KR20240028959A - 오토탁신 저해 화합물 및 이를 함유하는 약제학적 조성물 - Google Patents

오토탁신 저해 화합물 및 이를 함유하는 약제학적 조성물 Download PDF

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KR20240028959A
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Abstract

본 발명은 오토탁신의 억제를 위한 신규한 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염 및 이를 함유하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.

Description

오토탁신 저해 화합물 및 이를 함유하는 약제학적 조성물{COMPOUNDS AS AUTOTAXIN INHIBITORS AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS COMPRISING THE SAME}
본 발명은 오토탁신의 활성화 또는 리소포스파티드산의 농도 증가에 의한 병태 또는 질환의 치료 및 예방을 위한 신규 오토탁신 저해 화합물 및 이를 함유하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
오토탁신(Autotaxin, ATX)은 복수 및 혈장에서의 리소포스파티드산(Lysophosphatidic acid, LPA)의 증가의 원인이 되는 효소로서, 리소파티딜콜린(LPC)을 생활성 신호화 분자인 리소포스파티드산으로 전환하는 과정에서 중요한 분비 효소이다. 오토탁신은 엑토뉴클레오티드 피로포스파타제/포스포다이에스터라제-2(ecto-nucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase-2, ENPP-2) 또는 리소포스포리파제 D(lysophospholipase D, lysoPLD)로도 지칭되며, 섬유증, 관절염 염증, 신경 퇴화, 신경병성 통증, 및 암을 포함한 병태를 유발하는 역할을 한다.
리소포스파티드산는 다양한 세포 유형의 이동, 증식, 및 생존에 영향을 미치는 생리활성 지질이다. 혈장 내 리소포스파티드산은 오토탁신의 활성과 매우 연관되어 있으므로, 오토탁신은 세포 외 리소포스파티드산의 중요한 공급원인 것으로 여겨진다.
병리학적으로 상기 오토탁신을 억제하는 경우 리소포스파티드산을 감소시키며, 리소포스파티드산 또는 오토탁신의 활성화에 의해 유발되거나 매개되는 암, 림프구 귀소, 만성 염증, 신경병성 통증, 섬유성 질환, 예컨대 특발성 폐 섬유화증 (IPF), 혈전증, 및 담즙정체 가려움증 등의 질환에 치료 효과가 있는 것으로 알려져 있다.
종양 환자를 치료하기 위해 리소포스파티드산 수준을 낮추는 것이 바람직하며, 예를 들어, 오토탁신과 같은 리소포스파티드산 생합성과 관련된 효소를 저해시키는 것을 통해 달성될 수 있다. 오토탁신은 뉴클레오티드 피로포스파타아제 및 포스포디에스테라아제의 효소 패밀리에 속하며, 항종양 요법을 위한 중요한 출발점을 제시한다. 이는 오토탁신이 종양에서 증가된 정도로 발현되어 종양 세포 증식 및 이웃 조직으로의 침투에 영향을 주며, 이것이 전이의 형성을 야기할 수 있기 때문이다.
즉, 오토탁신은 종양에서 발현되고 주변 조직으로 종양 세포 증식 및 침습에 영향을 미치며 이들 모두 전이의 형성을 야기할 수 있기 때문에, 오토탁신은 항-종양 치료의 표적이다. 또한, 혈관 신생 과정에서, 오토탁신은 다른 항-혈관 신생인자와 함께 혈관 형성을 일으킨다. 혈관 신생은 종양 성장 동안에 종양에 영양분을 공급한다. 따라서, 혈관 신생의 억제는 암 및 종양 요법의 중요한 출발점이라 할 수 있다.
위의 원리에 기초하여, 오토탁신을 억제하고 다양한 유형의 암을 치료할 수 있는 항종양 화합물의 종류에 대한 필요성이 시급하고 증가하고 있다.
미국 특허공개공보 제2021-0009589호 (2021.01.14) 국제공개공보 WO2018-212534호 (2018.11.22)
이에, 본 발명의 발명자들은 신규한 구조의 화합물이 오토탁신에 대해 뛰어난 억제 활성을 나타냄을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 오토탁신의 활성화에 의한 병태 또는 질환의 치료 및 예방을 위한 신규한 오토탁신 저해 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은, 상기 오토탁신 저해 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 오토탁신 저해제 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은, 상기 오토탁신 저해 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 오토탁신 활성과 관련된 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 오토탁신의 활성을 효과적으로 억제할 수 있는 신규한 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
[화학식 1]
Figure pat00001
상기 화학식 1에서,
A는 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 치환 또는 비치환된 5원 내지 11원의 모노- 또는 바이- 헤테로사이클릭 환이고,
L은 단일결합, -C(=O)-, -C(=O)-NR1-, -C(=O)-NR2-(CR3R4)a-, 또는 -S(=O)2-NR5-이고,
B는 치환 또는 비치환된 카보사이클릭 환; 또는 치환 또는 비치환된 헤테로사이클릭 환이고,
R1 내지 R5는 각각 독립적으로 수소, 또는 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알킬기이고,
a는 1 내지 5의 정수이다.
상기 A는 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 치환 또는 비치환된 5원 내지 6원의 헤테로아릴 환; 트리아졸기를 포함하는 치환 또는 비치환된 9원 내지 10원의 바이사이클릭 헤테로사이클릭 환; 또는 옥사졸리디논기를 포함하는 치환 또는 비치환된 9원 내지 10원의 바이사이클릭 헤테로사이클릭 환일 수 있다.
상기 A는 치환 또는 비치환된 피리딘기, 치환 또는 비치환된 티아졸기, 치환 또는 비치환된 벤족사졸론기, 치환 또는 비치환된 벤조트리아졸기, 치환 또는 비치환된 테트라하이드로벤조트리아졸기, 치환 또는 비치환된 트리아졸로피리딘기 또는 치환 또는 비치환된 테트라하이드로트리아졸로피리딘기일 수 있다.
상기 A는 하기 구조에서 선택되는 것일 수 있다.
Figure pat00002
상기 Ra는 수소, R6-S(=O)2-NH-, R6-S(=O)2-CH2- 또는 테트라졸일기이고,
Rb는 할로겐, 또는 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알콕시기이고,
R6는 히드록시기, 또는 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알킬기이고,
d는 0 내지 6의 정수이고,
e는 0 내지 3의 정수이다.
상기 A는 하기 구조에서 선택되는 것일 수 있다.
Figure pat00003
상기 Rb는 할로겐, 또는 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알콕시기이고,
e는 0 내지 1의 정수이다.
상기 L은 하기 구조에서 선택되는 것일 수 있다.
Figure pat00004
상기 R3 및 R4는 각각 독립적으로 수소, 또는 치환 또는 비치환된 C1-C5의 알킬기이다.
상기 B는 치환 또는 비치환된 C6-C10 카보사이클릭 환; 또는 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 치환 또는 비치환된 5원 내지 11원의 모노- 또는 바이- 헤테로사이클릭 환일 수 있다.
상기 B는 치환 또는 비치환된 C6-C10의 아릴렌; 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 치환 또는 비치환된 5원 내지 6원의 헤테로아릴렌; 또는 이소옥사졸기를 포함하는 치환 또는 비치환된 8원 내지 11원의 스피로 사이클릭 환일 수 있다.
상기 B는 치환 또는 비치환된 페닐렌, 치환 또는 비치환된 피리도닐렌, 치환 또는 비치환된 이소옥사졸릴렌, 치환 또는 비치환된 피라졸릴렌, 치환 또는 비치환된 티아졸릴렌 또는 치환 또는 비치환된 티아디아졸릴렌일 수 있다.
상기 B는 하기 구조에서 선택되는 것일 수 있다.
Figure pat00005
상기 Rc 및 Rc1 내지 Rc6은 각각 독립적으로 수소, 할로겐기, 히드록시기, 카복실기, 치환 또는 비치환된 C1-C10의 일킬기, 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알콕시기, -NR7R8 또는 -C(=O)OR9이되, 상기 R7 및 R8는 서로 연결되어 포화 단환고리를 형성할 수 있고, 상기 형성된 고리는 질소 또는 산소로부터 선택되는 헤테로원자를 하나 이상 포함할 수 있으며, 히드록시기 및 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알킬기로부터 선택되는 하나 이상의 치환체로 더 치환될 수 있고,
R9는 수소, 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알킬기 또는 치환 또는 비치환된 C3-C10의 사이클로알킬기이고,
f는 0 내지 4의 정수이고, g는 0 내지 2의 정수이고, h는 0 내지 3의 정수이고, s 및 t는 서로 같거나 상이하고, 각각 독립적으로 0 내지 4의 정수이고, 이때 s 및 t의 합은 2 내지 5이다.
상기 B는 하기 구조에서 선택되는 것일 수 있다.
Figure pat00006
상기 Rc는 수소, 할로겐기, 히드록시기, 카복실기, 치환 또는 비치환된 C1-C10의 일킬기, 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알콕시기, -NR7R8 또는 -C(=O)OR9이되, 상기 R7 및 R8는 서로 연결되어 포화 단환고리를 형성할 수 있고, 상기 형성된 고리는 질소 또는 산소로부터 선택되는 헤테로원자를 하나 이상 포함할 수 있으며,
R9는 수소 또는 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알킬기이고,
f는 0 내지 4의 정수이다.
또한 본 발명은 상기 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 오토탁신 저해제 조성물을 제공한다.
또한 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물에 대한 우수한 오토탁신 억제 활성을 확인함으로써, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 오토탁신 활성과 관련된 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 화합물은 신규한 화합물로서, 오토탁신에 대한 매우 높은 저해 활성을 나타냄으로써, 오토탁신에 의해 매개되어 유발되는 질환의 치료, 예방 및 경감에 부작용없이 유용하게 사용될 수 있다.
이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.
하기의 설명은 본 개시내용의 구체예를 기술하는 것으로 이해되어야 하며, 본 개시내용이 반드시 이에 한정되는 것은 아니다. 본 개시내용의 실시예는 다양한 변경을 가할 수 있고, 다양한 형태로 실시할 수 있다. 따라서, 본 개시내용의 사상 및 기술적 특징의 동일성이 인정되는 범위의 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해하여야 한다.
달리 명시하지 않았더라도, 본 개시내용에 사용된 모든 숫자는 모든 경우마다 "약"이란 용어가 수식하고 있는 것으로 이해되어야 한다. 수식어 “약”은 통상적으로 인식되는 대략적으로의 의미를 갖도록 하기 위한 것인데, 이는 수식된 값의 특정 퍼센트 이내의 의미로서 더욱 정확하게 해석될 수 있고, 보다 구체적으로는 ±20%, ±10%, ±5%, ±2% 또는 ±1% 또는 그 미만을 의미할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 각 치환기의 정의에 대해 상세히 설명한다. 명시하지 않는 한, 각 치환기는 하기의 정의를 갖는다.
본 발명의 용어 “알킬”은 탄소 및 수소 원자만으로 구성된 1가의 직쇄 또는 분쇄 포화 탄화수소기를 의미하는 것으로, 1 내지 10개의 탄소원자, 바람직하게는 1 내지 7개의 탄소원자를 가질 수 있다. 이러한 알킬기의 예는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, 펜틸, 이소펜틸, 네오펜틸, 1-에틸프로필, 헥실, 이소헥실, 1,1-디메틸부틸, 2,2-디메틸부틸, 3,3-디메틸부틸, 2-에틸부틸 등을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다.
본 발명의 용어 “아릴”은 하나의 수소 제거에 의해서 방향족 탄화수소로부터 유도된 카보사이클릭 유기기로, 각 고리에 적절하게는 4 내지 7개, 바람직하게는 5 또는 6개의 고리원자를 포함하는 단일 또는 융합 고리계를 포함하며, 다수개의 아릴이 단일결합으로 연결되어 있는 형태까지 포함한다. 구체적인 예로 페닐, 나프틸, 비페닐, 안트릴, 인데닐(indenyl), 플루오레닐 등을 포함하지만, 이에 한정되지는 않는다. 아릴은 방향족 고리 상의 적정 위치에서 다른 기와 연결될 수 있다.
본 발명의 용어 “헤테로아릴”은 방향족 고리 골격 원자로서 N, O 및 S로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 포함하고, 나머지 방향족 고리 골격 원자가 탄소인 아릴 그룹을 의미하는 것으로, 5 내지 6원 단환 헤테로아릴, 및 하나 이상의 벤젠환과 축합된 다환식 헤테로아릴이며, 부분적으로 포화될 수도 있다. 또한, 본 발명에서의 헤테로아릴은 하나 이상의 헤테로아릴이 단일결합으로 연결된 형태도 포함한다. 상기 헤테로아릴기의 예는 피롤, 퀴놀린, 이소퀴놀린, 피리딘, 피리미딘, 옥사졸, 티아졸, 티아디아졸, 트리아졸, 이미다졸, 벤조이미다졸, 이소옥사졸, 벤조이소옥사졸, 티오펜, 벤조티오펜, 퓨란, 벤조퓨란 등을 포함하지만, 이에 한정되지는 않는다.
본 발명의 용어 “할로” 또는 “할로겐”은 할로겐족 원소를 나타내며, 예컨대, 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도를 포함한다.
본 발명의 용어 “시클로알킬”은 하나 이상의 고리로 구성된 1가의 포화 카보사이클릭 유기기로, 3 내지 10개의 탄소원자 바람직하게는 3 내지 7개의 탄소원자를 가질 수 있다. 구체적인 예로는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실 등을 들 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다.
본 발명의 용어 “알콕시”는 -O-알킬 유기기로, 1 내지 10개의 탄소원자, 바람직하게는 1 내지 7개의 탄소원자를 가질 수 있다. 여기서 ‘알킬’은 상기 정의한 바와 같다. 구체적인 예로는 메톡시, 에톡시, 이소프로폭시, 부톡시, 이소부톡시, tert-부톡시 등을 포함되지만 이에 한정되지는 않는다.
본 발명의 용어 "헤테로사이클"은 고리 구성 원자로서 탄소 원자 이외의 질소 원자, 황 원자 및 산소 원자에서 선택되는 헤테로원자를 함유하는 방향족 또는 비방향족 고리를 의미하며, 바람직하게는 1 내지 4의 상기 헤테로원자를 포함하는 4원 내지 10원, 더욱 바람직하게는 5원 내지 9원의 방향족 또는 비방향족환을 포함한다. 이러한 방향족환의 예는 티에닐, 푸릴, 피롤릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 피리딜, 피라지닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 1,2,4-옥사디아졸릴, 1,3,4-옥사디아졸릴, 1,2,4-티아디아졸릴, 1,3,4-티아디아졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 트리아지닐 및 벤조티아졸일을 포함한다. 또한 이러한 비방향족환의 예는 테트라히드로티에닐, 테트라히드로푸라닐, 피롤리닐, 피롤리디닐, 이미다졸리닐, 이미다졸리디닐, 옥사졸리닐, 옥사졸리디닐, 피라졸리닐, 피라졸리디닐, 티아졸리닐, 티아졸리디닐, 테트라히드로이소티아졸릴, 테트라히 드로옥사졸릴, 테트라히드로이속사졸릴, 피페리디닐, 피페라지닐, 테트라히드로피리디닐, 디히드로피리디닐, 디히드로티오피라닐, 테트라히드로피리미디닐, 테트라히드로피리다지닐, 디히드로피라닐, 테트라히드로피라닐, 테트라히드로티오피라닐, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 아제파닐, 디아제파닐 및 아제피닐을 포함한다.
본 발명의 용어 “아릴렌” 및 “헤테로아릴렌”은 방향족고리 및 헤테로방향족고리의 2가 유기기를 의미한다.
본 발명의 용어 “헤테로시클로알킬렌” 및 “헤테로시클로알케닐렌”은 포화 헤테로고리 및 불포화 헤테로고리의 2가 유기기를 의미한다.
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
[화학식 1]
상기 화학식 1에서,
A는 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 치환 또는 비치환된 5원 내지 11원의 모노- 또는 바이- 헤테로사이클릭 환이고,
L은 단일결합, -C(=O)-, -C(=O)-NR1-, -C(=O)-NR2-(CR3R4)a-, 또는 -S(=O)2-NR5-이고,
B는 치환 또는 비치환된 카보사이클릭 환; 또는 치환 또는 비치환된 헤테로사이클릭 환이고,
R1 내지 R5는 각각 독립적으로 수소, 또는 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알킬기이고,
a는 1 내지 5의 정수이다.
본 발명에 따른 화학식 1의 화합물은 신규한 화합물로서, 오토탁신에 대한 매우 높은 억제 활성으로 인해 리소포스파티드산의 생성을 저해하므로, 오토탁신에 의해 매개되는 질환, 특히 신장 질환, 간 질환, 염증성 질환, 신경계 질환, 섬유성 질병 및 급성 또는 만성 장기 이식 거부반응의 치료제 및 예방제로 유용하다.
본 발명의 일실시예에 따른 화합물에 있어서, 상기 A는 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 치환 또는 비치환된 5원 내지 6원의 헤테로아릴 환; 트리아졸기를 포함하는 치환 또는 비치환된 9원 내지 10원의 바이사이클릭 헤테로사이클릭 환; 또는 옥사졸리디논기를 포함하는 치환 또는 비치환된 9원 내지 10원의 바이사이클릭 헤테로사이클릭 환인 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 따른 화합물에 있어서, 상기 A는 치환 또는 비치환된 피리딘기, 치환 또는 비치환된 티아졸기, 치환 또는 비치환된 벤족사졸론기, 치환 또는 비치환된 벤조트리아졸기, 치환 또는 비치환된 테트라하이드로벤조트리아졸기, 치환 또는 비치환된 트리아졸로피리딘기 또는 치환 또는 비치환된 테트라하이드로트리아졸로피리딘기일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 따른 화합물에 있어서, 상기 A는 하기 구조에서 선택되는 것일 수 있다.
상기 구조들에서, 상기 Ra는 수소, R6-S(=O)2-NH-, R6-S(=O)2-CH2- 또는 테트라졸일기(
Figure pat00009
)이고, Rb는 할로겐, 또는 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알콕시기이고, R6는 히드록시기, 또는 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알킬기이고, d는 0 내지 6의 정수이고, e는 0 내지 3의 정수이다.
본 발명의 일실시예에 따른 화합물에 있어서, 상기 A는 하기 구조에서 선택되는 것일 수 있다.
상기 구조들에서, 상기 Rb는 할로겐, 또는 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알콕시기이고, e는 0 내지 1의 정수이다.
본 발명의 일실시예에 따른 화합물에 있어서, 상기 L은 하기 구조에서 선택되는 것일 수 있다.
상기 구조들에서, 상기 R3 및 R4는 각각 독립적으로 수소, 또는 치환 또는 비치환된 C1-C5의 알킬기이다.
본 발명의 일실시예에 따른 화합물에 있어서, 상기 B는 치환 또는 비치환된 C6-C10 카보사이클릭 환; 또는 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 치환 또는 비치환된 5원 내지 11원의 모노- 또는 바이- 헤테로사이클릭 환인 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 따른 화합물에 있어서, 상기 B는 치환 또는 비치환된 C6-C10의 아릴렌; 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 치환 또는 비치환된 5원 내지 6원의 헤테로아릴렌; 또는 이소옥사졸기를 포함하는 치환 또는 비치환된 8원 내지 11원의 스피로 사이클릭 환인 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 따른 화합물에 있어서, 상기 B는 치환 또는 비치환된 페닐렌, 치환 또는 비치환된 피리도닐렌, 치환 또는 비치환된 이소옥사졸릴렌, 치환 또는 비치환된 피라졸릴렌, 치환 또는 비치환된 티아졸릴렌 또는 치환 또는 비치환된 티아디아졸릴렌인 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 따른 화합물에 있어서, 상기 B는 하기 구조에서 선택되는 것일 수 있다.
상기 구조들에서, 상기 Rc 및 Rc1 내지 Rc6은 각각 독립적으로 수소, 할로겐기, 히드록시기, 카복실기, 치환 또는 비치환된 C1-C10의 일킬기, 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알콕시기, -NR7R8 또는 -C(=O)OR9이되, 상기 R7 및 R8는 서로 연결되어 포화 단환고리를 형성할 수 있고, 상기 형성된 고리는 질소 또는 산소로부터 선택되는 헤테로원자를 하나 이상 포함할 수 있으며, 히드록시기 및 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알킬기로부터 선택되는 하나 이상의 치환체로 더 치환될 수 있고, R9는 수소, 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알킬기 또는 치환 또는 비치환된 C3-C10의 사이클로알킬기이고, f는 0 내지 4의 정수이고, g는 0 내지 2의 정수이고, h는 0 내지 3의 정수이고, s 및 t는 서로 같거나 상이하고, 각각 독립적으로 0 내지 4의 정수이고, 이때 s 및 t의 합은 2 내지 5이다.
본 발명의 일실시예에 따른 화합물에 있어서, 상기 B는 하기 구조에서 선택되는 것일 수 있다.
상기 구조들에서, 상기 Rc는 수소, 할로겐기, 히드록시기, 카복실기, 치환 또는 비치환된 C1-C10의 일킬기, 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알콕시기, -NR7R8 또는 -C(=O)OR9이되, 상기 R7 및 R8는 서로 연결되어 포화 단환고리를 형성할 수 있고, 상기 형성된 고리는 질소 또는 산소로부터 선택되는 헤테로원자를 하나 이상 포함할 수 있으며, R9는 수소 또는 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알킬기이고, f는 0 내지 4의 정수이다.
본 발명의 일실시예에 따른 화합물에 있어서, 상기 화합물은 구체적으로 하기 표 1의 구조로부터 선택될 수 있으며, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 화학식 1의 화합물은 생화학적 및 약리학적 시험 결과 오토탁신에 대한 우수한 저해활성을 나타냄과 동시에 리소포스파티드산의 농도를 낮추어 오토탁신의 활성화 또는 리소포스파티드산의 농도 증가에 의한 병태 또는 질환의 치료 및 예방 효과를 나타낼 수 있다.
본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 생체내 흡수를 증진시키거나 용해도를 증가시키기 위하여 수화물, 용매화물 및 약제학적으로 허용되는 염의 형태로 만들어 사용할 수 있으므로, 상기의 수화물, 용매화물 및 약제학적으로 허용되는 염 역시 본 발명의 범위에 속한다. 또한, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 키랄 탄소를 갖고 있어서, 그의 입체이성질체가 존재하며, 이러한 입체이성질체 역시 본 발명의 범주 내에 포함된다.
용어 "약제학적으로 허용되는 염"은, 화합물이 투여되는 유기체에 심각한 자극을 유발하지 않고 화합물의 생물학적 활성과 물성들을 손상시키지 않는 화합물의 제형을 의미한다. 용어 "수화물", "용매화물", "이성질체" 역시 상기와 같은 의미를 가진다. 상기 약제학적 염은, 약제학적으로 허용되는 음이온을 함유하는 무독성 산부가염을 형성하는 산, 예를 들어, 염산, 황산, 질산, 인산, 브롬화수고산, 요드화수소산 등과 같은 무기산, 타타르산, 포름산, 시트르산, 아세트산, 트리클로로아세트산, 트리플로로아세트산, 글루콘산, 벤조산, 락트산, 푸마르산, 말레인산, 살리신산 등과 같은 유기 카본산, 메탄설폰산, 에탄술폰산, 벤젠설폰산, p-톨루엔설폰산 등과 같은 설폰산 등에 의해 형성된 산부가염이 포함된다. 예를 들어, 약제학적으로 허용되는 카르복실산 염에는, 리튬, 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘 등에 의해 형성된 금속염 또는 알칼리 토금속 염, 라이신, 아르지닌, 구아니딘 등의 아미노산 염, 디시클로헥실아민, N-메틸-D-글루카민, 트리스(히드록시메틸)메틸아민, 디에탄올아민, 콜린 및 트리에틸아민 등과 같은 유기염 등이 포함된다. 본 발명에 따른 화학식 1의 화합물은 통상적인 방법에 의해 그것의 염으로 전환시킬 수도 있다.
용어 "수화물(hydrate)"은 비공유적 분자간력(non-covalent intermolecular force)에 의해 결합된 화학양론적(stoichiometric) 또는 비화학양론적(non-stoichiometric) 량의 물을 포함하고 있는 본 발명의 화합물 또는 그것의 염을 의미한다.
용어 "용매화물(solvate)"은 비공유적 분자간력에 의해 결합된 화학양론적 또는 비화학양론적 양의 용매를 포함하고 있는 본 발명의 화합물 또는 그것의 염을 의미한다. 그에 관한 바람직한 용매들로는 휘발성, 비독성, 및/또는 인간에게 투여되기에 적합한 용매들이 있다.
용어 "이성질체(isomer)"는 동일한 화학식 또는 분자식을 가지지만 구조적 또는 입체적으로 다른 본 발명의 화합물 또는 그것의 염을 의미한다. 이러한 이성질체에는 호변 이성질체(tautomer) 등의 구조 이성질체와, 비대칭 탄소 중심을 가지는 R 또는 S 이성질체, 기하이성질체(트랜스, 시스) 등의 입체 이성질체가 모두 포함된다. 이들 모든 이성질체 및 그것의 혼합물들 역시 본 발명의 범위에 포함된다.
기타 용어들은 본 발명이 속하는 분야에서 통상적으로 이해되는 의미로서 해석될 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 화학식 1의 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 오토탁신 저해제 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 화학식 1의 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 오토탁신 활성과 관련된 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공한다.
상기한 바와 같이, 화학식 1의 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 오토탁신에 대한 높은 억제 활성을 나타냄과 동시에 리소포스파티드산의 생성을 저해하므로, 이들을 유효성분으로 포함하는 약제학적 조성물은 오토탁신에 의해 매개되는 질환, 예를 들어 심혈관 질환, 암, 비만, 당뇨병, 급성 신부전, 만성 신장병, 당뇨병성 신증, 급성 신장 이식 거부반응, 만성 동종이식 신증, 간 경화증, 간 출혈, 소양증, 비알코올성 지방간염, 급성 및 만성 간 이식 거부반응, 관절염, 아토피 피부염, 천식, 신경성 동통, 정신 분열증, 신경세포염증, 말초신경 신경장애, 자율신경 신경장애, 전신병, 혈관염, 유육종증, 과민성 폐렴, 폐포 단백질증, 랑게르한스 세포 육아종증, 림프관평활근종증, 방사선 유발 섬유증, 규폐증, 석면 유도된 폐 섬유증, 급성 호흡곤란 증후군(ARDS), 심근 및 혈관 섬유증, 신장 섬유증, 간 섬유증, 폐 섬유증, 피부 섬유증, 경피증, 포낭성 복막염, 신장 간질성 섬유증, 사구체 경화증, 비알코올성 간 지방증, 간 섬유증, 간 경화증, 특발성 폐 섬유증, 증식성 및 비증식성 망막증, 건조 및 습한 연령 관련 황반 변성(AMD), 황반 부종, 중추 동맥/정맥 폐쇄, 외상성 손상, 녹내장, 담즙울체성 형태의 만성소양증 및 급성 또는 만성 장기 이식 거부반응에 대한 효율적인 예방 및 치료제로 부작용없이 유용하게 사용할 수 있다.
심혈관 질환은 비제한적으로 급성 관동맥 증후군, 관동맥성 심장병, 심근 경색, 동맥 및 폐 고혈압, 심장 부정맥, 예컨대 심박 세동, 뇌졸중 및 다른 혈관 손상을 포함한다.
암은 비제한적으로 유방암, 난소암, 폐암, 전립선암, 중피종, 신경교종, 간암종, 위암 등을 포함한다.
대사성 질환은 비제한적으로 비만 및 당뇨병을 포함한다.
신장 질환은 비제한적으로 급성 신부전, 및 단백뇨를 동반하거나 동반하지 않는 만성 신장병(말기 신장병 포함(ESRD))을 포함한다. 보다 상세히, 신장 질환은 감소된 크레아니틴 청소율 및 감소된 사구체 여과율, 미세알부민뇨, 알부민뇨 및 단백뇨, 유의한 세포과다를 갖거나 갖지 않는 망상 혈관간 기질의 팽창을 갖는 사구체 경화증(특히 당뇨병성 신장증 및 아밀로이드증), 사구체 모세관의 초점 혈전증(특히 혈전성 미세혈관증), 전반적인 섬유성 괴사, 허혈성 병변, 악성 신장 경화증(예컨대, 허혈성 수축, 감소된 신장 혈류량 및 신장 동맥질환), 모세혈관 내(내피 및 혈관사이) 및/또는 모세혈관 외 세포(반월체)의 부종 및 증식, 예컨대 사구체 신염 개체, 초점성 분절 사구체 경화증, IgA 신증, 혈관염/전신병 뿐만 아니라 급성 및 만성 신장 이식 거부반응을 포함한다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 신장 질환은 급성 신부전, 만성 신장병, 당뇨병성 신증, 급성 신장 이식 거부반응 및 만성 동종이식 신증으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
간 질환은 비제한적으로 간 경화증, 간 출혈, 담즙울체성 간 질환, 예컨대 소양증, 비알코올성 지방간염 및 급성 및 만성 간 이식 거부반응을 포함한다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 간 질환은 급성 및 만성 신장 이식 거부반응이다.
염증성 질환은 비제한적으로 아토피 피부염, 관절염, 골관절염, 다발성 경화증, 전신 홍반성 낭창 뿐만 아니라 염증성 기도 질병, 예컨대 특발성 폐 섬유증(IPF), 만성 폐쇄성 폐 질환(COPD) 또는 만성 기관지 천식을 포함한다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 염증성 질환은 관절염, 아토피 피부염 및 천식으로부터 선택된다.
신경계 질환은 비제한적으로 신경성 동통, 정신 분열증, 신경세포염증(예컨대, 성상교세포증), 말초 및/또는 자율신경 (당뇨병성) 신경장애 등을 포함한다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 신경계 질환은 신경성 통증이다.
호흡계 질환은 비제한적으로 상이한 병인의 다른 미만성 조직질실성 폐 질병, 예컨대 의원성 약물-유도 섬유증, 직업적 및/또는 환경적 유도된 섬유증, 전신병 및 혈관염, 육아종성 질병(유육종증, 과민성 폐렴), 콜라겐 혈관 질병, 폐포 단백질증, 랑게르한스 세포 육아종증, 림프관평활근종증, 유전병(헤르만스키-푸드락(Hermansky-Pudlak) 증후군, 결정성 결화증, 신경섬유종증, 대사 축적병, 가족성 간질성 폐 질병), 방사선 유발 섬유증, 규폐증, 석면 유도된 폐 섬유증 또는 급성 호흡곤란 증후군(ARDS)을 포함한다.
섬유성 질병은 비제한적으로 심근 및 혈관 섬유증, 신장 섬유증, 간 섬유증, 폐 섬유증, 피부 섬유증, 경피증 및 포낭성 복막염을 포함한다. 또한, 상기 섬유성 질병은 신장 간질성 섬유증 또는 사구체 경화증이거나, 비알코올성 간 지방증, 간 섬유증 또는 간 경화증이거나, 특발성 폐 섬유증이다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 섬유성 질병은 포낭성 복막염, 특발성 폐 섬유증, 비알코올성 간 지방증, 간 섬유증 및 간 경화증으로부터 선택된다.
안구 질환은 비제한적으로 증식성 및 비증식성(당뇨병성) 망막증, 건조 및 습한 연령 관련 황반 변성(AMD), 황반 부종, 중추 동맥/정맥 폐쇄, 외상성 손상, 녹내장 등을 포함한다.
용어 "약제 조성물(pharmaceutical composition)"은 본 발명의 화합물과 희석제 또는 담체와 같은 다른 화학 성분들의 혼합물을 의미한다. 약제 조성물은 생물체내로 화합물의 투여를 용이하게 한다. 화합물을 투여하는 다양한 기술들이 존재하며, 여기에는 경구, 주사, 에어로졸, 비경구, 및 국소 투여 등이 포함되지만, 이들만으로 한정되는 것은 아니다. 약제 조성물은 염산, 브롬산, 황산, 질산, 인산, 메탄술폰산, p-톨루엔술폰산, 살리실산 등과 같은 산 화합물들을 반응시켜서 얻어질 수도 있다.
용어 "약리학적 유효량(therapeutically effective amount)"은 투여되는 화합물의 양이 치료하는 장애의 하나 또는 그 이상의 증상을 어느 정도 경감 또는 줄이거나, 예방을 요하는 질병의 임상학적 마커 또는 증상의 개시를 지연시키는데 유효한 활성성분의 량을 의미한다. 따라서, 약리학적 유효량은, (1) 질환의 진행 속도를 역전시키는 효과, (2) 질환의 그 이상의 진행을 어느 정도 금지시키는 효과, 및/또는 (3) 질환과 관련된 하나 또는 그 이상의 증상을 어느 정도 경감(바람직하게는, 제거)하는 효과를 가지는 량을 의미한다. 약리학적 유효량은 치료를 요하는 질병에 대한 공지된 생채내(in vivo) 및 생체외(in vitro) 모델 시스템에서 화합물을 실험함으로써 경험적으로 결정될 수 있다.
용어 "담체(carrier)"는 세포 또는 조직내로의 화합물의 부가를 용이하게 하는 화합물로 정의된다. 예를 들어, 디메틸 술폭사이드(DMSO)는 생물체의 세포 또는 조직내로의 많은 유기 화합물들의 투입을 용이하게 하는 통상 사용되는 담체이다.
용어 "희석제(diluent)"는 대상 화합물의 생물학적 활성 형태를 안정화시킬 뿐만 아니라, 화합물을 용해시키게되는 물에서 희석되는 화합물로 정의된다. 버퍼 용액에 용해되어 있는 염은 당해 분야에서 희석제로 사용된다. 통상 사용되는 버퍼 용액은 포스페이트 버퍼 식염수이며, 이는 인간 용액의 염 상태를 모방하고 있기 때문이다. 버퍼 염은 낮은 농도에서 용액의 pH를 제어할 수 있기 때문에, 버퍼 희석제가 화합물의 생물학적 활성을 변형하는 일은 드물다.
여기에 사용된 화합물들은 인간 환자에게 그 자체로서, 또는 결합 요법에서와 같이 다른 활성 성분들과 함께 또는 적당한 담체나 부형제와 함께 혼합된 약제 조성물로서, 투여될 수 있다. 본 응용에서의 화합물의 제형 및 투여에 관한 기술은 "Remington's Pharmaceutical Sciences," Mack Publishing Co., Easton, PA, 18th　edition, 1990에서 확인할 수 있다.
본 발명의 약제 조성물은, 예를 들어, 통상적인 혼합, 용해, 과립화, 당제-제조, 분말화, 에멀션화, 캡슐화, 트래핑과 또는 동결건조 과정들의 수단에 의해, 공지 방식으로 제조될 수 있다.
따라서, 본 발명에 따른 사용을 위한 약제 조성물은, 약제학적으로 사용될 수 있는 제형으로의 활성 화합물의 처리를 용이하게 하는 부형제들 또는 보조제들을 포함하는 것으로 구성되어 있는 하나 또는 그 이상의 약리학적으로 허용되는 담체를 사용하여 통상적인 방법으로 제조될 수도 있다. 적합한 제형은 선택된 투여 루트에 따라 좌우된다. 공지 기술들, 담체 및 부형제들 중의 어느 것이라도 적합하게, 그리고 당해 분야, 예를 들어, 앞서 설명한 Remingston's Pharmaceutical Sciences에서 이해되는 바와 같이 사용될 수 있다. 본 발명에서는 화학식 1의 화합물을 목적하는 바에 따라 주사용 제제 및 경구용 제제 등으로 제형화될 수 있다.
주사를 위해서, 본 발명의 성분들은 액상 용액으로, 바람직하게는 Hank 용액, Ringer 용액, 또는 생리 식염수버포와 같은 약리학적으로 맞는 버퍼로 제형될 수 있다. 점막 투과 투여를 위해서, 통과할 배리어에 적합한 비침투성제가 제형에 사용된다. 그러한 비침투성제들은 당업계에 일반적으로 공지되어 있다.
경구 투여를 위해서, 화합물들은 당업계에 공지된 약리학적으로 허용되는 담체들을 활성 화합물들과 조합함으로써 용이하게 제형될 수 있다. 이러한 담체들은 본 발명의 화합물들이 정제, 알약, 산제, 입제, 당제, 캡슐, 액체, 겔, 시럽, 슬러리, 현탁액 등으로 제형화될 수 있도록 하여 준다. 바람직하게는 캅셀제, 정제, 환제, 산제 및 입제가 가능하고, 특히 캅셀제와 정제가 유용하다. 정제 및 환제는 장피제로 제조하는 것이 바람직하다. 경구 사용을 위한 약제 준비는 본 발명의 하나 또는 둘 이상의 화합물들과 하나 또는 둘 이상의 부형제를 혼합하고, 경우에 따라서는 이러한 혼합물을 분쇄하고, 필요하다면 적절한 보조제를 투과한 이후 과립의 혼합물을 처리하여 정제 또는 당체 코어를 얻을 수 있다. 적절한 부형제들은 락토스, 수크로즈, 만니톨, 또는 소르비톨과 같은 필러; 옥수수 녹말, 밀 녹말, 쌀 녹말, 감자 녹말, 겔라틴, 검 트래거켄스, 메틸 셀룰로우즈, 히드록시프로필메틸-셀룰로우즈, 소듐 카르복시메틸 셀룰로우즈, 및/또는 폴리비닐피롤리돈(PVP)와 같은 셀룰루오즈계 물질 등이다. 필요하다면, 가교 폴리비닐 피롤리돈, 우뭇가사리, 또는 알긴산 또는 알긴산 나트륨과 같은 그것의 염 등의 디스인터그레이팅 에이전트와 마그네슘 스테아레이트와 같은 윤활제, 결합제 등과 같은 담체가 첨가될 수도 있다.
경구에 사용될 수 있는 제약 준비물은, 겔라틴 및 글리콜 또는 소르비톨과 같은 가소제로 만들어진 부드러운 밀봉 캡슐뿐만 아니라, 겔라틴으로 만들어진 밀어 고정하는 캡슐을 포함할 수도 있다. 밀어 고정하는 캡슐은 락토오스와 같은 필러, 녹말과 같은 바인더, 및/또는 활석 또는 마그네슘 스테아레이트와 같은 활제와의 혼합물로서, 활성 성분들을 포함할 수도 있다. 연질 캡슐에서, 활성 화합물들은 지방산, 액체 파라핀, 또는 액체 폴리에틸렌 글리콜과 같은 적합한 용체에 용해 또는 분산될 수도 있다. 또한, 안정화제가 포함될 수도 있다. 경구투여를 위한 모든 조제들은 그러한 투여에 적합한 함량으로 되어 있어야 한다.
화합물들은, 주사에 의해, 예를 들어, 큰 환약 주사나 연속적인 주입에 의해, 비경구 투입용으로 제형화될 수도 있다. 주사용 제형은, 예를 들어, 방부제를 부가한 앰플 또는 멀티-도스 용기로서 단위 용량 형태로 제공될 수도 있다. 조성물은 유성 또는 액상 비히클상의 현탁액, 용액, 에멀션과 같은 형태를 취할 수도 있으며, 현탁제, 안정화제 및/또는 분산제와 같은 제형용 성분들을 포함할 수도 있다.
또한, 예를 들어, 발열물질이 제거되고 무균인 물로, 사용 전에 녹여 사용하는 건조 분말의 형태일 수도 있다.
화합물들은, 예를 들어, 코코아 버터나 다른 글리세라이드와 같은 통상적인 좌약 기재를 포함하고 있는 좌약 또는 정체관장과 같은 직장 투여 조성물로 제형될 수도 있다.
본 발명에서 사용에 적합한 약제학적 조성물에는, 활성 성분들이 그것의 의도된 목적을 달성하기에 유효한 량으로 함유되어 있는 조성물이 포함된다. 더욱 구체적으로, 치료적 유효량은 치료될 객체의 생존을 연장하거나, 질환의 증상을 방지, 경감 또는 완화시키는데 유효한 화합물의 량을 의미한다. 치료적 유효량의 결정은, 특히, 여기에 제공된 상세한 개시 내용 측면에서, 당업자의 능력 범위 내에 있다.
단위 용량 형태로 제형화하는 경우, 활성성분으로서 화학식 1의 화합물은 약 0.1 내지 1,000 mg의 단위 용량으로 함유되는 것이 바람직하다. 화학식 1의 화합물의 투여량은 환자의 체중, 나이 및 질병의 특수한 성질과 심각성과 같은 요인에 따라 의사의 처방에 따른다. 그러나, 성인 치료에 필요한 투여량은 투여의 빈도와 강도에 따라 하루에 1회 내지 3회 투여할 수 있으며 일회 투여량은 약 1 내지 1,000 mg 범위가 보통이다. 성인에게 근육내 또는 정맥내 투여시 일회 투여량으로 분리하여 하루에 1회 내지 3회 투여할 수 있으며 일회 투여량은 보통 약 1 내지 1,000 mg의 투여량이면 충분할 것이나, 일부 환자의 경우 더 높은 일일 투여량이 바람직할 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 오토탁신의 활성을 저해한다. 본 발명에 따르면, 상기 화학식 1의 화합물은 리소포스파티딜콜린의 리소포스파티드산으로의 전환의 근본적인 조절제인 오토탁신의 활성을 효율적으로 억제한다. 본 발명에서 용어 “저해”는 대상 물질의 생체 내 발현량 또는 생물학적 활성을 유의한 수준으로 감소시키는 것을 의미한다.
이하, 바람직한 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하기로 한다. 다만, 이는 본 발명의 예시로 제시되는 것으로 어떠한 의미로도 이에 의해 본 발명의 권리범위가 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 권리범위는 후술하는 청구범위에 따라 정의될 뿐이다.
제조예
[제조예 1] 중간체 A의 제조
(제조예 A-1) 5-Bromo-N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)pyrimidin-2-amine (중간체 A-1)의 제조
Figure pat00020
5-브로모-2-클로로피리미딘 (5.0 g, 25.8 mmol), 2-아미노인단 (4.0 mL, 31.0 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (11.3 mL, 64.6 mmol)을 에탄올(15 mL)에 용해시키고 80 ℃에서 4 시간 교반하였다. 반응 종결 후, 실온까지 냉각시켜 생성된 고체를 여과하고 에탄올(40 mL)로 세정한 후 건조하여 베이지색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (6.76 g, 90%)
MS m/z: 290 [M+1]+
1H NMR (CDCl3, 400MHz), δ ppm: 8.27 (s, 2H), 7.24-7.18 (m, 4H), 5.45 (d, 1H), 4.77-4.70 (m, 1H), 3.38 (dd, 2H), 2.87 (dd, 2H).
(제조예 A-2) N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)-5-iodopyrimidin-2-amine (중간체 A-2)의 제조
Figure pat00021
제조예 A-1과 같은 방법으로 5-브로모-2-클로로피리미딘 대신 2-클로로-5-아이오도피리미딘 (5.0 g, 20.8 mmol)을 사용하여 베이지색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (6.6 g, 95%)
MS m/z: 338 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.45 (s, 2H), 7.73 (m, 1H), 7.21-7.15 (m, 4H), 4.54 (m, 1H), 3.25-3.22 (m, 2H), 2.90-2.86 (m, 2H).
(제조예 A-3) N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)-5-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)pyrimidin-2-amine (중간체 A-3)의 제조
Figure pat00022
중간체 A-1 (6.72 g, 23.16 mmol), 비스(피나콜레토)디보론 (7.65 g, 30.11 mmol), [1,1’-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II) (1.89 g, 2.32 mmol), 아세트산칼륨 (6.82 g, 69.48 mmol)의 혼합물에 1,4-디옥산 (55 mL)을 가하고, 반응혼합물을 질소 분위기 하, 100 ℃에서 18 시간 교반하였다. 반응 종결 후, 실온까지 냉각시킨 후 불용물을 셀라이트를 통해 제거하고 아세트산에틸로 세정한 여과액에 증류수 (150 mL)를 가하고 아세트산에틸(50 mL)로 3 회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸 : n-헥산 = 15 : 85)로 정제하여 흰색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (5.38 g, 69%)
MS m/z: 338 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.44 (s, 2H), 7.90 (d, 1H), 7.21-7.12 (m, 4H), 4.68-4.63 (m, 1H), 3.24 (dd, 2H), 2.88 (dd, 2H), 1.27 (s, 12H).
(제조예 A-4) Ethyl 2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidine-5-carboxylate (중간체 A-4)의 제조
Figure pat00023
에틸 2-클로로피리미딘-5-카복실레이트(2.0 g, 10.7 mmol)와 2-아미노인단(1.7 mL, 12.9 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(4.7 mL, 26.8 mmol)을 에탄올(6 mL)에 용해시키고, 80 ℃에서 18 시간 교반하였다. 반응 종결 후, 실온으로 식혀 생성된 고체를 여과하고 에탄올로 씻어 흰색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (2.54 g, 84%)
MS m/z: 284 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.76 (d, 2H), 8.46 (s, 1H), 7.22-7.15 (m, 4H), 4.70 (m, 1H), 4.27 (q, 2H), 3.29-3.25 (m, 2H), 2.95-2.91 (m, 2H), 1.29 (t, 3H).
(제조예 A-5) 3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-3-oxopropanenitrile (중간체 A-5)의 제조
Figure pat00024
무수 톨루엔(15 mL)에 무수 아세토니트릴(0.74　mL, 13.12 mmol)을 가한 후 영하 78 ℃로 냉각하여 n-부틸리튬 2M 헥산 용액(5.6 mL, 14.1 mmol)을 천천히 적가하고 20 분간 교반하였다.　반응 혼합물에 무수 톨루엔(15 mL)에 용해시킨 중간체 A-4(1.00 g, 3.53 mmol)을 적가하고 천천히 온도를 높여 실온에서 2 시간 교반하였다. 1N 염화수소 수용액을 가하여 반응을 종결시키고, 아세트산에틸(10 mL)로 3 회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (아세트산에틸 : n-헥산 = 0 : 10 → 2 : 3)로 정제하여 황색 고체로 표제화합물을 얻었다.(0.67 g, 68 %)
MS m/z: 279 [M+1]+
1H NMR (CDCl3, 400MHz), δ ppm: 8.87 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 7.27-7.21 (m, 4H), 6.03 (s, 1H), 4.93 (s, 1H), 3.90 (s, 2H), 3.43 (d, 2H), 2.93 (d, 2H).
(제조예 A-6) 2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidine-5-carbonitrile (중간체 A-6)의 제조
Figure pat00025
중간체 A-1(2.5 g, 8.6 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(41 mL)에 용해시키고, 시안화구리 (1.0 g, 11.20 mmol)을 첨가하여 180 ℃에서 18 시간 교반하였다. 반응 종결 후, 아세트산에틸 (40mL)를 가해 희석하고 10% 시안화나트륨 수용액(50 mL)으로 두 번 세정하였다. 유기층을 모아 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸 : n-헥산 = 2 : 8)로 정제하여 흰색의 고체로 표제화합물을 얻었다.(1.5 g, 74%)
MS m/z: 237 [M+1]+
1H NMR (CDCl3, 400MHz), δ ppm: 8.56 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.26-7.18 (m, 4H), 6.19 (d, 1H), 4.90-4.82 (m, 1H), 3.43-3.38 (m, 2H), 2.92-2.85 (m, 2H).
[제조예 2] 중간체 B의 제조
(제조예 B-1) 4,5,6,7-Tetrahydro-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-c]pyridine hydrochloride (중간체 B-1)의 제조
Figure pat00026
(단계 1) 1H-[1,2,3]triazolo[4,5-c]pyridine의 제조
3,4-디아미노피리딘(2.0g, 48 mmol)을 2N 염화수소 수용액(25mL)에 녹인 후, 0 ℃로 냉각시키고, 아질산나트륨(1.9g, 27 mmol)을 증류수(3mL)에 녹여 천천히 첨가하고, 1 시간 동안 교반하였다. 생성된 고체를 여과하고 증류수로 세정하여 황색 고체로 표제 화합물을 얻었다. (1.96g, 89%)
MS m/z: 121 [M+1]+.
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 9.47 (s, 1H), 8.49 (d, 1H), 7.89 (d, 1H).
(단계 2) 4,5,6,7-Tetrahydro-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-c]pyridine hydrochloride의 제조
상기 (단계 1)에서 제조한 화합물(1.0 g, 8.3 mmol)을 메탄올(60 mL)에 녹인 후 Pd/C(10 wt%, 2.0 g) 과 진한 염산(1 mL)을 가하고 수소 가압 하에 (75 psi) 7 시간 동안 반응시켰다. 불용물을 셀라이트를 통해 제거하고 메탄올로 세정한 여과액을 감압 하에서 농축하여 황색 고체로 표제화합물을 정량적으로 얻었다. (1.38 g)
MS m/z: 125 [M+1]+.
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 9.54(s, 2H), 4.34(s, 2H), 2.98(t, 2H).
(제조예 B-2) (S)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxylic acid (중간체 B-2)의 제조
Figure pat00027
(단계 1) 1-azido-4-nitrobenzene의 제조
p-톨루엔설폰산(124 g, 651 mmol)과 4-니트로아닐린 (10.0 g, 72.4 mmol)을 증류수(800 mL)에 녹여 실온에서 30 분간 교반한 후, 아질산나트륨(45.0 g, 651 mmol)을 1 시간 동안 천천히 첨가하였다. 출발물질이 다 사라진 것을 TLC로 확인한 후 아자이드화나트륨(7.53 g, 115 mmol)을 반응 혼합물에 1 시간 동안 천천히 첨가하고 실온에서 교반하였다. 반응 종결 후, 생성된 고체를 여과하고 증류수(500 mL)로 세정하여 황색 고체로 표제화합물을 얻었다. (13.0 g, 90%)
MS m/z: 165 [M+1]+
(단계 2) Ethyl (S)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxylate, Ethyl (R)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxylate의 제조
상기 (단계 1)에서 제조한 화합물(11.9 g, 72.4 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(100 mL)에 녹인 후, 에틸 4-옥소사이클로-1-카복실레이트(9.5 g, 55.7 mmol)와 아세트산암모늄(21.5 g, 278 mmol)을 순차적으로 첨가한 후, 80 ℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시킨 후 증류수를 200 mL 가하여 반응을 종료시키고 아세트산에틸 (150 mL)로 2회 추출하였다. 유기층을 포화 식염수(100 mL)로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (아세트산에틸 : 석유에테르 = 5 : 95 → 10 : 90)로 정제하여 붉은 색의 오일로 표제화합물의 라세미 혼합물을 얻었다. (7.50 g, 71%)
라세미 혼합물 (17.0 g)을 SFC로 정제하여 (S)-이성질체 (peak1, Rt=4.122, 8.0 g, ee ＞99%)와 (R)-이성질체 (peak 2, Rt=4.347, 8.1 g, ee ＞99%)을 얻었다 (ChiralPak IC, 250 × 50 mm I.D. 10 ㎛); mobile phase A:CO2, B: 0.1% NH4OH/EtOH; gradient: 5%-40% B; Flow rate: 2.5 mL/min)
MS m/z: 196 [M+1]+
(S)-이성질체 1H NMR (CDCl3, 500MHz), δ ppm: 4.27 - 4.11 (m, 2H), 3.13 - 3.06 (m, 1H), 3.02 - 2.89 (m, 2H), 2.85 - 2.72 (m, 2H), 2.33 - 2.24 (m, 1H), 1.97 (dtd, 1H), 1.28 (t, 3H).
(R)-이성질체 1H NMR (CDCl3, 500MHz), δ ppm: 4.20 (q, 2H), 3.13 - 3.06 (m, 1H), 3.02 - 2.89 (m, 2H), 2.86 - 2.71 (m, 2H), 2.36 - 2.24 (m, 1H), 1.98 (dtd, 1H), 1.28 (t, 3H).
(단계 3) (S)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxylic acid의 제조
상기 (단계 3)에서 제조한 (S)-이성질체 (8.0 g, 40.9 mmol)을 메탄올(50 mL)과 증류수(50 mL)의 혼합용매에 녹인 후, 수산화나트륨(3.28 g, 81.9 mmol)을 첨가하여 45 ℃에서 6 시간 동안 교반하였다. 황색의 현탁액을 감압 하에 농축한 후 1N 염화수소 수용액을 가하여 액성이 pH 5가 되도록 하고 다시 농축하였다. 잔류물에 염화메틸렌/메탄올 (1/1, 40 mL)을 가하여 흰색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (6.0 g, 87%, ee =98.96%)
MS m/z: 169 [M+1]+
1H NMR (DMSO- d6, 400MHz), δ ppm: 2.86 - 2.64 (m, 3H), 2.62 - 2.52 (m, 2H), 2.14 - 2.04 (m, 1H), 1.81 - 1.67 (m, 1H).
(제조예 B-3) (R)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxylic acid (중간체 B-3)의 제조
Figure pat00028
제조예 B-2 (단계 2)에서 제조한 (R)-이성질체(8.1 g, 41.2 mmol)를 사용하여 제조예 B-2 (단계 3)과 같은 방법으로 흰색 고체의 표제화합물을 얻었다. (6.8 g, 98%, ee =97.98%)
MS m/z: 169 [M+1]+
1H NMR (DMSO- d6, 400MHz), δ ppm: 2.82 - 2.65 (m, 3H), 2.59 - 2.52 (m, 1H), 2.47 - 2.39 (m, 1H), 2.13 - 2.02 (m, 1H), 1.77 - 1.65 (m, 1H).
(제조예 B-4) 6-fluoro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxylic acid (중간체 B-4)의 제조
Figure pat00029
(단계 1) methyl 4-amino-2-fluoro-5-nitrobenzoate의 제조
메틸 2,4-디플루오로-5-나이트로벤조에이트(1.0 g, 4.6 mmol)를 테트라히드로퓨란(9 mL)에 용해시키고, 0 ℃에서 28% 암모니아수(0.9 mL, 12.9 mmol)를 첨가하고 실온에서 40 시간 교반하였다. 반응 종결 후, 용매를 감압 농축하였다. 잔류물에 증류수(30 mL)를 가하여 생성된 황색 고체를 여과하여 감압 하에 건조하여 표제화합물을 얻었다. (0.96 g, 97%)
MS m/z: 215 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.59 (d, 1H), 8.08 (s, 1H), 6.78 (d, 1H), 3.81 (s, 3H).
(단계 2) methyl 4,5-diamino-2-fluorobenzoate의 제조
상기 (단계 1)에서 제조한 화합물(0.96 g, 4.46 mmol)을 메탄올(30 mL)과 아세트산에틸(30 mL) 혼합용매에 녹인 후, Pd/C (10 wt%, 186 mg)을 첨가한 후 1 기압의 수소 하, 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 불용물을 셀라이트를 통해 제거하고 메탄올로 세정한 여과액을 감압 농축하여 갈색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (943 mg)
MS m/z: 185 [M+1]+
1H NMR (CDCl3, 400MHz), δ ppm: 7.30 (m, 1H), 6.40 (dd, 1H), 4.00 (brs, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.15 (brs, 2H).
(단계 3) methyl 6-fluoro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxylate의 제조
상기 (단계 2)에서 제조한 화합물(0.90 g, 4.89 mmol)을 아세트산(7 mL)에 용해시키고, 0 ℃에서 아질산나트륨(0.37 g, 5.38 mmol)을 증류수(1.4 mL)에 녹인 용액을 첨가하여 실온에서 10 분 동안 교반하였다. 용매를 감압 농축하고 남은 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸 : 염화메틸렌 = 20 : 80)로 정제하여 진한 갈색의 고체로 표제화합물을 얻었다.(0.72 g, 75%)
MS m/z: 196 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.54 (d, 1H), 7.85 (d, 1H), 3.90 (s, 3H).
(단계 4) 6-fluoro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxylic acid의 제조
상기 (단계 3)에서 제조한 화합물(0.72 g, 3.69 mmol)을 테트라히드로퓨란/증류수 혼합용매 (1/1, 7 mL)에 용해시키고, 수산화리튬 일수화물(0.77 g, 18.45 mmol)을 첨가하여 실온에서 3 시간 교반하였다. 반응혼합물을 감압 농축하고 1N 염화수소 수용액을 가하여 액상을 pH 2로 맞추고, 아세트산에틸 (50 mL)로 2 회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 여과하였다. 여과액을 감압하에 농축하여 얻은 잔류물에 디에틸 에테르를 가하여 생성된 고체를 여과하고 디에틸 에테르로 세정한 후 건조하여 갈색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.54 g, 81%)
MS m/z: 182 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.50 (d, 1H), 7.81 (d, 1H).
(제조예 B-5) 6-methoxy-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxylic acid (중간체 B-5)의 제조
Figure pat00030
(단계 1) methyl 4,5-diamino-2-methoxybenzoate의 제조
메틸 4-아미노-2-메톡시-5-나이트로벤조에이트(0.5 g, 2.2 mmol)을 아세트산에틸(22 mL)에 용해시키고, Pd/C (10 wt%, 100 mg)을 첨가하여 1 기압의 수소 하, 50 ℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 불용물을 셀라이트를 통해 제거하고 메탄올로 세정한 여과액을 감압 하에 농축하여 갈색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.43 g, 99%)
MS m/z: 197 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 7.02 (s, 1H), 6.24 (s, 1H), 5.35 (s, 2H), 4.24 (brs, 2H), 3.64 (s, 6H).
(단계 2) methyl 6-methoxy-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxylate의 제조
상기 (단계 1)에서 제조한 화합물(0.43 g, 2.18 mmol)을 아세트산(3 mL)에 용해시키고, 0 ℃에서 아질산나트륨(0.16 g, 2.40 mmol)을 증류수(0.6 mL)에 녹인 용액을 첨가하여 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 농축하여 남은 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 염화메틸렌 = 5 : 95)로 정제하여 연한 갈색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.39 g, 86%)
MS m/z: 208 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.24 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.83 (s, 3H).
(단계 3) 6-methoxy-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxylic acid의 제조
상기 (단계 2)에서 제조한 화합물(0.39 g, 1.89 mmol)을 테트라히드로퓨란/메탄올/증류수 혼합용매 (3/2/1, 6 mL)에 용해시키고, 수산화리튬 일수화물(0.55 g, 13.2 mmol)을 첨가하여 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 감압 농축하고 1N 염화수소 수용액을 가하여 액상을 pH 2로 맞추고, 아세트산에틸 (50 mL)로 2 회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 여과하였다. 여과액을 감압하에 농축하여 얻은 고체를 디에틸 에테르로 세정한 후 건조하여 갈색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.32 g, 88%)
MS m/z: 194 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 12.88 (brs, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 3.90 (s, 3H).
(제조예 B-6) 6-(2,2-difluoroethoxy)-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxylic acid (중간체 B-6)의 제조
Figure pat00031
(단계 1) methyl 4-amino-2-fluoro-5-nitrobenzoate의 제조
메틸 2,4-디플루오로-5-니트로벤조에이트(1.0 g, 4.6 mmol)를 테트라히드로퓨란(9 mL)에 용해시키고, 0 ℃에서 28% 암모니아수(0.9 mL)를 적하하고 실온에서 40 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 농축하여 제거한 후 증류수 (50 mL)를 가하여 생성된 고체를 여과하고 증류수로 세정하여 황색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.96 g, 97%)
MS m/z: 215 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.59 (d, 1H), 8.08 (s, 1H), 6.78 (d, 1H), 3.81 (s, 3H).
(단계 2) methyl 4-amino-2-(2,2-difluoroethoxy)-5-nitrobenzoate의 제조
2,2-디플루오로에탄올(0.14 mL, 2.24 mmol)을 테트라히드로퓨란(9 mL)에 용해시키고, 칼륨 터트-부톡사이드(0.25 g, 2.24 mmol)을 첨가하여 실온에서 30 분 교반하였다. 반응혼합물에 상기 (단계 1)에서 제조한 화합물(0.40 g, 1.87 mmol)를 천천히 가하고 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 증류수 (30 mL)를 가하여 반응을 종결시킨 후 아세트산에틸(50 mL)로 3 회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸 : n-헥산 = 40 : 60)로 정제하여 황색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.44 g, 86%)
MS m/z: 277 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.52 (s, 1H), 7.89 (s, 2H), 6.56 (s, 1H), 6.54-6.27 (t, 1H), 4.38-4.32 (m, 2H), 3.75 (s, 3H).
(단계 3) methyl 4,5-diamino-2-(2,2-difluoroethoxy)benzoate의 제조
상기 (단계 2)에서 제조한 화합물(0.44 g, 1.61 mmol)을 아세트산에틸(16 mL)에 용해시키고, Pd/C (10 wt%, 89 mg)을 첨가하여 1 기압의 수소 하, 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후, 불용물을 셀라이트를 통해 제거하고 아세트산에틸로 세정한 여과액을 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸 : n-헥산 = 30 : 70 → 60 : 40)로 정제하여 갈색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.27 g, 67%)
MS m/z: 247 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 7.02 (s, 1H), 6.41-6.14 (m, 2H), 5.39 (s, 2H), 4.40 (s, 2H), 4.12-4.04 (m, 2H), 3.67 (s, 3H).
(단계 4) methyl 6-(2,2-difluoroethoxy)-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxylate의 제조
상기 (단계 3)에서 제조한 화합물(0.27 g, 1.08 mmol)을 아세트산(2 mL)에 용해시키고, 0 ℃에서 아질산나트륨(0.082 g, 1.19 mmol)을 증류수(1 mL)에 녹인 용액을 첨가하여 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후, 용매를 감압 하에 농축하여 제거하고 남은 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 염화메틸렌 = 5 : 95)로 정제하여 연한 갈색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.27 g, 97%)
MS m/z: 258 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.29 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.56-6.28 (t, 1H), 4.52-4.44 (m, 2H), 3.84 (s, 3H).
(단계 5) 6-(2,2-difluoroethoxy)-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxylic acid의 제조
상기 (단계 4)에서 제조한 화합물(0.27 g, 1.05 mmol)을 테트라히드로퓨란/메탄올/증류수 혼합용매 (3/2/1, 2 mL)에 용해시키고, 수산화리튬 일수화물(0.22 g, 5.27 mmol)을 첨가하여 실온에서 7 시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 감압 농축하고, 1N 염화수소 수용액을 가하여 액상을 pH 2로 조정하고, 아세트산에틸 (50 mL)로 2 회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 염화메틸렌으로 세정하여 갈색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.21 g, 83%)
MS m/z: 243 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 12.99 (brs, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 6.56-6.28 (t, 1H), 4.51-4.43 (m, 2H).
(제조예 B-7) 6-(methylsulfonamido)nicotinic acid (중간체 B-7)의 제조
Figure pat00032
메틸 6-아미노피리딘-3-카복실레이트(1.0 g, 6.57 mmol)와 트리에틸아민(1.1 mL, 7.89 mmol)을 염화메틸렌(22 mL)에 용해시키고, 0 ℃에서 염화메탄설포닐(0.6 mL, 7.3 mmol)을 첨가하여 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. TLC로 반응 확인 후, 메탄올(24 mL)와 4N 수산화나트륨 수용액(8 mL)를 첨가하여 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후, 유기 용매를 감압 농축하였다. 1N 염화수소 수용액을 가하여 pH 2가 되도록한 다음, 아세트산에틸로 추출하였다. 유기층을 모아 무수 황산나트륨으로 건조하고 필터한 다음, 용매를 감압 농축하였다. 잔류물을 여과하고 디에틸 에테르로 세정하여 베이지색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.52 g, 37%)
MS m/z: 217 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.72 (s, 1H), 8.18-8.15 (m, 1H), 7.04 (d, 1H), 3.31 (s, 3H).
(제조예 B-8) 2-(methylsulfonamido)isonicotinic acid (중간체 B-8)의 제조
Figure pat00033
제조예 B-7과 같은 방법으로 메틸 6-아미노피리딘-3-카복실레이트 대신 메틸 2-아미노피리딘-4-카복실레이트(2.0 g, 13.15 mmol)를 사용하여 베이지색의 고체로 표제화합물을 얻었다 (1.33 g, 47%).
MS m/z: 217 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.43 (d, 1H), 7.44-7.41 (m, 2H), 3.32 (m, 3H).
(제조예 B-9) 2-(methylsulfonamido)thiazole-4-carboxylic acid (중간체 B-9)의 제조
Figure pat00034
제조예 B-7과 같은 방법으로 메틸 6-아미노피리딘-3-카복실레이트 대신 에틸 2-아미노사이아졸-4-카복실레이트(0.93 g, 5.37 mmol)를 사용하여 흰색 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.14 g, 48%)
MS m/z: 223 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 7.62 (s, 1H), 2.94 (s, 3H).
(제조예 B-10) 6-((methylsulfonyl)methyl)nicotinic acid (중간체 B-10)의 제조
Figure pat00035
(단계 1) methyl 6-(bromomethyl)nicotinate의 제조
메틸 6-(히드록시메틸)니코티네이트(1.5 g, 9.0 mmol)을 클로로포름(38 mL)에 녹인 후,　0 ℃에서　브롬화인(1.0 mL, 10.8 mmol)을　천천히 적하하고 실온에서 3 시간 동안 교반하였다.　탄산나트륨 포화수용액 (20 mL)을 가하여 반응을 종결시키고, 클로로포름(50 mL)으로 3회 추출하였다.　　유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸 : n-헥산 = 30 : 70)로 정제하여 흰색 고체로 표제화합물을 얻었다. (1.5　g, 73%)
MS m/z: 231 [M+1]+
1H NMR (CDCl3, 400MHz), δ ppm: 9.16 (s, 1H), 8.30 (dd, 1H), 7.53 (d, 1H), 4.58 (s, 2H), 3.96 (s, 3H).
(단계 2) 6-((methylsulfonyl)methyl)nicotinic acid의 제조
상기 (단계 1)에서 제조한 화합물(0.3 g, 1.3 mmol)을　N,N-디메틸포름아미드(15 mL)에 녹인 후 메탄설핀산나트륨 (0.27 g, 2.6 mmol)을 첨가하여 120 ℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후, 감압 하에 농축하여 용매를 제거한 후 잔류물을 테트라히드로퓨란(2 mL)에 녹이고　1N 수산화나트륨 수용액(4 mL)를 가하여 70　℃에서 3 시간 동안 교반하였다.　반응 혼합물을 실온까지 식힌 후, 2N 염화수소 수용액을 가하여 액성을 pH 2로 조정하고, 아세트산에틸(30 mL)로 3 회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하여 베이지색 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.20 g, 72%)
MS m/z: 216 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 13.49 (s, 1H), 9.22 - 8.95 (m, 1H), 8.33 (dt,　1H), 7.65 (d, 1H), 4.77 (s, 2H), 3.05 (s, 3H).
(제조예 B-11) 2-((methylsulfonyl)methyl)isonicotinic acid (중간체 B-11)의 제조
Figure pat00036
(단계 1) methyl 2-(hydroxymethyl)isonicotinate의 제조
메틸이소니코티네이트(5.0 g,　36.5 mmol)을 메탄올(50 mL)에 녹인 후, 황산(0.2 mL)을 첨가하고 50 ℃에서 교반 중에 과황산암모늄(15 g, 65.6 mmol) 수용액 (25 mL)을 천천히 가하고, 100 ℃에서 30 분 더 교반하였다.　반응 종결 후, 실온까지 냉각하여 탄산나트륨 포화수용액(30 mL)으로 중화한 후　아세트산에틸 (50 mL)로 3 회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸 : n-헥산 = 50 : 50)로 정제하여 황색 고체로 표제화합물을 얻었다. (2.26 g, 37%)
MS m/z: 168 [M+1]+
1H NMR (CDCl3, 400MHz), δ ppm: 8.51 (d, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.58 (d, 1H), 4.70 (s, 3H), 3.81 (d, 3H).
(단계 2) methyl 2-(bromomethyl)isonicotinate의 제조
상기 (단계 1)에서 제조한 화합물(1.2 g, 7.18 mmol)을 클로로포름(30 mL)에 녹인 후,　0 ℃에서 브롬화인 (0.8 mL, 8.61 mmol)을　천천히 적하한 후 실온에서 3 시간 교반하였다.　탄산나트륨 포화수용액 (20 mL)을 가하고 반응을 종결시키고, 클로로포름(50 mL)으로 3회 추출하였다 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하여 얻은 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸 : n-헥산 = 30 : 70)로 정제하여 흰색 고체로 표제화합물을 얻었다. (1.38　g, 84%)
MS m/z: 231 [M+1]+
1H NMR (CDCl3, 400MHz), δ ppm: 8.73 (d, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.77 (d, 1H), 4.61 (s, 2H), 3.97 (s, 3H).
(단계 3) 2-((methylsulfonyl)methyl)isonicotinic acid의 제조
상기 (단계 2)에서 제조한 화합물(0.3 g, 1.3 mmol)을　N,N-디메틸포름아미드(15 mL)에 녹인 후 메탄설핀산 나트륨(0.27 g, 2.6 mmol)을 첨가하여 120 ℃에서 2 시간 동안 교반하였다.　반응 종결 후, 용매를 감압증류 후　1N 수산화나트륨 수용액(3.9 mL)과　테트라히드로퓨란(1.3 mL) 녹인 후, 70　℃에서 3 시간 교반하였다.　반응 종료 후, 2N 염화수소 수용액을 가하여 액성이 pH 2 이하가 되도록 하고　고체가 생성되도록 하였다. 생성된 고체를 여과하고 증류수로 세정한 후, 건조하여 갈색 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.22 g, 79%)
MS m/z: 216 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.78 (d, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.82 (d, 1H), 4.78 (s, 2H), 3.03 (s, 3H).
(제조예 B-12) 6-(sulfomethyl)nicotinic acid (중간체 B-12)의 제조
Figure pat00037
중간체 B-10의 (단계 1)에서 제조한 화합물(0.40 g, 1.74 mmol)을 증류수(20 mL)에 녹인 후 아황산나트륨(0.22 g, 1.74 mmol)을 첨가한 뒤,　100 ℃에서 16 시간 교반하였다.　반응 종결 후, 용매를 감압증류 후 4M 염화수소 수용액(20 mL)에 녹인 후, 100　℃에서 16 시간 교반하였다.　반응 종료 후,　실온으로 냉각한 후 감압 하에 농축하여 얻은 잔류물을 메탄올과 증류수로 세정하여 흰색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.21 g, 56%)
MS m/z: 218 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 9.07 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.86 (d, 1H), 4.12 (s, 2H).
(제조예 B-13) 6-(1H-tetrazol-5-yl)nicotinic acid (중간체 B-13)의 제조
Figure pat00038
(단계 1) methyl 6-cyanonicotinate의 제조
메틸 6-브로모니코티네이트(1.0 g, 4.6 mmol)을　N,N-디메틸포름아미드(6.5 mL)에 녹인 후,　테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0)(267 mg, 0.23 mmol), 시안화아연 (326 mg, 2.78 mmol)　첨가한 뒤 질소 분위기 하, 100 ℃에서 18 시간 동안 교반하였다.　증류수 (30 mL)를 가하여 반응을 종결시킨 후 아세트산에틸 (50 mL)로 3 회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸 : n-헥산 = 20 : 80)로 정제하여 흰색 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.57 g, 72%)
MS m/z: 163 [M+1]+
1H NMR (CDCl3, 400MHz), δ ppm: 9.29 (d, 1H), 8.44 (dd, 1H), 7.80 (d, 1H), 4.00 (s, 3H).
(단계 2) methyl 6-(1H-tetrazol-5-yl)nicotinate의 제조
상기 (단계 1)에서 제조한 화합물(0.57 g, 3.53 mmol)을　N,N-디메틸포름아미드(36 mL)에 녹인 후 아자이드화 나트륨(0.25 g, 3.88 mmol), 염화암모늄(0.20 g, 3.88 mmol), 염화리튬(0.075 g, 1.76 mmol)을　첨가한 뒤 질소 분위기 하, 110 ℃에서 18 시간 동안 교반하였다.　반응 종결 후, 실온까지 냉각하고 불용물을 셀라이트를 통해 제거하고 아세트산에틸 세정한 여과액을　감압 하에 농축하였다.　잔류물을 증류수와 1N 염화수소 수용액을 가하여 재결정하여 베이지색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.65 g, 90%)
MS m/z: 206 [M+1]+
1H NMR (CDCl3, 400MHz), δ ppm: 9.34 (s, 1H), 8.57-8.47 (m, 2H), 4.02 (s, 3H).
(단계 3) 6-(1H-tetrazol-5-yl)nicotinic acid의 제조
상기 (단계 2)에서 제조한 화합물(0.65 g, 3.18 mmol)을 테트라히드로퓨란(32 mL)에 녹인 후 1N 수산화리튬 수용액 (32 mL)를 첨가하여 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 2N 염화수소 수용액을 가하여 액성을 pH 2로 조정하여　고체가 생성되도록 하였다. 생성된 고체를 여과하고 증류수로 세정한 후, 건조하여 베이지색 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.43 g, 70%)
MS m/z: 192 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 9.23 (d, 1H), 8.53 (m, 1H), 8.36 (m, 1H).
(제조예 B-14) 1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-sulfonyl chloride (중간체 B-14)의 제조
Figure pat00039
(단계 1) 4-chloro-3-nitrobenzenesulfonyl chloride의 제조
1-클로로-2-니트로벤젠(1.0 g, 6.3 mmol)을 클로로설폰산(5 mL)에 용해시키고, 120 ℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 얼음물에 천천히 가하여 반응을 종결시킨 후 아세트산에틸(50 mL)로 3회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하여 갈색의 액체로 표제화합물을 정량적으로 얻었다. (1.73 g)
MS m/z: 257 [M+1]+
1H NMR (CDCl3, 400MHz), δ ppm: 8.54 (d, 1H), 8.19-8.17 (m, 1H), 7.88-7.86 (m, 1H).
(단계 2) 4-amino-3-nitrobenzenesulfonamide의 제조
상기 (단계 1)에서 제조한 화합물(1.73 g, 6.76 mmol)을 1,4-디옥산(6 mL)에 용해시키고, 28% 암모니아수(25 mL)를 첨가하여 120 ℃에서 30 시간 동안 교반하였다. 증류수 (30 mL)를 가하여 반응을 종결시키고 아세트산에틸 (50 mL)로 3회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸 : n-헥산 = 30 : 70 ~ 80 : 20)로 정제하여 황색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.87g, 59%)
MS m/z: 218 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.40 (d, 1H), 7.94 (s, 2H), 7.73-7.70 (m, 1H), 7.29 (s, 2H), 7.13-7.11 (m, 1H).
(단계 3) 3,4-diaminobenzenesulfonamide의 제조
상기 (단계 3)에서 제조한 화합물(0.87 g, 4.01 mmol)을 에탄올(20 mL)에 용해시키고, 염화제일주석 이수화물(4.52 g, 20.05 mmol)을 첨가하여 70 ℃에서　18 시간　동안 교반하였다. 반응 종결 후, 탄산나트륨 포화수용액을 가하여 액상을 pH 7이 되도록 하고 아세트산에틸 (50 mL)로 3회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 염화메틸렌 = 10 : 90)로 정제하여 적갈색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.70g, 93%)
MS m/z: 188 [M+1]+
(단계 4) 1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-sulfonamide의 제조
상기 (단계 3)에서 제조한 화합물(0.70 g, 3.72 mmol)을 아세트산(5.5 mL)에 용해시키고, 0 ℃에서 아질산나트륨(0.28 g, 4.1 mmol)를 증류수(1 mL)에 녹인 용액을 첨가하여 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후, 감압 하에 농축하고 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 염화메틸렌 = 10 : 90 ~ 20 : 80)로 정제하여 적갈색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.52 g, 71%)
MS m/z: 199 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.38 (s, 1H), 8.09 (d, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.51 (s, 2H).
(단계 5) 1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-sulfonyl chloride의 제조
상기 (단계 4)에서 제조한 화합물(0.050 g, 0.25 mmol)을 클로로설폰산(1 mL)에 용해시키고, 100 ℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 얼음물에 천천히 가하여 반응을 종결시킨 후 아세트산에틸(50 mL)로 3회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하여 갈색의 액체로 표제화합물을 정량적으로 얻어 별도의 정제 과정 없이 바로 었다. (0.055 g) 별도의 정제 과정 없이 곧바로 다음 반응에 사용하였다.
MS m/z: 218 [M+1]+
(제조예 B-15) 2-oxo-2,3-dihydrobenzo[d]oxazole-6-carboxylic acid (중간체 B-15)의 제조
Figure pat00040
4-아미노-3-하이드록시벤조산(2.0 g, 13 mmol)과 탄산칼륨(2.9 g, 20.9 mmol)을 증류수(16 mL)에 용해시키고, 40 ℃에서 메틸클로로포르메이트(1.5 mL, 19.6 mmol)을 첨가한 후 80 ℃에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후, 2N 염화수소 수용액을 가하여 액상을 pH 2가 되도록 하여 생성된 고체를 여과하고 증류수로 세정, 건조하여 갈색의 고체로 표제화합물을 얻었다 (1.55 g, 66%).
MS m/z: 180 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 7.80 (d, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.17 (d, 1H).
[제조예 3] 중간체 C의 제조
(제조예 C-1) Methyl 3-(aminomethyl)-5-bromobenzoate의 제조
Figure pat00041
메틸 3-브로모-5-(브로모메틸)벤조에이트(1.80 g, 5.84 mmol)를 다이메틸설폭사이드(15 mL)에 녹인 후 (디포밀아미노)소듐(0.93 g, 8.77 mmol)을 첨가하고 80 ℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 출발 물질이 소진된 것을 TLC로 확인한 후, 6 N 염화수소 수용액(3 mL)과 에탄올(20 mL)을 첨가하고 75 ℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 탄산수소나트륨 포화 수용액으로 액성을 pH = 8로 조정한 후, 염화메틸렌/메탄올 (9/1) 혼합 용매 (50 mL)로 3 회 추출했다. 유기층을 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산마그네슘으로 건조시킨 후, 감압 하에 농축했다. 잔류물을 역상 분취용 고성능 액체 크로마토그래피(Preparative HPLC, 컬럼 : Boston Uni C18 40×150×5㎛; 이동상: 0.1% TFA 아세토니트릴 : 증류수 = 5 : 95 ~ 35 : 45)로 정제하고 동결 건조하여 흰색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.70 g, 38%)
MS m/z: 245 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz), δ ppm: 8.29 (br s, 3H), 8.12 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 4.15 (s, 2H), 3.93 - 3.87 (m, 3H).
(제조예 C-2) 1-bromo-3-isopropoxy-5-nitrobenzene (중간체 C-2)의 제조
Figure pat00042
(단계 1) 2-amino-3-bromo-5-nitrophenol의 제조
2-아미노-5-니트로페놀(1.00 g, 6.49 mmol)을 아세토나이트릴(40.6 mL)에 용해시키고, 0 ℃에서 N-브로모숙신이미드(1.19 g, 6.68 mmol)을 첨가하여 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후, 용매를 감압 하에 농축하여 제거하고 남은 잔류물에 아세트산에틸/n-헥산 (1:1) 혼합용매를 가하여 생성된 고체를 여과하여 갈색의 고체로 표제화합물을 얻었다. (1.31 g, 87%)
MS m/z: 233 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 10.69 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.17 (brs, 2H).
(단계 2) 3-bromo-5-nitrophenol의 제조
상기 (단계 1)에서 제조한 화합물 (1.31 g, 5.62 mmol)을 에탄올(22 mL)에 용해시키고 진한 황산(0.6 mL)을 첨가한 후, 75 ℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응혼합물을 실온으로 식힌 후 아질산나트륨(0.97 g, 14.06 mmol)을 첨가한 후 75 ℃에서 1 시간 더 교반하였다. 반응 종결 후, 용매를 감압 하에 농축한 후 증류수 (50 mL)를 가하고 아세트산에틸(50 mL)로 3 회 추출하였다. 유기층을 모아 무수 황산나트륨으로 건조하고 여과한 여과액을 감압 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피(아세트산에틸 : n-헥산 = 10 : 90)로 정제하여 갈색의 고체로 표제화합물을 얻었다.(0.62 g, 51%)
MS m/z: 218 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 10.94 (brs, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.41 (s, 1H).
(단계 3) 1-bromo-3-isopropoxy-5-nitrobenzene의 제조
상기 (단계 2)에서 제조한 화합물(0.30 g, 1.38 mmol)과 탄산칼륨(0.76 g, 5.50 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(3 mL)에 용해시키고, 0 ℃에서 2-브로모프로판(0.52 mL, 5.50 mmol)을 첨가하여 80 ℃에서 20 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후, 증류수 (50 mL)를 가하고 아세트산에틸 (70 mL)로 3 회 추출하였다. 유기층을 포화 식염수로 씻어준 후, 유기층을 모아 무수 황산나트륨으로 건조하고 여과한 여과액을 감압 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸 : n-헥산 = 0 : 100 → 10 : 90)로 정제하여 주황색의 액체로 표제화합물을 얻었다.(0.32 g, 90%)
MS m/z: 260 [M+1]+
1H NMR (CDCl3, 400MHz), δ ppm: 7.93 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 4.64-4.59 (m, 1H), 1.39 (s, 6H).
(제조예 C-3) 3-bromo-N,N-dimethyl-5-nitroaniline (중간체 C-3)의 제조
Figure pat00043
3-브로모-5-나이트로아닐린(0.50g, 2.30 mmol)과 37% 폼알데하이드 용액(0.56 mL)을 아세토나이트릴(23 mL)에 용해시키고, 0 ℃에서 아세트산(3.5 mL)과 시안화수소화붕소나트륨(0.66 g, 10.55 mmol)을 첨가하여 실온에서 36시간 동안 교반하였다. 증류수 (50mL)를 가하여 반응을 종결시키고 아세트산에틸(50 mL)로 3 회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸 : n-헥산 = 20 : 80)로 정제하여 주황색의 고체로 표제화합물을 얻었다 (548 mg, 97%).
MS m/z: 245 [M+1]+
1H NMR (CDCl3, 400MHz), δ ppm: 7.64 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 3.05 (s, 6H).
(제조예 C-4) 4-(3-bromo-5-nitrophenyl)morpholine (중간체 C-4)의 제조
Figure pat00044
1-브로모-3-플루오로-5-니트로벤젠(0.50 g, 2.27 mmol), 모르폴린(0.20 mL, 2.5 mmol), 탄산세슘(0.74 g, 2.27 mmol)을　N,N-디메틸포름아미드 (6 mL)에 용해시키고 100　℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 증류수(30 mL)를 가하고 아세트산에틸(50 mL)로 3 회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸 : n-헥산 = 20 : 80)로 정제하여 흰색 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.25 g, 38%)
MS m/z: 288 [M+1]+
1H NMR (CDCl3, 400MHz), δ ppm: 7.77 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 3.87 (m, 4H), 3.25 (m, 4H).
(제조예 C-5) N-(1-(4-bromophenyl)-2,2-difluoroethyl)-2-methylpropane-2-sulfinamide (중간체 C-5)의 제조
Figure pat00045
(단계 1) 1-(4-bromophenyl)-2,2-difluoroethan-1-one의 제조
1-브로모-4-아이오도벤젠 (1.5 g, 5.30 mmol)을 무수 테트라하이드로퓨란(10 mL)에 용해시키고, -78 ℃에서　n-부틸리튬 2.5 M 헥산 용액 (2.55 mL,　6.36 mmol)을　가하고　30　분　교반하였다.　에틸 2,2-다이플루오로아세테이트 (0.67 mL, 6.36 mmol)를 가하여 -78 ℃를 유지하며　1 시간　교반한　후,　0　℃로 온도를 올린 후 1 시간　더 교반하였다. 1N　염산 수용액으로　반응물을　중화시켜 종결시킨 후,　증류수 (20 mL)로 희석한 후, 아세트산에틸 (20 mL)로3 회 추출하였다. 유기층을 모아 무수황산마그네슘으로 건조시킨 후 감압 하에 농축했다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (아세트산에틸 : n-헥산 = 0 : 10 ~ 2 : 8)로 정제하여 무색 액상의 표제화합물을 얻었다.(758 mg, 61%)
1H NMR (CDCl3, 400MHz), δ ppm: 7.95 (d, 2H), 7.69 (d, 2H), 6.24 (td, 1H).
(단계 2) (Z)-N-(1-(4-bromophenyl)-2,2-difluoroethylidene)-2-methylpropane-2-sulfinamide의 제조
상기 (단계 1)에서 제조한 화합물(758 mg, 3.23 mmol)을 무수 테트라하이드로퓨란(6.5 mL)에 용해시킨 후, 교반 중에 터트-부틸설핀아미드(586 mg, 4.84 mmol)와 티타늄 테트라에톡사이드(2.0 mL, 9.68 mmol)를 적가하고 60 ℃에서 18 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고 소량의 물을 가해 반응을 종결시킨 후, 불용물을 셀라이트를 통해 제거하고 아세트산에틸과 증류수로 세정한 여과액을 모아 추출하여 유기층을 모아 다시 포화식염수로 세정하고 무수황산마그네슘으로 건조시킨 후, 감압 하에 농축하여 노란색 고체의 표제화합물을 얻었다. (293 mg, 27%)
MS m/z: 339 [M+1]+
1H NMR (CDCl3, 400 MHz), δ ppm: 7.95 (d, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.58 (d, 2H), 6.24 (t, 1H), 1.34 (s, 9H).
(단계 3) N-(1-(4-bromophenyl)-2,2-difluoroethyl)-2-methylpropane-2-sulfinamide의 제조
상기 (단계 2)에서 제조한 화합물(293 mg, 0.87 mmol)을 테트라하이드로퓨란무수(5.0 mL)에 용해시킨 후, -10 ℃에서 교반 중에 소듐 보로하이드라이드(65.5 mg, 1.73 mmol)를 천천히 가하고 3 시간 교반하였다. 증류수 (10 mL)로 반응물을 희석하고, 아세트산에틸 (20 mL)로 3회 추출하였다. 유기층을 모아 무수황산마그네슘으로 건조시킨 후 감압 하에 농축하여 노란색 액체의 표제화합물을 얻었다. (292 mg, 99%)
MS m/z: 341 [M+1]+
[제조예 4] 중간체 D의 제조
(제조예 D-1) 5-(3-aminophenyl)-N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)pyrimidin-2-amine (중간체 D-1)의 제조
Figure pat00046
3-브로모아닐린(100 mg, 0.58 mmol)을 1,4-디옥산(6 mL)에 녹인 후, 중간체 A-3(0.24 g, 0.70 mmol), 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0)(67 mg, 0.06 mmol), 2N 탄산나트륨 수용액(0.9 mL, 1.74 mmol)을 첨가한 뒤 질소 분위기 하, 80 ℃에서 19 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후, 실온까지 냉각하여, 불용물을 셀라이트를 통해 제거하고 아세트산에틸로 세정한 여과액에 증류수 (30 mL)를 가하고 아세트산에틸(30 mL)로 3회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸 : n-헥산 = 40 : 60)로 정제하여 갈색 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.16 g, 88%)
MS m/z: 303 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.52 (s, 2H), 7.57 (d, 1H), 7.23-7.13 (m, 4H), 7.08 (t, 1H), 6.76 (s, 1H), 6.73 (d, 1H), 6.53 (d, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.68-4.63 (m, 1H), 3.30-3.24 (m, 2H), 2.95-2.89 (m, 2H).
상기 제조예 D-1과 같은 방법으로 3-브로모아닐린 대신, 하기 표 2에 따른 브롬화 화합물(반응물)을 사용하여 제조예 D-2 내지 제조예 D-11에 따른 화합물을 합성하였다. (중간체 D-2~중간체 D-11)
(제조예 D-2) 5-(5-amino-2-methylphenyl)-N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)pyrimidin-2-amine (중간체 D-2)의 제조
(제조예 D-3) 5-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-4-methylthiazol-2-amine (중간체 D-3)의 제조
(제조예 D-4) 5-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)thiazol-2-amine (중간체 D-4)의 제조
(제조예 D-5) 5-(3-amino-1-methyl-1H-pyrazol-5-yl)-N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)pyrimidin-2-amine (중간체 D-5)의 제조
(제조예 D-6) (S)-5-(4-(1-aminoethyl)phenyl)-N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)pyrimidin-2-amine (중간체 D-6)의 제조
(제조예 D-7) (R)-5-(4-(1-amino-2,2,2-trifluoroethyl)phenyl)-N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)pyrimidin-2-amine (중간체 D-7)의 제조
(제조예 D-8) 5-(3-(aminomethyl)phenyl)-N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)pyrimidin-2-amine (중간체 D-8)의 제조
(제조예 D-9) (R)-5-(3-(1-aminoethyl)phenyl)-N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)pyrimidin-2-amine (중간체 D-9)의 제조
(제조예 D-10) 5-(3-(aminomethyl)-4-fluorophenyl)-N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)pyrimidin-2-amine (중간체 D-10)의 제조
(제조예 D-11) Methyl 3-(aminomethyl)-5-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)benzoate (중간체 D-11)의 제조
(제조예 D-12) 5-(4-(1-amino-2,2-difluoroethyl)phenyl)-N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)pyrimidin-2-amine hydrochloride (중간체 D-12)의 제조
Figure pat00049
(단계 1) N-(1-(4-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)-2,2-difluoroethyl)-2-methylpropane-2-sulfinamide의 제조
제조에 D-1에서 사용한 3-브로모아닐린 대신 중간체 C-7 (0.29 g, 0.86 mmol)을 사용하여 동일한 방법으로 표제화합물을 노란색 고체로 표제화합물을 얻었다 (0.17 g, 42%).
MS m/z: 471 [M+1]+
1H NMR (CDCl3, 400 MHz), δ ppm: 8.51 (d, 2H), 7.51 (t, 2H), 7.48-7.42 (m, 2H), 7.26-7.22 (m, 2H), 7.21-7.15 (m, 2H), 6.17-5.80 (m, 1H), 5.59-5.52　(m, 1H), 4.93-4.79 (m, 1H), 4.74-4.65　(m, 1H), 3.90-3.81(m, 1H), 3.43 (dd, 2H), 2.92 (dd, 2H), 1.26 (s, 9H).
(단계 2) 5-(4-(1-amino-2,2-difluoroethyl)phenyl)-N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)pyrimidin-2-amine hydrochloride의 제조
상기 (단계 1)에서 제조한 화합물(0.17 g, 0.37 mmol)을 염화메틸렌(1.5 mL)에 용해시킨 후, 4M 염화수소 디옥산용액(0.5 mL)를 첨가하고 실온에서 1 시간 교반하였다. 반응 종결 후, 용매를 감압 하에 제거하고 잔류물을 디에틸 에테르로 세정한 후, 건조하여 고체상태의 표제화합물을 정량적으로 얻었다 (147 mg).
MS m/z: 367 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 　9.14 (s, 3H), 8.74 (s, 2H), 7.79 (d, 2H), 7.64-7.60 (m, 3H), 7.25-7.21 (m, 2H), 7.18-7.15 (m, 2H), 6.52 (td, 1H), 4.97 (s, 1H), 4.73-4.66 (m, 1H), 3.28 (dd, 2H), 2.94 (dd, 2H).
(제조예 D-13) 5-(3-amino-5-methoxyphenyl)-N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)pyrimidin-2-amine (중간체 D-13)의 제조
Figure pat00050
(단계 1) N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)-5-(3-methoxy-5-nitrophenyl)pyrimidin-2-amine의 제조
제조에 D-1에서 사용한 3-브로모아닐린 대신 1-브로모-3-메톡시-5-니트로벤젠을 사용하여 동일한 방법으로 표제화합물을 합성하였다.
MS m/z: 363 [M+1]+
1H NMR (CDCl3, 400MHz), δ ppm: 8.53 (s, 2H), 7.94 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.24-7.18 (m, 4H), 5.53 (m, 1H), 4.85 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.42 (m, 2H), 2.90 (m, 2H).
(단계 2) 5-(3-amino-5-methoxyphenyl)-N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)pyrimidin-2-amine의 제조
상기 (단계 1)에서 제조한 화합물(0.27 g, 0.75 mmol)을 아세트산에틸/테트라히드로퓨란 혼합용매(1/1, 14 mL)에 녹이고 Pd/C (10 wt%, 30 mg)을 첨가한 후 1 기압의 수소 하, 실온에서 24 시간 동안 교반하였다. 불용물을 셀라이트를 통해 제거하고 메탄올로 세정한 여과액을 감압 하에 농축하여 황색 고체로 표제화합물을 얻었다. (0.22 g, 88%)
MS m/z: 333 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.52 (s, 2H), 7.60 (d, 1H), 7.22-7.15 (m, 4H), 6.36 (s, 1H), 6.32 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.17 (s, 2H), 4.66-4.64 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.29-3.25 (m, 2H), 2.94-2.88 (m, 2H).
상기 제조예 D-13과 같은 2 단계 합성법으로 1-브로모-3-메톡시-5-니트로벤젠 대신, 하기 표 3에 따른 중간체 C-2 내지 중간체 C-4를 사용하여 제조예 D-14 내지 제조예 D-16에 따른 화합물을 합성하였다. (중간체 D-14~중간체 D-16)
(제조예 D-14) 5-(3-amino-5-isopropoxyphenyl)-N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)pyrimidin-2-amine (중간체 D-14)의 제조
(제조예 D-15) 5-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-N 1 ,N 1-dimethylbenzene-1,3-diamine (중간체 D-15)의 제조
(제조예 D-16) 5-(3-amino-5-morpholinophenyl)-N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)pyrimidin-2-amine (중간체 D-16)의 제조
(제조예 D-17) 5-amino-1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)pyridin-2(1H)-one (중간체 D-17)의 제조
Figure pat00052
(단계 1) tert-butyl (6-oxo-1,6-dihydropyridin-3-yl)carbamate의 제조
5-아미노-2-하이드록시피리딘(2.0 g, 18.2 mmol)을 터트-부탄올(30 mL)에 용해시키고, 0 ℃에서 디-터트-부틸 디카보네이트(4.2 mL, 18.2 mmol)을 첨가하여 85 ℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후, 증류수(20 mL)를 가하고 아세트산에틸(30 mL)로 2 회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물에 디에틸 에테르를 가하여 얻은 고체를 여과하여 녹색의 고체로 표제화합물을 얻었다 (1.75 g, 46%).
MS m/z: 211 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 11.28 (br s, 1H), 9.01 (br s, 1H), 7.52 (br s, 1H), 7.41 (dd, 1H), 6.31 (d, 1H), 1.44 (s, 9H).
(단계 2) 5-amino-1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)pyridin-2(1H)-one의 제조
상기 (단계 1)에서 제조한 화합물(1.16 g, 5.51 mmol)을 디메틸설폭사이드(15 mL)에 용해시키고, 탄산칼륨(0.76 g, 5.51 mmol)과 요오드화제일구리(53 mg, 0.28 mmol), L-프롤린(32 mg, 0.28 mmol), 중간체 A-1(0.80 g, 2.76 mmol)을 첨가하여 100 ℃에서 5일간 교반하였다. 반응 종결 후, 증류수(40 mL)를 가하고 염화메틸렌(50 mL)로 3 회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 염화메틸렌 = 1 : 99 → 10 : 90)로 정제하여 갈색의 고체로 표제화합물을 얻었다.(0.081 g, 5%)
MS m/z: 320 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.35 (br s, 2H), 7.84 (d, 1H), 7.25 - 7.14 (m, 5H), 6.81 (d, 1H), 6.37 (d, 1H), 4.63 (sxt, 1H), 4.40 (br s, 2H), 3.27 (dd, 2H), 2.93 (dd, 2H).
(제조예 D-18) 5-(3-amino-1H-pyrazol-1-yl)-N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)pyrimidin-2-amine (중간체 D-18)의 제조
Figure pat00053
중간체 A-2(2.23 g, 6.62 mmol)과 3-아미노-1H-피라졸(0.50 g, 6.02 mmol), 탄산세슘(2.94 g, 9.03 mmol), 브롬화구리 (0.086 g, 0.60 mmol)을 N-메틸-2-피롤리돈(12 mL)에 용해시킨 후, 반응혼합물을 질소 분위기 하, 120 ℃에서 6 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후, 실온까지 냉각시킨 후 셀라이트를 이용해 불용물을 여과하여 제거하였다. 여과액에 증류수(10 mL)를 가하고 아세트산에틸(20 mL)로 3 회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산마그네슘으로 건조시킨 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (아세트산에틸 : n-헥산 = 2 : 3 → 9 : 1)로 정제하여 베이지색 고체로 표제화합물을 얻었다.(1.27 g, 72 %).
MS m/z: 293 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.56 (s, 2H), 7.92 (s, 1H), 7.48-7.47 (d, 1H), 7.17-7.08 (m, 4H), 5.65 (s, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.58-4.53 (m, 1H), 3.24-3.18 (dd, 2H), 2.88-2.82 (dd, 2H), 2.39-2.37 (t, 2H).
(제조예 D-19) 5-(3-amino-5-methyl-1H-pyrazol-1-yl)-N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)pyrimidin-2-amine (중간체 D-19)의 제조
Figure pat00054
제조예 D-18과 같은 방법으로 3-아미노-1H-피라졸 대신 5-메틸-1H-피라졸-3-아민을 사용하여 표제화합물을 얻었다.
MS m/z: 307 [M+1]+
1H NMR (CDCl3, 400MHz), δ ppm:. 8.69 (s, 2H), 7.25-7.20 (m, 4H), 5.65 (br, 2H), 4.72 (m, 1H), 3.42 (dd, 2H), 2.92 (dd, 2H), 2.21(s, 3H)
(제조예 D-20) 5-(4-amino-1H-pyrazol-1-yl)-N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)pyrimidin-2-amine hydrochloride (중간체 D-20)의 제조
Figure pat00055
(단계 1) ethyl 1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-1H-pyrazole-4-carboxylate의 제조
에틸 1H-피라졸-4-카복실레이트(1.1 g, 7.85 mmol)와 중간체 A-2(2.91 g, 8.63 mmol), 요오드화제일구리(149.5 mg, 0.79 mmol)을, L-프롤린(180.8 mg, 1.57 mmol), 제삼인산칼륨(4.17 g, 19.62 mmol)을 N-메틸-2-피롤리돈 (26 mL)에 용해시키고, 질소를 통과시킨 후, 160 ℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후, 반응혼합물을 실온까지 식힌 후 포화 염화암모늄 수용액 (50 mL)을 가하고 셀라이트를 이용해 불용물을 여과하여 제거하였다. 여과액을 아세트산에틸(50 mL)로 3 회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸 : n-헥산 = 30 : 70 → 메탄올 : 염화메틸렌 = 10 : 90)로 정제하여 흰색의 고체로 표제화합물을 얻었다.(0.15 g, 5%)
MS m/z: 350 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.92 (s, 1H), 8.78 (s, 2H), 8.12 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.22-7.15 (m, 4H), 4.65 (m, 1H), 4.27 (m, 2H), 3.26 (m, 2H), 2.95-2.91 (m, 2H), 1.30 (m, 3H).
(단계 2) 1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-1H-pyrazole-4-carboxylic acid의 제조
상기 (단계 1)에서 제조한 화합물(0.15 g, 0.42 mmol)을 테트라히드로퓨란/메탄올/증류수 혼합용매(3/2/1, 24 mL)에 용해시키고, 수산화리튬 일수화물(0.18 mg, 4.23 mmol)을 첨가하여 실온에서 6 시간 교반하였다. 반응 종결 후, 유기 용매를 감압 농축하였다. 잔류물에 1N 염화수소 수용액을 가하여 pH 2로 조정하여 생성된 고체를 여과하고 증류수로 세정하여 베이지색의 고체로 표제화합물을 얻었다 (0.13 g, 96%).
MS m/z: 322 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.84 (s, 1H), 8.78 (s, 2H), 8.07 (s, 1H), 7.91 (brs, 1H), 7.25-7.13 (m, 4H), 4.67-4.61 (m, 1H), 3.31-3.25 (m, 2H), 2.95-2.90 (m, 2H).
(단계 3) tert-butyl (1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-1H-pyrazol-4-yl)carbamate의 제조
상기 (단계 2)에서 제조한 화합물(0.17 g, 0.54 mmol)을 터트-부탄올(1.8 mL)/N,N-디메틸포름아미드(1 mL) 혼합용매에 용해시키고, 디페닐포스포릴 아자이드(0.23 mL, 1.09 mmol)와 N,N-디이소프로필에틸아민(0.19 mL, 1.09 mmol)을 첨가하여 90 ℃에서 18 시간 교반하였다. 반응 종결 후, 증류수(30 mL)를 가하고 아세트산에틸(50 mL)로 3 회 추출하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸 : n-헥산 = 30 : 70)로 정제하여 베이지색의 고체로 표제화합물을 얻었다.(0.091 g, 43%)
MS m/z: 393 [M+1]+
1H NMR (CDCl3, 400MHz), δ ppm: 8.55 (s, 2H), 8.03 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.25-7.16 (m, 4H), 4.80-4.79 (m, 1H), 3.99 (m, 1H), 3.26-3.15 (m, 2H), 2.94-2.89 (m, 2H), 1.52 (s, 9H).
(단계 4) 5-(4-amino-1H-pyrazol-1-yl)-N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)pyrimidin-2-amine hydrochloride의 제조
상기 (단계 3)에서 제조한 화합물(0.091 g, 0.23 mmol)을 염화메틸렌(0.8 mL)에 용해시키고, 4M 염화수소 1,4-디옥산 용액(0.8 mL)를 첨가하여 40
Figure pat00056
에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후, 감압 하에 농축하여 베이지색의 고체로 표제화합물(0.094 g)을 얻어 별도의 정제과정 없이 곧바로 다음 반응에 사용하였다.
MS m/z: 293 [M+1]+
(제조예 D-21) 5-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-1,3,4-thiadiazol-2-amine (중간체 D-21)의 제조
Figure pat00057
중간체 A-6(0.50 g, 2.12 mmol)과 티오세미카바자이드(0.25 g, 2.75 mmol)을 트리플루오로화아세트산(10 mL)에 용해시키고, 80 ℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후, 25% 암모니아수 (20 mL)를 가하고 30 분 동안 교반하였다. 생성된 고체를 여과하고 증류수로 세정하고 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 염화메틸렌 = 5 : 95 → 10 : 90)로 정제하여 베이지색의 고체로 표제화합물을 얻었다.(0.42 g, 64%)
MS m/z: 311 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.66 (s, 2H), 8.03 (s, 1H), 7.32 (s, 2H), 7.22-7.15 (m, 4H), 4.67 (m, 1H), 3.26 (m, 2H), 2.95-2.91 (m, 2H).
(제조예 D-22) 3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)isoxazol-5-amine (중간체 D-22)의 제조
Figure pat00058
중간체 A-5(0.10 g, 0.36 mmol)을 1N 수산화나트륨 수용액 (0.7 mL)에 용해시키고, 염화하이드록실암모늄(27.5 mg, 0.40 mmol)을 첨가하여 100 ℃에서 5 시간 교반하였다. 반응 종결 후, 포화 염화암모늄 수용액(30 mL)을 가하고 아세트산에틸(30 mL)로 3 회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 여과 하고 디에틸 에테르로 세정하여 베이지색의 고체로 표제화합물을 얻었다 (0.032 g, 30%).
MS m/z: 294 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 12.71 (brs, 1H), 8.77-8.70 (m, 2H), 8.36 (s, 1H), 7.32-6.78 (m, 5H), 4.70 (m, 1H), 3.29-3.25 (m, 2H), 2.94-2.90 (m, 2H).
(제조예 D-23) 3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-1,2,4-oxadiazol-5-amine (중간체 D-23)의 제조
Figure pat00059
(단계 1) 2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)-N'-hydroxypyrimidine-5-carboximidamide의 제조
중간체 A-6(0.30 g, 1.27 mmol)을 에탄올(10 mL)에 용해시키고, 하이드록실아민 염산염 (0.7 g, 10.2 mmol)과 트리에틸아민 (1.03 g, 10.16 mmol)을 첨가하여 85 ℃에서 16 시간 교반하였다. 반응혼합물을 감압 하에 농축하여 용매를 제거하고 잔류물에 증류수 (10 mL)를 가하고 실온에서 30 분간 교반하여 흰색의 고체로 표제화합물을 얻었다 (0.21 g, 61%).
MS m/z: 270 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 9.51 (s, 1H), 8.53 (s, 2H), 7.72 (d, 1H), 7.26 - 7.18 (m, 2H), 7.17 - 7.09 (m, 2H), 5.82 (s, 2H), 4.73 - 4.55 (m, 1H), 3.25 (dd, 2H), 2.95 - 2.84 (m, 2H).
(단계 2) 3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-1,2,4-oxadiazol-5-amine의 제조
상기 (단계 2)에서 얻은 화합물(0.21 g, 0.78 mmol)을 톨루엔(8 mL)에 용해시켜 트리플루오로아세트산무수물(0.26 g, 0.86 mmol)을 적가한 후, 반응 혼합물을 110 ℃에서 16 시간 교반하였다. 반응혼합물을 감압 하에 농축하여 용매를 제거한 후 잔류물을 메탄올(10 mL)에 용해시키고, 7M 암모니아 메탄올 용액 (2 mL)를 가하고 실온에서 16 시간 교반하였다. 생성된 고체를 여과하고 메탄올로 세정하여 갈색의 고체로 표제화합물을 얻었다 (0.12 g, 50%).
MS m/z: 295 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.69 (d, 2H), 8.11 (d, 1H), 7.94 (s, 2H), 7.21 (dd, 2H), 7.17 - 7.10 (m, 2H), 4.77 - 4.59 (m, 1H), 3.26 (dd, 2H), 2.91 (dd, 2H).
(제조예 D-24) N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)-5-(5-oxa-2,6-diazaspiro[3.4]oct-6-en-7-yl)pyrimidin-2-amine (중간체 D-24)의 제조
Figure pat00060
(단계 1) (2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)methanol
중간체 A-4(2.34 g, 8.26 mmol)을 테트라히드로퓨란(28 mL)에 용해시키고, 영하 78 ℃에서 1M DIBAL-H 톨루엔 용액(27 mL)를 천천히 적하한 후 실온에서 5 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 다시 0 ℃로 냉각시킨 후 1N 수산화나트륨 수용액 (40 mL)를 천천히 가하여 반응을 종결시키고, 불용물을 셀라이트를 통해 제거하였다. 여과액을 감압 하에 농축한 후 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 염화메틸렌 = 10 : 90)로 정제하여 흰색의 고체로 표제화합물을 얻었다.(1.85 g, 93%)
MS m/z: 242 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.24 (s, 2H), 7.38 (d, 1H), 7.22-7.12 (m, 4H), 5.02 (t, 1H), 4.62-4.57 (m, 1H), 4.30 (d, 2H), 3.26-3.21 (m, 2H), 2.90-2.84 (m, 2H).
(단계 2) 2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidine-5-carbaldehyde의 제조
상기 (단계 1)에서 제조한 화합물(1.85 g, 7.67 mmol)을 염화메틸렌(17 mL)/디메틸설폭사이드(9 mL) 혼합용매에 용해시키고, 데스-마틴 퍼아이오디난(DMP, 5.2 g, 12.3 mmol)을 첨가하여 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후, 감압 하에 농축하고 난 잔류물에 증류수(20 mL)를 가하고 아세트산에틸(30 mL)로 3 회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸 : n-헥산 = 10 : 90 → 30 : 70)로 정제하여 베이지색의 고체로 표제화합물을 얻었다.(0.76 g, 41%)
MS m/z: 240 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 9.74 (s, 1H), 8.81-8.80 (s, 1H), 8.73-8.68 (m, 2H), 7.24-7.13 (m, 4H), 4.90-4.72 (m, 1H), 3.29-3.25 (m, 2H), 2.97-2.91 (m, 2H).
(단계 3) (E)-2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidine-5-carbaldehyde oxime의 제조
상기 (단계 2)에서 제조한 화합물(0.66 g, 2.75 mmol)을 에탄올(16 mL)에 용해시키고, 염화하이드록실암모늄(0.57 g, 8.26 mmol)과 피리딘(0.67 mL, 8.26 mmol)을 첨가하여 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후 생성된 고체를 여과하고 에탄올로 세정하여 베이지색의 고체로 표제화합물을 얻었다 (0.57 g, 81%).
MS m/z: 255 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 11.03 (s, 1H), 8.50 (s, 2H), 7.98 (s, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.22-7.13 (m, 4H), 4.66-4.61 (m, 1H), 3.28-3.22 (m, 2H), 2.93-2.87 (m, 2H).
(단계 4) tert-butyl 7-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-5-oxa-2,6-diazaspiro[3.4]oct-6-ene-2-carboxylate의 제조
상기(단계 3)에서 제조한 화합물(0.57 g, 2.23 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(5 mL)에 용해시키고, 0 ℃에서 N-클로로숙신이미드(0.33 g, 2.46 mmol)을 첨가하여 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후, 증류수(20 mL)를 가하고 아세트산에틸(30 mL)로 3 회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하여 얻은 잔류물을 테트라히드로퓨란(8 mL)에 용해시키고, 0 ℃로 냉각하여 터트-부틸 3-메틸렌아지티딘-1-카복실레이트(0.84 mL, 4.86 mmol)와 트리에틸아민(1.4 mL, 9.71 mmol)을 첨가한 후 70 ℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후, 증류수(30 mL)를 가하고 아세트산에틸 (50 mL)로 3 회 추출하였다. 유기층을 모아 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(아세트산에틸 : n-헥산 = 20 : 80 → 60 : 40)로 정제하여 황색의 고체로 표제화합물을 얻었다.(0.36 g, 38%)
MS m/z: 422 [M+1]+
1H NMR (CDCl3, 400MHz), δ ppm: 8.54 (s, 2H), 7.25-7.17 (m, 4H), 5.66 (d, 1H), 4.87-4.82 (m, 1H), 4.32 (d, 1H), 4.08 (d, 1H), 3.50 (s, 2H), 3.44-3.38 (m, 2H), 2.92-2.87 (m, 2H), 1.46 (s, 9H).
(단계 5) N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)-5-(5-oxa-2,6-diazaspiro[3.4]oct-6-en-7-yl)pyrimidin-2-amine의 제조
상기 (단계 5)에서 제조한 화합물(0.36 g, 0.85 mmol)을 염화메틸렌(3 mL)에 용해시키고, 트리플루오로아세트산(2.8 mL)를 첨가하여 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후, 감압 하에 농축하여 연한 황색의 고체로 표제화합물을 트리플루오로아세트산 염으로서 얻었다. (0.37 g)
MS m/z: 322 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.91 (brs, 1H), 8.66 (brs, 1H), 8.56 (s, 2H), 8.13 (d, 1H), 7.23-7.14 (m, 4H), 4.69-4.63 (m, 1H), 4.34-.20 (m, 2H), 3.76 (s, 2H), 3.29-3.23 (m, 2H), 2.94-2.89 (m, 2H).
(제조예 D-25) N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)-5-(1-oxa-2,7-diazaspiro[4.4]non-2-en-3-yl)pyrimidin-2-amine (중간체 D-25)의 제조
Figure pat00061
제조예 D-24의 (단계 3)에서 얻은 화합물을 사용하여 터트-부틸 3-메틸렌아지티딘-1-카복실레이트 대신 터트-부틸 3-메틸렌피롤리딘-1-카복실레이트를 사용하여 제조예 D-24의 단계 4, 단계 5과 같은 방법을 통해 표제화합물을 트리플루오로아세트산 염으로서 얻었다.
MS m/z: 336 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.56 (s, 2H), 8.05 (d, 1H), 7.24 - 7.21 (m, 2H), 7.16- 7.14 (m, 2H), 4.70 - 4.63 (m, 1H), 3.43 (br, 2H), 3.27-3.23 (br, 2H), 3.13 - 2.89 (m, 6H), 2.11 - 1.96 (m, 2H).
(제조예 D-26) N-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)-5-(1-oxa-2,8-diazaspiro[4.5]dec-2-en-3-yl)pyrimidin-2-amine (중간체 D-26)의 제조
Figure pat00062
제조예 D-24의 (단계 3)에서 얻은 화합물을 사용하여 터트-부틸 3-메틸렌아지티딘-1-카복실레이트 대신 터트-부틸 4-메틸렌피페리딘-1-카복실레이트를 사용하여 제조예 D-24의 단계 4 및 단계 5과 같은 방법을 통해 표제 화합물을 트리플루오로아세트산 염으로서 얻었다.
MS m/z: 350 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.53 (s, 2H), 8.26 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.22 - 7.18 (m, 2H), 7.14 - 7.09 (m, 2H), 4.70 - 4.57 (m, 1H), 3.58 (br s, 1H), 3.26 (d, 4H), 3.04 - 2.99 (m, 2H), 2.91 - 2.85 (m, 2H), 1.81 - 1.62 (m, 5H).
실시예
실시예 1: N-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)-1,4,6,7-tetrahydro-5H-[1,2,3]triazolo[4,5-c]pyridine-5-carboxamide(화합물 1)의 제조
Figure pat00063
중간체 D-1(38.7 mg, 0.13 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(1.3 mL)에 용해시키고, N,N-디이소프로필에틸아민(0.07 mL, 0.52 mmol), 1,1'-카보닐디이미다졸(25.3 mg, 0.16 mmol)을 순차적으로 첨가하고 반응혼합물을 질소 분위기 하, 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 출발물질이 모두 반응한 것을 TLC로 확인하고, 중간체 B-1(41 mg, 0.26 mmol)을 천천히 첨가하고, 반응혼합물을 질소 분위기 하, 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후, 증류수(10 mL)를 가하고 아세트산에틸(20 mL)로 3 회 추출하였다. 유기층을 모아 염화암모늄 수용액과 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 염화메틸렌 = 5 : 95)로 정제하여 흰색 고체로 표제화합물을 얻었다. (16.7 mg, 28%)
MS m/z: 453 [M+1]+
1H NMR (DMSO- d6, 400MHz), δ ppm: 8.78 (s, 1H), 8.58 (s, 2H), 7.70-7.64 (m, 2H), 7.48 (d, 1H), 7.32 (m, 1H), 7.23-7.13 (m, 5H), 4.68 (m, 3H), 3.81 (m, 2H), 3.28 (dd, 2H), 2.92 (dd, 2H), 2.81 (m, 2H).
상기 실시예 1과 동일한 방법으로 중간체 D-1 대신, 하기 표 4에 따른 중간체를 사용하여 다음의 실시예 2 내지 실시예 9의 화합물을 합성하였다.
실시예 2: (S)-N-(1-(4-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)ethyl)-1,4,6,7-tetrahydro-5H-[1,2,3]triazolo[4,5-c]pyridine-5-carboxamide(화합물 2)의 제조
실시예 3: (R)-N-(1-(4-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)-2,2,2-trifluoroethyl)-1,4,6,7-tetrahydro-5H-[1,2,3]triazolo[4,5-c]pyridine-5-carboxamide(화합물 3)의 제조
실시예 4: N-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)benzyl)-1,4,6,7-tetrahydro-5H-[1,2,3]triazolo[4,5-c]pyridine-5-carboxamide(화합물 4)의 제조
실시예 5: (R)-N-(1-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)ethyl)-1,4,6,7-tetrahydro-5H-[1,2,3]triazolo[4,5-c]pyridine-5-carboxamide(화합물 5)의 제조
실시예 6: N-(5-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-2-fluorobenzyl)-1,4,6,7-tetrahydro-5H-[1,2,3]triazolo[4,5-c]pyridine-5-carboxamide(화합물 6)의 제조
실시예 7: Methyl 3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-5-((4,5,6,7-tetrahydro-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-c]pyridine-5-carboxamido)methyl)benzoate(화합물 7)의 제조
실시예 8: N-(1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-1H-pyrazol-3-yl)-1,4,6,7-tetrahydro-5H-[1,2,3]triazolo[4,5-c]pyridine-5-carboxamide(화합물 8)의 제조
실시예 9: (7-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-5-oxa-2,6-diazaspiro[3.4]oct-6-en-2-yl)(1,4,6,7-tetrahydro-5H-[1,2,3]triazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)methanone(화합물 9)의 제조
실시예 10: (3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-1-oxa-2,7-diazaspiro[4.4]non-2-en-7-yl)(1,4,6,7-tetrahydro-5H-[1,2,3]triazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)methanone(화합물 10)의 제조
실시예 11: 3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-5-((4,5,6,7-tetrahydro-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-c]pyridine-5-carboxamido)methyl)benzoic acid(화합물 11)의 제조
Figure pat00066
실시예 7에서 제조한 화합물 화합물(68.8 mg, 0.13 mmol)을 테트라히드로퓨란(1.5 mL)에 녹인 후 1N 수산화리튬 수용액(1.5 mL)를 첨가하여 실온에서 2 시간 교반하였다. 반응 종료 후, 2N 염화수소 수용액을 가하여 액성을 pH 2로 하여 생성된 고체를 여과하고 증류수로 세정한 후, 건조하여 흰색 고체로 표제화합물을 얻었다. (47.2 mg, 70.5%)
MS m/z: 511 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.64 (s, 2H), 7.97 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.74 (m, 2H), 7.42 (m, 1H), 7.23-7.14 (m, 4H), 4.67 (m, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.35 (d, 2H), 3.69 (m, 2H), 3.27 (dd, 2H), 2.92 (dd, 2H), 2. 72 (m, 2H).
실시예 12: (S)-N-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 12)의 제조
Figure pat00067
중간체 D-1(30　mg, 0.1 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(1.0 mL)에 녹인 후 중간체 B-2(25 mg, 0.15 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(0.13 mL, 0.74 mmol)를 순차적으로 첨가하고, 0 ℃로 냉각시켜 벤조트리아졸-1-일 옥시-트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(129 mg, 0.25 mmol)을 천천히 첨가한 후 질소 하, 40 ℃에서 36 시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 증류수 (10 mL)를 가하고 아세트산에틸(20 mL)로 3 회 추출하였다. 유기층을 증류수와 포화 식염수로 세정하고 무수 황산나트륨으로 건조한 후 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 아세트산에틸 = 5 : 95)로 정제하여 흰색 고체로 표제화합물을 얻었다. (12.3 mg, 27%)
MS m/z: 452 [M+1]+
1H NMR (DMSO- d6, 400MHz), δ ppm: 10.13 (m, 1H), 8.60 (d, 1H), 7.88-7.57 (m, 3H), 7.40-7.32 (m, 2H), 7.23-7.15 (m, 4H), 4.68 (m, 1H), 3.27 (m, 2H), 2.93-2.81(m, 7H), 2.18 (m, 1H), 1.87 (m, 1H).
상기 실시예 12과 동일한 방법으로 중간체 B-2 및 중간체 D-1 대신, 하기 표 5에 따른 중간체를 사용하여 다음의 실시예 13 내지 실시예 55의 화합물을 합성하였다.
실시예 13: N-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)-6-fluoro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 13)의 제조
실시예 14: N-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)-6-methoxy-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 14)의 제조
실시예 15: N-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)-2-(methylsulfonamido)isonicotinamide(화합물 15)의 제조
실시예 16: N-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)-6-(methylsulfonamido)nicotinamide(화합물 16)의 제조
실시예 17: N-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)-2-(methylsulfonamido)thiazole-4-carboxamide(화합물 17)의 제조
실시예 18: N-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)-6-((methylsulfonyl)methyl)nicotinamide(화합물 18)의 제조
실시예 19: (5-((3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)carbamoyl)pyridin-2-yl)methanesulfonic acid(화합물 19)의 제조
실시예 20: N-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)-2-((methylsulfonyl)methyl)isonicotinamide(화합물 20)의 제조
실시예 21: N-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)-6-(1H-tetrazol-5-yl)nicotinamide(화합물 21)의 제조
실시예 22: (S)-N-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-5-methoxyphenyl)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 22)의 제조
실시예 23: N-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-5-methoxyphenyl)-6-fluoro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 23)의 제조
실시예 24: 6-(2,2-difluoroethoxy)-N-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-5-methoxyphenyl)-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 24)의 제조
실시예 25: (S)-N-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-5-isopropoxyphenyl)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 25)의 제조
실시예 26: (S)-N-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-5-(dimethylamino)phenyl)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 26)의 제조
실시예 27: (S)-N-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-5-morpholinophenyl)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 27)의 제조
실시예 28: (S)-N-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-4-methylphenyl)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 28)의 제조
실시예 29: (S)-N-(1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-6-oxo-1,6-dihydropyridin-3-yl)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 29)의 제조
실시예 30: 6-(2,2-difluoroethoxy)-N-(1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-6-oxo-1,6-dihydropyridin-3-yl)-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 30)의 제조
실시예 31: (S)-N-(5-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 31)의 제조
실시예 32: N-(5-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl)-6-methoxy-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 32)의 제조
실시예 33: (S)-N-(1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-1H-pyrazol-3-yl)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 33)의 제조
실시예 34: (R)-N-(1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-1H-pyrazol-3-yl)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 34)의 제조
실시예 35: N-(1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-1H-pyrazol-3-yl)-6-methoxy-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 35)의 제조
실시예 36: 6-(2,2-difluoroethoxy)-N-(1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-1H-pyrazol-3-yl)-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 36)의 제조
실시예 37: (S)-N-(1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 37)의 제조
실시예 38: (S)-N-(5-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)thiazol-2-yl)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 38)의 제조
실시예 39: (S)-N-(5-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-4-methylthiazol-2-yl)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 39)의 제조
실시예 40: (S)-N-(1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-5-methyl-1H-pyrazol-3-yl)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 40)의 제조
실시예 41: (S)-N-(5-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-1-methyl-1H-pyrazol-3-yl)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 41)의 제조
실시예 42: (S)-N-((S)-1-(4-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)ethyl)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 42)의 제조
실시예 43: (S)-N-((R)-1-(4-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)-2,2,2-trifluoroethyl)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 43)의 제조
실시예 44: (R)-N-(1-(4-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)-2,2,2-trifluoroethyl)-2-oxo-2,3-dihydrobenzo[d]oxazole-6-carboxamide(화합물 44)의 제조
실시예 45: (5S)-N-(1-(4-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)-2,2-difluoroethyl)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 45)의 제조
실시예 46: (R)-N-((R)-1-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)ethyl)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-carboxamide(화합물 46)의 제조
실시예 47: (R)-N-(1-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)phenyl)ethyl)-2-oxo-2,3-dihydrobenzo[d]oxazole-6-carboxamide(화합물 47)의 제조
실시예 48: (S)-(7-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-5-oxa-2,6-diazaspiro[3.4]oct-6-en-2-yl)(4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazol-5-yl)methanone(화합물 48)의 제조
실시예 49: (R)-(7-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-5-oxa-2,6-diazaspiro[3.4]oct-6-en-2-yl)(4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazol-5-yl)methanone(화합물 49)의 제조
실시예 50: 6-(7-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-5-oxa-2,6-diazaspiro[3.4]oct-6-ene-2-carbonyl)benzo[d]oxazol-2(3H)-one(화합물 50)의 제조
실시예 51: N-(4-(7-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-5-oxa-2,6-diazaspiro[3.4]oct-6-ene-2-carbonyl)pyridin-2-yl)methanesulfonamide(화합물 51)의 제조
실시예 52: N-(5-(7-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-5-oxa-2,6-diazaspiro[3.4]oct-6-ene-2-carbonyl)pyridin-2-yl)methanesulfonamide(화합물 52)의 제조
실시예 53: (3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-1-oxa-2,7-diazaspiro[4.4]non-2-en-7-yl)((S)-4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazol-5-yl)methanone(화합물 53)의 제조
실시예 54: (S)-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-1-oxa-2,8-diazaspiro[4.5]dec-2-en-8-yl)(4,5,6,7-tetrahydro-1H-benzo[d][1,2,3]triazol-5-yl)methanone(화합물 54)의 제조
실시예 55: N-(4-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-1-oxa-2,8-diazaspiro[4.5]dec-2-ene-8-carbonyl)pyridin-2-yl)methanesulfonamide(화합물 55)의 제조
실시예 56: N-(3-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-5-methoxyphenyl)-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-sulfonamide(화합물 56)의 제조
Figure pat00076
중간체 D-13(84 mg, 0.25 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(1 mL)에 용해시키고, 트리에틸아민(0.07 mL, 0.5 mmol)을 첨가하여 실온에서 30 분 교반한 후 0 ℃로 온도를 낮춰 중간체 B-14(55 mg, 0.25 mmol)를 염화메틸렌(1 mL)에 녹인 용액을 적가하고, 실온으로 온도를 올려 18 시간 교반하였다. 반응 종결 후, 염화암모늄 포화수용액(10 mL)을 가하고 아세트산에틸(20 mL)로 3 회 추출하였다. 유기층을 모아 무수 황산나트륨으로 건조하고 여과하여 모은 여액을 감압 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 아세트산에틸 = 0 : 100 → 10 : 90)로 정제하여 베이지색의 고체로 표제화합물을 얻었다.(5.0 mg, 4%)
MS m/z: 514 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.46 (s, 2H), 8.33 (s, 1H), 7.92 (m, 2H), 7.71-7.66 (m, 2H), 7.22-7.15 (m, 4H), 6.88 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.65 (s, 1H), 4.66 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.32 (m, 2H), 2.94-2.90 (m, 2H).
실시예 57: N-(1-(2-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)pyrimidin-5-yl)-1H-pyrazol-3-yl)-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-5-sulfonamide(화합물 57)의 제조
Figure pat00077
실시예 56에서 사용한 중간체 D-13 대신 중간체 D-18을 사용하여 동일한 방법을 통해 다음의 표제화합물을 합성하였다.
MS m/z: 474 [M+1]+
1H NMR (DMSO-d6, 400MHz), δ ppm: 8.51 (s, 2H), 8.46 (s, 1H), 8.10 (d, 2H), 7.88 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.20 (s, 2H), 7.14 (s, 2H), 6.29 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 3.29-3.24 (m, 2H), 2.89 (d, 2H).
실험예
본 발명에 따른 화합물의 오토탁신 저해 활성을 측정하기 위하여 다음과 같은 시험을 수행하였다.
실험예 1: 인간 오토탁신의 저해 활성 측정(In vitro ATX activity assay (FS-3))
각 피험 화합물 용액(10 μM, 100% 디메틸술폭시드)을 96-well V bottom plate(Costar 3363)에서 4배씩 희석한다. 피험 화합물 용액(100% 디메틸설폭시드) 각각을 3차 증류수로 10배 희석한 후 10 ㎕(10% 디메틸설폭시드)를 black flat bottom 96-well plate(Costar 3915)에 분주한다. 1.6X Assay 용액(224 mM NaCl, 80mM Tris-HCl(pH 8.0), 8mM KCl, 1.6 mM CaCl2, 1.6 mM MgCl2, 1.6 mg/mL fatty acid free BSA) 50 ㎕를 첨가하고 계속해서, 20 nM 인간 ENPP2 용액(완충액 : 140 mM NaCl, 50 mM Tris-HCl(pH 8.0), 5 mM KCl, 1 mM CaCl2, 1 mM MgCl2, 1 mg/mL fatty acid free BSA, 0.01% Brij35) 20 ㎕와 5 μM FS-3 용액(완충액 : 3차 증류수) 20 ㎕를 각각 첨가하여 혼합한다. Envision Xcite Multilabel Reader로 37 ℃에서 60 분간 반응시키면서, 5 분마다 형광 광도 측정(Ex: 485nm, Em: 535nm)을 행했다. 각 검액의 △CFU30min값(30 분에서 측정된 CFU값 - 0 분에서 측정된 CFU 값)을 구하고, 100 - (검액의 △CFU30min / 대조군의 △CFU30min 평균값 ) × 100 의 식으로 저해활성 백분율값(% inhibition)을 구한다. 또한 표 6에 나타내는 IC50값은 저해활성 백분율값을 토대로 GraphPad Prism® 소프트웨어[Windows 용 GraphPad 버전 9.3.1 GraphPad Software, La Jolla California USA, www.graphpad.com]의 4-파라미터 변수방법을 사용하여 억제 곡선을 피팅하여 결정하였다.
실시예 IC50 (nM) 실시예 IC50 (nM) 실시예 IC50 (nM)
1 B 20 B 39 A
2 A 21 B 40 A
3 A 22 A 41 A
4 A 23 A 42 A
5 A 24 A 43 A
6 A 25 A 44 B
7 A 26 B 45 A
8 A 27 B 46 A
9 A 28 A 47 A
10 A 29 A 48 A
11 A 30 A 49 A
12 B 31 A 50 A
13 B 32 A 51 C
14 B 33 A 52 C
15 A 34 A 53 A
16 A 35 B 54 A
17 C 36 A 55 C
18 B 37 A 56 C
19 B 38 A 57 A
(저해활성의 표시 A: IC50 ＜ 5 nM; B: IC50 = 5 nM~10 nM; C: IC50 ＞ 10 nM)
상기 표 6의 결과로부터, 본 발명의 화합물은 유의한 오토탁신 저해 활성을 갖는 것을 확인하였다.
실험예 2: 인간 또는 마우스 혈청에서 오토탁신 저해 활성 에세이 측정 (LC-MS/MS 분석에 의한 LysoPLD 저해 활성 측정)
각 피험 화합물 용액(2mM, 100% 디메틸설폭시드) 5 ㎕을 메탄올 495 ㎕로 100배 희석한 다음, 희석된 메탄올 용액(1% 디메틸설폭시드) 3 ㎕를 1.5 mL 튜브에서 인간 또는 마우스 혈청 용액 57 ㎕과 혼합한다. 혼합한 피험 화합물 용액을 12 ㎕씩 100% 혈청 48 ㎕에 차례로 희석하여 5개의 농도로 만들고, 각각의 튜브를 37 ℃ 항온수조에 15 분간 둔다. 계속해서, 10mg/mL 18:1 LPC 용액(50% 에탄올)을 혈청으로 375 ㎍/mL의 농도로 희석한 용액을 각 튜브에 2 ㎕씩 분주하여 50 ㎕가 되게 한다. 각 튜브를 37℃ 항온수조에서 3시간 동안 반응시킨다. 반응을 마친 튜브에 0.5 μM 17:0 LPA 용액 (Chloroform/Methanol/Water=65/35/8) 200 ㎕를 분주하여 혼합한다. 원심분리기에서 14,000 rpm, 4 ℃의 조건으로 10분간 원심분리한다. 50% 메탄올 용액 100 ㎕를 96-well polypropylene plate(Agilent Technology 5042-1385)에 먼저 분주하고, 원심분리를 끝낸 튜브의 상층액 50 ㎕를 조심스럽게 plate에 옮겨 혼합한다. Well cap(Thermo 276011)으로 덮은 후 LC-MS/MS(Agilent 1260)으로 분석을 행했다.
100 - (3시간 혈청 + 검액 / 3시간 혈청 + 대조군) × 100 의 식으로 백분율값(% inhibition)을 구한 뒤, GraphPad Prism® 소프트웨어[Windows 용 GraphPad 버전 9.3.1 GraphPad Software, La Jolla California USA, www.graphpad.com] 의 4-파라미터 변수방법을 사용하여 억제 곡선을 피팅하여 결정하였다.
하기 표 7에서 마우스 혈청은 (m), 인간 혈청은 (h)로 표기하였다.
실시예 IC50 (nM) 실시예 IC50 (nM)
1 A (h) 16 B (h)
5 A (h) 22 A (h)
7 A (h) 33 A (h)
11 A (h) 34 B (h)
12 A (h) 48 A (h)
15 C (h)
(저해활성의 표시 A: IC50 ＜ 10 nM; B: IC50 = 10 nM~100 nM; C: IC50 ＞ 100 nM)
상기 표 7의 결과로부터, 본 발명의 화합물은 마우스 또는 인간 혈청 존재하에서 리소포스파티드산을 감소시키며, 오토탁신에 의한 리소포스파티드산의 생성을 억제할 수 있음을 확인하였다.
실험예 3: 인간 혈청에서 오토탁신 저해 활성 에세이 (LysoPLD (TOOS)) 측정
각 피험 화합물 용액(0.5mM, 100% 디메틸설폭시드)을 96-well V bottom plate(Costar 3363)에서 4배씩 희석한다. 피험 화합물 용액(100% 디메틸설폭시드) 각각을 1X lysoPLD buffer(100mM Tris-HCl(pH 9.0), 500mM NaCl, 5mM MgCl2, 0.05% TritonX-100)로 10배 희석한 후 10 ㎕ (10% 디메틸설폭시드)를 96-well plate(Thermo ScientificTM, 카탈로그번호 269620)에 분주한다. 1X lysoPLD buffer 5 ㎕를 첨가하고 계속해서 Pooled Human plasma (Innovative research, Inc. 카탈로그번호 IPLANAH50ML-32895)를 10 ㎕ 첨가하여 혼합한 후 37℃ incubator에서 30분간 반응한다. 이어서 2mg/mL 18:1 Lyso PC (Avanti Polar Llipid, Inc., 카탈로그번호 845875P)를 1X lysoPLD buffer에 희석하여 25 ㎕씩 첨가한 후 37℃ incubator에서 24 시간 동안 추가 반응한다. 검출 용액 (4.5mM 4-animoantioyrine, 2.7mM TOOS (N-ethyl-N-[2-hydroxy-3-sulfopropyl]-3-methylaniline), 20U/mL horseradish peroxidase, 3U/mL choline oxidase, 50mM Tris-HCl (pH 8.0), 4.5mM MgCl2)을 50 ㎕씩 첨가하고 상온에서 10분간 반응한다. EPOCH2 microplate spectrophotometer (BioTek)를 이용하여 555nm 파장에서 흡광도를 측정한다. 다음과 같은 수식[100 - [(검액 OD - blank OD) / (대조군 OD - blank OD)] × 100]으로 백분율값(% inhibition)을 구한 뒤, GraphPad Prism ® 소프트웨어[Windows 용 GraphPad 버전 9.3.1 GraphPad Software, La Jolla California USA, www.graphpad.com] 의 4-파라미터 변수방법을 사용하여 IC50값을 산출하였다.
실시예 IC50 (nM) 실시예 IC50 (nM) 실시예 IC50 (nM)
8 B 33 A 45 A
9 A 34 B 48 A
10 A 40 B 53 A
15 C 41 B
(저해활성의 표시 A: IC50 ＜ 10 nM; B: IC50 = 10 nM ~ 50 nM; C: IC50 ＞ 50 nM)
상기 표 8의 결과로부터, 본 발명의 화합물은 인간 혈청 존재하에서 리소포스파티드산을 감소시키며, 오토탁신에 의한 리소포스파티드산의 생성을 억제할 수 있음을 확인하였다.
실험예 4: CTGF 발현 저해 활성 에세이 측정
일차 폐 섬유 아세포주 LL29(CCL-134)를 12 웰 플레이트에 웰 당 200,000 세포의 농도로 밤새 평판 배양하였다. 세포는 15% FBS(fetal bovine serum)와 항생제(100U/㎖ 페니실린, 100 ㎍/㎖ 스트렙토마이신)가 첨가된 Ham's F-12K 배지(Gibco, 카탈로그번호 21127022)을 사용하여 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다. 이후 무혈청 배지로 교환 후 4시간 동안 혈청 결핍(Serum starvation) 상태를 유지한다. 혈청 결핍된 LL29 세포에 18:1 LPC 용액 25 μM (Avanti, 카탈로그번호 845875)와 인간 ENPP2 효소 1nM로 처리함과 동시에 화합물을 1 μM 처리 후 하루 간 배양한다. 이후 AccuPrep® Universal RNA Extraction Kit (Bioneer, 카탈로그번호 K-3140)으로 RNA를 추출 후 RNA로부터 AccuPower® RT PreMix & Master Mix (Bioneer, 카탈로그번호 K-2044)를 사용하여 cDNA를 합성하였다. qPCR 반응액은 2ng(총 RNA량 기준) Luna® Universal qPCR Master Mix (New england biolabs, 카탈로그번호 M3003S) 및 10 μM 프라이머 각각을 1 ㎕를 첨가하여 총 10 ㎕로 구성하였다. qPCR은 QuantStudio 1 Real-Time PCR (Applied Biosystems)을 사용하여 95℃, 10분간 변성한 후 95℃, 15초, 60℃, 1분간 40회 반응조건으로 시행하였다. CTGF 유전자 카피수의 정량을 위해 18srRNA 내부 표준 유전자(Housekeeping gene)를 사용하여 샘플간의 표적 유전자 카피수를 보정하였다. 화합물이 처리된 각 샘플의 CTGF 유전자 Ct로부터 내부 표준 유전자의 Ct를 차감함으로써 샘플 간의 카피수를 보정하였다. 이후 표적 유전자의 Ct값과 LPC가 처리된 샘플의 Ct값의 차이(델타 Ct)와 각 화합물이 처리된 샘플을 비교함으로서 %저해활성 수치를 산출하고, 그 결과를 하기 표 9에 나타내었다.
실시예 %저해활성 실시예 %저해활성 실시예 %저해활성
1 B 21 B 38 B
3 B 22 A 39 B
4 B 23 B 42 C
5 B 24 B 43 B
6 B 25 B 44 B
7 B 26 A 46 A
9 B 27 A 47 B
11 B 28 B 48 B
12 A 29 B 49 B
13 B 30 B 50 B
14 A 31 B 54 B
17 B 33 B 55 B
18 B 34 C 56 A
19 B 37 B
(%저해활성의 표시 A: ＞70%; B: 30%~70%; C: ＜30%)
상기 표 9의 결과로부터, 본 발명의 화합물은 오토탁신에 의한 CTGF 발현을 억제할 수 있음을 확인하였다.
이상, 본 발명의 실시예를 설명하였지만, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적인 특징으로 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예는 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.

Claims (15)

  1. 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:
    [화학식 1]

    상기 화학식 1에서,
    A는 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 치환 또는 비치환된 5원 내지 11원의 모노- 또는 바이- 헤테로사이클릭 환이고,
    L은 단일결합, -C(=O)-, -C(=O)-NR1-, -C(=O)-NR2-(CR3R4)a-, 또는 -S(=O)2-NR5-이고,
    B는 치환 또는 비치환된 카보사이클릭 환; 또는 치환 또는 비치환된 헤테로사이클릭 환이고,
    R1 내지 R5는 각각 독립적으로 수소, 또는 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알킬기이고,
    a는 1 내지 5의 정수이다.
  2. 제1항에서,
    상기 A는 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 치환 또는 비치환된 5원 내지 6원의 헤테로아릴 환; 트리아졸기를 포함하는 치환 또는 비치환된 9원 내지 10원의 바이사이클릭 헤테로사이클릭 환; 또는 옥사졸리디논기를 포함하는 치환 또는 비치환된 9원 내지 10원의 바이사이클릭 헤테로사이클릭 환인 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  3. 제1항에서,
    상기 A는 치환 또는 비치환된 피리딘기, 치환 또는 비치환된 티아졸기, 치환 또는 비치환된 벤족사졸론기, 치환 또는 비치환된 벤조트리아졸기, 치환 또는 비치환된 테트라하이드로벤조트리아졸기, 치환 또는 비치환된 트리아졸로피리딘기 또는 치환 또는 비치환된 테트라하이드로트리아졸로피리딘기인 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  4. 제1항에서,
    상기 A는 하기 구조에서 선택되는 것인 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:

    상기 Ra는 수소, R6-S(=O)2-NH-, R6-S(=O)2-CH2- 또는 테트라졸일기이고,
    Rb는 할로겐, 또는 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알콕시기이고,
    R6는 히드록시기, 또는 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알킬기이고,
    d는 0 내지 6의 정수이고,
    e는 0 내지 3의 정수이다.
  5. 제1항에서,
    상기 A는 하기 구조에서 선택되는 것인 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:

    상기 Rb는 할로겐, 또는 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알콕시기이고,
    e는 0 내지 1의 정수이다.
  6. 제1항에서,
    상기 L은 하기 구조에서 선택되는 것인 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:

    상기 R3 및 R4는 각각 독립적으로 수소 또는 치환 또는 비치환된 C1-C5의 알킬기이다.
  7. 제1항에서,
    상기 B는 치환 또는 비치환된 C6-C10 카보사이클릭 환; 또는 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 치환 또는 비치환된 5원 내지 11원의 모노- 또는 바이- 헤테로사이클릭 환인 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  8. 제1항에서,
    상기 B는 치환 또는 비치환된 C6-C10의 아릴렌; 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 치환 또는 비치환된 5원 내지 6원의 헤테로아릴렌; 또는 이소옥사졸기를 포함하는 치환 또는 비치환된 8원 내지 11원의 스피로 사이클릭 환인 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  9. 제1항에서,
    상기 B는 치환 또는 비치환된 페닐렌, 치환 또는 비치환된 피리도닐렌, 치환 또는 비치환된 이소옥사졸릴렌, 치환 또는 비치환된 피라졸릴렌, 치환 또는 비치환된 티아졸릴렌 또는 치환 또는 비치환된 티아디아졸릴렌인 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
  10. 제1항에서,
    상기 B는 하기 구조에서 선택되는 것인 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:

    상기 Rc 및 Rc1 내지 Rc6은 각각 독립적으로 수소, 할로겐기, 히드록시기, 카복실기, 치환 또는 비치환된 C1-C10의 일킬기, 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알콕시기, -NR7R8 또는 -C(=O)OR9이되, 상기 R7 및 R8는 서로 연결되어 포화 단환고리를 형성할 수 있고, 상기 형성된 고리는 질소 또는 산소로부터 선택되는 헤테로원자를 하나 이상 포함할 수 있으며, 히드록시기 및 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알킬기로부터 선택되는 하나 이상의 치환체로 더 치환될 수 있고,
    R9는 수소, 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알킬기 또는 치환 또는 비치환된 C3-C10의 사이클로알킬기이고,
    f는 0 내지 4의 정수이고,
    g는 0 내지 2의 정수이고,
    h는 0 내지 3의 정수이고,
    s 및 t는 서로 같거나 상이하고, 각각 독립적으로 0 내지 4의 정수이고, 이때 s 및 t의 합은 2 내지 5이다.
  11. 제1항에서,
    상기 B는 하기 구조에서 선택되는 것인 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:

    상기 Rc는 수소, 할로겐기, 히드록시기, 카복실기, 치환 또는 비치환된 C1-C10의 일킬기, 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알콕시기, -NR7R8 또는 -C(=O)OR9이되,
    상기 R7 및 R8는 서로 연결되어 포화 단환고리를 형성할 수 있고, 상기 형성된 고리는 질소 또는 산소로부터 선택되는 헤테로원자를 하나 이상 포함할 수 있으며,
    R9는 수소 또는 치환 또는 비치환된 C1-C10의 알킬기이고,
    f는 0 내지 4의 정수이다.
  12. 제1항에서,
    상기 화합물은 하기 구조의 화합물들로부터 선택되는 것인 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:



    .
  13. 제1항 내지 제12항에서 선택되는 어느 한 항에 따른 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 오토탁신 저해제 조성물.
  14. 제1항 내지 제12항에서 선택되는 어느 한 항에 따른 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 오토탁신 활성과 관련된 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
  15. 제1항 내지 제12항에서 선택되는 어느 한 항에 따른 화합물, 이의 입체 이성질체, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 심혈관 질환, 암, 비만, 당뇨병, 급성 신부전, 만성 신장병, 당뇨병성 신증, 급성 신장 이식 거부반응, 만성 동종이식 신증, 간 경화증, 간 출혈, 소양증, 비알코올성 지방간염, 급성 및 만성 간 이식 거부반응, 관절염, 아토피 피부염, 천식, 신경성 동통, 정신 분열증, 신경세포염증, 말초신경 신경장애, 자율신경 신경장애, 전신병, 혈관염, 유육종증, 과민성 폐렴, 폐포 단백질증, 랑게르한스 세포 육아종증, 림프관평활근종증, 방사선 유발 섬유증, 규폐증, 석면 유도된 폐 섬유증, 급성 호흡곤란 증후군(ARDS), 심근 및 혈관 섬유증, 신장 섬유증, 간 섬유증, 폐 섬유증, 피부 섬유증, 경피증, 포낭성 복막염, 신장 간질성 섬유증, 사구체 경화증, 비알코올성 간 지방증, 간 섬유증, 간 경화증, 특발성 폐 섬유증, 증식성 및 비증식성 망막증, 건조 및 습한 연령 관련 황반 변성(AMD), 황반 부종, 중추 동맥/정맥 폐쇄, 외상성 손상, 녹내장, 담즙울체성 형태의 만성소양증 및 급성 또는 만성 장기 이식 거부반응으로부터 선택되는 질병의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
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