JPS58185599A - α，α―トレハロース―６，６′―脂肪酸ジエステルの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規なα、α−トレハロース−６，６′−脂肪
酸ジエステルの製造方法に関する。

α、α−トレハロースはグルコース２分子よりｍ成され
る所蘭二楯拳の一檜であり、自然界に広く分布する化合
物である。そしてこの化合物の酵導体も檀々合成され、
その４に埋活性が噴射されている。例えば、脂肪酸の結
合位置が異なるも橿のジエステル類の混合物が抗腫瘍作
用を有することが報告されている。

本発明者らは、α、α−トレハロースの６．６′−脂肪
酸ジエステルについて種々研究をおこなっていたが、公
知のα、α−トレハロース−６、６’−脂肪酸ジエステ
ルの製造方法は当該＠實を有利に製造する方法として満
足できるものでないとの結！ｉｃ達した。

すなわち、従来α、α−トレハロース−６，６′−脂肪
酸ジエステル（１）　；　（以下単ｔｃＦトレハロース
脂肪酸ジエステル」という）は例えばυの方法によりｌ
ｌ！！造されていた（　Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ　ｒ
（ｅｅｅａｒｃｈ。

４４．３０８（１９７５））。

以下余白 （ＩＩ　）　　　　　　　　　　　　　　（Ｉｌｌ・）
（■′） （■′） １−１ （■′） （式中、Ｒ’Ｑ　Ｏはアシル基を示し、ＴＭ８はトリメ
チルシリル基を示す）しかしながら、この方法は、■各
工程の収率が低いため、全体としての収率が患い、■（
ＩＩＩ’）から（■′）への選択的変換が暖かしく、操
作が繁雑となる、■高価であるＴＭＢ化剤をず用するた
め、経済的に不利である等の欠点を有し、大音合成を目
的とする工業的製法としては到底採用し雌いものであっ
た。

そこで、本発明者らは工業的ｔｌｅ用し得るトレハロー
ス脂肪酸ジエステルの製造方法に関し駅意検討をおこな
った結果、α、α−トレハロース（１）を２．５．２’
、５’−テトラ−０−ベンジル−α。

α−トレハロース（１１１）となし、次いでこれに脂肪
酸（ＩＶ）又はその活性訪導体を反応させて新規な中間
体２　、３　、２’　、　５’−テトラ−０−ペンシル
−α。

α−トレハロース−６、６’　−脂ａ７ｊ酸ゾエステル
■）を得、更に還元触媒を用いてこれを還元、脱ペンシ
ル化すれば有利にトレハロース脂肪酸ジエステル（Ｉ）
が得られることを見出し、本発明を完成した。

本発明は、次の反応式で示される。

（１） （Ｖ） Ｈ （１） （式中、ＲＱＯは炭素１２５０以下の指訪酸残基を示Ｌ
％　　”ｎはベンジル基を示ス） 本発明方法において、式（ｉｌｌ）で表わされる２゜３
　、２’　、　５’−テトラ−０−ペンシル−α、α−
トレハロースは、常法により式（（Ｉ）で表わされるト
レハロースにベンズアルデヒドを作用せしめて４゜６　
、４’　、　６’−シー０−ベンジリデン−α、α−ト
レバロースとし、ついでペンシルクロリドで２゜５　、
２’　、　５’−テトラ−０−ベンジル体とし、ＦＥ［
酸を作用せしめることにより得られる。

また、化合物（ＩＩＩ）と脂肪酸（ＩＶ）又はその活性
酩導体との反応は一斂のエステル化反応の条件に従い、
通常、ビリシン、トリエチルアミン等の脱酸剤の存在下
、１モルの化合物（ＩＩＩ）に対し、好ｆしくに１．８
〜２．４モルの割合の脂肪酸（ＩＶ）又はそのｒ占性誘
導体を反応させることＫよりおこなわれる。

この反応は、溶媒の存在又は不存在下、水冷下〜６０℃
で１〜２４時間おこなうのが好ましい。

ここで用いられる溶媒としては、例えば増化メチレン、
クロロホルム、ベンゼン、トルエン、エーテル、テトラ
ヒドロフラン、ジオキサン等が挙げられる。・ 斯くして得られた化合物（Ｖ）の還元的脱ペンシル反応
は、１モルの化合物（Ｖ）に対し好ましくは０．５〜１
０モルの還元触媒を用い、適当な溶媒中で接触還元する
ことによりおこなわれる。

還元触媒としては、パラジウム黒、パラジウム−炭＊、
　ラネーニッケル等があげられる。また、ここで用いる
溶媒としては、メタノール、エタノール、インプロパツ
ール等のアルコール類；クロロホルム、堪化メチレン等
のハロゲン化物及びこれらの混合溶媒が挙げられる。

本発明の製造方法は、式（ｊｌ）、 Ｈ で表わされるα、α−トレハロースの水酸基がエステル
化に対し、それぞれ反応性が異なる事実を利用するもの
である。即ち、本発明は化□合物（ＩＩ）が対称形であ
り、各水酸基の反応性は６．６’＞＞２　、２’＞５　
、５’＞４　、４’の順であるから２．ｚ及び５．５′
位の水酸基を保護してエステル化反応を行λば、反応性
の最も低い４．４′位はエステル化されず、６，６′位
のみ位置選択的にエステル化が起り、伏いて２　、５　
、７　、５’位の保賎基を除去すれば目的とする６、６
′−ジエステルのみが得られるという知見に基（もので
ある。したがって本発明方法によればα、α−トレノ１
０−スー６．６’−脂肪酸ジエステルが容易に高収率で
、しかも島純度で得られる。

次に、本発明方法で得られるトレハロース脂肪酸ジエス
テル（１）の条理作用を示す。

（１）トレハロースジエステル誘導体の殺ｄｉｄ作用ニ
ドレバロースジエステル酩導体の殺細胞作用の慎肘には
りコーケミアＬ−５１７８Ｙ＃ｌ胞を用い、これを１０
％牛脂児血渭を宮むＲＰＭＩ　１６４０培地中で１０”
１ｖＡ／１ＩＬｊとし、この培地中に試料を所定の一度
となるように加λた。３７−０の５％ＣＯ。

インキュベーター中で４８時間培養した後、生細胞数を
顧ｌｌｉ鏡下に計数し、対照群と比較して増噴率を求め
、対数確率紙上にプロットし、得られた直載より１ＯＳ
Ｏ瞳を求めた。試料一度は２５．５０゜１００．２００
及び４００μＩ／ＩＬｔとした。

この結果を第１表に示す。

［１表 （２）軸網内反糸機能に対する賦活効果：実験方法は、
所鯖、カーボンクリアランス法に依り、軸網内反糸細胞
の貧食能に対する賦活効果を測定した。４週令、体重２
０〜２５ｇのｄｄＹ雄性マウス１ｎ１０匹に、被検化合
物を滅耐生理食塙漱に懸濁して所定量を腹腔内に投与し
た。標準条としてずイモデン（Ｚｙｍｏ８ａｎ　）を同
ｍＫ投与し、対照群には滅菌生理食堪液のみを同様に投
与した。

破慣化合物投与２４時間後、カーボン１．６〜１０．１
耐の濃度ＶＣ２Ａ製したペリカンインク（ｃｏ　／１４
５１ａ）をマウスの尾静脈内ＫＯ，１１１ｊ／１０ｇ宛
注射し、直ちに一方の眼窩静脈叢よりプーリピペットを
用いて０．０２１４採血し、０．１憾炭酸ナトリウム水
溶液２．５Ｒｔ中に加えて溶血させた。更に正確に４分
後、他方の眼窩静獣寮より０．０２１４採血し、同様に
操作したのち、それぞれ波長ｂキロ；６００　ｎｍ［お
けルｆｉ光ＩＩ　ヲ１１１＋１　定Ｌ’、）７プサイテ
イツク　インデックスに値及びデイモデン投与群に対す
る相対的活性（Ｔ／Ｚ　）をそれぞれ丼出し、８２表に
示した。

ファゴサイテイツク　インデックスに値：２−　Ｔ１ 但し、０１はカーボンインク投与直後の吸光度０１１は
　　　　　　　Ｉ　４分後　ＩＴ＠　−Ｔｌ−４（ｍｉ
ｎ）とする。

相対的活性（Ｔ／Ｚ）： デイモデン投与群に対する相対的活性（Ｔ／Ｚ憾）但し
、ＫＴは被検化合物投与群の平均に値Ｋｚはヂイモデン
　ｌ ＫＯは　対　照　群　の　　　　Ｉ　とする。

第　２　表 以上の如くトレハロース脂肪酸ジエステルは抗癌作用及
び網内糸機程に賦活作用を有するものである。

本発明方法により製造されるトレノ・ロース脂肪酸ジエ
ステルの毒性は、例えばこれに＠似する物質であるショ
糖脂肪酸エステル類が食品添加物に指定され、無害な界
面活性剤として食品、医薬品、化粧品等圧広く使用され
ていることから明らかな如く殆んど毒性のない安全な化
合物である。

また、これを医薬品、例えば免疫賦活剤として使用する
場合は、経口、非経口等の投与形態に応じた各檜剤型、
例えば錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、液剤等の経口
投与剤；皮下、筋肉若しくは静脈注射剤、輸液混合用剤
または坐剤等の非経口投与剤とすることができる。

上記製剤化は、自体公知の方法によってなし得る。すな
わち、トレハロース脂肪酸ジエステルなデンプン、乳糖
、マンニトール等の賦形剤；カルボキシメチルセルロー
スナトリウム、ヒＦロキシプロビルセルロース等の結合
剤：結晶セルロース、カルざキシメチルセルロースカル
シウム等の崩壊剤：タルク、ステアリン酸マグネシウム
等の滑沢剤；軽貴無水ケイ酸等の流動性向上剤等を通宜
組み台わぜて処方することにより錠剤、カプセル剤、散
剤又は′＠粒剤を製造することができる。また、教則、
注射剤は、植物油等にトレハロース脂肪酸ジエステルを
浴解し、油性注射剤とするか、常法によって水等に溶解
又は懸濁させてシロップ剤等とすることにより製造する
ことができる。史に坐剤とするＫは、通常用いられる基
剤、例えばカカオ膓、合成油脂等に常法により分散後固
化させることによりＭ造することができる。

本発明方法によるトレハロース脂肪酸ジエステルの投与
量は、その疾患の檻度によっても異なるが、通常取入に
おいて経口投与の場合には０．１〜２０００η／ゆ、非
経口投与の場合は０．０５〜１０００＃１９／ｍを１日
１回ないし数回に分けて投与するのが好ましい。

次に実施例及び参考例を挙げ本発明を説明する。

実Ｎ？１１１ ２、’）、２’、５’−テトラ−０−ベンゾルーα。

α−トレハロース２．ＤＩにビリシン２０１及びジクロ
ルメタン２０１Ｌ／を加えて溶かし、承句下０°Ｃにお
いて攪拌しながらステアロイルクロライド１．８ｇを温
顔した。６０分攪拌後室温において更に１時間攪拌し、
反応混合物を氷水中に注ぎ、クロロホルムで抽出した。

クロロホルムを減圧上留去し、残留物をシリカデル力ラ
ムうロマトグラフイーにより精製して２．５．２’、５
’−テトラ−０−ペンシル−６，６′−シー０−ステア
ロイル−α。

α−トレハロース２．９９を得た。無色ロウ状物。

収率８５％。

〔α］、＋５８．８°（０＝１．０　＋　　クロロホル
ム）ＩＲｕＫ８ｒｃｙｓ−”、　１７４０ ａｘ ＮＭＲ（６ＱＭＨｚ　、重りｏｏホルム）δｐｐｍ　　
：０．８８ｔ（６Ｈ，Ｊ＝５Ｈｚ　）　、　１．２５Ｉ
ｌｏ（６ＤＨ）　、２．叶２．５ｍ（４）ｎ、５．５−
４．３”（１２Ｉ（）、５．１４’（２Ｈ。

Ｊ＝１５Ｈｚ）　、　４．６６”（４Ｍ）　、４．８６
ｄ（４Ｈ）　、７．叶７．４°’（２０Ｈ） 実施例２ ２．５．７．５’−テトラ−０−ベンツルー６゜６′−
シー０−ステアロイル−α、α−トレハロース１．２４
１１にクロロホルム２０耐を加えて浴かし、触媒として
パラジウム黒０．５９を加え、水素ガスを導入して１時
間接触還元した。反応液を沖過して触媒を除去し、Ｐ液
を減圧下に濃縮乾固した。

残留物をイノプロパツールから殉結晶して６．６′−シ
ー０−ステアロイル−α、α−トレハロースの無色針状
晶０．５５１を得た。収率６６％。

融点　１５７−１６０°Ｃ ０ 〔α〕ゎ　：　　４−８０．８０（ｃ＝１．０　、クロ
ロホルム）■Ｒ，ｘｓｒ、−１　　：　１７３５（＞Ｏ
−０−０）工 ＮＭＲ（ｉ　Ｑ　ＱＭＨｚ、　ｄ５−ピリジン）δｐｐ
ｍ　　；０．８８　ｔ（６Ｈ、Ｊ＝６．５Ｈｚ　）１．
１−１．８（６ＤＨ） ２．２−２．４（４Ｈ・Ｊ＝７Ｈｉ） ４．０−２．５°（４Ｈ） ４．５−５．２１１１（８Ｈ） ５．８４　　（２Ｈ、Ｊ−”１５Ｈｚ　）実施例１に準
じて反応を行ない第６表に示す化合物を得た。

Ｉｌｌ下余白 実施例２と（ロ）様に脱ペンシル反応を行ない第２表に
示す本発明化合物を得た。

以下余白 ９７６− −吉例１　錠剤 常法により、下記成分・分量の錠剤１個を製造した。

トレハロース脂肪酸ジエステル（ベヘネー））　　　１
００〜Ｄ−マンニトール　　　　　　　　　１５０〜結
晶セルロース　　　　　　　　　　　５０〜デンプン　
　　　　　　　　　　　　　２８〜カルボキンメチルセ
ルロースカルシウム　　　　　１６〜タルク　　　　　
　　　　　　　　　　４　ｔｔｖｙステアリン酸マグネ
シウム　　　　　　　２〜全　　童　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　５５０〜＃考Ｎ２　カ
プセル剤 常法により、下記成分・分量の顆粒を製造し、これを５
′＋Ｅｊ力プセル１個に充填した。

トレハロース脂ｌＬ／ｉ酸ゾエステル（パルミテート）
２５〜結晶セルロース　　　　　　　　　　　１７Ｉｖ
軽漬無水ケイ酸　　　　　　　　　　　　７〜ステアリ
ン酸マグネシウム　　　　　　　１１ｎｙ＆￥ｉ；しｕ
６　注射剤 常法により、下記成分・分層から注射剤１個を製造した
。

トレハロース自ａ／ｊｌｌジエステル（スデアレート）
　　２５〜オリーブ油をもって全１ｔ１１Ｌｔとする。

参考例４　坐剤 常法により、下記成分・分ｍな俗融、攪拌後、成型固化
し、坐剤１個を＃造した。

トレハロース脂肪酸ジエステル（ミリステー））１００
〜カカオ脂　　　　　　　　　　　　　１１００〜全量
　　　　　　　１２００〜 以上 出−人　ニスニス製薬株式会社 １−一゛門 丁　Ｈ（、神　１１　　・１：（自発）昭４１１５７　
’＝１５１ｉ　２１１１４旨１１“」ｌζ［１島田春備
　殿 ＋ｔｆ′Ｌ−ｚ）（小 ｉｌ、’イ＋ｌ：ｓｒ＋＋、　　　＠　　　　軒　　　
１□１１第　６９８４１　　　　−レ２　発＃４ｏ名称 α、α−トレハ■−スー６，６′−脂肪酸ジエステルの
製造方法鴫　ｉ山１）をする名″ 士、イ゛（−９）〕　１便ｌ　（，２出　１９負　）ｋ
ＩＩ　　　・・；［東京都中央区日本橋浜町２丁目１２
番４号と１　（自　ニスニスｍ薬株式会社 り看泰道直方 １　　　代　　）１１　　　人 自　　　発 明細書の「発明の詳細な説明」の禰及び特許法第３０条
第４項に規定の証明書 ７、補正の内容 （１）明細書中、第９Ｊ、第９行 「リコーケミア」とあるを、 「リューケミア」と訂正する、 （２）明細書中、第１６負、第１３行 ｒ１５−ピリジン」とあるを、 ｒｄ、−ピリジン」と訂正する。

０）特許法第３０条第４項に規定する証明書として下記
書面を別添の通り提出する。

■　日本薬学会証明書付発表刊行物 ［日本巣学会第１０２年会 ＠　、５’−Ｄｉ−０−ｆａｔｔｙａｃｙｌ−α、α−
ｔｒ＠ｂｌＬｌｏｔｊ＠丁　続　ぞ由　＋ｌ（＋’Ｆ　
（ｉ　う−一）昭和５７年９　月１０１１ １’＋１；１　”ｒ　１．：・１．−看杉和夫殿１゛Ｉ
；ｆ’ｌ　　ノ）　ノ、　小 昭＋１１５７年　特　　許　ｌ和第６９８４１“・じ２
　％−の名称 α、α−トレハロース−６、６’−ｋＤｔｌ’）エステ
ルの１１．！遊方法 ３　神」ｌを・する名゛ ・Ｉｔ　（’ｌと））関１系　　　出願穴（１所　束Ｔ
Ａ＠中央区日本機浜町２丁目１２着４号と１　称　ニス
ニス製系株式会社 代表者参道直方 １　　代　　理　　八 目　宛 ６、補正の灼象 明Ｉｋ１１１１の「発明の詳細な説明」の纏７、　補止
の内容 （１１明＃ｉｔＩ書中、絽１２負、最下行のあとに行を
換えて次又を仲人する。

ｒ　（３）　）レバロース膓肋籠ジエステルの抗癌作用
： ５適合のａ　ｔａ、−ｄｄＹ庵性マウスを各群６匹づつ
使用し、このマウス−匹宛サルコーマ１８０ａｍ胞５　
Ｘ　１０’個を腹腔内に移植した。

２４時間後より３０％ノロピレングリコールに一陶した
被慣化合物を１日１回、１５０■／峙用菫で５１：１間
連続して腹腔内に投与した。

＃Ｉｈ＃ＩＩＩ劇移檀恢７日目に腹水を採り、腋水蓋と
細胞比ｔ＊めた。朧−生長率（Ｔ／Ｃ％は、腹水瀘と細
胞比の横であるＴＰＣＶ　（酩＃１組容積）を細い、次
の式より釆め、被検化合物の抗−活性全判定した。この
結果を第３表に示す。

第３表 （２）　　同、第１６ｊｊ１厳下行 「第３表に示す」とめるを １編４表に示す」と［ｆ正する。

（３１ｐｉ、駆１８貞、表の上、穢外で、「第３表」と
あるを 「第４表」と引止する。

（４）　ＩＨＩ　、第１９真、縞ｌ竹ないし第２村「第
２表に示す」とあるｔ 「第５表に示す」と釘止する。

（５Ｊ　　Ｉｍ、第２０ｍ、表の上、欄外で、「第２表
」とある倉 「第５表」と引止する。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、　２　、５　、２’　、　３’−テトラ−０−ベン
   ゾルーα。 α−トレハロースに次の式（ＩＶ）、 ＲＯＯＯＨ（ＩＶ） （式中、ＲＯＯは炭素ａ３０以下の唸肪醗残基を示す） で表わされる脂肪酸又はその活性＃ｓ４体を作用させて
   式（Ｖ＞ （式中、ＲＯＯは前記と同じ意味ケ有し、Ｂｎはベンジ
   ル基を示す） で表わされる２　、　３　、２’　、　５’−テトラ−
   Ｏ−ベンゾルーα、α−トレハロース−６，６′−脂１
   ｆ７ｊ＃ジエステルとなし、次いでペンシル基を除去す
   ること？特徴とする式（１）、 （式中、Ｒ（Ｏは前記と同じ） で表わされるα、α−トレハロース−６，６’−脂肪酸
   ジエステルの製造方法。