KR20050078361A - 가려움증 억제 또는 완화용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 가려움증을 억제 또는 완화할 수 있는 조성물에 관한 것으로서, 하기 일반식 1로 표시되는 커규민(Curcumin)을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 한다.
<일반식 1>
커규민은 피부에 대한 부작용이 없이 가려움의 주된 중재자인 물질 P(Substance P)-NK1수용체의 결합을 방해하고 T 세포의 활성화를 억제하므로, 이를 유효성분으로 함유하는 조성물은 민감성 피부질환에 따른 가려움증이나, 두피 가려움증, 알러지에 의한 가려움증을 억제 또는 완화하는데 매우 효과적이다.
Description
본 발명은 가려움증을 억제 또는 완화할 수 있는 조성물에 관한 것이다.
가려움증이란 긁고 싶어하는 불쾌감을 유발하는 피부의 상태를 일컫는 것으로 ,가벼운 접촉, 온도변화, 스트레스 등의 자극이나 화학적, 물리적, 전기적인 자극으로도 유발될 수 있다. 또한 아토피, 건선, 접촉성 피부염과 같은 피부질환자나 민감성 피부 보유자의 증상으로 동반된다.
현대에는 아토피, 건선, 접촉성 피부염과 같이 외부 알러젠에 의해 발생하는 가려움증 환자가 많이 발생하고 있는데, 이는 신체내 특정 면역세포들(T 세포, 대식세포 등)이 활성화되어 여러 싸이토카인(TNF-a, IL-2등)과 가려움의 중재자인 히스타민의 분비를 유도하여 가려움증이 일어나는 것으로 알려져 있다(Br J Haematol, 1996; Cancer Biother, 1995). 또한, 피부 병변에 관한 어떠한 임상적 또는 조직학적 증상 없이 피부장애를 경험할 잠재력을 가진 사람들로서, 화장품이나 비누, 샴푸와 같은 세정제의 사용 후, 눈으로 드러나는 자극현상 이외에 감각적으로 가려움을 호소하는 민감성 피부 보유자들도 증가하고 있다.
최근 들어, 이러한 가려움에 대한 신경생리학적 접근 및 면역학적 연구가 활발히 진행되어 왔는데, 가려움증은 C-섬유 말단의 유해 감수기를 통해 무수구심신경으로 전달되며, C-섬유 말단에서 분비되는 푸루리토젠(pruritogen)인 물질 P, CGRP 등은 각각의 수용체와 결합하여 가려움을 촉발하는 것으로 보고되었다(Kuraish et al, J Pharmacol Exp Ther. 1998 , p270-275). 또한, 이들 푸루리토젠들은 비만세포(mast cell)를 활성화시켜 가려움의 또 다른 중재자인 히스타민의 방출을 유도하는 것으로 알려져 있다(Morohashi et al, Arch Dermatol Res. 2000, p418 421). 한편, 과민성 피부염의 가려움증은 항 히스타민제에 의해서는 억제되지 않으나 면역억제제인 사이클로스포린 A에 의해서 억제된다는 연구결과가 보도된 것을 살펴 볼때, 가려움증의 발생엔 자가면역이상도 관여한다고 볼 수 있다.
현재 사용되고 있는 가려움증 치료 요법들은 국소 및 전신약제로서, 스테로이드, 항 히스타민제, 면역억제제 등이 사용되고 있다. 그러나, 이러한 가려움증 억제 또는 완화성분들은 경구투여시 졸림이나 면역력 저하의 문제를 발생시키며, 국소투여시에는 피부에 대한 안전성이 문제된다. 또한, 피부용 조성물에 배합시 제형 안정성 면에서도 대부분 문제점을 안고 있어 그 사용이 제한되고 있다(김창종, 병태심리학, 한림상사, 1988, p61-69). 따라서, 인체 피부에 대한 부작용이 적으며 자극완화 효과가 있는 물질에 대한 연구가 계속되고 있다(Yakhak Hoeji, Arch. Pharm Res 21, 1998, p406-410).
따라서, 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 상기 문제점을 해결하여 제품 안정성이 우수하고 피부에 대한 부작용 없이 안전하게 사용될 수 있을 뿐만 아니라, 가려움증을 억제 또는 완화하는데 매우 효과적인 피부외용 조성물을 제공하는데 있다.
상기 기술적 과제를 달성하기 위하여, 본 발명은 하기 일반식 1로 표시되는 커규민(Curcumin)을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 가려움증 억제 또는 완화용 조성물을 제공한다.
<일반식 1>
상기 일반식 1에서, R1 및 R2는 각각 OCH3, OCH3이다.
본 발명에 따른 가려움증 억제 또는 완화용 조성물에 있어서, 커규민의 함량은 조성물 총 중량을 기준으로 0.0001 내지 10중량%인 것이 바람직하다.
본 발명에 따른 가려움증 억제 또는 완화용 조성물에 함유되는 커규민은 심황 식물의 뿌리로부터 정제수, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 1,2-부틸렌글리콜, 에틸아세테이트, 아세톤 등의 용매를 단독으로 또는 이들의 혼합용매로 추출될 수 있다.
이하, 본 발명에 따른 가려움증 억제 또는 완화용 조성물에 대하여 상세히 설명한다.
본 발명에 따른 가려움증 억제 또는 완화용 조성물에 유효성분으로 함유되는 커규민(Curcumin)은 하기 일반식 1로 표시된다.
<일반식 1>
상기 일반식 1에서, R1 및 R2는 각각 OCH3, OCH3이다.
본 발명자들은 커규민(Curcumin)을 이용하여 SP-NK1결합 방해 시험, T 세포증식 억제력 시험 및 가려움 유발 동물 행동 모델 시험을 실시 결과, 커규민이 매우 강력한 가려움 억제 및 완화효과를 나타냄을 밝혀냈다. 따라서, 본 발명에 따라 카규민을 전신 세정제, 두피 세정제, 헤어 컨디셔너, 화장료, 세안제, 비누, 피부 보호제, 피부외용 연고 등의 피부 외용 조성물에 유효성분으로 첨가하면 가려움증의 억제 및 완화효과를 부여할 수 있다.
본 발명에 따른 가려움증 억제 또는 완화용 조성물의 유효성분인 커규민은 심황 식물의 뿌리로부터 추출할 수 있는데, 이에 한정되지 않는다. 예를 들어 커규민은 생강과에 속하며 중국에서는 강황이라고도 하는 울금(Curcuma longa)의 뿌리에서 추출할 수 있다. 울금 추출물의 성분은 황색색소로서 curcumin, p-coumaroyl feruoyl methane, di-p-coumaroyl methane, 정유로서 turmerone, (+)-o--turmerone, zinggiberene, cineol 등과 지방유 및 전분이 함유되어 있다. 울금은 방향건위약으로 각종 처방에 배합되어 이담약으로 간염, 담도염, 담석증 등에 쓰이는 생약이다(생약학회지, 지형준, 14:67~69, 1983). 커규민(Curcumin)은 또한 카레의 노란색을 내는 주성분이다. 울금으로부터 커규민을 추출하는 방법을 예를 들면 다음과 같다.
먼저, 생약재로 시판되는 울금 뿌리를 구입하여 잘게 분쇄한 후, 정제수, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 1,2-부틸렌글리콜, 에틸아세테이트, 아세톤 등의 용매로 환류 냉각기가 달린 추출기에서 1 ~ 5시간 가열추출한다. 이 결과물을 여과포로 여과한 후 잔사를 같은 방법으로 1회 이상 더 추출한 후, 추출액을 합하여 감압 농축한 다음 동결건조 또는 분무건조하여 건조 추출물을 얻는다. 건조 추출물을 용매 분획을 통하여 헥산 및 클로로포름 제거하고, 얻은 분획을 수포화된 부탄올로 분획하여 분획을 얻은 다음, 이를 실리카겔 컬럼크로마토그라피와 고속액체크로마토그라피(HPLC) 등을 이용하여 정제하여 제결정한다.
전술한 방법으로 얻어진 커규민은 전술한 다양한 종류의 피부외용 조성물에에 첨가하여 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 조성물 제조시에 함유되는 커규민의 함량은 조성물 총중량을 기준으로 0.0001 내지 10중량%인 것이 바람직하다.
커규민은 정제된 형태로 조성물에 첨가하는 것이 바람직하나, 심황식물의 조추출물 형태로 첨가하여 사용할 수도 있다.
이하, 본 발명을 구체적으로 설명하기 위해 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 아래에서 상술하는 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어져서는 안된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해서 제공되어지는 것이다.
울금 추출예
시판되는 울금 뿌리를 구입하여 분쇄한 분쇄물 100g을 100% 메탄올 500ml에 투입하고, 냉각콘덴서가 달린 환류 추출기에서 3시간 동안 끓여 추출하였다. 이어서, 이 결과물을 300메쉬 여과포로 여과한 후, 잔사를 같은 방법으로 1회 더 추출하였다. 각각의 추출액을 합하여 상온에서 화트만(Whatman) 2번 여과지로 여과하여 불용성 물질을 제거한 후, 냉각 콘덴서가 달린 증류장치에서 감압농축하고 동결건조하여 건조 추출물을 얻었다.
커규민 추출예
얻어진 건조 추출물을 용매 분획을 통하여 핵산 및 클로로포름 분획을 제거하고, 얻은 분획을 수포화된 부탄올로 3회 분획하여 얻은 부탄올 분획 24g을 실리카겔 컬럼크로마토그라피와 고속액체크로마토그라피(HPLC)로 정제한 다음, 재결정 방법을 이용하여 얻은 커큐민을 질량분석 및 핵자기공명 스펙트럼으로 그 구조를 확인하였다.
물질 P-NK1 경쟁 결합 방해 시험
상기 추출예에 따라 얻은 커규민 또는 울금 추출물을 물질 P의 수용체인 NK1이 많이 존재하는 인간세포U373-MG을 이용하여 물질 P와 경쟁적 결합정도를 알아보았다.
U373-MG세포를 24웰 플래이트에 접종 후 24시간 동안 배양하였다. 70 ~ 80% 자란 상태의 세포는 0.1%FBS/RPMI 1640으로 교체한 후, 3nM 3H-SP를 실험예 1 내지 8과 같이 1 내지 200ug/ml농도의 시험물질과 동시에 1시간 동안 처리하였다. 대조예는 시험물질의 용매(에탄올)만 처리하였다. 이어서, PBS로 깨끗이 세척한 후 5% SDS/0.01N HCl을 이용하여 세포를 용해시키고, 액체섬광계수기(LSC)를 이용하여 용해액의 방사성 정도를 측정하였다. 이 측정값은 대조군에 대한 상대적인 물질 P 결합 억제률(%)로 계산하여 그 결과를 하기 표 1에 나타냈다.
표 1을 참조하면, 커규민 또는 울금 추출물은 대조예 1과 비교할 때 농도 의존적으로 NK1 수용체에 대한 물질 P의 경쟁적 결합 저해력이 있음을 알 수 있다.
T 세포증식 억제력시험
상기 추출예에 따라 얻은 커규민 또는 울금 추출물을 외부 알러젠 등에 의해서 증식되는 T 세포에 대한 증식 억제력을 알아보았다.
Balb/c 쥐의 비장에서 Ficoll-gradient법을 이용하여 T 세포를 분리하였다. 분리한 T 세포는 시험물질 1 내지 50ug/ml, Con A(1ug/ml)와 함께 96웰 플래이트에서 3일 동안 배양하였으며, 배양 끝나기 16시간 전에 3H(1uCi/well)을 처리하였다. 대조예는 에탄올 용매와 덱사메타손을 0.1 및 1ug/ml을 처리하였다. 3일 간 배양이 끝난 세포는 액체섬광계수기(LSC)를 이용하여 세포 용해액의 방사성 정도를 측정하였다. 이 측정값은 무 처리군에 대한 상대적인 커규민 또는 울금 추출물의 T 세포증식 억제률(%)로 계산하여 그 결과를 하기 표 2에 나타냈다.
표 2를 참조하면, 커규민 또는 울금 추출물은 비교 대조군과 비교할 때 농도 의존적으로 T세포 증식 억제력이 있음을 알 수 있다.
이하에서는, 커큐민 또는 울금 추출물을 바디클린저, 크림, 에센스 등에 첨가하여 가려움완화 조성물을 제조하고 마우스를 대상으로 가려움 억제효과를 살펴본다.
바디클린저의 제조
실시예 1 ~4
추출예에 따라 얻은 울금 추출물 및/또는 커규민을 유효성분으로 첨가하고, 하기 표 3에 기재된 성분과 함량으로 조성 성분들을 혼합한 후, 이 혼합물의 온도가 65°C가 될 때까지 가온하여 균일하게 용해시킨 다음 40°C까지 냉각시켰다. 여기에 색소(청색 1호), 파라옥시안식향산에스텔, 향료 및 구연산을 투입하여 혼합한 후 실온으로 냉각하여 바디클린저를 제조하였다.
비교예 1
울금 추출물과 커규민을 첨가하지 않은 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 피부 외용연고제를 제조하였다.
크림의 제조
실시예 5 ~ 8
추출예에 따라 얻은 울금 추출물 및/또는 커규민을 유효성분으로 첨가하고, 하기 표 4에 기재된 성분과 함량으로 조성 성분들을 잘 유화시키고 탈기, 여과, 냉각하여 크림 조성물을 제조하였다. 그 이외의 첨가제인 방부제, 향료, 색소 등을 첨가한 후, 작은 크기의 유성성분이 존재하도록 수중유형(O/W)으로 제조하였다.
비교예 2
울금 추출물과 커규민을 첨가하지 않은 것을 제외하고는 실시예 5와 동일한 방법으로 크림을 제조하였다.
에센스의 제조
실시예 9 ~ 12
추출예에 따라 얻은 울금 추출물 및/또는 커규민을 유효성분으로 첨가하고, 하기 표 4에 기재된 성분과 함량으로 조성 성분에 따라 에센스를 제조하였다
비교예 3
울금 추출물과 커규민을 첨가하지 않은 것을 제외하고는 실시예 9와 동일한 방법으로 에센스를 제조하였다.
전술한 바와 같이 제조한 바디클린저, 크림, 에센스에 의한 가려움증 억제 또는 완화효과를 테스트하기 위하여 하기와 같이 가려움 유발 동물 행동 모델 시험을 실시하였다.
사토(Satoh) 등의 원고에 기술된 방법은 본 발명에서 개발된 마우스 모델의 원형을 제시하였다(Satoh et al, 1995, Eur J Pharmacol, p229 233).
23 내지 26g 중량의 10마리의 수컷 ICR 마우스로 된 군을 시험에 사용하였다. 이들을 23 내지 25°C의 온도 조절 하에 수용하였다. 음식물 및 물은 자유로이 먹을 수 있게 하였다.
가려움 유발 동물 행동 모델 시험을 위해서 커규민 또는 울금 추출물을 실시예 1 내지 12와 같이 0.1 내지 2% 함유하여 처리하였다. 또한 비교예 1 내지 3과 같이 커규민 또는 울금 추출물을 포함하지 않은 각각의 제형을 대조군으로 처리하였다.
긁기를 유발시키기 위하여, 사람에게 가려움 감각을 일으키는 것으로 알려진 Compound 48/80을 사용하였다. 이때 Compound 48/80은 멸균생리 식염수에 용해 시켰다.
먼저, 마우스의 목 뒤에 용매 또는 시험물질 100ul을 도포하고 30분 후 Compound 48/80(2mg/ml : 100ug/site) 50ul를 목 뒤에 피내주사한다. 이 후 30분간 마우스의 움직임을 관찰하여, 뒷다리로 주사한 부위를 긁는 횟수를 헤아린다.
이 자료는 평균과 표준편차를 계산하여 분석하였으며, 평균값의 통계적 차이는 스튜던트 티-테스트(student t-test)를 사용해 결정하였다. 그 결과를 하기 표 6에 나타냈다.
상기 표 6에 나타난 바와 같이, 바디클린저, 크림, 에센스 제형내의 커규민 또는 울금 추출물의 함유량이 많아질수록 마우스에서 유발시킨 가려움에 대한 억제율이 높아짐을 알 수 있다. 또한 상기 제형의 비교예들에서는 가려움에 대한 억제력이 없는 것으로 나타났다.
한편, 실시예에 따른 제형들은 제형 안정성이 양호하였으며, 피부에 대한 부작용도 없는 것으로 나타났다.
이와 같이 본 발명에 따른 커규민을 함유하는 가려움증 억제 또는 완화용 조성물은 가려움의 주된 중재자인 물질 P(Substance P)-NK1수용체의 결합을 방해하고 T 세포의 활성화를 억제하므로, 민감성 피부질환에 따른 가려움증이나, 두피 가려움증, 알러지에 의한 가려움증 등을 억제 또는 완화하는데 매우 효과적이다. 또한, 피부내에 어떤 부작용도 나타나지 않으며 제형 안정성도 우수하다.
Claims (4)
- 하기 일반식 1로 표시되는 커규민(Curcumin)을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 가려움증 억제 또는 완화용 조성물.<일반식 1>상기 일반식 1에서, R1 및 R2는 각각 OCH3, OCH3이다.
- 제1항에 있어서, 상기 커규민의 함량은 조성물 총 중량을 기준으로 0.0001 내지 10중량%인 것을 특징으로 하는 가려움증 억제 또는 완화용 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 커규민은 심황 식물의 뿌리로부터 정제수, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 1,2-부틸렌글리콜, 에틸아세테이트 및 아세톤으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 용매로 추출된 것을 특징으로 하는 가려움증 억제 또는 완화용 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 가려움증 억제 또는 완화용 조성물은 전신 세정제, 두피 세정제, 헤어 컨디셔너, 화장료, 세안제, 비누, 피부 보호제 및 피부외용 연고로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형으로 이루어진 것을 특징으로 하는 가려움증 억제 또는 완화용 조성물.
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WITN | Withdrawal due to no request for examination |