KR20210013544A - Erbb/btk 억제제 - Google Patents

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KR20210013544A
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젱타오 리
하오 조우
웨이 주
창마오 센
루민 왕
웬젱 리우
시앙 첸
혼충 추이
젠판 양
시아오린 장
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디잘 (지앙수) 파마슈티칼 씨오., 리미티드
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Abstract

본 개시내용에는 ErbB(예컨대, EGFR 또는 Her 2), 특히 ErbB 및 BTK의 돌연변이 형태를 억제하는 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체, 및 그 화합물을 포함하는 약제학적 조성물이 개시되어 있다. 상기 화합물 및 약제학적 조성물은 암을 포함하는, ErbB(특히, ErbB의 돌연변이 형태) 또는 BTK 관련 질환을 효과적으로 치료할 수 있다.

Description

ERBB/BTK 억제제
본 개시내용은 ErbB(예컨대, EGFR 또는 Her2), 특히 ErbB의 돌연변이 형태를 억제하고/하거나, 브루톤 티로신 키나아제(BTK: Bruton's tyrosine kinase)를 억제하는 화합물에 관한 것이다. 또한, 본 개시내용은 하나 이상의 그 화합물을 활성 성분으로서 포함하는 약제학적 조성물, 및 ErbB(예컨대, EGFR 또는 Her2)의 돌연변이 형태 및/또는 BTK와 관련된 장애를 치료하기 위한 의약의 제조에서의 그 화합물의 용도에 관한 것이다.
ErbB 패밀리 수용체 티로신 키나아제는 이의 티로신 인산화 잔기에서 인산화 사건을 통해 2차 메시징 이펙터를 활성화시킴으로써 세포 외부로부터 내부로 신호를 전송하는 작용을 한다. 증식, 탄수화물 이용, 단백질 합성, 혈관신생, 세포 성장 및 세포 생존을 포함하는 다양한 세포 과정은 그러한 신호에 의해 조절된다. ErbB 패밀리 신호전달의 탈조절은 증식, 침습, 전이, 혈관신생, 및 종양 세포 생존을 조절하며 폐암, 두경부암 및 유방암을 비롯한 많은 인간 암과 관련될 수 있다. ErbB 수용체 신호 전달 및 이의 종양형성 관련성에 대한 상세한 개관은 문헌[New England Journal of Medicine, 2008, Vol. 358:1160-74 및 Biochemical and Biophysical Research Communications, 2004, Vol. 319: 1-11]에 제공되어 있다.
EGFR은 신경교종 및 비소세포 폐 암종과 같은 많은 암에서 과발현 및/또는 돌연변이되는 것으로 밝혀졌다. 예를 들어, 제피티닙(IRESSAT®), 에를로티닙 (TARCEVA®), 라파티닙(TYKERB®, TYVERB®), 파니투무맙(VECTIBIX), 세툭시맙 (ERBITUX), 오시메르티닙(TAGRISSO, AZD9291) 및 아파티닙(GIOTRIF)을 포함하는, EGFR을 표적으로 하는 항암 약물은 현재 임상적으로 이용 가능하다. 후천성 약물 내성이 재발한 대다수의 환자에서, 잔기 T790M에서 EGFR의 돌연변이가 이러한 임상적으로 내성이 있는 환자의 적어도 절반에서 검출되었다. 더욱이, T790M 돌연변이는 또한 기존에 존재할 수 있으며, 예를 들어, 제피티닙 치료를 받은 적이 없는 L858R/T790M 돌연변이를 가진 환자가 존재하며, 생식계열 EGFR T790M 돌연변이는 특정 가족성 폐암과 연관되어 있는데, 이는 T790M 돌연변이에 대하여 독립적인 종양형성 역할이 존재할 수 있음을 시사한다. BIBW2992, HKI-272 및 PF-0299804와 같은, 2세대 공유 억제제를 포함하는 현재 개발중인 약물은 기존 약물에 대한 내성이 있는 T790M 돌연변이에 대해 효과적이지만 야생형(WT) EGFR의 동시 억제로 인해 용량 제한 독성을 나타낸다. 정상 피부 및 장 세포에서 WT EGFR 신호전달 경로의 억제와 관련된 것으로 간주되는 피부 발진 및 설사와 같은 부작용은 또한 제피티닙 또는 에를로티닙으로 치료된 NSCLC 환자에서 >60%로 보고되었다(Zhou CC et al. Journal of Clinical Oncology, 2011, Vol. 12: 735-42; Mok TS et al. New England Journal of Medicine, 2009, Vol. 361: 947-57).
EGFR 엑손 20 삽입은 EGFR 돌연변이 폐암의 약 4-9.2%에서 발견되었으며(Mitsudomin and Yatabe FEBS J., 2010; 277(2):301-8), 그 대부분은 EGFR의 키나아제 도메인의 C-헬릭스를 따르는 루프 내에서, 엑손 20의 아미노산 767 내지 774를 코딩하는 영역에서 발생한다(Yasuda et al. Lancet Oncol., 2012; 13(1): e23-31). 전형적인 EGFR 엑손 20 삽입 돌연변이를 숨기고 있는 폐암 환자는 제피티닙 또는 에를로티닙 또는 아파티닙에 반응하지 않는 것으로 보고되었다(Yasuda et al. Lancet Oncol., 2012, 13(1): e23-31; Yasuda et al. Sci Transl Med., 2013, 5(216): 216ra177).
Her2 과발현은 유방암, 난소암, 방광암, 비소세포 폐 암종 및 기타 여러 가지 종양 유형에서 발생할 수 있다. Her2를 표적으로 하는 임상적으로 이용 가능한 항암 약물은 트라스투주맙(허셉틴으로도 알려져 있음)을 포함한다. 유방암 환자의 3분의 2가 허셉틴에 잘 반응하긴 하지만, 일부 Her2 양성 유방암 환자는 그 약물에 반응하지 않는다. 무응답 환자군이 Her2에서 약물 내성 돌연변이를 가질 수 있다는 것은 가능하다. 4개의 아미노산 YVMA 삽입 돌연변이는 Her2의 엑손 20의 코돈 775에서 발생하고, 또한 약 2-4%의 비흡연 비소세포 폐암 환자에서 발견되었으며, 이러한 Her2 YVMA 돌연변이를 갖는 환자는 공지된 EGFR 억제제에 크게 내성이 있는 것으로 밝혀졌다(Arcila et al. Clin Cancer Res., 2012, 18:4910-4918).
브루톤 티로신 키나아제(BTK)는 B 세포에서 주로 발현되고 림프계, 조혈계 및 혈액계에 분포된 세포질 티로신 키나아제의 src 관련 Tec 패밀리의 구성원이다. BTK는 B 세포의 발생, 활성화 및 생존에 필요한 B 세포의 B 세포 수용체 신호전달 경로에서 중요한 역할을 한다. 따라서, BTK 억제제는 만성 림프구성 백혈병(CLL) 및 비호지킨 림프종(NHL), 외투 세포 림프종(MCL), 및 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL)과 같은 BCR 신호전달에 의존하는 B 세포 악성 종양을 치료할 목적으로 개발되고 있다. 또한, BTK는 대식세포 활성화 및 전염증성 사이토카인의 생성을 조절하는 톨 유사 수용체(Toll-like receptor) 신호전달의 촉진에도 연루되어 있다. 여러 연구에 의하면, 다운스트림 캐스케이드의 전사활성화를 매개하는 BTK와 TLR 신호전달 경로 사이의 크로스토크가 입증되었다. 또한, BTK는 면역 조절에 중요한 역할을 하는 것으로 밝혀졌다. BTK는 B 세포 악성 종양의 치료뿐만 아니라 자가면역 질환의 치료를 위한 매력적인 표적이 되고 있다(Ping et al., Oncotarget, 2017, 8 (24):39218-39229 참조). CLL, 외투 세포 림프종(MCL) 및 발덴스트롬 매크로글로불린혈증(WM)의 치료에 승인되어 있는 비가역적, 소 분자 BTK 억해제인, 이브루티닙을 포함하는 BTK를 표적으로 하는 항암 약물은 현재 임상적으로 이용할 수 있다.
따라서, WT EGFR 보다 돌연변이 EGFR에 대한 선택성이 더 우수하거나, 또는 WT Her2 보다 돌연변이 Her2에 대한 선택성이 더 우수한 신규한 ErbB(특히, EGFR 또는 Her2) 억제제를 개발할 필요성이 남아 있다. 또한 신규한 BTK 억제제를 개발할 필요성도 남아 있다.
한 양상에서, 본 개시내용은 하기 화학식(I)로 표시되는 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체를 제공한다:
Figure pct00001
또 다른 양상에서, 본 개시내용은 하나 이상의 화학식(I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.
또 다른 양상에서, 본 개시내용은 ErbB, 바람직하게는 EGFR 또는 HER2를 억제하기 위한, 더 바람직하게는 EGFR 또는 HER2의 하나 이상의 돌연변이 형태를 억제하기 위한 의약으로서 사용하기 위한, 화학식(I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체, 또는 전술한 것 중 하나 이상을 포함하는 약제학적 조성물을 추가로 제공한다.
또 다른 양상에서, 본 개시내용은 대상에서 ErbB, 바람직하게는 EGFR 또는 HER2, 더 바람직하게는 EGFR 또는 HER2의 하나 이상의 돌연변이 형태를 억제하기 위한 의약의 제조에서의, 화학식(I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체, 또는 전술한 것 중 하나 이상을 포함하는 약제학적 조성물의 용도를 제공한다.
또 다른 양상에서, 본 개시내용은 하나 이상의 화학식(I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체, 또는 전술한 것 중 하나 이상을 포함하는 약제학적 조성물을 사용하여 ErbB, 바람직하게는 EGFR 또는 HER2, 더 바람직하게는 EGFR 또는 HER2의 하나 이상의 돌연변이 형태를 억제하는 방법을 제공한다.
또 다른 양상에서, 본 개시내용은 화학식(I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체, 또는 전술한 것 중 하나 이상을 포함하는 약제학적 조성물을 사용하여 ErbB 관련 장애(예컨대, 암)를 치료하는 방법을 제공한다.
추가 양상에서, 본 개시내용은 제2 치료제, 바람직하게는 항종양제와 조합된 화학식(I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체를 제공한다.
또 다른 양상에서, 본 개시내용은 화학식(I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체와 제2 치료제, 바람직하게는 항종양제와의 조합된 용도를 제공한다.
화합물
한 양상에서, 본 개시내용은 하기 화학식(I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체를 제공한다:
Figure pct00002
식 중,
A1은 N 또는 CR8이고;
A2, A3, A4 및 A5는 각각 독립적으로 N 또는 CR9이며, A2, A3, A4 및 A5 중 하나 만이 N이며;
R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소 또는 할로겐, 히드록실, -NRaRb, C1-12 알킬, C1-12 알콕시, 3-10원 포화 또는 불포화 카르보시클릴, 3-10원 포화 또는 불포화 헤테로시클릴 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환된 C1-12 알킬이고, 각각의 C1-12 알킬, C1-12 알콕시, 3-10원 포화 또는 불포화 카르보시클릴, 3-10원 포화 또는 불포화 헤테로시클릴은 비치환되거나 C1-12 알킬에 의해 단일- 또는 다중- 치환될 수 있으며,
Ra 및 Rb는 각각 독립적으로 수소 또는 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, 또는 C1-12 알콕시에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있는 C1-12 알킬로부터 선택되고,
또는 Ra 및 Rb는 이들이 결합된 질소 원자와 함께 할로겐, 히드록실, 또는 C1-12 알킬에 의해 임의로 단일- 또는 다중- 치환된 3-10원 포화 또는 불포화 헤테로시클릴을 형성하며;
또는 R1 및 R2는 이들이 결합된 질소 원자와 함께 N, O, 및 S로부터 선택된 하나 이상의 추가 헤테로원자를 임의로 포함하는 3-12원 모노시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 형성하며, 이 고리는 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬, C1-12 알콕시, -NRaRb, 또는 -C1-12 알킬-NRaRb에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있고;
R3은 H, C1-12 알킬, 또는 -C1-12 알킬-NRaRb이며;
R4 및 R5는 각각 독립적으로 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬, 또는 C1-12 알콕시 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환된 C1-6 알킬이고,
또는 R4 및 R5는 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 N, O, 및 S로부터 선택된 하나 이상의 헤테로원자를 임의로 포함하는 3-10원 모노시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 형성하며, 이 고리는 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬, 또는 C1-12 알콕시 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있고;
R6은 수소 또는 C1-12 알킬이고, 이 알칼은 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬 또는 C1-12 알콕시에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있으며;
R7은 수소 또는 C1-12 알킬이고, 이 알칼은 중수소, 삼중수소, 할로겐, 또는 히드록실에 의해 임의로 단일- 또는 다중- 치환될 수 있으며;
R8은 수소, 중수소, 삼중수소, 할로겐, 시아노, 히드록실, C1-12 알킬, C1-12 알콕실이고, 이들은 중수소, 삼중수소, 할로겐, 또는 C1-12 알킬 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있으며;
R9는 없거나, 수소, 중수소, 삼중수소, 할로겐, 시아노, 히드록실, C1-12 알킬, C1-12 알콕실이고, 이들은 중수소, 삼중수소, 할로겐, 또는 C1-12 알킬 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있으며;
n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
각각의 R은 독립적으로 수소, 중수소, 삼중수소, 할로겐, 시아노, 히드록실, C1-12 알킬, C1-12 알콕시, 3-10원 포화 또는 불포화 카르보시클릴, 또는 그것이 결합된 고리와 함께 융합된 3-10원 포화 또는 불포화 헤테로시클릴이고, 이들은 중수소, 삼중수소, 할로겐, 또는 C1-12 알킬 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있다.
일부 실시양태에서, 화학식(I)에서 A1은 N이다. 일부 실시양태에서, 화학식(I)에서 A1은 CR8이고, 여기서 R8은 수소, 중수소, 삼중수소, 할로겐, 시아노, 히드록실, C1-12 알킬, C1-12 알콕실이며, 이들은 중수소, 삼중수소, 할로겐, 또는 C1-12 알킬 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있다. 일부 실시양태에서, 화학식(I)에서 A1은 CH이다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물은 하기 화학식(Ia), 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체로 표시된다:
Figure pct00003
식 중,
A2, A3, A4 및 A5는 각각 독립적으로 N 또는 CR9이며, A2, A3, A4 및 A5 중 하나 만이 N이며;
R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소 또는 할로겐, 히드록실, -NRaRb, C1-12 알킬, C1-12 알콕시, 3-10원 포화 또는 불포화 카르보시클릴, 3-10원 포화 또는 불포화 헤테로시클릴 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환된 C1 -12 알킬이고, 각각의 C1-12 알킬, C1-12 알콕시, 3-10원 포화 또는 불포화 카르보시클릴, 3-10원 포화 또는 불포화 헤테로시클릴은 비치환되거나 C1-12 알킬에 의해 단일- 또는 다중- 치환될 수 있으며,
Ra 및 Rb는 각각 독립적으로 수소 또는 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, 또는 C1-12 알콕시에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있는 C1-12 알킬로부터 선택되고,
또는 Ra 및 Rb는 이들이 결합된 질소 원자와 함께 할로겐, 히드록실, 또는 C1-12 알킬에 의해 임의로 단일- 또는 다중- 치환된 3-10원 포화 또는 불포화 헤테로시클릴을 형성하며;
또는 R1 및 R2는 이들이 결합된 질소 원자와 함께 N, O, 및 S로부터 선택된 하나 이상의 추가 헤테로원자를 임의로 포함하는 3-12원 모노시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 형성하며, 이 고리는 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬, C1-12 알콕시, -NRaRb, 또는 -C1-12 알킬-NRaRb에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있고;
R3은 H, C1-12 알킬, 또는 -C1-12 알킬-NRaRb이며;
R4 및 R5는 각각 독립적으로 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬, 또는 C1-12 알콕시 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환된 C1-6 알킬이고,
또는 R4 및 R5는 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 N, O, 및 S로부터 선택된 하나 이상의 헤테로원자를 임의로 포함하는 3-10원 모노시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 형성하며, 이 고리는 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬, 또는 C1-12 알콕시 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있고;
R6은 수소 또는 C1-12 알킬이고, 이 알킬은 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬 또는 C1-12 알콕시에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있으며;
R7은 수소 또는 C1-12 알킬이고, 이 알킬은 중수소, 삼중수소, 할로겐, 또는 히드록실에 의해 임의로 단일- 또는 다중- 치환될 수 있으며;
R9는 없거나, 수소, 중수소, 삼중수소, 할로겐, 시아노, 히드록실, C1-12 알킬, C1-12 알콕실이고, 이들은 하나 이상의 중수소, 삼중수소, 할로겐, 또는 C1-12 알킬에 의해 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있으며;
n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
각각의 R은 독립적으로 수소, 중수소, 삼중수소, 할로겐, 시아노, 히드록실, C1-12 알킬, C1-12 알콕시, 3-10원 포화 또는 불포화 카르보시클릴, 또는 그것이 결합된 고리와 함께 융합된 3-10원 포화 또는 불포화 헤테로시클릴이고, 이들은 중수소, 삼중수소, 할로겐, 또는 C1-12 알킬 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물은 하기 화학식(Ib), 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체로 표시된다:
Figure pct00004
식 중,
A2, A3, A4 및 A5는 각각 독립적으로 N 또는 CR9이며, A2, A3, A4 및 A5 중 하나 만이 N이며;
R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소 또는 할로겐, 히드록실, -NRaRb, C1-12 알킬, C1-12 알콕시, 3-10원 포화 또는 불포화 카르보시클릴, 3-10원 포화 또는 불포화 헤테로시클릴 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환된 C1-12 알킬이고, 각각의 C1-12 알킬, C1-12 알콕시, 3-10원 포화 또는 불포화 카르보시클릴, 3-10원 포화 또는 불포화 헤테로시클릴은 비치환되거나 C1-12 알킬에 의해 단일- 또는 다중- 치환될 수 있으며,
Ra 및 Rb는 각각 독립적으로 수소 또는 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, 또는 C1-12 알콕시에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있는 C1-12 알킬로부터 선택되고,
또는 Ra 및 Rb는 이들이 결합된 질소 원자와 함께 할로겐, 히드록실, 또는 C1-12 알킬에 의해 임의로 단일- 또는 다중- 치환된 3-10원 포화 또는 불포화 헤테로시클릴을 형성하며;
또는 R1 및 R2는 이들이 결합된 질소 원자와 함께 N, O, 및 S로부터 선택된 하나 이상의 추가 헤테로원자를 임의로 포함하는 3-12원 모노시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 형성하며, 이 고리는 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬, C1-12 알콕시, -NRaRb, 또는 -C1-12 알킬-NRaRb에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있고;
R3은 H, C1-12 알킬, 또는 -C1-12 알킬-NRaRb이며;
R4 및 R5는 각각 독립적으로 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬, 또는 C1-12 알콕시 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환된 C1-6 알킬이고,
또는 R4 및 R5는 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 N, O, 및 S로부터 선택된 하나 이상의 헤테로원자를 임의로 포함하는 3-10원 모노시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 형성하며, 이 고리는 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬, 또는 C1-12 알콕시 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있고;
R6은 수소, 또는 C1-12 알킬이고, 이는 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬 또는 C1-12 알콕시에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있으며;
R7은 수소 또는 C1-12 알킬이고, 이 알킬은 중수소, 삼중수소, 할로겐, 또는 히드록실에 의해 임의로 단일- 또는 다중- 치환될 수 있으며;
R8은 수소, 중수소, 삼중수소, 할로겐, 시아노, 히드록실, C1-12 알킬, C1-12 알콕실이고, 이들은 하나 이상의 중수소, 삼중수소, 할로겐, 또는 C1-12 알킬에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있으며;
R9는 없거나, 수소, 중수소, 삼중수소, 할로겐, 시아노, 히드록실, C1-12 알킬, C1-12 알콕실이고, 이들은 중수소, 삼중수소, 할로겐, 또는 C1-12 알킬 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있으며;
n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
각각의 R은 독립적으로 수소, 중수소, 삼중수소, 할로겐, 시아노, 히드록실, C1-12 알킬, C1-12 알콕시, 3-10원 포화 또는 불포화 카르보시클릴, 또는 그것이 결합된 고리와 함께 융합된 3-10원 포화 또는 불포화 헤테로시클릴이고, 이들은 중수소, 삼중수소, 할로겐, 또는 C1-12 알킬 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있다.
일부 실시양태에서, 화학식(I), 화학식(Ia) 또는 화학식(Ib)에서 A2, A3, A4 및 A5중 하나는 N이고 나머지는 각각 독립적으로 CR9이다. 일부 실시양태에서, 화학식(I), 화학식(Ia) 또는 화학식(Ib)에서 A2, A3, A4 및 A5는 각각 독립적으로 CR9이다. 일부 실시양태에서, 화학식(I), 화학식(Ia) 또는 화학식(Ib)에서 A2, A3, A4 또는, A5가 R에 의해 더 치환된 CR9일 때, R9은 없다.
일부 실시양태에서, n은 2이고, A2 및 A5는 CH이며, A3 및 A4는 각각 독립적 R에 의해 더 치환된 CH이고, R은 독립적으로 할로겐이다.
일부 실시양태에서, 화학식(I), 화학식(Ia) 또는 화학식(Ib)에서 R1 및 R2는 각각 독립적으로 할로겐, 히드록실, -NRaRb, C1-12 알킬, C1-12 알콕시, 3-10원 포화 또는 불포화 카르보시클릴, 3-10원 포화 또는 불포화 헤테로시클릴 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있는 치환 또는 비치환된 C1-12 알킬이고, 각각의 C1-12 알킬, C1-12 알콕시, 3-10원 포화 또는 불포화 카르보시클릴, 3-10원 포화 또는 불포화 헤테로시클릴은 비치환되거나 C1-12 알킬에 의해 단일- 또는 다중- 치환될 수 있으며,
Ra 및 Rb는 각각 독립적으로 수소 또는 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, 또는 C1-12 알콕시에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있는 C1-12 알킬로부터 선택되고,
또는 Ra 및 Rb는 이들이 결합된 질소 원자와 함께 할로겐, 히드록실, 또는 C1-12 알킬에 의해 임의로 단일- 또는 다중- 치환된 3-10원 포화 또는 불포화 헤테로시클릴을 형성한다.
일부 실시양태에서, 화학식(I), 화학식(Ia) 또는 화학식(Ib)에서 R1 및 R2는 이들이 결합된 질소 원자와 함께 N, O, 및 S로부터 선택된 하나 이상의 추가 헤테로원자를 임의로 포함하는 3-12원 모노시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 형성하며, 이 고리는 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬, C1-12 알콕시, -NRaRb, 또는 -C1-12 알킬-NRaRb에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있고;
Ra 및 Rb는 각각 독립적으로 수소 또는 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, 또는 C1-12 알콕시에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있는 C1-12 알킬로부터 선택되고,
또는 Ra 및 Rb는 이들이 결합된 질소 원자와 함께 할로겐, 히드록실, 또는 C1-12 알킬에 의해 임의로 단일- 또는 다중- 치환된 3-10원 포화 또는 불포화 헤테로시클릴을 형성한다.
일부 실시양태에서, 화학식(I), 화학식(Ia) 또는 화학식(Ib)에서 R1 및 R2는 각각 독립적으로 하기의 기들로부터 선택되며, 이들은 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, C1-12 알콕시, 또는 C1-12 알킬에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있으며, 여기서 C1-12 알킬은 중수소, 삼중수소, 할로겐, 또는 히드록실에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있다.:
Figure pct00005
.
일부 실시양태에서, 화학식(I), 화학식(Ia) 또는 화학식(Ib)에서 R1 및 R2는 각각 독립적으로 하기의 기들로부터 선택된다:
Figure pct00006
일부 실시양태에서, 화학식(I), 화학식(Ia) 또는 화학식(Ib)에서 R1 및 R2는 이들이 결합된 질소 원자와 함께 하기의 기들로부터 선택된 3-12원 모노시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 형성하며, 이 고리는 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬, C1-12 알콕시, -NRaRb, 또는 -C1-12 알킬-NRaRb에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있다:
Figure pct00007
.
일부 실시양태에서, 화학식(I), 화학식(Ia) 또는 화학식(Ib)에서 R1 및 R2는 이들이 결합된 질소 원자와 함께 하기의 기들을 형성한다:
Figure pct00008
일부 실시양태에서, 화학식(I), 화학식(Ia) 또는 화학식(Ib)에서 R4 및 R5는 각각 독립적으로 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬, 또는 C1-12 알콕시 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있는 치환 또는 비치환된 C1-6 알킬이다. 일부 실시양태에서, 화학식(I), 화학식(Ia) 또는 화학식(Ib)에서 R4 및 R5는 각각 독립적으로 비치환된 C1-6 알킬이다.
일부 실시양태에서, 화학식(I), 화학식(Ia) 또는 화학식(Ib)에서 R4 및 R5는 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 N, O, 및 S로부터 선택된 하나 이상의 헤테로원자를 임의로 포함하는 3-10원 모노시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 형성하며, 이 고리는 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬, 또는 C1-12 알콕시 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있다.
일부 실시양태에서, 화학식(I), 화학식(Ia) 또는 화학식(Ib)에서 R6은 수소, 중수소, 또는 삼중수소이다.
일부 실시양태에서, 화학식(I), 화학식(Ia) 또는 화학식(Ib)에서 R7은 메틸, 디플루오로메틸 또는 트리플루오로메틸이다.
화학식(I)의 예시적인 화합물 1-98이 하기 표 1에 제시된다.
[표 1]
Figure pct00009
Figure pct00010
Figure pct00011
Figure pct00012
Figure pct00013
Figure pct00014
Figure pct00015
Figure pct00016
Figure pct00017
Figure pct00018
Figure pct00019
Figure pct00020
Figure pct00021
Figure pct00022
Figure pct00023
Figure pct00024
Figure pct00025
Figure pct00026
Figure pct00027
Figure pct00028
Figure pct00029
Figure pct00030
Figure pct00031
Figure pct00032
명확성을 위해, 별도의 실시양태들의 내용에서 기술되어 있는 본 개시내용의 특정한 특색들은 또한 단일 실시양태로 조합되어 제공될 수 있는 것으로 이해된다. 반대로, 간결성을 위해, 단일 실시양태의 내용에서 기술된 본 개시내용의 다양한 특색들은 또한 개별적으로 또는 임의의 적합한 하위 조합으로 제공될 수 있다.
본 개시내용의 다양한 위치에서, 연결 치환기가 기재되어 있다. 구조가 명확하게 연결기를 필요로 하는 경우, 그 기에 대해 나열된 마쿠쉬 변형은 연결기인 것으로 이해된다. 예를 들어, 구조가 연결기를 필요로 하고 그 변형에 대한 마쿠쉬 군 정의가 알킬을 열거하는 경우, "알킬"은 연결 알킬렌기를 나타내는 것으로 이해된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "치환된"은, 화학기를 의미할 때, 화학기가 치환기에 의해 제거되어 치환되는 하나 이상의 수소 원자를 갖는다는 것을 의미한다. 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "치환기"는 해당 기술 분야에 공지된 일반적인 의미를 가지며, 모체 기에 공유적 결합되거나 또는 적절한 경우 융합되어 있는 화학 모이어티를 의미한다. 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "임의로 치환된" 또는 "임의로 ... 치환된"은 화학기가 치환기를 갖지 않거나(즉, 비치환되거나) 하나 이상의 치환기를 가질 수 있다(즉, 치환된다)는 것을 의미한다. 주어진 원자에서의 치환은 원자가에 의해 제한되는 것으로 이해된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "Ci -j"는 탄소 원자수의 범위를 나타내며, 여기서 i 및 j는 정수이고 탄소 원자수의 범위는 종점들(즉 i 및 j) 및 그들 사이의 각각의 정수 점을 포함하고, 이때 i ∈{ 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10}이고, j는 i보다 크며, j ∈ {2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 또는 40}이다. 예를 들어, C1-6은 1개의 탄소 원자, 2개의 탄소 원자, 3개의 탄소 원자, 4개의 탄소 원자, 5개의 탄소 원자 및 6개의 탄소 원자를 포함하는 1 내지 6개의 탄소 원자의 범위를 나타낸다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "알킬"은 ,다른 용어의 일부로서 사용되는지 또는 독립적으로 사용되는지 여부와는 관계 없이, 포화 또는 불포화 탄화수소 사슬을 의미하며, 후자는 하나 이상의 이중 또는 삼중 결합을 갖는 탄화수소 사슬(알케닐 또는 알키닐)로 더 세분화될 수 있다. 상기 언급된 탄화수소 사슬은 직쇄 또는 분지쇄일 수 있다. 용어 "Ci -j 알킬"은 i 내지 j개의 탄소 원자를 갖는 알킬을 의미한다. 일부 실시양태에서, 알킬기는 1 내지 12개, 1 내지 8개, 1 내지 6개, 1 내지 4개, 1 내지 3개, 또는 1 내지 2개의 탄소 원자를 함유한다. 포화 알킬기의 예로는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, tert-부틸, 이소부틸, sec-부틸; 고급 동족체 예컨대 2-메틸-1-부틸, n-펜틸, 3-펜틸, n-헥실, 1,2,2-트리메틸프로필 등이 포함되지만, 이에 국한되는 것은 아니다. 불포화 알킬기의 예로는 에테닐, n-프로페닐, 이소프로페닐, n-부테닐, sec-부테닐, 에티닐, 프로핀-1-일, 프로핀-2-일 등이 포함되지만, 이에 국한되는 것은 아니다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "할로" 및 "할로겐"은 불소, 염소, 브롬 및 요오드로부터 선택된 원자를 의미한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "시아노"는 화학식 -CN의 기를 의미한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "히드록실"은 화학식 -OH의 기를 의미한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "알콕시"는, 다른 용어의 일부로서 사용되거나 또는 독립적으로 사용되는지 여부와는 관계 없이, 화학식 -O-알킬의 기를 의미한다. 용어 "Ci -j 알콕시"는 알콕시기의 알킬 모이어티가 i 내지 j개의 탄소 원자를 갖는다는 것을 의미한다. 일부 실시양태에서, 알킬 모이어티는 1 내지 12개, 1 내지 10개, 1 내지 8개, 1 내지 6개, 1 내지 5개, 1 내지 4개, 1 내지 3개 또는 1 내지 2개의 탄소 원자를 갖는다. 알콕시기의 예로는 메톡시, 에톡시, 프로폭시(예컨대, n-프로폭시 및 이소프로폭시), t-부톡시 등이 포함되지만, 이에 국한되는 것이 아니다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "카르보시클릴"은, 다른 용어의 일부로서 사용되거나 또는 독립적으로 사용되는지 여부와는 관계 없이, 모든 고리 원자가 탄소이고 적어도 3개 이상의 고리 형성 탄소 원자를 함유하는 임의의 고리를 의미한다. 일부 실시양태에서, 카르보시클릴은 3 내지 12개의 고리 형성 탄소 원자, 3 내지 10개의 고리 형성 탄소 원자, 3 내지 8개의 고리 형성 탄소 원자 또는 4 내지 8개의 고리 형성 탄소 원자를 함유할 수 있다. 카르보시클릴기는 포화 또는 부분 불포화될 수 있다. 일부 실시양태에서, 카르보시클릴기는 포화 시클릴 알킬기일 수 있다. 일부 실시양태에서, 카르보시클릴기는 그의 고리계 내에 적어도 하나의 이중 결합을 함유하는 불포화 시클릭 알킬기일 수 있다. 일부 실시양태에서, 불포화 카르보시클릴기는 하나 이상의 방향족 고리를 함유할 수 있다.
카르보시클릴기는 모노 또는 폴리 시클릭 고리(들)(예컨대, 2, 3 또는 4개의 융합형, 가교형 또는 스피로형 고리를 가짐)을 포함할 수 있다. 모노시클릭 카르보시클릴기의 예로는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸, 시클로펜테닐, 시클로헥세닐, 시클로헥사디에닐, 시클로헵타트리에닐 등이 포함되지만, 이에 국한되는 것은 아니다. 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "스피로형 고리"는 하나의 단일 공동 원자를 통해 연결된 2개의 고리를 갖는 고리 계를 의미하고; 용어 "융합형 고리"는 2개의 인접 원자를 공유하는 2개의 고리를 갖는 고리 계를 의미하며; 용어 "가교형 고리"는 2개의 고리가 3개 이상의 원자를 공유하는 고리 계를 의미한다. 스피로형 카르보시클릴의 예로는 스피로[5.5]운데칸, 스피로-펜타디엔, 스피로[3.6]-데칸 등이 포함되지만, 이에 국한되는 것은 아니다. 융합형 카르보시클릴의 예로는 나프탈렌, 벤조피렌, 안트라센, 아세나프텐, 플루오렌, 네인(nene) 등이 포함되지만, 이에 국한되는 것은 아니다. 가교형 카르보시클릴의 예로는 비시클로[2,2,1]헵테닐, 비시클로[2.2.1]헵탄, 비시클로[2.2.2]옥탄, 비시클로 [3.3.1]노난, 비시클로[3.3.3]운데칸 등이 포함되지만, 이에 국한되는 것은 아니다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로시클릴"은 하나 이상(예컨대 1, 2 또는 3개)의 고리 원자가 산소, 황, 질소, 인 등(이에 국한되는 것은 아님)을 포함하는 헤테로 원자로 치환되어 있는 카르보시클릴기를 의미한다. 일부 실시양태에서, 헤테로시클릴은 포화 헤테로시클릴이다. 일부 실시양태에서, 헤테로시클릴은 그의 고리 계 내에 하나 이상의 이중 결합을 갖는 불포화 헤테로시클릴이다. 일부 실시양태에서, 불포화 헤테로시클릴기는 하나 이상의 방향족 고리를 함유할 수 있다.
헤테로시클릴기는 모노 또는 폴리 시클릭 고리(들)(예컨대, 2, 3 또는 4개의 융합형, 가교형 또는 스피로형 고리를 가짐)을 포함할 수 있다. 모노시클릭 헤테로시클릴기의 예로는 피롤리딜, 테트라히드로푸란, 피페리딜, 피페라지닐, 모르폴리닐 등이 포함되지만, 이에 국한되는 것은 아니다. 스피로형 헤테로시클릴의 예로는 스피로피란, 스피로옥사진 등이 포함되지만, 이에 국한되는 것은 아니다. 융합형 헤테로시클릴의 예로는 퀴놀린, 이소퀴놀린, 퀴놀리진, 퀴나졸린, 프테리딘, 크로멘, 이소크로멘, 인돌, 이소인돌, 인돌리진, 인다졸, 푸린, 벤조푸란, 이소벤조푸란, 벤즈이미다졸, 벤조티에닐, 카르바졸, 페나진, 페노티아진, 페난트리딘 기 등이 포함되지만, 이에 국한되는 것은 아니다. 가교형 헤테로시클릴의 예로는 모르판, 헥사메틸렌테트라민, 1,4-디아자비시클로[2.2.2]옥탄 (DABCO) 등이 포함되지만, 이에 국한되는 것은 아니다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "i-j원"은 i 내지 j개의 고리 형성 원자를 갖는 카르보시클릴 또는 헤테로시클릴기를 의미한다. 예를 들어, "3-8원 카르보시클릴"은 3 내지 10(예컨대, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10)개의 고리 형성 구성원을 갖는 카르보시클릴기를 의미하고; "3-10원 헤테로시클릴"은 3 내지 10(예컨대, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10)개의 고리 형성 구성원을 갖는 헤테로시클릴을 의미한다. 일부 실시양태에서, 카르보시클릴 또는 헤테로시클릴 기는 3-10원, 3-8원, 3-6원, 또는 4-6원이다. 예를 들어, 피페리디닐은 6원 헤테로시클릴의 예이며, 피라졸릴은 5원 헤테로시클릴의 예이고, 피리딜은 6원 헤테로시클릴의 예이며, 1,2,3,4-테트라히드로-나프탈렌은 10 원 카르보시클릴의 예이다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "방향족기" 또는 "방향족 고리"는 적어도 하나의 고리에서 고리 형성 원자들 사이에 교대하는 이중 결합 및 단일 결합을 갖는 모노 또는 폴리시클릭 카르보시클릴 또는 헤테로시클릴 모이어티를 의미한다. 일부 실시양태에서, 방향족 고리는 5 내지 12개, 5 내지 10개, 5 내지 8개, 6 내지 12개, 6 내지 10개, 또는 6 내지 8개의 고리 형성 원자(즉, 5-12, 5-10, 5-8, 6-12, 6-10, 또는 6-8 원)를 갖는다. 카르보시클릭 방향족기의 예로는 페닐, 나프틸, 테트라히드로나프틸, 인다닐, 이데닐 등이 포함되지만, 이에 국한되는 것은 아니다. 일부 실시양태에서, 헤테로시클릭 방향족기는 5원 또는 6원이다. 예시적인 5원 헤테로시클릭 방향족기로는 티에닐, 푸릴, 피롤릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 옥사졸릴, 피라졸릴, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 1,2,3-트리아졸릴, 1,2,4-트리아졸릴, 1,3,4-트리아졸릴, 테트라졸릴, 1,2,3-티아디아졸릴, 1,2,4-티아디아졸릴, 1,3,4-티아디아졸릴, 1,2,3-옥사디아졸릴, 1,2,4-옥사디아졸릴, 1,3,4-옥사디아졸릴 등이 있다. 예시적인 6원 헤테로시클릭 방향족기로는 피리딜, 피라지닐, 피리미디닐, 트리아지닐 및 피리다지닐이 있다.
본 개시내용의 "화합물"은, 달리 명시되지 않는 한, 도시된 구조의 모든 입체 이성질체, 기하 이성질체 및 호변 이성질체를 포괄하도록 의도된다.
용어 "입체 이성질체"는 비대칭 화합물(예컨대, 하나 이상의 비대칭적으로 치환된 탄소 원자-"비대칭 중심"을 갖는 것)의 임의의 다양한 입체 이성질체 배열(예컨대, 에난티오머, 다이아스테레오머 및 라세미체) 중 임의의 것을 의미한다. 비대칭 중심을 함유하는 본 개시내용의 화합물은 광학 활성 형태(에난티오머 또는 다이아스테레오머) 또는 광학 비활성(라세미) 형태로 단리될 수 있다. 용어 "에난티오머"는 서로 중첩될 수 없는 거울상인 입체 이성질체의 쌍을 포함한다. 한 쌍의 에난티오머의 1:1 혼합물은 "라세미 혼합물"이다. 용어 "다이아스테레오머(diastereomer)" 또는 "부분입체 이성질체(diastereoisomer)"는 적어도 2개의 비대칭 원자를 갖지만 서로 거울상이 아닌 입체 이성질체를 포함한다. 하나 이상의 비대칭 중심을 함유하는 특정 화합물은 Cahn-Ingold-Prelog R-S 시스템에 따라 각각의 비대칭 중심에서 (R)- 또는 (S)-로서 절대 배열의 용어로 정의될 수 있는 에난티오머, 다이아스테레오머 또는 다른 입체 이성질체 형태를 부여할 수 있다. 절대 배열이 알려지지 않은 분해된 화합물은 비대칭 중심에서 용어 "또는"을 사용하여 지정할 수 있다. 라세미 혼합물로부터 광학 활성 형태를 어떻게 제조하는지에 대한 방법, 예컨대 HPLC에 의한 분할 또는 입체선택적 합성은 해당 기술 분야에 공지되어 있다.
"기하 이성질체" 또는 "시스 및 트랜스 이성질체"는 화학식이 동일하지만 작용기들이 3차원 공간에서 상이한 배향으로 회전되는 화합물을 의미한다. 용어 "토오토머(tautomer)"는 동일한 화학식 및 총 전하를 갖는 화합물의 이성질체 양성자화 상태인 양성자성 토오토머를 포함한다. 양성자성 토오토머의 예로는 케톤-엔올 쌍, 아미드-이미드 산 쌍, 락탐-락팀 쌍, 엔아민-이민 쌍, 및 프로톤이 헤테로시클릭 계의 2개 이상의 위치를 점유할 수 있는 환상 형태, 예를 들어 1H- 및 3H- 이미다졸, 1H-, 2H- 및 4H- 1,2,4-트리아졸, 1H- 및 2H- 이소인돌 및 1H- 및 2H- 피라졸이 포함되지만, 이에 국한되는 것은 아니다. 토오토머는 평형 상태로 존재할 수 있거나, 적절한 치환에 의해 하나의 형태로 입체적으로 고정될 수 있다. 하나의 특정 토오토머 형태로서 명칭 또는 구조에 의해 식별된 본 개시내용의 화합물은, 달리 명시되지 않는 한, 다른 토오토머 형태를 포함하는 것으로 의도된다.
본 개시내용의 "화합물"은 또한 화합물 내의 모든 원자의 동위원소를 포함하도록 의도된다. 원자의 동위원소는 원자 번호가 동일하지만 질량수가 상이한 원자들을 포함한다. 예를 들어, 본 개시내용의 "화합물" 내에서 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 황, 불소, 염소, 브롬 또는 요오드는 이들의 동위원소, 예컨대 1H, 2H, 3H, 11C, 12C, 13C, 14C, 14N, 15N, 16O, 17O, 18O, 31P, 32P, 32S, 33S, 34S, 36S, 17F, 19F, 35Cl, 37Cl, 79Br, 81Br, 127I 및 131I(이에 국한되는 것은 아님)도 포함한다는 것을 의미한다. 일부 실시양태에서, 수소는 경수소, 중수소 및 삼중수소를 포함한다. 일부 실시양태에서, 탄소는 12C 및 13C을 포함한다.
또한, 본 개시내용의 "화합물"은 용매화 형태뿐만 아니라 비용매화 형태, 예를 들어 수화 형태, 고체 형태로 존재할 수 있으며, 본 개시내용은 이러한 용매화 형태 및 비용매화 형태를 모두 포함하고자 하는 것으로 이해되어야 한다.
또한, 본 개시내용의 "화합물"은 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 에스테르의 형태로 존재할 수 있는 것으로 이해된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "약제학적으로 허용 가능한"은, 건전한 의학적 판단의 범위 내에서, 합리적인 이익/위험 비에 상응하여, 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응 또는 다른 문제 또는 합병증 없이, 인간 및 동물의 조직과의 접촉으로 사용하기에 적합한 화합물, 물질, 조성물 및/또는 제형을 의미한다. 일부 실시 양태에서, 약제학적으로 허용 가능한 화합물, 물질, 조성물 및/또는 제형은 동물, 보다 구체적으로 인간에서의 사용에 대해 규제 기관(예컨대, 미국 식품 의약청, 중국 식품 의약청 또는 유럽 의약청)에 의해 승인된 것들 또는 일반적으로 인정된 약전(예컨대, 미국 약전, 중국 약전 또는 유럽 약전)에서 나열된 것들을 의미한다.
본원에서 사용된 바와 같이, "약제학적으로 허용 가능한 염"은 모체 화합물이 존재하는 산성 모이어티(예컨대, 카르복실 등) 또는 염기성 모이어티(예컨대, 아민, 알칼리 등)를 그의 염 형태로 변환시킴으로써 변형되는 경우인 본 개시내용의 화합물의 유도체를 의미한다. 많은 경우에, 본 개시내용의 화합물은 아미노 및/또는 카르복실 기 또는 이와 유사한 기의 존재에 의해 산 및/또는 염기 염을 형성할 수 있다. 그리고 "약제학적으로 허용 가능한 염"은 모체 화합물의 생물학적 효과 및 특성을 보유하는 산 부가 또는 염기 염을 포함하며, 이 염은 전형적으로 생물학적으로 또는 다른 점에서 바람직하지 않은 것은 아니다.
본원에서 사용된 바와 같이, "약제학적으로 허용 가능 한... 에스테르"는 생체내에서 가수 분해되고 인체내에서 용이하게 분해되어 모체 화합물 또는 이의 염을 잔류하게 하는 에스테르를 의미한다. 이러한 에스테르는 본원에서 정의된 바의 프로드러그로서 작용할 수 있다. 에스테르는 본원에 기재된 화합물 상의 아민, 히드록시, 또는 카르복실 측쇄에 의해 형성될 수 있다. 예를 들어, 개시된 화합물이 알코올 작용기를 함유하는 경우엔,ㄴ, 알코올 기의 수소 원자를, 카르복실산, 인산, 포스핀산, 술핀산, 술폰산 및 보론산 기(이에 국한되는 것은 아님)를 포함하는 산성 기로 치환하는 것에 의해 에스테르가 형성될 수 있다. 이러한 에스테르를 제조하는 절차 및 특정 기는 당업자에게 공지되어 있으며, 문헌[Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., John Wiley & Sons, New York, N.Y., 1999]과 같은 참고 자료에서 용이하게 찾을 수 있으며, 이 문헌은 전체 내용이 참고로 본원에 포함된다.
본 개시내용의 화합물의 적합한 약제학적으로 허용 가능한 염은, 예를 들어 무기산(예, 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 등) 또는 유기산(예, 포름산, 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 옥살산, 말레산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 타르타르산, 트리메스산, 시트르산, 락트산, 페닐아세트산, 벤조산, 만델산, 메탄술폰산, 나프디실산, 에탄술폰산, 톨루엔술폰산, 트리플루오로아세트산, 살리실산, 술포살리실산 등)으로부터 예를 들어 유도될 수 있는 산 부가 염을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물의 약제학적으로 허용 가능한 염은 포름산 염이다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물의 약제학적으로 허용 가능한 염은 TFA 염이다. 또한, 본 개시내용의 화합물의 적합한 약제학적으로 허용 가능한 염은, 예를 들어 무기 염기(예, 나트륨, 칼륨, 암모늄 염 및 수산화물, 주기율표의 I족 내지 XII족의 금속, 예컨대 칼슘, 마그네슘, 철, 은, 아연, 구리 등의 탄산염, 중탄산염) 또는 유기 염기(예, 1차, 2차 및 3차 아민, 천연 발생 치환된 아민을 포함하는 치환된 아민, 시클릭 아민, 염기성 이온 교환 수지 등)로부터 예를 들어 유도될 수 있는 염기 부가 염을 포함한다. 특정 유기 아민으로는 이소프로필아민, 벤자틴, 콜리네이트, 디에탄올아민, 디에틸아민, 리신, 메글루민, 피페라진 및 트로메타민이 포함되지만, 이에 국한되는 것은 아니다. 당업자라면, 실시예에서 제시된 것 이외의 산/염기 부가 염을 형성하기 위한 추가의 산 또는 염기가 또한 가능할 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 추가적인 적합한 염의 목록은, 예컨대 문헌["Remington's Pharmaceutical Sciences," 20th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., (1985); 및 "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use" by Stahl and Wermuth(Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002)]에서 찾을 수 있다.
또한, 본 개시내용은 본 개시내용의 화합물의 활성 중간체, 활성 대사산물 및 프로드러그를 포함한다. 본원에서 사용된 바와 같이, "활성 중간체"는 최종 합성된 화합물과 동일하거나 본질적으로 동일한 생물학적 활성을 나타내는 합성 과정에서의 중간체 화합물을 의미한다.
본원에서 사용된 바와 같이, "활성 대사산물"은, 특정된 화합물과 동일하거나 본질적으로 동일한 생물학적 활성을 나타내는, 동물 또는 인체에서 대사 또는 생체내 변환을 통해 생성된, 본 개시내용의 화합물 또는 그의 염 또는 프로드러그의 분해 또는 최종 생성물을 의미한다. 이러한 대사산물은, 예를 들어 투여된 화합물 또는 이의 염 또는 프로드러그의 산화, 환원, 가수분해, 아미드화, 탈아미드화, 에스테르화, 탈에스테르화, 효소 분해 등으로부터 얻어질 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, "프로드러그"는, 동물 또는 인간 대상에게 투여될 때, 활성 모체 약물을 방출하는 임의의 화합물 또는 컨쥬게이트를 의미한다. 프로드러그는 변형이, 일상적인 조작 또는 생체 내에서, 모체 화합물로 분해되는 방식으로 화합물 내에 존재하는 작용기를 변형시킴으로써 제조할 수 있다. 프로드러그는 히드록실, 아미노, 술프히드릴, 또는 카르복실기가 포유동물 대상에게 투여될 때 분해되어 각각 유리 히드록실, 아미노, 술프히드릴, 또는 카르복실 기를 형성하도록 하는 임의의 기에 결합되어 있는 화합물을 포함한다. 프로드러그의 예로는 본 개시내용의 화합물 내에서 알코올 및 아민 작용기의 아세테이트, 포르메이트 및 벤조에이트 유도체가 포함되지만, 이에 국한되는 것은 아니다. 프로드러그의 제조 및 용도는 문헌[T. Higuchi and V. Stella, "Pro-drugs as Novel Delivery Systems," Vol. 14 of the A.C.S. Symposium Series, 및 Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987]에 논의되어 있으며, 이들 문헌 둘 다는 본원에서 이들의 전문이 참고로 포함된다.
달리 명시되지 않는 한, "ErbB" 또는 "야생형 ErbB"는 정상 ErbB 패밀리 구성원을 의미한다. 한 양상에서, 본 개시내용은 ErbB 패밀리 키나아제(예, EGFR, Her2, Her3 및/또는 Her4)를 억제하는 화합물 제공한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물은 ErbB 패밀리 키나아제의 야생형(WT) 및 돌연변이 형태를 둘 다 억제할 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물은 상응하는 WT ErbB 패밀리 키나아제와 비교하여 ErbB 패밀리 키나아제의 적어도 하나의 돌연변이의 선택적 억제제이다. 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "돌연변이"는 ErbB 단백질에 대한 임의의 돌연변이를 의미하고, "돌연변이" 또는 "돌연변이된 형태"는 그 돌연변이를 함유하는 단백질을 의미한다. ErbB의 예시적인 돌연변이로는, EGFR의 L858R, T790M, G719S, G719X, delE746-A750, A763_Y764insFQEA, V769_D770insASV, H773_V774insNPH 등 및 Her2의 엑손 20 insYVMA가 포함되지만, 이에 국한되는 것은 아니다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물은 WT EGFR과 비교하여 EGFR의 적어도 하나의 돌연변이의 선택적 억제제이다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물은 WT Her2와 비교하여 Her2의 적어도 하나의 돌연변이의 선택적 억제제이다. 일부 실시 양태에서, EGFR의 적어도 하나의 돌연변이는 점 돌연변이(예컨대, L858R, T790M)이다. 일부 실시양태에서, EGFR의 적어도 하나의 돌연변이는 결실 돌연변이(예컨대, delE746-A750)이다. 일부 실시양태에서, EGFR의 적어도 하나의 돌연변이는 삽입 돌연변이(예컨대, EGFR 엑손 20 V769_D770insASV, 엑손 20 H773_V774insNPH)이다. 일부 실시양태에서, EGFR의 적어도 하나의 돌연변이는 활성화 돌연변이(예컨대, L858R, G719S 또는 delE746-A750)이다. 일부 실시양태에서, EGFR의 적어도 하나의 돌연변이는 약물 내성 돌연변이(예컨대, 엑손 20_T790M)다. 특정 실시양태에서, EGFR의 적어도 하나의 돌연변이는 T790M이다. 일부 실시양태에서, 제공된 화합물은 T790M/L858R 공 돌연변이(co-mutation)를 선택적으로 억제하고, WT EGFR 억제에 대해서 부족하다.
본원에서 사용된 바와 같이, WT EGFR/Her2의 억제와 비교하여 사용되는 용어 "선택적으로 억제한다(selectively inhibits)"는 제공된 화합물이 본원에서 기재된 적어도 하나의 어세이(예컨대, 생화학 또는 세포 어세이)에서 EGFR/Her2의 적어도 하나의 돌연변이(즉, 적어도 하나의 점 돌연변이, 적어도 하나의 결실 돌연변이, 적어도 하나의 삽입 돌연변이, 적어도 하나의 활성화 돌연변이, 적어도 하나의 내성 돌연변이, 또는 적어도 하나의 결실 돌연변이와 적어도 하나의 점 돌연변이의 조합)의 억제제로서 더 강력하다는 것을 의미한다. 일부 실시양태에서, WT EGFR 억제와 비교하여 사용되는 용어 "선택적으로 억제한다"는 제공된 화합물이 WT EGFR과 비교하여 본원에서 정의 및 기재된 바와 같은 EGFR의 적어도 하나의 돌연변이의 억제제로서 적어도 100배 더 강력하고, 적어도 50배, 적어도 45배, 적어도 40배, 적어도 35배, 적어도 30배, 적어도 25배, 적어도 20배, 적어도 15배, 적어도 10배, 적어도 5배, 적어도 4배, 적어도 3배, 적어도 2배, 적어도 1.5배, 또는 적어도 1.25배 더 강력하다는 것을 의미한다. 일부 실시양태에서, WT EGFR 억제와 비교하여 사용되는 용어 "선택적으로 억제한다"는 제공된 화합물이 WT EGFR과 비교하여 본원에서 정의 및 기재된 바와 같은 EGFR의 적어도 하나의 돌연변이의 억제제로서 최대 1500배 더 강력하고, 최대 1200배, 최대 1000배, 최대 800배, 최대 600배, 최대 400배, 최대 200배, 최대 100배, 최대 50배, 최대 10배 더 강력하다는 것을 의미한다. 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "WT EGFR에 대해서 부족하다(sparing as to WT EGFR)"은 상기 및 본원에서 정의 및 기재된 바와 같은 EGFR의 적어도 하나의 돌연변이의 선택적 억제제가 본원에서 기재된 바와 같은 적어도 하나의 어세이(예컨대, 실시예에서 상세히 기술된 바와 같은 생화학 또는 세포 어세이)의 검출 상한 내에서 WT EGFR을 억제할 수 없다는 것을 의미한다. 일부 실시양태에서, 용어 "WT EGFR에 대해서 부족하다"은 제공된 화합물이 적어도 10 μM, 적어도 9 μM, 적어도 8 μM, 적어도 7 μM, 적어도 6 μM, 적어도 5 μM, 적어도 3 μM, 적어도 2 μM, 또는 적어도 1 μM의 IC50으로 WT EGFR을 억제한다는 것을 의미한다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물은 0.1-1000nM, 바람직하게는 0.1-600nM, 1-600nM, 0.1-500nM, 1-500nM, 0.1-400nM, 1-400nM, 0.1-300nM, 1-300nM, 0.1-200nM, 1-200nM, 0.1-100nM, 1-100nM, 0.1-80nM, 0.1-50nM, 0.1-40nM, 0.1-30nM, 0.1-20nmM, 0.1-10nM, 또는 0.1-5nM, 더 바람직하게는 0.1-20nM, 0.1-10nM, 또는 0.1-5nM의 IC50 값으로 WT EGFR 및/또는 돌연변이 EGFR의 인산화를 억제한다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물은 0.1-1000nM, 바람직하게는 0.1-600nM, 1-600nM, 0.1-500nM, 1-500nM, 0.1-400nM, 1-400nM, 0.1-300nM, 1-300nM, 0.1-200nM, 1-200nM, 0.1-100nM, 1-100nM, 0.1-80nM, 0.1-50nM, 0.1-40nM, 0.1-30nM, 0.1-20nmM, 0.1-10nM, 또는 0.1-5nM, 더 바람직하게는 0.1-20nM, 0.1-10nM, 또는 0.1-5nM의 IC50 값으로 WT Her2 및/또는 돌연변이 Her2의 인산화를 억제한다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물은 1-1000nM, 바람직하게는 1-800nM, 1-600nM, 1-500nM, 1-400nM, 1-300nM, 1-300 nM, 1-200 nM, 1-100 nM, 1-80 nM, 1-60 nM, 1-40 nM, 1-20 nM, 또는 1-10 nM, 더 바람직하게는 1-300 nM, 1-200 nM, 1-100 nM, 1-80 nM, 1-60 nM, 1-40 nM, 1-20 nM, 또는 1-10 nM의 GI50 값으로 WT EGFR 및/또는 돌연변이 EGFR 함유 세포의 증식을 억제한다 .
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물은 1-1000nM, 바람직하게는 1-800nM, 1-600nM, 1-500nM, 1-400nM, 1-300nM, 1-300 nM, 1-200 nM, 1-100 nM, 1-80 nM, 1-60 nM, 1-40 nM, 1-20 nM, 또는 1-10 nM, 더 바람직하게는 1-300 nM, 1-200 nM, 1-100 nM, 1-80 nM, 1-60 nM, 1-40 nM, 1-20 nM, 또는 1-10 nM의 GI50 값으로 WT Her2 및/또는 돌연변이 Her2 함유 세포의 증식을 억제한다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물은 1-1000nM, 1000nM 초과, 2000nM 초과, 또는 3000nM 초과, 바람직하게는 1-800nM, 1-600nM, 1-500nM, 1-400nM, 1-300nM, 1-300 nM, 1-200 nM, 1-100 nM, 1-80 nM, 1-60 nM, 1-40 nM, 1-20 nM, 또는 1-10 nM, 더 바람직하게는 1-300 nM, 1-200 nM, 1-100 nM, 1-80 nM, 1-60 nM, 1-40 nM, 1-20 nM, 또는 1-10 nM의 GI50 값으로 BTK 함유 세포의 증식을 억제한다.
일부 실시양태에서, EGFR 돌연변이에 대한 화합물의 IC50 및/또는 GI50은 야생형 EGFR에 대한 화합물의 IC50 및/또는 GI50 보다 적어도 2배, 3배, 4배, 5배, 바람직하게는 10배, 20배, 30배, 50배, 또는 100배 더 높다.
합성 방법
본원에 제공된 화합물의 염, 에스테르, 수화물 또는 용매화물 또는 입체 이성질체를 포함하는 본원에 제공된 화합물의 합성이 실시예에서 합성 도식으로 설명되어 있다. 본원에서 제공된 화합물은 임의의 공지된 유기 합성 기술을 이용하여 제조될 수 있고, 임의의 다수의 가능한 합성 경로에 따라 합성될 수 있으며, 따라서 이들 도식은 단지 예시적일 뿐이며 본원에서 제공된 화합물을 제조하는데 이용될 수 있는 다른 가능한 방법을 제한하려는 것은 아니다. 또한, 도식에서 단계는 보다 잘 설명하기 위한 것이며 필요한 경우 변경될 수 있다. 실시예에서 화합물의 실시양태는 연구 및 규제 기관에 잠정 제출을 위해 중국에서 합성하였다.
본 개시내용의 화합물을 제조하기 위한 반응은 적합한 용매 중에서 수행될 수 있으며, 그 용매는 유기 합성 분야의 당업자에 의해 용이하게 선택될 수 있다. 적합한 용매는 반응이 수행되는 온도, 예컨대 용매의 동결 온도에서 용매의 비등 온도에 이르는 범위일 수 있는 온도에서 출발 물질(반응물), 중간체 또는 생성물과 실질적으로 비반응성일 수 있다. 주어진 반응은 하나의 용매 중에서 또는 하나 초과의 용매의 혼합물 중에서 수행될 수 있다. 특정 반응 단계에 따라, 특정 반응 단계에 적합한 용매는 당업자에 의해 선택될 수 있다.
본 개시내용의 화합물의 제조는 다양한 화학 기의 보호 및 탈보호를 수반할 수 있다. 보호 및 탈보호의 필요성, 및 적절한 보호기의 선택은 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 보호기의 화학은, 예를 들어, 문헌 [T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., Wiley & Sons, Inc., New York (1999)]에서 찾을 수 있으며, 이 문헌은 그의 전체가 참고로 본원에 포함된다.
반응은 당업계에 공지된 임의의 적합한 방법에 따라 모니터링될 수 있다. 예를 들어, 생성물 형성은 분광 수단, 예컨대 핵자기 공명 분광법(예컨대, 1H 또는 13C), 적외선 분광법, 분광광도법(예컨대, UV-가시광), 질량 분광분석법에 의해, 또는 크로마토그래피 방법, 예컨대 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC), 액체 크로마토그래피-질량 분광법(LCMS), 또는 박층 크로마토그래피(TLC)에 의해 모니터링될 수 있다. 화합물은 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)("Preparative LC-MS Purification: Improved Compound Specific Method Optimization" Karl F. Blom, Brian Glass, Richard Sparks, Andrew P. Combs J. Combi. Chem. 2004, 6(6), 874-883, 이것은 그의 전체가 참고로 본원에 포함된다) 및 노말 상 실리카 크로마토그래피를 포함하는 다양한 방법으로 당업자에 의해 정제될 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이 약어는 다음과 같이 정의된다: 1회의 경우 "1 x" 또는 "x 1", 2회의 경우 "2 x" 또는 "x 2", 3회의 경우 "3 x" 또는 "x 3", 4회의 경우 "4 x" 또는 "x 4", 5회의 경우 "5 x" 또는 "x 5", 섭씨 온도의 경우 "℃" , 당량(들)의 경우 "eq" 또는 "eq.", 그램(들)의 경우 "g", 밀리그램(들)의 경우 "mg", 리터(들)의 경우 "L", 밀리리터(들)의 경우 "mL" 또는 "ml", 마이크로리터(들)의 경우 "μL", 노르말의 경우 "N", 몰의 경우 "M", 밀리몰(들)의 경우 "mmol", 분(들)의 경우 "min", 시간(들)의 경우 "h" 또는 "hr", 실온의 경우 "r.t." 또는 "rt", 분위기의 경우 "atm", 평방 인치당 파운드의 경우 "psi", 농축물의 경우 "conc.", 포화의 경우 "sat" 또는 "sat'd", 질량 분광분석법의 경우 "MS" 또는 "Mass Spec", 전자분무 이온화 질량 분광법의 경우 "ESI", 액체 크로마토그래피 질량 분광분석법의 경우 "LCMS", 고압 액체 크로마토그래피의 경우 "HPLC", 역상의 경우 "RP", 박층 크로마토그래피의 경우 "TLC" 또는 "tlc", 출발 물질의 경우 "SM", 핵자기 공명 분광법의 경우 "NMR", 양성자의 경우 "1H", 델타의 경우 "δ", 단일선의 경우 "s", 이중선의 경우 "d", 삼중선의 경우 "t", 사중선의 경우 "q", 다중선의 경우 "m", 브로드의 경우 "br", 및 헤르츠의 경우 "Hz". "α", "β", "R", "S", "E", 및 "Z"은 당업자에게 친숙한 입체 화학적 표기이다.
본원에서 제공된 화합물의 합성에 사용된 화학물질들에 대한 약어를 열거하면 다음과 같다:
Figure pct00033
Figure pct00034
Figure pct00035
Figure pct00036
약제학적 조성물
본 개시내용은 본 개시내용의 적어도 하나의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 일부 실시양태에서, 약제학적 조성물은 본 개시내용의 하나 초과의 화합물을 포함한다. 일부 실시양태에서, 약제학적 조성물은 본 개시내용의 하나 이상의 화합물, 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함한다.
약제학적으로 허용 가능한 담체는 약제학적 분야에서 공지된 방식으로 제조될 수 있는 통상의 의약 담체이다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물은 약제학적 조성물의 제조를 위해 약제학적으로 허용 가능한 담체와 혼합될 수 있다.
본원에서 사용된 바의 용어 "약제학적으로 허용 가능한 담체"는 약제학적으로 허용 가능한 물질, 조성물 또는 비히클, 예컨대 액체 또는 고체 충전제, 희석제, 부형제, 용매 또는 캡슐화 물질을 의미하며, 본원에서 제공된 화합물을 신체의 하나의 위치, 체액, 조직, 기관(내부 또는 외부) 또는 일부로부터, 신체의 다른 위치, 체액, 조직, 기관 또는 일부로 운반 또는 수송하는데 관여한다. 약제학적으로 허용 가능한 담체는 과도한 독성이나 부작용 없이 동물의 조직과 접촉하는데 사용될 수 있는 비히클, 희석제, 부형제 또는 다른 물질일 수 있다. 예시적인 약제학적으로 허용 가능한 담체는 당, 전분, 셀룰로오스, 맥아, 트라가칸트, 젤라틴, 링거액, 알긴산, 등장 식염수, 완충제 등을 포함한다. 본 개시내용에서 사용될 수 있는 약제학적으로 허용가능한 담체는 해당 기술 분야에 일반적으로 공지된 것들, 예컨대 문헌["Remington Pharmaceutical Sciences "Mack Pub. Co., New Jersey (1991)]에 개시된 것들 포함하며, 그 문헌은 본원에 참고로 포함된다.
약제학적으로 허용가능한 담체로서 작용할 수 있는 물질의 일부 예는 다음의 것들을 포함한다: (1) 당, 예컨대 락토오스, 글루코오스 및 수크로오스; (2) 전분, 예컨대 옥수수 전분 및 감자 전분; (3) 셀룰로오스, 및 그의 유도체, 예컨대 소듐 카르복시메틸 셀룰로오스, 에틸 셀룰로오스 및 셀룰로오스 아세테이트; (4) 분말 트라가칸트; (5) 맥아; (6) 젤라틴; (7) 탈크; (8) 부형제, 예컨대 코코아 버터 및 좌약 왁스; (9) 오일, 예컨대 땅콩유, 면실유, 잇꽃유, 참깨유, 올리브유, 옥수수유 및 대두유; (10) 글리콜, 예컨대 프로필렌 글리콜; (11) 폴리올, 예컨대 글리세린, 소르비톨, 만니톨 및 폴리에틸렌 글리콜; (12) 에틸 올레에이트 및 에틸 라우레이트와 같은 에스테르; (13) 한천; (14) 완충제, 예컨대 수산화마그네슘 및 수산화알루미늄; (15) 알긴산; (16) 발열원이 없는 물; (17) 등장 식염수; (18) 링거액; (19) 알코올, 예컨대 에틸 알코올 및 프로판 알코올; (20) 인산 완충 용액; 및 (21) 아세톤과 같은 약제학적 제제에 사용되는 다른 비독성의 상용성 물질.
약제학적 조성물은 대략적인 생리학적 조건을 위해 필요한 약제학적으로 허용 가능한 보조 물질, 예컨대 pH 조정제 및 완충제, 독성 조정제 등, 예를 들어 아세트산 나트륨, 염화나트륨, 염화칼륨, 염화칼슘, 락트산나트륨 등을 함유할 수 있다.
약제학적 조성물의 형태는 투여 경로, 질환의 정도, 또는 투여되는 용량(이에 국한되는 것은 아님)을 포함하는 다수의 기준에 따라 좌우된다.
약제학적 조성물은 경구, 비강, 직장, 경피, 정맥내 또는 근육내 투여를 위해 제제화될 수 있다. 원하는 투여 경로에 따라, 약제학적 조성물은 정제, 캅셀제, 환제, 당의정, 산제, 과립제, 사세트제, 카세제, 로젠지제, 현탁제, 에멀션제, 액제, 시럽제, 에어로졸제(고체로서 또는 액체 매질 중의), 스프레이제, 연고제, 페이스트제, 크림제, 로션제, 겔제, 패치제, 흡입제 또는 좌약의 형태로 제제화될 수 있다.
약제학적 조성물은 당업계에 공지된 절차를 이용하여 환자에게 투여한 후 활성 성분의 급속형, 지속형 또는 지연형 방출을 제공하도록 제제화될 수 있다. 일부 실시 양태에서, 약제학적 조성물은 지속형 방출 형태로 제제화된다. 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "지속형 방출 형태"는 대상에서, 주로 대상의 위장관에서, 장시간에 걸쳐(연장형 방출), 또는 특정 위치(제어형 방출)에서 생체 흡수에 이용 가능하게 되도록 약제학적 조성물로부터의 활성제의 방출을 의미한다. 일부 실시양태에서, 장시간은 약 1시간 내지 24시간, 2시간 내지 12시간, 3시간 내지 8시간, 4시간 내지 6시간, 1 내지 2일 또는 그 이상일 수 있다. 특정 실시양태에서, 장시간은 적어도 약 4시간, 적어도 약 8시간, 적어도 약 12시간, 또는 적어도 약 24시간이다. 약제학적 조성물은 정제 형태로 제제화될 수 있다. 예를 들어, 활성제의 방출 속도는 정제 또는 환제의 위장관 액에서 활성제의 용출 및 pH와 무관하게 후속적인 확산에 의해 제어될 수 있을뿐만 아니라, 정제의 붕해 및 침식의 물리적 과정에 의해서 영향을 받을 수 있다. 일부 실시양태에서, 문헌["Medical Applications of Controlled Release," Langer and Wise(eds.), CRC Pres., Boca Raton, Florida(1974); "Controlled Drug Bioavailability," Drug Product Design and Performance, Smolen and Ball (eds.), Wiley, New York (1984); Ranger and Peppas, 1983, J Macromol. Sci. Rev. Macromol Chem. 23:61; 및 Levy et al., 1985, Science 228:190; During et al., 1989, Ann. Neurol. 25:351; Howard et al., 1989, J. Neurosurg. 71:105]에 개시된 바와 같은 중합체 물질은 지속형 방출을 위해 사용될 수 있다. 상기 참고 문헌들은 그들 전체가 참고로 본원에 포함된다.
특정 실시양태에서, 약제학적 조성물은 본 개시내용의 화합물을 약 0.0001 mg 내지 약 5000 mg(예컨대, 약 0.0001 mg 내지 약 10 mg, 약 0.001 mg 내지 약 10 mg, 약 0.01 mg 내지 약 10 mg, 약 0.1 mg 내지 약 10 mg, 약 1 mg 내지 약 10 mg, 약 5 mg 내지 약 10 mg, 약 5 mg 내지 약 20 mg, 약 5 mg 내지 약 30 mg, 약 5 mg 내지 약 40 mg, 약 5 mg 내지 약 50 mg, 약 10 mg 내지 약 100 mg, 약 20 mg 내지 약 100 mg, 약 30 mg 내지 약 100 mg, 약 40 mg 내지 약 100 mg, 약 50 mg 내지 약 100 mg, 약 50 mg 내지 약 200 mg, 약 50 mg 내지 약 300 mg, 약 50 mg 내지 약 400 mg, 약 50 mg 내지 약 500 mg, 약 100 mg 내지 약 200 mg, 약 100 mg 내지 약 300 mg, 약 100 mg 내지 약 400 mg, 약 100 mg 내지 약 500 mg, 약 200 mg 내지 약 500 mg, 약 300 mg 내지 약 500 mg, 약 400 mg 내지 약 500 mg, 약 500 mg 내지 약 1000 mg, 약 600 mg 내지 약 1000 mg, 약 700 mg 내지 약 1000 mg, 약 800 mg 내지 약 1000 mg, 약 900 mg 내지 약 1000 mg, 약 1000mg 내지 약 2000mg, 약 2000mg 내지 약 3000mg, 약 3000mg 내지 약 4000mg, 또는 약 4000mg 내지 약 5000mg) 포함한다. 1일 대상에 적합한 투여량은 약 5 mg 내지 약 500 mg, 바람직하게는 약 5 mg 내지 약 50 mg, 약 50 mg 내지 약 100 mg, 또는 약 50 mg 내지 약 500 mg 일 수있다.
특정 실시양태에서, 약제학적 조성물은 단위 제형으로 제제화될 수 있으며, 각각의 투여량은 약 0.0001 mg 내지 약 10 mg, 약 0.001 mg 내지 약 10 mg, 약 0.01 mg 내지 약 10 mg, 약 0.1 mg 내지 약 10 mg, 약 1 mg 내지 약 10 mg, 약 5 mg 내지 약 10 mg, 약 5 mg 내지 약 20 mg, 약 5 mg 내지 약 30 mg, 약 5 mg 내지 약 40 mg, 약 5 mg 내지 약 50 mg, 약 10 mg 내지 약 100 mg, 약 20 mg 내지 약 100 mg, 약 30 mg 내지 약 100 mg, 약 40 mg 내지 약 100 mg, 약 50 mg 내지 약 100 mg, 약 50 mg 내지 약 200 mg, 약 50 mg 내지 약 300 mg, 약 50 mg 내지 약 400 mg, 약 50 mg 내지 약 500 mg, 약 100 mg 내지 약 200 mg, 약 100 mg 내지 약 300 mg, 약 100 mg 내지 약 400 mg, 약 100 mg 내지 약 500 mg, 약 200 mg 내지 약 500 mg, 약 300 mg 내지 약 500 mg, 약 400 mg 내지 약 500 mg, 약 500 mg 내지 약 1000 mg, 약 600 mg 내지 약 1000 mg, 약 700 mg 내지 약 1000 mg, 약 800 mg 내지 약 1000 mg, 약 900 mg 내지 약 1000 mg, 약 1000mg 내지 약 2000mg, 약 2000mg 내지 약 3000mg, 약 3000mg 내지 약 4000mg, 또는 약 4000mg 내지 약 5000mg의 본 개시내용의 화합물을 함유한다. 용어 "단위 제형(unit dosage form)"은 인간 대상 및 다른 포유동물을 위한 단위 투여량으로서 적합한 물리적으로 분리 단위를 의미하며, 각각의 단위는, 적합한 약제학적 담체와 회합하여, 치료 효과를 생성하도록 계산된 소정량의 활성 물질을 함유한다. 일부 실시 양태에서, 약제학적 조성물은 제1 활성 성분으로서 본 개시내용의 하나 이상의 화합물을 포함하고, 제2 활성 성분을 더 포함한다. 제2 활성 성분은 당업계에 공지된 임의의 항암제, 예를 들어 세포 신호 전달 억제제, 세포 신호 전달 억제제, 알킬화제, 토포이소머라아제 억제제, 면역 치료제, 유사분열 억제제, 항호르몬제, 화학요법 약물, EGFR 억제제, BTK 억제제, CTLA-4 억제제, MEK 억제제, PD-L1 억제제; OX40 아고니스트 등일 수 있다. 암 또는 종양을 치료하기 위한 대표적인 항암제의 예는 소라페닙, 수니티닙, 다사티닙, 보리노스타트, 템시롤리무스, 에버롤리무스, 파조파닙, 트라스투주맙, 아도-트라스투주맙 엠탄신, 페르투주맙, 베바시주맙, 세툭시맙, 라니비주맙, 페갑타닙, 파니투무맙, 트레멜리무맙, 펨브롤리주맙, 니볼루맙, 이필리무맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙, 더발루맙, 크리조티닙, 룩소리티닙, 파클리탁셀, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 시스플라틴, 카보플라틴, 젬시타빈, 타목시펜, 랄록시펜, 시플로포스파미드, 크로마부실(chromabucil), 카르무스틴, 메토트렉세이트, 플루오로우라실, 악티노마이신, 독소루비신, 에피루비신, 안트라사이클린, 블레오마이신, 미토마이신-C, 이리노테칸, 토포테칸, 테니포시드 인터루킨, 인터페론 등이 포함될 수 있지만, 이에 국한되는 것은 아니다. 일부 실시양태에서, 제2 활성제는 하나 이상의 베바시주맙, 펨브롤리주맙, 니볼루맙, 이필리무맙, 아테졸리주맙, 아벨루맙, 더발루맙, 크리조티닙 중 하나 이상이다.
치료 방법
본 개시내용은 ErbB(예를 들어, EGFR 또는 Her2 포함), 특히 ErbB 돌연변이와 관련된 질환을 치료하는 방법으로서, 본 개시내용의 하나 이상의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체, 또는 약제학적 조성물을 유효량으로 대상에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.
또한, 본 개시내용은 BTK와 관련된 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 특정 실시 양태에서, 상기 방법은 본 개시내용의 하나 이상의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체, 또는 약제학적 조성물을 유효량으로 대상에게 투여하는 것을 포함한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "ErbB와 관련된 질환" 또는 "ErbB 관련 질환"은 발병 또는 발달 또는 둘 다가 ErbB의 발현 또는 활성과 관련되는 질환을 의미한다. 그의 예로는 면역 관련 질환, 증식성 장애, 암 및 다른 질환이 포함되지만, 이에 국한되는 것은 아니다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "EGFR과 관련된 질환" 또는 "EGFR 관련 질환" 또는 "Her2와 관련된 질환" 또는 "Her2 관련 질환"은 경우에 따라 발병 또는 발달 또는 둘 다가 EGFR 또는 Her2의 게놈 변경, 발현 또는 활성과 관련되는 질환을 의미한다. 그의 예로는 면역 관련 질환, 증식성 장애, 암 및 다른 질환이 포함되지만, 이에 국한되는 것은 아니다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "BTK와 관련된 질환" 또는 "BTK 관련 질환"은 경우에 따라 발병 또는 발달 또는 둘 다가 BTK의 게놈 변경, 발현 또는 활성과 관련되는 질환을 의미한다. 특정 실시 양태에서, BTK 관련 질환은 종양학적 질환 및 자가면역 질환을 포함한다. 종양학적 질환으로는 림프종 및 백혈병이 포함되지만, 이에 국한되는 것은 아니다. 자가면역 질환으로는 류마티스성 관절염, 전신 홍반성 루푸스 및 쇼그렌 증후군이 포함되지만, 이에 국한되는 것은 아니다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "치료", "치료하다" 및 "치료하는"은 본원에서 기재된 바와 같은 질환 또는 장애, 또는 이의 하나 이상의 증상의 개시를 역전, 완화, 지연시키거나 또는 그러한 질환 또는 장해 또는 증상의 진행을 억제한다는 것을 의미한다. 일부 실시양태에서, 치료는 하나 이상의 증상이 발달된 후에 실시될 수 있다. 다른 실시양태에서, 치료는 증상이 없는 상태에서 실시될 수 있다. 예를 들어, 치료는 증상의 개시 전에 (예컨대, 증상의 이력을 고려하고/하거나 유전적 또는 다른 감수성 인자를 고려하여) 감수성이 있는 개체에게 실시될 수 있다. 또한, 치료는, 예를 들어 재발을 방지하거나 지연시키기 위해, 증상이 해결된 후에도 계속할 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에서 제공된 하나 이상의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체 또는 약제학적 조성물은 비경구 경로로 투여되거나 또는 비경구 경로가 아닌 경로로 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체, 또는 약제학적 조성물은 경구, 장내, 협측, 비측(nasally), 비강내(intranasally), 경점막, 상피(epidermally), 경피, 피부, 안과, 폐, 설하, 직장, 질, 국소, 피하(subcutaneously), 정맥내, 근육내, 동맥내, 경막내, 낭내(intracapsularly), 안와내, 심장내, 진피내(intradermally), 복강내, 경기관(transtracheally), 표피하(subcuticularly), 관절내, 피막하, 지주막하, 척수내 또는 흉골내 투여된다.
본원에서 제공된 화합물은 순수 형태, 다른 활성 성분과의 조합 또는 본 개시내용의 약제학적 조성물의 형태로 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에서 제공된 화합물은 당업계에 공지된 하나 이상의 항암제(들)와의 조합으로 동시적으로 또는 순차적으로 필요한 대상에게 투여될 수 있다. 일부 실시 양태에서, 투여는 1일 1회, 1일 2회, 1일 3회, 또는 2일마다 1회, 3일마다 1회, 4일마다 1회, 5일마다 1회, 6일마다 1회, 일주일마다 1회 수행된다.
일부 실시양태에서, 본원에서 제공된 하나 이상의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체, 또는 약제학적 조성물은 경구 투여된다. 경구 투여의 경우, 원하는 목표를 달성하는 임의의 용량이 적절하다. 일부 실시양태에서, 적합한 1일 투여량은 약 0.001-5000mg, 바람직하게는 0.1mg 내지 5g, 더 바람직하게는 5mg 내지 1g, 더 바람직하게는 10mg 내지 500mg이며, 투여는 1일 1회, 1일 2회, 1일 3회, 매일, 또는 1주마다 3-5일 수행된다. 일부 실시양태에서, 본원에서 제공된 하나 이상의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체, 또는 약제학적 조성물의 용량은 1일당 약 0.0001mg, 바람직하게는 0.001mg, 0.01mg, 0.1mg, 1mg, 10mg, 50mg, 100mg, 200mg, 250mg, 500mg, 750mg, 1000mg, 2000mg, 3000mg, 4000mg 또는 최대 약 5000mg 범위이다.
화합물의 용도
특정 실시양태에서, 본 개시내용은 ErbB(예컨대, EGFR, Her2, Her3 또는 Her4)와 관련된 질환을 치료하기 위한 의약의 제조에서의, 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체, 또는 약제학적 조성물의 용도를 제공한다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용은 돌연변이 ErbB와 관련된 질환을 치료하기 위한 의약의 제조에서의, 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체, 또는 약제학적 조성물의 용도를 제공한다. 일부 실시양태에서, 돌연변이 ErbB는 돌연변이 EGFR이다. 일부 실시양태에서, 돌연변이 ErbB는 돌연변이 Her2이다. 특정 실시양태에서, ErbB와 관련된 질환은 암을 포함하는 돌연변이 ErbB와 관련된 질환이다.
특정 실시양태에서, 본 개시내용은 BTK와 관련된 질환을 치료하기 위한 의약의 제조에서의, 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체, 또는 약제학적 조성물의 용도를 제공한다. 특정 실시양태에서, 본 개시내용은 BTK와 관련된 질환을 치료하기 위한 의약의 제조에서의, 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체, 또는 약제학적 조성물을 제공한다. 특정 실시양태에서, BTK와 관련된 질환은 암을 포함한다.
특히, 암으로는 백혈병, 교모세포종, 흑색종, 연골육종, 담관암종, 골육종, 림프종, 폐암, 선종, 골수종, 간세포 암종, 부신피질 암종, 췌장암, 유방암, 방광암, 전립선암, 간암, 위암, 결장암, 결장직장암, 난소암, 자궁경부암, 뇌암, 식도암, 골암, 고환암, 피부암, 신장암, 중피종, 신경모세포종, 갑상선암, 두경부암, 식도암, 안암(eye cancer), 전립선암, 비인두암 또는 구강암(oral cancer)이 포함되지만, 이에 국한되는 것이 아니다. 일부 실시양태에서, 암은 폐암, 유방암, 난소암, 방광암 암, 또는 교모세포종이다. 일부 실시양태에서, 암은 폐암(예컨대, 비소세포 폐암, 소세포 폐암, 선암종, 편평 세포 폐암 및 대세포 폐암)이다. 일부 실시 양태에서, 암은 전이성 폐암이다. 일부 실시 양태에서, 암은 하나 이상의 ErbB 돌연변이(예를 들어, EGFR 또는 Her2의 점 돌연변이, 결실 돌연변이, 삽입 돌연변이, 활성화 돌연변이 또는 약물 내성 돌연변이)를 갖는 암이다.
본 개시내용에서 화합물 및 이의 약제학적 조성물은 포유동물, 특히 인간에서 ErbB/BTK(발현 또는 활성)와 관련된 임의의 질환 또는 상태의 발병 또는 발달의 예방 또는 치료에 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물 및 이의 약제학적 조성물은 포유동물, 특히 인간에서 돌연변이 ErbB와 관련된 임의의 질환 또는 상태의 발병 또는 발발의 예방 또는 치료에 사용될 수 있다.
이러한 상황에서, 또한, 본 개시내용은 본 개시내용의 화합물 또는 약제학적 조성물을 단독으로 사용하거나 또는 다른 성분(예컨대, 제2 활성 성분, 예컨대 항암제)과의 조합으로 사용하여 치료하기에 적합한 환자를 스크리닝하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 환자로부터 종양 샘플을 시퀀싱하는 것, 및 환자에서 ErbB(예컨대, EGFR 또는 Her2) 또는 BTK의 축적을 검출하거나 환자에서 ErbB(예컨대, EGFR 또는 Her2) 또는 BTK의 돌연변이 상태를 검출하는 것을 포함한다.
실시예
하기는 본 개시내용의 일반적인 방법을 보다 상세히 설명한다. 본 개시내용의 화합물은 당업계에 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다. 하기는 본 개시내용의 바람직한 화합물의 상세한 제조 방법을 예시한다. 그러나, 이는 본 개시내용의 화합물의 제조 방법을 제한하고자 하는 것은 아니다.
합성예
하기 실시예에서 화합물의 구조는 핵 자기 공명(NMR) 또는/및 질량 분광분석법(MS)으로 특징화되었다. NMR 시프트(δ)는 10-6(ppm)의 단위로 제공되었다. 1H-NMR 스펙트럼은 디메틸술폭시드-d 6 (DMSO-d 6 ) 또는 CDCl3 또는 CD3OD 또는 D2O(Aldrich 또는 Cambridge Isotope Lab, Inc.로부터 이용 가능함) 중에서 ICON-NMR을 사용하는 Bruker AVANCE NMR(400 MHz) 분광계 (TopSpin 프로그램 제어 하에서), 또는 내부 표준물질로서 테트라메틸 실란을 사용하는 Varian 400MR NMR 또는 Varian VNMR400 NMR(400 MHz) 분광계(VnmrJ 프로그램 제어 하에서) 상에 기록하였다.
MS 측정은 일련의 기기 중에서 전기 분무, 화학 및 전자 충격 이온화 방법을 이용하는 Shimadzu 2010 질량 분광계 또는 Agilent 6110A MSD 또는 1969A TOF 질량 분광계를 사용하여 수행하였다.
고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 측정은 Ultimate XB-C18 컬럼(3.0*50mm, 3um 또는 3.0*150mm, 3um), 또는 Xbridge shieldRP18 컬럼(5um, 50mm*2.1mm) 또는 Xtimate C18 컬럼(3um, 2.1* 30mm), 또는 MERCK RP18 2.5-2mm, 또는 Agilent Zorbax Eclipse Plus C18 컬럼 (4.6mm * 150mm, 5μm )등을 사용하여 Shimadzu LC-20A 시스템 또는 Shimadzu LC-2010HT 시리즈, 또는 Agilent 1200 LC 또는 Agilent 1100시리즈에서 수행하였다.
박층 크로마토그래피는 Yantai Huanghai HSGF254 실리카 겔 또는 Anhui Liang Chen Gui Yuan 플레이트를 사용하여 수행하였다. 박층 크로마토 그래피(TLC)에 사용된 실리카 겔 플레이트는 0.15mm ~ 0.2mm이었다. TLC로 생성물을 분리 및 정제하는데 사용되는 실리카 겔 플레이트는 0.4mm ~ 0.5mm이었다.
정제된 크로마토그래피 컬럼은 담체로서 실리카 겔(100~200, 200~300 또는 300~400 mesh, Yantai Huanghai co., 또는 Anhui Liang Chen Gui Yuan co. 등에서 제조됨), 또는 플래시 컬럼(실리카-CS 플래시 컬럼 40-60 um, 또는 역상 C18 컬럼 20-35um, Agela Technologies, 등에서 제조됨) 또는 Teledyne ISCO 콤비-플래시 또는 Biotage 플래시 시스템에서 Agela Technologies 제조의 플래시 컬럼 실리카-CS (40-60um) 또는 C18 컬럼(20-40um)을 사용한다. 컬럼의 크기는 화합물의 양에 따라 조정하였다.
본 개시내용의 공지된 출발 물질은 당업계의 공지된 방법을 이용하여 합성될 수 있거나 또는 Alfa Aesar, Langcaster, TCI, Aldrich, Bepharm, 및 Scochem(또는 PharmaBlock, Bide, Amatek, Stru Chem, Firster Pharmaceutical, Titan(Adamas) 등)으로부터 구입할 수 있다.
달리 명시되지 않는 한, 실시예에서의 반응은 모두 아르곤 또는 질소 분위기 하에서 수행되었다. 아르곤 또는 질소 분위기는 반응 플라스크가 약 1L의 부피를 갖는 아르곤 또는 질소 벌룬에 연결되어 있다는 것을 의미한다. 수소화는 일반적으로 압력하에서 수행되었다. 달리 명시되지 않는 한, 실시예에서 반응 온도는 20℃~30℃인 주위 온도이었다.
실시예에서의 반응 진행은 TLC에 의해 모니터링되었다. 반응에 사용되는 용 리액 계는 디클로로메탄-메탄올 계 및 페트롤륨에테르-에틸 아세테이트 계를 포함한다. 용매의 부피 비는 화합물의 상이한 극성에 따라 조정되었다.
화합물 정제를 위해 사용된 컬럼 크로마토그래피의 용리 계 및 TLC의 용리액 계는 디클로로메탄-메탄올 계 및 페트롤륨 에테르-에틸 아세테이트 계를 포함한다. 용매의 부피비는 화합물의 상이한 극성에 따라 조정되었다. 포름산, 또는 아세트산, 또는 TFA, 또는 암모니아와 같은 소량의 알칼리성 또는 산성 제제(0.1% ~ 1%)가 조정을 위해 첨가될 수 있다.
실시예 1
( R )-N-(2-(3-(디메틸아미노)피페리딘-1-일)-5-(4-(2-(2-히드록시프로판-2-일)페닐아미노)-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00037
화합물 1b의 제조 절차:
THF(250 mL) 중의 화합물 1a(25 g, 1.0 eq, 133.59 mmol)의 용액에 CH3MgBr(222.65 mL, 5.0 eq, 667.95 mmol)을 0-5℃에서 빙수조 하에 첨가하였다. 생성된 흑색 혼합물을 TLC(페트롤륨 에테르/EtOAc = 5/1(v/v))가 출발 물질(Rf = 0.70)이 소비되었음을 나타낼 때까지 2h 동안 26-36℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 NH4Cl(500 mL)로 희석하고 EtOAc(2 Х 300mL)로 추출하였다. 조합된 유기층을 감압 하에 농축하고 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 10/1(v/v))로 정제하여 화합물 1b(22 g, 88% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt= 0.678 min, MS(ESI) m/z = 169.9 [M+H-18]+.
1 H NMR(400MHz, MeOH-d 4 ) δ 6.97 (dd, J=8.9, 12.7 Hz, 1H), 6.52 (dd, J=7.3, 12.8 Hz, 1H), 1.57 (s, 6H).
화합물 1c의 제조 절차:
CH2Cl2(10 mL) 중의 화합물 1b(1 g, 5.3 mmol) 및 DIEA(1 g, 7.9 mmol)의 용액에 2,4-디클로로-1,3,5-트리아진(0.96 g, 6.4 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 26-34℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응물을 직접 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르(v/v) 중 20% EtOAc)로 정제하여 표제 생성물 1c를 백색 고체로서 수득하였다(900 mg, 56% 수율).
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt= 0.803 min, MS(ESI) m/z = 300.9 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d6) δ 10.84 (s, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.46 (dd, J=8.8, 12.4 Hz, 1H), 6.35 (br s, 1H), 1.51 (s, 6H).
화합물 1d의 제조 절차:
n-BuOH(10 mL) 중의 화합물 1c(300 mg, 1.0 mmol) 및 4-플루오로-2-메톡시-5-니트로아닐린(185 mg, 1.0 mmol)의 용액에 TFA(0.1 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 26-33℃에서 2시간 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과로 수집하고 그 후 고 진공 하에 건조하여 표제 생성물 1d를 황색 고체로서 수득하였다(400 mg, 순도 99%, 88% 수율).
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt= 0.828 min, MS(ESI) m/z = 451.1 [M+H]+.
화합물 1e의 제조 절차:
DMSO(30 mL) 중의 화합물 1d (1.144 g, 2.76 mmol), (R)-N,N-디메틸피페리딘-3-아민 히드로클로라이드(500 mg, 3.04 mmol), 및 K2CO3(764 mg, 5.52 mmol)의 용액을 100℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 차가운 물(200 mL)에 첨가하였다. 황색 고체가 침전된 후, 잔류물은 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리액: CH2Cl2/MeOH 100/0에서 90/10에 이름)로 정제하여 표제 생성물 1e를 황색 고체로서 수득하였다(298 mg, 84.0% 순도, 20% 수율).
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt= 0.717 min, MS(ESI) m/z = 523.5 [M+H]+
화합물 1f의 제조 절차:
MeOH(10 mL) 중의 화합물 1e(298 mg, 0.57 mmol) 및 Pd/C(30 mg, 0.1 eq)의 용액을 1 atm의 H2 하에서 1시간 동안 25℃에서 교반하였다. 반응 매스는 셀라이트를 통해 여과하고 메탄올(5 mL Х 3)로 세척하였다. 여액을 조합하고 진공하에 증발시켜 표제 생성물을 갈색 오일로서 수득하였다(206 mg, 73% 수율).
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.630 min, MS(ESI) m/z = 493.3 [M+H]+
실시예 1의 제조 절차:
DMF(5 mL) 중의 1f(194 mg, 0.39 mmol) 및 DIEA(78 mg, 1.5eq, 0.59 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드(39 mg, 0.43 mmol)를 0℃에서 적가하였다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 prep-HPLC(컬럼: Phenomenex Gemini C18 150*25mm*5um; 조건: 30-40%B(A:물 중 0.05% 암모니아; B:CH3CN); 유속: 25 mL/min)로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 1을 백색 고체로서 수득하였다(47.2 mg, 20% 수율).
LCMS : 0-60AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 2.100 min, MS(ESI) m/z = 547.1 [M+H]+.
HPLC : 0-60_AB_1.2ml.met.크로마토그래피(Ultimate C18 3.0um 3.0*50mm)에서 Rt= 3.88 min; SFC: Rt = 3.763 min, 순도 96.5%.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.67 (br s, 1H), 9.91 (br s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.30 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.61 (br s, 1H), 7.35 - 7.30 (m, 2H), 7.04 (t, J=7.5 Hz, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.50 - 6.27 (m, 2H), 5.82 (br d, J=11.0 Hz, 1H), 5.60 (s, 1H), 4.06 - 3.95 (m, 1H), 3.07 (br s, 1H), 2.89 (br s, 1H), 2.67 (br s, 2H), 2.45 - 2.38 (m, 1H), 2.34 (s, 6H), 1.98 (br s, 2H), 1.80 (s, 6H), 1.72 - 1.68 (m, 2H), 1.68 - 1.64 (m, 2H).
실시예 2
N-(2-((2-(디메틸아미노)에틸)( 메틸 )아미노)-5-(4-(2-(1- 히드록시시클로프로필 )페닐아미노)-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00038
화합물 2b의 제조 절차:
THF(500 mL) 중의 화합물 2a(50 g, 253.5 mmol)의 혼합물에 n-BuLi(140 mL, 2.5 M, 354.8 mmol)을 -60℃에서 30 min에 걸쳐 적가하고, 혼합물을 -60℃에서 1 h 동안 교반하였다. 그 후 2-플루오로벤조산(32 g, 228.1 mmol)을 첨가하고 생성된 혼합물을 실온에서 20 h 동안 교반하였다. 반응물을 수성 NH4Cl(1000 mL)로 0℃에서 켄칭하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc(300 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Mg2SO4 상에서 건조시키고 진공에서 농축하였다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르: EtOAc = 3: 1)로 정제하여 화합물 2b(25 g, 31% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다.
LCMS : Rt= 0.753 min(MERCK RP18 2.5-2mm), MS(ESI) m/z = 318.0 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 8.17 (dd, J=8.0, 1.6 Hz, 1 H), 7.64 - 7.56 (m, 1 H), 7.49 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 7.40 - 7.35 (m, 2 H), 7.31-7.25 (m, 5 H), 7.24 - 7.16 (m, 4 H), 4.18 (s, 4 H).
화합물 2c의 제조 절차:
DMF(500 mL) 중의 화합물 2b(25 g, 70.89 mmol) 및 K2CO3(29.4 g, 212.67 mmol)의 혼합물에 MeI(20.1 g, 141.78 mmol)를 첨가하였다. 그 후 반응 혼합물을 25℃에서 1 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(1200 mL)에 붓고, EtOAc(400 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(300 mL Х 3)로 세척, 황산나트륨 상에서 건조, 여과하며, 여과액은 농축하여 화합물 2c(27 g, 조 물질)를 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt= 0.822 min, MS(ESI) m/z = 332.4 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.72 (dd, J=1.6 Hz, 8.0 Hz, 1 H), 7.34-7.23 (m, 11 H), 7.00-6.95 (m, 2 H), 4.27 (s, 4 H), 3.91 (s, 3 H).
화합물 2d의 제조 절차:
THF(250 mL) 중의 화합물 2c(27 g, 81.47 mmol)의 혼합물에 Ti(OiPr)4(6.9 mg, 24.44 mmol)를 80℃에서 N2 벌룬 하에 적가하였다. 그 후 EtMgBr(109 mL, 325.88 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃에서 1 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl 용액(200 mL)에 붓고, EtOAc(80 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(60 mL)로 세척, 황산나트륨 상에서 건조, 여과하고 여과액을 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 10% EtOAc)로 정제하여 화합물 2d(17 g, 63% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt= 0.760 min, MS(ESI) m/z = 330.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7.87 (brs, 1 H), 7.25-7.15 (m, 6 H), 7.14-7.08 (m, 5H), 7.05-6.97 (m, 2H), 6.92 (dd, J=1.2 Hz, 8.0 Hz, 1H), 4.11 (s, 4H), 1.09-1.03 (m, 2H), 0.93-0.87 (m, 2H).
화합물 2e의 제조 절차:
MeOH(8 mL) 중의 화합물 2d(0.5 g, 1.52 mmol)의 혼합물에 Pd/C(습식)(100 mg) 및 AcOH(0.1 mL)를 H2 벌룬 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 20-25℃에서 40 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과액을 농축 및 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르: EtOAc=3:1)로 정제하여 화합물 2e(200 mg, 29% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7.19-7.12 (m, 2 H), 6.75-6.70 (m, 2 H), 4.30 (brs, 2 H), 1.19-1.15 (m, 2 H), 0.10-0.95 (m, 2 H).
화합물 2f의 제조 절차:
CH2Cl2(8 mL) 중의 화합물 2e(200 mg, 1.34 mmol) 및 DIEA(346 mg, 2.68 mmol)의 혼합물에 2,4-디클로로-1,3,5-트리아진(241 mg, 1.61 mmol)을 첨가하였다. 그 후 반응 혼합물을 25℃에서 12 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 30% EtOAc)로 정제하여 1-(2-((4-클로로-1,3,5-트리아진-2-일)아미노)페닐)시클로프로판올 2f(220 mg, 62% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt= 0.718 min, MS(ESI) m/z = 262.9 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 8.79 (brs, 1 H), 8.55 (s, 1 H), 8.19 (s, 1 H), 7.41-7.33 (m, 1 H), 7.33-7.30 (m, 1 H), 7.18-7.13 (m, 1 H), 1.28-1.24 (m, 2 H), 1.03-0.99 (m, 2 H).
화합물 2g의 제조 절차:
Figure pct00039
DMF(200 mL) 중의 4-플루오로-2-메톡시-5-니트로아닐린(20 g, 0.11 mol) 및 K2CO3(29 g, 0.22 mol)의 용액에 N 1 ,N 1 ,N 2 -트리메틸에탄-1,2-디아민(13 g, 0.13 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 48시간 동안 교반하였다. 반응물을 1L 물로 처리하고 EtOAc(300 mL Х3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(500 mL Х3)로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조, 여과하고 여과액을 진공에서 농축하여 화합물 2g(30 g, 100% 수율)를 적색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt= 0.125 min, MS(ESI) m/z = 269.0 [M+H]+.
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 7.28 (s, 1H), 6.62 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.17 (t, J=7.2 Hz, 2H), 2.50 (t, J=7.2 Hz, 2H), 2.25 (s, 6H).
화합물 2h의 제조 절차:
n-BuOH(5 mL) 중의 화합물 2f(140 mg, 0.53 mmol) 및 화합물 2g(56 mg, 0.58 mmol)의 혼합물에 TFA(0.5 ml)를 첨가하였다. 그 후 반응 혼합물을 22-28℃에서 12 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2 중 5% MeOH)로 정제하여 화합물 2h(160 mg, 61% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt= 0.682 min, MS(ESI) m/z = 495.3 [M+H]+.
화합물 2i의 제조 절차:
MeOH(5 mL) 및 물(0.5 mL) 중의 화합물 2h(110 mg, 0.22 mmol) 및 NH4Cl(59 mg, 1.10 mmol)의 혼합물에 Zn(72 mg, 1.10 mmol)을 첨가하였다. 그 후 반응 혼합물을 90℃에서 1 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과액을 농축하여 화합물 2i(140 mg, 조 물질)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5min _220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt= 0.636 min, MS(ESI) m/z = 465.2 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 8.24 (brs, 1 H), 7.83 (brs, 1 H), 7.60 (brs, 1 H), 7.71-7.40 (m, 2 H), 7.20-6.93 (m, 1 H), 6.61 (s, 1 H), 3.80 (s, 3 H), 3.20-2.85 (m, 2 H). 2.70-2.25 (m, 11 H), 1.16-1.08 (m, 2 H), 0.91-0.82 (m, 2 H).
실시예 2의 제조 절차:
DMF(2 mL) 중의 화합물 2i(140 mg, 0.21 mmol) 및 DIEA(54 mg, 0.42 mmol)의 혼합물에 아크릴로일 클로라이드(21 mg, 0.23 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 24-27℃에서 0.5 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 prep-HPLC: [컬럼: Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10 um; 조건: 35-65% B(A: 0.05% 암모니아; B: CH3CN); 유속: 30 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 2(32.0 mg, 6% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_3min_220&254 크로마토그래피(B: XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt= 1.999 min, MS(ESI) m/z = 519.3 [M+H]+.
1H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.34 (brs, 1 H), 10.05 (brs, 1 H), 8.78 (brs, 1 H), 8.37-8.31 (m, 2 H), 7.60 (brs, 1 H), 7.30-7.24 (m, 2 H), 6.95 (t, J=7.6 Hz, 1 H), 6.71 (s, 1 H), 6.23-6.21 (m, 2 H), 5.64 (t, J=6.0 Hz, 1 H), 3.81 (s, 3 H), 2.81-2.78 (m, 2 H), 2.63 (s, 3 H), 2.23-2.18 (m, 9 H), 1.31-1.22 (m, 2 H), 0.97-0.94 (m, 2 H).
HPLC : 10-80CD_1.2ml 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt=3.56 min.
실시예 3
N -(2-((2-(디메틸아미노)에틸)( 메틸 )아미노)-5-(4-(6- 플루오로 -4-(2-히드록시프로판-2-일)피리딘-3-일아미노)-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00040
화합물 3b의 제조 절차:
EtOAc(20 mL) 및 MeOH(20 mL) 중의 화합물 3a(700 mg, 4.48 mmol)의 용액에 TMSCH2N2(4.48 mL, 8.97 mmol, 헥산 중 2M)를 첨가하였다. 혼합물을 27-34℃(실온)에서 1.5 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 5/1)로 정제하여 화합물 3b(650 mg,: 85% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt=0.576 min, MS(ESI) m/z = 170.8 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7.78 (s, 1H), 7.30 (d, J=2.6 Hz, 1H), 5.47 (br s, 2H), 3.94 (s, 3H).
화합물 3c의 제조 절차:
THF(40 mL) 중의 화합물 3b(650 mg, 3.82 mmol)의 용액에 CH3MgBr(5.1 mL, 에테르 중 3 M)를 0~5℃에서 첨가하였다. 혼합물을 26-33℃에서 1.5 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물은 수성 NH4Cl(20 mL)을 첨가하여 켄칭한 후 EtOAc(3 Х 40 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 감압 하에 농축하고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 3/1)로 정제하여 화합물 3c(600 mg, 92% 수율)를 밝은 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80_7min _220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 1.572 min, MS(ESI) m/z = 283.9 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7.47 (d, J=1.4 Hz, 1H), 6.58 (d, J=1.6 Hz, 1H), 1.62 - 1.58 (m, 6H).
화합물 3d의 제조 절차:
CH2Cl2(40 mL) 중의 화합물 3c(600 mg, 3.52 mmol) 및 DIEA(683 mg, 5.95 mmol)의 용액에 2,4-디클로로-1,3,5-트리아진(581 mg, 3.87 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 26-33℃(실온)에서 2 h 동안 교반하였다. 반응물을 감압 하에 농축하고 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 1/1)로 정제하여 화합물 3d(650 m g, 65% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_3MIN_220&254.lcm 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 1.299 min, MS(ESI) m/z = 283.9 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 9.85 - 9.51 (m, 1H), 8.97 (br s, 1H), 8.54 (br s, 1H), 6.85 (d, J=1.6 Hz, 1H), 2.97 - 2.37 (m, 1H), 1.70 (s, 6H).
화합물 3e의 제조 절차:
n-BuOH(10 mL) 중의 화합물 3d(600 mg, 2.11 mmol) 및 화합물 2g(624 mg, 2.32 mmol)의 용액에 TFA(0.1 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 26-32℃에서 18h 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 수성 NH4Cl(20 mL)을 첨가하여 켄칭하고, 그 후 EtOAc(3 Х 40 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(40 mL)로 세척, 건조 및 감압 하에 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2/MeOH =10/1)로 정제하여 화합물 3e(80 mg, 7.3% 수율)를 적색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 0.662 min, MS(ESI) m/z = 516.2 [M+H]+.
화합물 3f의 제조 절차:
THF(1 mL) 및 H2O(1 mL) 중의 화합물 3e(80 mg, 0.16 mmol)의 용액에 Zn(30 mg, 0.47 mmol) 및 NH4Cl(25 mg, 0.47 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 50℃에서 1.5 h 동안 N2 하에서 교반하였다. 반응 혼합물에 수성 NH4Cl(20 mL)을 첨가하여 켄칭한 후 EtOAc(3 Х 40 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척, 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 3f(35 mg)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt=0.596 min, MS(ESI) m/z = 486.2 [M+H]+.
실시예 3의 제조 절차:
DMF(1 mL) 중의 화합물 3f (35 mg, 0.07 mmol) 및 DIEA(14 mg, 0.11 mmol)의 용액에 DMF(1 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(6.5 mg, 0.07 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 30 min 동안 교반하였다. 반응물을 prep-HPLC[컬럼: Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10 um; 조건: 43-53%B(A: 0.05% 암모니아; B: CH3CN); 유속: 30 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 3(4.2 mg, 10.8% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_7MIN_220&254.lcm 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 3.921 min, MS(ESI) m/z = 540.3 [M+H]+.
HPLC : 10-80_cd_1.2ML. MET.크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt=3.26 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.40 (br s, 1H), 10.11 (br s, 1H), 9.88 (br s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.62 (br s, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.30 (br s, 3H), 5.75 - 5.63 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 2.81 (br s, 2H), 2.63 (s, 3H), 2.21 (br s, 8H), 1.71 (s, 6H).
실시예 4
N-(5-(4-(4,5- 디플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00041
화합물 4a의 제조 절차:
DMF(5 mL) 중의 화합물 1d(400 mg, 0.89 mmol), N 1 ,N 1 ,N 2 -트리메틸에탄-1,2-디아민(91 mg, 0.89 mmol) 및 K2CO3(184 mg, 1.45 mmol)의 용액을 27-34℃에서 N2 하에 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물(50 mL)에 적가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 15 min 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과로 수집하고 그 후 고 진공 하에 건조시켜 표제 생성물 4a를 주황색 고체로서 수득하였다(270 mg, 57% 수율).
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.707 min, MS(ESI) m/z = 533.1 [M+H]+.
화합물 4b의 제조 절차:
MeOH(10 mL) 중 화합물 4a(270 mg, 0.50 mmol) 및 Pd/C(20 mg)의 용액을 H2로 3회 퍼지 및 탈기한 후, H2(15psi)하에서 27-34℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 매스는 셀라이트를 통해 여과하고 메탄올(3 Х 5 mL)로 세척하였다. 여액을 조합하고 진공하에 증발시켜 표제 생성물 4b를 흑색 오일로서 수득하였다(200 mg, 93% 수율).
LCMS : 10-80AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 1.224 min, MS(ESI) m/z = 503.3 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.02 (s, 1H), 8.17-8.12 (m, 2H), 7.66 (s, 1H), 6.98 (dd, J= 11.2, 8.8 Hz, 2H), 6.58 (s, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.87-2.84 (m, 2H), 2.55 (s, 3H), 2.32 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 2.15 (s, 6H), 1.55 (s, 6H).
실시예 4의 제조 절차:
DMF(3 mL) 중의 화합물 4b(100 mg, 0.20 mmol) 및 DIEA(38 mg, 0.30 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드(18 mg, 0.20 mmol)를 0℃에서 적가하였다. 혼합물을 26-33℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 prep-HPLC(컬럼: Phenomenex Gemini C18 150*25mm*5um; 45-75%B(A: 물 중 0.05% 암모니아; B: CH3CN); 유속: 30 mL/min)로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 4를 백색 고체로서 수득하였다(14.5 mg, 순도 95.7%, 13% 수율).
LCMS : 10-80CD_3min_ 220&254.lcm, 크로마토그래피(Xtimate C18, 2.1*30mm3um)에서 Rt=2.053 min, MS(ESI) m/z = 557.3 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ml.met.크로마토그래피(Ultimate C18 3.0um 3.0*50mm)에서 Rt = 4.88 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.69 (s, 1H), 10.45 (s, 1H), 9.99 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.34 (dd, J=8.0, 12.8 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.13 (dd, J=8.4, 12.0 Hz, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.39 (s, 2H), 5.78 (d, J=11.2 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 2.90 (s, 2H), 2.72 (s, 3H), 2.29 (s, 8H), 1.79 (s, 6H).
실시예 5
(E)-N-(5-(4-(4,5- 디플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)-4-메톡시페닐)-4-(디메틸아미노)부트-2-엔아미드
Figure pct00042
실시예 5의 제조 절차:
CH2Cl2(4 mL) 중의 화합물 4b(80 mg, 0.16 mmol), 화합물 5a(31 mg, 0.19 mmol), HATU(91 mg, 0.24 mmol) 및 DIEA(62 mg, 0.48 mmol)의 혼합물을 28-35℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 prep-HPLC(컬럼: Phenomenex Gemini C18 150*25mm*5um; 55-85%B(A: 물 중 0.05% 암모니아; B: CH3CN); 유속: 30 mL/min)로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 5를 백색 고체로서 수득하였다(17.8 mg, 18% 수율).
LCMS : 0-60AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 1.755 min, MS(ESI) m/z = 614.3 [M+H]+.
HPLC : 0-60CD_1.2ml.met. 크로마토그래피(Ultimate C18 3.0um 3.0*50mm)에서 Rt = 2.15 min.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 10.69 (s, 1H), 10.29 (s, 1H), 9.98 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.33 (dd, J=13.2, 8.0 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.12 (dd, J=12.0, 8.8 Hz, 1H), 6.92 (td, J=15.2, 6.0 Hz, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.25 (s, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.73 (s, 1H), 3.18 (d, J=5.6 Hz, 2H), 2.89 (t, J=5.2 Hz, 2H), 2.71 (s, 3H), 2.33 (s, 8H), 2.30 (s, 6H), 1.79 (s, 6H).
실시예 6
N-(2-((2-(디메틸아미노)에틸)( 메틸 )아미노)-5-(4-(4-(2-히드록시프로판-2-일)-6-메틸피리딘-3-일아미노)-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00043
화합물 6b의 제조 절차:
EtOAc/MeOH=1:1(60 mL) 중의 화합물 6a(4.0 g, 23.2 mmol)의 용액에 TMSCH2N2(23.2 mL, 46.4 mmol, 헥산 중 2 M)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 24-30℃에서 30 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 H2O(30 mL)에 붓고, EtOAc(50 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 물(20 mL Х 3) 및 염수(20 mL)로 세척, Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 표제 화합물 6b(3.1 g, 67.7% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AB MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.672 min, MS(ESI) m/z=186.9 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.06 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.79 (br s, 2H), 3.84 (s, 3H).
화합물 6c의 제조 절차:
THF(40 mL) 중의 화합물 6b(3.1 g, 16.6 mmol)의 용액에 CH3MgBr(22.2 mL, 66.5 mmol, 에테르 중 3 M)을 0℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 26-34℃에서 1.5 h 동안 N2 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl(100 mL)에 붓고, 그 후 EtOAc(100 mLХ3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 물(30 mLХ3) 및 염수(30 mL)로 세척, Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 표제 화합물 6c(2.79 g, 85.6% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-Q MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.471 min, MS(ESI) m/z=187.0 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.71 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 5.63 (s, 2H), 5.52 (s, 1H), 1.46 (s, 6H).
화합물 6d의 제조 절차:
H2O/디옥산=1:5(20 mL) 중의 화합물 6c(1.0 g, 5.36 mmol), 메틸보론산(1.28 g, 21.44 mmol) 및 K2CO3(1.48 g, 10.72 mmol)의 용액에 Pd(PPh3)4(929 mg, 0.15 eq, 0.80 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 24 h 동안 N2 하에 가열하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과액을 진공에서 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2 중 4% MeOH)로 정제하여 화합물 6d(235 mg, 26.1% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AB MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.142 min, MS(ESI) m/z=167.0 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.79 (s, 1H), 6.81 (s, 1H), 5.34 (s, 1H), 5.25 (br s, 2H), 2.26 (s, 3H), 1.46 (s, 6H).
화합물 6e의 제조 절차:
Figure pct00044
CH2Cl2(1500 mL) 중의 화합물 6e1(100 g, 537.2 mmol) 및 DIEA(138.9 g, 1074.4 mmol)의 교반된 용액에 화합물 6e2(96.7 g, 644.6 mmol)를 10℃에서 첨가한 후 25℃에서 1 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 직접 농축하여 조 생성물을 수득하고, CH2Cl2(800 mL)로 30 min 동안 분쇄, 여과하며 고체 케이크를 CH2Cl2(100 mL Х 2)로 세척하였다. 여과 케이크를 진공에서 건조시켜 표제 화합물 6e(118 g, 73% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt= 0.760 min, MS(ESI) m/z = 299.9 [M+H]+.
1H NMR: (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.27 (s, 1 H), 8.60 (s, 1 H), 8.37 (d, J= 8.0 Hz, 1 H), 7.41 (d, J=13.6 Hz, 1 H), 3.95 (s, 3 H).
화합물 6f의 제조 절차:
피리딘(6 mL) 중의 화합물 6d(200 mg, 1.20 mmol) 및 화합물 6e(433 mg, 1.44 mmol)의 혼합물을 50℃에서 12 h 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2 중 5% MeOH)로 정제하여 화합물 6f(240 mg, 16% 수율)를 암갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AB MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.688 min, MS(ESI) m/z=430.1 [M+H]+.
화합물 6g의 제조 절차:
DMF(5 mL) 중의 화합물 6f(240 mg, 0.191 mmol) 및 화합물 N 1 ,N 1 ,N 2 -트리메틸에탄-1,2-디아민(29 mg, 0.286 mmol)의 용액에 K2CO3(53 mg, 0.382 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 27-34℃에서 12 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 H2O(30 mL)에 붓고, EtOAc(30 mLХ3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 물(20 mLХ3) 및 염수(20 mL)로 세척, Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 6g(120 mg, 91.8% 수율)를 주황색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AB MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.633 min, MS(ESI) m/z=512.2 [M+H]+.
화합물 6h의 제조 절차:
MeOH/H2O=2/1(9 mL) 중의 화합물 6g(90 mg, 0.131 mmol)의 용액에 Zn(26 mg, 0.394 mmol) 및 NH4Cl(21 mg, 0.394 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 TLC(CH2Cl2/MeOH=5/1(v/v))가 하나의 메인 스폿(Rf = 0.25)을 나타내고 출발 물질(Rf = 0.5)이 완전히 소비될 때까지 90℃에서 3 h 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 CHCl3/이소프로판올=3/1(20 mLХ3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4상에서 건조한 후 진공에서 농축하여 화합물 6h(85 mg, 94% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AB MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.571 min, MS(ESI) m/z=482.3 [M+H]+.
실시예 6의 제조 절차:
DMF(2 mL) 중의 화합물 6h(85 mg, 0.123 mmol) 및 DIEA(24 mg, 0.185 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드(11 mg, 0.123 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 1 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여과액을 pre-HPLC(컬럼: Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10um; 조건: 25-55%B(A: 0.05% 암모니아, B: CH3CN); 유속: 30 ml/min)로 정제 및 동결건조하여 불순한 생성물을 백색 고체로서 수득하고, 이것을 pre-TLC(CH2Cl2: MeOH=7:1(v/v))로 더 정제하여 실시예 6(18.4 mg, 27.9% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_3 min_220&254 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AS A:Xtimate C18,2.1*30mm,3um; B:XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 1.969 min, MS(ESI) m/z=537.3 [M+H]+.
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 10.40 (br s, 1H), 10.20 (br s, 1H), 9.93 (br s, 1H), 9.32 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.67 (br s, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.47 - 6.27 (m, 2H), 6.14 (br s, 1H), 5.80 - 5.69 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.90 - 2.84 (m, 2H), 2.69 (s, 3H), 2.53 (s, 3H), 2.31 - 2.25 (m, 8H), 1.75 (s, 6H).
실시예 7
N-(2-((2-(디메틸아미노)에틸)( 메틸 )아미노)-5-(4-(2-(2-히드록시프로판-2-일)-6-메틸피리딘-3-일아미노)-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00045
화합물 7b의 제조 절차:
무수 THF(70 mL) 중의 화합물 7a(5 g, 26.73 mmol)의 혼합물에 DMAP(6.35 g, 53.46 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, (Boc)2O (17.50 g, 80.19 mmol)를 첨가한 후, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 5~10% EtOAc)로 정제하여 원하는 생성물 7b(10 g, 96.6% 수율)를 밝은 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-Q MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.875 min, MS(ESI) m/z =388.9 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.40 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.14 (d, J=7.6 Hz, 1H), 2.57 (s, 3H), 1.41 (s, 18H)
화합물 7c의 제조 절차:
무수 MeOH(50 mL) 및 무수 DMF(150 mL) 중의 화합물 7b(3.5 g, 9.04 mmol)의 혼합물에 Pd(OAc)2(150 mg, 0.1 eq, 0.904 mmol)를 질소 하에 첨가하고, 이어서 DPPF(501 mg, 0.904 mmol) 및 Et3N(1.37 g, 13.56 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 CO 대기(50 Psi) 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과액은 물(10 mL)에 붓고, 추가로 10분 동안 교반하며, EtOAc(20 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(30 mL)로 세척, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중의 5~8% EtOAc)로 정제하여 화합물 7c(2.0 g, 60.4% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-Q MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.812 min, MS(ESI) m/z =367.1 [M+H]+.
화합물 7d의 제조 절차:
무수 THF(20 mL) 중의 화합물 7c(2.0 g, 5.46 mmol)의 혼합물에 MeMgBr(9.1 mL, 27.3 mmol, 에테르 중 3 M)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 2.5시간 동안 N2 대기하에서 교반하였다. 반응 혼합물을 수성 NH4Cl(25 mL)에 붓고, 10분 동안 교반한 후, EtOAc(30 mLХ 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(30 mL)로 세척, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 진공하에 농축하여 표제 생성물 7d(1.4 g, 49.8% 수율)을 황색 오일로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-Q MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.616 min, MS(ESI) m/z=267.1 [M+H]+.
화합물 7e의 제조 절차:
무수 CH2Cl2(9 mL) 중의 화합물 7d(1.4 g, 1.13 mmol)의 혼합물에 TFA(3 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수성 NaHCO3(25 mL)에 부어 pH=8.0으로 조정하고, 10분 동안 교반한 후, EtOAc(25mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(30 mL)로 세척, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(구배 용리액: 페트롤륨 에테르: 에틸 아세테이트= 20/1(v/v))로 정제하여 화합물 7e(230 mg, 26.3% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-Q MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.129 min, MS(ESI) m/z =167.0 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, 메탄올-d 4 ) δ 6.97 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.86 (d, J=8.0 Hz, 1H), 2.35 (s, 3H), 1.58 (s, 6H).
화합물 7f의 제조 절차:
무수 CH2Cl2(5 mL) 중의 화합물 7e(311 mg, 2.076 mmol)의 혼합물에 DIEA(358 mg, 2.768 mmol)에 이어 화합물 2,4-디클로로-1,3,5-트리아진(230 mg, 1.0 eq, 1.384 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(20 mL) 및 EtOAc(20 mL)에 붓고, 5분 동안 교반한 후 EtOAc(30 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(40 mL)로 세척, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 15~30% EtOAc)로 정제하여 화합물 7f(290 mg, 74.9% 수율)를 황백색(off-white) 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-Q MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.352, MS(ESI) m/z =279.9 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.93 - 9.54 (m, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.30 (br d, J=14.4 Hz, 1H), 7.12 (br d, J=8.4 Hz, 1H), 3.07 - 2.87 (m, 1H), 2.51 (s, 3H), 1.69 (s, 6H).
화합물 7g의 제조 절차:
n-BuOH(10 mL) 중의 화합물 7f(290 mg, 1.038 mmol)의 혼합물에 화합물 2g (289 mg, 1.038 mmol) 및 TFA(0.1 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물 실온에서 16시간 동안 교반하여 암적색의 혼탁한 용액을 수득하였다. 혼합물을 진공에서 직접 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2 중 0 ~ 15% MeOH, 1% 암모니아)로 정제하여 화합물 7g(110 mg, 20.7% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-Q MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.604 min, MS(ESI) m/z =512.2 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 8.91 (br s, 1H), 8.36 (br s, 1H), 8.24 (br s, 1H), 7.47 (br s, 1H), 7.15 (br d, J=8.4 Hz, 1H), 6.66 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.29 (t, J=7.2 Hz, 2H), 2.89 (s, 3H), 2.54 (s, 3H), 2.28 (s, 6H), 1.69 (s, 8H).
화합물 7h의 제조 절차:
MeOH/H2O=5/1(6 mL) 중의 화합물 7g(110 mg, 0.215 mmol)의 용액에 Zn(70 mg, 1.075 mmol) 및 NH4Cl(58 mg, 5.0 eq, 1.075 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 3 h 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과액은 CH2Cl2(20 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 물(10 mLХ3) 및 염수(10 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 7h(93 mg, 79.6% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피((ACSSH-LCMS-AB MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.554 min, MS(ESI) m/z =482.1 [M+H]+.
실시예 7의 제조 절차:
DMF(2 mL) 중의 화합물 7h(93 mg, 0.171 mmol) 및 DIEA(33 mg, 1.5 eq, 0.256 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드(15 mg, 1.0 eq, 0.171 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 1 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 조 생성물을 수득하고 이것을 pre-TLC(CH2Cl2: MeOH=7:1(v/v))로 정제하여 불순한 생성물을 황색 고체로서 수득하였다. 조 생성물을 pre-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 30-55%B(A: 0.05% 암모니아, B: CH3CN); 유속: 25 ml/min)로 더 정제 및 동결건조하여 실시예 7(20.3 mg, 22.2% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_3 min_220&254 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AS A:Xtimate C18,2.1*30mm,3um; B:XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 2.002 min, MS(ESI) m/z =536.3 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.34 (br s, 2H), 9.95 (br s, 1H), 8.43 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.37 (br s, 1H), 7.64 (br s, 1H), 7.07 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.52 - 6.31 (m, 2H), 5.77 (br d, J=10.4 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.88 (t, J=4.8 Hz, 2H), 2.70 (s, 3H), 2.49 (s, 3H), 2.28 (s, 8H), 1.78 (s, 6H).
실시예 8
N-(2-((2-(디메틸아미노)에틸)( 메틸 )아미노)-5-(4-(2-(2-히드록시프로판-2-일)피리딘-3-일아미노)-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00046
화합물 8b의 제조 절차:
CH2Cl2(20 mL) 중의 화합물 8a(1.0 g, 6.57 mmol)의 용액에 (Boc)2O(3.6 g, 16.42 mmol) 및 DMAP(1.2 g, 1.5 eq, 9.85 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 28-38℃에서 4h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 50/1(v/v))로 정제하여 화합물 8b(2.5 g, 99% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.784 min, MS(ESI) m/z = 353.0 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, 메탄올-d 4 ) δ 8.63 (dd, J=1.4, 4.6 Hz, 1H), 7.85 (dd, J=1.5, 8.0 Hz, 1H), 7.69 (dd, J=4.8, 8.0 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 1.36 (s, 18H).
화합물 8c의 제조 절차:
THF(30 mL) 중의 화합물 8b(2.3 g, 6.52 mmol)의 용액을 N2로 3회 퍼지 및 탈기하고 MeMgBr(10.87 mL)을 0℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 29-34℃에서 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 NH4Cl(10 mL)로 희석하고 EtOAc(2 Х 20 mL)로 추출하였다. 조합된 유기층을 감압 하에 농축하고 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 10/1)로 정제하여 화합물 8c(1 g, 61% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.697 min, MS(ESI) m/z = 253.0[M+H]+.
화합물 8d의 제조 절차:
CH2Cl2(6 mL) 중의 화합물 8c(1 g, 1.0 eq, 3.70 mmol)의 용액에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 29-36℃에서 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하여 화합물 8d(1.2 g, 94% 수율)를 황색 오일(TFA 염)로서 수득하였다.
1 H NMR(400MHz, 메탄올-d 4 ) δ 7.85 (dd, J=1.0, 5.3 Hz, 1H), 7.72 (dd, J=1.3, 8.5 Hz, 1H), 7.61 (dd, J=5.5, 8.5 Hz, 1H), 1.70 (s, 6H).
화합물 8e의 제조 절차:
피리딘(5 mL) 중의 화합물 8d(200 mg, 1.0 eq, 0.67 mmol)의 용액에 화합물 6e(256 mg, 1.1 eq, 0.74 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 28-36℃에서 6h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2/MeOH = 10/1)로 정제하여 화합물 8e(240 mg, 58% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.687 min, MS(ESI) m/z = 438.1[M+H]+.
화합물 8f의 제조 절차:
DMF(10 mL) 중의 화합물 8e(240 mg, 1.0 eq, 0.58 mmol)의 용액에 K2CO3(160 mg, 2.0 eq, 1.16 mmol) 및 화합물 N 1 ,N 1 ,N 2 -트리메틸에탄-1,2-디아민(118 mg, 2.0 eq, 1.16 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 28-36℃에서 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 H2O(200 mL)로 희석하고 EtOAc(2 Х 100 mL)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(100 mL)로 세척, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2/MeOH = 10/1)로 정제하여 화합물 8f(170 mg, 59% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.643 min, MS(ESI) m/z = 498.2[M+H]+.
화합물 8g의 제조 절차:
MeOH(10 mL) 및 H2O(5 mL) 중의 화합물 8f(170 mg, 1.0 eq, 0.34 mmol)의 용액에 Zn(111 mg, 5.0 eq, 1.70 mmol) 및 NH4Cl(182 mg, 10.0 eq, 3.40 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고 EtOAc(2 Х 10 mL)로 추출하였다. 조합된 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 8g(140 mg, 88% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.554 min, MS(ESI) m/z = 468.2[M+H]+.
실시예 8의 제조 절차:
DMF(3 mL) 중의 화합물 8g(140 mg, 1.0 eq, 0.30 mmol) 및 DIEA(58 mg, 1.5 eq, 0.45 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드(27 mg, 1.0 eq, 0.30 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 30 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 prep-HPLC[컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 28-58%B(A: 0.05% NH3H2O; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 8(58.7 mg, 37% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_3min_220&254 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 1.844 min, MS(ESI) m/z = 522.3 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ml 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt = 3.65 min.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 10.85 (br s, 1H), 10.41 (br s, 1H), 9.99 (br s, 1H), 8.69 (d, J=7.0 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.23 (dd, J=1.5, 4.5 Hz, 1H), 7.68 (br s, 1H), 7.23 (dd, J=4.9, 8.2 Hz, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.48 - 6.41 (m, 1H), 6.37 (br d, J=10.0 Hz, 1H), 5.78 (br d, J=11.0 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.88 (br s, 2H), 2.71 (s, 3H), 2.28 (s, 8H), 1.83 (s, 6H).
실시예 9
N-(5-(4-(3,4- 디플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00047
화합물 9b의 제조 절차:
CH2Cl2(6 mL) 중의 화합물 9a(340 mg, 1.0 eq, 1.18 mmol)의 용액에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 26-32℃에서 2h 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에 농축하여 TFA 염으로 화합물 9b(400 mg, 94% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(Agilent Pursit 5 C18 20*2.0mm)에서 Rt = 0.698 min, MS(ESI) m/z = 188.1 [M+H]+.
화합물 9c의 제조 절차:
피리딘(10 mL) 중의 화합물 9b(286 mg, 1.0 eq, 0.95 mmol)의 용액에 화합물 6e(400 mg, 1.1 eq, 1.05 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 6h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 1/1(v/v))로 정제하여 화합물 9c(200 mg, 42% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 25-2mm)에서 Rt = 0.946 min, MS(ESI) m/z = 451.1 [M+H]+.
화합물 9d의 제조 절차:
DMF(5 mL) 중의 화합물 9c(200 mg, 0.44 mmol)의 용액에 K2CO3(122 mg, 0.88 mmol) 및 화합물 N 1 ,N 1 ,N 2 -트리메틸에탄-1,2-디아민(54 mg, 0.53 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 26-33℃에서 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 H2O(50 mL)에 붓고 여과하였다. 여과 케이크를 감압 하에 농축하여 화합물 9d(200 mg, 85% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 25-2mm)에서 Rt = 0.807 min, MS(ESI) m/z = 533.2 [M+H]+.
화합물 9e의 제조 절차:
MeOH(5 mL) 중의 화합물 9d(200 mg, 0.38 mmol)의 용액에 Pd/C(20 mg)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 H2로 3회 퍼지 및 탈기하고, 그 후 26-34℃(실온)에서 H2(수소 벌룬, 30 Psi)하에 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 화합물 9e(150 mg, 78% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30 mm)에서 Rt = 0.752 min, MS(ESI) m/z = 503.2 [M+H]+.
실시예 9의 제조 절차:
DMF(3 mL) 중의 화합물 9e(150 mg, 0.30 mmol) 및 DIEA(58 mg, 0.45 mmol)의 용액에 화합물 아크릴로일 클로라이드(27 mg, 0.30 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 30 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 prep-HPLC[컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 42-72%B(A: 0.05% NH3H2O; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 9(39.4 mg, 23% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.784 min, MS(ESI) m/z = 557.0 [M+H]+.
HPLC : 10-80_ab_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 3.12 min.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 11.29 (br s, 1H), 10.45 (br s, 1H), 9.89 (br s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.14 (br dd, J=5.2, 7.2 Hz, 1H), 7.65 (br s, 1H), 7.09 (q, J=9.2 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.44 - 6.29 (m, 2H), 6.08 (br s, 1H), 5.81 - 5.74 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.92 - 2.84 (m, 2H), 2.70 (s, 3H), 2.35-2.20 (m, 8H), 1.88 (d, J=3.6 Hz, 6H).
실시예 10
N-(2-((2-(디메틸아미노)에틸)( 메틸 )아미노)-5-(4-(2-(3- 히드록시옥세탄 -3-일)페닐아미노)-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00048
화합물 10a의 제조 절차:
CHCl3(80 mL) 중의 화합물 아닐린(5 g, 53.69 mmol)의 혼합물에 Boc2O(23.4 g, 107.38 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 12 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 직접 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 2% EtOAc)로 정제하여 표제 화합물 10a(8 g, 100% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.793 min, MS(ESI) m/z = 137.9 [M+55]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.38 (d, J=8.0 Hz, 2 H), 7.33-7.28 (m, 2 H), 7.08-7.03 (m, 1 H), 6.50 (brs, 1 H), 1.54 (s, 9 H).
화합물 10b의 제조 절차:
THF(50 mL) 중의 화합물 10a(3.0 g, 1.55 mmol)의 용액에 t-BuLi(30 mL, 38.81 mmol)을 -78℃에서 1h 동안 적가하였다. 반응 혼합물을 15 min 동안 0℃로 가온하고 그 후 -78℃로 냉각하였다. 옥세탄-3-온(3.36 g, 46.61 mmol)을 -78℃에서 15 min 동안 적가하였다. 생성된 혼합물을 -78℃에서 1h 동안 교반하였다. 반응물은 100 mL의 물을 첨가하여 켄칭하고 그 후 EtOAc(3 Х 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(3 Х 100 mL)로 세척, 건조 및 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르:EtOAc = 3/1(v/v))로 정제하여 화합물 10b(580 mg, 14.1% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.722 min, MS(ESI) m/z = 209.9 [M-55]+.
1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.09 (s, 1H), 7.65 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.40 (dd, J=1.4, 7.8 Hz, 1H), 7.34 - 7.29 (m, 1H), 7.16 - 7.11 (m, 1H), 4.88 (d, J=7.0 Hz, 2H), 4.71 (d, J=7.0 Hz, 2H), 1.45 (s, 9H).
화합물 10c의 제조 절차:
MeOH(20 mL) 및 H2O(10 mL) 중의 화합물 10b(500 mg, 1.89 mmol)의 용액에 K2CO3(780 mg, 5.66 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc(3 Х 50 mL)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수로 세척, 건조 및 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 3/1(v/v))로 정제하여 화합물 10c(240 mg, 77.1% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 10-80CD_3MIN_220&254; XBrige Shield RP18 2.1*50mm에서 Rt = 0.553 min, MS(ESI) m/z = 166.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.14 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.05 - 6.99 (m, 1H), 6.70 (d, J=7.8 Hz, 1H), 6.59 (dt, J=1.0, 7.4 Hz, 1H), 6.18 (brs, 1H), 4.89 (d, J=6.8 Hz, 2H), 4.79 (s, 2H), 4.71 (d, J=6.8 Hz, 2H).
화합물 10d의 제조 절차:
MeOH(20 mL) 및 H2O(10 mL) 중의 화합물 10c(500 mg, 1.89 mmol)의 용액에 K2CO3(780 mg, 5.66 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 70℃에서 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc(3 Х 50 mL)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수로 세척, 건조 및 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 3/1(v/v))로 정제하여 화합물 10d(240 mg, 77.1% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 10-80CD_3MIN_220&254; XBrige Shield RP18 2.1*50mm에서 Rt = 0.553 min, MS(ESI) m/z = 166.1 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.14 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.05 - 6.99 (m, 1H), 6.70 (d, J=7.8 Hz, 1H), 6.59 (dt, J=1.0, 7.4 Hz, 1H), 6.18 (brs, 1H), 4.89 (d, J=6.8 Hz, 2H), 4.79 (s, 2H), 4.71 (d, J=6.8 Hz, 2H).
화합물 10e의 제조 절차:
피리딘(10 mL) 중의 화합물 10d(220 mg, 1.33 mmol)의 용액에 화합물 6e(439 mg, 1.47 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 18h 동안 교반하였다. 혼합 반응물을 감압 하에 농축하고 실리카 겔 상의 prep-TLC(CH2Cl2/MeOH = 15/1(v/v))로 정제하여 화합물 10e(150 mg, 26.3% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2 mm)에서 Rt = 0.723 min, MS(ESI) m/z = 429.1 [M+H]+.
화합물 10f의 제조 절차:
DMF(2 mL) 중의 화합물 10e(190 mg, 0.44 mmol) 및 K2CO3(122 mg, 0.89 mmol)의 용액에 화합물 N 1 ,N 1 ,N 2 -트리메틸에탄-1,2-디아민(54 mg, 0.53 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 25-33℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물에 10 mL의 물을 첨가하고, 혼합물은 EtOAc(10 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(10 mL Х 3)로 세척, 건조 및 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 상의 prep-TLC(CH2Cl2/MeOH = 15/1(v/v))로 정제하여 화합물 10f(140 mg, 62% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2 mm)에서 Rt =0.714 min, MS(ESI) m/z = 511.3 [M-OH]+.
화합물 10g의 제조 절차:
MeOH(3 mL) 중의 화합물 10f(130 mg, 0.25 mmol)의 용액에 Pd/C(13 mg)를 N2하에 첨가하였다. 혼합물을 26-31℃에서 H2(15Psi)하에 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 화합물 10g(95 mg, 78% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(5-95AB_1.5MIN_1500)에서 Rt =0.669 min, MS(ESI) m/z = 481.3 [M+H]+.
실시예 10의 제조 절차:
DMF(1 mL) 중의 화합물 10h(85 mg, 0.18 mmol) 및 DIEA(34 mg, 0.26 mmol)의 용액에 DMF(1 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(16 mg, 0.18 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 30 min 동안 교반하였다. 반응물을 prep-HPLC[컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 25-50%B(A: 0.05% 암모니아; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 10(25.2 mg, 26.7% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_7MIN_220&254 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 3.452 min, MS(ESI) m/z = 535.3 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ML 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt = 2.91 min.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.08 (s, 1H), 8.85 (br s, 1H), 8.47 - 8.33 (m, 2H), 8.23 (s, 1H), 7.92 (br s, 1H), 7.38 (brd, J=6.6 Hz, 1H), 7.08 (br s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.83 (br s, 1H), 6.47 - 6.33 (m, 1H), 6.27 - 6.17 (m, 1H), 5.75 (br d, J=11.4 Hz, 1H), 4.86 (br d, J=6.8 Hz, 2H), 4.70 (brd, J=7.0 Hz, 2H), 3.76 (s, 3H), 2.85 (br t, J=5.6 Hz, 2H), 2.71 (s, 3H), 2.34 - 2.28 (m, 2H), 2.20 (s, 6H).
실시예 11
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00049
화합물 11b의 제조 절차:
THF(20 mL) 중의 화합물 11a(2.0 g, 9.83 mmol)의 용액에 CH3MgBr(16.4 mL, 49.2 mmol, 에테르 중 3 M)을 0℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 27-34℃에서 2 h 동안 N2 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl(100 mL)에 붓고, EtOAc(30 mLХ3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 물(20 mL Х 3) 및 염수(20 mL)로 세척, Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 11b(2.0 g, 95% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AB MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.558 min, MS(ESI) m/z=185.9 [M-OH]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 6.91 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.63 (d, J=6.4 Hz, 1H), 1.64 (s, 6H).
화합물 11c의 제조 절차:
피리딘(20 mL) 중의 화합물 11b(1.9 g, 9.3 mmol) 및 화합물 6e(2.8 g, 9.3 mmol)의 혼합물을 50℃에서 12 h 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 50% EtOAc)로 정제하여 화합물 11c(2.6 g, 60% 수율)를 밝은 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.821 min, MS(ESI) m/z=467.1 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.73 (br s, 1H), 9.42 (br s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.33 (br s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.09 (d, J=10.4 Hz, 1H), 6.78 (d, J=12.0 Hz, 1H), 4.03 (s, 3H), 2.51 (br s, 1H), 1.71 (s, 6H).
화합물 11d의 제조 절차:
DMF(10 mL) 중의 화합물 11d(740 mg, 1.59 mmol) 및 K2CO3(439 mg, 3.18 mmol)의 용액에 N 1 ,N 1 ,N 2 -트리메틸에탄-1,2-디아민(244 mg, 2.39 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 26-31℃에서 4 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 빙수조 하의 H2O(100mL)에 적가한 후 여과하고, 여과 케이크를 H2O(15 mLХ3)로 세척, 및 고 진공에서 건조하여 화합물 11e(800 mg, 91.65% 수율)를 주황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.717 min, MS(ESI) m/z=549.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 9.70 (br s, 1H), 9.00 (br s, 1H), 8.39 (br s, 2H), 7.42 (br s, 1H), 7.08 (d, J=10.5 Hz, 1H), 6.64 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.28 (t, J=7.2 Hz, 2H), 2.88 (s, 3H), 2.57 (t, J=7.2 Hz, 2H), 2.25 (s, 6H), 1.69 (s, 6H).
화합물 11e의 제조 절차:
8mL의 MeOH/H2O=5/1(v/v) 중의 화합물 11d(200 mg, 0.364 mmol)의 용액에 Zn(119 mg, 1.82 mmol) 및 NH4Cl(97 mg, 1.82 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 1 h 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과액은 진공에서 농축하여 잔류물을 수득하고, 이것을 CH2Cl2(30 mL)로 용해, 물(20 mLХ3) 및 염수(20 mL)로 세척, Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 11e(180 mg, 95.3% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.679 min, MS(ESI) m/z=519.1 [M+H]+.
실시예 11의 제조 절차:
DMF(3 mL) 중의 화합물 11e(180 mg, 0.35 mmol) 및 DIEA(68 mg, 0.53 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드(32 mg, 0.35 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 1 h 동안 교반하였다. 반응물을 H2O(0.1 mL)로 켄칭하고 그 후 여과하였다. 여과액을 pre-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 52-82%B(A: 0.05% 암모니아, B: CH3CN); 유속: 25 ml/min)로 정제 및 동결건조하여 실시예 11(52.9 mg, 26.4% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_3 min_220&254 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50mm) 에서 Rt = 2.124 min, MS(ESI) m/z=573.3 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 10.60 (br s, 1H), 10.44 (br s, 1H), 9.96 (br s, 1H), 8.47 (d, J=7.6 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.69 (br s, 1H), 7.10 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.49 - 6.28 (m, 2H), 6.18 (br s, 1H), 5.91 - 5.65 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.88 (t, J=5.6 Hz, 2H), 2.70 (s, 3H), 2.27 (s, 8H), 1.77 (s, 6H).
실시예 12
N-(5-(4-(4- 클로로 -5- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00050
화합물 12b의 제조 절차:
CH2Cl2(20 mL) 중의 화합물 12a(2 g, 13.74 mmol)의 용액에 ICl(3.3 g, 20.61 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 27-34℃에서 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 100/1)로 정제하여 화합물 12b(2.5 g, 67% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18 25-2mm)에서 Rt = 0.811 min, MS(ESI) m/z = 271.8 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, 메탄올-d 4 ) δ 7.59 (d, J=8.0 Hz, 1H), 6.62 (d, J=11.6 Hz, 1H).
화합물 12c의 제조 절차:
MeOH(10 mL) 및 DMF(20 mL) 중의 화합물 12b(450 mg, 1.66 mmol)의 용액에 Pd(OAc)2(38 mg, 0.17 mmol), DPPF(94 mg, 0.17 mmol) 및 Et3N(504 mg, 4.98 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 CO로 3회 퍼지 및 탈기한 후, 80℃에서 CO(50 Psi)하에 24 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 EtOAc(50 mL)로 희석하였다. 유기층을 염수(50 mL)로 세척, 건조 및 감압 하에 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 50/1(v/v))로 정제하여 화합물 12c(320 mg, 95% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 25-2mm)에서 Rt = 0.941 min, MS(ESI) m/z = 203.9[M+H]+.
1 H NMR(400MHz, MeOH-d 4 ) δ 7.83 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.59 (d, J=11.6 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H).
화합물 12d의 제조 절차:
THF(10 mL) 중의 화합물 12c(320 mg, 1.57 mmol)의 용액에 CH3MgBr(2.62 mL, 7.85 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물 26-31℃에서 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 NH4Cl(10 mL)로 희석하고 EtOAc(2 Х 20 mL)로 추출하였다. 조합된 유기층을 감압 하에 농축하고 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 10/1(v/v))로 정제하여 화합물 12d(250 mg, 78% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 25-2mm)에서 Rt = 0.826 min, MS(ESI) m/z = 185.9 [M+H-18]+.
1 H NMR (400MHz, MeOH-d 4 ) δ 7.08 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.49 (d, J=11.6 Hz, 1H), 1.57 (s, 6H).
화합물 12e의 제조 절차:
CH2Cl2(10 mL) 중의 화합물 12d(200 mg, 0.98 mmol)의 용액에 DIEA(253 mg, 1.96 mmol) 및 2,4-디클로로-1,3,5-트리아진(162 mg, 1.08 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 26-32℃에서 2h 동안 교반하였다. 반응물을 감압 하에 농축하고 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 10/1(v/v))로 정제하여 화합물 12e(210 mg, 67% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 25-2mm)에서 Rt = 0.971 min, MS(ESI) m/z = 316.9 [M+H]+.
화합물 12f의 제조 절차:
n-BuOH(5 mL) 중의 화합물 12e(210 mg, 0.66 mmol) 및 화합물 2g(177 mg, 0.66 mmol)의 용액에 TFA(0.05 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 26-33℃에서 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2/MeOH = 10/1(v/v))로 정제하여 화합물 12f(150 mg, 41% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 25-2mm)에서 Rt = 0.821 min, MS(ESI) m/z = 549.1[M+H]+.
화합물 12g의 제조 절차:
MeOH(5 mL) 중의 화합물 12f(150 mg, 0.27 mmol)의 용액에 10% Pd/C(15 mg)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 H2로 3회 퍼지 및 탈기한 후, 26-34℃(실온)에서 H2(30 Psi) 하에 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 화합물 12g(110 mg, 78% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 0.771 min, MS(ESI) m/z = 519.1 [M+H]+.
실시예 12의 제조 절차:
DMF(3 mL) 중의 화합물 12g(110 mg, 0.21 mmol) 및 DIEA(41 mg, 0.32 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드(19 mg, 0.21 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 30 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 prep-HPLC[컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 50-80%B(A: 0.05% NH3H2O; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 12(13.5 mg, 11% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 2.167 min, MS(ESI) m/z = 573.0 [M+H]+.
HPLC : 10-80_ab_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 3.38 min.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 10.85 (br s, 1H), 10.45 (br s, 1H), 9.96 (br s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.39 (d, J=11.8 Hz, 1H), 7.72 (br s, 1H), 7.29 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.43 - 6.32 (m, 2H), 6.10 (br s, 1H), 5.81 - 5.73 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.91 - 2.85 (m, 2H), 2.70 (s, 3H), 2.35-2.20 (m, 8H), 1.78 (s, 6H).
실시예 13
N-(2-((2-(디메틸아미노)에틸)( 메틸 )아미노)-5-(4-(2-(2-히드록시프로판-2-일)-4-(트리플루오로메틸)페닐아미노)-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00051
화합물 13b의 제조 절차:
THF(15 mL) 중의 화합물 13a(0.92 g, 4.2 mmol) 및 Boc2O(3.17 g, 14.7 mmol)의 용액에 DMAP(256 mg, 2.1 mmol)를 26-32℃에서 첨가하였다. 반응물을 26-32℃에서 4 h 동안 교반하였다. 반응 용액을 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 0-10% EtOAc)로 정제하여 원하는 생성물 화합물 13b(1.43 g, 81.2% 수율)를 황백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 1.078 min, MS(ESI) m/z = 442.1 [M+23]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.28 (d, J=1.6 Hz, 1 H), 7.95 (dd, J=2.0, 8.4 Hz, 1 H), 7.53 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 3.93 (s, 3 H), 1.36 (s, 18 H).
화합물 13c의 제조 절차:
THF(25 mL) 중의 화합물 13b(1.43 g, 3.41 mmol)의 용액에 MeMgBr(4.54 mL, 13.63 mmol, 에테르 중 3 M)을 빙수조에서 적가하였다. 혼합물을 3 h 동안 26-32℃에서 교반하였다. 반응물에 포화 NH4Cl(30 mL)을 첨가하고 수성액을 EtOAc(50 mLХ3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(30 mL)로 세척, Na2SO4 상에서 건조, 여과 및 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 3-30% EtOAc)로 정제하여 원하는 생성물 화합물 13c(0.84 g, 77.8% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.889 min, MS(ESI) m/z = 246.0 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, 메탄올-d 4 ): δ 8.22 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 7.54-7.51 (m, 2 H), 1.64 (s, 6 H), 1.54 (s, 9 H).
화합물 13d의 제조 절차:
CH2Cl2(10 mL) 중의 화합물 13c(640 mg, 2.0 mmol)의 용액에 빙수조에서 HCl/EtOAc(20 mL, 4 M)을 적가하였다. 혼합물을 6 hr 동안 26-34℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 포화 NaHCO3를 사용하여 pH = 8로 염기성화하고 EtOAc(70 mLХ3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(50 mL)로 세척, Na2SO4 상에서 건조, 여과 및 진공에서 농축하여 조 물질을 수득하고, 이것을 플래시 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 3-30% EtOAc)로 정제하여 원하는 생성물 화합물 13d(260 mg, 45.1% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.726 min, MS(ESI) m/z = 202.0 [M-17]+.
1 H NMR (400MHz, 메탄올-d 4 ): δ 7.33 (s, 1H), 7.23 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 6.74 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 1.63 (s, 6 H).
화합물 13e의 제조 절차:
화합물 13d(260 mg, 1.18 mmol) 및 DIEA(304 mg, 2.56 mmol)의 용액에 2,4-디클로로-1,3,5-트리아진(267 mg, 1.78 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 반응물을 28-34℃에서 4h 동안 교반한 후, 반응물을 포화 NH4Cl(5 mL)로 켄칭하고 수용액은 EtOAc(50 mlХ3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(50 mL)로 세척하고 Na2SO4 상에서 건조, 여과 및 진공에서 농축하여 조 물질(320 mg)을 수득하고, 이것을 플래시 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 3-30% EtOAc)로 정제하여 화합물 13e (200 mg, 50.8% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.832 min, MS(ESI) m/z = 332.9 [M+H]+.
화합물 13f의 제조 절차:
n-BuOH(10 mL) 중의 화합물 13e(200 mg, 0.61 mmol) 및 화합물 2g(183 mg, 0.68 mmol)의 용액에 TFA(0.8 mL)를 빙수조에서 적가하였다. 혼합물을 2 hr 동안 28-34℃에서 교반하였다. 반응 용액을 직접 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄 중 0-15% MeOH로 용리함)로 정제하여 불순물(350 mg)을 수득하고, 이것을 prep-TLC (MeOH/ CH2Cl2 = 10/1)로 더 정제하여 화합물 13f(80 mg, 50.8% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.755 min, MS(ESI) m/z = 565.1 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3): δ ppm 8.48-8.43 (m, 2 H), 7.63 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.52-7.48 (m, 2 H), 6.96 (s, 1 H), 4.00 (s, 3 H), 3.40 (t, J=6.4 Hz, 2 H), 2.90 (s, 3 H), 2.65 (t, J=6.4 Hz, 2 H), 2.30 (s, 6 H), 1.75 (s, 6 H).
화합물 13g의 제조 절차:
EtOAc(30 mL) 중의 화합물 13f(80 mg, 0.14 mmol) 및 Pd/C(70 mg, 10%)의 혼합물을 H2(15 psi)에서 30 min 동안 교반하였다. 반응물을 여과하고 케이크는 EtOAc(50 mL)로 세척하였다. 여과액을 진공에서 농축하여 화합물 13g(60 mg, 80.0% 수율)를 회색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.712 min, MS(ESI) m/z = 535.2 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.83-9.80 (m , 1 H), 8.39 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 8.27-8.25 (m, 1 H), 7.77 (s, 1 H), 7.68-7.49 (m, 2 H), 7.41 (s, 1 H), 6.59 (s, 1 H), 3.95(s, 3 H), 2.88 (t, J=6.8 Hz, 2 H), 2.59 (s, 3 H), 2.37 (t, J=6.8 Hz, 2 H), 2.35-2.34 (m, 2 H), 2.25 (s, 6 H), 2.21-2.20 (m, 1 H), 1.67 (s, 6 H).
실시예 13의 제조 절차:
DMF(1 mL) 중의 화합물 12g(60 mg, 0.112 mmol) 및 DIEA(29 mg, 0.224 mmol)의 혼합물에 화합물 아크릴로일 클로라이드(1 mL의 DMF 중 16.5 mg)를 30 min에 걸쳐 빙수조에서 적가하였다. 반응물을 30 min 동안 0-5℃에서 교반한 후, 반응물은 갈색 용액으로 변하였다. 반응물은 H2O(45 mg)를 사용하여 켄칭하고 그 후 직접 prep-TLC(CH2Cl2/MeOH = 10/1)로 정제하여 실시예 13(18.2 mg, 27.5% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 0-60AB_4.0 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 2.698 min, MS(ESI) m/z = 589.0 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3): δ 10.88 (br s, 1H), 10.37 (br s, 1H), 9.89 (br s, 1H), 8.46 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.64 (br s, 1H), 7.54 - 7.43 (m, 2H), 6.71 (s, 1H), 6.39 - 6.22 (m, 2H), 5.71 (br d, J=11.2 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 2.81 (m, 2H), 2.63 (s, 3H), 2.21 (m, 8H), 1.75 (s, 6H).
실시예 14
N-(5-(4-(4- 클로로 -3- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00052
화합물 14b의 제조 절차:
THF(80 mL) 중의 화합물 14a(5 g, 34.35 mmol) 및 Boc2O(15 g, 68.70 mmol)의 용액을 60℃에서 12 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 직접 진공에서 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 2% EtOAc)로 정제하여 화합물 14b(8.2 g, 69% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt= 0.866 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7.36 (d, J=9.6 Hz, 1 H), 7.19 (t, J=6.8 Hz, 1 H), 6.87 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 6.45 (s, 1 H), 1.45 (s, 9 H).
화합물 14c의 제조 절차:
THF(120 mL) 중의 화합물 14b(8 g, 32.56 mmol)의 용액에 t-BuLi(1.3 M)(50 mL, 65.12 mmol)을 -78℃에서 N2 하에 첨가하였다. 1 h 교반 후, DMF(3.6 g, 48.84 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 -78 내지 33℃에서 16 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl 용액(300 mL)으로 켄칭한 후, EtOAc(200 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(100 mL)로 세척, 황산나트륨 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 14c(8.2 g, 92% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt= 0.929 min.
1 H NMR(400MHz, 메탄올-d 4 ) δ 10.49 (brs, 1 H), 10.28 (s, 1 H), 8.18 (dd, J= 0.8 Hz, 9.2 Hz, 1 H), 7.48(t, J= 8.8 Hz, 1 H), 1.46 (s, 9 H).
화합물 14d의 제조 절차:
THF(40 mL) 중의 화합물 14c(4 g, 14.62 mmol)의 용액에 MeMgBr(3.0 M) (19.5 mL, 58.48 mmol)을 0℃에서 N2 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 2 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl 용액(80 mL)으로 켄칭하고, EtOAc(30 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(30 mL)로 세척, 황산나트륨 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 14d(4 g, 94% 수율)를 황색 오일로서 수득하고, 이것을 추가의 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt= 0.871 min.
화합물 14e의 제조 절차:
CH2Cl2(40 mL) 중의 화합물 14d(4 g, 14.62 mmol)의 용액에 DMP(9.3 g, 21.93 mmol)를 0℃에서 N2 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 2 h 동안 교반하였다. 포화 NaHCO3 용액(40 mL), 및 포화 Na2SO3 용액(30 mL)을 첨가하고, 혼합물은 25-33℃에서 30 min 동안 교반, 유기층을 분리 및 CH2Cl2(30 mL)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(20 mL)로 세척, 황산나트륨 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 1% EtOAc)로 정제하여 화합물 14e(2.5 g, 59% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt= 0.924 min, MS(ESI) m/z = 187.9 [M-101+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.20 (brs, 1 H), 8.19 (d, J=9.6 Hz, 1 H), 7.47 (t, J=9.2 Hz, 1 H), 2.67 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 1.52 (s, 9 H).
화합물 14f의 제조 절차:
THF(40 mL) 중의 화합물 14e(2.5 g, 8.69 mmol)의 용액에 MeMgBr(3.0 M)(10 mL, 30.42 mmol)을 0℃에서 N2 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 2 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl 용액(80 mL)으로 켄칭하고, EtOAc(30 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(30 mL)로 세척, 황산나트륨 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 0.5% EtOAc)로 정제하여 화합물 14e(1.2 g)를 회수하고, 이어서 페트롤륨 에테르 중 2% EtOAc로 용리하여 표제 생성물 14f(1.5 g, 57% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt= 1.066 min, MS(ESI) m/z = 270.1 [M-55+Na]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.67 (brs, 1 H), 7.94 (d, J=9.2 Hz, 1 H), 7.23 (t, J=8.4 Hz, 1 H), 1.75 (d, J=3.6 Hz, 6 H), 1.51 (s, 9 H).
화합물 14g의 제조 절차:
CH2Cl2(15 mL) 중의 화합물 14f(1.5 g, 4.94 mmol)의 용액에 TFA(5 mL)를 0℃에서 N2 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 36-34℃에서 1 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 화합물 14g(700 mg, 94% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt= 0.652 min, MS(ESI) m/z = 185.9 [M -OH]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 6.92 (t, J= 8.0 Hz, 1 H), 6.24 (dd, J= 1.2 Hz, 8.4 Hz, 1 H), 1.65 (d, J= 3.6 Hz, 6 H).
화합물 14h의 제조 절차:
피리딘(1.5 mL) 중의 화합물 14g(200 mg, 0.98 mmol) 및 화합물 6e(294 mg, 0.98 mmol)의 용액을 50℃에서 4 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 직접 진공에서 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EtOAc: 페트롤륨 에테르=7:3 (v/v))로 정제하여 표제 생성물 14h(150 mg, 21% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt= 0.864 min, MS(ESI) m/z = 467.0 [M+H]+.
화합물 14i의 제조 절차:
DMF(3 mL) 중의 화합물 14h(150 mg, 0.32 mmol) 및 K2CO3(89 mg, 0.64 mmol)의 용액에 N 1 ,N 1 ,N 2 -트리메틸에탄-1,2-디아민(39 mg, 0.39 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 28-33℃에서 2 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(10 mL)에 붓고, 30 min 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과 케이크는 물(10 mL Х 3)로 세척하였다. 여과 케이크를 고 진공에서 건조시켜 화합물 14i(240 mg, 조 물질)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254 크로마토그래피(B: XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt= 0.738 min, MS(ESI) m/z = 549.1 [M+H]+.
화합물 14j의 제조 절차:
MeOH(4 mL) 및 물(0.5 mL) 중의 화합물 14i(200 mg, 0.35 mmol) 및 NH4Cl(95 mg, 1.75 mmol)의 용액에 Zn(115 mg, 1.75 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 2 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과액은 물(50 mL)에 붓고, EtOAc(25 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(20 mL)로 세척, 황산나트륨 상에서 건조, 여과하고 여과액은 진공에서 농축하여 화합물 14j(180 mg, 조 물질)를 흑색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt= 0.699 min, MS(ESI) m/z = 519.1 [M+H]+.
실시예 14의 제조 절차:
DMF(3 mL) 중의 14j(180 mg, 조 물질, 0.35 mmol) 및 DIEA(90 mg, 0.70 mmol)의 혼합물에 아크릴로일 클로라이드(32 mg, 0.35 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 26-32℃에서 0.5 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 prep-HPLC: [컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 65-95%B(A: 0.05% 암모니아; B: CH3CN); 유속: 30 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실 시예 14(24.5 mg, 12% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_3min_220&254 크로마토그래피(B: XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt= 2.204 min, MS(ESI) m/z = 573.2 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 11.61 (brs, 1 H), 10.30 (brs, 1 H), 9.86 (s, 1 H), 8.40 (s, 1 H), 8.27 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 7.66 (brs, 1 H), 7.35-7.26 (m, 1 H), 6.75 (brs, 1 H), 6.40 (d, J=16.0 Hz, 1 H), 6.01 (brs, 1 H), 5.78 (d, J=11.2 Hz, 1 H), 3.88 (s, 3 H), 3.07-2.87 (m, 2 H), 2.71 (s, 3 H), 2.58-2.13 (m, 8 H), 1.87 (d, J=3.6 Hz, 6 H).
HPLC : 10-80CD_1.2ml 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt=3.86 min.
실시예 15
N-(5-(4-(4,5- 디클로로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00053
화합물 15b의 제조 절차:
EtOAc(40 mL) 및 MeOH(40 mL) 중의 화합물 15a(2.0 g, 9.71 mmol)의 용액에 TMSCHN2(9.7 mL, 25.78 mmol, 헥산 중 2M)를 첨가하였다. 혼합물을 26-33℃에서 1.5 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하여 화합물 15b(2.0 g, 94.1% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.988 min, MS(ESI) m/z = 187.8 [M-31]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7.85 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 5.71 (br s, 2H), 3.80 (s, 3H).
화합물 15c의 제조 절차:
THF(30 mL) 중의 화합물 15b(1.0 g, 4.54 mmol)의 용액에 CH3MgBr(6 mL, 에테르 중 3 M)을 0~5℃에서 첨가하였다. 혼합물을 26-34℃에서 1.5 h 동안 교반하였다(황색 용액). 반응 혼합물을 수성 NH4Cl(20 mL) 을 첨가하여 켄칭한 후, EtOAc(3 Х 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(3 Х 100 mL)로 세척, 및 감압 하에 농축하여 화합물 15c(950 mg, 95% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.867 min, MS(ESI) m/z = 201.8 [M-OH]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7.13 (s, 1H), 6.70 (s, 1H), 1.64 (s, 6H).
화합물 15d의 제조 절차:
피리딘(5 mL) 중의 화합물 15c (500 mg, 2.27 mmol)의 용액에 화합물 6e(749 mg, 2.50 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 18 h 동안 교반하였다. 혼합 반응물을 감압 하에 농축하고 실리카 겔 상의 Prep-TLC(CH2Cl2/MeOH = 15/1(v/v))로 정제하여 화합물 15d(300 mg, 29.2% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.991 min, MS(ESI) m/z = 483.1 [M+H]+.
화합물 15e의 제조 절차:
DMF(4 mL) 중의 화합물 15d (300 mg, 0.62 mmol) 및 K2CO3(171 mg, 1.24 mmol)의 용액에 N 1 ,N 1 ,N 2 -트리메틸에탄-1,2-디아민(76 mg, 0.74 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 28-33℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물에 10 mL 물을 첨가하고 EtOAc(10 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(10 mL Х 3)로 세척, 황산나트륨 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 조 물질을 수득하고, 이것을 실리카 겔 상의 prep-TLC(CH2Cl2/MeOH = 15/1(v/v))로 정제하여 화합물 15e(250 mg, 71% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.745 min, MS(ESI) m/z = 565.1 [M+H]+.
화합물 15f의 제조 절차:
MeOH(5 mL) 및 H2O(1 mL) 중의 화합물 15e(220 mg, 0.39 mmol)의 용액에 Zn(127 mg, 1.95 mmol) 및 NH4Cl(208 mg, 3.89 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 1.5 h 동안 N2 하에 교반하였다(갈색 혼합물로 변함). 반응 혼합물은 수성 NH4Cl(20 mL)을 첨가하여 켄칭하고, 그 후 EtOAc(3 Х 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(3 Х 10 mL)로 세척, 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 15f(190 mg, 91.4% 수율)를 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.799 min, MS(ESI) m/z = 535.1 [M+H]+.
실시예 15의 제조 절차:
DMF(1 mL) 중의 화합물 15f(190 mg, 0.35 mmol) 및 DIEA(69 mg, 0.53 mmol)의 용액에 DMF(1 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(32 mg, 0.35 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 30 min 동안 교반하였다. 반응물을 prep-HPLC[컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 25-55%B(A: 0.05% 암모니아; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 15(37.8 mg, 12.2% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_7MIN_220&254 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 5.084 min, MS(ESI) m/z = 589.3[M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ML 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt = 4.32 min.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.32 (br s, 1H), 10.03 (s, 1H), 9.15 (br s, 1H), 8.42 (br s, 1H), 8.29 (br d, J=14.8 Hz, 2H), 7.38 (br s, 1H), 7.03 (br s, 1H), 6.43 - 6.34 (m, 1H), 6.33 (s, 1H), 6.25 - 6.13 (m, 1H), 5.73 (br d, J=11.6 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 2.86 (br t, J=5.6 Hz, 2H), 2.72 (s, 3H), 2.37 - 2.30 (m, 2H), 2.21 (s, 6H), 1.52 (s, 6H).
실시예 16
N-(5-(4-(4- 클로로 -3,5- 디플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00054
화합물 16b의 제조 절차:
EtOAc(50 mL) 및 MeOH(50 mL) 중의 화합물 16a(5.0 g, 28.89 mmol)의 용액에 TMSCHN2(29 mL, 57.76 mmol, 헥산 중 2M)를 0-5℃에서 첨가하였다. 혼합물을 28-36℃(실온)에서 1.5 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하여 화합물 16b(4.8 g, 82.5% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.882 min, MS(ESI) m/z = 187.8 [M+H]+.
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 6.05 - 5.94 (m, 2H), 5.93 - 5.72 (m, 2H), 3.76 (s, 3H).
화합물 16c의 제조 절차:
i-PrOH(50 mL) 중의 화합물 16b(2.70 g, 14.42 mmol)의 교반 용액을 0℃로 냉각하고 NCS(2.02 g, 15.15 mmol)를 소량씩 첨가하며, 생성된 황색 현탁액을 LCMS로 모니터링하면서 0℃ 내지 30℃에서 12 h 동안 교반하였다(서서히 투명하게 변함). 반응 혼합물을 진공에서 직접 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(조건: 65-75%B(A: 물 중의 0.05% TFA; B: MeOH); 유속: 40 ml/min))로 정제하여 화합물 16c(1000 mg 순도 87.20%, 및 500 mg 출발 물질)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.905 min, MS(ESI) m/z = 189.9 [M-32]+.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d6) δ 7.04 (br s, 2H), 6.61 (dd, J=1.8, 11.8 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H).
화합물 16d의 제조 절차:
THF(10 mL) 중의 화합물 16c(500 mg, 2.26 mmol)의 용액에 CH3MgBr(3 mL, 에테르 중 3 M)을 0~5℃에서 첨가하였다. 황색 용액을 24-29℃에서 1.5 h 동안 교반하였다(황색 용액). 반응 혼합물을 수성 NH4Cl(20 mL)을 첨가하여 켄칭한 후 EtOAc(3 Х 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(3 Х 10 mL)로 세척하고, 진공에서 직접 농축하여 화합물 16d(450 mg, 74% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.900 min, MS(ESI) m/z = 203.9 [M-OH]+.
화합물 16e의 제조 절차:
CH2Cl2(10 mL) 중의 화합물 16d(450 mg, 2.03 mmol) 및 DIEA(394 mg, 3.05 mmol)의 용액에 2,4-디클로로-1,3,5-트리아진(335 mg, 2.23 mmol)을 첨가하였다. 생성된 백색 혼합물을 24-29℃(실온)에서 2 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물은 수성 NH4Cl(20 mL)를 첨가하여 켄칭하고, 그 후 EtOAc(3 Х 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(3 Х 10 mL)로 세척하고, 진공에서 직접 농축하여 화합물 16e(500 mg, 30% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.927 min, MS(ESI) m/z = 334.9 [M+H]+.
화합물 16f의 제조 절차:
n-BuOH(2 mL) 중의 화합물 16e(100 mgХ3, 0.90 mmol) 및 화합물 2g(80 mg, 0.30 mmol)의 세 개의 개별 용액에 TFA(0.02 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25-33℃에서 3h 동안 교반하였다(적색 혼합물). 반응 혼합물을 진공에서 직접 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(조건: 87-89%B(A: 물 중의 0.05% TFA; B: MeOH); 유속: 40 ml/min))로 정제하여 화합물 16f(150 mg 순도 97.18%, 30% 수율)를 적색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.792 min, MS(ESI) m/z = 567.3[M+H]+.
화합물 16g의 제조 절차:
MeOH(5 mL) 및 H2O (1 mL) 중의 화합물 16f(150 mg, 0.26 mmol)의 용액에 Zn(87 mg, 1.32 mmol) 및 NH4Cl(142 mg, 2.65 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 1.5 h 동안 N2 하에 교반하였다(흑색 혼합물). 반응 혼합물은 수성 NH4Cl(20 mL)을 첨가하여 켄칭하고, 그 후 EtOAc(3 Х 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(3 Х 10 mL)로 세척, 건조 및 진공에서 직접 농축하여 화합물 16g(120 mg, 84.6% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.802 min, MS(ESI) m/z = 537.1 [M+H]+.
실시예 16의 제조 절차:
DMF(1 mL) 중의 화합물 16g(120 mg, 0.22 mmol) 및 DIEA(43 mg, 0.33 mmol)의 용액에 DMF(1 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(20 mg, 0.22 mmol)를 첨가하였다. 갈색의 생성된 혼합물을 0℃에서 30 min 동안 교반하였다. 반응물을 prep-HPLC [컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 62-92%B(A: 0.05% 암모니아; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 16(27.6 mg, 21% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_3MIN_220&254 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 2.310 min, MS(ESI) m/z = 591.2 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ML 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm)에서 Rt = 4.78 min.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d6) δ 11.23 (br s, 1H), 10.05 (br s, 1H), 9.24 (brs, 1H), 8.35 - 8.27 (m, 2H), 7.01 (s, 1H), 6.82 (br s, 1H), 6.42 (br s, 1H), 6.18 (br d, J=16.8 Hz, 1H), 5.72 (br d, J=10.8 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 2.90 (br s, 2H), 2.77 - 2.68 (m, 3H), 2.45 - 2.31 (m, 2H), 2.24 (br s, 6H), 1.61 (br s, 6H).
실시예 17
N-(5-(4-(4,5- 디플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시-2-((3aR,6aR)-5-메틸헥사히드로피롤로[3,4-b]피롤-1(2H)-일)페닐)아크릴아미드
Figure pct00055
화합물 17b의 제조 절차:
DMSO(6 mL) 중의 화합물 1d(200 mg, 0.444 mmol) 및 K2CO3(123 mg, 0.888 mmol)의 용액에 화합물 17a(67 mg, 0.533 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 85℃에서 1 h 동안 교반하였다(담황색에서 주황색으로 변함). 반응 혼합물을 빙수조 하의 H2O(80 mL)에 적가하고 침전된 고체를 여과로 수집하며, 여과 케이크는 H2O(15 mLХ3)로 세척하고, 그 후 고 진공에서 건조시켜 화합물 17b(200 mg, 81% 수율)를 주황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.717 min, MS(ESI) m/z==557.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, 메탄올-d 4 ) δ 8.24 (br s, 2H), 8.03 (br s, 1H), 7.21 (dd, J=8.4, 12.0 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.56 - 4.39 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.61 (dt, J=6.8, 10.4 Hz, 1H), 3.18 (t, J=8.8 Hz, 1H), 3.07 (quin, J=7.6 Hz, 1H), 2.83 (t, J=8.8 Hz, 1H), 2.79 - 2.69 (m, 1H), 2.39 (dd, J=7.2, 9.6 Hz, 1H), 2.26 (s, 3H), 2.20 (dd, J=3.2, 10.0 Hz, 1H), 2.14 - 2.02 (m, 1H), 1.92 (dd, J=6.4, 12.4 Hz, 1H), 1.60 (s, 6H).
화합물 17c의 제조 절차:
MeOH(15 mL) 중의 화합물 17b(200 mg, 0.36 mmol)의 용액에 Pd/C(10%, 20 mg)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 25-31℃에서 3 h 동안 H2 벌룬(15 Psi)하에 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과액은 진공에서 농축하여 화합물 17c(168 mg, 88.6% 수율)를 회색을 띤 녹색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.675 min, MS(ESI) m/z=527.3 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, 메탄올-d 4 ) δ 8.21 (br s, 2H), 7.47 (br s, 1H), 7.22 (dd, J=9.0, 12.4 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 4.15 - 4.03 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.48 - 3.38 (m, 1H), 3.00 - 2.88 (m, 1H), 2.74 - 2.65 (m, 2H), 2.62 (d, J=10.0 Hz, 1H), 2.45 (dd, J=7.8, 9.2 Hz, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.19 - 2.09 (m, 2H), 1.85 - 1.71 (m, 1H), 1.60 (s, 6H).
실시예 17의 제조 절차:
DMF(2 mL) 중의 화합물 17c(155 mg, 0.294 mmol) 및 DIEA(57 mg, 0.441 mmol)의 용액에 빙수조 하의 아크릴로일 클로라이드(27 mg, 0.294 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5-10℃에서 0.5 h 동안 교반하였다. 반응물을 H2O(0.1 mL)로 켄칭하고 그 후 여과하였다. 여과액을 pre-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 30-60%B(A: 0.05% 암모니아, B: CH3CN); 유속: 25 ml/min)로 정제 및 동결건조하여 실시예 17(39.1 mg, 22.90% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_3min_220&254. lcm 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 1.990 min, MS(ESI) m/z=581.3 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 10.65 (br s, 1H), 9.90 (br s, 1H), 9.59 (br s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.32 (dd, J=8.0, 12.8 Hz, 1H), 7.67 (br s, 1H), 7.10 (dd, J=8.8, 12.0 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.56 - 6.44 (m, 1H), 6.44 - 6.33 (m, 1H), 6.00 (br s, 1H), 5.76 (d, J=10.0 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.68 (dd, J=4.4, 7.8 Hz, 1H), 3.22 (t, J=7.2 Hz, 1H), 2.93 - 2.78 (m, 3H), 2.72 (d, J=10.0 Hz, 1H), 2.29 (s, 5H), 1.90 (dd, J=4.4, 10.4 Hz, 1H), 1.87 - 1.80 (m, 1H), 1.76 (s, 6H).
실시예 18
N-(5-(4-(4,5- 디플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시-2-(메틸(2-(피롤리딘-1-일)에틸)아미노)페닐)아크릴아미드
Figure pct00056
화합물 18b의 제조 절차:
DMSO(5 mL) 중의 화합물 1d(200 mg, 1.0 eq, 0.44 mmol) 및 K2CO3(243 mg, 4.0 eq, 1.76 mmol)의 용액에 화합물 18a(133 mg, 1.5 eq, 0.66 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 85℃에서 4h 동안 교반하며 그동안 색상은 담황색에서 진한 황색으로 변하였다. 반응 혼합물을 빙수(50 mL)에 부었고 황색 고체가 침전되었다. 침전된 황색 고체를 여과로 수집하고 그 후 CH2Cl2(30 mL)로 용해, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 18b(230 mg, 93% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.754 min, MS(ESI) m/z = 559.3 [M+H]+.
화합물 18c의 제조 절차:
MeOH(10 mL) 중의 화합물 18b(230 mg, 1.0 eq, 0.41 mmol)의 용액에 Pd/C(23 mg)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 H2로 3회 퍼지 및 탈기한 후, 25-28℃(실온)에서 수소 벌룬(15 psi)하에 1 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 화합물 18c(200 mg, 92% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.678 min, MS(ESI) m/z = 529.1 [M+H]+.
실시예 18의 제조 절차:
DMF(2.5 mL) 중의 화합물 18c(200 mg, 1.0 eq, 0.38 mmol) 및 DIEA(98 mg, 2.0 eq, 0.76 mmol)의 용액에 DMF(0.5 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(34 mg, 1.0 eq, 0.38 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 빙수조 하에 30 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 RP-HPLC(역상 HPLC)[컬럼: 역상 컬럼; 조건: 50-70%B(A: 0.25% NH3HCO3; B: MeOH); 유속: 40 ml/min]로 정제하고, 분획은 감압 하에 농축 및 동결건조하여 화합물 실시예 18(45.7 mg, 20% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.716 min, MS(ESI) m/z = 583.2 [M+H]+.
HPLC : 10-80_ab_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 3.24 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.65 (br s, 1H), 9.89 (br s, 2H), 8.40 (s, 1H), 8.32 (dd, J=8.0, 12.8 Hz, 1H), 7.67 (br s, 1H), 7.10 (dd, J=8.4, 12.0 Hz, 1H), 6.74 (s, 2H), 6.38 (d, J=16.8 Hz, 1H), 5.77 (br d, J=10.8 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.06 (br s, 2H), 2.91 - 2.74 (m, 4H), 2.70 (s, 5H), 1.94 (br s, 4H), 1.76 (s, 6H).
실시예 19
(R)-N-(5-(4-(4,5- 디플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-(2-((디메틸아미노)메틸)아제티딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00057
화합물 19a의 제조 절차:
DMSO(5 mL) 중의 화합물 1d(300 mg, 1.0 eq, 0.67 mmol) 및 K2CO3(926 mg, 10.0 eq, 6.70 mmol)의 용액에 (R)-1-(아제티딘-2-일)-N,N-디메틸메탄아민 TFA 염(2.0 g, 10.0 eq, 6.70 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 85℃에서 4h 동안 교반하고 그동안 색상은 담황색에서 진한 황색으로 변하였다. 반응 혼합물을 빙수(50 mL)에 붓고 황색 고체가 침전되었다. 침전된 고체를 여과로 수집하고 CH2Cl2 (20 mL)에 용해, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 19a(300 mg)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.734 min, MS(ESI) m/z = 567.2[M+Na]+.
화합물 19b의 제조 절차:
MeOH(10 mL) 중의 화합물 19a(300 mg, 1.0 eq, 0.55 mmol)의 용액에 Pd/C(30 mg)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 H2로 3회 퍼지 및 탈기한 후, 24-29℃에서 H2(수소 벌룬, 15 Psi)하에 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 화합물 19b(270 mg)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.679 min, MS(ESI) m/z = 515.3[M+H]+.
실시예 19의 제조 절차:
DMF(2.5 mL) 중의 화합물 19b(270 mg, 1.0 eq, 0.52 mmol) 및 DIEA(134 mg, 2.0 eq, 1.04 mmol)의 용액에 DMF(0.5 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(47 mg, 1.0 eq, 0.52 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 빙수조 하에 30 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 prep-HPLC[컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 20-50%B(A: 0.05% NH3H2O; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 19(77.5 mg)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.658 min, MS(ESI) m/z = 568.8 [M+H]+.
HPLC : 10-80_ab_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 2.89 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.49 (br s, 1H), 9.40 (br s, 1H), 8.94 (br s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.30 (dd, J=7.9, 12.9 Hz, 1H), 7.67 - 7.44 (m, 1H), 7.09 (dd, J=8.7, 12.2 Hz, 1H), 6.63 (s, 1H), 6.43 - 6.29 (m, 2H), 5.80 (br d, J=10.3 Hz, 1H), 4.30 - 4.17 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.86 (br s, 1H), 3.58 (q, J=8.0 Hz, 1H), 2.66 (dd, J=5.9, 12.9 Hz, 1H), 2.49 - 2.37 (m, 2H), 2.26 (s, 6H), 2.15 - 2.05 (m, 1H), 1.74 (s, 6H).
실시예 20
(R)-N-(5-(4-(4,5- 디플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시-2-(메틸((1-메틸피롤리딘-2-일)메틸)아미노)페닐)아크릴아미드
Figure pct00058
화합물 20b의 제조 절차:
DMSO(6 mL) 중의 화합물 1d(300 mg, 0.666 mmol) 및 K2CO3(184 mg, 1.332 mmol)의 용액에 화합물 20a(160 mg, 0.793 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 85℃에서 6 h 동안 교반하고 그동안 담황색에서 주황색으로 변하였다. 반응 혼합물을 빙수조 하의 H2O(80mL)에 적가하며 고체가 침전되었고, 이것을 여과로 수집하며 여과 케이크는 H2O(15 mL Х 3)로 세척, 진공 하에 건조하여 화합물 20b(300 mg, 81% 수율)를 주황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.731 min, MS(ESI) m/z=559.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, 메탄올-d 4 ) δ 8.37 (br s, 1H), 8.27 (br s, 1H), 8.05 (br s, 1H), 7.22 (dd, J=8.8, 12.4 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.54 (dd, J=5.2, 13.6 Hz, 1H), 3.23 - 3.00 (m, 2H), 2.90 (s, 3H), 2.67 - 2.54 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.29 (q, J=9.2 Hz, 1H), 2.12 - 1.97 (m, 1H), 1.81 - 1.68 (m, 2H), 1.60 (s, 6H), 1.57 - 1.47 (m, 1H).
화합물 20c의 제조 절차:
MeOH(15 mL) 중의 화합물 20b(300 mg, 0.537 mmol)의 용액에 Pd/C(10%, 30 mg)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 25-31℃에서 H2 벌룬(15 Psi) 하에 3 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과액은 진공에서 농축하여 화합물 20c(260 mg, 79.4% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.686 min, MS(ESI) m/z=529.2 [M+H]+.
실시예 20의 제조 절차:
DMF(3 mL) 중의 화합물 20c(260 mg, 0.427 mmol) 및 DIEA(83 mg, 0.64 mmol)의 용액에 빙수조 중의 아크릴로일 클로라이드(39 mg, 0.427 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5-10℃에서 0.5 h 동안 교반하였다. 반응물을 H2O(0.1 mL)로 켄칭한 후 여과하고, 여과액은 pre-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 50-80%B(A: 0.05% 암모니아, B: CH3CN); 유속: 25 ml/min)로 정제 및 동결건조하여 실시예 20(44.4 mg, 17.9% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_3min_220&254. lcm 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 2.208 min, MS(ESI) m/z=583.3 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ML 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt = 4.39 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.58 (br s, 1H), 10.08 (br s, 1H), 10.01 (br s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.31 (dd, J=8.0, 13.2 Hz, 1H), 7.65 (br s, 1H), 7.10 (dd, J=8.8, 12.0 Hz, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.39 (br s, 1H), 6.38 (br s, 1H), 6.04 (br s, 1H), 5.77 (t, J=5.6 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.18 - 3.03 (m, 1H), 2.87 - 2.80 (m, 1H), 2.74 (s, 3H), 2.71 - 2.64 (m, 2H), 2.56 (s, 3H), 2.41 - 2.33 (m, 1H), 1.97 (qd, J=8.8, 12.4 Hz, 1H), 1.79 - 1.72 (m, 8H), 1.43 - 1.35 (m, 1H).
실시예 21
(R)-N-(5-(4-(4,5- 디플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-(2-((디메틸아미노)메틸)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00059
화합물 21b의 제조 절차:
DMSO(3 mL) 중의 화합물 1d(150 mg, 0.33 mmol), 화합물 21a(101 mg, 0.50 mmol), 및 K2CO3(91 mg, 0.66 mmol)의 용액을 90℃에서 3 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 빙수(15 mL)에 붓고, 그 후 30 min 동안 교반하며, 침전된 고체를 수집하고 여과 케이크를 CH2Cl2(35 mL)에서 용해, 황산나트륨 상에서 건조, 여과하고 여과액을 진공에서 농축하여 화합물 21b(220 mg, 조 물질)를 황색 고체로서 수득하였다.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.75 (brs, 1 H), 8.88 (brs, 1 H), 8.30 (s, 1 H), 8.17 (s, 1 H), 7.26 (s, 1 H), 7.01 (dd, J=8.4 Hz, 12.0 Hz, 1 H), 6.63 (s, 1 H), 3.88 (s, 3 H), 3.58-3.50 (m, 1 H), 2.61-2.56 (m, 2 H), 2.36-2.28 (m, 1 H), 2.26-2.19 (m, 7 H), 1.96-1.91 (m, 1 H), 1.83-1.65 (m, 3 H), 1.62 (s, 6 H).
화합물 21c의 제조 절차:
MeOH(3 mL) 중의 화합물 21b(200 mg 조 물질, 0.33 mmol) 및 Pd/C(20 mg)의 용액을 H2 벌룬 하에 25-31℃에서 1 h 동안(어두운 색 혼합물) 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과액은 진공에서 농축하여 화합물 21c(180 mg, 조 물질)를 녹색 고체로서 수득하였다.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.75 (brs, 1 H), 8.29-8.15 (m, 2 H), 7.80-7.50 (m, 2 H), 7.01 (dd, J=9.2 Hz, 12.4 Hz, 1 H), 6.64 (s, 1 H), 3.74 (s, 3 H), 3.36-3.31 (m, 2 H), 2.60-2.53 (m, 1 H), 2.25-2.15 (m, 2 H), 2.13 (s, 6 H), 1.87-1.82 (m, 2 H), 1.68-1.63 (m, 1 H), 1.61-1.56 (m, 7 H).
실시예 21의 제조 절차:
DMF(3 mL) 중의 화합물 21c(180 mg, 조 물질, 0.33 mmol) 및 DIEA(85 mg, 0.66 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드(30 mg, 0.33 mmol)를 0℃에서 적가하였다. 흑색 혼합물을 0℃에서 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 prep-HPLC: [컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 40-70%B(A: 0.05% 암모니아; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실 시예 21(40.6 mg, 3 단계에 걸쳐 21%)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt= 1.856 min, MS(ESI) m/z = 583.0 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 11.65 (brs, 1 H), 10.06 (brs, 1 H), 9.88 (s, 1 H), 8.40 (s, 1 H), 8.32 (dd, J=8.0 Hz, 12.8 Hz, 1 H), 7.68 (s, 1 H), 7.10 (dd, J=8.8 Hz, 12.4 Hz, 1 H), 6.71 (s, 1 H), 6.41-6.30 (m, 2 H), 6.05 (brs, 1 H), 5.78 (dd, J=3.2 Hz, 8.0 Hz, 1 H), 3.86 (s, 3 H), 3.33-3.28 (m, 2 H), 3.02-2.93 (m, 1 H), 2.29 (dd, J=8.0 Hz, 12.4 Hz, 1 H), 2.17-2.07 (m, 7 H), 2.01-1.84 (m, 3 H), 1.76 (s, 6 H), 1.72-1.64 (m, 1 H).
HPLC : 10-80AB_1.2ml 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt=3.26 min.
실시예 22
N-(2-((2-( 비스(메틸- d 3 )아미노 )에틸)( 메틸 )아미노)-5-((4-((4,5- 디플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일)페닐)아미노)-1,3,5-트리아진-2-일)아미노)-4-메톡시페닐) 아크릴아미드
Figure pct00060
화합물 22b의 제조 절차:
THF(20 mL) 중의 화합물 22a(500 mg, 2.87 mmol) 및 K2CO3(793 mg, 5.74 mmol)의 용액에 CD3I(624 mg, 4.30 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 26-33℃에서 1h 동안 교반하고 그동안 백색 고체가 침전되었다. 그 후 CD3I(208 mg, 0.5 eq, 1.43 mmol)를 혼합물에 첨가하고 26-33℃에서 1h 동안 더 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 유기층을 감압 하에 농축하여 화합물 22b(300 mg, 50% 수율)를 무색 고체로서 수득하였다. LCMS: 0-60AB_2MIN_E.M 크로마토그래피(Xtimate C18, 2.1 Х30mm, 3um)에서 Rt = 0.743 min, MS(ESI) m/z = 209.2 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 3.24 - 3.18 (m, 1H), 3.12 (t, J=6.8 Hz, 1H), 2.78 (br s, 3H), 2.62 (br t, J=6.7 Hz, 1H), 2.34 - 2.26 (m, 1H), 1.38 (s, 9H).
화합물 22c의 제조 절차:
CH2Cl2(5 mL) 중의 화합물 22b(300 mg, 1.0 eq, 1.44 mmol)의 용액에 HCl-디옥산(5 mL, 4 M)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 22-27℃에서 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하여 화합물 22c(250 mg, 95% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS: 0-60AB_2MIN_E.M 크로마토그래피(Xtimate C18, 2.1 Х30mm, 3um)에서 Rt = 0.098 min, MS(ESI) m/z = 109.2 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 3.43 - 3.37 (m, 1H), 3.36 - 3.22 (m, 1H), 3.16 (br s, 2H), 2.56 (br s, 3H).
화합물 22d의 제조 절차:
DMSO(5 mL) 중의 화합물 22c(250 mg, 0.55 mmol) 및 K2CO3(304 mg, 2.20 mmol)의 용액에 화합물 6d(250 mg, 1.38 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 22-27℃에서 12h 동안 교반하고 그동안 색상은 담갈색에서 진한 황색으로 변하였다. 반응 혼합물을 EtOAc(20 mL)로 희석하고 염수(2 Х 30 mL)로 세척하였다. 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고 감압 하에 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2/MeOH = 10/1)로 정제하여 화합물 22d(90 mg, 30% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 10-80AB_7min_220&254.lcm 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1 Х30mm)에서 Rt = 2.414 min, MS(ESI) m/z = 539.0 [M+H]+.
화합물 22e의 제조 절차:
MeOH(10 mL) 중의 화합물 22d(90 mg, 1.0 eq, 0.17 mmol)의 용액에 Pd/C(9 mg)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 H2로 3회 퍼지 및 탈기한 후 23-28℃에서 수소 벌룬(15 Psi)하에 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 화합물 22e(70 mg, 81% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. 구조 및 순도는 LCMS(Rt= 0.698 min, 509.4 [M+H]+)에 의해 확인하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.698 min, MS(ESI) m/z = 509.4 [M+H]+.
실시예 22의 제조 절차:
DMF(2.5 mL) 중의 화합물 22e(70 mg, 0.14 mmol) 및 DIEA(36 mg, 0.28 mmol)의 용액에 DMF(0.5 mL) 중의 화합물 아크릴로일 클로라이드(13 mg, 0.14 mmol)의 용액을 0℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 빙수조 하에 30 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 prep-HPLC [컬럼: Waters Xbridge 150 Х25 5um; 조건: 38-68%B(A: 0.05% NH3H2O; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 22(21.9 mg, 28% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1 Х30mm)에서 Rt = 1.790 min, MS(ESI) m/z = 563.0 [M+H]+.
HPLC : 10-80_ab_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3 Х50mm 3um)에서 Rt = 3.06 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.68 (br s, 1H), 10.46 (br s, 1H), 9.97 (br s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.32 (dd, J=8.0, 12.8 Hz, 1H), 7.69 (br s, 1H), 7.11 (dd, J=8.8, 12.2 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.44 - 6.30 (m, 2H), 6.11 (br s, 1H), 5.80 - 5.73 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.88 (br s, 2H), 2.71 (s, 3H), 2.29 (br s, 2H), 1.77 (s, 6H).
실시예 23
N-(5-(4-(4,5- 디플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-(3-((디메틸아미노)메틸)아제티딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00061
화합물 23b의 제조 절차:
DMSO(2 mL) 중의 화합물 1d(150 mg, 0.318 mmol), 화합물 23a(60 mg, 0.318 mmol) 및 K2CO3(175 mg, 1.27 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3 h 동안 교반하였다(갈색 현탁액). 반응물을 빙수(8 mL)로 켄칭한 후 여과하고, 케이크는 H2O(5 mL)로 세척하고, 고 진공에서 건조하여 화합물 23b(180 mg, 74.3% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.710 min, MS(ESI) m/z = 545.2 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.05 (brs, 1 H), 8.98 (brs, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.28 (m, 1H), 7.11-7.05 (m, 1H), 5.97 (s, 1 H), 4.17 (d, J=8.0 Hz, 2 H), 3.93 (s, 3H), 3.67-3.63 (m, 2 H), 2.95-2.88 (m, 1H), 2.57 (d, J=7.6 Hz, 2 H), 2.43 (s, 6 H), 1.69 (s, 6 H).
화합물 23c의 제조 절차:
H2 벌룬 하의 EtOAc(20 mL) 및 MeOH(5 mL) 중의 화합물 23b(180 mg, 0.33 mmol) 및 Pd/C(180 mg, 10%)의 혼합물을 3 h 동안 23-28℃에서 교반하였다(흑색 혼합물로 변하였음). 반응물을 여과하고 케이크는 EtOAc(50 mL)로 헹구며, 여과액은 진공에서 농축하여 화합물 23c(140 mg, 82.3% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.660 min, MS(ESI) m/z = 515.2 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3): δ ppm 9.63 (brs, 1 H), 8.23-8.17 (m, 2H), 7.59 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.04-6.98 (m, 1H), 6.17 (m, 1H), 3.94 (t, J=7.2 Hz, 2 H), 3.50 (s, 3 H), 3.41 (t, J=7.6 Hz, 2 H), 2.85-2.77 (m, 1 H), 2.55-2.48 (m, 2 H), 2.17 (s, 6 H), 1.59 (s, 6H).
실시예 23의 제조 절차:
DMF(3 mL) 중의 화합물 23c(140 mg, 0.27 mmol) 및 DIEA(105 mg, 0.81 mmol)의 혼합물에 1 h에 걸쳐 빙수조 하에 DMF(1 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(29.9 mg, 0.33 mmol)의 용액을 적가하였다. 반응물을 30 min 동안 0-5℃에서 교반한 후(갈색 용액), 반응물을 H2O(0.1 mL)로 켄칭하고 생성된 용액을 prep-HPLC[Waters Xbridge 150*25.5um; 조건: 37-57%B(A: 0.05% 암모니아; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 직접 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 23(32.4 mg, 20.9% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 0-60AB_4.0 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 2.172 min, MS(ESI) m/z = 569.0 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 8.35-8.27 (m, 2 H), 7.50 (s, 1H), 7.30-7.27 (m, 1H), 7.10-7.25 (m, 1H), 6.41-6.27 (m, 3H), 5.80 (d, J=10.0 Hz, 2 H), 3.99 (t, J=7.6 Hz, 2 H), 3.87 (s, 3 H), 3.50 (t, J=7.2 Hz, 2 H), 2.94-2.87 (m, 1 H), 2.54 (d, J=8.0 Hz, 2 H), 2.23 (s, 6 H), 1.71 (s, 6H).
HPLC : Rt=2.24 min. HPLC-P Venusil XBP C18 3*50 mm, 방법＼0-60AB_1.2 ML.MET
실시예 24
N-(5-(4-(4,5- 디플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2- 일아미노 )-4-메톡시-2-(메틸(2-(피페리딘-1-일)에틸)아미노)페닐)아크릴아미드
Figure pct00062
화합물 24b의 제조 절차:
MeOH(10 mL) 중의 화합물 24a(1.0 g, 6.77 mmol) 및 메탄아민(1.4 g, 20.31 mmol)의 용액에 촉매량의 KI(225 mg, 1.35 mmol)와 함께 5 ml 물 중의 KOH(760 mg, 13.55 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃ 내지 80℃에서 18 h 동안 가열하였다. 반응물은 HCl(1M)로 처리하여 pH=7로 조정하고, 그 후 EtOAc(3 Х 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(3 Х 10 mL)로 세척, 건조 및 감압 하에 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2/MeOH=10/1(v/v))로 정제하여 화합물 24b(120 mg, 수율 12.5)를 무색 오일로서 수득하였다.
LCMS: 10-80CD_4MIN(XBrige Shield RP18 2.1 Х50mm)에서 Rt = 1.688 min (MSD TIC), MS(ESI) m/z = 143.2 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 2.57 - 2.47 (m, 2H), 2.46 - 2.30 (m, 8H), 2.28 - 2.15 (m, 2H), 1.59-1.54 (m, 5H), 1.42 (br d, J=5.2 Hz, 2H).
화합물 24c의 제조 절차:
DMSO(2 mL) 중의 화합물 1d(190 mg, 0.42 mmol) 및 K2CO3(116 mg, 0.84 mmol)의 용액에 화합물 24b(60 mg, 0.42 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 28-33℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(조건: 65-75%B(A: 물 중 0.05% TFA; B: MeOH); 유속: 40 ml/min))로 정제하여 화합물 24c(90 mg, 37.3% 수율)를 적색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.805 min, MS(ESI) m/z = 573.2 [M+H]+.
화합물 24d의 제조절 차:
MeOH(3 mL) 중의 화합물 24c(90 mg, 0.16 mmol)의 용액에 N2 보호하에 Pd/C(10 mg)를 첨가하였다. 흑색 혼합물을 26-33℃에서 H2 벌룬(15 Psi)하에 1 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 화합물 24d(70 mg, 82.1% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.764 min, MS(ESI) m/z = 543.1 [M-OH]+.
실시예 24의 제조 절차:
DMF(1 mL) 중의 화합물 24d(70 mg, 0.13 mmol) 및 DIEA(25 mg, 0.19 mmol)의 용액에 DMF(1 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(12 mg, 0.13 mmol)의 용액을 첨가하였다. 생성된 갈색 혼합물을 0℃에서 30 min 동안 교반하였다. 반응물을 prep-HPLC [컬럼: Waters Xbridge 150 Х25 5um; 조건: 40-70%B(A: 0.05% 암모니아; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 24(12.9 mg, 16.8% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_7MIN_ 220&254 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50 mm)에서 Rt = 5.224 min, MS(ESI) m/z = 597.3 [M+H]+.
HPLC, Rt = 4.81 순도 96.87% (220nm); 10-80_CD_1.2mL.MET(XBridge Shield RP 18 2.1 Х50mm 5um).
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.26 (br s, 1H), 9.33 (s, 1H), 9.14 (br s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.26 (br s, 1H), 6.96 (br s, 1H), 6.59 (dd, J=10.4, 16.8 Hz, 1H), 6.31 - 6.12 (m, 2H), 5.72 (br d, J=10.4 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 2.98 (br t, J=6.4 Hz, 2H), 2.70 (s, 3H), 2.40 - 2.22 (m, 6H), 1.57 - 1.44 (m, 10H), 1.37 (br d, J=4.0 Hz, 2H), 1.24 (br s, 1H).
실시예 25
N-(5-(4-(4,5- 디플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시-2-((3aS,6aS)-5-메틸헥사히드로피롤로[3,4-b]피롤-1(2H)-일)페닐)아크릴아미드
Figure pct00063
화합물 25b의 제조 절차:
DMSO(4 mL) 중의 화합물 1d(200 mg, 0.444 mmol) 및 K2CO3(123 mg, 0.888 mmol)의 용액에 화합물 25a(196 mg, 1.554 mmol)를 첨가하였다. 담황색 반응 혼합물을 85℃에서 3 h 동안 교반하였다(갈색에서 주황색으로 변하였음). 반응 혼합물을 빙수조 하의 H2O(40 mL)에 적가하고 그동안 고체가 침전되었다. 침전된 고체를 여과로 수집하고 H2O(15 mL Х 3)로 세척한 후, 고 진공에서 건조시켜 화합물 25b(230 mg, 89.8% 수율)를 주황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.709 min, MS(ESI) m/z = 557.2 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.04 (br s, 1H), 8.30 (br s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.48 (br s, 1H), 7.06 (dd, J=8.4, 12.0 Hz, 1H), 6.37 (s, 1H), 4.45 - 4.33 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.53 (dt, J=6.4, 10.4 Hz, 1H), 3.15 (t, J=8.4 Hz, 1H), 3.01 (quin, J=7.2 Hz, 1H), 2.67 (t, J=8.8 Hz, 1H), 2.61 - 2.51 (m, 1H), 2.39 (br dd, J=6.4, 9.2 Hz, 1H), 2.23 (d, J=9.2 Hz, 1H), 2.19 (s, 3H), 2.12 - 1.99 (m, 1H), 1.86 (dd, J=6.0, 12.4 Hz, 1H), 1.65 (s, 6H).
화합물 25c의 제조 절차:
MeOH(15 mL) 중의 화합물 25b(230 mg, 0.338 mmol)의 용액에 Pd/C(10%, 25 mg)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 22-28℃에서 3 h 동안 H2 벌룬(15 Psi) 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과액은 진공에서 농축하여 화합물 25c(180 mg, 82% 수율)를 회색을 띤 녹색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AB MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.667 min, MS(ESI) m/z = 527.2 [M+H]+.
실시예 25의 제조 절차:
DMF(2 mL) 중의 화합물 25c(170 mg, 0.33 mmol) 및 DIEA(64 mg, 0.50 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드(29 mg, 0.33 mmol)를 빙수조 하에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5-10℃에서 0.5 h 동안 교반하였다. 반응물을 H2O(0.1 mL)로 켄칭한 후 여과하고, 여과액을 pre-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 30-60%B(A: 0.05% 암모니아, B: CH3CN); 유속: 25 ml/min)로 정제 및 동결건조하여 실시예 25(48.0 mg, 25.1% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_3 min_220&254(XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 1.982 min, MS(ESI) m/z=581.3 [M+H]+.
HPLC: Rt = 3.94 순도 96.04%(220nm); 10-80_CD_1.2mL.MET(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um).
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.66 (br s, 1H), 9.92 (br s, 1H), 9.59 (br s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.33 (dd, J=8.0, 12.8 Hz, 1H), 7.68 (br s, 1H), 7.10 (dd, J=8.8, 12.0 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.53 - 6.34 (m, 2H), 5.99 (br s, 1H), 5.76 (d, J=9.6 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.72 - 3.60 (m, 1H), 3.21 (t, J=7.2 Hz, 1H), 2.92 - 2.78 (m, 3H), 2.71 (d, J=10.0 Hz, 1H), 2.33 - 2.31 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.23 - 2.17 (m, 1H), 1.90 (dd, J=4.0, 10.0 Hz, 1H), 1.87 - 1.80 (m, 1H), 1.76 (br s, 6H).
실시예 26
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시-2-(메틸(2-(피페리딘-1-일)에틸)아미노)페닐)아크릴아미드
Figure pct00064
화합물 26b의 제조 절차:
MeOH(10 mL) 중의 화합물 26a(1.0 g, 6.77 mmol)의 용액에 DIEA(1.8 g, 13.55 mmol) 및 메탄아민 히드로클로라이드(10 mL, 20.31 mmol, THF 중 2M)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 18 h 동안 교반하였다. 반응물을 HCl(1M)로 처리하여 pH=7로 조정하고, 그 후 EtOAc(3 Х10 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(3 Х10 mL)로 세척, 건조 및 감압 하에 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2/MeOH=10/1(v/v))로 정제하여 화합물 26b(120 mg, 12.5% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다.
LCMS: 10-80CD_4MIN(XBrige Shield RP18 2.1 Х50mm)에서 Rt = 1.688 min, MS(ESI) m/z = 143.2 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 2.57 - 2.47 (m, 2H), 2.46 - 2.30 (m, 8H), 2.28 - 2.15 (m, 2H), 1.59-1.54 (m, 5H), 1.42 (br d, J=5.0 Hz, 2H).
화합물 26c의 제조 절차:
DMSO(2 mL) 중의 화합물 26b(197 mg, 0.42 mmol) 및 K2CO3(116 mg, 0.84 mmol)의 용액에 화합물 11c(60 mg, 0.42 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 23-28℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이것을 MeOH/H2O(55% 내지 60%의 물 중의 MeOH)로 용리하는 Biotage 플래시 역상 C-18 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 화합물 26c(150 mg, 60.4% 수율)를 적색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.826 min, MS(ESI) m/z = 589.1 [M+H]+.
화합물 26d의 제조 절차:
MeOH(5 mL) 및 H2O (1 mL) 중의 화합물 26c(150 mg, 0.26 mmol)의 용액에 Zn(87 mg, 1.32 mmol) 및 NH4Cl(142 mg, 2.65 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 1.5 h 동안 N2 하에 교반하였다(흑색 혼합물). 반응 혼합물은 수성 NH4Cl(20 mL)을 첨가하여 켄칭하고, 그 후 EtOAc(3 Х10 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(3 Х10 mL)로 세척, 건조 및 진공에서 직접 농축하여 화합물 26d(120 mg, 84.4% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.783 min, MS(ESI) m/z = 559.1 [M-OH]+.
실시예 26의 제조 절차:
DMF(1 mL) 중의 화합물 26d(120 mg, 0.21 mmol) 및 DIEA(42 mg, 0.32 mmol)의 용액에 DMF(1 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(19 mg, 0.21 mmol)의 용액을 0℃에서 적가하였다. 생성된 갈색 혼합물을 0℃에서 30 min 동안 교반하였다. 반응물을 Biotage 플래시 역상 C-18 컬럼 크로마토그래피 [조건: 75-80%B(A: 0.05% 수성 NH4HCO3; B: CH3CN); 유속: 40 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 26(47.2 mg, 35.9% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 10-80CD_7MIN_220&254 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 5.365 min, MS(ESI) m/z = 613.3 [M+H]+.
HPLC: Rt = 4.83 순도 97.09% (220nm), 10-80_CD_1.2mL.MET(XBridge Shield RP 18 2.1 Х50mm 5um).
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.19 (br s, 1H), 9.34 (br s, 1H), 9.08 (br s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.26 (br s, 1H), 6.97 (br s, 1H), 6.60 (br s, 1H), 6.30 (s, 1H), 6.19 (br d, J=17.1 Hz, 1H), 5.72 (br d, J=10.3 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 2.98 (br s, 2H), 2.69 (s, 3H), 2.34 (br s, 6H), 1.57 - 1.31 (m, 13H).
실시예 27
(R)-N-(5-(4-(4,5- 디플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-(3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00065
화합물 27a의 제조 절차:
DMSO(4 mL) 중의 화합물 1d(180 mg, 0.40mmol), K2CO3(110.6 mg, 0.80 mmol)의 용액에 (R)-N,N-디메틸피롤리딘-3-아민(54.8 mg, 0.48 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 24-27℃에서 2 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 배스 1359-035의 것과 조합하고 교반하면서 조심스럽게 물(50 mL)에 부어 황색 고체가 침전되었다. 침전된 고체를 여과로 수집하고 CH2Cl2(20 mL)로 용해하며, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 27a(210 mg, 87% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.705 min, MS(ESI) m/z = 545.1 [M+H]+.
화합물 27b의 제조 절차:
MeOH(5 mL) 중의 화합물 27a(210 mg, 0.39 mmol)의 용액에 Pd/C(35 mg)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 H2로 3회 퍼지 및 탈기한 후, 23-29℃에서 H2 벌룬(15 Psi)하에 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 화합물 27b(170 mg, 84.7% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.667 min, MS(ESI) m/z = 515.2 [M+H]+.
실시예 27의 제조 절차:
DMF(2 mL) 중의 화합물 27b(100 mg, 0.19 mmol) 및 DIEA(50 mg, 0.38 mmol)의 용액에 DMF(1 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(17 mg, 0.19 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 빙수조 하에 20 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 세 방울의 물로 켄칭하고 prep-TLC (CH2Cl2/MeOH = 7/1(v/v))로 정제하여 불순한 생성물(100 mg)을 백색 고체로서 수득하며, 이것을 prep-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um: 30- 60%B(A: 물(0.05% 암모니아 히드록시드 v/v), B: CH3CN), 유속: 25 mL/min)로 더 정제하여 실시예 27(15 mg, 13.9% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.651 min, MS(ESI) m/z=568.9 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 3.17 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.59 (br s, 1H), 9.80 (br s, 1H), 8.49 (br s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.33 (dd, J=8.0, 13.2 Hz, 1H), 7.64 (br s, 1H), 7.10 (dd, J=8.4, 12.2 Hz, 1H), 6.76 (s, 1H), 6.40-6.36 (m, 2H), 5.84-5.78 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.15-3.07 (m, 4H), 2.90 (br t, J=7.2 Hz, 1H), 2.31 (s, 6H), 2.19 (dt, J=7.2, 12.8 Hz, 1H), 2.00-1.90 (m, 1H), 1.76 (s, 6H), 3.87 (s, 3H), 2.40 (s, 6H).
실시예 28
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시-2-((3aR,6aR)-5-메틸헥사히드로피롤로[3,4-b]피롤-1(2H)-일)페닐)아크릴아미드
Figure pct00066
화합물 28b의 제조 절차:
DMSO(5 mL) 중의 화합물 11c(300 mg, 0.64 mmol)의 용액에 탄산칼륨(450 mg, 3.25 mmol) 및 화합물 28a(120 mg, 0.95 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 85℃에서 3h 동안 교반하였다. 혼합물을 빙수(30 mL)에 붓고 고체가 침전되었다. 고체를 흡인 여과로 분리하고 진공에서 건조시켜 화합물 28b(320 mg, 87% 수율)을 주황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18, 2.1Х30mm, 3um)에서 Rt = 1.868 min, MS(ESI) m/z = 573.2[M+H]+.
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 9.60 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.00 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 6.32 (s, 1H), 4.40-4.29 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.53-3.43 (m, 1H), 3.18-3.08 (m, 1H), 3.01-2.90 (m, 1H), 2.61-2.55 (m, 1H), 2.47-2.40 (m, 1H), 2.39-2.33 (m, 1H), 2.24-2.17 (m, 1H), 2.13 (s, 3H), 2.05-1.95 (m, 1H), 1.86-1.75 (m, 1H), 1.62 (s, 6H).
화합물 28c의 제조 절차:
메탄올/물(5 mL/1 mL) 중의 화합물 28b(200 mg, 0.35 mmol)의 용액에 NH4Cl(112 mg, 2.09 mmol) 및 Zn(114 mg, 1.75 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 1h 동안 질소 하에 교반하였다. 혼합물을 물(20 mL)에 붓고 디클로로메탄(15 mL Х 4)으로 추출하였다. 조합된 유기층을 황산나트륨 상에서 건조, 여과 및 진공에서 농축하여 갈색 검을 수득하고, 이것을 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2 중의 0 내지 10% 메탄올)로 정제하여 화합물 28c(110 mg, 57.8% 수율)를 녹색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.716 min, MS(ESI) m/z = 543.0 [M+H]+.
1 H NMR: (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.15 (s, 1H), 8.82 (br. s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.27 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 6.80 (br. s, 3H), 6.29 (s, 1H), 4.28-4.20 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.07-2.95 (m, 2H), 2.70-2.59 (m, 2H), 2.53 (s, 3H), 2.49-2.36 (m, 2H), 2.32-2.18 (m, 1H), 2.15-2.02 (m, 1H), 1.85-1.72 (m, 1H), 1.52 (s, 6H).
실시예 28의 제조 절차:
DMF(3 mL) 중의 화합물 28c(90 mg, 0.17mmol)의 용액에 DIEA(43 mg, 0.33 mmol)에 이어서 아크릴로일 클로라이드(15 mg, 0.17 mmol)를 0℃에서 3회 첨가하였다. 혼합물을 물로 켄칭하고 pre-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150 Х 25, 5um, 조건: 46%-66% B(A: 물/10mM NH4HCO3, B: CH3CN), 유속: 25 mL/min)로 더 정제하기 위해 이전의 배치와 조합하여 실시예 28(29.4 mg, 23.8% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1 Х30mm)에서 Rt = 1.870 min, MS(ESI) m/z = 597.1 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ml 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1 Х50mm 5um)에서 Rt = 3.84 min.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 10.53 (s, 1H), 9.85 (s, 1H), 9.52 (s, 1H), 8.40 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.02 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 6.70 (s, 1H), 6.42 (br. s, 1H), 6.35-6.26 (m, 1H), 5.98 (br. s, 1H), 5.69 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.65-3.53 (m, 1H), 3.19-3.09 (m, 1H), 2.85-2.73 (m, 3H), 2.72-2.56 (m, 1H), 2.31-2.08 (m, 5H), 1.84-1.75 (m, 2H), 1.69 (s, 6H).
실시예 29
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시-2-(메틸(2-(피롤리딘-1-일)에틸)아미노)페닐)아크릴아미드
Figure pct00067
화합물 29b의 제조 절차:
DMSO(5 mL) 중의 화합물 11c(200 mg, 0.43 mmol) 및 K2CO3(119 mg, 0.86 mmol)의 용액에 화합물 29a(105 mg, 0.52 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 85℃에서 4h 동안 교반하고 그동안 색상은 담황색에서 진한 황색으로 변한다. 반응 혼합물을 빙수(50 mL)에 붓고 황색 고체가 침전되었다. 침전된 고체를 여과로 수집하고 CH2Cl2(30 mL)로 용해, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 29b(230 mg, 93% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.814 min, MS(ESI) m/z = 575.1 [M+H]+.
화합물 29c의 제조 절차:
MeOH(10 mL) 및 H2O(2 mL) 중의 화합물 29b(230 mg, 0.40 mmol)의 용액에 Zn(130 mg, 2.00 mmol) 및 NH4Cl(214 mg, 4.00 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여과액은 감압 하에 농축하여 잔류물을 수득하고, 이것을 EtOAc(2 Х10 mL)와 물(10 mL) 사이에서 분배하였다. 조합된 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조, 여과하고, 감압 하에 농축하여 화합물 29c(180 mg, 82% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.766 min, MS(ESI) m/z = 545.1 [M+H]+.
실시예 29의 제조 절차:
DMF(2.5 mL) 중의 화합물 29c (180 mg, 0.33 mmol) 및 DIEA(85 mg, 0.66 mmol)의 용액에 DMF(0.5 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(30 mg, 0.33 mmol)의 용액을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 빙수조 하에 0℃에서 30 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 RP-HPLC(역상 HPLC)[컬럼: 역상 컬럼; 조건: 42-72%B(A: 0.25% NH3HCO3; B: MeOH); 유속: 40 ml/min]로 정제하였다. 분획을 감압 하에 농축하고 동결건조하여 실시예 29(47.4 mg, 20% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1 Х30mm)에서 Rt = 1.912 min, MS(ESI) m/z = 599.0 [M+H]+.
HPLC : 10-80_ab_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3 Х50mm 3um)에서 Rt = 3.41 min.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 10.61 (br s, 1H), 10.06 (br s, 1H), 9.96 (br s, 1H), 8.48 (d, J=7.6 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.69 (br s, 1H), 7.10 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.38 (br d, J=4.8 Hz, 2H), 6.13 (br s, 1H), 5.80 - 5.72 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.95 (br s, 2H), 2.69 (s, 3H), 2.55 (br s, 4H), 2.42 (br s, 2H), 1.83 (br s, 4H), 1.78 (s, 6H).
실시예 30
(R)-N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시-2-(메틸((1-메틸피롤리딘-2-일)메틸)아미노)페닐) 아크릴아미드
Figure pct00068
화합물 30a의 제조 절차:
DMSO(3 mL) 중의 화합물 11c(180 mg, 0.386 mmol) 및 K2CO3(107 mg, 0.772 mmol)의 용액에 (R)-N-메틸-1-(1-메틸피롤리딘-2-일)메탄아민(93 mg, 0.463 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 85℃에서 1 h 동안 교반하였다(황색에서 진한 주황색으로 변하였음). 반응 혼합물을 빙수조 하의 H2O(40mL)에 적가하고 고체가 침전되었다. 고체를 여과로 수집하고 H2O(15 mL Х 3)로 세척 후, 진공에서 건조시켜 화합물 30a(227 mg, 82% 수율)를 주황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AB MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.743 min, MS(ESI) m/z=575.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 9.96 (br s, 1H), 8.88 (br s, 1H), 8.29 (br s, 2H), 7.51 (br s, 1H), 7.02 (d, J=10.4 Hz, 1H), 6.62 (s, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.48 - 3.39 (m, 1H), 3.07 (dd, J=7.6, 13.2 Hz, 1H), 3.01 - 2.95 (m, 1H), 2.80 (s, 3H), 2.54 - 2.43 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.22 - 2.15 (m, 1H), 2.02 - 1.91 (m, 1H), 1.75 - 1.65 (m, 2H), 1.63 (s, 6H), 1.54 - 1.46 (m, 1H).
화합물 30b의 제조 절차:
MeOH/H2O=5/1(5 mL) 중의 화합물 30a(227 mg, 0.316 mmol)의 용액에 Zn(124 mg, 6.0 eq, 1.896 mmol) 및 NH4Cl(101 mg, 1.896 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 1 h 동안 교반하였다(주황색에서 갈색으로 변하였음). 반응 혼합물을 여과하고, 여과액은 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 CH2Cl2(20 mL)로 용해, 물(15 mL Х 3)로 세척, 그 후 Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 30b(170 mg, 98% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AB MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.700 min, MS(ESI) m/z=545.2 [M+H]+.
실시예 30의 제조 절차:
DMF(2 mL) 중의 화합물 30b(170 mg, 0.312 mmol) 및 DIEA(60 mg, 0.468 mmol)의 용액에 빙수조 하의 아크릴로일 클로라이드(28 mg, 0.312 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5-10℃에서 10 min 동안 교반하였다. 반응물을 H2O(0.1 mL)로 켄칭한 후 여과하고, 여과액은 pre-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 50-80%B(A: 0.05% 암모니아, B: CH3CN); 유속: 25 ml/min)로 정제 및 그 후 동결건조하여 실시예 30(78.1 mg, 41.8% 수율)을 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254. lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-D Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.983 min, MS(ESI) m/z=599.0 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.52 (br s, 1H), 10.09 (br s, 1H), 10.02 (br s, 1H), 8.46 (d, J=7.2 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.65 (br s, 1H), 7.09 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.39 (br s, 1H), 6.38 (br s, 1H), 6.11 (br s, 1H), 5.77 (t, J=5.6 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.20 - 3.02 (m, 1H), 2.89 - 2.78 (m, 1H), 2.74 (s, 3H), 2.71 - 2.63 (m, 2H), 2.56 (s, 3H), 2.45 - 2.30 (m, 1H), 2.06 - 1.88 (m, 1H), 1.77 (br s, 6H), 1.73 - 1.69 (m, 2H), 1.45 - 1.32 (m, 1H).
실시예 31
(R)-N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-(2-((디메틸아미노)메틸)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00069
화합물 31a의 제조 절차:
DMSO(2 mL) 중의 화합물 11c(180 mg, 0.38 mmol), (R)-N,N-디메틸-1-(피롤리딘-2-일)-메탄아민 디히드로클로라이드(74 mg, 0.58 mmol) 및 K2CO3(106.6 mg, 0.77 mmol)의 용액을 85℃에서 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 빙수조 중의 H2O (10 mL)에 교반하면서 첨가하고, 침전된 고체를 여과로 수집한 후 DCM(30 mL)으로 용해, Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 생성물 31a(310 mg, 88% 수율)를 주황색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AB MERCK RP18 2.5-2mm) 에서 Rt = 0.758 min, MS(ESI) m/z=575.4 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 9.79 (br s, 1H), 8.86 (br s, 1H), 8.34 (br s, 2H), 7.33 (br s, 1H), 7.05 (d, J=10.4 Hz, 1H), 6.68 (s, 1H), 4.13 - 3.98 (m, 1H), 3.93 (s, 4H), 3.70 - 3.58 (m, 1H), 3.58 (dt, J=6.0, 10.4 Hz, 2H), 2.46 - 2.31 (m, 2H), 2.05 - 1.93 (m, 1H), 1.92 - 1.79 (m, 9H), 1.73 - 1.62 (m, 6H).
화합물 31b의 제조 절차:
MeOH/H2O=5/1(9 mL) 중의 화합물 31a(300 mg, 0.52 mmol)의 용액에 Zn(170.55 mg, 2.61 mmol) 및 NH4Cl(139.5 mg, 2.61 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 1h 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과액은 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 CH2Cl2(30 mL)로 용해, 물(30 mL Х 2) 및 염수(30mL)로 세척, 그 후 Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 생성물 31b(160 mg, 56% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_ 220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AB MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.693 min, MS(ESI) m/z=545.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 9.58 (br s, 1H), 8.35 (br d, J=7.2Hz, 1H), 7.81 (br s, 1H), 7.71 - 7.48 (m, 1H), 7.07 (br d, J=10.4 Hz, 1H), 6.71 (br s, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.05 - 3.85 (m, 2H), 3.81 (br s, 3H), 3.52 - 3.33 (m, 2H), 2.69 - 2.59 (m, 2H), 2.29 - 2.15 (m, 8H), 1.68 (br d, J=4.4 Hz, 6H).
실시예 31의 제조 절차:
DMF(2 mL) 중의 화합물 31b(90 mg, 0.165 mmol) 및 DIEA(31.9 mg, 0.53 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드(14.9 mg, 0.165 mmol)를 0℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 1h 동안 교반하였다. 반응물을 H2O(0.1 mL)로 켄칭한 후 여과하고, 여과액을 조합하며 prep-HPLC(컬럼: Gemini 150*25 5um; 이동상 A: 물 0.05% 암모니아 히드록시드 v/v 이동상 B: DMF 유속: 25 ml/min 구배 시간: 10 min 프로파일 설명: 35%-65%)로 더 정제하여 실시예 31(20.1 mg, 11.4% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4 min_220&254 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AS A: Xtimate C18, 2.1*30mm, 3um; B: XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 1.826 min, MS(ESI) m/z=599.3 [M+H]+.
HPLC : Rt = 3.98 10-80_CD_1.2ml.met XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.59 (br s, 1H), 10.05 (br s, 1H), 9.89 (br s, 1H), 8.56 - 8.32 (m, 2H), 7.67 (br s, 1H), 7.09 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.69 (s, 1H), 6.37 (br s, 2H), 6.08 (br s, 1H), 5.86 - 5.72 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.31 (br s, 2H), 3.08 - 2.86 (m, 1H), 2.39 (br s, 1H), 2.29 - 2.13 (m, 6H), 2.09 - 1.91 (m, 3H), 1.76 (s, 8H).
실시예 32
N-(2-((2-(디메틸아미노)에틸)( 메틸 )아미노)-5-(4-(6-(2-히드록시프로판-2-일)-1-메틸-1H-인돌-5-일아미노)-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00070
화합물 32a의 제조 절차:
EtOAc(100 mL) 및 MeOH(100 mL) 중의 2-플루오로-4-메틸벤조산(10.0 g, 64.87 mmol)의 용액에 TMSCHN2(64.87 mL, 129.75 mmol, 헥산 중 2M)를 첨가하였다. 혼합물을 28-36℃(실온)에서 1.5 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 10/1(v/v))로 정제하여 화합물 32a(9 g, 82.5% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.780 min, MS(ESI) m/z = 169.0 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3 ) δ 7.76 (t, J=7.8 Hz, 1H), 6.93 (d, J=7.4 Hz, 1H), 6.88 (d, J=12.0 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 2.32 (s, 3H).
화합물 32b의 제조 절차:
H2SO4(100 mL) 중의 화합물 32a(9.0 g, 53.52 mmol)의 용액에, 그 후 KNO3 (10.8 g, 107.04 mmol)을 수회 분량으로 0-5℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 28-36℃에서 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 10/1)로 정제하여 화합물 32b(10 g, 87% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.781 min, MS(ESI) m/z NA.
1 H NMR(400MHz, CDCl3 ) δ 8.66 (d, J=6.6 Hz, 1H), 7.16 (d, J=10.6 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H), 2.69 (s, 3H).
화합물 32c의 제조 절차:
DMSO(100 mL) 중의 화합물 32b(6.0 g, 28.15 mmol)의 용액에 화합물 디벤질아민(8.3 g, 42.22 mmol,) 및 DIEA(7.3 g, 56.29 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 120℃(실온)에서 1.5 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 10/1(v/v))로 정제하여 화합물 32c(4.8 g, 44% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.947 min, MS(ESI) m/z = 391.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, 메탄올-d 4 ) δ 8.46 (s, 1H), 7.33 - 7.22 (m, 10H), 6.96 (s, 1H), 4.44 (s, 4H), 3.91 (s, 3H), 2.54 (s, 3H).
화합물 32d의 제조 절차:
DMF(20 mL) 중의 화합물 32c(4.8 g, 12.30 mmol)의 용액에 DMF-DMA(4.4 g, 36.88 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 150℃에서 2 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축한 후, CH2Cl2(20 mL) 및 Pd/C(480 mg)를 첨가하고 혼합물은 수소 대기(15 Psi)하에 2h 동안 교반하였다. 반응물을 여과하고, CH2Cl2(100 mL) 및 H2O (300 mL)를 여과액에 첨가하였다. 유기물을 분리 및 염수(3 Х 100 mL)로 세척, 건조 및 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 5/1(v/v))로 정제하여 화합물 32d(3.0 g, 66.7% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_3MIN_220&254 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 1.395 min, MS(ESI) m/z = 371.2 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.18 (br s, 1H), 7.98 - 7.93 (m, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.42 (t, J=2.8 Hz, 1H), 7.35 (s, 2H), 7.34 (s, 2H), 7.31 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.25 (s, 2H), 7.23 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.31 (br s, 1H), 4.12 (s, 4H), 3.86 (s, 3H).
화합물 32e의 제조 절차:
아세톤(50 mL) 중의 화합물 32d(2.7 g, 7.29 mmol) 및 Cs2CO3(7.1 g, 21.87 mmol)의 용액에 CH3I(1.6 g, 10.93 mmol)를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 18-25℃에서 18 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여과액을 수성 NH4Cl(20 mL)로 처리한 후, CH2Cl2(25 mL Х 2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 32e(2.6 g, 92.9% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5MIN_220&254.lcm; 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.849 min, MS(ESI) m/z = 385.2 [M+H]+.
화합물 32f의 제조 절차:
MeOH(50 mL) 중의 화합물 32e(3.5 g, 9.10 mmol)의 용액에 Pd/C(10%, 300 mg)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 H2로 3회 퍼지 및 탈기시킨 후, 29-40℃에서 H2 벌룬(15 Psi)하에 18 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여과액은 감압 하에 농축하여 32f(1.6 g, 86.5% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5MIN_220&254.lcm 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 0.536 min, MS(ESI) m/z = 205.0 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.91 (s, 1H), 7.11 (d, J=3.2 Hz, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.24 (d, J=2.4 Hz, 1H), 5.31 (br s, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.76 (s, 3H).
화합물 32g의 제조 절차:
THF(50 mL) 중의 화합물 32f(1.0 g, 4.90 mmol)의 용액에 CH3MgBr(8.2 mL, 에테르 중 3 M)을 0~5℃에서 적가하였다. 혼합물을 17-21℃에서 1.5 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물은 수성 NH4Cl(100 mL)을 첨가하여 켄칭한 후, EtOAc(3 Х 100 mL)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(3 Х 100 mL)로 세척, 건조 및 감압 하에 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc=20/1(v/v))로 정제하여 화합물 32g(700 mg, 70% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_7min_220&254.lcm 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 0.865 min, MS(ESI) m/z = 186.9 [M-17]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 7.14 (s, 1H), 6.98 - 6.96 (m, 2H), 6.27 (d, J=2.4 Hz, 1H), 4.11 - 3.80 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 1.77 (s, 6H).
화합물 32h의 제조 절차:
DMF(3 mL) 중의 화합물 32g(200 mg, 0.98 mmol)의 용액에 화합물 6e(323 mg, 1.08 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 2 h 동안 교반하였다. 반응물을 교반하면서 빙수(50 mL)에 붓고 황색 고체가 침전되었다. 고체를 여과로 수집하고 CH2Cl2(20 mL)로 용해한 후, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 32h(380 mg, 83.1% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.796 min, MS(ESI) m/z = 490.1 [M+Na]+.
화합물 32i의 제조 절차:
DMSO(4 mL) 중의 화합물 32h(300 mg, 0.64 mmol)의 용액에 N 1 ,N 1 ,N 2 -트리메틸에탄-1,2-디아민(131 mg, 1.28mmol)을 첨가하고, 그 후 14-19℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 교반하면서 빙수(50 mL)에 붓고 황색 고체가 침전되었다. 고체를 여과로 수집하고 CH2Cl2(20 mL)로 용해한 후, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 32i(280 mg, 80% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.703 min, MS(ESI) m/z = 550.2 [M+H]+.
화합물 32j의 제조 절차:
MeOH(5 mL) 중의 화합물 32i(250 mg, 0.45mmol)의 용액에 N2 하에 Pd/C(25 mg, 10%)를 첨가하였다. 생성된 흑색 혼합물을 15-21℃에서 H2 벌룬(15 Psi)하에 1 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 화합물 32j(200 mg, 84.7% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.653 min, MS(ESI) m/z = 520.1 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.47 (br s, 1H), 8.24 (s, 2H), 7.96 (br s, 1H), 7.73 (br s, 1H), 7.07 (d, J=2.4 Hz, 1H), 6.67 - 6.64 (m, 1H), 6.50 (d, J=2.4 Hz, 1H), 3.81 - 3.79 (m, 6H), 3.49 (s, 3H), 2.91 (br t, J=6.8 Hz, 2H), 2.62 (s, 4H), 2.37 (br t, J=6.8 Hz, 2H), 2.26 - 2.22 (m, 6H), 1.77 (s, 6H).
실시예 32의 제조 절차:
DMF(1 mL) 중의 화합물 32j (200 mg, 0.38 mmol) 및 DIEA(75 mg, 0.58 mmol)의 용액에 DMF(1 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(35 mg, 0.38 mmol)를 0℃에서 적가하였다. 생성된 갈색 혼합물을 0℃에서 30 min 동안 교반하였다. 반응물을 prep-HPLC[컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 30-50%B(A: 0.05% 암모니아; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제한 후 동결건조하여 실시예 32(57.8 mg, 26.2% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: 10-80CD_7MIN_220&254 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 4.478 min, MS(ESI) m/z = 574.3 [M+H]+.
HPLC: 10-80_CD_1.2mL.MET(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt = 3.90 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.61 (br s, 1H), 10.42 (br s, 1H), 10.03 (br s, 1H), 8.41 - 8.39 (m, 2H), 7.59 (br s, 1H), 7.02 (d, J=2.8 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.48 - 6.44 (m, 2H), 6.37 - 6.30 (m, 1H), 6.00 (br s, 1H), 5.78 (br d, J=10.8 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 2.88 (br t, J=5.2 Hz, 2H), 2.71 (s, 3H), 2.27 (s, 8H), 1.90 (s, 6H).
실시예 33
(R)-N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-(3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00071
화합물 33a의 제조 절차:
DMSO(4 mL) 중의 화합물 11c(200 mg, 0.43 mmol) 및 K2CO3(119 mg, 0.86 mmol)의 용액에 화합물 (R)-N,N-디메틸피롤리딘-3-아민(59 mg, 0.51 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 24-27℃에서 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(50 mL)에 붓고 황색 고체가 침전되었다. 황색 고체를 여과로 수집하고, CH2Cl2(20 mL)로 용해, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 표제 생성물 33a(220 mg, 91% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.789 min, MS(ESI) m/z = 583.1[M+Na]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.69 (br s, 1H), 8.91 (br s, 1H), 8.38 (br s, 2H), 7.35 (br s, 1H), 7.08 (d, J=10.4 Hz, 1H), 6.28 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.59-3.51(m, 1H), 3.37-3.31 (m, 1H), 3.23-3.18 (m, 1H), 3.15-3.07(m, 1H), 2.86-2.75 (m, 1H), 2.29 (s, 6H), 2.25-2.15 (m, 1H), 1.99-1.88 (m, 1H), 1.69 (s, 6H).
화합물 33b의 제조 절차:
MeOH/H2O (6 mL, 5/1) 중의 화합물 33a(220 mg, 0.39 mmol), Zn(224 mg, 4.19 mmol)의 용액에 NH4Cl(236 mg, 3.6 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 2 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과 및 진공하에 농축하여 잔류물을 수득하고, 이것을 CH2Cl2(20 mL)로 용해, 물(15 mL Х 3)로 세척, Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 표제 생성물 33b(180 mg, 87% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.732 min, MS(ESI) m/z = 531.2[M+H]+.
실시예 33의 제조 절차:
DMF(2 mL) 중의 화합물 33b(180 mg, 0.34 mmol) 및 DIEA(66 mg, 0.51 mmol)의 용액에 DMF(0.5 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(31 mg, 0.34 mmol)의 용액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 빙수조 하에 20 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 3 방울의 물로 켄칭하고 prep-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um: 30-60%B(A: 물(0.05% 암모니아 히드록시드 v/v), B: CH3CN), 유속: 25 mL/min)로 정제하여 표제 생성물 실시예 33(53.6 mg, 27% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.726 min, MS (ESI) m/z=584.9 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 2.85 min.
1 H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.53 (br s, 1H), 9.79 (br s, 1H), 8.54-8.45 (m, 2H), 8.41 (s, 1H), 7.64 (br s, 1H), 7.09 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.40-6.35 (m, 2H), 5.84-5.79 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.14-3.06 (m, 4H), 2.93-2.84 (m, 1H), 2.30 (s, 6H), 2.23 - 2.13 (m, 1H), 2.00-1.90 (m, 1H), 1.76 (s, 6H).
실시예 34
N-(5-(4-(4- 시클로프로필 -5- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00072
화합물 34b의 제조 절차:
디옥산(20 mL) 및 H2O(4 mL) 중의 화합물 34a(1.0 g, 4.91 mmol)의 용액에 시클로프로필보론산(1.1 g, 12.28 mmol)에 이어, Pd(OAc)2(772 mg, 3.44 mmol), PCy3(1.9 g, 6.87 mmol) 및 Cs2CO3(4.8 g, 3.0 eq, 14.73 mmol)를 N2 대기하에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 N2로 1 min 동안 탈기하고 100℃에서 마이크로파 하에 1 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과 및 EtOAc(50 mL)로 희석, 염수(50 mL)로 세척, 무수 Na2SO4 상에서 건조, 감압 하에 농축하여 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 100/1(v/v))로 정제하여 화합물 34b(700 mg, 68% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.797 min, MS(ESI) m/z = 209.9[M+H]+.
1 H NMR(400MHz, 메탄올-d 4 ) δ 7.45 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.41 (d, J=12.4 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 1.88 - 1.81 (m, 1H), 0.89 - 0.81 (m, 2H), 0.60 - 0.50 (m, 2H).
화합물 34c의 제조 절차:
THF(10 mL) 중의 화합물 34b(700 mg, 3.35 mmol)의 용액에 CH3MgBr(5.58 mL, 16.75 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 24-26℃에서 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 NH4Cl(10 mL)로 희석하고 EtOAc(2 Х 20 mL)로 추출하며, 조합된 유기층은 감압 하에 농축하고 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 10/1)로 정제하여 화합물 34c(450 mg, 64% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.672 min, MS(ESI) m/z = 191.9 [M+H-18]+.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 6.65 - 6.56 (m, 1H), 6.34 (d, J=12.8 Hz, 1H), 1.84 - 1.72 (m, 1H), 1.44 (s, 6H), 0.82 - 0.75 (m, 2H), 0.55 - 0.48 (m, 2H).
화합물 34d의 제조 절차:
CH2Cl2(10 mL) 중의 화합물 34c(400 mg, 1.91 mmol)의 용액에 DIEA(494 mg, 3.82 mmol) 및 2,4-디클로로-1,3,5-트리아진(315 mg, 2.10 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 24-27℃에서 2h 동안 교반하였다. 반응물을 감압 하에 농축하고 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 10/1(v/v))로 정제하여 화합물 34d(450 mg, 73% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.999 min, MS(ESI) m/z = 323.0 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, 메탄올-d 4 ) δ 8.69 - 8.44 (m, 1H), 7.99 (br d, J=14.0 Hz, 1H), 6.93 (d, J=8.4 Hz, 1H), 2.08 - 2.02 (m, 1H), 1.59 (s, 6H), 1.02 - 0.93 (m, 2H), 0.77 - 0.68 (m, 2H).
화합물 34e의 제조 절차:
n-BuOH(5 mL) 중의 화합물 34d(450 mg, 1.39 mmol) 및 B(259 g, 1.39 mmol)의 용액에 TFA(0.05 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25-30℃에서 3 h 동안 교반하고 그동안 회색 고체가 침전되었다. 반응 혼합물을 여과하고 여과 케이크는 30 mL의 페트롤륨 에테르로 세척, 감압 하에 건조하여 화합물 34e(450 mg, 68% 수율)를 회색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.890 min, MS(ESI) m/z = 473.2 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, 메탄올-d 4 ) δ 8.80 (s, 1H), 8.31 (br s, 1H), 8.16 - 7.58 (m, 1H), 7.15 (d, J=12.8 Hz, 1H), 6.91 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.02 (s, 3H), 1.99 (br s, 1H), 1.59 (s, 6H), 0.95 (br d, J=7.2 Hz, 2H), 0.74 - 0.67 (m, 2H).
화합물 34f의 제조 절차:
DMSO(5 mL) 중의 화합물 34e(150 mg, 0.32 mmol) 및 K2CO3(88 mg, 0.64 mmol)의 용액에 N 1 ,N 1 ,N 2 -트리메틸에탄-1,2-디아민(49 mg, 0.48 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 22-32℃에서 12h 동안 교반하고 그동안 색상은 담갈색에서 진한 황색으로 변한다. 반응 혼합물을 빙수(50 mL)에 붓고 황색 고체가 침전되었다. 침전된 고체를 여과, CH2Cl2(30 mL)로 용해, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 34f(150 mg, 84% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.831 min, MS(ESI) m/z = 555.2 [M+H]+.
화합물 34g의 제조 절차:
MeOH(10 mL) 중의 화합물 34f(150 mg, 0.27 mmol)의 용액에 Pd/C(15 mg)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 H2로 3회 퍼지 및 탈기한 후, 23-29℃에서 H2 벌룬(15 Psi) 하에 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 화합물 34g(130 mg, 92% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.765 min, MS(ESI) m/z = 525.1 [M+H]+.
실시예 34의 제조 절차:
DMF(2.5 mL) 중의 화합물 34g (130 mg, 0.25 mmol) 및 DIEA(85 mg, 0.66 mmol)의 용액에 DMF(0.5 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(30 mg, 0.33 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 빙수조 하에 30 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 RP-HPLC(역상 HPLC)[컬럼: 역상 컬럼; 조건: 0-30%B(A: 0.25% NH3HCO3; B: MeOH); 유속: 40 ml/min]로 정제한 후 동결건조하여 실시예 34(24.4 mg, 17% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.994 min, MS(ESI) m/z = 601.3 [M+Na]+.
HPLC : 10-80_ab_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 3.41 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.72 (br s, 1H), 10.39 (br s, 1H), 9.97 (br s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.11 (d, J=12.4 Hz, 1H), 7.66 (br s, 1H), 6.86 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.45 - 6.30 (m, 2H), 5.93 (br s, 1H), 5.79 - 5.72 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.92 - 2.83 (m, 2H), 2.70 (s, 3H), 2.33 - 2.23 (m, 8H), 2.06 - 1.97 (m, 1H), 1.76 (s, 6H), 0.97 - 0.86 (m, 2H), 0.73 - 0.65 (m, 2H).
실시예 35
(S)-N-(5-(4-(4,5- 디플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-(3-((디메틸아미노)메틸)모르폴리노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00073
화합물 35b의 제조 절차:
CH2Cl2(40 mL) 중의 화합물 35a(1.4 g, 6.44 mmol)의 용액에 DMP(4.1 g, 9.67 mmol)를 0-5℃에서 소량씩 첨가하였다. 생성된 백색 혼합물을 0-5℃에서 1h 동안 교반하였다. 반응물을 수성 NaHCO3(30 mL)로 처리하고, EtOAc(3 Х 20 mL)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(3 Х 20 mL)로 세척, 건조 및 감압 하에 농축하여 조 물질을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 5/1(v/v))로 정제하여 화합물 35b(1.1 g, 79.7% 수율)를 밝은 황색 오일로서 수득하였다.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.60 (br d, J=10.0 Hz, 1H), 4.52 - 4.36 (m, 2H), 3.94 - 3.67 (m, 2H), 3.60 (dd, J=4.4, 12.2 Hz, 2H), 3.05 - 2.79 (m, 1H), 1.43 - 1.36 (m, 9H).
화합물 35c의 제조 절차:
MeOH(10 mL) 중의 화합물 35b(1.0 g, 4.65 mmol)의 용액에 Me2N.HCl(1.1 g, 13.94 mmol), NaOAc(572 mg, 6.97 mmol)를 첨가하고, 백색 혼합물은 24-26℃에서 2 h 동안 교반한 후, NaBH3CN(584 mg, 9.29 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물은 22-27℃에서 18h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수성 NH4Cl(20 mL)을 첨가하여 켄칭하고, EtOAc(3 Х 10 mL)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(3 Х 10 mL)로 세척, 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 35c(800 mg, 70.5% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다.
LCMS: 10-80CD_4MIN_E.M, XBrige Shield RP18 2.1*50mm에서 Rt = 2.519 min, MS(ESI) m/z = 245.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 3.99 - 3.63 (m, 2H), 3.46 - 3.33 (m, 1H), 2.98 (br s, 1H), 2.71 (br t, J=10.8 Hz, 1H), 2.31 - 2.18 (m, 6H), 1.41 (s, 9H).
화합물 35d의 제조 절차:
CH2Cl2(6 mL) 중의 화합물 35c(500 mg, 2.30 mmol)의 용액에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 생성된 무색 용액을 22-32℃에서 3h 동안 교반하였다. 반응 용액을 진공에서 직접 농축하여 TFA 염으로 화합물 35d(300 mg, 61.1% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다.
LCMS: 10-80CD_4MIN_E.M; XBrige Shield RP18 2.1*50mm에서 Rt = 0.306 min, MS(ESI) m/z = 145.2 [M-OH]+.
화합물 35e의 제조 절차:
DMSO(2 mL) 중의 화합물 35d(187 mg, 0.42 mmol) 및 K2CO3(116 mg, 0.84 mmol)의 용액에 화합물 1d(60 mg, 0.42 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 28-33℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이것을 MeOH/H2O(56% 내지 60%의 물 중 MeOH)로 직접 용리하는 Biotage 플래시 역상 C-18 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 원하는 생성물 35e(50 mg, 20.9% 수율)을 적색 고체로서 수득하고, 다음 단계에서 직접 사용하였다.
화합물 35f의 제조 절차:
MeOH(3 mL) 중의 화합물 35e(90 mg, 0.16 mmol)의 용액에 Pd/C(10 mg)를 N2 보호 하에 첨가하였다. 흑색 혼합물을 26-33℃에서 수소 벌룬(15Psi) 하에 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 화합물 35f(70 mg, 82.1% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS: 10-80CD_3MIN_220&254; XBrige Shield RP18 2.1*50mm에서 Rt = 1.791 min, MS(ESI) m/z = 545.3 [M+H]+.
실시예 35의 제조 절차:
DMF(1 mL) 중의 화합물 35f(70 mg, 0.13 mmol) 및 DIEA(25 mg, 0.19 mmol)의 용액에 DMF(1 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(12 mg, 0.13 mmol)의 용액을 적가하였다. 생성된 갈색 혼합물을 0℃에서 30 min 동안 교반하였다. 반응물을 prep-HPLC[컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 35-65%B(A: 0.05% 암모니아; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 35(11.9 mg, 16.8% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 10-80CD_3MIN_220&254; XBrige Shield RP18 2.1*50mm에서 Rt = 1.816 min, MS(ESI) m/z = 599.3 [M+H]+.
HPLC: Rt = 3.45 순도 92.56% (220nm), 10-80_CD_1.2mL.MET(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um).
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.29 (br s, 1H), 9.14 (s, 2H), 8.31 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.26 (br s, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.64 (br dd, J=10.4, 17.1 Hz, 1H), 6.27 (s, 1H), 6.18 (br d, J=16.8 Hz, 1H), 5.73 (br d, J=10.4 Hz, 1H), 4.02 (br d, J=9.2 Hz, 1H), 3.78 (s, 5H), 3.55 - 3.48 (m, 1H), 3.28 (br s, 1H), 2.85 (br s, 2H), 2.68 (br s, 1H), 2.34 (s, 1H), 2.25 (br t, J=11.2 Hz, 1H), 2.01 (s, 6H), 1.92 (br d, J=9.2 Hz, 1H), 1.52 (br s, 6H).
실시예 36
(N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )피리미딘-2-일아미노)-2-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드)
Figure pct00074
화합물 36a의 제조 절차:
이소프로판올(10 mL) 중의 화합물 11b(500 mg, 2.46 mmol) 및 DIEA(634 mg, 4.92 mmol)의 용액에 2,4-디클로로피리미딘(442 mg, 2.95 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 27 h 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 25-40% EtOAc)로 정제하여 화합물 36a(390 mg, 50.14% 수율)를 황백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AB MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.796 min, MS(ESI) m/z=315.9 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, 메탄올-d 4 ) δ 8.12 (d, J=6.0 Hz, 1H), 8.08 (br d, J=6.8 Hz, 1H), 7.31 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.70 (d, J=6.0 Hz, 1H), 1.57 (s, 6H).
화합물 36b의 제조 절차:
TFA/n-BuOH =1/10(11 mL) 중의 화합물 36a(760 mg, 2.4 mmol) 및 4-플루오로-2-메톡시-5-니트로아닐린(448 mg, 2.4 mmol)의 용액을 50℃에서 4 h 동안 가열하고, 추가의 30 mg의 화합물 4-플루오로-2-메톡시-5-니트로아닐린을 첨가하고 50℃에서 추가의 22 h 동안 반응 시간을 연장시켰다. 반응 혼합물을 여과하고 고체 케이크를 페트롤륨 에테르(20 mL Х 3)로 세척한 후, 고 진공에서 건조시켜 화합물 36b(960 mg, 86% 수율)를 황백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AB MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.753 min, MS(ESI) m/z=466.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, 메탄올-d 4 ) δ 8.52 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.96 (d, J=6.8 Hz, 1H), 7.84 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.33 (d, J=10.8 Hz, 1H), 7.20 (d, J=12.8 Hz, 1H), 6.48 (d, J=7.2 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 1.59 (s, 6H).
화합물 36c의 제조 절차:
DMF(3 mL) 중의 화합물 36b(200 mg, 0.43 mmol) 및 K2CO3(119 mg, 0.86 mmol)의 용액에 N 1 ,N 1 ,N 2 -트리메틸에탄-1,2-디아민(66 mg, 0.644 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 22-32℃에서 15 h 동안 교반하였다(갈색에서 진한 주황색으로 변하였음). 반응 혼합물을 빙수조 하의 H2O(40 mL)에 교반하면서 적가하고 고체를 침전시켰다. 고체를 여과로 수집하고 H2O(15 mL Х 3)로 세척한 후, 고 진공에서 건조시켜 화합물 36c(210 mg, 89% 수율)를 주황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AB MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.669 min, MS(ESI) m/z=548.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, 메탄올-d 4 ) δ 8.60 (s, 1H), 7.99 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.95 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.26 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.82 (s, 1H), 6.20 (d, J=6.0 Hz, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.24 (t, J=7.4 Hz, 2H), 2.85 (s, 3H), 2.59 (t, J=7.2 Hz, 2H), 2.28 (s, 6H), 1.59 (s, 6H).
화합물 36d의 제조 절차:
MeOH/H2O=5/1(5 mL) 중의 화합물 36c(200 mg, 0.365 mmol)의 용액에 Zn(143 mg, 2.190 mmol) 및 NH4Cl(117 mg, 2.190 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 2 h 동안 가열하였다(주황색에서 갈색으로 변하였음). 반응 혼합물을 여과하고, 여과액은 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 CH2Cl2(20 mL)로 용해, 물(15 mL Х 3)로 세척, Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 36d(170 mg, 89.9% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AB MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.646 min, MS(ESI) m/z=518.2 [M+H]+.
실시예 36의 제조 절차:
DMF(2 mL) 중의 화합물 36d (170 mg, 0.329 mmol) 및 DIEA(64 mg, 0.494 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드(30 mg, 1.0 eq, 0.329 mmol)를 빙수조에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5-10℃에서 10 min 동안 교반하였다. 반응물을 H2O(0.1 mL)로 켄칭한 후 여과하며, 여과액을 pre-HPLC(컬럼: Xtimate C18 150*25mm*5um; 조건: 53-83%B(A: 0.04%NH3·H2O+10mM NH4HCO3, B: CH3CN); 유속: 25 ml/min)로 정제한 후 동결건조하여 실시예 36(17.0 mg, 8.1% 수율)을 황백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_3 min_220&254 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AS A:Xtimate C18,2.1*30mm,3um; B:XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 2.356 min, MS(ESI) m/z=572.2 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.34 (br s, 1H), 9.72 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 8.02 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.41 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.08 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.69 (s, 1H), 6.36 - 6.21 (m, 3H), 6.02 (br s, 1H), 5.70 - 5.63 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 2.85 - 2.78 (m, 2H), 2.61 (s, 3H), 2.20 (s, 8H), 1.66 (s, 6H).
실시예 37
N-(2-((2-( 비스(메틸- d 3 )아미노 )에틸)( 메틸 )아미노)-5-((4-((4- 클로로 -5-플루오로-2-(2-히드록시프로판-2-일)페닐)아미노)-1,3,5-트리아진-2-일)아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00075
화합물 37b의 제조 절차:
THF(10 mL) 중의 화합물 37a(500 mg, 2.87 mmol) 및 K2CO3(793 mg, 5.74 mmol)의 세개의 분리된 용액에 CD3I(624 mg, 4.30 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 24-26℃에서 1h 동안 교반하고 그동안 백색 고체가 침전되었다. 세 개의 반응 혼합물을 여과하고 유기층을 감압 하에 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 EtOAc(20 ml)로 희석 및 H2O(20 mL)로 세척한 후, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 37b(350 mg, 19% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다.
LCMS: 0-60AB_2MIN_E.M 크로마토그래피(Xtimate C18, 2.1*30mm, 3um)에서 Rt = 0.744 min, MS(ESI) m/z = 209.2 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 3.19 - 3.13 (m, 1H), 3.13 - 3.10 (m, 1H), 2.68 (br d, J=6.4 Hz, 3H), 2.56 (t, J=6.8 Hz, 1H), 2.32 - 2.24 (m, 1H), 1.30 - 1.23 (m, 9H).
화합물 37c의 제조 절차:
CH2Cl2(5 mL) 중의 화합물 37b (300 mg, 1.44 mmol)의 용액에 HCl/디옥산(5 mL, 4 M)을 0℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 22-32℃에서 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하여 화합물 37c(260 mg, 조 물질)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 0-60AB_2MIN_E.M 크로마토그래피(Xtimate C18, 2.1*30mm, 3um)에서 Rt = 0.097 min, MS(ESI) m/z = 109.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 3.38 (s, 1H), 3.35 (br d, J=4.0 Hz, 1H), 3.27 - 3.11 (m, 2H), 2.58 (br d, J=4.4 Hz, 3H).
화합물 37d의 제조 절차:
DMSO(5 mL) 중의 화합물 37c(250 mg, 0.54 mmol) 및 K2CO3(149 mg, 1.08 mmol)의 용액에 화합물 11d(230 mg, 1.27 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 22-29℃에서 12h 동안 교반하고 그동안 색상은 담갈색에서 진한 황색으로 변한다. 반응 혼합물을 EtOAc(20 mL)로 희석하고 염수(2 Х 30 mL)로 세척하였다. 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조, 감압 하에 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2/MeOH = 10/1)로 정제하여 화합물 37d(90 mg, 30% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.820 min, MS(ESI) m/z = 555.2 [M+H]+.
화합물 37e의 제조 절차:
MeOH(4 mL) 및 H2O(2 mL) 중의 화합물 37d(90 mg, 0.16 mmol)의 용액에 Zn(52 mg, 0.80 mmol) 및 NH4Cl(85 mg, 1.60 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 N2로 3회 퍼지 및 탈기한 후, 80℃에서 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 여과 및 농축하고, 잔류물은 EtOAc(20 mL)로 용해 및 H2O(10 mL)로 세척, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 37e(80 mg, 95% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.709 min, MS(ESI) m/z = 525.0 [M+H]+.
실시예 37의 제조 절차:
DMF(2.5 mL) 중의 화합물 37e(80 mg, 0.15 mmol) 및 DIEA(39 mg, 0.30 mmol)의 용액에 DMF(0.5 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(14 mg, 0.15 mmol)의 용액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 빙수조 하에 30 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 prep-HPLC [컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 43-73%B(A: 0.05% NH3H2O; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 37(35.0 mg, 40% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.882 min, MS(ESI) m/z = 579.3 [M+H]+.
HPLC : 10-80_ab_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 3.23 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.60 (br s, 1H), 10.46 (br s, 1H), 9.96 (br s, 1H), 8.47 (d, J=7.6 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.69 (br s, 1H), 7.10 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.45 - 6.30 (m, 2H), 6.18 (br s, 1H), 5.81 - 5.70 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.87 (br d, J=4.8 Hz, 2H), 2.70 (s, 3H), 2.29 (br s, 2H), 1.78 (s, 6H).
실시예 38
(R)-N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-(2-((디메틸아미노)메틸)아제티딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00076
화합물 38b의 제조 절차:
DMSO(2 mL) 중의 화합물 11c(180mg, 0.385 mmol), 화합물 38a(440.3 mg, 3.86 mmol) 및 K2CO3(532.9 mg, 3.86 mmol)의 용액을 85℃에서 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 교반하면서 빙수조 중의 H2O(10mL)에 첨가하고, 침전된 고체를 여과하며 여과 케이크는 DCM(30 mL)으로 용해한 후, 건조 및 진공에서 농축하여 생성물 38b(230 mg, 95.7% 수율)를 주황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AB MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.718 min, MS(ESI) m/z=560.1, 583.1 [M+H, M+Na]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 9.71 (br s, 1H), 8.98 (br s, 1H), 8.37 (br s, 2H), 7.35 (br s, 1H), 7.06 (d, J=10.4 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 4.45 - 4.35 (m, 1H), 4.30 (dt, J=5.1, 9.2 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.33 - 3.24 (m, 1H), 2.80 (m, 1H), 2.49 (dd, J=5.6, 13.2 Hz, 1H), 2.46 - 2.36 (m, 1H), 2.30 (s, 6H), 2.20 - 2.08 (m, 1H), 1.69 (s, 6H).
화합물 38c의 제조 절차:
6 mL MeOH/H2O=5/1(v/v) 중의 화합물 38b(230 mg, 0.410 mmol)의 용액에 Zn(134.02 mg, 2.05 mmol) 및 NH4Cl(109.65 mg, 2.05 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 1 h 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과액은 진공에서 농축하여 조 물질을 수득하고, 이것을 CH2Cl2(30 mL)로 용해, 물(20 mL Х 2) 및 염수(20 mL)로 세척한 후, Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 생성물 38c (197 mg, 90.5% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AB MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.657 min, MS(ESI) m/z=531.3 [M+H]+.
실시예 38의 제조 절차:
DMF(3 mL) 중의 화합물 38c(197 mg, 0.351 mmol) 및 DIEA(67.9 mg, 0.527 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드(31.7 mg, 0.351 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 1 h 동안 교반하였다. 반응물을 H2O(0.1 mL)로 켄칭하고 분취 HPLC(기기: DB 컬럼: Gemini 150*25 5um. 이동상 A: 물 0.05% 암모니아 히드록시드 v/v 이동상 B: DMF 유속: 25 ml/min 구배 시간: 10 min 프로파일 설명: 30%-60%)로 정제하여 실시예 38(36.6 mg, 18% 수율)을 밝은 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4 min_220&254 크로마토그래피(ACSSH-LCMS-AS A: Xtimate C18, 2.1*30mm, 3um; B: XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt =1.295min, MS(ESI) m/z=585.3 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ml. met XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um에서 Rt =3.37 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.41 (br s, 1H), 9.38 (br s, 1H), 8.95 (br s, 1H), 8.38 (m, 1H), 7.56 (m, 1H), 7.08 (m, 1H), 6.62 (m, 1H), 6.37 (m, 1H), 6.82 - 6.21 (m, 2H), 5.80 (br s, 1H), 4.23 (m, 1H), 3.89 (m, 5H), 3.56 (m, 1H), 2.64 (m, 1H), 2.39 (m, 1H), 2.25 (m, 7H), 1.90-1.73 (s, 6H).
실시예 39
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-(3-((디메틸아미노)메틸)아제티딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00077
화합물 39b의 제조 절차:
DMSO(2 mL) 중의 화합물 11c(100 mg, 0.22 mmol), 화합물 39a(40 mg, 0.22 mmol) 및 K2CO3(110 mg, 0.85 mmol)의 혼합물을 90℃에서 3 h 동안 교반하였다(황색 현탁액). 완료 후, 빙수(10 mL)을 혼합물에 첨가하였다. 침전된 고체를 여과하고 여과된 케이크를 H2O(10 mL)로 세척, 고 진공에서 건조하여 화합물 39b(150 mg, 83.4% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.710 min, MS(ESI) m/z = 583.1 [M+Na]+.
1 H NMR:(400MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 10.23 (br s, 1H), 9.27 - 8.91 (m, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.30 (br s, 1H), 6.21 (s, 1H), 4.09 (t, J=8.4 Hz, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.62 (t, J=8.4 Hz, 2H), 2.91 - 2.82 (m, 1H), 2.55 (s, 2H), 2.15 (s, 6H), 1.51 (s, 6H).
화합물 39c의 제조 절차:
MeOH/H2O(50/10 mL) 중의 화합물 39b(150 mg, 0.267 mmol)의 혼합물에 Zn(87 mg, 1.34 mmol) 및 NH4Cl(71 mg, 1.34 mmol)을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 85℃에서 3 h 동안 교반하였다. 반응물을 여과하고 여과액을 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 물(20 mL)로 처리 및 CH2Cl2(30 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(20 mL)로 세척, Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 생성물 39c(120 mg, 85.1% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.665 min, MS(ESI) m/z = 529.1 [M+H-2]+.
1 H NMR:(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.11 (br s, 1H), 8.84 (br s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 6.53 (br s, 1H), 6.27 - 6.21 (m, 2H), 4.05 - 3.91 (m, 4H), 3.67 (s, 3H), 3.46 - 3.39 (m, 2H), 2.76 - 2.67 (m, 1H), 2.16 (s, 6H), 1.51 (s, 6H).
실시예 39의 제조 절차:
DMF(3 mL) 중의 화합물 39c(120 mg, 0.225 mmol) 및 DIEA(87 mg, 0.675 mmol)의 혼합물에 빙수조를 사용하여 DMF(1 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(26.6 mg, 0.293 mmol)를 1 h에 걸쳐 적가하였다. 생성된 혼합물을 30 min 동안 0-5℃에서 교반하고(갈색 용액), 그 후 H2O(0.05 mL)로 켄칭 및 직접 prep-HPLC [Waters Xbridge 150*25.5um; 조건: 28-58%B(A: 0.05% 암모니아; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 39(48.0 mg, 20.9% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 0-60AB_4.0 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 2.325 min, MS(ESI) m/z = 585.1 [M+H]+.
HPLC : 0-60_CD_1.2ml 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50 mm 5um)에서 Rt = 4.92 min.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ ppm 10.23 (brs, 1H), 9.07 (brs, 1H), 8.36-8.28 (m, 2H), 743-7.32 (m, 2H), 6.99 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.34-6.19 (m, 3H), 5.72 (d, J=9.2 Hz, 1H), 3.90 (t, J=7.2 Hz, 2H), 3.80 (s, 3 H), 3.42 (t, J=6.4 Hz, 2H), 2.86-2.79 (m, 1H), 2.45 (d, J=7.2 Hz, 2H), 2.16 (s, 6H), 1.64 (s, 6H).
실시예 40
(S)-N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-(3-((디메틸아미노)메틸)모르폴리노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00078
화합물 40b의 제조 절차:
CH2Cl2(40 mL) 중의 화합물 40a(1.4 g, 6.44 mmol)의 용액에 DMP(4.1 g, 9.67 mmol)를 0-5℃에서 소량씩 첨가하였다. 생성된 백색 혼합물을 0-5℃에서 1h 동안 교반하였다. 반응물을 수성 NaHCO3(30 mL)로 처리하고, EtOAc(3 Х 20 mL)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(3 Х 20 mL)로 세척, 건조 및 감압 하에 농축하여 조 물질을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 5/1(v/v))로 정제하여 화합물 40b(1.1 g, 79.7% 수율)를 밝은 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS: 10-80CD_3MIN_220&254, 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1 Х50 mm)에서 Rt = 1.300-1.400 min.
1 H NMR:(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.60 (br d, J=10.0 Hz, 1H), 4.52 - 4.36 (m, 2H), 3.94 - 3.67 (m, 2H), 3.63-3.52 (m, 2H), 3.08 - 2.79 (m, 1H), 1.43 - 1.36 (m, 9H).
화합물 40c의 제조 절차:
MeOH(10 mL) 중의 화합물 40b(1.0 g, 4.65 mmol)의 용액에 Me2N.HCl(1.1 g, 13.94 mmol) 및 NaOAc(572 mg, 6.97 mmol)을 첨가하고, 백색 혼합물을 24-26℃에서 2 h 동안 교반한 후, NaBH3CN(584 mg, 9.29 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 22-27℃에서 18h 동안 교반하였다. 반응 혼합물은 수성 NH4Cl(20 mL)을 첨가하여 켄칭하고, EtOAc(3 Х 10 mL)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(3 Х 10 mL)로 세척, 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 40c(800 mg, 70.5% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다.
LCMS: 10-80CD_7MIN_220&254, 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1 Х50mm)에서 Rt = 2.475 min, MS(ESI) m/z = 245.1 [M+H]+.
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 4.15-3.40 (m, 5H), 3.53- 3.44 (m, 2H), 3.06 (br s, 1H), 2.79 (br t, J=10.8 Hz, 1H), 2.32 (br s, 6H), 1.48 (s, 9H).
화합물 40d의 제조 절차:
CH2Cl2(6 mL) 중의 화합물 40c(500 mg, 2.30 mmol)의 용액에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 생성된 무색 용액을 22-32℃에서 3h 동안 교반하였다. 반응 용액을 진공에서 직접 농축하여 TFA 염으로 화합물 40d(300 mg, 61.1% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다.
LCMS: 10-80CD_4MIN_E, 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1 Х50mm)에서 Rt = 0.561 min, MS(ESI) m/z = 145.2 [M+H]+.
화합물 40e의 제조 절차:
DMSO(2 mL) 중의 화합물 40d(375 mg, 0.42 mmol) 및 K2CO3(230 mg, 1.67 mmol)의 용액에 화합물 11c(120 mg, 0.83 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 28-33℃에서 8시간 동안 교반하였다. 이것을 MeOH/H2O(56% 내지 60%의 물 중 MeOH)로 용리하는 Biotage 플래시 역상 C-18 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 화합물 40e(120 mg, 20.9% 수율)를 적색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5MIN_220&254, 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.809 min. MS(ESI) m/z = 591.3 [M+H]+.
화합물 40f의 제조 절차:
MeOH(5 mL) 및 H2O(1 mL) 중의 화합물 40e(120 mg, 0.20 mmol)의 용액에 Zn(67 mg, 1.02mmol) 및 NH4Cl(109 mg, 2.04 mmol)을 첨가하였다. 흑색 현탁액을 70℃에서 1.5 h 동안 N2 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 수성 NH4Cl(20 mL)을 첨가하여 켄칭하고, EtOAc(10 mL Х3)로 추출하였다. 유기층을 염수(10 mL Х3)로 세척, 건조 및 진공에서 직접 농축하여 화합물 40f(70 mg, 82.1% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5MIN_220&254.lcm, 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.760 min, MS(ESI) m/z = 561.2 [M+H]+.
실시예 40의 제조 절차:
DMF(1 mL) 중의 화합물 40f(70 mg, 0.12 mmol) 및 DIEA(24 mg, 0.19 mmol)의 용액에 DMF(1 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(11 mg, 0.12 mmol)의 용액을 적가하였다. 생성된 갈색 혼합물을 0℃에서 30 min 동안 교반하였다. 반응물을 prep-HPLC[컬럼: Waters Xbridge 150 Х25 5um; 조건: 35-65%B(A: 0.05% 암모니아; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 40(10.2 mg, 15.5% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 10-80CD_7MIN_220&254, 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1 Х50 mm)에서 Rt = 4.015 min, MS(ESI) m/z = 615.3 [M+H]+.
HPLC : Rt = 3.76 min, 10-80_CD_1.2mL.MET(XBridge Shield RP 18 2.1 Х50mm 5um).
1 H NMR:(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.20 (br s, 1H), 9.15-9.00 (m, 2H), 8.29 (br d, J=15.6 Hz, 2H), 7.26 (br s, 1H), 7.12 (br s, 1H), 6.63 (dd, J=10.0, 16.8 Hz, 1H), 6.30 (s, 1H), 6.17 (br d, J=16.8 Hz, 1H), 5.73 (br d, J=11.0 Hz, 1H), 4.01 (br d, J=9.4 Hz, 1H), 3.82-3.77 (m, 5H), 3.55-3.49 (m, 1H), 3.32-3.23 (m, 1H), 2.84 (br s, 2H), 2.29 - 2.18 (m, 1H), 2.02 (s, 6H), 1.91 (br d, J=9.4 Hz, 1H), 1.51 (d, J=7.2 Hz, 6H).
실시예 41
N-(5-(4-(4- 클로로 -5- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시-2-((3aR,6aR)-5-메틸헥사히드로피롤로[3,4-b]피롤-1(2H)-일)페닐)아크릴아미드
Figure pct00079
화합물 41a의 제조 절차:
디클로로메탄(150 mL) 중의 4-클로로-3-플루오로아닐린(15 g, 103.05 mmol)의 용액에 ICl(25 g, 154.57 mmol)를 적가하였다. 생성된 흑색 혼합물을 24-29℃에서 2h 동안 교반하였다. 혼합물을 100 mL의 디클로로메탄으로 희석하고 중탄산나트륨의 포화 용액(200 mL)으로 희석하였다. 유기층을 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 0 내지 0.5% 에틸 아세테이트)로 정제하여 화합물 41a(8 g 갈색 고체 및 12 g 흑색 고체, 71.5% 총 수율)를 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.974 min, MS(ESI) m/z = 271.8 [M+H]+.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 7.53 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.12 (s, 2H).
화합물 41b의 제조 절차:
DMF(60 mL) 및 메탄올(120 mL) 중의 화합물 41a(20 g, 73.67 mmol)의 용액에 DPPF(4.08 g, 7.37 mmol), Et3N(31 mL, 221.03 mmol) 및 Pd(OAc)2(1.65 g, 7.37 mmol)를 질소 하에 첨가하였다. 반응 혼합물은 CO를 사용하여 3회 퍼지 및 탈기하고 80℃에서 CO(50psi) 하에 24h 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 메탄올을 진공에서 제거하여 잔류물을 수득하고, 이것을 염수(300 mL)에 붓고 흑색 고체가 침전되었다. 고체를 여과로 수집하고 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 0 내지 1% 에틸 아세테이트)로 더 정제하여 화합물 41b(11.8 g, 78.6% 수율)를 분홍색 고체로서 수득하였다.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 7.83 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.36 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 5.80 (s, 2H), 3.79 (s, 3H).
화합물 41c의 제조 절차:
THF(100 mL) 중의 화합물 41b(6 g, 29.47 mmol)의 용액에 CH3MgBr(49.1 mL, 147.35 mmol)을 0℃에서 질소 하에 적가하였다. 생성된 갈색 혼합물을 24-31℃에서 2h 동안 교반하였다. 혼합물을 NH4Cl(300 mL)의 포화 용액으로 켄칭하고 에틸 아세테이트(200 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 황산나트륨 상에서 건조, 여과 및 농축된 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 0 내지 15% 에틸 아세테이트)로 정제하여 화합물 41c(5.17 g, 84% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.821 min, MS(ESI) m/z = 185.9 [M+H]+.
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 7.09 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.42 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.84 (s, 2H), 1.66 (s, 6H).
화합물 41d의 제조 절차:
디클로로메탄(100 mL) 중의 화합물 41c(5.17 g, 25.39 mmol)의 용액에 DIEA(6.56 g, 50.78 mmol) 및 2,4-디클로로-1,3,5-트리아진(4.19 g, 27.93 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 23-29℃에서 3h 동안 교반하였다. 용액을 진공에서 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 0 내지 10% 에틸 아세테이트)로 정제하여 화합물 41d(5.74 g, 71.3% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 2.614 min, MS(ESI) m/z = 316.7 [M+H]+.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 10.20 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.16 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 2.24 (s, 1H), 1.62 (s, 6H).
화합물 41e의 제조 절차:
n-BuOH/TFA(50 mL/0.5 mL) 중의 화합물 41d(4.74 g, 14.95 mmol)의 황색 용액에 4-플루오로-2-메톡시-5-니트로아닐린(2.8 g, 15.04 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 21-24℃에서 1h 동안 교반하고 그 후 색상은 갈색으로 변하였고 황색 고체가 침전되었다. 고체를 여과로 수집 및 페트롤륨 에테르(20 mL)로 세척하고, 고체를 진공에서 건조하여 화합물 41e(5.42 g, 77.7% 수율)를 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.971 min, MS(ESI) m/z = 467.1 [M+H]+.
1 H NMR:(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.56 (s, 1H), 9.49 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.45-7.34 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 1.53 (s, 6H).
화합물 41f의 제조 절차:
DMSO(5 mL) 중의 화합물 41e(200 mg, 0.43 mmol) 및 K2CO3(119 mg, 0.86 mmol)의 용액에 (3aR,6aR)-5-메틸옥타히드로피롤로[3,4-b]피롤(65 mg, 0.52 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 85℃에서 4h 동안 교반하고 그동안 색상은 담황색에서 진한 황색으로 변하였다. 반응 혼합물을 빙수(50 mL)에 붓고 황색 고체가 침전되었다. 황색 침전물을 여과하고 CH2Cl2(20 mL)로 용해한 후, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 41f(230 mg, 93% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30 mm)에서 Rt = 0.755 min, MS(ESI) m/z = 572.9 [M+H]+.
화합물 41g의 제조 절차:
MeOH(10 mL) 및 H2O(5 mL) 중의 화합물 41f(230 mg, 0.40 mmol)의 용액에 Zn(131 mg, 2.00 mmol) 및 NH4Cl(214 mg, 4.00 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물 N2로 3회 퍼지 및 탈기한 후, 80℃에서 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 잔류물을 수득하고, 이것을 EtOAc(20 mL)로 용해 및 H2O(10 mL)로 세척, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 41g(190 mg, 87% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30 mm)에서 Rt = 0.701 min, MS(ESI) m/z = 542.9 [M+H]+.
실시예 41의 제조 절차:
DMF(2.5 mL) 중의 화합물 41g(190 mg, 0.35 mmol) 및 DIEA(90 mg, 0.70 mmol)의 용액에 DMF(0.5 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(32 mg, 0.35 mmol)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 빙수조 하에 30 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 prep-HPLC[컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 40-70%B(A: 0.05% NH3H2O; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 41(74.4 mg, 36% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.924 min, MS(ESI) m/z = 597.1 [M+H]+.
HPLC : 10-80_ab_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 3.30 min.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 10.83 (br s, 1H), 9.91 (br s, 1H), 9.60 (br s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.40 (d, J=11.6 Hz, 1H), 7.70 (br s, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.56 - 6.33 (m, 2H), 5.96 (br s, 1H), 5.77 (br d, J=10.8 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.73 - 3.64 (m, 1H), 3.22 (br t, J=7.6 Hz, 1H), 2.93 - 2.79 (m, 3H), 2.72 (br d, J=10.4 Hz, 1H), 2.33 (br s, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.25 - 2.16 (m, 1H), 1.95 - 1.86 (m, 2H), 1.78 (s, 6H).
실시예 42
(S)-N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미 노)-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시-2-(메틸(2-(2-메틸피롤리딘-1-일)에틸)아미노)페닐)아크릴아미드
Figure pct00080
화합물 42b의 제조 절차:
MeOH(8 mL) 중의 화합물 42a(300 mg, 2.47 mmol)의 용액에 NaOAc(404.74 mg, 4.93 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 23-28℃에서 10 min 동안 교반하고 tert-부틸 메틸(2-옥소에틸)카르바메이트(512.76 mg, 2.96 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 23-28℃에서 1 h 동안 교반하고 그 후 NaBH3CN(310.05 mg, 4.93 mmol)을 상기 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 23-28℃에서 15 h 동안 교반하였다. 혼합물을 진공에서 농축하여 잔류물을 수득하고, 이것을 CH2Cl2(15 mL)로 용해하고 물(6 mL), 염수(6 mL)로 세척, Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 조 생성물을 수득하였다. 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2 중 0.5% MeOH)로 정제하여 화합물 42b(350 mg, 58.5% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 3.65 - 2.93 (m, 5H), 2.89 (s, 3H), 2.75 - 2.32 (m, 2H), 2.20 (br s, 1H), 2.06 - 1.65 (m, 3H), 1.46 (s, 9H), 1.26 - 1.06 (m, 3H).
화합물 42c의 제조 절차:
CH2Cl2(3 mL) 중의 화합물 42b(350 mg, 1.44 mmol)의 용액에 HCl-EtOAc(4 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 22-32℃에서 12 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 화합물 42c(200 mg, 64% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 0-60AB_2MIN_50_E.lcm 크로마토그래피(Xtimate C18, 2.1*30mm, 3um)에서 Rt = 0.101 min, MS(ESI) m/z=143.1 [M+H]+.
1 H NMR: (400MHz, D2O) δ 3.81 - 3.61 (m, 2H), 3.60 - 3.33 (m, 4H), 3.24 - 3.12 (m, 1H), 2.77 (s, 3H), 2.39 - 2.23 (m, 1H), 2.17 - 2.04 (m, 1H), 2.03 - 1.94 (m, 1H), 1.79 - 1.63 (m, 1H), 1.41 (d, J=6.4 Hz, 3H).
화합물 42d의 제조 절차:
DMSO(3 mL) 중의 화합물 11c(200 mg, 0.428 mmol) 및 K2CO3(118 mg, 0.856 mmol)의 용액에 화합물 42c(111 mg, 0.514 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 3 h 동안 가열하고 그동안 색상은 갈색에서 주황색으로 변하였다. 반응 혼합물을 교반하면서 빙수조 중의 H2O(40 mL)에 적가하고 그동안 고체는 침전되었고, 그 후 여과하였다. 여과 케이크를 H2O(15 mL Х 3)로 세척, 고 진공에서 건조하여 화합물 42d(210 mg, 83% 수율)를 주황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.748 min, MS(ESI) m/z=589.1 [M+H]+.
1 H NMR: (400MHz, CD3OD) δ 8.53 (br s, 1H), 8.26 (br s, 1H), 8.18 (br s, 1H), 7.21 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.81 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.42 - 3.33 (m, 2H), 3.19 - 3.08 (m, 2H), 2.90 (s, 3H), 2.51 - 2.34 (m, 2H), 2.24 (q, J=9.2 Hz, 1H), 2.04 - 1.91 (m, 1H), 1.81 - 1.70 (m, 2H), 1.60 (s, 6H), 1.40 (qd, J=8.4, 12.4 Hz, 1H), 1.12 (d, J=6.0 Hz, 3H).
화합물 42e의 제조 절차:
MeOH/H2O(5 mL, 5/1) 중의 화합물 42d(200 mg, 0.34 mmol)의 용액에 Zn(133 mg, 2.04 mmol) 및 NH4Cl(109 mg, 2.04 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 3 h 동안 가열하고 그동안 색상은 주황색에서 갈색으로 변하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 그 후 여과액을 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하였으며, 이것을 CH2Cl2(20 mL)로 용해, 및 물(15 mLХ3)로 세척한 후, Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 42e(118 mg, 62% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.703 min, MS(ESI) m/z=559.1 [M+H]+.
실시예 42의 제조 절차:
DMF(2 mL) 중의 화합물 42e(115 mg, 0.206 mmol) 및 DIEA(40 mg, 0.309 mmol)의 용액에 빙수조 중의 아크릴로일 클로라이드를 적가(19 mg, 0.206 mmol) 하였다. 생성된 혼합물을 5-10℃에서 15 min 동안 교반하였다. 반응물을 H2O(0.1 mL)로 켄칭 후 여과하고, 여과액은 pre-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 42-72%B(A: 0.05% 암모니아, B: CH3CN); 유속: 25 ml/min)로 정제 및 동결건조하여 실시예 42(23.7 mg, 16.8% 수율)를 황백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 30-90CD_7min_220&254. lcm 크로마토그래피(Xtimate 2.1*30mm 3um)에서 Rt = 4.638 min, MS(ESI) m/z=613.3 [M+H]+.
HPLC : 10-80CD_1.2ml 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt = 4.56 min.
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 10.60 (br s, 1H), 9.92 (br s, 1H), 9.73 (br s, 1H), 8.48 (d, J=7.2 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.69 (br s, 1H), 7.10 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.53 - 6.30 (m, 2H), 6.10 (br s, 1H), 5.84 - 5.70 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.22 - 3.18 (m, 1H), 3.02 - 2.90 (m, 2H), 2.88 - 2.77 (m, 1H), 2.67 (s, 3H), 2.37 - 2.28 (m, 1H), 2.16 - 1.91 (m, 3H), 1.77 (s, 6H), 1.66 (br s, 1H), 1.49 - 1.40 (m, 1H), 1.36 - 1.20 (m, 1H), 1.04 (d, J=5.6 Hz, 3H).
실시예 43
(R)-N-(5-(4-(4- 클로로 -5- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-(2-((디메틸아미노)메틸)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00081
화합물 43a의 제조 절차:
DMSO(3 mL) 중의 화합물 41e(200 mg, 0.428 mmol) 및 K2CO3(118 mg, 0.856 mmol)의 용액에 (R)-N,N-디메틸-1-(피롤리딘-2-일)메탄아민(103 mg, 0.514 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 85℃에서 2.5 h 동안 가열하고 그동안 색상은 갈색에서 주황색으로 변하였다. 반응 혼합물을 교반하면서 빙수조 하의 H2O(40 mL)에 적가하고 그동안 고체가 침전되었으며, 그 후 여과하였다. 여과 케이크를 H2O(15 mL Х 3)로 세척한 후, 고 진공에서 건조하여 화합물 43a(200 mg, 73.7% 수율)를 주황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.745 min, MS(ESI) m/z=575.2 [M+H]+.
화합물 43b의 제조 절차:
MeOH/H2O=5/1(5 mL) 중의 화합물 43a(200 mg, 0.348 mmol)의 용액에 Zn(136 mg, 2.087 mmol) 및 NH4Cl(112 mg, 2.087 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 1.5 h 동안 가열하고 그동안 색상은 주황색에서 갈색으로 변하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과액을 진공에서 농축하여 잔류물을 수득하고, 이것을 CH2Cl2(20 mL)로 용해 및 물(15 mLХ3)로 세척한 후, Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 43b(175 mg, 92.3% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30 mm)에서 Rt = 0.725 min, MS(ESI) m/z=545.0 [M+H]+.
실시예 43의 제조 절차:
DMF(2 mL) 중의 화합물 43b(175 mg, 0.321 mmol) 및 DIEA(62 mg, 0.482 mmol)의 용액에 빙수조 중의 아크릴로일 클로라이드(29 mg, 0.321 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5-10℃에서 15 min 동안 교반하였다. 반응물을 H2O(0.1 mL)로 켄칭하고 그 후 여과하였으며, 여과액을 pre-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 42-72%B(A: 0.05% 암모니아, B: CH3CN); 유속: 25 ml/min)로 정제하고 그 후 동결건조하여 실시예 43(46.0 mg, 21.44% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254. lcm 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 2.066 min, MS(ESI) m/z=599.2 [M+H]+.
HPLC : 10-80CD_1.2ml 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt = 4.12 min.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 10.82 (br s, 1H), 10.07 (br s, 1H), 9.88 (br s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.39 (d, J=12.0 Hz, 1H), 7.70 (br s, 1H), 7.32 - 7.25 (m, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.44 - 6.28 (m, 2H), 6.03 (br s, 1H), 5.84 - 5.71 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.39 - 3.25 (m, 2H), 3.03 - 2.92 (m, 1H), 2.37 (dd, J=7.8, 12.0 Hz, 1H), 2.33 - 2.21 (m, 1H), 2.19 (s, 6H), 2.06 (dd, J=5.4, 12.0 Hz, 1H), 2.02 - 1.92 (m, 2H), 1.78 (s, 6H), 1.70 - 1.65 (m, 1H).
실시예 44
(S)-N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시-2-(메틸((1-메틸피롤리딘-2-일)메틸)아미노)페닐) 아크릴아미드
Figure pct00082
화합물 44b의 제조 절차:
DMSO(10 mL) 중의 화합물 36b(180 mg, 0.39 mmol), K2CO3(216 mg, 1.56 mmol)의 용액에 화합물 44a(117 mg, 0.58 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 12 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 이전 배치와 조합하고 교반 하면서 빙수조 하의 H2O(100 mL)에 적가하고, 침전된 고체를 여과하고 여과 케이크는 CH2Cl2(15 mL Х 3)로 용해시킨 후, 건조 및 진공에서 농축하여 표적 화합물 44b(220 mg, 평균 89.0% 수율)를 주황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.738 min, MS(ESI) m/z = 575.1 [M+Na]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 9.64 (s, 1H), 9.04 (s, 1H), 8.40 (br s, 1H), 8.38-8.30 (m, 1H), 7.42 (br s, 1H), 7.08 (d, J=10.4 Hz, 1H), 6.68 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.50 (dd, J=4.8, 13.6 Hz, 1H), 3.17-3.05 (m, 2H), 2.86 (s, 3H), 2.63 (s, 2H), 2.59-2.52 (m, 1H), 2.42 (s, 3H), 2.30-2.21 (m, 1H), 2.07-1.96 (m, 1H), 1.80-1.74 (m, 1H), 1.70 (s, 6H).
화합물 44c의 제조 절차:
6 mL 메탄올/물=5:1(v/v) 중의 화합물 44b(220 mg, 0.38 mmol), Zn(125 mg, 1.9 mmol)의 용액에 NH4Cl(102 mg, 1.9 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 75℃에서 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과 및 진공하에 농축하여 잔류물을 수득하고, 이것을 물(10 mL)로 처리 및 CH2Cl2(15 mL)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4 상에서 건조, 여과 및 진공에서 농축하여 화합물 44c(90 mg, 43.4% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.701min, MS(ESI) m/z = 545.1[M+H]+.
실시예 44의 제조 절차:
DMF(2.5 mL) 중의 화합물 44c(90 mg, 0.17mmol) 및 DIEA(33 mg, 0.26 mmol)의 용액에 DMF(0.5 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(31 mg, 0.34 mmol)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 0℃(빙수조)에서 20 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 세 방울의 물로 켄칭하고 그 후 직접 prep-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um: 53- 83%B(A: 물(0.05% 암모니아 히드록시드 v/v), B: CH3CN), 유속: 25 mL/min)로 정제하여 실시예 44(11.1 mg, 10.9% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_ 4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.994min, MS(ESI) m/z=599.1 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ML 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt = 4.42 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.53 (br s, 1H), 10.10 (br s, 1H), 10.03 (br s, 1H), 8.47 (d, J=7.2 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.64 (br s, 1H), 7.10 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.43-6.32 (m, 2H), 6.12 (br s, 1H), 5.81-5.74 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.14-3.08 (m, 1H), 2.88-2.78 (m, 1H), 2.74 (s, 3H), 2.71-2.63 (m, 2H), 2.56 (s, 3H), 2.41-2.32(m, 1H), 2.06-1.90 (m, 1H), 1.81-1.72 (m, 7H), 1.45-1.23 (m, 2H).
실시예 45
N-(5-(4-(4- 시클로프로필 -5- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시-2-((3aR,6aR)-5-메틸헥사히드로피롤로[3,4-b]피롤-1(2H)-일)페닐)아크릴아미드
Figure pct00083
화합물 45b의 제조 절차:
DMSO(5 mL) 중의 화합물 34e(150 mg, 0.32 mmol) 및 K2CO3(88 mg, 0.64 mmol)의 용액에 화합물 45a(48 mg, 0.38 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 85℃에서 4h 동안 교반하고 그동안 색상은 담황색에서 진한 황색으로 변하였다. 반응 혼합물을 빙수(50 mL)에 붓고 황색 고체가 침전되었다. 고체를 여과하고 여과 케이크는 CH2Cl2(20 mL)로 용해시킨 후, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 45b(150 mg, 82% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.834 min, MS(ESI) m/z = 579.3 [M+H]+.
화합물 45c의 제조 절차:
MeOH(10 mL) 및 H2O(5 mL) 중의 화합물 45b(150 mg, 0.26 mmol)의 용액에 Zn(85 mg, 1.30 mmol) 및 NH4Cl(139 mg, 2.60 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 N2로 3회 퍼지 및 탈기한 후, 80℃에서 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과 및 감압 하에 농축한 후, EtOAc(10 mL Х 2)로 추출하고, 조합된 유기층을 H2O(10 mL)로 세척, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 45c(130 mg, 91% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.715 min, MS(ESI) m/z = 549.1 [M+H]+.
실시예 45의 제조 절차:
DMF(2.5 mL) 중의 화합물 45c(130 mg, 0.24 mmol) 및 DIEA(62 mg, 0.48 mmol)의 용액에 DMF(0.5 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(22 mg, 0.24 mmol)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 빙수조 하에 30 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 prep-HPLC[컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 35-65%B(A: 0.05% NH3H2O; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 45(28.1 mg, 19% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.778 min, MS(ESI) m/z = 603.3 [M+H]+.
HPLC : 10-80_ab_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 2.79 min.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 10.72 (br s, 1H), 9.93 (br s, 1H), 9.56 (br s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.12 (d, J=12.4 Hz, 1H), 7.64 (br s, 1H), 6.86 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.55 - 6.45 (m, 1H), 6.44 - 6.35 (m, 1H), 5.76 (br d, J=11.2 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.67 (br s, 1H), 3.22 (br t, J=7.6 Hz, 1H), 2.96 - 2.79 (m, 3H), 2.73 (br d, J=10.0 Hz, 1H), 2.30 (br s, 4H), 2.25 - 2.17 (m, 1H), 2.08 - 1.94 (m, 2H), 1.89 (br s, 1H), 1.76 (s, 6H), 1.05 - 0.88 (m, 2H), 0.75 - 0.55 (m, 2H).
실시예 46
(R)-N-(5-(4-(4- 시클로프로필 -5- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-(2-((디메틸아미노)메틸)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00084
화합물 46b의 제조 절차:
DMSO(5 mL) 중의 화합물 34e(150 mg, 0.32 mmol) 및 K2CO3(88 mg, 0.64 mmol)의 용액에 화합물 46a(96 mg, 0.48 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 85℃에서 4h 동안 교반하고 그동안 색상은 담황색에서 진한 황색으로 변하였다. 반응 혼합물을 빙수(50 mL)에 붓고 황색 고체가 침전되었다. 황색 고체를 여과하고 여과 케이크는 CH2Cl2(20 mL)로 희석, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 46b(140 mg, 75% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt= 0.766 min, MS(ESI) m/z = 581.1 [M+H]+.
화합물 46c의 제조 절차:
MeOH(5 mL) 중의 화합물 46b(140 mg, 0.24 mmol)의 용액에 Pd/C(15 mg)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 H2로 3회 퍼지 및 탈기한 후 21-24℃에서 H2 벌룬(15 Psi)하에 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 화합물 46c(130 mg, 98% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.738 min, MS(ESI) m/z = 551.1 [M+H]+.
실시예 46의 제조 절차:
DMF(2.5 mL) 중의 화합물 46c(130 mg, 0.24 mmol) 및 DIEA(62 mg, 0.48 mmol)의 용액에 DMF(0.5 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(22 mg, 0.24 mmol)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 빙수조 하에 30 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 prep-HPLC[컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 42-72%B(A: 0.05% NH3H2O; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 46(32.5 mg, 22% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.883 min, MS(ESI) m/z = 605.3 [M+H]+.
HPLC : 10-80_ab_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 3.00 min.
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 10.71 (br s, 1H), 10.00 (br s, 1H), 9.91 (br s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.11 (d, J=12.4 Hz, 1H), 7.65 (br s, 1H), 6.86 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.70 (s, 1H), 6.44 - 6.30 (m, 2H), 5.77 (br d, J=11.2 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.39 - 3.24 (m, 2H), 3.03 - 2.90 (m, 1H), 2.41 - 2.31 (m, 1H), 2.25 - 2.15 (m, 7H), 2.10 - 1.96 (m, 4H), 1.76 (s, 6H), 1.69 (br d, J=4.4 Hz, 1H), 0.98 - 0.88 (m, 2H), 0.73 - 0.66 (m, 2H).
실시예 47
N-(5-(4-(4,5- 디플루오로 -2-(2- 히드록시부탄 -2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시-2-((3aR,6aR)-5-메틸헥사히드로피롤로[3,4-b]피롤-1(2H)-일)페닐)아크릴아미드
Figure pct00085
화합물 47c의 제조 절차:
톨루엔(200 mL) 중의 화합물 47a(10 g, 48.08 mmol) 및 화합물 47b(20.84 g, 57.69 mmol)의 혼합물에 N2 하에 한 번에 Pd(PPh3)4(2.78 g, 2.4 mmol)를 첨가하였다. 생성된 흑색 혼합물을 100℃에서 12 h 동안 N2 하에 교반하였다. 반응물을 25℃로 냉각하고 그 후 교반하면서 25℃에서 1h 동안 6N HCl(10 mL)로 처리하였다. 물(400 mL)로 희석하고 EtOAc(120 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 20% KF 용액(200 mL) 및 염수(100 mL)로 연속적으로 세척, 황산나트륨 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 5% EtOAc)로 정제하여 화합물 47c(4.2 g, 51% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.709 min, MS(ESI) m/z=171.9 [M+H]+.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 7.50 (dd, J=8.8 Hz, 11.2 Hz, 1H), 6.41 (dd, J=6.8 Hz, 12.0 Hz, 1H), 6.37-6.17 (m, 2H), 2.52 (s, 3H).
화합물 47d의 제조 절차:
THF(100 mL) 중의 화합물 47c(2 g, 11.68 mmol)의 용액에 EtMgBr(3.0 M)(16 mL, 46.72 mmol)을 0℃에서 N2 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 23-27℃에서 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl 용액(50 mL)으로 켄칭하고, EtOAc(30 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4 상에서 건조, 여과하고, 여과액을 감압 하에 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 0-30% EtOAc(v/v))로 정제하여 화합물 47d(1.7g, 72% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피 MERCK RP18 2.5-2mm에서 Rt = 0.559 min, MS(ESI) m/z=184.0 [M+H-18]+.
1 H NMR: (400MHz, MeOD-d 4 ) δ 6.91 (dd, J=8.8 Hz, 12.8 Hz, 1H), 6.51 (dd, J=7.6 Hz, 12.8 Hz, 1H), 2.07-2.01 (m, 1H), 1.86-1.76 (m, 1H), 1.53 (s, 3H), 0.80 (t, J=7.6 Hz, 3H).
화합물 47e의 제조 절차:
CH2Cl2(15 mL) 중의 화합물 47d(1.68g, 8.4 mmol)의 용액에 DIEA(1.6 g, 12.6mmol) 및 2,4-디클로로피리미딘(1.5 g, 10.0 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 22-30℃에서 0.5 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중의 0-20% EtOAc)로 정제하여 화합물 47e(1.58g, 60% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.825 min, MS(ESI) m/z=314.9 [M+H]+.
화합물 47f의 제조 절차:
n-BuOH(10 mL) 중의 화합물 47e (1.58 g, 5.0 mmol) 및 4-플루오로-2-메톡시-5-니트로아닐린(935 mg, 5.0 mmol)의 용액에 TFA(0.1 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 18-25℃에서 2h 동안 교반하고 그동안 회색 고체가 침전되었다. 반응 혼합물 여과하고 여과 케이크는 수집하며 감압 하에 건조하여 화합물 47f(1.5 g, 97% 수율)를 연한색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30 mm)에서 Rt = 0.911 min, MS(ESI) m/z=464.9 [M+H]+.
1 H NMR:(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.55 (br s, 1H), 9.46 (br s, 1H), 8.46 (br s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.39 (d, J=13.6 Hz, 1H), 7.33-7.29 (m, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 1.82-1.70 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 0.71 (br t, J=7.6 Hz, 3H).
화합물 47h의 제조 절차:
DMSO(3 mL) 중의 화합물 47f(150 mg, 0.32 mmol) 및 K2CO3(88 mg, 0.64 mmol)의 용액에 화합물 47g(48 mg, 0.38 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 85℃에서 2h 동안 교반하고 그동안 색상은 담황색에서 진한 황색으로 변하였다. 반응 혼합물을 빙수(50 mL)에 붓고 침전된 황색 고체를 여과하였으며, 여과 케이크를 CH2Cl2(20 mL)로 용해 후, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 47h(160 mg, 88% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.766 min, MS(ESI) m/z = 571.0 [M+H]+.
화합물 47i의 제조 절차:
MeOH(5 mL) 중의 화합물 47h(160 mg, 0.28 mmol)의 용액에 Pd/C(16 mg)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 H2로 3회 퍼지 및 탈기한 후, 22-30℃에서 H2(수소 벌룬, 15 Psi)하에 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 표제 화합물 47i(140 mg, 92% 수율)을 무색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.732 min, MS(ESI) m/z = 541.0 [M+H]+.
실시예 47의 제조 절차:
DMF(2.5 mL) 중의 화합물 47i(140 mg, 0.26 mmol) 및 DIEA(67 mg, 0.52 mmol)의 용액에 DMF(0.5 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(24 mg, 0.26 mmol)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 빙수조 하에 30 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 prep-HPLC[컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 45-75%B(A: 0.05% NH3H2O; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 47(50.6 mg, 33% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.855 min, MS(ESI) m/z = 595.1 [M+H]+.
HPLC : 10-80_ab_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 2.69 min .
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 10.91 (br s, 1H), 9.94 (br s, 1H), 9.57 (br s, 1H), 8.45 - 8.35 (m, 2H), 7.69 (br s, 1H), 7.03 (dd, J=8.8, 12.4 Hz, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.49 - 6.33 (m, 2H), 5.78 - 5.73 (m, 1H), 3.96 - 3.81 (m, 3H), 3.62 (br dd, J=4.4, 7.6 Hz, 1H), 3.19 (br t, J=7.6 Hz, 1H), 2.98 - 2.76 (m, 3H), 2.70 (br d, J=10.4 Hz, 1H), 2.36 - 2.26 (m, 4H), 2.26 - 2.10 (m, 2H), 2.09 - 2.00 (m, 1H), 1.89 (br dd, J=4.0, 10.2 Hz, 1H), 1.86 - 1.78 (m, 1H), 1.70 (s, 3H), 0.89 (td, J=7.2, 11.2 Hz, 3H).
실시예 48
N-(5-(4-(4,5- 디플루오로 -2-(2- 히드록시부탄 -2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((R)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00086
화합물 48a의 제조 절차:
DMSO(5 mL) 중의 화합물 48a(200 mg, 0.43 mmol) 및 K2CO3(119 mg, 0.86 mmol)의 용액에 화합물 (R)-N,N-디메틸피롤리딘-3-아민(60 mg, 0.52 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 23-29℃에서 0.5 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 교반하면서 빙수조 하의 H2O(100 mL)에 적가하고, 침전된 고체를 여과하며 여과 케이크를 CH2Cl2(45 mL)로 용해한 후, 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 48b(230 mg, 96% 수율)를 주황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2 mm)에서 Rt = 0.722 min, MS(ESI) m/z=559.2[M+H]+.
화합물 48b의 제조 절차:
MeOH(10 mL) 중의 48a(230 mg, 0.41 mmol)의 용액에 Pd/C(35 mg)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 H2로 3회 퍼지 및 탈기한 후, 23-30℃에서 H2 벌룬(15 Psi)하에 0.5h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여과액은 감압 하에 농축하여 화합물 48b(205 mg, 94% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2 mm)에서 Rt = 0.680 min, MS(ESI) m/z=529.2 [M+H]+.
실시예 48의 제조 절차:
DMF(2.5 mL) 중의 화합물 48b(205 mg, 0.4mmol) 및 DIEA(78 mg, 0.4 mmol)의 용액에 DMF(0.5 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(37 mg, 0.4 mmol)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 빙수조 하에 20 min 동안 0℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 세 방울의 물로 켄칭하고 그 후 직접 prep-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um: 40-70%B(A: 물(0.05% 암모니아 히드록시드 v/v), B: CH3CN), 유속: 25 mL/min)로 정제하여 실시예 48(65.1 mg, 28% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_4 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30 mm에서 Rt = 1.795 min, MS(ESI) m/z=583.1 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ML 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50 mm 5um)에서 Rt = 3.45 min.
1 H NMR:(400 MHz, CDCl3) δ 10.84 (br s, 1H), 9.78 (br s, 1H), 8.43-8.35 (m, 2H), 7.64 (br s, 1H), 7.02 (dd, J=8.4 Hz, 12.0 Hz, 1H), 6.76 (s, 1H), 6.37-6.32 (m, 2H), 5.82-5.77 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.16-3.04 (m, 4H), 2.94-2.85 (m, 1H), 2.30 (s, 6H), 2.24-2.08 (m, 2H), 2.05-1.90 (m, 2H), 1.69 (s, 3H), 0.92-0.86 (m, 3H).
실시예 49
N-(5-(4-(4,5- 디플루오로 -2-(2- 히드록시부탄 -2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00087
화합물 49a의 제조 절차:
DMSO(5 mL) 중의 화합물 47f(200 mg, 0.43 mmol) 및 K2CO3(119 mg, 0.86 mmol)의 용액에 화합물 N 1 ,N 1 ,N 2 -트리메틸에탄-1,2-디아민(53 mg, 0.52 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 18-25℃에서 0.5 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 교반 하면서 빙수조 중의 H2O(50 mL)에 적가하고, 침전된 고체를 여과하며 여과 케이크는 CH2Cl2(50 mL)로 용해, 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 49a(230 mg, 97% 수율)를 주황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30 mm)에서 Rt = 0.778 min , MS(ESI) m/z=547.0 [M+H]+.
화합물 49b의 제조 절차:
MeOH(10 mL) 중의 화합물 49a(230 mg, 0.42 mmol)의 용액에 Pd/C(35 mg)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 H2로 3회 퍼지 및 탈기한 후, 18-20℃에서 H2 벌룬(15 Psi) 하에 0.5h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여과액은 감압 하에 농축하여 화합물 49b(150 mg, 69% 수율)를 진홍색(burgundy) 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2 mm)에서 Rt = 0.691 min, MS(ESI) m/z=517.2 [M+H]+.
1 H NMR: (400MHz, MeOH-d 4 ) δ 8.20 (br s, 2H), 7.16 (dd, J=8.8 Hz, 12.0 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.07-3.01 (m, 2H), 2.65 (s, 3H), 2.48 (t, J=7.2 Hz, 2H), 2.27 (s, 6H), 1.90-1.83 (m, 2H), 1.58 (s, 3H), 0.81 (t, J=7.2 Hz, 3H).
실시예 49의 제조 절차:
DMF(2.5 mL) 중의 화합물 49b(150 mg, 0.29 mmol) 및 DIEA(56 mg, 0.44 mmol)의 용액에 DMF(0.5 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(26 mg, 029 mmol)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 빙수조 하에 20 min 동안 0℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 세 방울의 물로 켄칭하고 직접 prep-HPLC(컬럼: Xbridge BEH C18, 250*50mm, 10um，조건： 44-84% B(A: 물(0.04% NH3H2O + 10mM NH4HCO3)), B: CH3CN), 유속: 25 mL/min)로 정제하여 실시예 49(31.3 mg, 20% 수율)를 담황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt =1.877 min, MS(ESI) m/z=571.1 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 2.72min.
1 H NMR:(400 MHz, CDCl3) δ 10.91 (br s, 1H), 10.42 (br s, 1H), 9.94 (br s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.39-8.33 (m, 1H), 7.70 (br s, 1H), 7.02 (dd, J=8.4 Hz, 12.0 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.44-6.26 (m, 2H), 5.93 (br s, 1H), 5.78-5.72 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.87 (br t, J=4.8 Hz, 2H), 2.70 (s, 3H), 2.35-2.20 (m, 8H), 2.19-2.09 (m, 1H), 2.07-1.99 (m, 1H), 1.70 (s, 3H), 0.88 (t, J=7.6 Hz, 3H).
실시예 50
N-(5-(4-(4,5- 디플루오로 -2-(2- 히드록시부탄 -2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시-2-((3aS,6aS)-5-메틸헥사히드로피롤로[3,4-b]피롤-1(2H)-일)페닐)아크릴아미드
Figure pct00088
화합물 50a의 제조 절차:
DMSO(3 mL) 중의 화합물 47f(150 mg, 0.32 mmol)의 혼합물에 K2CO3(134 mg, 0.97 mmol) 및 (3aS,6aS)-5-메틸옥타히드로피롤로[3,4-b]피롤(60 mg, 0.48 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 12h 동안, 그 후 80℃에서 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(15 mL)에 붓고 그동안 주황색 고체가 침전되었다. 고체를 흡인 여과로 수집하고 진공에서 건조하여 화합물 50a(190 mg, 91.7% 수율)를 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 2.019 min, MS(ESI) m/z = 571.1 [M+H]+.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 9.83 (br. s, 1H), 8.45-8.05 (m, 2H), 7.29 (br. s, 1H), 7.02-6.88 (m, 1H), 6.33 (s, 1H), 4.39-4.31 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.54-3.41 (m, 1H), 3.19-3.10 (m, 1H), 3.02-2.92 (m, 1H), 2.63-2.55 (m, 1H), 2.48-2.42 (m, 1H), 2.40-2.34 (m, 1H), 2.24-2.18 (m, 1H), 2.15 (d, J = 2.4 Hz, 3H), 2.07-1.99 (m, 1H), 1.90-1.87 (m, 1H), 1.82-1.76 (m, 2H), 1.59 (s, 3H), 0.81 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
화합물 50b의 제조 절차:
메탄올/물(5 mL/1 mL) 중의 화합물 50a(190 mg, 0.33 mmol)의 황색 용액에 NH4Cl(125 mg, 2.33 mmol) 및 Zn(109 mg, 1.66 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(15 mL)에 붓고 디클로로메탄/메탄올(3/1, 10 mL Х 4)로 추출하였다. 조합된 유기층을 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 50b(170 mg, 95.2% 수율)를 흑색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.526 min, MS(ESI) m/z = 541.2 [M+H]+.
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 9.86 (br. s, 1H), 8.29-8.15 (m, 2H), 7.78-7.42 (m, 2H), 7.01-6.88 (m, 1H), 6.62 (s, 1H), 4.06-3.96 (m, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.42-3.32 (m, 1H), 2.88-2.79 (m, 1H), 2.77-2.68 (m, 1H), 2.63-2.55 (m, 1H), 2.54-2.48 (m, 1H), 2.47-2.38 (m, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.15-2.07 (m, 1H), 2.06-1.97 (m, 1H), 1.85 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.77-1.73 (m, 1H), 1.57 (s, 3H), 0.79 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
실시예 50의 제조 절차:
DMF(3 mL) 중의 화합물 50b(170 mg, 0.31 mmol)의 용액에 DIEA(81 mg, 0.63 mmol)에 이어, 아크릴로일 클로라이드(28 mg, 0.31 mmol)를 0℃에서 3회 첨가하고 그 후 2h 동안 교반하였다. 혼합물을 3 방울의 물로 켄칭하고 pre-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um, 조건: 45%-75% B(A: 물/10mM NH4HCO3, B: CH3CN), 유속: 25 mL/min)로 정제하여 실시예 50(39.8 mg, 21.6% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.697 min, MS(ESI) m/z = 595.1 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ml 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um) 에서 Rt = 3.94 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.84 (br. s, 1H), 9.87 (s, 1H), 9.49 (s, 1H), 8.37-8.25 (m, 2H), 7.60 (br. s, 1H), 6.95 (dd, J = 8.8, 12.4 Hz, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.46-6.22 (m, 1H), 5.68 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.60-3.53 (m, 1H), 3.17-3.08 (m, 1H), 2.88-2.78 (m, 2H), 2.77-2.72 (m, 1H), 2.68-2.60 (m, 1H), 2.28-2.24 (m, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.18-2.03 (m, 2H), 2.00-1.89 (m, 1H), 1.85-1.72 (m, 2H), 1.65 (s, 3H), 0.86-0.77 (m, 3H).
실시예 51
(R)-N-(5-(4-(4- 클로로 -5- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-(3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00089
화합물 51a의 제조 절차:
DMSO(5 mL) 중의 화합물 41e(200 mg, 0.43 mmol)의 혼합물에 K2CO3(178 mg, 1.29 mmol) 및 (R)-N,N-디메틸피롤리딘-3-아민(59 mg, 0.51 mmol)을 첨가하였다. 생성된 주황색 혼합물을 23-29℃에서 4h 동안 교반하였다. 혼합물을 물(25 mL)에 붓고 침전된 주황색 고체를 흡인 여과로 수집하였다. 고체를 진공에서 건조하여 화합물 51a(230 mg, 95% 수율)를 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.778 min, MS(ESI) m/z = 583.0 [M+Na]+.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 10.06 (br. s, 1H), 8.92 (br. s, 1H), 8.46-8.25 (m, 2H), 7.35 (br. s, 1H), 7.26 (s, 1H), 6.31 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.61-3.52 (m, 1H), 3.39-3.32 (m, 1H), 3.25-3.12 (m, 2H), 2.89-2.78 (m, 1H), 2.31 (s, 6H), 2.02-1.81 (m, 2H), 1.71 (d, J = 5.2 Hz, 6H).
화합물 51b의 제조 절차:
메탄올/물(5 mL/1 mL) 중의 화합물 51a(230 mg, 0.41 mmol)의 황색 용액에 NH4Cl(154 mg, 2.87 mmol) 및 Zn(134 mg, 2.05 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 1h 동안 교반하였다. 혼합물을 물(20 mL)에 붓고 디클로로메탄(15 mL Х 5)으로 추출하였다. 조합된 유기층을 황산나트륨 상에서 건조, 여과 및 진공에서 농축하여 화합물 51b(180 mg, 82.7% 수율)를 녹색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 0.713 min, MS(ESI) m/z = 531.0 [M+H]+.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 9.86 (br. s, 1H), 8.30-8.16 (m, 2H), 7.79-7.39 (m, 2H), 7.18 (s, 1H), 6.59 (s, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.16-2.98 (m, 4H), 2.95-2.84 (m, 1H), 2.29 (s, 6H), 1.88-1.79 (m, 2H), 1.61 (s, 6H).
실시예 51의 제조 절차:
DMF(2 mL) 중의 화합물 51b(160 mg, 0.3 mmol)의 용액에 DIEA(78 mg, 0.6 mmol)를 첨가하고 0℃에서 교반하며, 이어서 아크릴로일 클로라이드(27 mg, 0.3 mmol)를 0℃에서 3회 첨가하고 0.5h 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 이전 배치의 것과 조합하고 pre-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um, 조건: 42%-72% B (A: 물/10mM NH4HCO3, B: CH3CN), 유속: 25 mL/min)로 정제하여 실시예 51(91.4 mg, 46% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.660 min, MS(ESI) m/z = 585.2 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ml 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt = 3.46 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.67 (br. s, 1H), 9.63 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.38-8.26 (m, 2H), 7.57 (s, 1H), 7.22-7.16 (m, 1H), 6.63 (s, 1H), 6.51-6.38 (m, 1H), 6.35-6.25 (m, 1H), 5.73 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.15-3.06 (m, 2H), 3.04-2.96 (m, 2H), 2.94-2.85 (m, 1H), 2.30 (s, 6H), 2.15-2.10 (m, 1H), 1.99-1.94 (m, 1H), 1.68 (s, 6H).
실시예 52
(R)-N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )피리미딘-2-일아미노)-2-(3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00090
화합물 52a의 제조 절차:
DMSO(3 mL) 중의 화합물 36b(200 mg, 0.429 mm ol) 및 K2CO3(119 mg, 0.858 mmol)의 용액에 (R)-N,N-디메틸피롤리딘-3-아민(59 mg, 0.515 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 22-30℃에서 4 h 동안, 그 후 50℃에서 1 h 동안 교반하고 그동안 색상은 갈색에서 진한 주황색으로 변하였다. 반응 혼합물을 빙수조 하의 H2O(40 mL)에 적가하였다. 침전된 고체를 여과로 수집하고, H2O(15 mL Х 3)로 세척하며, 여과 케이크는 CH2Cl2(20 mL)로 용해시키고, Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 52a(210 mg, 87.4% 수율)를 주황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt =0.677 min, MS(ESI) m/z=559.9 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, 메탄올-d 4 ) δ 8.42 (s, 1H), 7.99 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.96 (d, J=5.6 Hz, 1H), 7.24 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.50 (s, 1H), 6.15 (d, J=5.6 Hz, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.54 (dt, J=6.4, 10.4 Hz, 1H), 3.36 (t, J=9.2 Hz, 1H), 3.28 - 3.24 (m, 1H), 3.09 (dd, J=6.8, 10.0 Hz, 1H), 2.93 - 2.81 (m, 1H), 2.33 (s, 6H), 2.30 - 2.25 (m, 1H), 1.97 - 1.82 (m, 1H), 1.59 (d, J=3.6 Hz, 6H).
화합물 52b의 제조 절차:
5 mL MeOH/H2O=5/1(v/v) 중의 화합물 52a(210 mg, 0.375 mmol)의 용액에 Zn(147 mg, 2.25 mmol) 및 NH4Cl(120 mg, 2.25 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 2 h 동안 가열하고 그동안 색상은 주황색에서 갈색으로 변하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과액은 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 CH2Cl2(20 mL)로 용해, 물(15 mLХ3)로 세척, 그 후 Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 52b(125 mg, 63% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt =0.629 min, MS(ESI) m/z=530.1 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.85 (s, 1H), 8.15 (d, J=7.2 Hz, 1H), 8.03 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.08 (d, J=10.4 Hz, 1H), 6.66 (s, 1H), 6.05 (d, J=5.6 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.20 - 3.11 (m, 2H), 3.06 - 2.97 (m, 2H), 2.91 - 2.83 (m, 1H), 2.28 (s, 6H), 2.17 - 2.09 (m, 1H), 1.92 - 1.81 (m, 1H), 1.65 (s, 6H).
실시예 52의 제조 절차:
DMF(1.5 mL) 중의 화합물 52b(125 mg, 0.236 mmol) 및 DIEA(46 mg, 0.354 mmol)의 용액에 빙수조 중의 아크릴로일 클로라이드(21 mg, 0.236 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5-10℃에서 15 min 동안 교반하였다. 반응물을 H2O(0.1 mL)로 켄칭 후 여과하고, 여과액을 직접 pre-HPLC(컬럼: Xtimate C18 150*25mm*5um; 조건: 35-65%B(A: 0.04%NH3·H2O+10mM NH4HCO3, B: CH3CN); 유속: 30 ml/min)로 정제한 후 동결건조하여 실시예 52(14.5 mg, 10.5% 수율)를 황백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_3min_220&254. lcm 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50mm, 5um)에서 Rt =2.028 min, MS(ESI) m/z=584.3 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.62 (s, 1H), 9.43 (br s, 1H), 8.59 (br s, 1H), 8.08 (d, J=5.2 Hz, 1H), 7.53 (d, J=6.8 Hz, 1H), 7.47 (br s, 1H), 7.14 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.41 - 6.31 (m, 3H), 5.77 (t, J=5.4 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.15 - 3.02 (m, 4H), 2.97 - 2.84 (m, 1H), 2.30 (s, 6H), 2.21 - 2.14 (m, 1H), 1.99 - 1.94 (m, 1H), 1.72 (s, 6H).
실시예 53
(R)-N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )피리미딘-2-일아미노)-2-(2-((디메틸아미노)메틸)아제티딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00091
화합물 53a의 제조 절차:
DMSO(5 mL) 중의 화합물 36b(150 mg, 0.32 mmol) 및 K2CO3(442 mg, 3.20 mmol)의 용액에 (R)-1-(아제티딘-2-일)-N,N-디메틸메탄아민 TFA 염(986 mg, 3.20 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 85℃에서 4h 동안 교반하고 그동안 색상은 담황색에서 진한 황색으로 변하였다. 반응 혼합물을 빙수(50 mL)에 붓고 황색 고체가 침전되었다. 고체를 여과하고 CH2Cl2(20 mL)로 용해, 그 후 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 53a(150 mg, 84% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.692 min, MS(ESI) m/z = 559.9 [M+H]+.
화합물 53b의 제조 절차:
MeOH(5 mL) 중의 화합물 53a(150 mg, 0.27 mmol)의 용액에 Pd/C(15 mg)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 H2로 3회 퍼지 및 탈기한 후, 22-30℃에서 수소 벌룬(15 Psi) 하에 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 화합물 53b(100 mg, 70% 수율)를 흑색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.663 min, MS(ESI) m/z = 530.0 [M+H]+.
실시예 53의 제조 절차:
DMF(2.5 mL) 중의 화합물 53b(100 mg, 0.19 mmol) 및 DIEA(49 mg, 2.0 eq, 0.38 mmol)의 용액에 DMF(0.5 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(17 mg, 0.19 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 빙수조 하에 30 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 prep-HPLC [컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 36-66%B(A: 0.05% NH3H2O; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 53(12.2 mg, 11% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.378 min, MS(ESI) m/z = 584.1 [M+H]+.
HPLC : 10-80_ab_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 2.74 min.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 9.41 - 9.33 (m, 2H), 8.95 (br s, 1H), 8.08 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.52 (br d, J=6.8 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.15 (d, J=10.4 Hz, 1H), 6.68 (s, 1H), 6.38 (d, J=2.8 Hz, 1H), 6.36 - 6.30 (m, 2H), 5.81 - 5.75 (m, 1H), 5.62 - 5.36 (m, 1H), 4.19 (br d, J=6.8 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.83 - 3.78 (m, 1H), 3.56 (q, J=8.4 Hz, 1H), 2.65 (br dd, J=5.6, 12.4 Hz, 1H), 2.45 (br dd, J=6.8, 12.8 Hz, 1H), 2.37 (br d, J=7.6 Hz, 1H), 2.26 (s, 6H), 2.16 - 2.08 (m, 1H), 1.71 (d, J=2.8 Hz, 6H).
실시예 54
(R)-N-(5-(4-(4,5- 디클로로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-(2-((디메틸아미노)메틸)아제티딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00092
합성은 실시예 19와 유사한 실험 절차에 따라 실시예 54를 담 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_7min_220&254.lcm; XBrige Shield RP18 2.1*50mm에서 Rt = 4.386 min, MS(ESI) m/z = 601.3 [M+H]+.
HPLC : 10-80_ab_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 3.72 min.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.54 (br s, 1H), 9.32 (br s, 1H), 8.84 (br s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.52 (br s, 1H), 7.25 (s, 1H), 6.59 - 6.52 (m, 1H), 6.34 - 6.26 (m, 2H), 5.76 - 5.68 (m, 1H), 4.22 - 4.12 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.78 (br s, 1H), 3.48 (q, J=8.0 Hz, 1H), 2.60 (br dd, J=5.6, 12.8 Hz, 1H), 2.45 - 2.26 (m, 2H), 2.20 (s, 6H), 2.09 - 1.90 (m, 2H), 1.67 (br s, 6H).
실시예 55
N-(5-(4-(4,5- 디플루오로 -2-(2- 히드록시부탄 -2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((R)-2-((디메틸아미노)메틸)아제티딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00093
합성은 실시예 47과 유사한 실험 절차에 따라 실시예 55를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt= 1.741 min, MS(ESI) m/z=583.1 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ML 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50 mm 5um)에서 Rt = 3.49 min.
1 H NMR:(400 MHz, CDCl3) δ 10.70 (br s, 1H), 9.43 (br s, 1H), 8.87 (br s, 1H), 8.39-8.26 (m, 2H), 7.62-7.48 (m, 1H), 6.99 (dd, J=8.8 Hz, 12.4 Hz, 1H), 6.61 (br d, J=6.0 Hz, 1H), 6.40-6.26 (m, 2H), 5.80-5.74 (m, 1H), 4.27-4.16 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.84-3.79 (m, 1H), 3.60-3.51 (m, 1H), 2.65 (br dd, J=5.6 Hz, 13.6 Hz, 1H), 2.49-2.32 (m, 2H), 2.24 (s, 6H), 2.16-1.91 (m, 3H), 1.66 (s, 3H), 0.86 (q, J=7.6 Hz, 3H).
실시예 56
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2- 히드록시부탄 -2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((R)-2-((디메틸아미노)메틸)아제티딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00094
화합물 56b의 제조 절차:
DMF(50 mL) 중의 화합물 56a(5 g, 22.28 mmol)의 용액에 Pd(PPh3)2Cl2(1.0 g, 1.42 mmol) 및 화합물 47b(8.85 g, 24.5 mmol)를 질소 하에 첨가하였다. 혼합물을 100℃에서 질소 하에 12h 동안 교반한 후, 실온으로 냉각하고, 수성 HCl(6M, 8 mL)을 혼합물에 첨가하며 25℃에서 추가로 3h 동안 교반하였다. 혼합물을 물(250 mL)로 희석 및 에틸 아세테이트(200 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 물(300 mL)로 세척, 황산나트륨 상에서 건조, 여과 및 진공에서 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(PE 중 0 내지 10% EtOAc(v/v))로 정제하여 화합물 56b(1.89 g, 45% 수율)를 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 2.071 min, MS(ESI) m/z = 187.9 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.39 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 2.47 (s, 3H).
화합물 56c의 제조 절차:
THF(20 mL) 중의 화합물 56b(1.69 g, 9.01 mmol)의 황색 용액에 EtMgBr(12 mL, 36.03 mmol)을 질소 하에 0℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 19-24℃에서 3h 동안 교반하였다. 혼합물을 NH4Cl(100 mL)의 포화 용액으로 켄칭하고 EtOAc(30 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 이전 배치와 조합하고 진공에서 농축하여 조 생성물을 수득하였으며, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(PE 중 0 내지 10% EtOAc)로 정제하여 화합물 56c(1.1 g, 50% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.429 min, MS(ESI) m/z = 199.9 [M-H2O+H]+.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 6.94 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.50 (s, 2H), 1.88-1.72 (m, 2H), 1.43 (s, 3H), 0.72 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
화합물 56d의 제조 절차:
디클로로메탄(20 mL) 중의 화합물 56c(1.34 g, 6.16 mmol)의 황색 용액에 DIEA(1.59 g, 12.31 mmol) 및 2,4-디클로로-1,3,5-트리아진(1.02 g, 6.77 mmol)을 연속적으로 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 21-29℃에서 2h 동안 교반하였다. 혼합물을 진공에서 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(PE 중 0 내지 10% EtOAc)로 정제하여 화합물 56d(1.28 g, 58% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.922 min, MS(ESI) m/z = 330.7 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.35-10.03 (m, 1H), 8.62-8.44 (m, 1H), 8.35 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 2.44 (br. s, 1H), 1.95-1.88 (m, 2H), 1.66 (s, 3H), 0.87 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
화합물 56e의 제조 절차:
n-BuOH/TFA(10 mL/0.1 mL) 중의 화합물 56d(1.28 g, 3.87 mmol)의 혼합물에 4-플루오로-2-메톡시-5-니트로아닐린(720 mg, 3.87 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 23-29℃에서 4h 동안 교반하고 그동안 회색 고체가 침전되었다. 고체를 흡인 여과로 수집하고, 고 진공에서 건조하여 화합물 56e(1.07 g, 57.5% 수율)를 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.984 min, MS(ESI) m/z = 481.1 [M+H]+.
1 H NMR:(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.46 (br s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.40 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.26 (br d, J = 10.8 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 1.85-1.68 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 0.72 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
화합물 56f의 제조 절차:
DMSO(3 mL) 중의 화합물 56e(150 mg, 0.31 mmol)의 혼합물에 K2CO3(474 mg, 3.43 mmol) 및 (R)-1-(아제티딘-2-일)-N,N-디메틸메탄아민 TFA 염(1.07 mg, 3.12 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 85℃에서 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 이전 배치와 조합하고 빙수(20 mL)에 부었으며, 침전된 주황색 고체를 흡인 여과로 수집하고 물(10 mL)로 세척 후, 진공에서 건조하여 화합물 7(160 mg, 79% 수율)을 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 2.003 min, MS(ESI) m/z = 575.1 [M+H]+ .
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 9.66 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 8.45-8.18 (m, 2H), 7.28 (br. s, 1H), 6.93 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 6.75 (br. s, 1H), 4.35 (br. s, 1H), 4.29-4.18 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.28-3.15 (m, 1H), 2.82-2.74 (m, 1H), 2.68-2.60 (m, 1H), 2.50-2.23 (m, 2H), 2.26 (s, 3H), 2.14-2.02 (m, 1H), 1.92-1.85 (m, 2H),1.54 (s, 6H), 0.81 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
화합물 56g의 제조 절차:
메탄올/물(5 mL/1 mL) 중의 화합물 56f(160 mg, 0.28 mmol)의 황색 용액에 NH4Cl(89 mg, 1.67 mmol) 및 Zn(90 mg, 1.39 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(20 mL)에 붓고 디클로로메탄/메탄올=3:1(v/v)(10 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 56g(150 mg, 98% 수율)를 흑색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 0-60AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 2.144 min, MS(ESI) m/z = 545.2 [M+H]+.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 9.66 (br. s, 1H), 8.30 (br. s, 1H), 8.21 (br. s, 1H), 7.78-7.37 (m, 2H), 6.93 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 6.45 (s, 1H), 4.21-4.09 (m, 1H), 4.00-3.88 (m, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.34-3.20 (m, 1H), 2.43-2.30 (m, 1H), 2.22-2.17 (m, 5H), 2.14-2.00 (m, 2H), 1.89-1.83 (m, 2H), 1.61-1.51 (m, 6H), 0.82-0.77 (m, 3H).
실시예 56의 제조 절차:
DMF(2 mL) 중의 화합물 56g(150 mg, 0.27 mmol)의 흑색 용액에 DIEA(71 mg, 0.55 mmol)에 이어, 아크릴로일 클로라이드(25 mg, 0.27 mmol)를 0℃에서 3회 첨가하고 0℃에서 1h 동안 교반하였다. 혼합물을 3방울의 물로 켄칭하고 직접 pre-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um, 조건: 41%-61% B (A: 물/10mM NH4HCO3, B: CH3CN), 유속: 25 mL/min)로 정제하여 실시예 56(31.9 mg, 19.7% 수율)을 회색 고체로서 수득하며, 11.6 mg은 전달하고 나머지 20.3 mg의 배치를 SFC 분리에 의해 더 정제하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.709 min, MS(ESI) m/z = 621.1 [M+Na]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ml 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt = 3.65 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.68 (br s, 1H), 9.41 (br s, 1H), 8.90 (br s, 1H), 8.61-8.25 (m, 2H), 7.59 (br s, 1H), 7.02 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.64 (br s, 1H), 6.39 (br s, 2H), 5.80 (br s, 1H), 4.41-4.16 (m, 1H), 4.02-3.78 (m, 4H), 3.66-3.45 (m, 1H), 2.83-2.62 (m, 1H), 2.58-2.46 (m, 1H), 2.44-2.37 (m, 1H), 2.30 (s, 6H), 2.21-2.05 (m, 3H), 1.69 (s, 3H), 0.94-0.83 (m, 3H).
실시예 57
N-(5-(4-(4,5- 디플루오로 -2-(2- 히드록시부탄 -2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((R)-2-((디메틸아미노)메틸)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00095
합성은 실시예 47과 유사한 실험 절차에 따라 실시예 57을 담황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30 mm에서 Rt = 1.928 min, MS(ESI) m/z=597.1 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ML 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50 mm 5um)에서 Rt = 4.09 min.
1 H NMR:(400 MHz, CDCl3) δ 10.92 (br s, 1H), 10.14-9.97 (m, 1H), 9.95-9.80 (m, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.39-8.34 (m, 1H), 7.68 (br d, J=9.6 Hz, 1H), 7.03 (dd, J=8.4 Hz, 12.4 Hz, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.36 (br d, J=5.2 Hz, 2H), 6.04-5.63 (m, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.39-3.26 (m, 2H), 3.01-2.92 (m, 1H), 2.42-2.32 (m, 1H), 2.19 (s, 6H), 2.13-1.91 (m, 5H), 1.70 (s, 3H), 1.68-1.63 (m, 2H), 0.94-0.84 (m Hz, 3H).
실시예 58
N-(5-(4-(4,5- 디플루오로 -2-(2- 히드록시부탄 -2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((S)-2-((디메틸아미노)메틸)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00096
합성은 실시예 47과 유사한 실험 절차에 따라 실시예 58을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.959 min, MS(ESI) m/z = 619.1 [M+Na]+.
HPLC : 10-80_ab_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 2.74 min.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 10.91 (br s, 1H), 10.24 - 9.80 (m, 2H), 8.48 - 8.33 (m, 2H), 7.68 (br d, J=10.4 Hz, 1H), 7.03 (dd, J=8.8, 12.4 Hz, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.36 (br d, J=4.4 Hz, 2H), 5.79 - 5.75 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.32 (br d, J=10.8 Hz, 2H), 3.02 - 2.91 (m, 1H), 2.44 - 2.32 (m, 1H), 2.23 - 2.16 (m, 7H), 2.14 - 1.86 (m, 6H), 1.70 (s, 3H), 0.89 (td, J=7.6, 12.0 Hz, 3H).
실시예 59
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2- 히드록시부탄 -2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((R)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00097
합성은 실시예 56과 유사한 실험 절차에 따라 실시예 59를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254. lcm 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt =1.713 min, MS(ESI) m/z=599.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.78 (br s, 1H), 9.77 (br s, 1H), 8.54 (br s, 1H), 8.53 (br s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.64 (br s, 1H), 7.01 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.74 (s, 1H), 6.48 - 6.29 (m, 2H), 5.86 - 5.76 (m, 1H), 5.62 (br s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.17 - 3.03 (m, 4H), 2.98 - 2.86 (m, 1H), 2.33 (s, 6H), 2.24 - 2.15 (m, 1H), 2.14 - 2.07 (m, 1H), 2.05 - 1.95 (m, 2H), 1.69 (s, 3H), 0.89 (dt, J=3.2, 7.6 Hz, 3H).
실시예 60
(S)-N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-(3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00098
합성은 실시예 33과 유사한 실험 절차에 따라 실시예 60을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254. lcm 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.568 min, MS(ESI) m/z=585.2 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.51 (br s, 1H), 9.72 (br s, 1H), 8.56 (br s, 1H), 8.47 (d, J=7.2 Hz, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.63 (br s, 1H), 7.08 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.55 - 6.26 (m, 2H), 5.88 (br s, 1H), 5.79 (d, J=9.2 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.20 - 2.99 (m, 4H), 2.90 (quin, J=6.8 Hz, 1H), 2.31 (s, 6H), 2.23 - 2.12 (m, 1H), 2.03 - 1.90 (m, 1H), 1.75 (br s, 6H).
실시예 61
(R)-N-(5-(4-(4,5- 디클로로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-(3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00099
합성은 실시예 33과 유사한 실험 절차에 따라 실시예 61을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 0-60AB_4.0 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 2.535 min, MS(ESI) m/z = 601.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.71 (br s, 1H), 9.80 (br s, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.52 (br s, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.67 (br s, 1H), 7.35 (s, 1H), 6.76 (s, 1H), 6.39-6.38 (m, 2H), 5.95 - 5.70 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.15 - 3.08 (m, 4H), 2.94 - 2.87 (m, 1H), 2.32 (s, 6H), 2.24 - 2.13 (m, 1H), 1.96-1.93 (m, 1H), 1.78 (s, 6H).
실시예 62
(R)-N-(5-(4-(4- 클로로 -5- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-(2-((디메틸아미노)메틸)아제티딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00100
합성은 실시예 41과 유사한 실험 절차에 따라 실시예 62를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_3 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18, 2.1*30mm, 3um)에서 Rt=1.493 min, MS(ESI) m/z=585.3 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ml. met XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um에서 Rt =3.52 min.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 10.66 (br s, 1H), 9.50 - 9.19 (m, 1H), 8.93 (br s, 1H), 8.50 - 8.28 (m, 2H), 7.58 (br s, 1H), 7.26 (br s, 1H), 6.62 (s, 1H), 6.44 - 6.28 (m, 2H), 5.80 (br d, J=9.6 Hz, 1H), 4.29-4.17 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.87 - 3.79 (m, 1H), 3.58 (q, J=8.4 Hz, 1H), 2.73-2.62 (m, 1H), 2.56 - 2.40 (m, 2H), 2.26 (s, 6H), 2.18 - 2.00 (m, 1H), 1.75 (s, 6H).
실시예 63
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2- 히드록시부탄 -2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((R)-2-((디메틸아미노)메틸)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00101
합성은 실시예 56과 유사한 실험 절차에 따라 실시예 63을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254. lcm 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt =1.870 min, MS(ESI) m/z=613.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.86 (br s, 1H), 10.04 (d, J=27.6 Hz, 1H), 9.89 (br d, J=20.0 Hz, 1H), 8.53 (dd, J=2.8, 7.2 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.69 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.02 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.70 (s, 1H), 6.36 (s, 1H), 6.35 (br s, 1H), 5.92 (br s, 1H), 5.77 (t, J=5.8 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.39 - 3.24 (m, 2H), 3.02 - 2.92 (m, 1H), 2.37 (dd, J=7.8, 12.0 Hz, 1H), 2.23 - 2.16 (m, 7H), 2.13 - 1.88 (m, 5H), 1.70 (s, 3H), 1.69 - 1.64 (m, 1H), 0.89 (td, J=7.4, 20.0 Hz, 3H).
실시예 64
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2- 히드록시부탄 -2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((S)-2-((디메틸아미노)메틸)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00102
합성은 실시예 56과 유사한 실험 절차에 따라 실시예 64를 밝은 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_3 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18, 2.1*30 mm, 3 um)에서 Rt = 1.473 min, MS(ESI) m/z=613.3 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ml.met XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um에서 Rt = 4.27 min.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 10.86 (br s, 1H), 10.15 - 9.97 (m, 1H), 9.93-9.79 (m, 1H), 8.53 (br d, J= 7.4 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.73-7.63 (m, 1H), 7.02 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.36 (br d, J= 5.2 Hz, 2H), 5.91 (br s, 1H), 5.82 - 5.73 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.40-3.22 (m, 2H), 2.97 (q, J= 7.2 Hz, 1H), 2.46 - 2.30 (m, 2H), 2.22-2.16 (m, 7H), 2.13 - 1.89 (m, 6H), 1.71 (s, 3H), 0.94 - 0.85 (m, 3H).
실시예 65
(S)-N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-(2-((디메틸아미노)메틸)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00103
합성은 실시예 31과 유사한 실험 절차에 따라 실시예 65를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 0-60AB_4.0 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 2.553 min, MS(ESI) m/z = 621.0 [M+Na]+.
1 H NMR(CDCl3 400MHz) δ 10.60 (br s, 1H), 10.09 (br s, 1H), 9.91 (br s, 1H), 8.48 (d, J=7.2 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.68 (br s, 1H), 7.10 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.70 (s, 1H), 6.45 - 6.29 (m, 2H), 6.11 (br s, 1H), 5.85 - 5.73 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.38 - 3.25 (m, 2H), 3.02 - 2.93 (m, 1H), 2.42 - 2.34 (m, 1H), 2.24 - 2.16 (m, 7H), 2.16 - 1.91 (m, 4H), 1.77 (s, 6H).
실시예 66
N-(2-((2-(디메틸아미노)에틸)( 메틸 )아미노)-4- 메톡시 -5-(4-(2-(1,1,1- 트리플루오로 -2-히드록시프로판-2-일)페닐아미노)-1,3,5-트리아진-2-일아미노)페닐)아크릴아미드
Figure pct00104
화합물 66b의 제조 절차:
DCM(125 mL) 중의 화합물 66a(5.0 g, 29 mmol) 및 트리에틸아민(3.82 g, 38 mmol)의 용액에 피발로일 클로라이드(3.855 g, 32 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 16 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(100 mL)로 희석하고 유기상을 분리하였다. 수성상을 DCM(50 mL X 3)으로 추출하고, 조합된 유기층을 염수(200 mL X 1)로 세척, 무수 Na2SO4 상에서 건조, 여과 및 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 플래시 실리카 크로마토그래피, 페트롤륨 에테르 중 10%에서 30% EtOAc(v/v) 구배 용리로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 66b(7.271 g, 98% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN에서 Rt = 1.44 min, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃), MS(ESI) m/z = 257.2 [M+H]+.
화합물 66c의 제조 절차:
THF(46 mL) 중의 화합물 66b(2.0 g, 7.8 mmol)의 용액에 n-BuLi(12 mL, 헥산 중 1.6 M)을 -30℃에서 첨가하고, 생성된 혼합물을 -30℃에서 1 h 동안 교반하였다. TFAA(2.5 g, 12 mmol)를 -30℃에서 첨가한 후, 혼합물을 20℃에서 16 h 동안 더 교반하였다. 혼합물을 1 M HCl 용액(32 mL)으로 켄칭하고 EA(20 mL X 5)로 추출하였다. 조합된 유기물을 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과 및 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 con. HCl(20 mL) 및 THF(20 mL)로 처리한 후, 생성된 혼합물을 80℃에서 16 h 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 용액(100 mL)으로 희석하고, EA(50 mL X 5)로 추출하였다. 조합된 유기물을 염수(200 mL X 1)로 세척하고 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피, 페트롤륨 에테르 중 0%에서 30% EtOAc 구배 용리로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 66c(863 mg, 58% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다.
1 H NMR(500 MHz, CDCl3) δ ppm 6.4 (br s, 2 H) 6.7 - 6.8 (m, 2 H) 7.3 - 7.4 (m, 1 H) 7.7 - 7.8 (m, 1 H).
화합물 66d의 제조 절차:
THF(17 mL) 중의 화합물 66c(850 mg, 4.5 mmol)의 용액에 메틸마그네슘 브로마이드(7.48 mL, THF 중 3M)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 반응물을 20℃에서 1 h 동안 교반하였다. 반응물을 포화 NH4Cl 용액(50 mL)으로 켄칭하고 EA(50 mL X 3)로 추출하였다. 조합된 유기물을 염수로 세척, 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과 및 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피, 페트롤륨 에테르 중 10%에서 50% EtOAc 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 66d(342 mg, 21% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN에서 Rt = 1.16 min, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃), MS(ESI) m/z = 206.1 [M+H]+.
1 H NMR(500 MHz, DMSO-d 6) δ 1.7 (s, 3 H) 5.5 (s, 2 H) 6.5 - 6.5 (m, 1 H) 6.6 (dd, J=7.9, 1.3 Hz, 1 H) 6.9 (s, 1 H) 7.0 - 7.0 (m, 1 H) 7.1 (d, J=8.2 Hz, 1 H).
화합물 66e의 제조 절차:
NMP(1 mL) 중의 화합물 6e(174 mg, 0.58 mmol) 및 화합물 66d(120 mg, 0.58 mmol)의 용액을 밀봉하고 80℃에서 40 min 동안 가열하였다. 반응물을 물(50 mL)로 희석하고 EA(20 mL X 5)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수로 세척, 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과 및 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피, 페트롤륨 에테르 중 30%에서 100% EtOAc 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 66e(235 mg, 85% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN에서 Rt = 1.90 min, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃) MS(ESI) m/z = 469.3 [M+H]+.
화합물 66f의 제조 절차:
NMP(3.0 mL) 중의 화합물 66e(235 mg, 0.50 mmol), N1,N1,N2-트리메틸에탄-1,2-디아민(72 mg, 0.70 mmol), 및 DIEA(194 mg, 1.5 mmol)의 용액을 50℃에서 80 min 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물(100 mL)로 희석하고 EA(20 mL X 5)로 추출하였다. 조합된 유기물을 염수로 세척, 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과 및 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피, DCM 중의 0%에서 10% MeOH 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 66f(191 mg, 69% 수율)를 밝은 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중 5-95% MeCN) 에서 Rt = 1.28 min, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃), MS(ESI) m/z = 551.2 [M+H]+.
화합물 66g의 제조 절차:
탄소상 팔라듐(37 mg)을 MeOH(10 mL) 중의 화합물 66f(95 mg, 0.17 mmol)의 용액에 첨가하였다. 생성된 반응물을 20℃에서 수소 대기 하에 30 min 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여과액을 감압 하에 증발시켜 화합물 66(90 mg, 조 물질)을 밝은 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3 min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.19 min, MS(ESI) m/z = 521.3 [M+H]+.
실시예 66의 제조 절차:
NMP(3 mL) 중의 화합물 66g (90 mg, 0.17 mmol) 및 DIEA(67 mg, 0.52 mmol)의 용액에 NMP(0.5 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(21 mg, 0.23 mmol)의 용액을 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30 min 동안 교반하였다. 그 후 용액을 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% 암모니아) 중의 0% 내지 60% MeCN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 동결건조로 건조하여 실시예 66(23 mg, 23% 수율)을 밝은 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3 min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt =1.24 min, MS(ESI) m/z = 575.3 [M+H]+.
1 H NMR:(500 MHz, DMSO-d 6) δ 1.8 (br s, 3 H) 2.2 (s, 6 H) 2.3 (br t, J=5.7 Hz, 2 H) 2.7 (s, 3 H) 2.9 (br d, J=5.0 Hz, 2 H) 3.8 (s, 3 H) 5.7 (br d, J=10.7 Hz, 1 H) 6.2 (br d, J=17.3 Hz, 1 H) 6.4 (br dd, J=16.7, 10.1 Hz, 1 H) 7.0 (s, 2 H) 7.0 - 7.3 (m, 1 H) 7.3 - 7.4 (m, 1 H) 8.4 (s, 1 H) 8.2 (s, 1 H) 8.2 - 8.4 (m, 1 H) 8.9 (br s, 1 H) 10.1 (br s, 1 H).
실시예 67
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2- 히드록시부탄 -2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-R티아진-2-일아미노)-2-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00105
합성은 실시예 56과 유사한 실험 절차에 따라 실시예 67을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_3 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18, 2.1*30 mm)에서 Rt = 1.585 min, MS(ESI) m/z=609.1 [M+Na]+.
HPLC : Rt = 3.45 10-80AB _1.2ml.met (Ultimate C18 3*50 mm 3um).
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 10.84 (br s, 1H), 10.42 (br s, 1H), 9.94 (br s, 1H), 8.52 (br d, J=7.4 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.70 (br s, 1H), 7.02 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.42 - 6.29 (m, 2H), 5.97 (br s, 1H), 5.82 - 5.72 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.92 - 2.82 (m, 2H), 2.70 (s, 3H), 2.42-2.31 (m, 8H), 2.18 - 2.02 (m, 2H), 1.70 (s, 3H), 0.88 (br t, J=7.6 Hz, 3H).
실시예 68
(R)-N-(5-(4-(4,5- 디클로로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )피리미딘-2-일아미노)-2-(3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00106
화합물 68a의 제조 절차:
이소프로판올(2 mL) 중의 화합물 15c(900 mg, 4.09 mmol) 및 DIEA(1.1 g, 8.18 mmol)의 용액에 2,4-디클로로피리미딘(730 mg, 4.90 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 48 h 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르 중 25-35% EtOAc)로 정제하여 화합물 68a(1.1 g, 81% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.883 min, MS(ESI) m/z = 331.8/333.8 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, 메탄올-d 4 ) δ 8.27 (s, 1H), 8.14 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.74 (d, J=6.0 Hz, 1H), 1.58 (s, 6H).
화합물 68b의 제조 절차:
n-BuOH(10 mL) 중의 화합물 68a(1.1 g, 3.31 mmol) 및 4-플루오로-2-메톡시-5-니트로아닐린(616 mg, 3.31 mmol)의 용액에 TFA(0.1 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 12h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여과된 케이크를 감압 하에 건조하여 화합물 68b(1.3 g, 81% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.807 min, MS(ESI) m/z = 482.0 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.53 (br d, J=8.8 Hz, 1H), 8.02 - 7.92 (m, 2H), 7.53 (s, 1H), 7.22 (d, J=12.8 Hz, 1H), 6.49 (d, J=7.3 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 1.59 (s, 6H).
화합물 68c의 제조 절차:
DMSO(5 mL) 중의 화합물 68b(200 mg, 0.41 mmol) 및 K2CO3(113 mg, 0.82 mmol)의 용액에 (R)- N,N-디메틸피롤리딘-3-아민(56 mg, 0.49 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 16-21℃에서 12h 동안 교반하고 그동안 색상은 담황색에서 진한 황색으로 변하였다. 반응 혼합물을 빙수(50 mL)에 붓고 황색 고체가 침전되었다. 고체를 여과로 수집하고 CH2Cl2(20 mL)로 용해 후, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 68c(200 mg, 85% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.867 min, MS(ESI) m/z = 576.0 [M+H]+.
화합물 68d의 제조 절차:
EtOAc(5 mL) 중의 화합물 68c(200 mg, 0.35 mmol)의 용액에 Pd/C(40 mg)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 H2로 3회 퍼지 및 탈기한 후 12-17℃에서 H2 벌룬(15 Psi) 하에 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 화합물 68d(150 mg, 78% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.670 min, MS(ESI) m/z = 546.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 8.96 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.07 (d, J=5.6 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.68 (s, 1H), 6.09 (d, J=5.6 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.15 (br d, J=6.8 Hz, 2H), 3.05 (br d, J=6.4 Hz, 2H), 2.89 (s, 1H), 2.31 (s, 6H), 2.14 (br s, 1H), 1.90 (br s, 1H), 1.68 (s, 6H).
화합물 68e의 제조 절차:
CH2Cl2(3 mL) 중의 화합물 68d(150 mg, 0.27 mmol)의 용액에 빙수조 중의 3-클로로프로판오일 클로라이드(35 mg, 0.27 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5-10℃에서 5 min 동안 교반하고 그동안 색상은 갈색에서 황색으로 변하였다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3(5 mL)에 붓고 CH2Cl2(15 mL Х 2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2 중의 10% MeOH)로 정제하여 화합물 68e(90 mg, 52% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.709 min, MS(ESI) m/z = 636.1/638.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 9.60 - 9.43 (m, 2H), 8.63 - 8.45 (m, 1H), 8.11 (d, J=5.6 Hz, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 6.76 (s, 1H), 6.37 (s, 1H), 3.91 (br d, J=6.4 Hz, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.10 (br s, 4H), 2.91 (br s, 2H), 2.33 (br s, 8H), 2.06 (s, 1H), 1.77 - 1.70 (m, 6H).
실시예 68의 제조 절차:
CH3CN(3 mL) 중의 화합물 68e(90 mg, 0.14 mmol)의 용액에 TEA(42 mg, 0.42 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 18h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2 중 5% MeOH)로 정제하고, 용리액을 감압 하에 농축한 후 동결건조하여 실시예 68(33.1 mg, 31% 수율)을 밝은 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.589 min, MS(ESI) m/z = 600.0 [M+H]+.
HPLC : 10-80_ab_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 2.42 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 9.57 (br d, J=11.8 Hz, 2H), 8.04 (d, J=5.8 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.65 (br s, 1H), 6.37 - 6.27 (m, 2H), 5.71 (br d, J=11.2 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.12 (br d, J=12.8 Hz, 2H), 3.07 - 2.98 (m, 2H), 2.98 - 2.92 (m, 1H), 2.39 (br s, 6H), 2.15 (br s, 2H), 1.66 (s, 6H).
실시예 69/ 실시예 70
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-((R)-2- 히드록시부탄 -2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((R)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드 및 N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-((S)-2- 히드록시부탄 -2-일)페닐아미노)-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((R)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00107
실시예 59(50 mg, 0.0835 mmol)를 SFC로 분리하여 실시예 69(21.0 mg, 42% 수율)를 백색 고체로서 및 실시예 70(24.6 mg, 49.2% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 69:
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.840 min, MS(ESI) m/z = = 621.0 [M+Na]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ml 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt = 3.88 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.79 (br s, 1H), 9.69 (br s, 1H), 8.79 (br s, 1H), 8.53 (d, J=7.2 Hz, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.61 (br s, 1H), 7.01 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.73 (br s, 1H), 6.67 (s, 1H), 6.37 (d, J=16.4 Hz, 1H), 5.79 (d, J=10.8 Hz, 1H), 5.70 (br s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.41 - 3.24 (m, 2H), 3.18 (br s, 1H), 3.07 (dd, J=6.4, 10.0 Hz, 1H), 2.98 (q, J=8.0 Hz, 1H), 2.55 (s, 6H), 2.30 - 2.20 (m, 2H), 2.14 - 2.08 (m, 1H), 2.04 - 1.99 (m, 1H), 1.69 (s, 3H), 0.88 (t, J=7.6 Hz, 3H).
SFC : AD-3_IPA(DEA)_5_40_2.5ML에서 Rt = 6.855 min.
실시예 70:
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.850 min, MS(ESI) m/z = 599.0 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ml 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt = 3.85 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.79 (br s, 1H), 9.68 (br s, 1H), 8.86 (br s, 1H), 8.52 (d, J=7.2 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.61 (br s, 1H), 7.01 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.84 (br s, 1H), 6.66 (s, 1H), 6.37 (d, J=16.4 Hz, 1H), 5.80 (d, J=11.2 Hz, 1H), 5.71 (br s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.45 - 3.31 (m, 2H), 3.25 (br s, 1H), 3.06 (dd, J=6.6, 10.4 Hz, 1H), 2.96 (q, J=8.0 Hz, 1H), 2.60 (br s, 6H), 2.35 - 2.19 (m, 2H), 2.15 - 2.09 (m, 1H), 2.04 - 2.00 (m, 1H), 1.69 (s, 3H), 0.87 (t, J=7.6 Hz, 3H).
SFC : AD-3_IPA(DEA)_5_40_2.5ML에서 Rt = 7.292 min.
실시예 71
( R )-N-(5-(4-(4,5- 디클로로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )피리미딘-2-일아미노)-2-(2-((디메틸아미노)메틸)아제티딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00108
화합물 71a의 제조 절차:
DMSO(5 mL) 중의 화합물 68b(200 mg, 0.42 mmol) 및 K2CO3(1.2 g, 8.4mmol)의 용액에 (R)-1-(아제티딘-2-일)-N,N-디메틸메탄아민 TFA 염(887mg, 4.2 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 교반 하면서 빙수조 하의 H2O(100 mL)에 적가하고, 침전된 고체를 여과하고 여과 케이크는 CH2Cl2(45 mL)로 용해한 후, 건조하며 진공에서 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 MeOH/TFA/H2O(10%에서 100%의 물 중 MeOH)로 용리하는 플래시 역상 C-18 컬럼 크로마토그래피로 더 정제하여 화합물 71a(180 mg, 74% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30 mm)에서 Rt = 0.710 min, MS(ESI) m/z = 576.1 [M+H]+.
화합물 71b의 제조 절차:
MeOH(10 mL) 중의 71a(180 mg, 0.31 mmol)의 용액에 Pd/C(40 mg)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 H2로 3회 퍼지 및 탈기한 후, 15-21℃에서 H2 벌룬(15 Psi) 하에 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여과액은 감압 하에 농축하여 화합물 71b(140 mg, 73% 수율)를 흑색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30 mm)에서 Rt = 0.689min, MS(ESI) m/z = 546.1[M+H]+.
화합물 71c의 제조 절차:
CH2Cl2(3 mL) 중의 화합물 71b(110 mg, 0.2 mmol)의 용액에 3-클로로프로판오일 클로라이드(26 mg, 0.2 mmol)를 빙수조 하에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5-10℃에서 45 min 동안 교반하고 그동안 색상은 흑색에서 갈색으로 변하였다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3(5 mL)에 붓고, CH2Cl2(15 mL Х 2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 물(10 mL Х2) 및 염수(10 mL)로 연속적으로 세척, 건조 및 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2 중의 0-5% MeOH)로 정제하여 화합물 71c(50 mg, 39% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_2 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 0.883 min, MS(ESI) m/z=636.1 [M+H]+.
실시예 71의 제조 절차:
CH3CN(5 mL) 중의 화합물 71c(50 mg, 0.078 mmol)의 용액에 Et3N(32 mg, 0.31 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 12h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 조 물질을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2 중 0-5% MeOH)로 정제한 후 건조 및 동결건조 실시예 71(24.1 mg, 51% 수율)을 황백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30 mm)에서 Rt = 1.648min, MS(ESI) m/z=600.0 [M+H]+.
HPLC : 10-80AB_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3 um)에서 Rt = 2.42 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 9.76 (br s, 1H), 9.40 (br s, 1H), 8.76 (br s, 1H), 8.06 (d, J=5.6 Hz, 1H), 7.86-7.55 (m, 2H), 7.39 (s, 1H), 6.86 (br s, 1H), 6.67 (s, 1H), 6.43-6.35 (m, 2H), 5.80 (d, J=11.6 Hz, 1H), 5.70-5.43 (m, 1H), 4.69 (br s, 1H), 4.09 (br s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.45-3.33 (m, 1H), 3.16-3.08 (m, 2H), 2.75 (br s, 6H), 2.56-2.45 (m, 1H), 2.43-2.34 (m, 1H), 1.71 (s, 6H).
실시예 72
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(1- 히드록시시클로부틸 ) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드 포름산 염
Figure pct00109
화합물 72b의 제조 절차:
톨루엔(15 mL) 중의 화합물 72a(2.0 g, 9.0 mmol)의 혼합물에 포름산(1.0 g, 22 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 8시간 동안 환류하였다. 혼합물을 진공에서 농축하고 조 생성물은 메탄올(10 mL)로 세척한 후 여과하였다. 고체를 진공에서 건조하여 화합물 72b(1.6 g, 71% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.12 min, MS(ESI) m/z = 252.0, 254.0 [M+H]+.
화합물 72c의 제조 절차:
화합물 72b(1.6 g, 6.3 mmol)의 혼합물에 n-BuLi(10 mL, 헥산 중 1.6M)을 -78℃에서 질소 분위기 하에 3 min에 걸쳐 첨가한 후 이어서 시클로부탄온(1g, 14 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 -78℃에서 10 min 동안 질소 분위기 하에 교반하였다. 혼합물을 포화 NH4Cl 수용액(50 mL)으로 켄칭하고 EtOAc(50 mL)로 추출하였다. 유기층을 진공에서 농축하여 화합물 2c(500 mg, 32% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min- 물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.06 min, MS(ESI) m/z = 226.0 [M+H]+.
화합물 72d의 제조 절차:
에탄올(3 mL) 중의 화합물 72c(500 mg, 2.1 mmol)의 혼합물에 수산화칼륨(200 mg, 3.6 mmol) 및 물(2 mL)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 70℃에서 15 min 동안 질소 분위기 하에 가열하였다. 혼합물을 포화 NH4Cl 수용액(50 mL)으로 희석하고 EtOAc(50 mL)로 추출하였다. 유기층을 진공에서 농축하고, 잔류물은 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 5%에서 60% MeCN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 72d(320 mg, 72% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.12 min, MS(ESI) m/z = 198.2 [M+H]+.
화합물 72e 의 제조 절차:
DCM(5 mL) 중의 화합물 72d(302 mg, 1.4 mmol)의 혼합물에 2,4-디클로로-1,3,5-트리아진(300 mg, 2.0 mmol) 및 DIEA(300 mg, 2.3 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 20℃에서 16시간 동안 교반하였다. 그 후 혼합물을 플래시 실리카 크로마토그래피, 페트롤륨 에테르 중 5%에서 50% EtOAc 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 72e(350 mg, 77% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.39 min, MS(ESI) m/z = 329.1 [M+H]+.
화합물 72f의 제조 절차:
1-부탄올(8 mL) 중의 화합물 72e(160 mg, 0.49 mmol)의 혼합물에 4-플루오로-2-메톡시-5-니트로아닐린(80 mg, 0.54 mmol) 및 TFA(20 mg, 0.21 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 55℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물은 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 5%에서 70% MeCN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 72f(150 mg, 64% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.40 min, MS(ESI) m/z = 479.1 [M+H]+.
화합물 72g의 제조 절차:
NMP(5 mL) 중의 화합물 72f(80 mg, 0.17 mmol)의 혼합물에 N,N,N '-트리메틸에틸렌디아민(30 mg, 0.29 mmol) 및 DIEA(40 mg, 0.31 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 그 후 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 5%에서 60%의 MeCN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 72g(70 mg, 75% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.00 min, MS(ESI) m/z = 560.2 [M+H]+.
화합물 72h의 제조 절차:
메탄올(5 mL) 중의 화합물 72g(70 mg, 0.13mmol)의 혼합물에 탄소상 팔라듐 (20 mg)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 수소 대기 하에 교반하였다. 혼합물을 그 후 여과하고 여과액을 진공에서 농축하여 화합물 72h(50 mg, 76% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.92 min, MS(ESI) m/z = 531.3 [M+H]+.
실시예 72의 제조 절차:
NMP(2 mL) 중의 화합물 72h(50 mg, 0.094 mmol)의 혼합물에 아크릴로일 클로라이드(10 mg, 0.11mmol) 및 DIEA(30 mg, 0.23 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 생성된 용액을 0℃에서 10 min 동안 교반하였다. 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 5%에서 60% MeCN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 포름산 염 형태의 실시예 72(28 mg, 51% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.97 min, MS(ESI) m/z = 585.3 [M+H]+.
1 H NMR:(500 MHz, DMSO-d 6) δ 1.46 (br d, J=7.57 Hz, 1 H) 1.83 (br s, 1 H) 2.23 - 2.32 (m, 2 H) 2.35 - 2.44 (m, 2 H) 2.51 - 2.57 (m, 2 H) 2.59 (s, 3 H) 2.79 (s, 3 H) 2.80 (s, 3 H) 3.26 - 3.27 (m, 2 H) 3.81 (s, 3 H) 5.76 (br d, J=10.40 Hz, 1 H) 6.25 (br d, J=17.34 Hz, 1 H) 6.52 (br s, 1 H) 6.64 (br dd, J=17.18, 10.25 Hz, 1 H) 7.00 (br s, 1 H) 7.40 (br s, 1 H) 8.04 (br s, 1 H) 8.26 (s, 1 H) 8.81 - 9.22 (m, 2 H) 9.24 - 9.51 (m, 2 H).
실시예 73
(R)-N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시-2-(3-(메틸아미노)피롤리딘-1-일)페닐)아크릴아미드
Figure pct00110
화합물 73b의 제조 절차:
DMSO(2 mL) 중의 화합물 11c(200 mg, 0.428 mmol), 화합물 73a(128.71 mg, 0.642 mmol) 및 K2CO3(118.4 mg, 0.856 mmol)의 용액을 85℃에서 2h 동안 교반하였다. 반응물을 이전 배치와 조합하고 교반 하면서 빙수조 하의 H2O(20 mL)에 첨가하고, 침전된 고체를 여과하며 여과 케이크는 CH2Cl2(50 mL)로 용해, 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 73b(430 mg, 88.6% 수율)를 주황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.873 min, MS(ESI) m/z=647.1 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.71 (br s, 1H), 8.96 (br s, 1H), 8.38 (m, 2H), 7.36 (s, 1H), 7.08 (d, J=10.4 Hz, 1H), 6.32 (s, 1H), 4.82 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.43 - 3.28 (m, 3H), 3.14 - 3.04 (m, 1H), 2.86 (s, 3H), 2.22 - 2.10 (m, 2H), 1.70 (s, 6H), 1.47 (s, 9H).
화합물 73c의 제조 절차:
MeOH(5 mL) 중의 화합물 73b(380 mg, 0.587 mmol)의 용액에 Pd/C(200 mg)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 16-21℃에서 3h 동안 H2 벌룬(15 Psi) 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과액을 이전 배치와 조합하며 진공에서 농축하여 화합물 73c(380 mg, 92.7% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.823 min, MS(ESI) m/z=617.2 [M+H]+.
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 9.61 (br s, 1H), 8.33 (m, 2H), 7.87 - 7.33 (m, 2H), 7.09 (d, J=10.4 Hz, 1H), 6.63 (s, 1H), 4.91 (br s, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.80 - 3.55 (m, 2H), 3.20 (m, 1H), 3.12 - 3.06 (m, 2H), 2.92 (s, 3H), 2.32 - 2.21 (m, 1H), 1.98 - 1.87 (m, 1H), 1.68 (s, 6H), 1.48 (s, 9H).
화합물 73d의 제조 절차:
DMF(2mL) 중의 화합물 73c(280.0 mg, 0.453 mmol) 및 DIEA(87.65 mg, 0.679 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드(41.07 mg, 0.453 mmol)를 0℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 H2O(0.2 mL)로 켄칭하고, 이것을 이전 배치와 조합하며 C18-역 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH 및 물)로 정제하여 화합물 73d(114 mg, 27.6% 수율)를 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.868 min, MS(ESI) m/z = 671.3 [M+H]+.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 10.55 (br s, 1H), 9.87 (br s, 1H), 8.72 - 8.51 (m, 1H), 8.49 (br d, J=7.6 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.66 (br s, 1H), 7.10 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.39 (br s, 2H), 6.02 - 5.63 (m, 2H), 4.71 (br s, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.19 - 3.11 (m, 2H), 3.05 - 2.99 (m, 2H), 2.95 (s, 3H), 2.38 - 2.25 (m, 1H), 2.10 - 2.00 (m, 1H), 1.77 (s, 6H), 1.50 (s, 9H).
실시예 73의 제조 절차:
CH2Cl2(3mL) 중의 화합물 73d(94 mg, 0.146 mmol)의 용액에 15-21℃에서 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 그 후 이 온도에서 12 h 동안 교반하였다. 반응물을 이전 배치와 조합하고 분취 HPLC(기기: BH 컬럼: Gemini 150*25 5um. 이동상 A: 물 0.05% 암모니아 히드록시드 v/v 이동상 B: CH3CN 유속: 25 ml/min 구배 시간: 7 min 프로파일 설명: 42%-72%)로 정제하여 실시예 73(27.0 mg, 27.8% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4 min_220&254 크로마토그래피(A: Xtimate C18, 2.1*30mm, 3um; B: XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt =1.317min, MS(ESI)m/z=571.2 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ml. met, XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um에서 Rt =3.02 min.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 10.54 (br s, 1H), 9.77 (br s, 1H), 8.72 (br s, 1H), 8.48 (d, J=7.2 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.63 (br s, 1H), 7.09 (d, J=10.4 Hz, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.51 - 6.30 (m, 2H), 5.80 (br d, J=11.4 Hz, 1H), 6.04 - 5.68 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.73 (m, 1H), 3.72 - 3.66 (m, 1H), 3.49 (s, 1H), 2.98 (m, 3H), 2.48 (s, 3H), 2.32 - 2.24 (m, 1H), 1.85 - 1.79 (m, 1H), 1.76 (s, 6H).
실시예 74
(R)-N-(5-(5- 클로로 -4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )피리미딘-2-일아미노)-2-(3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐) 아크릴아미드
Figure pct00111
화합물 74a의 제조 절차:
i-PrOH(5 mL) 중의 화합물 11b(350 mg, 1.72 mmol), 2,4,5-트리클로로피리미딘(314.5 mg, 1.72 mmol) 및 DIEA(444 mg, 3.44mmol)의 혼합물을 80℃에서 5 hr 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 이전 배치와 조합하고 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피로 2회(페트롤륨 에테르 중 0-10% EtOAc) 정제하여 화합물 74a(580 mg, 84.6% 수율)를 황백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2 mm)에서 Rt = 0.870 min, MS(ESI) m/z = 351.8 [M+H+2]+.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 8.45 (d, J=7.2 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.09 (d, J=10.4 Hz, 1H), 2.77 (br s, 1H), 1.68 (s, 6H).
화합물 74b의 제조 절차:
n-BuOH(3.5 mL) 중의 화합물 74a (500 mg, 1.43 mmol), 4-플루오로-2-메톡시-5-니트로아닐린(345 mg, 1.85 mmol) 및 TFA(350 uL)의 혼합물을 100℃에서 5 hr 동안 교반하였다. 반응물을 이전 배치와 조합한 후 여과하고, 여과된 케이크를 n-BuOH(2 mL)로 세척 및 진공에서 건조하여 화합물 74b(560 mg, 71.4% 수율)를 회색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.836 min, MS(ESI) m/z = 500.1 [M+H]+.
화합물 74c의 제조 절차:
DMSO(2 mL) 중의 화합물 74b(150 mg, 0.3 mmol), (R)-N,N-디메틸피롤리딘-3-아민(41.1 mg, 0.36 mmol) 및 K2CO3(83.0 mg, 0.6 mmol)의 혼합물을 80℃에서 5 h 동안 교반하였다(갈색 현탁액). 반응물을 이전 배치와 조합하고 H2O(10 mL)에 첨가하며 그동안 고체가 침전되었다. 고체를 여과로 수집하고 H2O(5 mL)로 세척, 고 진공에서 건조하여 화합물 74c(220 mg, 92.8% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.709 min, MS(ESI) m/z = 594.1 [M+H]+.
화합물 74d의 제조 절차:
MeOH/H2O(5.0/2.0 mL) 중의 화합물 74c(180 mg, 0.3 mmol), Zn(98.4mg, 1.5 mmol) 및 NH4Cl(81 mg, 1.5 mmol)의 혼합물을 80℃에서 3 h 동안 교반하였다(흑색 현탁액). 반응 혼합물을 여과하고 여과 케이크는 CH2Cl2(20 mL) 및 H2O(5 mL)로 연속적으로 세척하고, 여과액을 CH2Cl2(30 mLХ3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(20 mL)로 세척, Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피(MeOH/ CH2Cl2=10/1(v/v)로 용리)로 정제하여 화합물 74d(130 mg, 76.0% 수율)를 회색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.708 min, MS(ESI) m/z = 564.1 [M+H]+.
실시예 74의 제조 절차:
DMF(3 mL) 중의 화합물 74d(130 mg, 0.23 mmol) 및 DIEA(89.1 mg, 0.69 mmol)의 혼합물에 빙수조 하의 아크릴로일 클로라이드(31.0 mg, 0.34 mmol)을 적가하였다. 반응물을 0-5℃에서 4 h 동안 교반한 후, 갈색 용액을 MeOH(0.05 mL)로 켄칭하고 직접 prep-HPLC [Xtimate C18 150*25 mm*5 um 조건: 44-74%B(A: 0.04% 암모니아+ 10 mM NH4HCO3 B: CH3CN); 유속: 30 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 74(32.4 mg, 22.8% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 0-60AB_4.0 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 2.266 min, MS(ESI) m/z = 618.0 [M+H]+.
HPLC : 0-60_CD_1.2ML 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt = 5.68 min.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 9.76 (br s, 1H), 8.93 (br s, 1H), 8.46 (d, J=7.2 Hz, 1H), 8.20 (br s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.87 (d, J=10.4 Hz, 1H), 6.68 (s, 1H), 6.40 - 6.20 (m, 2H), 5.72 (d, J=10.8 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.70 - 3.47 (m, 1H), 3.20 - 3.04 (m, 4H), 2.95 - 2.84 (m, 1H), 2.34 (s, 6H), 2.22 - 2.10 (m, 1H), 1.98 - 1.86 (m, 1H), 1.61 (d, J=2.0 Hz, 6H).
실시예 75
N-(5-(4-(5- 시클로프로필 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00112
화합물 75a의 제조 절차:
디옥산(10 mL) 및 H2O(2 mL) 중의 화합물 11c(500 mg, 1.07 mmol)의 용액에 시클로프로필보론산(229 mg, 2.67 mmol), Pd(OAc)2(168 mg, 0.75 mmol), PCy3(420 mg, 1.50 mmol) 및 Cs2CO3(1.1 g, 3.21 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 N2로 1 min 동안 탈기하고 130℃에서 마이크로파 하에 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 2/1(v/v))로 정제하여 화합물 75a(300 mg, 59% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.878 min, MS(ESI) m/z = 473.1 [M+H]+.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 9.32 (s, 1H), 8.55 - 8.28 (m, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.51 (br d, J=13.6 Hz, 1H), 7.26 - 7.23 (m, 1H), 6.97 (br d, J=11.2 Hz, 1H), 6.76 (d, J=12.0 Hz, 1H), 4.02 (s, 3H), 2.16 (br d, J=7.2 Hz, 1H), 1.69 - 1.64 (m, 6H), 0.96 (br s, 2H), 0.73 (br s, 2H).
화합물 75b의 제조 절차:
DMSO(5 mL) 중의 화합물 75a(300 mg, 0.64 mmol) 및 K2CO3(177 mg, 1.28 mmol)의 용액에 N 1 ,N 1 ,N 2 -트리메틸에탄-1,2-디아민(79 mg, 0.77 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 14-23℃에서 4h 동안 교반하고 그동안 색상은 갈색에서 진한 황색으로 변하였다. 반응 혼합물을 EtOAc(20 mL)로 희석하고 물(30 mL)로 세척하였다. 유기층을 건조 및 감압 하에 농축하여 조 물질을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2 중 5% MeOH)로 정제하여 화합물 75b(200 mg, 56% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.760 min, MS(ESI) m/z = 555.1 [M+H]+.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 9.47 - 8.93 (m, 1H), 8.38 (br s, 1H), 7.86 - 7.51 (m, 1H), 7.40 (br s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.04 - 6.88 (m, 1H), 6.65 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.28 (br t, J=7.2 Hz, 2H), 2.87 (s, 3H), 2.58 (br t, J=7.2 Hz, 2H), 2.27 (s, 7H), 1.73 - 1.65 (m, 6H), 1.00-0.90 (m, 4H).
화합물 75c의 제조 절차:
EtOAc(10 mL) 중의 화합물 75b(200 mg, 0.36 mmol)의 용액에 Pd/C(40 mg)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 H2로 3회 퍼지 및 탈기한 후, 12-21℃에서 H2 벌룬(15 Psi)하에 12h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 화합물 75c(160 mg, 85% 수율)를 밝은 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.799 min, MS(ESI) m/z = 525.2 [M+H]+.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 9.12 (s, 1H), 8.34 (br s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.26 - 7.23 (m, 1H), 7.06 - 6.90 (m, 1H), 6.67 (s, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.00 - 2.93 (m, 2H), 2.69 - 2.64 (m, 3H), 2.43 (br s, 2H), 2.29 (br s, 6H), 2.10 (br s, 1H), 1.67 (s, 6H), 0.96 (br s, 2H), 0.77 (br s, 2H).
화합물 75d의 제조 절차:
CH2Cl2(5 mL) 중의 화합물 75c(160 mg, 0.30 mmol)의 용액에 빙수조 하의 화합물 3-클로로프로판오일 클로라이드(42 mg, 0.33 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0-5℃에서 30 min 동안 교반하고 그동안 약간의 용해되지 않은 오일이 침전되었다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3(10 mL)에 붓고 15-22℃에서 30 min 동안 교반한 후, CH2Cl2(15 mL Х 2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2 중 5% MeOH)로 정제하여 화합물 75d(150 mg, 81% 수율)를 밝은 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 0.751 min, MS(ESI) m/z = 615.2 [M+H]+.
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 10.31 (br s, 1H), 10.08 (s, 1H), 9.86 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.80 (br d, J=8.0 Hz, 1H), 7.65 (br s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.02 - 6.90 (m, 1H), 6.74 (s, 1H), 3.92 (t, J=6.4 Hz, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.80 (t, J=6.8 Hz, 1H), 2.98 (br s, 3H), 2.80 (t, J=6.8 Hz, 1H), 2.68 (s, 3H), 2.41 (br s, 8H), 1.74 (s, 6H), 1.03 - 0.94 (m, 2H), 0.82 (br d, J=6.0 Hz, 2H).
실시예 75의 제조 절차:
CH3CN(5 mL) 중의 화합물 75d(150 mg, 0.24 mmol)의 용액에 TEA(97 mg, 4.0 eq, 0.96 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 12h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 prep-HPLC[컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 55-85%B(A: 0.05% NH3H2O; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 75(51.6 mg, 43% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.867 min, MS(ESI) m/z = 579.0 [M+H]+.
HPLC : 10-80_ab_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 3.29 min.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 10.43 (br s, 2H), 9.98 (br s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.83 (br d, J=7.6 Hz, 1H), 7.63 (br s, 1H), 6.96 (d, J=11.6 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.44 - 6.28 (m, 2H), 6.05 (br s, 1H), 5.80 - 5.73 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.91 - 2.84 (m, 2H), 2.70 (s, 3H), 2.27 (s, 7H), 2.14 - 2.04 (m, 1H), 1.76 (s, 6H), 1.04 - 0.94 (m, 2H), 0.86 - 0.73 (m, 2H).
실시예 76/ 실시예 77
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(( R )-2- 히드록시부탄 -2-일) 페닐아미노 )피리미딘-2-일아미노)-2-((R)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
및
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(( S )-2- 히드록시부탄 -2-일) 페닐아미노 )피리미딘-2-일아미노)-2-((R)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00113
화합물 76b의 제조 절차:
DMF(50 mL) 중의 화합물 76a(5.0 g, 22.28 mmol)의 용액에 질소 하에 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II)(1.0 g, 1.42 mmol) 및 트리부틸(1-에톡시비닐)주석(8.85 g, 24.51mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 110℃에서 질소 하에 12h 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응 혼합물을 수성 HCl(6 M, 10 mL)로 처리하고 25℃에서 4h 동안 더 교반하였다. 혼합물을 물(300 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(100 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 KF의 용액(20%, 100 mL Х 2) 및 염수(100 mL)로 연속적으로 세척, 황산나트륨 상에서 건조 및 농축하여 흑색 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(PE 중 0 내지 5% 에틸 아세테이트)로 정제하여 화합물 76b(1.7 g, 40.6% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 2.030 min, MS(ESI) m/z = 187.9 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.74 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 7.20 (s, 2H), 6.92 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 2.48 (s, 3H).
화합물 76c의 제조 절차:
THF(20 mL) 중의 화합물 76b(1.7 g, 9.06 mmol)의 황색 용액에 EtMgBr(12 mL, 36.25 mmol)을 질소 하에 0℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 19-21℃에서 2h 동안 교반하였다. 혼합물을 NH4Cl(100 mL)의 포화 용액으로 켄칭하고 EtOAc(50 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 건조 및 진공에서 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(PE 중 0 내지 10% EtOAc(v/v))로 정제하여 화합물 76c(1.2 g, 60.8% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 0.758 min, MS(ESI) m/z = 199.8 [M-H2O+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 6.76 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 6.55 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 4.53 (brs, 2H), 1.95-1.80 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 0.79 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
화합물 76d의 제조 절차:
n-BuOH(15 mL) 중의 화합물 76c(1.0 g, 4.59 mmol)의 밝은 황색 용액에 DIEA(1.19 g, 9.19 mmol) 및 2,4-디클로로피리미딘(753 mg, 5.05 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 120℃에서 10h 동안 교반하였다. 혼합물을 진공에서 농축하고 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(PE 중 0 내지 20% EtOAc)로 정제하여 화합물 76d(780 mg, 51.5% 수율)를 밝은 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.872 min, MS(ESI) m/z = 330.0 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 9.18 (s, 1H), 8.05 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 2.36 (s, 1H), 1.81 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 1.56 (s, 3H), 0.76 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
화합물 76e의 제조 절차:
n-BuOH/TFA(5 mL/0.05 mL) 중의 화합물 76d(700 mg, 2.12 mmol)의 혼합물에 4-플루오로-2-메톡시-5-니트로아닐린(415 mg, 2.23 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 3h 동안 및 80℃에서 3h 동안 교반하였다. 혼합물을 25℃로 냉각하고 그동안 회색 고체가 침전되었으며, 고체를 흡인 여과로 수집하고 그 후 진공에서 건조하여 화합물 76e(680 mg, 62.9% 수율)를 회색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.755 min, MS(ESI) m/z = 480.1 [M+H]+.
1 H NMR: (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.28 (br s, 1H), 8.60-8.47 (m, 1H), 8.08 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.85-7.76 (m, 1H), 7.45-7.34 (m, 2H), 6.47 (br. s, 1H), 5.89 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 1.84-1.65 (m, 2H), 1.49 (s, 3H), 0.67 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
화합물 76f의 제조 절차:
DMSO(3 mL) 중의 화합물 76e(160 mg, 0.33 mmol)의 주황색 용액에 K2CO3(92 mg, 0.67 mmol) 및 (R)-N,N-디메틸피롤리딘-3-아민(46 mg, 0.40 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 3h 동안 교반하였다. 혼합물을 빙수(30 mL)에 붓고 주황색 고체가 침전되었으며, 이것을 흡인 여과로 분리하고 진공에서 건조시켜 화합물 76f(130 mg, 68.6% 수율)를 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.674 min, MS(ESI) m/z = 574.1 [M+H]+.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 8.98 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.88 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 7.98 (dd, J = 6.0, 1.6 Hz, 1H), 7.90-7.82 (m, 1H), 7.11 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.96 (dd, J = 10.8, 2.0 Hz, 1H), 6.22 (s, 1H), 6.06 (dd, J = 6.0, 3.6 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.52-3.42 (m, 1H), 3.30-3.23 (m, 1H), 3.12-3.02 (m, 2H), 2.78-2.69 (m, 1H), 2.22 (d, J = 3.2 Hz, 6H), 2.16-2.07 (m, 1H), 1.90-1.75 (m, 3H),1.55 (s, 3H), 0.78 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
화합물 76g의 제조 절차:
메탄올/물(5 mL/1 mL) 중의 화합물 76f(200 mg, 0.36 mmol)의 혼합물에 Zn(114 mg, 1.74 mmol) 및 NH4Cl(186 mg, 3.48 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90℃에서 1h 동안 교반하였다. 혼합물을 물(30 mL)에 붓고 디클로로메탄/메탄올(3/1, 20 mL Х 4)로 추출하였다. 조합된 유기층을 건조 및 농축하여 화합물 76g(220 mg, 95% 수율)를 흑색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.345 min, MS(ESI) m/z = 544.1 [M+H]+.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 8.87 (s, 1H), 8.06 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.94 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 5.95 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.15-3.01 (m, 2H), 2.99-2.87 (m, 2H), 2.84-2.74 (m, 1H), 2.20 (s, 6H), 2.11-1.99 (m, 1H), 1.88-1.77 (m, 3H), 1.54 (s, 3H), 0.78 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
화합물 76h의 제조 절차:
디클로로메탄(5 mL) 중의 화합물 76g(200 mg, 0.31 mmol)의 갈색 용액에 3-클로로프로이오닐 클로라이드(40 mg, 0.31 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5-10℃에서 얼음 배스 하에 1h 동안 교반하였다. 혼합물을 중탄산나트륨의 포화 용액(30 mL)으로 켄칭하고 디클로로메탄(10 mL Х 3)으로 추출하였다. 조합된 유기층을 황산나트륨 상에서 건조, 여과 및 진공에서 농축하여 화합물 76h(200 mg, 86% 수율)를 갈색 검으로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.715 min, MS(ESI) m/z = 634.5 [M+H]+.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 9.48 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 9.31 (br. s, 1H), 8.49 (br. s, 1H), 8.00 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.52-7.46 (m, 1H), 7.42-7.38 (m, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.01 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 6.67 (s, 1H), 6.24 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 3.84-3.75 (m, 5H), 3.12-2.92 (m, 4H), 2.88-2.76 (m, 3H), 2.26 (s, 6H), 2.16-2.06 (m, 2H), 1.93-1.85 (m, 2H), 1.59 (s, 3H), 1.19-1.17 (m, 3H).
화합물 76i의 제조 절차:
CH3CN(5 mL) 중의 화합물 76h(200 mg, 0.27 mmol)의 갈색 혼합물에 Et3N(81 mg, 0.80 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 2h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 prep-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150 * 25, 5um, 조건: 42%-62% B (A: 물/10mM NH4HCO3, B: CH3CN), 유속: 25 mL/min)로 정제하고 그 후 동결건조하여 화합물 76i(73.2 mg, 44.7% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. 이것을 SFC 분리에 의해 더 정제하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.595 min, MS(ESI) m/z = 597.9 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ml 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt = 4.12 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 9.53 (s, 1H), 9.46 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.00 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.47-7.35 (m, 2H), 7.01 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 6.69-6.48 (m, 2H), 6.35-6.34 (m, 2H), 5.70 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 5.42 (br s, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.28-2.84 (m, 5H), 2.44 (s, 6H), 2.23-2.09 (m, 2H), 2.06-1.99 (m, 1H), 1.95-1.88 (m, 1H), 1.58 (s, 3H), 0.77 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
키랄 SFC : IC-3_MeOH(DEA)_40_2.5ML에서 Rt = 6.233 min 및 6.903 min.
실시예 76 및 실시예 77의 제조 절차:
화합물 76i(73.2 mg)를 SFC(컬럼: DAICEL CHIRALPAK IC 250mm * 30mm 5umm, 조건: 40% B(A: CO2, B: 0.1% 암모니아/메탄올), 유속: 60 mL/min)에 의해 분리하여 실시예 76(13.5 mg, 18.4% 수율) 및 실시예 77(18.2 mg, 24.9% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 76:
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.588 min, MS(ESI) m/z = 598.0 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ml 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt = 4.15 min.
1 H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.55 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.00 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.01 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 6.66 (s, 1H), 6.42-6.32 (m, 1H), 6.30 (s, 1H), 6.26 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 5.69 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 5.35 (br s, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.13-2.95 (m, 4H), 2.93-2.82 (m, 1H), 2.29 (s, 6H), 2.18-2.09 (m, 1H), 2.06-1.99 (m, 1H), 1.98-1.88 (m, 2H), 1.58 (s, 3H), 0.78 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
키랄 SFC : IC-3_MeOH(DEA)_40_2.5ML에서 Rt = 6.292 min.
실시예 77:
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.599 min, MS(ESI) m/z = 597.9 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ml 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt = 4.14 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 9.56 (s, 1H), 9.44 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.00 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.01 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 6.65 (s, 1H), 6.48-6.35 (m, 1H), 6.30 (s, 1H), 6.26 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 5.69 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 5.38 (br s, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.14-3.04 (m, 2H), 3.03-2.96 (m, 2H), 2.95-2.88 (m, 1H), 2.32 (s, 6H), 2.19-2.10 (m, 1H), 2.07-2.00 (m, 1H), 1.98-1.88 (m, 2H), 1.58 (s, 3H), 0.77 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
키랄 SFC : IC-3_MeOH(DEA)_40_2.5ML에서 Rt = 6.980 min.
실시예 78
N-(5-(5- 클로로 -4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐 아미노)피리미딘-2-일아미노)-2-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00114
합성은 실시예 74와 유사한 실험 절차에 따라 실시예 78을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_3 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18, 2.1*30mm, 3um)에서 Rt= 1.336 min, MS(ESI) m/z=606.2 [M+H]+.
HPLC: 10-80_AB_1.2ml. met Ultimate C18 3*50mm 3um 에서 Rt =3.13 min.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 10.15 (br s, 1H), 9.66 (br s, 1H), 9.16 (s, 1H), 8.44 (br d, J= 7.4 Hz, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.87 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.43 - 6.17 (m, 2H), 5.69 (d, J=11.2 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.78-3.66 (m, 1H), 2.88 (br s, 2H), 2.70 (s, 3H), 2.33-2.21 (m, 8H), 1.60 (s, 6H).
실시예 79
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )피리미딘-2-일아미노)-2-((3S,4R)-3-(디메틸아미노)-4-플루오로피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00115
화합물 79a의 제조 절차:
Figure pct00116
메탄올(3 mL) 중의 화합물 79a1(120 mg, 0.59 mmol)의 혼합물에 탄소상 팔라듐(40 mg) 및 포름알데히드(0.3 mL, 37% 수용액)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 20℃에서 16시간 동안 수소 대기 하에 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과액을 진공에서 농축하여 화합물 79a2(120 mg, 88% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.10 min, MS(ESI) m/z = 233.2 [M+H]+.
DCM(1 mL) 중의 화합물 79a2(120 mg, 0.52 mmol)의 혼합물에 TFA(1 mL)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 20℃에서 30 min 동안 교반하였다. 혼합물을 그 후 진공에서 농축하고 물(2 mL)로 희석하였다. 혼합물을 동결건조하여 화합물 79a(110 mg, 86% 수율)를 백색 고체(TFA 염)로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.27 min, MS(ESI) m/z = 133.2 [M+H]+
화합물 79b의 제조 절차:
DMF(3 mL) 중의 화합물 79a(40 mg, 0.30 mmol)의 혼합물에 화합물 36b(100 mg, 0.21 mmol) 및 탄산칼륨(90 mg, 0.65 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 그 후 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 5%에서 50% CH3CN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 79b(95 mg, 77% 수율)를 주황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.64 min, MS(ESI) m/z = 578.1 [M+H]+.
화합물 79c의 제조 절차:
메탄올(5 mL) 중의 화합물 79b(95 mg, 0.16mmol)의 혼합물에 탄소상 팔라듐 (30 mg)을 첨가하고, 생성된 혼합물은 20℃에서 3시간 동안 수소 대기 하에 교반하였다. 혼합물을 그 후 여과하고 여과액을 진공에서 농축하여 화합물 79c(75 mg, 83% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.99 min, MS(ESI) m/z = 548.2 [M+H]+.
실시예 79의 제조 절차:
NMP(2 mL) 중의 화합물 79c(70 mg, 0.13 mmol)의 혼합물에 아크릴로일 클로라이드(12 mg, 0.13mmol) 및 DIEA(40 mg, 0.31 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 생성된 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피, 물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5%에서 60% CH3CN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 실시예 79(22 mg, 29% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.31 min, MS(ESI) m/z = 602.3 [M+H]+.
1 H NMR: (500 MHz, DMSO-d 6) δ 1.49 (s, 6 H) 2.24 (s, 6 H) 2.53 - 2.65 (m, 1 H) 3.21 - 3.33 (m, 2 H) 3.41 - 3.45 (m, 1 H) 3.64 - 3.78 (m, 1 H) 3.80 (s, 3H) 5.17 - 5.35 (m, 1 H) 5.68 (dd, J=10.25, 1.73 Hz, 1 H) 6.05 (d, J=5.67 Hz, 1 H) 6.12 - 6.23 (m, 2 H) 6.39 - 6.55 (m, 2 H) 7.29 (d, J=11.03 Hz, 1 H) 7.47 (br s, 1 H) 7.82 (br s, 1 H) 7.95 (d, J=5.67 Hz, 1 H) 8.14 (br d, J=7.25 Hz, 1 H) 9.34 (s, 1 H) 9.57 (s, 1 H).
실시예 80
(R)-N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )피리미딘-2-일아미노)-4-메톡시-2-(3-(메틸아미노)피롤리딘-1-일)페닐)아크릴아미드 TFA 염
Figure pct00117
화합물 80a의 제조 절차:
DMSO(3 mL) 중의 화합물 36b(300 mg, 0.644 mmol) 및 K2CO3(178 mg, 1.29 mmol)의 용액에 화합물 73a(155 mg, 0.644 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 85℃에서 2 h 동안 교반하고 그동안 색상은 담황색에서 진한 황색으로 변하였다. 반응 혼합물을 교반하면서 빙수(20 mL)에 붓고 황색 고체가 침전되었다. 침전된 고체를 여과로 수집하고 그 후 CH2Cl2(50 mL)에 용해, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 80a(380 mg, 71% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.800 min, MS(ESI) m/z = 646.1 [M+H]+.
화합물 80b의 제조 절차:
EtOAc(5 mL) 중의 화합물 80a(350 mg, 0.542 mmol)의 용액에 Pd/C(200 mg, 10% 습식)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 H2로 3회 퍼지 및 탈기한 후, 13-20℃에서 H2 벌룬(15 Psi) 하에 2 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 화합물 80b(300 mg, 70% 수율)를 밝은 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.758 min, MS(ESI) m/z = 616.2 [M+H]+.
화합물 80c의 제조 절차:
CH2Cl2(5 mL) 중의 화합물 80b(300 mg, 0.377 mmol)의 용액에 아크릴로일 클로라이드(47.9 mg, 0.377 mmol)를 빙수조 하에 적가하였다. 생성된 혼합물을 0-5℃에서 30 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3(5 mL)에 붓고 12-17℃에서 2 h 동안 교반한 후, CH2Cl2(5 mL Х 2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2 중의 8% MeOH)로 정제하여 화합물 80c(200 mg, 60% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(Agilent Pursit 5 C18 20*2.0 mm)에서 Rt = 0.825 min, MS(ESI) m/z = 670.5 [M+H]+.
1 H NMR:(400MHz, CDCl3) δ 9.68 - 9.56 (m, 1H), 9.37 (s, 1H), 8.49 (br s, 1H), 8.01 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.37-7.27 (m, 1H), 7.08 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 6.64 (s, 1H), 6.32 - 6.26 (m, 2H), 5.74 - 5.65 (m, 1H), 4.68 (br s, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.20-3.12 (m, 2H), 2.97 - 2.90 (m, 2H), 2.87 (s, 3H), 2.27 - 2.18 (m, 1H), 1.97 - 1.89 (m, 1H), 1.63 (s, 8H), 1.40 (s, 9H).
실시예 80의 제조 절차:
CH2Cl2(10 mL) 중의 화합물 80c(200 mg, 2.12 mmol)의 용액에 TFA(1.57 g, 21.2 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 18-22℃에서 6 h 동안 교반하였다. 혼합물을 진공에서 농축하여 조 생성물을 갈색 오일로서 수득하고, 이것을 분취 HPLC (기기: BH 컬럼: Gemini 150*25 5um. 이동상 A: 물 0.05% 암모니아 히드록시드 v/v 이동상 B: DMF 유속: 25 ml/min 구배 시간: 7 min 프로파일 설명: 42%-72%)로 정제하여 TFA 염 형태의 실시예 80(90 mg, 78% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.455 min, MS(ESI) m/z = 570.1 [M+H]+.
HPLC : 10-80_ab_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 2.15 min.
1 H NMR:(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.53 (br s, 1H), 9.86 (br s, 1H), 9.14 (br s, 1H), 8.90 (br s, 2H), 7.90 (br s, 2H), 7.68 (br s, 1H), 7.40 (br s, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.55 (dd, J= 10.4 Hz, 17.2 Hz, 1H), 6.43 (br s, 1H), 6.28-6.01 (m, 2H), 5.76 - 5.70 (m, 1H), 3.82-3.77 (m, 4H), 3.39-3.25 (m, 3H), 3.10 - 3.01 (m, 1H), 2.68-2.62 (m, 3H), 2.37 - 2.28 (m, 1H), 2.09-1.98 (m, 1H), 1.47 (s, 6H).
실시예 81
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-5-메톡시피리미딘-2-일아미노)-2-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00118
화합물 81b의 제조 절차:
NMP(6 mL) 중의 화합물 81a(200 mg, 1.1mmol), 화합물 11b(240 mg, 1.2 mmol) 및 DIEA(434 mg, 3.4 mmol)의 용액을 밀폐하고 120℃에서 2 h 동안 가열하였다. 반응물을 물(100 mL)로 희석하고 EA(20 mL X 5)로 추출하였다. 조합된 유기물을 염수로 세척, 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과하고 여과액을 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피, 페트롤륨 에테르 중 30%에서 100% EtOAc 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 81b(50 mg, 13% 수율)를 밝은 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.53 min, MS(ESI) m/z = 346.1 [M+H]+.
1 H NMR: (500 MHz, DMSO-d 6) δ 1.5 (s, 6 H) 3.9 (s, 3 H) 6.4 (s, 1 H) 7.3 (d, J=11.0 Hz, 1 H) 8.0 (s, 1 H) 8.5 (d, J=7.3 Hz, 1 H) 10.8 (s, 1 H).
화합물 81c의 제조 절차:
프로판-2-올(2.0 mL) 중의 화합물 81b(47 mg, 0.14 mmol), 4-플루오로-2-메톡시-5-니트로아닐린(28 mg, 0.15 mmol), 및 TFA(15 mg, 0.136 mmol)의 용액을 밀폐하고 100℃에서 48 h 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피, DCM 중의 0%에서 10% MeOH 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 81c(67 mg, 79% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.20 min, MS(ESI) m/z = 496.1 [M+H]+.
화합물 81d의 제조 절차:
NMP(0.6 mL) 중의 화합물 81c(67 mg, 0.14 mmol), N 1 ,N 1 ,N 2 -트리메틸에탄-1,2-디아민(28 mg, 0.27 mmol) 및 DIEA(52 mg, 0.41 mmol)의 용액을 80℃에서 2 h 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물(50 mL)로 희석하고 EA(10 mL X 5)로 추출하였다. 조합된 유기물을 염수로 세척, 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과하고 여과액을 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피, DCM 중의 0%에서 10% MeOH 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 81d(30 mg, 38% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.46 min, MS(ESI) m/z = 578.1 [M+H]+.
화합물 81e의 제조 절차:
탄소상 팔라듐(11 mg)을 MeOH(5 mL) 중의 화합물 81d(30 mg, 0.050 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 20℃에서 30 min 동안 수소 대기 하에 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과하고 여과액을 감압 하에 증발시켜 화합물 81e(22 mg, 조 물질)를 밝은 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.22 min, MS(ESI) m/z = 548.2 [M+H]+.
실시예 81의 제조 절차:
NMP(0.8 mL) 중의 화합물 81e(22 mg, 0.04 mmol) 및 DIEA(16 mg, 0.12 mmol)의 용액에 NMP(0.2 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(21 mg, 0.23 mmol)의 용액을 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30 min 동안 교반하였다. 용액을 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% 암모니아) 중의 0%에서 80% MeCN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 동결건조로 건조하여 실시예 81(3.8 mg, 16% 수율)을 황백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.34 min, MS(ESI) m/z = 602.1 [M+H]+.
1 H NMR: (500 MHz, DMSO-d 6) δ 1.5 (s, 6 H) 2.2 (s, 6 H) 2.3 (br t, J=5.7 Hz, 2 H) 2.7 (s, 3 H) 2.8 (br t, J=5.5 Hz, 2 H) 3.8 (s, 3 H) 3.8 (s, 3 H) 5.7 - 5.7 (m, 1 H) 6.1 (dd, J=16.9, 1.7 Hz, 1 H) 6.2 (s, 1 H) 6.3 (dd, J=16.9, 10.2 Hz, 1 H) 7.0 (s, 1 H) 7.2 (d, J=11.0 Hz, 1 H) 7.6 (s, 1 H) 7.8 (s, 1 H) 8.6 (d, J=7.6 Hz, 1 H) 8.7 (s, 1 H) 10.0 (s, 1 H) 10.4 (s, 1 H).
실시예 82
(R)-N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )피리미딘-2-일아미노)-2-(2-((디메틸아미노)메틸)-4,4-디플루오로피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00119
화합물 82a의 제조 절차:
Figure pct00120
DCM(5mL) 중의 화합물 82a1(250 mg, 1.054 mmol) 및 TEA(213 mg, 2.108 mmol)의 교반 용액에 얼음/물 배스에 의해 0℃에서 MsCl(127 mg, 1.106 mmol, 1.05 equiv.)을 2 min에 걸쳐 적가하였다. 그 후 반응 혼합물을 이 온도에서 1 h 동안 교반하였다. 그 후 반응 혼합물을 50 ml의 포화 NaHCO3 용액으로 희석, DCM(20 mL X 3)으로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(60 mL X 1)로 세척, 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과 및 감압 하에 증발시켜 화합물 82a2(330 mg, 조 물질)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.21 min, MS(ESI) m/z = 216.1 [M-Boc]+.
THF 중의 화합물 82a2(330 mg, 1.05 mmol)의 용액에 40% Wt 디메틸아민 물 용액(3 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밀폐하고 80℃에서 16 h 동안 가열하였다. 반응물을 포화 NaHCO3 용액(50 mL)으로 희석, EA(20 mL X 3)로 추출, 염수(50 mL X 1)로 세척, 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과 및 감압 하에 증발시켜 화합물 82a3(275 mg, 조 물질)을 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.64 min, MS(ESI) m/z = 208.7 [M-55]+.
DCM(3 mL) 중의 화합물 82a3(275 mg, 1.04 mmol)의 교반 용액을 얼음/물 배스에 의해 0℃로 냉각하였다. 그 후 TFA를 반응 혼합물에 적가하였다. 생성된 혼합물을 교반하고 실온으로 2 h 동안 서서히 가온하였다. 완료 후, 반응 용액을 감압 하에 농축하여 화합물 82a(270 mg, 조 물질)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.25 min, MS(ESI) m/z = 165.1 [M+1]+.
화합물 82b의 제조 절차:
NMP(2.5 mL) 중의 화합물 36b(152 mg, 0.270 mmol), 화합물 82a(106 mg, 0.404 mmol) 및 DIPEA(105 mg, 0.810 mmol)의 용액을 밀폐하고 100℃에서 5일 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 100 mL의 물로 희석, EA(20 mL X 5)로 추출하고, 조합된 유기층을 염수(100 mL X 1)로 세척, 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과 및 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 플래시 컬럼(MeOH/DCM = 0%-10%)으로 정제하여 화합물 82b(84 mg, 51% 수율)를 밝은 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.63 min, MS(ESI) m/z = 610.1 [M+H]+.
화합물 82c의 제조 절차:
10%의 Pd/C(29 mg, 0.028 mmol)를 질소 하에 7 mL의 MeOH 중의 화합물 82b(84 mg, 0.138 mmol)의 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 수소 대기 하에 30 min 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 생성된 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 메탄올로 세척하였다. 여과액을 감압 하에 증발시켜 화합물 82c(80 mg, 조 물질)를 밝은 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.51 min, MS(ESI) m/z = 580.2 [M+H]+.
실시예 82의 제조 절차:
NMP(2 mL) 중의 화합물 82c(54 mg, 0.093 mmol) 및 DIPEA(36 mg, 0.279 mmol)의 용액을 냉각하고 얼음/물 배스에 의해 0℃에서 교반하였다. 그 후 NMP(0.2 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(8.4 mg, 0.093, 1.00 equiv.)의 용액을 반응물에 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30 min 동안 교반하였다. 그 후 용액을 C18/40 G(MeCN/물 = 0%-80%, 물 중의 0.02% 수산화암모늄 용액)로 정제 및 동결건조하여 실시예 82(8.50 mg, 14% 수율)를 황백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.56 min, MS(ESI) m/z = 634.2 [M+H]+.
HPLC : Rt = 10.203 min.(15min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Agilent Eclipse Plus C18, 5um, 4.6*150mm, 30℃).
1 H NMR(500 MHz, DMSO-d 6) δ 1.4 (s, 6 H) 2.0 (s, 6 H) 2.1 - 2.4 (m, 4 H) 2.5 - 2.7 (m, 1 H) 3.6 - 3.7 (m, 1 H) 3.7 (s, 3 H) 3.8 (br d, J=6.3 Hz, 1 H) 5.6 (br d, J=10.1 Hz, 1 H) 6.0 - 6.1 (m, 3 H) 6.5 (br dd, J=16.7, 10.4 Hz, 1 H) 6.8 (s, 1 H) 7.2 (br d, J=11.0 Hz, 1 H) 7.8 (br s, 1 H) 7.9 (br d, J=5.7 Hz, 1 H) 8.1 (br d, J=6.9 Hz, 1 H) 8.2 (s, 1 H) 9.2 (s, 1 H) 9.5 (br s, 1 H).
실시예 83
(R)-N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )피리미딘-2-일아미노)-2-(7-(디메틸아미노)-5-아자스피로[2.4]헵탄-5-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드 포름산 염
Figure pct00121
화합물 83b의 제조 절차:
NMP(3 mL) 중의 화합물 36b(120 mg, 0.26 mmol)의 혼합물에 화합물 83a(55 mg, 0.26 mmol) 및 DIEA(74 mg, 0.57 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 5%에서 70% CH3CN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 83b(120 mg, 70% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.19 min, MS(ESI) m/z = 658.1 [M+H]+.
화합물 83c의 제조 절차:
DCM(1 mL) 중의 화합물 83b(120 mg, 0.18 mmol)의 혼합물에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 30 min 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 탄산 나트륨 수용액(50 mL) 및 EtOAc(50 mL)로 희석하였다. 유기층을 염수로 세척, 황산나트륨 상에서 건조, 진공에서 농축하여 화합물 83c(96 mg, 94% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.34 min, MS(ESI) m/z = 558.1 [M+H]+.
화합물 83d의 제조 절차:
메탄올(3 mL) 중의 화합물 83c(95 mg, 0.17 mmol)의 혼합물에 포름알데히드 (1 mL) 및 NaBH3CN(54 mg, 0.85 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 5%에서 70% CH3CN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 83d(82 mg, 82% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.55 min, MS(ESI) m/z = 586.0 [M+H]+.
화합물 83e의 제조 절차:
메탄올(3 mL) 중의 화합물 83d(81 mg, 0.15mmol)의 혼합물에 탄소상 팔라듐 (20 mg)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 수소 대기하에 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그 후 혼합물을 여과하고 여과액은 진공에서 농축하여 화합물 83e(67 mg, 87% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.44 min, MS(ESI) m/z = 556.1 [M+H]+.
실시예 83의 제조 절차:
NMP(2 mL) 중의 화합물 83e(67 mg, 0.12 mmol)의 혼합물에 3-클로로프로피오닐 클로라이드(17 mg, 0.13mmol) 및 DIEA(19 mg, 0.15 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 생성된 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. MeCN(2 mL) 및 TEA(0.5 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 가열하였다. 혼합물을 물(30 mL) 및 EA(30 mL)로 희석하였다. 유기층을 농축하고, 잔류물은 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 5%에서 60% CH3CN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 포름산 형태의 실시예 83(38 mg, 52% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.74 min, MS(ESI) m/z = 610.2 [M+H]+.
1 H NMR(500 MHz, DMSO-d 6) δ 0.53 - 0.59 (m, 2 H) 0.66 - 0.72 (m, 1 H) 0.91 - 0.96 (m, 1 H) 1.49 (s, 6 H) 2.23 (s, 6 H) 2.77 (br dd, J=5.36, 2.84 Hz, 1H) 2.80 (d, J=8.83 Hz, 1 H) 3.35 - 3.37 (m, 3 H) 3.79 (s, 3 H) 5.63 - 5.73 (m, 1 H) 6.06 (d, J=5.67 Hz, 1 H) 6.16 (dd, J=17.18, 2.05 Hz, 1 H) 6.48 (dd, J=17.02, 10.40 Hz, 1 H) 6.56 (s, 1 H) 7.29 (d, J=11.03 Hz, 1 H) 7.65 (s, 1 H) 7.84 (br s, 1 H) 7.96 (d, J=5.67 Hz, 1 H) 8.14 (d, J=7.25 Hz, 1 H) 8.21 (s, 1 H) 9.21 (s, 1 H) 9.58 (s, 1 H).
실시예 84
(R)-N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일아미노)-2-(3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00122
화합물 84b의 제조 절차:
i-PrOH(20 mL) 중의 화합물 11b(1000 mg, 4.91 mmol) 및 DIEA(1269 mg, 9.82 mmol)의 용액에 화합물 84a(1065 mg, 4.91 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 2 h 동안 교반하였다. 반응물을 MeOH/H2O(10% 내지 100% 의 물 중 MeOH)로 용리하는 플래시 역상 C-18 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 화합물 84b(300 mg, 16% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.944 min, MS(ESI) m/z = 366.1[M-OH]+.
화합물 84c의 제조 절차:
TFA(0.05 mL)와 n-BuOH(5 mL) 중의 화합물 84b(300 mg, 0.78 mmol)의 용액에 4-플루오로-2-메톡시-5-니트로아닐린(160 mg, 0.86 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 18 h 동안 교반하였다. 반응물을 빙수(50 mL)에 붓고 황색 고체가 침전되었다. 고체를 여과하고 CH2Cl2(60 mL)로 용해시킨 후, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 84c(320 mg, 77% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.931 min, MS(ESI) m/z = 534.1 [M+H]+.
화합물 84d의 제조 절차:
DMSO(4 mL) 중의 화합물 84c(300 mg, 0.56 mmol)의 용액에 (R)-N,N-디메틸피롤리딘-3-아민(64 mg, 0.56 mmol) 및 K2CO3(233 mg, 1.69 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 18시간 동안 교반하였다. 반응물을 빙수(50 mL)에 붓고 황색 고체가 침전되었다. 황색 고체를 여과하고 CH2Cl2(60 mL)로 용해시킨 후, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 84d(280 mg, 80% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5MIN_220&254 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 0.773 min, MS(ESI) m/z = 628.4 [M+H]+.
화합물 84e의 제조 절차:
MeOH(5 mL) 중의 화합물 84d(280 mg, 0.45mmol)의 용액에 Pd/C(28 mg)를 N2 하에 첨가하였다. 흑색 혼합물을 6-13℃에서 H2 벌룬(15Psi) 하에 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 화합물 84e(250 mg, 95.4% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_3MIN_220&254 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 0.720 min, MS(ESI) m/z = 598.1 [M+H]+.
화합물 84f의 제조 절차:
CH2Cl2(10 mL) 중의 화합물 84e(250 mg, 1.0 eq, 0.42 mmol)의 용액에 빙수조 중의 3-클로로프로판오일 클로라이드(53 mg, 0.42 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0-5℃에서 45 min 동안 교반하고 그동안 색상은 흑색에서 갈색으로 변하였다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3(5 mL)에 붓고, CH2Cl2(15 mL Х 2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 물(10 mL Х 2) 및 염수(10 mL)로 연속적으로 세척, 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 84f(200 mg, 69% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5MIN_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.736 min, MS(ESI) m/z = 688.1 [M+H]+.
실시예 84의 제조 절차:
CH3CN(10 mL) 중의 화합물 84f(200 mg, 0.29 mmol)의 용액에 Et3N(118 mg, 1.16 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 12h 동안 교반하였다. 반응물을 prep-HPLC[컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 42-72%B(A: 0.05% 암모니아; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 84(85.7 mg, 45.3% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 0-60AB_4min_220&254.lcm; 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt =2.312 min, MS(ESI) m/z = 652.0 [M+H]+.
HPLC : 10-80AB_1.2ml.met; 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 3.32 min.
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 9.38 (br s, 1H), 8.75 (br s, 1H), 8.36 (br s, 1H), 8.15 (br s, 1H), 7.96 (br s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.04 (d, J=10.6 Hz, 1H), 6.70 (s, 1H), 6.33 - 6.20 (m, 2H), 5.75 - 5.68 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.21 - 3.06 (m, 4H), 2.93 - 2.82 (m, 1H), 2.72 (br s, 1H), 2.30 (s, 6H), 2.23 - 2.12 (m, 1H), 1.98 - 1.87 (m, 1H), 1.68 (br d, J=4.0 Hz, 6H).
실시예 85
( R )- N -(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-5-시아노피리미딘-2-일아미노)-2-(3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00123
화합물 85b의 제조 절차:
i-PrOH(5 mL) 중의 화합물 11b(500 mg, 2.46 mmol)의 용액에 DIEA(635 mg, 4.91 mmol) 및 화합물 85a(470mg, 2.70 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 1 h 동안 교반하였다. 혼합물을 물(20 mL)에 붓고 EtOAc(100 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4 상에서 건조, 여과 및 진공에서 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 prep-HPLC[컬럼 Boston Green ODS 150*30 5um, 조건 65% B(A, 물/0.1%TFA, B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 포화 NaHCO3 를 사용하여 분획의 pH를 7-8로 조정하고 EtOAc(20 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(50 mL)로 세척, Na2SO4 상에서 건조, 여과 및 진공에서 농축하여 원하는 화합물 85b(280 mg, 33% 수율) 및 그의 레지오이성질체(regioisomer)를 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_7.0 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 3.661, MS(ESI) m/z = 322.8 [M+H-18]+.
1 H NMR (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 11.22 (br s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.23 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.44 (d, J=11.2 Hz, 1H), 6.63 (br s, 1H), 1.53 (s, 6H).
화합물 85c의 제조 절차:
n-BuOH(3.0 mL) 중의 화합물 85b(280 mg, 0.82 mmol), 4-플루오로-2-메톡시-5-니트로아닐린(168.0 mg, 0.90 mmol) 및 TFA(300 uL)의 혼합물을 35℃에서 15 hr 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여과된 케이크를 n-BuOH(3 mL)로 세척한 후, 진공에서 건조하여 원하는 생성물 85c(270 mg, 67.2% 수율)를 회색 고체로서 수득하였다. 이 단계에서 2D-NMR(HMBC 등)에 의해 정확한 구조가 확인되었다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.899 min, MS(ESI) m/z = 491.1 [M+H]+.
1 H NMR : (400MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.81 (s, 1H), 9.47 (br s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.31 (br d, J=6.4 Hz, 1H), 8.02 (br s, 1H), 7.39 (d, J=13.6 Hz, 1H), 7.31 (br d, J=11.2 Hz, 1H), 7.28 - 7.14 (m, 1H), 6.56 (br s, 1H), 3.89 (s, 3H), 1.52 (s, 6H).
화합물 85d의 제조 절차:
DMSO(3 mL) 중의 화합물 85c(240 mg, 0.489 mmol), (R)-N,N-디메틸피롤리딘-3-아민(66.3 mg, 0.586 mmol) 및 K2CO3(135.0 mg, 0.978 mmol)의 혼합물을 80℃에서 20 h 동안 교반하였다(갈색 현탁액). 반응물을 H2O(10 mL)로 켄칭, EtOAc(10 mL)로 희석, 3 h 동안 교반 및 그 후 여과하고, 여과 케이크는 H2O(5 ml)로 세척 및 그 후 고진공에서 건조하여 표제 화합물 85d(190 mg, 66.4% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.760 min, MS(ESI) m/z = 607.2 [M+Na]+.
화합물 85e의 제조 절차:
MeOH/H2O(5.0 mL/2.0 mL) 중의 화합물 85d(140 mg, 0.239 mmol), Zn(77.8 mg, 1.196 mmol) 및 NH4Cl(64.5 mg, 1.196 mmol)의 혼합물을 80℃에서 2.0 hr 동안 교반하였다(백색 현탁액). 반응물을 여과하고 여과된 케이크를 CH2Cl2(10 mL) 및 H2O(10 mL)로 세척하고, 여과액을 CH2Cl2(20 mL Х3)로 추출하며, 조합된 유기층은 염수(20 mL)로 세척, Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 85e(120 mg, 90.9% 수율)를 회색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP-18e 25-2mm)에서 Rt = 0.712 min, MS(ESI) m/z = 555.1 [M+H]+.
실시예 85의 제조 절차:
CH2Cl2(3 mL) 중의 화합물 85e(120 mg, 0.217 mmol) 및 3-클로로프로판오일 클로라이드(34.1mg, 0.238 mmol)의 혼합물을 0℃에서 1 hr 동안 교반하였다(갈색 현탁액). 반응물을 CH3CN(5 ml)으로 희석하고, 생성된 혼합물을 진공에서 4 mL 부피로 농축하고, 잔류물에 TEA(218 mg, 2.16 mmol)를 첨가하며 생성된 혼합물을 100℃에서 4 hr 동안 교반하였다(흑색 현탁액). 반응물을 직접 prep-HPLC[Waters Xbridge 150*25 5um 조건: 42-72% B(A: 0.05% 암모니아 히드록시드 B: CH3CN); 유속: 25 mL/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 85(59.0 mg, 32.6% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 0-60AB_4.0 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 2.482 min, MS(ESI) m/z = 609.1 [M+H]+.
HPLC : 0-60_CD_1.2ML 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt = 5.13 min.
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 10.08 (br s, 1H), 9.30-8.03 (m, 2H), 8.01-7.71 (m, 1H), 7.48 (br s, 1H), 6.96 (d, J=10.4 Hz, 1H), 6.64 (s, 1H), 6.21 (br s, 2H), 5.67 (br d, J=6.0 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.70 - 3.36 (m, 1H), 3.25 - 2.98 (m, 4H), 2.82 (q, J=7.2 Hz, 1H), 2.24 (s, 6H), 2.17 - 2.06 (m, 1H), 1.88 - 1.82 (m, 1H), 1.62 (br s, 6H).
실시예 86
( S )- N -(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )피리미딘-2-일아미노)-2-(3-((디메틸아미노)메틸)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00124
화합물 86a의 제조 절차:
Figure pct00125
CH2Cl2(10 mL) 중의 화합물 86a1(1 g, 4.98 mmol) 및 TEA(1.0 g, 9.96 mmol)의 용액에 빙수조 중의 MsCl(800 mg, 6.98 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0-5℃에서 30 min 동안 교반하였다. 반응 용액을 염수(5 mL)에 붓고, CH2Cl2 (10 mLХ2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 물(10 mLХ2) 및 염수(10 mL)로 연속적으로 세척한 후, Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 화합물 86a2(1.2 g, 86% 수율)를 황색 오일로서 수득하고, 이것을 직접 추가의 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다.
DMF(10 mL) 중의 화합물 86a2(1.2 g, 4.30 mmol) 및 Me2NH.HCl(1.75 g, 21.5 mmol) 및 K2CO3(4.16 g, 30.1 mmol)의 혼합물을 100℃에서 5h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc(40 mL)로 희석하고 30 min 동안 더 교반하고, 여과하며 여과 케이크는 EtOAc(20 mL)로 세척하였다. 여과액을 진공에서 농축하여 조 생성물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2 중 0-10% MeOH)로 정제하여 화합물 86a3(800 mg, 66.7% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다.
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 3.52 - 3.42 (m, 1H), 3.41 - 3.31 (m, 1H), 3.28 - 3.16 (m, 1H), 2.94 - 2.85 (m, 1H), 2.34 - 2.13 (m, 9H), 1.95 - 1.85 (m, 1H), 1.59 - 1.44 (m, 1H), 1.38 (s, 9H).
CH2Cl2(10 mL) 중의 86a3(800 mg, 3.51 mmol)의 용액에 TFA(2.6 g, 35.1 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 6-13℃에서 6 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 TFA 염의 표제 화합물 86a(400 mg, 80.2% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다.
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 3.70 (br s, 1H), 3.51 (br s, 1H), 3.34 - 3.26 (m, 1H), 3.26 - 3.22 (m, 1H), 3.00-2.92 (m, 7H), 2.83-2.72 (m, 1H), 2.66 - 2.54 (m, 1H), 2.16 (br s, 1H), 1.73 (br s, 1H).
화합물 86b의 제조 절차:
DMSO(3 mL) 중의 화합물 36b(200 mg, 0.429 mmol) 및 K2CO3(118 mg, 0.858 mmol)의 용액에 화합물 86a(65.9 mg, 0.515 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 85℃에서 2 h 동안 교반하고 그동안 색상은 담황색에서 진한 황색으로 변하였다. 반응 혼합물을 교반하면서 빙수(20 mL)에 붓고 황색 고체가 침전되었다. 침전된 고체를 여과로 수집한 후 CH2Cl2(50 mL)에 용해, 무수 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 화합물 86b(200 mg, 70.6% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(Agilent Pursit 5 C18 20*2.0mm)에서 Rt = 0.691 min, MS(ESI) m/z = 574.5 [M+H]+.
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 8.97 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 8.09 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.92 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.10 (d, J= 10.4 Hz, 1H), 6.33 (s, 1H), 6.17 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.48 - 3.41 (m, 1H), 3.32-3.27 (m, 1H), 3.14 - 3.07 (m, 2H), 2.53 - 2.43 (m, 1H), 2.38 - 2.33 (m, 2H), 2.27 - 2.23 (m, 7H), 2.16 - 2.10 (m, 1H), 1.67 (s, 6H).
화합물 86c의 제조 절차:
EtOAc(5 mL) 중의 화합물 86b(200 mg, 0.348 mmol)의 용액에 Pd/C(50 mg, 10% 습식)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 H2로 3회 퍼지 및 탈기 시킨 후, H2 벌룬(15 Psi) 하에 2 h 동안 13-20℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 화합물 86c(150 mg, 72.8% 수율)를 밝은 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(Agilent Pursit 5 C18 20*2.0mm)에서 Rt = 0.667 min, MS(ESI) m/z = 544.5 [M+H]+.
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 8.08 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 7.95 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.00 (d, J= 10.4 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 5.97 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.52 - 3.43 (m, 1H), 3.40 - 3.31 (m, 1H), 3.26 - 3.16 (m, 1H), 3.08 - 3.01 (m, 2H), 2.89 (m, 1H), 2.75 (m, 1H), 2.43 (s, 1H), 2.31-2.26 (s, 5H), 2.18-2.13 (s, 3H), 1.95-1.92 (m, 1H), 1.58 (s, 6H).
실시예 86의 제조 절차:
CH2Cl2(150 mL) 중의 화합물 86c(150 mg, 0.276 mmol)의 용액에 빙수조 중의 아크릴로일 클로라이드(150 mg, 0.276 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0-5℃에서 30 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3(5 mL)에 붓고 12-17℃에서 2 h 동안 교반 후, CH2Cl2(15 mL Х 2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4 상에서 건조 및 감압 하에 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH2Cl2중 8% MeOH)로 정제하여 실시예 86(24.5 mg, 15.7% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.547 min, MS(ESI) m/z = 598.1 [M+H]+.
HPLC : 10-80_ab_1.2ML 크로마토그래피(Ultimate C18 3*50mm 3um)에서 Rt = 2.26 min.
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 9.52 - 9.33 (m, 2H), 8.39 (s, 1H), 7.99 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.52-7.41 (m, 2H), 7.07 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 6.63 (s, 1H), 6.37-6.24 (m, 3H), 5.75 - 5.67 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.18 - 3.11 (m, 1H), 3.05 - 2.94 (m, 2H), 2.91 - 2.85 (m, 1H), 2.81 - 2.59 (m, 3H), 2.51 (s, 6H), 2.22-2.14 (m, 1H), 1.82-1.74 (m, 1H), 1.64 (s, 6H).
실시예 87
( S )-N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )피리미딘-2-일아미노)-2-(3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00126
합성은 실시예 76과 유사한 실험 절차에 따라 실시예 87을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.446 min, MS(ESI) m/z =584.1 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2ML 크로마토그래피(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt = 3.74 min.
1 H NMR: (400MHz, CDCl3) δ 9.66 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.09 (d, J=5.6 Hz, 1H), 7.52 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.15 (d, J=10.4 Hz, 1H), 6.76 (s, 1H), 6.41-6.29 (m, 3H), 5.81-5.75 (m, 1H), 5.64 (br s, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.16-3.01 (m, 4H), 2.89 (q, J=6.8 Hz, 1H), 2.30 (s, 6H), 2.23-2.12 (m, 1H), 2.00-1.87 (m, 1H), 1.73 (s, 6H).
실시예 88
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )피리미딘-2-일아미노)-2-((2R,4R)-2-((디메틸아미노)메틸)-4-플루오로피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드 포름산 염
Figure pct00127
화합물 88a의 제조 절차:
Figure pct00128
DCM(5 mL) 중의 화합물 88a1(440 mg, 2.0 mmol) 및 TEA(404 mg, 4.0 mmol)의 교반 용액에 얼음/물 배스에 의해 0℃에서 MsCl(276 mg, 2.4 mmol)을 적가하였다. 그 후 반응 혼합물을 0℃에서 1 h 동안 교반하였다. 그 후 반응 혼합물을 50 ml의 포화 NaHCO3 용액으로 희석, DCM(30 mL X 3)으로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(60 mL X 2)로 세척, 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과 및 감압 하에 증발시켜 화합물 88a2(500 mg, 84% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.32 min, MS(ESI) m/z = 198.1[M-Boc]+.
THF 중의 화합물 88a2(500 mg, 1.7 mmol)의 용액에 디메틸아민 수용액(3 mL, 40% Wt)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밀폐하고 90℃에서 16 h 동안 가열하였다. 반응물을 포화 NaHCO3 용액(50 mL)으로 희석, EA(20 mL X 3)로 추출, 염수(50 mL X 1)로 세척, 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과 및 감압 하에 증발시켜 화합물 88a3(320mg, 77% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.18 min, MS(ESI) m/z = 247. 2 [M+H]+.
DCM(5 mL) 중의 화합물 88a3(320 mg, 1.3 mmol)의 교반 용액에 TFA(2 mL)를 0℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 2 h 동안 교반 후, 반응 용액을 감압 하에 증발시켜 화합물 88a(180mg, 95% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.25 min, MS(ESI) m/z = 147. 2 [M+H]+.
화합물 88b의 제조 절차:
DMSO(3.0 mL) 중의 화합물 36b(225 mg, 0.48 mmol), 화합물 88a(106 mg, 0.73 mmol), 및 K2CO3(200 mg, 1.4 mmol)의 혼합물을 밀폐하고 85℃에서 24 h 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 100 mL의 물로 희석하고 EA(20 mL X 5)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(100 mL X 1)로 세척, 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과 및 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 플래시 실리카 크로마토그래피, DCM 중의 0%에서 10% MeOH 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 88b(240mg, 85% 수율)를 밝은 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.48 min, MS(ESI) m/z = 592.2 [M+H]+.
화합물 88c의 제조 절차:
탄소상 팔라듐(25 mg, 10% Wt%)을 질소 분위기하에 MeOH(7 mL) 중의 화합물 88b(70 mg, 0.12 mmol)의 용액에 첨가하였다. 생성된 반응물을 수소 대기하에 20℃에서 30 min 동안 교반하였다. 혼합물은 셀라이트를 통해 여과하고, 여과액은 감압 하에 증발시켜 화합물 88c(62mg, 94% 수율)를 밝은 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.34 min, MS(ESI) m/z = 562.2 [M+H]+.
화합물 88d의 제조 절차:
NMP(5 mL) 중의 화합물 88c(62 mg, 0.11 mmol) 및 DIPEA(14 mg, 0.11 mmol)의 용액에 3-클로로프로피오닐 클로라이드(14 mg, 0.11 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 10 min 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(50 mL)로 희석, DCM(10 mL X 3)으로 추출하였다. 유기층을 염수(30 mL X 1)로 세척, 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과 및 감압 하에 증발시켜 화합물 88d(70mg, 91% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.37 min, MS(ESI) m/z = 652. 2 [M+H]+.
실시예 88의 제조 절차:
CH3CN(5 mL) 중의 화합물 88d(70 mg, 0.11mmol) 및 TEA(110 mg, 1.1 mmol)의 용액을 80℃에서 12 h 동안 가열하였다. 그 후 용액을 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 0%에서 80%의 CH3CN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 포름산 형태의 실시예 88(38 mg, 57% 수율)을 황백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.33 min, MS(ESI) m/z = 616.2 [M+H]+.
1 H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 1.50 (d, J=2.21 Hz, 6 H) 1.89 - 1.99 (m, 1 H) 2.12 (s, 6 H) 2.18 (dd, J=12.30, 7.57 Hz, 1 H) 2.34 (br dd, J=12.14, 5.83Hz, 1 H) 3.17 - 3.31 (m, 2 H) 3.42 - 3.51 (m, 1 H) 3.55 - 3.62 (m, 1 H) 3.79 (s, 3 H) 5.33 - 5.49 (m, 1 H) 5.72 (br d, J=11.66 Hz, 1 H) 6.10 - 6.13 (m, 1 H) 6.13 - 6.20 (m, 2 H) 6.38 (dd, J=17.02, 10.40 Hz, 1 H) 6.86 (s, 1 H) 7.29 (d, J=11.03 Hz, 1 H) 7.85 (s, 1 H) 7.97 - 8.01 (m, 1 H) 8.11 - 8.17 (m, 1 H) 8.36 -8.45 (m, 1 H) 9.53 - 9.56 (m, 1 H) 9.57 - 9.61 (m, 1 H).
실시예 89
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )피리미딘-2-일아미노)-4-메톡시-2-((1R,5R)-6-메틸-3,6-디아자비시클로[3.2.0]헵탄-3-일)페닐)아크릴아미드 포름산 염
Figure pct00129
화합물 89b의 제조 절차:
NMP(3 mL) 중의 화합물 36b(80 mg, 0.17 mmol)의 혼합물에 화합물 89a(34 mg, 0.17 mmol) 및 탄산칼륨(60 mg, 0.43 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 5%에서 70% CH3CN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 89b(75 mg, 68% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.15 min, MS(ESI) m/z = 644.1 [M+H]+.
화합물 89c의 제조 절차:
DCM(1 mL) 중의 화합물 5c(75 mg, 0.11 mmol)의 혼합물에 TFA(1 mL)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 20℃에서 30 min 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 탄산 나트륨 수용액(50 mL) 및 EtOAc(50 mL)로 희석하였다. 유기층을 염수로 세척, 황산나트륨 상에서 건조, 진공에서 농축하여 화합물 89c(59 mg, 93% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.21 min, MS(ESI) m/z = 544.1 [M+H]+.
화합물 89d의 제조 절차:
메탄올(3 mL) 중의 화합물 89c(59 mg, 0.11 mmol)의 혼합물에 포름알데히드 (0.5 mL) 및 NaBH3CN(34 mg, 0.54 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 5%에서 70% CH3CN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 89d (44 mg, 73% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.27 min, MS(ESI) m/z = 558.2 [M+H]+.
화합물 89e의 제조 절차:
메탄올(3 mL) 중의 화합물 89d(59 mg, 0.11mmol)의 혼합물에 탄소상 팔라듐 (20 mg)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 수소 대기 하에 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 그 후 여과하고 여과액은 진공에서 농축하여 화합물 89e(42 mg, 75% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.17 min, MS(ESI) m/z = 528.1 [M+H]+.
실시예 89의 제조 절차:
NMP(2 mL) 중의 화합물 5f(42 mg, 0.080 mmol)의 혼합물에 아크릴로일 클로라이드(8 mg, 0.089mmol) 및 DIEA(12 mg, 0.093 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 생성된 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 5%에서 50%의 CH3CN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 포름산 형태의 실시예 89(14 mg, 30% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.78 min, MS(ESI) m/z = 582.0 [M+H]+.
1 H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 0.99 (t, J=7.09 Hz, 1 H) 1.43 (s, 6 H) 2.63 - 2.83 (m, 2 H) 3.07 (br s, 1 H) 3.15 (br d, J=9.46 Hz, 1 H) 3.32 - 3.54 (m, 5 H) 3.66 - 3.80 (m, 4 H) 5.65 (br d, J=11.03 Hz, 1 H) 6.04 (d, J=5.67 Hz, 1 H) 6.11 (s, 1 H) 6.14 (br d, J=17.02 Hz, 1 H) 6.34 - 6.47 (m, 1 H) 6.79 (s, 1 H) 7.22 (d, J=11.03 Hz, 1 H) 7.84 (s, 1 H) 7.92 (d, J=5.67 Hz, 1 H) 8.04 - 8.21 (m, 2 H) 9.27 (s, 1 H) 9.54 (s, 1 H).
실시예 90
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )피리미딘-2-일아미노)-2-((((2R,4S)-1,4-디메틸피롤리딘-2-일)메틸)(메틸)아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드 포름산 염
Figure pct00130
화합물 90b의 제조 절차:
DCM(2 mL) 중의 화합물 90a(215 mg, 1.0 mmol) 및 DIEA(258 mg, 2.0 mmol)의 교반 용액에 메탄술포닐 클로라이드(127 mg, 1.1 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그 후 반응물은 물(10 mL)로 켄칭하고 DCM(10 mL)으로 2회 추출하였다. 유기층을 그 후 황산나트륨 상에서 건조 및 농축하여 화합물 90b(300 mg, 조 물질)를 무색 오일로서 수득하고, 이것은 추가의 정제없이 다음 단계에 사용될 수 있다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L 중탄산 암모늄) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.39 min, MS(ESI) m/z = 294.2 [M+H]+.
화합물 90c의 제조 절차:
에탄올(3 mL) 중의 화합물 90b(150 mg 조 물질, 0.50 mmol)의 혼합물에 25% 디메틸아민 수용액(1 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 질소 분위기 하에서 교반하였다. 혼합물을 그 후 농축하고 잔류물을 물(10 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(10 mL)로 2회 추출하였다. 유기층을 그 후 염수로 세척, 황산나트륨 상에서 건조, 농축하여 화합물 90c(100 mg, 조 물질)를 무색 오일로서 수득하고, 이것은 추가의 정제 없이 직접 사용될 수 있다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L 중탄산 암모늄) 중에 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.16 min, MS(ESI) m/z = 229.3 [M+H]+.
화합물 90d의 제조 절차:
DMF(3 mL) 중의 화합물 36d(120 mg, 0.26 mmol)의 혼합물에 화합물 90c(60 mg, 0.26 mmol) 및 DIEA(74 mg, 0.57 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 90℃에서 16시간 동안 가열하였다. 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피, 물(6 mmol/L 중탄산 암모늄) 중의 20%에서 100% MeCN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 90d(100 mg, 58% 수율)를 주황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L 중탄산 암모늄) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.96 min, MS(ESI) m/z = 674.1 [M+H]+.
화합물 90e의 제조 절차:
DCM(1 mL) 중의 화합물 90d(100 mg, 0.15 mmol)의 혼합물에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 90 min 동안 교반하였다. 용액을 그 후 농축하고 잔류물을 포화 탄산나트륨 수용액(20 mL) 및 에틸 아세테이트(20 mL)로 희석하였다. 유기층을 염수로 세척, 황산나트륨 상에서 건조, 진공에서 농축하여 화합물 90e(80 mg, 93% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min- 물(6 mmol/L 중탄산 암모늄) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.28 min, MS(ESI) m/z = 574.1 [M+H]+.
화합물 90f의 제조 절차:
메탄올(3 mL) 중의 화합물 90e(80 mg, 0.14 mmol)의 혼합물에 37% 포르말린(1 mL) 및 NaBH3CN(54 mg, 0.85 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 그 후 농축하고 잔류물은 포화 탄산 나트륨 수용액(20 mL) 및 EA(20 mL)로 희석하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조, 진공에서 농축하여 화합물 90f (80 mg, 98% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L 중탄산 암모늄) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.53 min, MS(ESI) m/z = 588.1 [M+H]+.
화합물 90g의 제조 절차:
메탄올(3 mL) 중의 화합물 90f(80 mg, 0.14 mmol)의 혼합물에 탄소상 팔라듐 (20 mg)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 수소 대기 하에 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 그 후 여과하고 여과액을 진공에서 농축하여 화합물 90g(70 mg, 92% 수율)을 황색을 띤 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L 중탄산 암모늄) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.85 min, MS(ESI) m/z = 558.1 [M+H]+.
실시예 90의 제조 절차:
DCM(2 mL) 중의 화합물 90g(70 mg, 0.13 mmol) 및 DIEA(17 mg, 0.13 mmol)의 냉각된 교반 용액에 3-클로로프로피오닐 클로라이드(17 mg, 0.13 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. MeCN(2 mL) 및 TEA(0.5 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 가열하였다. 혼합물을 농축하고 잔류물은 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.05% FA) 중의 5%에서 50% MeCN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 포름산 형태의 실시예 90(36.3mg, 52% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol 중탄산 암모늄) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.68 min, MS(ESI) m/z = 612.0 [M+H]+.
1 H NMR(500 MHz, DMSO-d 6) δ 9.93 (s, 1H), 9.66 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.17 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.24 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.34 (dd, J = 16.9, 10.1 Hz, 1H), 6.16 (dd, J = 16.9, 2.1 Hz, 1H), 6.08 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 5.72 (dd, J = 10.1, 2.1 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.13 - 3.10 (m, 1H), 2.88 - 2.82 (m, 1H), 2.81 - 2.75 (m, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.63 (dd, J = 12.9, 4.4 Hz, 1H), 2.11 - 1.97 (m, 2H), 1.61 - 1.47 (m, 8H), 0.96 (d, J = 6.2 Hz, 3H).
실시예 91
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )피리미딘-2-일아미노)-2-((2R,4S)-2-((디메틸아미노)메틸)-4-메틸피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00131
화합물 91b의 제조 절차:
DCM(2 mL) 중의 화합물 91a(215 mg, 1.0 mmol) 및 DIEA(258 mg, 2.0 mmol)의 교반 용액에 메탄술포닐 클로라이드(127 mg, 1.1 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그 후 반응물을 물(10 mL)로 켄칭하고 DCM(10 mL)으로 2회 추출하였다. 유기층을 그 후 황산나트륨 상에서 건조 및 농축하여 화합물 91b(300 mg, 조 물질)를 무색 오일로서 수득하였으며, 이것은 추가의 정제없이 다음 단계에 사용될 수 있다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L 중탄산 암모늄) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.39 min, MS(ESI) m/z = 294.2 [M+H]+.
화합물 91c의 제조 절차:
에탄올(3 mL) 중의 화합물 91b(150 mg 조 물질, 0.50 mmol)의 혼합물에 25% 디메틸아민 수용액(1 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 질소 분위기 하에서 교반하였다. 혼합물을 그 후 농축하고 잔류물을 물(10 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(10 mL)로 2회 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 용액을 농축하여 화합물 91c(120 mg, 조 물질)를 무색 오일로서 수득하였으며, 이것은 추가의 정제 없이 직접 사용될 수 있다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L 중탄산 암모늄) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.29 min, MS(ESI) m/z = 243.3 [M+H]+.
화합물 91d의 제조 절차:
DCM(1 mL) 중의 화합물 1c(120 mg, 0.50 mmol)의 혼합물에 TFA(1 mL)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 그 후 진공에서 농축하고 물(2 mL)로 희석하였다. 혼합물을 동결건조하여 화합물 91d(180 mg, 97%)를 백색 고체(TFA 염)로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.27 min, MS(ESI) m/z = 143.2 [M+H]+.
화합물 91e의 제조 절차:
DMF(3 mL) 중의 화합물 91d(110 mg, 0.30 mmol)의 혼합물에 화합물 36d(100 mg, 0.21 mmol) 및 DIEA(129 mg, 1.0 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 90℃에서 16시간 동안 교반하였다. 그 후 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피, 물(6 mmol/L 중탄산 암모늄) 중의 20%에서 90% MeCN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 91e(80 mg, 63% 수율)를 주황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L 중탄산 암모늄) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.63 min, MS(ESI) m/z = 588.1 [M+H]+.
화합물 91f의 제조 절차:
메탄올(6 mL) 중의 화합물 91e(80 mg, 0.14 mmol)의 혼합물에 탄소상 팔라듐 (20 mg)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 수소 대기 하에 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 그 후 여과하고 여과액은 진공에서 농축하여 화합물 91f(76 mg, 조 물질)를 황색을 띤 고체로서 수득하였고, 이것은 추가의 정제 없이 직접 사용될 수 있다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.99 min, MS(ESI) m/z = 558.2 [M+H]+.
실시예 91의 제조 절차:
DCM(2 mL) 중의 화합물 91f(76 mg, 0.14 mmol) 및 DIEA(17.6 mg, 0.14 mmol)의 냉각된 교반 용액에 3-클로로프로피오닐 클로라이드(17 mg, 0.14 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. MeCN(2 mL) 및 TEA(0.5 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 가열하였다. 혼합물을 농축하고 잔류물은 C18-플래시 크로마토그래피, 물(6 mmol/L 중탄산 암모늄) 중의 10%에서 70% MeCN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 실시예 91(17.6 mg, 21% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L 중탄산 암모늄) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.68 min, MS(ESI) m/z = 612.0 [M+H]+.
1 H NMR(500 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.61 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 8.22 - 8.15 (m, 2H), 8.00 (d, J = 5.7 Hz,1H), 7.86 (s, 1H), 7.31 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.53 (dd, J = 17.0, 10.2 Hz, 1H), 6.19 (s, 1H), 6.13 (dd, J = 16.5, 3.9 Hz, 1H), 5.70 (dd, J = 10.1, 2.0 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.70 (dq, J = 13.6, 7.0, 5.6 Hz, 1H), 3.45 (dd, J = 8.9, 6.5 Hz, 1H), 2.38 (h, J = 6.8 Hz, 1H), 2.25 (dd, J = 11.9, 4.8 Hz, 1H), 2.12 (s, 1H), 1.93 - 1.75 (m, 2H), 1.52 (s, 6H), 1.05 (d, J = 6.7 Hz, 3H).
실시예 92
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(1,1,1- 트리플루오로 -2-히드록시프로판-2-일)페닐아미노)피리미딘-2-일아미노)-2-((R)-3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00132
화합물 92a의 제조 절차:
DCM(40 mL) 중의 2-브로모-5-클로로-4-플루오로아닐린(2.0 g, 8.9 mmol) 및 트리에틸아민(1.2 g, 12 mmol)의 용액에 피발로일 클로라이드(1.2 g, 9.8 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 16 h 동안 교반하였다. 혼합물을 물(100 mL)로 켄칭하고 DCM(50 mL X 3)으로 추출하였다. 조합된 유기물을 염수로 세척, 무수 Na2SO4 상에서 건조, 여과하고 여과액은 진공에서 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피, 페트롤륨 에테르 중 10%에서 20% EtOAc 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 92a(2.7 g, 97% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.51 min, MS(ESI) m/z = 309.0 [M+H]+.
화합물 92b의 제조 절차:
THF(53 mL) 중의 화합물 92a(2.7 g, 8.6 mmol)의 용액에 n-BuLi(13 mL, 헥산 중 1.6 M)을 -30℃에서 첨가하고, 생성된 혼합물은 -30℃에서 1 h 동안 교반하였다. TFAA(2.7 g, 13 mmol)를 -30℃에서 첨가한 후, 혼합물을 20℃에서 16 h 동안 더 교반하였다. 혼합물을 1 M HCl 용액(35 mL)으로 켄칭하고 EA(30 mL X 5)로 추출하였다. 조합된 유기물을 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과 및 진공에서 농축하였다. 잔류물을 con. HCl(60 mL) 및 THF(30 mL)로 처리한 후, 생성된 혼합물을 100℃에서 2 h 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 용액으로 희석하고 EtOAc(50 mL X 5)로 추출하였다. 조합된 유기물을 염수로 세척하고 진공에서 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피, 페트롤륨 에테르 중의 0%에서 30% EtOAc 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 92b(576 mg, 28% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다.
1 H NMR(500 MHz, DMSO-d 6) δ 7.2 (d, J = 6.3 Hz, 1 H) 7.4 (dd, J = 10.6, 1.7 Hz, 1 H) 7.8 (br s, 1 H).
화합물 92c의 제조 절차:
THF(12 mL) 중의 화합물 92b(576 mg, 2.4 mmol)의 용액에 메틸마그네슘 브로마이드(4.0 mL, THF 중 3M)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 반응물을 20℃에서 1 h 동안 교반하였다. 반응물을 포화 NH4Cl 용액(50 mL)으로 켄칭하고 EA(50 mL X 3)로 추출하였다. 조합된 유기물을 염수로 세척, 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과하고 진공에서 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피, 페트롤륨 에테르 중의 10%에서 50% EtOAc 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 92c(401 mg, 65% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.22 min, MS(ESI) m/z = 258.1 [M+H]+.
화합물 92d의 제조 절차:
NMP(7 mL) 중의 화합물 92c(401 mg, 1.6 mmol)의 용액에 NaH(120 mg, 0.58 mmol, 미네랄 오일 중 60% 분산액)를 0℃에서 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 15 min 동안 교반 후, 2,4-디클로로피리미딘(232 mg, 1.6 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 1 h 동안 교반하였다. 반응물을 0℃에서 물(100 mL)로 켄칭하고 EA(20 mL X 5)로 추출하였다. 조합된 유기물을 염수로 세척, 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과하고 여과액은 진공에서 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피, 페트롤륨 에테르 중의 30%에서 100% EtOAc 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 92d(374 mg, 65% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.36 min, MS(ESI) m/z = 370.0 [M+H]+.
화합물 92e의 제조 절차:
프로판-2-올(5.7 mL) 중의 화합물 92d (374 mg, 1.0 mmol), 4-플루오로-2-메톡시-5-니트로아닐린(207 mg, 1.1 mmol), 및 TFA(576 mg, 5.1 mmol)의 용액을 밀폐하고 50℃에서 16 h 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공에서 증발시켰다. 잔류물을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피, DCM 중의 0%에서 10% MeOH 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 92e(420 mg, 80% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.21 min, MS(ESI) m/z = 520.1 [M+H]+.
화합물 92f의 제조 절차:
DMSO(8 mL) 중의 화합물 92e(420 mg, 0.81 mmol) 및 K2CO3(447 mg, 3.2 mmol)의 용액에 (R)-N,N-디메틸피롤리딘-3-아민(129 mg, 1.1 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 16 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 빙수(100 mL)로 희석하고 EA(20 mL X 5)로 추출하였다. 조합된 유기물을 염수로 세척, 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과하고 여과액은 진공에서 증발시켜 화합물 92f(500 mg, 조 물질)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.51 min, MS(ESI) m/z = 613.9 [M+H]+.
화합물 92g의 제조 절차:
탄소상 팔라듐(88 mg)을 MeOH(8 mL) 중의 화합물 92f(253 mg, 0.41 mmol)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 수소 대기하에 20℃에서 30 min 동안 교반하였다. 혼합물을 그 후 여과하고 여과액은 진공에서 증발시켜 조 화합물 92g(241 mg, 조 물질)을 밝은 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.10 min, MS(ESI) m/z = 583.9 [M+H]+.
화합물 92h의 제조 절차:
DCM(4 mL) 중의 화합물 92g(241 mg, 0.41 mmol)의 용액에 3-클로로프로판오일 클로라이드(55 mg, 0.43 mmol)를 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 0.5 h 동안 교반하였다. 혼합물을 그 후 포화 NaHCO3 수용액(10 mL)으로 희석하고 생성된 혼합물을 12-17℃에서 2 h 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(20 mL Х 3)으로 추출하였다. 조합된 유기물을 염수로 세척, 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과하고, 여과액은 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피, DCM 중의 0%에서 3% MeOH 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 92h(270 mg, 97% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.36 min, MS(ESI) m/z = 673.9 [M+H]+.
실시예 92의 제조 절차:
MeCN(4 mL) 중의 화합물 92h(270 mg, 0.40 mmol)의 용액에 TEA(162 mg, 1.60 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 16 h 동안 가열하였다. 반응 용액을 진공에서 증발시켰다. 잔류물을 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% 암모니아) 중의 0%에서 60% MeCN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 동결건조로 건조시켜 실시예 92(120 mg, 47% 수율)를 밝은 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.33 min, MS(ESI) m/z = 638.0 [M+H]+.
1 H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 1.7 - 1.8 (m, 1 H) 1.8 (s, 3 H) 2.0 - 2.1 (m, 1 H) 2.2 (s, 6 H) 2.7 (quin, J=7.6 Hz, 1 H) 3.1 - 3.2 (m, 3 H) 3.3 - 3.3 (m, 1 H) 3.3 (br s, 1 H) 3.8 (d, J=6.9 Hz, 3 H) 5.7 (br d, J=10.4 Hz, 1 H) 6.1 (dd, J=5.5, 3.0 Hz, 1 H) 6.2 (dd, J=17.0, 1.6 Hz, 1 H) 6.4 - 6.5 (m, 2 H) 7.5 (br dd, J=11.2, 2.0 Hz, 1 H) 7.5 (br d, J=7.6 Hz, 1 H) 7.9 (br d, J=6.3 Hz, 1 H) 7.9 (d, J=5.7 Hz, 2 H) 8.3 (dd, J=12.1, 7.4 Hz, 1 H) 9.3 (s, 1 H) 9.4 (br s, 1 H).
실시예 93
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-2-((3S,4R)-3-(디메틸아미노)-4-플루오로피롤리딘-1-일)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00133
화합물 93a의 제조 절차:
NMP(3 mL) 중의 화합물 1d(100 mg, 0.21 mmol)의 혼합물에 화합물 79a(28 mg, 0.21 mmol) 및 탄산칼륨(73 mg, 0.53 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 5%에서 60% CH3CN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 93a(91 mg, 74% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.99 min, MS(ESI) m/z = 579.0 [M+H]+.
화합물 93b의 제조 절차:
메탄올(5 mL) 중의 화합물 93a(90 mg, 0.16mmol)의 혼합물에 탄소상 팔라듐 (30 mg)을 첨가하고, 생성된 혼합물은 수소 대기 하에 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 그 후 여과하고 여과액은 진공에서 농축하여 화합물 93b(78 mg, 91% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.24 min, MS(ESI) m/z = 549.1 [M+H]+.
실시예 93의 제조 절차:
NMP(2 mL) 중의 화합물 93b(78 mg, 0.14 mmol)의 혼합물에 아크릴로일 클로라이드(13 mg, 0.14mmol) 및 DIEA(20 mg, 0.16 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 생성된 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 5%에서 50% CH3CN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 실시예 93(45 mg, 52% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.92 min, MS(ESI) m/z = 603.1 [M+H]+.
1 H NMR(500 MHz, DMSO-d6) δ 1.50 (br s, 6 H) 2.25 (s, 6 H) 2.54 - 2.66 (m, 1 H) 3.38 - 3.48 (m, 3 H) 3.78 (s, 3 H) 3.79 - 3.87 (m, 1 H) 5.17 - 5.34 (m, 1 H) 5.21 (br s, 1 H) 5.32 (br s, 1 H) 5.68 (br d, J=11.03 Hz, 1 H) 6.18 (br d, J=16.71 Hz, 1 H) 6.27 (br s, 1 H) 6.46 (br dd, J=17.02, 10.09 Hz, 2 H) 6.95 - 7.40 (m, 2 H) 8.21 (br s, 2 H) 8.52 - 9.11 (m, 1 H) 9.37 (br s, 1 H) 10.12 (br s, 1 H).
실시예 94
N-(2-((2-(디메틸아미노)에틸)( 메틸 )아미노)-5-(4-(4-(2-히드록시프로판-2-일)-1H-인돌-5-일아미노)-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00134
화합물 94b의 제조 절차:
DMF(10 mL) 중의 화합물 94a(3.0 g, 12.9 mmol)의 혼합물에 NBS(2.3 g, 12.9 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 20℃에서 30 min 동안 교반하였다. 혼합물을 물(50 mL)로 희석하고 EtOAc(50 mL)로 추출하였다. 유기층을 진공에서 농축하고, 잔류물을 플래시 실리카 크로마토그래피, 페트롤륨 에테르 중의 5%에서 50% EtOAc 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 94b(2.0 g, 50% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt=1.54 min, MS(ESI) m/z=313.2 [M+H]+.
화합물 94c의 제조 절차:
메탄올(15 mL) 중의 화합물 94b(1.6 g, 5.1 mmol) 및 [1,1'-비스(디페닐-포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II) 디클로로메탄 착물(200 mg, 0.25 mmol)의 혼합물에 TEA(1g, 9.9 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 일산화 탄소 대기 하에 가열하였다. 혼합물을 진공에서 농축하고, 잔류물은 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 5%에서 80% MeCN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 94c(350 mg, 24% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.49 min, MS(ESI) m/z = 291.3 [M+H]+.
화합물 94d의 제조 절차:
THF(10 mL) 중의 화합물 1c(300 mg, 1.0 mmol)의 혼합물에 MeMgBr(10 mL, THF 중 3M)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 질소 분위기 하에 교반하였다. 혼합물을 그 후 물(50 mL)로 희석하고 EtOAc(50 mL)로 추출하였다. 유기층을 진공에서 농축하고, 잔류물은 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 5%에서 70% MeCN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 1d(120 mg, 40% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.39 min, MS(ESI) m/z = 291.3 [M+H]+.
화합물 94e의 제조 절차:
NMP(5 mL) 중의 화합물 94d(120 mg, 0.41 mmol)의 혼합물에 화합물 6e(130 mg, 0.43 mmol) 및 DIEA(150 mg, 1.2 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 100℃에서 30 min 동안 교반하였다. 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 5%에서 70% MeCN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 94e(110 mg, 48% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.52 min, MS(ESI) m/z = 554.2 [M+H]+.
화합물 94f의 제조 절차:
NMP(5 mL) 중의 화합물 94e(110 mg, 0.20 mmol)의 혼합물에 N,N,N '-트리메틸에틸렌디아민(30 mg, 0.29 mmol) 및 DIEA(40 mg, 0.31 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 교반하였다. 그 후 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 5%에서 60% MeCN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 94f(120 mg, 95% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.04 min, MS(ESI) m/z = 636.2 [M+H]+.
화합물 94g의 제조 절차:
메탄올(5 mL) 중의 화합물 94f(110 mg, 0.17 mmol)의 혼합물에 소듐 메톡시드(500 mg, 4.0 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 20℃에서 6시간 동안 교반하였다. 혼합물을 그 후 물(50 mL)로 희석하고 EtOAc(50 mL)로 추출하였다. 유기층을 진공에서 농축하여 화합물 94g(75 mg, 81% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.78 min, MS(ESI) m/z = 536.2 [M+H]+.
화합물 94h의 제조 절차:
메탄올(5 mL) 중의 화합물 94g(40 mg, 0.075mmol)의 혼합물에 탄소상 팔라듐(20 mg)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 수소 대기 하에 교반하였다. 혼합물을 그 후 여과하고 여과액을 진공에서 농축하여 화합물 94h(32 mg, 85% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.67 min, MS(ESI) m/z = 506.3 [M+H]+.
실시예 94의 제조 절차:
NMP(2 mL) 중의 화합물 94h(32 mg, 0.063 mmol)의 혼합물에 아크릴로일 클로라이드(7 mg, 0.077mmol) 및 DIEA(20 mg, 0.15 mmol)를 0℃에서 첨가하였다, 생성된 용액을 0℃에서 10 min 동안 교반하였다. 혼합물을 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 5%에서 60% MeCN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 실시예 94(14 mg, 39% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.70 min, MS(ESI) m/z = 560.3 [M+H]+.
1 H NMR(500 MHz, DMSO-d 6) δ 1.69 (s, 7 H) 2.22 (s, 7 H) 2.34 (br t, J=5.83 Hz, 2 H) 2.70 (s, 3 H) 2.87 (br t, J=5.67 Hz, 2 H) 3.77 (br s, 3 H) 5.69 - 5.78 (m, 1 H) 5.92 (br s, 1 H) 6.23 (dd, J=17.02, 1.89 Hz, 1 H) 6.30 - 6.47 (m, 1 H) 6.56 - 6.71 (m, 1 H) 6.96 (s, 1 H) 7.06 - 7.29 (m, 2 H) 7.65 (br s, 1 H) 8.09 - 8.27 (m, 1 H) 8.12 - 8.57 (m, 1 H) 8.46 (br s, 1 H) 10.09 (br s, 2 H) 10.86 - 11.07 (m, 1 H).
실시예 95
N-(2-((2-(디메틸아미노)에틸)( 메틸 )아미노)-5-(4-(6-(2-히드록시프로판-2-일)-1H-인돌-5-일아미노)-1,3,5-트리아진-2-일아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드
Figure pct00135
화합물 95a의 제조 절차:
MeOH(50 mL) 중의 화합물 32d(3.0 g, 8.10 mmol)의 용액에 Pd/C(300 mg)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 H2로 3회 퍼지 및 탈기한 후, 29-40℃에서 H2(수소 벌룬, 15 Psi) 하에 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 화합물 95a(1.48 g, 95.5% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_3MIN_220&254 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 1.440 min, MS(ESI) m/z = 191.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.82 (br s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.42 (t, J=2.8 Hz, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.16 (br s, 1H), 5.91 (br s, 2H), 3.80 (s, 3H).
화합물 95b의 제조 절차:
THF(100 mL) 중의 화합물 95a(1.3 g, 6.84 mmol)의 용액에 CH3MgBr(9.1 mL, 에테르 중 3 M)을 0~5℃에서 첨가하였다. 혼합물을 29-40℃에서 1.5 h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수성 NH4Cl(20 mL)의 첨가로 켄칭한 후, EtOAc(3 Х 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(3 Х 100 mL)로 세척, 건조 및 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 20/1)로 정제하여 화합물 95b(1.1 g, 84.6% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80CD_7MIN_220&254 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 0.880 min, MS(ESI) m/z = 191.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.47 (br s, 1H), 7.09 (s, 2H), 6.78 - 6.62 (m, 1H), 6.07 (s, 1H), 5.18 (br s, 1H), 4.92 (br s, 2H), 1.56 (s, 6H).
화합물 95c의 제조 절차:
CH2Cl2(5 mL) 중의 화합물 95b(200 mg, 1.05 mmol) 및 DIEA(204 mg, 1.58 mmol)의 용액에 2,4-디클로로-1,3,5-트리아진(174 mg, 1.16 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25-33℃(실온)에서 2 h 동안 교반하였다. 반응물을 감압 하에 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르/EtOAc = 5/1)로 정제하여 화합물 95c(200 mg, 62.7% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 0.717 min, MS(ESI) m/z = 285.9 [M -18]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 10.13 - 9.72 (m, 1H), 8.56 - 8.41 (m, 1H), 8.35 - 8.09 (m, 2H), 7.40 (s, 1H), 7.26 (t, J=2.6 Hz, 1H), 6.65 - 6.51 (m, 1H), 1.76 (s, 6H).
화합물 95d의 제조 절차:
n-BuOH(5 mL) 중의 화합물 95c(190 mg, 0.63 mmol) 및 화합물 2g(168 mg, 0.63 mmol)의 용액에 TFA(0.05 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25-33℃에서 3h 동안 교반하였다. 반응물에 10 mL의 물을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc(10 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(10 mL Х 3)로 세척, 건조 및 진공에서 농축하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 실리카 겔 상의 prep-TLC(CH2Cl2/MeOH = 15/1(v/v))로 정제하여 화합물 95d(250 mg, 73% 수율)를 적색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.728 min, MS(ESI) m/z = 518.3 [M-18]+.
화합물 95e의 제조 절차:
MeOH(3 mL) 중의 화합물 95d(190 mg, 0.35 mmol)의 용액에 Pd/C(20 mg)를 N2 보호 하에 첨가하였다. 혼합물을 26-33℃에서 H2(수소 벌룬, 15Psi) 하에 1h 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 화합물 95e(100 mg, 75% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다.
LCMS: 5-95AB_1.5 min_220&254 크로마토그래피(MERCK RP18e 25-2mm)에서 Rt = 0.703 min, MS(ESI) m/z = 506.4 [M+H]+.
실시예 95의 제조 절차:
DMF(1 mL) 중의 화합물 95d(100 mg, 0.20 mmol) 및 DIEA(38 mg, 0.30 mmol)의 용액에 DMF(1 mL) 중의 아크릴로일 클로라이드(18 mg, 0.20 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 30 min 동안 교반하였다. 반응물을 prep-HPLC[컬럼: Waters Xbridge 150*25 5um; 조건: 25-55%B(A: 0.05% 암모니아; B: CH3CN); 유속: 25 ml/min]로 정제하였다. 원하는 화합물을 함유하는 분획을 동결건조하여 실시예 95(13.6 mg, 12.2% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 10-80CD_3MIN_220&254 크로마토그래피(XBrige Shield RP18 2.1*50mm)에서 Rt = 1.908 min, MS(ESI) m/z = 560.3 [M+H]+.
HPLC : 10-80_CD_1.2mL.MET(XBridge Shield RP 18 2.1*50mm 5um)에서 Rt = 3.44 min.
1 H NMR(400MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.87 (br s, 1H), 10.04 (br s, 2H), 8.43 (br s, 1H), 8.19 (br s, 2H), 7.28 (br s, 2H), 7.02 (br s, 1H), 6.41 (br d, J=9.4 Hz, 1H), 6.22 (br d, J=16.4 Hz, 2H), 5.91 (br s, 1H), 5.74 (br d, J=10.8 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 2.90 (br s, 2H), 2.71 (s, 3H), 2.42 - 2.12 (m, 8H), 1.57 (s, 6H).
실시예 96
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )피리미딘-2-일아미노)-4-메톡시-2-((1S,5R)-3-메틸-3,6-디아자비시클로[3.2.0]헵탄-6-일)페닐)아크릴아미드
Figure pct00136
화합물 96b의 제조 절차:
THF(8 mL) 중의 화합물 LiAlH4(230 mg, 6.05 mmol)의 용액에 화합물 96a (300 mg, 1.51 mmol)를 첨가하였다. 생성된 회색 혼합물을 75℃에서 14 h 동안 가열하였다. 실온으로 냉각 후, 반응물을 THF(15 mL)로 희석하고 H2O(0.2 mL), 15% 수성 NaOH(0.2 mL), 및 H2O(0.6 mL)로 연속적으로 처리한 후, 30 min 동안 더 교반하고 Na2SO4를 첨가하였다. 혼합물을 여과하고 여과액은 진공에서 농축하여 화합물 96b(130 mg, 77% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 0-60AB_2MIN_50_E 크로마토그래피(Xtimate C18, 2.1*30mm, 3um)에서 Rt = 0.079 min, MS m/z=113.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 4.24 (dd, J=4.4, 6.4 Hz, 1H), 3.68 - 3.66 (m, 1H), 3.38 (dd, J=4.8, 8.8 Hz, 1H), 3.08 - 3.03 (m, 1H), 2.98 - 2.93 (m, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.05 - 2.01 (m, 2H).
화합물 96c의 제조 절차:
DMSO(2 mL) 중의 화합물 36b(200 mg, 0.43 mmol) 및 K2CO3(119 mg, 0.86 mmol)의 용액에 화합물 96b(58 mg, 0.86 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 14 h 동안 교반하고 그동안 색상이 황색에서 주황색으로 변하였다. 반응 혼합물을 교반하면서 H2O(30 mL)에 적가하고, 침전된 고체를 여과로 수집하였다. 고체를 CH2Cl2(20 mL)에 용해, Na2SO4 상에서 건조, 진공에서 농축하여 화합물 96c(220 mg, 92% 수율)를 주황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.667 min, MS(ESI) m/z = 558.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 9.09 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.09 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.95 (d, J=6.8 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.09 (d, J=10.4 Hz, 1H), 6.16 (d, J=6.0 Hz, 1H), 5.94 (s, 1H), 5.02 (dd, J=4.4, 6.4 Hz, 1H), 4.07 (t, J=8.0 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.89 - 3.83 (m, 1H), 3.15 - 3.06 (m, 1H), 2.96 (d, J=10.0 Hz, 1H), 2.89 (d, J=11.2 Hz, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.07 (dd, J=5.2, 10.0 Hz, 1H), 1.85 (dd, J=4.4, 11.2 Hz, 1H), 1.67 (br s, 3H), 1.66 (s, 3H).
화합물 96d의 제조 절차:
EtOAc(10 mL) 중의 화합물 96c(220 mg, 0.39 mmol)의 용액에 Pd/C(10%, 30 mg)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 H2 벌룬(15 Psi) 하에 8-13℃에서 15 h 동안 교반한 후, 35℃에서 15 h 동안 더 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여과액은 진공에서 농축하여 화합물 96d(180 mg, 87% 수율)를 흑색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.640 min, MS(ESI) m/z = 528.1 [M+H]+.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 8.82 (s, 1H), 8.15 (d, J=7.2 Hz, 1H), 8.01 (d, J=5.6 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.07 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.34 (s, 1H), 6.01 (d, J=5.6 Hz, 1H), 4.65 (dd, J=4.8, 6.4 Hz, 1H), 3.91 (dd, J=4.8, 7.2 Hz, 1H), 3.87 - 3.79 (m, 4H), 3.13 - 3.05 (m, 1H), 3.01 (br d, J=10.4 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.10 (br dd, J=6.0, 10.0 Hz, 1H), 1.96 (dd, J=4.4, 10.8 Hz, 1H), 1.65 (s, 3H), 1.65 (s, 3H).
화합물 96e의 제조 절차:
CH2Cl2(3 mL) 중의 화합물 96d(176 mg, 0.33 mmol)의 용액에 빙수조 중의 화합물 3-클로로프로판오일 클로라이드(42 mg, 0.33 mmol)를 적가하였다. 생성된 흑색 혼합물을 5-10℃에서 1.5 h 동안 교반하고 고체가 침전되었다. 포화 수성 NaHCO3(10 mL)를 반응 혼합물에 첨가하고 2 h 동안 더 교반한 후, 실온에서 12 h 동안 방치하였다. 수성상을 분리하고 CH2Cl2(15 mL Х 3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 물(10 mL) 및 염수(10 mL)로 연속적으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조 및 진공에서 농축하여 표제 화합물 96e(164 mg, 59% 수율)를 암 녹색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 5-95AB_220&254.lcm 크로마토그래피(MERCK RP18 2.5-2mm)에서 Rt = 0.683 min, MS(ESI) m/z = 618.1 [M+H]+.
실시예 96의 제조 절차:
CH3CN(5 mL) 중의 화합물 96e(164 mg, 0.19 mmol)의 용액에 Et3N(79 mg, 0.78 mmol)을 첨가하였다. 생성된 흑색 혼합물을 80℃에서 14 h 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하여 조 잔류물을 수득하고, 이것을 MeOH(2 mL)로 용해하고 prep-TLC(CH2Cl2: MeOH=5:1(v/v))로 먼저 정제하여 불순한 생성물을 진한 적색 고체로서 수득하였다. 이것을 prep-HPLC(컬럼: Xbridge 150*30mm*10um; 조건: 37-67%B(A: 0.05% 암모니아 히드록시드, B: CH3CN); 유속: 25 ml/min)로 더 정제하고 그 후 동결건조하여 실시예 96(31.3 mg, 28% 수율)을 밝은 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 10-80AB_4min_220&254. lcm 크로마토그래피(Xtimate C18 2.1*30mm)에서 Rt = 1.225 min, MS(ESI) m/z=582.1[M+H]+.
HPLC : 10-80AB_1.2ml.met(Ultimate C18 3.0um 3.0*50mm)에서 Rt = 2.10 min.
1 H NMR(400MHz, CDCl3) δ 9.35 (br s, 1H), 9.08 (br s, 1H), 8.16 (br s, 1H), 8.05 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.60 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.12 (d, J=10.8 Hz, 1H), 6.46 - 6.31 (m, 3H), 6.25 (d, J=5.2 Hz, 1H), 5.75 (dd, J=3.6, 7.6 Hz, 1H), 5.40 (br s, 1H), 4.61 (dd, J=4.0, 6.4 Hz, 1H), 3.92 - 3.84 (m, 4H), 3.83 - 3.76 (m, 1H), 3.17 - 3.01 (m, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.18 (dd, J=6.4, 10.0 Hz, 1H), 2.04 - 1.94 (m, 1H), 1.75 - 1.63 (m, 6H).
실시예 97
N-(5-(4-(5- 클로로 -4- 플루오로 -2-(2-히드록시프로판-2-일) 페닐아미노 )피리미딘-2-일아미노)-4-메톡시-2-((1S,5S)-6-메틸-3,6-디아자비시클로[3.2.0]헵탄-3-일)페닐)아크릴아미드 포름산 염
Figure pct00137
합성은 실시예 89와 유사한 실험 절차에 따라 포름산 형태의 실시예 97을 담황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(0.02% FA) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.75 min, MS(ESI) m/z = 582.0 [M+H]+.
1 H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 9.61 (s, 1H), 9.55 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.15 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.28 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.55 (dd, J = 17.1, 10.3 Hz, 1H), 6.20 (dd, J = 17.1, 2.0 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 5.70 (dd, J = 10.2, 2.0 Hz, 1H), 4.25 - 4.16 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.58 - 3.53 (m, 4H), 3.21 (d, J = 9.8 Hz, 2H), 3.17 - 3.11 (m, 2H), 2.88 - 2.82 (m, 1H), 2.77 - 2.72 (m, 1H), 1.50 (s, 6H).
실시예 98
(R)-N-(2-(2-( 아제티딘 -1- 일메틸 ) 피롤리딘 -1-일)-5-(4-(5- 클로로 -4- 플루 오로-2-(2-히드록시프로판-2-일)페닐아미노)피리미딘-2-일아미노)-4-메톡시페닐)아크릴아미드 포름산 염
Figure pct00138
화합물 98b의 제조 절차:
DCM(5 mL) 중의 화합물 98a(0.70 g, 3.0 mmol)의 용액에 토실 클로라이드 (684 mg, 3.6 mmol) 및 피리딘(1.79 mL, 22 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 16 h 동안 교반하였다. 혼합물을 1N HCl(10 mL)로 희석하고 DCM(20 mL X 3)으로 추출하였다. 조합된 유기물을 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과하고 여과액은 감압 하에 증발시켜 조 생성물을 수득하며, 이것을 플래시 실리카 크로마토그래피, 페트롤륨 에테르 중의 0%에서 10% EtOAc 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 98b(1.1 g, 75% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.55 min, MS(ESI) m/z=390 [M+H]+.
화합물 98c의 제조 절차:
NMP(10 mL) 중의 화합물 98b(0.47 g, 1.2 mmol)의 용액에 아제티딘 히드로클로라이드(673 mg, 7.2 mmol) 및 탄산칼륨(995 mg, 7.2 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 85℃에서 16 h 동안 교반하였다. 혼합물을 물(20 mL)로 희석하고 EtOAc(20 mL X 3)로 추출하였다. 조합된 유기물을 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과하고, 여과액은 감압 하에 증발시켜 조 생성물을 수득하고, 이것을 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 0%에서 50% CH3CN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 화합물 98c(0.20 g, 60% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다.
LCMS: 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.94 min, MS(ESI) m/z=275 [M+H]+.
화합물 98d의 제조 절차:
IPA(5 mL) 중의 화합물 98c(90 mg, 0.30 mmol)의 용액에 탄소상 팔라듐(10 mg)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 수소 대기 하에 16 h 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여과액은 진공에서 농축하여 다음 단계에서 직접 사용된 조 화합물 98d(70 mg, 조 물질)를 수득하였다.
LCMS: 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 0.24 min, MS(ESI) m/z=141 [M+H]+.
화합물 98e의 제조 절차:
IPA(10 mL) 중의 화합물 98d(70 mg, 0.50 mmol)의 용액에 탄산칼륨(90 mg, 0.65 mmol) 및 화합물 36b(150 mg, 0.32 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 질소 분위기 하에 16 h 동안 가열하였다. 그 후 혼합물을 여과하고 여과액은 감압 하에 제거하였다. 잔류물을 물(20 mL)로 희석하고 EtOAc(20 mL X3)로 추출하였다. 조합된 유기물을 무수 황산나트륨 상에서 건조, 여과하고 여과액은 감압 하에 증발시켜 화합물 98e(150 mg, 80% 수율)를 적색 고체로서 수득하였다.
LCMS: 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.52 min, MS(ESI) m/z=586 [M+H]+.
화합물 98f의 제조 절차:
MeOH(15 mL) 중의 화합물 98e(70 mg, 0.12 mmol)의 용액에 탄소상 팔라듐(20 mg)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 수소 대기 하에 2 h 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여과액은 진공에서 농축하여 화합물 98f(50 mg, 60% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt = 1.16 min, MS(ESI) m/z = 556 [M+H]+.
실시예 98의 제조 절차:
NMP(3 mL) 중의 화합물 98f(40 mg, 0.070 mmol) 및 DIEA(10 mg, 0.080 mmol)의 용액에 3-클로로프로피오닐 클로라이드(10 mg, 0.080 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 그 후 MeCN(3 mL) 및 TEA(1 mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 80℃에서 16 h 동안 가열하였다. 혼합물을 진공에서 농축하고, 잔류물은 C18-플래시 크로마토그래피, 물(0.02% FA) 중의 0%에서 30%의 CH3CN 용리 구배로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜 포름산 형태의 실시예 98(3.9 mg, 8.9% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS : 3 min 크로마토그래피(3min-물(6 mmol/L NH4HCO3) 중의 5-95% MeCN, Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7um, 2.1*50 mm, 40℃)에서 Rt =1.16 min, MS(ESI) m/z = 610.1 [M+H]+.
1 H NMR(500 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 9.61 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.16 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.28 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.57 (dd, J = 17.0, 10.2 Hz, 1H), 6.35 - 6.03 (m, 3H), 5.70 (dd, J = 10.4, 1.9 Hz, 1H), 3.97 - 3.68 (m, 4H), 3.11 (dq, J = 22.2, 6.8 Hz, 4H), 2.96 - 2.85 (m, 1H), 2.48 - 2.34 (m, 2H), 2.27 - 2.15 (m, 1H), 2.11 - 2.00 (m, 1H), 1.98 - 1.71 (m, 4H), 1.69 - 1.59 (m, 1H), 1.55 - 1.40 (m, 6H).
생물학적 실시예:
WT EGFR(및 다른 단백질 키나아제)과 비교하여 돌연변이 EGFR의 선택적 억제제로서 제공된 화합물의 생물학적 활성을 측정하기 위해 사용되는 어세이가 하기에 기술되어 있다.
실시예 99 : EGFR 또는 HER2 돌연변이를 갖는 세포주
초기 시험관내 효능 분석을 위해, 렌티바이러스 시스템을 사용하여 상이한 EGFR 또는 Her2 돌연변이를 갖는 세포주를 생성할 수 있다.
구체적으로, 인간 EGFR 엑손 20 ASV 삽입 돌연변이를 갖는 세포주는 인간 EGFR 엑손 20 V769_D770insASV를 렌티 바이러스 트랜스퍼 벡터 pMT143(Sunbio Co., Ltd.)로 서브클로닝하고 그 후 상기 렌티바이러스 트랜스퍼 벡터 및 렌티바이러스 패키징 플라스미드를 293T/17(아메리칸 타입 컬쳐 컬렉션(ATCC), CRL-11268) 세포로 형질감염시켜 인간 EGFR V769_D770insASV를 코딩하는 재조합 렌티바이러스를 생성함으로써 생성된다. IL-3 의존성 증식으로 인해, 모 Ba/F3(DSMZ, Cat#ACC-300) 세포를 마우스 IL3의 공급원으로서 10% FBS가 보충된 RPMI1640 배지(라이프 테크놀로지, Cat# 11835-055) 및 WEHI-3B 세포주(DSMZ, Cat # ACC-26)의 10% 부피 조절 배지에서 배양하였다. EGFR 엑손 20 V769_D770insASV 형질도입된 Ba/F3 세포주를 생성하기 위해, 모 Ba/F3 세포를 재조합 EGFR V769_D770insASV 렌티바이러스로 감염시키고 그 후, 1 μg/ml의 푸로마이신 선택 및 IL3 고갈을 수행하였다. 생성된 세포주는 IL3의 부재하에 구성적으로 인산화된 EGFR 단백질을 발현 및 증식하며, 이는 시험관내 PD 및 항 증식 어세이에 사용될 수 있다.
인간 Her2 엑손 20 삽입 돌연변이 YVMA를 갖는 세포주는 인간 Her2 엑손 20 삽입 돌연변이 YVMA를 렌티바이러스 트랜스퍼 벡터 pMT143(Sunbio Co., Ltd.)로 서브클로닝하고 그 후 상기 렌티바이러스 트랜스퍼 벡터 및 렌티바이러스 패키징 플라스미드를 293T/17(아메리칸 타입 컬쳐 컬렉션(ATCC), CRL-11268) 세포로 형질감염시켜 인간 Her2 엑손 20 삽입 돌연변이 YVMA를 코딩하는 재조합 렌티바이러스를 생성함으로써 생성된다. 모 NIH-3T3 세포를 10% NBCS가 보충된 DMEM 배지(라이프 테크놀로지, Cat# 11835-055)에서 배양하였다. Her2 엑손 20 삽입 YVMA 형질도입된 NIH-3T3 세포주를 생성하기 위해, 모 세포를 재조합 Her2 엑손 20 삽입 YVMA 렌티바이러스로 감염시키고 그 후 1.0 μg/mL의 푸로마이신 선택을 수행하였다. 생성된 세포주는 인산화된 Her2 단백질을 발현하고 그의 증식은 돌연변이 유전자에 의존하며, 이는 시험관내 PD 및 항 증식 어세이에 사용될 수 있다.
재조합 인간 EGFR 엑손 20 H773_V774insNPH Ba/F3 세포주는 중국의 크라운 바이오사이언스 인코포레이티드(Cat# C2058)에서 구입하였다. 재조합 인간 EGFR 엑손 20 H769_V770insASV Ba/F3 세포주와 유사하게, 재조합 인간 EGFR 엑손 20 H773_V774insNPH Ba/F3 세포주는 또한 IL3의 부재하에 구성적으로 인산화된 EGFR 단백질을 발현 및 증식하며, 이는 시험관내 PD 및 항증식 어세이에 사용될 수 있다.
NCI-H1975 세포주(CRL5908TM)는 아메리칸 타입 컬쳐 컬렉션(ATCC)에서 구입한 점 돌연변이 EGFR L858R & T790M을 모두 함유한다.
실시예 100 : 효능 평가 EGFR (WT) 및 EGFR 돌연변이
돌연변이 EGFR 및 WT EGFR에 대한 화합물의 억제 활성 및 선택성을 실시예 99에서 기재된 바와 같이 WT EGFR 세포주 A-431(아메리칸 타입 컬쳐 컬렉션 (ATCC), CRL-1555TM) 및 돌연변이 세포주를 사용하여 평가하였다.
시험 하루 전, WT 또는 돌연변이 세포를 1% FBS가 보충된 상응하는 성장 배지를 사용하여 적절한 농도로 96 웰 플레이트에 시딩하고 밤새 인큐베이션하였다. 다음날, 일련의 농도로 시험 화합물을 각각의 플레이트의 개별 웰에 첨가하고, 플레이트를 5% CO2와 함께 37℃에서 4시간 동안 인큐베이션하였다. WT EGFR 세포주에 대하여, 10분 동안 100 ng/ml 재조합 hEGF(RD, Cat#236-EG)를 사용한 추가 자극을 시험 화합물과 인큐베이션한 후 및 MSD 키트로 분석하기 전에 수행하여야 한다.
각 웰에서 세포의 EGFR(Y1068) 인산화 레벨(활성)을 그 후 제조업체의 지침(MESO SCALE DISCOVERY, Cat# N45ZB-1)에 따라 "멀티-스폿(MULTI-SPOT)®96 4- 스폿 HB 프로토타입 EGFR 트리플렉스 분석물(ANALYTE): pEGFR(Tyr1068), pEGFR(Tyr1173), 총 EGFR" 명칭의 MSD 키트로 측정하였다. 어세이는 MSD SECTOR® 이미저를 갖는 세포의 인산화된 및 총 EGFR 둘 모두를 결정하기 위한 전기화학발광법이고, p-EGFR/총 EGFR의 비는 기계에 의해 생성될 수 있다. 각 웰에서 세포의 Her2(Y1248) 인산화 레벨(활성)을 제조업체의 지침(MESO SCALE DISCOVERY, Cat # K151CLD-3)에 따라 "포스포-ErbB2(Tyr1248) 어세이 전체 세포 용해물 키트(Phospho-ErbB2 (Tyr1248) Assay Whole Cell Lysate Kit)" 명칭의 MSD 키트로 측정하였다. 어세이는 MSD SECTOR® 이미저를 사용하여 세포의 인산화된 및 총 Her2 둘 모두를 결정하기 위한 전기화학발광법(MESO SCALE DISCOVERY)이며, 그 후 p-Her2/총 Her2의 비가 기계에 의해 생성될 수 있다. 억제 백분율은 하기식에 기초하여 계산되었다 : 억제 % = 100 x [1-(샘플 웰의 비 - 최소 ctrl 웰의 비)/(최대 비 - 최소 ctrl 웰의 비)]. IC50 값은 Prism GraphPad 7.0 또는 Microsoft Xlfit 소프트웨어를 사용하여 최적 곡선(best-fit curve)에서 50% 억제에 필요한 화합물의 농도로 계산되었다.
[표 2]
Figure pct00139
표 3은 상기 기재된 EGFR 억제 어세이에서 본 개시내용의 예시적인 화합물 및 양성 대조군으로서 다른 EGFR 억제제의 활성을 나타낸다. 돌연변이 EGFR 및 WT EGFR에 대한 시험 화합물의 선택성은 각각의 시험 화합물에 대한 데이터에 기초하여 평가될 수 있다. 화합물 번호는 표 1의 화합물 번호에 해당한다.
[표 3]
Figure pct00140
Figure pct00141
Figure pct00142
Figure pct00143
EGFR L858R 및 T790M 이중 돌연변이를 갖는 세포에 대한 화합물의 IC50은 야생형 EGFR에 대한 화합물의 IC50보다 최대 1500배 더 강력할 수 있다. 본 개시내용의 대부분의 화합물은 AZD9291과 비교하여 EGFR 엑손 20 NPH 및 ASV 삽입, 및 Her2 엑손 20 YVMA 삽입에 대해 더 높은 억제 활성을 나타낸다.
실시예 101 : 세포 증식 EGFR (WT) 및 EGFR 돌연변이
WT 또는 돌연변이 세포를 10% FBS가 보충된 상응하는 성장 배지를 사용하여적절한 농도로 384 웰 플레이트에 시딩하였고, 각각의 실험에 대해, 동일한 플레이트를 이중으로 준비하고, 플레이트는 밤새 인큐베이션 하였다. 다음날, 각각의 복제된 플레이트 중 하나에 일련의 농도로 시험 화합물을 투여하고, 복제된 플레이트 중 다른 하나는 G0 값에 대하여 분석하였다. 투여된 플레이트를 5% CO2와 함께 37℃에서 추가로 72시간 동안 인큐베이션하고, G0 플레이트 또는 투여된 플레이트의 각 웰에서 생 세포의 수를 CellTiter-Glo® 발광 세포 생존능 어세이(Promega)에 의해 측정하였다. 이 어세이는 루시퍼라아제 활성의 검출에 의한 세포 ATP 농도의 측정을 통해 생 세포 수를 결정하기 위한 발광 방법이다. 검출 시약(15 μl)을 웰마다 분배하고, 플레이트를 실온에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 그 후, 엔비젼 플레이트 판독기(PerkinElmer)를 사용하여 각 웰의 발광을 측정하였다. 증식의 백분율은 하기식에 기초하여 계산하였다: 증식 % = 100 x (샘플 웰의 G3 값-Go 값)/(DMSO 대조의 G3 값-Go 값). GI50 값은 진데이터 스크리너(Genedata Screener)® 소프트웨어를 사용하여 최적 곡선에서 50% 증식에 필요한 화합물 농도로 더 계산하였다.
[표 4]
Figure pct00144
표 5는 상기 기재된 증식 억제 어세이에서 본 개시내용의 예시적인 화합물 및 양성 대조로서 다른 EGFR 억제제의 증식 억제를 나타낸다.
[표 5]
Figure pct00145
Figure pct00146
Figure pct00147
Figure pct00148
EGFR L858R 및 T790M 이중 돌연변이를 갖는 세포에 대한 화합물의 GI50은 야생형 EGFR에 대한 화합물의 GI50보다 최대 25배 더 강력할 수 있다. 본 개시내용의 대부분의 화합물은 AZD9291과 비교하여 EGFR 엑손 20 NPH 및 ASV 삽입, 및 Her2 엑손 20 YVMA 삽입에 대해 더 높은 억제 활성을 나타낸다.
실시예 102: 세포 증식 BTK (WT)
3,750 세포/웰에서 OCI-LY-10, 2,000 세포/웰에서 TMD-8 및 Ri-1, 및 1,250 세포/웰에서 DB, 각각을 10% FBS를 갖는 RPMI1640 배지에서 384-웰 플레이트로 분류하였다. 밤새 인큐베이션한 후, 모든 세포를 일련의 농도에서 화합물과 인큐베이션 하였다. 한편, G0 값을 측정하기 위해 각 세포주의 복제 플레이트를 준비하였다. 투여된 플레이트를 72시간 동안 더 인큐베이션하고 생 세포의 수를 엔비젼 플레이트 판독기(PerkinElmer)를 사용하는 세포 ATP 농도의 측정을 통해 생 세포의 수를 결정하기 위한 발광 방법인 CellTiter-Glo® 발광 세포 생존능 어세이 (Promega)에 의해 측정하였다. 증식의 백분율은 하기와 같이 계산하였다 : 증식 % = 100 x (샘플 웰의 G3 값-G0 값)/(DMSO 대조의 G3 값-G0 값). GI50 값은 XLFit 소프트웨어를 사용하여 최적 곡선에서 50% 증식 억제에 필요한 화합물 농도로서 더 계산하였다.
표 6은 상기 기재된 증식 억제 어세이에서 본 개시내용의 예시적인 화합물 및 양성 대조로서 다른 BTK 억제제의 증식 억제를 나타낸다.
[표 6]
Figure pct00149
Figure pct00150
Figure pct00151
하기 표 7에 나타낸 바와 같이, 본 개시내용에 개시된 예시적인 화합물은 ACP-196 및 이브루티닙과 비교하여 더 낮은 약물 농도에서 더 우수한 효능 및 더 높은 수용체 점유율을 나타냈다.
p- BTK 어세이
1.5% FBS(Invitrogen)를 갖는 RPMI1640(Gibco)에서 Ramos 세포의 현탁액을 384-웰 소용량 백색 플레이트에 동일하게 분배하였다. 화합물을 플레이트메이트 플러스(Thermo)로 희석하고 ECHO 555 액체 핸들러(Labcyte)를 사용하여 어세이 플레이트에 첨가하여 0.1% DMSO 최종 농도를 제공하였다. 어세이 플레이트를 그 후 37℃, 5% CO2에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 바나데이트 당 300uM(3X)을 각 웰에 첨가하고, 어세이 플레이트를 37℃, 5% CO2에서 60분 동안 다시 인큐베이션하였다. Phospho-BTK(Tyr223)는 제조업체의 단일 플레이트 어세이 프로토콜에 따라 HTRF® 시약(Cisbio)을 사용하여 검출된다.
Btk 표적 부위 점유 효소 결합 면역흡착 어세이 .
마우스 및 인간 용해물에서 유리의 억제되지 않은 Btk의 검출을 위한 효소 결합 면역흡착 어세이(ELISA) 방법. 인간 또는 마우스 전혈을 37℃에서 2시간 동안 화합물과 함께 인큐베이션하였다. 전혈을 50 mM 트리스-HCl, pH 7.5, 150 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1% 트리톤 X-100을 함유하는 얼음 냉각된 용해 완충액에서 용해시켰다. 그 후 세포 용해물을 최종 농도 1μM에서 이브루티닙-비오틴과 함께 인큐베이션하였다. 샘플을 스트렙타비딘 코팅된 96 웰 ELISA 플레이트로 옮기고 실온에서 1시간 동안 진탕하면서 혼합하였다. α-Btk 항체(1:500; 클론 번호 D3H5, Cell signaling Technology, 미국 매사추세츠주 댄버스 소재)를 그 후 웰에 첨가하고 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 세척 후, 염소 α-토끼-HRP(PBS + 0.05% 트윈-20 + 1% BSA 중 1:5000 희석)를 각 웰에 첨가하고 실온에서 1 h 동안 인큐베이션 하였다. ELISA에 테트라메틸벤지딘(TMB)에 이어 정지 용액을 첨가하여 전개하고 OD 450nm에서 판독하였다.
[표 7]
Figure pct00152
실시예 103: 시험관내 랫트 /인간 간세포 클리어런스 어세이
랫트/인간 간세포 대사 안정성 어세이를 위한 프로토콜은 시험관 내에서 본 개시내용의 화합물의 클리어런스를 측정하기 위해 사용된다.
숫컷 성별의 랫트 간세포 및 혼합 성별의 인간 간세포는 상업적 벤더(예컨대, BioreclamationIVT)로부터 입수하여 사용 전 -150℃에서 저장하였다. 시험 화합물의 10 mM 스톡 용액을 DMSO에서 제조하였다. 해동 배지 및 보충 인큐베이션 배지(무 혈청)를 사용 전에 적어도 15분 동안 37℃ 물 배스에 두었다. 198 μL 아세토니트릴 및 2 μL의 10 mM 저장 용액을 조합하여 스톡 용액을 100μM로 희석시켰다.
동결 보존된 간세포의 바이알을 저장고에서 꺼내고, 바이알이 극저온에서 유지되도록 하였다. 바이알을 부드럽게 진탕하면서 37℃ 물 배스에서 해동시켰다. 모든 얼음 결정이 용해되어 더 이상 보이지 않을 때까지 바이알을 물 배스에 보관하였다. 바이알에 70% 에탄올을 분무한 후 생물안전 캐비닛으로 옮긴다. 이어서 내용물을 50 mL 해동 배지 원뿔형 관에 부었다. 바이알을 실온에서 10분 동안 100g에서 원심분리 하였다. 해동 배지를 흡인하고 간세포를 무 혈청 인큐베이션 배지로 재현탁시켜 ~ 1.5 Х 106 세포/mL를 수득하였다.
트리판 블루 배제(Trypan Blue exclusion)를 사용하여 세포 생존능 및 밀도를 계수한 다음, 세포를 무 혈청 인큐베이션 배지를 사용하여 1x106 생 세포/ ml의 작동 세포 밀도로 희석시켰다. 1 Х 106 생 세포/mL에서 간세포의 일부를 음성 대조로서 플레이트에 첨가하기 전에 10분 동안 비등시켜 효소 활성을 제거하여 기질 전환이 거의 또는 전혀 관찰되지 않아야 한다. 불활성화된 간세포를 사용하여 음성 샘플을 제조하였고, 이것을 화학 물질 자체의 불안정성으로 인한 오도 요인을 배제하기 위해 사용하였다.
247.5 μL 간세포의 분취량을 96 웰 비코팅 플레이트의 각 웰에 분배하였다. 플레이트를 회전 진탕기(orbital shaker) 상의 인큐베이터에 대략 10분 동안 두었다. 100 μM 시험 화합물 2.5 μL의 분취량을 코팅되지 않은 96 웰 플레이트의 각각의 웰에 첨가하여 반응을 개시하였다. 이 어세이는 이중으로 수행되었다. 플레이트를 설계된 시점 동안 회전 진탕기 상의 인큐베이터에서 인큐베이션하였다. 20 μL의 내용물을 옮기고 5, 15, 30, 45, 60, 80 및 100분의 시점에서 반응을 종결시키기 위해 내부 표준을 갖는 6 부피(120 μL)의 차가운 아세토니트릴과 혼합하였다. 샘플을 4000 g에서 20분 동안 원심 분리하고, 100 μL의 상청액의 분취량을 시험 화합물의 측정을 위해 LC-MS/MS 분석에 사용하였다
시험관내 간세포 클리어런스는 이들의 초기 농도로부터 화합물 소실의 제거 반감기(T1/2)의 결정에 기초하여 추정되었다. 각 화합물(시험 또는 대조군) 대 IS의 피크 면적비를 계산하였다. Ln(% 대조) 대 인큐베이션 시간(min) 곡선을 플롯하고, 선형 피팅 라인의 기울기를 계산하였다. 약물 제거 속도 상수 k(min-1), T1/2(min), 및 시험관내 고유 클리어런스 CLint(μL/min/E6)는 하기 수식에 따라 계산되었다.
k = -기울기
T1/2 = 0.693/k
CLint = k/Chep
여기서 Chep(세포ХμL-1)는 인큐베이션 시스템에서 세포 농도이다.
예시적인 데이터를 하기 표 8에 나타낸다.
[표 8]
Figure pct00153
Figure pct00154
간세포는 I 상 및 II 상 대사 효소를 모두 함유하기 때문에, 랫트/인간 간세포에서의 클리어런스 어세이는 간에서의 고유 클리어런스를 반영할 수 있다. 1차 스크리닝 어세이로서, 이것은 다음 라운드 생체내 랫트 약동학적 연구를 위한 화합물을 선택하고, 시험관내 - 생체내 외삽이 랫트에서 확립되는 경우 인간 간 클리어런스를 예측하기 위해 사용되었다.
실시예 104: 생체내 약동학적 연구
랫트 약동학적 연구를 위해, 6마리의 수컷 Han Wistar 랫트를 베이징 바이탈 리버(Beijing Vital River)로부터 구매하고, 0.5% 트윈-80 및 0.5% 히드록시프로필 메틸셀룰로오스(v/w) 중의 10 mg/kg의 시험 화합물을 경구 투여하였다. 투여 후, 0.5, 1, 2, 4, 7 및 16시간에서, 혈액 샘플(> 100 μL/시점)을 문맥으로부터 및 심장 천자를 통해 별개의 K2EDTA 응고된 관으로 수집한 다음 1500g, 5분 4℃에서 즉시 원심 분리하여 혈장을 분리하였다. 혈장 샘플을 4배 아세토니트릴(내부 표준 포함)과 함께, 10분 동안 볼텍스 및 4℃, 4000g에서 10분 동안 원심 분리하여 탈단백질화하였다. 상청액을 LC/MS/MS(API 5500, Applied Biosystems, Foster City) 분석에 제출하였다. 혈장 샘플 분석으로부터 각 배치의 시작과 끝에서 두 세트의 표준 곡선을 실행하였다.
화합물 흡수는 경구 투여 후 랫트에서 문맥 AUC(AUCHPV) 및 전신 AUC(AUCSYS)에 의해 관찰된 최대 농도(Cmax)에 의해 측정하였다. 용량은 SOA 연구에 사용된 실제 용량이다. 하기 표 9에 예시적인 시험 화합물에 대한 데이터를 나타낸다.
[표 9]
Figure pct00155
이 연구는 경구 흡수, 장 대사 및 간 추출에 의해 기여되는 Cmax 및 AUC의 관점에서 시험 화합물의 전신 노출을 평가하는 것을 목표로 한다. 이것은 생체내 약동학적 연구를 위한 화합물을 선택하기 위해 사용될 것이다.
본 개시내용이 특정 실시양태(이들 중 일부는 바람직한 실시양태임)를 참고하여 구체적으로 제시되어 기술되어 있지만, 당업자라면, 본원에서 개시된 바와 같은 본 개시내용의 기술적 사상 및 범위를 벗어남이 없이 그 안에서 형태 및 세부사항에서의의 다양한 변경이 이루어질 수 있다는 점을 이해할 수 있어야 한다.

Claims (23)

  1. 하기 화학식(I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체:
    Figure pct00156

    식 중,
    A1은 N 또는 CR8이고;
    A2, A3, A4 및 A5는 각각 독립적으로 N 또는 CR9이며, A2, A3, A4 및 A5 중 하나 만이 N이며;
    R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소 또는 할로겐, 히드록실, -NRaRb, C1-12 알킬, C1-12 알콕시, 3-10원 포화 또는 불포화 카르보시클릴, 3-10원 포화 또는 불포화 헤테로시클릴 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환된 C1-12 알킬이고, 각각의 C1-12 알킬, C1-12 알콕시, 3-10원 포화 또는 불포화 카르보시클릴, 3-10원 포화 또는 불포화 헤테로시클릴은 비치환되거나 C1-12 알킬에 의해 단일- 또는 다중- 치환될 수 있으며,
    Ra 및 Rb는 각각 독립적으로 수소 또는 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, 또는 C1-12 알콕시에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있는 C1-12 알킬로부터 선택되고,
    또는 Ra 및 Rb는 이들이 결합된 질소 원자와 함께 할로겐, 히드록실, 또는 C1-12 알킬에 의해 임의로 단일- 또는 다중- 치환된 3-10원 포화 또는 불포화 헤테로시클릴을 형성하며;
    또는 R1 및 R2는 이들이 결합된 질소 원자와 함께 N, O, 및 S로부터 선택된 하나 이상의 추가 헤테로원자를 임의로 포함하는 3-12원 모노시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 형성하며, 이 고리는 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬, C1-12 알콕시, -NRaRb, 또는 -C1-12 알킬-NRaRb에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있고;
    R3은 H, C1-12 알킬, 또는 -C1-12 알킬-NRaRb이며;
    R4 및 R5는 각각 독립적으로 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬, 또는 C1-12 알콕시 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환된 C1-6 알킬이고,
    또는 R4 및 R5는 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 N, O, 및 S로부터 선택된 하나 이상의 헤테로원자를 임의로 포함하는 3-10원 모노시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 형성하며, 이 고리는 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬, 또는 C1-12 알콕시 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있고;
    R6은 수소 또는 C1-12 알킬이고, 이 알킬은 중수소, 삼중수소, 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬 또는 C1-12 알콕시에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있으며;
    R7은 수소 또는 C1-12 알킬이고, 이 알킬은 중수소, 삼중수소, 할로겐, 또는 히드록실에 의해 임의로 단일- 또는 다중- 치환될 수 있으며;
    R8은 수소, 중수소, 삼중수소, 할로겐, 시아노, 히드록실, C1-12 알킬, C1-12 알콕실이고, 이들은 중수소, 삼중수소, 할로겐, 또는 C1-12 알킬 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있으며;
    R9는 없거나, 수소, 중수소, 삼중수소, 할로겐, 시아노, 히드록실, C1-12 알킬, 또는 C1-12 알콕실이고, 이들은 중수소, 삼중수소, 할로겐, 또는 C1-12 알킬 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있으며;
    n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
    각각의 R은 독립적으로 수소, 중수소, 삼중수소, 할로겐, 시아노, 히드록실, C1-12 알킬, C1-12 알콕시, 3-10원 포화 또는 불포화 카르보시클릴, 또는 그것이 결합된 고리와 함께 융합된 3-10원 포화 또는 불포화 헤테로시클릴이고, 이들은 중수소, 삼중수소, 할로겐, 또는 C1-12 알킬 중 하나 이상에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환될 수 있다.
  2. 제1항에 있어서, A1은 N인 화합물.
  3. 제1항에 있어서, A1은 CH인 화합물.
  4. 제1항에 있어서, A2, A3, A4 및 A5는 각각 독립적으로 CR9인 화합물.
  5. 제1항에 있어서, R1 및 R2는 각각 독립적으로 하기 기들로부터 선택되는 것인 화합물:
    Figure pct00157
    .
  6. 제1항에 있어서, R1 및 R2는 이들이 결합된 질소 원자와 함께 하기의 기들로부터 선택된 3-12원 모노시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 형성하며, 이 고리는 할로겐, 히드록실, C1-12 알킬, C1-12 알콕시, -NRaRb, 또는 -C1-12 알킬-NRaRb에 의해 임의로 단일- 또는 독립적 다중- 치환된 것인 화합물:
    Figure pct00158
    .
  7. 제1항에 있어서, R1 및 R2는 이들이 결합된 질소 원자와 함께 하기의 기를 형성하는 것인 화합물:
    Figure pct00159
  8. 제1항에 있어서, n은 2이고, A2 및 A5는 CH이며, A3 및 A4는 각각 독립적으로 R에 의해 치환된 CH이고, R은 각각 독립적으로 할로겐이며, R4 및 R5는 각각 독립적으로 비치환된 C1-6 알킬인 화합물.
  9. 제1항에 있어서, 하기 화학식들로 구성된 군으로부터 선택된 화합물:
    Figure pct00160

    Figure pct00161

    Figure pct00162

    Figure pct00163

    Figure pct00164

    Figure pct00165
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 결정질 형태인 화학식(I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체.
  11. 제1 활성 성분으로서 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 하나 이상의 화학식(I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체, 및 약제학적으로 허용 가능한 희석제, 부형제 또는 담체를 포함하는 약제학적 조성물.
  12. EGFR을 억제하기 위한 의약으로서 사용하기 위한, 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 화학식(I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체, 또는 제11항의 약제학적 조성물.
  13. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항의 하나 이상의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체, 또는 제11항의 약제학적 조성물을 사용하여 ErbB 또는 BTK를 억제하는 방법.
  14. 대상에서 ErbB 관련 질환 또는 BTK 관련 질환을 치료하는 방법으로서, 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항의 하나 이상의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체, 또는 제9항의 약제학적 조성물을 유효량으로 대상에게 투여하는 것을 포함하는 방법.
  15. 제14항에 있어서, 대상은 인간과 같은 온혈 동물인 방법.
  16. 제14항에 있어서, ErbB 관련 질환은 암인 방법.
  17. 제14항에 있어서, BTK 관련 질환은 종양학적 질환 또는 자가면역 질환인 방법.
  18. 제17항에 있어서, 종양학적 질환은 림프종 또는 백혈병인 방법.
  19. 제17항에 있어서, 자가면역 질환은 류마티스성 관절염, 전신 홍반성 루푸스 또는 쇼그렌 증후군인 방법.
  20. 제13항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, ErbB는 EGFR 또는 Her2이고, 바람직하게는 돌연변이 EGFR 또는 돌연변이 Her2인 방법.
  21. 제20항에 있어서, 돌연변이 EGFR은 EGFR D761_E762insEAFQ, EGFR A763_Y764insHH, EGFR M766_A767instAI, EGFR A767_V769dupASV, EGFR A767_S768insTLA, EGFR S768_D770 dupSVD, EGFR S768_V769insVAS, EGFR S768_V769insAWT, EGFR V769_D770insASV, EGFR V769_D770insGV, EGFR V769_D770insCV, EGFR V769_D770insDNV, EGFR V769_D770insGSV, EGFR V769_D770insGVV, EGFR V769_D770insMASVD, EGFR D770_N771insSVD, EGFR D770_N771insNPG, EGFR D770_N771insAPW, EGFR D770_N771insD, EGFR D770_N771insDG, EGFR D770_N771insG, EGFR D770_N771insGL, EGFR D770_N771insN, EGFR D770_N771insNPH, EGFR D770_N771insSVP, EGFR D770_N771insSVQ, EGFR D770_N771insMATP, EGFR delD770insGY, EGFR N771_P772insH, EGFR N771_P772insN, EGFR N771_H773dupNPH, EGFR delN771insGY, EGFR delN771insGF, EGFR P772_H773insPR, EGFR P772_H773insYNP, EGFR P772_H773insX, EGFR P772_H773insDPH, EGFR P772_H773insDNP, EGFR P772_H773insQV, EGFR P772_H773insTPH, EGFR P772_H773insN, EGFR P772_H773insV, EGFR H773_V774insNPH, EGFR H773_V774insH, EGFR H773_V774insPH, EGFR H773_V774insGNPH, EGFR H773_V774dupHV, EGFR H773_V774insG, EGFR H773_V774insGH, EGFR V774_C775insHV, EGFR 엑손19 결실, EGFR L858R, EGFR T790M, EGFR L858R/T790M, EGFR 엑손 19 결실/T790M, EGFR S768I, EGFR G719S, EGFR G719A, EGFR G719C, EGFR E709A/G719S, EGFR E709A/G719A, EGFR E709A/G719C, 및 EGFR L861Q로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 방법.
  22. 제20항에 있어서, 돌연변이 Her2는 Her2 A775_G776insYVMA, Her2 delG776insVC, Her2 V777_G778insCG 및 Her2 P780_Y781insGSP로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 방법.
  23. 제2 치료제, 바람직하게는 항종양제와 조합된, 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 화학식(I)의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체.
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