NL8202562A - Verbinding met cerebrale eubolische activiteit; werkwijze voor het bereiden daarvan; farmaceutische samenstellingen. - Google Patents

Description

i ΐ VO 31).80 i

Verbinding met cerebrale eubolische activiteit; verkwijze voor het be-reiden daarvan; farmaceutische samenstellingen.

De onderhavige uitvinding heeffc betrekking op een nieuw vinca-minederivaat, nl. 13a-ethyl-2,3,5,6,13a,13b-hexahydro-lH-indolo (3,2,1-de) pyrido (3,2.1-ij) (1,5) naftiridine-12-ftalidile carboxylaat met formule 1 van het formuleblad.

5 De verbinding (die ook kan worden gedefinieerd als ftalidile- apovincaminaat en verder kortheidshalve zal worden aangeduid als AP 69¾ blijkt bruikbare cerebrale eubolische eigenschappen te hebben, ver-sterkt door zijn geringe toxiciteit en gunstige farmacokinetiek. Der-halve heeffc de uitvinding ook betrekking op farmaceutische samenstel-10 . lingen, die geschikt zijn voor de behandeling van cerebrovasculaire aandoeningen en organische en functionele syndromen, die veroorzaakt zijn door een verslechtering van de cerebrale circulatie, welke samenstellingen de genoemde verbinding als hun belangrijkste actieve ingredient bevatten.

15 Verder wordt volgens de uitvinding een verkwijze verschaffc voor het bereiden van AP 698, welke gekenmerkt is doordat bromoftalide met formule 2 in reactie wordt gebracht met een metaalzoub van apovincami-nezuur met formule 3, volgens het op het formuleblad weergegeven schema, waarin Me een alkalimetaal of het equivalent van een aardalkalimetaal 20 is.

In een voorkeursuitvoeringsvorm van de werkvijze volgens de uitvinding is Me kalium. De reactie wordt bij voorkeur uitgevoerd in apro-tische polaire oplosmiddelen zoals dimethylsulfoxyde, acetonitrile, dimethylformamide of hexamethylfosforotriamide, bij temperaturen tus-25 sen 0 en 60°C, bij voorkeur bij kamertemperatuur.

Het onderstaande voorbeeld licht de werkwijze toe, zonder dat daarmede de omvang van de uitvinding zoals gedefinieerd in de conclu-sies wordt beperkt.

8202562 *' "5 - 2 -

Voorbeeld

Men loste 5 g (0,0138 mol) kaliumzout ran apovincaminezuur op in if-0 cm^ Ν,Ιϊ-dimethylformamide; men voegde 3,09 g (0,0138 mol) bromo-ftalide aan een spatelpunt kaliumjodide als katalysator toe. Men liet 5 reageren bij kamert enqperat uur. De reactie werd geverifieerd door dunne-1aagchromato grafie (eluens: acetaat/benzeen 70 : 30). Aan het einde (ongeveer 1 uur) werd het oplosmiddel verdampt, het residu gewassen met HgO en geextraheerd met ethylacetaat. De organische fase werd gedroogd, het oplosmiddel werd verdampt, het ethanolresidu werd gekristalliseerd 10 door heet filtreren met koolstof op Celite. Dit gaf 3,35 g (55/¾) van een kristallijn produkt met een smeltpunt van 190°C, waarvan de analyse gegevens overeenstemden met die, welke berekend waren voor een verbin-ding met formule 1.

Analyses: voor ^28^26^2¾ (molecuulgewicht ^5^,3) 15 berekend: C 7^,00, H 5»72, N 6,l6$; gevonden: C 73,83, H 5,81*, N 6,02%.

De spectraalgegevens bevestigden eveneens de structuur van de verkregen verbinding.

Infraroodspectrnm in nujol mull: de absorptiewaarden van de 20 strekbanden zijn in golfgetalien (cm ) gegeven: strek C*0 van lacton 1775 sterk strek C * 0 van ester 17^8 sterk strek C=C van alkenen 1630 medium strek C * C van aromaten l600 medium 25 strek C - 0 twee banden 970 sterk 960 sterk

Kernmagnetisch resonantiespectrum (KMR) in CDCl^ met TMS als interne standaard.

De chemische shiftwaarden zijn gegeven in £ 30 0,9. (t, 3H, -CH2-CH3); 1,8 )q, 2H, -CHg-CI^).; k, 1 (s, 1H, in C^); 6,25 (s, 1H = CH-); 7-8 (m, aromatische 8H, 1H 0-(?H-0).

De farmacotoxieologische eigenschappen van AP 698 kunnen als volgt worden samengevat: 1. Toxiciteit 35 De toxiciteit van enkelvoudige toedieningen van AP 698 is onder- 8202562 .. * *· - 3 - zocht bij ratten, door behandeling van de dieren langs orale en intra-peritoneale routes met varierende doseringsniveaus van AP 698.

De LDj-0-vaarden, bepaald door de methode volgens Litchfield en Wilcoson (J. Pharmacol'. Exp. Therap., 19^9» 96, 99) vorden getoond in 5 tabel A.

Pabel A

Acute toxiciteit van AP 698 in de rat Produkt Toedieningsroute LD^q (mg/kg) _ ___ (95% betrouvbaarheidsgrens) 10 AP 698 oraal > 3000 intraperitoneaal 68U (638 - 720) 2. Pharamcologische eigens chap-pen 2.1 Effect op versleehtering van elektrogenese door cerebrale ischemie bij konijnen.

15 De aetiviteit van het produkt AP 698 is onderzocht in dieren vaarin ischemie verd gelnduceerd door occlusie, gedurende 3 minuten en .

30 seconden, van de rechter brachiocefaalstam en de linker subclavieu- ' laire arterie.

• De effecten van ischemie op de hersenen verden aangetoond door .

20 EEG, met frontale-occipitale derivatie, met behulp van" permanente elek-troden die tevoren in de geschikte schorsgebieden van de konijnen va- ; ren geimplanteerd en gebruikmakend van het "PAT-systeem" dat beschre-ven is door Borzeix et al (lOde Salzburg Conferentie, 1980).

Uit alle onderzochte parameters kvam naar voren dat het produkt ' 25 -AP 698, toegediend langs intraveneuze route aan het eind van de ische-mie-manoeuvre, een dosisafhankelijk therapeutisch effect had, dat bleek uit een dosis van slechts 0,5 mg/kg (tabel B). In de behandelde dieren . verd in feite een sneller herstel van het EEG en van de schorsreaetivi-teit op stimulering vaargenomen dan in de controledieren, alsmede een.

30 terugkering in kortere tijd naar een verloop dat vergelijkbaar vas met dat, vat in hetzelfde dier voor de ischemie-manoeuvre vas opgetekend.

Kvantitatieve analyse van de verlopen maakte het pok mogelijk om vast te stellen dat AP 698 in staat vas om een bepaald aantal EEG- : veranderingen volgend op de experimentele ischemie en vaargenomen gedu-35 rende de post-ischemiefase te elimineren of af te zvakken.

8202562 - It -

In tegenstelling tot wat in de controledieren optrad, werd in het bijzonder in de met AP 698 behandelde dieren waargenomen dat - de frequentie van het theta-ritme niet toenam, de amplitude niet tussen de lOde en 20ste minuut afnam en de relatieve representatie- 5 tijden niet werden verstrooid; - het beta-ritme minder verminderd werd dan in de controledieren; - de waarden van de theta + beta/delta + alfa verhoudingen tussen de l4de en de 25ste minuut minder afhamen dan in de controledieren.

2.2 Veranderingen in sterftecijfer als gevolg van hypobare hypoxie.

10 De experimenten werden uitgevoerd aan muizen die opgesloten wa- ren in kooien waarin de druk werd verlaagd tot een niveau (190 mm Hg) dat de dood van de dieren veroorzaakte.

Ha vaststellen van de overlevingsduur van de controledieren, werden de effecten van verschillende doseringsniveaus van AP 698 onder-15 zocht. De verkregen resultaten staan in tabel C; deze tonen duidelijk hoe het onderzochte produkt in staat was om een zeer significante ver-lenging van de levensduur te geven met een aanzienlijk beschermend effect op gelnduceerde hypobare hypoxie in de muis.

2.3 Effect op de_gladde spieren . 20 Gebruikmakend van geisoleerde konijnen-kronkeldarm als experi- menteel model, bleek. AP 698 een aanzienlijke myorelaxerende werkzaam-heid te hebben, welke duidelijk groter was dan de werkzaamheid die door vincamine onder dezelfde proefomstandigheden werd tentoongespreid.

Dit grotere effect op de tonus en amplitude van de contracties 25 werd zowel gevonden in spieren in basale omstandigheden als in spieren die met natrium of cerotonine hypertonisch waren gemaakt.

8202562 - 5 - Η ft -- Ζ Ζ φ ο Ο Ο Ο la ά5 ο νο ,\ο η w φ ρ ΐ Λ Α Τη Τη χ* Ο Φ C\J Η Ο S ΐ> m ♦Η

-f3 · <υ I

•S 3345 - -- * η goo ο σ> ία m

• 4) p φ 43 ΜΟ ip CM LA

Ο 0) ·Ρ Λ

(I) ft Ρ r* Λ OJ

Η . Η

οβ ** _ I

Vi ft C ·Ρ ,ο 3 ώ +3 φ ϊ> F ο - - - £β +3 co c- -a- φ g +ϊ ο <η -ΐ W co ϋ φρρφ »*·-*- β g +j co co J* μο §*rs +3 Φ ·Ρ Η •η a t) > > ’ο Φ 03 ft Φ •Ρ Ρ Φ ·Ρ 43 φ Μ 03 = S = Ρ ί> φ S C\ Ο Ο

Η fH Ο Η CM CO

£ § tS m λ Η tn i OOPOCMCMHH I ·Ρ Ρ Ρ Φ ft CQ ·Η · ft §βΟΦ ccss • Η Φ & HI H o tn to ΦΛΟ 43 flj ·Η ΙΛ W ΙΑ rl ,D CJ ,rS Φ S Η O - * — -

3 03 -P .ft P &3 LA O) CO O

E4.rlftOSftCMHHr-i I Ο P ft 3 43

•Ρ Μ O

to p Ο Φ Ρ φ p* « , a

ft -P P

φ »1-3 03 φ ffj ·ρ4 ·Η ·Η t ί ^ · NOPK-^OCAVft ft Ρ Ρ φ Φ rp -=Τ CM -=r O φ φ 43 -P - - . '

i ^ O H H

co 2 0 0 C\ p - Pi o VO £ ts

•π O

Ph c ·ρ m φ

< .h ^ S B

ft 43 .φ flj ·Η ·Η M S ·“ 5 Φ Ρ φ la Ον ε

43 φ 43 CM CO CO

43 .p 43 P -

OP ft Ο Η Η H

φ ·Η Φ Φ «Ρ 43

cp O

(3 ft

03 Μ . LA Ο O

•H Al !> CM LA O

03 · « ·> ·*>

O bO.p 1 Ο Ο H

« S

w Φ 43 rp Μ O co 3 ρ o\

Ό 43 MO

0 P „ P O Pj

Ph O < 8202562 * ^ ·» - 6 -

Tabel C

Beschermend effect van AP 698 op sterfte aan hypobare hyposie in muizen 5 Dosis Aantal Overlevingsduur (gemiddel- Variatie Mate van sig- mg/kg dieren de waarden in sec. + stan- % nificatie i.v. daardafwijking) (’) 12 72,5+ 3,5 l6 12 67,5 + 2,5 -6,9 N.S.

10 25,6 12 116,3 + 13,5 , +60,1* 0,01 fcl,0 12 157,9 + 33,2 +117,8 0,01 (') volgens de Mann-Whitney test (1 rank) 3. Farmacokinetiek

De farmacokinetiek van enzymhydrolyse is zowel in vitro als in 15 vivo in ratten na orale toediening van met tritium gelabelled AP 698 onderzocht. ·

De gemaakte vergelijkingen tonen de volgende bijzondere kinetiek-aspecten, afgezet tegen de blende aspecten van vincamine: a) enzymhydrolyse in vitro, bepaald door incuberen van AP 698 met rat- 20 tenplasma en meten van bet gevormde apovincaminezuur door gaschroma- tografie gaf een baliVaardetijd van 7,3 minuten.

b) In vivo-proeven bij ratten maakten het mogelijk om zowel niet ver-anderd AP 698 als apovincaminezuur in het plasma te vinden; de half-waardetijd van niet veranderd AP 698 bedroeg 72 minuten, terwijl de 25 halfwaardetijd van het apovincaminezuur dat zich in vivo uitfAP 698 _ vormde, 7,5 uren was.

De aanwezigheid van aanhoudende gehaltes aan apovincaminezuur na de toediening van AP 698 kan derhalve worden opgevat als een factor van grotere activiteit en latentie, en lagere toxiciteit van AP 698 30 in vergelijking met vincamine.

De verbinding volgens de onderhavige uitvinding kan langs orale of parenterale route worden toegediend.

• Yoorbeelden van farmaceutische samenstellingen zijn als volgt: - capsules van 5 tot 50 mg 35 - tabletten van 5 tot 50 mg 8202562 « -r- -r* - 7 - - i.m./i.v. ampullen van 5 tot 15 mg - druppels van 1 tot 5%· i > 8202562

Claims (7)

1. 2. Werkwijze voor het bereiden van de verbinding volgens conclusie 5 1, waarbij bromoftalide met formule 2 in reactie wordt gebracht met een metaalzout van apovincaminezuur met formule 3 volgens de op het formuleblad weergegeven vergelijking, waarin Me een alkalimetaal of het equivalent van een aardalkalimetaal is.
2. 3. Werkwijze volgens conclusie 2, waarin het kaliumzout van apovin-10 caminezuur wordt gebruikt. b. Werkwijze volgens conclusie 2 of 3, waarin aprotische polaire oplosmiddelen worden gebruikt.
3. 5· Werkwijze volgens conclusie U, waarin dimethylformamide wordt gebruikt.
4. 6. Farmaceutische samenstellingen, welke cerebrale eubolische acti- viteit bezitten, bevattende de verbinding volgens conclusie 1 als be-langrijkste actieve ingredient.
5. 7· Verbinding volgens conclusie 1, in hoofdzaak zoals hierin be-schreven.
6. 8. Werkwijze volgens conclusie 2, in hoofdzaak zoals getoond in het voorbeeld.
7. 9· Farmaceutische samenstellingen volgens conclusie 6, in de hier getoonde formuleringen. , * 8202562