KR20100066321A - Production method of the cauliflower mushroom hypha using grain medium and the hypha produced thereof - Google Patents

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Abstract

PURPOSE: A cultivating method of sparassis crispa hypha by using a grain medium is provided to massively manufacture hypha in which β-glucan is abundant by cultivating only hypha in the grain medium. CONSTITUTION: A cultivating method of sparassis crispa hypha by using a grain medium comprises the following steps: inoculating an inoculums in a liquid medium for 8 ~ 12 days in 24-26°C; manufacturing mushroom spawn by adding inorganic salts and a pH adjusting agent in grains; putting a grain medium in a heat resistance PP bottle; sterilizing the PP bottle including the grain medium for 60 ~ 90 minutes in 110-125°C; cooling the bottles; inoculating mushroom spawn in the PP bottle including cooled grain medium in an aseptic room condition; cultivating mushroom spawn inoculated in the grain medium while supplying oxygen and collecting the cultivated mushroom spawn.

Description

곡립배지를 이용한 꽃송이 버섯 균사체의 배양방법 및 이에 의해 배양된 균사체{PRODUCTION METHOD OF THE CAULIFLOWER MUSHROOM HYPHA USING GRAIN MEDIUM AND THE HYPHA PRODUCED THEREOF}Cultivation method of cultivated mycelium mushroom mycelium using grain medium and mycelium cultured by the same {PRODUCTION METHOD OF THE CAULIFLOWER MUSHROOM HYPHA USING GRAIN MEDIUM AND THE HYPHA PRODUCED THEREOF}

본 발명은 꽃송이 버섯 균사체를 배양하는 것에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 곡립배지를 사용하여 균사체만을 생장시켜서 이를 직접 식품에 적용하거나, 화장품 또는 의약으로서 사용하는 유효성분인 베타글루칸을 다량 함유하는 균사체만을 집균함으로써 짧은 기간에 베타글루칸을 다량 생산하고 생산성의 향상 및 생산비용의 절감을 목적으로 하는 곡립배지를 이용한 꽃송이 버섯 균사체의 배양방법에 관한 것이다.The present invention relates to the cultivation of mycelium mushroom mycelium, and more specifically, only the mycelium containing a large amount of beta glucan, which is an active ingredient to be directly applied to foods or used as cosmetics or medicines by growing only mycelium using a grain medium The present invention relates to a method of cultivating the mycelium of the mushroom mushroom mycelium using a grain medium for the purpose of producing a large amount of beta glucan in a short period of time by collecting the bacteria, improving productivity and reducing production costs.

꽃송이 버섯은 담자균류 민주름버섯목 꽃송이버섯과의 버섯으로서, 학명은 `Sparassis Crispa Wulf. ex Fr.`이다. 한국, 일본, 유럽, 북아메리카, 오스트레일리아 등지에 자생하며, 주로 침엽수를 자른 그루터기나 고목 언저리에서 자생한다. 꽃송이 버섯은 씹는 맛이 좋고 송이버섯과 같은 향이 나는 버섯이다. The zinnia mushroom is a fungus of the genus Pleurotus eryngii (Pleurotus eryngii). ex Fr.`. It is native to Korea, Japan, Europe, North America, Australia, etc., and mainly grows on stumps and dead trees cut through conifers. Blossom mushrooms are chewy and smell like matsutake mushrooms.

상기 꽃송이 버섯은 베타(β)-글루칸이 100ｇ중 43.6ｇ이나 함유되어 있어서 베타글루칸 덩어리라고 해도 좋을 정도인데, 상기 베타글루칸은 인체의 면역력을 높여주는 핵심 성분으로서 신체의 면역 체계를 바로잡아, 암치료, 비만, 동맥경화, 당뇨병, 염증, 알러지, 바이러스(조류독감), 골다공증, 항균, 건선, 대사증후군, 간질환 및 신장질환 등을 다스리는 것으로 밝혀졌으며, 이러한 이유로 인하여 일반인의 면역증강을 위한 건강식품으로도 각광받고 있다. 다당체의 일종인 베타글루칸은 세포조직의 면역능력을 활성화시켜 암세포의 증식과 재발을 억제하고 면역세포의 기능을 활발하게 하는 인터루킨(interleukin), 인터페론(interferon)의 생성을 촉진시키는 것으로 보고되고 있다. 꽃송이 버섯은 항암작용으로 유명한 상황버섯이나 영지버섯보다도 베타글루칸이 3-4배 이상 함유되어 있는데, 특히 베타글루칸중 항암작용에 중요한 역할을 하는 β(1-3) 성분이 많아서 항암제로 임상에 활용되고 있는 실정이다.The blossom mushroom contains 43.6 g of beta (β) -glucan in 100 g, so it may be called a beta glucan lump, and the beta glucan is a key ingredient to increase the body's immunity and corrects the body's immune system, cancer. Treatment, obesity, arteriosclerosis, diabetes, inflammation, allergies, viruses (bird flu), osteoporosis, antibacterial, psoriasis, metabolic syndrome, liver disease and kidney disease have been found to control the health of the immune system It is also in the spotlight as a food. Betaglucan, a polysaccharide, has been reported to promote the production of interleukin and interferon, which activate the immune system of cells and inhibit the proliferation and recurrence of cancer cells and activate the function of immune cells. Blossom mushroom contains beta glucan 3-4 times more than situation mushroom or ganoderma lucidum which is famous for its anticancer activity. Especially, beta glucan contains β (1-3) which plays an important role in anticancer activity. It's happening.

한편, 꽃송이 버섯은 자연상태에서 자라는 양이 극히 적어서 신비의 버섯이라고도 알려져 이를 인공재배하기 위한 많은 노력이 있어 왔다. 일본국 특개평11-56098호에는 낙엽송을 열수추출하여 수가용 성분을 제거한 후 영양원을 첨가한 배지를 이용하여 꽃송이 버섯을 재배하는 방법이 개시된 바 있고, 또한, 대한민국 특허공개번호 제2002-48337호 "꽃송이 버섯의 인공재배법"에는 "낙엽송과 광엽수를 혼합한 배지에 활성탄 및 활성칼슘을 첨가하고, 통상적으로 사용되는 질소원을 첨가한 배지를 고온고압으로 살균한 후, 꽃송이버섯 균사를 배양할 때의 온도 변화를 이용하는" 꽃송이 버섯의 인공재배법이 개시된 바 있다. On the other hand, blossom mushrooms are known to be mysterious mushrooms because of their small growth in nature, and there have been many efforts to artificially cultivate them. Japanese Patent Laid-Open No. Hei 11-56098 discloses a method of cultivating zinnia mushrooms using a medium supplemented with nutrients after hot water extraction of larch to remove water-soluble components. Also, Korean Patent Publication No. 2002-48337 In the "artificial cultivation of zinnia mushroom", "activated carbon and activated calcium are added to the medium mixed with larch and broadleaf tree, and the medium which adds the nitrogen source normally used is sterilized by high temperature and high pressure, and when cultivating the mushroom mushroom mycelium A method of artificial cultivation of the blossom mushroom has been disclosed.

더 나아가, 대한민국 등록특허 제10-0474980호에는 침엽수와 광엽수의 나무가루를 5:1 내지 3:1의 중량 비율로 배합하여 배지를 형성하고, 이 배지를 고온 상 압 살균시키고, 버섯의 종균을 접종하고, 균사 만연전까지 배양 온도를 유지하는 균사 만연전 배양 과정과; 균사 만연후에는 상기 배지를 승온시켜 배양하는 균사 만연후 승온배양 과정과; 상기 균사 만연후 승온 과정 후에는 일정 럭스의 조도를 유지하면서 상기 배지를 강온시켜 배양하는 균사 만연후 강온/광조사 배양 과정을 포함함을 특징으로 하는 꽃송이 버섯의 인공 재배방법을 제공하고 있다.Furthermore, Korean Patent No. 10-0474980 discloses a medium by combining coniferous and broadleaf trees in a weight ratio of 5: 1 to 3: 1 to form a medium, and the medium is sterilized under high pressure and high pressure, and spawns of mushrooms. Inoculating and maintaining the culture temperature until mycelia infestation; After the hyphae infestation, the culture medium by raising the temperature of the hyphae after incubation; After the hyphae rampant temperature rising process, while maintaining the illuminance of a certain lux provides a method for artificial cultivation of the flower mushroom, characterized in that it comprises a temperature / light irradiation culture process after the hyphae rampant culture.

그러나, 상기한 방법들은 자실체를 성숙시키기까지 평균 90-110일 정도가 소요되어 기능성 식품, 화장품 및 의약용도로 사용될 수 있는 베타글루칸의 생산에 장기간이 소요되어 비용이 증가하고, 생산성이 저하된다는 문제점이 있어 왔다. However, the above methods require an average of 90-110 days to mature fruiting bodies, resulting in long-term production of beta glucan that can be used for functional foods, cosmetics, and medicinal purposes, resulting in increased cost and reduced productivity. This has been.

따라서 본 발명은 상기한 과제를 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 곡립배지에서 30 내지 40일 만에 균사체만을 생산하여 이를 건조시킨 후 직접 기능성 식품에 첨가하거나 의약 또는 화장품으로 사용할 수 있는 꽃송이 버섯 균사체를 배양하여 자실체까지 생장시키는 기존의 꽃송이 버섯의 배양방법에 비해 극히 단기간에 꽃송이 버섯에 함유되어 있는 베타글루칸을 생산하는 꽃송이버섯 균사체의 배양방법을 제공한다.Therefore, the present invention has been made in order to solve the above problems, produce only the mycelium in 30 to 40 days in the grain medium and dried it, and then culture the blossom mushroom mycelium which can be directly added to functional food or used as a medicine or cosmetics It provides a method of cultivating the mycelia of the blossom mushroom mycelium to produce beta glucan contained in the blossom mushroom in a very short period of time compared to the conventional cultivation method of the blossoming mushroom to grow to fruiting body.

상기와 같은 과제를 해결하기 위하여 본 발명에서는 곡립배지에서 균사체만을 생장시켜 이를 상기의 제품들에 직접 첨가하여 사용할 수 있도록 한다. 이는 균사체의 베타글루칸 함량이 평균 45.6% 함유되어 있다는 2008년 09월 16일자에 발표 된 (주)한국분석기술연구원에서 행해진 연구결과(시험성적서)에 바탕을 두고 있다. 꽃송이 버섯의 균사체를 생장시키기 위하여는 30 내지 40일 정도만이 소요되므로 자실체까지 성숙시키는 노고와 소요시간의 경감을 이룰 수 있는 것이다.In order to solve the above problems, in the present invention, only the mycelium is grown in the grain medium so that it can be added directly to the above products. This is based on the research results (test report) conducted by the Korea Institute of Analytical Technology, Inc., which was published on September 16, 2008, which contains 45.6% of the average amount of beta glucan. It takes only 30 to 40 days to grow the mycelium of the blossom mushroom can achieve the effort and maturation of maturity to fruiting body.

본 발명의 목적을 달성하기 위하여 사용하는 곡립배지의 곡립으로는 식용이 가능한 쌀, 현미, 보리, 밀, 옥수수, 조 등으로 이루어지는 모든 곡립을 포함한다. 이러한 곡립을 사용함으로써 침엽수의 톱밥 등을 사용하여 꽃송이 버섯을 재배할 때 필요한 탄소원과 질소원을 별도로 추가할 필요가 없게 된다. 즉, 곡립에 포함되어 있는 탄수화물과 단백질 및 아미노산에 의하여 탄소원과 질소원이 동시에 충족되게 되는 것이다. 예컨대, 쌀의 경우는 단백질은 글루텔린(glutelin)이 주성분으로서 약 80%를 차지하고 있고 그 다음이 프롤라민으로 10% 정도로 글로불린(5%)과 알부민(5%)도 소량 함유하고 있다. 쌀은 다른 곡류에 비하여 단백질 함량은 낮은 편이나 아미노산의 조성에 있어서 lysine 함량은 보리쌀보다 약간 높고 옥수수, 조, 밀가루보다는 약 2배 정도 높은 편이다. 쌀에서 전분 다음으로 많은 성분은 단백질이다. 현미의 단백질 함량은 7.1-15.4%로서 도정에 의하여 단백질이 풍부한 호분층이 제거된 백미에는 5.6-13.3%의 단백질이 함유되어 있다. 단백질 함량은 품종, 기후, 재배조건에 따라 변이가 심하나 대체로 인디카종이 자포니카종보다 많고 멥쌀보다 찹쌀이 많다. The grain of the grain medium used to achieve the object of the present invention includes all grains composed of edible rice, brown rice, barley, wheat, corn, crude, and the like. By using such grains, there is no need to separately add a carbon source and a nitrogen source necessary for growing flower mushrooms using sawdust of coniferous trees. That is, the carbon source and the nitrogen source are simultaneously satisfied by the carbohydrate, the protein and the amino acid contained in the grain. For example, in rice, protein contains about 80% of glutelin as the main ingredient, followed by 10% of prolamin, and a small amount of globulin (5%) and albumin (5%). Rice has lower protein content than other grains, but the lysine content in amino acid composition is slightly higher than barley rice and about twice as high as corn, crude and wheat flour. The second most common ingredient in rice after starch is protein. The protein content of brown rice is 7.1-15.4%, and 5.6-13.3% of protein is contained in the white rice, which has been removed from the protein-rich nutrient layer by milling. Protein content varies greatly depending on the variety, climate and cultivation conditions. However, indica species are more abundant than japonica and glutinous rice than non-glutinous rice.

배지를 조성하기 위한 곡립은 단일 품목을 사용하거나 두 가지 이상의 곡립을 사용할 수 있다. 예컨대, 쌀만으로 배지를 조성할 수도 있고, 밀 20%와 보리 80% 혼합으로 이루어진 배지를 조성할 수도 있다.The grains for forming the medium may use a single item or two or more grains. For example, the medium may be composed of only rice, or a medium consisting of 20% wheat and 80% barley may be formed.

이러한 곡립배지에 무기염류로서, 식용이 가능한 인산일수소칼륨, 폴리인산나트륨, 및 제일인산칼슘, 및 제이인산칼륨 등을 곡립대비 1-5중량부 첨가하고 수소이온농도 조정제로서는 식품첨가제로 인정되는 것 중 염산, 초산, 유산 등의 유기산이나 수산화나트륨, 수산화칼륨, 염기성아미노산 등에서 선택되는 것을 사용할 수 있다. 이렇게 조성된 곡립배지에 수분 조절 및 살균,접종하여 꽃송이 버섯 균사체를 배양시킨다. As inorganic salts, 1-5 parts by weight of edible potassium monohydrogen phosphate, sodium polyphosphate, calcium phosphate, potassium diphosphate, and the like are added to the grain medium, and as a hydrogen ion concentration regulator, it is recognized as a food additive. Among them, those selected from organic acids such as hydrochloric acid, acetic acid and lactic acid, sodium hydroxide, potassium hydroxide, basic amino acid and the like can be used. Moisture control, sterilization, and inoculation to the grain medium thus formed to incubate mycelium mushroom mushroom mycelium.

본 발명에 의한, 곡립배지를 이용하여 꽃송이 버섯의 균사체만을 배양함에 있어서는, 실내 CO2 농도 2,000-2,500ppm의 조건에서 배양온도를 20-30℃, 바람직하게는 24-25℃, 수소이온농도는 pH 4.0-6.0, 바람직하게는 pH 4.5-5.5 범위에서 배양한다.In culturing only the mycelium of zinnia mushroom using the grain medium according to the present invention, the culture temperature is 20-30 ℃, preferably 24-25 ℃, hydrogen ion concentration under conditions of 2,000-2,500ppm indoor CO 2 concentration Incubate at pH 4.0-6.0, preferably pH 4.5-5.5.

곡립배지에서 꽃송이 버섯 균사체를 배양시키는 방법은 도 1에 나타낸 바와 같으며 구체적으로는 다음과 같다.The method of cultivating the flower mushroom mycelium in the grain medium is as shown in Figure 1 and specifically as follows.

1. 종균제조단계1. Spawn production stage

야생에서 채취한 균주를 평판배지, 예컨대 페트리 디쉬에 이식하여 2차 또는 3차에 걸친 계대배양을 실시한 후 균사를 떼어내어 평판 배지상에 이식ㆍ접종하고 배양온도 24-26℃, 습도 60-70%의 배양기에서 22-28일간 배양하고 평판배지상에서 생장한 흰색의 투명한 균사표면이 80%정도 형성된 후 평판배지와 멸균 증류수를 균질기에 넣어 균질화 한다. 균질화 된 균액을 삼각 플라스크의 액체배지에 접종한 후 배양온도 24-26℃에서 10-15일간 항온 진탕배양 하여 접종원으로 사용한다. 상 기 삼각 플라스크에 배양된 접종원을 종균 제조 과정에서 조제된 배양조 액체 배지에 접종한 후 배양 온도 24-26℃에서 8-12일 배양하여 종균으로 사용한다. 상기의 배양기간 및 온도는 본 발명의 종균을 제조하기에 최적의 범위에 속한다.Strains from the wild were transplanted into a plate medium, such as a Petri dish, followed by two or three passages. The mycelia were removed, transplanted and inoculated on a plate medium, and cultured at a temperature of 24-26 ° C and a humidity of 60-70. Incubate for 22-28 days in% incubator and form about 80% of the white transparent mycelial surface grown on the plate medium and homogenize the plate medium and sterile distilled water in the homogenizer. Homogenized homogenate is inoculated into the liquid medium of the Erlenmeyer flask and incubated in constant temperature for 10-15 days at 24-26 ℃. The inoculum incubated in the Erlenmeyer flask was inoculated into the culture medium liquid medium prepared in the spawn preparation process, and then cultured for 8-12 days at a culture temperature of 24-26 ° C. to be used as a spawn seed. The incubation period and temperature are in the optimum range for preparing the seed of the present invention.

2. 곡립배지조성단계2. Grain medium composition stage

쌀, 현미, 보리, 밀, 옥수수, 조 등으로 이루어지는 곡립중에서 임의의 한 품목 또는 두 가지 이상의 혼합된 곡립을 준비한다. 여기에 무기염류를 곡립대비 1-5 중량부와 수소이온농도 조정제를 첨가하여 pH를 4-6으로 조정한다. 이렇게 준비된 곡립배지에 음용수를 곡립대비 40-60 중량부 첨가한다. 무기염류와 pH 및 음용수가 상기의 범위에서 벗어나면 균사체의 성장이 충분치 않게 된다. Prepare any one item or two or more mixed grains from among grains consisting of rice, brown rice, barley, wheat, corn, crude, and the like. The inorganic salts are adjusted to pH 4-6 by adding 1-5 parts by weight of the grains and the hydrogen ion concentration regulator. 40-60 parts by weight of drinking water is added to the grain medium thus prepared. If inorganic salts, pH and drinking water deviate from the above ranges, the growth of mycelium will be insufficient.

무기염류로는, 식품첨가제로 사용되는 인산일수소칼륨, 폴리인산나트륨, 제일인산칼슘, 및 제이인산칼륨 등을 사용할 수 있으며, 생장시킨 균사체를 식품에 직접 첨가하지 아니할 경우에는 이러한 무기염류를 풍부히 포함하고 있는 폐화석을 상기 중량부 사용할 수도 있다. 수소이온농도 조정제는 역시 식품첨가제로 인정되는 염산, 초산, 유산 등의 유기산이나 수산화나트륨, 수산화칼륨, 염기성 아미노산 등에서 선택하여 사용한다.As inorganic salts, potassium monohydrogen phosphate, sodium polyphosphate, calcium phosphate, potassium diphosphate, and the like used as food additives can be used. When the mycelium grown is not added directly to food, such inorganic salts are richly used. The said waste part containing waste fossil may be used. The hydrogen ion concentration regulator is selected from organic acids such as hydrochloric acid, acetic acid and lactic acid, sodium hydroxide, potassium hydroxide, basic amino acids, etc., which are also recognized as food additives.

3. 입병단계3. Entry stage

상기와 같이 제조된 곡립배지를 내열성 PP병에 적량 입병한다. 일 실시예로서 1100㎤ 내열성 PP병에 600g씩 입병한다.The grain medium prepared as described above is appropriately bottled in a heat resistant PP bottle. As an example, 600 g of each 1100 cm 3 heat-resistant PP bottle is introduced.

4. 살균단계4. Sterilization Step

상기한 곡립배지를 포함하는 PP병을 115-125℃, 바람직하게는 121℃ 및 1-1.2기압에서 60-90분간 살균하고 15-25℃, 바람직하게는 20℃로 냉각시킴으로써 배지조성이 완료된다. 살균단계에서는 내열/내압성인 전용 살균솥을 사용하여 꽃송이 버섯의 균사 생장에 저해되는 세균 및 곰팡이균 등을 멸균한다.The composition of the medium is completed by sterilizing the PP bottle containing the above grain medium for 60-90 minutes at 115-125 ° C, preferably 121 ° C and 1-1.2 atm, and cooling to 15-25 ° C, preferably 20 ° C. . In the sterilization step, sterilization of bacteria and fungi that are inhibited in mycelial growth of the flower mushroom is performed using a dedicated sterilization pot that is heat / pressure resistant.

5. 접종단계5. Inoculation step

냉각된 곡립배지를 포함하는 내열성 PP병에 무균실에서 종균을 접종한다. 일 실시예로서 1100㎤ 내열성 PP병에 25-30g씩 접종한다. 입병 접종시 다른 균에 의해 배지가 오염되지 않도록 각별한 주의를 기울여야한다. Heat resistant, including cooled grain media Inoculate spawn in a clean room to a PP bottle. In one embodiment, 25-30 g of 1100 cm 3 heat-resistant PP bottles are inoculated. Special care should be taken to ensure that the medium is not contaminated by other organisms during inoculation.

6. 배양단계6. Culture step

상기 곡립배지에 접종된 꽃송이 버섯 균사를 배양온도 20-30℃, 바람직하게는 24-26℃, 습도 60-70%, 실내 CO2 농도 2,000-2,500ppm의 암기조건에서 30-40일간 미세 필터를 사용하여 무균처리된 공기를 공급하면서 배양한다. Blossom mushroom mycelium inoculated on the grain medium is culture temperature 20-30 ℃, preferably 24-26 ℃, humidity 60-70%, indoor CO 2 Incubate for 30-40 days at the memorization condition of concentration 2,000-2,500ppm while supplying sterile air.

7. 집균단계7. Sterilization stage

30-40일간 배양하여 곡립배지에 균사체가 만연할 때 집균하여 40-55℃의 온도에서 균사체를 함수율 8%가 되도록 송풍건조한다.Incubate for 30-40 days when the mycelium spreads in the grain medium and blow dry the mycelium to a water content of 8% at a temperature of 40-55 ℃.

본 발명에 의하여 식용이 가능한 곡립배지를 이용하여 자실체를 가지지 아니하는 균사체만을 배양함으로써 베타글루칸을 풍부하게 포함하는 균사체를 짧은 기간내에 생산함으로써, 생산성이 향상되고 대량생산이 가능함으로써 의약품, 식품, 사료, 화장품 등 여러 산업 분야에 많이 이용할 수 있는 효과를 얻을 수 있고, 꽃 송이 버섯 재배 업체의 수익 증대에 기여할 수 있다.By cultivating only the mycelium which does not have fruiting bodies by using the edible grain medium according to the present invention, by producing a mycelia containing abundant beta glucan in a short period of time, the productivity is improved and mass production is possible, so that the medicine, food, feed It can be used in many industries such as cosmetics and cosmetics, and it can contribute to increasing profits of flower mushroom growers.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다, 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by way of Examples, but the following Examples are merely illustrative of the present invention, and the content of the present invention is not limited to the following Examples.

실시예Example 1: 배양온도에 따른 균사생장 1: Mycelial growth according to culture temperature

배양실의 온도를 10℃, 15℃, 20℃, 25℃ 및 30℃와 같이 조건을 달리하면서 꽃송이버섯 균사체를 배양하여 균사의 크기를 측정하였다.        The size of the mycelia was measured by cultivating mycelium mushroom mycelium with varying conditions such as the temperature of the culture room 10 ℃, 15 ℃, 20 ℃, 25 ℃ and 30 ℃.

곡립으로는 현미를 사용하고 현미 중량대비 2중량부의 인산칼륨을 첨가하며, pH를 5.0으로 조정하고, 실내 CO2 함량을 2,000ppm으로 정한 상태에서 38일간 균사를 배양하였다. 종균제조 과정을 통해 얻어진 액체 종균을 곡립배지에 접종균으로 사용했다.Use brown rice as grain, add 2 parts by weight of potassium phosphate to brown rice weight, adjust pH to 5.0, and indoor CO 2 The mycelia were incubated for 38 days with the content set at 2,000 ppm. The liquid spawn obtained through the spawn preparation process was used as the inoculum in the grain medium.

결과를 그래프로서 도 2에 나타내었다. 도 2에서 알 수 있는 바와 같이, 배양온도가 20-26℃의 범위에서 균사생장이 70-80mm로서 가장 양호하다는 것을 알 수 있었다. The results are shown in FIG. 2 as a graph. As can be seen in Figure 2, the mycelial growth was found to be the best as 70-80mm in the culture temperature range of 20-26 ℃.

실시예Example 2: 배지  2: badge pHpH 에 따른 균사생장Mycelial growth according to

균사의 생장이 균일한 종균을 곡립배지에 접종하고 배지의 pH를 각각 3.0 4.0, 5.0, 6.0, 7.0, 및 8.0으로 달리하면서 온도를 25℃로 고정하고 실시예 1과 같이 균사를 배양하였다.Seeds with uniform growth of mycelia were inoculated into the grain medium, and the pH was fixed at 25 ° C. while varying the pH of the medium to 3.0 4.0, 5.0, 6.0, 7.0, and 8.0, respectively, and the mycelia were cultured as in Example 1.

결과를 그래프로서 도 3에 나타내었다. 도 3에서 알 수 있는 바와 같이, pH가 4.0-6.0의 범위에서 균사생장이 70-80mm로서 가장 양호하다는 것을 알 수 있었다. The results are shown in FIG. 3 as a graph. As can be seen in Figure 3, it was found that mycelial growth was the best as 70-80 mm in the pH range of 4.0-6.0.

실시예Example 3 :  3: 곡립의Grain 종류에 따른 균사생장 Mycelial growth by type

균사의 생장이 균일한 종균을 곡립배지에 접종하고 배양실의 온도를 25℃, pH를 5.0로 고정하고 곡립의 종류를 달리하면서 실시예 1과 같이 균사를 배양하였다. Seeds of uniform growth of mycelia were inoculated into the grain medium, and the mycelium was cultured as in Example 1 while the temperature of the culture chamber was fixed at 25 ° C. and the pH was set at 5.0.

결과를 그래프로서 도 4에 나타내었다. 도 4에서 알 수 있는 바와 같이, 현미만을 사용한 것의 균사생장이 78mm로서 가장 양호하다는 것을 알 수 있었다. 이와 같은 결과는 현미의 영양원, 즉, 탄소원과 질소원이 꽃송이 버섯 균사체를 생장시키기에 가장 우수하기 때문으로 추정할 수 있다.The results are shown in FIG. 4 as a graph. As can be seen in Figure 4, it was found that the mycelial growth of only using brown rice was the best as 78mm. These results can be estimated because the nutrient source of brown rice, that is, the carbon source and the nitrogen source are the best for growing the blossom mushroom mycelium.

실시예Example 4 : 실내  4: indoor COCO 22 함량의 변화에 따른 균사생장Mycelial growth according to the change of content

배양실의 온도를 25℃, pH를 5.0로 고정하고 곡립으로는 현미를 사용하고 일정한 크기의 실내 공간에 각각 CO2 농도를 1,500, 2,000, 2,500, 3,000, 및 3,500ppm으로 달리하면서 실시예 1과 같이 균사를 배양하였다. 1m3의 공간에 1,100cm3의 PP병을 320개 넣고 CO2 농도를 조절했는데, 사용된 CO2 농도 조절기로서는 (CO2 CONTROLLER, 두루산업사, 대한민국)을 사용하였다.The temperature of the incubation chamber is fixed at 25 ° C and pH is 5.0, and brown rice is used as a grain, and CO 2 Mycelia were incubated as in Example 1 with varying concentrations of 1,500, 2,000, 2,500, 3,000, and 3,500 ppm. Put 320 bottles of the PP 1,100cm 3 CO 2 in the space of 1m 3 The concentration was adjusted, the CO 2 used As a concentration regulator (CO 2 CONTROLLER, DURU INDUSTRIES, Korea).

결과를 그래프로서 도 5에 나타내었다. 도 5에서 알 수 있는 바와 같이, 실내 CO2 농도가 2,000-2,500ppm에서 균사생장이 충분히 이루어짐을 알 수 있었다.The results are shown in FIG. 5 as a graph. As can be seen in Figure 5, it can be seen that the mycelial growth is sufficient at the indoor CO 2 concentration of 2,000-2,500ppm.

도 1은 본 발명의 곡립배지를 이용한 꽃송이 버섯 균사체의 배양방법의 일 실시예를 나타내는 흐름도이다.1 is a flow chart showing an embodiment of a cultivation method of a mycelium mushroom mycelium using a grain medium of the present invention.

도 2는 본 발명의 균사체 배양방법의 배양온도의 변화에 따른 균사생장의 정도를 나타낸 그래프이다.Figure 2 is a graph showing the degree of mycelial growth according to the change in the culture temperature of the mycelium culture method of the present invention.

도 3은 본 발명의 균사체 배양방법의 배지 pH의 변화에 따른 균사생장의 정도를 나타낸 그래프이다.Figure 3 is a graph showing the degree of mycelial growth according to the change of the medium pH of the mycelia culture method of the present invention.

도 4는 곡립의 종류에 따른 균사생장의 정도를 나타낸 그래프이다.4 is a graph showing the degree of mycelial growth according to the type of grain.

도 5는 배양실의 실내 CO2 함량의 변화에 따른 균사생장의 정도를 나타낸 그래프이다.5 is indoor CO 2 of the culture chamber It is a graph showing the degree of mycelial growth according to the change of content.

Claims (4)

꽃송이 버섯 균사체를 배양함에 있어서,In cultivating the flower mushroom mycelium, 야생에서 채취한 균주를 평판배지에 이식하여 2차 또는 3차에 걸친 계대배양을 실시한 후 균사를 떼어내어 시험관에 이식ㆍ접종하고 24-26℃의 온도, 습도 60-70%의 배양기에서 22-28일간 배양하고 평판배지상에서 생장한 흰색의 투명한 균사표면이 80%정도 형성된 후, 평판배지와 멸균증류수를 균질기에 넣어 균질화하고, 균질화된 균액을 삼각 플라스크의 액체배지에 접종하고, 배양온도 24-26℃에서 10-15일간 배양기에서 항온진탕 배양하여 접종원을 제조하고, 상기 배양된 접종원을 배양온도 24-26℃에서 8-12일 배양조에 조제된 액체 배지에 접종한 후 배양하여 종균을 제조하는 단계;Strains from the wild were transplanted into plate medium and passaged for 2nd or 3rd time. After the mycelia were removed, they were transplanted and inoculated in a test tube. In the incubator at 24-26 ℃ and 60-70% humidity, 22- After culturing for 28 days and forming about 80% of the white transparent mycelial surface grown on the plate medium, homogenize the plate medium and sterile distilled water into a homogenizer, inoculate the homogenized solution into the liquid medium of the Erlenmeyer flask, and culture temperature 24- The inoculum was prepared by incubating the incubator at 26 ° C. for 10-15 days, and inoculating the cultured inoculum in a liquid medium prepared in a culture medium at a culture temperature of 24-26 ° C. for 8-12 days, followed by culturing to prepare a seed. step; 곡립중에서 임의의 한 품목 또는 혼합된 곡립을 준비하고, 여기에 무기염류를 곡립대비 1-5 중량부와 수소이온농도 조정제를 첨가하고 pH를 4-6으로 조정하여 곡립배지를 조성하는 단계;Preparing any one item or mixed grains among the grains, adding 1-5 parts by weight of inorganic salts to the grains and a hydrogen ion concentration regulator and adjusting the pH to 4-6 to form a grain medium; 상기 곡립배지를 내열성 PP병에 입병하는 접종단계;Inoculating the grain medium into a heat-resistant PP bottle; 상기 곡립배지를 포함하는 PP병을 110-125℃, 1-1.2기압에서 60-90분간 살균하고 15-25℃로 냉각시키는 살균단계;Sterilization step of sterilizing the PP bottle containing the grain medium at 110-125 ℃, 1-1.2 at 60-90 minutes and cooled to 15-25 ℃; 냉각된 곡립배지를 포함하는 PP병에 무균실에서 실시하는 종균의 접종단계;Inoculation step of the spawn carried out in a clean room in a PP bottle containing the cooled grain medium; 상기 곡립배지에 접종된 꽃송이 버섯 균주를 배양온도 24-26℃, 습도 60- 70%, 실내 CO2 농도 2,000-2,500ppm의 조건에서 30-40일간 무균처리된 산소를 공급하면서 암기조건에서 균사체를 배양하는 단계; Blossom mushroom strains inoculated into the grain medium culture temperature 24-26 ℃, humidity 60-70%, indoor CO 2 Culturing the mycelium under dark conditions while supplying sterile oxygen for 30-40 days at a concentration of 2,000-2,500 ppm; 상기 단계에서 생장된 집균하는 집균단계;A collecting step of collecting bacteria grown in the step; 를 포함하는 곡립배지에서 균사체만을 배양하는 것을 특징으로 하는 곡립배지를 이용한 꽃송이 버섯 균사체의 배양방법.Method of cultivating the mushroom mushroom mycelium using a grain medium, characterized in that cultivating only the mycelium in a grain medium containing a. 제 1항에 있어서, The method of claim 1, 상기 배양온도는 24-26℃임을 특징으로 하는 곡립배지에서 균사체만을 배양하는 것을 특징으로 하는 곡립배지를 이용한 꽃송이 버섯 균사체의 배양방법.The culture temperature is a culture method of the mycelium mushroom mycelium using a grain medium, characterized in that cultivating only the mycelium in a grain medium, characterized in that 24-26 ℃. 제 1항에 있어서,The method of claim 1, 상기 수소이온농도는 pH 4,5 내지 5.5임을 특징으로 하는 곡립배지에서 균사체만을 배양하는 것을 특징으로 하는 곡립배지를 이용한 꽃송이 버섯 균사체의 배양방법.The hydrogen ion concentration is a culture method of cultivated mushroom mycelium using a grain medium, characterized in that cultivation only mycelium in a grain medium, characterized in that pH 4,5 to 5.5. 제 1항 내지 3항의 어느 한 항에 의하여 배양된 균사체.Mycelium cultured according to any one of claims 1 to 3.
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