RU2486252C1 - СПОСОБ ВИДОВОЙ ИДЕНТИФИКАЦИИ И ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ШТАММОВ Yersinia pseudotuberculosis ОТ Yersinia pestis И Yersinia enterocolitica - Google Patents
СПОСОБ ВИДОВОЙ ИДЕНТИФИКАЦИИ И ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ШТАММОВ Yersinia pseudotuberculosis ОТ Yersinia pestis И Yersinia enterocolitica Download PDFInfo
- Publication number
- RU2486252C1 RU2486252C1 RU2012119644/10A RU2012119644A RU2486252C1 RU 2486252 C1 RU2486252 C1 RU 2486252C1 RU 2012119644/10 A RU2012119644/10 A RU 2012119644/10A RU 2012119644 A RU2012119644 A RU 2012119644A RU 2486252 C1 RU2486252 C1 RU 2486252C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- yersinia
- pseudotuberculosis
- species
- pestis
- strains
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение касается экспресс-идентификации штаммов, принадлежащих к виду Yersinia pseudotuberculosis, и их дифференциации от близкородственных видов, а именно Y.pestis и Y.enterocolitica. Сущность способа заключается в использовании видоспецифических праймеров, состоящих из двух нуклеотидных последовательностей htr03-htr04, осуществляющих детекцию возбудителя псевдотуберкулеза путем амплификации участка специфического гена htrB и детерминирующих продукцию специфического фрагмента размером 229 п.н. Учет результатов исследуемых штаммов оценивают как положительный при обнаружении специфического фрагмента размером 229 п.н. При наличии данного фрагмента определяют принадлежность штамма к Y. pseudotuberculosis. Нуклеотидные последовательности праймеров htr03-htr04 приведены в формуле изобретения и описании. Использование способа позволяет с высокой степенью достоверности идентифицировать штаммы вида Yersinia pseudotuberculosis и дифференциацию этого вида с близкородственными видами Y.pestis и Y.enterocolitica. 1 з.п. ф-лы, 1 табл., 1 ил., 2 пр.
Description
Предлагаемое изобретение относится к биотехнологии и генетической инженерии и может быть использовано в экспресс-идентификации штаммов, принадлежащих к виду Y.pseudotuberculosis, и их дифференциации от близкородственных видов, а именно: Y.pestis и Y.enterocolitica.
В настоящее время в лабораторной диагностике предпочтение отдано методам полимеразной цепной реакции (ПЦР), основанной на выявлении специфических фрагментов ДНК.
Известен способ идентификации бактерий рода Yersinia и дифференциации патогенных видов Y.pestis, Y.pseudotuberculosis и Y.enterocolitica (см. А.М.Стенкова, М.П.Исаева и др. «Разработка многопраймерной ПЦР для идентификации бактерий рода Yersinia и патогенных видов Y.pestis, Y.pseudotuberculosis и Y.enterocolitica», Журнал «Молекулярная генетика, микробиология и вирусология». Москва, Медицина, №3, 2008, стр.18), заключающийся в том, что используют шесть различных праймеров, два из которых родоспецифические, а четыре - видоспецифические.
Однако известный способ требует много времени и затрат, что повышает его стоимость и срок выполнения, а кроме того, диагностическая достоверность требует доработки на большом числе образцов, что в итоге позволяет сделать вывод о низкой эффективности способа.
Наиболее близким по технической сущности является способ идентификации штаммов вида Yersinia pestis и Y.pseudotuberculosis (см. патент RU №2422535, кл. C12Q 1/68, 27.06.2011), заключающийся в том, что исследуемую пробу изучают двумя методами, путем постановки реакции иммунофлюоресценции (НИМФ) и ПЦР, причем первый метод включает обнаружение капсульного антигена F1 и поверхностного белка PEV с помощью моноклональных антител к этим белкам, а второй - идентификацию бактерий на основе родо- и и видоспецифических праймеров в ПЦР, при этом синтез специфических фрагментов ДНК, направляемых парой праймеров vlm33for/JSrev1759, подтверждает наличие в пробе штаммов возбудителя псевдотуберкулеза.
Однако использование реакции непрямой иммунофлюоресценции с помощью МКА, с одной стороны, снижает чувствительность метода, поскольку для обнаружения искомых бактерий в поле зрения при визуальном обследовании мазков необходимо содержание бактерий в исследуемой пробе не менее 106 м.к., а с другой стороны - использование МКА двух видов (к капсульному антигену F1 и поверхностному белку чумного микроба) приводит к удорожанию тест-системы в целом, двухэтапная постановка увеличивает срок выполнения.
Технической задачей предлагаемого изобретения является разработка нового простого и эффективного способа, позволяющего с высокой степенью достоверности проводить идентификацию штаммов вида Y.pseudotuberculosis и дифференциацию этого вида с близкородственными видами Y.pestis и Y.enterocolitica.
Поставленная цель достигается тем, что в известном способе видовой идентификации и дифференциации штаммов Yersinia pseudotuberculosis от Yersinia pestis и Yersinia enterocolitica, включающем ПЦР диагностику иерсиний псевдотуберкулеза путем использования видоспецифических праймеров, которые представлены в виде двух нуклеотидных последовательностей htr03-htr04, последние осуществляют детекцию возбудителя псевдотуберкулеза путем амплификации участка специфического гена htrB, детерминирующих продукцию специфического фрагмента размером 229 п.н., учет результатов исследуемых штаммов оценивают как положительный при обнаружении специфического фрагмента размером 229 п.н., который подтверждает принадлежность штамма к Y.pseudotuberculosis, а его отсутствие дает возможность идентифицировать и дифференцировать последний от близкородственных Y.pestis и Y.enterocolitica.
Кроме того, нуклеотидные праймеры htr03-htr04 имеют следующие последовательности:
htr03 CGCGACCACCACTGGCACTT
htr04 AAAGCGACGGTGCAGCCACA
Способ осуществляется следующим образом.
Для проведения способа предварительно конструируют праймеры к фрагменту специфического гена htrB (YPTB2490), детерминирующему продукцию lipid A biosynthesis lauroyl acyltransferase. Из известных источников информации htrB содержится только в штаммах Y.pseudotuberculosis и отсутствует у близкородственных видов Y.pestis. (1) У близкородственных Y.enterocolitica этот ген имеет некоторые отличия (Perez-Gutierrez, 2010) (2).
Для конструирования специфических праймеров нуклеотидные последовательности генов htrB Y.pseudotuberculosis и Y.enterocolitica были проанализированы с помощью пакета авторских программ ALINMENT. В ходе компьютерного анализа в структуре гена htrB Y.pseudotuberculosis был идентифицированы видоспецифические участки, к которым были сконструированы комплементарные олигонуклеотидные праймеры htr03 и htr04.
Последние обладают полной гомологией с геном htrB Y.pseudotuberculosis. Указанные праймеры детерминируют продукцию специфического фрагмента размером 229 нуклеотидов и имеют следующие последовательности:
htr03 CGCGACCACCACTGGCACTT
htr04 AAAGCGACGGTGCAGCCACA
Кроме того, предварительным этапом проведения способа является выделение ДНК-мишени, которая может включать нуклеотидную последовательность гена гена htrB.
Перед постановкой ПНР проводят предварительную подготовку материала (выделение ДНК). Массу бактерий, сформировавших колонию или газон, стерильной палочкой перемещают в микропробирку объемом 1,5 мл, содержащую 200 мкл дистиллированной воды, после чего выделяют ДНК как принято МУ 1.3.1791-9 (3).
Далее проводят амплификацию исследуемой ДНК со специфическими праймерами htr03 и htr04.
Условия проведения реакции амплификации.
Амплификацию проводитят по следующей схеме: денатурация при 95°С - 3 мин (1 цикл); затем 35 циклов: денатурация при 95°С - 20 с, отжиг при 60°С - 20 с, синтез при 72°С - 20 с; синтез при 72°С - 7 мин (1 цикл).
Инкубационную смесь объемом 25 мкл готовят из расчета: 1,5 мМ Mg-буфер, 0,2 мМ смеси дНТФ, 1,0 мкМ смеси праймеров (по 0,5 мкМ каждого праймера), 25 нг ДНК - матрицы, 0,25 ед. ДНК-полимеразы, оставшийся объем - вода. В качестве матрицы используют геномную ДНК, полученную из разных штаммов бактерий рода Yersinia.
Анализ продуктов амплификации проводят с помощью электрофореза в 2% агарозном или 10% полиакриламидном геле.
Учет результатов, а именно идентификацию проводят по анализу длин амплифицированных фрагментов. В случае появления специфического ампликона длинной 229 пар нуклеотидов оценивают результат как положительный, подтверждающий обнаружение специфического гена htrB, и поэтому делают вывод о принадлежности исследуемого штамма к Y.pseudotuberculosis. Отсутствие специфического ампликона дает отрицательный результат, позволяя дифференцировать близкородственные виды Y.pestis и Y.enterocolitica от Y.pseudotuberculosis.
Пример 1.
Подтверждающий видовую идентификацию и дифференциацию Y.pseudotuberculosis (штаммы 5343, 10358, 12309, 12312, 19049, 1992, 1993, 1995, 1985, 1988, 1991) от Y.pestis (EV 1290, 1255, 13287, 12259, 14710). Штаммы взяты из коллекции Ростовского противочумного института.
Предварительно выделяют ДНК исследуемых штаммов (МУ 1.3.1791-9) и далее проводят ПЦР с видоспецифическими олигонуклеотидными праймерами htr03-htr04. Затем проводят амплификацию по вышеуказанной схеме.
Результат электрофоретического разделения фрагментов ДИК в 10% геле полиакриламида представлен на фото, на котором показано, что лунки 1-11 содержат препарат ДНК из штаммов Y.pseudotuberculosis, а лунки 13-17 содержат препарат ДНК из штаммов Y.pestis. Лунка 12 содержит препарат ладдеров ДНК. Стрелка указывает на локализацию целевого специфического фрагмента 229 п.н.
Таким образом, только штаммы возбудителя псевдотуберкулеза формируют в ПЦР с видоспецифичными олигонуклеотидными праймерами htr03-htr04 целевой фрагмент массой 229 п.н.
Пример 2.
ПЦР-анализ штаммов Yersinia enterocolitica, Yersinia pestis и Yersinia pseudotuberculosis.
Манипуляции проводят как в примере 1, но в качестве объекта исследования используют штаммы возбудителя чумы и кишечного иерсиниоза (см. Таблицу).
Из данных таблицы видно, что только штаммы возбудителя чумы и кишечного иерсиниоза не формируют в ПЦР с видоспецифичными олигонуклеотидными праймерами htr03-htr04 целевой фрагмент массой 229 п.н. Указанный фрагмент образуется только в случае исследования ДНК Yersinia pseudotuberculosis
Следовательно, предложенный способ позволяет проводить дифференциации штаммов Y.pseudotuberculosis от Y.pestis и Y.enterocolitica.
Использование предлагаемого изобретения, основанного на монолокусной ПЦР с последующим гель-электрофоретическим анализом длин амплифицированных фрагментов, дает возможность в режиме тест-системы с высокой степенью достоверности определять видовую принадлежность и проводить дифференциацию близкородственных штаммов Y.pseudotuberculosis от Y.pestis и Y.enterocolitica.
Предложенный способ можно использовать в практической деятельности лабораторий Ростпотребнадзора, использующих в своей практической деятельности методы генной диагностики для постановки правильного диагноза и определения стратегии проведения профилактических и противоэпидемических мероприятий.
Источники информации
1. Pouillot F., Fay lle С., Carniel E. Characterization of chromosomal regions conseroed in Yersinia pseudotuberculosis and lost by Yersinia pestis.
Jnfect. Jmmun 2008, 76(10): 4692-4599.
2. Perez-Gutierrez C., Llobet E., Llomport C. et al Role of lipida acylation in Yersinia enterocolitica.
Jnfect. Jmmun. 2010, 78(6): 2768-2781.
3. Методические указания МУ 1.3.1791-9 «Организация работы при исследовании методом ПЦР материала, инфицированного микроорганизмами 1 и 2 группы патогенности» - М., 2003 - 38 с.
Таблица | ||
№ | Штамм | Результат в ПЦР |
1 | Y.enterocolitica 1999 | отрицат |
2 | Y.enterocolitica 2000 | отрицат |
3 | Y.enterocolitica 2012 | отрицат |
4 | Y.enterocolitica 5508 | отрицат |
5 | Y.enterocolitica 5515 | отрицат |
6 | Y.pestis 231 | отрицат |
7 | Y.pestis 1912 | отрицат |
8 | Y.pestis 5191 | отрицат |
9 | Y.pestis C-540 | отрицат |
10 | Y.pestis 1709 | отрицат |
11 | Y.pestis 1300 | отрицат |
12 | Y.pestis 14771 | отрицат |
13 | Y.pestis 3466/2 | отрицат |
14 | Y.pestis 1213 | отрицат |
15 | Y.pestis 1706 | отрицат |
16 | Y.pestis 11695 | отрицат |
17 | Y.pestis 1468 | отрицат |
18 | Y.pestis 13280 | отрицат |
19 | Y.pestis 1254 | отрицат |
20 | Y.pestis 1687 | отрицат |
21 | Yersinia pseudotuberculosis 5343 | положит |
Claims (2)
1. Способ видовой идентификации и дифференциации штаммов Yersinia pseudotuberculosis от Yersinia pestis и Yersinia enterocolitica, включающий ПЦР диагностику иерсиний псевдотуберкулеза путем использования видоспецифических праймеров, отличающийся тем, что видоспецифические праймеры состоят их двух нуклеотидных последовательностей htr03-htr04, которые осуществляют детекцию возбудителя псевдотуберкулеза путем амплификации участка специфического гена htrB, детерминирующих продукцию специфического фрагмента размером 229 п.н., учет результатов исследуемых штаммов оценивают как положительный при обнаружении специфического фрагмента размером 229 п.н., который подтверждает принадлежность штамма к Y.pseudotuberculosis, а его отсутствие дает возможность идентифицировать и дифференцировать последний от близкородственных Y.pestis и Y.enterocolitica.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что нуклеотидные праймеры htr03-htr04 имеют следующие последовательности:
htr03 CGCGACCACCACTGGCACTT,
htr04 AAAGCGACGGTGCAGCCACA.
htr03 CGCGACCACCACTGGCACTT,
htr04 AAAGCGACGGTGCAGCCACA.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012119644/10A RU2486252C1 (ru) | 2012-05-12 | 2012-05-12 | СПОСОБ ВИДОВОЙ ИДЕНТИФИКАЦИИ И ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ШТАММОВ Yersinia pseudotuberculosis ОТ Yersinia pestis И Yersinia enterocolitica |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012119644/10A RU2486252C1 (ru) | 2012-05-12 | 2012-05-12 | СПОСОБ ВИДОВОЙ ИДЕНТИФИКАЦИИ И ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ШТАММОВ Yersinia pseudotuberculosis ОТ Yersinia pestis И Yersinia enterocolitica |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2486252C1 true RU2486252C1 (ru) | 2013-06-27 |
Family
ID=48702220
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2012119644/10A RU2486252C1 (ru) | 2012-05-12 | 2012-05-12 | СПОСОБ ВИДОВОЙ ИДЕНТИФИКАЦИИ И ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ШТАММОВ Yersinia pseudotuberculosis ОТ Yersinia pestis И Yersinia enterocolitica |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2486252C1 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2566559C1 (ru) * | 2014-04-07 | 2015-10-27 | Федеральное казенное учреждение здравоохранения "Ростовский-на-Дону ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Способ дифференциации возбудителей чумы и псевдотуберкулеза по n-ацетил-бета-d-глюкозаминидазной активности |
RU2783710C1 (ru) * | 2021-12-16 | 2022-11-16 | Федеральное казённое учреждение здравоохранения "Иркутский ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Способ обнаружения возбудителя псевдотуберкулеза |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5654144A (en) * | 1995-04-24 | 1997-08-05 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army | Detection of Yersinia using the polymerase chain reaction |
RU2153671C1 (ru) * | 1999-09-07 | 2000-07-27 | Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока | Способ подготовки проб для диагностики псевдотуберкулеза методом полимеразной цепной реакции |
WO2004106553A2 (en) * | 2002-08-01 | 2004-12-09 | The Regents Of The University Of California | Nucleotide sequences specific to yersinia pestis and methods for the detection of yersinia pestis |
RU2385941C1 (ru) * | 2008-12-01 | 2010-04-10 | Ооо "Научно-Производственная Фирма "Омикс" | СПОСОБ ДЕТЕКЦИИ БАКТЕРИЙ РОДА Yersinia И ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ПАТОГЕННЫХ ДЛЯ ЧЕЛОВЕКА ВИДОВ ИЕРСИНИЙ МЕТОДОМ МУЛЬТИПЛЕКСНОЙ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ |
RU2422535C1 (ru) * | 2010-01-11 | 2011-06-27 | Федеральное государственное учреждение здравоохранения "Ростовский-на-Дону ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ ШТАММОВ ВИДА Yersinia pestis И Yersinia pseudotuberculosis |
-
2012
- 2012-05-12 RU RU2012119644/10A patent/RU2486252C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5654144A (en) * | 1995-04-24 | 1997-08-05 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army | Detection of Yersinia using the polymerase chain reaction |
RU2153671C1 (ru) * | 1999-09-07 | 2000-07-27 | Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока | Способ подготовки проб для диагностики псевдотуберкулеза методом полимеразной цепной реакции |
WO2004106553A2 (en) * | 2002-08-01 | 2004-12-09 | The Regents Of The University Of California | Nucleotide sequences specific to yersinia pestis and methods for the detection of yersinia pestis |
RU2385941C1 (ru) * | 2008-12-01 | 2010-04-10 | Ооо "Научно-Производственная Фирма "Омикс" | СПОСОБ ДЕТЕКЦИИ БАКТЕРИЙ РОДА Yersinia И ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ПАТОГЕННЫХ ДЛЯ ЧЕЛОВЕКА ВИДОВ ИЕРСИНИЙ МЕТОДОМ МУЛЬТИПЛЕКСНОЙ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ |
RU2422535C1 (ru) * | 2010-01-11 | 2011-06-27 | Федеральное государственное учреждение здравоохранения "Ростовский-на-Дону ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ ШТАММОВ ВИДА Yersinia pestis И Yersinia pseudotuberculosis |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2566559C1 (ru) * | 2014-04-07 | 2015-10-27 | Федеральное казенное учреждение здравоохранения "Ростовский-на-Дону ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Способ дифференциации возбудителей чумы и псевдотуберкулеза по n-ацетил-бета-d-глюкозаминидазной активности |
RU2783710C1 (ru) * | 2021-12-16 | 2022-11-16 | Федеральное казённое учреждение здравоохранения "Иркутский ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Способ обнаружения возбудителя псевдотуберкулеза |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Vrålstad et al. | A quantitative TaqMan® MGB real-time polymerase chain reaction based assay for detection of the causative agent of crayfish plague Aphanomyces astaci | |
EP1891232B1 (en) | Pcr diagnostics of dermatophytes and other pathogenic fungi | |
Vuran et al. | Identification of Malassezia species from pityriasis versicolor lesions with a new multiplex PCR method | |
RU2629604C1 (ru) | Набор олигонуклеотидных праймеров и зондов для идентификации вируса клещевого энцефалита, вируса лихорадки Западного Нила, боррелий и риккетсий методом мультиплексной ПЦР в режиме реального времени | |
Kac | Molecular approaches to the study of dermatophytes | |
Dąbrowska et al. | The use of a one-step PCR method for the identification of Microsporum canis and Trichophyton mentagrophytes infection of pets | |
Ilahi et al. | Real-time PCR identification of six Malassezia species | |
Dhib et al. | Evaluation of Chitine synthase (CHS1) polymerase chain reaction assay in diagnosis of dermatophyte onychomycosis | |
RU2612137C1 (ru) | Способ идентификации подвидов возбудителя туляремии Francisella tularensis subsp. tularensis, Francisella tularensis subsp. mediasiatica и Francisella tularensis subsp. holarctica | |
JP5522820B2 (ja) | イチゴ重要病害の病原菌検出方法および検出用プライマー | |
RU2550257C2 (ru) | СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ТИПИЧНЫХ И АТИПИЧНЫХ ШТАММОВ Yersinia pestis СРЕДНЕВЕКОВОГО БИОВАРА МЕТОДОМ ПЦР С ГИБРИДИЗАЦИОННО-ФЛУОРЕСЦЕНТНЫМ УЧЕТОМ РЕЗУЛЬТАТОВ | |
RU2471872C1 (ru) | Способ дифференциации штаммов yersinia pestis различных подвидов и биоваров методами полимеразной цепной реакции и мультилокусного сиквенс-типирования | |
Gorton et al. | Development of real-time diagnostic assays specific for Mycoplasma mycoides subspecies mycoides Small Colony | |
RU2486252C1 (ru) | СПОСОБ ВИДОВОЙ ИДЕНТИФИКАЦИИ И ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ШТАММОВ Yersinia pseudotuberculosis ОТ Yersinia pestis И Yersinia enterocolitica | |
RU2736649C1 (ru) | Способ генетической дифференциации штаммов Yersinia pseudotuberculosis путем молекулярно-генетического типирования | |
RU2346045C1 (ru) | ОЛИГОНУКЛЕОТИДНЫЕ ПРАЙМЕРЫ ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ Coccidioides posadasii | |
RU2737775C1 (ru) | Способ идентификации yersinia pestis и yersinia pseudotuberculosis и одновременной дифференциации yersinia pestis основного и центральноазиатского подвидов методом мультиплексной пцр | |
RU2565554C2 (ru) | СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ БИОВАРОВ И ГЕНОВАРИАНТОВ ШТАММОВ Yersinia pestis ОСНОВНОГО ПОДВИДА С ПОМОЩЬЮ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ | |
RU2496882C2 (ru) | Способ дифференциации штаммов возбудителя чумы основного подвида средневекового и античного биоваров методом полимеразной цепной реакции | |
RU2464318C1 (ru) | Олигонуклеотидные праймеры для идентификации возбудителя гистоплазмоза histoplasma capsulatum | |
RU2532845C1 (ru) | ФЛУОРЕСЦЕНТНО-МЕЧЕНЫЙ ОЛИГОНУКЛЕОТИДНЫЙ ЗОНД MS8 Flip-R ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ ВОЗБУДИТЕЛЯ ГИСТОПЛАЗМОЗА Histoplasma capsulatum | |
RU2765495C1 (ru) | Способ определения подвидов Francisella tularensis методом мультипраймерной ПЦР | |
RU2552611C2 (ru) | Способ подвидовой дифференциации штаммов возбудителя чумы методом полимеразной цепной реакции | |
KR20160075943A (ko) | 장수풍뎅이 병원성 바이러스 AdV(Allomyrina dichotoma Virus)의 감염 진단용 프라이머 세트 및 그 진단방법 | |
RU2425891C1 (ru) | Способ дифференциации штаммов возбудителя чумы основного и неосновных подвидов и возбудителя псевдотуберкулеза методом полимеразной цепной реакции |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170513 |