KR940007180A - 프로테아제 억제제의 제조방법 - Google Patents

프로테아제 억제제의 제조방법 Download PDF

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KR940007180A
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퓌르스트 페터
훗티거 토마스
쿠울라 요헨
포리그 가브리엘레
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베르너 발데크
시바-가이기 에이지
베. 브란트
우체페 겐-파르마 에이지
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Abstract

형질전환된 효모 균주에 의한 재조합 데셀파토히루딘의 신규한 제조방법이 제공되어 있다. 본 발명의 방법은 효모 CUP1 프로모터를 포함하는 발현 카세트를 이용한다. 또한 본 발명의 형질전환된 효모 균주, 신규한 발현 벡터 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

Description

프로테아제 억제제의 제조방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 플라스미스 pPFY56의 도식이고,
제2도는 플라스미스 pPFY58의 도식이고,
제3도는 플라스미스 pPFY59R의 도식이고, 제4도는 플라스미스 pPFY79의 도식이다.

Claims (24)

  1. 적당한 판독 프레임에서 데설파토히루딘을 암호화하는 제2의 DNA서열에 연결된 효모 시그날 펩타이드를 암호화하는 제1의 DNA서열에 작동적으로 연결된 효모 CUP1프로모터, 및 효모 전사 종결 시그날을 함유하는 DNA서열로 구성된 데설파토히루딘 발현 카세트를 포함하는 효모 발현 벡터를 가진 효모 균주를, 접종시 CUP1프로모터 유도량의 구리염이 공급되는 복합 배양 배지중에서 배양하고 생성된 데설파토히루딘을 배양 브로쓰로부터 분리함을 특징으로 하여 데설피토히루딘을 제조하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, 데설파토히루딘이 데설파토히루딘 변이체 HV1, HV2, HV3 및 이들 데설파토히루딘 변이체의 유도체로 구성된 그룹중에서 선택되는 방법.
  3. 제1항에 있어서, 데설파토히루딘 변이체 HV1을 제조하는 방법.
  4. 제1항에 있어서, 효모 균주가 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)의 균주인 방법.
  5. 제1항에 있어서, 효모 균주가 사카로마이세스 세레비지애의 cir0균주인 방법.
  6. 제1항에 있어서, 효모 균주가 단일 또는 다중성 프로테아제-결핍인 방법.
  7. 제6항에 있어서, 효모 균주가 카복시펩티다제 ysc및 yscY 활성 결핍인 방법.
  8. 제1항에 있어서, 효모 균주가 0내지 16, 특히 2내지 6 카피수의 염색체성 CUP1유전자인 방법.
  9. 제1항에 있어서, 효모 균주가 추가의 1내지 3카피수의 염색체성 ACE1유전자인 방법.
  10. 제1항에 있어서, 효모 균주의 플로이더티(ploidity)가 2이상인 방법.
  11. 제10항에 있어서, 효모 균주가 2배체인 방법.
  12. 적당한 판독 프레임에서 데설파토히루딘을 암호화하는 제2의 DNA서열에 연결된 효모 시그날 펩타이드를 암호화하는 제1의 DNA서열에 작동적으로 연결된 효모 CUP1프로모터, 및 효모 전사 종결 시그날을 함유하는 DNA 서열로 구성된 데설파토히루딘 발현 카세트를 포함하는 효모 발현 벡터.
  13. 제12항에 있어서, CUP1 프로모터가 서열확인번호 1에 도식된 0.4kB의 BamHI-EcoRI단편인 효모 발현 벡터.
  14. 제12항에 있어서, 시그날 펩타이드를 암호화하는 DNA 서열이 효모 인버타제,-인자, 페로몬 팹티다제(KEX 1), "킬러독소"및 억제성 산 포스파타제(PH05)유전자의 의 시그날 및 프레프로 서열 및 아스퍼길러스 아와모리(Aspergillus awamori)로 부터의 글루코아밀라제 시그날 서열로 구성된 그룹중에서 선택된 효모 발현 벡터.
  15. 제12항에 있어서, 시그날 펩타이드를 암호화하는 DNA 서열이 효모 인버타제 및 PH05 유전자의 시그날 서열로 구성된 그룹중에서 선택된 효모 발현 벡터.
  16. 제12항에 있어서, 효모 전사 종결 시그날을 함유하는 DNA 서열이 전사 종결 및 폴리아데닐화를 위한 적당한 시그날을 함유하는 효모 유전자의 3′플랭킹(flanking)서열인 효모 발현 벡터.
  17. 제12항에 있어서, 완전한 2μDNA를 함유하는 효모 발현 벡터.
  18. 제12항에 있어서, 추가로 1 내지 3개의 데설파토히루딘 발현 카세트를 포함하는 효모 발현 벡터.
  19. 제12항에 있어서, 추가로 1개의 전사 활성화제 ACE 1 발현 카세트를 포함하는 효모 발현 벡터.
  20. 제12항에 있어서, 대칭성을 나타내고 세균성 서열이 결핍된 효모 발현 벡터.
  21. 적당한 판독 프레임에서 데설파토히루딘을 암호화하는 제2의 DNA 서열에 연결된 효모 시그날 펩타이드를 암호화하는 제1의 DNA서열에 작동적으로 연결된 효모 CUP1프로모터, 및 효모 전사 종결 시그날을 함유하는 DNA서열로 구성된 데설파토히루딘 발현 카세트를 포함하는 효모 발현 벡터를 가진 효모 균주 및 이의 제조방법.
  22. 제21항에 있어서, 제12항에 따른 효모 발현 벡터를 가진 효모 균주.
  23. 제21항에 있어서, 플로이더티가 2이상인 효모 균주.
  24. 제23항에 있어서, 2배체인 효모 균주.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
KR1019930017604A 1992-09-04 1993-09-03 프로테아제 억제제의 제조방법 KR940007180A (ko)

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Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR19990010008A (ko) * 1997-07-14 1999-02-05 구광시 효모용 프로모터 및 이 프로모터를 포함하는 효모용발현 벡터
US6358705B1 (en) 1998-07-16 2002-03-19 Novo Nordisk A/S Method of making proteins in transformed yeast cells
US7795205B2 (en) * 2004-04-12 2010-09-14 Canyon Pharmaceuticals, Inc. Methods for effecting regression of tumor mass and size in a metastasized pancreatic tumor
JP2009543560A (ja) * 2006-07-14 2009-12-10 ノボザイムス，インコーポレイティド 真菌細胞中の遺伝子発現を上昇させる方法
CN102373216B (zh) * 2011-10-28 2013-06-05 元昊 一种含有医用水蛭素基因的重组真核汉逊酵母工程菌株的构建及重组水蛭素的生产工艺
EP3428282A1 (en) * 2017-07-11 2019-01-16 Alderys Ectoine-producing yeast

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4940661A (en) * 1984-05-17 1990-07-10 Genentech, Inc. Metallothionein transcription control sequences and use thereof
FR2593518B1 (fr) * 1985-05-02 1989-09-08 Transgene Sa Vecteurs d'expression et de secretion de l'hirudine par les levures transformees
MY101203A (en) * 1985-12-12 1991-08-17 Ucp Gen Pharma Ag Production of thrombin iinhibitors.
MC1834A1 (fr) * 1986-07-10 1988-06-03 Transgene Sa Bloc fonctionnel d'adn et plasmide codant pour l'hirudine,levure transformee,procede de preparation de l'hirudine,hirudine obtenue et son utilisation
AU614959B2 (en) * 1987-05-07 1991-09-19 Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation Expression system
PT88556B (pt) * 1987-09-28 1992-11-30 Smithkline Biolog Processo de integracao genomica estavel e de expressao de uma sequencia de cadificacao estranha, em leveduras
GB8809860D0 (en) * 1988-04-26 1988-06-02 Ciba Geigy Ag Process for production of polypeptides
AU614121B2 (en) * 1988-05-04 1991-08-22 Novartis Ag Improvements in the production of polypeptides
FR2645175B1 (fr) * 1989-03-31 1994-02-18 Transgene Sa Souche de saccharomyces cerevisiaeproductrice d'une proteine heterologue et procede de preparation de ladite proteine heterologue par fermentation de ladite souche

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Publication number Publication date
GR3035201T3 (en) 2001-04-30
NO933153D0 (no) 1993-09-03
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AU675071B2 (en) 1997-01-23
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ATE196927T1 (de) 2000-10-15
DE69329540T2 (de) 2001-06-07
IL106897A0 (en) 1993-12-28
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SG49859A1 (en) 2002-03-19
EP0592358B1 (en) 2000-10-11
US5726043A (en) 1998-03-10
NZ248558A (en) 1995-04-27

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