KR102215128B1 - 저온 내성을 갖는 사카로마이세스 세레비지에 ygt-10 균주 및 이를 포함하는 발효가축 사료 - Google Patents

저온 내성을 갖는 사카로마이세스 세레비지에 ygt-10 균주 및 이를 포함하는 발효가축 사료 Download PDF

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Abstract

본 발명은 효모계 미생물에 대한 것으로, 보다 구체적으로는 저온에서도 생장성이 우수하고, 알콜류 생산능이 저온에서도 유지되는 저온 내성을 갖는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주 및 이를 포함하는 발효가축사료에 관한 것이다.

Description

저온 내성을 갖는 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주 및 이를 포함하는 발효가축 사료{Saccharomyces cerevisiae YGT-10 having a tolerance at low temperature, and fermented livestock feed containing the same }
본 발명은 효모계 미생물에 대한 것으로, 보다 구체적으로는 저온에서도 생장성이 우수하고, 알콜류 생산능이 저온에서도 유지되는 저온 내성을 갖는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주 및 이를 포함하는 발효가축사료에 관한 것이다.
효모는 진핵세포로 주조, 식품, 의약, 사료, 화장품 등의 분야에 사용되는 발효 미생물이다. 동물 사료에서 특히 습식사료의 발효에 관여하는 미생물은 다양하지만 품질의 결정에 중요하게 관여하는 미생물은 유익 효모와 유산균으로 현재 습식사료 발효용으로 유통되고 있는 균주는 저가의 제빵용 중국산이 대부분을 차지하고 있으며 이들의 생육적온은 30℃로 동절기 습식사료 발효에는 부적합하다. 일부 저온에서 성장이 가능한 외국산 균주가 있으나 고가이며 특허로 묶여 있어서 사실상 사용이 어려운 실정이다.
이런 문제점을 해결하기 위해 다수의 연구가 진행되었고, 저온 내성을 갖는 효모 변이체(Yeast Varians Having Resistance to Low Temperatures)에 대한 다수의 기술이 개발되었는데, 국내특허등록번호 제10-1264294호는 NST1 및 이의 기능적 동족체(homologue)를 불활성화시키는 단계를 포함하는 저온에서 효모의 생장을 촉진시키는 방법 및 SRO9 유전자가 불활성화 되어 저온에서 증가된 생장능을 나타내는 효모 변이체로서, 상기 효모 변이체는 사카로마이세스 세레비지애 YSK2836(기탁번호: KCCM-11109P)인 것을 특징으로 하는 효모 변이체를 개시하고 있고, 국내특허출원번호 제10-2012-0093906호에서는 저온 내성을 갖는 효모 변이체 또한 STM1 유전자, SRO9 유전자 및 YKL075C 유전자로 구성된 군으로부터 선택되는 최소 하나의 유전자를 불활성화시키는 단계를 포함하는 저온에서의 효모의 생장을 증가시키는 방법 및 효모 변이체의 제조방법을 개시하고 있으나, 이들 특허에서 "저온 생장능"은 바람직하게는 25℃ 이하, 보다 바람직하게는 18℃ 이하의 온도에서의 생장능을 의미한다고 하였지만, 실질적으로 제시된 실험예는 18℃ 조건에서 성장 가능한 데이터가 개시되었을 뿐이다. 또한, 국내특허공개번호 제10-2017-0142648호에서는 저온 적응성 효모 사카로마이세스 세레비지에 Y297 및 이를 이용하여 제조된 발효주를 개시하면서 10℃ 내지 20℃에서 성장 가능한 저온내성 균주라 명시하였는데, 상기 특허에서도 15℃의 저온 조건에서 생장이 뛰어난 사카로마이세스 세레비지에 Y297을 선발하였고, 상기 균주는 저온 내성 및 알코올 생성능이 우수함을 명시하고 있을 뿐이다.
따라서 15℃ 미만의 저온에서 성장 할 수 있는 습식사료 발효에 관여하는 토종 균주 및 저온 발효균주의 개발이 요구된다.
대한민국 등록특허번호 제10-1264294호 대한민국 공개특허번호 제10-2017-0142648호
본 발명자들은 15℃ 미만의 저온에서 성장성 및 에탄올 발효능이 우수한 특성을 나타내는 신균주 효모를 분리함으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 기존 상온 성장성 균주(수입)를 대체하고 동절기 발효력 감소를 최소화할 수 있도록 15℃ 미만의 저온에서 성장할 수 있는 저온 내성을 갖는 토종 신균주인 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주를 포함함으로써 저온발효가 가능하여 저온에서 대부분의 병원성 미생물의 증식을 억제하고 저온 성장 유익균인 효모균 즉 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주만 선택적으로 자라게 할 수 있는 생균제조성물 및 가축의 기호성을 증진시키는 알콜류 생산능이 저온에서도 유지되고 대량으로 생산할 수 있는 발효가축사료를 제공하는 것이다.
본 발명의 목적들은 이상에서 언급한 목적들로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 목적들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상술된 본 발명의 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 15℃ 미만의 저온 생장에 내성이 있는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주(KACC93311P)를 제공한다.
바람직한 실시예에 있어서, 상기 균주는 10℃에서 5일 생장시 4%의 에틸알코올 생산능을 갖는다.
바람직한 실시예에 있어서, 상기 균주는 10℃에서 3일 생장시 이산화탄소를 발생시킨다.
또한, 본 발명은 상술된 어느 하나의 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주(KACC93311P) 및 상기 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주(KACC93311P)의 배양액 중 하나 이상을 포함하는 생균제 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상술된 어느 하나의 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주(KACC93311P) 및 상기 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주(KACC93311P)의 배양액 중 하나 이상을 포함하는 발효가축사료를 제공한다.
바람직한 실시예에 있어서, 상기 발효가축사료는 15℃의 미만의 온도조건에서 보관된다.
본 발명의 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주는 15℃ 미만의 저온에서 성장성 및 에탄올 발효능이 우수한 특성을 나타내므로, 기존 상온 성장성 균주(수입)를 대체하고 동절기 발효력 감소를 최소화할 수 있다.
또한, 본 발명의 생균제조성물 및 발효가축사료는 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주를 포함함으로써 저온발효가 가능하여 저온에서 대부분의 병원성 미생물의 증식을 억제하고 저온 성장 유익균인 효모균 즉 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주만 선택적으로 자라게 할 수 있고, 가축의 기호성을 증진시키는 알콜류 생산능이 저온에서도 유지되고 대량으로 생산할 수 있다.
본 발명의 효과는 이상에서 언급한 효과로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 효과들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
도 1은 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주의 콜로니모양과 효모의 현미경사진이다.
도 2a는 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주에서 분석된 26S rDNA 도메인 D1-D2를 바탕으로 작성된 계통발생수이고, 도 2b는 사카로마이세스 세레비지에YGT-10 균주에서 분석된 26S rDNA 유전자 도메인 D1-D2 염기서열이다.
도 3은 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주의 저온에서의 성장성을 보여주는 결과그래프이다.
도 4는 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주의 CO2생성능력을 보여주는 결과사진이다.
도 5는 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주가 포함된 저온발효사료에서 가스 발생량을 보여주는 결과이다.
본 발명에서 사용되는 용어는 본 발명에서의 기능을 고려하면서 가능한 현재 널리 사용되는 일반적인 용어들을 선택하였으나, 이는 당 분야에 종사하는 기술자의 의도 또는 판례, 새로운 기술의 출현 등에 따라 달라질 수 있다. 또한, 특정한 경우는 출원인이 임의로 선정한 용어도 있으며, 이 경우 해당되는 발명의 설명 부분에서 상세히 그 의미를 기재할 것이다.
본 발명에서 언급한 '포함한다', '갖는다', '이루어진다' 등이 사용되는 경우 '~만'이 사용되지 않는 이상 다른 부분이 추가될 수 있다. 구성 요소를 단수로 표현한 경우에 특별히 명시적인 기재 사항이 없는 한 복수를 포함하는 경우를 포함한다.
구성 요소를 해석함에 있어서, 별도의 명시적 기재가 없더라도 오차 범위를 포함하는 것으로 해석한다.
본 발명의 여러 구현예들 각각의 특징적인 부분들은 부분적으로 또는 전체적으로 서로 결합 또는 조합가능하고, 기술적으로 다양한 연동 및 구동이 가능하며, 각 구현예들은 서로에 대하여 독립적으로 실시 가능할 수도 있고 연관 관계로 함께 실시할 수도 있다.
이하, 첨부한 도면 및 바람직한 실시예들을 참조하여 본 발명의 기술적 구성을 상세하게 설명한다.
그러나, 본 발명은 여기서 설명되는 실시예에 한정되지 않고 다른 형태로 구체화 될 수도 있다. 명세서 전체에 걸쳐 본 발명을 설명하기 위해 사용되는 동일한 참조번호는 동일한 구성요소를 나타낸다.
본 발명의 기술적 특징은 15℃ 미만 특히 10℃이하의 저온에서 성장성 및 에탄올 발효능이 우수한 특성을 나타내므로, 기존 상온 성장성 균주(수입)를 대체하고 동절기 발효력 감소를 최소화할 수 있는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주 및 이의 용도에 있다.
일반적으로 효모는 진핵세포로 주조, 식품, 의약, 사료, 화장품 등의 분야에 사용되는 발효 미생물인데, 이들의 생육적온은 30℃이다. 따라서 그동안 다수의 저온 내성을 갖는 효모 변이체 균주가 개발되었으나, 실제로 15℃에서 배양된 결과는 보여 주었으나 아직까지 그 미만의 온도에서 배양된 결과를 보여준 바 없기 때문이다.
따라서, 본 발명은 15℃ 미만의 저온 생장에 내성이 있는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주(KACC93311P)를 제공한다.
여기서, 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주(KACC93311P)는 전통 누룩에서 분리된 균으로서 우리나라 고유의 생물자원으로, 15℃ 미만, 특히 10℃이하의 온도에서도 배양이 이루어지는 특성을 갖는다.
특히, 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주(KACC93311P)는 10℃에서 5일 생장시 4%의 에틸알코올 생산능을 갖는 특성을 나타내고, 10℃에서 3일 생장시 이산화탄소를 발생시키는 특성을 나타낸다.
이러한 본 발명의 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주(KACC93311P)의 특성을 이용하면 저온발효가 필요한 식품이나 발효주는 물론 발효사료를 효과적으로 제조할 수 있다.
그 결과, 본 발명의 생균제조성물은 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주(KACC93311P) 및 상기 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주(KACC93311P)의 배양액 중 하나 이상을 유효성분으로 포함할 수 있다.
또한, 본 발명의 발효가축사료는 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주(KACC93311P) 및 상기 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주(KACC93311P)의 배양액 중 하나 이상을 유효성분으로 포함할 수 있다. 이와 같이 발효가축사료가 본 발명의 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주 및 그 배양액중 하나 이상을 포함하게 되면 15℃미만의 온도조건, 더 나아가 10℃의 이하의 온도조건에서 보관되어도 발효가 일어나는 특성을 나타내므로 겨울철에도 유효하게 사용할 수 있다.
필요한 경우 본 발명의 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주(KACC93311P)는 운반이나 보관 등의 편의를 위하여 다양한 형태로 제제화 될 수 있다. 예를 들면, 동결보호제와 함께 동결건조하여 분말의 형태로 사용될 수 있고, 보존 담체와 혼합하여 흡착시킨 후 건조시켜 고체화하여 사용할 수도 있다. 상기 동결보호제 및 보존 담체는 당 분야에서 통상적으로 사용되는 것이면 그에 따른 특별한 제한은 없고, 예를 들면 동결보호제로는 글리세롤, 탈지유, 꿀 등이 사용될 수 있고, 보존 담체로는 규조토, 활성탄, 탈지강 등이 사용될 수 있다.
실시예
사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주를 다음과 같이 분리하여 동정하였다.
1. 균주의 분리
증류수 10ml에 전통누룩 1g을 첨가하여 연속 10배 희석한 다음 potato-dextrose agar(PDA)에 도말하여 효모 집락(colony)을 분리하였다. (배양조건은 10℃에서 5일간 배양) 분리된 효모 후보군은 다시 durham tube(듀럼 튜브)가 넣어진 Yeast extract 1%. Peptone, 2%. Dextrose,5%(YPD)broth 배지에 접종 균의 증식에 따라 이산화 탄소의 발생 유무로 발효 효모군을 선별하였다.
2. 26s-rDNA 도메인 D1-D2 서열분석을 통한 균주의 동정
선발된 효모군은 동정을 위한 단계로 26s rDNA 염기서열 상동성을 비교 분석하였다. 분리 효모 집락으로부터 Wizard genomic DNA purification kit (Promega, WI, USA)를 이용하여 genomic DNA를 정제한 후 26s rDNA primer D1-2를 이용하여 PCR 증폭하였다. 증폭된 sequence의 염기서열을 분석하고, 염기서열은 NCBI의 BLAST search (NCBI, http://www.ncbi.nlm.nih.gov)를 수행한 후 bioedit 프로그램과 Cluster W 프로그램을 효모의 동정에 이용하였다. Align된 염기서열은 Neighbor-Joining 방법으로 Neighbor-joining tree를 작성하였다.
도 1에 도시된 바와 같이 선발된 효모균의 콜로니 모양과 효모의 현미경사진을 비교하여 전형적인 효모 형태임을 알 수 있는데, 상술된 염기서열분석결과 얻어진 계통도는 도 2a에 나타내었고, 도 2b에 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주의 26s rDNA 염기서열을 나타내었다. 상기 염기서열분석결과 선발된 균주는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주로 동정되었다. 도 2a에 도시된 바와 같이 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)ATCC 18824 효모와 가장 가까운 근연관계를 나타내었다. 또한, 동정된 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주는 국립농업과학원 농업미생물은행에 2018년 8월 10일자로 기탁하여 KACC93311P 수탁번호를 부여받았다.
3. 실험용 균주 준비
순수 분리 동정된 카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주를 YPD 액체배지에 대량 배양 후 글리세롤 20% 함유하도록 첨가해 -20℃에서 보관하였다.
실험예 1. 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주의 저온성장성 확인
사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주(기탁번호: KACC93311P)의 저온성장성을 확인하기 위해 다음과 같이 실험하였다. 냉동 보관된 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주를 east extract 1%. Peptone, 2%. Dextrose,5%(YPD)broth 20ml에 접종 활성화 시켜, 같은 배지 50ml에 접종량 1x106/ml를 접종 한 다음 10℃로 조절된 냉장배양실에 배양하면서 24시간 간격으로 8일 동안 균수를 평판 계수법을 사용하여 측정하였고, 그 결과를 도 3 및 표 1에 나타내었다.
Figure 112019006681241-pat00001
표 1 및 도 3으로부터, 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주(분리균주)는 2일부터 증식을 하였으며 4일째 최대 증식력을 나타내었다. 반면 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주와 가장 근연관계에 있는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)ATCC 18824(표준균주)는 4일부터 증식을 하였으며 6일째에 최대 증식력을 보였다. 이러한 결과는 본 발명의 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주가 표준균주로 사용된 사카로마이세스 세레비지에 ATCC 18824 균주보다 저온에서 2배 이상 더 빨리 증식할 뿐만 아니라 증식량도 우수함을 보여준다.
실험예 2. 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주의 에탄올 발효조건 확인
저온(10℃) 및 상온(30℃)에서 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주의 에탄올 생산능을 다음과 같이 조사하고 그 결과를 표 2에 나타내었다. 여기서, 대조군으로 사카로마이세스 세레비지에 ATCC 18824(표준균주)를 사용하였다.
1. 저온 발효조건
10℃의 저온발효는 배지조성이 Yeast extract 1%. Peptone, 2%. Dextrose,5%(YPD)broth 50ml에 dextrose를 첨가하여 농도가 5%되게 하였다. 에틸 알콜 농도는 5일 배양 후 측정 하였다
2. 상온 발효조건
상온발효는 Yeast extract 1%. Peptone, 2%. Dextrose,5%(YPD)broth 와 실제 막걸리 발효 조성과 유사하게 쌀가루(rice powder) 누룩으로 조성하여 발효시켰다 배지조건은 도정 쌀을 세척한 후 121℃로 15분 멸균한 다음 건조기로 건조한 다음 분쇄기를 사용하여 분쇄한 건조 쌀가루 300(Dry Weight)을 증류수에 넣고 서서히 저어 주면서 포화시킨다 물은 최종 증류수 1000L로 하였다 이렇게 만들어진 발효 배양액은 상온으로 식힌 후 여기에 누룩 10g(Dry Weight)을 넣고, 충분히 풀어준 다음 효모를 투입한다. 투입효모는 다음과 같은 준비를 하였다. 즉 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주와 표준균주는 Yeast extract 1%. Peptone, 2%. Dextrose,5% (YPD)broth 배지300ml에 30℃ 24시간 진탕 배양으로 활성화 시켜 활성화된 균배양액을 원심분리 후 침전시킨 균체10g(Wet weight)을 접종한 다음 30℃ 배양기에서 배양하면서 12시간 간격으로 저어주면서 5일 배양 후 에틸알코올 농도를 측정하였다.
3. 에틸알코올 함량 측정
알코올 함량은 국세청의 주류분석규정(NTS 2010)에 의거하여 다음과 같이 시행하였다. 균질화한 발효 상등액을 100 mL 메스실린더의 눈금 까지 취하고 이것을 500 mL 플라스크에 옮긴 다음 이 메스실린더를 약 50 mL의 증류수로 2회 씻은 용액을 플라스크에 합치고 냉각기에 연결한 다음 메스실린더를 받는 용기로 하여 증류 한다. 증류용액이 80 mL가 되면 증류를 중지하고 증류수 를 20 mL 가하여 15ㅀC에서 주정계를 사용하여 Gay-Lussac 주 정도수환산표에 따라 최종 알코올 함량을 %로 나타내었다.
균주 / 배양온도 10℃ 30℃
YGT-10(분리균주) YPD YPD 쌀가루,누룩
4% 11% 18%
ATCC 18824
(표준균주:대조군)		 YPD YPD 쌀가루,누룩
2% 5% 15%
표 2에 나타난 바와 같이, 분리 균주인 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주는 저온(10℃)에서 5일 발효시킨 결과 4%의 에틸알코올 생산능을 보였으며 대조군은 2%의 생산능을 나타내어 분리 균주가 2배 이상 에틸알코올 생산능이 우수함을 알 수 있다. 또한, 상온(30℃)에서 5일 발효시에도 YPD배지에서는 분리균주인 YGT-10은 11%, 대조군인 표준균주 ATCC 18824는 에틸알코올 농도 5%를 보여 분리균주가 2배 이상 높은 발효력을 보여주었음을 알 수 있다. 쌀가루로 만든 배지에서도 분리균주가 대조군인 표준균주 ATCC 18824보다 우수한 에틸알코올의 생산능을 나타내는 것을 알 수 있다.
실험예 3. 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주의 CO2 생성능 확인
사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주가 실험예2의 저온발효조건 및 상온발효조건에서 배양시 CO2 생성능을 갖는지 듀람 튜브를 포화시켜 확인하고 그 결과를 도 4에 나타내었다.
도 4에 도시된 바와 같이, 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주는 저온일 경우 3일에 CO2를 발생시키고 5일에 CO2를 듀람 튜브를 포화시켰고, 30℃의 경우 접종 6시간부터 CO2 발생시키는 것으로 나타났으며 18시간에 이미 듀함 튜브를 포화 시켰음을 알 수 있다.
실험예 4. 사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주의 TMR의 발효 특성 확인
사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주가 포함된 발효가축사료의 저온 발효 특성을 알아보기 위해 TMR원료를 배합비 배로 혼합한 다음 최종 수분이 40%가 되도록 가수하고 표준균주와 분리균주(사카로마이세스 세레비지에 YGT-10 균주)를 0.2% 접종하여 TMR을 제조하였다. 접종시 균주의 균수 함량은 1.0ㅧ108cfu/g, TMR의 표면온도는 10℃ 였다.
총균수와 효모 균수의 측정은 각각 TSA와 YM 고체 배지를 사용하였다. 멸균 증류수 9mL에 발효사료 1g를 취하여 혼합 후 10-6까지 십진 희석한 다음 각각의 고체 배지에 100㎕씩 도말하여 10℃에서 96시간 동안 배양하였고, 그 결과를 표 3에 나타내었다. 발효취는 관능검사로 평가하여 그 결과를 표 4에 나타내었고, 발효가스의 함량은 포장지의 팽창 정도로 확인하여 그 결과를 도 5에 나타내었다.
Figure 112019006681241-pat00002
Incubation time(h) 0 24 48 72 96
YGT-10 + ++ ++ +++ ++++
ATCC 18824 + + ++ ++ ++++
표 3에 나타낸 바와 같이, 균수 측정 결과 발효 24일째부터 분리 균주 처리구의 효모 수가 많았고, 발효 시간 72h이 경과한 시점에는 분리균주인 YGT-10가 표준균주(ATCC 18824)에 비해 균수 함량이 2.3배 높게 나타났다.
에탄올취는 두 처리구 모두 발효초기에서 후기로 갈수록 증가하는 경향이었고, 분리균주는 발효 시작 후 24h과 72h에서 대조군인 표준균주에 비해 발효취의 강도가 높게 나타났다. 한편, 발효시작 후 96h이 경과한 시점에는 두 처리구간의 차이가 없었다.
도 5에 도시된 바와 같이, 가스 발생량 역시 분리균주(왼쪽)가 대조군(오른쪽)에 비해 증가했음이 육안으로 확인되었다.
이상의 실험결과로부터 본 발명의 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주는 전통 누룩에서 분리된 것으로, 온도 10℃에서 2일째부터 증식을 시작하여 저온성장성을 나타내며, 에틸알코올 발효능 및 CO2생성능을 나타내는 것을 알 수 있다.
또한, 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주를 포함하는 발효가축사료의 경우도 10℃에서 증식되어 에탄올발효취를 나타내므로 동물의 가축사료로 사용시 기호성 향상은 물론 동절기에도 활용이 가능한 특성을 갖는 것을 알 수 있다.
본 발명은 이상에서 살펴본 바와 같이 바람직한 실시 예를 들어 도시하고 설명하였으나, 상기한 실시 예에 한정되지 아니하며 본 발명의 정신을 벗어나지 않는 범위 내에서 당해 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 다양한 변경과 수정이 가능할 것이다.
국립농업과학원 농업미생물은행(국내) KACC93311P 20180810

Claims (6)

10℃ 이하의 저온 생장에 내성이 있는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주(KACC93311P)로서,
상기 균주는 10℃에서 5일 생장시 4%의 에틸알코올 생산능을 갖는 것을 특징으로 하는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주(KACC93311P).
삭제
10℃ 이하의 저온 생장에 내성이 있는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주(KACC93311P)로서,
상기 균주는 10℃에서 3일 생장시 이산화탄소를 발생시키는 것을 특징으로 하는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주(KACC93311P).
제 1 항 또는 제 3 항의 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주(KACC93311P) 및 상기 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주(KACC93311P)의 배양액 중 하나 이상을 포함하는 생균제조성물.
제 1 항 또는 제 3 항의 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주(KACC93311P) 및 상기 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) YGT-10 균주(KACC93311P)의 배양액 중 하나 이상을 포함하는 발효가축사료.
제 5 항에 있어서,
상기 발효가축사료는 10℃의 미만의 온도조건에서 보관되는 것을 특징으로 하는 발효가축사료.
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