SE469630B - Karbapenem-antibiotika - Google Patents

Description

469 630 2 vari Rö, Rs och R? oberoende av varandra är H eller substituerad eller osubstitue- rad alkyl, alkenyl, alkynyl, cykloalkyl, cykloalkenyl, cykloalkenylalkyl, cykloalkyl- alkyl, aryl, aralkyl, heteroaryl eller heteroaralkyl, avslöjas i den amerikanska patentskriften 4 235 920. Bland de föreningar som avslöjas i den amerikanska patentskriften 4 235 920 är föreningen E! EQ 2 :mapp r 4"-H O C002 vari A är en farmaceutiskt godtagbar anj on. Ovannämnda kvartära aminderivat beskrives även i Recent Adwgrances in Clgemistgv of ß-Lactagåntibiotici, London, 1981, sid. 240-254, där dess antibakteriella aktivitet anges vara i genomsnitt ca 1/2 till 2/3 av thienamycins aktivitet.

Föreningar med formeln Ä \\_ vari gruppen R som är bunden till amínokvävegruppen i thienamycin representerar en mono- eller polycyklisk N -haltig heterocyklisk grupp och R är väte, substituerad eller osubstituerad alkyl, aryl, alkenyl, heterocykloalkenyl, aralkenyl, heterocykloalkyl, aralkyl, NRg, COOR, CONRZ, -OR eller CN, avslöjas i europapatentansökan nr 21082.

Europapatentansökan 40 408 avslöjar föreningar med formeln a: a: ä. 3 469 650 vari RI är väte, metyl eller hydroxyl och Rsl är en envärd organisk grupp, som bland annat innefattar heterocyklylalkyl.

Europapatentansökan 38869 avslöjar föreningar med formeln RLWPF f-Rïfiooa vari RÖ, R7 och Rs oberoende av varandra är väte eller substítuerad och osubsti- tuerad alkyl, alkenyl eller alkynyl med 1-10 kolatomer; cykloalkyl, cykloalkylalkyl eller alkylcykloalkyl med 3-6 kolatomer i cykloalkylringen och 1-6 kolatomer i alkylgrupperna; aryl såsom fenyl; aralkyl, aralkenyl eller aralkynyl där arylgrup- pen är fenyl och den alífatiska delen innehåller 1-6 kolatomer; heteroaryl, heteroaralkyl, heterocyklyl eller heterocyklylalkyl; varvid substítuenten eller substítuenterna på ovannämnda grupper utgöres av -Xo halo (klor, brom, fluor) -OH hydroxi -OR1 alkoxi , aryloxi 0 u' 1 2 -CNR R karbamoyloxi O -CNRIRZ karbamoyl -NRl Rz amino NR1 K amidino NR1R2 RI -NO nitro 2 9 469 630 4 -N(R1) trisubstituerad amino (RAI-grupperna väljes oberoende av varandra) R1 -C=NOR2 oximino -SR1 alkyl- och aryltio -SOZNRT Rz sulfonamido 0 H 1 2 .

-NHCNR R ure :Ldo O ll Rlcnaz- amido -CO2H karboxi -C02R1 karboxylat O u 1 -CR acyl O u 1 -OCR acyloxi -SH merkapto O H -SR1 alkyl- ooh arylsulfinyl O i! -sal I! O -CN cyano alkyl- och arylsulfonyl -N 3 az ido där Rl och R2 oberoende av varandra är väte, alkyl, alkenyl eller alkynyl med 1- .10 kolatomer; cykloalkyl, cykloalkylalkyl eller alkylcykloalkyl med 3-6 kolatomer i cykloalkylringen och 1-6 kolatomer i alkylgrupperna; aryl såsom fenyl; aralkyl, aralkenyl eller aralkynyl där arylgruppen är fenyl och den alífatiska delen innehåller 1-6 kolatomer: heteroaryl, heteroaralkyl, heterocyklyl eller hetero- cyklylalkyl; och där heteroatomen eller heteroatomerna i ovannämnda heterocyk- líska grupper utgörs av l-4 syre-_. kväve- eller svavelatomer och där de alkylgmp- per som är förknippade med nämnda heterocyklíska grupper innehåller 1-6 kolatomer. (Se även europapatentansökningarna 1627, 1628, 10317, 17992, 37080, 4 6 9 6 3 0 37081 och 37082).

Vid the Gordon Research Conference i medicinsk kemi som hölls i New London, New Hampshire den 2-6 augusti 1982 utdelades en stencil, där en mångfald karbapenem-antibiotika avlöjades. Bland de föreningar som avslöjades på sid. 9 i stencilen är karbapenemen med formeln - H x- E a s l _ - ' x .

Ovannämnda karbapenem-derívat avslöjas på sid. 145 i europapatentansökan 38869 och på sid. 252 i europapatentansökan 17992.

Det amerikanska patentet 4 309 346 avslöjar karbapenem-derivat med 2- substituenter med formeln -sR8 där Rs bland annat kan vara heteroaralkyl, i vilken heteroatomen eller hetero- atomerna kan utgöras av 1-4 syre-, kväve- eller svavelatomer. Någon sulfonium- grupp, vilken är närvarande i föreningarna enligt föreliggande uppfinning, avslöjas ej.

Europapatentansökan 10317 (se även det amerikanska patentet 4 232 036) avslöjar karbapenem-foreningar med den allmänna formeln r” vari R° är väte eller -SR8g RI, Rö. E? och RS oberoende av varandra är väte (Rl är ej väte), substituerad eller osubstituerad alkyl, alkenyl eller alkynyl med 1-10 kolatomer; cykloalkyl, cykloalkylalkyl eller alkylcykloalkyl med 3-6 kolatomer i cykloalkylringen och 1-6 kolatomer i alkylgrupperna; fenyl; aralkyl, aralkenyl 469 630 6 eller aralkynyl, där arylgruppen är fenyl och alkylkedjan innehåller 1-6 kol- atomer; heteroaryl, heteroaralkyl, heterocyklyl eller heterocyklylalkyl, varvid substituenten eller substituenterna utgörs av amíno, mono-, di- eller trialkyl- amino, hydroxyl, alkoxyl, merkapto, alkyltio, fenyltio, sulfamoyl, amidino, guanidino, nitro, klor, brom, fluor, cyano eller karboxi och varvid heteroatomen eller heteroatomerna i ovannämnda heterocykliska grupper utgörs av 1-4 syre-, kväve- eller svavelatomer och varvid alkylgrupperna i ovannämnda substituenter innehåller 1-6 kolatomer.

Den brittiska patentansökan 2 119 37 1A avslöjar karbapenem- antibiotika, vilka utmärkes av en 2i-substituent med formeln CB -s-A-a e ) vari A representerar cyklopentylen, cyklohexylen eller CZ-CG-alkylen eventuellt substituerad med en eller flera Cl-C4-alkylgrupper och (-9 N ) representerar en kvartärniserad kvävehaltig aromatisk heterocykel.

Den brittiska patentansökan 2 122 196A avslöjar karbapenem-antibiotika, som utmärkes av en Z-substituent med formeln RS illa, vari A representerar cyklopentylen, cyklohexylen eller Cz-Cö-alkylen eventuellt substituerad med en eller flera C1-C4-alkylgrupper; R5 representerar antingen (a) en eventuellt substítuerad alifatisk, cykloalifatisk eller cykloalifatisk-alifatisk grupp, en arylgrupp, en aralifatisk grupp, en heteroarylgrupp, en heteroaralifa- tisk grupp, en heterocyklylgrupp eller en heterocyklyl-alifatisk grupp eller (b) en tvåvärd fenylen- eller Cl-Clfalkylengrupp förenad med ringen 6) »o 7 469 650 så att det bildas en överbryggad polycyklísk grupp; och G3 »O representerar en kvartärniserad kvävehaltig ícke-aromatísk heterocykel.

Den brittiska patentansökan 2 128 187A avslöjar karbapenem-antibiotika, som utmärkes av en 2-substituent med formeln G) -s-A-CN-as vari A representerar en rak- eller grenkedjig Cl-Cö-alkylengzupp; H5 represente- rar en eventuellt substituerad alifatisk, cykloalífatisk, cykloalifatisk-alifatisk, aralifatisk, heteroaralifatísk eller heterocyklyl-alífatisk grupp eller en aryl-, heteroaryl- eller heterocyklylgrupp och C Q representerar en kvävehaltig aromatisk heterocykel bunden till alkylengruppen A vid en ringkolatom och kvaterniserad genom substituenten Rs.

Den brittiska patentansökan 2 118 183A avslöjar karbapenem-antibiotika, som utmärkes av en Z-substituent med formeln 310 / -s-A-s 692.11 vari A representerar en rak eller grenkedjig C2-C6-alkylengrupp och B10 och Ru vardera oberoende av varandra är en eventuellt substituerad alifatisk, cykloalifa- tisk, cykloalifatisk-alifatisk, hetero cyklyl-alifatisk eller heteroalifatisk grupp eller en aryl-, heterocyklyl- eller heteroarylgrupp eller Rm och Ru tillsammans med den S69 till vilken de är bundna representerar en eventuellt substituerad svavel- haltig heterocyklisk ring. Exempel 1 i den brittiska patentansökan 2 118 183A avslöjar karbapenem-antibiotikumet med formeln 469 630 8 i ß @ Staaf/J l l off *l “cozê som skiljer sig från föreningarna enligt föreliggande uppfinning genom att den heterocykliska gruppen i Z-substituenten är bunden till etylengruppen via sulfoniumgruppen.

Ehuru det finns ett stort antal karbapenem-derivat avslöjade i litteraturen föreligger fortfarande ett behov av nya karbapenemer, eftersom kända derivat kan förbättras vad gäller aktivitetsspektrum, potens, stabilitet och/eller toxiska biverkningar.

SAMMANFATTNING AV UPPFINNINGEN Föreliggande uppfinning tillhandahåller en ny serie karbapenem-derivat, som har formeln vari Rz är väte eller en konventionell, lätt avlägsningsbar karboxylskyddsgrupp, B är väte eller metyl och R är Cl-CG-alkyl, och farmaceutiskt godtagbara salter och fysiologiskt hydrolyserbara estrar därav.

Föreningarna med formeln I är potenta antibakteriella medel, vilka utmärkes av ovanligt höga gramnegativa verkningar, speciellt för arter av Pseudomonas eller är mellanprodukter användbara vid framställning av dylika medel.

Inom ramen för föreliggande uppfinning innefattas även förfaranden för framställning av de ovan beskrivna nya karbapenem-derivaten och farmaceutiska beredningar, som innehåller de biologiskt aktiva karbapenem-derivaten i kombi- nation med farmaceutiskt godtagbara bärare eller utspädningsmedel. 9 469 630 DETALJERAJQ BESKRIVNING De nya föreningarna med den allmänna formeln I ovan innehåller karba- penem-kärnan Iq “ æ-¿;_m J ..- o” och kan således benämnas 1-karba-2-penem-3-karboxylsyra-derivat. Alternativt kan föreningarna anses ha grundstrukturen 7 a ff"-1 och benämnas 7 -oxo-1-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboxylsyra-derivat. Ehuru föreliggande uppfinning innefattar föreningar, där den relativa stereokemin hos ,6-protonerna är såväl gs som Lans, har de föredragna föreningarna 5R,6S Qgrgsystereokerrii såsom är fallet med thíenamycín.

Föreningarna med formeln I kan vara osubstituerade i l-positionen (B=väte) eller substituerade med en metylgrupp. Metylsubstituenten kan antin- gen föreligga i oc- eller ß-konfiguration och föreliggande uppfinning innefattar såväl de individuella oc- och ß-isomererna som blandningar därav. De mest föredragna l-substituerade föreningarna är sådana med ß-konfiguration.

Hydroxietyl-substituenten i 6-positionen i karbapenem-kärnan har i synnerhet den absoluta konfigurationen 5R, 6S, 8R. 2-substituenten i föreningarna enligt föreliggande uppfinning utmärkas av en 6-ledad heterocyklisk ring, som innehåller en funktionell sulfoniumgrupp, varvid nämnda ring via en kolatom är bunden direkt till den svavelatom som är bunden till karbapenem-kärnan.

Föreningarna enligt uppfinningen innehåller även en motjon med negativ laddning. När det gäller biologiskt aktiva slutprodukter väljes motjonen så att man erhåller farmaceutiskt godtagbara salter för terapeutisk administrering och när det gäller mellanprodukter med formeln I kan motjonen även vara en toxisk jon. I ett dylikt fall kan jonen efteråt avlägsnas eller ersättas med en farmaceu- tískt godtagbar 'jon för bildning av en aktiv slutprodukt för terapeutiskt bruk. 469 ÖÉÜ 10 Uttrycket "konventionelL lätt avlägsningsbar karboxylskyddsgrupp" avser i föreliggande sammanhang en känd estergrupp, som har använts för att blockera en karboxylgrupp under nedan beskrivna kemiska reaktionssteg och som kan avlägsnas, om så önskas, medelst metoder, som icke medför någon väsentlig förstöríng av den återstående delen av molekylen, exempelvis genom kemisk eller enzymatisk hydrolys, behandling med kemiska reduktionsmedel under milda betingelser, bestrålning med ultraviolett ljus eller katalytisk hydrering. Exempel på dylika esterskyddsgrupper innefattar benshydryl, allyl, p-nitrobensyl, 2- naftylmetyl, bensyl, trikloretyl, silyl såsom trimetylsilyl, fenacyl, p-metoxibensyl, acetonyl, o-nitrobensyl, 4-pyridylmetyl och Cl-CG-alkyl såsom metyl, etyl eller p- butyl. Bland dylika skyddsgrupper innefattas sådana som hydrolyseras under fysiologiska betingelser såsom pivaloyloximetyl, acetoximetyl, ftalídyl, indanyl och metoximetyl. Speciellt fördelaktiga karboxylskyddsgrupper är p-nitrobensyl, som lätt kan avlägsnas genom katalytisk hydrering och allyl, som kan avlägsnas med en katalysator innefattande en blandning av en palladiumfiirening och trifenyl- fosfin i ett aprotiskt lösningsmedel såsom tetrahydrofiiran, dietyleter, metylen- klorid, etylacetat eller acetonitril.

De farmaceutiskt godtagbara salter som avses ovan innefattar ogiitiga syraadditionssalter, exempelvis salter med mineralsyror, såsom klorvätesyra, bromvätesyra, j odvätesyra, svavelsyra, fosforsyra etc., och salter med organiska syror såsom maleinsyra, ättiksyra, citronsyra, bärnstenssyra, bensoesyra, vinsyra, fumarsyra, mandelsyra, askorbinsyra, mjölksyra, glukonsyra och äppelsyra.

Föreningar med formeln I, vari Rz är väte eller en fysiologiskt hydrolyser- bar estergrupp, jämte farmaceutiskt godtagbara salter därav är användbara som antibakteriella medel. Övriga föreningar med formeln I är värdefulla mellan- produkter, som kan omvandlas till ovannämnda biologiskt aktiva föreningar.

En föredragen utföringsform av föreliggande uppfinning innefattar före- ningar, vari substituenten R är metyl.

En synnerligen föredragen utföringsform av föreliggande uppfinning innefattar föreningarna 11 469 6333 vari B är väte eller ß-metyl, och farmaceutískt godtagbara salter och estrar därav.

Karbapenem-derivaten med den allmänna formeln I framställes utgående från utgångsmaterial med formeln Å J- N HI vari B har ovan angivna betydelse och Rz, är en konventionell, lätt avlägsningsbar karboxylskyddsgrupp. Föreningar med formeln III har exempelvis avslöjats i europapatentansökningarna 38869 och 54917 och kan framställas medelst de allmänna metoder som beskrives däri.

Ett forfarande for framställning av föreningarna I från utgångsmaterialen III innebär att man (1) omsätter en mellanprodukt med formeln vari B har ovan angivna betydelse och RZ, är en konventionell, lätt avlägsningsbar karboxylskyddsgrupp, i ett inert organiskt lösningsmedel med ett reagens med i förmåga att införa en konventionell utträdande grupp L í Z-positionen i mellan- produkten III för erhållande av en mellanprodukt med formeln vari B och RZ, har ovan angivna betydelser och L är en konventionell utträdande 469 630 12 šTU-PP; (2) omsätter mellanprodukten IV i ett inert organiskt lösningsmedel och i närvaro av en bas med 4-merkapto-tetrahydrotiopyran för erhållande av en mellanprodukt med formeln vari B och H2, har ovan angivna betydelser; (3) omsätter mellanprodukten II i ett inert organiskt lösningsmedel med ett alkyleríngsmedel med formeln R-X vari R har ovan angivna betydelse och X' är en konventionell utträdande grupp, for bildning av en kvartärniserad förening med formeln ...sgrši cooaz ' vari B, RZ, och R har ovan angivna betydelse, och att man, om så. önskas, avlägsnar karboxylskyddsgruppen Rz, för erhållande av den önskade avblockerade föreningen med formeln I eller ett farmaceutiskt godtagbart salt eller fysiologiskt hydrolyserbar ester därav.

Så exempelvis omsättes utgångsmaterialet III i ett inert organiskt lösnings- medel, såsom metylenklorid, acetonitril eller dimetylformamid, med ungefärligen en ekvimolär mängd av ett medel R°-L, såsom p-toluensulfonsyraanhydrid, p- nitrobensensulfonsyraanhydrid, 2A,6-triisopropylbensensulfonsyraanhydrid, metansulfonsyraanhydrid. trifluormetansulfonsyraanhydrid, difenylklorfosfat, toluensulfonylklorid, p-brombensensulfonylklorid eller liknande, vari L är 469 638 13 motsvarande utträdande grupp, såsom toluensulfonyloxi, p-nitrobensensulfonyloxí, difenoxifosfinyloxi och andra utträdande grupper, vilka är väl kända inom tekniken. Omsättningen för att införa den utträdande gruppen i 2-positionen i mellanprodukten III utföres med fördel i närvaro av en bas, såsom diisopropyl- etylamin, trietylamin, 4-dimetylaminopyridin eller liknande, vid en temperatur från ca -20 till +40°C, i synnerhet vid ca O°C. Den utträdande gruppen L i mellanprodukten IV kan även vara halogen, i vilket fall denna grupp införes genom omsättning av mellanprodukten III med ett halogeneríngsmedel, såsom ø3PCl2, ø3PBr2, (øO)3PBr2, oxalylklorid eller liknande, i ett lösningsmedel, såsom CH2Cl2, CH3CN, THF eller liknande, i närvaro av en bas såsom diisopro- pyletylamin, trietylamin, é-dimetylaminopyridin eller liknande. Mellanprodukten IV kan om så önskas isoleras men användes vanligen i efterföljande steg utan isolering eller rening.

Mellanprodukten IV omvandlas härefter till mellanprodukten II medelst en konventionell iörträngningsreaktion. Således omsättes mellanprodukten IV med ungefärligen en ekvimolär mängd av tiolen 4-merkapto-tetrahydrotiopyran i ett inert organiskt lösningsmedel, såsom dioxan, dimetylformarnid, dimetylsulf- oxid eller acetonitril, och i närvaro av en bas såsom diisopropyletylamin, trietyl- amin, natríumvätekarbonat, kaliumkarbonat eller 4-dimetylaminopyridin.

Temperaturen vid denna förträngningsreaktion är icke kritisk men ett föredraget temperaturintervall sträcker sig från ca -40°C till 25°C. I synnerhet utföres reaktionen under kylning, exempelvis vid från 0°C till -10°C.

Kvartäriseringen av ringsvavlet i den heterocykliska 2-substituenten i mellanprodukten II utföres genom omsättning av mellanprodukten II i ett inert organiskt lösningsmedel med minst en ekvivalent (upp till ca ett 50%-igt molärt överskott) av ett alkyleringsmedel med formeln R-X” vari R har ovan angivna betydelse och X' är en konventionell utträdande grupp såsom halo (klor, brom eller jod, i synnerhet jod) eller en sulfonatestergrupp såsom mesylat, tosylat eller triflat. Exempel på lämpliga icke-reaktiva organiska lösningsmedel är kloroform, metylenklorid, tetrahydrofuran, dioxan, aceton, dimetylsulfoxid och dimetylformamid. Temperaturen vid alkyleringsreaktionen är icke kritisk och temperaturer inom intervallet från ca O°C till 40°C föredrages.

I synnerhet utföres reaktionssteget vid rumstemperatur. 469 630 14 Mellanprodukten I' uppvisar en motjon X' (härrör exempelvis från det använda alkyleringsmedlet), vilken i detta skede eller i ett senare skede, dvs. efter avblockeringssteget, kan ersättas med en annan motjon, exempelvis en som är mera farmaceutiskt godtagbar, medelst konventionella förfaranden. Alternativt kan motjonen avlägsnas under avblockeringssteget.

Avblockeringssteget för att avlägsna karboxylskydds gruppen RZ, i mellan- produkten I” åstadkommas medelst konventionella förfaranden såsom solvolys, kemisk reduktion eller hydrering. När man använder en skyddsgrupp såsom p- nitrobensyl, bensyl, benshydryl eller Z-naftylmetyl, som kan avlägsnas genom katalytisk hydrering, kan mellanprodukten Ii ett lämpligt lösningsmedel, såsom dioxan-vatten-etanol, tetrahydrofuran-vattenlösning av dikaliumvätefosfat- isopropanol eller liknande, behandlas under ett vätetryck av 1-4 atmosfärer i närvaro av en hydreringskatalysator, såsom palladium på träkol, palladium- hydroxid, platinaoxid eller liknande, vid en temperatur från O till 50°C under från ca 0,24 till 4 timmar. När RZ, är en grupp såsom o-nitrobensyl kan även fotolys användas för avblockering. Skyddsgrupper såsom 2,2,2-trikloretyl kan avlägsnas genom mild zinkreduktion. Allylskyddsgmppen kan avlägsnas med en katalysa- tor, som innefattar en blandning av en palladiumförening och trifenylfosfin, i ett aprotiskt lösningsmedel såsom tetrahydrofuran, díetyleter eller metylenklorid.

Likaledes kan övriga konventionella karboxylskyddsgrupper avlägsnas medelst metoder som är kända fór fackmannen. Såsom nämnts ovan kan slutligen föreningar med formeln F, där H2, är en fysiologiskt godtagbar ester såsom acetoximetyl, ftalídyl, indanyl, pivaloyloximetyl, metoximetyl etc. administreras direkt till värddjuret utan avblockering eftersom dylika estrar hydrolyseras m 1 under fysiologiska betingelser.

Vid en variation av förfarandet ovan kan skyddsgruppen i mellanprodukten II avlägsnas fore kvartäriseringssteget. Karboxylskyddsgruppen avlägsnas således såsom beskrivits ovan för erhållande av motsvarande fria karboxylsyra och den fria syran kvartäriseras med alkyleringsmedlet R-X' för erhållande av den önskade kvartära produkten med formeln I. När den avblockerade mellanproduk- ten kvartäriseras kan lösningsmedlet vara vatten eller ett icke-reaktivt organiskt lösningsmedel eller blandningar därav. Exempel på lämpliga lösningsmedel innefattar vatten, organiska lösningsmedel såsom kloroform, metylenklorid, tetrahydrofuran, dioxan, aceton, dimetylsulfoxid och dimetylformamid och blandningar av vatten och organiskt lösningsmedel såsom vatten-aceton eller vatten-dimetylformamid. Temperaturen vid kvartäriseringsreaktionen är icke 469 630 kritisk och temperaturer inom intervallet från ca -40 till ungefär rumstemperatur kan lämpligen användas. Med fördel utföres reaktionen vid ca O°C.

Ett annat föredraget förfarande innebär att man omsätter en mellanpro- dukt med formeln vari B har ovan angivna betydelse, L är en konventionell utträdande grupp och RT är en konventionell, lätt avlägsningsbar karboxylskyddsgiupp, i ett inert lösningsmedel och i närvaro av en bas med en tiol med formeln vari R har ovan angivna betydelse, för framställning av en förening med formeln vari B, RZ, och R har ovan angivna betydelser, och att man, om så önskas, avlägsnar karboxylskyddsgruppen R? för erhållande av den önskade avblockerade föreningen med formeln I eller ett farmaceutiskt godtagbart salt eller fysiologiskt hydrolyserbar ester därav.

Vid detta förfarande användes mellanprodukten med formeln 469 630 16 vilken, såsom nämnts ovan, har avslöjats exempelvis i europapatentansök- ningama 38869 och 54917 och kan framställas medelst de däri beskrivna allmänna metoderna. L representerar en konventionell utträdande grupp (definieras som i europapatentansökan 38869) såsom klor, brom, jod, bensen- sulfonyloxi, p-toluensulfonyloxi, p-nitrobensensulfonyloxi, metansulfonyloxi, trifluormetansulfonyloxi, difenoxifosfinyloxi eller di(trikloretoxi)fosfinyloxi. Den föredragna utträdande gruppen är difenoxifosfinyloxi.

Mellanprodukter med formeln IV framställes i allmänhet in sií genom omsättning av en mellanprodukt med formeln med ett lämpligt acyleringsmedel R°-L. Den föredragna mellanprodukten IV, där L är difenoxifosfinyloxi, kan framställas genom att man omsätter ketoestern III i ett inert organiskt lösningsmedel, såsom metylenklorid, acetonitril eller dimetyl- formamid, med ungefärligen en ekvimolär mängd difenylklorfosfat i närvaro av en bas, såsom diisopropyletylamín, trietylamín, Li-dimetylaminopyridin eller liknande, vid en temperatur från ca -20°C till +40°C, i synnerhet vid ca O°C.

Mellanprodukten IV kan isoleras om så önskas men användes lämpligen som utgångsmaterial för detta förfarande utan isolering eller rening.

Karbapenem-mellanprodukten IV omsättes med ovan angivna tiol. Reak- tionen utföres i ett inert lösningsmedel, såsom acetonitril, acetonitril-dimetyl- formamid, tetrahydrofiiran, tetrahydrofuran-vatten, acetonitril-vatten, dimetyl- acetamid, dirnetylacetaniid-vatten eller aceton, i närvaro av en bas. Basens beskaffenhet är ej kritisk. Lämpliga baser innefattar natriumhydroxid, diisopro- pyletylamín, l,8-diazabicyklo[5.4.0]undek-7-en, 1,5-diazabicyklo[4.3.0]non-5-en och tri(Cl-C4)-alkylaminer såsom trietylamin, tributylamin eller tripropylamin.

Reaktionen kan utföras inom ett brett temperaturintervall, exempelvis från -15°C upp till rumstemperatur, men utföres företrädesvis vid en temperatur inom intervallet från ca -15°C till +l5°C, i synnerhet runt O°C.

Den karbapenem-produkt som framställes genom omsättning av tiolen med mellanprodukten IV innehåller en motj on (exempelvis ( C6H5O)2PÛ2', Cl' eller den motjon som ingår i den kvartära tiolen), som i detta skede kan ersättas med en 469 630 17 annan motjon, exempelvis en som är mera farmaceutiskt godtagbar, medelst konventionella förfaranden. Alternativt kan motjonen avlägsnas under efterföl- jande avblockeringssteg. När den kvartära karbapenem-iöreningen och motj onen bildar en olöslig produkt kan produkten utkristalliseras allteftersom den bildas och tillvaratagas i ren form genom filtrering.

Efter bildning av den önskade karbapenem-produkten kan karboxylskydds- gruppen RQ, i föreningen I' eventuellt avlägsnas medelst konventionella förfaran- den såsom solvolys, kemisk reduktion eller hydrering. När en skyddsgrupp såsom p-nitrobensyl, bensyl, benshydryl eller Z-naftylmetyl användes, vilken kan avlägsnas genom katalytísk hydrering, kan mellanprodukten I i ett lämpligt lösningsmedel såsom dioxan-vatten-etanol, tetrahydrofuran-dietyleter-buifert, tetrahydrofuran-vattenlösning av dikaliumvätefosfat-isopropanol eller liknande, behandlas under ett vätetryck av 1-4 atmosfärer i närvaro av en hydreringskata- lysator, såsom palladium på träkol, palladiumhydroxid, platinaoxid eller liknande, vid en temperatur av 0-50°C under en tid av från ca 0,244 timmar. När Rz, är en grupp såsom o-nitrobensyl kan fotolys även användas för avblockering.

Skyddsgrupper såsom 2,2,2-trikloretyl kan avlägsnas genom mild zinkreduktion.

Allylskyddsgruppen kan avlägsnas under användning av en katalysator, som innefattar en blandning av en palladiumförening och trifenylfosfin, i ett lämpligt aprotiskt lösningsmedel såsom tetrahydrofiiran, metylenklorid eller dietyleter.

Likaledes kan övriga konventionella karboxylskyddsgrupper avlägsnas medelst metoder, som är kända för fackmannen. Såsom nämnts ovan kan slutligen föreningar med formeln I', där Rz, är en fysiologlskt hydrolyserbar ester såsom acetoximetyl, ftalidyl, indanyl, pivaloyloximetyl, metoximetyl, etc., administreras direkt till värddjuret utan avblockering eftersom dylika estrar hydrolyseras in y_iv_o under fysiologiska betingelser.

Den kvartära tiolmellanprodukten kan framställas genom omsättning av en skyddad tiol med formeln vari P är en konventionell tiolskyddsgrupp, i ett inert organiskt lösningsmedel, såsom dietyleter, diklormetan, metylenklorid, dioxan, bensen, xylen, toluen eller blandningar därav, med ett lämpligt alkyleríngsmedel med formeln R-X' 4 6 9 6 3 0 18 vari R har ovan angivna betydelse och X' är en konventionell utträdande grupp såsom halo (klor, brom eller jod, i synnerhet jod) eller en sulfonatestergrupp såsom mesylat, tosylat eller triflat. Temperaturen vid alkyleríngsreaktionen är icke kritisk och temperaturer inom intervallet från ca O°C till 40°C föredrages.

Skyddsgruppen P är en konventionell tiolskyddsgrupp såsom de skydds- grupper som avslöjas i kapitel 6 i Protective Groups in Organic Synthesis, Theodora W. Greene, John Wiley and Sons, New York, 1981, sid. 193-217.

Exempel på lämpliga tiolskyddsgrupper innefattar tioetrar, såsom bensyl, 4- metylbensyl, SA-dimetylbensyl, p-metoxibensyl, o-hydroxibensyl, p-hydroxibensyl, acetoxibensyl, p-nitrobensyl eller difenylmetyl, och tioestrar såsom acetyl, bensoyl eller tiobensoyl. En föredragen skyddsgrupp är acetyl, som kan avlägsnas genom behandling med en vattenhaltig bas innan omsättning med mellanprodukten IV sker.

Såsom är fallet med andra ß-laktamantibiotika kan föreningarna med den allmänna formeln I medelst kända förfaranden omvandlas till farmaceutiskt godtagbara salter, vilka för syftena med föreliggande uppfinning är i huvudsak ekvivalenta med de salt-fria föreningarna. Så exempelvis kan man upplösa en förening med formeln I, vari H2 är en anjonisk laddning, i ett lämpligt inert lösningsmedel och därefter tillsätta en ekvivalent av en farmaceutiskt godtagbar syra. Det önskade syraadditionssaltet kan utvinnas medelst konventionella förfaranden, exempelvis lösningsmedelsutfällning, lyofilisering, etc.

Det torde inses att vissa produkter inom ramen för formeln I kan föreligga som optiska isomerer liksom i form av epimera blandningar därav. Föreliggande uppfinning innefattar inom sin ram alla dylika optiska isomerer och epimera blandningar. När det exempelvis gäller hydroxietyl-6-substituenten kan en dylik substituent antingen föreligga i R- eller S-konfiguration och de erhållna isome- rerna liksom epimera blandningar därav omfattas av föreliggande uppfinning.

En förening med formeln I, vari R2 är väte, eller ett farmaceutiskt godtag- bart salt därav kan även medelst konventionella förfaranden omvandlas till en motsvarande förening där R2 är en konventionell karboxylskyddsgrupp eller också kan en förening med formeln I, vari RZ är en konventionell karboxylskyddsgrupp, omvandlas till motsvarande förening vari Rz är väte eller en fysiologiskt hydro- lyserbar estergrupp, eller ett farmaceutiskt godtagbart salt därav.

De nya karbapenem-derivaten med den allmänna formeln I, vari H2 är väte eller en fysiologiskt hydrolyserbar karboxylskyddsgrupp, eller farmaceutiskt godtagbara salter därav är potenta antibiotika, som är aktiva mot olika gramposi- 469 630 19 tiva och gramnegativa bakterier, och de kan därför exempelvis användas som djurfodertillsatsmedel för att befrämja tillväxten, som konserveringsmedel i livsmedel, som baktericider vid industriella tillämpningar, exempelvis i vatten- baserad färg och i bakvattnet i pappersbruk för att inhibera tillväxten av skadliga bakterier, och som desinfektionsmedel för att förstöra eller inhibera tillväxten av skadliga bakterier på medicinsk utrustning och tandläkarutrustning. De är emellertid speciellt användbara vid behandling av infektionssjukdomar hos människa och andra djur, orsakade av grampositiva eller gramnegativa bakterier.

De farmaceutiskt aktiva föreningarna enligt denna uppfinning kan användas separat eller beredas som farmaceutiska beredningar, vilka förutom den aktiva karbapenem-beståndsdelen innefattar en farmaceutiskt godtagbar bärare eller utspädningsmedel. Föreningarna kan administreras på olika sätt; de administreringssätt som är av principiellt intresse innefattar oral, topisk eller parenteral (exempelvis intravenös eller intramuskulär injektion) administrering.

De farmaceutiska beredningarna kan föreligga i fast form, såsom kapslar, tabletter, pulver etc., eller i flytande form som lösningar, suspensioner eller emulsioner. Beredningar för injektion, som är det föredragna administrerings- sättet, kan framställas i enhetsdoseringsform i ampuller eller i flerdosbehållare och kan innehålla adjuvantia såsom suspenderings-, stabiliserings- och disperge- ringsmedel. Beredningarna kan föreligga i användningsfårdig form eller i pulverform för rekonstituering vid administreringstillfället med en lämplig vehikel såsom sterilt vatten.

Den för administrering avsedda dosen är i stor utsträckning beroende av den speciella förening ifråga som användes, den speciella beredning som använ- des, administreringssättet, värddjurets beskaffenhet och tillstånd, det speciella sjukdomsstället ifråga och den organism ifråga som behandlas. Valet av speciellt föredragen dosering och administreringssätt överlämnas åt läkaren. I allmänhet kan emellertid föreningarna administreras parenteralt eller oralt till däggdjur i en mängd av från ca 5 till 200 mg/kg/dag. Administreringen utföres i allmänhet i avdelade doser, exempelvis tre till fyra gånger per dag. i För att åskådliggöra den potenta antibakteriella bredspektrumaktiviteten hos karbapenemerna enligt föreliggande uppfinning ges nedan biologiska data för den karbapenem-förening enligt föreliggande uppfinning som för närvarande är den föredragna föreningen. 469 630 Aktivitet in vitro Den i Exempel 1 framställda karbapenem-föreningen visade sig efter upplösning i vatten och spädning med näringsvätska uppvisa i tabellen nedan angivna minsta inhíberande koncentrationer (MIK) i pg/nil med avseende på angivna mikroorganismer, vid bestämning genom inkubering över natten vid 37°C och under användning av rörutspädning.

Antibakteriell aktivitet in vitrc för karbapenem-derivatet enligt Exempel 1 Organism MIK (gglml) 382-250!! Sats 1 1795-25 Sats; 179-37 S . pneumoniae 8-9585 0. 001 0. 002 S . pyogenens A-9604 0 . 004 p, gps S. faecalis L20688 0.5 0.5 S. auzeus, 50% serum »9537 0. 01.6 0.015' s, (peni 'llín- _ _ auzeus reslsfèïent) ¿ 9505 0 . 016 0. 03 - 1182M18 (meiicillin- Aisoei - - :_ nu resistent) nåns m 008 m 01 6 s. esii 20341-1 c. cis c.c'3 K. paexmcniae 1-9666 0. 03 i 0. 06 K. pneinnoniae 120468 0. 06 0.25 2. cloacae L-SGSS 0.06 0.25 r. -mirabilis i-sscc o. cis c. cis P- wlsazis nisss c. cis c. cis 14-_ Mrsanis. Aisisz c. cs c.cs P - reflfiseri .szzazs c. i: o. ia - fi=======1== Azccis c. ca 0.0: P. ÄGIYJQÅQOSG. ¿.98¿3A 2 2 P . aerugincsa (karbeni- Anna 0 _ 25 0 _ 15 cillin- resistent) Blodnivåer För bestämning av blcdnivâer användes två grupper av möss. Varje grupp bestod av fyra möss med vikten 20 g. Före dosering (5-10 niin.) erhöll en av grupperna en intraperitoneal injektion av en dipeptidatinhibitor (BCH-1) i en dos 21 469 650 av 10 mg/kg. Vid intervall om 10, 20, 30, 40, 45, 60 och 90 minuter efter intra- muskulär dosering av föreningen enligt Exempel 1 uttogs blodprover från varje mus och dessa analyserades med avseende på biologisk aktivitet under använd- ning av känsliga analysplattor innehållande l_3_. subtilis ATCC 6633.

BCE-l BBC / NHCO T C: n \oos BCH-1 C max Halve- AUC ( 1 0 mg/kq l 018/ m1) :Éägs- Tmax (lig/hr) Förening i . p . (min . ) (min .) (min .) ml Ex . 1 - 1 5 , 4 9 10 6 , 8 + 1 6 , 1 1 0 20 1 0 , 9 BcH-i Bleanivåer (pg/ml) Förening i .p . Min . efter administrering vid 20 mg/kg i .m.

Ex. 1 1o 20 30 45 ' so 90 _ 712 2y9 017 013 + 15,4 16,1 12,6 7,4 3,0 0,3 Urinutsöndríng Två grupper av möss användes för utvärdering av urinutsöndringen. Varje grupp bestod av fyra möss om 20 g. Före dosering (5-10 minuter) erhöll en av grupperna en intraperitoneal injektion av en dipeptidatinhibitor (BCH-l) i en dos av 10 mg/kg. Efter doseringen placerades djuren i individuella metabolismburar och urin tillvaratogs över is med intervall om 0-3 och 3-6 timmar. Djuren fick fasta över natten och hade fri tillgång till en dextros-aminosyralösning från 1 timme fore läkemedelsadministreringen och under den 6 timmar långa urinupp- 469 sso 22 samlingen. Urinprover analyserades med avseende på biologisk aktivitet under användning av känsliga analysplattor innehållande å. subtilis ATCC 6633.

F 516111119' BCH-1 Procentuell utsöndring mg/kg i-P- o-s tim. 3-6 tim. o-e tim.

EX- 1 ~ 44 0,2 44,2 + 67 0,1 67,1 Aktivitet in vivo Pregarering av infektionsorganism: BHI-medium (9,0 ml) ympades med en full ögla av upptinad fórrådssuspension av 2. aeruginosa A 9843a och inkuberades vid 37°C under 18 timmar. En volym av 0,5 ml av den 18 timmar gamla kulturen sattes till 20 ml BHI-medium och inkuberades under 3 timmar under konstant omröring vid 37°C. En 1:10 000 spädning av skakkulturen framställdes i 0,4% svinmagemucin. Möss infekterades intraperitonealt med 0,5 ml av bakteriesus- pensionen (motsvarande 6,0 x 104 levande celler/mus.

Bestämning av 50%-ig skyddsdos (PD 50): Infekterade möss behandlades intramus- kulärt med olika doser av föreningen enligt Exempel 1 omedelbart efter infektion och ånyo 2 timmar efter infektion. Varje mus erhöll en volym av 0,2 ml intra- muskulärt. Dödsfall registrerades under en period av 5 dagar efter infektionen, vid vilken tidpunkt PD 50-värdet for föreningen bestämdes genom bestämning av den 50%-iga slutpunkten under användning av ett proberingsanalysdiagram.

PD50 intramuskulärt bestämdes till 0,71 mg/kg.

Uppfinningen åskådliggöres närmare medelst följande utiöringsexempel.

' Exempel 1 Ja, 23 4 6 9 6 3 Û ( 5R,6S )-6-( lfi-hydroxietyl)-7-oxo-3-( 1-metyl-4-tiatetrahydrotiopyraníum)- 1- azabícyklo[3.2.0]-hept-2-en-2-karboxylat.

A. 4-merka to-l-met l-tetrah drotio aniumtriflat us u; .lä ~ RS-CSQÛI m9 4 ml av en kyld (isbad) vattenlösning av 500 mg (l,47 mmol) 4-acetyltio-1- metyl-tetrahydrotiopyraníumtríflat (1,1 g, 6,25 mmol) 4-acetyltio-tetrahydrotio- pyran kvartärniserades med 1,1 rnl metyltriflat i metylenklorid vid 0°C för erhållande av 2,16 g (6,34 mmol, 98,6%) av motsvarande kvartärniserade derivat, behandlades med 2 ml av en 1M natriumhydroxidlösning (2 mmol). Blandníngen omrördes ca 1 timme tills allt utgångsmaterial hade försvunnit såsom kunde konstateras genom TLC (reverserad silikagelfas). pH-värdet hos den kraftigt basiska lösningen inställdes på 7,5 med 10% saltsyra. Denna tiol användes som sådan för efterföljande kopplingsreaktion med enolfosfatet.

B. p-nitrobensyl-(5R,6S)-6-(1-R-hydroxietyD-7-oxo-3-(l-metyl-ßi-tia-tetrahydro- tiopyraníum-difenylfosfafl-1-azabicyklo[8.2.0lhept-Z-en-Z-karboxylat its-GL. ICQ 9 :øoazm O --:--åv / 5 ...a (Quantz: J'- I 4322113 C922!!! En lösning av enolfosfatet framställt av 17 4 mg (O,500 mmol) p-nitrobensyl- ( öll-hydroxíetyD-ß,7-dioxo- 1-azabicyklo[3.2.0l-hept-2-en-3-karboxylat, 105 ul ( 0,603 mmol) diisopropyletylamin och 124 ul (0,598 mmol) difenylklorfosfat i 4 ml acetonítríl vid O°C behandlades under 1 timme med kallt fll-merkapto-l-metyl- tetrahydrotiopyraniumtiiflat (från 500 mg av motsvarande ÅL-acetyltioderivat). Ca ml kall acetonitril tillsattes till dess en fasblandning erhölls. Lösningen omrördes 2 timmar vid 0°C, hölls vid -78°C under 18 timmar och omrördes ånyo 4 timmar vid O°C; pH hölls vid 7,8 genom tillsats av en vattenlösning av natrium- vätekarbonat. Acetonítzil fórångades vid låg temperatur (under 15°C) for erhål- S-m filbfl: 469 630 24 lande av en vattenhaltig fraktion och ett utfällt gummi. Den vattenhaltiga fraktionen applicerades på en reverserad silíkagelfaskolonn (2,5 x 8 cm). Elue- ringsmedlets polaritet ökades med CH3CN. Det erhållna gummit upplöstes gradvis i ca 10% CH3CN/vatten och fick passera kolonnen. Den i rubriken angivna föreningen eluerades med en blandning av 15% + 30% CH3CN i vatten.

Acetonitríl evakuerades i högvakuum vid ca 0-5°C under 1 timme. Lyofiliseríng av den vattenhaltiga fraktionen gav ett gult pulver (240 mg, 67%); IR (nujol aumax: 1772 (s, ß-laktam C=O> och 1595 cnfl (s, cm; 111m (so MHz, 1320): 8,28, 8,17 7,68, 7,57 (4H, n, aromatiskt H), 7,57-7,11 (lOH, m, aromatiskt H), 7,57-7,11 ( 1OH, m, aromatiskt H), 5,39 (2H, b.s., O-CH2-), 4,45-4,10 (2I-I, m, H-l' och H-5); 3,95-3,00 (7H, m, CH2-4, CH2S+CH2, S-CI-D; 2,88, 2,87 (3H, 2s, >S"'-CI-I3), 2,75- l,75 (4H, m, C_I-l2CI-I-CH3) och 1,25 ppm (SI-I, d, @_l_=6,4, CH3).

Exemgel 2 i m: e S-Me a / i 0 COZG ( 511, 6§_)-6-( 1R-hydroxietyl)-4fi-metyl-3-( 1-metyl-4-tiatetrahydroxipyranium)-7 -oxo- 1-azabicyklo[3.2.0lhept-Z-en-Z-karboxylat A. Framställnin av LL-acetvltio-l-me ltetrah drotio anium-trifluonnetan- wššßflš, Qmf sulfonat (yiw, Till en kyld (5°C) lösning av 1,91 g (10,9 mmol) é-acetylmerkaptotetra- hydrotiopyran i 20 ml diklormetan sattes droppvis under 30 minuter 1,3 ml (11,5 cf3so3ça3 -íæ mmol) metyltrifluormetansulfonat. Lösningsmedlet avlägsnades i vakuum, varvid man erhöll 3,85% (> 100%) av den i rubriken angivna föreningen som en olja, som användes som sådan: lI-Imr (D20) ö: 2,14-3,79 (m, 8H, ringprotoner), 2,39 (s, 3H, 4 6 9 6 5 0 cocng), 2,93 (s, sH, song; och 5,46 ppm (s, 1H, oas).

B. Framställnin av LL-merkapto-l-metvl-tetrahvdrotiopvraniuin-trifligrmetan- sulfonat ° e Ûgïf QOTf Till en kyld (5°C) lösning av 3,35 g (9,83 mmol) 4-acetyltio-l-metyltetra- hydrotiopyranium-trifluormetansulfonat i 32 ml deoxigenerat vatten sattes en lösning av 10,8 ml ( 10,8 mmol) 1M natriumhydroxid droppvis. Efter omröring 1 timme vid 0°C inställdes pH på 7,5 med 1N saltsyra. Lösningen lyofiliserades, varvid man erhöll den önskade tíolen plus en blandning av salter. Produkten användes som sådan utan ytterligare rening: lHinr (D20) ö: 2,0-4,0 (m, llH), 2,90 (s, 3H, SCH3) och 1,9 ppm (s, 3H, CH3CO').

C. Framställning av (5R,6S)-p-nitrobensyl-6-(11R-hydroxietyD-4R-metyl-3-(1- metyl-4-tiatetrahydrotiopyranium)-7-oxo-1-azabicyklo[3.2.0lhept-2-en-2- karboxyl-difenylfosfat ° 5": CH (96 (orm, i! o j: s ß " f ® (>9-~^ e / owman + ns - en m, 5 s F? 2 C ß Om, CUZøNB ozpus Till en kyld (5°C) lösning av 3,27 g (5,5 mmol) nyframställd (5R,6S)~p- nitrobensyl-S-difenylfosfat-4R-metyl-7 -oxo-1-azabicyklo[3.Zlflhept-Z-en-Z-karboxy- lat. Denna förening framställdes på sedvanligt sätt utgående från (5R,6S)-p- nitrobensyl-6-( llR-hydroxietyl)-3,7-dioxo-4R-metyl-1-azabicyklo[3.2.0]heptan-2- karboxylat; enolfosfatet isolerades emellertid genom koncentrering av reaktions- blandningen i vakuum, spädning med en lzl-blandning av etylacetat och eter och tvättning med vatten. Efter torkning över vattenfritt magnesiumsulfat, träkols- behandling och avlägsnande av lösningsmedlet i vakuum erhölls den rena föreningen kvantitativt i 20 ml NN-dimetylformamid under kväveatmosfär sattes D. Framställning av 469 630 25 en suspension av 2,7 g (9,0 mmol) 1-mety1-4-merkaptotetrahydrotiopyranium- trifluormetansulfonati 10 ml NN-dimetylformamíd, följt av 1,57 ml (9,0 mmol) NN-diisopropyletylamin. Eñer omröríng 1 timme vid 5°C triturerades bland- ningen med 210 ml av en 1:1-blandning av eter och petroleumeter och oljeskiktet späddes med 210 ml av en 8:1-blandning av vatten och acetonítril. Lösningen tvättades med 2 X 100 ml eter och vattenfasen applicerades på en reverserad faskolonn (innehållande 200 g pBondapak C18 silikagel), varvid man' först eluerade med 500 ml vatten och därefter med en blandning av acetonitríl och vatten (10%, 20%, 30%, 500 ml vardera). Efter frystorkning erhölls 2,4 g (58,6%) av den i rubriken angivna föreningen: IR (nujol) umax: 1765 (CO ß-laktam), 1705 Cm-l (co esta), lnm (acewn-ae) a; 1,2 (d, en, cg3oHoH och 01134), 2,12-s,s2 (m, 41-1), 3,10 (s, 3H, SCH3), 3,37-4,55 (m, 9H), 5,42 (q, J-14 Hz, CEZAI), 6,89-8,34 ppm (m, ArI-I). (sR,6s>-e-<1ln-hydmxiety1>-4R-mety1-3-<1-mety1-4- tiatetrahydrotiopyranium)-7-oxo-l-azabicyklolfß.2.0]hept-2-en-2-karboxylat QOPOWPh) gg :H3 2 OH C33 /Ix Q /tx i Û l / S WH: az, wc / SÖfiB DDZpNB mZQ Till en kyld (5°C) lösning av 2,40 g (3,23 mmol) (5R,6S)-p-nitrobensyl-6- ( 1 1R-hydroxietyD-4R-metyl-3-( 1-metyl-4-tiatetrahydrotiopyraniuml-7-oxo-1- azabicyklo[3.2.0]hept-2-en-2-karboxyl-difenylfosfat i 240 ml tetrahydrofuran och 240 ml av en 0,05M fosfatbuffert pI-I 7,0 sattes 240 ml eter och 2,4 g 10% Pd/C.

Blandningen hydrerades i en Paar-apparat vid 3,15 kg/cm2 väte under 1 timme vid 15°C. Lösningen filtrerades därefter genom glasfiberpapper och katalysatorn tvättades med 25 ml vatten. Vattenfasen av ñltratet tvättades med 2-x 100 ml eter och försattes under vakuum för att avlägsna eventuella spår av organiskt lösningsmedel. Produkten renades genom reverserad faskromatografering på uBonclapak C18 silikagel (100 g) under användning av blandningar av acetonitril och vatten som elueringsmedel ( %CI-I3CN-H.¿O, volym ml; 0%, 500 ml; 2%, 500 m1; 4%. 500 ml; 10%, 250 ml) för erhållande av 1,08 g oren produkt. Efter

Claims (6)

10 15 20 27 469 630 lyofilisering renades denna produkt och ett prov om 0,020 g från ett annat försök (utgående från 0,067 mmol av estern) medelst I-IPLC (HPLC-data: C18 pBonda- pak under användning av 5% CH3CN-vatten vid 4 ml/min., R.I.-detektor), varvid man erhöll 328 mg. Produkten renades ånyo medelst reverserad faskromatografe- ring på silikagel ( 15 g, pBondapak C18) under användning av vatten och därefter 2% acetonitríl-vatten som elueringsmedel, varvid man erhöll 225 mg (19,1%) av den i rubriken angivna föreningen som ett vitt fast material efter lyofilisering: UV (H20) tmax; 298 mn (9581), IR (nujol) tmax; 1750 (co ß-laktam), 1590 cm* (co karboxynte; 1Hmru32o> a; 1,21 (a, J=7,25 Hz, an, ons-t), 1,30 (d, J=e,s7 Hz, 3H, CH3CHOH), l,92-2,64 (m, 4H, tíopyranylt-protoner), 2,94 (s, 3H, S-CH3), 3,15- 3,7 8 (m, 7 H), 4,l9-4,32 ppm (m, 2Hl; halveringstiden beräknades vara 30 timmar vid 37°C i en biologisk buffert pH 7,4. PATENTKRAV

1. Föreningar med formeln 3 ® (3 -ß mi, ° cozaz vari Rg är väte eller en konventionell, lätt avlägsningsbar karboxylskyddsgrupp, Ä B är väte eller metyl och R är Cl-CG-alkyl, och farmaceutiskt godtagbara salter och fysíologiskt hydrolyserbara estrar därav.

2. Föreningar enligt krav 1, kännetecknade därav att B är B-metyl, och farmaceutiskt godtagbara salter och fysiologiskt hydrolyserbara estrar därav.

3. Föreningarna ( 5R,6S)-6-( 1R-hydroxietyl)-7-oxo-3-( l-metyl-4-tiatetrahydro- tiopyraníuml-1-azabicyklo[3.2.0]hept-2-en-2-karboxylat och (5R,6S)-6-(1R-hydroxi- etyl)-4R-metyl-7-oxo-3-( 1-metyl-4-tiatetrahydrotiopyraníum)-1-azabicyklo[3.2.0]- hept-Z-en-Z-karboxylat enligt krav l. 10 469 650 28

4. Förfarande för framställning av föreningar enligt krav 1 med formeln vari RZ är väte eller en konventionell, lätt avlägsningsbar karboxylskyddsgrupp, B är väte eller metyl och R är Cl-Cö-alkyl, och farmaceutiskt godtagbara salter och fysiologiskt hydrolyserbara estrar därav, kännetecknat därav, att man (l) omsätter en mellanprodukt med formeln vari B har ovan angivna betydelse och H2, är en konventionell, lätt avlägsningsbar karboxylskyddsgmpp, i ett inert organiskt lösningsmedel med ett reagens med förmåga att införa en konventionell utträdande grupp L i 2-positionen i mellan- produkten III för erhållande av en mellanprodukt med formeln vari B och RZ, har ovan angivna betydelser och L är en konventionell utträdande šTuPPš (2) omsätter mellanprodukten IV i ett inert organiskt lösningsmedel och i närvaro av en bas med LL-merkapto-tetrahydrotíopyran för erhållande av en mellanprodukt med formeln 10 29 469 630 vari B och Rz, har ovan angivna betydelser; ( 3) omsätter mellanprodukten II i ett inert organiskt lösningsmedel med ett alkyleringsmedel med formeln R-X' vari R har ovan angivna betydelse och X' är en konventionell utträdande grupp, för bildning av en kvartäñserad förening med formeln vari B, R? och R har ovan angivna betydelser, och att man, om så önskas, avlägs- nar karboxylskyddsgruppen Rz, för erhållande av den önskade avblockerade föreningen med formeln I eller ett farmaceutiskt godtagbart salt eller fysiologiskt hydrolyserbar ester därav.

5. Förfarande enligt krav 4, kännetecknat därav, att kvartäriseríngssteget utföres efter avlägsnande av karboxylskyddsgzuppen E21

6. Förfarande för framställning av en förening enligt krav 1 med formeln 10 469 630 30 vari Rz är väte eller en konventionell, lätt avlägsningsbar karboxylskyddsgmpp, B är väte eller metyl och R är Cl-CG-alkyl, och farmaceutiskt godtagbara salter och fysiologiskt hydrolyserbara estrar därav, kännetecknat därav, att man omsätter en mellanprodukt med formeln à- ° coca? IV vari B har ovan angivna betydelse, L är en konventionell utträdande grupp och Rz, är en konventionell, lätt avlägsningsbar karboxylskyddsgrupp, i ett inert lösningsmedel och i närvaro av en bas med en tiol med formeln vari R har ovan angivna betydelse, för framställning av en förening med formeln Ä 'B _ fa @ _ 113-; l-JA _. ° coca* I-l vari B, RZ, och R har ovan angivna betydelser, och att man, om så önskas, avlägsnar karboxylskyddsgruppen RZ, for erhållande av den önskade avblockerade föreningen med formeln I eller ett farmaceutískt godtagbart salt eller fysiologískt hydrolyserbar ester därav.