KR100900177B1

KR100900177B1 - 트리테르펜 유도체의 제조 방법

Info

Publication number: KR100900177B1
Application number: KR1020047014988A
Authority: KR
Inventors: 하루오 고이께; 가쯔오 오다; 유따까 니시노; 마꼬또 가끼누마
Original assignee: 시오노기세이야쿠가부시키가이샤
Priority date: 2002-03-22
Filing date: 2003-03-18
Publication date: 2009-06-02
Also published as: KR20040105791A; EP1489091A1; CN1310940C; CN1642970A; JP4437923B2; AU2003221074A1; WO2003080643A1; TWI330642B; EP1489091A4; JPWO2003080643A1; TW200306289A; MXPA04008944A; US7223882B2; BR0308617A; CA2480096A1; US20050143596A1

Abstract

하기 반응식 1에 의해 보여지는, 화합물 V 또는 이의 염의 제조 방법.

[반응식 1]

[상기 식 중, R¹ 및 R² 는 각각 독립적으로 C_1-8 알킬을 나타냄]

Description

트리테르펜 유도체의 제조 방법{PROCESS FOR PRODUCING TRITERPENE DERIVATIVE}

본 발명은 엔도쎌린(endothelin) 수용체 길항제 등으로서 유용한 트리테르펜 유도체, 특히 하기 화학식 V:

의 화합물, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매 화합물(이후, 화합물 V로 언급됨)의 제조 방법에 관한 것이다.

화합물 V는 엔도쎌린 수용체 길항제이고, 각종 순환계 질환, 예를 들어, 고혈압, 허혈성 질환, 뇌 순환 장애, 신장 장애, 각종 장기의 순환 부전, 천식, 뇌졸중, 뇌 경색, 뇌 부종 등의 치료에 유용하다(특허 문헌 1, 특허 문헌 2 등).

화합물 V의 중간체인 올레아놀산 유도체, 예를 들어, 미리세론(myricerone) 등의 제조 방법이 특허 문헌 3에 개시된다. 또한, 올레아놀산을 사용한 화합물 V의 제조 방법이 비특허 문헌 1 및 비특허 문헌 2 등에 개시된다. 그러나, 상기 문헌에 기술된 방법은 중간체의 단리, 각 반응 단계에서의 상이한 시약 또는 용매의 사용, 환경적으로 유해한 시약의 사용 등을 요구하고, 이는 산업적 제조 방법을 위해 반드시 만족스러운 것은 아니다.

촉매적 환원 반응에 의한, 히드록시-2-니트로벤즈알데히드의 니트로기를 아미노기로 환원하는 방법은 특허 문헌 4에 개시되지만, 상기 방법에서 환원 공정은 알데히드기가 아세탈로서 보호된 이후에 수행된다.

특허 문헌 1 WO92/12991

특허 문헌 2 JP 7-53484 A

특허 문헌 3 JP 7-316188 A

특허 문헌 4 JP 7-1011956 A

비특허 문헌 1 Organic Process Research & Development, 1999, vol. 3, p.347-351

비특허 문헌 2 Journal of Organic Chemistry, 1997, vol.62, p.960-966

도 1은 참고예 1에서 수득된, 화합물 5의 분말 X-선 회절 무늬를 보여준다. 수직 축은 피크 강도를 나타내고, 수평축은 회절 각도(2θ)를 나타낸다.

[본 발명의 수행을 위한 최량의 형태]

본 발명의 발명자는 화합물 V의 제조 방법의 개선을 연구하였고, 하기의 발명을 완성하였다.

(1) 하기 반응식 1로 나타내어지는, 하기 단계를 포함하는, 화합물 V, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매 화합물의 제조 방법:

(단계 1) 유기 용매 중의 리튬 시약 (A)의 존재 하에 화합물 I과 화합물 II를 반응시킴에 의한, 화합물 III 함유 용액의 제조,

(단계 2) 리튬 시약 (B)을 단계 1에 의해 수득된 용액에 첨가시킴에 의한 화합물 IV 함유 용액의 제조, 및

(단계 3) 산을 단계 2에 의해 수득된 용액에 첨가:

[상기 식 중, R¹ 및 R² 는 각각 독립적으로 C1 - C8 알킬임].

(2) 하기 반응식 2로 나타내어지는, 하기 단계를 순서대로 수행하는 것을 포함하는, 화합물 V, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매 화합물의 제조 방법:

(단계 1) 화합물 I, 화합물 II 및 리튬 시약 (A)를 유기 용매 내에 용해시킴,

(단계 2) 리튬 시약 (B)의 첨가, 및

(단계 3) 산의 첨가:

[상기 식 중, R¹ 및 R² 는 각각 독립적으로 C1 - C8 알킬임].

(3) 상기 (1) 또는 (2)에 있어서, 화합물 V, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매 화합물을 단리하는 것을 포함하는 방법.

(4) 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 있어서, 리튬 시약 (A)이 염화리튬 또는 수산화리튬이고, 리튬 시약 (B)이 수산화리튬인 방법.

(5) 상기 (1) 내지 (4)의 어느 한 항에 있어서, 유기 용매가 N,N-디메틸포름아미드인 방법.

(6) 하기 반응식 3으로 나타내어지는, 하기 단계를 포함하는, 화합물 II, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매 화합물의 제조 방법:

(단계 1) Pd-C의 존재 하에, 화합물 VI을 환원시킴에 의한, 화합물 VII 함유 용액의 제조, 및

(단계 2) 단계 1에 의해 수득된 용액 중의 화합물 VII을, 화합물 VIII과 반응시킴:

[상기 식 중, R² 는 C1 - C8 알킬임].

(7) 상기 (6)에 있어서, 단계 2가 1 내지 7 범위인 pH 값에서 수행되는 방법.

(8) 상기 (6)에 있어서, 단계 2가 N,N-디메틸아닐린의 존재 하에 수행되는 방법.

(9) 하기 반응식 4로 나타내어지는, 하기 단계를 포함하는, 화합물 V, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매 화합물의 제조 방법:

(단계 1) 유기 용매 및 물 중의 염기의 존재 하에, 화합물 I을 화합물 II'과 반응시킴에 의한 화합물 IV 함유 용액의 제조, 및

(단계 2) 산을 단계 1에 의해 수득된 용액에 첨가:

[상기 식 중, R¹은 C1 - C8 알킬이고, R³ 는 수소 또는 C1 - C8 알킬임].

(10) 하기 반응식 5로 나타내어지는, 하기 단계를 순서대로 수행하는 것을 포함하는, 화합물 V, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매 화합물의 제조 방법:

(단계 1) 화합물 1, 화합물 II' 및 염기를 유기 용매 및 물에 용해시킴, 및

(단계 2) 산의 첨가:

[상기 식 중, R¹ 은 C1 - C8 알킬이고, R³ 는 수소 또는 C1 - C8 알킬임].

(11) 상기 (9) 또는 (10)에 있어서, 화합물 V, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매 화합물을 단리하는 것을 포함하는 방법.

(12) (9) 내지 (11) 중 어느 한 항에 있어서, 염기가 수산화리튬, 수산화나트륨 또는 수산화칼륨인 방법.

(13) 하기 화학식의 화합물 I-1의 결정:

[상기 식 중, R¹ 은 에틸임].

(14) 상기 (1)에 따른 화합물 V를 유기 용매에 용해시키고, 정제수로 세정함에 의해 엔도톡신을 제거하는 것을 포함하는, 화합물 V의 제조 방법.

(15) 상기 (14)에 있어서, 유기 용매가 에틸 아세테이트인 방법.

상기 화합물 I을 이용한 화합물 5의 제조 방법이 본 발명의 구현으로서 설명된다.

(방법 A, 단계 1)

본 단계에서, 화합물 I, 화합물 II 및 리튬 시약 (A)를 유기 용매 내에 용해시킨다. 화합물 III 함유 용액은 유기 용매 중의 리튬 시약 (A)의 존재 하에, 화합물 I을 화합물 II과 반응시킴에 의해 수득된다.

본 명세서에서, "용액"은, 화합물 III가 용해된 균일 액상 상태 및 화합물 III가 완전히 용해되지 않았지만 분산된 현탁액 상태를 포함한다.

이후, 본 명세서의 "용액"은 현탁액 상태를 포함하고, "용해"도 또한 "현탁 상태"를 포함한다.

화합물 I 및 이의 3-케토 유도체는, 상기 특허 문헌 3, 비특허 문헌 1, 비특허 문헌 2 등에서 기술된 방법, 또는 상기 문헌에 따른 Horner-Emmons 반응을 사용한 방법과 동일한 방식으로 제조될 수 있다. 화합물 I은 3-케토 유도체를 에틸렌디옥소기로 보호함에 의해 용이하게 제조될 수 있다.

화합물 II는 또한 상기 문헌에서 기술된 것과 동일한 방법으로 제조될 수 있다.

R¹또는 R²에 의해 나타내어지는 "C1 - C8 알킬" 은 직선형 및 분지형 알킬을 포함한다. "C1 - C8 알킬"의 예는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, n-펜틸, 이소펜틸, 네오펜틸, 헥실, 이소헥실, n-헵틸, 이소헵틸, n-옥틸 및 이소옥틸이다. 메틸 또는 에틸이 R¹을 위해 바람직하고, 에틸이 더 바람직하다. 메틸은 R²를 위해 바람직하다.

리튬 시약 (A)의 예는 염화리튬, 브롬화리튬, 수산화리튬 및 탄산리튬이다. 염화리튬 및 수산화리튬이 바람직하다. 화합물 I에 대하여, 약 2.0 내지 10.0 몰 당량, 바람직하게는 약 2.0 내지 3.0 몰 당량의 리튬 시약 (A)가 사용된다.

유기 용매의 예는 N,N-디메틸포름아미드, 디에틸 에테르, 테트라히드로푸란, N,N-디메틸아세트아미드 및 에틸렌 글리콜 디메틸 에테르이다. N,N-디메틸포름아미드가 바람직하다.

반응 온도는 일반적으로 약 -20 내지 60 ℃이고, 바람직하게는 약 10 내지 20 ℃이다.

반응 시간은 일반적으로 약 1 시간 내지 50 시간이고, 바람직하게는 6 시간 내지 24 시간이다.

반응은 필요하다면, 염기의 존재 하에 수행될 수 있다. 염기의 예는 DBU(1,8-디아자비시클로[5.4.6]운데크-7-엔), 트리메틸아민, 트리에틸아민, 콜린, 프로카인 및 에탄올아민이고, DBU가 바람직하다.

화합물 III 함유 용액이 상기 단계에 의해 수득된다. 화합물 III이 단리될 수 있지만, 바람직하게는 단리되지 않고 하기 단계에서 사용될 수 있다.

(단계 2)

본 단계에서, 리튬 시약 (B)을 단계 1에서 수득된 반응 혼합물에 첨가한다. 리튬 시약 (B)를 단계 1에 의해 수득된 화합물 III 함유 용액에 첨가함에 의해 화합물 IV 함유 용액이 수득될 수 있다.

리튬 시약 (B)의 예는 수산화리튬 및 탄산리튬이고, 수산화리튬이 바람직하다. 본 반응을 위한 리튬 시약 (B)의 양은 화합물 II에 대하여 약 2.0 내지 10.0 몰 당량이고, 바람직하게는 약 2.0 내지 4.0 몰 당량이다. 상기 리튬 시약 (B)는 리튬 시약 (A)와 동일하거나 또는 리튬 시약 (A)와 상이할 수 있다.

유기 용매의 예는 N,N-디메틸포름아미드, 디에틸 에테르, 테트라히드로푸란, N,N-디메틸아세트아미드 및 에틸렌 글리콜 디메틸 에테르이다. 단계 1에서 사용된 것과 동일한 용매가 바람직하고, 더 바람직한 것은 N,N-디메틸포름아미드이다.

반응 온도는 일반적으로 약 -40 내지 60 ℃이고, 바람직하게는 약 -10 내지 0 ℃이다.

반응 시간은 일반적으로 약 0.1 시간 내지 10 시간이고, 바람직하게는 약 0.5 시간 내지 2.0 시간이다.

화합물 IV 함유 용액이 상기 단계에 의해 수득된다. 화합물 IV는 단리될 수 있지만, 바람직하게는 단리되지 않고 하기 단계에서 사용될 수 있다.

(단계 3)

본 단계에서, 단계 2에 의해 수득된 반응 혼합물에 산을 첨가한다. 단계 2에 의해 수득된 화합물 IV 함유 용액에 산을 첨가함에 의해 화합물 V가 수득된다. 화합물 V는 통상의 방법에 따라, 추출, 물로 세정, 결정화 등에 의해, 바람직하게는 결정으로 단리될 수 있다.

산은 특별히 제한되지 않고, 화합물 IV의 에틸렌디옥시기를 탈보호할 수 있는 모든 산이 사용될 수 있다. 산의 예는 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산, p-톨루엔술폰산, 메탄술폰산, 포름산, 트리플루오로아세트산, 말레산 및 옥살산이고, 염산이 바람직하다. 산의 양은 화합물 IV에 대하여 약 4.5 내지 15.0 몰 당량이고, 바람직하게는 7.0 내지 9.0 몰 당량이다.

반응 온도는 일반적으로 약 0 내지 80 ℃이고, 바람직하게는 약 40 내지 50 ℃이다.

반응 시간은 일반적으로 0.1 시간 내지 10 시간이고, 바람직하게는 약 1.0 시간 내지 2.0 시간이다.

상기 단계에 따르면, 화합물 V는 바람직하게는 각 중간체를 단리하지 않고, 단일 용기 반응(one-pot reaction)에 의해 화합물 I로부터 수득될 수 있다. 동일한 종류의 염기 또는 용매가 각 단계에서 사용될 수 있다. 따라서, 본 방법은 공업적 제법을 위해 매우 유용하다.

(방법 B)

화합물 V는 하기 단계를 순서대로 수행함에 의해 수득될 수 있다; 화합물 I, 화합물 II' 및 염기를 유기 용매 및 물에 용해시키고, 산을 이 혼합물에 첨가. 화합물 V는 하기 단계에 의해 수득된다; 유기 용매 및 물 중의 염기의 존재 하에, 화합물 I과 화합물 II'을 반응시켜 화합물 IV 함유 용액을 제공하는 단계, 및 화합물 IV 함유 용액을 상기 방법 A, 단계 3에서 기술된 것과 동일한 방식으로 반응시키는 단계.

R³ 에 의해 나타내어지는 "C1 - C8" 알킬은 상기 언급된 R¹ 또는 R² 와 동일하다.

염기의 예는 수산화리튬, 수산화나트륨 및 수산화칼륨이고, 수산화리튬이 바람직하다. 염기의 양은, 화합물 I에 대하여, 약 2.0 내지 10.0 몰 당량, 바람직하게는 약 2.0 내지 5.0 몰 당량이다.

유기산의 예는 N,N-디메틸포름아미드, 디에틸 에테르, 테트라히드로푸란, N,N-디메틸 아세트아미드 및 에틸렌 글리콜 디메틸 에테르이고, N,N-디메틸포름아미드가 바람직하다.

물의 양은 특별히 제한되지 않는다. 예를 들어, 염기는 물을 첨가 함에 의해, 0.1 % (w/w) 내지 30 % (w/w), 바람직하게는 1 % (w/w) 내지 10 % (w/w) 농도의 수용액으로 사용된다.

반응 온도는 일반적으로 약 -40 내지 60 ℃이고, 바람직하게는 약 -10 내지 0 ℃이다. 반응 시간은 일반적으로 약 0.1 시간 내지 10 시간이고, 바람직하게는 약 0.5 시간 내지 4.0 시간이다.

상기 방법은, 상당히 단시간에 화합물 IV가 화합물 I로부터 직접적으로 생성될 수 있기 때문에, 대량 생산 방법으로서 유용하다.

그리하여 수득된 화합물 IV에 상기 단계 3을 적용하여 화합물 V를 제공한다. 필요하다면, 화합물 V는 추출, 물로 세정, 결정화 등에 의해 바람직하게는 결정으로 단리될 수 있다.

화합물 V는, 염을 형성하는 공지된 방법에 의해 쉽게 약학적으로 허용가능한 염으로 전환될 수 있다.

화합물 V의 약학적으로 허용가능한 염의 예는 무기염기, 암모니아, 유기염기, 염기성 아미노산 등으로 형성된 염 또는 분자내염이다. 무기염기의 예는 나트륨, 칼륨 등과 같은 알칼리 금속, 칼슘, 마그네슘 등과 같은 알칼리 토금속이고, 유기염기의 예는 트리메틸아민, 트리에틸아민, 콜린, 프로카인, 에탄올아민 등이다. 염기성 아미노산의 예는 리신, 아르기닌, 오르니틴, 히스티딘이다. 화합물 V의 염의 바람직한 예는 2 나트륨 염 및 3 나트륨 염과 같은 알칼리 금속 염이다. 화합물 V 및 이의 염은 물 또는 알콜로 용매화될 수 있다.

본 발명의 부가적 구현으로서, 상기 화합물 VI으로부터 화합물 II를 제조하는 방법이 하기에 기술된다.

(단계 1)

화합물 VII은 Pd-C의 존재 하에, 화합물 VI의 니트로기를 환원함에 의해 수득된다.

Pd-C의 중량비는 화합물 VI에 대하여 약 0.01 내지 0.2 당량 이고, 바람직하게는 약 0.05 내지 0.1 당량이다.

용매의 예는 물, 에틸 아세테이트, 아세토니트릴, 테르라히드로푸란, 메탄올 및 에탄올이다. 에틸 아세테이트 또는 아세토니트릴이 바람직하다.

반응 온도는 일반적으로 약 -10 내지 60 ℃이고, 바람직하게는 약 -5 내지 25 ℃이다.

반응 시간은 일반적으로 약 0.5 시간 내지 10.0 시간이고, 바람직하게는 약 1.0 시간 내지 5.0 시간이다.

상기 단계에 따르면, 환원 반응은 환경을 위해 바람직하지 않은 TiCl₃ 등을 사용하지 않고 수행될 수 있다. 또한, Pd-C가 반응 후 회수될 수 있으므로, Pd-C를 사용한 반응은 효율적이다.

화합물 VI은 니트로기 옆에 알데히드기를 가진다. 이러한 알데히드를 갖는 니트로 화합물은 일반적으로 알데히드기의 보호 이후에 환원될 수 있지만(특허 문헌 4 참조), 니트로기는 알데히드기의 보호 없이 상기 단계에 의해 선택적으로 환원되었다.

화합물 VII의 용액은 상기 단계에 의해 수득되고, 화합물 VII은 단리하지 않고 다음 단계에서 사용될 수 있다. 따라서, 상기 단계는 공업적 제법을 위해 유용하다.

(단계 2)

화합물 II는 단계 1에서 수득된 화합물 VII의 아미노기를 화합물 VIII과 축합함 의해 수득될 수 있다. 화합물 VII은 매우 불안정하므로, 상기 반응에서 반응 용액의 pH 값 조절이 중요하다. 상기 반응은, 아세트산, 아세트산나트륨 등으로 pH값이 1 내지 7, 바람직하게는 2 내지 5로 조절되었을 때 효율적으로 진행된다. 화합물 VIII의 양은, 반응이 두 상(two phase) 반응으로 진행되는 경우 감소될 수 있다.

화합물 VIII의 양은, 화합물 VI에 대하여 일반적으로 약 0.8 내지 5.0 몰 당량이고, 바람직하게는 약 1.0 내지 1.5 몰 당량이다.

용매의 예는 물, 아세트산, 에틸 아세테이트, 아세토니트릴, 테트라히드로푸란, 메탄올 및 에탄올이고, 에틸 아세테이트가 바람직하다. 반응 온도는 일반적으로 약 0 내지 40 ℃이고, 바람직하게는 약 0 내지 15 ℃이다.

반응 시간은 일반적으로 약 0.1 시간 내지 5.0 시간이고, 바람직하게는 약 0.5 시간 내지 1.5 시간이다. 화합물 VIII 내의 R² 을 위해 메틸이 바람직하다.

단계 1 및 2가 유기 용매계 내에서 연속 수행되는 경우, 단계 2에서 화합물 VIII의 양은, TiCl₃를 사용하는 수성계 내의 양과 비교시 상당히 감소될 수 있다.

(단계 2 별법)

화합물 II는, 염기의 존재 하에 화합물 VIII과 단계 1에 의해 수득된 화합물 VII을 반응시킴에 의해 수득될 수 있다. 목적 화합물 II를 고수율로 수득하고, 부산물의 생성을 억제하기 위해 N,N-디메틸아닐린이 염기로서 바람직하다.

용매의 예는 물, 아세트산, 에틸 아세테이트, 아세토니트릴, 테트라히드로푸란, 메탄올 및 에탄올이고, 아세토니트릴이 바람직하다.

반응 온도는 일반적으로 약 -10 ℃ 내지 40 ℃이고, 바람직하게는 약 -10 ℃ 내지 10 ℃이다.

반응 시간은 일반적으로 약 0,1 시간 내지 5.0 시간이고, 바람직하게는 약 0.5 시간 내지 1.5 시간이다.

화합물 VIII의 양은 화합물 VI에 대하여 일반적으로 0.8 내지 5.0 몰 당량이고, 바람직하게는 약 1.0 내지 1.5 몰 당량이다.

상기 별법은, 목적 화합물 II가 고수율로 수득될 수 있고, 화합물 VIII의 양이 TiCl₃를 사용하는 수성계 내에서의 양과 비교시 감소될 수 있는 이점을 가진다.

화합물 II의 염 및 용매화물의 예는 상기 언급한 화합물 V의 것과 동일하다.

본 발명은 상기 화합물 I-1의 결정을 제공한다. 결정은, 분말 X-선 회절로 측정된, 하기의 회절 각도의 주 피크(main peak)로 특징지어지는 것에 의해 예시된다.

2θ=5.760, 6.480, 9.580, 10.080, 14.720, 15.340, 15.740, 19.480, 20.280 도.

X-선 회절 조건:

Cu Kα 선: 1.54 Å

관 전압: 40 kV

관 전류: 40 mA

상기 결정은 보존시 높은 안정성, 및 높은 순도를 가진다. 상기 결정이 단리되고 중간체로 사용되는 경우, 화합물 I 또는 이의 염의 제조 방법에서 칼럼 크로마토그래피와 같은 정제 단계는 생략될 수 있다. 따라서, 상기 결정은 화합물 I의 제조 방법을 위해 매우 중요하다.

본 발명은 화합물 V의 정제 방법을 제공한다. 더 구체적으로, 이는 엔토톡신이 화합물 V와 혼합되어 있는 경우, 엔도톡신의 제거 방법을 제공한다. 이 방법은, 상기 방법 등에 의해 수득된 화합물 V를 유기 용매에 용해시키고, 이어서 혼합물을 물로 세정하는 단계를 포함한다.

바람직한 유기 용매는 에틸 아세테이트에 의해 예시된다.

상기 방법에서 사용되는 물은 약 수 십 내지 수 백 EU/mL의 엔도톡신을 포함하지만, 상기 방법은 충분한 정제 효과를 제공한다. 물은 바람직하게는 정제수이고, 주사용 증류수가 더 바람직하다.

화합물 V와 혼합된 엔도톡신은 화합물 V 함유 유기 용액을 물로 세정함에 의해 수성층으로 이동된다. 상기 조작은 오직 한 번 만에 상당한 정제 효과를 제공하고, 바람직하게는 두 번 이상 반복된다. 상기 반복으로 인해, 엔도톡신의 양은 상기 조작 이전에 비해 약 1% 이하, 바람직하게는 약 0.5% 이하로 감소될 수 있다. 따라서, 상기 정제 방법은 화합물 V 또는 이의 염이 주사제로 사용되는 경우 바람직하다.

[발명의 개시]

화합물 V 또는 이의 중간체의 효율적인 공업적 대량 생산 방법의 개발이 요구된다.

본 발명의 실시예는 하기에 예시된다. 본 실시예의 약어는 하기와 같은 의미를 가진다:

DME : 에틸렌 글리콜 디메틸 에테르

AcOH : 아세트산

DMF : N,N-디메틸포름아미드

THF : 테트라히드로푸란

참고예 1 화합물 3의 합성

화합물 1 (18.2ｇ, 36.4 mmol)을 DME (182 mL) 및 아세트산 (18.2 ｇ) 내에 현탁시키고, 25%의 티타늄 트리클로라이드 (49.4 ｇ, 80.1 mmol) 수용액을 혼합물 내로 유입하였다. 혼합물을 50℃까지 가열하고, 1시간 동안 반응시킨 후에, 감압하에 약 120 g으로 농축하였다. 에틸 아세테이트 (91 mL) 및 물 (91 mL)을 상기 농축된 혼합물에 첨가하고, 유기층을 분리하였다. 유기층 내의 침전물을 여과 제거하고, 유기층을 10% 식염수 (91 ｇ)로 세정하였다.

수성층을 에틸 아세테이트 (91 mL)로 추출한 후, 모든 유기층을 혼합하고, 감압 하에 44.25 ｇ으로 농축하였다. DME (68.3 mL) 및 아세트산 (3.3 ｇ)을 22.13 ｇ의 수득된 농축 혼합물에 첨가하였다. 혼합물 내로 21%의 아질산나트륨 수용액(17.85 ｇ, 54.3 mmol)을 유입하고, 혼합물을 25 (+10, -5) ℃로 1시간 동안 반응시켰다. 반응의 완결 후에, 16% 수산화나트륨 수용액(33.74 ｇ)을 혼합물 내로 유입하고, 혼합물을 50 ℃에서 4시간동안 반응시켰다. 16%의 수산화나트륨 수용액을 첨가하여 pH 값을 13 이상으로 유지하면서 상기 반응을 수행하였다(16%의 수산화나트륨 수용액의 총량 : 39.68 ｇ). 반응이 완결된 후에, 혼합물을 25 ℃로 냉각하고, 메탄올 (54.6 mL)을 혼합물 내로 유입하여 결정화하였다. 혼합물을 7% 염산(5.6 ｇ)으로 중화시킨 후, 혼합물을 여과하여 6.13 ｇ의 백색 결정의 화합물 3을 수득하였다 (수율: 69.4%).

참고예 2 화합물 8의 합성

(1) 화합물 6의 합성

톨루엔 (56 mL) 중의 화합물 4 (8.0 ｇ, 16.5 mmol)의 현탁액 내로, 에틸렌 글리콜 (2.0 ｇ, 33.0 mmol) 및 피리디늄 p-톨루엔설포네이트 (0.2 ｇ, 0.8 mmol)를 첨가하였다. Dean-Stark 트랩에 의해 물을 제거하면서, 혼합물을 110 ℃에서 환류하였다. 2시간 후, 반응 혼합물을 90 ℃로 냉각하였고, 에틸렌 글리콜 (1.0 ｇ, 16.5 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 추가 3시간 동안 110 ℃에서 환류하여, 톨루엔 중의 화합물 5의 용액을 수득하였다. 용액을 70 ℃로 냉각시키고, 피리딘 (5.2 ｇ, 66.0 mmol)을 첨가하였다. 무수 아세트산 (5.1 ｇ, 49.5 mmol) 및 4-디메틸아미노피리딘 (0.6 ｇ, 5.0 mmol)을 첨가하였고, 혼합물을 2시간 동안, 80 ℃에서 반응시켰다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 메탄올을 유입하였다. 혼합물을 5 ℃에서 2시간 동안 교반하고 냉각된 메탄올 (24 mL)로 세정하여 8.3 ｇ의 화합물 6을 수득하였다(수율: 88%).

(2) 화합물 8의 합성

금속 리튬 (3.5 ｇ, 498.6 mmol)을, 앞서 -50 ℃로 냉각된 액체 암모니아 내에 용해시키고, THF (400 mL) 중의 화합물 6 (47.0 ｇ, 82.3 mmol)의 용액을 1시간에 걸쳐 혼합물로 적가하였다. 용액을 1시간 동안 -50 ℃에서 반응시킨 후, 에탄올 (236 mL)를 유입하고, 혼합물을 가온하여 암모니아를 제거하였다.

물을 10 ℃의 혼합물 내로 유입하고, 7% 염산 (545 ｇ)을 적가하였다. 용액을 5 내지 10 ℃로 1시간 동안 교반하였고, 나타나는 결정을 여과에 의해 수집하고, 50%의 아세토니트릴 및 아세토니트릴의 수용액으로 세정하여, 화합물 7의 습윤 결정 (42.6 ｇ)을 수득하였다.

27.12 ｇ의 상기 수득된 습윤 결정 및 디에틸 포스포노아세트산 (22.7 ｇ, 115.6 mmol)을 DMF (150 mL) 및 에틸 아세테이트 (600 mL) 내에 용해시켰다. 물을 제거함에 의해, 혼합물을 감압 하에 약 210 mL로 농축하고, 1,1'-카르보닐 비스-1H-이미다졸 (17.0 ｇ, 105.1 mmol)을 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 70 ℃에서 1시간 동안 반응시켰다. 반응이 완결된 후, 혼합물을 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트 (450 mL)을 유입하였다. 3.5%의 염산을 적가함에 의해, 혼합물의 pH 값을 약 5로 조절하고 난 후, 물 (23 mL)를 첨가하고, 유기층을 분리하였다. 유기층을 40 ℃로 유지하고, 유기층 및 물 (240 mL) 사이에서 분할하였다. 수성층을 에틸 아세테이트 (150 mL)로 추출하였다. 상기 유기층을 혼합하고, 에틸 아세테이트 (300 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 감압하에 약 300 mL로 농축하여 결정화하였다. 혼합물을 0 내지 5 ℃로 냉각하고, 1시간 동안 교반하고 여과하여, 22.8 ｇ의 백색 결정의 화합물 8을 수득하였다 (수율: 63%).

화합물 8의 분말 X-선 회절 차트는 도 1에서 보여지고, 주 피크는 하기에서 보여지는 바와 같다.

(X선 회절 조건 : CuKα 선 1.54Å, 관 전압 40 mV, 관 전류 40mA)

회절 각도 (2θ, 도) 간격 (d, Å)

5.760 15.33071

6.480 13.62882

9.580 9.22449

10.080 8.76802

14.720 6.01297

15.340 5.77131

15.740 5.62553

19.480 4.55309

20.280 4.37525

실시예 1 화합물 9의 합성

화합물 13 (1.7 ｇ, 10 mmol)의 에틸 아세테이트 (17 mL) 중의 용액에, 10% Pd-C (50% 함수) (0.25 ｇ)을 첨가하고, 대기압에서, 15 내지 20 ℃로 5.5시간 동안 수소화하였다. 촉매를 여과 제거하고, 에틸 아세테이트 (8 mL)로 세정하였다. 상기 수득된 에틸 아세테이트 중의 화합물 14의 용액에, 아세트산나트륨 (0.8 ｇ) 및 아세트산 (3.3 mL)의 수용액 (33 mL)을 빙냉(ice cooling) 하에 첨가하였다(pH 3.90). 3-메톡시카르보닐 아크릴레이트 클로라이드 (1.5 ｇ)를 빙냉 하에 상기 혼합물로 적가하고, 혼합물을 50분 동안 교반하였다. 나타나는 결정을 여과에 의해 수집하였고, 물 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (5 mL)로 세정하고 건조하여, 1.8 ｇ의 화합물 9를 수득하였다 (수율: 72%)

실시예 2 화합물 9의 합성

화합물 13 (10.0 ｇ, 59.8 mmol) 및 10% Pd-C (2.08 ｇ, 52.1 % 함수, 10% (w/w))을 아세토니트릴 (200 mL) 내에 현탁시키고, 혼합물을 0 ℃ 미만으로 냉각하였다. 수소를 4 ㎏f/㎠ 이하로 제공하고, 5 ℃ 미만으로 유지시키면서, 상기 혼합물을 1 시간 이상 교반하였다. Pd-C를 여과 제거하고 아세토니트릴으로 세정하여, 아세토니트릴 중의 화합물 14의 용액을 수득하였다. N,N-디메틸아닐린 (6.53 ｇ, 53.9 mmol)을 상기 수득된 용액에 첨가하고, 앞서 -5 ℃로 냉각된 아세토니트릴 (50 mL) 중의 3-메톡시카르보닐 아크릴레이트 클로라이드 (10.7 ｇ, 72.0 mmol)의 용액에 상기 혼합물을 적가하였다. 첨가가 완료된 후, 황색 고체(화합물 9)가 나타났다. 반응 혼합물을 30 분간 교반하고, 물 (100 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 가온하고, 하루동안 정치하였다. 감압 하에 농축 후, 혼합물을 빙냉 하에 1시간 동안 교반하였다. 침전된 황색 고체를 여과에 의해 수집하고, 1 mol/L 염산 및 물로 세정하여, 습윤 조 결정질 생성물의 화합물 7을 수득하였다. 상기 수득된 생성물을 DMF (100 mL) 및 아세토니트릴 (50 mL)의 혼합물에 현탁하고, 40 ℃에서 용해하였다. 0.66%의 탄산수소나트륨 수용액(302 ｇ)을 용액에 적가하여 화합물 9의 황색 고체를 침전시킨 후, 혼합물을 실온으로 냉각하고, 1시간 동안 교반하였다. 침전된 황색 고체를 여과에 의해 수집하고, 물로 세정하여, 12.3 ｇ의 화합물 9의 순수 생성물을 수득하였다 (수율: 82.5%).

실시예 3 아실화 반응에 대한 염기의 효과

아실화 반응을 위한 염기로서, N,N-디메틸아닐린, 이미다졸, 피리딘, 2,6-루티딘, 트리에틸아민 및 Li₂CO₃가 연구되었다. N,N-디메틸아닐린을 사용한 반응에서, 목적 화합물 9가 고수율로 수득되었고, 다른 염기를 사용한 반응에 비해, 부산물의 생성이 최소로 억제되었다.

염기	HPLC 피크 영역 (%)				수율(%)
염기	화합물 9	부산물 A	부산물 B	부산물 C	수율(%)
사용안함	69.6	3.1	-	-	40.7
N,N- 디메틸아닐린	66.7	6.2	-	0.6	57.9
이미다졸	62.6	1.6	1.4	1.7	47.1
피리딘	26.9	47.3	3.7	13.8	-
2,6-루티딘	38.9	2.0	2.5	14.2	36.6
Li₂CO₃	54.9	16.6	-	-	32.6

실시예 4 화합물 12의 합성

(방법 1) 화합물 8 (12.6 ｇ, 18.2 mmol), 화합물 9 (5.0 ｇ, 20.0 mmol) 및 염화리튬 (1.9 ｇ, 45.5 mmol)을 DMF (47.8 ｇ) 내에 현탁시키고, 혼합물을 10 ℃ 미만으로 냉각하였다. DBU (1,8-디아자비시클로[5.4.6]운데크-7-엔) (6.9 ｇ, 45.5 mmol)을 첨가한 후, 혼합물을 실온으로 가온하고, 20시간 동안 반응시켜, DMF 중의 화합물 10의 용액을 수득하였다. 용액을 -5 ℃로 냉각하고, 4%의 수산화리튬 (37.7 ｇ) 수용액을 혼합물에 적가하였다. 상기 혼합물을 -5℃에서 1시간 동안 교반하여, DMF 중의 화합물 11의 용액을 수득하였다. 용액을 35 ℃까지 가온하였고, 35% 염산 (16.1 ｇ)을 첨가하였으며, 상기 혼합물을 45 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완결된 후, 에틸 아세테이트 (136 mL) 및 물 (120 ｇ)을 혼합물에 첨가하였고, 유기층을 분리하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 추출한 후, 모든 유기층을 혼합하고, 물로 세정하였다. 유기층을 5%의 탄산수소나트륨 수용액으로 추출하였다. 수성층을 분리한 후, 에틸 아세테이트 (160 mL)를 첨가하였다. 혼합물의 pH 값을 7% 염산으로 약 5로 조절하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하고, 모든 유기층을 물로 세정한 후 혼합하였다. 혼합된 유기층을 감압하에 농축하였고, 화합물 12의 씨결정(seed crystals)을 70 ℃에서 첨가하였으며, 혼합물을 1 시간 동안 교반하였다. 결정화 후에, 아세토니트릴 (52 ｇ)을 첨가하였고, 혼합물을 서서히 실온으로 냉각하고, 2시간 동안 교반하였다. 침전된 황색 고체를 여과로 수집하고, 아세토니트릴으로 세정하여, 9.3 ｇ의 화합물 12를 수득하였다 (수율: 70%).

(방법 2) 화합물 8 (25.20 ｇ, 36.4 mmol) 및 화합물 9 (10.88 ｇ, 43.7 mmol)을 DMF (176 mL) 내로 현탁하였다. 상기 혼합물 내로, 수산화리튬 (3.82 ｇ, 91.0 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 20 시간 동안 반응시켜, DMF 중의 화합물 10의 용액을 수득하였다. 용액을 -5 ℃로 냉각한 후, 3%의 수산화리튬 (75.34 ｇ) 수용액을 혼합물에 적가하였고, 혼합물을 -5 ℃에서 1 시간 동안 교반하여, DMF 중의 화합물 11의 용액을 수득하였다. 혼합물을 35 ℃로 가온하였고, 35% 염산 (28.4 ｇ)을 첨가하였으며, 상기 혼합물을 45 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응을 완결한 후에, 혼합물을 에틸 아세테이트 (89 mL)와 물 (240 ｇ) 사이에서 분획화하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하고, 각 유기층을 물로 세정하였다. 유기층을 5%의 탄산수소나트륨 수용액으로 추출하였다. 수성층을 분리하고, 에틸 아세테이트 (320 mL)를 첨가하였다. 혼합물의 pH 값을 7% 염산으로 약 5로 조정하고, 추출하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하고, 모든 유기층을 물로 세정한 후 혼합하였다. 혼합된 용액 (화합물 8의 6.30 ｇ, 9.1 mmol에 해당함)의 1/4을 농축하였고, 화합물 12의 씨결정을 70 ℃에서 첨가하였으며, 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 결정화 후, 아세토니트릴 (26 ｇ)을 첨가하였고, 혼합물을 서서히 실온으로 냉각하였으며, 2시간 동안 교반하였다. 침전된 황색 고체를 여과로 수집하고, 아세토니트릴로 세정하여, 4.8 ｇ의 화합물 12를 수득하였다 (수율: 73%).

실시예 5 화합물 12의 합성

화합물 8 (3.46 ｇ, 5 mmol) 및 화합물 9 (1.50 ｇ, 6 mmol)을 DMF (24.2 mL) 내에 현탁시키고, 혼합물을 -5 ℃ 미만으로 냉각하였다. 상기 혼합물 내로, 5.6%의 수산화리튬 수용액(10.7 ｇ, 25 mmol)을 적가하고, 혼합물을 3.5 시간동안 반응시켜, DMF 중의 화합물 11의 용액을 수득하였다. 상기 혼합물을 5 ℃까지 가온하였고, 35%의 염산 (3.39 ｇ, 32.5 mmol)을 첨가하였으며, 혼합물을 45 ℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응이 완결된 후, 상기 혼합물을 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트 (44.6 ｇ) 및 물 (33.5 ｇ)을 첨가하였다. 혼합물의 pH 값을 10%의 수산화나트륨 수용액으로 약 5.5로 조절한 후, 유기층을 분리하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하고, 모든 유기층을 물로 세정한 후 혼합하였다. 혼합된 용액을 감압하에 농축하고, 70 ℃에서 결정화하였다. 아세토니트릴 (14.9 ｇ)을 혼합물에 첨가하였고, 혼합물을 서서히 실온으로 냉각하였고 추가로 0 ℃로 냉각하였으며, 이후 1시간 동안 교반하였다. 침전된 황색 고체를 여과로 수집하고, 아세토니트릴로 세정하여, 2.97 ｇ의 화합물 12를 수득하였다 (수율: 81.4 %)

실시예 6

화합물 9 대신 R³ 가 수소인 화합물 2'를 사용하고, 8.8%의 수산화나트륨 수용액(11.4 ｇ, 25 mmol)을 염기로서 사용하며, 반응 시간이 2시간인 것을 제외하고는, 실시예 5와 동일한 방법에 의해 화합물 12 (3.11 ｇ, 수율: 85.3%)를 수득하였다.

실시예 7 엔도톡신의 제거 방법

주: EU/mL는 엔도톡신의 농도를 의미한다.

실시예 4에서 수득된 화합물 12 (1.8 ｇ) (<0.3 EU/mL)을, 증류수는 원래 엔도톡신을 함유하지 않지만 엔도톡신 농도가 앞서 120 EU/mL로 조절된 증류수(17 mL)와, 에틸 아세테이트 (40 mL, <1.2 EU/mL)의 혼합물에 첨가하였고, 분리하였다 (수성층 중 120 EU/mL). 주사용 증류수 (17 mL, 엔도톡신을 함유하지 않음)로 유기층을 추출하였다 (수성층 중 6 EU/mL). 유기층을 주사용 증류수 (17 mL)로 추가 추출하였다 (수성층 중 0.6 EU/mL). 유기층을 농축하였고, 에틸 아세테이트 (25.5 mL, <1.2 EU/mL)를 첨가하였으며, 혼합물을 농축하였다. 아세토니트릴 (8.6 mL, <0.3 EU/mL)을 70 ℃의 혼합물에 첨가한 후, 혼합물을 교반하였고, 상기 혼합물이 서서히 실온으로 냉각되게 하였다. 침전된 황색 고체를 여과에 의해 수집하고, 아세토니트릴 (31 mL, <0.3 EU/mL)로 세정하여, 화합물 12 (1.5 g, <0.3 EU/mL)를 수득하였다.

엔도쎌린 수용체 길항제 등을 위해 유용한 트리테르펜 유도체가 본 발명의 방법에 의해 효율적으로 제조될 수 있다. 또한 본 발명은 트리테르펜 유도체의 합성을 위해 유용한 중간체의 결정을 제공한다.

Claims

하기 반응식 1로 나타내어지는, 하기의 단계를 포함하는, 화합물 V, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매 화합물의 제조 방법으로서:

(단계 1) 유기 용매 중 수산화 리튬의 존재 하에 화합물 I과 화합물 II를 반응시킴에 의한, 화합물 III 함유 용액의 제조,

(단계 2) 수산화 리튬을 단계 1에 의해 수득된 용액에 첨가시킴에 의한 화합물 IV 함유 용액의 제조, 및

(단계 3) 산을 단계 2에 의해 수득된 용액에 첨가:

[반응식 1]

[상기 식 중, R¹ 및 R² 는 각각 독립적으로 C1 - C8 알킬임],

상기 유기 용매는 N,N-디메틸포름아미드, 디에틸 에테르, 테트라히드로푸란, N,N-디메틸아세트아미드 및 에틸렌 글리콜 디메틸 에테르로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 제조방법.
하기 반응식 2로 나타내어지는, 하기 단계를 순서대로 수행하는 것을 포함하는, 화합물 V, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매 화합물의 제조 방법으로서:

(단계 1) 화합물 I, 화합물 II 및 수산화 리튬을 유기 용매 내에 용해시킴,

(단계 2) 수산화 리튬의 첨가, 및

(단계 3) 산의 첨가:

[반응식 2]

[상기 식 중, R¹ 및 R² 는 각각 독립적으로 C1 - C8 알킬임],

상기 유기 용매는 N,N-디메틸포름아미드, 디에틸 에테르, 테트라히드로푸란, N,N-디메틸아세트아미드 및 에틸렌 글리콜 디메틸 에테르로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 제조방법.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 화합물 V, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매 화합물을 단리하는 것을 포함하는 방법.
삭제
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 유기 용매가 N,N-디메틸포름아미드인 방법.
삭제
삭제
삭제
하기 반응식 4로 나타내어지는, 하기 단계를 포함하는, 화합물 V, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매 화합물의 제조 방법으로서:

(단계 1) 유기 용매 및 물 중 염기의 존재 하에, 화합물 I과 화합물 II'을 반응시킴에 의한 화합물 IV 함유 용액의 제조, 및

(단계 2) 산을 단계 1에 의해 수득된 용액에 첨가:

[반응식 4]

[상기 식 중, R¹은 C1 - C8 알킬이고, R³ 는 수소 또는 C1 - C8 알킬임],

상기 유기 용매는 N,N-디메틸포름아미드, 디에틸 에테르, 테트라히드로푸란, N,N-디메틸아세트아미드 및 에틸렌 글리콜 디메틸 에테르로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 제조방법.
하기 반응식 5로 나타내어지는, 하기 단계를 순서대로 수행하는 것을 포함하는, 화합물 V, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매 화합물의 제조 방법으로서:

(단계 1) 화합물 I, 화합물 II' 및 염기를 유기 용매 및 물에 용해시킴, 및

(단계 2) 산의 첨가:

[반응식 5]

[상기 식 중, R¹ 은 C1 - C8 알킬이고, R³ 는 수소 또는 C1 - C8 알킬임],

상기 유기 용매는 N,N-디메틸포름아미드, 디에틸 에테르, 테트라히드로푸란, N,N-디메틸아세트아미드 및 에틸렌 글리콜 디메틸 에테르로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 제조방법.
제 9 항 또는 제 10 항에 있어서, 화합물 V, 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매 화합물을 단리하는 것을 포함하는 방법.
제 9 항 또는 제 10 항에 있어서, 염기가 수산화리튬, 수산화나트륨 또는 수산화칼륨인 방법.
삭제
제 1 항에 있어서, 화합물 V를 에틸 아세테이트에 용해시키고 정제수로 세정함에 의해 엔도톡신을 제거하는 단계를 추가로 포함하는 화합물 V의 제조 방법으로서, 여기서, 상기 엔도톡신이 상기 정제수에 포함되지 않는 방법.
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