NO337072B1 - (2R)-2-amino-2-metyl-4-{1-metyl-5-[4-(4-metylfenyl)butanoyl]pyrrol-2-yl}butan-1-ol, dens farmakologisk aksepterbare salter og estere og farmasøytiske preparater derav. - Google Patents

Description

Teknisk område

Den foreliggende oppfinnelse angår anvendelsen av en aminoalkoholforbindelse, eller et farmakologisk akseptabelt salt eller ester av denne, som har utmerket immunsuppresjonsaktivitet som et medikament, og anvendelsen av et farmasøytisk preparat som minsker lymfocytt-tallet i perifert blod og som viser overlegne fysikalske egenskaper og farmakokinetika.

Bakgrunnsteknikk

Ved behandlingen av immunrelaterte sykdommer som revmatoid artritt og andre autoimmune sykdommer, har det konvensjonelt vært anvendt inflammasjons-hemmende legemidler som steroider mot inflammasjonsreaksjoner forårsaket av en unormal immunrespons. Denne behandling er imidlertid kun en nosotropisk terapi og utgjør ingen grunnleggende helbredelse.

Selv om det i tillegg også er rapportert at abnormaliteter i immunsystemet vil være involvert ved starten av diabetes og nefritt (se for eksempel ikke-patentpublikasjon 1), så er det ennå ikke utviklet et legemiddel med evne til å korrigere disse unormaliteter.

På den annen side vil utvikling av en metode for å undertrykke immun-responsen være ekstremt viktig for å hindre awisningsreaksjoner under organ- og celletransplantasjoner, og for behandling og forhindring av forskjellige autoimmune sykdommer. Imidlertid er det kjent at konvensjonelt kjente immunsuppresjonsmidler som Cyclosporin A (CsA) og Tacrolimus (TRL) viser toksisitet overfor nyrer og lever, og selv om det er svært vanlig å benytte terapier hvor anvendelse av disse kombineres med steroider for å minske slike uheldige bivirkninger, så er disse legemidler fortsatt ikke i stand til å demonstrere adekvate immunsuppresjonsvirkninger uten å forårsake uheldige bivirkninger.

I lys av disse omstendigheter har det vært gjort forsøk på å komme frem til forbindelser med lav toksisitet og bedre immunsuppresjonsaktivitet.

I det følgende listes opp eksempler på kjente immunsuppresjonsmidler.

(1) En forbindelse med generell formel (a) er kjent som en immunsuppresant (se for eksempel patentpublikasjon 1):

Kjemisk formel 1

I forbindelse (a) representerer Rx en eventuelt substituert, lineær eller forgrenet karbon-kjede (som kan ha en dobbeltbinding, trippelbinding, oksygen-, svovel- eller -N(RX<6>)-gruppe (hvor Rx<6>representerer hydrogen), eventuelt substituert arylen eller eventuelt substituert heteroarylen, og kan eventuelt på kjedeenden ha substituert aryl, eventuelt substituert sykloalkyl eller eventuelt substituert heteroaryl, og Rx2, Rx<3>, Rx<4>, og Rx<5>kan være like eller forskjellige og representere hydrogen eller alkyl.

Selv om forbindelse (a) i kjent teknikk har som nødvendige substituenter 2 oksymetylgrupper substituert på det samme karbonatom (nemlig -CH2ORx<4>og

-CH2ORx<5>), så vil forbindelsen ifølge den foreliggende oppfinnelse skille seg fra forbindelsen (a) ved at den har en -CH2OH-gruppe og en metyl- eller etylgruppe substituert på det samme karbonatom som de korresponderende grupper. (2) En forbindelse med generell formel (b) er kjent som en immunsuppresant (se for eksempel patentpublikasjon 2):

Kjemisk formel 2

12 3

I forbindelse (b) representerer Ry , Ry og Ry et hydrogenatom eller lignende, W representerer et hydrogenatom, en alkylgruppe eller lignende, Zy representerer en enkelt-binding eller en alkylengruppe, Xy representerer et hydrogenatom eller en alkoksygruppe, og Yy representerer et hydrogenatom, en alkylgruppe, en alkoksygruppe, en acylgruppe, en acyloksygruppe, en aminogruppe, en acylaminogruppe eller lignende.

Selv om det er nødvendig at forbindelse (b) har en fenylgruppe i sin grunnleggende ryggrad, så vil forbindelsen inneholdt i det farmasøytiske preparat ifølge den foreliggende oppfinnelse skille seg fra forbindelse (b) ved at den korresponderende gruppe er en heterosyklisk gruppe i form av en pyrrolgruppe som har en substituent på nitrogenatomet.

Dessuten er det i denne publikasjon uansett ikke beskrevet noen forbindelse med en struktur som ligner strukturen for forbindelsen inneholdt i det farmasøytiske preparat ifølge den foreliggende oppfinnelse. (3) En forbindelse med generell formel (c) er kjent som en immunsuppresant (se for eksempel patentpublikasjon 3): Kjemisk formel 3

i forbindelse (c) kan R^, Rz<2>, Rz3 og Rz<4>være like eller forskjellige og representere et hydrogenatom eller en acylgruppe.

Selv om forbindelse (c) har som nødvendige substituenter 2 oksymetylgrupper (nemlig -CH2ORz3 og -CH2ORz<4>) substituert på det samme karbonatom, så vil forbindelsen ifølge den foreliggende oppfinnelse skille seg fra forbindelse (c) ved at den har en -CH2OH-gruppe og en metyl- eller etylgruppe substituert på det samme karbonatom som de korresponderende grupper. Selv om forbindelse (c) har en nødvendig gruppe i form av en fenylgruppe mellom -(CH2)2-gruppen og -CO-(CH2)4-gruppen i den grunnleggende ryggrad, så vil i tillegg forbindelsen inneholdt i det farmasøytiske preparat ifølge den foreliggende oppfinnelse skille seg fra forbindelse (c) ved at den korresponderende gruppe er en heterosyklisk gruppe i form av en pyrrolgruppe som har en substituent på nitrogenatomet. (4) En forbindelse med generell formel (d) er kjent som en immunsuppresant (se for eksempel patentpublikasjoner 4 og 5):

Kjemisk formel 4

i forbindelse (d) representerer R<1>et halogenatom, en trihalogenmetylgruppe, en hydroksylgruppe, en lavere alkylgruppe som har 1 til 7 karbonatomer, en fenoksy-metylgruppe eller lignende, R representerer et hydrogenatom, et halogenatom, en trihalogenmetylgruppe eller lignende, X representerer O, S, SO eller S02, og n representerer et helt tall fra 1 til 4.

Selv om forbindelse (d) har som nødvendige substituenter 2 oksymetylgrupper (-CH2OH) substituert på det samme karbonatom, så vil forbindelsen ifølge den foreliggende oppfinnelse skille seg fra forbindelse (d) ved at den har en -CH2OH-gruppe og en metyl- eller etylgruppe substituert på det samme karbonatom som de korresponderende grupper. Selv om forbindelse (d) har en substituert fenylgruppe i sin grunnleggende ryggrad som en nødvendig gruppe, vil i tillegg forbindelsen inneholdt i det farmasøytiske preparat skille seg fra forbindelsen (d) ved at den korresponderende gruppe er en heterosyklisk gruppe i form av en pyrrolgruppe som har en substituent på nitrogenatomet.

På den annen side er en forbindelse med generell formel (e), som har immunsuppresjonsaktivitet, beskrevet av den foreliggende søker i japansk patentsøknad (Kokai) nr. 2002-167382 (patentpublikasjon 6) og i EP 1 300 405 Al (forbindelsene 1-2302til 1-2327 avdisse):

Kjemisk formel 5

12 * 3

hvor R og R representerer et hydrogenatom eller en aminobeskyttende gruppe, R representerer et hydrogenatom eller en hydroksylbeskyttende gruppe, R<4>representerer en lavere alkylgruppe, n representerer et helt tall fra 1 til 6, X representerer en etylen-gruppe, Y representerer en Ci_i0-alkylengruppe, R5 representerer en arylgruppe eller substituert arylgruppe, og R og R representerer et hydrogenatom.

I tillegg er en forbindelse med generell formel (f), som har immunsuppresjonsaktivitet, beskrevet av den foreliggende søker i japansk patentsøknad (Kokai) nr. 2003-267950(forbindels l-1082av disse) (patentpublikasjon 7) (= EP 1 471 054 Al):

Kjemisk formel 6

hvor R og R representerer et hydrogenatom, en aminobeskyttende gruppe eller lignende, R<3>representerer et hydrogenatom eller en hydroksylbeskyttende gruppe, R<4>representerer en lavere alkylgruppe, n representerer et helt tall fra 1 til 6, X representerer et oksygenatom eller et usubstituert nitrogenatom eller et nitrogenatom som er substituert med en lavere alkylgruppe, eller lignende, Y representerer en etylen-gruppe eller lignende, Z representerer en alkylengruppe som har 1 til 10 karbonatomer,

eller lignende, R<5>representerer en arylgruppe eller substituert arylgruppe eller lignende, og R 6 og R 7 representerer et hydrogenatom eller lignende.

I lys av disse omstendigheter er det ønskelig å komme frem til et preparat med lav toksisitet og forbedret immunsuppresjonsaktivitet.

Patentpublikasjon 1: Internasjonal publikasjon WO94/08943 (EP627406)

Patentpublikasjon 2: Internasjonal publikasjon WO96/06068

Patentpublikasjon 3: Internasjonal publikasjon W098/45249

Patentpublikasjon 4: Internasjonal publikasjon WO03/029184

Patentpublikasj on 5: Internasj onal publikasj on WO03/029205

Patentpublikasjon 6: Japansk patentsøknad (Kokai) nr. 2002-167382

Patentpublikasjon 7: Japansk patentsøknad (Kokai) 2003-267950 (= EP 1 471 054 Al);

Ikke-patentpublikasjon 1: Kidney International, vol. 51, 94 (1997) Journal of Immunology, vol. 157, 4691 (1996)

Beskrivelse av oppfinnelsen

(Problemet som skal løses med oppfinnelsen)

Som et resultat av å ha gjennomført omfattende studier over mange år av farmasøytiske preparater, har de foreliggende oppfinnere funnet et nytt farmasøytisk preparat med lav toksisitet og forbedret immunsuppresjonsaktivitet, som er anvendelig mot awisningsreaksjoner under forskjellige organtransplantasjoner eller hudtransplantasjoner, autoimmune sykdommer og andre immunrelaterte sykdommer, så som systemisk lupus erytematosis, revmatoid artritt, polymyositt, fibrositt, skjelletmyositt, artrose, osteoartritt, dermatomyositt, skleroderma, Behcets sykdom, Crohns sykdom, ulcerøs kolitt, autoimmun hepatitt, aplastisk anemi, ideopatisk trombocytopenisk purpura, autoimmun hemolyttisk anemi, multippel sklerose, autoimmun pomfus, psoriasis vulgaris, angiitt, Wegeners granulom, uveitt, Sjøgrens syndrom, idiopatisk interstitial pneumoni, Goodpastures syndrom, sarkoidose, allergisk granulomatøs angiitt, bronkial astma, myokarditt, kardiomyopati, aortittsyndom, postmyokaridalt infarktsyndrom, primær pulmonal hypertensjon, lipoidnefrose, membrannefropati, membranproliferativ glomerulonefritt, fokal glomerulær sklerose, halvmåne-nefritt, myastenia gravis, inflammatorisk nevropati, atopisk dermatitt, kronisk fotosensitiv dermatitt, hyperfotosensitivitet, dekubitus ulcer, Sydenhams korea, sklerose, aldersdiabetes, insulinavhengig diabetes, juvenil diabetes, aterosklerose, glomerulonefritt, IgA-nefropati, tubulointerstitiell nefritt, primær gallecirrhose, primær skleroserende kolangitt, fulminant hepatitt, viral hepatitt, GVHD, kontaktdermatitt og septicemi, infeksjoner som fungal,- mykoplasma-, viral- og protozoaninfeksjoner, kardiovasku-lære sykdommer som hjertesvikt, kardiomegali, arytmia, angina pectoris, kardial iskemi, arteriell embolisme, aneurisme, varix og sirkulasjonslidelser, sentralnerve-systemsykdommer som Alzheimers sykdom, demens, Parkinsons sykdom, slag, cerebralt infarkt, cerebral iskemi, depresjon, manisk depresjon, schizofreni, Huntingtons korea, epilepsi, konvulsjon, hyperaktivitetslidelse, encefalitt, meningitt, anoreksi og bulemi, og forskjellige sykdommer som lymfoma, leukemi, polyuria, thamuria og diabetisk retinopati (og spesielt mot awisningsreaksjoner under forskjellige organtransplantasjoner og hudtransplantasjoner, og autoimmune sykdommer som systemisk lupus erytematosis, revmatoid artritt, multippel sklerose og atopisk dermatitt).

Et mål med den foreliggende oppfinnelse er således å tilveiebringe anvendelsen av en aminoalkoholforbindelse med lav toksisitet og bedre immun-suppresjonsaktivititet, et farmakologisk akseptabelt salt av denne eller en farmakologisk akseptabel ester av denne, i et farmasøytisk preparat.

Siden det i tillegg er ønskelig å komme frem til et farmasøytisk preparat som er anvendelig for sykdommer forårsaket av unormalt lymfocytt-tall i perifert blod, og så videre, er et problem som skal løses med den foreliggende oppfinnelse å tilveiebringe et farmasøytisk preparat som er anvendelig for de forannevnte sykdommer, som har lav toksistet og som viser overlegne fysikalsk-kjemiske egenskaper og overlegne farmakokinetika.

Tiltak for å løse problemet

Den foreliggende oppfinnelse skal nå beskrives mer spesifikt.

(1). Forbindelse med formel:

som er (2R) -2-amino-2-metyl-4- {l-metyl-5- [4- (4-metylfenyl) butanoyl] pyrrol-2-yl} butan-1-ol, et farmakologisk akseptabelt salt derav eller en farmakologisk akseptabel ester derav, i et farmasøytisk preparat for anvendelse som et medikament; (2) Et farmasøytisk preparat inneholdende en forbindelse, salt eller ester som definert i (1), for anvendelse ved undertrykking av avstøtningsreaksjoner ved hudtransplantssjoner eller organ transplantasjoner; (3) . Et farmasøytisk preparat inneholdende en forbindelse, salt eller ester som definert i (1), for anvendelse i profylaksen eller behandlingen av autoimmun sykdom; (4) . Det farmasøytiske preparat for anvendelse ifølge (3), hvor de autoimmune sykdommene er en eller flere typer valgt fra gruppen bestående av reumatoid artritt, psoriasis, atopisk dermatitt, multippel sklerose, ulcerøs kolitt og Crohns sykdom; og (5) . Det farmasøytisk preparat for anvendelse ifølge et hvilket som helst av (2) til (4), hvor preparatet er for anvendelse ved oral administrasjon til voksne mennesker i en dose av den aktive ingrediens fra 0,0001 mg/kg/døgn til 1 mg/kg/døgn.

Vkkninger av oppfinnelsen

Et farmasøytisk preparat som inneholder forbindelsen, salt eller ester som definert i (1) har lav toksisitet og overlegen immunsuppresjonsaktivitet, og er særlig anvendelig som et profylaktisk eller terapeutisk middel (og fortrinnsvis et terapeutisk middel) for varmblodige dyr (og spesielt mennesker) mot awisningsreaksjoner under forskjellige organtransplantasjoner eller hudtransplantasjoner, autoimmune sykdommer eller andre immunrelaterte sykdommer, så som systemisk lupus erytematosis, revmatoid artritt, polymyositt, fibrositt, skjelletmyositt, artrose, osteoartritt, dermatomyositt, skleroderma, Behcets sykdom, Crohns sykdom, ulcerøs kolitt, autoimmun hepatitt, aplastisk anemi, ideopatisk trombocytopenisk purpura, autoimmun hemolyttisk anemi, multippel sklerose, autoimmun pomfus, psoriasis vulgaris, angiitt, Wegeners granulom, uveitt, Sjøgrens syndrom, idiopatisk interstitial pneumoni, Goodpastures syndrom, sarkoidose, allergisk granulomatøs angiitt, bronkial astma, myokarditt, kardiomyopati, aortittsyndom, postmyokaridalt infarktsyndrom, primær pulmonal hypertensjon, lipoidnefrose, membrannefropati, membranproliferativ glomerulonefritt, fokal glomerulær sklerose, halvmåne-nefritt, myastenia gravis, inflammatorisk nevropati, atopisk dermatitt, kronisk fotosensitiv dermatitt, hyperfotosensitivitet, dekubitus ulcer, Sydenhams korea, sklerose, aldersdiabetes, insulinavhengig diabetes, juvenil diabetes, aterosklerose, glomerulonefritt, IgA-nefropati, tubulointerstitiell nefritt, primær gallecirrhose, primær skleroserende kolangitt, fulminant hepatitt, viral hepatitt, GVHD, kontaktdermatitt og septisemi, infeksjoner som fungal,- mykoplasma-, viral- og protozoaninfeksjoner, kardiovasku-lære sykdommer som hjertesvikt, kardiomegali, arytmia, angina pectoris, kardial iskemi, arteriell embolisme, aneurisme, varix og sirkulasjonslidelser, sentralnerve-systemsykdommer som Alzheimers sykdom, demens, Parkinsons sykdom, slag, cerebralt infarkt, cerebral iskemi, depresjon, manisk depresjon, schizofreni, Huntingtons korea, epilepsi, konvulsjon, hyperaktivitetslidelse, encefalitt, meningitt, anoreksi og bulemi, og forskjellige sykdommer som lymfoma, leukemi, polyuria, tamuria og diabetisk retinopati (og spesielt mot awisningsreaksjoner under forskjellige organtransplantasjoner og hudtransplantasj oner, og autoimmune sykdommer som systemisk lupus erytematosis, revmatoid artritt, multippel sklerose og atopisk dermatitt).

Fordi det farmasøytiske preparat ifølge den foreliggende oppfinnelse har lav toksisitet, demonstrerer overlegne fysikalske egenskaper og overlegne farmakokinetika, og demonstrerer tilfredsstillende aktivitet for å minske lymfocytt-tallet i blod ved oral administrasjon, så er det anvendelig som et oralt profylaktisk eller oralt terapeutisk middel (og fortrinnsvis et oralt terapeutisk middel) for de forannevnte autoimmune sykdommer, og så videre, eller som et oralt profylaktisk eller oralt terapeutisk middel (og fortrinnsvis et oralt terapeutisk middel) for andre sykdommer forårsaket av unormalt antall perifere blodlymfocytter.

Beste måte for utførelse av oppfinnelsen

I det følgende gis en spesifikk forklaring av den foreliggende oppfinnelse.

Det forannevnte "farmakologisk akseptable salt av denne" henviser til et salt av en forbindelse som definert i (1), siden forbindelsen har en basisk gruppe i form av en aminogruppe, og kan bli omdannet til et salt ved omsetning med syre.

Foretrukne eksempler på farmakologisk akseptable salter av en forbindelse som definert i (1) innbefatter normalt salter av halogenerte hydrogensyrer, så som hydrogenfluorider, hydrogenklorider, hydrogenbromider og hydrogenjodider, salter dannet med uorganiske syrer, så som nitrater, perklorater, sulfater og fosfater, salter dannet med lavere alkansulfonsyrer, så som metansulfonater, trifluormetansulfonater og etansulfonater, salter dannet med arylsulfonsyrer, så som benzensulfonater og p-toluensulfonater, salter dannet med organiske syrer, så som acetater, malater, fumarater, suksinater, citrater, askorbater, tartrater, oksalater og maleater, og salter dannet med aminosyrer, så som glycin, lycin, arginin, ornitin, glutamater og aspertater, og mer foretrukket salter dannet med halogenerte hydrogensyrer.

I den foreliggende oppfinnelse vil et foretrukket salt være bestemt ved å ta hensyn til selve saltets fysiske egenskaper, løselighet, hygroskopiske egenskaper, termisk stabilitet, smeltepunkt og så videre, og stabiliteten ved blanding med en vehikkel eller et fortynningsmiddel, og så videre, under formuleringen og så videre, (innbefattende at det ikke reagerer med blandingen, samt preparatets fysiske egenskaper, løselighet, hygroskopiske egenskaper, termisk stabilitet, smeltepunkt og så videre). Et farmakologisk akseptabelt salt av forbindelsen som definert i (1) som tjener som den aktive ingrediens i den foreliggende oppfinnelse, er fortrinnsvis et salt av en organisk syre, og mer foretrukket et fumarat.

Den forannevnte "ester" betegner en ester av en forbindelse som definert i (1), siden forbindelsen kan bli omdannet til en ester. Et eksempel på en slik ester er en "ester av en hydroksylgruppe", og slike estere gjelder estere hvor hver esterrest er en "ordinær beskyttende gruppe" eller en "beskyttende gruppe som kan bli spaltet av ved en biologisk metode, så som hydrolyse, i kroppen".

En "ordinær beskyttende gruppe" betegner beskyttende grupper som kan bli spaltet av med en kjemisk metode, så som hydrogenolyse, hydrolyse, elektrolyse eller fotolyse.

Foretrukne eksempler på en "ordinær beskyttende gruppe" i en "ester av en hydroksylgruppe" innbefatter "alifatiske acylgrupper", innbefattende alkanoylgrupper så som en formyl-, acetyl-, propionyl-, butyryl-, isobutyryl-, pentanoyl-, pivaloyl-, valeryl-, isovaleryl-, oktanoyl-, nonanoyl-, dekanoyl-, 3-metylnonanoyl-, 8-metylnonanoyl-, 3-etyloktanoyl-, 3,7-dimetyloktanoyl-, undekanoyl-, dodekanoyl-, tridekanoyl-, tetradekanoyl-, pentadekanoyl-, heksadekanoyl-, 1-metylpentadekanoyl-, 14-metylpentadekanoyl-, 13,13-dimetyltetradekanoyl-, heptadekanoyl-, 15-metylheksa-dekanoyl-, oktadekanoyl-, 1-metylheptadekanoyl-, nonadekanoyl-, eicosanoyl- eller heneicosanoylgruppe, halogenerte alkylkarbonylgrupper så som en kloracetyl-, dikloracetyl-, trikloracetyl- eller trifluoracetylgruppe, lavere alkoksyalkylkarbonyl-grupper så som en metyksyacetylgruppe, og umettede alkylkarbonylgrupper så som en akryloyl-, propionoyl-, metakryloyl-, krotonoyl-, isokrotonoyl- eller (E)-2-metyl-2-butenoylgruppe (og fortrinnsvis lavere alifatiske acylgrupper med 1 til 6 karbonatomer), "aromatiske acylgrupper" innbefattende arylkarbonylgrupper så som benzoyl, a-naftoyl- eller P-naftoylgruppe, halogenerte arylkarbonylgrupper så som en 2-brombenzoyl-, 4-klorbenzoyl- eller 2,4,6-trifluorbenzoylgruppe, lavere alkylerte arylkarbonylgrupper så som en 2,4,6-trimetylbenzoyl- eller 4-toloylgruppe, lavere alkoksylerte arylkarbonylgrupper så som en 4-anisoylgruppe, nitrerte arylkarbonylgrupper så som en 4-nitrobenzoyl eller 2-nitrobenzoylgruppe, lavere alkoksy-karbonylerte arylkarbonylgrupper så som en 2-(metoksykarbonyl)benzoylgruppe, og arylerte arylkarbonylgrupper så som en 4-fenylbenzoylgruppe, "alkoksykarbonylgrupper" innbefattende lavere alkoksykarbonylgrupper så som en metoksykarbonyl-, etoksykarbonyl-, propoksykarbonyl-, butoksykarbonyl-, s-butoksykarbonyl-, t-butoksykarbonyl- eller isobutoksykarbonylgruppe, og lavere alkoksykarbonylgrupper substituert med et halogenatom eller en tri-lavere alkylsilylgruppe så som en 2,2,2-trikloretoksykarbonyl- eller 2-trimetylsilyletoksykarbonylgruppe, "tetrahydropyranyl-eller tetrahydrotiopyranyl-grupper" så som en tetrahydropyran-2-yl-, 3-bromtetra-hydropyran-2-yl- eller 4-metoksytetrahydrotiopyran-4-ylgruppe, "tetrahydrofuranyl-eller tetrahydrotiofuranyl"-grupper så som en tetrahydrofuran-2-yl- eller tetrahydrotio-furan-2-ylgruppe, "silylgrupper" innbefattende tri-lavere alkylsilylgrupper så som en trimetylsilyl-, trietylsilyl-, isopropyldimetylsilyl-, t-butyldimetylsilyl-, metyldiiso-propylsilyl-, metyldi-t-butylsilyl- eller triisopropylsilylgruppe, og tri-lavere alkylsilylgrupper substituert med 1 til 2 arylgrupper, så som en difenylmetylsilyl-, difenyl- butylsilyl-, difenylisopropylsilyl- eller fenyldiisopropylsilylgruppe, "alkoksymetylgrupper" innbefattende lavere alkoksymetylgrupper, så som en metoksymetyl-, 1,1-dimetyl-l-metoksymetyl-, etoksymetyl-, propoksymetyl-, isopropoksymetyl-, butoksymetyl- eller t-butoksymetylgruppe, lavere alkoksylerte lavere alkoksymetylgrupper, så som en 2-metoksyetoksymetylgruppe, og halogen-lavere alkoksymetylgrupper, så som en 2,2,2-trikloretoksymetyl- eller bis(2-kloretoksy)metylgruppe, "substiterte etylgrupper" innbefattende lavere alkoksylerte etylgrupper, så som en 1-etoksyetyl- eller l-(isopropoksy)etylgruppe, og halogenerte etylgrupper så som en 2,2,2-trikloretyl-gruppe, "aralkylgrupper" innbefattende lavere alkylgrupper substituert med 1 til 3 arylgrupper, så som en benzyl-, a-naftylmetyl-, P-naftylmetyl-, difenylmetyl-, trifenylmetyl-, a-naftyldifenylmetyl- eller 9-antrylmetylgruppe, og lavere alkylgrupper substituert med 1 til 3 arylgrupper hvor arylringen er substituert med en lavere alkyl-, lavere alkoksy-, nitro-, halogen- eller cyanogruppe, så som en 4-metylbenzyl-, 2,4,6-trimetylbenzyl-, 3,4,5-trimetylbenzyl-, 4-metoksybenzyl-, 4-metoksyfenyldifenylmety-l, 2-nitrobenzyl-, 4-nitrobenzyl-, 4-klorbenzyl-, 4-brom-benzyl- eller 4-cyanobenzylgruppe, "alkenyloksykarbonylgrupper" så som en vinyloksykarbonyl- eller allyloksykarbonylgruppe, og "aralkyloksykarbonylgrupper" hvor arylringen eventuelt er substituert med 1 til 2 lavere alkoksygrupper eller nitrogrupper, så som en benzyloksykarbonyl-, 4-metoksybenzyloksykarbonyl-, 3,4-dimetoksybenzyloksykarbonyl-, 2-nitrobenzyloksykarbonyl- eller 4-nitrobenzyloksy-karbonylgruppe.

En "beskyttende gruppe som kan bli spaltet ved en biologisk metode så som hydrolyse i kroppen" henviser til en beskyttende gruppe som genererer en fri syre eller et salt som et resultat av å bli spaltet ved en biologisk metode slik som hydrolyse i kroppen, og om det er et derivat av forbindelsen eller ikke, kan bli bestemt ved administrasjon til et laboratoriedyr, så som en rotte eller mus, ved intravenøs injeksjon og deretter undersøke en kroppsvæske fra dyret og detektere den opprinnelige forbindelse eller det farmakologisk akseptable salt av forbindelsen.

Foretrukne eksempler på en "beskyttende gruppe som kan bli spaltet ved en biologisk metode så som hydrolyse i kroppen" i en "ester av en hydroksylgruppe", innbefatter en l-(acyloksy)-"lavere alkylgruppe" så som en 1-("lavere alifatisk acyl"-oksy)-"lavere alkylgruppe", f.eks. en formyloksymetyl-, acetoksymetyl-, dimetyl-aminoacetoksymetyl-, propionyloksymetyl-, butyryloksymetyl-, pivaloyloksymetyl-, valeryloksymetyl-, isovaleryloksymetyl-, heksanoyloksymetyl-, 1 -formyloksyetyl-, 1-acetoksyetyl-, 1-propionyloksyetyl-, 1-butyryloksyetyl-, 1-pivaloyloksyetyl-, 1-valeryloksyetyl-, 1-isovaleryloksyetyl-, 1-heksanoyloksyetyl-, 1 -formyloksypropyl-, 1-acetoksypropyl-, 1-propionyloksypropyl-, 1-butyryloksypropyl-, 1-pivaloyloksy-propyl-, 1-valeryloksypropyl-, 1-isovaleryloksypropyl-, 1-heksanoyloksypropyl-, 1-acetoksybutyl-, 1-propionyloksybutyl-, 1-butyryloksybutyl-, 1-pivaloyloksybutyl-, 1-acetoksypentyl-, 1-propionyloksypentyl-, 1-butyryloksy-pentyl-, 1-pivaloyloksy-pentyl- eller 1-pivaloyloksyheksylgruppe, en l-("sykloalkyl"-karbonyloksy)-"lavere alkylgruppe", f.eks. en syklopentylkarbonyloksymetyl-, sykloheksylkarbonyl-oksymetyl-, 1 -syklopentylkarbonyloksyetyl-, 1 -sykloheksylkarbonyloksyetyl-, 1 -syklopentylkarbonyloksypropyl-, 1 -sykloheksylkarbonyloksypropyl-, 1 -syklopentyl-karbonyloksybutyl- eller 1-sykloheksylkarbonyloksybutylgruppe, en 1-("aromatisk acyl"oksy)-"lavere alkylgruppe" f.eks. en benzoyloksymetylgruppe, en "karbonyloksyalkylgruppe" så som en (lavere alkoksykarbonyloksy)alkylgruppe, f.eks. en metoksykarbonyloksymetyl-, etoksykarbonyloksymetyl-, propoksykarbonyloksymetyl-, isopropoksykarbonyloksymetyl-, butoksykarbonyloksymetyl-, isobutoksykarbonyl-oksymetyl-, pentyloksykarbonyloksymetyl-, heksyloksykarbonyloksymetyl-, sykloheksyloksykarbonyloksy-metyl-, sykloheksyloksykarbonyloksy-, (sykloheksyl)metyl-, l-(metoksykarbonyloksy)etyl-, 1 -(etoksykarbonyloksy)etyl-, l-(propoksy-karbonyl-oksy)etyl-, 1 -(isopropoksykarbonyloksy)etyl-, 1 -(butoksykarbonyloksy)etyl-, 1 -(isobutoksykarbonyloksy)etyl-, 1 -(t-butoksykarbonyloksy)etyl-, 1 -(pentyloksy-karbonyloksy)etyl-, 1 -(heksyloksykarbonyloksy)etyl-, 1 -(syklopentyloksykarbonyl-oksy)etyl-, 1 -(syklopentyloksykarbonyloksy)propyl-, 1 -(sykloheksyloksykarbonyloksy)propyl-, 1 -(syklopentyloksykarbonyloksy)butyl-, 1 -(sykloheksyloksykarbonyloksy )butyl-, 1 -(sykloheksyloksykarbonyloksy)etyl-, 1 -(etoksykarbonyloksy)propyl-, 1 -(metoksykarbonyloksy)propyl-, 1 -(etoksykarbonyloksy)propyl-, 1 -(propoksy-karbonyloksy)propyl-, 1 -(isopropoksykarbonyloksy)propyl-, 1 -(butoksykarbonyl-oksy)propyl-, 1 -(isobutoksykarbonyloksy)propyl-, 1 -(pentyloksykarbonyloksy)propyl-, 1 -(heksyloksykarbonyloksy)propyl-, 1 -(metoksykarbonyloksy)butyl-, 1 -(etoksy-karbonyloksy)butyl-, 1 -(propoksykarbonyloksy)butyl-, 1 -(isopropoksykarbonyl-oksy)butyl-, 1 -(butoksykarbonyloksy)butyl-, 1 -(isobutoksykarbonyloksy)butyl-, 1 -(metoksykarbonyloksy)pentyl-, 1 -(etoksykarbonyloksy)pentyl-, 1 -(metoksy-karbonyloksy)heksyl- eller l-(etoksykarbonyloksy)heksylgruppe, enokso-dioksolenylmetylgruppe, f.eks. en (5-fenyl-2-okso-l,3-dioksolen-4-yl)metyl-, [5-(4-metylfenyl)-2-okso-1,3-dioksolen-4-yl]metyl-, [5-(4-metoksyfenyl)-2-okso-1,3-dioksolen-4-yl]metyl-, [5-(4-fluorfenyl)-2-okso-l,3-dioksolen-4-yl]metyl-, [5-(4-klorfenyl)-2-okso-1,3-dioksolen-4-yl]metyl-, (2-okso-1,3-dioksolen-4-yl)metyl-, (5-metyl-2-okso-1,3-dioksolen-4-yl)metyl-, (5-etyl-2-okso-1,3-dioksolen-4-yl)metyl-, (5-propyl-2-okso-1,3-dioksolen-4-yl)metyl-, (5-isopropyl-2-okso-1,3-dioksolen-4-yl)metyl- eller (5-butyl-2-okso-l,3-dioksolen-4-yl)metyl-gruppe; en "ftalidylgruppe" så som en ftalidyl-, dimetylftalidyl- eller dimetoksyftalidyl-gruppe; den ovennevnte "lavere alifatisk acylgruppe"; den ovennevnte "aromatisk acylgruppe"; et "halvester-saltradikal av ravsyre"; et "fosfatestersaltradikal"; et "esterdannende radikal så som aminosyre"; en karbamoylgruppe; en karbamoylgruppe substituert med 1 eller 2 lavere alkylgrupper; og en pivaloyloksymetyloksykarbonylgruppe, og fortrinnsvis en "karbonyloksyalkylgruppe".

Forbindelsen, saltet eller esteren som definert i (1), kan være i form av et hydrat ved å la forbindelsen henstå i luft, ved rekrystallisering, absorpsjon av vann eller adsorpsjon av vann, og slike hydrater er også innbefattet i den foreliggende oppfinnelse.

Følgende forkortelser er anvendt i Tabell 1.

Me: metylgruppe

MeO: metoksygruppe

Ph: fenylgruppe

Tabell 1 over, innbefatter eksemplifisert forbindelse nr. 19: 2-amino-2-metyl-4-{l-metyl-5-[4-(4-metylfenyl)butanoyl]pyrrol-2-yl}butan-l-ol, referanseforbindelse nr. 23: 2-amino-2-metyl-4-{1 -metyl-5-[4-(3,4-dimetylfenyl)butanoyl]pyrrol-2-yl}butan-1 - ol, og referanseforbindelse nr. 57: 2-amino-2-metyl-4-{l-metyl-5-[4-(3-metyl-4-metoksyfenyl)butanoyl]pyrrol-2-yl}butan-1 -ol.

I det tilfellet at det anvendes en aktiv ingrediens ifølge den foreliggende oppfinnelse i form av forbindelsen, saltet eller esteret som definert i (1), som det forannevnte terapeutiske eller profylaktiske middel, kan selve den aktive ingrediens, eller en blanding med en egnet farmakologisk akseptabel vehikkel eller et fortynningsmiddel og så videre, bli administrert oralt i form av for eksempel en tablett, kapsel, granulater, pulver eller sirup, eller parenteralt i form av en injeksjon eller stikkpille og så videre, og blir fortrinnsvis administrert oralt i form av en tablett eller kapsel.

Disse preparater kan fremstilles med vanlig kjente metoder ved å anvende et additiv, så som en vehikkel (eksempler på slik innbefatter sukkerderivater som laktose, sukrose, glukose, mannitol og sorbitol, stivelsesderivater som maisstivelse, potet-stivlese, a-stivelse og dekstrin, cellulosederivater som krystallinsk cellulose, organiske vehikler som pullulan, og uorganiske vehikler som lett silisiumsyreanhydrid, syntetisk aluminiumsilikat, kalsiumsilikat og magnesiummetasilikataluminat), et smøremiddel (eksempler på slikt innbefatter stearinsyre og stearinsyre-metallsalter som kalsium-stearat eller magnesiumstearat, talkum, kolloidalt silika, voks som bivoks og spermaseti, borsyre, adipinsyre, sulfater som natriumsulfat, glykol, fumarsyre, natrium-benzoat, DL-leucin, fettsyrenatriumsalter, laurylsulfater som natriumlaurylsulfat og magnesiumlaurylsulfat, siliciumsyrer som siliciumsyreanhydrid eller siliciumsyre-hydrid, og de forannevnte stivelsesderivativer), et bindemiddel (eksempler på slikt innbefatter hydroksypropylcellulose, hydroksypropylmetylcellulose, polyvinylpyrrolidon, macrogol og forbindelser tilsvarende de forannevnte vehikler), et desintegrerende middel (eksempler på slikt innbefatter cellulosederivativer som lav substituert hydroksypropylcellulose, karboksymetylcellulose, kalsiumkarboksymetyl-cellulose og indre tverrbundet natriumkarboksymetylcellulose, og kjemisk modifiserte stivelser og celluloser som karboksymetylstivelse, natriumkarboksymetylstivelse og tverrbundet polyvinylpyrrolidon), en stabilisator (eksempler på slik innbefatter para-oksybenzosyreestere som metyl-p-hydroksybenzoat og propyl-p-hydroksybenzoat, alkoholer som klorbutanol, benzylalkohol og fenyletylalkohol, fenoler som benz-alkoniumklorid, fenol og kresol, timerosal, eddiksyreanhydrid og sorbinsyre), eller et fortynningsmiddel.

Selv om den varierer avhengig av symptomer, alder og så videre, vil dosen med aktiv ingrediens i form av en aminoalkoholforbindelse til et voksent menneske, uansett om det skjer ved oral administrasjon eller intravenøs administrasjon, være fra 0,0001 mg/kg til 1,0 mg/kg, og fortrinnsvis fra 0,001 mg/kg/døgn til 0,1 mg/kg/døgn.

Når det gjelder oral administrasjon hvor antallet administrasjoner normalt er fra 1 til 3 ganger pr. dag til 1 gang pr. uke avhengig av det enkelte tilfelle, så vil det farmasøytiske preparat ifølge den foreliggende oppfinnelse, siden det har tilfredsstillende fysisk-kjemisk stabilitet, biologisk absorptivitet og farmakokinetikker (innbefattende halveringstid i blod), ha den fordel at det tillater at antall administrasjoner er lavere enn normalt, og antallet administrasjoner av preparatet er fra 1 gang pr. dag til 1 gang pr. uke, og fortrinnsvis fra 1 gang pr. dag til 1 gang pr. 3 dager.

Eksempler

I det følgende er det vist eksempler og testeksempler, og den foreliggende oppfinnelse er forklart mer detaljert, men rammen for den foreliggende oppfinnelse er ikke begrenset til disse.

Eksempel 1

(2R)-2-ammo-2-metyl-4-{l-metyl-5-[4-(4-metylfenyl)butanoyl]pyrrol-2-yl} butan-1 -ol-hydrogenklorid

Eksemplifisertforbindelse nr. 19

Kjemisk formel 16

(la) (2R)-1 -acetoksy-2-acetylamino-2-metyl-4-{ 1 -metyl-5-[4-(4-metylfenyl)-1 -(4-(4-metylfenyl)butanoyloksy)but-1 -enyl]pyrrol-2-yl}butan

Tionylklorid (9,0 ml, 123 mmol) og N,N-dimetylformamid (50 ul) ble tilsatt til en oppløsning av tionylklorid (9,0 ml, 123 mmol) og N,N-dimetylformamid (50 ul) og blandingen ble omrørt ved 80 °C i 2 timer. Etter at blandingen var avkjølt til romtemperatur ble løsningsmidlet dampet av under redusert trykk, og det ble oppnådd 5-(4-metylfenyl)smørsyreklorid. En oppløsning av 4-dimetylaminopyridin (15,2 g, 124 mmol) og 4-(4-metylfenyl)smørsyreklorid (12,2 g, 62,0 mmol) i toluen (50 ml) ble tilsatt til en løsning av (2R)-l-acetoksy-2-acetylamino-2-metyl-4-(l-metylpyrrol-2-yl)butan (5,00 g, 18,8 mmol) ble fremstilt i referanseeksempel 1 i toluen (150 ml), og blandingen ble omrørt ved 110 °C i 48 timer. Blandingens temperatur fikk komme tilbake til romtemperatur, og etylacetat og vann ble tilsatt til reaksjonsblandingen for å separere den. Den således oppnådde organiske fase ble skilt fra, vasket med vann og en mettet vannløsning av NaCl, og tørket over vannfritt natriumsulfat, og løsningsmidlet ble dampet av under redusert trykk. Residuet ble renset med silikagelkromatografi (etylacetatheksan, 3:2-2:1), og tittelforbindelsen ble oppnådd (5,15 g, utbytte: 47 %).

(lb) (2R)-2-amino-2-metyl-4-{l-metyl-5-[4-(4-metylfenyl)butanoyl]pyrrol-2-yl }butan-1 -ol-hydrogenklorid

(2R)-1 -acetoksy-2-acetylamino-2-metyl-4- {1 -metyl-5-[4-(4-metylfenyl)-1 -(4-(4-metylfenyl)butanoyloksy)but-l-enyl]pyrrol-2-yl}butan (5,15 g, 8,80 mmol) fremstilt i eksempel 1 (la) ble oppløst i en blanding av tetrahydrofuran (52 ml) og metanol (52 ml), og det ble tilsatt vann (52 ml) og litiumhydroksidmonohydrat (3,68 g, 87,7 mmol),

fulgt av omrøring av blandingen ved 50 °C i 4 timer. Etter avkjøling ble vann og metylenklorid tilsatt til reaksjonsblandingen for å separere den. Den således oppnådde organiske fase ble skilt fra, vasket med en mettet vannløsning av NaCl og tørket over vannfritt natriumsulfat, og løsningsmidlet ble dampet av under redusert trykk. Residuet ble renset ved kromatografi med basisk silikagel (NH-type) (metylenklorid: metahanol, 100:1) og det ble oppnådd (2R)-2-amino-2-metyl-4-{l-metyl-5-[4-(4-metylfenyl)-butanoyl]pyrrol-2-yl}butan-l-ol (2,51 g). En 4N løsning av saltsyre-dioksan (0,42 ml, 1,68 mmol) ble tilsatt til oppløsningen av det således oppnådde (2R)-2-amino-2-metyl-4-{l-metyl-5-[4-(4-metylfenyl)butanoyl]pyrrol-2-yl}butan-l-ol (600 mg, 1,80 mmol) i metanol (9 ml) under iskjøling, og blandingen ble omrørt i 10 minutter. Blandingen ble konsentrert under redusert trykk, etylacetat ble tilsatt og de utfelte krystaller ble samlet opp ved filtrering. Krystallene ble vasket med etylacetat og tørket under redusert trykk, hvorved tittelforbindelsen ble oppnådd (500 mg, utbytte: 86 %).

Smp: 165-166°C,

[<x]D-4,848 (c 1,00, MeOH),

<*>H NMR (CD3OD, 400 MHz): 5 7,06-7,05 (m, 4H,), 6,96 (d, 1H, J = 4,0 Hz), 6,02 (d, 1H, J = 4,0 Hz), 3,86 (s, 3H), 3,65 (d, 1H, J = 11,7 Hz), 3,55 (d, 1H, J = 11,7 Hz), 2,74 (t, 2H, J = 6,2 Hz), 2,72-2,65 (m, 2H), 2,61 (t, 2H, J = 7,7 Hz), 2,29 (s, 3H), 2,03 (ddd, 1H, J = 13,9, 9,5, 7,3 Hz), 1,94 (t, 1H, J = 6,6 Hz), 1,92-1,86 (m, 2H), 1,35 (s, 3H), IR vWs cm"<1>(KBr): 3345, 3019, 2946, 2919, 2900, 1645, 1499, 1481, 1462, 1381, 1362, 1174, 1067, 1043,770,

MS (FAB) m/z : 343 ((M+H)<+>, fritt legeme),

elementæranalyse (% for C2iH3oN202 HC10,5 H20),

beregnet: C : 65,01, H : 8,31 , N : 7,22,

funnet: C : 64,58, H : 8,44 , N : 7,26.

Eksempel 2 ( referanse)

(2R)-2-ammo-2-metyl-4-{l-metyl-5-[4-(3,4-dimetylfenyl)butanoyl]pyrrol-2-yl }butan-1 -ol-hydrogenklorid

Forbindelse nr. 23

Kjemisk formel 17

(2a) (2R)-1 -acetoksy-2-acetylarnino-2-metyl-4-{ 1 -metyl-5-[4-(3,4-dimetylfenyl)-1 -

(4-(3,4-dimetylfenyl)butanoyloksy)but-l-enyl]pyrrol-2-yl}butan

Reaksjonen ble utført på samme måte som i eksempel 1 (la) ved å anvende 4-(3,4-dimetylfenyl)smørsyre oppnådd i referanseeksempel 4 og (2R)-l-acetoksy-2-acetylamino-2-metyl-4-(l-metylpyrrol-2-yl)butan oppnådd i referanseeksempel 1 for å oppnå tittelforbindelsen (utbytte: 65 %).

(2b) (2R)-2-amino-2-metyl-4-{ 1 -metyl-5-[4-(3,4-dimetylfenyl)butanoyl]pyrrol-2-yl }butan-1 -ol-hydrogenklorid

Reaksjonen ble utført på samme måte som i eksempel 1 (lb) ved å anvende (2R)-l-acetoksy-2-acetylammo-2-metyl-4-{l-metyl-5-[4-(3,4-dimetylfenyl)-l-(4-(3,4-dimetylfenyl)butanoyloksy)but-l-enyl]pyrrol-2-yl}butan oppnådd i eksempel 2 (2a) hvorved tittelforbindelsen ble oppnådd (utbytte: 64 %).

<*>H NMR (CD30D, 400 MHz): 5 6,99 (d, 1H, J = 7,7 Hz), 6,96 (d, 1H, J = 4,0 Hz), 6,93 (s, 1H), 6,87 (d, 1H, J = 7,7 Hz), 6,02 (d, 1H, J = 4,0 Hz), 3,86 (s, 3H), 3,65 (d, 1H, J = 11,7 Hz), 3,55 (d, 1H, J = 11,7 Hz), 2,76-2,63 (m, 4H), 2,57 (t, 2H, J = 7,3 Hz), 2,21 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,07-2,01 (m, 1H), 1,93 (t, 1H, J = 7,3 Hz), 1,99-1,86 (m, 2H),1,35 (s, 3H),

IR Umaks cm"1 (KBr): 3354, 2947, 2898, 1645, 1502, 1480, 1380, 1354, 1174, 1066, 986,911,769,

MS (FAB) m/z: 357 ((M+H)<+>, fritt legeme),

elementæranalyse (% for C21H30N2O2HCI),

beregnet: C : 67,24, H : 8,46 , N : 7,13,

funnet: C : 67,09, H : 8,41 , N : 7,29.

Eksempel 11

(2R)-2-amino-2-metyl-4-{l-metyl-5-[4-(3-metyl-4-metoksyfenyl)butanoyl]-pyrrol-2-yl} butan-1 -ol-hydrogenklorid

Forbindelse nr. 57 ( referanse)

Kjemisk formel 26

(Ila) (2R)-l-acetoksy-2-acetylamino-2-metyl-4-{ l-metyl-5-[4-(3-metyl-4-metoksyfenyl)-1 -(4-(3-metyl-4-metoksyfenyl)butanoyloksy)but-1 -enyl]pyrrol-2-yl}butan

Reaksjonen ble utført på samme måte som i eksempel 1 (la) ved å anvende 4-(3-metyl-4-metoksyfenyl)smørsyre oppnådd i referanseeksempel 13 og (2R)-1-acetoksy-2-acetylamino-2-metyl-4-(l-metylpyrrol-2-yl)butan oppnådd i referanseeksempel 1, hvorved tittelforbindelsen ble oppnådd (utbytte: 37 %).

(1 lb) (2R)-2-amino-2-metyl-4-{ 1 -metyl-5-[4-(3-metyl-4-metoksyfenyl)butanoyl]-pyrrol-2-yl} butan-1 -ol-hydrogenklorid

Reaksjonen ble utført på samme måte som i eksempel 1 (lb) ved å anvende (2R)-1-acetoksy-2-acetylamino-2-metyl-4-{1-metyl-5-[4-(3-metyl-4-metoksyfenyl)-1-(4-(3 -metyl-4-metoksyfenyl)butanoyloksy)but-1 -enyl]pyrrol-2-yl }butan oppnådd i eksempel 11(1 la), hvorved tittelforbindelsen ble oppnådd (utbytte: 64 %).

<l>R NMR (DMSO, 400 MHz): 5 8,00 (br, 3H), 6,98-6,95 (m, 3H), 6,81 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 5,94 (d, 1H, J = 3,7 Hz), 5,53 (t, 1H, J = 5,1Hz), 3,80 (s, 3H), 3,77 (s, 3H), 3,52-3,42 (m, 2H), 2,72-2,63 (m, 4H), 2,60-2,48 (m, 2H), 2,11 (s, 3H), 1,89-1,78 (m, 4H), 1,23 (s, 3H),

IR Umaks cm"1 (KBr): 3365, 2999, 2837, 1630, 1505, 1486, 1463, 1375, 1253, 1228, 1133, 1067, 1032, 904,

MS (FAB) m/z: 373 ((M+H)<+>, fritt legeme),

elementæranalyse (% for C21H30N2O2HCI),

beregnet: C : 64,61, H : 8,13 , N : 6,85,

funnet: C : 63,78, H : 8,16 , N : 6,69.

Referanseeksempel 1

(2R)-1 -acetoksy-2-acetylamino-2-metyl-4-( 1 -metylpyrrol-2-yl)butan

(la) (2R)-2-t-butoksykarbonylamino-3 -n-heksanoyloksy-2-metyl-1 -propanol

2-t-butoksykarbonylamino-2-metylpropan-l,3-diol (20,0 g, 97,4 mmol) ble suspendert i isopropyleter (200 ml), og det ble tilsatt 16,3 ml (0,100 mol) vinyl-heksanoat og lipase [immobilisert lipase fra Pseudomonas sp., produsert av TOYOBO Co., Inc., 0,67 U/mg] (0,8 g) fulgt av omrøring av blandingen ved romtemperatur i 2 timer. Etter at reaksjonsblandingen var filtrert ble filtratet dampet inn under redusert trykk. Residuet ble renset med kolonnekromatografi over silikagel (heksan: etylacetat 10:1-2:1), hvorved tittelforbindelsen ble oppnådd (25,0 g, utbytte: 85 %).

Det således oppnådde (2R)-2-t-butoksykarbonylamino-3-n-heksanoyloksy-2-metyl-1-propanol ble analysert med optisk aktiv HPLC-kolonne for analyse

["ChiralCel OF" (0,46 cm KS 25 cm), produsert av Daicel Chemical Industries, elueringsmiddel heksan:2-propanol, 70:30, strømningshastighet 0,5 ml/min] og optisk renhet (85 % ee) ble bestemt. Retensjonstiden for 2S-formen var 8,2 minutter og retensjonstiden for 2R-formen var 10,5 minutter.

[<x]D-8,5 (cl,86, CHC13),

<l>R NMR (CDCI3, 400 MHz): 5 4,86 (s, 1H), 4,25 (d, 1H, J = 11,2 Hz), 4,19 (d, 1H, J = 11,2 Hz), 3,86 (br s, 1H), 3,70-3,55(m, 2H), 2,36 (t, 2H, J = 7,4 Hz), 1,44 (s, 9H), 1,40-1,30 (m, 4H), 1,25 (s, 3H), 0,90 (t, 3H, J = 7,0 Hz),

IR Umaks cm"<1>(Liquid Film): 3415, 3380, 2961, 2935, 2874, 1721, 1505, 1458, 1392, 1368, 1293, 1248, 1168, 1076,

MS (FAB) m/z: 304 ((M+H)<+>).

(lb) (2S)-2-t-butoksykarbonylamino-3 -n-heksanoyloksy-2-metyl-1 -propanal

Molekylsikt 4A (220 g) og pyridinklorkromat (43,6 g, 0,202 mol) ble tilsatt til en oppløsning av (2R)-2-t-butoksykarbonylamino-3-n-heksanoyloksy-2-metyl-l-propanol (30,7 g, 0,101 mol) oppnådd i referanseeksempel 1 (la) i metylenklorid (600 ml) under iskjøling, og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 3 timer. Det ble tilsatt eter til reaksjonsblandingen, og blandingen ble filtrert og filtratet dampet inn under redusert trykk. Residuet ble renset med silikagelkromatografi (heksan: etylacetat 10:1-5:1), hvorved tittelforbindelsen ble oppnådd (28,8 g, utbytte: 95 %).

<l>R NMR (CDCI3, 400 MHz): 5 9,45 (s, 1H), 5,26 (br s, 1H), 4,44 (d, 1H, J = 11,2 Hz), 4,32 (d, 1H, J = 11,2 Hz), 2,32 (t, 2H, J = 7,46 Hz), 1,70-1,55 (m, 2H), 1,45 (s, 9H), 1,38 (s, 3H), 1,40-1,25 (m, 4H), 0,90 (t, 3H, J = 7,0 Hz),

IRUmakscm"<1>(Liquid Film): 3367, 2961, 2935, 2874, 1742, 1707, 1509, 1458, 1392, 1369, 1290, 1274, 1254, 1166, 1100, 1078,

MS (FAB) m/z: 302 ((M+H)<+>).

(1 c) (1 -metylpyrrol-2-yl)metyltrifenylfosfoniumj odid

En blanding av vannløsning med 35 % formaldehyd (20,8 ml, 264 mmol) og dimetylaminhydrogenklorid (22,7 g, 278 mmol) ble tilsatt til 1-metylpyrrol (21,4 g, 264 mmol) under iskjøling og omrøring i løpet av 1 time og 30 minutter, og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 6 timer. Det ble tilsatt en 10 % vannløsning av natriumhydroksid (150 ml) og eter til reaksjonsblandingen for å separere den. Den således oppnådde organiske fase ble skilt fra, vasket med en mettet vannløsning av NaCl og tørket over vannfritt natriumsulfat. Etter filtrering ble løsningsmidlet dampet av under redusert trykk og residuet ble renset med silikagelkromatografi (metylenklorid: metanol 10:1), og det ble oppnådd 2-(N,N-dimetylaminometyl)-l-metylpyrrole (31.5 g, utbytte: 86 %). Metyljodid (16,2 ml, 260 mmol) ble tilsatt til en oppløsning av 2-(N,N-dimetylaminometyl)-l-metylpyrrol (30,0 g, 217 mmol) i etanol (220 ml) under iskjøling, og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Etylacetat (220 ml) ble tilsatt til reaksjonsblandingen, de utfelte krystaller ble samlet opp ved filtrering, vasket med etylacetat og tørket, og det ble oppnådd (l-metylpyrrol-2-yl)metyl-trimetylammoniumjodid (55,3 g, utbytte: 91 %).

(l-metylpyrrol-2-yl)metyltrimetylammoniumjodid (55,3 g, 198 mmol) ble suspendert i acetonitril (400 ml) og trifenylfosfin (62,2 g, 237 mmol) ble tilsatt, fulgt av omrøring av blandingen ved 80 °C i 10 timer. Etter avkjøling ble blandingen konsentrert til ca. 1/2 under redusert trykk, etylacetat (200 ml) ble tilsatt og de utfelte krystaller ble samlet opp ved filtrering. Det krystallinske stoff ble vasket med etylacetat og tørket under redusert trykk, hvorved tittelforbindelsen ble oppnådd (77,1 g, utbytte: 81 %).

(Id) (2R)-2-t-butoksykarbonylamino-1 -n-heksanoyloksy-2-metyl-4-( 1 -metylpyrrol-2-yl)-3-buten

(l-metylpyrrol-2-yl)metyltrifenylfosfoniumjodid (58,0 g, 120 mmol) oppnådd i referanseeksempel 1 (lc) ble suspendert i tetrahydrofuran (300 ml) og i løpet av 30 minutter ble det tilsatt en oppløsning av kalium t-butoksid (13,5 g, 120 mmol) i tetrahydrofuran (180 ml) under iskjøling og med omrøring, fulgt av videre omrøring av blandingen under iskjøling i 80 minutter. En oppløsning av (2S)-2-t-butoksykarbonyl-amino-3-n-heksanoyloksy-2-metyl-l-propanal (30,3 g, 101 mmol) oppnådd i referanseeksempel 1 (lb) i tetrahydrofuran (120 ml) ble tilsatt til reaksjonsblandingen i løpet av 30 minutter, og blandingen ble omrørt under iskjøling i 30 minutter. En mettet vannløsning av ammoniumklorid ble tilsatt til reaksjonsblandingen for å stoppe reaksjonen, og temperaturen i væsken fikk returnere til romtemperatur. Blandingen ble konsentrert under redusert trykk, og vann og etylacetat ble tilsatt for å separere den. Den således oppnådde organiske fase ble skilt fra, vasket med vann og en mettet vann-løsning av NaCl, og så tørket over vannfritt natriumsulfat. Etter filtrering ble løsnings-midlet dampet av under redusert trykk og residuet ble renset med silikagelkromatografi (heksan:etylacetat 9:1), hvorved tittelforbindelsen ble oppnådd (37,0 g, utbytte: 97 %).

<*>H NMR (CDC13, 400 MHz): 5 6,60 (t, 1H, J = 2,3 Hz), 6,57 (t, 1H, J = 2,3 Hz), 6,38 (d, 1H, J = 16,1 Hz), 6,30-6,26 (m, 2H), 6,27 (d, 1H, J = 12,5 Hz), 6,11 (t, 1H, J = 3,2Hz), 6,08 (t, 1H, J = 3,2Hz), 5,99 (d, 1H, J =16,1 Hz), 5,58 (d, 1H, J = 12,5 Hz) 5,04 (br s, 1H), 4,81 (br s, 1H), 4,34-4,16 (m, 4H), 3,60 (s, 3H), 3,54 (s, 3H), 2,36-2,30 (m, 4H), 1,67-1,22 (m, 36H), 0,92-0,87 (s, 6H),

MS (EI) m/z: 280(M<+>), 249, 224, 193 (base), 164, 149, 132, 108, 94, 57.

(1 e) (4R)-4-metyl-4- [2-( 1 -metylpyrrol-2-yl)etenyl] -1,3 -oksazolidin-2-on

(2R)-2-t-butoksykarbonylamino-1 -n-heksanoyloksy-2-metyl-4-( 1 -metylpyrrol-2-yl)-3-buten (37,0 g, 97,8 mmol) oppnådd i referanseeksempel 1 (ld) ble oppløst i en blanding av tetrahydrofuran (100 ml) og metanol (100 ml), og det ble tilsatt en 2N vannløsning av natriumhydroksid (100 ml), fulgt av omrøring av blandingen ved romtemperatur i 1 time. Vann og metylenklorid ble tilsatt til reaksjonsblandingen for å separere den. Den således oppnådde organiske fase ble skilt fra, vasket med en mettet vannløsning av NaCl og tørket over vannfritt natriumsulfat. Etter filtrering ble løsningsmidlet dampet av under redusert trykk, og det ble oppnådd et urent produkt (28,8 g, utbytte: kvantitativt). En oppløsning av kalium-t-butoksid (13,2 g, 117 mmol) i tetrahydrofuran (80 ml) ble tilsatt til en oppløsning av det urene produkt i tetrahydrofuran (329 ml) under iskjøling i løpet av 10 minutter, og blandingen ble omrørt ved den samme temperatur i 20 minutter. Det ble tilsatt eddiksyre (6,7 ml, 117 mmol) til reaksjonsblandingen for å nøytralisere denne, og blandingen ble konsentrert under redusert trykk. Vann og etylacetat ble tilsatt for å separere den. Den således oppnådde organiske fase ble skilt fra, vasket med en mettet vannløsning av NaCl og tørket over vannfritt natriumsulfat. Etter filtrering ble løsningsmidlet dampet av under redusert trykk og residuet ble renset med silikagelkromatografi (heksan:etylacetat 1:1-1:2), hvorved tittelforbindelsen ble oppnådd (20,3 g, utbytte: kvantitativt).

<l>R NMR (CDC13, 400 MHz): 5 6,67 (t, 1H, J = 2,1 Hz), 6,62 (t, 1H, J = 1,5 Hz), 6,48 (d, 1H, J = 15,7 Hz), 6,36 (dd, 1H, J =3,7, 1,5Hz), 6,31 (d, 1H, J = 12,2 Hz), 6,14-6,10 (m, 2H), 6,07 (br d, 1H, J = 3,6Hz), 5,99 (d, 1H, J =15,7 Hz), 5,65 (d, 1H, J = 12,2 Hz), 5,46 (br s, 1H), 5,11 (br s, 1H), 4,31 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 4,22 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 4,17 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 4,16 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 3,62 (s, 3H), 3,55 (s, 3H), 1,59 (s, 3H), 1,57 (s, 3H),

MS (EI) m/z: 206 (M<+>, base), 191, 176, 161, 147, 132, 120, 106, 94, 81, 77.

(1 f) (4R)-4-metyl-4-[2-( 1 -metylpyrrol-2-yl)etyl-1,3-oksazolidin-2-on

10 % palladium-karbon (2,02 g, 50 % vannholdig) ble suspendert i metanol (40 ml) og det ble tilsatt til en oppløsning av (4R)-4-metyl-4-[2-(l-metylpyrrol-2-yl)etenyl]-l,3-oksazolidin-2-on (20,3 g, 97,8 mmol) oppnådd i referanseeksempel 1 (le) i metanol (360 ml), fulgt av omrøring av blandingen under hydrogenatmosfære ved romtemperatur i 60 minutter. Etter at palladium-karbon i reaksjonsblandingen var "Celite"-filtrert, ble filtratet dampet inn under redusert trykk. Residuet ble renset med silikagelkromatografi (heksan: etylacetat 3:2), hvorved tittelforbindelsen ble oppnådd (18,8 g, utbytte 88 %).

Det således oppnådde (4R)-4-metyl-4-[2-(l-metylpyrrol-2-yl)etyl]-l,3-oksazolidin-2-on ble analysert med en optisk aktiv HPLC-kolonne beregnet for analyse ["ChiralCel OJ" (0,46 cm KS 25 cm), produsert av Daicel Chemical Industries, elueringsmiddel n-heksan:2-propanol, 70:30, strømningshastighet 1,0 ml/min] for å bestemme optisk renhet (75 % ee). Retensjonstiden for 4S-formen var 12,5 minutter og retensjonstiden for 4R-formen var 15,5 minutter.

<*>H NMR (CDC13, 400 MHz): 5 6,58 (t, 1H, J = 2,4 Hz), 6,05 (dd, 1H, J = 3,2 Hz, 2,4 Hz), 5,88 (br d, 1H, J = 3,2 Hz), 5,15 (br s, 1H), 4,14 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 4,07 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 2,70-2,58 (m, 2H), 2,00-1,87 (m, 2H), 1,42 (s, 3H),

IRVW* cm"<1>(KBr): 3289, 3103, 2977, 2938, 1759, 1713, 1495, 1397, 1381, 1309, 1281, 1231, 1032, 945, 928, 776, 718, 706, 656,

MS (EI) m/z: 208 (M<+>), 108 (base), 94, 81, 56, 42.

(1 g) (2R)-2-amino-2-metyl-4-( 1 -metylpyrrol-2-yl)butan-1 -ol-1 /2D-(-)-tartrat

(4R)-4-metyl-4-[2-(l-metylpyrrol-2-yl)etyl]-l,3-oksazolidin-2-on (17,9 g, 86,0 mmol) oppnådd i referanseeksempel 1 (lf) ble oppløst i en blandinge av tetrahydrofuran (250 ml) og metanol (125 ml), og det ble tilsatt en 5N vannløsning av kaliumhydroksid (125 ml), fulgt av oppvarming under tilbakeløp av blandingen i 4 døgn. Etter avkjøling ble vann og metylenklorid tilsatt til reaksjonsblandingen for å separere den. Den således oppnådd organiske fase ble skilt fra og tørket over vannfritt natriumsulfat. Etter filtrering ble løsningsmidlet dampet av under redusert trykk og residuet oppløst i etanol (260 ml). D-(-)-vinsyre (6,45 g, 43,0 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i 2 timer. De utfelte krystaller ble samlet opp ved filtrering, og det ble oppnådd et urent krystallinsk stoff (20,7 g). Det urene krystallinske stoff (18,7

g) ble rekrystallisert fra en blanding av etanol (370 ml) og vann (37 ml), og det således oppnådde krystallinske stoff ble igjen rekrystallisert fra en blanding av etanol (300 ml)

og vann (30 ml). Videre ble det oppnådde krystallinske stoff igjen rekrystallisert fra en blanding av etanol (240 ml) og vann (24 ml), hvorved tittelforbindelsen ble oppnådd

(10,5 g, utbytte 53 %) som et fargeløst, skjellaktig krystallinsk stoff.

Den optiske renhet av den oppnådde tittelforbindelse ble bestemt som vist nedenfor.

Det oppnådde (2R)-2-amino-2-metyl-4-( 1 -metylpyrrol-2-yl)butan-1 -ol-1 /2-D-(-)-tartrat (41,4 mg, 0,16 mmol) ble suspendert i metylenklorid (1,6 ml) og di-t-butyl dikarbonat (0,176 g, 0,810 mmol), trietylamin (0,225 ml, 1,62 mmol) og 4-dimetylaminopyridin (2,0 mg, 0,016 mmol), fulgt av omrøring av blandingen ved romtemperatur i 30 minutter. Løsningsmidlet ble dampet av under redusert trykk og residuet ble renset med silikagelkromatografi (heksan: etylacetat 3:2-2:1), hvorved det ble oppnådd (4R)-4-metyl-4-[2-(l-metylpyrrol-2-yl)etyl]-l,3-oksazolidin-2-on (17,7 mg, utbytte: 53 %).

Det således oppnådde (4R)-4-metyl-4-[2-(l-metylpyrrol-2-yl)etyl]-l,3-oksazolidin-2-on ble analysert med en optisk aktiv HPLC-kolonne beregnet for analyse

["ChiralCel OJ" (0,46 cm KS 25 cm), produsert av Daicel Chemical Industries, elueringsmiddel n-heksan:2-propanol, 70:30, strømningshastighet 1,0 ml/min] slik som i referanseeksempel (1 f) for å bestemme den optiske renhet (99,7 % ee).

Smp: 198-199°C,

[<x]d-13.3 (cl.00, H20),

<*>H NMR (CD3OD, 400 MHz): 5 6,54 (t, 1H, J = 2,3 Hz), 5,91 (dd, 1H, J = 3,7 Hz, 2,3 Hz), 5,82 (br d, 1H, J = 3,7 Hz), 4,32 (s, 1H), 3,61 (d, 1H, J = 11,3 Hz), 3,55 (s, 3H), 3,54 (d, 1H, J = 11,3 Hz), 2,69-2,57 (m, 2H), 1,97 (ddd, 1H, J = 13,8, 9,4, 7,6 Hz), 1,88 (ddd, 1H, J = 13,8, 11,0, 6,3 Hz), 1,28 (s, 3H),

IR Umaks cm"<1>(KBr): 3480, 3430, 2926, 2634, 2545, 1586, 1516, 1389, 1359, 1309, 1291, 1105, 1039,710, 690,

MS (FAB) m/z : 183 ((M+H)<+>, fritt legeme),

elementæranalyse ( % for CioHig^O 1/2C4H606),

beregnet: C : 56,01, H : 8,23 , N : 10,89,

funnet: C : 55,81, H : 8,22 , N : 10,89.

(1 h) (2R)-1 -acetoksy-2-acetylamino-2-metyl-4-( 1 -metylpyrrol-2-yl)butan

(2R)-2-amino-2-metyl-4-( 1 -metylpyrrol-2-yl)butan-1 -ol-1 /2-D-(-)-tartrat (3,98 g, 15,5 mmol) oppnådd i referanseeksempel 1 (lg) ble suspendert i en blanding av metylenklorid (50 ml) og vann (12,5 ml), og det ble tilsatt en vannløsning av natriumhydroksid (3,20 g av 97 % natriumhydroksid ble oppløst i 12,5 ml vann), fulgt av om-røring av blandingen ved romtemperatur i 20 minutter. Metylenklorid ble tilsatt til

reaksjonsblandingen for å separere den. Den således oppnådde organiske fase ble skilt fra og tørket over vannfritt natriumsulfat. Etter filtrering ble løsningsmidlet dampet av under redusert trykk og residuet ble oppløst i metylenklorid (78 ml). Trietylamin (21,5 ml, 155 mmol), eddiksyreanhydrid (7,30 ml, 77,4 mmol) og 4-dimetylaminopyrridin (0,189 g, 1,55 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1 time. Metanol ble tilsatt for å stoppe reaksjonen og løsningsmidlet ble dampet av under redusert trykk. Etylacetat og vann ble tilsatt til residuet for å separere det. Den således oppnådde organiske fase ble skilt fra og vasket med vann, en mettet vannløsning av natriumhydrogenkarbonat og en mettet vannløsning av NaCl, og så tørket over vannfritt natriumsulfat. Etter filtrering ble løsningsmidlet dampet av under redusert trykk og residuet ble renset med silikagelkromatografi (etylacetat), hvorved tittelforbindelsen ble oppnådd (4,23 g, utbytte: kvantitativt).

<*>H NMR (CDCI3, 400 MHz): 5 6,54 (t, 1H, J = 2,4 Hz), 6,04 (t, 1H, J = 2,4 Hz), 5,88 (d, 1H, J = 2,4 Hz), 5,39 (br s, 1H), 4,33 (d, 1H, J = 11,2 Hz), 4,20 (d, 1H, J = 11,2 Hz), 2,60-2,51 (m, 2H), 2,26-2,19 (m, 1H), 2,09 (s, 3H), 1,97-1,89 (m, 4H), 1,38 (s, 3H),

MS (FAB) m/z: 267 ((M+H)<+>), 266 (M<+>-).

Referanseeksempel 4

4-(3,4-dimetylfenyl)smørsyre

[2-(l,3-dioksolan-2-yl)etyl]trifenylfosfoniiimbromid (99,2 g, 224 mmol) ble suspendert i tetrahydrofuran (200 ml), og det ble tilsatt en oppløsning av kalium t-butoksid (25,1 g, 224 mmol) i tetrahydrofuran (200 ml) under nitrogenatmosfære i løpet av 30 minutter, fulgt av omrøring av blandingen under iskjøling i 30 minutter. En oppløsning av 3,4-dimetylbenzaldehyd (20,2 g, 151 mmol) i tetrahydrofuran (100 ml) ble tilsatt i løpet av 20 minutter og blandingen ble omrørt under iskjøling i 20 minutter. En mettet vannløsning av ammoniumklorid og etylacetat ble tilsatt til reaksjonsblandingen for å separere den. Den således oppnådde organiske fase ble skilt fra, vasket med vann og en mettet vannløsning av NaCl, og så tørket over vannfritt magnesimsulfat. Etter filtrering ble løsningsmidlet dampet av under redusert trykk og residuet ble renset med silikagelkromatografi (heksan:etylacetat 15:1-10), hvorved det ble oppnådd et urent produkt (29,9 g). 10 % palladium-karbon (3,01 g, 50 % vannholdig) ble tilsatt til en oppløsning av det urene produkt (29,9 g) i metanol (300 ml), og blandingen ble omrørt ved romtemperatur under hydrogenatmosfære i 2 timer. Etter at palladium-karbon i reaksjonsblandingen var "C elite "-filtrert, ble filtratet dampet inn under redusert trykk. Residuet ble renset med silikagelkromatografi (heksan: etylacetat 10:1), hvorved det ble oppnådd [l-(l,3-dioksolan-2-yl)-3-(3,4-dimetylfenyl)propan (29,6 g, utbytte: 98 %). Vann (250 ml) ble tilsatt til en oppløsning av det oppnådde [1-(l,3-dioksolan-2-yl)-3-(3,4-dimetylfenyl)]propan (29,6 g, 134,4 mmol) i tetrahydrofuran (250 ml) og det ble tilsatt OKSON (248 g, 403 mmol) under omrøring ved romtemperatur i løpet av 20 minutter, fulgt av omrøring av blandingen ved romtemperatur i 18 timer. Uløselig stoff ble skilt fra ved filtrering og en IN vannløsning av natriumhydroksid ble tilsatt for å bringe pH til 11. Eter ble tilsatt for å separere blandingen. En IN vandig saltsyreløsning ble tilsatt til en vannfase for å bringe pH til 2, og etylacetat ble tilsatt for å separere den. Den således oppnådde organiske fase ble skilt fra, vasket med vann og en mettet vannløsning av NaCl, og så tørket over vannfritt magnesiumsulfat. Etter filtrering ble løsningsmidlet dampet av under redusert trykk, hvorved tittelforbindelsen ble oppnådd (26,1 g, utbytte 98 %).

Referanseeksempel 13

4-(3 -metyl-4-metoksyfenyl)smørsyre

[2-(l,3-dioksolan-2-yl)etyl]trifenylfosfoniumbromid (28,2 g, 63,8 mmol) ble suspendert i tetrahydrofuran (100 ml) og en oppløsning kalium-t-butoksid (7,15 g, 63,8

mmol) i tetrahydrofuran (100 ml) ble tilsatt under nitrogenatmosfære i løpet av 30 minutter, fulgt av omrøring av blandingen under iskjøling i 30 minutter. En oppløsning av 4-metoksy-3-metylbenzaldehyd (8,2 ml, 60,6 mmol) i tetrahydrofuran (100 ml) ble tilsatt i løpet av 20 minutter og blandingen ble omrørt under iskjøling i 20 minutter. En mettet vannløsning av ammoiumklorid ble tilsatt til reaksjonsblandingen for å stoppe reaksjonen, og etylacetat ble tilsatt for å separere den. Den således oppnådde organiske fase ble skilt fra, vasket med vann og en mettet vannløsning av NaCl, og tørket over vannfritt magnesiumsulfat. Etter filtrering ble løsningsmidlet dampet av under redusert trykk og residuet ble renset med silikagelkromatografi (heksan:etylacetat 15:1-10:1), hvorved det ble oppnådd et urent produkt (14,9 g). 10 % palladium-karbon (5,99 g, 50 % fuktighet) ble tilsatt til en oppløsning av det oppnådde urene produkt (14,9 g) i etanol (100 ml), og blandingen ble omrørt ved romtemperatur under hydrogenatmosfære i 2 timer. Etter at palladium-karbon i reaksjonsblandingen var "Celite"-filtrert, ble filtratet dampet inn under redusert trykk. Residuet ble renset med silikagelkromatografi (heksan:etylacetat, 10:1), hvorved det ble oppnådd [l-(l,3-dioksolan-2-yl)-3-(4-metoksy-3-metylfenyl)]propan (12,8 g, utbytte: 85 %). En 3N vandig saltsyreløsning ble tilsatt dråpevis til en oppløsning av det oppnådde [l-(l,3-dioksolan-2-yl)-3-(4-metoksy-3-metylfenyl)]propan (12,8 g, 54,0 mmol) i TF (200 ml) og blandingen ble omrørt i 2 timer. Vann (400 ml) og etylacetat (300 ml) ble tilsatt til reaksjonsblandingen for å separere den. Den således oppnådde organiske fase ble skilt fra, vasket med en mettet vannløsning av NaCl, og så tørket over vannfritt magnesiumsulfat. Etter filtrering ble løsningsmidlet dampet av under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd 4-(3-metyl-4-metoksyfenyl)butanaldehyd (8,42 g, 81 %). En vannløsning (50 ml) av sulfaminsyre (7,8 g, 0,08 mol) og en vannløsning (50 ml) av natriumkloritt (9,2 g, 0,10 mol) ble tilsatt til en oppløsning av 4-(3-metyl-4-metoksyfenyl)butan-aldehyd (8,42 g, 43,8 mmol) i dioksan (100 ml) under iskjøling, og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1 time. Etyleter (200 ml) ble tilsatt til reaksjonsblandingen for å separere den. Etter at pH i vannfasen var brakt til 3 til 4 med IN saltsyre, ble etylacetat tilsatt for å separere blandingen. Den således oppnådde organiske fase ble skilt fra, vasket med en mettet vannløsning av NaCl og tørket over vannfritt magnesiumsulfat. Etter filtrering ble løsningsmidlet dampet av under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd 4-(3-metyl-4-metoksyfenyl)smørsyre (5,38 g, utbytte: 60 %).

Testeksempler

Testeksempel 1

Måling av lymfocytt-tall i periferblod hos rotter

(1) LEW-rotter (hannrotter, 5 uker gamle, Japan Charles River) ble anvendt i grupper på 5 dyr pr. gruppe.

(2) Administrasjon av forbindelser

Forbindelsene ble suspendert i 1 % tragakantvæske (løsningsmiddel). De suspenderte forbindelser ble administrert oralt til rottene ved å anvende en gastrisk slange i en dose på 5 ml pr. kg kroppsvekt. Videre ble løsningsmiddel administrert i stedet for de suspenderte forbindelser til en normal kontrollgruppe.

(3) Måling av lymfocytt-tall i periferblod

Blodprøver ble samlet opp fra nedre vena cava under eterbedøvelse 3 timer etter administrasjon av løsningsmidlet eller de suspenderte forbindelser, og deretter overført til reagensrør som inneholdt EDTA.

De absolutte lymfocytt-tall ble målt for de oppsamlede blodprøver ved å anvende en hematologisk testinnretning. Lymfocytt-tall som gir senket aktivitet av test-forbindelsene ble beregnet som en relativ verdi (%) basert på en verdi lik 100 % for lymfocytt-tallet hos den normale kontrollgruppe.

Forbindelsene ifølge den foreliggende oppfinnelse viser overlegen aktivitet.

Sammenligningsforbindelse 1 er en forbindelse beskrevet i japansk patent-søknad (Kokai) nr. 2002-167382 (eksemplifisert forbindelse nr. 1-1344, eksempel 19), mens sammenligningsforbindelse 2 er en optisk isomer av en forbindelse beskrevet i japansk patentsøknad (Kokai) nr. 2003-267950 (= EP 1 471 054 Al) (eksemplifisert forbindelse nr. 1-1082).

Kjemisk formel 31

Måling av ID50for lymfocytt-tall i periferblod hos rotte (mg/kg).

Inhiberingsgrad for hver dose i gruppen som hadde fått dosert forbindelse ble beregnet i henhold til ligningen nedenfor.

Inhiberingsgrad (%) = (1-(lymfocytt-tall hos gruppe som hadde fått dosert forbindelse/lymfocytt-tall hos gruppe som hadde fått dosert løsningsmiddel)) x 100. Den dose av forbindelsen som gir en verdi på 50 % for inhiberingsgraden ble beregnet som ID50-verdien.

Testekesempel 2

Farmakokinetikk hos rotte (dose: 1 mg/kg)

(1) LEWIS-rotter (hannrotter, 6 uker gamle, Japan Charles River) ble anvendt etter akklimatisering i 1 uke. Det ble anvendt 1-3 rotter for hver forbindelse.

(2) Administrasjon av forbindelser

Forbindelsene ble oppløst i en fysiologisk saltvannløsning som inneholdt 4 %

(vekt/volum) av sulfobutyleter-P-syklodekstrin. Rottene fikk administrert de oppløste forbindelser direkte i magesekken i en dose på 2 ml pr. kg kroppsvekt ved å anvende en gastrisk metallslange.

(3) Måling av konsentrasjoner av forbindelse i blod

Blodprøver ble samlet opp med 0,5 ml/dyr/oppsamling fra jugularvenen ved å anvende heparin som antikoagulant under eterbedøvelse ved forutbestemte tider etter administreringen av forbindelsene. Blodprøvene ble etter oppsamling behandlet umiddelbart med metanol, og de ble lagret fryst inntil tidspunktet for gjennomføring av målinger. Etter behandling av de resulterende blodprøver med fastfase-ekstrahering, ble konsentrasjoner av forbindelser i blod målt med høyoppløselig væskekromatograf (HPLC)-kvadropolmassespektrometer. Forskjellige farmakokinetiske parametere ble deretter beregnet fra de resulterende blodkonsentrasjoner ved å anvende programvare for farmakokinetiske analyser ("Winnolin Professional").

På basis av disse testresultater ble det fastslått at preparatet ifølge den foreliggende oppfinnelse demonstrerer tilfredsstillende farmakokinetiske egenskaper.

Kjemisk formel 32

Claims (5)

1. Forbindelse med formel:

som er (2R) -2-amino-2-metyl-4- {l-metyl-5- [4- (4-metylfenyl) butanoyl] pyrrol-2-yl} butan-1-ol, et farmakologisk akseptabelt salt derav eller en farmakologisk akseptabel ester derav, i et farmasøytisk preparat for anvendelse som et medikament.

2. Farmasøytisk preparat inneholdende en forbindelse, salt eller ester som definert i krav 1, for anvendelse ved undertrykking av avstøtningsreaksjoner ved hudtransplantssjoner eller organ transplantasjoner.

3. Farmasøytisk preparat inneholdende en forbindelse, salt eller ester som definert i krav 1, for anvendelse i profylaksen eller behandlingen av autoimmun sykdom.

4. Farmasøytisk preparat for anvendelse ifølge krav 3, hvor de autoimmune sykdommene er en eller flere typer valgt fra gruppen bestående av reumatoid artritt, psoriasis, atopisk dermatitt, multippel sklerose, ulcerøs kolitt og Crohns sykdom.

5. Farmasøytisk preparat for anvendelse ifølge et hvilket som helst av kravene 2 til 4, hvor preparatet er for anvendelse ved oral administrasjon til voksne mennesker i en dose av den aktive ingrediens fra 0,0001 mg/kg/døgn til 1 mg/kg/døgn.