NO166038B - Fremgangsmaate til fremstilling av carbapenemderivater. - Google Patents

Fremgangsmaate til fremstilling av carbapenemderivater. Download PDF

Info

Publication number
NO166038B
NO166038B NO840865A NO840865A NO166038B NO 166038 B NO166038 B NO 166038B NO 840865 A NO840865 A NO 840865A NO 840865 A NO840865 A NO 840865A NO 166038 B NO166038 B NO 166038B
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
pyridinium
mmol
carboxylate
hydroxyethyl
azabicyclo
Prior art date
Application number
NO840865A
Other languages
English (en)
Other versions
NO840865L (no
NO166038C (no
Inventor
Pierre Dextraze
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Publication of NO840865L publication Critical patent/NO840865L/no
Priority to NO902554A priority Critical patent/NO171271C/no
Publication of NO166038B publication Critical patent/NO166038B/no
Publication of NO166038C publication Critical patent/NO166038C/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D477/00—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/06—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom containing only hydrogen and carbon atoms in addition to the ring nitrogen atom
    • C07D213/16—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom containing only hydrogen and carbon atoms in addition to the ring nitrogen atom containing only one pyridine ring
    • C07D213/20—Quaternary compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/28—Radicals substituted by singly-bound oxygen or sulphur atoms
    • C07D213/30—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/63—One oxygen atom
    • C07D213/65—One oxygen atom attached in position 3 or 5
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/70—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/73—Unsubstituted amino or imino radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/66—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D233/84—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/08—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms
    • C07D295/084—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms with the ring nitrogen atoms and the oxygen or sulfur atoms attached to the same carbon chain, which is not interrupted by carbocyclic rings
    • C07D295/088—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms with the ring nitrogen atoms and the oxygen or sulfur atoms attached to the same carbon chain, which is not interrupted by carbocyclic rings to an acyclic saturated chain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D477/00—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring
    • C07D477/02—Preparation
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)

Description

Foreliggende oppfinnelse angår en fremgangsmåte for fremstilling av karbapenem-derivater med formelen
der
R<8> er hydrogen,
R<1> er 1-(R)-hydroksyetyl,
A er etylen som eventuelt er substituert med C1_4-alkylf eller cykloheks-1,2-ylen,
R<14> er et kvaternisert pyridin-, imidazolin-, N-metylmorfolin, N-metyltiomorfolin-, N-metyltiomorfolin-s-oksyd-eller 1,4-dimetylpiperazingruppe som eventuelt er substituert med en eller flere grupper valgt blant C1_3-alkyl, hydroksy-C1_3-alkyltio, Ci_3~alkyloksy og amino og er bundet til A via det kvaternære nitrogenatom, og
R<2> er hydrogen, en anionisk blanding eller en konvensjonell lett avspaltbar karboksylbeskyttende gruppe under den forutsetning at det, når R<2> er hydrogen eller en beskyttende gruppe, også foreligger et motanion, eller
et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
De ifølge oppfinnelsens fremgangsmåte fremstilte karbapenem-derivater er beskrevet av Choung U. Kim og Peter F. Misco i US-SN 366.910, 471.379 og 389.652. US-SN 366 910 og den derfra avdelte US-SN 471.379, tilsvarende DE-OS 3.312.533, behandler fremstilling av karbapenem-antibiotika med formelen
der R<8> betyr hydrogen og R<1> er valgt blant hydrogen;
substituert og usubstituert alkyl, alkenyl og alkynyl med fra
1-10 karbonatomer; cykloalkyl og cykloalkylalkyl med 3-6 karbonatomer i cykloalkylringen. og 1-6 karbonatomer i alkyldelen; fenyl; aralkyl, aralkenyl og aralkynyl* der aryldelen er fenyl og den alifatiske del har 1-6 karbonatomer ; heteroaryl, heteroaralkyl, heterocyklyl og heterocyklylalkyl, der heteroatomet eller -atomene i den ovenfor nevnte heterocykliske del er valgt blant 1-4 oksygen-, nitrogen- eller svovelatomer og alkyldelene som er forbundet med de heterocykliske deler har 1-6 karbonatomer; der substituenten eller substituentene med henblikk på de ovenfor nevnte grupper er valgt blant C^g-alkyl som eventuelt er substitt7?rt med amino, halogen, hydroksy eller karboksyl,
der med henblikk på de ovenfor nevnte substituenter gruppene R<3> og R<4> uavhengig er valgt blant hydrogen; alkyl, alkenyl og alkynyl med fra 1-10 karbonatomer; cykloalkyl, cykloalkylalkyl og alkylcykloalkyl med 3-6 karbonatomer i cykloalkylringen og 1-6 karbonatomer i alkyldelen; fenyl; aralkyl, aralkenyl og aralkynyl, der aryldelen er fenyl og den alifatiske del har 1-6 karbonatomer; og heteroaryl, heteroaralkyl , heterocyklyl og heterocyklylalkyl, der heteroatomet
eller -atomene i de ovenfor nevnte heterocykliske deler er valgt blant 1-4 oksygen-, nitrogen- eller svovelatomer og alkyldelene i forbindelse med disse heterocykliske deler hair 1-6 karbonatomer eller R<3> og R<4> sammen med nitrogenatomet hvortil minst den ene er bundet, danner en 5- eller 6-leddet nitrogenholdig heterocyklisk ring, R<9> er som definert for R<3 >bortsett fra at den ikke kan være hydrogen; eller der R<1> og R<8> sammen danner C2_1Q-alkyliden eller med hydroksy substituert C2_1Q-alkyliden, A er cyklopentylen, cykloheksylen eller C2_6~alkylen, eventuelt substituert med en eller flere C1_4~alkylgrupper; R<2> er hydrogen, en anionisk ladning eller en konvensjonell lett fjernbar karboksylbeskyttende gruppe under den forutsetning at det, når R<2> er hydrogen eller en beskyttende gruppe, også finnes et motvirkende anion; og
betyr en substituert eller usubstituert mono-, bi- eller polycyklisk aromatisk heterocyklisk gruppe inneholdende minst et nitrogenatom i ringen og bundet til A gjennom et ringnitrogenatom, hvorved det dannes en kvaternær ammoniumgruppe; og farmasøytisk akseptable salter derav ved den i det etterfølgende reaksjonsskjema viste fremgangsmåte:
US-SN 389.652 og den derfra avledede US-SN 499.690 behandler fremstilling av karbapenem-antibiotika med formelen:
der R<8> betyr hydrogen og R<1> er valgt blant hydrogen; substituert og usubstituert alkyl, alkenyl og alkynyl med fra 1-10 karbonatomer; cykloalkyl og cykloalkylalkyl med 3-6 karbonatomer i cykloalkylringen og 1-6 karbonatomer i alkyldelen; fenyl; aralkyl, aralkenyl og aralkynyl, der aryldelen er fenyl og den alifatiske del har 1-6 karbonatomer ; heteroaryl, heteroaralkyl, heterocyklyl og heterocyklylalkyl, der heteroatomet eller -atomene i den ovenfor nevnte heterocykliske del er valgt blant 1-4 oksygen, nitrogen- eller svovelatomer og alkyldelene som er forbundet med de heterocykliske deler har 1-6 karbonatomer, der substituenten eller substituentene med henblikk på de ovenfor nevnte grupper uavhengig er valgt blant C^^-alkyl som eventuelt er substituert med amino, halogen, hydroksy eller karboksyl, der med henblikk på de ovenfor nevnte substituenter gruppene R<3> og R<4> uavhengig er valgt blant hydrogen; alkyl, alkenyl og alkynyl med fra 1-10 karbonatomer; cykloalkyl, cykloalkylalkyl og alkylcykloalkyl med 3-6 karbonatomer i cykloalkylringen og 1-6 karbonatomer i alkyldelen; fenyl; aralkyl, aralkenyl og aralkynyl, der aryldelen er fenyl og den alifatiske del har 1-6 karbonatomer; og heteroaryl, heteroaralkyl, heterocyklyl og heterocyklylalkyl, der heteroatomet eller -atomene i de ovenfor nevnte heterocykliske deler er valgt blant 1-4 oksygen-, nitrogen- eller svovelatomer og alkyldelene i forbindelse med disse heterocykliske deler har 1-6 karbonatomer eller R<3> og R<4> sammen med nitrogenatomet hvortil minst den ene er bundet, danner en 5- eller 6-leddet, nitrogenholdig, heterocyklisk ring, R<9> er som definert for R<3 >bortsett fra at den ikke kan være hydrogen; eller der R<1> og R<8> sammen danner C2_1Q<-a>lkyliden eller med hydroksy substituert C2_1Q<-a>lkyliden, R<5> er valgt blant substituert eller usubstituert alkyl, alkenyl og alkynyl med fra 1-10 karbonatomer; cykloalkyl og cykloalkylalkyl med 3-6 karbonatomer i cykloalkylringen og 1-6 karbonatomer i alkyldelene; fenyl; aralkyl, aralkenyl og aralkynyl, der i aryldelen er fenyl og den alifatiske del har 1-6 karbonatomer; heteroaryl, heteroaralkyl, heterocyklyl og heterocyklylalkyl, der heteroatomet eller -atomene i de ovenfor nevnte heterocykliske deler er valgt blant 1-4 oksygen-, nitrogen- eller svovelatomer og alkyldelene som er forbundet med de heterocykliske ringer har 1-6 karbonatomer; der de ovenfor nevnte R<5->grupper eventuelt er substituert med 1-3 substituenter valgt blant: C. -alkyl, som eventuelt er substituert med amino, fluor, klor, karboksyl, hydroksy eller karbamoyl; fluor, klor eller brom; fenyl, som eventuelt er substituert med 1-3 fluor, klor, brom, C.j_6-alkyl, -OR<3>, -NR3 R4, -S03R3 , -C02R<3> eller -CONR<3>R<4>, der R<3>, R<4> og R<9> i disse R<5->substituenter er som definert ovenfor; eller R<5> kan bety en divalent fenylen-eller C^^-alkylengruppe som er forbundet til ringen under dannelse av en brodannet polycyklisk gruppe; A er cyklopentylen, cykloheksylen eller C2_g-alkylen, som eventuelt er substituert med en eller flere C1_4-alkylgrupper; R<2> er hydrogen, en anionisk ladning eller en konvensjonell lett fjernbar karboksylbeskyttende gruppe under den forutsetning at det, når R<2> er hydrogen eller en beskyttende gruppe, også finnes et motvirkende ion; og betyr en substituert eller usubstituert mono-, bi eller polycyklisk, ikke-aromatisk, heterocyklisk gruppe inneholdende minst et nitrogenatom i ringen og bundet til A gjennom et ringnitrogenatom, hvorved det dannes en kvaternær ammoniumgruppe; og farmasøytisk akseptable salter derav, ved den i det følgende reaksjonsskjema viste fremgangsmåte:
Mere spesielt omsettes utgangsmaterialet III i et inert organisk oppløsningsmiddel med difenylklorfosfat i nærvær av en base under dannelse av mellomprodukt IV. Dette omsettes deretter med en merkaptanreagens med formelen HS-A-OH i et inert organisk oppløsningsmiddel og i nærvær av en base under dannelse av mellomproduktet V. Dette acyleres deretter med metansulfonylklorid i et inert organisk oppløsningsmiddel og i nærvær av en base under dannelse av mellomproduktet VI som omsettes med en jodid-ionkilde i et inert organisk oppløs-ningsmiddel under dannelse av mellomproduktet II. Dette omsettes så med det ønskede amin i et inert organisk oppløsningsmiddel og i nærvær av et sølvion under dannelse av det kvaterniserte produkt I'A eller I'B som deretter kan deblokkeres under dannelse av det tilsvarende deblokkerte karbapenem med formel IA eller IB.
Den ovenfor beskrevne fremgangsmåte har flere ulemper. Således omfatter fremgangsmåten f.eks. flere trinn, hvorav antallet med fordel kunne reduseres. Det samlede reaksjons-utbyttet er også relativt lavt og kvaterniseringstrinnet utføres på hele karbapenem-forbindelsen.
Det ville være ønskelig å ha en ny fremgangsmåte for fremstilling av forbindelsene med formel IA eller IB som (1) omfatter færre trinn, (2) gir et høyere utbytte, (3) tillater at det kvaterniserte amin dannes først og deretter bindes til karbapenem-kjernen på et senere stadium av syntesen og (4) kan anvendes for en enklere dannelse av kvaternære amin-produkter med et stort antall miner, dvs. aminer med sterisk
hindring og med lavere pKjj-verdier.
Foreliggende oppfinnelse har til hensikt å søke å eliminere manglene ved den kjente teknikk og angår i den forbindelse en fremgangsmåte for fremstilling av de innledningsvis nevnte karbapenem-derivater og denne fremgangsmåte karakteriseres ved at man omsetter et mellomprodukt med formelen
der R<1> og R<8> har den ovenfor angitte betydning og R<2>' er en p-nitrobenzylgruppe, med difenylklorfosfat i nærvær av diisopropyletylamin, og behandler den resulterende blanding med en tioforbindelse med formelen der A og R<14> har den ovenfor angitte betydning og X- er et motanion, i et inert oppløsningsmiddel med en temperatur fra —15 °C til romtemperatur og i nærvær av diisopropyletylamin for fremstilling av et karbapenem-produkt med formelen
der R<1>, R<8>, R<2>', A, R<14> og X~ har den ovenfor angitte betydning, og, hvis ønskelig, fjerner den karboksylbeskyttende gruppe R<2>' på i og for seg kjent måte for dannelse av den tilsvarende ubeskyttede gruppe med formel (I), eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
Karbapenem-forbindelsene med formel I er kraftige anti-bakterielle midler eller mellomprodukter som er verdifulle
for fremstilling av slike midler.
De ovenfor nevnte forbindelser med den generelle formel I inneholder karbapenem-kjernen
og kan derfor kalles l-karba-2-penem-3-karboksylsyre-derivater. Alternativt kan forbindelsene anses å ha basis-strukturen
og betegnes som 7-okso-l-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karbok-sylsyrederivater. Mens foreliggende oppfinnelse omfatter forbindelser der den relative stereokjemi for 5,6—protonene er både cis og trans, har de foretrukne forbindelser 5R.6S-(trans)-stereokjemi som i tilfellet tienamycin.
Uttrykket "konvensjonell lett fjernbar karboksylbeskyttende gruppe" refererer til en kjent estergruppe som har vært anvendt til å blokkere en karboksylgruppe under de nedenfor beskrevne kjemiske reaksjonstrinn, og som kan fjernes hvis dette er ønsket, ved hjelp av metoden som ikke resulterer i noen vesentlig ødeleggelse av resten av molekylet, f.eks. ved kjemisk eller enzymatisk hydrolyse, behandling med kjemiske reduksjonsmidler under milde betingelser, bestråling med ultrafiolett lys eller katalytisk hydrogenering. Eksempler på slike esterbeskyttende grupper er benzhydryl, p-nitrobenzyl-, 2-naftylmetyl, allyl, benzyl, trikloretyl, silyl slik som trimetylsilyl, fenacyl, p-metoksybenzyl, acetonyl, o—nitro-benzyl-, 4-pyridylmetyl og C^g-alkyl, slik som metyl, etyl eller t-butyl. Slike beskyttende grupper omfatter slik som hydrolyseres under fysiologiske betingelser, f.eks. pivaloyloksymetyl, acetoksymetyl, ftalidyl, indanyl og metoksymetyl. Spesielt fordelaktige karboksylbeskyttende grupper er p-nitrobenzyl som lett kan fjernes ved katalytisk hydrogenolyse samt allyl som kan fjernes ved Pd(PO3)4-katalysert omsetning.
De ovenfor omtalte farmasøytisk akseptable alter er ikke-toksiske syreaddisjonssalter, f.eks. salter med mineralsyrer som saltsyre, bromhydrogensyre, jodhydrogensyre, fosforsyre, svovelsyre osv. og salter med organiske syrer som maleinsyre, eddiksyre, sitronsyre, ravsyre, benzosyre, vinsyre, fumar-syre, mandelsyre, askorbinsyre, melkesyre, glukonsyre og eplesyre. Forbindelser med formel I i form av addisjonssalter kan skrives som
(R<2> = H eller en beskyttende gruppe) hvor Xe betyr syre-anionet. Det motvirkende anion XO kan velges slik at det tilveiebringes farmasøytisk akseptable salter for terapeutisk inngivelse, men i tilfellet mellomprodukter med formel I kan Xe også være et toksisk anion. I et slik tilfelle kan ionet etterpå fjernes eller substitueres med et farmasøytisk akseptabelt anion under dannelse av et aktivt sluttprodukt for terapeutisk bruk. Når sure eller basiske grupper er tilstede i R^-gruppen eller på den kvaterniserte R<14->gruppe, omfatter foreliggende oppfinnelse også passende base- eller syresalter av disse funksjonelle grupper, f.eks. syreaddisjonssalter i tilfelle en basis gruppe og metallsalter (f.eks. natrium, kalium, kalsium og aluminium), ammonium-saltet og salter med ikke-toksiske aminer (f.eks. trialkyl-aminer, prokain, dibenzylamin, 1-efenamin, N-benzyl-3-fenetylamin, N,N'-dibénzyletylendiamin, etc.) i tilfellet en
sur gruppe.
Omsetning av mellomprodukt IV med tiol VII kan gjennomføres innenfor et vidt temperaturintervall, f.eks. -15'C opp til romtemperatur, men gjennomføres fortrinnsvis ved en temperatur i området ca. -15'C til +15'C og helst ved ca. 0°C.
Karbapenem-forbindelsen som fremstilles ved omsetning av den kvaternære amintiol VII med mellomproduktet IV vil ha et motanion i forbindelse med seg (f.eks. (C6H50)2P02<e>, Cl<e >eller anionet i forbindelse med de kvaternære tiol), som på dette tidspunkt kan være substituert med et annet motanion, f.eks. et som er mere farmasøytisk akseptabelt, ved hjelp av konvensjonelle fremgangsmåter. Alternativt kan motanionet fjernes i løpet av det etterfølgende deblokkeringstrinn. Der den kvaterniserte karbapenem-forbindelse og motanionet danner et uoppløselig produkt, kan produktet krystallisere ut, mens det dannes, og samles rent ved filtrering.
Etter dannelse av det ønskede karbapenem-produktet kan den karboksylbeskyttende gruppe R<2>' av forbindelse I' eventuelt fjernes ved hjelp av konvensjonelle fremgangsmåter som solvolyse, kjemisk reduksjon eller hydrogenering. Der det anvendes en beskyttende gruppe som p-nitrobenzyl, benzyl, benzhydryl eller 2-naftylmetyl, som kan fjernes ved katalytisk hydrogenering, kan mellomprodukt I' i et egnet oppløs-ningsmiddel slik som dioksan-vann-etanol, tetrahydrofuran-dietyleter-buffer, tetrahydrofuran-vandig dikalium-hydrogen-fosfat-isopropanol eller lignende, behandles under et hydrogentrykk på fra 1-4 atmosfærer i nærvær av en hydroge-neringskatalysator som palladium-på-trekull, palladium-hydroksyd, platinaoksyd eller lignende, ved en temperatur fra 0-50'C i fra 0,24 - 4 timer. Når R<2>' er en gruppe som o—nitrobenzyl, kan fotolyse også anvendes for deblokkering. Beskyttende grupper slik som 2,2,2-trikloretyl kan fjernes ved mild sinkreduksjon. Den allylbeskyttende gruppe kan fjernes under anvendelse av en katalysator omfattende en blanding av en palladiumforbindelse og trifenylfosfin i et egnet aprotisk oppløsningsmiddel som tetrahydrofuran, metylenklorid eller dietyleter. Tilsvarende kan andre konvensjonelle karboksylbeskyttende grupper fjernes ved for fagmannen kjente metoder. Endelig kan forbindelser med formel I', der R<2>' er en fysiologisk hydrolyserbar ester som acetoksymetyl, ftalidyl, indenyl, pivaloyloksymetyl, metoksymetyl osv. som nevnt ovenfor inngis direkte til verten uten deblokkering, da slike estere hydrolyseres in vivo under fysiologiske betingelser.
Det vil kunne forstås at når R<1-> og/eller R<8->substituenten eller den til substituent A bundne kvaterniserte nukleofile gruppe R<14> inneholder en funksjonell gruppe som kan inter-ferere med det tilsiktede reaksjonsforløp, kan en slik gruppe være beskyttet ved hjelp av en konvensjonell blokkerende gruppe og deretter deblokkeres for gjendannelse av den ønskede funksjonelle gruppe. Egnede blokkerende grupper og prosedyrer for innføring og fjerning av slike er velkjente for fagmannen.
Som tilfellet er med andre P-laktam-antibiotika kan forbindelser med den generelle formel I omdannes ved hjelp av kjente prosedyrer til farmasøytisk akseptable salter som til foreliggende oppfinnelses formål er i det vesentlige ekvivalente med ikke-saltdannende forbindelser. Således kan man f.eks. oppløse en forbindelse med formel I, der R<2> er en anionisk ladning i et passende inert oppløsningsmiddel og deretter tilsette en ekvivalent av en farmasøytisk akseptabel syre. Det ønskede syreaddisjonssalt kan utvinnes ved hjelp av konvensjonelle prosedyrer, f.eks. oppløsningsmiddelutfelling, lyofilisering, osv. Når andre basiske eller sure funksjonelle grupper er tilstede i forbindelse med formel I, kan farmasøy-tisk akseptable baseaddisjonssalter og syreaddisjonssalter
tilsvarende fremstilles ved hjelp av kjente metoder.
Det kvaternære amintiol-mellomprodukt vil ha et motanion bundet til seg og som vil være bestemt av den spesielle syre som anvendes. Det er selvfølgelig mulig å substituere med et annet motanion på dette tidspunkt ved hjelp av konvensjonelle fremgangsmåter for anvendelse i den etter-følgende omsetning med karbapenem-mellomprodukt IV.
Karbapenem-derivatene med den generelle formel I, der R<2>
er hydrogen, en anionisk ladning eller en fysiologisk hydrolyserbar karboksylbeskyttende gruppe, eller de farma-søytisk akseptable salter derav, er kraftige antibiotika, som er aktive overfor forskjellige gram-positive og gram-negative bakterier og de kan anvendes f.eks. som animalske foradditiver for vekstfremmingsformål, som preserverings-middel i næringsmidler, som baktericider ved industrielle anvendelser, f.eks. i vannbasert maling og i bakvannet fra papirmøller for å inhibere veksten av skadelige bakterier samt som desinfeksjonsmiddel for å ødelegge eller inhibere vekst av skadelige bakterier på medisinsk og dental apparatur. De er dog spesielt verdifulle for behandling av infeksjonssykdommer hos mennesker og dyr, forårsaket av gram-positive eller gram-negative bakterier.
De farmasøytisk aktive forbindelser som tilveiebringes ifølge oppfinnelses fremgangsmåte kan anvendes alene eller formuleres som farmasøytiske preparater som foruten den aktive karbapenem-bestanddel omfatter en farmasøytisk akseptabel bærer eller et fortynningsmiddel. Forbindelsene kan inngis ved hjelp av en rekke midler, de av primær interesse omfatter: oral, topisk eller parenteral (intra-venøs eller intramuskulær injeksjon). De farmasøytiske preparater kan anvendes i fast form som kapsler,
tabletter, pulvere osv. eller i flytende form som oppløsninger, suspensjoner eller emulsjoner. Preparater til injeksjon som er den foretrukne inngivelsesvei, kan fremstilles på enhetsdoseform i ampuller eller i multi-dosisbeholdere, og kan inneholde formuleringsmidler som suspensjons-, stabiliserings- og dispergeringsmidler. Preparatene kan være på klar-til-bruk form eller på pulver-form for rekonstituering på inngivelsestidspunktet med en passende bærer som sterilt vann.
Dosen som skal inngis, avhenger i stor grad av den spesielle forbindelse som anvendes, det spesielle preparat som formuleres, inngivelsesveien, typen og tilstanden hos verten og den bestemte situs og organismen som behandles. Utvelgelse av den spesielt foretrukne dose og inngivelsesveien overlates derfor til den behandlende person. Vanligvis kan forbindelsene dog inngis parenteralt eller oralt til pattedyrs verter i en mengde fra ca.
5-200 mg/kg/dag. Inngivelsen utføres vanligvis i oppdelte dose, f.eks. 3-4 ganger daglig.
De følgende eksempler skal belyse oppfinnelsen uten å begrense den.
Eksempel 1
Fremstilling av 3-[ 2-( 1- pyridinium) etyltio]- 6a-[ 1-( R)-hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0)- hept- 2- en- 2-karboksylat
A. 1-( 2- merkaptoetyl) pyridiniummetansulfonat
Til en suspensjon av pyridiniummetansulfonat i pyridin, fremstilt ved dråpevis tilsetning av metansulfonsyre (1,95 ml, 0,03 mol) til pyridin (8,0 ml, 0,099 mol) under avkjøling ble det satt etylensulfid (1,96 ml, 0,033 mol). Den resulterende blanding ble omrørt ved 55°C i 16 timer og konsentrert under redusert trykk til en tykk sirup som ble blandet med noen få ml vann. Oppløsningen ble helt på toppen av en kolonne (40 x 16 cm) av u-bondapak C-18 som ble eluert med vann. Lyofilisering av de passende
fraksjoner ga en farvelas sirup, 6,5 g (91%).
IR (fil<m>) <u>maks: 2300-2600 (br. SH), 1635 (pyridinium), 1490, 1200 (sulfonat), 1068, 1060, 1045, 791, 780 cm"<1>.
<1>HMR (DMSO-dg) 6: 2,32 (3H, s, CH3S03~), 2,61, 2,70, 2,73, 2,82 (1H, B del av A2B-system, SH) , 3,07 (2H, m [med D20, 3,08 (2H, t, J=6,5 Hz)], CH2S), 4,76 (2H, t, J=6,5 Hz, CH2N +, 8,19 (2H, m, Hm av pyridinium), 8,6 (lH, m Ho av pyridinium), 9,08 (2H, dd, J=6,8 Hz, J=l,4 Hz, Ho av pyridinium).
UV (H20) *maks: <2>06 U5230), 258 (e3760) mu.
Metode A
B. 1-( 2- merkaptoetyl) pyridiniumklorid
En vandig oppløsning av uren 1-(2-merkaptoetyl)pyridiniummetansulf onat (9,4 g, 0,04 mol) ble helt på toppen av en kolonne (2,5 x 41 cm) av permutit s-1 Cl". Kolonnen ble eluert med vann i en mengde av 0,5 ml pr. minutt og de passende fraksjoner ble forenet og lyofilisert under dannelse av en gulaktig sirup, 7,0 g (100%), som ble anvendt som den var i neste trinn.
<1>HMR (D20) 5: 3,22 (2H, m, CH2S), 4,88 (m, CH2N<+>), 8,18 (2H, m, Hm av pyridinium), 8,7 (1H, m, Hp av pyridinium), 9,0 ppm (2H, m, Ho av pyridinium).
Metode B
Til en på forhånd avkjølt (isbad) pyridin (5,6 ml, 70 mmol) ble det satt pyridin-hydroklorid (4,05 g, 35 mmol) og etylensulfid (2,1 ml, 35 mmol). Blandingen ble oppvarmet til 65°C og omrørt i 75 minutter for dannelse av et tofase-system. Den lettere fase ble fjernet. Den tilbakeblevne olje ble vasket med 5 x 10 ml eter og pumpet under høyvakuum for dannelse av 90-100% av tittelforbindelsen, som ble anvendt som sådan i neste trinn.
C . Paranitrobenzyl- 3-[ 2 - ( 1- pyridinium) etyltio] - 6a ~[_ 1-( R) -
hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0)hept-2-en-2-karboksylatklorid
En oppløsning av p-nitrobenzyl-6a-[1-(R)-hydroksyetyl]-3,7-diokso-l-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboksylat (6,09 g, 17,5 mmol) i 20 ml acetonitril ble avkjølt til +5°C under nitrogenatmosfære og suksessivt behandlet med diisopropyletylamin (3,65 ml, 21,0 mmol) og difenylklorfosfat (4,34
ml, 21,0 mmol). Den resulterende blanding ble omrørt i 30 minutter ved 5<C>C, avkjølt til -5°C og behandlet suksessivt med en oppløsning av uren 1-(2-merkaptoety1)pyridiniumklorid (4,3 g, 24 mmol) i 1,0 ml N,M-dimetylformamid og dråpevis med diisopropyletylamin (3,65 ml, 21,0 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 0°C i 1 time, avkjølt til -30°C og omrørt i ytterligere 15 minutter. Det faste stoff ble filtrert av og vasket med kald (-30°C) acetonitril, 5,77 g (65%) .
IR (nujo<l>) <u>maks: 3300 (OH), 1775 (C=0 av 6-laktam), 1690 (C=0 av pNB-ester), 1630 (pyridinium), 1605 (fenyl av pNB-ester), 1515 (N02), 1335 cm"<1> (N02).
<1>HMR (DMSO-d ) 6: 1,17 (3H, d, J=6,l Hz, CH,CHOH), 3,2-3,75 6 J (5H, H-4, H-6, CH2S), 3,75-4,5 (2H, H-5, CH3CHOH), 4,92 (2H, brt, J=6,5 Hz, CH2N<+>), 5,18 (1H, d, J=4 ,.9 Hz, OH) , 5,37 (sentrum av ABq, J cl / D =14,2 Hz, CH £, • av pNB), 7,69 (2H, d, J=8,7 Hz, HO av pNB), 8,24 (d, J=8,7 Hz, Hm av pNB), 8,0-8,4 (4H, Hm av pNB, Hm av pyridinium), 8,66 (1H, m,
Hp av pyridinium), 9,17 (2H, bred, J=5,5 Hz, Ho av pyridinium) .
Filtratet og vaskevæskene ble forenet og fortynnet med 150 ml eter. Overstående væske ble dekantert og gummien oppløst i 40 ml vann inneholdende tilstrekkelig acetonitril til å holde en oppløsning som ble helt på toppen av en 3 x 10 cm kolonne av y-bondapak C-18. Kolonnen ble eluert med 150 ml 10% acetonitril - 90% vann og 100 ml 50% acetonitril - 50% vann. De passende fraksjoner ble forenet og lyofilisert etter at acetonitrilet var fjernet under vakuum, under dannelse av et gulaktig pulver. NMR bekrefter nærværet av tittelforbindelsen blandet med noe p-nitrobenzyl-3-[2-(1-pyridinium) etyltio] -6<>- [ 1- (R) -hydroksyetyl ] -7-okso-l-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboksylat-difenylfosfat (2:1). Pulveret ble oppløst i en minimal mengde vann og ført gjennom en 1,5 x 21 cm kolonne av permutit S-l Cl med vann. Lyofilisering av de passende fraksjoner ga 1,8 g eller 20% av tittelforbindelsen.
D. Paranitrobenzyl- 3-[ 2-( 1- pyridinium) etyltiol- 6a-[ 1-( R)-hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0) hept- 2- en- 2-karboksylat- difenylfosfat
En oppløsning av p-nitrobenzyl-6a-[1-(R)-hydroksyetyl]-3,7-diokso-l-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboksylat (0,174 g, 0,50 mmol) i 2 ml acetonitril ble avkjølt til 0°C under nitrogenatmosfære og behandlet suksessivt med diisopropyletylamin (0,105 ml, 0,60 mmol) og difenylklorfosfat (0,124 ml, 0,60 mmol). Den resulterende oppløsning ble omrørt i 30 minutter ved 0°C og behandlet suksessivt med en oppløs-ning av 1-(2-merkaptoetyl)pyridinium-metansulfonat (0,170 g, 0,72 mmol) i 0,6 ml acetonitril og diisopropyletylamin (0,105 ml, 0,60 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 0°C i 15 minutter, fortynnet med 7 ml kaldt vann av 0°C
og helt på toppen av en 1,5 x 6,4 cm kolonne av u-bondapak C-18. Kolonnen ble eluert med en blanding av 25-50% acetonitril i 75-50% vann. De passende fraksjoner ble forenet og lyofilisert etter at acetonitrilet var fjernet under vakuum under dannelse av et gulaktig pulver, 0,33 g (92%) .
IR (KBr) u mak, s: <3>600-300 (OH), 1765 (C=0 av B-laktam),
1690 (C=0 av pNB-ester), 1625 (pyridinium), 1585 (fenyl), 1510 (N02), 1330 (N02), 885 cm"<1> (N02).
<1>HMR (DMSO-d6) 6: 1,16 (3H, d, J=6,2 Hz, CH3CHOH), 4,87 (2H, brt, J=6,6 Hz, CH-S), 5,37 (sentrum av ABq, J K=4,3 Hz, CH2 av pNB), 6,7-7,5 (fenyl), 7,68 (d, J=8,8 Hz, Ho av pNB), 8,23 (d, J=8,8 Hz, Hm av pNB), 8,0-8,3 (m, Hm av pyridinium), 8,4-8,8 (1H, Hp av pyridinium), 9,09 (2H, dd, J=6,7 Hz, J=l,3 Hz, Ho av pyridinium).
E. 3-[ 2-( 1- pyridinium) etyltio]- 6a-[ 1-( R)- hydroksyetyl]- 7-
okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0) hept- 2- en- 2- karboksylat
Metode A
Til en oppløsning av p-nitrobenzyl-3-[2-(1-pyridinium)etyltio]-6a-[l-(R)-hydroksyetyl]-7-okso-l-azabicyklo(3.2.0)-hept-2-en-karboksylat-difenylfosfat (0,16 g, 0,22 mmol) i 10 ml våt tetrahydrofuran ble det satt 10 ml eter, monobasisk kaliumfosfat-natriumhydroksyd-buffer> pH 7,4, (16 ml, 0,05 M) og 0,16 g 10% palladium på trekull. Den resulterende blanding ble hydrogenert under ca. 3,2 kp/cm<3> i 1 time ved 25°C. De to faser ble separert, og den organiske fase ekstrahert med 2 x 3 ml vann. De vandige oppløsninger ble forenet, vasket med 2 x 10 ml eter og helt på toppen av en 1,5 x 6,2 cm kolonne av u-bondapak C-18 etter at sporene av organiske oppløsningsmidler var fjernet under vakuum. Eluering av kolonnen med vann ga etter lyofilisering av de passende fraksjoner et gulaktig pulver, 0,062 g (84%).
IR (KBr) umaks: 3700-3000 (OH), 1755 (C-0 av S-laktam),
1630 (pyridinium), 1590 cm (karboksylat).
"""HMR (D20): 1,22 (3H, d, J=6,4 Hz, CH3CH0H) , 2,92 (d, J=9,l Hz, H-4), 2,97 (d, J=9,l Hz, H-4), 3,20 (dd, J=2,5 Hz, J=6,l Hz, H-6), 3,44 (t, J=6,0 Hz, CH2S), 3,93 (dd, J=9,1 Hz, J=2,5 Hz, H-5), 4,82 (t, J=6,0 Hz, CH2N<+>), 8,04 (m,
Hm av pyridinium), 8,5 (m, Hp av pyridinium), 8,82 (dd,
J= 3,2 Hz, J=l,l Hz, Ho av pyridinium).
UV (H20) xmaks= 259 (e5800), 296 (e7030 mu, t^=13,5 timer (målt ved en konsentrasjon på 10~4 M i en fosfatbuffer,
pH 7,4 ved 36,8°C) .
Metode B
Til en oppløsning av p-nitrobenzyl-3-[2-(1-pyridinium)etyltio]-6a-[1-(R)-hydroksyetyl]-7-okso-l-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboksylatklorid (5,77 g, 11,4 mmol) i monobasisk kaliumfosfat-natriumhydroksyd- buffer (170 ml, 0,2 M, pH 7,22) ble det satt 20 ml tetrahydrofuran, 30 ml eter og 5,7 g 10% palladium på trekull. Den resulterende blanding ble hydrogenert ved 22°C under ca. 3,2 kp/cm<2> i 1 time og filtrert på en Celite-pute. Puten ble vasket med 2 x 15 ml vann. Filtratet og vaskevæsken ble forenet og fortynnet med 100 ml eter. Den vandige fase ble separert fra, vasket med 3 x 100 ml eter og helt på toppen av en 4,5 x 20 cm kolonne av u-bondapak C-18, etter at de organiske oppløs-ningsmidler var fjernet under vakuum. Eluering av kolonnen med vann, fulgt av en blanding av 10% acetonitril i vann ga etter lyofilisering av de passende fraksjoner 2,48 g eller 65% av tittelforbindelsen som et gulaktig pulver.
De analytiske data var identiske med de data som ble rapportert for forbindelsen fremstilt under metode A.
Eksempel 2
Fremstilling av 3-[ 2-( 2-( 3, 5- dimetylpyridinium)- etyltio]- 6a-
LI-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0) hept- 2- en-2- karboksylat A. 1- ( 2- merkaptoetyl) - 3 , 5- dimetylpyridi' niummetansulf onat
Til en suspensjon av 3,5-lutidiniummetansulfonat i 3,5-lutidin, fremstilt ved tilsetning av metansulfonsyre (0,65 ml, 0,010 mol) til kald 3,5-lutidin (2,51 ml, 0,022 mol) settes det etylerisulfid (0,655 ml, 0,011 mol). Den resulterende blanding omrøres under nitrogenatmosfære ved 55°C
i 24 timer, avkjøles til 23°C og fortynnes med 5 ml vann og 5 ml eter. De organiske sjikt separeres og den vandige oppløsning vaskes med 6 x 4 ml eter. Sporene av eter fjernes under vakuum og oppløsningen settes til toppen av en 2,5 x 6,0 cm kolonne av u-bondapak C-18. Kolonnen elueres med vann og lyofilisering av de passende fraksjoner ga en farveløs sirup, 2,4 g (91%).
IR (film) umaks: 2520 (SH), 1628 (pyridinium), 1600,
1495, 1325, 1305, 1283, 1200 (sulfonat), 1040, 938, 765, 680 cm<-1>.
"""HMR (DMSO-dg) 6: 2,31 (3H, s, CH3SC>3~), 2,47 (6H, S, CH3 på pyridinium), 2,57, 266, 269, 2,78 (1H, B del av A2B-system), SH), 3,06 (2H, m [med D20 tilsatt (2H, t, J=6,5 Hz)], CH2S), 4,65 (2H, t, J=6,5 Hz, CH2N+), 8,34 (1H,
s, Hp av pyridinium), 8,79 (2H, s, Ho av pyridinium).
UV (Ho0) X ; 271 (e4860) mu.
2 maks
Analyse beregnet for cioH17N03S2"0'5H2°:
B. Paranitrobenzyl- 3-[ 2-( 1-( 3, 5- dimetylpyridjnium)) etyltio]-6g-[ 1-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- azabicyklo( 3. 2. 0) hept- 2-en- 2- karboksylatdifenylfosfat
Til en kald (0°C) oppløsning av p-nitrobenzyl-6a-(1-(R)-hydroksyetyl)-3,7-diokso-l-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboksylat (0,523 g, 1,50 mmol) i 6,0 ml acetonitril, som holdes under nitrogenatmosfære ble det satt diisopropyletylamin (0,314 ml, 1,8 mmol) fulgt av difenylklorfosfat (0,373 ml, 1,8 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 30 minutter og behandlet med en oppløsning av 1-(2-merkaptoetyl )-3,5-dimetylpyridiniummetansulfonat (0,493 g, 1,87 mmol) i 1,9 ml acetonitril, fulgt av diisopropyletylamin (0,314 ml, 1,8 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 0°C i 1 time, fortynnet med 26 ml kaldt vann av 0°C og holdt på toppen av en 7,0 x 3,5 cm u-bondapak C-18-kolonne. Eluering av kolonnen med 25-50% acetonitril - 75-50% vannblan-ding ga etter lyofilisering av de passende fraksjoner 1,01 g eller 90% av tittelforbindelsen som et gulaktig pulver.
IR (KBr) v mak, s: 3700-3100 (OH), 1778 (C=0 av 6-laktam), 1700 (C=0 av pNB-ester), 1635 (pyridinium), 1595 (fenyl), 1521 (N02), 1335 (N02), 895 cm"<1> (N02).
"""HMR (DMSO-d,) 5: 1,16 (3H, dm J=6,l Hz, CH,CH0H), 2,43 (s, CH^ på pyridinium), 4,75 (2H, m, CH2N ), 5,38 (sentrum av ABq, J , = 14,3 Hz, CH_ av pNB), 6,6-7,5 (10H, m,
cl r D
fenyl), 7,70 (2H, d, J=8,7 Hz, Ho av pNB), 8,0-8,5 (3H,
m Hp av pyridinium, Hm av pNB), 8,82 (2H, s, Ho av pyridinium) .
UV (H2<0>) <*>maks: <2>70 U11570), 306 (e7343) um. '
Analyse beregnet for C37<H>3gN3O10SP-H20:
C. 3-[ 2-( 1-( 3, 5- dimetylpyridinium)) etyltio]- 6a -[ 1-( R)-hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0) hept- 2- en- 2-karboksylat
Til en oppløsning av p-nitrobenzyl-3-[2-(1-(3,5-dimetylpyridinium))etyltio]-6a-[l-(R)-hydroksyetyl]-7-okso-l-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboksylatdifenylfosfat (0,600 g, 0,80 mmol) i 36 ml våt tetrahydrofuran ble det satt eter (36 ml), monobasisk kaliumfosfat-natriumhydroksyd-buffer (0,05 M, pH 7,4, 44 ml) samt 0,60 g 10% palladium på trekull. Den resulterende blanding hydrogeneres under ca. 3,2 kp/cm<2> ved 23°C i 1,25 timer. Det organiske sjikt ble separert fra og ekstrahert med 2 x 5 ml puffer. De vandige sjikt ble forenet, filtrert gjennom en Celite-pute, vasket med 40 ml eter, pumpet for å fjerne spor av organiske oppløsningsmidler og helt på toppen av en 2,5 x 10,0 cm u-bondapak C-18-kolonne. Eluering av kolonnen med vann og lyofilisering av de passende fraksjoner ga 0,186 g tilsvarende 64% som et gulaktig pulver.
IR (KBr) u , : 3700-3100 (OH), 1760 (C=0 av g-laktam),
^ maks
1595 cm (karboksylat).
<1>HMR (D20) 6; 1,21 (3H, d, J=6,3 Hz, CH3CH0H), 2,45 (6H, s, CH3 på pyridinium), 2,81 (d, J=9,2 Hz, H-4), 2,96 (d, J=9,2 Hz, H-4), 3,22 (dd, J=2,6 Hz, J=6,2 Hz, H-6), 3,40 (t, J=6,2 Hz, CH2S), 3,84 (dd, J=9,2 Hz, J=2,6 Hz, H-5), 4,15 (m, CH3CH0H)k 4,71 (t, J=6,2 Hz, CH2N<+>), 8,21 (1H,
s, Hp av pyridinium), 8,46 (2H, s, Ho av pyridinium).
UV (H2<0>) <x>maks: 2,79 (e8345), 296 (e7714) m
[a]^<3> + 40,7 (c 0,53, H-O) , t, = 16,9 t (målt ved en konsentrasjon pa 10 M i fosfatbuffer, pH 7,4 ved 3 6,8°C).
Eksempel 3
Fremstilling av ( 5R, 6S)- 3-[[ 2-( 3- hydroksymetylpyridinio)-etyl] tio]- 6-[( R)- 1- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo[ 3. 2. 0]-hept- 2- en- 2- karboksylat
A. 3- hydroksymety1- 1-( 2- merkaptoetyl) pyridinium- trifluor-metansulfonat
Trifluormetansulfonsyre (1,327 ml, 0,015 mol) settes dråpevis til 3-pyridinmetanol (2,91 ml, 0,030 mol) fulgt av etylensulfid (0,89 ml, 0,015 mol). Den resulterende homogene blanding ble oppvarmet i et oljebad til 50-70°C under N2 i 20 timer. Reaksjonsblandingen ble samlet i 15 ml H^O og ekstrahert med 5 x 5 ml CH2C12. Den vandige fase ble konsentrert i vakuum og deretter satt til en C^g-revers-fase-kolonne. Eluering med H,,0, fulgt av inndamping av de relevante fraksjoner ga en blekgul olje. Dette materialet ble omkromatografert under dannelse av en nesten farveløs olje. Etter tørking i vakuum over P2°59a dette produktet i en mengde av 4,50 g tilsvarende 94% som en viskøs olje.
IR (film) umaks: 3450 (s, OH), 2560 (w, SH) cm"<1>.
"""HMR (d6-aceton) 6: 9,10-8,05 (m, 4H, aromatisk), 5,01 (t,
J=5,5 Hz, 2H, N-CH2), 4,93 (s, 2H, -CH2OH), 4,43 (br S, 1H, -OH), 3,43-3,18 (m, 2H, S-CH2), 2,34-2,10 (m, lH,
SH) .
B. p- nitrobenzyl-( 5R, 6S)- 3-[ 2-( 3- hydroksymetylpyridinio)-etyltio]- 6-[ 1-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo-[ 3. 2. 0] hept- 2- en- 2- karboksylat- difenylfosfat
Til en oppløsning av p-nitrobenzyl (5R,6S)-6-[1-(R)-hydroksyetyl ]-3,7-diokso-l-azabicyklo[3.2.0]heptan-2-karboksylat (0,174 g, 0,50 mmol) i 2 ml tørr acetonitril ble det satt diisopropyletylamin (0,096 ml, 0,55 mmol) ved 0°C under N->. Difenylklorfosfat (0,114 ml, 0,55 mmol) ble deretter tilsatt dråpevis og reaksjonsblandingen omrørt ved 0°C i 30 minutter. En oppløsning av 3-hydroksymetyl-1-(2-merkaptoetyl) pyridinium-trifluormetansulfonat (0,223 g, 0,70 mmol) i 0,50 ml acetonitril ble deretter tilsatt, fulgt av diiso-propylamin (0,122 ml, 0,70 mmol). Etter at reaksjonsblandingen var blitt holdt ved 0°C i 30 minutter, ble den konsentrert i vakuum og den resterende gule gummi oppsamlet i H20 (det ble tilsatt tilstrekkelig acetonitril for å hjelpe oppløsning av gummien). Denne oppløsning ble satt til en C^g-revers-fase-kolonme som ble eluert med 15% acetonitril-H20. Lyofilisering av de relevante fraksjoner ga 0,305 g tilsvarende 81% av produktet som en beigefarvet fast stoff.
IR (KBr) u , : 3420 (br, OH), 1775 (B-laktam CO), 1695
rriciKs
(-C02pNB) cm-1;
<1>HMR (dg-aceton) 5: 9,44-7,72 (m, 8H, aromatisk), 7,22-6,91 (m, 10H, difenylfosfat), 5,53, 5,27 (ABq, J=14 Hz, 2H, benzylisk), 5,04 (t, J=7,4 Hz, 2H, N-CH2), 4,75 (s, 2H, CH2OH), 4,5-3,1 (m, 8H), 1,21 (d, J=6,3 Hz, 3H, CHMe).
C. ( 5R, 6S)- 3-[ 2-( 3- hydroksymetylpyridinio) etyltio]- 6-[ 1-( R) - hydroksyetyl ] ;- 7- okso- l- azabicyklo[ 3. 2. 0] hept- 2- en-2- karboksylat
Til en oppløsning av p-nitrobenzyl-(5R,6S)-3-[2-(3-hydroksymetylpyridinio) etyltio]-6-[1-(R)-hydroksyetyl]-7-okso-l-azabicyklo[3.2.0]hept-2-en-2-karboksylat-difenylfosfat (0,145 g, 0,194 mmol) i 10 ml THF inneholdende 5 dråper H,,0 ble det satt 6,0 ml fosfatbuffer (0,05 M, pH 7,4), 0,145 g 10% palladium på trekull og 10 ml eter. Blandingen ble hydrogenert (Parr) ved ca. 3,2 kp/cm<2> i 1 time og deretter filtrert gjennom en pute av Celite. Filterkaken ble vasket med noe H^O og eter og den vandige fase separert fra og ekstrahert tre ganger med eter. Den vandige oppløsning ble deretter avkjølt ved 0°C og pH-verdien innstilt til 7,0 med pH 7,4-buffer. Etter fjerning av tilbakeblevne flyktige stoffer i vakuum, ble den vandige oppløsning satt til en C-^g-revers-fase-kolonne som ble eluert med H.>0. Lyofili-sering av de relevante fraksjoner ga 36 mg tilsvarende 51% av produktet som et lysegult fast stoff. Ytterligere rensing ved revers-fase-HPLC ga 31 mg eller 41% rent produkt som et fast stoff.
IR (KBr) umaks-* 3300 (br, OH) , 1755 (s-laktam CO), 1590 (-C02~), era"1;
1HNMR (D20) 6: 8,78-7,94 (m, 4H, aromatisk), 4,83 (t, J= 6,0 Hz, 2H, N-CH2), 4,83 (s, 2H, CH2OH), 4,16 (d av q, J=J'=6,2 Hz, 1H, H-l'), 3,98 (d, av t, J=9,1 Hz, J'=2,6 Hz, 1H, H-5), 3,75-3,20 (m, 3H), 3,20-2,65 (m, 2H),
1,22 (d, J=6,4 Hz, 3H, CHMe).
UV (H20) *maks: <2>94 (e7614), 266 (e6936) nm;
t^ (pH 7,4, 36,8°C) 14,0 t.
Eksempel 4
Fremstilling av ( 5R, 6S)- 3-[ 2-( 4- hydroksymetylpyridinio)-etyltio ] - 6-[ 1- ( R) - hydroksyetyl ] - 7- okso- l- azabicykloj_ 3 . 2. 0]-hept- 2- en- 2- karboksylat A. 4- hydroksymetyl- l-( 2- merkaptoetyl) pyridinium- trifluor-metansulfonat
Til en oppløsning av 4-pyridinmetanol (1,635 g, 0,015 mol)
i 10 CH2C12 ved 0°C under N2 ble det dråpevis tilsatt trifluormetansulfonsyre (1,327 ml, 0,015 mol). En gulbrun olje skilte seg hurtig ut. En ytterligere ekvivalent 4-pyridinmetanol (1,635 g, 0,015 mol) ble satt til denne blanding og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk under dannelse av en olje. Til denne olje ble det satt etylensulfid (0,891 ml, 0,015 mol) og den resulterende homogene blanding ble oppvarmet i et oljebad ved ca. 60°C i 3 timer. Deretter ble reaksjonsblandingen samlet i 15 ml H20, og den vandige oppløsning vasket med 5 x 5 ml CH2C12. Etter å ha fjernet tilbakeblitt organisk oppløsningsmiddel under vakuum, ble den vandige oppløsning satt til en C-^g-revers-f ase-kolonne. Eluering med H.,0 og etterfølgende inndamping av de relevante fraksjoner ga en olje som ble tørket ytterligere i vakuum over ^ 2^ 5' nvorvecl man oppnådde 4,64 g eller 97% av produktet som en farveløs olje.
IR (film) u , : 3455 (s, OH), 2565 (w, SH) cm"<1>;
mciK s <1>HNMR (dg-aceton) 6: 9,07, 8,18 (ABq, J=6,8 Hz, 4H, aromatisk), 5,03 (s, 2H, CH20H), 4,96 (t, J=6,5 Hz, 2H, N-CH2), 4,09 (br S, 1H, -OH), 3,5-3,1 (m, 2H, S-CH2), 2,25 (brs, 1H, -SH).
B. p- nitrobenzyl-( 5R, 6S)- 3 -[ 2-( 4- hydroksymetylpyridinio)-etyltio]- 6-[ l-( R)- 1- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo-[ 3. 2. 0] hept- 2- en- 2- karboksylat- difenylfosfat
Til en oppløsning av p-nitrobenzyl-(5R,6S)-6-[1-(R)-1-hydroksyetyl]-3,7-diokso-l-azabicyklo[3.2.0]heptan-2-karboksylat (0,348 g, 1,0 mmol) i 5 ml tørr acetonitril ved 0°C under N2 ble det dråpevis tilsatt diisopropyletylamin (0,191 ml, 1,1 mmol), fulgt av difenylklorfosfat (0,228 ml, 1,1 mmol). Den resulterende gyldenguls oppløs-ning ble omrørt ved 0°C i 40 minutter. Til denne oppløsning ble det satt en oppløsning av 4-hydroksymetyl-l-(2-merkaptoetyl)pyridinium-trifluormetansulfonat (0,447 g, 1,4 mmol) i 1 ml acetonitril, fulgt av diisopropyletylamin (0,191 ml, 1,1 mmol). En rødlig-sort gummi skilte seg ut fra reaksjonsblandingen. Etter 20 minutter ved 0°C ble reaksjonsblandingen filtrert og konsentrert under vakuum. Resten ble samlet i et minimalt volum (1:1) acetonitril: H^ O og satt til en C^g-revers-fase-kolonne. Eluering med 25% acetonitril-H20 og etterfølgende lyofilisering av de relevante fraksjoner ga 0,353 g tilsvarende 47% av produktet som et kremfarvet fast stoff.
IR (KBr) umakg: 3240 (br, OH), 1775 (e-laktam CO), 1695 (-C02pNB) cm-1;
"""HNMR (dg-aceton) 6 : 9 ,24-7 ,84 (m, H, aromatisk), 7,4-6,9 (m, 10H, difenylfosfat), 5,52, 5,24 (ABq, J=14 Hz, 2H, benzyklisk), 5,15-4,80 (m, 4H), 4,45-3,05 (m, 7H), 1,35 (d, J=6,6 Hz, 3H, CHMe).
C. ( 5R, 6S)- 3-[ 2-( 4- hydroksymetylpyridinio) etyltio]- 6- [ 1-( R)- 1- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo[ 3. 2. 0] hept- 2-en- 2- karboksylat
En blanding av p-nitrobenzyl-(5R,6S)-3-f 2-(4-hydroksymetylpyridinio) etyltio]-6-[1-(R)-1-hydroksyetyl]-7-okso-l-azabicyklo-[3.2.0]hept-2-en-2-karboksylat-difenylfosfat (0,348 g, 0,465 mmol) og 10% palladium på trekull (0,35 g) i 11 ml fosfatbuffer (0,05 M, pH 7,4), 5 ml THF og 10 ml eter ble hydrogenert ved ca. 3,2 kp/cm<2> i 1,25 timer. Blandingen ble derétter filtrert gjennom en Celite-pute og den vandige fase vasket tre ganger med eter. pH-verdien i den vandige oppløsning ble deretter innstilt til 7,0 under anvendelse av ytterligere pH 7,4-buffer. Etter å ha fjernet de resterende flyktige stoffer under vakuum ble den vandige oppløs-ning satt til en C-^g-revers-f ase-kolonne. Eluering med 2% acetonitril-H20 og etterfølgende lyofilisering ga et gulbrunt fast stoff. Dette materialet ble omkromatografert (C^g-revers-fase/H^O) hvorved man oppnådde 0,060 g tilsvarende 36% av det ønskede produkt som et lysegult fast stoff.
IR (KBr) u__,. : 3400 (br, OH) , 1755 ( 6-laktam CO), 1590
nitijv S
(-C02~) cm-1;
"""HNMR (D20) 6 : 8,73 , 7,96 (ABq, J=6,8 Hz, 4H, aromatisk), 4,93 (s, 2H, CH20H), 4,77 (t, J=6,0 Hz, 2H, N-CH2),
4,15 (d av q, J=J'=6,3 Hz, 1H, H-l'), 3,96 (d av t, J=
9,2 Hz, J'=2,6 Hz, 1H, H-5), 3,65-3,20 (m, 3H), 3,13-2,62 (m, 2H), 1,21 (d, J=6,3 Hz, 3H, CHMe);
UV (H2 -O) X mak. s: 295 U6880), 256 U5595), 224 U8111) nm;
t^ (pH 7,4, 36,8°C) 14,5 t.
Eksempel 5
Fremstilling av 3-[ 2-( l-( 2- metylpyridinium)) etyltio]- 6a-[ 1-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0) hept- 2- en- karboksylat
A. 1-( 2- merkaptoetyl)- 2- metylpyridiniummetansulfonat
Til en suspensjon av 2-metylpyridiniummetansulfonat i 2-metylpyridin, fremstilt ved tilsetning av metansulfonsyre (0,65 ml, 0,010 mol) til kald 2-metylpyridin (2,17 ml,
0,022 mol) ble det satt etylensulfid (0,655 ml, 0,011 mol). Reaksjonsblandingen ble omrørt under nitrogen ved 55°C i
21 timer, avkjølt til 23°C og fortynnet med 5 ml vann.
Den vandige oppløsning ble vasket med 6 x 4 ml eter, pumpet for å fjerne spor av organiske oppløsningsmidler og helt på toppen av en 2,5 x 10,0 cm u-bondapak C-18-kolonne. Kolonnen ble eluert med vann og lyofilisering av de passende fraksjoner ga 2,13 g tilsvarende 85% av tittelforbindelsen.
IR (film) u : 2520 (SH), 1623 (pyridinium), 1574, 1512,
rricixs i
1485, 1412, 1195 (sulfonat), 1038 cm" .
<1>HMR (DMSO-d, + D_0) 6: 2,37 (3H, S, CH-.SO,"), 2,83 (3H, s, CH3 på pyridinium), 3,09 (2H, J=6,9 Hz, CH2S), 4,71 (2H,
t, J=6,9 Hz, CH2N<+>), 7,93 (2H, m, Hm av pyridinium), 8,44 (1H, m. Hp av pyridinium), 8,89 (1H, m, Ho av pyridinium);
UV (H c0. 0) X rriciK s: <2>66 (e 3550) mu.
B. Paranitrobenzyl- 3-[ 2-( 1-( 2- metylpyridinium)) etyltio]— 6a -
[ 1-( R)- hydroksyetyl ]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0) hept- 2- en-2- karboksylat- difenylfosfat
Til en kald (0°C) oppløsning av p-nitrobenzyl-6a-[1-(R)-hydroksyetyl]-3,7-diokso-l-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboksylat (0,523 g, 1,50 mmol) i 6 ml acetonitril, og som ble holdt under nitrogenatmosfære ble det satt diisopropyletylamin (0,314 ml, 1,80 mmol), fulgt av difenylklorfosfat (0,373 ml, 1,80 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 30 minutter ved 0°C og behandlet med en oppløsning av l-(2-merkaptoetyl)-2-metylpyridiniummetansulfonat (0,530 g, 2,16 mmol) i 18 ml acetonitril, fulgt av diisopropyletylamin (0,314 ml, 1,8 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 0°C i 1 time, fortynnet med 26 ml kaldt vann av 0°C og helt på toppen av en 3,5 x 7,0 cm u-bondapak C-18-kolonne. Eluering av kolonnen med 25% acetonitril - 75% vann og med 50% acetonitril - 50% vann ga etter lyofilisering av de passende fraksjoner 1,06 g tilsvarende 96% av tittelforbindelsen som et gullig pulver.
IR (KBr) "maks: <3>650-3100 (OH), 1700 (C=0 av ø-laktam), 1695 og 1690 (C=0 av pNB-ester), 1630 (pyridinium), 1595 (fenyl), 1518 (N02), 1335 (N02), 890 cm"<1> (N02);
<1>HMR (DMSO, dg) 6: 1,15 (3H, d, J=6,l Hz, CH3CHOH), 2,87 (s, CH3 på pyridinium), 3,6-4,4 (2H, m, H-5, CH3CHOH), 4,75 (2H, m, CH2N<+>), 5,37 (sentrum av ABq, J=14 Hz, CH2 av pNB), 6,5-7,4 (10H, m, fenyl), 7,70 (2H, d, J=8,8 Hz, HO av pNB), 8,0 (2H, m, Hm av pyridinium), 8,24 (2H, d, J=8,8 Hz, Hm av pNB), 8,50 (1H, m, Hp av pyridinium), 8,95 (1H, brd, J=6,l Hz, Ho av pyridinium);
UV (H20) *maks= <2>65 (ell990), 314 (e8020) mu.
C. 3-[ 2-( 1-( 2- metylpyridinium)) etyltio]- 6a-[ 1-( R)- hydroksyetyl ]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0) hept- 2- en- karboksylat
Til en oppløsning av p-nitrobenzyl-3-[2-(1-(2-metylpyridinium))-etyltio]-6a-[l-(R)-hydroksyetyl]-7-okso-l-azabicyklo(3.2.0)-hept-2-en-2-karboksylat-difenylfosfat (0,66 g, 0,90 mmol) i 34 ml våt tetrahydrofuran ble det satt 34 ml eter, monobasisk kaliumfosfat-natriumhydroksyd-buffer (0,15 M, 16,5 ml, pH
7,22) samt 0,66 g 10% palladium på trekull. Den resulter-
ende blanding ble hydrogenert under ca. 3,2 kp/cm<2> ved 23°C
i 1,25 timer. Det organiske sjikt ble separert fra og ekstrahert med 2 x 6 ml buffer. De vandige sjikt ble forenet, filtrert gjennom en Celite-pute, vasket med 40 ml eter,
pumpet for å fjerne spor av organiske oppløsningsmidler og helt på toppen av en 2,5 x 10 cm u-bondapak C-18-kolonne. Eluering av kolonnen med vann og lyofilisering av de passende fraksjoner ga 0,098 g tilsvarende 31% av tittelforbindelsen som et gulaktig pulver.
IR (KBr) " ,: 3650-3100 (OH), 1755 (C=0 av 6-laktam),
mciKS ^
1630 (pyridinium), 1595 cm (karboksylat);
<1>HMR (D20) 6: 1,20 (3H, d, J=6,3 Hz, CH3CH0H), 2,83 (s,
CH^ på pyridinium), 2,7-3,1 (5H, H-4, CH^ på pyridinium), 3,1-3,7 (3H, m, CH2S, H-6), 3,90 (dd, J=9,1 Hz, J=2,6 Hz, H-5), 3,1 (m, CH3CHOH), 4,78 (t, J=6,2 Hz, CH2N<+>),
7,8 (2H, m, Hm av pyridinium), 8,3 (1H, m, Hp av pyridinium), 8,65 (1H, m, Ho av pyridinium);
UV (H20) xmaks= 268 (e9350), 296 (e8840) mu
[a]2<3> +41° (c 0,5, H20)
-4
t^ = 15,0 t (malt ved en konsentrasjon pa 10 Mi fosfat-puffer, pH 7,4 ved 36,8°C).
Eksempel 6
Fremstilling av 3-[ 2-( 1-( 4- metylpyridinium)) etyltio]- 6a-[ 1( R)-hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0) hept- 2- en- 2- karboksylat
A. 1-( 2- merkaptoetyl)- 4- metylpyridinium) metansulfonat
Til en suspensjon av 4-pikoliniummetansulfonat i 4-pikolin, fremstilt ved tilsetning av metansulfonsyre (0,65 ml,
0,010 mol) til 4-pikolin (2,14 ml, 0,022 mol) under avkjø-ling, settes etylensulfid (0,655 ml, 0,011 mol). Reaksjonsblandingen omrøres under nitrogen ved 55°C i 24 timer, av-kjøles til 23°C og fortynnes med 5 ml vann og 10 ml eter.
Det organiske sjikt separeres fra og det vandige sjikt vaskes med 5 x 5 ml eter og settes til toppen av en 2,5 x 10 cm u-bondapak C-18-kolonne etter at spor av eter var fjernet under redusert trykk. Eluering av kolonnen med en blanding av 15% acetonitril og 85% vann ga etter lyofilisering av de passende fraksjoner 2,66 g tilsvarende 100% av en farve løs sirup.
IR (film) u ro ci K , s : <2>500 (SH), 1640 (pyridini-ium), 1572, 1520, 1478, 1200 (sulfonat),1040, 833 og 768 cm" ;
"""HMR (DMSO-dg) 6: 2,31 (3H, s, CH3SC>3~) , 2,62 (s, CH3 på pyridinium), 2,2-2,9 (4H, SH, CH3 på pyridinium), 3,04 (2H, m, CH2S), 4,68 (2H, t, J=6,4 Hz, CH2N<+>), 8,01 (2H, d, J=6,6 Hz, Hm av pyridinium), 8,89 (2H, d, J=6,6 Hz, Ho av pyridinium);
UV (H2<0>) <x>maks: 256 (e4100), 221 (e7544) mu.
B. 1-( 2- merkatoetyl)- 4- metylpyridinium- p- toluensulfonat
Til en suspensjon av p-toluensulfonsyre (1,72 g, 0,01 mol)
i 6,5 ml benzen ble det satt 4-pikolin (1,17 ml, 0,012 mol). Den resulterende blanding ble omrørt under nitrogen ved 23°C i 30 minutter, behandlet med etylensulfid (0,65 ml, 0,011 mol) og omrørt ved 75° i 24 timer. Mere etylensulfid (0,65 ml, 0,011 mol) ble tilsatt, og omrøringen fortsatte ved 75°C i ytterligere 24 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til 23°C og fortynnet med 5 ml vann og 8 ml eter. Det vandige sjikt ble separert fra og vasket med 3 x 8 ml eter. Sporene av organiske oppløsningsmidler ble fjernet under vakuum og forbindelsen kromatografert på u-bondapak C-18
med vann som elueringsmiddel, hvorved man oppnådde 2,94 g eller 90% av tittelforbindelsen som en farveløs sirup.
IR (film) umaks: 2510 (SH), 1640 (pyridinium), 1595, 1582, 1475, 1200 (sulfonat), 1031, 1010, 818 cm"<1>.
<1>HMR (DMSO, dg) 6: 2,29 (3H, s, CH3 på pyridinium), 2,61
(s, CH3, Ph), 2,4-2,8 (4H, SH, CH3Ph), 3,03 (2H, m [tilsetning av D20 ga en t, J=6,4 Hz, ved 3,04], CH2S), 4,68 (2H, t, J=6,4 Hz, CH2N<+>), 7,11, 7,49 (4H, 2d, J=7,9 Hz, fenyl), 8,00 (2H, d, J=6,5 Hz, Hm av pyridinium), 8,89 (2H, d, J=6,5 Hz, Ho av pyridinium);
UV (H2<0>) <x>maks: 256 (e4315), 222 (el7045) mu .
C. Paranitrobenzyl- 3-[ 2-( 1-( 4- metylpyridinium)) etyltio]- 6a-[ 1-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0) hept- 2- en-2- karboksylat- difenylfosfat
Til en kald (0°C) oppløsning av p-nitrobenzyl-6a-[1-(R)-hydroksyetyl]-3,7-diokso-l-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-' karboksylat (0,522 g, 1,5 mmol) i 6 ml acetonitril, holdt under en nitrogenatmosfære, ble det satt diisopropyletylamin (0,314 ml, 1,8 mmol) fulgt av difenylklorfosfat (0,373 ml, 1,9 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 4 5 minutter og behandlet dråpevis med en oppløsning av 1-(2-merkaptoetyl)-4-metylpyridiniummetansulfonat (0,539 g, 2.16 mmol) i 1,8 ml acetonitril, fulgt av diisopropyletylamin (0,314 ml, 1,8 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 0°C i 1 time, fortynnet med 24 ml kaldt vann av 0°C og helt på toppen av en 2,5 x 8,5 cm u-bondapak C-18-kolonne. Eluering av kolonnen, først med 100 ml av en blanding av
25% acetonitril og 75% vann og deretter med 100 ml av en blanding av 50% acetonitril og 50% vann, ga etter lyofilisering av de passende fraksjoner 0,91 g eller 83% av tittelforbindelsen som et gulaktig pulver.
IR (KBr) umaks: 3700-2800 (OH), 1770 (C=0 av B-laktam),
1700 (C=0 av pNB-ester), 1640 (pyridinium), 1595 (fenyl), 1520 (N02), 1340 (N02), 890 cm"<1> (N02).
<1>HMR (DMSO, d,) 6: 1,16 (3H, d, J=6,2 Hz, CH-.CH0H) , 2,61 (s, CH3 på pyridinium), 3,1-3,7 (3H, m, H-6, CH2S), 3,7-4,4 (2H, m, H-5, CH3CHOH), 4,79 (2H, brt, J=6,3 Hz, CH2N<+>), 5.17 (d, J=4,9 Hz, OH), 5,37 (sentrum av ABq, J=14,l Hz, CH2 av pNB), 6,7-7,4 (10H, m, fenyl), 7,69 (2H, d, J=8,8 Hz, Ho av pNB), 8,00 (2H, d, J=6,5 Hz, Hm av pyridinium), 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz, Hm av pNB), 8,92 (2H, d, J=6,5 Hz, Ho av pyridinium);
UV (H2<0>) <*>maks: 262 (el0835), 311 (e9670) m|i.
Analyse for C-. ,H., gN30,QSP . 1, 5H20;
D. 3-[ 2-( 1-( 4- metylpyridinium)) etyltio]- 6a -[ 1-( R)- hydroksyetyl ]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0) hept- 2- en- 2- karboksylat Til en oppløsning av p-nitrobenzyl-3-[2-(1-(4-metylpyridinium))-etyltio]-6a-[l(R)-hydroksyetyl -7-okso-l-azabicyklo-(3.2.0)hept-2-en-2-karboksylat-difenylfosfat (0,587 g, 0,80 mmol) i 30 ml våt tetrahydrofuran ble det satt 30 ml eter, monobasisk kaliumfosfat-natriumhydroksyd-buffer (0,15 M, 14,7 ml, pH 7,22) og 0,59 g 10% palladium på trekull. Den resulterende blanding ble hydrogenert under ca. 32 kp/cm<2> ved 23°C i 1,25 timer. Det organiske sjikt ble separert fra og ekstrahert med 2 x 6 ml puffer. De vandige ekstrakter ble forenet, filtrert gjennom en Celite-pute, vasket med 3 x 20 ml eter, pumpet for fjerning av spor av organiske oppløsningsmidler og helt på toppen av en 2,5 x 10 cm kolonne av u-bondapak C-18. Eluering av kolonnen med vann og lyofilisering av de passende fraksjoner ga 0,136 g tilsvarende 49% av tittelforbindelsen som et gulaktig pulver .
IR (KBr) u , : 3700-300 (OH), 1770 (C=0 av B-laktam), 1642
rriciJC s
(pyridinium), 1592 cm (karboksylat);
<1>HMR (D20) «: 1,19 (3H, s, J=6,3 Hz, CH3CHOH), 2,59 (3H, s, CH3 på pyridinium), 2,84 (d, J= 9,1 Hz, H-4), 2,90 (d, J=9,l Hz, H-4), 3,0-3,6 (3H, m, CH2S, H-6), 3,86 (dd, J=9,l Hz, J=2,6 Hz, H-5), 4,12 (m, CH3CHOH), 4,5-4,9 (CH2N<+> maskert med HOD), 7,80 (2H, d, J=6,6 Hz, Hm av pyridinium), 8,58 (2H, d, J=6,6 Hz, Ho av pyridinium);
UV (<H>2<0>) ^ aks- <2>56 (e5510), 262 (e5360), 296 (e7050) m,
[a]^<3> -20,8° (c 0,48, H20),
o o -4
= 12,8 t (malt ved en konsentrasjon pa 10 Mi en fosfatbuffer, pH 7,4 ved 36,8°C).
Eksempel 7
Fremstilling av ( 5R)- 3-[ 2-( 4- metyltiopyridinio) etyltio]-( 6S)-[( IR)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo[ 3. 2. 0] hept- 2- en- 2-karboksylat
A. 4- metyltiopyridin*
4-merkaptopyridin (5,55 g, 50,0 mmol; Aldrich) ble oppløst i 50 ml kokende absolutt EtOH. Det uoppløselige materialet
♦Fremstilling av denne forbindelse ble rapportert i King & Ware, J. Chem. Soc., 873 (1939). Man fulgte den her beskrevne prosedyre.
ble fjernet ved filtrering over Celite. Filtratet ble oppvarmet til gjenoppløsning og etter avkjøling til ca. 50°C ble det på en gang tilsatt metyljodid (3,17 ml, 51,0 mmol; Aldrich). Blandingen ble avkjølt til krystallisering. Filtrering av det faste stoff ga 6,77 g (26,7 mmol, utbytte 53,5 %) av tittelforbindelsen som hydrojodid;
"""HMR (D20) 6: 2,70 (3H, s, -SCH3) og 7 , 65-7 ,77-8 , 35-8 ,48 ppm (4H, A2B2-type, aromatisk-Hs);
IR (nujo<l>) <u>maks: 1615, 1585 (aromatisk og 780 cm"<1>;
UV (H2<0>) <x>maks: 227 (e2,20 x IO<4>) og 298 nm (el,64 x IO<4>).
Hydrojodidet (6,33 g, 25,0 mmol) ble oppløst i 40 ml H20
og det uoppløselige materialet fjernet og vasket med 10 ml H20. Til filtratet ble det ved 0-5°C satt 5 g NaOH-tabletter og man ekstraherte med 3 x 25 ml Et20, det vandige lag ble mettet med NaCl. De forenede organiske ekstrakter ble vasket to ganger med saltvann, tørket over MgSO^ og inndampet til et utbytte på 2,92 g (23,4 mmol, totalt utbytte 50%) av tittelforbindelsen som en olje;
"""HMR (CDC13) 5; 2,48 (3H, s, -SCH3) og 7,03-7,13-8,38-8,48 ppm (4H, A2B2~type, aromatisk-Hs);
IR (film) <u>maks: 1580 og 800 cm<-1>.
B. 4- metyltio- N-( 2- merkaptoetyl) pyridiniummetansulfonat
4-metyltiopyridin (2,75 g, 22,0 mmol) ble satt langsomt til
metansulfonsyre<*> (0,65 ml, 10,5 mmol) under avkjøling i et isbad. Til dette faste stoff ble det satt etylensulfid<*>
(0,66 ml, 11,0 mmol, Aldrich), og blandingen ble oppvarmet til 50-60°C i 2 timer. Ettersom reaksjonen skred frem, gikk det faste stoff i oppløsning. Etter avkjøling ble reaksjonsblanidngen oppløst i 5 ml H^O og vasket med 5x4 ml Et20. Det uklare vandige sjikt ble filtrert over Celite og filtratet renset ved revers-fase-silikagel-kolonnekroma-tografi (<C>lg u-bondapak, 10 g) og man eluerte med H20. Hver fraksjon på 10 ml ble samlet. Fraksjonene 2 og 3 ble forenet og renset igjen ved hjelp av revers-fase-kolonnen. Fraksjon 2 ga 1,258 g (4,48 mmol, utbytte 42,6%) av tittelforbindelsen som en viskøs olje;
^HMR (DMSO-d6, CFT-20) 6: 2,32 (3H, s, MeSC^<9>), 2,72 (3H, s, -SMe), 2,68 (lH,m SH), 2,9-3,2 (3H, m, -CH2S-), 4,59 (2H, t, J=6,4 Hz, -CH2N<ffi>), 7,97 (2H, "d", J=7,2 Hz, aromatisk-Hs) og 8,72 ppm (2H, "d", J=7,2 Hz, aromatisk-Hz),
IR (ren) u in ciK, . s : 1630, 1200 (br, -SOj,6, 785 og 770 cm<-1>.
<*> Disse reagenser destilleres før bruk.
C. ( 5R)- p- nitrobenzyl- 3- 12-( 4- metyltiopyridinio) etyltio]-( 6S)-[( IR)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo[ 3. 2. 0]-hept- 2- en- 2- karboksylatklorid
Til en oppløsning av (5R)-p-nitrobenzyl-3,7-diokso-(6S)-[(IR)-hydroksyetyl]-1-azabicyklo 3.2.0 heptan-(2R)-karboksylat (475 mg, 1,36 mmol) og diisopropyletylamin (0,24 ml,
1,4 mmol) i CH3CN (5 ml) ble det ved 0-5°C under nitrogen satt difenylklorfosfat (0,29 ml, 1,41 mmol). Blandingen ble omrørt ved 0-5°C i 30 minutter. Til denne blanding ble det satt en oljeaktig suspensjon av 4-metyltio-N-(2-merkaptoetyl)pyridiniummetansulfonat (678 mg, 1,45 mmol;
60% rent) i 1,5 ml CH^CN, fulgt av diisopropyletylamin (0,24 ml, 1,4 mmol). Blandingen ble omrørt ved 0-5°C i 1 time. Umiddelbart etter tilsetning av basen ble det dannet et gulaktig bunnfall. Dette ble filtrert av og vasket med 3 ml kald CH^CN til et utbytte på 314 mg av et gulaktig fast stoff. Dette ble triturert fra 5 ml 10% MeOH i H20 og man oppnådde 341 mg (0,618 mmol, utbytte 45,4%)
av tittelforbindelsen i form av hvite krystaller med smeltepunkt 118-120°C;
<1>HMR (DMSO-dg, CFT-20) 6: 1,16 (3H, d, J=6,l Hz, 1'-CH3), 2,72 (3H, s, -CH3), 3,1-3,7 (5H, m), 3,7-4,3 (2H,m),
4,71 (2H, t, J=6,3 Hz, -C^N®) , 5,15 (1H, d, J=4 ,9 Hz, OH) , 5,20-5,35-5,40-5,55 (2H, ABq, C02CH2-Ar), 7,70 (2H, "d", J=8,8 Hz, nitrofenyl-Hs), 7,97 (2H, "d", J=7,0 Hz, pyridinio-Hs), 8,25 (2H, "d", J=8,8 Hz, nitrofenyl-Hs), og 8,76 ppm (2H, "d", J=7,l Hz, pyridinio-Hs);
IR (nujol) «maks: 3250 (OH), 1775 (6-laktam), 1700 (ester) og 1625 cm 1 (pyridinio);
UV (abs, EtOH) *maks: 308 nm (e4,47 x 10);
[a]^3° + 24,8 (c 0,5, MeOH);
Analyse for C„.H_,N,0,S~C1 .H_0:
J 24 26 3 6 2 2 D. ( 5R)- 3-[ 2-( 4- metyltiopyridinio) etyltio]-( 6S)-[( 1R)-hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo 3. 2. 0 hept- 2- en- 2-karboksylat
(5R)-p-nitrobenzyl-3-[2-(4-metyltiopyridinio)etyltio]-(6S)-[(IR)-hydroksyetyl]-7-oksd-l-azabicyklo[3.2.0]hept-2-en-2-karboksylatklorid (380 mg, 0,688 mmol) ble oppløst i 31,5 ml THF og fosfatbuffer., pH 7,4, (31,5 ml, 0,05 M Fisher) og fortynnet med 31,5 ml Et20. Denne oppløsning ble blandet med 10% Pd-C (380 mg, Engelhard) og hydrogenert ved ca.
2,5 kp/cm<2> på en Parr-ryster ved romtemperatur i 1 time. Det vandige sjikt ble' filtrert over Celite for å fjerne katalysatoren og vasket med 2 x 5 ml H^O. Filtratet og vaskevannet ble forenet og vasket med 2 x 30 ml Et20. Det
vandige sjikt ble pumpet av for å fjerne alle organiske oppløsningsmidler og renset ved revers-fase-søylekromato-grafi (Clg u-bondapak, 13 g. Waters Associates), idet det ble eluert med H20. Fraksjoner med en UV-absorpsjon ved 307 nm ble samlet (ca. 1 liter) og lyofilisert, hvorved man oppnådde 127 mg (0,334 mmol, utbytte 48,5%) av tittelforbindelsen som et gulaktig pulver;
"""HMR (D20, CFT-20) 6 : 1,20 (3H, d, J=6,4 Hz, 1'-CH3) ,
2,64 (3H, s, -SCH3), 2,81 (2H,m, -SCH2~), 3,19 (1H, dd, J6_1,<=>6,l Hz, Jg_5=2,6 Hz, 6-H), 3,32 (2H, dd, J=ll Hz, J=5,5 Hz, 4-Hs), 3,92 (1H, dt, J=9,2 Hz, Jc ,-=2,6 Hz, 5-H), 4,1 (lH,m, l'-H), 4,61 (2H, t, J=5,9 Hz, -CH2N ), 7,70 (2H, "d", J=7,l Hz, aromatisk-Hs) og 8,40 ppm (2H, "d", J=7,1 Hz, aromatisk-Hs);
IR (KBr, plate) "maks: 3400 (OH), 1750 (B-laktam), 1630 (pyridinium) og 1590 cm (karboksylat;
UV (H2<0>) xmaks: <2>31 U9800) og 307 nm (e25000);
[a]"0 + 3,14 (c 0,5, H20) .
Eksempel 8
Fremstilling av 3-[ 2-( 3- metoksy- l- pyridinium) etyltio]- 6a-[ 1'-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0) hept- 2- en- 2-karboksylat A. 1-(2-merkaptoetyl)-3-metoksypyridiniummetansulfonat
Til 5°C forkjølt 3-metoksypyridin (698 g, 6,4 mmol) ble
det dråpevis satt metansulfonsyre (0,216 ml, 3,05 mmol)
og etylensulfid (0,19 ml, 3,2 mmol). Blandingen ble deretter oppvarmet til 60°C i 18 timer, avkjølt til 20°C, fortynnet med 10 ml vann og vasket med 3 x 10 ml eter. Den vandige fasen ble under høyvakuum pumpet i 15 minutter og heit på en C-^g-revers-f ase-kolonne . Tittelf orbindelsen ble eluert med vann. De passende fraksjoner ble forenet og dampet inn under høyt vakuum, hvorved man oppnådde det ønskede tiol (61,6 mg,utbytte 76,3%);
IR (CH2C12) <u>maks<:><2>550 (w, SH)'og 1620, 1600, 1585 cm"<1 >(m, aromatisk);
■""HMR (DMSO-d,) 6: 8, 90-7, 90 (4H, m, aromatisk C-H) , 4,72 (2H, t, J=6,6 6 Hz, CH2N +), 4,01 (3H, s, 0CH3), 3,5-3,0 (m, skjult CH2S), 2,66 (1H, dd, J=9,5 Hz, J=7,5 Hz, SH) og 2,31 ppm (3H, s, CH3S03).
B. para- nitrobenzyl- 3[ 2-( 3- metoksy- l- pyridiniumklorid) etyltio ]- 6a-[ 1'-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0)-hept- 2- en- 2- karboksylat
En kald (0°C) oppløsning av p-nitrobenzyl-6a-[1'-(R)-hydroksyetyl ]-3,7-diokso-l-azabicyklo(3.2.0)heptan-2-karboksylat (1,04 g, 3 mmol) i 12 ml acetonitril ble behandlet dråpevis med diisopropyletylamin (0,63 ml, 3,6 mmol) og difenylklorfosfat (0,75 ml, 36 mmol) og omrørt ved 0°C i 30 minutter. Det resulterende enol-fosfat ble behandlet med 1-(2-merkaptoetyl) -3-metoksypyridiniummetansulfonat (1,14 g, 4,3 0 mmol)
i 7 ml CH3CN,diisopropyletylamin (0,63 ml, 4,3 0 mmol), om-rørt i 30 minutter og avkjølt ved -10°C i 30 minutter. Det faste stoff som ble felt ut fra blandingen, ble filtrert av, vasket med 2 ml kald acetonitril og tørket under dannelse av tittelforbindelsen (1,32 g, utbytte 82%);
IR (nujol) u : 3320 (m, OH), 1780, 1765 (s, B-laktam C=0),
rriciKS i
1700, 1695 (m, ester C=0) og 1520 cm" (s, N02);
<1>HMR (DMSO dg) 6: 9,01 (1H, bs, H-3 aromatisk), 8,75 (1H,
bd, J=5,4 Hz, H-6 aromatisk), 8,35-7,95 (4H, m, H-aromatisk), 7,70 (2H, d, J=7,7 Hz, H-aromatisk), 5,37 (2H, sentrum av ABq, J=13 Hz, CH2pNB), 5,17 (1H, d, J=4,9 Hz,
OH), 4,87 (2H, t, J=6,3, CH2-N<®>), 4,35-3,75 (2H, m, H-5
og H-l'), 4,00 (3H, s, OCH3), 3,56 (del av en t, J=6,3 Hz, CH2S), 3,5-3,20 (3H, m, H-6, H-3) og 1,16 ppm (3H, d,
J=6,l Hz, CH3CHO).
C. 3-[ 2-( 3- metoksy- l- pyridinium) etyltio]- 6a-[ 1'-( R)-hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0)hept-2-en-2-karboksylat
En oppløsning av para-nitrobenzyl-3[ 2-(3-metoksy-l-pyridiniumklorid)etyltio]-6a-[1'-(R)-hydroksyetyl]-7-okso-l-azabicyklo-(3.2.0)hept-2-en-2-karboksylat (600 mg, 1,12 mmol) i 25 ml THF, 25 ml eter og f osf atbuf f er, pH 7,4 (0,1 M, 25 ml) ble hydrogenert i en Parr-ryster over 10% Pd/C (1,1 g) il time ved ca. 2,8 kp/cm2 . Blandingen ble fortynnet med eter og den vandige fase filtrert gjennom herdet filterpapir nr. 52. Det vandige sjikt ble vasket med 2 x 20 ml eter, pumpet under vakuum og helt på en silikagel-revers-fase-kolonne. Tittelforbindelsen ble eluert med vann inneholdende 2 og 5% acetonitril. De passende fraksjoner ble forenet og lyofilisert under dannelse av et gult fast stoff, som igjen ble renset ved hjelp av HPLC under dannelse av penem-karboksylatet (150 mg, 38%);
IR (nujol) u maK , s: 1750 (s, /<3->laktam C=0) og 1580 cm<-1> (s, karboksylat);
<1>HMR (D20) 6: 8,55-8,30 (2H,m, H-2, H-6 aromatisk), 8,17-7,75 (2H, m, H-3, H-4 aromatisk), 4,77 (2H, t, J=5,9 Hz, CH2N<®>), 4,10 (1H, del av 5 linjer, J=6,3 Hz, H-l'), 3,97 (3H, s, OCH3), 3,85, 3,82 (2 linjer, del av dt, J=2,6 Hz, del av H-5), 3,42 (2H, t, J=5,9 Hz, CH2~S), 3,25 (1H, dd,
J=6,l Hz, J=2,6 Hz, H-6), 2,99-2,60 (2H, 6 linjer, del av H-3) og 1,20 ppm (3H, d, J=6,4 Hz, CH3);
UV (H20), c 0,05) xmaks: 290 (e 10517), 223 (£ 6643);
(0,1 M fosfatbuffer, pH 7,4, 37°C) 20 t.
Eksempel 9
Fremstilling av ( 5R, 6S)- 3- [ [ 2-( 3- metyltiopyridinio) etyl] tio]-6-[ 1-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo[ 3. 2. 0] hept- 2- en-2- karboksylat
A. 3- metyltio- l-( 2- merkaptoetyl) pyridiniumklorid
Til en oppløsning av 3-metyltiopyridin<1> (2,00 g, 0,016 mol)
i 10 ml eter settes 15 ml IN HC1 og det hele rystes grundig. Den vandige fase skilles av, vaskes med 10 ml eter og dampes inn. Det gjenblevne hydrokloridet tørkes deretter i vakuum over P2°5 unc^er dannelse av et hvitt fast stoff. Til dette faste hydroklorid settes 3-metyltiopyridin (1,88 g, 0,015 mol) og etylensulfid (0,89 ml, 0,015 mol), og den resulterende blanding ble oppvarmet i et oljebad til 55-65°C under
"'"Fremstilt ved metoden ifølge J.A. Zoltewiez og C. Nisi,
"J. Org. Chem." 34, 765 (1969).
N2 i 15 timer. Dette ga en lett uklar olje som ble samlet
i 125 ml H-,0 og vasket med CH^C^ . Den vandige oppløsning ble konsentrert til ca. 2 ml og deretter ble det tilsatt noen få dråper acetonitril for å gjøre blandingen homogen. Den resulterende vandige oppløsning ble satt til en C-^g-revers-fase-kolonne. Eluering med H20 og etterfølgende inndamping av de relevante fraksjoner ga produktet (2,66 g, 80%) som enblekgul, viskøs olje.
IR (fil<m>) u mak, s: 2410 (br, -SH) cm"<1>;
<1>HNMR (db ,DMSO+D i_0) 6: 8,88-7,88 (m, 4H, aromatisk), 4,70
(t, J=6,5 Hz, 2H, N-CH2), 3,08 (skrå t, J=6,5 Hz, 2H, S-CH2), 2,64 (s, 3H, S-Me).
B. p- nitrobenzyl-( 5R, 6S)- 3-[ 2-( 3- metyltiopyridinio) etyltio]-6- [ 1-( R)- hydroksyetyl ]- 7- okso- l- azabicyklo[ 3. 2. 0] hept- 2-en- 2- karboksylatklorid
En oppløsning av p-nitrobenzyl-(5R,6S)-6-[1-(R)-hydroksyetyl ]-3,7-diokso-l-azabicyklo[3.2.0]heptan-2-karboksylat (0,522 g, 1,50 mmol) i 7 ml tørr acetonitril avkjøles til 0°C og deretter tilsettes dråpevis diisopropyletylamin (0,287 ml, 1,65 mmol). Til den resulterende gulbrune opp-løsning ble det dråpevis tilsatt difenylklorfosfat (0,342 ml, 1,65 mmol) og reaksjonsblandingen ble holdt ved 0°C i 30 minutter. Deretter ble det tilsatt diisopropyletylamin (0,313 ml, 1,80 mmol), fulgt av en oppløsning av 3-metyltio-1-(2-merkaptoetyl)pyridiniumklorid (0,398 g, 1,80 mmol) i 0,70 ml tørr DMF. Ca. 1 minutt etter avsluttet tilsetning skilte det seg ut et bunnfall fra reaksjonsblandingen og ytterligere avkjøling ved -10°C i 10 minutter ga en fast, oransjefarvet masse. Dette faste stoff ble deretter triturert med acetonitril og resten samlet ved filtrering. Resten ble vasket med acetonitril, deretter aceton og til slutt tørket i vakuum og man oppnådde 0,455 g tilsvarende 55% av produktet som et krem farvet fast stoff. Det forenede filtrat ble dampet inn under dannelse av en gul olje som ble samlet i et minimalt volum acetonitril og avkjølt ved 0°C i 30 minutter. Filtrering av denne blanding ga ytterligere 0,139 g produkt som et lysegult fast stoff. Det samlede utbytte var 0,594 g (72%).
IR (KBr) u_ , : 3345 (br, -GH), 1770 (B-laktam CO), 1680 (-C02pNB) cm"<1>;
<1>HNMR (dg-DMSO) 6: 8,98-7,96 (m, 4H, pyridinium aromatisk), 8,20-7,65 (ABq, J=7,0 Hz, 4H, pNB aromatisk), 5,53-4,80 (m, 4H), 4,3-3,7 (m, 2H) , 3,6-3,25 (m, 6H), 2,66 (s, 3H, S-Me), 1,16 (d, J=6,0 Hz, 3H, CHMe).
C. ( 5R, 6S)- 3-[ 2-( 3- metyltiopyridinio) etyltio]- 6-[ 1-( R)-hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo 3. 2. 0 hept- 2- en- 2-karboksylat
Til en blanding av p-nitrobenzyl-(5R,6S)-3-[2-(3-metyltiopyridinio)etyltio ]-6- [1-(R)-hydroksyetyl] -7-okso-l-azabicyklo [3.2.0]hept-2-en-2-karboksylatklorid (0,551 g, 1,0 mmol) og 0,55 g 10% palladium på trekull i 25 ml fosfatbuffer (0,05 M, pH 7,4) ble det satt 5 ml THF og 2 5 ml eter. Denne blanding ble hydrogenert (Parr) ved ca. 2,8 kp/cm<2> i
1 time. Reaksjonsblandingen ble deretter filtrert gjennom Celite og filterkaken vaskes med H20 og eter. Den vandige fase ble separert og vasket ytterligere tre ganger med eter. Etter fjerning av gjenværende organiske oppløsningsmidler
i vakuum, ble den vandige oppløsning avkjølt til 0°C og pH-verdien innstilt til 7,0 med mettet vandig NaHCO^. Denne oppløsning ble øyeblikkelig satt til en C^g-revers-fase-kolonne. Eluering med H^O og etterfølgende lyofilisering av de relevante fraksjoner ga 0,25 g av et klart gult,
fast stoff. Dette materialet ble renset igjen ved revers-fase-HPLC og man oppnådde 0,210 g tilsvarende 55% av produktet som et lysegult fast stoff.
IR (KBr) w ITlclJ, C S: 3400 (br, -OH), 1755 (B-laktam CO), 1590 (-C02~) cm<-1>;
<1>HNMR (D20) «: 8,60-7,76 (m, 4H, aromatisk), 4,76 (t, J=5,8 Hz, 2H, N-CH2), 4,13 (d av q, J=J'=6,3 Hz, 1H, H-l■), 3,95 (d av t, J=9,0 Hz, J'=2,8 Hz, 1H, H-5), 3,45-2,75 (m, 5H), 2,59 (s, 3H, S-Me), 1,20 (d, J=6,4 Hz, 3H, CHMe);
UV (H20) xmaks-' 296 U8509), 273 (el3005), 231 (ell576) nm;
t^ (pH 7,4, 36,8°C) 20 t.
Eksempel 10
Fremstilling av 3-[ 2-( 1-( 2, 6- dimetylpyridinium) etyltio]- 6a -
[ 1-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0) hept- 2- en- 2-karboksylat
A. l-( 2- merkaptoetyl)- 2, 6- dimetylpyridiniummetansulfonat
En blanding av 2,6-dimetylpyridin (19,2 ml, 0,165 mol) og metansulfonsyre (3,27 ml, 0,050 mol) ble omrørt i 15 minutter, behandlet med etylensulfid (4,17 ml, 0,070 mol) og om-rørt ved 100°C i 42 timer under en nitrogenatmosfære. Etter avkjøling til 25°C ble reaksjonsblandingen fortynnet med 45 ml eter og 30 ml vann. De to sjikt ble separert og det organiske sjikt ekstrahert med 2 x 5 ml vann. De vandige sjikt ble forenet, filtrert gjennom en Celite-pute, vasket med 2 x 15 ml eter, pumpet for å fjerne spor av organiske oppløsningsmidler og helt på toppen av en 3,0 x 12 cm u-bondapak C-18-kolonne. Eluering med en blanding av 3% acetonitril og 97% vann ga etter lyofilisering av de passende fraksjoner 2,5 g av den urene tittelforbindelse som en sirup. Den renses igjen ved hjelp av HPLC (u-bondapak C-18), hvorved man oppnådde 0,90 g tilsvarende 7% av tittelforbindelsen.
IR (film) u , : 2520 (SH), 1640 og 1625 (pyridinium),
1585, 1490, 1200 cm (sulfonat);
<1>HMR (DMSO-dg + D20) 6: 2,36 (3H, s, CH2SC>3~), 4,62 (2H, m, CH2N<+>), 7,74 (2H, m, Hm av pyridinium), 8,24 (1H, m, Hp av pyridinium);
UV (H20) <x>maks: 272 (4080 mu.
B. Para- nitrobenzyl- 3-[ 2-( l-( 2, 6- dimetylpyridinium)) etyltio ]- 6a- [ 1-( R)- hydroksyetyl]- 6- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0)-hept- 2- en- karboksylat- difenylfosfat
Til en kald (0°C) oppløsning av p-nitrobenzyl-6a-[1-(R)-hydroksyetyl ]-3,7-diokso-l-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboksylat (0,658 g, 1,89 mmol) i 6 ml acetonitril, som holdes under en nitrogenatmosfære, ble det satt diisopropyletylamin (0,394 ml, 2,26 mmol) og difenylklorfosfat (0,4 68 ml, 2,2 6 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 30 minutter og deretter behandlet med en oppløsning av 1-(2-merkaptoetyl)-2,6-dimetylpyridiniummetansulfonat (0,720 g, 2,73 mmol) i 3 ml acetonitril, fulgt av diisopropyletylamin (0,394 ml, 2,26 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 0°C i 2 timer, fortynnet med 27 ml kaldt vann av 0°C og helt på toppen av en 25 x 9,0 cm kolonne av u-bondapak C-18. Eluering med blandinger av acetonitril
og vann og lyofilisering av de passende fraksjoner ga 0,92
g tilsvarende 65% av tittelforbindelsen;
IR (KBr) umaks= 3700-3000 (OH), 1765 (C=0 av B-laktam), 1690 (C=0 av pNB-ester), 1620 (pyridinium), 1590 (fenyl), 1517 (N02), 1330 (N02), 880 cm"<1> (N02).
<1>HMR (DMSO, dg) 6i 1,15 (3H, d, J=6,2 Hz, CH3CHOH), 2,7-3,7 (11H, CH2S, 2-CH3 på pyridinium, H-4, H-6), 3,7-4,4 (2H, CH3CHOH, H-5), 4,7 (2H,m, CH2N<+>), 5,14 (1H, d, J=4,5 Hz, OH), 5,37 (sentrum av ABq, J=13,2 Hz, CH2 av pNB), 6,7-7,5 (10H, m, fenyl), 7,5-8,7 (7H, pyridinium, H'er av pNB);
UV (H20) xmaks= 274 (e 14150), 319 (e 9445) mu.
C. 3-[ 2-( l-( 2, 6- dimetylpyridinium)) etyltio]- 6a-[ 1-( R)-hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0) hept- 2- en- 2-karboksylat
Til en oppløsning av p-nitrobenzyl-3-[2-(1-(2,6-dimetylpyridinium) )etyltio ]-6a-[1-(R)-hydroksyetyl]-7-okso-l-azabicyklo (3.2.0)hept-2-en-2-karboksylatdifenylfosfat (0,80 g, 1,07 mmol) i 42 ml våt tetrahydrofuran ble det satt 42 ml eter, monobasisk kaliumfosfat-natriumhydroksyd-puffer (0,15 M, pH 7,22, 21 ml) og 0,80 g 10% palladium på trekull. Den resulterende blanding ble hydrogenert i 1 time under ca. 2,8 kp/cm<2> ved 23°C og filtrert gjennom en Celite-pute. De to sjikt ble separert og det organiske sjikt ekstrahert med 3 x 8 ml buffer. Den vandige fase ble forenet, vasket med 50 ml eter, pumpet for å fjerne spor av organiske oppløsningsmiddel og helt på toppen av en 3,0 x 10,2 cm u-bondapak G-18-kolonne. Eluering av kolonnen med en blanding av 5% acetonitril og 95% vann og lyofilisering av de passende fraksjoner ga tittelforbindelsen i en mengde av 0,246 g tilsvarende 63% som et gulaktig pulver;
IR (KBr) u . : 3700-2800 (OH), 1750 (C=0 av B-laktam),
maXs _,
1620 (pyridinium), 1585 cm (karboksylat);
<1>HMR (D20) «: 1,23 (3H, d, J=6,4 Hz, CH3CHOH), 2,5-3,5 (11H, H-4, H-6, CH2S, 2CH3 på pyridinium), 3,8-4,4 (2H, CH3CHOH, H-5), 4,5-4,9 (CH2N+, HOD), 7,64 og 7,74 (2H,
A del av A2B-system, Hm av pyridinium), 8,07, 8,16, 8,18 og 8,27 (1H, B del av A2B-system, Hp av pyridinium);
UV (H20) xmaks-' 277 (e9733), 300 (£8271) mu.
[*]* 3 +50,7° (C 0,48, H20);
Analyse for C^8H22N2°4S'1'5H2°'
Eksempel 11
Fremstilling av ( 5R, 6S)- 3-[ 2-( 2- metyltio- 3- metylimidazolio)-etyltio]- 6-[ 1-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo[ 3. 2. 0] hept-2- en- 2- karboksylat A. 2- metyltio- 3- mety1- 1-( 2- merkaptoetyl) imidazolium-trifluormetansulfonat
Trifluormetansulfonsyre (1,38 ml, 0,015 mol) ble dråpevis tilsatt til 2-metyltio-l-metylimidazol<1> (4,0 g, 0,03 mol) ved 0°C under N2. Deretter ble det tilsatt etylensulfid (0,9 ml, 0,015 mol) og blandingen ble oppvarmet til 55°C under N2 i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble triturert tre ganger med eter og resten samlet i aceton, filtrert og dampet inn. Dette ga produktet i en mengde av 4,2 g tilsvarende 82% som et semikrystallinsk fast stoff som ble anvendt som sådant uten ytterligere rensing.
IR (film) u , : 2550 (w, sh) cm"<1>;
TC13.KS
<1>HNMR (dg-aceton) 6: 7,97 (s, 2H), 4,66 (t, J=7 Hz, 2H, metylen), 4,17 (s, 3H, N-Me), 3,20 (d av t, J=7 Hz, J'=9 Hz, 2H, metylen), 2,72 (s, 3H, S-Me), 2,20 (t, J=9 Hz, 1H,
-SH) .
Fremstilt som i A. Wohl og W. Marckwald, "Chem. Ber."
22, 1353 (1889) .
B. p- nitrobenzyl-( 5R, 6S)- 3-[ 2-( 2- metyltio- 3- métyl- imidazolio)-etyltio]- 6-[ 1-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo-[ 3. 2. 0] hept- 2- en- 2- karboksylatdifenylfosfat.
Til en oppløsning av p-nitrobenzyl-(5R,6S)-6-[1-(R)-hydroksyetyl ]-3,7-diokso-l-azabicyklo[3.2.0]heptan-2-karboksylat (1,40 g, 4,0 mmol) i 50 ml tørr acetonitril ved 0°C under N2 ble det dråpevis tilsatt diisopropyletylamin (0,76 ml, 4,4 mmol) fulgt av difenylklorfosfat (0,91 ml, 4,1 mmol). Etter omrøring av reaksjonsblandingen ved romtemperatur i 1 time ble det tilsatt diisopropyletylamin (0,76 ml, 4,4 mmol) og deretter dråpevis en oppløsning av 2-metyltio-3-metyl-l-(2-merkaptoetyl)imidazolium-trifluormetansulfonat (2,0 g,
5,9 mmol) i 5 ml acetonitril. Reaksjonsblandingen ble holdt ved romtemperatur i 1% time og deretter konsentrert i vakuum for å oppnå en gummi. Denne ble samlet i H^O og tilsatt til en C-^g-revers-f ase-kolonne. Eluering med H20, deretter med 20% acetonitril-H.,0 og tilslutt 30% acetonitril-H20, fulgt av lyofilisering av de passende fraksjoner ga produktet i en mengde av 0,90 g tilsvarende 30% som et lysegult fast stoff.
IR (KBr) u , : 3380 (br, OH), 1770 (B-laktam CO) cm"<1>;
IT13XS
<1>HNMR (dg-aceton) 6: 8,35 (br, s, 1H), 8,24, 7,78 (ABq, J=8,8 Hz, 4H, aromatisk), 7,89 (br s, 1H), 7,25-6,91 (m, 10H, difenylfosfat), 5,50, 5,25 (ABq, J=12 Hz, 2H, benzylisk), 4,75-4,27 (m, 3H), 4,03 (s, 3H, N-Me), 4,15-2,75 (m, 8H)., 2,53 (s, 3H, S-Me) , 1,22 (d, J=6,2 Hz, 3H, -CHMe) .
C. ( 5R, 6S)- 3-[ 2-( 2- metyltio- 3- metylimidazolio) etyltio]- 6-[ 1-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo[ 3. 2. 0] hept- 2-en- 2- karboksylat
Til en oppløsning av p-nitrobenzyl-(5R,6S)-3-[2-(2-metyltio-3-metylimidazolio)etyltio]-6-[1-(R)-hydroksyetyl]-7-okso-l-azabicyklo[3.2.0]hept-2-en-2-karboksylat-difenylfosfat (1,20 g, 1,56 mmol) i en blanding av 70 ml THF, 70 ml eter og 31 ml fosfatbuffer (0,05 M, pH 7,4) ble det satt 1,2 g 10% palladium på trekull. Denne blanding ble hydrogenert (Parr) ved ca. 2,5 kp/cm<2> i 55 minutter. Reaksjonsblandingen ble deretter filtrert gjennom Celite, og filterkaken vasket med H2O og eter. Den vandige fase ble separert, avkjølt ved 0°C og pH-verdien innstilt til 7,0 med mettet vandig NaHCO^. Etter å ha fjernet resterende organiske oppløsningsmidler under vakuum ble den vandige oppløsning tilsatt til en C-^g-revers-f ase-kolonne. Eluering med H20 og deretter 8% acetonitril-H20 og etterfølgende lyofilisering av de relevante fraksjoner ga 0,25 g av et fast stoff. Dette materialet ble renset igjen ved revers-fase-HPLC under dannelse av produktet i en mengde av 0,114 g tilsvarende 19% som et off-white fast stoff.
IR(KBr) umaks: 3420 (OH), 1750 ( 6-laktam CO) , 1590 (-CO^)
<1>HNMR (D20) 6: 7,58 (s, 2H), 4,52 (t, J=6 Hz, 2H), 4,28-3,82 (m, 2H), 3,90 (s, 3H, n-Me), 3,40-2,87 (m, 5H), 2,40 (s, 3H, S-Me), 1,20 (d, J=6,4 Hz, 3H, -CHMe);
UV (H20) xmaks: 297 (e7572), 262 (e6259), 222 (e7955) nm.
Eksempel 12
Fremstilling av ( 5R, 6S)- 3-[ 2-( 3- aminopyridinio) etyltio]- 6-[ 1-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo[ 3. 2. 0] hept- 2- en- 2-karboksylat
A. 3- amino- l-( 2- merkaptoetyl) pyridiniumklorid
3-aminopyridin (1,50 g, 0,16 mmol) ble oppsamlet i 15 ml IN metanolisk HC1 og den resulterende oppløsning inndampet inntil hydrokloridet var dannet som en olje. Til denne olje ble det satt 3-aminopyridin (1,32 g, 0,015 mmol) og etylensulfid (0,89 ml, 0,015 mmol), og den reuslterende oppløsning ble oppvarmet i et oljebad ved 60-65°C under N2 i 2 timer. En ytterligere ekvivalent etylensulfid (0,89 ml, 0,015 mmol) ble tilsatt, og oppvarmingen fortsatt ved 55-65°C i 65 timer. Reaks jonsblandingen ble vasket med CH2Cl2 og deretter samlet i 25 ml HjO. Den vandige oppløsning ble satt til en C^g-revers-fase-kolonne, som ble eluert med H^O. Inndamping av de relevante fraksjoner ga produktet i en mengde på 1,26 g tilsvarende 44% som en farveløs, viskøs olje.
IR (film) umaks: 3180 (NH2) cm"<1>;
<1>HNMR (dg-DMSO) 6: 8,19-7,59 (m, 4H, aromatisk), 4,59 (t, J=6,2 Hz, 2H, N-CH2), 3,5 (br s, 2H, -NH2), 3,20-2,77 (m, 3H) .
B. p- nitrobenzyl-( 5R, 6S)- 3-( 2-( 3- aminopyridinio) etyltio)-6-( l-( R)- hydroksyetyl)- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0) hept-2- en- 2- karboksylatdifenylfosfat
Til en oppløsning av p-nitrobenzyl-(5R,6S)-6-(1-(R)-hydroksyetyl )-3,7-diokso-l-azabicyklo(3.2.0)heptan-2-karboksylat (0,696 g, 2,0 mmol) i 10 ml tørr acetonitril ved 0°C under N2, ble det dråpevis tilsatt diisopropyletylamin (0,382 ml, 2,2 mmol) fulgt av difenylklorfosfat (0,457 ml, 2,2 mmol). Etter omrøring ved 0°C i 30 minutter ble det tilsatt en opp-løsning av 3-amino-l-(2-merkaptoetyl)pyridiniumklorid (0,475 g, 2,5 mmol) i 1 ml tørr DMF, fulgt av ytterligere diisopropyletylamin (0,435 ml, 2,5 mmol). Reaksjonsblan-dingen holdes ved 0°C i 1% time og konsentreres deretter i vakuum. Den resulterende gummi samles i 1:1 acetonitril:H^O og ble satt til C^g-revers-fase-kolonne. Eluering med H^O fulgt av 20% acetonitril-H20 og etterfølgende lyofilisering av de relevante fraksjoner ga produktet i en mengde av 0,730 g, tilsvarende 50% som et beigefarvet, fast stoff.
IR (KBr) umaks: 3330 (br, OH), 3180 (br, NH2), 1770 (6-laktam CO), 1690 (-C02pNB) cm"<1>;
"""HNMR (dg-DMSO) 6 : 8 ,29-7, 63 (m, 8H, aromatisk), 7,2-6,7
(m, 10H, difenylfosfat), 5,47, 5,18 (ABq, J=14 Hz, 2H, benzylisk), 4,73-4,45 (m, 3H), 4,2-3,8 (m, 1H), 3,6-2,6
(m, 8H), 1,15 (d, J=6,2 Hz, 3H, CHMe).
C. ( 5R, 6s)- 3-(( 2-( 3- aminopyridinio) etyl) tio)- 6- 1-( R)-hydroksyetyl)- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0) hept- 2- en-2- karboksylat
Til en blanding av p-nitrobenzyl-(5R,6S)-3-(2-(3-aminopyridinio)etyltio)-6-(1-(R)-hydroksyetyl)-7-okso-l-azabicyklo-(3.2.0)hept-2-en-2-karboksylat-difenylfosfat (0,730 g,
1,0 mmol) og 0,7 g 10% palladium på trekull i 25 ml fosfatbuffer (0,05 M, pH 7,4) ble det satt 8 ml THF og 20 ml eter. Denne blanding ble hydrogenert (Parr) ved ca. 2,8 kp/cm 2 i
1 time. Den resulterende blanding ble filtrert gjennom en pute av Celite og filterkaken ble vasket med H^O og eter. Den vandige fase ble separert, vasket to ganger med eter
og deretter ble tilbakeblevne flyktige stoffer fjernet under vakuum. Den vandige oppløsning ble straks satt til en C^g" revers-fase-kolonne som ble eluert med H^O. Lyofilisering av de relevante fraksjoner ga 0,45 g av et av-hvitt, fast stoff. Dette ble renset igjen ved revers-fase-HPLC under dannelse av det ønskede produkt i en mengde av 0,123 g tilsvarende 35% som et elfenbensfarvet, fast stoff.
IR (KBr) u : 3340 (br), 1750 (br, B-laktam CO), 1580
(br, -C02 ) cm ;
<1>HNMR (D20) 6: 8,07-7,59 (m, 4H, aromatisk), 4,61 (t, J=5,8 Hz, 2H, N-CH2), 4,14 (d av q, J=J'=6,3 Hz, 1H,
H-l'), 3,97 (d av t, J=9,2 Hz, J'=2,6 Hz, 1H, H-5),
3,38 (t, J=5,8 Hz, 2H, S-CH2), 3,24 (d av d, J=6,0 Hz, J'=2,6 Hz, 1H, H-6), 3,17-2,57 (m, 2H, H-4), 1,21 (d, J=6,3 Hz, 3H, CHMe);
UV (H20) *maks: <2>99 (e7949), 256 (e8822) nm;
(pH 7,4, 36,8°C), 18,5 t.
Eksempel 13
Fremstilling av
( 5R, 6S)- 3- [ 1-( S)- mety1- 2-( 1- pyridinium) etyltio ]- 6-[ 1-( R)-hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0) hept- 2- en- 2-karboksylat og ( 5R, 6S) 3-[ 1-( R)- metyl- 2-( 1- pyridinium) etyltio]- 6-[ 1-( R)-hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicklo( 3. 2. 0) hept- 2- en- 2-karboksylat A. d&- 1- ( 2 - merkapto- 2- metyletyl) pyridiniummetansulf onat d&- 1-( 2- merkapto- l- metyletyl) pyridiniummetansulfonat
Metansulfonsyre (1,95 ml, 0,030 mol) ble langsomt satt til kald pyridin (7,83 ml, 0,097 mol), og den resulterende blanding ble omrørt ved 40°C i 15 minutter, behandlet med da-propylensulfid (2,59 ml, 0,033 mol) og omrørt ved 60°C under nitrogen i 90 timer. Pyridin ble fjernet under vakuum, resten ble blandet med vann og renset ved kroma-tografi (preparativ HPLC, bondapak C-18). De passende fraksjoner ble forenet og lyofilisert under dannelse av dn-l-(2-merkapto-2-metyletyl)pyridiniummetansulfonat, 1,14 g (15%) som en farveløs sirup;
IR (film) u : 2520 (SH), 1640 (pyridinium), 1180 (s,
IT13.X S -i
CH3S03~), 1040 (CH3S03~) cm ;
<1>HMR (DMS0-d6) S: 1,35 (d, J=6,8 Hz, 3H, CH3CHS), 2,30 (s, 3H, CH3S03~), 2,90 (d, J=8,5 Hz, 1H, SH), 3,2-3,7 (m, CHSH), 4,52 (dd, Jgem=12,9 Hz, J=8,4 Hz, CHCH2N<+>), 4,87 (dd, Jgem=12,9 Hz, J=6,0 Hz, CHCH2N<+>), 8,0-8,4 (m, 2H, Hm av pyridinium), 8,5-8,8 (m, 1H, Hp av pyridinium), 9,04 (dd, J=l,4 Hz, J=6,7 Hz, 2H, Ho av pyridinium);
UV (Ho0) X : 208 (e5267), 259 (e3338);
Analyse for CqH,cNO^S,.2H~0:
og dfc-1-(2-merkapto-l-metyletyl)pyridiniummetansulfonat, 0,82 g, (11%) som en farveløs sirup;
IR (film) "maks: 2500 (SH), 1628 (pyridinium), 1180 (sulfonat), 1035 (sulfonat) cm "*";
"""HMR (DMSO-dt) 6: 1,69 (d, J=6,8 Hz, 3H, CH0CHN+) , 2,31 (s, 3H, CH3S03 ), 3,0-3,3 (m, 2H, CH2S), 4,2-5,2 (m, 1H, CHN ), 8,0-8,4 (m, 2H, Hm av pyridinium), 8,5-8,8 (m, 1H, Hp av pyridinium), 9,0-9,2 (m, 2H, Ho av pyridinium);
UV (H20) Xmakg: 209 (e4987), 258 (e3838).
Analyse for CgH,5NO.,S2.1,5H20: B . ( 5R, 6S)- paranitrobenzyl- 3-[ 1-( R, S) metyl- 2-( 1- pyridinium) etyltio]- 6-[ 1-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo ( 3. 2. 0) hept- 2- en- 2- karboksylatdifenylfosfat Til en kald (0°C) oppløsning av (5R,6S)-paranitrobenzyl-6-[1-(R)-hydroksyetyl ]-3,7-diokso-l-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboksylat (0,523 g, 1,5 mmol) i 6 ml acetonitril, holdt under nitrogenatmosfære, ble det satt diisopropyletylamin (0,314 ml, 1,8 mmol) fulgt av difenylklorfosfat (0,373 ml, 1,8 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 30 minutter og behandlet med en oppløsning av d£-l-(2-merkapto-2-metyletyl)pyridiniummetansulfonat (0,539 g, 2,16 mmol) i 2 ml acetonitril og diisopropyletylamin (0,314 ml, 1,8 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 0°C i 1 time, fortynnet med 24 ml kaldt vann av 0°C og kromatografert over en 2,5 x 8,5 cm preparativ bondapak C-18-kolonne med 25-50% acetonitril i vann som eluerings-oppløsningsmidler under dannelse av 1,07 g tilsvarende 97% av tittelforbindelsen som et gulaktig pulver etter lyofilisering;
IR (KBr) umaks<:><3>700-3100 (OH), 1770 (C=0 av 6-laktam), 1695 (C=0 av pNB-ester), 1630 (pyridinium), 1590 (fenyl), 1518 (N02), 1348 (N02), 885 (N02) cm"<1>;
J1=HM6R ,3 (DHMzS, O-3Hd6 ,, ) CH63: CHS1),1, 4 4(d,6, -J5=,0 6,l (mH, zC, H23N H- , )C, H 3..C5H,O14 ) , (d13,3 (d,
J=5,2 Hz, 1H, OH), 5,37 (sentrum av ABq, J=12,4 Hz, 2H, CH2 av pNB), 6,6-7,5 (m, 10H, fenyl av fosfat), 7,69 (d, J=8,7 Hz, 2H, Ho av pNB), 8,0-8,4 (m, 4H, Hm av pNB, Hm av pyridinium), 8,4-8,8 (m, 1H, Hp av pyridinium), 9,08 (d, J=5,6 Hz, 2H, Ho av pyridinium);
UV (H20) xmaks: 263 (el3325), 308 (e8915).
Analyse for <C>36<H>36<N>3<0>i<qSP>'H20:
C. ( 5R, 6S)- 3-[ l-( R og S)- metyl- 2-( 1- pyridinium) etyltio] - 6- [ 1-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0) hept-2- en- 2- karboksylat
Til en oppløsning av (5R,6S)-paranitrobenzyl-3-[1-(R,S)-metyl-2-(1-pyridinium)etyltio]-6-[1-(R)-hydroksyetyl]-7-okso-l-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboksylatdifenylfosfat (0,60 g, 0,82 mmol) i 33 ml våt tetrahydrofuran ble det satt 33 ml eter, monobasisk kaliumfosfat-natriumhydroksyd-buffer (17 ml, 0,15 N, pH7,22) og 0,60 g 10% palladium på trekull. Den resulterende blanding ble hydrogenert i 1 time under ca. 2,8 kp/cm<2> ved 23°C. De to sjikt ble separert og det organiske sjiktet ekstrahert med 3 x 7 ml vann. De vandige sjikt ble forenet, filtrert gjennom en Celite-pute, vasket med 3 x 20 ml eter og kromatografert på en 2,5 x 9,5 cm preparativ bondapak C-18-kolonne med vann som elueringsmiddel, hvorved man oppnådde 0,18 g tilsvarende 63% av en blanding av diastereoisomerer. Disse ble separert ved hjelp av HPLC (preparativ bondapak C-18) med vann som elueringsoppløsningsmiddel: isomer med lavere retensjonstid, 0,068 g (23%) forbindelse "B";
IR (KBr) u . : 1770 (C=0 av 3-laktam), 1633 (pyridinium), 1593 (karboksylat) cm ;
<1>HMR (D20) 6: 1,20 (d, J=6,3 Hz, 3H, CH3CHO), 1,42 (d, J=6,9 Hz, 3H, CH3CHS), 2,3-3,2 (m, 3H, H-4, H-6), 3,5-3,9 (m, 1H, SCH), 3,9-4,2 (m, 2H, H-5, CH..CHO) , 4,3-
+ J
5,1 (m, CH2N ), 7,8-8,2 (m, 2H, Hm av pyridinium),
8,4-8,7 (m, 1H, Hp av pyridinium), 8,7-9,0 (m, 2H, Ho av pyridinium);
UV (H_0) X ; 260 (<£>6727), 300 (e8245);
£. rrict.K s
[a]23 -39,3° (c, H20),
-4
ti = 12,6 t (malt ved en konsentrasjon pa 10 Mi fosfatbuffer, pH 7,4 ved 36,8°C);
isomer med høyere retensjonstid, 0,081 g (28%), forbindelse
"A" ;
IR (KBr) umaks= 1755 (C=0 av /&-laktam) , 1630 (pyridinium), 1590 (karboksylat). cm
<1>HMR (D20) S : 1,18 (d, J=6,3 Hz, 3H, CH3CH0), 1,40 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH3CHS), 2,84 (d, J=9,3 Hz, 2H, H-4),
3,26 (dd, J=2,7 Hz, J=5,9 Hz, 1H, H-6), 3,4-4,2 (m, 3H, SCH, CH3CH0, H-5), 4,2-5,1 (m, CH2N<+>), 7,7-8,1 (m, 2H, Hm av pyridinium), 8,3-8,65 (m, 1H, Hp av pyridinium), 8,65-8,9 (m, 2H, Ho av pyridinium);
UV (H20) xmaks: 259 (e 5694), 296 (e 6936),
[a]^<3> + 96,9° (c 0,56, H20),
tj^ = 15,6 t (malt ved en konsentrasjon pa 10 Mi fosfatbuffer-, pH 7,4 ved 3 6,8°C).
Eksempel 14
Fremstilling av
( 5R, 6S)- 3-[ 2-[( S)-( 1- pyridinium)]- 1-( S)- cykloheksyltio]- 6-[ 1-( R)- hydroksyetyl ]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0) hept- 2- en-2- karboksylat og ( 5R, 6S)- 3-[ 2-[( R)-( 1- pyridinium)]- 1-( R)- cykloheksyltio]-6- [ 1-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0) hept- 2-en- 2- karboksylat A. dg,- l- [ 2- merkapto- l- cykloheksyl] pyridiniummetansulf onat
Metansulfonsyre (0,65 ml, 0,01 mol) ble dråpevis tilsatt til pyridin (2,42 ml, 0,03 mol) under avkjøling. Blandingen ble omrørt under nitrogen i 10 minutter, behandlet med d«.-cykloheksensulfid 1,377 g (85% rent), 0,0103 mol og om-rørt ved 72°C i 25 timer. Overskuddet av pyridin ble fjernet under vakuum og sporene samdestillert med vann. Resten ble blandet med vann og kromatografert på en 5 x 13 cm preparat bondapak C-18-kolonne med 0-2% acetonitril i vann som elueringsmiddel, hvorved det etter lyofilisering ble dannet en farveløs sirup, 1,57 g (53%);
IR (film) u ITlclK S : <2>500 (SH), 1625 (pyridinium), 1190 (SOj~);
1HiyiR (DMSO dg) 6: 1,2-2,5 (m, 8H, cykloheksyl H) , 2,32 (s, 3H, CH3S03~), 2,82 (d, J=9,8 Hz, SH), 3,0-3,5 (m, lH, CHSH), 4,2-4,9 (m, 1H, CHN<+>), 8,0-8,3 (m, 2H, Hm av pyridinium), 8,4-8,8 (m, 1H, Hp av pyridinium), 8,9-9,3 (m, 2H, Ho av pyridinium);
UV (H 2o. 0) X maks: 214 (e 5365), 258 (e 3500).
Analyse for C12H19N03S2,H20; B. ( 5R, 6S)- paranitrobenzyl- 3-[ 2-[( R eller S)-( 1- pyridinium) ]- l-( R eller S)— cykloheksyltio]- 6-[ 1-( R)-hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0)hept-2-en-2-karboksylatdifenylfosfat
Til en kald (0°C) oppløsning av (5R,6S)-paranitrobenzyl-6-[1-(R)-hydroksyetyl]-3,7-diokso-l-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboksylat (1,37 g, 3,93 mmol) 15 ml acetonitril, holdt under nitrogen, ble det satt diisopropyletylamin (0,822 ml, 4,7 mmol) og difenylklorfosfat (0,979 ml, 4,7 mmol). Den resulterende oppløsning ble omrørt i 30 minutter og behandlet med en oppløsning av d -l-(2-merkapto-l-cykloheksyl)pyridiniummetansulfonat (1,64 g, 5,66 mmol) i 4,7 ml acetonitril, fulgt av diisopropyletylamin (0,822 ml, 4,7 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 0°C i 1 time, fortynnet med 75 ml kaldt vann av 0°C og kromatografert på preparativ bondapak C-18 med 25-50% acetonitril i vann som elueringsoppløsningsmiddel, hvorved det etter lyofilisering av de passende fraksjoner ble dannet 1,9 g tilsvarende 53% av tittelforbindelsen;
IR (KBr) vj : 3700-3000 (OH) , 1770 (C=0 av B-laktam) ,
rricLK s
1700 (C=0 av pNB-ester), 1628 (pyridinium), 1590 (fenyl),
1515 (N02), 1345 (N02), 880 (N02) cm - 1.
<1>HMR (D20) 6: 1,13 (d, J=6,l Hz, 3H, CH3CHO), 1,2-2,5
(m, 8H, cykloheksyl H), 2,7-3,5 (m, 4H, H-4, H-6, CHS), 3,5-4,4 (m, 2H, CH3CH0, H-5), 4,4-5,0 (m, 1H, CHN<+>), 5,30 (sentrum av ABq, J=12,8 Hz, CH2 av pNB), 6,7-7,4 (m, 10H, fenyl), 7,65 (d, J=8,6 Hz, 2H, Ho av pNB), 7,9-8,4 (m, 4H, Hm av pNB, Hm av pyridinium), 8,4-8,8 (m, lH,
Hp av pyrdinium), 9,0-9,4 (m, 2H, Ho av pyridinium);
UV (H20) xmaks: 263 (e 9038), 309 (e 6394).
Analyse for C3gH4nN30,gSP.H20: C. ( 5R, 6S)- 3-[ 2-[( R eller S)-( 1- pyridinium)]- 1-( R eller S)- cykloheksyltio ]- 6- [ 1-( R)- hydroksyetyl] - 7- okso- l-azabicyklo( 3. 2. 0) hept- 2- en- 2- karboksylat Til en oppløsning av (5R,6S)-paranitrobenzyl-3-[2-[(R eller S)-(l-pyridinium)]-l-(R eller S)-cykloheksyltio]-6-[1-(R)-hydroksyetyl]-7-okso-l-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboksylatdifenylfosfat (1,85 g, 2,34 mmol) i 96 ml våt tetrahydrofuran ble det satt 96 ml eter, monobasisk kaliumfosfat-natriumhydroksyd-buffer (0,15 M, pH 7,22, 50 ml) og 1,9 g 10% palladium på trekull. Den resulterende blanding ble hydrogenert ved 23°C under ca. 2,8 kp/cm<2> i 1,2 5 timer. Det organiske sjikt ble fraskilt og vasket med 3 x 20 ml vann. De vandige oppløsninger ble filtrert gjennom en Celite-pute, vasket med 2 x 60 ml eter, pumpet for å fjerne spor av organiske oppløsningsmidler og kromatografert på en 4,5 x 9 cm preparativ bondapak C-18-kolonne med 0-5% acetonitril i vann som elueringsmiddel, hvorved det etter lyofilisering ble dannet 0,705 g tilsvarende 76% av en blanding av diastereoisomerer. Separering av disse ble foretatt ved hjelp av HPLC med 4% acetonitril i vann som elueringsmiddel; diastereoisomeren med lavere retensjonstid, forbindelse "A", (0,29 g, 31%);
IR (KBr) u : 1750 (C=0 av B-laktam), 1620 (sh, pyri-IT13KS ^ ^
dinium), 1685 (karboksylat) cm ;
<1>HMR (D20) <S: 1,21 (d, J=6,3 Hz, 3H, CH3CHO) , 1,4-2,5 (m, 8H, cykloheksyl H), 2,5-3,05 (m, 2H, H-4), 3,05-3,25 (m, 1H, H-6), 3,3-3,7 (m, 1H, CHS), 3,9-4,3 (m, 2H, H-5, CH3CHO), 4,3-4,8 (m, CHN<+>), 7,8-8,2 (m, 2H, Hm av pyridinium), 8,3-8,7 (m, 1H, Hp av pyridinium), 8,8-9,1 (m, 2H, Ho av pyridinium);
UV (H2<0>) <x>maks: 260 (e7123), 300 (e8685);
[al^<3> +6,2° (c 0,63, H20),
= 16,6 h (målt ved en konsentrasjon på 10 4 M i fosfatbuffer, pH 7,4 ved 36,8°C);
Analyse fir C2n<H>24<N>2<0>4<S.>2H20;
diastereoisomere med høyere rentensjonstid, forbindelse "B", (0,35 g, 38%);
IR (KBr) "maks: 1750 (C=0 av e-laktam), 1622 (sh, pyridinium), 1588 (karboksylat) cm 1;
<1>HMR (D20) 6: 1,19 (d, J=6,4 Hz, 3H, CH3CHO), 1,3-2,5 (m, 8H, cykloheksyl H), 2,5-3,1 (m, 2H, H-4), 3,1-3,3 (m, 1H, H-6), 3,3-3,8 (m, 2H, H-5, CHS), 4,1 (sentrum av m, 1H, CH3CH0), 4,25-4,7 (m, 1H, CHN<+>), 7,8-8,1 (m, 2H, Hm av pyridinium), 8,3-8,7 (m, 1H, Hp av pyridinium), 8,75-
9,0 (m, 2H, Ho av pyridinium);
UV (H20) xmaks: 259 (e5992), 296 (e7646);
[a]p<3>° +65,3° (c 0,43, H20),
= 20,2 t (målt ved en konsentrajson på 10 4 M i fosfatbuffer, pH 7,4 ved 3 6,8°C) .
Eksempel 15
A. ( 5R)- allyl- 3-[( 2- pyridinioetyl) tio]-( 6S)-[( IR)- hydroksyetyl ]- 7- okso- l- azabicyklo[ 3. 2. 0] hept- 2- en- 2- karboksylatdifenylfosfat
Til en oppløsning av (5R)-allyl-3,7-diokso-(6S)-[(IR)-hydroksyetyl ]-l-azabicyklo[3.2.0]heptan-(2R)-karboksylat (473 mg, 1,87 mmol) i CH3CN (6 ml) ble det ved ca. -10°C under nitrogen satt diisopropyletylamin (0,42 ml, 2,4 mmol) fulgt av difenylklorfosfat (0,50 ml, 2,4 mmol). Blandingen ble om-rørt ved 0°C i 30 minutter og deretter avkjølt til -15°C. Til dette ble det satt en oljeaktig suspensjon av N-(2-merkaptoetyl)-pyridiniumklorid (52 7 mg, 3,00 mmol) i 1 ml CH-jCN inneholdende 5 dråper DMF, fulgt av diisopropyletylamin (0,42 ml, 2,4 mmol). Blandingen ble omrørt ved -15°C i 3 0 minutter, og deretter fortynnet med 20 ml H^O. Denne blanding ble renset direkte på en revers-fase-silikagel-kolonne (C^g PrepPAK, 12 g, Waters Associates), og det ble eluert med H20 (200 ml), 10% CH3CN/H20 (100 ml), 20% CH3CN/ H20 (100 ml), 30% CH3CN/H20 (100 ml) og til slutt 40% CH3CN/H20 (100 ml). Passende fraksjoner ble samlet, de organiske oppløsningsmidler fjernet ved hjelp av en vakuum-pumpe og lyofilisert for å oppnå 786 mg (1,26 mmol, utbytte 67,3%) av tittelforbindelsen som et brunt pulver; <1>HMR (DMSO-dg), CFT-20) 6: 1,16 (3H, d, J=6 Hz, 1'-CH3), 2,6-3,7 (m), 3,75-4,3 (2H, m, 5-H og l'-H), 4,65 (2H, m, -CH2CH2-), 4,87 (2H, t, J=6 Hz, -CH2N<+>), 5-6,2 (3H, m, olefiniske protoner), 6,6-7,4 (m, aromatiske protoner),
8,15 (2H, "t", J=7 Hz, aromatiske protoner meta til nitrogenet), 8,63 (1H, "t", J=7 Hz, aromatisk proton para til nitrogenet) og 9,07 ppm (2H, "d", J=7 Hz, aromatiske protoner orto til nitrogenet);
IR (film) u; 3400 (OH), 1770 (B-laktam), 1690 (ester),
1625 (pyridinio).
B. ( 5R)- 3-[( 2- pyridinioetyl) tio]-( 6S)-[( IR)- hydroksyetyl]- 7-okso- l- azabicyklo[ 3. 2. 0] hept- 2- en- 2- karboksylat
Til en oppløsning av (5R)-allyl-3-[(2-pyridinioetyl)tio]-(6S)-[(IR)-hydroksyetyl]-7-okso-l-azabicyklo[3.2.0]hept-2-en-2-karboksylatdifenylfosfat (156 mg, 0,25 mmol) i CH^CN
(2 ml) ble det suksessivt ved ca. 22°C satt en oppløsning av kalium-2-etylheksanoat i EtOAc (0,5 M, 0,6 ml, 0,3 mmol), trifenylfosfin (15 mg, 0,057 mmol) og tetrakistrifenyl-fosfin-palladium (15 mg, 0,013 mmol). Blandingen ble omrørt ved ca. 22°C under nitrogen i 2 timer. Etter tilsetning av 7 ml vannfri Et20 ble bunnfallet filtrert fra, vasket med
7 ml vannfri Et.,0 og tørket i vakuum under dannelse av 101 mg brunlig, fast stoff. Dette ble renset ved revers-fase-kolonne-kromatografi (C-^g PrepPAK, 12 g, Waters Associates), hvorved man eluert med H20. Passende fraksjoner (nemlig fraksjonene 7-12, hver på 20 ml), ble samlet og lyofilisert for å oppnå 53 mg (0,16 mmol, utbytte 64%) av tittelforbindelsen som et gulaktig pulver. Dette materialet var
forurenset med kaliumdifenylfosfat og kalium-2-etylheksa-
noat;
<1>HMR (D20, CFT-20) 6: 0,80 (t, J=6,4 Hz, Me fra etylheksa-
noat) , 1,21 (3H, d, J=6,3 Hz, l'-Me), 2,93 (2H, dd, J],_4 =
9 Hz, J =4 Hz, 1-Hs), 3,28 (1H, dd, J, ,=6,2 Hz, J, c=
gem o—± o—d
2,5 Hz, 6-H), 3,42 (2H, t, J=6 Hz, -CH2S), 3,98 (1H, td,
<J>5_1<=>9 Hz, J5_6=2,5 Hz, 5-H), 4,15 (1H, q, J=6,2 Hz, l'-H),
4,80 (2H, t, J=6,0 Hz, -CH2N<+>), 7-7,5 (m, fenylprotoner fra difenylfosfat), 8,03 (2H, m, Hm av pyridinium), 8,56 (1H,
m, Hp av pyridinium) og 8,81 ppm (2H, "d", J-6,5 Hz, Ho av pyridinium).
Eksempel 16
Fremstilling av 3-[ 2-( N- metyl- tiomorfolinium) etyltio]- 6a-[ 1'-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo[ 3. 2. 0] hept- 2-en-2- karboksylat
A. N- metyl- N-( 2- merkaptoetyl)- tiomorfoliniummetansulfonat
*
Til isbad foravkjølt N-metyltiomorfolin (5,00 g, 42,7 mmol) ble det satt metansulfonsyre (1,47 ml, 20,5 mmol) og etylensulfid (1,30 ml, 21,4 mmol). Blandingen ble oppvarmet ved
<*>J.M. Lehn & J. Wagner, "Tetrahedron", 26, 4227 (1970)
65°C i 24 timer og fortynnet med 25 ml vann. Den vandige oppløsning ble vasket med 3 x 25 ml dietyleter, pumpet under vakuum og helt over en silikagel-revers-fase-kolonne, idet tittelforbindelsen ble eluert med vann. De passende fraksjoner ble forenet og dampet inn under dannelse av tiol som en olje (4,80 g, utbytte 86%);
IR (film) u . : 2550 cm"<1> (w, SH);
2T13JC S
<1>HMR (DMSO-d,) fi: 3,25-2,95 (6H, m, CH_N<+>), 3,32 (3H, s,
+
CH3N ), 3,20-2,65 (7H, m, CH2S, SH) og 2,32 ppm (3H, s, CH3S03).
B. para- nitrobenzyl- 3-[ 2-( N- metyl- tiomorfolinium- difenylfosfat) etyltio]- 6a-[ 1'-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo[ 3. 2. 0] hept- 2- en- 2- karboksylat
En kald (isbad) oppløsning av para-nitrobenzyl-6a-[1'-(R)-hydroksyetyl]-3,7-diokso-l-azabicyklo[3.2.0]heptan-2-karboksylat (557 mg, 1,60 mmol) i 8 ml CH3CN ble dråpevis behandlet med diisopropyletylamin (0,336 ml, 1,92 mmol) og difenylklorfosfat (0,400 ml, 1,92 mmol) og omrørt i 30 minutter. Reaksjonsblandingen ble på ny behandlet med N-metyl-N-(2-merkaptoetyl)tiomorfolinium-metansulfonat (893 mg, 2,29 mmol) i 4 ml CH^CN og diisopropyletylamin (0,33 6 ml, 1,92 mmol) og omrørt i 3 0 minutter. Oppløsningen ble fortynnet med 20 ml vann og helt over en silikagel-revers-fase-kolonne. Den ønskede forbindelse ble fortynnet med en 50% acetonitril-vann-blanding. De passende fraksjoner ble forenet, pumpet under vakuum i 2 timer og lyofilisert under dannelse av tittelforbindelsen (1,01 g, utbytte 85%);
IR (nujo<l>) vmaks-- <1>760 (s, B-laktam C=0) og 1510 cm"<1> (s, N02);
<1>HMR (DMSO-d^) 6: 8,25 (2H, d, J=8,8 Hz, H-aromatisk), 7,70 (2H, d, J=8,8 Hz, H-aromatisk), 7,33-6,84 (10H, m, H-aromatisk), 5,37 (2H, sentrum for ABq, J=14,2 Hz, CH2), 5,14
(1H, d, J=4,5 Hz, OH), 4,35-3,80 (2H, m, H-l<*> og H-5), 3,75-3,45 (6H, m, CH2N<+>), 3,31 (3H, s, CH3N<+>), 3,45-2,75 (9H, m, CH2S, H-6 og H-4) og 1,15 ppm (3H, d, J=6,2 Hz,
CH3) .
C. 3-[ 2-( N- metyl- tiomorfolinium) etyltio3- 6a-[ 1'-( R)- hydroksyetyl ] 1- 7- okso- l- azabicyklo[ 3. 2. 0] hept- 2- en- 2- karboksylat
En oppløsning av para-nitrobenzyl-3-[2-(N-metyl-tiomorfolinium-difenylfosfat)etyltio]-6a-[1'-(R)-hydroksyetyl]-7-okso-l-azabicyklo[3.2.0]hept-2-en-2-karboksylat (1,31 g, 1,76 mmol) i 0,1 M fosfatbuffer, pH 7,4 (48,8 ml), tetrahydrofuran (20 ml) og dietyleter (20 ml) ble hydrogenert over 1,5 g 10% palladium på trekull i et Parr-rysteapparat i 1 time ved ca. 2,8 kp/cm2 . Reaksjonsblandingen ble fortynnet med 4 0 ml dietyleter og fasene separert. Den organiske fase ble vasket med 2 x 5 ml vann. De vandige faser ble kombinert, filtrert gjennom filterpapir som var herdet 52 ganger, vasket med 2 x 50 ml dietyleter og pumpet under vakuum. Den vandige oppløsning ble helt på en silikagel-revers-fase-kolonne og det ønskede kabapenem ble fortynnet med 5% acetonitril-vann. De passende fraksjoner ble kombinert og lyofilisert og man oppnådde tittelforbindelsen som et amorft, fast stoff (205 mg, 31%);
IR (nujo<l>) <v>maks: 1750 (s, e-laktam C=0) og 1590 cm"<1> (s, C=0) ;
"""HMR (D-O) 5: 4,25-3 ,95 (2H, m, H-l1 , H-5) , 3,70-3,40 (6H, m, CH2N ), 3,35 (1H, dd, J=6,l Hz, J=2,6 Hz, H-6), 3,08 (3H, s, CH3N<+>), 3,25-2,75 (8H, CH2S, H-4) og 1,24 ppm (3H, d, J=6,4 Hz, CH3);
UV (H20, c 0,062) Xmaks<:><2>99 (el0962)
t, 17,7 timer (0,1 M fosfatbuffer, pH 7, 37°C).
Eksempel 17
Fremstilling av ( 5R, 6S)- 3-[ 2-( 1- metylmorfolino) etyltio]- 6-[( R)- 1- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo[ 3. 2. 0] hept- 2- en-2-karboksylat A. 1- metyl- l-( 2- merkaptoetyl) morfolinium- trifluormetan-sulf onat
Til N-metylmorfolin (3,29 ml, 0,030 mol) ble det dråpevis satt trifluormetansulfonsyre (1,327 ml, 0,015 mol) ved 10°C, fulgt av etylensulfid (0,89 ml, 0,015 mol), Den resulterende gul-brune oppløsning ble oppvarmet i oljebad ved 50-60°C under N-, i 18 timer. Flyktige materialer ble deretter fjernet i vakuum, og den resterende olje ble samlet i 10 ml H^O. Den vandige oppløsning ble vasket med 3 x 5 ml dietyleter
og deretter ble resterende organisk oppløsningsmiddel fjernet i vakuum. Den resulterende vandige oppløsning ble satt til en C^g-revers-fase-kolonne, det ble fortynnet med H^O
og deretter med 5% acetonitril-H20 og til slutt med 10% acetonitril-H20. Avdamping av de relevante fraksjoner ga et hvitt, fast stoff som ble tørket i vakuum over P2°5'
noe som ga produktet (1,92 g, 41%).
IR (KBr) v_„,, : 2560 (-SH) cm"<1>;
<1>HNMR (dg-aceton) 6; 4,25-3,6 (m, 8H), 3,49 (s, 3H, N-Me), 3,35-2,7 (m, 5H).
B. p- nitrobenzyl-( 5R, 6S)- 3-[ 2-( 1- metylmorfolino) etyltio]-6-[( R)- 1- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo[ 3. 2. 0] hept-2- en- 2- karboksylat- difenylfosfat
Til en oppløsning av p-nitrobenzyl-(5R,6S)-6-[(R)-1-hydroksyetyl ]-3,7-diokso-l-azabicyklo[3.2.0]heptan-2-karboksylat (0,348 g, 1,0 mmol) i 25 ml tørr acetonitril ble det dråpevis tilsatt diisopropyletylamin (0,191 ml, 1,1 mmol) og deretter difenylklorfosfat (0,228 ml, 1,1 mmol) ved 0°C
under N2 . Etter omrøring ved 0°C i 1 time ble det tilsatt diisopropyletylamin (0,226 ml, 1,3 mmol) til det resulterende enol-fosfat, fulgt av l-metyl-l-(2-merkaptoetyl)morfolinium-trifluormetansulfonat (0,373 g, 1,2 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1,5 timer og deretter konsentrert under vakuum. Det resterende materiale ble samlet i H^O og satt til en C-^g-revers-f ase-kolonne. Fortynning med H.,0 og deretter med 20% acetonitril-H^O og
til slutt med 30% acetonitril-H^O, fulgt av lyofilisering av de relevante fraksjoner ga produktet (0,360 g, 40%) som et amorft, fast stoff.
IR (film) : 3300 (-0H), 1770 (6-laktam CO), 1700 (-CO-pNB)
-1
cm
<1>HNMR (dg-aceton) 6: 8,25, 7,80 (ABq, J=8,6 Hz, 4H, aromatisk), 7,4-6,8 (m, 10H, difenylfosfat), 5,56, 5,27 (ABq, J=14,2'Hz, 2H, benzylisk), 4,42 (d av t, J=9,2 Hz, J'=
2,7 Hz, 1H, H-5), 4,1-2,7 (m, 17H), 3,40 (s, 3H; N-Me),
1,22 (d, J=6,2 Hz, 3H, -CHMe).
C. ( 5R, 6S)- 3-[ 2-( 1- metylmorfolino) etyltio]- 6-[( R)- 1- hydroksyetyl ]- 7- okso- l- azabicyklo[ 3. 2. 0] hept- 2- en- 2- karboksylat
Til en oppløsning av p-nitrobenzyl-(5R,6S)-3-[2-(1-metylmorfolino)etyltio]-6-[(R)-1-hydroksyetyl]-7-okso-l-azabicyklo [3.2.0 ]hept-2-en-2-karboksylat-difenylfosfat (0,360 g, 0,49 mmol) i 13 ml fosfatbuffer (0,05 M, pH 7,4) ble det satt 0,36 g 10% palladium på trekull, 20 ml tetrahydrofuran og 2 0 ml dietyleter. Denne blanding ble hydrogenert i en Parr-apparatur ved 2,24 kp/cm<2> i 1 time. Blandingen ble filtrert gjennom Celite, og filterputen vasket med H.,0 og dietyleter. Den vandige fase ble skilt fra og pH-verdien innstilt til 7,0 med ytterligere fosfatbuffer, pH 7,4.
Etter fjerning av tilbakeblevne organiske oppløsningsmidler under vakuum, ble den vandige oppløsning tilsatt til en C-^g-revers-f ase-kolonne . Eluering med H.,0 og lyof ilisering av de relevante fraksjoner ga 0,13 g av et amorft fast stoff. Dette ble renset på ny ved revers-fase-HPLC, noe som ga det rene produkt (0,058 g, 34%) som et amorft, fast stoff.
IR (KBr) <v>maks: 3420 (br, OH), 1750 (6-laktam CO), 1590 (-C02~) cm-<1>;
<1>HNMR (D20) S; 4,35-2,77 (m, 17H), 3,18 (s, 3H, N-Me),
1,23 (d, J=6,3 Hz, 3H, CHMe);
UV (<H>2<0>) <x>maks<=><3>00 U6344) nm;
t, (pH 7,4, 36,8°C), 18,5 timer.
Eksempel 18
Fremstilling av ( 5R, 6S)- 3-[ 2-( 1, 4- dimetyl- l- piperazinium)-etyltio]- 6-[ 1-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo[ 3. 2. 0]-hept-2-en-2-karboksylat
A. 1-(2-acetyltioetyl)-1,4-dimetylpiperaziniumbromid En oppløsning av 2-brometyl-tioacetat *(2,20 g, 0,012 mol) og 1,4-dimetylpiperazin (1,95 ml, 0,014 mol) 4 ml aceton ble omrørt ved 50°C i 65 timer. Etter avkjøling til 25°C ble den flytende fase omhelt fra gummien som var triturert to ganger i dietyleter, og man oppnådde et hygroskopisk, gulaktig pulver, 3,2 g (90%); IR (nuj<ol>) <V>maks: 1685 (C=0 av tioester) cm 1; <1>HMR (D20) 6: 2,37, 2,39 (2s, 6H 3,18 (s, 3H,
<*>B. Hansen, "Acta Chem. Scand.", 11, 537-40 (1957)
B. 1, 4- dimetyl- l-( 2- merkaptoetyl) piperaziniumbromid,
hydroklorid
En oppløsning av 1-(2-acetyltioetyl)-1,4-dimetyl-piperaziniumbromid (1,1 g, 3,7 mmol) i 6N saltsyre (4 ml) ble oppvarmet til 80°C under nitrogen i 1 time. Oppløsningen ble konsentrert under redusert trykk, noe som ga et hvitt pulver, 0,41 g (38%); <1>HMR (DMSO, d6) 6 : 2,90
Analyse for C<gH>-<gN-S>BrCl.H_0:
C. ( 5R, 6S)- paranitrobenzyl- 3-[ 2-( 1, 4- dimetyl- l- piperazinium)-etyltio ]- 6-[ 1- ( R) - hydroksyetyl ] - 7- okso- l- azabicykloJj3 . 2. 0]-hept- 2- en- 2- karboksylat- difenylfosfat Til en kald (0°C) oppløsning av (5R,6S)-paranitrobenzyl-6-[1-(R)-hydroksyetyl]-3,7-diokso-l-azabicyklo[3.2.0]-heptan-2-(R)-karboksylat (0,465 g, 1,33 mmol) i 2 ml acetonitril, holdt under nitrogen, ble det tilsatt diisopropyletylamin (0,278 ml, 1,59 mmol) og difenylklorfosfat (0,33 ml, 1,59 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 30 minutter og behandlet med en suspensjon av 1,4-dimetyl-l-(2-merkaptoetyl)piperaziniumbromid,hydroklorid (0,40 g, 1,37 mmol) i en blanding av 3 ml acetonitril og 1 ml vann og diisopropyletylamin (0,278 ml, 1,59 mmol). Etter omrøring i 18 timer ved 5°C satte man 15 ml kaldt vann til blandingen. Den resulterende oppløsning ble kromatografert over en PrepPak -500/C-^g-kolonne (Waters Associates) (2,5 x 7,5 cm) med 25-35% acetonitril i vann som elueringsmiddel, noe som ga et gulaktig pulver, 0,50 g (50%) etter lyofilisering;
IR (KBr) v : 1765 (C=0 av B-laktam), 1690 (C=0 av pNB-niciK s -i
ester), 1585 (fenyl), 1512 (N02), 875 (N02) cm ;
^HMR (DMSO-dg) 6: 1,16, 1,18 (2d, J=6,l Hz, 3H, CH3CHOH),
10H, fenyl av fosfat), 7,71 (d, J=8,8 Hz, 2H, Ho av pNB), 8,2 6 (d, J=8,8 Hz, Hm av pNB). D. ( 5R, 6S)- 3- j2-( 1, 4- dimetyl- l- piperazinium) etyltio]- 6-[ 1-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo[ 3. 2. 0] hept- 2- en-2- karboksylat
Til en oppløsning av (5R,6S)-paranitrobenzyl-3-[2-(1,4-dimetyl-l-piperazinium)etyltio]-6-[1-(R)-hydroksyetyl]-7-okso-l-azabicyklo[3.2.0]hept-2-en-2-karboksylat-difenylfosfat (0,47 g, 0,623 mmol) i 25 ml våt tetrahydrofuran ble det satt 25 ml dietyleter, kaliumfosfat monobasisk-natriumhydroksydbuffer (13 ml, pH 7,22) og 0,47 g 10% palladium på trekull. Den resulterende blanding ble hydrogenert ved 23°C under ca. 2,8 kgp/cm<2> i 1 time. De to sjikt ble separert bg det organiske sjikt ble ekstrahert med 2x 7 ml vann. De vandige sjikt ble kombinert, filtrert gjennom en Celite-pute, vasket med 2 x 15 ml dietyleter og kromatografert på en PrepPak -500/C^g-kolonne (Waters Associates) (2,5 x 9,5 cm) med vann som elueringsmiddel, noe som ga 0,097 g (43%) etter lyofilisering;
IR (KBr) v , : 3000-3700 (OH), 1750 (C=0 av B-laktam),
ntci.K s ^
1585 (karboksylat) cm ;
<1>HMR (D20) 6: 1,24 (d, J=6,4 Hz, 3H, CH3CHOH), 2,33 (s, 3H,
), 3,15 (s,
), 4,0-4,5 (m, H-5, CH3CH0H);
UV (<H>2<0>) <*>maks: 296 (e9476);
[a]<23> 61,1° (c 0,26, H20);
t^ = 12,4 timer (målt ved en konsentrasjon på 10 <4> M i fosfat-buf f er, ph 7,4, ved 3 6,8°C).
Eksempel 19
Fremstilling av ( 5R, 6S)- 3-[ 2-( N- metyl- tiomorfoliniumoksyd)-etyltio]- 6-[ 1-( R)- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0)-hept- 2- en- 2- karboksylat
Til en kald (-10°C) oppløsning av (5R,6S)-3-[2-(N-metyl-tio-morf olinium)etyltio]-6-[1-(R)-hydroksyetyl]-7-okso-l-azabicyklo ( 3 . 2 . 0 ) hept-2-en-2-karboksylat (6.08 mg, 1,65 mmol)
i 9 ml av en 1:1 blanding av acetonitril og vann ble det satt m-klorperbenzosyre (334,8 mg, 1,65 mmol) i liten mengde i løpet av en time. Blandingen ble deretter fortynnet med 15 ml vann og vasket med 3 x 15 ml dietyleter. Den vandige fase ble pumpet under vakuum og ført gjennom en revers-fase-silikagel-kolonne (H^O), noe som ga et fast stoff som besto av en blanding av forbindelser. Denne blanding ble separert ved revers-fase-HPLC, noe som ga fraksjon A, 52,4 mg (utbytte 12%) og fraksjon B, 23,6 mg (utbytte 6%) som diastereo-
isomerer av tittelforbindelsen;
fraksjon A;
IR (nujol) v_ , : 1750 (s, B-laktam C=0) og 1580 cm<-1>
(s, C=0);
1HMR (D„0) 6: 4,26-2,91 (20H, m, H-4, H-5, H-6, H-l', CH-S, CH2S-0, CH3-N og CH2~N ) og 1,24 ppm (3H, d, J=6,4 Hz, CH3);
UV (H20, c 0,06) *maks: 302 (el0425);
t^: 12 timer (0,065 M, pH 7,4, fosfatbuffer, 37°C).
fraksjon B:
IR (nujol) ^maks: 1750 (s, B-laktam, C=0) og 1585 cm<-1>
(s, C=0).
"""HMR (D20) 5: 3,86-2,90 (17H, m, H-4, H-5, H-6, H-l", CH2S, CH2S-0, CH2N<+>), 3,25 (3H, s, CH3N<+>) og 1,24 ppm (3H, d, J=6,4 Hz, CH3);
UV (H20, c 0,05) *maks: 2,99 U6517);
t'^: 10,75 timer (0,065 M, pH 7,4, bufferoppløsning, 37°C).
Eksempel 20
Fremstilling av ( 5R, 6S)- 3-[ 2-( 1, 4, 4- trimetyl- l- piperazinium)-etyltio]- 6-[ lR- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0) hept-2- en- 2- karboksylatklorid A. 1-( 2- acetyltioetyl)- 1, 4, 4- trimetylpiperazinium-bromidjodid
En suspensjon av 1-(2-acetyltioetyl)-1,4-dimetyl-piperaziniumbromid (1,48 g, 5,0 mmol) i 10 ml isopropylalkohol ble behandlet med metyljodid (0,3 73 ml, 6,0 mmol) og oppvarmet til 55-60°C i 30 timer. Oppløsningsmidlene ble dampet av under redusert trykk, resten triturert i heksan og det faste stoff filtrert, man oppnådde 1,85 g. Det faste stoff ble oppløst i 8 ml varmt vann og oppløsningen fortynnet med aceton til uklarhet (70-80 ml). To etterfølgende krystal-liseringer ga 1,5 g med smeltepunkt 220-225°C under dekom-ponering, 68% av tittelforbindelsen;
IR (KBr) v : 1692 cm"<1> (C=0);
maks
<1>HMR (D20 6: 2,40 (s, 3H, CH^COO) , 3,37 (s, N-CH"3) , 3,39 (s, N-CH3), 3,99 (s);
UV (Ho0) X , : 226 (el3144).
2 maks
Analyse for C,,H24N2OSBrI:
B. 1-( 2- merkaptoetyl)- 1, 4, 4- trimetylpiperaziniumbisklorid
En blanding av 1-(2-acetyltioetyl)-1,4,4-trimetyl-pipera-ziniumbromidjodid (1,84 g, 4,19 mmol) og 15 ml 6N saltsyre ble oppvarmet til 57°C under en nitrogenatmosfære i
2h time. Oppløsningen ble konsentrert under redusert rykk til tørr tilstand. Det faste stoff ble suspendert i 10 ml vann og den godt omrørte suspensjon ble behandlet med permutit S-l Cl inntil det ble oppnådd oppløsning. Oppløs-ningen ble helt på en 1,2 x 60 cm kolonne av permutit S-l Cl . Kolonnen ble fortynnet med vann (1,5 ml/min.). De passende fraksjoner ble forenet og lyofilisert, noe som ga et hvitt pulver i en mengde av 0,93 g og med smeltepunkt 190-191°C, 85%;
IR (nujol) umaks: 2460 (SH);
"""HMR (D20) 6: 3,4 (s, N-CH3) , 3,45 (s, N-CH3) , 4,07 (s).
Analyse for C9H22N2SC12.0,75H-0:
C. ( 5R, 6S)- paranitrobenzyl- 3-[ 2-( 1, 4, 4- trimetyl- l- piperazinium) etyltio ]- 6-[ lR- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo-( 3. 2. 0) hept- 2- en- 2- karboksylatbisklorid
Til en kald (5°C) oppløsning av (5R,6S)-paranitrobenzyl-6-[lR-hydroksyetyl]-3,7-diokso-l-azabicyklo(3.2.0)heptan-2R-karboksylat (0,94 g, 2,7 mmol) i 3 ml acetonitril, holdt under nitrogen, ble det satt diisopropyletylamin (0,557 ml, 3,2 mmol) og difenylklorfosfat (0,663 ml, 3,2 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 30 minutter ved 5°C og behandlet med diisopropyletylamin (0,599 ml, 3,44 mmol) og 4 ml av en vandig oppløsning av 1-(2-merkaptoetyl)-1,4,4-trimetylpiperaziniumbisklorid (0,90 g, 3,44 mmol). Etter 1,25 timer ble det tilsatt diisopropyletylamin (0,1 ml, 0,57 mmol) og omrøringen fortsatte i 2 timer. En del av acetonitrilet ble fjernet under redusert trykk og den resulterende røde blanding ble kromatografert på en PrepPak -500/C^g-søyle (Waters Associates) med 25-75% acetonitril i vann som elueringsmiddel, noe som ga 1,4 g av et gulaktig pulver etter lyofilisering. Dette ble oppløst i vann og oppløsningen helt på en 1,2 x 58 cm kolonne av permutit S-l Cl under anvendelse av vann som elueringsmiddel. Lyofilisering av de passende fraksjoner ga 1,17 g av et pulver som på ny ble renset på en PrepPak -500/C^g-kolonne. Lyofilisering av de passende fraksjoner ga et gulaktig pulver, 0,80 g (53%) ;
IR (KBr) v . : 3400 (br, OH), 1770 (C=0 av B-laktam),
maks
1690 (C=0 av pNB-ester), 1605 (aromatisk), 1515 (N02),
1345 (N02) cm"<1>;
<1>HMR (D20) 6: 1,26 (d, J=6,3 Hz, 3H, CH3CHOH), 3,39 (s, NCH3), 4,00 (s), 5,37 (Br, s, CH2 av pNB), 7,60 (d,
J=8,6 Hz, 2H, Ho av pNB), 8,20 (d, J=8,7 Hz, 2H, HM av pNB) ;
UV (H-<O>) X , : 276 (el2094), 306 (el0752).
2 maKs
Analyse for C25<H3>6N4<OgS>Cl2.3H20
D. ( 5R, 6S)- 3-[ 2-( l, 4, 4- trimety1- 1- piperazinium) etyltio]-6-[ lR- hydroksyetyl]- 7- okso- l- azabicyklo( 3. 2. 0)- hept- 2r en- 2- karboksylatklorid
En blanding av (5R,6S)-paranitrobenzyl-3-[2-(1,4,4-trimetyl-1-piperazinium)etyltio]-6-[IR, hydroksyetyl]-7-okso-l-azabicyklo ( 3 . 2 . 0 ) hept-2-en-2-karboksylatbisklorid (0,40 g,
0,68 mmol), fosfatbuffer (30 ml, 0,05 M, pH 7,0), tetrahydrofuran (10 ml), eter (30 ml) og 0,40 g 10% palladium på trekull ble hydrogenert ved 23°C under et trykk på
2,45 kp/cm<2> i 1 time. De to faser ble separert. Den organiske fase ble ekstrahert med 10 ml vann. De vandige faser ble filtrert på en Celite-pute, vasket med 10 ml eter, konsentrert under vakuum til 10 ml og kromatografert på en PrepPak -500/C^g-kolonne (2,2 x 11 cm) med vann som elueringsmiddel, noe som ga 70 mg eller 25% etter lyofilisering;
IR (KBr) vmakg: 3400 (br, OH), 1755 (C=0 av B-laktam),
1585 (karboksylat) cm <1>;
HMR (D20) 6: 1,24 (3H, d, J=6,3 Hz, CH3CHOH), 3,36 (s, NCH3), 3,98 (s);
uv <H2<0>) <X>maks<:><2>96 (e7987);
[a]<23> 35,9° (c, 0,30, H20) ,
-4
t^ = 9,8 timer (målt ved en konsentrasjon pa 10 Mi fosfatbuffer, pH 7,4, ved 3 6,8°C.

Claims (1)

1.
Fremgangsmåte for fremstilling av et karbapenem-derivat med formelen
der
R<8> er hydrogen,
R<1> er 1-(R)-hydroksyetyl,
A er etylen som eventuelt er substituert med C1_4-alkyl, eller cykloheks-1,2-ylen,
R<14> er et kvaternisert pyridin-, imidazolin-, N-metylmorfolin, N-metyltiomorfolin-, N-metyltiomorfolin-s-oksyd-eller 1,4-dimetylpiperazingruppe som eventuelt er substituert med en eller flere grupper valgt blant C1_3-alkyl, hydroksy-
C1_3-alkyltio, -alkyloksy og amino og er bundet til A via det kvaternære nitrogenatom, og
R<2> er hydrogen, en anionisk blanding eller en konvensjonell lett avspaltbar karboksylbeskyttende gruppe under den forutsetning at det, når R<2> er hydrogen eller en beskyttende gruppe, også foreligger et motanion, eller
et farmasøytisk akseptabelt salt derav, karakterisert ved at man omsetter et mellomprodukt med formelen
der R<1> og R<8> har den ovenfor angitte betydning og R<2>' er en p-nitrobenzylgruppe, med difenylklorfosfat i nærvær av diisopropyletylamin, og behandler den resulterende blanding med en tioforbindelse med formelen
der A og R<14> har den ovenfor angitte betydning og X" er et motanion, i et inert oppløsningsmiddel med en temperatur fra -15"C til romtemperatur og i nærvær av diisopropyletylamin
for fremstilling av et karbapenem-produkt med formelen
der R<1>, R<8>, R<2>', A, R<14> og X" har den ovenfor angitte betydning, og, hvis ønskelig, fjerner den karboksylbeskyttende gruppe R<2>' på i og for seg kjent måte for dannelse av den tilsvarende ubeskyttede gruppe med formel (I), eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
NO840865A 1983-03-08 1984-03-07 Fremgangsmaate til fremstilling av carbapenemderivater. NO166038C (no)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
NO902554A NO171271C (no) 1983-03-08 1990-06-08 Kvaternaere amintiolforbindelser

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US47137883A 1983-03-08 1983-03-08
US49969183A 1983-06-07 1983-06-07
US55729583A 1983-12-01 1983-12-01

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO840865L NO840865L (no) 1984-09-10
NO166038B true NO166038B (no) 1991-02-11
NO166038C NO166038C (no) 1991-05-22

Family

ID=27413179

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO840865A NO166038C (no) 1983-03-08 1984-03-07 Fremgangsmaate til fremstilling av carbapenemderivater.

Country Status (31)

Country Link
JP (1) JPH05255250A (no)
KR (1) KR900002247B1 (no)
AR (1) AR241016A1 (no)
AT (1) AT387968B (no)
AU (2) AU572124B2 (no)
CA (1) CA1284324C (no)
CH (1) CH658248A5 (no)
CY (1) CY1546A (no)
DD (1) DD228258A5 (no)
DE (1) DE3408347A1 (no)
DK (1) DK140584A (no)
ES (2) ES8505205A1 (no)
FI (1) FI840863A (no)
FR (1) FR2542316B1 (no)
GB (1) GB2136802B (no)
GR (1) GR81871B (no)
HK (1) HK82990A (no)
HU (1) HU193895B (no)
IE (1) IE57098B1 (no)
IL (1) IL71149A (no)
IT (1) IT1178465B (no)
LU (1) LU85241A1 (no)
NL (1) NL8400702A (no)
NO (1) NO166038C (no)
NZ (1) NZ207346A (no)
OA (1) OA07674A (no)
PT (1) PT78211B (no)
SE (2) SE8401278L (no)
SG (1) SG35490G (no)
YU (2) YU46147B (no)
ZW (1) ZW3884A1 (no)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4683301A (en) * 1982-04-08 1987-07-28 Bristol-Myers Company Carbapenem antibiotics
US4552696A (en) * 1982-04-09 1985-11-12 Bristol-Myers Company Carbapenem antibiotics
CA1285940C (en) * 1984-07-02 1991-07-09 Merck & Co., Inc. Carbapenems having a 2-quaternary heteroarylalkylthio substituent
IE851586L (en) * 1984-07-02 1986-01-02 Interchem Internat S A I methylcarbapenems having a 2-quaternary¹heteroarylalkylthio substituent
US4665169A (en) * 1985-09-11 1987-05-12 Bristol-Myers Company Carbapenem antibiotics
US4880922A (en) * 1985-11-22 1989-11-14 Bristol-Myers Company Carbapenems with quaternized heterothioalkylthio substitution at position 2
NZ219892A (en) * 1986-04-15 1991-02-26 Merck & Co Inc N-amino quaternised heteroarylium carbapenem derivatives and pharmaceutical compositions thereof
IE910606A1 (en) * 1990-02-23 1991-08-28 Sankyo Co Carbapenem derivatives having antibiotic activity, their¹preparation and their use
US5712267A (en) * 1991-06-04 1998-01-27 Sankyo Company,. Limited Carbapenem derivatives, their preparation and their use as antibiotics
ATE348818T1 (de) 2003-06-12 2007-01-15 Btg Int Ltd Cyclische hydroxylamine als psychoactive verbindugen
FR2921258A1 (fr) * 2007-09-24 2009-03-27 Oreal Composition tinctoriale comprenant au moins un precurseur incolore disulfures/thiol, proced de coloration a partir de la composition

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS55147284A (en) * 1979-04-17 1980-11-17 Sanraku Inc Novel beta-lactam derivative and its preparation
IE52147B1 (en) * 1980-03-27 1987-07-08 Merck & Co Inc 4-(3-carboxy-2-oxopropyl)-azetidin-2-ones and process for their preparation
EP0038869A1 (en) * 1980-04-30 1981-11-04 Merck & Co. Inc. Process for the preparation of 1-carbapenems, and intermediates for their preparation
EP0060612A1 (en) * 1981-02-04 1982-09-22 Beecham Group Plc Process for the preparation of azabicyclo(3.2.0)-hept-2-ene derivatives
US4552873A (en) * 1981-08-19 1985-11-12 Sankyo Company Limited Carbapenem compounds, and compositions containing them
EP0074599A1 (en) * 1981-09-09 1983-03-23 Takeda Chemical Industries, Ltd. 5,6-cis-Carbapenem derivatives, their production and use
US4552696A (en) * 1982-04-09 1985-11-12 Bristol-Myers Company Carbapenem antibiotics
US4536335A (en) * 1982-06-18 1985-08-20 Bristol-Myers Company Carbapenem antibiotics

Also Published As

Publication number Publication date
ATA76984A (de) 1988-09-15
AU605491B2 (en) 1991-01-17
ES530337A0 (es) 1985-05-16
DD228258A5 (de) 1985-10-09
FR2542316B1 (fr) 1988-10-07
ZW3884A1 (en) 1984-10-10
SE8901162D0 (sv) 1989-04-03
FI840863A (fi) 1984-09-09
IT8419945A0 (it) 1984-03-07
IT1178465B (it) 1987-09-09
HUT34980A (en) 1985-05-28
IE57098B1 (en) 1992-04-22
YU46147B (sh) 1993-05-28
ES537349A0 (es) 1985-08-16
DK140584A (da) 1984-09-09
CH658248A5 (de) 1986-10-31
NO840865L (no) 1984-09-10
SG35490G (en) 1990-07-13
GB2136802A (en) 1984-09-26
LU85241A1 (fr) 1984-11-14
CA1284324C (en) 1991-05-21
FR2542316A1 (fr) 1984-09-14
SE8401278D0 (sv) 1984-03-07
PT78211A (en) 1984-04-01
ES8505205A1 (es) 1985-05-16
SE8901162L (sv) 1989-04-03
ES8507145A1 (es) 1985-08-16
FI840863A0 (fi) 1984-03-05
NZ207346A (en) 1987-01-23
GB2136802B (en) 1987-05-20
AR241016A1 (es) 1991-04-30
AU7592487A (en) 1987-10-22
YU42084A (en) 1986-08-31
AU2536084A (en) 1984-09-13
GR81871B (no) 1984-12-12
PT78211B (en) 1986-08-12
AU572124B2 (en) 1988-05-05
AT387968B (de) 1989-04-10
HK82990A (en) 1990-10-19
IL71149A0 (en) 1984-06-29
AR241016A2 (es) 1991-04-30
JPH05255250A (ja) 1993-10-05
DE3408347A1 (de) 1984-09-13
KR900002247B1 (ko) 1990-04-07
NO166038C (no) 1991-05-22
HU193895B (en) 1987-12-28
DK140584D0 (da) 1984-02-29
IL71149A (en) 1990-03-19
IE840549L (en) 1984-09-08
GB8405984D0 (en) 1984-04-11
NL8400702A (nl) 1984-10-01
YU46305B (sh) 1993-05-28
SE8401278L (sv) 1984-09-09
OA07674A (fr) 1985-05-23
YU49486A (en) 1987-12-31
KR840008157A (ko) 1984-12-13
CY1546A (en) 1991-03-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE68917023T2 (de) 3-Pyrrolidinylthio-1-azabicyclo[3.2.0]-hept-2-en-2-carbonsäureverbindungen.
US4536335A (en) Carbapenem antibiotics
CH657853A5 (de) Carbapenemderivate, deren herstellung und solche verbindungen enthaltende praeparate.
EP0050334B1 (en) 2-carbamimidoyl-6-substituted-1-carbadethiapen-2-em-3-carboxylic acids, a process for preparing and an antibiotic composition comprising the same
NO166038B (no) Fremgangsmaate til fremstilling av carbapenemderivater.
DE3312533C2 (no)
DE3334937C2 (no)
JPS60233077A (ja) １‐テヘロ‐６‐〔１‐ヒドロキシエチル〕‐２‐ｓｒ↑８‐１‐カルバデチアペン‐２‐エム‐３‐カルボン酸
CH651037A5 (de) Penem-3-carbonsaeurederivate und verfahren zu deren herstellung.
US4224336A (en) 3-(2-Aminoethylthio)-6-amido-7-oxo-1-azabicyclo[3.2.0]-hept-2-ene-2-carboxylic acid
US4880922A (en) Carbapenems with quaternized heterothioalkylthio substitution at position 2
US4640799A (en) Carbapenem antibiotics
CH661729A5 (de) Fluoralkylierte carbapenemverbindungen.
US4665170A (en) Carbapenem antibiotics
US4997936A (en) 2-carbamimidoyl-6-substituted-1-carbadethiapen-2-em-3-carboxylic acids
AT387223B (de) Verfahren zur herstellung von neuen carbapenem-derivaten
US4710568A (en) Carbapenem antibiotics
US4281002A (en) 3-(2-Aminoethylthio)-6-amido-7-oxo-1-azabicyclo(3.2.0)-hept-2-ene-2-carboxylic acid
US4642341A (en) Carbapenem antibiotics
DD237507A5 (de) Verfahren zur herstellung von quaternaeren aminthiol.-zwischenverbindungen
NO171271B (no) Kvaternaere amintiolforbindelser
AT387574B (de) Verfahren zur herstellung neuer carbapenem-derivate
CS250658B2 (cs) Způsob výroby karbapenemových derivátů
JPH09503518A (ja) ３−ピロリジニルチオ−カルバペネム誘導体およびそれらの抗菌活性
JPS5910588A (ja) カルバペネム抗生物質