KR101454970B1 - 당귀로부터 추출되는 정유(ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｏｉｌ) 분획물을 포함하는 체지방 또는 셀룰라이트 감소 및 예방효과를 갖는 아로마 오일 조성물 및 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 당귀(Angelica gigas Nakai)로부터 체지방 또는 셀룰라이트의 감소 및 예방효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 조성물은 고지방 식이를 이용한 비만 유도 동물에서 체중 및 체지방 감소, 혈중 중성지방의 감소 및 식이섭취량의 감소를 가져왔으며, 조직에서 고지방식이 공급으로 유발되는 지방 간병증, 지방세포 비대, 췌장섬 증식, 인슐린(insulin), 글루카곤(glucagon) 생산세포의 증가를 억제함을 확인함으로써, 체지방 또는 셀룰라이트의 감소 및 예방효과를 갖는 아로마 오일 조성물과(또는) 화장료 조성물에 유용하게 이용될 수 있다.

Description

당귀로부터 추출되는 정유(ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｏｉｌ) 분획물을 포함하는 체지방 또는 셀룰라이트 감소 및 예방효과를 갖는 아로마 오일 조성물 및 화장료 조성물{A aromatic oil composition and cometic composition comprising the essential oil fraction from Angelica gigas Nakai for the prevention or reduction of body fats or cellulite}

본 발명은 당귀로부터 추출되는 정유(ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｏｉｌ) 분획물을 포함하는 체지방 또는 셀룰라이트 감소 및 예방효과를 갖는 아로마 오일 조성물 및 화장료 조성물에 관한 것이다.

[문헌 1] Van der Ploeg LH. Related Obesity: an epidemic in need of therapeutics. Curr Opin Chem Biol. 4(4), pp.452-460, 2004

[문헌 2] 노효경, 인체의 균형미에 영향을 미치는 셀룰라이트의 효과적 관리방법. 한국생활과학회지, 13(2), pp.283-290, 2004

[문헌 3] Aviva M, et, al,. The disease burden associated with overweight and obesity. JAMA, 282, pp.1523-9, 1999

[문헌 4] Jung. B. The annual socioeconomic costs of six obesity-related disease. Unpublished master's dissertation, Seoul National University, Seoul. 2001

[문헌 5] 김은선 외 2, 비만치료제, 심층정보분석보고서, 한국과학기술정보연구원, pp.1-111, 2002

[문헌 6] 이득주 외 1, 여성에서 허리둔부둘레비와 비만관련 질환 예측. 대한비만학회지, 5, pp.41-48, 1996

[문헌 7] 비만증의 치료. 한국영양학회지, 5(2), pp.179-190, 1990

[문헌 8] 이종화 외 1, 갱년기 여성들이 인지하는 폐경이후의 생활변화와 이에 대한 수용. 대한폐경학회지, 9(3), pp.254-260, 2003

[문헌 9] 신진희. 피부관리사의 아로마테라피 이용 실태조사, 석사학위논문, 고신대학교. 2000

[문헌 10] 한국아로마협회. 아로마 에센셜오일 백과사전. 현문사, 서울, 2002

[문헌 11] 박진아, 한약재 당귀(Angelica Gigantis Radix)에 포함된 휘발성분 및 향기성분, 석사학위논문, 울산대학교. 2008

[문헌 12] 김희자. 향기요법 마사지가 폐경이후 비만여성의 신체구성과 혈청지질에 미치는 효과, 노인간호학회지, 9(1), pp.29-39, 2007

[문헌 13] 김명숙 외 1, 중년기 복부 비만 여성의 특성과 비만관리 실시효과, 대한비만학회지, 12(1), pp.65-66, 2003

[문헌 14] Han SK, Effects of Angelica gigas Nakai herbal acupuncture into Hyolhae(SP10) of brain ischemic injury induced by Intraluminal Filament insertion in the rats, The Journal of Korean Acupuncture & Moxibustion Society, 21(2), pp.1-20, 2004

[문헌 15] Huang B. et, al, Cinnamaldehyde prevents adipocyte differentiation and adipogenesis via regulation of peroxisome proliferator-activated receptor-γ (PPARγ) and AMP-activated protein kinase (AMPK) pathways, J Agric Food Chem, Apr 27;59(8), pp.3666-73, 2011

[문헌 16] Allain C. et al., Enzymatic determination of total serum cholesterol, Clin. Chem. 20(4), pp.470-475, 1974

[문헌 17] (Lee J. S. et al., Supplementation of whole persimmon leaf improves lipid profiles and suppresses body weight gain in rat fed high-fat diet, Food and Chemical Toxicology, 44(11), pp.1875-1883, 2006).

[문헌 18] Allain C. et al., Enzymatic determination of total serum cholesterol, Clin. Chem. 20(4), pp.470-475, 1974

[문헌 19] Van Handel E. et al, Micromethod for the direct determination of serum triglycerides, J. Lab. Clin. Med. 50(1), pp.152-157, 1957

[문헌 20] Giusti G. et al., A comparative study of some spectrophotometric and colorimetric procedures for the determination of serum glutamic-oxaloacetic and glutamic-pyruvic transaminase in hepatic diseases. Enzymol. Biol. Clin(Basel), 10(1), pp.17-38, 1969

[문헌 21] Murase T. et, al, Nootkatone, a characteristic constituent of grapefruit, stimulates energy metabolism and prevents diet-induced obesity by activating AMPK, Am J Physiol Endocrinol Metab, 299(2), pp.E266-75, 2010

[문헌 22] 허명행 외 4, 향 흡입이 비만을 유도한 쥐의 체중, 식이 섭취량, 섭취 효율 및 혈청 렙틴에 미치는 효과, 한국인간식물환경학회지 pp.113-124, 9(2), 2006

[문헌 23] 구세광 외 3, 고지방식이로 유발된 비만마우스에서 산마늘 잎추출물의 항비만효과, 한국임상수의학회지, 28(3), pp.280-286, 2011

비만이란 체지방의 과잉 축적으로 정의된다. 비만은 건강을 해칠 정도로 체내 지방이 과도하게 축적된 상태를 말하며, 각 개인의 표준체중보다 20% 이상의 증가가 있을 때 비만이라고 정의할 수 있다. 구체적으로 지방의 무게가 체중에서 차지하는 체지방 비율이 남자의 경우는 25% 이상, 여자의 경우, 30% 이상일 때를 말한다(Van der Ploeg LH. Related Obesity: an epidemic in need of therapeutics. Curr Opin Chem Biol. 4(4), pp.452-460, 2004). 이는 서구사회의 문제만이 아니라 우리나라를 포함한 여러 아시아 국가들에서도 급증하고 있는 심각한 보건문제의 하나이다. 전 세계적으로도 현재의 증가 추세가 지속되면 2025년에는 세계 인구 3분의 1이 비만환자(BMI, Body Mass Index, 30 kg/㎡이상)가 될 것이라고 세계비만연맹(International Obesity Task Force)은 예측하고 있다.

셀룰라이트는 허벅지, 엉덩이 복부의 피하지방조직에서 지방과 노폐물의 과도한 축적으로 인해 임파액 등의 순환장애를 초래하여 오렌지 껍질같이 울퉁불퉁한 피부가 되는 것을 말한다. 셀룰라이트의 생성은 지방세포의 비대나 증가와 관련이 있으므로, 비만의 원인이 되며, 지방세포 내의 지방을 분해시켜 체내 지방의 축적을 억제하는 것이 바람직하다(노효경, 인체의 균형미에 영향을 미치는 셀룰라이트의 효과적 관리방법. 한국생활과학회지, 13(2), pp.283-290, 2004).

또한 비만은 미용상의 스트레스뿐만 아니라 제2형 당뇨병, 고혈압과 관상동맥질환 등의 여러 질환을 유발한다고 알려져 있으며 유방암, 자궁내막암, 전립선암과 대장암의 발병도 증가시킨 것으로 알려져 있다(Aviva M, et, al,. The disease burden associated with overweight and obesity. JAMA, 282, pp.1523-9, 1999).

뿐만 아니라 비만은 6개 비만관련 질병의 사회경제적 비용이 전체 국민의료비 대비 2.1-1.1% 정도라고 보고된 바 있어, 경제적 부담 또한 막대하다고 볼 수 있다(Jung. B. The annual socioeconomic costs of six obesity-related disease. Unpublished master's dissertation, Seoul National University, Seoul. 2001).

이렇듯 비만은 발생빈도, 관련 질병유발, 경제적 손실, 일상생활에 대한 문제점 등이 문제가 되는 것으로 현대사회에서는 보다 다차원적이고 과학적인 방법을 통해 속히 비만에 대한 중재가 이뤄져야 할 것이며, 적극적인 예방이 필요하다.

비만치료법으로는 식욕억제제, 지방흡수억제제, 에너지대사촉진제, 호르몬제제 등의 약물요법과 위절제술, 지방흡입술 등의 외과적 수술법이 사용되고 있으나, 치료효과의 지속적 유지 여부 및 약물 중단 시 체중이 증가하는 현상 등이 문제되고 있다(김은선 외 2, 비만치료제, 심층정보분석 보고서, 한국과학기술정보연구원, pp.1-111, 2002).

비만을 관리하는 방법으로는 식이요법, 운동요법, 약물요법, 수술요법 등이 있으나 식이요법으로는 내장지방의 감소효율이 적고 원래의 식습관으로 돌아가는 경우 내장지방이 더 많이 증가하는 부작용이 있고(이득주 외 1, 여성에서 허리둔부둘레비와 비만관련 질환 예측. 대한비만학회지, 5, pp.41-48, 1996) 운동요법으로는 효과뿐만 아니라 경제적인 면에서도 월등히 뛰어나지만 시간이 오래 걸려 현대인의 생활에는 부담을 줄 수 있다는 단점이 있으며, 약물요법이나 수술요법은 경제적 부담, 통증, 부작용 등의 위험요소가 있는 것으로 보고되고 있다(비만증의 치료. 한국영양학회지, 5(2), pp.179-190, 1990). 이렇듯 식욕조절이 어렵고 운동이 어려운 비만한 현대인들의 경우 쉽게 사용할 수 있는 대체요법을 찾는 실정이며, 실제로 우리나라 폐경 후 비만한 여성의 44%는 살을 빼기 위해서 마사지, 사우나 및 찜질방 등의 대체요법을 사용하며(이종화 외 1, 갱년기 여성들이 인지하는 폐경이후의 생활변화와 이에 대한 수용. 대한폐경학회지, 9(3), pp.254-260, 2003) 대체요법을 사용하는 사람들 중 25%는 비만관리를 위해 아로마 향기요법을 사용한다고 하였다(신진희. 피부관리사의 아로마테라피 이용 실태조사, 고신대학교, 석사학위논문. 2000).

향기요법이란 향과 향기를 의미하는 아로마(aroma)와 치료를 의미하는 테라피(therapy)의 합성어로서 종자, 껍질, 뿌리, 잎, 꽃, 나무, 발삼과 레진을 포함하여 모든 다양한 부분에서 추출된(한국아로마협회. 아로마 에센셜오일 백과사전. 현문사, 서울, 2002) 휘발성이면서 독특한 향을 발산하는 에센셜 오일 성분을 후각이나 피부를 통해 인체에 흡수시켜 신체와 정신의 부조화를 개선하여 건강을 유지하고 증진시키기 위한 자연요법이다(김명숙 외 1, 중년기 복부 비만 여성의 특성과 비만관리 실시효과, 대한비만학회지, 12(1), pp.65-66, 2003). 향기요법은 투여방법에 따라 마사지법, 향을 발향시키는 확산법, 코로 향을 흡입하는 흡입법, 목욕법, 통증 있는 부위를 찜질하는 습포법, 입안을 헹구는 가글링법, 복용법, 도포법이 있는데, 후각을 통한 흡수 경로는 코로 흡입되어 점막에 있는 후각신경을 통해 대뇌에 전달된 향기물질이 대뇌의 변연계에서 분석이 이루어진 후 신경화학(Neurochemical)물질을 조절하여 심신의 불균형상태를 안정시켜 준다. 이 신경화학물질들은 뇌하수체 등에도 영향을 주어 호르몬 분비를 조절함으로서 전체적인 신체조직에 영향을 미치게 된다.

향기가 풍부한 당귀(Angelica Gigantis Radix)는 미나리과에 속하는 다년생 초본으로 1~2년 생근을 말하며 한국에서는 이의 뿌리를 건조한 것이다. 늦가을에 채취하여 수염 뿌리를 제거하고, 수분이 약간 증발할 때를 기다렸다가 천천히 연기로 훈증한다. 당귀의 유효성분으로는 coumarin류의 decoursin, decousinol, phthalide류의 ligustilide, butylidene phthalide, butylphthalide 등이 있다. 뿌리에는 베르갑텐 C12H8O4, 이소핌피넬린, 정유 약 0.2%, β-시토스테롤이 있다.

비만을 해결하기 위한 여러 대책들 중 하나로 최근 아로마 테라피가 각광받고 있는 가운데 현재 사용되고 있는 정유의 종류는 70가지 이상이지만, 비만을 타켓으로 하는 방향성 정유들에 대한 과학적인 연구는 매우 드문 현황이다. 방향성이 있는 당귀는 많이 연구되어왔으나, 국내 및 해외에서도 비만증 치료에 관한 당귀 정유의 연구는 활발하지 않다.

이에 본 발명자들은 상기와 같은 문제점을 해결하고, 체지방 감량, 체중감소 등 비만 억제 활성을 가지는 화장료의 개발 연구를 통해 지방 식이를 이용한 비만 유도 동물에서 당귀 정유분획물 흡입 후에 체중 및 체지방 감소, 혈중 중성지질농도의 감소 및 식이섭취량의 감소를 가져왔다. 또한 조직에서 고지방식이 공급으로 유발되는 지방 간병증, 지방세포 비대, 췌장섬 증식, insulin, glucagon 생산세포의 증가 억제를 유의적으로 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 당귀를 건조하여 마쇄한 후 시료 중량의 약 1 내지 100배, 바람직하게는 약 2 내지 20배에 달하는 부피의 n-헥산, 헵탄, 메틸렌 클로라이드, 클로로포름 또는 에틸 아세테이트로부터 선택된 비극성용매, 바람직하게는 헥산 또는 에틸아세테이트 용매, 보다 바람직하게는, 헥산 용매를 가하여, 20 내지 120℃, 바람직하게는 실온 내지 80℃에서 약 24시간 내지 144시간, 바람직하게는 48 내지 96시간 동안에서 냉침추출, 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 추출방법을 사용하여, 바람직하게는 냉침추출법으로 추출하여 얻어진 추출액을 20 내지 80℃, 바람직하게는 30 내지 60℃에서 감압여과 및 농축하여 당귀 비극성 용매 분획물을 수득하는 제 1단계; 상기 비극성 용매 분획물에 상기 분획물 중량의 약 0.05 내지 50배, 바람직하게는 0.5 내지 5배 부피 (v/w%)의 에탄올을 가하여 생성된 침전물을 제거하고 얻어진 정유 분획물을 농축하여 제 2단계를 공정을 포함하는 제조공정으로 수득된 당귀로부터 당귀 정유 분획물을 유효성분으로 함유하는 체지방 또는 셀룰라이트의 감소 및 예방효과를 갖는 아로마 오일 조성물 및 화장료 조성물을 제공한다.

또한, 상기 아로마 오일 조성물은 마사지법, 향을 발향시키는 확산법, 코로 향을 흡입하는 흡입법, 목욕법, 통증 있는 부위를 찜질하는 습포법, 입안을 헹구는 가글링법, 복용법, 또는 도포법으로 이용가능한 아로마요법에 유용한 아로마 에센셜오일, 아로마 마사지 오일, 아로마 바디 오일, 아로마향초, 아로마램프, 아로마방향제, 아로마디퓨저, 아로마스틱 등의 제형을 포함한다.

또한, 상기 화장료 조성물은, 비누, 세안제, 화장수, 스킨, 로션, 영양로션, 영양크림, 마사지 크림, 에센스, 팩의 제형을 포함한다.

상기 추출물을 함유한 조성물은 총 중량에 대하여 0.1 내지 50 중량%로 사용이 가능하다.

상기에서 수득된 당귀 정유 분획물들은 고지방 식이를 이용한 비만 유도 동물에서 체중 및 체지방 감소, 혈중 중성지질농도의 감소 및 식이섭취량의 감소를 가져왔다. 또한 조직에서 고지방식이 공급으로 유발되는 지방 간병증, 지방세포 비대, 췌장섬 증식, 인슐린(insulin), 글루카곤(glucagon) 생산세포의 증가 억제를 유의적으로 확인하였다.

또한, 본 발명의 추출물은 비만증 개선 효과를 갖는 화장품 및 세안제 등에 다양하게 이용될 수 있다.

본 발명의 아로마 오일 조성물은 상기 비만, 체지방 또는 셀룰라이트의 감소 및 예방효과를 갖는다. 본 발명의 조성물은 또한 휘발이나 증기를 통해 효과를 나타내는 아로마 오일의 형태를 가지며 이를 위해 통상적으로 사용되는 아로마 오일의 구성성분들을 더 포함할 수 있다. 예컨대, 기제(base) 또는 캐리어 오일로서 아로마테라피에 많이 사용되는 조조바 오일 , 아몬드 오일 또는 살구씨 오일 등을 포함할 수 있는데, 이들은 아로마 오일을 피부에 가장 빠르고 효과적으로 침투시키는 역할을 한다.

본 발명의 아로마 오일 조성물은 바람직하게는 로즈 오일, 네롤리 오일 및 라벤더 오일을 더 함유하는 것을 특징으로 한다. 상기 로즈오일은 여성 생리장애, 생리전증후군을 완화하고 호르몬밸런스를 조절하는 역할을 하며, 네롤리 블라섬은 피부 탄력를 증가시키고 세포를 활성화하는 역할을 하며, 라벤더는 항균작용 및 상처 완화의 역할을 한다.

본 발명의 여성용 아로마 오일 조성물은 더욱 바람직하게는 조조바오일 80-90 중량%, 라벤더 4-6 중량%, 로즈오일 1-3 중량%, 네롤리 0.5-2 중량%, 사이프러스 2-4 중량%, 제라늄 1-3 중량%, 및 당귀 정유 분획물 0.5-2 중량%를 함유하는 것을 특징으로 한다. 상기 조조바오일은 아로마 오일의 기제(base) 역할을 하며, 사이프러스는 염증완화 및 수축작용을 하고, 제라늄은 피부탄력증가 및 염증관리의 역할을 한다.

또한, 상기 아로마 오일 조성물의 각종 성분들은 우수한 호감도를 나타낼 수 있는 오일들만을 선발한 것이다.

본 발명의 아로마 오일 조성물은 사용방법은 본 발명의 아로마 오일 1방울을 옷에 하루 1-2방울 떨어뜨려 사용하거나, 목욕시 3-4 방울 정도의 오일을 따뜻한 물에 떨어뜨려 5-10분만 목욕을 한다. 본 발명의 아로마 오일 조성물은 항비만 효과가 탁월하다.

본 조성물을 첨가할 수 있는 제품으로는, 예를 들어, 에센셜오일, 향수, 화장수, 스킨, 로션, 영양로션, 영양크림, 맛사지크림, 에센스, 팩 등과 같은 화장품류와 클렌징, 세안제, 비누, 트리트먼트, 미용액 등이 있다.

본 발명의 화장료는 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 조성물을 포함한다.

수용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 피리독신, 염산피리독신, 비타민 B12, 판토텐산, 니코틴산, 니코틴산아미드, 엽산, 비타민 C, 비타민 H 등을 들 수 있으며, 그들의 염 (티아민염산염, 아스코르빈산나트륨염 등)이나 유도체 (아스코르빈산-2-인산나트륨염, 아스코르빈산-2-인산마그네슘염 등)도 본 발명에서 사용할 수 있는 수용성 비타민에 포함된다. 수용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 수득할 수 있다.

유용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 A, 카로틴, 비타민 D2, 비타민 D3, 비타민 E (d1-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤) 등을 들 수 있으며, 그들의 유도체 (팔미틴산아스코르빈, 스테아르산아스코르빈, 디팔미틴산아스코르빈, 아세트산 dl-알파 토코페롤, 니코틴산 dl-알파 토코페롤비타민 E, dl-판토테닐알코올, D-판토테닐알코올, 판토테닐에틸에테르 등) 등도 본 발명에서 사용되는 유용성 비타민에 포함된다. 유용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 취득할 수 있다.

고분자 펩티드로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 콜라겐, 가수 분해 콜라겐, 젤라틴, 엘라스틴, 가수 분해 엘라스틴, 케라틴 등을 들 수 있다. 고분자 펩티드는 미생물의 배양액으로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 정제 취득할 수 있으며, 또는 통상 돼지나 소 등의 진피, 누에의 견섬유 등의 천연물로부터 정제하여 사용할 수 있다.

고분자 다당으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 히드록시에틸셀룰로오스, 크산탄검, 히알루론산나트륨, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 (나트륨염 등) 등을 들 수 있다. 예를 들어, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 등은 통상 포유동물이나 어류로부터 정제하여 사용할 수 있다.

스핑고 지질로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 세라미드, 피토스핑고신, 스핑고당지질 등을 들 수 있다. 스핑고 지질은 통상 포유류, 어류, 패류, 효모 또는 식물 등으로부터 통상의 방법에 의해 정제하거나 화학 합성법에 의해 취득할 수 있다.

해초 엑기스로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 갈조 엑기스, 홍조 엑기스, 녹조 엑기스 등을 들 수 있으며, 또, 이들의 해초 엑기스로부터 정제된 칼라기난, 아르긴산, 아르긴산나트륨, 아르긴산칼륨 등도 본 발명에서 사용되는 해초 엑기스에 포함된다. 해초 엑기스는 해초로부터 통상의 방법에 의해 정제하여 취득할 수 있다.

본 발명의 화장료에는 상기 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합해도 된다.

이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.

유지 성분으로서는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지, 식물 유지 등을 들 수 있다.

에스테르계 유지로서는 트리2-에틸헥산산글리세릴, 2-에틸헥산산세틸, 미리스틴산이소프로필, 미리스틴산부틸, 팔미틴산이소프로필, 스테아르산에틸, 팔미틴산옥틸, 이소스테아르산이소세틸, 스테아르산부틸, 리놀레산에틸, 리놀레산이소프로필, 올레인산에틸, 미리스틴산이소세틸, 미리스틴산이소스테아릴, 팔미틴산이소스테아릴, 미리스틴산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 세바신산디에틸, 아디핀산디이소프로필, 네오펜탄산이소알킬, 트리(카프릴, 카프린산)글리세릴, 트리2-에틸헥산산트리메틸롤프로판, 트리이소스테아르산트리메틸롤프로판, 테트라2-에틸헥산산펜타엘리슬리톨, 카프릴산세틸, 라우린산데실, 라우린산헥실, 미리스틴산데실, 미리스틴산미리스틸, 미리스틴산세틸, 스테아르산스테아릴, 올레인산데실, 리시노올레인산세틸, 라우린산이소스테아릴, 미리스틴산이소트리데실, 팔미틴산이소세틸, 스테아르산옥틸, 스테아르산이소세틸, 올레인산이소데실, 올레인산옥틸도데실, 리놀레산옥틸도데실, 이소스테아르산이소프로필, 2-에틸헥산산세토스테아릴, 2-에틸헥산산스테아릴, 이소스테아르산헥실, 디옥탄산에틸렌글리콜, 디올레인산에틸렌글리콜, 디카프린산프로필렌글리콜, 디(카프릴,카프린산)프로필렌글리콜, 디카프릴산프로필렌글리콜, 디카프린산네오펜틸글리콜, 디옥탄산네오펜틸글리콜, 트리카프릴산글리세릴, 트리운데실산글리세릴, 트리이소팔미틴산글리세릴, 트리이소스테아르산글리세릴, 네오펜탄산옥틸도데실, 옥탄산이소스테아릴, 이소노난산옥틸, 네오데칸산헥실데실, 네오데칸산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 이소스테아르산이소스테아릴, 이소스테아르산옥틸데실, 폴리글리세린올레인산에스테르, 폴리글리세린이소스테아르산에스테르, 시트르산트리이소세틸, 시트르산트리이소알킬, 시트르산트리이소옥틸, 락트산라우릴, 락트산미리스틸, 락트산세틸, 락트산옥틸데실, 시트르산트리에틸, 시트르산아세틸트리에틸, 시트르산아세틸트리부틸, 시트르산트리옥틸, 말산디이소스테아릴, 히드록시스테아르산 2-에틸헥실, 숙신산디2-에틸헥실, 아디핀산디이소부틸, 세바신산디이소프로필, 세바신산디옥틸, 스테아르산콜레스테릴, 이소스테아르산콜레스테릴, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 올레인산콜레스테릴, 올레인산디히드로콜레스테릴, 이소스테아르산피트스테릴, 올레인산피트스테릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소세틸, 12-스테알로일히드록시스테아르산스테아릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소스테아릴 등의 에스테르계 등을 들 수 있다.

탄화 수소계 유지로서는 스쿠알렌, 유동 파라핀, 알파-올레핀올리고머, 이소파라핀, 세레신, 파라핀, 유동 이소파라핀, 폴리부덴, 마이크로크리스탈린왁스, 와셀린 등의 탄화 수소계 유지 등을 들 수 있다.

실리콘계 유지로서는 폴리메틸실리콘, 메틸페닐실리콘, 메틸시클로폴리실록산, 옥타메틸폴리실록산, 데카메틸폴리실록산, 도데카메틸시클로실록산, 디메틸실록산ㆍ메틸세틸옥시실록산 공중합체, 디메틸실록산ㆍ메틸스테알록시실록산 공중합체, 알킬 변성 실리콘유, 아미노 변성 실리콘유 등을 들 수 있다.

불소계 유지로서는 퍼플루오로폴리에테르 등을 들 수 있다.

동물 또는 식물 유지로서는 아보카도유, 아르몬드유, 올리브유, 참깨유, 쌀겨유, 새플라워유, 대두유, 옥수수유, 유채유, 행인(杏仁)유, 팜핵유, 팜유, 피마자유, 해바라기유, 포도종자유, 면실유, 야자유, 쿠쿠이너트유, 소맥배아유, 쌀 배아유, 시아버터, 월견초유, 마커데이미아너트유, 메도홈유, 난황유, 우지(牛脂), 마유, 밍크유, 오렌지라피유, 호호바유, 캔데리러왁스, 카르나바왁스, 액상 라놀린, 경화피마자유 등의 동물 또는 식물 유지를 들 수 있다.

보습제로서는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자, 지용성 고분자 등을 들 수 있다.

수용성 저분자 보습제로서는 세린, 글루타민, 솔비톨, 만니톨, 피롤리돈-카르복실산나트륨, 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜B(중합도 n = 2 이상), 폴리프로필렌글리콜(중합도 n = 2 이상), 폴리글리세린B(중합도 n = 2 이상), 락트산, 락트산염 등을 들 수 있다.

지용성 저분자 보습제로서는 콜레스테롤, 콜레스테롤에스테르 등을 들 수 있다.

수용성 고분자로서는 카르복시비닐폴리머, 폴리아스파라긴산염, 트라가칸트, 크산탄검, 메틸셀룰로오스, 히드록시메틸셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 수용성 키틴, 키토산, 덱스트린 등을 들 수 있다.

지용성 고분자로서는 폴리비닐피롤리돈ㆍ에이코센 공중합체, 폴리비닐피롤리돈ㆍ헥사데센 공중합체, 니트로셀룰로오스, 덱스트린지방산에스테르, 고분자 실리콘 등을 들 수 있다.

에몰리엔트제로서는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산, 라놀린지방산콜레스테릴에스테르 등을 들 수 있다.

계면 활성제로서는 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제, 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.

비이온성 계면 활성제로서는 자기 유화형 모노스테아르산글리세린, 프로필렌글리콜지방산에스테르, 글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 솔비탄지방산에스테르, POE (폴리옥시에틸렌)솔비탄지방산에스테르, POE 솔비트지방산에스테르, POE 글리세린지방산에스테르, POE 알킬에테르, POE 지방산에스테르, POE 경화피마자유, POE 피마자유, POEㆍPOP (폴리옥시에틸렌ㆍ폴리옥시프로필렌) 공중합체, POEㆍPOP 알킬에테르, 폴리에테르변성실리콘, 라우린산알카놀아미드, 알킬아민옥시드, 수소첨가대두인지질 등을 들 수 있다.

음이온성 계면 활성제로서는 지방산비누, 알파-아실술폰산염, 알킬술폰산염, 알킬알릴술폰산염, 알킬나프탈렌술폰산염, 알킬황산염, POE 알킬에테르황산염, 알킬아미드황산염, 알킬인산염, POE 알킬인삼염, 알킬아미드인산염, 알킬로일알킬타우린염, N-아실아미노산염, POE 알킬에테르카르복실산염, 알킬술포숙신산염, 알킬술포아세트산나트륨, 아실화 가수분해 콜라겐펩티드염, 퍼플루오로알킬인산에스테르 등을 들 수 있다.

양이온성 계면 활성제로서는 염화알킬트리메틸암모늄, 염화스테아릴트리메틸암모늄, 브롬화스테아릴트리메틸암모늄, 염화세토스테아릴트리메틸암모늄, 염화디스테아릴디메틸암모늄, 염화스테아릴디메틸벤질암모늄, 브롬화베헤닐트리메틸암모늄, 염화벤잘코늄, 스테아르산디에틸아미노에틸아미드, 스테아르산디메틸아미노프로필아미드, 라놀린 유도체 제 4급 암모늄염 등을 들 수 있다.

양성 계면 활성제로서는 카르복시베타인형, 아미드베타인형, 술포베타인형, 히드록시술포베타인형, 아미드술포베타인형, 포스포베타인형, 아미노카르복실산염형, 이미다졸린 유도체형, 아미드아민형 등의 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.

유기 및 무기 안료로서는 규산, 무수규산, 규산마그네슘, 탤크, 세리사이트, 마이카, 카올린, 벵갈라, 클레이, 벤토나이트, 티탄피막운모, 옥시염화비스무트, 산화지르코늄, 산화마그네슘, 산화아연, 산화티탄, 산화알루미늄, 황산칼슘, 황산바륨, 황산마그네슘, 탄산칼슘, 탄산마그네슘, 산화철, 군청, 산화크롬, 수산화크롬, 칼라민 및 이들의 복합체등의 무기 안료 ; 폴리아미드, 폴리에스테르, 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리우레탄, 비닐수지, 요소수지, 페놀수지, 불소수지, 규소수지, 아크릴수지, 멜라민수지, 에폭시수지, 폴리카보네이트수지, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 실크파우더, 셀룰로오스, CI 피그먼트옐로우, CI 피그먼트오렌지 등의 유기 안료 및 이들의 무기 안료와 유기 안료의 복합 안료 등을 들 수 있다.

유기 분체로서는 스테아르산칼슘 등의 금속비누; 세틸린산아연나트륨, 라우릴린산아연, 라우릴린산칼슘 등의 알킬인산금속염; N-라우로일-베타-알라닌칼슘, N-라우로일-베타-알라닌아연, N-라우로일글리신칼슘 등의 아실아미노산 다가금속염; N-라우로일-타우린칼슘, N-팔미토일-타우린칼슘 등의 아미드술폰산 다가금속염; N-엡실론-라우로일-L-리진, N-엡실론-팔미토일리진, N-알파-파리토일올니틴, N-알파-라우로일아르기닌, N-알파-경화우지지방산아실아르기닌 등의 N-아실염기성아미노산; N-라우로일글리실글리신 등의 N-아실폴리펩티드; 알파-아미노카프릴산, 알파-아미노라우린산 등의 알파-아미노지방산; 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 나일론, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리스티렌, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 사불화에틸렌 등을 들 수 있다.

자외선 흡수제로서는 파라아미노벤조산, 파라아미노벤조산에틸, 파라아미노벤조산아밀, 파라아미노벤조산옥틸, 살리실산에틸렌글리콜, 살리신산페닐, 살리신산옥틸, 살리신산벤질, 살리신산부틸페닐, 살리신산호모멘틸, 계피산벤질, 파라메톡시계피산-2-에톡시에틸, 파라메톡시계피산옥틸, 디파라메톡시계피산모노-2-에틸헥산글리세릴, 파라메톡시계피산이소프로필, 디이소프로필ㆍ디이소프로필계피산에스테르 혼합물, 우로카닌산, 우로카닌산에틸, 히드록시메톡시벤조페논, 히드록시메톡시벤조페논술폰산 및 그 염, 디히드록시메톡시벤조페논, 디히드록시메톡시벤조페논디술폰산나트륨, 디히드록시벤조페논, 테트라히드록시벤조페논, 4-tert-부틸-4'-메톡시디벤조일메탄, 2,4,6-트리아닐리노-p-(카르보-2'-에틸헥실-1'-옥시)-1,3,5-트리아진, 2-(2-히드록시-5-메틸페닐)벤조트리아졸 등을 들 수 있다.

살균제로서는 히노키티올, 트리클로산, 트리클로로히드록시디페닐에테르, 크로르헥시딘글루콘산염, 페녹시에탄올, 레조르신, 이소프로필메틸페놀, 아줄렌, 살리칠산, 진크필리티온, 염화벤잘코늄, 감광소 301호, 모노니트로과이어콜나트륨, 운데시렌산 등을 들 수 있다.

산화 방지제로서는 부틸히드록시아니솔, 갈릭산프로필, 엘리소르빈산 등을 들 수 있다.

pH 조정제로서는 시트르산, 시트르산나트륨, 말산, 말산나트륨, 프말산, 프말산나트륨, 숙신산, 숙신산나트륨, 수산화나트륨, 인산일수소나트륨 등을 들 수 있다.

알코올로서는 세틸알코올 등의 고급 알코올을 들 수 있다.

또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 총중량에 대하여 바람직하게는 0.01-5 %중량, 보다 바람직하게는 0.01-3% 중량으로 배합된다.

본 발명의 화장료는 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상기 형개 추출물이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예를 들면, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함한다.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 유액, 크림, 화장수, 팩, 파운데이션, 로션, 미용액, 모발화장료 등을 들 수 있다.

구체적으로, 본 발명의 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저의 제형을 포함한다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 당귀로부터 추출 분리되는 정유 분획물은 고지방 식이로 비만을 유도한 흰쥐에서 체중감소 및 체지방 감소, 혈중지질농도를 감소시킬 뿐만 아니라 복부지방 감소 및 셀룰라이트의 예방 및 감소를 위한 화장료조성물에 유용하게 이용될 수 있다.

도 1은 고지방 식이 투여로 인한 비만 쥐의 몸무게에 대한 당귀 정유분획물의 효과를 나타낸 도이며,
도 2는 고지방 식이 투여로 인한 비만 쥐의 식이섭취량에 대한 당귀 정유분획물의 효과를 나타낸 도이며,
도 3는 고지방식이 투여로 인한 비만 쥐의 간무게에 대한 당귀 정유분획물의 효과를 나타낸 도이며,
도 4은(a-d) 고지방식이 투여로 인한 비만 쥐의 체지방 무게에 대한 당귀 정유분획물의 효과를 나타낸 도이며,
도 5(a-d)은 고지방식이 투여로 인한 비만 쥐의 혈중 간기능 효소 및 중성지질농도에 대한 당귀 정유분획물의 효과를 나타낸 도이며,
도 6(a-h)은 고지방식이 투여로 인한 비만 쥐의 간 소엽 전반에 걸친 간세포의 비대와 지방간 병증에 대한 당귀 정유분획물의 효과를 나타낸 도이며,
도 7(a-h)은 고지방식이 투여로 인한 비만 쥐의 부고환 조직에서 부고환 지방세포 비대에 대한 당귀 정유분획물의 효과를 나타낸 도이며,
도 8(a-h)은 고지방식이 투여로 인한 비만 쥐의 췌장 Zymogen과립의 감소와 함께 췌장섬의 분포에 대한 당귀 정유분획물의 효과를 나타낸 도이며,
도 9(a-h)은 고지방식이 투여로 인한 비만 쥐의 인슐린 생산 세포의 수적 증가에 대한 당귀 정유분획물의 효과를 나타낸 도이며,
도 10(a-h)은 고지방식이 투여로 인한 비만 쥐의 glucagon 생산 세포의 수적 증가에 대한 당귀 정유분획물의 효과를 나타낸 도이다.

이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.

단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예, 참고예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.

실시예 1. 당귀 정유 분획물의 제조

당귀는 대구소재 대원약업사에서 8Kg을 구입하여 깨끗이 세척하여 분쇄 후 추출기에 넣고 n-헥산(hexane) 30L을 첨가한 다음, 72시간 동안 실온 방치하면서 교반하여 추출하고 이 추출액을 회전 진공증류기(R-220, Buchi, rotary vacuum evaporator, Switzerland)를 이용하여 40℃에서 감압 농축 하였다. 농축된 당귀 헥산 추출물에 에탄올(ethanol 10L)을 첨가하여 재 용해 후 침전된 Wax층 등을 여과(Filter Paper NO2 Advantec)하고 농축과정을 거쳐 실험에 사용된 정유 성분을 획득하였다. 그 결과, 수득한 정유의 수율은 약 1.81%이었다(이하, AGEO라 함).

참고예 1. 실험동물의 준비

실험동물은 체중 28~32 g의 생후 5주령의 ICR mice(오리엔트 사)를 사용하였고, 대구한의대학교 동물 사육실에서 일정한 조건(온도: 21±2, 명암: 12시간 명암주기)하에, 사료와 음수의 자유로운 섭취가 가능하도록 하였으며, 실험시작 전까지 물과 먹이를 충분히 제공하였다.

참고예 2. 당귀 정유 흡입 및 비만 유도

비만을 유발하기 위하여 문헌에 기재된 식이조성을 이용하여 하기와 같이 실험을 수행하였다(Lee J. S. et al., Supplementation of whole persimmon leaf improves lipid profiles and suppresses body weight gain in rat fed high-fat diet, Food and Chemical Toxicology, 44(11), pp.1875-1883, 2006).

먼저, 정상군을 제외한 실험군에는 AIN-76 조성을 기초로 한 식이에 표 1과 같이 콜레스테롤 1%와 Lard 15%를 첨가한 펠렛 형태의 고형사료(#102038, AIN-76A Based High Fat/High Carb Purified Rodent Diet with Cholesterol & Cholic Acid, Dyet, USA) 6주간 먹였으며, 실험동물은 각 군당 15마리씩 배정하였다. 정상군(NOR), 고지방대조군(HFD), 고지방사료와 당귀 정유분획물을 흡입하는 당귀정유흡입군(AGEO)으로 나누었다. 당귀정유흡입군(AGEO)은 다시 2주 흡입군(2AGEO)과 3주 흡입군(3AGEO)으로 나누고 상기 실시예 1에서 수득한 당귀 정유분획물을 매일 12시간씩 각각 고지방 식이 공급 4주 후부터 2주간, 또는 고지방식이 공급 3주 후부터 3주간 고지방식이와 함께 흡입시켰으며, 매일 10 g의 사료를 할당하였다.

Ingredient	Normal	HFD
Casein	20	20
DL - Methionine	0.3	0.3
Com starch	15	15
Sucrose	50	39.75
Cellulose	5	5
Corn oil	5	5
Mineral-mix	3.5	3.5
Vitamin-mix	1	1
Choline bitartrate	0.2	0.2
Lard	-	10
Cholesterol	-	0.2
Cholic acid	-	0.05
total(%)	100	100
Kcal/100g diet	3850	4340
Calorie from fat(%)	117	311
Calorie from carbohydrate(%)	675	505
Calorie from protein(%)	208	184

참고예 3. 통계처리

실험성적의 통계적 유의성은 SPSS 프로그램(Version 14.01)의 투웨이(Two-way) ANOVA와 LSD 사후검정을 이용하여, P<0. 05 인 경우에 유의한 것으로 인정하였으며, NOR군과의 통계학적 유의성(#) 및 HFD군과의 통계학적 유의성(*)을 도면 및 표에 각각 표기하였다.

실험예 1. 고지방 식이를 이용한 비만 유도 쥐의 식이효율, 체중측정 및 조직의 채취

상기 실시예의 당귀 정유 분획물(AGEO)이 고지방 식이를 이용한 비만 유도 쥐의 식이효율, 체중측정 등에 미치는 영향을 확인하기 위하여 문헌에 기재된 방법을 응용하여 하기와 같이 실험을 수행하였다(허명행 외 4, 향 흡입이 비만을 유도한 쥐의 체중, 식이 섭취량, 섭취 효율 및 혈청 렙틴에 미치는 효과, 한국인간식물환경학회지 pp.113-124, 9(2), 2006).

식이 섭취량은 매일 오후 5시에 측정하여, 일일 먹이 섭취량을 계산하였으며, 체중은 3일에 한 번씩 측정하였다. 식이효율(FER; Food efficiency ratio)은 실험기간 동안의 체중 증가량을 구하고 그 값을 식이섭취량으로 나눈 값이다(FER=body weight gain/food intake).

상기 실험 결과 표 2 및 도 1에 나타나는 바와 같이 3주 후 정상군(NOR)의 체중보다 고지방식이 투여군(HFD)에서 유의성 있게 체중이 증가하였으며, 당귀 정유 2주 흡입(2AGEO), 당귀 정유 3주 흡입군(3AGEO)에서는 체중의 증가를 유의적으로 억제하는 결과를 얻을 수 있었다. 또한, 표 2 및 도 2에 나타나는 바와 같이 식이섭취량을 보면 정상군(NOR)과 비교하였을 때, 2AGEO, 3AGEO 군에서 유의성 있는 감소를 보였다. 체중의 변화율에 있어서는 HFD군에 비해 NOR군과 2AGEO, 3AGEO 군에서 유의적인 감소를 보였다. 식이효율(FER)에 있어서도 NOR군에 비해 HFD군, 3AGEO 군에서 유의적으로 높은 결과를 보였다.

한편, 실험동물은 희생 전 12시간 절식 시킨 후 펜토바비탈로 마취한 상태에서 간 및 부위별 내장지방조직(부고환;epididymal, 내장;visceral adipose tissue)과 갈색지방(brown adipose tissue; BAT)을 채취하였다. 조직 염색용 조직은 포르말린 용액에 고정 시켰으며, 분석용 체지방조직은 액체 질소로 급속 냉동시켜 사용하기 전까지 -80℃에 보관하였다.

상기 실험 결과 도 3 및 도 4(a-d)에 의하면 정상군에 비해 고지방 식이 투여군(HFD)군에서 간 무게, 부고환 지방 무게, 내장 무게, 갈색지방(BAT) 무게가 유의하게 증가하였으며, 2AGEO, 3AGEO 군에서 부고환지방 무게, 신장주위 지방조직 무게, 내장 무게 및 갈색지방 무게가 감소되었으며, 그 중에서도 2AGEO 군에서 유의하게 억제되었다. 이 결과는 비만에 있어서 단순한 체중감소 보다는 심혈관계 질환과 같은 합병증을 야기 시키는 것으로 알려진 체지방 감소에 대한 강력한 당귀 정유의 효과를 보여주는 것으로서 비만 치료제로서의 더 큰 의미가 있다고 할 수 있다.

	NOR	HFD	2AGEO	3AGEO
Food intake	5.14±0.43	4.33±0.83	4.48±0.54	3.62±0.40
Weight gain (g/day)	0.17±0.07	0.22±0.04	0.01±0.05	0.06±0.07
FER	0.03±0.02	0.05±0.01	0.02±0.01	0.04±0.02

실험예 2. 비만을 유발시킨 쥐의 채혈 및 혈청 분석

각 군의 실험동물을 희생 전 12시간 절식시킨 후 pentobarbital sodium (10901,한림제약주식회사, 한국)로 마취한 다음, 복부 대정맥에서 혈액을 채취하였다. 채취한 혈액은 test tube에 넣고 상온에서 1시간 방치한 다음 4℃, 3,500 rpm에서 15분간 원심분리하여 혈청을 분리하고, 혈청 중 총콜레스테롤(total cholesterol; TC)은 C. Allain 1의 효소법(Allain C. et al., Enzymatic determination of total serum cholesterol, Clin. Chem. 20(4), pp.470-475, 1974)에 따라 분석시약(L-type GHO M, Wako, 일본)을 사용하였고 중성지방(triglyceride) 함량은 Van Handel 등의 효소법(Van Handel E. et al, Micromethod for the direct determination of serum triglycerides, J. Lab. Clin. Med. 50(1), pp.152-157, 1957)에 의하여 검사시약(L-type TG M, Wako, 일본)을 사용하였다.

간 기능과 관련된 트랜스아미나아제(transaminase)인 혈청 중 에이엘티(ALT; Alanine aminotransferase)와 혈청 에이에스티(AST; Aspartate aminotransferase) 함량은 분광광도법(Giusti G. et al., A comparative study of some spectrophotometric and colorimetric procedures for the determination of serum glutamic-oxaloacetic and glutamic-pyruvic transaminase in hepatic diseases. Enzymol. Biol. Clin(Basel), 10(1), pp.17-38, 1969)을 이용한 검사시약(L-type ALT J2, L-type AST J2, Wako, 일본)을 사용하여 자동화된 생화학 분석기(Hitachi 7080, Japan)로 분석하였다.

실험결과, 도 5(a-d)에 나타나는 바와 같이, 정상군에 비해 고지방 식이 투여군(HFD)군에서 혈청 중 ALT(143.4± 7.8 U/L), AST(1238.8± 691.1 U/L)와 중성지방(50.5± 3.5 ㎎/㎗) 함량이 증가하였으나, 당귀 정유의 흡입으로 2AGEO, 3AGEO 군에서 각각 혈청 중에서 ALT(79.4± 6.8. 71.4± 6.9 U/L), AST(703.7± 265.0, 499.1± 137.8 U/L) 및 중성지방(27.3± 7.6, 41.2± 13.4 ㎎/㎗) 함량이 감소하였다.

실험예 3. 고지방 식이를 이용하여 비만을 유발시킨 쥐의 조직병리학적 분석

상기 실시예의 당귀 정유 분획물(AGEO)이 비만 유발 쥐에 대한 영향을 확인하기 위하여 문헌에 기재된 방법을 응용하여 하기와 같이 실험을 수행하였다.(구세광 외 3, 고지방식이로 유발된 비만 마우스에서 산마늘 잎추출물의 항비만효과, 한국임상수의학회지, 28(3), pp.280-286, 2011)

재료 및 방법: 정상 대조군, HFD 대조군, 2AGEO, 3AGEO 군에서 각각 간, 부고환 주위 지방 및 췌장 실질조직의 일부를 취하여 10% 중성포르말린에 고정시킨 다음 일반적인 방법으로 탈수 및 파라핀 포매를 실시하고, 3~4μm의 절편을 제작하여 Hematoxylin-eosin(MHS16-SIGMA) 또는 Massons trichrome(B8563, SIGMA) 염색을 실시한 후 광학현미경하에서 관찰하였으며, 췌장섬내 insulin 및 glucagon 생산세포를 avidin-biotin-peroxidase (ABC) 방법을 이용하여 염색하였다. 또한 명확한 조직병리학적 변화의 관찰을 위해 지방간 병변 부위의 비율 (%/mm² of hepatic parenchyma), 간세포 직경 (μm/hepatocyte), 부고환 지방세포 크기 (μm/adipocyte), 췌장 zymogen 과립 (%/ mm² of exocrine pancreatic parenchyma) 및 췌장섬이 차지하는 부위 (%/mm² of pancreatic parenchyma), insulin 및 glucagon 생산세포의 수적 (cells/mm² of pancreatic parenchyma)변화와 이들의 비율 (insulin/glucagon cell ratio)를 각각의 현미경 시야에서 자동영상 분석장치 (DMI-300 Image Processing; DMI, Korea)를 이용하여, histomorphometry적으로 평가하였다.

실험결과, 도 6(a-h)에 나타난 바와 같이, 고지방사료 공급(HFD)에 의해 간 소엽 전반에 걸쳐 간세포의 비대와 공포화를 특징으로 하는 지방변화 (fatty changes) 소견이 인정되었다. 한편, 고지방식이투여와 정유 분획물을 병용 흡입한 2AGEO, 3AGEO군에서는 HFD 대조군에 비해 현저한 간세포 직경을 감소시킴으로써, HFD 공급으로 유발되는 지방간병증을 2AGEO, 3AGEO군 모두에서 현저하게 개선시켰으나 3AGEO에서 더 유의한 직경감소가 관찰되었다.

도 7에 나타난 바와 같이 고지방사료 공급에 의해 부고환 지방 세포의 직경이 극적으로 증가하였으나, 고지방식이투여와 정유 분획물을 병용 흡입한 2AGEO, 3AGEO군에서는 HFD 대조군에 비해 부고환 지방세포의 직경이 유의하게 감소하였다.

도 8에 나타난 바와 같이 고지방사료 공급에 의해 HFD군에서 췌장 zymogen 과립의 감소와 함께 췌장섬의 증가를 나타내었으나, 고지방식이투여와 정유를 병용흡입한 2AGEO, 3AGEO군에서는 HFD 대조군에 비해 zymogen 과립의 수가 두군 모두에서 정상화 되었으며, 고지방사료 공급에 의한 췌장 내분비 호르몬의 확산 또한 정상화 되었다.

도 9에 나타난 바와 같이 고지방사료 공급에 의해 HFD군에서 insulin 과 glucagon 생산세포의 수적 증가와 같은 내분비 장애가 나타났으나, 고지방식이투여와 정유 분획물을 병용 흡입한 2AGEO, 3AGEO군에서는 HFD 대조군에 비해 현저하게 정상화 되었다.

도 10에 나타난 바와 같이 고지방사료 공급에 의해 HFD군에서 glucagon 생산세포의 수적 증가와 같은 내분비 장애가 나타났으나, 고지방식이투여와 정유 분획물을 병용 흡입한 2AGEO, 3AGEO군에서는 HFD 대조군에 비해 현저하게 정상화 되었다.

즉, 정상 대조군에 비해 HFD 대조군에서는 유의성 있는 (p<0.01) 변성 간 부위 비율, 평균 간세포 직경, 부고환 주위 지방세포의 크기, 췌장섬이 차지하는 부위, 인슐린(insulin) 및 글루카곤(glucagon) 생산세포의 수적 증가가 각각 인정되었으며, 췌장 zymogen 과립이 차지하는 비율은 유의성 있는 (p<0.01) 감소를 나타내었다. 한편, 2AGEO, 3AGEO군 모두 고지방식이 투여로 유발되는 지방 간병증, 지방세포 비대, 췌장섬 증식, 인슐린(insulin) 및 글루카곤(glucagon) 생산세포의 증가를 현저히 억제하는 것으로 관찰되었으며, 특히 췌장의 zymogen 과립의 감소 억제가 인정되어, 이들의 분비 조절을 통한 지방 흡수 및 대사의 제어로 고지방 식이 공급에 의해 초래되는 다양한 변화들이 억제되는 것으로 판단되며, 전체적으로 3AGEO군이 2AGEO군 보다 비교적 우수한 지방 간병증, 지방세포 비대, 췌장섬 증식, 인슐린(insulin) 및 글루카곤(glucagon) 생산세포 증가 억제효과를 나타내었다.

하기에 본 발명의 분획물을 포함하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.

이하, 본 발명의 제형예로서 에센셜 오일, 크림, 맛사지크림, 로션, 스킨로션, 에센스, 팩, 클렌징폼 등의 제형을 예시하고 있으나, 본 발명의 화장품 조성물을 포함하는 제형은 이에 한정되는 것은 아니다.

제형예 1. 크림조성물

유상과 수상을 각각 75 ℃로 가열 혼합한 후 실온으로 냉각한다.

제형예 2. 맛사지크림 조성물

유상과 수상을 각각 75 ℃로 가열 용해 혼합한 후 실온으로 냉각한다.

제형예 3. 로션 조성물

유상과 수상을 각각 75 ℃로 가열 혼합 유화한 후 실온으로 냉각한다.

제형예 4. 스킨로션 조성물

수상과 에탄올상을 각각 제조 혼합한 후 여과한다.

제형예 5. 에센스 조성물

수상과 에탄올상을 각각 제조 혼합한 후 여과한다.

제형예 6. 팩 조성물

수상과 에탄올상을 각각 분산 용해하여 혼합시킨 후 실온으로 냉각한다.

제형예 7. 클렌징폼 조성물

수상과 오일상을 각각 분산 용해하여 혼합 검화한 후 실온으로 냉각한다.

제제예 8. 에센셜 오일의 제조

라벤더 오일 20 내지 40 중량부, 카모마일 오일 1 내지 5 중량부, 제라늄 오일 1 내지 5 중량부, 오렌지 오일 5 내지 20 중량부, 당귀 정유 분획물(AGEO) 오일 1 내지 10 중량부 및 일랑일랑 오일 0.5 내지 2 중량부로 구성된 아로마 오일 1 내지 15 중량%에 알코올 5 내지 15 중량%, 적정량의 정제수를 합하여 아로마 에센셜 오일을 제조한다.

Claims (5)

1. 당귀를 건조하여 마쇄한 후 시료 중량의 2 내지 20배에 달하는 부피의 n-헥산, 헵탄, 메틸렌 클로라이드, 클로로포름 또는 에틸 아세테이트 용매를 가하여, 20 내지 120℃에서 48 내지 96시간 동안에서 냉침추출방법을 사용하여 추출하여 얻어진 추출액을 20 내지 80℃에서 감압여과 및 농축하여 당귀 용매 분획물을 수득하는 제 1단계; 상기 용매 분획물에 상기 분획물 중량의 0.5 내지 5배 부피 (v/w%)의 에탄올을 가하여 생성된 침전물을 제거하고 얻어진 정유 분획물을 농축하여 제 2단계를 공정을 포함하는 제조공정으로 수득된 당귀 정유분획물을 유효성분으로 포함하는 체지방 또는 셀룰라이트의 감소 및 예방효과를 갖는 아로마 오일 조성물.
2. 삭제
3. 제 1항에 있어서,
   상기 아로마 오일 조성물은 마사지법, 향을 발향시키는 확산법, 코로 향을 흡입하는 흡입법, 목욕법, 통증 있는 부위를 찜질하는 습포법, 입안을 헹구는 가글링법, 복용법, 또는 도포법으로 이용가능한 아로마요법에 유용한 아로마 에센셜 오일, 아로마 마사지 오일, 아로마 바디 오일, 아로마향초, 아로마램프, 아로마방향제, 아로마디퓨저, 또는 아로마스틱 제형임을 특징으로 하는 아로마 오일 조성물.
4. 당귀를 건조하여 마쇄한 후 시료 중량의 2 내지 20배에 달하는 부피의 n-헥산, 헵탄, 메틸렌 클로라이드, 클로로포름 또는 에틸 아세테이트 용매를 가하여, 20 내지 120℃에서 48 내지 96시간 동안에서 냉침추출방법을 사용하여 추출하여 얻어진 추출액을 20 내지 80℃에서 감압여과 및 농축하여 당귀 용매 분획물을 수득하는 제 1단계; 상기 용매 분획물에 상기 분획물 중량의 0.5 내지 5배 부피 (v/w%)의 에탄올을 가하여 생성된 침전물을 제거하고 얻어진 정유 분획물을 농축하여 제 2단계를 공정을 포함하는 제조공정으로 수득된 당귀 정유분획물을 유효성분으로 포함하는 체지방 또는 셀룰라이트의 감소 및 예방효과를 갖는 화장료 조성물.
5. 제 4항에 있어서,
   상기 화장료 조성물은 비누, 세안제, 화장수, 스킨, 로션, 영양로션, 영양크림, 마사지 크림, 에센스, 팩의 제형임을 특징으로 하는 화장료 조성물.

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