KR102280377B1 - 효소 시스템-함유 화장료 조성물 - Google Patents

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Abstract

대상체의 피부, 모발 및/또는 네일 도포용 화장료 또는 화장료 또는 약제학적 조성물, 뿐만 아니라 대상체의 피부, 모발 및/또는 네일에 과산화수소를 투여하기 위해 상기 조성물을 활용하는 방법, 및 상기 조성물을 도포하기 위한 키트를 개시한다. 상기 조성물은 과산화수소-생성 효소, 및 상기 과산화수소-생성 효소의 기질을 포함한다. 추가로 리그닌 과산화효소를 포함하는 피부 및/또는 모발을 라이트닝을 위한 화장료 조성물 및 키트, 그리고 상기 조성물 및 키트를 활용한 미용 방법을 본원에 추가로 개시한다.

Description

효소 시스템-함유 화장료 조성물{ENZYMATIC SYSTEM-CONTAINING COSMETIC COMPOSITIONS}
본 발명은, 이의 구현예 일부로, 새로운 화장료 조성물, 키트 및 방법, 특히 전적으로는 아니지만, 원위치에서 과산화수소 생성을 위한 효소 시스템을 활용하는 화장료 조성물, 키트 및 방법, 그리고 예를 들면 피부 및/또는 모발 라이트닝인 이의 용도에 관한 것이다.
사람의 피부색은 멜라닌의 양, 질 및 분포, 또한 식물과 미생물에 존재하는 색소에 의해 좌우된다.
멜라닌 합성은 티로시나제의 작용을 통해 제 2 전구체 도파퀴논으로 변형되는 전구체 L-티로신으로부터 개시한다. 멜라닌 합성은 표피 기저층에 존재하는 멜라노사이트 세포에 존재하는 멜라노솜에서 일어난다; 이들 세포에서 멜라닌의 합성은 자외선(UV)에 의해 유도된다. 합성 후, 멜라닌은 상피 세포로 이동하고, 그 안으로 분산된다, 상기 멜라닌은 피부의 신진 대사 후 탈색되고, 그런 다음 피부 재생 시 각질 형태로 떨어져 나간다. 멜라닌은 UV 광에 의해 발생하는 악영향으로부터 피부를 보호하기 때문에 임상적으로 중요하다. 그러나, 높은 멜라닌 양은 원치 않게 피부 다크닝을 초래할 수 있고, 이의 불균일한 분포는 미학적으로 불쾌하게 할 수 있는 기미와 주근깨로 이어질 수 있다.
피부 라이트닝 제품은 지난 몇 년 동안 점점 더 인기를 끌고 있다. 상기 피부 라이트닝 제품의 주요 목적은 피부를 밝게 또는 하얗게 하거나 기미, 주근깨, 임신 마크 및 검버섯 등의 색소 질환을 치료하는 것이다. 몇 가지 타입의 피부 라이트닝 제품은 현재 구입 가능하다.
색소 세포의 변성 및 사멸을 기반으로 한 제품은 일반적으로, 피부 화이트닝, 라이트닝, 또는 피부 착색을 옅게 하는 것을 촉진하는 강한 화학 물질, 예를 들면 히드로퀴논, 4-이소프로필카네콜, 및 히드로퀴논 모노벤질 에테르를 포함한다. 피부 화이트닝에 보통 구입할 수 있는 다른 제제는 멜라닌 생성을 억제하는 코직산 및 이의 유도체, 및 코직산이 하는 것과 같이 유사한 방법으로 피부에 멜라닌 생성 세포의 산화 활성을 감소시키는 글라브리딘을 포함하는 감초(Glycyrrhiza glabra)와 같은 다양한 추출물을 포함한다.
다른 라이트닝 제품은 전구체 L-티로신을 제 2 전구체 도파퀴논으로 변형하는 효소인 티로시나제의 억제에 기초한다. 이런 그룹의 제품으로는 알부틴, 도파크롬에서 5,6-디히드록시인돌(DHI) 및 5,6-디히드록시인돌-2-카르복실산(DHICA)으로 호변이성화를 억제함으로써 킬레이팅 구리 이온에 의한 티로시나제를 저해할 수 있는 글루코스 히드로퀴논 화합물을 포함한다.
멜라노스타트(Melanostat)는 티로시나제를 통해 작용하는 또 다른 라이트닝 제품이다. 멜라노스타트는 멜라노사이트에서 비활성하는 멜라닌 형성 작용으로 기능 하는 합성 펩타이드이다.
멜라닌의 생성을 억제할 수 있는 몇몇 항산화 화합물은 또한 라이트닝 제품에 사용된다. 멜라닌의 합성은 산화 반응을 포함하기 때문에, 티로신/DOPA에서 멜라닌으로 다양한 지점에서의 산화를 차단하는 것은 궁극적으로 멜라닌 합성을 억제한다. 예를 들면, L-아스코르브산(비타민 C)은 멜라닌 중간체 상에 환원제로 작용하고, 산화 반응을 차단한다; 라이트닝 제품으로 사용되는 다른 항산화제는 일반적으로 뽕나무 또는 감초에서 추출되는 바이오플라보노이드를 포함한다.
그러나, 현재 구입 가능한 피부 라이트닝 제품의 지속적인 외부 도포는 영구적인 어루러기와 색소이상 및 발진과 같은 부작용을 초래할 수 있기 때문에 이러한 제품은 일반적으로 비효율적이며, 피부에 유해할 수 있다.
소비자는 자주 자신의 피부를 케어하기 위해 화장품을 사용한다. 일부 소비자들은 일반적으로 거칠고/거나 (예: 햇빛 노출, 피부 노화 또는 인간 피부에 환경적인 손실과 관련된 검버섯, 주근깨, 갈색 패치와 같은) 파괴된 피부 및 과색소침착을 치료하는 것을 추구한다. 피부 라이트닝은 특정 아시아 집단에서 관심이 많다.
미국 특허 출원 공개 제20050013784호에는 수불용성 기재를 포함하는 트리트먼트 마스크 및 피부 톤 변화제와 수용성 증점제를 포함하는 액상 조성물을 개시한다.
과산화수소를 포함하는 트리트먼트 마스크는 현재 Reviva 연구소(예를 들어, 산소 마스크, 그린 파파야 & 과산화수소 산소 마스크, REV-11305)로부터 구입 가능하다.
국제 특허 출원 공개 WO 2004/052275호에는 리그닌 과산화효소의 제조 방법 및 피부 및 모발 라이트닝을 위한 적합한 방법 및 화장료 조성물뿐만 아니라, 피부 및 모발 라이트닝용 활성 성분을 포함하는 키트 및 제조품을 개시한다.
국제 특허 출원 공개 WO 2012/153336호에는 과산화수소와 같은 산화 활성제를 포함하는 마스크 및 리그닌 과산화효소를 포함하는 화장료 조성물; 또는 리그닌 과산화효소를 포함하는 마스크 및 산화 활성제를 포함하는 화장료 조성물을 사용하는 대상체의 피부 라이트닝용 키트 및 방법을 개시한다.
미국 특허 제 8,426,158호에는 발효 동안에 생성된 과산화물로 가수분해 억제를 감소시키기 위한 과산화효소 활성을 가지는 폴리펩타이드의 존재 하에 셀룰로오스성 물질을 효소 조성물로 가수 분해함으로써 셀룰로오스성 물질의 가수분해를 증가시키기 위한 방법을 설명한다.
과산화수소는 글루코스 산화효소에 의한 글루코스 산화에 의해, 타액에서 형성된다. 상기 과산화수소는 티오시아네이트, 브로마이드 및 아이오다이드 각각으로부터 히포티오시아네이트, 히포브로마이트 및 히포아이오다이트와 같은 살균 산화 중간체를 형성하는 타액에서 락토페록시다제용 기질로서 역할을 한다.
국제 특허 출원 공개 WO 88/002600호에서는 글루코스 산화효소와 같은 과산화수소-생성 효소, 락토페록시다제와 같은 과산화효소, 티오시아네이트 및 리소자임을 포함하는 살균 조성물을 설명한다. 이용 중에 생성된 과산화수소는 과산화효소와의 결합으로 티오시아네이트를 히포티오시아네이트로 변환하려고 하고, 그렇게 함으로써 박테리아가 리소자임에 의해 용균되도록 박테리아를 약화시킨다.
Midda & Cooksey [J Clin Periodontol 1986, 13:950-956]에는 식이 발효 가능한 탄수화물로부터 과산화수소를 생성하기 위한 아밀로글루코시다제 및 글루코스 산화효소를 포함하는 구강세정액 및 박하 치약을 설명한다. 이는 타액 락토페록시다제의 존재 하에서 티오시아네이트를 히포티오시아네이트로 차례로 변환하고 이로서 박테리아를 억제한다.
Enzycal™ 치약 (Curaprox)은 타액의 항균 효과를 강화하기 위해 락토페록시다제, 글루코스 산화효소 및 아밀로글루코시다제를 포함한다 [Br Dent J 2008, 205:681].
Biotene™ 치약 및 구강 청결제(글락소스미스클라인)는 글루코스 산화효소, 락토페린, 락토페록시다제, 리소자임을 포함한다.
미국 특허 제 5,607,681호에는 아이오다이드, 티오시아네이트, 글루코스 산화 효소, D-글루코스 및 선택적으로 또한, 락토페록시다제와 같은 과산화효소를 포함하는 항균 조성물을 설명한다. 상기 조성물은 구강 위생, 데오도란트, 및 항-비듬 제품에 방부제 또는 활성제로 사용하기 위함이다. 상기 조성물은 항균 활성을 얻기 위해 희석될 수 있는 비반응 건조 분말 및 비수성 용액을 제공될 수 있다.
미국 특허 제 6,214,339호에는 외이 환경에 접할 때 과산화수소를 생성하기 위해, 글루코스와 같은 산화가능한 기질 및 글루코스 산화효소와 같은 산화환원효소를 함유하는 비수용성 조성물을 외이에 투여함으로써 개와 고양이의 외이염 치료를 설명한다. 상기 조성물은 아이오다이드 염과 과산화수소로부터 히포아이오다이트(hypioiodite) 제조용 락토페록시다제와 같은 과산화효소를 추가로 포함한다.
미국 특허 제 7,833,290호에는 적합한 기질 존재 하에서 헤마톡실린, 헤마테인, 브라질린 및 브라질레인과 같은 화합물; 금속 염; 바이카보네이트; 및 과산화수소 또는 우레아 과산화물, 금속 과산화물, 퍼보레이트, 퍼카르보레이트 및 산화효소와 같은 과산화수소를 발생시키는 시스템;으로 처리함으로써 케라틴 섬유의 염색방법을 설명한다.
DE 102009045798은 과산화효소, 과산화수소 생성 효소 및 과산화수소 생성 효소의 기질을 포함하는 멀티-성분 포장 단위의 형태인 피부 라이트닝을 위한 화장료 조성물 및 상기 성분들은 혼합하는 단계 및 피부 상에 상기 혼합물을 도포하는 단계를 포함하는 미용 방법을 설명한다.
DE 102005041443은 원 위치에서 과산화수소를 생성하는 글루코스 및 글루코스 산화효소의 용도를 설명한다.
민텔의 GNPD 내 등록번호 1889052에 시네론 뷰티에 의해 생산된 "강렬한 브라이트닝과 콜렉팅 나이트 크림"에 대해 설명되어 있다. 이 제품은 과산화수소 및 리그니나제를 포함한다.
추가적인 배경 기술로는 Hugoson 등 [Odontol Rev 1974, 25:69-80]; 미국 특허 제 7,981,166호; 및 미국 특허 공개 제 20040161435호 및 제 20090130040호를 포함한다.
본 발명자들은 화장료 조성물 및 키트, 및 특히 리그닌 과산화효소-함유 조성물 및 키트에 과산화수소를 포함하지 않아도 되는 방법을 고안하고 성공적으로 실시하였다.
본 발명의 일부 구현예의 양태에 따라, 리그닌 과산화효소, 과산화수소-생성 효소, 및 상기 과산화수소-생성 효소의 기질을 포함하는 대상체의 피부 및/또는 모발 라이트닝을 위한 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 일부 구현예의 양태에 따라, 과산화수소-생성 효소, 상기 과산화수소-생성 효소의 기질 및 리그닌 과산화효소를 포함하고, 상기 과산화수소-생성 효소, 상기 과산화수소-생성 효소의 기질 및 상기 리그닌 과산화효소 중에서 적어도 하나는 키트 내 개별 포장된 조성물의 일부를 형성하는 대상체의 피부 및/또는 모발 미백용 화장료 키트를 제공한다.
본 발명의 일부 구현예의 양태에 따라, 리그닌 과산화효소, 과산화수소-생성 효소 및 상기 과산화수소-생성 효소의 기질을 포함하는 조성물을 대상체의 피부 및/또는 모발 부위에 접촉하여 대상체의 피부 및/또는 모발을 라이트닝 하는 단계를 포함하는, 대상체의 피부 및/또는 모발의 라이트닝을 위한 미용 방법을 제공한다.
본 발명의 일부 구현예의 양태에 따라, 과산화수소-생성 효소, 및 상기 과산화수소-생성 효소의 기질을 포함하는 대상체의 피부, 모발 및/또는 네일 도포 화장료 또는 약제학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 일부 구현예의 양태에 따라, 과산화수소를 포함하는 대상체의 피부, 모발 및/또는 네일 화장료 또는 약제학적 조성물을 적용하기 위한 키트로서, 상기 화장료 또는 약제학적 조성물은 과산화수소-생성 효소를 포함하는 제 1 조성물, 및 상기 과산화수소-생성 효소의 기질를 포함하는 제 2 조성물을 포함하는 키트를 제공한다.
본 발명의 일부 구현예의 양태에 따라, 과산화수소-생성 효소 및 상기 과산화수소-생성 효소의 기질을 포함하는 조성물을 대상체의 피부, 모발 및/또는 네일 부위에 접촉하여 피부, 모발 및/또는 네일 상에 과산화수소를 발생시키는 단계를 포함하는, 대상체의 피부, 모발 및/또는 네일에 과산화수소를 투여하는 방법을 제공한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 조성물 내 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 units/gram 내지 125 units/gram의 범위 내이다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소의 농도는 0.125 units/gram 내지 1250 units/gram의 범위 내이다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소의 기질의 농도는 0.0175 μmole/gram 내지 175 μmole/gram의 범위 내이다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 조성물은 산화 매개체를 추가로 포함한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 산화 매개체는 베라트릴 알코올, 베라트롤 및 1,4-디메톡시벤젠으로 이루어진 군에서 선택된다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 조성물 내 산화 매개체의 농도는 0.03 μmole/gram 내지 300 μmole/gram의 범위 내이다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 과산화수소-생성 효소는 글루코스 산화효소, 헥소스 산화효소, 콜레스테롤 산화효소, 아릴 알코올 산화효소, L-굴로노락톤 산화효소, 갈락토스 산화효소, 피라노스-2-산화효소, 피리독신-4-산화효소, 알코올 산화효소, 2-히드록시-산산화효소, 콜린 산화효소, 장쇄-알코올 산화효소, 글리세롤-3-포스페이트 산화효소, D-아라비노노-1,4-락톤 산화효소, 바닐릴 알코올 산화효소, 알디톨 산화효소, 프로솔라나피론 II 산화효소, 파로마민 6'-산화효소, 글리옥살 산화효소, 베라트릴 알코올 산화효소, 알코올 탈수소효소, 셀로비오스 탈수소효소, 알데히드 산화효소, 옥살레이트 산화효소, 아릴 알데히드 산화효소, 디히드로오로테이트 산화효소, 피롤로퀴놀린-퀴논 합성효소, L-아미노산 산화효소, L-글루타메이트 산화효소, 폴리아민 산화효소, NAD(P)H 산화효소, 우레이트 산화효소, 히드록실아민 산화효소, 티올 산화효소, 글루타치온 산화효소, 시토크롬 C 산화효소, 크산틴 산화효소 및 슈퍼옥사이드 디스뮤타제로 이루어진 군에서 선택된다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 과산화수소-생성 효소는 글루코스 산화효소를 포함하고, 상기 기질은 D-글루코스를 포함한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 리그닌 과산화효소는 동종효소 H1 또는 동종효소 H2의 변형된 형태이다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 리그닌 과산화효소는 백색 부후균의 리그닌 과산화효소이다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 리그닌 과산화효소는 파네로카에테 크리소스포리움(Phanerochaete chrysosporium ) 균의 추출물이다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 리그닌 과산화효소는 재조합으로 발현된다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 리그닌 과산화효소는 서열번호 1로 표시되는 폴리펩타이드 서열을 포함한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 화장료 조성물은 마스크, 세럼, 로션, 크림, 샴푸, 젤 및 토너로 이루어진 군에서 선택된 제형이다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 조성물은 화장품으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 조성물은 밀폐용기에 포장된다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 밀폐용기는 용기 내로 공기 유입 없이 조성물을 분산시키도록 구성된다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 과산화수소-생성 효소는 제 1 조성물의 일부를 형성하고, 상기 기질은 제 2 조성물의 일부를 형성하며, 상기 제 1 및 제 2 조성물은 키트 내 개별 포장된다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 제 1 조성물은 추가로 리그닌 산화효소를 포함한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 제 2 조성물은 추가로 리그닌 산화효소를 포함한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 리그닌 산화효소는 키트 내 제 3 조성물의 일부를 형성하며, 상기 제 3의 조성물은 키트 내 개별 포장된다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 과산화수소-생성 효소 및 상기 과산화수소-생성 효소의 기질은 키트 내 밀폐 포장으로 함께 포장된다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 밀폐용기는 용기 내로 공기 유입 없이 조성물을 분산시키도록 구성된다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 리그닌 과산화효소를 포함하는 조성물 내 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 2.5 units/gram 내지 250 units/gram의 범위 내이다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 키트는 산화 매개체, 상기 과산화수소-생성 효소, 상기 과산화수소-생성 효소의 기질 및 상기 리그닌 과산화효소를 포함한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 산화 매개체는 상기 리그닌 과산화효소를 포함하는 조성물의 일부를 형성한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 조성물 내 상기 산화 매개체의 농도는 0.06 μmole/gram 내지 600 μmole/gram의 범위 내이다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 과산화수소-생성 효소를 포함하는 조성물 내 상기 과산화수소-생성 효소의 농도는 0.25 units/gram 내지 2500 units/gram의 범위 내이다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 기질을 포함하는 조성물 내 상기 기질의 농도는 0.035 μmole/gram 내지 350 μmole/gram의 범위 내이다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라,
상기 키트는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내 농도의 상기 리그닌 과산화효소, 및 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내 농도의 상기 글루코스 산화효소를 포함하는 제 1 조성물; 및
0.35 μmole/gram 내지 35 μmole/gram의 범위 내 농도의 상기 D-글루코스를 포함하는 제 2 조성물을 포함한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 키트 내 개별 포장된 상기 조성물은 마스크, 세럼, 로션, 크림, 샴푸, 젤 및 토너로 이루어진 군에서 선택된 제형이다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 키트 내 개별 포장된 상기 조성물은 화장품으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 키트 내로 포장된 상기 조성물은 리그닌 과산화효소, 과산화수소-생성 효소 및 상기 과산화수소-생성 효소의 기질에 의해 형성된다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 접촉 단계는 적어도 5회 실시한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 접촉 단계는 하루에 1회 또는 2회 실시한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 조성물은 리그닌 과산화효소를 피부 및/또는 모발 부위에 접촉한 후에, 과산화수소-생성 효소 및/또는 상기 과산화수소-생성 효소의 기질을 피부 및/또는 모발 부위에 접촉하여 형성된다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 피부는 얼굴 피부를 포함한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 피부는 햇빛에 노출된 피부 영역을 포함한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 피부를 라이트닝 하는 것은 전체 피부 안색을 라이트닝 하는 것을 포함한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 피부는 고르지 못한 피부 톤, 다크 스팟(들), 주근깨(들), 기미, 색소 침착, 피부 변색, 검버섯(들), 여드름 자국(들) 및/또는 흉터를 포함한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 조성물은 과산화수소 존재 하에 화장료 또는 약제학적 활성을 나타내는 적어도 하나의 제제를 추가로 포함한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 적어도 하나의 제제는 과산화효소 및 산화 염료 전구체로 이루어진 군에서 선택된다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 조성물은 블렌칭 조성물, 헤어-염색 조성물, 항-미생물 조성물 및 냄새-제거용 조성물로 이루어진 군에서 선택된다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 키트는 과산화수소 존재 하에 화장료 또는 약제학적 활성을 나타내는 적어도 하나의 제제를 추가로 포함한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라,
2.5 내지 250 units/gram의 범위 내 농도에서의 글루코스 산화효소를 포함하는 상기 제 1 조성물; 및
0.35 μmole/gram 내지 35 μmole/gram의 범위 내 농도에서의 D-글루코스를 포함하는 상기 제 2 조성물을 포함한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 제 1 조성물 및 제 2 조성물은 각각 독립적으로 마스크, 세럼, 로션, 크림, 샴푸, 젤 및 토너로 이루어진 군에서 선택된 제형으로 제형화된다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 제 1 조성물 및 제 2 조성물은 추가로 화장품으로 허용 가능한 담체 및/또는 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함한다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상기 조성물은 상술된 키트 내로 포장된 과산화수소-생성 효소 및 상기 과산화수소-생성 효소의 기질에 의해 형성된다.
본 발명의 일부 임의의 구현예 및 이의 임의의 조합에 따라, 상술된 방법의 조성물은 임의의 조합에서, 이의 구현예들 중 어느 하나를 포함하는 본원에 기술된 임의의 조성물이다.
다르게 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술적 및/또는 과학적 용어는 일반적으로 본 발명이 속하는 기술 분야에서 당업자에 의해 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다. 본원에 기재된 것과 유사하거나 동등한 방법 및 재료가 본 발명의 실시예의 실시 또는 시험에 사용될 수 있지만, 예시적인 방법 및/또는 재료는 다음에서 설명한다. 상충되는 경우, 정의를 포함한 특허 명세서는 조절될 것이다. 게다가 재료, 방법 및 실시예는 단지 예시적인 것이며 반드시 제한하고자 하는 것은 아니다.
본 발명의 일부 구현예는 본원에 첨부된 도면을 참조하여 예시적으로만 설명된다. 상세하게 특정 도면을 참조하여, 도시된 특정 사항은 본 발명의 실시예의 방식으로, 그리고 본 발명의 구현예로 예시적인 논의를 목적으로 강조된다. 이와 관련하여, 도면이 포함된 명세서는 당업자에게 본 발명의 실시예가 어떻게 실시될 수 있는지를 명백히 보여준다.
도면에서,
도 1은 140 μg/ml 멜라닌과 함께 25 units/gram 리그닌 과산화효소(LIP) 동종효소 H1 분획, 25 units/gram 글루코스 산화효소(GOX) 및 6 mmol/kg 베라트릴 알코올(VA)을 포함하는 예시적인 효소 크림(LIP/VA/GOX) 및 3.5 mmol/kg 글루코스(GLU)를 포함하는 예시적인 활성제 크림, 140 μg/ml 멜라닌과 함께 25 units/gram LIP 동종효소 H1 분획, 및 6 mmol/kg 베라트릴 알코올(VA)을 포함하는 대조군 효소 크림(LIP/VA) 및 3.53 mmol/kg H2O2를 포함하는 대조군 활성화 크림, 뿐만 아니라 예시적인 효소 및 활성제 크림(LIP/VA/GOX/GLU)의 혼합물 및 대조군 효소 및 활성제 크림의 혼합물(LIP/VA/H2O2)을 보여주는 이미지를 나타내며;
도 2a 및 2b는 본 발명의 실시예에 따른 LIP 동종효소 H1, 글루코스 산화효소 및 글루코스를 하루에 2회 투여하는 치료 0, 7, 및 21일째 대상체의 다양한 얼굴 부위에서의 멜라닌 지수(도 2a) 및 홍반 지수(도 2b) 값을 보여주는 막대 그래프를 나타내며(* p<0.05 vs. day 0);
도 3a 및 3b는 본 발명의 실시예에 따른 LIP 동종효소 H1, 글루코스 산화효소 및 글루코스를 하루에 2회 투여하는 치료 0, 및 21일째 대상체의 다양한 얼굴 부위에서의 멜라닌 지수(도 3a) 및 홍반 지수(도 3b) 값을 보여주는 막대 그래프를 나타내며(* p<0.05 vs. day 0);
도 4a 및 4b는 본 발명의 실시예에 따른 LIP 동종효소 H1, 글루코스 산화효소 및 글루코스를 하루에 2회 투여하는 치료 0, 7, 및 21일째 대상체의 다양한 얼굴 부위에서의 멜라닌 지수(도 4a) 및 홍반 지수(도 4b) 값을 보여주는 막대 그래프를 나타내며(* p<0.05 vs. day 0);
도 5a 및 5b는 본 발명의 실시예에 따른 LIP 동종효소 H1, 글루코스 산화효소 및 글루코스를 하루에 2회 투여하는 치료 0, 7, 및 21일째 대상체의 다양한 얼굴 부위에서의 멜라닌 지수(도 5a) 및 홍반 지수(도 5b) 값을 보여주는 막대 그래프를 나타내며(* p<0.05 vs. day 0, # p<0.05 vs. day 7);
도 6a 및 6b는 본 발명의 실시예에 따른 LIP 동종효소 H1, 글루코스 산화효소 및 글루코스를 하루에 2회 투여하는 치료 0, 7, 및 21일째 대상체의 다양한 얼굴 부위에서의 멜라닌 지수(도 6a) 및 홍반 지수(도 6b) 값을 보여주는 막대 그래프를 나타내며(* p<0.05 vs. day 0, # p<0.05 vs. day 7);
도 7a 및 7b는 본 발명의 실시예에 따른 LIP 동종효소 H1, 글루코스 산화효소 및 글루코스를 하루에 2회 투여하는 치료 0, 7, 및 21일째 대상체의 다양한 얼굴 부위에서의 멜라닌 지수(도 7a) 및 홍반 지수(도 7b) 값을 보여주는 막대 그래프를 나타내며(* p<0.05 vs. day 0, # p<0.05 vs. day 7);
도 8a 및 8b는 본 발명의 실시예에 따른 LIP 동종효소 H1, 글루코스 산화효소 및 글루코스를 하루에 2회 투여하는 치료 0, 및 7일째 대상체의 다양한 얼굴 부위에서의 멜라닌 지수(도 8a) 및 홍반 지수(도 8b) 값을 보여주는 막대 그래프를 나타내며(* p<0.05 vs. day 0);
도 9a 및 9b는 본 발명의 실시예에 따른 LIP 동종효소 H1, 글루코스 산화효소 및 글루코스를 하루에 2회 투여하는 치료 0, 7, 및 21일째 대상체의 다양한 얼굴 부위에서의 멜라닌 지수(도 9a) 및 홍반 지수(도 9b) 값을 보여주는 막대 그래프를 나타내며(* p<0.05 vs. day 0, # p<0.05 vs. day 7; 치료와 관계없는 자극으로 21 일째 양볼의 홍반 지수 증가);
도 10a 및 10b는 본 발명의 실시예에 따른 LIP 동종효소 H1, 글루코스 산화효소 및 글루코스를 하루에 2회 투여하는 치료 0, 4, 6, 및 8주 후 피부 색소(도 10a) 및 비색소(도 10b) 멜라닌 지수를 보여주는 그래프를 나타내며(** p<0.01 (도 10A에서 p=0.001, 도 10B에서 p=0.007), *** p<0.001);
도 11은 본 발명의 실시예에 따른 LIP 동종효소 H1, 글루코스 산화효소 및 글루코스를 하루에 2회 투여하는 치료 0, 4, 6, 및 8주 후, 피부과 전문의의 판단으로 피부의 색소 침착의 균일성을 보여주는 VAS(visual analogue scale)를 나타내며(0=균일함, 고름, 10=고르지 않음, 부스럼 투성이, 얼룩덜룩함,* p<0.05);
도 12는 본 발명의 실시예에 따른 LIP 동종효소 H1, 글루코스 산화효소 및 글루코스를 하루에 2회 투여하는 치료 0, 4, 6, 및 8주 후, 피부과 전문의의 판단으로 피부의 선명도를 보여주는 VAS를 나타내며(0=깨끗함, 고름, 10=칙칙함, 불투명, * p<0.05, ** p<0.01);
도 13은 본 발명의 실시예에 따른 LIP 동종효소 H1, 글루코스 산화효소 및 글루코스를 하루에 2회 투여하는 치료 0, 4, 6, 및 8주 후, 피부과 전문의의 판단으로 피부의 라이트닝/화이트닝을 보여주는 VAS를 나타내며(0=밝은 외모, 10=칙칙함, 무광, ** p<0.01, *** p<0.001);
도 14는 본 발명의 실시예에 따른 LIP 동종효소 H1, 글루코스 산화효소 및 글루코스를 하루에 2회 투여하는 치료 0, 4, 6, 및 8주 후, 피부과 전문의의 판단으로 피부 톤을 보여주는 VAS를 나타내며(0=고름, 건강한 피부색, 10=고르지 않음, 변색된 외모, * p<0.05, *** p<0.001);
도 15는 본 발명의 실시예에 따른 LIP 동종효소 H1, 글루코스 산화효소 및 글루코스를 하루에 2회 투여하는 치료 0, 4, 6, 및 8주 후, 피부과 전문의의 판단으로 피부의 윤기를 보여주는 VAS를 나타내며(0 = 빛남, 발광 모습, 10 = 칙칙한, 무광, 누르스름한 외모, *** p<0.001);
도 16은 본 발명의 실시예에 따른 LIP 동종효소 H1, 글루코스 산화효소 및 글루코스를 하루에 2회 투여하는 치료 0, 4, 6, 및 8주 후, 피부과 전문의의 판단으로 피부의 전반적인 모습을 보여주는 VAS를 나타내며(0 = 건강해 보임, 10 = 건강하지 않게 보임, *** p<0.001); 그리고
도 17은 본 발명의 실시예에 따른 LIP 동종효소 H1, 글루코스 산화효소 및 글루코스를 하루에 2회 투여하는 치료 전(기준선) 및 8주 후 대상체의 사진을 나타낸다.
본 발명은, 이의 일부 구현예로, 새로운 화장료 조성물, 키트 및 방법, 특히 전적으로는 아니지만, 과산화수소-생성 화장료 조성물, 키트 및 방법, 그리고 예를 들면 피부 및/또는 모발 라이크닝인 이의 용도에 관한 것이다.
본 발명의 적어도 하나의 구현예를 상세히 설명하기 전에, 본 발명은 반드시 다음 명세서 또는 실시예로 예시된 세부 사항에 이의 적용이 제한되지 않음을 알아야 한다. 본 발명은 다른 구현예들이 가능하거나, 또는 다양한 방식으로 실시되거나 수행될 수 있다.
과산화수소 및 리그닌 과산화효소를 사용하여 대상체의 피부를 라이트닝 하는 방법이 이전에 개시되었다 (예를 들면, 상술된 국제 특허 공개 WO 2012/153336호 참조하시오). 이러한 방법은 과산화수소를 함유하는 조성물의 이용을 필요로 한다.
많은 다른 화장료 조성물 및 방법은 과산화수소를 포함하거나 이용한다.
그러나, 화장품 적용에 있어 과산화수소의 이용은 최근에 바람직하지 않은 것으로 인식되었다.
과산화수소를 함유하는 조성물을 사용하기 위한 필요성이 회피되는 방법론에 대한 연구에서, 본 발명자들은 적용 시 과산화수소를 발생시키기 위한 효소 시스템을 이용하는 새로운 방법론을 구상하고 성공적으로 고안하고 실시하였다.
보다 특히, 본 발명자들은 과산화수소-생성 효소 및 이의 기질을 함유하는 조성물 또는 시스템의 적용 직전 및/또는 과산화수소-생성 효소 및 이의 기질을 함유하는 조성물 또는 시스템을 적용하는 동안, 원위치에서 과산화수소를 생성시키기 위한 과산화수소-생성 효소 및 이의 기질을 이용하였다. 상기 효소 시스템은 과산화수소 생성이 요구될 때까지 및/또는 산소 부재의 보관으로 효소 및 기질이 서로 불활성을 유지할 때까지 효소 및 기질이 분리하도록 유지함으로써 용이하게 제어 가능하다. 본원에 개시된 방법은 원위치에서 점진적으로 과산화수소를 발생시킬 수 있음에 유리하며, 시간이 지남에 따라 그것은 소비되어 과산화수소의 농도는 낮아지고 안정하다.
본 발명을 실습하면서, 본 발명자들은 피부를 라이트닝 하도록 리그닌 과산화효소의 활성화를 위한 과산화수소를 생성하는 효소 시스템의 유효성을 증명하였다.
따라서, 다음 실시예 부분에 나타낸 바와 같이, 본 발명자들은 리그닌 과산화효소를 포함하는 화장료 조성물 및 글루코스를 포함하는 활성제 조성물을 디자인하였다. 이는 함께 (예를 들어, 환자의 피부 영역에) 적용될 때, 글루코스 산화효소 및 글루코스에 의해 생성되는 과산화수소와 리그닌 과산화효소의 작용으로 인해, 멜라닌 함량(도 1-9B) 감소 결과로 현저한 화이트닝 효과를 초래한다.
이러한 결과는, (예, 과산화효소-촉매 반응에서 멜라닌과) 반응하려고 한 원위치에서(즉, 신체 영역 내 또는 상에서) 과산화수소를 생성하는 위한 효소/기질 시스템을 사용하는 효과를 보여준다.
본 발명의 일부 구현예의 양태에 따라, 국소 도포용(예, 대상체의 피부, 모발 및/또는 네일 도포) 화장료 또는 약제학적 조성물이 제공된다. 본 발명의 일부 구현예의 양태에 따라, 상기 조성물은 과산화수소-생성 효소 시스템, 즉, 과산화수소-생성 효소 및 상기 과산화수소-생성 효소의 기질을 포함한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 본원에 개시된 임의의 조성물, 키트 및 방법 (및 임의의 다른 양태)과 관련하여 용어 "화장료"는 인체의 외모 또는 냄새를 개선시키는 조성물, 키트 및 방법을 말한다.
일부 구현예에서, 용어 "화장료"는 전 세계적으로 정의 규제 당국을 따른다. 예를 들면, 일부 구현예에서, 용어 "화장료"는 "신체의 구조 또는 기능에 영향을 미치지 않고 세정, 미화, 매력 촉진 또는 외모 변화를 위해 인체에 적용하고자 하는" 것으로서, 미국 식품 의약품 안전청(FDA) 정의에 따른다.
과산화수소-생성 효소 시스템:
본원에 걸쳐 사용된 바와 같이, 문구 "과산화수소-생성 효소"는 과산화수소가 생성물인 반응을 촉매하는 효소를 의미한다.
본원에 걸쳐 사용된 바와 같이, 과산화수소 생성 효소의 "기질"은 과산화수소가 생성물인 과산화수소-생성 효소에 의해 촉매된 상술된 반응용 기질로 역할을 하는 O2 또는 물 외에 임의의 화합물을 의미한다. "기질"은 단일 화합물 또는 복수의 화합물일 수 있다. 복수의 화합물은 다른 반응의 일부로 상기 효소 또는 기질로서 복수의 화합물을 이용하는 단일 반응을 촉매하는 효소와 상호 작용할 수 있다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 상기 기질이 산화되고 O2가 과산화수소로 환원되는 반응을 촉매한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 상기 기질이 환원되고 물이 과산화수소로 산화되는 반응을 촉매한다.
본 발명의 구현예들로 사용될 수 있는 과산화수소-생성 효소의 예로 다음을 포함하나, 이에 제한되지 않는다:
예를 들어, 글루코스 산화효소(EC 1.1.3.4), 헥소스 산화효소(EC 1.1.3.5), 콜레스테롤 산화효소(EC 1.1.3.6), 아릴 알코올 산화효소(EC 1.1.3.7), L-굴로노락톤 산화효소(EC 1.1.3.8), 갈락토스 산화효소(EC 1.1.3.9), 피라노스-2-산화효소(EC 1.1.3.10), 피리독신-4-산화효소(EC 1.1.3.12), 알코올 산화효소(EC 1.1.3.13), 2-히드록시-산 산화효소(EC 1.1.3.15), 콜린 산화효소(EC 1.1.3.17), 장쇄-알코올 산화효소(EC 1.1.3.20), 글리세롤-3-포스페이트 산화효소(EC 1.1.3.21), D-아라비노노-1,4-락톤 산화효소(EC 1.1.3.37), 바닐릴 알코올 산화효소(EC 1.1.3.38), 알디톨 산화효소(EC 1.1.3.41), 프로솔라나피론 II 산화효소(EC 1.1.3.42), 파로마민 6'-산화효소(EC 1.1.3.43), 글리옥살 산화효소 및 베라트릴 알코올 산화효소와 같은 EC 1.1.3 산화환원효소;
알코올 탈수소효소(EC 1.1.99.8);
셀로비오스 탈수소효소(EC 1.1.99.18);
예를 들어, 알데히드 산화효소(EC 1.2.3.1), 옥살레이트 산화효소(EC 1.2.3.4) 및 아릴 알데히드 산화효소(EC 1.2.3.9)와 같은 EC 1.2.3 산화환원효소;
예를 들어, 디히드로오로테이트 산화효소(EC 1.3.3.1) 및 피롤로퀴놀린-퀴논 합성효소(EC 1.3.3.11)와 같은 EC 1.3.3 산화환원효소;
예를 들어, L-아미노산 산화효소(EC 1.4.3.2) 및 L-글루타메이트 산화효소(1.4.3.11)와 같은 EC 1.4.3 산화환원효소;
예를 들어, 폴리아민 산화효소(1.5.3.11)와 같은 EC 1.5.3 산화환원효소;
예를 들어, NAD(P)H 산화효소(1.6.3.1)와 같은 EC 1.6.3 산화환원효소;
예를 들어, 아우레이트 산화효소(EC 1.7.3.3) 및 히드록실아민 산화효소(EC 1.7.3.4)와 같은 EC 1.7.3 산화환원효소;
예를 들어, 티올 산화효소(EC 1.8.3.2) 및 글루타치온 산화효소(EC 1.8.3.3)와 같은 EC 1.8.3 산화환원효소;
예를 들어, 시토크롬 C 산화효소(EC 1.9.3.1)와 같은 EC 1.9.3 산화환원효소;
예를 들어, 크산틴 산화효소(EC 1.17.3.2)와 같은 EC 1.17.3 산화환원효소; 및
슈퍼옥사이드 디스뮤타제(EC 1.15.1.1).
본원의 EC 명명법은 생화학 및 분자 생물학의 국제 연합에 따른 것이다.
일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소는 EC 1.1.3 산화환원효소, EC 1.2.3 산화환원효소, EC 1.3.3 산화환원효소, EC 1.4.3 산화환원효소, EC 1.5.3 산화환원효소, EC 1.6.3 산화환원효소, EC 1.7.3 산화환원효소, EC 1.8.3 산화환원효소, EC 1.9.3 산화환원효소 및 EC 1.17.3 산화환원효소(예, 본원에 기술된 산화환원효소와 같음)의 하나 이상이다.
일부 구현예에서, 슈퍼옥사이드 디스뮤타제는 슈퍼옥사이드 원과 조합하여, 슈퍼옥사이드로부터 과산화수소 생성을 위해 포함된다. 일부 구현예에서, 상기 슈퍼옥사이드 원은 슈퍼옥사이드를 생성하는 효소, 예를 들어 NAD(P)H 산화효소 및/또는 크산틴 산화효소이다.
일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소는 슈퍼옥사이드를 생성한다. 슈퍼옥사이드는 보통 과산화수소를 형성하기 위해 상당한 정도로 반응함에 따라(예, 디뮤데이션에 의해), 슈퍼옥사이드의 생성이 과산화수소의 생성을 포함하는 본원에 고려된다.
과산화수소-생성 효소의 적합한 기질은 당업자에게 명백할 것이다.
예시적인 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소(EC 1.1.3.4)이고, 상기 기질은 D-글루코스를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 헥소스 산화효소(EC 1.1.3.5)이고, 상기 기질은 D-글루코스, D-갈락토스, D-만노스, 말토스, 락토스 및/또는 셀로비오스를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 콜레스테롤 산화효소(EC 1.1.3.6)이고, 상기 기질은 콜레스테롤을 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 아릴 알코올 산화효소(EC 1.1.3.7)이고, 상기 기질은 방향족 1차 알코올을 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 L-굴로노락톤 산화효소(EC 1.1.3.8)이고,, 상기 기질은 L-글로노-1,4-락톤을 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 갈락토스 산화효소(EC 1.1.3.9)이고, 상기 기질은 1차 알코올(예, 메탄올, 에탄올, n-프로판올, n-부탄올, 이소부탄올), 단당류, 올리고당 및/또는 다당류를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 피라노스-2-산화효소(EC 1.1.3.10) 및 상기 기질은 알도피라노스(예, D-글루코스, D-자일로스, D-갈락토스), L-소르보스 및/또는 1,5-안히드로글루시톨, 및/또는 이의 이당류를 포함한다. 피라노스-2- 산화효소가 리그닌 셀룰로오스 활성화를 위한 과산화수소용 천연 공급원임을 이해해야 한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 피라노스-4-산화효소(EC 1.1.3.12)이고, 상기 기질은 피리독신을 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 알코올 산화효소(EC 1.1.3.13)이고, 상기 기질은 1차 알코올(예, 메탄올, 에탄올, n-프로판올, n-부탄올, 이소부탄올)을 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 2-히드록시-산 산화효소(EC 1.1.3.15)이고, 상기 기질은 (S)-2-히드록시 산(예, 글리코레이트, 2-히드록시글루타레이트) 및/또는 (S)-2-아미노산을 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 콜린 산화효소(EC 1.1.3.17)이고, 상기 기질은 콜린 및/또는 글리신 베타인 알데히드를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 장쇄-알코올 산화효소(EC 1.1.3.20)이고, 상기 기질은 장쇄 알코올(예, 지방 알코올)을 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 글리세롤-3-포스페이트 산화효소(EC 1.1.3.21)이고 상기 기질은 글리세롤-3-포스페이트를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 D-아라비노노-1,4-락톤 산화효소(EC 1.1.3.37)이고, 상기 기질은 L-굴로노-1,4-락톤, D-아라비노노-1,4-락톤, 및/또는 L-갈락토노-1,4-락톤을 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 바닐릴 알코올 산화효소(EC 1.1.3.38)이고, 상기 기질은 4-아릴페놀, 4-히드록시벤질 알코올(예, 바닐릴 알코올), 4-히드록시벤자민 및/또는 4-(메톡시메틸)페놀을 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 알디톨 산화효소(EC 1.1.3.41)이고, 상기 기질은 알디톨(예, 자일톨, D-소르비톨)을 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 프로솔라나피론 II 산화효소(EC 1.1.3.42)이고 상기 기질은 프로솔라나피론 II를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 파로마민 6'-산화효소(EC 1.1.3.43)이고, 상기 기질은 파로마민 및/또는 6'''-디아미노-6'''히드록시네오마이신 C를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 베라트릴 알코올 산화효소이고, 상기 기질은 1차 (4-메톡시)-방향족 알코올(예, 베라트릴 알코올)을 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 글리옥살 산화효소이고, 상기 기질은 글리옥살, 알킬 글리옥살(예, 메틸 글리옥살) 및/또는 셀로비오스를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 알코올 탈수소효소(EC 1.1.99.8)이고 상기 기질은 1차 알코올(예, 메탄올, 에탄올, n-프로판올, n-부탄올, 이소부탄올)을 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 셀로비오스 탈수소효소(EC 1.1.99.18)이고, 상기 기질은 셀로비오스, 셀로-올리고당, 락토스, 및/또는 D-글루코실-1,4-β-D-만노스를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 알데히드 산화효소(EC 1.2.3.1)이고, 상기 기질은 알데히드를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 옥살레이트 산화효소(EC 1.2.3.4)이고, 상기 기질은 옥살레이트를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 아릴 알데히드 산화효소(EC 1.2.3.9)이고, 상기 기질은 방향족 알데히드(예, 벤즈알데히드, 바닐린)를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 디히드로오로테이트 산화효소(EC 1.3.3.1)이고, 상기 기질은 디히드로오로테이트를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 피롤로퀴놀린-퀴논 합성효소(EC 1.3.3.11)이고, 상기 기질은 6-(2-아미노-2-카르복시에틸)-7,8-디옥소-1,2,3,4,7,8-헥사히드로퀴놀린-2,4-디카르복시레이트를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 L-아미노산 산화효소(EC 1.4.3.2)이고, 상기 기질은 L-아미노산을 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 L-글루타메이트 산화효소(1.4.3.11)이고, 상기 기질은 L-글루타메이트를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 폴리아민 산화효소(1.5.3.11)이고, 상기 기질은 N1-아세틸스페르민을 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 NAD(P)H 산화효소(1.6.3.1)이고, 상기 기질은 NADH 및/또는 NADPH를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 우레이트 산화효소(EC 1.7.3.3)이고, 상기 기질은 우레이트를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 히드록실아민 산화효소(EC 1.7.3.4)이고, 상기 기질은 히드록실아민을 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 티올 산화효소(EC 1.8.3.2)이고, 상기 기질은 티올 그룹을 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 글루타치온 산화효소(EC 1.8.3.3)이고, 상기 기질은 글루타치온 및/또는 시스테인을 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 시토크롬 C 산화효소(EC 1.9.3.1)이고, 상기 기질은 페르로시토크롬 C를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 효소는 크산틴 산화효소(EC 1.17.3.2)이고, 상기 기질은 크산틴 및/또는 히포크산틴을 포함한다.
본원에 기술된 과산화수소-생성 효소(예: 글루코스 산화효소)는 예를 들어, 상업적 공급업체로부터, 천연 공급원으로부터 추출에 의해 및/또는 재조합 발현에 의해 얻을 수 있다, 단백질 발현을 위한 일반적인 절차는 이하에서 상세히 설명되며, 본원에 기술된 과산화수소-생성 효소 발현을 위해 사용될 수 있다.
과산화수소-생성용 조성물:
본원에 기술된 과산화수소-생성 조성물은 과산화수소-생성 효소 및 그 기질이 산소(또는 공기) 및/또는 물 존재 하에 서로 접촉할 때 과산화수소를 생성한다.
이는 과산화수소-생성용 조성물(예를 들면, 본 섹션에서 설명된 바와 같이)과 관련한 임의의 일 구현예에 따른 상기 조성물은 과산화수소-생성용 시스템과 관련한 본원에 기술된 임의의 일 구현예에 따른 상기 시스템을 이용할 수 있음을 이해해야 한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 본원에 기술된 임의의 조성물이 원위치, 즉 상기 조성물의 서로 다른 조성 성분을 접촉시킴으로써, 대상체의 도포 부위(예, 피부, 모발 및/또는 네일) 상에 제조된다. 일부 구현예에서, 과산화수소 생성은 단지 원위치에서 과산화수소-생성 효소를 이의 기질과 접촉 할 때만 시작한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 효소를 포함하는 조성물의 일부와 도포 부위를 접촉한 후 상기 효소의 기질을 포함하는 조성물의 일부와 도포 부위를 접촉함으로써, 또는 반대로, 상기 효소의 기질을 포함하는 조성물의 일부와 도포 부위를 접촉한 후 상기 효소를 포함하는 조성물의 일부와 도포 부위를 접촉함으로써, 상기 조성물은 대상체의 도포 부위(예, 피부, 모발 및/또는 네일) 상에 제조된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 효소의 기질을 포함하는 조성물의 일부와 효소의 기질을 포함하는 조성물의 일부를 접촉한 후 대상체의 도포 부위(예, 피부, 모발 및/또는 네일)와 상기 결과 조성물을 접촉함으로써, 상기 조성물은 대상체의 도포 부위(예, 피부, 모발 및/또는 네일)와 접촉되기 전 짧게 제조된다.
본원에 더욱 상세히 기술된 바와 같이, 상기 조성물은 키트 내 포장된 조성성분으로부터 제조될 수 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물은 용기 내 포장되고, 포장 후 잘 사용될 수 있다.
임의의 일부 구현예에서, 조성물은 과산화수소-생성 효소의 기질과 상기 효소를 포함하나, 용기 내 산소 부족으로 상기 조성물 내 상기 효소가 과산화수소 생성을 억제한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 용기는 과산화수소를 생성하는 상기 효소에 의해 사용될 수 있는 산소의 양을 제한하기 위하여 밀폐된다.
여기서, 상기 용어 "밀폐"는 포장 및/또는 산소와 같은 가스가 들어가거나 배출되도록 하는 마개 없이 그러한 방식으로 밀봉된 용기를 의미하며, 상기 포장 및/또는 용기는 그러한 가스에 실질적으로 투과할 수 없는 물질로 형성된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 예를 들면, 포장 및/또는 용기를 감압 처리하고/거나 포장 및/또는 용기를 산소가 포함되지 않은 가스(예, 질소)로 퍼징함으로써 밀봉 전에 포장 및/또는 용기로부터 공기를 빠져나가게 한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물의 일부를 분산한 후 상기 용기 내 과산화수소 생성을 막도록, 상기 밀폐 용기는 상기 조성물을 분산시키기 위해(1회 이상 분산) 용기 내로 공기 주입 없이 구성된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 용기는 상기 용기 내 상기 조성물의 부피가 분산 시 감소하는 경우에 조차도, 상기 용기는 공기가 거의 또는 아예 주입되지 않도록 분산 시 감소된 부피를 갖는다. 이러한 용기의 예로는 예를 들면, 압력을 받을 때 조성물을 분산하는 플렉시블 튜브(예, 치약 튜브와 유사) 및 조성물을 분산 시 이동하는 피스톤을 함유하는 용기를 포함한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 용기의 개구부(예, 노즐)는 분산되고 있는 조성물이 개구부를 통해 유입되는 공기를 막는 시점에서 개구부를 통해 조성물이 용기를 빠져나갈 때만 열도록 구성된 밸브를 포함한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 조성물은 과산화수소-생성 효소의 기질과 접촉하는 상기 효소를 포함하나, 상기 조성물 내 상기 효소는 용기 내 물 또는 습기 부족으로 과산화수소 생성을 저해한다. 습하지 않는 환경에서 포장용 수단은 당업계에서 잘 알려져 있다.
상기 조성물이 용기 내 포장되어 있는 구현예에서, 상기 용기는 이하에 더욱 상세히 기술하듯이, 과산화수소를 필요로 하는 화장료 도포에 사용하기 위해 식별될 수 있다.
과산화수소-생성 효소 및 이의 기질 농도는 적합한 과산화수소 생성 속도를 초래하도록 선택될 수 있다.
당업자는 (상기 조성물의 의도된 용도에 따라 의존할 수 있는)과산화수소의 바람직한 농도(예, 정상 상태의 농도) 및 예를 들면 과산화수소와 반응하는 화합물(예, 본원에 기술된 제제)의 농도와 반응성에 따른 과산화수소가 소비되는 속도를 기반으로 과산화수소의 적합한 속도를 결정할 수 있다.
과산화수소-생성용 조성물과 관련하여 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소)의 농도는 0.125 내지 1250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 6 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 약 12.5 units/gram이다.
과산화수소-생성용 조성물과 관련하여 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소)의 농도는 1.25 내지 1250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 4 내지 1250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 12.5 내지 1250 units/gram의 범위 내이다.
과산화수소-생성용 조성물과 관련하여 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소)의 농도는 0.125 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 0.125 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 0.125 내지 12.5 units/gram의 범위 내이다.
본원 및 당분야에서 사용된 바와 같이, 효소의 "유닛"은 25 ℃의 온도 및 최대 전환율을 수득하는 기질 농도에서 분당 1 마이크로몰의 기질(예, 본원에서 기술된 기질)의 전환을 촉매하는 효소의 양을 말한다.
과산화수소-생성용 조성물과 관련하여 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소의 기질(예, 글루코스)의 농도는 0.0175 μmole/gram 내지 175 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 0.175 μmole/gram 내지 17.5 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 0.5 μmole/gram 내지 6 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 1 μmole/gram 내지 3.5 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 약 1.75 μmole/gram이다.
과산화수소-생성용 조성물과 관련하여 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소의 기질(예, 글루코스)의 농도는 0.175 μmole/gram 내지 175 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 0.5 μmole/gram 내지 175 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 1.75 μmole/gram 내지 175 μmole/gram의 범위 내이다.
과산화수소-생성용 조성물과 관련하여 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소의 기질(예, 글루코스)의 농도는 0.0175 μmole/gram 내지 17.5 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 0.0175 μmole/gram 내지 6 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 0.0175 μmole/gram 내지 1.75 μmole/gram의 범위 내이다.
과산화수소-생성용 조성물과 관련하여 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소)의 농도는 0.125 내지 1250 units/gram의 범위 내이고, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소의 기질(예, 글루코스)의 농도는 0.0175 μmole/gram 내지 175 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 6 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 약 12.5 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소이고, 상기 기질은 글루코스이다.
과산화수소-생성용 조성물과 관련하여 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소)의 농도는 0.125 내지 1250 units/gram의 범위 내이고, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소의 기질(예, 글루코스)의 농도는 0.175 μmole/gram 내지 175 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 6 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 약 12.5 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소이고, 상기 기질은 글루코스이다.
과산화수소-생성용 조성물과 관련하여 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소)의 농도는 0.125 내지 1250 units/gram의 범위 내이고, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소의 기질(예, 글루코스)의 농도는 0.0175 μmole/gram 내지 17.5 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 6 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 약 12.5 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소이고, 상기 기질은 글루코스이다.
과산화수소-생성용 조성물과 관련하여 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소)의 농도는 0.125 내지 1250 units/gram의 범위 내이고, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소의 기질(예, 글루코스)의 농도는 0.175 내지 17.5 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 6 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 약 12.5 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소이고, 상기 기질은 글루코스이다.
과산화수소-생성용 조성물과 관련하여 임의의 기술된 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소)의 농도는 0.125 내지 1250 units/gram의 범위 내이고, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소의 기질(예, 글루코스)의 농도는 0.5 내지 175 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 6 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 약 12.5 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소이고, 상기 기질은 글루코스이다.
과산화수소-생성용 조성물과 관련하여 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소)의 농도는 0.125 내지 1250 units/gram의 범위 내이고, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소의 기질(예, 글루코스)의 농도는 0.0175 내지 6 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 6 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 약 12.5 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소이고, 상기 기질은 글루코스이다.
과산화수소-생성용 조성물과 관련하여 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소)의 농도는 0.125 내지 1250 units/gram의 범위 내이고, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소의 기질(예, 글루코스)의 농도는 0.5 내지 6 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 6 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 약 12.5 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소이고, 상기 기질은 글루코스이다.
과산화수소-생성용 조성물과 관련하여 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소)의 농도는 0.125 내지 1250 units/gram의 범위 내이고, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소의 기질(예, 글루코스)의 농도는 1.75 내지 175 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 6 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 약 12.5 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소이고, 상기 기질은 글루코스이다.
과산화수소-생성용 조성물과 관련하여 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소)의 농도는 0.125 내지 1250 units/gram의 범위 내이고, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소의 기질(예, 글루코스)의 농도는 0.0175 내지 1.75 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 6 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 약 12.5 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소이고, 상기 기질은 글루코스이다.
과산화수소-생성용 조성물과 관련하여 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소)의 농도는 0.125 내지 1250 units/gram의 범위 내이고, 상기 조성물 내 과산화수소-생성 효소의 기질(예, 글루코스)의 농도는 1 내지 3.5 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 6 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 상기 효소 농도는 약 12.5 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소이고, 상기 기질은 글루코스이다.
이는 그에 대하여 본원에 기술된 임의의 구현예를 포함하면서, 본원에 기재된 조성물에 관한 구현예 중 어느 하나에 대해, (다른 지시가 없는 한) 과산화수소 생성 효소의 임의의 하나가 이용될 수 있음을 주목하여야 한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 및 임의의 양태 중 일부 구현예에서, 상기 조성물은 활성제로서 과산화수소 자체를 얻기 위한 것이다. 상기 과산화수소는 예를 들면, 대상체의 국소 신체 부위와 직접 반응(예, 블렌칭)하여 상기 국소 신체 부위(예, 대상체의 피부, 모발 및.또는 네일 부위)를 라이트닝 하거나 항균 활성을 나타내거나, 또는 냄새 제거 활성(예, 스컹크 냄새 제거)을 나타내기 위해 의도될 수 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예 및 임의의 양태 중 일부 구현예에서, 상기 조성물은 과산화수소 존재 하에 화장료 또는 약제학적 활성을 나타내는 적어도 하나 이상의 제제를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 조성물은 제제의 존재 하에 과산화수소를 발생시킴으로써, 이러한 제제의 활성을 얻기 위한 것이다.
여기서, "과산화수소 존재 하에 화장료 또는 약제학적 활성을 나타내는 제제"는 과산화수소 존재 하에 활성화되는 제제를 포함한다. "활성화되는"은 제제가 화학적으로 과산화수소 존재 하에 변성되고(예, 산화되고) 이의 산화된 형태가 바람직한 화장료 또는 약제학적 활성을 나타내며; 또는 제제가 이의 활성을 나타내기 위한 과산화수소를 요구(예, 기질 또는 공활성제로 과산화수소를 요구)하는 효소임을 의미한다;
과산화수소 존재 하에 화장료 또는 약제학적 활성을 나타내는 제제의 비제한적인 예로는 예를 들어 과산화효소 및 산화 염료 전구체를 포함한다.
산화 염료 전구체는 예를 들면, 염색 모발에 사용하기 위한, 산화 시 염색제(예, 영구 염색)를 형성에 반응하는 화합물이다. 과산화수소는 흔히 이러한 염료 전구체를 산화시키는데 사용되고, 많은 적합한 산화 염료 전구체 및 이의 정확한 용도는 당업자에게 공지되어 있을 것이다. 본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물은 염색 모발용 산화 염료 전구체를 적어도 하나 포함한다.
과산화효소는 과산화수소 존재 하에, 반응성 산소종(ROS)과 같은 반응성 화합물의 형성을 촉매하는 효소이다. 그렇게 함으로써 과산화효소는 과산화수소를 반응성 화합물로 변환시켜 과산화수소의 반응성을 향상시킨다. 이러한 조성물은, 예를 들면, 신체 부위와 반응성 화합물의 반응에 의해 국소 신체 부위를 라이트닝 하거나, 항균 활성을 나타내거나, 또는 강력한 냄새 제거(예, 스컹크 냄새 제거) 활성을 나타내기 위해 유용할 수 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 과산화효소는 티오시아네이트를 히포티오시아네이트로 산화시키고/시키거나 적어도 하나의 할라이드(예, 클로라이드, 브로마이드 및/또는 아이오다이드)를 히포할라이트(히포클로라이트, 히포브로마이트 및/또는 히포아이오다이트)로 산화시킨다. 이러한 과산화효소의 비제한적인 예로는 마이엘로페록시다제 및 (예, 티오시아네이트, 클로라이드, 브로마이드 및 아이오다이드를 각각 산화시킬 수 있는) 호산구 과산화효소, (예, 티오시아네이트, 브로마이드 및 아이오다이드를 산화시킬 수 있는) 락토페록시다제, 옥소페록시다제 및 (예, 브로마이드 및 아이오다이드를 각각 산화시킬 수 있는) 바나디움 브로모페록시다제, (예, 브로마이드를 산화시킬 수 있는) 뿔고둥 브로모페록시다제, (예, 티오시아네이트 및 아이오다이드를 산화시킬 수 있는) 서양고추냉이 과산화효소 및 (예, 아이오다이드를 산화시킬 수 있는) 갑상선 과산화효소를 포함한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물은 과산화수소 및 상기 과산화효소 존재 하에 산화되는 기질(예, 티오시아네이트, 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드 및/또는 본원에 기술된 산화 매개체)을 추가로 포함한다.
여기서, 문구 "산화 매개체"는 예를 들면, 산화 포텐셜 및/또는 과산화효소의 안정성을 증가시키고/시키거나, 과산화효소의 보조인자로 작용하고/하거나, 반응 중간 산물(예, 자유 라디칼)을 형성하는 과산화효소의 기질로서 작용함으로써. 과산화효소에 의해, 촉매되는 산화 환원 반응을 촉진하는 분자를 의미한다. 산화 매개체는 과산화효소에 의해 촉매 반응 동안 이동되는 전자를 안정화(예, 비편재화에 의해)할 수 있는 화합물(예, 방향족 화합물)을 포함한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 과산화효소는 과산화효소 또는 과산화수소의 존재 하에 국소 신체 부위 내 또는 상에 존재하는 기질(예. 티오시아네이트, 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드)을 산화시킨다.
과산화효소의 다른 화장료 또는 약제학적 활성은 또한 본 발명의 이러한 양태 중 임의의 구현예에 활용될 수 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 과산화효소는 과산화수소의 존재 하에 대상체(예, 피부 및/또는 모발)에서 멜라닌을 분해할 수 있다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소의 존재 하에 멜라닌을 분해하는 과산화효소에 대해 산화 매개체의 존재가 필요하다. 멜라닌의 저하는 피부 및/또는 모발 라이트닝을 위해 유용하다. 리그닌 과산화효소는 멜라닌을 분해할 수 있는 예시적인 과산화효소이다.
임의의 특정 이론에 구애받지 않고, 자유 라디칼을 형성하도록 약간의 과산화효소(예. 리그린 과산화효소)는 (기질로서 작용하는) 산화 매개체를 산화시킴으로써 멜라닌을 분해하고, 그리고 나서 상기 자유 라디칼이 멜라닌을 분해하도록 반응하는 것으로 알려져 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예 및 임의의 양태 중 일부 구현예에서, 상기 조성물은 모발-염색 조성물이다. 여기서, 문구 "모발-염색 조성물"은 모발 염료 및/또는 이의 전구체를 포함하는 조성물 및 모발 염료 또는 이의 전구체를 포함하지 않지만 모발 염료 및/또는 이의 전구체와 (예, 모발 상에) 접촉하려고 하는 조성물을 포함하면서 모발의 염색(예, 영구 염색)에 사용된 임의의 조성물을 의미한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 및 임의의 양태 중 일부 구현예에서, 상기 조성물은 (예, 피부, 모발 및/또는 네일로부터) 냄새-제거 조성물, 예를 들면 스컹크 냄새 제거이다. 일부 구현예에서, 상기 냄새-제거 조성물 추가로 계면활성제(예, 소듐 라우릴 설페이트) 및/또는 알칼리제(예, 소듐 비카보네이트)를 추가로 포함한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 및 임의의 양태 중 일부 구현예에서, 상기 조성물은 항균 조성물이다. 여기서, 문구 "항균 조성물"은 아주 작은 동물, 식물, 곰팡이, 세균, 고세균 및/또는 바이러스를 죽이거나, 그렇지 않으면 억제하기 위한 임의의 조성물을 의미한다.
본원에 기재된 임의의 구현예 및 임의의 양태 중 일부 구현예에서, 상기 조성물은 블렌칭 조성물이다. 여기서, 문구 "블렌칭 조성물"은 색의 적어도 일부를 제거하기 위한 임의의 조성물을 의미하며, 예를 들어, 피부 및/또는 피부의 일부를 라이트닝용 조성물, 모발 탈색 조성물, 및 네일 칼라 제거용 조성물을 포함한다.
본원에 예시된 바와 같이, 리그닌 과산화효소는 멜라닌을 분해시켜 피부 및/또는 모발을 라이트닝 할 수 있다.
리그닌 과산화효소는 과산화수소의 존재 하에 화장료 활성을 나타내는 예시적인 제제이다.
일부 구현에에서, 리그닌 과산화효소는 조성물 및/또는 과산화수소 생성 효소 및 이의 조합으로 본원에 기술된 임의의 일 구현예와 결합하여 활용된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 라이트닝 될 피부는 얼굴 피부(예, 이마 및/또는 볼)를 포함한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 라이트닝 될 피부는 햇빛에 노출된 피부 부위(예, 그을린 부분)를 포함한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 피부를 라이트닝 하는 것은 전체 피부 안색을 라이트닝 하는 것을 포함한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 라이트닝 될 피부는 피부의 상대적으로 어두운 부위, 예를 들면 고르지 않은 피부 톤, 하나 이상의 다크 스팟, 하나 이상의 주근깨, 기미, 피부의 색소 침착, 피부 변색, 하나 이상의 검버섯, 하나 이상의 여드름 자국 및/또는 흉터를 포함한다
본원에 기술된 바와 같이, 과산화수소의 바람직한 농도는 적합한 과산화수소 생성 효소 및 이의 기질의 농도 및 과산화수소와 반응하는 화합물(본원에 기재된 임의의 경우)을 선택함으로써 결정될 수 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 과산화수소 자체를 얻기 위한 조성물(예, 블렌칭 조성물)은 상대적으로 높은 과산화수소 농도, 예를 들면, 0.5 내지 12 중량%를 초래하도록 선택된 성분의 농도를 가진다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소의 농도는 6 중량% 이내이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소의 농도는 3 중량% 이내이다. 본원에 기술된 바와 같이, 상대적으로 높은 과산화수소 농도는 예를 들면, 과산화수소와 반응하는 화합물의 존재를 최소화하고/하거나 효소 시스템 성분에서 더 높은 농도를 선택함으로써 얻을 수 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 과산화수소 존재 하에 활성을 나타내는 제제를 포함하는 조성물(예, 본원에 기술된)은 제제의 활성을 얻기에 적합한 과산화수소 농도를 초래하도록 선택된 성분의 농도를 가진다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소의 농도는 상대적으로 낮은, 예를 들면 0.5 중량% 이내이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소의 농도는 0.1 중량% 이내이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소의 농도는 0.02 중량% 이내이다. 이는 상기 제제가 과산화수소와 반응하여 상대적으로 낮은 과산화수소 농도를 유지하는데 도울 수 있음을 이해한다. 상기 제제는 과산화수소의 낮은 농도가 연속적으로 유지되도록 상기 생성된 과산화수소와 연속적으로 반응할 수 있다.
과산화수소의 낮은 농도는 예를 들면, 높은 과산화수소 농도에 민감(예, 불리하게 영향을 받는)할 수 있고/있거나 과산화수소와의 반응에서 매우 효율적일 수 있는 제제(예, 과산화효소와 같은 단백질)를 포함하는 조성물에서, 특히 바람직할 수 있다.
높은 과산화수소 농도에 의해 불리하게 영향을 받을 수 있는 이러한 제제로는, 예를 들면, 과산화수소의 높은 농도의 존재 하에서 "자가-자살경향성"을 겪는 것으로 알려진 특정 과산화효소(예, 리그닌 과산화효소)를 포함한다.
과산화수소-생성용 조성물을 얻기 위한 키트 :
이러한 조성물과 관련된 임의의 일 구현예에 따른 과산화수소-생성용 조성물은 이러한 키트(예, 본 섹션에 기술된)와 관련되어 본원에 기술된 임의의 일 구현예에 따른 키트를 사용하여 얻을 수 있다. 당업자는 본원에 기술된 임의의 바람직한 조성물을 얻기 위하여 본원에 제공된 지침서에 기초하여, 본원에 기술된 바와 같이 적합한 키트를 선택할 수 있을 것이다.
키트를 설명하는 임의의 일 구현예로, 이의 각각의 구현예 중 어느 하나를 포함하는 과산화수소-생성 효소 및/또는 조성물 중 어느 하나, 및 이의 임의의 조합은 활용될 수 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 본원에 기술된 임의의 조성물은 상기 조성물의 일 부분은 본원에 기술된 과산화수소-생성 효소를 포함하고, 상기 조성물의 일 부분은 상기 효소의 기질을 포함하는 두 (또는 그 이상) 부분의 조성물로 간주될 수 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 본원에 기술된 바와 같이, 상기 두 부분의 조성물은 키트 내 포장되고 과산화수소, 그 자체 또는 다른 제제와의 조합 중 하나를 활용하는 임의의 화장료 또는 약제학적 적용에 사용하기 위해 확인된다.
본 발명의 일부 구현예의 양태에 따라, 본원에 기술된 바와 같이, 대상체의 국소 신체 부위에 화장품 또는 약제학적 조성물을 형성 및/또는 적용(국소적으로)하기 위한 키트가 제공되며, 상기 화장료 또는 약제학적 조성물은 과산화수소를 포함한다(예, 본원에 기술된 방법에 따라).
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 본원에 기술된 바와 같이, 상기 조성물은, 모든 구성 요소가 과산화수소의 형성을 억제하는 조건 하에서 용기 내 함께 포장되도록 상기 키트 내 포장된다. 일부 구현예에서, 상기 조성물이 용기로부터 분산되어 신체 부위에 도포되면, 이의 노출이 공기 및/또는 습기에 과산화수소-생성 효소와 이의 기질 간의 반응을 촉진하고 과산화수소가 생성된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 과산화수소-생성 효소를 포함하는 상기 조성물의 일 부분 및 상기 기질을 포함하는 상기 조성물의 일 부분이 상기 키트 내 개별 포장되고, 상기 조성물의 이들 두 부분이 혼합되면 상기 조성물이 형성되도록 한다.
"개별 포장"은 상기 키트 내에서 상기 조성물의 상기 부분들(또는 본원에 기술된 바와 같이 제 1 및 제 2 조성물) 간에 직접적인 접촉이 없는 것을 의미한다.
예를 들어, 상기 조성물의 각 부분(예, 본원에 기술된 바와 같이 제 1 조성물 및 제 2 조성물)은 개별적으로 키트 내 밀봉된 용기 내에 포장된다. 상기 용기는 예를 들면, 플라스틱, 목재, 나일론, 유리, 직물, 금속, 가죽 및/또는 금속 호일로 제조될 수 있다.
하나 이상의 용기는 직접 국소 신체 부위 또는 키트 내 개별 포장된 상기 조성물의 다른 부분과 혼합하기 위한 통에, 이의 내용물을 분산하기 위한 수단을 포함할 수 있다. 또한, 상기 키트는 추가로 하나 이상의 상기 용기의 내용물을 분산하기 위한 수단, 및/또는 상기 용기의 내용물을 혼합하기 위한 수단 및 상기 국소 신체 부위 상에 수득된 혼합물을 분산시키기 위한 수단을 포함한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 키트는 과산화수소-생성 효소(예, 본원에 기술된 바와 같이)를 포함하는 제 1 조성물 및 상기 과산화수소-생성 효소의 기질(예, 본원에 기술된 바와 같이)을 포함하는 제 2 조성물을 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 키트의 제 1 및 제 2 조성물은 키트는 개별 포장된다. 상기 키트의 제 1 조성물 및 제 2 조성물은 상기 효소가 상기 기질과 접촉하여 상기 조성물 내에서 과산화수소를 생성하는 화장료 또는 약제학적 조성물(예, 본원에 기술된 조성물)을 제조하기 위해 결합될 수 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 키트는 (예, 본원에 기술된 바와 같이) 과산화수소의 존재 하에서 화장료 또는 약제학적 활성을 나타내는 적어도 하나의 제제를 추가로 포함한다. 상기 제제(들)은 제 1 조성물, 제 2 조성물 내 및/또는 상기 키트에 개별 포장된 상기 키트 내 제 3 조성물에 포함될 수 있다. 상기 키트의 제 1 조성물 및 제 2 조성물 및 선택적인 제 3 조성물은 (예, 본원에 기술된 바와 같이) 상기 제제(들)을 포함하는 화장료 또는 약제학적 조성물을 제조하기 위해 결합될 수 있다.
상기 키트의 제 1 및 제 2 조성물의 결합은 상기 국소 신체 부위에 도포 직 전(예, 도포 전 1분 내지 10분 간) 또는 상기 국소 신체 부위에 도포하는 동안에 수행될 수 있다.
상기 조성물의 결합 사이의 시간 간격을 최소화하는 것이 과산화수소가 상기 조성물이 상기 국소 신체 부위와 접촉하지 않을 때 (예, 본원에 기술된 바와 같이) 과산화효소 또는 과산화수소와 반응하는 산화 염료 전구체와 같은 제제의 존재 하에서 생성되고 있는 상황을 피하는 것에 유리할 수 있으며, 이러한 상황은 과산화수소의 비생산적인 소비(예, 폐기물)를 초래할 수 있다.
상기 키트의 제 1 및 제 2 조성물이 도포하는 동안 결합하는 것은 예를 들면, 상기 키트의 제 1 및 제 2 조성물을 상기 국소 신체 부위에 공동 투여하여 수행될 수 있다.
"공동 투여"는 제 1 및 제 2 조성물을 국소적으로 신체 부위에 동시에(병용) 투여되거나 또는 임의의 순서로 순차적으로 투여되는 것을 의미하며, 이에 의한 제 1 조성물 투여와 제 2 조성물 투여 사이의 시간 간격은 0.1분 내지 5분의 범위 일 수 있다. 일부 구현예에서, 상기 시간 간격은 2분 이내이다.
제 3 조성물이 상기 키트에 포함되는 경우, 신체 부위에 도포 전에 제 1 및 제 2 조성물과 결합될 수 있거나, 또는 제 1 및 제 2 조성물과 함께 신체 부위에 공동 투여될 수 있다.
상기 제 3 조성물은 상술한 바와 같이 투여 사이의 시간 간격을 두고, 제 1 및/또는 제 2 조성물의 투여 전 또는 그 후에, 제 1 및 / 또는 제 2 조성물과 공동 투여될 수 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 키트는 그 안에 조성물을 사용하는 방법에 대한 지시서, 예를 들면, 도포되기 위한 조성물의 양, 상이한 조성물이 적용되어야 하는 순서, 타이밍 및/또는 도포 빈도수, 및/또는 치료의 지속 기간(예, 본원에 기술된 바와 같이)을 추가로 포함한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 키트는 본원에 기술된 조성물과 접촉하기 전에 국소 신체 부위를 깨끗이 하기 위해, 세안과 같은 세정 조성물을 추가로 포함한다.
예시적인 구현예에 따르면, 세안은 표 1에 나타낸 성분을 포함한다:
예시적인 구현예에 따른 세안
성분 중량% 범위
물 25 - 50 %
프로판디올 10 - 25 %
글리세린 10 - 25 %
스테아릭산 10 - 25 %
미리스틱산 5 - 10 %
포타슘 히드록시드 5 - 10 %
라우릭산 1 - 5 %
데실 글루코사이드 1 - 5 %
글리콜 디스테아레이트 1 - 5 %
글리세릴 스테아레이트 1 - 5 %
PEG-100 스테아레이트 1 - 5 %
합성 밀랍 1 - 5 %
포타슘 코코일 글리시네이트 0 - 0.1 %
BHT(Butylated hydroxytoluene) 0 - 0.1 %
리그닌 과산화효소 0 - 0.1 %
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 키트는 본원에 기술된 바와 같이, 표시된 용도를 위한 규제 기관의 승인을 나타내는 적절한 사용 방법 및 라벨이 포함되어 있다.
과산화수소-생성용 조성물의 화장료 용도:
본원에 예시된 바와 같이, 과산화수소-생성 효소의 기질과 접촉하는 상기 효소를 제공함으로써, 본원에 기재된 상기 조성물은 표면에 과산화수소를 투여하는데 효과적이다.
본 발명의 구현예의 양태에 따르면, 국소적으로 대상체의 국소 신체 부위(예, 대상체의 피부, 모발 및/또는 네일)에 과산화수소를 투여하는 방법이 제공된다. 일부 구현예에 따르면, 상기 방법은 과산화수소-생성 효소 및 과산화수소-생성 효소의 기질을 포함하는 조성물(예, 본원에 기술된 조성물)을 대상체의 국소 신체 부위 또는 이의 영역에 접촉시킴으로써 수행된다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 바와 같이, 상기 조성물은 키트 내 포장되어 과산화수소-생성 효소 및 이의 기질에 의해 형성된다.
이러한 방법에 관한 임의의 일 구현예에 따른(예, 본 섹션에 설명된 바와 같이) 국소적으로 과산화수소를 투여하는 방법은 이러한 시스템 및/또는 키트와 관련된 본원에 기술된 임의의 일 구현예에 따라서, 과산화수소-생성 시스템 및/또는 키트를 이용할 수 있다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "국소" 또는 "국소적으로"는 본원에 정의된 바와 같이, 예를 들어, 국소 신체 부위에 도포함으로써 조성물의 투여를 포함하는 국소 신체 부위 및 그러한 방식으로 투여하기 위한 조성물과 관련이 있다.
여기서, 문구 "국소 신체 부위" 또는 "국소 신체의 부위"는 피부 표면(피부 표면의 특정 부위를 포함) 및/또는 몸의 일부로부터 모발(모발 전체 및/또는 모발의 특정 부위를 포함), 및/또는 네일 표면(모든 손톱 및/또는 발톱, 및/또는 개별 네일 및/또는 이의 영역)을 의미한다. 상기 피부는 신체의 임의의 부위, 예를 들어, 얼굴 피부, 목 피부, 팔 피부, 손, 피부, 몸통 피부 및/또는 다리 피부일 수 있다, 모발은 예를 들어, 머리 털, 얼굴 털 및/또는 음모일 수 있다. 상기 표현은 본원에 보다 상세히 기술된 다른 부분과 같이, 또한 특정 영역 또는 피부 표면의 일부(예, 얼굴 피부의 일부, 팔 또는 다리 피부의 일부), 또는 모발의 일부(얼굴 털, 머리 털 또는 음모의 일부)를 포함한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 국소 신체 부위의 피부는 입, 입술, 눈꺼풀, 귀, 생식기 및 항문의 것과 같은 점막을 포함하지 않는다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물은 과산화수소-생성 효소 및/또는 이의 기질을 국소 신체 부위 또는 이의 영역과 접촉하고 나서 과산화수소 존재 하에 화장료 또는 약제학적 활성을 나타내는 제제를 국소 신체 부위 또는 이의 영역에 접촉함으로써 형성된다. 이러한 순서로, 과산화수소는 단지 제제의 존재 하에 생성되며, 상기 제제는 과산화수소 존재 하에서 화장료 또는 약제학적 활성을 나타내며, 과산화수소의 더 효율적인 활용을 허용할 수 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물은 상기 기질이 국소 신체 부위에 접촉하기 전에 과산화수소-생성 효소를 국소 신체 부위에 접촉함으로써 형성된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물은 상기 기질이 국소 신체 부위에 접촉한 후, 과산화수소-생성 효소를 국소 신체 부위에 접촉함으로써 형성된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물은 상기 기질이 국소 신체 부위에 접촉하는 것과 함께 부수적으로 과산화수소-생성 효소를 국소 신체 부위에 접촉함으로써 형성된다.
과산화수소 존재 하에서 화장료 또는 약제학적 활성을 나타내는 상기 제제는 임의의 다른 성분을 국소 영역에 접촉 전, 후 또는 부수적으로, 예를 들면, 과산화수소-생성 효소 및/또는 이의 기질과 함께 (본원에서 정의된 바와 같이) 상기 제제를 공동 투여함으로써 국소 신체 부위(또는 이의 영역)에 접촉될 수 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 방법은 염색 모발을 위한 것이며, 본원에 기술된 바와 같이 염색 모발을 위해 적어도 하나의 산화 염료 전구체를 모발에 접촉하는 단계를 추가로 포함하는 방법이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 방법은 과산화효소를 상기 국소 신체 부위에 접촉하는 단계를 추가로 포함한다(예, 본원에 기술된 바와 같이). 이러한 방법은 예를 들면, 국소 신체 부위를 라이트닝 하기 위해, 항균 활성을 나타내기 위해 또는 향상된 냄새 제거 활성을 나타내기 위해 유용할 수 있다(예, 본원에 기술된 바와 같이).
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 방법은 과산화효소의 기질 및/또는 산화 매개체를 국소 신체 부위에 접촉하는 단계를 추가로 포함한다(예, 본원에 기술된 바와 같이).
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 방법은 (예, 국소 신체 부위로부터) 스컹크 냄새 제거를 위한 것이다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 계면활성제(예, 소듐 라우릴 설페이트) 및/또는 알칼리제(예, 소듐 바이카보네이트)를 상기 국소 신체 부위에 접촉하는 단계를 추가로 포함한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 방법은 예를 들면 항균 조성물을 형성함으로써 항균 활성을 얻기 위한 것이다(예, 본원에 기술된 바와 같이).
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 방법은 블렌칭 조성물을 형성함으로써 국소 신체 부위 또는 이의 영역을 블렌칭하기 위한 것이다(예, 본원에 기술된 바와 같이). 상기 방법은 예를 들면, 피부 및/또는 피부 일부를 라이트닝 하고, 모발을 탈색하고/하거나 네일 염색을 제거하는 것을 포함할 수 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 방법은 얼굴 피부(예, 이마 및/또는 볼)의 라이트닝을 위한 것이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 방법은 햇빛에 노출된 피부 부위(예, 그을린 부위)를 라이트닝 하기 위한 것이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 방법은 전체 피부 안색을 라이트닝 하기 위한 것이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 방법은 피부의 상대적으로 어두운 부위, 예를 들면 고르지 않은 피부 톤, 하나 이상의 다크 스팟, 하나 이상의 주근깨, 기미, 피부의 색소 침착, 피부 변색, 하나 이상의 검버섯, 하나 이상의 여드름 자국 및/또는 흉터를 포함하는 피부를 라이트닝 하기 위한 것이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 방법은 피부에 새로 형성된 멜라닌, 검은 머리의 새로운 성장, 네일의 만성 얼룩 형성 등과 같은 반복되는 컬러 형성에 대응하기 위하여, 반복적으로, 선택적으로 심지어 무한대로 영향을 받는다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 방법은 상기 조성물을 적어도 5회 국소 영역에 접촉함으로써 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 상기 조성물을 적어도 10회 국소 영역에 접촉함으로써 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 상기 조성물을 적어도 20회 국소 영역에 접촉함으로써 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 상기 조성물을 적어도 50회 국소 영역에 접촉함으로써 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 상기 조성물을 적어도 100회 국소 영역에 접촉함으로써 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 상기 조성물을 적어도 200회 국소 영역에 접촉함으로써 영향을 받는다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 방법은 하루에 1회 또는 2회 국소 영역에 접촉함으로써 영향을 받는다. 실시예에서, 접촉은 하루에 2회 영향을 받는다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 방법은 적어도 1주 동안 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 적어도 2주 동안 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 적어도 3주 동안 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 적어도 4주 동안 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 적어도 6주 동안 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 적어도 8주 동안 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 적어도 3개월 동안 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 적어도 4개월 동안 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 적어도 6개월 동안 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 적어도 1년 동안 영향을 받는다.
상기 투여량 및 치료 과정은 하루 내지 몇 주 또는 그 이상까지 또는 치유가 될 때까지 또는 치료된 상태가 약화될 때까지 지속되는 치료 과정으로 치료 종류와 치료받고 있는 고통의 정도에 의존할 것이다.
투여되는 조성물의 양은 물론, 치료되고 있는 대상체, 치료되고 있는 상태 정도, 투여 방식, 처방 의사 또는 화장품 제조인 또는 소비자의 판단, 상기 조성물의 원하는 효과 등에 의존할 것이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 국소 신체 부위는 본원에 기술된 조성물과 접촉하기 전에 깨끗이 한다(예, 본원에 기술된 바와 같이, 세정으로).
예를 들면 모발 탈색 또는 염색을 위한 상기 방법의 구현예에서, 상기 방법은 원하는 효과를 달성하기 위해, 한 번 영향을 받을 수 있고, 원하는 효과가 감소되거나 사라지면 한 번 반복될 수 있다.
예를 들면 감염을 치료하기 위한 상기 범위의 구현예에서, 상기 치료는 감염이 제거될 때까지 한 번 영향을 받고, 치유가 될 때까지 투여 횟수 및 치료 기간에 영향을 받는다.
피부 및/또는 모발 라이트닝용 과산화수소-생성 조성물, 방법 및 키트 :
본원에 기술된 상기 조성물, 방법 및 키트의 실시예는 본원에 기술된 바와 같이 과산화수소-생성용 조성물이 리그닌 과산화효소와 결합하여 사용되는 피부 및/또는 모발과 같은 국소 신체 부위를 라이트닝 하기 위한 조성물이다.
이러한 조성물, 방법 및/또는 키트와 관련하여 임의의 일 구현예에 따른 조성물, 방법 및/또는 키트는 본원에 기술된 바와 같이(예, 본 섹션에서), 피부 및/또는 모발 라이트닝을 위해 사용될 수 있음을 이해해야 한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 대상체의 피부 및/또는 모발과 같은 국소 신체 부위(예, 본원에 기술된 바와 같이)를 라이트닝 하기 위한 화장료 조성물을 제공하며, 상기 조성물은 리그닌 과산화효소, 과산화수소-생성 효소(예, 본원에 기술된 바와 같이) 및 상기 과산화수소-생성 효소의 기질(예, 본원에 기술된 바와 같이)을 포함한다.
본원에 기술된 구현예의 또 다른 양태에 따르면, 대상체의 피부 및/또는 모발과 같은 국소 신체 부위(예, 본원에 기술된 바와 같이)를 라이트닝 하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 리그닌 과산화효소, 과산화수소-생성 효소 및 상기 과산화수소-생성 효소의 기질을 포함하는 조성물(예, 본원에 기술된 리그닌 과산화효소-함유 조성물)을 대상체의 국소 영역에 접촉하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 조성물은 본원에 기술된 키트 내로 포장되어 리그닌 과산화효소, 과산화수소-생성 효소 및 상기 과산화수소-생성 효소의 기질에 의해 형성된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물은 과산화수소-생성 효소 및/또는 이의 기질을 국소 신체 부위 또는 이의 영역과 접촉하고 나서 리그닌 과산화효소를 국소 영역에 접촉함으로써 형성된다. 이러한 순서로, 과산화수소는 단지 과산화수소의 더 효율적인 활용을 허용할 수 있는 리그닌 과산화효소 존재 하에 생성될 것이다.
본원에 기술된 바와 같이, 리그닌 과산화효소를 포함하는 조성물은 더 높은 농도로 제공될 수 있으며, 기미, 간반, 조직흑갈병 및 흑자와 같은 피부 착색 질환을 치료하고/하거나 피부 안색 전체를 라이트닝 하기 위한 약제학적 또는 화장료 조성물로서 의사로부터 처방받을 수 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 방법은 상기 조성물을 적어도 5회 국소 영역에 접촉함으로써 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 상기 조성물을 적어도 10회 국소 영역에 접촉함으로써 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 상기 조성물을 적어도 20회 국소 영역에 접촉함으로써 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 상기 조성물을 적어도 50회 국소 영역에 접촉함으로써 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 상기 조성물을 적어도 100회 국소 영역에 접촉함으로써 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 상기 조성물을 적어도 200회 국소 영역에 접촉함으로써 영향을 받는다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 방법은 하루에 1회 또는 2회 국소 영역에 접촉함으로써 영향을 받는다. 실시예에서, 접촉은 하루에 2회 영향을 받는다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 방법은 적어도 1주 동안 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 적어도 2주 동안 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 적어도 3주 동안 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 적어도 4주 동안 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 적어도 6주 동안 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 적어도 8주 동안 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 적어도 3개월 동안 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 적어도 4개월 동안 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 적어도 6개월 동안 영향을 받는다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 적어도 1년 동안 영향을 받는다.
상기 투여량 및 치료 과정은 몇 일 내지 몇 주 또는 그 이상까지 또는 치유가 될 때까지 또는 피부 질환이 약화될 때까지 지속되는 치료 과정으로 치료되는 영역에서 예를 들면, 피부 색소 침착 질환(예, 간반, 기미, 조직흑갈병 및 흑자)에서 피부 색소 침착의 정도, 피부색의 톤, 피부 안색 및/또는 피부 반응성과 같은 색(예, 색소 침착)의 정도에 의존할 것이다.
투여되는 조성물의 양은 물론, 치료되고 있는 대상체, 치료되고 있는 상태 정도, 투여 방식, 처방 의사 또는 화장품 제조인 또는 소비자 등의 판단 등에 의존할 것이다.
리그닌 과산화효소:
리그닌 과산화효소(예, 본 섹션에 기술된 바와 같이)과 관련되어 본원에 기술된 임의의 일 구현예에 따른 리그닌 과산화효소는 과산화수소-생성 효소 시스템과 관련하여 본원에 기술된 임의의 일 구현예에 따른 상기 시스템과 결합하여 사용될 수 있음을 이해해야 한다.
본원에 사용된 문구 "리그닌 과산화효소"는 리그닌 분해에 중요한 역할을 하는 효소를 의미한다. 리그닌 과산화효소는 높은 산화환원 포텐셜로 기질의 산화를 촉진할 수 있다. 상기 고유 능력은 높은 산화환원 포테셜에 의해 나타나는 낮은 전자 밀도의 헴 활성 부위와 일치한다[Cai and Tien, J Biotechnol 1993, 30: 79-90].
리그닌 과산화효소의 예들은 EC 1.11.1.14.로 분류된다.
망간 과산화효소(EC 1.11.1.13)는 담자균류(예, 파네로카에테 크리소스포리움)의 리그닌 분해에 관련되며, 또한 리그닌 분해 과산화효소로 본원에 정의된다.
리그닌 과산화효소는 다양한 생물에서 생성되고 리그닌 과산화효소의 코딩 서열은 하이퍼텍스트 전송 프로토콜://World Wide Web (dot) ncbi (dot) nlm (dot) nih (dot) gov/. 을 통해 GenBank에서 사용할 수 있다. 예, 파네로카에테 크리소스포리움으로부터 리그닌 과산화효소 (SEQ ID NO:1); 결핵균 H37Rv [GenBank Accession No. NP_216416.1 (SEQ ID NO:2 (폴리펩티드) 및 SEQ ID NO:3 (폴리뉴클레오티드)]; 소결핵균 AF2122/97 [GenBank Accession No. NP_855586.1 (SEQ ID NO:4 (폴리펩티드) 및 SEQ ID NO:5 (폴리뉴클레오티드)]; 소결핵균 BCG str. Pasteur 1173P2 [GenBank Accession No. YP_978029.1 (SEQ ID NO:6 (폴리펩티드) 및 SEQ ID NO:7 (폴리뉴클레오티드)]; 소결핵균 BCG str. Tokyo 172 [GenBank Accession No. YP_002644977.1 (SEQ ID NO:8 (폴리펩티드) 및 SEQ ID NO:9 (폴리뉴클레오티드)]; 결핵균 H37Ra [GenBank Accession No. YP_001283231.1 (SEQ ID NO:10 (폴리펩티드) 및 SEQ ID NO:11 (폴리뉴클레오티드)]; 미코박테리움 울서란스 Agy99 [GenBank Accession No. YP_908214.1 (SEQ ID NO:12 (폴리펩티드) 및 SEQ ID NO:13 (폴리뉴클레오티드)]; 미코박테리움 마리눔 M [GenBank Accession No. YP_001848608.1 (SEQ ID NO:14 (폴리펩티드) 및 SEQ ID NO:15 (폴리뉴클레오티드)]; 결핵균 KZN 1435 [GenBank Accession No. YP_003032055.1 (SEQ ID NO:16 (폴리펩티드) 및 SEQ ID NO:17 (폴리뉴클레오티드)]; 결핵균 F11 [GenBank Accession No. YP_001287866.1 (SEQ ID NO:18 (폴리펩티드) 및 SEQ ID NO:19 (폴리뉴클레오티드)]; 파네로카에테 크리소스포리움 리그니나제 (CKG4) [GenBank Accession No. M18743.1 (SEQ ID NO:20 (폴리펩티드) 및 SEQ ID NO:21 (폴리뉴클레오티드)]; 파네로카에테 크리소스포리움 (무성생식: 스포로트리쿰 프루이노숨) [GenBank Accession No. M80213.1 (SEQ ID NO:22 (폴리펩티드) 및 SEQ ID NO:23 (폴리뉴클레오티드)]; 유색고약버섯 ylpB [GenBank Accession No. AB455007.1 (SEQ ID NO:24 (폴리펩티드) 및 SEQ ID NO:25 (폴리뉴클레오티드)]; 파네로카에테 크리소스포리움 (무성생식: 스포로트리쿰 프루이노숨) [GenBank Accession No. M77508.1 (SEQ ID NO:26 (폴리펩티드) 및 SEQ ID NO:27 (폴리뉴클레오티드)].
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소는 백색부후균의 리그닌 과산화효소, 예를 들면, 백색 부후균으로부터 추출된 리그닌 과산화효소, 또는 리그닌 과산화효소로부터 유래된 재조합 단백질이다.
여기서 그리고 당분야에서, 상기 문구 "백색 부후균"은 나무에서 리그닌을 분해할 수 있는 균류를 의미한다. 이러한 프로세스는 종종 나무의 밝은 색 셀룰로오스를 남게 하므로, 이러한 균류가 일반적으로 침범한 나무는 밝은 색을 띤다.
적합한 리그닌 과산화효소를 생성하는 백색 부후균의 예로는 제한 없이, 파네로카에테(예, 파네로카에테 크리소스포리움, 파네로카에테 소리디다), 트라메테스(예, 트라메테스 베르시콜라) 및 가노데르마를 포함한다.
본 발명의 임의의 구현예 중 일부 구현예에 따르면, 본 발명의 일부 구현예에 사용된 상기 리그닌 과산화효소는 인 비트로 그리고 인 비보에서 멜라닌 산화 활성을 나타내는 리그닌 과산화효소 H1 이소폼이다 [WO 2004/052275].
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 6 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 약 12.5 units/gram이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 리그닌 과산화효소의 농도는 4 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 6 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 12.5 내지 125 units/gram의 범위 내이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 1.25 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 1.25 내지 12.5 units/gram의 범위 내이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이고, 상기 과산화수소-생성 효소의 농도는 0.125 내지 1250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 4 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 6 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 약 12.5 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소는 글루코스 산화효소이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이고, 상기 과산화수소-생성 효소의 농도는 1.25 내지 1250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 4 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 6 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 약 12.5 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소는 글루코스 산화효소이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이고, 상기 과산화수소-생성 효소의 농도는 0.125 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 4 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 6 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 약 12.5 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소는 글루코스 산화효소이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이고, 상기 과산화수소-생성 효소의 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 4 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 6 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 약 12.5 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소는 글루코스 산화효소이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이고, 상기 과산화수소-생성 효소의 농도는 4 내지 1250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 4 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 6 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 약 12.5 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소는 글루코스 산화효소이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이고, 상기 과산화수소-생성 효소의 농도는 0.125 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 4 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 6 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 약 12.5 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소는 글루코스 산화효소이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이고, 상기 과산화수소-생성 효소의 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 4 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 6 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 약 12.5 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소는 글루코스 산화효소이다.
본원에 기술된 임의의 구현예들 중 일부 구현예에 따르면, 리그닌 과산화효소는 산화 매개체와 결합하여 사용된다. 본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 리그닌 과산화효소를 포함하는 조성물은 추가로 산화 매개체를 포함한다(본원에 정의된 바와 같이).
리그닌 과산화효소에 대한 산화 매개체는 메톡실화된 방향족 화합물과 같은 방향족 분자를 포함한다.
적합한 산화 매개체의 예로는 제한 없이, 베라트릴 알코올(3,4-디메톡시벤질 알코올), 베라트롤(1,2-디메톡시벤젠) 및 1,4-디메톡시벤젠과 같은 페놀성 화합물을 포함한다. 베라트릴 알코올은 대표적인 산화 매개체이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 산화 매개체의 농도는 0.03 μmole/gram 내지 300 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 0.3 내지 30 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 1 내지 10 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 2 내지 5 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 약 3 μmole/gram이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 산화 매개체의 농도는 0.3 μmole/gram 내지 300 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 1 내지 300 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 3 내지 300 μmole/gram의 범위 내이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 산화 매개체의 농도는 0.03 μmole/gram 내지 30 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 0.03 내지 10 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 0.03 내지 3 μmole/gram의 범위 내이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 산화 매개체의 농도는 0.03 μmole/gram 내지 300 μmole/gram의 범위 내이고, 상기 조성물 내 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.03 내지 30 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.3 내지 300 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.3 내지 30 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 1 내지 10 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 2 내지 5 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 약 3 μmole/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올, 베라트롤 및 1,4-디메톡시벤젠로 이루어진 군에서 선택된 것이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 산화 매개체의 농도는 0.03 μmole/gram 내지 300 μmole/gram의 범위 내이고, 상기 조성물 내 리그닌 과산화효소의 농도는 4 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.03 내지 30 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.3 내지 300 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.3 내지 30 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 1 내지 10 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 2 내지 5 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 약 3 μmole/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올, 베라트롤 및 1,4-디메톡시벤젠로 이루어진 군에서 선택된 것이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 산화 매개체의 농도는 0.03 μmole/gram 내지 300 μmole/gram의 범위 내이고, 상기 조성물 내 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.03 내지 30 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.3 내지 300 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.3 내지 30 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 1 내지 10 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 2 내지 5 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 약 3 μmole/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올, 베라트롤 및 1,4-디메톡시벤젠로 이루어진 군에서 선택된 것이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 산화 매개체의 농도는 0.03 μmole/gram 내지 300 μmole/gram의 범위 내이고, 상기 조성물 내 리그닌 과산화효소의 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.03 내지 30 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.3 내지 300 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.3 내지 30 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 1 내지 10 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 2 내지 5 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 약 3 μmole/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올, 베라트롤 및 1,4-디메톡시벤젠로 이루어진 군에서 선택된 것이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 산화 매개체의 농도는 0.03 μmole/gram 내지 300 μmole/gram의 범위 내이고, 상기 조성물 내 리그닌 과산화효소의 농도는 6 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.03 내지 30 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.3 내지 300 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.3 내지 30 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 1 내지 10 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 2 내지 5 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 약 3 μmole/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올, 베라트롤 및 1,4-디메톡시벤젠로 이루어진 군에서 선택된 것이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 산화 매개체의 농도는 0.03 μmole/gram 내지 300 μmole/gram의 범위 내이고, 상기 조성물 내 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.03 내지 30 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.3 내지 300 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.3 내지 30 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 1 내지 10 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 2 내지 5 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 약 3 μmole/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올, 베라트롤 및 1,4-디메톡시벤젠로 이루어진 군에서 선택된 것이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 산화 매개체의 농도는 0.03 μmole/gram 내지 300 μmole/gram의 범위 내이고, 상기 조성물 내 리그닌 과산화효소의 농도는 6 내지 20 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.03 내지 30 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.3 내지 300 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.3 내지 30 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 1 내지 10 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 2 내지 5 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 약 3 μmole/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올, 베라트롤 및 1,4-디메톡시벤젠로 이루어진 군에서 선택된 것이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 산화 매개체의 농도는 0.03 μmole/gram 내지 300 μmole/gram의 범위 내이고, 상기 조성물 내 리그닌 과산화효소의 농도는 12.5 내지 125 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.03 내지 30 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.3 내지 300 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.3 내지 30 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 1 내지 10 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 2 내지 5 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 약 3 μmole/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올, 베라트롤 및 1,4-디메톡시벤젠로 이루어진 군에서 선택된 것이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물 내 산화 매개체의 농도는 0.03 μmole/gram 내지 300 μmole/gram의 범위 내이고, 상기 조성물 내 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 내지 12.5 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.03 내지 30 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.3 내지 300 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.3 내지 30 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 1 내지 10 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 2 내지 5 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 약 3 μmole/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올, 베라트롤 및 1,4-디메톡시벤젠로 이루어진 군에서 선택된 것이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올이다.
여러 방법들이 본 발명의 일부 구현예에 따라 활용된 리그닌 과산화효소를 생성하는데 사용될 수 있다.
예를 들면, 리그닌 과산화효소 동종효소 H1은 파네로카에테 크리소스포리움 균류로부터 제조될 수 있다. 폴리우레탄 폼 상에 고정화되면서 교반 탱크 반응기(STR) 발효조 또는 현탁 액에서 배양 시 리그닌 과산화효소의 고수준의 효소 활성은 상기 균류로부터 생성될 수 있다[Dosoretz et al., Appl Environ Microbiol 1993, 59: 1919-26].
본 발명의 일부 구현예에 따르면, 상기 발효조는 37 ℃의 배양 온도를 유지하도록 냉각 시스템과 연결되고, 50-300 rpm(분당 회전 속도), 보다 바람직하게는 100-200 rpm, 더욱 바람직하게는 160 rpm의 속도로 교반된다. 리그닌 과산화효소 활성의 수율을 증가시키기 위해, 상기 발효조는 분당 배양 배지의 리터당 0.1-1 리터 공기의 통기 속도로 통기된다. 본 발명의 바람직한 구성에 따르면, 분당 배양 배지의 리터당 공기 0.2 리터의 통기 속도로 통기된다.
상기 파네로카에테 크리소스포리움은 망간 이온의 결여 및 탄소원으로 글리세롤을 함유하는 배양 조건 하에서 배양된다.
본 발명의 일부 구현예에 따르면, 상기 글리세롤은 리터당 3-20 그램의 농도 범위에서 제공된다. 본 발명의 일부 구현예에 따르면, 상기 글리세롤은 리터당 6 그램의 농도에서 제공된다.
상기 균류로부터 리그닌 과산화효소 동종효소 H1의 정제 과정 동안에, 정제된 단백질의 효소 활성은 베라트릴 알코올의 산화로 베라트릴 알데히드를 발생하는 310 nm에서의 흡광도 변화에 의해 추가로 시험된다.
리그닌 과산화효소 동위 효소 H1은 동종효소 H2의 번역 후의 탈인산화를 발생할 수 있듯이[Kuan and Tien, J Biol Chem 1989, 264:20350-20355], 본 발명의 일부 구현예에 따라 사용된 상기 리그닌 과산화효소는 리그닌 과산화효소 동종효소 H2를 탈인산화함으로써 제조될 수 있다.
본 발명의 임의의 구현예들 중 일부 구현예에 따르면, 상기 리그닌 과산화효소는 숙주 세포에서 리그닌 과산화효소의 코딩 서열을 발현하기 위해 디자인된 핵산 구조체를 이용하여 재조합으로 발현될 수 있다. 이러한 핵산 서열의 비제한적인 예로는 SEQ ID NOs: 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 21, 23, 25 및 27로 제공된다.
리그닌 과산화효소와 같은 단백질을 발현하기 위한 일반적인 절차는 본원에 상세히 설명되어 있다.
본 발명의 임의의 구현예들 중 일부 구현예에 따르면, 상기 리그닌 과산화효소는 미국 특허 제 5,200,338호에 기술된 바와 같이, 상기 리그닌 과산화효소를 발현하도록 변형된 박테리아 세포에서 발현된다. 예를 들어, 대장균과 같은 박테리아 세포는 강한 항시성 프로모터(예, SP6)의 조정 제어 하에서 배치된 리그닌 과산화효소 코딩 서열(예, SEQ ID NO: 1을 가지는 폴리펩티드의 코딩)을 포함하는 발현 벡터로 형질전환될 수 있다. 발현 후, 상기 박테리아 세포는 용해될 수 있고, 상기 리그닌 과산화효소는 크로마토그래피 기술을 사용하여 모을 수 있다(좀 더 상세한 것은 Billman-Jacobe [Curr Opin Biotechnol 1996, 7: 500-4]; Harris and Emtage [Microbiol. Sci . 1986, 3: 28-31]을 참조하시오)
본 발명의 임의의 구현예들 중 일부 구현예에 따라, 상기 리그닌 과산화효소는 HeLa 세포와 같은 포유류 세포주로부터 추출될 수 있다.
이 경우에는 상기 리그닌 과산화효소 코딩 서열은 적합한 발현 벡터(예, pCDNA3.1, Invitrogen Life Technologies, Frederick, MD, USA) 내 강한 포유류 프로모터(예 : CMV) 하에 위치된다. 발현 벡터로 HeLa 세포를 트랜스펙션하고 나서, 상기 리그닌 과산화효소 발현산물은 통상적인 정제 및 크로마토그래피 기술에 의해 상기 세포 또는 배지(예, 분비 신호를 포함하도록 리그닌 과산화효소 서열을 변경함으로써)로부터 추출될 수 있다(좀 더 상세한 것은 Cunha and Aires-Barros [Mol. Biotechnol . 2002, 20: 29-40] 참조하시오).
단백질 발현:
본 발명의 일부 구현예에서 사용된(예, 본원에서 기술된 리그닌 과산화효소 또는 과산화수소-생성 효소 발현용) 핵산 구조체(또한, 본원에서 "발현 벡터"로 명명)는 원핵생물, 진핵생물, 또는 바람직하게는 둘 다(예, 셔틀벡터)에서 이 벡터를 복제 및 삽입에 적합하게 만들게 하는 추가적인 서열을 포함한다. 추가로, 일반적인 클로닝 벡터는 또한 전사 및 번역 개시 서열, 전사 및 번역 종결부위 및 폴리아데닐화 신호를 포함할 수 있다. 예로서, 이러한 구조체는 일반적으로 5 'LTR, tRNA 결합 부위, 패키징 신호, 두 번째 가닥 DNA 합성 기원, 및 3 'LTR 또는 이의 부분(portion)를 포함할 것이다.
본 발명의 일부 구현예의 상기 핵산 구조체는 일반적으로 놓여있는 숙주 세포 유래 펩티드 분비용 신호 서열을 포함한다. 바람직하게 이러한 목적을 위한 신호 서열은 본 발명의 일부 구현예의 포유동물 신호 서열 또는 폴리펩티드 변이체 신호 서열이다.
진핵 프로모터는 일반적으로 인식 서열의 두 가지 타입, TATA 박스와 업스트림 프로모터 요소를 포함한다. 전사 개시 부위의 업스트림 25-30 염기쌍에 위치된 상기 TATA 박스는 RNA 합성을 시작하기 위한 RNA 중합 효소를 유도하는데 관여하는 것으로 생각된다. 상기 다른 업스트림 프로모터 요소들은 전사가 개시되는 속도를 결정한다.
인핸서 요소는 링크된 동종 또는 이종 프로모터로부터 1,000 배 만큼 전사를 자극할 수 있다. 인핸서는 전사 개시 부위에서 다운스트림 또는 업스트림에 위치 할 때 활성화된다. 바이러스에서 유래된 많은 인핸서 요소는 넓은 숙주 범위를 가지며 다양한 조직에서 유효하다. 예를 들어, 상기 SV40 초기 유전자 인핸서는 많은 세포 타입에 적합하다. 본 발명의 일부 구현예에 적합한 다른 인핸서/프로모터 조합은 폴리오마 바이러스, 인간 또는 쥐 사이토메갈로바이러스(CMV), 예컨대 쥐 백혈병 바이러스, 쥐 또는 라우스 육종 바이러스 및 HIV와 같은 장기간 반복된 다양한 레트로바이러스로부터 유도된 것들을 포함한다. 본원에 참고로 인용된 Enhancers and Eukaryotic Expression, Cold Sprin gHarbor Press, Cold Spring Harbor, N.Y. 1983을 참조하십시오.
상기 발현 벡터의 구성에 있어서, 상기 프로모터는 바람직하게 자연상태에서 전사 개시 부위로부터의 거리와 이종 전사 개시 부위로부터의 거리가 거의 동일한 위치에 놓여진다. 그러나, 당업계에 공지된 바와 같이, 이러한 거리의 일부 변화는 프로모터 기능의 손실 없이 조절될 수 있다.
폴리아데닐화 서열은 또한 mRNA 번역(예, 리그닌 과산화효소 mRNA 번역) 효율을 향상시키기 위해 발현 벡터에 추가될 수 있다. 두 가지 다른 서열 요소는 정확하고 효율적인 폴리아데닐화를 위해 필요하다: 폴리아데닐화 부위로부터 다운스트림에 위치된 GU 또는 U 풍부한 서열 및 11-30 뉴클레오티드 업스트림에 위치된 여섯 개의 뉴클레오티드 AAUAAA의 높게 보존된 서열. 본 발명의 일부 구현예에 적합한 종결 및 폴리아데닐화 신호는 SV40로부터 유도된 것들을 포함한다.
이미 설명된 요소에 추가하여, 본 발명의 일부 구현예의 상기 발현 벡터는 일반적으로 복제된 핵산의 발현 수준을 증가시키거나 또는 재조합 DNA를 운반하는 세포의 식별을 용이하게 하기 위한 다른 특별한 요소들을 함유할 수 있다. 예를 들어, 동물 바이러스의 수는 허용 세포 유형에서 바이러스 게놈의 여분 염색체 복제를 촉진하는 DNA 서열을 함유한다. 적절한 인자가 플라스미드에서 또는 숙주 세포의 게놈으로 수행되는 유전자에 의해 제공되는 한, 이 바이러스 레플리콘 관련 플라스미드는 에피솜하게 복제된다.
벡터는 진핵 레플리콘을 포함하거나 포함하지 않을 수 있다. 진핵 레플리콘이 존재하는 경우, 상기 벡터는 적절한 선택 가능한 마커를 사용하여 진핵 세포에서 증폭할 수 있다. 벡터는 진핵 레플리콘을 포함하지 않는 경우, 에피솜 증폭이 불가능하다. 대신에, 재조합 DNA는 프로모터가 원하는 핵산의 발현을 지시하는 조작 세포의 게놈에 삽입한다.
본 발명의 일부 구현예 중 상기 발현 벡터는 예를 들면, 프로모터-키메라 폴리펩티드의 게놈 통합을 위한 내부 리보솜 진입 부위(IRES) 및 서열과 같은 단일의 mRNA에서 몇몇 단백질의 번역을 허용하는 추가의 폴리뉴클로티드 서열을 더 포함한다.
상술한 바와 같이, 다양한 원핵 세포 또는 진핵 세포는 본 발명의 일부 구현예의 폴리펩티드를 발현하는 숙주-발현 시스템으로 사용될 수 있다. 이들은 재조합 박테리오파지 DNA, 플라스미드 DNA 또는 코딩 서열을 포함하는 코스미드 DNA 발현벡터로 형질전환된 박테리아; 코딩 서열을 포함하는 재조합 효모 발현 벡터로 형질전환된 효모; 재조합 바이러스 발현 벡터(예, CaMV(cauliflower mosaic virus); TMV(tobacco mosaic virus))로 감염되거나 코딩 서열을 포함하는 Ti 플라스미드와 같은 재조합 플라스미드 발현 벡터로 형질전환된 식물 세포 시스템과 같은 미생물을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 포유류 발현 벡터는 또한 본 발명의 일부 구현예 중 상기 폴리펩티드를 발현하는데 사용될 수 있다.
포유류 발현 벡터의 예로는, Invitrogen사로부터 얻을 수 있는 pcDNA3, pcDNA3.1(+/-), pGL3, pZeoSV2(+/-), pSecTag2, pDisplay, pEF/myc/cyto, pCMV/myc/cyto, pCR3.1, pSinRep5, DH26S, DHBB, pNMT1, pNMT41, pNMT81, Promega사로부터 얻을 수 있는 pCI, Strategene사로부터 얻을 수 있는 pMbac, pPbac, pBK-RSV 및 pBK-CMV, Clontech사로부터 얻을 수 있는 pTRES 및 이의 유도체를 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
이러한 레트로바이러스와 같은 진핵 바이러스로부터 조절 요소를 포함하는 발현 벡터를 사용할 수도 있다. SV40 벡터는 pSVT7 및 pMT2를 포함한다. 소 유두종 바이러스로부터 유도된 벡터는 pBV-1MTHA를 포함하고, 엡스타인 바 바이러스로부터 유도된 벡터는 pHEBO, 및 p2O5를 포함한다. 다른 예의 벡터로는 pMSG, pAV009/A+, pMTO10/A+, pMAMneo-5, 바쿨로바이러스 pDSVE, 및 SV-40 초기 프로모터, SV-40 이후 프로모터, 메탈로티오네인 프로모터, 쥐 유방 종양 바이러스 프로모터, 라우스 육종 바이러스 프로모터, 폴리헤드린 프로모터, 또는 진핵 세포에서의 발현에 효과적으로 도시된 다른 프로모터의 지시 하에 단백질의 발현을 허용하는 임의의 다른 벡터를 포함한다.
다양한 방법은 줄기세포 내로 본 발명의 일부 구현예의 발현 벡터를 도입하는데 사용될 수 있다. 이러한 방법은 일반적으로 Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Springs Harbor Laboratory, New York (1989, 1992), in Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley and Sons, Baltimore, Md. (1989), Chang et al., Somatic Gene Therapy, CRC Press, Ann Arbor, Mich. (1995), Vega et al., Gene Targeting, CRC Press, Ann Arbor Mich. (1995), Vectors: A Survey of Molecular Cloning Vectors and Their Uses, Butterworths, Boston Mass. (1988) and Gilboa et at. [Biotechniques 4 (6): 504-512, 1986]에 설명되어 있으며, 예를 들어 안정하거나 일시적인 형질 전환, 전기 천공법, 및 재조합 바이러스 벡터로의 감염을 포함한다. 추가로, 양성-음성 선별 방법에 대한 미국 특허 제 5,464,764호 및 제 5,487,992호를 참조하시오.
더 높은 형질 전환 효율은 바이러스 감염 특성상 얻어질 수 있기 때문에, 바이러스 감염에 의한 핵산의 도입은 전기 천공과 같은 다른 방법에 비해 몇 가지 장점을 제공한다.
삽입된 코딩 서열의 전사 및 번역에 필요한 요소를 포함하는 것 외에, 본 발명의 일부 구현예의 발현 구조체는 또한 발현된 펩티드의 안정성, 생산, 정제, 수율 또는 독성 효과를 향상시키도록 조작된 서열을 포함할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 일부 구현예의 리그닌 과산화효소 H1 또는 H2 단백질 및 이종 단백질을 포함하는 융합 단백질 또는 절단 가능한 융합 단백질이 설계될 수 있다. 이러한 융합 단백질은 상기 융합 단백질이 친화성 크로마토그래피에 의해, 예를 들어, 이종 단백질에 특이적으로 컬럼에 고정하여. 쉽게 분리될 수 있도록 설계될 수 있다.
절단 부위가 리그닌 과산화효소 H1 또는 H2 단백질 및 이종 단백질 사이에 설계되는 경우, 상기 리그닌 과산화효소 단백질은 절단 부위를 방해하는 적절한 효소 또는 제제로 처리하여 컬럼 크로마토그래피로부터 방출될 수 있다[e.g., see Booth et al. (1988) Immunol. Lett. 19:65-70; and Gardella et al., (1990) J. Biol. Chem. 265:15854-15859].
상술한 바와 같이, 다양한 원핵 세포 또는 진핵 세포는 본 발명의 일부 구현예의 폴리펩티드를 발현하는 숙주-발현 시스템으로 사용될 수 있다. 이들은 재조합 박테리오파지 DNA, 플라스미드 DNA 또는 코딩 서열을 포함하는 코스미드 DNA 발현벡터로 형질전환된 박테리아; 코딩 서열을 포함하는 재조합 효모 발현 벡터로 형질전환된 효모; 재조합 바이러스 발현 벡터(예, CaMV(cauliflower mosaic virus); TMV(tobacco mosaic virus))로 감염되거나 코딩 서열을 포함하는 Ti 플라스미드와 같은 재조합 플라스미드 발현 벡터로 형질전환된 식물 세포 시스템과 같은 미생물을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 포유류 발현 벡터는 또한 본 발명의 일부 구현예 중 상기 폴리펩티드를 발현하는데 사용될 수 있다.
박테리아 구조체의 예로는 대장균 발현 벡터의 pET 시리즈를 포함한다[Studier et al. (1990) Methods in Enzymol. 185:60-89).
효모에서, 구성 또는 유도성 프로모터를 포함하는 다수의 벡터가 미국 특허 출원 제5,932,447호에 개시된 바와 같이 사용될 수 있다. 그 대신에, 벡터는 효모 염색체에 외래 DNA 서열의 삽입을 촉진하는데 사용될 수 있다.
식물 발현 벡터가 사용되는 경우, 코딩 서열의 발현은 다수의 프로모터에 의해 구동될 수 있다
예를 들면, CaMV의 35S RNA 및 19S RNA 프로모터와 같은 바이러스성 프로모터[Brisson et al. (1984) Nature 310:511-514] 또는 TMV에 코트 단백질 프로모터[Takamatsu et al. (1987) EMBO J. 6:307-311]가 사용될 수 있다. 또한, RUBISCO의 작은 서브유닛과 같은 식물 프로모터 [Coruzzi et al. (1984) EMBO J. 3:1671-1680 and Brogli et al., (1984) Science 224:838-843] 또는 열 충격 프로모터, 예 대두 hsp17.5-E 또는 hsp17.3-B [Gurley et al. (1986) Mol. Cell. Biol. 6:559-565]가 사용될 수 있다. 이러한 구조체는 Ti 플라스미드, Ri 플라스미드, 식물 바이러스성 벡터, 직접 DNA 형질 전환, 미세 주입, 전기 천공 및 당업자에게 잘 알려진 다른 기술들을 사용하여 식물 세포 내로 도입될 수 있다. 예를 들어, Weissbach & Weissbach, 1988, Methods for Plant Molecular Biology, Academic Press, NY, Section VIII, pp 421-463를 참조하시오.
당 분야에서 잘 알려져 있고 후술되는 곤충 및 포유류 숙주 세포 시스템과 같이 다른 발현 시스템은 또한 본 발명의 일부 구현예에 의해 사용될 수 있다.
재조합 폴리펩티드의 회복은 배양의 적절한 시간에 따라 영향을 받는다. 문구 "재조합 폴리펩티드 회복"은 폴리펩티드를 포함하는 전체 발효 배지를 수집하는 것을 의미하고 분리 또는 정제 단계를 추가로 내포할 필요는 없다. 상기에도 불구하고, 본 발명의 일부 구현예의 폴리펩티드는 친화성 크로마토그래피, 이온 교환 크로마토그래피, 여과, 전기영동, 소수성 상호 작용 크로마토그래피, 겔 여과 크로마토그래피, 역상 크로마토그래피, 콘카나발린 A 크로마토그래피, 크로마토 포커싱 및 차등 가용화 등과 같은 표준 단백질 정제 기술의 다양성을 이용하여 정제될 수 있다.
리그닌 과산화효소-함유 키트 :
본 발명의 일부 구현예의 또 다른 양태에 따르면, 대상체의 피부 및/또는 모발과 같은 국소 신체 부위를 라이트닝 하기 위한 키트가 제공된다(예를 들어, 본원에 기재된 방법에 따라). 상기 키트는 리그닌 과산화효소(예, 본원에 기술된 바와 같이), 과산화수소-생성 효소(예, 본원에 기술된 바와 같이) 및 과산화수소-생성 효소의 기질(예, 본원에 기술된 바와 같이)을 포함한다. 리그닌 과산화효소, 과산화수소-생성 효소 및 이의 기질 중 적어도 하나는 키트 내 개별적으로 포장된 조성물의 일부를 형성한다.
본원(예, 이 섹션에서)에 기재된 리그닌 과산화효소-함유 키트는 리그닌 과산화효소에 관한 본원에 기술된 임의의 일 구현예에 따른 리그닌 과산화효소를 포함할 수 있고, 과산화수소-생성 시스템 및/또는 그러한 시스템을 포함하는 키트와 관련된 본원에 기술된 임의의 일 구현예에 따른 과산화수소-생성 시스템(예, 효소 및/또는 기질)을 포함할 수 있음을 이해해야한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소는 제 1 조성물의 일부를 형성하고, 상기 기질은 제 2 조성물의 일부를 형성하며, 상기 제 1 및 제 2 조성물은 상기 키트 내 개별적으로 포장된다. 즉, 상기 효소 및 기질은 상기 키트 내의 분리된 조성물로 있고, 그것들이 키트에 있는 동안 효소와 기질 간의 접촉은 없다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 제 2 조성물은 상기 리그닌 과산화효소(예, 상기 리그닌 과산화효소는 과산화수소-생성 효소의 기질과 동일한 조성물 내에 포장된다)를 추가로 포함한다. 그러한 구현예에서, 리그닌 과산화효소 함유 제 2 조성물과 접촉할 때 리그닌 과산화효소의 활성 결과로서 제 1 조성물은 또한 "활성제"로 불려진다.
실시예에서, 제 1 조성물은 추가로 상기 리그닌 과산화효소(예, 상기 리그닌 과산화효소는 과산화수소-생성 효소와 동일한 조성물 내에 포장된다)를 추가로 포함한다. 그러한 구현예에서, 그것이 두 개의 활성 효소를 포함할 때 제 1 조성물은 또한 "효소" 제형(예, "효소 크림")으로 불려진다. 리그닌 과산화효소-함유 제 1 조성물과 접촉할 때 리그닌 과산화효소의 활성 결과로서 제 2 조성물은 또한 "활성제"로 불려진다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소는 상기 키트 내 제 3 조성물의 일부를 형성하고, 상기 제 3 조성물은 상기 키트 내 개별적으로 포장된다.
본원에 기술된 임의의 구현예에서, 본원에 기술된 제 1 조성물, 본원에 기술된 제 2 조성물, 각각 및 본원에 기술된 과산화수소-생성용 조성물의 임의의 다른 일부는 본원에 기술된 바와 같이, 이러한 제형의 혼합이 임의의 과산화수소-생성용 조성물의 형성 결과로서 상기 키트 내 포장된 제형으로 본원에서 또한 나타낸다.
상기 키트의 제 1 조성물 및 제 2 조성물 및 임의의 제 3 조성물은 리그닌 과산화효소, 과산화수소-생성 효소 및 이의 기질(예, 본원에 기술된 바와 같이)을 포함하는 화장료 조성물을 제조하기 위해 결합될 수 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소 및 이의 기질은 상기 키트(예, 본원에 기술된 밀폐용기) 내 공기-밀폐 포장으로 함께(예, 하나의 조성물의 일부로) 포장된다. 상기 리그닌 과산화효소는 과산화수소-생성 효소 및 이의 기질을 함께 또는 분리되도록 포장될 수 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예들 중 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소를 포함하는 키트 내 조성물에서 리드닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 12 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 약 25 units/gram이다.
본원에 기술된 임의의 구현예들 중 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소를 포함하는 키트 내 조성물에서 리드닌 과산화효소의 농도는 8 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 12 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 25 내지 250 units/gram의 범위 내이다.
본원에 기술된 임의의 구현예들 중 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소를 포함하는 키트 내 조성물에서 리드닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 2.5 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 2.5 내지 25 units/gram의 범위 내이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에 따르면, 상기 키트는 추가로 산화 매개체를 포함한다(예, 본원에 기술된 바와 같이).
본원에 기술된 임의의 구현예들 중 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 상기 리그닌 과산화효소를 포함하는 상기 키트 내 조성물의 일부(a part)이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소 및 산화매개체는 제 1 조성물의 두 부분(both part)이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소 및 산화매개체는 제 2 조성물의 두 부분이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소 및 산화매개체는 제 3 조성물의 두 부분이다.
본원에 기술된 임의의 구현예들 중 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 상기 리그닌 과산화효소를 포함하는 상기 키트 내 조성물로부터 분리되어 포장된다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소는 본원에 기술된 제 1 조성물 또는 제 3 조성물의 일부이고, 상기 산화 매개체는 제 2 조성물의 일부이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소는 본원에 기술된 제 2 조성물 또는 제 3 조성물의 일부이고, 상기 산화 매개체는 제 1 조성물의 일부이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체를 포함하는 키트 내 조성물에서 산화 매개체의 농도는 0.06 μmole/gram 내지 600 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 0.6 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 2 내지 20 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 4 내지 10μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 약 6 μmole/gram이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체를 포함하는 키트 내 조성물에서 산화 매개체의 농도는 0.6 μmole/gram 내지 600 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 2 내지 600 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 6 내지 600 μmole/gram의 범위 내이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체를 포함하는 키트 내 조성물에서 산화 매개체의 농도는 0.06 μmole/gram 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 0.06 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 0.06 내지 6 μmole/gram의 범위 내이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체를 포함하는 키트 내 조성물에서 산화 매개체의 농도는 0.06 μmole/gram 내지 600 μmole/gram의 범위 내이고, 상기 리그닌 과산화효소를 포함하는 키트 내 조성물에서 리그닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.06 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.6 내지 600 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.6 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 2 내지 20 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 4 내지 10 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 약 6 μmole/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올, 베라트롤 및 1,4-디메톡시벤젠로 이루어진 군에서 선택된 것이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개제 및 상기 리그닌 과산화효소는 동일한 조성물에 의해 포함된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체를 포함하는 키트 내 조성물에서 산화 매개체의 농도는 0.06 μmole/gram 내지 600 μmole/gram의 범위 내이고, 상기 리그닌 과산화효소를 포함하는 키트 내 조성물에서 리그닌 과산화효소의 농도는 8 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.06 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.6 내지 600 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.6 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 2 내지 20 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 4 내지 10 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 약 6 μmole/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올, 베라트롤 및 1,4-디메톡시벤젠로 이루어진 군에서 선택된 것이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개제 및 상기 리그닌 과산화효소는 동일한 조성물에 의해 포함된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체를 포함하는 키트 내 조성물에서 산화 매개체의 농도는 0.06 μmole/gram 내지 600 μmole/gram의 범위 내이고, 상기 리그닌 과산화효소를 포함하는 키트 내 조성물에서 리그닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.06 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.6 내지 600 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.6 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 2 내지 20 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 4 내지 10 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 약 6 μmole/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올, 베라트롤 및 1,4-디메톡시벤젠로 이루어진 군에서 선택된 것이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개제 및 상기 리그닌 과산화효소는 동일한 조성물에 의해 포함된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체를 포함하는 키트 내 조성물에서 산화 매개체의 농도는 0.06 μmole/gram 내지 600 μmole/gram의 범위 내이고, 상기 리그닌 과산화효소를 포함하는 키트 내 조성물에서 리그닌 과산화효소의 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.06 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.6 내지 600 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.6 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 2 내지 20 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 4 내지 10 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 약 6 μmole/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올, 베라트롤 및 1,4-디메톡시벤젠으로 이루어진 군에서 선택된 것이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개제 및 상기 리그닌 과산화효소는 동일한 조성물에 의해 포함된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체를 포함하는 키트 내 조성물에서 산화 매개체의 농도는 0.06 μmole/gram 내지 600 μmole/gram의 범위 내이고, 상기 리그닌 과산화효소를 포함하는 키트 내 조성물에서 리그닌 과산화효소의 농도는 12 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.06 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.6 내지 600 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.6 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 2 내지 20 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 4 내지 10 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 약 6 μmole/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올, 베라트롤 및 1,4-디메톡시벤젠으로 이루어진 군에서 선택된 것이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개제 및 상기 리그닌 과산화효소는 동일한 조성물에 의해 포함된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체를 포함하는 키트 내 조성물에서 산화 매개체의 농도는 0.06 μmole/gram 내지 600 μmole/gram의 범위 내이고, 상기 리그닌 과산화효소를 포함하는 키트 내 조성물에서 리그닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.06 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.6 내지 600 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.6 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 2 내지 20 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 4 내지 10 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 약 6 μmole/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올, 베라트롤 및 1,4-디메톡시벤젠으로 이루어진 군에서 선택된 것이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개제 및 상기 리그닌 과산화효소는 동일한 조성물에 의해 포함된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체를 포함하는 키트 내 조성물에서 산화 매개체의 농도는 0.06 μmole/gram 내지 600 μmole/gram의 범위 내이고, 상기 리그닌 과산화효소를 포함하는 키트 내 조성물에서 리그닌 과산화효소의 농도는 12 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.06 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.6 내지 600 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.6 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 2 내지 20 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 4 내지 10 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 약 6 μmole/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올, 베라트롤 및 1,4-디메톡시벤젠으로 이루어진 군에서 선택된 것이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개제 및 상기 리그닌 과산화효소는 동일한 조성물에 의해 포함된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체를 포함하는 키트 내 조성물에서 산화 매개체의 농도는 0.06 μmole/gram 내지 600 μmole/gram의 범위 내이고, 상기 리그닌 과산화효소를 포함하는 키트 내 조성물에서 리그닌 과산화효소의 농도는 25 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.06 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.6 내지 600 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.6 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 2 내지 20 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 4 내지 10 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 약 6 μmole/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올, 베라트롤 및 1,4-디메톡시벤젠으로 이루어진 군에서 선택된 것이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개제 및 상기 리그닌 과산화효소는 동일한 조성물에 의해 포함된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체를 포함하는 키트 내 조성물에서 산화 매개체의 농도는 0.06 μmole/gram 내지 600 μmole/gram의 범위 내이고, 상기 리그닌 과산화효소를 포함하는 키트 내 조성물에서 리그닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 25 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.06 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.6 내지 600 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 0.6 내지 60 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 2 내지 20 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 4 내지 10 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체의 농도는 약 6 μmole/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올, 베라트롤 및 1,4-디메톡시벤젠으로 이루어진 군에서 선택된 것이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개체는 베라트릴 알코올이다. 일부 구현예에서, 상기 산화 매개제 및 상기 리그닌 과산화효소는 동일한 조성물에 의해 포함된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 본원에 기술된 상기 임의의 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 1 조성물)에서 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소)의 농도는 0.25 내지 2500 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 12 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 약 25 units/gram이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 1 조성물)에서 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소)의 농도는 2.5 내지 2500 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 8 내지 2500 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 25 내지 2500 units/gram의 범위 내이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 1 조성물)에서 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소)의 농도는 0.25 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 0.25 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 0.25 내지 25 units/gram의 범위 내이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 리그닌 과산화효소를 포함하는 상기 키트 내 조성물에서 리그닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이며, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 1 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 농도는 0.25 내지 2500 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 8 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 12 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 약 25 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소 및 상기 리그닌 과산화효소는 동일 조성물에 의해 포함된다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소는 글루코스 산화효소이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 리그닌 과산화효소를 포함하는 상기 키트 내 조성물에서 리그닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이며, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 1 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 농도는 2.5 내지 2500 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 8 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 12 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 약 25 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소 및 상기 리그닌 과산화효소는 동일 조성물에 의해 포함된다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소는 글루코스 산화효소이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 리그닌 과산화효소를 포함하는 상기 키트 내 조성물에서 리그닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이며, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 1 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 농도는 0.25 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 8 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 12 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 약 25 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소 및 상기 리그닌 과산화효소는 동일 조성물에 의해 포함된다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소는 글루코스 산화효소이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 리그닌 과산화효소를 포함하는 상기 키트 내 조성물에서 리그닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이며, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 1 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 8 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 12 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 약 25 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소 및 상기 리그닌 과산화효소는 동일 조성물에 의해 포함된다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소는 글루코스 산화효소이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 리그닌 과산화효소를 포함하는 상기 키트 내 조성물에서 리그닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이며, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 1 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 농도는 8 내지 2500 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 8 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 12 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 약 25 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소 및 상기 리그닌 과산화효소는 동일 조성물에 의해 포함된다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소는 글루코스 산화효소이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 리그닌 과산화효소를 포함하는 상기 키트 내 조성물에서 리그닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이며, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 1 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 농도는 0.25 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 8 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 12 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 약 25 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소 및 상기 리그닌 과산화효소는 동일 조성물에 의해 포함된다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소는 글루코스 산화효소이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 리그닌 과산화효소를 포함하는 상기 키트 내 조성물에서 리그닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이며, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 1 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 8 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 12 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 약 25 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소 및 상기 리그닌 과산화효소는 동일 조성물에 의해 포함된다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소는 글루코스 산화효소이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 본원에 기술된 상기 임의의 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 2 조성물)에서 상기 과산화수소-생성 효소의 기질(예, 글루코스)의 농도는 0.035 μmole/gram 내지 350 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 0.35 내지 35 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 1 내지 12 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 2 내지 7 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 약 3.5 μmole/gram이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 2 조성물)에서 상기 과산화수소-생성 효소의 기질(예, 글루코스)의 농도는 0.35 μmole/gram 내지 350 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 1 내지 350 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 3.5 내지 350 μmole/gram의 범위 내이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 2 조성물)에서 상기 과산화수소-생성 효소의 기질(예, 글루코스)의 농도는 0.035 μmole/gram 내지 35 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 0.035 내지 12 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 농도는 0.035 내지 3.5 μmole/gram의 범위 내이다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 본원에 기술된 상기 임의의 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 1 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 농도는 0.25 내지 2500 units/gram의 범위 내이며, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 2 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 기질 농도는 0.035 μmole/gram 내지 350 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 0.25 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 2.5 내지 2500 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 12 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 약 25 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소이고, 상기 기질은 글루코스이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소) 및 상기 기질(예, 글루코스)는 상기 키트 내 서로 다른 조성물에 의해 포함된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 본원에 기술된 상기 임의의 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 1 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 농도는 0.25 내지 2500 units/gram의 범위 내이며, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 2 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 기질 농도는 0.35 μmole/gram 내지 350 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 0.25 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 2.5 내지 2500 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 12 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 약 25 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소이고, 상기 기질은 글루코스이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소) 및 상기 기질(예, 글루코스)는 상기 키트 내 서로 다른 조성물에 의해 포함된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 본원에 기술된 상기 임의의 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 1 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 농도는 0.25 내지 2500 units/gram의 범위 내이며, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 2 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 기질 농도는 0.035 μmole/gram 내지 35 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 0.25 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 2.5 내지 2500 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 12 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 약 25 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소이고, 상기 기질은 글루코스이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소) 및 상기 기질(예, 글루코스)는 상기 키트 내 서로 다른 조성물에 의해 포함된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 본원에 기술된 상기 임의의 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 1 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 농도는 0.25 내지 2500 units/gram의 범위 내이며, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 2 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 기질 농도는 0.35 μmole/gram 내지 35 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 0.25 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 2.5 내지 2500 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 12 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 약 25 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소이고, 상기 기질은 글루코스이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소) 및 상기 기질(예, 글루코스)는 상기 키트 내 서로 다른 조성물에 의해 포함된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 본원에 기술된 상기 임의의 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 1 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 농도는 0.25 내지 2500 units/gram의 범위 내이며, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 2 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 기질 농도는 1 μmole/gram 내지 350 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 0.25 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 2.5 내지 2500 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 12 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 약 25 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소이고, 상기 기질은 글루코스이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소) 및 상기 기질(예, 글루코스)는 상기 키트 내 서로 다른 조성물에 의해 포함된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 본원에 기술된 상기 임의의 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 1 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 농도는 0.25 내지 2500 units/gram의 범위 내이며, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 2 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 기질 농도는 0.035 μmole/gram 내지 12 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 0.25 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 2.5 내지 2500 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 12 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 약 25 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소이고, 상기 기질은 글루코스이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소) 및 상기 기질(예, 글루코스)는 상기 키트 내 서로 다른 조성물에 의해 포함된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 본원에 기술된 상기 임의의 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 1 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 농도는 0.25 내지 2500 units/gram의 범위 내이며, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 2 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 기질 농도는 1 μmole/gram 내지 12 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 0.25 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 2.5 내지 2500 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 12 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 약 25 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소이고, 상기 기질은 글루코스이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소) 및 상기 기질(예, 글루코스)는 상기 키트 내 서로 다른 조성물에 의해 포함된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 본원에 기술된 상기 임의의 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 1 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 농도는 0.25 내지 2500 units/gram의 범위 내이며, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 2 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 기질 농도는 3.5 μmole/gram 내지 350 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 0.25 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 2.5 내지 2500 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 12 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 약 25 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소이고, 상기 기질은 글루코스이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소) 및 상기 기질(예, 글루코스)는 상기 키트 내 서로 다른 조성물에 의해 포함된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 본원에 기술된 상기 임의의 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 1 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 농도는 0.25 내지 2500 units/gram의 범위 내이며, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 2 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 기질 농도는 0.035 μmole/gram 내지 3.5 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 0.25 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 2.5 내지 2500 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 12 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 약 25 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소이고, 상기 기질은 글루코스이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소) 및 상기 기질(예, 글루코스)는 상기 키트 내 서로 다른 조성물에 의해 포함된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 본원에 기술된 상기 임의의 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 1 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 농도는 0.25 내지 2500 units/gram의 범위 내이며, 상기 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 제 2 조성물)에서 과산화수소-생성 효소의 기질 농도는 2 μmole/gram 내지 7 μmole/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 0.25 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 2.5 내지 2500 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 12 내지 40 units/gram의 범위 내이다. 일부 구현예에서, 상기 효소의 농도는 약 25 units/gram이다. 일부 구현예에서, 상기 효소는 글루코스 산화효소이고, 상기 기질은 글루코스이다. 일부 구현예에서, 상기 과산화수소-생성 효소(예, 글루코스 산화효소) 및 상기 기질(예, 글루코스)는 상기 키트 내 서로 다른 조성물에 의해 포함된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 키트의 제 1 조성물은 2.5 내지 250 units/gram 범위 내 농도의 글루코스 산화효소(예, 본원에 기술된 글루코스 산화효소 농도)를 포함하며, 상기 키트의 제 2 조성물은 0.35 μmole/gram 내지 35 μmole/gram 범위 내 농도의 D-글루코스(예, 본원에 기술된 글루코스 농도)를 포함한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 키트의 제 1 조성물은 2.5 내지 250 units/gram 범위 내 농도의 글루코스 산화효소(예, 본원에 기술된 글루코스 산화효소 농도) 및 2.5 내지 250 units/gram 범위 내 농도의 리그닌 과산화효소(예, 본원에 기술된 리그닌 과산화효소 농도)를 포함하며; 상기 키트의 제 2 조성물은 0.35 μmole/gram 내지 35 μmole/gram 범위 내 농도의 D-글루코스(예, 본원에 기술된 글루코스 농도)를 포함한다.
본원에 기술된 키트는 본원에 기재된 바와 같은 하나 이상의 활성 성분(예를 들어, 과산화수소, 리그닌 과산화효소, 과산화수소-생성 효소, 과산화수소 생성 효소의 기질 및/또는 산화 매개체의 존재 하에 활성을 나타내는 제제)을 포함하는 조성물 외에도 추가 조성물(예를 들면, 화장료 조성물)을 포함할 수 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 키트는 추가로 본원에 기술된 조성물과 접촉하기 전에 국소 신체 부위를 깨끗이 하기 위해, 세안과 같은 세정 조성물(예, 본원에 기술된 바와 같이)을 포함한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 키트는 본원에 기술된 바와 같이, 사용에 대한 적절한 지시사항 및 지시된 사용을 위해 규제 기관의 승인을 나타내는 라벨을 포함한다.
조성물의 제형:
본원에 기술된 본 발명의 임의의 구현예 중 일부 구현예 및 구현예 중 임의의 양태에 따르면, 본원에 기술된 상기 활성 성분(예를 들어, 과산화수소, 리그닌 과산화효소, 과산화수소-생성 효소, 과산화수소 생성 효소의 기질 및/또는 산화 매개체의 존재 하에 활성을 나타내는 제제)은 활성 성분 그 자체 또는 생리학적으로 적합한 담체 및 부형제와 같은 추가적인 화학 성분과의 조합을 포함하는 조성물에 사용될 수 있다. 조성물은 (본원에 기술된 바와 같이 화장료 또는 약제학적 활성을 나타내는) 본원에 기술된 화장료 또는 약제학적 조성물 및 본원에 기술된 화장료 또는 약제학적 조성물을 제조하기 위해 사용될 수 있는 (그것들이 그 자체에 의해 비활성화될 수 있지만) 키트 내 조성물(예, 본원에 기술된 바와 같이, 제 1 조성물, 제 2 조성물, 및/또는 제 3 조성물)을 포함한다.
담체 및 부형제를 포함하는 화장료 또는 약제학적 조성물의 목적은 유기체에 활성 성분의 투여를 용이하게 하는 것이다. 본원에 정의된 바와 같이 조성물에 의해 나타나는 활성이 화장료인 구현예에서, 상기 조성물은 또한 "화장료 조성물"로 지칭된다. 본원에 정의된 바와 같이 조성물에 의해 나타나는 활성이 약제학적인 구현예에서, 상기 조성물은 또한 "약제학적 조성물"로 지칭된다.
본원에 걸쳐, 용어 "약제학적"은 조성물 또는 키트가 본원에 기재된 바와 같이 대상체의 신체 부위에 적용될 때 치료 효과를 발휘한다는 것을 의미하다.
이하, 문구 "적합한 담체"는 유기체에 심각한 자극을 초래하지 않으며, 활성 성분(들)의 생물학적 활성 및 특징을 없애지 않는 담체 또는 희석제를 말한다. 활성 성분(들)에 의해 나타나는 활성이 화장료인 구현예에서, 그러한 담체는 또한 "화장료 또는 약용화장료로 허용가능한 담체"로 지칭된다. 활성 성분(들)에 의해 나타나는 활성이 약제학적인 구현예에서, 그러한 담체는 또한 "약제학적으로 허용가능한 담체"로 지칭된다.
본원에서 용어 "부형제"는 상기 활성 성분(들)의 투여를 더욱 용이하게 하기 위해 조성물에 첨가하는 비활성 물질을 말한다. 부형제의 예로는, 제한 없이 탄산 칼슘, 인산 칼슘, 각종 당 및 전분 유형, 셀룰로스 유도체, 젤라틴, 식물유 및 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다.
본 발명의 조성물은 당업계에 공지된 방법, 예를 들면, 통상적인 혼합, 용해, 과립화, 당의정-조제, 레비게이팅(levigating), 유화, 캡슐화, 포집 또는 동결 건조 공정에 의해 제조될 수 있다.
따라서 본 발명의 일부 구현예에 따른 용도 조성물은 활성 성분(들)의 조제 프로세싱을 촉진하는 부형제 및 보조제를 포함하는 하나 이상의 적합한 담체를 사용하여 통상의 방식으로 제형화될 수 있다. 적절한 제형은 선택된 투여법에 따라 달라진다.
그 대신에, 활성 성분(들)은 사용 전에 적합한 비히클, 예를 들어, 피로겐이없는 멸균 기반 용액을 구성하는 분말 형태일 수 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예 및 임의의 양태의 일부 구현예에 따른 조성물은 예를 들면, 마스크, 세럼, 로션, 크림, 샴푸, 젤, 및/또는 토너와 같은 화장품 산업에 의해 이용(예, 국소 용도)된 임의의 다양한 형태로 제형화될 수 있다.
당업자에게 명백한 바와 같이, 제형의 적합성은 활성 성분(들)과 접촉될 표면의 유형에 의존할 것이다-따라서, 예를 들면, 샴푸 제형은 모발과 접촉하기에 적합하고, 얼굴 마스크는을 얼굴 피부 등에 접촉하기에 적합하다.
본원에 기술된 바와 같은 특성을 갖는 조성물의 제조 방법은 당업자에게 잘 알려져 있으며, Remington's Pharmaceutical Sciences, 1990 (supra); 및 Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 6th ed., Williams & Wilkins (1995)에 상세히 기재되어 있다.
본 발명의 임의의 구현예들의 일부 구현예에 따르면, 상기 화장료 조성물은 치료 부위에 남아 있을 정도로 충분한 점성으로 제형화되고, 쉽게 증발하지 않고/않거나 물로 헹궈도 쉽게 제거되지 않는다.
본원에서 사용되는 용어 "세럼"은 국소 도포용으로 제형화되는 수용액을 말한다.
본 발명의 임의의 구현예들의 일부 구현예에 따르면, 상기 세럼은 끈적한 수성의 화장료 용액이다. 본 발명의 일부 구현예에 따르면, 상기 세럼은 약간 흐릿한 수용액이 명백하다.
본 발명의 임의의 구현예들의 일부 구현예에 따르면, 상기 세럼은 국소 신체 부위에 남겨지기 위해 제형화되고 물, 비누 및/또는 클린저에 의해 제거될 필요가 없다.
본 발명의 임의의 구현예들의 일부 구현예에 따르면, 세럼의 국소 도포(예, 피부)에 따라, 상기 세럼은 미용적으로 우아한 실크처럼 부드러운 느낌을 남기면서, 신속하게 흡수된다.
본 발명의 임의의 구현예들의 일부 구현예에 따르면, 상기 세럼은 마스크(예, 화장료 마스크) 내에 포함된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 세럼은 표 2에 나타낸 성분을 포함한다:
일부 구현예에 따른 세럼 조성물
성분 중량% 범위
물 75 - 100 %
활성 성분(들) 본원에 기술된대로
글리세린 5 - 10 %
폴리아크릴레이트-13 0.1 - 1 %
디메치콘 0.1 - 1 %
디카프릴일 카보네이트 0.1 - 1 %
세틸 알코올 0.1 - 1 %
스테아릴 알코올 0.1 - 1 %
페녹시에탄올 0.1 - 1 %
마치현(Portulaca oleracea) 0 - 1 %
폴리이소부텐 0.1 - 1 %
부틸렌 글리콜 0 - 1 %
풀루란 0 - 0.1 %
폴리소르베이트 20 0 - 0.1 %
PEG-4 라우레이트 0 - 0.1 %
PEG-4 디라우레이트 0 - 0.1 %
PEG-4 0 - 0.1 %
이오도프로피닐 부틸카바메이트 0 - 0.1 %
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 본원에 기술된 조성물(예, 세럼, 로션, 크림)은 피부학적으로 허용 가능한 연화제를 포함한다. 이러한 조성물은 바람직하게는 약 2% 내지 약 50%의 연화제를 함유한다. 본원에 사용된 바와 같이, "연화제"는 예방 또는 건조 완화뿐만 아니라, 피부 보호에 유용한 물질을 말한다. 다양하고 적합한 연화제는 공지되어 있으며, 본원에 이용될 수 있다. 예를 들어, 완화제로 적합한 물질의 다양한 예가 포함된 Sagarin, Cosmetics, Science and Technology, 2nd Edition, Vol. 1, pp. 3243 (1972)을 참조하시오. 바람직한 연화제는 글리세린이다. 글리세린은 바람직하게 약 0.001 내지 약 20%, 보다 바람직하게 약 0.01 내지 약 10%, 가장 바람직하게 약 0.1 또는 약 5%, 예를 들면, 3%의 양으로 사용된다.
본 발명에 따른 로션 및 크림은 일반적으로 용액 담체 시스템 및 하나 이상의 연화제를 포함한다. 로션은 일반적으로 약 1% 내지 약 20%, 바람직하게는 약 5% 내지 약 10%의 연화제; 약 50% 내지 약 90%, 바람직하게는 약 60% 내지 약 80%의 물; 및 본원에 기술된 약제학적으로 유효한 양의 제제를 포함한다. 크림은 일반적으로 약 5% 내지 약 50%, 바람직하게는 약 10% 내지 약 20%의 연화제; 약 45% 내지 약 85%, 바람직하게는 약 50% 내지 약 75%의 물; 및 유효한 양의 활성성분(들)을 포함한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 크림 또는 로션은 하기 표 3에 나타낸 성분을 포함한다:
일부 구현예에 따른 크림 또는 로션 조성물
성분 중량% 범위
물 50 - 75 %
활성 성분(들) 본원에 기술된대로
글리세린 5 - 10 %
쉐어버터(Butyrospermum Parkii butter) 0 - 5 %
디메치콘 1 - 5 %
디카프릴일 카보네이트 1 - 5 %
트레할로스 0 - 5 %
카프릴릭 카프릭 트리글리세라이드 0 - 1 %
세틸 알코올 0.1 - 1 %
호호바 에스테르 0 - 1 %
스테아릴 알코올 0.1 - 1 %
폴리아크릴레이트-13 0.1 - 1 %
세틸 팔미테이트 0 - 1 %
미리스틸 미리스테이트 0 - 1 %
페녹시에탄올 0.1 - 1 %
폴리이소부텐 0.1 - 1 %
풀루란 0 - 1 %
폴리소르베이트 20 0 - 0.1 %
PEG- 4 라우레이트 0 - 0.1 %
PEG-4 디라우레이트 0 - 0.1 %
PEG-4 0 - 0.1 %
이오도프로피닐 부틸카바메이트 0 - 0.1 %
실시예에서, 상기 크림 또는 로션은 하기 표 4에 나타낸 성분을 포함한다:
일부 구현예에 따른 크림 또는 로션 조성물
성분 중량% 범위
물 75 - 100 %
활성 성분(들) 본원에 기술된대로
글리세린 5 - 10 %
프로필렌 글리콜 1 - 5 %
디카프릴일 카보네이트 0.1 - 1 %
디메치콘 0.1 - 1 %
폴리아크리레이트-13 0.1 - 1 %
세틸 알코올 0.1 - 1 %
유동 파라민(Paraffinum liquidum) 0.1 - 1 %
스테아릴 알코올 0.1 - 1 %
페녹시에탄올 0.1 - 1 %
폴리이소부텐 0.1 - 1 %
폴리소르베이트 20 0 - 0.1 %
PEG- 4 라우레이트 0 - 0.1 %
PEG-4 디라우레이트 0 - 0.1 %
PEG-4 0 - 0.1 %
이오도프로피닐 부틸카바메이트 0 - 0.1 %
클로페네신 0 - 1 %
카이살피아니스피노사 검 0 - 1 %
시트르산 0 - 0.1 %
본원에 사용된 용어 "마스크"는 본원에 기재된 바와 같이 활성 성분(들)을 포함하고, 국소 영역에 활성 성분(들)의 접촉을 유지하기 위해, 예를 들어, 국소 영역을 라이트닝 하기 위해, 국소적으로 적용되는 미용 마스크를 의미한다.
미용 마스크의 다양한 타입은 화장품업계에 공지되어 있다. 이들은 고체 지지체를 갖는 마스크, 린스-오프 마스크, 필-오프 마스크, 또는 설정 시간 후에 경화되거나 중합되는 마스크를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
본원에 사용된 문구 "린스-오프 마스크"는 국소적으로 비교적 두꺼운 층에 적용하고 일정 시간, 일반적으로 몇 분에서 몇 십분 동안 남아 있게 하기 위해 또는 이 시간 마지막에 물로 세척 또는 간단히 닦아내기 위해 제형화된 화장료 조성물을 의미한다.
적합한 마스크 및 본원에 기술된 활성 성분(들)으로 마스크를 제조하는 기술은 국제 특허 WO 2012/153336호에 기재되어 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 조성물의 형태는 적어도 일부에서, 적절한 담체를 선택함으로써 결정된다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 담체는 에멀젼을 포함한다. 이러한 담체는 제한 없이, O/W, W/O, W/O/W, O/W/실리콘 에멀젼, 크림, 연고, 수용액, 로션 또는 에어로졸을 포함한다. 당업자에 의해 이해될 수 있는 바와 같이, 조성물 내 성분의 수용성/분산성에 따라, 정해진 성분은 수상 또는 오일/실리콘 상 내로 주로 분포할 것이다.
본 발명의 임의의 구현들 중 일부 구현예에 따른 에멀젼은 일반적으로 본 명세서에 개시된 유효량의 활성 성분(들) 및 오일을 함유한다. 상기 활성 성분(들)(예, 과산화수소, 리그닌 과산화효소, 과산화수소-생성 효소, 과산화수소-생성 효소의 기질 및/또는 산화 매개체의 존재 하에 활성을 나타내는 제제) 및 오일은 동물, 식물 또는 석유로부터 유래될 수 있으며, 천연 또는 합성(즉, 인공)일 수 있다. 바람직한 에멀젼은 또한 글리세린과 같은 보습제를 포함한다. 에멀젼은 담체 중량에 대하여, 바람직하게 약 1% 내지 약 10%, 보다 바람직하게 약 2% 내지 약 5%의 유화제를 추가로 포함할 것이다. 유화제는 비이온성, 음이온성 또는 양이온성일 수 있다. 적합한 유화제는 예를 들어, 1973년 8월 28일 Dickert 등에 의해 발행된 미국 특허 제3,755,560호, 1983년 12월 20일 Dixon 등에 의해 발행된 미국 특허 제4,421,769호, 및 McCutcheon's Detergents and Emulsifiers, North American Edition, pages 317-324 (1986)에 설명되어 있다.
상기 에멀젼은 또한 각질 조직에 적용 시 거품을 최소화하기 위해 소포제를 함유할 수 있다. 소포제는 고분자량 실리콘 및 당업계에 공지된 다른 물질을 포함한다.
적합한 에멀젼은 원하는 제품 형태에 따라 광범위한 점도를 가질 수 있다. 바람직한 예시적인 저점도 에멀젼은 약 50 센티스토크스 이하, 보다 바람직하게는 약 10 센티스토크스 이하, 가장 바람직하게는 약 5 센티스토크스 이하의 점도를 갖는다. 상기 에멀젼은 또한 국소 적용 시 거품을 최소화하기 위해 소포제를 함유할 수 있다. 소포제는 고분자량 실리콘 및 당업계에 공지된 다른 물질을 포함한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 에멀젼은 연속적인 수성 상 및 그 안에 분산된 소수성, 수-불용성 상("오일 상")을 갖는 O/W 에멀젼이다. O/W 에멀젼을 포함하는 적합한 담체의 예는 미국 특허 제 5,073,371호 및 제5,073,372호에 기재되어 있다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 O/W 에멀젼은 액정 겔 망상 구조의 형성에 도움이 되는 구조화제를 포함한다. 이론에 의해 제한되지 않고, 상기 구조화제는 조성물의 안정성에 기여하는 조성물에 유동학적 특성을 제공하는 것을 돕는 것으로 여겨진다. 상기 구조화제는 유화제 또는 계면 활성제로서 작용할 수 있다. 본 발명의 바람직한 조성물은 조성물의 중량에 대하여 약 0.5% 내지 약 20%, 보다 바람직하게 약 1% 내지 약 10%, 가장 바람직하게 약 1% 내지 약 5%의 구조화제를 포함한다. 본 발명의 바람직한 구조화제는 스테아르산, 팔미트산, 스테아릴 알코올, 세틸 알코올, 베헤닐 알코올, 평균 약 1 내지 21개 에틸렌 옥사이드 유닛을 갖는 스테아릴 알코올의 폴리에틸렌 글리콜 에테르, 평균 약 1 내지 5개 에틸렌 옥사이드 유닛을 갖는 세틸 알코올의 폴리에틸렌 글리콜 에테르 및 이의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된다.
예를 들면, 미국 특허 제 3,929,678호에 개시된 바와 같이, 다양한 음이온성 계면활성제는 또한 본원에 유용하다. 또한, 양쪽성 및 양쪽이온성 계면활성제도 본원에 유용하다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 O/W 에멀젼은 국소 담체 중량에 대하여 약 25% 내지 98%, 바람직하게는 65% 내지 98%, 보다 바람직하게는 70% 내지 90%의 물을 포함한다.
본원에 기술된 임의의 구현예 중 일부 구현예에서, 상기 에멀젼은 W/실리콘 에멀젼이다. W/실리콘 에멀젼은 연속 실리콘 상과 분산된 수성 상을 함유한다.
본 발명의 바람직한 W/실리콘 에멀젼은 연속 실리콘 상의 중량에 대하여 약 1% 내지 약 60%, 보다 바람직하게는 5% 내지 40%, 가장 바람직하게는 10% 내지 20%를 포함한다. 상기 연속 실리콘 상은 후술되는 불연속 수상을 포함하거나 둘러싼 외부 상으로 존재한다. 상기 연속 실리콘상은 폴리오르가노실록산 오일을 함유할 수 있다.
상기 연속 실리콘 상은 하나 이상의 비실리콘 오일을 함유할 수 있다. 연속 실리콘 상 내의 비실리콘 오일의 농도는 상기 조성물의 활성 성분(들)의 산화 안정성을 보다 향상시키도록 바람직하게 최소화하거나 대체로 피한다. 적합한 비실리콘 오일의 압력은 약 1기압 하에서 약 25 ℃ 이하의 융점을 갖는다.
연속 실리콘 상에 사용하기 적합한 비실리콘 오일의 예로는 W/O 에멀젼, 예를 들어, 미네랄 오일, 식물성 오일, 합성 오일, 반합성 오일 등의 형태로 국소 퍼스널 케어 제품에서 화학 분야에 공지된 것들이다.
본 발명의 임의의 구현예 중 일부 구현예에 따른 유용한 국소 조성물은 분산된 수상의 약 30% 내지 90%, 보다 바람직하게 약 50% 내지 85%, 그리고 가장 바람직하게 약 70% 내지 80%를 포함한다. 상기 '분산된 상'은 용어 "분산된 상"은 당업자에게 잘 알려져 있고, 현탁되고 연속 상에 의해 둘러싸인 작은 입자 또는 액적으로 존재하는 것을 의미한다. 상기 분산된 상은 또한 내부 또는 불연속 상으로 알려져 있다. 상기 분산된 수상은 지속적인 오일 및/또는 실리콘 상에 의해 (본원에 기술된 바와 같이) 둘러싸인 작은 수성 입자 또는 액적의 분산이다. 상기 수상은 물 또는 하나 이상의 수용성 또는 분산성 성분과 물의 조합일 수 있다. 그러한 임의의 성분의 비제한적인 예로는 증점제, 산, 염기, 염, 킬레이트제, 고무, 수용성 또는 분산성 알코올 및 폴리올, 완충제, 방부제, 자외선차단제, 착색제 등을 포함한다.
본 발명의 일부 구현예의 국소 조성물은 일반적으로 상기 조성물의 중량에 대하여 분산된 수상의 물을 약 25% 내지 90%, 바람직하게 약 40% 내지 80%, 보다 바람직하게 약 60% 내지 약 80% 포함한다.
본 발명의 일부 구현예의 에멀젼은 유화제를 포함한다. 바람직한 구현예에서, 상기 조성물은 상기 조성물의 중량에 대하여 유화제를 약 0.1% 내지 약 10%, 보다 바람직하게 약 0.5% 내지 약 7.5%, 가장 바람직하게 약 1% 내지 약 5% 포함한다. 상기 유화제는 상기 오일 및/또는 실리콘 상 내의 수상을 분산하고 현탁하는 것을 돕는다. 선별된 유화제가 화학적으로 그리고 물리적으로 상기 조성물의 필수 성분과 잘 맞을 수 있다면 상기 조성물에 공지 또는 종래의 유화제가 사용될 수 있고, 원하는 분산 특성을 제공한다. 적합한 유화제는 국소 개인 케어 제품에 사용하기 위해 당업자에게 공지된 유화제를 포함한다.
적합한 유화제는 다양한 공지의 양이온성, 음이온성, 양성이온 및 양쪽성 계면활성제 중 임의의 하나를 포함한다. 알루 출판사에 의해 출판된 McCutcheon's. Detergents and Emulsifiers, North American Edition (1986); Ciotti 등에 의해 1991년 4월 30일에 출원된 미국특허 제 5,011,681호; Dixon 등에 의해 1983년 12월 20일에 출원된 미국특허 제 4,421,769호; 및 제 3,755,560호를 참조하시오. 상기 선택된 계면활성제는 조성물의 pH 및 존재하는 다른 성분에 의존한다. McCall 등에 의해 1992년 9월 29일에 출원된 미국 특허 제 5,151,209호; Steuri 등에 의해 1992년 9월 29일에 출원된 미국 특허 제 No. 5,151,210호; 미국 특허 제 5,120,532호; 미국 특허 제 4,387,090호; 미국 특허 제 3,155,591호; 미국 특허 제 3,929,678호; 미국 특허 제 3,959,461호; McCutcheon's, Detergents & Emulsifiers (North American edition 1979) M.C. 출판사; 및 Schwartz 등, Surface Active Agents, Their chemistry and Technology, New York: Interscience Publishers, 1949에 기술된 예들인 양이온성 계면활성제, 특히 디알킬 4급 암모늄 화합물이 바람직하다.
또한, 다른 유용한 양이온성 유화제는 아미노-아미드를 포함한다. 이러한 양이온성 유화제의 비제한적 예로 스테아르아미도프로필 PG-디모늄 클로라이드 포스페이트, 베헨아미도프로필 PG 디모늄 클로라이드, 스테아르아미도프로필 에틸디모늄 에토설페이트, 스테아르아미도프로필 디메틸 (미리스틸 아세테이트) 암모늄 클로라이드, 스테아르아미도프로필 디메틸 세테아릴 암모늄 토실레이트, 스테아르아미도프로필 디메틸 암모늄 클로라이드, 스테아르아미도프로필 디메틸 암모늄 락테이트, 및 이의 혼합물을 포함한다.
활성 성분(들)의 유효량 결정은 특히 본원에 제공된 상세한 설명에 비추어 충분히 당업자의 능력 내에 있다.
본 발명의 상기 방법에 사용된 임의의 조제의 경우, 치료 유효량 또는 투여 량은 인 비트로 분석으로부터 초기에 추정될 수 있다. 또한, 투여량은 생체 외 시스템 (예를 들어, 생체 외 피부, 모발 및/또는 네일) 또는 동물 모델에서 원하는 농도 또는 역가를 달성하기 위해 제형화될 수 있다. 그러한 정보는 인간에 유용한 투여량을 더욱 정확히 결정하기 위해 사용될 수 있다.
활성 성분(예, 리그닌 과산화효소, 및/또는 산화 매개체)의 경피 흡수를 향상시키기 위해, 하나 이상의 다수의 제제가 디메틸설폭사이드, 디메틸아세트아미드, 디메틸포름아미드, 계면활성제, 아존, 알코올, 아세톤, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜 및 부틸렌 글리콜을 포함하나, 이에 제한되지 않는 상기 조성물에 첨가될 수 있다.
본원에 기재된 상기 조성물은 예를 들면, 향료 및 영양 인자(예, 피부 또는 모발 영양 인자들)로 조성물을 풍부하게 하기 위해 추가되는 첨가 성분을 또한 포함할 수 있다.
이러한 성분은 올바른 의학적 판단 범위 내에서 독성, 불친화성, 불안정성, 알레르기 반응 등을 갖지 않으며 인체에 국소 사용하기에 적합하게 선택된다. 또한, 이러한 임의의 성분은 그것들이 본 발명의 활성 화합물의 효과를 허용할 수 없도록 변화시키지 않는 경우에 유용하다.
상기 CTFA 화장 성분 핸드북, 제2판(1992)에는 본 발명의 조성물에 사용하기 적합한 피부 케어 분야에서 흔히 사용되는 다양한 비제한적인 화장 성분을 설명한다. 이들 성분의 예로는 다음을 포함한다: 연마제, 흡수제, 향료, 안료, 색소/착색제, 에센셜 오일, 스킨 센세이트, 수렴제 등과 같은 미적 성분(예, 정향 오일, 멘톨, 장뇌, 유칼립투스 오일, 유제놀, 멘틸 락테이트, 하마메리스 증류액), 항여드름제, 고결 방지제, 소포제, 항균제(예, 아이오도프로필 부틸카바메이트), 산화 방지제, 결합제, 생물 첨가제, 완충제, 벌킹제, 킬레이트제, 화학 첨가제, 착색제, 화장용 수렴제, 화장용 살생제, 변성제, 약물 수렴제, 외부 진통제, 필름 형성 제 또는 물질, 예를 들면, 조성물의 필름-형성 성질 및 지속성을 돕기 위한 고분자(예, 에이코센 및 비닐 피롤리돈의 공중합체), 불투명화제, pH 조정제, 추진제, 환원제, 금속 이온 봉쇄제, 피부 컨디셔닝제(예, 보습제, 기타 및 피부밀폐형성분 포함제) 피부 진정 및/또는 치료제(예, 판테놀 및 유도체(예, 에틸 판텐올), 알로에 베라, 판토텐산 및 그 유도체, 알란토인, 비사보롤, 및 디포타슘 글리시리제이트, 피부 치료제, 증점제, 및 비타민 및 이의 유도체.
본원에 기술된 일부 구현예에 따른 조성물과 같이 생체 내에 이용을 위한 것으로, 상기 조성물은 고순도의 것이 바람직하고, 잠재적으로 유해한 오염 물질이 실질적으로 없다, 예, 적어도 국가 식품(NF) 등급, 일반적으로 적어도 분석 등급, 바람직하게는 적어도 약제학적 등급. 주어진 화합물을 사용하기 전에 합성해야 하는 범위 내에서, 이러한 합성 또는 후속 정제는 바람직하게 합성 또는 정제 과정 동안 사용될 수 있는 임의의 잠재적 오염된 독성 제제가 실질적으로 없는 제품을 만들어야 한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "약"은 ±10%이다.
용어 "함유한다", "함유하는", "포함한다", "포함하는", "갖는" 및 이의 활용은 "포함하지만 이에 제한되지 않음"을 의미한다.
용어 "이루어진(구성된)"은 "포함하고 제한됨"을 의미한다.
용어 "필수적으로 구성된"은, 추가 성분, 단계 및/또는 일부가 청구된 조성물, 방법 또는 구조의 기본 및 새로운 특성을 구체적으로 변경하지 않은 경우에만, 상기 조성물, 방법 또는 구조가 추가 성분, 단계 및/또는 일부를 포함할 수 있다는 것을 의미한다.
본원에 사용된 바와 같이, 단수 형태 "a", "an" 및 "the"는 문맥이 명백히 달리 지시하지 않는 한 복수 레퍼런스를 포함한다. 예를 들어, 용어 "화합물" 또는 "적어도 하나의 화합물"은 혼합물을 포함하는 복수 개의 화합물들을 포함할 수 있다.
본 출원에 걸쳐, 본 발명의 다양한 구현예는 다양한 구성 방식으로 나타낼 수 있다. 이는 다양한 구성 방식 내 명세서는 단지 편의와 간결성을 위한 것이며, 본 발명의 범위 상 완강한 한정으로 해석되어선 안되는 것을 이해해야 한다. 따라서, 상기 명세서 내 범위는 그 범위 내 모든 가능한 하위 범위뿐만 아니라 개별 수치를 명확히 개시된 것으로 간주되어야 한다. 예를 들면, 1 내지 6과 같은 명세서 내 범위는 1 내지 3, 1 내지 4, 1 내지 5, 2 내지 4, 2 내지 6, 3 내지 6 등과 같은 하위 범위, 뿐만 아니라 그 범위 내 개별 수치, 예를 들면 1, 2, 3, 4, 5 및 6으로 명확히 개시되는 것으로 간주되어야 한다.
수치 범위가 본원에 지시될 때마다, 상기 지시된 범위 내 임의의 인용 부호(분수 또는 정수)를 포함하는 것을 의미한다. 상기 문구 첫 번째 지시 수와 두 번째 지시 수 "간의 범위/범위인" 및 첫 번째 지시 수"에서" 두 번째 지시 수"까지의 범위/범위인" 것은 본원에서 상호교환적으로 사용되며, 첫 번째와 두 번째 지시 수들 및 이들 사이의 모든 분수와 정수를 포함하는 것을 의미한다.
본원에서 사용된 용어 "방법"은 주어진 태스크를 수행하기 위한 방식, 수단, 기술 및 과정을 의미하고, 이는 화학, 약리학, 생물학, 생화학 및 의학 분야의 실무자에 의해 공지된 또는 공지된 방식, 수단, 기술 및 과정으로부터 손쉽게 개발된 방식, 수단, 기술 및 과정을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
본원에 사용된 바와 같이, 상기 용어 "치료하는"은 없앰, 실질적으로 억제하는, 상태의 진행을 서서히 하거나 반전하는, 실질적으로 상태의 임상 또는 심미 증상을 개선하거나, 또는 실질적으로 상태의 임상 또는 심미 증상의 모습을 막는 것을 포함한다.
명확하도록 하기 위해 별개의 구현예의 문맥에 기술된 본 발명의 특정 기능이 또한 단일 구현예의 조합으로 제공될 수 있음을 인식해야 한다. 반대로, 간결하도록 하기 위해 단일 구현예의 문맥에 기술된 본 발명의 다양한 특징이 또한 개별적으로 또는 임의의 적절한 하위 조합으로 또는 본 발명의 다른 구현예에 적절하게 제공될 수 있다. 다양한 구현예의 문맥에 기술된 특정 기능은, 구현예가 해당 요소 없이 유효하지 않은 경우, 해당 구현예의 필수적인 기능을 고려해서는 안된다.
상술된 바와 같이, 그리고 특허청구범위 내 청구된 바와 같이, 본 발명의 다양한 구현예 및 양태는 하기 실시예에서 실험적으로 뒷받침된다.
실시예
상술한 내용과 함께 본 발명의 일부 구현예들을 예시하는 하기 실시예는 제한되지 않은 방식으로 설명한다.
일반적으로, 본원에 사용된 명명법 및 본 발명에서 활용되는 실험 절차는 분자, 생화학, 미생물학 및 재조합 DNA 기술을 포함한다. 이러한 기술은 철저히 문헌에 설명되어 있다. 예를 들면, "Molecular Cloning: A laboratory Manual" Sambrook et al., (1989); "Current Protocols in Molecular Biology" Volumes I-III Ausubel, R. M., ed. (1994); Ausubel et al., "Current Protocols in Molecular Biology", John Wiley and Sons, Baltimore, Maryland (1989); Perbal, "A Practical Guide to Molecular Cloning", John Wiley & Sons, New York (1988); Watson et al., "Recombinant DNA", Scientific American Books, New York; Birren et al. (eds) "Genome Analysis: A Laboratory Manual Series", Vols. 1-4, Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York (1998); 미국 특허 제 4,666,828호; 제 4,683,202호; 제 4,801,531호; 제 5,192,659호 및 제 5,272,057호에 기재된 방법; "Cell Biology: A Laboratory Handbook", Volumes I-III Cellis, J. E., ed. (1994); "Current Protocols in Immunology" Volumes I-III Coligan J. E., ed. (1994); Stites et al. (eds), "Basic and Clinical Immunology" (8th Edition), Appleton & Lange, Norwalk, CT (1994); Mishell and Shiigi (eds), "Selected Methods in Cellular Immunology", W. H. Freeman and Co., New York (1980) 참조; 이용 가능한 면역분석은 광범위하게 특허 및 과학 문헌에 기술되어 있다, 예를 들면, 미국 특허 제 3,791,932호; 제 3,839,153호; 제 3,850,752호; 제 3,850,578호; 제 3,853,987호; 제 3,867,517호; 제 3,879,262호; 제 3,901,654호; 제 3,935,074호; 제 3,984,533호; 제 3,996,345호; 제 4,034,074호; 제 4,098,876호; 제 4,879,219호; 제 5,011,771호 및 제 5,281,521호; "Oligonucleotide Synthesis" Gait, M. J., ed. (1984); "Nucleic Acid Hybridization" Hames, B. D., and Higgins S. J., eds. (1985); "Transcription and Translation" Hames, B. D., and Higgins S. J., Eds. (1984); "Animal Cell Culture" Freshney, R. I., ed. (1986); "Immobilized Cells and Enzymes" IRL Press, (1986); "A Practical Guide to Molecular Cloning" Perbal, B., (1984) and "Methods in Enzymology" Vol. 1-317, Academic Press; "PCR Protocols: A Guide To Methods And Applications", Academic Press, San Diego, CA (1990); Marshak et al., "Strategies for Protein Purification and Characterization - A Laboratory Course Manual" CSHL Press (1996); 참조, 충분히 본원에 설명된 것처럼 모두 참고문헌으로 인용된다. 다른 일반적인 참조는 이 문서에서 제공된다. 그 안의 상기 절차는 공지된 것으로 간주되고 독자의 편의를 위해 제공된다. 그 안에 포함된 모든 내용은 본원에 참고로 인용된다.
재료 및 방법
재료:
글루코스 산화효소(안정제-무) 시그마-알드리치로부터 얻었다;
다음 약간의 수정과 함께, 국제 특허 공개 WO2004/052275호에 기술된 바와 같이, 리그닌 과산화효소 동종효소 H1(P. chrysosporium 유래)를 제조하였다: 7.5*104 포자/㎖를 가진 포자 용액을 직접 성장 배지에 섞었다; 상기 성장 배지에 효모 추출물 및 영양액을 추가로 포함하였다; 그리고 발효기의 통기는 150 rpm의 교반과 함께 4 리터/분이었다(다른 백색 부후균 유래 리그닌 과산화효소는 또한 본 발명의 구현예에 사용하기 위해 고려됨);
베라트릴 알코올은 플루카로부터 얻었다.
크림 제형:
예시적인 제형은 두 개의 상보적 크림의 형태로 제조하였다 :
예시적인 효소 크림은 25 units/gram LIP 동종효소 H1 분획, 25 units/gram GOX 및 0.01 중량% 베라트릴 알코올(크림의 6 mmol/kg)을 포함하고, 상기 상보적 활성제 크림은 글루코스(크림의 3.5 mmol/kg)를 포함한다.
비교를 위해, 상보적 효소 크림과 활성제 크림은 비-효소적으로 생성된 H2O2에 의한 LIP의 활성화용으로 제형화되었다. 이 효소 크림은 GOX 없이 LIP 동종효소 H1 분획(25 units/gram) 및 베라트릴 알코올(크림의 6 mmol/kg)을 포함하고, 상기 상보적 활성제 크림은 H2O2(크림의 3.53 mmol/kg)를 포함하였다.
크림의 다른 성분(예, 담체)는 하기 표 5에 기재된 바와 같다.
예시 크림의 비활성 성분
성분 중량% 상품명 및 기타 세포 사항
글리세린 8.0 % Superol® V
프로필렌 글리콜 2.0 %
디메치콘 1.0 % xiameter® pmx-200
디카프릴일 카보네이트 1.0 % Cetiol® CC
Paraffinum liquidum 0.50 % Draekol® 19
세틸 알코올 0.50 % Lanette® C16 98-100MY
스테아릴 알코올 0.50 % Lanette® C18 98-100MY
폴리이소부텐 0.200 - 0.213 % 0.80 - 0.85 % Sepiplus™ 400
(25 % 폴리이소부텐, 5 % 폴리소르베이트 20 및 70 % 폴리아크릴레이트 13)
폴리소르베이트 20 0.040 - 0.043 %
폴리아크릴레이트 13 0.560 - 0.595 %
페녹시에탄올 0.50 %
클로르페네신 0.30 % Elestab® CPN
Caesalpinia spinosa gum 0.30 % Solagum™ Tara
시트르산 0.011- 0.040 % 수용액으로 첨가
탈이온수 To 100 %
VAS(Visual analogue scale):
VAS는 특성 또는 용이하게 직접 측정될 수 없는 연속된 값들을 전체에 걸쳐 범위로 추정되는 애티튜트를 측정하는데 사용되는 방법이다. 상기 VAS는 후술한 바와 같이, 각 말단에 용어 설명에 의해 기반을 둔 수평선으로 나타내었다. 상기 스케일의 말단은 수치 0 (가장 바람직한 결과) 및 10 (가장 바람직하지 않은 결과)에 의해 표시되었다. 통계적 유의성은 반복 측정 ANOVA에 따라 p 값을 계산하여 결정 하였다. VAS는 다음의 각가의 변수를 평가하는데 사용되었다:
색소 침착의 균일성 (기술자에 의해 "균일함, 고름" 및 고르지 않음, 부스럼 투성이, 얼룩덜룩함" 고정됨);
투명성 (기술자에 의해 "깨끗, 고름" 및 "칙칙함, 불투명" 고정됨);
라이트닝/브라이트닝 (기술자에 의해 "밝은 외모" 및 "칙칙함, 무광" 고정됨);
피부 톤 (기술자에 의해 "고름, 건강한 피부색" 및 "고르지 않음, 변색된 외모" 고정됨);
발광도 (기술자에 의해 "빛남, 발광 모습" 및 "칙칙함, 무광, 누르스름한 외모" 고정됨); 및
전반적인 외모 (기술자에 의해 "건강해 보임" 및 "건강하지 않게 보임" 고정됨).
디지털 사진:
치료된 대상체 얼굴의 디지털 사진은 안정하고 일정한 주변 조명 환경에 놓여 VISIA®-CR 얼굴 영상 시스템을 이용하여 수행되었다. 상기 시스템은 각 대상체에 의한 상이한 방문을 위해 동일한 위치/방향으로 남아 있게 하였다.
실시예 1
크림 제형에서의 리그닌 과산화효소, 글루코스 산화효소 및 글루코스에 의한 멜라닌 산화
과산화수소의 효소원에 의해 활성화 시 피부를 라이트닝 하는 리그닌 과산화효소(LIP)의 능력을 평가하기 위해, LIP, 베라트릴 알코올 및 GOX(글루코스 산화효소)를 포함하는 효소 크림, 그리고 글루코스를 포함하는 활성제 크림을 상술한 바와 같이 제조하였으며, 가용화된 멜라닌에 대해 시험하였다. 결과는 상술한 바와 같이 제조된 LIP 및 베라트릴 알코올을 포함하는 효소 크림 및 과산화수소를 포함하는 활성제 크림으로 얻어 비교하였다.
각 효소 크림 0.3 g을 먼저 잿빛 흑색을 나타내는 멜라닌(140 μg/㎖)과 혼합하었다. 그런 다음 상기 상보적 활성제 크림 0.3 g을 첨가하였다.
도 1에 나타낸 바와 같이, 각 효소 크림 제형의 색상은 활성제 크림 첨가 직후 잿빛 흑색에서 베이지로 변화하였다.
이러한 결과는 종래의 비-효소적 H2O2 활성 시스템으로 얻어진 것으로 비교할 수 있는 정도로, LIP는 GOX-글루코스 시스템에 의해 효소로 생성된 H2O2에 의해 효율적으로 활성화된 것을 나타낸다.
실시예 2
크림 제형으로 21일간 치료시 리그닌 과산화효소, 글루코스 산화요소 및 글루코스에 의한 피부 라이트닝
본원에 기술된 대표적인 효소 및 활성제 크림을 생체 내에서 피부 라이트닝 하는 능력에 대해 시험하였다.
리그닌 과산화효소, 글루코스 산화효소 및 글루코스를 10명의 여성 피험자 (23-65세)에 투여하였으며, 이 중 8명은 상기 연구를 완료하였다.
조성물은 다음 처방에 따라 얼굴 피부에 도포하였다 :
아침
단계 1 - ELURETM 세안
단계 2 - 리그닌 과산화효소 및 글루코스 산화효소를 포함하는 크림(재료 및 방법 섹션에 기술된 바와 같이)
단계 3 - 글루코스를 포함하는 활성제 크림(재료 및 방법 섹션에 기술된 바와 같이)
단계 4 - SPF 30 자외선차단제(새로운 멜라닌 형성을 줄이기 위함)
저녁
단계 1 - 세안
단계 2 - 리그닌 과산화효소 및 글루코스 산화효소를 포함하는 크림
단계 3 - 글루코스를 포함하는 활성제 크림
리그닌 과산화효소 및 글루코스 산화효소를 포함하는 상기 크림을 피부에 도포하고 흡수한 후, 상기 활성제 크림을 도포하였다.
피부색은 피부색에 대해 멜라닌 및 홍반(헤모글로빈) 기여를 평가하기 위해 사용되는 Mexameter® 피부 비색계를 사용하여 측정하였다. 피부 색이 다양한 부위 (이마, 오른쪽 볼, 왼쪽 볼, 관심있는 부위)에서 측정하였다. 각 부위의 피부색은 상이한 지점에서 측정하고, 그 결과로 평균을 내었다. 피부색은 치료 0일째(즉, 치료 전), 7일째 및 21일째 평가하였다.
도 2a 내지 도 9b에 나타낸 바와 같이, 상기 치료는 시험한 모든 8명 피험자에서 멜라닌 함량이 적어도 일부 감소된 결과를 나타내었고, 상기 멜라닌 함량의 감소는 일반적으로 치료 기간에 의존하였다(도 2a, 6a, 7a, 9a).
추가로 나타낸 바와 같이, 상기 치료는 홍반 수준에 임의의 일관된 영향을 미치지 않았다.
도 3a, 도 5a 및 도 6a에 나타낸 바와 같이, 상기 치료는 피부 대부분 지점에서 멜라닌 함량의 감소 결과를 나타내었다.
한 명의 피험자(도 9b)에서, 21일에 볼에서 홍반의 증가가 관찰되었지만, 치료와 관련없는 자극(얼룩진 아이 쉐도우 제거에 사용된 토너에 의한 자극)에 의한 것으로 판단되었다.
이들 결과는 리그닌 과산화효소, 글루코오스 산화효소 및 글루코스의 치료가 상당한 피부 자극 없이, 멜라닌 함량이 감소됨으로써 피부 라이트닝에 효과적임을 나타낸다.
실시예 3
크림 제형으로 8주간 치료시 리그닌 과산화효소, 글루코스 산화요소 및 글루코스에 의한 피부 라이트닝
실시예 2에 기술된 제형 및 하루 섭생으로 기미를 포함하는 마일드하고 확산된 색소침착을 가진 여성 지원자 28명(33-50세)을 8주 동안 시험하였다. 다음 조건 중 하나를 충족하는 피험자를 제외시켰다: 민감한, 과민성, 또는 아토피성 피부; 화장품이나 피부 세정제에 대한 알러지 히스토리; 연구 결과를 방해할 수 있는 질병/상태 또는 공전하는 병에 대한 히스토리; 임신, 임신 예정, 또는 모유 수유; 테스트를 위한 부위에서 피부 질환, 사마귀, 여드름, 붉은 반점, 모세 혈관 확장증 등을 포함하는 피부 문제; 최근 3개월 이내에 피부과 치료, 또는 잠재적인 방해 절차; 임상 피부 관리 연구에 현재 참여하거나 최근 3개월 이내 참여; 임상 시험에 등록하기 부적합할 수 있다는 의사의 판단.
상기 제형의 효과는 다음 기술을 사용하여, 치료 개시로부터 0, 4, 6, 8주에 피부 착색 평가에 의해 평가하였다 :
1) Mexameter® 피부 비색계를 사용하여 기구 측정;
2) 피부과 의사에 의한 VAS 평가;
3) VISIA®-CR 얼굴 이미징 시스템으로 디지털 사진; 및
4) 피험자에 의한 자가-평가.
도 10a 및 도 10b에 나타낸 바와 같이, 상기 제형은 치료 8주에 걸쳐 착색된 피부(도 10a) 및 비착색된 피부(도 10b)에서 점차 멜라민 지수가 낮아졌다(Mexameter® 피부 비색계를 사용하여 결정).
또한, 4주 후 착색된 피부에서 멜라닌 지수는 28명 중 22명(78.6%)이 낮아졌고, 비착색된 피부에서 멜라닌 지수는 28명 중 20명(71.4%)이 낮아졌다. 6, 8주 후, 착색된 피부 및 비착색된 피부에서 각각의 멜라닌 지수는 28명 중 27명(96.4%)이 낮아졌다.
치료 피부의 색소 침착의 균일성, 투명성, 라이트닝/브라이트닝. 톤, 발광, 전반적인 외모를 평가하기 위해 재료 및 방법 섹선에 상술한 바와 같이, 치료 과정에 걸쳐 다양한 시점에서 VAS를 사용하였다.
도 11-16 뿐만 아니라 표 6과 표 7에 나타낸 바와 같이, 상기 제형은 치료 피부의 색소 침착의 균일성(도 11). 투명성(도 12), 라이트닝/브라이트닝(도 13). 톤(도 14), 발광(도 15) 및 전반적인 외모(도 16)를 치료 8주에 걸쳐 점차 개선되었다.
도 11-16에 나타낸 각각의 시점에서 평균 개선 정도를 표 6에 나타내었다:
치료 개시에 상대적인 피부 외모의 평균 개선 및 통계적 유의성(n=28)
개선 (%)
(p value)
4주 후 6주 후 8주 후
색소침착의 균일성 1.26 %
(0.223)		 2.96 %
(0.106)		 5.47 %
(0.046)
투명성 4.00 %
(0.004)		 4.65 %
(0.033)		 8.59 %
(0.002)
라이트닝/브라이트닝 9.28 %
(0.000)		 8.09 %
(0.001)		 11.52 %
(0.000)
톤 8.03 %
(0.000)		 6.13 %
(0.015)		 12.53 %
(0.000)
발광 11.64 %
(0.000)		 12.15 %
(0.000)		 18.38 %
(0.000)
전반적인 외모 14.25 %
(0.000)		 13.21 %
(0.000)		 21.57 %
(0.000)
도 17은 상기 제형으로 8주 동안 치료한 개별 피험자의 얼굴 안색 변화를 보여준다.
치료 4, 6, 8주 후, 전체 얼굴 안색의 투명성, 라이트닝/브라이트닝. 피부 톤, 발광 및/또는 전반적인 외모에 대한 유의적인 개선도를 보여주었던 28명 피험자의 퍼센티지는 표 7에 나타내었다.
치료 개시에 상대적인 피부 외모의 개선도를 보여주는 피험자 퍼센티지(n=28)
4주 후 6주 후 8주 후
색소침착의 균일성 46.4 %
(13/28)		 60.7 %
(17/28)		 67.9 %
(19/28)
투명성 67.9 %
(19/28)		 64.3 %
(18/28)		 67.9 %
(19/28)
라이트닝/브라이트닝 89.3 %
(25/28)		 78.6 %
(22/28)		 75.0 %
(21/28)
톤 78.6 %
(22/28)		 67.9 %
(19/28)		 82.1 %
(23/28)
발광 92.9 %
(26/28)		 92.9 %
26/28)		 96.4 %
(27/28)
전반적인 외모 92.9 %
(26/28)		 82.1 %
(23/28)		 89.3 %
(25/28)
표 8에 나타낸 바와 같이, 상기 제형에 대한 피험자의 만족도는 치료 8주에 걸쳐 점차 증가하였다(설문지에 의한 자자 평가에 따라 결정된 바와 같이).
"전반적으로 당신이 사용한 제품에 만족하십니까?"라는 질문에 대한 피험자의 응답
응답 0 주 4 주 6 주 8 주
n % n % n % n %
강하게 동의하지 않음(1) 0 0.0 0 0.0 0 0.0 0 0.0
동의하지 않음 (2) 0 0.0 1 3.6 0 0.0 1 3.6
보통 (3) 27 96.4 9 32.1 8 28.6 6 21.4
동의함(4) 1 3.6 18 64.3 16 57.1 18 64.3
강하게 동의함 (5) 0 0.0 0 0.0 4 14.3 3 10.7
더구나, 표 9에 나타내는 바와 같이, 상기 제형에 대한 피험자의 만족도는 치료 8 주에 걸쳐 설문지의 각 질문 항목에 대한 응답으로 나타내었다.
구체적인 설문 항목에 대한 피험자 응답 (n=28)
설문 항목 응답 0 weeks 4 weeks 6 weeks 8 weeks
n % n % n % n %
전반적으로, 도포 후 피부 밝기 개선 효과를 느낍니까? 강하게 동의하지 않음 (1) 0 0.0 0 0.0 0 0.0 0 0.0
동의하지 않음 (2) 0 0.0 0 0.0 0 0.0 1 3.6
보통 (3) 26 92.9 11 39.3 4 14.3 3 10.7
동의함 (4) 2 7.1 15 53.6 23 82.1 22 78.6
강하게 동의함 (5) 0 0.0 2 7.1 1 3.6 2 7.1
착색된 부위의 피부색은 밝아졌습니까?
 강하게 동의하지 않음 (1) 0 0.0 0 0.0 0 0.0 0 0.0
동의하지 않음 (2) 0 0.0 0 0.0 0 0.0 2 7.1
보통 (3) 27 96.4 17 60.7 11 39.3 8 28.6
동의함 (4) 1 3.6 10 35.7 16 57.1 17 60.7
강하게 동의함(5) 0 0.0 1 3.6 1 3.6 1 3.6
착색된 부위의 변화를 느낄 수 있습니까? 강하게 동의하지 않음(1) 0 0.0 0 0.0 0 0.0 0 0.0
동의하지 않음 (2) 1 3.6 0 0.0 0 0.0 1 3.6
보통 (3) 27 96.4 19 67.9 15 53.6 15 53.6
동의함 (4) 0 0.0 9 32.1 12 42.9 10 35.7
강하게 동의함 (5) 0 0.0 0 0.0 1 3.6 2 7.1
당신의 피부는 사용 후 더 부드러워진 느낌입니까?
강하게 동의하지 않음 (1) 0 0.0 0 0.0 0 0.0 0 0.0
동의하지 않음 (2) 0 0.0 0 0.0 0 0.0 1 3.6
보통 (3) 23 82.1 10 35.7 8 28.6 6 21.4
동의함 (4) 5 17.9 18 64.3 18 64.3 19 67.9
강하게 동의함 (5) 0 0.0 0 0.0 2 7.1 2 7.1

이 제품이 이전에 사용한 제품 보다 더 효과적입니까?		 강하게 동의하지 않음 (1) 0 0.0 0 0.0 0 0.0 0 0.0
동의하지 않음(2) 0 0.0 0 0.0 0 0.0 1 3.6
보통 (3) 27 96.4 11 39.3 9 32.1 9 32.1
동의함 (4) 0 0.0 17 60.7 17 60.7 16 57.1
강하게 동의함 (5) 1 3.6 0 0.0 2 7.1 2 7.1
다른 사람에게 이 제품을 추천하시겠습니까? 강하게 동의하지 않음 (1) 0 0.0 1 3.6 0 0.0 0 0.0
동의하지 않음 (2) 0 0.0 1 3.6 0 0.0 1 3.6
보통 (3) 27 96.4 9 32.1 10 35.7 8 28.6
동의함 (4) 0 0.0 16 57.1 16 57.1 14 50.0
강하게 동의함 (5) 1 3.6 1 3.6 2 7.1 5 17.9
출시되면 이 제품을 구입하시겠습니까? 강하게 동의하지 않음 (1) 0 0.0 2 7.1 0 0.0 0 0.0
동의하지 않음(2) 0 0.0 0 0.0 0 0.0 1 3.6
보통 (3) 25 89.3 8 28.6 8 28.6 7 25.0
동의함 (4) 3 10.7 17 60.7 17 60.7 16 57.1
강하게 동의함 (5) 0 0.0 1 3.6 3 10.7 4 14.3
추가로 자가-평가에 의해 확인된 바와 같이, 상기 제형을 사용하는 동안 어떠한 불편함 또는 알러지 반응에 대해서는 28명의 피험자 중 아무도 보고되지 않았다.
이러한 결과는, 리그닌 과산화효소, 글루코스 산화효소 및 글루코스의 치료가 피부의 상당한 자극을 일으키지 않고, 멜라닌 함량을 감소시킴으로써 피부 라이트닝에 효과적임을 확인하고, 또한 치료 과정 동안 치료된 피부의 안색이 계속 향상되는 것을 나타낸다.
본 발명이 이의 특정 구현예와 관련하여 설명되었지만, 많은 대안, 변경 및 변형이 당업자에게 명백할 것임은 자명하다. 따라서, 이는 첨부된 청구 범위의 사상 및 넓은 범위에 포함되는 모든 대안, 변경 및 변형과 같은 모두를 포괄하도록 의도된다.
각각의 개별적인 간행물, 특허 또는 특허 출원이 구체적으로 그리고 개별적으로 참조로 본원에 포함되는 것으로 나타낸 것과 같은 정도로, 본 명세서에 언급된 모든 간행물, 특허 및 특허 출원은 본원에서 본 명세서에 참고문헌으로 인용되어 있다. 게다가, 본 출원에서 임의의 참조문헌의 인용 또는 식별은 그러한 참조문헌이 본 발명에 대한 선행기술로 사용될 수 있음을 인정하는 것으로 해석되어서는 안된다. 섹션 제목이 사용되는 정도로 반드시 제한하는 것으로 해석되어서는 안된다.
<110> Rakuto Bio Technologies Ltd. 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Phe Thr Gly Arg 145 150 155 160 Lys Pro Ala Thr Gln Pro Ala Pro Asp Gly Leu Val Pro Glu Pro Phe 165 170 175 His Thr Val Asp Gln Ile Ile Ala Arg Val Asn Asp Ala Gly Glu Phe 180 185 190 Asp Glu Leu Glu Leu Val Trp Met Leu Ser Ala His Ser Val Ala Ala 195 200 205 Val Asn Asp Val Asp Pro Thr Val Gln Gly Leu Pro Phe Asp Ser Thr 210 215 220 Pro Gly Ile Phe Asp Ser Gln Phe Phe Val Glu Thr Gln Phe Arg Gly 225 230 235 240 Thr Leu Phe Pro Gly Ser Gly Gly Asn Gln Gly Glu Val Glu Ser Gly 245 250 255 Met Ala Gly Glu Ile Arg Ile Gln Thr Asp His Thr Leu Ala Arg Asp 260 265 270 Ser Arg Thr Ala Cys Glu Trp Gln Ser Phe Val Asn Asn Gln Ser Lys 275 280 285 Leu Val Asp Asp Phe Gln Phe Ile Phe Leu Ala Leu Thr Gln Leu Gly 290 295 300 Gln Asp Pro Asn Ala Met Thr Asp Cys Ser Asp Val Ile Pro Leu Ser 305 310 315 320 Lys Pro Ile Pro Gly Asn Gly Pro Phe Ser Phe Phe Pro Pro Gly Lys 325 330 335 Ser His Ser Asp Ile Glu Gln Ala Cys Ala Glu Thr Pro Phe Pro Ser 340 345 350 Leu Val Thr Leu Pro Gly Pro Ala Thr Ser Val Ala Arg Ile Pro Pro 355 360 365 His Lys Ala 370 <210> 2 <211> 462 <212> PRT <213> Mycobacterium tuberculosis H37Rv <400> 2 Met Ala Gln Ala Pro His Ile His Arg Thr Arg Tyr Ala Lys Cys Gly 1 5 10 15 Asp Met Asp Ile Ala Tyr Gln Val Leu Gly Asp Gly Pro Thr Asp Leu 20 25 30 Leu Val Leu Pro Gly Pro Phe Val Pro Ile Asp Ser Ile Asp Asp Glu 35 40 45 Pro Ser Leu Tyr Arg Phe His Arg Arg Leu Ala Ser Phe Ser Arg Val 50 55 60 Ile Arg Leu Asp His Arg Gly Val Gly Leu Ser Ser Arg Leu Ala Ala 65 70 75 80 Ile Thr Thr Leu Gly Pro Lys Phe Trp Ala Gln Asp Ala Ile Ala Val 85 90 95 Met Asp Ala Val Gly Cys Glu Gln Ala Thr Ile Phe Ala Pro Ser Phe 100 105 110 His Ala Met Asn Gly Leu Val Leu Ala Ala Asp Tyr Pro Glu Arg Val 115 120 125 Arg Ser Leu Ile Val Val Asn Gly Ser Ala Arg Pro Leu Trp Ala Pro 130 135 140 Asp Tyr Pro Val Gly Ala Gln Val Arg Arg Ala Asp Pro Phe Leu Thr 145 150 155 160 Val Ala Leu Glu Pro Asp Ala Val Glu Arg Gly Phe Asp Val Leu Ser 165 170 175 Ile Val Ala Pro Thr Val Ala Gly Asp Asp Val Phe Arg Ala Trp Trp 180 185 190 Asp Leu Ala Gly Asn Arg Ala Gly Pro Pro Ser Ile Ala Arg Ala Val 195 200 205 Ser Lys Val Ile Ala Glu Ala Asp Val Arg Asp Val Leu Gly His Ile 210 215 220 Glu Ala Pro Thr Leu Ile Leu His Arg Val Gly Ser Thr Tyr Ile Pro 225 230 235 240 Val Gly His Gly Arg Tyr Leu Ala Glu His Ile Ala Gly Ser Arg Leu 245 250 255 Val Glu Leu Pro Gly Thr Asp Thr Leu Tyr Trp Val Gly Asp Thr Gly 260 265 270 Pro Met Leu Asp Glu Ile Glu Glu Phe Ile Thr Gly Val Arg Gly Gly 275 280 285 Ala Asp Ala Glu Arg Met Leu Ala Thr Ile Met Phe Thr Asp Ile Val 290 295 300 Gly Ser Thr Gln His Ala Ala Ala Leu Gly Asp Asp Arg Trp Arg Asp 305 310 315 320 Leu Leu Asp Asn His Asp Thr Ile Val Cys His Glu Ile Gln Arg Phe 325 330 335 Gly Gly Arg Glu Val Asn Thr Ala Gly Asp Gly Phe Val Ala Thr Phe 340 345 350 Thr Ser Pro Ser Ala Ala Ile Ala Cys Ala Asp Asp Ile Val Asp Ala 355 360 365 Val Ala Ala Leu Gly Ile Glu Val Arg Ile Gly Ile His Ala Gly Glu 370 375 380 Val Glu Val Arg Asp Ala Ser His Gly Thr Asp Val Ala Gly Val Ala 385 390 395 400 Val His Ile Gly Ala Arg Val Cys Ala Leu Ala Gly Pro Ser Glu Val 405 410 415 Leu Val Ser Ser Thr Val Arg Asp Ile Val Ala Gly Ser Arg His Arg 420 425 430 Phe Ala Glu Arg Gly Glu Gln Glu Leu Lys Gly Val Pro Gly Arg Trp 435 440 445 Arg Leu Cys Val Leu Met Arg Asp Asp Ala Thr Arg Thr Arg 450 455 460 <210> 3 <211> 1389 <212> DNA <213> Mycobacterium tuberculosis H37Rv <400> 3 gtggcgcagg ctccccacat tcacaggacc cgctacgcaa aatgcggcga catggatatc 60 gcctaccagg tgctgggtga cggtccgacg gatctgctgg tgttgccggg gccgttcgtg 120 ccgatcgact cgatcgacga cgagccatcg ctgtaccgtt tccatcgccg tcttgcgtca 180 ttcagcaggg tgatccgcct cgaccatcgt ggggtcggcc tgtcgtcacg gctcgccgcg 240 ataaccacgc tggggccgaa gttctgggcc caggacgcga tcgcggtgat ggacgcggtc 300 ggatgcgagc aggcgacaat tttcgcgccc agtttccacg ccatgaacgg acttgttctc 360 gccgccgact accccgagcg ggtgcgcagc ctgatcgtcg tcaacggctc ggcgcgccca 420 ctatgggcgc ccgactaccc ggtaggcgcc caggttcgtc gagctgaccc gttcctgacg 480 gtggcgctgg aaccggatgc cgtcgagcgg ggcttcgacg tgctgagcat cgtggctcct 540 accgtggccg gagatgacgt gtttcgagcc tggtgggatc tcgccggcaa ccgtgccgga 600 ccgccgagca ttgcccgtgc cgtttcaaag gtcatagccg aggccgacgt acgagatgtc 660 ttgggacaca tcgaggctcc aacactgatc ttgcaccgtg tcggatcgac gtacatcccg 720 gtgggacatg gtcgctacct cgccgagcac atcgctggat cccgcttggt cgaactaccc 780 ggcaccgata ccctgtactg ggttggcgac accgggccga tgctcgatga aatcgaggaa 840 ttcatcaccg gcgtgcgcgg cggcgctgac gccgagcgca tgcttgccac catcatgttt 900 accgacatcg tcggctcgac ccagcacgcc gccgcgctcg gcgacgaccg atggcgcgac 960 ctgttggaca accacgacac catcgtgtgc cacgaaatcc agcggttcgg cggtcgcgaa 1020 gtgaacacgg ccggtgacgg tttcgtcgcg acgttcacca gtccgagtgc cgcgatcgcg 1080 tgcgcggacg acatcgtcga cgcggtcgcc gcgctgggta ttgaggtccg gatcggtatt 1140 catgcgggcg aggtcgaggt gcgcgatgcc tcgcacggta ccgacgtcgc cggcgtggcc 1200 gtgcatatcg gtgcgcgcgt ctgcgcgctg gccggaccca gtgaggtgct ggtgtcctcg 1260 accgtgcgag acatcgtcgc cggatcacgg caccggttcg ccgagcgtgg tgagcaggaa 1320 ctcaagggcg taccgggcag atggcggcta tgcgtgctca tgcgcgacga cgccacccgc 1380 acgcgctaa 1389 <210> 4 <211> 462 <212> PRT <213> Mycobacterium bovis AF2122/97 <400> 4 Met Ala Gln Ala Pro His Ile His Arg Thr Arg Tyr Ala Lys Cys Gly 1 5 10 15 Asp Met Asp Ile Ala Tyr Gln Val Leu Gly Asp Gly Pro Thr Asp Leu 20 25 30 Leu Val Leu Pro Gly Pro Phe Val Pro Ile Asp Ser Ile Asp Asp Glu 35 40 45 Pro Ser Leu Tyr Arg Phe His Arg Arg Leu Ala Ser Phe Ser Arg Val 50 55 60 Ile Arg Leu Asp His Arg Gly Val Gly Leu Ser Ser Arg Leu Ala Ala 65 70 75 80 Ile Thr Thr Leu Gly Pro Lys Phe Trp Ala Gln Asp Ala Ile Ala Val 85 90 95 Met Asp Ala Val Gly Cys Glu Gln Ala Thr Ile Phe Ala Pro Ser Phe 100 105 110 His Ala Met Asn Gly Leu Val Leu Ala Ala Asp Tyr Pro Glu Arg Val 115 120 125 Arg Ser Leu Ile Val Val Asn Gly Ser Ala Arg Pro Leu Trp Ala Pro 130 135 140 Asp Tyr Pro Val Gly Ala Gln Val Arg Arg Ala Asp Pro Phe Leu Thr 145 150 155 160 Val Ala Leu Glu Pro Asp Ala Val Glu Gln Gly Phe Asp Val Leu Ser 165 170 175 Ile Val Ala Pro Thr Val Ala Gly Asp Asp Val Phe Arg Ala Trp Trp 180 185 190 Asp Leu Ala Gly Asn Arg Ala Gly Pro Pro Ser Met Ala Arg Ala Val 195 200 205 Ser Lys Val Ile Ala Glu Ala Asp Val Arg Asp Val Leu Gly His Ile 210 215 220 Glu Ala Pro Thr Leu Ile Leu His Arg Val Gly Ser Thr Tyr Ile Pro 225 230 235 240 Val Gly His Gly Arg Tyr Leu Ala Glu His Ile Ala Gly Ser Arg Leu 245 250 255 Val Glu Leu Pro Gly Thr Asp Thr Leu Tyr Trp Val Gly Asp Thr Gly 260 265 270 Pro Met Leu Asp Glu Ile Glu Glu Phe Ile Thr Gly Val Arg Gly Gly 275 280 285 Ala Asp Ala Glu Arg Met Leu Ala Thr Ile Met Phe Thr Asp Ile Val 290 295 300 Gly Ser Thr Gln His Ala Ala Ala Leu Gly Asp Asp Arg Trp Arg Asp 305 310 315 320 Leu Leu Asp Asn His Asp Thr Ile Val Cys His Glu Ile Gln Arg Phe 325 330 335 Gly Gly Arg Glu Val Asn Thr Ala Gly Asp Gly Phe Val Ala Thr Phe 340 345 350 Thr Ser Pro Ser Ala Ala Ile Ala Cys Ala Asp Asp Ile Val Asp Ala 355 360 365 Val Ala Ala Leu Gly Ile Glu Val Arg Ile Gly Ile His Ala Gly Glu 370 375 380 Val Glu Val Arg Asp Ala Ser His Gly Thr Asp Val Ala Gly Val Ala 385 390 395 400 Val His Ile Gly Ala Arg Val Cys Ala Leu Ala Gly Pro Ser Glu Val 405 410 415 Leu Val Ser Ser Thr Val Arg Asp Ile Val Ala Gly Ser Arg His Arg 420 425 430 Phe Ala Glu Arg Gly Glu Gln Glu Leu Lys Gly Val Pro Gly Arg Trp 435 440 445 Arg Leu Cys Val Leu Met Arg Asp Asp Ala Thr Arg Thr Arg 450 455 460 <210> 5 <211> 1389 <212> DNA <213> Mycobacterium bovis AF2122/97 <400> 5 gtggcgcagg ctccccacat tcacaggacc cgctacgcaa aatgcggcga catggatatc 60 gcctaccagg tgctgggtga cggtccgacg gatctgctgg tgttgccggg gccgttcgtg 120 ccgatcgact cgatcgacga cgagccatcg ctgtaccgtt tccatcgccg tcttgcgtca 180 ttcagcaggg tgatccgcct cgaccatcgt ggggtcggcc tgtcgtcacg gctcgccgcg 240 ataaccacgc tggggccgaa gttctgggcc caggacgcga tcgcggtgat ggacgcggtc 300 ggatgcgagc aggcgacaat tttcgcgccc agtttccacg ccatgaacgg acttgttctc 360 gccgccgact accccgagcg ggtgcgcagc ctgatcgtcg tcaacggctc ggcgcgccca 420 ctatgggcgc ccgactaccc ggtaggcgcc caggttcgtc gagctgaccc gttcctgacg 480 gtggcgctgg aaccggatgc cgtcgagcag ggcttcgacg tgctgagcat cgtggctcct 540 accgtggccg gagatgacgt gtttcgagcc tggtgggatc tcgccggcaa ccgtgccgga 600 ccgccgagca tggcccgtgc cgtttcaaag gtcatagccg aggccgacgt acgagatgtc 660 ttgggacaca tcgaggctcc aacactgatc ttgcaccgtg tcggatcgac gtacatcccg 720 gtgggacatg gtcgctacct cgccgagcac atcgctggat cccgcttggt cgaactaccc 780 ggcaccgata ccctgtactg ggttggcgac accgggccga tgctcgatga aatcgaggaa 840 ttcatcaccg gcgtgcgcgg cggcgctgac gccgagcgca tgcttgccac catcatgttt 900 accgacatcg tcggctcgac ccagcacgcc gccgcgctcg gcgacgaccg atggcgcgac 960 ctgttggaca accacgacac catcgtgtgc cacgaaatcc agcggttcgg cggtcgcgaa 1020 gtgaacacgg ccggtgacgg tttcgtcgcg acgttcacca gtccgagtgc cgcgatcgcg 1080 tgcgcggacg acatcgtcga cgcggtcgcc gcgctgggta ttgaggtccg gatcggtatt 1140 catgcgggcg aggtcgaggt gcgcgatgcc tcgcacggta ccgacgtcgc cggcgtggcc 1200 gtgcatatcg gtgcgcgcgt ctgcgcgctg gccggaccca gtgaggtgct ggtgtcctcg 1260 accgtgcgag acatcgtcgc cggatcacgg caccggttcg ccgagcgtgg tgagcaggaa 1320 ctcaagggcg taccgggcag atggcggcta tgcgtgctca tgcgcgacga cgccacccgc 1380 acgcgctaa 1389 <210> 6 <211> 462 <212> PRT <213> Mycobacterium bovis BCG str. Pasteur 1173P2 <400> 6 Met Ala Gln Ala Pro His Ile His Arg Thr Arg Tyr Ala Lys Cys Gly 1 5 10 15 Asp Met Asp Ile Ala Tyr Gln Val Leu Gly Asp Gly Pro Thr Asp Leu 20 25 30 Leu Val Leu Pro Gly Pro Phe Val Pro Ile Asp Ser Ile Asp Asp Glu 35 40 45 Pro Ser Leu Tyr Arg Phe His Arg Arg Leu Ala Ser Phe Ser Arg Val 50 55 60 Ile Arg Leu Asp His Arg Gly Val Gly Leu Ser Ser Arg Leu Ala Ala 65 70 75 80 Ile Thr Thr Leu Gly Pro Lys Phe Trp Ala Gln Asp Ala Ile Ala Val 85 90 95 Met Asp Ala Val Gly Cys Glu Gln Ala Thr Ile Phe Ala Pro Ser Phe 100 105 110 His Ala Met Asn Gly Leu Val Leu Ala Ala Asp Tyr Pro Glu Arg Val 115 120 125 Arg Ser Leu Ile Val Val Asn Gly Ser Ala Arg Pro Leu Trp Ala Pro 130 135 140 Asp Tyr Pro Val Gly Ala Gln Val Arg Arg Ala Asp Pro Phe Leu Thr 145 150 155 160 Val Ala Leu Glu Pro Asp Ala Val Glu Arg Gly Phe Asp Val Leu Ser 165 170 175 Ile Val Ala Pro Thr Val Ala Gly Asp Asp Val Phe Arg Ala Trp Trp 180 185 190 Asp Leu Ala Gly Asn Arg Ala Gly Pro Pro Ser Met Ala Arg Ala Val 195 200 205 Ser Lys Val Ile Ala Glu Ala Asp Val Arg Asp Val Leu Gly His Ile 210 215 220 Glu Ala Pro Thr Leu Ile Leu His Arg Val Gly Ser Thr Tyr Ile Pro 225 230 235 240 Val Gly His Gly Arg Tyr Leu Ala Glu His Ile Ala Gly Ser Arg Leu 245 250 255 Val Glu Leu Pro Gly Thr Asp Thr Leu Tyr Trp Val Gly Asp Thr Gly 260 265 270 Pro Met Leu Asp Glu Ile Glu Glu Phe Ile Thr Gly Val Arg Gly Gly 275 280 285 Ala Asp Ala Glu Arg Met Leu Ala Thr Ile Met Phe Thr Asp Ile Val 290 295 300 Gly Ser Thr Gln His Ala Ala Ala Leu Gly Asp Asp Arg Trp Arg Asp 305 310 315 320 Leu Leu Asp Asn His Asp Thr Ile Val Cys His Glu Ile Gln Arg Phe 325 330 335 Gly Gly Arg Glu Val Asn Thr Ala Gly Asp Gly Phe Val Ala Thr Phe 340 345 350 Thr Ser Pro Ser Ala Ala Ile Ala Cys Ala Asp Asp Ile Val Asp Ala 355 360 365 Val Ala Ala Leu Gly Ile Glu Val Arg Ile Gly Ile His Ala Gly Glu 370 375 380 Val Glu Val Arg Asp Ala Ser His Gly Thr Asp Val Ala Gly Val Ala 385 390 395 400 Val His Ile Gly Ala Arg Val Cys Ala Leu Ala Gly Pro Ser Glu Val 405 410 415 Leu Val Ser Ser Thr Val Arg Asp Ile Val Ala Gly Ser Arg His Arg 420 425 430 Phe Ala Glu Arg Gly Glu Gln Glu Leu Lys Gly Val Pro Gly Arg Trp 435 440 445 Arg Leu Cys Val Leu Met Arg Asp Asp Ala Thr Arg Thr Arg 450 455 460 <210> 7 <211> 1389 <212> DNA <213> Mycobacterium bovis BCG str. Pasteur 1173P2 <400> 7 gtggcgcagg ctccccacat tcacaggacc cgctacgcaa aatgcggcga catggatatc 60 gcctaccagg tgctgggtga cggtccgacg gatctgctgg tgttgccggg gccgttcgtg 120 ccgatcgact cgatcgacga cgagccatcg ctgtaccgtt tccatcgccg tcttgcgtca 180 ttcagcaggg tgatccgcct cgaccatcgt ggggtcggcc tgtcgtcacg gctcgccgcg 240 ataaccacgc tggggccgaa gttctgggcc caggacgcga tcgcggtgat ggacgcggtc 300 ggatgcgagc aggcgacaat tttcgcgccc agtttccacg ccatgaacgg acttgttctc 360 gccgccgact accccgagcg ggtgcgcagc ctgatcgtcg tcaacggctc ggcgcgccca 420 ctatgggcgc ccgactaccc ggtaggcgcc caggttcgtc gagctgaccc gttcctgacg 480 gtggcgctgg aaccggatgc cgtcgagcgg ggcttcgacg tgctgagcat cgtggctcct 540 accgtggccg gagatgacgt gtttcgagcc tggtgggatc tcgccggcaa ccgtgccgga 600 ccgccgagca tggcccgtgc cgtttcaaag gtcatagccg aggccgacgt acgagatgtc 660 ttgggacaca tcgaggctcc aacactgatc ttgcaccgtg tcggatcgac gtacatcccg 720 gtgggacatg gtcgctacct cgccgagcac atcgctggat cccgcttggt cgaactaccc 780 ggcaccgata ccctgtactg ggttggcgac accgggccga tgctcgatga aatcgaggaa 840 ttcatcaccg gcgtgcgcgg cggcgctgac gccgagcgca tgcttgccac catcatgttt 900 accgacatcg tcggctcgac ccagcacgcc gccgcgctcg gcgacgaccg atggcgcgac 960 ctgttggaca accacgacac catcgtgtgc cacgaaatcc agcggttcgg cggtcgcgaa 1020 gtgaacacgg ccggtgacgg tttcgtcgcg acgttcacca gtccgagtgc cgcgatcgcg 1080 tgcgcggacg acatcgtcga cgcggtcgcc gcgctgggta ttgaggtccg gatcggtatt 1140 catgcgggcg aggtcgaggt gcgcgatgcc tcgcacggta ccgacgtcgc cggcgtggcc 1200 gtgcatatcg gtgcgcgcgt ctgcgcgctg gccggaccca gtgaggtgct ggtgtcctcg 1260 accgtgcgag acatcgtcgc cggatcacgg caccggttcg ccgagcgtgg tgagcaggaa 1320 ctcaagggcg taccgggcag atggcggcta tgcgtgctca tgcgcgacga cgccacccgc 1380 acgcgctaa 1389 <210> 8 <211> 462 <212> PRT <213> Mycobacterium bovis BCG str. Tokyo 172 <400> 8 Met Ala Gln Ala Pro His Ile His Arg Thr Arg Tyr Ala Lys Cys Gly 1 5 10 15 Asp Met Asp Ile Ala Tyr Gln Val Leu Gly Asp Gly Pro Thr Asp Leu 20 25 30 Leu Val Leu Pro Gly Pro Phe Val Pro Ile Asp Ser Ile Asp Asp Glu 35 40 45 Pro Ser Leu Tyr Arg Phe His Arg Arg Leu Ala Ser Phe Ser Arg Val 50 55 60 Ile Arg Leu Asp His Arg Gly Val Gly Leu Ser Ser Arg Leu Ala Ala 65 70 75 80 Ile Thr Thr Leu Gly Pro Lys Phe Trp Ala Gln Asp Ala Ile Ala Val 85 90 95 Met Asp Ala Val Gly Cys Glu Gln Ala Thr Ile Phe Ala Pro Ser Phe 100 105 110 His Ala Met Asn Gly Leu Val Leu Ala Ala Asp Tyr Pro Glu Arg Val 115 120 125 Arg Ser Leu Ile Val Val Asn Gly Ser Ala Arg Pro Leu Trp Ala Pro 130 135 140 Asp Tyr Pro Val Gly Ala Gln Val Arg Arg Ala Asp Pro Phe Leu Thr 145 150 155 160 Val Ala Leu Glu Pro Asp Ala Val Glu Arg Gly Phe Asp Val Leu Ser 165 170 175 Ile Val Ala Pro Thr Val Ala Gly Asp Asp Val Phe Arg Ala Trp Trp 180 185 190 Asp Leu Ala Gly Asn Arg Ala Gly Pro Pro Ser Met Ala Arg Ala Val 195 200 205 Ser Lys Val Ile Ala Glu Ala Asp Val Arg Asp Val Leu Gly His Ile 210 215 220 Glu Ala Pro Thr Leu Ile Leu His Arg Val Gly Ser Thr Tyr Ile Pro 225 230 235 240 Val Gly His Gly Arg Tyr Leu Ala Glu His Ile Ala Gly Ser Arg Leu 245 250 255 Val Glu Leu Pro Gly Thr Asp Thr Leu Tyr Trp Val Gly Asp Thr Gly 260 265 270 Pro Met Leu Asp Glu Ile Glu Glu Phe Ile Thr Gly Val Arg Gly Gly 275 280 285 Ala Asp Ala Glu Arg Met Leu Ala Thr Ile Met Phe Thr Asp Ile Val 290 295 300 Gly Ser Thr Gln His Ala Ala Ala Leu Gly Asp Asp Arg Trp Arg Asp 305 310 315 320 Leu Leu Asp Asn His Asp Thr Ile Val Cys His Glu Ile Gln Arg Phe 325 330 335 Gly Gly Arg Glu Val Asn Thr Ala Gly Asp Gly Phe Val Ala Thr Phe 340 345 350 Thr Ser Pro Ser Ala Ala Ile Ala Cys Ala Asp Asp Ile Val Asp Ala 355 360 365 Val Ala Ala Leu Gly Ile Glu Val Arg Ile Gly Ile His Ala Gly Glu 370 375 380 Val Glu Val Arg Asp Ala Ser His Gly Thr Asp Val Ala Gly Val Ala 385 390 395 400 Val His Ile Gly Ala Arg Val Cys Ala Leu Ala Gly Pro Ser Glu Val 405 410 415 Leu Val Ser Ser Thr Val Arg Asp Ile Val Ala Gly Ser Arg His Arg 420 425 430 Phe Ala Glu Arg Gly Glu Gln Glu Leu Lys Gly Val Pro Gly Arg Trp 435 440 445 Arg Leu Cys Val Leu Met Arg Asp Asp Ala Thr Arg Thr Arg 450 455 460 <210> 9 <211> 1389 <212> DNA <213> Mycobacterium bovis BCG str. Tokyo 172 <400> 9 gtggcgcagg ctccccacat tcacaggacc cgctacgcaa aatgcggcga catggatatc 60 gcctaccagg tgctgggtga cggtccgacg gatctgctgg tgttgccggg gccgttcgtg 120 ccgatcgact cgatcgacga cgagccatcg ctgtaccgtt tccatcgccg tcttgcgtca 180 ttcagcaggg tgatccgcct cgaccatcgt ggggtcggcc tgtcgtcacg gctcgccgcg 240 ataaccacgc tggggccgaa gttctgggcc caggacgcga tcgcggtgat ggacgcggtc 300 ggatgcgagc aggcgacaat tttcgcgccc agtttccacg ccatgaacgg acttgttctc 360 gccgccgact accccgagcg ggtgcgcagc ctgatcgtcg tcaacggctc ggcgcgccca 420 ctatgggcgc ccgactaccc ggtaggcgcc caggttcgtc gagctgaccc gttcctgacg 480 gtggcgctgg aaccggatgc cgtcgagcgg ggcttcgacg tgctgagcat cgtggctcct 540 accgtggccg gagatgacgt gtttcgagcc tggtgggatc tcgccggcaa ccgtgccgga 600 ccgccgagca tggcccgtgc cgtttcaaag gtcatagccg aggccgacgt acgagatgtc 660 ttgggacaca tcgaggctcc aacactgatc ttgcaccgtg tcggatcgac gtacatcccg 720 gtgggacatg gtcgctacct cgccgagcac atcgctggat cccgcttggt cgaactaccc 780 ggcaccgata ccctgtactg ggttggcgac accgggccga tgctcgatga aatcgaggaa 840 ttcatcaccg gcgtgcgcgg cggcgctgac gccgagcgca tgcttgccac catcatgttt 900 accgacatcg tcggctcgac ccagcacgcc gccgcgctcg gcgacgaccg atggcgcgac 960 ctgttggaca accacgacac catcgtgtgc cacgaaatcc agcggttcgg cggtcgcgaa 1020 gtgaacacgg ccggtgacgg tttcgtcgcg acgttcacca gtccgagtgc cgcgatcgcg 1080 tgcgcggacg acatcgtcga cgcggtcgcc gcgctgggta ttgaggtccg gatcggtatt 1140 catgcgggcg aggtcgaggt gcgcgatgcc tcgcacggta ccgacgtcgc cggcgtggcc 1200 gtgcatatcg gtgcgcgcgt ctgcgcgctg gccggaccca gtgaggtgct ggtgtcctcg 1260 accgtgcgag acatcgtcgc cggatcacgg caccggttcg ccgagcgtgg tgagcaggaa 1320 ctcaagggcg taccgggcag atggcggcta tgcgtgctca tgcgcgacga cgccacccgc 1380 acgcgctaa 1389 <210> 10 <211> 462 <212> PRT <213> Mycobacterium tuberculosis H37Ra <400> 10 Met Ala Gln Ala Pro His Ile His Arg Thr Arg Tyr Ala Lys Cys Gly 1 5 10 15 Asp Met Asp Ile Ala Tyr Gln Val Leu Gly Asp Gly Pro Thr Asp Leu 20 25 30 Leu Val Leu Pro Gly Pro Phe Val Pro Ile Asp Ser Ile Asp Asp Glu 35 40 45 Pro Ser Leu Tyr Arg Phe His Arg Arg Leu Ala Ser Phe 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Gly 260 265 270 Pro Met Leu Asp Glu Ile Glu Glu Phe Ile Thr Gly Val Arg Gly Gly 275 280 285 Ala Asp Ala Glu Arg Met Leu Ala Thr Ile Met Phe Thr Asp Ile Val 290 295 300 Gly Ser Thr Gln His Ala Ala Ala Leu Gly Asp Asp Arg Trp Arg Asp 305 310 315 320 Leu Leu Asp Asn His Asp Thr Ile Val Cys His Glu Ile Gln Arg Phe 325 330 335 Gly Gly Arg Glu Val Asn Thr Ala Gly Asp Gly Phe Val Ala Thr Phe 340 345 350 Thr Ser Pro Ser Ala Ala Ile Ala Cys Ala Asp Asp Ile Val Asp Ala 355 360 365 Val Ala Ala Leu Gly Ile Glu Val Arg Ile Gly Ile His Ala Gly Glu 370 375 380 Val Glu Val Arg Asp Ala Ser His Gly Thr Asp Val Ala Gly Val Ala 385 390 395 400 Val His Ile Gly Ala Arg Val Cys Ala Leu Ala Gly Pro Ser Glu Val 405 410 415 Leu Val Ser Ser Thr Val Arg Asp Ile Val Ala Gly Ser Arg His Arg 420 425 430 Phe Ala Glu Arg Gly Glu Gln Glu Leu Lys Gly Val Pro Gly Arg Trp 435 440 445 Arg Leu Cys Val Leu Met Arg Asp Asp Ala Thr Arg Thr Arg 450 455 460 <210> 11 <211> 1389 <212> DNA <213> Mycobacterium tuberculosis H37Ra <400> 11 gtggcgcagg ctccccacat tcacaggacc cgctacgcaa aatgcggcga catggatatc 60 gcctaccagg tgctgggtga cggtccgacg gatctgctgg tgttgccggg gccgttcgtg 120 ccgatcgact cgatcgacga cgagccatcg ctgtaccgtt tccatcgccg tcttgcgtca 180 ttcagcaggg tgatccgcct cgaccatcgt ggggtcggcc tgtcgtcacg gctcgccgcg 240 ataaccacgc tggggccgaa gttctgggcc caggacgcga tcgcggtgat ggacgcggtc 300 ggatgcgagc aggcgacaat tttcgcgccc agtttccacg ccatgaacgg acttgttctc 360 gccgccgact accccgagcg ggtgcgcagc ctgatcgtcg tcaacggctc ggcgcgccca 420 ctatgggcgc ccgactaccc ggtaggcgcc caggttcgtc gagctgaccc gttcctgacg 480 gtggcgctgg aaccggatgc cgtcgagcgg ggcttcgacg tgctgagcat cgtggctcct 540 accgtggccg gagatgacgt gtttcgagcc tggtgggatc tcgccggcaa ccgtgccgga 600 ccgccgagca ttgcccgtgc cgtttcaaag gtcatagccg aggccgacgt acgagatgtc 660 ttgggacaca tcgaggctcc aacactgatc ttgcaccgtg tcggatcgac gtacatcccg 720 gtgggacatg gtcgctacct cgccgagcac atcgctggat cccgcttggt cgaactaccc 780 ggcaccgata ccctgtactg ggttggcgac accgggccga tgctcgatga aatcgaggaa 840 ttcatcaccg gcgtgcgcgg cggcgctgac gccgagcgca tgcttgccac catcatgttt 900 accgacatcg tcggctcgac ccagcacgcc gccgcgctcg gcgacgaccg atggcgcgac 960 ctgttggaca accacgacac catcgtgtgc cacgaaatcc agcggttcgg cggtcgcgaa 1020 gtgaacacgg ccggtgacgg tttcgtcgcg acgttcacca gtccgagtgc cgcgatcgcg 1080 tgcgcggacg acatcgtcga cgcggtcgcc gcgctgggta ttgaggtccg gatcggtatt 1140 catgcgggcg aggtcgaggt gcgcgatgcc tcgcacggta ccgacgtcgc cggcgtggcc 1200 gtgcatatcg gtgcgcgcgt ctgcgcgctg gccggaccca gtgaggtgct ggtgtcctcg 1260 accgtgcgag acatcgtcgc cggatcacgg caccggttcg ccgagcgtgg tgagcaggaa 1320 ctcaagggcg taccgggcag atggcggcta tgcgtgctca tgcgcgacga cgccacccgc 1380 acgcgctaa 1389 <210> 12 <211> 458 <212> PRT <213> Mycobacterium ulcerans Agy99 <400> 12 Met Ser Gln Ala Pro Arg Thr Pro Arg Thr Arg Tyr Ala Arg Cys Gly 1 5 10 15 Asp Leu Asp Ile Ala Tyr Gln Val Ile Gly Asp His Pro Ile Asp Leu 20 25 30 Leu Val Ile Pro Gly Ala Ser Ile Pro Val Asp Thr Ile Asp Ser Glu 35 40 45 Pro Ser Met Tyr Arg Phe His Arg Arg Leu Ala Ser Phe Ser Arg Leu 50 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Ala Leu Leu Asp Glu Val Glu Glu Phe Ile Thr Gly Val Arg Gly Gly 275 280 285 Phe Val Thr Glu Arg Val Leu Thr Ala Val Met Phe Thr Gly Ile Val 290 295 300 Gly Ser Thr Gln Arg Ala Ala Thr Val Gly Asp Leu Arg Trp Arg Asp 305 310 315 320 Leu Leu Asp Asn His Asp Asn Leu Val Arg His Glu Ile Gln Arg Phe 325 330 335 Gly Gly Arg Glu Val Asn Thr Ala Gly Asp Gly Phe Val Ala Thr Phe 340 345 350 Ser Ser Pro Ser Ala Ala Ile Asn Cys Ala Asp Ala Val Val Asp Ala 355 360 365 Val Ala Val Leu Gly Ile Glu Val Arg Val Gly Ile His Ala Gly Glu 370 375 380 Val Glu Val Arg Gly Ala Asp Val Ala Asp Leu Ala Val His Ile Gly 385 390 395 400 Ala Arg Val Cys Ala Leu Ala Gly Ser Ser Glu Val Leu Val Ser Ser 405 410 415 Thr Val Arg Asp Ile Val Thr Gly Ser Ser His Arg Phe Ala Glu Arg 420 425 430 Gly Glu His Glu Leu Lys Gly Val Pro Gly Arg Trp Arg Leu Cys Ala 435 440 445 Leu Val Arg Glu His Leu Thr Gly Gln Arg 450 455 <210> 13 <211> 1377 <212> DNA <213> Mycobacterium ulcerans Agy99 <400> 13 gtgtcgcagg cgccccgaac tccccggact cgctacgcca ggtgcggcga cctggacatc 60 gcctaccagg tgatcgggga tcatccgatc gacctgctcg tcataccggg ggcctcgatt 120 ccggtcgaca ccatcgattc cgaaccgtcg atgtaccgct ttcaccgccg tctggcgtcg 180 ttttcccgcc tgatccggtt cgaccatcgc ggcgtcggcc tgtcatcgcg ggtttcgtcg 240 ccggatgcgc tcggcccgag gttctgggcc gaggatgcga ttgcggtgat ggacgcggcc 300 ggatgccagc aagccacgat tcttgcctcc gggttcaccg cgacgaccgc cctggtgctg 360 gccgccgact atcccgagcg ggtgcgcagc ctggtgctca tcaacgcctc cgcgcggaca 420 ctgcatgcgc ccgactacga actgggcatc aggtccaaca ccgccgaacc attcctcacc 480 ctcggaaccg atcccgacgc ggtcgagcag gggttcgacg tgctgcgcat catggcgccc 540 agtgtggccc atgacgacgc gttccgccac tggtgggatc tggccggaaa ccgggcggcc 600 tcgcccagca cggcgcgcgc cttcatcaac gcggttcaag cctcggatgc gcgcgactcg 660 ctgccccaca tcaccgcgcc gacgctgatc ctgcatcggg tgggcaccaa gttcgttccg 720 gtcgagcacg gccgctatct ggccgagcac attgccgggt cgcgcttggt cgagcttccc 780 ggttccgatt ccttgtattg ggtcggcgac accgccgcgt tgctcgacga ggtcgaggag 840 ttcatcaccg gcgtccgggg cggcttcgtc accgagcggg tactgaccgc 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ctgttggaca accacgacac catcgtgtgc cacgaaatcc agcggttcgg cggtcgcgaa 1020 gtgaacacgg ccggtgacgg tttcgtcgcg acgttcacca gtccgagtgc cgcgatcgcg 1080 tgcgcggacg acatcgtcga cgcggtcgcc gcgctgggta ttgaggtccg gatcggtatt 1140 catgcgggcg aggtcgaggt gcgcgatgcc tcgcacggta ccgacgtcgc cggcgtggcc 1200 gtgcatatcg gtgcgcgcgt ctgcgcgctg gccggaccca gtgaggtgct ggtgtcctcg 1260 accgtgcgag acatcgtcgc cggatcacgg caccggttcg ccgagcgtgg tgagcaggaa 1320 ctcaagggcg taccgggcag atggcggcta tgcgtgctca tgcgcgacga cgccacccgc 1380 acgcgctaa 1389 <210> 18 <211> 462 <212> PRT <213> Mycobacterium tuberculosis F11 <400> 18 Met Ala Gln Ala Pro His Ile His Arg Thr Arg Tyr Ala Lys Cys Gly 1 5 10 15 Asp Met Asp Ile Ala Tyr Gln Val Leu Gly Asp Gly Pro Thr Asp Leu 20 25 30 Leu Val Leu Pro Gly Pro Phe Val Pro Ile Asp Ser Ile Asp Asp Glu 35 40 45 Pro Ser Leu Tyr Arg Phe His Arg Arg Leu Ala Ser Phe Ser Arg Val 50 55 60 Ile Arg Leu Asp His Arg Gly Val Gly Leu Ser Ser Arg Leu Ala Ala 65 70 75 80 Ile Thr Thr Leu Gly Pro Lys Phe Trp Ala Gln 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accacgacac catcgtgtgc cacgaaatcc agcggttcgg cggtcgcgaa 1020 gtgaacacgg ccggtgacgg tttcgtcgcg acgttcacca gtccgagtgc cgcgatcgcg 1080 tgcgcggacg acatcgtcga cgcggtcgcc gcgctgggta ttgaggtccg gatcggtatt 1140 catgcgggcg aggtcgaggt gcgcgatgcc tcgcacggta ccgacgtcgc cggcgtggcc 1200 gtgcatatcg gtgcgcgcgt ctgcgcgctg gccggaccca gtgaggtgct ggtgtcctcg 1260 accgtgcgag acatcgtcgc cggatcacgg caccggttcg ccgagcgtgg tgagcaggaa 1320 ctcaagggcg taccgggcag atggcggcta tgcgtgctca tgcgcgacga cgccacccgc 1380 acgcgctaa 1389 <210> 20 <211> 372 <212> PRT <213> Phanerochaete chrysosporium <400> 20 Met Ala Phe Lys Gln Leu Leu Ala Ala Leu Ser Val Ala Leu Thr Leu 1 5 10 15 Gln Val Thr Gln Ala Ala Pro Asn Leu Asp Lys Arg Val Ala Cys Pro 20 25 30 Asp Gly Val His Thr Ala Ser Asn Ala Ala Cys Cys Ala Trp Phe Pro 35 40 45 Val Leu Asp Asp Ile Gln Gln Asn Leu Phe His Gly Gly Gln Cys Gly 50 55 60 Ala Glu Ala His Glu Ala Leu Arg Met Val Phe His Asp Ser Ile Ala 65 70 75 80 Ile Ser Pro Lys Leu Gln Ser Gln Gly Lys Phe Gly Gly Gly Gly Ala 85 90 95 Asp Gly Ser Ile Ile Thr Phe Ser Ser Ile Glu Thr Thr Tyr His Pro 100 105 110 Asn Ile Gly Leu Asp Glu Val Val Ala Ile Gln Lys Pro Phe Ile Ala 115 120 125 Lys His Gly Val Thr Arg Gly Asp Phe Ile Ala Phe Ala Gly Ala Val 130 135 140 Gly Val Ser Asn Cys Pro Gly Ala Pro Gln Met Gln Phe Phe Leu Gly 145 150 155 160 Arg Pro Glu Ala Thr Gln Ala Ala Pro Asp Gly Leu Val Pro Glu Pro 165 170 175 Phe His Thr Ile Asp Gln Val Leu Ala Arg Met Leu Asp Ala Gly Gly 180 185 190 Phe Asp Glu Ile Glu Thr Val Trp Leu Leu Ser Ala His Ser Ile Ala 195 200 205 Ala Ala Asn Asp Val Asp Pro Thr Ile Ser Gly Leu Pro Phe Asp Ser 210 215 220 Thr Pro Gly Gln Phe Asp Ser Gln Phe Phe Val Glu Thr Gln Leu Arg 225 230 235 240 Gly Thr Ala Phe Pro Gly Lys Thr Gly Ile Gln Gly Thr Val Met Ser 245 250 255 Pro Leu Lys Gly Glu Met Arg Leu Gln Thr Asp His Leu Phe Ala Arg 260 265 270 Asp Ser Arg Thr Ala Cys Glu Trp Gln Ser Phe Val Asn Asn Gln Thr 275 280 285 Lys Leu Gln Glu Asp Phe Gln Phe Ile Phe Thr Ala Leu Ser Thr Leu 290 295 300 Gly His Asp Met Asn Ala Met Ile Asp Cys Ser Glu Val Ile Pro Ala 305 310 315 320 Pro Lys Pro Val Asn Phe Gly Pro Ser Phe Phe Pro Ala Gly Lys Thr 325 330 335 His Ala Asp Ile Glu Gln Ala Cys Ala Ser Thr Pro Phe Pro Thr Leu 340 345 350 Ile Thr Ala Pro Gly Pro Ser Ala Ser Val Ala Arg Ile Pro Pro Pro 355 360 365 Pro Ser Pro Asn 370 <210> 21 <211> 1263 <212> DNA <213> Phanerochaete chrysosporium <400> 21 gctacagctc accgtccggt ctcagcagca gcaatggcgt tcaagcagct cctcgcagcc 60 ctctccgtcg ccctgaccct ccaggtcacc caagctgccc cgaacctcga caagcgcgtc 120 gcttgccccg acggcgtgca caccgcctcc aacgcggcgt gctgtgcatg gttcccggtc 180 ctcgatgata tccagcagaa cctcttccac ggtggccagt gcggtgccga ggcccacgag 240 gcccttcgta tggtcttcca cgactccatc gctatctcgc ccaagcttca gtcgcagggc 300 aagtttggcg gcggcggcgc ggacggctcg atcattacct tctcctcgat cgagaccacg 360 taccacccga acatcggcct cgacgaggtc gtcgccatcc agaagccgtt catcgcgaag 420 cacggcgtca cccgtggcga cttcatcgca ttcgctggtg ccgtcggcgt gagcaactgc 480 ccgggcgcgc cgcagatgca gttcttcctt ggccgccccg aggcaacgca ggccgccccc 540 gacggtctcg tgcccgagcc cttccacacc atcgatcagg ttctcgctcg catgcttgac 600 gctggtggct tcgacgagat cgagactgtc tggctgctct ctgcccactc catcgcggct 660 gcgaacgacg tcgacccgac catctccggc ctgccgttcg actccactcc cggccagttc 720 gactcccagt tcttcgtcga gacgcagctc cgcggtaccg cattccctgg caagactggt 780 atccagggca ccgtcatgtc cccgctcaag ggcgagatgc gtctgcagac ggaccacttg 840 ttcgcgcgtg actcgcgcac ggcatgcgag tggcagtcct tcgtcaacaa ccagacgaag 900 ctgcaggagg acttccagtt catcttcacg gcgctctcga cgctcggcca cgacatgaac 960 gccatgatcg actgctccga ggtcatcccc gcgcccaagc ccgtcaactt cggcccgtcg 1020 ttcttccccg ccggtaagac gcacgccgac atcgagcagg cctgcgcatc cacgccgttc 1080 ccgacgctca tcaccgcccc cggtccctct gcgtccgtcg ctcgcatccc cccgccgccg 1140 tcccccaact aagctatgtc tatgctggac atgctctcgg ttctacctcg tcggtatcgt 1200 cgcacggtta tctcgcgttt gcatcatgta tacctgctcg tggaatatac aaagtggtct 1260 atc 1263 <210> 22 <211> 372 <212> PRT <213> Phanerochaete chrysosporium <400> 22 Met Ala Leu Lys Gln Leu Ala Ala Ala Val Ala Leu Ala Leu Ser Ile 1 5 10 15 Gln Ala Ala Gln Gly Ala Ala Val Lys Glu Lys Arg Ala Thr Cys Ser 20 25 30 Asn Gly Ala Thr Val Gly Asp Ala Ser Ser Cys Ala Trp Phe Asp Val 35 40 45 Leu Asp Asp Ile Gln Gln Asn Leu Phe Asn Gly Ala Gln Cys Gly Ala 50 55 60 Glu Ala His Glu Ser Ile Arg Leu Val Phe His Asp Ala Ile Ala Ile 65 70 75 80 Ser Pro Ala Leu Glu Ser Gln Gly Lys Phe Gly Gly Gly Gly Ala Asp 85 90 95 Gly Ser Ile Ile Leu Phe Asp Asp Ile Glu Thr Asn Phe His Pro Asn 100 105 110 Ile Gly Leu Asp Glu Ile Val Asn Leu Gln Lys Pro Phe Ile Gln Lys 115 120 125 His Gly Val Thr Pro Gly Asp Phe Ile Ala Phe Ala Gly Ala Val Ala 130 135 140 Met Ser Asn Cys Pro Gly Ala Pro Gln Met Asn Phe Phe Thr Gly Arg 145 150 155 160 Ala Pro Ala Thr Gln Ala Ala Pro Asp Gly Leu Val Pro Glu Pro Phe 165 170 175 His Thr Val Asp Gln Ile Ile Ser Arg Val Asn Asp Ala Gly Glu Phe 180 185 190 Asp Glu Leu Glu Leu Val Trp Met Leu Ser Ala His Ser Val Ala Ala 195 200 205 Ala Asn Asp Val Asp Pro Thr Ile Gln Gly Leu Ala Phe Asp Ser Thr 210 215 220 Pro Gly Val Phe Asp Ser Gln Phe Phe Val Glu Thr Gln Leu Arg Gly 225 230 235 240 Thr Ala Phe Pro Gly Ser Gly Gly Asn Gln Gly Glu Val Glu Ser Pro 245 250 255 Leu Pro Gly Glu Met Arg Leu Gln Ser Asp Ser Ser Ile Ala Arg Asp 260 265 270 Ser Arg Thr Ala Cys Glu Trp Gln Ser Phe Val Asn Asn Gln Ser Lys 275 280 285 Leu Val Ser Asp Phe Gln Phe Ile Phe Leu Ala Leu Thr Gln Leu Gly 290 295 300 Glu Asn Pro Asp Ala Met Thr Asp Cys Ser Asp Val Ile Pro Ile Ser 305 310 315 320 Lys Pro Val Pro Asn Asn Val Pro Phe Ser Phe Phe Pro Ala Gly Lys 325 330 335 Thr Met Ala Asp Val Glu Gln Ala Cys Ala Glu Thr Pro Phe Pro Thr 340 345 350 Leu Thr Thr Leu Pro Gly Pro Glu Thr Ser Val Gln Arg Ile Gln Pro 355 360 365 Pro Pro Gly Ala 370 <210> 23 <211> 1119 <212> DNA <213> Phanerochaete chrysosporium <400> 23 atggctctta agcaactcgc tgctgccgtc gctctcgcac tctcgatcca ggctgcccaa 60 ggcgctgctg tgaaggagaa gcgcgccacc tgctccaacg gcgcgactgt cggcgacgcg 120 tcgtcgtgcg cctggtttga cgttctcgac gacatccagc agaacctctt caacggcgcc 180 cagtgtggtg ctgaggctca cgagtccatt cgtcttgtct tccacgacgc catcgctatc 240 tcgcctgccc ttgagtctca aggcaaattc ggtggtggag gcgctgatgg ctccattatc 300 ctcttcgacg atatcgagac caactttcac cccaacattg gccttgacga gattgtcaac 360 ctgcagaagc ccttcatcca gaagcacggc gttactcctg gcgatttcat tgcctttgct 420 ggcgccgtcg ccatgagcaa ctgccctggt gctccgcaga tgaacttctt caccggtcgt 480 gctcctgcta ctcaggccgc tccagacggc ctcgttcccg agccattcca cactgtcgac 540 cagatcatct ctcgcgtcaa cgacgctggc gagtttgacg agcttgagct cgtctggatg 600 ctgtctgctc actccgtcgc tgcggcgaac gatgtcgatc cgacgatcca ggggcttgcg 660 ttcgactcta ccccgggtgt cttcgactcg cagttcttcg ttgagacaca gcttcgcggc 720 acggcgttcc ccggctcggg tggcaaccag ggtgaggttg aatcccctct ccccggtgag 780 atgcgcctcc agtccgactc ctcgatcgcc cgcgactcgc gcacggcgtg cgagtggcag 840 tccttcgtca acaaccagtc gaagctcgtt agcgacttcc agttcatctt cctcgccctt 900 acccagctcg gcgagaaccc ggatgctatg accgactgct cagacgtgat cccgatctcg 960 aagccggtcc ccaacaacgt cccgttctcg ttcttcccgg ctggcaagac catggctgat 1020 gttgagcagg cgtgtgctga gacgcccttc ccgactctga cgacgcttcc tggccccgag 1080 acctcggtgc agcgcatcca gcctcctccg ggtgcttaa 1119 <210> 24 <211> 372 <212> PRT <213> Phanerochaete sordida <400> 24 Met Ala Phe Lys Arg Leu Leu Ala Val Leu Thr Ala Ala Ile Ser Leu 1 5 10 15 Gly Ala Val Gln Gly Val Ala Val Glu Lys Arg Ala Thr Cys Ser Asn 20 25 30 Gly Lys Thr Val Ser Ala Ser Ser Cys Cys Ala Trp Phe Asn Val Leu 35 40 45 Ser Asp Ile Gln Glu Asn Leu Phe Asn Gly Gly Gln Cys Gly Ala Glu 50 55 60 Ala His Glu Ser Ile Arg Leu Val Phe His Asp Ser Ile Ala Ile Ser 65 70 75 80 Pro Ala Met Glu Ala Ala Gly Gln Phe Gly Gly Gly Gly Ala Asp Gly 85 90 95 Ser Ile Met Ile Phe Asp Glu Ile Glu Thr Asn Phe His Pro Asn Ile 100 105 110 Gly Leu Asp Glu Ile Val Arg Leu Gln Lys Pro Phe Val Gln Lys His 115 120 125 Gly Val Thr Pro Gly Asp Phe Ile Ala Phe Ala Gly Ala Val Ala Leu 130 135 140 Ser Asn Cys Pro Gly Ala Pro Gln Met Asn Phe Phe Thr Gly Arg Ala 145 150 155 160 Pro Ala Thr Gln Ala Ala Pro Asp Gly Leu Val Pro Glu Pro Phe His 165 170 175 Thr Val Asp Gln Ile Ile Asp Arg Val Gly Asp Ala Gly Glu Phe Asp 180 185 190 Glu Leu Glu Leu Val Trp Met Leu Ser Ala His Ser Ile Ala Ala Ala 195 200 205 Asn Asp Val Asp Pro Thr Thr Gln Gly Leu Pro Phe Asp Ser Thr Pro 210 215 220 Gly Ile Phe Asp Ser Gln Phe Phe Val Glu Thr Gln Leu Ala Gly Thr 225 230 235 240 Gly Phe Pro Ala Ser Ala Asn Asn Gln Gly Glu Val Thr Ser Pro Leu 245 250 255 Ala Gly Glu Met Arg Leu Gln Ser Asp Phe Leu Ile Ala Arg Asp Ala 260 265 270 Arg Thr Ala Cys Glu Trp Gln Ser Phe Val Asn Asn Gln Ser Lys Leu 275 280 285 Val Ser Asp Phe Gln Phe Ile Phe Leu Ala Leu Thr Gln Leu Gly Gln 290 295 300 Asp Pro Thr Val Met Thr Asp Cys Ser Asp Val Ile Pro Ile Ser Lys 305 310 315 320 Pro Ala Pro Ala Asn Thr Pro Gly Phe Ser Phe Phe Pro Ala Gly Lys 325 330 335 Thr Met Ala Asp Val Glu Gln Ala Cys Ala Glu Thr Pro Phe Pro Thr 340 345 350 Leu Ser Thr Leu Pro Gly Pro Gln Thr Ser Val Ala Arg Ile Gln Pro 355 360 365 Pro Pro Gly Ala 370 <210> 25 <211> 1727 <212> DNA <213> Phanerochaete sordida <400> 25 aggtcactct cagcctctca gactcttctc cagtcgccct agctcagaca tggctttcaa 60 gaggctcctc gctgttctca ccgccgccat ctccctcggc gccgtccagg gtacgtccta 120 cgcttcccca ctttaccgca ggacactgac agcggcgcct aggtgtcgct gttgagaagc 180 gcgccacctg ctccaacggc aagacggtca gcgcgtcgtc gtgctgcgcc tggttcaatg 240 tcctctcgga catccaggag aacctcttca acggcggcca gtgcggcgct gaggcccatg 300 agtccatccg cctgtaagca tcaccctctg tccctagcgt tcttgcactg atctcgtcgc 360 agtgtcttcc acgactccat cgccatctcg cctgctatgg aggccgctgg tcagtttggg 420 tatgtagacg tggcctccgc ttctgcacaa tcctgacaga gcacaatata gcggcggcgg 480 tgctgacggc tccatcatga tcttcgacga gatcgagacc aacttccacc ccaacatcgg 540 cctcgacgag atcgtgcgcc tgcagaagcc cttcgtccag aagcacggcg tcacccccgg 600 cgacttcatc gccttcgctg gcgcggttgc cctgtccaac tgccccggtg ccccgcagat 660 gaacttcttc accggccgtg ctcccgccac ccaggccgcc cccgatggtc ttgtccccga 720 gcccttccgt gagttattcc gcccacatat gtcgaccgta gcgaactgac agcactcgta 780 gacactgtcg accagattat cgaccgtgtc ggcgacgccg gcgagttcga tgagctcgag 840 ctcgtctgga tgctttccgc gtacggcttc gttctcactg ccggctatcg catactgatc 900 aatcgactcc agccattcca ttgcggctgc gaacgacgtc gacccgacca cccagggtct 960 tcccttcgac tccaccccgg gtatcttcga ctcgcagttc ttcgtcgaga cccagctcgc 1020 cggcactggc ttccccgcgt acgtctcctc gtctttccct ccttctgcgc tgctcaccac 1080 gcctacagct ccgcgaacaa ccagggcgag gtcacgtccc cgcttgcggg cgagatgcgc 1140 ctgcagtccg acttcctcat cgcccgcgac gcgcgcaccg catgcgagtg gcagtccttc 1200 gtcaacaacc agtcgaagct cgtgtccgac ttccagttca tcttcctcgc cctcacgcag 1260 ctcggccagg acccgaccgt catgaccgac tgctcggacg ttattcccat ctccaagccc 1320 gcgcccgcga acacccccgg attctctttc ttccccgccg gcaagaccat ggctgacgtc 1380 gagcaggctg tgcgtgaatt catgtttgag cgcatatatg tggctggcaa gctgacgaac 1440 gctcctctag tgcgccgaga cgcccttccc gactctctcg accctccccg gcccgcaaac 1500 ctcggtcgct cgcatgttcg tactaaaatt caatcatatc cgggggccag ctgacaatgt 1560 tttcttacag ccaaccccct cccggtgctt aaatagccac cacaacccgg ttctctcccc 1620 ggcacaggca gctaagctta gacttaaccc cagaaggttc agatgtagaa actgctcgct 1680 ttgtctcaat accgcttttg aagcaaatac acgtgtatta ctggccc 1727 <210> 26 <211> 371 <212> PRT <213> Phanerochaete chrysosporium (anamorph: Sporotrichum pruinosum) <400> 26 Met Ala Leu Lys Gln Leu Ala Ala Ala Val Ala Leu Ala Leu Ser Ile 1 5 10 15 Gln Ala Ala Gln Gly Ala Ala Val Lys Glu Lys Arg Ala Thr Cys Ser 20 25 30 Asn Gly Ala Thr Val Gly Asp Ala Ser Ser Cys Ala Trp Phe Asp Val 35 40 45 Leu Asp Asp Ile Gln Gln Asn Leu Phe Asn Gly Ala Gln Cys Gly Ala 50 55 60 Glu Ala His Glu Ser Ile Arg Leu Val Phe His Asp Ala Ile Ala Ile 65 70 75 80 Ser Pro Ala Leu Glu Ser Gln Gly Lys Phe Gly Gly Gly Gly Ala Asp 85 90 95 Gly Ser Ile Ile Leu Phe Asp Asp Ile Glu Thr Asn Phe His Pro Asn 100 105 110 Ile Gly Leu Asp Glu Ile Val Asn Leu Gln Lys Pro Phe Ile Gln Lys 115 120 125 His Gly Val Thr Pro Gly Asp Phe Ile Ala Phe Ala Gly Ala Val Ala 130 135 140 Met Ser Asn Cys Pro Gly Ala Pro Gln Met Asn Phe Phe Thr Gly Arg 145 150 155 160 Ala Pro Ala Thr Gln Ala Ala Pro Asp Gly Leu Val Pro Glu Pro Phe 165 170 175 His Thr Val Asp Gln Ile Ile Ser Arg Val Asn Asp Ala Gly Glu Phe 180 185 190 Asp Glu Leu Glu Leu Val Trp Met Leu Ser Ala His Ser Val Ala Ala 195 200 205 Ala Asn Asp Val Asp Pro Thr Ile Gln Gly Leu Ala Phe Asp Ser Thr 210 215 220 Pro Gly Val Phe Asp Ser Gln Phe Phe Val Glu Thr Gln Leu Arg Gly 225 230 235 240 Thr Ala Phe Pro Gly Ser Gly Gly Asn Gln Gly Glu Val Glu Ser Pro 245 250 255 Leu Pro Gly Glu Met Arg Leu Gln Ser Asp Ser Ser Ile Ala Arg Asp 260 265 270 Ser Arg Thr Ala Cys Glu Trp Gln Ser Phe Val Asn Asn Gln Ser Lys 275 280 285 Leu Val Ser Asp Phe Gln Phe Ile Phe Leu Ala Leu Thr Gln Leu Gly 290 295 300 Glu Asn Pro Asp Ala Met Thr Asp Cys Ser Asp Val Ile Pro Ile Ser 305 310 315 320 Lys Pro Val Pro Asn Asn Val Pro Phe Ser Phe Phe Pro Ala Gly Lys 325 330 335 Thr Met Ala Asp Val Glu Gln Ala Cys Ala Glu Thr Pro Phe Pro Thr 340 345 350 Leu Thr Thr Leu Pro Gly Pro Glu Thr Ser Val Gln Arg Ile Pro Pro 355 360 365 Pro Gly Ala 370 <210> 27 <211> 2104 <212> DNA <213> Phanerochaete chrysosporium (anamorph: Sporotrichum pruinosum) <400> 27 tatgttttct tttaccatag tgtcttcgcc attcagtgca gagcgcaaca tgactgtcat 60 gccgccgttg ctcgacccac gactacaatg ccgtctgtcg agcatctact cccgaccgat 120 cctcgttcac aggcaaggta cgcgcttttt tcattggctg cggtggccag ggagtctgct 180 atcgagggca cacggcgcgg cgagggcatc ggcagaggcg gagggtagtg caggccagag 240 cggtataaaa acgcaaacag gcaggccacc ctctctccag gacactcgca gtcttctgtg 300 cgctcagctt aacagtcatg gctcttaagc aactcgctgc tgccgtcgct ctcgcactct 360 cgatccaggc tgcccaaggt gcggcatcta ctccatatcc ttgtcccccc gtactgacct 420 cgatgcaggc gctgctgtga aggagaagcg cgccacctgc tccaacggcg cgactgtcgg 480 cgacgcgtcg tcgtgcgcct ggtttgacgt tctcgacgac atccagcaga acctcttcaa 540 cggcgcccag tgtggtgctg aggctcacga gtccattcgt ctgtaagtgc ctccgcttgt 600 ttcggtctag agcctactca ccgcgtctac agtgtcttcc acgacgccat cgctatctcg 660 cctgcccttg agtctcaagg caaattcggg tcgcgtcctc tctccgtttg actgcagggg 720 gtcgctgagt gtagcatagt ggtggaggcg ctgatggctc cattatcctc ttcgacgata 780 tcgagaccaa ctttcacccc aacattggcc 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acaacgtccc gttctcgttc ttcccggctg 1680 gcaagaccat ggctgatgtt gagcaggcgg tgcgtagcaa ctcacgtcta ccatattgct 1740 gcaggagcta acttatgcac agtgtgctga gacgcccttc ccgactctga cgacgcttcc 1800 tggccccgag acctcggtgc agcgcatgta agtactttct gatgccaatg tacaagcacc 1860 aaggcactaa cggtccattg cagccaghcc tcctccgggt gcttaaattg tattcatcac 1920 ggtcatcacg ttcacggtac tactacgtct ggattgcgtc gccttggctg cctttgtagg 1980 cttatcgaat acacagcttt tctctcagtc atgaccatga agtgtgccat ggtaagcgga 2040 gacaagcaat tcttcgattg tggctcgcat gccgcccgta gcacatagct cctatgtagt 2100 gcac 2104

Claims (50)

  1. 리그닌 과산화효소, 과산화수소-생성 효소, 및 상기 과산화수소-생성 효소의 기질을 포함하고, 상기 과산화수소-생성 효소는 글루코스 산화효소를 포함하고, 상기 기질은 D-글루코스를 포함하며, 상기 글루코스 산화효소의 농도는 1.25 내지 125 units/gram의 범위 내이고, 상기 D-글루코스의 농도는 0.175 μmole/gram 내지 17.5 μmole/gram의 범위 내인 대상체의 피부 및/또는 모발 라이트닝을 위한 화장료 조성물.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 리그닌 과산화효소의 농도는 1.25 units/gram 내지 125 units/gram의 범위 내인 화장료 조성물.
  3. 제 1 항에 있어서,
    상기 과산화수소-생성 효소의 농도는 4 내지 40 units/gram의 범위 내인 화장료 조성물.
  4. 제 1 항에 있어서,
    상기 과산화수소-생성 효소의 기질의 농도는 0.5 μmole/gram 내지 6 μmole/gram의 범위 내인 화장료 조성물.
  5. 제 1 항에 있어서,
    산화 매개체를 추가로 포함하는 화장료 조성물.
  6. 제 5 항에 있어서,
    상기 산화 매개체의 농도는 0.03 μmole/gram 내지 300 μmole/gram의 범위 내인 화장료 조성물.
  7. 제 1 항에 있어서,
    상기 리그닌 과산화효소는 동종효소 H1 또는 동종효소 H2의 변형된 형태인 화장료 조성물.
  8. 과산화수소-생성 효소, 상기 과산화수소-생성 효소의 기질 및 리그닌 과산화효소를 포함하고, 상기 과산화수소-생성 효소는 글루코스 산화효소를 포함하고, 상기 기질은 D-글루코스를 포함하며, 상기 과산화수소-생성 효소는 제 1 조성물의 일부를 형성하고, 상기 기질은 제 2 조성물의 일부를 형성하며, 상기 제 1 및 제 2 조성물은 키트 내 개별 포장되고, 상기 제 1 조성물 내 상기 글루코스 산화효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram 범위 내 이고, 상기 제 2 조성물 내 상기 D-글루코스의 농도는 0.35 μmole/gram 내지 35 μmole/gram의 범위 내인 대상체의 피부 및/또는 모발 라이트닝을 위한 화장료 키트.
  9. 제 8 항에 있어서,
    상기 제 1 조성물은 리그닌 과산화효소를 추가로 포함하는 화장료 키트.
  10. 제 8 항에 있어서,
    상기 리그닌 과산화효소를 포함하는 조성물 내 상기 리그닌 과산화효소의 농도는 2.5 내지 250 units/gram의 범위 내인 화장료 키트.
  11. 제 8 항에 있어서,
    산화 매개체, 상기 과산화수소-생성 효소, 상기 과산화수소-생성 효소의 기질 및 상기 리그닌 과산화효소를 포함하는 화장료 키트.
  12. 제 8 항에 있어서,
    상기 제 1 조성물 내 상기 과산화수소-생성 효소의 농도는 8 내지 80 units/gram의 범위 내인 화장료 키트.
  13. 제 8 항에 있어서,
    상기 제 2 조성물 내 상기 기질의 농도는 1 μmole/gram 내지 12 μmole/gram의 범위 내인 화장료 키트.
  14. 제 8 항에 있어서,
    상기 리그닌 과산화효소는 동종효소 H1 또는 동종효소 H2의 변형된 형태인 화장료 키트.
  15. 제 1 항에 있어서,
    대상체의 피부 및/또는 모발 라이트닝으로 사용하기 위한 화장료 조성물.
  16. 제 8 항에 있어서,
    대상체의 피부 및/또는 모발 라이트닝으로 사용하기 위한 화장료 키트.
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