o funcție de carboxamidă (-CONH2) unde compușii din prezenta invenție au un alcool primar (-CH2OH). Compușii din prezenta invenție sunt superiori celor din WO95/ 02609 din punct de vedere al stabilității, mai ales al al stabilității în mediu apos. Acesta este în mod evident un avantaj atunci când compusul este formulat sub forma unei soluții apoase care, în consecință, va avea un termen de valabilitate mai mare și va necesita mai puțin să stea în frigider, și este, de asemenea, un avantaj în procedeele de producere și formulare, care implică perioade în care compusul este în soluție chiar dacă compoziția finală este un solid.
Deși mai sus s-a arătat faptul că, compușii din invenție sunt deosebit de utili în controlul contracțiilor mușchiului uterin, o persoană de specialitate în domeniu își va da seama că sunt posibile și alte utilizări terapeutice ale antagoniștilor de oxitocină. De exemplu, o altă țintă a acțiunii oxitocinei este glanda mamară, unde provoacă lactația. Prin urmare, compușii din invenție pot fi folosiți pentru controlarea lactației necorespunzătoare. Ei pot fi utili, de asemenea, în controlul anumitor tumori, mai ales al tumorilor mamare și al metastazelor secundare derivate din tumori mamare primare. O altă țintă terapeutică este hiperplazia prostatei. S-a sugerat, de asemenea, că oxitocină este implicată în dezvoltarea luteică și în facilitarea transportului de spermă post-coitală. De aici se poate deduce faptul că, compușii din invenție pot fi folosiți ca agenți contraceptivi sau pentru reglarea fertilității. O altă țintă periferică a oxitocinei este sistemul imun. Deci, antagoniștii de oxitocină sunt utili ca agenți imunomodulatori și antiinflamatori. Oxitocină este, de asemenea, prezentă în creier, unde s-a sugerat că are un rol în etiologia diverselor afecțiuni cum ar fi problemele erectile psihogene, schizofrenia și deficiențele neuropsihologice induse de alcool. în unele cazuri, s-a dovedit că are efect asupra comportamentului complex social. în consecință, compușii din invenție potfi folosiți ca, de exemplu, agenți anti-psihotici sau care măresc conștiența. Utilizarea compușilor din invenție în oricare dintre aceste situații terapeutice se încadrează în domeniul acestei descrieri.
în cele ce urmează, invenția va fi descrisă, în general, și cu ajutorul unor exemple specifice. Trebuie înțeles faptul că această descriere nu intenționează să limiteze domeniul invenției și că unele variații cunoscute în domeniu și care vor fi considerate echivalente de către cel care le pune în practică se încadrează, de asemenea, în scopul invenției.
RO 120772 Β1
Transformările chimice necesare pentru efectuarea sintezei compușilor din invenție 1 sunt bine cunoscute în domeniu. Tehnicile chimiei peptidelor atât în soluție, cât și pe suporturi solide, sunt deosebit de relevante. Metodele fazei în soluție sunt descrise în următoarele 3 referințe: Law, H.B. and Du Vigneaud, V., J. Am. Chem. Soc. 82,4579-4581,1960; Zhuze, A.L. și colab., Coli. Czech. Chem. Comm. 29,2648 - 2662,1964; și Larsson, L.-E. Și colab., 5 J. Med. Chem. 21, 352 - 356, 1978. Metodele în faza solidă sunt prezentate în: Merrifield, R.B., J. Am. Chem. Soc. 85, 2149, 1963; Merrifield, R.B., Biochemistiy 3, 1385, 1964; și 7 Konig, W and Geiger; R., Chem. Ber. 103,788,1970.
Procedeul folosit de inventatori este discutat mai jos în linii mari și apoi este exempli- 9 ficată în detaliu. Pentru cineva familiarizat cu practica chimiei peptidelor este evident că ordinea în care au loc unele etape poate varia. Nu este în intenția inventatorilor excluderea aces- 11 tor variații evidente din scopul invenției. Cel mai des, materia primă este un N-alchil aminoacid protejat de formula generală 1. 13
P2 (CHîlo-N-P3 (1)
P'-N-CH-COzH 19
R 21
R și n sunt aleși, în linii mari, dintre variantele descrise mai sus. P este o grupare de protejare a azotului. O variantă deosebit de preferată pentru P1 este 9-fluorenilmetil-oxicarbonil 23 (Fmoc).
Atunci când A în compusul țintă urmează să fie H atunci fie P2 este o grupare de pro- 25 tejare a azotului care se deosebește de P1 (de exemplu, benziloxicarbonil) și P3 este H sau același cu P2, sau P2 și P3 împreună sunt o grupare de protejare divalentă pentru azot (de 27 exemplu ftaloil).
Atunci când A este -C(=NH)NH2 atunci P2 este fie H, fie o grupare de protejare ca mai 29 sus și P3 este -C(=NP4)NH2, unde P4 este o grupare de protejare și este, de preferință, aceeași cu P2. Cel care va pune în practica va observa că aceste guanidine protejate pot 31 exista sub formă de tautomeri și de izomeri poziționali. Deși -(CH2)n-N(P2)P3 este definit ca 2A, izomerii 2B, 2C și 2° pot fi, de asemenea, considerați ca echivalenți ai acestei structuri 33 pentru scopurile acestei descrieri.
35 | |||
N-P | N-H | N-P | |
p H | p ϋ | P 1 -(CH2)n-N-C-NH-P | 37 |
- (CH2)n - N - C - NH2 | - (CH2)„-N - C - NH - Ρ | ||
2a | 2b | 2C |
NH-P 41 (CH2)n-N - C ~ NH —P
2D 43
Atunci când N-alchil aminoacizii protejați cu formula generală 1 nu se găsesc pe piață, ei pot fi preparați prin metodele descrise în literatură, sau prin metode analoage 45 acestora.
Presupunând că se folosesc metode în fază solidă, aminoacidul 1 este atașat la o 47 rășină corespunzătoare pentru a obține compusul 3 ca un prim intermediar.
RO 120772 Β1 (3) (CH^-N-P3 p’-N-CH-COz-flej
R unde Res reprezintă rășina polimerică.
P1 este scindat și FmocAbu (SCF2CH2CO2-Bu)OH este cuplat pentru a obține compusul 4.
t~BuO2C(CH2)2-S~(CH2)2 p2
(4)
Peptidă este extinsă prin cuplare secvențială cu FmoaAsn, FmocY, Fmoclle și apoi BocX. Atunci când X este D-Trp este bine să se protejeze azot indolului sub forma derivatul său de formil. Folosirea Boc-protecției pentru acest aminoacid permite scindarea simultană a t-butil esterului și a grupării de protejare N-terminale. în această etapă, este prezent intermediarul 5.
t - BuO2C(CH2)2 - S - (CH2)2 (CjH2)n - N - P3
Boc-X-Ile- Y - Asn-NH-CH-CO-N-CH-CO2-/tes (5)
Peptidă este scindată din rășină folosind condiții standard adecvate și apoi este esterificată, de exemplu, prin tratare cu bromură de benzii, pentru a da benzii esterul 6.
p2 t - BuO2C(CH2)2 - S - (CH2)2 (CH2)n -1 - P3
Boc —X —Ile —Y-Asn-NH —CH-CO-^-CH-CO2-CH2Ph (6) (Care poate fi scris sub forma
(6}) u-N-CH-COi-CHîPh
RO 120772 Β1
Gruparea Boc și f-butil esterul sunt scindate prin tratament cu acid și amină și grupările de acid care rezultă sunt condensate pentru a forma macrociclul. Benzii esterul este apoi redus pentru a obține alcoolul primar al compusului țintă, de exemplu prin reacția cu borohidrură de sodiu în izopropanol apos. în mod convenabil, în timpul acestei transformări poate avea loc și îndepărtarea grupelor de protejare care au mai rămas. Dacă nu este cazul, este necesară o etapă finală de deprotejare. Produsul este izolat și purificat folosind tehnici standard.
Următoarele exemple specifice se realizează conform acestei descrieri generale. Ele sunt reprezentative pentru compușii din prezenta invenție. Se folosesc următoarele abrevieri: TBTU tetrafluorborat de2-(1-H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluroniu Boc fe/j-butiloxicarbonil
Fmoc 9-fluorenilmetiloxicarbonil
TFA acid trifluoracetic
DMF dimetilformamidă
DBU 1,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-enă
Bn benzii
Om ornitină
Pht ftaloil
Aminoacizii protejați se obțin după cum urmează:
FmocAbu (SCH2CH2CO2t-Bu) preparat conform Prochazka, E., și colab., Coli. Czech. Chem. Comm. 57, 1335, 1992;
FmochTMeOrn (Pht) preparat pe o cale asemănătoare celei folosite pentru derivatul de lizină de către Freidinger, R.M. și colab., J. Org. Chem. 48, 77,1983;
Fmoc-alolle preparat conform lui Ten Kortenaar, P.B.W. și colab., Int. J. Peptide Protein Res. 27, 398, 1986;
FmocAla (3,3-dietil) preparat conform lui Eisler, K. și colab., Coli. Czech. Chem. Comm. 31, 4563, 1966;
Boc-D-Trp(CHO); Boc-D-Nai; FmocAsn; Fmoclle; FmocVal; FmocLeu; FmocCha toate din Bachem (CH și USA).
Exemplul 1
Mya - D -Trp - Ile - alolle - Asn - A^bu -jq — - CH2OH
CHj CH2CH2CH2NII2
Ia: Boc - D — Trp (CHO) — Ile - alolle — Asn — Abu - N“MeOm(Ft)OBn
SCH2CH2CO2t - Bu
Peptida este sintetizată folosind metoda în faza solidă pe rășină o—clorotitril și cu prin tehnica Fmoc. 41
Primul aminoacid, FmocNaMeOrn(Pht)OH, este atașat la rășină. Scindarea grupării
Fmoc are loc cu 2% DBU în DMF. Alte reziduuri se cuplează secvențial, terminând cu Boc-D- 43 Trp(CHO)OH. Peptida legată la rășină este tratată cu un amestec de 1:2:7 acid acetic/trifluoretanol/diclormetan, după care amestecul este filtrat, iar acesta este supus evaporării și 45 uscării prin congelare. Acidul de peptidă care rezultă este esterificat prin reacția cu bromurâ de benzii (2 ech.) și diizopropiletilamină (2,5 ech.) în DMF timp de 27 h. Solventul este eva- 47 porat și reziduul este uscat prin congelare din acid acetic.
RO 120772 Β1
Mpa - D - Trp (CHO) - Ile - alolle - Asti - Abu - NaMeOm (Pht)OBn
Gruparea Boc N-terminală și t-butil esterul din compusul cu formula la sunt scindate prin tratare cu 95%TFA/2,5% anisol/2,5% apă timp de 1,5 h la temperatura camerei. TFA-ul este evaporat și produsul este precipitat prin adăugare de dietil eter. Peptidă este ciclizată prin tratare cu TBTU (1 ech.) și N-metilmorfolină (17 ech.) în DMF la temperatura camerei. Solventul este evaporat și peptidă Ib este purificată prin cromatografie în fază inversă.
Benzii esterul Ib purificat este tratat cu NaBH4 (7 ech.) în soluție într-un amestec de izopropanol/apă (6:1) la temperatura camerei timp de 22 h sub o atmosferă de gaz inert. Se adaugă acid acetic (18 ech.) și amestecul este încălzit la 80*C timp de 6 h. Solventul este evaporat și produsul peptidic Ic (='peptidă I) este purificat prin cromatografie lichidă cu faza inversă: fază staționară; Kromasil® 13μ sau 5μ, 100 Â, C sau C9 (EKA Nobel, Suedia): fază mobilă; acetonitril/ 0,1% TFA în apă. Se obțin 14 mg produs. Spectrometria de masă (ionizare prin electropulverizare, analiza cu captare de ioni, mod pozitiv) indică o masă moleculară conformă structurii propuse (s-au găsit m/z = 830,5 [MH+]; calc, pentru [C40H63N9O8S+H+] m/z=830,5).
Exemplele 2-7. Folosind aceeași metodă ca în exemplul 1, și prin substituirea cu aminoacizii corespunzători a Boc-D-Trp(CHO)OH și Fmoc-alolleOH, se prepară peptidele enumerate în tabelul 1.
Tabelul 1
Datele de spectroscopie de masă
H - CH2OH
CH3 CHîCHzCHîNHî
Peptidă | X | Y | Spectrul de masă | |
Calc MH+ | Găsit | |||
I | D-Trp | Leu | 830,5 | 830,4 |
III | D-Trp | Val | 816,4 | 816,4 |
IV | D-Trp | Cha | 870,5 | 870,5 |
V | D-Trp | Ile | 830,5 | 830,5 |
VI | D-Trp | Alolle | 841,5 | 841,5 |
VII | D-Trp | Ala(3,3-dietil) | 844,5 | 844,5 |
Se prepară, conform metodelor descrise în W095/02069, un număr de amide peptidice de referință, pentru a compara proprietățile din prezenta invenție cu cele cunoscute în domeniu. Aceste peptide de referință sunt enumerate în tabelul 2.
RO 120772 Β1
Tabelul 2
Peptide de referință
Mpa-X- Ile-Y-Asn-Abu-y — CONH
CHj CH2CH2CH2NH2
Peptida | X | Y |
r-IX | D-Trp | alolle |
r-X | D-Trp | Val |
r-XI | D-Nal | alolle |
Exemplul 8. Folosind metoda din exemplul 1, dar substituind Na-etil-ornitina cu Nametil aminoacidul, se prepară următoarea peptidă (VIII) (găsit m/z = 855,1 calc, pentru [C41H65N9O8S+HH m/x-855,5).
- D - Nai - Ile - alolle - Asn - Abu - N — CH - CONH
CH3-CH2 CH2CH2CH2NH2
Peptida VIII
Exemplul 9. Evaluarea biologică a compușilor
Compușii din prezenta invenție pot fi testați într-un număr de sisteme biologice in vitro și in vivo. Aceste sisteme de testare sunt alese pentru a fi cât mai relevante cu putință pentru pacienții umani.
i) Testul legării receptorului de oxitocin
Receptorii umani recombinanți de oxitocin sunt exprimați fie în celule CHO, fie în celule HEK293 folosind tehnici standard de biologie moleculară. O fracțiune de membrană este preparată și incubată în prezența [1Z5l]-oxitocinei și la diferite concentrații de analog heptapeptidic. Membranele sunt apoi izolate prin filtrare și radioactivitatea lor este măsurată, pentru a determina legarea oxitocinei. Analog este determinată o constantă de inhibare Kj. Rezultatele obținute sunt prezentate în tabelul 3.
Tabelul 3
Testul de receptor al oxitocinei, constantele Kt de inhibare
Peptida | K/nM); ±SEM |
I | 0,25 ±0,16 |
II | 3,2 ± 0,75 |
III | 0,80 ± 0,30 |
IV | 7,0 ± 1,85 |
V | 0,1 ±0,0 |
VI | 2,4 ± 0,85 |
RO 120772 Β1 ii) Efectul antagonistului in vitro într-un model de uter uman
Țesut de mușchi, de la uterul femeii în ultima etapă a sarcinii, care suferă o secțiune Cezariană, este tăiat în fâșii care sunt montate într-o baie de țesut umplută cu tampon KrebsRinger și sunt oxigenate cu gaz carbogen (95% O2+5% CO2). Schimbările în tensiunea izometrică a mușchiului detectate cu un traductor de tensiune sunt înregistrate cu un poligraf Grass. Este înregistrată curba concentrație-efect pentru oxitocină. Efectul măsurat în acest caz corespunde valorii nete a curbei integrate a contracțiilor timp de 10 min după administrarea agonistului (adică oxitocină). Este selectată o concentrație de oxitocin care dă cel puțin jumătate din răspunsul maxim. Această concentrație de agonist este administrată țesutului în prezența a diferite concentrații de analog heptapeptidic de antagonist și răspunsul este înregistrat. Concentrația de antagonist necesară pentru a reduce răspunsul la 50% din valoarea sa de control este determinată prin analiza regresiei și este dată aici ca o valoare IC50. [valoare IC50=concentrația antagonistului necesară pentru a reduce efectul unei doze date de agonist cu 50%]. Rezultele sunt prezentate în tabelul 4.
Tabelul 4
Inhibarea efectului agonistului (model de uter)
Peptida | IC50, model de uter uman (nM) |
I | 5±1 |
r-VIII | 18±3 |
iii) Model de șobolan in vivo
Șobolanii Sprague Dawley (cca 250 g) în estru natural sunt anesteziați cu Inactin (0,5 mg/100 g din greutatea corpului, i.p.). Activitatea miometriumului este măsurată cu ajutorul unui cateter fixat în cavitatea uterină și umplut cu soluție Lockes modificată. Cateterul este conectat la un traductor de forță P23d Statham și contracțiile sunt înregistrate cu un poligraf Grass (model 7D).
Este înregistrată curba de răspuns la doză de oxitocină (2x10J’-5x10'3pmol/kg). în acest caz răspunsul este cuantificat prin integrarea curbei pe perioada celor 15 min după injectarea agonistului. Este selectată o doză de oxitocină, care dă un efect corespunzător la o contracție intralumenară cu presiunea 10-30 mm Hg și în secțiunea liniară a curbei. Această doză de oxitocină este administrată animalului împreună cu cel puțin două doze de antagonist și este înregistrat efectul. Doza de antagonist care reduce efectul agonistului până la 50% din valoarea sa de control este determinată prin interpolare și este dată aici ca valoare ID50. [Valoare ID50=doza de antagonist necesară pentru a reduce efectul unei doze date de agonist cu 50%]. Rezultatele sunt prezentate în tabelul 5.
în acest model este determinată, de asemenea, durata de acțiune a antagoniștilor. Este selectată o doză de oxitocină (2x10 4-5x10-3pmol/kg) care dă un efect care corespunde cu jumătate din efectul maxim (această doză este ED50). Efectul determinat este același ca pentru determinarea de ID50 definită mai sus. Este selectată o doză de antagonist (8x10 44x10 3pmol/kg) astfel încât să dea o inhibare de cel puțin 50% a răspunsului la agonist. La începutul experimentului, erau co-administrate doze unice de agonisiși antagonist. La intervale de 20 de min după administrare, se administrau numai doze de agonist și răspunsul era măsurat. Timpul necesar pentru ca inhibarea efectului agonistului să scadă la 25% din valoarea inițială este determinat prin interpolare și este dată aici ca valoarea t75. [Valoarea t75=perioada de timp necesară pentru ca eficiența unei doze unice să scadă cu 75%]. Rezultatele sunt prezentate în tabelul 5.
RO 120772 Β1
Tabelul 5 1
Inhibarea efectului agonistului (model de șobolan in-vivo)
Peptidă | ICgo, model de șobolan (nmol/kg) | t75 model de șobolan (min) |
I | 2,9 ±0,3 | 169 ±2 |
r-IX | 2,9 ±0,3 | 180 ±9 |
Reiese în mod evident din rezultatele prezentate în tabele 3-5 faptul că, compușii din 7 prezenta invenție sunt cel puțin la fel de buni precum compușii dinaintea lor pe modelul șobolan, atât din punct de vedere al potenței, cât și al duratei de acțiune, și că sunt superiori 9 compușilor precedenți pe modelul uman superior.
Exemplul 10. Formulări farmaceutice11
Soluție în ser izotonic tamponat pentru injectare i.v.
Se prepară următoarele soluții:13
Soluția A (0,02 M acid citric)15
Monohidrat de acid citric..............................................0,42 g
Apă distilată ad.....................................................100 ml17
Soluția B (0,04 M fosfat acid disodic)19
Na2HPO4-2H2O....................................................0,712g
Apă distilată ad.....................................................100 ml21
La 27 ml de soluție A se adaugă 23 ml de soluție B, 0,81 g de NaCI și 0,322g peptidă I acetat. pH-ul este ajustat la 4,5 cu soluția A, după care se adaugă apă distilată pentru a ajunge la un volum total de 100 ml. în final, amestecul este filtrat prin 0,22 pm de SterivexGV. Aceasta duce la obținerea unei soluții izotonice care conține 0,3 mg/ml de peptidă I (calculată ca bază liberă) corespunzătoare pentru injectarea intravenoasă.
Tablete pentru administrarea orală
Se combină următoarele componente:
Peptidă 1 acetat...................................................108mg
Manitol ............................................................7,7g
Lactoză............................................................6,0g
Celuloză microcristalină...............................................6,0g
Carboximetil celuloză reticulată ....................................... 200mg
Talc............................................................. 800mg
Stearat de magneziu ............................................... 200mg
PolivinilpirolidonăV etanol....................................... Pentru legare
Amestecul este turnat sub formă de tablete folosind metode standard. Amestecul este39 suficient pentru a prepara 100 de tablete care conțin fiecare 1 mg de peptidă 1 (calculată ca bază liberă).41
Tabletă enterică pentru administrarea orală din tabletele menționate mai sus sunt acoperite prin pulverizare cu 100 mg de 43 ftalat de acetat de celuloză (4 mg pentru fiecare tabletă).
Este, de asemenea, utilă în invenție compoziția descrisă în WO 95/25534 în care 45 agentul activ (de exemplu, desmopresin) poate fi substituit de compușii conform prezentei
RO 120772 Β1 invenții. Adaptarea compoziției pentru a se putea lucra cu cantități mai mari de agenți activi necesari pentru a fi încorporați în tabletă poate fi ușor făcută de către un specilist în domeniu.
Exemplul 11. Evaluarea stabilității
Soluțiile de analogi de heptapeptidă din prezenta invenție se prepară cu compoziții reprezentative de formulări apoase. Soluțiile se țin timp de câteva săptămâni la 50’C și se extrag periodic alicoți pentru analiză prin HPLC. Peptidele de referință sunt studiate în paralel. Degradarea este determinată ca pierdere de peptidă (% în greutate pe săptămână), independent de natura produșilor de descompunere. Rezultatele sunt prezentate în tabelul 6.
Tabelul 6
Test de stabilitate
Peptida | Compoziția soluției de test | Degradarea la 50*C (greut. % săptămână) |
I | Tampon izotonic citrat/fosfat, pH 4,5 | 0,4 |
r- IX | Ca mai sus | 2,9 |
III | Ca mai sus | 0,7 |
r-X | Ca mai sus | 4,3 |
VI | Ca mai sus | 1.2 |
r-XI | Ca mai sus | 4,0 |
Rezultatele prezentate mai sus indică, in mod clar faptul că, compușii din invenție sunt mai stabili în soluție decât compușii descriși în stadiul tehnicii. în practică, această stabiliate mărită indică faptul că formulările apoase au un termen de valabilitate mai mare și au mai mică nevoie de a fi ținuți la rece. Pe lângă economiile care rezultă, există beneficii atât din punct de vedere al siguranței, cât și al convenabilității, deoarece nevoia de a prepara doze individuale imediat înaintea administrării este mult scăzută.
Procedeul de producere este, de asemenea, avantajos, deoarece compușii vor fi mult mai rezistenți la descompunere în timpul și după purificare.
Claims (9)
1. Analog de heptapeptidă, caracterizat prin aceea că are activitate de antagonist de oxitocină și care constă dintr-un radical S de hexapeptidă și un reziduu de Z de β-aminoalcool C-terminal legat la partea S printr-o legătură amidică, unde β-aminoalcoolul Z este:
-nr-ch-ch2oh
I (Z)
Q unde Q este (CH2)-NH-A, n este 1...6, și A este H sau -C(=NH)NH2, și unde R este CH3 sau C2H5;
și radicalul S este
Mpa-X^Ile-Y-Asn-Abu- (S)
RO 120772 Β1 unde Mpa, lle, Asn și Abu au următoarele înțelesuri Mpa reziduu de acid 3-mercaptopropionic (denun lle reziduu de izoleucină
Asn reziduu de asparagină
Abu reziduu de acid a-aminobutiric;
și unde
X este un α-aminoacid D-aromatic; și reziduu de acid 3-mercaptopropionic (denumit desaminocisteină) reziduu de izoleucină reziduu de asparagină reziduu de acid a-aminobutiric;
Y este un α-aminoacid alifatic.
2. Analog de heptapeptidă conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că X este9 reziduul aminoacil al D-triptofanului sau p-(2-naftil)-D-alaninei.
3. Analog de heptapeptidă conform revendicării 2, caracterizat prin aceea că Y este11 reziduul amino acil al uneia dintre valină, leucină, izoleucină, aloizoleucină, ciclohexilalanină, β, β-dietilalanină sau ciclohexilglicină.13
4. Analog de heptapeptidă conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că Y este reziduul amino acil al uneia dintre valină, leucină, izoleucină, aloizoleucină, ciclohexilalanină,15 β, β-dietilalanină sau ciclohexilglicină.
5 unde Μ este (CH2)n-N(Pht) sau -(CH2)n-N(P)-C(=NP)NP2 în care una sau două dintre grupările P sunt grupări de protejare a azotului și restul sunt hidrogen, n este 1...6 și R1 este
5. Analog de heptapeptidă conform revendicării 4, caracterizat prin aceea că n este 17 2, 3 sau 4.
6. Analog de heptapeptidă conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că n este 19 2, 3 sau 4.
7 CH3 sau C2H5, folosind o sare borhidrură sau o borhidrură substituită sau boran.
7. Analog de heptapeptidă conform revendicării 6, caracterizat prin aceea că X este 21 reziduul amino acil al D-triptofanului sau p-(2-naftil)-D-alaninei.
8. Analog de heptapeptidă conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că X este 23 reziduul de amino acil al D-triptofanului sau β-(2-η3ίΙΐΙ)-0-3ΐ3ηΐηβΐ, Y este reziduul amino acil al uneia dintre valină, leucină, izoleucină, aloizoleucină, ciclohexilalanină, β, β-dietilalanină 25 sau ciclohexilglicină și π este 2, 3 sau 4.
9. Analog de heptapeptidă conform revendicării 8, caracterizat prin aceea că este 27 ales dintre:
CHj CH2GH;CH2NHî
Ile-al loIle'Asn-Abu-N---CH-CHjOH
C»3 C!f2CH2CH2CIl?Nn3
Mpa-D-Trp-Ile-alloIie-Asn-Abu-N---CH-CHaOH
CHs CHjCHîNHî
RO 120772 Β1
Hpa-D-Trp-Ile-alloIle-Asn-Abu-N---CH-CHzOH
Ϊ------------------------------------------------------1 | |
CH) CH2CH2CH2NH-C-NH
I nh2
M^a-D-Trp-Ile-Ala(3, 3-dlethyl)-Asn-Abu-N---CH-CHjOH
CH) CH2CH2CH2NH2
Mpa-D-Nal-Ile-alloIle-Asn-Abu-N---CH-CH2OH ~---------------------------------i I I
CHj CHîCKiCHjNHa
Mya-D-Nal-Ile-Ala(3,3-diethyl) -Agn-Abu-N---CH-CHtOH
CK3 CH2CH2CHjNH2 ch-ch2oh
I
CH) CH2CH2CH2NH2
Mpa-D-Irp-Ile-Leu-Asn-Abu-N---CH-CH2OH î------------------------------------------1 I J
CHj CHîCHaCH2Nliz
Mpa-D-Trp-Ile-Val-Asn-AbU-N—CH-CH2QH
Ϊ------------------------------------------1 | |
CH) CH2CHzCH2NH2 a-D-Trp-Ile-Cha-Asn-Abu-N---CH-CHjOH
CH, CHaCHzCHîNHî
10. Analog de heptapeptidă conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că are structura:
Mpa-D-Trp-Ile-alloIle'Asn-Abu-N---CH-CH2OH t------------------------------------------------------1 I |
CH, CHîCHiCH^NHî
11. Analog de heptapeptidă conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că, are structura:
Mpa-n-Ttp-Ile-al]ol 1e-Asn-Abu-N---CH-CH2OH
I------------------------------------------------------1 | |
CHj CHjCHzOhCHîNHj
RO 120772 Β1
12. Analog de heptapeptidă conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că are 1 structura:
CHj
13. Analog de heptapeptidă conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că are structura:
14. Analog de heptapeptidă conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că are structura:
I le-alloIle-Asn-Abu-N—CH-CHjOH
CH, CH,CH2CH2NH?
15. Compoziție farmaceutică, caracterizată prin aceea că,cuprinde o cantitate eficientă din punct de vedere farmacologic dintr-un analog de heptapeptidă definit în revendi- 21 carea 1 și un purtător acceptabil farmaceutic.
16. Compoziție farmaceutică, conform revendicării 15, caracterizată prin aceea că 23 este o soluție apoasă pentru administrare nazală, subcutanată sau intravenoasă.
17. Compoziție farmaceutică, conform revendicării 15, caracterizată prin aceea că 25 purtătorul include un agent de tamponare.
18. Compoziție farmaceutică, conform revendicării 15, caracterizată prin aceea că 27 este sub formă de tabletă, capsulă, granule și similarele pentru administrare orală.
19. Compoziție farmaceutică, conform revendicării 15, caracterizată prin aceea că, 29 cuprinde un amestec intim între un analog de heptapeptidă sau o sare a acestuia și aditivul, învelit cu o acoperire enterică, în particular o acoperire enterică care nu este ușor solubilă 31 la pH 5,0 sau mai mic.
20. Utilizare a unui analog de heptapeptidă definit în revendicarea 1, pentru fabrica- 33 rea unui medicament pentru reducerea sau blocarea contracției mușchiului uterin.
21. Utilizare a compoziției definite în revendicarea 15, pentru fabricarea unui medi- 35 cament pentru reducerea sau blocarea contracției mușchiului uterin.
22. Utilizare conform revendicării 21, în care contracția mușchiului uterin este aso- 37 ciată cu travaliul dinainte de termen.
23. Utilizare conform revendicării 21, în care contracția mușchiului uterin este aso- 39 ciată cu durerile menstruale.
24. Utilizare a unui analog de heptapeptidă definit în revendicarea 1, pentru tratarea 41 neoplaziilor și a hiperplaziilor, a schizofreniei, a dereglărilor de comportament, a disfuncției erectile, a inflație și a eliberării necorespunzătoare de lapte sau cu agent pentru creșterea 43 percepției, agent imunomodulator și pentru reglarea fertilității.
25. Procedeu pentru prepararea unui analog de heptapeptidă definit în revendi- 45 carea 1, caracterizat prin aceea că.cuprinde etapa de reducere a unui compus corespunzător în care Z este: 47
RO 120772 Β1
-NRx~CH-CO-OBn I
Μ (Y)
9 26. Procedeu conform revendicării 25, caracterizat prin aceea că borhidrură este
NaBH4.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SE9604341A SE9604341D0 (sv) | 1996-11-26 | 1996-11-26 | Hepta-peptide oxytocin analogue |
PCT/SE1997/001968 WO1998023636A1 (en) | 1996-11-26 | 1997-11-21 | Heptapeptide oxytocin analogues |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RO120772B1 true RO120772B1 (ro) | 2006-07-28 |
Family
ID=20404757
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RO99-00593A RO120772B1 (ro) | 1996-11-26 | 1997-11-21 | Analogi de heptapeptidă, compoziţie farmaceutică care îi conţine şi procedeu de preparare a acestora |
Country Status (35)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US6143722A (ro) |
EP (1) | EP0938496B1 (ro) |
JP (1) | JP3405460B2 (ro) |
KR (1) | KR100463132B1 (ro) |
CN (1) | CN1129606C (ro) |
AR (1) | AR008531A1 (ro) |
AT (1) | ATE242264T1 (ro) |
AU (1) | AU713424B2 (ro) |
BR (1) | BR9713366B1 (ro) |
CA (1) | CA2272990C (ro) |
CZ (1) | CZ299532B6 (ro) |
DE (1) | DE69722651T2 (ro) |
DK (1) | DK0938496T3 (ro) |
EE (1) | EE03832B1 (ro) |
ES (1) | ES2203823T3 (ro) |
HK (1) | HK1022481A1 (ro) |
HR (1) | HRP970630B1 (ro) |
HU (1) | HU228568B1 (ro) |
IL (1) | IL129519A (ro) |
LT (1) | LT4650B (ro) |
LV (1) | LV12350B (ro) |
MY (1) | MY125555A (ro) |
NO (1) | NO321380B1 (ro) |
NZ (1) | NZ336445A (ro) |
PL (1) | PL189292B1 (ro) |
PT (1) | PT938496E (ro) |
RO (1) | RO120772B1 (ro) |
RU (1) | RU2180668C2 (ro) |
SE (1) | SE9604341D0 (ro) |
SI (1) | SI20026B (ro) |
SK (1) | SK283800B6 (ro) |
TR (1) | TR199901028T2 (ro) |
UA (1) | UA54459C2 (ro) |
WO (1) | WO1998023636A1 (ro) |
ZA (1) | ZA9710518B (ro) |
Families Citing this family (33)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2181297C2 (ru) | 2000-06-20 | 2002-04-20 | Эпштейн Олег Ильич | Способ лечения патологического синдрома и лекарственное средство |
US6476072B1 (en) * | 2000-11-21 | 2002-11-05 | Arthur Vanmoor | Method of treating menstrual pain by enhancing the effectiveness of the human immune system |
DE60309847T2 (de) * | 2002-02-27 | 2007-10-18 | Ferring B.V. | Zwischenprodukte und verfahren zur herstellung von heptapeptid-oxytocinanaloga |
EP1504268A2 (en) * | 2002-05-02 | 2005-02-09 | Bayer HealthCare AG | Diagnostics and therapeutics for diseases associated with oxytocin receptor (oxtr) |
GB0210397D0 (en) | 2002-05-07 | 2002-06-12 | Ferring Bv | Pharmaceutical formulations |
UA76639C2 (uk) * | 2002-08-02 | 2006-08-15 | Олєг Ільіч Епштєйн | Гомеопатичний лікарський засіб та спосіб лікування еректильних дисфункцій |
EP1530967B1 (en) * | 2003-11-13 | 2006-05-03 | Ferring B.V. | Blister pack and solid dosage form comprising desmopressin |
EP1555029A1 (en) | 2004-01-19 | 2005-07-20 | Ferring B.V. | Use of substances having oxytocin antagonistic properties for the preparation of a medicament for treating hypertension |
US20060171909A1 (en) * | 2005-02-03 | 2006-08-03 | The Procter & Gamble Company | Cosmetic compositions comprising colorants with low free dye |
SE528446C2 (sv) * | 2006-03-02 | 2006-11-14 | Ferring Int Ct Sa | Farmaceutisk sammansättning innefattande desmopressin, kiseldioxid och stärkelse |
KR101522747B1 (ko) | 2007-08-06 | 2015-05-26 | 알레간 인코포레이티드 | 데스모프레신 약물 전달을 위한 방법 및 장치 |
NZ587817A (en) * | 2008-03-31 | 2012-05-25 | Ferring Bv | Oxytocin analogues |
LT2712622T (lt) | 2008-05-21 | 2016-09-26 | Ferring B.V. | Burnoje disperguojamas desmopresinas, skirtas nikturijos netrikdomo miego pirminio periodo pailginimui |
US11963995B2 (en) | 2008-05-21 | 2024-04-23 | Ferring B.V. | Methods comprising desmopressin |
US20100286045A1 (en) | 2008-05-21 | 2010-11-11 | Bjarke Mirner Klein | Methods comprising desmopressin |
TWI463990B (zh) * | 2009-09-21 | 2014-12-11 | Ferring Bv | 催產素受體促進劑 |
AU2011278038B2 (en) | 2010-07-15 | 2017-02-02 | Oleg Iliich Epshtein | A method of increasing the effect of an activated-potentiated form of an antibody |
JO3400B1 (ar) * | 2010-09-30 | 2019-10-20 | Ferring Bv | مركب صيدلاني من كاربيتوسين |
ES2742299T3 (es) | 2011-03-09 | 2020-02-13 | Jitsubo Co Ltd | Nuevos péptidos entrecruzados que contienen una estructura entrecruzada no peptídica, método para sintetizar péptidos entrecruzados y nuevo compuesto orgánico utilizado en el método |
CN102875650B (zh) * | 2012-09-26 | 2014-06-11 | 深圳翰宇药业股份有限公司 | 巴卢西班的制备方法 |
US9365615B2 (en) | 2013-09-09 | 2016-06-14 | Jitsubo Co., Ltd. | Cross-linked peptides containing non-peptide cross-linked structure, method for synthesizing cross-linked peptides, and novel organic compound used in method |
EP3037101B1 (en) | 2014-12-22 | 2019-03-06 | Ferring B.V. | Oxytocin receptor antagonist therapy in the luteal phase for implantation and pregnancy in women undergoing assisted reproductive technologies |
US9750785B2 (en) | 2015-01-30 | 2017-09-05 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US9744209B2 (en) | 2015-01-30 | 2017-08-29 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US9687526B2 (en) | 2015-01-30 | 2017-06-27 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US9937223B2 (en) | 2015-01-30 | 2018-04-10 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US9744239B2 (en) | 2015-01-30 | 2017-08-29 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US9925233B2 (en) | 2015-01-30 | 2018-03-27 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
EP3359557A1 (en) | 2015-10-06 | 2018-08-15 | Ferring B.V. | New methods for making barusiban and its intermediates |
RS63286B1 (sr) | 2016-01-04 | 2022-06-30 | ObsEva SA | Istovremeno davanje alfa-amino estra hidroksipropiltiazolidin karboksamidnog derivata i tokolitičkog agensa |
MX2019000498A (es) | 2016-07-21 | 2019-09-16 | ObsEva SA | Regímenes de dosis de antagonista de oxitocina para promover la implantación embrionaria y prevenir abortos espontaneos. |
WO2021043726A1 (en) | 2019-09-03 | 2021-03-11 | ObsEva S.A. | Oxytocin antagonist dosing regimens for promoting embryo implantation and preventing miscarriage |
EP4103750A1 (en) | 2020-02-10 | 2022-12-21 | ObsEva S.A. | Biomarkers for oxytocin receptor antagonist therapy |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2036973A1 (en) * | 1990-02-27 | 1991-08-28 | Mark G. Bock | Cyclic hexapeptide oxytocin antagonists |
SE9002384D0 (sv) * | 1990-07-09 | 1990-07-09 | Ferring Ab | Derivat av baklobshormoner |
SE501678C2 (sv) * | 1993-07-13 | 1995-04-10 | Ferring Bv | Peptid med oxytocinantagonistaktivitet samt farmaceutisk komposition innehållande nämnda peptid |
SE523819C2 (sv) | 1994-01-27 | 2004-05-18 | Per-Ingvar Nilsson | Accelerationsmunstycke samt metod för dess användning |
SE9400918L (sv) | 1994-03-18 | 1995-09-19 | Anne Fjellstad Paulsen | Stabiliserad komposition för oral administrering av peptider |
SE9500249L (sv) | 1995-01-25 | 1996-03-25 | Valeo Engine Cooling Ab | Värmeväxlartank med ändstycken, förfarande för framställning av en sådan tank, samt värmeväxlare försedd med en sådan |
-
1996
- 1996-11-26 SE SE9604341A patent/SE9604341D0/xx unknown
-
1997
- 1997-11-21 NZ NZ336445A patent/NZ336445A/en not_active IP Right Cessation
- 1997-11-21 HR HR970630A patent/HRP970630B1/xx not_active IP Right Cessation
- 1997-11-21 TR TR1999/01028T patent/TR199901028T2/xx unknown
- 1997-11-21 SI SI9720076A patent/SI20026B/sl unknown
- 1997-11-21 DE DE69722651T patent/DE69722651T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1997-11-21 JP JP52460298A patent/JP3405460B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1997-11-21 CN CN97180014A patent/CN1129606C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1997-11-21 AT AT97946210T patent/ATE242264T1/de active
- 1997-11-21 SK SK704-99A patent/SK283800B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1997-11-21 PL PL97333876A patent/PL189292B1/pl unknown
- 1997-11-21 ES ES97946210T patent/ES2203823T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1997-11-21 IL IL12951997A patent/IL129519A/en not_active IP Right Cessation
- 1997-11-21 AU AU51429/98A patent/AU713424B2/en not_active Expired
- 1997-11-21 HU HU0000577A patent/HU228568B1/hu unknown
- 1997-11-21 PT PT97946210T patent/PT938496E/pt unknown
- 1997-11-21 RO RO99-00593A patent/RO120772B1/ro unknown
- 1997-11-21 EE EEP199900210A patent/EE03832B1/xx unknown
- 1997-11-21 BR BRPI9713366-3A patent/BR9713366B1/pt not_active IP Right Cessation
- 1997-11-21 EP EP97946210A patent/EP0938496B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-11-21 KR KR10-1999-7004449A patent/KR100463132B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1997-11-21 CA CA002272990A patent/CA2272990C/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-11-21 RU RU99113364/04A patent/RU2180668C2/ru active
- 1997-11-21 UA UA99042410A patent/UA54459C2/uk unknown
- 1997-11-21 ZA ZA9710518A patent/ZA9710518B/xx unknown
- 1997-11-21 WO PCT/SE1997/001968 patent/WO1998023636A1/en active IP Right Grant
- 1997-11-21 US US09/308,912 patent/US6143722A/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-11-21 CZ CZ0183299A patent/CZ299532B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1997-11-21 DK DK97946210T patent/DK0938496T3/da active
- 1997-11-25 MY MYPI97005691A patent/MY125555A/en unknown
- 1997-11-26 AR ARP970105543A patent/AR008531A1/es active IP Right Grant
-
1999
- 1999-04-30 LV LVP-99-77A patent/LV12350B/en unknown
- 1999-05-11 LT LT99-052A patent/LT4650B/lt not_active IP Right Cessation
- 1999-05-26 NO NO19992532A patent/NO321380B1/no not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-03-07 HK HK00101422A patent/HK1022481A1/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RO120772B1 (ro) | Analogi de heptapeptidă, compoziţie farmaceutică care îi conţine şi procedeu de preparare a acestora | |
US5470947A (en) | CHRH antagonists with low histamine release | |
US20030040482A1 (en) | LHRH antagonist peptides | |
PT682524E (pt) | Composicoes farmaceuticas que contem a proteina bactericida indutora da permeabilidade e um agente tensioactivo | |
SK285381B6 (sk) | Peptid antagonistický k hormónu uvoľňujúcemu gonadotropín (GnRH), farmaceutický prostriedok s jeho obsahom, jeho použitie a medziprodukt | |
US5620959A (en) | Bombesin antagonists | |
KR20000076211A (ko) | 택산과 조합된 돌라스태틴-15 유도체 | |
EP0683792A1 (en) | Lhrh antagonists having modified aminoacyl residues at postions 5 and 6 | |
WO1992002545A1 (en) | Bombesin antagonists | |
AU8225191A (en) | Derivatives of pituitary posterior lobe hormones | |
KR0142195B1 (ko) | 고나도리베린의 경쟁적 길항제 | |
TW386086B (en) | Heptapeptide oxytocin analogues | |
CZ9896A3 (en) | Peptide suppressing oxytocin activity | |
CZ993A3 (en) | derivatives of neurohypophysis lobe hormones | |
AU3130100A (en) | LHRH antagonist peptides |