LU86973A1 - Agent therapeutique pour le traitement des troubles associes a l'ischemie cerebrale - Google Patents

Description

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Agent thérapeutique pour le traitement des troubles associes à l'ischémie cérébrale.

La présente invention concerne un agent thérapeutique pour le traitement des troubles associés à .5 l'ischémie cérébrale, cet agent étant caractérisé en ce qu'il contient du nitrate de N-(2-hydroxyéthyl)-nicotinamide ou un de ses sels, comme ingrédient actif. Plus particulièrement, la présente invention concerne un agent très efficace pour le traitement des troubles 10 associés à l'ischémie cérébrale, par exemple, l'artério- sclérose cérébrale, les séquelles de l'infarctus cérébral, les séquelles de l'hémorragie cérébrale, les séquelles de l'apoplexie cérébrale, les séquelles des traumatismes survenant dans la tête, etc., ainsi que les symptômes 15 apparentés à ces troubles, par exemple, l'hypoxie, l'anoxie, etc., et également des symptômes neurologiques tels que les vertiges, les troubles de la parole, les troubles moteurs et sensoriels, la paropsie, etc.

Le nitrate de N-(2-hydroxyéthyl)-nicotinamide 20 a été utilisé pour traiter des patients souffrant de l'angine de poitrine. Toutefois, ce composé n'a pas été utilisé pour guérir l'ischémie cérébrale ou les maladies apparentées à cette dernière.

D'autre part, on a utilisé différents agents 25 thérapeutiques pour le traitement de troubles associés 2 ' <"λ ; à l'ischémie cérébrale, couvrant à la fois les phases aiguës et chroniques. Ces agents sont généralement . divisés dans les deux groupes suivants : les agents améliorant la circulation cérébrale et les activateurs 5 du métabolisme cérébral. Bien que des agents thérapeu tiques classés parmi les agents améliorant la circula-: tion cérébrale exercent généralement des effets vaso dilatateurs sur les vaisseaux sanguins cérébraux, ils exercent les memes effets sur les autres vaisseaux , 10 sanguins périphériques, ces effets conduisant à des > issues défavorables telles que l'hypotension générale.

En conséquence, on a recherché des agents agissant sélectivement sur les vaisseaux sanguins cérébraux.

D'autre part, on considère que des activateurs du 15 métabolisme cérébral constituent des remèdes à l'ischémie cérébrale en augmentant la consommation d'oxygène cérébral et l'apport de glucose dans le cerveau, et également en exerçant des effets protecteurs sur le système producteur d'énergie, ainsi qu'on le constate 20 dans des expériences ischémiques et ce, quoique le mécanisme de leur action n'ait pas encore été clarifié.

Quelques agents seulement de la technique antérieure pour le traitement des troubles circulatoires cérébraux exercent des effets sélectifs sur les vais-25 seaux sanguins cérébraux et certains d'entre eux sont la cause d'une hypotension générale. En outre, le mécanisme d'action de la plupart de ces agents n'est pas connu.

La Demanderesse a trouvé que les composés de 30 la présente invention, c'est-à-dire le nitrate de N-(2-hydroxyéthyl)-nicotinamide et ses sels, dilataient les vaisseaux sanguins cérébraux sans aucunement provoquer une chute importante de la pression artérielle générale (Kekjkan (Blood Vessel) 6, 3 (1983), "Japanese Heart 35 Journal" (Jap. Heart J.) '1_9, 1 1 2 (1977) et Chiryou t 3 Λ*- (Treatment) 60, 1 (1978)). En outre, la Demanderesse a trouvé que ces composés augmentaient le métabolisme cérébral par l'accroissement d'apport de glucose dans le cerveau et que ces composés étaient efficaces pour 5 le traitement de différents modèles d'hypoxie, abou tissant ainsi à la présente invention.

On peut préparer les composés de la présente invention, à savoir le nitrate de N-(2-hydroxyéthyl)-nicotinamide et ses sels, par exemple, comme décrit 10 ci-après : A un ester nitrate de 2-amino-éthanol, on ajoute un catalyseur tel que 1'hydrogénocarbonate de sodium, la pyrimidine, ou un catalyseur basique, par exemple, le carbonate de potassium, la triéthylamine, 15 etc. Il est préférable d'utiliser un catalyseur, encore • que la réaction puisse se dérouler sans aucun catalyseur.

On ajoute de l'eau ou un solvant organique tel que le chloroforme, la pyridine, le tétrachlorure de carbone, le benzène, le dichlorométhane, le toluène, la triéthyl-20 amine, etc., au mélange réactionnel que l'on refroidit ensuite. Tout en agitant, on ajoute, par portions, une quantité molaire égale ou excédentaire de chlorure d'acide nicotinique ou de son sel chlorhydrate, ou encore d'un autre dérivé fonctionnel de l'acide nicoti-25 nique, avec chauffage ou à la température ambiante, de préférence, à une température comprise entre 0 et 5°C pendant une période de 5 à 90 minutes, mieux encore, pendant une période de 10 à 30 minutes. Après avoir poursuivi l'agitation et après avoir séparé la couche 30 de solvant du produit obtenu, on extrait à nouveau la couche aqueuse avec le solvant. On lave la couche de solvant combinée et on la sèche, puis on procède à une concentration sous pression réduite. On recristallise le résidu obtenu dans un solvant organique pour obtenir 35 le composé faisant l'objet de l'invention sous forme de \ 4 •Tfc.

cristaux en aiguilles incolores.

Ce composé peut facultativement être converti , en sels inorganiques ou organiques tels que le sel chlorhydrate, le sel oxalate, le sel p-toluène-sulfonate, 5 le sel maléate, etc., en recourant à une méthode clas sique .

Cet agent thérapeutique pour le traitement des troubles circulatoires cérébraux peut être administré à un sujet humain par des méthodes appropriées telles 10 qu'une administration par voie orale ou par voie parentérale (administration par voie intramusculaire, par voie sous-cutanée, par voie intraveineuse et par suppositoires) . Le composé de la présente invention peut être formulé sous des formes posologiques telles que 15 des comprimés, des granulés, des poudres, des capsules, des suspensions, des injections, des suppositoires, etc., par une méthode classique habituellement adoptée dans le domaine de la technologie de la formulation.

Par exemple, il peut être formulé en comprimés, en 20 granulés ou en poudres en le mélangeant avec un excipient, un agent liant, un solvant, etc., par exemple, des excipients pharmaceutiques tels que le lactose, l'amidon, le mannitol, le kaolin, la cellulose cristalline, le talc, le carbonate de calcium, le stéarate 25 de magnésium, etc. Le composé peut également être formulé en capsules en remplissant une capsule dure avec le composé sous forme de granulés ou de poudres, ou en remplissant une capsule molle avec le composé dissous dans une huile. Dans le cas d'une formulation 30 sous forme d'une suspension, le composé peut être mis en suspension dans une solution aqueuse conjointement avec de la gomme arabique en poudre ou du sucre blanc, tout en procédant ensuite au réglage de son pH. Dans le cas d'une formulation sous forme d'une injection, 35 le composé peut être mélangé avec du mannitol.

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La teneur du composé de la présente invention dans différentes formes posologiques telles que des comprimés, des capsules, etc., doit être une quantité appropriée de telle sorte que l'effet thérapeutique et 5 prophylactique de ce composé sur des troubles circula toires cérébraux se manifeste sans exercer des effets ! néfastes. En règle générale, il convient que chaque comprimé ou chaque capsule contienne 1-20 mg de cet agent de traitement des troubles circulatoires comme 10 unité posologique pour une administration par voie ; orale, et que chaque fiole contienne environ 0,1-12 mg de cet agent comme unité posologique pour une administration par voie parentérale.

La dose réelle qu'il convient d'administrer 15 à un patient en utilisant les unités posologiques ci-dessus de la préparation, dépend de l'état individuel des patients. Il va sans dire qu'il est nécessaire de modifier la dose réelle en fonction des besoins de chaque patient individuel. La dose quotidienne appro-20 priée pour un patient adulte est d'environ 1 à 100 mg dans le cas d'une administration par voie orale, et d'environ 0,1 à 150 mg, dans le cas d'une injection par voie intraveineuse.

Exemple 1 (Préparation) 25 (a) Comprimé sublingual

Composé de la présente invention (forme libre) 5 mg

Lactose 19,7 mg

Mannitol 25 mg 30 Stéarate de magnésium 0,3 mg_ 50 mg/comprimé

On mélange convenablement les composants énumérés ci-dessus et on les transforme directement en comprimés à 50 mg et d'un diamètre de 5 mm dans une 35 machine de formation de comprimés.

6 (b) Comprimé (pour administration par voie orale)

Composé de la présente invention (sel chlorhydrate) 10 mg

Lactose 44,5 mg 5 Amidon de maïs 20 mg

Cellulose cristalline 25 mg

Stéarate de magnésium 0,5 mg_ 100 mg/comprimé

On mélange convenablement les composants 10 énumérés ci-dessus et on les transforme directement en comprimés à 100 mg d'un diamètre de 7 mm, dans une machine de formation de comprimés.

(c) Capsule dure

Composé de la présente invention 15 (forme libre) 20 mg

Lactose 176 mg

Stéarate de magnésium 4 mg_ 200 mg/capsule

On mélange convenablement les composants 20 énumérés ci-dessus et on les introduit dans une machine de remplissage de capsules, afin de les verser dans des capsules n° 3 de telle sorte que chaque capsule contienne 200 mg du mélange et pèse, au total, 250 mg.

(d) Granulé (capsule dure) 25 Composé de la présente invention (forme libre) 10 mg

Lactose 710 mg

Colle d'amidon de maïs 280 mg_ 1.000 mg/condi- 30 tionnement

On mélange les composants énumérés ci-dessus et on les malaxe convenablement. On transforme le mélange en granulés d'un diamètre de 1 mm en utilisant un granulateur. On les < verse dans une capsule n° 3 35 de telle sorte que chaque capsule contienne 200 mg de \ 7 granulés et pèse, au total, 250 mg.

(e) Injection

Composé de la présente invention (forme libre) 5 mg 5 Mannitol 50 mg___ 55 mg/fiole j On mélange convenablement les composants énumérés ci-dessus et on les verse dans une fiole appropriée, puis on procède à une lyophilisation selon 10 une méthode classique. Ensuite, on scelle la fiole en vue de la préparation d’une injection. Le produit est préparé pour être dissous dans 1 ml d'eau distillée au moment de l'utiliser pour une injection.

Exemple 2 (toxicité aiguë) 15 On a étudié les toxicités aiguës des composés de la présente invention, administrés par voie orale et par voie intraveineuse, chez des rats SD mâles et femelles âgés de 4 semaines. Les résultats obtenus ont démontré que la valeur DL,-q (dose létale à 50¾) 20 par voie orale se situait entre 1.200 mg/kg et 1.300 mg/kg à la fois chez les sujets mâles et femelles et que la valeur DL5Q par voie intraveineuse se situait entre 800 mg/kg et 1.000 mg/kg à la fois chez les sujets mâles et femelles.

25 Exemple 3 (Effets sur l'hypoxie ou la mortalité due au KCN) (1) Animaux et médicaments utilisés.

Lors de cette étude, on a utilisé des rats mâles F344/NS1c (Fischer) pesant 178-210 g (âgés de 30 9 semaines).

On a mis le médicament d'essai en suspension dans une solution de gomme arabique à 2¾ et, par voie orale, on a administré la suspension obtenue aux animaux 30 minutes avant l'introduction du gaz ou l'injection r 35 intraveineuse de KCN. De la même manière, un groupe ' \ ί %'* ; ! · 8 témoin a reçu 2,0 ml/kg de solution de gomme arabique ' à 2% par voie orale.

(2) Effet sur l'hypoxie normobare. }

On a placé des rats dans une cage sous pres-i 5 sion atmosphérique normale et, à un débit de 2 1/minute, on a introduit un mélange gazeux constitué de 971 de N2 et de 3¾ d'02. La période s'écoulant entre le début de l'introduction de gaz et l'arrêt de la respiration a été enregistrée comme "temps de survie (secondes)".

10 Le tableau 1 ci-après indique les résultats obtenus.

TABLEAU 1 Médicament d'essai Dose Temps de survie (mg/kg) (secondes) 15 administrée (moyenne + erreur par voie orale type) Témoin - 311,8 + 10,3 20 Composé de la 3 357,4 + 19,4 présente 10 446,5 + 31 ,2KX3€

invention 30 411,8 +_ 28,6XX

1 318,3 + 9,6 25 Nicardipine 3 293,7 +_ 15,3 10 283,8 + 14,4 10 348,3 + 18,1

Vinpocétine 30 367,8 + 18,6K

30 100 371,4 + 23,8* x P<0,05, xx 0,01, xxx P< 0,001 (essai t de l'Etudiant).

\ 9 (3) Effets sur la mortalité provoquée par KCN.

On a utilisé un groupe de dix rats mâles (groupe du médicament d'essai) et un groupe de vingt rats mâles (groupe témoin). Trente minutes après 5 l'administration du médicament d'essai, on a administré 3 mg/kg de KCN par la veine caudale et l'on a enregistré le taux de survie. L'importance des résultats relatifs au taux de survie a été déterminée par la 2 2 méthode du Chi (X ). Le tableau 2 ci-après donne 10 les résultats obtenus.

TABLEAU 2 Médicament d'essai Dose Taux de survie (mg/kg) m

administrée K-0J

15 ___ par voie orale__ Témoin - 3/20 (15,0)

Composé de la 3 2/10 (20,0) présente 10 3/10 (30,0) 20 invention 30 8/10** (80,0) 1 0/10 ( 0,0)

Nicardipine 3 0/10 ( 0,0) 10 3/10 (30,0) 25____ 10 3/10 (30,0)

Vinpocétine 30 5/10 (50,0) 100 7/10** (70,0) 30 xx P <0,01

Exemple 4 (Effets sur l'apport de glucose dans le cerveau).

(1) Animaux et médicaments utilisés.

On a utilisé des rats mâles F344/NS1c 35 (Fischer) âgés de 9-11 semaines. On les a soumis à Γ V,, ' 10 } ι ι : . une étude après les avoir privés de nourriture pendant environ 18 heures.

On a mis le médicament d'essai en suspension dans une solution de gomme arabique à 2% et, à chaque 5 groupe, on a administré, par voie orale, 2 mg/kg de la suspension obtenue. De la même manière, le groupe témoin a reçu une solution de gomme arabique à 2% par voie orale.

(2) Accroissement de l'apport de glucose dans le cerveau 10 chez des rats normaux.

On a divisé les animaux en quatre groupes (cinq par groupe). On a administré le composé de la présente invention par voie orale à des groupes d'essai à 3 niveaux posologiques, à savoir : 3, 10 et 30 mg/kg ; 15 un groupe témoin a reçu une solution de gomme arabique à 2%.

Trente minutes après l'administration, on a tué les rats par irradiation à des micro-ondes (applica-teur de micro-ondes "Toshiba", TMW-6402, 5 KW, 1,4 20 seconde), appliquée à la tête. On a ouvert immédiatement le crâne pour exciser le cerveau et l'on a procédé à la dissection du cortex cérébral. On a préparé des échantillons de dosage quantitatif selon la méthode de Forbergrova et al. £J. Neurochem., volume 19 25 (1972)J7· En d'autres mots, à un échantillon de cerveau pondéré, on a ajouté une solution glacée de HCIO^ 0,3N/ acide éthylène-diamine-tétracétique 1 millimolaire (2 ml/200 mg de poids de tissu humide). On a homogénéisé le mélange et on l'a centrifugé (26.000 x g, 10 minutes 30 à 4°C) pour séparer le produit surnageant que l'on a conservé. On a homogénéisé le précipité obtenu et on l'a à nouveau centrifugé dans les mêmes conditions, puis on a combiné le produit surnageant avec celui obtenu à la suite de la première centrifugation. On a neutralisé le produit surnageant combiné, avec un 35 mélange glacé de KOH 1,5N/imidazole 0,4M/KC1 0,3N et, \ ; n après centrifugation, on a utilisé le produit surnageant obtenu comme échantillons pour le dosage quantitatif du glucose. On a dosé les échantillons au fluorophotomètre (longueur d'onde d'excitation : 340 nm, 5 longueur d'onde en fluorescence : 455 nm, spectrophoto- fluoromètre "Aminco" fabriqué par "American Institute Company"), contrôlant la formation et la décomposition de NADH (= nicotinamide adénine dinuclêotide hydrogéné) ou de NADPH (= nicotinamide adénine dinuclêotide phosphate 10 réduit). Le tableau 3 donne les résultats obtenus.

TABLEAU 3 Médicament Dose N Teneur en glucose dans administré (mg/kg par le cerveau ( yumoles/g 15 voie orale) de cerveau) * (moyenne + erreur type) Témoin - 5 0,93 + 0,06 20 Composé de 3 5 1,45 + 0,07xxx la présente 10 5 1,53 + 0,10xxx invention 30 5 1,80 + Ο,Οδχχχ xxx P <,0,001 (essai t de l'Etudiant).

25 (3) Accroissement de l'apport de glucose dans le cerveau chez des rats dans des conditions hypoxiques.

Les animaux ont reçu, par voie orale, soit 30 mg/kg du composé de la présente invention, soit une solution de gomme arabique à 2% (témoin). Trente 30 minutes après l'administration du médicament d'essai, on a placé les rats dans une cage et, à un débit de 2 1/minute, pendant 5 minutes, on a introduit un gaz mixte constitué de 97¾ de ^ et de 3¾ d'02» de façon à les soumettre à un état hypoxique. Immédiate-35 ment après la période hypoxique, on a tué les rats par 12 -Λ> irradiation aux micro-ondes. On a tué les rats normaux du groupe témoin par une méthode semblable 30 minutes après l'administration de la solution témoin. On a disséqué le cortex cérébral et on a préparé des échan-5 tillons pour analyse comme décrit sub (1), puis on a déterminé la teneur en glucose. Le tableau 4 donne les résultats obtenus.

| TABLEAU 4 10 Médicament administré Dose N Teneur en glucose (mg/kg dans le cerveau par voie ( yamoles/g de cer- orale) veau) (moyenne + erreur 15 type)

Etat Témoin - 8 0,92 + 0,05 hypo- ____ xique Composé de la 20 présente 30 8 1 ,12 +_ 0,04** invention

Normal Témoin - 8 1,30+0,03*** 25 xx P <0,01, xxx P<0,001 (essai t de l'Etudiant).

Exemple 5 (essai clinique)

Pendant 8 semaines, par voie orale, on a administré, en une dose quotidienne de 15 à 30 mg, des comprimés contenant le composé de la présente invention 30 à des patients âgés de 40 à 80 ans souffrant d'infarctus cérébral (thrombose ou embolie) et d'artériosclérose cérébrale. On a évalué l'atténuation des symptômes « subjectifs et mentaux (récupération légère - récupération remarquable) ; les résultats sont repris dans le tableau 35 5.

; 13 \ ! TABLEAU 5 : Nombre total Nombre de cas pour lesquels le de cas traitement a été efficace (taux S d’efficacité) 49 33 (67,3¾)

Pour deux cas, les seules réactions néfastes 10 observées étaient une céphalée modérée.

Les résultats décrits ci-dessus démontrent que le composé de la présente invention prolonge le temps de survie et augmente l'apport de glucose dans le cerveau chez des rats se trouvant dans des conditions 15 hypoxiques. Dès lors, il est démontré que ce composé est utile comme agent thérapeutique pour le traitement de troubles associés à l'ischémie cérébrale.

Claims (6)

1. Agent thérapeutique pour le traitement des troubles associés à l'ischémie cérébrale, caractérisé en ce qu'il comprend du nitrate de N-(2-hydroxy-5 éthyl)-nicotinamide ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables, comme ingrédient actif, en une quantité a efficace pour dilater les vaisseaux sanguins cérébraux, conjointement avec un support pharmaceutiquement acceptable.

2. Agent selon la revendication 1, caracté risé en ce qu'il est sous forme d'un comprimé contenant 0,1-20 mg de cet ingrédient actif.

3. Agent selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il est sous forme d'une capsule contenant 15 0,1 à 20 mg de cet ingrédient actif.

4. Agent selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il est sous forme d'une injection contenant 1-12 mg de cet ingrédient actif.

5. Procédé pour le traitement d'un patient 20 souffrant d'un trouble associé à l'ischémie cérébrale, ou atteint d'un symptôme apparenté à ce trouble, caractérisé en ce qu'il consiste à administrer, au patient, du nitrate de N-(2-hydroxyéthyl)-nicotinamide ou un de - ses sels pharmaceutiquement acceptables, en une dose 25 quotidienne de 1-100 mg'par voie orale ou de 0,1 à 150 mg par injection, ce procédé ne provoquant prati- 15 quement aucune hypotension générale chez le patient.

6. Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que le trouble ou le symptôme est choisi parmi le groupe comprenant l'artériosclérose cérébrale, 5 les séquelles de l'infarctus cérébral, les séquelles de l'hémorragie cérébrale, les séquelles de l'apoplexie cérébrale, les séquelles des traumatismes dans la tête, l'hypoxie, l'anoxie, les vertiges, les troubles de la parole, les troubles moteurs et sensoriels, de même que 10 la paropsie.