KR102015176B1 - 황매실 종자 에센셜 오일 및 이를 포함하는 미백 화장료 조성물 - Google Patents

황매실 종자 에센셜 오일 및 이를 포함하는 미백 화장료 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR102015176B1
KR102015176B1 KR1020170125288A KR20170125288A KR102015176B1 KR 102015176 B1 KR102015176 B1 KR 102015176B1 KR 1020170125288 A KR1020170125288 A KR 1020170125288A KR 20170125288 A KR20170125288 A KR 20170125288A KR 102015176 B1 KR102015176 B1 KR 102015176B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
essential oil
lotion
weight
yellow plum
parts
Prior art date
Application number
KR1020170125288A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20190036269A (ko
Inventor
민유홍
정여원
Original Assignee
대구한의대학교산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 대구한의대학교산학협력단 filed Critical 대구한의대학교산학협력단
Priority to KR1020170125288A priority Critical patent/KR102015176B1/ko
Publication of KR20190036269A publication Critical patent/KR20190036269A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102015176B1 publication Critical patent/KR102015176B1/ko

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/92Oils, fats or waxes; Derivatives thereof, e.g. hydrogenation products thereof
    • A61K8/922Oils, fats or waxes; Derivatives thereof, e.g. hydrogenation products thereof of vegetable origin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00Preparations for care of the skin
    • A61Q19/02Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

본 발명은 황매실 종자 에센셜 오일 및 이를 포함하는 미백 화장료 조성물에 관한 것으로, 황매실 종자 에센셜 오일은 티로시나아제(tyrosinase) 활성을 억제하고, 멜라닌의 생성을 억제하는 효과가 있으며, 생성된 색소 침착을 개선하는 효과가 있어 피부 미백용 화장료 조성물로 유용할 수 있다.

Description

황매실 종자 에센셜 오일 및 이를 포함하는 미백 화장료 조성물{Japanese apricot essential oil and cosmetic composition for skin whitening containing the same}
본 발명은 황매실 종자 에센셜 오일 및 이를 포함하는 미백 화장료 조성물에 관한 것이다.
장미과(Rosaceae)에 속하는 매화나무(Prunus mume Sieb. et Zucc)는 중국의 호북성, 사천성 등이 원산지이며 한국, 일본 등 아시아 지역에 분포하며 약 3000년간 제배되어왔다. 중국에서는 매화나무의 열매, 꽃, 가지, 잎, 뿌리 등 여러 부위를 약재로 사용했다. 특히 매화나무의 열매는 매실(梅實)이라 하여 예로부터 매실주, 절임 등으로 식용 또는 약재로 사용되어왔다. 매실은 지름 2~3cm 정도이며 껍질에 털이 많고 신맛이 강하다(이영은, 홍승헌 2004). 핵과(核果)로서 핵(核)이 있으며, 녹색이나 6~7월이 되면 익어서 노란색으로 변한다. 매실은 수확시기, 가공법에 따라 다음과 같이 5종류로 나누어 진다(이영은, 홍승헌 2004). 청매(靑梅)는 녹색으로 덜 익은 매실로서 5~6월에 수확한 것이며 신맛이 강하고 과육이 단단하다. 황매(黃梅)는 노란색으로 6~7월에 수확하며 과육이 무르고 향이 좋다. 금매(金梅)는 증기로 쪄서 말린 청매이며, 오매(烏梅)는 청매를 훈증하여 검게 만든 매실이다. 백매(白梅)는 청매를 소금물에 절인 후 말린 것이다. 청매에는 청산배당체인 아미그달린(amygdalin)이 있어 사람이 섭취 시 장내의 소화효소에 의해 청산(시안화수소, HCN)을 생성하므로 생식하면 위험하다.
매실은 한방에서는 약재로서 오매를 사용하는데 해독, 해열, 갈증해소, 기침해소에 좋으며 소화가 안 될 때 사용한다(이영은, 홍승헌 2004). 매실은 이하선의 parotin 분비를 촉진하여 얼굴과 피부를 윤택하게 하는 미용적 효능도 있다(주영승, 김기연, 장성환 2004). 매실의 과학적 효능으로는 인플루엔자 A 바이러스 억제(Yingsakmongkon et al 2008), 항균(Xia et al 2011), 항산화(Xia et al 2010), 골다공증 억제(Yan et al 2014), 항암(Jeong et al 2006), 건위(Sheo, Lee, Chung 1990), 알코올 대사 촉진(Hwang, Ham, Nam 2004) 등 다양하다.
멜라닌은 생체의 필터와 같은 역할로서 자외선을 흡수하거나 산란시켜 피부조직이 자외선에 의해 손상되는 것을 막아준다(김춘자 2009). 하지만 멜라닌 양이 많아지면 기미(melasma) 등과 같은 미적 문제를 야기한다. 멜라닌은 자외선 및 멜라닌세포 자극 호르몬(melanocyte stimualting hormone; MSH) 등에 의해 생성이 촉진된다(Parvez et al 2006). 멜라닌 생성 기전을 살펴보면 우선 tyrosine이 tyrosinase 효소의 촉매반응에 의해 3,4-dihydroxyphenylalanine(DOPA)가 되고 DOPA는 다시 tyrosinase에 의해 DOPAquinone이 된다. 이후 DOPAquinone은 DOPAchrome을 거쳐 eumelanin이 된다(Parvez et al 2006).
여기서 tyrosinase는 멜라닌 생합성 효소로 미백제의 일반적인 억제 목표가 된다(Ando et al 2007). Tyrosinase를 억제하는 미백성분으로는 하이드로퀴논(hydroquinone), 아젤라산(azelaic acid), 코직산(kojic acid), 알부틴(arbutin), N-acetyl-4-S-cysteaminylphenol, 알로에신(aloesin), 감초추출물(licorice extract), 비타민 E등이 있다.
멜라닌소체(melanosome)의 각질 세포로의 이동을 막는 미백성분은 나이아신아미드(niacinamide), 렉틴(lectin), neoglycoprotein 등이 있으며, 표피세포의 각화주기를 빠르게 하여 미백효과를 나타내는 성분으로는 α-hydroxyacid(AHA), salicylic acid, retinoid 등이 있다 (Ebanks, Wickett, Boissy 2009). 하지만 세계적으로 가장 많이 사용되는 미백성분 중 하나인 하이드로퀴논(hydroquinone)의 경우 안전성에 문제가 있어 이를 대체하기 위한 새로운 미백성분에 대한 연구가 이루어지고 있다(Parvez et al 2006).
한국공개특허 제10-2010-0059347호 한국공개특허 제10-2012-0113459호
본 발명의 다른 목적은 황매실 종자 에센셜 오일의 제조방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 제조방법으로 제조된 황매실 종자 에센셜 오일을 포함하는 미백 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여,
본 발명은 1) 황매실 과육을 제거하여 종자를 분리한 후, 상기 종자의 단단한 껍질을 제거한 뒤, 자연건조하여 분쇄하는 단계(단계 1); 및
2) 상기 분쇄 후, 탈이온수와 분쇄한 황매실 종자를 혼합하여 물증류법(water distillation)으로 2 내지 4시간 동안 90 내지 130℃로 가열한 뒤, 상온에서 교반하여 물을 제거하고, 여과하여 황매실 종자 에센셜 오일을 제조하는 단계(단계 2);
를 포함하는 황매실 종자 에센셜 오일 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 제조방법에 따라 제조된 황매실 종자 에센셜 오일을 포함하는 미백 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 황매실 종자 에센셜 오일은 티로시나아제(tyrosinase) 활성을 억제하고, 멜라닌의 생성을 억제하는 효과가 있으며, 생성된 색소 침착을 개선하는 효과가 있어 피부 미백용 화장료 조성물로 유용할 수 있다.
도 1은 황매실 종자 에센셜 오일의 mushroom tyrosinase 억제 효과를 나타낸 도이다.
도 2는 황매실 종자 추출물 및 황매실 종자 에센셜오일(정유)의 mushroom tyrosinase 억제 효과를 나타낸 도이다(처리농도 0.01%).
도 3은 황매실 종자 에센셜 오일(정유)의 cell-free tyrosinase 억제 활성을 나타낸 도이다.
도 4는 B16F10 세포에서의 황매실 종자 에센셜오일(정유)의 멜라닌 생합성 억제효과를 나타낸 도이다.
도 5는 B16F10 세포에서의 황매실 종자 추출물 및 황매실 종자 에센셜오일(정유)의 멜라닌 생합성 억제 효과 비교한 도이다(처리 농도 0.01%).
도 6은 황매실 종자 에센셜오일(정유)에 대한 B16F10 세포의 생존율을 나타낸 도이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
황매실 종자 에센셜 오일 제조방법
본 발명은 1) 황매실 과육을 제거하여 종자를 분리한 후, 상기 종자의 단단한 껍질을 제거한 뒤 자연건조하여 분쇄하는 단계(단계 1); 및
2) 상기 분쇄 후, 탈이온수와 분쇄한 황매실 종자를 혼합하여 물증류법(water distillation)으로 2 내지 4시간 동안 90 내지 130℃로 가열한 뒤, 상온에서 교반하여 물을 제거하고, 여과하여 황매실 종자 에센셜 오일을 제조하는 단계(단계 2);
를 포함하는 황매실 종자 에센셜 오일 제조방법을 제공한다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 상기 단계 2는 분쇄한 황매실 종자 100 중량부에 탈이온수를 300 내지 700 중량부로 혼합할 수 있으며, 바람직하게는 분쇄한 황매실 종자 100 중량부에 탈이온수를 400 내지 600 중량부로 혼합할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 분쇄한 황매실 종자 100 중량부에 탈이온수를 500 중량부로 혼합하여 사용할 수 있다.
피부 미백용 화장료 조성물
본 발명은 상기 황매실 종자 에센셜 오일을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 용어, "미백"이란 피부의 과다 색소 침착을 억제, 저해 또는 완화시키는 것을 말한다. 피부의 과다 색소 침착은 주근깨, 기미, 자외선 노출 후 과다 색소 침착, 염증 후 과다 색소 침착, 노인흑색점, 갈색 반점 또는 검버섯 등을 포함한다.
본 발명에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 피부 미백용 화장료 조성물은 상기 황매실 종자 에센셜 오일 총 중량에 대하여 0.0001~90 중량부의 양으로 함유할 수 있으나, 바람직한 미백 효과를 제공할 수 있는 유효량을 포함한다면 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 용어, "유효량"이란 피부의 과다 색소 침착을 억제, 저해 또는 완화시킬 수 있는 화합물의 양을 의미한다. 본 발명의 피부 미백용 조성물에 포함되는 상기 황매실 종자 에센셜 오일의 유효량은 피부 미백용 조성물이 제품화되는 형태, 상기 황매실 종자 에센셜 오일이 피부에 적용되는 방법 및 피부에 머무르는 시간 등에 따라 달라질 것이다. 예컨대, 상기 피부 미백용 조성물이 피부의 과다 색소 침착에 따른 피부과적 치료를 위한 의약품으로 제품화되는 경우에는 일상적으로 피부에 적용하게 되는 화장품으로 제품화되는 경우에 비해 높은 농도로 상기 황매실 종자 에센셜 오일을 포함할 수 있을 것이다. 화장품으로 제품화되는 경우에 있어서도 유효성분이 단기간 내에 피부에 머무르게 되는 메이크업 제거제, 세정제 등과 같은 워쉬-오프(wash-off) 타입의 화장품의 경우에는 비교적 높은 농도의 상기 황매실 종자 에센셜 오일을 포함할 수 있을 것이다. 반면 유효성분이 장기간 동안 피부에 머무르게 되는 화장수, 유액, 크림, 에센스 등의 리브-온(leave-on) 타입의 화장품의 경우에는 워쉬-오프 타입의 화장품에 비해 낮은 농도의 상기 황매실 종자 에센셜 오일을 포함해도 무방할 것이다.
본 발명에 따른 피부 미백용 화장료 조성물은 피부외용연고, 크림, 유연화장수, 영양화장수, 팩, 에센스, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 트리트먼트, 젤, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드 크림, 파운데이션, 영양에센스, 선스크린, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디 로션 및 바디 클렌저로 이루어지는 군으로부터 선택된 제형을 가질 수 있으며, 이에 제한되지 않는다. 이들 각 제형의 조성물은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 당업자에 의해 용이하게 선정될 수 있다.
본 발명의 조성물은 본 발명의 황매실 종자 에센셜 오일에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 피부 미백 활성 성분을 1종 이상 함유할 수 있다. 피부 미백 활성 성분으로는 코지산 및 이의 유도체, 알부틴, 아스코르브산 및 이의 유도체, 하이드로퀴논 및 이의 유도체, 레조르시놀, 사이클로알카논, 메틸렌디옥시페닐 알칸올, 2,7-디니트로인다졸 또는 덩굴귤 추출물, 쌀 추출물, 감초 추출물과 같은 식물 추출물 등이 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형은 형광물질, 살진균제, 굴수성 유발물질, 보습체, 방향제, 방향제 담체, 단백질, 용해화제, 당유도체, 일광차단제, 비타민, 식물 추출물 등을 포함하는 부형제를 추가로 함유할 수 있다.
상기와 같이 피부 미백용 화장료 조성물을 의약품 또는 화장품으로 제형화할 경우, 활성 성분에 대한 담체로 작용하는 피부에 적용가능한 공지의 부형제를 포함할 수 있다. 의약품으로의 제형화시에는 [Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA]에 개시되어 있는 내용을 참조할 수 있으며, 화장품으로 제형화시에는 [International cosmetic ingredient dictionary, 6th ed., The cosmetic, Toiletry and Fragrance Association, Inc., Washington, 1995]에 개시되어 있는 내용을 참조할 수 있을 것이다. 상기 문헌들은 본 명세서의 일부로서 포함된다.
이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명한다. 단, 하기의 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기의 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
<준비예 1> 시약 및 세포
Mushroom tyrosinase, α-melanocyte stimulating hormone(α-MSH), L-DOPA, phenylmethanesulfonyl fluoride(PMSF), 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide(MTT), kojic acid는 Sigma-Aldrich(USA)에서, sodium sulfate는 MBcell (USA)에서 dimethyl sulfoxide(DMSO), Triton X-100은 Amresco(USA)에서, Bradford solution은 Bio-Rad(USA)에서 구입하였다.
Mouse melanocyte인 B16F10 세포는 ATCC(USA)에서 분양받았으며, 10% fetal bovine serum (FBS; Gibco, USA)이 함유된 Dulbecco Modified Eagle Medium (DMEM; Gibco, USA)으로 배양하였다.
<실시예 1> 황매실 종자 추출물 오일 제조
황매실은 2016년 6월 대구시에서 채취한 것을 사용하였으며, 황매실 과육을 제거하여 종자를 분리한 후, 상기 종자의 단단한 껍질을 제거한 뒤 자연건조하여 분쇄하였다
상기 분쇄한 황매실 종자 300g을 둥근 플라스크에 넣고 탈이온수 1.5L를 넣어 혼합한 뒤, 물 증류법(water distillation)으로 Clevenger type apparatus(고흥초자, 한국)에 넣고 100℃에서 3시간 동안 가열하였다.
가열시 증발된 에센셜오일을 냉각관을 통해 냉각하여 응축된 에센셜 오일을 수거하였다.
모아진 에센셜 오일에 sodium sulfate 0.1g을 넣은 후 상온에서 교반하여 물을 제거한 뒤, syringe filter(0.2μm, Millipore)으로 여과하여 불순물을 제거하여 황매실 종자 에센셜 오일을 제조하였다.
상기 황매실 종자 에센셜 오일을 유리용기에 넣고 차광하여 4℃에서 보관하였다.
황매실 종자 에센셜 오일의 수득률(yield)은 0.38%(w/w)이었고, 밀도는 1.0g/ml였다.
<비교예 1>
건조한 황매실 종자를 분쇄하고, 분쇄한 황매실 종자 10g을 탈이온수 100mL에 넣고 60℃에서 24시간 추출하였다. 이를 10,000×g에서 10분간 원심분리한 후 상등액을 취하여 filter paper (No.2, Whatman, UK)으로 여과하여, 비교예 1을 제조하였다.
<비교예 2>
상기 비교예 1을 동결건조기(일신랩, 한국)로 동결건조 후, 탈이온수 100mL을 다시 넣어 용해하여 비교예 2를 제조하였다.
<비교예 3>
건조한 황매실 종자를 분쇄하고, 분쇄한 황매실 종자 10g을 50% 에탄올(덕산약품, 한국)수용액 100mL에 넣고 60℃에서 24시간 추출하였다. 이를 10,000×g에서 10분간 원심분리한 후 상등액을 취하여 filter paper (No.2, Whatman, UK)으로 여과하여, 비교예 3을 제조하였다.
<비교예 4>
건조한 황매실 종자를 분쇄하고, 분쇄한 황매실 종자 10g을 100% 에탄올(덕산약품, 한국) 100mL에 넣고 60℃에서 24시간 추출하였다. 이를 10,000×g에서 10분간 원심분리한 후 상등액을 취하여 filter paper (No.2, Whatman, UK)으로 여과하여, 비교예 4를 제조하였다.
<비교예 5>
건조한 황매실 종자를 분쇄하고, 분쇄한 황매실 종자 10g을 20% 1,3-부틸렌글라이콜(코스넷, 한국) 100mL에 넣고 60℃에서 24시간 추출하였다. 이를 10,000×g에서 10분간 원심분리한 후 상등액을 취하여 filter paper (No.2, Whatman, UK)으로 여과하여, 비교예 5를 제조하였다.
<비교예6>
건조한 황매실 종자를 분쇄하고, 분쇄한 황매실 종자 10g을 100% 1,3-부틸렌글라이콜(코스넷, 한국) 100mL에 넣고 60℃에서 24시간 추출하였다. 이를 10,000×g에서 10분간 원심분리한 후 상등액을 취하여 filter paper (No.2, Whatman, UK)으로 여과하여, 비교예 6을 제조하였다.
<실험예1> 버섯형 티로시나아제(Mushroom tyrosinase)활성 억제 효과
상기 실시예 1과 비교예 1 내지 6의 버섯형 티로시나아제(Mushroom tyrosinase)활성 억제 효과를 확인하기 위해, ll microplate의 각 well에 0.1M potassium phosphate buffer(pH 6.8) 60μL 및 dimethyl sulfoxide(DMSO)로 희석된 시료 10μL를 넣었다. 여기에 333unit/mL mushroom tyrosinase 용액을 30μL씩 넣은 후 상온에서 5분간 방치하였다. 여기에 12mM L-DOPA 용액을 100μL씩 가하였다(안정현, 민유홍 2014). 이 반응액을 microplate reader(Tecan, Switzerland)를 사용하여 492nm에서 2분간 흡광도를 측정하고 식(a)에 의해 계산하여 tyrosinase 저해율을 산출하였다(안정현, 민유홍 2014).
식(a)
Tyrosinase inhibition activity (%) = {(A-B)/A}×100
A: 시료가 들어가지 않은 경우(대조군) 흡광도
B: 시료가 들어간 경우 흡광도
도 1에 황매실 종자 에센셜 오일의 mushroom tyrosinase 억제 효과를 나타내었고, 도 2에 0.01% 농도에서 황매실 종자 추출물(비교예1 내지 6) 및 황매실 종자 에센셜오일(실시예 1)의 mushroom tyrosinase 억제 효과를 나타내었다.
그 결과, 황매실 종자 에센셜 오일은 농도의존적으로 mushroom tyrosinase의 활성을 억제하였으며, 비교예 1 내지 6의 황매실 종자 추출물에 비해 황매실 종자 에센셜 오일(실시예 1)은 95.5%로 매우 높은 억제율을 나타내었다.
<실험예2> Cell-free tyrosinase 억제 활성
Mouse melanocyte의 tyrosinase 저해 활성을 다음과 같이 측정하였다(안정현, 민유홍 2014). Mouse melanocyte인 B16F10 세포를 아무런 처리없이 100 mm dish에서 배양하고 이를 phosphate buffered saline(PBS)로 2번 washing한 후, 1% Triton X-100 및 1 mM PMSF가 포함된 4℃의 0.1 M potassium phosphate buffer (pH6.8)를 넣고 Dounce homogenizer로 30번 stroke하여 homogenization하였다. 이를 15,000 rpm으로 15분간 4℃에서 centrifugation하고 상등액을 취하여 Bradford solution을 이용하여 단백질 농도를 측정하였다. 새로운 튜브에 0.1M potassium phosphate buffer (pH6.8), 시료, 단백질 500 μg에 해당하는 상등액, 2.5mM L-DOPA를 넣어 최종부피가 1mL가 되도록 하였다. 이때 최종농도가 0.1%가 되도록 DMSO를 시료의 용해를 위하여 첨가하였다. 그리고 이를 37℃, 15분 방치한 후 흡광도를 475 nm에서 측정하였다. 식(a)를 이용하여 tyrosinase 저해율을 계산하였다. 대조군으로 코직산을 사용하였다.
도 3에 황매실 종자 에센셜 오일(정유)의 cell-free tyrosinase 억제 활성을 나타내었다. 그 결과, 황매실 종자 에센셜 오일은 농도의존적으로 mouse melanocyte인 B16F10 세포의 tyrosinase를 억제하였다. 대조군인 코직산과 거의 비슷한 억제활성을 나타내었다.
<실험예3> 멜라닌 생합성 억제 활성
Mouse melanocyte에서의 melanin 생합성 억제효과는 다음과 같이 측정하였다(안정현, 민유홍 2014). Mouse melanocyte인 B16-F10세포를 6well plate에 2×105의 양으로 넣었다. 24시간 배양 후 0.1% DMSO 및 시료가 포함된 배지로 바꾸어주었다. 이때 배지에 α-MSH를 10 nM이 되도록 첨가하였다. 이틀 동안 배양한 후, 세포를 PBS로 2번 세척하고, lysis buffer (20mM Tris, 0.1% Triton X-100, pH 7.6)를 0.5mL 넣은 후 세포를 scrape하여 4℃에서 1시간 방치하였다. 이후 4℃에서 12,000×g로 5분간 원심분리 하였다. 생성된 pellet에 1N NaOH 200μL를 가하고 60℃에서 1시간동안 방치하여 용해시켰다. 다음 microplate reader(Tecan, switzerland)로 405nm에서 흡광도를 측정하였다. 멜라닌 생성량은 α-MSH를 처리하지 않은 군의 흡광도와 비교하여 %로 나타내었다. 대조군으로 코직산을 사용하였다.
도 4에 B16F10 세포에서의 황매실 종자 에센셜오일(정유)의 멜라닌 생합성 억제효과를 나타내었고, 도 5에 B16F10 세포에서의 0.01% 처리농도로 황매실 종자 추출물(비교예 1 내지 6) 및 황매실 종자 에센셜오일(실시예 1)의 멜라닌 생합성 억제 효과 나타내었다.
그 결과, 황매실 종자 에센셜 오일은 0.01%까지 농도의존적으로 mouse melanocyte인 B16F10 세포의 멜라닌 함량을 감소시켜 멜라닌 생합성을 감소시킴을 확인하였으며, 멜라닌 생합성 억제효과는 0.005%부터 대조군인 코직산보다 높아졌다. 따라서 황매실 종자의 에센셜 오일은 매우 높은 멜라닌 생합성 억제효과가 있음을 확인하였다.
또한, 0.01%의 농도로 처리하였을 때, 황매실 종자 에센셜 오일은 황매실 종자 추출물인 비교예 1 내지 6보다 더 높은 억제활성을 나타내었다.
<실험예4> 세포 독성
독성을 MTT assay를 mouse melanocyte인 B16F10 세포에 대하여 다음과 같이 측정하였다(안정현, 민유홍 2014). 96-well plate에 B16F10 세포를 5×103 cells/well 되도록 넣고 24시간 배양하였다. 이후 각 농도별 시료 및 0.1% DMSO가 포함된 새로운 배지로 교환하고 24시간 배양하였다. 그런 다음, 각 well에 5mg/mL MTT 20 μL을 넣고 3시간 더 배양하였다. 배지를 제거하고 DMSO를 100μL씩 가하여 crystal을 녹인 후, 570 nm 흡광도를 microplate reader를 이용하여 측정하였다. 식(b)를 이용하여 세포생존율을 계산하였다. 비교를 위해 코직산을 사용하였다.
식(b)
Cell survival rate (%) = (A/B) × 100
A : 시료를 처리한 세포 반응물의 흡광도
B : 시료를 처리하지 않은 세포 반응물의 흡광도
도 6에 황매실 종자 에센셜오일(정유)에 대한 B16F10 세포의 생존율 나타내었다. 그 결과, 황매실 종자 에센셜 오일은 처리농도 0.01% 까지 생존율 100%이상으로 B16F10 세포에 독성을 나타내지 않았다. 그리고 이는 대조군인 코직산보다 높은 생존율이었다.
화장료의 제조예
본 발명에 따른 상기 황매실 종자 추출물 또는 황매실 종자 에센셜 오일은 목적에 따라 여러 형태의 화장료로 제조 가능하다. 하기는 본 발명에 따른 황매실 종자 추출물 또는 황매실 종자 에센셜 오일을 활성성분으로 함유시킨 몇몇 화장료의 제조방법을 예시한 것으로 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.
<화장료 제조예 1> 유연 화장수의 제조
황매실 종자 에센셜 오일 10.0 중량부
1,3-부틸렌글리콜 1.00 중량부
디소듐이디티에이 0.05 중량부
알란토인 0.10 중량부
디포타슘글리시리제이트 0.05 중량부
시트르산 0.01 중량부
소듐시트레이트 0.02 중량부
글리세레스-26 1.00 중량부
알부틴 2.00 중량부
하이드로제네이티드캐스터오일 1.00 중량부
에탄올 30.0 중량부
보존제 미량
착색제 미량
착향제 미량
정제수 잔량
<화장료 제조예 2> 영양 크림의 제조
황매실 종자 에센셜 오일 10.0 중량부
1,3-부틸렌글리콜 7.00 중량부
글리세린 1.00 중량부
D-판테놀 0.10 중량부
식물 추출물 3.20 중량부
마그네슘알루미늄실리케이트 0.30 중량부
PEG-40 스테아레이트 1.20 중량부
스테아르산 2.00 중량부
폴리소르베이트 60 1.50 중량부
친유형글리세릴스테아레이트 2.00 중량부
소르비탄세스퀴올리에이트 1.50 중량부
세테아릴알코올 3.00 중량부
미네랄오일 4.00 중량부
스쿠알란 3.80 중량부
카르릴릭/카프릭트리글리세라이드 2.80 중량부
식물성오일 1.80 중량부
디메치콘 0.40 중량부
디포슘글리시리제이트 미량
알란토인 미량
소듐 히아루로네이트 미량
토코페릴아세테이트 적량
트리에탄올아민 적량
보존제 적량
착향제 적량
정제수 잔량
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특히 청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (5)

1) 황매실 과육을 제거하여 종자를 분리한 후, 상기 종자의 단단한 껍질을 제거한 뒤 자연건조하여 분쇄하는 단계(단계 1); 및
2) 상기 분쇄 후, 탈이온수와 분쇄한 황매실 종자를 혼합하여 물증류법(water distillation)으로 2 내지 4시간 동안 100 내지 130℃로 가열한 뒤, 상온에서 교반하여 물을 제거하고, 여과하여 황매실 종자 에센셜 오일을 제조하는 단계(단계 2);
를 포함하는 황매실 종자 에센셜 오일 제조방법.
제 1항에 있어서,
상기 단계 2는 분쇄한 황매실 종자 100 중량부에 탈이온수를 300 내지 700 중량부로 혼합하는 것을 특징으로 하는 제조방법.
제 1항에 있어서,
상기 단계 2는 분쇄한 황매실 종자 100 중량부에 탈이온수를 400 내지 600 중량부로 혼합하는 것을 특징으로 하는 제조방법.
제 1항의 제조방법으로 제조된 에센셜 오일을 포함하는 미백 화장료 조성물.
제 4항에 있어서,
상기 조성물은 피부외용연고, 크림, 유연화장수, 영양화장수, 팩, 에센스, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 트리트먼트, 젤, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크 로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드 크림, 파운데이션, 영양에센스, 선스크린, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디 로션 및 바디 클렌저로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 제형으로 제조된 것을 특징으로 하는 조성물.
KR1020170125288A 2017-09-27 2017-09-27 황매실 종자 에센셜 오일 및 이를 포함하는 미백 화장료 조성물 KR102015176B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020170125288A KR102015176B1 (ko) 2017-09-27 2017-09-27 황매실 종자 에센셜 오일 및 이를 포함하는 미백 화장료 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020170125288A KR102015176B1 (ko) 2017-09-27 2017-09-27 황매실 종자 에센셜 오일 및 이를 포함하는 미백 화장료 조성물

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20190036269A KR20190036269A (ko) 2019-04-04
KR102015176B1 true KR102015176B1 (ko) 2019-08-27

Family

ID=66105425

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020170125288A KR102015176B1 (ko) 2017-09-27 2017-09-27 황매실 종자 에센셜 오일 및 이를 포함하는 미백 화장료 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR102015176B1 (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102228735B1 (ko) 2020-02-03 2021-03-17 유해현 미세캡슐화된 에센셜 오일을 포함하는 화장료 조성물

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102291441B1 (ko) * 2020-02-19 2021-08-20 계명대학교 산학협력단 자두 씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백용 조성물
KR20240008063A (ko) 2022-07-11 2024-01-18 주식회사 더블유지에스 피부 미백 및 주름방지 효과가 증진된 식물성 오일을 함유하는 기능성 화장품 조성물

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002284633A (ja) * 2001-03-28 2002-10-03 Katakura Chikkarin Co Ltd 化粧料
JP2005187474A (ja) 2003-12-06 2005-07-14 Takashi Kodera 改善された香粧料
KR100755427B1 (ko) * 2006-03-20 2007-09-04 주식회사 생그린 피부 탄력 증진 효과를 갖는 녹차씨 오일을 함유하는화장료 조성물.
KR100843674B1 (ko) 2007-05-10 2008-07-04 동우에네스톤 주식회사 매실 종자유를 함유하는 황토 미용팩 조성물
KR101729920B1 (ko) 2014-09-22 2017-04-25 전라남도 천연 정유 및 천연 하이드로졸을 포함하는 아로마테라피 세럼 조성물

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR960030917A (ko) * 1995-02-06 1996-09-17 김성녕 매실 추출물을 함유하는 화장품 조성물
KR101601022B1 (ko) 2008-11-26 2016-03-08 (주)아모레퍼시픽 인삼꽃 정유를 함유하는 피부용 외용제 조성물
KR20120113459A (ko) 2011-04-05 2012-10-15 주식회사 바이오랜드 애엽, 레몬, 회향 및 소나무에서 추출한 정유 성분을 함유하는 피부 미백용 조성물
KR101454970B1 (ko) * 2012-11-06 2014-10-28 대구한의대학교산학협력단 당귀로부터 추출되는 정유(essential oil) 분획물을 포함하는 체지방 또는 셀룰라이트 감소 및 예방효과를 갖는 아로마 오일 조성물 및 화장료 조성물
KR101491463B1 (ko) * 2013-05-08 2015-02-10 (주)내츄럴코리아 청매실 발효 추출물을 함유하는 피부미백용 화장료 조성물 및 그 제조방법
KR101758327B1 (ko) * 2015-03-31 2017-07-26 대구한의대학교산학협력단 보습 효과를 갖는 창포 추출물, 형개 및 야국화 아로마 오일을 유효성분으로 함유하는 동물 세정용 조성물

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002284633A (ja) * 2001-03-28 2002-10-03 Katakura Chikkarin Co Ltd 化粧料
JP2005187474A (ja) 2003-12-06 2005-07-14 Takashi Kodera 改善された香粧料
KR100755427B1 (ko) * 2006-03-20 2007-09-04 주식회사 생그린 피부 탄력 증진 효과를 갖는 녹차씨 오일을 함유하는화장료 조성물.
KR100843674B1 (ko) 2007-05-10 2008-07-04 동우에네스톤 주식회사 매실 종자유를 함유하는 황토 미용팩 조성물
KR101729920B1 (ko) 2014-09-22 2017-04-25 전라남도 천연 정유 및 천연 하이드로졸을 포함하는 아로마테라피 세럼 조성물

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102228735B1 (ko) 2020-02-03 2021-03-17 유해현 미세캡슐화된 에센셜 오일을 포함하는 화장료 조성물

Also Published As

Publication number Publication date
KR20190036269A (ko) 2019-04-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101971837B1 (ko) 병풀 부정근 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백 및 주름개선용 화장료 조성물
KR101989407B1 (ko) 엉겅퀴 추출물을 유효성분으로 포함하는 멜라닌 생성 촉진용 조성물
KR102015176B1 (ko) 황매실 종자 에센셜 오일 및 이를 포함하는 미백 화장료 조성물
KR101071414B1 (ko) 과나바나 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백용 조성물
KR101289813B1 (ko) 회화나무꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 개선용 조성물
KR100894714B1 (ko) 피부 미백 및 항산화 활성을 가지는 백모사 추출물
KR20170137549A (ko) 복합 생약 추출물을 포함하는 피부 개선용 조성물
KR20170137412A (ko) 복합 생약 추출물을 포함하는 피부 개선용 조성물
KR20200104999A (ko) 항노화 화장료 조성물
KR20080104760A (ko) 후박 추출물 또는 이로부터 분리된 4-o-메틸호노키올을유효성분으로 함유하는 피부 미백용 조성물
KR20170137405A (ko) 복합 생약 추출물을 포함하는 피부 개선용 조성물
KR102090169B1 (ko) 고본 발효 추출물을 포함하는 주름개선 및 탄력증가활성 화장료 조성물
KR20100042090A (ko) 자스민 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백용 조성물
KR20170136919A (ko) 복합 생약 추출물을 포함하는 피부 개선용 조성물
KR20100042086A (ko) 육계 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백용 조성물
KR20190089748A (ko) 눈빛승마 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 피부 미백용 조성물
KR101521579B1 (ko) 보센벌지아 로툰다 추출물을 함유하는 피부 미백 및 항산화 조성물
KR20100043717A (ko) 익소라 콕시니아 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백용 조성물
KR101068808B1 (ko) 봉황목 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백용 조성물
KR20110064292A (ko) 루시놀 및 하수오 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물
KR102394459B1 (ko) 고들빼기 추출물을 유효성분으로 하는 미백 조성물
KR20170137432A (ko) 복합 생약 추출물을 포함하는 피부 개선용 조성물
KR101419212B1 (ko) 5-시아노-6-[(3-메톡시벤질)술파닐]-2-메틸-n-페닐-4-(2-티에닐)-1,4-디하이드로-3-피리딘카르복스아미드 화합물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 조성물 및 이의 용도
KR101518275B1 (ko) 6-아미노-4-(3-브로모-4-플루오로페닐)-3-(3,4-디메틸페닐)-2,4-디하이드로피라노[2,3-c]피라졸-5-카르보니트릴 화합물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 조성물 및 이의 용도
KR101419213B1 (ko) 메틸 5-시아노-6-{[2-(4-메톡시페닐)-2-옥소에틸]술파닐}-2-메틸-4-(2-티에닐)-1,4-디하이드로-3-피리딘카르복실레이트 화합물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 조성물 및 이의 용도

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant