JPS59154995A - 発酵法によるl−グルタミン酸の製造法 - Google Patents
発酵法によるl−グルタミン酸の製造法Info
- Publication number
- JPS59154995A JPS59154995A JP3048083A JP3048083A JPS59154995A JP S59154995 A JPS59154995 A JP S59154995A JP 3048083 A JP3048083 A JP 3048083A JP 3048083 A JP3048083 A JP 3048083A JP S59154995 A JPS59154995 A JP S59154995A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- glutamic acid
- acid
- corynebacterium
- genus
- brevibacterium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は発酵法によるし一グルタミン酸の製造法に関す
る。更に詳しくはコリネバクテリウム属またはブレビバ
クテリウム属に属し、エネルギー代謝阻害を示す抗生物
質またはユビキノンの生合成の前駆体に耐性を有する微
生物を培地に培養して培地にL−グルタミン酸を蓄積せ
しめることを特徴とする発酵法によるし一グルタミン酸
の製造法に関する。その目的とするところは食品として
有用なL−グルタミン酸を工業的に安価に製造すること
にある。
る。更に詳しくはコリネバクテリウム属またはブレビバ
クテリウム属に属し、エネルギー代謝阻害を示す抗生物
質またはユビキノンの生合成の前駆体に耐性を有する微
生物を培地に培養して培地にL−グルタミン酸を蓄積せ
しめることを特徴とする発酵法によるし一グルタミン酸
の製造法に関する。その目的とするところは食品として
有用なL−グルタミン酸を工業的に安価に製造すること
にある。
発酵法によるL−グルタミン酸の製法として。
コリネバクテリウム、ブレビバクテリウムの野住株ある
いは種々の物質を生育に要求する又は種々の物質に耐性
を有する変異株を用いる方法が知られている。
いは種々の物質を生育に要求する又は種々の物質に耐性
を有する変異株を用いる方法が知られている。
収率のよい製法の開発は常に求められており。
その目的のため、より効率のよいし一グルタミン酸生産
菌について研究した結果エネルギー代謝阻害を示す抗生
物質またはユビキノンの生合成の前駆体に耐性を有する
変異株が高収率でL−グルタミン酸を生成することが見
い出された。
菌について研究した結果エネルギー代謝阻害を示す抗生
物質またはユビキノンの生合成の前駆体に耐性を有する
変異株が高収率でL−グルタミン酸を生成することが見
い出された。
本発明において用いられる微生物としては、コリネバク
テリウム属、ブレビバクテリウム属に属しエネルギー代
謝阻害を示す抗生物質またはユビキノンの生合成の前駆
体に耐性を示すL−グルタミン酸住産菌がいずれも用い
うる。
テリウム属、ブレビバクテリウム属に属しエネルギー代
謝阻害を示す抗生物質またはユビキノンの生合成の前駆
体に耐性を示すL−グルタミン酸住産菌がいずれも用い
うる。
本変異株はコリネバクテリウム属またはブレビバクテリ
ウム属のし一グルタミン酸生産性細菌から誘導すること
により、あるいは上記性質を有すル菌にL−グルタミン
酸生産性を付与することによって得られる。
ウム属のし一グルタミン酸生産性細菌から誘導すること
により、あるいは上記性質を有すル菌にL−グルタミン
酸生産性を付与することによって得られる。
例えばL−グルタミン酸生産菌コリネバク”チリウム・
グルタミクム ^TCC−13032、ブレビバクテリ
ウム・ラクトファーメンタム ATCC−13869を
X線、紫外線、co 等の照射あるいは薬剤例えばN
−メチル−N′−ニトロ−N−ニトロソグアニジンに接
触せしめる等の通常の変異誘導方法が適宜適用できる。
グルタミクム ^TCC−13032、ブレビバクテリ
ウム・ラクトファーメンタム ATCC−13869を
X線、紫外線、co 等の照射あるいは薬剤例えばN
−メチル−N′−ニトロ−N−ニトロソグアニジンに接
触せしめる等の通常の変異誘導方法が適宜適用できる。
変異処理した菌株から変異株を分離する方法は。
親株が生育できない量のエネルギー代謝阻害を示す抗生
物質あるいはユビキノンの生合成の前駆物質を含む固体
培地中に生育できるような菌株を採取することにより行
われる。エネルギー代謝阻害の定義については抗生物質
大要(化学と生物活性。
物質あるいはユビキノンの生合成の前駆物質を含む固体
培地中に生育できるような菌株を採取することにより行
われる。エネルギー代謝阻害の定義については抗生物質
大要(化学と生物活性。
第2版、東京大学出版会)に記載されており1本発明に
おいても同様の意義を有する。
おいても同様の意義を有する。
エネルギー代謝阻害を示す抗生物質としては。
オリゴマイシン(Oligomycin ) 、アンチ
マイシンA (Antimycin A ) 、パ
リノマイシン(Rutamycin )グラミシジンS
(Gramicidin S ) 、パリノマイシン
(Valinomycin )等が例示される。
マイシンA (Antimycin A ) 、パ
リノマイシン(Rutamycin )グラミシジンS
(Gramicidin S ) 、パリノマイシン
(Valinomycin )等が例示される。
ユビキノンの生合成の前駆体としては、O−ヒドロキシ
ケイ皮酸(0−Coumarate )およびその沸化
物1m−ヒドロキシケイ皮酸(m −Coumarat
e )およびその沸化物、フェニルピルビン酸(Phe
nylpyruvate) 、 P−ヒドロキシフェニ
ルピルビン酸(P −Hydroxy phenyl
pyruvate )およびその沸化物、フエ+−ル酢
酸(Phenyl acetate ) 、 P −ヒ
ドロキシフェニル乳酸(P −Hydroxy phe
nylIactate )およびその沸化物、ケイ皮酸
(C4nnamate ) 。
ケイ皮酸(0−Coumarate )およびその沸化
物1m−ヒドロキシケイ皮酸(m −Coumarat
e )およびその沸化物、フェニルピルビン酸(Phe
nylpyruvate) 、 P−ヒドロキシフェニ
ルピルビン酸(P −Hydroxy phenyl
pyruvate )およびその沸化物、フエ+−ル酢
酸(Phenyl acetate ) 、 P −ヒ
ドロキシフェニル乳酸(P −Hydroxy phe
nylIactate )およびその沸化物、ケイ皮酸
(C4nnamate ) 。
安息香酸(Be’nzoate ) 、 P−ヒドロキ
シ安息香酸(P −Hydroxy benzoate
)およびその沸化物。
シ安息香酸(P −Hydroxy benzoate
)およびその沸化物。
P−ヒドロキシベンズアルデヒド(P −Hydrox
ybenz aldehyde )およびその沸化物が
例示される。
ybenz aldehyde )およびその沸化物が
例示される。
本発明の変異株の具体的な変異誘導方法を示す。
コリネバクテリウム・グルタミクム ATCC−130
32またはブレビバクテリウム・クラトファ、−メンタ
ム ATCC−13869の菌体をM/20リン酸緩衝
液(pH7,0)に懸濁し、これに 200μg/ml
のN−メチル−N′−ニトロ−N−ニトログアニジンを
加えて30℃で30分間保つ。処理後菌体を集め同緩衝
液にて洗浄後、下記組成にオリゴマイシン 100μg
/ml又はP−ヒドロキシケイ皮酸2■/mlを含む培
地に塗床し、30℃で2〜10日間培養する。これらの
菌株についてL−グルタベン酸の生産能の顕著に向上し
た菌株を分離する。このようにしてオリゴマイシン耐性
株またはP−ヒドロキシケイ支度耐性株の中から選択し
た代表株はコリネバクテリウム・グルタミクム COM
−53(微工研菌寄第6921号)、ブレビバクテリ
ウム・ラクトファーメンタム BOM−419(微工研
菌寄第6922号)(以上オリゴマイシン耐性株)、コ
リネバクテリウム・グルタミクム CPC−8(微工研
菌寄第6923号)、ブレビバクテリウム・ラクトファ
ーメンタムRPC−106(微工研菌寄第6924号)
(以上P−ヒドロキシケイ皮酸耐性株)である。
32またはブレビバクテリウム・クラトファ、−メンタ
ム ATCC−13869の菌体をM/20リン酸緩衝
液(pH7,0)に懸濁し、これに 200μg/ml
のN−メチル−N′−ニトロ−N−ニトログアニジンを
加えて30℃で30分間保つ。処理後菌体を集め同緩衝
液にて洗浄後、下記組成にオリゴマイシン 100μg
/ml又はP−ヒドロキシケイ皮酸2■/mlを含む培
地に塗床し、30℃で2〜10日間培養する。これらの
菌株についてL−グルタベン酸の生産能の顕著に向上し
た菌株を分離する。このようにしてオリゴマイシン耐性
株またはP−ヒドロキシケイ支度耐性株の中から選択し
た代表株はコリネバクテリウム・グルタミクム COM
−53(微工研菌寄第6921号)、ブレビバクテリ
ウム・ラクトファーメンタム BOM−419(微工研
菌寄第6922号)(以上オリゴマイシン耐性株)、コ
リネバクテリウム・グルタミクム CPC−8(微工研
菌寄第6923号)、ブレビバクテリウム・ラクトファ
ーメンタムRPC−106(微工研菌寄第6924号)
(以上P−ヒドロキシケイ皮酸耐性株)である。
培地組成ニ
ゲルコース3%、尿素0.2%、Fe、MnおよびCu
イオン各10 ppm、サイアミン塩酸塩IIng/
I1. ビオチン50.ag/j!、寒天2%、PH6
,8 本発明で用いる培地としては、炭素源、窒素源。
イオン各10 ppm、サイアミン塩酸塩IIng/
I1. ビオチン50.ag/j!、寒天2%、PH6
,8 本発明で用いる培地としては、炭素源、窒素源。
無機物、その他使用菌株の必要とす7+微量の栄養素を
程良く含有するものであれば合成培地および天然培地の
いずれも使用できる。培地に使用する炭素源、窒素源は
使用菌株の利用可能なものならばいずれの種類を用いて
もよい。即ち、炭素源としては、グルコース、フラクト
ース、シュクロース、マルトース、マンノース、ソルヒ
トール等ノ炭水化物、糖アルコール、グリセロール、殿
粉。
程良く含有するものであれば合成培地および天然培地の
いずれも使用できる。培地に使用する炭素源、窒素源は
使用菌株の利用可能なものならばいずれの種類を用いて
もよい。即ち、炭素源としては、グルコース、フラクト
ース、シュクロース、マルトース、マンノース、ソルヒ
トール等ノ炭水化物、糖アルコール、グリセロール、殿
粉。
殿粉加水分解物、糖蜜などが使用でき、また酢酸。
ピルビン酸、乳酸、フマール酸、グルコン酸などの有機
酸、゛およびアスパラギン酸などのアミノ酸類、あるい
はエタノールなどの低級アルコールも使用できる。
酸、゛およびアスパラギン酸などのアミノ酸類、あるい
はエタノールなどの低級アルコールも使用できる。
窒素源としては、アンモニア、塩化アンモニウム、硫酸
アンモニウム、炭酸アンモニウム、リン酸アンモニウム
、酢酸アンモニウムなどの各種無機および有機アンモニ
ウム塩類、あるいはアスパラギン酸などのアミノ酸類、
尿素および窒素含有物質例えばペプトン、肉エキス、コ
ーン・スチープ・リカー、カゼイン加水分解物、大豆粕
の加水分解物などの窒素含有有機物質等積々のものが使
用できる。
アンモニウム、炭酸アンモニウム、リン酸アンモニウム
、酢酸アンモニウムなどの各種無機および有機アンモニ
ウム塩類、あるいはアスパラギン酸などのアミノ酸類、
尿素および窒素含有物質例えばペプトン、肉エキス、コ
ーン・スチープ・リカー、カゼイン加水分解物、大豆粕
の加水分解物などの窒素含有有機物質等積々のものが使
用できる。
無機物としてはリン酸−カリウム、リン酸二カリウム、
硫酸マグネシウム、塩化ナトリウム、硫酸第1鉄、硫酸
マンガンおよび炭酸カルシウム等が用いられる。
硫酸マグネシウム、塩化ナトリウム、硫酸第1鉄、硫酸
マンガンおよび炭酸カルシウム等が用いられる。
さらに、必要に応じてビオチン、ニコチンアミド、パン
トテン酸、サイアミン等の微生物の生育に必要なビタミ
ン類も使用されるが、前記のような他の培地組成に伴っ
て培地に供されれば特に加えなくとも良い。
トテン酸、サイアミン等の微生物の生育に必要なビタミ
ン類も使用されるが、前記のような他の培地組成に伴っ
て培地に供されれば特に加えなくとも良い。
培養は振盪培養あるいは通気攪拌培養などの好気的条件
下で行う。培養は20〜40℃でpH3〜9好ましくは
中性付近で行われる。通常1〜4日間の培養で培地中に
著量のL−グルタミン酸が蓄積する。
下で行う。培養は20〜40℃でpH3〜9好ましくは
中性付近で行われる。通常1〜4日間の培養で培地中に
著量のL−グルタミン酸が蓄積する。
また、L−グルタミン酸を蓄積させるため、従来知られ
ているように、ビオチン量を低くおさえたり、ビオチン
量の高い培地の湯治には、界面活性剤、ペニシリン等を
加えて培養してもよい。
ているように、ビオチン量を低くおさえたり、ビオチン
量の高い培地の湯治には、界面活性剤、ペニシリン等を
加えて培養してもよい。
培養終了後、培養液よりL−グルタミン酸を採取するに
は、培養液より菌体などの固形物を除去し、公知のイオ
ン交換処理法、濃縮法、吸着法。
は、培養液より菌体などの固形物を除去し、公知のイオ
ン交換処理法、濃縮法、吸着法。
塩析法などを併用することにより、培養液からL−グル
タミン酸を回収することができる。
タミン酸を回収することができる。
以下、実施例をあげて本発明を具体的に示す。
実施例1゜
種菌としてコリネバクテリウム・グルタミクムATCC
−13032及びCOM −53、ブレビバクテリウム
・ラクトファーメンタムATCC−13869及びRO
M−419の4株を用いる。種培地にはグルコース4%
、ポリペプトン2%、酵母エキス0.5%、KH2PO
40,15%、に2HPO’4 0.05%、MgSO
4・7 H200,05%、ビオチン 100μg/β
、尿素0,3%、pH7,2の組成で、120℃、10
分間殺菌したものを用いる。上記の菌株を30℃。
−13032及びCOM −53、ブレビバクテリウム
・ラクトファーメンタムATCC−13869及びRO
M−419の4株を用いる。種培地にはグルコース4%
、ポリペプトン2%、酵母エキス0.5%、KH2PO
40,15%、に2HPO’4 0.05%、MgSO
4・7 H200,05%、ビオチン 100μg/β
、尿素0,3%、pH7,2の組成で、120℃、10
分間殺菌したものを用いる。上記の菌株を30℃。
24時間振盪培養する。その1mlを下記の発酵培地2
0m1を含む300m1三角フラスコに植菌して。
0m1を含む300m1三角フラスコに植菌して。
30°C13日間振盪培養した時のし一グルタミン酸の
生成量および対糖収率が第1表に示される。
生成量および対糖収率が第1表に示される。
発酵培地の組成;
グルコース10%、肉エキス0.5%、硫安3%K H
2P Oa 0.1 ’5%、に2HPO4−0,0
5%、Mg5Oa・7H200,05%、すqアミン塩
酸塩500 、If g / 1 、 F e S
Oa ・7 H2010ug/In MnSO4・4
〜6H2010mg/ 7!、 Cu S○a・5H
2011ng/L 尿素0.5%、CaCO3,3%
(pH7,2) 、 120’c、10分間殺菌 第 1 表 GA : L−グルタミン酸(以下同様)実施例2゜ 実施例1の発酵培地をグルコースの代わりに廃糖蜜10
%(グルコース換算)とし、培養開始時にペニシリンG
5ユニット1ml添加する以外は実施例1と同様に実施
する。結果を第2表に示す。
2P Oa 0.1 ’5%、に2HPO4−0,0
5%、Mg5Oa・7H200,05%、すqアミン塩
酸塩500 、If g / 1 、 F e S
Oa ・7 H2010ug/In MnSO4・4
〜6H2010mg/ 7!、 Cu S○a・5H
2011ng/L 尿素0.5%、CaCO3,3%
(pH7,2) 、 120’c、10分間殺菌 第 1 表 GA : L−グルタミン酸(以下同様)実施例2゜ 実施例1の発酵培地をグルコースの代わりに廃糖蜜10
%(グルコース換算)とし、培養開始時にペニシリンG
5ユニット1ml添加する以外は実施例1と同様に実施
する。結果を第2表に示す。
第 2 表
実施例3゜
種菌としてコリネバクテリウム・り゛ルタミクムATC
C−13032,CPC−8、ブレビツマクチ1ノウム
・ラクトファーメンタム ATCC−13869、RP
C−106の4株を用いる他実施例1と同様Gこ実施し
、第3表に結果が示される。
C−13032,CPC−8、ブレビツマクチ1ノウム
・ラクトファーメンタム ATCC−13869、RP
C−106の4株を用いる他実施例1と同様Gこ実施し
、第3表に結果が示される。
第 3 表
実施例4.実施例3の発酵培地をり゛ルコースの代わり
に廃糖蜜10%(グルコース換算)とし。
に廃糖蜜10%(グルコース換算)とし。
培養開始時にペニシリンG5ユニ・ノ)1ml添加する
以外は実施例3と同様に実施した結果を第4表に示す。
以外は実施例3と同様に実施した結果を第4表に示す。
第 4 表
手続補正書
昭和59年2月1.と―
特許庁長官 殿
1、事件の表示
昭和58年特許願第30480号
2、発明の名称
発酵法によるし一グルタミン酸の製造法3、補正をする
者 事件との関係 特許出願人 郵便番号 100 住 所 東京都千代田区大手町−丁目6番1号名 称
(102)協和醗酵工業株式会社(T E L :
、03−201−7211内線2751)明細書の発
明の詳細な説吋の欄 5、補正の内容 1) 明細書第4負下4、下3〜2、下1〜第5頁1及
び第5頁2〜3行 「微工研菌奇第6921号、微工研菌奇第6922号、
微工研菌奇第6923号及び微■研菌寄第6924@J
を「微工研条寄第428号、微工研条寄第A29@、微
工研条奇第430号及び微工研条寄第431号」に訂正
する。
者 事件との関係 特許出願人 郵便番号 100 住 所 東京都千代田区大手町−丁目6番1号名 称
(102)協和醗酵工業株式会社(T E L :
、03−201−7211内線2751)明細書の発
明の詳細な説吋の欄 5、補正の内容 1) 明細書第4負下4、下3〜2、下1〜第5頁1及
び第5頁2〜3行 「微工研菌奇第6921号、微工研菌奇第6922号、
微工研菌奇第6923号及び微■研菌寄第6924@J
を「微工研条寄第428号、微工研条寄第A29@、微
工研条奇第430号及び微工研条寄第431号」に訂正
する。
2) 同書第5頁1〜2行
「ブレビバクテリウム・クラドファーメンタム」を[ブ
レビバクテリウム・ラクトファーメンタム」に訂正する
。
レビバクテリウム・ラクトファーメンタム」に訂正する
。
3) 同門第8頁4行
「1 ON2/LJを1−10.v1yμ」に訂正する
。
。
Claims (1)
- コリネバクテリウムまたはブレビバクテリウムに属し、
エネルギー代謝阻害を示す抗生物質またはユビキノンの
生合成の前駆体に耐性を有し、L−グルタミン酸住産能
を有する微生物を培地に培養し、培養液中にL〜グルタ
ミン酸を生成蓄積せしめ、これを採取することを特徴と
するL−グルタミン酸の製造法
Priority Applications (8)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP3048083A JPS59154995A (ja) | 1983-02-25 | 1983-02-25 | 発酵法によるl−グルタミン酸の製造法 |
CA000447882A CA1215338A (en) | 1983-02-25 | 1984-02-21 | Process for producing l-glutamic acid by fermentation |
US06/582,883 US4729952A (en) | 1983-02-25 | 1984-02-23 | Process for producing L-glutamic acid by fermentation |
EP84301208A EP0117740B1 (en) | 1983-02-25 | 1984-02-24 | Process for producing l-glutamic acid by fermentation and mutant microorganisms for use therein |
EP89115776A EP0350971B1 (en) | 1983-02-25 | 1984-02-24 | Process for producing l-glutamic acid by fermentation and mutant microorganisms for use therein |
EP89115775A EP0350970A1 (en) | 1983-02-25 | 1984-02-24 | Process for producing L-glutamic acid by fermentation and mutant microorganisms for use therein |
DE89115776T DE3486168T2 (de) | 1983-02-25 | 1984-02-24 | Verfahren zur Herstellung von L-Glutaminsäure durch Fermentation und dabei zu verwendende mutante Mikroorganismen. |
DE8484301208T DE3484206D1 (de) | 1983-02-25 | 1984-02-24 | Verfahren zur herstellung von l-glutaminsaeure durch fermentation und dazu zu verwendende mutante mikroorganismen. |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP3048083A JPS59154995A (ja) | 1983-02-25 | 1983-02-25 | 発酵法によるl−グルタミン酸の製造法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS59154995A true JPS59154995A (ja) | 1984-09-04 |
JPH045437B2 JPH045437B2 (ja) | 1992-01-31 |
Family
ID=12305002
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP3048083A Granted JPS59154995A (ja) | 1983-02-25 | 1983-02-25 | 発酵法によるl−グルタミン酸の製造法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS59154995A (ja) |
-
1983
- 1983-02-25 JP JP3048083A patent/JPS59154995A/ja active Granted
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPH045437B2 (ja) | 1992-01-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP3006926B2 (ja) | 発酵法によるl−スレオニンの製造法 | |
HU214909B (hu) | Eljárás L-triptofán előállítására | |
JPS6236676B2 (ja) | ||
US5492818A (en) | Method of producing L-glutamic acid by fermentation | |
JPH04262790A (ja) | 発酵法による5’−キサンチル酸の製造法 | |
KR950005133B1 (ko) | L-발린의 제조방법 | |
JPS6257315B2 (ja) | ||
US5538888A (en) | Culture of Rhizobium cobalaminogenum capable of producing vitamin B12 and mutants thereof | |
JP3006929B2 (ja) | 発酵法によるl−バリンの製造法 | |
US3939042A (en) | Process for the production of L-glutamic acid | |
US4657860A (en) | Process for producing L-lysine by fermentation | |
JPS59154995A (ja) | 発酵法によるl−グルタミン酸の製造法 | |
JPS6312292A (ja) | L−リジンの製造法 | |
US4421853A (en) | Fermentative preparation of L-leucine | |
JPH0362396B2 (ja) | ||
JP3100763B2 (ja) | 発酵法によるl−アルギニンの製造法 | |
US4430429A (en) | Production of vitamin B12 -activity substances | |
JPH029384A (ja) | 発酵法によるl−グルタミン酸の製造方法 | |
HU215248B (hu) | Eljárás L-lizin előállítására | |
JP2817228B2 (ja) | L―グルタミン酸の製造法 | |
JPS60156399A (ja) | 5’−キサンチル酸の製造法 | |
JPH01257486A (ja) | 発酵法によるl−アルギニンの製造法 | |
JPH02312594A (ja) | 発酵法による5’―イノシン酸の製造法 | |
JPH043957B2 (ja) | ||
JPH027635B2 (ja) |