RU2653447C2 - Стабилизированные содержащие антитела жидкие композиции - Google Patents
Стабилизированные содержащие антитела жидкие композиции Download PDFInfo
- Publication number
- RU2653447C2 RU2653447C2 RU2012135384A RU2012135384A RU2653447C2 RU 2653447 C2 RU2653447 C2 RU 2653447C2 RU 2012135384 A RU2012135384 A RU 2012135384A RU 2012135384 A RU2012135384 A RU 2012135384A RU 2653447 C2 RU2653447 C2 RU 2653447C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antibody
- buffer
- histidine
- arginine
- aspartate
- Prior art date
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 207
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims abstract description 121
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 113
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims abstract description 71
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims abstract description 67
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 claims abstract description 51
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 30
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims abstract description 24
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims abstract description 12
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 121
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 claims description 118
- 238000003860 storage Methods 0.000 claims description 63
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 53
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 48
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 46
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 43
- SUUWYOYAXFUOLX-ZBRNBAAYSA-N (2s)-2-aminobutanedioic acid;(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N SUUWYOYAXFUOLX-ZBRNBAAYSA-N 0.000 claims description 38
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims description 38
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 claims description 38
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 38
- 229960002223 arginine aspartate Drugs 0.000 claims description 38
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 claims description 37
- 229940049906 glutamate Drugs 0.000 claims description 27
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 21
- RVEWUBJVAHOGKA-WOYAITHZSA-N Arginine glutamate Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N RVEWUBJVAHOGKA-WOYAITHZSA-N 0.000 claims description 16
- 229960004246 arginine glutamate Drugs 0.000 claims description 16
- 108010013835 arginine glutamate Proteins 0.000 claims description 16
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 14
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 claims description 14
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 13
- 102000010781 Interleukin-6 Receptors Human genes 0.000 claims description 11
- 108010038501 Interleukin-6 Receptors Proteins 0.000 claims description 11
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 8
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 claims 3
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 45
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 abstract description 45
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 abstract description 45
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 abstract description 41
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 41
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 14
- 238000009472 formulation Methods 0.000 abstract description 6
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 abstract description 6
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 abstract description 6
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 abstract 2
- 235000014304 histidine Nutrition 0.000 description 106
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical class Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 73
- 101100476210 Caenorhabditis elegans rnt-1 gene Proteins 0.000 description 67
- 238000000034 method Methods 0.000 description 55
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 50
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 46
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 43
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 101100075829 Caenorhabditis elegans mab-3 gene Proteins 0.000 description 42
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 42
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 36
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 33
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 32
- LOFGQZYYARWABM-BYPYZUCNSA-N (2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl chloride Chemical compound ClC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N LOFGQZYYARWABM-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 28
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 28
- 101100075830 Caenorhabditis elegans mab-5 gene Proteins 0.000 description 25
- 241000894007 species Species 0.000 description 21
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 20
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 20
- -1 arginine Chemical class 0.000 description 19
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 19
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 18
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 17
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 17
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 16
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 15
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 15
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 15
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 10
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 10
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 10
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- QGTQPBHVCIQNAE-DKWTVANSSA-N (2s)-2-aminobutanedioic acid;2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol Chemical compound OCC(N)(CO)CO.OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O QGTQPBHVCIQNAE-DKWTVANSSA-N 0.000 description 9
- CZWZDUAKSLOMPP-DFWYDOINSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;(2s)-2-aminopentanedioic acid Chemical compound OCC(N)(CO)CO.OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O CZWZDUAKSLOMPP-DFWYDOINSA-N 0.000 description 9
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 9
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 9
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 9
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 9
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 9
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 9
- 229940074410 trehalose Drugs 0.000 description 9
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 8
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 description 6
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 5
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 5
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 5
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 5
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 5
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 4
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 4
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 4
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 4
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 4
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 4
- QZNNVYOVQUKYSC-JEDNCBNOSA-N (2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoic acid;hydron;chloride Chemical compound Cl.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 QZNNVYOVQUKYSC-JEDNCBNOSA-N 0.000 description 3
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- 108700020797 Parathyroid Hormone-Related Proteins 0.000 description 3
- 102000043299 Parathyroid hormone-related Human genes 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 3
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 3
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 3
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 3
- 229960003589 arginine hydrochloride Drugs 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 3
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 3
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 3
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 3
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 3
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 3
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 3
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 3
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 3
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- CFKMVGJGLGKFKI-UHFFFAOYSA-N 4-chloro-m-cresol Chemical compound CC1=CC(O)=CC=C1Cl CFKMVGJGLGKFKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010051118 Bone Marrow Stromal Antigen 2 Proteins 0.000 description 2
- 102100037086 Bone marrow stromal antigen 2 Human genes 0.000 description 2
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 108010014173 Factor X Proteins 0.000 description 2
- 102000010956 Glypican Human genes 0.000 description 2
- 108050001154 Glypican Proteins 0.000 description 2
- 108050007237 Glypican-3 Proteins 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N L-Aspartic acid Natural products OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N N-methylglucamine Chemical compound CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 2
- 102000002262 Thromboplastin Human genes 0.000 description 2
- OZBJWQQAAQSQPL-WCCKRBBISA-N acetic acid;(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid Chemical compound CC(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N OZBJWQQAAQSQPL-WCCKRBBISA-N 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940035676 analgesics Drugs 0.000 description 2
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 2
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 2
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 2
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- NUVBSKCKDOMJSU-UHFFFAOYSA-N ethylparaben Chemical compound CCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 NUVBSKCKDOMJSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004222 factor ix Drugs 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 150000002337 glycosamines Chemical class 0.000 description 2
- 229960000443 hydrochloric acid Drugs 0.000 description 2
- 235000011167 hydrochloric acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 description 2
- 229940044601 receptor agonist Drugs 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 230000001235 sensitizing effect Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- ATHGHQPFGPMSJY-UHFFFAOYSA-N spermidine Chemical compound NCCCCNCCCN ATHGHQPFGPMSJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PFNFFQXMRSDOHW-UHFFFAOYSA-N spermine Chemical compound NCCCNCCCCNCCCN PFNFFQXMRSDOHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 2
- CWERGRDVMFNCDR-UHFFFAOYSA-N thioglycolic acid Chemical compound OC(=O)CS CWERGRDVMFNCDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003989 tocilizumab Drugs 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 2
- PBTPTBMYJPCXRQ-MGMRMFRLSA-N (2r)-2-[(1s)-1,2-dihydroxyethyl]-3,4-dihydroxy-2h-furan-5-one;hexadecanoic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O.CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O PBTPTBMYJPCXRQ-MGMRMFRLSA-N 0.000 description 1
- CSTRPYAGFNTOEQ-MGMRMFRLSA-N (2r)-2-[(1s)-1,2-dihydroxyethyl]-3,4-dihydroxy-2h-furan-5-one;octadecanoic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O CSTRPYAGFNTOEQ-MGMRMFRLSA-N 0.000 description 1
- REYLLNRLWCBKCM-YFKPBYRVSA-N (2s)-2-acetamido-4-sulfanylbutanoic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCS REYLLNRLWCBKCM-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AGBQKNBQESQNJD-SSDOTTSWSA-N (R)-lipoic acid Chemical compound OC(=O)CCCC[C@@H]1CCSS1 AGBQKNBQESQNJD-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- SPSPIUSUWPLVKD-UHFFFAOYSA-N 2,3-dibutyl-6-methylphenol Chemical compound CCCCC1=CC=C(C)C(O)=C1CCCC SPSPIUSUWPLVKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTWJRLJHJPIABL-UHFFFAOYSA-N 2-methylphenol;3-methylphenol;4-methylphenol Chemical compound CC1=CC=C(O)C=C1.CC1=CC=CC(O)=C1.CC1=CC=CC=C1O QTWJRLJHJPIABL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MOMKYJPSVWEWPM-UHFFFAOYSA-N 4-(chloromethyl)-2-(4-methylphenyl)-1,3-thiazole Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C1=NC(CCl)=CS1 MOMKYJPSVWEWPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000282832 Camelidae Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 102100022641 Coagulation factor IX Human genes 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N D-alpha-tocopherylacetate Chemical compound CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N 0.000 description 1
- CIWBSHSKHKDKBQ-DUZGATOHSA-N D-araboascorbic acid Natural products OC[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-DUZGATOHSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L EDTA disodium salt (anhydrous) Chemical class [Na+].[Na+].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide/propylene oxide copolymer Chemical compound CCCOC(C)COCCO CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010076282 Factor IX Proteins 0.000 description 1
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 description 1
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 description 1
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 101001043821 Homo sapiens Interleukin-31 Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 102100021596 Interleukin-31 Human genes 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N L-Methionine Natural products CSCCC(N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N L-N-acetyl-Cysteine Chemical compound CC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ULEBESPCVWBNIF-BYPYZUCNSA-N L-arginine amide Chemical compound NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N ULEBESPCVWBNIF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 239000002211 L-ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000000069 L-ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930195722 L-methionine Natural products 0.000 description 1
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101001043818 Mus musculus Interleukin-31 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 241000208125 Nicotiana Species 0.000 description 1
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 1
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- 206010041235 Snoring Diseases 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102100027188 Thyroid peroxidase Human genes 0.000 description 1
- 241000269370 Xenopus <genus> Species 0.000 description 1
- DFPAKSUCGFBDDF-ZQBYOMGUSA-N [14c]-nicotinamide Chemical compound N[14C](=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 229940022663 acetate Drugs 0.000 description 1
- 229960004308 acetylcysteine Drugs 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 150000005215 alkyl ethers Chemical class 0.000 description 1
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 1
- AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-N alpha-Lipoic acid Natural products OC(=O)CCCCC1CCSS1 AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 229940124691 antibody therapeutics Drugs 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 150000001483 arginine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N butylated hydroxyanisole Chemical compound COC1=CC=C(O)C(C(C)(C)C)=C1.COC1=CC=C(O)C=C1C(C)(C)C CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010354 butylated hydroxytoluene Nutrition 0.000 description 1
- 229960005069 calcium Drugs 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 229960001777 castor oil Drugs 0.000 description 1
- 238000003163 cell fusion method Methods 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229960002242 chlorocresol Drugs 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 229940105778 coagulation factor viii Drugs 0.000 description 1
- 239000000306 component Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 229930003836 cresol Natural products 0.000 description 1
- 229940013361 cresol Drugs 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N cysteamine Chemical compound NCCS UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 235000010350 erythorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004318 erythorbic acid Substances 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010228 ethyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004403 ethyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229940071106 ethylenediaminetetraacetate Drugs 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- PFJKOHUKELZMLE-VEUXDRLPSA-N ganglioside GM3 Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC[C@@H]([C@H](O)/C=C/CCCCCCCCCCCCC)NC(=O)CCCCCCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@]2(O[C@H]([C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)C2)[C@H](O)[C@H](O)CO)C(O)=O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 PFJKOHUKELZMLE-VEUXDRLPSA-N 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 150000002306 glutamic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000009878 intermolecular interaction Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 229940026239 isoascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 235000019136 lipoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 1
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229940091250 magnesium supplement Drugs 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 229960003194 meglumine Drugs 0.000 description 1
- 229960003151 mercaptamine Drugs 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- PJUIMOJAAPLTRJ-UHFFFAOYSA-N monothioglycerol Chemical compound OCC(O)CS PJUIMOJAAPLTRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000287 oocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000004091 panning Methods 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- 229960003742 phenol Drugs 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 229940044519 poloxamer 188 Drugs 0.000 description 1
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920002503 polyoxyethylene-polyoxypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 229940068965 polysorbates Drugs 0.000 description 1
- 229960003975 potassium Drugs 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 238000002708 random mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000010187 selection method Methods 0.000 description 1
- 229940083542 sodium Drugs 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- WBHQBSYUUJJSRZ-UHFFFAOYSA-M sodium bisulfate Chemical compound [Na+].OS([O-])(=O)=O WBHQBSYUUJJSRZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J sodium diphosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- LNDCCSBWZAQAAW-UHFFFAOYSA-M sodium hydrogen sulfate sulfuric acid Chemical compound [Na+].OS(O)(=O)=O.OS([O-])(=O)=O LNDCCSBWZAQAAW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000019983 sodium metaphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 229940048086 sodium pyrophosphate Drugs 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 229940063673 spermidine Drugs 0.000 description 1
- 229940063675 spermine Drugs 0.000 description 1
- 230000010473 stable expression Effects 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019818 tetrasodium diphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001577 tetrasodium phosphonato phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229940126622 therapeutic monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 229960002663 thioctic acid Drugs 0.000 description 1
- YODZTKMDCQEPHD-UHFFFAOYSA-N thiodiglycol Chemical compound OCCSCCO YODZTKMDCQEPHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950006389 thiodiglycol Drugs 0.000 description 1
- 229940035024 thioglycerol Drugs 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 1
- 229940042585 tocopherol acetate Drugs 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 1
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
- A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/08—Solutions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
- C07K16/244—Interleukins [IL]
- C07K16/248—IL-6
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой устойчивую, содержащую антитело фармацевтическую композицию для подкожного введения, включающую аргининаспартат или аргининглутамат и/или буфер, выбранный из группы, включающей гистидинаспартатный, гистидинглутаматный буфер, трис(гидроксиметил)аминометанаспартатный буфер и трис(гидроксиметил)аминометанглутаматный буфер, причем концентрация антитела в ней равна 50 мг/мл или более, а антитело является антителом, которое было модифицировано для обеспечения изоэлектрической точки (pI) от 5 до 8. Изобретение позволяет получить значительный стабилизирующий антитело эффект при использовании аспарагиновой кислоты или глутаминовой кислоты, в качестве разновидности противоиона в гистидиновом буфере или трис(гидроксиметил)аминометана, в частности, при использовании гистидин-аспартатного буфера или гистидин-глутаматного буфера, или трис(гидроксиметил)аминометан-аспартата или трис(гидроксиметил)аминометан-глутамата в качестве буфера. 5 н. и 14 з.п. ф-лы, 24 ил., 14 табл., 8 пр.
Description
Область изобретения
Настоящее изобретение касается содержащих антитела композиций, в частности, устойчивых высококонцентрированных содержащих антитела композиций.
Уровень техники
В последние годы существует возрастающая потребность в разработке самоинъектируемых содержащих антитела композициях для подкожных инъекций в соответствии с медицинскими потребностями. Разработка содержащих антитела композиций для подкожных инъекций вызывает необходимость в повышении концентрации антитела во вводимом растворе, поскольку отдельные дозы антитела очень высоки (приблизительно от 100 до 200 мг), и объем инъекции для подкожного введения, как правило, ограничен.
Высококонцентрированные содержащие антитела растворы имеют склонность к самостоятельному образованию высоковязких растворов из-за межмолекулярного взаимодействия и макромолекулярные характеристики белка. Кроме того, явление деградации, например, агрегация, становится проблематичным, когда белки хранятся в виде высококонцентрированных растворов, и, таким образом, такую деградацию необходимо предотвратить. В частности, высококонцентрированные содержащие антитела растворы склонны к образованию агрегатов во время замораживания-оттаивания или при хранении в жидком или замороженном состояниях в течение длительного времени (непатентные документы 1 и 2).
В настоящее время такие высококонцентрированные содержащие антитела композиции, как правило, приготавливают традиционным способом концентрирования путем лиофилизации (патентный документ 1), который представляет собой способ стабилизации высококонцентрированных содержащих антитела композиций. Согласно этому способу, высококонцентрированные содержащие антитела композиции получают путем лиофилизации раствора антитела относительно низкой концентрации и растворения в объеме воды, меньшем, чем объем до лиофилизации. В этом случае проблему вызывает повышенная вязкость растворенных композиций, поскольку должен добавляться криопротектор, такой, как сахар, для получения лиофилизированных композиций.
В этом аспекте этой проблемы можно избежать, если жидкую композицию приготавливать без лиофилизации. Однако, как описано выше, высококонцентрированные содержащие антитела жидкие композиции склонны к образованию агрегатов. Несмотря на это, в таких композициях существует большая потребность, поскольку содержащие антитела жидкие композиции легче поддаются обработке по сравнению с лиофилизированными композициями и легче могут быть рецептированы в композиции для предварительного наполнения шприцев.
Проводились разные исследования по стабилизации высококонцентрированных содержащих антитела жидких композиций (непатентные документы 1-4). Как известно из сообщений, гистидиновый буфер и аргинин могут использоваться в качестве буфера и стабилизатора, соответственно, в содержащих антитела жидких композициях (патентные документы 2, 3, 4, 5 и 6). Гистидиновый буфер обычно применяется в форме соли хлористоводородной кислоты. Недавно сообщалось о том, что гистидин-ацетат демонстрирует больший стабилизирующий эффект по сравнению с гистидин гидрохлоридом, и, таким образом, уксусная кислота может применяться как разновидность противоиона в гистидиновом буфере (патентный документ 6). В то же время, аргинин в качестве стабилизатора, как правило, применяется в форме аргинин гидрохлорида. Однако в некоторых случаях, достаточная устойчивость не достигается, когда хлористоводородную кислоту или уксусную кислоту используют в качестве разновидности противоиона к гистидину или аргинину. Таким образом, нужны более эффективные разновидности противоиона.
Документы существующего уровня техники
Патентные документы
Патентный документ 1: WO 1997/004801
Патентный документ 2: WO 2008/121615
Патентный документ 3: WO 2009/141239
Патентный документ 4: WO 2008/071394
Патентный документ 5: WO 2006/065746
Патентный документ 6: WO 2006/044908
Непатентные документы
Непатентный документ 1: Challenges in the development of high protein concentration formulations, J Pharm Sci, 2004, 93(6), 1390-1402
Непатентный документ 2: Curr Opin Biotechnol. 2009 Dec; 20(6): 708-14. Epub 2009 Oct 31
Непатентный документ 3: Antibody structure, instability, and formulation, J Pharm Sci, 2007, 96(1), 1-26
Непатентный документ 4: Formulation and delivery issues for monoclonal antibody therapeutics, Adv Drug Del Rev, 2006, 58(5-6), 686-706
Описание изобретения
[Проблемы, решаемые благодаря изобретению]
Цель настоящего изобретения состоит в обеспечении устойчивых высококонцентрированных содержащих антитела композиций, подходящих для подкожного введения.
[Средства решения проблем]
Для достижения вышеописанной цели авторы настоящего изобретения провели специальные исследования. В результате авторами настоящего изобретения было обнаружено, что значительно более высокий эффект стабилизации достигается благодаря применению кислой аминокислоты, аспарагиновой кислоты или глутаминовой кислоты в качестве разновидностей противоиона в гистидиновом буфере или трис(гидроксиметил)аминометановом буфере, т.е., гистидин-аспартатном буфере или гистидин-глутаматном буфере или трис(гидроксиметил)аминометан-аспартатном буфере или трис(гидроксиметил)аминометан-глутаматном буфере по сравнению с традиционными буферами для фармацевтических композиций, такими, как гистидин-гидрохлоридный буфер и гистидин-ацетатный буфер. Авторами настоящего изобретения также было обнаружено, что значительно более высокий эффект стабилизации достигается благодаря применению аргинин-аспартата или аргинин-глутамата в качестве стабилизатора, т.е., благодаря применению кислой аминокислоты, аспарагиновой кислоты или глутаминовой кислоты как разновидности противоиона к основной аминокислоте, такой, как аргинин, которая применяется в качестве стабилизатора, по сравнению с традиционными стабилизаторами для фармацевтических композиций, такими, как аргинин гидрохлорид. Таким образом, авторами настоящего изобретения было обнаружено, что устойчивые высококонцентрированные содержащие антитела жидкие композиции могут быть получены путем их добавления в качестве стабилизатора, и, таким образом, было выполнено настоящее изобретение.
Конкретно настоящее изобретение обеспечивает:
[1] устойчивую содержащую антитело композицию, включающую основную аминокислоту-аспартат или основную аминокислоту-глутамат;
[2] композицию [1], включающую гистидин-аспартатный буфер или гистидин-глутаматный буфер, причем основной аминокислотой является гистидин;
[3] композицию [1], включающую аргинин-аспартат или аргинин-глутамат, причем основной аминокислотой является аргинин;
[4] устойчивую содержащую антитело композицию, включающую гистидин-аспартатный буфер или гистидин-глутаматный буфер и аргинин-аспартат или аргинин-глутамат;
[5] устойчивую содержащую антитело композицию, включающую трис(гидроксиметил)аминометан-аспартатный буфер или трис(гидроксиметил)аминометан-глутаматный буфер;
[6] устойчивую содержащую антитело композицию, включающую трис(гидроксиметил)аминометан-аспартатный буфер и трис(гидроксиметил)аминометан-глутаматный буфер;
[7] композицию в соответствии с любым из пунктов с [1] по [6], которая по сути не содержат иона хлорида и ион ацетата;
[8] композицию в соответствии с любым из пунктов с [1] по [7], которая дополнительно включает сахар;
[9] композицию в соответствии с любым из пунктов с [1] по [8], причем антитело является гуманизированным антителом или человеческим антителом;
[10] композицию в соответствии с любым из пунктов с [1] по [9], причем антитело было модифицировано для обеспечения изоэлектрической точки (pI) от 5 до 8;
[11] композицию в соответствии с любым из пунктов с [1] по [10], причем концентрация антитела составляет 50 мг/мл или более;
[12] композицию в соответствии с любым из пунктов с [1] по [10], причем концентрация антитела составляет от 50 до 250 мг/мл;
[13] композицию в соответствии с любым из пунктов с [1] по [12], которая является жидкой композицией;
[14] композицию в соответствии с [13], причем вязкость жидкой композиции составляет 30 мПа⋅с или менее;
[15] композицию в соответствии с [13] или [14], причем жидкая композиция является устойчивой при температуре от 2°С до 8°С в течение как минимум шести месяцев;
[16] композицию в соответствии с любым из пунктов с [13] по [15], которая не подвергалась лиофилизации во время приготовления композиции;
[17] композицию в соответствии с любым из пунктов с [13] по [16], которую хранят в замороженном виде при температуре от -30°С до -10°С;
[18] композицию в соответствии с любым из пунктов с [1] по [12], причем композиция является лиофилизированной композицией;
[19] композицию в соответствии с любым из пунктов с [2], [4] и с [7] по [18], причем концентрация буфера составляет от 5 до 100 мМ;
[20] композицию в соответствии с любым из пунктов с [3] и с [7] по [19], причем концентрация аргинина составляет от 5 до 300 мМ;
[21] композицию в соответствии с любым из пунктов с [1] по [20], причем антитело является антителом к рецептору IL-6;
[22] композицию в соответствии с любым из пунктов с [2], [4] и с [7] по [21], причем буфер по сути включает только аминокислоту(ы);
[23] композицию в соответствии с любым из пунктов с [1] по [22], которая предназначается для подкожного введения;
[24] способ подавления образования агрегатов во время хранения высококонцентрированной содержащей антитело композиции в замороженном виде путем применения аспарагиновой кислоты или глутаминовой кислоты в качестве разновидности противоиона к буферу в композиции;
[25] способ подавления образования агрегатов во время хранения высококонцентрированной содержащей антитело композиции в виде жидкости путем применения аспарагиновой кислоты или глутаминовой кислоты в качестве разновидности противоиона к буферу в композиции;
[26] способ подавления образования агрегатов во время хранения высококонцентрированной содержащей антитело композиции в замороженном виде путем применения аспарагиновой кислоты или глутаминовой кислоты в качестве разновидности противоиона к стабилизатору в композиции; и
[27] способ подавления образования агрегатов во время хранения высококонцентрированной содержащей антитело композиции в виде жидкости путем применения аспарагиновой кислоты или глутаминовой кислоты в качестве разновидности противоиона к стабилизатору в композиции.
Кроме того, настоящее изобретение касается применения основной аминокислоты-аспартата или основной аминокислоты-глутамата в производстве устойчивой содержащей антитело композиции; и аспарагиновой кислоты или глутаминовой кислоты в качестве разновидности противоиона к буферу или стабилизатору в высококонцентрированной содержащей антитело композиции, которые применяются согласно способу подавления агрегации во время хранения композиции в замороженном виде или в виде жидкости.
[Эффект изобретения]
Настоящее изобретение обеспечивает содержащие антитела композиции, обладающие превосходной устойчивостью. Настоящее изобретение также может обеспечивать высококонцентрированные содержащие антитела композиции путем подавления образования агрегатов в замороженных и жидких композициях. Высококонцентрированные содержащие антитела композиции согласно настоящему изобретению могут сохранять устойчивость при хранении в жидком или замороженном состоянии в течение длительного периода. Кроме того, композиции согласно настоящему изобретению обладают повышенной устойчивостью к нагрузкам при замораживании-оттаивании. Кроме того, в отношении осмотического давления стабилизация может достигаться без повышения осмотического давления путем применения аспарагиновой кислоты и глутаминовой кислоты вместо традиционно применяемых хлористоводородной кислоты и уксусной кислоты в качестве разновидности противоиона к гистидину, аргинину или трис(гидроксиметил)аминометану. Преимущество состоит в достижении стабилизации без повышения осмотического давления с целью получения почти изотонических, устойчивых композиций, таких, как композиции для подкожного (SC) введения.
Краткое описание фигур
Фиг.1 представляет график зависящих от времени изменений количества (%) агрегата во время хранения Mab1 при 40°С на вертикальной оси.
Фиг.2 представляет график зависящих от времени изменений количества (%) агрегата во время хранения Mab2 при 40°С на вертикальной оси.
Фиг.3 представляет график зависящих от времени изменений количества (%) агрегата во время замораживания-оттаивания Mab1 на вертикальной оси.
Фиг.4 представляет график зависящих от времени изменений количества (%) агрегата во время хранения Mab1 при 25°С на вертикальной оси.
Фиг.5 представляет график зависящих от времени изменений количества (%) агрегата во время хранения Mab1 при 5°С на вертикальной оси.
Фиг.6 представляет график зависящих от времени изменений количества (%) агрегата во время замораживания-оттаивания (от -20°С до комнатной температуры) Mab1 на вертикальной оси.
Фиг.7 представляет график, показывающий количество (%) агрегата после трех месяцев хранения Mab1 при -20°С на вертикальной оси.
Фиг.8 представляет график зависящих от времени изменений количества (%) агрегата во время замораживания-оттаивания (-20°С до комнатной температуры) Mab2 на вертикальной оси.
Фиг.9 представляет график, показывающий количество (%) агрегата после хранения Mab1 при -20°С на вертикальной оси.
Фиг.10 представляет график, показывающий количество (%) агрегата после замораживания-оттаивания (-20°С до комнатной температуры) Mab1 на вертикальной оси.
Фиг.11 представляет график, показывающий количество (%) агрегата после трех месяцев хранения Mab1 при 25°С на вертикальной оси.
Фиг.12 представляет график зависящих от времени изменений количества (%) агрегата во время хранения Mab2 при 25°С на вертикальной оси.
Фиг.13 представляет график зависящих от времени изменений количества (%) агрегата во время хранения Mab3 при 25°С на вертикальной оси.
Фиг.14 представляет график зависящих от времени изменений количества (%) агрегата во время замораживания-оттаивания (от -20°С до комнатной температуры) Mab3 на вертикальной оси.
Фиг.15 представляет график зависящих от времени изменений количества (%) агрегата во время хранения Mab4 при 25°С на вертикальной оси.
Фиг.16 представляет график зависящих от времени изменений количества (%) агрегата во время замораживания-оттаивания (от -20°С до комнатной температуры) Mab4 на вертикальной оси.
Фиг.17 представляет график зависящих от времени изменений количества (%) агрегата во время хранения Mab1, Mab2 и Mab3 при 25°С на вертикальной оси.
Фиг.18 представляет график зависящих от времени изменений количества (%) агрегата во время замораживания-оттаивания (от -20°С до комнатной температуры) Mab1, Mab2 и Mab3 на вертикальной оси.
Фиг.19 представляет график зависящих от времени изменений количества (%) агрегата во время хранения Mab5 при 25°С на вертикальной оси.
Фиг.20 представляет график зависящих от времени изменений количества (%) агрегата во время замораживания-оттаивания (от -20°С до комнатной температуры) Mab5 на вертикальной оси.
Фиг.21 представляет график зависящих от времени изменений количества (%) агрегата во время хранения Mab1, Mab2, Mab3 Mab4, и Mab5 при 25°С на вертикальной оси.
Фиг.22 представляет график зависящих от времени изменений количества (%) агрегата во время замораживания-оттаивания (от -20°С до комнатной температуры) Mab1, Mab2, Mab3, Mab4 и Mab5 на вертикальной оси.
Фиг.23 представляет график зависящих от времени изменений количества (%) агрегата во время хранения Mab1, Mab2 и Mab3 при 25°С на вертикальной оси.
Фиг.24 представляет график зависящих от времени изменений количества (%) агрегата во время замораживания-оттаивания (от -20°С до комнатной температуры) Mab1, Mab2 и Mab3 на вертикальной оси.
Способ осуществления изобретения
Далее настоящее изобретение описывается более подробно.
Настоящее изобретение обеспечивает устойчивые содержащие антитела композиции, включающие основную аминокислоту-аспартат или основную аминокислоту-глутамат. Согласно настоящему изобретению, к основным аминокислотам относятся, например, гистидин, аргинин и лизин. Кроме того, согласно настоящему изобретению, буферы основных аминокислот, такие, как трис(гидроксиметил)аминометан, также включаются в определение основных аминокислот согласно настоящему изобретению.
Так, настоящее изобретение обеспечивает устойчивые содержащие антитела композиции, включающие гистидин-аспартатный буфер или гистидин-глутаматный буфер, в которых основной аминокислотой является гистидин. Кроме того, настоящее изобретение обеспечивает устойчивые содержащие антитела композиции, включающие аргинин-аспартат или аргинин-глутамат в качестве стабилизатора, в которых основной аминокислотой является аргинин. Настоящее изобретение также обеспечивает устойчивые содержащие антитела композиции, включающие гистидин-аспартатный буфер или гистидин-глутаматный буфер и аргинин-аспартат или аргинин-глутамат. Кроме того, настоящее изобретение обеспечивает устойчивые содержащие антитела композиции, включающие трис(гидроксиметил)аминометан-аспартатный буфер или трис(гидроксиметил)аминометан-глутаматный буфер. Настоящее изобретение также обеспечивает устойчивые содержащие антитела композиции, включающие трис(гидроксиметил)аминометан-аспартатный буфер и трис(гидроксиметил)аминометан-глутаматный буфер. Содержащая антитела композиция согласно настоящему изобретению означает композицию, включающую антитело в качестве активного ингредиента и приготавливается в форме, обеспечивающей возможность введения животным, включая человека.
В контексте данного описания "устойчивая содержащая антитела композиция" означает композицию, в которой практически не образуются агрегаты белков, таких, как антитело, в частности, композицию, в которой деградация, например, образование нерастворимых и растворимых агрегатов, практически не происходит во время хранения в жидком или замороженном состоянии.
Концентрация антитела в композиции согласно настоящему изобретению особенно не ограничивается; однако композиция предпочтительно содержит высококонцентрированное антитело. Концентрация антитела предпочтительно составляет 50 мг/мл или более, более предпочтительно - 100 мг/мл или более, еще более предпочтительно - 120 мг/мл или более, еще более предпочтительно - 150 мг/мл или более, и еще более предпочтительно - 180 мг/мл или более. Конкретного верхнего предела концентрации антитела в композиции согласно настоящему изобретению не предусмотрено; однако предельное значение, как правило, составляет 250 мг/мл.
В отношении антител, используемых согласно настоящему изобретению, особенных ограничений нет, и главным условием является их связывание с нужным антигеном. Антитела могут быть поликлональными или моноклональными антителами; однако моноклональным антителам отдается предпочтение, поскольку они могут устойчиво вырабатываться как гомогенные антитела.
К моноклональным антителам, используемым согласно настоящему изобретению, относятся не только антитела, взятые из организма животных, включая человека, мышей, крыс, хомяков, кролей, овец, верблюдов и обезьян, но и искусственно модифицированные гены рекомбинантных антител, таких, как химерные антитела, гуманизированные антитела и биспецифические антитела. К антителам согласно настоящему изобретению также относятся гены рекомбинантных антител, полученные в результате искусственной модификации постоянных областей антитела для изменения физических свойств молекулы антитела (в частности, изменения изоэлектрической точки (pI), улучшения аффинности к Fc-рецептору и т.п.) с целью улучшения устойчивости в крови и in vivo фармакокинетики.
Иммуноглобулиновый класс антител, используемых согласно настоящему изобретению, особенно не ограничивается; и этот класс может быть любым классом, включающим IgG, например, IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4, IgA, IgD, IgE и IgM. Однако предпочтение отдается IgG и IgM.
Антитела, используемые согласно настоящему изобретению, также включают не только целые антитела, но и фрагменты антител, такие, как Fv, Fab, и F(ab)2, и мини-антитела (антитела с низкой молекулярной массой), такие, как одновалентные или двухвалентные одноцепочечные Fv, возникающие в результате связывания вариабельных областей антитела через линкер, такой, как пептидный линкер (scFv, sc(Fv)2, диатела, такие, как димер scFv, и т.п.).
Вышеописанные антитела, используемые согласно настоящему изобретению, могут быть получены способами, известными специалистам в данной области.
Как правило, вырабатывающие моноклональные антитела гибридомы могут быть получены описанными ниже традиционными способами. В частности, иммунизацию осуществляют традиционным способом иммунизации, применяя нужный антиген или клетки, экспрессирующие нужный антиген как сенсибилизирующий антиген. Подготовленные иммуноциты сливают с известными родительскими клетками, применяя традиционный способ слияния клеток. Слитые клетки отбирают на вырабатывающие моноклональные антитела клетки (гибридомы) традиционными способами отбора. Гибридомы могут быть получены, например, согласно способу, описанному в публикации Milstein et al. (Kohler, G. и Milstein, С., Methods Enzymol. (1981) 73: 3-46). Если антиген обладает низкой иммуногенностью, иммунизация может производиться с применением антигена, связанного с иммуногенными макромолекулами, такими, как альбумин.
В альтернативном варианте возможно использование генов рекомбинантных антител, полученных с применением технологий рекомбинации генов, при которых гены антител клонируют из гибридом и вставляют в соответствующие векторы, и полученные в результате векторы вводят в организмы-хозяева (см., например, Carl, А.К. Borrebaeck, James, W. Larrick, Therapeutic Monoclonal Antibodies, Published in the United Kingdom by Macmillan Publishers, 1990). Так, кДНК для вариабельных областей (V-областей) антитела синтезируют из мРНК гибридом с использованием обратной транскриптазы. Когда получают ДНК, кодирующую нужную V-область антитела, ДНК связывают с ДНК, кодирующей нужную константную область (С-область) антитела. Полученную в результате последовательность вставляют в вектор экспрессии. В альтернативном варианте Кодирующая V-область антитела ДНК может быть вставлена в вектор экспрессии, включающий ДНК С-области антитела. Полученную в результате последовательность вставляют в вектор экспрессии таким образом, чтобы она экспрессировалась под контролем участка регулирования экспрессии, например, энхансера и промотора. Затем клетки-хозяева трансформируют вектором экспрессии для экспрессии антитела.
Согласно настоящему изобретению, искусственно модифицированные гены рекомбинантных антител, таких, как химерные и гуманизированные антитела, могут применяться для снижения гетерологической антигенности против человека. Такие модифицированные антитела могут вырабатываться с применением известных способов. Химерное антитело является антителом, имеющим вариабельные области тяжелой цепи и легкой цепи антитела из организма отличного от человека млекопитающего, такого, как мышь, и тяжелой цепи и легкой цепи константных областей человеческого антитела. Химерное антитело может быть получено путем связывания ДНК, кодирующей вариабельные области антитела мыши с ДНК, кодирующей константные области человеческого антитела, вставки лиганда в вектор экспрессии с последующей вставкой вектора в организм-хозяин для экспрессии.
Гуманизированное антитело также называют реконструированным человеческим антителом, получаемым путем замещения гипервариабельного участка (CDR) человеческого антитела гипервариабельным участком антитела, взятого из организма отличного от человека млекопитающего, например, мыши. Традиционные технологии рекомбинации генов известны. Так, последовательность ДНК конструируют таким образом, чтобы она включала CDR антитела мыши, связанный с каркасным участком (FR) человеческого антитела, и синтезируют путем PCR с применением нескольких олигонуклеотидов, предусмотренных с перекрывающимися участками на концах. Полученную ДНК лигируют с ДНК, кодирующей константную область человеческого антитела, а затем вставляют в вектор экспрессии. Вектор экспрессии включают в организм-хозяин для образования гуманизированного антитела (см., Публикацию европейской патентной заявки № ЕР 239400 и WO 96/02576). FR CDR-связанного человеческого антитела выбирают таким образом, чтобы гипервариабельный участок образовывал предпочтительный антиген-связывающий домен. Аминокислоты в каркасном участке вариабельной области антитела могут быть замещены в соответствии с требованием, таким образом, чтобы гипервариабельный участок реконструированного человеческого антитела образовывал соответствующий антиген-связывающий домен (Sato, К. et al., Cancer Res. (1993) 53, 851-856).
Существуют способы замещения аминокислот в антителах для улучшения активности антител, их физических свойств, фармакокинетики, безопасности и т.п. Примеры таких способов описываются ниже. К антителам согласно настоящему изобретению также относятся имеющие такие аминокислотные замещения.
Описываются способы замещения аминокислот в вариабельных областях IgG-антител, и к ним относятся гуманизация (Tsurushita N, Hinton PR, Kumar S., Design of humanized antibodies: from anti-Tac to Zenapax., Methods. 2005 May; 36(1): 69-83); матричного созревания для повышения активности связывания через замещение аминокислот в гипервариабельном участке (CDR) (Rajpal A, Beyaz N, Haber L, Cappuccilli G, Yee H, Bhatt RR, Takeuchi T, Lerner RA, Crea R., A general method for greatly improving the affinity of antibodies by using combinatorial libraries., Proc Natl Acad Sci USA. 2005 Jun 14; 102(24): 8466-71); и улучшения физико-химической устойчивости через замещение аминокислот в каркасе (FR) (Ewert S, Honegger A, Pluckthun A., Stability improvement of antibodies for extracellular and intracellular applications: CDR grafting to stable frameworks and structure-based framework engineering., Methods. 2004 Oct; 34(2): 184-99. Review). Также известны способы повышения опосредованной антителами клеточной цитотоксичности (ADCC) и комплементзависимой цитотоксичности (CDC) путем замещения аминокислот в Fc-домене IgG-антитела (Kim SJ, Park Y, Hong HJ., Antibody engineering for the development of therapeutic antibodies., Mol Cells. 2005 Aug 31; 20(1): 17-29. Review). Кроме того, помимо способов повышения эффекторных функций, существуют публикации о способах улучшения времени полужизни антитела в крови путем замещения аминокислот в Fc (Hinton PR, Xiong JM, Johlfs MG, Tang MT, Keller S, Tsurushita N., An engineered human IgG1 antibody with longer serum half-life., J Immunol. 2006 Jan 1; 176(1): 346-56; Ghetie V, Popov S, Borvak J, Radu C, Matesoi D, Medesan C, Ober RJ, Ward ES., Increasing the serum persistence of an IgG fragment by random mutagenesis., Nat Biotechnol. 1997 Jul; 15(7): 637-40). Другая известная технология включает способ замещения аминокислот для контроля изоэлектрической точки (pI) антитела с целью улучшения устойчивости в крови или in vivo фармакокинетики, в частности, способ модификации аминокислотных остатков, открытых на поверхности антитела, для контроля pI антитела (документ WO 07/114319). Также известны различные способы замещения аминокислот в константных областях с целью улучшения физических свойств антитела (документ WO 09/41613).
Снижение дозы антитела в качестве фармацевтического средства или увеличение интервала введения антитела, очевидно, можно обеспечить путем увеличения периода полужизни антитела или его удерживания в плазме. Перспективные технологии, позволяющие этого достичь включают способ уменьшения изоэлектрической точки антитела (документ WO 07/114319). Композиции согласно настоящему изобретению обладают высоким стабилизирующим эффектом для антител с измененной изоэлектрической точкой. PI-модифицированное антитело означает модифицированное антитело, pI которого ниже, чем показатель исходного антитела, на один или более, предпочтительно два или более, и более предпочтительно - три или более. Как правило, предполагается, что природные (или обычные) антитела имеют изоэлектрическую точку в пределах от 7,5 до 9,5. Композиции согласно настоящему изобретению имеют высокое стабилизирующее влияние, в частности, на антитела с низкой изоэлектрической точкой, которая вряд ли существует в природе. Изоэлектрическая точка таких антител может составлять от 5,0 до 8,0, предпочтительно от 5,0 до 7,5, более предпочтительно - от 5,0 до 7,0, и еще более предпочтительно - от 5,5 до 6,5. Как описывается ниже в Примерах, изоэлектрическая точка Mab1, полученного путем модификации аминокислотной последовательности Mab2 (изоэлектрическая точка = 9,3) для контроля изоэлектрической точки, составляла 5,8.
Способы получения человеческих антител также известны. Например, нужные человеческие антитела с антигенсвязывающей активностью могут быть получены путем сенсибилизации человеческих лимфоцитов нужным антигеном или клетками, экспрессирующими нужный антиген in vitro; и слияния сенсибилизированных лимфоцитов с клетками человеческой миеломы, такими, как U266 (см. Публикацию японской патентной заявки Kokoku № (JP-B) Н01-59878 (прошедшая экспертизу утвержденная японская патентная заявка, опубликованная для противопоставления)). В альтернативном варианте нужные человеческие антитела также могут быть получены путем иммунизации трансгенных животных, имеющих полный набор генов человеческих антител, антигеном (см. документы WO 93/12227, WO 92/03918, WO 94/02602, WO 94/25585, WO 96/34096 и WO 96/33735). Кроме того, известны способы получения человеческих антител путем пэннинга с библиотекой человеческих антител. Например, вариабельные области человеческих антител могут экспрессироваться как одноцепочечные антитела (scFvs) на поверхности фагов с применением фаг-дисплейного метода, и затем могут отбираться фаги, связывающиеся с антигеном. Гены отобранных фагов анализируют для определения последовательностей ДНК, кодирующих вариабельные области человеческих антител, которые связываются с антигеном. При распознавании последовательностей ДНК scFvs, которые связываются с антигеном, могут быть построены соответствующие векторы экспрессии, включающие эти последовательности, для получения человеческих антител. Такие способы уже хорошо известны. См. документы WO 92/01047, WO 92/20791, WO 93/06213, WO 93/11236, WO 93/19172, WO 95/01438 и WO 95/15388. Антитела, применяемые согласно настоящему изобретению, также включают такие человеческие антитела.
Когда гены антител выделяют и вводят в соответствующие организмы-хозяева для вырабатывания антител, хозяева и векторы экспрессии могут использоваться в соответствующих комбинациях. Если в качестве хозяев используются эукариотные клетки, могут использоваться животные клетки, растительные клетки и грибковые клетки. К животным клеткам относятся: (1) клетки млекопитающих, такие, как СНО, COS, клетки миеломы, клетки почек новорожденного хомяка (ВНК), HeLa и Vero; (2) клетки земноводных, такие, как ооциты шпорцевой лягушки Xenopus; и (3) клетки насекомых, такие, как sf9, sf21 и Tn5. К известным растительным клеткам относятся клетки, полученные из рода Nicotiana, например, Nicotiana tabacum, которые могут культивироваться в виде каллюса. К известным грибковым клеткам относятся дрожжи, например, рода Saccharomyces, например, Saccharomyces cerevisiae, и нитчатые грибы, например, рода Aspergillus, например, Aspergillus niger. Если используются прокариотные клетки, могут использоваться продукционные системы, в которых используются бактериальные клетки. К известным бактериальным клеткам относятся Escherichia coli (E.coli) и Bacillus subtilis. Антитела могут быть получены путем введения нужных генов антител в эти клетки при помощи трансформации с последующим культивированием трансформированных клеток in vitro.
Антитела, применяемые согласно настоящему изобретению, также включают фрагменты антител, мини-антитела и модифицированные антитела. К таким фрагментам антител и мини-антителам относятся, например, Fab, F(ab’)2, Fv или одно-, двух- или многовалентные одноцепочечные Fv (scFv, sc(Fv)2 и т.п.), образующиеся в результате связывания Н-цепочечных и L-цепочечных Fv через соответствующие линкеры (Huston J.S. et al., (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 85: 5879-5883). В частности, такие фрагменты антител образуются при обработке антител ферментом, таким, как папаин или пепсин. В альтернативном варианте ген, кодирующий фрагмент антитела, строят, вставляют в вектор экспрессии и экспрессируют в соответствующих клетках-хозяевах (см., например, Со, М.S. et al., J. Immunol. (1994) 152, 2968-2976; Better, M. и Horwitz, A.H., Methods Enzymol. (1989) 178, 476-496; Pluckthun, А. и Skerra, A., Methods Enzymol. (1989) 178, 497-515; Lamoyi, E., Methods Enzymol. (1986) 121, 652-663; Rousseaux, J. et al., Methods Enzymol. (1986) 121, 663-669; Bird, R.E. и Walker, B.W., Trends Biotechnol. (1991) 9, 132-137).
К модифицированным антителам относятся антитела, связанные с полиэтиленгликолем (PEG) или разными молекулами, такими, как цитотоксические средства (Farmaco. 1999 Aug 30; 54(8): 497-516; Cancer J. 2008 May-Jun; 14(3): 154-69). К "антителам" согласно настоящему изобретению также относятся такие модифицированные антитела. Такие модифицированные антитела могут быть приготовлены путем химической модификации полученных антител. Такие способы являются традиционными в данной области.
К антителам, которые могут содержаться в композициях согласно настоящему изобретению, помимо прочих, относятся антитела против тканевого фактора, антитела против рецептора IL-6, антитела против IL-6, моноклональные антитела против HM1.24-антигена, антитела против родственного паратиреоидному гормону пептида (антитела против PTHrP), антитела против глипикана-3, антитела против ганглиозида GM3, антитела против агониста ТРО-рецептора, антитела в качестве функционального заместителя фактора коагуляции VIII, антитела против рецептора IL31, антитела против HLA, антитела против AXL, антитела против CXCR4, антитела против NR10 и биспецифические антитела против фактора IX и фактора X.
К предпочтительным реконструированным гуманизированным антителам, применяемым согласно настоящему изобретению, относятся гуманизированные антитела против рецептора интерлейкина 6 (IL-6) (тоцилизумаб, hPM-1 и MRA) (см. документ WO 92/19759), гуманизированные моноклональные антитела против НМ1.24-антигена (см. документ WO 98/14580), гуманизированные антитела против родственного паратиреоидному гормону пептида (антитела против PTHrP) (см. документ WO 98/13388), гуманизированные антитела против тканевого фактора (см. документ WO 99/51743), гуманизированные антитела против глипикана-3 IgG1κ (см. документ PCT/JP 05/013103) и гуманизированные антитела против NR10 (см. документ WO 2009/072604). Особое предпочтение среди гуманизированных антител, применяемых согласно настоящему изобретению, отдается гуманизированным антителам против рецептора IL-6.
К предпочтительным человеческим IgM-антителам относятся рекомбинантные человеческие IgM-антитела против ганглиозида GM3 (см. документ WO 05/05636).
К предпочтительным мини-антителам относятся диатела против агониста ТРО-рецептора (см. документ WO 02/33072) и диатела против агониста CD47 (см. документ WO 01/66737).
Кроме того, к антителам с улучшенной изоэлектрической точкой относятся, например, Mab1 (Н-цепь/SEQ ID NO: 1; L-цепь/SEQ ID NO: 2), которое является антителом к рецептору IL-6, описанным в документе WO 2009/041621, гуманизированные антитела против NR10 и полностью гуманизированные антитела NS22, получаемые при помощи способа, описанного в Примере 12 документа WO 2009/072604.
В предпочтительном варианте осуществления буфер композиции согласно настоящему изобретению (например, гистидин-аспартатный буфер, гистидин-глутаматный буфер, трис(гидроксиметил)аминометан-аспартатный буфер или трис(гидроксиметил)аминометан-глутаматный буфер) получают путем титрования водного раствора, содержащего основную аминокислоту, такую, как гистидин или трис(гидроксиметил)аминометан, в форме свободной аминокислоты водным раствором, содержащим аспарагиновую кислоту и/или глутаминовую кислоту в форме свободной аминокислоты. В альтернативном варианте буфер может быть получен путем добавления ингредиентов в обратном порядке или путем прямого титрования с порошками.
В предпочтительном варианте осуществления аргинин-аспартат или аргинин-глутамат в композиции согласно настоящему изобретению представляет собой соль, приготовленную путем титрования водного раствора, содержащего аспарагиновую кислоту (свободную аминокислоту) и/или глутаминовую кислоту (свободную аминокислоту) в форме свободной аминокислоты с водным раствором, содержащим аргинин (свободное основание) в форме свободной аминокислоты. В альтернативном варианте соль может быть получена путем добавления ингредиентов в обратном порядке или путем прямого титрования с порошками.
Авторы настоящего изобретения осуществляли исследование с замораживанием-оттаиванием, исследование с термическим ускорением, исследование долгосрочной устойчивости и исследование хранение в замороженном состоянии для оценки влияния различных добавок на устойчивость высококонцентрированных композиций антитела во время хранения. В результате авторами настоящего изобретения было обнаружено, что образование агрегатов значительно подавляется при использовании кислой аминокислоты, аспарагиновой кислоты или глутаминовой кислоты в качестве разновидности противоиона в гистидиновом буфере, т.е., при использовании гистидин-аспартатного буфера или гистидин-глутаматного буфера в качестве буфера по сравнению с традиционными буферами для фармацевтических композиций, таких, как гистидин-гидрохлоридный буфер и гистидин-ацетатный буфер.
Авторами настоящего изобретения также было обнаружено, что больший стабилизирующий эффект достигается путем добавления аргинин-аспартата или аргинин-глутамата по сравнению с аргинин гидрохлоридом, о котором сообщалось в качестве стабилизатора для содержащей антитела композиции. Ниже в Примерах приведены результаты оценки с использованием гуманизированного антитела к рецептору IL-6.
В частности, устойчивые высококонцентрированные содержащие антитела композиции, имеющие низкий уровень агрегации антител, могут быть получены путем добавления гистидин-аспартатного буфера или гистидин-глутаматного буфера или трис(гидроксиметил)аминометан-аспартатного буфера или трис(гидроксиметил)аминометан-глутаматного буфера. Кроме того, более устойчивые высококонцентрированные содержащие антитела композиции, имеющие значительно более низкий уровень агрегации антител, могут быть получены путем добавления аргинин-аспартата или аргинин-глутамата в качестве стабилизатора. Таким образом, настоящее изобретение касается способов значительного подавления образования агрегатов путем использования гистидин-аспартатного буфера или гистидин-глутаматного буфера или трис(гидроксиметил)аминометан-аспартатного буфера или трис(гидроксиметил)аминометан-глутаматного буфера в качестве буфера для высококонцентрированных содержащих антитела растворов и способов значительного подавления образования агрегатов путем добавления аргинин-аспартата или аргинин-глутамата в качестве стабилизатора для высококонцентрированных содержащих антитела растворов.
В одном варианте осуществления к способам согласно настоящему изобретению относятся, например, способы подавления образования агрегатов во время хранения высококонцентрированных содержащих антитела композиций в замороженном состоянии или при замораживании-оттаивании путем применения аспарагиновой кислоты или глутаминовой кислоты в качестве разновидности противоиона к буферу (например, гистидиновому буферу или трис(гидроксиметил)аминометановому буферу) или в качестве разновидности противоиона к стабилизатору (например, аргинину) в композициях.
В другом варианте осуществления к способам согласно настоящему изобретению относятся, например, способы подавления образования агрегатов во время хранения высококонцентрированных содержащих антитела композиций в жидком состоянии путем применения аспарагиновой кислоты или глутаминовой кислоты в качестве разновидности противоиона к буферу (например, гистидиновому буферу или трис(гидроксиметил)аминометановому буферу) или в качестве разновидности противоиона к стабилизатору (например, аргинину) в композициях.
Согласно настоящему изобретению, буферы, которые могут применяться вместо гистидинового буфера, и в которых аспарагиновую кислоту или глутаминовую кислоту используют в качестве разновидности противоиона, включают трис(гидроксиметил)аминометан (Tris) и имидазол. Такие буферы также могут добавляться к гистидиновому буферу согласно настоящему изобретению.
Согласно настоящему изобретению, стабилизаторы, к которым аспарагиновая кислота или глутаминовая кислота могут использоваться в качестве разновидности противоиона, включают аргининамид, лизин, меглумин, спермин, спермидин, магний, кальций, натрий и калий, дополнительно к аргинину.
Как описано выше, настоящее изобретение обеспечивает устойчивые содержащие антитела композиции, включающие гистидин-аспартатный буфер или гистидин-глутаматный буфер, или трис(гидроксиметил)аминометан-аспартатный буфер или трис(гидроксиметил)аминометан-глутаматный буфер. Значительно больший стабилизирующий эффект достигается в содержащей антитела композиции согласно настоящему изобретению при дополнительном содержании в ней аргинин-аспартата или аргинин-глутамата. Таким образом, настоящее изобретение касается содержащей антитела композиции, включающей соль, которая сочетает в жидкости основную аминокислоту, такую, как гистидин или аргинин (предпочтительно гистидин и/или аргинин) или трис(гидроксиметил)аминометан с аспарагиновой кислотой или глутаминовой кислотой.
Гистидин, применяемый согласно настоящему изобретению, может представлять собой сам гистидин или его производную, причем особое предпочтение отдается L-гистидину. Аргинин применяемый согласно настоящему изобретению, может представлять собой сам аргинин, его производную или его соль, причем особое предпочтение отдается L-аргинину или его соли. Предпочтительно соли аргинина включают аспартатную соль и глутаматную соль.
В композициях согласно настоящему изобретению концентрация (количество) гистидин-аспартатного буфера или гистидин-глутаматного буфера предпочтительно составляет от 1 до 100 мМ, более предпочтительно - от 5 до 100 мМ, еще более предпочтительно - от 5 до 50 мМ, и еще более предпочтительно - от 10 до 25 мМ.
В композициях согласно настоящему изобретению концентрация (количество) аргинина предпочтительно составляет от 5 до 300 мМ, более предпочтительно - от 25 до 200 мМ, и еще более предпочтительно - от 50 до 150 мМ.
Композиции согласно настоящему изобретению могут быть растворами (содержащими жидкие композиции антител) или лиофилизированными композициями. Жидкие композиции согласно настоящему изобретению также включают растворы перед этапом(ами) лиофилизации и разбавленные растворы. Жидкие композиции согласно настоящему изобретению предпочтительно получают без этапа(ов) лиофилизации в процессе производства. В то же время, лиофилизированные композиции согласно настоящему изобретению могут быть получены путем лиофилизации жидких композиций согласно настоящему изобретению с применением способов, известных специалистам в данной области.
Уровень рН композиций согласно настоящему изобретению предпочтительно составляет от 4 до 8, более предпочтительно - от 5,0 до 7,5, и еще более предпочтительно - от 5,5 до 6,5.
Вязкость жидких композиций согласно настоящему изобретению при комнатной температуре (25°С) предпочтительно составляет 30 мПа⋅с или менее, более предпочтительно - 20 мПа⋅с или менее, и еще более предпочтительно - 15 мПа⋅с или менее.
Значительных изменений не наблюдается для жидких композиций согласно настоящему изобретению в течение как минимум 6 месяцев, предпочтительно 12 месяцев, более предпочтительно - двух лет, еще более предпочтительно - трех лет в низкотемпературных условиях (от 2°С до 8°С) или в течение как минимум шести месяцев, предпочтительно одного года, и более предпочтительно - двух лет при комнатной температуре (от 22°С до 28°С). В частности, настоящее изобретение касается жидких композиций, устойчивых в течение как минимум шести месяцев при температуре от 22°С до 28°С.
Жидкие композиции согласно настоящему изобретению могут замораживаться и храниться при температуре в пределах от -30°С до -10°С.
Композиции согласно настоящему изобретению дополнительно могут содержать поверхностно-активные вещества. Применяемые согласно настоящему изобретению предпочтительные поверхностно-активные вещества включают полиоксиэтиленовые эфиры сорбита и жирной кислоты и полиоксиэтилен-полиоксипропилен-алкиловые эфиры, более предпочтительно поверхностно-активные вещества включают полисорбаты 20 и 80 и Pluronic F-68 (полоксамер 188). Поверхностно-активные вещества могут добавляться к композициям согласно настоящему изобретению, как правило, в количестве от 0,0001% до 10% (масса/объем), предпочтительно от 0,001% до 5%, и более предпочтительно - от 0,005% до 3%.
Композиции согласно настоящему изобретению также могут включать аминокислоты. Согласно настоящему изобретению, к предпочтительным аминокислотам относятся природные аминокислоты и производные аминокислот, причем особенно предпочтительными аминокислотами являются L-метионин и L-пролин.
Композиции согласно настоящему изобретению также могут содержать сахара. Предпочтительными сахарами, применяемыми согласно настоящему изобретению, являются сахароза, трегалоза, меглумин и сорбит.
Количество аминокислоты или сахара, которое может добавляться к композициям согласно настоящему изобретению, обычно составляет от 1 до 1000 мМ, предпочтительно от 5 до 500 мМ, более предпочтительно - от 10 до 300 мМ.
Композиции согласно настоящему изобретению также могут содержать неорганические соли. К предпочтительным неорганическим солям, применяемым согласно настоящему изобретению, относятся соли магния и соли кальция.
Композиции согласно настоящему изобретению по сути состоят из нижеуказанных ингредиентов от А до D.
(A) антитело к рецептору IL-6;
(B) гистидин-аспартатный буфер и/или гистидин-глутаматный буфер;
(C) аргинин (включая аргинин-аспартат и аргинин-глутамат), аминокислоты, отличные от аргинина, и/или сахара в случае необходимости; и
(D) поверхностно-активные вещества.
"По сути состоят" означает, что концентрация описанных ниже необязательных добавок, которые являются ингредиентами, отличными от ингредиентов, обычно добавляемых к композициям, составляет 5 мМ или менее, предпочтительно 2 мМ или менее, более предпочтительно - 1 мМ или менее. К таким необязательным добавкам относятся криопротекторы, суспендирующие агенты, солюбилизирующие компоненты, изотонизирующие агенты, консерванты, ингибиторы адсорбции, разбавители, формообразующие, регуляторы рН, анальгетики, серосодержащие восстановители и антиоксидант.
Кроме того, композиции согласно настоящему изобретению предпочтительно не содержат анионов, отличных от аспарагиновой кислоты и глутаминовой кислоты, в качестве противоионов к буферу или стабилизатору. В одном варианте осуществления к таким композициям относятся, например, те, которые по сути не содержат иона хлорида и иона ацетата. "По сути не содержат иона хлорида и иона ацетата" означает, что концентрация иона хлорида и иона ацетата составляет, например, 5 мМ или менее, предпочтительно 2 мМ или менее, более предпочтительно - 1 мМ или менее. Высокоустойчивые содержащие антитела композиции могут быть получены без повышения осмотического давления, в результате использования аспарагиновой кислоты и глутаминовой кислоты, обеспечивающих более высокий стабилизирующий эффект качестве противоионов, и практически без содержания иона хлорида и иона ацетата с худшим стабилизирующим эффектом.
В случае необходимости композиции согласно настоящему изобретению также могут содержать соответствующие криопротекторы, суспендирующие агенты, солюбилизирующие компоненты, изотонизирующие агенты, консерванты, ингибиторы адсорбции, разбавители, формообразующие, регуляторы рН, анальгетики, серосодержащие восстановители, антиоксиданты и т.п.
К криопротекторам относятся, например, сахара, такие, как трегалоза, сахароза и сорбит.
К солюбилизирующим компонентам относятся, например, полиоксиэтилен-гидрогенизованное касторовое масло, полисорбат 80, никотинамид, полиоксиэтиленсорбитмонолаурат, макрогол и этиловый эфир жирной кислоты касторового масла.
К изотонизирующим агентам относятся, например, хлорид натрия, хлорид калия и хлорид кальция.
К консервантам относятся, например, метилпарагидроксибензоат, этилпарагидроксибензоат, сорбиновая кислота, фенол, крезол и хлорокрезол.
К ингибиторам адсорбции относятся, например, альбумин сыворотки человека, лецитин, декстран, сополимер этиленоксид/пропиленоксид, гидроксипропилцеллюлоза, метилцеллюлоза, полиоксиэтилен-гидрогенизованное касторовое масло и полиэтиленгликоль.
К серосодержащим восстановителям относятся, например, содержащие сульфгидрильные группы, такие, как N-ацетилцистеин, N-ацетилгомоцистеин, тиоктовая кислота, тиодигликоль, тиоэтаноламин, тиоглицерин, тиосорбит, тиогликолевая кислота и ее соли, тиосульфат натрия, глутатион и тиоалкановые кислоты, имеющие от одного до семи атомов углерода.
К антиоксидантам относятся, например, эриторбиновая кислота, дибутилгидрокситолуол, бутилгидроксианизол, α-токоферол, токоферолацетат, L-аскорбиновая кислота и ее соли, пальмитат L-аскорбиновой кислоты, стеарат L-аскорбиновой кислоты, гидросульфит натрия, сульфит натрия, триамилгаллат, пропилгаллат и хелатообразующие реагенты, такие, как этилендиаминтетраацетат натрия двузамещенный (EDTA), пирофосфат натрия и метафосфат натрия.
Композиции согласно настоящему изобретению могут вводиться перорально или парентерально. Как правило, композиции вводят парентерально, в частности, путем инъекции, трансдермального введения, трансмукозального введения, назального введения, легочного введения и т.п. Инъекции включают, например, системное или локальное введение путем подкожной инъекции, внутривенной инъекции, внутримышечной инъекции и т.п. Объем инъекции при подкожной инъекции ограничен; однако отдельная доза антитела может включать большое количество (приблизительно от 100 до 200 мг). Таким образом, композиции согласно настоящему изобретению особенно приемлемы для подкожного введения (инъекции).
С точки зрения безболезненности предпочтительно, чтобы отношение осмотического давления буферного агента в композициях для подкожного введения было приближенным к изотоническому 1,0. Таким образом, отношение осмотического давления жидких композиций согласно настоящему изобретению предпочтительно составляет приблизительно 1. Аргинин, сахара и т.п. Добавляют для улучшения устойчивости композиций во время хранения. Однако, если осмотическое давление превышает изотонический уровень, оно может вызывать болевые ощущения при подкожном введении. Таким образом, добавление таких стабилизаторов с учетом осмотического давления является предпочтительным.
Кроме того, настоящее изобретение касается применения основной аминокислоты-аспартата или основной аминокислоты-глутамата в производстве устойчивой содержащей антитело композиции; и аспарагиновой кислоты или глутаминовой кислоты в качестве разновидности противоиона к буферу или стабилизатору в высококонцентрированной содержащей антитело композиции, которые применяются согласно способу подавления агрегация во время хранения композиции в замороженном виде или в виде жидкости.
Все документы существующего уровня техники, приведенные в описании, включаются в это описание путем ссылки.
[Примеры]
Ниже настоящее изобретение подробнее описывается со ссылкой на Примеры, однако объем настоящего изобретения ими не ограничивается.
[Пример 1] Оценка стабилизирующего эффекта разновидностей противоиона с применением Mab1 и Mab2
Mab1 (Н-цепь/SEQ ID NO: 1; L-цепь/SEQ ID NO: 2) и Mab2 (Н-цепь/SEQ ID NO: 3; L-цепь/SEQ ID NO: 4; тоцилизумаб), которые описываются как антитело к рецептору IL-6 в документе WO 2009/041621, экспрессировали способом, известным специалистам в данной области, с применением устойчивой экспрессии линии клеток СНО, а затем очищали до высокой степени чистоты способом, известным специалистам в данной области, с применением белка А. Очищенные Mab1 и Mab2 использовали в исследовании устойчивости, описанном ниже в Примерах.
Устойчивость двух типов композиций, включающих гистидин-хлорид или гистидин-ацетат, оценивали путем замораживания-оттаивания или путем хранения при 40°С с применением Mab1 и Mab2. Композиции Mab1 и Mab2 приготавливали путем суточного диализа с применением каждого рецептированного раствора (Таблица 1) с последующим концентрированном растворов. Конечную концентрацию Mab1 и Mab2 доводили до 37 мг/мл. Исследование с замораживанием-оттаиванием осуществляли путем проведения десяти циклов медленного замораживания-оттаивания (замораживание при -20°С с последующим оттаиванием при комнатной температуре), с последующими десятью циклами быстрого замораживания-оттаивания (замораживание при -20°С с последующим оттаиванием в ванне теплой воды (37°С)). Количество агрегата в каждой композиции после замораживания-оттаивания или хранения при 40°С рассчитывали через процент от площади с применением эксклюзионной хроматографии (SEC). Увеличение агрегатов (%) свидетельствует о сниженной устойчивости Mab1 или Mab2. Таким образом, увеличение количества агрегатов использовали как показатель для сравнения устойчивости между соответствующими композициями.
Эксклюзионная хроматография (SEC)
Эксклюзионную хроматографию (SEC) выполняли для анализа количества агрегатов и низкомолекулярных продуктов деградации в каждой композиции. Каждую композицию разбавляли приблизительно до 0,4-2,0 мг/мл описанной ниже мобильной фазой, а затем анализировали, применяя колонку G3000SWXL (Tosoh Co.) при скорости потока 0,5 мл/мин с мобильной фазой из 50 мМ фосфатного буфера (рН 7,0), содержащего 300 мМ NaCl (длина волны детектирования: 220 нм). Пик элюирования, который появлялся раньше, чем мономерный пик, анализировали как агрегаты, а пик элюирования, который появлялся после мономерного пика, но раньше, чем образованный буфером пик, анализировали как низкомолекулярные продукты деградации. Соответствующее содержание (%) рассчитывали через процент от площади.
| Таблица 1 | |||
| Список композиций | |||
| № | Буфер | Стабилизатор | рН |
| 1 | 20 мМ гистидин-хлорида | 150 мМ NaCl | 6,0 |
| 2 | 20 мМ гистидин-ацетата | ||
Результаты исследования устойчивости двух типов композиций, содержащих гистидин-хлорид или гистидин-ацетат, с применением Mab1 и Mab2 показаны на Фигурах с 1 по 3. Результаты продемонстрировали, что Mab1 было несколько устойчивее в гистидин-хлориде, чем в гистидин-ацетате как при хранении в жидком состоянии, так и при замораживании-оттаивании. Результат хранения в жидком состоянии показал, что Mab2 было приблизительно в два раза устойчивее в гистидин-хлориде, чем в гистидин-ацетате.
[Пример 2] Оценка стабилизирующего эффекта разновидностей противоиона с использованием Mab1 (1)
Как правило, использовали хлористоводородную кислоту в качестве разновидности противоиона к гистидину и аргинину. В соответствии с более ранним сообщением (PCT/US 2005/037471), результаты оценки уксусной кислоты, фосфорной кислоты и серной кислоты в качестве разновидности противоиона к гистидину показали, что уксусная кислота обладает превосходящим стабилизирующим эффектом при использовании в качестве разновидности противоиона к гистидину. Однако, как описано выше в Примере 1, настоящее изобретение продемонстрировало, что хлористоводородная кислота несколько превосходит уксусную кислоту в качестве разновидности противоиона к гистидину при использовании для Mab1 и Mab2. Хлористоводородная кислота является распространенной разновидностью противоаниона, хотя известно, что хлористоводородная кислота имеет склонность к разъеданию нержавеющей стали, из которой обычно изготавливают тару (Dent. Mater. 17: 409-414 (2001); J. Pharm. Sci. 86: 1250-1255 (1997)). Кроме того, сообщалось об изменчивости уровня рН в уксусной кислоте из-за ее летучести (Injectable Drug Development, Authors: Pramod К. Gupta (Editor), Gayle A. Brazeau, Gayle A).
Таким образом, в этом Примере авторы настоящего изобретения пытались найти нелетучие противоионы, которые не являются разрушительными для нержавеющей стали и обладают превосходящим стабилизирующим эффектом по сравнению с уксусной кислотой и хлористоводородной кислотой в качестве разновидности противоиона в буфере для Mab1 и Mab2. Авторы настоящего изобретения оценивали разновидности анионов, отличные от хлористоводородной кислоты, уксусной кислоты, фосфорной кислоты и серной кислоты, о которых ранее сообщалось в PCT/US 2005/037471. В частности, в качестве разновидностей противоиона оценивали аспарагиновую кислоту и глутаминовую кислоту, которые являются аминокислотами. Как описано в Примере 1, было продемонстрировано, что гистидин-хлорид обладает превосходящим стабилизирующим эффектом по сравнению с гистидин-ацетатом в Mab1 и Mab2, поэтому стабилизирующий эффект разновидностей противоиона сравнивали с эффектом хлористоводородной кислоты. В частности, в соответствии с тремя композициями, показанными в Таблице 2, оценивали влияние хлористоводородной кислоты, аспарагиновой кислоты и глутаминовой кислоты на устойчивость в качестве разновидности противоиона к гистидину в качестве буфера или аргинину в качестве стабилизатора при использовании Mab1.
Каждую композицию приготавливали одним способом, как описано в Примере 1. Mab1 подвергали диализу с применением раствора каждой композиции (Таблица 2) в течение суток. Затем каждый раствор концентрировали и конечную концентрацию Mab1 доводили до 200 мг/мл. Исследование с замораживанием-оттаиванием осуществляли путем проведения десяти циклов медленного замораживания-оттаивания (замораживание при -20°С с последующим оттаиванием при комнатной температуре). Способ приготовления каждого рецептированного раствора описывается ниже. Образец композиции №3 приготавливали следующим образом: L-гистидин и L-аргинин растворяли в воде MilliQ при 20 мМ и 50 мМ, соответственно, и растворы титровали до рН 6 1 N хлористоводородной кислотой. Образцы композиций №№4 и 5 приготавливали следующим образом: L-гистидин, L-аргинин и L-аспарагиновую кислоту или L-глутаминовую кислоту растворяли в воде MilliQ при 20 мМ, 50 мМ и 60 мМ, соответственно, а затем растворы титровали до рН 6 раствором 30-40 мМ L-аспарагиновой кислоты или L-глутаминовой кислоты. Количество агрегата в каждом образце после замораживания-оттаивания или хранения при -20°С, 25°С и 5°С рассчитывали через процент от площади с применением эксклюзионной хроматографии (SEC).
| Таблица 2 | |||
| Список композиций | |||
| № | Буфер | Стабилизатор | рН |
| 3 | 20 мМ гистидин-хлорида | 50 мМ Arg-хлорида | 6,0 |
| 4 | 20 мМ гистидин-аспартата | 50 мМ Arg-аспартата | |
| 5 | 20 мМ гистидин-глутамата | 50 мМ Arg-глутамата | |
Увеличение количества (%) агрегата во время замораживания-оттаивания или хранения при -20°С, 25°С и 5°С для каждой композиции показывается на Фигурах с 4 по 7. Увеличение количества (%) агрегата во время хранения при 5°С и 25°С показывало, что устойчивость повышается в следующем порядке: глутаминовая кислота = аспарагиновая кислота > хлористоводородная кислота в качестве разновидности противоиона к гистидину и аргинину. Таким образом, было продемонстрировано, что устойчивость Mab1 улучшается благодаря применению аспарагиновой кислоты или глутаминовой кислоты в качестве разновидности противоиона вместо хлористоводородной кислоты. Такая же тенденция наблюдалась при замораживании-оттаивании и хранении в замороженном состоянии. Увеличение количества (%) агрегата во время хранения при -20°С в течение трех месяцев с глутаминовой кислотой, аспарагиновой кислотой или хлористоводородной кислотой составляло приблизительно 0,8%, 1,2%, или 3,0%, соответственно. Таким образом, стабилизирующий эффект глутаминовой кислоты был несколько выше эффекта аспарагиновой кислоты.
Примеры 1 и 2 продемонстрировали, что при применении в качестве разновидности противоиона глутаминовая кислота и аспарагиновая кислота обладают превосходящим Mab1-стабилизирующим эффектом по сравнению с хлористоводородной кислотой и уксусной кислотой. Сообщения о том, что глутаминовая кислота и аспарагиновая кислота являются летучими или вызывающими коррозию нержавеющей стали, отсутствуют. Таким образом, было обнаружено, что глутаминовая кислота и аспарагиновая кислота являются перспективными в качестве разновидности противоиона для Mab1. Так, гистидин-глутамат и гистидин-аспартат превосходят в качестве буфера гистидин-хлорид и гистидин-ацетат, а аргинин-глутамат и аргинин-аспартат превосходят в качестве стабилизатора аргинин-хлорид и аргинин-ацетат.
[Пример 3] Оценка стабилизирующего эффекта разновидностей противоиона с использованием Mab2 (1)
Как описано в Примере 1, было обнаружено, что Mab2 более устойчиво в гистидин-хлоридном буфере, чем в гистидин-ацетатном буфере (так же, как и Mab1, Фиг.2). Кроме того, как описано в Примере 2, устойчивость Mab1 в жидком и замороженном состояниях значительно улучшалась при использовании аспарагиновой кислоты или глутаминовой кислоты вместо хлористоводородной кислоты в качестве разновидности противоиона к гистидину и аргинину. В частности, устойчивость Mab1 в замороженном состоянии значительно улучшалась (приблизительно в три таза) при использовании глутаминовой кислоты вместо хлористоводородной кислоты в качестве разновидности противоиона к гистидину и аргинину. В этом контексте глутаминовую кислоту и хлористоводородную кислоту оценивали в качестве разновидности противоиона к гистидину на их способность к стабилизации Mab2 во время замораживания-оттаивания. Содержащие аргинин композиции, обладающие высоким стабилизирующим эффектом, также оценивали в то же время и использовали в качестве контроля для сравнения стабилизирующего эффекта, наблюдаемого при использовании глутаминовой кислоты в качестве разновидности противоиона к гистидину.
Каждую композицию приготавливали одним способом, как описано в Примере 1. Mab2 подвергали суточному диализу с применением каждого рецептированного раствора (Таблица 3). Затем каждый раствор концентрировали и конечную концентрацию Mab2 доводили приблизительно до 40-230 мг/мл. Способ получения каждого рецептированного раствора описывается ниже. Образцы композиций №№6 и 8 приготавливали следующим образом: L-гистидин и L-аргинин (только композиция №8) растворяли в воде MilliQ при 50 мМ и растворы титровали до рН 6 1 N хлористоводородной кислотой. Образец композиции №7 приготавливали следующим образом: L-гистидин и L-глутаминовую кислоту растворяли в воде MilliQ при 50 мМ и 25 мМ, соответственно, а затем раствор титровали до рН 6 раствором 30-40 мМ L-глутаминовой кислоты. Концентрация Mab2 в каждой композиции после приготовления образца показывается в Таблице 4. Исследование с замораживанием-оттаиванием осуществляли с десятью циклами замораживания при -20°С с последующим оттаиванием при комнатной температуре (медленное замораживание-оттаивание). После медленного замораживания-оттаивания количество агрегата в каждой композиции рассчитывали через процент от площади с применением эксклюзионной хроматографии (SEC).
| Таблица 3 | |||
| Список композиций | |||
| № | Буфер | Стабилизатор | pH |
| 6 | 50 мМ гистидин-хлорида | - | 6,0 |
| 7 | 50 мМ гистидин-глутамата | ||
| 8 | 50 мМ гистидин-хлорида | 50 мМ аргинин-хлорида | |
| Таблица 4 | ||||
| Результат измерения: список показателей концентрации Mab2 в растворе каждой композиции | ||||
| № | Буфер | Стабилизатор | рН | Концентрация Mab2 (мг/мл) |
| 6А | 50 мМ гистидин-хлорида | - | 6,0 | 47 |
| 6В | 70 | |||
| 6С | 97 | |||
| 6D | 122 | |||
| 6Е | 143 | |||
| 6F | 164 | |||
| 6G | 186 | |||
| 6Н | 229 | |||
| 7А | 50 мМ гистидин-глутамата | 46 | ||
| 7В | 72 | |||
| 7С | 97 | |||
| 7D | 119 | |||
| 7Е | 144 | |||
| 7F | 165 | |||
| 7G | 196 | |||
| 8А | 50 мМ гистидин-хлорида | 50 мМ аргинин-хлорида | 44 | |
| 8В | 68 | |||
| 8С | 94 | |||
| 8D | 120 | |||
| 8Е | 144 | |||
| 8F | 168 | |||
| 8G | 192 | |||
Увеличение количества (%) агрегата для каждой композиции в исследовании с замораживанием-оттаиванием показывается на Фиг.8. Результаты продемонстрировали, что при использовании глутаминовой кислоты вместо хлористоводородной кислоты в качестве разновидности противоиона к гистидину устойчивость Mab2 улучшается приблизительно в два раза. Кроме того, стабилизирующий эффект глутаминовой кислоты был сравним с эффектом 50 мМ аргинин хлорида, который является традиционным стабилизатором. Таким образом, было продемонстрировано, что одна глутаминовая кислота обеспечивает высокий стабилизирующий эффект в качестве разновидности противоиона.
В то же время, считается, что отношение осмотического давления буфера предпочтительно должно быть приближенным к изотоническому 1,0 в композициях для подкожного введения из-за болезненности инъекции. Устойчивость во время замораживания-оттаивания была сравнимой для 50 мМ гистидин-хлорида/50 мМ аргинин-хлорида и 50 мМ гистидин-глутамата. Осмотическое давление буфера в последнем случае было приблизительно на 100 мосмоль ниже, чем в первом. Таким образом, как описано выше, при улучшении устойчивости путем применения аспарагиновой кислоты или глутаминовой кислоты в качестве разновидности противоиона устойчивость может быть повышена без повышения осмотического давления. Это может быть большим преимуществом в разработке композиций для подкожного введения.
В то же время, аргинин, сахара и т.п. Добавляют для улучшения устойчивости композиций во время хранения. Однако, если осмотическое давление превышает изотонический уровень, инъекция может быть болезненной при подкожном введении. Таким образом, такие стабилизаторы должны добавляться с учетом осмотического давления (Injectable Drug Development, Authors: Pramod К. Gupta (Editor), Gayle A. Brazeau, Gayle A; Challenges in the development of high protein concentration formulations, J Pharm Sci, 2004, 93(6), 1390-1402). При добавлении хлористоводородной кислоты или уксусной кислоты в качестве разновидности противоиона к гистидину или аргинина ни хлористоводородная кислота, ни уксусная кислота не обладают эффектом стабилизации Mab1. Таким образом, хлористоводородная кислота и уксусная кислота только обеспечивают эффект повышения осмотического давления. Соответственно, с точки зрения осмотического давления концентрация разновидностей ионов, не обладающих стабилизирующим эффектом, должна быть сведена в композициях до минимума. В частности, также с точки зрения осмотического давления, предпочтительным является отсутствие хлористоводородной кислоты и уксусной кислоты. Гистидин-глутамат и гистидин-аспартат превосходят в качестве буфера гистидин-хлорид и гистидин-ацетат; и аргинин-глутамат и аргинин-аспартат превосходят в качестве стабилизатора аргинин-хлорид и аргинин-ацетат.
[Пример 4] Оценка стабилизирующего эффекта разновидностей противоиона с использованием Mab1 (2)
Как описано в Примерах 2 и 3, при использовании глутаминовой кислоты в качестве разновидности противоиона к гистидину и аргинину устойчивость Mab1 значительно улучшалась - приблизительно в два-три раза, в частности, во время хранения в замороженном виде. В этом контексте исследование устойчивости с хранением при -20°С проводили для оценки устойчивости Mab1 с хранением при -20°С при использовании глутаминовой кислоты в качестве разновидности противоиона к гистидину и аргинину и сахара (трегалозы) в качестве стабилизатора. Одновременно также проводили исследование с хранением в жидком состоянии и замораживанием-оттаиванием.
Каждую композицию приготавливали следующим образом: Mab1 подвергали суточному диализу с применением каждого рецептированного раствора (Таблица 5); затем растворы концентрировали и конечную концентрацию Mab1 доводили до 200 мг/мл. Способ приготовления каждого рецептированного раствора описывается ниже. L-Гистидин, L-аргинин, L-глутаминовую кислоту и трегалозу растворяли в воде MilliQ при 100 мМ, 50 мМ, 100 мМ и от 0 до 150 мМ, соответственно, а затем растворы титровали до рН 6 раствором от 30 до 40 мМ L-глутаминовой кислоты. Исследование с замораживанием-оттаиванием осуществляли с десятью циклами замораживание при -20°С с последующим оттаиванием при комнатной температуре (медленное замораживание-оттаивание). Количество агрегата в каждой композиции после замораживания-оттаивания или хранения при -20°С и 25°С рассчитывали через процент от площади с применением эксклюзионной хроматографии (SEC).
| Таблица 5 | ||||
| Список композиций | ||||
| № | Буфер | Стабилизатор | Сахар | рН |
| 9 | 100 мМ гистидин-глутамата | 50 мМ аргинин-глутамата | - | 6,0 |
| 10 | 50 мМ трегалозы | |||
| 11 | 100 мМ трегалозы | |||
| 12 | 150 мМ трегалозы | |||
Увеличение количества (%) агрегата каждой композиции после храпения при -20°С, замораживания-оттаивания и хранения при 25°С показывается на Фигурах с 9 по 11. Путем добавления 50 мМ или более трегалозы получали композицию, агрегация которой практически не повышалась во время хранения при -20°С и замораживания-оттаивания, как можно видеть на Фигурах с 9 по 11. Кроме того, зависящий от концентрации трегалозы стабилизирующий эффект наблюдался при хранении в жидком состоянии при 25°С. Как описано выше, авторами настоящего изобретения были найдены простые композиции, состоящие только из аминокислот и сахара, которые способствуют стабилизации во время хранения в жидком состоянии и хранении в замороженном состоянии.
[Пример 5] Оценка стабилизирующего эффекта разновидностей противоиона с использованием Mab2 (2)
Как описано в Примере 1, было обнаружено, что Mab2 стабилизируется гистидин-хлоридом лучше, чем гистидин-ацетатом, как и Mab1 (Фиг.2). Кроме того, как описано в Примере 2, устойчивость Mab1 в жидком и замороженном состояниях значительно улучшалась при использовании аспарагиновой кислоты или глутаминовой кислоты вместо хлористоводородной кислоты в качестве разновидности противоиона к гистидину и аргинину. В этом контексте устойчивость Mab2 во время хранения в виде жидкости (25°С) использовали для оценки хлористоводородной кислоты и глутаминовой кислоты в качестве разновидности противоиона к гистидину. Содержащие аргинин композиции обладающие высоким стабилизирующим эффектом также оценивали в то же время и использовали в качестве контроля для сравнения стабилизирующего эффекта, наблюдаемого при использовании глутаминовой кислоты в качестве разновидности противоиона к гистидину.
Каждую композицию приготавливали одним способом, как описано в Примере 1. Mab2 подвергали суточному диализу с применением каждого рецептированного раствора (Таблица 3). Затем растворы концентрировали и конечную концентрацию Mab2 доводили приблизительно до 40-230 мг/мл. Способ приготовления рецептированных растворов был таким, как описано в Примере 3. Концентрация Mab2 в каждой композиции после приготовления образца показывается в Таблице 4. Количество агрегата в каждой композиции в течение двух-четырех недель хранения при 25°С рассчитывали через процент от площади с применением эксклюзионной хроматографии (SEC).
Увеличение количества (%) агрегата для каждой композиции после хранения при 25°С показано на Фиг.12. Результаты показали, что, в отличие от исследования с замораживанием-оттаиванием, устойчивость Mab2 не изменялась даже при использовании глутаминовой кислоты вместо хлористоводородной кислоты в качестве разновидности противоиона к гистидину. Показатели pI Mab1 и Mab2 составляют 5,8 и 9,3, соответственно. Это свидетельствует о значительности стабилизирующего влияния разновидностей противоиона на антитела с низким pI при хранение в жидком состоянии.
[Пример 6] Оценка стабилизирующего эффекта разновидностей противоиона с использованием Mab1, Mab2, Mab3, Mab4 и Mab5
Mab3 является биспецифическим антителом фактора IX и фактора Х и имеет IgG4-константную область. Кроме того, его показатель pI был снижен до 6,8 путем изменения аминокислотной последовательности.
Mab4 является гуманизированным антителом против NR10 (полностью гуманизированным антителом NS22, полученным в соответствии со способом, описанным в Примере 12 документа WO 2009/072604) и относится к классу антител IgG2. Его показатель pI был снижен до 5,6 путем изменения аминокислотной последовательности.
Mab5 является гуманизированным антителом против глипикана 3 (оно было гуманизировано способом, описанным в Примере 24 документа WO 2006/006693, и его L-цепь была изменена способом в соответствии с Примером 25). Относится к классу антител IgG1.
Как описано в Примерах 2 и 3, было продемонстрировано, что устойчивость Mab1 в жидком и замороженном состояниях и Mab2 значительно улучшается при использовании аспарагиновой кислоты или глутаминовой кислоты вместо хлористоводородной кислоты в качестве разновидности противоиона к гистидину и аргинину. Затем Mab1 и Mab2, а также Mab3, Mab4 и Mab5, которые являются антителами, модифицированными для обеспечения изоэлектрической точки от 5 до 8, использовали для оценки устойчивости раствора и устойчивости при замораживании-оттаивании при использовании хлористоводородной кислоты и аспарагиновой кислоты в качестве разновидности противоиона к гистидину и аргинину. Показатели pI Mab1, Mab2, Mab3, Mab4 и Mab5 представлены ниже в Таблице 6.
| Таблица 6 | |||||
| Образец | Mab1 | Mab2 | Mab3 | Mab4 | Mab5 |
| pI | 5,8 | 9,4 | 6,8 | 5,6 | 9,0 |
Образцы приготавливали следующим образом: Mab1, Mab2, Mab3, Mab4 и Mab5 подвергали диализу с применением каждого диализного буфера (Таблица 7) в течение суток. Затем раствор каждого антитела концентрировали и к нему добавляли маточный буфер для каждой композиции (Таблица 8), таким образом, чтобы довести конечную концентрацию антитела приблизительно до 100-190 мг/мл. Список рецептированных растворов, приготовленных, как описано выше, показан в Таблице 9. Для каждой композиции осуществляли исследовании с хранением в жидком состоянии при 25°С и замораживанием-оттаиванием. Исследование с замораживанием-оттаиванием осуществляли в десять циклов замораживания при -20°С с последующим оттаиванием при 25°С (медленное замораживание-оттаивание). После медленного замораживания-оттаивания количество агрегата в каждом образце рассчитывали через процент от площади с применением эксклюзионной хроматографии (SEC).
| Таблица 7 | |||
| № | Образец | Диализный буфер | pH |
| 13 | Mab3 | Вода | 6,0 |
| 14 | Mab3 | ||
| 15 | Mab4 | 50 мМ гистидин-хлорида | |
| 16 | Mab4 | 50 мМ гистидин-аспартата | |
| 17 | Mab2 | 20 мМ гистидин-хлорида | |
| 18 | Mab2 | ||
| 19 | Mab1 | ||
| 20 | Mab1 | ||
| 21 | Mab3 | Вода | |
| 22 | Mab3 | ||
| 23 | Mab5 | 20 мМ гистидин-хлорида | |
| 24 | Mab5 | ||
| Таблица 8 | |||
| № | Образец | Маточный буфер | рН |
| 13 | Mab3 | 500 мМ гистидин-хлорида | 6,0 |
| № | Образец | Маточный буфер | рН |
| 14 | Mab3 | 500 мМ гистидин-аспартата | |
| 15 | Mab4 | 50 мМ гистидин-хлорида | |
| 16 | Mab4 | 50 мМ гистидин-аспартата | |
| 17 | Mab2 | 20 мМ гистидин-хлорида, 500 мМ аргинин-хлорида | |
| 18 | Mab2 | 20 мМ гистидин-хлорида, 500 мМ аргинин-аспартата | |
| 19 | Mab1 | 20 мМ гистидин-хлорида, 500 мМ аргинин-хлорида | |
| 20 | Mab1 | 20 мМ гистидин-хлорида, 500 мМ аргинин-аспартата | |
| 21 | Mab3 | 200 мМ гистидин-хлорида, 500 мМ аргинин-хлорида | |
| 22 | Mab3 | 200 мМ гистидин-хлорида, 500 мМ аргинин-аспартата | |
| 23 | Mab5 | 20 мМ гистидин-хлорида, 500 мМ аргинин-хлорида | |
| 24 | Mab5 | 20 мМ гистидин-хлорида, 500 мМ аргинин-аспартата | |
| Таблица 9 | ||||
| № | Образец | Композиция | pH | Концентрация Mab (мг/мл) |
| 13 | Mab3 | 50 мМ гистидин-хлорида | 6,0 | 100 |
| 14 | Mab3 | 50 мМ гистидин-аспартата | ||
| 15 | Mab4 | 50 мМ гистидин-хлорида | ||
| 16 | Mab4 | 50 мМ гистидин-аспартата | ||
| 17 | Mab2 | 20 мМ гистидин-хлорида, 50 мМ аргинин-хлорида | 190 | |
| 18 | Mab2 | 20 мМ гистидин-хлорида, 50 мМ аргинин-аспартата | ||
| 19 | Mab1 | 20 мМ гистидин-хлорида, 50 мМ аргинин-хлорида | 110 | |
| 20 | Mab1 | 20 мМ гистидин-хлорида, 50 мМ аргинин-аспартата | ||
| 21 | Mab3 | 20 мМ гистидин-хлорида, 50 мМ аргинин-хлорида | ||
| 22 | Mab3 | 20 мМ гистидин-хлорида, 50 мМ аргинин-аспартата | ||
| 23 | Mab5 | 20 мМ гистидин-хлорида, 50 мМ аргинин-хлорида | 120 | |
| 24 | Mab5 | 20 мМ гистидин-хлорида, 50 мМ аргинин-аспартата | ||
Результат увеличения количества (%) агрегата в каждой композиции после замораживания-оттаивания или хранения в жидком состоянии при 25°С показывается на Фигурах с 13 по 20. Сравнение увеличения количества агрегата во время хранения в виде жидкости при 25°С продемонстрировало, что показатели устойчивости сравнимы между композицией гистидин-аспартата и композицией гистидин-хлорида и между композицией аргинин-аспартата и композицией аргинин-хлорида (Фигуры 13, 15, 17 и 19).
Тем временем, сравнение увеличения количества агрегатов после замораживания-оттаивания выявило, что устойчивость композиции с гистидин-аспартатом в два раза или более выше показателя композиции с гистидин-хлоридом, и устойчивость композиции с аргинин-аспартатом выше показателя композиции с аргинин-хлоридом (Фигуры 14, 16, 18 и 20). Таким образом, было продемонстрировано, что устойчивость антитела в замороженном состоянии значительно улучшается при использовании аспарагиновой кислоты вместо хлористоводородной кислоты в качестве разновидности противоиона к гистидину или аргинину.
[Пример 7] Оценка стабилизирующего эффекта разновидностей противоиона с использованием Mab1, Mab2, Mab3, Mab4 и Mab5
Как описано в Примерах 2, 3 и 6, было продемонстрировано, что устойчивость антитела в жидком и замороженном состояниях значительно улучшается при использовании аспарагиновой кислоты или глутаминовой кислоты вместо хлористоводородной кислоты в качестве разновидности противоиона в композиции гистидина. Затем хлористоводородную кислоту и аспарагиновую кислоту использовали в качестве разновидности противоиона в композиции трис(гидроксиметил)аминометана (Tris) и оценивали на устойчивость при хранении в жидком состоянии и устойчивость при замораживании-оттаивании с применением Mab1, Mab2, Mab3, Mab4 и Mab5.
Образцы приготавливали следующим образом: Mab1, Mab2, Mab3, Mab4 и Mab5 подвергали диализу с применением каждого диализного буфера (Таблица 10) в течение суток. Затем раствор каждого антитела концентрировали и к нему добавляли маточный буфер для каждой композиции (Таблица 11), таким образом, чтобы довести конечную концентрацию антитела приблизительно до 100-110 мг/мл. Список рецептированных растворов, приготовленных, как описано выше, показан в Таблице 12. Для каждого рецептированного раствора проводили исследование с хранением при 25°С и замораживанием-оттаиванием. Исследование с замораживанием-оттаиванием осуществляли в десять циклов замораживания при -20°С с последующим оттаиванием при 25°С (медленное замораживание-оттаивание). После медленного замораживания-оттаивания количество агрегата в каждом образце рассчитывали через процент от площади с применением эксклюзионной хроматографии (SEC).
| Таблица 10 | |||
| № | Образец | Диализный буфер | pH |
| 25 | Mab1 | 20 мМ Tris-хлорида | 6,5 |
| 26 | Mab1 | 20 мМ Tris-аспартата | |
| 27 | Mab2 | 20 мМ Tris-хлорида | |
| 28 | Mab2 | 20 мМ Tris-аспартата | |
| 29 | Mab3 | Вода | |
| 30 | Mab3 | Вода | |
| 31 | Mab4 | 20 мМ Tris-хлорида | |
| 32 | Mab4 | 20 мМ Tris-аспартата | |
| 33 | Mab5 | 20 мМ Tris-хлорида | |
| 34 | Mab5 | 20 мМ Tris-аспартата | |
| Таблица 11 | |||
| № | Образец | Маточный буфер | pH |
| 25 | Mab1 | 20 мМ Tris-хлорида, 500 мМ аргинин-хлорида | 6,5 |
| 26 | Mab1 | 20 мМ Tris-хлорида, 500 мМ аргинин-аспартата | |
| 27 | Mab2 | 20 мМ Tris-хлорида, 500 мМ аргинин-хлорида | |
| 28 | Mab2 | 20 мМ Tris-хлорида, 500 мМ аргинин-аспартата | |
| 29 | Mab3 | 200 мМ Tris-хлорида, 500 мМ аргинин-хлорида | |
| 30 | Mab3 | 200 мМ Tris-хлорида, 500 мМ аргинин-аспартата | |
| 31 | Mab4 | 20 мМ Tris-хлорида, 500 мМ аргинин-хлорида | |
| 32 | Mab4 | 20 мМ Tris-хлорида, 500 мМ аргинин-аспартата | |
| 33 | Mab5 | 20 мМ Tris-хлорида, 500 мМ аргинин-хлорида | |
| 34 | Mab5 | 20 мМ Tris-хлорида, 500 мМ аргинин-аспартата | |
| Таблица 12 | ||||
| № | Образец | Композиция | pH | Концентрация Mab (мг/мл) |
| 25 | Mab1 | 20 мМ Tris-хлорида, 50 мМ аргинин-хлорида | 6,5 | 100 |
| 26 | Mab1 | 20 мМ Tris-хлорида, 50 мМ аргинин-аспартата | ||
| 27 | Mab2 | 20 мМ Tris-хлорида, 50 мМ аргинин-хлорида | ||
| 28 | Mab2 | 20 мМ Tris-хлорида, 50 мМ аргинин-аспартата | ||
| 29 | Mab3 | 20 мМ Tris-хлорида, 50 мМ аргинин-хлорида | ||
| № | Образец | Композиция | pH | Концентрация Mab (мг/мл) |
| 30 | Mab3 | 20 мМ Tris-хлорида, 50 мМ аргинин-аспартата | ||
| 31 | Mab4 | 20 мМ Tris-хлорида, 50 мМ аргинин-хлорида | 110 | |
| 32 | Mab4 | 20 мМ Tris-хлорида, 50 мМ аргинин-аспартата | ||
| 33 | Mab5 | 20 мМ Tris-хлорида, 50 мМ аргинин-хлорида | ||
| 34 | Mab5 | 20 мМ Tris-хлорида, 50 мМ аргинин-аспартата |
Результат увеличения количества (%) агрегата в каждой композиции после замораживания-оттаивания или хранения в жидком состоянии при 25°С показывается на Фигурах 21 и 22. Сравнение увеличения количества агрегата во время хранения в виде жидкости при 25°С продемонстрировало, что показатели устойчивости сравнимы между композицией Tris-аспартата/аргинин-аспартата и Tris-хлорида/аргинин-хлорида (Фиг.21).
В то же время, сравнение увеличения количества агрегата после замораживания-оттаивания выявило, что устойчивость композиции Tris-аспартата/аргинин-аспартата выше показателя композиции Tris-хлорида/аргинин-хлорида (Фиг.22). Таким образом, было продемонстрировано, что устойчивость антитела в замороженном состоянии также значительно улучшается при использовании аспарагиновой кислоты вместо хлористоводородной кислоты в качестве разновидности противоиона в композиции Tris.
[Пример 8] Оценка стабилизирующего эффекта разновидностей противоиона к Tris с использованием Mab1, Mab2 и Mab3
Как описано в Примере 7, было продемонстрировано, что устойчивость антитела в замороженном состоянии значительно улучшается при использовании аспарагиновой кислоты вместо хлористоводородной кислоты в качестве разновидности противоиона в композиции Tris. Затем хлористоводородную кислоту и аспарагиновую кислоту использовали в качестве разновидности противоиона к Tris и оценивали на устойчивость при хранении в жидком состоянии и устойчивость при замораживании-оттаивании с использованием Mab1, Mab2 и Mab3.
Образцы приготавливали следующим образом: Mab1, Mab2, и Mab3 подвергали диализу с применением каждого диализного буфера (Таблица 13) в течение суток. Затем раствор каждого антитела концентрировали до 100 мг/мл или более высокой концентрации и к нему добавляли каждый диализат, таким образом, чтобы довести конечную концентрацию антитела приблизительно до 100 мг/мл. Список рецептированных растворов, приготовленных, как описано выше, показан в Таблице 14. Исследование с хранением при 25°С и исследование с замораживанием-оттаиванием осуществляли с использованием каждого рецептированного раствора. Исследование с замораживанием-оттаиванием осуществляли в десять циклов замораживания при -20°С с последующим оттаиванием при 25°С (медленное замораживание-оттаивание). После медленного замораживания-оттаивания, количество агрегата в каждом образце рассчитывали через процент от площади с применением эксклюзионной хроматографии (SEC).
| Таблица 13 | |||
| № | Образец | Диализный буфер | pH |
| 35 | Mab1 | 50 мМ Tris-хлорида | 6,5 |
| 36 | Mab1 | 50 мМ Tris-аспартата | |
| 37 | Mab2 | 50 мМ Tris-хлорида | |
| 38 | Mab2 | 50 мМ Tris-аспартата | |
| 39 | Mab3 | 50 мМ Tris-хлорида | |
| 40 | Mab3 | 50 мМ Tris-аспартата | |
| Таблица 14 | ||||
| № | Образец | Композиция | рН | Концентрация Mab (мг/мл) |
| 35 | Mab1 | 50 мМ Tris-хлорида | 6,5 | 100 |
| 36 | Mab1 | 50 мМ Tris-аспартата | ||
| 37 | Mab2 | 50 мМ Tris-хлорида | ||
| 38 | Mab2 | 50 мМ Tris-аспартата | ||
| 39 | Mab3 | 50 мМ Tris-хлорида | ||
| 40 | Mab3 | 50 мМ Tris-аспартата | ||
Результат увеличения количества (%) агрегата после замораживания-оттаивания или хранения в жидком состоянии при 25°С в каждой композиции показывается на Фигурах 23 и 24. Сравнение увеличения количества агрегата на основе этого результата продемонстрировало, что во время хранения в жидком состоянии при 25°С и во время замораживания-оттаивания устойчивость композиции Tris-аспартата выше, чем показатель композиции Tris-хлорида, и устойчивость во время замораживания-оттаивания, в частности, больше в два или более раз. Таким образом, было продемонстрировано, что устойчивость антитела также значительно улучшается при использовании аспарагиновой кислоты вместо хлористоводородной кислоты в качестве разновидности противоиона к Tris, используемому в качестве буферного агента.
Claims (25)
1. Устойчивая содержащая антитело фармацевтическая композиция для подкожного введения, включающая аргининаспартат или аргининглутамат и/или буфер, выбранный из группы, включающей гистидинаспартатный, гистидинглутаматный буфер, трис(гидроксиметил)аминометанаспартатный буфер и трис(гидроксиметил)аминометанглутаматный буфер, причем концентрация антитела в ней равна 50 мг/мл или более, а антитело является антителом, которое было модифицировано для обеспечения изоэлектрической точки (pI) от 5 до 8.
2. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что, по сути, не содержит иона хлорида и иона ацетата.
3. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что дополнительно включает сахар.
4. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что антитело является гуманизированным антителом или человеческим антителом.
5. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что концентрация антитела составляет от 50 до 250 мг/мл.
6. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что является жидкой композицией.
7. Фармацевтическая композиция по п. 6, отличающаяся тем, что вязкость жидкой композиции составляет 30 мПа⋅с или менее.
8. Фармацевтическая композиция по п. 7, отличающаяся тем, что жидкая композиция является устойчивой при температуре от 2 до 8°С в течение как минимум шести месяцев.
9. Фармацевтическая композиция по п. 6, отличающаяся тем, что не подвергалась лиофилизации во время приготовления композиции.
10. Фармацевтическая композиция по п. 6, отличающаяся тем, что ее хранят в замороженном виде при температуре от -30 до -10°С.
11. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что композиция является лиофилизированной композицией.
12. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что концентрация буфера составляет от 5 до 100 мМ.
13. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что концентрация аргинина составляет от 5 до 300 мМ.
14. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что антитело является антителом к рецептору IL-6.
15. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что буфер по существу включает только аминокислоту(ы).
16. Применение буфера, выбранного из группы, включающей
гистидинаспартатный, гистидинглутаматный буфер,
трис(гидроксиметил)аминометанаспартатный буфер и
трис(гидроксиметил)аминометанглутаматный буфер, для подавления образования агрегатов во время хранения в замороженном виде высококонцентрированной, содержащей антитело фармацевтической композиции, причем концентрация антитела в ней равна 50 мг/мл или более, а антитело является антителом, которое было модифицировано для обеспечения изоэлектрической точки (pI) от 5 до 8.
17. Применение буфера, выбранного из группы, включающей
гистидинаспартатный, гистидинглутаматный буфер,
трис(гидроксиметил)аминометанаспартатный буфер и
трис(гидроксиметил)аминометанглутаматный буфер, для подавления образования агрегатов во время хранения в жидком виде высококонцентрированной, содержащей антитело фармацевтической композиции, причем концентрация антитела в ней равна 50 мг/мл или более, а антитело является антителом, которое было модифицировано для обеспечения изоэлектрической точки (pI) от 5 до 8.
18. Применение аргининаспартата или аргининглутамата для подавления образования агрегатов во время хранения в замороженном виде высококонцентрированной, содержащей антитело фармацевтической композиции, причем концентрация антитела в ней равна 50 мг/мл или более, а антитело является антителом, которое было модифицировано для обеспечения изоэлектрической точки (pI) от 5 до 8.
19. Применение аргининаспартата или аргининглутамата для подавления образования агрегатов во время хранения в жидком виде высококонцентрированной, содержащей антитело фармацевтической композиции, причем концентрация антитела в ней равна 50 мг/мл или более, а антитело является антителом, которое было модифицировано для обеспечения изоэлектрической точки (pI) от 5 до 8.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2010-010060 | 2010-01-20 | ||
| JP2010010060 | 2010-01-20 | ||
| PCT/JP2011/050911 WO2011090088A1 (ja) | 2010-01-20 | 2011-01-20 | 安定化抗体含有溶液製剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2012135384A RU2012135384A (ru) | 2014-02-27 |
| RU2653447C2 true RU2653447C2 (ru) | 2018-05-08 |
Family
ID=44306888
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012135384A RU2653447C2 (ru) | 2010-01-20 | 2011-01-20 | Стабилизированные содержащие антитела жидкие композиции |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US10022319B2 (ru) |
| EP (3) | EP3378486B1 (ru) |
| JP (2) | JP5939799B2 (ru) |
| KR (5) | KR20120117862A (ru) |
| CN (2) | CN105944099B (ru) |
| AR (2) | AR080428A1 (ru) |
| AU (5) | AU2011208075B2 (ru) |
| BR (1) | BR112012018023A2 (ru) |
| CA (2) | CA3115615C (ru) |
| DK (1) | DK2526963T3 (ru) |
| ES (1) | ES2671224T3 (ru) |
| IL (3) | IL296486A (ru) |
| MX (1) | MX349560B (ru) |
| MY (1) | MY185867A (ru) |
| NZ (1) | NZ601374A (ru) |
| PL (1) | PL2526963T3 (ru) |
| RU (1) | RU2653447C2 (ru) |
| SG (2) | SG10202003196SA (ru) |
| TR (1) | TR201807401T4 (ru) |
| TW (2) | TWI609698B (ru) |
| WO (1) | WO2011090088A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA201205446B (ru) |
Families Citing this family (71)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2401040A (en) | 2003-04-28 | 2004-11-03 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Method for treating interleukin-6 related diseases |
| KR101374454B1 (ko) | 2005-03-31 | 2014-03-17 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 회합제어에 의한 폴리펩티드 제조방법 |
| EP4218801A3 (en) | 2006-03-31 | 2023-08-23 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antibody modification method for purifying bispecific antibody |
| EP2006381B1 (en) | 2006-03-31 | 2016-02-03 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for controlling blood pharmacokinetics of antibodies |
| PL2202245T3 (pl) | 2007-09-26 | 2017-02-28 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Sposób modyfikowania punktu izoelektrycznego przeciwciała poprzez podstawienie aminokwasu w cdr |
| PE20091174A1 (es) | 2007-12-27 | 2009-08-03 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Formulacion liquida con contenido de alta concentracion de anticuerpo |
| JP5711751B2 (ja) | 2009-10-26 | 2015-05-07 | エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ | グリコシル化された免疫グロブリンの調製方法 |
| AR080428A1 (es) | 2010-01-20 | 2012-04-11 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Formulaciones liquidas estabilizadas contentivas de anticuerpos |
| MX2013005024A (es) | 2010-11-08 | 2013-11-21 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpo anti-il-6 receptor administrado subcutaneamente. |
| MY166429A (en) | 2010-11-17 | 2018-06-26 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Multi-specific antigen-binding molecule having alternative function to function of blood coagulation factor viii |
| EP2735315B1 (en) | 2011-07-19 | 2019-10-02 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Stable protein-containing preparation containing argininamide or valinamide |
| KR101993488B1 (ko) | 2011-09-01 | 2019-06-26 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 한외여과에 의해 고도로 농축된 항체를 포함하는 조성물의 제조 방법 |
| ES2828656T3 (es) * | 2012-04-04 | 2021-05-27 | Polaris Group | Composición que comprende arginina desiminasa pegilada |
| US9969794B2 (en) | 2012-05-10 | 2018-05-15 | Visterra, Inc. | HA binding agents |
| US20150157619A1 (en) * | 2012-07-10 | 2015-06-11 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Pharmaceutical preparation for injection |
| EP2905342A4 (en) | 2012-10-03 | 2016-03-16 | Kyowa Hakko Kirin Co Ltd | METHOD FOR PREVENTING POLYPEPTIDE REDUCTION BY ADDITION OF AMINO ACID TO A LIQUID CULTURE MEDIUM |
| EP2727602A1 (en) * | 2012-10-31 | 2014-05-07 | Takeda GmbH | Method for preparation of a high concentration liquid formulation of an antibody |
| JP6534615B2 (ja) | 2013-09-27 | 2019-06-26 | 中外製薬株式会社 | ポリペプチド異種多量体の製造方法 |
| WO2015080513A1 (en) * | 2013-11-29 | 2015-06-04 | Hanwha Chemical Corporation | A liquid formulation of a fusion protein comprising tnfr and fc region |
| BR112016021083A2 (pt) | 2014-03-17 | 2017-10-03 | Mitsubishi Tanabe Pharma Corp | Conjugados anticorpo-fynomer |
| TW201625299A (zh) | 2014-06-20 | 2016-07-16 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | 用於因第ｖｉｉｉ凝血因子及／或活化的第ｖｉｉｉ凝血因子的活性降低或欠缺而發病及／或進展的疾病之預防及／或治療之醫藥組成物 |
| TWI700300B (zh) | 2014-09-26 | 2020-08-01 | 日商中外製藥股份有限公司 | 中和具有第ｖｉｉｉ凝血因子（ｆｖｉｉｉ）機能替代活性的物質之抗體 |
| TWI701435B (zh) | 2014-09-26 | 2020-08-11 | 日商中外製藥股份有限公司 | 測定ｆｖｉｉｉ的反應性之方法 |
| CN107073113A (zh) * | 2014-10-18 | 2017-08-18 | 辉瑞大药厂 | 抗il‑7r抗体组合物 |
| TWI741969B (zh) * | 2014-10-30 | 2021-10-11 | 日商中外製藥股份有限公司 | 具備注射器蓋之附針預填充注射器製劑 |
| EP3224359B1 (en) * | 2014-11-25 | 2023-10-25 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Arginine improves polymerase storage stability |
| AU2016224409B2 (en) | 2015-02-27 | 2021-01-28 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Composition for treating IL-6-related diseases |
| US11142587B2 (en) | 2015-04-01 | 2021-10-12 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for producing polypeptide hetero-oligomer |
| EP3398965A4 (en) | 2015-12-28 | 2019-09-18 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | METHOD FOR PROMOTING THE EFFICACY OF PURIFYING A POLYPEPTIDE CONTAINING AN FC REGION |
| BR112018014123A2 (pt) * | 2016-01-12 | 2018-12-11 | Dr. Reddy's Laboratories Limited | formulação farmacêutica aquosa estável. |
| BR112018014277A2 (pt) * | 2016-01-13 | 2018-12-18 | Genmab As | formulação, e, método de preparação de uma solução injetável de um axl-adc |
| EP3419663A1 (en) * | 2016-02-24 | 2019-01-02 | Visterra, Inc. | Formulations of antibody molecules to influenza virus |
| US20190060241A1 (en) * | 2016-04-13 | 2019-02-28 | Medimmune, Llc | Use of amino acids as stabilizing compounds in pharmaceutical compositions containing high concentrations of protein-based therapeutic agents |
| AR108240A1 (es) * | 2016-04-28 | 2018-08-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Formulaciones que contienen anticuerpos |
| CN109661241A (zh) | 2016-09-06 | 2019-04-19 | 中外制药株式会社 | 使用识别凝血因子ix和/或活化凝血因子ix以及凝血因子x和/或活化凝血因子x的双特异性抗体的方法 |
| BR112019018022A2 (pt) * | 2017-03-01 | 2020-06-02 | Medimmune Limited | Formulações de anticorpos monoclonais |
| WO2018179138A1 (ja) * | 2017-03-29 | 2018-10-04 | 持田製薬株式会社 | 抗体含有液体製剤 |
| EP3603670A4 (en) | 2017-03-31 | 2021-03-10 | Public University Corporation Nara Medical University | MEDICAL COMPOSITION FOR THE PREVENTION AND / OR TREATMENT OF BLOOD CLOG FACTOR IX ANOMALY WITH A MULTI-SPECIFIC ANTIGIBINDING MOLECULAR FUNCTION OF BLOOD CLOTHING FACTOR VIII |
| KR20190129061A (ko) | 2017-03-31 | 2019-11-19 | 메이지 세이카 파루마 가부시키가이샤 | 수성 제제 및 주사기 내 수성 제제, 및 항체 단백질 탈응집제 및 항체 단백질 탈응집 방법 |
| CA3061705A1 (en) | 2017-04-11 | 2018-10-18 | Kiniksa Pharmaceuticals, Ltd. | Stable anti-osmr antibody formulation |
| EP3615065A1 (en) * | 2017-04-28 | 2020-03-04 | Amgen Inc. | Excipients to reduce the viscosity of antibody formulations and formulation compositions |
| RU2019138507A (ru) | 2017-05-02 | 2021-06-02 | Мерк Шарп И Доум Корп. | Составы антител против lag3 и совместные составы антител против lag3 и антител против pd-1 |
| JOP20190260A1 (ar) | 2017-05-02 | 2019-10-31 | Merck Sharp & Dohme | صيغ ثابتة لأجسام مضادة لمستقبل الموت المبرمج 1 (pd-1) وطرق استخدامها |
| AU2018338859A1 (en) | 2017-09-29 | 2020-02-06 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Multispecific antigen-binding molecule having blood coagulation factor VIII (FVIII) cofactor function-substituting activity, and pharmaceutical formulation containing said molecule as active ingredient |
| KR20200074160A (ko) | 2017-10-20 | 2020-06-24 | 가꼬우호우징 효고 이카다이가쿠 | 항il-6 수용체 항체를 함유하는 수술 후의 유착을 억제하기 위한 의약 조성물 |
| CN109350740B (zh) * | 2017-11-30 | 2023-06-20 | 百奥泰生物制药股份有限公司 | 一种治疗il-6相关疾病的人源化抗体的液体制剂 |
| TWI822728B (zh) | 2018-01-31 | 2023-11-21 | 加藤元一 | 含有il-6抑制劑的哮喘治療劑 |
| EP3781124A1 (en) * | 2018-04-16 | 2021-02-24 | Merck Patent GmbH | Method for stabilizing protein comprising formulations by using a meglumine salt |
| US20200113912A1 (en) | 2018-09-12 | 2020-04-16 | Silverback Therapeutics, Inc. | Methods and Compositions for the Treatment of Disease with Immune Stimulatory Conjugates |
| JP7467438B2 (ja) * | 2018-10-18 | 2024-04-15 | メルク・シャープ・アンド・ドーム・エルエルシー | 抗ｒｓｖ抗体の製剤及びその使用方法 |
| MA54095A (fr) * | 2018-10-31 | 2022-02-09 | Richter Gedeon Nyrt | Formulations pharmaceutiques aqueuses |
| KR20200093949A (ko) | 2019-01-29 | 2020-08-06 | 현대자동차주식회사 | 엔진 시스템 |
| US20220220210A1 (en) | 2019-03-29 | 2022-07-14 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-il-6 receptor antibody-containing inhibitor for inhibiting deterioration of bbb function |
| JP7501876B2 (ja) | 2019-04-17 | 2024-06-18 | 国立大学法人広島大学 | Ｉｌ－６阻害剤及びｃｃｒ２阻害剤を組み合わせて投与することを特徴とする泌尿器がんの治療剤 |
| MA55750A (fr) * | 2019-04-23 | 2022-03-02 | Sanofi Sa | Formulations d'anticorps stables et à faible viscosité et leurs utilisations |
| CA3141085A1 (en) | 2019-06-19 | 2020-12-24 | Brenda Stevens | Anti-mesothelin antibodies and immunoconjugates thereof |
| EP3996740A4 (en) * | 2019-07-12 | 2023-07-05 | Contrafect Corporation | THERAPEUTIC PROTEIN FORMULATIONS INCLUDING ANTIBODIES AND THEIR USES |
| WO2021070885A1 (ja) | 2019-10-11 | 2021-04-15 | 中外製薬株式会社 | 後天性血友病ａの予防および／または治療に用いられる医薬組成物、および当該医薬組成物を含む製品 |
| EP3808777A1 (en) | 2019-10-16 | 2021-04-21 | Glenmark Specialty S.A. | Stable liquid antibody formulations |
| US20240057587A1 (en) * | 2019-11-14 | 2024-02-22 | Miyoshi Oil & Fat Co.,Ltd. | Organic ammonium salt and hydrogen-bonding material treatment agent using same |
| EP4106819A1 (en) | 2020-02-21 | 2022-12-28 | Silverback Therapeutics, Inc. | Nectin-4 antibody conjugates and uses thereof |
| AU2021281152A1 (en) * | 2020-05-28 | 2022-12-22 | Kashiv Biosciences, Llc | An improved process of storing and preparing the protein |
| IL298551A (en) * | 2020-05-29 | 2023-01-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | A formulation containing antibodies |
| WO2022006327A1 (en) | 2020-07-01 | 2022-01-06 | Silverback Therapeutics, Inc. | Anti-asgr1 antibody conjugates and uses thereof |
| US20220042977A1 (en) * | 2020-08-04 | 2022-02-10 | ProStabilis, Inc. | Protein Solubility Screening Kits and Their Use |
| KR20220028972A (ko) * | 2020-08-31 | 2022-03-08 | (주)셀트리온 | 안정한 약제학적 제제 |
| CN112798720B (zh) * | 2021-01-11 | 2022-04-19 | 苏州药明生物技术有限公司 | 组氨酸缓冲液在减少蛋白聚体中的应用 |
| CN117320749A (zh) | 2021-03-12 | 2023-12-29 | 中外制药株式会社 | 用于治疗或预防重症肌无力的药物组合物 |
| CN117858722A (zh) * | 2021-08-18 | 2024-04-09 | 百奥泰生物制药股份有限公司 | 用于治疗il-6相关疾病的包含高浓度人源化抗体的液体制剂 |
| USD987969S1 (en) * | 2022-02-24 | 2023-06-06 | L'atelier De Chaussures, S.L | Heel for footwear |
| CN117007791A (zh) * | 2023-07-18 | 2023-11-07 | 广州市进德生物科技有限公司 | 一种辣根过氧化物酶偶联物稀释保存液 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0420649A2 (en) * | 1989-09-28 | 1991-04-03 | Immunobiology Research Institute, Inc. | Stabilized aqueous formulations of small peptides |
| RU98109886A (ru) * | 1995-10-25 | 2000-08-20 | Роше Диагностикс Гмбх | Композиция и способ стабилизации биологических материалов путем сушки без замораживания |
| WO2007092722A2 (en) * | 2006-01-31 | 2007-08-16 | Sento Corporation | Systems and methods for providing a dynamic interaction router |
| WO2007109221A3 (en) * | 2006-03-20 | 2008-02-21 | Wyeth Corp | Methods for reducing protein aggregation |
Family Cites Families (91)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS55102519A (en) | 1979-01-31 | 1980-08-05 | Green Cross Corp:The | Stabilization of interferon |
| JPS58201994A (ja) | 1982-05-21 | 1983-11-25 | Hideaki Hagiwara | 抗原特異的ヒト免疫グロブリンの生産方法 |
| GB8607679D0 (en) | 1986-03-27 | 1986-04-30 | Winter G P | Recombinant dna product |
| AU665190B2 (en) | 1990-07-10 | 1995-12-21 | Cambridge Antibody Technology Limited | Methods for producing members of specific binding pairs |
| GB9015198D0 (en) | 1990-07-10 | 1990-08-29 | Brien Caroline J O | Binding substance |
| DE69127627T2 (de) | 1990-08-29 | 1998-02-19 | Genpharm Int | Produktion und Nützung nicht-menschliche transgentiere zur Produktion heterologe Antikörper |
| AU668349B2 (en) | 1991-04-25 | 1996-05-02 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Reconstituted human antibody against human interleukin 6 receptor |
| WO1993006213A1 (en) | 1991-09-23 | 1993-04-01 | Medical Research Council | Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach |
| ATE463573T1 (de) | 1991-12-02 | 2010-04-15 | Medimmune Ltd | Herstellung von autoantikörpern auf phagenoberflächen ausgehend von antikörpersegmentbibliotheken |
| AU3328493A (en) | 1991-12-17 | 1993-07-19 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
| EP0656941B1 (en) | 1992-03-24 | 2005-06-01 | Cambridge Antibody Technology Limited | Methods for producing members of specific binding pairs |
| WO1994002602A1 (en) | 1992-07-24 | 1994-02-03 | Cell Genesys, Inc. | Generation of xenogeneic antibodies |
| CA2161351C (en) | 1993-04-26 | 2010-12-21 | Nils Lonberg | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
| GB9313509D0 (en) | 1993-06-30 | 1993-08-11 | Medical Res Council | Chemisynthetic libraries |
| CA2177367A1 (en) | 1993-12-03 | 1995-06-08 | Andrew David Griffiths | Recombinant binding proteins and peptides |
| KR100261941B1 (ko) | 1994-07-13 | 2000-07-15 | 나가야마 오사무 | 사람의 인터루킨-8에 대한 재구성 사람항체 |
| HU223602B1 (hu) | 1994-10-07 | 2004-10-28 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Krónikus reumatoid artritisz kezelésére szolgáló, IL-6 receptor elleni antitestet tartalmazó gyógyszerkészítmény |
| CN101011574B (zh) | 1994-10-21 | 2012-10-03 | 岸本忠三 | Il-6受体的抗体在制备药物组合物中的用途 |
| EP1978033A3 (en) | 1995-04-27 | 2008-12-24 | Amgen Fremont Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
| AU2466895A (en) | 1995-04-28 | 1996-11-18 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
| CN102416176A (zh) | 1995-07-27 | 2012-04-18 | 基因技术股份有限公司 | 稳定等渗的冻干蛋白质制剂 |
| DE19539574A1 (de) | 1995-10-25 | 1997-04-30 | Boehringer Mannheim Gmbh | Zubereitungen und Verfahren zur Stabilisierung biologischer Materialien mittels Trocknungsverfahren ohne Einfrieren |
| TWI240627B (en) | 1996-04-26 | 2005-10-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Erythropoietin solution preparation |
| AU744146B2 (en) | 1996-09-26 | 2002-02-14 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antibody against human parathormone related peptides |
| UA76934C2 (en) | 1996-10-04 | 2006-10-16 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Reconstructed human anti-hm 1.24 antibody, coding dna, vector, host cell, method for production of reconstructed human antibody, pharmaceutical composition and drug for treating myeloma containing reconstructed human anti-hm 1.24 antibody |
| AU758240B2 (en) | 1998-02-25 | 2003-03-20 | Merck Patent Gmbh | Enhancing the circulating half-life of antibody-based fusion proteins |
| JP3998419B2 (ja) | 1998-04-03 | 2007-10-24 | 中外製薬株式会社 | ヒト組織因子（ｔｆ）に対するヒト型化抗体およびヒト型化抗体の作製方法 |
| JP2000247903A (ja) | 1999-03-01 | 2000-09-12 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | 長期安定化製剤 |
| TWI242043B (en) | 2000-03-10 | 2005-10-21 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Polypeptide inducing apoptosis |
| DE10022092A1 (de) | 2000-05-08 | 2001-11-15 | Aventis Behring Gmbh | Stabilisiertes Protein-Präparat und Verfahren zu seiner Herstellung |
| AU2002210917B2 (en) | 2000-10-20 | 2006-05-18 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Degraded TPO agonist antibody |
| JP5290489B2 (ja) | 2001-11-08 | 2013-09-18 | アッヴィ・バイオセラピューティクス・インコーポレイテッド | Ｉｇｇ抗体の安定な液体医薬製剤 |
| EP2311489A3 (en) | 2002-02-14 | 2013-08-21 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Formulation of antibody-containing solutions comprising a sugar as a stabilizer |
| EP1539212A4 (en) | 2002-07-12 | 2007-05-02 | Medarex Inc | METHOD AND COMPOSITIONS FOR PREVENTING OXIDATIVE DEGRADATION OF PROTEINS |
| JP4768439B2 (ja) | 2002-10-15 | 2011-09-07 | アボット バイオセラピューティクス コーポレイション | 変異誘発による抗体のＦｃＲｎ結合親和力又は血清半減期の改変 |
| US7217797B2 (en) | 2002-10-15 | 2007-05-15 | Pdl Biopharma, Inc. | Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
| AU2003293543A1 (en) * | 2002-12-13 | 2004-07-09 | Abgenix, Inc. | System and method for stabilizing antibodies with histidine |
| KR101235507B1 (ko) | 2003-02-28 | 2013-02-20 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 단백질을 함유하는 안정화 제제 |
| US20050158303A1 (en) | 2003-04-04 | 2005-07-21 | Genentech, Inc. | Methods of treating IgE-mediated disorders comprising the administration of high concentration anti-IgE antibody formulations |
| CN1798575A (zh) | 2003-04-04 | 2006-07-05 | 健泰科生物技术公司 | 高浓度抗体和蛋白制剂 |
| CN1798767B (zh) | 2003-04-10 | 2011-02-16 | 晶面生物技术公司 | 通过诱变来改变抗体对FcRn的结合亲和力或血清半衰期 |
| GB2401040A (en) | 2003-04-28 | 2004-11-03 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Method for treating interleukin-6 related diseases |
| WO2005019266A2 (en) | 2003-07-15 | 2005-03-03 | Amgen Inc. | Human anti-ngf neutralizing antibodies as selective ngf pathway inhibitors |
| JP5452835B2 (ja) | 2003-07-15 | 2014-03-26 | 中外製薬株式会社 | 形質転換細胞によるＩｇＭの産生とその定量方法 |
| ATE518888T1 (de) | 2003-10-09 | 2011-08-15 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Stabilisierte lösung mit hoher igm-konzentration |
| WO2005035754A1 (ja) | 2003-10-14 | 2005-04-21 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | 機能蛋白質を代替する二重特異性抗体 |
| AU2003271174A1 (en) | 2003-10-10 | 2005-04-27 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Double specific antibodies substituting for functional protein |
| RU2392967C2 (ru) | 2003-10-17 | 2010-06-27 | Тугаи Сейяку Кабусики Кайся | Терапевтический агент для мезотелиомы |
| EP1712240B1 (en) * | 2003-12-25 | 2015-09-09 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Stable water-based medicinal preparation containing antibody |
| JP2008505054A (ja) | 2004-02-11 | 2008-02-21 | ワーナー−ランバート カンパニー リミテッド ライアビリティー カンパニー | Ｉｌ−６アンタゴニストで骨関節炎を治療する方法 |
| BRPI0506125B8 (pt) | 2004-07-09 | 2021-05-25 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | anticorpo anti - glipicano 3, seu método de produção, polinucleotídeo, vetor e inibidor do crescimento de células |
| JO3000B1 (ar) | 2004-10-20 | 2016-09-05 | Genentech Inc | مركبات أجسام مضادة . |
| EA016022B1 (ru) | 2004-12-21 | 2012-01-30 | Сентокор, Инк. | Выделенное антитело млекопитающего против il-12 и способ изменения его активности |
| EP1876236B9 (en) | 2005-04-08 | 2015-02-25 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antibody substituting for function of blood coagulation factor viii |
| US7785595B2 (en) | 2005-04-18 | 2010-08-31 | Yeda Research And Development Company Limited | Stabilized anti-hepatitis B (HBV) antibody formulations |
| EP1977763A4 (en) | 2005-12-28 | 2010-06-02 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | STABILIZER PREPARATION CONTAINING ANTIBODIES |
| AU2007212147A1 (en) * | 2006-02-03 | 2007-08-16 | Medimmune, Llc | Protein formulations |
| CN101426527A (zh) * | 2006-02-03 | 2009-05-06 | 米迪缪尼有限公司 | 蛋白质制剂 |
| EP2006381B1 (en) | 2006-03-31 | 2016-02-03 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for controlling blood pharmacokinetics of antibodies |
| CN101460622A (zh) * | 2006-03-31 | 2009-06-17 | 中外制药株式会社 | 用于纯化双特异性抗体的抗体修饰方法 |
| EP4218801A3 (en) | 2006-03-31 | 2023-08-23 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antibody modification method for purifying bispecific antibody |
| US7285876B1 (en) | 2006-05-01 | 2007-10-23 | Raytheon Company | Regenerative gate drive circuit for power MOSFET |
| DK2374818T3 (da) | 2006-06-02 | 2013-01-21 | Regeneron Pharma | Højaffinitetsantistoffer mod human IL-6-receptor |
| US20080070230A1 (en) | 2006-06-12 | 2008-03-20 | Wyeth | Methods for reducing or preventing liquid-liquid phase separation in high concentration protein solutions |
| WO2008045373A2 (en) | 2006-10-06 | 2008-04-17 | Amgen Inc. | Stable antibody formulations |
| EP2094729A1 (en) | 2006-12-11 | 2009-09-02 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Abeta antibody parenteral formulation |
| AU2007338791B2 (en) * | 2006-12-21 | 2014-03-13 | Amgen Inc | Stable buffered formulations containing polypeptides |
| CA2674608A1 (en) | 2007-01-09 | 2008-07-17 | Wyeth | Anti-il-13 antibody formulations and uses thereof |
| GB0700523D0 (en) * | 2007-01-11 | 2007-02-21 | Insense Ltd | The Stabilisation Of Proteins |
| CA2681743A1 (en) | 2007-03-22 | 2008-09-25 | Imclone Llc | Stable antibody formulations |
| AU2008232902B2 (en) | 2007-03-30 | 2013-10-03 | Medlmmune, Llc | Antibody formulation |
| GB0707938D0 (en) | 2007-04-25 | 2007-05-30 | Univ Strathclyde | Precipitation stabilising compositions |
| US20110014676A1 (en) | 2007-06-29 | 2011-01-20 | Battelle Memorial Institute | Protein stabilization |
| SG193868A1 (en) | 2007-09-26 | 2013-10-30 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Modified antibody constant region |
| WO2009041621A1 (ja) * | 2007-09-26 | 2009-04-02 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | 抗il-6レセプター抗体 |
| PL2202245T3 (pl) | 2007-09-26 | 2017-02-28 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Sposób modyfikowania punktu izoelektrycznego przeciwciała poprzez podstawienie aminokwasu w cdr |
| ES2834741T3 (es) | 2007-12-05 | 2021-06-18 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpo anti-NR10 y uso del mismo |
| SG187410A1 (en) * | 2007-12-28 | 2013-02-28 | Baxter Int | Recombinant vwf formulations |
| ES2563483T3 (es) | 2008-04-11 | 2016-03-15 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Molécula de unión a antígeno capaz de unirse repetidamente a dos o más moléculas de antígeno |
| WO2009141239A1 (en) | 2008-05-20 | 2009-11-26 | F. Hoffmann-La Roche Ag | A pharmaceutical formulation comprising an antibody against ox40l, uses thereof |
| SG10201703707YA (en) | 2009-03-19 | 2017-06-29 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Pharmaceutical formulation containing improved antibody molecules |
| EP2522724B1 (en) | 2009-12-25 | 2020-02-05 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Polypeptide modification method for purifying polypeptide multimers |
| AR080428A1 (es) | 2010-01-20 | 2012-04-11 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Formulaciones liquidas estabilizadas contentivas de anticuerpos |
| MY166429A (en) | 2010-11-17 | 2018-06-26 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Multi-specific antigen-binding molecule having alternative function to function of blood coagulation factor viii |
| TW201625299A (zh) | 2014-06-20 | 2016-07-16 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | 用於因第ｖｉｉｉ凝血因子及／或活化的第ｖｉｉｉ凝血因子的活性降低或欠缺而發病及／或進展的疾病之預防及／或治療之醫藥組成物 |
| EP3395835B1 (en) | 2015-12-25 | 2021-02-03 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antibody having enhanced activity, and method for modifying same |
| AR108240A1 (es) | 2016-04-28 | 2018-08-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Formulaciones que contienen anticuerpos |
| WO2018021450A1 (ja) | 2016-07-29 | 2018-02-01 | 中外製薬株式会社 | 増強されたｆｖｉｉｉ補因子機能代替活性を有する二重特異性抗体 |
| CN109661241A (zh) | 2016-09-06 | 2019-04-19 | 中外制药株式会社 | 使用识别凝血因子ix和/或活化凝血因子ix以及凝血因子x和/或活化凝血因子x的双特异性抗体的方法 |
| EP3603670A4 (en) | 2017-03-31 | 2021-03-10 | Public University Corporation Nara Medical University | MEDICAL COMPOSITION FOR THE PREVENTION AND / OR TREATMENT OF BLOOD CLOG FACTOR IX ANOMALY WITH A MULTI-SPECIFIC ANTIGIBINDING MOLECULAR FUNCTION OF BLOOD CLOTHING FACTOR VIII |
| AU2018361430A1 (en) | 2017-11-01 | 2020-06-11 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antibody variant and isoform with lowered biological activity |
-
2011
- 2011-01-19 AR ARP110100185A patent/AR080428A1/es not_active Application Discontinuation
- 2011-01-19 TW TW104130738A patent/TWI609698B/zh active
- 2011-01-19 TW TW100101946A patent/TWI505838B/zh active
- 2011-01-20 DK DK11734694.0T patent/DK2526963T3/en active
- 2011-01-20 MY MYPI2012003266A patent/MY185867A/en unknown
- 2011-01-20 KR KR1020127021266A patent/KR20120117862A/ko active Search and Examination
- 2011-01-20 KR KR1020177036349A patent/KR101944211B1/ko active IP Right Grant
- 2011-01-20 KR KR1020227013705A patent/KR20220054725A/ko not_active Application Discontinuation
- 2011-01-20 BR BR112012018023A patent/BR112012018023A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2011-01-20 CN CN201610373014.7A patent/CN105944099B/zh active Active
- 2011-01-20 NZ NZ601374A patent/NZ601374A/en unknown
- 2011-01-20 CN CN201180014798.XA patent/CN102858366B/zh active Active
- 2011-01-20 EP EP18155113.6A patent/EP3378486B1/en active Active
- 2011-01-20 RU RU2012135384A patent/RU2653447C2/ru active
- 2011-01-20 SG SG10202003196SA patent/SG10202003196SA/en unknown
- 2011-01-20 EP EP11734694.0A patent/EP2526963B1/en not_active Revoked
- 2011-01-20 IL IL296486A patent/IL296486A/en unknown
- 2011-01-20 CA CA3115615A patent/CA3115615C/en active Active
- 2011-01-20 ES ES11734694.0T patent/ES2671224T3/es active Active
- 2011-01-20 US US13/522,848 patent/US10022319B2/en active Active
- 2011-01-20 JP JP2011550936A patent/JP5939799B2/ja active Active
- 2011-01-20 EP EP21159453.6A patent/EP3892292B1/en active Active
- 2011-01-20 MX MX2012008225A patent/MX349560B/es active IP Right Grant
- 2011-01-20 TR TR2018/07401T patent/TR201807401T4/tr unknown
- 2011-01-20 CA CA2786981A patent/CA2786981C/en active Active
- 2011-01-20 KR KR1020207015344A patent/KR102391571B1/ko active IP Right Grant
- 2011-01-20 SG SG2012051918A patent/SG182517A1/en unknown
- 2011-01-20 WO PCT/JP2011/050911 patent/WO2011090088A1/ja active Application Filing
- 2011-01-20 AU AU2011208075A patent/AU2011208075B2/en active Active
- 2011-01-20 KR KR1020197002197A patent/KR20190011326A/ko active Application Filing
- 2011-01-20 PL PL11734694T patent/PL2526963T3/pl unknown
-
2012
- 2012-07-12 IL IL220934A patent/IL220934B/en active IP Right Grant
- 2012-07-19 ZA ZA2012/05446A patent/ZA201205446B/en unknown
-
2016
- 2016-03-07 JP JP2016042984A patent/JP6265563B2/ja active Active
- 2016-07-08 AU AU2016204729A patent/AU2016204729A1/en not_active Abandoned
-
2018
- 2018-03-21 AU AU2018202013A patent/AU2018202013A1/en not_active Abandoned
- 2018-06-14 US US16/008,486 patent/US11612562B2/en active Active
-
2019
- 2019-03-20 IL IL265501A patent/IL265501B2/en unknown
-
2020
- 2020-01-21 AU AU2020200395A patent/AU2020200395B2/en active Active
-
2021
- 2021-05-28 AR ARP210101446A patent/AR122198A2/es unknown
- 2021-10-07 AU AU2021245178A patent/AU2021245178A1/en active Pending
-
2023
- 2023-02-24 US US18/174,043 patent/US20230277442A1/en active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0420649A2 (en) * | 1989-09-28 | 1991-04-03 | Immunobiology Research Institute, Inc. | Stabilized aqueous formulations of small peptides |
| RU98109886A (ru) * | 1995-10-25 | 2000-08-20 | Роше Диагностикс Гмбх | Композиция и способ стабилизации биологических материалов путем сушки без замораживания |
| WO2007092722A2 (en) * | 2006-01-31 | 2007-08-16 | Sento Corporation | Systems and methods for providing a dynamic interaction router |
| WO2007109221A3 (en) * | 2006-03-20 | 2008-02-21 | Wyeth Corp | Methods for reducing protein aggregation |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2653447C2 (ru) | Стабилизированные содержащие антитела жидкие композиции | |
| US10898572B2 (en) | Stable protein-containing preparation containing argininamide or analogous compound thereof |