JPS6135358A - 過酸化性作用物質の測定方法 - Google Patents
過酸化性作用物質の測定方法Info
- Publication number
- JPS6135358A JPS6135358A JP14941085A JP14941085A JPS6135358A JP S6135358 A JPS6135358 A JP S6135358A JP 14941085 A JP14941085 A JP 14941085A JP 14941085 A JP14941085 A JP 14941085A JP S6135358 A JPS6135358 A JP S6135358A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cooh
- formula
- oxidizing
- color
- general formula
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
- C12Q1/28—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving peroxidase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2326/00—Chromogens for determinations of oxidoreductase enzymes
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/14—Heterocyclic carbon compound [i.e., O, S, N, Se, Te, as only ring hetero atom]
- Y10T436/142222—Hetero-O [e.g., ascorbic acid, etc.]
- Y10T436/143333—Saccharide [e.g., DNA, etc.]
- Y10T436/144444—Glucose
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/20—Oxygen containing
- Y10T436/206664—Ozone or peroxide
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Catalysts (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は、カップリング成分(Kupplungs−k
OmpOnente )としてアニリン誘導体を使用す
る酸化的発色反応の実施方法に関する。
OmpOnente )としてアニリン誘導体を使用す
る酸化的発色反応の実施方法に関する。
フェノール又はアニリンと、適当な漣I成分、例えば4
−アミノアンチピリン(4−AAP)又はメチル4ンゾ
チアゾロンーヒrラゾン(MBTH)との酸化的発色反
応〔エマーソンートリンダー反応(Emerson−T
r 1nder −React ion )は、発色反
応のために使用される酸化剤の検出及び測定のために使
用することができる。この反応は、酸素分析又は他の分
野、例えば免疫学における化学的診断法の基礎として利
用することができる。例えば同反応は、体液中のグルコ
ース、尿酸又はコレステリンの、酵素例えばグルコース
オキシダーーキ、ウリカーゼ及びコリンエステラーゼに
よる酸化の際に形成される過酸化水素の測定による体液
中の前記物質の測定のため、酸化剤としての過酸化水素
を用いる基質及び/又はペルオキシダーゼの測定のため
又は例えば体液中のリビPペルオキシダーゼのようなペ
ルオキシPの測定のだめに利用することができる(例え
ば***国特許出願公開第3037342号明細書参照)
。この種の測定法の重要な前提は、高い感光性、つt−
b高い吸光係数を有しかつ高い収量で得られる色素の形
成である。これは例えば特に臨床化学的診断で、体液中
に少量しか存在しない物質の測定の場合に重要である、
それというのもこの場合には例えば血清成分による障害
が十分に除去されうるからである。
−アミノアンチピリン(4−AAP)又はメチル4ンゾ
チアゾロンーヒrラゾン(MBTH)との酸化的発色反
応〔エマーソンートリンダー反応(Emerson−T
r 1nder −React ion )は、発色反
応のために使用される酸化剤の検出及び測定のために使
用することができる。この反応は、酸素分析又は他の分
野、例えば免疫学における化学的診断法の基礎として利
用することができる。例えば同反応は、体液中のグルコ
ース、尿酸又はコレステリンの、酵素例えばグルコース
オキシダーーキ、ウリカーゼ及びコリンエステラーゼに
よる酸化の際に形成される過酸化水素の測定による体液
中の前記物質の測定のため、酸化剤としての過酸化水素
を用いる基質及び/又はペルオキシダーゼの測定のため
又は例えば体液中のリビPペルオキシダーゼのようなペ
ルオキシPの測定のだめに利用することができる(例え
ば***国特許出願公開第3037342号明細書参照)
。この種の測定法の重要な前提は、高い感光性、つt−
b高い吸光係数を有しかつ高い収量で得られる色素の形
成である。これは例えば特に臨床化学的診断で、体液中
に少量しか存在しない物質の測定の場合に重要である、
それというのもこの場合には例えば血清成分による障害
が十分に除去されうるからである。
しかしまだ前記診断法の場合と同様に他の分野でも、例
えば標識酵素としてベルオキシダーぜが頻繁に使用され
る免疫学においても鋭敏な発色系を必要としている。
えば標識酵素としてベルオキシダーぜが頻繁に使用され
る免疫学においても鋭敏な発色系を必要としている。
フェノールと、発色のために適当なカップリング成分、
例えば4−アミノアンチピリン(4−AAP )又はメ
チルペンゾチアゾロンヒPラゾン(MBTH)との酸化
的発色反応の場合、4位で塩素化又は臭素化されたフェ
ノールを発色反応に投入すると、酸化剤の量に対して色
素の収量が増大されうることは公知である。この効果は
、ハロゲン化フェノールを用いる発色反応は2電子酸化
法であるが、4位f置換されていないフェノールは4電
子酸化法で有色化合物に変化されるという事実に起因し
ている〔例えば特開昭54−9821号参照〕。つまり
、酸化剤、例えばFe3+又は酵素的に形成されたH0
の測定時の感光性は、発色反応の際に4−ハロゲンフェ
ノールを使用すると倍加される。
例えば4−アミノアンチピリン(4−AAP )又はメ
チルペンゾチアゾロンヒPラゾン(MBTH)との酸化
的発色反応の場合、4位で塩素化又は臭素化されたフェ
ノールを発色反応に投入すると、酸化剤の量に対して色
素の収量が増大されうることは公知である。この効果は
、ハロゲン化フェノールを用いる発色反応は2電子酸化
法であるが、4位f置換されていないフェノールは4電
子酸化法で有色化合物に変化されるという事実に起因し
ている〔例えば特開昭54−9821号参照〕。つまり
、酸化剤、例えばFe3+又は酵素的に形成されたH0
の測定時の感光性は、発色反応の際に4−ハロゲンフェ
ノールを使用すると倍加される。
4− AAP又はMBTHを用いる酸化的発色反応の際
、ハロゲンフェノールに対して、4位で塩素又は臭累で
置換されたアニリン誘導体は、発色反応を示さないか又
は僅かしか示さない(J。
、ハロゲンフェノールに対して、4位で塩素又は臭累で
置換されたアニリン誘導体は、発色反応を示さないか又
は僅かしか示さない(J。
Org、 Chem、 3 (1938’)、153頁
;アナリテイカル・ケミストリー(Analytica
l Chemistry)23(1961)、722頁
参照〕が、水素で置換されているがその点手は類似して
いる化合物は一般に、特に中性乃至弱酸性pH範囲で、
フェノールよりも高い吸光係数及びより−長い波長の最
大吸収幅を有する電床を供給する。また0位又はp位で
低級アルキル基によって置換されたN −1i換アニリ
ンを用いても、感光性及び呈色安定性の点で満足すべき
成果が得られなかつた(***国特許出願公告第2833
612号)。
;アナリテイカル・ケミストリー(Analytica
l Chemistry)23(1961)、722頁
参照〕が、水素で置換されているがその点手は類似して
いる化合物は一般に、特に中性乃至弱酸性pH範囲で、
フェノールよりも高い吸光係数及びより−長い波長の最
大吸収幅を有する電床を供給する。また0位又はp位で
低級アルキル基によって置換されたN −1i換アニリ
ンを用いても、感光性及び呈色安定性の点で満足すべき
成果が得られなかつた(***国特許出願公告第2833
612号)。
従って、例えば過酸化水素及びベルオキシダーぜ(PO
D )のような酸化剤の測定のために新規の鋭敏な発色
系を開発するという実験はなかった。酸化的発色反応の
場合、諸開発により、改善されたアニリン系カップリン
グ成分を生シ、この際感受性の増大は、大低、アニリン
窒素又はC−3一原子における置換分の変化によって得
られた〔例えば***国特許出願公開第3037342号
及び同第2833612号;ヨーロッパ特許出願公開第
00077 ’87号参照〕。
D )のような酸化剤の測定のために新規の鋭敏な発色
系を開発するという実験はなかった。酸化的発色反応の
場合、諸開発により、改善されたアニリン系カップリン
グ成分を生シ、この際感受性の増大は、大低、アニリン
窒素又はC−3一原子における置換分の変化によって得
られた〔例えば***国特許出願公開第3037342号
及び同第2833612号;ヨーロッパ特許出願公開第
00077 ’87号参照〕。
発明の解決しようとする問題点
本発明の課題は、酸化的発色反応の際に高い収量及び選
択性をもって、高い吸光度及び呈色安定性を有する色素
を生じ、かつそれ故に酸化的発色反応の際に鋭敏な発色
系を形成する新規なアニリン誘導体を提供することであ
る。
択性をもって、高い吸光度及び呈色安定性を有する色素
を生じ、かつそれ故に酸化的発色反応の際に鋭敏な発色
系を形成する新規なアニリン誘導体を提供することであ
る。
問題点を解決するための手段
前記課題は本発明により解決される。本発明の対象は、
酸化的発色反応におけるカップリング成分として、一般
式I: C式中81=H又1e (C)(2)、−X−C−6り
、コノ際n = 1〜3 F)整数、X=H,08%N
H3、CHCoNH%CHSo N)−1%C0OH%
5o3H又はArSO3H(Ar =場合により置換さ
れたアリーレン基であり、mは2〜4の整数ヤあり、好
ましくは3であり、R3”” H、炭素原子1〜3個を
有スルアルキル基、OCR3、CI(3CONH,Co
2H又ハSOHであり、かツR’ =H,Ct、 Br
、 C0OH又は5o3Hである〕で示されるアニリ
ン誘導体を使用する酸化的発色反応の実施法である。
酸化的発色反応におけるカップリング成分として、一般
式I: C式中81=H又1e (C)(2)、−X−C−6り
、コノ際n = 1〜3 F)整数、X=H,08%N
H3、CHCoNH%CHSo N)−1%C0OH%
5o3H又はArSO3H(Ar =場合により置換さ
れたアリーレン基であり、mは2〜4の整数ヤあり、好
ましくは3であり、R3”” H、炭素原子1〜3個を
有スルアルキル基、OCR3、CI(3CONH,Co
2H又ハSOHであり、かツR’ =H,Ct、 Br
、 C0OH又は5o3Hである〕で示されるアニリ
ン誘導体を使用する酸化的発色反応の実施法である。
Ar基は置換されているか又は好ましくは未1!であっ
てよくかつ例えば1,4−ナフチレy、4Hct、4−
フェニレンである。置換されたアリーレン基は1個以上
の置換分、好ましくは1又は2個の置換分、例えば炭素
原子1〜3個ヲ有スルアルキル基、0H1OCH3,5
03H及ヒ/又はハロゲン、特に塩素を有していてもよ
い。
てよくかつ例えば1,4−ナフチレy、4Hct、4−
フェニレンである。置換されたアリーレン基は1個以上
の置換分、好ましくは1又は2個の置換分、例えば炭素
原子1〜3個ヲ有スルアルキル基、0H1OCH3,5
03H及ヒ/又はハロゲン、特に塩素を有していてもよ
い。
R3を表わす炭素原子1〜3個を有するアルキル基は、
メチル基、エチル基、プロピル基又はイソプロピル基で
ある。
メチル基、エチル基、プロピル基又はイソプロピル基で
ある。
特に一般式■;
〔式中R及びRは式■に関して記載したものを表わ踵R
は特に(CH2)n−X(nは2又は3を表わし、X=
OH,N1−1 、 CH3GO+N1−1゜CH35
o21NH、C0OHである)及びR4は特にHである
〕で示されるアニリン誘導体が有利に使用される。
は特に(CH2)n−X(nは2又は3を表わし、X=
OH,N1−1 、 CH3GO+N1−1゜CH35
o21NH、C0OHである)及びR4は特にHである
〕で示されるアニリン誘導体が有利に使用される。
式Iで示されるアニリン誘導体と発色剤との酸化的発色
反応の際に生じる色素のスペクトルは、意外にも比較的
高い8値及び極めて広い最大吸光幅を示し;後者は極め
て特定された波長の依存性を減少することが判明した(
例えば第1図乃至第3図参照)。さらに本発明による式
■のアニリン誘導体は、相応の非環状N−アルキル−又
はN、N−−,7アルキル化合物と比べると、発色剤、
例えばメチルペンゾチアゾロンヒPラゾン(MBTH)
又はスルホン化メチレンペンゾチアゾロンヒPラゾン(
SIT/18TH)との酸化的発色反応の際に意外にも
また著しく良好な呈色安定性及びよシ小さい9値遅延(
Leerwert−schleich)を示し、これに
よってよシ高い選択性が得られる。
反応の際に生じる色素のスペクトルは、意外にも比較的
高い8値及び極めて広い最大吸光幅を示し;後者は極め
て特定された波長の依存性を減少することが判明した(
例えば第1図乃至第3図参照)。さらに本発明による式
■のアニリン誘導体は、相応の非環状N−アルキル−又
はN、N−−,7アルキル化合物と比べると、発色剤、
例えばメチルペンゾチアゾロンヒPラゾン(MBTH)
又はスルホン化メチレンペンゾチアゾロンヒPラゾン(
SIT/18TH)との酸化的発色反応の際に意外にも
また著しく良好な呈色安定性及びよシ小さい9値遅延(
Leerwert−schleich)を示し、これに
よってよシ高い選択性が得られる。
まだ極性基によって置換された一般式■の化合物は、部
分的には、特にアルキルスルホン酸基又はスルホン酸基
によって十分でさえある改善された水溶性も示す;しか
しまたあまシ溶解しない式■の化合物も、適当な常用の
洗浄剤を発色剤を含有する、H2O2/PODで酸化さ
れた発色系のλmaxで測定された吸光係数g (cr
l/p mo l H2O,)と、常用ノアニリン系カ
ップリング成分の代シに相応に置換された本発明のアニ
リン誘導体を含有する、その他の点では同じ発色系の吸
光係数とが比較されている。発色剤としてはスルホン化
メチルペンゾチアゾロンヒPラゾン(SMBTH)を使
用した。
分的には、特にアルキルスルホン酸基又はスルホン酸基
によって十分でさえある改善された水溶性も示す;しか
しまたあまシ溶解しない式■の化合物も、適当な常用の
洗浄剤を発色剤を含有する、H2O2/PODで酸化さ
れた発色系のλmaxで測定された吸光係数g (cr
l/p mo l H2O,)と、常用ノアニリン系カ
ップリング成分の代シに相応に置換された本発明のアニ
リン誘導体を含有する、その他の点では同じ発色系の吸
光係数とが比較されている。発色剤としてはスルホン化
メチルペンゾチアゾロンヒPラゾン(SMBTH)を使
用した。
発色反応は自体公知のようにして行われる(例えば***
国特許出願公告第2833612号明細書)。好壕しく
は室温で作業されるが、カップリング成分/発色剤の濃
度割合〉5が極めて有利であることが判明した。pH値
は好ましくは中性範囲にある。次の値(反応混合物中の
各濃度)が表1の基礎になっている: 燐酸カリウム緩衝液 pH7,0: 0.1 mo
l/lアニリンカップリング成分:3・10 mol
/A発色剤(SMBTH) :3−10 m
of/を過酸化水素 ・ 1.5−10 mm
ol/zペルオキシダーゼ : 1.2 U/fnt
表 1 1) N−(2−アセトアミPエチル)−N−エチル
−3−、メチル−アニリン 2) N−エチル−N−(2−ヒPロキシエチル)−
3−メチル−アニリン 3) N−エチル−IN −(3メーチルフエニル)
−2−アミノエタン−スルホン酸 表1から判るように、本発明によシ使用されるアニリン
誘導体を用いるとその他の点では同じ条件下で著しく高
い吸光係数(1,3〜1.8倍)が得られる:従って本
発明による化合物を用いると、常用の発色剤と一緒に使
用することによシ酸化的発色反応用の極めて鋭敏な発色
系を与えるカップリング成分が提供される。一般式■で
示される化合物は特にH2O2及びPODの測定のため
に使用される。
国特許出願公告第2833612号明細書)。好壕しく
は室温で作業されるが、カップリング成分/発色剤の濃
度割合〉5が極めて有利であることが判明した。pH値
は好ましくは中性範囲にある。次の値(反応混合物中の
各濃度)が表1の基礎になっている: 燐酸カリウム緩衝液 pH7,0: 0.1 mo
l/lアニリンカップリング成分:3・10 mol
/A発色剤(SMBTH) :3−10 m
of/を過酸化水素 ・ 1.5−10 mm
ol/zペルオキシダーゼ : 1.2 U/fnt
表 1 1) N−(2−アセトアミPエチル)−N−エチル
−3−、メチル−アニリン 2) N−エチル−N−(2−ヒPロキシエチル)−
3−メチル−アニリン 3) N−エチル−IN −(3メーチルフエニル)
−2−アミノエタン−スルホン酸 表1から判るように、本発明によシ使用されるアニリン
誘導体を用いるとその他の点では同じ条件下で著しく高
い吸光係数(1,3〜1.8倍)が得られる:従って本
発明による化合物を用いると、常用の発色剤と一緒に使
用することによシ酸化的発色反応用の極めて鋭敏な発色
系を与えるカップリング成分が提供される。一般式■で
示される化合物は特にH2O2及びPODの測定のため
に使用される。
本発明の対象はまた、酸化的発色反応による成分として
式I又は好ましくは式■で示される化合物を含有するこ
とである。
式I又は好ましくは式■で示される化合物を含有するこ
とである。
発色剤としては、このような発色反応に関して慣用の発
色剤、例えばスルホン化メチルペンゾチアゾロンヒPラ
ゾン(SMI=37H)が使用されうる。
色剤、例えばスルホン化メチルペンゾチアゾロンヒPラ
ゾン(SMI=37H)が使用されうる。
酸化的発色反応の際に本発明により使用されるカップリ
ング成分及び発色剤から得られる色素は、相応の白色色
素に容易に還元され、このものはさらに再酸化されうる
ので、酸化性物質、例えば体液中のH2O2の検出のた
めにも同様に使用することができる。
ング成分及び発色剤から得られる色素は、相応の白色色
素に容易に還元され、このものはさらに再酸化されうる
ので、酸化性物質、例えば体液中のH2O2の検出のた
めにも同様に使用することができる。
<Iで示される化合物は、公知であるか又は自体公知の
合成法により、例えば式■のアニリン誘導体(式中R1
=H)を、式:CL−(鑓、)。−X(式中X及びnは
前記のものを表わす)で示される化合物でアルキル化す
ることによって製造することができる〔例えばフーペン
ーノ々イル(Houben−Weyl )、メトーデン
・デルΦオルサニツシエン・ヒエミー(Methode
n der Orga−nischen Chemie
)、巻11/1、第2及び3章;巻2/2.251頁
参照〕。
合成法により、例えば式■のアニリン誘導体(式中R1
=H)を、式:CL−(鑓、)。−X(式中X及びnは
前記のものを表わす)で示される化合物でアルキル化す
ることによって製造することができる〔例えばフーペン
ーノ々イル(Houben−Weyl )、メトーデン
・デルΦオルサニツシエン・ヒエミー(Methode
n der Orga−nischen Chemie
)、巻11/1、第2及び3章;巻2/2.251頁
参照〕。
出発物質として使用されるR =)−1である式■のア
ニリン誘導体は、例えば相応のキノリン誘導体の接触水
素化によって製造することができる〔ツーペン−パイル
、巻4/IC,271頁〕。
ニリン誘導体は、例えば相応のキノリン誘導体の接触水
素化によって製造することができる〔ツーペン−パイル
、巻4/IC,271頁〕。
分と発色剖としてのスルホン化メチルベンゾチアゾロン
ヒドラゾン(SMBT?−1)とから成る発色系のスペ
クトルを示す。反応混合物中の濃度はで得られる′スペ
クトルを表わし、図中吸光度Eは波長λ(nm)に対し
てプロットしである:A:式■、R1=CH2CH20
H,R’=HB : EHT C:式■、R1= CH2CH2CH25o3H、R’
= HD : EST ′E:式■、R1−CH2CH2NHCOCH3、R’
=HF : E+1/lAE スペクトルの比較により、本発明により使用よるスペク
トルと比較して特に著しく高いε値及びよシ広い最大吸
光幅を有することが判る。
ヒドラゾン(SMBT?−1)とから成る発色系のスペ
クトルを示す。反応混合物中の濃度はで得られる′スペ
クトルを表わし、図中吸光度Eは波長λ(nm)に対し
てプロットしである:A:式■、R1=CH2CH20
H,R’=HB : EHT C:式■、R1= CH2CH2CH25o3H、R’
= HD : EST ′E:式■、R1−CH2CH2NHCOCH3、R’
=HF : E+1/lAE スペクトルの比較により、本発明により使用よるスペク
トルと比較して特に著しく高いε値及びよシ広い最大吸
光幅を有することが判る。
実施例
例 1
1.2,3.4−テトラヒドロキノリン13.3f(o
、tmo+)及び2−クロルエタノール16.1? (
0,2mof )を、120℃に4時間加熱する。
、tmo+)及び2−クロルエタノール16.1? (
0,2mof )を、120℃に4時間加熱する。
冷却後に反応混合物に水200 mlを加えかつ2N苛
性ソーダ溶液でアルカリ性にする。次にクロロホルムを
用いて抽出を施し、有機相を硫酸ナトリウムを介して乾
燥しかつ回転蒸発器で蒸発する。残留物をAゲルによる
カラムクロマトグラフィーにより(キジロール/メチル
エチルケトン=]/1を用いて溶離)精製する。
性ソーダ溶液でアルカリ性にする。次にクロロホルムを
用いて抽出を施し、有機相を硫酸ナトリウムを介して乾
燥しかつ回転蒸発器で蒸発する。残留物をAゲルによる
カラムクロマトグラフィーにより(キジロール/メチル
エチルケトン=]/1を用いて溶離)精製する。
収量す:10.5F=理論値の59係
質量スペクトル:M+=177゜
同様にして1,2,3.4−テトラヒPロキノリンと2
−アセトアミド−プロピルクロリドとの反応によってN
−(2−アセトアミドプロピル)−1,2,3,4−テ
トラヒドロキノリンが得られる。
−アセトアミド−プロピルクロリドとの反応によってN
−(2−アセトアミドプロピル)−1,2,3,4−テ
トラヒドロキノリンが得られる。
例 2
500−フラスコ中で1. 2. 3. 4−テトラヒ
Pロキノリン5B、4fに溶融した1、3−プロノぐン
スルホン48.4fを、60〜80℃で50分以内に滴
加した。反応混合物を約70℃で3.45時間放置し、
次に還流下にメタノール470−を少しずつ加え、固体
のガラス状液底体が完全溶解するまで還流下に引続き攪
拌した。次いで攪拌下に室温に冷却すると、急速な結晶
化が起こる。冷却器での約12時間の放置後に結晶を濾
取した。
Pロキノリン5B、4fに溶融した1、3−プロノぐン
スルホン48.4fを、60〜80℃で50分以内に滴
加した。反応混合物を約70℃で3.45時間放置し、
次に還流下にメタノール470−を少しずつ加え、固体
のガラス状液底体が完全溶解するまで還流下に引続き攪
拌した。次いで攪拌下に室温に冷却すると、急速な結晶
化が起こる。冷却器での約12時間の放置後に結晶を濾
取した。
収址:約5021融点:233〜237℃例 3
化:
氷酢酸6〇−中の1. 2. 3. 4−テトラヒドロ
キノリン13.3fの溶液に、氷酢酸7〇−中(で溶し
た臭素16fを、10〜15℃で(氷水を用いて冷却)
激しい攪拌下に50分以内に滴加した。形成された結晶
スラッジを氷酢酸3×30fntで希釈し、さらに10
〜15分攪拌し、飽和酢酸ナトリウム溶液200mA及
び次いでエーテル3001n1.を加えた。水で2tに
希釈した後エーテル相を分離し、水で2回洗浄し、Na
25o、を用いて乾燥しかつ30℃で真空蒸発した。褐
色油状の残留物19.3fが得られた。
キノリン13.3fの溶液に、氷酢酸7〇−中(で溶し
た臭素16fを、10〜15℃で(氷水を用いて冷却)
激しい攪拌下に50分以内に滴加した。形成された結晶
スラッジを氷酢酸3×30fntで希釈し、さらに10
〜15分攪拌し、飽和酢酸ナトリウム溶液200mA及
び次いでエーテル3001n1.を加えた。水で2tに
希釈した後エーテル相を分離し、水で2回洗浄し、Na
25o、を用いて乾燥しかつ30℃で真空蒸発した。褐
色油状の残留物19.3fが得られた。
残留物にカラムクロマトグラフィーを施した(珪酸ゲル
;ジイソプロピルエーテル/クロロホルム/氷酢酸)。
;ジイソプロピルエーテル/クロロホルム/氷酢酸)。
最初の物質含有画分(画分1〜8、各15tnt)から
5,6−ジブロム−1゜2.3.4−テトラヒドロキノ
リン6.23Fが得られ、最後の両分(16〜28、各
15−)からは6−ブロム−1,2,3,4−テトラヒ
ドロキノリン(融点:30〜34℃)3.75rが得ら
れた。
5,6−ジブロム−1゜2.3.4−テトラヒドロキノ
リン6.23Fが得られ、最後の両分(16〜28、各
15−)からは6−ブロム−1,2,3,4−テトラヒ
ドロキノリン(融点:30〜34℃)3.75rが得ら
れた。
キノリン−N−プロノぐンスルホン酸
a)により得られた6−ブロム−1,2,3,4−テト
ラヒドロキノリン4.21を、アセトン2〇−中に溶か
しかつ攪拌下にアセトン20fnt中に溶カした溶融1
.3−プロパンスルホン2.442を50℃で30分以
内に滴加した。24時間の還流煮沸後にもう一度、アセ
トン20tnt中に溶カシた溶融プロパンスルホン2.
444を前記と同じ条件下で滴加した。48時間の速流
煮沸後に反応混合物にカラムクロマトグラフィーを施し
た(SiO;溶離剤CHC4/メタノール−1/1、画
分25ゴ)。両分6〜10を35℃で真空蒸発し、得ら
れた赤喝色残留物(1,8r)をメタノール約20−と
−緒に攪拌し、砂色の結晶1.0!M’が得られた。融
点=217℃(分解)。
ラヒドロキノリン4.21を、アセトン2〇−中に溶か
しかつ攪拌下にアセトン20fnt中に溶カした溶融1
.3−プロパンスルホン2.442を50℃で30分以
内に滴加した。24時間の還流煮沸後にもう一度、アセ
トン20tnt中に溶カシた溶融プロパンスルホン2.
444を前記と同じ条件下で滴加した。48時間の速流
煮沸後に反応混合物にカラムクロマトグラフィーを施し
た(SiO;溶離剤CHC4/メタノール−1/1、画
分25ゴ)。両分6〜10を35℃で真空蒸発し、得ら
れた赤喝色残留物(1,8r)をメタノール約20−と
−緒に攪拌し、砂色の結晶1.0!M’が得られた。融
点=217℃(分解)。
同様にしてa)によシ得られだ5,6−ジプロムー1.
2,3.4−テトラヒドロキノリンからは、5,6−ジ
プロムー1.2,3.4−テトラヒドロキノリン−N−
プロパンスルホン酸が得れる。
2,3.4−テトラヒドロキノリンからは、5,6−ジ
プロムー1.2,3.4−テトラヒドロキノリン−N−
プロパンスルホン酸が得れる。
例 4
メタノール(無水)200−中の1.2,3゜4−テト
ラヒrロキノリ713.3 y (o、tmol )及
びアセチルアジリジy9.4 f (0,11mol
)を、夜通し還流煮沸する。回転蒸発器での蒸発後に得
られる、未反応出発物質と反応生成物とから成る混合物
(13F)を珪酸ゲルによるカラムクロマトグラフィー
(展開剤:クロロホルム/アセトン−4:1)によって
精製する。融点:102℃。
ラヒrロキノリ713.3 y (o、tmol )及
びアセチルアジリジy9.4 f (0,11mol
)を、夜通し還流煮沸する。回転蒸発器での蒸発後に得
られる、未反応出発物質と反応生成物とから成る混合物
(13F)を珪酸ゲルによるカラムクロマトグラフィー
(展開剤:クロロホルム/アセトン−4:1)によって
精製する。融点:102℃。
例 5
無水エタノール100ゴ中の7−メチル−1,2,3,
4−テトラヒドロキノリン4t(27mmo+)及びN
−7セチ#7ジリジ72.5t(30mmol’)を、
1時間還流下に煮沸し、次いで真空蒸発する。反応生成
物を、珪酸ゲルによるカラムクロマトグラフィー(展開
剤クロロホルム/アセトン=471 )及びジイソプロ
ピルエーテルカラの再結晶化によって精製する。収量:
1.3ri融点:99℃。
4−テトラヒドロキノリン4t(27mmo+)及びN
−7セチ#7ジリジ72.5t(30mmol’)を、
1時間還流下に煮沸し、次いで真空蒸発する。反応生成
物を、珪酸ゲルによるカラムクロマトグラフィー(展開
剤クロロホルム/アセトン=471 )及びジイソプロ
ピルエーテルカラの再結晶化によって精製する。収量:
1.3ri融点:99℃。
第1図、第2図及び第3図は、本発明により使用される
化合物を用いて得られるスペクトル(点線)及び類似の
常用アニリン系カップリング成分を用いて得られるスペ
クトル(笑線)の吸収曲線を示すグラフである。 FIG、1 FIG、3
化合物を用いて得られるスペクトル(点線)及び類似の
常用アニリン系カップリング成分を用いて得られるスペ
クトル(笑線)の吸収曲線を示すグラフである。 FIG、1 FIG、3
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1、酸化的発色反応におけるカップリング成分として、
一般式 I : ( I ) 〔式中R^1=H又は(CH_2)_n−X、この際n
=1〜3の整数、X=H、OH、NH_2、 CH_3CONH、CH_3SO_2NH、COOH、
SO_3H又はArSO_3H(Ar=場合により置換
されたアリーレン基)、m=2〜4の整数、R^3=H
、炭素原子1〜3個を有するアルキル基、OCH_3C
H_3CONH、CO_2H又はSO_3H、R^4=
H、Cl、Br、COOH又はSO_3H〕で示される
アニリン誘導体を使用することを特徴とする酸化的発色
反応の実施方法。 2、一般式II: (II) 〔式中R^1=(CH_2)_n−X(n=2又は3、
X=OH)NH_2、CH_3CONH、CH_3SO
_2NH、COOH又はSO_3H)、R^4=H、C
l、Br、COOH又はSO_3H〕で示されるアニリ
ン誘導体を使用する特許請求の範囲第1項記載の方法。 3、式IIにおいてR^1が(CH_2)_n−X(n=
2又は3、X=OH、NH_2、CH_3CONH、C
H_3SO_2NH、COOH又はSO_3H)を表わ
しかつR^4=Hである式IIのアニリン誘導体を使用す
る特許請求の範囲第2項記載の方法。 4、過酸化水素及びPODを測定するための特許請求の
範囲第1項から第3項までのいずれか1項記載の方法。 5、酸化的発色反応によって酸化性物質を分析的に測定
するための器具において、該器具がカップリング 成分として一般式 I : ( I ) 〔式中R^1=H又は(CH_2)_n−X、この際n
=1〜3の整数、X=H、OH、NH_2、CH_3C
ONH、CH_3SO_2NH、COOH、SO_3H
又はArSO_3H(Ar=場合により置換されたアリ
ーレン基)、m=2〜4の整数、R^3=HN炭素原子
1〜3個を有するアルキル基、OCH_3、CH_3C
ONH、CO_2、H又はSO_3H、R^4=H、C
l、Br、COOH又はSO_3H〕又は一般式II: (II) 〔式中R^1=(CH_2)_n−X(n=2又は3、
X=OH、NH_2、CH_3CONH、CH_3SO
_2、NH、COOH又はSO_3H)、R^4=H、
Cl、Br、COOH又はSO_3H〕で示されるアニ
リン誘導体を含有することを特徴とする前記器具。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE19843425219 DE3425219A1 (de) | 1984-07-09 | 1984-07-09 | Verwendung von anilinderivaten als kupplungskomponente in oxidativen farbbildungsreaktionen |
DE3425219.3 | 1984-07-09 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS6135358A true JPS6135358A (ja) | 1986-02-19 |
JPH0518062B2 JPH0518062B2 (ja) | 1993-03-10 |
Family
ID=6240179
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP14941085A Granted JPS6135358A (ja) | 1984-07-09 | 1985-07-09 | 過酸化性作用物質の測定方法 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4845030A (ja) |
EP (1) | EP0168035B1 (ja) |
JP (1) | JPS6135358A (ja) |
AT (1) | ATE68212T1 (ja) |
DE (2) | DE3425219A1 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS61138163A (ja) * | 1984-12-06 | 1986-06-25 | イーストマン コダツク カンパニー | 発色性カップラー及び過酸化水素又は他の被分析物の測定へのその使用 |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3790229D2 (en) * | 1986-04-28 | 1988-08-25 | Boehringer Mannheim Gmbh | Process and reagent for detecting heart lesions or diseases |
US5532138A (en) * | 1990-04-26 | 1996-07-02 | Behringwerke Ag | Method and kits for determining peroxidatively active catalysts |
US6015683A (en) * | 1992-07-15 | 2000-01-18 | Clinical Diagnostic Systems, Inc. | Dry analytical element for acetaminophen assay |
US8361802B2 (en) * | 2009-03-09 | 2013-01-29 | University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education | Fluorescent ozone sensor |
CN102686635B (zh) * | 2009-05-01 | 2014-10-22 | 汉高公司 | 用于厌氧可固化组合物的固化促进剂 |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
NL126365C (ja) * | 1963-06-24 | |||
IT986838B (it) * | 1972-05-12 | 1975-01-30 | Sclavo Inst Sieroterapeut | Complesso di reagenti per la deter minazione enzimatica del glucosio sistema glucosio ossidasi perossi dasi con metodo manuale e automati co con lettura a termine o in cinetica |
US3986833A (en) * | 1975-09-08 | 1976-10-19 | Miles Laboratories, Inc. | Test composition, device, and method for the detection of peroxidatively active substances |
DE3037342A1 (de) * | 1980-01-09 | 1981-07-16 | Dojindo Laboratories, Kumamotoshi | N-sulfoalkylanilinderivate und ihre verwendung |
DE3125667C2 (de) * | 1981-06-30 | 1986-01-23 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren und Mittel zum Nachweis von Wasserstoffperoxid |
DE3413693A1 (de) * | 1984-04-11 | 1985-10-17 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Fluorierte anilinderivate und ihre verwendung |
JPH05340585A (ja) * | 1992-06-11 | 1993-12-21 | Matsushita Seiko Co Ltd | レンジフード |
-
1984
- 1984-07-09 DE DE19843425219 patent/DE3425219A1/de not_active Withdrawn
-
1985
- 1985-07-09 AT AT85108525T patent/ATE68212T1/de not_active IP Right Cessation
- 1985-07-09 DE DE8585108525T patent/DE3584323D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1985-07-09 JP JP14941085A patent/JPS6135358A/ja active Granted
- 1985-07-09 EP EP85108525A patent/EP0168035B1/de not_active Expired - Lifetime
-
1987
- 1987-11-20 US US07/122,600 patent/US4845030A/en not_active Expired - Lifetime
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS61138163A (ja) * | 1984-12-06 | 1986-06-25 | イーストマン コダツク カンパニー | 発色性カップラー及び過酸化水素又は他の被分析物の測定へのその使用 |
JPH0525071B2 (ja) * | 1984-12-06 | 1993-04-09 | Eastman Kodak Co |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE3584323D1 (de) | 1991-11-14 |
DE3425219A1 (de) | 1986-02-06 |
EP0168035A3 (en) | 1988-12-21 |
ATE68212T1 (de) | 1991-10-15 |
EP0168035A2 (de) | 1986-01-15 |
US4845030A (en) | 1989-07-04 |
EP0168035B1 (de) | 1991-10-09 |
JPH0518062B2 (ja) | 1993-03-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4394512A (en) | 1-(Substituted phenyl) aminoantipyrin compounds | |
US5445943A (en) | Method for the colorimetric determination of an analyte by means of benzyl alcohol dehydrogenase and a chromogenic redox indicator | |
JPS6154786B2 (ja) | ||
JP2003513025A (ja) | 8−(アリニノ)−1−ナフタレンスルホネート類似物およびそれらを分析物検出検定で用いる使用 | |
EP0159870B1 (en) | Method for the determination of mercapto compounds and reagent for use therein | |
JPH0764986B2 (ja) | 新規な発色試薬 | |
US4396714A (en) | N-Sulfoalkylaniline derivatives | |
JPS6135358A (ja) | 過酸化性作用物質の測定方法 | |
EP0153872B1 (en) | Method for the determination of the reduced form of nicotinamide adenine dinucleotide | |
JP2701090B2 (ja) | 被酸化性呈色試薬 | |
JP2722874B2 (ja) | 新規N−アセチル−β−D−グルコサミン誘導体及びこれを基質に用いたN−アセチル−β−D−グルコサミニダーゼ活性測定法 | |
US4822891A (en) | 4-amino-2,3-di-substituted-1-(mono- or trichlorophenyl)-3-pyrazolin-5-ones | |
EP0553427A1 (en) | Water-soluble methylenebis(dialkylaniline) derivatives and application thereof | |
US4912258A (en) | Fluorinated aniline derivatives and their use | |
JPH05229993A (ja) | トリフェニルメタン誘導体 | |
EP0233342B1 (en) | 1,3-dioxol-2-one derivatives, process for production thereof, and use thereof as substrate for measurement of arylesterase activity | |
JP4180243B2 (ja) | 酸化発色試薬 | |
CS223896B2 (en) | Method of making the alpha-benzamide-alpha-halogene-1,1-dianthrimide | |
JPS60248674A (ja) | 新規アミノアンチピリン化合物 | |
JPH0699403B2 (ja) | アミノアンチピリン誘導体及びその使用法 | |
JPH05262716A (ja) | 被酸化性呈色試薬 | |
JPH0662871B2 (ja) | 新規なイミダゾール誘導体 | |
JPH0745477B2 (ja) | イミダゾ−ル誘導体及びこれを発色成分として用いる測定法 | |
JPS6165850A (ja) | ベタイン類誘導体及びその製造方法並びにコリンエステラ−ゼ基質 | |
JPH0625146B2 (ja) | 新規イミダゾ−ル誘導体及びこれを発色成分として用いる測定法 |