KR100491106B1 - 검은색 과채류를 주재료로 하는 건강기능식품 및 이의제조방법 - Google Patents

검은색 과채류를 주재료로 하는 건강기능식품 및 이의제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 검은색 과채류를 주재료로 하는 건강기능식품 및 이의 제조방법에 관한 것으로 보다 상세하게는 검은색 과채류의 암과 노화예방, 안과질환예방, 항산화로 면역력 향상, 심장질환, 뇌졸중 예방에 효능이 있는 검은색 과채류를 주재료로 하고 곡물 분말과 증점제를 첨가하여 영양성분과 기호성을 향상시킨 식품 및 건강기능식품의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명은 검은색 과채류로서 고들빼기, 돌미나리, 톳, 오디, 수박씨, 블루베리 열매, 가지 등을 열수추출하여 얻은 검은색 과채류추출물에 메밀, 흑미, 검은콩, 검은깨 등 곡물분말 및 증점제를 첨가하여 다양하고 일정한 형태의 제형으로 가공하여 휴대와 섭취가 용이한 건강기능식품 및 이의 제조방법 제공을 목적으로 한다.
본 발명은 (1)수확된 검은색 과채류를 90℃ 이하에서 열수 또는 에탄올로 추출한 후 추출물을 여과 및 농축하는 단계와,
(2)곡물을 증숙하고 건조한 다음 분말화하는 단계와,
(3)상기 (1)단계의 검은색과채류 추출물농축액 45∼55중량%, (2)단계의 곡물 분말 52∼44.5중량% 및 증점제 0.5∼3중량%를 혼합하는 단계를 포함한다.

Description

검은색 과채류를 주재료로 하는 건강기능식품 및 이의 제조방법{health functional food with black fruits and vegetables, Manufacturing method thereof}
본 발명은 검은색 과채류를 주재료로 하는 건강기능식품 및 이의 제조방법에 관한 것으로 보다 상세하게는 검은색 과채류의 암과 노화예방, 안과질환예방, 항산화로 면역력 향상, 심장질환, 뇌졸중 예방에 효능이 있는 검은색 과채류를 주재료로 하고 곡물 분말과 증점제를 첨가하여 영양성분과 기호성을 향상시킨 건강기능식품 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
일반적으로 과일, 식용열매, 과일씨앗, 채소, 야채, 해초류는 그 외부 또는 내부에 각각 독특한 색깔을 가지고 있다(이하 본 발명에서 과일, 식용열매, 과일씨앗, 채소, 야채, 해초류를 과채류라고 통칭한다.).
본 발명은 검은색 과채류로서 고들빼기, 돌미나리, 톳, 오디, 수박씨, 블루베리 열매, 가지에 직접 열수로 추출하여 얻은 검은색 과채류추출물에 메밀, 흑미, 검은콩, 검은깨 등 곡물분말 및 증점제를 첨가하여 일정한 형태의 제형으로 가공하여 휴대와 섭취가 용이한 건강기능식품 및 이의 제조방법 제공을 목적으로 한다.
건강식으로 애용되고 있는 검은콩은 거의 모든 가공식품에 포함되어 있어 인기가 있으며, 검은 초콩은 옛날부터 가정이나 산사로부터 그 제조방법이 비법으로 전래되어 오고 있는데 검은 콩은 시력보호는 물론 단백질공급원으로서 알려져 있다.
검은깨, 흑표고버섯, 건포도, 흑태, 오징어먹물, 가지, 포도, 체리 등 검은 색을 띄는 안토시아닌은 강력한 항산화 물질로 알려지고 있으며, 심장질환, 뇌졸중의 위험을 줄이고 면역력을 강화해 암, 성인병, 노화를 예방하는 것으로 알려져 있다. 또한 안토시아닌은 눈의 망막에서 빛을 감지해 이를 뇌에 전달하는 색소(로돕신)가 있는데 안토시아닌이 이 색소의 재생을 돕는다고 알려져 있다. 미국 미시간주립대학 무랄레다란 나이르 박사는 실험을 통해 체리에 든 안토시아닌이 아스피린 보다 소염효과가 10배나 높다는 사실을 알아냈다. 한방에서 검은색 식품은 신장을 보호해 주는 식품으로 위장과 혈관을 데워서 소화를 잘 할 수 있게 하고, 피를 잘 통하게 해 주며 신장을 자극해 몸속 노폐물을 빨리 배출되도록 하는 효능도 있다고 알려져 있다. 검은 콩은 여성의 난소암, 유방암, 골다공증, 안면홍조예방과 여성호르몬(에스트로겐)이 효능을 발휘하도록 한다. 검은 수박씨는 콜레스테롤 수치를 낮추어 주고 식이버섯과 목이버섯은 정력과 얼굴색이 좋아지고 이질, 설사, 고혈압, 대장염, 당뇨병 예방에 좋으며, 인체에 꼭 필요한 단백질, 지방, 칼슘, 인, 철, 당, 비타민을 고루 함유하고 있어 피를 맑게 해주고 빈혈증세를 완화해 준다고 알려져 있다.
과채류 중에서 사과, 수박, 포도와 같이 외부가 적색이지만 내부는 적색이 아닌 과채류도 있고, 토마토, 고추, 피망, 딸기, 석류 등 외부와 내부가 모두 적색인 과채류도 있다. 이처럼 적색 과채류는 자체적으로 여러 가지 기능성 성분이 있어 항암작용, 대장암 및 유방암 등의 암 예방, 동맥경화, 심장병 발병 억제, 노화지연 작용, 피부 탄력 유지 등의 효능이 있다고 알려져 있다.
과채류 중에서 당근, 호박, 귤, 유자, 레몬, 고구마, 복숭아, 살구, 감 등의 노란색과채류로는 대표적인 성분으로 카로티노이드임이 알려져 있다. 카로티노이드는 노랑, 주황, 색소로서 동물 또는 식물계에 여러종에 널리 분포되어 있고, 카로티노이드는 분자내에 산소를 함유하지 않는 카로틴으로서 β-카로틴이 있는데 당근 뿌리와 녹색잎, 달걀 노른자, 혈액 등과 라이코펜으로서 토마토, 수박, 딸기 등에 분포되어 있다. 또한 분자내에 산소를 함유하지 않는 카로틴으로서 루테인이 있는데 달걀 노른자, 녹색 잎, 꽃잎 등에 분포되어 있고 제아잔틴으로는 황색 옥수수, 달걀 노른자 등에 분포되어 있다. 이들 물질은 비슷하면서도 각기 다른 역할을 하는 데, β-카로틴은 비타민A 공급원으로서 인체에서는 비타민A로 전환되며, 남자의 정자를 만들고 면역력을 높여주고 식욕 증진 및 성장 촉진에 도움을 준다.
따라서 이와 같은 적색 또는 노란색과 같은 과채류를 자주 섭취하는 것이 건강학적으로 바람직하다. 그러나 이런 적색 과채류는 보통 식사후 디저트로서 날것으로 소량 섭취하고 있을 뿐만 아니라 보관이 용이하지 않아 간편히 휴대하면서 섭취하기 어려운 문제가 있다. 또한 상기 적색 과채류 및 노란색 과채류가가 몸에 좋다고 하여 적색 과채류만 섭취하는 경우 인체에서 필요한 여러 가지 영양성분이 부족한 문제가 있다.
한편 본 발명과 관련된 종래기술로는 한국특허공개 2000-0073830호에 "검정색 곡물을 주원료로 하는 선식 및 그 제조방법"이 있으나 과채류를 주원료로 하는 본 발명과는 기술적 구성이 다른 것이다.
본 발명은 검은색과채류에 함유되어 있는 성인병예방 성분을 간편하고 손쉽게 섭취할 수 있도록 검은색 과채류를 추출물형태로 가공하고, 이 검은색과채류 가공물에 곡물분말 및 증점제를 첨가하여 다양하고 일정한 형태의 제형으로 가공함으로써 영양성분과 기호성이 우수한 건강기능식품 및 이의 제조방법 제공을 목적으로 한다.
상기에서 언급한 목적을 달성하기 위한 본 발명의 검은색 과채류를 주재료로 하는 건강기능식품의 제조방법은 종래의 기능식품 제조에 있어서,
(1)검은색 과채류를 90℃ 이하에서 열수 또는 에탄올로 추출한 후 여과 및 농축하여 검은색과채류를 가공하는 단계와,
(2)곡물을 증숙하고 건조한 다음 분말화하는 단계와,
(3)상기 (1)단계의 검은색과채류 추출물농축액 45∼55중량%, (2)단계의 곡물 분말 52∼44.5중량% 및 증점제 0.5∼3중량%를 혼합하는 단계를 포함한다.
이하 본 발명을 상기 단계별로 보다 상세히 설명하고자 한다.
제1단계 : 검은색과채류의 가공단계
검은색과채류를 가공함에 있어서 휴대나 복용의 편의상 정제, 캡슐 또는 환으로 공급하기 위해서는 과채류로부터 열수추출하여 곡물류와 점증제를 혼합할 수 있도록 추출물로 가공한다.
<추출물>
검은색과채류는 고들빼기, 돌미나리, 톳, 오디, 수박씨, 블루베리 열매, 가지 중에서 선택된 어느 하나이거나 또는 둘 이상을 시중에서 구입하여 사용한다. 과채류를 잘게 분쇄하여 과채류 중량에 대하여 10배수의 물 또는 에탄올로 추출온도 70∼90℃에서 과채류의 유효성분을 추출한 후, 추출물을 다시 감압농축기에서 1/10의 부피로 농축하고 여과하여 추출물 원료로 사용한다.
한편 상기에서 과채류의 추출시 과채류는 2종류 이상의 혼합물을 사용할 수 있다. 일예로 두 가지 과채류를 혼합하는 경우 혼합비는 1:9∼9:1의 비로 혼합할 수 있으며, 세 가지 이상의 과채류를 혼합하는 경우에는 1:1:8∼1:8:1∼8:1:1의 비로 혼합할 수 있고, 바람직하게는 각각 동일한 중량의 비로 혼합한 혼합물을 사용할 수 있다.
제2단계 : 곡물의 증숙 및 분말
본 발명에서 곡물 역시 검은색 곡물을 사용할 수 있으나 꼭 검은색 곡물에 한정되는 것이 아니라 일반적인 곡물을 사용할 수 있다. 본 발명에서 검은색 곡물의 일예로서 메밀, 흑미, 검은콩, 검은깨 중에서 선택된 어느 하나이거나 또는 둘 이상을 사용할 수 있다. 또한 일반 곡물은 현미, 찹쌀, 멥쌀, 메밀, 보리, 옥수수, 조, 피, 수수, 기장, 콩, 팥, 녹두, 완두콩 중에서 선택된 어느 하나 이상이거나 또는 둘 이상의 혼합물을 사용할 수 있다. 한편 검은색 곡물과 일반 곡물의 혼합물을 사용할 수 있다. 본 발명에서 곡물을 사용함에 있어, 두 가지 곡물을 혼합하는 경우 혼합비는 1:9∼9:1의 비로 혼합할 수 있으며, 세 가지 이상의 곡물을 혼합할 경우에는 1:1:8∼1:8:1∼8:1:1의 비로 혼합할 수 있다.
본 발명의 건강기능식품을 섭취시 미감 및 복용감을 위해서는 곡물을 분말화하기 전에 세척하여 불순물을 제거한 다음 증숙하는 것이 좋다. 본 발명에서 곡물의 증숙은 당해 기술분야에서 통상적으로 실시되어지는 조건으로 곡물을 증숙할 수 있다. 본 발명에서는 곡물 증숙의 조건의 일예로서 100∼120℃에서 20∼40분 동안 곡물을 증숙할 수 있다.
한편, 상기에서 언급한 바와 같이 본 발명의 건강기능식품에서 곡물은 분말화한 후 단독으로 사용하거나 또는 몇 가지 곡물이 소정의 비로 혼합된 혼합물을 사용할 수 있으나, 곡물을 분말화하기 전에 사용하는 곡물의 증숙은 각각의 곡물의 특성이 상이하므로 가급적 각각 증숙하는 것이 바람직하다.
증숙이 끝난 곡물을 바로 분쇄기로 분말화하면 곡물에 함유되어 있는 수분에 의해 분쇄기의 상태가 나빠질 수 있으므로 증숙된 곡물은 건조를 실시한 후 분쇄기로 분말화하는 것이 좋다. 이때 건조는 자연건조, 열풍을 이용한 건조, 건조기를 이용하여 건조를 실시할 수 있다. 이러한 건조는 당업자가 적의 선택하여 실시할 수 있는 것이므로 이하 자세한 내용은 생략하기로 한다.
본 발명에서 곡물 분말은 상기 제1단계의 검은색과채류 추출물 농축액과 용이하게 혼합되기 위해서 200∼400메쉬(mesh)로 분말화하는 것이 좋다.
제3단계 : 과채류추출물, 곡물 분말 및 증점제 혼합
상기 제1단계 및 제2단계로부터 얻은 과채류추출물 농축액과 곡물분말에 증점제를 첨가하여 혼합한다. 증점제는 과채류 분말과 곡물분말이 혼합시 고루 혼합이 되도록 하는 역할을 한다. 본 발명에서 증점제는 식품학적으로 허용된 식품첨가물이라면 어떠한 것이라도 사용할 수 있다. 이러한 증점제의 일예로서 카라기난, 로커스트 검, 구아검, 잔탄검, 타마린드검, 아라비아검, 글루코만난 중에서 선택된 어느 하나이거나 또는 둘 이상의 혼합물을 사용할 수 있다. 이때 두 가지 증점제를 혼합하는 경우 혼합비는 1:9∼9:1의 비로 혼합할 수 있으며, 세 가지 이상의 증점제를 혼합하는 경우 혼합비는 1:1:8∼1:8:1∼8:1:1의 비로 혼합할 수 있다.
본 발명은 상기 1단계 및 2단계로부터 얻은 검은색과채류 추출물농축액 45∼55중량%, 곡물 분말 52∼44.5중량% 및 증점제 0.5∼3중량%를 혼합할 수 있다.
본 발명에서 다양한 함량의 검은색과채류 추출물농축액, 곡물 분말 및 증점제를 적용한바 본 발명의 목적하는 건강기능식품을 얻기 위해서는 전술한 수치 범위 함량의 검은색과채류 추출물농축액, 곡물 분말 및 증점제를 사용하는 것이 좋다.
<환, 정제, 캡슐 제품>
본 발명의 제품이 분말 형태가 아닌 고농축 제형의 환, 정제, 캡슐로 제품을 할 경우에는 과채류 농축물에 상기에서 언급된 곡물분말, 점증제 및 부형제를 사용하여 당업계에서 공지된 방법에 의하여 본 발명의 건강기능식품의 제형을 환, 정제(tablet) 또는 캡슐화 할 수 있다. 본 발명에서 건강기능식품의 제형을 변화시키기 위해 첨가할 수 있는 부형제는 식품학적 또는 약품학적으로 허용된 것을 하나 또는 둘 이상의 혼합물로 사용할 수 있다. 본 발명에서 이러한 부형제는 발명의 필수 구성성분이 아니고, 또한 당해 기술분야에서 널리 알려진 것이므로 당업자가 적의 선택하여 소정의 함량으로 적용할 수 있다.
한편 본 발명은 상기에서 언급한 방법에 의해 검은색과채류를 주재료로 하는 건강기능식품을 포함한다.
이하 본 발명의 내용을 실시예 및 시험예를 통하여 구체적으로 설명한다. 그러나, 이들은 본 발명을 보다 상세하게 설명하기 위한 것으로 본 발명의 권리범위가 이들에 의해 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1>
(1)검은색과채류로서 고들빼기, 돌미나리, 톳, 오디, 수박씨, 블루베리 열매, 가지를 동일한 비율로 하여 잘게 분쇄한 7kg에 정제수 70L를 넣고 90℃에서 5시간 동안 추출한 후, 여과한 다음 감압농축기를 이용하여 1/10으로 농축하였다.
2)곡물로서 현미, 찹쌀을 선택하고 이들을 세척하여 불순물을 제거하였다. 그런 다음 현미와 찹쌀을 100∼120℃에서 20∼40분 동안 각각 증숙하고 열풍건조를 실시하여 건조하였다. 건조가 끝난 곡물은 볼밀을 포함하는 분쇄기를 이용하여 각각 200∼400메쉬(mesh)로 분말화하고 현미분말과 찹쌀분말을 1:1의 비로 혼합하였다.
(3)상기 (1)단계의 분말화된 각각의 검은색 과채류가 모두 동일한 비로 혼합된 혼합물 95중량%, 상기 (2)단계에서 현미분말과 찹쌀분말이 1:1의 비로 혼합된 혼합물 4.5중량% 및 증점제로서 아라비아 검 0.5중량%를 혼합하여 적색 과채류를 주재료로 하는 건강기능식품을 제조하였다.
<실시예 2>
검은색과채류로서 고들빼기, 돌미나리, 톳, 오디, 수박씨, 블루베리 열매, 가지를 각각 동일한 비율로 하여 잘게 분쇄한 과채류 3.5kg에 정제수 35L를 넣고 80℃로 8시간 동안 추출한 후, 얻은 추출물을 감압농축기를 이용하여 1/10으로 농축하였다. 검은색과채류 농축물 50중량%, 현미분말과 찹쌀분말이 1:1의 비로 혼합된 혼합물 47중량% 및 증점제로서 아라비아 검 3중량%를 혼합한 후 공지의 방법에 의해 부형제를 첨가하여 환 형태의 건강기능식품을 제조하였다.
<실시예 3>
상기 실시예 2에서 검은색과채류에 열수 70℃로 8시간 동안 추출하는 것을 제외하고는 실시예 2와 동일한 조성 및 방법을 이용하여 정제 형태의 건강기능식품을 제조하였다.
<실시예 4>
검은색 과채류의 추출용매로 에탄올을 사용하여 80℃로 3시간 동안 추출하는 것을 제외하고는 실시예 2와 동일한 조성 및 방법을 이용하여 정제 형태의 건강기능식품을 제조하였다.
<시험예 1>: In Vitro 면역 활성시험
본 발명에서 사용한 검은색과채류인 고들빼기, 돌미나리, 톳, 오디, 수박씨, 블루베리 열매, 가지의 추출물 농축액 및 이들의 혼합추출물의 농축액을 대상으로 면역 세포주 Raji를 배지(RPM1-1640)에 접종하여 1주일간 세포 정상 생육기에 도달시킨 후, 96-well Plate(5×104Cell/㎖로 농도 조절한 배지 100㎕/well)를 37℃에서 5% CO2 상태로 24시간 배양하였다. 검은색과채류 각각의 추출물 농축액 및 이들의 혼합추출물 농축액을 0.5mg/ml, 1.0mg/ml, 1.5mg/ml, 2.0mg/ml 농도로 100㎕를 투여한 후 37℃에서 5% CO2 상태로 48시간 배양하였다.
상등액을 제거한 배양액에 냉각시킨 10%(w/v) TCA(trichloroacetic acid) 100㎕를 가하여 4℃에서 1시간동안 방치하고 증류수로 4∼5회 세척하여 TCA를 제거하여 실온에서 플레이트를 건조한 후, 각각의 well에 1%(v/v) 초산에 녹인 0.4%(w/v) SRB용액을 100㎕씩 첨가하고 상온에서 30분 동안 염색시켰다.
결합되지 않은 SRB 염색액은 1% 초산으로 4∼5회 정도 세척, 건조시킨 후에 10mM Tris buffer 100㎕를 첨가하여 염색액을 녹여낸 후 540nm에서 마이크로플레이트리더(microplate reader)를 이용하여 흡광도를 측정한 후 암세포 생육도(test/control×100)를 계산하였다.
검은색과채류로서 고들빼기, 돌미나리, 톳, 오디, 수박씨, 블루베리 열매, 가지의 추출물 농축액 및 이들의 혼합추출물의 농축액에 대한 면역활성은 표 1과 같이 나타났다. 검은색과채류 중 고들빼기추출물 1.5mg/ml 농도에서 168(%/mg/ml), 돌미나리추출물 1.0mg/ml 농도에서 152(%/mg/ml), 오디추출물 1.5mg/ml 농도에서 134(%/mg/ml), 오디추출물 1.5mg/ml 농도에서 134(%/mg/ml), 수박씨추출물 0.5mg/ml 농도에서 134(%/mg/ml), 블루베리 열매추출물 1.5mg/ml 농도에서 120(%/mg/ml), 가지추출물 1.5mg/ml 농도에서 126(%/mg/ml)으로 나타났다. 이들 중에서 가장 면역효과가 좋게 나타나는 것은 검은색과채류 혼합추출물로서 0.5mg/ml 농도에서 175∼182(%/mg/ml) 정도의 활성증가가 나타났다.
<표 1> 검은색과채류 추출물의 면역활성 능력(%/mg/ml)
구 분 농 도
0.5mg/ml 1.0mg/ml 1.5mg/ml 2.0mg/ml
고들빼기추출물 152 166 168 162
돌미나리추출물 148 152 150 149
톳추출물 136 140 142 139
오디추출물 128 132 134 130
수박씨추출물 134 132 128 130
블루베리 열매추출물 114 118 120 119
가지추출물 112 124 126 121
혼합추출물 180 182 181 175
효 과 기 준 50% 이하
검 정 방 법 SRB assay
<시험예 2> Ex Vivo 면역기능 검색
실시예 1 내지 실시예 4에서 얻을 수 있는 검은색과채류의 추출물을 BALB/c 마우스에 50mg/kg b.w.과 500mg/kg b.w.의 농도로 0.2ml/day씩 4주 동안 격일로 투여하였으며, 대조군(control)으로는 동량의 생리 식염수를 사용하였다. 마우스 면역능을 측정하기 위한 지표로서 비장세포를 분리해 비장세포 증식능을 측정하였고, 복강 대식세포를 분리해 활성화된 복강 대식세포가 분비하는 cytokine(IL-1β, IL-6, TNF-α) 분비량을 측정하였다.
<검은색과채류 추출물이 마우스 비장세포 증식능에 미치는 영향>
경추탈골에 의해 희생된 마우스(암컷 balb/c mouse, 5주) 비장을 무균적으로 적출한 다음 RPMI medium 1640 용액으로 2회 원심세척한 후 비장세포를 모아 그 세포수를 측정하였다. 세포농도 5.0×106cell/ml로 분산시킨 후 96-well plate에 분주, 배양시 마이토겐(mitogen)을 첨가하지 않은 실험구, Concanavalin A(conA) 1mcg/ml를 첨가한 것을 실험구 및 lipopolysaccharide(LPS) 5mcg/ml를 첨가한 것 실험구로 나눈 후, MTT assay를 이용하여 24시간, 48시간에 증식능을 측정하였다.
비장세포 증식능에 미치는 영향은 도 1에 나타내었다. 도 1(a)는 실시예 1의 검은색 과채류 추출물을 급여한 마우스의 비장세포 증식능 결과이고, 도 1(b)는 실시예 2의 검은색 과채류 추출물을 급여한 마우스의 비장세포 증식능 결과이고, 도 1(c)는 실시예 3의 검은색 과채류 추출물을 급여한 마우스의 비장세포 증식능 결과이고, 도 1(d)는 실시예 4의 검은색 과채류 추출물을 급여한 마우스의 비장세포 증식능 결과이다.
도 1(a) 내지 도 1(d)에서 보면 검은색과채류 추출물을 급여한 마우스의 비장세포 증식능에서 conA를 첨가한 실험구의 50mg/kg b.w 농도군에서 유의적으로 높은 증식능을 나타냈다. LPS를 첨가한 실험구의 경우, 50mg/kg b.w.군과 500mg/kg b.w. 투여군에서 마이토겐을 첨가하지 않은 실험구 보다 유의적으로 높은 증식능을 나타냈다.
<검은색 먹거리 추출물이 마우스 복강 대식 세포 증식능에 미치는 영향>
마우스 복강 내에 4% 티오글리콜레이트(thioglycollate) 2ml를 주사하여 3일간 복강 내에 대식세포가 모이게 한 후, 경추 탈골에 의해 희생시킨다. 마우스 복부의 표피를 절개한 후, 10ml의 RPMI medium 1640 용액으로 복강을 세척하여 대식세포를 취한 후 4℃, 3000rpm에서 10분간 원심침전시켜 세포를 얻어 배양하다가, 식품 추출물을 처리하여 마우스 대식세포가 활성화될 때 분비하는 cytokines의 농도를 배양액에서 EILSA kit를 이용하여 측정하였다. 먼저, 불활성화된 10%의 FBS를 함유한 RPMI medium 1640 용액에 1×106 cell/㎖의 세포농도로 분산시켜 24-well plate의 각 well에 1000㎕씩 분주하여 인큐베이터(incubator)에서 2시간 배양하였다. 배지 교환을 위해 상층액을 걷고 각 well에 불활성화된 RBS를 함유한 RPMI 1640 900㎕, 추출물(10ug/ml) 100㎕ 첨가하여 인큐베이터(incubator)에서 48시간 배양 후 배양액을 얻어 복강 대식세포의 Cytokine(IL-1β, IL-6, TNF-α)의 생성량을 측정하여 각각 도 2 내지 도 4에 나타냈다.
(1) IL-1β(도 2)
도 2에서와 같이 실시예 1 내지 실시예 4에서 얻을 수 있는 검은색과채류 추출물의 투여에 의한 복강 대식세포의 IL-1β생성량은 50mg/kg b.w.군이 유의적으로 많은 양의 IL-1β를 분비함을 알 수 있었고, LPS 자극시, 50 mg/kg b.w.과 500mg/kg b.w.군이 대조군에 비해 유의적으로 높은 분비능을 보였다. LPS로 자극한 실험구(C)에서 IL-1β분비가 유의적으로 상승한 것으로 보아 검은색과채류 추출물을 함유한 건강기능식품의 경구투여는 IL-1β생성을 자극하여 면역반응을 촉진시키는 것으로 추측된다.
도 2에서 도 2(a)는 실시예 1의 검은색 과채류 추출물을 급여한 마우스의 IL-1β생성량 결과이고, 도 2(b)는 실시예 2의 검은색 과채류 추출물을 급여한 마우스의 IL-1β생성량 결과이고, 도 2(c)는 실시예 3의 검은색 과채류 추출물을 급여한 마우스의 IL-1β생성량 결과이고, 도 2(d)는 실시예 4의 검은색 과채류 추출물을 급여한 마우스의 IL-1β생성량 결과이다.
(2)IL-6(도 3)
실시예 1 내지 실시예 4에서 얻을 수 있는 검은색과채류 추출물을 투여한 결과(도 3 참조), 50mg/kg b.w.군에서 IL-6 분비가 유의적으로 증가된 것으로 나타났다. LPS 처리구의 50mg/kg b.w.군과 500 ㎎/㎏ b.w.군에서 IL-6 분비가 대조군에 비해 유의적으로 증가하였다.
LPS 처리하지 않은 경우, 농도 50mg/kg b.w.군에서 IL-6 분비가 유의적으로 상승하여, 검은색과채류 추출물의 투여가 IL-6 생성을 자극하여 면역반응을 촉진시키는 것으로 추측되었다. 500mg/kg b.w.군에서는 IL-6 분비가 감소하는 것으로 나타났고 이는 고농도 투여로 인한 결과라고 사료된다. 그러나 LPS 처리시, 농도 50mg/kg b.w.과 500mg/kg b.w.의 모든 실험군에서 유의적인 IL-6 생성능을 보여 검은색과채류 추출물이 면역세포를 활성화시킬 수 있는 잠재능이 있으리라 사료된다.
도 3에서 도 3(a)는 실시예 1의 검은색 과채류 추출물을 급여한 마우스의 IL-6생성량 결과이고, 도 3(b)는 실시예 2의 검은색 과채류 추출물을 급여한 마우스의 IL-6생성량 결과이고, 도 3(c)는 실시예 3의 검은색 과채류 추출물을 급여한 마우스의 IL-6생성량 결과이고, 도 3(d)는 실시예 4의 검은색 과채류 추출물을 급여한 마우스의 IL-6 생성량 결과이다.
(3) TNF-α(도 4)
실시예 1 내지 실시예 4에서 얻을 수 있는 검은색과채류 추출물을 투여한 결과(도 4 참조), 대조군에 비해 50mg/kg b.w.군과 500mg/kg b.w.군에서 TNF-α분비가 유의적으로 높았다.
LPS 처리시, 50mg/kg b.w.군에서 유의적으로 높은 TNF-α분비능을 보였다. LPS 처리하지 않은 경우 50mg/kg b.w.농도 투여군과 LPS로 자극한 50mg/kg b.w. 농도 투여군에서 대조군에 비해 높은 TNF-α분비능을 나타내었다. 농도 500mg/kg b.w. 투여군의 경우 대조군에 비해 높았으나 농도 50mg/kg b.w.군에 비해서는 감소하는 TNF-α분비경향을 나타내었다.
도 4에서 도 4(a)는 실시예 1의 검은색 과채류 추출물을 급여한 마우스의 TNF-α분비 결과이고, 도 4(b)는 실시예 2의 검은색 과채류 추출물을 급여한 마우스의 TNF-α분비 결과이고, 도 4(c)는 실시예 3의 검은색 과채류 추출물을 급여한 마우스의 TNF-α분비 결과이고, 도 4(d)는 실시예 4의 검은색 과채류 추출물을 급여한 마우스의 TNF-α분비 결과이다.
본 발명의 검은색과채류를 주재료로 하는 건강기능식품은 암과 노화예방, 안과질환예방 항산화로 면역력 향상, 심장질환, 뇌졸중 예방에 효능이 있음을 알 수 있고 또한 기능성분과 영양성분이 고루 함유되어 있고 휴대와 섭취가 용이한 건강기능식품 및 이의 제조방법을 제공할 수 있다.
상술한 바와 같이, 본 발명의 바람직한 실시예를 참조하여 설명하였지만 해당 기술 분야의 숙련된 당업자라면 하기의 특허청구범위에 기재된 본 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있음을 이해할 수 있을 것이다.
도 1(a) 내지 도 1(d)은 본 발명의 검은색과채류에 대한 Ex vivo 면역기능검색에서 마우스의 비장세포 증식능을 나타낸 것이다.
도 2(a) 내지 도 2(d)는 본 발명의 검은색과채류에 대한 Ex vivo 면역기능검색에서 마우스의 복강대식세포 Cytokine(IL-1β) 분비량을 나타낸 것이다.
도 3(a) 내지 도 3(d)은 본 발명의 검은색과채류에 대한 Ex vivo 면역기능검색에서 마우스의 복강대식세포 Cytokine(IL-6) 분비량을 나타낸 것이다.
도 4(a) 내지 도 4(d)는 본 발명의 검은색과채류에 대한 Ex vivo 면역기능검색에서 마우스의 복강대식세포 Cytokine(TNF-α) 분비량을 나타낸 것이다.

Claims (9)

  1. (1)톳, 오디, 수박씨, 블루베리 열매 중에서 선택된 어느 하나이거나 또는 둘 이상의 혼합물의 검은색과채류를 90℃ 이하에서 용매로 추출한 후 추출물을 여과 및 농축하는 단계와,
    (2)곡물을 증숙하고 건조한 다음 분말화하는 단계와,
    (3)상기 (1)단계의 검은색과채류 추출물농축액 45∼55중량％, (2)단계의 곡물 분말 52∼44.5중량％ 및 증점제 0.5∼3중량％를 혼합하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 검은색과채류를 주성분으로 하는 건강기능식품의 제조방법.
  2. 삭제
  3. 제1항에 있어서, 곡물은 현미, 찹쌀, 메밀, 보리, 옥수수, 조, 피, 수수, 기장, 콩, 팥, 녹두, 완두콩 중에서 선택된 어느 하나 이상이거나 또는 둘 이상의 혼합물 임을 특징으로 하는 검은색과채류를 주재료로 하는 건강기능식품의 제조방법.
  4. 제1항에 있어서, 곡물은 100∼120℃에서 20∼40분 동안 증숙하는 것을 특징으로 하는 검은색과채류를 주재료로 하는 건강기능식품의 제조방법.
  5. 제1항에 있어서, 증점제는 카라기난, 로커스트 검, 구아검, 잔탄검, 타마린드검, 아라비아검, 글루코만난 중에서 선택된 어느 하나이거나 또는 둘 이상의 혼합물 임을 특징으로 하는 검은색과채류를 주재료로 하는 건강기능식품의 제조방법.
  6. 제1항에 있어서, 곡물은 200∼400메쉬(mesh)로 분말화 하는 것을 특징으로 하는 검은색과채류를 주재료로 하는 건강기능식품의 제조방법.
  7. 제1항에 있어서, 건강기능식품의 제형은 분말, 환, 정제(tablet), 캡슐 중에서 선택된 어느 하나 임을 특징으로 하는 검은색과채류를 주재료로 하는 건강기능식품의 제조방법.
  8. 제1항에 있어서, 검은색과채류 추출물의 용매는 열수 또는 에탄올로 90℃ 이하에서 추출하고 농축한 농축물임을 특징으로 하는 검은색과채류를 주재료로 하는 건강기능식품의 제조방법.
  9. 특허청구범위 제1항 내지 제8항 중에서 선택된 어느 한 항의 방법에 의해 제조한 건강기능식품.
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