KR20200098045A - 대황 추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선을 위한 조성물 - Google Patents

대황 추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선을 위한 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20200098045A
KR20200098045A KR1020190015650A KR20190015650A KR20200098045A KR 20200098045 A KR20200098045 A KR 20200098045A KR 1020190015650 A KR1020190015650 A KR 1020190015650A KR 20190015650 A KR20190015650 A KR 20190015650A KR 20200098045 A KR20200098045 A KR 20200098045A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
composition
preventing
extract
ultraviolet rays
skin damage
Prior art date
Application number
KR1020190015650A
Other languages
English (en)
Other versions
KR102189415B1 (ko
Inventor
이선희
신유경
이근석
안혜신
Original Assignee
코스맥스바이오 주식회사
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 코스맥스바이오 주식회사 filed Critical 코스맥스바이오 주식회사
Priority to KR1020190015650A priority Critical patent/KR102189415B1/ko
Publication of KR20200098045A publication Critical patent/KR20200098045A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102189415B1 publication Critical patent/KR102189415B1/ko

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789Magnoliopsida [dicotyledons]
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q17/00Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
    • A61Q17/04Topical preparations for affording protection against sunlight or other radiation; Topical sun tanning preparations
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00Function of food ingredients
    • A23V2200/30Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/318Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on skin health and hair or coat
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/74Biological properties of particular ingredients
    • A61K2800/78Enzyme modulators, e.g. Enzyme agonists
    • A61K2800/782Enzyme inhibitors; Enzyme antagonists
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • A61K2800/92Oral administration

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

본 발명은 대황 (Eisenia bicyclis) 추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선을 위한 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 조성물은 자외선에 의해 손상된 인간 피부세포에서 프로콜라겐의 분비를 증가시키고, 피부탄력 저해유전자 MMP-1(Matrix Metalloproteinase-1)의 분비 및 상위 기전인 MAPKs (Mitogen-activated protein kinases)와 AP-1 (Activator protein-1) complex의 인산화를 억제시킴으로써, 자외선에 의한 인간 피부세포 손상의 예방 또는 개선 효과를 확인하였다. 따라서 본 명세서에 개시된 대황 (Eisenia bicyclis) 추출물을 포함하는 조성물은 건강기능식품 또는 화장료 조성물로서 유용하게 사용될 수 있다.

Description

대황 추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선을 위한 조성물{Compositions for preventing or improving the UV-induced skin damage comprising the extract of Eisenia bicyclis as an active ingredient}
본 발명은 자외선에 의한 피부손상 예방 또는 개선용 조성물에 관한 것이다. 더욱 구체적으로 대황 (Eisenia bicyclis) 추출물을 유효성분으로 포함하여 자외선의 자극으로 인한 피부탄력 저해유전자 MMP-1(Matrix Metalloproteinase-1) 분비를 억제시키고, 프로콜라겐의 분비를 증가시킴으로써, 자외선 노출에 의해 생기는 피부 손상을 예방 또는 개선하는 조성물에 관한 것이다.
사람의 피부는 크게 표피층, 진피층, 피하지방층으로 구성되어 있다. 피부의 가장 기본적인 역할은 우리 몸으로부터 수분이 증발되는 것을 막아주고, 외부로부터 유해성분이 침입하는 것을 막아주는 것이다. 이러한 피부는 항상 외부자극에 노출되어 있기 때문에 다양한 방어능력을 가지고 있다.
또한, 피부는 아름다움을 나타내는 표상으로써 피부가 건강하고 깨끗함은 곧 사람의 아름다움으로 인식되는 경우가 많다. 최근 들어, 여성뿐만 아니라 남성들도 피부노화 등 여러 가지 피부트러블들에 대한 관심이 많아지면서 이와 관련된 제품들이 많이 개발되고 있다.
피부노화는 요인에 따라 내인성 노화(Intrinsic aging)와 외인성 노화(Extrinsic aging)로 구분할 수 있다. 내인성 노화는 나이에 따른 피부 표피 및 진피의 생리적 기능 변화가 원인이며, 외인성 노화는 대기오염, 자외선 노출, 스트레스 등의 환경으로부터 발생하는 피부의 생리적 기능 변화가 원인으로 알려져 있다. 특히 외인성 노화의 주요원인으로 광노화(photoaging)를 들수 있는데, 오랫동안 햇빛에 노출된 얼굴, 손등, 목뒤 등의 피부에서 관찰되는 노화현상을 말하는 것으로 내인성 노화 현상과 자외선에 의한 영향이 합쳐진 결과로 발생한다.
이러한 피부노화의 원인은 UV에 의해 유도되는 산화적 스트레스(Oxidative Stress)가 체내의 자유라디칼(Free Radical)을 증가시키고, 이로 인해 피부 내 콜라겐의 양이 부족해지고, 탄력섬유인 히알우론산(Hyaluronic acid)가 변성되어 나타난다고 알려져 있다. 피부노화가 진행되는 과정 중에는 다양한 신호전달경로를 통해 콜라겐 분해효소인 matrix metalloproteinase-1(MMP-1)의 활성 증가 및 히알우론산(Hyaluronic acid)을 분해하는 히알우론다제(Hyaluronidase)의 활성 증가로 피부 표피 및 진피 손상을 야기한다.
일상생활에서 우리는 햇빛에 항상 노출되어 있으며, 특히 UV-B 노출로 인해 발생하는 세포의 손상 및 피부암 유발은 일상생활에서 피할 수 없는 요소이다. 이에 따라, 최근 자외선 노출에 의한 피부세포손상 예방 또는 개선에 대한 생화학적 효능, 효과를 나타내는 소재에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다.
대황(Eisenia bicyclis) 은 다시마목 감태과의 여러살이해 갈조식물로 대한민국의 울릉도, 독도 해역에 분포하며, 식약처에서 고시한 식품원재료에 전체부위가 식용가능부위로 명시되어 있다.
대황(Eisenia bicyclis)은 엑콜(eckol), 디엑콜(dieckol) 등과 같은 플로로탄닌(phlorotannin), 푸코스테롤 (Fucosterol) 과 같은 스테롤(sterol), 다당류 , 피로페오피틴(pyropheophytin), 펩타이드(peptides), 옥실리핀(oxylipin) 등과 같은 생리활성성분이 보고된 바 있으며, 고지혈증 및 당뇨 치료효과 (한국공개특허 KP10-2008-002846), 파필로마바이러스(HPV) 감염 치료 또는 예방 효과 (한국공개특허 KP10-2016-0089992). 미백활성 (한국공개특허 KP10-1749-5490000)에 대한 보고가 이루어지고 있다.
하지만 상기 성분은 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선 대한 직접적인 기전 연구가 이루어지지 않은 실정이다. 따라서 본 발명자들은 상기 성분이 가지는 자외선에 의한 인간 진피세포 손상 억제에 대한 직접적인 기초 효능 연구를 수행하였다.
이에, 본 발명자들은 상기 종래기술들의 문제점들을 극복하기 위하여 연구한 결과, 대황(Eisenia bicyclis) 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물이 인간 진피세포에서 프로콜라겐의 분비를 증가시켰다. 또한, MMP-1(Matrix Metalloproteinase-1)의 감소 및 이의 상위 기전인 MAPKs (Mitogen-activated protein kinases)와 AP-1 (Activator protein-1) complex의 인산화를 억제시킴으로서, UV-B에 의한 피부 손상을 억제해 피부개선효과를 나타낼 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.
KR 1020090077098 A KR 1020180008119 A KR 1020170019112 A
Kim, Sang Min, Kang, Kyungsu, Jeon, Je-Seung, Jho, Eun Hye, Kim, Chul Young, Nho, Chu Won, Um, Byung-Hun Isolation of phlorotannins from Eisenia bicyclis and their hepatoprotective effect against oxidative stress induced by tert-butyl hyperoxide. Applied biochemistry and biotechnology, 2011, 165: 1296-1307 Kim, EB , Kwak, JH, Antiviral phlorotannin from Eisenia bicyclis against human papilloma virus in vitro, Planta medica 2015, 81 , 0032-0943
따라서, 본 발명의 주된 목적은 대황 (Eisenia bicyclis) 추출물을 유효성분으로 하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선 조성물을 포함하는 건강기능식품 조성물 또는 화장품 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 대황(Eisenia bicyclis)의 추출물을 유효성분으로 함유하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선용 조성물을 제공한다.
본 발명에 있어서, 상기 피부 손상은 자외선에 의한 인간 진피세포의 손상인 것을 특징으로 하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선용 조성물을 제공한다.
본 발명의 실험예에서는 대황 (Eisenia bicyclis) 추출물이 자외선으로 손상된 진피세포에서 손상된 세포를 증식 또는 복구하고, MMP-1(Matrix Metallo- proteinase-1)의 생성을 감소시키고, 프로콜라겐 생성량을 증가시킴으로써 자외선에 의한 피부손상을 예방, 개선 또는 치료하는 효과가 있음을 증명하였다.
본 발명에 있어서, 피부의 “손상”이란 자외선에 의한 인간 피부세포의 사멸, 피부 세포 DNA 손상, 활성산소종 증가, 지질과산화 증가 등을 포함하며, 그 증상으로는 홍반, 일광화상, 색소침착, 광노화, 피부암 등을 포함할 수 있다. 또한, 손상의“예방”은 상기 자외선에 의한 피부세포의 손상을 억제시키거나 지연시키는 모든 행위를 의미한다. 또한, 손상의 “개선”은 상기 자외선에 의한 피부세포의 손상 상태의 완화 또는 증상의 정도를 감소시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에 있어서, 대황 (Eisenia bicyclis) 추출물은 종래에 천연식물을 추출하기 위하여 이용된 열수추출, 용매추출, 증류추출, 초임계 추출 등 어떠한 추출방법으로도 추출될 수 있으며, 바람직하게는 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매로 추출되는 것을 특징으로 한다. 상기 유기용매는 탄소수 1 내지 4의 알코올, 예컨대 에탄올, 메탄올, 이소프로판올, 및 부탄올 등으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상이 사용될 수 있으며, 바람직하게는 에탄올이 사용될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 발효주정이 사용될 수 있다(실시예 1 참조).
본 발명에 있어서, 상기 추출물은 조성물 총 중량대비 0.001 내지 80.0 중량%로 포함할 수 있으며, 바람직하게는 5 내지 20 중량% 포함하는 것을 특징으로 한다. 또한 상기 조건에서 높은 수율과 뛰어난 자외선으로 부터의 피부 복구 효능을 나타냄을 확인할 수 있었다.
본 발명에 있어서, 상기 조성물은 자외선으로부터 자극된 피부의 보습 또는 주름개선용으로 사용되는 것을 특징으로 하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선용 조성물을 제공한다. 본 발명의 실험예에서 자외선에 의해 증가되었던 MMP-1(Matrix Metalloproteinase-1)의 생성과 MAPK (Mitogen-activated protein kinases)및 AP-1 (Activator protein-1) complex의 인산화를 감소시키고, 프로콜라겐 의 생성을 증가시키는 효과는 본 발명의 조성물이 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선용뿐만 아니라, 자외선으로부터 자극된 피부의 보습 또는 주름개선 용도로도 사용될 수 있다는 것을 알려준다(실험예 1 내지 4 참조).
본 발명에 있어서, 상기 조성물은 정제, 과립제, 환제, 캡슐제, 액상형, 젤리 또는 껌으로 구성되는 군으로부터 선택된 하나 이상의 제형을 갖는 것으로서, 구강 섭취용 인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 있어서, 상기 조성물은 유연화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 수분 크림, 스팟, 젤 로션 또는 연고로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 제형을 갖는 것으로서, 피부 외용제용 인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 대황 (Eisenia bicyclis) 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 다양한 용도로 사용될 수 있으며, 예컨대 화장품 조성물, 건강기능식품 조성물 등으로 사용될 수 있다. 상기 화장품 조성물은 피부 외용제용뿐만 아니라 구강 섭취용이 될 수도 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면 활성제, 보습제, 저급 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 건강기능식품 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제, 또는 희석제 등을 더 포함할 수 있다. 상기 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제, 또는 희석제는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 마그네슘스테아레이트, 및 광물유 등으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상이 포함될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
본 발명에 따른 조성물의 투여량은 피부 손상의 정도, 연령, 체중, 제제화 방법, 투여 경로에 따라 다양할 수 있다. 본 발명에 따른 조성물의 투여는 하루에 1회 투여될 수 있고, 수회에 나누어 투여될 수 있다. 따라서 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다. 본 발명에 따른 조성물의 바람직한 투여량은, 1일 0.001 mg/kg 내지 1,OOO mg/kg일 수 있다.
이상 설명한 바와 같이, 본원발명의 대황 (Eisenia bicyclis) 추출물을 함유하는 조성물은 자외선노출에 의해 증가되는 MMP-1(Matrix Metalloproteinase-1)의 분비를 감소시키고, 프로콜라겐의 분비를 증가시킴으로써 자외선에 의한 피부노화를 방지하고 피부탄력을 유지시킬 수 있다. 따라서 본 발명의 조성물은 식품 또는 화장품 조성물로서 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 대황 (Eisenia bicyclis)추출물 처리시 세포증식율을 비교한 그래프이다.
도 2는 대황 (Eisenia bicyclis) 추출물 처리시 변화되는 MMP-1 (Matrix Metallo- proteinase-1) 억제효능을 나타낸 그래프이다.
도 3은 대황 (Eisenia bicyclis)추출물 처리시 변화되는 프로콜라겐 생성량을 나타낸 그래프이다.
도 4는 대황 (Eisenia bicyclis) 추출물 처리시 신호전달 경로의 인산화 변화를 나타낸 그림이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이러한 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.
실시예 1: 대황 ( Eisenia bicyclis )추출물 제조
본 발명의 조성물 중 대황 (Eisenia bicyclis) 추출물은 다음과 같은 과정에 의해 제조된다. 우선, 대황 (Eisenia bicyclis)은 울릉도에서 채집하여 건조시킨 재료를 구매해 이용하였다. 세절한 대황 (Eisenia bicyclis) 10 g을 열수와 30% 발효주정 500mL(50배, v/v)을 사용하여 각각 100℃, 60℃에서 5시간 동안 환류 추출하였다. 추출에 의해 얻어진 물질은 상온에서 와트만(No 2.) 추출 용매 여과지를 사용하여 불용성 물질을 제거하였다. 그 후, 냉각 콘덴서가 달린 증류장치에서 감압농축 하면서 용매를 완전히 제거하였다. 대황 (Eisenia bicyclis) 추출물을 완전히 건조 후 추출 수율을 측정한 결과 각각 열수 추출물 31% 와 30% 발효주정 추출물 17.4%의 수율을 나타내었다.
실험예 1: 대황 ( Eisenia bicyclis ) 추출물의 자외선에 의한 손상된 세포의 증식 확인
상기 실시예 1에서 얻은 시료에 대하여 자외선(Ultraviolet B, UV-B)에 노출시킨 피부세포의 손상을 복구할 수 있는지 측정하였다. 본 실험에서 진피세포로 HS68 fibroblast를 사용하였다. 자외선에 의한 피부세포 손상 예방 또는 개선의 효능이 있는지 확인하기 위해, 1.0 X 104 cells/well 의 농도로 각각의 세포들을 96-웰 플레이트 상에 24시간동안 부착시켜 안정화 시켰다. UV-B를 조사하기 위해, 기존 배지를 제거하고, PBS (Phosphate BuffeR Solution) 세척을 한 후 15 mJ/cm2으로 UV-B를 처리하였다. 이후 시료를 처리한 배지를 이용해 24시간 배양 후, MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay를 통해 세포 생존 정도를 측정하였다.
MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide)assay는 살아있는 세포의 미토콘드리아에 의해 환원된 MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide)로부터 형성된 포마잔의 양을 측정하는 방법이다. 더 자세하게는, 최종적으로 0.5 mg/ml 농도가 될 수 있도록 MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide)용액을 각각의 세포에 처리하고 4시간동안 배양한 후, 용액을 완전히 제거하고 DMSO (Dimethyl sulfoxide)로 용해시킨 플레이트를 540 nm의 흡광도에서 측정하였다.
도 1에 도시된 것과 같이, 15 mJ/cm2 UV-B로부터 손상이 야기된 진피세포에서 실시예 1의 모든 추출물 (E.bicyclis Hot Water: 대황 (Eisenia bicyclis) 열수추출물, E. bicyclis 30% EtOH: 대황 (Eisenia bicyclis) 30% 주정추출물)이 세포독성을 나타내지 않았다. 특히 대황 (Eisenia bicyclis) 30% 주정추출물에서는 세포증식 효과를 확인하였다. 대황 (Eisenia bicyclis) 30% 주정추출물의 가장 낮은 농도에서도 UV-B에 의해 세포가 손상되는 것을 개선하는 것으로 보아 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선에 우수한 효능을 가진다는 것을 알 수 있었다.
실험예 2: MMP-1(Matrix Metalloproteinase-1)의 함량 분석
상기 실시예 1에서 얻은 추출물에 대하여 진피세포 Hs68 fibroblast에서 MMP-1 (Matrix Metalloproteinase-1)의 분비를 억제시킬 수 있는지 측정하였다. UV-B에 의해 증가하는 MMP-1 (Matrix Metalloproteinase-1)의 분비량을 추출물에 의해 감소 혹은 증가 억제를 할 수 있는지 확인하기 위해, 1.0 X 105 cells/well의 농도로 각각의 세포들을 24-웰 플레이트 상에 분주하고 24시간동안 안정화시켰다. 이후 UV-B를 조사하기 위해, 기존 배지를 제거하고, PBS (Phosphate BuffeR Solution) 세척을 한 후 15 mJ/cm2으로 UV-B를 처리하였다. 그리고, 시료를 처리한 배지를 이용해 48시간 배양 후 상층액에서 MMP-1 (Matrix Metalloproteinase-1) Human ELISA Kit(ab100603, abcam, US)를 사용하여 MMP-1 (Matrix Metalloproteinase-1)의 분비 정도를 측정하였다.
도 2에 도시된 것과 같이, 15 mJ/cm2의 UV-B부터 손상이 야기된 진피세포에서 실시예 1의 모든 추출물들이 MMP-1 (Matrix Metalloproteinase-1) 생성을 농도 의존적으로 감소시켰다. 특히 대황 (Eisenia bicyclis) 30% 주정추출물은 50 μg/ml의 저 농도에서도 매우 효과적으로 MMP-1(Matrix Metalloproteinase-1)의 분비를 억제하는 것을 확인하였다.
실험예 3: 프로콜라겐 타입 1 의 함량 분석
상기 실시예 1에서 얻은 시료에 대하여 진피세포 Hs68 fibroblast에서 프로콜라겐 타입1 을 증가시킬 수 있는지 측정하였다. 추출물 처리에 따라 프로콜라겐 타입1 의 분비양이 증가할 수 있는지 확인하기 위해, 1.0 X 105 cells/well의 농도로 각각의 세포들을 24-웰 플레이트 상에 분주하고 24시간동안 안정화시켰다. 이후 UV-B를 조사하기 위해, 기존 배지를 제거하고 PBS (Phosphate BuffeR Solution) 세척을 한 후 15 mJ/cm2으로 UV-B를 처리하였다. 시료를 처리한 배지를 이용해 48시간 배양 후 상층액에서 Procollagen Type I C-peptide(PIP) EIA kit(Mk101, Takara, japan)를 사용하여 프로콜라겐 타입1 의 분비 정도를 측정하였다.
도 3에 도시된 것과 같이, 15 mJ/cm2 UV-B로부터 손상이 야기된 진피세포에서 실시예 1의 모든 추출물이 프로콜라겐 생성량을 증가시켰다. 특히 대황 (Eisenia bicyclis) 30% 주정추출물의 경우 25 μg/ml의 저 농도에서도 우수한 프로콜라겐 생성 효과를 보였다. 이로써, 실시예 1이 프로콜라겐의 생성을 증가시켜 자외선으로부터 분해된 콜라겐 섬유들의 재생을 도와 자외선에 의한 피부 손상을 예방 또는 개선한다는 것을 확인하였다.
실험예 4: 대황 ( Eisenia bicyclis ) 추출물의 MAPKs(Mitogen-activated protein kinase) 와 AP-1 (Activator protein-1) complex의 인산화 조절
상기 실시예 1에서 얻은 시료에 대하여 진피세포 Hs68 fibroblast에서 MMP-1의 분비량을 조절하는 상위 기전에 대해 발현양을 확인하였다. 물질처리에 따라 MAPKs (Mitogen-activated protein kinase)와 AP-1 (Activator protein-1) complex의 발현양이 달라질 수 있는지 확인하기 위해, 2.0 X 106 cells/well의 농도로 각각의 세포들을 60mm 플레이트 상에 분주하고 24시간동안 안정화시켰다. 이후 UV-B를 조사하기 위해, 기존 배지를 제거하고 PBS (Phosphate BuffeR Solution) 세척을 한 후 15 mJ/cm2으로 UV-B를 처리하였다. 시료를 처리한 배지를 이용해 1시간 배양 후 세포 내 단백질을 RIPA buffer (Radioimmunoprecipitation assay buffer) 로 추출하였다. 추출한 각각의 단백질 20 μg을 SDS-PAGE (Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis) 로 분리한 뒤 nitrocellulose membrane에 transfer한 뒤 1차 항체 (MAPK: phospho-p38, phospho-ERK, phospho-JNK, AP-1 complex: phospho-c-jun, phospho-c-fos)를 24시간 처리하였다. 그 후 각각의 단백질의 인산화 정도를 화학발광 분석을 통해 확인하였다.
도 4에 도시된 것과 같이, 15 mJ/cm2 UV-B로부터 손상이 야기된 진피세포에서 실시예 1의 모든 추출물이 MAPK (Mitogen-activated protein kinase) 단백질 중 특히 p38 및 ERK (Extracellular signal regulated kinase) 의 인산화를 효과적으로 억제하였다. 또한 MAPK (Mitogen-activated protein kinase)의 하위기전인 AP-1 (Activator protein-1) complex 중 UV-B처리에 의해 증가한 c-jun의 인산화를 실시예 1의 모든 추출물이 효과적으로 감소시키는 것을 확인할 수 있었다. 이로써, 실시예 1이 MMP-1(Matrix Metalloproteinase-1)의 발현을 조절하는 기전 역시 억제함으로써 자외선에 의한 피부 손상을 예방 또는 개선한다는 것을 확인하였다.
제형예 1: 정제의 제조
상기 실시예 1에 대하여 통상의 정제 제조방법에 따라 하기 표 1의 성분을 혼합하고 타정하여 정제를 제조한다.
원료명 단위중량 (mg)
실시예 1 100
옥수수 전분 100
유당 100
스테아린산 2
제형예 2: 캡슐제의 제조
상기 실시예 1에 대하여 통상의 캡슐제 제조방법에 따라 하기 표 2의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 연질캡슐제를 제조한다.
원료명 단위중량 (mg)
실시예 1 100
비타민 E 2.25
비타민 C 2.25
팜유 0.5
식물성 경화유 2
황납 1
레시틴 2.25
연질캡슐충진액 387.75
제형예 3: 액제의 제조
상기 실시예 1에 대하여 기호에 적합한 음료 제조방법에 따라서 하기 표 3의 성분을 혼합하고 과병 또는 파우치에 충전하여 액제를 제조한다.
원료명 단위중량 (g)
실시예1 2.5050
산탄검 0.0075
프락토올리고당액 0.7500
코코넛꽃진액분말 1.0500
쌍화농축액 1.5000
홍삼향 0.0450
정제수 9.1425
제형예 4: 젤리의 제조
상기 실시예 1에 대하여 기호에 적합한 젤리 제조방법에 따라서 하기 표 4의 성분을 혼합하고 삼면포에 충전하여 젤리를 제조한다.
원료명 단위중량 (g)
실시예1 2.0000
푸드겔 0.3600
카라기난 0.0600
젖산칼슘 0.1000
구연산나트륨 0.0600
복합황금추출물 0.0200
효소처리스테비아 0.0440
프락토올리고당액 5.0000
적포도농축액 2.4000
정제수 13.9560
제형예 5 : 영양크림의 제조
상기 실시예 1에 대하여 영양크림을 통상의 방법에 따라 하기 표 5의 조성으로 제조하였다.
원 료 함 량 (%)
실시예1 1.0
시토 스테롤 4.0
폴리글리세릴 2-올레이트 3.0 3.0
세테아레스-4 2.0
콜레스테롤 3.0
디세틸포스페이트 0.4
농글리세린 5.0
선플라우어오일 22.0
카르복시비닐폴리머 0.5
트리에탄올아민 0.5
방부제 미량
향료 미량
정제수 잔량
상기의 조성비는 일반적으로 적합한 성분을 혼합하여 제형예로 조성하였지만, 필요에 따라서 그 배합비 및 원료를 임의로 변경 실시하여도 무방하다.
본 발명의 추출물은 모든 제형예 시험 조건에서 안정하므로 제형의 안정성에는 문제가 없었다.

Claims (7)

  1. 대황(Eisenia bicyclis) 추출물을 유효성분으로 함유하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선용 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 건강기능식품 조성물 또는 화장품 조성물인 것을 특징으로 하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선용 조성물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출되는 것을 특징으로 하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선용 조성물.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 추출물은 조성물 총 중량대비 0.001 내지 80중량% 포함하는 것을 특징으로 하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선용 조성물.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 추출물은 자외선에 의해 손상된 피부세포를 증식시키고, 피부탄력 저해 유전자 MMP-1(Matrix Metalloproteinase-1)의 생성을 감소시키고, 프로콜라겐 (Pro-collagen type 1)의 생성을 증가시키는 것을 특징으로 하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선용 조성물.
  6. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 조성물은 정제, 과립제, 환제, 캡슐제, 액상형, 젤리, 껌으로 구성되는 군으로부터 선택된 하나 이상의 제형을 갖는 것으로서, 구강 섭취용인 것을 특징으로 하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선용 조성물.
  7. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 조성물은 유연화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 수분 크림, 스팟, 젤, 로션, 연고로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 제형을 갖는 것으로서, 피부 외용제용인 것을 특징으로 하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선용 조성물.
KR1020190015650A 2019-02-11 2019-02-11 대황 추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선을 위한 조성물 KR102189415B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020190015650A KR102189415B1 (ko) 2019-02-11 2019-02-11 대황 추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선을 위한 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020190015650A KR102189415B1 (ko) 2019-02-11 2019-02-11 대황 추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선을 위한 조성물

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20200098045A true KR20200098045A (ko) 2020-08-20
KR102189415B1 KR102189415B1 (ko) 2020-12-11

Family

ID=72242711

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020190015650A KR102189415B1 (ko) 2019-02-11 2019-02-11 대황 추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선을 위한 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR102189415B1 (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20220075077A (ko) * 2020-11-27 2022-06-07 재단법인 환동해산업연구원 대황효소추출물을 유효성분으로 하는 피부 미백 및 주름개선용 화장료 조성물 및 그 제조방법

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20220152594A (ko) 2021-05-07 2022-11-17 세명대학교 산학협력단 대황 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증용 한방 조성물

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100879558B1 (ko) * 2007-07-31 2009-01-22 라이브켐 주식회사 디벤조­파라­디옥신 유도체를 유효성분으로 함유한 피부보호 및 개선제
KR20090077098A (ko) 2008-01-10 2009-07-15 대구가톨릭대학교산학협력단 고지혈증 및 당뇨 치료용 대황 효소추출물, 대황정제환 및이의 제조방법
KR20130043872A (ko) * 2011-10-21 2013-05-02 재단법인 경북해양바이오산업연구원 대황 추출물에서 추출된 화합물을 포함하는 자외선에 대한 피부보호용 조성물
KR20170019112A (ko) 2015-08-11 2017-02-21 대한민국(관리부서:국립수산과학원) 대황 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백활성 조성물
KR20170052556A (ko) * 2017-05-04 2017-05-12 연세대학교 산학협력단 퓨코스테롤을 유효성분으로 포함하는 피부노화 개선용 및 피부 보습용 화장료 조성물
KR20180008119A (ko) 2016-07-15 2018-01-24 성균관대학교산학협력단 해조류 대황 추출물 또는 분획물을 유효성분으로 함유하는 인체 파필로마바이러스(hpv) 감염 치료, 개선 또는 예방용 조성물
KR101904501B1 (ko) * 2012-06-04 2018-10-05 (주)앗코스텍 퓨코스테롤을 유효성분으로 포함하는 피부주름 개선 또는 피부탄력 증진용 화장료 조성물

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100879558B1 (ko) * 2007-07-31 2009-01-22 라이브켐 주식회사 디벤조­파라­디옥신 유도체를 유효성분으로 함유한 피부보호 및 개선제
KR20090077098A (ko) 2008-01-10 2009-07-15 대구가톨릭대학교산학협력단 고지혈증 및 당뇨 치료용 대황 효소추출물, 대황정제환 및이의 제조방법
KR20130043872A (ko) * 2011-10-21 2013-05-02 재단법인 경북해양바이오산업연구원 대황 추출물에서 추출된 화합물을 포함하는 자외선에 대한 피부보호용 조성물
KR101904501B1 (ko) * 2012-06-04 2018-10-05 (주)앗코스텍 퓨코스테롤을 유효성분으로 포함하는 피부주름 개선 또는 피부탄력 증진용 화장료 조성물
KR20170019112A (ko) 2015-08-11 2017-02-21 대한민국(관리부서:국립수산과학원) 대황 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백활성 조성물
KR20180008119A (ko) 2016-07-15 2018-01-24 성균관대학교산학협력단 해조류 대황 추출물 또는 분획물을 유효성분으로 함유하는 인체 파필로마바이러스(hpv) 감염 치료, 개선 또는 예방용 조성물
KR20170052556A (ko) * 2017-05-04 2017-05-12 연세대학교 산학협력단 퓨코스테롤을 유효성분으로 포함하는 피부노화 개선용 및 피부 보습용 화장료 조성물

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Kim, EB , Kwak, JH, Antiviral phlorotannin from Eisenia bicyclis against human papilloma virus in vitro, Planta medica 2015, 81 , 0032-0943
Kim, Sang Min, Kang, Kyungsu, Jeon, Je-Seung, Jho, Eun Hye, Kim, Chul Young, Nho, Chu Won, Um, Byung-Hun Isolation of phlorotannins from Eisenia bicyclis and their hepatoprotective effect against oxidative stress induced by tert-butyl hyperoxide. Applied biochemistry and biotechnology, 2011, 165: 1296-1307

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20220075077A (ko) * 2020-11-27 2022-06-07 재단법인 환동해산업연구원 대황효소추출물을 유효성분으로 하는 피부 미백 및 주름개선용 화장료 조성물 및 그 제조방법

Also Published As

Publication number Publication date
KR102189415B1 (ko) 2020-12-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101902911B1 (ko) 산수국 추출물을 함유하는 자외선에 의한 인간 피부세포 손상 개선용 조성물
KR101824770B1 (ko) 적하수오 부정근 추출물을 함유하는 피부 주름개선 기능성 화장료 조성물
CA2780225A1 (en) Aloe vera sprout concentrate or extract having superior skin cell promotion, antioxidant, and anti-allergy effects
KR20130090150A (ko) 황칠 추출/발효물을 유효성분으로 함유하는 항산화 기능성 화장료 조성물 및 그로부터 제조된 기능성 화장품
KR102189415B1 (ko) 대황 추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선을 위한 조성물
KR20170047514A (ko) 그라비올라 항균 추출물을 함유하는 피부 주름 개선용 마스크 화장료 조성물 및 그 제조방법
KR101946526B1 (ko) 하이드란제놀을 유효성분으로 하는 자외선에 의한 피부 손상 예방 또는 개선을 위한 조성물
KR20220144748A (ko) 항염증용 화장료 조성물 및 그의 제조방법
KR101033921B1 (ko) 피부 염증 및 자극 완화 효과를 갖는 조성물
KR101073284B1 (ko) 피부 외용제 조성물
KR102585685B1 (ko) 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 의한 피부손상 예방 또는 개선용 조성물
KR20100121352A (ko) 피부노화 예방 및 미용 효과를 지니는 복합생약 조성물 그리고 피부노화 예방 및 개선용 건강 기능 식품
KR20200049714A (ko) 두충나무 껍질 추출물을 함유하는 피부 쿨링 또는 피부 홍조 완화용 화장료 조성물
KR102612017B1 (ko) 혼합 추출물을 포함하는 화장료 조성물
KR102400090B1 (ko) 주름개선용 화장료 조성물
KR102221137B1 (ko) 주름개선, 항염증 및 항산화 활성을 갖는 위도 상사화 추출물 및 이를 유효성분으로 포함하는 조성물, 및 이의 용도
KR20090105225A (ko) 피부 노화 방지용 화장료 조성물
KR101446295B1 (ko) 사가섬 에조엔스 추출물을 포함하는 항노화용 조성물
KR20170047515A (ko) 그라비올라 항균 추출물을 함유하는 피부 활력 증진용 화장료 조성물 및 그 제조방법
KR20090078084A (ko) 두충 추출물과 아데노신을 함유하는 피부 주름 개선용화장료 조성물
KR102470781B1 (ko) 주름개선용 화장료 조성물
KR102438804B1 (ko) 주름 개선 및 피부 노화 방지를 위해 인삼 오일 및 프랑킨센스 오일을 이용하여 제조된 바디 로션 조성물 및 이의 제조 방법
KR101810825B1 (ko) 굴거리나무 잎 배양물을 함유하는 피부 외용제 조성물
KR20150007368A (ko) 미숙 토마토 발효물을 함유하는 항노화 기능성 화장료 조성물
KR102597794B1 (ko) 상피세포 성장인자와 아로니아 열매 추출물을 포함하는 피부 상태 개선용 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant