MX2012009755A

MX2012009755A - Composiciones que contienen anticuerpo estable.

Info

Publication number: MX2012009755A
Application number: MX2012009755A
Authority: MX
Inventors: Dorthe Kot Engelund; Henrik Parshad; Malin T Gustavsson
Original assignee: Novo Nordisk As
Priority date: 2010-02-26
Filing date: 2011-02-28
Publication date: 2012-09-12
Also published as: RS61082B1; EP2538973A2; JP2016047858A; KR20120130757A; EP3708190A1; CN107496917B; EP3409289B1; JP6742290B2; EP3409289A3; EP3409289A2; CN103037899A; US20130028907A1; US10709782B2; US9795674B2; CN107693791A; WO2011104381A3; EP3216462A2; EP3216462A3; CN107693791B; US20180000935A1

Abstract

La invención se relaciona a composiciones que contienen proteína estable y de baja viscosidad (<50 cP), en particular, pero no exclusivamente composiciones que contienen anticuerpo estable y al uso de las proteínas estables en terapia, en particular para el suministro subcutáneo de la proteína estable.

Description

COMPOSICIONES QUE CONTIENEN ANTICUERPO ESTABLE Campo de la Invención La invención se relaciona a composiciones líquidas estables y de baja viscosidad que contienen proteínas, en particular, pero no exclusivamente anticuerpos estables, y al uso de las composiciones en terapia, en particular para el suministro subcutáneo de la proteína estable.

Antecedentes de la Invención Las inmunoglobulinas , anticuerpos monoclonales (mAbs, por sus siglas en inglés) y anticuerpos humanizados han sido desarrollados como productos farmacéuticos por una gran cantidad de años. Hay un claro incentivo para desarrollar formulaciones líquidas de alta concentración de mAbs debido al potencial de administración subcutánea lo cual resulta en mayor conveniencia para el paciente. Sin embargo, hay un consenso general que el desarrollo de formulaciones de alta concentración de mAbs posee serios retos con respecto a la estabilidad física y química del mAb tal como formación incrementada de agregados solubles así como también insolubles lo cual incrementa la probabilidad de una respuesta inmunogénica así como también dan origen a baja bioactividad.

Formación de agregado por un polipéptido durante el almacenamiento de una composición farmacéutica líquida puede Ref.: 233218 afectar adversamente la actividad biológica de ese polipéptido, resultando en pérdida de eficacia terapéutica de la composición farmacéutica. Además, la formación de agregado puede provocar otros problemas como bloqueo de tubería, membranas o bombas, cuando la composición farmacéutica que contiene polipéptido se administra usando un sistema de infusión.

Adicionalmente, las formulaciones de alta concentración de mAbs han sido reportadas para resultar en viscosidad incrementada por lo mismo creando serios retos para la capacidad de fabricación y capacidad de inyección.

Controlar la agregación y viscosidad de formulaciones líquidas de alta concentración de mAbs no es materia trivial . El hecho de que solamente pocos productos con mAb existen en el mercado como una formulación líquida de alta concentración (>^ 100 mg/ml) exhibe la complejidad. Han ¦ sido publicados documentos lo cual muestra que NaCl puede disminuir la viscosidad y también algún grado de control de agregación (Patente Europea 1981824) . La sacarosa ha sido también mostrada para estabilizar mAb contra formación de agregados por la forma de mecanismo de exclusión preferencial . Sin embargo, identificar estabilizantes adecuados es todavía una ciencia empírica en este campo.

Es bien conocido que cantidades relativamente altas de electrolitos, como sal y amortiguador, son usadas para disminuir la viscosidad de formulaciones de mAb de alta concentración (Patente Europea 1981824) . La solicitud WO 01/24814 (Chiron Corporation) describe una composición farmacéutica que contiene polipéptido líquido que comprende una base de aminoácido como un estabilizante. La Patente Europea 1336410 (Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha) describe una formulación farmacéutica inyectable que contiene una proteína fisiológicamente activa y por lo menos un azúcar como un agente t anquilizador. La Patente EP 1314437 (Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha) describe una preparación que contiene anticuerpo que comprende un amortiguador de glicina y/o histidina. La solicitud WO 02/30463 (Genentech, Inc.) describe una formulación de proteína concentrada que tiene viscosidad reducida y una sal y/o amortiguador en una cantidad de por lo menos aproximadamente 50 mM. La patente EP 1475100 (Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha) describe una solución que contiene anticuerpo que comprende un ácido orgánico y un tensioactivo como estabilizante. La Patente EP 1475101 (Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha) describe una solución que contiene anticuerpo que comprende un azúcar como un estabilizante. La solicitud WO 2004/001007 (IDEC Pharmaceuticals Corporation) describe una composición de anticuerpo concentrada que consiste esencialmente de histidina o amortiguador de acetato en el intervalo de aproximadamente 2 mM a aproximadamente 48 mM. La solicitud WO 2004/016286 (Abbot Laboratories Bermuda Ltd.) describe una formulación de anticuerpos humanos que tienen un pH de entre aproximadamente 4 y 8. La solicitud WO 2005/123131 (Medimmune Vaccines, Inc.) describe una formulación para secado por aspersión un anticuerpo o vacuna. La solicitud WO 2007/003936 (Insense Limited) describe un sistema, acuoso estable que comprende una proteina y uno o más agentes estabilizantes los cuales tienen grupos ionizables. La solicitud WO 2007/092772 (Medimmune, Inc.) describe una formulación de proteína líquida que comprende una proteína variante Fe y entre 1 mM a 100 mM de agente amortiguador. La solicitud US 2004/0022792 (Immunex Corporation) describe un método para estabilizar una proteína en un pH de entre aproximadamente 2.8 y aproximadamente 4.0. La solicitud US 2003/0180287 (Immunex Corporation) describe una composición farmacéutica acuosa adecuada para almacenamiento a largo plazo de polipéptidos . La solicitud WO 2008/071394 (F. Hoffmann-La Roche AG) describe una formulación parental farmacéutica estable que contiene un anticuerpo. La' solicitud WO 2009/120684 y solicitud WO 2008/121615 (Medimmune Inc.) ambos describen formulaciones líquidas de alta concentración de anticuerpos o fragmentos de los mismos que enlazan específicamente a un alfa polipéptido de interferón humano. La solicitud WO 2009/070642 (Medimmune Inc.) describe formulaciones liofilizadas estables de anticuerpos biespecíficos o fragmentos de los mismos. La Patente Europea EP 1977763 (Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha) describe composiciones estabilizantes que contienen anticuerpos que comprenden uno o más aminoácidos . La solicitud de los Estados Unidos de Norteamérica 2004/0197324 (Genentech, Inc.) describe formulaciones de anticuerpo y proteína altamente concentrada con viscosidad reducida. La solicitud WÓ 2008/132439 (University of Strathclyde) describe composiciones estabilizantes de precipitación las cuales son reclamadas para evitar o reducir la agregación. La Solicitud de los Estados Unidos de Norteamérica 2007/0020255 (Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd) describe un método para estabilizar un anticuerpo en solución el cual comprende la adición de glicina y ácido cítrico a la solución. La solicitud de los Estados Unidos de Norteamérica US 2007/0184050 (Kirin Beer Kabushiki Kaisha) describe una formulación líquida estable que contiene un anticuerpo en un amortiguador de glutamato y/o amortiguador de citrato. La solicitud de los Estados unidos de Norteamérica US 2009/0280129 (Genentech describe formulaciones de anticuerpo y proteína de alta concentración) .

Hay por lo tanto una gran necesidad para una composición de anticuerpo farmacéutica concentrada alta estable que tienen una baja viscosidad y factible la cual es adecuada para administración subcutánea, como en dispositivo listo para usarse. Adicionalmente, a partir de un punto de vista del paciente puede ser altamente deseable tener productos estables a temperatura ambiente. En este momento, no hay formulaciones de mAb vendidas donde el almacenamiento en temperatura ambiente es una posibilidad en toda la vida media del producto de fármaco. Típicamente, ocurre la degradación de proteína incrementada formando un alto nivel inaceptable de agregados e impurezas relacionadas a proteína, las cuales pueden dar origen a reacciones inmunogénicas .

Muchos de los productos de mAb vendidos contienen tensioactivos en su formulación. Típicamente, se agregan los tensioactivos con el fin de reducir la tensión interfacial lo cual puede inducir agregación de proteína y formación de partículas llevando a una calidad de producto inaceptable. Ejemplos de tensión interfacial pueden ser contacto de la proteína con i) aire ii) material de cierre de contenedor, como un tapón de goma, pistón, vidrio, jeringas prellenadas iii) materiales relacionados a producción, como tanques de acero, tuberías y bombas iv) hielo, durante congelación/descongelación, etc. Sin embargo, los tensioactivos como polisorbatos contienen típicamente un residuo de peróxidos los cuales pueden oxidar la molécula de proteína llevando a una calidad comprometida de producto. Adicionalmente, a partir de un punto de vista de fabricación de polisorbatos requiere una etapa extra en la producción ya que la ultra/diafiltración es un retó a realizar cuando la formulación contiene los polisorbatos . La formación de productos oxidados es una cuestión retadora, por lo tanto un manejo cuidado de polisorbatos es requerido con el fin de controlar la formación de productos oxidados. De esta forma, puede ser deseable diseñar formulaciones sin tensioactivos , tanto desde un punto de vista de estabilidad y fabricación.

Sumario de la Invención De acuerdo con un primer aspecto de la invención, la invención proporciona una composición líquida, estable que comprende una proteína, una sal y/o un amortiguador, caracterizada porque la concentración total de la sal y/o amortiguador es menor a 100 mM.

De acuerdo a otro aspecto de la invención, se proporciona una composición líquida, estable . que comprende proteína, una sal y/o un amortiguador, en donde la concentración total de la sal y/o amortiguador es menor a 60 mM.

De acuerdo a otro aspecto de la invención, se proporciona una composición de proteína líquida estable, que es estable en temperatura ambiente.

De acuerdo a otro aspecto de la invención, se proporciona una composición líquida, estable, en donde la concentración de la proteína está entre 100 mg/ml y 300 mg/ml .

De acuerdo a otro aspecto de la invención, se proporciona una composición de proteína líquida, estable donde el aminoácido, L-arginina es usado como un estabilizante.

De acuerdo a otro aspecto de la invención, se proporciona una composición de proteína estable como se define en la presente para uso en terapia.

De acuerdo a otro aspecto de la invención, la invención proporciona una composición de proteína sin agregar tensioactivo la cual es tanto estable y factible para producir .

Breve Descripción de las Figuras La Figura 1, muestra un análisis estadístico del efecto de factores principales e interacciones de 2 -factores en la formación de % de HM P después de que las formulaciones han sido almacenadas en 40°C por 3 meses.

La Figura 2 muestra el análisis estadístico del efecto de histidina y arginina en la formulación de % de HMWP después de que han sido almacenadas las formulaciones en 40°C por 3 meses .

La Figura 3 muestra el análisis estadístico del efecto de histidina, cloruro de sodio (NaCl) y arginina en la viscosidad de la formulación.

Descripción Detallada de la Invención De acuerdo a un primer aspecto de la invención, la invención proporciona una composición líquida, estable que comprende una proteína, una sal y/o un amortiguador, caracterizada porque la concentración total de la sal y amortiguador es menor a 100 mM.

Sorpresivamente, se ha encontrado que las composiciones estables de proteína con bajas cantidades de sal y amortiguador tienen una viscosidad baja y factible, como la viscosidad de < 50 cP en 25 °C. Es especialmente deseable baja viscosidad de formulaciones farmacéuticas para inyección subcutánea, pero es también deseable para otras formulaciones líquidas, donde por ejemplo mejora el manejo de la formulación.

El término "composición estable" se refiere a una composición con estabilidad física satisfactoria, estabilidad ' química satisfactoria o estabilidad física y química satisfactoria.

El término "estabilidad física" de la composición de proteína como se usa en la presente se refiere a la tendencia de la proteína para formar agregados inactivos y/o insolubles biológicamente como un resultado de la exposición de la proteína a las tensiones termomecánicas y/o interacción con interfases y superficies que son desestabilizantes, como superficies hidrofóbicas e interfases. La estabilidad física de las composiciones de proteína acuosa ets evaluada por medio de inspección visual y/o mediciones de turbidez después de exponer la composición llenada en recipientes adecuados (por ejemplo cartuchos o viales) . Es una calidad inherente de formulaciones altamente concentradas de mAbs para exhibir opalescencia debido a difusión Raleigh. De esta forma, una composición no puede ser clasificada como inestable físicamente con respecto a la agregación de proteína, cuando muestra turbidez visual a la luz del día. Sin embargo, cuando hay precipitados o separación de fase visible a la luz. del día la formulación es clasificada como inestable físicamente.

El término "estabilidad química" de la composición de proteína como se usa en la presente se refiere a cambios covalentes químicos en la estructura de proteína llevando a la . formación de productos de degradación química con menos . potencial de potencia biológica y/o propiedades inmunogénicas incrementadas potenciales comparadas con la estructura de proteína nativa. Varios productos de degradación química pueden ser formados dependiendo del tipo y naturaleza de la proteína nativa y el ambiente al cual se expone la proteína. La eliminación de degradación química puede a lo más probablemente no ser evitada completamente e incrementar cantidades de productos de degradación química es con frecuencia visto durante el almacenamiento y uso de la composición de proteína es bien conocido por la persona experta en la técnica. La mayoría de las proteínas son tendientes a deamidación, un proceso en el cual el grupo de amida de cadena lateral en residuos glutaminilo o asparaginilo es hidrolizada para formar un ácido carboxílico libre. Otras trayectorias de degradación implican la formación de productos de transformación de alto peso molecular donde dos o más moléculas de proteína son enlazadas covalentemente entre sí a través de la transamidación y/o interacciones de disulfuro llevando a la formación de dímero enlazado covalentemente, productos de degradación de oligómero y polímero (Stability of Protein Pharmaceuticals , Ahern. T. J. & Manning M. C, Plenum Press, New York 1992). La oxidación (de por ejemplo residuos de metionina) puede ser mencionada como otra variante de degradación química. La estabilidad química de la composición de proteína puede, ser evaluada por medir la cantidad de los productos de degradación química en varios puntos de tiempo después de la exposición a diferentes condiciones ambientales (la formación de productos de degradación puede con frecuencia ser acelerada por ejemplo incrementando la temperatura) . La cantidad de cada producto de degradación individual es con frecuencia determinada por separación de los productos de degradación dependiendo del tamaño de molécula y/o carga usando varias técnicas de cromatografía (por ejemplo SEC-HPLC y/o RP-HPLC) . .

SEC-HPLC es en particular usado para cuantificación de agregados de proteína. Las muestras pueden por ejemplo ser analizadas usando una columna TSK G3000 S XL, elución isocrática y subsecuente detección de UV en 214 nm. Este método es usado para determinar el contenido IgG monomérico y % de HM P que consiste de especies diméricas o mayores las cuales son separadas de acuerdo al tamaño por la resina de gel . El contenido monomérico y % de HMWP son determinados con relación al contenido de proteína total detectado por el método .

Por lo tanto, como se indica anteriormente, una composición estable se refiere a una composición con estabilidad física satisfactoria, estabilidad química satisf ctoria o estabilidad física y química satisfactoria. Una estabilidad satisfactoria de una formulación puede ser una en. donde menos de 10% y preferentemente menos de 5% de la proteína está como un agregado (HMWP, por sus siglas en inglés) en la formulación. En general, una composición debe ser estable durante el uso y almacenamiento (en cumplimiento con el uso recomendado y condiciones de almacenamiento) hasta que se alcance la fecha de expiración.

La viscosidad como se usa en la presente es usada como la viscosidad absoluta también nombrada viscosidad dinámica. Las mediciones son hechas por la técnica de cono y placa con un grupo de elemento Peltier en 25 °C, y donde se aplica un gradiente dé tensión de esfuerzo cortante bien definido es aplicado a una muestra y la proporción de esfuerzo cortante resultante -es medida. La viscosidad es la proporción de la presión de esfuerzo cortante a la proporción de esfuerzo cortante. La viscosidad absoluta es expresada en unidades de centipoise (cP) en 25°C.

El término "temperatura ambiente" como se usa en la presente, significa una temperatura del cuarto y donde algún tipo de un efecto frío no es requerido. Una temperatura ambiente está entre 15 y 30°C, como entre 20 y 30°C, como 20°C, 25°C ó 30°C.

El término "proteína" , "polipéptido" , y "péptido" como se usa en la presente significa un compuesto hecho de por lo menos cinco aminoácidos constituyentes conectados por enlaces de péptido. Los aminoácidos constituyentes pueden ser del grupo de los aminoácidos codificados por el código genético y pueden ser aminoácidos naturales los cuales no son codificados por el código genético, así como también aminoácidos sintéticos. Los aminoácidos naturales los cuales no son codificados por el código genético son por ejemplo, hidroxiprolina, y-carboxiglutamato, ornitina, fosfoserina, D-alanina y D-glutatnina. Los aminoácidos sintéticos comprenden aminoácidos fabricados por síntesis química, es decir D-isómeros de . los aminoácidos codificados por el código genético como D7alanina y D-leucina, Aib (ácido a-aminoisobutírico) , Abu (ácido alfa-aminobutírico) , Tle (tert-butilglicina) , beta-alanina, ácido 3 -aminometilbenzoico y ácido antranílico .

En una modalidad, la concentración total de sal y amortiguador es 95 m o menor, tal como cualquiera de 90, 85, 80, 75, 70, 65 ó 60 mM o menores. En una modalidad, la concentración total- de la sal y amortiguador es menor a 60 mM, como 50 mM, o menores, como 45, 40, 35, 33, 30, 25, 20 mM o menores.

En algunas modalidades, la sal puede tener una capacidad de amortiguamiento en el pH relevante, y en algunas modalidades, el amortiguador puede ser una sal. La característica crítica es que la concentración total de sal y amortiguador no exceda los valores establecidos .

En una modalidad, la sal es una sal inorgánica, o una sal orgánica o una combinación de uno o más de estos. En una modalidad, la sal es seleccionada del grupo que consiste de cloruro de sodio, cloruro de magnesio, triocianato de sodio, tiocianato de amonio, sulfato de amonio, cloruro de amonio, cloruro de calcio, clorhidrato de arginina, cloruro de zinc, acetato de sodio, aminoácidos o una combinación de los mismos.

En una modalidad, la sal es cloruro de sodio o cloruro de magnesio, opcionalmente en combinación con otras sales. En una modalidad, la sal es clorhidrato de arginina. En una modalidad, la sal es una combinación de una sal inorgánica y clorhidrato de arginina.

En una modalidad, la sal es un aminoácido. En una modalidad se usa el L-estereoisoméro del aminoácido. En una modalidad, la sal seleccionada de arginina, glicina, lisina, ácido aspártico, o ácido glutámico, o una combinación de los mismos. En una modalidad, el aminoácido es arginina o glicina. En una modalidad adicional, el aminoácido es arginina, como L-arginina. El aminoácido puede ser agregado a la composición en su forma de sal o en su forma libre, lo que sea adecuado.

En una modalidad, la sal (o combinación de sales) está presente en una concentración de entre 0 y 100 mM. En una modalidad, la concentración total de sal es 100 mM o menor, como 50 mM, 40 mM, 35 mM, 33 mM, 30 mM, 25 mM o menores .

Se ha encontrado sorpresivamente que el aminoácido, L-arginina, actúa como un estabilizante, y que la presencia de L-arginina tiene un efecto estabilizante estadísticamente significativo contra la formación de agregados de HM P en formulaciones líquidas de alta concentración de. proteínas, como anticuerpos. De esta forma, la invención también proporciona una composición líquida estable que comprende un anticuerpo y arginina en una concentración de entre 5 mM y 100 mM, tal como o menor, como 50 mM, 40 mM, 35 mM, 33 mM, 30 mM, 25 mM o menores.

En una modalidad, el amortiguador es un amortiguador aceptable farmacéuticamente adecuado, el cual comprende tanto una base aceptable farmacéuticamente y un ácido aceptable farmacéuticamente. En una modalidad, el amortiguador tiene un pKa de entre 4 y 8.

Ejemplos de ácido y bases aceptables farmacéuticamente puede incluir ácidos/bases no tóxicas inorgánicas así como también orgánicas como es bien conocido en la técnica. Ejemplos son acetato disódico, carbonato de sodio, citrato, glicilglicina, histidina, glicina, lisina, arginina, maleato, succinato, fosfato dihidrógeno sódico, fosfato hidrógeno disódico, fosfato de sodio y tris (hidroximetil) -amino metano, o mezclas de los mismos. Cada uno de estos amortiguadores específicos, constituye una modalidad alternativa de la invención. En una modalidad, el amortiguador aceptable farmacéuticamente comprende histidina, maleato, succinato, fosfato, o tris (hidroximetil) -amino metano .

En una modalidad, el amortiguador tiene un valor pKa + 1 unidad de pH a partir del pH objetivo de la composición.

En una modalidad, la composición es amortiguada a un pH de entre 5 y 7, como un pH de 5.0, 5.1, 5.2, 5.3, 5.4, 5.5, 5.6, 5.7, 5.8, 5.9, 6.0, 6.1, 6.2, 6.3, 6.4, 6.5, 6.6, 6.7, 6.8, 6.9 ó 7.0 o a un pH como se define por cualesquiera intervalos entre los mismos. En una modalidad, la composición es amortiguada a un pH de 5.0, 5.5, 6.0, 6.5 ó 7.0. En una modalidad, la composición es amortiguada a un pH de entre 6.0 y 6.5. En una modalidad, la composición es amortiguada a un pH de 6.0 ó 6.5.

En una modalidad, la composición comprende adicionalmente un tensioactivo . En una modalidad de la invención el tensioactivo es seleccionado de un detergente, aceite de ricino etoxilado, glicéridos poliglicolizados , monoglicéridos acetilados, ésteres de ácido graso de sorbitan, polímeros de bloque de polioxipropileno-polioxietileno (por ejemplo poloxámeros como Pluronic* F68, poloxámero 188 y 407, Tritón X-100) , ésteres de ácidos grasos de sorbitan polioxietileno, derivados de polioxietileno y polietileno como derivados alquilados y alcoxilados (polisorbatos , por ejemplo polisorbato 20, polisorbato 40, polisorbato 80 y Bri'j-35), monoglicéridos ?· derivados etoxilados de los mismos, diglicéridos o derivados polioxietileno de los mismos, alcoholes, glicerol, lectinas y fosfolípidos (por ejemplo, fosfatidilserina, fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina, fosfatidil inositol, difosfatidilglicerol y esfingomiélina) , derivados de fosfolípidos (por ejemplo ácido dipalmitoilfosfatídico) y lisofosfolípidos (por ejemplo palmitoil lisofosfatidil-L-serina y ésteres de l-acil-sn-glicero-3-fosfato de etanolamina, colina, serina o treonina) y alquilo, alcoxilo (éster de alquilo) , alcoxi (alquil éter) - derivados de lisofosfatidil y fosfatidilcolinas , por ejemplo derivados de lauroilo y miristoilo de lisofosfatidilcolina, dipalmitoilfosfatidilcolina, y modificaciones del grupo de cabeza polar, es decir colinas, etanolaminas , ácido fosfatídico, serinas, treoninas, glicerol, inositol y DODAC, DOTMA, DCP, BISHOP cargado positivamente, lisofosfatidilserina y lisofosfatidiltreonina y glicerofosfolípidos (por ej . Cefalinas) , gliceroglicolípidos (por ejemplo galactopiransoide) , lisolecitina de huevo de gallina, derivados de ácido fusídico (por ejemplo tauro dihidrofusidato de sodio, etc.) ácidos grasos de cadena larga y sales de los mismos C6-C12 (por ejemplo ácido oleico y ácido caprílico) , acilcarnitinas y derivados, derivados de Na-derivados acilados de lisina, arginina o histidina, o derivados acilados de cadena lateral de lisina o arginina, N -derivados acilados de dipéptidos que comprenden cualquier combinación de lisina, arginina o histidina y un aminoácido neutral o ácidos, Na-derivado acilado de un tripéptido que comprende cualquier combinación de un aminoácido neutral y dos aminoácidos cargados, DSS (docusato de sodio, no. de registro CAS (577-11-7), docusato de calcio, no. de registro CAS (128-49-4) , docusato de potasio, no. de registro CAS (7491-09-0) , SDS (dodecilsulfato de sodio o lauril sulfato de sodio) , caprilato de sodio, ácido cólico o derivados de los mismos, ácidos biliares y sales de los mismos y glicina o conjugados de taurina, ácido ursodeoxicólico, colato de sodio, deoxicolato de sodio, taurocolato de sodio, glicocolate de sodio, N-hexadecil-N, N-dimetil-3 -amonio-1-propanosulfato, tensioactivos monovalentes aniónicos (alquil-aril-sulfonatos) , tensioactivos zwiteriónicos (por ejemplo N-alquil-N, -dimetilamonio-l-propansulfonatos , 3 -colamido- 1-propildimetilamonio-l-propansulfonato, tensioactivos catiónicos (bases de amonio cuaternario) (por ejemplo bromuro de cetil-trimetilamonio, cloruro de cetilpiridinio) , tensioactivos no iónicos (por ejemplo dodecil beta-D-glucopiranósido) , poloxaminas (por ejemplo Tetronic's) , los cuales son copolímeros de bloque tetrafuncional derivados de la adición secuencial de óxido de propileno y óxido de etileno a etilendiamina, o el tensioactivo puede ser seleccionado del grupo de derivados de imidazolina, o mezclas de los mismos. Cada uno de estos tensioactivos específicos constituye una modalidad alternativa de la invención. En una modalidad, el tensioactivo es polisorbato 80 (es decir Tween™80)..

El uso de un tensioactivo en composiciones farmacéuticas es bien conocido para la persona experta. Para conveniencia se hace referencia a Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th edition, 2000.

En una modalidad, el tensioactivo está presente dentro de la composición en una cantidad abajo de 0.01%. En una modalidad, el tensioactivo está presente dentro de la composición en una cantidad abajo de 0.0075%, es decir entre 0.001% y 0.005%, como 0.001%.

En una modalidad, no está presente tensioactivo.

Sorpresivamente, se ha encontrado que las composiciones de proteína pueden ser estables con tanto bajas cantidades de sal, baja cantidad de amortiguador o baja cantidad de sal y amortiguador y sin ninguna adición, de tensioactivo.

En una modalidad, la composición adicionalmente comprende un agente modificador dé tonicidad. Ejemplos de agentes de modificación de tonicidad adecuados incluyen sales (por ejemplo cloruro de sodio) , alcoholes polihídricos (glucosa o maltosa) , disacáridos, (por ejemplo sacarosa) , aminoácidos (L-glicina, L-histidina, arginina, lisina, isoleucina, ácido aspártico, triptófano, treonina) , polietilenglicoles (por ejemplo PEG 400) o mezclas de los mismos. En una modalidad, el agente de modificación de tonicidad es sacarosa, manitol o propilenglicol . En una modalidad adicional, el agente de modificación de tonicidad es sacarosa. En algunas modalidades, el amortiguador y/o sal de la composición (como se describe anteriormente) también actúa como modificador de tonicidad o el modificador de tonicidad actuará como un amortiguador y/o sal (y la concentración del modificador de tonicidad por lo tanto en esos casos será calculada como tal) .

En una modalidad, el agente de modificación de tonicidad está presente dentro de la composición en una cantidad de entre 50 y 250 mM, como entre 100 y 200 mM, por ejemplo cualquiera de 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, ó 200 o cualesquiera intervalos entre ellos. En una modalidad, el agente modificador de tonicidad está presente dentro de la composición en una cantidad de 150 mM.

En una modalidad, la composición es isotónica.

En una modalidad, la proteína es una inmunoglobulina. En una modalidad, la protelna es un anticuerpo. En una modalidad, la proteína es un anticuerpo monoclonal (mAb) . En una modalidad, la proteína es un anticuerpo IgG4.

El término "anticuerpo" cubre anticuerpos monoclonales (incluyendo anticuerpos de gran longitud los cuales tienen una región Fe de inmunoglobulina) , composiciones de anticuerpo con especificidad poliepitópica, anticuerpos biespecíficos, diacuerpos, y moléculas de cadena sencilla, así como también fragmentos de anticuerpo (por ejemplo, Fab F(ab')2y Fv) .

El término "anticuerpo monoclonal" como se usa en la presente se refiere a un anticuerpo obtenido de una población de anticuerpos substancialmente homogéneos, es decir, los anticuerpos individuales que comprenden la población son idénticos excepto para posibles mutaciones que ocurren en forma natural que pueden estar presentes en cantidades menores . Los anticuerpos monoclonales son altamente específicos, siendo dirigidos contra un sitio antigénico sencillo. Adicionalmente, en contraste a preparaciones de anticuerpo convencionales (policlonales) las cuales incluyen típicamente diferentes anticuerpos se dirigen contra diferentes determinantes (epítopos) , cada anticuerpo monoclonal es dirigido contra un solo determinante en el antígeno. Además de su- especificidad, los anticuerpos monoclonales son ventajosos ya que son sintetizados por el cultivo de hibridoma, no contaminados por otras inmunoglobulinas . El modificador "monoclonal" indica el carácter del anticuerpo como siendo obtenido de una población substancialmente homogénea de anticuerpos, y no es para ser construida como que requiere producción del anticuerpo por cualquier método particular. Por ejemplo, los anticuerpos monoclonales a ser usados de acuerdo con la presente invención pueden ser hechos por el método de hibridoma descrito primero por Kohler et al., Nature 256: 495 (1975), o puede ser hecho por métodos de ADN recombinantes (ver, por ejemplo la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica No. 4,816,557). Los "anticuerpos monoclonales" pueden también ser aislados de bibliotecas de anticuerpo de fagos usando las técnicas descritas en Claxon et al. Nature, 353:624-628 (1991) y Marks et al., J. Mol. Biol., 222:581-597 (1991), por ej emplo .

Los anticuerpos monoclonales en la presente pueden extenderse para incluir anticuerpos "quiméricos" (inmunoglobulinas) en la cual una porción de la cadena pesada y/o ligera . es idéntica con u homologa a secuencias correspondientes en anticuerpos derivados de una especie particular o que pertenece a una clase o subclase de anticuerpo particular, mientras que el resto de la cadena es idéntica con u homologa a secuencias correspondientes en anticuerpos derivados de otra especie o que pertenece a otra clase o subclase de anticuerpo, así como también de los anticuerpos, siempre y cuando exhiban la actividad biológica deseada (Patente de los Estados Unidos de Norteamérica No. 4,816,567·; Mórrison et al., Proc . Nati. Acad. Sci. USA, 81:6851-6855 (1984) ) .

Ejemplos de anticuerpos adecuados, los cuales pueden ser formulados en una composición estable de la invención incluyen: 3F8, Abagovomab, Abciximab, ACZ885 (canakinumab) , Adalimumab, Adecatumumab, Afelimomab, Afutuzumab, Alacizumab pegol, Alemtuzumab, Altumomab pentetato, anatumomab mafenatox, Anrukinzumab (IMA-638) , Apolizumab, Arcitumomab, Aselizumab, Atlizumab (tocilizumab) , Atorollmümab, Bapineuzumab, Basiilximab, Bavituximab, Bectumomab, Bellmumab, Bertilimumab, Besilesomab, Bevacizumab, Biciromab, Bivatuzumab mertansina, Blinatumomab, Brentuximab vedotin, Briakinumab, Canakinumab, Cantuzumab mertansina, Blinatumomab, Brentuximab vedotina, Briakinumab, Canakimumab, Cantuzumab mertansina, Capromab pendetida, Catumaxomab, .Cedelizumab, Certolizumab. pegol, Cetuximab, Citatuzumab bogatox, Cixutumumab, Clenoliximab, Clivatuzumab tetraxetan, CNTO 148 (golimumab) , CNTO 1275 (ustekinumab) , Conatumumab, Dacetuzumab, Daclizumab, Denosumab, Detumomab, Dorlimomab aritox, Dorlixizumab, Ecromeximab, Eculizumab, Edobacomab, Edrecolomab, Efalizumab, Efungumab, Elsilimomab, Enlimomab pegol, Epitumomab cituxetan, Epratuzumab, Erlizumab, ertumaxomab, Etaracizumab, Exbivirumab,.

Fanolesomab, Faralimomab, Felvizumab, Fezakinumab, Figitumumab, Fontolizumab, Foravirumab, Fresolimumab, Galiximab, Gantenerumab, Gavilimomab, Gemtuzumab ozogamicin, Golimumab, Gomiliximab, Ibalizmab, Ibritumomab tiuxetan, Igovomab Imciromab, Infliximab, Intetumumab, Inolimomab, Inotuzumab ozogamicin, Ipilimmumab, Iratumumab, Keliximab, Labetuzumab, Lebrikizumab, Lemalesomab, Lerdelimumab, Lexatumumab, Libivirumab, Lintuzumab, Lucatumumab, Lumiliximab, Mapatumumab, Maslimomab, Matuzumab, Mepolizumab, Metelimumab, Milatuzumab, Minretumomab, Mitumomab, Morolimumab, Motavizumab, Muromonab-CD3 , MYO-029 (stamulumab) , Nacolomab tafenatox, Naptumomab estafenatox, Natalizumab, Nebacumab, Necitumurnab, Nerelimomab, Nimotuzumab, Nofetumomab merpentan, Ocrelizumab, Odulimomab, Ofatumumab, Omalizumab, Oportuzumab monatox, Oregovomab, Otelixizumab, Pagibaximab, Palivizumab, Panitumumab, Panobacumab, Pascolizumab, Pemtumomab, Pertuzumab, Pexelizumab, Pinturaomab, Priiximab, Pritumumab, PRO 140, Rafivirumab, Ramucirumab, Ranibizumab, Raxibacumab, Regavirumab, Reslizumab, Rilotumumab, Rituximab, Robatumumab, Rontalizumab, Rovelizumab, Ruplizumab, Saturaomab, Sevirumab, Sibrotuzumab, Sifalimumab, Siltuximab, Siplizumab., Solanezuraab, Sonepcizumab, Sontuzumab, Stamulumab, Sulesomab, Tacatuzumab tetraxetan, Tadocizumab, Talizumab, Tanezumab, Taplitumomab paptox, Tefibazumab, Telimomab aritox, Tenatumomab, Teneliximab, Teplizumab, TGN1412, Ticilimumab (tremelimumab) , Tigatuzumab, TNX-355 (ibalizumab) , TNX-650, TNX-901 (talizumab) , Tocilizumab (atlizumab) , Toralizumab, Tositumomab, Trastuzumab, Tremelimumab, Tucotuzumab celmoleukin, Tuvirumab, Urtoxazumab, Ustekinumab, Vapaliximab, Vedolizumab, Veltuzumab, Vepalimomab, Visilizumab, Volociximab, Votumumab, Zalutumumab, Zanolimumab, Ziralimumab, Zolimomab aritox y similares.

En una modalidad, el anticuerpo es un anticuerpo anti-IL-20 monoclonal. En una modalidad, el anticuerpo es un anticuerpo anti-IL-20 como se describe en la solicitud WO 2010/000721. En una modalidad, el anticuerpo monoclonal anti-IL20 es 15D2 o 5B7 como se describe en la solicitud WO 2010/000721.

En una modalidad, el anticuerpo es un anticuerpo monoclonal anti-TFPI monoclonal. En una modalidad, el anticuerpo es un anticuerpo anti-TFPI como se describe en la solicitud PCT2009EP067598. En una modalidad, el anticuerpo monoclonal anti-TFPI es HzTFPI4F36 como se describe en la solicitud PCT2009EP067598.

En una modalidad, el anticuerpo es un anticuerpo monoclonal anti-C5aR monoclonal. En . una modalidad, el anticuerpo és un anticuerpo anti-C5aR como se describe en la solicitud WO2009/103113. En una modalidad, el anticuerpo monoclonal anti-C5aR es 7F3 como se describe en la solicitud O2009/103113.

En una modalidad, el anticuerpo es un anticuerpo monoclonal anti-NKG2D monoclonal. En una modalidad, el anticuerpo es un anticuerpo anti -NKG2D como se describe en la solicitud O2009/077483. En una modalidad, el anticuerpo monoclonal anti-NKG2D es MS como se describe en la solicitud WO2009/077483.

En una modalidad, el anticuerpo es un. anticuerpo monoclonal anti-NKG2A monoclonal. En una modalidad, el anticuerpo es un anticuerpo anti-NKG2A como se describe en la solicitud WO2008/009545. En una modalidad, el anticuerpo monoclonal anti-NKG2A es humX270 como se describe en la solicitud WO2008/009545.

Será apreciado que la invención encuentra utilidad particular donde la proteína está presente dentro de la composición en altas concentraciones. De esta forma, en una modalidad, la proteína está presente en una concentración de 50 mg/ml ó más, como 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95., 100, 150, 200, 250, 300 mg/ml ó más. En una modalidad, la proteína está presente dentro de la composición en una cantidad de entre. 50 mg/ml y 300 mg/ml, por ejemplo entre 50 mg/ml y 250 mg/ml, como entre 50 mg/ml y 200 mg/ml, por ejemplo entre 50 mg/ml y 150 mg/ml. En una modalidad, la proteína está presente en una concentración de entre 75 mg/ml y 300 mg/ml, por ejemplo entre 75 mg/ml y 250 mg/ml, como entre 75 mg/ml y 200 mg/ml, por ejemplo entre 75 mg/ml y 150 mg/ml. En una modalidad, la proteína está presente en una concentración de entre 100 mg/ml y 300 mg/ml,. por ejemplo entre 100 mg/ml y 250 mg/ml, como entre 100 mg/ml y 200 mg/ml, por ejemplo entre 100 mg/ml y 150 mg/ml.

En una modalidad, las composiciones estables de la invención tienen una viscosidad de 50 cP o menos cuando se miden en 25°C, como cualquiera de menos de 45, 40, 35, 30, 25, 20, 15, 10, 5 ó 1 cP . En particular, las composiciones estables de la invención tienen una viscosidad de 5 cP ó menos cuando se miden en 25°C.

Empleando una formulación alta concentrada que contiene por ejemplo 100 mg/ml de proteína y menos de 100 mM de la suma de sal y concentración de amortiguador lleva a una formulación relativamente baja en viscosidad (5 cP en 25°C para un anticuerpo anti-IL>20) la cual es estable en temperatura en almacenamiento de 2-8°C. En una modalidad, la formulación es también estable en temperaturas superiores como la temperatura ambiente. La formulación es adecuada para uso en dispositivos listos para uso con un tamaño de aguja pequeño que confiere conveniencia incrementada al paciente como se compara con un producto vendido listo para uso (por ejemplo Humira® el cual emplea una aguja 27G y 50 mg/ml de concentración de anticuerpo) .

En, una modalidad, la composición de' proteína de la invención comprende: (a) > 50 mg/ml de anticuerpo; (b) 30 mM o menos de una sal inorgánica, como cloruro de sodio o cloruro de magnesio; (c) 0-25 mM de un aminoácido, como arginina o glicina; (d) 50 mM o menos de un amortiguador como amortiguador de histidina; (e) 0.001-0.005% de un tensioactivo no iónico; (f) 100-200 mM de un agente modificador de tonicidad, como sacarosa, propilenglicol , glicerol mantirol o D- sorbitol amortiguado a un pH de entre 5 y 7 ; En una modalidad, una composición de proteína de la invención comprende: (a) 100 mg/ml de anticuerpo; (b) 25 mM de cloruro de sodio; (c) 33 mM de amortiguador de histidina; (d) 25 mM de arginina; (e) 0.001% de polisorbato 80; (f) 150 mM de sacarosa; amortiguado a un pH. de entre 5 y 7 En una modalidad, la composición de proteína estable comprende: (a) 100 mg/ml de anticuerpo; (b) 25 mM de cloruro de sodio; (c) 33 mM de amortiguador de histidina; (d) 25 mM de arginina; (e) 0.001% de polisorbato 80; (f) 150 mM de manitol; ·. amortiguado a un pH entre 5 y 7 En una modalidad, la composición de proteína estable comprende : (a) 100 mg/ml de anticuerpo; (b) 25 mM de cloruro de sodio; (c) 33 mM de amortiguador de histidina; (d) 25 mM de arginina; (e) 0.0001% de polisorbato 80; (f) 150mM de sacarosa amortiguado a un pH de 6.0 a 6.5 En una modalidad, la composición de proteína estable comprende: (a) 100 mg/ml de anticuerpo; (b) 25 m de cloruro de sodio; (c) 33 mM de amortiguador de histidina; (d) 25 mM de arginina: (e) 150 mM de sacarosa; amortiguado a un pH entre 5 y 7.

Composiciones de la invención han demostrado sorpresivamente estabilidad contra la formación de HMWP en temperatura ambiente (aquí medido en 25 °C) por 12 meses y en 5°C por hasta 24 meses donde no hay incremento detectable de % de HMWP. Además, varias composiciones de la invención muestran típicamente que solamente 2-7% dé HMWP es formada sobre 3 meses en 40°C sugiriendo una formulación termoestable interesante a pesar de tener una concentración total baja de sal y amortiguador.

Será aparente para aquellos expertos, en la técnica de composiciones farmacéuticas que las composiciones de proteína estables descritas anteriormente en la presente pueden ser preparadas de acuerdo con procedimientos estándar (Luo R et al. High-concentration UF/DF of a monoclonal antibody. Strategy for optimization and scale-up, Bioprocess Int. 4, 44-48 (2006)). Por ejemplo, las composiciones de proteína estable pueden ser preparadas típicamente por primero diafiltrar la proteína en una concentración de 50 mg/ml ó más por el uso de Equipos de Filtración de Flujo Tangencial (TFF, por sus siglas en inglés) . Subsecuentemente, el producto formulado, excepto para la adición de un tensioactivo (donde sea aplicable) es ultrafiltrado a 100 mg/ml o concentraciones superiores después de lo cual puede ser agregado tensioactivo.

Es posible que otros ingredientes pueden estar presentes en la composición farmacéutica de la presente invención. Los ingredientes adicionales pueden incluir cosolventes, agentes de humectación, emulsificadores , antioxidantes, agentes de volumen, agentes quelantes, iones metálicos, vehículos oleaginosos, proteínas (por ejemplo, albúmina sérica humana, gelatina o proteínas) y zwiterión. Los ingredientes adicionales, por supuesto, no deben afectar adversamente la estabilidad total de la formulación farmacéutica de la presente invención.

En una modalidad, las composiciones farmacéuticas de la invención son estables por más de 6 meses de uso y por más de 3 años de almacenamiento.

En una modalidad, las composiciones farmacéuticas de la invención son estables para más de 4 semanas de uso y para más de 3 años de almacenamiento .

En una modalidad, las composiciones farmacéuticas de la invención son estables para más de 2 semanas de uso y para más de dos años de almacenamiento.

En una modalidad, las composiciones farmacéuticas de la invención son estables para más de 1 semana de uso y para más de seis meses de almacenamiento.

De acuerdo a un segundo aspecto de la invención, se proporciona una composición de proteína estable como se define en la presente para uso en terapia.

El término "tratamiento" y "tratar" como se usa en la presente significa el manejo y cuidado de un paciente para el propósito de combatir una afección, como una enfermedad o un trastorno. El término es propuesto para incluir el espectro total de tratamientos para una afección dada a partir de la cual el paciente está sufriendo, como administración del compuesto activo para aliviar los síntomas o complicaciones, · para retrasar la progresión de la enfermedad, trastorno o afección, para aliviar o mejorar los síntomas y complicaciones, y/o para curar o eliminar la enfermedad, trastorno o afección así como también para evitar la afección, en. donde la prevención es para ser entendida como el manejo y cuidado de un paciente para el propósito de combatir la enfermedad, afección, o trastorno e incluye la administración de los compuestos activos para evitar el inicio de los síntomas o complicaciones. El paciente a ser tratado es preferentemente un mamífero; en particular un ser humano, pero puede también incluir animales, como perros, gatos, vacas, borregos y cerdos.

Por ejemplo, las composiciones de anticuerpos anti-IL20 de la presente invención pueden ser usados en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria, en particular enfermedades autoinflamatorias particulares, como psoriasis, lupus eritomatoso sistémico, artritis reumatoide , enfermedad de Crohn y artritis psoriática u otra forma como se describe en la solicitud WO2010/000721.

De esta forma de acuerdo a un aspecto adicional, la invención proporciona un método para tratar una enfermedad inflamatoria la cual comprende administrar a un paciente una cantidad efectiva terapéuticamente de una composición de un anticuerpo anti-IL20 de la presente invención.

' La invención también proporciona una composición de un anticuerpo anti-IL20 de la presente invención para uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

La invención también proporciona el uso de una composición de un anticuerpo anti-IL20 de la presente invención en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

L invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende una composición de un anticuerpo anti-IL20 de la presente invención para uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

Por ejemplo, las composiciones de anticuerpos anti-TFPI de la presente invención pueden ser usadas en el tratamiento de una coagulopatía (trastorno sangrante) , como la hemofilia A, con o sin inhibidores, y hemofilia B, con o sin inhibidores o de otra forma como se describe en la solicitud PCT2009EP067598.

De esta forma de acuerdo a un aspecto adicional, la invención proporciona un método para tratar una coagulopatía la cual comprende administrar a un paciente una cantidad efectiva terapéuticamente de una composición de un anticuerpo antiTFPI de la presente invención.

La invención también proporciona una composición de un anticuerpo antiTFPI de la presente invención para uso en el tratamiento de una coagulopatía.

* La invención también proporciona el uso de una composición de un anticuerpo antiTFPI de la presente invención en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una coagulopatía, La invención también proporciona una composición farmacéutica la cual comprende una composición de un anticuerpo anti-IL20 de la presente invención para uso en el tratamiento de una coagulopatía.

Por ejemplo, las composiciones de anticuerpos anti-C5aR de la presente invención pueden ser usadas en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria, en particular enfermedades autoinflamatorias , como psoriasis, lupus eritomatóso sistémico, artritis reumatoide, enfermedad de Crohn y artritis soriática o de otra forma como se describe en la solicitud WO 2009/103113.

De esta forma de acuerdo a un aspecto adicional, la invención proporciona un método para tratar una enfermedad inflamatoria la cual comprende administrar a un paciente una cantidad efectiva terapéuticamente de una composición de un anticuerpo anti-C5aR de la presente invención.

La invención también proporciona una composición de un anticuerpo anti-C5aR de la presente invención para uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

La invención también proporciona el uso de una composición de un anticuerpo anti-C5aR de la presente invención en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

La invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende una composición de un anticuerpo anti-C5aR de la presente invención para uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

Por ejemplo, las composiciones de los anticuerpos anti-NKG2D de la presente invención pueden ser usadas en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria, en particular enfermedades autoinflamatorias como psoriasis, lupus eritomatóso sistémico, artritis reumatoide, enfermedad de Crohn y artritis psoriática o de otra forma como se describe en la solicitud O2009/077483.

De esta forma de acuerdo a un aspecto adicional, la invención proporciona un método para tratar una enfermedad inflamatoria el cual comprende administrar a un paciente una cantidad efectiva terapéuticamente de una composición de un anticuerpo anti-NKG2D de la presente invención.

La invención también proporciona una composición de un anticuerpo anti-NKG2D de la presente invención para uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

La invención también proporciona el uso de una composición de un anticuerpo anti-NKG2D de la presente invención en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

La invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende una composición de un anticuerpo anti-NKG2D de la presente invención para, uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

Por ejemplo, las composiciones de anticuerpos anti-NKG2A de la presente invención pueden ser' usadas en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria, en particular enfermedades autoinflamatorias (también llamadas autoinmunes) , como psoriasis, lupus eritomatoso sistémico, artritis reumatoide, enfermedad de Crohn y artritis psoriática u otra forma como se describe en la solicitud De esta forma de acuerdo a un aspecto adicional, la invención proporciona un método para tratar una enfermedad inflamatoria la cual comprende administrar a un paciente una cantidad efectiva terapéuticamente de una composición de un anticuerpo anti-NKG2A de la presente invención.

La invención también. proporciona una composición de un anticuerpo anti-NKG2A de la presente invención para uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

La invención también proporciona el uso de una composición de un -anticuerpo anti-NKG2A de la presente invención en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

La invención también proporciona una composición farmacéutica la cual comprende una composición de un anticuerpo anti-NKG2A de la presente invención para uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

Será entendido, que los regímenes terapéuticos y profilácticos (preventivos) representan aspectos separados de la presente invención.

Las formulaciones farmacéuticas de la invención son generalmente adecuadas para administración parental . La administración parental puede ser realizada por inyección subcutánea, intramuscular, intraperitoneal o intravenosa por medio de una jeringa, opcionalmente una jeringa similar a polígrafo. Alternativamente, puede ser realizada administración parental por medio de una bomba de infusión.

La invención es además descrita con referencia a los siguientes ejemplos no limitantes.

Ejemplo 1 Se preparan 18 formulaciones (ver la Tabla 1 posterior). Se preparan las formulaciones a partir de una solución madre que contiene aproximadamente 150 mg/ml de mAb 1 y 10 ti de amortiguador de histidina, pH 6.5. Esta solución madre es preparada por UF/DF/UF convencional. La solución madre de los excipientes son preparados y mezclados en la proporción correcta usando un sistema robot Biomek® 2000, Beckman Coulter. Las formulaciones finales son llenadas en cartuchos de 3 mi Penfill®, de vidrio tipo 1. El pistón en el cartucho es ajustado para acomodar 0.6 mi lo cual es también el volumen de llenado. Las formulaciones son almacenadas en 40°C por tres meses y entonces se analizan química, . farmacéutica y biofísicamente . El incremento en la formación de agregados de proteína (% HMWP) puede ser modelado usando software SAS JMP 8.0. Los datos muestran que hay un efecto positivo en la estabilidad de arginina lo cual disminuye la formación de agregados de proteína significativamente. Similarmente, el efecto combinado de histidina y NaCl también disminuye la formación de agregados de proteína. La sacarosa y polisorbato 80 (PS 80) aumenta débilmente la formación de agregados de proteína.

Tabla 1 Composición de Formulaciones PS=polisorbato Se muestra en la Figura 1 el efecto estadístico de factores principales e interacciones de 2 factores en la formación de % HMWP, después de que la formulación ha sido almacenada en 40°C por tres meses.

Ejemplo 2 Se prepara una solución de mAb por UF/DF/UF a una concentración de > 100 mg/ml incluyendo ya sea 10 mM de histidina ó 10 mM de NaCl. Se prepara una solución que contiene los excipientes a ser investigados y mezclada con la solución de mAb a la concentración propuesta. Se ajusta el pH al pH objetivo. Se llenan las formulaciones en cartuchos de 3 mi Penfill®, de vidrio tipo 1. El pistón en el cartucho es ajustado para acomodar 1.5 mi el cual es también el volumen de llenado. Los cartuchos son almacenados en 5°C y/o 25°C y/o 40°C. La Tabla 2 muestra las varias formulaciones preparadas y la viscosidad resultante e incrementa en agregados (% HMWP) .

Similar al Ejemplo 1 se observa que la arginina tiene un efecto estabilizante ya que contrarresta la formación de % de HMWP. La histidina es también observada para contener un efecto estabilizante similar. Adicionalmente, se observa también que la histidina, el cloruro de sodio y la arginina cada uno tienen un efecto disminuyente de viscosidad estadísticamente significativo en la formulación- histidina que tiene el efecto más profundo.

En forma interesante, después de 12 meses en 25 °C el incremento en % de HMWP es virtualmente no existente lo cual indica fuertemente que hay un potencial para una formulación estable a temperatura ambiente (Tabla 2) . mAbl es el anticuerpo anti-IL20 15D2 como se describe en la solicitud WO 2010/000721. mAb2 es el anticuerpo monoclonal antiTEPl HzTFPI4F36 como se describe en la solicitud PCT2009EP067598. mAb3 es el anticuerpo monoclonal anti-C5aR hAb- Q como se describe en la solicitud WO2009/103113. mAb4 es el anticuerpo monoclonal anti-NKG2D MS como se describe en 2009/077483. mAb5 es el anticuerpo monoclonal anti-NKG2A humZ270 como se describe en la solicitud WO2008/009545.

La Tabla 2 Ejemplos de formulaciones y su estabilidad química y viscosidad correspondiente.

Concentración de mAb: la concentración del anticuerpo establecido dado en mg/ml AHMVWP (%) : Determinado por SE-HPLC viscosidad: (cP) en 25°C en tiempo cero PS : olisorbato Se muestra en la Figura 2 los efectos estadísticos de histidina o arginina en la formación de % HM P después de que la formulación se ha almacenado en 40°C por 3 meses.

Se muestran en la Figura 3 los efectos estadísticos de histidina, cloruro de sodio (NaCl) y arginina en la viscosidad de la formulación.

Ejemplo 3 Se han preparado formulaciones de mAbs como se menciona en el Ejemplo 2 con variación solamente en la cantidad de tensioactivo . La robustez de las formulaciones ha sido evaluada por estabilidad de almacenamiento en temperatura acelerada y de almacenamiento (Tabla 3) y adicionalthente por agitación mecánica y congelación/descongelación (Tabla 4) . Todas las formulaciones contienen: 100 mg/ml de mAb, 33 mM de histidina, 25 mM de arginina, 25 mM de NaCl, 150 mM de sacarosa, 0-0.1 mg/ml de polisorbato 80. Formulación pH: 6.5 (mAb 1) y 6.0 (mAb 4) Tabla 3. Estabilidad de almacenamiento en condiciones de temperatura acelerada y almacenamiento. Formulaciones que contienen cantidades variadas de tensioactivo. 40 3 1 6 0 25 mAbl 0.05 5 9 0 0 0 00 6 1 40 3 1 5 0 17 mAbl 0.1 5 9 0 0 0 00 6 0 40 3 1 7 0 34 mAb4 Ninguna 5 9 0 2 0 01 4 3 40 3 3 0 0 29 mAb4 0.01 5 9 0 1 0 03 4 9 40 3 3 0 0 32 mAb4 0.02 5 9 0 1 0 01 4 6 40 3 3 1 0 32 mAb4 0.05 5 9 0 2 0 01 5 0 40 3 3 .3 0 36 mAb4 0.1 5 9 0 3 0 09 5 4 40 3 3 .3 0 .43 *Los valores son calculados como: punto de tiempo X menos punto de tiempo cero. La viscosidad medida en 25 °C en tiempo cero.

El análisis de apariencia visual ha sido también realizado en cabina de luz y lámpara de arquitectura para todas las formulaciones para evaluar la posibilidad de formación de partículas. En tiempo cero todas las muestras son encontradas para ser claras a ligeramente opalescentes sin ninguna partícula visible usando ambos métodos analíticos. No se ha observado ninguna diferencia durante el periodo de estabilidad de almacenamiento de la apariencia de todas la formulaciones.

Tabla 4. Formulaciones de mAbs expuestas a i) estrés congelación/descongelación (10 ciclos de -20 °C a temperatura ambiente) ii) agitación mecánica a temperatura ambiente y iii) estrés de rotación y térmica combinadas (37 °C) .

* Los valores son calculados como: punto de tiempo X menos punto de tiempo cero. La viscosidad medida en 25 °C en empo cero .

El análisis de apariencia visual ha sido también realizado en cabina con lu2 y lámpara de arquitectura para todas las formulaciones para evaluar la posibilidad de formación de partículas. En tiempo cero todas las muestras son encontradas para ser claras a ligeramente opalescentes sin ninguna partícula visible usando tanto métodos analíticos. No se ha observado ninguna diferencia durante las condiciones de tensión anteriores. Adicionalmente , ningún incremento en % H WP puede ser detectado durante estas condiciones de estrés.

Ejemplo 4. se han producido dos lotes (aprox. 3 1) en instalación de planta piloto de acuerdo a las condiciones de llenado regulares. La formulación es llenada en cartuchos de 3 mi Penfill®, vidrio tipo 1. El pistón en el cartucho es ajustado para acomodar 1 mi el cual es también el volumen de llenado. La. diferencia entre la composición de los lotes es que uno contiene polisorbato 80 mientras que el otro no. Los dos productos de fármaco son expuestos a condiciones de temperatura acelerada y agitación mecánica (Tabla 5) .

Tabla 5. Estabilidad de almacenamiento de dos lotes de producción piloto de mAbl *los valores son calculados como: punto d tiempo X menos punto de tiempo cero. NA: no aplicable. La viscosidad medida en 25°C en tiempo cero. ** agitación mecánica o producto de fármaco tomando lugar en temperatura ambiente por 2 semanas.

Ejemplo 5 Se prepara un lote a escala de laboratorio como en el Ejemplo 2 y se llena en cartuchos de 3 mi Penfill®, vidrio tipo 1. El pistón en el cartucho es ajustado para acomodar 1.5 mi el cual es también el volumen de llenado. El efecto de estrés interfacial aire/agua en el producto de fármaco es evaluado por aplicar volumen variado de aire a la formulación, y exponiéndolo a condiciones severas de estrés de temperatura y mecánica (Tabla 6) .

Tabla 6 influencia en la estabilidad de proteína de volumen de aire agregado a producto de fármaco llenado en cartuchos de 3.0 mi de Penfill®. Se evalúa la estabilidad de proteína después del estrés rotacional y térmico en 37 °C por 14 días. *producto de fármaco contiene: 100 mg/ml de mAbl, 33 mM de histidina, 25 mM de arginina, 25 mM de NaCl, 150 mM de sacarosa, 0.001% de polisorbato 80. **Los valores son calculados como: punto de tiempo X menos punto de tiempo cero .

Lo siguiente es una lista no limitante de modalidades de la presente invención.

Modalidad. 1: una composición líquida, estable que comprende una proteína, una sal y/o un amortiguador, caracterizado porque la concentración total de la sal y amortiguador es menor a 100 mM.

Modalidad 2 : una composición de acuerdo a una modalidad 1, en donde la concentración total de la sal y amortiguador está entre 5 y 100 mM.

Modalidad 3: Una composición de acuerdo a una modalidad 1 ó 2, en donde la concentración total de la sal y amortiguador está entre 5 y 95 mM.

Modalidad 4: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 3, en donde la' concentración total de la sal y amortiguador está entre 5 y 90 mM.

Modalidad 5: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 4, en donde la concentración total de la sal y amortiguador está entre 5 y 95 mM.

Modalidad 6: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 5, en donde la concentración total de la sal y amortiguador está entre 5 y 80 mM.

Modalidad 7: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 6, en donde la concentración total de la sal y amortiguador está entre 5 y 75 mM.

Modalidad 8 : Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 7 , en donde la concentración total de la sal y amortiguador está entre 5 y 70 mM.

Modalidad 9: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 8, en donde la concentración total de la sal y amortiguador está entre 5 y 65 mM.

Modalidad 10: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 9, en donde la concentración total de la sal y amortiguador está entre 5 y 60 mM.

Modalidad 11: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 10, en donde la concentración total de la sal y amortiguador está entre 5 y 55 mM.

Modalidad 12: una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 11, en donde la concentración total de la sal y amortiguador está entre 5 y 50 mM.

Modalidad 13 : Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 12, en donde la concentración total de la sal y amortiguador está entre 5 y 45 mM.

Modalidad 14 : Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 13, en donde la concentración total de la sal y amortiguador está entre 5 y 40 mM.

Modalidad 15: una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 14, en donde la concentración total de la sal y amortiguador está entre 5 y 35 raM.

Modalidad 16: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 15, en donde la concentración total de la sal y amortiguador está entre 5 y 30 mM.

Modalidad 17: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 16, en donde la concentración total de la sal y amortiguador está entre 5 y 25 mM.

Modalidad 18: Una composición de acuerdo con la modalidad 1 ó 2, en. donde la concentración total del amortiguador es 100 o menos .

Modalidad 19: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 12, en donde la concentración del amortiguador es 50 ó menos.

Modalidad 20: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 13, en donde la concentración del amortiguador es 45 ó menos.

Modalidad 21: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 14, en donde la concentración del amortiguador es 40 ó menos.

Modalidad 22: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 15, en donde la concentración del amortiguador es 35 ó menos.

Modalidad 23: Una composición de acuerdo a la modalidad 22, en donde la concentración del amortiguador es 33 ó menos.

Modalidad 24: Una composición de acuerdo a la modalidad 1 ó 2, en donde la concentración de la sal es 100 ó menos .

Modalidad 25: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades l a 12, en donde la concentración de la sal es 50 ó menos.

Modalidad 26: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 13, en donde la concentración. de la sal es 45 ó menos.

Modalidad 27: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 14, en donde la concentración de la sal es 40 ó menos.

Modalidad 28: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 15, en donde la concentración de la sal es 35 ó menos.

Modalidad 29: Una composición de acuerdo a cualquiera ¦ de las modalidades 1 a 16, en donde la concentración de la sal es 25 ó menos.

Modalidad 30 : Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 20, en donde está presente un amortiguador y el amortiguador tiene un pKa entre 4 a 8.

Modalidad 31: Una composición de acuerdo a la modalidad 30, en donde el amortiguador tiene un pKa entre 5 a 7.

Modalidad 32: Una composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades 1 a 30, en donde está presente un amortiguador y el amortiguador es acetato disódico, carbonato de sodio, citrato, glicilglicina, histidina, glicina, lisina, arginina, maleato, succinato, fosfato dihidrógeno de sodio, fosfato hidrógeno disódico, fosfato de sodio, o tris (hidroximetil) -amino metano o mezclas de los mismos .

Modalidad 33: una composición de acuerdo con la modalidad 32, en donde el amortiguador es histidina, maleato, succinato, fosfato, o tris (hidroximetil) -amino metano.

Modalidad 34: Una composición de acuerdo a la modalidad 33, en donde el amortiguador es histidina.

Modalidad 35: Una composición de acuerdo a cualesquiera de las modalidades 1-34, en donde el amortiguador tiene un valor pKa + de 1 unidad de pH del pH objetivo de la composición.

Modalidad 36: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 35, en donde una sal está presente y la sal se selecciona del grupo que consiste de cloruro de sodio, cloruro de magnesio, tiocianato de sodio, tiocianato de amonio, sulfato de amonio, cloruro de amonio, cloruro de calcio, clorhidrato de arginina, cloruro de zinc y acetato de sodio o cualquier combinación de los mismos .

Modalidad 37: Una composición de conformidad con la modalidad 36, en donde la sal es cloruro de sodio o cloruro de magnesio.

Modalidad 38: Una composición de acuerdo a la modalidad 37, en donde la sal es cloruro de sodio.

Modalidad 39: Una composición de acuerdo a la modalidad 36, en donde la sal es arginina-HCl .

Modalidad 40: Una composición líquida estable, que comprende un anticuerpo y arginina, en donde la arginina está presente en una concentración de entre 5 mM y 100 mM.

Modalidad 41: Una composición de acuerdo a la modalidad 40, en donde la arginina está presente en una concentración de entre 5 mM y 50 mM.

Modalidad 42: Una composición de acuerdo a la modalidad 41, en donde la arginina está presente en una concentración de entre 5 mM y 40 mM.

Modalidad 43: Una composición de acuerdo a la modalidad 42, en donde la arginina está presente en una concentración de entre 5 mM y 35 mM.

Modalidad 44: Una composición de acuerdo a la modalidad 43, en donde la arginina está presente en una concentración de entre 5 mM y 33 mM.

Modalidad 45: Una composición de acuerdo a la modalidad 44, en donde la arginina está presente en una concentración de entre 5 mM y 30 mM.

Modalidad 46: Una composición de acuerdo a la modalidad 45, en donde la arginina está presente en una concentración de entre 5 mM y 25 mM.

Modalidad 47: Una composición de acuerdo a la modalidad 40 o modalidad 41, en donde la arginina está presente en una concentración de 50 mM, 40 mM, 35 mM, 33 mM, 30 mM ó 25 mM.

Modalidad 48: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 47, la cual tiene un pH de entre 5.0 y 7.0.

Modalidad 49: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 48, la cual tiene un pH de entre 6.0 ó 6.5.

Modalidad 50 : Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 49, la cUal comprende adicionalmente un tensioactivo.

Modalidad 51: Una composición de acuerdo a la modalidad 50, en donde el tensioactivo es polisorbato 80.

Modalidad 52 : Una composición de acuerdo a la modalidad 50 ó modalidad 51, en donde el tensioactivo está presente dentro de la composición en una cantidad abajo de 0.01%.

Modalidad 53: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 50 a 52, en donde el tensioactivo está presente dentro de la composición en una cantidad abajo de 0.0075%.

Modalidad 54 : Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 50 a 52, en donde el tensioactivo está presente dentro de la composición en una cantidad entre 0.001% y 0.005%.

Modalidad 55: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 49, en donde el tensioactivo está presente dentro de la composición en una cantidad de 0.001%.

Modalidad 56: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 49, la cual no comprende un tensioactivo .

Modalidad 57: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 56, la cual adicionalmente comprende un agente modificador de tonicidad.

Modalidad 58: Una composición de acuerdo a la modalidad 57, en donde el agente modificador de tonicidad es sacarosa o manitol .

Modalidad 59: Una composición de acuerdo a la modalidad 58, en donde el agente modificador de tonicidad es sacarosa .

Modalidad 60: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 57 a 59, en donde el agente modificador de tonicidad está presente dentro de la composición en una cantidad de entre 50 y 250 mM.

Modalidad 61: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 57 a .60, en donde el agente modificador de tonicidad está presente dentro de la composición en una cantidad de entre 100 y 200 mM.

Modalidad 62 : Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 57 a 61, en donde el agente modificador de tonicidad está presente en una cantidad de 150 mM.

Modalidad 63: Una composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades 1 a 62, en donde la composición es farmacéuticamente aceptable.

Modalidad 64: Una composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades 1 a 63, en donde la proteína es una inmunoglobulina .

Modalidad 65: Una composición de acuerdo a la modalidad 64, en donde la proteína es un .anticuerpo .

Modalidad 66: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 65, en donde la proteína está presente dentro de la composición en una concentración de entre 50 mg/ml y 300 mg/ml .

Modalidad 67: Una composición de acuerdo a la modalidad 66, en donde la proteína está presente dentro de la composición en una concentración de entre 75 mg/ml y 300 mg/ml.

Modalidad 68: Una composición de acuerdo con la modalidad 67, en donde la proteína está presente dentro de la composición en una concentración de entre 100 mg/ml y 300 mg/ml.

Modalidad 69: Una composición de acuerdo con la modalidad 68, en donde la proteína está presente dentro de la composición en una concentración' de entre 50 mg/ml y 200 mg/ml .

Modalidad 70: Una composición de acuerdo con la modalidad 69, en donde la proteína está presente dentro de la composición en una concentración de 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 90, 95, 100, 150, 200, 250 ó 300 mg/ml.

Modalidad 71: Una composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades 1 a 70, la cual tiene una viscosidad de 50 cP ó menos cuando se mide en 25°C.

Modalidad 72: Una composición de acuerdo con la modalidad 71, la cual tiene una viscosidad de entre 1 y 10 cP ó menos cuando se mide en 25°C.

Modalidad 73: Una composición de acuerdo con la modalidad 71 ó modalidad 72, la cual tiene una viscosidad de entre 2 y 10 cP ó menos cuando se mide en 25°C.

Modalidad 74: Una composición de acuerdo con la modalidad 1, la cual comprende: a) _> 50 mg/ml de una proteína, la cual es un anticuerpo; b) 30 mM ó menos de una sal, como cloruro de sodio o cloruro de magnesio; c) 50 mM ó menos de un amortiguador como amortiguador de histidina; d) 0-25 mM de un aminoácido, como arginina o glicina; e) 0.001-0.005% de un tensioactivo no iónico; f) 100-200 mM de un agente modificador de tonicidad, como sacarosa, propilenglicol , glicerol, manitol o D- sorbitol; amortiguado a un pH entre 5 y 7.

Modalidad 75: Una composición de acuerdo con la modalidad 1, la cual comprende: a) 100. mg/ml de una proteína, la cual es un anticuerpo; b) 25 mM de cloruro de sodio; c) 33 mM de amortiguador de histidina; d) 25 mM de arginina; e) 0.001% de polisorbato 80; f) 150 mM de manitol; amortiguado a un pH de entre 5 y 7.

Modalidad 77 : Una composición de acuerdo a la modalidad 1, la cual comprende: a) 100 mg/ml de una proteína, la cual es un anticuerpo; b) 25 mM de cloruro de sodio; c) 33 mM de amortiguador de histidina; d) 25 mM de arginina; e) 0.001% de polisorbato 80; f) 150 mM de sacarosa; amortiguado a un H de 6.5 Modalidad 78; Una composición de acuerdo a la modalidad 1, la cual comprende: a) 100 mg/ml de una proteína, la cual es un anticuerpo; b) 25 mM de cloruro de sodio c) 33. mM de amortiguador de histidina,-d) 25 mM de arginina; e) 150· mM de sacarosa; amortiguado a un pH entre 5 y 7.

Modalidad 79: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1-78, en donde la composición es estable en temperatura ambiente.

Modalidad 80: Una composición de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1-79, en donde la composición es estable en temperaturas entre 15 y 30°C.

Modalidad 81: Una composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades 1 a 80, en dónde la proteína es anticuerpo monoclonal .

Modalidad 82: Una composición de acuerdo con la modalidad 65 ó 81, en donde el anticuerpo es del subtipo IgG4.

Modalidad 83: Una composición de acuerdo con la modalidad 65, 81 ó 82, en donde el anticuerpo monoclonal es un anticuerpo monoclonal anti-IL-20.

Modalidad 84: Una composición de acuerdo con la modalidad 65, 81 ó 82, en donde el anticuerpo monoclonal es un anticuerpo monoclonal anti-TFPI.

Modalidad 85: Una composición de acuerdo con la modalidad 65, 81 ó 82, en donde el anticuerpo monoclonal es un anticuerpo monoclonal anti-C5aR.

Modalidad 86: Una composición de acuerdo con la modalidad 65, 81 ó 82, en donde el anticuerpo monoclonal es un anticuerpo monoclonal anti-NKG2D.

Modalidad 87: Una composición de acuerdo con la modalidad 65, 81 ó 82, en donde el anticuerpo monoclonal es un anticuerpo monoclonal anti-NKG2A.

· Modalidad 88: Una composición de proteína estable de acuerdo a cualquiera de las modalidades 1 a 87 para uso en terapia.

Modalidad 89: Un método para tratar una enfermedad inflamatoria la cual comprende administrar a un paciente una cantidad efectiva terapéuticamente de una composición de acuerdo a la modalidad 83.

Modalidad 90. Una composición de acuerdo a la modalidad 83 para uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

Modalidad 91: El uso de una composición de acuerdo con la modalidad 83 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

Modalidad 92: Una composición farmacéutica la cual comprende una composición anti-IL20 de acuerdo con la modalidad 82 para uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria .

Modalidad 93 : Un método para tratar una coagulopatia la cual comprende administrar a un paciente una cantidad efectiva terapéuticamente de una composición de acuerdo con la modalidad 84.

Modalidad 94: Una composición de acuerdo con la modalidad 84 para uso en el tratamiento de una coagulopatía.

Modalidad 95: Uso de una composición de acuerdo con la modalidad 84 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una coagulopatía.

Modalidad 96: Una composición farmacéutica la cual comprende una composición anti-TFPI de acuerdo a la modalidad 84 para uso en el tratamiento de una coagulopatía.

Modalidad 97: Un método para tratar una enfermedad inflamatoria el cual comprende administrar a un paciente una cantidad efectiva terapéuticamente de una composición de acuerdo con la modalidad 84.

Modalidad 98: Una composición de acuerdo con la modalidad 85 para uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

Modalidad 99: Uso de una composición de acuerdo con la modalidad 85 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

Modalidad 100. Una composición farmacéutica la cual comprende una composición anti-C5aR de acuerdo a la modalidad 85 para uso en el tratamiento de. una enfermedad inflamatoria.

Modalidad 101. Un método para tratar una enfermedad inflamatoria la cual comprende, administrar a un paciente una cantidad efectiva terapéuticamente de una composición de acuerdo a la modalidad 86.

Modalidad 102: una composición de acuerdo con la modalidad 86 para uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

Modalidad 103 : el uso de una composición de acuerdo con la modalidad 86, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

Modalidad 104: Una composición farmacéutica la cual comprende una composición anti-NKG2D de acuerdo con la modalidad 86 para uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

Modalidad 105: Un método para tratar una enfermedad inflamatoria la cual comprende administrar al paciente una cantidad efectiva terapéuticamente de una composición de acuerdo con la modalidad 87.

Modalidad 106: Una composición de acuerdo con la modalidad 87 para uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

Modalidad 107: Uso de una composición de acuerdo con la modalidad 87 en el fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

Modalidad 108: Una composición farmacéutica la cual comprende una composición anti-NKG2A de acuerdo a una modalidad 87 para uso en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria.

Todas las referencias, incluyendo publicaciones, aplicaciones de patente, y patentes, citadas en la presente son incorporadas en la presente para referencia en su totalidad y al mismo grado como si cada referencia se indicara individual y específicamente para ser incorporada para referencia y se indica en su totalidad en la presente (al grado máximo permitido por ley) , independientemente de cualquier incorporación proporcionada separadamente de documentos particulares hechos en cualquier parte en la presente .

El uso de los términos "un, una" y "el, la" y referentes similares en el contexto de describir la invención son para ser construidos para cubrir tanto el singular y el plural, a menos que se indique de otra forma en la presente o se contradiga claramente en el texto. Por ejemplo, la frase "el compuesto" es para ser entendido como que se refiere a varios "compuestos" de la invención o aspecto particular descrito, a menos que se indique de otra forma.

A menos que se indique de otra forma, todos los valores exactos proporcionados en la presente son representativos de valores aproximados correspondientes (por ejemplo, todos los valores de ejemplo exactos proporcionados con respecto a un factor particular o medición pueden ser considerados para. también proporcionar una medición aproximada correspondiente, modificada por "aproximadamente" donde sea apropiado) . Cuando se da un intervalo, el intervalo incluye tanto valores de extremo, a menos que se indique de otra forma .

La descripción en la presente de cualquier aspecto o aspecto de la invención usando términos como "que comprende" "que tiene" , "que incluye" o "que contiene con referencia a un elemento o elementos es proporcionado para proporcionar soporte a un aspecto similar o aspecto de la invención que consiste de, "consiste esencialmente" o "substancialmente comprende" elemento o elementos particulares, a menos que se establezca de otra forma o contradiga claramente por contexto (por ejemplo, una composición descrita en la presente como que comprende un elemento particular debe · ser entendido como que describe también una composición que consiste de ese elemento, a menos que se establezca otra cosa o contradiga claramente por contexto) .

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones:

1. Una composición estable, líquida que comprende una proteína, una sal y/o un amortiguador, caracterizada porque la concentración total de la sal y/o amortiguador es menor a 100 mM.

2. La composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque la concentración total de la sal y/o un amortiguador es menor a 60 mM.

3. La composición de conformidad con la reivindicación 1 ó 2, caracterizada porque no comprende un tensioactivo .

4. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1, 2 ó 3, caracterizada porque la proteína está presente dentro de la composición en una concentración entre 100 mg/ml y 300 mg/ml.

5. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-4, caracterizada porque la composición es estable en temperatura ambiente

6. La composición de conformidad con ' cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizada porque tiene una viscosidad de 50 cP ó menos cuando se mide en 25°C.

7. La composición líquida, estable caracterizada porque comprende un anticuerpo y arginina, en donde la arginina está presente en una concentración de entre 5 mM y 100 mM.

8. La composición líquida, estable de conformidad con la reivindicación 7, caracterizada porque la concentración de arginina está entre 5 mM y 30 mM.

9. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizada porque la proteína es un anticuerpo.

10. La composición de conformidad con la reivindicación 9, caracterizada porque el anticuerpo es del subtipo IgG4.

11. La composición de conformidad con la reivindicación 9 ó 10, caracterizada porque el anticuerpo monoclonal es un anticuerpo monoclonal anti-IL20, un anticuerpo monoclonal anti-C5aR, un anticuerpo monoclonal anti-NKG2D, o un anticuerpo monoclonal anti-NKG2A.

12. La composición de . conformidad con la reivindicación 9 ó 10, caracterizada porque el anticuerpo monoclonal es un anticuerpo monoclonal anti-TFPI.

13. Un método para tratar una enfermedad inflamatoria caracterizado porque comprende administrar a un paciente una cantidad efectiva terapéuticamente de una composición de conformidad con la reivindicación 11.

14. Un método para tratar una coagulopatía caracterizado porque comprende administrar a un paciente una cantidad efectiva terapéuticamente de una composición de conformidad con la reivindicación 12.