KR101126592B1

KR101126592B1 - 가려움증 억제 또는 완화 조성물

Info

Publication number: KR101126592B1
Application number: KR1020040049049A
Authority: KR
Inventors: 조호성; 이민호; 노경옥; 박형국
Original assignee: 주식회사 엘지생활건강
Priority date: 2004-06-28
Filing date: 2004-06-28
Publication date: 2012-03-20
Also published as: KR20060000127A

Abstract

본 발명은 민감성 피부질환에 따른 가려움증이나, 두피 가려움증, 알러지에 의한 가려움증을 완화시킬 수 있는 가려움증 억제 또는 완화 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 상기 조성물은 베르바민(berbamine) 또는 베르바민(berbamine)을 함유하는 추출물을 함유하는 것을 특징으로 한다. 상기 베르바민(berbamine) 또는 베르바민(berbamine)을 함유하는 추출물은 황련(Coptis chinesis French.) 이나 소벽beris amurensis Rupr.), 분방기(Stephania tetrandria S. Moore), 함바기(Stephania japonica Miers) 등의 뿌리 및/또는 줄기로부터 얻을 수 있다. 본 발명의 가려움증 억제 또는 완화 조성물은 두피 세정제, 저자극성 화장료, UV등으로부터 피부보호제, 전신세정제, 세안제, 비누, 크림, 일회용 기저귀, 아토피성 유아 제품 등을 구성한다.

물질 P-NK1수용체, 피부질환, 가려움증, 베르바민, 황련 추출물.

Description

가려움증 억제 또는 완화 조성물{Composition having anti-itching effect}

본 발명은 민감성 피부질환에 따른 가려움증이나, 알러지에 의한 가려움증 또는 두피 가려움증을 억제 또는 완화시킬 수 있는 조성물에 관한 것이다. 좀더 구체적으로는 베르바민(berbamine)을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 가려움증 억제 또는 완화 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 베르바민(berbamine)을 함유하는 조성물이 가려움의 주된 중재자인 물질 P (Substance P)-NK1수용체의 결합을 방해하거나(고) 가려움 유발인자(물질 P)의 비만세포나 T세포로의 작용을 억제 시킴으로써 가려움증의 억제 또는 완화에 우수한 효과가 있음을 확인하였다.

본 발명에 따른 상기 가려움증 억제 또는 완화 조성물은 베르바민(berbamine) 또는 베르바민(berbamine)을 함유하는 식물추출물을 조성물 총 중량에 대하여 0.0001 ~ 10중량% 함유하는 것이 바람직하다. 본 발명에 따른 상기 가려움증 억제 또는 완화 조성물은 두피 세정제, 저자극성 화장료, UV등으로부터 피부보호제, 전신 세정제, 세안제, 비누, 크림, 일회용 기저귀, 아토피성 유아 제품 등에 이용될 수 있는 조성물이다.

가려움증이란 긁고 싶어하는 불쾌감을 유발하는 피부의 상태를 일컫는 것으로 가벼운 접촉, 온도변화, 스트레스 등의 자극이나 화학적, 물리적, 전기적인 자극으로도 유발할 수 있다. 또한 아토피, 건선, 접촉성 피부염과 같은 피부질환자나 민감성 피부 보유자의 증상으로 동반된다.

민감성 피부 보유자란 피부 병변에 관한 어떠한 임상적 또는 조직학적 증상 없이 피부장애를 경험할 잠재력을 가진 사람들로써 화장품이나 비누, 샴푸와 같은 세정제의 사용 후, 눈으로 드러나는 자극현상 이외에도, 감각적으로 가려움을 호소 또는 제품에 불평하곤 한다.

또한 아토피, 건선, 접촉성 피부염과 같이 외부 알러젠에 의해 발생하는 피부 질환 및 가려움은 신체내 특정 면역세포 들(T 세포, 대식세포 등)을 활성화 시키며 이로 인해 여러 싸이토카인(TNF-a, IL-2등) 및 가려움의 중재자인 히스타민의 분비를 유도하여 가려움이 일어나는 것으로 알려져 있다.(Br J Haematol, 1996; Cancer Biother, 1995)

최근 들어 이러한 가려움에 대한 신경생리학적 접근 및 면역학적 연구가 활발히 진행되어 가려움은 C-섬유 말단의 유해 감수기를 통해 무수구심신경으로 전달되며, C-섬유 말단에서 분비되는 푸루리토젠(pruritogen)으로써 물질 P, CGRP등은 각각의 수용체와 결합하여 가려움을 촉발하는 것으로 알려지고 있다.(Kuraish et al, J Pharmacol Exp Ther. 1998 , p270-275) 또한 이들 푸루리토젠들은 비만세포(mast cell)의 활성화를 이루어 가려움의 또 다른 중재자인 히스타민의 방 출을 유도하는 증거가 있다.(Morohashi et al, Arch Dermatol Res. 2000, p418-421)

또한 과민성 피부염의 경우, 가려움은 항 히스타민제에 의해서 억제되지 않지만 면역억제제인 사이클로스포린 A에 의해서 억제된다는 보고로 보아 가려움의 발생엔 자가면역이상도 관여한다고 볼 수 있다.

현재 가려움을 치료하기 위한 요법들은 국소 및 전신약제, 예를 들면 스테로이드, 항 히스타민제, 면역억제제등이 있으나, 경구투여로 인한 졸림, 면역력 저하 및 국소투여에 따른 피부에 대한 안전성 면에서나 피부용 조성물 배합시의 안정성 면에서 대부분 문제점을 안고 있어 그 사용이 제한되고 있는 실정으로(김창종, 병태심리학, 한림상사, 1988, p61-69) 인체에 부작용이 적으며 자극완화 효과가 있는 물질이 연구, 개발되고 있는 중이다.(Yakhak Hoeji, Arch. Pharm Res 21, 1998, p406-410)

본 발명의 목적은 현재 가려움억제를 위해 사용되어 지는 스테로이드, 항 히스타민제들의 문제점을 극복하고, 인체 안전성이 우수한 가려움증의 억제 또는 완화 조성물을 제공하려는 것이다.

본 발명의 상기 목적은 가려움증의 억제 또는 완화 조성물에 베르바민 또는 베르바민(berbamine)을 함유하는 식물 추출물을 조성성분으로 구성함으로써 달성할 수 있다.

본 발명의 상기 조성물은 두피 세정제, 저자극성 화장료, UV등으로부터 피부 보호제, 전신세정제, 세안제, 비누, 크림, 일회용 기저귀, 아토피성 유아 제품 등에 적용할 수 있는 조성물이다.

본 발명의 가려움증 억제 또는 완화 조성물은 베르바민(berbamine)을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 한다. 본 발명의 가려움 억제 또는 완화를 위한 유효성분으로 함유되는 상기 베르바민(berbamine)은 하기 일반식 1로 표시되는 화합물 또는 하기 일반식 1로 표시되는 화합물을 함유하고 있는 황련(Coptis chinesis French.), 소벽(Berberis amurensis Rupr.), 분방기(Stephania tetrandria S. Moore), 함바기(Stephania japonica Miers) 등의 뿌리 또는 줄기의 추출물이다.

<일반식 1>

본 발명에 따른 가려움증 억제 또는 완화 조성물은 베르바민(berbamine)이 조성물 총 중량에 대하여 0.0001 ~ 10중량% 함유된다. 본 발명에 따른 상기 가려움증 억제 또는 완화 조성물은 두피 세정제, 저자극성 화장료, UV등으로부터 피부 보 호제, 전신 세정제, 세안제, 비누, 크림, 일회용 기저귀, 아토피성 유아 제품 등의 조성성분으로 이용되는 조성물로서 상기 제품 또는 제형을 이룬다.

상기 일반식 1로 표기되는 베르바민(Tetrandrine)은 황련(Coptis chinesis French.) 이나 소벽(Berberis amurensis Rupr.), 분방기(Stephania tetrandria S. Moore), 함바기(Stephania japonica Miers)등의 뿌리 및 줄기에 존재하는 베르베린계 알카로이드이다. 베르바민을 함유한 황련이나 소벽 등의 추출물의 약리작용은 민간에서 아픔멎이 및 진경작용이 있는 것으로 알려져 있으며(약초의 성분과 이용, 최옥자, 일월서각, 1999), T세포 활성화 작용으로 발생하는 조직이식거부 반응과 타입4형 지연성 과민반응을 상당히 억제 시키는 것으로 보고 되어 있다.(Luo CN et al, J Ethnopharmacol 59, 1998, p211-5)

그러나 본 발명자들은 베르바민 또는 베르바민(berbamine)을 함유하는 상기 황련(Coptis chinesis French.)이나 소벽(Berberis amurensis Rupr.), 분방기(Stephania tetrandria S. Moore), 함바기(Stephania japonica Miers) 등의 추출물에 대한 가려움증 억제 효과를 알아보기 위해 SP-NK1 결합 방해 시험과 가려움 유발 동물 행동 모델 시험을 하였으며, 그 결과 베르바민 또는 베르바민(berbamine)을 함유하는 상기 식물의 추출물이 가려움증 억제 효과가 우수함을 알아내어 본 발명을 완성하게 되었다.

본 발명의 베르바민(berbamine)은 황련(Coptis chinesis French.)이나 소벽(Berberis amurensis Rupr.), 분방기(Stephania tetrandria S. Moore), 함바기(Stephania japonica Miers) 등의 뿌리 또는 줄기로부터 추출할 수 있다.

예를 들면, 베르바민(berbamine)을 함유하는 추출물은 황련(Stephania tetrandria S. Moore)이나 소벽(Berberis amurensis Rupr.), 분방기(Stephania tetrandria S. Moore) 또는 함바기(Stephania japonica Miers)의 뿌리 및/또는 줄기를 건조, 잘게 분쇄한 후, 추출용매를 사용하여 환류 냉각기가 달린 추출기에서 50-100℃ 로 1-5시간 가열, 추출한 다음, 이 결과물을 여과포로 여과한 후, 잔사를 같은 방법으로 1회 이상 더 추출하여, 상기 추출액을 합하여 감압 농축한 다음, 동결건조 또는 분무 건조하여 건조 추출물을 얻을 수 있다.

상기 추출 용매로는 정제수, 메탄올, 에탄올, 헥산, 클로로포름, 프로판올, 부탄올, 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸아세테이트, 아세톤으로 구성된 군에서 선택된 1종 또는 2종 이상의 혼합용매를 사용할 수 있다.

상기 화학식 1로 표기되는 베르바민(berbamine)은 상기 건조 추출물을 용매 분획을 통하여 헥산 분획을 제거한 후, 메탄올로 3회 분획하여 분획물을 얻고, 상기 분획물을 5% 염산에 녹인 다음, 불용성 물질을 여과하고 암모니아수로 중화하고, 상기 중화된 분획물은 에틸아세테이트와 클로로포름 용매 분획을 실시한 뒤, 실리카겔 컬럼크로마토그라피와 고속액체크로마토그라피(HPLC)로 정제한 다음, 재결정 방법으로 얻을 수 있다.

이러한 베르바민 또는 베르바민을 함유한 추출물은 두피 세정제, 저자극성 화장료, UV등으로부터 피부보호제, 전신세정제, 세안제, 비누 및 크림, 일회용 기저귀, 아토피성 유아 제품 등에 첨가할 수 있으며 첨가량은 조성물 총 중량에 대하여 0.0001 ~ 10중량% 함유되는 것이 바람직하다. 조성비율이 10중량%를 초과하는 경우에는 조성물 제조 시 안정성이 떨어지며, 0.0001%미만의 경우에는 그 작용효과가 미미하다.

하 본 발명을 구체적으로 설명하기 위해 실시 예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나 본 발명에 따른 실시 예 들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 아래에서 상술하는 실시 예 들에 한정되는 것으로 해석되어져서는 안 된다.

[베르바민을 함유한 추출물 추출 예]

먼저 건조된 황련(Coptis chinesis French.) 1.5kg의 뿌리를 잘게 분쇄한 후 n-헥산을 용매로 하여 환류 냉각기가 달린 추출기에서 80°C 로 5시간동안 가열 추출하였다. 이 결과물을 여과포로 여과한 후, 잔사를 같은 방법으로 1회 더 추출한 후, 추출액을 합하여 감압 농축한 다음, 동결건조, 건조 추출물 60g을 얻었다.

[베르바민 제조 예]

상기 건조 추출물 60g을 용매 분획을 통하여 헥산 분획을 제거한 후, 메탄올로 3회 분획하여 분획물30g을 얻었다. 상기 분획물을 5% 염산에 녹인 후, 불용성 물질을 여과하고 암모니아수로 중화하였다. 중화된 분획물은 에틸아세테이트와 클로로포름 용매 분획을 실시한 뒤, 실리카겔 컬럼크로마토그라피와 고속액체크로마토그라피(HPLC)로 정제하였다. 마지막으로 재결정 방법을 이용하여 얻은 1.5g에 대하여 질량분석 및 핵자기공명 스펙트럼으로 베르바민 구조를 확인하였다.

[유효성 시험 예]

물질 P-NK1 경쟁 결합 방해 시험

상기 추출 예 및 제조 예에 따라 얻은 베르바민 또는 황련의 건조 추출물을 물질 P의 수용체인 NK1(Neurokinin-1)이 많이 존재하는 인간세포U373-MG(한국세포주은행에서 분양받음 : KCLB-30017)을 이용하여 물질 P와 경쟁적 결합정도를 알아보았다. 간략히 요약하면 U373-MG세포를 24웰 플래잇트에 접종 후 24시간 동안 배양하였다. 70 - 800% 자란 상태의 세포는 0.1%FBS/RPMI 1640으로 교체한 후, 3nM ³H-SP를 실시예1 내지 8과 같이 1내지 200ug/ml농도의 시험물질과 동시에 1시간 동안 처리하였다. 비교예로는 시험물질의 용매(에탄올)만 처리하였다. 그 후 PBS(Phospate Buffer Saline)로 깨끗이 세척한 후 5% SDS( Sodium Dodesyl Sulfate )/0.01N HCl을 이용하여 세포를 용해시키고, 액체섬광계수기(LSC)를 이용하여 용해액의 방사성 정도를 측정하였다. 이 측정값은 대조군에 대한 상대적인 물질 P 결합 억제률(%)로 계산하여 그 결과를 하기 표1에 나타냈다.

(N=3)

시료명	결합 저해율(%)
비교예1(에탄올 용매)	0
시험예1(황련 추출물-최종농도 31.25ug/ml)	6
시험예2(황련 추출물-최종농도 62.5ug/ml)	29
시험예3(황련 추출물-최종농도 125ug/ml)	50
시험예4(황련 추출물-최종농도 250ug/ml)	80
시험예5(베르바민-최종농도 6.25ug/ml)	34
시험예6(베르바민-최종농도 12.5ug/ml)	75
시험예7(베르바민-최종농도 25ug/ml)	83
시험예8(베르바민-최종농도 50ug/ml)	91

을 참조하면, 베르바민 또는 황련 추출물은 비교예1과 비교할 때 농도 의존적으로 NK1 수용체에 대한 물질 P의 경쟁적 결합 저해력이 있음을 알 수 있다.

[실시 예]

이하에서는 베르바민 또는 황련 추출물을 샴푸, 크림, 에센스 등에 첨가하여 가려움완화 조성물을 제조하고 마우스를 대상으로 가려움 억제효과를 살펴본다.

표2에 기재된 조성으로 혼합한 후. 이 혼합물의 온도가 60°C 가 될 때까지 가온하여 균일하게 용해시킨 다음 40°C 까지 냉각시켰다. 여기에 색소(청색 1호), 파라옥시안식향산에스텔, 향료 및 구연산을 투입하여 혼합한 후 실온으로 냉각하여 샴푸를 제조(실시 예 1-4)하였다.

[비교예2]

베르바민 또는 또는 황련 추출물을 혼합하지 않은 것을 제외하고는 실시예1 내지 4와 동일한 방법으로 샴푸를 제조하였다.

원료명(중량%)	실시예1	실시예2	실시예3	실시예4	비교예2
라우릴황산나트륨	20.0	20.0	20.0	20.0	20.0
폴리옥시에틸렌라우릴 황산나트륨(30%)	20.0	20.0	20.0	20.0	20.0
야자유지방산디에탄올 아미드	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
프로필렌글리콜	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
황련 추출물(%)	0.5	2	-	-	-
베르바민(%)	-	-	0.1	1	-
아연피리티온	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
피록톤올아민	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
파라옥시안식향산에스텔	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2
색소(청색 1호)	적량	적량	적량	적량	적량
향료(조합향 SKP-3473 : Haesegawa)	적량	적량	적량	적량	적량
구연산	적량	적량	적량	적량	적량
정제수	To 100	To 100	To 100	To 100	To 100

표3에 기재된 조성비율로 혼합기에서 잘 유화시키고 탈기, 여과, 냉각하여 크림제형의 조성물을 제조(실시 예 5-8)하였다. 그 이외의 첨가제인 방부제, 향료, 색소 등을 첨가한 후, 작은 크기의 유성성분이 존재하도록 수중유형(O/W)으로 제조하였다.

[비교예3]

베르바민 또는 황련 추출물을 혼합하지 않은 것을 제외하고는 실시예5 내지 8과 동일한 방법으로 크림을 제조하였다.

원료명(중량%)	실시예5	실시예6	실시예7	실시예8	비교예3
스테아린산	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0
스테아릴알코올	4.0	4.0	4.0	4.0	4.0
스테아린산부틸	6.0	6.0	6.0	6.0	6.0
프로필렌글리콜	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
황련 추출물	0.5	2	-	-	-
베르바민	-	-	0.1	1	-
모노스테아린산글리세린	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
수산화칼륨	0.4	0.4	0.4	0.4	0.4
색소	적량	적량	적량	적량	적량
향료	적량	적량	적량	적량	적량
방부제	적량	적량	적량	적량	적량
정제수	To 100	To 100	To 100	To 100	To 100

표4에 기재된 조성비율로 에센스(실시 예 9-12)를 제조하였다.

비교예4

베르바민 또는 황련 추출물을 혼합하지 않은 것을 제외하고는 실시예9 내지 12와 동일한 방법으로 에센스을 제조하였다.

원료명(중량%)	실시예9	실시예10	실시예11	실시예12	비교예4
프로필렌글리콜	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0
글리세린	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0
히알루론산나트륨 수용액(1%)	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
황련 추출물	0.5	2	-	-	-
베르바민	-	-	0.1	1	-
에탄올	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
폴리옥시에틸렌경화 피마자유	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0
향료	적량	적량	적량	적량	적량
정제수	To 100	To 100	To 100	To 100	To 100

[실험예 2] 가려움 유발 동물 행동 모델 시험]

사토(Satoh)등의 하기원고에 기술된 방법은 본 발명에서 개발된 마우스 모델의 원형을 제시하였다.(Satoh et al, 1995, Eur J Pharmacol, p229-233)

이를 간단히 설명하면, 23 내지 26g 중량의 10마리의 수컷 ICR 마우스로 된 군을 시험에 사용하였다. 이들을 23내지 25°C 로의 온도 조절 하에 수용하였다. 음식물 및 물은 자유로이 먹을 수 있게 하였다.

가려움 유발 동물 행동 모델 시험을 위해서 베르바민 또는 황련 추출물을 실시예1 내지 12와 같이 0.1 내지 2% 함유하여 처리하였다. 또한 비교예2 내지 4과 같이 베르바민 또는 황련 추출물을 포함하지 않은 각각의 제형을 대조군으로 처리하였다.

긁기를 유발시키기 위하여, 사람에게 가려움 감각을 일으키는 것으로 알려진 Compound 48/80을 사용하였다. 이때 Compound 48/80은 멸균생리 식염수에 용해 시켰다.

먼저 마우스의 목 뒤에 용매 또는 시험물질 100ul을 도포하고 30분 후 Compound 48/80(2mg/ml : 100ug/site) 50ul를 목 뒤에 피내 주사 한다. 이 후 30분간 마우스의 움직임을 관찰하여, 뒷다리로 주사한 부위를 긁는 횟수를 헤아린다.

이 자료는 평균과 표준편차를 계산하여 분석하였으며, 평균값의 통계적 차이는 스튜던트 티-테스트(student t-test)를 사용해 결정하였다.

그 결과는 하기 표5 에 나타냈다.

시험물질	가려움 억제%	시험물질	가려움 억제%
실시예1	18	실시예9	20
실시예2	39	실시예10	55
실시예3	30	실시예11	42
실시예 4	52	실시예12	72
실시예5	19	비교예2	0.2
실시예6	43	비교예3	0.1
실시예7	42	비교예4	0.1
실시예8	65

상기 표6에 나타난 바와 같이 샴푸, 크림, 에센스 제형 내 베르바민 또는 황련 추출물의 함유량이 많아질수록 마우스에서 유발시킨 가려움의 억제율이 높아짐을 알 수 있다. 또한 상기 제형의 비교군들에서는 가려움의 억제력이 없어 베르바 민 또는 황련 추출물의 가려움 억제력을 알 수 있다.

이와 같이 본 발명에 따른 베르바민 또는 황련 추출물을 함유하는 가려움억제, 완화용 조성물은, 가려움 유발인자인 물질P의 수용체에 대한 결합을 방해하여 가려움 유발인자의 비만세포나 T세포로의 작용을 억제 시킴으로써 가려움 개선에 효과적이다. 또한 피부내에 어떤 부작용도 나타나지 않으므로 안전하게 사용될 수 있는 효과가 있다.

Claims

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황련(Coptis chinesis French.) 뿌리의 헥산 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 가려움증 억제 또는 완화용 화장료 조성물.
제 7 항에 있어서, 상기 추출물의 함량이 조성물 전체 중량에 대하여 0.0001 내지 10 중량%인 것을 특징으로 하는 가려움증 억제 또는 완화용 화장료 조성물.
제 7 항에 있어서, 상기 추출물이 황련 뿌리를 건조, 잘게 분쇄한 후, 추출용매를 사용하여 환류 냉각기가 달린 추출기에서 50-100 ℃로 1 ~ 5시간 가열한 다음, 추출, 여과하여 추출액을 얻고, 상기 추출액을 감압 농축한 다음, 동결건조 또는 분무 건조하여 얻은 건조 추출물인 것을 특징으로 하는 가려움증 억제 또는 완화용 화장료 조성물.
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황련(Coptis chinesis French.) 뿌리의 헥산 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 아토피 피부염 완화 또는 개선용 화장용 조성물.
황련(Coptis chinesis French.) 뿌리의 헥산 추출물이 첨가된 것을 특징으로 하는 일회용 기저귀.