JPS6126558B2 - - Google Patents
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Description
本発明は、酵素活性測定用のけい光性基質また
はその合成中間体として有用な新規7−グリシル
プロリルミノ−4−メチルクマリンに関する。 本発明者は、簡便で高感度の測定が可能な酵素
の新しい基質を得るために鋭意研究を重ねた結
果、構造式 で示される7−グリシルプロリルアミノ−4−メ
チルクマリン(分子を構成するグリシンのd−ア
ミノ基が保護されているものをも含む)の合成に
成功し、さらにこの新規化合物が、簡便で高感度
の測定が可能な、酵素例えばすでに本発明者が見
出しているX−プロリルジペプチジルアミノペプ
チダーゼ即ちX−L−プロリンP−ニトロアニリ
ド(Xは中性、酸性或いは塩基性アミノ酸)に作
用しN−末端X−L−プロリン及びP−ニトロア
ニリンに分解遊離せしめる酵素のけい光性基質お
よび/またその合成中間体となることを見出し本
発明を完成するに至つた。 本発明の化合物は塩酸、硫酸等の鉱酸あるいは
酢酸、P−トルエンスルホン酸等の有機酸の酸付
加塩の形であつてもよい。 このような酸付加塩から遊離形のものを得るに
は、酸付加塩をアルカリで中和すればよい。 本発明の7−グリシルプロリルアミノ−4−メ
チルクマリンは、それを構成するグリシンのアミ
ノ基が保護されているものをも含む。 アミノ基の保護基としては、カルボベンゾキシ
基、t−ブチルオキシカルボニル基、t−アミル
オキシカルボニル基、トリチル基、P−ニトロカ
ルボベンゾキシ基、ホルミル基、トリフルオルア
セチル基、フタロイル基等ペプチドの合成に慣用
されているアミノ基の保護基やベンゾイル基、ア
セチル基、トシル基の保護基をあげることができ
る。なお、上記保護基による保護方法あるいは保
護されたものの保護基の脱離方法は、例えばそれ
ぞれペプチド合成の際にアミノ基の保護方法ある
いは脱離方法として慣用されている手段を適宜選
択利用して行うことができる。 本発明の目的化合物は例えばN−保護−グリシ
ルプロリンと7−アミノ−4−メチルクマリン
(MCA)を反応せしめることにより製造すること
ができる。この場合N−保護の保護基としてはも
ちろん上述したものが採用できる。反応において
はトリメチルアミン、トリエチルアミン等トリア
ルキルアミン、ピリジン等の有機塩基の存在下ジ
シクロヘキシルカルボジイミド(DCCD)、N−
エチル−N′−3−ジメテルアミノプロピル−カ
ルボジイミド(WSCI)、クロル蟻酸イソブチル
等のクロル蟻酸エステル等で縮合させるとよい。
この縮合反応はジメチルホルムアミド(DMF)
クロロホルム、ジクロルメタン、エチル酢酸エス
テルやジオキサン、テトラヒドロフラン
(THF)等の不活性溶媒を用いることもできる。 このようにして得られた縮合物から、そのアミ
ノ基の保護基を脱離するには、脱離方法として上
記慣用手段を適宜選択利用すればよい。例えば、
接触的水素化方法を利用すればよい。 また分子を構成するプロリンがL−体又はD−
体のいずれか一方のものである目的化合物を製造
するには、目的化合物の製造反応に用いる出発原
料のグリシルプロリンに目的とする光学活性体を
採用してもよいし、目的化合物のDL−体を製造
してこれを常法の光学分割に付してもよい。 試料溶液と7−グリシル−L−プロリルアミノ
−4−メチルクマリンを接触せしめ、次いで7−
アミノ−4−メチルクマリンを定量することによ
り試料溶液中の酵素X−プロリルジペプチジルア
ミノペプチダーゼ活性を測定することができる。
7−グリシル−L−プロリルアミノ−4−メチル
クマリンは試料溶液中にX−プロリルジペプチジ
ルアミノペプチダーゼが存在すればその量に比例
してグリシル−L−プロリンと7−アミノ−4−
メチルクマリンに分解遊離する。ここでEx380n
m、Em460nmのけい光下でその7−アミノ−4
−メチルクマリンのけい光強度を測定することに
より高感度の酵素活性を測定できる。すなわち、
7−アミノ−4−メチルクマリンは分解遊離前の
7−グリシル−L−プロリルアミノ−4−メチル
クマリンの30倍という相対けい光強度を示すこと
を見出したことにより上記測定を可能とした。 本発明者は体内に特に体液例えば血清、唾液に
7−グリシル−L−プロリルアミノ−4−メチル
クマリンに作用してグリシル−L−プロリンと7
−アミノ−4−メチルクマリンに分解するジペプ
チジルアミノペプチダーゼの一種である酵素、X
−プロリルジペプチジルアミノペプチダーゼが存
在することを見出し、さらに体液中、特に血清中
の当該酵素活性を前記7−グリシル−L−プロリ
ルアミノ−4−メチルクマリンを基質として正常
人並びに各種疾患に罹つている患者につき測定し
たところ、正常人であれば男女間に、特に若年層
の男女間に若干有意な差は認められるがほぼ一定
であるにもかかわらず、肝臓並びに隣接臓器の疾
患例えば急性及び慢性肝炎、肝硬変或いは胆管ガ
ンにあつては当該酵素活性が増加していること、
さらに驚くべきことに癌例えば胃癌、膵癌にあつ
ては活性が低下していることを見出し、本酵素活
性を測定することは疾患診断時に癌診断に大変役
立つことを認めた。殊に、従来よい診断方法のな
い、胃癌の肝転移の診断に極めて有力な方法であ
る。 さらに、7−グリシル−L−プロリルアミノ−
4−メチルクマリンは本酵素活性測定用基質とし
て発癌性等の問題を惹起することのない安全な物
質であり、また基質として不可欠な各種条件即ち
酵素作用を受けた基質量の測定の容易さ、安定
性、酵素量及び接触反応時間に対する直線性等を
全て満足するものであることを確認し、医学上重
要な意義を有する本酵素活性測定法を確立した。 基質としての7−グリシル−L−プロリルアミ
ノ−4−メチルクマリンは遊離体として使用され
るのみならず、酵素反応を阻害しない酸との付加
塩、例えばP−トルエンスルホン酸、塩酸、臭化
水素酸との塩の形で測定系に導入することもでき
る。 酵素活性の測定方法は格別に困難なく行うこと
ができる。例えば、まず初めに基質溶液を調製す
るのであるが、先述の如く7−グリシル−L−プ
ロリルアミノ−4−メチルクマリンの適当な濃度
の溶液を調製する。基質の水溶解性が低い場合に
は界面活性剤等の溶解促進物質を用いるのが有利
である。基質溶液のPHは使用する基質の種類によ
り異るが、本酵素による加水分解速度並びに基質
の酵素以外の要因による分解(即ち基質安定性)
等を考慮し、実験的に容易に最適値を求めること
ができる。通常PHは中性付近より詳しくは6〜9
付近が選択される。 測定は前記基質溶液と試料溶液を混合せしめ、
30〜45℃にて基質量及び試料溶液中のグリシルプ
ロピルジペプチジルアミノペプチダーゼの量に応
じ適当時間反応させた後、酵素活性を常法により
失活せしめ遊離7−アミノ−4−メチルクマリン
を上述の如く定量することにより本酵素活性を高
感度に知ることができる。 以下、実施例により本発明を詳細に説明する。 実施例 N−カルボベンゾキシグリシル−L−プロリン
1.53g(5ミリモル)およびトリエチルアミン
0.7ml(5ミリモル)のTHF溶液30mlに−5〜−
10℃冷却下クロル蟻酸イソブチル585mg(5ミリ
モル)を加え10分間かきまぜた後これに7−アミ
ノ−4−メチルクマリン875mg(5ミリモル)の
DMF溶液20mlを加え同温度で30分次いで室温で
4時間かきまぜた。 反応混合物より溶媒を減圧下留去し残渣に酢酸
エチル75mlを加え1規定塩酸、水、5%重炭酸ナ
トリウム水溶液、水の順で洗浄した後、酢酸エチ
ル層を無水芒硝で乾燥した。酢酸エチルを減圧留
去後得られた粗生成物をシリカゲル(50gのカラ
ムクロマトグラフイー(溶出溶媒、ベンゼン:酢
酸エチル=1:2、酢酸エチルのみ)で精製し、
次に酢酸エチル(10ml)−n−ヘキサン(30ml)
で再沈し、7−(N−カルボベンゾキシグリシル
−L−プロリル)アミノ−4−メチルクマリン
1.4g(収率60%)を得た。 融点:107.5〜113.5℃〔α〕18 D−116.1゜(C=
1、DMF) この結晶は薄層クロマトグラフイー(クロロホ
ルム:メタノール:酢酸=95:5:3)で単一ス
ポツト(Rf=0.65)を与えた。 元素分析 測定値 C 62.49%、H 5.81%、N 8.96% C25H25N3O6・H2Oとしての計算値 C 62.36%、H 5.65%、N 8.73% 7−(N−カルボベンゾキシグリシル−L−プ
ロリル)アミノ−4−メチルクマリン464mg(1
ミリモル)を80%酢酸10mlとメタノール50mlに溶
解し、これに10%Pd−C50mgを加え4時間水素ガ
スを通じて接触還元を行い7−グリシル−L−プ
ロリルアミノ−4−メチルクマリンを生成せしめ
た。 反応混合物より触媒を別後液にP−トルエ
ンスルホン酸の1水和物190mg(1ミリモル)加
えてそのまま凍結乾燥した。残渣に水50mlを加え
さらに凍結乾燥して得た白色粉末465mgをエタノ
ール(10ml)−エーテル(50ml)で再沈を行い、
7−グリシル−L−プロリルアミノ−4−メチル
クマリンのP−トルエンスルホン酸塩400mg(7
−(N−カルボベンゾキシグリシル−L−プロリ
ル)アミノ−4−メチルクマリンよりの収率:
77.4%)を得た。融点:182.0〜188.5℃。 〔α〕20 D=−111.0゜(C=1、酢酸) この結晶は次に示す如く薄層クロマトグラフイ
ーで単一スポツトを与えた。 n−ブタノール:酢酸:水:=4:1:5
Rf=0.4 n−ブタノール:ピリジン:酢酸:水=15:
10:3:12 Rf=0.7 元素分析 測定値 C 54.08%、H 5.44%、N 7.58% C24H27O7N3S・3/2H2Oとしての計算値 C 54.53%、H 5.72%、N 7.95% 7−グリシル−L−プロリルアミノ−4−メチ
ルクマリンP−トルエンスルホン酸塩(GIy−
Pro−MCA Tosylate)を水に2ミリモル濃度と
なるように溶解し基質溶液とした。ヒト顎下腺よ
り均一に精製したX−プロリルジペプチジルアミ
ノペプチダーゼを酵素液として用いて次の表に示
す操作を順次行い、次いで同様の操作をインキユ
ベート時間を変化させて行つた。けい光分析によ
り反応時間と生成した7−アミノ−4−メチルク
マリン量と関係を求めた。
はその合成中間体として有用な新規7−グリシル
プロリルミノ−4−メチルクマリンに関する。 本発明者は、簡便で高感度の測定が可能な酵素
の新しい基質を得るために鋭意研究を重ねた結
果、構造式 で示される7−グリシルプロリルアミノ−4−メ
チルクマリン(分子を構成するグリシンのd−ア
ミノ基が保護されているものをも含む)の合成に
成功し、さらにこの新規化合物が、簡便で高感度
の測定が可能な、酵素例えばすでに本発明者が見
出しているX−プロリルジペプチジルアミノペプ
チダーゼ即ちX−L−プロリンP−ニトロアニリ
ド(Xは中性、酸性或いは塩基性アミノ酸)に作
用しN−末端X−L−プロリン及びP−ニトロア
ニリンに分解遊離せしめる酵素のけい光性基質お
よび/またその合成中間体となることを見出し本
発明を完成するに至つた。 本発明の化合物は塩酸、硫酸等の鉱酸あるいは
酢酸、P−トルエンスルホン酸等の有機酸の酸付
加塩の形であつてもよい。 このような酸付加塩から遊離形のものを得るに
は、酸付加塩をアルカリで中和すればよい。 本発明の7−グリシルプロリルアミノ−4−メ
チルクマリンは、それを構成するグリシンのアミ
ノ基が保護されているものをも含む。 アミノ基の保護基としては、カルボベンゾキシ
基、t−ブチルオキシカルボニル基、t−アミル
オキシカルボニル基、トリチル基、P−ニトロカ
ルボベンゾキシ基、ホルミル基、トリフルオルア
セチル基、フタロイル基等ペプチドの合成に慣用
されているアミノ基の保護基やベンゾイル基、ア
セチル基、トシル基の保護基をあげることができ
る。なお、上記保護基による保護方法あるいは保
護されたものの保護基の脱離方法は、例えばそれ
ぞれペプチド合成の際にアミノ基の保護方法ある
いは脱離方法として慣用されている手段を適宜選
択利用して行うことができる。 本発明の目的化合物は例えばN−保護−グリシ
ルプロリンと7−アミノ−4−メチルクマリン
(MCA)を反応せしめることにより製造すること
ができる。この場合N−保護の保護基としてはも
ちろん上述したものが採用できる。反応において
はトリメチルアミン、トリエチルアミン等トリア
ルキルアミン、ピリジン等の有機塩基の存在下ジ
シクロヘキシルカルボジイミド(DCCD)、N−
エチル−N′−3−ジメテルアミノプロピル−カ
ルボジイミド(WSCI)、クロル蟻酸イソブチル
等のクロル蟻酸エステル等で縮合させるとよい。
この縮合反応はジメチルホルムアミド(DMF)
クロロホルム、ジクロルメタン、エチル酢酸エス
テルやジオキサン、テトラヒドロフラン
(THF)等の不活性溶媒を用いることもできる。 このようにして得られた縮合物から、そのアミ
ノ基の保護基を脱離するには、脱離方法として上
記慣用手段を適宜選択利用すればよい。例えば、
接触的水素化方法を利用すればよい。 また分子を構成するプロリンがL−体又はD−
体のいずれか一方のものである目的化合物を製造
するには、目的化合物の製造反応に用いる出発原
料のグリシルプロリンに目的とする光学活性体を
採用してもよいし、目的化合物のDL−体を製造
してこれを常法の光学分割に付してもよい。 試料溶液と7−グリシル−L−プロリルアミノ
−4−メチルクマリンを接触せしめ、次いで7−
アミノ−4−メチルクマリンを定量することによ
り試料溶液中の酵素X−プロリルジペプチジルア
ミノペプチダーゼ活性を測定することができる。
7−グリシル−L−プロリルアミノ−4−メチル
クマリンは試料溶液中にX−プロリルジペプチジ
ルアミノペプチダーゼが存在すればその量に比例
してグリシル−L−プロリンと7−アミノ−4−
メチルクマリンに分解遊離する。ここでEx380n
m、Em460nmのけい光下でその7−アミノ−4
−メチルクマリンのけい光強度を測定することに
より高感度の酵素活性を測定できる。すなわち、
7−アミノ−4−メチルクマリンは分解遊離前の
7−グリシル−L−プロリルアミノ−4−メチル
クマリンの30倍という相対けい光強度を示すこと
を見出したことにより上記測定を可能とした。 本発明者は体内に特に体液例えば血清、唾液に
7−グリシル−L−プロリルアミノ−4−メチル
クマリンに作用してグリシル−L−プロリンと7
−アミノ−4−メチルクマリンに分解するジペプ
チジルアミノペプチダーゼの一種である酵素、X
−プロリルジペプチジルアミノペプチダーゼが存
在することを見出し、さらに体液中、特に血清中
の当該酵素活性を前記7−グリシル−L−プロリ
ルアミノ−4−メチルクマリンを基質として正常
人並びに各種疾患に罹つている患者につき測定し
たところ、正常人であれば男女間に、特に若年層
の男女間に若干有意な差は認められるがほぼ一定
であるにもかかわらず、肝臓並びに隣接臓器の疾
患例えば急性及び慢性肝炎、肝硬変或いは胆管ガ
ンにあつては当該酵素活性が増加していること、
さらに驚くべきことに癌例えば胃癌、膵癌にあつ
ては活性が低下していることを見出し、本酵素活
性を測定することは疾患診断時に癌診断に大変役
立つことを認めた。殊に、従来よい診断方法のな
い、胃癌の肝転移の診断に極めて有力な方法であ
る。 さらに、7−グリシル−L−プロリルアミノ−
4−メチルクマリンは本酵素活性測定用基質とし
て発癌性等の問題を惹起することのない安全な物
質であり、また基質として不可欠な各種条件即ち
酵素作用を受けた基質量の測定の容易さ、安定
性、酵素量及び接触反応時間に対する直線性等を
全て満足するものであることを確認し、医学上重
要な意義を有する本酵素活性測定法を確立した。 基質としての7−グリシル−L−プロリルアミ
ノ−4−メチルクマリンは遊離体として使用され
るのみならず、酵素反応を阻害しない酸との付加
塩、例えばP−トルエンスルホン酸、塩酸、臭化
水素酸との塩の形で測定系に導入することもでき
る。 酵素活性の測定方法は格別に困難なく行うこと
ができる。例えば、まず初めに基質溶液を調製す
るのであるが、先述の如く7−グリシル−L−プ
ロリルアミノ−4−メチルクマリンの適当な濃度
の溶液を調製する。基質の水溶解性が低い場合に
は界面活性剤等の溶解促進物質を用いるのが有利
である。基質溶液のPHは使用する基質の種類によ
り異るが、本酵素による加水分解速度並びに基質
の酵素以外の要因による分解(即ち基質安定性)
等を考慮し、実験的に容易に最適値を求めること
ができる。通常PHは中性付近より詳しくは6〜9
付近が選択される。 測定は前記基質溶液と試料溶液を混合せしめ、
30〜45℃にて基質量及び試料溶液中のグリシルプ
ロピルジペプチジルアミノペプチダーゼの量に応
じ適当時間反応させた後、酵素活性を常法により
失活せしめ遊離7−アミノ−4−メチルクマリン
を上述の如く定量することにより本酵素活性を高
感度に知ることができる。 以下、実施例により本発明を詳細に説明する。 実施例 N−カルボベンゾキシグリシル−L−プロリン
1.53g(5ミリモル)およびトリエチルアミン
0.7ml(5ミリモル)のTHF溶液30mlに−5〜−
10℃冷却下クロル蟻酸イソブチル585mg(5ミリ
モル)を加え10分間かきまぜた後これに7−アミ
ノ−4−メチルクマリン875mg(5ミリモル)の
DMF溶液20mlを加え同温度で30分次いで室温で
4時間かきまぜた。 反応混合物より溶媒を減圧下留去し残渣に酢酸
エチル75mlを加え1規定塩酸、水、5%重炭酸ナ
トリウム水溶液、水の順で洗浄した後、酢酸エチ
ル層を無水芒硝で乾燥した。酢酸エチルを減圧留
去後得られた粗生成物をシリカゲル(50gのカラ
ムクロマトグラフイー(溶出溶媒、ベンゼン:酢
酸エチル=1:2、酢酸エチルのみ)で精製し、
次に酢酸エチル(10ml)−n−ヘキサン(30ml)
で再沈し、7−(N−カルボベンゾキシグリシル
−L−プロリル)アミノ−4−メチルクマリン
1.4g(収率60%)を得た。 融点:107.5〜113.5℃〔α〕18 D−116.1゜(C=
1、DMF) この結晶は薄層クロマトグラフイー(クロロホ
ルム:メタノール:酢酸=95:5:3)で単一ス
ポツト(Rf=0.65)を与えた。 元素分析 測定値 C 62.49%、H 5.81%、N 8.96% C25H25N3O6・H2Oとしての計算値 C 62.36%、H 5.65%、N 8.73% 7−(N−カルボベンゾキシグリシル−L−プ
ロリル)アミノ−4−メチルクマリン464mg(1
ミリモル)を80%酢酸10mlとメタノール50mlに溶
解し、これに10%Pd−C50mgを加え4時間水素ガ
スを通じて接触還元を行い7−グリシル−L−プ
ロリルアミノ−4−メチルクマリンを生成せしめ
た。 反応混合物より触媒を別後液にP−トルエ
ンスルホン酸の1水和物190mg(1ミリモル)加
えてそのまま凍結乾燥した。残渣に水50mlを加え
さらに凍結乾燥して得た白色粉末465mgをエタノ
ール(10ml)−エーテル(50ml)で再沈を行い、
7−グリシル−L−プロリルアミノ−4−メチル
クマリンのP−トルエンスルホン酸塩400mg(7
−(N−カルボベンゾキシグリシル−L−プロリ
ル)アミノ−4−メチルクマリンよりの収率:
77.4%)を得た。融点:182.0〜188.5℃。 〔α〕20 D=−111.0゜(C=1、酢酸) この結晶は次に示す如く薄層クロマトグラフイ
ーで単一スポツトを与えた。 n−ブタノール:酢酸:水:=4:1:5
Rf=0.4 n−ブタノール:ピリジン:酢酸:水=15:
10:3:12 Rf=0.7 元素分析 測定値 C 54.08%、H 5.44%、N 7.58% C24H27O7N3S・3/2H2Oとしての計算値 C 54.53%、H 5.72%、N 7.95% 7−グリシル−L−プロリルアミノ−4−メチ
ルクマリンP−トルエンスルホン酸塩(GIy−
Pro−MCA Tosylate)を水に2ミリモル濃度と
なるように溶解し基質溶液とした。ヒト顎下腺よ
り均一に精製したX−プロリルジペプチジルアミ
ノペプチダーゼを酵素液として用いて次の表に示
す操作を順次行い、次いで同様の操作をインキユ
ベート時間を変化させて行つた。けい光分析によ
り反応時間と生成した7−アミノ−4−メチルク
マリン量と関係を求めた。
【表】
380nm/460nmにおけるけい光強度をそれぞ
れ測定(Ex/Em)し、酵素により生成した
MCAの量は、次式により求めた。 E−C/S−B×3nmol 結果を次表に示した。
れ測定(Ex/Em)し、酵素により生成した
MCAの量は、次式により求めた。 E−C/S−B×3nmol 結果を次表に示した。
【表】
以上の結果から、本基質は反応時間に対し比例
して(直線関係に)MCAを生成せしめることが
わかる。 次に、上記の実験を酵素液量を各種変化せしめ
て行い37℃、30分間インキユベーシヨンした後の
けい光強度を同様に測定して、酵素により生成し
たMCAの量を求めた。結果を次に示した。
して(直線関係に)MCAを生成せしめることが
わかる。 次に、上記の実験を酵素液量を各種変化せしめ
て行い37℃、30分間インキユベーシヨンした後の
けい光強度を同様に測定して、酵素により生成し
たMCAの量を求めた。結果を次に示した。
【表】
【表】
上記の結果から明らかな通り、本基質は使用酵
素量に比例して(直線関係に)MCAを与えるこ
とが確認された。 試料溶液に本基質を上記の方法に準じて作用せ
しめて生成するMCA量を測定し標準関係と比較
すれば、試料溶液中の目的とする酵素の量を正確
に測定でき、故に前述のような病気の診断に役立
つことがわかる。 正常ヒトの脳脊髄液、血清及び唾液について上
記同様にしてMCA量を求め、酵素活性(I.U./
1ml酵素液)を求めた。結果を次に示した。
素量に比例して(直線関係に)MCAを与えるこ
とが確認された。 試料溶液に本基質を上記の方法に準じて作用せ
しめて生成するMCA量を測定し標準関係と比較
すれば、試料溶液中の目的とする酵素の量を正確
に測定でき、故に前述のような病気の診断に役立
つことがわかる。 正常ヒトの脳脊髄液、血清及び唾液について上
記同様にしてMCA量を求め、酵素活性(I.U./
1ml酵素液)を求めた。結果を次に示した。
【表】
血清中のX−プロリルジペプチジルアミノペプ
チダーゼ活性は前記のように肝疾患や胃癌の診断
上有意義であるが、本物質を基質として用いれ
ば、1μl以下の血清で超微量測定が可能であ
る。また、脳脊髄液中の本酵素活性は本物質と用
いる測定法によつて始めて測定が可能となり、酵
素の存在が発見された。唾液中の本酵素活性も本
物質を基質として用いれば測定容易であり、血清
の代りに唾液を用いる酵素検査法にも応用可能で
ある。
チダーゼ活性は前記のように肝疾患や胃癌の診断
上有意義であるが、本物質を基質として用いれ
ば、1μl以下の血清で超微量測定が可能であ
る。また、脳脊髄液中の本酵素活性は本物質と用
いる測定法によつて始めて測定が可能となり、酵
素の存在が発見された。唾液中の本酵素活性も本
物質を基質として用いれば測定容易であり、血清
の代りに唾液を用いる酵素検査法にも応用可能で
ある。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1 構造式 で示される7−グリシルプロリルアミノ−4−メ
チルクマリン。
Priority Applications (7)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2066377A JPS53105477A (en) | 1977-02-26 | 1977-02-26 | 7-glycylprolylamono-4-methylcoumarine |
US05/878,826 US4147692A (en) | 1977-02-26 | 1978-02-17 | Novel dipeptide derivatives, and method of measuring enzymatic activity |
SE7801997A SE7801997L (sv) | 1977-02-26 | 1978-02-21 | Dipeptidderivat |
GB7155/78A GB1547747A (en) | 1977-02-26 | 1978-02-22 | Dipeptide derivatives of glycylproline |
DE19782808111 DE2808111A1 (de) | 1977-02-26 | 1978-02-24 | Neue dipeptidderivate und deren verwendung zur messung der enzymatischen aktivitaet |
FR7805438A FR2381764A1 (fr) | 1977-02-26 | 1978-02-24 | Nouveaux derives dipeptidiques de la glycyl-prolylamino-7-methyl-4-coumarine et procede pour mesurer l'activite enzymatique |
US05/943,778 US4191809A (en) | 1977-02-26 | 1978-09-20 | Method of measuring enzymatic activity using novel peptide derivatives |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2066377A JPS53105477A (en) | 1977-02-26 | 1977-02-26 | 7-glycylprolylamono-4-methylcoumarine |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS53105477A JPS53105477A (en) | 1978-09-13 |
JPS6126558B2 true JPS6126558B2 (ja) | 1986-06-20 |
Family
ID=12033434
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
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