KR20050059132A

KR20050059132A - 신규 결정

Info

Publication number: KR20050059132A
Application number: KR1020057003290A
Authority: KR
Inventors: 히로카즈 구보타; 기요시 이와오카; 소우 야마구치; 마사키 요코타
Original assignee: 아스텔라스세이야쿠 가부시키가이샤
Priority date: 2002-08-27
Filing date: 2003-08-26
Publication date: 2005-06-17
Also published as: JPWO2004020433A1; AU2003257541A1; EP1548015A1; CA2495437A1; US20060069130A1; WO2004020433A1; MXPA05002218A; CN1325491C; CN1678606A; US7309710B2

Abstract

칼슘 방출 의존성 칼슘 채널 억제작용 및 IL-2 생성 억제 작용활성이 우수한 4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드의 결정을 수득하고, 당해 화합물에는 2종류의 결정 다형이 존재하며, 어느 쪽의 결정도 의약 조성물의 제조원료로서 적절한 것임을 밝혀냈다.

Description

신규 결정 {Novel crystals}

본 발명은 칼슘 방출 의존성 칼슘 채널 억제제로서 유용한 4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드의 신규 결정에 관한 것이다.

칼슘 방출 의존성 칼슘 채널[Ca²⁺ release activated Ca²⁺ channel; 이하 CRACC라고 약칭한다; 칼슘 스토어 의존성 칼슘 채널(store-dependent Ca²⁺ channel)이라고도 호칭한다]은 비만 세포, 임파구, 성상 세포[참조: J. Bi01. Chem., 270, p29-32(1995)] 등의 거의 모든 염증성 세포에 존재하는 것이 공지되어 있으며, 사이토카인 생성 및 지질 조정자 유리 등에 깊게 관여하고 있는 것이 보고되어 있다[참조: J. Immuno1., 155, p285-96(1995) 및 Br. J. Pharmacol., 144, p598-601(1995)].

또한, CRACC는 내피 세포[참조: Am. J. Physiol., 269, C733-8(1995)] 및 상피 세포[참조: J. Biol. Chem., 270, p169-75(1995)]에도 존재하는 것이 공지되어 있다. 내피 세포가 라디칼 장애를 받을 때에 지속적 칼슘 유입이 관여하고 있는 것이 보고되어 있으며[참조: Am. J. Physiol., 261, C889-896(1991)], CRACC 억제제는 내피 세포가 관여하는 조직 장애에 대한 보호작용을 갖는 것이 시사되어 있다. 또한, 칼슘 유입 억제가 세포증식의 억제작용을 갖는 것 및 인터류킨2(IL-2)의 생성을 억제하는 것도 보고되어 있으며[참조: Br. J. Pharmmacol., 133, p861-8(1994)], CRACC 억제제는 악성 종양 등의 증식성 또는 진행성 질환이나 자가 면역질환의 예방·치료제로서 유용하며, 또한 이식할 때에 거부반응의 억제제로서도 유용하다.

따라서, CRACC 억제제는 각종 염증성 질환, 알레르기성 질환, 자가 면역질환, 조직 손상, 증식성 질환 등의 예방 또는 치료에 유용한 약제로 될 수 있는 것이 기대되고 있다.

평활근 세포나 신경 세포 등의 흥분성 세포의 세포내 칼슘조절에 관여하는 막 전위 의존성 Ca²⁺ 채널(이하 VOCC라고 약칭한다)과 CRACC의 억제 선택성이 높으며, IL-2 생성 억제활성을 갖는 피라졸 유도체가 보고되어 있다(예를 들면, 특허 문헌 1).

상기식에서,

D는 할로게노 저급 알킬 등으로 치환될 수 있는 피라졸릴이며,

n은 0 또는 1이고,

B는 페닐렌 등이며,

X는 -NR¹-CR²R³- 등이고,

A는 1개 이상의 치환기를 가질 수 있는 단일환 또는 2 내지 3환식 축합 헤테로 아릴 등을 각각 나타낸다. (상세한 것은 당해 공보 참조.)

또한, IL-2 생성 억제활성을 가지며 자가 면역질환 치료제로서 유용한 기타 피라졸 유도체도 보고되어 있으며(예를 들면, 특허 문헌 2 및 3), 특허 문헌 2에는 다음 화합물이 개시되어 있다.

상기식에서,

R₁ 내지 R₃은 1 내지 15개의 탄소의 퍼플루오로알킬 등이며,

Z는 질소 또는 탄소이고,

Q는 아릴 등이며,

E는 -L₃-B 등을 나타낸다. (상세한 것은 당해 공보 참조.)

또한, 특허 문헌 3에는 다음 화합물이 개시되어 있다.

상기식에서,

R₁ 내지 R₃은 CF₃등이며,

L은 -NHC(O)- 등을 각각 나타낸다. (상세한 것은 당해 공보 참조.)

4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드는 특허 문헌 1 내지 3의 청구범위에는 포함되지만, 구체적 개시가 없는 신규 화합물이다.

특허 문헌 1

국제 공개 제99/19303호 팜플렛

특허 문헌 2

국제 공개 제99/51580호 팜플렛

특허 문헌 3

국제 공개 제99/62885호 팜플렛

화합물을 의약품으로서 사용하는 경우, 일반적으로 이의 안정성 면에서 결정이 바람직하며, 또한 이의 취급이나 품질의 안정을 위해서는 결정 다형의 제어가 필요해지는 경우가 있다.

도 1은 4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드의 α형 결정의 분말 X선 회절도이다.

도 2는 4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드의 α형 결정의 열분석도이다.

도 3은 4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드의 β형 결정의 분말 X선 회절도이다.

도 4는 4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드의 β형 결정의 열분석도이다.

본 발명자등은 CRACC을 선택적으로 억제하며, 각종 염증성 질환, 알레르기성 질환의 예방·치료에 유용한 신규한 의약을 제공하는 것을 목적으로 하여 연구를 수행하는 바, 4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드를 결정으로서 수득하고, 의외로 당해 화합물의 결정에는 2종류의 다형이 존재하여, 또한 어느 쪽의 다형 결정도 의약 조성물의 제조원료로서 적절한 것임을 밝혀냈다.

즉, 본 발명은 의약 조성물의 제조원료로서 유용한 4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드의 다형 결정에 관한 것이다.

이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.

본 발명은 4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드의 결정에 관한 것이다. 본 발명의 결정은 의약의 제조원료로서 사용할 수 있을 정도로 안정한 결정이면 양호하고, 특히 하기 물성치를 갖는 α형 또는 β형의 결정이 바람직하다. 각 결정은 각각 하기의 분말 X선 회절 스펙트럼[2θ(^o)]으로 특징지어진다. 또한, 분말 X선 회절은 데이터의 성질상, 결정의 동일성 확인에서는 결정 격자 간격이나 전체적인 패턴이 중요하며, 상대강도는 결정 성장의 방향, 입자의 크기, 측정조건에 따라 다소 변할 수 있는 점으로부터 엄밀하게 해석되어야 하는 것은 아니다.

α형: 5.94, 9.94, 15.64, 15.88, 18.48, 20.04 및 20.76.

β형: 10.60, 12.90 및 17.24.

또한, DSC 분석으로 α형 결정은 약 196℃(발생: 피크가 일어나는 온도)에 흡열 피크를 갖는다. β형 결정은 172 내지 174℃ 부근에서 상전이에 따르는 미소한 피크를 가지며, 다시 약 196℃(발생)에서 흡열 피크를 갖는다. 즉, α형 및 β형 결정 어느 것이나 195 내지 198℃(발생)에서 흡열 피크를 갖는다.

α형 및 β형 어느 쪽의 결정도 5 내지 60℃에서 적어도 3개월간은 안정적이며, 재결정에 따른 고순도화가 가능한 점으로부터, 의약의 제조원료로서 사용할 수 있으며, 특히 고형 제제의 원료로서 적절하다.

예를 들면, 40℃, 차광하에서의 안정성 시험의 결과를 표1에 기재한다.

40℃에서의 안정성 시험

	1개월	3개월
α형 결정	100.7%	99.2%
β형 결정	99.7%	100.7%

(값은 HPLC에서 수득된 피크 면적을 기초로 내부표준법에 의해 구한 정량치를 나타낸다.)

α형 결정은 톨루엔 중에서 재결정을 함으로써 수득할 수 있다. 또한, α형 결정은 β형 결정을 2-프로판올과 물의 혼합 용매 중에 현탁하면서 실온 내지 가열하에, 바람직하게는 30 내지 60℃, 보다 바람직하게는 40 내지 50℃에서 가온하에 수시간 내지 수일 동안 교반함으로써 수득할 수 있다. 즉, α형 결정은 이의 현탁하 에서의 안정성으로부터 대규모로 제조하는데 적합한 결정형이다.

β형 결정은 2-프로판올 용액에 교반하면서 물(바람직하게는 2-프로판올과 동량)을 가하여 결정을 석출시킴으로써 보다 수득할 수 있다. 즉, β형 결정은 톨루엔 등보다 독성이 낮은 용매만을 사용하여 직접적으로 제조할 수 있는 점에서 우수하다.

α형 결정 및 β형 결정 어느 것이나 재결정을 할 때, 별도로 수득된 원하는 결정을 종자 결정으로서 사용하는 것이 바람직하다.

또한, 2-프로판올과 물의 혼합 용매(예를 들면, 4:3의 혼합비)를 사용하여, 가열 용해한 후, 냉각시켜 결정을 석출시킴에 따라, DSC 분석으로 α형 결정과 동일한 흡열 피크를 가지며, 분말 X선 회절에서도 2θ= 19.24^o의 피크 이외에는 α형 결정과 동일한 회절 패턴을 나타내는 결정이 수득되는 경우가 있다. 당해 결정은 실온하에서 안정적이며, 이의 DSC 분석이나 분말 X선 회절의 결과로부터 당해 결정도 본 발명의 α형 결정에 포함된다.

또한, 본 발명은 4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드의 결정과 약제학적으로 허용되는 담체를 함유하는 고형 의약 조성물에 관한 것이다.

이하, 실시예에 따라 본 발명을 구체적으로 설명하지만, 이들은 본 발명의 범위를 한정하는 것이 아니다.

분말 X선 회절의 측정은 정해진 방법에 따라서 분쇄한 시료와 MAC Science사에서 제조한 MXP18TAHF22를 사용하고, 음극에 대해: 구리, 관 전류: 350mA, 관 전압: 45kV, 샘플링 간격: 0.020^o, 주사속도: 3.0./분, 파장: 54056Å, 주사범위(2θ): 5 내지 40^o의 조건으로 실시하였다.

시차주사열량(DSC) 및 열질량(TG)의 측정은 TA Instruments 사에서 제조한 DSC2910 및 Hi-Res TGA 2950을 사용하고, 시료량: 약 5mg, 시료 용기: 알루미늄 팬(개방, DSC용) 및 백금 팬(개방, TG용), 가열속도: 10℃/분, 측정 온도범위: 실온 내지 250℃, 분위기 가스: 건조 질소, 분위기 가스 유량: 50ml/분의 조건으로 실시하였다.

실시예 1

4,6-디메틸니코틴산(15.1g) 및 디클로로메탄(150ml)의 혼합물에, 빙냉하에 옥살릴클로리드(8.7ml)를 가하여, 15 내지 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응액에 4-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]아닐린(23.59g) 및 디클로로메탄(300ml)의 혼합물을 가하여, 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응액에 20% 탄산칼륨 수용액(약 200ml)을 가하고, 유기층을 분리한 후, 수층을 디클로로메탄(약 50ml)으로 추출하였다. 유기층과 추출액을 합한 후, 감압하에 농축하였다. 수득된 잔사를 에탄올과 물(2:1)의 혼합 용매(270ml)로부터 재결정하여, 4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드(26.70g)을 청백색 고체로서 수득하였다.

FAB-MS(Pos.): m/z 429[(M+H)⁺]; NMR(DMSO-d₆)δ: 2.41(3H, s), 2.49(3H, s), 7.24(1H, s), 7.60(2H, d, J = 8.8Hz), 7.79(1H, s), 7.95(2H, d, J = 8.8Hz), 8.58(1H, s), 10.72(1H, s).

실시예 2 (α형 결정의 제조)

4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드(8.0g)와 톨루엔(160ml)의 혼합물을 용액이 비등할 때까지 가열한 후, 실온까지 냉각시켜서 교반자로 밤새 교반하였다. 석출된 결정을 여과하여 취하고, 톨루엔(10ml)으로 세정한 후, 60℃에서 밤새 감압 건조하여, 4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드의 α형 결정(6.52g)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 3 (β형 결정의 제조)

4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드(8.0g)에 2-프로판올(120ml)을 가하며, 용액이 비등할 때까지 가열하여 용해시킨 후, 실온까지 냉각시켰다. 이 때, 결정의 석출은 관찰되지 않았다. 교반 날개로 교반하면서, 용액에 물(120ml)을 가하고, 그대로 실온에서 1시간 30분 동안 교반하였다. 석출한 결정을 여과하여 취하고, 2-프로판올과 물(1:1)의 혼합 용매(약 50ml)로 세정한 후, 60℃에서 1일 동안 감압 건조하여, 4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드의 β형 결정(7.32g)을 백색 고체로서 수득하였다.

본 발명의 4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드의 결정, 특히 α형 및 β형 결정은 안정성이 우수하고, 의약품의 제조 원료로서 유용하다.

4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드는 CRACC 억제작용, VOCC와의 억제선택성 및 IL-2 생성 억제작용이 우수하다. 또한, TNCB 유발 접촉성 과민증(TNCB-induced Contact Hypersensitivity)에 대한 억제효과, 마우스 콜라겐 관절염 모델에 대한 관절염 억제작용, 호산구 침윤 억제작용[Antigen-induced airway eosinophilia(rat)] 등의 특허 문헌 1에 기재된 시험에서도 양호한 활성을 나타냈다. 따라서, 당해 화합물을 함유하는 의약은 CRACC나 IL-2가 관여하는 알레르기성, 염증성 또는 자가 면역질환의 예방 또는 치료제로서 유용하다. 여기서, 알레르기성, 염증성 또는 자가 면역질환으로서는 기관지 천식, 건선, 아토피성 피부염을 포함하는 아토피성 질환, 클론병을 포함하는 염증성 대장질환, 소화성 궤양, 신장염, 간염, 췌장염, 교원병, 관절 류마티즘, 변형성 관절염, 이식시의 거부반응 등이 포함된다. 상기 질환에의 유용성은 특허 문헌 1에 기재된 CRACC 억제작용 및 IL-2 생성 억제작용 등의 시험관내의 시험, 또한 기관지 천식의 대표적 질환 모델인 항원 유발 기도내 호산구 침윤 모델, 마우스 콜라겐 관절염 모델 등을 사용하는 각종 시험에 의해 확인할 수 있다. 4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드는 특허 문헌 1에 기재된 방법에 따라 제조할 수 있다.

본 발명의 4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드의 결정을 유효성분으로서 함유하는 고형 의약 조성물은 당해 분야에서 통상적으로 사용되고 있는 약제용 담체, 부형제 등을 사용하여 통상적으로 사용되고 있는 방법에 따라 조제할 수 있다. 투여는 정제, 환제, 캡슐제, 과립제, 산제, 액제 등에 의한 경구투여 또는 관절내, 정맥내, 근육내 등의 주사제, 좌제, 경피용 액제, 연고제, 경피용 첩부제, 경점막 액제, 경점막 첩부제, 흡입제 등에 의한 비경구투여의 어떤 형태라도 양호하다. 특히, 4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드의 결정을 제조 원료로 하는 경구투여용의 정제, 환제, 캡슐제, 과립제, 산제 등 및 비경구 투여용의 흡입제, 경비제 등은 안정적인 고형 제제로서 유리하다.

경구투여를 위한 고형 제제에서는 본 발명의 화합물이 하나 이상의 불활성 부형제, 예를 들면, 락트당, 만니톨, 포도당, 하이드록시프로필셀룰로스, 미세 결정 셀룰로스, 전분, 폴리비닐피롤리돈, 메타규산알루민산마그네슘 등과 혼합된다. 조성물은 통상적인 방법에 따라서, 불활성 첨가제, 예를 들면, 스테아르산마그네슘 등의 윤활제나 카복시메틸스타치나트륨 등의 붕괴제, 용해보조제를 함유할 수 있다. 정제 또는 환제는 필요에 따라 당의 또는 위용성 또는 장용성 코팅제로 피막할 수 있다.

경구투여를 위한 액체 조성물은 약제학적으로 허용되는 유제, 액제, 현탁제, 시럽제, 에릭서제 등을 포함하며, 일반적으로 사용되는 불활성 용제, 예를 들면, 정제수 및 에탄올을 포함한다. 이러한 조성물은 불활성 용제 이외에 가용화제, 습윤제, 현탁화제와 같은 보조제, 감미제, 교미(矯味)제, 방향제, 방부제를 함유할 수 있다.

비경구투여를 위한 주사제는 무균의 수성 또는 비수성의 액제, 현탁제, 유제를 포함한다. 수성 용제로서는, 예를 들면 주사용 증류수 및 생리 식염액이 포함된다. 비수성 용제로서는, 예를 들면 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브유와 같은 식물유, 에탄올과 같은 알콜류, 폴리소르베이트 80(상품명) 등이 있다. 이러한 조성물은 추가로 등장화제, 방부제, 습윤제, 유화제, 분산제, 안정화제, 용해보조제를 포함할 수 있다. 이들은, 예를 들면 세균 보류(保留) 필터를 통과시키는 여과, 살균제의 배합 또는 조사에 의해서 무균화된다. 또한, 이들은 무균의 고체 조성물을 제조하며, 사용전에 무균수 또는 무균의 주사용 용매에 용해 현탁하여 사용할 수 있다.

흡입제나 경비제 등의 경점막제는 고체, 액체, 반고체형의 것이 사용되며, 종래부터 공지된 방법에 따라서 제조할 수 있다. 예를 들면, 락트당이나 전분과 같은 부형제나, 또한 pH 조정제, 방부제, 계면활성제, 윤활제, 안정제나 증점제 등을 적절하게 첨가할 수 있다. 투여는 적당한 흡입 또는 취송(吹送)을 위한 장치를 사용할 수 있다. 예를 들면, 계량 투여 흡입 장치 등의 공지된 장치나 분무기를 사용하여, 화합물을 단독 또는 처방된 혼합물의 분말로서, 또는 의약적으로 허용할 수 있는 담체와 조합하여 용액 또는 현탁액으로 하여 투여할 수 있다. 건조 분말 흡입기 등은 일회 또는 복수회의 투여용의 것이라도 양호하며, 건조 분말 또는 분말 함유 캡슐을 이용할 수 있다. 또는, 적당한 분무제, 예를 들면, 클로로플루오로알칸, 하이드로플루오로알칸 또는 이산화탄소 등의 적절한 기체를 사용하는 가압 에어졸 스프레이 등의 형태라도 양호하다.

투여량은 증상, 투여대상의 연령, 성별 등을 고려하여 개개의 경우에 대응하여 적절하게 결정되지만, 통상적으로 경구투여의 경우, 성인 1일당 O.O01mg/kg 내지 10mg/kg 정도이며, 이것을 1회에, 또는 2 내지 4회로 나누어 투여한다. 또한, 흡입의 경우에는 통상적으로 성인 1회당 O.OO01mg/kg 내지 1mg/kg의 범위로 1일에 1회 내지 복수회 투여한다.

Claims

4,6-디메틸-4'-[3,5-비스(트리플루오로메틸)-1H-피라졸-1-일]니코틴아닐리드의 결정.
제1항에 있어서, 분말 X선 회절에서 2θ(^o) 5.94, 9.94, 15.64, 15.88, 18.48, 20.04 및 20.76의 피크를 갖는 결정.
제1항에 있어서, 분말 X선 회절에서 2θ(^o) 10.60, 12.90 및 17.24의 피크를 갖는 결정.
제1항에 있어서, DSC 분석으로 195 내지 198℃(발생)에서 흡열 피크를 갖는 결정.
제2항에 있어서, DSC 분석으로 195 내지 198℃(발생)에서 흡열 피크를 갖는 결정.
제3항에 있어서, DSC 분석으로 195 내지 198℃(발생)에서 흡열 피크를 갖는 결정.
제1항에 따른 결정과 약제학적으로 허용되는 담체를 함유하는 고형 의약 조성물.