KR101508022B1

KR101508022B1 - 메틸 ((1ｓ)-1-(((2ｓ)-2-(5-(4'-(2-((2ｓ)-1-((2ｓ)-2-((메톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부타노일)-2-피롤리디닐)-1ｈ-이미다졸-5-일)-4-바이페닐릴)-1ｈ-이미다졸-2-일)-1-피롤리디닐)카르보닐)-2-메틸프로필)카르바메이트 디히드로클로라이드 염의 결정질 형태

Info

Publication number: KR101508022B1
Application number: KR20107002658A
Authority: KR
Inventors: 수진 김; 치 가오; 푸캉 양
Original assignee: 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니
Priority date: 2007-08-08
Filing date: 2008-07-31
Publication date: 2015-04-08
Also published as: JP5244179B2; CO6160327A2; BRPI0815142B1; EA201000196A1; AU2008284100A1; CN101778840B; ES2402791T3; MX2010001368A; US8629171B2; KR20100042641A; EA018152B1; CA2695729C; CA2695729A1; JP2010535785A; IL203684A; HK1144089A1; NZ583148A; BRPI0815142B8; CN101778840A; BRPI0815142A2

Abstract

본 발명은 개괄적으로 메틸 ((1S)-1-(((2S)-2-(5-(4'-(2-((2S)-1-((2S)-2-((메톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부타노일)-2-피롤리디닐)-1H-이미다졸-5-일)-4-바이페닐릴)-1H-이미다졸-2-일)-1-피롤리디닐)카르보닐)-2-메틸프로필)카르바메이트 디히드로클로라이드 염의 결정질 형태에 관한 것이다. 본 발명은 또한 개괄적으로 결정질 형태를 포함하는 제약 조성물 뿐만 아니라 C형 간염의 치료에서의 결정질 형태의 이용 방법 및 상기 결정질 형태의 수득 방법에 관한 것이다.

Description

메틸 ((1Ｓ)-1-(((2Ｓ)-2-(5-(4'-(2-((2Ｓ)-1-((2Ｓ)-2-((메톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부타노일)-2-피롤리디닐)-1Ｈ-이미다졸-5-일)-4-바이페닐릴)-1Ｈ-이미다졸-2-일)-1-피롤리디닐)카르보닐)-2-메틸프로필)카르바메이트 디히드로클로라이드 염의 결정질 형태 {CRYSTALLINE FORM OF METHYL ((1S)-1-(((2S)-2-(5-(4'-(2-((2S)-1-((2S)-2-((METHOXYCARBONYL)AMINO)-3-METHYLBUTANOYL)-2-PYRROLIDINYL)-1H-IMIDAZOL-5-YL)-4-BIPHENYLYL)-1H-IMIDAZOL-2-YL)-1-PYRROLIDINYL)CARBONYL)-2-METHYLPROPYL)CARBAMATE DIHYDROCHLORIDE SALT}

관련 출원과의 상호-참조

본원은 2007년 8월 8일자로 출원된 미국 가출원 제60/954,592호의 이점을 청구한다.

본 발명은 개괄적으로 메틸 ((1S)-1-(((2S)-2-(5-(4'-(2-((2S)-1-((2S)-2-((메톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부타노일)-2-피롤리디닐)-1H-이미다졸-5-일)-4-바이페닐릴)-1H-이미다졸-2-일)-1-피롤리디닐)카르보닐)-2-메틸프로필)카르바메이트 디히드로클로라이드 염의 결정질 형태에 관한 것이다. 본 발명은 또한 개괄적으로 결정질 형태를 포함하는 제약 조성물 뿐만 아니라 C형 간염 바이러스 (HCV)의 치료에서의 결정질 형태의 이용 방법 및 상기 결정질 형태의 수득 방법에 관한 것이다.

C형 간염 바이러스 (HCV)는 전세계적으로 어림잡아 1억 7천만 인구 (인간 면역결핍 바이러스 1형으로 감염된 수의 대략 5배)를 감염시키는 주요 인간 병원체이다. 상기 HCV 감염된 개인 중 실질적 분율은 간경화 및 간세포 암종을 비롯한 심각한 진행성 간 질환으로 발전된다.

현재, 가장 효과적인 HCV 요법은 알파-인터페론 및 리바비린의 조합을 사용하며, 이는 환자의 40％에서 지속적인 효능을 야기한다. 최근의 임상 결과는 peg화된 알파-인터페론이 단일요법으로서의 비수식 알파-인터페론보다 월등함을 증명한다. 그러나, peg화된 알파-인터페론 및 리바비린의 조합을 포함하는 실험적 치료 계획으로도, 실질적 분율의 환자들은 바이러스 로드에서 지속적인 감소가 없다. 따라서, HCV 감염의 치료를 위한 효과적인 치료제를 개발할, 분명하고 충족되지 않은 필요성이 존재한다.

화합물 메틸 ((1S)-1-(((2S)-2-(5-(4'-(2-((2S)-1-((2S)-2-((메톡시카르보닐)아미노)-3-메틸부타노일)-2-피롤리디닐)-1H-이미다졸-5-일)-4-바이페닐릴)-1H-이미다졸-2-일)-1-피롤리디닐)카르보닐)-2-메틸프로필)카르바메이트는 HCV 감염의 치료에 유용하다. 상기 화합물을 결정화하는 것이 어렵기 때문에, 순수한 생성물의 형성은 재현가능하지 않았다. 본원에서 하기 화학식 (I)로 나타내고 화합물 (I)이라고 언급되는 디히드로클로라이드 염이 본원에서 형태 N-2라고 언급되는 하나의 특정 다형체로 반복적으로 결정화될 수 있고, 상기 형태 N-2가 높은 수용해도 및 탁월한 정제 역량을 제공한다는 것이 밝혀졌다.

<화합물 (I)>

본 발명의 제1 측면에서, 본 발명은

의 형태 N-2를 제공한다.

제2 측면에서, 본 발명은 약 20℃ 내지 약 25℃의 온도에서 결정질 형태의 측정시, 하기 단위 셀 파라미터:

셀 치수: a = 7.5680 Å

b = 9.5848 Å

c = 16.2864 Å

α = 74.132 도

β = 84.132 도

γ = 70.646 도

공간군 P1

분자/단위 셀 1

을 특징으로 하는

의 형태 N-2를 제공한다.

제3 측면에서, 본 발명은 표 3에 나열된 바와 같은 단위 셀 내의 분율 원자 좌표를 특징으로 하는

의 형태 N-2를 제공한다.

제4 측면에서, 본 발명은 NIST 기타 적합한 표준으로 보정된 2θ를 갖는 스핀 모세관을 이용한 회절계 (CuKα)로 수집된 고품질 패턴을 기준으로, 약 20℃ 내지 약 25℃의 온도에서 10.3 ± 0.1, 12.4 ± 0.1, 12.8 ± 0.1, 13.3 ± 0.1, 13.6 ± 0.1, 15.5 ± 0.1, 20.3 ± 0.1, 21.2 ± 0.1, 22.4 ± 0.1, 22.7 ± 0.1, 및 23.7 ± 0.1의 2θ 값에서 분말 X-선 회절 패턴상의 특징적 피크를 갖는

의 형태 N-2를 제공한다.

제5 측면에서, 본 발명은

a) 약 20℃ 내지 약 25℃의 온도에서 결정질 형태의 측정시, 하기와 실질적으로 동일한 파라미터를 갖는 단위 셀:

셀 치수: a = 7.5680 Å

b = 9.5848 Å

c = 16.2864 Å

α = 74.132 도

β = 84.132 도

γ = 70.646 도

공간군 P1

분자/단위 셀 1;

b) NIST 기타 적합한 표준으로 보정된 2θ를 갖는 스핀 모세관을 이용한 회절계 (CuKα)로 수집된 고품질 패턴을 기준으로, 약 20℃ 내지 약 25℃의 온도에서 10.3 ± 0.1, 12.4 ± 0.1, 12.8 ± 0.1, 13.3 ± 0.1, 13.6 ± 0.1, 15.5 ± 0.1, 20.3 ± 0.1, 21.2 ± 0.1, 22.4 ± 0.1, 22.7 ± 0.1, 및 23.7 ± 0.1의 2θ 값에서의 분말 X-선 회절 패턴상의 특징적 피크; 및/또는

c) 전형적으로는 225 내지 245℃ 범위에서 개시되는 분해 흡열을 동반한 용융

중 하나 이상을 특징으로 하는

의 형태 N-2를 제공한다.

제6 측면에서, 본 발명은

의 실질적으로 순수한 형태 N-2를 제공한다.

제6 측면의 제1 실시양태에서, 상기 형태 N-2는 95 중량％ 이상의 순도를 갖는다. 제6 측면의 제2 실시양태에서, 상기 형태 N-2는 99 중량％ 이상의 순도를 갖는다.

제7 측면에서, 본 발명은 NIST 기타 적합한 표준으로 보정된 2θ를 갖는 스핀 모세관을 이용한 회절계 (CuKα)로 수집된 고품질 패턴을 기준으로, 약 20℃ 내지 약 25℃의 온도에서 10.3 ± 0.1, 12.4 ± 0.1, 12.8 ± 0.1, 13.3 ± 0.1, 13.6 ± 0.1, 15.5 ± 0.1, 20.3 ± 0.1, 21.2 ± 0.1, 22.4 ± 0.1, 22.7 ± 0.1, 및 23.7 ± 0.1의 2θ 값에서 분말 X-선 회절 패턴상의 특징적 피크를 갖는

의 실질적으로 순수한 형태 N-2를 제공한다.

제8 측면에서, 본 발명은

의 형태 N-2 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다.

제9 측면에서, 본 발명은

의 실질적으로 순수한 형태 N-2 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 제9 측면의 제1 실시양태에서, 상기 형태 N-2는 95 중량％ 이상의 순도를 갖는다. 제9 측면의 제2 실시양태에서, 상기 형태 N-2는 99 중량％ 이상의 순도를 갖는다.

제10 측면에서, 본 발명은

의 형태 N-2와 함께 항-HCV 활성을 갖는 1 또는 2종의 추가 화합물을 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 제10 측면의 제1 실시양태에서, 상기 형태 N-2는 90 중량％ 이상의 순도를 갖는다. 제10 측면의 제2 실시양태에서, 상기 형태 N-2는 95 중량％ 이상의 순도를 갖는다. 제10 측면의 제3 실시양태에서, 상기 형태 N-2는 99 중량％ 이상의 순도를 갖는다.

제10 측면의 제4 실시양태에서, 항-HCV 활성을 갖는 추가 화합물 중 적어도 하나는 인터페론 또는 리바비린이다. 제10 측면의 제5 실시양태에서, 상기 인터페론은 인터페론 알파 2B, peg화된 인터페론 알파, 컨센서스 인터페론, 인터페론 알파 2A, 및 림프모구양 인터페론 tau로부터 선택된다.

제10 측면의 제6 실시양태에서, 본 발명은

의 형태 N-2와 함께 항-HCV 활성을 갖는 1 또는 2종의 추가 화합물을 포함하며, 여기서 추가 화합물 중 적어도 하나는 인터류킨 2, 인터류킨 6, 인터류킨 12, 1형 헬퍼 T 세포 반응의 발전을 증대시키는 화합물, 간섭 RNA, 안티센스 RNA, 이미퀴모드, 리바비린, 이노신 5'-모노포스페이트 데히드로게나제 억제제, 아만타딘, 및 리만타딘으로부터 선택된 것인 제약 조성물을 제공한다.

제11 측면에서, 본 발명은 치료 유효량의

의 형태 N-2를 포유동물에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 포유동물에서 HCV 감염을 치료하는 방법을 제공한다.

제11 측면의 제1 실시양태에서, 상기 형태 N-2는 90 중량％ 이상의 순도를 갖는다. 제11 측면의 제2 실시양태에서, 상기 형태 N-2는 95 중량％ 이상의 순도를 갖는다. 제11 측면의 제3 실시양태에서, 상기 형태 N-2는 99 중량％ 이상의 순도를 갖는다. 제11 측면의 제4 실시양태에서, 상기 포유동물은 인간이다.

본 발명의 다른 실시양태는 본원에 개시된 실시양태 및/또는 측면 중 2개 이상의 적합한 조합을 포함할 수 있다.

본 발명의 또다른 실시양태 및 측면은 하기 제시되는 기재에 따라 명백할 것이다.

본 발명의 화합물은 또한 호변이성질체로서 존재하므로, 본 발명은 또한 모든 호변이성질체 형태를 포함한다.

[도면의 간단한 설명]

도 1은 화합물 (I)의 N-2 결정질 형태의 실험 및 모의실험 분말화된 X-선 회절 패턴 (T = 실온에서 CuKαλ=1.54178 Å)을 예시한다.

도 2는 화합물 (I)의 N-2 결정질 형태의 시차 주사 열량 패턴을 예시한다.

도 3은 화합물 (I)의 N-2 결정질 형태의 고체 상태 NMR 스펙트럼을 예시한다.

본 발명은 하기 화합물 (I)의 결정질 형태에 관한 것이다.

<화학식 I>

정의

본원에 사용된 바와 같은 "다형체"는 화학적 조성은 동일하나 결정을 형성하는 분자, 원자, 및/또는 이온의 공간 배열이 상이한 결정질 형태를 의미한다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "제약상 허용되는"은 건전한 의학적 판단 범위 내에서, 합리적인 유익/위험 비율에 알맞게 과도한 독성, 자극, 알레르기성 반응, 또는 다른 문제 합병증 없이 인간 및 동물의 조직에 접촉하기에 적합한 화합물, 물질, 조성물, 및/또는 투여 형태를 의미한다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "실질적으로 순수한"은 약 90％ 초과로 순수한 화합물 (I)의 형태 N-2를 의미한다. 이는 화합물 (I)의 다형체가 임의의 다른 화합물을 약 10％ 초과로 함유하지 않음을, 특히, 화합물 (I)의 임의의 다른 형태를 약 10％ 초과로 함유하지 않음을 의미한다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "치료 유효량"은 단독으로 또는 조합으로 투여시 C형 간염을 치료하기에 유효한 화합물 (I)의 결정질 형태의 양을 포함하는 것으로 의도된다. 화합물 (I)의 결정질 형태 및 그의 제약 조성물은 C형 간염을 치료하는 데에 유용할 수 있다. 화합물 (I)이 또다른 의약과 조합으로 사용되는 경우, 본원에 기재된 화합물의 조합은 상승작용 조합을 야기할 수 있다. 예를 들면 문헌 [Chou and Talalay, Adv. Enzyme Regul. 1984, 22, 27-55]에 기재된 바와 같은 상승작용은 조합으로 투여시 화합물의 효과가 단일제로서 단독 투여시의 화합물의 효과보다 클 때 발생한다.

용어 "치료하는"은 (i) 질환, 장애 및/또는 질병의 소인이 있을 수 있지만 아직 그에 걸렸다고 진단되지 않은 환자에서 질환, 장애 또는 질병이 발생하는 것을 막음; (ii) 질환, 장애 또는 질병을 억제, 즉, 그의 발전 정지; 및/또는 (iii) 질환, 장애 또는 질병의 완화, 즉, 질환, 장애 및/또는 질병의 퇴행을 야기하는 것을 의미한다.

한 실시양태에서, 본 발명은 화합물 (I)의 결정질 형태를 제공한다. 상기 화합물 (I)의 결정질 형태는 예를 들면 부형제, 담체, 및 상이한 분자 구조의 다른 활성 제약 성분 활성 화학적 실체 중 하나로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 다른 성분을 임의로 포함할 수 있는 제약 조성물 중에서 사용될 수 있다.

한 실시양태에서, 결정질 형태는, 실험으로 측정된 PXRD 패턴에서의 총 피크 면적 중 10％ 미만이, 또다른 실시양태에서는 5％ 미만이, 또다른 실시양태에서는 2％ 미만이 모의실험 PXRD 패턴에 없는 가외의 피크에서 기인하는 것으로 나타내어지는 상 동질성을 갖는다. 또다른 실시양태에서, 결정질 형태는 실험으로 측정한 PXRD 패턴에서의 총 피크 면적 중 1％ 미만이 모의실험 PXRD 패턴에 없는 가외의 피크에서 기인하는 상 동질성을 갖는다.

한 실시양태에서, 조성물은 화합물 (I)의 결정질 형태 N-2로 본질적으로 이루어진다. 상기 실시양태의 조성물은 조성물 중 화합물 (I)의 중량을 기준으로, 화합물 (I)의 결정질 형태 N-2를 90 중량％ 이상 포함할 수 있다. 나머지 물질은 상기 화합물의 다른 형태(들) 및/또는 반응 불순물, 및/또는 그의 제조로부터 발생하는 가공 불순물을 포함한다.

반응 불순물 및/또는 가공 불순물의 존재는 당업계에 공지된 분석 기술, 예를 들면, 크로마토그래피, 핵 자기 공명 분광계, 질량 분석법, 또는 적외선 분광계로 결정할 수 있다.

결정질 물질의 일반적 제조:

결정질 형태는 예를 들면 적합한 용매로부터의 결정화 또는 재결정화, 승화, 용융물로부터의 성장, 또다른 상으로부터의 고체 상태 변환, 초임계 유체로부터의 결정화 및 제트 분무를 비롯한 각종 방법에 의하여 생성될 수 있다. 용매 혼합물로부터 결정질 형태의 결정화 또는 재결정화를 위한 기법은 예를 들면 용매의 증발, 용매 혼합물의 온도 감소, 분자 및/또는 염의 과포화 용매 혼합물의 결정 씨딩(seeding), 용매 혼합물의 동결 건조 및, 역용매 (반대용매)의 용매 혼합물로의 첨가 등이 있다. 고 처리량의 결정화 기법은 다형체를 비롯한 결정질 형태를 생성하는 데 사용될 수 있다. 다형체를 비롯한 약물의 결정, 약물 결정의 제조 및 특징규명 방법은 문헌 [Solid-State Chemistry of Drugs, S. R. Byrn, R. R. Pfeiffer and J. G. Stowell, 2^nd Edition, SSCI, West Lafayette, Indiana (1999)]에 논의되어 있다.

용매를 사용하는 결정화 기법의 경우, 용매 또는 용매들의 선택은 통상적으로 하나 이상의 요인, 예컨대 화합물의 용해도, 결정화 기법 및 용매의 증기압에 따라 결정된다. 용매의 조합을 사용할 수 있으며, 예를 들면 화합물을 제1의 용매로 가용화시켜 용액을 생성한 후, 역용매를 첨가하여 용액중의 화합물의 용해도를 감소시킬 수 있으며, 그리하여 결정을 형성하게 된다. 역용매는 화합물의 용해도가 낮은 용매이다.

결정을 생성하는 한 방법에서는, 화합물을 적합한 용매에 현탁 및/또는 교반시켜 슬러리를 생성하며, 이를 가열하여 용해를 촉진시킬 수 있다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 "슬러리"는 주어진 온도에서 화합물 및 용매의 불균질 혼합물을 제공하기 위하여 추가량의 화합물을 함유할 수 있는 화합물의 포화 용액을 의미한다.

씨드 결정은 결정화를 촉진하기 위하여 임의의 결정화 혼합물에 첨가될 수 있다. 씨딩은 특정 다형체의 성장을 조절하기 위하여 또는, 결정질 생성물의 입자 크기 분포를 조절하기 위하여 사용될 수 있다. 따라서, 필요한 씨드의 양의 계산은 입수 가능한 씨드의 크기 및, 예를 들면 문헌 ["Programmed Cooling of Batch Crystallizers," J. W. Mullin and J. Nyvlt, Chemical Engineering Science, 1971, 26, 369-377]에 기재된 바와 같은 평균 생성물 입자의 원하는 크기에 따라 달라진다. 일반적으로, 작은 크기의 씨드는 회분식으로 결정의 성장을 효과적으로 조절하는 데 필요하다. 작은 크기의 씨드는 커다란 결정의 체질, 제분 또는 미분화에 의하여 또는, 용액의 미세결정화에 의하여 생성될 수 있다. 결정을 제분 또는 미분화하는 것이 원하는 결정 형태의 결정화도에서의 어떠한 변화 (즉, 무정형으로 또는 또다른 다형체로의 변화)도 초래하지 않도록 주의를 기울여야만 한다.

냉각된 결정화 혼합물은 진공하에서 여과할 수 있으며, 단리된 고체는 적합한 용매, 예컨대 저온의 재결정화 용매로 세척하고, 질소 퍼징하에 건조시켜 원하는 결정질 형태를 생성할 수 있다. 분리된 고체는 적합한 분광학적 또는 분석 기법, 예컨대 고체 상 핵 자기 공명, 시차 주사 열량, X-선 분말 회절 등에 의하여 분석하여 생성물의 바람직한 결정질 형태의 형성을 확인할 수 있다. 생성된 결정질 형태는 통상적으로 처음에 결정화 절차에 사용된 화합물의 중량을 기준으로, 약 70 중량％ 초과의 단리 수율, 바람직하게는 90 중량％ 초과의 단리 수율의 양으로 생성된다. 생성물은 필요할 경우, 생성물의 덩어리를 제거하기 위하여 메쉬 스크린을 통하여 통과 또는 동시제분될 수 있다.

결정질 형태는 화합물 (I)을 생성하기 위한 최종 공정의 반응 매질로부터 직접 생성될 수 있다. 이는 예를 들면 화합물 (I)이 결정화될 수 있는 용매 또는 용매들의 혼합물을 최종 공정 단계에 사용하여 달성될 수 있다. 또는, 결정질 형태는 증류 또는 용매 첨가 기법에 의하여 얻을 수 있다. 이러한 목적에 적합한 용매의 예로는 양성자성 극성 용매, 예를 들면 알콜 및 비양성자성 극성 용매, 예컨대 케톤을 비롯한 전술한 비극성 용매 및 극성 용매 등이 있다.

샘플 중의 하나 초과의 다형체의 존재는 분말 X-선 회절 (PXRD) 또는 고체 상 핵자기 공명 분광학 (SSNMR)과 같은 기법에 의하여 측정될 수 있다. 예를 들면, 모의실험에 의한 PXRD 패턴과 비교했을 때, 실험으로 측정된 PXRD 패턴에서의 가외의 피크의 존재는 샘플 중의 하나 초과의 다형체를 나타낼 수 있다. 모의실험 PXRD는 단일 결정 X-선 데이타로부터 계산될 수 있다. 문헌 [Smith, D. K., "A FORTRAN Program for Calculating X-Ray Powder Diffraction Patterns," Lawrence Radiation Laboratory, Livermore, California, UCRL-7196 (April 1963)] 참조.

특징규명:

화학식 (I)의 형태 N-2는 그 작업이 당업자에게 공지되어 있는 다양한 기법으로 특징규명될 수 있다. 특징규명 방볍의 예로는 단일 결정 X-선 회절, 분말 X-선 회절 (PXRD), 모의실험 분말 X-선 패턴 (Yin. S.; Scaringe, R. P.; DiMarco, J.; Galella, M. and Gougoutas, J. Z., American Pharmaceutical Review, 2003, 6,2, 80), 시차 주사 열량 (DSC), 고체-상태 C¹³ NMR (W. L. Earl and D. L. VanderHart, J. Magn. Reson., 1982, 48, 35-54), 라만 분광학, 적외선 분광학, 등온 흡습 곡선, 열 중량 분석 (TGA) 및 고온 단계 기법이 포함되나 이에 제한되지 않는다.

상기 형태는 형태 N-2의 단일 결정의 단위 셀 측정에 기초하는 단일 결정 X-선 회절을 사용하여 특징규명 및 구별될 수 있다. 단위 셀의 상세한 설명은 본 명세서에서 참고로 인용하는 문헌 [Stout & Jensen, X-Ray Structure Determination: A Practical Guide, Macmillan Co., New York (1968), Chapter 3]에 제시되어 있다. 대안으로, 결정질 격자 내 공간 관계에서의 원자의 독특한 배열은 관찰된 분율 원자 좌표(fractional atom coordinate)에 따라 특징규명될 수 있다. 또다른 결정질 구조의 특징규명 방법은 회절 프로파일을 동일한 분석 온도에서 실시되는 순수한 분말 물질을 나타내는 모의실험 프로파일과 비교하는 분말 X-선 회절 분석 및, 일련의 2θ 값으로서 특징규명되는 해당 형태에 대한 측정에 의한 것이다.

당업자는 X-선 회절 패턴이 사용한 측정 조건에 따라 달라지는 오차의 측정과 함께 얻어질 수 있다는 것을 숙지할 것이다. 특히, 일반적으로 X-선 회절 패턴에서의 세기는 사용한 측정 조건에 따라 변동될 수 있는 것으로 공지되어 있다. 또한 상대적 세기는 실험 조건에 따라 변경될 수 있으며, 따라서 세기의 정확한 순서는 고려해서는 안된다는 것을 이해하여야 한다. 또한, 통상의 X-선 회절 패턴에 대한 회절각의 측정 오차는 통상적으로 약 5％ 이하이고, 이와 같은 측정 오차의 정도는 전술한 회절각과 관련됨을 고려해야만 한다. 따라서, 본 발명의 결정 형태는 본 명세서에 개시된 도면에 도시된 X-선 회절 패턴과 완전히 동일한 X-선 회절 패턴을 제공하는 결정 형태에 한정되지 않는 것으로 이해하여야 한다. 첨부한 도면에 개시된 것과 실질적으로 동일한 X-선 회절 패턴, DSC 온도기록도 또는 SSNMR 스펙트럼을 제공하는 임의의 결정 형태는 본 발명의 범위에 포함된다. X-선 회절 패턴의 실질적인 동일성을 확인하는 능력은 당업자의 권한에 포함된다.

용도:

화학식 (I)의 N-2 형태는 단독으로 또는 다른 화합물과의 조합으로 HCV 감염을 치료하기 위해 사용될 수 있다.

본 발명은 또한 치료 유효량의 화합물 (I)의 N-2 형태 및 1종 이상의 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물을 제공한다.

상기 조성물에서 활성 성분, 즉, 화합물 (I)의 형태 N-2는 전형적으로는 조성물의 0.1 중량％ 내지 99.9 중량％를 구성하고, 종종 약 5 내지 95 중량％를 구성한다. 몇몇 사례에서, 제제의 pH를 제약상 허용되는 변경제 (예컨대 탄산칼슘 및 산화마그네슘)로 조정하여 제제화된 화합물 또는 그의 전달 형태의 안정성을 향상시킬 수 있다. 본 발명의 다형체의 제제는 흡수 및 생체이용률 향상을 위한 첨가제도 함유할 수 있다.

본 발명의 제약 조성물은 경구로, 비경구로 또는 이식 저장소를 통해 투여될 수 있다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 비경구는 피하, 피내, 정맥내, 근육내, 관절내, 윤활막내, 흉골내, 경막내, 및 병변내 주사 또는 주입 기법을 포함한다.

제약 조성물은 멸균 주사가능한 제제, 예를 들면, 멸균 주사가능한 수성 또는 유성 현탁액의 형태로 존재할 수 있다. 상기 현탁액은 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁제를 이용하여 당업계에 공지된 기법에 따라 제제화될 수 있다. 상기 화합물의 제조에 관한 상세내용은 당업자에게 공지되어 있다.

경구 투여되는 경우, 본 발명의 제약 조성물은 캡슐, 정제, 및 수성 현탁액 및 용액을 포함하나 이에 제한되지 않는, 경구로 허용되는 임의의 투여 형태로 투여될 수 있다. 경구 사용을 위한 정제의 경우에서, 통상적으로 사용되는 담체로는 락토스 및 옥수수 전분이 포함된다. 윤활제, 예컨대 마그네슘 스테아레이트도 또한 첨가될 수 있다. 캡슐 형태로의 경구 투여의 경우, 유용한 담체/희석제로는 락토스, 고분자량 및 저분자량 폴리에틸렌 글리콜, 및 건조 옥수수 전분이 포함된다. 수성 현탁액을 경구 투여하는 경우, 활성 성분은 유화제 및 현탁제와 배합된다. 원한다면, 특정 감미제 및/또는 향미제 및/또는 착색제가 첨가될 수 있다.

상기 언급된 조성물에 대한 다른 적합한 담체는 표준 제약 서적, 예를 들면 문헌 ["Remington's Pharmaceutical Sciences", 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, Penn., 1995]에서 발견할 수 있다. 본 발명의 제약 조성물의 적합한 전달 형태의 고안 및 제조에 관한 추가의 세부사항은 당업자에게 공지되어 있다.

HCV 매개 질환의 예방 및/또는 치료를 위한 단일요법에서, 본 발명의 화합물의 1일 당 체중 1 킬로그람 당 약 0.05 내지 약 100 밀리그람 ("mg/kg")의 투여량 수준, 보다 구체적으로는 1일 당 약 0.1 내지 약 50 mg/kg(체중)이 전형적이다. 전형적으로는, 본 발명의 제약 조성물은 1일 당 약 1 내지 약 3회 투여되거나 또는 별법으로, 연속 주입으로서 투여될 것이다. 이러한 투여는 만성 또는 급성 요법으로서 사용될 수 있다. 단일 투여 형태를 제조하기 위하여 담체 물질과 조합될 수 있는 활성 성분의 양은 치료하는 숙주 및 특정 투여 방식에 따라 달라질 것이다.

당업자는 상기 언급된 것보다 더 낮거나 더 높은 투여량이 요구될 수 있음을 이해할 것이다. 임의의 특정 환자에 대한 구체적인 투여량 및 치료 투여계획은 사용되는 특정 화합물의 활성, 연령, 체중, 전체적 건강 상태, 성별, 식이, 투여 시간, 치료 지속기간, 배설율, 약물 조합, 감염의 중증도 및 과정, 감염에 대한 환자의 소질 및 치료 전문의의 판단을 비롯하여 다양한 인자에 의존할 것이다. 한 실시양태에서, 단위 투여량 제제는 본원에서 상기 언급된 바와 같은 일일 투여량 또는 하위-투여량, 또는 그의 적절한 분획의 활성 성분을 함유하는 것이다. 일반적으로, 치료는 펩티드의 최적 투여량보다 실질적으로 낮은 소투여량으로 시작한다. 이하에서는, 특정 상황에서의 최적 효과에 도달할 때까지 투여량은 작은 증가량만큼 증가된다. 일반적으로, 화합물은, 일반적으로 어떠한 해로운 또는 유해한 부작용도 유발함이 없이 항바이러스 유효 결과를 얻게 될 농도 수준으로 투여되는 것이 가장 바람직하다.

본 발명의 조성물이 본 발명의 다형체 및 1종 이상의 추가의 치료제 또는 예방제의 조합물을 포함하는 경우, 화합물 및 추가 작용제는 모두 통상적으로 단일요법 투여계획에서 보통 투여되는 투여량의 약 10 내지 100％, 보다 바람직하게는 약 10 내지 80％의 투여량 수준으로 존재한다. 1종 이상의 추가 작용제는 본 발명의 다형체 이전에, 이후에 또는 그와 동시에 투여할 수 있다.

다형체가 제약상 허용되는 담체와 함께 제제화되는 경우, 생성된 조성물은 NS5A를 억제하거나 HCV 바이러스 감염을 치료 또는 예방하기 위하여 포유동물, 예컨대 인간에 생체내 투여될 수 있다. 상기 치료는 또한 면역조절제, 예컨대 인터페론; 다른 항바이러스제, 예컨대 리바비린, 아만타딘; 다른 NS5A 억제제; HCV 생활 주기에서의 다른 표적, 예컨대 헬리카제, 프로테아제, 폴리머라제, 메탈로프로테아제, 또는 내부 리보솜 진입 부위의 억제제; 또는 그의 조합물을 포함하나 이에 제한되지 않는 작용제와 조합된 본 발명의 다형체를 이용하여 달성할 수 있다. 추가의 작용제는 단일 투여 형태를 생성하기 위하여 본 발명의 다형체와 조합될 수 있다. 별법으로, 상기 추가 작용제는 다중 투여 형태의 일부로서 포유동물에 별도로 투여될 수 있다.

하기 표 1은 본 발명의 화합물과 함께 투여될 수 있는 화합물의 몇몇 예시적 예를 나열한다. 본 발명의 화합물은 조합 요법에서 다른 항-HCV 활성 화합물과 함께, 연합되어 또는 별도로, 또는 상기 화합물들을 조성물로 조합하여 투여될 수 있다.

본 발명의 또다른 측면은 본 발명의 다형체를 투여함으로써 환자에서 HCV NS5A 활성을 억제하는 방법을 제공한다.

한 실시양태에서, 상기 방법은 환자에서 HCV NS5A 활성을 감소시키는 데에 유용하다. 제약 조성물이 활성 성분으로서 본 발명의 다형체만을 포함하는 경우, 상기 방법은 면역조절제, 항바이러스제, HCV NS5A 억제제, 또는 HCV 생활 주기에서의 다른 표적, 예컨대 헬리카제, 프로테아제, 폴리머라제 또는 메탈로프로테아제의 억제제로부터 선택된 작용제를 상기 환자에게 투여하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 이러한 추가 작용제는 본 발명의 화합물의 투여 이전에, 동시에 또는 이후에 환자에게 투여될 수 있다.

또다른 실시양태에서, 상기 방법은 환자에서 바이러스 복제를 억제하기에 유용하다. 이러한 방법은 HCV 질환을 치료 또는 예방하는 데에 유용할 수 있다.

본 발명의 다형체는 또한 실험실용 시약으로서 사용될 수 있다. 상기 다형체는 HCV 질환 메카니즘의 지식을 더욱 증대시키기 위한 바이러스 복제 분석의 설계, 동물 분석 시스템의 인증 및 구조적 생물학 연구를 위한 조사 도구를 제공하는 데에 도움이 될 수 있다.

본 발명의 다형체는 또한 물질의 바이러스 오염을 치료 또는 예방하여, 이러한 물질, 예를 들면, 혈액, 조직, 수술 기구 및 의복, 실험실 기구 및 의복, 및 혈액 수집 또는 수혈 기구 및 물질과 접촉하게 되는 실험실 또는 의료상의 개인 또는 환자의 바이러스 감염 위험을 감소시키기 위하여 사용될 수 있다.

하기 비제한적인 실시예는 본 발명을 예시한다.

실시예

화합물 2의 제조

질소 라인, 오버헤드 교반기 및 열전대(thermocouple)가 구비된 1 L 3구 둥근 바닥 플라스크에 20 g (83.9 mmol, 1 당량) 1,1'-(바이페닐-4,4'-디일)디에타논, 200 mL CH₂Cl₂ 및 8.7 mL (27.1 g, 169.3 mmol, 2.02 당량) 브롬을 넣었다. 혼합물을 질소하에 약 20 시간 동안 주위 조건하에서 교반하였다. 생성된 슬러리에 200 mL CH₂Cl₂를 넣고, 진공 증류를 통해 약 150 mL로 농축시켰다. 이어서, 슬러리를 진공 증류를 통해 THF로 200 mL의 표적 부피로 용매 교환하였다. 슬러리를 1 시간에 걸쳐 20-25℃로 냉각시키고, 추가 시간 동안 20-25℃에서 교반하였다. 회백색 결정질 고체를 여과하고 150 mL CH₂Cl₂로 세척하였다. 생성물을 60℃에서 진공하에 건조시켜 원하는 생성물 27.4 g (69.2 mmol, 82％)을 수득하였다:

화합물 3의 제조

질소 라인, 열전대 및 오버헤드 교반기가 구비된 500 mL 재킷 플라스크에 20 g (50.5 mmol, 1 당량) 화합물 2, 22.8 g (105.9 mole, 2.10 당량) 1-(tert-부톡시카르보닐)-L-프롤린 및 200 mL 아세토니트릴을 넣었다. 슬러리를 20℃로 냉각시킨 후, 18.2 mL (13.5 g, 104.4 mmol, 2.07 당량) DIPEA를 첨가하였다. 슬러리를 25℃로 가온하고, 3 시간 동안 교반하였다. 생성된 맑은 유기 용액을 3 x 100 mL 13 wt％ 수성 NaCl로 세척하였다. 0.5 vol％ 미만의 아세토니트릴이 존재할 때까지, 진한(rich) 아세토니트릴 용액을 진공 증류에 의해 톨루엔 (표적 부피 = 215 mL)으로 용매 교환하였다.

화합물 4의 제조

화합물 3의 톨루엔 용액에 78 g (1.011 mole, 20 당량) 암모늄 아세테이트를 넣고, 95-100℃로 가열하였다. 혼합물을 15 시간 동안 95-100℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 혼합물을 70-80℃로 냉각시키고, 7 mL 아세트산, 40 mL n-부탄올, 및 80 mL의 5 vol％ 수성 아세트산을 넣었다. 온도를 50℃ 초과로 유지하면서, 생성된 2상 용액을 분리하였다. 온도를 50℃ 초과로 유지하면서, 풍부 유기상에 80 mL의 5 vol％ 수성 아세트산, 30 mL 아세트산 및 20 mL n-부탄올을 넣었다. 온도를 50℃ 초과로 유지하면서, 생성된 2상 용액을 분리하고, 풍부 유기상을 추가의 80 mL의 5 vol％ 수성 아세트산으로 세척하였다. 이어서, 풍부 유기상을 진공 증류에 의해 톨루엔으로 215 mL의 표적 부피로 용매 교환하였다. 온도를 60℃ 초과로 유지하면서, 64 mL 메탄올을 넣었다. 생성된 슬러리를 70-75℃로 가열하고, 1 시간 동안 숙성시켰다. 슬러리를 1 시간에 걸쳐 20-25℃로 냉각시키고, 추가 시간 동안 상기 온도에서 숙성시켰다. 슬러리를 여과하고, 케이크를 200 mL 10:3 톨루엔:메탄올로 세척하였다. 생성물을 70℃에서 진공하에 건조시켜 원하는 생성물 19.8 g (31.7 mmol, 63％)을 수득하였다:

화합물 5의 제조

질소 라인 및 오버헤드 교반기가 장착된 250 mL 반응기에, 25.0 g의 화합물 4 (40.01 mmol, 1 당량)을 넣은 후, 250 mL 메탄올 및 32.85 mL (400.1 mmol, 10 당량) 6M 수성 HCl을 넣었다. 온도를 50℃ 증가시키고, 50℃에서 5 시간 동안 교반하였다. 생성된 슬러리를 20-25℃로 냉각시키고, 약 18 시간 동안 교반하며 두었다. 슬러리를 여과하여 고체를 수득하고, 이를 100 mL 90％ 메탄올/물 (V/V) 및 2 x 100 mL의 메탄올로 연속적으로 세척하였다. 습윤 케이크를 50℃에서 진공 오븐에서 밤새 건조시켜 원하는 생성물 18.12 g (31.8 mmol, 79.4％)을 수득하였다.

화합물 5의 재결정화

질소 라인 및 오버헤드 교반기가 장착된 250 mL 반응기에, 17.8 g의 상기 화합물 5를 넣은 후, 72 mL 메탄올을 넣었다. 생성된 슬러리를 50℃에서 4 시간 동안 교반하고, 20-25℃로 냉각시키고, 20-25℃에서 1 시간 동안 교반하며 두었다. 슬러리를 여과하여 결정질 고체를 수득하고, 이를 60 mL 메탄올로 세척하였다. 생성된 습윤 케이크를 4일 동안 50℃에서 진공 오븐에서 건조시켜 정제된 생성물 14.7 g (25.7 mmol, 82.6％)을 수득하였다:

화합물 (I)의 제조

질소 라인 및 오버헤드 교반기가 장착된 1 L 재킷 플라스크에 100 mL 아세토니트릴, 13.69 g (89.4 mmol, 2.5 당량) 히드록시벤조트리아졸 수화물, 15.07 g (86 mmol, 2.4 당량) N-(메톡시카르보닐)-L-발린, 16.46 g (85.9 mmol, 2.4 당량) 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 및 추가의 100 mL 아세토니트릴을 넣었다. 생성된 용액을 20℃에서 1 시간 동안 교반하고, 20.4 g (35.8 mmol, 1 당량)의 정제된 화합물 5를 넣었다. 슬러리를 약 0℃로 냉각시키고, 온도를 10℃ 미만으로 유지하면서 18.47 g (142.9 mmol, 4 당량) 디이소프로필에틸아민을 30 분에 걸쳐 첨가하였다. 용액을 3 시간에 걸쳐 15℃로 서서히 가열하고, 15℃에서 12 시간 동안 두었다. 생성된 용액에 120 mL 13 wt％ 수성 NaCl을넣고, 1 시간 동안 50℃로 가열하였다. 20℃로 냉각시킨 후, 100 mL의 이소프로필 아세테이트를 첨가하였다. 2상 용액을 0.45 ㎛ 필터를 통해 여과하고, 혼합물을 분리하였다. 풍부 유기상을 13 wt％ NaCl을 함유하는 2 x 240 mL의 0.5 N NaOH 용액으로 세척한 후, 120 mL 13 wt％ 수성 NaCl로 세척하였다. 이어서, 혼합물을 진공 증류에 의해 이소프로필 아세테이트로 400 mL의 표적 부피로 용매 교환하였다. 생성된 흐린 용액을 20℃로 냉각시키고, 0.45 ㎛ 필터를 통해 여과하였다. 이어서, 맑은 용액을 140 mL의 표적 부피로 진공 증류에 의해 에탄올로 용매 교환하였다. 온도를 50℃에서 유지하면서, 66.4 mL (82.3 mmol, 2.3 당량)의 에탄올 중의 1.24M HCl을 첨가하였다. 이어서, 혼합물에 33 mg (0.04 mmol, 0.001 당량)의 화합물 (I)의 씨드 결정 (하기 제조 참조)을 넣고, 생성된 슬러리를 50℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 1 시간에 걸쳐 20℃로 냉각시키고, 상기 온도에서 추가 22 시간 동안 숙성시켰다. 슬러리를 여과하고, 습윤 케이크를 100 mL의 2:1 아세톤:에탄올로 세척하였다. 고체를 70℃에서 진공 오븐에서 건조시켜 원하는 생성물 22.15 g (27.3 mmol, 76.3％)을 수득하였다.

화합물 (I)의 탄소 처리 및 재결정화

3.17 g의 상기 화합물 (I)을 22 mL 메탄올에 용해시킴으로써 화합물 (I)의 용액을 제조하였다. 용액을 약 5 psig에서 약 58 ml/분의 유속으로 47mm 쿠노 제타 카본(Cuno Zeta Carbon)^® 53SP 필터를 통과시켰다. 카본 필터를 32 mL의 메탄올로 세정하였다. 용액을 진공 증류에 의해 16 mL로 농축하였다. 온도를 40-50℃에서 유지하면서, 15.9 mL 아세톤 및 5 mg의 화합물 (I)의 씨드 결정 (하기 절차 참조)을 첨가하였다. 이어서, 생성된 슬러리에 30 분에 걸쳐 32 mL 아세톤을 넣었다. 슬러리를 50℃에서 2 시간 동안 두고, 약 1 시간에 걸쳐 20℃로 냉각시키고, 20℃에서 약 20 시간 동안 두었다. 고체를 여과하고, 16 mL 2:1 아세톤:메탄올로 세척하고, 60℃에서 진공 오븐에서 건조시켜 정제된 화합물 (I) 2.14 g (67.5％)을 수득하였다:

화합물 (I)의 씨드 결정의 제조

250 mL 둥근 바닥 플라스크에 6.0 g (10.5 mmol, 1 당량) 화합물 5, 3.87 g (22.1 mmol, 2.1 당량) N-(메톡시카르보닐)-L-발린, 4.45 g (23.2 mmol, 2.2 당량) 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드, 0.289 g (2.14 mmol, 0.2 당량) 1-히드록시벤조트리아졸, 및 30 mL 아세토니트릴을 넣었다. 이어서, 생성된 슬러리에 7.33 mL (42.03 mmol, 4 당량) 디이소프로필에틸아민을 넣고, 24-30℃에서 약 18 시간 동안 교반하였다. 혼합물에 6 mL의 물을 넣고, 약 5 시간 동안 50℃로 가열하였다. 혼합물을 냉각시키고, 32 mL 에틸 아세테이트 및 30 mL 물을 넣었다. 층을 분리하고 풍부 유기층을 30 mL의 10 wt％ 수성 NaHCO₃, 30 mL 물, 및 20 mL의 10 wt％ 수성 NaCl로 세척하였다. 이어서, 풍부 유기층을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 잔류물을 얻었다. 이어서, 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카겔, 디클로로메탄 중의 0-10％ 메탄올)를 통해 정제하여 화합물 (I)의 유리 염기를 수득하였다.

화합물 (I)의 유리 염기 (0.03 g)를 20℃에서 1 mL 이소프로판올에 용해시켰다. 무수 HCl (70 ㎕, 에탄올 중에 용해됨, 대략 1.25M 농도)을 첨가하고, 반응 혼합물을 교반하였다. 상기 용액에 메틸 tert-부틸 에테르 (1 mL)를 첨가하고, 생성된 슬러리를 40℃ 내지 50℃에서 12 시간 동안 격렬히 교반하였다. 결정 슬러리를 20℃로 냉각시키고, 여과하였다. 습윤 케이크를 20℃에서 대기 건조하였다. 백색 결정질 고체 (화합물 (I)의 형태 N-2)를 수득하였다.

형태 N-2는 하기 기재된 시험 방법 중 하나 이상을 이용하여 분석하였다.

1 단일 결정 X-선 측정

Cu Kα 방사 (λ = 1.54178 Å)의 회전 애노드 발생기가 장착된 Bruker APEX2 Kappa CCD 회절계를 사용하여 실온에서 회절 데이타를 수집하였다. 측정된 세기 데이타의 인덱싱 및 프로세싱은 APEX2 소프트웨어 패키지/프로그램 스위트 (APEX2 데이타 콜렉션 및 프로세싱 유저 인터페이스: APEX2 유저 매뉴얼, v1.27; BRUKER AXS, Inc., 미국 53711 위스컨신주 매디슨 이스트 체릴 파크웨이 5465 소재)로 수행하였다. 전체 데이타 세트를 이용하여 최종 단위 셀 파라미터를 결정하였다.

모든 구조를 직접적 방법으로 해결하고, SHELXTL 소프트웨어 팩키지 (Sheldrick, GM. 1997, SHELXTL. 구조 결정 프로그램. 버젼 5.10, Bruker AXS, 미국 위스컨신주 매디슨 소재)를 사용하여 풀 매트릭스 최소 자승 기법에 의하여 정밀화하였다. 정밀화에서 최소화된 함수는

이다. R은

로 정의되며,

이며, 여기서 w는 세기 측정치에서의 오차에 기초한 적절한 가중 함수이다. 차등 푸리에(Fourier) 맵은 모든 정밀화 단계에서 조사하였다. 모든 비-수소 원자는 비등방성 열적 변위 변수를 사용하여 정밀화하였다. 수소 결합과 관련된 수소 원자는 최종 차분 푸리에 맵에 위치하며, 다른 수소 원자의 위치는 표준 결합 길이 및 각도를 갖는 이상적인 기하로부터 계산한다. 이들은 정렬된 등방성 온도 인자이며, 고정된 변수를 사용한 구조 인자 계산에 포함된다.

N-2 형태의 결정 데이타를 표 2에 나타낸다. 분율 원자 좌표를 표 3에 나열한다. 당업자는 상기 좌표에서의 약간의 변화가 가능하며, 본 발명의 범위 내로 여겨짐을 이해해야 한다.

2. 분말 X-선 회절

약 200 mg을 필립스(Philips) 분말 X-선 회절 (PXRD) 샘플 홀더에 패킹하였다. 샘플을 필립스 MPD 단위 (45 KV, 40 mA, Cu Kα)로 옮겼다. 데이타를 실온에서 2 내지 32 2θ 범위에서 수집하였다 (연속 스캔 모드, 스캔 속도 0.03 도/초, 자가 발산 및 산란 방지 슬릿, 수용 슬릿: 0.2 mm, 샘플 스피너: 켜짐).

PXRD 패턴 및 단일 결정 데이타로부터 계산된 모의실험 패턴의 결과를 도 1에 나타내었다.

표 4는 화합물 (I)의 형태 N-2를 설명하는 특징적 PXRD 피크를 나열한다.

3. 시차 주사 열량

시차 주사 열량 (DSC) 실험은 TA Instruments™ 모델 Q2000, Q1000 또는 2920로 실시하였다. 샘플 (약 2 내지 6 mg)을 알루미늄 팬에서 칭량하고, 1/100 밀리그램 단위로 정확하게 기록하고, DSC로 옮겼다. 기구는 50 ml/분으로 질소 기체로 퍼징하였다. 데이타는 실온과 300℃ 사이에서 10℃/분의 가열 속도로 수집하였다. 아래로 향하는 흡열 피크로 플롯팅하였다.

결과는 도 2에 나타낸다.

4. 고체-상태 NMR (SSNMR)

모든 고체-상태 C-13 NMR 측정은 Bruker DSX-400, 400 MHz NMR 분광계로 수행하였다. 고분해능 스펙트럼은 고출력 양성자 디커플링, 및 대략 12 kHz에서 마법의 각도 스핀 (MAS)을 이용한 TPPM 펄스 시퀀스 및 램프 진폭 교차-편파 (RAMP-CP)를 이용하여 수득하였다 (A.E. Bennett et al. J. Chem. Phys. 1995, 103, 6951). (G. Metz, X. Wu, and S.O. Smith, J. Magn. Reson. A., 1994, 110, 219-227). 각각의 실험에서 깡통 디자인의 지르코니아 로터로 패킹된 대략 70 mg의 샘플을 사용하였다. 화학적 이동 (δ)은 38.56 ppm으로 설정된 고진동수 공명을 갖는 외부 아다만탄을 기준으로 하였다 (W.L. Earl and D.L. VanderHart, J. Magn. Reson., 1982, 48, 35-54).

SSNMR 스펙트럼은 도 3에 나타낸다.

표 5는 화합물 (I)의 형태 N-2를 설명하는 특징적 SSNMR 피크를 나열한다.

Claims

20℃ 내지 25℃의 온도에서 결정형의 측정시, 하기 단위 셀 파라미터:
셀 치수: a = 7.5680 Å
b = 9.5848 Å
c = 16.2864 Å
α = 74.132 도
β = 84.132 도
γ = 70.646 도
공간군 P1
분자/단위 셀 1
을 특징으로 하는

의 결정형 N-2.
하기 표에 나열된 바와 같은 단위 셀 내의 분율 원자 좌표:

를 특징으로 하는

의 결정형 N-2.
20℃ 내지 25℃의 온도에서 10.3 ± 0.1, 12.4 ± 0.1, 12.8 ± 0.1, 13.3 ± 0.1, 13.6 ± 0.1, 15.5 ± 0.1, 20.3 ± 0.1, 21.2 ± 0.1, 22.4 ± 0.1, 22.7 ± 0.1, 및 23.7 ± 0.1의 2θ 값에서의 분말 X-선 회절 패턴상의 특징적 피크를 갖는

의 결정형 N-2.
a) 20℃ 내지 25℃의 온도에서 결정형의 측정시, 하기와 동일한 파라미터를 갖는 단위 셀:
셀 치수: a = 7.5680 Å
b = 9.5848 Å
c = 16.2864 Å
α = 74.132 도
β = 84.132 도
γ = 70.646 도
공간군 P1
분자/단위 셀 1;
b) 20℃ 내지 25℃의 온도에서 10.3 ± 0.1, 12.4 ± 0.1, 12.8 ± 0.1, 13.3 ± 0.1, 13.6 ± 0.1, 15.5 ± 0.1, 20.3 ± 0.1, 21.2 ± 0.1, 22.4 ± 0.1, 22.7 ± 0.1, 및 23.7 ± 0.1의 2θ 값에서의 분말 X-선 회절 패턴상의 특징적 피크; 및/또는
c) 225 내지 245℃ 범위에서 개시되는 분해 흡열을 동반한 용융
중 하나 이상을 특징으로 하는

의 결정형 N-2.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 90 중량％ 이상의 순도를 갖는 것인 결정형 N-2.
제5항에 있어서, 95 중량％ 이상의 순도를 갖는 것인 결정형 N-2.
제5항에 있어서, 99 중량％ 이상의 순도를 갖는 것인 결정형 N-2.
20℃ 내지 25℃의 온도에서 10.3 ± 0.1, 12.4 ± 0.1, 12.8 ± 0.1, 13.3 ± 0.1, 13.6 ± 0.1, 15.5 ± 0.1, 20.3 ± 0.1, 21.2 ± 0.1, 22.4 ± 0.1, 22.7 ± 0.1, 및 23.7 ± 0.1의 2θ 값에서의 분말 X-선 회절 패턴상의 특징적 피크를 가지며, 90 중량％ 이상의 순도를 갖는 것인,

의 결정형 N-2.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 결정형 N-2와 함께 항-HCV 활성을 갖는 1 또는 2종의 추가 화합물을 포함하는, 포유동물에서 C형 간염 바이러스 (HCV) 감염을 치료하기 위한 제약 조성물.
제9항에 있어서, 상기 결정형 N-2가 90 중량％ 이상의 순도를 갖는 것인 제약 조성물.
제9항에 있어서, 상기 결정형 N-2가 95 중량％ 이상의 순도를 갖는 것인 제약 조성물.
제9항에 있어서, 상기 결정형 N-2가 99 중량％ 이상의 순도를 갖는 것인 제약 조성물.
제9항에 있어서, 항-HCV 활성을 갖는 1종 이상의 추가 화합물이 인터페론 또는 리바비린인 제약 조성물.
제13항에 있어서, 상기 인터페론이 인터페론 알파 2B, peg화된 인터페론 알파, 컨센서스 인터페론, 인터페론 알파 2A, 및 림프모구양 인터페론 tau로부터 선택된 것인 제약 조성물.
제9항에 있어서, 1종 이상의 추가 화합물이 인터류킨 2, 인터류킨 6, 인터류킨 12, 이미퀴모드, 리바비린, 아만타딘, 및 리만타딘으로부터 선택된 것인 제약 조성물.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 결정형 N-2의 치료 유효량을 포함하는, 포유동물에서 HCV 감염을 치료하기 위한 제약 조성물.
제16항에 있어서, 상기 결정형 N-2가 90 중량％ 이상의 순도를 갖는 것인 제약 조성물.
제16항에 있어서, 상기 결정형 N-2가 95 중량％ 이상의 순도를 갖는 것인 제약 조성물.
제16항에 있어서, 상기 결정형 N-2가 99 중량％ 이상의 순도를 갖는 것인 제약 조성물.
제16항에 있어서, 상기 포유동물이 인간인 제약 조성물.
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