PL217740B1 - Preparaty do traktowania gleby i nasion roślin zawierające żywe mikroorganizmy lub mikroorganizmy zdolne do rozmnażania się w glebach, sposób wytwarzania produktów do traktowania gleby i nasion roślin, mikroorganizmy, sposób wytwarzania mikroorganizmów oraz sposób traktowania gleby i nasion roślin preparatami - Google Patents
Preparaty do traktowania gleby i nasion roślin zawierające żywe mikroorganizmy lub mikroorganizmy zdolne do rozmnażania się w glebach, sposób wytwarzania produktów do traktowania gleby i nasion roślin, mikroorganizmy, sposób wytwarzania mikroorganizmów oraz sposób traktowania gleby i nasion roślin preparatamiInfo
- Publication number
- PL217740B1 PL217740B1 PL369237A PL36923702A PL217740B1 PL 217740 B1 PL217740 B1 PL 217740B1 PL 369237 A PL369237 A PL 369237A PL 36923702 A PL36923702 A PL 36923702A PL 217740 B1 PL217740 B1 PL 217740B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- ncaim
- var
- microorganisms
- ssp
- soil
- Prior art date
Links
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims abstract description 161
- 239000002689 soil Substances 0.000 title claims abstract description 102
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 58
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 53
- 241000194107 Bacillus megaterium Species 0.000 claims abstract description 30
- 241000194105 Paenibacillus polymyxa Species 0.000 claims abstract description 26
- 241000589540 Pseudomonas fluorescens Species 0.000 claims abstract description 25
- 241000589938 Azospirillum brasilense Species 0.000 claims abstract description 24
- 241000589149 Azotobacter vinelandii Species 0.000 claims abstract description 21
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 20
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 85
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 68
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 38
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 32
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 24
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 24
- 241000589174 Bradyrhizobium japonicum Species 0.000 claims description 21
- 241000191948 Kocuria rosea Species 0.000 claims description 21
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 20
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 19
- 241000187759 Streptomyces albus Species 0.000 claims description 15
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims description 13
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 11
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 11
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims description 11
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims description 11
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 10
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 9
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 claims description 9
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 claims description 9
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 7
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 7
- PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 2-(3-bromo-2-fluorophenyl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC(Br)=C1F PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims description 6
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000005018 casein Substances 0.000 claims description 6
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims description 6
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims description 6
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims description 5
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 5
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 4
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 4
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 claims description 3
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims description 3
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims description 3
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims description 3
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims description 3
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 claims description 3
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 claims description 3
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 claims description 3
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000001166 ammonium sulphate Substances 0.000 claims description 2
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000012263 liquid product Substances 0.000 claims description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 claims description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 claims description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 claims description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 64
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 55
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 31
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 26
- 241000589941 Azospirillum Species 0.000 description 25
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 23
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 23
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 20
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 20
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 20
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 18
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 15
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 15
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 14
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 14
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 13
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 12
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 12
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 11
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 11
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 11
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 10
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 10
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 10
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 10
- 241000894007 species Species 0.000 description 10
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 10
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 9
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 9
- 239000000589 Siderophore Substances 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 8
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 description 8
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 8
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 7
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 7
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 7
- 238000011160 research Methods 0.000 description 7
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 7
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 238000003359 percent control normalization Methods 0.000 description 6
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 6
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 241000589151 Azotobacter Species 0.000 description 5
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 description 5
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 description 5
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 5
- HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N alpha-acetylene Natural products C#C HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 5
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 5
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 5
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 125000002534 ethynyl group Chemical group [H]C#C* 0.000 description 5
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 5
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 5
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 5
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 5
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 5
- 239000003375 plant hormone Substances 0.000 description 5
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- 241000589939 Azospirillum lipoferum Species 0.000 description 4
- 241000589173 Bradyrhizobium Species 0.000 description 4
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 4
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 4
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 4
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 4
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 4
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 4
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910001414 potassium ion Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000131971 Bradyrhizobiaceae Species 0.000 description 3
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 3
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 description 3
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 3
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 3
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 description 3
- 241001134691 Nitrospirillum amazonense Species 0.000 description 3
- 241001478326 Niveispirillum irakense Species 0.000 description 3
- 235000019482 Palm oil Nutrition 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 3
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 3
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004927 clay Substances 0.000 description 3
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- IXORZMNAPKEEDV-OBDJNFEBSA-N gibberellin A3 Chemical class C([C@@]1(O)C(=C)C[C@@]2(C1)[C@H]1C(O)=O)C[C@H]2[C@]2(C=C[C@@H]3O)[C@H]1[C@]3(C)C(=O)O2 IXORZMNAPKEEDV-OBDJNFEBSA-N 0.000 description 3
- 235000021312 gluten Nutrition 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N heavy water Substances [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 description 3
- 239000003864 humus Substances 0.000 description 3
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000002540 palm oil Substances 0.000 description 3
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 3
- 150000003018 phosphorus compounds Chemical class 0.000 description 3
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 3
- 230000008121 plant development Effects 0.000 description 3
- NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M potassium iodide Chemical compound [K+].[I-] NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 3
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 241000589154 Azotobacter group Species 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 239000005980 Gibberellic acid Substances 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N Lycopene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1C(=C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=C)CCCC2(C)C UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- 240000004658 Medicago sativa Species 0.000 description 2
- 241000192041 Micrococcus Species 0.000 description 2
- 229910018890 NaMoO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920000331 Polyhydroxybutyrate Polymers 0.000 description 2
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N Pyruvic acid Chemical compound CC(=O)C(O)=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000589180 Rhizobium Species 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 2
- 230000033558 biomineral tissue development Effects 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 2
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 2
- 150000001746 carotenes Chemical class 0.000 description 2
- 235000005473 carotenes Nutrition 0.000 description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 2
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 239000010433 feldspar Substances 0.000 description 2
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 2
- IXORZMNAPKEEDV-UHFFFAOYSA-N gibberellic acid GA3 Natural products OC(=O)C1C2(C3)CC(=C)C3(O)CCC2C2(C=CC3O)C1C3(C)C(=O)O2 IXORZMNAPKEEDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 208000037824 growth disorder Diseases 0.000 description 2
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N indole-3-acetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC(=O)O)=CNC2=C1 SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- -1 iron ions Chemical class 0.000 description 2
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 2
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 2
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 238000004172 nitrogen cycle Methods 0.000 description 2
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000005015 poly(hydroxybutyrate) Substances 0.000 description 2
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 2
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 150000003112 potassium compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 230000036435 stunted growth Effects 0.000 description 2
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 235000019731 tricalcium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000391 tricalcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940078499 tricalcium phosphate Drugs 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- NCYCYZXNIZJOKI-UHFFFAOYSA-N vitamin A aldehyde Natural products O=CC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C NCYCYZXNIZJOKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000011686 zinc sulphate Substances 0.000 description 2
- 235000009529 zinc sulphate Nutrition 0.000 description 2
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LMSDCGXQALIMLM-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid;iron Chemical compound [Fe].OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O LMSDCGXQALIMLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WTLKTXIHIHFSGU-UHFFFAOYSA-N 2-nitrosoguanidine Chemical compound NC(N)=NN=O WTLKTXIHIHFSGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZPLCXHWYPWVJDL-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-1,3-oxazolidin-2-one Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1CC1NC(=O)OC1 ZPLCXHWYPWVJDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 229930192334 Auxin Natural products 0.000 description 1
- 241001478327 Azospirillum sp. Species 0.000 description 1
- 241000589152 Azotobacter chroococcum Species 0.000 description 1
- 101100190374 Caenorhabditis elegans mob-4 gene Proteins 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241001288713 Escherichia coli MC1061 Species 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 206010056740 Genital discharge Diseases 0.000 description 1
- 229930191978 Gibberellin Natural products 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 description 1
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-OWMBCFKOSA-N L-ribopyranose Chemical compound O[C@H]1COC(O)[C@@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-OWMBCFKOSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241000209510 Liliopsida Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 235000010624 Medicago sativa Nutrition 0.000 description 1
- 235000017587 Medicago sativa ssp. sativa Nutrition 0.000 description 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010020943 Nitrogenase Proteins 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 241000588701 Pectobacterium carotovorum Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 241000209049 Poa pratensis Species 0.000 description 1
- 241000209504 Poaceae Species 0.000 description 1
- NPYPAHLBTDXSSS-UHFFFAOYSA-N Potassium ion Chemical compound [K+] NPYPAHLBTDXSSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020001027 Ribosomal DNA Proteins 0.000 description 1
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000589196 Sinorhizobium meliloti Species 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- 229930003451 Vitamin B1 Natural products 0.000 description 1
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- 238000005299 abrasion Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 239000002363 auxin Substances 0.000 description 1
- 238000004178 biological nitrogen fixation Methods 0.000 description 1
- 229910021538 borax Inorganic materials 0.000 description 1
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 1
- FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L calcium hydrogenphosphate Chemical compound [Ca+2].OP([O-])([O-])=O FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000004177 carbon cycle Methods 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 239000002975 chemoattractant Substances 0.000 description 1
- 230000035605 chemotaxis Effects 0.000 description 1
- VIEXQFHKRAHTQS-UHFFFAOYSA-N chloroselanyl selenohypochlorite Chemical compound Cl[Se][Se]Cl VIEXQFHKRAHTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L cobalt dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Co+2] GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000005336 cracking Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 208000031513 cyst Diseases 0.000 description 1
- 235000019700 dicalcium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000013681 dietary sucrose Nutrition 0.000 description 1
- YGANSGVIUGARFR-UHFFFAOYSA-N dipotassium dioxosilane oxo(oxoalumanyloxy)alumane oxygen(2-) Chemical compound [O--].[K+].[K+].O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O YGANSGVIUGARFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 1
- UQGFMSUEHSUPRD-UHFFFAOYSA-N disodium;3,7-dioxido-2,4,6,8,9-pentaoxa-1,3,5,7-tetraborabicyclo[3.3.1]nonane Chemical compound [Na+].[Na+].O1B([O-])OB2OB([O-])OB1O2 UQGFMSUEHSUPRD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 241001233957 eudicotyledons Species 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 1
- 244000037666 field crops Species 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000003448 gibberellin Substances 0.000 description 1
- 239000001056 green pigment Substances 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000002515 guano Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 235000003642 hunger Nutrition 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- RXPAJWPEYBDXOG-UHFFFAOYSA-N hydron;methyl 4-methoxypyridine-2-carboxylate;chloride Chemical compound Cl.COC(=O)C1=CC(OC)=CC=N1 RXPAJWPEYBDXOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 229910052816 inorganic phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 description 1
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- FBAFATDZDUQKNH-UHFFFAOYSA-M iron chloride Chemical compound [Cl-].[Fe] FBAFATDZDUQKNH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940116298 l- malic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000357 manganese(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000012533 medium component Substances 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 239000010445 mica Substances 0.000 description 1
- 229910052618 mica group Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052627 muscovite Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000002445 nipple Anatomy 0.000 description 1
- 230000001546 nitrifying effect Effects 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000003895 organic fertilizer Substances 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 239000010451 perlite Substances 0.000 description 1
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 description 1
- 230000029553 photosynthesis Effects 0.000 description 1
- 238000010672 photosynthesis Methods 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229930195732 phytohormone Natural products 0.000 description 1
- 238000003976 plant breeding Methods 0.000 description 1
- 239000004476 plant protection product Substances 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L potassium sulfate Chemical compound [K+].[K+].[O-]S([O-])(=O)=O OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910052939 potassium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011151 potassium sulphates Nutrition 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 229940107700 pyruvic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 230000005070 ripening Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 1
- 239000010454 slate Substances 0.000 description 1
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L sodium carbonate Substances [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011684 sodium molybdate Substances 0.000 description 1
- 235000015393 sodium molybdate Nutrition 0.000 description 1
- TVXXNOYZHKPKGW-UHFFFAOYSA-N sodium molybdate (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][Mo]([O-])(=O)=O TVXXNOYZHKPKGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KKCBUQHMOMHUOY-UHFFFAOYSA-N sodium oxide Chemical compound [O-2].[Na+].[Na+] KKCBUQHMOMHUOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910001948 sodium oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004328 sodium tetraborate Substances 0.000 description 1
- 235000010339 sodium tetraborate Nutrition 0.000 description 1
- 244000000000 soil microbiome Species 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical class OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 description 1
- DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M thiamine hydrochloride Chemical compound Cl.[Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- HPGGPRDJHPYFRM-UHFFFAOYSA-J tin(iv) chloride Chemical compound Cl[Sn](Cl)(Cl)Cl HPGGPRDJHPYFRM-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 235000010374 vitamin B1 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011691 vitamin B1 Substances 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
- C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
- C05F11/00—Other organic fertilisers
- C05F11/08—Organic fertilisers containing added bacterial cultures, mycelia or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
- A01N63/22—Bacillus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
- A01N63/27—Pseudomonas
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
- A01N63/28—Streptomyces
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/07—Bacillus
- C12R2001/11—Bacillus megaterium
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/07—Bacillus
- C12R2001/12—Bacillus polymyxa ; Paenibacillus polymyxa
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/265—Micrococcus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/38—Pseudomonas
- C12R2001/39—Pseudomonas fluorescens
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/465—Streptomyces
- C12R2001/47—Streptomyces albus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Fertilizers (AREA)
- Cultivation Of Plants (AREA)
- Processing Of Solid Wastes (AREA)
- Soil Conditioners And Soil-Stabilizing Materials (AREA)
- Pretreatment Of Seeds And Plants (AREA)
Description
Opis wynalazku
Wynalazek dotyczy preparatów do traktowania gleby i nasion roślin zawierających żywe mikroorganizmy lub mikroorganizmy zdolne do rozmnażania się w glebach, sposobu wytwarzania produktów do traktowania gleby i nasion roślin, mikroorganizmów, sposobu wytwarzania mikroorganizmów oraz sposobu traktowania gleby i nasion roślin preparatami.
W szczególności wynalazek dotyczy sposobu otrzymywania powyższych produktów z dowolnego wymienionego poniżej mikroorganizmu lub z ich mieszaniny.
Ponadto wynalazek dotyczy sposobu otrzymywania kultur mikroorganizmów przeznaczonych do stosowania. Przedmiotem wynalazku są również same mikroorganizmy.
W szczególności wynalazek dotyczy sposobu traktowania gleby i roślin produktem zawierającym co najmniej jeden z następujących mikroorganizmów: Azospirillum brasilense ssp. SW51 (NCAIM /P/ B 001293), Azotobacter vinelandii spp. M657 (NCAIM /P/ B 0012 91), Pseudomonas fluorescens var. SW11 (NCAIM /P/ B 001296), Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295), Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291), Microccus roseus ssp. A21 (NCAIM /P/ B 001294), Bradyrhizobium japonicum var. PH25 (NCAIM /P/ B 0013 02) i Streptomyces albus var. 0003 LP (NCAIM /P/ B 001301), a ponadto rozmnażających się i istniejących w otoczeniu danej rośliny produktów zawierających powyższe mikroorganizmy oraz sposobu ich otrzymywania.
Środowisko naturalne gleby stanowi samoregulujący się ekosystem obejmujący rośliny i mikroorganizmy w warunkach naturalnych, przy czym istnienie jednych stanowi o istnieniu drugich. Odchylenia od ustalonego w toku ewolucji stanu równowagi, spowodowane działaniami człowieka (takimi jak głęboka orka, stosowanie nawozów naturalnych i sztucznych, środków ochrony roślin itp.) mogą doprowadzić do takich zmian jego struktury i sposobu funkcjonowania, których skutki trudno przewidzieć. Rozwój populacji mikroorganizmów niezbędnych w optymalnej uprawie danej rośliny, na różnych typach gleb i w różnych warunkach klimatycznych wymaga wieloletniej selekcji. Jednak najważniejsze mikroorganizmy występujące w korzystnej populacji można wprowadzić do gleby w ciągu 1-2 dni, stwarzając w ten sposób warunki wymagane do optymalnej uprawy. W wyniku takiego postępowania osiąga się wyższy plon bez naruszania w niekorzystny sposób naturalnego ekosystemu. Użyteczne mikroorganizmy dominujące w otoczeniu danej rośliny ważnej z ekonomicznego punktu widzenia można określić drogą badań laboratoryjnych, po czym selektywnie rozmnożyć, wyprodukować metodami przemysłowymi i ponownie wprowadzić do gleby w odpowiedniej proporcji.
W ekosystemie obejmującym glebę i mikroorganizmy można zaobserwować istotne, regularnie powtarzające się zjawiska. W bezpośrednim otoczeniu systemu korzeniowego rosnących roślin (ryzosferze) oraz kiełkujących nasion (spermatosferze) oznacza się inną liczbę mikroorganizmów i inne ich gatunki niż w miejscach bardziej od nich oddalonych. Na rozprzestrzenianie się bakterii w strefie korzeniowej wpływa wiele czynników. Zależą one od regionu, jakości gleby, składu populacji mikroorganizmów oraz od warunków klimatycznych.
Węgiel występujący w glebie jest przede wszystkim i w zdecydowanej większości wynikiem procesu fotosyntezy z wykorzystaniem energii słonecznej.
Cykl azotu jest bardziej skomplikowany niż cykl węgla. Na przemianę azotu wpływają procesy biologiczne i chemiczne. W przyrodzie przeważa azot gazowy w tzw. stanie obojętnym, a tzw. azot związany (w postaci azotanu, azotynu, amoniaku) występuje jedynie w ograniczonej ilości.
Za mineralizację gazowego azotu odpowiedzialny jest przede wszystkim proces biologicznego wiązania azotu. Ponieważ ilość cząsteczkowego azotu występującego nad powierzchnią jednego hektara wynosi 6-7 x 108 ton, jest to niewyczerpane źródło związanego azotu. Zainteresowanie ekspertów kieruje się ku żywym organizmom zdolnym do wiązania azotu, które są w stanie zredukować cząsteczkowy azot do amoniaku, gdyż poznanie mikroorganizmów tego typu i odpowiednie wykorzystanie ich właściwości może m. in. doprowadzić do zmniejszenia występowania głodu na świecie, w sposób przyjazny dla środowiska.
Niektóre bakterie zdolne do wiązania azotu wykazują tę cechę w stanie wolnym; ale liczne bakterie są zdolne do wiązania azotu jedynie we współpracy z innymi, wyższymi roślinami.
Przeciwnie do cyklu azotu, cykl przemian fosforu jest w warunkach naturalnych praktycznie procesem zamkniętym. Ilość dostarczanego i oddawanego fosforu jest taka sama, przepływ jest bardzo nieznaczny, a powietrze nie ulega zanieczyszczeniu fosforem. W końcowym etapie pierwiastek ten gromadzi się w wodach, morzach, a jedynie niewielka ilość wraca do gleby (np. w postaci guano).
PL 217 740 B1
W żywych komórkach w glebie fosfor podlega akumulacji w postaci związków organicznych, których 2 mineralizacja przebiega z dużą szybkością (3-8 g/m2/rok). Powstające związki fosforu różnią się rozpuszczalnością, a więc i dostępnością dla roślin; z 400-1200 mg fosforu znajdowanego w 1 kg przeciętnej gleby dostępne jest jedynie 5%. Cykl przemiany niektórych związków fosforu trwa 500-2000 lat.
Wprowadzenie do gleby niektórych grup mikroorganizmów zdolnych do przetwarzania fosforu pozwala na przeprowadzenie do roztworu złożonych związków fosforowych, niedostępnych dla roślin. Jeżeli mikroorganizmy wprowadzone do gleby rozpoczną działalność, to przy zadowalającym składzie mineralnym gleby nie ma potrzeby stosowania nawozów fosforowych lub też można znacznie obniżyć ich ilość.
Do wzrostu rośliny wymagają znacznych ilości potasu, zwłaszcza w okresie dojrzewania zbiorów. Hodowcy roślin dostarczają potas do gleby w postaci zawierającego go nawozu sztucznego. Z obecnych w nim mineralnych związków potasu mikroorganizmy uwalniają jony potasu, co czyni go przyswajalnym dla roślin.
Z punktu widzenia roślin rozmnażające się w glebie mikroorganizmy prowadzą biosyntezę fizjologicznie aktywnych związków, z których najważniejsze są: fitohormony, auksyny (kwas 3-indolilooctowy), etylen, gibereliny, kinetyny itp. Niektóre grupy Pseudomonas w obecności niewielkich ilości żelaza wytwarzają tzw. syderofory, które wykazują zdolność akumulowania żelaza. Efekt ten prowadzi do spowolnienia wzrostu fitopatologicznych bakterii i grzybów, które nie wykazują zdolności do wykorzystywania żelaza występującego w syderoforach, a niekorzystnie odczuwają jego brak; z drugiej strony obecność syderoforów w glebie, w której brakuje żelaza, znacząco stymuluje wzrost roślin, gdyż dzięki wiązaniu żelaza mogą je bezpośrednio dostarczać roślinom.
Dla rozwiązania powyższego zagadnienia opracowano kilka wariantów technicznych; kilka mikroorganizmów opisano szczegółowo w literaturze specjalistycznej.
Wynalazcy węgierscy ujawnili preparat zawierający sproszkowane kultury mikroorganizmów wykazujących zdolność do nitryfikacji (węgierski opis patentowy HU 143391), kultury Azobacter chroococcum i Rhizobium meliloti (węgierski opis patentowy HU 188434), kultury glonów (węgierski opis patentowy HU 195068) i ponownie kultury Azotobacter chroococcum, jak również sposób otrzymywania kultur mikroorganizmów Bacillus megaterium (węgierski opis patentowy HU 207751). Azotobacter chroococcum zdeponowano pod numerem 00238, Bacillus megaterium pod numerem seryjnym NCAIM /P/ B 1140. W szczególności, w węgierskich opisach patentowych HU 188434 i HU 207751 opisano fermentację prowadzącą do mieszaniny powyższych mikroorganizmów. Według węgierskiego opisu patentowego HU 213163 uzupełnia się kulturę mikroorganizmów opisanych w HU 207751 dodatkiem karboksymetylocelulozy. W HU 1671/96 opisano kultury zawierające mikroorganizmy Azospirillum lipoferum ssp., Azobacter vinelandi sp., Pseudomonas fluorescens ssp. i Bacillus megaterium ssp.
Zastosowanie oraz działanie wywierane przez powyżej opisane mikroorganizmy oraz sposoby ich wykorzystania są ograniczone z uwagi na fakt ich krótkiego czasu przetrwania w różnych warunkach uprawy, w glebach o różnym składzie i w różnych warunkach klimatycznych, a środowisko i ryzosfera różnych roślin nie zawsze stwarzają ku temu optymalne warunki.
Podstawowym celem wynalazku jest wytworzenie kultur mikroorganizmów glebowych, które z punktu widzenia uprawy roślin oraz wymogów ekonomicznych wykazują korzystne działanie, a jednocześnie są zdolne do przetrwania, rozmnażania się i korzystnego oddziaływania w glebach różnego typu i na różne rodzaje roślin, w zróżnicowanych warunkach klimatycznych i przy różnych warunkach uprawy.
Nieoczekiwanie stwierdzono, że zdolność do rozmnażania się i przetrwania wykazywana przez wyhodowane w warunkach laboratoryjnych mikroorganizmy, które korzystnie oddziałują na rozwój roślin, są zdolne do wiązania azotu, udostępniania roślinom jonów fosforanowych, pobudzenia wzrostu roślin oraz poprawy struktury gleby, zmienia się zależnie od rodzaju gleby, warunków cieplnych oraz roślin występujących w bezpośrednim otoczeniu roślin uprawnych. Różne grupy mikroorganizmów wykazują aktywność w czarnoziemach, w glebach o niskiej zawartości próchnicy, w lessach lub glebach gliniastych. Podczas badań nieoczekiwanie stwierdzono, że różne grupy mikroorganizmów są zdolne do rozmnażania się w ryzosferze różnych roślin lub w jej bezpośrednim sąsiedztwie, wywierając przy tym swój wpływ przez dłuższy okres czasu.
Z tego powodu przeprowadzono doświadczenia w celu wyizolowania mikroorganizmów korzystnie oddziaływujących w środowisku danej rośliny ważnej z ekonomicznego punktu widzenia, w sposób istotny dla jej uprawy. Dodatkowo przeprowadzono doświadczenia w celu wyizolowania mikroorganizmów zdolnych do udostępnienia roślinom jonów potasu oraz otrzymania takich mikroor4
PL 217 740 B1 ganizmów - wyizolowanych z gleby i zmienionych laboratoryjnie w procesach mutacji - które mogą rozwijać się po wprowadzeniu do gleby, w niskiej temperaturze, a przy tym zdolnych do korzystnego oddziaływania na rośliny uprawne, co jest zaskakujące nawet dla specjalistów.
Ponadto podczas badań nieoczekiwanie stwierdzono, że niektóre mikroorganizmy wytwarzające polisacharydy korzystnie zmieniają strukturę gleby z rolniczego punktu widzenia, zwiększając w ten sposób jej odporność na suszę.
W podsumowaniu prac doświadczalnych ich celem było wyizolowanie mikroorganizmów zdolnych do dostarczania roślinom azotu, fosforu, potasu, do biosyntezy roślinnych hormonów wzrostu i polisacharydów poprawiających strukturę gleby, zdolnych do rozwoju w okresie zasiewów oraz w krajach o chłodniejszym klimacie, wywierających wpływ na gleby rozmaitego typu oraz na różne rośliny. Ponadto celem było otrzymanie preparatów zawierających mikroorganizmy, które w danym środowisku roślinnym, w ryzosferze lub pomiędzy komórkami rośliny stymulują rozwój roślin lub rodziny roślin dzięki swej zdolności do wiązania i udostępniania roślinom ważnych pierwiastków, jak również dzięki wytwarzaniu związków stymulujących wzrost roślin oraz polisacharydów. Pozwala to na oszczędności w stosowaniu nawozów, w sposób sprzyjający ochronie środowiska.
Wynalazek dotyczy dziedziny hodowli wyżej wymienionych mikroorganizmów, zawierających je preparatów, a także zastosowania preparatu lub preparatów zawierających mikroorganizm(y) oraz samych mikroorganizmów.
Wynalazek dotyczy preparatów do traktowania gleby i nasion roślin zawierające żywe mikroorganizmy lub mikroorganizmy zdolne do rozmnażania się w glebach różnego typu w otoczeniu roślin,
11 7 10 przy czym te preparaty zawierają, w ilości 5 x 106 - 1011, korzystnie 107 - 1010 komórek/g, kulturę Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291) oraz jeden lub większą liczbę mikroorganizmów spośród
Azospirillum brasilense ssp. SW51 (NCAIM /P/ B 001293),
Azotobacter vinelandii ssp. M657 (NCAIM /P/ B 001292),
Pseudomonas fluorescens var. SW11 (NCAIM /P/ B 001296),
Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 0012 95),
Micrococcus roseus ssp. A21 (NCAIM /P/ B 001294),
Bradyrhizobium japonicum var. PH25 (NCAIM /P/ B 001302), i
Streptomyces albus var. 0003 LP (NCAIM /P/ B 001301), jako mikroorganizmów zdolnych do rozmnażania się również w niskiej temperaturze, korzystnie poniżej 20°C, jak również w glebach o niskiej wartości pH, korzystnie poniżej 5, zdeponowanych w Krajowej Kolekcji Mikroorganizmów do Użytku w Rolnictwie i Przemyśle, Budapeszt, Węgry, oraz mokre lub suche nośniki dopuszczalne w uprawach rolniczych i nietoksyczne dla mikroorganizmów.
Korzystne są preparaty, które jako nośnik zawierają wodę i/lub mączkę sojową i/lub skrobię i/lub celulozę i/lub glukozę.
Korzystne są preparaty, które jako mikroorganizm zawierają
Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291),
Azospirillum brasilense ssp. SW51 (NCAIM /P/ B 001293),
Azotobacter vinelandii ssp. M657 (NCAIM /P/ B 001292),
Pseudomonas fluorescens var. SW11 (NCAIM /P/ B 001296),
Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295), oraz
Streptomyces albus var. 0003 LP (NCAIM /P/ B 001301).
Korzystne są preparaty, które jako mikroorganizm zawierają
Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291),
Azospirillum brasilense ssp. SW51 (NCAIM /P/ B 001293),
Azotobacter vinelandii ssp. M657 (NCAIM /P/ B 001292),
Pseudomonas fluorescens var. SW11 (NCAIM /P/ B 001296),
Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295),
Micrococcus roseus ssp. A21 (NCAIM /P/ B 001294),
Bradyrhizobium japonicum var. PH25 (NCAIM /P/ B 001302), oraz
Streptomycees albus var. 0003 LP (NCAIM /P/ B 001301).
Korzystne są preparaty, które jako mikroorganizm zawierają
Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291),
Azospirillum brasilense ssp. SW51 (NCAIM /P/ B 001293),
Azotobacter vinelandii ssp. M657 (NCAIM /P/ B 001292),
PL 217 740 B1
Pseudomonas fluorescens var. SW11 (NCAIM /P/ B 001296),
Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295),
Micrococcus roseus ssp. A21 (NCAIM /P/ B 001294), i
Bradyrhizobium japonicum var. PH25 (NCAIM /P/ B 001302).
Korzystne są preparaty, które jako mikroorganizm zawierają
Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291),
Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295),
Micrococcus roseus ssp. A21 (NCAIM /P/ B 001294), i
Bradyrhizobium japonicum var. PH25 (NCAIM /P/ B 001302).
Wynalazek dotyczy także sposobu wytwarzania produktów do traktowania gleby i nasion roślin i/lub preparatów zawierających żywe mikroorganizmy lub mikroorganizmy zdolne do rozmnażania się w otoczeniu roślin w glebach różnego typu, również w niskiej temperaturze, korzystnie poniżej 20°C i przy niskiej wartości pH, korzystnie poniżej 5, w którym hoduje się osobno lub w mieszaninie, na pożywce zawierającej źródło węgla i azotu oraz sole nieorganiczne, mikroorganizm Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291), oraz ewentualnie, osobno lub w mieszaninie, jeden lub większą liczbę spośród mikroorganizmów
Azospirillum brasilense ssp. SW51 (NCAIM /P/ B 001293),
Azotobacter vinelandii ssp. M657 (NCAIM /P/ B 001292),
Pseudomonas fluorescens var. SW11 (NCAIM /P/ B 001296),
Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 0012 95),
Micrococcus roseus ssp. A21 (NCAIM /P/ B 001294),
Bradyrhizobium japonicum var. PH25 (NCAIM /P/ B 001302), i
Streptomyces albus var. 0003 LP (NCAIM /P/ B 001301), zdeponowanych w Krajowej Kolekcji Mikroorganizmów do Użytku w Rolnictwie i Przemyśle, do osiągnięcia liczby komórek 5 x 107 - 5 x 109 na ml, ewentualnie otrzymaną kulturę lub kultury miesza się w określonym stosunku lub nanosi się ją (lub je) na nośnik lub miesza z nim i ewentualnie poddaje liofilizacji w znany sposób.
Korzystny jest sposób, w którym jako źródło węgla stosuje się glukozę i/lub sacharozę i/lub melasę, jako źródło azotu stosuje się chlorek amonu i/lub azotan amonu i/lub siarczan amonu i/lub wyciąg namokowy z kukurydzy i/lub hydrolizat kazeiny, a jako sól nieorganiczną stosuje się węglan wapnia i sole uwalniające w wyniku dysocjacji jony sodu, potasu, magnezu, wapnia, żelaza, jony azotanowe, chlorkowe, siarczanowe, węglanowe, fosforanowe, oraz stosuje się dodatek pierwiastków śladowych.
Wynalazek dotyczy również mikroorganizmów, korzystnie zdolnych do rozmnażania się również w temperaturze poniżej 20°C i przy niskiej wartości pH, zdeponowanych w Krajowej Kolekcji Mikroorganizmów do Użytku w Rolnictwie i Przemyśle, Budapeszt, Węgry, pod następującymi numerami:
Azospirillum brasilense ssp. SW51 (NCAIM /P/ B 001293),
Azotobacter vinelandii ssp. M657 (NCAIM /P/ B 001292),
Pseudomonas fluorescens var. SW11 (NCAIM /P/ B 001296),
Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295),
Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291),
Micrococcus roseus ssp. A21 (NCAIM /P/ B 001294),
Bradyrhizobium japonicum var. PH25 (NCAIM /P/ B 001302) i
Streptomyces albus var. 0003 LP (NCAIM /P/ B 001301).
Wynalazek dotyczy ponadto sposobu wytwarzania mikroorganizmów zdefiniowanych powyżej, w którym z otoczenia roślin pobiera się próbkę gleby z wierzchniej (górnej) warstwy o grubości 40 cm, identyfikuje się wybrane mikroorganizmy, poddaje działaniu środków mutagennych i izoluje się odmiany rozmnażające się również w niskiej temperaturze.
Wynalazek dotyczy także sposobu traktowania gleby preparatami zdefiniowanymi powyżej, 10 14 w którym nanosi się preparaty zawierające komórki mikroorganizmów w liczbie 1010 - 1014, korzystnie 11 12
1011 - 1012 na hektar, na powierzchnię lub do wnętrza gleby, w porze roku, w której nie występuje spadek temperatury poniżej 0°C.
Wynalazek dotyczy także sposobu traktowania nasion roślin preparatami zdefiniowanymi powyżej, w którym traktuje się nasiona produktem w postaci ciekłej, zawierającym co najmniej jeden z mikroorganizmów lub ich mieszaninę.
Wynalazek opiera się na ustaleniu, że do uzyskania docelowych preparatów najdogodniej stosuje się następujące mikroorganizmy: Azospirilium brasilense ssp. SW51 (NCAIM / P/ B 001293),
PL 217 740 B1
Azobacter vinelandi ssp. M657 (NCAIM /P/ B 001292), Pseudomonas fluorescens var. SW11 (NCAIM /P/ B 001296), Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295), Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291), Micrococcus roseus ssp. A21 (NCAIM /P/ B 001294), Bradyrhizobium japonicum var. PH25 (NCAIM /P/ B 001302) i Streptomyces albus var. 0003 LP (NCAIM /P/ B 001301), zdolne do rozmnażania się w niskiej temperaturze w okresie zasiewów, które dostarczają roślinom azot, udostępniają fosfor i potas, prowadzą biosyntezę hormonów wzrostu i polisacharydów. Z tego powodu wyizolowano je i opracowano sposób ich hodowli.
W związku z tym w latach 1998-1999 wyizolowano mikroorganizmy z europejskich gleb oraz z otoczenia systemów korzeniowych wybranych roślin, zbadano in vitro ich zdolność do wiązania azotu, zdolność do zwiększania rozpuszczalności fosforanów i potasu, wytwarzania polisacharydów i biosyntezy hormonów roślinnych; identyfikowano pod względem systematyki wybrane mikroorganizmy, drogą mutacji wytworzono takie odmiany, które są zdolne do intensywnego rozmnażania się również w temperaturze poniżej 20°C, opracowano sposób ich hodowli, z kultur tych mikroorganizmów wykonano preparaty i wykazano ich wpływ na rozwój roślin oraz wydajność uprawy, zarówno w warunkach upraw cieplarnianych, jak i polowych.
Wyizolowano gatunki i podgatunki Azospirillum, Azobacter, Bradyrhizobium, Pseudomonas, Bacillus, Streptomyces i Micrococcus.
Najmniej znane gatunki Azospirillum to bakterie Gram-ujemne o zróżnicowanej kolorystyce, żyjące w glebie, które w warunkach mikroaerofilowych (w obecności 1-2% tlenu), w ścisłym związku z systemem korzeniowym roślin wykazują zdolność do redukowania azotu z powietrza do amoniaku, po czym przenoszą go do roślin. Niektóre grupy wytwarzają także hormony roślinne drogą biosyntezy.
Grupy Azospirillum wyizolowano ze środowiska systemów korzeniowych kukurydzy, pszenicy, jęczmienia i ryżu uprawianych na różnych ziemiach uprawnych Europy, na glebach różnego typu, a także traw łąkowych. Zawiesinę bakterii pochodzących z próbki gleby rozpraszano na pożywce Nfb(II) i pożywce (MM), o składzie podanym w dalszej części opisu, po czym hodowano w warunkach mikroaerofilowych. Po 72 godzinach zidentyfikowano kultury Azospirillum. Kultury te, w odróżnieniu od kultur innych małych bakterii i grzybów, osiągają rozmiar około 3 mm.
Kultury Azospirillum sp. rosnące wykładniczo na ciekłych pożywkach agarowych MM i Nb(II) o składzie podanym w dalszej części opisu, wykazują charakterystykę morfologiczną typową dla komórek Azospirillum. Komórki mają kształt przecinków lub litery S, o wymiarach 1-2 x 2-4 μm. Do wzrostu potrzebują biotyny. Na podstawie obserwacji pod mikroskopem można stwierdzić, że poruszają się szybko. Ruchliwość ich przypisuje się obecności biegunowych witek. W swoich komórkach gromadzą ziarna poli^hydroksymaślanu) i karotenu. Czerwonawe zabarwienie można wyjaśnić starzeniem się kultur. Do swojego wzrostu mogą wykorzystać kwasy organiczne, także jak kwas jabłkowy, mlekowy, pirogronowy i butanodiowy. Wiązanie azotu z powietrza przebiega w warunkach mikroaerofilowych. W warunkach ekstremalnych, jak np. podczas suszy, przy niskich lub wysokich wartościach pH, przy braku źródła azotu lub węgla, komórki przekształcają się w cysty pozbawione witek, ale zawierające ziarna poli^hydroksymaślanu) i są otoczone powłoczką polisacharydową. Źródło węgla wykorzystywane przez mikroorganizmy zmienia się zależnie od gatunku: A. Amazonense glukoza + sacharoza + inozytol, A. Brasilense glukoza + sacharoza i inozytol, A. Irakense wykorzystuje glukozę (+) i sacharozę (+), ale nie wykorzystuje inozytolu (-), A. Lipoferum tylko glukozę. W środowisku pozbawionym azotu źródła przyswajanego węgla są bardziej zróżnicowane, co pozwala odróżnić powyższe cztery gatunki. Źródła węgla przyswajanego przez wyizolowane przez nas mikroorganizmy różnią się częściowo od nowego typu ATCC 29.731 A. Lipoferum, A. Amazonense, A. Brasiliense i A. Irakense (Holt, J. G. i współpracownicy, Bergeys Manual of Determinative Bacteriology, wyd. 9, 1994). W przeciwieństwie do typowych grup, wzrastają one prawidłowo w obecności 3,5% chlorku sodu; na miękkiej pożywce agarowej (opisanej w dalszej części) ich obrazy mikroskopowe uzyskane na różnych etapach hodowli są różne, a wytwarzanie pigmentu jest bardziej intensywne w przypadku stosowania agaru z dodatkiem ekstraktu z ziemniaków.
Niektóre wyizolowane szczepy Azospirillum są zbliżone do gatunków Azospirillum lipoferum, Azospirillum amazonense, Azospirillum brasilense i Azospirillum irakense; wykonywano badania z ich użyciem wybierając jedną z grup Azospirillum brasilense.
Z powyżej opisanych próbek gleby wyizolowano mikroorganizmy Azotobacter drogą selektywnej hodowli na miękkiej pożywce agarowej Nfb(II), następnie na pożywce MM i pożywce Fjodorova przez rozproszenie i wybór jednego z podgatunków ze względu na jego zdolność do wiązania azotu; podgatunek ten zachowano do dalszych badań. Komórki w grupie są plejomorficzne, w kształcie ziarenek. W obecności tlenu przemieszczają się szybko. Są Gram-ujemne. Na pozbawionej azotu pożywce
PL 217 740 B1 wytwarzają fluorescencyjny, żółtozielony pigment, we właściwy sposób wykorzystują ramnozę i mezoinozytol.
Jak wiadomo, mikroorganizmy Rhizobium tworzą brodawki na korzeniach roślin motylkowych, a następnie, po dotarciu pomiędzy komórki roślinne przenoszą związany azot bezpośrednio do rośliny. Różne gatunki Rhizobium wiążą się z różnymi gatunkami roślin motylkowych; z soją wiążą się mikroorganizmy z grupy Bradyrhizobium. Ponieważ jest to jedyny gatunek spośród Rhizobiumr który umiera po zebraniu zbiorów, nie pozostając w glebie w znaczącej ilości, zaleca się poddawanie gleby działaniu tej grupy mikroorganizmów. Grupę Bradyrhizobium wyizolowano 13 lipca z plantacji soi w Subasa w pobliżu Szeged-Kiskundorozsma. Spośród roślin rosnących na glebie lessowej wybrano dobrze rozwiniętą roślinę i z jej korzeni pobrano dobrze wykształcone brodawki. Psychrofilna odmiana mikroorganizmu wyizolowanego sposobem opisanym w przykładzie została zdeponowana.
W zebranych próbkach gleby szukano mikroorganizmów zdolnych do udostępnienia fosforanów i badano właściwości wybranych bakterii z punktu widzenia systematyki. Okazało się, że część mikroorganizmów jest przedstawicielem gatunku Pseudomonas, a część - Bacillus.
Bakterie Pseudomonas są Gram-ujemnymi, aerobowymi komórkami w postaci cienkiej pałeczki; na większości pożywek wytwarzają fluorescencyjny pigment i są saprofitami. Nie zaobserwowano wytwarzania karotenu i bakterie nie rosną w temperaturze przekraczającej 40°C. Na galaretowatych pożywkach agarowych można zaobserwować upłynnianie. Grupa ta przyswaja glukozę, ale nie przyswaja skrobi. Mimo że odmiany grup bakterii Pseudomonas wytwarzających fluorescencyjny pigment stanowią pokrewne jednostki systematyczne, obserwuje się pewne różnice systematyczne pomiędzy wybranym przez nas mikroorganizmem a typowymi grupami: wybrane przez nas mikroorganizmy - co charakterystyczne dla Pseudomonas - we właściwy sposób przyswajają glukozę, galaktozę, kwas octowy, maltozę, glicerynę i kwas pirogronowy. Nie przyswajają fruktozy, D- arabinozy, maltozy, laktozy, skrobi i inuliny. W przeciwieństwie jednak do typowych grup mogą wzrastać na ksylozie, sacharozie i do pewnego stopnia na sorbitolu. Mogą wykorzystywać glicynę jako jedyne źródło węgla.
Biorąc powyższe pod uwagę jeden z wyizolowanych mikroorganizmów zidentyfikowano jako gatunek Pseudomonas fluorescens i stwierdzono jego bliskie pokrewieństwo z odmianami należącymi do III grupy Biovar. Grupę tę nazwano Pseudomonas fluorescens ssp.
Biorąc pod uwagę charakterystykę systematyczną okazało się, że spośród komórek Bacillus zdolnych do rozpuszczania nierozpuszczalnych fosforanów część należy do gatunku Bacillus polymyxa, a część - do Bacillus megaterium. Niektóre grupy wybrano do dalszych badań.
Aby wyizolować mikroorganizmy zdolne do udostępnienia potasu w postaci jonu potasowego, wyizolowano mikroorganizmy występujące na powierzchni minerałów zawierających potas, jak skaleń i muskowit, po czym poddano je badaniom sposobem opisanym w przykładach, na stałej pożywce pozbawionej potasu, w celu udowodnienia zjawiska udostępniania potasu. Zgodnie ze sposobem postępowania opisanym w przykładach drogą obróbki połączonej z mutacją uzyskano i zdeponowano mikroorganizm zidentyfikowany jako Streptomyces psychrophilic.
Wyizolowaliśmy również mikroorganizm, którym po systematycznych badaniach morfologicznych i badaniu rybozomalnego DNA okazał się Micrococcus roseus; podczas badań na roślinach wykazał się nadzwyczaj korzystnym oddziaływaniem. Po transformacji laboratoryjnej jedną z grup mikroorganizmu zdeponowano.
Wynalazek opiera się również na obserwacji, że po wprowadzeniu do gleby mikroorganizmy korzystnie oddziaływujące na rośliny mogą rozmnażać się bardzo szybko zarówno we wstępnej fazie zasiewów, jak i w warunkach klimatycznych występujących jesienią i wczesną wiosną, także w krajach o chłodniejszym klimacie. W związku z tym mikroorganizmy poddano obróbce, wyizolowano i hodowano zgodnie z opisem podanym w przykładzie 4. Znanymi sposobami wyizolowano mutanty i odmiany rozmnażające się w niskiej temperaturze, po czym zdeponowano je w Krajowym Zbiorze Mikroorganizmów do Użytku w Rolnictwie i Przemyśle.
Wynalazek dotyczy takich preparatów i sposobów postępowania, których stosowanie zapewnia zwiększenie plonu upraw roślinnych. Otrzymywanie ich polega na hodowli mikroorganizmów o zbadanych właściwościach, wyizolowanych z różnego typu ziem ornych, z otoczenia różnych roślin, występujących w otoczeniu danej rodziny roślin przez dłuższy okres czasu, zdolnych do rozmnażania się w niskiej temperaturze, w glebach różnego typu; zawierający kulturę preparat nanosi się następnie na wybrane rośliny, nasiona lub ziemię orną. Preparaty według wynalazku stosuje się do traktowania gleby, roślin lub nasion, przy czym zawiera on co najmniej jeden z następujących mikroorganizmów: Azospirillum brasilense ssp. SW51 (NCAIM /P/ B 001293), Azotobacter vinelandii ssp. M657 (NCAIM /P/ B 001292), Pseudomonas
PL 217 740 B1 fluorescens var. SW11 (NCAIM /P/ B 001296), Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295),
Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291), Micrococcus roseus ssp. A21 (NCAIM /P/ B
001294), Bradyrhizobium japonicum var. PH25 (NCAIM /P/ B 0012..) i Streptomyces albus var. 0003 LP (NCAIM /P/ B 0012..).
W wyniku takiego postępowania rozwój roślin ulega przyspieszeniu, zwiększa się ich odporność na patogeny i zmiany ilości wody w strukturze gleby, wzrasta jakość roślin oraz osiąga się wysoki plon upraw, nawet przy zmniejszonym nawożeniu lub przy jego całkowitym braku.
Jedną z najważniejszych zalet sposobu według wynalazku stanowi to, że zastosowanie go podczas uprawy roślin pozwala w praktyce na rezygnację ze stosowania nawozów azotowych, fosforowych i potasowych, bądź na znaczne ograniczenie ich stosowania. Zanieczyszczenie środowiska spowodowane używaniem nawozów sztucznych jest powszechnie znane. Związki wytwarzane drogą biosyntezy w komórkach mikroorganizmów stymulują rozwój roślin, przyspieszają wzrost poddawanych ich działaniu roślin oraz ich systemu korzeniowego, a jednocześnie poprawiają zaopatrzenie roślin w wodę; wprowadzone mikroorganizmy hamują rozwój mikroorganizmów fitopatologicznych, polisacharydy wytwarzane drogą biosyntezy w komórkach niektórych mikroorganizmów według wynalazku w szczególnie korzystny sposób poprawiają strukturę gleby, jej bilans wodny i długość życia. W przeciwieństwie do znanych preparatów stosowanych w tym samym celu i w ten sam sposób oraz sposobów ich otrzymywania, preparaty według wynalazku, sposób ich otrzymywania i stosowania wykorzystuje mikroorganizmy o zróżnicowanym działaniu, wyizolowane z gleb różnego typu, wywierające określony wpływ na dane rośliny uprawne o znaczeniu gospodarczym, przy czym mikroorganizmy te zdolne są do rozmnażania się w niskich temperaturach występujących jesienią i wczesną wiosną, również w rejonach o chłodniejszym klimacie.
Mikroorganizmy według wynalazku można hodować na pożywce zawierającej jako źródło węgla np. glukozę, skrobię, sacharozę lub melasę; jako źródło azotu wyciąg namokowy z kukurydzy, kazeinę, ekstrakt drożdżowy lub sole amonowe; ponadto inne sole nieorganiczne i sole uwalniające podczas dysocjacji jony pierwiastków śladowych; ale, co jest oczywiste dla specjalistów, można stosować dowolne źródło przyswajalnego węgla i azotu, sole nieorganiczne, umożliwiające rozmnażanie się bakterii według wynalazku.
Kulturę mikroorganizmów według wynalazku można wprowadzać bezpośrednio do zaprawianej gleby lub roślin wraz z pożywką stosowaną do jej hodowli, bądź w postaci preparatów zachowujących potencjał biotyczny mikroorganizmu, w tym preparatów zawierających nośniki zapewniające przyleganie bakterii do nasion dzięki siłom adhezji. Liczba wprowadzanych do gleby bakterii może się wahać ή ή ή Ε ή Q ή Ο od 5 x 1011 do 5 x l015 komórek na hektar, korzystnie liczba komórek wynosi 1012 - 1013.
Zgodnie z Porozumieniem Budapesztańskim zidentyfikowane mikroorganizmy wyizolowane z różnych środowisk roślinnych, zdolne do rozmnażania się również w niskiej temperaturze, zostały zdeponowane w Krajowej Kolekcji Mikroorganizmów do Użytku w Rolnictwie i Przemyśle, w którym zarejestrowano je pod następującymi numerami depozytowymi:
Azospirillum brasilense ssp. SW51 (NCAIM /P/ B 001293),
Azotobacter vinelandii ssp. M657 (NCAIM /P/ B 001292),
Pseudomonas fluorescens var. SW11 (NCAIM /P/ B 001296),
Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295),
Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291),
Micrococcus roseus ssp. A21 (NCAIM /P/ B 001294),
Bradyrhizobium japonicum var. PH25 (NCAIM /P/ B 001302) i Streptomyces albus var. 0003 LP (NCAIM /P/ B 001301).
Zakres ochrony rozciąga się również na zdeponowane grupy oraz ich sztuczne i naturalne mutanty, odmiany i linie grup powyższych mikroorganizmów otrzymanych dowolnym znanym sposobem.
Wynalazek zilustrowano poniżej w przykładach.
O ile nie podano inaczej, w przykładach procenty oznaczają procenty wagowe.
Najlepszy sposób realizacji wynalazku
PL 217 740 B1
P r z y k ł a d 1
Izolowanie mikroorganizmów zdolnych do wiązania azotu z powietrza, z gleb różnego typu i otoczenia różnych roślin oraz potwierdzenie ich zdolności do wiązania azotu
Gatunek Azospirillum to bakterie Gram-ujemne o zmiennym zabarwieniu, zdolne do redukcji zawartego w powietrzu azotu do amoniaku w warunkach mikroaerofilowych (w obecności 1-2% tlenu) oraz udostępnienia go roślinom.
Gatunek Azospirillum wyizolowano z próbek różnych gleb (próchnicznych, lessowych, o dużej zawartości sodu, gleby brunatnej, czarnoziemu itp.), z otoczenia systemów korzeniowych różnych roślin (zbóż, słonecznika, kukurydzy, traw itp.). Chemiczne atraktanty, takie jak kwasy organiczne i cukry przyciągają grupy Azospirillum dzięki chemotaksji. Wspomagane przez witki, bakterie przemieszczają się w stronę korzeni, po dotarciu do których zakładają kolonie.
Przygotowane próbki gleb rozcieńczono 10-, 100-, 1000- i 10000-krotnie jałową wodą destylowaną; zawiesiny 100-100 μΐ posiano na płytkach Petriego z pożywkami MM i Nfb(II) z miękkim agarem. Skład pożywki MM jest następujący:
K2HPO4 | 1,65 g/l |
KH2PO4 | 0,87 g/l |
MgSO4 x 7H2O | 0,29 g/l |
NaCl | 0,18 g/l |
CaCl2 x 2H2O | 0,07 g/l |
FeCl3 x 6H2O | 0,01 g/l |
NaMoO4 x 2H2O | 0,005 g/l |
MnSO4 x H2O | 0,00014 g/l |
ZnSO4 x 7H2O | 0,007 g/l |
CuSO4 x 5H2O | 0,000125 g/l |
CoSO4 x 7H2O | 0,00014 g/l |
H3BO3 | 0,00003 g/l |
Glukoza | 5,0 g/l |
Sacharoza | 5,0 g/l |
Bacto agar | 20,0 g/l |
Glukozę wyjałowiono oddzielnie od innych składników pożywki MM, w autoklawie (121°C, 30 |
minut), po czym wymieszano z nimi po ochłodzeniu do temperatury 60°C. Odczyn jałowej pożywki doprowadzono do pH 7,4 z użyciem jałowego 1N roztworu NaOH.
Skład pożywki Nfb(II) jest następujący:
Kwas L-jabłkowy 5,0 g
Wodorofosforan dipotasowy 0,5 g
Siarczan magnezu x 7H2O 0,2 g
Chlorek sodu 0,1 g
Chlorek wapnia 0,02 g
Roztwór pierwiastków śladowych* 2,0 ml
Błękit bromotymolowy (wodny roztwór 0,5% substancji rozpuszczonej w 0,2N KOH) 2,0 ml
1,564% roztwór Fe-EDTA 4,0 ml
Roztwór witamin** 1,0 ml
Agar 1,75 g
Odczyn pożywki doprowadzono do pH 6,8 z użyciem 1N wodnego roztworu KOH.
*Skład roztworu pierwiastków śladowych:
Siarczan żelaza(II) x 7H2O 200 mg
Chlorek żelaza(III) x 6H2O 10 mg
Siarczan manganu x H2O 1 mg
Siarczan miedziowy x 5H2O 2 mg
NaMoO4 x 2H2O 1 mg
Chlorek kobaltu x 6H2O 2 mg
Siarczan cynku x 7H2O 2 mg
Tetraboran sodu x 10H2O 1 mg
Ρ2Ο5 x 24WO3 x H2O 0,5 mg
Azotan bizmutu x 5H2O 0,1 mg
PL 217 740 B1
Chlorek cyny | 0,01 mg |
Chlorek selenu | 0,01 mg |
Jodek potasu | 1 mg |
Kwas cytrynowy | 100 mg |
Woda destylowana | 1000 ml |
**Skład roztworu witamin: | |
Witamina C | 50 mg |
Witamina B1 | 5 mg |
Witamina E | 2 mg |
Witamina A | 2 mg |
Biotyna | 4 mg |
Woda destylowana | 100 ml |
Bakterie wprowadzone na płytki z pożywką MM umieszczono w termostatach pozbawionych tlenu, w których powietrze zastąpiono azotem; następnie wprowadzono tlen w ilości potrzebnej do uzyskania stężenia 1,6% przez przepłukiwanie odpowiednią ilością powietrza. Płytki inkubowano w temperaturze 32°C, po czym po upływie 72 godzin zidentyfikowano organizmy Azospirillum. Zależnie od stopnia rozcieńczenia próbki na płytkach pokrytych zawiesiną o 10-krotnym rozcieńczeniu rozwinęła się ciągła murawa bakteryjna, podczas gdy przy rozcieńczeniu 10000-krotnym rozwijało się zazwyczaj 30-50 kultur. W przeciwieństwie do kultur innych małych bakterii oraz grzybów, kultury Azospirillum osiągnęły rozmiar około 3 mm. Spośród otrzymanych kultur kilka wykazywało morfologiczne podobieństwo do kultur Azospirillum. Niektóre z nich poddano dalszym badaniom.
Kultury wyhodowane na pożywce Nfb(II) z miękkim agarem umieszczono w termostacie aerobowym, na powyżej opisanej pożywce i w powyżej opisanych warunkach hodowli, w których kultury Azospirillum przede wszystkim rozmnażają się, w charakterystyczny morfologicznie, łatwo rozpoznawalny sposób.
Różne grupy bakterii Azospirillum uzyskane na pożywkach MM i Nfb(II) hodowano dalej znanym w mikrobiologii sposobem, przez dwukrotny posiew pierwotnej kultury bakterii na pojedynczej kulturze, na kompletnej pożywce Tag. Grupy bakterii Azospirillum oczyszczono przez dwukrotny posiew na pojedynczej kulturze w środowisku ciekłej pożywki Tag i przechowywano jako kulturę grupową. Za kulturę grupową uznano zawiesinę bakterii przechowywaną w temperaturze -80°C; tak określona kultura grupowa stanowiła punkt wyjściowy we wszystkich doświadczeniach.
Skład pożywki Tag:
Bacto trypton (Difco) 1,0%
Ekstrakt drożdżowy (Difco) 0,1%
NaCl 0,5%
Agar 2,5%
Po sterylizacji dodano wodne roztwory następujących związków, o podanym stężeniu końcowym:
0,1% 0,1M CaCl2 x 6H2O
0,1% 0,1M MgCl2 x 6H2O
0,2% glukozy (wyjałowionej oddzielnie).
Po sterylizacji odczyn pożywki doprowadzono do pH 7,0-7,2.
Proste doświadczenie pozwala na stwierdzenie obecności kolonii na korzeniach roślin. Na korzeniach kukurydzy i pszenicy potraktowanych bakteriami Azospirillum, wysianych w jałowym perlicie, 10 w doniczkach o średnicy 15 cm, do których wprowadzono takie same ilości komórek (1 x 1010 komórek na doniczkę) zliczono pod mikroskopem liczbę komórek Azospirillum; wykryto ich zasadniczo więcej niż w próbkach kontrolnych. Tworzenie kolonii w układzie korzeniowym opiera się na specyficznym mechanizmie rozpoznawania. Podczas kolonizacji komórki Azospirillum wnikają do wnętrza korzeni i tam - dzięki aktywnemu wiązaniu azotu - pokrywają część zapotrzebowania rośliny na azot (asocjacyjne wiązanie azotu). Świadczy o tym zwiększony przyrost masy zielonej kukurydzy i pszenicy zaszczepionych podczas badań laboratoryjnych grupami Azospirillum; wyniki te będą szczegółowo omówione w dalszej części opisu. Bakterie Azospirillum wytwarzają ponadto hormony roślinne i substancje stymulujące wzrost; wytwarzanie tych substancji i ich korzystne oddziaływanie na roślinę główną przejawia się zwiększoną zdolnością do kiełkowania i bardziej intensywnym wzrostem roślin, co zaobserwowano w warunkach laboratoryjnych.
Charakterystyki morfologiczne wyizolowanych gatunków Azospirillum zamieszczono w głównej części opisu.
PL 217 740 B1
Drogą selektywnej hodowli prowadzonej najpierw na miękkim agarze Nfb(II), a następnie na pożywce MM pozbawionej azotu wyizolowano mikroorganizmy Azospirillum z próbek gleby pobranej z ziem ornych. Na podstawie charakterystyki systematycznej i zakresu wykorzystywanych źródeł węgla grupy te zidentyfikowano jako Azospirillum brasilense; dzięki zdolności do wiązania azotu cząsteczkowego z powietrza - w dużej mierze jako odmiana SW5-01-07, następnie, jak opisano poniżej, odmiany rozmnażające się również w niskiej temperaturze i zdolne do biologicznej syntezy polisacharydów wyizolowano i jedną z nich zdeponowano.
W celu wyizolowania grup Azotobacter, poza zastosowaniem pożywek Nfb(II) i MM o składzie opisanym powyżej, próbki gleby poddano dodatkowo hodowli na pożywce Fjodorova, na której bakterie Azotobacter wykazują charakterystyczne cechy morfologiczne. Skład pożywki Fjodorova jest następujący:
Diwodorofosforan potasu | 0,03% |
Wodorofosforan wapnia | 0,02% |
Siarczan potasu | 0,02% |
Siarczan magnezu x 7H2O | 0,03% |
Węglan wapnia | 0,5% |
Chlorek sodu | 0,05% |
Chlorek żelaza III | 0,02% |
Molibdenian sodu | 0,0002% |
Mannit | 2,0% |
Bacto agar | 2,0% |
Przed sterylizacją odczyn roztworu doprowadzono do pH 7,0 z użyciem roztworu 1N wodoro- |
tlenku sodu.
Drogą selektywnej hodowli najpierw na miękkim agarze Nfb(II), a następnie na pozbawionej azotu pożywce MM i pożywce Fjodorova wyizolowano mikroorganizmy Azotobacter z próbek gleby pobranych z ziem ornych. Na podstawie charakterystyki systematycznej i zakresu wykorzystywanych źródeł węgla grupy te zidentyfikowano jako Azotobacter vinelandii; dzięki wiązaniu azotu cząsteczkowego z powietrza w dużej mierze jako odmiana M65-01-34, następnie, jak opisano poniżej, wyizolowano odmiany rozmnażające się również w niskiej temperaturze i jedną z nich zdeponowano.
Zdolność grup Azospirillum i Azobacter do wiązania azotu oznaczono metodą redukcji acetylenu. W sposobie tym (Dilworth M. J., J. Biochem. Biophys. Acta, 27, 285, 1996) acetylen wprowadza się strzykawką do kultury bakterii umieszczonej w zamkniętym naczyniu. Następnie po okresie inkubacji wynoszącym 12 godzin 0,25 ml mieszaniny gazów wprowadza się do kolumny Propak N chromatografu gazowego Perkin-Elmer. Stężenie acetylenu i etylenu w mieszaninie gazów oznacza się przy użyciu detektora jonizacyjnego z płomieniem wodorowym. Wysokość pików odpowiadających acetylenowi i etylenowi pozwala na ostateczne ustalenie złożonej aktywności enzymatycznej nitrogenazy. Grupy Azospirillum i Azotobacter według wynalazku redukowały w ciągu 1 godziny 15 - 85 nmoli acetylenu do etylenu.
Grupę Bradyrhizobium wyizolowano 13 lipca 2000 r. z roślin soi na polu w Subasa, w pobliżu Szeged-Kiskundorozsma. Spośród roślin rosnących w glebie lessowej wybrano dobrze rozwinięty okaz i z jego korzeni pobrano dobrze wykształcone brodawki. Brodawki przemyto następnie sterylną wodą destylowaną, zgnieciono i uzyskane cząstki zdyspergowano w soli fizjologicznej. Z zawiesiny w sterylnych warunkach przygotowano serię rozcieńczeń, które rozprowadzono na kompletnej pożywce. Zdolność do wiązania azotu przez kultury otrzymane w wyniku 48-godzinnej inkubacji w tak zwanym eksperymencie z rośliną symbiotyczną, ustalono w następujący sposób: powierzchnię dostępnych w handlu nasion lucerny siewnej (Medicago sativa) poddano sterylizacji przez obróbkę cieplną prowadzoną przez 2 godziny w temperaturze 72°C i ostrożne przemycie roztworem 20% Hypo, następnie doprowadzono do wykiełkowania na pożywce z wody destylowanej zawierającej 1% agaru. Sadzonki po wykiełkowaniu umieszczono na skośnym 1,5% agarze Gibsona (patrz dalej) i hodowano w cieplarni przez tydzień. Tygodniowe rośliny zaszczepiono komórkami kultur bakterii i hodowano w cieplarni przez osiem następnych tygodni. Spośród grup przypisanych do trzech roślin wyraźnie wykazujących optymalny stopień rozwoju (sucha masa części naziemnych wynosząca 22-26 mg, wobec 3-5 mg wykazywanych przez rośliny kontrolne) wybrano trzy i z uwagi na ich właściwości istotne z morfologicznego i systematycznego punktu widzenia nazwano je Bradyrhizobium japonicum var. PH-2-1-3.
PL 217 740 B1
P r z y k ł a d 2
Izolowanie mikroorganizmów zdolnych do solubilizacji fosforanów i potasu
W różnych częściach świata pobrano próbki gleby, wodne zawiesiny próbek rozprowadzono na pożywce Tag (patrz wyżej), a następnie zbadano wyizolowane kultury Pseudomonas i Bacillus oraz określono ich morfologię komórkową.
Różne grupy Pseudomonas i Bacillus oczyszczono sposobem znanym w mikrobiologii przez kilkakrotne naniesienie pierwotnej kultury bakterii na pojedynczą kulturę, na kompletnej pożywce TAg. Grupy bakterii hodowano na ciekłej i stałej pożywce TAg i przechowywano po oczyszczeniu.
Zdolność mikroorganizmów do udostępniania fosforanów badano na pożywce Nutrient Agar (Oxoid) zawierającej 1% hydroksyapatytu, uzupełnionej zmodyfikowaną pożywką Pikovskaya (HP) oraz 10% roztworem fosforanu triwapniowego i glukozą (0,2%).
Skład pożywek stosowanych w badaniach był następujący:
Zmodyfikowana pożywka Pikovskaya:
Hydroksyapatyt 1,0% (NH4)2SO4 0,05%
NaCl 0,02%
KCl 0,02%
MgSO4 x 7H2O 0,01%
Ekstrakt drożdżowy 0,05%
Agar 1,5%
Glukoza (wyjałowiona oddzielnie) 1,0%
Po sterylizacji do pożywki dodano roztwory następujących związków:
1% 20 mg/100 ml FeSO4 x 7H2O
1% 40 mg/100 ml MnSO4 x H2O
Przed sterylizacją odczyn pożywki doprowadzono do pH 7,2.
Naoxg: Nutrient agar (Oxoid) przygotowany zgodnie z instrukcją producenta + 0,2% glukozy.
Podczas badania zdolności do solubilizacji fosforanu, wykazywanej przez grupy wybrane w trakcie wstępnych doświadczeń na pożywce Pikovskaya (HP) okazało się, że kultury wyhodowane w ciągu 3-4 dni w temperaturze 30°C wykazywały pierścienie rozpuszczonego fosforanu o średnicy 29 i 38 mm. Zawiesinę komórek tych samych grup otrzymaną ze skośnego agaru TAg wraz z dodatkiem 1 ml wody destylowanej wprowadzono w dołki wykonane na płytkach z Naoxg, przy czym do każdego dołka dodano ponadto 10% roztwór fosforanu triwapniowego w ilości 0,1 ml/dołek. Po inkubacji kultur przez 2-3 dni w temperaturze 30°C zaobserwowano wyraźnie widoczne pierścienie roztworu. Przy szczegółowych badaniach prowadzonych na grupach Pseudomonas ich rozmiar wynosił 24 mm, podczas gdy dla grup Bacillus - 26 mm, przeciętnie 34 mm.
Każda z grup Pseudomonas i niektóre z grup Bacillus wykazały bardzo wysoką zdolność do solubilizacji fosforanu. Grupy przeprowadzają obydwie odmiany nieorganicznych fosforanów do roztworu, gdzie łatwo jest je wykryć, należy więc stwierdzić, że ich zdolność do solubilizacji fosforanu jest doskonała.
Na podstawie charakterystyki systematycznej i źródeł przyswajania węgla dla 14 grup mikroorganizmów Pseudomonas i 25 grup mikroorganizmów Bacillus wybranych na podstawie doświadczeń stwierdzono, że należały one do gatunku Pseudomonas fluorescens i Bacillus polymyxa, jak również Bacillus megaterium, oznaczonych kolejno jako SW1-1-14, SW17-1-15 i M32-1-10. Następnie, jak opisano poniżej, wyizolowano i zdeponowano odmiany rozmnażające się w niskiej temperaturze oraz wykazujące zdolność do biosyntezy polisacharydu w znacznych ilościach.
Wyizolowania mikroorganizmów zdolnych do udostępniania jonów potasu dokonano zgodnie z powyższym opisem, z tą tylko różnicą, że w pożywce Pikovskaya (HP) o składzie podanym powyżej pominięto chlorek potasu, a zamiast hydroksyapatytu dodano 1% drobno sproszkowanego skalenia i łupek mikowy.
W otoczeniu kultur mikroorganizmów zdolnych do przeprowadzenia nierozpuszczalnych w wodzie minerałów w całości lub w części do roztworu obserwuje się powstanie przezroczystej strefy.
Wybrane kultury poddano badaniom i na podstawie charakterystyki systematycznej, właściwości morfologicznych i źródeł przyswajania węgla stwierdzono, że były to Bacillus i Streptomyces; 15 badanych grup oznaczono numerem 1-015-0003, a następnie, jak opisano poniżej, wyizolowano odmiany rozmnażające się w niskiej temperaturze i jedną z nich zdeponowano.
PL 217 740 B1
P r z y k ł a d 3
Izolowanie mikroorganizmów wytwarzających syderofory i hormony roślinne
Zdolność grup wyizolowanych sposobami opisanymi w przykładach 1 i 2 do wytwarzania syderoforu i hormonów badano wykorzystując pożywkę King B o następującym składzie:
Pepton 2%
Gliceryna 1%
K2HPO4 0,15%
MgSO4 x 7H2O 0,15%
Agar 2%
Przed sterylizacją odczyn pożywki doprowadzono do pH 7,2 z użyciem roztworu wodorotlenku sodu.
Grupy Pseudomonas wytwarzające syderofory wykazują zdolność do wiązania jonów żelaza, które przekazują roślinom rosnącym w glebach o niskiej ich zawartości. Ponadto hamują wzrost niektórych mikroorganizmów fitopatologicznych jak Erwinia caratovora, które nie są w stanie wykorzystać żelaza w postaci związanej. Wytwarzanie syderoforu badano hamując wzrost Escherichia coli grupy MC1061. Sporządzono zawiesiny w wodzie destylowanej hodowli dwóch grup wyhodowanych na pożywce agarowej, które hodowano przez 48 godzin na płytce z pożywką King B (30-50 μθ pozbawioną żelaza oraz zawierającą je w ilości 1 μΜ FeCl3 x 7H2O w temperaturze 28°C. Następnie płytkę spryskano hodowlą E. Coli MC1061 otrzymaną na agarze TAg i inkubację kontynuowano przez kolejne 28 godzin w temperaturze 28°C. Wokół hodowli zaobserwowano pojawienie się rozmaitych stref zahamowanego wzrostu. Uśrednione wyniki z 4 doświadczeń zestawiono w tabeli 1. Jako gatunku negatywnego w stosunku do próbki kontrolnej użyto Bacillus megaterium, jako pozytywnego - Pseudomonas fluorescens.
T a b e l a 1
Mikroorganizm | Strefa zahamowanego wzrostu King B | Strefa zahamowanego wzrostu King B + 1 μΜ FeCh |
SW1-1-6 | ++++ | - |
SW1-1-12 | ++ | - |
P. fluores. | + | - |
B. megater. | - |
* Stopień zahamowania wzrostu: - brak; + niski; ++ i +++ wysoki i bardzo wysoki
Podczas badania wytwarzania syderoforu z mob4 i pozytywnej grupy kontrolnej zaobserwowano strefę zahamowanego wzrostu o znacznych rozmiarach, która nie występowała w obecności jonów żelaza.
Jak wspomniano wcześniej, niektóre grupy Pseudomonas wytwarzają hormony roślinne. Poddano badaniom wybrane grupy mikroorganizmów celem sprawdzenia ich zdolności do biosyntezy kwasu giberelinowego na pożywce TAg o składzie podanym powyżej. Badania przeprowadzono z użyciem wzorca, kwasu giberelinowego A (Sigma), metodą chromatografii cienkowarstwowej na żelu silikonowym (40 μg/ml, Merck). Kultury wyekstrahowano octanem etylu, następnie roztworem wodorotlenku i węglanu sodu o podwójnej objętości, a następnie ponownie octanem etylu z roztworu o wartości pH 2,5. W pozostałości po odparowaniu ekstraktu w następujących grupach stwierdzono plamki o wartości współczynnika Rf bliskiej wzorcowi:
T a b e l a 2
Grupa | Rf | Rozmiar plamki (mm2) |
Wzorzec | 0,41 | 24 |
SW1-1-6 | 0,46 | 17 |
M32-1-9 | 0,42 | 27 |
P. fluor. | 0,49 | 14 |
B. megat. | 0,57 | 7 |
Wybrano grupy oznaczone jako SW1-1-6 i M32-1-9 (wytwarzające w przybliżeniu 3-15 μg hormonu/mm).
Grupy poddano badaniom i zidentyfikowano systematycznie zgodnie z opisem podanym w części ogólnej.
PL 217 740 B1
P r z y k ł a d 4
Izolowanie mikroorganizmów wytwarzających polisacharyd zewnątrzkomórkowy
4A. Selekcja Bradyrhizobium
Grupy Bradyrhizobium PH2-1-3 posiano na pożywce Tag zawierającej 1% glukozy i 1% sacharozy (patrz wyżej) i zbadano ilość polisacharydu (występującego w postaci śluzu) wydzielonego wokół kultur. Wybrano grupy PH2-1-1 i -2 zdolne do biosyntezy polisacharydu.
4B. Wydzielanie Bacillus
Grupy Bacillus M32-1-10 i SW17-1-15 posiano na pożywce Tag zawierającej 1% glukozy i 1% sacharozy (patrz wyżej) i zbadano ilość polisacharydu (występującego w postaci śluzu) wydzielonego wokół kultur. Wybrano grupy M32-1-6,8 i 10 oraz SW17-1-7,11 i 15 zdolne do biosyntezy polisacharydu.
Wydzielonym mikroorganizmem był Micrococcus roseus. Na kompletnej pożywce zawierającej glukozę i sacharozę jest on zdolny do biosyntezy dużych ilości polisacharydu, przekształcając przy tym pożywkę w lepką masę.
Zgodnie z wynikami tych badań wybrane grupy wykazują zdolność do biosyntezy rozpuszczalnych w wodzie polisacharydów typu sukcynoglukanu, o znanej budowie.
P r z y k ł a d 5
Wydzielanie mikroorganizmów odpornych na niskie temperatury
Mikroorganizmy wybrane według kryteriów opisanych w przykładach 1-4 poddano działaniu środka mutagennego oraz promieniowania. Zawiesiny mikroorganizmów przygotowane z dodatkiem wody destylowanej zadawano roztworem nitrozoguanidyny o stężeniu 0,01, 0,1, 1,0, 10 i 100 μg/ml przez 1, 3, 5, 10 i 30 minut. Następnie zawiesinę komórek odwirowano, przemyto dwukrotnie wodą destylowaną, po czym komórki posiano na pożywce TAg. Potem postępowanie powtórzono poddając zawiesinę komórek w wodzie destylowanej, zawierającą 109 mikroorganizmów/mm, działaniu lampy ultrafioletowej o mocy 15 W ustawionej w odległości 10 cm, przez 1, 3, 5, 10 i 30 minut. Zawiesiny komórek posiano na pożywce Tag po seryjnym rozcieńczeniu.
Kultury na pożywce TAg inkubowano w temperaturze 18°C przez 192 godziny, po czym wyizolowano kultury o największych wymiarach wyhodowane na nieprzejrzystej pożywce agarowej TAg podczas inkubacji w temperaturze 18°C.
Poniżej podano, które z wyhodowanych kultur poddano badaniom i zachowano.
Spośród wyizolowanych, wybranych mikroorganizmów odpornych na niskie temperatury wydzielono i zdeponowano następujące:
Azospirillum brasilense ssp. SW51 (NCAIM /P/ B 001293),
Azotobacter vinelandii ssp. M657 (NCAIM /P/ B 001292),
Pseudomonas fluorescens var. SW11 (NCAIM /P/ B 001296),
Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295),
Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291),
Micrococcus roseus ssp. A21 (NCAIM /P/ B 001294),
Bradyrhizobium japonicum var. PH25 (NCAIM /P/ B 001302) i Streptomyces albus var. 0003 LP (NCAIM /P/ B 001301).
P r z y k ł a d 6
Hodowla mikroorganizmów
6A. Hodowla na kompletnej pożywce do kultur:
Z pożywki Tag do hodowli przygotowano skośne kultury agarowe, które inkubowano przez 48 godzin w temperaturze 30°C. Kultury Azospirillum, Azotobacter, Bacillus, Bradyrhizobium, Pseudomonas, Streptomyces i Micrococcus zaszczepiono na pożywce oznaczonej jako Ta1i o następującym składzie:
Glukoza (wyjałowiona oddzielnie w 50% roztworze wodnym) 0,5%
Melasa 1,5%
Wyciąg namokowy z kukurydzy (50% suchej masy) 1,5%
Ekstrakt drożdżowy Gistex 0,2%
Kazeina kwasowa 0,1%
Siarczan amonu 0,1%
Azotan amonu 0,1%
Węglan wapnia 0,3%
Diwodorofosforan potasu 0,1%
Chlorek sodu 0,1%
PL 217 740 B1
Siarczan magnezu x 7H2O 0,1%
Olej palmowy 0,2%
Porcje 100-100 ml pożywki umieszczono w kolbach Erlen-meyera o pojemności 500 ml i poddano sterylizacji w temperaturze 121°C przez 30 minut. Sterylną pożywkę zaszczepiono mikroorganizmami wyhodowanymi na skośnych kulturach agarowych i kontynuowano hodowlę w temperaturze 25°C, na stole obrotowym, obracającym się z prędkością 260 pełnych obrotów na minutę, przez 36 minut. Wzrost hodowli obserwowano pod mikroskopem, pobierając 5% inokulantów zaszczepionych na pożywce Ta1f do fermentacji o następującym składzie:
Glukoza (wyjałowiona oddzielnie w 50% roztworze wodnym) 1,5%
Melasa 2,5%
Wyciąg namokowy z kukurydzy (50% suchej masy) 1,5%
Ekstrakt drożdżowy Gistex 0,4%
Kazeina kwasowa 0,4%
Siarczan amonu 0,2%
Azotan amonu 0,2%
Węglan wapnia 0,3%
Diwodorofosforan potasu 0,2%
Chlorek sodu 0,1%
Siarczan magnezu x 7H2O 0,2%
Roztwór pierwiastków śladowych* 0,45%
Olej palmowy 0,2% *Skład roztworu pierwiastków śladowych - jak w przykładzie 1.
Porcje pożywek po 100 ml poddano sterylizacji w kolbach Erlenmeyera i w laboratoryjnych kadziach fermentacyjnych o objętości brutto 10 litrów i objętości netto 5 litrów, w powyżej opisanych warunkach.
Hodowle umieszczone w kolbach hodowano na stole obrotowym, natomiast hodowle w kadziach w znany sposób, przez napowietrzanie i stosowanie mieszadła turbinowego o podwójnym wlocie, o prędkości 360 obrotów/minutę, przez 24 godziny, do osiągnięcia liczby komórek na milimetr rzędu 4 x 108 - 1,3 x 109 zależnie od gatunku bakterii.
Do otrzymania hodowli w większej ilości przygotowano 10 litrów hodowli na pożywce Ta1i, o wyżej podanym składzie, w warunkach opisanych powyżej. Następnie porcje 100 litrów wyjałowionej pożywki Ta1i i 100 litrów pożywki Ta1f zaszczepiono porcjami kultur, każda o objętości 5 litrów. Hodowlę kontynuowano w powyżej opisanych warunkach przez 24 godziny, po czym kulturę hodowano na pożywce Ta1f w glebie, 50 litrów kultury wyhodowanej na pożywce Ta1i użyto do zaszczepienia 1000 litrów wyjałowionej pożywki Ta1f. Hodowlę kontynuowano w opisanych powyżej warunkach fermentacji przez 24 godziny, po czym po sprawdzeniu stwierdzono, że kultura była gotowa do użycia. W przypadku nadzwyczaj intensywnego pienienia dodawano 0,01% glikolu polipropylenowego jako środka przeciw pienieniu.
6B. Hodowla na pożywce półminimalnej
Sposób postępowania opisany w przykładzie 6 powtórzono zastępując pożywkę Ta1f pożywką
Ta2f o następującym składzie:
Glukoza (wyjałowiona oddzielnie w 50% roztworze wodnym) 1,5%
Melasa 0,5%
Kazeina kwasowa 0,1%
Siarczan amonu 0,7%
Azotan amonu 0,5%
Węglan wapnia 0,3%
Diwodorofosforan potasu 0,3%
Chlorek sodu 0,1%
Siarczan magnezu x 7H2O 0,2%
Roztwór pierwiastków śladowych* 0,35%
Olej palmowy 0,2% *Skład roztworu pierwiastków śladowych - jak w przykładzie 1.
Po zakończeniu hodowli kultury zawierały 1-7 x 108 komórek na milimetr, zależnie od rodzaju bakterii.
PL 217 740 B1
P r z y k ł a d 7
Badania poprawy struktury gleby i uprawy roślin
7A. Badania poprawy struktury gleby
Próbki piaszczystej gleby pobranej nad Dunajem w pobliżu Somlyósziget oraz gliniastej gleby z Esztergom umieszczono na tackach o wymiarach 90 x 90 cm, przy grubości warstwy wynoszącej 25 cm. Każdą tackę z glebą piaszczystą zadano 10 g azotanu amonu i 5 g fosforanu wapnia. Na tackach wysiano kukurydzę, w liczbie 104 nasion na każdą tackę. Przy ocenie wzrostu nie uwzględniano danych dla pięciu największych i pięciu najsłabiej rozwiniętych roślin. Masę korzeni badano po przemyciu wodą destylowaną i suszeniu w temperaturze 45°C przez dwa dni. Tacę nr 1 podlewano obficie wodą, tacę nr 2 podlano obficie jedynie podczas siewów, a później wcale. Tace oznaczone jako „a” zaszczepiono zdolnymi do biosyntezy polisacharydów mikroorganizmami z grup: Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295), Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291), Micrococcus roseus ssp. A21 (NCAIM /P/ B 001294) i Bradyrhizobium japonicum var. PH25 (NCAIM /P/ B 0013 02) zdeponowanymi w Krajowej Kolekcji Mikroorganizmów do Użytku w Rolnictwie i Przemyśle. Kultury przygotowano sposobem opisanym w przykładzie 6, liczba komórek każdego gatunku bakterii wynosiła 108 na 1 m2. Tacek oznaczonych jako „b” nie zadawano mikroorganizmami.
W tabeli 3 zestawiono wyniki uzyskane 33-go dnia po posiewach. Wyniki wyrażono w przeliczeniu na wartości średnie na jedną roślinę.
T a b e l a 3
Gleba | Tacka | Sposób postępowania | Wysokość rośliny (cm) | Masa systemu korzeniowego (mg) |
Piaszczysta | Nr 1 | A | 24 | 945 |
B | 17 | 634 | ||
Nr 2 | A | 18 | 866 | |
B | 11 | 757 | ||
Gliniasta | Nr 1 | A | 27 | 1095 |
B | 23 | 1213 | ||
Nr 2 | A | 20 | 1012 | |
B | 19 | 689 |
W tabeli 4 przedstawiono stopień kruszenia i spękania niepodlewanych próbek piaszczystej i gliniastej gleby (tace nr 2). Stopień kruszenia gleby oznaczano uwzględniając wymiar większości fragmentów gleby rozrzuconych na arkuszu papieru, które nie uległy dalszemu pokruszeniu podczas lekkiego potrząsania: poniżej 2 mm (-), pomiędzy 2-5 mm ( + ) lub powyżej 5 mm (++). Stopień spękania powierzchni oznaczono w następujący sposób: ++ oznacza brak pęknięć, + oznacza drobne pęknięcia o grubości włosa, podczas gdy - oznacza duże pęknięcia, charakterystyczne dla wysuszonej gleby.
T a b e l a 4
Gleba | Sposób postępowania | Stopień kruszenia | Stopień spękania |
Piaszczysta | A | + | + |
B | - | -lub + | |
Gliniasta | A | ++ | + |
B | ++ | ++ |
Jak wynika z danych zestawionych w tabelach 3 i 4 obecność mikroorganizmów zdolnych do biosyntezy polisacharydów wpływa na poprawę wzrostu roślin i struktury gleby.
7B. Próby polowe
Próby prowadzono w 2000 r. w Technicznej Stacji Doskonalenia i Hodowli Roślin Uniwersytetu w Mosonmagyaróvar, na przypadkowo wybranych poletkach powtarzających się czterokrotnie, stosując 10 I mieszanki mikroorganizmów na hektar.
Typ gleby, na jakiej prowadzono badania: pochodząca z rejonu Dunaju, o grubości 120-140 cm, zawartości próchnicy 2,4%; opady: słabe.
PL 217 740 B1
Pszenica jara
Zawartość białka % | |
Próbka kontrolna | 11,80 |
NPK 200 kg/ha | 11,87 |
BactoFil A | 11,96 |
Zawartość białka w przeliczeniu na suchą masę % | |
Próbka kontrolna | 13,84 |
NPK 200 kg/ha | 13,91 |
BactoFil A | 14,00 |
Wilgotny gluten % | |
Próbka kontrolna | 32,0 |
NPK 200 kg/ha | 31,1 |
BactoFil A | 31,1 |
Masa 1000 ziaren (g) | |
Próbka kontrolna | 36,4 |
NPK 200 kg/ha | 36,8 |
BactoFil A | 36,4 |
Ścieranie % | |
Próbka kontrolna | 50,5 |
NPK 200 kg/ha | 50,0 |
BactoFil A | 49,8 |
Czas opadania (s) | |
Próbka kontrolna | 278,3 |
NPK 200 kg/ha | 281,5 |
BactoFil A | 272,5 |
Spłaszczenie glutenu (cm) | |
Próbka kontrolna | 2,75 |
NPK 200 kg/ha | 3,25 |
BactoFil A | 2,75 |
Wydłużenie glutenu (cm) | |
Próbka kontrolna | 12,5 |
NPK 200 kg/ha | 11,8 |
BactoFil A | 12,3 |
Wskaźnik Zeleny'ego | |
Próbka kontrolna | 30,0 |
NPK 200 kg/ha | 30,3 |
PL 217 740 B1
BactoFil A | 30,8 | |
Zdolność do absorpcji wody oznaczona przy użyciu walorigrafu (ml) | ||
Próbka kontrolna | 31,3 | |
NPK 200 kg/ha | 31,6 | |
BactoFil A | 31,4 | |
Wartość uzyskana w pomiarach przy użyciu walorigrafu | ||
Próbka kontrolna | 57,3 | |
NPK 200 kg/ha | 53,1 | |
BactoFil A | 48,0 | |
Objętość bochenka (cm3) | ||
Próbka kontrolna | 962,5 | |
NPK 200 kg/ha | 977,5 | |
BactoFil A | 1055,0 | |
Wskaźnik morfologiczny chleba | ||
Próbka kontrolna | 2,38 | |
NPK 200 kg/ha | 2,46 | |
BactoFil A | 2,32 | |
Wydajność białka (kg/ha) | ||
Próbka kontrolna | 469,8 | |
NPK 200 kg/ha | 498,6 | |
BactoFil A | 510,3 | |
Wysokość roślin (cm) | ||
Próbka kontrolna | 56,3 | |
NPK 200 kg/ha | 57,7 | |
BactoFil A | 55,4 | |
Zbiór ziarna w przeliczeniu na 13% wilgotność (g/działkę) | ||
Zbiór ziarna t/ha | % próby kontrolnej | |
Próbka kontrolna | 3,366 | 100,0 |
NPK 200 kg/ha | 3,552 | 105,5 |
BactoFil A | 3,617 | 107,5 |
Zbiór ziarna (g/działkę) | ||
Zbiór ziarna t/ha | % próby kontrolnej | |
Próbka kontrolna | 3,398 | 100,0 |
NPK 200 kg/ha | 3,584 | 105,5 |
BactoFil A | 3,646 | 107,3 |
Zawartość wilgoci w plonach % | ||
Próbka kontrolna | 14,08 |
PL 217 740 B1
NPK 200 kg/ha | 14,00 |
BactoFil A | 13,93 |
Ciężar badany (kg) | |
Próbka kontrolna | 69,8 |
NPK 200 kg/ha | 70,4 |
Kukurydza
Zbiór surowych kolb (kg/działkę) | ||
Zbiór surowych kolb (t/ha) | % próby kontrolnej | |
Próbka kontrolna | 5,725 | 100,0 |
NPK 200 kg/ha | 6,848 | 119,6 |
BactoFil A | 6,495 | 113,4 |
Zbiór ziarna przy 14% wilgoci (kg/działkę) | ||
Zbiór ziarna (t/ha) | % próby kontrolnej | |
Próbka kontrolna | 5,496 | 100,0 |
NPK 200 kg/ha | 6,614 | 120,3 |
BactoFil A | 6,175 | 112,3 |
Zawartość wilgoci w ziarnie (%) | ||
Próbka kontrolna | 18,40 | |
NPK 200 kg/ha | 17,78 | |
BactoFil A | 19,63 | |
Masa łodyg (kg/działkę) | ||
Masa łodyg (t/ha) | % próby kontrolnej | |
Próbka kontrolna | 2,672 | 100,0 |
NPK 200 kg/ha | 3,016 | 112,9 |
BactoFil A | 2,886 | 108,0 |
Zawartość wilgoci w łodygach (%) | ||
Próbka kontrolna | 26,1 | |
NPK 200 kg/ha | 25,6 | |
BactoFil A | 25,9 | |
Masa łodyg przy 14% wilgoci (kg/działkę) | ||
Masa łodyg (t/ha) | % próby kontrolnej | |
Próbka kontrolna | 2,416 | 100,0 |
NPK 200 kg/ha | 2,740 | 113,4 |
BactoFil A | 2,613 | 108,2 |
Liczba łodyg (w tys. szt./ha) | ||
Próbka kontrolna | 38,41 |
PL 217 740 B1
NPK 200 kg/ha | 39,13 | |
BactoFil A | 39,86 | |
Liczba kolb na łodydze | ||
Próbka kontrolna | 1,04 | |
NPK 200 kg/ha | 1,10 | |
BactoFil A | 1,05 | |
Liczba kolb (w tys. szt./ha) | ||
Próbka kontrolna | 39,86 | |
NPK 200 kg/ha | 42,93 | |
BactoFil A | 42,03 | |
Masa tysiąca surowych ziaren (g) | ||
Próbka kontrolna | 255,2 | |
NPK 200 kg/ha | 259,2 | |
BactoFil A | 263,3 | |
Masa tysiąca surowych ziaren o wilgotności 14% (g) | ||
Próbka kontrolna | 245,6 | |
NPK 200 kg/ha | 250,9 | |
BactoFil A | 251,0 | |
Masa badany (kg) po zbiorach | ||
Próbka kontrolna | 65,9 | |
NPK 200 kg/ha | 65,1 | |
BactoFil A | 64,6 | |
Masa 1 kolby (kg) przy 14% wilgoci | ||
Próbka kontrolna | 0,121 | |
NPK 200 kg/ha | 0,136 | |
BactoFil A | 0,131 | |
Liczba ziaren w kolbie (db) | ||
Próbka kontrolna | 493,5 | |
NPK 200 kg/ha | 545,1 | |
BactoFil A | 523,1 | |
Zawartość wilgoci w kolbie % | ||
Próbka kontrolna | 19,4 | |
NPK 200 kg/ha | 20,7 | |
BactoFil A | 18,9 | |
Masa kolby (g) | ||
Próbka kontrolna | 22,3 | |
NPK 200 kg/ha | 22,3 |
PL 217 740 B1
BactoFil A | 22,4 | |
Indeks plonów | ||
Próbka kontrolna | 44,1 | |
NPK 200 kg/ha | 41,5 | |
BactoFil A | 42,3 |
Burak cukrowy
Buraki, sztuki/ha | ||
Próbka kontrolna | 79891 | |
NPK 200 kg/ha | 81159 | |
BactoFil B | 83696 | |
Zbiór liści (kg/działkę) | ||
Zbiór liści (t/ha) | % próby kontrolnej | |
Próbka kontrolna | 13,41 | 100,0 |
NPK 200 kg/ha | 13,96 | 104,1 |
BactoFil B | 15,38 | 114,7 |
Zbiór korzeni (kg/działkę) | ||
Zbiór korzeni (t/ha) | % próby kontrolnej | |
Próbka kontrolna | 30,46 | 100,0 |
NPK 200 kg/ha | 36,74 | 120,6 |
BactoFil B | 39,35 | 129,2 |
Stosunek liści do korzeni | ||
Stosunek liści do korzeni | % próby kontrolnej | |
Próbka kontrolna | 0,443 | 100,0 |
NPK 200 kg/ha | 0,381 | 85,9 |
BactoFil B | 0,391 | 88,2 |
Przeciętna masa korzenia (dag) | ||
Przeciętna masa korzenia (dag) | % próby kontrolnej | |
Próbka kontrolna | 38,2 | 100,0 |
NPK 200 kg/ha | 45,3 | 118,6 |
BactoFil B | 47,1 | 123,5 |
Gnicie (%) | ||
Gnicie (%) | % próby kontrolnej | |
Próbka kontrolna | 11,61 | 100,0 |
NPK 200 kg/ha | 11,07 | 95,3 |
BactoFil B | 10,59 | 91,3 |
PL 217 740 B1
Zawartość sodu (mg/100 g buraków) | ||
Próbka kontrolna | 1,94 | |
NPK 200 kg/ha | 2,28 | |
BactoFil B | 2,08 | |
Zawartość azotu w grupach α-aminowych (mg/100 g buraków) | ||
Próbka kontrolna | 1,20 | |
NPK 200 kg/ha | 1,02 | |
BactoFil B | 1,02 | |
Zawartość potasu (mg/100 g buraków) | ||
Próbka kontrolna | 2,52 | |
NPK 200 kg/ha | 1,89 | |
BactoFil B | 2,10 | |
Ubytki (%) | ||
Próbka kontrolna | 2,95 | |
NPK 200 kg/ha | 2,68 | |
BactoFil B | 2,68 | |
Zawartość cukru po oczyszczeniu, % | ||
Zawartość cukru po oczyszczeniu % | % próby kontrolnej | |
Próbka kontrolna | 8,66 | 100,0 |
NPK 200 kg/ha | 8,39 | 96,9 |
BactoFil B | 7,92 | 91,4 |
Produkcja cukru brutto (t/ha) | ||
Produkcja cukru brutto (t/ha) | % próby kontrolnej | |
Próbka kontrolna | 3,557 | 100,0 |
NPK 200 kg/ha | 4,081 | 114,7 |
BactoFil B | 4,181 | 117,5 |
Produkcja cukru netto (t/ha) | ||
Produkcja cukru netto (t/ha) | % próby kontrolnej | |
Próbka kontrolna | 2,656 | 100,0 |
NPK 200 kg/ha | 3,091 | 116,4 |
BactoFil B | 3,125 | 117,7 |
P r z y k ł a d 8
Wytwarzanie preparatów zawierających mikroorganizmy według wynalazku
8A. Wytwarzanie mieszaniny mikroorganizmów:
Kultury Azospirillum brasilense ssp. SW51 (NCAIM /P/ B 001293), Azotobacter vinelandii ssp. M657 (NCAIM /P/ B 001292), Pseudomonas fluorescens var. SW11 (NCAIM /P/ B 001296), Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295), Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291), Micrococcus roseus ssp. A21 (NCAIM /P/ B 001294), Bradyrhizobium japonicum var. PH25 (NCAIM /P/ B 001302) i Streptomyces albus var. 0003 LP (NCAIM /P/ B 001301) otrzymane sposobem opisaPL 217 740 B1 nym w przykładzie 6 zmieszano, optymalnie w takich samych proporcjach, po czym użyto do traktowania gleby w ilości od 5 litrów do 50 litrów, optymalnie w ilości 12 litrów/ha, w dowolnej porze roku o temperaturach powyżej 0°C, optymalnie od marca do października.
8B. Preparat do traktowania roślin jednoliściennych
Wytworzono preparat postępując zgodnie ze sposobem podanym przykładzie 6, z tą różnicą, że użyto następujących mikroorganizmów: Azospirillum brasilense ssp. SW51 (NCAIM /P/ B 001293), Azotobacter vinelandii ssp. M657 (NCAIM /P/ B 001292), Pseudomonas fluorescens var. SW11 (NCAIM /P/ B 001296), Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295), Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291) i Streptomyces albus var. 0003 LP (NCAIM /P/ B 001301).
8C. Preparat do traktowania roślin dwuliściennych
Wytworzono preparat postępując zgodnie ze sposobem podanym przykładzie 6, z tą różnicą, że użyto następujących mikroorganizmów: Azospirillum brasilense ssp. SW51 (NCAIM /P/ B 001293), Azotobacter vinelandii ssp. M657 (NCAIM /P/ B 001292), Pseudomonas fluorescens var. SW11 (NCAIM /P/ B 001296), Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295), Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291), Micrococcus roseus ssp. A21 (NCAIM /P/ B 001294) i Bradyrhizobium japonicum var. PH25 (NCAIM /P/ B 001302, otrzymując preparat według wynalazku.
8D. Wytwarzanie liofilizowanego preparatu litry wodnej zawiesiny mikroorganizmów otrzymanej sposobem podanym w przykładzie 6 poddano liofilizacji w urządzeniu Gelman SP54, zgodnie z instrukcją użytkowania dołączoną przez producenta. Mikroorganizmy w postaci wysuszonego proszku stosowano bez dalszego przetwarzania, bądź zależnie od sposobu użycia po wymieszaniu z węglanem wapnia, skrobią, glukozą lub celulozą w stosunku 1:1 - 1:100, po czym przechowywano w temperaturze 4-10°C aż do użycia.
8E. Wytwarzanie preparatu zawierającego nośnik
Kultury wyhodowane na pożywce sposobem podanym w przykładzie 6 zmieszano, optymalnie w równych ilościach, z nawozem organicznym, mączką sojową (o średnim uziarnieniu 4 mesh), metylocelulozą lub skrobią ziemniaczaną tak, aby preparat zawierał 5 x 108 - 1010, optymalnie 5 x 109 komórek mikroorganizmów. Następnie wilgotny preparat bądź preparat po wysuszeniu w temperaturze poniżej 40°C zastosowano do traktowania gleby w ilości 2-20 kg/ha, optymalnie 5 kg/ha. Optymalnie do gleby wprowa13 dza się co najmniej 1013 komórek mikroorganizmów na hektar.
Wynalazek dotyczy produktów oraz sposobów traktowania gleby bakteriami w celu poprawy wzrostu roślin i zwiększenia plonów; sposobów otrzymywania produktów według wynalazku, opartych na szczepach mikroorganizmów zdolnych do rozmnażania się w niskiej temperaturze i biosyntezy polisacharydów; oraz sposobów wytwarzania mikroorganizmów według wynalazku. Komórki jednego z mikroorganizmów według wynalazku bądź ich mieszaninę wprowadza się do gleby lub zaprawia się nasiona roślin.
Sposób według wynalazku umożliwia wprowadzenie do gleby produktu zawierającego co najmniej jedną z grup bakterii glebowych przetwarzających zawarty w powietrzu azot w związki przyswajalne dla roślin, rozpuszczających mineralne fosforany i związki potasu, zdolnych do biosyntezy substancji poprawiających wzrost roślin, wytwarzania polisacharydów, które optymalnie poprawiają strukturę gleby, wyizolowanych z gleb różnego typu i zmodyfikowanych w warunkach laboratoryjnych, w celu otrzymania zadowalających plonów praktycznie bez stosowania kosztownych nawozów sztucznych.
Claims (12)
1. Preparaty do traktowania gleby i nasion roślin zawierające żywe mikroorganizmy lub mikroorganizmy zdolne do rozmnażania się w glebach różnego typu w otoczeniu roślin, znamienne tym, że zawierają, w ilości 5 x 106 - 1011, korzystnie 107 - 1010 komórek/g, kulturę Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291) oraz jeden lub większą liczbę mikroorganizmów spośród
Azospirillum brasilense ssp. SW51 (NCAIM /P/ B 001293),
Azotobacter vinelandii ssp. M657 (NCAIM /P/ B 001292),
Pseudomonas fluorescens var. SW11 (NCAIM /P/ B 001296),
Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295),
Micrococcus roseus ssp. A21 (NCAIM /P/ B 001294),
Bradyrhizobium japonicum var. PH25 (NCAIM /P/ B 001302), i
Streptomyees albus var. 0003 LP (NCAIM /P/ B 001301),
PL 217 740 B1 jako mikroorganizmów zdolnych do rozmnażania się również w niskiej temperaturze, korzystnie poniżej
20°C, jak również w glebach o niskiej wartości pH, korzystnie poniżej 5, zdeponowanych w Krajowej Kolekcji Mikroorganizmów do Użytku w Rolnictwie i Przemyśle, Budapeszt, Węgry, oraz mokre lub suche nośniki dopuszczalne w uprawach rolniczych i nietoksyczne dla mikroorgani zmów.
2. Preparaty według zastrz. 1, znamienne tym, że jako nośnik zawierają wodę i/lub mączkę sojową i/lub skrobię i/lub celulozę i/lub glukozę.
3. Preparaty według zastrz. 1 albo 2, znamienne tym, że jako mikroorganizm zawierają
Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291),
Azospirillum brasilense ssp. SW51 (NCAIM /P/ B 001293),
Azotobacter vinelandii ssp. M657 (NCAIM /P/ B 001292),
Pseudomonas fluorescens var. SW11 (NCAIM /P/ B 001296),
Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295), oraz
Streptomyces albus var. 0003 LP (NCAIM /P/ B 001301).
4. Preparaty według zastrz. 1 albo 2, znamienne tym, że jako mikroorganizm zawierają
Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291),
Azospirillum brasilense ssp. SW51 (NCAIM /P/ B 001293),
Azotobacter vinelandii ssp. M657 (NCAIM /P/ B 001292),
Pseudomonas fluorescens var. SW11 (NCAIM /P/ B 001296),
Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295),
Micrococcus roseus ssp. A21 (NCAIM /P/ B 001294),
Bradyrhizobium japonicum var. PH25 (NCAIM /P/ B 001302), oraz
Streptomyces albus var. 0003 LP (NCAIM /P/ B 001301).
5. Preparaty według zastrz. 1 albo 2, znamienne tym, że jako mikroorganizm zawierają
Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291),
Azospirillum brasilense ssp. SW51 (NCAIM /P/ B 001293),
Azotobacter vinelandii ssp. M657 (NCAIM /P/ B 001292),
Pseudomonas fluorescens var. SW11 (NCAIM /P/ B 001296),
Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295),
Micrococcus roseus ssp. A21 (NCAIM /P/ B 001294), i
Bradyrhizobium japonicum var. PH25 (NCAIM /P/ B 001302).
6. Preparaty według zastrz. 1 albo 2, znamienne tym, że jako mikroorganizm zawierają
Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291),
Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295),
Micrococcus roseus ssp. A21 (NCAIM /P/ B 001294), i
Bradyrhizobium japonicum var. PH25 (NCAIM /P/ B 001302).
7. Sposób wytwarzania produktów do traktowania gleby i nasion roślin i/lub preparatów zawierających żywe mikroorganizmy lub mikroorganizmy zdolne do rozmnażania się w otoczeniu roślin w glebach różnego typu, również w niskiej temperaturze, korzystnie poniżej 20°C i przy niskiej wartości pH, korzystnie poniżej 5, znamienny tym, że hoduje się osobno lub w mieszaninie, na pożywce zawierającej źródło węgla i azotu oraz sole nieorganiczne, mikroorganizm Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291), oraz ewentualnie, osobno lub w mieszaninie, jeden lub większą liczbę spośród mikroorganizmów
Azospirillum brasilense ssp. SW51 (NCAIM /P/ B 001293),
Azotobacter vinelandii ssp. M657 (NCAIM /P/ B 001292),
Pseudomonas fluorescens var. SW11 (NCAIM /P/ B 001296),
Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295),
Micrococcus roseus ssp. A21 (NCAIM /P/ B 001294),
Bradyrhizobium japonicum var. PH25 (NCAIM /P/ B 001302), i
Streptomyces albus var. 0003 LP (NCAIM /P/ B 001301), zdeponowanych w Krajowej Kolekcji Mikroorganizmów do Użytku w Rolnictwie i Przemyśle, do osiągnięcia liczby komórek 5 x 107 - 5 x 109 na ml, ewentualnie otrzymaną kulturę lub kultury miesza się w określonym stosunku lub nanosi się ją (lub je) na nośnik lub miesza z nim i ewentualnie poddaje liofilizacji w znany sposób.
8. Sposób według zastrz. 7, znamienny tym, że jako źródło węgla stosuje się glukozę i/lub sacharozę i/lub melasę, jako źródło azotu stosuje się chlorek amonu i/lub azotan amonu i/lub siarczan amonu i/lub wyciąg namokowy z kukurydzy i/lub hydrolizat kazeiny, a jako sól nieorganiczną stosuje się węglan
PL 217 740 B1 wapnia i sole uwalniające w wyniku dysocjacji jony sodu, potasu, magnezu, wapnia, żelaza, jony azotanowe, chlorkowe, siarczanowe, węglanowe, fosforanowe, oraz stosuje się dodatek pierwiastków śladowych.
9. Mikroorganizmy, korzystnie zdolne do rozmnażania się również w temperaturze poniżej 20°C i przy niskiej wartości pH, zdeponowane w Krajowej Kolekcji Mikroorganizmów do Użytku w Rolnictwie i Przemyśle, Budapeszt, Węgry, pod następującymi numerami:
Azospirillum brasilense ssp. SW51 (NCAIM /P/ B 001293),
Azotobacter vinelandii ssp. M657 (NCAIM /P/ B 001292),
Pseudomonas fluorescens var. SW11 (NCAIM /P/ B 001296),
Bacillus polymyxa var. SW17 (NCAIM /P/ B 001295) ,
Bacillus megaterium var. M326 (NCAIM /P/ B 001291),
Micrococcus roseus ssp. A21 (NCAIM /P/ B 001294) ,
Bradyrhizobium japonicum var. PH25 (NCAIM /P/ B 001302) i Streptomyces albus var. 0003 LP (NCAIM /P/ B 001301).
10. Sposób wytwarzania mikroorganizmów zdefiniowanych w zastrz. 9, znamienny tym, że z otoczenia roślin pobiera się próbkę gleby z wierzchniej (górnej) warstwy o grubości 40 cm, identyfikuje się wybrane mikroorganizmy, poddaje działaniu środków mutagennych i izoluje się odmiany rozmnażające się również w niskiej temperaturze.
11. Sposób traktowania gleby preparatami zdefiniowanymi w zastrz. 1-6, znamienny tym, że
10 14 11 12 nanosi się preparaty zawierające komórki mikroorganizmów w liczbie 1010 - 1014, korzystnie 1011 - 1012 na hektar, na powierzchnię lub do wnętrza gleby, w porze roku, w której nie występuje spadek temperatury poniżej 0°C.
12. Sposób traktowania nasion roślin preparatami zdefiniowanymi w zastrz. 1-6, znamienny tym, że traktuje się nasiona produktem w postaci ciekłej, zawierającym co najmniej jeden z mikroorganizmów lub ich mieszaninę.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
HU0103294A HU230555B1 (hu) | 2001-08-13 | 2001-08-13 | Környezetbarát mikroorganizmus-készítmény és annak előállítása |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
PL369237A1 PL369237A1 (pl) | 2005-04-18 |
PL217740B1 true PL217740B1 (pl) | 2014-08-29 |
Family
ID=90001687
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
PL369237A PL217740B1 (pl) | 2001-08-13 | 2002-08-12 | Preparaty do traktowania gleby i nasion roślin zawierające żywe mikroorganizmy lub mikroorganizmy zdolne do rozmnażania się w glebach, sposób wytwarzania produktów do traktowania gleby i nasion roślin, mikroorganizmy, sposób wytwarzania mikroorganizmów oraz sposób traktowania gleby i nasion roślin preparatami |
Country Status (19)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US7842494B2 (pl) |
EP (2) | EP1919848A1 (pl) |
JP (1) | JP2005500413A (pl) |
KR (1) | KR100940615B1 (pl) |
CN (1) | CN1315758C (pl) |
AU (1) | AU2009200523B2 (pl) |
BR (1) | BR0211920B1 (pl) |
CA (1) | CA2457154A1 (pl) |
CO (1) | CO5560603A2 (pl) |
EA (1) | EA009126B1 (pl) |
ES (1) | ES2451341T3 (pl) |
HR (1) | HRP20040126B1 (pl) |
HU (1) | HU230555B1 (pl) |
MX (1) | MXPA04001383A (pl) |
PL (1) | PL217740B1 (pl) |
RS (1) | RS52487B (pl) |
UA (1) | UA86178C2 (pl) |
WO (1) | WO2003016241A1 (pl) |
ZA (1) | ZA200401142B (pl) |
Families Citing this family (48)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR100577717B1 (ko) * | 2004-06-12 | 2006-05-10 | 대한민국 | 작물생장을 촉진시키는 미생물 바실러스 메가테리움kr076(kacc91049) 및 이를 함유하는 미생물 제제 |
KR101118485B1 (ko) * | 2004-07-26 | 2012-03-12 | 충북대학교 산학협력단 | 고정화된 인산 가용화 미생물을 포함하는 비료 조성물의 제조방법 |
CN100370005C (zh) * | 2005-01-13 | 2008-02-20 | 中国科学院水生生物研究所 | 土壤藻类对荒漠半荒漠土壤的改良方法 |
KR100755509B1 (ko) * | 2006-05-29 | 2007-09-04 | 대한민국(관리부서:농촌진흥청) | 질소고정력 및 작물생장촉진 효과가 있는 신균주 아조스피릴룸 브라실렌스 cw301, 이를 이용한 생물비료 및 그 제조방법 |
ES2307391B1 (es) * | 2006-07-26 | 2009-09-28 | Consejo Superior De Investigaciones Cientificas | Microorganismos recombinantes que contienen un gen de resistencia a estres salino y sus aplicaciones. |
US8415271B2 (en) * | 2007-04-21 | 2013-04-09 | Uxmal S.A. | Biofertilizer formulation |
CN101801891B (zh) * | 2007-06-20 | 2014-01-08 | 欧亚生物科技有限公司 | 微生物制剂和使用其促进植物生长的方法 |
CN101182478B (zh) * | 2007-12-07 | 2010-05-19 | 华南农业大学 | 一种根瘤固氮菌株系bdyd1及其应用 |
BRPI0906761A2 (pt) | 2008-01-15 | 2015-07-14 | Univ Michigan State | Formulações polimicrobianas para aumentar produtividade de planta |
JP5020839B2 (ja) * | 2008-01-30 | 2012-09-05 | 新日本製鐵株式会社 | 新規微生物および新規微生物を用いた化合物の製造方法 |
US20120015806A1 (en) * | 2009-03-25 | 2012-01-19 | Sitaram Prasad Paikray | Novel formulation of microbial consortium based bioinoculant for wide spread use in agriculture practices |
US8796179B2 (en) * | 2009-12-22 | 2014-08-05 | Lantmannen Bioagri Ab | Fluorescent pseudomonad of the species pseudomonas azotoformans for enhancement of plant emergence and growth |
WO2011099019A1 (en) * | 2010-02-09 | 2011-08-18 | Patel, Babubhai, C. | Composition and method of preparation of bacterial based product that fix atmospheric nitrogen from air and makes available to plant |
WO2011154962A1 (en) * | 2010-06-09 | 2011-12-15 | Patel, Babubhai C. | Advance material and method of preparation of bacterial formulation using plant growth promoting bacteria for providing nutrition essential for promoting plant growth |
WO2011154963A1 (en) * | 2010-06-09 | 2011-12-15 | Patel, Babubhai C. | Advance material and method of preparation of bacterial formulation using phosphorus solubilizing bacteria that makes phosphorous available to plant which are unavailable due to higher soil ph |
RU2464308C2 (ru) * | 2010-11-11 | 2012-10-20 | Государственное научное учреждение Татарский научно-исследовательский институт агрохимии и почвоведения Российской академии сельскохозяйственных наук | ШТАММ БАКТЕРИЙ AZOTOBACTER CHROOCOCCUM 5 V(e), ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ АЗОТФИКСИРУЮЩЕГО УДОБРЕНИЯ ДЛЯ ЗЕРНОВЫХ И КОРМОВЫХ КУЛЬТУР |
CN102021133B (zh) * | 2010-11-25 | 2012-12-19 | 甘肃农业大学 | 一种燕麦根际微生物复合接种剂及其制备方法 |
HUP1100008A2 (en) | 2011-01-07 | 2013-03-28 | Saniplant Biotechnologiai Kutato Es Fejlesztoe Kft | Serum for soil |
CN102174436B (zh) * | 2011-01-24 | 2012-06-27 | 领先生物农业股份有限公司 | 一株高效固氮的大豆慢生根瘤菌及其培养方法与它的用途 |
WO2013035032A2 (en) * | 2011-09-11 | 2013-03-14 | Chaudhari Sharad N | Capsulated formulation with beneficial microbes for healthy plant growth |
CN104168771B (zh) | 2011-12-13 | 2017-06-30 | 孟山都技术公司 | 植物生长促进微生物及其用途 |
CN102636613B (zh) * | 2012-03-22 | 2014-10-15 | 叶春 | 一种人工湿地填料生物膜活性的测定方法 |
CN102826895B (zh) * | 2012-08-01 | 2014-04-23 | 邓振山 | 一种多元复合微生物菌肥及其制备方法 |
MA35581B1 (fr) * | 2013-04-05 | 2014-11-01 | Valorhyze | Procédé de formulation stable d'un produit biofertilisant à base d'une souche fixatrice d'azote atmosphérique, azospirillum basillence lr11 |
AP2016009398A0 (en) * | 2014-01-29 | 2016-08-31 | Univ Pretoria | Plant growth promoting rhizobacterial strains and their uses |
HU231353B1 (hu) * | 2014-02-10 | 2023-03-28 | BioFil Mikrobiológiai, Géntechnológiai és Biokémiai Kft | Stressztalajok oltására szolgáló talajbaktériumok |
CN104945078A (zh) * | 2014-05-12 | 2015-09-30 | 山东沃地丰生物肥料有限公司 | 一种保根生物活菌株修复剂 |
KR101743607B1 (ko) | 2015-01-28 | 2017-06-05 | (주)케이케이티생명자원개발연구소 | 에스-아바(엡시스산) 추출물 제조방법 |
CN104830724B (zh) * | 2015-05-05 | 2018-01-23 | 浙江省环境保护科学设计研究院 | 一株根瘤菌菌株及其应用 |
WO2017089641A1 (es) * | 2015-11-24 | 2017-06-01 | Biobab R&D, S.L | Composiciones bioestimulantes de plantas que comprenden cepas de microorganismos |
CN105565978B (zh) * | 2015-12-23 | 2019-04-02 | 湖北翔农化肥有限公司 | 一种聚合碳微球肥料缓释增效剂及其制备方法 |
WO2018182555A2 (en) * | 2016-10-05 | 2018-10-04 | Yedi̇tepe Sağlik Hi̇zmetleri̇ Anoni̇m Şi̇rketi̇ | Microorganisms which are effective for preventing plant's cold stress |
CN111148827A (zh) | 2017-05-09 | 2020-05-12 | 塔克森生物科学公司 | 促进植物生长的微生物、组合物和用途 |
CN108456058A (zh) * | 2018-02-28 | 2018-08-28 | 北京沃土天地生物科技股份有限公司 | 一种液体复合微生物肥料及其制备方法 |
RU2678755C1 (ru) * | 2018-03-23 | 2019-01-31 | Общество с ограниченной ответственностью "Органик парк" | Биологический агент для стимуляции ростовых процессов в растениях |
RU2675503C1 (ru) * | 2018-04-05 | 2018-12-19 | Светлана Александровна Ибрагимова | Способ получения биологического препарата для стимуляции роста и защиты растений от заболеваний |
CN110358698B (zh) * | 2018-04-11 | 2021-06-25 | 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 | 巨大芽孢杆菌在增强植物抗干旱胁迫能力中的应用 |
CN108559721A (zh) * | 2018-05-15 | 2018-09-21 | 北京师范大学 | 一种净化空气的复合微生物菌剂及其应用 |
EP4209581A1 (en) * | 2018-06-06 | 2023-07-12 | AMVAC Hong Kong Limited | Microbial consortia producing dipicolinic acid and methods for selecting microbes for co-formulation with carriers |
US20210400985A1 (en) | 2018-10-10 | 2021-12-30 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Plant growth-promoting microbes, compositions, and uses |
ES2789973B2 (es) * | 2019-04-26 | 2022-02-07 | Probelte S A U | Biofertilizante liquido que comprende cepas de azospirillum brasilense y pantoea dispersa y metodo de obtencion del mismo |
CN110317087A (zh) * | 2019-07-25 | 2019-10-11 | 南京林业大学 | 适用于南方贫瘠土壤的解磷固氮复合菌肥、制备方法及其应用 |
CN110885771B (zh) * | 2019-11-22 | 2023-05-16 | 云南省烟草公司临沧市公司 | 用于提升植烟土壤微生态环境水平的生物菌剂 |
CN110885693A (zh) * | 2019-12-05 | 2020-03-17 | 吉林省电力科学研究院有限公司 | 一种煤泥晾晒方法 |
US11505509B2 (en) * | 2020-01-22 | 2022-11-22 | Larry D. Mohr | Agricultural additive composition for improving soil health and method of use |
CN111849842B (zh) * | 2020-08-17 | 2022-05-03 | 南昌师范学院 | 解钾菌、包括其的解钾菌菌剂及应用 |
CN116694526B (zh) * | 2023-06-16 | 2024-04-09 | 临沂大学 | 一种促进生根的复合微生物菌剂及其制备方法 |
CN117229957B (zh) * | 2023-09-19 | 2024-05-03 | 中化化肥有限公司临沂农业研发中心 | 一种链霉菌、发酵液及其应用 |
Family Cites Families (41)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2355453A1 (fr) * | 1976-06-21 | 1978-01-20 | Gist Brocades Nv | Application de streptomyces albus en agronomie et dans l'industrie alimentaire |
EP0127642A4 (en) * | 1982-10-28 | 1986-07-23 | Biotech General Corp | NOVEL AZOSPIRILLUM STRAINS, METHODS FOR CULTURING SUCH STRAINS, COMPOSITIONS CONTAINING THEM AND THEIR USE AS BIOENGRAINS. |
HU188434B (en) | 1983-03-02 | 1986-04-28 | Phylaxia Oltoanyagtermeloe Vallalat,Hu | Process for preparing a bacterial substance for the inoculation of soil |
US4900348A (en) * | 1983-08-02 | 1990-02-13 | The Ohio State University Research Foundation | Production of disease suppresive compost and container media, and microorganism culture for use therein |
HU195068B (en) | 1984-02-24 | 1988-04-28 | Varosepitesi Tudomanyos | Method for grafting by alga and forming respectively increasing the productivity of soil |
US4663162A (en) * | 1984-03-14 | 1987-05-05 | The Regents Of The University Of California | Method of using Bacillus polymyxa 9A to protect plants against verticillium wilt |
US4647533A (en) * | 1984-09-14 | 1987-03-03 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Method for screening bacteria and application thereof for field control of Pythium spp. on small grain crops |
EP0210734A1 (en) * | 1985-06-14 | 1987-02-04 | BURNS, PHILP & COMPANY LIMITED | Mushroom blotch control agent |
CA1335363C (en) * | 1985-07-02 | 1995-04-25 | Imperial Oil Limited | Emergence-promoting rhizobacteria |
US4711656A (en) * | 1986-08-01 | 1987-12-08 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Enhancement of nitrogen-fixation with rhizobial tan variants |
CA1335366C (en) * | 1986-08-19 | 1995-04-25 | Joseph Kloepper | Plant growth promoting rhizobacteria for agronomic nonroot crops |
CA1335364C (en) * | 1986-12-17 | 1995-04-25 | Joseph Wayne Kloepper | Beneficial, direct-acting soil bacteria |
US4863866A (en) * | 1987-03-12 | 1989-09-05 | Lipha Chemicals, Inc. | Bradyrhizobium japonicum mutants exhibiting superior soybean nodulation |
CA1327333C (en) * | 1988-08-03 | 1994-03-01 | Jennifer L. Parke | Biological inoculant effective against aphanomyces |
US5021076A (en) * | 1989-03-17 | 1991-06-04 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Enhancement of nitrogen fixation with Bradyrhizobium japonicum mutants |
CA2035738C (en) * | 1990-02-07 | 2001-04-24 | Zongling Liu | Biological agent for control of crop fungal disease |
HU207751B (en) | 1991-02-08 | 1993-05-28 | Phylaxia Oltoanyagtermeloe | Process for producing composition for utilizing nitrogen of the air and phosphorous of the soil for plant |
GB9107678D0 (en) * | 1991-04-11 | 1991-05-29 | Ici Plc | Antifungal micro-organism |
US5348742A (en) * | 1991-05-24 | 1994-09-20 | Ciba-Geigy Corporation | Anti-pathogenic bacterial strains of Pseudomonas fluorescens |
IT1248095B (it) * | 1991-06-20 | 1995-01-05 | Ministero Dell Uni E Della | Ceppi batterici di pseudomonas (ncimb 40403, ncimb 40376, ncimb 40375,ncimb 40377, ncimb 40402, ncimb 40379) in grado di controllare le infezioni fungine. |
FR2678281A1 (fr) * | 1991-06-26 | 1992-12-31 | Agronomique Inst Nat Rech | Moyens pour ameliorer la croissance des plantes. |
GB9207352D0 (en) * | 1992-04-03 | 1992-05-13 | Ici Plc | Method to control fungal disease |
HU213163B (en) | 1993-12-07 | 1997-02-28 | Phylaxia Rt | Method for preparation of a composition and use for recultivation of soil |
CN1056959C (zh) * | 1994-03-28 | 2000-10-04 | 北京大学 | 高效花生增产剂及其制备方法 |
JPH08322556A (ja) * | 1995-03-28 | 1996-12-10 | Nisshin Flour Milling Co Ltd | 新規なシュードモナス・フルオレッセンス |
ES2093559B1 (es) * | 1995-05-04 | 1997-07-01 | Consejo Superior Investigacion | Fertilizante bacteriano y procedimiento de obtencion. |
US5650372A (en) * | 1995-05-30 | 1997-07-22 | Micro Flo Company | Plant treatment with bacillus strain ATCC |
JP2835598B2 (ja) * | 1996-05-20 | 1998-12-14 | 多木化学株式会社 | 育苗培土及びその製造方法並びに耐病性苗の育成方法 |
SK279941B6 (sk) * | 1997-02-25 | 1999-06-11 | Arp�D Poll�K | Spôsob prípravy zmesi mikroorganizmov na viazanie |
JP3119349B2 (ja) * | 1997-04-15 | 2000-12-18 | 多木化学株式会社 | 植物成長抑制剤 |
HUP9701446A1 (hu) * | 1997-08-27 | 1999-05-28 | Phylaxia-Pharma Gyógyszer-, Oltóanyag és Agrobiológiai Készítményeket Gyártó és Forgalmazó Rt. | Eljárás a talaj mikroorganizmus populációjának előnyös kialakítására |
US6228806B1 (en) * | 1997-09-09 | 2001-05-08 | Organica Inc. | Biochemical fertilizer composition |
US6565846B2 (en) * | 1997-09-26 | 2003-05-20 | Kureha Chemical Industry Co., Ltd. | Microbial strains of pseudomonas, bacillus and enterobacter/in agricultural chemical compositions |
US6277625B1 (en) * | 1997-11-20 | 2001-08-21 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Transgenic strains of Pseudomonas for biocontrol of plant root diseases |
CA2238289C (en) * | 1998-05-20 | 2013-08-06 | The Governors Of The University Of Alberta | Biocontrol agent and fungicide for blackleg disease |
AUPP589798A0 (en) * | 1998-09-14 | 1998-10-08 | Charles Sturt University | Novel bacterial strains and methods of controlling fungal pathogens |
US5951978A (en) * | 1998-12-10 | 1999-09-14 | Tatko Biotech, Inc. | Microorganisms for improving plant productivity |
DE59805847D1 (de) * | 1998-12-24 | 2002-11-07 | Berg Gabriele | Rhizobakterienisolate zur Anwendung gegen phytopatogene Bodenpilze und Verfahren zur Anwendung der Rhizobakterienisolate |
WO2001038492A1 (en) * | 1999-11-24 | 2001-05-31 | University Of Maryland | Improved inoculant strains of bradyrhizobium japonicum |
CN1275551A (zh) * | 2000-06-19 | 2000-12-06 | 韩承民 | 环保生物菌肥及其生产方法 |
EP1241247A1 (en) * | 2001-03-13 | 2002-09-18 | C.C.H. S.A. | Isolated bacteria for the protection of plants against phytopathogenic fungi and bacteria |
-
2001
- 2001-08-13 HU HU0103294A patent/HU230555B1/hu unknown
-
2002
- 2002-08-12 CN CNB028203003A patent/CN1315758C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2002-08-12 CA CA002457154A patent/CA2457154A1/en not_active Abandoned
- 2002-08-12 US US10/486,747 patent/US7842494B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-08-12 RS YU14004A patent/RS52487B/en unknown
- 2002-08-12 EP EP02755388A patent/EP1919848A1/en not_active Withdrawn
- 2002-08-12 EP EP09005034.5A patent/EP2233458B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-08-12 JP JP2003521170A patent/JP2005500413A/ja active Pending
- 2002-08-12 KR KR1020047002210A patent/KR100940615B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2002-08-12 BR BRPI0211920-0A patent/BR0211920B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2002-08-12 ES ES09005034.5T patent/ES2451341T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-08-12 PL PL369237A patent/PL217740B1/pl unknown
- 2002-08-12 WO PCT/HU2002/000081 patent/WO2003016241A1/en active Application Filing
- 2002-08-12 EA EA200400309A patent/EA009126B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2002-08-12 MX MXPA04001383A patent/MXPA04001383A/es unknown
- 2002-12-08 UA UA2004021085A patent/UA86178C2/uk unknown
-
2004
- 2004-02-06 HR HRP20040126AA patent/HRP20040126B1/hr not_active IP Right Cessation
- 2004-02-12 ZA ZA200401142A patent/ZA200401142B/en unknown
- 2004-02-13 CO CO04012433A patent/CO5560603A2/es not_active Application Discontinuation
-
2009
- 2009-02-11 AU AU2009200523A patent/AU2009200523B2/en not_active Ceased
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
BR0211920B1 (pt) | 2012-02-07 |
HU230555B1 (hu) | 2016-12-28 |
EA200400309A1 (ru) | 2004-08-26 |
CA2457154A1 (en) | 2003-02-27 |
EA009126B1 (ru) | 2007-10-26 |
CO5560603A2 (es) | 2005-09-30 |
MXPA04001383A (es) | 2005-06-06 |
US20050060930A1 (en) | 2005-03-24 |
YU14004A (sh) | 2006-08-17 |
CN1315758C (zh) | 2007-05-16 |
JP2005500413A (ja) | 2005-01-06 |
EP2233458A2 (en) | 2010-09-29 |
AU2009200523A1 (en) | 2009-03-05 |
HRP20040126B1 (hr) | 2014-02-14 |
US7842494B2 (en) | 2010-11-30 |
HRP20040126A2 (en) | 2004-06-30 |
KR100940615B1 (ko) | 2010-02-05 |
RS52487B (en) | 2013-02-28 |
ZA200401142B (en) | 2005-04-18 |
UA86178C2 (uk) | 2009-04-10 |
EP1919848A1 (en) | 2008-05-14 |
CN1568296A (zh) | 2005-01-19 |
WO2003016241A1 (en) | 2003-02-27 |
ES2451341T3 (es) | 2014-03-26 |
AU2009200523B2 (en) | 2012-01-12 |
EP2233458A3 (en) | 2011-02-23 |
EP2233458B1 (en) | 2013-12-11 |
BR0211920A (pt) | 2004-10-26 |
PL369237A1 (pl) | 2005-04-18 |
KR20040032915A (ko) | 2004-04-17 |
HUP0103294A2 (en) | 2003-05-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
PL217740B1 (pl) | Preparaty do traktowania gleby i nasion roślin zawierające żywe mikroorganizmy lub mikroorganizmy zdolne do rozmnażania się w glebach, sposób wytwarzania produktów do traktowania gleby i nasion roślin, mikroorganizmy, sposób wytwarzania mikroorganizmów oraz sposób traktowania gleby i nasion roślin preparatami | |
US8592343B2 (en) | Polymeric compositions containing rhizobium and/or plant growth-promoting rhizobacteria inoculant, use thereof and seeds treated with the compositions | |
US8252720B2 (en) | Use of Gluconacetobacter with reduced use of nitrogen fertilizer to improve beet crop production | |
CN109852565B (zh) | 一种盐碱地复合改良剂及其施用方法 | |
CN109810924B (zh) | 一种重度盐碱地改良方法 | |
US20120192605A1 (en) | Fertilizer composition and method | |
CN112111427B (zh) | 一株枯草芽孢杆菌pa8及其应用 | |
KR101456171B1 (ko) | 물억새 뿌리로부터 분리한 미생물을 이용한 식물 생장 촉진방법 | |
Tara et al. | Plant growth promoting traits shown by bacteria Brevibacterium frigrotolerans SMA23 isolated from Aloe vera rhizosphere | |
US20060018883A1 (en) | Microbial preparation & method for preventing and curing the bacterial wilt the plant and its use | |
CN108795797B (zh) | 一株玉米根系内生阴沟肠杆菌及其应用 | |
CN108587986B (zh) | 一种具有防病和降解有机磷双重作用的解淀粉芽孢杆菌 | |
CN109207410A (zh) | 一株解钾假单胞菌及其应用 | |
CN117586931B (zh) | 一种木糖氧化无色杆菌ivf-wk240及其用途 | |
Tiwari et al. | Associative diazotrophs of pearl millet (Pennisetum glaucum) from semi arid region-Isolation and characterization | |
CN115927083B (zh) | 葡萄牙链霉菌和含有其的菌剂及其在作物抗低温方面的应用 | |
CN117264845A (zh) | 一种促进青豌豆生产的根瘤菌及其应用 | |
CN112352791A (zh) | 一种防治马铃薯疮痂病的菌株k1及其发酵方法 | |
CN115537349A (zh) | 一株秸秆降解菌及应用 | |
Abduelafez et al. | The abundance of ACC deaminase-positive bacteria and their interaction with winter wheat in a Colorado soil | |
AU2002321675A1 (en) | Micro-organisms for the treatment of soil and process for obtaining them |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
RECP | Rectifications of patent specification |