KR101858222B1 - A medium for mass cultivation of a Sparassis crispa containing charcoal and a method for reduction of contamination rate using the same - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 꽃송이버섯 재배용 배지; 이의 제조방법; 및 상기 방법으로 제조된 배지를 이용한 꽃송이버섯 균사체 배양방법에 관한 것이다.The present invention relates to a culture medium for cultivating a mushroom; A method for producing the same; And a method for cultivating mycelia of P. japonica using the medium prepared by the above method.
꽃송이버섯(학명: Sparassis crispa)은 영어로는 cauliflower mushroom이라 불리우며, 식용, 약용, 또는 식품으로서 이용되고 있으며, 성분에 있어서는, 단백질과 비타민 B1, B2, D 등이 풍부하고 칼슘, 철분, 나트륨 등 미네랄 성분도 많이 함유되어 있음과 동시에, 기능성 미네랄 성분인 셀레늄(Se)이 100g당 970㎍ 함유되어 있는 것으로 확인되었다.Mushroom (Scientific name: Sparassis crispa is called cauliflower mushroom in English and is used as edible, medicinal, or food. Its components are rich in protein, vitamins B1, B2, D, and also contains minerals such as calcium, iron, and sodium. At the same time, it was confirmed that 970 μg of selenium (Se) as a functional mineral component was contained per 100 g.
특히, 꽃송이버섯은 추출량을 기준으로 했을 때, 면역증강 기능성물질인 베타글루칸(β-glucan) 성분을 다량 함유하고 있는 것으로 알려진 아가리쿠스 버섯(학명: Agaricus blazei : 영문명 Murill)에 비하여도 약 3~4배 정도나 많은 약 45% 정도를 함유하고 있다.Especially, the extract of Agaricus mushroom (name: Agaricus ), which is known to contain a large amount of beta-glucan, an immunomodulating functional substance, blazei : English name Murill) is about 3 to 4 times more than about 45% is contained.
베타글루칸 성분은 종양증식 억제작용, 알러지 증상 개선작용, NK세포 활성화작용, 혈당치상승 억제작용, 콜레스테롤상승 억제작용, 혈압상승 억제작용, 항산화활성, 콜라겐생성 촉진작용, 미백작용 등을 발휘하기 때문에, 이러한 베타글루칸 성분을 다량 함유하고 있는 꽃송이버섯은 건강기능식품의 원료로서의 이용이 매우 기대되고 있는 실정이다.The beta-glucan component exerts a tumor growth inhibiting action, an allergic symptom improving action, an NK cell activating action, a blood glucose level elevation inhibiting action, a cholesterol elevation inhibiting action, a blood pressure elevation inhibiting action, an antioxidative activity, a collagen production stimulating action, It has been expected that the mushroom, which contains a large amount of beta-glucan, is used as a raw material for health functional foods.
한편, 꽃송이버섯은 영양성분이 풍부한 식용버섯임에 동시에, 이를 원료로 하는 의약품의 개발에 대한 관심이 지대한, 다양한 용도의 버섯이기도 하다. 이러한 꽃송이버섯은 자연산을 구하기가 어렵기 때문에, 주로 인공재배에 의하여 수요를 충당하고 있으나, 인공재배에 있어서는 다음과 같은 문제점이 있다.On the other hand, Mushroom is an edible mushroom which is rich in nutritional ingredients. At the same time, it is also a mushroom of various uses with a great interest in the development of medicines using it as a raw material. Since these mushrooms are difficult to obtain natural products, they are mainly supplied by artificial cultivation. However, the artificial cultivation has the following problems.
첫째, 톱밥이나 원목배지에서의 종균 배양기간이 대략 4~5개월이 소요되며, 자실체의 생육기간도 2개월 이상이 소요되므로, 재배에 이르기까지 많은 기간이 소요된다.First, it takes about 4-5 months to grow seeds in sawdust or logs, and it takes more than two months to grow fruiting bodies, so it takes a lot of time to grow.
둘째, 현재 일반적으로 이용되고 있는 꽃송이버섯 재배용 배지의 조성은 통상 톱밥 약 75%에, 미강, 밀기울, 비트밀 등을 약 25%가량 혼합하여 사용하고 있지만, 이것만으로는 영양을 충분히 제공하지 못하므로, 상기한 바와 같이 자연산 꽃송이 버섯의 베타글루칸 성분이 약 45%인 것에 비교할 때, 15~20% 밖에는 포함되지 않으며, 병충해에 약하여 대량생산이 되지 못하고 있다.Second, the composition of the medium for cultivating the mushroom which is commonly used at present is usually about 25% mixed with about 75% of sawdust, rice bran, wheat bran, bitumen, etc. However, As described above, only about 15 to 20% of the beta-glucan component of the wild-bellied mushroom is less than about 45%, which is insufficient to be mass-produced due to insect pests.
따라서 최근에는 이와 같은 꽃송이버섯 재배와 관련된 여러가지 문제점을 개선하고자, 꽃송이버섯에 적합하면서도 베타글루칸의 유효성분량을 증가시킬 수 있는 영양제 및 이를 이용한 꽃송이버섯 재배방법에 대한 연구가 꾸준히 진행되고 있으나 아직까지는 만족할 만한 성과를 내지 못하고 있는 실정이다.Therefore, in order to solve various problems related to the cultivation of the mushroom, there have been a lot of researches on the nutritional agent and the method of cultivating the mushroom using the mushroom, which are suitable for the mushroom and increase the effective amount of beta glucan, It is not possible to achieve such a result.
이에, 본 발명자는 꽃송이버섯 균사체에 빠른 생장과 더불어 폐사율을 낮춤으로서 생산성이 뛰어난 배양 배지를 개발하고자 하였으며, 그 결과 낙엽송 및 숯을 포함하는 혼합물에 영양성분 및 유산균을 첨가하여 숙성시키는 과정을 거침으로써 제조되는 배지가 꽃송이버섯 균사체의 배양에 최적화된 배지임을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다. Accordingly, the present inventor has developed a culture medium having excellent productivity by lowering the mortality rate as well as rapid growth in the mycelia of P. japonicus. As a result, the nutrients and the lactic acid bacteria are added to the mixture containing the larch and charcoal, The present inventors completed the present invention by confirming that the medium to be produced is a medium optimized for culturing mycelia of P. japonicus.
따라서 본 발명의 목적은 꽃송이버섯 재배용 배지를 제공하는 것이다.Accordingly, an object of the present invention is to provide a medium for cultivating a mushroom.
본 발명의 또 다른 목적은, 꽃송이버섯 재배용 배지 제조방법을 제공하는 것이다.It is still another object of the present invention to provide a method for producing a medium for cultivating a mushroom.
본 발명의 또 다른 목적은, 상기 꽃송이버섯 재배용 배지를 이용하여 꽃송이버섯 균사체를 효과적으로 배양하는 방법을 제공하는 것이다.It is another object of the present invention to provide a method for effectively cultivating mycelia of P. japonica using the medium for cultivation of the mushroom.
상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위해서, In order to achieve the above-mentioned object of the present invention,
본 발명은 침엽수 톱밥, 숯, 호박껍질, 유산균, 염화칼슘, 물 및 아미노산을 포함하는 꽃송이버섯 재배용 배지를 제공한다.The present invention provides a culture medium for cultivating mushrooms of softwood including coniferous sawdust, charcoal, zucchini shell, lactic acid bacteria, calcium chloride, water and amino acids.
또한, 본 발명은 침엽수 톱밥과 숯을 혼합하여 가열하는 단계; 및 상기 혼합물에 호박껍질, 유산균, 염화칼슘, 물 및 아미노산을 첨가하여 숙성하는 단계를 포함하는 꽃송이버섯 재배용 배지 제조방법을 제공한다.The present invention also relates to a method for producing a carbon black, comprising: mixing and heating coniferous sawdust and char; And aging the mixture by adding zucchini shell, lactic acid bacteria, calcium chloride, water and amino acid to the mixture.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 유산균은 락토바실러스 사케이 또는 락토바실러스 플란타룸일 수 있다.In one embodiment of the present invention, the lactic acid bacteria may be lactobacillus saccharide or lactobacillus plantarum.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 숙성은 7일 내지 15일 동안 이루어질 수 있다.In one embodiment of the present invention, the aging may be carried out for 7 to 15 days.
또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 꽃송이버섯 재배용 배지를 고압멸균하는 단계; 상기 멸균된 배지에 꽃송이버섯 종균을 접종하는 단계; 및 상기 접종한 배지를 20~30℃에서 30~40일 동안 배양하는 단계를 포함하는, 꽃송이버섯 균사체의 배양방법을 제공한다.The present invention also relates to a method for producing a mushroom cultured medium, comprising the steps of: Inoculating the above-mentioned sterilized medium with the bryophyta mushroom seedlings; And culturing the inoculated medium at 20 to 30 DEG C for 30 to 40 days.
본 발명의 꽃송이버섯 재배용 배지는 침엽수 톱밥에 숯을 첨가함으로써 활성산소를 제거 및 꽃송이버섯 균사체 생장을 저해하는 물질을 흡착시킬 수 있으며, 호박껍질을 영양원으로 포함하고 유산균을 첨가하여 숙성시킴으로써 버섯 균사체의 생산성을 저하시키는 푸른곰팡이 등의 오염율을 효과적으로 낮춤과 동시에 배양기간을 획기적으로 단축시킬 수 있다. 본 발명의 배지를 이용하는 경우 꽃송이버섯 균사체의 배양기간이 30~40일 내로 단축될 수 있다.The culture medium for the growth of the mushroom of the present invention can remove the active oxygen and adsorb the substance inhibiting the growth of the mycelial growth of the mushroom by adding charcoal to the softwood sawdust and the mushroom mycelium by adding the lactic acid bacterium, It is possible to effectively reduce the contamination rate of the blue fungus and the like which deteriorate the productivity, and at the same time, the culture period can be remarkably shortened. When the medium of the present invention is used, the cultivation period of the mycelia of P. falciparum can be shortened to 30 to 40 days.
도 1은 본 발명에서 사용한 낙엽송(도 1a), 숯(도 1b) 및 호박껍질 분말(도 1c) 사진이다.
도 2는 본 발명의 제조과정을 통해 제조된 꽃송이버섯 재배용 배지의 사진이다.
도 3은 꽃송이버섯 균사 사진이다.
도 4a 내지 4c는 본 발명의 꽃송이버섯 재배용 배지를 입병하고 멸균한 후 꽃송이버섯 종균을 접종하여 배양준비를 하는 일련의 과정을 보여주는 사진이다.
도 5a 내지 5c는 본 발명의 꽃송이버섯 재배용 배지에 꽃송이버섯을 배양한 사진이다. Fig. 1 is a photograph of the larch (Fig. 1a), charcoal (Fig. 1b) and pumpkin shell powder (Fig. 1c) used in the present invention.
FIG. 2 is a photograph of a culture medium for growing mushroom cultivated through the manufacturing process of the present invention.
Fig.
FIGS. 4A to 4C are photographs showing a series of procedures for preparing a culture medium for cultivating a mushroom of the present invention and preparing a culture by inoculating the mushroom seedlings after sterilization.
5A to 5C are photographs showing the cultivation of the mushroom on the medium for cultivation of the mushroom of the present invention.
본 발명은 꽃송이버섯 재배용 배지를 제공함에 그 특징이 있다.The present invention is characterized by providing a culture medium for cultivating a mushroom.
자세하게는, 침엽수 톱밥, 숯, 호박껍질, 유산균, 염화칼슘, 물 및 아미노산을 포함하는 꽃송이버섯 재배용 배지에 관한 것이다. In detail, the present invention relates to a medium for cultivating a mushroom of mushroom including coniferous sawdust, charcoal, pumpkin husks, lactic acid bacteria, calcium chloride, water and amino acids.
상기 ‘침엽수 톱밥’은 낙엽송(Larix kaemferi C), 소나무(Pinus densiflora), 해송(Pinus thunbergii Parl.), 리기다소나무(Pinus rigida Mill.), 리기테다소나무(Pinus rigida P. taeda ybrid), 잣나무(Pinus koraiensis) 및 삼나무(Cryptomeria japonica) 중 하나 이상의 나무에서 얻어지는 것을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 낙엽송이 좋다.The "softwood sawdust" is larch (Larix kaemferi C), Pinus densiflora ( Pinus densiflora ), Pinus thunbergii Parl.), Ligandia pine ( Pinus rigida Mill.), Rigi teaswood ( Pinus rigida P. taeda ybrid), Pinus koraiensis , and Cryptomeria japonica , preferably of larch.
침엽수 톱밥의 평균크기는 1.5mm~5mm일 수 있다. 여기서 상기 침엽수 톱밥의 “크기”는 최대길이를 의미한다. 상기 평균크기의 침엽수 톱밥을 적용시 균사의 생장속도 및 꽃송이버섯의 생산성을 향상시킬 수 있다.The average size of the conifer sawdust may be between 1.5 mm and 5 mm. Here, the " size " of the softwood sawdust means the maximum length. When the average size of softwood sawdust is applied, the growth rate of hypha and the productivity of the mushroom can be improved.
상기 ‘숯’은 배지에 항균 활성과 더불어 활성산소를 제거하는 효과를 부여할 수 있으며, 꽃송이버섯 성장을 저해하는 물질을 흡착시키고 균사가 성장하면서 배출하는 노폐물을 배지로부터 제거하는 역할을 한다. 이러한 숯은 침엽수 톱밥 1000중량부에 대하여 5 내지 20중량부로 포함될 수 있다.The 'char' is capable of imparting an effect of removing active oxygen as well as an antibacterial activity to the medium. It also plays a role of adsorbing substances that inhibit growth of the mushroom and removing waste products discharged from the medium while growing hyphae. Such charcoal may be contained in an amount of 5 to 20 parts by weight based on 1000 parts by weight of the softwood sawdust.
상기 ‘호박껍질’은 배지에 영양성분을 부여할 뿐 아니라, 꽃송이버섯 배양 최대의 관건인 배지의 푸른곰팡이로부터의 오염을 억제하여 꽃송이버섯 균사체의 생산성을 높이는 역할을 한다.The 'zucchini shell' not only gives the nutrients to the medium but also acts to increase the productivity of the mycelium of the mushroom mycelia by inhibiting contamination from the blue mold of the medium which is the greatest point of cultivation of the mushroom.
종래 기술은 일반적으로 꽃송이버섯의 균사 생장을 위한 영양원 목적으로 밀가루(소백분)을 사용하는데, 본 발명에서는 영양원으로 밀가루 대신 호박껍질 분말을 사용함으로써 꽃송이버섯 배양시 오염율을 낮추고 배양기간을 단축시킴으로써 꽃송이버섯 균사체의 생산성을 월등하게 높일 수 있음을 하기 실험을 통해 확인하였다.The prior art generally uses wheat flour as a nutrient source for mycelial growth of the mushroom. In the present invention, by using the zucchini shell powder instead of wheat flour as a nutrient source, the pollution rate is lowered and the culture period is shortened The productivity of the mycelia of P. japonica can be greatly improved by the following experiments.
상기 ‘유산균’은 배지를 구성하는 침엽수 톱밥을 숙성시키는 역할을 함으로써 꽃송이버섯 종균 접종시 폐사량을 대폭 감소시킬 수 있다. 상기 유산균은 락토바실러스 종을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 락토바실러스 사케이 또는 락토바실러스 플란타룸을 사용할 수 있다.The 'lactic acid bacteria' can aggravate the softwood sawdust constituting the culture medium, thereby greatly reducing the amount of dead cells inoculated with the mushroom seedlings. The lactic acid bacteria may be selected from the group consisting of Lactobacillus species, preferably Lactobacillus saccharum or Lactobacillus plantarum.
상기 ‘염화칼슘’은 배지의 pH를 조절하는 역할을 한다.The 'calcium chloride' serves to control the pH of the medium.
일반적으로 균사는 생장함에 따라서 용액 중에서 영양물질을 흡수하기도 하고 용액중으로 불필요한 폐기물을 분비하기도 한다. 그 때문에 배지성분이 변하며 따라서 pH도 변화한다. 예를 들면 질소원으로 암모니움염을 첨가해주면 암모니움 이온이 균사에 의해 흡수되기 때문에 용액은 산성화 한다. 한편, 초산소다를 염기성으로 변화시킨다. 또한 균사내에서 생성되는 유기산이 축적, 용액중으로 분비되면 pH는 저하한다. 반대로 아미노산이 탈아미노 작용을 받아 암모니아가 생성되어 균사외로 분비되면 용액의 pH는 상승한다. 일반적으로 배지 중의 탄수화물이 비교적 많이 존재하면 배양 중에 용액은 서서히 산성 측으로 기울어지며, 반대로 펩톤과 같은 유기질소가 비교적 많은 경우는 용액의 pH는 상승해 간다.In general, mycelium absorbs nutrients in solution and releases unnecessary waste into solution as it grows. As a result, the medium component changes and thus the pH also changes. For example, when ammonia salt is added as a nitrogen source, the solution is acidified because ammonium ions are absorbed by mycelium. On the other hand, soda acetic acid is changed to basic. In addition, when the organic acid generated in the mycelium accumulates and is released into the solution, the pH decreases. Conversely, if the amino acid is deaminated and ammonia is formed and secreted out of the mycelium, the pH of the solution increases. In general, when a relatively large amount of carbohydrate is present in the medium, the solution gradually leans to the acidic side during culturing. On the contrary, when the organic nitrogen such as peptone is relatively large, the pH of the solution rises.
상기 ‘아미노산’은 꽃송이버섯 균사 생장시 질소원으로 작용한다.The 'amino acid' acts as a nitrogen source during the growth of mycelium of mushrooms.
본 발명의 꽃송이버섯 재배용 배지는 침엽수 톱밥, 숯, 호박껍질, 유산균, 염화칼슘, 물 및 아미노산 이외에도, 꽃송이버섯 생장에 필요한 미량원소, 비타민, 미네랄, 무기염류 등을 더 포함할 수 있다.In addition to the coniferous sawdust, charcoal, zucchini shell, lactic acid bacteria, calcium chloride, water and amino acid, the medium for cultivating the mushroom of the present invention may further contain trace elements, vitamins, minerals, inorganic salts and the like required for growth of mushroom.
본 발명은 또한, (a) 침엽수 톱밥과 숯을 혼합하여 가열하는 단계; 및 (b) 상기 혼합물에 호박껍질, 유산균, 염화칼슘, 물 및 아미노산을 첨가하여 숙성하는 단계를 포함하는 꽃송이버섯 재배용 배지 제조방법을 제공한다.The present invention also relates to a method for producing a green tea cake, comprising the steps of: (a) mixing and heating coniferous sawdust and charcoal; And (b) adding an amber shell, lactic acid bacteria, calcium chloride, water and an amino acid to the mixture and aging the mixture.
본 발명의 (a) 단계는 침엽수 톱밥과 숯을 혼합하여 가열하는 단계로서, 자세하게는 낙엽송 1000중량부를 기준으로 숯을 5~20중량부로 첨가하여 수분을 50~60%가 되도록 혼합한 다음 일정 시간동안 가열하는 단계이다. 가열 후 상기 혼합물은 식혀서 준비한다.The step (a) of the present invention is a step of mixing the coniferous sawdust and the char and heating the mixture. Specifically, the char is added in an amount of 5 to 20 parts by weight based on 1000 parts by weight of the larch, Lt; / RTI > After heating, the mixture is cooled and ready.
본 발명의 (b) 단계는 상기 혼합물에 호박껍질, 유산균, 염화칼슘, 물 및 아미노산을 첨가하여 숙성하는 단계로서, 자세하게는 상기 혼합물에 호박껍질 200~400중량부, 유산균 10~30중량부, 식용 염화칼슘 0.1~0.5중량부를 첨가하고, 여기에 물 1000~1500중량부와 아미노산 0.1~0.5중량부를 첨가한 후 숙성시키는 단계이다.In step (b) of the present invention, the mixture is aged by adding an amber shell, a lactic acid bacterium, a calcium chloride, water and an amino acid to the mixture. Specifically, 200-400 parts by weight of an amber shell, 10-30 parts by weight of a lactic acid bacterium, 0.1 to 0.5 parts by weight of calcium chloride is added, and 1000 to 1500 parts by weight of water and 0.1 to 0.5 parts by weight of amino acid are added, followed by aging.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 상기 유산균은 락토바실러스 사케이 또는 락토바실러스 플란타룸일 수 있다.In one embodiment of the present invention, the lactic acid bacteria may be Lactobacillus saccharum or Lactobacillus plantarum.
본 발명의 다른 구체예에서, 상기 숙성은 7일 내지 15일 동안 이루어질 수 있다.In another embodiment of the present invention, the aging can be effected for 7 to 15 days.
본 발명의 하기 실험에서는 숙성기간별 꽃송이버섯 균사체의 생산성을 조사한 결과, 숙성기간이 7일 내지 15일을 벗어나는 경우, 즉 7일 미만이나 15일을 초과하는 경우에는 꽃송이버섯 균사체의 생산성이 두드러지게 감소되는 것을 확인하였다. 특히 상기 숙성기간 범위에서 푸른곰팡이에 대한 오염을 저하 및 배양기간이 단축됨으로써 균주의 생산성이 획기적으로 개선되는 효과가 나타났으며, 이러한 숙성기간의 범위가 임계치로서 의미를 가지는 것을 확인하였다.In the following experiment of the present invention, the productivity of the mycelia of P. japonica according to the aging period was examined. When the aging period exceeded 7 to 15 days, that is, when the aging period was less than 7 days or more than 15 days, . Particularly, in the range of aging period, the productivity of the strain was remarkably improved by decreasing the pollution to the blue mold and shortening the incubation period, and it was confirmed that the range of the aging period was meaningful as the threshold value.
본 발명은 또한, (i) 상기 방법으로 제조된 꽃송이버섯 재배용 배지를 고압멸균하는 단계; (ⅱ) 상기 배지에 꽃송이버섯 종균을 접종하는 단계; 및 (ⅲ) 상기 접종한 배지를 20~30℃에서 30~40일 동안 배양하는 단계를 포함하는, 꽃송이버섯 균사체의 배양방법을 제공한다.The present invention also relates to a method for producing a mushroom culture comprising: (i) high pressure sterilization of a culture medium for cultivating mushroom cultivated by the above method; (Ii) inoculating the culture medium with the bacterium spp. And (iii) culturing the inoculated medium at 20 to 30 DEG C for 30 to 40 days.
본 발명의 (i) 단계는 상기 방법으로 제조된 꽃송이버섯 재배용 배지를 고압멸균하는 단계이다.The step (i) of the present invention is a step of high pressure sterilization of the medium for cultivation of the mushroom cultivated by the above method.
상기 멸균은 본 발명의 꽃송이버섯 재배용 배지가 충진된 용기의 뚜껑을 닫고, 100℃~130℃의 온도 및 1.0~1.5기압 조건에서 30분~150분 동안 멸균할 수 있다. 상기 조건에서 상기 배지 내의 모든 잡균을 제거하고 배지의 성분을 균사가 이용하기 쉬운 형태로 변화시켜 균사 생장을 촉진시킬 수 있다. 또한, 상기 멸균 이후 꽃송이버섯 재배용 배지가 충진된 용기를 15~25℃로 냉각시킬 수 있다.The sterilization can be performed by closing the lid of the container filled with the medium for cultivation of the mushroom cultivation of the present invention and sterilizing at a temperature of 100 ° C to 130 ° C and a pressure of 1.0 to 1.5 atm for 30 minutes to 150 minutes. Under the above conditions, all the germs in the medium can be removed, and the components of the medium can be changed into a form in which hyphae can be easily used, thereby promoting mycelial growth. In addition, the container filled with the culture medium for cultivation of the mushroom after the sterilization can be cooled to 15 to 25 ° C.
본 발명의 (ⅱ) 단계는 상기 멸균된 배지에 꽃송이버섯 종균을 접종하는 단계이다.The step (ii) of the present invention is a step of inoculating P. aeruginosa seeds to the sterilized medium.
상기 꽃송이버섯 종균은 통상적인 것을 사용할 수 있다. 예를 들면, KFRI 644, KFRI 645, KFRI 691, KFRI 700, KFRI 720, KFRI 722, KFRI 723, KFRI 724, KFRI 746, KFRI 747, KFRI 748 또는 KFRI 749 등을 사용할 수 있다.As the above-mentioned P. aeruginosa seeds, conventional ones can be used. For example, KFRI 644, KFRI 645, KFRI 691, KFRI 700, KFRI 720, KFRI 722, KFRI 723, KFRI 724, KFRI 746, KFRI 747, KFRI 748 or KFRI 749 can be used.
또한, 상기 꽃송이버섯 종균은 시중에서 판매 유통되는 품종을 사용할 수 있으며, 예를 들면, ‘화이트블룸’이나 ‘너울’ 품종을 사용할 수 있으나, 바람직하게는 ‘너울’이 좋다.For example, 'white bloom' or 'wool' varieties may be used, but preferably 'wool' is preferred.
참고로, 꽃송이버섯 종균은 액체배양한 것을 사용할 수 있다. 예를 들면, 꽃송이버섯 자실체에서 분리한 균주는 PDB 배지를 이용하여 20~35일 동안 20~25℃ 조건에서 배양한 다음, 다시 PDB 배지에 계대하여 20~35일 동안 20~25℃ 조건에서 배양한 것을 사용할 수 있다.For reference, it is possible to use a liquid culture of the mushroom sprout. For example, strains isolated from fruiting body of mushroom fungus are cultured in the PDB medium for 20 to 35 days at 20 to 25 ° C., then cultured in the PDB medium for 20 to 35 days at 20 to 25 ° C. Can be used.
상기 꽃송이버섯 종균은 멸균된 배지 100 중량부에 대하여 1~20 중량부 접종할 수 있다.The mushroom spp. Can be inoculated in an amount of 1 to 20 parts by weight per 100 parts by weight of the sterilized medium.
본 발명의 (ⅲ) 단계는 상기 접종한 배지를 20~30℃에서 30~40일 동안 배양하는 단계이다.The step (iii) of the present invention is a step of culturing the inoculated medium at 20 to 30 DEG C for 30 to 40 days.
상기 배양은 꽃송이버섯 자실체의 발이를 유도하는 것으로써, 자세하게는 접종된 꽃송이버섯 균주를 20~30℃ 및 60~70%의 습도에서 30~40일 동안 배양함으로써 균사체가 배지 전체에 퍼지고 원기가 형성되기까지의 재배 단계이다.The cultivation induces the feet of fruiting mushroom fruiting bodies. Specifically, the mycelium spreads throughout the medium and grows on the medium by culturing the inoculated mushroom strain at 20-30 ° C and 60-70% humidity for 30-40 days It is the cultivation stage until it becomes.
상기 (ⅲ) 단계 이후 20~30℃ 및 60~70%의 습도에서 10~60일 동안 추가로 배양함으로써 꽃송이버섯 자실체를 발육시킬 수 있다.After the step (iii), the foliar mushroom fruiting body can be developed by further culturing at 20 to 30 ° C and 60 to 70% of humidity for 10 to 60 days.
한편, 상기 꽃송이버섯의 수확시 색상 또는 꽃모양 자실체의 탄력도를 확인하여 채취시기를 결정할 수 있는데 대체로 어린 버섯은 진노랑을 띠고 있으며 재배가 완료된 버섯은 색깔이 연노랑을 띤 흰색에 가깝고 자실체의 끝부분이 물결처럼 골이 깊게 꽃양배추형으로 될 뿐만 아니라 채취시기가 가까워질수록 탄력이 떨어짐을 감안하여 채취시기를 결정할 수 있다.On the other hand, the time of harvesting can be determined by checking the elasticity of the color or floral fruiting body at the time of harvesting of the above-described mushroom, and the young mushroom is generally in the form of a crinoid, and the mushroom cultivated is close to a white- It can be determined not only that the corolla becomes deeply cauliflower like a wave, but also because the elasticity decreases as the harvesting time approaches.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. These examples are for further illustrating the present invention, and the scope of the present invention is not limited to these examples.
<< 실시예Example 1> 1>
배지 성분별 꽃송이버섯 배지 제조Manufacture of Mushroom Mushroom Medium
실시예Example <1-1> <1-1>
낙엽송 1000중량부에 숯을 5중량부로 첨가하여 수분을 50~60%가 되도록 혼합한 다음 2시간 동안 열을 가한 후 식혔다. 이후, 밀가루 300중량부, 펩톤 50중량부 및 물 1400중량부를 첨가하여 배지를 제조하였다. 낙엽송은 아영산업(남원)에서 구입하였으며, 숯(차콜)은 DUKSAN PHAMACEUTICAL CO., LTD.에서 구입한 것을 사용하였다. 낙엽송과 숯은 100 내지 150 메쉬 크기로 분쇄하여 사용하였다.Charcoal was added in an amount of 5 parts by weight to 1000 parts by weight of the larch, mixed with 50 to 60% water, heated for 2 hours, and then cooled. Thereafter, 300 parts by weight of wheat flour, 50 parts by weight of peptone and 1400 parts by weight of water were added to prepare a culture medium. Larch were purchased from Aoyong Industry (Namwon) and charcoal (charcoal) purchased from DUKSAN PHAMACEUTICAL CO., LTD. Was used. Larch and charcoal were ground to 100-150 mesh size.
실시예Example <1-2> <1-2>
낙엽송 1000중량부에 숯을 5중량부로 첨가하여 수분을 50~60%가 되도록 혼합한 다음 2시간 동안 열을 가한 후 식혔다. 이후, 밀가루 300중량부, 효모 20중량부, 식용 염화칼슘 0.3중량부를 첨가하고, 여기에 물 1400중량부와 아미노산 0.3중량부를 첨가한 후 10일간 숙성과정을 거쳐 배지를 제조하였다. Charcoal was added in an amount of 5 parts by weight to 1000 parts by weight of the larch, mixed with 50 to 60% water, heated for 2 hours, and then cooled. Thereafter, 300 parts by weight of wheat flour, 20 parts by weight of yeast and 0.3 part by weight of calcium chloride for cooking were added, and 1400 parts by weight of water and 0.3 part by weight of amino acid were added thereto, followed by aging for 10 days to prepare a culture medium.
실시예Example <1-3> <1-3>
상기 실시예 <1-2>와 비교하여 밀가루 대신 미강을 사용한 것 이외에는 동일한 과정을 통해 배지를 제조하였다. A medium was prepared by the same procedure except that rice bran was used instead of wheat flour as compared with the above Example <1-2>.
실시예Example <1-4> <1-4>
상기 실시예 <1-2>와 비교하여 밀가루 대신 호박껍질 분말(건조된 호박껍질을 분쇄한 것)을 사용한 것 이외에는 동일한 과정을 통해 배지를 제조하였다. A medium was prepared in the same manner as in Example <1-2>, except that the pumpkin skin powder (ground pumpkin skin) was used instead of wheat flour.
실시예Example <1-5> <1-5>
상기 실시예 <1-2>와 비교하여 효모 대신 락토바실러스 사케이를 사용한 것 이외에는 동일한 과정을 통해 배지를 제조하였다.A medium was prepared in the same manner as in Example < 1-2 > except that Lactobacillus sake was used instead of yeast.
실시예Example <1-6> <1-6>
상기 실시예 <1-2>와 비교하여 효모 대신 락토바실러스 사케이를 사용하고 밀가루 대신 미강을 사용한 것 이외에는 동일한 과정을 통해 배지를 제조하였다.The medium was prepared in the same manner as in Example < 1-2 > except that lactobacillus sage was used instead of yeast and rice bran was used instead of wheat flour.
실시예Example <1-7> <1-7>
상기 실시예 <1-2>와 비교하여 효모 대신 락토바실러스 사케이를 사용하고 밀가루 대신 호박껍질 분말을 사용한 것 이외에는 동일한 과정을 통해 배지를 제조하였다.The medium was prepared in the same manner as in Example < 1-2 > except that Lactobacillus sake was used instead of yeast and pumpkin skin powder was used instead of wheat flour.
실시예Example <1-8> <1-8>
상기 실시예 <1-2>와 비교하여 효모 대신 락토바실러스 플란타룸을 사용한 것 이외에는 동일한 과정을 통해 배지를 제조하였다.The medium was prepared in the same manner as in Example <1-2> except that Lactobacillus plantarum was used instead of yeast.
실시예Example <1-9> <1-9>
상기 실시예 <1-2>와 비교하여 효모 대신 락토바실러스 플란타룸를 사용하고 밀가루 대신 미강을 사용한 것 이외에는 동일한 과정을 통해 배지를 제조하였다.A medium was prepared in the same manner as in Example <1-2> except that Lactobacillus planta was used instead of yeast and rice bran was used instead of wheat flour.
실시예Example <1-10> <1-10>
상기 실시예 <1-2>와 비교하여 효모 대신 락토바실러스 플란타룸를 사용하고 밀가루 대신 호박껍질 분말을 사용한 것 이외에는 동일한 과정을 통해 배지를 제조하였다.The medium was prepared in the same manner as in Example < 1-2 > except that Lactobacillus planta was used instead of yeast and pumpkin skin powder was used instead of wheat flour.
<< 실험예Experimental Example 1> 1>
실시예Example 1의 배지를 이용한 생산성 실증배양 결과 Results of Productivity Assay Culture using Medium 1
상기 실시예 <1-1> 내지 실시예 <1-10>에서 제조된 각각의 배지에 꽃송이버섯 종균을 접종하여 배양하였다. 재배형태는 병재배를 이용하였으며, 내열성 플라스틱병(850 cc, 75 Φ)에 약 700 ± 25g씩 담아 고압멸균기에서 121℃에서 40분간 멸균한 뒤 꽃송이버섯 종균을 접종하였다. 접종한 배지는 배양실(2 m(W)×3.5 m(D)×2.5 m(H))에서 평균온도 25℃, 평균습도 60%의 조건에서 배양하였다.Each of the media prepared in Examples <1-1> to <1-10> was inoculated with a bacteriophage of Mushroom mushroom. The cultivated form was used as a seedling, and about 700 ± 25g was placed in a thermostable plastic bottle (850 cc, 75 Φ), sterilized at 121 ° C for 40 minutes in a high pressure sterilizer, and then inoculated with P. aeruginosa. The inoculated medium was cultured in an incubation room (2 m (W) × 3.5 m (D) × 2.5 m (H)) at an average temperature of 25 ° C. and an average humidity of 60%.
병재배에 따른 각각의 배지별 배양로스 및 배양일수를 측정하였다. 배양로스는 접종 후 2주내에 오염 등에 의한 로스(loss)이고, 로스율은 오염율에 해당하며, 배양일수는 접종일로부터 발이전 원기형성까지의 일수를 의미한다. The culture broth and incubation days of each medium were measured according to the seedlings. The culture broth is a loss due to contamination within 2 weeks after inoculation, and the loss rate corresponds to the contamination rate, and the incubation days means the days from the inoculation date to the development of the embryo.
자세한 결과는 하기 표 1에서 나타내었다.The detailed results are shown in Table 1 below.
상기에서 나타낸 바와 같이, 실시예 <1-1> 대비, 발효 미생물 첨가에 따른 숙성기간을 거친 다른 모든 실시예에서 푸른곰팡이 오염율이 낮고 배양일수가 단축되는 것을 확인할 수 있었다. 특히, 발효 미생물로 락토바실러스 사케이를 이용하고 호박껍질 분말을 영양분으로 첨가한 실시예 <1-7>의 경우 푸른곰팡이 오염율이 10%대로 감소되어 대폭적인 생산증대가 가능한 것을 확인할 수 있었다.As shown above, it was confirmed that the rate of contaminating the blue fungus was decreased and the number of culturing days was shortened in all the other examples after aging according to the addition of the fermenting microorganism as compared with Example <1-1>. Particularly, in Example <1-7> using lactobacillus sake as a fermenting microorganism and adding zucchini shell powder as a nutrient, it was confirmed that the contamination rate of blue fungus was reduced to 10%, which enabled a significant increase in production.
<< 실시예Example 2> 2>
숙성 기간별 꽃송이버섯 배지 제조Manufacture of Mushroom Mushroom Medium
실시예Example <2-1> <2-1>
낙엽송 1000중량부에 숯을 5중량부로 첨가하여 수분을 50~60%가 되도록 혼합한 다음 2시간 동안 열을 가한 후 식혔다. 이후, 밀가루 300중량부, 락토바실러스 사케이 20중량부, 식용 염화칼슘 0.3중량부를 첨가하고, 여기에 물 1400중량부와 아미노산 0.3중량부를 첨가한 후 5일간 숙성과정을 거쳐 배지를 제조하였다. Charcoal was added in an amount of 5 parts by weight to 1000 parts by weight of the larch, mixed with 50 to 60% water, heated for 2 hours, and then cooled. Thereafter, 300 parts by weight of wheat flour, 20 parts by weight of lactobacillus saccharide and 0.3 part by weight of edible calcium chloride were added, and 1400 parts by weight of water and 0.3 part by weight of amino acid were added thereto, followed by aging for 5 days to prepare a medium.
실시예Example <2-2> <2-2>
상기 실시예 <2-1>과 비교하여 숙성을 7일간 진행한 것 이외에는 동일한 과정을 통해 배지를 제조하였다.The medium was prepared in the same manner as in Example <2-1> except that aging was carried out for 7 days.
실시예Example <2-3> <2-3>
상기 실시예 <2-1>과 비교하여 숙성을 10일간 진행한 것 이외에는 동일한 과정을 통해 배지를 제조하였다.The medium was prepared in the same manner as in Example <2-1> except that the ripening was carried out for 10 days.
실시예Example <2-4> <2-4>
상기 실시예 <2-1>과 비교하여 숙성을 15일간 진행한 것 이외에는 동일한 과정을 통해 배지를 제조하였다.The medium was prepared in the same manner as in Example <2-1> except that the aging was carried out for 15 days.
실시예Example <2-5> <2-5>
상기 실시예 <2-1>과 비교하여 숙성을 20일간 진행한 것 이외에는 동일한 과정을 통해 배지를 제조하였다.The medium was prepared in the same manner as in Example <2-1> except that the aging was carried out for 20 days.
실시예Example <2-6> <2-6>
상기 실시예 <2-1>과 비교하여 숙성을 25일간 진행한 것 이외에는 동일한 과정을 통해 배지를 제조하였다.The medium was prepared in the same manner as in Example <2-1> except that the ripening was continued for 25 days.
실시예Example <2-7> <2-7>
상기 실시예 <2-1>과 비교하여 숙성을 30일간 진행한 것 이외에는 동일한 과정을 통해 배지를 제조하였다.The medium was prepared in the same manner as in Example <2-1> except that the ripening was continued for 30 days.
<< 실험예Experimental Example 2> 2>
실시예Example 2의 배지를 이용한 생산성 실증배양 결과 2 Results of Productivity Assay Culture
상기 실시예 <2-1> 내지 실시예 <2-7>에서 제조된 각각의 배지에 꽃송이버섯 종균을 접종하여 배양하였다. 재배형태는 병재배를 이용하였으며, 내열성 pp병(850 cc, 75 Φ)에 약 700 ± 25g씩 담아 고압멸균기에서 121℃에서 40분간 멸균한 뒤 꽃송이버섯 종균을 접종하였다. 접종한 배지는 배양실(2 m(W)×3.5 m(D)×2.5 m(H))에서 평균온도 25℃, 평균습도 60%의 조건에서 배양하였다.Each of the media prepared in Examples <2-1> to <2-7> was cultured inoculated with P. japonicus. The cultivated form was used as a seedling, and about 700 ± 25g was added to a heat - resistant pp bottle (850 cc, 75 Φ), sterilized at 121 ° C for 40 minutes in a high - pressure sterilizer, and then inoculated with P. aeruginosa. The inoculated medium was cultured in an incubation room (2 m (W) × 3.5 m (D) × 2.5 m (H)) at an average temperature of 25 ° C. and an average humidity of 60%.
병재배에 따른 각각의 배지별 배양로스 및 배양일수를 측정하였다. 배양로스는 접종 후 2주내에 오염 등에 의한 로스(loss)이고, 로스율은 오염율에 해당하며, 배양일수는 접종일로부터 발이전 원기형성까지의 일수를 의미한다. The culture broth and incubation days of each medium were measured according to the seedlings. The culture broth is a loss due to contamination within 2 weeks after inoculation, and the loss rate corresponds to the contamination rate, and the incubation days means the days from the inoculation date to the development of the embryo.
자세한 결과는 하기 표 2에서 나타내었다.The detailed results are shown in Table 2 below.
상기에서 나타낸 바와 같이, 숙성기간이 5일인 경우 로스율(오염율)이 높고 배양일수가 길어지는 반면, 숙성기간이 7일 이상인 경우 오염율이 낮아지고 배양일수가 짧아지는 것으로 나타났다. 다만, 숙성기간이 20일을 초과하는 경우도 생산성이 낮아지는 것을 확인할 수 있었다. As shown above, when the aging period is 5 days, the loss rate (contamination rate) is high and the incubation days are long, whereas when the aging period is 7 days or more, the contamination rate is decreased and the incubation days are shortened. However, when the aging period exceeded 20 days, the productivity was lowered.
따라서 7일 내지 20일 이내에 숙성기간이 가장 적합한 것으로 나타났으며, 특히, 숙성기간이 15일인 경우 푸른곰팡이 오염율이 8%대로 감소되어 가장 최적의 기간임을 확인할 수 있었다.Therefore, the aging period was most suitable within 7 to 20 days. Especially, when the ripening period was 15 days, the rate of contamination of blue mold was decreased to 8%, which is the most optimal period.
<< 실험예Experimental Example 3> 3>
꽃송이버섯 품종별 생산성 측정Productivity Measurements of Mushroom Cultivars
상기 실시예 <1-7>에서 제조된 배지에 꽃송이버섯 품종으로 ‘화이트블룸’과 농업진흥원에서 신품종으로 개발한 ‘너울’을 각각 종균으로 접종하여 배양하였다. 재배형태는 병재배를 이용하였으며, 내열성 pp병(850 cc, 75 Φ)에 약 700 ± 25g씩 담아 고압멸균기에서 121℃에서 40분간 멸균한 뒤 꽃송이버섯 종균을 접종하였다. 접종한 배지는 배양실(2 m(W)×3.5 m(D)×2.5 m(H))에서 평균온도 25℃, 평균습도 60%의 조건에서 배양하였다.In the medium prepared in Example <1-7>, 'white bloom' as a varieties of Zygomyx mushroom and 'wool' developed as a new variety in the National Institute of Agricultural Science and Technology were inoculated with seeds. The cultivated form was used as a seedling, and about 700 ± 25g was added to a heat - resistant pp bottle (850 cc, 75 Φ), sterilized at 121 ° C for 40 minutes in a high - pressure sterilizer, and then inoculated with P. aeruginosa. The inoculated medium was cultured in an incubation room (2 m (W) × 3.5 m (D) × 2.5 m (H)) at an average temperature of 25 ° C. and an average humidity of 60%.
병재배에 따른 각각의 배지별 배양로스 및 배양일수를 측정하였다. The culture broth and incubation days of each medium were measured according to the seedlings.
자세한 결과는 하기 표 3에서 나타내었다.The detailed results are shown in Table 3 below.
상기에서 나타낸 바와 같이, 꽃송이버섯 품종으로 ‘너울’의 경우 본 발명의 배양 배지에서 더욱 효과적으로 생산증대가 가능한 것을 확인할 수 있었다.As shown above, it was confirmed that the production of 'wool' in the cultivar of the present invention can be more effectively increased in the culture medium of the present invention.
<< 실험예Experimental Example 4> 4>
꽃송이버섯의 자실체 생산량 측정Measurement of fruiting body production of Mushroom
상기 실시예 <1-7>에서 제조된 배지에 꽃송이버섯 품종으로 ‘너울’을 종균으로 접종하여 배양하였다. 재배형태는 병재배를 이용하였으며, 내열성 pp병(850 cc, 75 Φ)에 약 700 ± 25g씩 담아 고압멸균기에서 121℃에서 40분간 멸균한 뒤 꽃송이버섯 종균을 접종하였다(입병수량 100병). 접종한 배지는 배양실(2 m(W)×3.5 m(D)×2.5 m(H))에서 평균온도 25℃, 평균습도 60%의 조건에서 배양하였다.In the medium prepared in the above Example <1-7>, a 'wolf' mushroom variety was inoculated with a seed culture. The cultivated form was used as a seedling, and about 700 ± 25g was added to a heat resistant pp bottle (850 cc, 75 Φ). The seeds were sterilized in a high pressure sterilizer at 121 ℃ for 40 minutes and then inoculated with a mushroom seedlings (100 bottles). The inoculated medium was cultured in an incubation room (2 m (W) × 3.5 m (D) × 2.5 m (H)) at an average temperature of 25 ° C. and an average humidity of 60%.
그 결과 상기 표 4에서 나타낸 바와 같이, 배지에 종균 접종 후 원기로부터 자실체를 발육시켜 자실체 생산량이 132g이 될 때까지 평균 재배기간이 48일이 소요되는 것을 확인하였다. 자실체 발생율도 88%로 나타나, 오염에 의한 폐사율도 매우 낮은 것을 확인할 수 있었다. 이러한 자실체 발육 재배기간은 종래 기술대비 획기적으로 단축된 기간으로서 본 발명의 배지조성물이 꽃송이버섯 배양에 매우 유용한 것을 확인할 수 있었다. As a result, as shown in Table 4, it was confirmed that the average growth period was 48 days until the fruit body production amount of 132 g was developed by growing fruiting bodies from the shoot after inoculation on the medium. The occurrence rate of fruit body was also 88%, and mortality rate due to contamination was also very low. As a result, it was confirmed that the culture medium of the present invention is very useful for culturing the mushroom.
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.The present invention has been described with reference to the preferred embodiments. It will be understood by those skilled in the art that various changes in form and details may be made therein without departing from the spirit and scope of the invention as defined by the appended claims. Therefore, the disclosed embodiments should be considered in an illustrative rather than a restrictive sense. The scope of the present invention is defined by the appended claims rather than by the foregoing description, and all differences within the scope of equivalents thereof should be construed as being included in the present invention.
Claims (5)
상기 혼합물에 호박껍질, 락토바실러스 사케이, 염화칼슘, 물 및 아미노산을 첨가하여 7일 내지 15일 동안 숙성하는 단계를 포함하는, 꽃송이버섯 재배용 배지 제조방법.Mixing the softwood sawdust and charcoal; And
Adding an amber shell, Lactobacillus saccharum, calcium chloride, water and an amino acid to the mixture, and aging the mixture for 7 to 15 days.
상기 멸균된 배지에 꽃송이버섯 종균을 접종하는 단계; 및
상기 접종한 배지를 20~30℃에서 30~40일 동안 배양하는 단계를 포함하는, 꽃송이버섯 균사체의 배양방법.A step of high pressure sterilization of the medium for cultivating the mushroom cultivated by the method of claim 2;
Inoculating the above-mentioned sterilized medium with the bryophyta mushroom seedlings; And
Culturing the inoculated medium at 20 to 30 DEG C for 30 to 40 days.
Priority Applications (1)
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KR1020170144739A KR101858222B1 (en) | 2017-11-01 | 2017-11-01 | A medium for mass cultivation of a Sparassis crispa containing charcoal and a method for reduction of contamination rate using the same |
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CN103755436A (en) * | 2013-12-12 | 2014-04-30 | 颍上县鸿涛菌业专业合作社 | Mushroom cultivation material with straw as raw material and preparation method thereof |
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GRNT | Written decision to grant |